Potenciais de repouso e ação

(Okuno, caps. 21 e 22; Alberts, cap. 11; Guyton, caps. 4 e 5)

(Fluxo através de uma membrana seletiva)

 O potencial de repouso da célula (V0)
Cap. 21 (Okuno)

-
+ Voltímetro
Solução
eletrodo de KCl
de vidro

+
+
+ - -
- - +
+ - V2 - +
- -
-
+
+ +
Vext. = V1 = zero
Vint. – Vext. = V2 – V1 = V0
Por convenção

Tipicamente V0 = -70 mV

Primeiramente os dois eletrodos são colocados no meio externo para zerar o voltímetro
“patch-clamp” (fixação de placas) – Método
usado para o registro de fluxo de corrente por
canal isolado. Demonstração do princípio
tudo ou nada na abertura e fechamento do
canal de sódio (Guyton, cap. 4).
V0 é mantido através de bomba de íons que gastam ATP.

20% da energia do corpo é gasta para manter V0.

A bomba de sódio gasta 1 ATP para transportar 3 Na+ para fora e 2 K+ para dentro da
célula.

A taxa de transferência pode chegar a 200 Na+ e 130 K+ por segundo.

Os neurônios podem ter mais de 1 milhão de bombas de sódio.

Em contrapartida a célula utiliza V0 para:

-Transporte ativo de substâncias (glicose, aminoácidos,.....).

-Redução da pressão osmótica intracelular.

-Impulso nervoso.

-Contração muscular. O músculo se contrai quando o Ca++ entra na célula

muscular. Para o músculo relaxar o Ca++ precisa ser removido para o retículo
sarcoplasmático. A bomba de Na+ participa indiretamente desta remoção
(através de V0).
 V kvácuo = 1
E
x kar = 1,00054
 densidade superficia l de carga kágua (20 oC) = 80,4
E 
 permissivi dade elétrica do meio ketanol ~25
kmembrana ~7
  k 0 k = constante dielétrica kproteina ~4
Okuno, cap. 21
Okuno, cap. 21
 Potencial de Nernst Membrana permeável

1 2
+ -
Extracelular V=0 Intracelular V=V0

K+ K+ K+ K+

K+ K+ K+ K+

JE

JD

JR = 0 (equilíbrio de Donnan)

JR, JE e JD são densidades de corrente elétrica através da membrana devido ao

campo elétrico (JE ), devido à difusão (JD ) e resultante (JR).
JE  ?
J E é proporcion al a :
ΔV
1) força elétrica  q i E  q i
Δx
2) número de portadores de carga  q i Ci
3) mobilidade do íon  i
Assim,
ΔV
J  - μ i q i Ci
E 2
i
Δx
J ?
D

ΔC
Da lei de Fick F-D onde
Δx
g
F  fluxo do soluto ( 2 )
m .s
m2
D  constante de difusão ( )
s
ΔC g
 gradiente de concentraç ão ( 3 )
Δx m .m
 ΔC
F-D
Δx
g m2 g
( 2 )  ( ) ( 3 ) grama do soluto  número de íons
m .s s m .m
n o íons m 2 n o íons
( 2 )  ( ) ( 3 ) x q i em ambos os membros
m .s s m .m
n o íons m 2 n o íons
( 2 ) qi  ( ) ( 3 ) qi
m .s s m .m
ΔCi
Fq i  D i q i (D = kT/6phr, onde D é
Δx a constante de difusão,
kT é a energia térmica, h
ΔCi
como D i  i kT
é a viscosidade e r é o
J i  Di q i
D
raio da partícula)
Δx
ΔCi
J i   i kTq i
D

Δx
J iD  J iE  0

ΔCi ΔV
 μ i kTq i  μ i q i Ci
2
0
Δx Δx

ΔCi ΔV
 μ i q i (kT  q i Ci )0 kTdC i  q i Ci dV
Δx Δx
ou
C2 dC i qi V2
C1 Ci

kT 
V1
dV

 kT Ci (2)
V  i
N
ln (potencial de Nernst)
qi Ci (1)
Eletrodos de membrana seletiva (mede a concentração iônica
em uma solução aquosa)

Tem sido desenvolvidos eletrodos específicos para íons

tais como Li+, Na+ e K+.

O princípio em que esses eletrodos se baseiam é que o íon é

encapsulado em uma cavidade molecular cujo tamanho é
combinado ao tamanho do íon. Por exemplo, um eletrodo com
base em Valinomicina pode ser usado para a determinação da
concentração de K+.

Valinomicina
 Valores típicos do pot. de Nernst
N
VNa  55 mV
Ca++ VKN  85 mV
K+ Cl- VClN  75 mV
Na+
Mg++ VCaN  40 mV
Mg++ N
VMg  20 mV
Ca++

V0  70 mV
Na+ Cl-
K+ Para um íon +
Solução fisiológica
ViN  V0 ViN  V0
dentro fora
Há transporte ativo para a maioria dos íons.
V0
No caso do sódio a maior concentração
está no lado externo.
 J i  J ia  g i (V0  ViN ) J aNa  0 p/ fora

Como o interior da célula é negativo, a corrente seria positiva

entrando na célula, mas os autores adotaram o sentido positivo
para fora (consisten te com o modelo de Hodgkin e Huxley).

g Na (V0  VNa
N
)0  g Na (-70 mV  55 mV)  - 125 mV(g Na )

J aK  0 p/ dentro
g K (V0  VKN )  0  g K (-70 mV  85 mV)   15 mV(g K )

Assim, o transporte passivo do Sódio é para dentro da célula (JNa < 0) e o

do Potássio para fora (JK > 0). Pela diferença de potencial pode-se
verificar que o Sódio é atraído mais fortemente para dentro do que o
Potássio para fora.
 1
a
J Na  2


Na

K
a
J K
No equilíbrio ,  i  i  0,
J a
 J P

pois V0 se mantém constante.

também,  i 0 i )  0 (em diversas células)

g (V - V N

para o Cl-, V0  VClN (corrente pequena)

As concentrações de Ca e Mg são bem menores que as de Na e K.

Assim, em diversas células, podemos usar essa aproximação,
considerando apenas o sódio e o potássio e usar essa expressão para
calcular a relação gk/gNa.

N
g Na (V0 - VNa )  g K (V0 - VKN )  0
Cap. 21
Problema 15
Os potenciais de Nernst de uma célula para os íons Na+ e K+ são, respectivamente,
65 e -90 mV. O potencial de repouso da célula é -80 mV. Considerando desprezíveis
a densidade de corrente elétrica devida aos íons Cl- e a soma das densidades de
corrente elétrica passiva, calcule a razão entre as condutâncias da membrana para
os íons Na+ e K+.

g Na (V0  VNa
N
)  g K (V0  VKN )  0

g Na (-80mV  65mV)  g K (-80mV  90mV)  0

g K - (-145mV)
  14,5
g Na  10mV
Tamanhos iônicos
Os íons carregam em torno de si uma camada de hidratação. Apesar do Sódio (PA =
23g) ser um íon menor que o Potássio (PA = 39g) e o Cloro (PA = 35g), o seu canal na
membrana celular é o maior. Isto ocorre porque o campo elétrico na superfície do
Sódio é maior devido ao seu menor raio atômico (E a 1/r2) e assim atrai mais
moléculas de água (são polares possuindo um dipolo elétrico intrínseco).
H

- +
O<
- +
H
- + - + - +
Na+ - + K+ - +
- +

- +
Os íons não atravessam a bicamada lipídica porque não abandonam as moléculas de
água para entrarem na membrana.
Na membrana celular há canais específicos para cada íon.
• A condutividade de um dado íon “i” é proporcional ao número de
canais desse íon na membrana.

• Há poucos canais de Sódio, muitos canais de Potássio e um número

intermediário de canais de Cloro.

• Se a condutividade do Potássio for considerada gK+ = 1, então a

condutividade aproximada do Cloro seria gCl- = 0,6 e do Sódio
gNa+ = 0,05, ou seja, a condutividade do Potássio é cerca de 20 vezes
maior que a do Sódio.
 Canal
de
Potássio

Os átomos
de Hidrogênio
foram omitidos
• No interior das células há os grandes ânions A- impermeáveis

pela membrana que contribuem para o potencial de repouso da

célula (já gerando um potencial negativo no interior mesmo sem o
transporte ativo). Geralmente são proteínas como a Albumina e a
Hemoglobina.

• No eritrócito a presença da Hemoglobina já fornece um potencial

de repouso de -10 mV.
• A bomba de sódio/potássio foi descoberta em 1950 por um
dinamarquês, Jens Christian Skou. Trabalho publicado em 1957
(BBA) – ganhou o prêmio Nobel de 1997 (em dois) por isso.

• A enzima transportadora de Ca++-Na+ usa o gradiente de Na+

para remover Ca++ do meio intracelular. Em atividade diminuída da
bomba de sódio, aumenta a concentração de Ca++ no interior do
músculo provocando contração.
A concentração interna de 24Na (emissor de partícula b) é medida usando um Contador de Cinti-
lações. A densidade de corrente de sódio é alta devido ao transporte ativo. Ela vai diminuindo
com o tempo porque a concentração interna de sódio diminui. Quando a temperatura é diminuída
ocorre diminuição abrupta do transporte ativo. O DNP (dinitrofenol) impede a formação de ATP
pela mitocôndria, mostrando que o transporte ativo depende de ATP.
Transporte de substâncias usando o potencial de repouso (Leningher, pág. 328)

No lúmen intestinal, nas microvilosidades da superfície apical do intestino há

proteínas transportadora de glicose às custas do gradiente de Sódio (2 íons Na+
+ glicose para dentro da célula).

Do outro lado da célula há um canal de glicose que leva para o sangue.

K+ Na+ Na+
Na+
K+
Na+
A concentração de
Na+
glicose dentro da célula
Na+ é cerca de 30.000 X à
do intestino
Na+

Na E. coli a captação de lactose é feita pelo transportador galactosídio com o uso

do gradiente de prótons (1 H+ por lactose) gerado pela sua bomba de prótons.
Na contração muscular, um potencial de ação se move ao longo de um nervo motor
até suas terminações nas fibras musculares.

Em cada terminação, o nervo secreta pequena quantidade de substância

neurotransmissora acetilcolina.

Esta atua sobre a membrana da fibra muscular abrindo múltiplos canais em proteínas
reguladas por ela, permitindo a passagem de íons Na+, K+ e Ca++.

A despolarização da membrana muscular induz o retículo sarcoplasmático a liberar

grande quantidade de íons cálcio.

Na presença de Ca++ ocorrem forças atrativas entre os filamentos de actina e miosina

fazendo com que um deslize ao longo do outro, o que constitui o processo contrátil.

Os Ca++ são bombeados de volta para o retículo sarcoplasmático, por uma bomba de
Ca++ da membrana e com a retirada do Ca++ o músculo relaxa.
 Modelo HH – medidas das densidades de corrente em axônio gigante de lula

Tetrodotoxina – bloqueia os canais de sódio – veneno do baiacu

Cloreto de Tetraetilamônio – bloqueia os canais de potássio

Assim, JK = gK (VM – VKN) e JNa = gNa (VM – VNaN), podem ser medidos de maneira

independente e avaliadas as condutividades dos íons durante o impulso

Obs: durante o impulso tanto V0 quanto VKN e VNaN não mudam

 gK
~ 100 no repouso (para o axônio)
g g Na
gNa
g Na aumenta 10 4 X e
g K aumenta 20 X (durante o potencial de ação)

gK

0 4 t (ms)

Assim, se
g Na  1, aumentando 10 4 X seria igual a 10 4 e
g K ~ 100, aumentando 20 X seria igual a 2000,
g Na
desse modo, agora 5
gK
9) Numa experiência foi colocada certa quantidade de radioisótopos sódio-24 (24Na) na
solução em que se encontra imerso o axônio de uma célula nervosa. A variação
com o tempo da concentração de íons 24Na no lado interno da célula é mostrada na
figura abaixo. Durante essas medidas foi detectada a passagem de três potenciais
de ação e também adicionado o veneno dinitrofenol à solução externa.
Identifique, em cada uma das oito fases assinaladas na figura, o fenômeno biológico
responsável pela variação ou não da concentração de 24Na no interior do axônio.
9) Continuação
Os segmentos 1, 4 e 7 refletem grande afluxos de 24Na+ devido às passagens de
potenciais de ação.

Nos segmentos 2, 6 e 8 houve transporte ativo de sódio.

No início do segmento 3 foi adicionado dinitrofenol interrompendo o transporte ativo que

perdurou até o final da fase 5.
11) Numa experiência, usando o esquema representado na figura abaixo, o potencial de
membrana de um axônio foi alterado de um valor inicial V0 = -60 mV para um valor
V, como indica o gráfico (a). A variação com o tempo da densidade de corrente
elétrica JM através da membrana desse axônio é mostrada nos gráficos seguintes
para diferentes valores de V. O potencial de Nernst para o sódio é VNaN = 40 mV.
a) Explique a diferença entre os gráficos com diferentes valores de V.
b) O que se pode concluir dessa experiência sobre o transporte de íons através da
membrana?
 VNaN = 40 mV e V0 = -60 mV

Supõe VKN = -80 mV

JNa = gNa(VM – VNaN)

JK = gK (VM – VKN)

Voltagem
(VM – VNaN) (VM – VKN)
(mV)

-33 -73 47

0 -40 80

26 -14 106

40 0 120

55 15 135
11) Continuação
a) A despolarização da membrana abre os canais de sódio e um grande afluxo de
sódio ocorre, entretanto, se o potencial momentaneamente colocado no interior for
igual ao potencial de Nernst do sódio não há diferença de potencial pois (VM - VNaN
=0) e assim não há corrente de sódio. Como da eq. 22.29 JNa = gNa(VM – VNaN), o
fluxo ocorre em sentido contrário (para fora) se VM > VNaN (JNa > 0); dos valores de
VM apresentados JNa deveria ser maior para V = -33 mV (maior ddp),

mas este potencial deve ter sido insuficiente

para abrir todos os canais de sódio, pois
está muito próximo do potencial limiar. Assim
o afluxo de sódio foi menor do que para V =
0. Como o fluxo de potássio é dado por JK =
gK (VM – VKN), a densidade de corrente foi
maior para V = +55 mV (maior ddp).
Quando VM é igual ao VNaN (VM = 40 mV) a
densidade de corrente de membrana é igual
a zero e ela torna-se positiva para VM > VNaN
(veja tabela anterior).

b) A resposta do potássio foi independente do

afluxo de Na+, indicando que a saída do K+ é
primariamente devido à mudança no
potencial da membrana, sendo pouco
influenciada pela entrada de sódio.
5) Qual seria o valor máximo que o potencial de membrana VM poderia atingir
durante o potencial de ação? E o valor mínimo?

O valor máximo seria o potencial de Nernst do sódio e o valor mínimo seria

o potencia de Nernst do potássio.
5) Qual seria o
valor máximo
que o potencial
de membrana
VM poderia
atingir durante o
potencial de
ação? E o valor
mínimo?
10) Usando o arranjo experimental representado na figura abaixo, o potencial de
membrana VM de um axônio foi alterado como indicado na figura (a) e medida a
densidade de corrente elétrica JM através da membrana celular. Na figura (b) é
mostrada a variação de JM com o tempo quando o axônio foi colocado num
recipiente contendo água de mar. A variação mostrada em (c) foi obtida com o
axônio colocado em uma solução sem sódio. Explique a diferença entre as figuras
(b) e (c).
 10) Resposta Supõe que VNaN = +40mV e
VkN = -85mV
Com água de mar no meio externo houve um
pequeno afluxo de sódio (JM < 0), e
posteriormente houve um fluxo grande de
potássio para o exterior. Como VM é mudado
para cerca de +20 mV que é um valor próximo
do potencial de Nernst do sódio, a diferença de
potencial de -20mV é pequena e assim é
gerada apenas uma pequena corrente de sódio
para dentro do axônio. No caso do potássio a
diferença de potencial é de +105 mV e por isso
a grande corrente de potássio.
Na solução sem o sódio, o íon sódio saiu
ao invés de entrar e houve um grande fluxo de
 KT Ci (2)
V 
i
N
ln potássio para o meio externo.
qi Ci (1)

Em (c) com a retirada do sódio do meio externo o potencial de Nernst do sódio cai
(veja na eq.). Supõe que VNaN tenha caído para +10 mV na solução sem sódio.
Da eq. JNa = gNa(VM – VNaN)
JNa = gNa(+20 mV – 10 mV) = 10 mV que é maior que zero, portanto, o sódio
deve sair. Já para o potássio a situação praticamente não muda em relação ao item
(b).
12) Numa experiência realizada com um axônio, o axoplasma foi substituído por uma
substância “A”. A seguir, esse axônio foi colocado num recipiente contendo água de
mar. Essa experiência foi repetida para duas outras substâncias “B” e “C”. As concen-
trações de sódio dessas substâncias satisfazem a desigualdade CNaA < CNaB < CNaC.
Na figura está indicado para cada uma dessas substâncias, a variação do potencial de
membrana VM, em um ponto desse axônio, durante a passagem de um potencial de
ação. Explique a diferença entre os valores máximos de VM nas três curvas
apresentadas.
12) Resposta
A concentração de sódio no axoplasma foi variada mantendo fixa a concentração
extracelular (água de mar). Com o aumento do sódio interno o potencial de Nernst do
sódio diminui, de modo que:
 KT Ci (2)
CNaA < CNaB < CNaC e ViN  ln
qi Ci (1)
VNaN (A) > VNaN (B) > VNaN (C)

Como JNa = gNa(VM – VNaN), durante o impulso o valor máximo que VM atinge é
geralmente o potencial de Nernst do sódio, assim o menor VM máximo é observado
para a substância C.
  KT Ci (2)
V 
i
N
ln
qi Ci (1)
Além de aumentar a velocidade,
diminui o gasto de energia da
bomba de sódio e potássio porque
menos íons necessitam entrar no
axônio. A saída de potássio também
ajuda a restaurar o potencial de
repouso que decresce com a
entrada de sódio, isso também
reduz o gasto de energia.
 Ressonância Magnética Nuclear

Imagem do tensor de difusão (DTI)

A medição da relaxação do sinal da

difusão da água é um dos mecanismos de
contraste mais importantes. Em particular,
a imagem por tensor de difusão (DTI) pode
ser usada para mapear e caracterizar a
difusão tridimensional da água em função
da localização espacial. O tensor de
difusão descreve a magnitude, o grau de
anisotropia e a direção da difusão.
Pode influenciar a aprendizagem, o autocontrole (e porque os adolescentes não o tem)

Doença mental: esclerose múltipla (degeneração do SNC),

Doenças suspeitas: esquizofrenia (delírios, alucinações),

autismo (comprometimento da comunicação e desapego emocional)
distúrbio bipolar (períodos de mania alternados com períodos de
depressão)
dislexia (distúrbios de linguagem ao ler e outros)