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LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA CLÍNICA

COLESTEROL TOTAL

INSTRUÇÕES GERAIS

1. Neste experimento, você irá aprimorar seus conhecimentos sobre dosagem


bioquímica do colesterol total por meio de uma reação colorimétrica. Esta
técnica é realizada através de um método analítico que se baseia na interação
da matéria com a radiação eletromagnética, calculando o quanto é absorvido e
quanto é transmitido, com o uso do espectrofotômetro.

2. Utilize a seção “Recomendações de Acesso” para melhor aproveitamento da


experiência virtual e para respostas às perguntas frequentes a respeito do
VirtuaLab.

3. Caso não saiba como manipular o Laboratório Virtual, utilize o “Tutorial


VirtuaLab” presente neste Roteiro.

4. Caso já possua familiaridade com o Laboratório Virtual, você encontrará as


instruções para realização desta prática na subseção “Procedimentos”.

5. Ao finalizar o experimento, responda aos questionamentos da seção


“Avaliação de Resultados”.

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RECOMENDAÇÕES DE ACESSO
PARA ACESSAR O VIRTUALAB

ATENÇÃO:

O LABORATÓRIO VIRTUAL DEVE SER ACESSADO POR COMPUTADOR. ELE NÃO DEVE
SER ACESSADO POR CELULAR OU TABLET.

O REQUISITO MÍNIMO PARA O SEU COMPUTADOR É UMA MEMÓRIA RAM DE 4 GB.

SEU PRIMEIRO ACESSO SERÁ UM POUCO MAIS LENTO, POIS ALGUNS PLUGINS SÃO
BUSCADOS NO SEU NAVEGADOR. A PARTIR DO SEGUNDO ACESSO, A VELOCIDADE DE
ABERTURA DOS EXPERIMENTOS SERÁ MAIS RÁPIDA.

1. Caso utilize o Windows 10, dê preferência ao navegador Google Chrome;


2. Caso utilize o Windows 7, dê preferência ao navegador Mozilla Firefox;
3. Feche outros programas que podem sobrecarregar o seu computador;
4. Verifique se o seu navegador está atualizado;
5. Realize teste de velocidade da internet.

Na página a seguir, apresentamos as duas principais dúvidas na utilização dos


Laboratórios Virtuais. Caso elas não se apliquem ao seu problema, consulte a nossa
seção de “Perguntas Frequentes”, disponível em: https://algetec.movidesk.com/kb/pt-
br/

Neste mesmo link, você poderá usar o chat ou abrir um chamado para o contato com
nossa central de suporte. Se preferir, utilize os QR CODEs para um contato direto por
Whatsapp (8h às 18h) ou para direcionamento para a central de suporte. Conte conosco!

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PERGUNTAS FREQUENTES

1) O laboratório virtual está lento, o que devo fazer?

a) No Google Chrome, clique em “Configurações” -> “Avançado” -> “Sistema” ->


“Utilizar aceleração de hardware sempre que estiver disponível”. Habilite a
opção e reinicie o navegador.

b) Verifique as configurações do driver de vídeo ou equivalente. Na área de


trabalho, clique com o botão direito do mouse. Escolha “Configurações
gráficas” e procure pela configuração de performance. Escolha a opção de
máximo desempenho.

Obs.: Os atalhos e procedimentos podem variar de acordo com o driver


de vídeo instalado na máquina.

c) Feche outros aplicativos e abas que podem sobrecarregar o seu computador.

d) Verifique o uso do disco no Gerenciador de Tarefas (Ctrl + Shift + Esc) ->


“Detalhes”. Se estiver em 100%, feche outros aplicativos ou reinicie o
computador.

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2) O laboratório apresentou tela preta, como proceder?

a) No Google Chrome, clique em “Configurações” -> “Avançado” -> “Sistema” ->


“Utilizar aceleração de hardware sempre que estiver disponível”. Habilite a
opção e reinicie o navegador. Caso persista, desative a opção e tente
novamente.

b) Verifique as configurações do driver de vídeo ou equivalente. Na área de


trabalho, clique com o botão direito do mouse. Escolha “Configurações
gráficas” e procure pela configuração de performance. Escolha a opção de
máximo desempenho.

Obs.: Os atalhos e procedimentos podem variar de acordo com o driver


de vídeo instalado na máquina.

c) Verifique se o navegador está atualizado.

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DESCRIÇÃO DO LABORATÓRIO

MATERIAIS NECESSÁRIOS

 Banho-maria;
 Caneta marcadora;
 Cubeta;
 Espectrofotômetro;
 Kit Colesterol total (reagente de trabalho e solução padrão de colesterol);
 Micropipeta de 100 µL;
 Micropipeta de 1000 µL;
 Ponteira para micropipeta;
 Recipiente de descarte;
 Suporte para micropipeta;
 Suporte para tubo de coleta;
 Suporte para tubo de ensaio;
 Tubo de coleta com amostra de soro;
 Tubo de ensaio.

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PROCEDIMENTOS

1. SEGURANÇA DO EXPERIMENTO

Faça a higienização das mãos na pia antes de iniciar o procedimento. Em seguida,


coloque os equipamentos de proteção individual localizados no “Armário de EPIs”.

2. IDENTIFICANDO OS TUBOS

Identifique o primeiro tubo de ensaio com a sigla A. Identifique o segundo tubo de


ensaio com a sigla B, o terceiro tubo de ensaio com a sigla P. Em seguida faça a
identificação das cubetas. Identifique a primeira cubeta com a sigla A; identifique a
segunda cubeta com a sigla B, e por fim, identifique a terceira cubeta com a sigla P.

3. ADICIONANDO A AMOSTRA

Pipete 1000 µL do reagente de trabalho. Transfira a solução pipetada para o tubo de


ensaio B (branco). Em seguida, pipete 1000 µL do reagente de trabalho e transfira
para o tubo B. Repita as etapas de pipetagem e transfira o reagente de trabalho para
o tubo de ensaio P e A. Descarte a ponteira. Ajuste o volume da micropipeta de 100
µL para 20 µL. Pipete 20 µL da solução padrão e transfira a solução pipetada para o
tubo de ensaio P (padrão). Descarte a ponteira e pipete 20 µL da amostra de soro.
Transfira a amostra pipetada para o tubo de ensaio A (amostra) e descarte a
ponteira. Homogeneíze a solução agitando o tubo por 20 segundos. Mova o suporte
com os tubos para o banho-maria. Ligue o banho-maria e aguarde por 10 minutos.
Retire o suporte com os tubos de ensaio do banho-maria.

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4 REALIZANDO A LEITURA NO ESPECTROFOTÔMETRO

Ligue o espectrofotômetro e configure para o comprimento de 505 nm. Abra o


equipamento. Pipete 1000 µL do conteúdo do tubo B e transfira o conteúdo para a
cubeta B. Descarte a ponteira. Coloque a cubeta do branco (B) no equipamento e
feche o equipamento. Zere o equipamento. Abra e retire o tubo do
espectrofotômetro. Em seguida, pipete 1000 µL do conteúdo do tubo P e transfira o
conteúdo para a cubeta P. Descarte a ponteira. Coloque a cubeta com a solução
padrão (P) no espectrofotômetro, feche o equipamento e realize a leitura. Retire a
cubeta P. Pipete 1000 µL do conteúdo do tubo A e transfira o conteúdo para a
cubeta A. Descarte a ponteira. Coloque a cubeta com a amostra (A) e realize a
leitura. Abra o equipamento e retire a cubeta. Feche o equipamento e preencha o
laudo com o resultado observado.

5 AVALIANDO OS RESULTADOS

Siga para a seção “Avaliação dos Resultados”, localizada na página 08 deste roteiro,
e responda de acordo com o que foi observado no experimento, associando também
com os conhecimentos aprendidos sobre o tema.

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AVALIAÇÃO DOS RESULTADOS

1. Qual é o conceito da espectrofotometria?

2. O que é absorbância e transmitância?

3. Explique o tipo de reação bioquímica que ocorreu na realização do teste?

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TUTORIAL VIRTUALAB

1. SEGURANÇA DO EXPERIMENTO

Visualize a pia clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome “Pia”
localizada dentro do painel de visualização no canto superior esquerdo da tela. Se
preferir, também pode ser utilizado o atalho do teclado “Alt+1”.

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Lave as mãos na pia clicando com o botão direito do mouse sobre a pia.

Visualize o armário de EPIs clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o
nome “Armário de EPIs” localizada dentro do painel de visualização no canto superior
esquerdo da tela. Se preferir, também pode ser utilizado o atalho do teclado “Alt+2”.

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Abra o armário de EPIs clicando com o botão direito do mouse sobre as portas do
armário.

Selecione o EPI necessário para a realização do ensaio clicando com o botão esquerdo
do mouse sobre ele. Nesse experimento, é obrigatório o uso de: jaleco, luvas e óculos.

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Feche o armário de EPIs clicando com o botão direito do mouse sobre as portas do
armário de EPIs.

Visualize a bancada clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome
“Bancada” localizada dentro do painel de visualização no canto superior esquerdo da
tela ou através do atalho do teclado “Alt+3”.

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2. IDENTIFICANDO OS TUBOS

Selecione a caneta marcadora clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ela e
selecione a opção “Assinar objetos”.

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3. ADICIONANDO A AMOSTRA

Pipete 1000 µL do reagente de trabalho clicando com o botão direito do mouse sobre
a pipeta e selecione a opção “Colocar em reagente de trabalho”.

Transfira a solução pipetada clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a pipeta
e selecione a opção: “Colocar em tubo de ensaio B”.

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Pipete 1000 µL do reagente de trabalho clicando com o botão direito do mouse sobre
a pipeta e selecione a opção “Colocar em reagente de trabalho”.

Transfira a solução pipetada clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a pipeta
e selecione a opção: “Colocar em tubo de ensaio B”.

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Pipete 1000 µL do reagente de trabalho clicando com o botão direito do mouse sobre
a pipeta e selecione a opção “Colocar em reagente de trabalho”.

Transfira a solução pipetada clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a pipeta
e selecione a opção: “Colocar em tubo de ensaio P”.

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Pipete 1000 µL do reagente de trabalho clicando com o botão direito do mouse sobre
a pipeta e selecione a opção “Colocar em reagente de trabalho”.

Transfira a solução pipetada clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a pipeta
e selecione a opção: “Colocar em tubo de ensaio P”.

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Pipete 1000 µL do reagente de trabalho clicando com o botão direito do mouse sobre
a pipeta e selecione a opção “Colocar em reagente de trabalho”.

Transfira a solução pipetada clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a pipeta
e selecione a opção: “Colocar em tubo de ensaio A”.

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Pipete 1000 µL do reagente de trabalho clicando com o botão direito do mouse sobre
a pipeta e selecione a opção “Colocar em reagente de trabalho”.

Transfira a solução pipetada clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a pipeta
e selecione a opção: “Colocar em tubo de ensaio A”.

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Descarte a ponteira clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a ponteira e


selecione a opção “Trocar ponteira”.

Ajuste o volume da micropipeta clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a


ponteira e selecione a opção “Reajustar volume”.

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Ajuste o volume da micropipeta de 100 µL para 20 µL clicando com o botão direito do


mouse e selecione “Ok”.

Pipete 20 µL da solução padrão clicando com o botão direito do mouse sobre a pipeta
e selecione a opção “Colocar em reagente de trabalho”.

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Transfira a solução pipetada clicando com o botão esquerdo do mouse e selecione a


opção “Colocar em tubo de ensaio P”.

Descarte a ponteira clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a ponteira e


selecione a opção “Trocar ponteira”.

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Pipete 20 µL da amostra de soro clicando com o botão direito do mouse sobre a pipeta
e selecione a opção “Colocar em amostra de soro”.

Transfira a solução pipetada clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a pipeta
e selecione a opção “Colocar em tubo de ensaio A”.

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Descarte a ponteira clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a pipeta e


selecione a opção “Trocar ponteira”.

Homogeneíze os tubo clicando com o botão esquerdo do mouse sobre os tubos.

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Visualize o banho-maria clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o


nome “Banho-maria” localizada dentro do painel de visualização no canto superior
esquerdo da tela ou utilize o atalho do teclado “Alt+4”.

Ligue o banho-maria clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o botão de ligar
do banho-maria e selecione a opção “Ligar”.

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Visualize a bancada clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome
“Bancada” localizada dentro do painel de visualização no canto superior esquerdo da
tela ou utilize o atalho do tec lado “Alt+3”.

Coloque os tubos no banho-maria clicando com o botão direito do mouse sobre os


tubos e selecione a opção “Colocar no banho-maria”.

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Aguarde por 10 minutos ou avance o tempo clicando com o botão esquerdo do mouse
sobre a opção “Avançar”.

Retire os tubos de ensaio do banho-maria clicando com o botão esquerdo do mouse


sobre eles e selecione a opção “Colocar no suporte”.

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4. REALIZANDO A LEITURA NO ESPECTROFOTÔMETRO

Visualize o espectrofotômetro clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera


com o nome “Espectrofotômetro” localizada dentro do painel de visualização no canto
superior esquerdo da tela ou utilize o atalho do teclado “Alt+5”.

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Ligue o espectrofotômetro clicando com o botão direito do mouse sobre o botão de


ligar o aparelho.

Abra o espectrofotômetro clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a tampa do


aparelho.

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Pipete 1000 µL do tubo B clicando com o botão direito do mouse sobre a pipeta e
selecione a opção “Colocar em tubo de ensaio B”.

Transfira o conteúdo para a cubeta B clicando com o botão esquerdo do mouse sobre
a pipeta e selecione a opção “Colocar em cubeta B”.

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Descarte a ponteira clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a ponteira e


selecione a opção “Trocar ponteira”.

Coloque a cubeta do branco (B) no espectrofotômetro clicando com o botão esquerdo


do mouse sobre a cubeta B.

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Zere o equipamento clicando sobre o espectrofotômetro com o botão esquerdo do


mouse.

Abra o espectrofotômetro clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a tampa.

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Mova a cubeta para a bancada clicando com o botão direito do mouse sobre a cubeta
e selecione a opção “Colocar na bancada”.

Pipete 1000 µL do tubo P clicando com o botão direito do mouse sobre a pipeta e
selecione a opção “Colocar em tubo de ensaio P”.

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Transfira o conteúdo para a cubeta P clicando com o botão esquerdo do mouse sobre
a pipeta e selecione a opção “Colocar em cubeta P”.

Descarte a ponteira clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a ponteira e


selecione a opção “Trocar ponteira”.

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Mova a cubeta P para o espectrofotômetro clicando com o botão esquerdo do mouse


sobre a cubeta P e selecione a opção “Colocar no espectrofotômetro”.

Realize a leitura clicando com o botão direito do mouse sobre o painel de iniciar a
leitura.

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Anote o valor do resultado da leitura que aparece no visor do espectrofotômetro.

Abra a tampa do espectrofotômetro clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a


tampa.

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Mova a cubeta para a bancada clicando com o botão direito do mouse sobre a cubeta
e selecione a opção “Colocar na bancada”.

Pipete 1000 µL do tubo A clicando com o botão direito do mouse sobre a pipeta e
selecione a opção “Colocar em tubo de ensaio A”.

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Transfira o conteúdo para a cubeta A clicando com o botão esquerdo do mouse sobre
a pipeta e selecione a opção “Colocar em cubeta A”.

Descarte a ponteira clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a ponteira e


selecione a opção “Trocar ponteira”.

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Mova a cubeta A para o espectrofotômetro clicando com o botão esquerdo do mouse


sobre a cubeta A e selecione a opção “Colocar no espectrofotômetro”.

Feche a tampa do espectrofotômetro clicando com o botão esquerdo do mouse sobre


a tampa.

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Realize a leitura clicando com o botão direito do mouse sobre o painel de iniciar a
leitura.

Anote o valor do resultado da leitura que aparece no visor do espectrofotômetro.

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Abra a tampa do espectrofotômetro clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a


tampa.

Mova a cubeta para a bancada clicando com o botão direito do mouse sobre a cubeta
e selecione a opção “Colocar na bancada”.

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COLESTEROL TOTAL

Visualize o laudo clicando com o botão direito do mouse sobre o painel na lateral
direita da tela e selecione a opção “Laudo”.

Preencha o resultado do laudo clicando com o botão direito do mouse sobre a caixa de
resposta e selecione a opção “Responder”.

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5. AVALIANDO OS RESULTADOS

Siga para a seção “Avaliação dos Resultados”, localizada na página 08 deste roteiro, e
responda de acordo com o que foi observado no experimento, associando também
com os conhecimentos aprendidos sobre o tema.

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