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MINISTÉRIO DA EDUCAÇÃO

UNIVERSIDADE FEDERAL DE LAVRAS


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GFP 101 - FITOPATOLOGIA 1 2019/1

3ª Aula Prática – Reação de Hipersensibilidade

Prof. Ricardo Magela de Souza


Bacteriologia de Plantas/Coordenador
Reação de Hipersensibilidade
Reação de Hipersensibilidade
- O que é a Reação de Hipersensibilidade?

É uma resposta de defesa da planta contra o ataque de patógenos


- É uma resposta rápida (ocorre em torno de 2 horas) com
os sintomas visíveis entre 12 a 24 h
- A reação é localizada, ocorre a morte repentina de um
número limitado de células do hospedeiro ao redor do sítio de
infecção
- É uma resposta de defesa induzida, pós infeccional, com a
parada do crescimento e desenvolvimento do patógeno
- Ocorre nas interações Incompatíveis entre planta e
patógeno, quando há o reconhecimento do patógeno pela planta
Reação de Hipersensibilidade
-Características

- Ocorre o colapso do tecido vegetal ao redor do sítio de infecção


- A lesão é necrótica, ocorrendo o dessecamento
da área necrosada
- A lesão é localizada e rápida (24 h ou menos)
Reação de Hipersensibilidade
“O que são interações compatíveis e interações
incompatíveis?”
Incompatível
Bactéria Fitopatogênica

Planta HR HR em fumo
Não-Hospedeira
Compatível

Pseudomonas syringae
pv. tomato
Planta Suscetível
Doença
Pinta bacteriana em tomateiro
Reação de Hipersensibilidade
- Considerações...

É possível ocorrer continuamente na natureza e


ser induzida artificialmente, para fins de diagnose

Somente células vivas são capazes de induzir HR

A HR é uma resposta ativa de plantas à infecção


por bactérias incompatíveis

Assim que a bactéria entra em contato com os


tecidos do hospedeiro, as células ao redor do sítio de
infecção entram em colapso e morrem rapidamente.
Reação de Hipersensibilidade
Importância:

. Permite uma melhor compreensão dos mecanismos que


governam as interações bactéria-planta e dos fenômenos
determinantes de reações de compatibilidade/ incompatibilidade

.Utilizada em Bacteriologia de Plantas para a confirmação da


patogenicidade de isolados bacterianos em:

Novas diagnoses, quando não se conhece a colônia

Patologia de sementes
Patologia de Sementes
Plaqueamento das diluições dos extratos de sementes em meio de cultura

Kobayasti, 2002

Colônias bacterianas obtidas de extratos de sementes de


feijão, cultivar Pérola
Reação de Hipersensibilidade
Diferentes colônias encontradas nas sementes e possíveis
associações planta - bactéria

4a7
dias Suscetibilidade

24 h
Patogênica - HR

24 h Saprófita
Placa de isolamento

Bactéria Planta Associação Sintomas Típicos HR


Fitopatogênica Hospedeira Compatível + -

Fitopatogênica Não-Hospedeira Incompatível - +

Saprófita Qualquer - - -
Confirmação da espécie e patovar da bactéria
Imunofluorescência

Live and dead cells of Xhanthomons axonopodis pv. phaseoli of bean seeds
simultaneously stained with antibodies conjugated with Alexa 488 and with propidium
iodide. Live cells are green, dead cells are green/red and red.
Tebaldi, 2005
Confirmação da espécie e patovar da bactéria
Bio-PCR
kb M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
10,0-

4,0 -

2,0 -

1,5 -

1,0 -

0,5 -

Detecção de colônias de Xapf obtidos dos extratos de sementes de feijão, cultivar


Pérola. M = DNA Marker; 1 = água; 2 = Xapf 5 x 107; 3 = 34(F); 4 = 32 col.; 5 = 44 (F); 6
= 10(4+F); 7 = 3 (F); 8 = 10(F); 9 = 8 (F); 10 = 5(5+F); 11 =5 col.
Kobayasti, 2002
TESTE HIPERSENSIBILIDADE PARA
CONFIRMAÇÃO DA PATOGENICIDADE

Procedimentos...
Teste de HR
- Material:

• Plantas de fumo, tomate, pimentão (feijão, couve, café)


• Seringas hipodérmicas estéreis
• Isolados bacterianos crescidos por 24 h em meio sólido
• Solução salina esterilizada de NaCl 0,85%
• Béquer
Reação de Hipersensibilidade

- Procedimento:
• Preparar a suspensão de inóculo ajustada para
OD550=0,1 (aproximadamente 108 UFC/mL) em cada
béquer
• Injetar a suspensão bacteriana no mesófilo foliar, face
abaxial, em diferentes
Teste de HR
- Procedimento:

• Manter as plantas inoculadas em casa-de-vegetação a


25-28oC e observar o surgimento dos sintomas nas
próximas 24 h
Teste de HR
- Resultados:

Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli


em pimentão - HR

Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli


em fumo HR

Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli


em tomate - HR

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