Controle nutricional da puberdade na fêmea bovina:

regulação pré-natal e pós-natal precoce do

sistema neuroendócrino
R.C. Cardosoa,*, S.M. Westa, T. S. Maiaa,b, B.R.C. Alvesa,
G. L. Williamsa, b
a Departamento de Ciência Animal, Texas A&M
University, College Station, TX, EUA
b Laboratório de Reprodução Animal, Texas A&M AgriLife
Research, Beeville, TX, EUA
in f o r t i c o
Historia do artigo:
Recebido em 14 de novembro de 2019
Recebido em forma revisada em 2 de janeiro de 2020
Aceito em 3 de janeiro de 2020
Palavras-chave:
novilhas
Hipotálamo
leptina
Nutrição
Puberdade
abstrato
A puberdade é um evento biológico complexo que requer
maturação dos órgãos reprodutivos.
eixo neuroendócrino e subsequente iniciação de
liberação episódica de alta frequência de GnRH
e LH. A nutrição é um fator crítico que afeta o controle
neuroendócrino da puberdade.
Embora a restrição de nutrientes durante o
desenvolvimento juvenil atrase a puberdade, taxas
elevadas
de ganho de peso corporal durante este período facilitam
a maturação puberal ao programar
centros hipotalâmicos que estão por trás do processo
puberal. Achados recentes sugerem que
nutrição materna durante a gestação também pode
modular o desenvolvimento do feto
eixo neuroendócrino, influenciando assim a puberdade e
subsequente função reprodutiva.
Entre os vários sinais metabólicos, a leptina desempenha
um papel crítico na transmissão de
informações ao cérebro e, conseqüentemente,
controlando a puberdade. Os efeitos da leptina sobre
A secreção de GnRH é mediada por uma rede neuronal a
montante porque os neurônios de GnRH
não expressam o receptor de leptina. Duas populações
neuronais localizadas no núcleo arqueado
que expressam o peptídeo orexígeno neuropeptídeo Y
(NPY), e o anorexígeno
peptídeo alfa hormônio estimulante de melanócitos
(aMSH), são componentes-chave do
neurocircuito que transmite entradas inibitórias (NPY) e
excitatórias (aMSH) aos neurônios GnRH.
Além disso, neurônios no núcleo arqueado que
coexpressam kisspeptina, neuroquinina B,
e dinorfina (denominados neurônios KNDy) também
estão envolvidos no controle metabólico da puberdade
Nossos estudos na fêmea bovina demonstram que planos
de nutrição aumentados
durante o desenvolvimento juvenil levam a mudanças
organizacionais e funcionais no hipotálamo
vias compreendendo NPY, proopiomelanocortina (POMC,
o precursor de aMSH),
e neurônios kisspeptina. As mudanças incluem alterações
na abundância de NPY, POMC e
Kiss1 mRNA e na plasticidade das projeções neuronais
para neurônios GnRH. Nossos estudos também
indicam que mecanismos epigenéticos, como
modificações na metilação do DNA
padrão, estão envolvidos neste processo. Finalmente,
nossos dados mais recentes demonstram que
nutrição materna durante a gestação também pode
induzir alterações morfológicas e funcionais
no sistema NPY hipotalâmico na prole de novilhas que
provavelmente persistirão por muito tempo após
aniversário. Essas mudanças organizacionais que ocorrem
durante o desenvolvimento fetal têm o potencial
impactar não apenas a puberdade, mas também
influenciar o desempenho reprodutivo ao longo
idade adulta na fêmea bovina.
_ 2020 Elsevier Inc. Todos os direitos reservados.
Introdução
A puberdade é um evento maturacional e biológico
complexo
no mamífero fêmea que envolve aspectos físicos e
comportamentais
modificações associadas à ativação do

eixo hipotálamo-hipófise-ovariano e subsequente

estabelecimento da ciclicidade reprodutiva [1].
Puberdade
A maturação é iniciada em grande parte no nível
hipotalâmico por
o aumento da ativação de neurônios que secretam GnRH.
O
aumento na liberação pulsátil de GnRH e subseqüente
aumento na
A frequência de pulso de LH suporta o desenvolvimento
final de
folículos ovarianos e esteroidogênese necessários para o
primeiro
ovulação [2]. A maturação puberal é amplamente
controlada por
fatores genéticos e ambientais, entre os quais a nutrição
desempenha um papel fundamental. Dados
epidemiológicos em humanos e
resultados de pesquisas em vários modelos animais
inequivocamente
demonstram que o aumento da ingestão de nutrientes
durante o início
desenvolvimento (infantil e juvenil) avança a puberdade
em
fêmeas [2,3].
O momento do início da puberdade tem implicações
importantes
para a pecuária, principalmente para bovinos de corte
indústria. A produção de carne bovina em quase todas as
situações é sazonal
na natureza para coordenar os recursos alimentares com
o
necessidades nutricionais da barragem. Independente do
horário de
a época de reprodução, a natureza sazonal da produção
de carne bovina
exacerba a perda de eficiência resultante se a puberdade
não
não ocorrem na idade apropriada. Produtividade vitalícia
de
novilhas de corte depende em grande parte de sua
capacidade de alcançar
maturação reprodutiva, para conceber no início de sua
primeira estação reprodutiva, e parir pela primeira vez
por
aproximadamente 24 meses de idade [4]. Além disso, a
incidência
de múltiplos ciclos estrais antes da reprodução
direcionada positivamente
influencia a fertilidade de um ano [5]. No entanto, um
significativo
proporção de novilhas dentro dos sistemas de produção
de carne existentes
falham em alcançar os pontos finais de desenvolvimento
necessários
para facilitar a puberdade precoce (puberdade antes dos
14 meses de idade) [6].
Isso é particularmente verdadeiro para raças de
maturação tardia (por exemplo, Bos
indicus-influenciado) em que o tamanho do esqueleto
necessário para
apoiar uma gravidez saudável e segura é muitas vezes
bem alcançado
antes da puberdade. Portanto, uma melhor compreensão
do
mecanismos neuroendócrinos subjacentes à puberdade
podem ajudar
no desenvolvimento de novas estratégias gerenciais que
explorar a plasticidade cerebral durante janelas críticas de
desenvolvimento
para programar com sucesso a puberdade precoce em
novilhas.
Além de gerar informações translacionais para o
pecuária, o uso da fêmea bovina como animal
modelo para estudar os efeitos da nutrição no
neuroendócrino
função também tem o potencial de gerar
conhecimento com relevância biomédica humana. animal
grande
modelos, como ovinos e bovinos, fizeram
contribuições para uma melhor compreensão de vários
aspectos reprodutivos
processos em humanos [7]. Alguns benefícios do uso do
bovinos para pesquisa neuroendócrina e reprodutiva
incluem os seguintes atributos: 1) A fêmea bovina é uma
espécies não produtoras de serapilheira que são passíveis
de diferentes
procedimentos cirúrgicos e experimentais. 2) O corpo
grande
o tamanho permite perfis hormonais detalhados e
repetitivos
e medição da secreção hipotalâmica de neuropeptídeos
via canulação do terceiro ventrículo do cérebro. 3)
Bovídeos são domesticados, podem ser mantidos na
maior parte do tempo
tempo em um ambiente natural e, portanto, são menos
propensos a serem
submetido ao estresse do confinamento extremo. 4) O
gado é
uma espécie precoce com uma duração de gestação
semelhante à
humanos; portanto, a trajetória de desenvolvimento de
diversos
sistemas de órgãos, como o cérebro e o ovário, segue um
padrão semelhante ao dos humanos [8].
Os objetivos desta revisão são apresentar uma visão geral
dos mecanismos neuroendócrinos que controlam a
puberdade em
novilhas, discutem os efeitos da nutrição no
desenvolvimento puberal,
e resumir descobertas de pesquisas recentes sobre
os efeitos de programação da nutrição durante a
gestação e
início da vida pós-natal nas vias hipotalâmicas que
controlam
puberdade. Embora esta revisão se concentre
principalmente no
fêmea bovina, corroborando dados de outras espécies,
incluindo ovelhas e roedores, também são discutidos.
2. Controle neuroendócrino da puberdade
2.1. Padrão pré-púbere de secreção de LH
Na novilha, assim como em outras fêmeas de mamíferos,
o
processo de desenvolvimento subjacente à obtenção da
sexualidade
a maturação encontra-se no hipotálamo [1,2,9]. Assim,
baixa frequência
liberação de GnRH no hipotálamo-hipófise
sistema portal durante a pré-puberdade é finalmente
transformado
em um padrão de alta frequência de liberação como
maturação sexual
progride. Uma aceleração correspondente no
segue-se a secreção de LH pelos gonadotrofos
hipofisários e
permite a maturação final dos folículos ovarianos e a
primeira
ovulação [10,11]. O aumento peripuberal na frequência
de
Pulsos de LH não são observados na novilha até
aproximadamente
50 d antes do início da puberdade; portanto, os padrões
de secreção de LH
não pode ser usado para prever com segurança o
momento da puberdade
antes deste período [12]. É importante ressaltar que
estoques inadequados de
O LH na hipófise anterior não contribui para a pré-
puberdade
estado. Em ruminantes, um padrão de frequência muito
baixa
da liberação de GnRH é suficiente para estimular a síntese
de LHb por
gonadotrópicos e induzem estoques normais de LH na
hipófise
durante a pré-puberdade [13], bem como outros estados
de infertilidade
(por exemplo, anestro pós-parto). Embora a secreção de
FSH seja
também controlada pela liberação hipotalâmica de GnRH,
o FSH não é um
fator limitante na obtenção da puberdade [13]. Além
disso, sua
secreção temporal após a puberdade é modulada para
um nível muito
maior grau pelas concentrações circulantes de estradiol-
17b e os peptídeos ovarianos, inibina e ativina, do que
por
GnRH [14,15].
O papel do GnRH como controlador mestre da
reprodução
tornou-se dogma há quase 50 anos, quando foi
identificado
como o único neuropeptídeo que controla o LH e o FSH
liberação [16]. No entanto, a observação de que o LH é
liberado em
uma maneira episódica ou pulsátil foi descoberta pela
primeira vez
por acaso na macaca por Knobil e colegas
[17]. Logo foi determinado que este episódio
padrão de lançamento foi um resultado direto da
sincronia
despolarização dos neurônios GnRH [18] e caracterizada
por
saraivadas de atividade elétrica multiunitária no basal
medial
hipotálamo [19-22]. O fenômeno da sincronia
disparo de neurônios GnRH hipotalâmicos tem sido
referido
historicamente como o gerador de pulsos de GnRH
[23,24], mas, até
recentemente, permaneceu uma “caixa preta”
mecanicamente. Esse
começou a mudar no início dos anos 2000, após a
descoberta
de kisspeptina. Caracterização de mutações de perda de
função
em uma variante do receptor GPR54, agora denominado
Kiss1R, em humanos e camundongos [25,26], seguido de
caracterização
de seu ligante, a kisspeptina, provocou uma
nova compreensão de como os neurônios GnRH são
controlados
[27-29]. Interrupção da rede de sinalização da kisspeptina
resulta na interrupção do processo secretor de GnRH e
incapacidade de atingir a puberdade [25-27].
Correspondentemente, intracerebral
administração de kisspeptina acelera o início
da ovulação em ratas pré-púberes [30] e ovelhas [31].
Embora a maior parte dos trabalhos que caracterizam
este complexo
rede de sinalização não foi realizada em bovinos, uma
contribuição significativa para a nossa compreensão veio
de outro ruminante, a ovelha [31-34]. Descrições
sistemáticas
da localização e arquitetura de kisspeptina
neurônios já foram relatados, incluindo a identificação
de um subconjunto dentro do núcleo arqueado (ARC) que
colocaliza
3 peptídeos, kisspeptina, neuroquinina B (NKB) e
dinorfina (denominados neurônios KNDy) [35]. Esses
neurônios
também coexpressam receptores para NKB e dinorfina
[32];
no entanto, eles não contêm receptores de kisspeptina
[35]. O
Neurônios KNDy secretam kisspeptina em resposta a seus
próprios
liberação de NKB, que resulta na liberação de kisspeptina
em dois
localizações: corpos celulares de GnRH e seus terminais
no
eminência mediana do hipotálamo [35-38]. Esse
A sequência inicia a liberação síncrona de GnRH. Em
por sua vez, a ativação dos neurônios KNDy causa a
liberação de
dinorfina, que inibe a atividade do neurônio KNDy. O
cascata repetitiva deste ciclo controlado localmente
fornece,
pela primeira vez, uma explicação plausível para o
chamado
Gerador de pulsos de GnRH [39]. Na ovelha, existem
outros
neurônios kisspeptina na área pré-óptica (área
imediatamente
rostral ao hipotálamo) que não coexpressam NKB ou
dinorfina [40]. No entanto, semelhantes aos neurônios
KNDy, eles não
contêm receptor de estrogênio-a (ER-a) [41]. Estradiol
suprime
abundância de transcrição Kiss1 no ARC, mas
positivamente
modula neurônios kisspeptina na área pré-óptica
[41,42]. Nocaute de ESR1 (codificação do gene para ER-a)
em todos
neurônios que expressam kisspeptina avança o início da
puberdade
em camundongos, apoiando a afirmação de que o
estradiol
inerentemente restringe a secreção de GnRH/LH, função
ovariana,
e início da puberdade através do ER-a [42,43].
2.2. Escape neuroendócrino do feedback negativo do
estradiol
A inter-relação entre ER-a e kisspeptina
neurônios fornecem uma base potencial através da qual
as mudanças
no feedback negativo, a sensibilidade ao estradiol pode
regular
o momento da puberdade. Durante o período juvenil,
uma gônada dependente
A supressão do LH se desenvolve devido a um aumento
na sensibilidade aos efeitos de feedback negativo do
estradiol
[10,12,44]. Em muitas espécies, particularmente bovinos
e ovinos,
clara diminuição na sensibilidade de feedback negativo ao
estradiol
durante o período juvenil tardio anuncia o início da
puberdade
[11,12]. Experimentalmente, a eficiência do estradiol em
redução do número de pulsos de LH diminui com a idade
em
novilhas ovariectomizadas [45]. Este efeito serve de base
para a transição para um padrão de alta frequência de
GnRH/LH
liberação no início da puberdade (Fig. 1). No entanto,
Bedenbaugh
et al [46], usando a ovelha como modelo, descobriram
que o aumento
na pulsatilidade do LH em pré-púberes, ovariectomizadas
(OVX)-
ovelhas substituídas por estradiol foi associada a um
aumento,
em vez de uma diminuição, na abundância de mRNA de
ESR1 em
neurônios kisspeptina no ARC. Isso ocorreu apesar da
observação de que o número de neurônios kisspeptina foi
reduzido pelo estradiol. Da mesma forma, a ausência de
estradiol
substituição em ovelhas OVX resultou em um aumento
abundância de mRNA de ESR1 e porcentagem de
kisspeptina
Fig. 1. Alterações hormonais, metabólicas e
neuroendócrinas que ocorrem durante a maturação
puberal na fêmea bovina. Taxas aumentadas de ganho de
peso corporal resultam em concentrações elevadas de
sinais metabólicos, como leptina, insulina e IGF1, que por
sua vez promovem alterações no sistema
neuroendócrino. Esses as mudanças incluem uma
redução no tônus inibitório do NPY e aumento do tônus
excitatório do POMC. Consequentemente, a sensibilidade
aos efeitos inibitórios do estradiol sobre A secreção de
GnRH diminui, resultando em aumento da secreção
pulsátil de GnRH e LH. Este aumento da secreção pulsátil
de LH é fundamental para apoiar neurônios contendo a
proteína ER-a no ARC. Essas observações são contrários
às expectativas e, portanto, falharam em fornecer uma
explicação para a puberdade bem caracterizada escapar
do feedback negativo de estradiol em ovelhas e novilhas.
O desenvolvimento e a maturação de um estrogênio ativo
folículo pré-ovulatório resulta em concentrações
circulantes aumentadas de estradiol que, finalmente,
iniciam uma ação mediada por GnRH surto de LH. No
entanto, este positivo separado mecanismo de feedback
é funcional bem antes da puberdade [44] e, portanto, não
é um fator limitante no estabelecimento final do estado
puberal. 2.3. Sinais metabólicos que regulam o início da
puberdade O estado metabólico de um indivíduo é
percebido pelo sistema nervoso central (SNC) através de
uma variedade de sinais, inclusive vários que circulam na
corrente sanguínea. Esses sinais metabólicos podem
modular a secreção de GnRH e LH, direta ou
indiretamente [47]. Insulina, semelhante à insulina fator
de crescimento-1 (IGF1), leptina e grelina são metabólicos
hormônios que têm efeitos significativos sobre o tempo
da puberdade [47,48]. Por exemplo, tanto a insulina
quanto o IGF1 responder a planos crescentes de nutrição
e servir como moduladores positivos das vias de
sinalização neuroendócrinas no hipotálamo que
promovem a secreção de GnRH [47,48].
Correspondentemente, a restrição calórica dietética
atrasa início da puberdade [49-51]. Embora as
concentrações de leptina e insulina correlacionam-se
positivamente com o plano nutricional, A grelina
(produzida principalmente no estômago) é secretada
durante o jejum e restrição energética dietética crônica e
pode desempenhar um papel no atraso do início da
puberdade [52]. Mulheres pré-púberes sob um plano
positivo de nutrição geralmente exibem concentrações
crescentes de insulina, IGF1, e leptina à medida que a
puberdade se aproxima [53,54]. Leptina, primeiro
descoberto e caracterizado em meados da década de
1990, é sintetizado principalmente por adipócitos [55].
Em geral, aumentou adiposidade em novilhas pré-
púberes em desenvolvimento e outras fêmeas mamíferos
é acompanhada por concentrações aumentadas da
leptina plasmática [53,54], que desempenha um papel
permissivo no estabelecimento da puberdade [9,56].
mutações genéticas que eliminam a produção de leptina
ou a síntese de seu receptor resultar na incapacidade de
atingir a puberdade e esterilidade ao longo da vida

[57]. Se a leptina for reposta em mulheres obesas

deficientes em leptina
camundongos, a fertilidade é restaurada [58]. Frisch [59]
propôs pela primeira vez a
ideia de que uma quantidade crítica de gordura é
necessária para
fertilidade em humanos. Declínios significativos no tecido
adiposo
reservas resultam em efeitos aberrantes nos ciclos
ovarianos em fêmeas
mamíferos, e isso persiste até que as reservas de gordura
sejam
restaurado a algum nível mínimo. Porque a reprodução
cessa bem antes da fome, mecanismos que sinalizam
balanço energético negativo para os centros
hipotalâmicos que controlam
reprodução deve ser operável. No ruminante, o
efeitos estimulatórios da leptina na secreção de GnRH e
LH são restritos principalmente a períodos de estresse
nutricional
[60-62]. Esses efeitos têm sido demonstrados
por meio de ações diretas tanto no hipotálamo quanto na
hipófise
níveis [62,63]. Efeitos no nível hipotalâmico podem
influenciar
a secreção de GnRH, alterando a sensibilidade do
o eixo neuroendócrino reprodutivo ao estradiol
[2,10,12,13]. Como os neurônios GnRH não expressam o
receptor de leptina [64] ou ER-a [65], outros
hipotalâmicos
As vias de sinalização medeiam os efeitos de uma
mudança na leptina
ambiental em ruminantes. Estes incluem o neuropeptídeo
Y
(NPY) [66-68] e proopiomelanocortina (POMC) [69]
neurônios que se projetam e modulam a atividade
neuronal do GnRH
(Figura 1).
2.4. Vias neuroendócrinas mediando o metabolismo
controle da puberdade
Hormônios metabólicos, como leptina, insulina e IGF1,
influenciam o funcionamento dos neurônios
hipotalâmicos e
outros componentes celulares, controlando a secreção de
neuropeptídeos que regulam a ingestão de alimentos, o
gasto de energia,
e secreção de GnRH [70]. O ARC é um hipotálamo
área particularmente sensível a sinais metabólicos e é
portanto, uma região principal de integração de
hormônios e
outras pistas metabólicas com núcleos hipotalâmicos
adjacentes, como
bem como com outras regiões do SNC [71].
Duas populações neuronais no ARC são intermediários
chave
de leptina e outros sinais metabólicos sinalizando para
Neurônios GnRH: POMC e peptídeo relacionado agouti
(AgRP)/
Neurônios NPY [72]. A transcrição do POMC é
positivamente
regulada pela leptina [73] e resulta na produção do
peptídeo anorexígeno hormônio estimulante de alfa-
melanócitos
(a-MSH). Neurônios do hormônio liberador de
gonadotrofina
pode ser diretamente excitado por a-MSH através da
ativação do
receptor de melanocortina MC4R [74], que é
antagonizado por
AgRP [75]. Os peptídeos orexígenos AgRP e NPY são
produzido em condições de baixa sinalização de leptina,
jejum,
ou desnutrição [76]. O neuropeptídeo Y demonstrou
inibem a secreção de GnRH em vários mamíferos fêmeas,
incluindo a vaca [66]. Observações recentes mostram que
a ausência de receptores de leptina exclusivamente em
AgRPexpressing
neurônios atrasa a idade no primeiro estro em
camundongos [77]
destacam a importância da sinalização da leptina no
População NPY/AgRP durante a maturação puberal. Além
disso,
modulação da sinalização da melanocortina via ablação
de
AgRP ou heterozigosidade de MC4R completamente
restaurado puberal
desenvolvimento e fertilidade no receptor de leptina –
ratos deficientes. Isso demonstra a importância do
melanocortina na mediação da regulação da leptina
Secreção de GnRH e puberdade [78].
Kisspeptina, que como discutido anteriormente regula
diretamente
secreção de GnRH, também está envolvida no controle
metabólico
da função reprodutiva. Transcrição do gene que
codifica a kisspeptina, Kiss1, é regulado pela leptina;
hipoleptinemia
reduz o mRNA do Kiss1 hipotalâmico em roedores,
e a administração de leptina previne o jejum induzido
diminuição na abundância de mRNA de Kiss1 [79,80]. Pelo
menos um
subconjunto de neurônios kisspeptina em camundongos
[79] e ovelhas [81]
contém o receptor de leptina, indicando que a leptina
pode
influenciam diretamente a produção e liberação de
kisspeptina.
De fato, foi demonstrado que a leptina despolariza
diretamente
neurônios kisspeptina de cobaias [82]. No entanto, em
camundongos, foi proposto que a ação da leptina em
facilitar o início da puberdade pode não exigir
ações da leptina nos neurônios kisspeptina, mas podem
envolver
interneurônios localizados no núcleo pré-mamilar ventral
[83]. Da mesma forma, observações em ovelhas e ratas
indicam
que os principais efeitos da leptina no neuronal
kisspeptina
atividade envolvem grupos neuronais intermediários, que
provavelmente
incluem neurônios NPY [81] e POMC [84,85].
3. Regulação nutricional pós-natal da puberdade
3.1. Aceleração nutricional da puberdade em novilhas
A influência do estado nutricional durante o pós-natal
precoce
desenvolvimento na maturação reprodutiva é bem
conhecido em bovinos [5,53,86]. Estudos anteriores
conduzidos por
nosso grupo [51,54,68] e outros [87] mostraram que
aumentando a ingestão de nutrientes durante o
desenvolvimento juvenil
pode avançar acentuadamente a puberdade em novilhas.
Em estudos realizados
por Gasser et al [87], a maioria das novilhas desmamadas
em aproximadamente
3 meses de idade e alimentados com dietas de alto
concentrado para atingir
altas taxas de ganho de peso atingiram a puberdade
antes
300 dias de idade (puberdade precoce). Embora esses
estudos
foram realizados em bovinos das raças Bos taurus (Angus
e
Hereford), achados semelhantes foram observados em
nossos estudos
usando novilhas influenciadas por B indicus, que são
posteriormente
amadurecimento (as novilhas Angus normalmente
atingem a puberdade por volta
12 meses de idade, enquanto novilhas influenciadas por B
indicus atingem
puberdade entre 14 e 18 meses de idade). Em nossos
estudos,
novilhas foram desmamadas entre 3,5 e 4 meses de idade
e alimentadas com
dieta rica em concentrado para promover uma taxa de
peso corporal
ganho de aproximadamente 1 kg/dia [51,68]. Este regime
alimentar
puberdade significativamente avançada, com uma alta
porcentagem
(~85%) de novilhas atingindo a puberdade antes dos 12
meses de idade
em comparação com <20% para novilhas ganhando
apenas 0,5 kg/d durante
o mesmo período.
Identificar os períodos de desenvolvimento em que as
novilhas
são mais sensíveis à programação nutricional dos
primeiros
puberdade, usamos um regime nutricional escalonado
envolvendo
períodos alternados de restrição alimentar e
realimentação.
É importante ressaltar que descobrimos que novilhas que
ganharam corpo
peso em altas taxas entre 4 e 6,5 meses de idade e foram
subseqüentemente submetido a uma restrição alimentar
marcada entre
6,5 e 9 meses de idade, ainda atingiu a puberdade
precoce
(puberdade <12 meses de idade) a taxas comparáveis às
novilhas alimentadas
uma dieta rica em concentrado continuamente [51]. Da
mesma forma, B
novilhas taurus que foram alimentadas para ganho de
peso em alta
taxas entre 126 e 196 dias de idade exibiram uma alta
incidência
da puberdade precoce [87]. No entanto, a puberdade foi
não avançou na mesma proporção quando novilhas
foram alimentadas com
dieta semelhante mais tarde durante o desenvolvimento
juvenil. Coletivamente,
estes resultados indicam que durante o desenvolvimento
inicial,
plausivelmente entre 4 e 9 meses de idade, as novilhas
são mais
sensível aos efeitos de programação da nutrição em
avanço da puberdade.
3.2. Mecanismos metabólicos e neuroendócrinos
Na fêmea bovina, regimes nutricionais que promovam
altas taxas de ganho de peso corporal (1 kg/d) são
acompanhadas por
maior adiposidade e aumento das concentrações
circulantes
dos hormônios metabólicos leptina, insulina e IGF1
quando
em comparação com novilhas ganhando 0,5 kg/d de peso
corporal
[51,67,88]. Estas alterações metabólicas induzidas pelo
aumento
taxas de ganho de peso corporal promovem modificações
no
eixo neuroendócrino reprodutivo, que em última análise
resulta
no aumento da liberação pulsátil de GnRH e LH.
Utilizando
novilhas pré-púberes submetidas ao terceiro ventrículo
cerebral
canulação, observamos que a frequência de pulso de
GnRH
(líquido cefalorraquidiano) e LH (sangue jugular) foi de
fato
maior em novilhas ganhando 1 kg/d quando comparado a
novilhas
ganhando 0,5 kg/d entre 4 e 8 meses de idade [68].
Os mecanismos celulares e moleculares subjacentes ao
os efeitos dos sinais metabólicos na secreção de GnRH
envolvem
múltiplas vias hipotalâmicas e neuropeptídeos.
Aumento do ganho de peso corporal durante o
desenvolvimento juvenil
reduziu a abundância de mRNA AgRP [88] e NPY [67,88]
no
ARC, diminuiu as concentrações de NPY no cérebro
fluido coletado do terceiro ventrículo do cérebro
[68], e reduziu a magnitude das entradas neuronais do
NPY para
Neurônios GnRH [67]. Além disso, o aumento das taxas
de corpo
ganho de peso aumentou a abundância de mRNA POMC e
imunocoloração a-MSH (um produto do gene POMC) em
o ARC [69]. Um número aumentado de imunopositivos a-
MSH
contatos em neurônios kisspeptina e uma maior
porcentagem
de neurônios kisspeptina inervados por fibras a-MSH
também foram observados em novilhas ganhando peso
corporal em altas
taxa [69]. Coletivamente, essas observações sugerem que
taxas aumentadas de ganho de peso corporal induzem
alterações metabólicas
alterações em novilhas pré-púberes, que por sua vez
atuam no
hipotálamo para diminuir o tônus inibitório do NPY e
aumentar
o estímulo excitatório POMC (via a-MSH) na kisspeptina
e neurônios GnRH, promovendo assim o aumento pré-
púbere
na secreção pulsátil de GnRH/LH.
Mecanismos epigenéticos, como a metilação do DNA,
parecem desempenhar um papel importante neste
processo. Aumentou
taxas de ganho de peso corporal durante o
desenvolvimento juvenil
alterou o padrão de metilação do DNA no ARC da pré-
puberdade
novilhas [89]. Entre os genes que carregavam
modificações no estado de metilação foi o gene
que codifica o receptor do hormônio do crescimento
(GHR), cujo
expressão no ARC é mais abundante em NPY contendo
neurônios [90]. Novilhas submetidas a aceleração
crescimento juvenil exibiu hipermetilação em GHR, que
foi associado com uma diminuição na abundância de
mRNA de GHR em
o ARC [89]. Portanto, a potencial redução do crescimento
sinalização hormonal aos neurônios NPY/AgRP, através
alterações epigenéticas da abundância de transcritos de
GHR,
podem estar envolvidos na programação da puberdade
precoce em novilhas.
Essas observações corroboram a noção de que a
epigenética
modificações são jogadores fundamentais no processo de
programação das funções metabólicas e reprodutivas.
4. Regulação nutricional pré-natal da puberdade
A programação fetal, também conhecida como
programação de desenvolvimento,
é o conceito de que o período pré-natal, um período
em que ocorrem a organogênese e a diferenciação
tecidual.
através de mecanismos rigidamente controlados e
cronometrados, é uma
janela crítica de suscetibilidade para a programação da
descendência
fenótipo [91]. Alterações no ambiente intrauterino
durante este período crítico de desenvolvimento pode ter
implicações duradouras no crescimento pós-natal e na
saúde do
filhos. Efeitos de programação fetal foram demonstrados
em várias espécies e indicam que o tempo,
duração e a natureza do insulto/estímulo materno são
influências importantes nos resultados fisiológicos [92-
94].
Especificamente, bezerros que sofreram insulto
nutricional
durante o segundo e terceiro trimestres de gestação são
conhecido por ser altamente suscetível a esses efeitos
fisiológicos adversos
resultados [95].
Do ponto de vista neuroendócrino, estudos em roedores
demonstraram que a nutrição materna durante a
gestação
modula as vias hipotalâmicas que controlam o GnRH
liberar, programando assim a puberdade na prole
feminina
[96-98]. Em bovinos, no entanto, os efeitos da nutrição
pré-natal
no sistema neuroendócrino da prole permanecem
virtualmente
inexplorado. Usando um modelo bovino de desnutrição
pré-natal
ou supernutrição durante o segundo e terceiro trimestres
da gestação, recentemente começamos a explorar o
efeitos da nutrição pré-natal no desenvolvimento do
cérebro e
função neuroendócrina na descendência feminina (Fig. 2).
Alguns
de nossas descobertas iniciais estão resumidas no
seguinte
Seções.
4.1. Transporte de leptina através da barreira
hematoencefálica
A leptina é um hormônio chave que transmite
informações metabólicas
ao SNC, e alterações no estado nutricional podem
modular seu transporte através da barreira
hematoencefálica [99].
Em um estudo no qual ovelhas adultas obesas e magras
foram alimentadas para
ganhar ou perder peso, foi relatado que animais obesos
tinha transporte prejudicado de leptina através do sangue
cerebral
barreira [99]. Além disso, o transporte de periféricos
leptina administrada através da barreira
hematoencefálica não foi
revertido após significativa perda de peso corporal em
ovinos obesos.
Essas descobertas e dados gerados em outros modelos
animais
sugerem que a exposição de animais a um
hiperleptinêmico
ambiente, como o que se espera que ocorra no feto de
uma barragem de alto plano nutricional, pode resultar em
alterações fisiológicas na barreira hematoencefálica.
Portanto, postulamos que os descendentes de mães com
Graus amplamente variados de nutrição durante a
gestação podem
desenvolver um estado de resistência à leptina devido a
alterações estruturais
na barreira hematoencefálica.
Para testar essa premissa, investigamos a transcrição
abundância de várias isoformas de receptores de leptina
no
plexo coróide de novilhas submetidas a diferentes
tratamentos pré-natais
(magro, moderado e obeso) e pós-natal (baixo e alto)
tratamentos nutricionais. Notavelmente, o transporte de
leptina
através da barreira hematoencefálica depende da
expressão de
as diferentes isoformas curtas do receptor de leptina, que
atuam como transportadores de leptina em células
endoteliais [100]. Nós
descobriram que a restrição pré-natal de nutrientes
significativamente
reduziu a abundância de mRNA da forma curta do
receptor de leptina ObRc no plexo coróide de pré-
púberes
novilhas, enquanto não foram observadas alterações para
o ObRa
isoforma [101]. Além disso, a abundância de mRNA do
total
receptor de leptina (ObRt) também foi reduzido na
coróide
plexo de novilhas submetidas à desnutrição pré-natal.
Fig. 2. Diagrama esquemático resumindo os efeitos da
nutrição pré-natal e pós-natal precoce no
desenvolvimento do sistema neuroendócrino em
novilhas.
Alterações no estado nutricional e metabólico que
ocorrem em qualquer período de desenvolvimento entre
a vida fetal e a puberdade podem afetar o
desenvolvimento do hipotálamo.
vias que controlam a secreção de GnRH e a maturação
puberal. Nutrição materna adequada durante a gestação
em conjunto com taxas elevadas de
o ganho de peso corporal durante o desenvolvimento
pós-natal precoce resulta em várias alterações endócrinas
e neuroendócrinas que promovem a puberdade precoce.
Estes incluem 1)
aumento das concentrações circulantes de leptina,
insulina e IGF1; 2) reduziu a abundância de mRNA de NPY
e entradas de NPY (inibitórias) para neurônios GnRH; 3)
aumentado

Níveis de mRNA POMC e a-MSH

Curiosamente, a restrição pós-natal de nutrientes
aumentou a
Níveis de mRNA de ObRb, a longa isoforma do receptor
de leptina
envolvidos na sinalização da leptina, no plexo coróide de
novilhas submetidas à desnutrição pré-natal. Esses
resultados
indicam que a desnutrição pré-natal modula a transcrição
abundância das diferentes isoformas da leptina
receptor no plexo coróide, potencialmente reduzindo a
leptina
transporte através da barreira hematoencefálica na pré-
puberdade
novilhas. Esta premissa está atualmente sendo
investigada usando
modelo de canulação do terceiro ventrículo.
4.2. Via do neuropeptídeo Y
Usando o mesmo paradigma experimental mencionado
anteriormente, investigamos os efeitos interativos do
pré-natal
(restrito, moderado e supernutrição) e pós-natal
nutrição (baixa e alta) nos números de NPY
projeções (inibitórias) em direção aos neurônios GnRH.
Embora
nenhuma das combinações de tratamento alterou o
número de
neurônios GnRH, redução da nutrição pós-natal
aumentou o
número de neurônios GnRH em estreita aposição a NPY
contendo
projeções [101]. Curiosamente, esses efeitos
foram significativamente maiores em novilhas de nutrição
barragens restritas, sugerindo que a desnutrição pré-
natal
interage com a nutrição pós-natal para modular a
extensão da
Entradas neuronais NPY para neurônios GnRH. Apesar de
relevância funcional deste achado continua a ser
totalmente
explorado, é provável que os efeitos da desnutrição pré-
natal
aumentar as projeções de NPY para os neurônios GnRH
inibem a liberação pulsátil de GnRH e dificultam o
processo de
desenvolvimento puberal em novilhas. Conforme
discutido no
seção seguinte, alguns de nossos resultados preliminares
suportam
esta premissa.
4.3. Efeitos da nutrição materna no desenvolvimento
puberal
Nossos resultados preliminares indicam que a nutrição
materna
durante a gestação interage com a nutrição pós-natal
precoce para
programar a idade de puberdade em novilhas. Embora os
efeitos
da nutrição pós-natal foram mais significativas do que
efeitos maternos na idade na puberdade, novilhas
nascidas de mães
submetidos à restrição nutricional foram mais sensíveis
ao
efeitos deletérios do crescimento pós-natal limitado
[102].
Novilhas nascidas de mães com restrição de nutrientes e
submetidas
ao crescimento pós-natal limitado atingiu a puberdade
aproximadamente
90 d mais tarde do que novilhas de vacas supernutridas
que ganharam peso corporal em altas taxas pós-natal
[102]. Em
juntamente com nossos estudos neuroanatômicos, essas
observações
sugerem que a desnutrição pré-natal pode resultar
em alterações funcionais dentro do sistema
neuroendócrino
que resultam em puberdade atrasada e podem
potencialmente afetar
função reprodutiva subsequente durante a vida adulta. O
repercussões a longo prazo da desnutrição pré-natal
sobre
função neuroendócrina reprodutiva estão atualmente sob
investigação.
Por outro lado, um estudo anterior relatou que a
restrição de nutrientes durante o segundo e terceiro
trimestres
de gestação não afetou as taxas de crescimento, idade na
puberdade ou
contagem de folículos antrais em novilhas descendentes
[95]. Esse
discrepância nos resultados pode ser devido ao fato de
que o nível
de restrição de nutrientes no estudo de Cushman et al
[95]
foi muito moderado em comparação com nossos estudos.
Em seu estudo,
as vacas restritas tinham um escore de condição corporal
de 5,5 a 6 (escala
de 1 a 9; 1: emaciado, 9: obeso), enquanto em nosso
estudo,
as vacas restritas tinham um escore de condição corporal
de 3 a 3,5.
Outra possibilidade é que em seu estudo novilhas B
taurus
foram usadas em comparação com novilhas influenciadas
por B indicus em nosso
estudos. No entanto, considerando a importância da
programação para a pecuária e os dados limitados
disponível, estudos adicionais em bovinos são necessários
para determinar
os efeitos a longo prazo da desnutrição gestacional sobre
a prole e elucidar os mecanismos subjacentes.
5. Resumo e direções futuras
Em resumo, a nutrição durante a gestação e no início do
período pós-natal
vida pode regular o desenvolvimento do sistema
neuroendócrino
sistema e influenciar a puberdade em bovinos e outros
espécies de mamíferos. Entre os vários sinais metabólicos
que podem estar envolvidos neste processo, a leptina
desempenha um papel crítico
papel na transmissão de informações metabólicas para o
SNC e
também exerce efeitos organizacionais significativos
modulando
Desenvolvimento cerebral. Neurônios expressando NPY e
POMC em
o ARC são componentes importantes do neurocircuito
controlam a liberação de GnRH e são alvos para o
e efeitos ativadores da leptina. Além disso, KNDy
neurônios no ARC são um componente central do GnRH
gerador de pulsos e também são influenciados pela
programação
efeitos da nutrição precoce. Essas organizações
mudanças que ocorrem durante o desenvolvimento fetal
e pós-natal inicial
são susceptíveis de não só impactar a puberdade, mas
também influenciar
desempenho reprodutivo ao longo da vida adulta
na fêmea bovina. No momento, estamos investigando
isso
hipótese em um grupo relativamente grande de
indivíduos nutricionalmente programados
novilhas. No futuro, será importante
determinar os efeitos transgeracionais da nutrição
perinatal
em bovinos porque achados em outros modelos animais
sugerem que muitas características fenotípicas expressas
na F1
geração pode ser transmitida para as gerações
subseqüentes
(F2 e F3). Embora esses estudos sejam difíceis de realizar
em bovinos devido ao longo intervalo de geração, esta
informação
poderia ter implicações importantes para a vida animal
saúde e produtividade.
Declaração de contribuição de autoria do CRediT
R.C. Cardoso: Conceitualização, Curadoria de dados,
Formal
análise, aquisição de financiamento, investigação, projeto
administração, Recursos, Software, Supervisão, Validação,
Visualização, Redação - rascunho original, Redação -
revisão
& edição. S.M. Oeste: Investigação, Escrita - rascunho
original,
Redação - revisão e edição. TS Maia: Investigação, Escrita
- rascunho original, Redação - revisão e edição. B.R.C.
Alves:
Investigação, Redação - rascunho original, Redação -
revisão e
edição. G.L. Williams: Conceitualização, curadoria de
dados,
Análise formal, aquisição de financiamento, investigação,
projeto
administração, Recursos, Software, Supervisão, Validação,
Visualização, Redação - rascunho original, Redação -
revisão
& edição.
Agradecimentos
Este trabalho foi apoiado pela Agricultura e Alimentação
Bolsas Competitivas para Iniciativas de Pesquisa no. 2013-
67015-
20960 (GLW) e 2018-67015-27595 (RCC e GLW) de
Instituto Nacional de Alimentos e Agricultura do USDA.
Os autores declaram não haver conflito de interesses.
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