SUMÁRIO

1. Introdução...................................................................... 3
2. Transcrição.................................................................... 3
3. Exportação do mRNA para fora do núcleo.....14
4. Tradução.......................................................................15
5. Polirribossomos.........................................................20
Referências bibliográficas .........................................24
TRANSCRIÇÃO E TRADUÇÃO
1. INTRODUÇÃO
O DNA genômico não direciona a sín-
tese proteica diretamente, mas utiliza
o RNA como uma molécula interme-
diária. Quando a célula necessita de
uma proteína específica, a sequência
de nucleotídeos da região apropriada
de uma molécula de DNA imensa-
mente longa em um cromossomo é
inicialmente copiada sob a forma sob
a forma de RNA por meio de um pro-
cesso denominado transcrição. São
estas cópias de RNA de segmentos
de DNA que são usadas diretamen-
te como moldes para direcionar a
síntese da proteína em um processo
chamado de tradução. O fluxo da in-
formação genética nas células é, por-
tanto, de DNA para RNA para proteí-
na. Todas as células, desde a bactéria
até seres humanos, expressam sua
informação genética dessa maneira.
Um princípio tão fundamental que é
denominado dogma central da bio-
logia molecular.
2. TRANSCRIÇÃO
O primeiro passo executado pela cé-
lula para ler a informação necessária a
partir de suas instruções genéticas é
a cópia de uma parcela específica da
sequência de nucleotídeos do DNA,
ou seja, de um gene. O gene é copia-
do sob a forma de uma sequência de
nucleotídeos de RNA. A esse proces-
so denomina-se transcrição.
3
Assim como o DNA, o RNA é um polí-
mero linear composto de quatro tipos
diferentes de subunidades nucleotídi-
cas unidas entre si por ligações fofo-
diéster. O RNA difere quimicamente
do DNA em dois aspectos. Os nucle-
otídeos do RNA são ribonucleotíde-
os, isto é, eles contêm o açúcar ribose
em vez de desoxirribose presente no
DNA. Outra diferença é a existência
da base uracila (U) em vez da timi-
na (T) encontrada no DNA. A apesar
disso, a U, assim como a T, pode for-
mar pares pelo estabelecimento de li-
gações de hidrogênio com a adenina
(A). Em outras palavras, as proprieda-
des de complementaridade por pare-
amento de bases que se aplicam para
o DNA também são aplicáveis para o
RNA. A única peculiaridade do RNA,
nesse sentido, é a presença da U no
lugar da T.
A maioria dos genes carreados no
DNA das células especifica a sequ-
ência de aminoácidos de proteínas.
As moléculas que são copiadas a
partir desses genes são chamadas
de moléculas de RNA mensageiro
(mRNA). No entanto, as moléculas de
mRNA representam somente 3 a 5%
do peso seco de uma célula. Existem
outras variadas moléculas RNA, sen-
do que a maioria do RNA nas células
é constituída pelo RNA ribossômico
(rRNA). Veja na tabela abaixo os ti-
pos de RNA produzidos nas células.
TRANSCRIÇÃO E TRADUÇÃO
TIPO DE RNA
mRNAs (RNA mensageiro)
rRNAs (RNA ribossômico)
tRNAs (RNA transportador)
snRNAs (pequenos RNAs nucleares)
snoRNAs (pequenos RNAs nucleolares)
scaRNAs (pequenos RNAs de Cajal)
miRNAs (micro RNAs)
siRNAs (pequenos RNAs de
interferência)
RNAs não codificantes
Transcrição em procariotos
A transcrição começa com a abertura
e a desespiralização de uma peque-
na porção da dupla-hélice de DNA, o
que expõe as bases em cada fita de
DNA. Uma das duas fitas da dupla-
-hélice de DNA age, então, como um
molde para a síntese de uma molécu-
la de RNA. Assim como na replicação
do DNA, a sequência de nucleotídeos
da cadeia de RNA é determinada pela
complementariedade do pareamen-
to de bases entre os nucleotídeos a
serem incorporados e o DNA-molde.
Quando o pareamento adequado é
estabelecido, o ribonucleotídeo a ser
incorporado é covalentemente ligado
4
FUNÇÃO
Codificam proteínas.
Formam a estrutura básica do ribossomo e catalisam a síntese
proteica.
São elementos essenciais para a síntese proteica, funcionando
como adaptadores entre o mRNA e os aminoácidos.
Atuam em uma série de processos nucleares incluindo o splicing do
pré-mRNA
Utilizados para processar e modificar quimicamente os rRNAs
Usados para modificar snoRNAs e snRNAs.
Regulam a expressão gênica tipicamente pelo bloqueio da tradução
de mRNAs selecionados.
Desligam a expressão de genes pela degradação direta de mRNA
selecionados e pelo estabelecimento de estruturas de cromatina
compacta.
Atuam em diversos processos celulares, incluindo a síntese de
telômeros, a ativação do cromossomo X e o transporte de proteínas
para o retículo endoplasmático.
à cadeia de RNA em formação, por
meio de uma reação catalisada enzi-
maticamente pela RNA-polimerase.
Assim como a DNA-polimerase cata-
lisa a replicação do DNA, as RNA-po-
limerases catalisam a formação de li-
gações fofodiéster que conectam os
nucleotídeos entre si formando uma
cadeia linear.
A RNA-polimerase move-se pau-
latinamente sobre o DNA, desespi-
ralizando a dupla-hélice à frente do
sítio ativo de polimerização e, assim,
expondo uma fita molde para o pa-
reamento de bases por complemen-
taridade. Dessa maneira, a cadeia de
RNA em formação é estendida em
TRANSCRIÇÃO E TRADUÇÃO
um nucleotídeo por vez na direção 5’
para 3’. A hidrólise de trifosfatos de
nucleotídeos (como ATP, CTP, UTP
e GTP) fornece a energia necessária
para impulsionar essa reação.
Nas bactérias (principais represen-
tantes dos procariotos), a RNA-poli-
merase bacteriana é um complexo de
múltiplas subunidades que sintetiza
RNA a partir de um molde de DNA.
Uma subunidade destacável, deno­
minada fator sigma (σ), se associa
com o cerne da enzima e auxilia na
leitura dos sinais no DNA que indicam
onde iniciar a transcrição. Em conjun­
to, a enzima base (RNA-polimerase)
e o fator sigma (σ) são denominados
holoenzima RNA-polimerase. Esse
complexo adere firmemente ao DNA
bacteriano quando ele desliza em
uma região de dupla-hélice de DNA
denominada promotor, uma sequên-
cia especial de nucleotídeos indicando
o ponto inicial para a síntese de RNA.
A holoenzima polimerase, através de
seu fator σ, reconhece a sequência de
DNA promotor pelo estabelecimento
de contatos específicos com porções
de bases que estão expostas na face
externa de hélice (passo 1).
5
Após a RNA-polimerase se ligar for-
temente ao DNA promotor, ela abre a
dupla-hélice para expor uma peque-
na extensão de nucleotídeos em cada
fita (passo 2). Com o DNA desespi-
ralizado, uma das duas fitas de DNA
expostas age como um molde para a
complementaridade por pareamento
de bases com ribonucleotídeos que
são incorporados, dois dos quais são
unidos pela polimerase para dar iní-
cio a uma cadeia de RNA (passo 3).
Após cerca de 10 nucleotídeos de
RNA serem sintetizados, a enzima
quebra suas interações com o DNA
promotor, relaxa suas interações com
o fator σ e começa a se mover sobre o
DNA, sintetizando RNA (passos 4 e
5). A extensão da cadeia continua a
uma velocidade de aproximadamen-
te 50 nucleotídeos/segundo até que
a enzima libera a tanto cadeia-mol-
de de DNA, quanto a cadeia de RNA
recém-sintetizada (passo 7). Após a
enzima polimerase ter sido liberada
no terminador, ela reassocia-se com
um fator σ livre para forma uma ho-
loenzima que poderá começar nova-
mente o processo de transcrição. Veja
na figura abaixo os passos da trans-
crição descritos acima.
TRANSCRIÇÃO E TRADUÇÃO 6

Fator σ
RNA

DNA

RNA-polimerase

RNA
RNA
Figura 1. Fonte: Adaptado de ALBERTS, B.; JOHNSON, A. & WALTER, P. Biologia Molecular da Célula. 6ª Ed. 2017.

O terminador consiste em um se- de bases de Watson-Crick. Confor-

guimento de DNA que contém sinais
de terminação para a transcrição. No
caso da maioria dos genes bacteria-
nos, o sinal de terminação consiste em
uma fita de pares de nucleotídeos A-T,
precedida por uma sequência de DNA
duplamente simétrica, a qual, quando
transcrita em RNA, dobra-se em uma
estrutura em “grampo de cabelo” (ob-
serve a figura acima) pelo pareamento
me a polimerase transcreve um ter-
minador, a formação de um grampo
pode ajudar a “empurrar” o transcrito
de RNA para longe do sítio ativo. O
híbrido DNA-RNA no sítio ativo, que
está preso ao terminador predominan-
temente por interações entre pares de
bases U-A (os quais são menos está-
veis do que pares de bases G-C, pois
formam duas ligações de hidrogênio
TRANSCRIÇÃO E TRADUÇÃO
por par de bases em de três) não é su-
ficientemente forte para manter essa
união e dissocia-se, causando a libe-
ração da polimerase do DNA. É válido
lembrar que a transcrição em procario-
tos ocorre no citosol.
Transcrição em eucariotos
Em contraste com as bactérias, que
contêm um único tipo de RNA-poli-
merase, os núcleos eucarióticos têm
três: RNA-polimerase I, RNA-poli-
merase II e RNA-polimerase III. As
três polimerases são estruturalmente
similares entre si e, inclusive, à enzima
TIPO DE POLIMERASE
RNA-polimerase I
Todos os genes que codificam proteínas, além de genes de que codifi-
RNA-polimerase II
cam snoRNA, miRNA, siRNA e a maioria dos genes de snRNA.
Genes de tRNA, rRNA 5S, alguns snRNA e genes de outros pequenos
RNA-polimerase III
Apesar de a RNA-polimerase II eu-
cariótica apresentar muitas simi-
laridades estruturais em relação à
RNA-polimerase bacteriana, existem
várias diferenças importantes na ma-
neira como as enzimas bacterianas e
eucarióticas atuam. Por exemplo:
• Enquanto a RNA-polimerase bac-
teriana requer uma única prote-
ína adicional (o fator σ) para que
ocorra a transcrição, as RNA-po-
limerases eucarióticas necessitam
de diversas proteínas adicionais,
7
bacteriana, mas transcrevem diferen-
tes tipos de genes. As RNA-polime-
rases I e III transcrevem os genes que
codificam o tRNA, o rRNA e vários
pequenos RNAs. A RNA-polimerase
II transcreve a grande maioria dos ge-
nes, inclusive todos aqueles que codi-
ficam proteínas. Por isso, essa última
enzima se torna o cerne da descrição
dos processos envolvidos na transcri-
ção em eucariotos. Vale ressaltar que
a transcrição em eucariotos ocorre no
núcleo da célula. Confira na tabela
abaixo os genes transcritos pelas po-
limerases em eucariotos.
GENES TRANSCRITOS
Genes do rRNA 5,8S, 18 S e 28S.
RNAs.
coletivamente chamadas de fato-
res gerais de transcrição.
• A iniciação da transcrição eucarió-
tica precisa lidar com o DNA em-
pacotado em nucleossomos e sob
outras formas de estruturação de
cromatina, características ausen-
tes nos cromossomos bacterianos.
Os fatores gerais de transcrição
ajudam a posicionar a RNA-polime-
rase eucariótica corretamente sobre o
TRANSCRIÇÃO E TRADUÇÃO 8

promotor, auxiliam na separação das Início da transcrição

duas fitas de DNA para permitir que
a transcrição inicie e liberam a RNA-
-polimerase do promotor no modo de
extensão, uma vez que a transcrição TBP TFIID
tenha iniciado. Esses fatores consis-
tem em um grupo de proteínas inte-
rativas designadas como TFII (fator
de transcrição para a polimerase II)
e recebem nomes arbitrários, como TTFIIB
TFIIB, TFIID e assim por diante. Em
um sentido amplo, os fatores gerais
de transcrição eucarióticos desempe- CTD
TFIIF
nham funções equivalentes àquelas
do fator σ em bactérias.
O processo de transcrição tem início TFIIE
com a ligação do fator geral de trans-
crição TFIID a uma pequena sequên- TFIIH
cia de DNA de dupla-hélice composta RNA-polimerase II
por nucleotídeos T e A. Por esse moti-
vo, essa sequência é conhecida como
TATA, ou TATA box, e a subunidade
de TDFIID que reconhece é denomi-
nada proteína de ligação a TATA. A
sequência TATA box, geralmente,
UTP, ATP ATIVIDADE HELICASE E
está localizada 25 nucleotídeos antes CTP, GTP FOSFORILAÇÃO CTD
do sítio de início da transcrição. Ou-
DISSOCIAÇÃO DA MAIORIA DOS
tros fatores são então reunidos, junto FATORES GERAIS DA
à RNA-polimerase II, para formar um TRANSCRIÇÃO

complexo de iniciação de transcri-

ção completo.

SE LIGA! A sequência TATA não é a úni-

ca sequência de DNA que sinaliza o iní-
RNA
cio da transcrição. Porém, para a maioria
dos promotores de polimerase II, ela é a
TRANSCRIÇÃO
mais importante.
Figura 2. Fonte: Adaptado de ALBERTS, B.; JOHN-
SON, A. & WALTER, P. Biologia Molecular da Célula. 6ª
Ed. 2017.
TRANSCRIÇÃO E TRADUÇÃO
Após a formação de um complexo
de iniciação de transcrição sobre o
DNA, a RNA-polimerase II deverá ter
acesso à fita molde no ponto inicial
da transcrição. O TFIIH, o qual con-
tém uma enzima denominada DNA-
-helicase como uma de suas subuni-
dades, torna possível esse passo por
hidrólise de ATP, promovendo a de-
sespiralização do DNA e consequen-
temente expondo a fita-molde. A se-
guir, a RNA-polimerase II, da mesma
forma que a polimerase bacteriana,
se mantém no promotor, sintetizan-
do pequenos fragmentos de RNA
até sofrer uma série de alterações
estruturais que permitem sua saída
do promotor e a entrada na fase de
extensão da transcrição. Um evento
importante para essa transição é a
adição de grupos fosfato à “cauda” da
RNA-polimerase II, conhecida como
CTD, ou domínio C-terminal. Nesse
sentido, resíduos de serina da “cau-
da” são fosforilados pelo TFIID, o qual
contém uma proteína-cinase como
uma de suas subunidades. A polime-
rase pode então se separar do agru-
pamento de fatores gerais de trans-
crição. Durante esse processo, ela
sofre uma série de modificações con-
formacionais que fortalecem a sua in-
teração com o DNA e adquire novas
proteínas que lhe permite transcrever
por longas distâncias, e em muitos
casos por várias horas, sem se disso-
ciar do DNA.
9
Uma vez que a polimerase II tenha
iniciado a extensão do transcrito de
RNA, a maioria dos fatores gerais
de transcrição é liberada do DNA
de forma que eles estarão disponí-
veis para iniciar outro ciclo de trans-
crição, com outra nova molécula de
RNA-polimerase.
Um fato que ganha relevância em re-
lação a transcrição em eucariotos é a
forma como o DNA se encontra nas
células. O DNA das células eucarió-
ticas está empacotado em nucleos-
somos, os quais são posteriormente
organizados em estruturas de croma-
tina de alta magnitude. Como resul-
tado, a iniciação da transcrição nas
células eucarióticas requer uma ma-
quinaria molecular complexa. Nesse
sentido, a presença de um comple-
xo proteico conhecido como Media-
dor se torna relevante. O complexo
Mediador permite que as proteínas
ativadoras se comuniquem adequa-
damente com a polimerase II e com
os fatores gerais de transcrição. Fi-
nalmente, a iniciação da transcrição
nas células eucarióticas tipicamente
requer o recrutamento da cromatina
e enzimas modificadoras de histonas.
Ambos tipos de enzimas possibilitam
maior acesso ao DNA presente sob a
forma de cromatina e, assim, facilitam
a montagem da maquinaria de inicia-
ção da transcrição sobre o DNA.
TRANSCRIÇÃO E TRADUÇÃO
Proteínas ativadora
Estimulador
(sítio de ligação para a
proteína ativadora)
Mediador
INÍCIO DA TRANSCRIÇÃO
Figura 3. Fonte: Adaptado de ALBERTS, B.; JOHNSON, A. & WALTER, P. Biologia Molecular da Célula. 6ª Ed. 2017.
Processamento do mRNA
Os mRNAs bacterianos são sintetiza-
dos somente pela RNA-polimerase,
começando e finalizando em regiões
específicas do genoma. Nos eucario-
tos, no entanto, o cenário é bastan-
te diferente. Em particular, a trans-
crição é apenas o primeiro passo de
diferentes etapas necessárias para a
produção de um mRNA. Outras eta-
pas essenciais incluem a modificação
covalente de ambas extremidades do
RNA e a remoção de sequências de
íntrons que são retiradas do meio do
10
TATA box
Início da
LIGAÇÃO DOS FATORES GERAIS DE transcrição
TRANSCRIÇÃO, RNA-POLIMERASE, MEDIADOR,
COMPLEXOS DE REMODELAÇÃO DE
CROMATINA E ENZIMAS MODIFICADORAS DE
HISTONAS
Complexo de
remodelação da
cromatina
Enzimas modificadora de
histona
transcrito de RNA pelo processo de
splicing do RNA.
Ambas as extremidades do mRNA
eucariótico são modificadas pelo ca-
peamento na extremidade 5’ e pela
poliadenilação na extremidade 3’.
Essas extremidades especiais permi-
tem que a célula verifique se ambas
as extremidades de uma molécula
de mRNA estão presentes e, conse-
quentemente, se mensagem está in-
tacta, antes de exportar a sequência
de RNA do núcleo para ser traduzida
em proteína.
TRANSCRIÇÃO E TRADUÇÃO 11

Capeamento do RNA: a primeira é realizada por três enzimas agindo

modificação dos pré-mRNAs sucessivamente. Uma fosfatase re-
eucarióticos move um fosfato da extremidade 5’
do RNA nascente. Outra, uma gua-
Assim que a RNA-polimerase II tenha
nil-transferase, adiciona um GMP
produzido aproximadamente 25 nu-
em uma ligação reversa (5’ para 5’
cleotídeos de RNA, a extremidade 5’
em vez de 5’ para 3’). Uma terceira,
da nova molécula de RNA é modifi-
metil-transferase, adiciona um gru-
cada pela adição de um “quepe” que
po metil à guanosina.
consiste em um nucleotídeo guanina
modificado. A reação de capeamento

CAPEAMENTO DA EXTREMIDADE 5’
DISTINÇÃO DO mRNA
PARA OS OUTROS RNAS

Fosfatase remove
um Pi

Guanil-transferase
Adiciona um GMP

Metil-transferase
adiciona um Metil a
Guanosina

Figura 4. Fonte: Adaptado de ALBERTS, B.; JOHNSON, A. & WALTER, P. Biologia Molecular da Célula. 6ª Ed. 2017.

O quepe metil 5’ identifica a extre- os mRNAs dos outros tios de molécu-

midade 5’ de mRNAs eucarióticos, e las de RNA presentes na célula. Por
esta marca ajuda a célula a distinguir exemplo, as RNA-polimerases I e III
TRANSCRIÇÃO E TRADUÇÃO
produzem RNAs não-capeados du-
rante a transcrição, em parte porque
essas polimerases carecem de um
CTD. No núcleo, o quepe se liga a um
complexo proteico denominado com-
plexo de ligações ao quepe, o qual,
como discutiremos em seções subse-
quentes, ajuda o RNA a ser adequa-
damente processado e exportado. O
quepe metil 5’ também desempenha
um importante papel na tradução dos
mRNAs no citosol.
Splicing do RNA
As sequências codificantes de genes
eucarióticos são caracteristicamente
interrompidas por sequências inter-
venientes não codificantes, os íntrons.
Em outras palavras, os genes eucari-
óticos são encontrados sob a forma
de pequenos pedaços de sequências
expressas ou éxons intercaladas por
sequências muito longas, as sequên-
cias intervenientes ou íntrons. Assim,
a porção codificantes de um gene
eucariótico é, em geral, apenas uma
pequena fração do comprimento do
gene.
Tanto as sequências de íntrons quan-
to de éxons são transcritas em RNA.
As sequências dos íntrons são remo-
vidas do RNA recentemente sinteti-
zado (pré-RNA) por meio de um pro-
cesso denominado splicing de RNA.
Grande parte do splicing de RNA que
ocorre nas células atua na produção
de mRNA. Portanto, o splicing do
12
precursor de mRNA ganha grande
relevância. Somente após ter ocorri-
do o splicing e o processamento das
extremidades 5’ e 3’ esse RNA será
denominado mRNA.
Cada evento de splicing remove um
íntron, por meio de duas reações se-
quenciais de transferências de fosforil,
conhecidas como transesterificações,
as quais unem dois éxons, enquanto
removem o íntron sob a forma de um
“laço”. Uma vez que o número de li-
gações de fosfato de alta energia per-
manece o mesmo, tais reações podem
ocorrer, em princípio, sem hidrólise de
trifosfatos de nucleosídeo. Entretanto,
a maquinaria que catalisa o splicing
do pré-RNA é complexa, consistin-
do em cinco moléculas adicionais de
RNA e até 200 proteínas, e hidrolisa
muitas moléculas de ATP por evento
de splicing. Essa complexidade é pre-
sumivelmente necessária para asse-
gurar que o splicing seja exato, sen-
do ao mesmo tempo suficientemente
flexível para lidar com a enorme di-
versidade de íntrons encontrada em
uma célula eucariótica típica.
No contexto de uma escala de tempo
evolutiva, a presença de numerosos
íntrons no DNA permite que a recom-
binação genética facilmente combine
éxons de diferentes genes, possibili-
tando que genes para novas proteí-
nas evoluam mais facilmente por in-
termédio da combinação de partes de
genes preexistentes.
TRANSCRIÇÃO E TRADUÇÃO
Outra vantagem que é, atualmente,
observada é o splicing de diferentes
maneiras ou splicing alternativo.
Estima-se que 75% dos genes em
humanos sofram splicing alternativo,
permitindo que um mesmo gene pro-
duza um grupo de correspondente
de diferentes proteínas. Dessa forma,
esse processo concede aos eucario-
tos incrementar o já enorme potencial
codificante de seus genomas.
O splicing do RNA é realizado pelo
spliceossomo. Cinco moléculas de
RNA (U1, U2, U4 e U5 e U6) relativa-
mente pequenas, com menos de 200
nucleotídeos cada, constituem o ma-
quinário molecular envolvido na prin-
cipal forma de splicing do pré-mRNA.
Conhecidas como snRNAs ou pe-
quenos RNAs nucleares, cada uma é
complexada com pelo menos sete su-
bunidades proteicas para formar um
snRNP (pequena ribonucleoproteína
nuclear). As snRNPs formam o cerne
do spliceossomo, o grande complexo
de moléculas de RNA e de proteínas
que realiza o splicing do pré-mRNA
na célula.
13
Poliadenilação na extremidade 3’
À medida que a RNA-polimerase II
se aproxima do final de um gene, um
mecanismo similar ao capeamento da
extremidade 5’ assegura que a extre-
midade 3’ do pré-mRNA seja correta-
mente processada. Duas proteínas de
subunidades múltiplas, denominadas
fator de estimulação à clivagem (CstF)
e fator de especificidade de clivagem
e poliadenilação (CPSF) são de espe-
cial importância. Ambas movimen-
tam-se com a cauda da RNA-polime-
rase e são transferidas à extremidade
3’ da sequência em processamento
sobre uma molécula de RNA, logo
que ela emerge da RNA-polimerase.
Uma vez que CstF e CPSF se ligam a
sequências nucleotídicas específicas
sobre a molécula de RNA que está
em formação, proteínas adicionais
associam-se a elas para criar a extre-
midade 3’ do mRNA. Inicialmente, o
RNA é clivado. Logo após, uma enzi-
ma denominada poli-A-polimerase
(PAP) adiciona, um a um, aproxima-
damente 200 nucleotídeos A (adeni-
na) à extremidade 3’ produzida pela
clivagem. O nucleotídeo precursor
dessas adições é o ATP, e o mesmo
tipo de ligações 5’ a 3’ utilizado na
síntese convencional de RNA é for-
mado nessa situação.
TRANSCRIÇÃO E TRADUÇÃO 14

POLIADENILAÇÃO DA EXTREMIDADE 3’

mRNA é clivado

Adição ± 200
Nucleotídeos

Figura 5. Fonte: Adaptado de ALBERTS, B.; JOHNSON, A. & WALTER, P. Biologia Molecular da Célula. 6ª Ed. 2017.

Após a clivagem da extremidade 3’ 3. EXPORTAÇÃO DO mRNA

de uma molécula de pré-mRNA eu- PARA FORA DO NÚCLEO
cariótica, a RNA-polimerase II conti-
Os mRNAs adequadamente proces-
nua a transcrever, em alguns casos
sados são guiados através dos canais
transcrevendo até várias centenas de
aquosos dos complexos do poro
nucleotídeos. Mas a polimerase logo
nuclear (NPCs) da membrana nucle-
libera a sua pressão sobre a fita-mol-
ar, os quais conectam diretamente o
de, e a transcrição termina.
TRANSCRIÇÃO E TRADUÇÃO
nucleoplasma e o citosol. Pequenas
moléculas, com menos de 50.000
dáltons, podem difundir livremente
através desses canais. No entanto, a
maioria das macromoléculas celula-
res, inclusive mRNAs complexados a
proteínas, apresenta tamanho exces-
sivo, o que as impossibilita de atraves-
sar os canais sem o uso de processos
especiais. A célula usa energia para o
transporte ativo dessas macromolé-
culas em ambos os sentidos através
dos complexos do poro nuclear.
As macromoléculas são transporta-
das através dos complexos do poro
nuclear via receptores de transpor-
te nuclear, os quais, dependendo da
identidade da macromolécula, as es-
coltam do núcleo para o citoplasma
ou vice-versa. Para que ocorra a ex-
portação do mRNA, um receptor de
transporte nuclear específico deve ser
carregado sobre o mRNA, uma etapa
que, pelo menos em alguns organis-
mos, ocorre em concerto à clivagem e
poliadenilação 3’. Uma vez que tenha
auxiliado a transportar uma molécu-
la de RNA através do complexo do
poro nuclear, o receptor de transporte
se dissocia do mRNA, penetra nova-
mente o núcleo e exporta uma nova
molécula de mRNA.
4. TRADUÇÃO
Uma vez que o mRNA tenha sido
produzido por meio da transcrição
e do processamento, a informação
15
presente em sua sequência de nu-
cleotídeos é usada para sintetizar
uma proteína. Ocorre, portanto, uma
tradução da informação contida no
RNA para uma linguagem que en-
volve uma sequência de aminoácidos
que dará origem a uma proteína. Isso
ocorre por meio da aplicação de re-
gras que são conhecidas como códi-
go genético.
A sequência de nucleotídeos em uma
molécula de mRNA é lida em grupos
consecutivos de três. O RNA é um po-
límero linear de quatro diferentes nu-
cleotídeos, de tal forma que existem
64 combinações (4x4x4) possíveis
de três nucleotídeos: os tripletes AAA,
AUA, AUG, e assim por diante. Entre-
tanto, somente 20 aminoácidos dife-
rentes normalmente são encontrados
nas proteínas. Ou alguns tripletes de
nucleotídeos nunca são usados, ou o
código é redundante e alguns ami-
noácidos são determinados por mais
de um triplete. Essa segunda pos-
sibilidade é, de fato, a possibilidade
correta, conforme demonstrado pelo
código genético completamente de-
cifrado. Cada grupo de três nucleotí-
deos consecutivos no RNA é denomi-
nado códon, e cada códon especifica
ou um aminoácido, ou a finalização
do processo de tradução. É importan-
te ressaltar que o código genético é
utilizado universalmente em todos os
organismos conhecidos.
TRANSCRIÇÃO E TRADUÇÃO 16

Ribossomos Quando a síntese de proteínas não

está ativa, as duas subunidades do
A síntese de proteínas é guiada pela
ribossomo estão separadas. Elas se
informação presente nas molécu-
unem sobre uma molécula de mRNA,
las de mRNA. Para manter a fase
normalmente próxima à sua extremi-
de leitura correta e para assegurar a
dade 5’, para iniciar a síntese de uma
exatidão, a síntese é realizada no ri-
proteína. O mRNA é então puxado
bossomo, uma maquinaria catalítica
através do ribossomo. Conforme seus
complexa feita a partir de mais de 50
códons encontram os sítios ativos dos
proteínas ribossomais e diversas mo-
ribossomos, a sequência nucleotídica
léculas de RNA, os RNAs ribossômi-
do mRNA é traduzida em uma se-
cos (rRNAs). Uma célula eucariótica
quência de aminoácidos, usando os
típica contém milhões de ribossomos
tRNAs como adaptadores para adi-
em seu citoplasma. As subunidades
cionar cada aminoácido na sequência
ribossomais eucarióticas são mon-
correta à extremidade da cadeia po-
tadas nos nucléolos pela associação
lipeptídica em formação. Quando um
de rRNAs recém-transcritos e modi-
códon de terminação é encontrado, o
ficados com proteínas ribossomais,
ribossomo libera a proteína finalizada,
as quais foram transportadas para o
e suas duas subunidades separam-
interior do núcleo após sua síntese no
-se novamente. Essas subunidades
citoplasma. As duas subunidades ri-
podem então ser utilizadas para ini-
bossomais são então transportadas
ciar a síntese de outra proteína sobre
para o citoplasma, onde serão unidas
outra molécula de mRNA.
para realizar a síntese de proteínas.
Um ribossomo contém quatro sítios de
Os ribossomos eucarióticos e proca-
ligação para moléculas de RNA: uma
rióticos são muito similares tanto em
para o mRNA e três denominados sí-
forma quanto em função. Ambos são
tio A, sítio P e sítio E, que são para
compostos de uma subunidade gran-
tRNA. Uma molécula de tRNA adere
de e de uma subunidade pequena que
fortemente aos sítios A e P apenas
se encaixam para formar um ribosso-
se seus anticódons formam pares de
mo completo. A subunidade pequena
bases com o códon complementar na
fornece uma região sobre a qual os
molécula de mRNA que está ligada
tRNAs pode ser eficientemente pa-
ao ribossomo. Os sítios A e P estão
reados sobre os códons do mRNA,
suficientemente próximos para que
enquanto que a subunidade gran-
suas duas moléculas de tRNA se-
de catalisa a formação das ligações
jam forçadas a formar pares de base
peptídicas que unem os aminoácidos,
com códons adjacentes na molécu-
formando uma cadeia polipeptídica.
la de mRNA. Essa característica do
TRANSCRIÇÃO E TRADUÇÃO
ribossomo mantém a fase de leitura
correta no mRNA.
RNA transportador (tRNAs)
A tradução do mRNA em proteína de-
pende de moléculas adaptadoras que
podem reconhecer e se ligar ao códon
e, em outra região de sua superfície,
ao aminoácido. Esses adaptadores
consistem em um conjunto de pe-
quenas moléculas de RNA conhecido
como RNAs transportadores (tR-
NAs), cada um com tamanho aproxi-
madamente de 80 nucleotídeos.
Quatro pequenos segmentos do
tRNA dobrado formam dupla-héli-
ces, produzindo uma molécula que
se assemelha que se a uma folha de
trevo quando desenhada esquemati-
camente. Essa é a estrutura do tRNA.
Duas regiões de nucleotídeos não-
-pareados situadas em cada uma das
extremidades da molécula são cru-
ciais para a função do tRNA na sínte-
se de proteínas. Uma dessas regiões
forma o anticódon, um conjunto de
três nucleotídeos consecutivos que
pareiam com o códon complementar
em uma molécula de mRNA. A outra
é uma pequena região de fita simples
na extremidade 3’ da molécula: este é
o sítio onde o aminoácido que corres-
ponde ao códon é ligado ao tRNA.
17
Etapas da Tradução
A tradução ocorre por três etapas
subsequentes: iniciação, alongamen-
to e terminação.
Iniciação
A tradução de um mRNA inicia com
um códon AUG, e um tRNA especial
é necessário para iniciar a tradução.
Esse tRNA iniciador sempre carrega
o aminoácido metionina, portanto
todas as proteínas recém-formadas
possuem metionina como seu primei-
ro aminoácido em suas extremidades
N-terminal, a extremidade de uma
proteína que é sintetizada primeiro.
O tRNA iniciador pode ser especifi-
camente reconhecido pelos fatores
de iniciação, pois tem uma sequên-
cia nucleotídica distinta do tRNA que
normalmente carrega a metionina.
Nos eucariotos, o complexo iniciador-
-metionina (Met-tRNAi) é inicialmen-
te depositado sobre a subunidade ri-
bossomal pequena, juntamente com
proteínas adicionais denominadas
fatores de iniciação eucarióticos
ou eIFs. Apenas o tRNA carregado
com metionina é capaz de se ligar
firmemente à subunidade ribosso-
mal pequena, sem a presença do ri-
bossomo completo, sendo capaz de
ligar diretamente ao sítio P. A seguir,
a subunidade ribossomal pequena se
liga à extremidade 5’ de uma molé-
cula de mRNA, a qual é reconhecida
TRANSCRIÇÃO E TRADUÇÃO
em virtude de seu quepe 5’ e de seus
dois fatores de iniciação ligados, o eI-
F4E e o eIF4G. A subunidade ribos-
somal pequena então se move para
frente (5’ para 3’) sobre o mRNA, fa-
zendo uma varredura e procurando
pelo primeiro AUG. Esse movimento
é facilitado pelos fatores de iniciação
adicionais, que agem como helicases,
impulsionados por ATP. A tradução
então se inicia no primeiro AUG en-
contrado pela subunidade pequena.
Nesse ponto, os fatores de iniciação
dissociam-se, permitindo que a subu-
nidade ribossomal grande se associe
ao complexo e complete o ribossomo.
O tRNA iniciador encontra-se, nesse
momento, ligado ao sítio P, deixando
o sítio A livre. A síntese de proteína
está, portanto, pronta para iniciar.
Nas bactérias, o mecanismo para se-
lecionar o códon de iniciação é dife-
rente. Os mRNAs das bactérias não
possuem quepe 5’ para iniciar a pro-
cura pelo início da tradução. Em vez
disso, cada mRNA bacteriano contém
um sítio de ligação ao ribossomo es-
pecífico denominado sequência Shi-
ne-Dalgarno, o qual está localizado
uns poucos nucleotídeos acima do
AUG em que a tradução deve iniciar.
Essa sequência nucleotídica forma
pares de bases com o rRNA 16S da
subunidade ribossomal pequena para
posicionar o códon de iniciação AUG
no ribossomo. Um grupo de fatores de
iniciação da tradução orquestra essa
interação e a subsequente montagem
18
da subunidade ribossomal grande
para completar o ribossomo.
Diferentemente de um ribossomo
eucariótico, um ribossomo bacteria-
no pode facilmente ligar-se de modo
direto a um códon de iniciação que
esteja no interior de uma molécula de
mRNA, desde que um sítio de ligação
ribossomal o preceda por diversos
nucleotídeos. Como resultado, os mR-
NAs bacterianos com frequência são
policistrônicos, ou seja, codificam
várias proteínas diferentes, todas tra-
duzidas a partir da mesma molécula
de mRNA. Em contraste, um mRNA
eucariótico geralmente codifica uma
única proteína (monocistrônico).
Alongamento
Uma vez que a síntese de proteína
tenha sido iniciada, cada novo ami-
noácido é adicionado à cadeia em ex-
tensão em um ciclo de reações con-
tendo quatro passos iniciais: ligação
do tRNA, formação da ligação pep-
tídica, translocação das subunidades
grande e pequena. Como resultado
dos dois passos de translocação, o ri-
bossomo completo move-se três nu-
cleotídeos sobre o mRNA e é posicio-
nado para dar início ao próximo ciclo.
Partindo do princípio que alguns ami-
noácidos já foram ligados entre si e
que já existe uma molécula de tRNA
no sítio P no ribossomo ligada cova-
lentemente à extremidade da cadeia
polipeptídica em crescimento, no
TRANSCRIÇÃO E TRADUÇÃO
passo 1 do alongamento, um tRNA
carregando o próximo aminoácido
da cadeia liga-se ao sítio A ribosso-
mal, formando pares com o códon do
mRNA lá posicionado. Dessa forma, o
sítio P e o sítio A contêm tRNAs adja-
centes ligados. No passo 2, a extre-
midade carboxila da cadeia polipep-
tídica é liberada do tRNA no sítio P
pelo rompimento da ligação altamen-
te energética entre o tRNA e seu ami-
noácido. A carboxila é, então, ligada
ao grupo amino livre do aminoácido
ligado ao tRNA no sítio A, formando
uma nova ligação peptídica. Essa re-
ação central da síntese de proteínas
é catalisada por uma peptidil-trans-
ferase contida na subunidade ribos-
somal grande. No passo 3, a subuni-
dade grande se move em relação ao
mRNA que está preso à subunidade
pequena, o que interfere nas hastes
aceptoras dos dois tRNAs que se en-
contram nos sítios E e P da subunida-
de grande. No passo 4, outra série de
modificações conformacionais move
a subunidade pequena e o mRNA a
ela conectado exatamente três nucle-
otídeos, reposicionando o ribossomo
de tal forma que ele está pronto para
receber o próximo aminoacil-tRNA. O
passo 1 é então repetido com a che-
gada de um novo aminoacil-tRNA, e
assim por diante.
Dois fatores de extensão entram e
saem do ribossomo a cada ciclo, cada
um hidrolisando GTP em GDP e le-
vando a modificação conformações
19
no processo. Esses fatores são de-
nominados EF-Tu e EF-G em bacté-
rias, e EF1 e EF2 em eucariotos. Sob
determinadas condições in vitro, os
ribossomos podem ser induzidos a
realizar a síntese proteica sem a aju-
da desses fatores de extensão e da
hidrólise de GTP, mas essa síntese é
muito lenta, ineficiente e inexata. O
acoplamento de alterações mediadas
pela hidrólise de GTP nos fatores de
extensão às transições entre os dife-
rentes estados do ribossomo aumen-
ta bastante a velocidade do processo.
Os ciclos de associação dos fatores
de extensão, hidrólise de GTP e dis-
sociação asseguram que as mudan-
ças conformacionais ocorram em um
sentido “para a frente” e, dessa ma-
neira, a tradução pode proceder com
maior eficiência.
Terminação
O final da mensagem codificadora de
uma proteína é sinalizado pela pre-
sença de um de três códons de ter-
minação: UAA, UAG ou UGA. Eles
são reconhecidos por um tRNA e não
determinam um aminoácido. Em vez
disso, sinalizam para o ribossomo o
final da tradução. As proteínas co-
nhecidas como fatores de termina-
ção ligam-se a qualquer ribossomo
que possua um códon de terminação
posicionado no sítio A, e esta ligação
força a peptidil-transferase no ri-
bossomo a catalisar a adição de uma
TRANSCRIÇÃO E TRADUÇÃO 20

molécula de água em vez de um ami- finalizada é imediatamente liberada

noácido no peptidil-tRNA. Essa rea-
ção libera a extremidade carboxila da
cadeia polipeptídica em crescimento
de sua conexão a uma molécula de
tRNA. Tendo em vista que apenas
essa conexão normalmente mantém
unido o polipeptídio em crescimento
ao ribossomo, a cadeia de proteína
no citoplasma. O ribossomo, então, li-
bera o mRNA e separa-se nas duas
subunidades grande e pequena, as
quais podem associar-se sobre essa
mesma ou outra molécula de mRNA
para iniciar um novo cilco de síntese
de proteínas.

QUADRO RESUMO: FATORES DE TRADUÇÃO

PAPEL PROCARIOTOS EUCARIOTOS
eIF-1, eIF-1A, eIF-2, eIF-2B, eIF-3,
Iniciação IF-1, IF2, IF-3 eIF-4A, eIF-4B, eIF-4E, eIF-4G,
eIF-5
Alongamento EF-Tu, EF-Ts, EF-G eEF-1α, eEF-1βγ, eEF-2
Terminação RF-1, RF-2, RF-3 eRF-1, Erf-3

5. POLIRRIBOSSOMOS citoplasmáticos compostos de vá-

A síntese da maioria das moléculas
de proteína leva entre 20 segundos
e alguns minutos. Porém, mesmo du-
rante esse período bastante curto, é
comum ocorrerem iniciações múlti-
plas sobre cada molécula de mRNA
que está sendo traduzida. Assim que
o ribossomo precedente tenha tradu-
zido o suficiente da sequência nucle-
otídica para mover-se, a extremidade
5’ da molécula de mRNA é capturada
por um novo ribossomo. As molécu-
las de mRNA que estão sendo tra-
duzidas são, consequentemente, de
modo geral encontradas sob a forma
de polirribossomos, também conhe-
cidos como polissomos. Estas estru-
turas consistem em grandes arranjos
rios ribossomos separados por cerca
de 80 nucleotídeos sobre uma única
molécula de mRNA. Essas iniciações
múltiplas permitem que a célula pro-
duza muito mais moléculas de prote-
ína em um espaço de tempo deter-
minado do que seria possível se cada
ribossomo tivesse que completar o
processo antes que o próximo ribos-
somo o iniciasse.
Tanto as bactérias quanto os eucario-
tos utilizam polissomos, e ambos em-
pregam estratégias adicionais para
acelerar ainda mais a taxa de síntese
proteica. Tendo em vista que o mRNA
bacteriano não necessita de proces-
samento e que ele está acessível aos
ribossomos ao mesmo tempo em que
TRANSCRIÇÃO E TRADUÇÃO 21

está sendo produzido, os ribossomos

podem ligar se à extremidade livre de
uma molécula de mRNA bacteriano TRANSCRIÇÃO
e iniciar sua tradução, mesmo antes
que a transcrição deste RNA esteja
finalizada, seguindo bastante próxi-
mos da RNA-polimerase, à medida
que ela se move sobre o DNA. Em PROCARIOTO
eucariotos as extremidades 5’ e 3’
do mRNA interagem. Portanto, assim
que um ribossomo se dissocia, suas
FATOR σ RNA-POLIMERASE
duas subunidades estão em uma po-
sição ótima para reiniciar a tradução
sobre a mesma molécula de mRNA.
DNA PROMOTOR

DESESPIRALIZAÇÃO DE UMAPORÇÃO
DA DUPLA-HÉLICE DE DNA

FITA-MOLDE DNA

QUEBRA DAS
INÍCIO DA TRANSCRIÇÃO
INTERAÇÕES DA
POLIMERASE COM
FATOR σ E O PROMOTOR

EXTENSÃO DA CADEIA DE RNA

BASES DE
WATSON-CRICK
(“GRAMPO DE CABELO”)
RNA

TERMINADOR
MENSAGEIRO

TRANSPORTADOR

RIBOSSÔMICO

OUTROS TIPOS
TRANSCRIÇÃO E TRADUÇÃO 22

TRANSCRIÇÃO

EUCARIOTO

RNA-POLIMERASE

I II III

FATORES GERAIS DE TATA BOX

TRANSCRIÇÃO (TFII)

COMPLEXO DE INICIAÇÃO
DE TRANSCRIÇÃO

DESESPIRALIZAÇÃO DE UMA PORÇÃO

DA DUPLA-HÉLICE DE DNA

FITA-MOLDE DNA

FOSFORILAÇÃO
DA “CAUDA” DA
INÍCIO DA TRANSCRIÇÃO
POLIMERASE II

EXTENSÃO DA CADEIA DE RNA

QUEPE METIL NA
EXTRMIDADE 5’ PRÉ-mRNA

CAPEAMENTO SPLICING POLIADENILAÇÃO

PAP
REMOÇÃO DOS UNIÃO ENTRE ÉXONS ALTERNATIVO
ÍNTRONS (“LAÇO”)

INCREMENTO ADICIONA 200

NO POTENCIAL NUCLEOTÍDEOS A NA
CODIFICANTE DO EXTREMIDADE 3’
GENOMA

mRNA EXPORTAÇÃO PARA

(PROCESSADO) FORA DO NÚCLEO
TRANSCRIÇÃO E TRADUÇÃO 23

INÍCIO DA TRADUÇÃO

REDUNDANTE 64 CÓDONS
CÓDON AUG

UNIVERSAL 20 AMINOÁCIDOS (AA)

SEQUÊNCIA SHINE- SUBUNIDADE GRANDE
DALGARNO
CÓDIGO GENÉTICO SUBUNIDADE
RIBOSSOMOS
FATORES DE PEQUENA
Met-tRNAi INICIAÇÃO
PROCARIÓTICOS tRNA ESTRUTURA EM
“FOLHA DE TREVO”

MAQUINÁRIO EXTREMIDADES
INICIAÇÃO TRADUÇÃO
MOLECULAR
ANTICÓDON
FATORES DE
Met-tRNAi INICIAÇÃO SÍTIO DE LIGAÇÃO P/AA
EUCARIÓTICOS
ALONGAMENTO TERMINAÇÃO
SUBUNIDADE trocar
UAA
RIBOSSOMAL PEQUENA
FATORES DE CÓDONS DE
UAG
PASSO 1 NOVO tRNA NO SÍTIO A TERMINAÇÃO TERMINAÇÃO
QUEPE 5’
UGA

CÓDON AUG LIGAÇÃO PEPTÍDICA

PASSO 2 DISSOCIAÇÃO DAS
(PEPTIDIL-TRANSFERASE) SUBUNIDADES
RIBOSSÔMICAS
INÍCIO DA TRADUÇÃO TRANSLOCAÇÃO LIBERAÇÃO DA
PASSO 3 DA SUBUNIDADE CADEIA DE PROTEÍNA
RIBOSSOMAL GRANDE FINALIZADA

TRANSLOCAÇÃO
PASSO 4 DA SUBUNIDADE CITOPLASMA
RIBOSSOMAL PEQUENA
TRANSCRIÇÃO E TRADUÇÃO 24

REFERÊNCIAS
BIBLIOGRÁFICAS
ALBERTS, B.; JOHNSON, A. & WALTER, P. Biologia Molecular da Célula. 6ª Ed., Artmed
Editora, 2017.
ALBERTS, B.; BRAY, D.; JOHNSON, A. et al. Fundamentos da Biologia Celular. 6ª Ed., Artmed
Editora, 2017.
TRANSCRIÇÃO E TRADUÇÃO 25