Method 1664b 2010.en - PT

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com
Estados Unidos Escritório de Água

Agência de Proteção Ambiental (4303) Fevereiro de 2010
Método 1664, Revisão B: Material

Extraível de n-Hexano (HEM; Óleo e
Graxa) e Material Extraível de n-
Hexano Tratado com Sílica Gel (SGT-
HEM; Material Não Polar) por Extração
e Gravimetria
Fevereiro de 2010
Escritório de Água da Agência de Proteção
Ambiental dos EUA (4303T)
Avenida Pensilvânia, 1200, NW
Washington, DC 20460
EPA-821-R-10-001
Método 1664, Revisão B
Agradecimentos
A revisão B deste método foi preparada pela Divisão de Engenharia e Análise do Escritório de
Água da EPA. A EPA agradece a assistência da DynCorp Information and Enterprise Technology
na preparação das versões anteriores. Além disso, a EPA agradece a Xenosep Technologies pelos
seus comentários e análises.
Isenção de responsabilidade
Este método foi revisado pela Divisão de Engenharia e Apoio Analítico da Divisão de Engenharia
e Análise (EAD) da OST e aprovado para publicação. A menção de nomes comerciais ou
produtos comerciais não constitui endosso ou recomendação de uso.
Contato
Dúvidas relativas a este método ou sua aplicação devem ser encaminhadas para:
Equipe de métodos CWA ou Lemuel Walker

US EPA
Divisão de Engenharia e Análise, Escritório de
Ciência e Tecnologia MC 4303T
1200 Avenida Pensilvânia NW
Washington, DC 20460
OSTCWAMethods@epa.gov
Walker.Lemuel@epa.gov
Cópias adicionais deste método estão disponíveis em: http://www.epa.gov/waterscience/methods/
Fevereiro de 2010 eu
Índice
Introdução................................................. .................................................. ................................. iii 1.0
Escopo e Aplicação ............................................. .................................................. ....... 1

2,0 Resumo do Método ............................................... .................................................. .......... 6
3,0 Definições.................................................. .................................................. ........................ 6
4,0 Interferências.................................................. .................................................. ....................6
5,0 Segurança ................................................. .................................................. ................................ 7
6,0 Equipamentos e suprimentos ............................................... .................................................. .... 7
7,0 Reagentes e Padrões ............................................. .................................................. ... 10

8,0 Coleta, Preservação e Armazenamento de Amostras .......................................... ........................ 11
9,0 Controle de qualidade ................................................ .................................................. ............... 12
10,0 Calibração e Padronização................................................. ........................................... 19

11,0 Procedimento ................................................... .................................................. ........................ 19
12,0 Análise de dados e cálculos ............................................. ........................................... 24

13,0 Desempenho do Método.................................................. .................................................. ....... 25
14,0 Prevenção de poluição................................................ .................................................. ........ 25

15,0 Gestão de resíduos................................................ .................................................. ......... 25
16,0 Referências................................................. .................................................. ...................... 26
17,0 Tabelas ................................................... .................................................. ............................ 27
18,0 Glossário de Definições e Finalidades......................................... ................................... 27
Fevereiro de 2010 eu
Introdução
A EPA retirou todos os métodos de óleo e graxa usando clorofluorocarbono-113 (CFC-113; Freon-113) como
solvente de extração na regra final publicada em 7 de março de 2007; 72 FR 11199, incluindo o Método 413.1
aprovado e os Métodos 418.1 e 418.2, que nunca foram aprovados para uso em 40 CFR 136, embora
estivessem listados nos agora desatualizados Métodos para Análise Química de Água e Resíduos (EPA
600/4-79- 020; NTIS PB84-128677). Como tal, o Método EPA 1664, Revisão B: Material Extraível de n-Hexano
(HEM; Óleo e Graxa) e Material Extraível de n-Hexano Tratado com Sílica Gel (SGT-HEM; Material Não Polar) é o
único método EPA aprovado para a medição de óleo e graxa.
O termo “Material Extraível de n-Hexano (HEM; Óleo e Graxa)” reflete o material extraído por hexano como aquele
que está sendo medido usando o Método 1664 e que o nome comum “óleo e graxa” está sendo mantido devido à sua
familiaridade com o comunidade analítica. O termo “Material extraível de n-hexano tratado com sílica gel (SGT-HEM;
Material não polar)” designa as substâncias que permanecem após o material extraível com n-hexano ser exposto ao
gel de sílica. Na regra final publicada em 14 de maio de 1999 (64 FR 26315) o termo “Material Não Polar” (NPM) foi
escolhido para evitar confusão na comunidade analítica com o termo “hidrocarbonetos totais de petróleo” (TPH), pois
este termo pode medir uma propriedade ou material diferente, ou empregar diferentes técnicas analíticas, incluindo
espectroscopia infravermelha e cromatografia gasosa.
O Método 1664B é um método baseado em desempenho aplicável à medição dos parâmetros HEM e SGT-HEM definidos
pelo método a partir de matrizes aquosas e requer o uso de n-hexano como solvente de extração, gravimetria como
técnica determinante e inclui procedimentos adicionais de CQ projetado para monitorar precisão e exatidão. Embora a
modificação pelo analista de um método de analito aprovado e definido pelo método geralmente não seja permitida,
algumas alterações baseadas no desempenho podem ser aceitáveis. No entanto, deve-se notar que, devido à natureza de
alguns fluxos de descarga/resíduos, nem todas as amostras podem ser passíveis de análise com um método modificado
(por exemplo, SPE como a modificação) e para estas amostras, 1664B deve ser aplicado conforme escrito .
O objetivo desta atualização é fornecer informações adicionais para melhorar o desempenho do método e definir mais
claramente por exemplo:
1. Modificações permitidas para uso em todo o país sem revisão prévia da EPA (40 CFR 136.6).
2. Modificações não permitidas.
As modificações listadas abaixo e incluídas na Seção 1.7 não pretendem ser uma lista exaustiva de todas as
modificações possíveis no método, mas sim representam modificações que foram apresentadas à EPA por
várias partes interessadas e nossa determinação de sua aceitabilidade para uso no Método 1664B.
Em reconhecimento dos avanços que estão ocorrendo na tecnologia analítica, são permitidas ao laboratório certas
opções para melhorar as separações ou reduzir os custos das medições, desde que todas as especificações de
desempenho sejam atendidas. Essas opções incluem dispositivos alternativos de extração e concentração e
procedimentos como extração contínua líquido-líquido (CLLE), evaporação, concentração Kuderna-Dinamarquesa e
extração em fase sólida (SPE). Técnicas determinativas alternativas, como imunoensaio e espectroscopia
infravermelha, e alterações que degradam o desempenho do método ou alteram a química do método, incluindo o
uso de solventes de extração diferentes de n-hexano (85% de pureza mínima, 99,0% min. C saturado6isómeros,
resíduos inferiores a 1 mg/L – ver Secção 7.3) não são permitidos. Se for utilizada uma técnica analítica diferente
das técnicas especificadas neste método, essa técnica deve ter uma especificidade igual ou melhor que a
especificidade das técnicas deste método para HEM e/ou SGT-HEM na amostra de interesse. A especificidade é
definida como a produção de resultados equivalentes aos resultados produzidos por este método para padrões
analíticos (Seção 9.2.2) e, quando aplicável, amostras ambientais (Seção 9.2.3), e que atendem a todos os critérios
de CQ estabelecidos neste método. Qualquer modificação deste método, além daquelas expressamente
permitidas, será considerada uma modificação importante, sujeita à aplicação e aprovação de procedimentos de
teste alternativos sob 40 CFR 136.4 e 136.5.
Fevereiro de 2010 iii


Material Extraível de n-Hexano (HEM; Óleo e Graxa) e Material
Extraível de n-Hexano Tratado com Sílica Gel (SGT-HEM;
Material Não Polar) por Extração e Gravimetria
1.0 Escopo e Aplicação
1.1 Este método é para determinação de material extraível de n-hexano (HEM; óleo e graxa) e material extraível
de nhexano que não é adsorvido por sílica gel (SGT-HEM; material não polar) em águas superficiais e salinas
e resíduos aquosos industriais e domésticos . Os materiais extraíveis que podem ser determinados são
hidrocarbonetos relativamente não voláteis, óleos vegetais, gorduras animais, ceras, sabões, graxas e
materiais relacionados. O método é baseado em métodos anteriores da Agência de Proteção Ambiental
(EPA) para determinação de “óleo e graxa” e “hidrocarbonetos totais de petróleo” (Referências 16.1 e 16.2).
1.2 Este método é para uso nos programas de pesquisa e monitoramento da Agência de Proteção Ambiental
(EPA) sob a Lei da Água Limpa; a Lei de Conservação e Recuperação de Recursos; a Lei Abrangente de
Resposta, Compensação e Responsabilidade Ambiental; e outros programas regulatórios da EPA. “Óleo e
graxa” é um poluente convencional sob a Lei da Água Limpa e codificado em 40 CFR 401.16. O termo
“material extraível com n-hexano” reflete que este método pode ser usado para determinar outros
materiais além de óleos e graxas. Da mesma forma, o termo “material extraível com n-hexano tratado com
sílica gel” reflete que este método pode ser usado para determinar o material que não é adsorvido pela
sílica gel (material não polar).
1.3 Este método não é aplicável à medição de materiais que volatilizam a temperaturas abaixo de aproximadamente 85°C.
Combustíveis de petróleo, desde gasolina até óleo combustível nº 2, podem ser parcialmente perdidos na operação de
remoção de solvente.
1.4 Alguns óleos brutos e óleos combustíveis pesados contêm uma percentagem significativa de materiais que não são
solúveis em n-hexano. Consequentemente, as recuperações destes materiais podem ser baixas.
1,5 Este método é capaz de medir HEM e SGT-HEM na faixa de 5 a 1000 mg/L, e pode ser estendido para
níveis mais elevados através da análise de um volume menor de amostra coletada separadamente.
1.6 Para HEM e SGT-HEM neste método, o limite de detecção do método (MDL) é 1,4 mg/L e o nível
mínimo de quantificação (ML) é 5,0 mg/L (Referência 16.3).
1.7 O laboratório tem permissão para modificar o método para superar interferências ou reduzir o custo das
medições, desde que todos os critérios de desempenho deste método sejam atendidos. Os requisitos para
estabelecer a equivalência de métodos são apresentados nas Seções 9.1.2 e 9.2.3.
Alguns exemplos de modificações permitidas e inaceitáveis incluem:
1.7.1 Modificações permitidas
1.7.1.1Técnicas alternativas de extração, incluindo extração contínua líquido-líquido,

extração em fase sólida, extração com solvente aquecido em fase sólida,
extração em fase sólida-Soxhlet e outros. Os produtos aceitáveis de extração
em fase sólida (SPE) incluem: Filtros Xenosep para Método EPA 1664, no. 24547
e 25390H ou equivalente; UCT LLC Cartucho de óleo e graxa no.
Fevereiro de 2010 1
ECUNIOGXF, ou equivalente; ou outros produtos SPE que atendam a todos os critérios de

desempenho do método, como Horizon part no. 50-021-HT, padrão Snip and Pour QC ou
equivalente.
1.7.1.2Técnicas de concentração alternativas, incluindo concentração Kuderna-dinamarquesa

e evaporação usando panelas, béqueres e frascos de alumínio, bem como temperaturas
definidas pelo usuário e tempos de concentração aproximados.
1.7.1.3A exigência de secar o frasco de ebulição por 30-45 minutos no forno

mantido a 70 ± 2 °C na Seção 11.4.2.2 pode ser completamente omitido ou substituído por
uma temperatura mais baixa definida pelo usuário e/ou tempo de secagem mais curto.
1.7.1.4Uma concentração padrão de PAR (Precisão e Recuperação) mais baixa, como

20 mg/L podem ser usados para adicionar amostras de matriz, desde que a
concentração do pico seja: (a) maior que a concentração de fundo, (b) menor ou
igual ao nível de conformidade regulatória e (c) todo controle de qualidade
requisitos são alcançados.
1.7.1.5A coleta e a análise de um volume menor de amostra são permitidas, desde que todas
os requisitos de controle de qualidade da Seção 9 são atendidos. Se forem usados
volumes de amostra menores, todo CQ e demonstração inicial e contínua de amostras de
desempenho devem usar o mesmo volume que as amostras de volume menor. Para
obter um pico de matriz proporcionalmente menor na concentração de OPR
recomendada de 40 mg/L, ou seja, adicionar 0,1 mL do padrão PAR de 4 mg/mL para cada
10 mL de volume de amostra proporcionalmente menor ou fração do mesmo. Para
relatar os valores mais precisos de HEM e SGT-HEM em mg/L, subtraia o valor em branco
do método de volume menor do valor da amostra de volume menor, desde que o valor
de recuperação do pico de matriz de volume menor seja igual ou maior que o MDL para o
modificado método. Multiplique esse valor amostral proporcionalmente menor pelo fator
de diluição apropriado e expresse o resultado final da amostra em mg/L. Por exemplo, se
4. 4 mg/100 mL foi o resultado para a amostra proporcionalmente menor e 0,6 mg/100
mL foi o resultado para o branco do método, a concentração relatada da amostra deve
ser 38,0 mg/L ([4,4 mg/100 mL – 0,6 mg/100 mL] x 10 = 38,0 mg/L). Além disso, todas as
amostras devem ser associadas a um branco de método de 1 L não contaminado antes
que os resultados possam ser relatados para fins de conformidade regulatória.
1.7.1.6As balanças devem ser calibradas com um peso adicional de classe superior “S” em
para colocar entre parênteses o valor de pesagem final esperado. Além disso, a frequência de
calibração da balança conforme a Seção 9.5 pode ser modificada para antes e depois de cada
dia, desde que todos os requisitos de CQ sejam atendidos e o laboratório aceite a
responsabilidade por seus resultados.
1.7.1.7Todas as amostras devem ser acidificadas e/ou verificadas em laboratório para pH<2 imediatamente
antes da análise. Se a análise for atrasada por mais de quatro horas, ajuste a amostra
no campo para pH<2 com HCl ou H2ENTÃO4solução (Seção 7.2) no momento da
coleta e refrigerar a 0-6 °C (40 CFR 136, Tabela II). Se a amostra for enviada por
transportadora comercial, os regulamentos do Departamento de Transportes dos
EUA (consulte 49 CFR Parte 172) limitam o pH ao mínimo
Fevereiro de 2010 2
de 1,96 se HCl for usado e 1,15 se H2ENTÃO4é usado. (Ver 40 CFR Parte 136, Tabela
II, nota de rodapé 3).
1.7.1.8O uso de pré-filtros opcionais, auxiliares de filtração, lã de vidro e/ou outros meios
incluindo centrifugação e sedimentação para auxiliar no processamento de amostras
específicas é permitido de acordo com a Seção 11.3.5. Conforme apropriado, as amostras
acidificadas a pH<2 que assentaram durante o armazenamento refrigerado podem ser
analisadas “como estão” em vez de primeiro misturar e depois centrifugar a amostra para
atingir um estado físico sedimentado semelhante antes da análise.
1.7.1.9Se forem utilizados filtros SPE no lote analítico, todos deverão ser da mesma marca e diâmetro
do fabricante. Se filtros SPE de marcas de fabricantes diferentes ou diâmetros diferentes
forem usados em lotes ou métodos analíticos diferentes, cada método SPE diferente
deverá ter seu próprio gráfico de controle de qualidade.
1.7.1.10O laboratório pode escolher aleatoriamente pelo menos um representante

fluxo de descarga/resíduos para o pico da matriz para cada lote de amostras analisadas e
deve manter um registro contínuo de sua seleção. No entanto, o laboratório não pode
utilizar para o pico de matriz o mesmo fluxo de descarga/resíduos que foi utilizado no lote
imediatamente anterior, a menos que o laboratório analise apenas um fluxo de descarga/
resíduos. Se o mesmo fluxo de descarga/resíduos for selecionado, o laboratório deve
selecionar aleatoriamente o pico da matriz entre descargas/fluxos de resíduos não
utilizados para o lote imediatamente anterior.
1.7.1.11É permitido o uso de tratamentos repetitivos com sílica gel, bem como
quantidades, desde que seja mantida a proporção mínima de tratamento de 3 g de sílica gel
para cada 100 mg de HEM, conforme Seção 11.5.
1.7.1.12O uso de papel de separação de fases solvente ou outro meio equivalente pode ser
usado em vez de sulfato de sódio para remover a água do extrato, desde que todos os
requisitos de CQ sejam atendidos, especialmente as Seções 9.3 e 9.4, pico de matriz e brancos
de laboratório, respectivamente.
1.7.1.13Poderá ser utilizado o uso de sílica gel equivalente ao especificado na Seção 7.7,
desde que todos os critérios de desempenho de CQ neste método sejam atendidos.
1.7.1.14O uso de um tempo de agitação do extrato otimizado (seção 11.3.4) e/ou um número
otimizado de extrações de n-hexano (seção 11.3.9) é permitido, desde que todos os
critérios de desempenho de CQ neste método sejam alcançados.
1.7.1.15Os padrões de referência de hexadecano e ácido esteárico podem ser armazenados no

escuro em um refrigerador à prova de explosão para ajudar a evitar a evaporação da
acetona, desde que: 1) O nível de volume da temperatura ambiente esteja claramente
marcado no recipiente e 2) O padrão pode ser reequilibrado à temperatura ambiente
antes do uso.
1.7.1.16Enxaguar garrafas ou aparelhos com solvente polar para limpeza de vidros

(Seção 6.1.2), ou outros fins, é permitido, desde que o solvente: 1) seja
imediatamente enviado para o lixo, 2) seja suficientemente removido das
superfícies de contato para não introduzir o analito alvo na amostra, 3) não
colocado com o solvente de extração n-hexano e 4) não será coletado no
Fevereiro de 2010 3
navio coletor. Consulte a Seção 1.7.2.1 e a nota abaixo dessa seção para
requisitos adicionais do aparelho SPE.
1.7.1.17As amostras podem ser analisadas dentro de uma temperatura controlada e definida pelo usuário
faixa para melhorar a eficiência da extração, desde que todas as amostras (incluindo CQ) sejam
analisadas sob condições semelhantes e todos os critérios de desempenho de CQ neste método
sejam alcançados.
1.7.2 Modificações inaceitáveis
1.7.2.1O solvente de extração deve ser n-hexano (85% de pureza mínima, 99,0% min.
C saturado6isómeros, resíduo inferior a 1 mg/L – ver Secção 7.3). Não são
permitidos solventes ou co-solventes de extração alternativos, incluindo
metanol, acetona e outros que reajam ou introduzam o poluente alvo na
amostra.
No entanto, um enxágue com metanol ou outro solvente polar após a filtração da

amostra pode remover a água residual ao usar a tecnologia SPE em um método
modificado, desde que:
1. O enxágue com metanol é imediatamente descartado.
2. O filtro SPE é suficientemente seco ao ar com vácuo para remover qualquer

metanol residual remanescente no filtro SPE em quantidades vestigiais, de
modo a garantir que o metanol residual não introduza o analito alvo na
amostra e em nenhum momento o metanol residual se colocará ou será
coletados com as extrações de n-hexano.
3. O laboratório deve demonstrar e documentar as condições operacionais

apropriadas (1 e 2) acima para permitir o uso do metanol.
OBSERVAÇÃO: É permitido o uso de um solvente polar para condicionar um filtro SPE ou

dispositivo SPE em um método modificado antes da filtração da amostra. O uso de metanol ou
outro solvente polar após a filtração da amostra para remover a água residual pode ser
permitido, desde que o solvente polar seja imediatamente descartado e o filtro SPE ou
dispositivo SPE seja suficientemente seco ao ar com vácuo para remover qualquer solvente
polar residual em quantidades vestigiais. portanto, em nenhum momento o solvente polar
residual introduzirá o analito alvo na amostra, será colocado ou coletado com o solvente de
extração, n-hexano. Um teste simples para determinar a remoção suficiente de solvente polar
residual de um filtro SPE por secagem a vácuo e ar seria pesar e registrar o peso de um filtro
SPE seco com aproximação de 0,1 mg. Em seguida, analise um branco usando o filtro SPE seco,
condicionar o filtro SPE e filtrar a amostra em branco pelo método SPE modificado.
Imediatamente após descartar o solvente polar para o lixo (e antes da adição do solvente de
extração de n-hexano), interrompa o vácuo, remova o filtro SPE do aparelho e pese o filtro SPE
úmido saturado com solvente polar residual com aproximação de 0,1 mg. Registre o peso do
filtro SPE úmido. Remonte o filtro SPE úmido no aparelho e continue secando o filtro SPE com
ar a vácuo até que o peso do filtro SPE úmido seja inferior a 101% do peso do filtro SPE seco.
Por exemplo, se o peso do filtro SPE seco for 1.000,0 mg, continue secando o filtro SPE úmido
ao ar a vácuo até que o peso final seja menor ou igual a 1.010,0 mg antes de contatar o filtro
SPE com o solvente de extração n-hexano.
Fevereiro de 2010 4
1.7.2.2Técnicas determinativas alternativas, como espectroscopia infravermelha ou

imunoensaio e alterações que prejudiquem o desempenho do método não são
permitidas.
OBSERVAÇÃO: Os métodos 418.1 e 418.2 da EPA, que empregavam CFC-113 como solvente de extração e
espectroscopia infravermelha e gravimetria respectivamente como técnica determinante, nunca foram aprovados
para uso em 40 CFR Parte 136, embora estivessem listados em Métodos para Análise Química de Água e Resíduos
(EPA 600/4-79-020; NTIS PB84-128677). Na norma definitiva publicada em 12 de março de 2007; 72 FR 11199, EPA
retirou a aprovação de todos os métodos de óleo e graxa que empregavam cloroflurocarbono-113 (CFC-113,
Freon-113) como solvente de extração e gravimetria ou espectroscopia infravermelha como técnica determinante.
1.7.2.3Devido à natureza não homogênea das amostras de águas residuais e ao alto

probabilidade de que o material extraível possa entrar em contato e aderir a uma ampla
variedade de superfícies (incluindo substâncias na amostra, bem como o frasco e a tampa
da amostra) e ser distribuído de forma não uniforme por toda a amostra, subamostragem
ou análise inferior ao volume total coletado de amostra não é permitida.
1.7.2.4Não é permitida uma alteração nos padrões de n-hexadecano e ácido esteárico

porque os dados de desempenho para este método foram desenvolvidos usando estes
padrões de referência.
1.7.2.5Colocação dos padrões de n-hexadecano e ácido esteárico no extrator

(funil de separação, corpo CLLE, reservatório SPE, etc.) para melhorar potencialmente a
recuperação do pico de matriz não é permitido, pois a recuperação aceitável do pico de
matriz do recipiente de amostra deve ser demonstrada de acordo com a Seção 9.3.2.2
(Referência 16.10)
1,8 Qualquer modificação deste método, além daquelas expressamente permitidas, será considerada uma
modificação importante, sujeita à aplicação e aprovação de procedimentos de teste alternativos sob 40 CFR 136.4
e 136.5.
OBSERVAÇÃO: Laboratórios ou descarregadores na Região 8 da EPA ou regulamentados pela EPA podem solicitar à Região 8
uma aplicação de ATP de uso limitado para usar o Método 1664 “Cu” modificado para abordar resultados inflados com
enxofre coloidal ou tiossulfato em amostras de água produzida. Para cumprir a nova regulamentação e poder utilizar o 1664
“Cu” modificado, o laboratório ou licenciado deve, no mínimo:
1. Execute o Método 1664B e demonstre resultados falsamente altos e fora de conformidade

2. Execute o Método 1664 “Cu” modificado e demonstre resultados em conformidade com os níveis de licença
3. Documentar a interferência e determinar o motivo do resultado fora de conformidade devido à
presença de enxofre coloidal ou tiossulfato no efluente específico
4. Solicite à Região 8 a aprovação de um pedido de ATP de uso limitado para usar o Método 1664 “Cu”
modificado em vez do Método 1664B para o efluente específico.
O uso deste método modificado em outras regiões da EPA requer o envio ao respectivo escritório regional da EPA
ou à autoridade reguladora apropriada de um pedido de ATP de uso limitado para aprovação (40 CFR 136.4 e
136.5).
Fevereiro de 2010 5
1,9 Cada laboratório que utiliza este método, com ou sem as modificações permitidas acima, deve
demonstrar a capacidade de gerar resultados aceitáveis utilizando o procedimento da Seção 9.2.
2.0 Resumo do Método
2.1 Uma amostra de 1 L é acidificada até pH <2 e extraída em série três vezes com n-hexano (85% de pureza
mínima, 99,0% min. C saturado6isómeros, resíduo inferior a 1 mg/L – ver Secção 7.3) num funil de
separação. O extrato é seco sobre sulfato de sódio.
2.2 O solvente é destilado do extrato e o HEM é dessecado e pesado. Se o HEM for utilizado
para determinação de SGT-HEM, o HEM é redissolvido em n-hexano.
2.3 Para a determinação de SGT-HEM, uma quantidade de sílica gel proporcional à quantidade de HEM é
adicionada à solução contendo o HEM redissolvido para remover materiais polares. A solução é
filtrada para remover a sílica gel, o solvente é destilado e o SGT-HEM é dessecado e pesado.
2.4 A qualidade é garantida através de calibração e testes dos sistemas de extração, destilação e
gravimétricos.
3.0 Definições
3.1 HEM e SGT-HEM são analitos definidos pelo método; ou seja, as definições de HEM e SGT-HEM
dependem do procedimento utilizado e, como tal, o único solvente de extração permitido é o hexano
(85% de pureza mínima, 99,0% min. C saturado6isómeros, resíduo inferior a 1 mg/L – ver Secção 7.3)
com gravimetria como técnica determinante. O uso de co-solventes, solventes alternativos ou técnicas
determinativas diferentes da gravimetria, incluindo espectroscopia infravermelha, imunoensaio e
cromatografia gasosa, não é permitido porque a química do método é alterada. A natureza dos óleos
e/ou graxas e a presença de matéria extraível não oleosa na amostra influenciarão o material medido
e a interpretação dos resultados.
3.2 As definições dos termos usados neste método são fornecidas no glossário no final do método.
4.0 Interferências
4.1 Solventes, reagentes, vidrarias e outros equipamentos de processamento de amostras podem gerar artefatos que
afetam os resultados. Pode ser necessária seleção específica de reagentes e purificação de solventes.
4.2 Todos os materiais utilizados na análise devem ser demonstrados como livres de interferências através da execução de brancos
de laboratório conforme descrito na Seção 9.4.
4.3 A limpeza da vidraria é feita por lavagem em água quente contendo detergente, enxágue com água da torneira e
destilada e enxágue com solvente ou fermento. Os frascos de ebulição que conterão o resíduo extraído são secos
em estufa a 105–115°C e armazenado em dessecador.
Fevereiro de 2010 6
4.4 Os finos de sulfato de sódio e sílica gel têm o potencial de aumentar os resultados de HEM e SGT-HEM ao
passarem pelo papel de filtro. Se o papel de filtro especificado neste método for inadequado para a
remoção desses finos, recomenda-se o uso de um filtro de 0,45 mícron.
4,5 As interferências extraídas das amostras variam consideravelmente de fonte para fonte, dependendo da
diversidade do local que está sendo amostrado. Nos casos em que se pensa que as amostras consistem em
matrizes complexas contendo substâncias (tais como partículas ou detergentes) que podem interferir com o
procedimento de extracção, poderá ser necessário recolher uma amostra mais pequena para análise.
5.0 Segurança
5.1 A toxicidade ou carcinogenicidade de cada reagente utilizado neste método não foi determinada com precisão; no
entanto, cada produto químico deve ser tratado como um perigo potencial para a saúde. A exposição a estes
produtos químicos deve ser reduzida ao nível mais baixo possível. Sugere-se que o laboratório realize o
monitoramento da higiene pessoal de cada analista que utiliza esse método. Este monitoramento deve ser
realizado usando métodos de monitoramento de higiene pessoal aprovados pela Administração de Segurança e
Saúde Ocupacional (OSHA) ou pelo Instituto Nacional de Segurança e Saúde Ocupacional (NIOSH). Os resultados
deste monitoramento devem ser disponibilizados ao analista.
5.2 Foi demonstrado que o n-hexano tem efeitos neurotóxicos aumentados em relação a outros hexanos e
alguns outros solventes. A OSHA propôs uma média ponderada no tempo (TWA) de 50 partes por milhão
(ppm); O NIOSH concorda que um TWA/limite de exposição permitido (PEL) de 8 horas de 50 ppm é
apropriado para n-hexano; e a Conferência Americana de Higienistas Industriais Governamentais (ACGIH)
publicou um valor limite (TLV) de 50 ppm para n-hexano. A inalação de n-hexano deve ser minimizada
realizando todas as operações com n-hexano em uma capela à prova de explosão ou em uma área bem
ventilada.
5.3 n-Hexano tem um ponto de inflamação de -23°C (-9°F), tem limites de explosão no ar na faixa de 1-7% e representa um
sério risco de incêndio quando aquecido ou exposto a chamas. O n-hexano pode reagir vigorosamente com materiais
oxidantes. O laboratório deve incluir procedimentos nas suas operações que abordem o manuseamento seguro do n-
hexano.
5.4 Amostras desconhecidas podem conter altas concentrações de compostos tóxicos voláteis. Os
recipientes de amostras devem ser abertos com capuz e manuseados com luvas para evitar exposição.
5.5 Este método não aborda todas as questões de segurança associadas ao seu uso. O laboratório é responsável por manter
um ambiente de trabalho seguro e um arquivo de conhecimento atualizado dos regulamentos da OSHA relativos ao
manuseio seguro dos produtos químicos especificados neste método. Um arquivo de referência de fichas de dados de
segurança de materiais (MSDSs) deve estar disponível para todo o pessoal envolvido nessas análises. Informações
adicionais sobre segurança laboratorial podem ser encontradas nas Referências 16.4–16.6.
6.0 Equipamentos e Suprimentos
OBSERVAÇÃO: Nomes de marcas, fornecedores e números de peças são apenas para fins ilustrativos. Nenhum endosso
está implícito. Desempenho equivalente pode ser alcançado utilizando aparelhos e materiais diferentes dos aqui
especificados, mas a demonstração de desempenho equivalente que atenda aos requisitos deste método é de
responsabilidade do laboratório.
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6.1 Equipamento de amostragem
6.1.1 Frascos de coleta de amostras – Vidro, aproximadamente 1 L, com tampa de rosca revestida de PTFE
OBSERVAÇÃO: Nos casos que necessitam de coleta de uma amostra conhecida ou suspeita de conter >500 mg/L de HEM
(Seção 8.1.2), ou que consiste em uma matriz complexa contendo substâncias (como partículas ou detergentes) que podem
interferir no procedimento de extração (Secção 4.5), pode ser utilizado um recipiente de amostra mais pequeno.
6.1.2Limpeza
6.1.2.1Garrafas – Lavar com água detergente, enxaguar com água da torneira, tampar com papel alumínio e
leve ao forno a 200–250°C por no mínimo 1 h antes do uso. O enxágue com solvente pode ser usado no
lugar do cozimento.
6.1.2.2Revestimentos para tampas de rosca – lavagem com água com detergente, água da torneira e enxágue com solvente e
leve ao forno a 110–200°C por no mínimo 1 h antes do uso.
6.1.3 Os frascos e os invólucros devem ter lote certificado como isentos de artefatos, executando brancos de laboratório
de acordo com este método (conforme Seção 9.4). Se os espaços em branco de frascos e/ou revestimentos sem
limpeza ou com menos etapas de limpeza do que o exigido acima não apresentarem materiais detectáveis, as etapas
de limpeza de frascos e revestimentos que não eliminam esses artefatos podem ser omitidas.
6.2 Equipamento para limpeza de vidros
6.2.1 Pia de laboratório com capela suspensa.
6.2.2 Forno – Capaz de manter uma temperatura dentro de ± 2 ºC na faixa de 20–250°C.
6.3 Equipamento para calibração
6.3.1 Balança Analítica – Capaz de pesar 0,1 mg.
6.3.2 Balão volumétrico – Vidro, 100 mL.
6.3.3 Frascos – Tamanhos variados, com tampas de rosca revestidas de PTFE.
6.3.4 Pipeta volumétrica – Vidro, 10 mL.
6.4 Equipamento para extração de amostras
6.4.1 Balança (opcional) – Carregamento superior, capaz de pesar 500–2.000 g dentro de ± 1%
6.4.2 Haste de agitação de vidro
6.4.3 Funil separador – Vidro, 2.000 mL, com torneira de PTFE
6.4.4 Funil – Grande, de vidro, para despejar a amostra no funil de separação
Fevereiro de 2010 8
6.4.5 Centrífuga (opcional) – À prova de explosão, capaz de girar pelo menos quatro tubos de centrífuga de
vidro de 100 mL a 2.400 rpm no mínimo
6.4.6 Tubos de centrífuga (opcional) – vidro de 100 mL
6.4.7 Frasco de lavagem (opcional) – Construção em fluoropolímero para enxágues com hexano
6,5 Equipamento para remoção de finos de água, sulfato de sódio e sílica gel
6.5.1 Funil – Analítico, vidro
6.5.2 Papel de filtro – Whatman nº 40 (ou equivalente), para encaixar no funil
6.6 Equipamento para destilação de solvente
6.6.1 Banho-maria ou Banho de vapor – À prova de explosão, capaz de manter uma temperatura de pelo menos
85°C
6.6.2 Frasco – Fervura, 125 mL (Corning No. 4100 ou equivalente)
6.6.3 Cabeça de destilação – Claisen (VWR Scientific No. 26339-005, ou equivalente), inclui tubo
de conexão tipo Claisen e condensador
6.6.4 Adaptador de destilação (fixado à cabeça de destilação e ao frasco de coleta de destilado para
recuperação de solvente)
6.6.5 Frasco de coleta de destilado (conectado ao adaptador de destilação para coleta do solvente
destilado)
6.6.6 Banho de gelo ou resfriador de recirculação (para auxiliar na condensação e coleta do solvente
destilado)
6.6.7 Vácuo–Bomba de vácuo ou outra fonte de vácuo
6.6.8 Pinças, para manusear o frasco de ebulição (Humboldt Manufacturing No. H-23442, ou
equivalente)
6.6.9 Dessecador – tipo gabinete ou frasco, capaz de manter o frasco de ebulição (Seção 6.6.2) seco
durante o resfriamento
6.6.10Capa à prova de explosão, capaz de acomodar o equipamento utilizado para solvente

destilação (Seção 6.6.1–6.6.5)
6.7 Equipamento para remoção de materiais adsorvíveis
6.7.1 Agitador magnético
6.7.2 Barras de agitação magnética revestidas com PTFE
6.7.3 Proveta graduada – 500 mL, capaz de medir ± 5 mL
6.7.4 Pipetas – tamanhos variados, calibradas dentro de ± 0,5 por cento
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7.0 Reagentes e Padrões
7.1 Água reagente – Água na qual o HEM não é detectado no nível mínimo (ML) deste método ou acima dele. A
água destilada engarrafada, ou a água preparada pela passagem da água da torneira através de carvão
ativado, demonstraram ser fontes aceitáveis de água reagente.
7.2 Ácido clorídrico ou ácido sulfúrico – ACS. Misture volumes iguais de HCl concentrado e água reagente ou 1
parte de H2ENTÃO4e 3 partes de água reagente para produzir uma solução de aproximadamente 6N
7.3 n-Hexano – pureza mínima de 85%, 99,0% min. C saturado6isômeros, resíduo inferior a 1 mg/L
(0,0001% máx.)
7.4 Acetona – ACS, resíduo inferior a 1 mg/L (0,0001% máx.)
7,5 Sulfato de sódio – ACS, granulado anidro. Secar a 200-250°C por no mínimo 24 horas e armazene em um
recipiente bem fechado até o uso
OBSERVAÇÃO: O sulfato de sódio em pó não deve ser usado porque vestígios de água podem causar sua solidificação.
7.6 Lascas de ebulição – carboneto de silício ou fluoropolímero
7.7 Sílica gel – anidra, 75-150 µm, tamanho de poro de 30 Å (Davisil Grau 923 ou equivalente). Secar a 200–
250°C por no mínimo 24 horas e armazenar em dessecador ou recipiente bem fechado. Determine o
conteúdo de material solúvel em n-hexano da sílica gel extraindo 30 g de sílica gel com nhexano e
destilando o n-hexano até a secura. A sílica gel deve conter menos de 5 mg de material solúvel em n-
hexano por 30 g (< 0,17 mg/g).
7,8 Hexadecano – pureza mínima de 98%
7,9 Ácido esteárico – pureza mínima de 98%
7.10 Solução de adição de hexadecano/ácido esteárico (1:1) – preparar em acetona a uma concentração de 2 mg/mL
cada
7.10.1Coloque 200 ± 2 mg de ácido esteárico e 200 ± 2 mg de hexadecano em um balão volumétrico de 100 mL

e preencha até a marca com acetona
OBSERVAÇÃO: A solução pode necessitar de aquecimento para a dissolução completa do ácido esteárico. Se aquecida, deixe a
solução esfriar até a marca de volume em temperatura ambiente antes de usar, pois o calor gerado pela agitação vigorosa pode
aumentar o volume da solução, o que pode causar baixa recuperação. Os melhores resultados são obtidos se a solução for deixada
esfriar por pelo menos uma hora após o aquecimento.
7.10.2Depois que o hexadecano e o ácido esteárico se dissolverem e a solução esfriar

até a marca de volume em temperatura ambiente, transfira a solução para um frasco de 100–150
mL com tampa revestida com fluoropolímero (Kontes No. 482600-0100, ou equivalente) e aperte
bem a tampa. Marque o nível da solução no frasco e guarde no escuro à temperatura ambiente.
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7.10.3 Imediatamente antes de usar, verifique o nível no frasco e complete o volume com acetona, se
necessário. Aqueça para redissolver todo o precipitado visível, se necessário, mas deixe a solução
para esfriar até a marca de volume em temperatura ambiente antes de usar.
OBSERVAÇÃO: Em caso de dúvida quanto à concentração, retirar 10,0 ± 0,1 mL com pipeta volumétrica, colocar em prato
de pesagem tarado e evaporar até a secura em capela. O peso deve ser de 40 ± 1 mg. Caso contrário, prepare uma
solução nova (Seção 7.10.1). Os melhores resultados são obtidos usando pratos de pesagem de alumínio com paredes
lisas e grande diâmetro (Xenosep # 26506 ou equivalente).
7.11 Padrão de precisão e recuperação (PAR) - Usando uma pipeta, adicione 10,0 ± 0,1 mL da solução de
adição de hexadecano/ácido esteárico (Seção 7.10) em 950 - 1.050 mL de água reagente para produzir
concentrações de aproximadamente 20 mg/L cada de hexadecano e ácido esteárico. O padrão PAR é
usado para a determinação da precisão e recuperação inicial (Seção 9.2.2) e contínua (Seção 9.6).
7.12 As soluções de enriquecimento devem ser verificadas frequentemente quanto a sinais de degradação ou evaporação
usando o teste indicado na Seção 7.10.3, e devem ser substituídas após seis meses, ou antes, caso tenha ocorrido
degradação.
8.0 Coleta, Preservação e Armazenamento de Amostras
8.1 Colete aproximadamente um litro de amostra representativa em um frasco de vidro seguindo práticas
convencionais de amostragem (Referência 16.7), exceto que o frasco não deve ser pré-enxaguado com amostra
antes da coleta. Para permitir potenciais falhas de CQ, recomenda-se que sejam recolhidas alíquotas de amostra
adicionais.
8.1.1 Todas as amostras devem ser acidificadas e/ou verificadas em laboratório para pH<2 imediatamente
antes da análise. Se a análise for atrasada por mais de quatro horas, ajuste o pH da amostra para
menos de 2 com HCl ou H2ENTÃO4solução (Seção 7.2) no momento da coleta e leve à geladeira entre
0–6°C (40 CFR 136, Tabela II). Para estabelecer o volume de HCl ou H2ENTÃO4
necessário, colete uma alíquota separada, ajuste o pH desta alíquota para menos de 2 com ácido e
adicione o volume de ácido determinado a cada frasco de amostra antes da coleta.
Durante a coleta da amostra, não mergulhe papel de pH, eletrodo de pH, haste de agitação ou
outros materiais em uma amostra que será usada para determinação de HEM ou SGT-HEM porque
as substâncias na amostra podem aderir a esses itens.
8.1.2 Se uma amostra for conhecida ou suspeita de conter mais de 500 mg/L de material extraível ou
consistir em uma matriz complexa contendo substâncias (como partículas ou detergentes) que
possam interferir no procedimento de extração, colete um volume proporcionalmente menor de
amostra (o volume necessária dependerá da quantidade estimada de material extraível) em uma
garrafa de vidro. Adicione uma quantidade proporcionalmente menor de HCl ou H2ENTÃO4solução
para a amostra menor para preservação, conforme necessário.
8.2 Colete uma ou duas alíquotas adicionais (1 L, volume adicional menor ou ambos) de uma amostra para cada
conjunto de vinte amostras ou menos para o pico da matriz e, se usado, a duplicata do pico da matriz.
OBSERVAÇÃO: Para aquelas circunstâncias que exigem a coleta de múltiplas alíquotas de uma amostra, cada alíquota deve
ser coletada de uma das seguintes maneiras: 1) coletar simultaneamente e em paralelo, se possível, ou 2) coletar como
amostras aleatórias em rápida sucessão.
8.3 A alta probabilidade de que matéria extraível possa aderir ao equipamento de amostragem e resultar em
medições com baixa tendência impede a coleta de amostras compostas para determinação de óleo e graxa.
Portanto, as amostras devem ser coletadas como amostras aleatórias. Se uma medição composta for
necessária, amostras individuais coletadas em intervalos de tempo prescritos devem ser analisadas
separadamente e as concentrações calculadas. Alternativamente, as amostras podem ser coletadas em
campo e compostas em laboratório. Por exemplo, colete quatro amostras individuais de 250 mL ao longo de
um dia. No laboratório, despeje cada amostra de 250 mL no funil de separação, enxágue cada um dos
quatro frascos (e tampas) sequencialmente com 30 mL de n-hexano e use os 30 mL de n-hexano para a
extração (Seção 11.3) .
8.4 Todas as amostras devem ser refrigeradas a 0–6°C desde o momento da coleta até a extração (40 CFR
136, Tabela II).
8,5 Todas as amostras devem ser analisadas no prazo de 28 dias a partir da data e hora da coleta (40 CFR 136,
Tabela II).
9.0 Controle de Qualidade
9.1 Cada laboratório que utiliza este método é obrigado a operar um programa formal de garantia de qualidade
(Referência 16.8). Os requisitos mínimos deste programa consistem numa demonstração inicial da capacidade
laboratorial, análises contínuas de padrões e brancos como teste de desempenho contínuo e análise de um pico
de matriz (MS) para avaliar a recuperação. O desempenho do laboratório é comparado com critérios de
desempenho estabelecidos para determinar se os resultados das análises atendem às características de
desempenho do método.
9.1.1 O laboratório deve fazer uma demonstração inicial da capacidade de gerar exatidão e precisão
aceitáveis com este método. Essa habilidade é estabelecida conforme descrito na Seção 9.2.
9.1.2 Em reconhecimento dos avanços que estão ocorrendo na tecnologia analítica, são permitidas ao
laboratório certas opções para melhorar as separações ou reduzir os custos das medições, desde
que todas as especificações de desempenho sejam atendidas. Essas opções incluem dispositivos
alternativos de extração e concentração e procedimentos como extração contínua líquido-
líquido, evaporação, concentração Kuderna-Dinamarquesa e extração em fase sólida. Técnicas
determinativas alternativas, como imunoensaio ou espectroscopia infravermelha, e alterações
que degradam o desempenho do método ou alteram a química do método, incluindo o uso de
solventes de extração diferentes de n-hexano (85% de pureza mínima, 99,0% min. C saturado6
isómeros, resíduos inferiores a 1 mg/L – ver Secção 7.3) não são permitidos. Se for utilizada uma
técnica analítica diferente das técnicas especificadas neste método, essa técnica deve ter uma
especificidade igual ou melhor que a especificidade das técnicas deste método para HEM e/ou
SGT-HEM na amostra de interesse. A especificidade é definida como a produção de resultados
equivalentes aos resultados produzidos por este método para padrões analíticos (Seção 9.2.2) e,
quando aplicável, amostras ambientais (Seção 9.2.3), e que atendem a todos os critérios de CQ
estabelecidos neste método.
9.1.2.1Cada vez que uma modificação é feita neste método, o laboratório é obrigado a
repetir o teste de DPI na Seção 9.2.2 para demonstrar que a modificação produz
resultados equivalentes ou superiores aos resultados produzidos por este
método. Se o limite de detecção do método for afetado pela modificação, o
laboratório deverá demonstrar que o MDL (40 CFR Parte 136, Apêndice B) é
menor ou igual ao MDL neste método ou um terço do limite de conformidade

regulatória, o que for maior. Se o método modificado for usado para monitoramento de
conformidade, o descarregador/gerador também deverá demonstrar que o método
modificado recupera uma quantidade de HEM e/ou SGT-HEM equivalente à quantidade
recuperada por este método em cada fluxo específico de descarga/resíduos ( não é
necessário para modificações permitidas na Seção 1.7.1). Os testes necessários para esta
demonstração de equivalência são apresentados na Seção 9.2.3.
9.1.2.2O laboratório é obrigado a manter registros das modificações feitas neste

método. Esses registros incluem o seguinte, no mínimo:
9.1.2.2.1Os nomes, títulos, endereços e números de telefone dos

analista(s) que realizaram as análises e modificações, e do
responsável pelo controle de qualidade que testemunhou e
verificará as análises e modificações (não exigido para
modificações permitidas na Seção 1.7.1).
9.1.2.2.2Uma lista de poluentes medidos (HEM e/ou SGT-HEM)
9.1.2.2.3Uma narrativa declarando o(s) motivo(s) para a modificação
9.1.2.2.4Resultados de todos os testes de controle de qualidade (CQ) comparando o

método modificado para este método,
incluindo: (a) Calibração (Seção 10)
(b) Verificação de calibração (Seção 9.5)
(c) Precisão inicial e recuperação (Seção 9.2.2)
(d) Análise de espaços em branco (Seção 9.4)
(e) Avaliação de precisão (Seção 9.3)
(f) Precisão e recuperação contínuas (Seção 9.6)
(g) Limite de detecção do método (Seção 9.2.1).
9.1.2.2.5Dados que permitirão que um revisor independente valide cada

determinação rastreando a saída do instrumento (peso ou outro sinal)
até o resultado final. Esses dados devem incluir:
(a) Números de amostra e outros identificadores
(b) Datas de extração
(c) Datas e horários de análise
(d) Sequência de análise/cronologia de execução
(e) Peso ou volume da amostra (Seção 11.1.4)
(f) Volume de extração para SGT-HEM (Seção 11.5.2)
(g) Marca e modelo de balança analítica e pesos rastreáveis ao
NIST
(h) Cópias de diários de bordo, fitas de impressora e outras gravações de dados
brutos
(i) Resultados do sistema de dados e outros dados para vincular os dados brutos
aos resultados relatados.
9.1.3 A análise de um pico de matriz (MS) é necessária para demonstrar a recuperação e monitorar as
interferências da matriz (interferências causadas pela matriz da amostra). O procedimento e os
critérios de CQ para adição estão descritos na Seção 9.3.
9.1.4 As análises dos brancos laboratoriais são necessárias para demonstrar a ausência de
contaminação. O procedimento e os critérios para análise de um branco estão descritos na
Seção 9.4.
9.1.5 O laboratório deve demonstrar continuamente, através da verificação da calibração e da análise

da amostra contínua de precisão e recuperação (OPR), que o sistema de análise está sob
controle. Esses procedimentos estão descritos nas Seções 9.5 e 9.6, respectivamente.
9.1.6 O laboratório deve manter registros para definir a qualidade dos dados gerados. O
desenvolvimento de declarações de precisão é descrito nas Seções 9.3.7 e 9.6.3.
9.1.7 O CQ de acompanhamento para a determinação de HEM e/ou SGT-HEM é necessário por

lote analítico. Para a definição de lote analítico, consulte o glossário ao final deste método.
9.2 Demonstração inicial da capacidade do laboratório
9.2.1Limite de detecção de método (MDL) – Para estabelecer a capacidade de detectar HEM e SGT-HEM,
o laboratório deve determinar o MDL de acordo com o procedimento em 40 CFR 136, Apêndice
B, usando os aparelhos, reagentes e padrões que serão usados na prática deste método. Um
MDL menor ou igual ao MDL na Seção 1.6 ou menor que 1/3 do limite de conformidade
regulatória deve ser alcançado antes da prática deste método.
9.2.2 Precisão e recuperação inicial (IPR) – para estabelecer a capacidade de gerar precisão
e exatidão aceitáveis, o laboratório deve realizar as seguintes operações:
9.2.2.1Determine a concentração de HEM e/ou SGT-HEM em quatro amostras de

padrão PAR (Seção 7.11) de acordo com o procedimento iniciado na
Seção 11.
9.2.2.2Usando os resultados do conjunto de quatro análises, calcule a porcentagem média

recuperação (X) e o desvio padrão da(s) porcentagem(s) de recuperação para HEM e
para SGT-HEM (se determinado). Ao determinar o SGT-HEM, a concentração
verdadeira (T) deve ser dividida por 2 para refletir a concentração de hexadecano
que permanece após a remoção do ácido esteárico. Use a seguinte equação para
calcular o desvio padrão da recuperação percentual:
(∑x)
∑x -
2
2
s= n
n-1
Equação 1
onde:
n = Número de amostras
x =% de recuperação em cada amostra
9.2.2.3Compare s e X com os limites correspondentes para precisão inicial e

recuperação na Tabela 1. Se s e X atenderem aos critérios de aceitação, o desempenho do
sistema é aceitável e a análise das amostras pode começar. Se, no entanto,
exceder o limite de precisão ou X estiver fora da faixa de recuperação, o

desempenho do sistema será inaceitável. Neste caso, corrija o problema e
repita o teste.
9.2.3 Demonstração de equivalência para aplicação de uma modificação de método para monitoramento de
conformidade - Para estabelecer a capacidade de uma modificação deste método para recuperar uma
quantidade de HEM e/ou SGT-HEM equivalente à quantidade recuperada por este método de um fluxo
específico de descarga/resíduos ( tipos de matriz), proceda da seguinte forma:
OBSERVAÇÃO:A demonstração de equivalência para tipos específicos de descargas/fluxos de resíduos não é necessária
para as modificações listadas como aceitáveis na Seção 1.7.1. Para modificações não listadas como aceitáveis na Seção
1.7.1, a demonstração é necessária apenas para um exemplo do fluxo específico de descarga/resíduos (tipo de matriz) a ser
analisado até um máximo dos 9 tipos de matrizes identificados abaixo, que seriam necessários para valide o método
modificado para uso com todas as amostras. Ao validar o método modificado para uso com todas as amostras, cada
exemplo de fluxo de resíduos abaixo (exceto efluente POTW) deve ser conhecido ou suspeito de conter uma concentração
média de 5 a 1.000 mg/L de HEM e/ou SGT-HEM a ser incluído em A demonstração:
1. Um efluente POTW
2. Um segundo efluente POTW de uma fonte diferente
3. Água salina
4. Dois exemplos representativos de diferentes águas residuais tratadas ou não tratadas que provavelmente contêm
substâncias à base de petróleo (hidrocarbonetos semelhantes em composição química ao n-hexadecano) em
concentrações significativamente diferentes
5. Dois exemplos representativos de diferentes águas residuais tratadas ou não tratadas que provavelmente contêm
substâncias de origem animal (gorduras animais semelhantes em composição química ao ácido esteárico) em
concentrações significativamente diferentes
6. Dois exemplos representativos de diferentes águas residuais tratadas ou não tratadas que provavelmente
contêm outros materiais extraíveis com hexano de diversas composições químicas, incluindo, entre outros,
óleos vegetais, ceras, sabões, graxas e outros materiais relacionados.
9.2.3.1Colete, extraia, concentre e pese o HEM ou SGT-HEM em dois conjuntos

de quatro alíquotas de águas residuais não contaminadas. Um conjunto de quatro alíquotas de
águas residuais é analisado de acordo com o protocolo da Seção 11 deste método e o outro
conjunto de quatro alíquotas é analisado usando o método modificado.
9.2.3.2Calcule a concentração média de HEM e SGT-HEM para o conjunto de

resultados deste método e para o conjunto de resultados do método modificado. A
concentração média utilizando o método modificado deve ser de 78 a 114 por cento
da concentração média produzida por este método para HEM e de 64 a 132 por
cento da concentração média produzida por este método para SGT-HEM. Caso
contrário, o método modificado não poderá ser utilizado.
OBSERVAÇÃO: Se a concentração média dos quatro resultados produzidos utilizando este método e a
concentração média dos quatro resultados produzidos utilizando o método modificado estiverem abaixo do
nível mínimo (Secção 1.6), e se o teste de equivalência do método modificado for aprovado para picos de
padrões de referência em água reagente (Seção 9.2.2), o método modificado é considerado equivalente a este
método para determinação de MH e/ou SGT-HEM nesse fluxo específico de descarga/resíduos.
9.3 Picos de matriz – O laboratório deve adicionar um mínimo de 5 por cento de todas as amostras de um determinado local de
amostragem ou, se for para monitoramento de conformidade, de um determinado fluxo de descarga/resíduos (tipo de
matriz). A alíquota da amostra deve ser enriquecida com a solução de enriquecimento de hexadecano/ácido esteárico (Seção
7.10). Um pico de matriz duplicado (MSD) é recomendado, mas não obrigatório.
9.3.1 A concentração do pico na amostra deve ser determinada do seguinte modo:
9.3.1.1Se, como no monitoramento da conformidade, a concentração de HEM ou SGT-HEM em

a amostra está sendo verificada em relação a um limite de concentração
regulamentar, o nível de adição deve estar nesse limite, de 1 a 5 vezes a
concentração de fundo da amostra (determinada na Seção 9.3.2), ou na
concentração do OPR (Seção 9.6 ), qualquer que seja a concentração mais alta.
9.3.1.2Se a concentração de HEM ou SGT-HEM em uma amostra não estiver sendo verificada
contra um limite, o pico deve estar na concentração do padrão de precisão e
recuperação (secção 7.11) ou 1 a 5 vezes superior à concentração de fundo,
consoante a concentração que for mais elevada.
9.3.2 Analise uma alíquota de amostra de cada conjunto de 20 amostras de cada local ou
fluxo de descarga/resíduos de acordo com o procedimento iniciado na Seção 11 para
determinar a concentração de fundo (B) de HEM ou SGT-HEM.
9.3.2.1Se necessário, prepare uma solução padrão apropriada para produzir um nível no
amostra no limite de conformidade regulatória ou em 1 a 5 vezes a concentração
de base (conforme Seção 9.3.1).
OBSERVAÇÃO: Amostras contendo altas concentrações (> 100 mg/L) de HEM exigirão um grande
volume de solução de adição (Seção 7.10) para o MS (e MSD). Se se espera que a concentração de
HEM exceda 1.000 mg/L, volumes menores de amostra devem ser coletados para a medição de fundo
e MS (e MSD), de modo que a quantidade de HEM mais a quantidade enriquecida não exceda 1.000
mg/L.
9.3.2.2Adicione a(s) alíquota(s) de amostra adicional(ais) com a solução de adição e analise

a(s) alíquota(s) para determinar a concentração após a adição (A).
9.3.3 Calcule a recuperação percentual (P) de HEM ou SGT-HEM em cada alíquota usando a
seguinte equação:
100 (A-B)
P=
T
Equação 2
onde:
A = Concentração medida do analito após a adição
B = Concentração de fundo medida de HEM ou SGT HEM T =
Concentração verdadeira da amostra enriquecida
Ao determinar o SGT-HEM, a concentração verdadeira (T) deve ser dividida por 2 para refletir a concentração de hexadecano
que permanece após a remoção do ácido esteárico.
9.3.4 Compare a recuperação percentual do HEM ou SGT-HEM com os critérios de aceitação de CQ

correspondentes na Tabela 1.
9.3.4.1Se os resultados do pico falharem nos critérios de aceitação e a recuperação do padrão de

CQ no teste de precisão e recuperação em andamento (Seção 9.6) para o lote
analítico estiver dentro dos critérios de aceitação na Tabela 1, há interferência. Neste
caso, o resultado não pode ser relatado ou utilizado para fins de conformidade
regulamentar e o laboratório deve avaliar a causa potencial para
a interferência. Se a interferência for atribuível à amostragem, o local ou o
fluxo de descarga/resíduos deverá ser reamostrado. Se a interferência for
atribuível a um problema de matriz, o laboratório deverá modificar o
método, repetir os testes exigidos na Seção 9.1.2 e repetir a análise da
amostra e do MS (e do MSD, se realizado). A maioria dos problemas de
interferência na matriz são atribuíveis à formação de emulsões na extração.
A Seção 11.3.5 fornece sugestões para superar problemas de emulsão.
9.3.4.2Se os resultados do pico e do teste de precisão e recuperação em curso

falhar nos critérios de aceitação, o sistema analítico será considerado fora de
controle, e o problema deverá ser identificado e corrigido, e o lote de amostra
reanalisado. Todas as amostras devem estar associadas a um MS válido (e MSD,
se realizado).
9.3.5 Se um MSD foi analisado, calcule a diferença percentual relativa (RPD) entre o MS e
o MSD (não entre as duas recuperações) usando a seguinte equação:
D1-D2
RPD= x 100
(D1+D2)
2
Equação 3
onde:
D1= Concentração de HEM ou SGT HEM na amostra
D2= Concentração de HEM ou SGT HEM na segunda amostra (duplicada)
9.3.6 A diferença percentual relativa para duplicatas deverá atender aos critérios de aceitação da
Tabela 1. Se os critérios não forem atendidos, o sistema analítico será considerado fora de
controle e o problema deverá ser imediatamente identificado e corrigido, e o lote analítico
reanalisado.
9.3.7 Como parte do programa de CQ do laboratório, sugere-se que a precisão e exatidão do método
para amostras sejam avaliadas e que os registros sejam mantidos. Após a análise de cinco
amostras enriquecidas nas quais a recuperação passa no teste da Seção 9.3.4, calcule a
recuperação percentual média (Pa) e o desvio padrão da porcentagem de recuperação (sp).
Expresse a avaliação da precisão como um intervalo percentual de recuperação de Pa– 2sp
principala+ 2sp. Por exemplo, se Pa= 90% e sp= 10% para cinco análises de HEM ou SGT-HEM, o
intervalo de precisão é expresso como 70–110%. Atualize a avaliação de precisão regularmente
(por exemplo, após cada cinco a dez novas medições de precisão).
9.4 Brancos de laboratório – Os brancos de água reagente de laboratório são analisados para demonstrar ausência de
contaminação.
9.4.1 Extraia e concentre inicialmente um reagente de laboratório com água em branco (ou seja, com os
testes da Seção 9.2) e com cada lote analítico. O branco deve ser submetido às mesmas etapas
processuais que uma amostra.
9.4.2 Se for detectado material no branco em uma concentração superior ao nível mínimo (Seção 1.6), a
análise das amostras é interrompida até que a fonte de contaminação seja eliminada e o branco não
mostre nenhuma evidência de contaminação. Todas as amostras devem ser associadas a um branco
de método não contaminado antes que os resultados possam ser relatados para fins de conformidade
regulatória.
9,5 Verificação da calibração – Verifique a calibração da balança de acordo com a Seção 10 antes e depois de
cada lote analítico. Se a calibração não for verificada antes e depois de cada dia ou após a medição do
lote analítico, recalibre a balança e pese novamente o lote.
9.6 Precisão e recuperação contínuas – Para demonstrar que o sistema de análise está sob controle e que a
precisão e a exatidão aceitáveis estão sendo mantidas em cada lote analítico, o laboratório deve realizar
as seguintes operações:
9.6.1 Extraia e concentre um padrão de precisão e recuperação (Seção 7.11) com cada lote
analítico de acordo com o procedimento iniciado na Seção 11.
9.6.2 Compare a recuperação com os limites de precisão e recuperação contínuas na Tabela 1. Se a

recuperação estiver na faixa especificada, os processos de extração, destilação e pesagem estarão sob
controle e a análise de brancos e amostras poderá prosseguir. Se, no entanto, a recuperação não
estiver na faixa especificada, o processo analítico não estará sob controle. Neste caso, corrija o
problema, extraia novamente o lote analítico e repita o teste contínuo de precisão e recuperação.
9.6.3 O laboratório deve adicionar resultados que atendam às especificações da Seção 9.6.2 aos dados de
IPR e OPR anteriores e atualizar os gráficos de CQ para formar uma representação gráfica do
desempenho contínuo do laboratório. O laboratório também deve desenvolver uma declaração de
qualidade dos dados laboratoriais para cada analito, calculando a percentagem média de recuperação
(R) e o desvio padrão da percentagem de recuperação (s).R). Expresse a precisão como um intervalo de
recuperação de R – 2sRpara R + 2sR. Por exemplo, se R = 95% e sR= 5%, a precisão é de 85% a 105%.
9.7 Amostra de controle de qualidade (QCS) – Sugere-se que o laboratório obtenha um QCS de uma fonte
diferente da fonte do hexadecano e do ácido esteárico usados rotineiramente neste método (Seções 7.8 e
7.9), e que o QCS seja usado para verificação de as concentrações de HEM e SGT-HEM utilizando o
procedimento indicado na nota da secção 7.10.3. O QCS deve ser analisado mensalmente por laboratórios
que realizam análises de rotina e com menor frequência por laboratórios que realizam essas análises de
forma intermitente.
9,8 As especificações contidas neste método podem ser atendidas se o aparelho utilizado for
escrupulosamente limpo e dedicado à determinação de HEM e SGT-HEM. Os padrões usados para
precisão e recuperação inicial (IPR, Seção 9.2.2), pico de matriz (MS, Seção 9.3) e precisão e
recuperação contínuas (OPR, Seção 9.6) devem ser idênticos, para que os resultados mais precisos
sejam obtidos .
9,9 Dependendo dos requisitos específicos do programa, podem ser necessárias réplicas de campo e picos de campo
dos analitos de interesse nas amostras para avaliar a precisão e exatidão das técnicas de amostragem e transporte
de amostras.
10.0 Calibração e Padronização
10.1 Calibre a balança analítica em 2 mg e 1000 mg, usando pesos classe “S” ou ASTM E 617-1997
Classe 1. Recomenda-se que a balança também seja calibrada com um peso adicional de classe
“S” ou ASTM E 617-1997 Classe 1 que irá delimitar o valor de pesagem final esperado.
10.2 A calibração deve estar dentro de ± 10% (ou seja, ± 0,2 mg) a 2 mg, ± 0,5% (ou seja, ± 5 mg) a 1.000 mg e, se
aplicável, na tolerância apropriada especificada pelo usuário para pesos de Classe 1 superiores a 1.000 mg .
Se os valores não estiverem dentro desses limites, recalibre a balança.
11.0 Procedimento
Este método é inteiramente empírico. Resultados precisos e exatos só podem ser obtidos através do cumprimento estrito de
todos os detalhes.
OBSERVAÇÃO: O procedimento abaixo é baseado na preparação, extração e análise de uma amostra de 1 L. Se um

volume menor for coletado para análise, o laboratório deve diluir a amostra para 1 L com água reagente para que os
resultados do IPR, branco, OPR, MS e, se realizado, do MSD sejam consistentes. Também é importante que todas as
superfícies de vidro sejam enxaguadas com n-hexano para efetuar uma transferência quantitativa dos constituintes
da amostra e do hexadecano/ácido esteárico no IPR, OPR, MS e, se realizado, no MSD.
11.1 Preparação do lote analítico
11.1.1Leve o lote analítico de amostras, incluindo as alíquotas de amostra para MS (e MSD), à

temperatura ambiente.
11.1.2Coloque aproximadamente 1.000 mL (950–1.050 mL) de água reagente (Seção 7.1) em um recipiente limpo.
frasco de amostra para servir como branco de laboratório.
11.1.3Prepare o OPR (Seção 9.6) usando o padrão PAR (Seção 7.11).
11.1.4Marque o frasco de amostra no menisco da água ou pese o frasco para mais tarde
determinação do volume da amostra. A pesagem será mais precisa. Marque ou pese
o MS (e MSD).
11.2 Verificação de pH
11.2.1Verifique se o pH da amostra é inferior a 2 usando o seguinte procedimento:
11.2.1.1Mergulhe uma vareta de vidro na amostra bem misturada.
11.2.1.2Retire a haste de agitação e deixe que uma gota da amostra caia ou toque
o papel de pH.
OBSERVAÇÃO: Não mergulhe o papel de pH no frasco nem toque na amostra na tampa.
11.2.1.3Enxágue a haste de agitação com uma pequena porção de n-hexano que será usada para
extração (para garantir que nenhum material extraível seja perdido na haste de
agitação). Colete o enxágue no funil de separação a ser usado para extração da amostra.
11.2.2Se a amostra estiver em pH neutro, adicione 5-6 mL de HCl ou H2ENTÃO4solução (Seção 7.2) para o
Amostra de 1 L. Se a amostra estiver em pH alto, use uma quantidade proporcionalmente maior de HCl ou H
2ENTÃO4solução. Se um volume de amostra menor foi coletado, use uma quantidade proporcionalmente
menor de HCl ou H2ENTÃO4solução.
11.2.3Recoloque a tampa e agite o frasco para misturar bem. Verifique o pH da amostra

usando o procedimento na Seção 11.2.1. Se necessário, adicione mais ácido à amostra e teste novamente.
11.2.4Adicione a quantidade apropriada de HCl ou H2ENTÃO4solução para o branco, OPR, MS (e MSD)

para ajustar o pH dessas soluções para <2.
OBSERVAÇÃO: O procedimento detalhado abaixo é para extração líquido-líquido por funil de separação. A extração em fase
sólida (SPE) pode ser utilizada a critério do descarregador/gerador e seu laboratório. Contudo, se for utilizado SPE, é
responsabilidade do descarregador/gerador e do laboratório garantir que os resultados produzidos sejam equivalentes aos
resultados produzidos pelo procedimento abaixo. No entanto, deve-se notar que, devido à natureza de alguns fluxos de
descarga/resíduos, nem todas as amostras podem ser passíveis de análise com um método modificado (por exemplo, SPE
como modificação) e para estas amostras, 1664B deve ser aplicado conforme escrito.
11.3 Extração
11.3.1Tarar um frasco de ebulição limpo contendo 3–5 lascas de ebulição da seguinte forma:
11.3.1.1Coloque o frasco contendo os chips em um forno a 105–115°C por no mínimo 2 horas

para secar o frasco e as aparas.
11.3.1.2Retire do forno e transfira imediatamente para um dessecador para esfriar até

temperatura do quarto.
11.3.1.3Quando esfriar, retire do dessecador com uma pinça e pese imediatamente

em uma balança calibrada (Seção 10).
11.3.2Despeje a amostra no funil de separação.
11.3.3Adicione 30 mL de n-hexano ao frasco de amostra e feche o frasco com o frasco original

boné. Agite o frasco para enxaguar todas as superfícies internas do frasco, incluindo a tampa
do frasco. Despeje o solvente no funil de separação.
11.3.4Extraia a amostra agitando vigorosamente o funil de separação durante 2 minutos com

ventilação periódica em um exaustor para liberar o excesso de pressão.
11.3.5Deixe a fase orgânica se separar da fase aquosa durante um mínimo de 10 minutos. Se uma
emulsão se formar entre as fases e a emulsão for maior que um terço do volume da
camada de solvente, o laboratório deverá empregar técnicas de quebra de emulsão para
completar a separação de fases. A técnica ideal depende da amostra, mas pode incluir
agitação, filtração através de lã de vidro, uso de papel de separação de fases solvente,
centrifugação, uso de banho ultrassônico com gelo, adição de NaCl ou outros métodos
físicos. Alternativamente, a extração em fase sólida (SPE), a extração contínua líquido-
líquido ou outras técnicas de extração podem ser utilizadas para evitar a formação de
emulsão, desde que os requisitos da Seção 9.1.2 sejam atendidos.
11.3.6Drene a camada aquosa (camada inferior) para o recipiente de amostra original. Escorra um pequeno
quantidade da camada orgânica no recipiente de amostra para minimizar a quantidade de água
restante no funil de separação.
OBSERVAÇÃO: A quantidade de água restante com o n-hexano deve ser minimizada para evitar a dissolução ou
aglomeração do sulfato de sódio no processo de secagem do extrato.
OBSERVAÇÃO: As propriedades específicas de uma amostra podem exigir o uso de maiores quantidades de Na2ENTÃO4.
11.3.7Coloque um papel filtro (Seção 6.5.2) em um funil de filtro (Seção 6.5.1), adicione aproximadamente
10 g de Na anidro2ENTÃO4e enxágue com uma pequena porção de n-hexano. Descarte o
enxágue.
11.3.8Drene a camada de n-hexano (camada superior) do funil de separação através do Na2ENTÃO4

para o balão de ebulição pré-pesado contendo as lascas de ebulição (seção 11.3.1.3).
OBSERVAÇÃO: É importante que a água seja removida nesta etapa. Água deixada filtrar através do Na2ENTÃO4
irá dissolver parte do Na2ENTÃO4e levar para o balão de ebulição comprometendo a determinação.
11.3.9Repita a extração (Seções 11.3.3-11.3.6 e 11.3.8) mais duas vezes com porções frescas de 30 mL
de n-hexano, combinando os extratos no balão de ebulição.
11.3.10Enxágue a ponta do funil de separação, o papel de filtro e o funil com 2–3 pequenas
(3–5 mL) porções de n-hexano. Recolha as lavagens no frasco.
OBSERVAÇÃO: Para amostras que deverão conter uma alta concentração de sal (por exemplo, águas de instalações de
produção de petróleo), pode ser prudente coletar o extrato em um funil de separação de 250 mL e retroextrair com
água reagente. Após a reextração, o extrato deve ser drenado através de Na2ENTÃO4para remover todos os vestígios de
água.
11.3.11Um extrato leitoso indica a presença de água. Se o extrato for leitoso, deixe o
deixe a solução repousar por até uma hora para permitir que a água assente. Decantar a camada de
solvente (camada superior) através de sulfato de sódio para remover qualquer excesso de água como nas
Seções 11.3.7 e 11.3.8. Enxágue a vidraria e o sulfato de sódio com pequenas porções de hexano para
efetuar uma transferência quantitativa.
11.3.12Se apenas o SGT-HEM for determinado, prossiga para a Seção 11.5.
11.4 Destilação de solvente
11.4.1Conecte o balão de ebulição ao aparelho de cabeça de destilação e destile o solvente por

imersão da metade inferior do frasco em banho-maria ou banho de vapor. Ajuste a temperatura da
água conforme apropriado para completar a concentração. O solvente pode ser coletado para
reutilização, desde que o laboratório possa demonstrar que o solvente atende ou excede as
especificações de pureza estabelecidas na Seção 7.3.
11.4.2Quando a temperatura na cabeça de destilação atingir aproximadamente 70°C ou o frasco

parecer quase seco, retire a cabeça de destilação. Varrer o frasco por 15 segundos com ar para
remover o vapor do solvente, inserindo um tubo de vidro conectado a uma fonte de vácuo.
11.4.2.1Usando uma pinça, remova imediatamente o frasco da fonte de calor enquanto ainda
contém aproximadamente 2 mL de líquido residual. Seque a superfície externa para remover
umidade e impressões digitais e coloque o frasco em uma capa até que a secura visível seja
alcançada durante o resfriamento à temperatura ambiente.
11.4.2.2Se desejado, o frasco pode ser colocado em um forno capaz de manter o usuário
temperatura definida dentro de ± 2 °C (até 70 °C no máximo) por um período de tempo definido
pelo usuário (até 45 minutos no máximo).
OBSERVAÇÃO: O laboratório deve monitorar cuidadosamente o frasco durante os estágios finais da destilação para garantir
que todo o solvente seja removido e para evitar a perda dos constituintes mais voláteis da amostra. Os melhores resultados
são alcançados quando o frasco é removido da fonte de calor enquanto ainda contém alguns mL de líquido residual e a
secura visível é alcançada enquanto o frasco é resfriado à temperatura ambiente.
11.4.3Inspecione o resíduo no balão de ebulição em busca de cristais. A formação de cristais é uma indicação
esse sulfato de sódio pode ter se dissolvido e passado para o balão de ebulição. Isto pode acontecer
se a capacidade de secagem do sulfato de sódio for excedida ou se a amostra não for ajustada para
pH baixo. Se forem observados cristais, redissolva o extrato em n-hexano, transfira
quantitativamente através de um filtro para outro balão de ebulição tarado e repita o procedimento
de destilação (Seções 11.4.1–11.4.2).
11.4.4Continue a secar e resfrie o frasco à temperatura ambiente em um dessecador por no mínimo 30

minutos. Retire com uma pinça e pese imediatamente. Enquanto estiver em temperatura
ambiente e sem aquecimento adicional, repita o ciclo de dessecação e pesagem até que o
a perda de peso do frasco e do resíduo seco for inferior a 4% do peso anterior ou inferior a
0,5 mg, o que for menor. A pesagem final deve ser utilizada para determinar o valor de
HEM ou SGT-HEM conforme apropriado.
11.4.4.1Se o extrato foi do procedimento HEM, determine o HEM (Wh) por

subtraindo o peso da tara (Seção 11.3.1) do peso total do frasco.
11.4.4.2Se o extrato for do procedimento SGT-HEM (Seção 11.5.5), determine

o peso do SGT-HEM (Wé) subtraindo o peso da tara do peso total
do frasco.
11.4.5Determine o volume original da amostra (Vé) em litros, enchendo o frasco de amostra até a
marca com água e medindo o volume de água em um cilindro graduado de 1 a 2 litros.
Se o peso da amostra foi utilizado (Seção 11.1.4), pese o frasco vazio e a tampa e determine
Vépor diferença, assumindo uma densidade amostral de 1,00.
11,5 Determinação do SGT-HEM
11.5.1Capacidade de sílica gel – Para garantir que a capacidade da sílica gel não será excedida,
a quantidade de HEM deve ser inferior a 100 mg ou, se for superior a 100 mg, deve ser conhecida.
11.5.1.1Se for conhecido que a quantidade de HEM é inferior a 100 mg, o laboratório pode
prosseguir com a determinação de SGT-HEM de acordo com as Seções 11.5.3 a
11.5.5 sem determinação de HEM.
11.5.1.2Se, no entanto, a quantidade de HEM não for conhecida, o HEM deve primeiro ser
determinado usando o procedimento nas Seções 11.3–11.4.
11.5.2Materiais extraíveis em sílica gel – porque a capacidade da sílica gel não é conhecida por todos
substâncias, presume-se que 3 g irão normalmente adsorver 100 mg de todos os materiais
adsorvíveis. Portanto, para amostras contendo 1000 mg de HEM, serão necessários 30 g de
sílica gel. A quantidade de sílica gel que pode ser usada para adsorção no procedimento SGT-
HEM abaixo foi limitada a 30 g devido a preocupações sobre possíveis impurezas extraíveis na
sílica gel. Se a quantidade de HEM na amostra for superior a 1000 mg, divida o extrato
conforme o seguinte procedimento:
11.5.2.1Adicione 85-90 mL de n-hexano ao balão de ebulição para redissolver o HEM. Se

necessário, aqueça a solução para redissolver completamente o HEM.
11.5.2.2Transferir quantitativamente o extrato para um balão volumétrico de 100 mL. Diluir para
a marca com n-hexano.
11.5.2.3Calcule o volume de extrato que contém 1000 mg de material extraível

de acordo com a seguinte equação:
1000Vt
Va =
Ch
Equação 4
onde:
Va= Volume da alíquota a ser retirada (mL) Vt= Volume total de
solvente utilizado na Seção 11.5.2.2 (mL) Wh= Peso do material
extraível da medição HEM (mg)
11.5.2.4Usando uma pipeta calibrada, remova o volume a ser retirado (Va) e retorno
para o balão de ebulição. Diluir para aproximadamente 100 mL com n-hexano.
11.5.3Adsorção com sílica gel
11.5.3.1Adicione 3,0 ± 0,3 g de sílica gel anidra (Seção 7.7) ao balão de ebulição para
cada 100 mg de HEM, ou fração deste, até no máximo 30 g de sílica gel. Por
exemplo, se o peso do HEM for 735 mg, adicione 3 x 8 = 24 g de sílica gel.
11.5.3.2Adicione uma barra de agitação revestida com fluoropolímero ao frasco e agite a solução em
um agitador magnético por no mínimo 5 minutos.
11.5.4Filtre a solução através de papel de filtro umedecido com n-hexano em um recipiente pré-seco e tarado.
balão fervente contendo várias lascas ferventes. Lave o gel de sílica e o papel de filtro com várias
pequenas quantidades de n-hexano para completar a transferência.
11.5.5Destilar a solução e determinar o peso do SGT-HEM conforme Seção 11.4.
12.0 Análise de Dados e Cálculos
12.1 Material extraível n-hexano – Calcule a concentração de HEM (“óleo e graxa”) na amostra de
acordo com a seguinte equação:
Wh(mg)
HEM (mg/L)=
Vé(EU)
Equação 5
onde:
Ch= Peso do material extraível da Seção 11.4.4.1 (mg) Vé=
Volume da amostra da Seção 11.4.5 (L)
12.2 Material extraível com n-hexano tratado com sílica gel – calcule a concentração de SGT-HEM (“material não
polar”) na amostra de acordo com a equação acima, substituindo Wé(da Seção 11.4.4.2) para Wh. Se o
extrato foi dividido para diminuir a quantidade total de material para 1.000 mg, determine o peso total
corrigido de SGT-HEM no extrato não dividido (Wc) usando a seguinte equação:
VtCd(mg)
Cc(mg) =
Va
Equação 6
onde:
Cc= Peso total corrigido de SGT-HEM no extrato não dividido
Cd= Peso na porção do extrato dividido para adsorção (Seções 11.5.2.4 e 11.4.4.2) Va=
Volume de alíquota retirada (mL)
Vt= Volume total de solvente utilizado na Seção 11.5.2.2 (mL)
Use o peso total corrigido de SGT-HEM no extrato não dividido (Wc) para determinar o SGT-
HEM total na amostra substituindo Wcpara Whna Equação 5.
12.3 Relatório – Relate os resultados com três algarismos significativos para HEM e SGT-HEM encontrados em ou acima de 10
mg/L, e relate os resultados com dois algarismos significativos para HEM e SGT-HEM encontrados abaixo de 10 mg/L.
12.3.1Amostras – Relatar resultados para HEM e SGT-HEM encontrados abaixo do ML como < 5,0 mg/L,
ou conforme exigido pela autoridade licenciadora ou licença.
12.3.2Espaços em branco – Resultados do relatório para HEM e SGT-HEM encontrados abaixo do MDL como menores que o
valor real de MDL, ou seja, < 1,4 mg/L, ou conforme exigido pela autoridade licenciadora ou
licença. Não relate resultados abaixo do MDL, a menos que exigido pela autoridade ou licença.
12.3.3Os resultados de testes realizados com um sistema analítico que não esteja sob controle (Seção 9) não devem ser
relatados ou usados de outra forma para fins de licenciamento ou conformidade regulatória
propósitos e não dispensam um descarregador ou autorizado de relatar oportunamente.
13.0 Desempenho do Método
13.1 Este método foi validado através de estudos de laboratório único e um estudo de validação de método
interlaboratorial (Referência 16.9). Os dados combinados destes estudos mostram uma recuperação média de
93 por cento para o HEM e 89 por cento para o SGT-HEM e uma precisão (como desvio padrão relativo) de 8,7
por cento para o HEM e 13 por cento para o SGT-HEM.
13.2 O limite de detecção do método (MDL) e o nível mínimo de quantificação (ML) são baseados em cinco
estudos conduzidos pela EPA e descritos na proposta do Método 1664 (61 FR 1730) e verificados pelos
dados apresentados nos comentários sobre a proposta do Método 1664 ( Referência 16.3).
14.0 Prevenção da Poluição
14.1 Os solventes utilizados neste método representam pouca ameaça ao meio ambiente quando reciclados e gerenciados de maneira
adequada.
14.2 Os padrões devem ser preparados em volumes consistentes com o uso laboratorial para minimizar o volume de
padrões vencidos a serem descartados.
15.0 Gestão de Resíduos
15.1 É responsabilidade do laboratório cumprir todas as regulamentações federais, estaduais e locais que regem a
gestão de resíduos, particularmente as regras de identificação de resíduos perigosos e restrições de descarte em
solo, e proteger o ar, a água e a terra, minimizando e controlando todas as liberações das capelas de exaustão. e
operações de bancada. A conformidade com todas as licenças e regulamentos de descarga de esgoto também é
necessária.
15.2 Amostras preservadas com HCl ou H2ENTÃO4com pH < 2 são perigosos e devem ser neutralizados antes de serem
descartados ou devem ser tratados como resíduos perigosos.
15.3 Para obter mais informações sobre gerenciamento de resíduos, consulte “The Waste Management
Manual for Laboratory Personnel” e “Less is Better: Laboratory Chemical Management for Waste
Reduction”, ambos disponíveis no Departamento de Relações Governamentais e Política Científica da
American Chemical Society, 1155 16th Street. NO, Washington, DC 20036.
16.0 Referências
16.1 “Métodos para Análise Química de Água e Resíduos”, 3ª Edição, Agência de Proteção Ambiental,
Laboratório de Sistemas de Monitoramento Ambiental-Cincinnati (EMSL-Ci), Cincinnati, Ohio 45268,
EPA-600/4-79-020, Método 413.1, (1983 ).
16.2 “Métodos para Análise Química de Água e Resíduos”, 3ª Edição, Agência de Proteção Ambiental,
Laboratório de Sistemas de Monitoramento Ambiental-Cincinnati (EMSL-Ci), Cincinnati, Ohio 45268,
EPA-600/4-79-020, Método 418.2
16.3 Diretrizes que Estabelecem Procedimentos de Teste para Análise de Óleo e Graxa e Materiais Apolares;
Regra Final; Preâmbulo, Respostas aos Comentários e Súmula, conforme referenciado na Regra Final, 7 de
março de 2007; 72FR 11199.
16.4 “Carcinógenos - Trabalhando com Carcinógenos”, Departamento de Saúde, Educação e Bem-Estar, Serviço
de Saúde Pública, Centro de Controle de Doenças, Instituto Nacional de Segurança e Saúde Ocupacional,
Publicação nº 77-206, agosto de 1977.
16,5 “OSHA Safety and Health Standards, General Industry,” (29 CFR 1910), Occupational Safety and
Health Administration, OSHA 2206 (revisado, janeiro de 1976).
16.6 “Segurança em Laboratórios Acadêmicos de Química”, American Chemical Society, Comitê de

Segurança Química, 3ª Edição, 1979.
16.7 “Práticas Padrão para Amostragem de Água”, Livro Anual de Padrões ASTM, Parte 31, D3370-76,
Sociedade Americana para Testes e Materiais, 1916 Race Street, Filadélfia, PA 19103-1187, 1980.
16,8 “Manual de Controle Analítico de Qualidade em Laboratórios de Água e Águas Residuais”, USEPA,
EMSL-Ci, Cincinnati, OH 45268, EPA-600/4-79-019, março de 1979.
16,9 “Relatório sobre os Estudos de Validação do Método 1664”, abril de 1995. Disponível na Equipe de Métodos
CWA, OSTCWAMethods@epa.gov .
16.10 “Orientação de método analítico para implementação e uso do método EPA 1664A (parte 40 CFR
136)”, Escritório de Água da USEPA, EPA/821-R-00-003, fevereiro de 2000.
17.0 Tabelas
Tabela 1. Critérios de Aceitação para Testes de Desempenho

Critério de Aceitação Seção Limite (%)
Precisão inicial e recuperação 9.2.2

Precisão(ões) HEM 9.2.2.2 11
Recuperação HEM (X) 9.2.2.2 83 - 101
Precisão(ões) SGT-HEM 9.2.2.2 28
Recuperação SGT-HEM (X) 9.2.2.2 83 - 116
Pico de matriz/pico de matriz duplicado 9.3
Recuperação HEM 9.3.4 78 - 114
HEM RPD 9.3.5 18
Recuperação SGT-HEM 9.3.4 64 - 132
RPD SGT-HEM 9.3.5 34
Precisão e recuperação contínuas 9.6
Recuperação HEM 9.6 78 - 114
Recuperação SGT-HEM 9.6 64 - 132
18.0 Glossário de Definições e Finalidades
As definições e propósitos são específicos deste método, mas foram adaptados ao uso comum na
medida do possível.
18.1 Unidades de peso e medida e suas abreviaturas
18.1.1Símbolos
°C graus Celsius
< menor que
% por cento
± mais ou menos
18.1.2Caracteres alfabéticos
g grama
h hora
eu litro
mg miligrama
mg/g miligrama por grama
mg/L miligrama por litro
mg/mL miligrama por mililitro
mL mililitro
Não. número
rpm revoluções por minuto
18.2 Definições, siglas e abreviações
18.2.1Analito – O HEM ou SGT-HEM determinado por este método.
18.2.2Lote analítico – O conjunto de amostras iniciou o processo de extração em um período de 12 horas

turno, para um máximo de 20 amostras de campo. Cada lote analítico de 20 ou menos amostras
deve ser acompanhado por um branco de laboratório (Seção 9.4), uma amostra contínua de
precisão e recuperação (OPR, Seção 9.6) e um pico de matriz (Seção 9.3), resultando em um
mínimo de quatro análises (1 amostra, 1 branco, 1 OPR e 1 MS) e um máximo de 23 análises (20
amostras de campo, 1 branco, 1 OPR e 1 MS) no lote. Se mais de 20 amostras forem extraídas em
um turno de 12 horas, as amostras deverão ser separadas em lotes analíticos de 20 ou menos
amostras.
18.2.3Descarga (tipo matriz) – Um meio de amostragem com características comuns em um determinado

subcategoria industrial (40 CFR partes 403-500). Por exemplo, efluentes do estágio C de fábricas de
branqueamento com cloro na categoria industrial de celulose, papel e papelão; efluente da
subcategoria Lingotamento Contínuo da categoria industrial Ferro e Aço; lamas de trabalhos de
tratamento de propriedade pública (POTW); e os fluxos em processo na subcategoria Processamento
de ostras com casca manual do Atlântico e da Costa do Golfo são, cada um, um tipo de matriz.
18.2.4Campo em branco – Uma alíquota de água reagente que é colocada em um recipiente de amostra no
laboratório ou no campo e tratado como uma amostra em todos os aspectos, incluindo exposição às
condições do local de amostragem, armazenamento, preservação e todos os procedimentos analíticos. O
objetivo do campo em branco é determinar se os procedimentos e ambientes de transporte do campo ou da
amostra contaminaram a amostra.
18.2.5HEM – Veja material extraível com n-hexano.
18.2.6Material extraível de n-hexano – Material que é extraído de uma amostra usando o

solvente de extração n-hexano e determinado gravimetricamente por este método, também
conhecido pelo nome comum de “óleo e graxa”. Este material inclui hidrocarbonetos relativamente
não voláteis, óleos vegetais, gorduras animais, ceras, sabões, graxas e matérias relacionadas.
18.2.7DPI – Veja precisão inicial e recuperação.
18.2.8Precisão e recuperação inicial (IPR) –Quatro alíquotas do PAR diluído analisadas para
estabelecer a capacidade de gerar precisão e exatidão aceitáveis. Um DPI é realizado na
primeira vez que este método é usado e sempre que o método é modificado.
18.2.9Branco de laboratório (branco de método) – Uma alíquota de água reagente que é tratada exatamente como
uma amostra incluindo a exposição a todos os artigos de vidro, equipamentos, solventes, reagentes,
padrões internos e substitutos usados com amostras. O branco de laboratório é usado para
determinar se analitos ou interferências estão presentes no ambiente do laboratório, nos reagentes
ou no aparelho.
18.2.10Amostra de controle de laboratório (LCS) – Consulte o padrão contínuo de precisão e recuperação (OPR).
18.2.11Pico de matriz (MS) e pico de matriz duplicado (MSD) – Alíquotas de um ambiente

amostra à qual quantidades conhecidas dos analitos são adicionadas no laboratório. O MS e o
MSD são preparados e/ou analisados exatamente como uma amostra de campo. Seu objetivo
é quantificar qualquer viés e imprecisão adicionais causados pela matriz amostral. As
concentrações de fundo dos analitos na matriz da amostra devem ser determinadas numa
alíquota separada e os valores medidos no MS e no MSD corrigidos para as concentrações de
fundo.
18.2.12Maio – Esta ação, atividade ou etapa processual não é obrigatória nem proibida.
18.2.13Não pode – Esta ação, atividade ou etapa processual é proibida.
18.2.14Limite de detecção do método – O nível mais baixo no qual um analito pode ser detectado com 99
porcentagem de confiança de que a concentração do analito é maior que zero.
18.2.15Nível Mínimo (ML) – O nível mais baixo no qual todo o sistema analítico fornece uma
sinal reconhecível e ponto de calibração aceitável para o analito. É equivalente à concentração
do padrão de calibração mais baixo, assumindo que todos os pesos de amostra, volumes e
procedimentos de limpeza especificados pelo método foram empregados.
18.2.16Obrigatório – Esta ação, atividade ou etapa processual é necessária.
18.2.17Padrão contínuo de precisão e recuperação (OPR, também chamado de controle de laboratório

amostra) –Um branco de laboratório enriquecido com quantidades conhecidas de analitos. O OPR é
analisado exatamente como uma amostra. Sua finalidade é garantir que os resultados produzidos pelo
laboratório permaneçam dentro dos limites especificados neste método de precisão e exatidão.
18.2.18OPR – Veja o padrão contínuo de precisão e recuperação.
18.2.19PAR–Veja padrão de precisão e recuperação.
18.2.20Padrão de precisão e recuperação – Padrão secundário que é diluído e adicionado para

formar o IPR e o OPR.
18.2.21Amostra de controle de qualidade (QCS) – Uma amostra contendo analitos de interesse em níveis conhecidos
concentrações. O QCS é obtido de fonte externa ao laboratório ou é preparado a partir de
padrões obtidos de fonte diferente dos padrões de calibração. O objetivo é verificar o
desempenho do laboratório utilizando materiais de teste que foram preparados
independentemente do processo normal de preparação.
18.2.22Transferência quantitativa – O processo de transferência de uma solução de um recipiente para

outra usando uma pipeta na qual é transferida a maior quantidade possível de solução, seguida de enxágue
das paredes do recipiente fonte com um pequeno volume de solução de enxágue (por exemplo, n-hexano),
seguida de transferência da solução de enxágue, seguida por uma segundo e terceiro enxágue e
transferência.
18.2.23Água reagente – Água demonstrada como isenta de HEM e SGT-HEM e

substâncias potencialmente interferentes no nível mínimo deste método ou acima dele.
18.2.24Limite de Conformidade Regulatória – Um limite para a concentração ou quantidade de um poluente ou

contaminante especificado em um padrão nacional, em uma licença ou de outra forma estabelecido por uma
autoridade reguladora.
18.2.25SGT-HEM – Veja material extraível de n-hexano tratado com sílica gel.
18.2.26Deveria – Esta ação, atividade ou etapa processual é sugerida, mas não obrigatória.
18.2.27Material extraível de n-hexano tratado com sílica gel – Componentes do material extraível de n-
hexano (HEM) que não são adsorvidos por sílica gel e são determinados gravimetricamente
por este método, também conhecido como material não polar (NPM).
18.2.28SPE – Extração em fase sólida é uma técnica de extração na qual os analitos de interesse
que podem estar presentes em uma amostra são adsorvidos seletivamente em um disco ou cartucho e
subsequentemente dessorvidos por um solvente de eluição.
18.2.29Solução estoque – Uma solução contendo um analito que é preparada usando um material de
referência rastreável à EPA, ao Instituto Nacional de Ciência e Tecnologia (NIST), ou uma
fonte que atestará a pureza e autenticidade do material de referência.

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Traduzido do Inglês para o Português - www.onlinedoctranslator.

Estados Unidos Escritório de Água

Método 1664, Revisão B: Material

Equipe de métodos CWA ou Lemuel Walker

Cópias adicionais deste método estão disponíveis em: http://www.epa.gov/waterscience/methods/

Introdução................................................. .................................................. ................................. iii 1.0

Escopo e Aplicação ............................................. .................................................. ....... 1

7,0 Reagentes e Padrões ............................................. .................................................. ... 10

9,0 Controle de qualidade ................................................ .................................................. ............... 12

10,0 Calibração e Padronização................................................. ........................................... 19

12,0 Análise de dados e cálculos ............................................. ........................................... 24

14,0 Prevenção de poluição................................................ .................................................. ........ 25

Fevereiro de 2010 iii

Método 1664, Revisão B

1.0 Escopo e Aplicação

1.7.1 Modificações permitidas

1.7.1.1Técnicas alternativas de extração, incluindo extração contínua líquido-líquido,

ECUNIOGXF, ou equivalente; ou outros produtos SPE que atendam a todos os critérios de

1.7.1.2Técnicas de concentração alternativas, incluindo concentração Kuderna-dinamarquesa

1.7.1.3A exigência de secar o frasco de ebulição por 30-45 minutos no forno

1.7.1.4Uma concentração padrão de PAR (Precisão e Recuperação) mais baixa, como

1.7.1.10O laboratório pode escolher aleatoriamente pelo menos um representante

1.7.1.15Os padrões de referência de hexadecano e ácido esteárico podem ser armazenados no

1.7.1.16Enxaguar garrafas ou aparelhos com solvente polar para limpeza de vidros

1.7.2 Modificações inaceitáveis

No entanto, um enxágue com metanol ou outro solvente polar após a filtração da

1. O enxágue com metanol é imediatamente descartado.

2. O filtro SPE é suficientemente seco ao ar com vácuo para remover qualquer

3. O laboratório deve demonstrar e documentar as condições operacionais

OBSERVAÇÃO: É permitido o uso de um solvente polar para condicionar um filtro SPE ou

1.7.2.2Técnicas determinativas alternativas, como espectroscopia infravermelha ou

1.7.2.3Devido à natureza não homogênea das amostras de águas residuais e ao alto

1.7.2.4Não é permitida uma alteração nos padrões de n-hexadecano e ácido esteárico

1.7.2.5Colocação dos padrões de n-hexadecano e ácido esteárico no extrator

1. Execute o Método 1664B e demonstre resultados falsamente altos e fora de conformidade

2.0 Resumo do Método

6.0 Equipamentos e Suprimentos

6.1 Equipamento de amostragem

leve ao forno a 110–200°C por no mínimo 1 h antes do uso.

6.2 Equipamento para limpeza de vidros

6.2.1 Pia de laboratório com capela suspensa.

6.2.2 Forno – Capaz de manter uma temperatura dentro de ± 2 ºC na faixa de 20–250°C.

6.3 Equipamento para calibração

6.3.1 Balança Analítica – Capaz de pesar 0,1 mg.

6.3.2 Balão volumétrico – Vidro, 100 mL.

6.3.3 Frascos – Tamanhos variados, com tampas de rosca revestidas de PTFE.

6.3.4 Pipeta volumétrica – Vidro, 10 mL.

6.4 Equipamento para extração de amostras

6.4.1 Balança (opcional) – Carregamento superior, capaz de pesar 500–2.000 g dentro de ± 1%

6.4.2 Haste de agitação de vidro

6.4.3 Funil separador – Vidro, 2.000 mL, com torneira de PTFE

6.4.4 Funil – Grande, de vidro, para despejar a amostra no funil de separação

6.4.6 Tubos de centrífuga (opcional) – vidro de 100 mL

6.5.1 Funil – Analítico, vidro

6.5.2 Papel de filtro – Whatman nº 40 (ou equivalente), para encaixar no funil

6.6 Equipamento para destilação de solvente

6.6.2 Frasco – Fervura, 125 mL (Corning No. 4100 ou equivalente)

6.6.7 Vácuo–Bomba de vácuo ou outra fonte de vácuo

6.6.10Capa à prova de explosão, capaz de acomodar o equipamento utilizado para solvente

6.7 Equipamento para remoção de materiais adsorvíveis

6.7.1 Agitador magnético

6.7.2 Barras de agitação magnética revestidas com PTFE

6.7.3 Proveta graduada – 500 mL, capaz de medir ± 5 mL