1.

INTRODUO

A degradao das protenas que do origem aos aminocidos que so desaminados e tm seu grupo amino convertidos em ureia. O grupo amino por desaminao d origem amnia que, em sua maioria, convertida em ureia no fgado. A ureia se forma a partir dos grupos NH dos aminocidos e constitui, no homem, o produto final do metabolismo do nitrognio, chega ao sangue e se difunde para todos os tecidos e lquidos do organismo. Dessa forma, o sangue, a linfa, o liquor e a bile possuem, aproximadamente, a mesma concentrao de ureia, sendo que a maior parte excretada pela urina. A ureia foi descoberta pelo francs Hilaire Rouelle em 1773, que por sua vez, teve valor histrico na poca sendo o primeiro composto orgnico sintetizado artificialmente obtido a partir do cianeto de potssio (sal Inorgnico).

2. OBJETIVO: Dosar a concentrao da ureia em uma amostra de soro, determinando o valor deste no sangue, para os seus possveis diagnsticos.

3. MATERIAIS E MTADOS: 3.1 Materiais - 3 tubos de ensaios; - Estante; - 2 pipetas graduadas; - Pera para pipetar; - Micropipeta de 20 ; - Ponteiras; - Banho-maria a 37C; - Espectrofotmetro 600 nm; - 3 Cubetas.

3.2 Reagentes - Reagentes de trabalho: urase; reagente 1 (mistura de salicilato de sdio, nitroprussiato de sdio e EDTA dissdico); reagente 2 (hipoclorito de sdio e hidrxido de sdio); - Soluo-padro (soluo de ureia 80 mg/d). 3.3 Mtodos - Dosar a ureia do soro.

4. PROCEDIMENTOS

01. Separar 3 tubos de ensaio identificando-os com, B (branco), A (amostra) e P ( padro). 02. Pipetar 2 ml de reagente 1 em cada tubo homogeneizando-os. 03. No tubo P (padro) utilizar a micropipeta para pipetar 20 l do reagente padro. 04. No tubo A (amostra) utilizar a micropipeta para pipetar 20 l do soro fornecido. 05. Incubar os 3 tubos de ensaio (B, P e A ), estando eles na estante, em banho-maria temperatura de 37 C, por 5 minutos. 06. Aps os 5 minutos, pipetar 2 ml do Reagente 2 em cada tubo identificado, homogeneizando-os. 07. Incubar os 3 tubos de ensaio ( B, P e A), estando eles na estante, em banho-maria temperatura de 37 C, por 5 minutos. 08. Aps os 5 minutos em banho-maria tirar a estante com os devidos tubos de ensaio para o procedimento de dosagem no espectrofotmetro. 09. Acertar a absorbncia do espectrofotmetro em 600nm; 09.1 - Colocar a amostra do tubo B na Cubeta e inserir no espectrofotmetro para zerar o aparelho. 09.2 - Aps zerar, retirar a amostra do tubo B e inserir a cubeta com amostra do tubo P e anotar o valor fornecido pelo aparelho. 09.3 - Aps o valor fornecido e anotado, retirar a amostra do tubo P e inserir a cubeta com a amostra do tubo A e anotar o valor fornecido pelo aparelho. 10. Calcular os RF. identificados acima,

5. RESULTADOS
Frmula usada:

Rf = A/ P x 60 Onde: Rf= Ureia (mg /dl); A= absorbncia da amostra; P= absorbncia do padro; 60 = Concentrao do padro.

Rf=? A= 0,33 P= 0,56

Rf= 0,33 / 0,56 x 60 Rf = 35,35 mg/dl

6. DISCUSSO

Aps pipetar o reagente 2 nos tubos de ensaio (B, P e A) observou-se a mudana de colorao da amostra, o tubo P ficou mais esverdeado e outros (A, P) mais amarelados. Sempre seguir a ordem no espectrmetro de B (branco), para zerar o aparelho, tubo P (padro) para seguir o padro, tubo A (amostra) para medir absorbncia da amostra do paciente, sendo que na zeragem do espectrofotmetro com o tubo de ensaio B observar o (bla, bla). Os valores de ureia no sangue so indicativos de problemas renais, como este secretado pela urina, os valores aumentados no sangue indicar que os rins no esto secretando estes metablicos. Utilizando a amostra (soro) do paciente Raimundo obteve-se os valores 35,35 mg/dl, os quais esto dentro dos valores da normalidade, referente ao valor de referencia. Obs.: Valor de referencia: Soro: 10 a 50 mg/dl ou 1,7 a 8,3 mmol/L; Urina: 15 a 30 mg/dl g/24 h, podendo ser dosado valores de ureia na urina.

Caso o paciente apresentar um resultado ao qual no est de acordo os valores da normalidade, poder ser diagnosticado de 2 formas: - Hiperuremia ( aumento da ureia) : Problemas renais, ingesto aumentada de protenas e etc. - Hipouremia (diminuio de ureia): Gravidez, insuficincia heptica e desnutrio.

7. CONCLUSO Conclui-se que, com a dosagem de ureia do paciente Raimundo encontra-se nos valores de normalidade.

8. QUESTIONRIO

1. Qual a finalidade da produo de ureia? Para a sntese de ureia no ciclo da ureia, o processo envolve a converso da ornitina em citrulina e desta em arginina. No final do ciclo, a ornitina regenerada e a ureia, produzida. O CO e o NH so introduzidos no ciclo por molculas transportadoras cuja formao requer ATP. Deficincias das enzimas do ciclo da ureia resultam no acmulo de amnia no sangue, sendo que a amnia txica para o corpo. 2. possvel dietas hiperproticas modificarem os valores da determinao de ureia? Sim. Ingesto aumentada de protena causa Hiperuremia.

9. BIBLIOGRAFIA

MARIANE, C. N., MRCIA, B. S. e CAROLINA, O. , Prticas de Laboratrio de Bioqumica e Biofsica Uma Viso integrada. Ed. Guanabara Koogan, Rio de Janeiro, 2009 PLT.