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Microbiano
DOCENTE: ELINA DELANE
Crescimento microbiano
◦ Aumento do número e de
colônias
Crescimento microbiano
•Fatores necessários ao crescimento
• Físicos
• Temperatura • Químicos
• pH • Fontes de carbono
• Pressão osmótica • Nitrogênio
• Enxofre,
• Fosforo
• Oxigênio
• Elementos traços
Fatores necessários ao crescimento
microbiano
•Fatores Físicos
•Temperatura
• Psicrófilos (25º C)
• Psicrotroficos (20-30º C)
• Mesófilos (25-45º C)
• Termófilos (50-60º C)
• Deterioração de alimentos
Fatores Físicos
Fatores Físicos
• pH
Acidez ou alcalinidade da solução
Neuralidade 6,5 e ,5
Acidófilas
Ex: Bacterias quimioautotroficas
Minas de carvão na oxidação do enxofre podem sobreviver em PH1
Fungos e leveduras (pH ótimo de 5-6)
Tampões peptonas e aminoácidos
Fatores Físicos
Pressão osmótica
Saída da água de dentro da célula
que gera a plasmólise.
A separação da membrana à
parede inibe o crescimento.
Preservação de alimentos: Peixe
salgado, mel e leite
• Halófilos extremos
• Halófilos obrigatórios
• Halófilos facultativos
Fatores químicos
◦ Carbono
Esqueleto estrutural da matéria viva
Constitui a metade do peso bacteriano
Quimio-heterotróficos obtém carbono de proteínas lipídeos e
carboidratos
Quimioautotroficos e fotoautotróficos obtém do dióxido de carbono
•Nitrogênio, enxofre e fósforo
◦ Síntese de proteínas requer N e S
◦ Síntese de DNA e RNA requer N, P
◦ Síntese de ATP
N (14%), S e P (4%) do peso seco bacteriano
◦ Enxofre – síntese de aa e vitaminas Tiamina e biotina
◦ Fósforo – síntese de ácidos nucleicos e fosfolipídeos da
membranas celulares
◦ Nas ligações de energia de ATP
Elementos traço
◦ Fe, Co, Mb, Zn
◦ Cofatores de certas enzimas
Oxigênio
◦ Aeróbicos obrigatórios
◦ Anaeróbicos facultativos (fermentação ou respiração anaeróbica)
Ex: E. coli
◦ Anaeróbicos obrigatórios. Ex: clostridium
◦ Microaerofilas
◦ Anaerobicos aerotolerantes
•Formas toxicas de oxigênio
Oxigênio Singlet (¹O₂¯)- oxigênio molecular induzido ao estado de
alta energia
Radicais superóxidos (O₂¯) ou aniões superóxidos são formados
durante a respiração e por anaeróbios obrigatórios quando em
presença de oxigênio (SOD- superóxido dismutase)
Fatores orgânicos de crescimento
Compostos orgânicos essenciais que o organismo não consegue
produzir
Ex: Vitaminas
◦ Coenzima Cofator
◦ Bactérias
◦ Aminoácidos
◦ Purinas e
◦ pirimidinas
Biofilmes
◦ Comunidade de
microrganismos
◦ Formada de polissacarídeo-
hidrogel
◦ Quorum- sensing sinais
químicos de comunicação
◦ 1000 vezes mais resistentes
◦ Importância Industria de
alimentos, medicina
Meio de cultura
Material nutriente para o crescimento de microrganismos
Um meio deve fornecer uma fonte de energia, de carbono, nitrogênio, enxofre,
fósforo e quaisquer outros fatores orgânicos de crescimento que o organismo seja
incapaz de sintetizar.
Inóculo- iniciam o crescimento
Cultura- crescem sobre o meio de cultura
Meio estéril- meio sem moo
Ágar- polissacarídeo derivado de alga marinha (40- liquefaz 100º C)
◦ Em placa
◦ Tubo de ensaio
Meio quimicamente
definido
Meio complexo
◦ Caldo nutriente
◦ Agar nutriente
Meio e método de crescimento
anaeróbico
Usam –se meios redutores
contendo tioglicolato de sódio que
combina-se quimicamente com
oxigênio dissolvido e eliminam-no
do meio de cultura
◦ Câmara anaeróbica
◦ Jarra de culturas de bactérias em
placa
Meios enriquecidos
Usa-se em amostras de solo e fezes
Favorece o crescimento de um em detrimento de outros (meio seletivo )
Meio seletivo e diferencial
Seletivo-impedem o crescimento de bactérias indesejáveis e favorecem o
desejável
Ex: Agar sulfeto de bismuto- gram-negativa Salmonela Typhi apartir da fezes
Diferencial – diferenciação das colônias de microrganismo desejável
Ex: Agar sangue (contem hemácias) – Streptococcus pyogenes
Obtenção de culturas puras
Preservação de culturas bacterianas
Refrigeração
Congelamento a baixas temperaturas (-50 a -95º C)
Liofilização (congelamento dessecação) (-54 a -72º C)- agua retirada
por vácuo (sublimação)
Crescimento de culturas
bacterianas
Fissão binária
Brotamento
Conideósporos
Crescimento de culturas bacterianas
Tempo de geração
O tempo necessário para uma célula se dividir
Desvantagem
Precisa 24horas para as colônias se tornarem visíveis
As vezes as células crescem em agregados ou cadeias (UFC- unidades
formadoras de colônias)
Food na drug administration recomenda para contagem 25 a 250
colônias
Microbiologistas preferem de 30 a 300 colônias
Diluição seriada o inoculo inicial é diluído várias vezes para que
algumas colônias estejam na faixa de contagem.
Incorporação em placa e a
espalhamento em placa
Incorporação em placa cresce tanto
dentro do ágar nutriente quanto na
superfície
Desvantagem: microrganismos sensíveis
podem se danificar pelo ágar fundido,
sedo incapaz de formar colônias
As colônias que se formam abaixo da
superfície não são adequadas para
testes diferenciais
Espalhamento em placa evita o contato
entre as células e o ágar fundido
Filtração
É usada quando a
quantidade de bactérias
é relativamente
pequena, em aguas
relativamente puras.
Método de numero mais provável (NMP)
Usa-se quando os microrganismos não crescem em
meio sólido. É usado para o crescimento diferencial
(95% de probabilidade)
Contagem microscópica direta
Contador de células Petroff-Hausser
A maior vantagem das contagens
microscópicas e que um tempo de
incubação não é requerido
Turbidimetria
Espectrofotômetro ou
colorimetro
Registro de porcentagem de
transmissão
Absorbância (densidade ótica-
D.O) 10 a 10milhoes de células no
minimo
Abs = 2 – log de % da transmissão
Determinação por métodos indiretos
Atividade metabólica
A quantidade de um produto metabólico como Acido ou CO2 é
diretamente proporcional ao número de bactérias
Peso seco
Para bactérias e fungos filamentosos
Controle do crescimento microbiano
Esterilização é a remoção ou destruição de todas as formas de vida microbiana. Liquidos ou
gases podem ser esterilizados por filtração
Quando alguém precisa receber uma injeção, a pele e limpa com alcool – o processo de
degerminação, que resulta principalmente na remoção mecânica, em vez da morte, da
maioria dos micro-organismos em uma área limitada
Os copos, as louças e os talheres dos restaurantes estao sujeitos a
sanitização, que tem a finalidade de reduzir as contagens
microbianas a niveis seguros de saúde publica e minimizar as
chances de transmissão de doença de um usuario para outro. Isso
normalmente e obtido por lavagem em altas temperaturas ou,
no caso das loucas em um bar, lavagem em uma pia seguida por
imersão em um desinfetante químico.
Biocida ou Germicida- mata (com exceção de endosporos)
bacteriostase Inibem o crescimento e a multiplicação bacteriana
Sepse (gr. Estragado podre)- contaminação bacteriana
Asseptico- livre de patógenos
Assepcia ausência de contaminação significativa
Taxa de morte
microbiana
Quando
submetidos a um
tratamento a taxa
de morte é
constante ao
longo do tempo.
Ações dos agentes antimicrobianos
1. ALTERAÇÃO NA PERMEABILIDADE DA MEMBRANA
•regula a passagem de nutrientes para o interior da célula
•e a eliminação celular de dejetos.