CURSO DE BIORGNICA

VIA DO ACETATO: BIOSSNTESE DOS CIDOS GRAXOS, POLICETDEOS, ANTRAQUINONAS E MACROLDEOS

Dra. Maria da Paz Lima Coordenao de Pesquisas em Produtos Naturais

PARTE I

CIDOS GRAXOS cidos graxos saturados cidos graxos insaturados cidos graxos acetilnicos cidos graxos ramificados

Derivados de cidos graxos C20: Prostaglandinas,

tromboxanos e leukotrienos

Esquema 1. Principais vias metablitas

CO2 e H2O Fotossntese luz C6H12O6 Carboidratos

CO2H

HO CH3-CO-CO2H cido pirvico

OH OH cido chiqumico

HO CH3-C-CH2CO2H CH2CH2OH cido mevalnico CH3-CO2H cido actico HO2C CH2COCO2H

cidos graxos Policetdeos Isoprenides Terpenoides Esterides Carotenides

H OH cido prefnico
Ciclo do c. ctrico

Aminocidos

Metablitos do cido chiqumico Derivados do cido cinmico Lignanasas Outros compostos aromticos

alcalides

1. INTRODUO A acetil coenzima A (CH3CO-ScoA) produzida atravs

da oxidao da glicose e pode ser oxidada originando cido carbnico (Esquema 1) CH3COOH + HSCoA
Acido actico CoenzimaA

CH3CO-ScoA + HOH
Acetil coenzima A

CH3CO-ScoA - a origem da unidade base C2, de muitas substncias naturais: cidos graxos, poliacetilenos, prostaglandinas, macroldeos e vrios compostos aromticos (ex. antraquinonas) .

Parte cido pantotnico

Parte 2 aminoetanotiol

Parte adenosina difosfato

 O fato dos cidos graxos terem um nmero par de tomo de carbono fez os bioqumicos suspeitarem que os cidos graxos

fossem sintetizados e degradados na clula atravs da adio ou

subtrao de fragmentos C2.

- Knoop (bioqumico alemo), em 1904 administrou em ratos

vrios tipos de cidos e isolou da urina dos animais os cidos benzico e cido fenil actico

CH2

(CH2

CH2)n

CH2

CO2H

CO2H

n = 0,1,2,3,.....

cido benzico

A cadeia substituinte tem 3 + 2 n tomos de carbono, isto , um nmero mpar. Ao removermos sequencialmente unidades C2, por degradao, ficamos sempre com um carbono final, ligado ao grupo fenilo, que oxidado dando origem funo carboxi, do cido benzico.

(CH2

CH2)n

CH2

CO2H

CH2

CO2H

n = 0,1,2,3,.....

cido fenil actico

Cadeia 2 n + 2 tomos de carbono, isto , um nmero par que oxidado d origem ao cido fenil actico * Este experimento sugeriu o seguinte mecanismo de degradao:
b CH 2 [O] a CH 2

CH 2

CO 2H

CH2

C O

CH2

CO2H

Conhecido pelo mecanismo de oxidao

CH2

CO2H

CH3

CO2H

Oxidaes de cidos graxos Lembrete reaes de Condensao (Prof. Srgio)

FORMAO DO MALONIL- CoA

Experimento in vitro [14C]bicarbonato: a reao envolve ATP, CO2 (como bicarbonato, HCO-3) e coenzima biotina (catalizador)
H2O O OPP-Adenosina HN NH HN S Biotina (CH2)4COOH S (CH2)4COOH S N O C O +P (CH2)4COOH H2O, CO2 HN O N O C OH

COOH BIOTINA + CH2 CO-SCoA MALONIL COA

CH3CO-SCoA

A converso do Acetil-CoA em Malonil-CoA aumenta a acidez do hidrognio e assim fornece um melhor nuclefilo para a condensao de Claisen

 As cadeias policetnicas so poli--ceto,

formadas pelo acoplamento de unidades de cido actico (C2) via reaes de condensao
ESQUEMA 2. FORMAO DA CADEIA POLI--CETO

O CH3 C Acetil-CoA SCoA O H2C C C O O

Reao de Claisen

O CH3 C H2C SCoA C SCoA O

CH3 C CH2 C SCoA Acetoactil-CoA Malonil-CoA Repetidas reaes de Claisen

SCoA

O CH3 C

O SCoA

Malonil-CoA

CH2 C CH2 C n Poli--ceto ester

2. CIDOS GRAXOS

cidos graxos naturais podem conter de 4 30 (ou mais)

tomo de carbono - mais abundantes aqueles com 16 ou 18

carbonos
A gordura animal contm alta proporo de glicerdeos de cidos graxos saturados e tende a ser slida; As plantas e peixes contm predominantemente steres de cidos graxos insaturados e tendem a ser lquidos (leos); Alguns cidos graxos so encontrados na combinao ster com glicerol na forma de triglicerdeos

EXEMPLOS

1. cido graxo saturado

OCOR1
OH O

R2COO

OCOR3

cido palmtico (C16)

Triacilglicerol (triglicerdeo)

2. cido graxo insaturado

cido olico (C18)

OH
OH O

HO

OH
Glicerol

cido olico (C18)

Estereoqumica da dupla ligao: Cis ou Z

CIDO PALMTICO (C16) CIDO OLICO (C18)

Ricinus communis (Euphorbiaceae) ( Mamona) Os cidos palmtico e olico encontrados em sementes de diversas espcies so importantes p/ indstrias de cosmticos e nas dietas alimentares Prunus amygdalus (Rosaceae) (Amendoeira)

ESQUEMA 3. BIOSSNTESE DOS CIDOS GRAXOS SATURADOS

Reao de Claisen O CH3 C S Enz CO2

NADPH (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate

(Iniciador)
O CH3 C SCoA Acetil-CoA O C

Acil-enzima thioester O ACP C

O CH3 C CH2 C O -ceto acil-ACP S ACP

O H SCoA

O H S ACP

CH2 C Malonil- CoA O

CH2 C Malonil-ACP O H E H3C C O S ACP

(Continuador)

NADPH -H2O (eliminao E2) HO H3C H CH2 C O -hidroxi acil-ACP S ACP

cido olico (C18) H acil-ACP ,-insaturado

NADPH (reduo de dupla insaturada) HSCoA H3C CH2 CH2 C O S ACP H2O H3C CH2 CH2 C Acil graxo-CoA O H3C CH2 CH2 C SCoA

Acilgraxo-ACP

OH

cido graxo O

Lembrete reaes de Condensao (Prof. Srgio)

OBSERVAES
Esquema 3: o acilgraxo-ACP, tem 2 carbonos a mais que o

material inicial ou seja, uma nova condensao com malonil-ACP, seguida por reduo, desidratao, aumenta gradativamente o tamanho da cadeia em 2 C cada ciclo at o tamanho da cadeia desejada. EX: A combinao de 1 unidade de acetato inicial + 7 malonatos produz o cido graxo C16 ( cido palmtico)
OH
CIDO PALMTICO (C16)

Os 2 carbonos da cabea da cadeia (metila final) so

provenientes do acetato e os restantes derivados do malonato

(que fornece a extenso da unidade C2)

O malonato produzido pela carboxilao do acetato, isso

significa que todos os carbonos dos cidos graxos originam de acetato.

cidos Graxos Insaturados Exemplo: 20:5 (5c,8c,11c,14c,17c) 20 = n0 de tomos de Carbono; 5 = n0 de insaturaes;

5c,8c,11c,14c,17c = configurao cis (Z) da dupla ligao

5

COOH
20

Fonte
cido Eicosapentaenico (EPA)

leo de fgado de bacalhau

Outra sistemtica de enumerao iniciando pela metila terminal ( final) Nomenclatura: C20:5 :3
O consumo dos cidos graxos :3, :6 e :9, previne a arteriosclerose e os riscos de ataque cardaco

OBSERVAES

Os cidos graxos insaturados podem ser produzidos por mais de

1 rota biossnttica mas na maioria dos organismos o mecanismo

por insaturao do cido alcanico correspondente com insaturao

adicional. A maioria dos organismos possui uma 9 desaturase que introduz uma dupla ligao no cido graxo saturado (O2 , NADPH ou NADH) Posio das insaturaes adicionais (Esq. 4) depende do organismo

ESQUEMA 4. BIOSSNTESE DOS CIDOS GRAXOS INSATURADOS

CO-SR

R=ScoA (em animais e fungos) R=ACP (em plantas)

cido esterico 18:0

CO-SR

Plant/fungos insaturao em direo metila terminal

CO-SR

cido olico 18:1 (9c)

cido olico (C18)
Animais insaturao em direo carboxila terminal

cido linolico 18:2 (9c,12c)

Animais

CO-SR

CO-SR

18:2 (6c, 9c)

cido g-linolico 18:3 (6c,9c,12c)

Lembrete: Os 2 carbonos da cabea da cadeia (metila final) so prevenientes do acetato e o restante derivados do malonato (extenso da cadeia)

cidos Graxos Acetilnicos

Muitos compostos encontrados na natureza contm 1 ou mais

ligaes acetilnicas e estes so predominantemente produzidos por

adicional dessaturao de sistemas olefnicos nos derivados de

cidos graxos. Os cidos graxos acetilnicos, so comuns em espcies de

Asteraceae, Apiaceae e em fungos do grupo Basidiomiceto

Resinas segregadas por plos secretores

Grindelia robusta (Asteraceae)

Matricariol

Mal-me-quer-do-campo

Balsmico,expectorante, afeco renais e das vias urinrias

 Os cidos graxos contendo vrias duplas ligaes tende a

possuir insaturao no conjugadas;

as molculas contendo tripla ligao - tende a possuir

insaturao conjugada

CO 2H

cido dehidromatricaria

ESQUEMA 5. BIOSSNTESE DOS CIDOS GRAXOS ACETILNICOS Nomenclatura (forma resumida) a = tripla; c = dupla; cis; t= dupla trans

CO2H cido olico 18:1 (9c)

CO2H cido linolico 18:2 (9c, 12c)

CO2H cido crepennico 18:2 (9c, 12a)

CO2H cido dehidrocrepennico cido olico (C18)18:3 (9c, 12a, 14c)

CO2H 18:3 (9c, 12a, 14a)

cido dehidromatricria

CO2H 18:4 (9c, 12a, 14a, 16a)

-oxidaes

CO2H cido 10:4 (2t, 4a,6a,8a)

cidos Graxos Ramificados

Embora os cidos graxos alifticos sejam os mais comuns, os

ramificados tem sido encontrados em sistemas de mamferos (ex. gordura animal) e so constituintes caractersticos da parte lipdica das paredes celulares em algumas bacterias patognicas. Vrios mecanismos parece atuar na sua formao:

Condensao entre 2 cidos graxos; Introduo da metila usando metilmalonil-Coa ao invz do

Malonil-Coa

Introduo da metila produzida por mecanismo de C-alquilao

usando S-Adenosilmetionina (SAM)

ESQUEMA 6A. EXEMPLO DE CONDENSAO ENTRE 2 CIDOS GRAXOS

O SCoA SCoA O
Combinao de 2 cidos palmticos

OH

CO2H

cido corinomiclico Bactria: Corynebacterium diphtheriae

Corynebacterium diphtheriae (bacilo gram-positivo) : o agente etiolgico da Difteria

ESQUEMA 6B. EXEMPLO DE .INTRODUO DA METILA USANDO METILMALONIL-COA AO INVZ DO MALONIL-COA

SCoA O Propionil-CoA

CO2, ATP biotina

CO2H SCoA O Metil malonil-CoA

SCoA O

CO2H

cido 3,4,6,8-tetrametil decanico

Glndulas

ESQUEMA 6C. INTRODUO DA METILA PRODUZIDA POR MECANISMO DE C-ALQUILAO USANDO S-ADENOSILMETIONINA (SAM)

Adio eletroflica: SAM como agente alquilante

Ad CH3-S R SAM O SCoA Oleoil-CoA

H CH2 O SCoA Carboction (intermedirio) NADPH (adio de hidreto)

CO2H cido tuberculosterico

(Mycobacterium tuberculosis)

Lembrete reaes de de alquilao via adio eletroflica (Prof. Srgio)

SAM (S-adenosylmethionine)

2. PROSTAGLANDINAS, TROMBOXANOS E LEUKOTRIENOS

Derivados de cidos graxos C20 (cidos eicosanicos)

So metabolitos isolados fundamentalmente do reino animal, mas so tambm encontrados em algas e corais.

Desempenham papel importante nos organismos que os

produzem, e tambm a sua utilizao como drogas ( objetos de intensos estudos biolgicos, mdicos e farmacuticos).

ESQUELETO BSICO DAS PROSTAGLANDINAS (PG)

So cidos graxos C20 ciclizados, contendo: um anel ciclopentano; uma cadeia lateral C7 com uma carbonila; uma cadeia lateral C8 com uma metila terminal

EXEMPLOS D E PROSTAGLANDINAS E SEUS PRECURSORES

9 10 11

8 7

4 3

CO2H 18 20 19

CO2H
11

CO2H

12

13 14 15

16

17

11

14

14

17

cido 8,11,14 -eicosatrienico

cido 5,8,11,14-eicosatetraenico

cido 5,8,11,14,17-eicosapentaenico

O CO2H

O
8

CO2H

CO2H

12

12

HO

PGE 1

OH

HO

PGE 2

OH

HO

PGE 3

OH

cido olico (C18)

Os 3 precursores levam produtos de estruturas similares mas com variao nos nveis de insaturaes das duas cadeia laterais.

As prostaglandinas so usualmente abreviadas por PG e a nomenclatura semisistemtica baseada no padro de substituio do anel de 5 membros:
O R1 R2 PGA PGB O O R1 R2 PGC R1 R2 HO R1 R2 O PGD HO O R1 R2 HO PGE PGF HO R1 R2 O O R1 R2 PGH

Prostaglandinas- constituem um grupo de compostos de grande atividade fisiolgica, que esto presente em largas quantidades ( 50 a 60 g/ml) no lquido seminal humano, mas tambm se encontram em quantidades inferiores (1 g/ml) em vrios rgos (pulmo, rim,

pncreas, crebro, etc). A importncia destes compostos advm da multiplicidade de efeitos

fisiolgicos como no ritmo cardaco, na presso sangunea e no metabolismo das gorduras.

ESQUEMA 7. MECANISMOS DE BIOSSNTTICOS DAS PROSTAGANDINAS E TROMBOXANOS

CO2H Ciclo oxigenase O O

CO2H

14

14

cido 5,8,11,14-eicosatetraenico (cido araquidnico)

O O

CO2H
14

Clivagem do perxido acclico

O O

CO2H
14

12

12

OH PGH 2

Perxido cclico

O-OH
Perxido acclico

PGG 2

cido olico (C18)

Clivagem radicalar do perxido acclico

OUTRAS PROSTAGLANDINAS (PGF 2, PGE 2, PGD 2,PGI 2)

.O .O

CO2H
14

TROMBOXANOS

12

OH Intermedirio I

ESQUEMA 7A CONTINUAO DO MECANISMO DE FORMAO DOS TROMBOXANOS

.O .O

8 12 14

CO2H

.O
O

CO2H
14

12

OH Intermedirio I

OH

OH
8 12

CO2H O
14

8 12 14

CO2H

HO

OH

H2O:

cido olico B (C18 ) Tromboxano 2 (TXB 2)

OH Tromboxano A 2 (TXA 2)

Os

tromboxanos

foram

isolados

em

plaquetas do sangue, participam dos

mecanismos de coagulao do sangue e tem propriedade de estimular ou ativar outras plaquetas

ESQUEMA 8 . BIOSSNTESE DOS LEUCOTRIENOS

O
8 5

O CO2H H
8 5

O OH CO2H

H
14

14

Hidroperxido
cido 5,8,11,14-eicosatetraenico (cido araquidnico)

k
HO CO2H
OH

H 2O :

O
5

CO2H

l
LTA4

cido olico (C18) LTB 4

Alguns leucotrienos atuam sinergicamente no desenvolvimento da broncoconstrio

caracterstica desta fase do processo asmtico. A terapia antiasmtica moderna

permitiu a identificao de novos alvos teraputicos teis para seu tratamento, os antileucotrienos (substncias que atuam inibindo a produo ou bloqueando a ao dos leucotrienos, atravs da inibio enzimtica de sua biotransformao) .

BIOSSNTESE DOS CIDOS GRAXOS O processo da biossntese catalisada pela enzima cido graxo sintetase O Acetil-CoA e malonil-CoA no so envolvidos nos passos da condensao:

- Acetil, convertido em tioster enzima e Malonil ster, interage

com Acyl Carrier Protein (ACP) - Protena transportadora do

grupo acilo (Esquema 3)