MINISTRIO DA EDUCAO

DIRECO REGIONAL DE EDUCAO DO ALGARVE

AGRUPAMENTO DE ESCOLAS DR. LAURA AYRES


Quarteira
Outubro 2011

Disciplina: Biologia e geologia
Professora: Zenaida Lima


Extrao de DNA de clulas vegetais







Relatrio reallizado por:

Ruben Miguel Heath Seromenho
N 17 11 B


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ndice



ndice ............................................................................................................................................. 2
Introduo ..................................................................................................................................... 3
Fundamentao terica .................................................................................................................. 4
Processo experimental ................................................................................................................... 6
Materiais .................................................................................................................................... 6
Metodologia .............................................................................................................................. 7
Registo dos resultados ............................................................................................................... 8
Interpretao dos resultados .......................................................................................................... 9
Concluso .................................................................................................................................... 10
Bibliografia ................................................................................................................................. 11


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Introduo


Este relatrio baseado numa experincia em que o objectivo principal a extrao do
DNA de clulas vegetais.
Para isto utilizamos o kiwi por vrios motivos. Um destes o seu fcil manuseamento
mas tambm optamos pelo kiwi devido simplesmente a ser a fruta da poca.

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Fundamentao terica


Esta experincia tem como principal objectivo extrair o DNA de clulas vegetais.
Mas o que o DNA?
At meados do sculos XX, o suporte fsico da informao necessria para o
desenvolvimento de um ser vivo era desconhecido, de facto at considerava-se que a
informao necessria para formar um ser vivo estaria contida nas protenas mas na
realidade esta est contida no DNA.
O DNA foi descoberto em 1869 por Friedrich Miescher. No entanto, esta descoberta
teve pouca importncia na altura, porque estas molculas foram consideradas demasiado
simples para albergarem a complexa informao que se esperava que o material
gentico contivesse.
Ento em 1928, os trabalhos realizados pelo bacteriologista Frederick Griffith abriram
caminho para um conjunto de trabalhos experimentais que viriam a permitir identificar
o material gentico.
Uma das suas experincias foi com bactrias do tipo S e do tipo R. As bactrias do tipo
S so capsuladas enquanto que as bactrias do tipo R no ou seja as bactrias do tipo R
so logo destrudas. Esta experincia mostrou que as bactrias conseguem ir buscar
informao as bactrias do tipo S para criarem tambm uma cpsula. Esta informao
deveria ser transmitida por uma substncia qumica, que ficou conhecida por prncipio
transformante, pelo facto de transformar um tipo de bactrias noutro.
A descoberta deste princpio transformante surgiu em 1944 como resultado de trabalhos
de investigao realizados por uma equipa de investigadores norte-americanos. Avery e
os seus colaboradores suspeitavam que o DNA pudesse ser o prncipio transformante
e com umas experincias estas suspeitas foram comprovadas.
Hershey e Chase, em 1952, realizaram novas experincias que confirmavam o prncipio
transformante.
Desta forma, ficou demonstrado que o DNA contm a informao necessria para a
produo de novos vrus, no tendo havido interveno das protenas virais.
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Assim, estes investigadores puderam concluir que o DNA o suporte da informao
gentica e no as protenas, reforando os resultados de Avery e dos seus colaboradores.

Mas em que constituido o DNA?
O DNA consttuido por bases azotadas que podem ser a adenina, a citosina, a guanina
e a timina. Os nucletidos estabelecem ligaes entre si, formando cadeias
polinucleotdicas. Estas ligaes estabelecem-se entre o grupo fosfato de um dos
nucletidos e o carbono 3 da pentose do nucletido seguinte. Estas ligaes designam-
se ligaes fosfodister.

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Processo experimental

Materiais

-Kiwi
-Almofariz
-Bisturi
-Banho-maria (37C)
-Coador
-Proveta de 100 ml
-Tubo de ensaio
-gua Destilada
-Detergente da loua
-Cloreto de Sdio
-Etanol (5C)
-Gobel
-Fucsina bsica
-Vareta
- Caixa de Petri


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Metodologia

1. Descascar um kiwi, cort-lo em pequenos cubos e esmag-lo num almofariz.

2. Adicionar uma soluo composta por: 100 ml de H2O; 10 ml de detergente de loua;
3g de NaCl.

3. Continuar o processo de esmagamento.

4. Colocar o preparado em banha-maria (37) durante 15 minutos

5. Filtrar, atravs de uma gaze (ou pano) de forma a obter 5 ml de lquido para um tubo
de ensaio.

6. Adicionar, lentamente, 5 ml de etanol 96% a 5 C.

7. Deixar repousar at se observar a ascenso de uma camada gelatinosa.

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Registo dos resultados


Fig.1- Extrao do DNA


Ao fim de alguns minutos , aps adicionarmos a pequena quantidade de etanol , foi
possvel observar na experincia 3 camadas diferentes . A superior branca , a central
transparente e a inferior verde o que indica que o trabalho experimental foi realizado
corretamente.
A camada gelatinosa superior onde o DNA ficou concentrado.


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Interpretao dos resultados

A experincia realizada, em que o principal objectio era extrair o DNA das clulas
vegetais, apresentou os resultados esperados obtendo 3 camadas diferenciadas pelo tom
de cor devido s substncias adicionadas e necessrias para o nosso objectivo.
O detergente teve a funo desagregar as membranas fosfolipdicas, o cloreto de sdio
teve como objectivo impedir a repulso eltrica entre as molculas de DNA por ter
carga positiva neutralizando a carga negativa do grupo de fosfato do DNA e permitiu a
sua agregao de modo a formar filamentos mais espessos e compridos sendo assim
mais visveis.
A soluo foi aquecida em banho-maria a 37 C e devido adio do etanol a 5C
provocou um choque trmico originando as tais formaes de bolhas de ar ajudando a
elevar o ADN.
Outra razo pelo DNA ter ascendido porque este insoluvl a etanol de concentrao
96%, separando assim o DNA. E como este menos denso que a gua, posicionou-se na
parte duperior do filtrado.

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Concluso

A nossa experincia foi bem sucedida e assim foi possvel concluir o objetivo que era
observar a estrutura do DNA das clulas vegetais do kiwi e claro, compreender como
funciona todo o processo e os efeitos das substncias utilizadas que permitiram fazer a
extrao do DNA.


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Bibliografia

MATIAS, Osrio e MARTINS Pedro, Biologia 11Ano,Areal Editores,
Porto, pp.13-23.