NUTRIO MINERAL DE PLANTAS

INTRODUO
PARTE I - A AQUISIO DE NUTRIENTES
Captulo 1 Elementos Essenciais
Captulo 2 Razes
Captulo 3 Micorrzas
Captulo 4 Solues Nutritivas
Captulo 5 Absoro de Nutrientes
Captulo 6 Fixao Biolgica de N2
Captulo 7 Efeitos Fisiolgicos de Substncias Hmicas
Captulo 8 Efeitos Fisiolgicos do xido Ntrico
PARTE II - OS MACRONUTRIENTES
Captulo 9 Nitrognio
Captulo 10 Potssio
Captulo 11 Fsforo
Captulo 12 Clcio, Magnsio e Enxofre
PARTE III - OS MICRONUTRIENTES
Captulo 13 Micronutrientes
PARTE IV - OS ELEMENTOS BENFICOS
Captulo 14 Silcio, Sdio e Cobalto
PARTE V - OS ELEMENTOS TXICOS
Captulo 15 Alumnio
Captulo 16 Metais Pesados

CAPTULO 1
ELEMENTOS ESSENCIAIS E BENFICOS S PLANTAS SUPEIRORES
Antonio Roque Dechen(1);Gilmar Ribeiro Nachtigall(2)
(1)
(2)

Professor do Departamento de Solos e Nutrio de Plantas ESALQ/USP C. Postal

9, 13418-900, Piracicaba, SP. ardechen@esalq.usp.br.
Eng. Agr. Pesquisador da Embrapa Uva e Vinho, C. Postal 130, 95700-000, Bento
Gonalves, RS. gilmar@cnpuv.embrapa.br.
SUMRIO

INTRODUO............................................................................................................................................. 2

CRITRIOS DE ESSENCIALIDADE ......................................................................................................... 3

REFERNCIA BIBLIOGRFICA............................................................................................................... 7

INTRODUO

O uso de tcnicas de cultivos hidropnicos com solues de composio qumica bem

definida e a possibilidade de obteno de compostos qumicos de alto grau de pureza foram
fatores que contriburam muito para os avanos nas pesquisas em nutrio mineral de plantas,
j que possibilitaram o crescimento normal das plantas e permitiram um controle mais preciso
no fornecimento de nutrientes s razes.
Revendo a histria da nutrio mineral de plantas, provavelmente Woodward em
1699, realizou os primeiros experimentos em cultivo de plantas em meio lquido sem o uso de
substratos slidos. Em 1804, Saussure realizou uma das primeiras tentativas para analisar os
fatores envolvidos no cultivo de plantas em meios nutritivos, estabelecendo a necessidade de
fornecer nitrato soluo destes cultivos. No sculo XIX foram realizadas intensas pesquisas
envolvendo solues nutritivas e o crescimento de plantas. Pesquisadores como Sachs,
Boussingault e Knop, realizaram experimentos que ajudaram a determinar que certos
elementos eram importantes para o crescimento das plantas. O alemo Justus von Liebig
compilou em seus livros e cartas publicadas entre 1840 e 1855, informaes da poca quanto
a importncia dos elementos minerais para as plantas, referindo-se que os elementos minerais
essenciais para as plantas eram: nitrognio (N), fsforo (P), potssio (K), clcio (Ca),
magnsio (Mg), enxofre (S), silcio (Si), sdio (Na) e ferro (Fe), todos retirados do solo, alm
dos elementos essenciais carbono (C), hidrognio (H) e oxignio (O), retirados da gua e do
ar. Knop, em 1865, publicou os resultados de seu experimento envolvendo o efeito da
composio de uma soluo nutritiva sobre o crescimento das plantas, bem como props uma
frmula de uma soluo nutritiva simples, baseada em relaes moleculares, a qual foi o

ponto de partida para modificaes posteriores por outros autores (Ploeg et al., 1999; Furlani,
2004; Epstein & Bloom, 2005).
2

CRITRIOS DE ESSENCIALIDADE

Em termos mdios, o protoplasma de uma planta contm 85 a 90% de gua. O

contedo de gua nas razes, expresso em peso fresco, varia de 71 a 93%, dos ramos de 48 a
94%, das folhas de 77 a 98% e dos frutos entre 84 e 94%. A presena de elementos qumicos
nas cinzas de uma planta no um indicador das necessidades quantitativas e qualitativas dos
diferentes elementos qumicos para uma planta fotoautotrfica, como demonstraram Arnon &
Stout (1939), utilizando cultivos hidropnicos. Estes autores estabeleceram trs critrios que
devem sem atendidos para que um elemento possa ser considerado como essencial:
Critrio 1: Um elemento essencial se a sua deficincia impede que a planta complete
o seu ciclo vital.
Critrio 2: Para que um elemento seja essencial, este no pode ser substitudo por
outro elemento com propriedades similares. Por exemplo: O sdio (Na)
apresenta propriedades semelhantes ao potssio (K), contudo no pode
substituir o potssio completamente.
Critrio 3: O ltimo critrio que deve ser cumprido que o elemento deve participar
diretamente no metabolismo da planta e que seu benefcio no esteja
somente relacionado ao fato de melhorar as caractersticas do solo,
melhorando o crescimento da microflora ou algum efeito similar.
A presena de um elemento em altas concentraes em uma planta no um indicador
seguro de sua essencialidade, j que as plantas apresentam uma capacidade de absoro
seletiva limitada, de modo que podem absorver pelas razes elementos minerais no essenciais
e/ou mesmo txicos. Assim, mesmo que um elemento possibilite melhorar o crescimento ou

um processo fundamental de uma planta, no se considera como essencial se no atender os

trs critrios da essencialidade. Todos os 17 elementos apresentados na Tabela 1 cumprem
estas exigncias e devem ser fornecidos s plantas para que estas germinem, cresam,
floresam e produzam sementes.
Tabela 1. Relao dos elementos essenciais s plantas superiores, com as concentraes
mdias na matria seca da parte area de plantas e os respectivos autores que
demonstraram a sua essencialidade e o ano em que ocorreu a descoberta.
Elemento

Concentrao na massa
seca

Carbono (C)
450 g kg-1
Oxignio (O)
450 g kg-1
Hidrognio (H)
60 g kg-1
Nitrognio (N)
15 g kg-1
Potssio (K)
10 g kg-1
Clcio (Ca)
5 g kg-1
Fsforo (P)
2 g kg-1
Magnsio (Mg)
2 g kg-1
Enxofre (S)
1 g kg-1
Cloro (Cl)
100 mg kg-1
Mangans (Mn)
50 mg kg-1
Boro (B)
20 mg kg-1
Zinco (Zn)
20 mg kg-1
Ferro (Fe)
10 mg kg-1
Cobre (Cu)
6 mg kg-1
Nquel (Ni)
3 mg kg-1
Molibdnio (Mo)
0,1 mg kg-1
Fonte: Malavolta (1980); Marschner (1995).

Demonstrao da
Essencialidade
Saussure
Saussure
Saussure
Saussure
Sachs & Knop
Sachs & Knop
Ville
Sachs & Knop
Sachs & Knop
Broyer et al.
Maz, McHargue
Warington
Sommer & Lipman
Sachs & Knop
Lipman & McKinney
Brown et al.
Arnon & Stout

Ano
1804
1804
1804
1804
1860, 1865
1860, 1865
1860
1860, 1865
1865
1954
1915, 1922
1923
1926
1860, 1865
1931
1987
1938

Alguns elementos so classificados como benficos para algumas plantas, como o

sdio (Na), selnio (Se), silcio (Si) e cobalto (Co). Por exemplo, existem algumas espcies de
plantas de mangue que acumulam Na, j algumas plantas de deserto como Atriplex vesicaria e
Halogeton glomeratus que requerem sdio para o seu desenvolvimento, enquanto para a
Amaranthus tricolor (espcie C4) o Na essencial quando em condies de baixas

concentraes de CO2; existem plantas como Astragalus, Stanleya e Lecythis que crescem em
solos com altas concentraes de Se, constituindo-se em plantas acumuladoras deste
elemento. Tem sido proposto que os silicatos presentes em folhas e inflorescncias de
gramneas podem impedir ou diminuir o ataque por animais e insetos. O Co essencial e
necessrio para a fixao do nitrognio (N) por bactrias presentes nos ndulos das razes de
leguminosas, bem como para bactrias de vida livre que fixam N.
Desta forma, os elementos requeridos pelas plantas podem ser classificados como
essenciais e benficos, contudo, esta listagem atual pode ser ampliada, j que com o avano
das tcnicas analticas, outros elementos exigidos em quantidades mnimas podero ser
considerados essenciais ou benficos s plantas.
O contedo mineral dos tecidos vegetais varivel, dependendo do tipo de planta, das
condies climticas existentes durante o perodo de crescimento, da composio qumica do
meio e da idade do tecido entre outros. Por exemplo, uma folha madura provavelmente
contm uma concentrao de nutrientes maior do que uma folha muito jovem. Por outro lado,
uma folha madura pode ter uma concentrao de nutrientes maior do que uma folha velha,
devido ao processo de perda de minerais solveis em gua, ao ser lavado pela gua de chuva
ou mediante mecanismos de translocao para folhas jovens.
Os elementos minerais essenciais so denominados nutrientes minerais e so
classificados, conforme as quantidades exigidas pelas plantas em: macronutrientes que
constituem aproximadamente o 99,5% da massa seca e em micronutrientes, que constituem
cerca do 0,03%. Desta forma, so considerados macronutrientes os nutrientes C, H, O, N, P,
K, Ca, Mg e S e como micronutrientes os nutrientes B, Cl, Cu, Fe, Mn, Mo, Ni e Zn. Esta
classificao utilizada sob o ponto de vista da nutrio mineral de plantas e da fertilidade do
solo.

Segundo Mengel & Kirkby (2001), sob o ponto de vista fisiolgico difcil justificar a
classificao dos elementos essenciais s plantas segundo a classificao de macro e
micronutrientes, dependente da concentrao do nutriente nos tecidos da planta. Segundo
estes autores, a classificao dos elementos essenciais s plantas seguindo um critrio que
leve em considerao os processos bioqumicos e as funes fisiolgicas mais apropriada, e
estabeleceram uma classificao dos nutrientes em quatro grupos segundo estas caractersticas
(Tabela 2).
Tabela 2. Classificao dos elementos essenciais s plantas
Nutriente
1 Grupo
C, H, O, N, S

Absoro
Na forma de CO2, HCO3H2O, O2, NO3-, NH4+, N2,
SO42-,SO2, na forma de ons
da soluo do solo, de gases
e da atmosfera.

Funes Bioqumica
Maior constituinte de compostos orgnicos.
Elementos essenciais de grupos atmicos
que so envolvidos em processos
enzimticos. Assimilao por reaes de
oxidao-reduo.

2 Grupo
P, B

Na forma fosfatos, cido Esterificao com grupos alcolicos em

brico
ou
borato, plantas. Os esteres de fosfato esto
absorvidos da soluo do envolvidos em reaes com transferncia de
solo.
energia.

Na forma de ons da soluo Funes no especficas, estabelecendo

3 Grupo
potencial
osmtico.
Reaes
mais
K, Mg, Ca, do solo.
Mn, Cl
especficas nas qual o on proporciona um
melhor arranjo em enzimas proticas
(ativao de enzima). Balanceamento inico.
Controlando a permeabilidade de membrana
e o potencial eltrico.
Na forma de ons ou Presente predominantemente em formas
4 Grupo
Fe, Cu, Zn, quelatos da soluo do solo. quelatadas
incorporadas
em
grupos
prostticos. Habilita o transporte de eltron
Mo
atravs da mudana de valncia.
Fonte: Mengel & Kirkby (2001).

REFERNCIA BIBLIOGRFICA

ARNON, D.I.; STOUT, P.R. 1939. The essentiality of certain elements in minute quantity for
plants with special reference to copper. Plant Physiology, 14:371-375.

EPSTEIN, E.; BLOOM, A.J. 2005. Mineral nutrition of plants: Principles and perspectives.
Sinauer, Massachusetts. 400p.

FURLANI, A.M.C. 2004. Nutrio mineral. In: Kerbauy, G.B. Fisiologia vegetal. Editora
Guanabara Koogan, Rio de Janeiro. pp.40-75.

MALAVOLTA, E. 1980. Elementos de nutrio mineral de plantas. Ceres, So Paulo. 254p.

MARSCHNER, H. 1995. Mineral nutrition of higher plants. 2th ed. Academic Press, London.
889p.

MENGEL, K.; KIRKBY, E.A. 2001. Principles of plant nutrition. 5. ed. Kluwer Academic,
Dordrecht. 849p.

PLOEG, R.R.; BHM, M.; KIRKHAM, M.B. 1999. History of soil science. On the origin of
the theory of mineral nutrition of plants and the law of the minimum. Soil Science Society of
American Journal, 63:1055-1062.

CAPTULO 2
O SISTEMA RADICULAR E SUAS INTERAES COM O AMBIENTE
EDFICO

Everaldo Zonta1; Felipe da Costa Brasil2; Silvia Regina Goi3; Maria Mercedes
Teixeira da Rosa4
1 Prof. Dr. Departamento de Solos UFRRJ ezonta@ufrrj.br
2 - Prof. da Universidade Severino Sombra, Vassouras, RJ.
3 - Prof. Dr. Departamento de Silvicultura UFRRJ
4 - Prof. Dr. Departamento de Botnica UFRRJ

1. INTRODUO
Durantes muitos anos (at meados do sculo passado), as razes foram
consideradas como a metade oculta dos vegetais (Waisel, et al, 2002), com uma
significativa escassez de resultados de pesquisa sobre este tema em todo o mundo. As
razes para esta carncia de dados so historicamente explicveis pelas dificuldades
metodolgicas (Van Noordwijk, 1993), a prpria inacessibilidade ao sistema radicular
como objeto de experimentao, sua complexidade tridimensional e sua marcada
variabilidade espacial e temporal (Van Noordwijk, 1993).
Hoje existe consenso da importncia desses estudos com observaes in situ
no campo, para o manejo das lavouras, que quando associado aos fatores
edafoclmaticos so fundamentais para a otimizao das prticas de adubaes e
aplicaes de pesticidas de solo, alm das demais como, tratos culturais, densidade de
plantio, irrigao, cultivos intercalares e na arborizao urbana. Os estudos das razes
so ainda fundamentais para o entendimento das relaes de absoro de gua e

nutrientes, necessrios aos avanos das pesquisas bsicas que nortearo os estudos
aplicados.
Neste captulo, sero apresentados de forma sucinta os conhecimentos
acumulados sobre sistemas radiculares, tanto bsicos como prticos, obtidos nas ultimas
dcadas, de estudos sobre o assunto.
2. Origem e funes das razes
Filogenticamente, as razes so rgos recentes, cujo aparecimento data da
fixao dos vegetais na terra, da diferenciao do sistema vascular e novas rotas
metablicas conducentes sntese de substncias fenlicas e ligninas (Chriqui et al,
1996).
Os ancestrais mais antigos conhecidos de plantas vasculares pertencem ao
gnero Rhynia, que existiram durante o perodo Siluriano e Devoniano (h cerca de 354
a 435 milhes de anos). Eram plantas aquticas sem sementes, no havendo
diferenciao morfolgica de suas partes (raiz, caule e folha), constitudas unicamente
de um eixo com ramificaes dicotmicas, possuindo, no entanto, estmatos e um
sistema fotossinttico rudimentar. muito provvel que as razes tenham surgido ao
longo da evoluo, a partir da parte subterrnea do eixo da Rhynia, ou de uma
subespcie um pouco mais evoluda, no final do perodo Devoniano ou no incio do
perodo Carbonfero da Era Paleozica. Inicialmente, este sistema radicular pouco
definido morfologicamente, tinha como funo a fixao da planta no seu ambiente e
substrato, visto que a absoro de gua e nutrientes era primordialmente processada pela
parte area, j que estas viviam em meio aquoso (Raven et al, 1996).
Especificamente, as razes, como rgos distintos da parte area, evoluram
nas esporfitas, quando da maior ocupao do ambiente terrestre, onde, estruturas
semelhantes a razes penetravam a quase um metro dentro do substrato, aumentando o

volume de material mineral sujeito intemperizao, pelo aumento do nvel de CO2

gerado pela respirao das plantas e microrganismos em materiais com contacto restrito
com a atmosfera. Estruturas mais refinadas envolvidas na absoro de nutrientes de
baixa difuso no solo evoluram a pelo menos 400 milhes de anos atrs, como as
micorrizas arbusculares (capitulo 3 deste volume) ou plos radiculares. (Raven et al,
1996).
Com essa evoluo, o sistema radicular, subterrneo e heterotrfico, passou a
desempenhar funes mais complexas, como a fixao das plantas e a absoro e
conduo de gua e nutrientes do meio externo at o caule. Funes estas, primordiais
para o desenvolvimento vegetal e indiscutivelmente necessrias para a sobrevivncia de
toda e qualquer espcie (Raven & Edwards, 2001).
Particularmente, em algumas espcies, alm das funes primrias de
sustentao e absoro de gua e nutrientes, houve evolutivamente, a necessidade das
razes cumprirem outras funes, em parte moduladas pelo ambiente a que estavam
submetidas, tais como: a) dreno final no armazenamento de substncias de reserva, b)
propagao e disperso da espcie, c) nicho ecolgico para simbiontes e organismos
livres associados rizosfera, d) produo de metablitos secundrios, e) aerao
(oxidao) da rizosfera, e, f) sntese de reguladores de crescimento (Raven et al, 1996).
Ainda, em modelos singulares de sistemas radiculares (como em orqudeas) os sistemas
radiculares podem ser areos e fotossintetizantes (Peres & Kerbauy, 2000).
Independentemente das caractersticas especficas, o primrdio do sistema
radicular em plantas vasculares o embrio (esporfito jovem), formado por um eixo
caulinar (hipoctilo-epictilo), uma ou duas folhas embrionrias (cotildones) e por
uma raiz embrionria (radcula). Com a germinao da semente, a radcula sofre
divises e alongamentos celulares por um perodo de tempo e espao variado e com

tendncia catica at o seu desenvolvimento total (Figura 1), e originando razes laterais
de primeira, segunda, terceira e demais ordens.

Figura 1. Desenvolvimento de uma eudicotilednea (sombreiro), mostrando a raiz

principal e razes laterais de primeira e segunda ordem. Desenho de Maria Mercedes
Teixeira da Rosa, Depto de Botnica IB UFRRJ (2005).
3. Anatomia Radicular
A unidade bsica e estrutural da anatomia a clula, que se caracteriza pela
presena de parede celular envolvente, que mantm sua forma independente da clula
estar viva ou no. Agrupadas, estas estruturas compem todo o vegetal desde suas razes
at o plen.
A organizao particular e especializada de parte destas clulas determina a
anatomia radicular das plantas, conforme mostra Figura 2.

Figura 2. Estrutura anatomica da raiz principal de Ravenala madagascariensis, na

regio de ramificao. Seco transversal. Desenho de Maria Mercedes Teixeira da
Rosa, Depto de Botnica IB UFRRJ (2005).
3.1. pice da raiz
O pice da raiz (Figura 3a) em crescimento protegida pela coifa que consiste
de camadas de clulas concntricas que envolvem o meristema apical onde novas
clulas so produzidas. freqentemente coberta por uma grossa camada de mucilagem
(Figura 3b), usualmente considerada um lubrificante, para ajudar o pice a atravessar o
solo. A mucilagem tambm protege contra a dessecao, especialmente se contm
arabinogalactanas que se associam a partculas do solo e ajudam a garantir a
continuidade do filme de gua entre o solo e a raiz (Lynch, 1990). A mucilagem
tambm tem a funo de proteo contra substncias txicas do solo e funciona como
superfcie de absoro, afetando a troca inica, dissolvendo e provavelmente formando
quelatos com certos nutrientes. medida que novas clulas so produzidas, as clulas
da periferia da ponta da raiz so destacadas (Figura 3b). Quando a raiz para de crescer, o

pice da raiz pode ser protegido por suberizao das suas clulas externas. Essa
metacutinizao, que uma modificao das pontas das razes dormentes por
suberizao de uma ou mais camadas de clulas da coifa (Romberger, 1963), no
produzida em espcies anuais, mas produzida em espcies perenes como as rvores,
presumivelmente como uma forma de proteo contra fatores adversos do solo
(Brundrett & Kendrick, 1990).

Figura 3. a) pice da raiz de cebola. No detalhe, clulas em diferentes fases de diviso.

Depto de Botnica IB UFRRJ (2005); b) Clulas da periferia radicular destacadas e
mucigel em raiz de plntula de cana-de-acar. Silvia Regina Goi Departamento de
Cincias Ambientais IF - UFRRJ (2005).
3.2. Epiderme
A epiderme, chamada por alguns autores de rizoderme, presente na estrutura
primria, funciona como interface entre a planta e o solo. A parede celular de clulas da
epiderme podem ser suberizadas, lignificadas ou relativamente no modificadas.
Clulas da epiderme de razes novas secretam mucilagem.

3.3 Crtex
O crtex, regio compreendida entra a epiderme e o cilindro central,
freqentemente composto por clulas do parnquima. O crtex pode se diferenciar em
aernquima (Figura 2), com espaos intercelulares representados por grandes lacunas. O
aernquima das razes considerado como um tecido que serve ao transporte de gases e
como reservatrio de oxignio necessrio respirao dos tecidos principalmente em
solos alagados. As clulas do crtex so altamente vacuoladas, seus plastdeos
usualmente no possuem clorofila, mas acumulam amido. A camada interna do crtex
diferenciada em endoderme, e uma ou mais nas camadas externas, podem desenvolver
uma exoderme.
3.4 Exoderme
A camada de clulas abaixo da epiderme chamada exoderme. a camada
mais externa do crtex, podendo, apresentar vrios estratos celulares, cujas paredes
poder ser suberizadas e/ou lignificadas (Raven et al, 1996).
3.5 Endoderme
Na regio de absoro das razes, as clulas da endoderme contm suberina em
uma regio que se estende completamente ao redor das clulas, nas paredes radiais e
transversais, formando as estrias de Caspary. Nas razes que no apresentam
crescimento secundrio, como nas monocotiledneas, onde portanto o crtex retido,
verifica-se um depsito adicional de camadas alternadas de suberina e cera internamente
s paredes das clulas endodrmicas, formando-se o chamado espessamento em U
(Figura 4).

Espessamento em U

Estria de Caspary

Figura 4. Clulas da endoderme com espessamento em U e estria de Caspary de raiz

de Heliconia sp em diferentes fases de desenvolvimento. Depto de Botnica IB
UFRRJ (2005).
3.6 Tecido vascular e Cilindro central
O cilindro central compreende os feixes vasculares e uma ou mais camadas de
clulas no vasculares denominadas de periciclo. O xilema freqentemente forma uma
slida medula com projees cnicas dispostas radialmente no periciclo. Feixes de
floema se alternam com os cones do xilema. Se o xilema no se diferencia no centro da
raiz, um cerne, consistindo de parnquima ou esclernquima aparece (encontrado em
muitas monocotiledneas).
4. Morfologia Radicular
A morfologia radicular refere-se s caractersticas intrnsecas externas do
sistema, sendo fundamental tambm na identificao e classificao das espcies. Em
geral morfologicamente que se pode visualizar as principais alteraes no sistema

devido a efeitos biticos e/ou abiticos (McCully, 1999). Essas alteraes so devidas
s caractersticas de elasticidade e plasticidade intrnseca dessa parte do vegetal.
A maioria das plantas ramifica suas razes a partir do eixo principal em eixos
laterais de ordens superiores. Essas diferentes ordens de razes podem variar suas
caractersticas, com relao espessura, taxa de crescimento, capacidade de
crescimento secundrio, durao, estruturas e adaptaes. Essas variaes por sua vez,
vo influenciar a capacidade de obteno de gua, nutrientes, sobrevivncia a condies
adversas e a possibilidade de servir de habitat para microrganismos da rizosfera.
A radcula a raiz inicial da planta e est geralmente presente no embrio
dentro da semente. Ela forma a raiz principal da plntula. Em certas espcies o embrio
to pequeno e imaturo, como nas micro-sementes de orqudeas, que a radcula no est
presente. Em gimnospermas e dicotiledneas, a raiz principal e suas ramificaes
constituem o sistema radicular. Nas monocotiledneas, a primeira raiz comumente tem
um curto perodo de vida e o sistema radicular formado por razes adventcias (Figura
5) que emergem da parte area, freqentemente em conexo com as gemas axilares
(Esa, 1977). Um esquema da morfologia externa de uma raiz apresentado na figura 6.

Figura 5. Razes adventcias de Pandanus sp. No detalhe, a presena de espinhos.

Fotografia de Lucia Helena Cunha dos Anjos Depto de Solos IA UFRRJ
(2003).

Figura 6. Morfologia de eixo radicular principal ou de raiz lateral. Modificado de Raven

et al (1996), por Orlando Carlos Huertas Tavares CAPGA-CS Depto de
Solos IA - UFRRJ (2006).
4.1 Plos Radiculares
A epiderme pode apresentar projees que so os plos radiculares (Figura 7),
podendo ser curtos, longos, raros ou densos. Os plos radiculares so estruturas
cilndricas e tubulares derivadas de clulas epidrmicas da raiz chamadas tricoblastos
(Mller & Schmidt, 2004).

Figura 7. Plos radiculares de Ravenala madagascariensis. A e B) Tecido submetido a

diferentes corantes; C) Detalhe do Plo (unicelular). Departamento de Botnica
IB UFRRJ (2005).
Os plos radiculares so importantes no processo de aquisio de nutrientes,
pois aumentam a superfcie de absoro radicular. Resultados obtidos por Itoh & Barber
(1983) mostram a contribuio dos plos radiculares no aumento da superfcie da raiz
de alface, tomate e Salsola kali L.. A distribuio, densidade e comprimento dos plos
radiculares, pode variar de acordo com fatores genticos e ambientais. Experimentos
com tomate, canola e espinafre mostraram que a formao do plo fortemente
influenciada pelo suprimento de nitrato e fosfato (Foehse & Jungk, 1983). O etileno
parece estar envolvido na regulao do desenvolvimento dos plos radiculares de
Arabidopsis thaliana L. crescida em baixa concentrao de fsforo; a inibio do

etileno sob deficincia de fsforo resultou em reduo do crescimento da raiz,

diminuio do nmero de clulas formadoras de plos radiculares e reduo no
comprimento dos plos (Zhang et al 2003). Essas mudanas morfolgicas so
sinergsticas aquisio de fsforo, aumento da capacidade e competitividade da planta
quando este elemento o fator limitante (Bates & Lynch, 2000; Bates & Lynch, 2001).
O crescimento dos plos radiculares regulado por vrios genes, como RHD2,
RHD3, RHD4 e T!P! (Aeschbacher, 1994). Esses genes podem codificar produtos que
afetam o crescimento da ponta do plo, tal como o fluxo de clcio.
Antes da emergncia do plo radicular, a maioria dos feixes de
microfilamentos nos tricoblastos so orientados longitudinalmente ao eixo da raiz;
durante o desenvolvimento do plo, eles mantm essa orientao. O primeiro passo a
formao de uma protuberncia no tricoblasto. Os microfilamentos ficam nesta
protuberncia com a mesma orientao das clulas epidrmicas. As protuberncias se
desenvolvem em plos radiculares e inicialmente apresentam dimetro pequeno e tm
feixes finos de microfilamentos no citoplasma, mas que no chegam ponta do plo. No
estgio intermedirio de crescimento, o vacolo principal fica encostado na ponta e os
microfilamentos podem se estender at a ponta, mas no so to finos como no incio do
crescimento. O plo totalmente crescido possui um grande vacolo no centro da clula e
o citoplasma localizado perifericamente. Os microfilamentos ficam no citoplasma e se
dirigem at a ponta do plo, contornando-a (Miller et al 1999).
Outras modificaes na morfologia de plos radiculares tem sido mais
intensivamente estudadas em plantas inoculadas com Rhizobium (Ervin & Hubbell,
1985; Crdenas et al 2000). A especificidade das interaes simbiticas entre Rhizobium
e as leguminosas hospedeiras governada por um nmero de fatores que atuam em
vrios estgios. Fatores Nod so os principais determinantes da especificidade para

vrias espcies de Rhizobium (Dnairi et al. 1996). Fatores Nod so lipo-quitina

oligopolissacardeos que aplicados em razes de leguminosas podem induzir vrias
respostas, tais como deformao do plo radicular

e diviso de clulas corticais

(Walker & Downie, 2000). A estrutura bsica de fatores Nod permite ao Rhizobium
leguminosarum bv. viciae entrar no plo radicular e os genes nod nodO ou nodE
promoveram o desenvolvimento subseqente do cordo de infeco em Vicia hirsuta
(Walker & Downie, 2000).
Em plos radiculares, a presena de feixes finos de microfilamentos subapicais esto correlacionados com o crescimento da ponta do plo. Aps a aplicao de
fatores Nod especficos de Rhizobium, o nmero de feixes de microfilamentos subapicais aumentou em todos os estgios de desenvolvimento do plo radicular de Vicia
sativa, mostrando de uma maneira quantitativa, como a aplicao de Fatores Nod
pode mudar a configurao dos microfilamentos do citoesqueleto. As mudanas so
muito rpidas para terem sido causadas pela transcrio de um novo gene e para sntese
proteica de novo. Isso implica em que os fatores Nod lipochito-oligossacardeos
(LCO) acionam um sinal de transduo que termina produzindo molculas que
influenciam o citoesqueleto de microfilamentos. Aps a percepo da sinalizao do
LCO, ocorre um influxo de ons de clcio dentro dos plos radiculares de Medicago
sativa (Felle et al. 1998).
Vrios trabalhos tem demonstrado o efeito da inoculao de bactrias
diazotrficas endofticas, no s em gramneas mas tambm em outras plantas
cultivadas, causando modificaes nos plos radiculares. Azospirillum pode produzir in
vitro os fitohormnios AIA, giberelina e citocinina A aplicao de giberelina teve
efeito similar inoculao de Azospirillum lipoferum, aumentando a densidade dos
plos radiculares (Bashan & Holguin, 1997). Estirpes de Azospirillum brasilense e A.

lipoferum aumentaram a formao de plos radiculares e produziram um nmero maior

de razes laterais em trigo, tomate e pimento (Bashan, 1998).

O Azospirillum

promoveu um efeito especfico na deformao do plo radicular de trigo, semelhante ao

efeito causado por Rhizobium na deformao de plos radiculares de leguminosas
(Patriquin et al 1983). Considerando o efeito da presena de bactrias no crescimento
dos plos radiculares, estas poderiam modificar a expresso dos genes que codificam o
crescimento dos plos em funo da mudanas no nvel de fitohormnios (Jain &
Patriquin, 1985) ou mesmo em funo de mudanas na absoro de nutrientes minerais
(Lin et al, 1983).
Foram observadas variaes na distribuio e tamanho dos plos radiculares
nas diferentes zonas de razes de plantas cana-de-acar inoculadas com bactrias
diazotrficas; plos radiculares de tamanho maior foram obtidos com a inoculao da
estirpe Mex 77 de Azospirillum lipoferum; a inoculao com a estirpe PAL 5 de
Gluconacetobacter diazotrophicus promoveram um aumento da densidade de plos
radiculares na zona proximal da raiz (Baldani et al., 1999).
Em relao forma do plo, foram observados plos radiculares bifurcados
(em forma de garfo) em plntulas de cana-de-acar inoculadas com Burkholderia
brasilensis. Plos radiculares helicoidais foram observados em plntulas de cana-deacar inoculadas com a estirpe PAL-5 de Acetobacter diazotrophicus (Goi et al 1998).
4.2 Formao de razes laterais
A formao das razes laterais um processo multifsico que inclui pelo
menos a iniciao, emergncia dos primrdios da raiz e ativao dos meristemas das
razes laterais. Estas razes se originam no periciclo, onde clulas quiescentes
individuais so estimuladas a se diferenciar e proliferar para formar primrdios de razes
laterais (Figura 8). Os primrdios crescem via diviso e expanso celular. A emergncia

dos primrdios a partir das razes parentais ocorre primariamente por expanso celular.
Imediatamente aps a emergncia o primrdio fica ativado para formar um sistema
meristemtico funcional da raiz lateral, que direciona o crescimento deste estgio em
diante.
Vrios trabalhos indicam que a auxina seria necessria para a iniciao e
subseqente crescimento das razes laterais (Lloret & Pulgarin, 1992; Reed et a, 1998).
A aplicao exgena ou aumento da sntese endgena de auxina resulta em aumento
significativo do nmero de razes laterais (Boerjan et al. 1995). A citocinina juntamente
com a auxina teria uma importante atuao na morfognese da planta, influenciando a
formao da raiz e da parte area e seu crescimento relativo. Segundo Wightman et al.
(1980) as citocininas so formadas na ponta da raiz e interagem com a auxina na
regulao da formao das razes laterais, tendo ao inibitria em relao emergncia
das razes laterais. Resultados recentes mostram que as citocininas (cinetina e transzeatina) tiveram efeito inibitrio na iniciao da raiz lateral e efeito estimulatrio no
alongamento da raiz lateral em arroz (Debi et al, 2005). Da mesma forma, em Lotus
japonicum a expresso do gene ARR5 (que controla a expresso de citocinina em
Arabidopsis) no foi observado nas clulas em diviso nos primrdios das razes
laterais, mas foi observada alta expresso nas etapas seguintes da formao da raiz
lateral (Lohar et al. 2004); estes autores observaram tambm a expresso do ARR5 nos
plos radiculares deformados e tambm nos primrdios de ndulos, em resposta
inoculao com rizobio. Em plntulas de Pinus pinea a formao de razes laterais
estaria controlada por fatores de estmulo localizados na parte area (Atzmon et al 1994)

Traquedes
Raiz Lateral
Raiz Lateral
C
Endoderme

Xilema

Figura 8. Emisso das razes laterais de Ravenala madagascariensis. a) Corte

transversal; b) Corte longitudinal, evidenciando os traquedeos, que so clulas
relativamente alongadas e com a parede primria e secundria lignificada, com funo
de conduo de solutos e de sustentao; c) Detalhes do xilema primrio da raiz lateral e
do rompimento das clulas da endoderme. Depto de Botnica IB UFRRJ, 2005.
4.3 Formao de razes adventcias
Comumente, as razes adventcias se formam a partir do caule, originadas da
diviso celular do crtex ou menos freqentemente, a partir de gemas axilares

escondidas na casca. Geralmente tem origem endgena e surgem prximo aos tecidos
vasculares. Em caules novos de eudicotiledneas e gimnospermas, as razes adventcias
comumente surgem no parnquima interfascicular e em caules velhos, no raio hipottico
dos tecidos vasculares, prximo ao cmbio. Portanto a nova raiz aparece prxima ao
xilema e floema.
Quando as razes adventcias so formadas em explantes, elas provavelmente
se originam no tecido que se localiza na base do explante. Os primrdios das razes
adventcias so iniciados por diviso de clulas do parnquima, lembrando as divises
que iniciam a formao de razes laterais a partir do periciclo de razes jovens. Antes da
emergncia das razes adventcias do caule ou raiz, so diferenciados um meristema
apical, uma coifa e o comeo do cilindro vascular e do crtex.
Quando os elementos vasculares se diferenciam, a partir das clulas do
parnquima, localizadas na extremidade proximal do primrdio, estes passam a fornecer
uma conexo com os elementos correspondentes do rgo principal. A formao das
razes adventcias tem sido bem estudada em conexo com os reguladores de
crescimento. Em explantes, possvel regenerar razes, atravs da aplicao de auxinas,
o que aumenta o nmero de razes adventcias (Esa, 1977).
Durante a formao das razes adventcias podem ser distinguidos diferentes
estgios de desenvolvimento: iniciao, desenvolvimento inicial, crescimento e
emergncia do primrdio da raiz. A iniciao da raiz adventcia a partir de clulas
diferenciadas de tabaco determinada pela expresso do gene HRGPnt3, induzido antes
da diviso celular dos primrdios. O desenvolvimento de primrdios de razes
adventcias e razes laterais de Arabidopsis caracterizado pela expresso do gene
LRP1, que em razes laterais foi mostrado como desligado antes da emergncia do
primrdio. Em arroz inundado o crescimento de razes adventcias induzido pelo

etileno. Quando as plantas so submersas, a concentrao de etileno aumenta (Mtraux

& Kende, 1983) e a expresso das ciclinas sugerem que o etileno atua sistematicamente
e o primrdio da raiz responde ao etileno no estgio inicial de desenvolvimento
(Lorbiecke & Sauter, 1999). Recentemente isolado, o gene que controlaria a iniciao
dos primrdios de raiz adventcia em arroz: ARL1 seria um gene responsivo a auxina e
etileno. ARL1 estaria envolvido na diferenciao celular mediado pela auxina e promove
a diviso inicial nas clulas do periciclo, adjacentes ao cilindro vascular perifrico no
caule (Liu et al., 2005).
4.4 Outras razes especializadas
So razes especializadas, os pneumatforos, que so razes areas e
esponjosas de plantas de mangue, e se constituem em razes respiratrias, que possuem
canais de ar (lenticelas), para troca gasosa com a atmosfera e existe uma via interna para
distribuio de O2 dentro da raiz, para suprimento das razes submersas. Ainda, as razes
adventcias do tipo escora, com espinhos, como as de Pandanus sp, que servem como
suporte mecnico planta, seriam tambm uma outra especializao (Figura 5).
As razes proteides ou razes em cluster (Figura 9) so adaptaes
encontradas em um nmero grande de famlias, incluindo Leguminosae, Betulaceae,
Myricaceae, Elegnaceae, Casuarinaceae, Proteaceae e Moraceae (Skene, 2000;
Neumann & Martinoia, 2002).

C
A

Figura 9. Raizes proteides ou razes em cluster de diferentes espcies. a) Lupinus

albus; b) Hakea sp; c) Lupinus sp e d) Imagem obtida por endoscopia de solo. Dimetro
do eixo radicular menor ou igual a 0,2 mm (Fotografia de 18 x 13,5 mm). Fontes: a b
Nemoy, 2006; c Schimidt, 2006; d Brasil, 2005.
Do ponto de vista ecolgico, as razes em cluster, embora ocorram em vrias
famlias, pertencem a um nmero limitado de ecotipos. Muitas espcies que possuem
essas razes so espcies pioneiras e muitas no se associam com micorrzas ou exibem
infeco micorrzica reduzida. Essas razes so consideradas juntamente com as
micorrizas e ndulos das leguminosas, as maiores adaptaes para a aquisio de
nutrientes.
Cada raiz em cluster composta por pequenas razes de desenvolvimento
determinado, que surgem do periciclo, opostas ao plo do protoxilema, e do raiz o

formato de escova de lavar mamadeira. A iniciao est ligada a vrios fatores,

incluindo deficincia de fosfato. Essas razes combinam adaptao de ramificao da
raiz, alterao da rizosfera, desenvolvimento da raiz e absoro de nutrientes em uma
nica via. A formao das razes em cluster parece ser induzida pela diminuio da
disponibilizao de fsforo e pelo menos em algumas espcies, pela deficincia de ferro
(Neumann & Martinoia, 2002). Existem evidncias fortes de que ocorram mudanas
metablicas durante o desenvolvimento das razes proteides, contribuindo para um
aumento no acmulo de carboxilato no tecido da raiz e finalmente a liberao
temporria desses compostos na rizosfera.
Durante o estgio de desenvolvimento destas razes, grandes quantidades de
carboxilatos, prtons, fosfatases cidas e compostos fenlicos so liberados na rizosfera
durante um perodo de 1 a 3 dias. Este padro de desenvolvimento da raiz em cluster
associado a um aumento na concentrao de carboxilatos no tecido da raiz e uma troca
na acumulao de malato por citrato, antes da exsudao. A liberao temporria de
carboxilatos pelas razes em cluster provavelmente mediada por mecanismos de
transporte controlado. Em Lupinus albus, estudos com inibidores sugerem o
envolvimento de canais inicos para exsudao de citrato acoplados com a
concomitante liberao de prtons para manter o balano de cargas (Neumann &
Martinoia, 2002).
4.5 Rizosfera e Rizoplano
Em termos nutricionais, a interface solo-raiz bastante importante e os
eventos que ocorrem na rizosfera, sero referenciados nos prximos captulos. O termo
rizosfera foi introduzido por Hiltner em 1904, e a zona de influncia das razes, que
vai desde a sua superfcie at uma distncia de 1 a 3 mm. Entretanto, atualmente, outros
autores em trabalhos mais recentes, consideram uma distncia de at 5 mm. A sua

extenso varia com o tipo de solo, espcie considerada, idade e muitos outros fatores,
mas assume-se que esta se estenda a partir da superfcie da raiz (rizoplano) at poucos
milmetros para dentro do solo, ou possivelmente poucos centmetros, em alguns casos
especiais (Lynch, 1990). neste volume do meio de crescimento do sistema radicular
que se processa uma infinidade de eventos fsico-quimico-biolgicos que podem alterar
a morfologia e a dinmica do sistema radicular e a disponibilidade de nutrientes, ao
mesmo tempo, que este espao pode ser alterado pelo sistema radicular.
5. Fisiologia das Razes.
O sistema radicular como um todo, independente de seu desenvolvimento
fsico ou idade, apresenta regies espacialmente mais ou menos ativas, em relao
capacidade intrnseca de absorver gua e nutrientes, de exsudarem molculas orgnicas,
ou de fazer extruso de prtons. Em relao absoro de gua, nutrientes e outros
solutos, faz-se necessrio o entendimento da interface solo/planta, das rotas de absoro
e das barreira existentes nos tecidos radiculares, que podem acelerar ou reduzir a
velocidade do movimento radial, da superfcie radicular at o cilindro central.
5.1. Rotas de Absoro
O movimento da gua, nutrientes e outras substncias a partir da superfcie da
raiz - considerando a rizosfera - ao interior das plantas, ocorre em dois espaos distintos
denominados de apoplasto e simplasto, at a endoderme (Figura 10).
O apoplasto definido como um "continuum" entre as paredes celulares,
espaos intercelulares e os vasos xilemticos ao longo de todo o corpo da planta desde o
crtex da raiz at os traquedes e elementos de vaso que chegam s folhas. A
caracterizao do apoplasto remonta ao botnico Ernst Mnch, que em 1930, distinguiu
a planta em dois compartimentos: o morto, que denominou de apoplasto e o vivo, que
denominou simplasto. Mnch sugeriu, na poca, que a funo do apoplasto era

exclusivamente o transporte de gua e solutos. Hoje sabemos que este compartimento

tem funes mais numerosas, e que os nutrientes simplesmente no apenas atravessam o
apoplasto, mas podem ser adsorvidos ou fixados na parede celular, por exemplo, com
implicaes diretas na aquisio de nutrientes, alm de poder conferir tolerncia de
algumas plantas toxidez por metais (Al, Mn). Este espao pode ser colonizado por
microorganismos, que podem contribuir diretamente para a nutrio da planta
(Sattelmacher, 2001).
De acordo com a compreenso atual, todos os compartimentos alm da
plasmalema constituem o apoplasto, incluindo o espao interfibrilar e intermicelar das
paredes celulares, o lumem das clulas mortas e os espaos intracelulares do xilema
(com gua e gases), sendo as suas bordas externas formadas pela superfcie do rizoplano
e da cutcula na parte area (Sattelmacher, 2001). Entretanto, pode existir uma
interrupo neste contnuo apoplstico, quando considerada a planta toda, esta
interrupo representada pela endoderme, mais especificamente pelas estrias de
Caspary, onde uma camada mais ou menos suberizada pode apresentar maior ou menor
permeabilidade a gua e solutos.

Figura 10. Rotas para absoro de gua e nutrientes. A partir do crtex at o cilindro
central o movimento acontece entre os espaos celulares (rota apoplstica) ou atravs
dos plasmodesmos (rota simplastica) ou aquaporinas (para gua). Desenho de Orlando
Carlos Huertas Tavares CAPGA-CS Depto de Solos IA - UFRRJ (2006).

Atualmente, considera-se a endoderme, com as estrias de Caspary, uma

barreira, porm, no totalmente impermevel, ao movimento radial da gua e ons nos
dois sentidos (Pimentel, 2004).
RANATHUNGE et al (2005) usando uma nova tcnica de precipitao de
sais, estudaram a permeabilidade da parede celular, e, em especial das estrias de
Caspary da endoderme, utilizando como modelo de estudo razes jovens de milho e
arroz. Os autores concluram que em termos de permeabilidade da estria de caspary para
ons no representa uma barreira absoluta. Esses autores verificaram que alguns ons
podem eventualmente ultrapassar a barreira da endoderme, mas consideram este
fenmeno pouco relevante, do ponto de vista da nutrio da planta. A permeabilidade da
barreira endodrmica pode variar em funo das condies e fases do crescimento
radicular. Em particular, observaram os autores, que em arroz pode haver um fluxo
apoplstico significativo pelas regies onde o surgimento das razes laterais rompe a
barreira endodrmica.
O simplasto por sua vez considerado como todo o citoplasma e membranas
de todas as clulas vivas. Muitas vezes faz-se referncia ao simplasto como uma
unidade devido existncia dos plasmodesmos, observados apenas em clulas vegetais,
e que so interligaes entre membranas de clulas vizinhas, criando pontes
citoplasmticas (Figura 11).
Os plasmodesmos, so estruturas tubulares da membrana plasmticas de 40 a
50 nm de dimetro que atravessam a parede celular e conectam os citoplasmas das
clulas adjacente (Taiz & Zeiger, 2004), e ocorrem em uma densidade que pode variar
de 0,1 a 10,0 por m2 (cerca de 20.000 por cada parede tangencial, ou 5108
unidades/cm2). Anatomicamente, apresentam uma estrutura interna complexa,
constituda pelo eixo central, desmotbulo (que um prolongamento do retculo

endoplasmtico), cavidade central e protenas filamentosas, entre outras organelas,

sendo que o movimento do on se faz exclusivamente pela cavidade central. O papel do
desmotbulo, que envolve o eixo central, ainda incerto quanto ao movimento de
solutos e outras substncias, pois no parece existir espao entre essas membranas para
tal fim.

Figura 11. Plasmodesmatas. Microfotografia de microscpio eletrnico de transmisso

de ndulo radicular de Mimosa caesolpiniaefolia. Silvia Regina Goi Departamento de
Cincias Ambientais IF - UFRRJ (2005).
5.2.

Absoro de gua.

Para as plantas terrestres, o solo o reservatrio natural de gua, e ela est

presente no solo como gua gravitacional, capilar e higroscpica. A gravitacional
pouco utilizada, pois drenada rapidamente atravs do macroporos. A higroscpica
constitui uma frao que est quimicamente ligada s partculas do solo, formando uma
pelcula lquida, e no utilizada pela planta devido a grande tenso de reteno. A
frao de gua capilar, retida nos microporos, por sua vez de extrema importncia por
representar a fonte direta para a planta.

At superfcie das razes, que representam o acesso para o interior do

vegetal, a gua se movimenta por difuso ou por fluxo de massa, e a partir da, flui e
penetra pela camada epidrmica. Uma vez na superfcie da raiz, a absoro e/ou
movimento da gua pode ocorrer atravs de trs rotas (simplstica, apoplstica ou
transmembranar), at atingir o cilindro central onde ascender pela planta para as
demais partes do vegetal. Esse deslocamento se d sempre de zonas hipotnicas (menos
concentradas) para zonas hipertnicas (mais concentradas), ou seja, de zonas com
elevado potencial hdrico para zonas de baixo potencial hdrico. Um efeito tpico, que
viabiliza este mecanismo, a prpria absoro ativa de ons (Captulo 5 deste volume),
fazendo com que as razes acumulem nutrientes, e outros solutos e elementos em
concentraes centenas de vezes superiores ao do meio externo. Este transporte torna a
soluo interna ainda mais hipertnica, diminuindo o potencial hdrico e causando mais
entrada de gua por osmose.
Pela rota apoplstica, da rizoderme at o xilema no cilindro central, passando
pela endoderme, onde pode haver dificuldade sua passagem, mas no impedimento,
em funo da composio qumica da endoderme, ao seu desenvolvimento e
especificidade (mono e eudicotiledneas; Pimentel, 1998). Durante este movimento, por
um ou outro mecanismo, pode haver absoro de gua pelas clulas corticais.
Pela rota simplstica, a absoro preferencial para as clulas da raiz se d
atravs dos plos radiculares, onde a gua se movimenta pelo citoplasma, passando de
clula a clula, pelos plasmodesmos at o cilindro central. A rota transcelular (ou
simplstica), sendo um movimento clula a clula, atravessa pelo menos duas
membranas, via aquaporinas, descobertas na dcada de 90, que so canais seletivos para
gua, regulados pelo seu estado de fosforilao, de modo que as clulas podem regular a
sua permeabilidade gua ao acrescentando ou removeno grupos fosfato a resduos de

aminocidos especficos. Esta modulao da atividade da aquaporina pode ento alterar

a taxa de movimento da gua atravs da membrana (Taiz & Zeiger, 2004).
Espacialmente, considerando um nico eixo radicular, a absoro e
movimentao da gua tende a ocorrer mais rapidamente atravs das regies que
oferecem menor resistncia sua movimentao. Essas regies variam de acordo com a
espcie, idade e velocidade de desenvolvimento da raiz. Atualmente, sabe-se que a
mxima absoro de gua ocorre na regio de diferenciao celular onde o xilema est
bem diferenciado e na qual a suberizao e lignificao ainda no reduziram a
permeabilidade das paredes celulares, destacando-se em especial as regies de plos
radiculares. Nas regies meristemticas, a absoro de gua bastante limitada, devido
principalmente grande resistncia oferecida pelo protoplasma denso e a falta de
elementos de conduo nesta regio.
Quando considerado o sistema radicular como um todo, sob condies normais
de hidratao da planta (e do solo), a absoro de gua feita preferencialmente via
simplstica. Com a reduo da gua disponvel, ou aumento da transpirao, o
mecanismo apoplstico ativado. Por fim, sob condies de dficit, o transporte transmembrana ativado (aquaporinas). Destes mecanismos, o apoplstico, resulta tambm
em maior arraste de solutos da rizosfera, aumentando a zona de depleo (Pimentel,
2004). A velocidade de deslocamento de gua pela via apoplstica pode ser cerca de 60
vezes superior prevista para movimentos citoplasmticos, e, considera-se que este
deva ser o percurso preferencial, nos momentos de demanda elevada.
5.3 Absoro de nutrientes
A absoro de nutrientes e o seu movimento radial at o cilindro central
acontece da mesma forma que o descrito para a gua, exceto para a rota
transmembranar. As plantas adquirem numerosos ons e substncias, mesmo

desnecessrias ou txicas, do solo, pelas vias apoplsticas e simplsticas. Estes podem

se movimentar at o cilindro central, serem assimilados em tecidos prprios ou ainda
ficarem retidos nas cargas da superfcie radicular (CTC radicular). Isso implica
inclusive na possibilidade de disperso de substncias potencialmente txicas para os
seres vivos, sendo, porm esta capacidade das plantas, proveitosa para a remediao
de solos contaminados (Capitulo 15 neste volume).
O deslocamento via simplasto por sua vez dependente inicialmente de um
mecanismo qualquer (bomba, canal ou transportador; Capitulo 6 neste volume), que
permita a sua entrada na clula vegetal, ultrapassando a membrana plasmtica, o que
pode acontecer em qualquer parte da raiz, em clulas compreendidas entre o espao
fsico da superfcie radicular e o cilindro central, resguardando a variabilidade relativa
para cada elemento e espcie vegetal. Este deslocamento, ao contrrio do que se
imagina, no totalmente livre, pois estas superfcies radiculares, em geral, apresentam
um quantidade relativa de cargas, que podem reduzir ou aumentar a velocidade de
deslocamento do on neste espao. Porm, indubitavelmente, a velocidade de
movimento neste espao sempre maior que pela rota simplastica.
Quando o on de uma forma ou outra cruza a endoderme, tambm pode
regressar ao apoplasto, difundindo-se para dentro de um traquedeo ou elemento de vaso
no xilema, sendo conduzido at o local especfico de sua absoro, e, para participar
ativamente do metabolismo necessita ser reabsorvido (Taiz & Zeiger, 2004). ainda
possvel, que alguns elementos, principalmente os no estruturais como o potssio,
possam de uma ou outra forma retornar mais facilmente para os espaos intercelulares
(apoplasto), aps a reabsoro. Indiscutivelmente, porm, a presena da estria de
Caspary permite planta manter uma concentrao inica mais elevada em seus tecidos
do que na soluo do solo (Taiz & Zeiger, 2004).

5.4 Zonas e taxas de absoro

O termo taxa de absoro de nutrientes, embora usado com conotaes
variadas na literatura, tende a englobar as contribuies dos processos associados sua
aquisio do solo, que produto da interao entre as propriedades absortivas do
sistema radicular, o seu estgio de desenvolvimento (arquitetura e tamanho), e a
concentrao do nutriente na soluo do solo e na superfcie radicular (Jungk, 1991;
Williams & Yanai, 1996).
A taxa de absoro de um dado nutriente pode ser estimada a partir da rea
superficial e da cintica de absoro, tal como mostra a equao (Williams & Yanai,
1996):
TAn = 2 . .r L.. C ................................. ...............Equao 1

onde TAn a taxa de absoro do nutriente, r o raio radicular, L o

comprimento radicular, o poder de absoro radicular (relacionado aos mecanismos
de transporte do nutriente a nvel de membrana), e C a concentrao do soluto na
superfcie radicular, expressos em dimenses e unidades homogneas.
A equao 1 ainda uma representao parcial do processo de aquisio de
nutrientes, na medida que no integra efeitos importantes, tais como exsudao
radicular ou variaes do pH rizosfrico, induzidas pelo prprio processo de absoro
(Fernandes & Rossiello, 1995). Entretanto ela tem sido extensivamente usada em
modelos de simulao de absoro, ao explicitar os principais fatores envolvidos
(Williams & Yanai, 1996). Por outro lado, a qualquer instante, a taxa de absoro
representa o produto da intensidade do influxo do nutriente (ou taxa de absoro por
unidade de rea radicular) pelo tamanho do sistema radicular (a sua rea superficial
total).

Destaca-se ainda, que esses modelos avaliam o sistema radicular

como um todo, mas consideram que apenas a superfcie radicular
responsvel pela absoro. Isso leva a uma superestimativa da atividade
absortiva das clulas epidrmicas. Essa superestimativa acontece tambm
quando se avalia o influxo ou efluxo em plantas de diferentes idades. Neste
caso, sabendo-se que as regies mais novas da raiz tem maior capacidade
absortiva, pode-se explicar porque um sistema radicular novo tem maior
influxo, pois proporcionalmente, existem mais superfcies aptas absoro, do
que regies suberizadas.
Quando se estuda um eixo unitrio do sistema radicular, seja de uma raiz
principal ou de uma lateral, pode-se observar a existncia de um gradiente ativo entre
seu pice e a sua base, j que apresentam anatomia e fisiologia semelhantes, variando
apenas em magnitude e funo.
Sabendo-se que a atividade radicular pode ser medida pela intensidade do
efluxo de prtons, o trabalho de Fan & Neumann (2004) mostra que a acidificao ao
longo da zona de alongamento de uma raiz, tende a alcanar um mximo a
aproximadamente 4 mm do pice, quando em condies de controle de deficincia
hdrica, como mostrado na figura 12, e, a partir dos 6 mm, o ritmo desacelerado,
tendendo a ficar constante.

0,3
Efluxo

12

0,1

-1

0,2

TCR Raiz (h )

TCR

-2

-1

Efluxo de H (nmol m s )

15

3
0

0
0

10

Distncia do apice radicular (mm)

Figura 12. Variao espacial do efluxo de prtons e da taxa de crescimento relativo da

raiz (TCRRaiz) em razes de milho, sob condies hdricas favorveis. Modificado de
Fan & Neumann (2004).
Enquanto as razes principais tm como principal funo a fixao, e as
laterais, a absoro, ambas possuem as respectivas zonas de crescimento, alongamento e
maturao. Assim podem possuir regies mais ou menos ativas fisiologicamente,
quando da absoro de nutrientes, e este tem sido um tpico de considervel interesse.
Taiz & Zeiger (2004) expem claramente as diferentes linhas, onde alguns autores
consideram que os nutrientes sejam absorvidos somente nas regies apicais dos eixos
principais ou de menor calibre, enquanto outros consideram a absoro ao longo de toda
a superfcie radicular. Isto est, entretanto relacionado com a espcie estudada e com a
tecnologia adotada para estudar a absoro, que pode ser mais ou menos sensvel a
ponto de identificar tais diferenas.
Trabalhos clssicos da literatura demonstram diferentes variaes na absoro
de nutrientes pelas razes em funo da espcie estuda. Por exemplo, na cevada, o ferro

 absorvido mais intensamente na regio apical, enquanto que no milho, a absoro do

mesmo elemento no tem tal diferenciao. Potssio, nitrato e amnio, na maioria das
espcies so absorvidos igualmente em toda superfcie, mas, em particular no milho,
na zona de alongamento que encontramos as taxas mximas de absoro. Taiz & Zeiger
(2004), explicam que uma possvel maior absoro nas zonas apicais resultado da
elevada demanda metablica por nutrientes nestes tecidos. De qualquer maneira porm,
a absoro de ons mais pronunciada na zona de ocorrncia de plos radiculares, do
que nos meristemas de crescimento ou na zona de alongamento. Isto se deve ao fato de
que estas clulas completaram seu alongamento, mas no iniciaram seu crescimento
secundrio, e tm grande superfcie de contato com o solo, aumentando a superfcie de
absoro (Taiz & Zeiger, 2004).
A partir da zona de pelos radiculares, at o local onde surge a primeira raiz
lateral, tem-se uma rea com absoro reduzida (onde acontece o crescimento
secundrio, nas eudicotiledneas). Quando surge a primeira raiz lateral, as regies
fisiolgicas acima descritas se repetem, e as mesmas explicaes so vlidas. Um ponto
duvidoso, mas importante, na absoro de gua e nutrientes o local de surgimento das
razes laterais, onde h o rompimento da endoderme (figura 8). Temporariamente, esta
regio pode ficar sujeita a fluxos intensos para o interior da planta de gua, nutrientes,
molculas orgnicas e elementos txicos.
5.5 Extruso de prtons
O efluxo ativo de prtons na raz, por H+-ATPases ligadas a membrana
plasmtica, na raiz, de importncia fundamental para a planta, participando de seu
crescimento atravs de processos como absoro de nutrientes, gerao de turgncia
celular, acidificao externa para relaxamento da parede celular e desenvolvimento de
polaridade em clulas em crescimento (Frana et al, 2005). Quando um excesso de

ctions absorvido pelas clulas radiculares, (Capitulo 6 deste volume), uma

quantidade equivalente de carga positiva deve ser deslocada para o espao extracelular,
para evitar excessiva despolarizao atravs da plasmalema, com efeitos lesivos para a
funcionalidade da membrana e evitando flutuaes acentuadas no pH do citossol
(Fernandes e Rossiello, 1995). Este efeito notrio quando acontece a absoro de
ctions de alta demanda metablica como por exemplo NH4+ e K+. Isso ocasiona a
acidificao no meio rizosfrico, como resultado do efluxo lquido de H+ gerado no
processo (Frana et al, 2005).
Na literatura encontram-se referncias de estimativas do efluxo liquido
expressas por unidade de massa de raiz fresca ou seca, ou ainda por planta inteira
(Frana et al, 2005), porm uma estimativa mais apropriada para o efluxo instantneo,
considerando o sistema radicular como um todo e um volume fixo de soluo ou meio,
pode ser aproximado pela equao descrita por Frana et al (2005):
EH+ =

1 dU H +

................................. ...............Equao 2
AR
dT

onde; UH+ contedo total de prtons livres na soluo, t o tempo, e AR a rea

radicular atravs da qual prtons permeiam soluo segundo a uma certa taxa

Na prtica

dU H +
dT

aproximado por

UH +
T

dU H +
dT

, mas mesmo assim a aplicao da

Equao 2 envolve muita incerteza, considerando a variao axial do influxo-efluxo de

H+ no pice radicular, das dificuldades tcnicas associadas determinao da atividade
de H+ ao nvel da superfcie radicular e da quantificao precisa da rea radicular
(Zonta, 2003).

5.6 Exsudao radicular

Os sistemas radiculares acrescentam quantidades significativas de carbono ao
solo, em suas mais diversas formas, independente da quantidade estocada nos seus
tecidos e disponibilizada aps a colheita ou morte da planta.
O carbono acrescentado rizosfera durante o crescimento ativo da raiz
raramente excede 1% de peso seco (Nye, 1981) sob condies normais de crescimento.
Porm, essas taxas podem ser 2 a 4 vezes maiores sob condies de estresse, onde,
dependendo da espcie e condies ambientais, at 40% do carbono fixado pelas plantas
pode ser depositado diretamente na rizosfera (Zonta, 2003), o que significaria 5 - 25%
do C lquido assimilado pela planta, resultando em uma perda lquida de fotossintatos.
Exemplos tpicos de exsudaes radiculares so os cidos orgnicos, por
estarem diretamente envolvidos na tolerncia das plantas ao Al (Zonta, 2003) (Capitulo
16 deste volume). Os cidos orgnicos tm relao especial com a toxicidade por Al e
outros metais e com a nutrio da planta (Jones, 1998; Ryan, 2001), participando como
componente chave no sistema operacional da interface solo-raiz (Bcio et al, 2000).
Alm destes, uma grande quantidade de substncias so exudadas pelas razes, entre
elas podem ser citados: acares, compostos aminados, cidos orgnicos, cidos graxos,
esteris, nucleotdeos, flavonas, enzimas e outras substncias.
6. Dinmica do desenvolvimento radicular
O crescimento das razes ocorre quando clulas da regio meristemtica (coifa)
dividem-se, alongam-se e levam a ponta da raiz atravs do material adjacente. A presso
de turgor nas clulas que se alongam direcional, que deve ser suficientes para se
sobrepor resistncia da parede celular ou s demais resistncias externas do meio.
Assim, a presso de turgor celular e a resistncia da parede celular, somadas as

resistncias do meio deformao, so fatores importantes para avaliao do

crescimento radicular atravs do solo (Camargo & Alleoni, 1997).
Plantas cultivadas, tipicamente possuem razes que crescem 1 cm ou mais por
dia (Russel, 1977), enquanto que razes de plantas em ecossistemas naturais podem
crescer 1 mm ou menos por dia (Brundrett & Kendrick, 1990).
6.1 Rizocrescimento
Nos vegetais, a maior parte do desenvolvimento ocorre aps a embriognese
atravs das atividades de seus meristemas, os quais continuam formando rgos (razes,
ramos, folhas, verticilos florais e frutos) ao longo de todo o ciclo de vida. Essa continua
formao de rgos, parece ser uma adaptao das plantas vida fixa em substratos,
permitindo que seu desenvolvimento seja ajustado s variaes de gua, luz e nutrientes
(plasticidade fenotpica).
Dentre os principais grupos de hormnios envolvidos no crescimento dos
vegetais, as auxinas e citocininas parecem estar intimamente associadas atividade dos
meristemas radicular PERES & KERBAUY (2000). Como um todo, o sistema radicular
repete-se indiscriminadamente e de forma catica, existindo um diferencial a nvel
hierrquico (magnitude do sistema), sempre modulado pelas condies ambientais.
6.2

Economia de carbono e nutrientes nos sistemas radiculares

As razes so rgos heterotrficos das plantas (com exceo de alguns tipos

singulares, fotossintetizantes, como das orqudeas), e por tal motivo, os gastos com
carbono no sistema radicular se constituem em limitao primria para o crescimento de
plantas cultivadas, comuns em solos com baixa disponibilidade de nutrientes (Nielsen et
aI., 1999), como os solos brasileiros, pois o crescimento e a atividade do sistema

radicular apresenta um custo metablico significativo, especialmente, quando a planta

est sob estresse edfico (Lynch, 1995).
MOREIRA & SIQUEIRA (2002) citam que at 60% do carbono
fotoassimilado pode ser consumido pelo sistema radicular, sendo que metade deste em
mdia utilizado pela respirao (25% do carbono fotossintetizado), e o restante,
utilizado para a formao de tecidos, do mucigel e exudao radicular. Estes
fotossintatos so translocados de suas fontes at o sistema radicular atravs do floema, e
seu movimento atravs dos tecidos se d via plasmodesmatas, podendo, a qualquer
momento, compor novos tecidos, formar o mucigel ou ainda deixar o simplasto e
penetrar no apoplasto, podendo ser eventualmente exudados para o solo ou ser trocados
por ons.
Pimentel (1998), revisando diversos autores, indica que 44% do carbono
fixado pela fotossntese v para a raz, com 1/4 desse valor utilizado no crescimento, e o
restante na respirao de manuteno. O mesmo autor afirma que para plantas em
simbiose com o Rhizobium, pelo menos 12% dos fotossintatos produzidos pela planta
so gastos na respirao e crescimento dos ndulos, assim como em plantas
micorrizadas, 5 a 10% destes fotossintatos so usados pelo fungo.
A quantidade de fotoassimilados na planta , geralmente, proporcional rea
foliar, resguardando as particularidades devidas. Sabe-se que o alongamento de razes
cessa num perodo de 24 horas, quando 40-50% da parte area removida, tanto em
plantas de metabolismo fotossinttico C3, como C4 (Richards, 1993). Assim, o
desenvolvimento de novas folhas, a partir do momento que assumem o papel de fonte,
correlaciona-se positiva e linearmente com o alongamento radicular.
Matthew et al (2001), mostraram que a reduo no metabolismo e senescncia
do sistema radicular diferenciada de acordo com o fitmero de origem da raiz. Razes

mais velhas, que crescem a partir de fitmeros mais distantes da coroa da planta,
recebem menor quantidade de fotoassimilados, o que determina a reduo na taxa de
alongamento e a progressiva diminuio na respirao destas razes, sinalizando o
avanar do processo de senescncia e eventual morte. Logo, pode-se conjecturar que a
alocao de fotossintetizados inversamente proporcional distncia das razes em
relao coroa da planta, ou seja, h maior partio de carbono para as razes mais
prximas da fonte de fotoassimilados (folhas).
MATTHEW et al (2001) demonstraram que a maior reduo no carboidrato
alocado raiz ocorre em sua ponta, onde se concentra a atividade meristemtica. As
razes recm formadas (mais jovens) e portanto, mais prximas superfcie do solo,
foram as que receberam a maior parte do carbono direcionado ao sistema radicular.
Neste contexto, estabelece-se um aparente paradoxo, em que a planta investe no
metabolismo de razes superficiais, mais sujeitas ao dficit hdrico do solo, enquanto
provoca a morte de razes (velhas) estabelecidas em maiores profundidades do solo,
onde h maior disponibilidade de gua.
Portanto, a seleo de plantas com sistema radicular bem desenvolvido, para
profundidade e rea radicular, apesar da raiz no ser um rgo colhido na maioria das
culturas, permitir aumentos de produtividade (Pimentel, 1998).
6.3 Arquitetura e topologia radicular
Um sistema radicular pode ser definido como um objeto que apresenta autosemelhana e complexidade infinita, ou seja, tm sempre cpias aproximadas de si
mesmo em seu interior. Essa a prpria definio de fractal, e assim o sistema
radicular de toda e qualquer espcie, apresentando aparncia consensual e crescimento
catico.

A arquitetura radicular nada mais primordialmente do que a forma

determinada geneticamente, de ordenar e organizar no espao este rgo, de forma a
obter sua melhor eficincia de uso, na aquisio de recursos. A topologia de um sistema
radicular, por sua vez, est contida no sistema arquitetnico radicular, e permite a
quantificao desta organizao. A figura 13, mostra a arquitetura radicular de vrias
espcies (Lynch, 1995), onde a diversidade estrutural dos sistemas radiculares vista
como uma adaptao para o desempenho mais eficiente das funes das razes.

Figura 13. Exemplos de variao da arquitetura radicular. Imagens obtidas a partir de

escavao parcial de diversas eudicotiledneas Europias. Modificado de Lynch (1995),
com permisso da American Society of Plant Biologists.

Um sistema radicular eficiente aquele que otimiza a relao entre quantidade

de recursos adquiridos e empregados para sua obteno, e, a arquitetura do sistema
radicular fundamental para a aquisio de recursos no solo (Miller et al., 1999). Sua
definio muito complexa, por envolver vrios aspectos, como taxa de crescimento,
ramificao, orientao e longevidade dos diferentes tipos de raiz (Bonser et aI., 1996).
O desenvolvimento espacial do sistema radicular determina a habilidade da
planta em explorar recursos que esto mal distribudos (Fan et aI., 2003), e a arquitetura
do sistema radicular pode alterar o custo dessa explorao em termos de carbono, e,
definir a capacidade de competio do sistema radicular (Fan et aI., 2003). Lynch
(1995) afirma no existir uma ferramenta quantitativa adequada que caracterize o
sistema radicular, j que estes sistemas variam amplamente em funo da caracterstica
gentica e da sua interao com vrios fatores fsicos, qumicos e biolgicos no solo,
alm dos temporais e espaciais.
A geometria radicular tem importante papel na dinmica global do ecossistema
pastoril (Jarvis, 1999), atravs de efeitos sobre a aquisio de nutrientes de baixa
mobilidade, como o fsforo; a captura e reciclagem de outros nutrientes em
profundidade, como o nitrato, e o estabelecimento de associaes com a biota do solo
(Mc Cully, 1999; Salcedo, 1999). O estudo desses aspectos, que relacionam a
distribuio radicular s suas funes de aquisio de gua e nutrientes, demandam a
separao das razes em classes funcionais, e a quantificao da sua contribuio ao
sistema total (Rossiello et al., 1995).
A resposta da arquitetura radicular disponibilidade de fsforo parece ser
extremamente especfica (Bates & Lynch, 2000; Williamson et aI., 2001; Lpez-Bucio
et aI., 2002), influenciando o ngulo de crescimento das razes basais em relao
gravidade (Bonser et aI., 1996).

Estudos relativos arquitetura do sistema radicular so teis na quantificao

da eficincia fisiolgica de sistemas radiculares contrastantes, fornecendo ferramentas
para a investigao de mecanismos especficos, viabilizando a formao de variedades
cultivadas com maior eficincia no uso de fsforo (Nielsen et aI., 1999).
6.4 Caractersticas de interesse quantitativo
Na tabela 1 so apresentados as principais caractersticas radiculares a serem
medidas de acordo com suas funes (Adaptadas do trabalho de Atkinson, 2000).
Tabela 1. Principais caractersticas radiculares mensuradas, unidades e funes.
Modificada e adaptada de Atkinson (2000).
Caracterstica

Unidade

Comprimento
Radicular

m ou Km de
razes

Massa Radicular
(fresca ou Seca)

g ou Kg de
razes

Volume
Radicular

cm3 ou m3 de
razes.

rea radicular

cm2 ou m2 de
razes.

Dimetro
Radicular

mm

Definio

Funo
Determina o potencial de
Somatrio do
absoro de gua e nutrientes
comprimento de
do solo. Indicador da
todos os eixos
interao das razes com os
radiculares
microorganismos do solo.
Somatrio em massa
Estoque total de massa
de todos os eixos
subterrnea alocada.
radiculares.
Contedo de Reserva.
Espao ocupado
Volume de solo explorado
pelo sistema
pelas razes.
radicular.
Superfcie de
Absoro de gua e
contato ente as
nutrientes do solo.
razes e o solo.
Potencial do
desenvolvimento de
associaes com
Dimetro mdio dos
microorganismos; indicao
eixos radiculares.
da regulao do stress
Geralmente assumehdrico; potencial do
se a raiz como um
crescimento radicular;
cilindro.
indicador da influencia e
respostas das condies
fsicas e qumicas do solo.

Os valores da Tabela 1, podem ser expressos por unidade de volume de solo

extrado, sendo apresentados como densidade da rea radicular (DRA), do comprimento

radicular (DRC) e da massa seca radicular total (DMR), expressas em cm2 dm-3, m dm3

e g dm-3, respectivamente (Van Noordwijk, 1993; Brasil et al., 2005). Durante muitos

anos, o tempo gasto nas atividades de quantificao desses parmetros, e as incertezas

quanto aos resultados, constituram fortes desestmulos ao trabalho com razes.
Outros valores podem ser derivados das caractersticas morfolgicas das razes,
como por exemplo, a utilizao dos valores da rea e do comprimento especfico, obtido
pela razo entre a rea ou o comprimento e a massa radicular, respectivamente (cm2 g-1
e m g-1 de razes) como indicadores da espessura ou do dimetro radicular, (Oliveira et
al., 2000).
Os dados de densidade radicular podem ser a ajustados a uma funo
exponencial decrescente, da forma: DR = a(-bz), onde a o parmetro de ajuste, b
a taxa de decrscimo relativo da DR (m-1) e z a profundidade (m) para solos de textura
homognea, ou para diversas outras funes (Nicoullaud et al., 1994), com o objetivo de
se estudar a distribuio vertical das razes em profundidade. O que pode ser feito por
classes de dimetro.
Embora em estudos de razes no campo, a caracterstica de maior enfoque seja a
massa radicular (fitomassa de razes), o comprimento radicular, tem sido a caracterstica
mais utilizada como base de clculo para inmeras funes de determinao de
variaes temporais do sistema radicular, sendo considerado como caracterstica padro
para a determinao da densidade (m de raz m-3 de solo) e do crescimento radicular
(Van Noordwijk, 1993, Rossiello et al., 1995). Tal caracterstica um indicador do
potencial de absoro de gua e nutrientes, sendo proporcionalmente maior o volume
ocupado e explorado do solo, quanto maior for o comprimento radicular total (Atkinson,
2000). Adicionalmente, os estudos sobre o influxo lquido de nutrientes deve levar em
conta a influencia do dimetro radicular e a distancia mdia entre razes (Frana et al.,

1999). Outros estudos, ligados produtividade primria, necessitam de dados sobre as

quantidades totais de biomassa e sua partio entre parte area e razes.
6.5 Magnitude dos sistemas radiculares
Em parte, a eficincia na captao de recursos das plantas est associada
capacidade de explorar o meio, e via de regra, quanto mais escassos os recursos no
meio, maior o investimento em sistema radicular. Segundo TAIZ & ZEIGER (2004), a
habilidade das plantas em obter gua e nutrientes minerais est relacionada sua
capacidade de desenvolver um extenso sistema radicular.

Os autores retornam a

Dittmer, que em 1930, examinou o sistema radicular de uma nica planta de centeio
depois de 16 semanas de crescimento e estimou que a mesma tinha 13 milhes de eixos
radiculares primrios e secundrios, estendendo-se por aproximandamente 500 km
(comprimento total) e proporcionando 200 m2 de rea radicular superficial, que
somados aos 300 m2 de rea dos plos radiculares do sistema, faziam contato com 500
m2 de solo.
TAIZ & ZEIGER (2004), tambm destacam as razes das plantas do gnero
Prosopis, que podem, em reas desrticas, estender-se a 50 m de profundidade para
alcanar a gua subterrnea. Por outro lado, plantas cultivadas anualmente tm razes
que normalmente crescem entre 0,1 e 2,0 m em profundidade e se estendem
lateralmente a distncias de 0,3 a 1,0 m. Plantas perenes, atingem, em mdia, um
comprimento total de 12 a 18 km por rvore.
A produo anual de razes, principalmente em ecossistemas naturais, pode
facilmente ultrapassar a de partes areas, j que podem crescer continuamente ao logo
de todo o ano, sendo que a proliferao das mesmas, no entanto, depende da
disponibilidade de gua e nutrientes. Em geral, se a rizosfera pobre em nutrientes ou

muito seca, o crescimento radicular lento, havendo retomada do mesmo quando as

condies na rizofera melhoram.
Em azevm, Matthew et al. (2001), mostraram que o comprimento do sistema
radicular atingiu 2,5 m por fitmero (unidade bsica das gramneas, constituda de de
lmina, bainha, entren,n e gema, ou, simplesmente perfilho) , o que resultou em
cerca de 82 km de razes/m2 de superfcie, para uma profundidade de 70 cm.
6.6 Plasticidade radicular
A capacidade de adaptao do sistema radicular, atravs de mudanas
morfolgicas e fisiolgicas s condies do meio ambiente dada pela plasticidade
fenotpica (Lpez-Bucio et aI., 2002), sendo que as plantas que apresentam maior
plasticidade so mais competitivas (Fan et aI., 2003).
Essas alteraes em geral no modificam a arquitetura, de modo a afetar as
caractersticas bsicas do sistema radicular como a fasciculao e a pivotncia, dentre
outras.
A relao entre raiz e parte area determinada pela diferena fisiolgica entre
esses rgos. Razes geralmente se desenvolvem no escuro, portanto, so dependentes
de fotoassimilados. As partes areas, por sua vez, so dependentes da absoro de gua
e nutrientes pelas razes. As atividades da parte area, bem como do sistema radicular,
so decisivas para definir a massa e o volume de ambos. As relaes entre esses rgos
so coordenadas e reguladas por fitohormnios, com destaque para auxinas e
citocininas. O balano entre parte area e sistema radicular dinmico e sujeito a
modificaes. A comprovada correlao existente entre parte area e sistema radicular,
no entanto, no deixa claro o que causa ou efeito (Moreira, 2004).

O efeito de estresses nutricionais sobre a alocao de carbono, geralmente,

proporciona aumento do sistema radicular, ou seja, da capacidade de absoro. O P por
exemplo, apresenta baixa mobilidade no solo e freqentemente limita a produtividade
(Lpez-Bucio et aI., 2002), e a resposta do sistema radicular bem especfica
(Williamson et aI., 2001), e, ocorre atravs de diversas caractersticas do sistema
radicular, tal como proliferao de razes em stios onde ocorre maior disponibilidade
deste elemento (Bonser et aI., 1996).
As razes de Pocea (gramneas), proliferadas em regies mais frteis do
substrato, so finas e apresentam aumento de diversas caractersticas, tais como
comprimento especfico, nmero de razes laterais de primeira e segunda ordem,
comprimento do eixo radicular principal e comprimento mdio da raiz principal em
relao ao comprimento do eixo principal (Larigauderie & Richards, 1994).
6.7 Gravitropismo
Gravitropismo a resposta especfica de crescimento em relao fora da
gravidade, e faz com que uma planta colocada na horizontal, curve sua parte area para
cima e seu sistema radicular para baixo. Razes em geral, apresentam gravitropismo
positivo, sendo que as razes principais so orientadas mais verticalmente que as laterais
de primeira ordem, enquanto razes laterais de segunda ou de ordem superior, podem se
desenvolver quase que em todas as direes (Salisbury & Ross, 1992).
A resposta mudana de gravidade pode ser divida em trs fases: percepo,
traduo e resposta (Taiz & Zeiger, 2004). A percepo ou a deteco inicial da
gravidade parece ocorrer na coifa, nos ltimos milmetros da raiz. Essa resposta, uma
alterao no padro de crescimento, que conduz curvatura para baixo, ocorre na zona
de alongamento (Evans et al., 1986).

A percepo da gravidade dada pela movimentao de amiloplastos. Esses

possuem dois ou mais grnulos de amido e se localizam nas clulas da coifa da raiz
(Taiz & Zeiger, 2004). Conforme o posicionamento da raiz em relao gravidade, os
amiloplastos se sedimentam sobre os retculos endoplasmticos, localizados na parte
basal da clula, proporcionando a liberao de clcio. O clcio se liga uma protena
denominada calmodolina. Quando desprovida de clcio, a calmodolina inativa. A
clcio-calmodolina, originria dessa ligao, ativa as bombas de clcio e a auxina
localizadas nas partes basais da membrana celular, proporcionando aumento na
concentrao de auxina e clcio. A elevada concentrao de auxina inibe o crescimento
dessa regio da raiz, provocando a curvatura da mesma (Evans et aI., 1986; Figura 14).

20 min.

120 min.

Figura 14. Sucesso de mudanas do padro de pH na superfcie da raiz principal de

milho exposta a um estmulo geotrpico. Regies de pH alto so representadas pelo
vermelho e regies de pH baixo so representadas por amarelo. O tempo de exposio
ao estmulo (posio horizontal do eixo radicular) foi de 20 minutos e 120 minutos.
Adaptado a partir de de Mulkey e Evans (1981).
Quando a raiz est na posio horizontal, ocorre migrao de Ca para a coifa.
O acmulo desse on na parte basal estimula a movimentao diferencial e baspeta da
auxina para a zona de alongamento. Ao longo do estmulo da gravidade, o balano entre
o movimento acrpeto (da base para o pice) da auxina, como estimulador do

crescimento, e o movimento baspeto do ABA, que inibe o crescimento, alterado.

Como conseqncia, ocorre o crescimento longitudinal e assimtrico entre os lados
inferior e superior (Jesko, 1994).
Existe ainda outra hiptese, onde o sinal que desencadeia a resposta seria
eltrico, ou eletroqumico, e no hormonal (Taiz & Zeiger, 2004). Essa hiptese
considera uma corrente eltrica simtrica ao longo do sistema radicular, quando esse
est na posio vertical. Quando as razes so colocadas na horizontal, essa corrente
passa a ser assimtrica. H evidncias da participao do fluxo de H+ na formao dessa
corrente eltrica. (Evans et aI., 1986; Salisbury & Ross, 1992). O fluxo de H+ estaria
refletindo o fluxo de clcio para a parte basal da coifa, para manuteno do equilbrio de
cargas (Evans et aI., 1986).
6.8 Variabilidade e arranjo espacial e temporal
Os estudos sobre o desenvolvimento, a distribuio e a profundidade efetiva
das razes tm permitido aprimorar os conhecimentos sobre essa relao, atravs da
determinao da camada de solo a ser umedecida pela aplicao de gua, assim como a
profundidade de monitoramento da gua no solo. A figura 15 mostra a distribuio
espacial das razes de cana-de-aucar, em condies de campo.

0,0
0,5

Profundidade (m)

1,0

Raizes
superficiais

1,5

Raizes de
sustentao

2,0
2,5

Raizes-cordo

3,0
3,5
4,0
3,0

2,0

1,0

0,0

1,0

2,0

3,0

Distncia do centro da touceira (m )

Figura 15.

Distribuio vertical e horizontal do sistema radicular da cana-de-aucar.

O tolete foi plantado aos 25 cm de profundidade, destacando: Razes superficiais, mais

ramificadas responsveis pela absoro da maior parte da gua e dos nutrientes; Razes
de sustentao ou fixadoras, responsveis pela ancoragem da touceira, e, Razes-cordo,
profundas e importantes no processo de ciclagem de nutrientes e absoro de gua nos
perodos de veranicos. Adaptado de Orlando Filho (1983) e Smith et al (2005).
Neves et al. (2000) analisaram o sistema radicular de trs cultivares de acerola
em um Latossolo Roxo e verificaram que a profundidade efetiva do sistema radicular
das trs variedades variou de 0,50 a 0,69m, pois nesta profundidade foram encontrados
80% do sistema radicular das plantas analisadas.
Com relao distribuio horizontal das razes no perfil do solo, os autores
observaram que 80% do sistema radicular concentravam-se a 0,75 metro de distncia da
planta. Diante disto, recomenda-se que sejam feitas avaliaes da distribuio do
sistema radicular das plantas, no sentido de se determinar a profundidade efetiva das
razes de absoro de gua e nutrientes para locais especficos e, conseqentemente, os

volumes de gua disponveis no perfil do solo para as plantas. Somente, a partir dessas
informaes, ser possvel otimizar a freqncia e ou a intermitncia da irrigao e as
lminas de gua a aplicar em cada irrigao.
Avaliando a distribuio e variao temporal de caractersticas radiculares de
B. humidicula em Planossolo arenoso, Brasil (2001) verificou a importncia de trs
classes de razes (finas (<0,8mm), mdias (1,5-0,8mm) e grossas (2,5-1,6mm) para o
comprimento e biomassa radicular em amostras de solo coletadas em camadas paralelas
de 10cm de solo at 70cm de profundidade. Estes autores verificaram que as razes finas
contriburam com a quase totalidade do comprimento total e mais da metade da
biomassa acumulada at 70cm de profundidade, concentrando-se principalmente nos
primeiros 20cm (Figura 16). Estes resultados revelam que a cuidadosa separao de
razes por classes de dimetro essencial para o entendimento da dinmica de resposta
do sistema radicular de B. humidicola s flutuaes nas condies ambientais e que a
frao razes finas contribuem significativamente no somente para o comprimento total
do sistema radicular como tambm para a biomassa total do mesmo.
-3

Comprimento Radicular (m dm )
0

40

80

120

Profundidade (m)

0,1
0,2

Grossa

0,3

Mdia

0,4

Fina

0,5
0,6
0,7

Muito Fina
Total

160

200

Figura 16. Variao da densidade do comprimento radicular (Total; m dm-3) de

Brachiaria decumbens em funo do dimetro de razes (Grossa, mdia, fina e muito
fina), em profundidade. Brasil, 2005.
7. Fatores abiticos e biticos que alteram o desenvolvimento radicular
Os fatores abiticos que influenciam a fisiologia das razes e, por conseqncia,
o crescimento e o desenvolvimento das culturas, podem ser classificados, quanto sua
natureza, em qumicos (pH, a concentrao de elementos txicos e nutrientes), fsicos e
fisico-hdricos (oxigenao, temperatura, umidade, textura, densidade/porosidade).
Quase todos estes fatores so interdependentes.
A influncia da umidade do solo com relao resistncia penetrao das
razes, e pode estar relacionado com fatores biticos, como exemplos, a influncia da
temperatura e do pH na atividade microbiana (decompositores, FBN e micorrizas), a
oxigenao interagindo com os fatores qumicos e biolgicos (oxidao, respirao,
etc.).
De modo geral, o crescimento das plantas reduzido drasticamente na presena
de camadas compactadas; com impedimentos de natureza qumica (acidez e toxidez por
Al+3); e fsico-hdrica (alagamento, seca). No entanto algumas diferenas entre espcies
so observadas (Taylor, 1981; Materechera et al., 1991). As razes no podem alterar o
dimetro de seu pice, para penetrar em poros menores sua proporo tecidual
(dimetro e rea superficial), por isto ao crescer em solos compactados, as plantas
necessitam deslocar partculas minerais (areia, argila, etc.), para alongar e expandir seus
eixos radiculares.
Muitas espcies sofrem limitaes de crescimento na presena de horizontes ou
camadas compactadas, ocorrendo freqentemente o encurtamento e aumento do
dimetro dos eixos radiculares, e, alm disso, podem ocorrer alteraes anatmicas

significativas como a relao entre a espessura do crtex e a espessura do cilindro

vascular das razes (Bassoi et al., 1999).
No entanto, a simples reduo no alongamento dos eixos principais no pode ser
considerada como uma diminuio do crescimento radicular, e sim uma alterao na
distribuio espacial das razes, em proporo horizontal, j que em condies de
limitao do crescimento radicular em profundidade, ocorre uma intensa proliferao de
eixos laterais finos (secundrios e de ordens superiores, com dimetro < 0,8 mm) e
plos radiculares (dimetro < 0,1 mm), que contribuem para o aumento significativo da
superfcie especfica radicular superficialmente (Dias Correia, 1986), o que pode ser
limitante em regies com perodos prolongados de seca. Por esta razo, a profundidade
em que as camadas compactadas aparecem no solo, determinar a importncia agrcola
do mesmo.
A estrutura a propriedade fsica do solo que diz respeito aglutinao das
partculas primrias em partculas secundrias (agregados), delimitadas umas das outras
por superfcies de fraqueza ou separadas por descontinuidades, dando origem a
agregados de configuraes peculiares. Esta propriedade exerce influncia direta sobre
o crescimento das razes, reduzindo a sua extenso em funo de alteraes
significativas provocadas pelo stress mecnico no alongamento das diferentes espcies
cultivadas.
Dexter (1988) define a estrutura do solo como sendo a heterogeneidade
espacial dos diferentes componentes do solo, e por isto ainda existe uma grande lacuna
na pesquisa, sobre mtodos de estudos para determinar as interaes entre a estrutura do
solo e o desenvolvimento do sistema radicular, que precisam ser melhor desenvolvidos.
Esta propriedade controla os espaos vazios e, conseqentemente, a quantidade de gua
e oxignio que pode ser armazenada no solo e a velocidade com que so liberados para

as razes das plantas. Desta forma, a porcentagem de espaos vazios no volume do solo
e, especialmente, seus aspectos geomtricos, como nmero, tamanho, forma,
distribuio, direo, continuidade e conexo so portanto, bastante relevantes e podem
alterar o crescimento das razes.
A forma e a orientao dos agregados dentro do solo podem afetar a penetrao
das razes, pois esses fatores influenciam o ngulo de contato no qual a coifa encontra a
superfcie dos mesmos. A chance de penetrao menor quando o ngulo de contato
coifa-superfcie do agregado mais agudo. Por outro lado, a falta de ancoragem (apoio)
em camadas mais soltas (frouxas) do solo pode impedir a penetrao de razes em
camadas mais duras. Por exemplo, se a semente plantada em solo desagregado e a
plntula encontra uma crosta superficial, em vez de emergir poder ser empurrada para
baixo. Da mesma forma acontece com razes, quando encontram superfcies duras, se a
camada acima no oferecer apoio suficiente ela no conseguir penetr-la, mesmo que
tenha fora suficiente para tal (Rezende, 2000).
A infiltrao e a capacidade de armazenamento de gua tambm esto
intimamente relacionadas com a porosidade do solo e as razes das plantas. A dinmica
destas propriedades, pode sofrer modificaes na sua poro superficial com o passar do
tempo, atravs de prticas de manejo como arao, tratos culturais, calagem, adubao,
incorporao de matria orgnica, dentre outras. A distribuio vertical das
caractersticas radiculares dos vegetais tambm pode ser alterada em funo da variao
de textura nos horizontes superficiais e subsuperficiais do solo (Atkinson, 2000). Em
solos argilosos as rvores muitas vezes formam razes dispersantes concentradas no
horizonte superficial, podendo muitas vezes o sistema radicular estar limitado s zonas
de coveamento de plantio (Figura 17).

Figura 17. Razes dispersantes - efeito de coveamento na distribuio radicular da

Acerola. A linha pontilhada representa o espao tridimensional da cova de plantio.
Fotografia de Felipe da Costa Brasil (2002).
Os solos com textura homognea (textura mdia a arenosa), ao longo de toda sua
profundidade efetiva, apresentam normalmente uma distribuio radicular que declina
conforme uma funo exponencial decrescente (Brasil, 2001), o que pode ser alterado
por ao de agentes de impedimento, como os j descritos anteriormente, ou em funo
do manejo do solo.
Em solos com variao de textura entre os horizontes (Ex. A-AB-BA-Bt), ou
com camadas de adensamento, tal distribuio passa a ser afetada de forma bimodal,
ocorrendo zonas de acmulo radicular aps a camada de impedimento. No caso de solos
coesos dos tabuleiros costeiros, estes apresentam normalmente uma reduo grande da
porosidade entre o horizonte superficial e subsuperficial. Cintra (1997), estudando um
Podzlico acinzentado fragipan (Segundo a antiga Classificao de Solos), encontrou
uma reduo de 41% a 34% da biomassa radicular, entre o horizonte Ap e o BA, e,
salienta que esta reduo, deve em grande parte, resultar da diminuio de macroporos
do horizonte compactado.

A distribuio horizontal de razes tambm pode ser afetada, uma vez que
comum observar agrupamentos de razes concentrados em rachaduras, gretas ou covas
de animais (Figura 18).
a

Figura 18. Fissuras em um solo Mediterrnico (Luvisol) no perodo de seca na na

Regio do Alentejo em Portugal; a) na superficie; b) no perfil. Foto de Felipe da Costa
Brasil (2004).
Agrupamentos ou acmulos de razes no espao ocorrem naturalmente em certas
regies, especialmente em sistemas radiculares que possuem elevado nmero de
ramificaes curtas por unidade de comprimento da raiz parental (Bingham &
Bengough, 2003). Um exemplo tpico a proliferao do sistema adventcio de razes
nas gramneas, nos primeiros centmetros do solo, onde a concentrao de fatores de
crescimento maior que no subsolo.
Como propriedade qumica limitante, a acidez do solo comum em todas as
regies onde a precipitao suficientemente elevada para lixiviar quantidades
apreciveis de bases permutveis das camadas superficiais dos solos. To generalizada
a sua ocorrncia e to pronunciada a sua influncia sobre os vegetais, que se
transformou numa das mais discutidas propriedades do solo. Especificamente a
presena de Al+3 a nveis txicos para a maioria das plantas cultivadas, um dos
principais fatores que limitam a produo agrcola (Ma et al., 2001) (Figura 19).

Figura 19. Efeito do contedo de Al+3 no desenvolvimento de plntulas de arroz,

variedade Caiap (Zonta, 2003).
Particularmente, na raiz que se verifica o principal sintoma de toxicidade e
maior sinal de danos, sendo a inibio do crescimento longitudinal uma das
caractersticas que pode variar entre espcies tolerantes e sensveis, em diferentes graus
(Kochian, 1995). Este ction, quando em contato com as razes, promove rapidamente a
paralisao do crescimento radicular, tornando-as atrofiadas em funo da morte ou
injria do meristema radicular. Especificamente, a parte distal da zona de transio no
pice das razes, onde as clulas esto entrando em fase de alongamento, o stio da
ao txica primria do Al+3 (Sivaguru & Horst, 1998).
Ainda, o Al+3, atua fixando fsforo em formas menos disponveis nas superfcies
das razes, diminuindo a respirao desta, alm de interferir na atividade das enzimas de
fotofosforilao, reduzindo a absoro, transporte, e a eficincia de uso de gua e vrios
nutrientes essenciais (Ca, Mg, K, P e Fe), entre outros efeitos diretos e indiretos (Nichol
& Oliveira, 1995). Em sntese, plantas afetadas por Al tambm apresentam sintomas de
deficincia de nutrientes, tais como P, Ca, Mg, K e Mo, devido interferncia do Al nos

processos de absoro, transporte e uso destes nutrientes. Tais deficincias

aparentemente ocorrem porque o Al induz a deposio de calose nos canais
plasmodesmticos, inibindo fisicamente o transporte simplstico entre clulas (Sivaguru
et al., 2000). Esse assunto ser melhor discutido no capitulo 16 neste volume.
A matria orgnica do solo afeta significativamente sobre diferentes aspectos
diretos e indiretos, para o desenvolvimento e a dinmica do sistema radicular. Funciona
como fonte e reserva de nutrientes, e atua sobre os principais processos pedogenticos,
participando na migrao ou fixao de alguns elementos (Ca, Fe, Al) e argilas;
reduzindo o efeito txico de metais (Al, Mn); estabilizando o pH do meio, alm de
regular o regime trmico e hdrico do solo; melhorando a densidade e a estrutura do solo
(SANTOS & CAMARGO, 1999).
No obstante a estes efeitos conhecidos da matria orgnica do solo, a
importncia das substncias hmicas como bioativadoras do crescimento vegetal tem
sido relatada por alguns autores. Os resultados demonstram que estas substncias podem
alterar o arranjo tridimensional, com um aumento substancial da superfcie especfica do
sistema radicular, alm de atuar sobre a ativao das H+-ATPases e na permeabilidade
das membranas (Capitulo 4 neste volume), com isto tornando-o mais eficiente nos
processos de absoro de gua e nutrientes (Faanha et al., 2002).
Outro aspecto a ser abordado na dinmica do crescimento radicular, que governa
as demais propriedades acima discutidas, a prpria natureza mineralgica dos solos.
Tomando-se como exemplo solos Cauliniticos (Ki e Kr > 0,75 ) e solos Oxdicos (Kr <
0,75) (Embrapa, 1999), que diferem quanto ao grau de intemperismo, e
conseqentemente apresentam

diferenas significativas nas propriedades fsicas e

qumicas dos solos e de suas interaes com o crescimento radicular das culturas. Como
exemplo de propriedades fsico-hdricas, podemos citar as diferenas entre os

Argissolos (caulinticos), que apresentam uma descontinuidade de capilaridade na

transio do Horizonte A (mais arenoso) com o Horizonte Bt (argiloso), onde so
observadas maior microporosidade no horizonte B do que no A, e o inverso em relao
macroporosidade, tendo influncia direta na maior umidade da camada subsuperficial.
Comparativamente, a homogeneidade da macro e microporosidade em todos os
horizontes dos Latossolos (Oxdicos), facilita a evaporao da gua, sua drenagem, e
conseqentemente a distribuio do sistema radicular em profundidade. Embora os
Latossolos tenham propriedades fsicas mais favorveis que os Argissolos, devido a seu
estgio avanado de intemperismo, inmeros problemas de natureza qumica so
acentuados, tais como: pH, alumnio, baixo contedo de matria orgnica, baixa CTC,
fsforo, etc. (Oliveira, 2001). Tais propriedades conforme j descrito anteriormente,
alteram o crescimento radicular, sendo encontrados na literatura inmeros trabalhos,
sobre o manejo e correo dos solos, principalmente atravs de calagem e adubaes de
NPK, em solos da regio do Cerrado brasileiro, com predomnio de solos Oxdicos.
7.1. Micorrizao
As razes podem ser ajudadas em suas funes por microrganismos encontrados
no solo. Entre essas associaes, a mais generalizada interao entre as plantas e
microrganismos a micorriza. Os fungos micorrzicos arbusculares (FMA) esto sendo
apresentados em detalhes no capitulo 3 neste volume. Algumas modificaes nas razes,
resultantes da interao com fungos ectomicorrzicos so aqui apresentadas. De uma
maneira geral, a rede de Hartig distribuda ao redor das clulas corticais e a manta de
fungos pode envolver a raiz como uma bainha. A infeco no se espalha em tecidos
meristemticos

ou

dentro

dos

vasos

condutores.

ectomicorriza

penetra

enzimaticamente e mecanicamente entre as clulas epidrmicas e entre a lamela mdia

das clulas corticais.

A penetrao enzimtica primeiramente hidroltica via enzimas pectolticas e

pode progredir at a endoderme. O grau de desenvolvimento do fungo no crtex da raiz
aparentemente mediado pela agressividade do fungo e pela resposta do hospedeiro
(Marx & Krupa, 1978). Brundrett (2002) sugere que presses de seleo causaram
divergncias morfolgicas em razes com diferentes tipos de micorrizas. A espessura e
suberizao da exoderme so maiores em plantas micorrzicas obrigatrias, enquanto
plantas no micorrizadas possuem tendncia a ter razes finas, com mais plos
radiculares e defesas qumicas avanadas.
Espcies em associao com ectomicorrizas geralmente possuem razes laterais
curtas e grossas, resultando um sistema radicular distinto.
Existem plantas que parecem ter razes curtas quando em associao com fungos
micorrzicos vesculo-arbusculares (VAM), como as angiospermas Acer e Ulmus e a
gymnosperma Podocarpus. Arisaema atrorubens com razes grossas e relativamente
sem ramificaes e sem plos radiculares considerada altamente dependente de
micorrizas (Brundrett & Kendrick, 1988).
Contudo, existem excees, como Geranium robertianum que apresenta razes
altamente ramificadas e considerada como tendo baixa necessidade de micorrizas. As
razes micorrizadas da espcie arbrea btula (Betula alleghaniensis) so mais grossas
que as razes da mesma ordem no micorrizadas, dado manta de hifas na superfcie
(Brundrett, 2002). O padro de crescimento das razes das plantas hospedeiras
freqentemente alterado pelo desenvolvimento de fungos ectomicorrzicos (ECM) no
sistema radicular. Por exemplo, em Pinus a proliferao de razes curtas estimulada
pela colonizao com o fungo, bem como a bifurcao das razes curtas (Reid, 1990). A
colonizao com MA mudou a morfologia do sistema radicular de Annona cherimola,

aumentando o nmero total de razes, o nmero de razes laterais de primeira ordem e

de segunda ordem (Padilla et al., 2005).
Outra importante interao da raiz com microrganismos a produo de ndulos
radiculares em leguminosas (Capitulo 9 neste volume). Esses ndulos so estruturas que
se desenvolvem em muitos membros da famlia Leguminosae em presena do rizbio
apropriado (Sprent & Sprent, 1990) ou Burkholderia (Chen et al 2005) e que suprem a
planta de nitrognio fixado. Pode ocorrer tambm a formao de ndulos radiculares
fixadores de nitrognio em membros das famlias Rosaceae, Eleagnaceae, Rhamnaceae,
Betulaceae, Casuarinaceae, Myricaceae, Coriariaceae e Datiscaceae, em associao com
Frankia (Sprent & Sprent, 1990).
Fatores ambientais podem afetar o processo de enraizamento de esplantes e citase que para E globulus e E. saligna, baixas temperaturas ocasionaram uma demora no
enraizamento dos explantes. Neste caso, foram identificadas caractersticas preferenciais
por espcie, sendo que E. saligna prefere temperaturas mais elevadas e E. globulus,
temperaturas mais baixas (Corra & Fett-Neto, 2004).
7.2. As razes e a formao de agregados no solo
Apesar de representarem uma pequena frao dos constituintes orgnicos do
solo, as razes exercem tambm grande influncia direta e indireta, na formao e
estabilidade dos agregados no ambiente edfico (Silva & Mielniczuck, 1997).
A dinmica radicular, atravs da transferncia direta dos produtos da
fotossntese para a matriz do solo, tem sido considerada a principal fora propulsora na
manuteno da qualidade do solo. Tais produtos so representados pelo tecido radicular
vivo, exsudatos e diversos constituintes orgnicos derivados das razes em crescimento,
razes mortas e pelos radiculares, alm de microrganismos rizosfricos e seus
subprodutos de elevado poder agregante (Mielniczuck, 1999). Estes compostos, ao se

associarem com a matria mineral do solo, formam agregados estveis em gua, onde
permanecem menos acessveis ao ataque de microorganismos decompositores (Haynes
& Beare, 1996).
As razes atuam na primeira fase de formao dos agregados, sendo este um
resultado de interaes de componentes fsicos, qumicos e biolgicos, onde os
principais agentes so o clima, as razes, os microorganismos, a fauna e o prprio
tracionamento do solo (Silva & Mielniczuck, 1997). Durante seu crescimento, exercem
presses biofsicas (axial e radial), no seu avano atravs do espao poroso,
aproximando as partculas minerais, e conseqentemente aumentando a densidade do
solo nas regies mais prximas superfcie radicular. Paralelamente a absoro de gua
pelas razes ocasiona um secamento das partculas adjacentes, provocando presses
capilares que intensificam a compresso dos grnulos minerais.
Como componente bioqumico, o ambiente da rizosfera, rico em energia,
estimula a proliferao de microorganismos que liberam substncias hmicas e
polissacardeos responsveis pela estabilizao dos microagregados formados
(partculas < 250 m), e sua aglutinao em unidades maiores (Figura 20). Ao lado
desta atividade, que ocorre enquanto o sistema radicular est em crescimento, a matria
orgnica oriunda da decomposio do tecido radicular aps a sua senescncia, razes
no decompostas, hifas de fungos e micorrizas tambm atuam na formao e
estabilizao, principalmente dos macroagregados (partculas > 250 m) (Mielniczuck,
1999).

Figura 20. Diagrama esquemtico de um microagregado. Adaptado de Haynes & Beare

(1996) por Orlando Carlos Huertas Tavares CAPGA-CS Depto de Solos
IA - UFRRJ (2006).
Em conjunto, e analisando a dinmica radicular, atravs de seus processos
bioqumicos e fsico-qumicos em interao com a matriz mineral do solo, pode-se
admitir que o sistema radicular o principal componente formador dos micro e
macroagregados do solo (Figura 21). Porm, a ao das razes finas (< 800 m) e dos
plos radiculares (1 mm de comprimento por 10 m de dimetro) (Dias Correia, 1986),
tanto pelo seu arranjo tridimensional (distribuio espacial, vertical e horizontal), que
pode contribuir com mais de 90 % da rea superficial e do comprimento radicular total
(alta superfcie especfica) (Brasil, 2001), em conjunto com os processos de absoro de
gua e exudao de substncias orgnicas, constituem a frao do sistema radicular
mais efetiva na gnese e estabilidade dos agregados do solo (Haynes & Beare, 1996;
Mielniczuck, 1999).

Figura 21. Diagrama esquemtico de um macroagregado de solo. Adaptado de Haynes

& Beare (1996) por Orlando Carlos Huertas Tavares CAPGA-CS Depto de Solos
IA - UFRRJ (2006).
Em adio aos componentes de formao dos agregados e a prpria morfologia
radicular, uma anlise comparativa pode ser feita, quando da dinmica (crescimento e
renovao) de um sistema radicular denso, bem desenvolvido e atuante por vrios anos
no mesmo local, como por exemplo o das gramneas forrageiras perenes, verificamos
que o mesmo distribui uniformemente os efeitos de agregao em toda a matriz do solo,
por favorecerem as ligaes dos pontos de contato entre partculas minerais e
constituintes orgnicos, quando comparado com as culturas anuais, cujo sistema
radicular menos desenvolvido e atua por curtos perodos de tempo no solo (Silva &
Mielniczuck, 1997).
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CAPTULO 3

FUNGOS MICORRZICOS ARBUSCULARES: MUITO ALM

DA NUTRIO
Ricardo L.L. Berbara1; Francisco A. de Souza2; Henrique M.A.C. Fonseca3
1

Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, Departamento de Solos, Seropdica,

Itagua, RJ, CEP 23851-970, Brasil.

Berbara@ufrrj.br
2
Embrapa Agrobiologia, BR-23851970, Seropdica, Seropdica, Itagua, RJ, Brasil.
3
Centro de Biologia Celular, Departamento de Biologia, Universidade de Aveiro, 3810193, Aveiro, Portugal

SUMRIO
1. INTRODUO ................................................................................................................ 3
2. EVOLUO E CARACTERIZAO.......................................................................... 6
3. CARACTERSTICAS GENTICAS E MORFOLGICAS .................................... 16
3.1 ASPECTOS GENTICOS......................................................................................................16
3.2 MORFOTIPOS....................................................................................................................18
4. CLASSIFICAO E NOMENCLATURA ................................................................. 23
6. MICORRIZAS E A DINMICA DO CARBONO ..................................................... 30
6.1 GLOMALINA.....................................................................................................................34
7. NUTRIO MINERAL ................................................................................................ 38
8. MANEJO DE FMA ........................................................................................................ 45
9. CONCLUSES............................................................................................................... 47
10. REFERNCIAS ........................................................................................................... 49

1. INTRODUO
Plantas no tm razes, elas tm micorrizas. Esta sentena foi proferida dcadas
atrs por J. L. Harley com o intuito de alertar ecologistas e bilogos para o fato de que, em
condies naturais, a maioria das espcies de plantas se encontram associadas a
determinados fungos de solo numa simbiose mutualstica do tipo micorrzico, do grego
mico [fungo] e riza [raiz]. Indo alm das relaes funcionais que se estabelecem entre
plantas e estes fungos, van der Heijden & Sanders (2002) enfatizaram que associaes
micorrzicas devem sempre serem consideradas quando se busca entender a ecologia e
evoluo de plantas, suas comunidades e ecossistemas. Esta considerao est baseada em
experimentos que demonstram o papel desta simbiose no resultado da competio e
sucesso de plantas bem como na hiptese de que a evoluo de plantas terrestres ter sido
dependente da presena desta simbiose (van der Heijden et al., 1998a; 1998b; Kiers et al.,
2000; Klironomos et al., 2000; Allen et al., 2003; Cairney 2000; Brundrett 2002).
Atualmente so reconhecidos seis tipos diferentes de associaes micorrzicas,
sendo algumas delas muito especficas, encontradas em apenas algumas famlias de plantas
terrestres (Arbuscular-, Arbutoide-, Ericoide-, Ecto-, Monotropoide-, e Orquidoide). Para
detalhes destes tipos ver Siqueira (1996). Este captulo ir enfatizar as micorrzas
arbusculares, em particular devido ao seu carter ubquo, seu papel vital para a
sustentabilidade da agricultura em regies tropicais, e seu potencial biotecnolgico,
impacto na estrutura de comunidades vegetais e no dreno de carbono atmosfrico.
O carter cosmopolita desta simbiose advm de levantamentos que indicam que
80% das famlias de plantas so formadas por espcies que formam micorrzas arbusculares
(MA). Ela encontrada em todas as latitudes, estando presente em quase todos os

ecossistemas terrestres (Siqueira & Franco, 1988). A simbiose micorrzica arbuscular a

mais ancestral dentre todos tipos de micorrzas conhecidas. Evidncias fsseis indicam que
as primeiras plantas terrestres j estavam colonizadas por fungos que apresentavam
estruturas miceliais e esporos similares a dos atuais fungos arbusculares (FMA) (Redecker
et al., 2000a). Atualmente, a maioria das angiospermas, e muitas gimnospermas,
pteridfitas e brifitas formam associao com FMA (Smith & Read 1997). Alm disso,
provvel que eles sejam os fungos de solo mais abundantes na maioria dos ecossistemas
tropicais, principalmente nos sistemas agrcolas, onde eles podem representar quase que
50% da biomassa microbiana (Olsson et al., 1999). Devido a esta ubiqidade, esta simbiose
tem sido considerada a mais importante dentre todas as que envolvem plantas. Esta
associao simbitica pelo fato dos organismos co-existirem em um mesmo ambiente
fsico, raiz e solo, e mutualstica porque, em geral, ambos os simbiontes se beneficiam da
associao. Ela considerada como sendo mutualista nutricional, onde a planta supre o
fungo com energia para crescimento e manuteno via produtos fotossintticos, enquanto
que o fungo prov a planta com nutrientes e gua. Neste sentido, esta simbiose amplia a
capacidade de absoro de nutrientes por parte do simbionte autotrfico e,
conseqentemente, a sua competitividade inter-especfica e produtividade.
A sustentabilidade da produo agrcola est ligada aos efeitos benficos das
micorrzas sobre a nutrio de plantas, principalmente com relao absoro de fsforo,
que um recurso natural no renovvel. Vrias espcies de plantas respondem
positivamente inoculao com fungos MA, dentre elas caf, soja, milho, batata-doce,
mandioca, cana-de-acar, alm de varias essncias florestais e frutferas brasileiras. A
contribuio dos fungos MA sobre a nutrio fosfatada de plantas est amplamente aceita e
documentada na literatura nacional e internacional. No entanto, os servios prestados pelo
4

fungo vo muito alm da nutrio de plantas individualizadas pois eles tambm contribuem
para a estruturao de comunidades vegetais. O miclio de fungos MA freqentemente
interconecta o sistema radicular de plantas vizinhas da mesma espcie ou de espcies
distintas. Neste sentido a maioria das plantas esto interligadas por uma rede de hifas
micorrzicas comum, durante alguma fase do seu ciclo de vida (Newman 1988). As
consequncias desta trama micelial para a competio inter-especfica em comunidades
vegetais sugere que ela seja elemento importante na definio da sucesso vegetal
conforme ainda discutiremos.
Como decorrncia desta imensa quantidade de hifas produzidas por FMA, existe
significante impacto sobre a estruturao e estabilidade de agregados em solos (Jastrow et
al., 1998). Esta funo significativa por que a estruturao do solo modifica a capacidade
de mobilizao de nutrientes, o contedo de gua, a penetrao de razes e o potencial
erosivo dos solos. Fungos MA conferem tambm incrementos resistncia de plantas
frente ao ataque patognico (Hwang et al., 1992), tolerncia ao estresse hdrico,
eficincia fotossinttica (Brown & Bethlenfalvay 1987), ao intemperismo de minerais (van
Breemen et al., 2000). Como consequncia, existem evidncias de que FMA colaboram no
aumentos do dreno de carbono da atmosfera, varivel importante e pouco estudada frente
aos processos de mudana climticas (Leake et al., 2004). Estas caractersticas fazem com
que a simbiose micorrzica arbuscular tenha um potencial biotecnolgico e ecolgico
imenso ainda a ser explorado.
Neste captulo buscaremos discutir estas associaes em um contexto amplo que
ultrapassa seus impactos sobre a nutrio mineral de plantas, uma vez que por mais
importante que eles sejam, aspectos relevantes esto por serem desvendados. Consideraes
bsicas so tambm abordados de forma a possibilitar a leitura por um pblico mais amplo.
5

2. EVOLUO E CARACTERIZAO
Fungos MA, sem exceo, so simbiontes obrigatrios: eles dependem da simbiose
com plantas compatveis para sua multiplicao. Alm disso, no existem evidncias
comprovadas que indiquem que estes fungos se reproduzam sexualmente. At
recentemente, sugeria-se que estes fungos vinham se multiplicando clonalmente, de forma
puramente assexuada, por centenas de milhes de anos (Rosendahl et al., 1997; Sanders
2002). No entanto sabe-se que organismos que se multiplicam clonalmente por longos
perodos de tempo tendem rapidamente a extino devido acumulao de mutaes
deletrias originadas durante o crescimento somtico e a incapacidade de elimin-las e de
gerar variabilidade gentica, caractersticas fundamentais para a adaptao a mudanas do
ambiente. Recentemente, evidncias de recombinao em fungos MA tm sido observadas
pela anlise de seqncias de DNA indicando que estes fungos desenvolveram mecanismos
de evoluo que ainda necessitam elucidao (ver caracterizao molecular).
Quanto origem desta simbiose, sabemos pelo estudo de fosseis, que o surgimento
das plantas na superfcie terrestre ocorre entre 460-500 Mi de anos (Figura 1). enquanto a
diviso Glomeromycota (que contm todos os fungos MA) j era encontrada aos 600 Mi de
anos. A simbiose com plantas superiores j est perfeitamente registrada em fosseis do
Ordoviciano (Redecker et al., 2000a) (450 milhes de anos). Especula-se portanto que estes
fungos foram fundamentais para a conquista de ambientes terrestres pelas plantas (Simon et
al., 1993b; Simon 1996) . A presena de AM em plantas primitivas (entendidas como
plantas no vasculares), sugere a possibilidade desta associao ter evoludo de ambientes
aquticos uma vez que as primeiras plantas terrestres encontraram um ambiente inspito
para seu desenvolvimento, ressecado e infrtil (Pirozynski & Malloch, 1975). Alm disso,

suas razes eram desprovidas de pelos radiculares ou ramificaes. Eram estruturas

similares a rizides, sem tecidos vasculares, similares aos encontrados em brifitas e
hepticas (Malloch et al., 1980; Raven & Edwards 2001). Assim, como essas plantas
poderiam absorver nutrientes (principalmente P) e evoluir de ambientes onde estes
elementos eram mobilizados facilmente (aquticos), sem o auxilio da simbiose? Portanto,
apesar da origem da associao ser ainda matria em debate, no se discute o papel central
desta relao mutualistas na ecologia e evoluo de espcies vegetais.

Figura 1 Fssil de fungo micorrzico, indicando suas vesculas, associado

simbioticamente Aglaophyton, Rhynia e Nothia, plantas vasculares. As vesculas
provavelmente

se

desenvolviam

em

esporngias.

(da

pgina:

http://www.xs4all.nl/~steurh/engrhyn/eglomit2.html, um excelente local para

buscas sobre vegetao fossilizada).

Outra hiptese aceita para o surgimento da simbiose micorrzica vem da relao

mutualstica observada entre fungos e cianobactrias. A endossimbiose formada entre o
fungo Geosiphon pyriformis e cianobactrias tem sido apontada como sendo uma das
possveis origens da simbiose micorrzica, principalmente porque este fungo apresenta
morfologia, estrutura e funo prxima dos fungos MA inclusive quanto ao fornecimento
de fsforo e o papel regulador deste elemento sobre a simbiose. Alm disso, a filogenia
molecular confirma a relao evolutiva entre estes simbiontes (Schler et al., 2001).
Infelizmente, no so conhecidas evidenciais fosseis desta relao e os nicos
representantes conhecidos desta simbiose foram encontrados em poucas localidades na
Europa (ustria e Alemanha). Atualmente, G. pyriformis o nico fungo conhecido capaz
de formar simbiose com cianobactrias. Estas observaes portanto permitem expandir o

interesse da simbiose micorrzica para alm das plantas vasculares e brifitas (Schler et
al., 1996).
A relao micorrzica expresso de um evento mutuamente benfico: plantas
suprem o fungo com carbono (fixado via processos fotossintticos pelo simbionte
autotrfico), enquanto fungos provm s plantas de nutrientes (Moreira & Siqueira, 2002).
A simbiose possvel graas ao fato do fungo produzir hifas intra e extraradiculares
capazes de absorver elementos minerais do solo e transferi-los ao ambiente radicular, onde
so absorvidos. No espao intraradicular, a troca bi-direcional ocorre principalmente em
uma estrutura presente no crtex radicular, similar a um haustrio excessivamente
ramificado, os arbsculos. Arbsculos so estruturas formadas pela interao de hifas de
fungos MA e a plasmalema de algumas clulas do cortex. Estas estruturas so consideradas
chave para o desenvolvimento da simbiose micorrzica e sua formao depende da
completa interao gentica e funcional entre combinaes fungo-planta (Harrison 1999).
Aps penetrar a parede celular, a hifa se torna extremamente finas, com dimetro menor
que 1 m que se ramifica profusamente, formando uma matriz de troca com a plasmalema
da clula vegetal sem entretanto a ultrapassar. Como conseqncia, aumenta-se
massivamente a superfcie de contato entre as membranas dos simbiontes permitindo uma
eficiente troca de sinais, nutrientes e compostos orgnicos entre a planta e o fungo.
Hifas extraradiculares por sua vez, so mais eficientes que razes na captura de
nutrientes por serem estruturas extremamente longas e finas (Figura 2). Em associaes
arbusculares, hifas podem se estender a vrios decmetros da superfcie da raiz (comparado
aos 1-2 mm de extenso mdia das radicelas). Por serem finas, com cerca de 2 m de
dimetro, hifas arbusculares podem explorar volumes do solo inatingveis por estruturas
radiculares (pelos radiculares apresentam valores de 10-20 m de dimetro e razes laterais
9

100-500 m). Portanto hifas so capazes de absorver os elementos minerais, como uma
raiz, mas de maneira mais eficiente (Figura 3).

10

Figura 2 Fotografia e diagrama de hifas extraradiculares penetrando em raiz de trevo.

Note a dimenso da hifa em relao ao pelo radicular. Barra 1mm

Quanto aos mecanismos de absoro e mobilizao de nutrientes, da mesma forma,

FMA so ainda mais eficientes que razes. Quando adiciona-se

32

P em meio contendo

fungos micorrzicos percebe-se que todo Pi em geral absorvido por hifas (Nielsen et al.,
2002). O transporte para as razes entretanto no total devido ao movimento bi-direcional
observado em hifas permitir seu deslocamento para drenos do prprio fungo. Neste estudo,
a maior quantidade de Pi transportada raiz correlacionou-se no com o comprimento da
hifa, mas com o seu nmero total (Bago et al., 2000).

11

Figura 3 Cultura em placa Petri de Lunularia cruciata (L.) Lindb. em simbiose com o
Glomus proliferum Dalp & Declerck. Vista inferior do talo da heptica mostrando
extensa proliferao de hifas e esporos (ver detalhe no canto superior esquerdo).
Barras 50 m. Fotografia Fonseca & Berbara, no publicada.

Como FMA dependem do hospedeiro para sua prpria existncia, no existe dvida
da importncia central da simbiose para fungos micorrzicos. A condio de simbionte
obrigatrio advm do fato de que, ao longo de sua evoluo, estes organismos perderam sua
capacidade de fixar C passado a depender exclusivamente do hospedeiro autotrfico como
fonte de compostos orgnicos (Gadkar et al., 2001). No caso das plantas, entretanto, existe
uma faixa grande de resposta simbiose. Espcies vegetais tm sido classificadas quanto
dependncia micorrzica em facultativas, obrigatrias ou no micorrzicas (Smith & Read,
1997).
12

O carter facultativo pode ser observado em condies de solo com alta

disponibilidade de nutrientes, onde plantas no necessitam de FMA. Nestas condies a
simbiose inibida atravs de mecanismos genticos controlados pela planta (Lambais &
Mehdy, 1998; Lambais, 2000; Lambais et al., 2003). Neste caso o hospedeiro perde C ao
micobionte de maneira desnecessria. Como exemplo pode-se mencionar Brachiaria
decumbens. Esta espcie adaptada a solos com baixos nveis de nutrientes disponveis. B.
decumbens tem um sistema radicular bem desenvolvido, contudo no suficiente o
bastante para absorver Pi em condies de baixa disponibilidade comuns em solos
Brasileiros (Figura 4). Espcies facultativas usualmente se beneficiam da simbiose apenas
em situaes onde a fertilidade baixa. Elas em geral apresentam um sistema radicular bem
desenvolvido e altas taxas de crescimento, caso tpico de gramneas.

Figura 4 Resposta de uma espcie micorrzica facultativa, a gramnea forrageira

Brachiaria decumbens, inoculao com Glomus clarum CNPAB5 em solo sem
adio de fertilizante fosfatado. Vasos da esquerda inoculados e os da direita no
inoculados (de Souza, no publicado).
Outras espcies vegetais desenvolvem obrigatoriamente AM para poderem
completar seu ciclo (Amijee et al., 1993; Peng et al., 1993; Johnson et al., 1997). Plantas
micorrzicas obrigatrias no crescem na ausncia de fungos MA em nveis normais de

13

disponibilidade de nutrientes. Como exemplo temos a leguminosa arbrea nativa da regio

amaznica, tax-dos-campos, (Sclerolobium paniculatum) (Figura 5). Esta caracterstica
encontrada com frequncia em espcies nativas de solos de baixa fertilidade natural como
em boa parte dos solos brasileiros (Siqueira & Saggin-Junior, 2001). Nestes solos,
demonstrou-se que inmeras espcies vegetais so incapazes de absorver fsforo na
ausncia da MA, como mandioca e batata-doce (Sieverding, 1991; Paula & Siqueira, 1992).

Figura 5 Resposta de uma espcie micorrzica obrigatria, a leguminosa arbrea taxdos-campos (Sclerolobium paniculatum), a inoculao com o fungo Glomus clarum

14

CNPAB5 em diferentes nveis de adubao com fsforo. No painel superior plantas

no inoculadas e inferior plantas inoculadas. Esta leguminosa apenas se desenvolve
na ausncia de fungos MA quando a disponibilidade de P alta, que no ocorre
naturalmente nos solos da regio amaznica. (Teles, de Souza e Faria, no
publicado).

Plantas que no desenvolvem MA apresentam um sistema radicular bem

desenvolvido com muitas razes finas e pelos radiculares. Apesar disso, so plantas ruderais
que se desenvolvem, em geral, em solos com altos nveis de nutrientes disponveis
apresentando baixa competitividade em solos pobres em fsforo. A colonizao nestas
plantas inibida devido incompatibilidade gentica que impede ao fungo ultrapassar as
primeiras camadas radiculares. Hifas chegam a produzir haustrios buscando ultrapassar a
epiderme, o que no conseguem (Allen et. al., 1989). Provavelmente existem dificuldades
estruturais, ou defesas qumicas que impedem a colonizao uma vez que o fungo consegue
produzir haustrios. Como exemplo pode-se mencionar as famlias Juncaceae,
Caryophyllaceae e Brassicaceae.
importante mencionar que a dependncia micorrzica de uma planta varia com a
espcie de fungo inoculada, para uma mesma planta a resposta pode variar desde levemente
negativa at altamente positiva (Sieverding, 1991). Assim, por parte do simbionte
autotrfico, existem excees quanto ao mutualismo da simbiose. Portanto, strictu sensu,
micorrzas so associaes simbiticas porm nem todas mutualistas. A dinmica entre
mutualismo e parasitismo na simbiose micorrzica, por sinal, tem sido apontada como um
dos mecanismos que facilitam a coexistncia de plantas e a diversidade florstica em
ecossistemas naturais (van der Heijden et al., 1998a; van der Heijden et al., 1998b); van der
Heijden and Kuyper 2003). Como resultado destes mltiplos nveis de dependncia da

15

planta ao fungo micorrzico, a associao acaba por influenciar na modelao da estrutura

da paisagem sendo um dos componentes definidores da diversidade de espcies vegetais e
da produtividade primria. Inversamente, plantas influenciam na diversidade e abundncia
da comunidade FMA. Modificaes ambientais como na fertilidade, em especial na oferta
de N, tambm alteram a estrutura da comunidade de fungos micorrzicos (e plantas),
induzindo a predominncia de espcies cujos esporos apresentam pequenas dimenses,
como os Glomus, bem como na reduo da abundncia e riqueza de espcies. Assim, a
estrutura da comunidade FMA um importante indicador da qualidade ambiental bem
como de alteraes climticas como as causadas por precipitaes cidas e ricas em xidos
de N (Jeffries & Barea 2001; Corkidi et al., 2002). Voltaremos a estes temas no item 5.
3. CARACTERSTICAS GENTICAS E MORFOLGICAS
3.1 Aspectos genticos
Como j mencionado, FMA s completam seu ciclo de vida quando associados
plantas compatveis. Esta caracterstica esperada em simbioses altamente evoludas.
Provavelmente estes fungos seguem um ciclo reprodutivo assexual (Rosendahl & Taylor,
1997) formando esporos grandes, em relao a outros grupos de fungos, variando de 22 a
1050 m em dimetro (Perez & Schenck, 1990). Os esporos so multinucleados e podem
apresentar centenas a milhares de ncleos. Evidncias moleculares indicam que o fungo
haplide havendo controvrsias sobre o seu carter homo ou heterocaritico (Hijri &
Sanders, 2004; Hijri & Sanders, 2005; Pawlowska & Taylor, 2004). Ambas situaes
podem ser esperadas se o fungo seguir um ciclo parasexual de recombinao.
O ciclo parasexual caracterizado pela ocorrncia de anastomose seguida de troca
de ncleos entre fungos geneticamente distintos mas que apresentem compatibilidade

16

vegetativa. Este processo resulta em um miclio contendo ncleos geneticamente distintos

(heterocaritico). No entanto, a heterocariose uma condio instvel onde, em geral,
ncleos diferentes se fundem formando um ncleo diplide o qual, para retornar condio
haplide, devem sofrer perdas cromossomais (Schardl & Craven, 2003). Recentemente,
evidncias da ocorrncia de recombinao parasexual em fungos do gnero Gigaspora
foram encontradas (de Souza et al., 2005a). Alm disso outros estudos de recombinao j
tinham sido relatadas (Pawlowska & Taylor, 2004) indicando que estes fungos apesar de se
multiplicarem clonalmente, desenvolveram mecanismos de recombinao que operam
durante o crescimento somtico. A elucidao destes mecanismos de fundamental
importncia para que possamos compreender processos de evoluo, especiao e
adaptao destes fungos.
Recentemente, foi caracterizado o tamanho, a complexidade e a ploidia do genoma
de trs espcies de fungos MA, Glomus intraradices, Glomus etunicatum e Scutellospora
castanea (Hijri & Sanders, 2004; Hijri & Sanders, 2005). Todas as espcies estudadas
apresentaram condio haplide e o tamanho aproximado do genoma foi respectivamente
17, 37, e 795 Mb. A grande diferena entre o tamanho do genoma das espcies de Glomus
para a Scutellospora castanea se deve a uma grande quantidade de seqncias repetidas:
58% do genoma em contraste com 1,6% em G. intraradices. O genoma do fungo G.
intraradices est sendo seqenciado, resultados preliminares indicam que o fungo apresenta
aproximadamente 30% contedo GC e presena de pequenos introns entre genes
(Shachar-Hill (comunicao pessoal).

17

3.2 Morfotipos
O miclio dos fungos micorrzicos dimrfico e no septado, ou coenoctico (Perez
& Schenck, 1990). Septos quando presentes indicam que o miclio esta senescente. Apesar
de cerca de 80% das plantas superiores formarem MA, as associaes se distinguem
morfologicamente em apenas dois tipos: o Paris e o Arum. Estes termos advm do fato do
primeiro grupo ter sido reconhecido h cerca de 100 anos, na espcie vegetal Paris
quadrifolia enquanto o segundo em Arum maculatum (Dickson 2004). No tipo Arum a hifas
crescem intercelularmente, de maneira linear e longitudinal ao longo do espao cortical
formando estruturas finas e muito ramificadas nas clulas, os arbsculos (Figura 6). No tipo
Paris, hifas mais grossas, enovelam-se intracelularmente, desenvolvendo hifas arbusculares
(Figura 7). As estruturas arbusculares so similares para ambos os morfotipos enquanto
que, funcionalmente, sugere-se que em hifas enoveladas tambm possam ocorrer
deslocamento de fosfato ao hospedeiro. Ao que parece, estas estruturas so definidas pela
planta (Gerdeman, 1965; Bedini et al., 2000; Ahulu et al., 2005; van Aarle et al., 2005)
apesar de Cavagnaro et al. (2001) terem observando a mesma espcie vegetal, mas
colonizada por 6 diferentes espcies de FMA, formava tanto arbsculos do tipo Arum como
Paris.

18

Figura 6 - Colonizao tipo Arum hifas se desenvolvem intercelularmente, de maneira

linear e longitudinal ao longo do espao cortical formando estruturas finas e muito
ramificadas nas clulas, os arbsculos (Fotografia gentilmente cedida por Dr. Larry
R. Peterson, University of Guelph, Canada).

Figura 7 - Colonizao micorrzica tipo Paris com hifas mais grossas, enovelam-se
intracelularmente (Fotografia gentilmente cedida por Dr. Larry R. Peterson,
University of Guelph, Canada).

19

Diversos levantamentos tm registrado que espcies anuais e a maioria das perenes

apresentam morfotipo Arum, como no extenso levantamento realizado por Santos et al.,
(2000) com monocotiledoneas da Regio Nordeste do Brasil. Sugere-se portanto que este
tipo esteja mais presente em espcies vegetais de rpido crescimento pelo fato destas
plantas apresentarem taxas de crescimento, e de colonizao micorrzicas, mais altas
(Brundrett and Kendrick 1990). Assim, FMA seriam capazes de acompanhar o crescimento
das razes com um elevado custo energtico para estas. Plantas com taxas de crescimento
menor, apresentariam a predominncia do morfotipo Paris apesar de Breuninger et al.
(2000) terem encontrado em Araucria angustifolia o morfotipo Arum. Existem espcies
intermedirias, que apresentam os dois tipos, conforme relatado em Anandenantera
peregrina, o angico do cerrado (Gross et al., 2004). O mais provvel que ocorra um
continuum nas estruturas fngicas de Arum para Paris em uma mesma planta (Dickson
2004). Como pouco se conhece dos aspectos funcionais envolvidos em ambos os tipos,
sugere-se que em estudos de identificao da colonizao, tente-se, para futuras referncias,
determinar o morfotipo do fungo e no apenas a presena ou ausncia da simbiose, ao
longo dos estdios sucessionais do hospedeiro (Figura 8).

20

Tipo de crescimento
Ca
Pe
rs
du
ist
Pe
ci
en
re
f
ne
te
lia

10

Tipo:
Arum
Paris
Intermedirio
Ausente

A
nu
al

Nmero de plantas

0
Pioneiros

Sucesso
inicial

Sucesso
tardia

Grupos de sucesso

0% 20% 40% 60% 80% 100

%
Proporo de espcies de plantas

Figura 8 Diagrama sugerindo a distribuio dos morfotipos de FMA entre tipos de

espcies vegetais e sua sucesso, de acordo com Ahulu et al., 2005.
3.3 Hifas extraradiculares

O comprimento de hifas extraradiculares expresso por unidade de massa ou

volume do solo ou ainda por unidade de comprimento de raiz colonizada. A extenso e
impacto das FMA sobre o volume do solo varia principalmente com as caractersticas
radiculares e de textura do solo sendo que razes mais finas tendem a induzir maiores
comprimentos de hifa (Figura 7). Por exemplo em razes de Lolium perene
(monocotiledonea com razes fibrosas e nveis elevados de colonizao micorrzica),
observou-se 14 metros de hifas (m) de FMA . g solo-1 mas apenas 1 m hifas . m de raiz
colonizada-1. Por outro lado, razes de Trifolium repens (leguminosa trevo, com razes
bem mais grossas) induziu a produo de 3 m de hifas. g de solo-1 e 46 m hifas. m de raiz
colonizada-1 (Tisdall & Oades, 1979). Normalmente, em condies de campo, observa-se

21

maiores valores de hifas em solos sob pastagem bem conduzidas onde a perturbao
mnima e o solo est coberto permanentemente.

Figura 9 Raiz de Trifolium repens colonizada por Gigaspora margarita. Barra 250 m.
(fotografia de Souza, no publicada).

Para fungos ectomicorrzicos, devido s dificuldades em distinguir-se suas hifas das

de fungos saprofticos, os resultados obtidos so incertos variando de 30-8000 m hifas . m-1
raiz ou 3 600 m. g solo-1. Finlay & Soderstrom (1989) encontraram, a partir de
correlaes entre micomassa e respirao, valores de 200 m. g solo-1 sob floresta de
conferas o que um valor mdio em relao aos determinados em microcosmos (Leake et
al., 2001). De qualquer forma, pelas caractersticas do fungo ectomicorrzico que graas a
sua exuberante micomassa desloca maiores quantidades de C da planta que FMA, os
valores devem ser superiores aos encontrados para FMA.

22

4. CLASSIFICAO E NOMENCLATURA
A taxonomia deste grupo de fungos vem sendo alterada significativamente.
Gerdemann & Trappe (1974) propuseram a primeira classificao dos fungos MA. Estes
pesquisadores utilizaram parmetros morfolgicos para agrupa-los na ordem Endogonales
(Zigomicota), gnero Endogone. Posteriormente, Morton & Benny (1990) utilizaram
cladstica para analisar parmetros morfolgicos e formular uma nova classificao, onde
os fungos MA foram reclassificados em uma nova ordem chamada Glomales, composta por
duas sub ordens Glominea e Gigasporineae. Esta ordem exclua o gnero Endogone que
forma ectomicorrizas. No entanto, o filo Zigomicota no refletia adequadamente a filogenia
dos fungos MA. Em 1998, Cavalier-Smith criou a classe Glomeromicetos para englobar os
fungos MA dentro do filo Zigomicota. Morton (1999) lanou uma hiptese na qual os
fungos MA teriam uma origem polifiltica, contrariando evidncias moleculares que
indicavam claramente que os fungos MA constituam um grupo monofiltico e que
Acaulosporaceae era filogeneticamente prxima famlia Gigasporaceae e no a
Glomeraceae (Simon et al., 1993a; Simon 1996).
Morton e colaboradores, com base na anlise filogentica de seqncia de DNA da
sub unidade menor do gene ribossomal (SSU rDNA), verificaram que seqncias
pertencentes a espcies do gnero Sclerocystes agrupavam junto com espcies de Glomus.
Estes autores reclassificaram ento todas as espcies descritas como Sclerocystes para o
gnero Glomus (Morton et al., 2000). No ano seguinte, Morton & Redecker (2001)
propuseram duas novas famlias (Paraglomeraceae e Archaeosporaceae, e seus respectivos
gneros Paraglomus e Archeospora) com base em caracteres morfolgicos e moleculares
(SSU rDNA). Estas famlias so consideradas linhagens ancestrais dos fungos MA. No

23

mesmo ano, Schwarzott et al. (2001) propuseram, com base na anlise filogentica de
seqncia do SSU rDNA, a polifilia do gnero Glomus, o gnero com maior nmero de
espcies descritas. Estes autores agruparam as espcies do gnero Glomus em trs grupos
denominados A, B e C. Espcies no grupo C foram posteriormente reclassificadas para o
gnero Diversispora (Walker et al., 2004) Ainda em 2001, Schler e colaboradores (2001)
propuseram, com base na anlise filogentica de seqncia SSU rDNA, a criao do filo
Glomeromicota, o qual agrupa todos os fungos MA e o fungo Geosiphon pyriformis
(Tabela 1). Esta anlise confirma que os fungos MA formam um grupo monofiltico e
sugere que estes fungos compartilham o mesmo ancestral que os Basidiomicetos e
Ascomicetos, e no com Zigomicota que forma um grupamento artificial.
Recentemente, a famlia Pacisporaceae e o gnero Pacispora foram propostos (Oehl
& Sieverding, 2004) com base em uma nova descrio da espcies Glomus scinthillans e da
descoberta de novas espcies com caractersticas morfolgicas similares (Walker et al.,
2004), com aspectos de Glomoides (vesculas e hifa de sustentao) e com caractersticas
encontradas em Acaulosporaceae e Scutellospora (paredes internas flexveis e escudo de
germinao ou orbe). Estas evidncias morfolgicas fortaleceram a criao da ordem
Diversisporales que foi criada exclusivamente com base na anlise filogentica do SSU
rDNA. Ela indica que caractersticas ligadas presena de paredes flexveis e estrutura de
germinao com formao de escudo ou orbe, so homologas entre Pacispora,
Acaulosporaceae (Acaulospora e Entrophospora) e Scutellospora. Buscando evidncias, de
Souza e colaboradores fizeram uma avaliao filogentica do gnero Scutellospora
comparando resultados da anlise filogentica baseada em seqncias do SSU rDNA com a
anlise morfolgica baseada no padro de desenvolvimento ontognico de esporos. A
anlise indicou que para algumas espcies o padro morfolgico no coincide com o
24

molecular, ou seja, espcies com padro de paredes similares agruparam separadamente na

anlise molecular. Este resultado sugere que apesar destas caractersticas morfolgicas
serem teis para diferenciar espcies os agrupamentos feitos com base nestes critrios
podem no ser adequados para reconstruir a filogenia deste grupo (de Souza et al., 2005b).
Por outro lado, a anlise filogentica baseada em um s gene tambm deve ser
analisada com cuidado, visto que a evoluo de genes nem sempre segue o processo de
especiao. No caso dos fungos MA a anlise de outros genes como beta tubulina (Corradi
et al., 2004), fator de elongamento alfa 1 (Helgason et al., 2003), tem comprovado o carter
monofiltico dos fungos MA, mas a posio do grupo ainda continua incerta. A anlise
parcial do Fator de elongamento 1 alfa aponta os Zigomicota como grupo irm (Helgason et
al., 2003). J Corradi e colaboradores verificaram que pela anlise dos genes da Beta
tubulina, Glomeromicota se coloca como um grupo prximo ao Chitridiomicota, que
engloba linhagens ancestrais dos fungos. Atualmente o projeto AFToL (Assembling the
Fungal Tree of Life, Lutzoni et al., 2004) est sequenciando um conjunto de genes
cromossomais e mitocondriais de representantes de todos os grupos de fungos conhecidos
visando aprimorar a filogenia dos fungos.

25

Tabela 1. Ordens, famlias e gneros pertencentes diviso Glomeromycota e distribuio

de espcies por gnero.
Nmero de
Ordem

Famlia

Gneros

espcies
descritas *

Diversisporales

Diversisporaceae

Diversispora

Gigasporaceae

Gigaspora

Scutellospora

32

Pacisporaceae

Pacispora **

Acaulosporaceae

Acaulospora

33

Entrophospora

Glomerales

Glomeraceae

Glomus ***

104

Archaeosporales

Archaeosporaceae

Archaeospora

Geosiphonaceae

Geosiphon****

Paraglomeraceae

Paraglomus

Paraglomerales
Total:

10

197

(*) O nmero total de espcies inclui sinonmias.

(**) Recentemente a famlia Pacisporaceae e o genero Pacispora foram propostos
para acomodar espcies semelhantes Glomus, bem como novas espcies que partilham
germinao e caractersticas internas da parede e apresentam aspectos moleculares que as
vincula a espcies de Scutellospora e Acaulosporaceae (Oehl & Sieverding, 2004; Walker
et al., 2004). Pacispora foi descrita na famlia Glomeraceae (Oehl & Sieverding, 2004), e
reclassificado na ordem Diversisporales, com base em resultados morfolgicos, citolgicos
e moleculares (Walker et al., 2004).
(***) O gnero Glomus polifiltico e foi dividido em Glomus grupos A, B e C
(Schwarzott et al., 2001). Glomus grupo C pertence agora ao gnero Diversispora, ordem
Diversisporales.

26

(****) Geosiphon no forma micorriza arbuscular. Esta espcie estabelece simbiose

mutualstica com cianobactrias, sendo considerada uma possvel precursora da simbiose
micorrzica.
A taxonomia molecular tem sido muito til para elucidar a filogenia dos fungos MA
ao nvel de sub-gnero ou nveis superiores. No entanto, pouco tem sido feito para a
diferenciao de espcies. Isto se deve principalmente a dificuldades em se multiplicar o
fungo em cultura pura. O sistema tradicional de vasos de cultivo no garante a ausncia de
contaminantes em esporos que podem ser de outros fungos como Ascomicetos (Schler,
1999; Fonseca et al., 2001) ou mesmo outros fungos MA. Alm disso, vrias bactrias so
comumente encontradas no citoplasma de fungos MA. Inclusive reconhecida uma
endosimbiose entre bactrias do gnero e espcie nova Candidatus Glomeribacter
gisporararum e esporos de diversas espcies da famlia Gigasporaceae (Bianciotto et al
2003). Outra caracterstica que dificulta a anlise de fungos MA ao nvel de espcies o
alto grau de polimorfismo entre genes encontrados em um mesmo fungo (esporo).
Recentemente esta caracterstica foi utilizada para diferenciar espcies ou at isolados do
gnero Gigaspora, parece ser promissora para diferenciar espcies de outros gneros
tambm (Figura 8, de Souza dados no publicados).

27

Figura 10 Identificao de espcies de Gigaspora atravs da diferenciao do

polimorfismo inter e intra especfico entre cpias do rDNA pela tcnica do PCRDGGE (Denaturing Gradiente Gel Electrophoresis). Dendrograma mostrando a
similaridade (Jaccard - UPGMA) entre perfis de bandas de PCR-DGGE de 48
estirpes de Gigaspora e dois perfis divergentes encontrados em esporos das culturas
das estirpes Gi. albida CL151 e Gi. margarita UFLA36. A escala indica a
similaridade entre os perfis de bandas, e linhas tracejadas indicam separao entre
os grupamentos principais, barra nos grupamentos indica faixa de erro. Nmeros
indicam o fator cofentico de correlao (Modificado de Souza et al., 2004).
5. Fungos MA como determinantes da diversidade de plantas
28

Estudos conduzidos em condies controladas indicam que a resposta em

crescimento da planta inoculada depende da compatibilidade gentica e funcional entre a
espcie vegetal e a estirpe do fungo utilizada, bem como das condies ambientais
vigentes, como tipo de solo, pH e disponibilidade de nutrientes em especial o P. Alm
destas variveis, em condies naturais onde mais do que uma espcie de fungo coloniza
simultaneamente razes da planta hospedeira, os benefcios da simbiose micorrzica
dependero da comunidade de fungos presentes e da competio que se estabelece entre
eles conforme discutido na Figura 9.

Planta A

Fungo a

Planta B

Fungo b

Figura 11 - Coexistncia hipottica entre duas espcies de plantas, uma com folhas escura
(A) e a outra com folhas claras (B). O fungo a favorece o crescimento da planta A
que passa a dominar a comunidade vegetal. Assim manejos que favoream a
manuteno do fungo a promovero a excluso da planta B (Modificado de van der
Heijden 2001).

29

Um experimento clssico conduzido em microcosmos por Marcel van der Heijden e

colaboradores ilustra bem os efeitos deste tipo de interao sobre o desenvolvimento de
comunidades de plantas. Para conduo do experimento foram isolados quatro espcies de
fungos MA e 11 espcies de plantas autctones de uma pastagem temperada em solo
calcreo na Europa. A manipulao da diversidade de fungos MA resultou em profundas
modificaes na diversidade da comunidade de plantas enquanto os tratamentos com maior
diversidade fngica resultaram tambm em maior diversidade de plantas (van der Heijden
et al., 1998a).
Em sntese, fungos micorrzicos arbusculares causam impactos que vo desde suas
relaes com plantas (processos de absoro de nutrientes), com comunidades vegetais
(influenciando em sua diversidade e abundncia) e finalmente, com processos relacionados
estabilidade de ecossistemas, ao participarem de forma ativa e significante na dinmica do
C e agregao do solo, conforme ainda enfatizaremos neste captulo. Assim, percebida no
apenas na perspectiva da planta, mas do solo em suas mltiplas relaes, MA so hoje
reconhecidos como um componente integral e fundamental na construo e estabilidade de
ecossistemas de todo o planeta (van der Heijden et al., 1998a; van der Heijden et al.,
1998b; van der Heijden et al., 2003).
6. MICORRIZAS E A DINMICA DO CARBONO
O ciclo do carbono orgnico do solo um componente fundamental de ecossistemas
terrestres sendo um dos elementos reguladores dos fluxos de gases entre a biosfera e a
atmosfera. Os principais elementos definidores da magnitude e rapidez deste ciclo so a
relao entre a produtividade primria e a distribuio do carbono entre a parte area e as
razes, com os processos de mineralizao e imobilizao (Brady, 1989). Um dos
30

indicadores utilizados para determinar-se a eficincia deste processo a biomassa

microbiana e sua atividade. O quanto de C drenado direta ou indiretamente da atmosfera
pelas funes microbianas incerto mas certamente depende de variveis como o a
estrutura da cobertura vegetal, manejo, quantidade e qualidade da matria orgnica
adicionada, clima e fatores edficos. No por acaso, as mesmas variveis que regulam a
abundncia, riqueza e atividade de FMA (Lovelock & Ewel, 2005).
Fungos micorrzicos so um importante componente do ciclo do C no solo devido a
sua direta influncia sobre: (a) a produtividade primria graas ao seu impacto na absoro
de nutrientes e gua por plantas; (b) a estabilidade de agregados do solo e; (c) por sua
imensa biomassa e produo de Glomalinas (Zhu & Miller, 2003) protenas de alta
estabilidade produzida por hifas de FMA conforme discutido no prximo item. Apesar do
impacto evidente, poucos so os estudos, em especial em sistemas tropicais, sobre o papel
destes organismos no ciclo do C. Fungos micorrzicos so fontes (graas a sua respirao e
a de aumentos na taxa respirao da raiz colonizada) ou, bem mais provvel, dreno (devido
sua imensa biomassa, produo de glomalinas e modificaes na produtividade primria)
de C da atmosfera? Em qual escala e como este balano pode ser mediado pelo ambiente e
manejo?
Estudos diversos usando 14C tm demonstrado que fotossintetatos so deslocados da
parte area s hifas poucas horas aps este elemento ter sido marcado (Bucking & ShacharHill, 2005). Estes resultados confirmam que FMA so dreno importante de C da planta
podendo impor perdas de at 20% do C fixado pelo simbionte autotrfico. Como resposta
da planta ao dreno imposto pelo sistema micorrzico, ocorrem aumentos significativos de
sua taxa fotossinttica ocasionando aumentos no potencial da produtividade primria e
dreno de C da atmosfera (Jakobsen et al., 2002). Estima-se que, globalmente, FMA possam
31

ser responsveis pelo dreno anual de 5 bilhes de toneladas de C aos solos (Bago et al.,
2000). As consequncias deste fenmeno so ainda desconhecidas, seja nas propriedades
do solo, seja em escala global, nas relaes referentes s mudanas globais e o papel desta
simbiose no sequestro de C da atmosfera. Pode-se especular sobre a necessidade em
ampliar-se as linhas de investigao das AM para alm de seus aspectos nutricionais.
Fungos micorrzicos podem portanto serem considerados canais de drenagem do C
da atmosfera para o solo, via planta, por terem acesso direto fontes de carbono da planta.
Esta caracterstica os diferenciam de boa parte dos microorganismos saprfitas que
adquirem acares (energia) a partir de fontes diversas e espacialmente limitadas. Estes
organismos so energizados por uma quantidade e qualidade de fontes orgnicas
praticamente ilimitadas, desde que haja plantas metabolicamente ativas sendo colonizadas.
Esta vantagem competitiva lhes confere uma significativa parcela da biomassa microbiana
presente no solo (Bago et al., 2000; Graham 2000). Entretanto, alguns mtodos tradicionais
de quantificao da biomassa microbiana baseada na tcnica de respirao induzida pelo
substrato no conseguem detectar essa imensa contribuio micorrzica por duas razes:
Os mtodos discriminam contra a deteco da biomassa micelial. Isso porque a
tcnica da respirao induzida (Anderson & Domsch, 1978) aplicada amostras de terra
destorroadas e peneiradas. Neste processo hifas micorrzicas so fragmentadas e suas
coneces s plantas, ou seja, sua nica fonte de C, destrudas. Como consequncia, a
induo por adio de sacarose ao substrato indiferente ao fungo uma vez que este
incapaz de mobilizar aucares que no sejam os deslocados por plantas. Desta maneira,
como FMA no conseguem mobilizar fontes externas de aucares, sendo dependentes
obrigatrios da planta para este fim, o mtodo subestima a contribuio fngica;

32

Os mtodos de fumigao Voroney & Winter (1993), da mesma forma, apenas

conseguem detectar a atividade de FMA se as anlises forem realizadas aps poucas horas
da coleta.
A insensibilidade destes mtodos em detectar a biomassa de hifas de FMA intactas,
coloca em dvida os resultados quantitativos obtidos para biomassa microbiana (Leake et
al., 2004) e os cuidados em se considerar este atributo como indicador da fertilidade
biolgica do solo. Apenas hifas extraradiculares podem contribuir com at 30% da
biomassa total do solo em sistemas agropastoris (Hamel et al., 1991; Miller & Kling, 2000;
Olsson & Wilhelmsson, 2000). Os valores de biomassa microbiana encontrados na
literatura provavelmente esto subestimados.
A biomassa de fungos micorrzicos, no deve ser desconsiderada. Apesar de boa
parte do C transferido ao fungo retornar atmosfera via respirao, cerca de 25% deste C
pode ser acumulado apenas no miclio extraradicular o qual pode representar 90% da
biomassa de hifas do FMA (Olsson et al., 1999). O miclio intraradicular por sua vez,
corresponde a 3-20% do peso das razes (Smith & Read, 1997). Considerando-se a
biomassa micelial, desconsiderando-se esporos, vesculas ou clulas auxiliares, podem ser
encontrados valores de biomassa prximos aos do prprio sistema radicular. Extenses
superiores a 70 m de hifas por grama de solo j foram registrados em solos sob pastagem.
Em solos tropicais estes valores so em geral menores (30-50 m hifas g-1 solo) talvez
devido maior taxa de ciclagem ou acidez (van Aarle et al., 2002; 2003). Considerando-se
que mais de 50% do comprimento de hifas no solo advenham de fungos micorrzicos
(Rillig et al., 2002), correspondendo a 0,03 0,5 mg g-1 em peso seco de hifas extraradiculares, conclumos que FMA representam uma grande e funcionalmente significativa
parcela da biomassa microbiana, podendo, apenas as hifas extraradiculares, chegar a 1
33

tonelada ha-1, considerando-se os 20 cm iniciais do perfil. Ainda mais, se o solo no for

perturbado e os agregados mantidos intactos, a meia vida de hifas, ricas em quitina, uma
molcula recalcitrante e de difcil decomposio, pode chegar a 25 anos (Rillig et al.,
2001).
Hifas so, portanto, um importante reservatrio de C no solo, ainda no
incorporados nos estudos de sua ciclagem. Outro dreno no desprezvel, so os prprios
esporos. Em condies controladas, em placas de Petri contendo razes transformadas,
pode-se observar mais de 40.000 esporos (ver Figura 3). Portanto, no existe
constrangimento, sob o ponto de vista gentico (da planta ou do fungo), na produo de
imensas quantidades de propgulos fngicos. Como de 45% a 95% do pool de C em
esporos constitudo por lipdeos, pode-se concluir que estas estruturas so potencialmente
um importante dreno de C garantido pelos simbiontes autotrficos em algumas situaes
ainda mais significantes que o encontrado em hifas (Bago 2000).

6.1 Glomalina
A contribuio das hifas extraradiculares no se limita sua biomassa ou
aumentos na capacidade de plantas em mobilizar nutrientes. Estas so caractersticas
clssicas e fundamentais na simbiose micorrzica. Entretanto, o miclio externo tambm
responsvel pela exsudao (ou incorporao em suas paredes celulares bem como de
esporos) de glicoproteinas hidrofbicas chamadas glomalinas. Estas protenas muito
provavelmente so produzidas por FMA uma vez que em sua ausncia, glomalinas no so
encontradas (Leake et al.,2004). Elas apresentam alta estabilidade no solo podendo
permanecer 42 anos at sua mineralizao completa, perodo bem superior aos de hifas, que
no ultrapassa 5-7 dias (Rillig et al., 2001; Zhu & Miller, 2003) ou razes que variam de 10
34

dias at morte da planta arbrea (Fitter & Moyersoen, 1996). Glomalinas constituem-se
em um importante componente do Corg do solo podendo atingir 1.45 Mg C.ha-1 em
florestas tropicais apenas nos 10 cm do perfil, se estabilizando em geral na frao argila
(Lovelock et al., 2004). A funo das glomalinas incerto, entretanto provvel que elas
tenham impacto sobre a construo de nichos ao promover a agregao do solo e sua
estruturao com a consequente reduo dos processos erosivos. Desta forma, apesar de
estudos de hifas fngicas intraradiculares absorverem maior ateno graas a sua maior
facilidade e ao interesse nos mecanismos de transferncia de nutrientes, so as hifas
extraradiculares que atuam diretamente sobre atributos relacionados qualidade do solo,
entendida como expresso de um conjunto de processos que estimulam ganhos de
produtividade sem prejuzo das funes nele realizadas, conforme diagrama da Figura 10.
Isso porque, como j mencionado, estas estruturas ultrapassam em muito o espao
rizosfrico, mobilizam nutrientes para bem alm da zona de depleo, produzem uma srie
de compostos quelantes (uma das quais, glomalinas), clulas mortas que interagem com
outros organismos criando uma hifosfera com uma bem caracterstica e particular
comunidade microbiana. Bactrias especficas, no encontradas na rizosfera, interagem
com glomalinas ampliando o efeito rizosfrico criando uma micorrizosfera, com
propriedades prprias (Vancura et al., 1990; Bomberg et al., 2003). Se, alm destas
qualidades, considerarmos a influncia de hifas extraradiculares nos processos de
agregao do solo, a concluso de que FMA so um fundamental indicador de qualidade de
manejo e cobertura do solo, torna-se emblemtica.
Considera-se a agregao do solo como a forma em que partculas e poros se
distribuem no solo. Ela influenciada pela ao da biota (em especial bactrias e fungos em
geral) e atividade de cargas superficiais em um contexto de secagem e humidecimento do
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solo (Brady, 1989). O papel dos FMA, em particular, no , via de regra, considerado ou
menos ainda, dimensionado. No sabemos qual sua contribuio neste processo:
secundrio ou absolutamente fundamental? Alguns estudos indicam que a importncia de
FMA similar ao das razes enquanto outros apontam que hifas extraradiculares so o
elemento mais importante dentre todos os que atuam neste processo com bvias
implicaes na capacidade de armazenamento de gua (Thomas et al., 1993; Jastrow et al.,
1998). Se assim, quais so os mecanismos que permitem ao FMA esta ao, tanto sobre a
agregao quanto sobre sua estabilidade? Provavelmente so dois: um fsico, com hifas
extraradiculares envolvendo e enovelando partculas minerais e orgnicas do solo e, outro,
quelante, graas ao de glomalinas.
Em estudos realizados em um gradiente de textura e classes de solos, comprovou-se
que existe forte e positiva correlao entre estabilidade de agregados com a quantidade de
glomalinas no solo (Wright & Upadhyaya, 1998). Percebeu-se tambm que estas protenas
ficam estocadas dentro destes agregados, protegidos ento dos processos de mineralizao.
Desta forma, glomalinas representam uma forma estvel de armazenar C no solo (Rillig
2004). Pelo exposto, clara a necessidade de criar-se condies que apontem para o
aumento da produo destes metablitos. Sabe-se que o manejo (em especial a
mecanizao), a diversidade da cobertura vegetal alm de variveis fsicas e qumicas do
solo, controlam a produo de glomalinas. Sistemas que estimulem a produo de hifas
extraradiculares devem tambm induzir a sntese destas molculas apesar de resultados
iniciais serem contraditrios (Piotrovsky et al., 2004). Em solos agrcolas, a quantidade de
glomalina detectada baixa em relao aos encontrados sob pastagem ou florestas. Isso
porque com o revolvimento e compactao do solo, a rede micelial destroada e, com
isso, a produo de glomalinas diminui drasticamente (Figura 10).
36

Figura 12 - Diagrama indicando as mltiplas funes desempenhadas pelos FMA, seja

sobre funes do solo, seja sobre a comunidade de espcies vegetais (Zhu & Miller
2003).

Existe necessidade de ampliar-se os estudos em condies tropicais sobre o impacto

destas glicoproteinas sobre o pool do C, agregao e estabilidade, bem como da relao
glomalina FMA, ainda no definida.

37

7. NUTRIO MINERAL
Daremos nfase na nutrio fosfatada pelo seu maior impacto sobre plantas
hospedeiras apesar de estudos com inoculao com FMA tambm ocasionarem, via de
regra, aumentos tanto na taxa de crescimento como nos nveis de Cu, Mg e Zn, no por
acaso, todos elementos pouco mveis no solo. Micorrzas arbusculares so reconhecidas
por sua habilidade em estimular o crescimento de plantas principalmente atravs do
incremento na absoro de nutrientes em geral, P em especial. Ryan e colaboradores (2003)
identificaram nveis elevados de nutrientes em hifas intraradicais. Os nveis de P variaram
de 60 170 mM, apesar de valores como 600 mM terem sido detectados. Estes valores
correlacionaram-se fortemente com os de K, com cerca de 350 mM, e Mg, com 175 mM.
Muito pouco Ca foi detectado. Os nveis de P em arbsculos ativos variou de 30 50 mM
enquanto os nveis de potssio foram de 100 mM. Estes elevados valores so muito
superiores aos encontrados em solos ou mesmo em tecidos vegetais, confirmando a
capacidade de FMA na absoro e acumulao de elementos minerais.
Fsforo um macronutriente presente no solo em baixas concentraes,
normalmente em nveis inferiores a 1 M de fsforo disponvel, e pouco mvel em solos
intemperizados, como so os tropicais. So nestas condies que as AM assumem um papel
determinante na sobrevivncia de diversas espcies vegetais, incapazes de mobilizar este
elemento. No que FMA no absorvam nitrognio por exemplo. Absorvem e em nveis
superiores aos de P (Gamper et al., 2004). Entretanto, a planta no necessita do FMA para
sua nutrio nitrogenada pois seu prprio sistema radicular capaz de absorve-lo, visto que
apresenta grande mobilidade no solo. Alm disso, P um nutriente estrutural na
constituio de cidos nucleicos, fosfolipdeos bem como de diversas enzimas (Lehninger

38

et al., 1989). Est envolvido diretamente nos processos de fosforilao e portanto no

metabolismo energtico, na transduo de sinais e regulao da atividade celular. Sua falta
ocasiona significante declnio no contedo de ATP (-74%) e ADP (-91%) bem como dos
nveis de enzimas (Duff et al., 1989). Portanto, a manuteno da homeostasis celular deste
elemento central para organismos em geral e plantas tropicais desenvolvidas em solos de
baixa fertilidade em particular.
Como a taxa de absoro e transporte de Pi por razes maior que sua taxa de
difuso no solo, uma zona de depleo formada, resultando em uma zona de esgotamento
para este elemento ainda no ambiente rizosfrico. Desta forma, a planta, em sua evoluo,
desenvolveu mecanismos de captura deste elemento para alm desta zona, atravs das MA
(Figura 11).
Os aumentos na taxa de absoro do P propiciados pelas MA podem ser atribudos
a:
Aumento do volume de solo explorado pelas hifas extra-radiculares do fungo
arbuscular;
O pequeno dimetro da hifa, o que a permite explorar espaos do volume do solo
inatingveis pela raiz;
Maiores taxas de influxo por unidade de superfcie;
A formao de polifosfatos, molculas orgnicas sintetizadas pelo fungo AM ricas
em P, as quais acarretam a diminuio da concentrao de P inorgnico no interior das hifas
com o concomitante acumulo de P em condies de alta disponibilidade deste elemento,
com sua remobilizao em condies de estresse permitindo, assim, um fluxo contnuo ao
hospedeiro;

39

Produo de enzimas como fosfatases que catalisam a liberao de P dos complexos

orgnicos; permitindo sua absoro na forma inica pelas plantas nas unidades arbusculares
(Marschner & Dell, 1994).

Figura 13 - Estrutura das hifas intra-radicular, arbsculos e vesculas, e extra-radicular com

hifas ultrapassando a zona de depleo de Pi. Como se pode constatar (grfico) a
taxa de absoro de Pi maior que a sua taxa de difuso no solo.

O aumento da nutrio de P em plantas colonizadas ocasionar ento: (a) aumentos

no crescimento e atividade fotossinttica; (b) aumentos na taxa de transferncia de
carboidratos para as razes e (c) aumentos no seu efluxo ao apoplasto, em direo ao dreno
imposto pelo fungo micorrzico (Bucking & Shachar-Hill, 2005). Devido ao aumento da
absoro de P (e em menor escala Zn), o pH da rizosfera normalmente cai na presena de
FMA, o que leva a aumentos da solubilidade de P no solo (Mohammad et al., 2004).

40

Como outros nutrientes, fosfato absorvido de forma seletiva contra um gradiente

de potencial eletroqumico partindo de nveis no solo da ordem de micromolar, para mais
de 1000 vezes estes valores no interior da clula. Este processo de absoro portanto
energeticamente dependente dos transportadores de P (simporte) e da ao das H+-ATPases
(Figura 12). Recentemente alguns destes transportadores foram identificados. Estudos
realizados por Smith et al. (2003 e 2004), demonstram que os transportadores de fosfato
envolvidos na sua absoro por razes, so distintos dos envolvidos pela absoro por razes
colonizadas. Este resultado sugere h regulao gentica dos mecanismos de transporte de
Pi em sistemas AM e que esta regulao controlada diretamente pelo fungo pois sabe-se
que genes que codificam para estes transportadores, apenas so expressos na presena do
fungo simbionte (Karandashov & Bucher, 2005).

Figura 14 Clulas arbusculares de Lunularia cruciata (L.) Lindb. com diagrama

indicando a transferncia de fosfato (Pi) e estruturas de carbono atravs da interface
micorrzica. Em circulos fechados H+-ATPases e transportadores secundrios j
identificados. Circulos abertos indicam modelos hipotticos de transferncia de
metablitos ou Pi (modificado de (Ferrol et al., 2002). Barra 10m. Fotografia
Fonseca & Berbara, no publicada.

41

Como no existe conexo simplstica entre os simbiontes, nutrientes e fosfato

devem ser absorvidos via apoplasto (Rausch et al., 2001). provvel que ocorram
transferncias passivas tanto de Pi como de carboidratos atravs da plasmalema de ambos
os simbiontes, ao apoplasto matricial (que separa as membranas dos simbiontes) e,
posteriormente, ativamente absorvidas graas a ao de bombas H+-ATPases. Modelos
originais propunham o que seria mais plausvel: a existncia de transportadores acoplados
de carboidratos fosfato (Schwab et al., 1991; Smith et al., 1994) apesar de Nehls et al.
(2001), terem identificado transportadores independentes para P e carboidratos em
associaes ectomicorrizicas. Estudos com plantas sob limitaes fotossintticas, mostram
diminuies nos efeitos benficos do fungo arbuscular devido, provavelmente,
competio por carboidratos (Son & Smith, 1988). Nesta linha, (Bucking & Shachar-Hill,
2005) um estudo com razes transformadas e em placas dividas, demonstrou que aumentos
na oferta de carboidratos, em especial sacarose, estimulam o transporte de C atravs da
interface micorrzica, em direo ao simbionte fngico. Neste momento, carboidratos
diversos (monosacarideos, di-sacarideos ou poli-sacardeos), exudados pela raiz, seriam
hidrolisadas por invertases presentes no apoplasto, em hexoses, principalmente, estruturas
que podem ser absorvidas pelo FMA (Bago et al., 2000). Como a atividade da invertase
pH dependente, deve-se incrementar a ao das H+-ATPases as quais, no por acaso, tem
sua expresso genica ativada tanto pela infeco micorrzica como pela concentrao de
sacarose (Blee & Anderson, 2002), de acordo com o modelo proposto na Figura 12.
Provavelmente MA obtm todo o seu C do ambiente radicular, passivamente
deslocado pelas razes em favor de um gradiente de concentrao. Nas razes, FMA
polimerizam os aucares absorvidos, hexoses principalmente, em trealose e glicognio,
estruturas encontrados em fungos em geral (Bago et al., 2003). fungo. Algumas destas
42

formas de lipdeos podem ento ser deslocadas das hifas intra para as extraradiculares. O
transporte de C de hifas para a planta no tem sido reportada, sendo o transporte de C
considerado unidirecional da planta para as hifas. Os Triacilglicerois (TAG) so outra das
mais importantes formas em que carbono armazenado pelo fungo (Pfeffer et al., 2004).
Entretanto nas hifas, ocorre um rpido fluxo citoplasmtico nos dois sentidos com
deslocamento de recursos de regies fonte para regies dreno dentro no miclio fngico.
Este fluxo tambm responsvel pela movimentao de organelas (Bago et al., 2002; Bago
et al., 2003).

Figura 15 - Modelo de transporte de fosfato indicando stios de transferncia de entre solohifa. esquerda, graas atividade de ATPases, protons (H+) so bombeados, com
gastos de energia (ATP), pela planta. O gradiente de concentrao de protons
gerado por este mecanismo, cria um potencial eletroqumico atravs da membrana.
Este gradiente facilita a movimentacao de Pi atravs de transportadores especficos
(Pnt1) conforme indicado direita (modificado de Karandashov & Bucher, 2005).

provvel que a absoro de Pi pelo FMA e sua transferncia planta seja

estimulada pela transferncia de carbono da planta para o fungo (Bucking, 2004). Frente
43

maior oferta de C, o fungo diminui a sntese de polifosfatases levando a aumentos nos

nveis de Pi citoplasmticos bem como na sua incorporao em fosfolipdeos e Poli P
(Viereck et al., 2004).
Pi ativamente absorvido por hifas extra-radiculares e metabolizado em cidos
nucleicos, fosfolipdeos e outras molculas fosforiladas, bem como condensadas em
molculas de polifosfatos (poliP). Polifosfatos so polmeros ricos em fosfatos e presentes
em diversos organismos, como bactrias, fungos, plantas e animais superiores (BjmBRASIL). Em fungos micorrzicos arbusculares, os poliP so armazenados em hifas intra e
extraradiculares, bem como em esporos, e so centrais no metabolismo do fosfato. Aps
absoro de Pi por hifas, poliP so sintetizados antes mesmo de serem detectados em
vacolos (Viereck et al., 2004) denotando a importncia desta via metablica no
armazenamento de fosfato em estruturas moleculares capazes de concentrar grandes
quantidades de Pi. Pode-se especular que a rapidez e a quantidade com que poli P
sintetizado e armazenado tem como objetivo manter seja o dreno de Pi do solo pelo fungo
inalterado, seja a transferncia de Pi raiz. Eventualmente estas molculas so deslocadas
ao espao intra-radicular, hidrolisados em Pi e, finalmente, deslocados ao apoplasto e
clulas vegetais, devido ao dreno imposto pela planta (Karandashov & Bucher, 2005).
A hidrlise do Poli P provavelmente ocorre nas hifas intra-radiculares e no no
apoplasto ou menos ainda nas clulas vegetais uma vez que plantas no absorvem poliP,
mas Pi (Ohtomo et al., 2004). Esta hidrlise intracelular induziria a incrementos no Pi do
citoplasma fngico levando ao seu transporte em direo ao apoplasto interfacial. A
passagem de fosfato atravs da plasmalema fngica seria portanto passiva em favor de um
gradiente de concentrao. Sua passagem pela matriz micorrzica pode se dar por canais ou
transportadores inicos. Finalmente, o fosfato liberado transferido s clulas corticais
44

atravs de transportadores de fosfato, conforme j discutido. Bucking (2004) sugere que as

trocas de C por P estejam efetivamente acopladas conforme a Figura 10. Assim, a absoro
de P pelo fungo e sua transferncia planta, estaria diretamente associada disponibilidade
de C ao fungo micorrzico.
Da mesma forma que para Pi, FMA absorvem e deslocam plantas significantes
quantidades de Nitrognio seja na forma de amonia seja na de nitrato. As enzimas de
assimilao de N esto presentes tanto em razes como em estruturas do FMA. Este
elemento pode ser acumulado em fungos, o que garante gradientes de concentrao entre o
espao extra e intracelular bem como entre clulas do cortex (Jolicoeur et al., 2002).
Os pools gerados pelo acumulo de P na forma de PoliP / Pi e de N, na forma de
distintos amino cidos, NH4+ ou NO3-, tanto em clulas corticais como em hifas, produzem
gradientes que so percebidos pelos simbiontes provavelmente no espao arbuscular.
Estudos realizados por Jolicoeur et al. 2002, demonstram que os nveis de Pi (e
possivelmente outros nutrientes) alm de acares intracelulares regulam a orientao do
fungo em produzir hifas ou cessar seu crescimento. comum observar o incremento no
nmero de esporos de algumas espcies de FMA conforme avana o desenvolvimento das
razes (Berbara e de Souza, observaes pessoais). Estudos de (Declerck et al., 2001) em
meio de cultura utilizando razes transgnicas, confirmam que a produo de esporos segue
uma fase lag, log e estacionria, obedecendo uma curva clssica sigmoide, sugerindo que
este processo obedece uma dinmica similar ao do metabolismo primrio.
8. MANEJO DE FMA
No contexto da nutrio mineral de plantas e otimizao das funes de
ecossistemas, visando aumentos em sua estabilidade e resilincia, considera-se alguns

45

atributos biolgicos como centrais: (a) quantidade e qualidade de razes (finas, terminais,
no-lignificadas e metabolicamente ativas); (b) riqueza e abundncia de organismos como
FMA; (c) bactrias promotoras de crescimento de plantas (incluindo bactrias fixadoras e
solubilizadoras de fosfato) e; (d) minhocas (Hamel et al., 2004; Wardle et al., 2004). Aqui,
considera-se estabilidade como a capacidade que um sistema apresenta para manter
inalteradas suas propriedades frente a um impacto ambiental ou antrpico, enquanto que,
resilincia, como a capacidade de ecossistemas em recuperar suas funes aps sofrer uma
perturbao ou estresse, sendo uma funo do tempo (Lal, 1997). Ambas estas propriedades
so decisivamente influenciadas pelas associaes micorrzicas. Isso porque FMA e
bactrias promotoras de crescimento associadas, relacionam-se estrutura de comunidades
vegetais (ver item 5). Portanto, podem ser manejados juntamente com os tratos culturais.
Outros grupos funcionais, como os da meso-macrofauna, da mesma forma so importantes.
Entretanto, seu manejo bem mais complexo ao no se correlacionarem to rapidamente
com variaes ambientais ou antrpicas (Schloter et al., 2003).
Pelos seus mltiplos impactos, j apontados neste captulo, estratgias de manejo
que incrementem no apenas a diversidade de FMA, mas em especial hifas
extraradiculares, devem ser buscadas mesmo porque, a maioria dos agroecossistemas
apresenta condies no-timas para o funcionamento de FMA. Manejos como
mecanizao excessiva com alta fertilizao do solo, aplicao de pesticidas, rotaes de
cultura com plantas no hospedeiras (ex. Brassicas), poluentes diversos, inclusive orgnicos
com uso excessivo de esterco por exemplo, levam diminuio da otimizao desta
simbiose seja pela reduo da atividade fngica, de sua diversidade ou da produo de hifas
extraradiculares. Considera-se que as chamadas modernas tcnicas de manejo do solo vm
diminuindo sobremaneira no apenas a diversidade, mas a importncia de FMA nas
46

funes j discutidas neste captulo, implicando em quedas na resilincia e estabilidade de

agroecossistemas (Jeffries et al., 2003).
9. CONCLUSES
Os primeiros estudos sobre micorrzas realizados no Brasil por Sacco (1958, 1962),
foram descritivos. Avanou-se desde ento, de maneira gradual, na formao de
pesquisadores que tiveram acertadamente o interesse em estudar o impacto das MA sobre o
desenvolvimento de plantas em solos tropicais. Estes trabalhos foram importantes por
enfatizar seu carter fundamental na sobrevivncia de inmeras espcies vegetais, as quais,
sem esta simbiose para garantir sua nutrio fosfatada, provavelmente no existiriam. Os
novos desafios para a pesquisa nestes ambientes no so menos relevantes. Incorporar este
componente fngico s inmeras funes realizadas pelo solo, relacionadas estabilidade e
resilincia de ecossistemas imperativo (Fitter, 2005).
Apesar de seus mais de 120 anos de estudos, desde as primeiras descries e
hipteses formuladas sobre a funcionalidade das associaes micorrzicas (Trappe, 2005),
suspeitamos que o impacto mais profundo desta simbiose ainda est por ser desvendado. O
esforo pela potencializao das AM em campo, bem como pela gerao de tecnologias a
elas relacionadas, demanda tcnicas de estudo que incorporem protocolos de multiplicao
de FMA, seja em potes, aero ou hidroponia, ou principalmente cultivos in vitro com o uso
de Ri-DNA, razes transformadas (Berbara & Fonseca, 1996) uma formidvel ferramenta
ainda pouco explorada no Brasil. Implica considerar este componente em estudos de longa
durao que busquem detectar no apenas seu impacto sobre o desenvolvimento de uma
planta, mas sobre a magnitude de sua contribuio a eventos globais e estruturao de
comunidades vegetais. Com a perspectiva aberta pelas tecnologia moleculares, temos a

47

oportunidade de entender mecanismos de evoluo de espcies vegetais e da prpria

simbiose. Resta aos investigadores em MA ampliarem seu leque de investigao em um
esforo multidisciplinar, mesmo porque, sem esta abordagem, no compreenderemos a
dimenso completa desta formidvel simbiose.

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71

CAPTULO 4
SOLUES NUTRITIVAS: FORMULAO E APLICAES
Nilton Nlio Cometti 1, Pedro Roberto Furlani2, Hugo Alberto Ruiz3 & Elpdio Incio
Fernandes Filho3
1

Escola Agrotcnica Federal de Colatina - ES, CP 256 Colatina - ES, CEP 29709-910,

www.eafcol.gov.br, 2Pesquisador Cientfico Voluntrio, Bolsista do CNPq Instituto

Agronmico, CP 28, CEP 13.001.970 Campinas - SP: pfurlani@iac.gov.br , 3 Professores do
Departamento de Solos da Universidade Federal de Viosa, CEP 36570-000, Viosa (MG). Emails: hruiz@ufv.br; espidio@ufv.br

SUMRIO

1. INTRODUO

2. COMPOSIO DAS SOLUES NUTRITIVAS

2.1. Composio da soluo nutritiva

2.2. Sais utilizados nas solues

2.3. Exemplo de formulao de soluo nutritiva para a cultura da alface

10

2.4. Concentrao da soluo nutritiva

12

3. MANEJO DA SOLUO

16

3.1. Reposio da soluo

16

3.2. Preparo e utilizao de solues estoque

18

3.3. pH da soluo nutritiva

21

4. ESPECIAO INICA DA SOLUO NUTRITIVA

24

4.1. Fora inica

25

4.2. pH

26

4.3. Quelatos

28

5. ESTUDOS DE CINTICA DE ABSORO DE NUTRIENTES

33

6. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

40

1. INTRODUO
Uma soluo nutritiva pode ser definida como um sistema homogneo onde os nutrientes
necessrios planta esto dispersos, geralmente na forma inica e em propores adequadas.
Alm dos nutrientes, pressupe-se que a soluo nutritiva contenha O2 e esteja na temperatura
ideal para a absoro dos nutrientes. Entretanto, uma soluo nutritiva no composta
inteiramente de elementos em suas formas minerais, puras e simples, onde uma simples anlise
dos elementos seja suficiente para desvendar os segredos de suas frmulas mgicas. A partir
do instante em que a soluo nutritiva colocada em contato com as razes, transforma-se em
uma verdadeira sopa nutritiva, contendo vrios compostos orgnicos provenientes da atividade
microbiana, dos exsudatos das razes e da decomposio de fragmentos de razes. Alm desses,
h resduos do meio de cultivo das mudas, fragmentos do sistema hidropnico e do sistema
hidrulico.
Em qualquer sistema de cultivo sem solo, duas variveis so preponderantes sobre a
produtividade: a ambincia, determinada pelo tipo de proteo das plantas, especialmente a
cobertura com filmes plsticos transparentes e telas de sombreamento; e a soluo nutritiva, que
pode estar livre ou dispersa em um substrato. Em condies normais, todos os nutrientes podem
ser absorvidos da soluo nutritiva pela raiz em quantidades suficientes ao requerimento da
planta. Alm dos nutrientes, O2 e gua so absorvidos diretamente da soluo, enquanto o C
retirado normalmente da atmosfera. Tanto em pesquisas de nutrio mineral de plantas, quanto
na produo de alimentos em sistemas hidropnicos, a soluo nutritiva tem o carter de ser o
objeto e a ferramenta de trabalho e estudo.

2. COMPOSIO DAS SOLUES NUTRITIVAS

A composio da soluo nutritiva tem sido estudada h muitos anos, com relatos de
solues datando de 1865, como a soluo de Knopp (Resh, 2002). Entretanto, somente a partir
3

de 1933 houve preocupao com a elaborao de uma soluo contendo micronutrientes, em

1938, Hoagland & Arnon apresentaram uma soluo nutritiva completa e balanceada para
tomateiro, baseada na composio de plantas cultivadas em vasos com soluo nutritiva
(Hoagland & Arnon, 1950). Em 1957, essa soluo sofreu uma pequena adaptao na relao
NO3-:NH4+ para o valor de 7:1, por Johnson e colaboradores, para manter o pH mais prximo de
cinco. A partir da soluo de Hoagland & Arnon, muitas outras foram desenvolvidas, mas a
tradicional soluo Hoagland permanece como a mais utilizada, por atender adequadamente s
necessidades das culturas.
Admite-se que no exista uma soluo nutritiva ideal para todas as culturas. Desta forma,
a composio da soluo nutritiva varia com uma srie de fatores: a espcie de planta cultivada
(a exigncia nutricional geneticamente controlada), o estdio fenolgico da planta, a poca do
ano (durao do perodo de luz), fatores ambientais (temperatura, umidade e luminosidade) e a
parte da planta colhida e, eventualmente, comercializada. Alm disso, aspectos intrnsecos
soluo alteram sua composio, tais como pH, fora inica, temperatura e presena de
molculas orgnicas, em especial os agentes quelantes.
Diversas solues nutritivas tm sido propostas, havendo diferenas marcantes em
relao s concentraes dos macronutrientes, enquanto que para os micronutrientes, as
diferenas so bem menores (Quadro 1). comum encontrar nos artigos cientficos a soluo
nutritiva modificada de Hoagland, isto , frmulas derivadas da soluo nutritiva proposta por
Hoagland & Arnon. Essa soluo tem sido a mais usada na pesquisa em nutrio mineral de
plantas e constitui a base para a formulao de inmeras solues nutritivas comerciais. As
faixas de concentraes dos nutrientes utilizadas nas solues so muito amplas, variando em at
10 vezes, como no caso do S (Quadro 1).

Quadro 1. Faixas de concentrao encontradas nas solues nutritivas e soluo de Hoagland &
Arnon (1950) modificada.
Nutriente

Faixas de concentrao 1

Massa
atmica

----mg L-1-----

--------mmol L-1------

Hoagland & Arnon

mg L-1

mmol L-1

N-NO3-

14,0

70

- 250

5,00

17,86

196

14,00

N-NH4+

14,0

33

0,00

2,36

14

1,00

31,0

15

80

0,48

2,58

31

1,00

39,1

150

- 400

3,84

10,23

234

5,98

Ca

40,0

70

- 200

1,75

5,00

160

4,00

Mg

24,3

15

80

0,62

3,29

48

1,98

32,0

20

- 200

0,63

6,25

64

2,00

------mol L-1------

mol L-1

10,8

0,1

- 0,6

9,26

55,56

0,5

46,30

Cu

63,5

0,05

- 0,3

0,79

4,72

0,02

0,31

55,8

0,8

14,34

- 107,53

17,92

Mn

54,9

0,5

9,11

36,43

0,5

9,11

Mo

95,9

0,01

- 0,15

0,52

1,56

0,01

0,10

Zn

65,4

0,05

- 0,5

1,53

7,65

0,05

0,76

Cl

35,5

- 188

28,17

- 5.295,77

Adaptado de Barry (1996) e Resh (2002).

Para formular uma soluo nutritiva, importante entender o modo e a velocidade com
que os nutrientes so absorvidos pelas plantas. H vrios sistemas de monitoramento da
concentrao dos ons na soluo nutritiva, incluindo aqueles totalmente automatizados,
compostos de sensores (eletrodos especficos para ons) e computadores para registrar o teor do
nutriente e a necessidade de reposio. Entretanto, esse monitoramento pode ser interessante,
mas no fundamental para a manuteno da soluo adequada ao cultivo hidropnico.

 muito comum verificar a rpida depleo de um nutriente na soluo, enquanto outros

se acumulam, devido s diferentes taxas de absoro. A velocidade de absoro de N, P e K
maior do que dos outros nutrientes, o que pode levar ao rpido esgotamento desses nutrientes e
acmulo de outros, especialmente S e Ca (Figura 1). O mesmo pode ocorrer com
micronutrientes, considerando que o Mn tem alta taxa de absoro em comparao ao B. Assim,
os nutrientes podem ser separados em trs grandes grupos, considerando a velocidade de
absoro (Quadro 2). O conhecimento da velocidade com que um on absorvido pode explicar
porqu, na anlise de uma soluo nutritiva, um nutriente pode estar praticamente ausente,
enquanto outros ainda esto em concentraes adequadas para a cultura, mesmo que as plantas
tenham um crescimento exuberante. Ento, a depleo do nutriente na soluo nutritiva, ao invs
de indicar sua deficincia, pode indicar que as plantas esto saudveis, e que esto absorvendo os
nutrientes rapidamente. Por exemplo, se a concentrao de P for mantida constante na soluo
circulante (0,5 mmol L-1), sua concentrao no tecido poder atingir a 1% da massa seca, valor
trs vezes maior do que o timo para a maioria das plantas, o que pode induzir deficincias de Fe
e Zn (Chaney & Coulomb, 1982). Sendo assim, ao longo do ciclo de um cultivo hidropnico sem
renovao da soluo, os resultados de anlises devem apresentar concentraes estveis dos
nutrientes de absoro lenta (Figura 1 e Quadro 2), enquanto para os nutrientes de absoro
rpida, as concentraes normalmente so baixas, mesmo com o ajuste dirio da concentrao da
soluo.

Quadro 2. Taxa de absoro aproximada dos nutrientes por plantas crescidas em soluo
nutritiva (adaptado de Bugbee, 1995).
Grupo

Taxa de absoro

Nutriente

Absoro rpida

N-NO3 N-NH4 P K Mn

Absoro intermediria

Mg S Fe Zn Cu Mo

Absoro lenta

Ca B

100
80

% do Inicial (%)

60
40

S
Ca
Mg

20

N
K

0
80
60

B
40
Fe
20
Mn

0
0

20

40

60

80

100

120

Tempo (horas)
Figura 1. Variao temporal da concentrao relativa de nutrientes da soluo nutritiva em NFT
(tcnica do nutriente em filme) em cultivo de alface (Adaptado de Furlani, 2003 dados
no publicados).

A concentrao total dos nutrientes na soluo pode ser estimada medindo-se a

condutividade eltrica (CE) da soluo. Devido taxa diferencial de absoro dos nutrientes, a
CE da soluo indica, na maior parte, o Ca, Mg e S remanescentes, enquanto os micronutrientes
contribuem com menos de 0,1 % da CE da soluo. No Sistema Internacional de Unidades, a CE
expressa em S m-1 (siemen por metro), sendo mais comum sua utilizao na faixa de mS m-1,
muito empregada comercialmente, e que equivale unidade mMho cm-1 usada no passado.

2.1. Composio da soluo nutritiva

Em seu trabalho pioneiro, Hoagland & Arnon (1950) formularam uma soluo nutritiva a
partir da composio elementar mdia de plantas de tomate, mas seus clculos foram baseados
em plantas cultivadas em recipientes com 18 L de soluo, com troca semanal de soluo. Com o
advento das novas tcnicas de cultivo hidropnico e novas formas de reposio da soluo
nutritiva, surgiram algumas questes: o que ocorre quando se cultiva uma planta diferente, ou
quando o volume de soluo por planta for diferente, ou quando a forma e a freqncia de
reposio da soluo nutritiva forem distintas? Portanto, dois fatores devem ser considerados
para a formulao de uma soluo nutritiva: a composio da soluo, determinada pela relao
entre as concentraes dos nutrientes no tecido da planta cultivada; e a concentrao da soluo,
determinada pela razo de transpirao para o crescimento da planta, pelo volume de soluo por
planta, pelo grau de agitao da soluo e pela velocidade de reposio da soluo.
A composio da soluo deve ser determinada a partir da concentrao desejada de cada
nutriente dentro da planta. O ponto de partida a anlise qumica de toda a planta, j que as
diferentes partes contm concentraes diferentes de nutrientes. As quantidades acumuladas de
cada nutriente, e suas propores relativas, servem de referncia para a definio da
concentrao relativa de cada nutriente na soluo nutritiva. Outro meio utilizar referncias
bibliogrficas, com interpretao de anlise de plantas contendo as concentraes adequadas de
nutrientes para o crescimento e desenvolvimento timos das plantas. Quando se procede
8

anlise das exigncias nutricionais de plantas visando ao cultivo em soluo nutritiva, deve-se
enfocar as relaes existentes entre os nutrientes, pois essa uma indicao da relao de
extrao do meio de crescimento.
Alm das diferenas nos teores de nutrientes nas folhas em funo de sua posio,
cultivares e pocas de amostragem, tambm ocorrem diferenas nas relaes entre os teores
foliares de nutrientes para as diversas espcies, o que deve ser levado em considerao quando se
utiliza uma nica soluo para a nutrio de diversas espcies vegetais. Quando isso ocorre para
espcies que possuem relao de extrao diferente, h grande possibilidade de desequilbrio
nutricional ao longo do desenvolvimento das plantas, principalmente aquelas com ciclo mais
longo e quando a soluo nutritiva no renovada integralmente. Essas relaes devem ser
consideradas tambm para a reposio de nutrientes durante o crescimento das plantas. Em
trabalhos de pesquisa, comum a renovao total da soluo aps uma semana de cultivo em
vasos, a fim de evitar desequilbrios nas relaes entre os nutrientes.
2.2. Sais utilizados nas solues
Para a escolha de um sal para uma determinada soluo deve-se considerar,
primeiramente, a finalidade da soluo. Em trabalhos de pesquisa, utilizam-se normalmente sais
puros para anlise, a fim de evitar contaminaes com outros nutrientes que possam distorcer os
resultados. Entretanto, em cultivos hidropnicos com fins comerciais, o volume de soluo
utilizado geralmente grande, e neste caso o uso de sais comerciais prefervel pelo seu menor
custo. Esses sais so comumente utilizados em fertirrigao devido sua alta solubilidade e
ausncia de resduos que possam obstruir os emissores. Se o objeto de estudo forem os
micronutrientes, os cuidados devem ser maiores, inclusive com a purificao de sais.
No fornecimento de macronutrientes, prefervel utilizar sais que no contenham Na e
Cl, que podem acumular-se na soluo, aumentando a salinidade e reduzindo a absoro de
alguns nutrientes. O Cl pode reduzir a absoro de NO3-, e o Na pode interferir na absoro de
Ca e K (Marschner, 1995).
9

2.3. Exemplo de formulao de soluo nutritiva para a cultura da alface

Como exemplo de um mtodo prtico de clculo de uma soluo nutritiva, deve-se
inicialmente definir a relao de concentrao entre os nutrientes para a cultura em questo
(dados do Quadro 3, para a cultura da alface), para preparar a base da soluo, assumindo uma
quantidade inicial de 100 g de K por m3 de soluo (Quadro 6).

Quadro 3. Relao entre nutrientes, e quantidade de nutriente para preparar a soluo bsica
para a cultura da alface
K

Ca

Mg

Relao entre nutrientes

1,00

0,62

0,09

0,31

0,08

0,03

Relao 100

100

62

31

Quantidade (g m-3)

100

62

31

Em seguida, definem-se os sais que sero utilizados para os macronutrientes. Geralmente

utilizam-se os seguintes sais:
- nitrato de clcio (Ca 19 %, N-NO3 4,5 %, N-NH4 1,0 %);
- nitrato de potssio (K 36,5 %, N-NO3 13 %);
- MAP purificado (N-NH4 11 %, P 26 %); deve ser utilizado quando o pH da soluo for
ligeiramente neutro ou alcalino, devido presena do amnio que acidifica a soluo;
- MKP (K 29 %, P 23 %); deve ser utilizado quando o pH da soluo for cido;
- sulfato de magnsio (Mg 10 %, S 13%).

a)

Clculo do Ca: nitrato de clcio = 31/0,19 = 163,2 g m-3

(o valor 31 indica a quantidade de Ca do Quadro 3; o valor 0,19 indica 19 % de Ca no

nitrato de clcio; iniciou-se pelo nitrato de clcio por ser a nica fonte de clcio.
b)

Clculo do K: nitrato de potssio = 100/0,36 = 278 g m-3

c)

Clculo do P: de MAP = 9/0,26 = 23 g m-3

d)

Clculo do Mg: sulfato de magnsio = 8/0,10 = 80 g m-3

10

e)

Clculo do N: N contido nos sais acima = 163,20,145 + 2780,13 + 230,11 =

62,3 g m-3
f)

Caso o N resultante da soma das quantidades dos sais no seja suficiente, pode-se

complet-lo com nitrato de clcio e nitrato de potssio.

g)

A composio da soluo nutritiva bsica para atender a proporo entre os

nutrientes ser (em g m-3): 163,2 g de nitrato de clcio, 278 g de nitrato de potssio, 23 g de
MAP e 80 g de sulfato de magnsio; esta dever ser corrigida para a condutividade eltrica
desejada, 1,5 mS cm-1, por exemplo.
h)

Para a estimativa da condutividade eltrica, multiplica-se a CE de uma soluo em

g L-1 (Quadro 4) pela quantidade do sal. Para a soluo nutritiva bsica, a CE estimada ser:
163,21,18 + 2781,28 + 230,95 + 800,88 = 641 S cm-1 ou 0,64 mS cm-1.
i)

Para se obter a CE da soluo nutritiva desejada (CE = 1,5 mS cm-1), deve-se

multiplicar os valores de concentrao de sais calculados no item g pelo fator de correo da CE

(fce = 1,50 / 0,64 = 2,3), obtendo-se as concentraes finais dos sais (Quadro 4).

Quadro 4. Soluo nutritiva final para a cultura do alface, corrigida para a condutividade
eltrica desejada.
Sal utilizado

Soluo bsica

Soluo desejada

g m-3

g m-3

Nitrato de clcio

163

375

Nitrato de potssio

278

639

MAP

23

53

Sulfato de magnsio

80

184

CE (mS cm-1)

0,64

1,5

Para o clculo da soluo de micronutrientes, no h necessidade de correo da CE.

Podem-se utilizar as concentraes consideradas adequadas e preparar uma soluo estoque, 10
vezes mais concentrada, chamada de soluo de micronutrientes 10 (Quadro 5). Portanto, a
11

soluo nutritiva com CE de 1,50 mS cm-1 ter, em g m-3: 375 g de nitrato de clcio, 639 g de
nitrato de potssio, 53 g de MAP, 184 g de sulfato de magnsio e 100 mL da soluo de
micronutrientes 10.

Quadro 5. Clculo de uma soluo de micronutrientes 10 para alface

Micronutriente

Sal utilizado
(% do micronutriente) 1

Concentrao
adequada 2

Quantidade
do sal

Soluo 10

mg L-1

mg L-1

g L-1

cido brico (17)

0,3

1,76

17,6

Cu

Sulfato de cobre (25)

0,02

0,08

0,8

Fe-EDDHA (6)

2,0

34,00

340,0

Mn

Sulfato de mangans (25)

0,4

1,60

16,0

Mo

Molibdato de sdio (39)

0,06

0,15

1,5

Zn

Sulfato de zinco (21)

0,06

0,29

2,9

Furlani et al. (1999)

2.4. Concentrao da soluo nutritiva
A definio da concentrao dos nutrientes na soluo nutritiva a ser fornecida s plantas

o segundo passo para sua formulao. A concentrao adequada, independentemente da

relao entre os nutrientes, vai depender primariamente da taxa transpiratria da planta. Segundo
Bugbee (1995), uma boa estimativa da gua transpirada em relao ao crescimento de plantas em
hidroponia est em torno de 300 a 400 L de gua transpirada por kg de massa seca acumulada. A
taxa de transpirao depende principalmente da umidade do ar, ventilao, concentrao de CO2,
temperatura e luminosidade. Em condies de clima tropical, a alta transpirao contribui ainda
mais para a reduo do volume e da concentrao da soluo nutritiva. A absoro dos
nutrientes, por outro lado, determinada pela taxa de crescimento da planta. Por isso, muito
comum encontrar um desequilbrio entre a quantidade de gua e de nutrientes que a planta
12

absorve da soluo, ocorrendo aumento da CE da soluo ao longo do dia, quando no h

reposio da gua.
As primeiras solues nutritivas propostas na literatura cientfica eram muito
concentradas, por serem formuladas para sistemas hidropnicos estticos, geralmente em vasos
com oxigenao. Com o advento dos sistemas circulantes, com constante agitao e renovao
da soluo fluindo em velocidade pelas razes, foi possvel reduzir consideravelmente sua
concentrao. Enquanto as primeiras solues utilizavam CE de 2,5 a 3,0 mS cm-1, atualmente
comum a utilizao de CE em torno de 1,0 a 1,5 mS cm-1 (Cometti, 2003).
Um exemplo consiste na determinao da concentrao de um nutriente na soluo
nutritiva a partir do balano de massas. Assumindo-se a concentrao de K no tecido em torno de
40 g kg-1 de massa seca e uma transpirao de 300 L kg-1 de massa seca, deveria haver 40 g de K
em 300 L de gua, ou 133 mg K L-1. Se a taxa de transpirao for maior, 400 L kg-1, a soluo
deveria ser mais diluda, ou seja, 40 g por 400 L, ou 100 mg K L-1.
Em uma soluo nutritiva, o principal componente do potencial da gua o osmtico,
conseqncia da quantidade de sais dissolvidos na soluo. Quanto maior a quantidade de sais na
soluo, tanto maior ser a restrio absoro de gua pelas razes, e, portanto, de nutrientes.
Se a concentrao de sais for muito alta, os vegetais podero perder gua para o meio, ocorrendo
injrias (plasmlise das clulas) que, dependendo da intensidade, podem causar morte de razes e
da planta. O efeito salino de cada sal varivel, sendo geralmente utilizado o nitrato de sdio
como referncia (Quadro 6). Na prtica, em solues nutritivas, a salinidade pode se tornar um
problema apenas quando a circulao da soluo interrompida por longos perodos em
momentos de alta transpirao, podendo ocorrer acmulo de sais na superfcie das razes.

13

Quadro 6. Solubilidade de alguns sais utilizados em hidroponia (adaptado de Boodley, 1996 e

Resh, 2002).
Sal

ndice salino 1

Solubilidade
gua fria (0,5 oC)

gua quente (100 oC)

g L-1

g L-1

cido brico

19,5

389

Cloreto de potssio

277

561

116

Fosfato diamnio

426

1063

34

Fosfato monoamnio

224

1730

30

Nitrato de amnio

1183

8711

105

Nitrato de clcio

1212

6598

53

Nitrato de potssio

134

2471

74

Nitrato de sdio

100

Sulfato de amnio

704

Sulfato de clcio

Insolvel

Sulfato de magnsio 2

700

906

Sulfato de mangans

516

696

Sulfato de potssio

67

239

ndice de salinidade relativo ao nitrato de sdio = 100.

Temperatura em gua fria = 20 oC e gua quente = 40 oC.

1033

69
8
2

46

O potencial osmtico (o) pode ser calculado pela equao de Vant Hoff, que relaciona
o potencial osmtico concentrao de soluto na soluo:
o =

- nsRT
V

em que o o potencial osmtico em pascals, V o volume do solvente em litros, ns o nmero de

mols de soluto, R a constante dos gases (0,00832 MPa K-1 mol-1 a 273 oK), e T a temperatura em
o

K. Medies diretas, entretanto, tm mostrado que esta relao aproximadamente correta para

14

solues diludas que no se dissociam. Para eletrlitos que se dissociam em soluo, no entanto,
h um grande desvio do valor terico. Assim, a presso osmtica de uma soluo molar de NaCl
aproximadamente 4,32 MPa, em vez do valor terico de 2,27 MPa. Assumindo-se que haja a
completa dissociao do NaCl, o potencial osmtico seria 4,54 MPa, e a discrepncia pode ser
atribuda, principalmente, s foras de Van der Waals operando entre os ons. Em solues
nutritivas, que trabalham na faixa milimolar, o efeito da concentrao sobre a fora inica
menor, permitindo uma aproximao maior entre os valores calculado e real do potencial
osmtico.
Um potencial osmtico entre -0,05 e -0,1 MPa tem sido considerado adequado para o
cultivo hidropnico. Considerando-se uma soluo nutritiva que contenha uma concentrao de
ons totais em torno de 20 mmol L-1 e temperatura de 27 oC, o potencial osmtico seria:
o =

- 0,02 * 0,00832 * 300

= 0,0499 MPa
1

Devido dificuldade de medio direta da presso osmtica da soluo e de seu clculo,

pois seria necessrio conhecer a concentrao de cada on, pode-se utilizar a medida de CE, que
apresenta uma boa correlao com a quantidade total de slidos solveis da soluo ou com a
sua fora inica estimada (Figura 2). H uma relao significativa entre a CE e a concentrao
total de ons da soluo, que pode ser determinada pelas seguintes equaes:
CE (mS cm-1) = [total de ons (mmol L-1)] 0,0698; ou
total de ons (mmol L-1) = [CE (mS cm-1)] 14,33; ou
total de ons (mg L-1) = [CE (mS cm-1)] 655
Estas equaes permitem que se utilize apenas a molaridade total da soluo, sem que
sejam necessrias as concentraes individuais dos nutrientes na soluo. A relao entre CE e a
concentrao de ons deve ser determinada para cada sal em soluo, visto que h grande
variao entre a CE de cada espcie inica (Quadro 4). Quando se utilizam estas relaes para
estimar a concentrao total dos ons a partir da CE, deve-se considerar que seu valor pode ser
diferente para cada soluo nutritiva, dependendo da relao entre os nutrientes. Finalmente, a
15

soma das CE estimadas de cada sal dissolvido pode ser utilizada como a CE estimada da soluo
nutritiva, com uma boa aproximao do valor medido por meio de condutivmetro.
A CE da soluo tambm varia com sua temperatura. A cada cinco graus de aumento de
temperatura, h um aumento da CE em torno de 11,0 %. Sendo assim, uma soluo com CE de 1
mS cm-1 a 25 oC dever apresentar, aproximadamente, uma CE de 1,11 mS cm-1 a 30 oC.

2,5

Fora Inica

2,0

CE = FI*0,0853
2
r = 0,99

CE (mS cm-1)

Concentrao de ons
1,5

CE = [Total de ons] * 0,0698

2
r = 0,99

1,0

0,5

0,0
0

10

15

20

25
-1

Concentrao Total de ons e Fora Inica (mmol L )

Figura 2. Relao entre condutividade eltrica (CE) da soluo nutritiva e a concentrao total
de ons e fora inica (FI) estimada; fora inica simulada com o programa GEOCHEM
3.0 (Parker et al., 1995). Fonte: Cometti (2003).

3. MANEJO DA SOLUO

3.1. Reposio da soluo

Durante o crescimento das plantas em soluo nutritiva, h absoro de gua e nutrientes
em propores diferentes, com diferentes quantidades acumuladas no tecido vegetal. Os
nutrientes, por sua vez, so absorvidos da soluo nutritiva com velocidade diferenciada (Figura
1). Assim, o manejo da soluo nutritiva deve contemplar essas diferenas a fim de se alcanar o
16

fim do ciclo de cultivo com o menor desbalanceamento inico possvel, constituindo um desafio
a adequada reposio dos nutrientes e da gua. Dentre os mtodos disponveis de reposio da
soluo nutritiva, podem-se listar:
a) Renovao de toda a soluo: em vasos, comum a troca de toda a soluo ao final de
uma semana de cultivo, utilizando-se 2 a 3 L de soluo para plantas como soja, arroz, e feijo.
Para determinar o momento da troca da soluo, Ruiz (1977) props utilizar o K como nutriente
indicador. Em cultivos comerciais, o volume total de soluo costuma ser grande, tornando alto o
custo com desperdcio de soluo, alm de riscos de contaminao do meio ambiente.
b) Reposio da soluo absorvida: esse mtodo utiliza a soluo bsica para repor a gua
absorvida por transpirao. Em condies de baixa umidade relativa do ar, alta velocidade do
vento e alta temperatura, h uma perda de gua por transpirao desproporcionalmente maior do
que a absoro de nutrientes, provocando a concentrao da soluo nutritiva remanescente.
Caso seja feita a reposio da soluo na mesma concentrao inicial, haver um aumento da
concentrao de sais na soluo, aumentando consideravelmente sua CE. A forma de solucionar
o problema monitorar a CE da soluo e adicionar gua pura para reduzi-la, quando necessrio,
ou efetuar a reposio com uma soluo mais diluda do que a original.
c) Reposio de nutrientes e gua separadamente com anlise qumica da soluo. Depois
de efetuada a anlise qumica da soluo nutritiva, pode-se adicionar gua para atingir o nvel
inicial e adicionar os nutrientes por meio de solues-estoque concentradas de cada sal. O custo
de monitoramento da soluo por esse mtodo pode ser impeditivo, alm de demandar um certo
tempo para a anlise e de no traduzir exatamente a necessidade de reposio dos ons, Apesar
do ajuste da concentrao dos nutrientes, a soluo tem restries para uso indefinido, pois h
exsudao de cidos orgnicos, descamao e quebra de razes liberando fragmentos,
crescimento de algas, bactrias e fungos, e contaminao por microrganismos patognicos,
resduos de substratos, poeira e metais pesados contaminantes . Todos esses elementos exigiriam
um tratamento de alto custo da soluo para que esta pudesse ser reutilizada com segurana. A
17

vida til de uma soluo com acompanhamento semanal por anlise qumica pode chegar a trs
meses, segundo Resh (2002).
d) Reposio de gua e nutrientes separadamente, com uso de sensores de concentrao
dos ons. Alm do custo elevado dos eletrodos especficos para os ons, sua vida til reduzida e
necessitam de calibraes freqentes. A esse mtodo, aplicam-se as consideraes anteriores
sobre a vida til da soluo.
e) Reposio de gua e nutrientes separadamente, por meio do monitoramento da CE da
soluo. Este o mtodo mais utilizado atualmente na hidroponia comercial, alm de aplicar-se
s pesquisas em nutrio de plantas, pois de baixo custo e permite um acompanhamento da
concentrao total de sais da soluo. A reposio de gua pode ser efetuada instantaneamente
por meio de vlvula de nvel com bia ou diariamente, de forma manual. A medida da CE
permite monitorar a absoro de nutrientes pois, apesar de no fornecer a concentrao de cada
on, a CE d uma idia da concentrao total dos ons em soluo (Figura 2). A reposio dos
ons feita com solues-estoque concentradas, repondo-se apenas um volume de soluoestoque suficiente para elevar a CE para o valor inicial. O descarte da soluo nutritiva
efetuado apenas ao final de um ciclo de cultivo, reduzindo bastante os custos com nutrientes e
anlises qumicas da soluo. A vida til da soluo, em condies de cultivo hidropnico de
hortalias folhosas, no Brasil, tem sido em torno de trinta dias em sistemas NFT, ou tcnica do
filme nutriente, onde a soluo nutritiva conduzida por toda a parte inferior do tanque inclinado
onde as plantas so crescidas.

3.2. Preparo e utilizao de solues estoque

Para facilitar o manejo da reposio de nutrientes, conveniente preparar soluesestoque concentradas, contendo todos os nutrientes na mesma proporo da soluo nutritiva.
Para determinar a concentrao mxima da soluo estoque, necessrio utilizar a solubilidade
dos sais como o limite (Quadro 6). Alm disso, pode haver incompatibilidade entre sais que no
permita que os mesmos sejam colocados na mesma soluo concentrada, destacando-se a
18

incompatibilidade entre nitrato de clcio e os sais contendo P e S por formarem precipitados de

baixa solubilidade (Quadro 7). Portanto, preparam-se duas solues, intituladas A e B, onde
o nitrato de clcio colocado em apenas uma delas. Considerando que o nitrato de potssio tenha
compatibilidade com todos os outros sais, e que seja utilizado em maior quantidade, pode ser
dividido entre as solues A e B, e servir como determinante para a concentrao final das
solues.

19

Quadro 7. Compatibilidade entre diferentes fertilizantes (C compatvel; I incompatvel; R

compatibilidade reduzida).
C

Uria

Nitrato de amnio

Sulfato de amnio

Nitrato de potssio

Cloreto de potssio

Sulfato de potssio

Fosfato diamnio (DAP)

Fosfato monoamnio (MAP)

cido fosfrico

cido sulfrico

cido ntrico

Sulfato de ferro, zinco, cobre e mangans

Nitrato de clcio

Sulfato de magnsio

Quelato de ferro, zinco, cobre e mangans

Utilizando como exemplo de clculo a soluo formulada para a cultura do alface,

considerando que o nitrato de potssio possui solubilidade de 134 g L-1 (Quadro 6), sero
necessrios 4,77 L para solubilizar os 639 g para a soluo nutritiva (Quadro 8); este valor pode
ser arredondado para 5 L. Assim, o nitrato de potssio ser utilizado como base para as solues
estoque por ser o sal com maior quantidade de gua necessria para solubilizao. Como ser
utilizado nitrato de potssio em ambas as solues A e B, pode-se ento dobrar as quantidades
dos outros sais e recalcular as quantidades para preparar 10 L de cada soluo estoque.

20

Quadro 8. Volume mnimo necessrio para solubilizar os sais da soluo nutritiva para a cultura
do alface

Sal

Solubilidade

Soluo
desejada

Volume mnimo

g L-1

g m-3

Nitrato de clcio

1212

375

0,14

Nitrato de potssio

134

639

4,77

MAP

224

53

0,24

Sulfato de magnsio

700

184

0,26

3.3. pH da soluo nutritiva

Altas concentraes de H+ na soluo nutritiva podem desestabilizar as membranas
celulares, provocando perda de ons e morte das clulas da raiz. As plantas podem suportar
perfeitamente pH entre 4,5 e 7,5 sem grandes efeitos fisiolgicos. Entretanto, efeitos indiretos,
tais como a reduo na disponibilidade de nutrientes, podem comprometer seriamente o
crescimento das plantas, pois as mudanas de pH podem favorecer a formao de espcies
inicas que no so prontamente transportadas para o interior das clulas, comprometendo a
absoro do nutriente. Alm disso, dependendo do pH da soluo, h formao de complexos
insolveis. Em pH acima de 6,5 h reduo na disponibilidade de Mn, Cu, Zn, B, P e,
especialmente, Fe, enquanto h uma pequena reduo na disponibilidade de P, K, Ca e Mg em
pH abaixo de 5,0. Portanto, em uma cultura hidropnica recomendado um pH entre 5,5 e 5,8,
condio que permite a mxima disponibilidade dos nutrientes em geral (Bugbee, 1995). Em
soluo nutritiva, Inoue et al. (2000) observaram reduo no crescimento da parte area e do
sistema radicular de alface quando o pH foi reduzido abaixo de 4,2.
As variaes de pH que ocorrem na soluo nutritiva so reflexos da absoro
diferenciada de ctions e nions. Por exemplo, quando o N suprido na forma ntrica, a absoro
de nions maior que ctions, ocorrendo elevao do pH. A absoro de um mol de NO3- feita
21

em cotransporte com dois mols de H+, enquanto na absoro de um mol de NH4+ pode ocorrer o
bombeamento de um mol de H+ para o exterior da clula. Assim, enquanto a absoro de NO3aumenta o pH, a absoro de NH4+ o reduz. Em plantas supridas com NH4+ e NO3-, o pH da
soluo pode voltar a subir assim que o NH4+ tenha sido absorvido e que a absoro de NO3torne-se maior do que a de NH4+ (Figura 3). Devido ao abaixamento do pH com a absoro do
NH4+, recomenda-se o suprimento apenas parcial do N na forma amoniacal, tornando a soluo
mais tamponada.
Em geral, o poder de tamponamento das solues nutritivas utilizadas em hidroponia
muito pequeno. A utilizao de gua deionizada, muito comum em pesquisa, reduz ainda mais o
poder de tamponamento da soluo. Apesar do poder do fosfato (H2PO4- HPO42-) de tamponar
a soluo, sua concentrao necessria para estabilizar o pH em uma soluo nutritiva o tornaria
txico para as plantas. Alm disso, a rpida absoro do P retira toda sua capacidade de
tamponamento, que se encontra a partir de 5,5, e alcana o mximo no pH 7,2. Portanto, mais
conveniente manter a soluo nutritiva equilibrada em ctions e nions para atender a demanda
da planta, do que tentar manter o pH numa faixa estreita de valores por meio do uso de cidos
(sulfrico, fosfrico, ntrico ou clordico) e bases (hidrxido de sdio, potssio ou amnio) fortes
para reduzir ou elevar o pH do meio de crescimento, respectivamente.

22

N-NO3-

200

-1

Nutrientes na Soluo Nutritiva (mg L )

150
100
50
0
25

N-NH4+

20
15
10
5
0

pH

6
5
4
3
17

24

31

38

45

Dias Aps a Semeadura

Figura 3. Variao de NO3-, NH4+ e pH da soluo nutritiva em cultivo hidropnico (NFT) de
alface. A soluo foi renovada totalmente a cada sete dias (linhas verticais pontilhadas) e
ajustada diariamente pela condutividade eltrica e pH com soluo de hidrxido de sdio
(Furlani, 1998).
A utilizao de doses pequenas e contnuas de N-NH4+ de uma soluo de sulfato de
amnio pode manter o pH em 5,5 ( 0,5) durante todo o ciclo da cultura, sem que haja
necessidade de lanar mo de cidos fortes para baixar o pH da soluo e sem comprometimento
da produtividade da cultura (Martins et al., 2002). Entretanto, esses estudos tm sido realizados
em sistemas automatizados, onde o computador interpreta o pH e libera uma soluo contendo
amnio atravs do controle por uma vlvula solenide. Em experimentos conduzidos em vasos
com soluo nutritiva, possvel manter o pH estvel utilizando-se uma concentrao de 1 mmol

23

L-1 de MES (cido 2 (N-morfolino) ethanosulfnico) sem qualquer prejuzo para as plantas
(Bugbee & Salisbury, 1985).

4. ESPECIAO INICA DA SOLUO NUTRITIVA

A especiao inica para compreender as respostas das plantas presena de certos ons
nas solues, principalmente em cultivos hidropnicos, tem sido crescente, e cada vez mais til.
Apenas a concentrao total de um elemento tal como se obtm a partir de anlises laboratoriais,
ou aquela que se acredita ter sido adicionada, no corresponde, muitas vezes, aos efeitos
observados no aumento ou na reduo do crescimento vegetal. Da mesma forma, os efeitos
txicos de metais pesados tm se mostrado mais coerentemente correlacionados com a atividade
de espcies inicas do que com a concentrao total do elemento. Na especiao de solues
contendo Al, Sr, Fe, Ca, P e outros elementos, observa-se o forte efeito do pH na formao de
vrios complexos e precipitados, acarretando sua baixa disponibilidade para a planta mesmo sob
altas concentraes, e assim pouco ou nenhum efeito pode ser observado em resposta ao
aumento de sua concentrao na soluo nutritiva.
Segundo Bernhard et al. (1986), espcie qumica refere-se a uma forma molecular
(configurao) de tomos de um elemento ou aglomerado de tomos de diferentes elementos. O
termo especiao qumica, por sua vez, tem sido utilizado para descrever a anlise das espcies
predominantes numa amostra, a abundncia dessas espcies ou distribuio numrica, a
reatividade de dadas espcies e a transformao de uma espcie em outra. Como as formas do
metal complexado so de difcil ou impossvel determinao por mtodos de anlises
laboratoriais, o uso de expresses termodinmicas em modelos computacionais mostra-se uma
alternativa mais vivel, simples e segura para a obteno desse conhecimento. Programas de
computador tais como REDEQL, GEOCHEM-PC, MINTEQ, CHEAQS e outros, podem indicar
as espcies qumicas em uma soluo nutritiva a partir das concentraes analticas conhecidas

24

dos elementos adicionados, apontando os pares inicos, complexos e formas livres dos ons
(Parker et al., 1995).
Na especiao inica de uma soluo nutritiva, trs variveis determinam a
disponibilidade de um dado on: a fora inica da soluo, que atua sobre a atividade inica
individual; o pH, que propicia a presena das vrias espcies inicas; e a presena de agentes
quelantes, que promovem o seqestro de alguns ons em maior ou menor escala.

4.1. Fora inica

Geralmente, quando a fora inica aumenta, ons de cargas opostas interagem de tal
forma que sua atividade inica diminui, e ento, o nmero de ons ativos diminui.
Pesquisadores na rea de solos, aparentemente, foram os primeiros a desenvolver o conceito de
que as respostas das plantas se correlacionam melhor com a atividade do que com a concentrao
analtica de ons inorgnicos (Adams, 1971). O Quadro 9 mostra que a atividade inica mais
prxima da concentrao analtica tanto quanto mais diluda for a soluo. Em solos, essa
situao agravada devido s mudanas observadas nas reaes de troca inica. Em estudos com
soluo nutritiva, entretanto, no faz diferena em se utilizar atividade ou concentrao inica,
pois a maioria das solues nutritivas utilizadas possui fora inica na faixa de 5 a 20 mmol L-1,
onde as comparaes podem ser realizadas razoavelmente utilizando-se tanto atividade quanto
concentrao inica. Cuidado adicional deve ser tomado quando se trabalha com o on Al3+, que
tem a atividade fortemente reduzida pelo aumento da fora inica da soluo.

25

Quadro 9. Efeito da fora inica nos coeficientes de atividades individuais

on

ri x 10-8 1

Fora inica (mmol L-1)

1

10

50

100

coeficiente de atividade de ons univalentes 2

K+, OH-, Cl-, NO3-

0,964

0,925

0,899

0,805

0,755

Na+, HCO3-, H2PO4-

0,964

0,927

0,901

0,815

0,770

H+

0,967

0,933

0,914

0,860

0,830

coeficiente de atividade de ons bivalentes

SO42-, HPO42-

0,867

0,740

0,660

0,445

0,335

Ca2+, Fe2+

0,870

0,749

0,675

0,485

0,405

Mg2+

0,872

0,755

0,690

0,520

0,450

coeficiente de atividade de ons trivalentes

PO43-

0,725

0,505

0,395

0,160

0,095

Al3+, Fe3+

0,738

0,540

0,445

0,245

0,180

ri = raio da atmosfera inica.

Coeficiente de atividade: razo entre a atividade e a concentrao analtica do on.

4.2. pH
Alguns trabalhos mostram que a absoro por plantas, de nions que exibem um
comportamento de cido ou base fraca, depende do pH e do seu efeito na especiao. Para alguns
nions, o efeito pode ser observado como um aumento do cotransporte do nion com prtons
(Marschner, 1995). O potencial transmembrana negativo nas clulas torna o processo de entrada
na clula de qualquer nion um transporte ativo, onde qualquer reduo da carga aninica reduz
o potencial da barreira energtica de entrada do on na clula. Alguns exemplos incluem a maior
absoro de H2PO4- em relao ao HPO42- (Hendrix, 1967) e maior absoro de H3BO30 do que
B(OH)4- (Oertli & Grgurevic, 1975). Outro exemplo o aumento da toxidez de N amoniacal s
razes de algodo com o aumento do pH (Bennett & Adams, 1970). A maioria das solues
26

nutritivas so pouco tamponadas, e o pH varia bastante, no se mantendo dentro de uma faixa

ideal. Diferentemente do solo, a faixa de pH ideal deve situar-se entre 5,0 e 6,0, pois valores de
pH diferentes destes ocasionam alterao nas formas livres e complexadas dos nutrientes. Com
relao aos macronutrientes, apenas as formas disponveis de Ca e de P so negativamente
afetadas por aumentos no pH da soluo nutritiva. A partir do pH 6,0 ocorre reduo na
disponibilidade de Ca2+ e HPO4- Furlani et al. (1999). Em pesquisas com Al e metais pesados,
importante observar o efeito do pH na disponibilidade do metal livre, pois o Al e o Sr tm sua
disponibilidade reduzida em pH mais elevado ou formam precipitados. importante observar
que o efeito do pH varivel com a fora inica da soluo, bem como a concentrao dos
elementos. A simulao de uma soluo de Hoagland com 40 mol de cloreto de alumnio
mostra que a concentrao preponderante sobre a disponibilidade e a formao de precipitados
de Al (Figura4). Assim, o Al em soluo nutritiva s ocasiona restries ao crescimento vegetal
quando em solues altamente diludas ou em altas concentraes de Al (Pintro et al., 1999).

27

100% da Soluo de Hoagland

10

80

Fora Inica

60

Al - EDTA

40

20

100

25 % da Soluo de Hoagland

10

Al-OH - slido

80
Al3+ - livre

60

8
6

40

20

3,8

4,0

Fora Inica (mmol.L-1)

Composto formado pelo metal (%)

100

4,2

4,4

4,6

pH
Figura 4. Efeito da concentrao da soluo nutritiva de Hoagland na disponibilidade de Al
(adio de 40 mol L-1 de AlCl3) e na formao de quelato de EDTA e hidrxido
precipitado em funo do pH; simulao com o programa GEOCHEM-PC (Parker et al.,
1995).

4.3. Quelatos
A presena de agentes quelantes tambm determinante no resultado da especiao
inica da soluo. Um bom exemplo disso o Fe, normalmente quelatado nas formas de
FeDTPA (dietileno triamino penta acetato de ferro), FeEDTA (etileno diamino tetra acetato de
ferro), FeEDDHA (etileno diamino di-orto hidroxi fenil acetato de ferro) e FeEDDHMA (etileno
diamino di-orto hidroxi para metil fenil acetato de ferro).

28

Para o Fe (Figura 7) e demais ctions micronutrientes (Quadro 10), as alteraes nas

formas livres e complexadas so dependentes do pH e do quelato de Fe utilizado. Considerando
a faixa normal de pH das solues nutritivas (5,5 a 6,5), o quelato FeEDDHA mais estvel que
o FeDTPA e este mais estvel que o FeEDTA. Aumentos eventuais de pH na soluo podem
comprometer a disponibilidade de Fe, acarretando sua deficincia. Desta maneira, comum

Composto de Ferro Formado (%)

ocorrer carncia de Fe em pH acima de 7, quando se utiliza o EDTA como quelante.

100
80

Fe-EDTA
Fe-EDDHA
Fe-DTPA
Fe-OH (com EDTA)
Fe-OH (com EDDHA)
Fe-OH (com DTPA)

60
40
20
0
4,5

5,0

5,5

6,0

6,5

7,0

7,5

8,0

pH
Figura 5. Formao de compostos de ferro em funo do quelato de ferro usado e do pH da
soluo nutritiva simulado com o programa GEOCHEM-PC (Parker et al., 1995).
A adio de quelatos de Fe soluo tambm leva quelao de Cu, Zn e Mn. O quelato
entra em soluo dissociando-se conforme sua constante de estabilidade, liberando o agente
quelante que poder se ligar aos outros ons. A adio do quelato FeEDDHA como fonte de Fe
(2,5 mg L-1) soluo nutritiva (Quadro 10) promover, em parte, a quelao apenas do Cu,
enquanto outros agentes quelantes como o DTPA e EDTA tambm formam complexos com Zn e
Mn. No caso do Zn, tanto o DTPA quanto o EDTA possuem capacidade semelhante e crescente
de quelao a partir do pH 5,5. No caso do Mn, o EDTA tem capacidade de quelao superior ao
DTPA, porm com importncia significativa apenas em pH superior a 7,0. Essas relaes na
29

soluo se refletem na absoro dos micronutrientes pelas plantas. Os dados da Quadro 15

indicam que as formas livres de Mn e de Zn so determinantes na absoro pelas plantas. No
caso de plantas de alface, as concentraes de Mn e de Zn so maiores em plantas crescidas com
soluo nutritiva contendo FeEDDHA do quem em plantas crescidas em soluo nutritiva
contendo FeEDTA. Na primeira soluo, as quantidades de Mn e de Zn livres ocorrem em
maiores propores do que em soluo com EDTA (Quadro 10). Em crisntemo (Quadro 11), o
EDDHA e o DTPA proporcionam semelhantes concentraes livres de Mn, porm a
concentrao de Zn maior na soluo com EDDHA (Quadro 10), refletindo em maior acmulo
de Zn nas folhas (Quadro 11). Esses experimentos validam as simulaes das especiaes
inicas realizadas com programas computacionais.

30

Quadro 10. Formao de compostos de Cu, Mn e Zn em funo do quelato de Fe e do pH da

soluo nutritiva.

Quelatos

Formas

pH da soluo nutritiva
4,5

5,0

5,5

6,0

6,5

7,0

7,5

8,0

Composto formado (%)

FeEDTA

FeEDDHA

FeDTPA

Cu2+

6,3

0,7

0,1

0,0

0,0

0,0

0,0

0,0

Mn2+

92,7

92,5

91,3

82,1

67,0

18,5

4,3

3,4

Zn2+

83,1

54,5

13,1

1,8

0,6

0,1

0,0

0,0

Cu EDTA

92,8

99,2

99,9

100,0

100,0

100,0

100,0

100,0

Mn EDTA

0,0

0,2

1,5

11,4

27,2

79,7

92,6

96,1

Zn EDTA

6,2

38,1

84,9

97,9

99,2

99,9

100,0

100,0

Cu2+

28,1

22,1

13,5

6,5

6,6

1,4

0,1

0,0

Mn2+

92,6

92,6

92,6

92,6

92,0

91,4

89,8

75,1

Zn2+

88,6

88,1

86,6

82,9

81,2

77,8

63,8

37,9

Zn OH

0,0

0,1

0,4

1,1

3,4

10,4

27,3

53,6

Cu EDDHA

67,7

74,4

84,0

91,3

88,8

95,9

98,3

98,8

Mn
EDDHA

0,1

0,1

0,1

0,1

0,0

0,1

1,1

13,6

Zn EDDHA

0,0

0,0

0,0

0,0

0,0

0,0

0,1

0,8

Cu2+

2,9

0,6

0,1

0,0

0,0

0,0

0,0

0,0

Mn2+

92,7

92,7

92,6

92,0

89,9

68,3

9,1

0,4

Zn2+

79,5

62,0

33,9

11,1

5,7

0,5

0,0

0,0

Cu DTPA

96,7

99,3

99,9

100,0

100,0

100,0

100,0

100,0

Mn DTPA

0,0

0,0

0,1

0,8

2,3

25,3

90,0

99,5

Zn DTPA

10,4

29,6

60,9

86,6

93,0

99,4

100,0

100,0

31

Em uma hidroponia comercial, observou-se em certa ocasio que a adio acidental de

grande quantidade de sulfato de zinco. Apenas a no adio do sal de Zn com a adio de maior
quantidade de Fe-EDTA foi suficiente para recuperar as plantas com sintomas de toxidez de Zn.
Quando foi utilizado Fe-EDDHA, qualquer excesso de Zn causava sintomas caractersticos de
reduo abrupta no crescimento radicular, com grave deficincia de Fe. A partir do uso de FeEDTA, esses sintomas desapareceram, mesmo quando a anlise da soluo nutritiva mostrava
uma concentrao de Zn potencialmente fitotxica. Tanto o tipo de quelato de Fe utilizado,
quanto as concentraes de P e S (que formam complexos com Zn) podem explicar porqu podese encontrar altas concentraes de Zn na soluo nutritiva, acima de 0,5 mg L-1 (10 vezes acima
do recomendado na soluo de Hoagland), sem que haja sintomas visuais de toxidez de Zn.
Muito h que ser pesquisado para uma perfeita compreenso dessas relaes.

Quadro 11. Teores de Mn e Zn em folhas de alface e de crisntemo cultivadas em soluo

nutritiva com diferentes quelatos de ferro.

Quelato de Ferro

Teor de Mn

Teor de Zn
mg kg-1

Folhas de alface 1
FeEDDHA

125,2 a

69,0 a

FeEDTA

80,9 b

38,4 b

Folhas de crisntemo 2
FeEDDHA
FeDTPA
(1)

Furlani (dados no publicados);

(2)

219,6 a

104,6 a

230,6 a

45,8 b

De Kreij & Paternotte (1999). Para cada espcie

vegetal, mdias seguidas por letras iguais em cada coluna no diferem estatisticamente pelo teste
de Tukey a 5%.

32

5. CINTICA DE ABSORO DE NUTRIENTES

As solues nutritivas tm larga aplicao em estudos de cintica de absoro de
nutrientes em plantas. A absoro de ons presentes em solues de concentraes relativamente
baixas, pelos vegetais, segue, geralmente, a cintica de Michaelis-Menten (Epstein, 1975), cujo
modelo matemtico representado pela equao:

I=

Vmax C
Km + C

(1)

em que I o influxo ou velocidade de absoro do on (mol g-1 h-1) numa soluo de

concentrao C (mol L-1). As constantes Vmax (mol g-1 h-1) e Km (mol L-1) representam a
velocidade mxima de absoro e a concentrao em que a velocidade de absoro corresponde
metade da Vmax, respectivamente.
Para facilitar o clculo das constantes foram propostas diversas transformaes, que
permitem obter formas lineares da equao de Michaelis-Menten. Assim, Lineweaver & Burk
(1934) relacionaram os valores inversos de I e C por meio da equao:

1 Km 1
1
=
+
I Vmax C Vmax

(2)

e Hofstee (1952) estimou I em relao a I/C:

I = K m

I
+ Vmax
C

(3)

Uma representao no-linear foi proposta por Claassen & Barber (1974). Eles
caracterizaram a absoro pela velocidade de diminuio da quantidade, Q (mol), do nutriente na
soluo. Esse valor depende da concentrao, C (mol L-1), e do volume da soluo, v (L), no
tempo t (h):

Qt = Ct vt

(4)

A representao grfica de Q, em relao ao tempo t, denota a diminuio da quantidade

do on em soluo com o tempo, em conseqncia da absoro pela planta. O influxo, em
33

qualquer ponto da curva, ser o valor correspondente a dQ/dt dividido pela massa radicular.
Pode-se tambm usar o comprimento ou a superfcie das razes.
Claassen & Barber (1974) ajustaram Q vs t a uma srie de funes cbicas ou parablicas e
estimaram as constantes de Michaelis-Menten. Essas constantes podem, tambm, ser determinadas
graficamente. Neste caso, a declividade da poro de maior comprimento dentro da curva,
aproximadamente linear, permitir o clculo de Vmax e a tangente, na parte mais curva da
representao, com valor equivalente metade da declividade anteriormente determinada, indicar
o Km.
Para minimizar as imprecises devidas a uma estimativa exclusivamente grfica, Ruiz
(1985) props uma aproximao matemtica para o clculo das constantes Vmax e Km. Os dados
que sero utilizados para exemplificar o mtodo resultaram de um ensaio de absoro de fsforo,
conduzido em cmara de crescimento, usando soja como planta-teste. Nesse ensaio usou-se uma
concentrao inicial de fsforo igual a 32,29 mol L-1, estimando-se a absoro do nutriente pela
diminuio da atividade de

32

P na soluo, amostrada a cada meia hora. Essa atividade foi

corrigida para o tempo de contagem, devido meia vida, relativamente curta, do 32P.
O volume de soluo para cada tempo, vt, foi calculado levando em conta o volume
inicial, vi (0,801 L), o volume aps 24 horas, vf (0,410 L), o volume amostrado, va (0,026 L) e
uma taxa de transpirao uniforme, uma vez que a iluminao e a temperatura foram mantidas
no mesmo nvel por 24 horas. O valor do va resulta de uma amostragem inicial (tempo zero) de
0,002 L, acrescido de amostragens de 0,001 L cada meia hora, at totalizar 12 horas de ensaio.
Assim, va foi estimado a cada meia hora, no intervalo de 0 a 12 horas, usando a equao:

v vf va

v t = v i 0,002 i
+ 0,002 t
24

(5)

A concentrao para cada tempo, Ct, foi calculada pela equao:

a v
C t = C0 t t
a 0 v0

(6)

34

em que a a atividade do 32P corrigida, v o volume estimado (equao 5) e os subndices

0 e t os tempos zero e t, respectivamente. Com os valores de vt e Ct calculou-se a quantidade do
nutriente em soluo por meio da equao 4.
No Quadro 12 apresentam-se os dados de uma repetio desse ensaio, que foram
utilizados para exemplificar o clculo das constantes de Michaelis-Menten. A seqncia do
ajuste grfico e matemtico foi a seguinte:
a) Os valores de Q = f(t) foram representados graficamente (Figura 8);
b) Na regio inicial da curva, onde so observadas as maiores declividades, escolheu-se, em
seqncia ininterrupta, os pontos que melhor se ajustaram a uma reta (intervalo de 1 a 3,5 horas,
no exemplo), determinando-se uma equao de regresso linear:

Q = a1 + b1t

(7)

em que a1 e b1 so os valores da intercepo e da declividade, respectivamente;

c) Calculou-se Vmax pela equao:

b
Vmax = 1
M

(8)

em que M a massa da matria seca das razes (0,9348 g, no exemplo);

35

Quadro 12. Tempo de exausto, atividade de

32

P, volume e concentrao da soluo e

quantidade de fsforo absorvida por plantas de soja em ensaio para determinar as

constantes de Michaelis-Menten (Fonte: Ruiz, 1985)

Tempo

Atividade

Volume

Concentrao

Quantidade

cpm

mol L-1

mol

4.998,8

0,7990

32,29

25,80

0,5

4.452,6

0,7904

28,45

22,49

1,0

3.490,5

0,7818

22,06

17,25

1,5

3.128,8

0,7732

19,56

15,12

2,0

2.447,4

0,7646

15,13

11,57

2,5

1.747,9

0,7560

10,68

8,08

3,0

1.526,6

0,7474

9,22

6,89

3,5

870,6

0,7388

5,20

3,84

4,0

462,2

0,7302

2,73

1,99

4,5

346,2

0,7216

2,02

1,46

5,0

162,5

0,7130

0,94

0,67

5,5

127,2

0,7044

0,72

0,51

6,0

106,8

0,6958

0,60

0,42

6,5

83,4

0,6872

0,46

0,32

7,0

81,0

0,6786

0,44

0,30

7,5

74,1

0,6700

0,40

0,27

8,0

56,8

0,6614

0,30

0,20

8,5

69,5

0,6528

0,37

0,24

36

Figura 6. Diminuio da quantidade de fsforo (Q) com o tempo de exausto (t) e equaes de
regresso usadas para o clculo das constantes de Michaelis-Menten.

d)

Na regio curva da parte inferior do grfico (intervalo 3,5 a 6,5 horas, no exemplo),

determinou-se a equao de regresso com melhor ajuste aos pontos experimentais, que exigisse
somente 1 grau de liberdade para o modelo. Para os dados analisados, a melhor aproximao
correspondeu a uma equao exponencial:

Q = a 2t b2

(9)

em que a2 e b2 so o coeficiente e o expoente, respectivamente. O critrio de menor soma

do quadrado dos desvios (Nelson & Anderson, 1977) foi usado para escolher os pontos da reta e
da curva. Considerando que a exausto um fenmeno contnuo usou-se, como critrio, a
coincidncia do ltimo ponto da reta com o primeiro ponto da curva;

37

e) Km foi calculada por uma relao semelhante equao 4:

Qm
vm

Km =

(10)

em que Qm a quantidade de ons para a qual a velocidade de absoro equivale metade

da Vmax e vm o volume de soluo correspondente. Qm o ponto da curva da regio inferior do
grfico em que sua tangente iguala-se metade da declividade da reta usada no clculo de Vmax.
Matematicamente:

1 d
(a1 + b1t ) = d a 2 t b 2
2 dt
dt

(11)

1
b1 = a 2 b 2 t m (b 2 1)
2

(12)

em que tm o tempo em que Q iguala-se a Qm. Reordenando:

1 (b 2 1)

b1

t m =
2
a
b
2 2

(13)

Calculando tm estimou-se vm, Qm e Km pelas equaes 5, 9 e 10, respectivamente.

Os valores numricos obtidos com os dados apresentados no Quadro 16 foram os
seguintes:
Equao da reta:

22,70 5,4417 t

R2 = 0,987***

Equao da curva:

592,85 t -4,0791

R2 = 0,980***

Vmax

5,821 mol g-1 h-1

tm

3,81 h

vm

0,733 L

Qm

2,531 mol

Km

3,453 mol L-1

O mtodo grfico-matemtico envolve um volume aprecivel de clculos matemticos

para alocao dos pontos experimentais, o que o torna um processo demorado. Para superar essa
38

dificuldade Ruiz & Fernandes Filho (1992) desenvolveram o programa CINTICA, inicialmente
em DOS, que executa de forma rpida e confivel os clculos necessrios. Uma nova verso
desse programa, em ambiente Windows foi desenvolvido por esses autores, e pode ser obtido a
partir do link ftp://ftp.solos.ufv.br/cinetica .
interessante observar, que embora esse mtodo tenha sido desenvolvido para sistemas
estticos (vasos), Cometti (2003) empregou com sucesso o programa CINTICA a sistemas de
hidroponia NFT, para estudar a cintica de absoro de NH4+ e NO3- por alface.

39

6. LITERATURA CITADA
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43

CAPTULO 5
ABSORO DE NUTRIENTES
Manlio S. Fernandes1 e Sonia R. Souza2
1
2

Departamento de Solos, UFRRJ

Departamento de Qumica, UFRRJ

SUMRIO

TRANSPORTE ATRAVS DA PAREDE CELULAR E DA MEMBRANA PLASMTICA. 2

MEMBRANA PLASMTICA E A ABSORO ONS. ........................................................ 13

ENERGTICA DO PROCESSO DE ABSORO ................................................................. 21

CONTROLE DE pH NAS CLULAS ...................................................................................... 36

CINTICA DE ABSORO DE IONS ................................................................................... 39

INTERAES INICAS.......................................................................................................... 44

TRANSLOCAO DE NUTRIENTES ................................................................................... 46

REFERENCIAS......................................................................................................................... 50

TRANSPORTE ATRAVS DA PAREDE CELULAR E DA MEMBRANA

PLASMTICA.
As clulas vegetais so separadas do meio externo por membranas. Genericamente falando,

as membranas permitiram o desenvolvimento da vida, pois criaram compartimentos separando o

ambiente externo do ambiente interno, ao mesmo tempo em que possibilitam trocas entre estes
ambientes. As membranas permitem assim que as clulas possam ter composio diferente daquela
do meio que as circundam, ao mesmo tempo em que podem retirar do meio o material de que
necessitam para o seu metabolismo e sua organizao estrutural.
As clulas vegetais tm uma parede celular externa, rgida, composta na sua maior parte de
material inerte, e que mantm a sua forma mesmo aps a morte da clula. Internamente, existe uma
membrana, composta principalmente de material lipoprotico, e conhecida como plasmalema ou
membrana plasmtica (Figura 1).
Como pode ser visto na figura 1 a membrana plasmtica um delgado filme de fosfolipdios
e protenas, pressionado contra a parede celular. Na verdade, pode-se dizer que a parede celular
"contm" a membrana plasmtica e o citoplasma. Isto porque, o interior da clula um meio
hipertnico em relao soluo do solo. Deste modo, a clula vegetal se em contacto livre com a
soluo do solo tenderia a expandir explosivamente. Neste sentido, a clula vegetal contida pela
parede rija que a circunda.
A parede celular formada principalmente por uma rede de microfibrilas de celulose
interligadas por feixes de glicanas (Figura 2). Este conjunto est embebido em uma matriz de
hemicelulose e substncias pcticas.
A celulose que forma as microfibrilas da parede celular um polissacardio, que ocorre em
longos polmeros de unidades de D-glicose, que esto unidas por ligaes 1-4, este arranjo
espacial confere celulose a conformao de longas fibras paralelas de 100 a 200 de largura. A
unidade estrutural de repetio da celulose a celobiose formada pela unio de duas molculas de
glicose. A cadeia glicana da celulose pode ter de 200 a mais de 25.000 resduos de glicoses. As
molculas longas e rgidas da celulose combinam-se em orientao paralela, para formar as
microfibrilas. Cada microfibrila pode ter aproximadamente 35 cadeias de celulose (Raven et al.,
2001). Em fungos, as microfibrilas da parede celular podem ser formadas principalmente por quitina
(polmeros de N-acetilglicosaminas).
O dimetro das microfibrilas est entre 5 e 10 nm. A parede celular tem aproximadamente
100 nm de espessura, podendo conter de 5 a 10 camadas de microfibrilas (Figuras 1 e 2).

Clula A

Clula B

Figura 1. Clula vegetal destacando a parede celular e membrana plasmtica. Deslocamento de

ons pelos macro e microporos, e atravs dos transportadores da membrana at o citossol.

Figura 2. Estrutura dos blocos de construo das substncias pcticas (cido -Dpoligalacturnico) depositadas nas microfibrilas de celulose da parede celular.

A hemicelulose um heteropolissacardeo composto de hexoses (glicose) pentoses

(arabinose, xilose) e cidos urnicos (cido glicurnico). Na hemicelulose de gramneas a cadeia
principal composta de xilanas ( 1-4-glicose-glicose) e a cadeia lateral de cido metil-glucurnico,
enquanto as leguminosas apresentam xilanas no ramificadas.
As substncias pcticas podem ser denominadas de homopolissacardeos, quando formadas
por cido 1,4 D galacturnico, ou heteropolissacardeos, quando em sua constituio pode haver
cido galacturnico, D-galactose, L-arabinose e L-ramnose.

As substncias pcticas so

5
particularmente importantes para a nutrio mineral das plantas. Elas so formadas por polmeros do
cido 1,4 D-galacturnico, geralmente esterificado com grupos metila. Estas substncias tm peso
molecular variando entre 25.000 a 360.000. Os feixes de microfibrilas com seus depsitos de
poligalacturatos esto representados na figura 2. Nessa mesma figura podem ser observados os
resduos de cargas negativas sobre as microfibrilas.
Na tabela 1, est a composio da parede celular de alguns tecidos vegetais:

Tabela 1. Composio da parede celular de alguns tecidos vegetais.

Composio da parede celular (% de massa seca)
Tecido Vegetal

Celulose

Hemicelulose

Pectatos

Protenas

Lipdios

Milho (coleptilo)

35

30

13

21

Trigo (folhas)

30

11

22

Aveia (caule)

26

40

20

13

As protenas na parede celular podem ser estruturais (como a extensina) ou enzimticas

(oxidases, fosfatases, ATPases, estearases e outras). Essas protenas podem ser excretadas para o
meio externo. Em geral essas protenas so consideradas "incrustaes" na matriz da parede celular.
Protenas estruturais como a extensina so ricas em prolina e hidroxiprolina. Considera-se que a
maior flexibilidade dos caules das plantas aquticas deve-se principalmente a converso de prolina
em hidroxiprolina nos ambientes aquticos, devido a menor presso de oxignio.
Esta organizao da parede celular permite a formao no seu interior de microporos e
macroporos. Estes poros tm em torno de 3 a 5 nm de dimetro, e em torno de 100 a 200 nm de
comprimento (Figura 2)
Diversas substncias que esto incrustadas ou apenas sobrepostas s microfibrilas de
celulose tm grande importncia para a nutrio das plantas. Protenas, particularmente as que tm
atividade enzimtica podem estar depositadas sobre a superfcie dessas microfibrilas. Tambm
podem ocorrer deposies de acares e de lipdeos. Entretanto, so as deposies de cidos
poligalacturnicos e seus steres (as substncias pcticas), que afetam intensamente a circulao de
ons dentro e atravs da parede celular (Figura 2).
As pectinas podem dar origem a pectatos como os de clcio, que afetam grandemente a
rigidez das membranas.
As microfibrilas de celulose, nas plantas superiores, no formam uma parede contnua, mas
so constitudas de cadeias de polisacardeos de tamanho varivel, que se fixam atravs de ligaes

6
no-covalentes com a matriz que as envolve, e pela coeso desenvolvida pelas foras fsicas
resultantes de seu enovelamento.
Por sua natureza, as microfibrilas de celulose no tm praticamente qualquer
expansibilidade, e por essa razo, os movimentos de expanso celular ocorrem atravs do
rompimento das ligaes no-covalentes entre as microfibrilas e a matriz. Nessa situao, as
microfibrilas e matriz podem deslizar umas sobre as outras, permitindo assim que a clula se
expanda cedendo s presses de turgor.
Embora ainda no se conheam em todos os detalhes do exato mecanismo atravs do qual as
paredes celulares expandem, permitindo o crescimento celular, certo que este fenmeno envolve a
acidificao do espao livre, e portando a ao das bombas inicas de extruso de H+. A
acidificao do espao livre ativa a ao de um grupo de enzimas que atua neste processo; as
expansinas.
Aparentemente, a ao das expansinas se d atravs do rompimento das ligaes nocovalentes que ligam as microfibrilas de celulose matriz de hemicelulose e pectinas. Ou seja, as
expansinas rompem as pontes de hidrognio que unem os feixes de microfilbrilas. Este rompimento
de ligaes no-covalentes permite ento o deslizamento dos feixes de microfibrilas.
Diversas outras enzimas so tambm ativadas quando da acidificao do espao livre. Entre
elas destacamos as endoglicanases que cortam as glicanas da matriz em segmentos menores, o
que contribui para diminuir a resistncia da parede celular.
Dentro da parede celular temos os micro e macroporos formados pela organizao das
microfibrilas de celulose, hemicelulose e lignina, com incrustaes, depsitos de cidos orgnicos,
protenas estruturais e outros compostos que ajudam a formar a estrutura da parede celular (Figuras
1 e 2).

Estes macro e microporos conectam-se com os espaos intercelulares e formam um

continuum. A este conjunto formado pelos espaos intercelulares e poros da parede celular
chamamos de espao livre.
Na verdade, este espao est dividido em dois: um espao em que gua e ons circulam
livremente, e um outro, em que ons de um sinal circulam livremente, enquanto que ons de outro
sinal tm a sua circulao restrita. Assim por exemplo, Cl- e SO4= poderiam circular livremente
neste espao, enquanto que K+ tem a sua circulao limitada. Isto d origem ao conceito de " espao
livre aparente ".
A figura 1 mostra o conjunto formado pelo espao intercelular e poros na parede celular,
formando o o espao livre aparente. Na figura 1, o espao intercelular e o poro com gua (H2O)

7
formam o espao livre de gua. gua e solutos podem circular no espao livre (com restries
devido carga).
Solutos podem entrar e sair dos poros, dependendo dos gradientes de concentrao, e pode
ocorrer troca com o meio externo (soluo do solo). No apenas ons podem circular no espao
livre, mas tambm molculas como acares, aminocidos e outras.
Consideramos estar na endoderme o limite interno do espao livre porque nem a gua nem
os solutos podem atravessar os seus espaos intercelulares, uma vez que, eles esto cimentados com
suberina que recobre as clulas e as une como o cimento une uma parede de tijolos, embora essa
limitao no seja absoluta, principalmente nas reas de crescimento da raiz. ons e gua podem
circular dentro da parede celular, atravs de seu sistema de poros, mas no conseguem atravessar
a membrana interna (plasmalema), que com a sua natureza lipo-protica, impermevel a ons e
gua. Assim podemos estabelecer os limites do espao livre das razes como sendo o espao entre a
epiderme, a endoderme e a plasmalema das clulas do crtex radicular (Ver captulo 2, neste
volume).
Qualquer espcie inica, o K+ por exemplo, pode difundir livremente da soluo do solo para
o interior das razes, circulando pelo espao livre, seja no espao intercelular ou nos poros dentro da
parede celular.
Veja o exemplo do macroporo na clula B da figura 1. A maior ou menor circulao desse
on no espao livre vai depender da concentrao relativa do on nos diversos compartimentos
(macro e microporos-espao intercelular) e da eventual interferncia de foras de adsoro.
Eventualmente o on pode ser perdido para o espao externo. Por esta razo no se pode considerar
que os ons que circulam no espao livre radicular tenham sido realmente absorvidos. Embora
eles estejam dentro da raiz, podem ser facilmente perdidos para o meio externo por simples difuso.
S so considerados realmente absorvidos os ons que atravessam a membrana plasmtica e passam
para o espao interno da clula.
A passagem de um on do espao externo (espao livre) para o espao interno da clula s
ocorre atravs de stios especficos na superfcie da plasmalema. Se um on no encontra o seu stio
especfico de absoro, pode circular por macro e microporos, voltar para o espao intercelular, ou
sair do espao livre. Uma vez que tenha atravessado a plasmalema, entretanto no pode mais voltar
livremente ao espao externo. Foi absorvido! (Figura 1).
O continuum formado pelo conjunto dos espaos intercelulares e poros da parede celular que
resulta numa via de deslocamento de ons tambm chamado de apoplasma, e essa via de
deslocamento a via apoplstica (Figura 3).

8
A absoro de um on (passagem para o interior da clula) pode ocorrer em uma das clulas
da endoderme atravs de sua superfcie exposta (no revestida de material suberificado). Neste
caso, o on atravessa uma nica clula, e chega ao parnquima vascular. A absoro pode tambm
ocorrer em uma das clulas corticais, ou numa clula da epiderme. Nestes dois ltimos casos o on
absorvido tem que ser deslocado, de uma clula a outra at chegar finalmente ao parnquima
vascular. O caminho a ser percorrido, de clula a clula, tornado possvel graas a uma intensa
rede de comunicao clula a clula, os plasmodesmas (Figura 3 e captulo 2). O plasmodesma
um prolongamento do material celular que passa atravs de poros na parede celular. formado por
um desmotbulo, e tem uma espcie de revestimento citoplasmtico.

O desmotbulo o

prolongamento do retculo endoplasmtico de duas clulas adjacentes. A maior parte do transporte

clula a clula, entretanto, pode ser feito atravs do revestimento citoplasmtico. Os plasmodesmas
ocorrem em uma densidade que pode ir de 0,1 a 10,0 por m2 (cerca de 20.000 por cada parede
tangencial, ou 5 X 108 /cm2) (Ver captulo 2 neste volume). Estes canais ligam as clulas desde a
epiderme at a endoderme formando um continuum. A este conjunto chamamos de simplasma. Os
ons que se deslocam de clula a clula atravs do simplasma esto seguindo a via simplstica
(Figura 3).
Seguir a via simplstica uma maneira de contornar as limitaes e/ou restries ao
deslocamento que os ons enfrentam, nos diversos compartimentos do espao livre aparente.
Algumas espcies inicas, de absoro muito rpida so quase que totalmente absorvidas nas
clulas epidrmicas ou nas primeiras camadas de clulas corticais, o que significa que praticamente
s alcanam a rea vascular das plantas por deslocamento atravs do simplasma. O on fosfato
(H2PO4-) uma dessas espcies. Outros ons como o K+ deslocam-se facilmente por via apoplstica.
Na figura 3 esse movimento do on H2PO4- pode ser visto desde a clula epidrmica (1 esquerda)
at as clulas do parnquima vascular.

Figura 3. Deslocamento de ons, desde a soluo externa at o xilema; por via apoplstica (K+), ou
simplstica (H2PO4-).

O deslocamento por via simplsmica resulta em um significativo aumento das possibilidades

de partio ao longo da via de transporte. No caso do fsforo, quando ocorre deficincia desse
nutriente h uma partio desequilibrada de matria seca entre raiz e parte area. Como o on
fosfato tem que percorrer a longa via simplsmica, sob deficincia, a demanda metablica ao longo
da via de transporte retira o fsforo da rota de deslocamento e o incorpora ao metabolismo das
clulas da raiz. Disso resulta o fato de que sob deficincia de P, as razes crescem
proporcionalmente mais do que a parte area (Tabela 2).

10
Tabela 2 Massa seca das Folhas e das razes de plantas de hortel aos 64 dias aps o transplantio
(DAT) em cultivo hidropnico com diferentes doses de N e P (Souza et al., no prelo)
Tratamento

Teor (mg/L)
N-NO3

-------Massa Seca (g/5 plantas) -------

Razes

Folhas
122,9 a

T1

120

16

T2

60

16

30,5 b
29,5 b

T3

120

37,7 a

73,8 c

T4

60

37,8 a

65,8 d

81,2 b

Letras minsculas iguais na mesma coluna no diferem significativamente (Fisher LSD 5%).

O espao livre aparente subdividido em dois: o espao livre de gua, e espao livre de
Donnan. O espao livre de gua aquele em que gua e solutos circulam livremente, enquanto que
o espao livre de Donnan, aquele onde existem limitaes para circulao de ions. Para entender a
origem e extenso deste espao (de Donnan), voltamos a nossa discusso a respeito da deposio de
cidos galacturnicos sobre a superfcie das microfibrilas de celulose.
Pela figura 2 vemos que os cidos galacturnicos so cidos orgnicos de cadeia longa. O
pK dos grupos carboxlicos desses cidos est em torno de 3,5. Isto significa, que nas condies
normais de equilbrio entre a soluo do solo e o apoplasto, estes cidos estaro dissociados (o pH
da soluo do solo, em solos normais est entre 5,0 e 7,0 ). Quando o espao intercelular e os macro
e microporos das clulas entram em contacto com a soluo do solo, ocorre um arraste e eventual
substituio dos prtons do cido. Pode ento ocorrer uma troca de ctions (H+ por K+ por
exemplo), com os resduos de carga negativa formando uma superfcie de carga negativa fixa. Essas
cargas fixas formam uma superfcie de troca de ctions. Esta superfcie, capaz de trocar ctions a
origem da capacidade de troca de ctions das razes, ou CTCR (Figura 4).
Nos microporos, se estas cargas estiverem muito prximas, e sua densidade for grande,
forma-se uma barreira para a livre difuso dos ons. Os ons Cl- , NO3- e H2PO4- por exemplo
teriam grande reduo de sua velocidade de difuso sob essas condies. Por outro lado, os ctions
seriam atrados por essas superfcies carregadas. A intensidade dessa atrao depende da densidade
das cargas eltricas fixas, e da valncia do on. Assim por exemplo, em uma superfcie de pequena
densidade de carga um on monovalente como o K+ seria atrado com muito maior facilidade do que
um on trivalente como o Al+++ (Figura 4A e 4B). Por outro lado em uma superfcie de alta
densidade de carga, ctions de maior valncia como o Ca++, seriam atrados com maior intensidade,
e teriam maior atividade do que os ons monovalentes (Figura 4D). Deste modo, teremos como uma

11
regra geral: poros com baixa densidade de carga atraem preferencialmente ons monovalentes, em
detrimento dos ons di e trivalentes, enquanto que, poros com alta densidade de carga atraem
preferencialmente ons di e trivalentes, em detrimento dos ons monovalentes (Figura 4).
ons trivalentes como o Al+++, tm uma interao to grande com superfcies de alta
densidade de cargas, que praticamente entram em colapso sobre essas superfcies, formando
ligaes quase covalentes (Figura 4C). Neste caso, dificilmente so substitudos nas superfcies de
troca e reduzem a CTCR da planta (ver captulo 15 neste volume).
Em geral, as monocotiledneas tm uma menor densidade de carga do que as
eudicotiledneas. Plantas como o milho, arroz e brachiaria, tm uma densidade de carga (expressa
em CTCR) em torno de 10 a 20 meq/100 g de razes secas, enquanto que soja e feijo tm suas
CTCR em torno de 40 a 80 meq/100 g de razes secas.
Esta variao da CTCR nos permite fazer algumas consideraes sobre a capacidade de
diferentes plantas de extrair nutrientes do solo. Embora a CTCR seja um dentre os inmeros fatores
que afetam o processo de aquisio de nutrientes pelas plantas, se colocarmos sob as mesmas
condies ambientais duas razes com diferentes CTCR e do mesmo tamanho, podemos esperar que
as plantas de menor CTCR sejam mais eficientes na absoro de K+, enquanto que as plantas de
maior CTCR absorvero Ca++ e Mg++ mais eficientemente, se todos os outros fatores forem
mantidos constantes. Glass et al. (1992) observaram que a absoro de ctions monovalentes (K+ e
Na+) diminui, e a absoro de ctions divalentes (Ca++ e Mg++) aumenta, medida que a CTCR das
plantas aumenta. Este fenmeno importante no desenvolvimento de espcies de plantas calccolas
ou calcfugas.

12

Figura 4. Superfcies de cargas nos macro e microporos da parede celular

13

MEMBRANA PLASMTICA E A ABSORO ONS.

A membrana celular (plasmalema ou membrana plasmtica) formada por uma dupla camada

de fosfolipdios e incrustada de protenas apresenta o seu interior hidrofbico, portanto impermevel

gua e a espcies inicas (Figura 5).

Figura 5. Diagrama representativo de um segmento de membrana biolgica: dupla camada de

fosfolipdios e protenas.

A absoro de ons atravs das membranas ocorre necessariamente atravs de stios

especficos, de origem protica (protenas integrais da membrana), que permitem a passagem dos
ons do meio externo para o interior das clulas. Essas protenas integrais de membrana formam os
trs sistemas que atuam no transporte de ons: as bombas inicas, os transportadores de ons e os
canais inicos (Figura 6).

14

As bombas inicas atuam no transporte unidirecional de ons (uniporte), e esto acoplados a

sistemas geradores de energia (ex. H+-ATPases). A velocidade de transporte das bombas
inicas de 100 ons/segundo.

Os transportadores de ons (carreadores) podem ser unidirecionais (uniporte); podem atuar

na troca de uma espcie inica por outra (antiporte), ou no transporte simultneo de ons
(simporte). Sofrem mudanas conformacionais durante o transporte. A velocidade de
transporte variar de 300 a 1000 ons/segundo.

Os canais inicos so de alta velocidade. Transportam apenas a favor de gradientes de

potencial eletroqumico. A velocidade de transporte dos canais inicos pode variar de 106 a
108 ons/segundo.

Figura 6. Sistemas de transporte atravs da membrana plasmtica.

15
A seguir feita uma descrio detalhada dos sistemas de transporte.
a) Bombas inicas
As bombas inicas atuam no transporte ativo de ons, com o uso direto de energia
metablica. Geralmente so sistemas que incluem ATPases ou Pirofosfatases. Estes transportadores
usam a energia gerada pela hidrlise de ligaes de alta energia (ATP ou PPi), sofrem mudanas
conformacionais, e voltam ao estado inicial aps transportar o on.
Entre as bombas inicas, sem dvida a mais estudada a bomba inica de extruso de
prtons. A extruso de prtons, conhecida como "transporte ativo primrio" um mecanismo
gerador de eletrogenicidade, e portando atua sobre as diferenas de potencial que compem, junto
com as atividades da espcie inica, o potencial eletroqumico que determina as caractersticas do
transporte ativo ou passivo.
Foram identificadas bombas de prtons que atuam tanto na membrana plasmtica como na
membrana do vacolo (tonoplasto). Na plasmalema, a bomba de extruso de prtons atua, tornando
o interior da clula mais negativo e criando um gradiente de prtons entre o exterior e o interior da
clula (gradiente protoninico). No tonoplasto, foram identificadas bombas de prtons que atuam no
sentido citoplasma vacolo, que so as H+-ATPases e as H+-PPases. No caso de transporte
atravs do tonoplasto, um gradiente protoninico criado de dentro para fora (vacolo
citoplasma) (figura 7).

Figura 7. Sistemas de transporte de ons na clula: (1) P-H+-ATPase; (2) Transportador de nitrato
(simporte com 2H+); (3) Canal inico; (4) V-H+-ATPase; (5) P-H+-PPase; (6) Transportador
de nitrato (simporte com 1H+)

16
A P-H+-ATPase uma glicoproteina de aproximadamente 100 kDa com 10 hlices
transmembrana (Figura 8), que hidrolisa ATP para gerar um movimento vetorial de H+ em direo
ao apoplasto, criando gradientes de pH e potencial eltrico na membrana, o que viabiliza o
transporte de ons e molculas para dentro ou fora da clula atravs de sistemas de transporte ativo
secundrio.

H+ H+
H+
H+

H+

Apoplasto

Citosol
H+

H+3N

H+

H+

ATP

FC
Ao da FC

COO

14-3-3

ADP + Pi

Figura 8. Forma estendida da P-H+-ATPase destacando as 10 hlices transmembrana, domnio de

hidrlise do ATP e ao da fusicocina (FC) na extremidade auto-inibitria C-terminal,
ativando irreversivelmente a enzima (Adaptado de Azevedo, L., tese de mestrado, UFRRJ,
2006).
As P-H+-ATPase so fortemente inibidas por ortovanadato (HVO42-), um on anlogo ao
fosfato (HPO42-) que compete com o fosfato do ATP pelo stio de fosforilao de um resduo de
aspartato na enzima. Isso ocorre porque o ortovanadato muito parecido com a estrutura do fosfato
no momento da hidrlise.
Estas protenas so reguladas pela concentrao de substrato, temperatura, pH, e ons entre
outros, e podem ser reversivelmente ativadas ou desativadas por diversos sinais exgenos como
hormnios, luz, ataque de pragas e/ou patgenos, dentre outras. A regulao das P-H+-ATPase
mediada por um domnio auto-inibitrio localizado na extremidade C-terminal da cadeia

17
polipeptdica (face citosslica), que atua na regulao da atividade hidroltica desta protena. Esta
regulao pode tambm ser resultado da ao de quinases ou fosfatases que podem adicionar ou
remover grupos fosfato nos resduos de serina ou treonina presente no domnio auto-inibitrio da
enzima (Figura 8).
A fosforilao destes resduos e a ligao da protena regulatria 14-3-3, resulta na ativao
da enzima. Este complexo H+-P-ATPase-14-3-3 pode ser observado em plantas tratadas com
fusicosina, uma toxina produzida pelo fungo Fusicoccum amygdali. A fusicosina liga-se ao
complexo H+-P-ATPase-14-3-3 e o estabiliza, ativando dessa forma irreversivelmente a enzima.
(Figuras 8 e 9).

C
300

0.8

CONTROLE

FUSICOCCINA

K+
H+

250

-1
+

eq H L

200

VANADATO

meq K L

-1

0.6

150

0.4

100
0.2
50
0

0.0

10 12 14 16 18 20 22 24 0

10 12 14 16 18 20 22 24 0

10 12 14 16 18 20 22 24

TEMPO (HORAS)

Figura 9. Efeito do vanadato (inibidor) e da fusicocina (estimulante) na atividade das H+ATPase nas razes de arroz. (A) Controle, (B) Com vanadato h uma completa inibio
da extruso de H+ e consequentemente no h queda na concentrao externa de K+
(influxo de K+); (C) Ao contrrio, a fusicocina aumenta a extruso de H+ e a absoro de
K+ (Bucher et al., no prelo).

A H+-ATPase vacuolar ou V-H+-ATPase uma enzima que acidifica compartimentos

intracelulares e est localizada no apenas no tonoplasto, mas tambm no retculo endoplasmtico
(RE), provacolos, membrana plasmtica, e outras membranas da via secretria. Essas enzimas
diferem tanto estrutural quanto funcionalmente das P-H+-ATPases de plasmalema (Figuras 8 e 10).
A V-ATPase estruturalmente mais relacionada as F-ATPases (ou F1Fo ATP-sintase) que
normalmente funciona na sntese de ATP em mitocndrias, cloroplastos e bactrias.
A V-ATPase usa a energia liberada durante a hidrlise do ATP para bombear prtons para o
interior do lmem vacuolar, portanto criando um gradiente de potencial eletroqumico, e a fora

18
prton motriz para uma variedade de eventos de transporte de ons e metablitos. Dessa forma, a
H+-V-ATPase gera um gradiente de pH atravs do tonoplasto explicando o fato do pH vacuolar ser
tipicamente de 3 a 6 enquanto o pH do citosol se encontra por volta de 7,5.
A V-ATPase composta de dois domnios estruturais. O domnio perifrico (V1) um
complexo de 640 kDa responsvel pela hidrlise de ATP e contm oito diferentes subunidades (AH) de massa molecular entre 13 e 70 kDa com a estequiometria A3B3CDEFG2H1-2. O domnio
integral (Vo) um complexo de 260 kDa responsvel pela translocao de prtons e composto de
cinco subunidades (a, b, c, c, c) com massa molecular entre 17 e 100 kDa na estequiometria
abccc4 (Kawasaki-Nishi, et al., 2003). A subunidade a forma dois hemi-canais em comunicao
com os lados citoplasmticos e o lmem vacuolar e provavelmente o local por onde os prtons
passam.

ADP+Pi
B G

B
A

H+

ATP
E
H

C
D
F

c c c

Figura 10: Modelo rotacional de funcionamento das V-H+-ATPase. (Azevedo, L., tese de
mestrado, UFRRJ, 2006, adaptado de Kawasaki-Nishi, et al., 2003).

Muitos estudos sobre a funo fisiolgica dessas protenas tem sido possveis graas
existncia de inibidores especficos das V-ATPAses como a bafilomicina A1. Este antibitico inibe
a atividade da V-ATPases de diferentes organismos em concentraes na faixa do nanomolar. A
ao da bafilomicina A1 se d pela ligao desse inibidor ao setor Vo impedindo o fluxo de prtons
atravs do canal de prtons da enzima. As V-H+-ATPase so tambm inibidas pela presena de
NO3- no citossol. Esta caracterstica importante no metabolismo de N nas plantas.

19
Outro tipo de bomba de prtons, a H+-PPase trabalha paralelamente s V-ATPases para gerar
um gradiente de prtons atravs do tonoplasto. A H+-PPase composta de um nico polipeptdio
com massa molecular em torno de 80 kDa com tamanho aparente em gel de poliacrilamida de 67 a
73 kDa. A H+-PPase a nica bomba de prtons que utiliza um substrato de baixo custo energtico,
o pirofosfato (PPi), sendo este, produto gerado por vrios processos biosintticos de
macromolculas, como protena, DNA, RNA, celulose entre outras.
comumente aceito que o requerimento diferenciado de energia entre as V- H+-ATPases e
as H+-PPases pode prover uma plasticidade energtica necessria para manuteno da homeostase
celular numa ampla faixa de condies metablicas. Por exemplo, tem sido argumentado que H+PPase a bomba predominante em tecidos jovens que contm um elevado contedo de pirofosfato
oriundo das altas atividades biossintticas desses tecidos. Alm disso, a atividade das V-PPase nas
clulas em crescimento ajuda a conservar o ATP, que moeda corrente de energia na clula.
A sntese de H+-PPase vacuolar em determinadas plantas pode ser induzida por carncia de
Pi, anoxia ou frio. Portanto, prope-se que esta enzima deva funcionar como um sistema para
garantir a manuteno das funes essenciais da clula sob condies em que a produo de energia
metablica (ATP) reduzida pela inibio do processo respiratrio.
A gerao de um gradiente protoninico, no caso da plasmalema, fundamental para o
transporte simultneo (simporte) de um on e de um prton como no caso do transporte de nitrato
(NO3-/ 2H+) ou para o transporte de nitrato do vacolo para citoplasma (NO3-/ H+) (Figura 7).
Gradientes protoninicos so tambm essenciais para o transporte (simporte) de acares e de
aminocidos em plantas.
Os transportadores de ons (carreadores) podem transportar ons atravs da plasmalema a
favor de um gradiente de potencial eletroqumico (transporte passivo) sem troca por outra espcie
inica de mesma carga (uniporte) ou permitir a troca de uma espcie inica de um sinal, por outra
de mesmo sinal (antiporte). O transporte de Na+ para fora da clula atravs da plasmalema em troca
de um H+, um exemplo de transporte do tipo antiporte. O transporte de K+ (de fora para dentro)
um exemplo de transporte unidirecional (uniporte) (Figura 11).
Os transportadores podem tambm fazer o transporte ativo de ons (contra um gradiente de
potencial eletroqumico) em sistemas de cotransporte (simporte) em que o on, a ser transportado
(ction ou anion) entra na clula contra o seu gradiente de potencial eletroqumico. A energia para
esse processo obtida com a entrada simultnea de outro on, este sim, entrando a favor do seu
gradiente de potencial eletroqumico.

20
A atividade das H+-P-ATPases gera um gradiente de prtons H+ entre o exterior e o
interior da clula. Este acmulo de H+ no exterior da clula cria um potencial, com tendncia dos H+
a voltar ao interior eletronegativo da clula. Isso gera na verdade, uma fora prton motriz p
(Figura 11).
A fora prton-motriz est relacionada ao potencial da membrana e a diferena de pH
(pH) entre os meios interno (citosol) e externo (espao livre):

p = - 2,303 RT/F. pH
(R= constante dos gases; T=Temperatura absoluta; F= Constante de Faraday)
A 25C, teremos: p= - 59 pH
Por exemplo: com o potencial de membrana em -110mV e a diferena entre o pH externo e o pH
interno (pH) de 2,0; teremos:

p=-228mV

esta fora prton-motriz (p) que energiza o transporte de outros ons, que por seu
gradiente de potencial eletroqumico tem que ser absorvidos ativamente, nas que no dispem de
um sistema ativo primrio (tipo bomba inica) para transporte.

21

Figura 11. Gerao de gradiente de prtons (H+) atravs da plasmalema.

ENERGTICA DO PROCESSO DE ABSORO

Os nutrientes esto em concentraes muito pequenas no solo e para que esses nutrientes

possam ser retirados deste ambiente rarefeito, a estratgia desenvolvida pelas plantas foi a de criar
uma grande superfcie radicular, para permitir contacto com o maior volume possvel da soluo do
solo. Por outro lado, as plantas tambm desenvolveram uma grande superfcie foliar na parte area
para permitir a captao mais eficiente da energia solar, que chega a superfcie das folhas em
pequena densidade sob a forma de quanta de luz.
A imagem usada fica assim justificada; uma grande superfcie de captao de nutrientes em
contacto com o solo, e uma grande superfcie de captao de energia, aberta para o cu. Entre as
duas, um eficiente sistema de transporte (Figura 12).

22

Figura 12. As plantas superiores apresentam duas grandes superfcies que so como uma imagem
especular uma da outra, e ligadas por um sistema de vasos condutores (xilema e floema)
para comunicao entre elas.

Na tabela 1 do captulo 1, neste volume, esto as concentraes dos nutrientes nas plantas.
Em condies normais, as concentraes de nutrientes nas plantas podem exceder em muito as
concentraes no solo. Experincias feitas com cenoura, por exemplo, mostram que os tecidos
podem acumular K+ em concentraes 10.000 vezes maiores do que a concentrao na soluo em
que esto imersas. Mesmo que as concentraes normais nos tecidos vegetais no sejam assim to
elevadas, o fato que as plantas, e em particular as razes das plantas tm em geral uma
concentrao de nutrientes muito maior do que a soluo do solo. A despeito desta grande diferena
de concentrao, as plantas retiram do solo os nutrientes de que necessitam.
Se os ons encontrados entre a soluo do solo e o interior das razes fossem distribudos
naturalmente, de acordo com os princpios da fisico-qumica, deveria haver um deslocamento dos
ons do local de maior concentrao para o de menor concentrao. No caso, como a concentrao
de ons na planta (razes) maior do que na soluo do solo, deveria haver uma perda de ons pela
raiz e um conseqente enriquecimento da soluo do solo em nutrientes. Entretanto, o que a
experincia nos mostra que ocorre exatamente o contrrio: mesmo que a concentrao de ons em
uma soluo externa seja 1000 vezes menor do que o das razes, ainda assim as plantas retiram este
nutriente deste meio rarefeito e aumentam a concentrao do on em seus tecidos. Em outras

23
palavras, os ons podem se deslocar de um ambiente para outro (do solo para as razes) contra
gradientes de concentrao.
Agora vamos nos deter um pouco na questo; que foras seriam capazes de vencer a barreira
formada pelos gradientes de concentrao durante o processo de absoro de nutrientes pelas
plantas?
Inicialmente vamos considerar que a entrada de nutrientes na clula pode ser passiva. Por
passivo queremos dizer: energia metablica no est sendo usada diretamente no transportador,
o que no significa como j vimos que este transporte esteja sendo feito sem gasto de energia.
Todo e qualquer processo metablico usa energia. A questo onde e quando!
No caso do transporte passivo, a energia metablica (no caso, energia obtida atravs da
hidrlise de ATP) est sendo usada em outro processo, que usa essa energia para gerar gradientes de
potencial atravs das membranas. So ento esses gradientes as foras que ajudam transportar os
ons de fora para dentro das clulas. Em outras palavras, no transporte passivo ocorre um uso
indireto da energia metablica, tornada disponvel pela hidrlise do ATP.
No caso do transporte ativo, que feito contra um gradiente de potencial eletroqumico,
energia pode ser usada diretamente pelo transportador, como o caso das bombas inicas, ou
indiretamente, atravs da gerao de gradientes de prtons. O gradiente de prtons permite um cotransporte em que o H+ transportado a favor de seu gradiente (passivamente), enquanto que o
elemento co-transportado (anions, acares, aminocidos) o contra seu gradiente (ativamente).
Este tipo de deslocamento de solutos, de um local em que esto em menor concentrao,
para outro em que esto em maior concentrao, em desacordo aparente com as leis da fsica,
conhecido como "deslocamento contra um gradiente de concentrao".
Vejamos, na tabela 3, o deslocamento de um soluto de um compartimento cuja concentrao
0,01 mM, para outros compartimentos de maior concentrao, e a energia necessria para este
trabalho.
Tabela 3. Deslocamento de um glicose de um compartimento cuja concentrao 0,01 mM, para
outros compartimentos de maior concentrao, e a energia necessria para o processo
(Adaptado Nelson e Cox, 2004)
Concentrao de Glicose (mM)
externa
interna
0,01
0,1
0,01
1,0
0,01
10,0

Razo de concentrao
1:10
1:100
1:1000

Variao de Energia Livre

(G) (Kcal / mol)
1,34
2,68
4,02

24
Como pode ser observado na tabela 3, temos um soluto (glicose), sendo transportado de um
compartimento em que a concentrao de 0,01 mM para outros compartimentos em que as
concentraes so 10, 100 ou 1000 vezes maiores. Para que isso ocorra, necessrio que alguma
fora atue empurrando o soluto contra um gradiente de concentrao. Para um soluto neutro, como a
glicose, por exemplo, possvel calcular qual a fora necessria para este trabalho, atravs da
equao de Nernst:
G = RT ln Ci
Ce

(1)

Onde: Ci = concentrao interna e Ce= concentrao externa.

No nosso exemplo :
G = RT ln 0,1
0,01
Nesta equao, G a variao da energia livre no sistema (formado pelos dois
compartimentos), R a constante dos gases, e T a temperatura absoluta. ln o logaritmo natural, no
caso, da razo entre as concentraes interna e externa do on.
Pelo que podemos ver na ltima coluna da tabela 2, a energia necessria para "empurrar" um
mol de glicose contra um gradiente de concentrao duplica medida que a concentrao interna
aumenta de 10 para 100 e de 100 para 1000 vezes.
Estes dados indicam que tambm a absoro de ons pelas plantas a partir de baixas
concentraes como as que ocorrem na soluo do solo, exigem energia, sendo feita contra um
gradiente de concentrao.
necessrio observar, entretanto, que no exemplo acima se trata de uma molcula neutra
(glicose). Os nutrientes, entretanto, existem nas solues externas s razes como espcies inicas,
tm carga. Neste caso, a equao tem que ser modificada para incluir a carga. A equao de Nernst
pode ento ser modificada:

G = RT ln C2 + ZF
C1

(2)

Onde: Z a carga do on, F a constante de Faraday (96,493 Coulomb/Eqg) e a diferena

de potencial eltrico atravs da membrana por onde o transporte est sendo mediado.
Para que possamos entender melhor as aplicaes deste conceito preciso antes examinar o
conceito de "potencial atravs da membrana", sua origem e suas funes.

25
Quando uma clula vegetal em equilbrio com a soluo externa examinada com um
microeletrodo (do tipo Ling- Gerard ), observa-se que entre o interior da clula e a soluo externa,
geralmente existe uma diferena de potencial em torno de - 100mV (interior negativo). Estes
microeletrodos tm em geral pontas de 10 de dimetro quando so usados em algas gigantes, e de
1 de dimetro para clulas animais e vegetais. Os microeletrodos so feitos de vidro, e tm alta
impedncia. Internamente o eletrodo imerso no citoplasma ou no vacolo e externamente na
soluo que banha a clula. Os trabalhos clssicos nesta rea foram feitos com algas unicelulares
(algas gigante) (figura 12).

Figura 12. Correntes eltricas podem ser formadas entre o interior da clula e o meio externo

A existncia deste potencial, em condies de equilbrio de fluxos, indica que as plantas

tendem a manter um excesso de carga negativa no seu interior (em relao soluo externa). Estas
cargas tm origem nos resduos de carga negativa resultantes da dissociao de cidos orgnicos,
com posterior extruso dos prtons. Estes cidos podem ser de grande peso molecular ou no, o que
pode lhes dar caractersticas de superfcies de cargas fixas.
O pH citoplasmtico est em torno da neutralidade, os cido orgnicos tem um pK em torno
de 3,5, assim sob condies normais de metabolismo estes cidos esto dissociados. Para que ocorra

26
um desequilbrio em favor das cargas negativas, necessrio que as plantas eliminem o excesso de
H+, ficando na clula os resduos negativos (Figura 11).
As plantas desenvolveram um eficiente sistema de eliminao de prtons, atravs das
bombas inicas de extruso de prtons. A bomba inica de extruso de prtons o mecanismo
central no processo de nutrio mineral das plantas.

Este mecanismo gera direta ou

indiretamente a energia que permite a entrada de espcies inicas nas clulas, mesmo contra um
gradiente de concentrao (ou como veremos adiante, contra um gradiente de potencial
eletroqumico).
A bomba de prtons na verdade um transportador de ons, especfico para prtons que
funciona usando energia metablica (ATP). O transportador, estimulado pela presena de H+ no
meio interno, usa a energia gerada pela hidrlise do ATP para mudar de estado energtico, liga-se
ao H+, e o bombeia para o meio externo, independentemente de troca por outro cation (do meio
externo). , portanto, um sistema de transporte unidirecional chamado uniporte. (Figura 6)
Uma transferncia unidirecional de cargas positivas gera eletronegatividade (pois no ocorre
transporte simultneo de outro ction de fora para dentro, de modo a que a diferena de carga
positiva pudesse ser compensada) (interior negativo). Deste modo quando um microeletrodo for
inserido na clula, surge uma corrente. Este potencial que gerado entre o interior e o exterior da
clula, atravs da plasmalema, denominado potencial de membrana ( ).
Origem dos potenciais de membrana (desenvolvimento de cargas negativas no interior das
clulas):
O potencial qumico de um on J :
-j =

*j + RT Ln aj + VjP + zj FE
O termo VjP indica o efeito da presso no potencial qumico. Nas razes, este termo

negligvel.(considerando-se -j)
R = constante dos gases
T = temperatura absoluta
aj = atividade qumica do on j
z = valncia do on
F = Constante de Faraday
E = potencial eltrico em volts

27

Consideremos as atividades do on j dentro e fora da clula:

- j i = *ji + RT Ln aji + zj FEi

- jo = *jo + RT Ln ajo + zj FEo

Exterior

Interior da clula

em condies de equilbrio :
- j o = -ji

logo :

Ei - Eo = RT ln ajo
zj F
aji

Por essa equao, verificamos que, em condies de equilbrio, o potencial gerado atravs da
membrana depende da atividade qumica do on nos dois compartimentos. A bomba de prtons
desloca este equilbrio em favor do compatimento externo, gerando eletronegatividade, e criando
um gradiente protoninico.
Potencial atravs da membrana.
A difuso de um on (C+) com um coeficiente de permeabilidade diferente do co-ion gera um
potencial (potencial de difuso). Quando existe um on fixo (por exemplo, os cidos orgnicos no
citoplasma, ou as protenas estruturais) a direo do potencial dada pela carga do on fixo.

28

A-i

A-o

C+

C+

C+XExterior

Interior da clula

Onde: X-, o on fixo.

Quando um on difunde livremente (e passivamente), sem ser afetado por outros ions ou por
interaes com a membrana:
Ej = Em
Onde, Ej o potencial do on (potencial de Nernst) e o segundo termo, Em, o potencial da
membrana.
Quando Ej difere de Em, isso significa que foras outras que no a difuso esto agindo
sobre os ons.
Podemos agora voltar equao de Nernst, adequada para a incluso da carga dos solutos:
G = RT ln Ce + ZF
Ci
Ce= concentrao externa de ons.
Ci= concentrao interna de ons.
A partir desta equao podemos calcular qual o potencial de membrana a partir do qual uma
espcie inica pode ser transportada para o interior da clula, a favor do gradiente de potencial
eletroqumico.
Vejamos o potencial de membrana para a absoro de K. Em primeiro lugar, necessrio
conhecer as concentraes externa e interna da espcie inica. No caso, teremos uma concentrao

29
externa (na soluo) de 1 mM. A concentrao interna (na clula) de 89mM (Lttge e
Higinbothan, 1979)
Arranjando a equao teremos:
Ek+ = RT ln [K]e
ZF [K] i
Onde : (ZC+ =+1);

(RT =25,3)
ZF

Ek+ = 25,3 ln 1
89
Ek+ = -114 mV
No exemplo citado (Lttge & Higinbotham, 1979), o potencial da membrana medido com
eletrodo foi de -109 mV. A pergunta ento : dadas s concentraes de K+ (Ke/Ki), e o potencial de
membrana (), a tendncia do on K ser de entrar ou de sair da clula?
A fora potencial para entrada (ou sada) de um on ser:
EDK= Em - Ek
ou seja: EDK= (-109) - (-114) = 5 mV
(D=drive)
Com este resultado (+5) no haver tendncia de deslocamento de K+ para o interior da
clula. Neste caso, o gradiente de potencial eletroqumico desfavorvel ao transporte (passivo) de
K+. Para que o on possa ser transportado ser necessrio usar energia adicional, capaz de realizar o
trabalho de transporte do on.
A partir deste exemplo de Lttge & Higinbotham (1979), fizemos uma modificao nesse
sistema de modo a permitir que se desenvolva um gradiente de potencial eletroqumico favorvel
absoro passiva de K+.
Um parmetro que pode ser modificado facilmente a concentrao externa de K (na prtica
agronmica isso feito via aplicao de fertilizantes). Neste caso, por exemplo, vamos duplicar a
concentrao externa de K. Teremos:

30

[K]e = 2mM

[K]i = 89 mM

EK+ = 25,3 ln 2
89
EK+ = - 96 mV
logo,
EKD = -109 (-96) = - 14 mV
(Em) (EK)
Com este resultado negativo, o on K+, nessa nova situao, ser absorvido passivamente.
Uma outra possibilidade seria estimular a atividade da bomba inica de extruso de H+, por
exemplo, com a aplicao de Fusicocina, como pode ser visto na figura 9.
Neste caso, e todos os outros fatores sendo mantidos constantes, o potencial da membrana
() torna-se ainda mais negativo. Vamos supor, por exemplo, que como resultado do estmulo
atividade das H+-ATPases, devido aplicao da Fusicocina, o potencial da membrana caia para
150 mV. Neste caso, e mantendo-se as mesmas concentraes iniciais interna (89 mM) e externa (1
mM), teremos o seguinte resultado:
EDK+= -150 (-114) = -36 mV
Tambm neste caso, o K+ pode ser absorvido, passivamente, graas ao gradiente de potencial
eletroqumico favorvel, criado pela ao eletrognica da bomba inica de extruso de H+.
Resumindo teremos:

Transporte ativo: feito contra um gradiente de potencial eletroqumico

Transporte passivo: feito a favor de um gradiente de potencial eletroqumico

Quando transportadores do tipo simporte, aceitam o on a ser transportado ativamente em

um stio, e o H+ em outro stio, a fora prton-motriz (p) arrasta as duas espcies inicas para o
interior da clula. Como pode ser visto na figura 7, o NO3- por exemplo, praticamente nunca teria
condies de entrar passivamente em uma clula da raiz. Seu transporte teria que ser ativo. Neste

31
caso, a energia para o transporte contra um gradiente de potencial eletroqumico, fornecida pela
fora prton motriz (p).
Em qualquer dessas formas de transporte, o transportador sofre mudanas de conformao.
A velocidade de transporte desse sistema est em torno de 103 ons por segundo.
Os canais inicos, formados por protenas, com uma frao apolar embebida no interior da
plasmalema, e com o lmen formado com stios eletricamente carregados so mecanismos de
transporte de grande velocidade (106 a 108 molculas por segundo), reduzindo a energia necessria
para o transporte atravs da membrana. Os canais inicos atuam sempre a favor do gradiente de
potencial eletroqumico, e pela sua velocidade so retificadores de corrente. Quando abertos, os
canais inicos formam poros seletivos que transportam ons sem que ocorram mudanas de
conformao na protena (Zimmermann & Sentenac, 1999).
Canais inicos ajudam a controlar o potencial das membranas, e participam da transduo de
informaes em plantas.
Alguns canais inicos so de maior seletividade, enquanto que outros podem transportar
diversas espcies inicas, como por exemplo os canais no seletivos de ctions. Certos

canais

inicos s so ativados a partir de um dado potencial de membrana, ou seja tm um controle ou

(portal) umbral a partir do qual esto abertos. Abaixo deste potencial de membrana o canal inico
estar fechado.
Por exemplo, o canal inico pode abrir a potenciais de membrana mais negativo que 200mV, e fechar com potenciais mais positivos que -100mV.
Os canais inicos mais estudados so os de K. Canais transportadores de K existem em
plantas e em animais, e podem ser de diversos tipos. Os mais conhecidos so os da famlia shaker.
So formados por uma cadeia polipeptdica com 6 segmentos que atravessam a membrana (S1 a
S6), estando as extremidade N-terminal e C-terminal, ambas no interior da clula (Figura 13). O
domnio P localizado entre os segmentos S5 e S6 forma o poro aquoso, quando quatro cadeias
polipeptdicas se arranjam espacialmente na membrana, formando a estrutura tetramrica do canal.
O segmento S4 o elemento sensor do potencial eltrico, ele caracterizado pela presena de
aminocidos com carga positiva. O arranjo espacial de quatro cadeias polipeptdicas (estrutura
tetramrica) com seus respectivos seguimentos que atravessam a membrana (S1 a S6) formam o
poro do canal de K+, por onde esse on atravessa a membrana (Figuras 13 e 14). Em canais de K do
tipo KAT1, aminocidos com carga positiva foram identificados como parte do sistema de sensores
de voltagem (Zimmermann e Sentenac, 1999).

32

Figura 13. Representao esquemtica dos domnios transmembrana dos canais de K+.(Adaptado
de Zimmermann e Sentenac, 1999).

Figura 14. Arranjo espacial em estrutura tetramrica dos domnios transmenbrana dos canais de
potssio (vista superior) (Modificado a partir de Zimmermann e Sentenac, 1999)

33
Alguns canais inicos esto localizados prioritariamente em rgos especficos da planta.
Canais codificados pelos genes AKT1 so expressos preferencialmente em clulas da epiderme e
crtex da raiz ( possvel que este canal tambm participe do transporte de alta afinidade de K).
(Figura 3).
H tambm os canais que aceleram a sada de ons, da clula. No caso do K por exemplo, o
gene skor (Stellar K+ outward-rectifying channel) codifica para um canal inico (SKOR) que acelera
a sada de K da clula. Estes canais esto situados preferencialmente nas clulas do periciclo e do
parnquima vascular. So eles os responsveis pela liberao no espao livre estelar, do K+ que vai
ser deslocado para o xilema (Figura 3).
Os canais inicos so extremamente importantes no controle de Ca++ no citoplasma, e no
transporte de NO3- para o vacolo. No caso do nitrato, o rpido transporte para fora do citoplasma
explica as quedas de atividade das enzimas de reduo (NR) quando o suprimento externo de nitrato
reduzido, mesmo quando o teor total de nitrato na planta ainda elevado.
Canais para transporte de anions tambm foram localizados na raiz, e so importantes para o
efluxo de nutrientes para o apoplasto, na rea do parnquima estelar (Roberts, 2006).
Tambm de grande significao para a nutrio de plantas so os canais inicos para efluxo
de cidos orgnicos. Na plasmalema das clulas da raiz, existem canais deste tipo, que so ativados
pela presena no meio externo de ons potencialmente txicos como o Al+++(Ver Cap. 15 neste
Volume). Existem outros canais especializados na exsudao de cidos orgnicos que so ativados
quando h deficincia de Fsforo (P) no meio externo. Este tipo de canal aninico particularmente
ativo nas razes proteides de algumas espcies vegetais.
A importncia dos transportadores de ons para as plantas pode ser avaliada pelo fato de que
um grande nmero de genes ou de famlias de genes codifica para a sntese das protenas
envolvidas. No primeiro organismo cujo patrimnio gentico foi completamente decodificado
(Haemophilus influenzae), de um total de 1743 genes, nada menos que 12,2 % codificam para os
transportadores ou para as protenas que formam o complexo transportador. Ao que tudo indica esta
percentagem deve ser regra geral para todos os organismos.
Em H+ATPases vacuolares foi observado que existem famlias multignicas codificando
para as subunidades das H+-ATPases, que funcionariam em complemento aos genes bsicos que
codificam para o transportador e que mantm o sistema em funcionamento. Isto significa que podem
surgir genes codificando para sistemas transportadores em resposta a estmulos ambientais, o que
extremamente interessante do ponto de vista da nutrio mineral de plantas.

34
Como j mencionamos, interessante observar a existncia de bombas inicas como a de
Ca++ (de dentro para fora atravs da plasmalema) e do antiporte Ca++/ H+ no tonoplasto atuando
como um eficiente sistema para a homeostase do Ca++ nas clulas. Por outro lado a existncia de
bombas inicas de protons tanto para fora atravs da plasmalema como para o vacolo atravs do
tonoplasto (inclusive com as PPiases) permite um eficiente controle do pH citoplasmtico. Os
sistema de bombas que usam energia das PPiases tambm so importantes nas situaes de estresse
por baixa presso de oxignio. Tambm j foi confirmada a existncia no tonoplasto de um
antiporte Na+/ H+. Este transportador seria de grande importncia no desenvolvimento da tolerncia
ao estresse salino. A hidrlise de ATP aumenta, em plantas halfitas, com o tratamento (aplicao)
de sal. Isto pode indicar o aparecimento de novas subunidades (polipeptdeos) dos transportadores.
Na figura 15, temos os principais sistemas de transporte conhecidos, tanto atravs da
membrana plasmtica como do tonoplasto.

Figura 15. Sistemas de transporte localizados na membrana plasmtica e tonoplasto.

35
A figura 15 mostra que o K+ e o Ca++ podem ser deslocados para o interior das clulas,
atravs da plasmalema, via canais inicos. O K+ tambm pode ser transportado ativamente via
simporte (H+/K+). NH4+ e H+ so transportados via uniporte por transportadores de ons na
plasmalema. Ainda na plasmalema foi observado um antiporte, com a troca de Na+ por H+.
Na plasmalema ocorre o cotransporte de Cl-/ 2H+; de 2H+/ NO3-, H+(2-4)/H2PO-4 e 3H+/SO-4.
Acares e aminocidos tambm so transportados via simporte (cotransporte) com um prton.
Duas bombas inicas de grande importncia para o metabolismo celular operam na plasmalema: a
bomba de prtons (transporte ativo primrio), e a bomba de Ca++.
No tonoplasto, trs canais inicos operam no tranporte de K+, Ca++, e NO3-. Este ltimo,
provavelmente tambm capaz de transportar Cl- e malato.
Um mecanismo antiporte H+/Na+ funciona no tonoplasto, transportando H+ para fora do
vacolo, e Na++ do citosol para o vacolo. Tambm ocorre no tonoplasto um antiporte Ca++/ 2H+
transportando Ca++do citoplasma para o vacolo.
Nitrato sai do vacolo via simporte (NO3-/ H+) enquanto que o sistema de cotransporte para
o malato exige dois prtons (malato-/ 2H+). A formao de um gradiente protoninco no vacolo,
em relao ao citosol, garantido por duas bombas inicas: uma H+-ATPase, e uma H+-PPase.
Este esquema via bombas inicas, uniportes, simportes e antiportes, mostra algumas
caractersticas importantes dos sistemas de transporte, e de sua influncia no metabolismo celular.
Em primeiro lugar, h que ressaltar a eficiente bomba inica de extruso de prtons (5 a 20
pmoles/cm2/seg) de carter eletrognico, e que funciona como sistema primrio de transporte,
permitindo a criao de potenciais que possam ser favorveis ao transporte unidirecional (uniporte)
de ctions. Este mesmo mecanismo acaba por gerar grandientes de prtons (de fora para dentro) que
permitiro o cotransporte de anions. Inversamente, no tonoplasto, as duas bombas de protons
retiram H+ do citosol, acumulando-o do vacolo. Isso permite o controle do pH citoplasmtico e
tambm a gerao de um gradiente prton-inico de dentro para fora, em relao ao vacolo. Este
ltimo gradiente, permitir a sada de NO3- e de malato do vacolo (Figura 15).
Este esquema de transportes mostra ainda claramente os mecanismos de excluso de Ca++ e
de Na+ do citoplasma. No caso do Ca++, ele tanto pode ser eliminado da clula via bomba inica,
quando transportado rapidamente para o vacolo via canal inico. No caso do Na+, o on pode ser
trocado por um proton de fora da clula, via plasmalema, ou trocado por um proton do vacolo, via
tonoplasto. De qualquer maneira estes mecanismos evitam o acmulo de Ca++ no citoplasma,
mantendo sua atividade citoplasmtica em torno de 10-6 M. Tambm evitam o acmulo de Na+,que
poderia perturbar o funcionamento de sistemas enzimticos em que K+ tem um papel essencial.

36
interessante observar que o gradiente prton-inico vacolo/citoplasma garantido por
duas bombas inicas (uma das quais H+-PPiase), e ocorre mesmo sob condies de stress de
oxignio (baixas presses de O2). Com isto, a planta tem o potencial de retirar NO3- do vacolo, e
us-lo no metabolismo de N, o que viabiliza o vacolo como compartimento de reserva de N nas
plantas.

CONTROLE DE PH NAS CLULAS

Para que as atividades enzimticas ocorram a um nvel timo para o metabolismo, o pH

citoplasmtico deve ser mantido um pouco acima da neutralidade (7,3). Como se pode antever do
estudo dos mecanismos de absoro de nutrientes, este pH timo pode facilmente ser mudado.
Extruso de H+, entrada de H+ nas clulas, ou bombeamento de H+ para o interior do vacolo podem
afetar o pH celular. Alm desses mecanismos, a constante produo de cidos orgnicos tambm
contribui para essas mudanas no pH celular.
Pequenas variaes de pH (entre 0.2 e 0.3 unidades de pH) podem ser controladas pela
capacidade tampo do citoplasma. Esta capacidade gira em torno de 20 mmol de H+ por litro por
unidade de pH. A eficincia deste mecanismo tambm de curta durao (6 a 8 minutos). Quando
as variaes do pH citoplasmtico vo alm desta capacidade de tamponamento natural da clula,
um segundo mecanismo de controle acionado. Neste caso, o metabolismo celular cria ou destri
cidos orgnicos para controlar as variaes do pH celular.
Em casos de aumentos de pH, cidos orgnicos so gerados, a partir de precursores neutros,
com o consumo de CO2 e OH-. Nos casos de queda de pH, cidos orgnicos so descarboxilados,
com a liberao de CO2 e OH-. O cido orgnico formado o malato, e sua descarboxilao d
origem ao piruvato.
Esquematicamente, este mecanismo pode ser assim descrito:

37

Este mecanismo chamado de "sintonia fina".

Quando as variaes de pH celular so superiores a capacidade de controle deste mecanismo
bioqumico de sintonia fina, entram em ao os sistemas fisico-qumico de controle, fazendo a
extruso de prtons atravs da plasmalema, ou bombeando prtons para o vacolo atravs do
tonoplasto.
A extruso de prtons, alm dos importantes efeitos que tem sobre o metabolismo celular,
afeta o espao livre (macro e micro poros e o espao intercelular) aumentando a extensibilidade
plstica da parede celular por ativao de enzimas hidrolticas de polissacardeos, o que permite o
deslizamento das microfibrilas e a expanso celular. Os efeitos da extruso de prtons podem
tambm se extender alm deste espao livre celular, afetando o pH do rizocilindro e mesmo da
rizosfera como um todo. Na figura 16, temos um exemplo de como a absoro de K+, via canal
inico ou via simporte afeta o pH da soluo externa. A figura 16 mostra a variao de pH
observado no meio de cultivo (K2SO4 + CaSO4), em funo da absoro de K+ por plantas de arroz.
A rpida queda do contedo de K+ (Figura 16 A e B) corresponde faixa de absoro via canal
inico. A contrapartida a extruso de H+, com queda de pH. Na extremidade oposta (Figura 16 A e
C), quando a percentagem de K+ se aproxima de zero, afeta o simporte H+/K+, com predomnio
dessa fase o pH sobe.

38

Figura 16. A absoro de K+ estimula a extruso de H+ e resulta em queda do pH da soluo

externa (A e B). Em concentrao muito baixa de K+, um sistema de co-transporte
(simporte) elva o pH da soluo externa (A e C).

Sob condies normais de metabolismo, a absoro de ctions e de nions resulta em influxo

lquido de um excesso de carga negativa. Experincias feitas com 62 espcies, mostraram que a
soma de K+, Na++, Mg++, e Ca++ na parte area dessas plantas produz um total de 2,5 meq/g de
carga. A absoro de NO3-, SO4-- , H2PO4- e Cl- por outro lado, produz um total de 3,6 meq/g de
carga. Nestas condies, h um desequilbrio em favor de cargas negativas, o que pode resultar, em
mdio prazo, na necessidade de que a planta faa a extruso de cargas negativas (ou absoro de
H+).

39
preciso observar, entretanto, que o NO3- responsvel por cerca de 50% do total de anions
absorvidos pelas plantas. Assim, se o suprimento de N s plantas for feito via fixao de N2, ou
atravs de N-NH4+, esta equao (balano entre ctions e anions) alterada, e a planta passa a
absorver um excesso de carga positiva. Neste caso, mantendo-se esta tendncia por perodos longos
de tempo, deve ocorrer uma extruso ativa de prtons, para reequilibrar as cargas no interior do
citoplasma, e controlar o pH celular.

CINTICA DE ABSORO DE IONS

O grupo que estudava nutrio de plantas em Davis (Rains e Epstein, 1967; Rains, 1976), fez

um experimento que consistiu em colocar razes, envoltas em gaze, em bechers contendo solues
de K+, de concentrao crescente. Por exemplo, concentraes de K+ de 0,002 mM a 0,2 mM, a
intervalos constantes. As razes ficaram em contato com a soluo por um certo perodo de tempo
(20 minutos a 1 hora). Ao fim deste perodo um grama de razes foi pesado e o seu contedo em K+
determinado (na esses autores usaram Rb+, que tem um istopo de vida mais longa para substituir o
K, e mediram a radiao emitida pelas razes).
Os trabalhos iniciais de Epstein e seu grupo em Davis mostraram que a absoro de K
mostrava cintica de saturao (figura 17).

Figura 17. Grfico da velocidade de absoro (V em moles/g/h) em funo da concentrao do

on (M)

40
Relacionando-se o desaparecimento do K+ sua absoro pelas razes das plantas, e
conhecendo-se o peso das razes, teremos ento a absoro de certa quantidade de ons, por unidade
de peso de razes, por tempo. Por exemplo, teremos 10 umoles de K sendo absorvidos por grama de
razes por hora. Ou seja, umoles K/ g/ hora = velocidade de absoro.
Logicamente, quando a concentrao mnima (prxima de zero) a velocidade de absoro
do ion muito baixa, quase zero. medida que aumenta a concentrao do on na soluo aumenta
a velocidade de absoro. Entretanto, este fenmeno no linear na faixa de concentrao que
estamos considerando. Ou seja, vamos chegar a certa concentrao do on na soluo a partir da
qual os aumentos na velocidade de absoro sero negligveis, mesmo que a concentrao do on
continue a crescer.
O resultado desta experincia pode ser colocado em um grfico, em que no eixo dos X
teremos as concentraes de K (mM), e no eixo dos Y as velocidades de absoro (mol./g/hr)
(Figuras 17 e 18).
Imagine-se agora uma roleta de estdio de futebol, com pessoas chegando para entrar antes
do jogo. Quando apenas uma pessoa est do lado de fora, a velocidade de entrada das pessoas
mnima. medida que aumenta o nmero de pessoas a velocidade de entrada tambm aumenta, at
que uma velocidade mxima alcanada. A partir desse ponto, mesmo que aumente o nmero de
pessoas do lado de fora, a velocidade no aumenta mais. Seria correto dizer que a partir desse ponto
os aumentos de velocidade de entrada so negligveis. Os limites de velocidade de entrada das
pessoas no estdio so fixadas pelo tempo necessrio para que a roleta gire permitindo a passagem
de uma pessoa do lado de fora para o lado de dentro, ficando livre para que a prxima pessoa seja
transportada. Em linguagem de cintica de absoro, dizemos que h uma limitao de velocidade,
neste caso devido razo de turnover.
O influxo de pessoas no estdio vai depender no apenas da velocidade de entrada de cada
roleta, mas tambm do nmero total de roletas que esto sendo efetivamente usadas em dado
momento (Vmx). Ou, em linguagem de cintica de absoro, a velocidade de absoro de ons em
um dado momento ser:
v= Vmx x
em que (fator intensidade) a frao do total de stios de transporte sendo efetivamente utilizados
em um dado momento (N de roletas disponveis).

41

Figura 18. Diferentes isotermas so formadas (so mostradas aqui apenas como I e II), medida
que a concentrao K+ aumenta na soluo externa.

Quando verificamos a curva resultante do grfico da velocidade versus concentrao temos

uma hiprbole quadrada (Figuras 17 e 18). Pode-se observar nesta curva, que inicialmente, quando a
concentrao aumenta, a velocidade de absoro aumenta quase linearmente. A seguir, a inclinao
da curva comea a diminuir, e deixa de existir proporcionalidade entre os aumentos de concentrao
e velocidade de absoro. A partir de concentraes maiores, a curva comea a se aproximar
assintoticamente de um ponto a que chamaremos velocidade mxima (mx). Vmx. linguagem
emprestada da cintica enzimtica, em Nutrio de Plantas, podemos usar Influxo mximo, Imx.
Fica claro por este grfico, que de nada adianta aumentar as concentraes de K+ alm de
0,2mM. Diz-se que, neste ponto, houve saturao. Ou seja, a absoro de K+ mostra cintica de
saturao.
Neste grfico, chamamos de Vmx, mxima velocidade que o sistema atinge, a uma dada
concentrao. Agora podemos a partir do eixo dos Y (da velocidade) em direo curva, determinar
a concentrao do nutriente (K) na qual, a absoro atinge a metade da velocidade mxima. Este
ponto o Km aparente. Por Km aparente, entendemos a concentrao do substrato na qual o
processo de absoro atinge a metade da sua velocidade mxima (Vmx/2).

42
Vmx o mximo de transporte possvel, quanto todos os stios dos transportadores esto
carregados o fator capacidade.
Chamaremos de teta () frao do transportador que est sendo efetivamente utilizado a
uma determinada concentrao do substrato. tambm chamado de fator intensidade.

v= Vmx.
[M]
= _____
Km + [M]

e assim teremos a: [M] = concentrao do ion a ser absorvido.

Vmx [M]
v = __________
Km + [M]
Esta ltima equao descreve a hiprbole obtida na figura 18.
Em nutrio de plantas, o Km aparente uma medida da afinidade do sistema transportador
(na raiz) pelo on a ser transportado. Neste caso, quanto menor o Km, maior a afinidade do sistema
pelo on. Inversamente, quanto maior o Km, menor a afinidade do sistema pelo on a ser
transportado.
Outros modelos de representao grfica deste sistema podem ser usados. Aqui usaremos
apenas uma outra possibilidade; o modelo Lineweaver-Burk. Este modelo usa um grfico duplo
invertido, assim, no eixo das ordenadas (Y) teremos 1/V e no eixo X teremos 1/[M]. O resultado
que a hiprbole do caso anterior transformada em uma reta. Este tipo de grfico tem uma grande
vantagem sobre o anterior, a Vmx obtida com exatido, isto porque a intercesso da reta com o
eixo Y 1/Vmx. (Figura 19)

43

Figura 19. Grfico duplo invertido de Lineweaver-Burk, indicando os inversos de velocidade x

concentrao, o que transforma a hiprbole quadrada em reta

A faixa de concentrao que estamos usando neste caso (0 a 0,2 mM) est dentro dos limites
do mecanismo de alta afinidade para absoro de K, mecanismo I (Epstein & Bloom, 2005).
Quando as concentraes externas de K vo muito alm desse limite, surge uma segunda isoterma,
que foi chamada por Epstein de mecanismo II. Na verdade, esta segunda isoterma uma soma de
vrias isotermas que surgem nas faixas de alta concentrao de K (Figura 18).
Em uma primeira aproximao, podemos considerar que no caso do K, a primeira isoterma
corresponde faixa do transporte ativo do on (K+/H+) (Mecanismo I), enquanto que as isotermas
das faixas de maior concentrao refletem a absoro via canais inicos (uniporte) (Mecanismo II).
A figura 16, baseada em trabalho de V. Pimentel (resultados no publicados) exemplifica esses
casos.
A faixa do mecanismo I, da figura 18, tambm denominada de Sistema de transporte de
alta afinidade (HATS em lngua inglesa). A faixa do mecanismo II representa o Sistema de
transporte de baixa afinidade (LATS em lngua inglesa). Para o NO3-, o NH4+ e o K+, a grosso
modo, as concentraes de 1mM do on em soluo externa pode ser usada como limite entre os
dois mecanismos.

44
6

INTERAES INICAS
Embora o transporte de ons seja especfico isto ; cada espcie inica transportada atravs

de um stio particular, seja ele um tipo qualquer de transportador (ATP-ase especfica, canal inico,
ou um sistema acoplado de transporte, cotransporte), existem situaes em que dois ou mais ons
por sua semelhana em termos de raio inico e carga podem ser transportados pelo mesmo sistema.
O caso mais bvio, pelo seu largo uso em pesquisa cientfica, o dos ons K+ e Rb+. Os sistemas
transportadores de K+ no conseguem distinguir entre o on K+ e o on Rb+ . Como no existem
istopos estveis de K+, o fato do transportador de K+ tambm transportar Rb+, permite o uso de um
istopo de Rb+ como traador para K+.
Outros casos existem em que este tipo de interao evidente. O on SeO4= e o on SO4= so
outros exemplos de interao deste tipo.
Interaes deste tipo so chamadas de interaes competitivas. Nas interaes competitivas
o on competidor compete de modo reversvel com o on nativo (no caso acima, Rb+ o on
competidor, e K+ o on nativo) pelo mesmo lugar no transportador. Neste caso, no ocorrem
mudanas no total de stios disponveis, mas sim na frao do total de stios que ficam disponveis
para o on nativo.
Como o total de stios transportadores no muda, se representarmos graficamente este
processo de interao, usando o grfico de Lineweaver-Burk, teremos ento a figura 21.

Figura 21. Efeito de um on competidor (linhas pontilhadas) sobre a absoro do on nativo

45
A intensidade deste tipo de competio depende:
a) da concentrao do on nativo
b) da concentrao do on competidor
c) das afinidades relativas dos ons nativos e competidor em relao ao sistema transportador.
Um outro parmetro foi introduzido no estudo da cintica de absoro, o Cmin. Que
representa a concentrao do on na soluo externa a partir da qual no se observa mais influxo
lquido desse on. Todos estes parmetros (Vmx, Km, e Cmin) so geneticamente determinados e
refletem as presses relativas a que as planta foi submetida ao longo do processo de evoluo.
Na Tabela 4, temos a variao dos parmetros cinticos na absoro de NH4+ para duas
variedades de arroz: uma variedade tradicional (Bico Ganga) e uma variedade melhorada (Agulha).
Observa-se que com o aumento das concentraes de N-NH4+ na soluo nutritiva a Vmx para a
variedade Agulha aumenta, enquanto que para a variedade Bico Ganga diminui. Os valores de
Cmin para a variedade Bico Ganga so menores do que para a Agulha, indicando que ainda h
influxo de NH4+ na variedade tradicional mesmo em menores concentraes externas. Os maiores
valores de Vmx associados aos valores baixos de Cmin, apresentado pela variedade Bico Ganga
tanto aos 25 quanto aos 50 dias, quando cultivadas com 20 mg de N-NH4+ .L-1 sugerem maior
capacidade de absoro de N em condies de menor disponibilidade desse nutriente, sendo um
indicativo de adaptabilidade ambientes com baixa fertilidade natural.
Os mtodos de estudo da cintica de absoro foram modificados por Claassen e Barber
(1974). Ao invs de vrios recipientes com concentraes diferentes do nutriente, um s vaso
usado, e a depleo de nutriente medida a intervalos regulares de tempo. A curva de depleo
ento usada para determinar os parmetros cinticos. Baseado neste conceito, um mtodo grficomatemtico foi desenvolvido por Ruiz (1985), e um software usado para estimativas das constantes
Vmx e Km (Ruiz e Fernandes Filho, 1992). Um CD com uma verso deste software desenvolvido
para ambiente Windows, e as instrues sobre como us-lo, esto no anexo I deste volume.

46
Tabela 4. Parmetros Vmx, Km e Cmin em plantas de arroz (variedades Agulha e Bico Ganga) aos
25 e 50 dias, submetidas a quatro nveis de N-NH4+ em soluo nutritiva (Baptista, Fernandes e
Souza, 2001)

N-NH4+
(mgL-1)

Vmx (mol L-1.h-1)

Agulha

Bico Ganga

Km (mmol L-1)
Agulha

Bico Ganga

Cmin (mmol L-1)

Agulha

Bico Ganga

________________________________25 dias______________________________
20

16,27b

22,10a

0,513b

0,577a

0,252a

0,222b

40

28,50ns

29,50ns

1,061a

0,867b

0,868a

0,828b

60

34,20a

32,90ab

2,796ns

2,691ns

1,377b

1,537a

80

54,60a

44,29b

3,514b

4,510a

2,049b

2,134a

________________________________50 dias______________________________
20

20,31b

41,70a

0,836a

0,518b

0,389a

0,119b

40

32,40b

35,50a

2,044a

1,645b

1,606a

0,708b

60

100,60a

52,20b

3,450a

2,938b

1,208b

1,374a

80

134,81a

11,60b

3,517ns

3,582ns

1,873b

2,880a

Mdias seguidas de letras iguais na mesma linha, para cada parmetro no diferem
significativamente pelo teste de Tukey 5%

TRANSLOCAO DE NUTRIENTES
Os nutrientes, aps deslocamento por via simplstica ou apoplstica alcanam as clulas do

parnquima vascular, e um processo inverso tem lugar, com o efluxo dos nutrientes para o espao
livre da rea estelar. Esses nutrientes e a gua seguem ento via xilema para a parte area das
plantas onde so novamente depositados no espao livre das clulas. Para participar do metabolismo
celular, esses nutrientes precisam atravessar novamente a barreira da plasmalema (Figura 23)
A sada de ctions e nions das clulas do parnquima estelar para o apoplasma e
consequentemente o xilema requer o funcionamento de canais inicos tanto para ctions como j foi
mostrado para K+, como para nions. Canais de efluxo de anions podem ser ativados por
hiperpolarizao das plasmalema. possvel, entretanto, que canais para ctions e anions atuem
simultaneamente (Roberts, 2006).
Temos agora uma viso de conjunto do sistema de aquisio de nutrientes pelas plantas via
sistema radicular: os nutrientes so absorvidos via plasmalema das clulas da epiderme, crtex ou
plos radiculares, que do ponto de vista do conjunto (trans-root) podem ser classificadas como

47
clulas perifricas (Roberts, 2006), internamente, esto as clulas estelares que atuam na liberao
dos nutrientes para o apoplasma estelar e vasos do xilema (Roberts, 2006).
Como pode ser visto no esquema da figura 22, nutrientes como o H2PO4- e K+ so
absorvidos por clulas da epiderme e crtex, respectivamente, via canais inicos e transportadores.
Circulando via plasmodesmas esses ons ultrapassam a barreira da endoderme e alcanam as clulas
do parnquima estelar. Nas clulas do parnquima estelar esses nutrientes so passveis de efluxo, e
podem deslocar-se para o apoplasma, seguindo para o xilema acompanhando o fluxo de gua. Via
xilema os nutrientes alcanam a parte area das plantas, ou outras partes (incluindo razes em
crescimento) que podem funcionar como drenos (Fernandes e Souza, 2004).
Na parte area, os nutrientes encontram-se num espao que seria o equivalente ao espao
livre das razes. Novamente precisam deslocar-se atravs de macro e micro poros, vencer as
barreiras dos espaos de Donnan, e alcanar a plasmalema das clulas, onde podem ser
transportados para o citossol. Os nutrientes assim absorvidos podem entrar no metabolismo celular,
ou ser deslocados por via simplstica em direo aos vasos condutores. Em alguns casos, conexes
podem ser estabelecidas com as clulas companheiras, mas o mais provvel, que esses nutrientes,
juntamente com produtos do metabolismo celular sofram efluxo para o apoplasma, e depois voltem
a ser absorvidos, via transportadores, atravs da plasmalema das clulas companheiras. A partir da,
alguns nutrientes podem se deslocar diretamente via floema na direo dos drenos. Outros
nutrientes, entretanto, apenas aps sofrerem transformaes (assimilao) so deslocados no floema
(Figura 22).
O deslocamento de ons pode ser feito como pares inicos. Por exemplo, o NO3- e o K+
deslocam-se juntos no xilema. No sentido inverso, nutrientes podem tambm ser translocados via
floema (Fernandes e Souza, 2004). Entretanto, nem todos os nutrientes conseguem se deslocar no
floema em forma inica. O NO3- por exemplo, no se desloca no floema. O N geralmente
movimentado no floema como aminocidos ou amidas. O K+ por outro lado, desloca-se no floema, e
como acontece no transporte no xilema, e geralmente o faz em companhia de um anion, neste caso
de cidos orgnicos (R-COO-). O resultado dessa mobilidade o fenmeno da recirculao do K+
entre raiz-parte area-raz.
O clcio, o enxofre e o ferro que tambm so transportados para a parte area, via xilema, ao
contrario do K+, no circulam no floema. O clcio e o ferro so particularmente pouco mveis na
planta. Uma vez localizados em um tecido vegetal, no so mais remobilizados para outra parte da
planta. conhecido um tipo de clorose chamada clorose de topo caracterstica de deficincia de
ferro. Isto ocorre porque o ferro no se desloca das folhas mais velhas para as mais novas. Como

48
resultado, so as folhas mais novas que apresentam clorose. No caso de elementos de grande
mobilidade como o nitrognio, sua deficincia gera clorose das folhas mais velhas, que perdem o
nutriente em uma relao fonte-dreno (Fernandes e Souza, 2004).
Em todo esse processo ao longo da via de absoro, translocao e efluxo h uma demanda
de energia, principalmente via ativao das ATPases, para a absoro de nutrientes, seja nas clulas
da epiderme, do crtex da raiz, ou nas clulas de folhas, bainhas e caule. O processo como um todo
resulta, portanto em um custo energtico, principalmente para a gerao de gradiente de potencial
entre compartimentos da clula, e o apoplasma.
Aps o deslocamento no floema, sempre no sentido fonte dreno, os nutrientes podem seguir
por via simplstica, para as clulas dos frutos ou sementes, ou para clulas em crescimento nas
razes. Como pode ser visto na figura 22, ocorre ento uma ltima etapa de efluxo (para o
apoplasma) e nova absoro, desta vez para as clulas do destino final.

49

Figura 22. Esquema da circulao dos nutrientes desde sua absoro por clulas epidrmicas ou corticais; circulao no xilema e no floema, e
redistribuio entre clulas da parte area e da raiz (Modificado a partir de Sondergaard et al., 2004).

50

REFERENCIAS

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CAPTULO 6
FIXAO BIOLGICA DE NITROGNIO SIMBITICA E
ASSOCIATIVA
Veronica Massena Reis1,3, Andr Luiz de Martinez de Oliveira1, Vera Lucia Divan
Baldani1, Fbio Lopes Olivares2 & Jos Ivo Baldani1.
1

Embrapa Agrobiologia, Rodovia 465, km 7, CP 74505, CEP 23851-970, Seropdica,

Rio de Janeiro, Brasil. 2Centro de Biocincias e Biotecnologia, Universidade Estadual
do Norte Fluminense, Campo dos Goytacazes, RJ, Brazil. Autor para correspondncia:
veronica@cnpab.embrapa.br
SUMRIO
1

Introduo.......................................................................................................... 2

Mecanismos de fixao biolgica de nitrognio ............................................... 5

Quem so os organismos responsveis por esta fixao biolgica de

nitrognio? ........................................................................................................................ 7
4

Onde ocorre o processo de fixao biolgica de nitrognio.............................. 9

4.1

Formao do ndulo .......................................................................................... 9

4.2

Interaes associativas..................................................................................... 11

4.3

Associaes com bactrias diazotrficas endofticas ...................................... 12

4.4

Vida livre ......................................................................................................... 14

Fixao Biolgica de Nitrognio e o ambiente ............................................... 15

Absoro de nitrognio fixado pelas plantas................................................... 17

Quantificao da FBN ..................................................................................... 22

7.1

Mtodos para estimar a contribuio da FBN ................................................. 24

7.1.1

Reduo de acetileno ...................................................................... 24

7.1.2

Balano de N .................................................................................. 25

7.1.3

Tcnicas isotpicas 15N ............................................................... 26

Potencial de uso agrcola e otimizao da FBN .............................................. 28

Perspectivas Futuras ........................................................................................ 29

10

Referencias bibliogrfica................................................................................. 32

INTRODUO

Um dos mais importantes processos conhecido na natureza e realizado apenas

por microrganismos procariotos o da fixao biolgica de nitrognio (FBN). A
primeira publicao sobre a capacidade das bactrias fixarem nitrognio atmosfrico e
este ser absorvido pelas plantas foi descrita em 1888. A incorporao de nitrognio via
FBN aos diferentes ecossistemas de nosso planeta bastante elevada, representando
uma economia substancial de energia fssil, normalmente empregada na produo de
fertilizantes nitrogenados necessrios para atender a demanda da agricultura mundial.
Para se ter uma idia, a contribuio da fixao biolgica de nitrognio para o total de N
introduzido em sistemas agrcolas no mundo, estimada em 65 %. A disponibilidade de
nitrognio para os vegetais em sistemas naturais ocorre principalmente pela
mineralizao da matria orgnica do solo (ciclagem de nutrientes), haja vista o
pequeno contedo deste nutriente nos minerais do solo. Apesar disto, a grande maioria
do nitrognio do solo est presente em fraes cuja mineralizao bastante lenta
(hmus e argilosilicatos), sendo mineralizado (disponibilizado para absoro pelas
razes) apenas 2 % a 3 % do N total presente no solo a cada ano. Esta frao
mineralizvel est ainda sujeita perdas por lixiviao, volatilizao e desnitrificao,
alm da imobilizao e adsoro pelas partculas do solo.
A primeira bactria fixadora de nitrognio atmosfrico, tambm conhecida como
diazotrfica, foi descrita em 1893. Desde o comeo, esta descoberta gerou um grande
impacto e vasta literatura no tema, sendo at hoje os rizbios as mais estudadas.
Atualmente o uso de tcnicas moleculares tem possibilitado a reclassificao e o
conhecimento da grande diversidade existente neste grupo de bactrias. Estes so
reconhecidos pela capacidade de formar ndulos, principalmente na famlia das

leguminosas. Hoje se sabe que estes ndulos podem ser formados por outros gneros,
tais como Herbaspirillum, Ralstonia, Orthrobactum, etc., deixando de ser exclusividade
de um pequeno grupo de microrganismos. Os ndulos no so exclusividade das razes,
mas tambm podem ocorrer nos caules de plantas que sofrem perodos de alagamento.
Ainda que as maiores contribuies da fixao biolgica de nitrognio tenham
sido detectadas em oceanos e plantas leguminosas, algumas plantas da famlia Poacea
(antiga famlia Gramineae) tm mostrado um potencial bastante significativo de fixao
biolgica de nitrognio. No caso especfico da cultura de cana-de-acar cultivada no
Brasil, esses ganhos so bastante expressivos, podendo gerar uma economia potencial
de cerca de 200 milhes de reais por ano se considerarmos que o processo de fixao
biolgica de nitrognio contribui com cerca de 65 % do N acumulado pela cultura.
Ainda que possamos considerar esses ganhos apenas razoveis quando comparados ao
das leguminosas, a fixao biolgica de nitrognio tem um papel fundamental a exercer
tambm no ambiente, principalmente pela reduo dos nveis de nitrato acumulado nos
lagos e rios, devido lixiviao do nitrognio aplicado na forma de fertilizantes.
A seguir, apresentamos a tabela contendo os gneros de microrganismos
fixadores de nitrognio conhecidos atualmente. Esta tabela tem como base a atual
classificao dos microrganismos baseada na evoluo e foi proposta e aceita a partir
dos anos 70. A molcula usada para diferenciar os grupos, a subunidade 16 S (S de
Svedberg unidade de sedimentao de molculas) do cido ribonuclico ribossomal
(ARN). Como esta molcula possui em torno de 1500 pares de bases e seu arranjo
espacial permite a sua diviso em regies chamadas de hipervariveis e sua variao na
composio dos pares de bases usada na formao dos trs super-reinos: Archae
(archae = antigo bactrias ancestrais), Eubactria (Eubactria bactria verdadeira) e
Eucaria (organismos que possuem membrana nuclear) (maiores detalhes Sapp, 2005)

Tabela 1: Grupo e gnero de microrganismos fixadores de nitrognio conhecidos

atualmente. Esta classificao est baseada na organizao dos grupos de
microrganismos levando em considerao a evoluo destes usando a
variabilidade gentica presente na composio de pares de bases da subunidade
16 S do cido ribonuclico (ARN) ribossomal (16 S rRNA).
Grupo
Alfa

Gnero
Grupo
Gnero
Azospirillum
Gamma cont. Scytonema
Gluconacetobacter
Symploca
Mesorhizobium
Synechococcus (Cyanothece)
Rhodobacter
Synechocystis (marine)
Rhodospirillum
Tolypothrix
Rhizobium
Trichodesmium
Sinorhizobium
Xenococcus
Beijerinckia
Delta
Desulfobacter
Methylocella
Desulfomicrobium
Methylosinus
Desulfovibrio
Methylocystis
Desulfotomaculum
Bradyrhizobium
Desulfonema
Methylocystis
Firmicutes
Frankia
Xanthobacter
Paenibacillus
Methanosarcina
Clostridium
Beta
Alcaligenes
Acetobacterium
Burkholderia
Desulfosporosinus
Herbaspirillum
Spirochaetes
Spirochaeta
Azoarcus
Treponema
Thiobacillus
Spirochaeta
Epsilon
Arcobacter
Treponema
Gamma
Anabaena
Spirochaeta
Azotobacter
Spirochaeta
Chlorogloeopsis
Treponema
Calothrix
Archae
Methanobrevibacter
Cyanothece
Methanococcus
Dermacarpa
Methanothermobacter
Fischerella
Methanosarcina
Gloeothece
Methanothermobacter
Lyngbya
Methanopyrus
Myxosarcina
Methanococcus
Nostoc
Methanocaldococcus
Oscillatoria
Heliobacteria Heliobacterium
Phormidium
Cyanobacteria Grupo das Cyanothece
Plectonema
Grupo das Gloeocapsa
Pseudanabaena
Gloeothece
Adaptado de Zehr,J.P.; Jenkins,B.D.; Short,S.M.; Steward,G.F (2003).

MECANISMOS DE FIXAO BIOLGICA DE NITROGNIO

Todos os microrganismos fixadores de nitrognio so procariotos e esta

habilidade est distribuda entre os super-reinos Archaea e Eubacteria. Todos eles
possuem o complexo nitrogenase, que hidrolisa 16 adenosinas tri-fosfato (ATP) e 8
eltrons por molcula de nitrognio fixado, sendo um dos processos metablicos mais
caros para a clula. Estudos tm mostrado que a quantidade de N fixado no planeta gira
em torno de 2 x 1013 g por ano. A nitrogenase, um complexo enzimtico redox-ativo
que hidrolisa ATPs para efetuar a reduo do N molecular (N2). formado por duas
subunidades, um heterotetrmero, a dinitrogenase 22, e um homodmero, a
dinitrogenase redutase 2. A subunidade contem um stio ativo para a reduo do
nitrognio, composto de molibdnio, ferro e enxofre MoFe7S9 chamado de FeMocofator. Alguns microrganismos contm nitrogenases ditas alternativas, onde o Mo
trocado pelo Vandio (V) ou Ferro (Fe) e os genes que codificam estas nitrogenases so
denominados de Vnf e Anf respectivamente, no lugar do Nif. At o momento, poucas
bactrias diazotrficas descritos possuem estas nitrogenases alternativas, mas todas
possuem a nitrogenase de Molibdnio. As alternativas s so expressas na falta de Mo,
sendo que a de vandio expressa preferencialmente de ferro. Nesta mesma ordem est
a eficincia de reduo do nitrognio (Loveless, T.M., Saah, J.R., & Bishop, P.E. 1999;.
Miller & Eady, 1988).
A estequiometria da reao de reduo do N2 at NH3 apresentada na equao
1.

Equao 1 N2 + 8 H+ + 8e- + 16 ATP = 2 NH3 + H2 + 16 ADP + 16 Pi

Por ser uma enzima redutora, o oxignio reprime a expresso da nitrogenase ou

inativa quando j sintetizada e em funcionamento. No caso dos microrganismos
diazotrficos aerbicos, que precisam de oxignio para crescer, alguns mecanismos de
proteo podem atuar quando o processo de fixao biolgica de nitrognio est ativo.
Alm disso, por ser um processo fisiolgico que requer uma grande quantidade de
energia, a sua regulao controlada em diversos momentos, atravs da ao modular
de genes reguladores. A disponibilidade energtica da clula, idade fisiolgica,
concentrao de oxignio, presena de alguns aminocidos essenciais, disponibilidade
de oxignio e nitrognio em excesso (principalmente o amnio) so alguns dos fatores
que inibem a atividade da nitrogenase. A tabela 2 apresenta alguns mecanismos de
proteo contra concentraes elevadas de oxignio (O2) presentes em microrganismos
diazotrficos. Geralmente a fixao biolgica de nitrognio ativa em baixas presses
de O2 (<0.1 % v/v).
Tabela 2. Mecanismos de proteo contra o oxignio
Mecanismo
Aerotaxia
Proteo

Forma de ao
Busca por baixas presses de oxignio
Respirao
Hemoglobina que combina eficientemente
com O2

Algumas protenas protegem exposio ao O2

proteo conformacional
Separao
Heterocistos - no fazem fotossntese e no
espacial
envolve O2
Vesculas na simbiose de Frankia
Colnia, diferencia em filamentos
fotossintticos e filamentos fixadores de
nitrognio
Separao no
Fotossntese durante o dia e FBN noite.
tempo
Mudana de
Facultativos s fixam em anaerobiose
metabolismo
Fsica
Barreira de clulas contra o O2
Produo de polissacardeos extracelulares
Relao superfcie/volume celular

Organismo
Azospirillum
Azotobacter, Derxia
ndulos de rizbio,
casuarina-Frankia
Simbiose
Azotobacter
Cianobacteria
Frankia
Scenedesmium microrganismo
marinho
Cianobacteria
Klebsiellaspp.,
Clostridium spp.
Ndulos
Derxia, Beijerinckia
Azotobacter

QUEM SO OS ORGANISMOS RESPONSVEIS POR ESTA FIXAO

BIOLGICA DE NITROGNIO?

Sabe-se hoje que muitos gneros e espcies capazes de realizar a FBN esto
distribudos no ambiente e associados s plantas. Estas associaes podem variar em
especificidade, estrutura, localizao, e microrganismo responsvel. Temos as bactrias
denominadas simbiticas que so capazes de formar ndulos, e pertencem
principalmente ao grupo do rizbio e do gnero Frankia. Temos tambm bactrias que
colonizam os tecidos internos das plantas e so denominadas de bactrias diazotrficas
endofticas. Um terceiro grupo forma associaes superficiais aos tecidos radiculares,
sobrevivem bem no solo e no so caracterizadas como espcie-especficas, sendo
denominadas de associativas. O que todos estes organismos tem em comum a
presena da nitrogenase. Alm deste grupo de bactrias heterotrficas, temos as
cianobactrias de vida livre, cianobactrias simbiticas, bactrias que vivem no trato
digestivo de animais, lquens e bactrias minerotrficas do grupo Archae.
A maioria das bactrias diazotrficas est posicionada na subdiviso alfa de
Proteobacteria, sendo este o subgrupo mais estudado. Dentro deste grupo esto tambm
posicionados as bactrias simbiticas do gnero Azorhizobium, Bradyrhizobium,
Rhizobium e Sinorhizobium, alm de organismos fototrficos e metanotrficos,
tornando esta subdiviso bastante varivel. J a subdiviso Beta e Gamma de
Proteobacteria possuem uma minoria das bactrias diazotrficas descritas. A subdiviso
Delta de Proteobacteria possui, em sua maioria, bactrias anaerbicas obrigatrias
redutoras de enxofre, incluindo espcies de Desulfovibrio e Desulfobacter.
A descoberta de organismos fixadores de N2 em Archaebacteria foi uma
surpresa, o que trouxe luz a hiptese mais plausvel de ter havido um ancestral
diazotrfico comum a todos os microrganismos atuais, do que ter ocorrido uma

transferncia lateral dos genes estruturais da enzima nitrogenase, ou uma evoluo

independente, e que a separao entre eucariotos e procariotos ocorreu posteriormente a
diferenciao de Archaebacteria e Bacteria. Neste grupo, esto inseridas bactrias
halfitas, termfitas dependentes de enxofre (como doador ou receptor de eltrons),
entre outras, mas nenhum gnero foi descrito com associado a plantas.
Existe ainda a simbiose das cianobactrias com diatomceas, fungos e bactrias.
Na simbiose entre Azolla e Anabaena/Nostoc o simbionte est localizado na cavidade
foliar de vegetal e a troca de N2 fixado por fotoassimilados realizada atravs de plos
de transferncia. Esta simbiose tem importncia agrcola principalmente na cultura do
arroz inundado. No caso das cianobactrias, ocorre a especializao de um rgo onde
ocorre a FBN, o heterocisto. Estas simbioses ocorrem em sistemas aquticos marinhos
ou de gua doce, e desempenham um papel fundamental no ciclo de nitrognio. A
simbiose de fungos e cianobactrias formam os liquens que so os pioneiros na
pedognese e na colonizao de ambientes inspitos. Actinomicetos do gnero Frankia
formam ndulos radiculares em oito famlias de plantas pertencentes a sete ordens.
Estimativas de FBN em espcies destes gneros se situam entre 40 a 300 kg de N ha-1
ano-1 (Arora, A.& Singh,P.K., 2003).
Na Tabela 3 so apresentados alguns tipos de relaes simbiticas entre
bactrias diazotrficas e organismos vegetais.

Tabela 3: Lista de microrganismos fixadores de nitrognio atmosfrico

Microrganismo
Grupo

Gnero

Bacteria
Rhizobium
(alfaBradyrhizobium
Proteobacteria) Azorhizobium
Actinomicetos
Frankia
Cianobacteria

Nostoc
Nostoc
(Anabaena?)
Nostoc

Nostoc

Planta Hospedeira
Grupo de Plantas

Tecido

Leguminosas e
Parasponia

Ndulos
(induzidos)

Betulaceae e 8
Ndulos
familias de rvores (induzidos)
Bryophytes
Cavidade da
(Antheros etc.)
folha
Pteridophyte
Cavidade da
(Azolla)
folha
Cycadophyta
Raiz coralide
(Cycas,
Macrozamia etc.)
Angiosperm
Tecido da
(Gunnera)
glande

Localizao

Isolado
???

Dentro ou fora da
clula vegetal
Dentro

Sim

Dentro

Sim

Fora

Sim

Fora

No

Fora

Sim

Dentro

Sim

ONDE OCORRE O PROCESSO DE FIXAO BIOLGICA DE

NITROGNIO

4.1

Formao do ndulo

Vrios genes especficos controlam os diferentes aspectos do processo de

nodulao. Uma estirpe de Rhizobium pode infectar somente algumas espcies de
legumes, o que chamamos de especificidade hospedeira. Por exemplo: Rhizobium
leguminosarum biovar viciae, nodula ervilha e R. leguminosarum biovar trifolii. nodula
trevo. Existem casos em que a estirpe nodula a planta, mas se no for o seu hospedeiro
correto ela no fixa o nitrognio, sendo chamado de ndulo inefetivo. A efetividade do
processo de nodulao governada por diferentes genes. Os genes nod agem
diretamente nos vrios estgios de nodulao. No estgio inicial ocorre a liberao de
uma variedade de compostos qumicos das clulas radiculares para o solo, influenciando
a multiplicao da bactria no seu estgio de vida livre. Estes compostos so

responsveis pelo reconhecimento do hospedeiro pela bactria, permitindo a adeso

superfcie dos plos radiculares. Estas substncias qumicas so chamadas de
flavonides e isoflavonides e induzem a formao do ndulo. Na etapa seguinte, a
bactria secreta os fatores nod que estimulam a curvatura dos pelos radiculares e a
invaso da raiz, que inclui a formao de um cordo de infeco. Este cordo formado
pelas clulas das razes em resposta a infeco. A bactria continua a se multiplicar e a
secretar fatores nod, que estimulam a diviso das clulas radiculares. Aps uma semana,
o pequeno ndulo visvel e cada ndulo representa um pacote de milhes de clulas
vivas de Rhizobium, que nesta fase so denominados de bacterides. Estes bacterides
so envolvidos por membrana de origem vegetal conhecidas como membrana
peribacteroidal.
Existem outras maneiras de formao do ndulo, onde o rizbio invade a planta
por feridas e no h a formao do cordo de infeco. Este o caso da nodulao de
Parasponia (Famlia Ulmaceae; ordem Urticales). o nico gnero de plantas no
leguminosas que possui ndulos do simbionte Bradyrhizobium/Rhizobium. No caso do
amendoim e do Estilosantes, o stio de infeco a regio de emergncia da raiz lateral.
Tambm no corre a formao do cordo de infeco.

Ndulos de crescimento determinado

em Dalbergia nigra. Foto: Sergio
Miana de Faria (Embrapa
Agrobiologia)

Quanto ao tipo de ndulos, podemos ter o clssico ndulo formado na soja,

feijo, etc chamado de ndulo de crescimento determinado (circulares). Neste caso, uma

vez formado ele fixa enquanto a simbiose estiver ativa, facilmente notada pela
colorao avermelhada da atividade da leghemoglobina. Uma vez que a simbiose for
interrompida, por vrios motivos, este ndulo senesce e se despende da planta
hospedeira. O outro tipo de formao de ndulos chamado de indeterminado. Neste
caso o ndulo no para de crescer, isto , o centro responsvel pela FBN muda
conforme um novo tecido organizado para este fim formado. So comumente
encontrados em espcies arbreas como os ndulos de Leucena.

Ndulos de crescimento
indeterminado em simbiose com
Accia podalfriaefolia. .
Foto: Dr. Sergio Miana de Faria
Embrapa Agrobiologia).

4.2

Interaes associativas

Entre as bactrias que fixam nitrognio e no formam ndulos, as mais

estudadas so as do gnero Azospirillum, principalmente A. brasilense e A. lipoferum.
Este gnero est dividido hoje em sete espcies, sendo que estas duas espcies so mais
freqentemente encontradas colonizando a maioria das plantas de regies tropicais e
temperadas, chegando a ser isoladas de gramneas crescidas em locais gelados como o

rtico. As espcies citadas acima e A. amazonense tem sido encontradas em associao

com plantas monocotiledneas incluindo milho, arroz, cana-de-acar, sorgo e
gramneas forrageiras como Digitaria, Brachiaria alm de plantas eudicotiledneas
como palmeiras e fruteiras. Apesar da sua ampla ocorrncia, o isolamento da espcie A.
amazonense tem se restringido a plantas crescidas em algumas regies do Brasil, exceto
por sua deteco em amostras de plantas de cana-de-acar cultivadas no Hava e
Tailndia. As outras quatro espcies possuem poucos relatos de sua presena, sendo que
A. halopraeferens foi isolado de uma espcie de grama (Leptochloa fusca L.) crescida
em solos salinos no Paquisto, A. doebereinerae (espcie cujo nome homenageia a
cientista Johanna Dbereiner) foi isolada de plantas de outra espcie de gramnea
forrageira do gnero Miscanthus plantada na Alemanha, e A. irakense foi descrito
utilizando amostras do solo da rizosfera e de razes de plantas de arroz cultivadas no
Iraque. J a espcie A. largimobile uma reclassificao de Conglomeromonas
largomobilis, mas no foi evidenciada a capacidade de fixar nitrognio. Da mesma
forma, outros gneros e espcies so descritos em associao com diversas plantas e em
diversos ecossistemas, mostrando a grande diversidade de organismos diazotrficos no
planeta.

4.3

Associaes com bactrias diazotrficas endofticas

Algumas bactrias so capazes de colonizar os tecidos internos das plantas e se

perpetuarem nestes tecidos sem causar nenhum sintoma de patogenicidade, promovendo
o crescimento da planta hospedeira. Estas associaes internas so denominadas de
endofticas. Algumas espcies de bactrias diazotrficas foram caracterizadas como

endfitas tais como Gluconacetobacter diazotrophicus, Herbaspirillum seropedicae,

Herbaspiririllum rubrisubalbicans, Azoarcus spp., entre outras.

Independente das controvrsias, existe um consenso razovel quanto a definio

prtica do termo endfito. De acordo com Kloepper et al. (1997), bactrias endofticas
so aquelas que podem ser isoladas de tecidos vegetais superficialmente desinfestados
ou extradas de dentro da planta, e que no causam danos visveis ou induzem sintomas
na planta. Fica claro portanto, que bactrias com capacidade para estabelecer-se
endofiticamente em tecidos vegetais, devem ser enquadradas em algumas regras:

A bactria deve ser capaz de invadir e proliferar nos tecidos da planta hospedeira,
desenvolvendo mecanismos para ultrapassar as barreiras fsicas e qumicas
desenvolvidas pela planta (mecanismos constitutivos e induzveis), estabelecendo
vias de infeco e colonizao, bem como os stios de estabelecimento;

A bactria no deve induzir uma resposta drstica da planta infeco (resposta

hipersensvel), caracterizada pela morte rpida e necrose das clulas ao redor do
ponto de infeco, impedindo a colonizao dos tecidos (H. seropedicae causa HR
em sorgo)

A bactria deve possuir um padro de colonizao modelado pela planta hospedeira,

uma vez que a multiplicao massiva e/ou hiperativao de genes de virulncia,
pode colapsar os tecidos, induzindo sintomas na planta e consequentemente
estabelecendo uma interao patognica;

No caso de interaes mais evoludas, a bactria deve seguir o ciclo de vida da

planta hospedeira, desenvolvendo mecanismos para colonizar sementes ou estruturas
de propagao vegetativa.

Vamos dar como exemplo a descrio do endfito mais conhecido atualmente e

que recentemente foi reclassificado como Gluconacetobacter diazotrophicus (antiga
Acetobacter diazotrophicus) (Yamada et al., 1997, 1998). Esta espcie foi isolada
inicialmente de razes, colmos e folhas de cana-de-acar por Cavalcante & Dbereiner,
(1989), e posteriormente outros relatos mostraram a sua existncia em canaviais
plantados na Argentina, no Uruguai, no Mxico, Cuba, Estados Unidos, ndia, Canad e
Austrlia. Esta bactria tambm est associada a outras plantas tais como a batata-doce,
e capim elefante (Pennisetum purpureum), caf, abacaxi, entre outras. Por no possuir a
enzima nitrato redutase, a atividade do complexo nitrogenase no ser inibida pela
presena de nitrato no meio externo clula da bactria. considerada uma bactria
endoftica pois possui baixa sobrevivncia no solo. A via principal de transmisso o
tolete de cana-de-acar, muito embora o palhio da prpria cultura no deva ser
descartado como uma fonte alternativa de inculo quando incorporado ao solo, esporos
de fungos micorrzicos arbusculares ou atravs da contaminao ocorrida no momento
da suco da seiva do floema por cochonilhas que vivem dentro da bainha foliar da
plantas de cana-de-acar e que possuem esta bactria dentro da linfa. Devido a estas
caractersticas fisiolgicas e a importncia da cana-de-acar na economia brasileira, o
seu genoma est sendo seqenciado alm dos estudos relacionados a caracterizao de
protenas presentes nos diversos estgios de seu metabolismo (Baldani, J.I.; Reis, V.M.;
Baldani,V.L.D.; Dobereiner, J.; 2002).

4.4

Vida livre

As bactrias capazes de sobreviver no solo, e que tambm colonizam as plantas

desde que o ambiente esteja proprcio para a sua multiplicao celular so chamadas de

bactrias de vida livre. Este grupo representado por bactrias aerbicas, anaerbicas e
facultativas. Esses organismos podem viver harmoniosamente em associao com as
plantas, utilizando para sua nutrio os exudatos das razes das plantas. Mas como
fazem para manter a sua populao? Por serem quimiorganotrficas, utilizam
compostos orgnicos como principal fonte de carbono e energia. Este grupo
representado pela maioria das bactrias fixadoras como Azospirillum, Beijerinkia,
Derxia, Azotobacter entre outras. Outros, denominados de fotoautotrficas, utilizam a
luz como fonte de energia e CO2 como fonte de carbono. Neste grupo est a espcie
Rodospirillum rubrum, as cianobactrias como Nostoc, entre outras. Tambm temos os
fotoheterotrficos, que utilizam compostos orgnicos como a principal fonte de carbono
e a luz como fonte de energia. Neste grupo esto as bactrias verdes sulfurosas
Chlorobium. As quimiolitotrficas utilizam compostos inorgnicos reduzidos como
fonte de energia e CO2 como fonte de carbono e tem como principal representante
Thiobacillus ferroxidans.

FIXAO BIOLGICA DE NITROGNIO E O AMBIENTE

Independente do tipo de associao entre a planta e a bactria, o gentipo da

planta exerce grande influncia. Na simbiose, a especificidade hospedeira um exemplo
deste controle entre os componentes da interao. No caso das associativas, endofticas
e de vida livre, esta associao menos exigente. Vrios estudos tm mostrado que a
eficincia da inoculao depende do gentipo da planta. Outros fatores biolgicos,
qumicos e fsicos podem interferir na fixao biolgica de nitrognio. As plantas
diferem entre si quanto a quantidade do N fixado, e uma mesma espcie vegetal se
diferencia quanto ao gentipo e idade. Dependendo da promiscuidade do hospedeiro e

da eficincia do simbionte, teremos taxas variveis de FBN. A seguir apresentamos os

fatores que interferem no N fixado e a recomendao para solucionar o problema.

Tabela 4: Fatores que afetam a fixao biolgica de nitrognio

Fatores
Temperatura e
umidade

Efeito
Na sobrevivncia do rizbio e na
habilidade de nodular e fixar N2
Occore inibio da FBN

Recomendao
Introduzir o inoculante nas
camadas mais profundas
evitando a dessecao
Usar cobertura morta
Salinidade
Reduo massa seca de parte area,
Uso de estirpes tolerantes
nodulao e atividade da nitrogenase
e/ou adaptadas regio
Uso de
Inibio da nodulao e da fixao
Utilizao de pequenas
fertilizantes
biolgica de nitrognio.
quantidades no solo, ou
nitrogenados
foliar em plantas que no
fixam todo o N necessrio
A compatibilidade do rizbio com
Pesticidas,
Antes do uso do produto
pesticidas pouco conhecida.
fungicidas e
fazer teste de sensibilidade
inseticidas
Os fungicidas interferem na
Se possvel aplicar longe da
sobrevivncia
semente
Os inseticidas no tm efeito desde
que no sejam aplicados nas
sementes.
Se conhece o efeito de herbicidas de
Poucos herbicidas
Cultivo
Aumentam as oportunidades do uso
Rotao de culturas
intercalado
do N complementar.
Reduzir a necessidade de fertilizantes
nitrogenados, alm de aumentar a
disponibilidade de N ou de sua
transferncia.
Solos cidos
Limitam a produtividade e a FBN.
Usar cultivares adaptados
bem como de estirpes.
Acidez e toxidade de alumnio
Fazer a calagem
Preparo do solo Com o uso do plantio direto, ocorre
Estimular a FBN
menor mineralizao e nitrificao
acoplada a maior imobilizao e a
maior denitrificao, o que limita a
disponibilidade de N.
Deficincia
Fsforo principalmente em solos
Uso de fertilizantes
nutricional
tropicais
Elementos
Metais pesados
Uso de estirpes tolerantes
txicos

ABSORO DE NITROGNIO FIXADO PELAS PLANTAS

Em sistemas agrcolas tropicais, a simbiose mutualstica entre rizbios e

leguminosas apresenta-se como uma das principais tecnologias para reduzir a carncia,
e/ou aumentar a disponibilidade de nitrognio assimilvel. Entretanto, as associaes
no mutualsticas, envolvendo gramneas e bactrias diazotrficas endofticas, vem
sendo cada vez mais amparadas por resultados experimentais, e tornando-se uma
realidade para culturas importantes, como o arroz, o milho e a cana-de-acar, apesar de
ser um sistema quantitativamente inferior ao observado para leguminosas.
Para que as plantas consigam aproveitar os benefcios da FBN, necessrio que
o N fixado pelos organismos diazotrficos seja liberado em uma forma assimilvel. Em
sistemas onde ocorre a contribuio destes microrganismos em vida livre, bem como em
alguns sistemas associativos, a disponibilizao do nitrognio biologicamente fixado
ocorre aps a morte das clulas bacterianas e a lise de constituintes orgnicos celulares,
que so diretamente absorvidos pelas razes vegetais atravs de transportadores
especficos. Em sistemas simbiticos, ocorre a transferncia direta de molculas
contendo o N fixado para dentro de vias metablicas vegetais de assimilao de N
(Kennedy, I. R., Choudhury, A. T. M. A., Kecskes, M. L.; 2004).
Nas simbioses mutualsticas entre leguminosas e rizbios, todo o processo de
interao entre os organismos envolvidos bastante estudado, apesar de estar longe de
ser esgotado. Nestes casos, aps as etapas de sinalizao e reconhecimento de molculas
de origem bacteriana e vegetal, ocorre a penetrao das razes pelos microrganismos
simbiontes atravs do cordo de infeco. O carter especfico no dilogo molecular
entre a planta hospedeira e a bactria diazotrfica caracteriza-se pelo fato de que
determinada espcie de rizbio apresenta um nmero limitado de espcies vegetais com
as quais interage. O cordo de infeco um canal formado por um processo de

endocitose dos plos radiculares, e direciona as clulas bacterianas para o crtex

radicular onde elas diferenciam-se em bacterides e induzem a formao dos ndulos,
verdadeiras fbricas de produo de compostos aminados. A forma bacteride dos
rizbios caracterizada pela perda da parede celular bacteriana e o conseqente
aumento do volume celular, alm da represso da atividade da enzima glutamato sintase
(GOGAT) que impede a assimilao do N fixado pelos bacterides. Os bacterides no
possuem contato direto com o citoplasma celular, sendo envolvidos por uma membrana
de origem vegetal denominada membrana peribacteride, extremamente importante
para a formao de ndulos eficientes. A estrutura formada pela membrana
peribacteride e os bacterides assemelha-se uma organela, e denomina-se
simbiossoma, a unidade bsica de fixao de nitrognio no ndulo. Um ndulo maduro
ativo apresenta muitos milhares de simbiossomas dentro das clulas diferenciadas.
A Figura 1 apresenta um esquema simplificado do funcionamento de
simbiossomas em ndulos de soja.

citoplasma de clula infectada do ndulo (-)

assimilao
ADP + Pi

A
ATP

NH3 + H+

H+
H+
malatoB
malato-

NH4+

N2 + nitrogenase
C

H+

bacteride (-)

(+)
membrana peribacteride

Figura 1 Representao grfica de um simbiossoma de ndulo de soja (Glycine max).

A, ATPase da membrana peribacterioidal; B, carreador de composto
dicarboxilado da membrana peribacterioidal; C, carreador de composto
dicarboxilado do bacteride; D, transportador de amnio. Simplificado de
Udvardi & Day, (1997).

A membrana peribacteride envolve de um a muitos bacterides (dependendo da

espcie vegetal e idade dos ndulos), permitindo um controle da planta sobre a
colonizao bacteriana em seus tecidos. Sua funo regular o trnsito de nutrientes
entre os bacterides e a planta hospedeira, onde a planta fornece compostos reduzidos
de carbono para o funcionamento constante da nitrogenase no bacteride, e este fornece
compostos nitrogenados reduzidos para a planta, que so assimilados no citoplasma
vegetal. Alm disso, a membrana peribacteride apresenta outros transportadores e
canais, que so responsveis pelo suprimento de compostos necessrios para o

funcionamento eficiente da simbiose. A degradao desta membrana leva senescncia

da simbiose, e sua no formao leva a ndulos ineficientes (Udvardi & Day, 1997).
A sacarose formada atravs da fotossntese a principal fonte de energia para o
ndulo, metabolizada enzimaticamente no citoplasma vegetal a dicarboxilados que iro
suprir a demanda energtica dos bacterides ativos no processo de fixao biolgica de
nitrognio. Outros compostos reduzidos de carbono so presentes em abundncia nos
ndulos, e provvel que ocorra a utilizao de mais de um composto, bem como
variaes qualitativas no fornecimento de compostos energticos de acordo com o
desenvolvimento do ndulo e a espcie vegetal. A energia dos compostos
dicarboxilados utilizada na forma de poder redutor e ATP para catalizar a reduo de
Nitrognio molecular amnia pela enzima nitrogenase, segundo a Equao 1,
anteriormente citada.
A amnia produzida liberada pelo bacteride por difuso simples, e assimilada
no citoplasma da clula infectada pela enzima glutamina sintase (GS), convertendo a
amnia at glutamina. Em seguida ocorre a ao da GOGAT, que converte a glutamina
at glutamato. A enzima GOGAT apresenta uma atividade bastante elevada nos
ndulos, promovendo um nvel muito baixo de amnia no citoplasma da clula
infectada e o consequente efluxo da amnia presente nos bacterides. O glutamato
contendo o N derivado da FBN utilizado na sntese de compostos aminados que sero
utilizados para suprir outros tecidos da planta. A molcula utilizada para o transporte
deste nitrognio apresenta variao entre diferentes espcies de leguminosas. Em geral,
leguminosas de clima temperado exportam amidas, enquando leguminosas de clima
tropical exportam uredos (Udvardi M. K., Ou Yang L-J, Young S, Day D. A., 1990).
A forma de assimilao do N biologicamente fixado nas relaes associativas
com bactrias diazotrficas, envolvendo principalmente gramneas, ainda no

conhecida. Apesar dos estudos baseados no balano de N utilizando o istopo

15

comprovarem a contribuio de diferentes espcies de bactrias diazotrficas

(destacando-se

Azospirillum

spp.,

Herbaspirillum

spp.

Gluconacetobacter

diazotrophicus) em culturas como arroz, milho, sorgo, trigo e cana-de-acar, entre

outras, a forma como ocorre a transferncia do N fixado no foi determinada (vide
tpicos anteriores). Alm disso, a maioria destes organismos apresenta outras formas de
promoo do crescimento vegetal, como a produo de fitormnios, resistncia a
estresses, produo de siderforos e antibiose, entre outras (Gray & Smith, 2005).
Soma-se a isso a inexistncia de uma estrutura especializada semelhante aos ndulos,
dificultando o estudo destas associaes, e a determinao da real contribuio de cada
mecanismo na melhoria da nutrio das plantas inoculadas. Estas associaes
apresentam uma eficincia muito menor que a observada nas simbioses entre rizbios e
leguminosas, e uma baixa reproducibilidade dos resultados experimentais. Entretanto,
resultados experimentais de co-cultivo sugerem a capacidade de excreo de amnia por
G. diazotrophicus, bem como a ausncia da enzima nitrato redutase e uma baixa
represso do mecanismo de fixao de N por quantidades relativamente elevadas de
amnia, como observado em bacterides. Estudos recentes baseados na anlise da
expresso gnica comparativa de variedades de cana-de-acar contrastantes quanto
capacidade de associao com bactrias diazotrficas, sugerem que a enzima glutamina
sintetase (GS) citosslica do vegetal pode estar envolvida na assimilao do N
biologicamente fixado. Espera-se que a continuidade de estudos fundamentados em
ferramentas de biologia molecular possa fornecer em breve um modelo da associao
entre gramneas e bactrias fixadoras de Nitrognio.

QUANTIFICAO DA FBN

A presena de bactrias capazes de fixar nitrognio em plantas que no formam

ndulos no significa que estas plantas estejam recebendo contribuies significativas
deste processo. Os primeiros trabalhos utilizavam clculos sobre o balano de
nitrognio onde todas as entradas e sadas do sistema eram medidas. Resultados
positivos destes estudos, aplicados em plantas crescidas em potes, sugeriram uma
quantidade significativa de entradas via FBN. Estes trabalhos, embora limitados a
condies experimentais e pouco convincentes, foram suficientes para estimular os
estudos sobre contribuies agronmicas em plantas que no formavam ndulos como a
maioria dos cereais e forrageiras. Mas quais so as necessidades de nitrognio de
culturas onde no h a formao dos ndulos? Por exemplo, o arroz remove cerca de
16-17 kg N por tonelada produzida de gros secos (Sahrawat, 2000), o trigo requer
cerca de 26-28 kg de N para produzir 1 tonelada de gros secos (Angus, 2001). O milho
requer de 9-11 kg de N para produzir 1 tonelada de biomassa (Anuar, Shamsuddin &
Yaacob, 1995) e a cana-de-acar utiliza 1,45 kg de N para produzir 1 tonelada de
biomassa fresca ou 7 kg N para 1 ton massa seca por hectare, o que seria igual a 116274 kg N/ha (Bhuiyan, 1995). Mas este nitrognio pode ser adquirido apenas via o
processo biolgico? Infelizmente, os estudos tm mostrado que no melhor dos casos
para plantas como o arroz e a trigo, menos de 20 % do N advm do processo biolgico
(Tabela 5).

Tabela 5: Estimativa de contribuio de FBN por diversas espcies de bactrias

diazotrficas inoculadas em cereais e gramneas forrageiras.
Gnero
Azotobacter
Azospirillum

Burkholderia
Herbaspirillu
m

Rhizobium

Quantidade de N
Planta
Arroz
20% aumento gro
Arroz 20% a 58% dependendo
da variedade/casa de
vegetao
Arroz
58,9 % Ndfa

Referncia
Yanni & El-Fattah, 1999
Mirza et al., 2000

Mirza, Rasul, Mehnaz, Ladha,

So, Ali & Malik, 2000
Trigo 30% aumento gro/ 50Okon & Labandera60 kg N/ha
Gonzalez,1994
Trigo
7-12% - 15N
Malik, Mirza, Hassan, Mehnaz,
Rasul, Haurat, Bally &
Normand, 2002
Trigo 14 37 %; Balano de Didonet, A. D., Rodrigues, O.
N
& Kenner, M. H. 1996
10 a 79 %; Balano de Boddey, R. M., Oliveira, O. C.
N
de, Urquiaga, S., Reis, V. M.,
Olivares, F. L., Baldani, V. L.
D. & Dobereiner, J. 1986
Cana
9 t/ha cana-planta e 5
Muthukumarasamy, Revathi &
t/ha em cana soca
Lakshminarasimhan, 1999
Milho
50-95% dependendo
Dobbelaere, Vanderleyden &
solo com aplicao 18Okon, 2001
46 kgN/ha
Riggs, Chelius, Iniguez,
13 a 25% aumento gros
Kaeppler &Triplett, 2001
dependendo do gentipo
Arroz
0,8 t/ha
Trn Van, Berge, K,
Balandreau & Heulin., 2000
Arroz
19-58% casa de
Mirza, Rasul, Mehnaz, Ladha,
vegetao
So, Ali & Malik, 2000
Arroz
58,2 % Ndfa
Mirza, Rasul, Mehnaz, Ladha,
So, Ali & Malik, 2000
Milho
11% campo
Gutirrez-Zamora & MartinezRomero, 2001

Para as leguminosas, a expectativa de contribuio da FBN varivel. O que

determina esta amplitude a variedade, o local de plantio, o mtodo utilizado para
medir a contribuio, a estirpe utilizada entre outros fatores biticos e abiticos.

Tabela 6: Quantificao de contribuio da FBN em leguminosas

Espcies

(kg N/ha/por ano)

Alfalfa (Medicago sativa L.)

80-250

Amendoim (Arachis hupogaea)

33-297

Caupi (Vigna unguiculata L.)

73-240

Ervilha (Pisum sativum)

7-244

Ervilhaca peluda (Vicia villosa Roth)

110-184

Trevo (Trifolium pratense L.)

22-150

Estilosantes (Stylosanthes sp.)

110-184

Lupine (Lupinus spp. L.)

50-100

Feijo (Phaseolus vulgaris L.)

30-50

Guandu (Cajanus cajan)

7-235

Lentilha (Lens culinaris)

35-192

Mucuna preta (Stizolobium aterrimun)

157

Feijo mungo (Vigna radiate)

55

Soja (Glycina max)

17-450

Sesbania rostrata

324

Sesbania sesban

7-18

Trevo branco (Trifolium repens)

128-291

Adaptado de Freire, (1992) e Moreira & Siqueira (2002)

7.1

7.1.1

Mtodos para estimar a contribuio da FBN

Reduo de acetileno
Os primeiros esforos em medir a contribuio da FBN utilizaram um inibidor

competitivo da enzima nitrogenase, que uma vez presente na atmosfera era reduzido
preferencialmente: o acetileno. Neste mtodo substitui-se parte da atmosfera por
acetileno, que reduzido a etileno e medido em um cromatgrafo a gs. A principal
crtica deste mtodo era o tempo de pr-incubao de 6 a 12 horas, e durante este
perodo ocorria uma diferena alta entre o incio e o fim do perodo de anlise, sendo

este atribudo multiplicao de clulas estimulada pela liberao de carbono advindo

da lise celular das razes aps a extrao (Van Berkum & Bohlool, 1980). Vrias
modificaes foram feitas no mtodo para minimizar crticas como estas e outras
advindas da dificuldade de difuso de gases em sistemas inundados, dificuldade de
medir a contribuio de bactrias diazotrficas e no de algas fotossintticas e tambm
fixadoras, etc. O principal problema advindo deste mtodo era a modificao da pO2,
visto que sistemas nodulantes apresentam queda imediata da atividade da nitrogenase
aps distrbios fsicos aplicados ao sistema radicular, mesmo sabendo-se que barreiras
fsicas protegem os ndulos do efeito inibidor do oxignio (Witty & Minchin, 1988).

7.1.2

Balano de N
O princpio muito simples: estimar o N total no solo, semente, e outros

insumos como adubos desde o incio do crescimento at a colheita e novamente ao final

quantificar o N total na planta e no solo. Diminuindo o teor inicial do final tem-se o
balano de N. Se o N total na cultura e no solo for significativamente maior que o
inicial, assume-se que houve incremento de N ao sistema advindo da FBN. Devemos ter
em mente que perdas naturais de nitrognio normalmente ocorrem no solo tais como
lixiviao, denitrificao e volatilizao e estas perdas normalmente no so
quantificveis, o que leva a uma superestimativa da contribuio de FBN.
Como a massa de solo necessria para crescer uma planta sadia pode ser maior
que 100 vezes a massa da planta, o N total do solo muito maior que o acumulado na
planta, mesmo em solos deficientes. Desta forma, as perdas advindas dos trs processos
descritos acima devem ser quantificadas e portanto esta tcnica deve ser aplicada em
experimentos de vasos ou similares, capazes de serem quantificados e mesmo assim
deve-se utilizar as mesmas condies para sucessivos plantios, para obter um ganho de

N significativamente superior aos erros de amostragem e das anlises. A principal

vantagem desta tcnica a sua simplicidade e baixo custo e permitem explorar sistemas
onde no se tenha nenhum dado da contribuio de FBN por grupos de pesquisa
iniciantes.

7.1.3

Tcnicas isotpicas 15N

6.1.3.1. Incorporao de 15N2 gs

Com a utilizao do istopo mais pesado do nitrognio, o 15N, possvel marcar
compostos ou mesmo utilizar 15N2 para quantificar a contribuio da FBN. No caso do
gs marcado necessrio o controle da atmosfera de CO2 e O2 pela clausura das plantas,
alm de mant-las em um sistema de luz controlada, temperatura e transpirao,
necessitando de um sistema sofisticado de controle ambiental (Eskew, Eaglesham &
App, 1981). Devido a problemas como perdas de gases e perodos curtos de incubao
em atmosfera controlada inibem a quantificao da FBN de uma maneira global que
incluem dados de todo o ciclo da cultura, principalmente tratando-se de um processo
que varia com as condies ambientais e perodo de crescimento. Se a contribuio for
muito pequena no perodo de incubao, erros advindos de variaes na aplicao da
tcnica podem ocasionar valores de acmulo de

15

N2 menores que a planta controle

(Morris, Zuberer & Weaver, 1985).

6.1.3.2. Diluio de 15N

Podemos utilizar compostos nitrogenados onde parte do teor de N est na forma
de 15N e adicionar este adubo ao solo para ser absorvido pelas plantas. Uma vez que a
planta absorve esta istopo mais pesado juntamente com o

14

N, podemos discriminar

esta absoro utilizando um espectrmetro de massa, com sensibilidade suficiente para

quantificar o

15

N presente nas amostras de tecidos vegetais e subtrair da abundancia

natural (McAuliffe, Chamblee, Uribe Arango & Woodhouse, 1958). Este clculo da
contribuio de FBN na planta depende da comparao com uma planta controle que
devemos escolher. Esta planta primeiramente no fixa nitrognio e portanto todo o
nitrognio absorvido vir do contedo de N disponvel no solo. Outras caractersticas
tambm devem ser levadas em conta para a escolha da planta controle: possuir taxa de
crescimento semelhante a planta teste, ter um sistema radicular que explore as mesma
camadas de solo. Os principais problemas advm do fato que ao se adicionar adubo
marcado com

15

N, o N disponvel marcado (essencialmente NH4+ e NO3-) geralmente

varia de acordo com a profundidade e com o tempo. Plantas com absoro diferencial
ao longo do tempo e espao explorado pelas razes tero uma marcao diferente,
introduzindo um erro na estimativa na contribuio da FBN (Witty, 1983). A soluo
para este tipo de problema utilizar vasos ou tanques de concreto e incorporar o
material marcado com

15

N em diferentes profundidades alguns meses antes do plantio,

permitindo a estabilizao do N disponvel no solo (Kohl & Shearer, 1981).

6.1.3. 3. Abundncia natural de 15N

O que se entende pela tcnica de abundncia natural do 15N refere-se a marcao
natural deste istopo no solo. Plantas que recebem contribuies significativas da FBN
acumularo teores deste elemento de duas fontes: solo e ar, diluindo esta marcao
natural. Com o advento de espectrmetros de massa mais sensveis, possvel
diferenciar a absoro entre plantas. O uso desta tcnica para estimar a contribuio da
FBN em plantas noduladas e plantas capazes de se associar com actinorrizas, foi feito
primeiramente por Shearer & Kohl (1986). Para aplicar a tcnica de abundncia natural

de 15N na quantificao de FBN para gramneas ou cereais faz-se necessrio utilizar um

grande nmero de plantas vizinhas, ou mesmo invasoras dos campos de produo que se
deseja avaliar. Somente quando esta diferena de marcao natural entre sua planta de
interesse e suas plantas controle for significativa pode-se realmente estimar a
contribuio da FBN ao sistema.
Tabela 7: Comparao entre os mtodos de se estimar a contribuio da fixao
biolgica de nitrognio
Mtodos

Vantagem

Desvantagem

Sensibilidade

1. Balano de N

Simples

Baixa sensibilidade e no inclui

Baixa

total

todos os itens de ganhos e perdas

2. Incorporao

Mais direto

15

de N2

Caro e apenas por perodos

Alta a moderada

curtos

3. Reduo de

Simples e sensvel

Indireto e semi-quantitativo

Alta

Mede todo o

Somente para FBN em planta e

Alta-baixa

acetileno
4. Diluio de
15

perodo de cultivo problemas de marcao estvel

do solo

4a. Abundncia

Simple e no

Somente baixa diferena no

natural

pertuba o sistema

contedo de 15N

4b. Adio de

Diferena no

Mudana do 15N em tempo e no

substrato

contedo de 15N

solo

Baixa
Moderado

grande

POTENCIAL DE USO AGRCOLA E OTIMIZAO DA FBN

Em sistemas agrcolas, a possibilidade de utilizao de fertilizantes nitrogenados

para suprir a demanda de cultivos comerciais com nitrognio pode ocorrer tanto pela
transferncia de N de uma rea para outra, atravs do uso da biomassa vegetal ou de
estercos animais, como pela utilizao de tecnologias baseadas na utilizao de sistemas
capazes de fixar biologicamente o nitrognio atmosfrico. Esta ltima alternativa, onde

se inclui a utilizao de adubao verde, apresenta-se como a nica capaz de aumentar

naturalmente a quantidade de N assimilvel in situ.
Quando se fala de FBN lembramos de plantas da famlia das leguminosas,
principalmente da soja. Realmente o maior sucesso da tecnologia de uso de bactrias
fixadoras de nitrognio como inoculante a cultura da soja onde no se recomenda a
adubao nitrogenada em todo o territrio brasileiro. Hoje 95 % ou mais da industria de
inoculantes instaladas no Brasil produzem somente insumos para a soja. Outras culturas
de importncia nacional como o feijo Phaseolus vulgaris, regional Caupi (Vigna
unguiculata), ou mesmo para cereais como milho, arroz e plantas de importncia
industrial como a cana-de-acar, so passveis de aplicao de inoculantes comerciais.
O que falta a iniciativa privada mudar a linha de produo para atender a
demanda crescente por produtos biolgicos, no trangnicos, e que podem contribuir
para reduzir os custos e o impacto ecolgico da produo.

PERSPECTIVAS FUTURAS

Alguns pontos importantes devem ser alvo das pesquisas nesta rea visando um
maior aproveitamento da FBN em gramneas. Primeiro refere-se a seleo de gentipos,
pois existe um grande nmero de evidncias sobre diferenas entre cultivares. Segundo,
qual a bactria ou grupo destas deve ser a melhor combinao com o gentipo mais
promissor. Terceiro, refere-se aos fatores ambientais biticos e abiticos relativos a
eficincia do processo tais como temperatura, gua, luminosidade, nitrognio,
associao com outros organismos tais como micorrizas, interao com a microflora
nativa, etc. Quarto ponto seria referente a modificaes tanto na planta como na bactria
visando o aperfeioamento desta associao.

Algumas perguntas continuam sem resposta: Existe suficiente fonte de carbono

para suportar uma populao elevada de bactrias ou estas podem ser um dreno para as
plantas? A Nitrogenase expressa (genes nif) mas est realmente ativa? Os produtos da
fixao so diretamente transferidos para a planta ou somente aps a morte e
mineralizao das clulas? Os nmeros encontrados em plantas no leguminosas ficam
entre 10.00.000 clulas por grama de massa fresca sendo que no caso do rizbio estes
nmeros chegam a 100.000.000.000 bacterides por grama de massa fresca. Estes
nmeros seriam suficientes? Como poderemos aument-lo sem causar uma resposta de
defesa da planta? Muitos aspectos ainda precisam ser estudados visando tornar esta
associao mais eficiente.
Acima de tudo, o que a pesquisa busca atualmente fazer uso destas associaes
benficas para substituir fontes no renovveis de energia, como o caso do processo de
obteno de nitrognio fertilizante, que usa energia fssil. A busca por sustentabilidade
e produtividade tem que levar em considerao o custo / benefcio da tecnologia,
facilidade de implantao, disponibilidade de obteno do inoculante ou muda
inoculada, entre outros fatores scio-econmicos e mesmo ambientais. Acima de tudo o
manejo sustentvel visualizado na figura 1, engloba todas as possveis utilizaes da
FBN para a agricultura.

Associativas

Endfitos

Vida livre

Ndulos

Fixao Biolgica de Nitrognio

Quais os possveis hospedeiros que podem se beneficiar

dos ganhos da FBN, mantendo a produtividade agrcola?

Manejo Sustentvel dos Agroecossistemas

Figura 1: Maneiras de utilizar os ganhos advindos da fixao biolgica de nitrognio
para a reduo do uso de fertilizantes nitrogenados na agricultura.

Agradecimentos
Os autores agradecem ao Conselho Nacional de Desenvolvimento Cientfico e
Tecnolgico-CNPq pela bolsa de recm-doutor do segundo autor, as bolsas de
produtividade em pesquisa dos outros autores, Fundao de Amparo Pesquisa do Rio
de Janeiro (FAPERJ) pelas bolsas Cientista do Nosso Estado do primeiro e ltimo autor.
Este trabalho foi parcialmente financiado pela Embrapa, pelo CNPq (PRONEX II),

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CAPTULO 7
EFEITOS FISIOLGICOS DE SUBSTNCIAS HMICAS UMA
REVISO SOBRE O ESTMULO NAS H+-ATPASES
Luciano Pasqualoto Canellas(1), Daniel Baslio Zandonadi(1), Fbio Lopes
Olivares(2) & Arnoldo Rocha Faanha(2)

(1) Laboratrio de Solos, Centro de Cincias e Tecnologias Agropecurias,

Universidade Estadual do Norte Fluminense Darcy Ribeiro (UENF), Av. Alberto
Lamego 2000, 28013-602 Campos dos Goytacazes RJ.bolsista do CNPq:
canellas@uenf.br; daniel@uenf.br
(1)Laboratrio de Biologia Celular e Tecidual Centro de Biocincias e
Biotecnologias, UENF. bolsista do CNPq: fabioliv@uenf.br; arnoldo@uenf.br

SUMRIO

INTRODUO........................................................................................................ 2

CARACTERSTICAS QUMICAS E ESTRUTURAIS DAS SUBSTNCIAS

HMICAS........................................................................................................................ 3
2.1

Bioatividade de Substncias hmicas................................................. 11

2.2

perspectiva histrica ........................................................................... 11

2.3

Efeitos indiretos das substncias hmicas sobre o crescimento das

plantas

............................................................................................................ 13

2.4

Efeitos diretos das substncias hmicas sobre o metabolismo das

plantas

............................................................................................................ 14

2.5

O papel da H+-ATPases na nutrio e crescimento celular ................ 15

2.6

Mecanismos de ativao da H+-ATPase de membrana plasmtica pelas

substncias hmicas.................................................................................................... 26
3

REFERENCIA BIBLIOGRFICA........................................................................ 36

INTRODUO

As substncias hmicas so o principal componente da matria orgnica dos

solos, das guas e dos sedimentos. Alm de influenciar as propriedades qumicas, fsicas
e biolgicas determinando a produo biolgica dos ecossistemas, elas exercem um
efeito direto sobre o crescimento e metabolismo das plantas, especialmente sobre o
desenvolvimento radicular (Nardi et al., 2002). No recente a concepo de que as
substncias hmicas podem regular o crescimento das plantas, porm os mecanismos
celulares atravs dos quais tal efeito se manifesta ainda no so bem claros. Parte do
atraso na evoluo deste tema decorre de uma concepo reducionista que,
freqentemente, pe em questo se os cidos hmicos, sendo macromolculas de alto
peso molecular, poderiam de fato serem reconhecidas por receptores de membrana na
superfcie/apoplasto, ou mesmo acessar o interior da clula e regular o metabolismo das
plantas. Entretanto, evidncias experimentais recentes tm lanado luz sobre o problema
ao verificar que as substncias hmicas, e entre elas especificamente os cidos hmicos,
podem regular a atividade das bombas de H+ induzindo a sntese de H+-ATPase de
membrana plasmtica e vacuolar.
Existe uma srie de trabalhos que compilam o efeito fisiolgico de substncias
hmicas (Vaughan & Malcolm, 1985; Chen & Aviad, 1990; Nardi et al., 2002). Esta
reviso centrada nos efeitos fisiolgicos de cidos hmicos sobre a atividade de
enzimas transmembranares responsveis pela gerao do gradiente eletroqumico que
energiza os canais e transportadores de ons e molculas, utilizados na absoro de
nutrientes pelas clulas, e ainda, pela acidificao do apoplasto, condio necessria
para a expanso celular. Antes, porm, realizada uma breve discusso sobre aspectos
estruturais das substncias hmicas

CARACTERSTICAS QUMICAS E ESTRUTURAIS DAS SUBSTNCIAS

HMICAS

Tradicionalmente, os cidos hmicos (AHs) tm sido definidos como

substncias de colorao escura compostas por macromolculas de massa molecular
relativamente elevada formada atravs de reaes de sntese secundria a partir de
resduos orgnicos de plantas, animais e microrganismos (Stevenson, 1994). Entretanto,
alguns estudos tm sugerido uma nova concepo para a estrutura destas complexas
substncias hmicas (Orlov et al., 1975; Piccolo, 2002).
Piccolo et al. (1996a; 1996b) observaram que AHs submetidos cromatografia
de excluso por tamanho molecular apresentaram alteraes reversveis no perfil de
distribuio da massa molecular, ou seja, diminuio do tamanho dos Ahs, com a
acidificao da soluo de AHs pela adio de cidos orgnicos (na faixa de pH 9,2
2,0). A partir destes dados, Piccolo postulou que, em vez de consistir num polmero
estvel em pH neutro ou alcalino, os AHs se comportam como uma associao
supramolecular de molculas relativamente pequenas e heterogneas que se mantm
unidas pela ao de foras fracas dispersivas, tais como foras de van der Waals e
interaes - , CH- em valores de pH na neutralidade ou atravs de pontes de H+ em
valores mais baixos de pH. Segundo a concepo mais antiga de Orlov et al. (1975),
esse menor agregado corresponderia clula estrutural mnima das substncias hmicas
sobre a qual vai se desenvolvendo paulatinamente a macroestrutura atravs da adio de
camadas sobre esta clula bsica, num arranjamento semelhante ao supraestrutural. A
adio de cidos orgnicos altera a estabilidade dessa conformao atravs do
rompimento de interaes hidrofbicas fracas. A subseqente eluio na cromatografia
por excluso de tamanho resulta em subunidades menores, que so protegidas da

reassociao das unidades estruturais, que pode ocorrer em condies estticas. Piccolo
e colaboradores consideraram os resultados desse experimento como a expresso da
natureza associativa de pequenas molculas hmicas, que se auto-organizam num
material de tamanho molecular aparentemente elevado. Essas fraes de menor massa
molecular so um produto do rearranjamento conformacional e composio qumica
diferente das substncias hmicas. A associao supramolecular em soluo formada,
ento, por meio da interao de domnios hidrofbicos de compostos anfipticos (um
composto anfiptico ou anfiflico aquele que apresenta uma parte polar e outra apolar
na mesma molcula). A tendncia termodinmica natural desses compostos de formar
agregados espontaneamente. Essas associaes so isoladas progressivamente da rede
de estrutura da gua (Wershaw, 1986). Tal separao resulta no acrscimo da entropia
do sistema e na energia livre de estabilizao das diferentes unidades moleculares
hmicas para formar a superestrutura. Na associao hmica supramolecular, as foras
intermoleculares determinam a conformao estrutural das substncias hmicas, e a
complexidade de mltiplas interaes no covalentes controlam e regulam a sua
reatividade no ambiente.
Considerando a nova concepo (associao supramolecular ou unidade
estrutural mnima) para o comportamento estrutural das substncias hmicas, a
definio clssica de cidos flvicos e hmicos precisa, necessariamente, ser revista.
Piccolo (2002) redefine, ento, cidos flvicos como a associao de pequenas
molculas hidroflicas com uma quantidade de grupamentos funcionais cidos
suficientemente grandes para manter os agrupamentos de cidos flvicos dispersos em
qualquer valor de pH. Os cidos hmicos, por sua vez, so compostos por associaes
de

material

humificado

onde

predominam

compostos

hidrofbicos

(cadeias

polimetilnicas, cidos graxos, esterides), que so estabilizados em pH neutro por

foras hidroflicas dispersivas. De acordo com o modelo de Piccolo, a conformao dos

cidos hmicos cresce progressivamente de tamanho quando as foras oriundas das
ligaes hidrognio so progressivamente aumentadas at um valor baixo de pH onde
os cidos hmicos floculam.
Essa concepo foi duramente criticada por Swift (1999), que considerou as
modificaes provenientes do cromatograma de excluso por tamanho das substncias
hmicas com variao do pH de eluio como uma conseqncia de artefatos
produzidos pela interao polmero gel da cromatografia. No entanto, o modelo supraestrutural se mostrou consistente ao serem reproduzidos qualitativamente os
experimentos de Piccolo por Faanha et al. (2002). Alm disso, uma srie de outras
evidncias de um arranjamento supra-estrutural para substncias hmicas foram obtidas
a partir de diferentes mtodos espectroscpicos. Atravs de uma extensiva reviso de
literatura sobre o uso da pirlise na anlise de estrutura de substncias hmicas, SaizJimenez (1996) concluiu que os principais produtos da pirlise encontrados nos
fragmentos da frao hmica tambm foram observados em ligninas e polissacardeos,
no havendo evidncias de uma condensao aparente entre lignina e polissacardeos. O
mesmo autor argumenta que, tendo em conta os produtos da pirlise, no se pode,
necessariamente, assumir que as substncias hmicas sejam geradas por reaes de
condensao de lipdeos, carboidratos, amino-cidos, etc. Teoricamente, misturas de
compostos mais ou menos biodegradveis, de macromolculas e de outras molculas
com baixo peso molecular podem explicar mais adequadamente os dados de pirlise
(Saiz-Jimenez & Leew, 1986).
A associao supramolecular de substncias hmicas foi encontrada por Haider
et al. (2000) e Ricca et al. (2000) e por meio da ruptura at pequenos componentes pela
preparao de derivados hmicos atravs de reaes silanizao ou metilao de

funes oxigenadas cidas. Com essa simples produo de derivados (que no quebra
ligaes ter e steres), desagregado o frgil aglomerado de estruturas hmicas num
plano supramolecular at chegar a pequenas entidades que so prontamente dissolvidas
em solventes orgnicos e, assim, eludos em faixas de massa molecular pequenas por
cromatografia por excluso de tamanho a alta presso. Os espectros de ressonncia
magntica nuclear (RMN) e de infravermelho (IV) gerados dessa forma so muito
melhor resolvidos.
Estudos com espectroscopia RMN tm demonstrado que, como sugere Piccolo et
al. (2003), as substncias hmicas resultam da agregao de vrias classes de compostos
orgnicos, tais como acares, aminocidos, steres e teres alifticos e aromticos.
Numerosos estudos mostram que h uma correlao direta entre o peso molecular e os
coeficientes de difuso para uma variedade de espcies orgnicas e estas correlaes so
descritas por equaes empricas. Baseado nestas observaes foi desenvolvido um
experimento

bidimensional

chamado

DOSY

(do

ingls

Diffusion

Ordered

SpectroscopY), em que observam-se deslocamentos qumicos em um eixo e no outro

eixo encontram-se os respectivos coeficientes de difuso. Comparando-se os
deslocamentos qumicos e os coeficientes de difuso com os de diferentes padres,
possvel identificar vrias classes de compostos no agregado. Usando a tcnica de
DOSY 1H RMN, Simpson (2002) foi capaz de demonstrar que as substncias hmicas
so, na realidade, associaes ou agregados de molculas de menores pesos moleculares
que podem ser rompidos pela adio de cido. A Figura 1 mostra os espectros de
DOSY, em duas concentraes diferentes, de AHs isolados de turfa.

Figura 1. Espectros de DOSY de cido hmico isolado de turfa em concentrao de

5mg mL-1 (A) e 133 mg mL-1 (B) e aps adio de 5l de cido actico (C e
D). Adaptado de Simpson 2002.
Em ambas as concentraes de AHs, os componentes da mistura exibem
coeficientes de difuso semelhantes, indicando que existem associaes entre os vrios
componentes. Entretanto, a adio de cido actico, que promove a desagregao de
materiais hmicos (Piccolo 2002), resulta na formao de bandas discretas de difuso
que esto correlacionadas com deslocamentos qumicos consistentes com as espcies
mais abundantes nestas misturas, ou seja, lignina, polissacardeos e peptdeos (ver
tambm Piccolo et. al. 2003). Aps a desagregao com cido actico, os coeficientes
de difuso mdios para cada uma das espcies podem ser calculados (Figura 1D).

Finalmente, os tamanhos moleculares podem ser extrapolados a partir da comparao

destes coeficientes com padres e os resultados estimam pesos moleculares na regio de
200-600, ~1000 e 2000-2500 Da, respectivamente. Este resultado muito significante,
pois valida a concepo do arranjamento supraestrutural de pequenas associaes de
molculas orgnicas com grandes implicaes para o efeito fisiolgico de substncias
hmicas como se ver mais adiante. Wang and Xing (2004), usando a tcnica de
correlao de tempos para RMN de 1H, obtiveram uma srie de informaes novas
sobre a mobilidade das substncias hmicas em soluo. Eles concluram que os
fragmentos estruturais tpicos de carboidratos so maiores e apresentam baixa
mobilidade em soluo, enquanto que grupamentos alqulicos e aromticos so
relativamente menores e mais mveis. Esta mobilidade diferencial das unidades
constitutivas dos cidos hmicos pode estar diretamente relacionada com a capacidade
de interao das substncias hmicas com as clulas vegetais.
O estudo da ao direta das substncias hmicas sobre o metabolismo e o
crescimento das plantas tem sido centrado, principalmente, sobre os cidos flvicos, ou
seja, a frao humificada considerada de menor massa molecular (Vaughan & Malcolm,
1985). Isto ocorreu por uma simples questo: no era possvel conceber que uma
substncia de massa dois ou trs milhes de vezes maiores como os cidos hmicos (na
ordem de micrmetros) (Cameron et al., 1972a; Cameron et al., 1972b) pudessem
passar por poros ou espaos aparentes no apoplasto (na ordem de nanmetros). No
entanto, baseando-se na concepo emergente do arranjamento macro-estrutural de
substncias hmicas, compostos de reconhecida capacidade de regulao e estimulao
do crescimento vegetal tais como os hormnios vegetais podem estar fracamente unidos
supra-estrutura das substncias hmicas e serem liberados para a soluo do solo e
para a absoro das plantas por uma simples variao de pH na interface das razes

decorrente, por exemplo, da exsudao de cidos orgnicos como experimentado por

Faanha et al. (2002). Dessa forma, os cidos hmicos e seus domnios hidrofbicos
predominantes podem ser considerados como um armrio de compostos qumicos que
pode ser aberto ou fechado para liberao de determinados componentes de acordo com
uma conversa entre a planta e seu ambiente de crescimento. O stio inicial de interface
ativa entre os AH e as razes de plantas a regio que compreende a rizosfera e o
rizoplano, onde partculas supra-estruturais de cidos hmicos aplicados a planta ou que
naturalmente so formadas no solo, entram em contato com uma diversidade de
secrees e exsudatos radiculares das plantas (Figura 2A). O produto desta interao
causa alteraes fsico-qumicas no ambiente radicular externo, que, por conseguinte
promovem alteraes estruturais nas partculas supra-estruturais de AH. Tais alteraes,
podem supostamente gerar sub-unidades/fragmentos de baixo peso molecular (como
demonstrado por estudos de pirlise, excluso molecular e alterao de perfil
cromatogrfico), potencialmente capazes de induzirem alteraes no metabolismo
celular de plantas. Embora os detalhes moleculares que respondem pelas alteraes
fisiolgicas na planta sejam pouco explorados, presumivelmente tais sub-produtos de
baixo peso molecular podem ser reconhecidos por receptores presentes na plasmalema
ou mesmo de modo no conhecido serem internalizados (via apoplasto/simplasto)
(Figura 2B e 2C) e elicitarem respostas em nvel celular, eventos de transcrio e
transduo especficos, resultando em alteraes estruturais e fisiolgicas na planta.
Neste sentido, a localizao desse armrio est na rizosfera/ rizoplano das razes. Os
quais parecem guardar a chave desse armrio, e que, promovem, de forma no
elucidada, a entrada de substncias hmicas para o interior da clula (Figura 2B e 2C,
D, E). A linguagem dessa conversao permanece ainda como um mistrio desafiador.

A
A

Figura 2. A: Fotomicrografia de imunomarcao fluorescente de partculas de cidos

hmicos (AHs) dispersas no rizoplano de razes de milho (estrela). Aumento de
620X. B: Fotomicrografia de imunomarcao fluorescente de seo transversal
de razes de milho, com imagem de sinal amplificado, evidenciando agregados
de partculas de AHs no lmem de vasos do protoxilema. Aumento de 750X.
C/D: Imagens de correspondncia, respectivamente por microscopia tica de
contraste diferencial e interferncial (DIC) e de fluorescncia de seo
transversal de razes de milho evidenciando agregado de AHs presente nos
espaos intercelulares de clulas do parnquima cortical de milho (quadrado).
Aumentos de 500X. E: Fotomicrografia de imunomarcao fluorescente de
razes de milho evidenciando agregados de AHs (seta) em clulas de
parnquima prximas

ao aernquima formado pelas condies de cultivo

hidropnico no ensaio em questo. Aumento de 250X. A Deteco de AHs na

planta foi feita por imunoflorescncia, combinando anticorpos secundrios de
cabra, IgG anti-coelho, marcados com isotiocianato de fluorescena (FitC) e
anticorpos primrios policlonais no purificado anti-AHs isolado de
vermicomposto.

2.1

Bioatividade de Substncias hmicas

2.2

Perspectiva histrica
Vaughan e Malcoln fizeram, em 1985, uma reviso brilhante sobre a cronologia

do estudo do efeito das substncias hmicas sobre a fisiologia das plantas. Aqui feito
um breve resumo desse artigo.
Por mais de 8000 anos, o homem tem considerado que as terras de colorao
escura so normalmente mais produtivas e que a colorao e a produtividade esto
associadas presena de matria orgnica proveniente da decomposio dos resduos de
plantas ou animais. Conta uma famosa lenda que o rei Augeas de Elis possua um curral
com 3 mil cabeas de gado. Por trinta anos, o curral nunca fora limpo. O legendrio
Hrcules se disps a limpar o curral numa nica noite. O rei Augeas, considerando
impossvel tal proeza, concordou em pagar o equivalente a 10% de seu rebanho pela
tarefa. Hrcules desviou o rio Alpheus para dentro do curral dispersando todo o esterco.
Ento, o rei usou a perda do precioso material como uma das razes para no pagar a
dvida. Homero, na Odissia, escrita provavelmente entre 800 e 900 antes de Cristo,
menciona a fertilizao das vinhas com esterco. Teofrasto (372-287 A.C.) recomendava
o uso abundante de esterco nos solos enfraquecidos. Alm desses, h uma srie de
outros relatos do uso da matria orgnica desde a Antigidade, seja em fatos histricos
ou em contos mitolgicos (Tisdale & Nelson, 1966).
Aristteles sempre mencionado como o primeiro a sugerir que as plantas
deveriam absorver seus alimentos na mesma forma que os animais. No sculo XVII,
muitos estudiosos consideravam que as plantas poderiam absorver seus nutrientes
orgnicos diretamente do solo. A utilizao direta do hmus pelas plantas (A teoria do
hmus) foi enunciada originalmente por Thaer, que, no incio do sculo XIX, indicou
que o hmus compreende uma poro mais ou menos considervel do solo e a

fertilidade do solo depende dele; alm da gua, o hmus o nico material capaz de
fornecer nutrientes para as plantas. Apesar da Teoria do Hmus de Thaer ter sido
amplamente disseminada, foi na mesma poca que tambm surgiu a maior crtica sobre
o papel do hmus na fertilidade do solo. De Saussure foi o responsvel pela descoberta
de que as plantas podem sintetizar substncias orgnicas a partir de CO2 atmosfrico e
gua. Tambm o papel dos elementos inorgnicos na nutrio das plantas foi descrito
por Liebig, que formulou, em contraposio Teoria do Hmus, a Teoria da Nutrio
Mineral de Plantas: a produo das culturas no campo aumenta ou diminue na exata
proporo em que aumentam ou diminuem a quantidade de substncias minerais que
podem ser liberadas do esterco. Embora a controvrsia entre as duas teorias ainda
tenha perdurado, ao longo dos anos, a teoria da nutrio mineral de plantas mostrou-se
inequcova e tem sido a mais defendida na literatura especializada.
Numa srie de 15 artigos para a Academia Real Inglesa, publicados entre 1912 e
1921, Bottomley chegou concluso de que as substncias hmicas aumentavam o
crescimento de Lema major, Salvinia natans e Limobium stoloniferum em soluo de
cultivo. Ele cunhou a denominao de auximnios para a frao bioativa da matria
humificada. Bottomley (1917) considerou que os auximnios poderiam regular o
crescimento das plantas. Foram publicados, nessa mesma poca, os primeiros relatos
sobre os hormnios vegetais. Idias muito semelhantes s de Bottomley foram
defendidas por Hillitzer, Chaminade e Boucher. Seguindo uma outra linha de
pensamento, Olsen pregava que as substncias hmicas promoviam o crescimento das
plantas por tornarem os micronutrientes mais solveis e mais disponveis para a
absoro celular. O caso clssico estudado por Olsen em 1930 foi o aumento da
absoro de ferro pelas plantas, que inspirou, mais tarde, os trabalhos de Pinton et al.
(1997; 1999b), Mohamed et al. (1998), Cesco et al. (2000), Agnolon et al. (2002),

Nikolic et al. (2003) e Chen et al. (2004). A forma absorvida pelas plantas FeII e
Olsen demonstrou que as substncias hmicas tm poder redutor suficiente para
transformar FeIII em FeII. Alm disso, Lieske (1931) sugeriu que as substncias
hmicas tambm poderiam alterar a permeabilidade das membranas das plantas atravs
de sua ao surfactante aumentando a capacidade de absoro de nutrientes. A ao
detergente das substncias hmicas e o conseqente aumento da fluidez das membranas
ainda advogada at hoje como um dos principais efeitos das substncias hmicas no
metabolismo celular (Visser, 1985; Visser, 1987a e 1987b; Samson & Visser, 1989;
Varanini et al., 1993).
Na seqncia, desenvolveremos uma discusso crtica dos resultados e
interpretaes dos trabalhos mencionados acima, os quais tm constitudo a base do
conhecimento geralmente aceito e descrito na literatura cientfica que versa sobre a
influencia das substncias hmicas no metabolismo e crescimento das plantas.

2.3

Efeitos indiretos das substncias hmicas sobre o crescimento das plantas

O condicionamento das propriedades do solo pela matria orgnica, via de regra,

proporciona melhores condies de cultivo. Esta influncia global das substncias
hmicas sobre a macro e a microestrutura dos solos, a qual proporciona benefcios para
a atividade biolgica, conhecida como o efeito indireto da matria orgnica
humificada sobre o crescimento vegetal. Existe uma srie muito grande de evidncias
experimentais que asseguram que as substncias hmicas (SH) participam de reaes
importantes que ocorrem na interface soluo parte slida do solo, influenciando a
fertilidade atravs da liberao de nutrientes, da detoxificao de elementos qumicos,
na formao de estrutura, ou seja, da melhoria das condies qumicas, fsicas e

biolgicas do solo (Canellas et al., 1999). O Quadro 1 resume alguns dos principais
efeitos da matria orgnica humificada sobre as propriedades do solo.

2.4

Efeitos diretos das substncias hmicas sobre o metabolismo das plantas

As substncias hmicas podem afetar diretamente o metabolismo das plantas

atravs de mecanismos ainda no muito claros. O efeito das substncias hmicas sobre
o metabolismo das plantas foi resumido por Nannipieri et al. (1993) como resultado (i)
da influncia positiva sobre o transporte de ons, facilitando a absoro; (ii) do aumento
da respirao e da velocidade das reaes enzimticas do ciclo de Krebs, resultando em
maior produo de energia metablica sob a forma de ATP; (iii) do aumento no
contedo de clorofila; (iv) do aumento da sntese de cidos nuclicos; (v) do efeito
seletivo sobre a sntese protica e (vi) do aumento ou inibio da atividade de diversas
enzimas. Todavia, as molculas hmicas dotadas de bioatividade e seus alvos celulares
bem como as vias sinalizadoras primariamente envolvidas nessas respostas no foram
ainda elucidadas.

Quadro 1. Propriedades gerais das substncias hmicas e efeitos causados no solo

Propriedade

Reteno de gua

Substncias hmicas
Apresentam colorao
variando de amarelo at
escuro
Podem reter gua at 20
vezes a sua massa

Unio de partculas
slidas

Cimentam partculas do
solo formando agregados

Cor

Efeitos no solo
Interferem no matiz e no
croma do solo; reteno de
calor
Proteo contra eroso;
armazenamento de gua no
solo
Formao de estrutura no
solo; porosidade do solo;
densidade do solo
Detoxificao de ons
txicos (Al+++), aumentam
mobilidade de ons

Formam complexos
especficos (Cu++, Mn++,
Complexao
Zn++, Al+++) e no
especficos (Ca++, Cd++)
Devido sua associao
Pouca matria orgnica
Insolubilidade em gua
com argilas e sais de
perdida com a gua de
ctions di e tri valentes
percolao
Tm funo tamponante
ajudam a manter o
Efeito tampo
em amplos intervalos de
equilbrio da soluo do
pH
solo
Responsveis pela
A acidez total das fraes
capacidade de troca de
Troca de ons
isoladas do hmus varia de
300 a 1400 cmolesc kg-1 ctions e de nions no solo
A decomposio da
Fornecimento de nutrientes
matria orgnica libera
para o crescimento das
Mineralizao
ons e molculas (CO2,
plantas
+
-3
-2
NH4 , NO3 , PO4 e SO4 )
Adaptado de Rocha & Rosa (2003)
2.5

O papel da H+-ATPases na nutrio e crescimento celular

Em funo de seu papel central no processo de nutrio e proteo celular e por

ser a barreira que comunica o citoplasma com a rizosfera, evidente que a membrana
plasmtica deveria ser um dos alvos primrios da ao das substncias hmicas. Neste
contexto, evidncias experimentais crescentes tm sugerido que o monitoramento da
atividade das bombas de prtons nesta membrana poderia ser utilizada para avaliar a
bioatividade das substncias hmicas.

A H+-ATPase de membrana plasmtica exerce um papel central no crescimento

das clulas vegetais e em sua nutrio mineral. Essa enzima funciona como uma bomba
de H+ acionada pela hidrlise de ATP, sendo responsvel pelo transporte primrio de
prtons (H+) do interior da clula para o apoplasto e, conseqentemente, pela formao
do gradiente de H+ gerado atravs da membrana plasmtica. Este gradiente de H+
energiza o transporte secundrio de ons e outros metablitos contra um gradiente de
concentrao. Vrios ons dos principais micro e macro-nutrientes vegetais se
encontram em concentraes nano ou micromolares nos solos e precisam ser
transportados para o interior celular, onde esto centenas de vezes mais concentrados.
Para isto, existem na membrana plasmtica vrias protenas transportadoras especficas
capazes de acoplar a dissipao do(s) componente(s) eltrico e/ou qumico do gradiente
de H+ gerado pelas bombas ao co-transporte dos H+ com estes ons.
De fato, o principal papel imputado H+-ATPase de membrana plasmtica na
fisiologia das plantas sempre foi o de ativar o transporte secundrio de ons
(Sondergdard et al., 2004). A absoro de ons da soluo do solo pode acontecer contra
ou a favor de um gradiente de concentrao e, em qualquer dos casos, o gradiente de H+
pode exercer forte influncia, quer seja energizando o transporte ativo atravs de
transportadores tipo simporte, uniporte ou antiporte, quer seja regulando a abertura e o
fechamento de alguns canais responsveis pelo transporte passivo de ons (Figura. 3).
Alm dos ons, o gradiente eletroqumico de H+ tambm fornece a energia necessria
para o transporte de alguns compostos orgnicos (Maathuis et al., 2003). Um exemplo
j bem caracterizado o do transportador de sacarose envolvido no transporte de acar
do apoplasto para os vasos do floema (Morsomme & Boutry, 2000)

Teoria do Crescimento cido

H+
AH / AUXINA

CELULOSE

+ + ++
- - - -

EXPANSINA
HEMICELLULOSE

H2O
nions

ATP

ADP + Pi

ctions

uniport

simport

antiport

Figura 3. Representao esquemtica da H+-ATPase de membrana plasmtica. A

atividade de hidrlise de ATP gera de 3 a 5 moles de H+ que, transportados em
outro domnio da mesma enzima, gera gradiente de prtons necessrio para i)
energizar o transporte de ons e ii) diminuir o pH do apoplasto (condio para
ao das expansinas e conseqente afrouxamento da parede celular).

Tambm existem vrias evidncias que indicam que as respostas das plantas a
diversos estresses ambientais, tais como o a tolerncia salinidade e ao estresse hdrico,
esto relacionadas com a ativao dos sistemas de transporte primrios e secundrios.
Para prevenir a acumulao excessiva de sais no citoplasma, as plantas desenvolveram
os mais variados tipos de mecanismos, parte destes envolvendo a expresso diferencial
de transportadores especficos. Uma resposta imediata ao acmulo de um sal ou de
outro agente potencialmente citotxico na clula consiste, basicamente, na excluso
deste do citoplasma por meio de sua compartimentalizao no vacolo ou sua extruso

para o exterior celular. No caso especfico do estresse salino, a super- expresso do

antiporte Na+/H+ tanto na membrana plasmtica quanto na vacuolar (tonoplasto) parece
ser fundamental para o desenvolvimento da tolerncia. Adicionalmente, tem se
evidenciado que o processo tambm envolve a ativao dos transportadores primrios
de H+ presentes nestas membranas. A abertura e o fechamento dos estmatos tambm
energizado pelas H+-ATPases das membranas plasmticas e dos vacolos das clulas
guardas que mantm e regulam um fluxo massivo, bidirecional de ons e de gua atravs
de transportadores e de canais especficos que controlam a presso de turgor destas
clulas e, conseqentemente, a funo estomtica.
As H+-ATPases tambm exercem um papel central na regulao do pH celular, o
qual, na maioria das espcies, permanece constante dentro de uma estreita faixa de pH
(7,0 a 7,5), independente do estdio fisiolgico da clula vegetal ou do estresse a que
est submetida. Apesar de saber-se relativamente pouco sobre o mecanismo de ao das
H+-ATPases nesta regulao, vrios experimentos tm demonstrado que o pH
citoplasmtico varia de acordo com o estado de ativao das H+-ATPase e com a
modulao da expresso dos genes que as codificam. Enquanto o pH celular mantido
acima de 7,0, o pH timo para a atividade da H+-ATPase de membrana plasmtica fica
entre 6,0 e 6,5. Assim, qualquer acidificao do citoplasma pode ativar esta enzima,
aumentando a extruso de H+ e contribuindo para a alcalinizao do citoplasma.
Entretanto, tambm foi observado em plos radiculares de alfafa que mudanas pontuais
da atividade da H+-ATPase no provocaram mudanas no pH do citoplasma.
Obviamente, existem outros controles na regulao do pH celular e muitos caminhos
metablicos e de transporte que envolvem H+, tornando difcil uma idia clara de como
essa regulao feita.

No obstante, um dos fenmenos que tm sido mais relacionado com a

bioatividade das substncias hmicas corresponde acidificao da parede celular
causada pela ativao da H+-ATPase de membrana plasmtica. Esse evento tido como
o evento inicial da expanso celular. Esse mecanismo conhecido como teoria do
crescimento cido (Rayle & Cleland, 1992) e est associado com a ao da auxina, um
hormnio vegetal que ativa a H+-ATPse por diversos mecanismos, entre eles a induo
da sntese de H+-ATPse modulada por genes Mha1 e Mha2 (Frias et al., 1996). A
acidificao do apoplasto seguida da elogamento celular tambm ativada pela
fusiccocina (uma toxina fngica) que, reconhecidamente, estimula a H+-ATPase. De
acordo com a teoria do crescimento cido, a acidificao do apoplasto leva ao
rompimento de ligaes da parede celular promovendo sua elasticidade, enquanto a
hiperpolarizao da membrana plasmtica aumenta a absoro de K+ (por meio da
energizao de transportadores). Essa absoro provoca mudanas no potencial
osmtico da clula, permitindo influxo de gua atravs das membranas mediado pelas
aquaporinas, favorecendo, assim, o crescimento celular (Morssome e Boutry, 2000).
Esse breve resumo do trabalho de Morssome e Boutry (2000) deixa claro o papel
central dessa enzima na adaptao da planta ao ambiente.
As primeiras evidncias de que as bombas de prtons membranares estariam
envolvidas no aumento da absoro de nutrientes na presena de substncias hmicas
foi obtida por Varanini et al. (1993) que obtiveram uma evidncia direta da interao
entre substncias hmicas de baixo peso molecular e H+-ATPase de membrana
plasmtica. Nesse estudo foi usado um surfactante (brij58) e postulado que o aumento
da permeabilidade da membrana poderia ser responsvel pela maior capacidade de
absoro de nutrientes proporcionada pela presena de substncias hmicas em soluo
tem sido justificada por um hipottico aumento da permeabilidade da membrana

plasmtica por meio da ao surfactante das substncias hmicas e a ativao da H+ATPase de membrana plasmtica (Varannni et al., 1993). Nessa linha de argumentao,
h vrios estudos que sugerem uma analogia entre a ao fisiolgica das substncias
hmicas e a ao dos surfactantes. Os dois grupos de substncias exercem algum efeito
sobre o crescimento das plantas. Visser (1985) sugeriu que o resultado da atividade de
superfcie das substncias hmicas teria como alvo principal s membranas celulares,
uma vez que os surfactantes aumentam a fluidez da membrana, diminuindo a coeso
entre os componentes da membrana. Esse fenmeno resulta num aumento da
permeabilidade da membrana plasmtica e na diminuio da temperatura na qual ocorre
a transio da matriz lipdica entre as fases lquida e slida. O mesmo autor, utilizando
clulas de batata, estudou a ao de dipalmitoil fosfatidicolina (DPPC) e de cidos
hmicos. A concentrao de 40 mg AH L-1 de soluo foi suficiente para aumentar o
efluxo de K+ da clula. A explicao para o fenmeno dada por Visser (1987a) inclui o
aumento da permeabilidade da membrana celular. Reconhecidamente, os agentes
surfactantes, que apresentam superfcie ativas, aumentam a permeabilidade de
membranas biolgicas (Visser, 1985; 1987b; Samson & Visser, 1989). Entretanto, seria
improvvel que o aumento da permeabilidade da membrana plasmtica e a dissipao
do potencial transmembranar possam induzir qualquer efeito benfico sobre as plantas.
O controle da permeabilidade celular est intimamente relacionado manuteno da
seletividade da membrana plasmtica, fator fundamental para a manuteno da
homeostase celular. Em outras palavras, com a perda da seletividade, o aumento do
fluxo de ons atravs da membrana leva, invariavelmente, perda do equilbrio qumico
da clula e de sua funcionalidade.
A Figura 4 mostra claramente a ao de cidos hmicos adicionados ao meio de
reao contendo vesculas enriquecidas de membrana plasmtica e ATP como substrato

para reao de hidrlise e gerao de H+ + Pi + ADP. observada uma forte ao

depletora na atividade da enzima in vitro com o aumento da concentrao de cidos
hmicos na soluo de reao, provavelmente pela ao surfactante mencionada acima.

Caf

Milho

100
100

90

90

80

80

70

70
A.E. (%)

A.E. (%) 60

60

50

50

40

40

30

30
20

20

10

10

0
0

10

20

40

CIDOS HMICOS (mg/ L)

50

100

10

20

40

50

100

CIDOS HMICOS (mg/ L)

Figura 4. Ensaio in vitro da ao dos AH sobre a atividade especfica (A.E.) sensvel

vanadato (expressa em porcentagem) da H+ ATPase de membrana plasmtica
isolada de razes de caf e milho controle (i.e. crescidas sem cidos hmicos).
O meio de reao consistiu de 50 mM Mops-tris pH 6,5, 100 mM KCl, 3 mM
MgSO4, 1 mM ATP, 0,05 mg.mL-1 de protena e concentraes crescentes dos
cidos hmicos extrados de vermicomposto (o) e de lodo da estao de
tratamento de esgoto ().

A ativao das bombas de H+ pelas substncias hmicas isoladas de

vermicomposto foi observada por Nardi et al. (1991), que verificaram aumento na
hidrlise de ATP pela H+-ATPase da frao microssomal obtida de razes de milho.
Ensaios in vivo, com plntulas de milho tratadas com substncias hmicas solveis em
gua isoladas de turfas, tambm mostraram a estimulao da atividade da H+-ATPase
associada a um aumento na absoro de NO3- (Pinton et al., 1999). Por outro lado, Nardi

et al. (2000) encontraram forte inibio da H+-ATPase tambm obtida de microssomos

de razes de milho, porm tratado com substncias hmicas de baixo peso molecular
extradas do horizonte superficial de um solo de regio de clima temperado.Tal
discrepncia foi relacionada s diferenas encontradas nas concentraes e na natureza
qumica das substncias hmicas testadas. A maioria dos trabalhos sobre bioatividade
de substncias hmicas tem se concentrado nas fraes solveis em gua e/ou de baixo
peso molecular porque essas substncias poderiam acessar mais facilmente possveis
receptores na superfcie da membrana plasmtica ou no interior da clula (Vaughan &
Malcolm, 1985).
Canellas e Faanha (2004) observaram um forte estmulo no transporte de
prtons atravs de vesculas enriquecidas de membrana plasmtica isoladas de razes de
milho por substncias hmicas isoladas das camadas superficiais de um Argissolo
Amarelo em avanado estdio de intemperismo em comparao com as substncias
hmicas isoladas das camadas mais profundas. Alm disso, foi observado que o
estmulo no transporte de H+ e no crescimento de razes de plntulas de milho foi maior
para cidos hmicos do que para os cidos flvicos (Quadro 2).
Foi encontrada uma correlao matemtica significativa entre o estmulo no
transporte de H+ e a relao E4/E6 determinada pela razo entre a absorbncia em 465
nm e 665 nm (Figura 5). Esse ndice est diretamente relacionado com a agregao das
substncias hmicas (Kononova, 1982). Quanto menor a relao, maior a
hidrofibicidade da substncia hmica e o grau de agregao das unidades no
arranjamento supra-estrutural. A mesma relao foi encontrada quando comparado o
efeito da bioatividade de cidos hmicos isolados de solos com estdios diferentes de
intemperismo. cidos hmicos com valores de E4/E6 mais elevados foram isolados de
solos mais intemperizados e apresentaram maior acidez total e carboxlica (Latossolo

Amarelo > Luvissolo Crmico> Argissolo Vermelho Amarelo). cidos hmicos

isolados dos Chernossolos e do Neossolo Litlico apresentaram valores menores de
E4/E6 e de acidez total e carboxlica.

Quadro 2. Efeito de cidos flvicos e hmicos isolados de diferentes profundidades

de um Argissolo Amarelo sobre a rea e o transporte de H+ em vesculas
isoladas da preparao microssomal de razes de plntulas de milho.

Amostra

Profundidade
(m)

rea superficial

Velocidade inicial do

radicular

transporte de H+

(mm2)

% min

cidos Hmicos
Controle

28,81 C*

3,8

AH-1

0,00-0,05

36,44 BC

14,0

AH-2

0,05-0,10

58,76 A

16,0

AH-3

0,10-0,20

38,22 BC

11,0

AH-4

0,20-0,40

46,49 AB

8,0

cidos Flvicos
AF-1

0,00-0,05

47,06 AB

8,0

AF-2

0,05-0,10

37,29 BC

5,2

AF-3

0,10-0,20

34,92 BC

11,5

AF-4

0,20-0,40

32,04 C

0,0

4,87**

CV

25,6

mdias seguidas de letras iguais no diferem estatisticamente pelo teste de Tukey P <

0,05.(**) significativo a P < 0.01.

O efeito de uma soluo de 20 mg C de cidos hmicos L-1 sobre o crescimento

radicular de plntulas de milho apresentado no Quadro 3. Os diferentes cidos
hmicos promoveram estmulos na massa seca, rea superficial e no nmero de stios de
mitose e de razes laterais emergidas em comparao com o tratamento controle

(soluo de CaCl2 2 mmol L-1 sem os cidos hmicos). Aps o perodo do ensaio (sete
dias de exposio das plntulas) foi possvel observar incrementos entre 237% e 395%
para massa radicular, de 89% a 378% para rea superficial, de 35% a 162% para o
nmero de stios de mitose e entre 14% e 108% para o nmero de razes emergidas. O
aumento do desenvolvimento radicular promovido pelos cidos hmicos est dentro de
uma faixa j observada por Vaughan & Malcolm (1985) e por Chen & Aviad (1990).
Foi possvel estabelecer uma relao inversa e significativa entre a razo E4/E6
dos cidos hmicos e os incrementos de massa seca (r2= 0,70 p<5%) e de rea radicular
(r2=0,74 p<5%) (Figura 5). A correlao entre a E4/E6 e a soma do nmero de stios de
mitose mais o de razes laterais j emergidas foi, tambm, inversa e significativa (y= 0,0195 x + 12,516; r2= 0,82 p<1%).

10

AF4

AF2

AF1

E4/E6 7

AH4

AF3
R2 = 0,92**

AH3

5
AH1

AH2

R2 = 0,99**

3
2
0

100

200

estmulo no transporte de H

300
+

400

(%)

Figura 5. Relao entre o estmulo no bombeamento de H+ em vesculas da

preprarao microssomal isoladas de plntulas de milho tratadas com cidos
hmicos (AH) e flvicos (AF) isolados em diferentes profundidades de um
Argissolo Amarelo (0,00-0,05; 0,005-0,10; 0,10-0,20; 0,20-0,40 m).

Provas adicionais da ao de substncias hmicas sobre a H+-ATPase de

membrana plasmtica e a absoro de nutrientes foram obtidas atravs do estudo do
efeito de substncias hmicas sobre a absoro de nitrato. A principal via para o
transporte desse nutriente um processo ativo que envolve o co-transporte com ons H+.
Sabe-se, tambm, que altas taxas de absoro de nitrato freqentemente ocorrem
paralelamente elevao dos nveis de expresso da H+-ATPase na membrana
plasmtica e de sua atividade. Este o caso descrito para a ao de substncias hmicas
de baixo peso molecular sobre razes de milho, onde se demonstrou que ocorre um
aumento na capacidade de absoro de nitrato associada a um aumento na expresso da
H+-ATPase de membrana plasmtica (Quaggiotti et al., 2004).

Quadro 3. Bioatividade dos cidos hmicos isolados de uma seqncia tpica de solos
do Rio de Janeiro avaliada atravs da promoo do crescimento radicular e
sobre a atividade de hidrlise do ATP da frao microssomal de plntulas de
milho crescidas em meio mnimo de CaCl2 2 mmol L-1 (controle) e 20 mg C
de AH L-1.

Tratamentos

massa seca
g

Controle

0,019

rea superficial
m

mol de Pi mg Protena-1

0,009

Hidrlise de ATP
min-1

0,86 + 0,014 (100%)

AH-1

0,064 c

0,019 cd

2,46 + 0,037 (286%)

AH-2

0,079 abc

0,024 bc

1,40 + 0,049 (163%)

AH-3

0,090 ab

0,043 a

4,40 + 0,076 (511%)

AH-4

0,087 ab

0,032 ab

3,67 + 0,037 (427%)

AH-5

0,071 bc

0,017 cd

2,69 + 0,042 (312%)

AH-6

0,094 a

0,041 a

5,24 + 0,113 (609%)

Mdias seguidas de mesma letra no diferem entre si (teste de Duncan a 5%).

Luvissolo Crmico Plico abrptico (AH-1), Argissolo Vermelho Amarelo Distrfico
(AH-2), Chernossolo Argilvico rtico vrtico (AH-3), Chernossolo Rndzico

Saproltico tpico (AH-4), Latossolo Amarelo Coeso tpico (AH-5) e Neossolo Litlico
Eutrfico tpico (AH-6)

2.6

Mecanismos de ativao da H+-ATPase de membrana plasmtica pelas

substncias hmicas

Os trabalhos acima mencionados explicitam a notria estimulao que as

substncias hmicas, especialmente cidos hmicos e flvicos, exercem sobre o
desenvolvimento de razes de plntulas e sua possvel associao com a induo da
expresso da enzima que representa o sistema primrio de transporte de H+ da
membrana plasmtica e, conseqentemente, da hidrlise de ATP e do transporte de H+,
estudados, principalmente, em vesculas microssomais. O aumento na atividade das
bomba de H+ parece favorecer a induo da emisso de plos radiculares, de razes
laterais finas, o que resultaria, principalmente, no aumento na rea superficial do
sistema radicular (Figura 6). A teoria baseia-se num processo onde grupamentos com
atividade auxnica, presentes na composio estrutural dos substncias hmicas,
sensibilizariam receptores especficos na membrana plasmtica, desencadeando cascatas
de sinalizao que culminariam com a ativao da transcrio dos genes que codificam
para isoformas especficas da H+-ATPase de membrana plasmtica, as quais seriam
superexpressas na superfcie das clulas radiculares (Canellas et al., 2002). Essa
hiptese foi confirmada no trabalho de Quaggiotti et al. (2004). Isto promove o aumento
do gradiente eletroqumico de H+ atravs da membrana, ativando os sistemas
secundrios de transporte de ons (estimulao da nutrio) e a acidificao e
conseqente aumento de plasticidade da parede celular (teoria do crescimento cido),
condies estas que dariam suporte profuso dos plos radiculares e induo de
razes laterais (Figura 6).

Figura 6. Efeito do tratamento de razes de plntulas de cana-de-acar (A), milho (B) e

tomate (C) com 20 mg C de AH isolado de vermicomposto. O tratamento com
cidos hmicos induz a formao de stios de mitose nas razes e,
posteriormente, o nmero de razes laterais emergidas.

Todavia, permanecem ainda pendentes vrias questes que envolvem o

mecanismo de ativao das bombas de H+ pelos cidos hmicos. E uma das principais
questes diz respeito dificuldade de identificao das molculas bioativas
responsveis pela sensibilizao dos receptores. Atravs da cromatografia de excluso
por tamanho em gel de sephadex, foi observado uma mudana drstica no perfil de
distribuio das faixas de tamanho dos agregados hmicos aps o contato da soluo de
cidos hmicos com o sistema radicular tanto de plntulas de milho como de caf
(Figura 7)

0.5

0.5

0.45

0.45

Ab 0.4
sor
v 0.35
nci
a 0.3
em
25 0.25
0
nm 0.2

depois

0.4

depois

Ab
sor
v
nci
a
em
25
0
nm

0.15

0.35
0.3
0.25
0.2

antes

0.15

antes

0.1

0.1

0.05

0.05

0
0

10

20

30

40

50

60

Volume de eluio (mL)

20

40

60

Volume de eluio (mL)

Figura 7. Cromatografia de excluso por tamanho da soluo de cidos hmicos a pH

5,5. AHVantes: cidos hmicos isolados de vermicomposto antes do
crescimento das plntulas de milho; AHV depois: cidos hmicos isolados do
vermicomposto depois do crescimento de plntulas de milho. AHLantes:
cidos hmicos isolados de lodo da estao de tratamento de esgoto antes do
crescimento das plntulas de milho; AHL depois: cidos hmicos isolados de
lodo da estao de tratamento de esgoto depois do crescimento de plntulas de
milho. (Adaptado de Faanha et al., 2002).

As substncias exsudadas pelas razes de milho parecem modificar a distribuio

e/ou conformao dos componentes de ambos os cidos hmicos testados neste ensaio.
Foi postulado por Piccolo et al. (1999) que os cidos hmicos so formados por uma
mistura heterognea de pequenas molculas reunidas num arranjo supramolecular
estabilizado por foras relativamente fracas (ligaes do tipo van de Waals, -, CH-).
Essas ligaes podem ser quebradas reversivelmente na presena de baixas
concentraes de cidos orgnicos (Nardi et al., 2000; Cozzolino et al., 2001). Vrios
cidos orgnicos so exsudados pelas razes de vrias plantas que podem mobilizar
subunidades estruturais das SH, resultando na alterao observada do perfil

cromatogrfico de excluso das amostras (Piccolo, 2002). possvel que pelo menos
algumas dessas subunidades possuam atividade hormonal tais como os grupamentos
auxnicos detectados nos derivados metilados de cidos hmicos (Muscolo et al., 1998;
Canellas et al., 2002). Um esquema representativo ilustrando essa hiptese mostrado
na Figura 8.

Figura 8. Esquema representativo da ruptura do arranjamento supra-estrutural dos

cidos hmicos em decorrncia da ao de cidos orgnicos. Pequenas
subunidades estruturais podem ser portadoras de atividade qumica especfica
para estimular o metabolismo de plantas como, por exemplo, grupamentos
similares auxina detectados atravs da cromatografia gasosa espectrometria
de massas. A e B cromatograma e espectro de massas de 1,3 cido indol
actico respectivamente, C e D correspondem ao cromatograma e espectro de
massa do pico assinalado pela seta obtido de cido hmico isolado do
vermicomposto.

Essas subunidades funcionais, uma vez dissociadas da molcula base dos cidos
hmicos, poderiam acessar receptores na superfcie ou no interior das clulas das razes
desencadeando processos que culminariam com o estmulo do desenvolvimento
radicular das plntulas. Ou seja, parece existir um dialogo envolvendo a troca
bidirecional de substncias interativas, onde exsudatos radiculares interagem com a
matria orgnica do solo liberando molculas bioativas, as quais, por sua vez, interagem
com as clulas radiculares promovendo alteraes fisiolgicas complexas. Evidncias
experimentais tm sugerido que pelo menos uma dentre estas molculas liberadas das
substncias hmicas apresenta similaridades estruturais a/ou funcionais com
fitohormnios como a auxina. Tal descoberta est de acordo com os vrios relatos na
literatura sobre a atividade hormonal semelhante auxina exibida por vrias substncias
hmicas, incluindo cidos hmicos (Bottomley, 1917; Hillitzer, 1932; Chaminade &
Boucher, 1940; Paszewski et al., 1957; ODobmel 1973; Cacco & DellAgnola, 1984;
DellAgnola & Nardi, 1987; Nardi et al., 1988; Piccolo et al., 1992; Muscolo et al.,
1993; Muscolo et al., 1998; Canellas et al., 2002; Quaggiotti et al., 2004). O efeito do
crescimento de razes na presena de cidos hmicos e de inibidores de transporte
(TIBA) e de receptores (PCIB) de auxinas mostrado na Figura 9.

Figura 9. Crescimento radicular de plntulas de milho controle (A), na presena de 20

mg C cidos hmicos L-1 (B) e de cidos hmicos com inibidores de auxinas;
C: inibidor de transporte (TIBA), D: inibidor no especfico de receptores
(PCIB).

A interao dos cidos hmicos deve ocorrer via receptores especficos e no

diretamente com a H+-ATPase, pois devido a evidncias experimentais, os cidos
hmicos no parecem responder pela ativao dessa enzima porque in vitro, a adio de
ambos AH ao meio de reao promoveu a inibio da atividade ATPsica (Figura 6). As
atividades da H+-ATPase exibidas no Quadro 3 e 4 foram obtidas de vesculas de
membrana plasmtica que se formaram durante o fracionamento celular com a face
citoplasmtica exposta ao meio (inside-out vesicles). Logo, parece que a hiptese mais
plausvel que molculas de AH ou suas subunidades interajam com receptores na
superfcie celular, que, por sua vez, transmitiriam um sinal para dentro da clula,
desencadeando a ativao da H+-ATPase.

Esses resultados so o alicerce da hiptese onde a H+-ATPase de membrana

plasmtica figura como um dos principais alvos moleculares envolvidos na ao dos
cidos hmicos sobre o crescimento das plantas. Essa enzima o principal sistema de
transporte ativo de H+ da membrana plasmtica, exercendo forte efeito sobre a
regulao do pH do apoplasto (Morsomme & Boutry, 2000). A acidificao do
apoplasto uma pr-condio para o aumento da plasticidade da parede celular e a
conseqente elogamento da clula vegetal. Esse fenmeno tem sido associado ao do
fitormnio auxina, promovendo ativao da H+-ATPase atravs de mecanismos que
ainda no foram completamente elucidados (Rayle & Cleland, 1992). Portanto, o
aumento do desenvolvimento radicular em resposta ao tratamento com AHL e AHV
pode estar relacionado estimulao da atividade da H+-ATPase de membrana
plasmtica observada nas preparaes de vesculas extradas de plntulas tratadas com
cidos hmicos Esse estmulo parece resultar de uma superexpresso da enzima na
membrana plasmtica evidenciada pela maior quantidade de H+-ATPase detectada
imunologicamente nas vesculas isoladas (Figura 10).

Figura 10. Diferena no contedo de H+-ATPase de membrana plasmtica em

preparaes de razes tratadas (+) ou no (-) com 20 mg C de cidos hmicos
isolados de vermicomposto separadas em gel de SDS-PAGE a 7,5%. O

Western blot foi realizado utilizando-se anticorpos contra H+-ATPase de

membrana plasmtica de Nicotiniana plumbaginifolia para identificar esta
enzima nas prepraraes de vesculas de membrana plasmtica de razes de
milho. (Adaptado de Canellas et al., 2002).

Esse dado refora a idia de um envolvimento direto dos grupamentos auxnicos

dos AH (Figura 8) na ativao da H+-ATPase, uma vez que j foi demonstrado que a
incubao de tecidos de milho com auxina induz um aumento do nmero de H+ATPases expressas na membrana plasmtica (Frias et al., 1996).
Comparativamente, foram observadas diferenas significativas entre os AH no
estmulo da atividade hidroltica da H+-ATPase de membrana plasmtica. Tanto nos
experimentos com caf como com plntulas de milho, os AH isolados de lodo de esgoto
(AHL) estimularam mais a atividade da H+-ATPase de membrana plasmtica do que os
isolados do vermicomposto (AHV) (Figura 11). O gradiente de H+ gerado pela ATPase

nas vesculas isoladas de razes de milho tratadas com AHL foi maior do que o das
tratadas com AHV, consistente com o efeito fisiolgico observado no crescimento
radicular (Figura 9). Outra possibilidade seria um acoplamento entre o estmulo da
atividade da H+-ATPase e o aumento do transporte de nutrientes que, por sua vez,
resultaria em estmulo do crescimento da planta (Pinton et al., 1999).

Figura 11. Transporte de H+ atravs de vesculas enriquecidas com membrana

plasmtica isolada de razes de milho tratadas com cidos hmicos (a e b) e
controle (linha tracejada). O aumento no transporte de H+ corresponde ao
decrscimo na intensidade de fluorescncia da sonda ACMA. A seta aponta
adio do protonforo (FCCP) permeabilizando as membranas para H+ dissipar
o gradiente eletroqumico.

Foi postulado previamente que cidos flvicos poderiam dissipar o potencial

eltrico da membrana plasmtica e que tambm promoveriam aumento gradual na

permeabilidade da mesma a nutrientes. Contrrio a essa hiptese, apesar de ambos os

efeitos promoverem de fato aumento da atividade ATPsica in vitro, seria improvvel
que os mesmos possam proporcionar qualquer efeito benfico sobre a clula vegetal
intacta, uma vez que o potencial eltrico e a permeabilidade seletiva das membranas so
caractersticas indispensveis para a homeostase, a sinalizao e a integridade celular.
A ao das substncias hmicas sobre as bombas de H+ membranares representa
um efeito geral sobre o metabolismo energtico celular e aponta para uma ao
sinalizadora mltipla dos cidos hmicos envolvendo vrios processos metablicos.
A matria orgnica humificada, alm de condicionar todas as propriedades do
solo, contribui diretamente para a adaptao das plantas ao meio de cultivo.

AGRADECIMENTOS

Ao CNPq (471910/2003-1), FAPERJ (E26/170.526/2004) e International

Foudation of Science (IFS grants # c3391-1; C/3483-1) pelo apoio financeiro.

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CAPTULO 8
ORIGEM DO XIDO NTRICO EM PLANTAS E SEU PAPEL
COMO SINALIZADOR DE ESTRESSES

Jose R Magalhaes1, Luzia V Modolo2, Sonia R de Souza3, Luciano freschi4, Marcel

G C Frana5, Filomena LIM Silva1
1

Embrapa Gado de Leite - 36038-330 Juiz de Fora MG; 2Plant Biology Division, Samuel

Roberts Noble Foundation, 2510 Sam Noble Parkway, Ardmore, OK 73401, USA; 3Dep.
Qumica-Bioqumica-UFRRJ, BR465 km7, 23890-000 Seropdica RJ; 4Dep. Botnica, IB,
USP, 05508-900 So Paulo SP; 5Dep. Botnica, ICB, UFMG, Av. Antnio Carlos, 31270901 Belo Horizonte MG

SUMRIO

1. Introduo........................................................................................................................... 3
2. Qumica e Bioqumica do xido Ntrico............................................................................ 5
3. Produo de xido Ntrico em Algas, Fungos e Bactrias ................................................ 6
4. Produo de xido Ntrico via Nitrato Redutase em Plantas............................................. 8
5. Estimativa da Capacidade da Nitrato Redutase para a Formao de xido Ntrico ........ 10
6. Papel do Oxido Ntrico no Desenvolvimento Vegetal e Estresse Ambiental................... 11
7. Novas fronteiras da Nitrato Redutase e a produo de xido Ntrico em Plantas........... 15
8. Consideraes finais ......................................................................................................... 19
9. Referncias ....................................................................................................................... 21

Resumo

O xido Ntrico (NO) um radical livre gasoso altamente reativo com outros
tomos ou molculas que contm eltrons no emparelhados. Em animal, o NO
sintetizado pela enzima NO sintase (NOS). No entanto, vrios estudos indicam que clulas
vegetais possuem outras vias de produo de NO alem daquela mediada pela NOS,
destacando-se a reduo enzimtica de nitrito (NO2-). Os primeiros estudos com mutante
duplo de Arabidopsis thaliana nia1 nia2 defectivo para nitrato redutase (NR), indicaram a
produo de NO atravs da atividade desta enzima. A NR teria um papel chave como fonte
de NO2- para as atividades produtoras de NO. A origem do NO2- depende da atividade NR a
partir da reduo de NO3-, e a produo de NO derivada de NO2- dependente de uma
atividade redutora mitocondrial. Em todos os sistemas vegetais estudados por Planchet et
al. (2005), a emisso de NO foi exclusivamente devido reduo do NO2- a NO. A
concentrao do NO2- o fator limitante e o transporte mitocondrial de eltrons seria a
principal fonte de energia para a reduo do NO2- a NO. Este captulo focaliza os
conhecimentos atuais dos mecanismos para a produo de NO em plantas, em resposta a
condies de estresse.

1. INTRODUO
O NO um radical livre gasoso que reage rapidamente com outros tomos ou
molculas que contm eltrons desemparelhados, tendo uma meia vida de menos de 10
segundos na presena de oxignio (Lancaster Jr., 1992; MeBmer et al., 1994). O NO
produzido como um poluente do ar pela atividade industrial, tendo um papel chave na
qumica dos gases atmosfricos. A oxidao do NO por radicais de perxido de hidrognio
(H2O2) levam formao do radical hidroxila (OH), dixido de nitrognio (NO2) e
produo fotoqumica de O3 na troposfera. Assim, o NO importante para o equilbrio de
radicais na atmosfera e para a gerao de foto-oxidantes (Wildt et al., 1997).
O NO tambm produzido por vrios componentes da biosfera, incluindo bactrias,
fungos, plantas e animais. Devido ao crescente interesse do papel do NO na fisiologia
humana, este radical livre tem despertado grande ateno como composto sinalizador no
desenvolvimento das plantas e nas interaes planta-patgeno. Por se tratar de uma
molcula pequena e com caracterstica lipoflica, o NO facilmente se difunde atravs de
membranas biolgicas sem precisar de um transportador (Leshem, 1996). Uma das suas
principais funes na clula a ativao da enzima guanilato ciclase que converte
guanosina trifostato (GTP) gerando um segundo mensageiro a guanosina-3',5'-monofosfato
cclica (cGMP) (Moncada, 1998). Comparado grande quantidade de referncias para o
NO em clulas animais e humanas, os estudos da sua produo e funo em plantas so
ainda escassos (Delledonne et al. 1998; Durner et al. 1998; Kim et al. 1998; Magalhaes et
al. 1999; 2000; 2005). O primeiro relato da produo de NO em plantas aconteceu h mais
de 30 anos (Klepper, 1975). Entretanto, foi somente a partir de 1998 que o papel deste
radical livre como sinalizador no desenvolvimento de planta e em interaes planta3

patgeno foi evidenciado, causando grande impulso nas pesquisas com NO em plantas. Um
conhecimento detalhado dos processos que esto potencialmente envolvidos na sntese de
NO e sua regulao de fundamental importncia para a elucidao do papel deste radical
de nitrognio em plantas sob condies de estresse.
Em animais, o NO sintetizado a partir da L-arginina atravs de uma oxidao
complexa catalisada pela NOS (EC 1.14.13.39) (Ignarro, 1996). A enzima NOS catalisa a
oxidao da L-arginina a L-citrullina com formacao de NO, num processo dependente de
oxignio e NADPH. Esta reao requer no mnimo outros cinco cofatores, incluindo flavina
adenina dinucleotideo (FAD), flavina mononucleotideo (FMN), tetrahidrobiopterina (H4B),
heme, clcio e calmodulina. Em clulas de mamfero, vrias isoenzimas da NOS foram
isoladas, purificadas, clonadas, e seqenciadas (Tzeng e Billar, 1996). De maneira geral,
tais isoenzimas so formadas por protenas altamente conservadas (Stuehr, 1997; Lin et al.,
1996; Marletta, 1999;). Vale destacar que existem diferentes reaes possveis para
produo de NO in vivo independente da NOS. Estas reaes incluem: a reduo do NO2- a
NO sob condies cidas; oxidao da arginina por H2O2; a reduo do NO2- catalisada
pela xantina oxidase (XO) em condies de anoxia (Zhang et al., 1998). A Reducao de
NO2-, catalisada por nitrito redutase microbiana seria uma outra fonte de NO sendo que em
vegetais a produo deste radical livre tambm pode ocorrer por vias independentes de ao
enzimtica. NO pode ser produzido em cloroplastos atravs da converso fotoqumica de
dixido de nitrognio (NO2), mediada por carotenides (Cooney et al., 1994). Ainda, a
produo de NO a partir de NO2- foi observada em camadas de aleurona de cevada devido
s condies de acidez do espao apoplstico (Bethke et al., 2004).
Em plantas, foram descritas atividades do tipo NOS (Delledonne et al., 1998;
Durner et al., 1998; Ribeiro et al., 1999; Modolo et al., 2002). Alem da atividade do tipo
4

NOS, largamente conhecido que plantas adubadas com NO3- podem gerar NO atravs da
ao da enzima nitrato redutase [NAD(P)H-NR] como um subproduto da assimilao de
nitrognio. Inicialmente este mecanismo parecia ser restrito a NR constitutiva (Dean e
Harper, 1988; Klepper, 1990). Porm, evidncias que a NR induzida tambm pode produzir
NO so descritas (Yamasaki et al., 1999; Magalhaes et al., 2000). Este captulo focaliza o
conhecimento da NR concernente produo de NO em plantas sob condies de estresse.

2. QUMICA E BIOQUMICA DO XIDO NTRICO

A qumica do NO envolve a disposio de formas redox inter-relacionadas: ctions

de nitrosnium (NO+), oxido ntrico (NO), e nion nitrosil (NO-). fundamental para o
conhecimento da bioqumica do NO, compreender as propriedades e reatividades qumicas
de NO+, NO, e NO-. Sem dvida os compostos nitrosos e nitrosil so amplamente
estudados. Dentre estes compostos destaca-se S-nitrosoglutationa, um nitrosotiol produzido
como forma de armazenamento de NO. Alem disso, a reao entre o grupamento sulfidrila
(-SH) da glutationa com NO parece ser um recurso utilizado pela clula para aumentar a
eficincia de transporte deste radical livre ao seu stio de ao (Gaston, 1999). Snitrosoglutationa comercial amplamente utilizada como uma molcula doadora de NO
para o estudo do papel deste radical de nitrognio em plantas. Um exemplo de composto
nitrosil tambm amplamente utilizado como doador de NO em modelo de planta o
nitroprussiato de sdio (SNP). Ao contrrio da S-nitrosoglutationa, o SNP um composto
inorgnico que apresenta um tomo de ferro ligado a cinco grupos CN- e um grupo NO.
Apesar disso, sabe-se que o NO pode interconverter nas diferentes formas redox, j citadas
e que apresentam caractersticas qumicas distintas.
5

A forma neutra NO tem um nico eltron em seu orbital 2P- . A neutralidade de

carga do NO facilita sua livre difuso em meio aquoso e atravs da membrana celular. A
reao do NO com O2 em fase gasosa ou soluo aquosa um processo complexo que
acontece na seguinte ordem [NO] [K (NO)2(O2)]. Assume-se que a meia-vida biolgica do
NO, esteja na ordem de grandeza de segundos, dependendo criticamente da sua
concentrao inicial (Stanler a al., 1992).

3. PRODUO DE XIDO NTRICO EM ALGAS, FUNGOS E

BACTRIAS
O NO formado via nitrato redutase (NR), no somente em plantas superiores
(Magalhaes et al., 2000), mas tambm em algas (Mallick et al., 1999; Sakihama et al.,
2002), em fungos (Takaya, 2002) e em bactrias, (Baumgrtner et al., 1991; Zhang et al.,
1998). A produo do NO foi observada em algas como Chlamydomonas reinhardtii
(Sakihama et al. 2002), Scenedesmu, Anabaena doliolum, e Synechoccocus (Mallick et al.,
1999). Experimentos com inibidores de fotossntese (DCMU), de sntese de ATP (2,4DNP) e o arsenato, revelaram que a inibio da assimilao do NO2- no plastdio est
conectada com a emisso de NO.
Desta forma destaca-se a uma relao linear entre concentrao de NO2- no meio de
cultura e a produo de NO. Ausncia de crescimento de Scenedesmus, quando se substitui
no meio de crescimento o metal molibdnio (Mo) por tungstnio (W), com conseqente
reduo na sntese de NO/NO2- em picos de luz ou no escuro indicam que a NR funcional
(que contem um centro metlico de Mo) necessria para a produo de NO2- e NO num
meio de crescimento suplementado com NO3- como fonte de nitrognio. Alm disso, o

papel da NR na emisso de NO destaca-se pelo aparecimento de pico de NO imediatamente

aps a suplementao de NO2- no escuro em meios de culturas no qual utiliza-se W
(Mallick et al. 1999).
A produo de NO foi tambm estudada em algas verdes unicelulares
Chlamydomonas reinhardtii utilizando tcnicas amperomtricas e um eletrodo especfico
para NO. A L-arginine, o substrato para NOS sintase, no induziu a produo de NO, e o
inibidor de NOS N-nitro-L-arginina no teve efeito na produo de NO dependente de NO2.
Uma Chlamydomonas mutante deficiente de atividade da NR no mostrou quaisquer das
respostas observadas nas clulas selvagens. Estes resultados obtidos in vivo diretamente
confirmam as evidncias que a NR est envolvida na produo de NO a partir de NO2- em
algas verdes (Sakihama et al., 2002).
No fungo Fusarium oxysporum a via de desnitrificao do NO3- catalisada pelas
reaes seqenciais da NR e da nitrito redutase (NiR). Essas enzimas esto acopladas com
a gerao de ATP pela cadeia respiratria e produo de NO. A xido ntrico redutase do
fungo utiliza NADH como doador direto de eltron em contraste aos sistemas bacterianos, e
assim pode funcionar na regenerao de NAD+ e detoxificao do radical txico, NO.
Outras vias podem reduzir NO3- a amnio (NH4+), acoplando reaes acetognicas com
fosforilao em nvel de substrato. Este mecanismo tambm caracterstico de uma
variedade de fungos e a via metablica chamada de fermentao de amnia (Takaya,
2002).
Em bactrias, durante a oxidao de NH4+ a NO3-, quantidades significativas de NO
so produzidas e o NO2- acumulado. Por outro lado, a nitrificaro e a liberao de NO so
detectadas somente em pH neutro. A aplicao de nitrapirina inibe tanto a oxidao de
NH4+ como a produo de NO. A produo de NO pode tambm ser detectada em amostras
7

de rochas que contm Nitrosomonas ou Nitrosovibrio, mas no em amostras contendo

somente a Nitrobacter. A maior parte da produo de NO pela corroso das rochas
atribuda bactria nitrificadora que oxida amnia (Baumgrtner et al., 1991).
Sob condies de hipoxia o NO pode tambm ser formado por outros mecanismos
independentes de NOS e NR. A reduo do NO2- a NO pela xantina oxidase (XO) foi
estudada sob hipoxia, uma vez que nitrato/nitrito reductases bacteriana tem semelhana
estrutural a XO. A xantina oxidase presente no tecido catalisa a reduo do NO2- a NO.
Esta reao redox tambm requer NADH como doador de eltron, e independente de
oxignio (Zhang et al., 1998).

4. PRODUO DE XIDO NTRICO VIA NITRATO REDUTASE EM

PLANTAS
A produo de NO pelas clulas vegetais tem sido estudada basicamente com os
mesmos mtodos utilizados na pesquisa animal, descritos por Kojima et al. (1998).
Recentemente mostramos que a produo de NO em clulas vegetais pode ser visualizada
usando uma sonda especfica, diaminofluoresceina diacetato (DAF-2DA), e que o NO
induz apoptose em plantas (Magalhaes et al., 1999; 2000; 2005). A produo de NO in vitro
por solues enzimticas foi quantificada utilizando mtodos amperomtricos (Yamasaki,
2000) e a emisso de NO na atmosfera a partir de plantas ou rgos vegetais, foi medida
pela deteco de quimioluminescncia (Rockel et al., 2002). A emisso de NO em vrias
espcies vegetais foi observada em tanque-reator, e a ligao entre a emisso de NO e
absoro de CO2 (3x10-6 mol de NO emitido por mol de CO2 absorvido) permitiram

estimar o potencial das plantas para evoluo de NO em uma escala global de 0.23 Tg ano1 de N (Wildt et al., 1997).
Estudos anteriores indicam que as clulas vegetais possuem uma via de produo de
NO dependente de NO2-, distinta das reaes mediada pela NOS. A nitrato redutase (NR,
EC 1.6.6.1-3), uma enzima bifuncional, pode reduzir NO3- a NO2- [NO3- + NAD(P)H + H+
NO2- + NAD(P)+ + H2O] ou NO2- a NO [2 NO2- + NAD(P)H + H+ + 2 NO + NAD(P)+ 2
OH-], porem este ltimo processo em uma menor taxa de converso. A produo de NO
pelas plantas foi inicialmente observada por Klepper (1975) em soja tratada com herbicidas
inibidores de fotossnteses e outros compostos qumicos, como tambm sob condies
anaerbias no escuro (Klepper, 1990). Em seguida, a produo de NOx pelas plantas foi
confirmada e a nitrato redutase constitutiva dependente de NAD(P)H era responsvel pela
evoluo de NOx (Dean e Harper, 1988; Klepper 1990).
Mais recentemente, medies eletroqumica, fluoromtrica e quimioluminescncia
in vitro mostraram que o NO pode tambm ser produzido por NR purificada de milho ou
por NR na presena de NO3- ou NO2- e NADH em pH 7 a partir de extratos brutos foliares
dessalinizados (Yamasaki, 2000; Yamasaki e Sakihama, 2000; Rockel et al., 2002). A
produo de NO pode ser inibida por azida sdica, um conhecido inibidor de NR
(Yamasaki, 2000). Alm disso, uma NR ligada membrana plasmtica acoplada a NO2-:
NO redutase em vesculas de membrana de razes de tabaco tambm mostraram produo
de NO (Sthr et al., 2001).
A utilizao de inibidores da NOS no contribuiu para a reduo da emisso de NO
em folhas de Arabidopsis (Magalhaes et al., 2000; Rockel et al., 2002). Novas evidncias
para a produo de NO dependente da NR foram obtidas atravs do uso de mutantes duplos
nia (Tabaco ou Arabidopsis), que no possuem atividade NR. Essas plantas no produziram
9

NO, tanto por medies por cromatografia gasosa (49457 e 00000 nL.gfw-1.h-1 em planta
selvagem e mutante nia1/nia2 respectivamente) (Magalhaes et al., 2005), quanto por
quimioluminescncia (Rockel et al., 2002). Experimentos utilizando NO3- marcado com
15

N mostraram a produo de 15NOx evidenciando, de maneira inequvoca, que os xidos de

nitrognio foram formados a partir de NO3- (Dean e Harper, 1988).

5. ESTIMATIVA DA CAPACIDADE DA NITRATO REDUTASE PARA A

FORMAO DE XIDO NTRICO
Extratos de folhas contendo NR ou NR purificada, na presena de NAD(P)H,
produziram NO a partir de NO3-. Substituindo-se o NO3- por NO2-, a produo de NO
iniciou-se imediatamente (Yamasaki 2000; Rockel et al., 2002), indicando que o NO2- o
real substrato, e que a produo de NO partir do NO3- requerer a formao e acmulo de
NO2-. A produo de NO no foi observada na ausncia de NAD(P)H ou de NR, e foi
completamente inibida por azida sdica que interrompe o fluxo de eltron para a atividade
da NR (Yamasaki, 2000).
O valor de KM da NR (purificada a partir de folha de milho) para o NO2- foi
relativamente alto (100 M) para a formao de NO quando comparado concentrao de
NO2- em folhas sob condies de luz (10 M). NO3- foi um inibidor competitivo (Ki=50
M) neste processo. A capacidade mxima, in vitro, da NR para formao de NO a partir
do NO2- e NAD(P)H de aproximadamente 1% da capacidade de reduo do NO3- (at 0.2
mol g-1 pf-1 h-1 com NR de espinafre) e foi detectada por quimioluminescncia (Rockel et
al., 2002). Taxas similares in vitro foram obtidas utilizando deteco amperomtrica
(Yamasaki, 2000).
10

As taxas de emisso de NO por girassol (Helianthus annuus L.) ou por folhas de

espinafre, medidas por quimioluminescncia, foram freqentemente muito baixas (Rockel
et al., 2002). Em girassol, os valores observados foram de 0,05 mol g-1.pf-1.h-1 no escuro
at 0,5 mol g-1.pf-1.h-1 na presena de luz As mais altas taxas de emisso de NO foram
obtidas no escuro sob anoxia, 200 mol g-1pf-1h-1 (Rockel et al. 2002). Plantas de
Arabidopsis intactas produziram at 20 mol de NO g-1 pf-1 h-1 na luz (Tabela 1).
Avaliando o conjunto dessas medidas a taxa mxima de emisso de NO pela NR in
vitro ou por plantas ou folhas representa apenas uma pequena percentagem da capacidade
da NR. Essas baixas taxas contrastam nitidamente com resultados anteriores de Klepper
(1990), que encontrou taxas de NO 100 vezes maior quase to alta quanto a taxa de
produo, quase to alto quanto a taxa de reduo de NO3- (at 15 moles NO g-1pf-1h-1 sob
condies anaerbicas no escuro). A razo para esta grande discrepncia no clara, mas
nas medidas efetuadas por Klepper (1990) as taxas muito altas podem estar baseadas em
uma insuficiente remoo de outros compostos gasosos emitidos pelas folhas os quais
podem tambm dar um sinal quimioluminescente.

6. PAPEL DO OXIDO NTRICO NO DESENVOLVIMENTO VEGETAL E

ESTRESSE AMBIENTAL
Os fatores que induzem estresse, tais como ataque de patgenos, ferimentos,
perturbaes mecnicas, anaerobiose, seca, alagamento, esfriamento, congelamento,
estresse salino, metais pesados, oznio, correntes eltricas, certos herbicidas, levam ao
estabelecimento do chamado estresse de etileno (Kacperska, 1997). O estresse de etileno
est relacionado ao NO como molcula sinalizadora em plantas (Magalhaes et al., 2000).
11

Como anteriormente observado, a emisso de NO por plantas altamente varivel.

Um exame mais detalhado mostra que emisso de NO varia grandemente com o estdio de
desenvolvimento da planta, intensidade luminosa e diferente tipo de estresse. Uma
tendncia inversa para NO e emisso de etileno foi observada na fase da florao at o
inicio da senescncia (Magalhaes et al., 2000). Quando as plantas entram em senescncia, a
emisso de NO diminui. A relao inversa entre a emisso de etileno e NO sugere a
interao das duas vias de sntese, embora o mutante duplo nia1, nia2 defectivo para NR,
que no emite NO, produza etileno de modo similar planta selvagem (Magalhaes et al.,
2000).
A seca e o alagamento reduzem drasticamente a emisso de NO (Magalhaes et al.,
2000). No entanto, anoxia em curto prazo ativa NR, leva ao acumulo de NO2- e altas taxas
de emisso NO pelas folhas e razes (Rockel et al., 2002). Assim, tanto em curto quanto em
longo prazo a hipoxia e a anoxia podem ter diferentes efeitos na produo de NO pelas
razes. Uma queda da atividade da NR tambm foi observada em condies de estresse
provocado pela seca (Garg et al., 1998).
A emisso de NO em funo da intensidade luminosa um processo complexo. A
emisso cai a valores prximos de zero nas primeiras duas horas de exposio luz e ento
aumenta drasticamente com o tempo e com aumento da intensidade luminosa, embora
tenha sido observada emisso de NO no escuro (Tabela 1). Nas primeiras duas horas do dia,
a intensidade luminosa na casa de vegetao baixa (115 ol.m-2.s-1 em mdia). Isto
explica a queda at zero da emisso de NO e consistente com experimentos em uma
cmara de crescimento com intensidade luminosa de 105 ol.m-2.s-1, onde NO no foi
produzido.

12

Diversos experimentos mostraram significativa variao diurna na emisso de NO.

Por esta razo, as medies de NO mais precisas quando feitas pelo menos h trs horas
aps as plantas serem expostas a luz (Tabela 1). Isto produz resultados consistentes e
comparveis. A Tabela 1 mostra que plantas transferidas do escuro para baixa luminosidade
(105 mol.m-2.s-1) no emitem NO durante 12 horas. Quando transferidas de 555 para 105
mol.m-2.s-1, uma diminuio gradual foi observada nas primeiras 4 horas e ento diminuiu
para prximo de zero por 12 horas. Quando as plantas foram transferidas de 555 mol.m2 -1

.s para o escuro, a emisso de NO diminuiu gradualmente, mas uma considervel emisso

de NO foi observada ao fim de 12 horas. Aps a transferncia da luz para o escuro, Salalkar
et al. (1999) observaram que a atividade da NR nas folhas persistiu por algum tempo
durante a fase de escuro e ento declinou gradualmente. Aps a re-exposio luz a
atividade da NR aumentou rapidamente de uma maneira bastante similar emisso NO em
nossos estudos, respaldando a observao do paralelismo entre as taxas de NO, atividade da
NR e eventual concentrao de NO2-. tambm razovel atribuir a diminuio da emisso
de NO ao declnio da atividade da NR com a idade da planta (Anburaj e Francis, 1996; Lee
et al., 1998; Yu et al., 1998). A NR em alface mostrou pico de atividade 20 dias aps o
plantio (Lee et al., 1998) em uma maneira similar emisso de NO observada por
Magalhaes et al. (2000).
A nitrato redutase uma enzima altamente regulada (Magalhaes et al., 2005). Tem
uma meia vida curta de algumas horas e sua induo requer NO3- e luz (fotossntese). A
atividade da enzima pode ser diminuda em minutos por fosforilao de um resduo de
serina conservado na regio 1, e subseqente ligao de uma protena 14-3-3, o que inativa
a enzima. A fosforilao um processo reversvel e depende da presena de ctions
bivalentes. Uma vez desfosforilada, a enzima volta a sua atividade normal. A degradao
13

proteoltica da NR acelerada quando a enzima est ligada a protena 14-3-3 (Magalhaes et

al., 2005). In vitro, a NR inativada por incubao com magnsio (Mg) e ATP,
eventualmente na presena de inibidores da fosfatase PP2A, que impedem a
desfosforilao. A pr-incubao com ATP tambm diminui a produo de NO dependente
de NO2-enquanto que a reativao da NR por desfosforilao aumenta a produo de NO
(Rockel et al., 2002).
Como mencionado anteriormente, a luz e altos nveis de CO2 ativam a NR, o que
tambm leva a altas taxas de emisso de NO. Isto tambm sugere que a modulao da NR
in vivo acompanhada pela produo NO. Os tratamentos artificiais com conhecidos
ativadores da NR no escuro (quando a enzima est freqentemente inativa) levam a alta
emisso de NO (que tambm freqentemente baixa no escuro). Ao lado da anoxia, essas
condies podem produzir desacopladores de anlogos de 5'-AMP (5-aminoimidazol-4carboxiamida-1--ribofuranosill 5'-monofosfato) entre outros. Quando a ativao da NR
impedida pelo cido okadaico, um inibidor das fosfatases, a emisso de NO bloqueada
(Rockel et al., 2002). Estes resultados indicam, que a modulao da NR in vivo tambm
modula a emisso de NO.
Em interaes planta-patgeno, uma das primeiras respostas aps inoculao do
hospedeiro a formao de espcies reativas de oxignio (ROS). O nion superxido (O2-)
pode reagir rapidamente com NO levando formao de peroxinitrito (ONOO-) que
altamente txico, desencadeando prontamente a nitrao de aminocidos aromticos como
a tirosina presente em muitas protenas. De forma interessante, a NR tambm capaz de
catalisar em baixas taxas a reduo de oxignio molecular a superxido (Yamasaki, 2000).
A produo simultnea de superxido e NO leva quase inevitavelmente formao de
peroxonitrito. Mutantes de tabaco defectivas para nitrito redutase (NiR), mas com NR
14

normal acumulam NO2-, emitem altas quantidades de NO e tm um alto grau de nitrao da

tirosina (Morot-Gaudry-Talarmain et al., 2002).
Enquanto as consideraes anteriores esto focalizadas na formao de NO
dependente de NR, no deve ser negligenciada a atuao da NOS como uma fonte de NO
em plantas, H indicaes para a presena em plantas de uma atividade enzimtica suposta
NOS (Delledonne et al., 1998; Durner et al., 1998; Ribeiro et al., 1999; Modolo et al.,
2002). Embora, nem o gene e nem uma protena homloga NOS de mamferos foram
isolados em plantas, recentemente, Guo et al. (2003) identificaram um gene de A. thaliana
(AtNOS1) que codifica uma protena com atividade conversora de L-arginina em Lcitrulina com liberao de NO. AtNOS1 uma protena homloga quela responsvel pela
sntese de NO em Helix pomatia (Huang et al., 1997).

7. NOVAS FRONTEIRAS DA NITRATO REDUTASE E A PRODUO DE

XIDO NTRICO EM PLANTAS
A enzima nitrato redutase (NR; Ec: 1.6.6.1) a mais estudada entres as possveis
fontes de NO em planta (Magalhaes et al., 2005). A converso de NO2- a NO poderia ser
atribuda atividade da NR, como tem sido sugerido na literatura (Yamasaki e Sakihama,
2000; Rockel et al., 2002; Vanin et al., 2004). A produo de NO partir da atividade da
NR ocorre em tecidos onde a concentrao de NO2- alta (Morot-Gaudry-Talarmain et al.,
2002; Rockel et al., 2002) e, em plantas transgnicas expressando a enzima NR
permanentemente ativada apresentam uma emisso de NO consideravelmente aumentada
(Lea et al., 2004).

15

Evidncias espectroscpicas fornecem um estado intermedirio em que o nitrosil-Fe

(II) siroheme formado durante o ciclo cataltico da enzima nitrito redutase (NiR),
purificada a partir de cloroplastos de espinafre (Kuznetsova et al., 2004). Contudo, plantas
de tabaco contendo uma seqncia anti-senso para NiR (Morot-Gaudry-Talarmain et al.,
2004), bem como alga verde Chlorella sorokiniana (Tischner et al., 2004) acumulam NO2e, emitem uma quantidade elevada de NO. Em adio a NiR como uma possvel fonte de
NO, uma enzima ligada membrana plasmtica tambm proposta com atividade
conversora de NO2- (Sthr et al., 2001).
Em todos os sistemas vegetais estudados por Planchet et al. (2005), a emisso de
NO foi exclusivamente devido reduo do NO2- a NO. A concentrao do NO2- foi um
fator limitante e o transporte mitocondrial de eltron foi identificado como a fonte principal
para a reduo do NO2- a NO. O NO est envolvido no controle de vrios aspectos de
resistncia da planta ao patgeno, crescimento, e desenvolvimento (Delledonne et al., 1998,
Garcya-Mata e Lamattina, 2003).
Uma enzima tipo NOS parece contribuir para a produo de NO durante a interao
planta-patgeno, convertendo L-arginina em L-citrulina (Delledonne et al., 1998; Modolo
et al., 2002; Zeidler et al., 2004). A produo de NO via atividade da enzima tipo NOS foi
relacionada com a sinalizao de movimento de estmatos (Garcia-Mata e Lamattina,
2003). No entanto, a NR tem sido considerada tambm como a fonte do NO, em ambos
sistemas, na relao planta-patgeno (Yamamoto et al., 2003) e no controle dos estmatos
(Desikan et al., 2004).
Planchet et al. (2005) mostraram que as plantas ou suspenses de clulas sem NR
supridas com NO3- por curtos perodos de tempo nunca emitiam NO. Entretanto, quando
supridas com NO2-, as suspenses de clulas sem NR crescidas com amnio virtualmente
16

emitiam NO sob condies de anoxia quase nas mesmas taxas que as clulas com NR.
Assim, a NR imprescindvel para produo de NO, porque a fonte do NO2-.
Como a alta produo de NO foi encontrada em folhas de mutante deficiente em
nitrito redutase (NiR), parece muito improvvel que a prpria NiR seja uma enzima fonte
para a produo de NO. Estudos baseados em inibidores e suspenso de clulas mostram
que a mitocndria contribui para produo do NO a partir do NO2-, pelo menos nos casos
onde a enzima NR estava ausente. Confirmando isto, foi demonstrado que a mitocndria
das plantas, assim como a de algas, reduzem o NO2- a NO sob anoxia (Planchet et al.,
2005).
A ao combinada dos inibidores mixotiazol e cido salicilhidroxmico (SHAM,
inibidor da oxidase alternativa) no causou inibio completa da produo de NO. Contudo,
produo de NO foi bloqueada na presena de KCN (inibidor da NR e outras enzimas
heme). Assim, quando no h nenhuma dvida que todo o NO foi produzido
enzimaticamente, algumas reaes sensveis a cianeto ainda indefinidas parecem contribuir
de certa forma para formao de NO (Planchet et al., 2005). A oxidorreductase de NO2-,
detectada por Sthr et al. (2001), pode ser uma candidata possvel.
Em quase todos os sistemas estudados pelo grupo de Werner M. Kaiser, a produo
de NO foi fortemente inibida pelo oxignio do ar. Assumiu-se originalmente que o NADH
do citosol poderia se tornar um fator limitante na presena do ar, pelo menos sob condies
em que o NO2- era elevado (em suspenses de clulas supridas com NO2-). Embora, as
determinaes de piruvato/lactato sugerirem apenas um ligeiro aumento de NADH/NAD+
na luz em comparao com escuro. Alm disso, mitocndrias purificadas a partir de
suspenses de clulas no apresentaram quase nenhuma emisso de NO na presena de ar,
mesmo quando NO2- e NADH foram adicionados ao meio. A baixa produo aerbica de
17

NO no poderia ser rastreada pela limitao substrato, e presentemente no temos nenhuma

explicao satisfatria para essa observao. Encontrou-se que 0.05% oxignio era o
suficiente para uma inibio de 50% da emisso de NO das mitocndrias purificadas de
razes. Em contraste mitocndria, a emisso de NO a partir da atividade da NR purificada
foi bastante insensvel ao ar (Planchet et al., 2005). Hemoglobina pode catalisar a oxidao
de NO, dependente de NADH, de volta a nitrito e nitrato (Igamberdiev e Hill, 2004). Tal
reao conduziria a uma produo de NO subestimada na presena do ar, mas no em
presena de nitrognio. A que extenso esta reao contribui no sentido de retirar NO do
meio ainda desconhecido.
Considerando a hiptese da produo mitocondrial de NO em clulas supridas com
NO2-, estudos com os inibidores SHAM e mixotiazol causaram inibio quase completa da
emisso de NO de clulas sem NR, sob anoxia, uma inibio de 57% em clulas crescidas
com NO3- e baixa emisso de NO em mitocndria purificada. Quando o NO2- foi suprido no
escuro sob o anoxia, a folha do mutante nia deficiente para NR emitiu muito pouco NO
(abaixo de 0.3 mol g-1 FW h-1), embora em folhas do material selvagem com NR houve
emisso de NO 100 vezes maior (50 mol g-1 FW h-1) (Planchet et al., 2005).
Sob condies de anoxia, o NO2- acumulado em todos os tecidos (ou liberado ao
meio) que contem NR e NO3-. Este acmulo de NO2- sob anoxia tem duas razes: uma a
bem conhecida ativao da NR, provocada provavelmente pela acidificao celular; a
segunda a queda na taxa de reduo do NO2- do plastdio (Planchet et al. 2005). Com a
utilizao de suspenso de clulas NR-deficientes nia supridas com NO2-, observou-se que
a reduo deste anion sob anoxia foi aproximadamente 25% daquela na presena do ar. Os
plastdios no-verdes ou cloroplastos no escuro produzem NAD(P)H atravs do ciclo da

18

pentose fosfato oxidativa (OPP). Sob o anoxia, os nveis de ATP e do acar fosfatado so
muito baixos, eventualmente insuficientes para abastecer o ciclo da OPP. Vale especular se
a reduo do NO2- a NO sob anoxia, onde se acumula NO2-, pode representar uma
respirao do nitrito. Entretanto, as taxas medidas da produo de NO em condies de
anoxia so muito baixas, demasiadamente distantes para serem consideradas relevantes
para a produo de energia (Planchet et al. 2005).
8. CONSIDERAES FINAIS
No passado, o grande foco dado aos estudos da nitrato redutase se dava ao papel
desta enzima no metabolismo de nitrognio, enquanto que sua habilidade para produzir NO
no era considerada. Embora o NO tenha se mostrado um importante mediador em vrios
processos fisiolgicos ou relacionados com estresse, pouco se conhece a respeito de sua
origem nestes sistemas. Compreender a relevncia da contribuio de todas as possveis
fontes de NO em plantas, bem com a localizao subcelular de sua produo, torna-se
essencial para um melhor entendimento de quais enzimas estariam relacionadas a um
processo fisiolgico e/ou de estresse.
Como o NO pode ser originado a partir de diferentes vias, cada uma delas poderia
ser regulada independentemente bem como interaes entre elas poderiam ocorrer. Um
exemplo dessa interao seria a produo de NO a partir de NO2- com relevante
contribuio de ambas, NR e mitocndria conforme discutido neste capitulo. Alem disso,
vale ressaltar que o NO formado via atividade NR poderia refletir na sinalizao em
resposta a nutrio, intensidade luminosa e fotossnteses. Os efeitos fisiolgicos do NO
sugerem um potencial papel-chave para este radical livre como uma molcula sinalizadora

19

em situaes adaptativas e a emisso de NO tambm pode ser utilizada como indicador

para fatores que provocam estresse em plantas.

20

9. REFERNCIAS

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28

Legendas
Table 1. Emisso de NO em Arabidopsis, em funo da intensidade e tempo da
exposio de luz. Plantas de quatro semanas de idade foram submetidas aos diferentes
regimes de luz, transferindo as plantas de 555 para 105 moles.m-2.s-1; de 555 moles.m2 -1

.s para escuro; do escuro para 105 moles.m-2.s-1 (em cmara do crescimento) e a

transferncia do escuro para casa de vegetao 555 moles.m-2.s-1 ou completa luz do sol
1500 moles.m-2.s-1. NO foi medido no tempo zero, 2; 4; 6; 8 e 12 h com quatro repeties.
Os resultados so apresentados nL.gfw-1. h-1 erro padro da media.

Tabela 1
Regime de Luz

0h

2h

4h

8h

12 h

555 para 105 mol.m-2.s-1

50362

18724

17223

8912

1.790.20

555 mol.m-2.s-1 - Escuro

50362

49247

47742

42541

23224

Escuro - 105 mol.m-2.s-1

26424

0000

0000

0000

0000

Escuro - 555 mol.m-2.s-1

26424

0000

27827

66757

54362

29

NITROGNIO
Sonia R. Souza1 e Manlio S. Fernandes2
1 Departamento de Qumica, UFRRJ
2 Departamento de Solos, UFRRJ

SUMRIO
1

O NITROGNIO NA NATUREZA............................................................................................2

ABSORO DE NITROGNIO PELAS PLANTAS................................................................3

2.1
2.1.1
2.2
2.2.1
2.3

A absoro de Amnio (NH4+) ............................................................................................6

Transportadores de Amnio.........................................................................................8
Absoro de Nitrato (NO3-)................................................................................................10
Transportadores de Nitrato.........................................................................................13
Absoro de nitrognio orgnico por plantas ....................................................................14

REDUO DO NITRATO .......................................................................................................15

3.1

Nitrato Redutase (NR) .......................................................................................................16

3.2

Nitrito Redutase (NiR) .......................................................................................................18

ACMULO E REMOBILIZAO DO NITRATO.................................................................18

ASSIMILAO DO AMNIO ................................................................................................22

5.1

Glutamina Sintetase (GS)...................................................................................................24

5.2

Glutamato Sintase (GOGAT).............................................................................................25

5.3

Glutamato Desidrogenase (GDH)......................................................................................26

VISO GERAL DO METABOLISMO DE NITROGNIO ....................................................29

TOXIDEZ DE NH4+ EM PLANTAS ........................................................................................30

REMOBILIZAO DE NITROGNIO...................................................................................34

8.1

Senescncia ........................................................................................................................34

8.2

Enchimento dos Gros .......................................................................................................37

Referncias.................................................................................................................................39

O NITROGNIO NA NATUREZA

O nitrognio (N) um dos elementos minerais requeridos em maiores quantidades pelas

plantas e o que mais limita o crescimento. Ele faz parte de protenas, cidos nuclicos e muitos
outros importantes constituintes celulares, incluindo membranas e diversos hormnios vegetais. Sua
deficincia resulta em clorose gradual das folhas mais velhas e reduo do crescimento da planta,
sendo que inicialmente, em detrimento das reservas da parte area a planta promove um
alongamento do sistema radicular, como uma tentativa de buscar o nutriente (Figura 1).

Figura 1. Folhas e razes de plantas de arroz cultivadas em soluo nutritiva com 0,1 e 0,5 mM de
N-NO3- ou sem nitrognio.

O nitrognio molecular (N2) representa 78% dos gases de nossa atmosfera, entretanto, a
despeito dessa abundncia h uma escassez desse nutriente em formas disponveis para as plantas, o
que pode ser explicada pela extraordinria estabilidade do N2 que, ao contrrio de outras molculas
2

diatmicas, como O2, NO ou CO, praticamente no passvel de reaes qumicas em condies

naturais.
A ligao dos tomos da molcula de N2 curta (1,098), o potencial de ionizao de 15,6
eV, e a energia de dissociao de 224,5 kcal. Os eltrons do nitrognio molecular esto em
orbitais de baixa energia, e o mais elevado orbital molecular efetivamente preenchido um orbital
, no centro da molcula. Nestas condies, a reatividade qumica da molcula extremamente
baixa. Chatt e Leigh (1968) observaram: No existe nenhum agente oxidante que seja
suficientemente forte para oxidar nitrognio em condies ambientais, nem mesmo fluoreto.
Nenhum agente redutor que seja suficientemente forte para reduzir o nitrognio molecular pode
existir em meio aquoso, porque a gua seria preferencialmente reduzida, produzindo hidrognio.
Existe um aporte de nitrognio aos solos atravs do arraste, pela chuva, dos xidos de
nitrognio produzidos na atmosfera por descargas eltricas. Entretanto, a maior parte do nitrognio
disponvel nos solos para a nutrio de plantas obtida atravs de fixao biolgica, um processo
complexo que envolve a enzima nitrogenase presente em bactrias. A decomposio dessas plantas
fixadoras contribui para a disponibilidade de nitrognio mineral para as outras culturas. Embora a
simbiose bactria-leguminosa seja o principal sistema responsvel pela fixao de N2, observou-se
que a fixao biolgica de nitrognio tambm pode ocorrer na rizosfera de gramneas. A fixao de
N2, tanto simbitica quanto associativa abordada no captulo 6 neste volume.
Os estudos do nitrognio em plantas indicam uma tendncia para o mximo de economia,
atravs de complexo sistema de absoro, assimilao e remobilizao desse nutriente nos tecidos
vegetais, de modo a evitar desperdcios. O desenvolvimento desses mecanismos, atravs de
processos de seleo, indica uma progressiva adaptao das plantas a condies ambientais
caracteristicamente deficientes em nitrognio.

ABSORO DE NITROGNIO PELAS PLANTAS

O nitrognio est disponvel no solo em diversas formas, incluindo amnio, nitrato,

aminocidos, peptdeos e formas complexas insolveis. As espcies vegetais diferem na sua

preferncia por fontes de N, mas o absorvem principalmente sob formas inorgnicas como nitrato
(NO3-) ou amnio (NH4+) (Williams & Miller, 2001).
O nitrato absorvido pode ser reduzido a amnio, atravs da ao seqencial das enzimas
Nitrato redutase e Nitrito redutase. O NO3- tambm pode ser acumulado no vacolo ou exportado
para outras partes da planta. O transporte para as folhas ocorre via xilema, embora a redistribuio a
partir das folhas para outros rgos ocorra predominantemente na forma de aminocidos, via
3

floema. Essa redistribuio essencial para suprir os tecidos que no participam na assimilao de
N.
O amnio absorvido ou o proveniente da reduo do nitrato imediatamente incorporado
em esqueletos de carbono preferencialmente atravs das enzimas da via Glutamina sintetaseGlutamato sintase (GS-GOGAT). Tanto a reduo do NO3- quanto a assimilao do NH4+ requerem
energia na forma de ATP e poder redutor como o NADH, o NADPH e a Ferredoxina reduzida, bem
como esqueletos de carbono derivados do ciclo de Krebs, como o -cetoglutarato. Esses processos
drenam tanto esqueletos de carbono quanto energia e doadores de eltrons, competindo com o
metabolismo do carbono.
Quando ocorre a assimilao do N nas razes, aminocidos so transportados para as folhas
via fluxo transpiratrio, pelo xilema (Marschner et al., 1995). O N tambm pode ser transportado
atravs da membrana plasmtica de certas clulas, em outras formas tais como peptdeos menores e
as bases purinas e pirimidinas e seus derivados (Gillissen et al., 2000).
Na natureza, as concentraes de amnio e de nitrato podem variar grandemente em funo
de inmeros fatores inerentes a caractersticas fsicas, qumicas e biolgicas do solo. As plantas
desenvolveram ao longo de sua histria evolutiva, em suas membranas celulares protenas
transportadoras que permitem a aquisio desses nutrientes a partir de concentraes bastante
variveis.
As plantas absorvem o NO3- e o NH4+ em processos dependentes de energia. H uma bomba
de prtons na plasmalema, P-H+ATPase, que hidrolisa ATP, bombeando H+ para fora da clula, o
que cria um gradiente de potencial eletroqumico, que composto do potencial eltrico atravs da
membrana () e da diferena de potencial qumico para o ion NH4+ ou NO3- (NH4+ ou NO3-)
entre o interior e o exterior da clula (ver captulo 5 neste volume). O gradiente de prtons gera uma
fora prton motriz, direcionando os H+ do exterior da clula para o citossol. O gradiente de
potencial eletroqumico contribui favoravelmente para a entrada de ctions na clula, enquanto que
os nions so absorvidos acompanhando o fluxo de prtons. Deste modo, a absoro do NH4+
passiva, e acontece atravs de um transportador do tipo uniporte, enquanto a absoro do NO3- um
processo ativo secundrio, em simporte com 2 H+ (Figura 2).

Figura 2. Absoro de nitrato (NO3-) e amnio (NH4+) atravs da membrana plasmtica. (1) Bomba
de prtons (P-H+ATPase); (2) Transportador de NO3- (simporte) =; (3) Transportador de
NH4+ (uniporte). (potencial eltrico atravs da membrana); NH4+ ou NO3(respectivamente, diferena de potencial qumico para o ion NH4+ ou NO3-, entre o interior e
o exterior da clula)

As protenas transportadoras de NO3- ou NH4+ podem ter maior ou menor afinidade pelo on
transportado, deste modo, eles formam nas plantas os sistemas de absoro que so denominados
de: sistema de transporte de alta afinidade (HATS High affinity transport system) ou sistema de
transporte de baixa afinidade (LATS Low affinity transport system).
A concentrao de 1mM de NH4+ ou NO3- pode, de modo geral, ser tomado como um limite
de concentrao abaixo do qual opera o sistema de alta afinidade (HATS), e acima do qual opera o
sistema de baixa afinidade (LATS):

Os transportadores de NO3- do sistema de alta afinidade so passveis de induo (iHATS),

embora exista tambm um sistema de alta afinidade constitutivo (cHATS). Os sistemas de
transporte de NO3- de baixa afinidade (LATS) so todos constitutivos.
Os sistemas de transporte de NH4+ tambm so de alta afinidade (passveis de induo) e de
baixa afinidade (constitutivos).
A induo dos genes que codificam para as protenas transportadoras de NO3- do sistema
iHATS, estimulada pela presena de NO3- no meio, enquanto que os sistemas transportadores de
NH4+ so induzidos pela ausncia de NH4+ no meio externo.
As protenas transportadoras de NH4+ so codificadas por uma famlia multignica, e
apresentam ampla variao de padres de cintica de absoro, este fato demonstra a plasticidade
das plantas, para a aquisio de formas reduzidas de N, que devem ter sido abundantes durante certo
perodo na evoluo das plantas superiores.
Por outro lado, a existncia de transportadores constitutivos na faixa do LATS e passveis de
induo na faixa do HATS, pode sugerir uma gradual, porm contnua, adaptao a condies
ambientais caracterizadas pela passagem da predominncia de formas reduzidas para formas
oxidadas de N e uma progressiva reduo na disponibilidade de N mineral em ambientes de terra
firme. Dentro dessa linha de raciocnio, de se esperar que plantas adaptadas a ambientes de baixa
disponibilidade natural de nutrientes, especialmente N, acionem com maior facilidade sistemas de
transporte de alta afinidade.

2.1

A absoro de Amnio (NH4+)

Evidncias indicam que o on amnio (NH4+) a forma absorvida pelas plantas e no o gs

amnia (Ludewig , 2002). A amnia (NH3) uma base fraca (pK = 9,25), deste modo, como o
citossol tem em mdia pH 7,2, aproximadamente todo o N-amoniacal neste compartimento est na
forma protonada de NH4+ .
A absoro de NH4+ feita por um sistema bifsico. Quando os nveis de NH4+ no meio
externo (soluo nutritiva ou soluo do solo) so baixos opera um sistema de absoro de alta
afinidade (HATS), mediado por uma protena transportadora do tipo uniporte e que mostra cintica
de saturao. Enquanto que, em nveis elevados de NH4+ no meio externo entra em funcionamento
6

o sistema de baixa afinidade (LATS), sendo a concentrao de 1mM de NH4+ o limite abaixo do
qual opera o sistema de alta afinidade (HATS), e acima do qual opera o sistema de baixa afinidade
(LATS).
HATS e LATS so protenas integrais da membrana, com 12 hlices que atravessam a
membrana, separadas por uma regio hidroflica em dois domnios de seis hlices.
Na faixa de absoro do sistema de alta afinidade (HATS) os valores da velocidade mxima
(Vmx) diminuem, enquanto que os valores da constante de Michaelis-Menten (KM) aumentam,
acompanhando o aumento dos teores de N-NH4+ na soluo externa, o que levou Wang et al. (1993)
a concluir que estes parmetros cinticos resultam da combinao dos dois mecanismos de absoro
(sistema de alta afinidade + baixa afinidade).
Em milho, milheto e cevada o sistema de alta afinidade mostrou cintica de saturao em
plantas que foram cultivadas sob concentraes externas de NH4+ entre 0,1 a 1,0 mM. Em arroz,
foram observadas velocidade de absoro de NH4+ (Vmx) em torno de 5,2 e 5,4 moles/g. peso
fresco/hora (Kronzucker, 1998). Baptista et al. (2000) observaram em duas variedades de arroz
valores de Km de 0.51 e 0.58 mM, quando se utilizou 20 mg N-NH4+ /L na soluo nutritiva.
Quando as plantas foram submetidas 80 mg N-NH4+/L, o Km aumentou para 3.5 e 4.5 mM
respectivamente.
Wang et al. (1993) estimaram o influxo lquido de NH4+ em arroz (influxo - efluxo) em 1,32;
6,08 e 10,16 moles/g. peso fresco/hora, quando sob concentraes externas de NH4+ de 2, 100 e
1000 M respectivamente.
Em tomate, Ludewig (2002) observou que o Km do transportador HATS para amnio variou
em funo do potencial de membrana, sendo muito menor -140 mV do que a -40 mV (4 vezes).
semelhana do que ocorre com a absoro de outros ctions como o K+, vrios fatores
afetam a absoro de NH4+. Teremos ento um sistema de transporte que positivamente
influenciado pela ao da luz (ocorre uma duplicao no total absorvido, em relao a plantas no
escuro), e negativamente influenciado por inibidores metablicos e hipoxia. Alm disso, preciso
levar em considerao que a absoro de NH4+ passvel de inibio por feedback.
Com o aumento dos teores de NH4+ na soluo externa (0,002 a 1mM) aumenta o efluxo de
NH4+ das razes de modo que o influxo lquido pode cair de 89% para as plantas sob 0,002 mM
NH4+, para 80% em plantas sob 1mM NH4+.
Um processo de efluxo contnuo de NH4+ sugerido como uma caracterstica do processo de
absoro de N-NH4+ por plantas.
O NH4+ absorvido por razes de arroz pode tambm ser compartimentalizado, acumulando no
vacolo. Wang et al. (1993) observaram que em 30 minutos, cerca de 20% do NH4+ absorvido
7

acumulou no vacolo, enquanto que 41% do total permaneceram no citoplasma, 19% foi
assimilado, e 20% saram das razes para o meio externo por efluxo.

2.1.1

Transportadores de Amnio
Estudos moleculares identificaram uma famlia de genes que codificam para os

transportadores de amnio (AMT, ammonium transporter), e que operam na membrana plasmtica

das plantas (Figura 3). Este grande nmero de transportadores de uma mesma famlia permite ao
organismo adequar-se s mltiplas condies de concentrao de NH4+ no meio externo, e aumenta
a eficincia da planta como um todo.
O sistema AMT de transporte de NH4+ em plantas especfico. Por exemplo, os ons K+,
Rb+ e Cs+ no interferem com a absoro do NH4+. O sistema AMT do tipo uniporte, e o
transporte de NH4+ passivo (a favor do gradiente de potencial eletroqumico gerado pelas P-H+ATPases da membrana) (Figura 2).
Os membros da famlia de transportadores AMT1 so responsveis pelo transporte de alta
afinidade em plantas (HATS) e os AMT2 pelo transporte de baixa afinidade (Figura 3).

Figura 3. Famlias de tranportadores de NH4+ (AMT, ammonium transporter), de alta (AMT1) e

baixa afinidade (AMT1)

Em Arabidopsis, um dos transportadores codificados por essa famlia de multigenes, o

AtAMT1;1 parece ser responsvel pela absoro de NH4+ quando o N est em baixas concentraes
no meio externo. Foi observado em Arabidopsis que a deficincia de NH4+ no meio, resulta em
rpido incremento da transcrio do gene AtAMT1. Essa transcrio diminui rapidamente com o
aumento de NH4+ no meio. A queda nos nveis do RNA mensageiro do gene que codifica para o
transportador AtAMT1 parece ser causada principalmente pelo acmulo de glutamina nos tecidos.
O nmero de transportadores da famlia AMT em arroz muito maior do que em Arabidopsis e em
tomate, o que indica que cada planta forma o seu sistema de transporte de acordo com as presses
seletivas a que foi submetida (Loqu e von Wrem, 2004).
O sistema de transporte de NH4+ de alta afinidade (HATS) mostra cintica de saturao, com
KM tipicamente abaixo de 100M. Como mencionado anteriormente a atividade desses
transportadores depende do gradiente de potencial eletroqumico gerado atravs da membrana
plasmtica.
Quando plantas so submetidas deficincia de NH4+, o AtAMT1;1 o transportador que
mais aumenta de atividade, enquanto que AtAMT1;2 e AtAMT1;3 mantm-se constantes, o que
mostra que sob deficincia, o transportador de maior afinidade que transcrito.
O sistema de transporte de baixa afinidade (LATS) aparentemente no saturvel, e no
indica ser passvel de regulao por produtos do metabolismo de N.
O gene do primeiro transportador de NH4+ a ser isolado foi o AtAMT1;1, em Arabidopsis
thaliana. Depois foram isolados em Arabidopsis os genes de outros membros da famlia AMT1: o
AtAMT1;2, AtAMT1;3, AtAMT1;4 e AtAMT1;5.
Um outro gene, o AtAMT2;1 tambm j foi identificado. Genes homlogos ao AMT foram
localizados em arroz: OsAMT1;1 e em tomate LeAMT1;1/ LeAMT1;2/ e LeAMT1;3.
Ludewig (2002) demonstrou que o gene LeAMT1;1 de tomate codifica para uma protena
transportadora do tipo uniporte (AMT1;1).
A existncia desses diversos sistemas de transporte de NH4+, controlados por vrios genes
so uma indicao da importncia na nutrio amoniacal para as plantas.
Embora os genes AMT1 sejam normalmente expressos nas razes das plantas, os genes que
codificam para os transportadores AMT1;1 e AMT1;2 tambm so expressos na parte area, o que
mostra a importncia desses transportadores no processo de reassimilao do NH4+ produzido na
parte area das plantas, principalmente como conseqncia da fotorespirao.
O influxo de NH4+ em plantas mostra uma variao circadiana. O mximo de absoro
ocorre ao fim do perodo luminoso, e uma queda acentuada no ritmo de absoro ocorre aps o
incio do perodo escuro (von Wirn et al., 2000).
9

2.2

Absoro de Nitrato (NO3-)

A absoro de NO3- ativa ou seja, contra um gradiente de potencial eletroqumico, e uma

ampla variao de Km aparente foi observada para espcies vegetais distintas, indicando diferenas
de presso seletiva nos diversos ambientes em que essas espcies vivem. Epstein (1972) cita a alga
marinha Skeletonemas notatum, cujo Km aparente para NO3- de 0,4M, enquanto que em arroz
(O. sativa), uma planta de terra firme, o Km aparente de 0,6mM.
Experincias feitas com diferentes concentraes externas de NO3- demonstraram que a
absoro de NO3- mediada por dois sistemas de transporte atravs da membrana plasmtica,
ambos co-transportadores (Glass et al., 1992; Siddiqi et al.,1990). Ou seja a absoro de NO3-
bifsica.
O primeiro seria um sistema de transporte de NO3- de baixa afinidade (LATS), que se torna
funcional sob condies de elevadas concentraes externas de NO3- (> 1mM). O outro um
sistema de absoro de alta afinidade (HATS), que funcional em concentraes menores que 1
mM. Esses sistemas so aditivos.
O sistema de baixa afinidade (que opera a elevadas concentraes de NO3-), constitutivo
(cLATS), enquanto que o sistema de alta afinidade (que opera a baixas concentraes de NO3-)
passvel de induo pelo substrato NO3- (iHATS).
Em baixas concentraes externas o sistema de absoro de alta afinidade saturvel. Em
cevada, este sistema de alta afinidade mostra Km aparente na faixa de 10 a 100 M. Em milho, foi
observado um Km aparente de 50 M para o sistema de alta afinidade.
Estudos feitos em cevada por Siddiqi et al. (1990), mostraram que na faixa de concentrao
externa que vai de 5M a 0,5 mM o transporte de NO3- obedece cintica de Michaelis-Menten,
mostrando saturao com o aumento na concentrao externa de NO3-. No sistema de baixa
afinidade ([NO3-] >1mM) a velocidade de absoro de NO3- aumenta linearmente com o aumento
da concentrao externa. A soma dos dois sistemas mostra claramente a existncia de um sistema
bifsico para a absoro de NO3-.
Embora o sistema LATS no mostre cintica de saturao, muito pouco provvel que se
trate de um sistema passivo de transporte. Clculos feitos por Crawford (1995) mostram que, com
um potencial de membrana de 110 mV, e com uma concentrao externa de 2mM, para que
houvesse transporte passivo de NO3- a concentrao citosslica desse on deveria estar em torno de
28 M. Na prtica, as concentraes citosslicas obtidas experimentalmente so milhares de vezes
maiores.

10

Em Arabidobsis, LATS transporta NO3- a velocidades que variam de 4 a 700 Moles/g/hr

(peso fresco de razes). O sistema LATS foi caracterizado como constitutivo e insensvel a
inibidores metablicos.
A absoro de NO3- controlada por feedback. Nveis elevados de NO2-, NH4+ e
aminocidos livres no citossol inibem a absoro de NO3-.
Em citros, a absoro de NO3- foi fortemente afetada pelo pH do meio externo. Aumentos do
pH externo de 4,0 para 7,0 reduziram drasticamente a absoro de NO3-. Por outro lado, quando as
razes de citros foram submetidas a inibidores de P-H+-ATPases (DCCD ou DES), tambm
observou-se redues significativas na absoro de nitrato (Cerezo et al., 2000).
Fried et al. (1965), usando ambos NH4+ e NO3- marcados (15N), observaram que o arroz
absorve NH4+ mais rapidamente medida que o pH da soluo nutritiva aumenta, situando-se o pH
timo em torno de 8,5. Para NO3-, entretanto, foi observada uma absoro mais rpida medida que
o pH diminua, situando-se o pH timo em torno de 4,0. Para qualquer dos nveis intermedirios
entre estes dois valores, entretanto, a absoro de NH4+ pelas plantas era sempre maior que a de
nitrato. Por exemplo, a um pH de 5,5, as razes de arroz absorvem 300g de N por g de peso seco,
quando NH4+ foi usado, enquanto que, quando NO3- foi usado, as razes absorveram apenas 68g de
N por g de peso seco. O pH da soluo externa (de 4,5 a 9,0) teve pouco efeito sobre a absoro de
NH4+ via sistema de alta afinidade (0,1 mM NH4+), mas teve um efeito acentuado sobre a absoro
de NH4+ pelo sistema de baixa afinidade (pH acima de 6,0). Por outro lado, a reduo do pH para
3,0 resultou numa reduo drstica da absoro de NH4+ tanto pelo sistema de alta como de baixa
afinidade. Nielsen e Schoerring (1998) observaram que no espao livre aparente da parte area de
colza ocorria uma queda de 30% nos teores de NH4+ com a variao de cada unidade de pH entre
5,0 e 8,0.
Mesmo em pH 4, quando a absoro de NO3- atinge o seu mximo, se NH4+ e NO3estiverem em concentraes equimolares, as plantas ainda absorvem de 5 a 10 vezes mais N como
NH4+ do que como NO3-. A absoro mais rpida de N-NH4+ do que de N-NO3- foi observada
tambm por Eira (1977) em Digitaria decumbens.
Syrett (1956) observou que clulas de Clorela, quando expostas a altos nveis de N, tanto na
forma de NH4+ ou na de NO3-, absorveram 4 a 5 vezes mais N no primeiro caso. A absoro de
NH4+ por plantas , portanto, mais rpida do que a absoro de NO3- sob amplas condies de
variao ambiental.
Em cevada, foi observada a absoro de NO3- em nveis de 1,8 a 2,1 moles/g.peso
fresco/hora sob condies normais de nutrio. Entretanto, plantas submetidas previamente
11

deficincia de N, mostraram velocidades de absoro de NO3- (Vmx) de 9,6 a 10,1 moles/g. peso
fresco/hora (Sidiqqi et al., 1990).
Em algodo, Aslam et al. (1997) observaram que medida que a concentrao de NO3- na
soluo externa era aumentada de 0,05 at 1,00 mM, as velocidades de absoro de NO3- variavam
desde 2,0 at 7,0 moles/g.peso fresco/hora, Em trigo foram observadas velocidades de absoro de
2,0 a 2,6 moles/g.peso fresco/hora dependo de haver ou no pr-induo do sistema de transporte
pela presena de NO3- no meio.
A velocidade de absoro de NO3- varia no apenas com a espcie estudada, mas tambm
depende da concentrao externa de NO3-, da pr-incubao (com NO3-) dos sistemas
transportadores, e de controles (inibio) por feedback exercido no apenas pela concentrao
interna de NO3-, mas tambm por substncias resultantes do metabolismo de N-NO3- nas plantas.
A absoro de nitrato causa inicialmente uma despolarizao no potencial da membrana
(). Esta despolarizao inicial seguida de repolarizao, e em alguns casos at de uma
hiperpolarizao. Este ltimo efeito deve-se ao estmulo que a despolarizao inicial causa sobre os
mecanismos de extruso de prtons atravs das P-H+-ATPases. A despolarizao inicial deve-se ao
fato de que a absoro de NO3- um processo termodinamicamente ativo. um simporte, com uma
relao 2H+/ NO3- (Figura 2).
Em algumas plantas esta despolarizao inicial pode ser pequena (da ordem de 10 mV ou
menos), mas em cevada foram observadas despolarizaes da ordem de 40 mV, poucos minutos
aps a exposio das plantas ao NO3- externo, e antes que se observe o estmulo atividade das H+ATPAses e conseqente extruso de H+.
Os efeitos de NO3- sobre o potencial da membrana () podem ser observados na faixa de
pH que vai de 4,4 a 7,0. Em pH = 8,0 as plantas no mais responderam presena de NO3- no meio
externo. Quando, entretanto o pH da soluo foi reajustado para 6,0 a atividade eltrica das
membranas reapareceu aps 30 minutos (McClure et al., 1990). Estes pesquisadores mostraram que,
o transporte de NO3- em razes de milho foi sendo inibido medida que o pH da soluo externa
aumentava de 4,4 at 8,0. Acima de pH = 8,0 o transporte de NO3- cessou completamente. Alm
disso, a pH = 8,0 as razes no apresentaram variao no potencial da membrana em resposta
concentrao externa de NO3-.
Estes resultados contribuem para demonstrar que a fora prton-motriz (p) realmente
responsvel pelo transporte de NO3- atravs das membranas. Isto explica em parte porque a
velocidade de absoro de NO3- aumenta medida que o pH da soluo externa diminui.
preciso considerar que do ponto de vista energtico, o primeiro passo para a absoro de
-

NO3 ser a extruso ativa de H+ pelas bombas de prtons da membrana plasmtica (P-H+12

ATPases), de modo a que seja criado um gradiente de H+ (H+) entre o apoplasto e o interior da
clula. Considerando como vlida a relao 1 H+: 1 ATP, sero necessrios 2 moles de ATP para
cada mol de NO3- absorvido (Figura 2). preciso levar em conta, entretanto, que nestes clculos de
custos energticos de absoro de nions, a concentrao relativa dos nions dentro e fora da clula
tem um papel fundamental (ver captulo 5 neste volume).
Mudanas no pH do meio, devidas absoro de ons por razes de cevada, foram
observadas por Hoagland e Broyer (1940). As observaes de vrios pesquisadores indicam que a
absoro diferencial de nions ou ctions resulta em aumento ou reduo do pH do meio,
respectivamente (Moore, 1974). Na absoro de um excesso de nions (NO3- no caso), o sistema de
cotransporte 2H+/NO3- resulta no aumento do pH da soluo externa.
No caso especfico do nitrognio, variaes drsticas no pH foram observadas, quando arroz
foi cultivado em soluo nutritiva em que N estava presente em forma amoniacal (Karim & Vlamis,
1962); estes autores s conseguiram obter crescimento das plantas quando um excesso de carbonato
de clcio foi includo na soluo nutritiva. A mesma tcnica foi usada por Fernandes (1974) usando
nveis elevados de N-NH4+ (150 ppm) em soluo nutritiva. Variaes de pH de 6,1 para 4,3 foram
observadas em nossos laboratrios (resultados no publicados), quando arroz (4 plantas por 2 litros
de soluo nutritiva) foi mantido por 90 horas em uma soluo nutritiva com 5 ppm de N-NH4+. As
variaes de pH (aumento) obtidas quando amnio foi substitudo por nitrato, no foram to
elevadas.

2.2.1

Transportadores de Nitrato

A absoro de NO3- feita atravs de sistemas de absoro de alta (HATS) e baixa afinidade
(LATS). Os transportadores do tipo LATS so constitutivos, enquanto o sistema de absoro de
NO3- de alta afinidade (HATS) tem um componente constitutivo (cHATS) e um outro passvel de
induo (iHATS). Cada um dos trs sistemas propostos para a absoro de nitrato (cHATS, iHATS,
LATS) pode consistir ou no, de diversos transportadores, geneticamente diferentes.
Transportadores do tipo cHATS e iHATS, podem ser expressos simultaneamente e responder ao
aumento das concentraes externas de NO3- com um aumento de atividade (upregulation).
A induo do sistema iHATS pode ser feita tanto por NO2- como por NO3-. Foi observado
em cevada que o sistema iHATS pode aumentar sua atividade em at 30 vezes em relao ao
cHATS, como resposta ao aumento da concentrao externa de nitratos.

13

Estudos moleculares em Arabidopsis, localizaram uma famlia de transportadores de NO3codificada pelos genes NRT (Nitrate transporter). Nessa famlia, os genes NRT1 codificam para os
transportadores do sistema de baixa afinidade e os genes NRT2 para os sistemas de alta afinidade.
Em Arabidopsis, dois membros da famlia NRT2, AtNRT2.1 e AtNRT2.2 corresponderiam ao
sistema iHATS, enquanto que AtNRT2.3, AtNRT2.4, AtNRT2.5 AtNRT2.6 e AtNRT2.7
corresponderiam ao sistema cHATS (Figura 4).
A expresso do genes para NRT2 estimulada pela presena externa de NO3- e reprimida
pela presena interna de glutamina. Entretanto h um gene, AtNRT2;5 que ao contrrio dos outros,
inibido pela adio de nitrato (Okamoto e Okada, 2004).

Figura 4. Sistemas de absoro de NO3- (NRT: Nitrate transporter) de alta (NRT2) e baixa
afinidade (NRT1). cHATS (constitutivos); iHATS (induzveis)

2.3

Absoro de nitrognio orgnico por plantas

Em plantas superiores a capacidade de absorver formas orgnicas de nitrognio foi estudada

por Virtanen e Linkola (1946). Entretanto, estes estudos foram limitados a certos grupos de plantas,
leguminosas entre elas. Foi observado que alguns aminocidos, quando usados como nica fonte
externa de nitrognio, causavam crescimento anormal em plantas.

14

Em geral, o nitrognio em forma orgnica no considerado como fonte direta importante

de N para as plantas, em condies normais de solo. A absoro de aminocidos feita via
simporte, com prton e depende, portanto, da formao de gradientes de H+, e gerao de fora
prtonmotriz, pelas P-H+-ATPases. Tambm existe a sugesto de que plantas como o arroz possam
absorver diretamente protenas (Yamagata e Ae, 1999).
Nsholm et al. (1998) observaram a absoro de N-orgnico por rvores e arbustos de
florestas boreais. Este mecanismo seria importante nessas regies onde a baixa temperatura impede
a mineralizao do N-orgnico. Glicinas marcadas no carbono e no nitrognio foram absorvidas
pelas plantas, e usadas como fonte de N para o crescimento. Aparentemente este processo
mediado pela micorrizao.
Okamoto e Okada (2004) observaram o efeito positivo de fontes de N-orgnico (farelo e
palha de arroz) no crescimento de sorgo e arroz, enquanto que milho e milheto so menos afetados e
respondem melhor ao N-mineral. Estes autores sugerem que as necessidades de N do sorgo podem
ser supridas com a absoro de protena da soluo do solo, e que o arroz tambm poderia recorrer a
essa fonte complementar, quando h deficincia de N-mineral no solo.

REDUO DO NITRATO

O nitrato a principal fonte de nitrognio para a maioria das plantas, especialmente para os
cereais e culturas granferas.
As plantas no assimilam nitrognio em alto estado de oxidao, deste modo, quando nitrato
absorvido, ele s ser assimilado se for primeiro reduzido a amnio.
A converso de nitrato a amnio ocorre em duas etapas, atravs de uma reduo que requer
oito eltrons. O nitrognio passa do estado de oxidao (+5) para (-3).
Inicialmente ocorre no citossol a reduo do NO3- a nitrito (NO2-) com o uso de dois
eltrons, transferidos das coenzimas NADH ou NADPH e catalisada pela enzima nitrato redutase
(NR). Em seguida, o nitrito transportado para os cloroplastos nos tecidos fotossintetizantes ou
para os plastdios nas razes, sendo ento reduzido a amnio, atravs da enzima nitrito redutase,
com transferncia de seis eltrons doados pela Ferredoxina reduzida (Figura 5).

15

Figura 5. Reduo do nitrato (NO3-) a nitrito (NO2-) no citossol pela enzima Nitrato Redutase e do
NO2- a amnio (NH4+) atravs da Nitrito Redutase no cloroplasto (plastidio).

3.1

Nitrato Redutase (NR)

A Nitrato redutase (EC. 1.6.6.1) a primeira enzima na via de reduo de nitrato pelas

plantas, e representa, a etapa limitante e reguladora deste processo (Beevers e Hageman, 1969;
Campbell, 1988; Campbell, 1999).
Nas plantas superiores, algas e fungos as NR so consideradas enzimas solveis localizadas
no citoplasma (Hageman e Bellow, 1990; Kleinhofs e Warner, 1990), embora tenha sido
identificada em razes de milho e cevada uma forma de NR ligada membrana plasmtica. Essa
isoforma da Nitrato Redutase ancorada na face externa da membrana plasmtica referida como um
possvel sensor para o NO3- (Forde e Clarkson, 1999).
A NR encontrada em muitas plantas e rgos principalmente quando nitrato a fonte de
nitrognio. A atividade da NR pode ocorrer no citoplasma tanto de razes como de folhas (Hageman
e Bellow, 1990), sendo que, normalmente, a atividade da enzima nitrato redutase alta nas folhas.
No entanto, segundo Campbell (1999), algumas plantas tm pouca ou nenhuma atividade da NR nas
folhas, havendo maior atividade nas razes. A NR pode tambm ser encontrada em um tipo de
16

clula particular, como ocorre em folhas de plantas C4, onde a enzima est localizada somente nas
clulas da bainha vascular.
A NR um homotetrmero formado por dois dmeros simtricos. Cada tetrmero ativo, em
baixas concentraes da enzima, dissocia-se em dmeros ativos, sem que ocorra perda significativa
de atividade, sugerindo que a associao/dissociao no exerce papel na regulao da atividade da
enzima.
Dois eltrons so necessrios para a reduo do nitrato a nitrito pela NR, esses eltrons
podem ser fornecidos pelo NADH ou NADPH. Sendo que o NADH o principal doador de eltrons
para a NR na maior parte das plantas superiores e algas eucariticas, enquanto que somente os
fungos utilizam NADPH. Entretanto, algumas plantas superiores (arroz, milho, cevada, soja) e
algumas espcies de algas podem utilizar tanto o NADH quanto o NADPH como doador de eltrons
para a NR sendo chamadas de plantas NAD(P)H-NRs bi-especficas (Kleinhofs e Warner, 1990).
Todas as NRs eucariticas contm trs grupos prostticos na proporo estequiomtrica de
1:1:1, por subunidade: Flavina Adenina Dinucleotideo (FAD), Citocromo b557 e Cofator
Molibdnio (molibdnio associado com a pterina, formando complexo molibdopterina). Segundo
Kleinhofs e Warner (1990) o fluxo de eltrons na NR ocorre da coenzima NAD(P)H atravs do
FAD, Citocromo b557 e Cofator Molibdnio, e finalmente chegando ao NO3- que reduzido a NO2(Figura 6).

Figura 6. Esquema da transferncia de eltrons na enzima Nitrato Redutase. Os eltrons doados

pelo NAD(P)H so transferidos pelo FAD, citocromo b557 e cofator molibdnio-pterina at
chegarem ao NO3- que ento reduzido a NO2-.
Como a NR est localizada no citoplasma, a fonte primria de poder redutor para a formao
de NADH (forma reduzida) seria proveniente da degradao de acares (Beevers e Hageman,
1969), provavelmente atravs da via Glicoltica durante a oxidao do gliceraldeido 3-fosfato a 1,3
bisfosfoglicerato que catalisada pela enzima da Gliceraldeido 3-fosfato desidrogenase citosslica
(Klepper et al., 1971). Em tecidos fotossintetizantes o poder redutor requerido para a atividade da
17

NR parece ser derivado do NADPH produzido nos cloroplastos pela etapa luminosa da fotossntese.
Atravs de sistemas especiais de transporte de eltrons entre o cloroplasto e o citossol, os eltrons
do NADPH reduzem o NAD+ citoplasmtico a NADH, que desta maneira poder ser usado pela NR
e outras reaes de reduo do citossol (Hageman e Bellow, 1990, Oaks e Yamaya, 1990).

3.2

Nitrito Redutase (NiR)

O nitrito (NO2-) produzido pela reao da nitrato redutase, txico, devendo, portanto, ser
prontamente metabolizado. A reduo do NO2- a amnio ocorre pela ao da enzima Nitrito
redutase (NiR), que transfere seis eltrons de seis molculas de Ferredoxina reduzida (Fd red) para
o nitrito produzindo amnio (Figura 5).
A NiR est localizada nos cloroplastos da parte area ou nos plastdios das clulas
radiculares. Nos cloroplastos (presena de luz) a Ferredoxina reduzida produzida atravs da cadeia
de transporte de eltrons da fotossntese, enquanto nas clulas radiculares NO2- reduzido a amnio
pela NiR localizada nos plastdeos, de maneira anloga a que acontece no tecido foliar. Entretanto,
como no pode ser produzida diretamente, atravs da fotossntese, a Ferredoxina que ser utilizada
pela NiR presente nas razes (ou na parte area no escuro) reduzida pelos eltrons doados pelos
NADPH, gerados atravs da Via das Pentoses-fosfato.
Sthr et al. (2001) descreveram a atividade cataltica de uma enzima ancorada na membrana
plasmtica, que reduz NO2- a xido ntrico (NO) nas razes de fumo. Esses estudos sugerem que a
enzima nitrito:NO redutase deve atuar concomitantemente com a NR da plasmalema, para converter
NO3- externo em NO, o NO por sua vez, atravessa a membrana plasmtica e atua como
intermedirio na sinalizao por NO3-. Em mamferos, o papel do xido ntrico est estabelecido
como uma molcula sinalizadora importante (ver captulo 8 neste volume). Na verdade, o NO, por
si s, capaz de induzir genes que respondem a NO3-.

ACMULO E REMOBILIZAO DO NITRATO

De maneira geral o nitrato absorvido pela clula pode ser:

Reduzido e assimilado no local de absoro

Acumulado no Vacolo da clula que o absorveu, atravessando o tonoplasto por um

canal de nitrato

Absorvido nas razes e enviado para a parte area, onde pode ser reduzido e
18

assimilado, ou acumulado no vacolo celular.

Quando o nitrato absorvido no citossol ele induz a atividade da enzima NR. Deste modo, o
nitrato pode ser reduzido a nitrito pela NR, e a seguir o nitrito reduzido pela NiR a amnio, que
precisa ento ser assimilado em molculas orgnicas atravs das enzimas Glutamina Sintetase (GS)
e Glutamato Sintase (GOGAT). Todo esse processo de reduo e assimilao, necessita de energia,
poder redutor e esqueletos de carbono, que em algumas situaes esto em nveis limitantes na
clula (escuro, senescncia, baixa taxa fotossinttica, estresse etc). Nestas condies o nitrato
absorvido pode ser enviado para outras clulas ou acumulado no vacolo, passando pelo tonoplasto
atravs de um canal de NO3- (Figura 7).

Figura 7. Viso geral da absoro de nitrato e amnio; reduo, exportao e acmulo de nitrato;
assimilao de amnio. T (tonoplasto; MP (membrana plasmtica)
(1) P-H+-ATPase; (2) Transportador de NO3- (simporte); (3) Transportador de NH4+ (uniporte); (4)
Canal de NO3-.

19

A remobilizao do nitrato acumulado no vacolo, com seu retorno ao citossol, envolve a

participao de um transportador de nitrato, do tipo simporte, com um prton e depende de um
gradiente eletroqumico que gerado pelas bombas de prtons presentes no tonoplasto: a VH+ATPase e a Pirofosfatase (H+PPase). No citossol o nitrato atua como um desacoplador das
unidades Vo e V1 das V-H+ATPase (ver captulo 5 neste volume), deste modo esta enzima s atua
bombeando prtons para o interior do vacolo, na ausncia de nitrato no citossol, quando ento, a
sua atividade permite a sada do nitrato que esteja acumulado no vacolo (Figura 8).

Figura 8. Viso geral da remobilizao de nitrato do vacolo. (5) V-H+-ATPase; (6) H+-PPase; (7)
Transportador de NO3- (simporte: H+/NO3-).

Na clula pode se considerar que h dois reservatrios ("pools") de nitrato separados

espacialmente: o "Reservatrio metablico ou pool indutor" (de curta durao - ligado regulao
do nvel da NR) e o "Reservatrio de reserva ou pool substrato" (de existncia mais longa - ligado
ao suprimento de substrato) (Heimer e Filner, 1971; Ferrari et al.,1973)
20

O pool indutor se refere ao NO3- presente no citossol, enquanto o pool substrato o NO3acumulado nos vacolos.
Ferrari et al. (1973) verificaram em clulas de tabaco que o NO3- acumulado no "pool
substrato" podia ser utilizado pela planta, no entanto era incapaz de substituir o NO3- do "pool
indutor" em sua capacidade de induzir sntese "de novo" de NR, ou aumentar a atividade da NR j
existente. O excesso de nitrato no citossol (pool indutor) passa rapidamente para o vacolo (pool de
reserva), atravs de um canal inico no tonoplasto (Satter e Moran, 1988; Hedrich e Schroeder,
1989). Segundo Siddiqi et al. (1989), o fornecimento de nitrognio exgeno, pode restaurar o fluxo
de nitrato no citoplasma e assim aumentar a atividade da NR.
A Nitrato redutase uma enzima passvel de induo pelo substrato (NO3-). Numerosos
estudos comprovaram aumento da atividade dessa enzima aps nitrato ser fornecido s plantas. O
nitrato tanto induz os genes para a Nitrato Redutase (NIA) como os genes para a Nitrito Redutase
(NII).
Sommers et al. (1983) utilizando imunoeletroforese com anticorpos especficos para NR,
encontraram aumento da atividade da NR em plantas induzidas por nitrato, que corresponde a um
aumento da protena-NR. Estes resultados indicam que o nitrato induz a expresso gnica que
culmina com a sntese de novo da protena NR. Posteriormente, quando o nitrato foi removido
das plantas, a atividade da NR e a protena-NR diminuram, demonstrando que a NR no permanece
quando o sinal-nitrato para a induo removido.
Evidncias indicam que a luz no tem papel direto na atividade da NR (Campbell, 1999). A
influncia da luz poderia ser devido a um efeito geral na sntese de protena e no diretamente na
NR.
Segundo Campbell (1988), a luz no influencia a expresso gnica para a NR, uma vez que
o RNA mensageiro (RNAm) para a NR no est presente em altos nveis em plantas crescidas na
luz, a menos que nitrato seja fornecido. Deste modo, a luz no capaz de exercer influncia nos
nveis de RNAm para a NR a menos que o nitrato j tenha ativado o gene que codifica a NR. H
evidncias de que o nitrato desencadeia a expresso gnica para a NR (e provavelmente para genes
relacionados, como o da nitrito redutase), enquanto que a luz influencia o nvel de expresso desses
genes, alm de fornecer energia para a reao. Em milho foi verificado que a induo da protenaNR inativa ocorreu em resposta luz, na presena de baixos nveis de nitrato, no entanto, a
expresso total da atividade enzimtica requereu altos nveis de nitrato (Oaks et al., 1982).
Quando plantas de milho induzidas por nitrato foram transferidas da luz para o escuro, a
atividade da NR atingiu nveis baixos, em um perodo de 12 horas. No escuro o nitrato
direcionado para o pool de reserva, nos vacolos, devido deficincia de poder redutor produzido
21

na fotossntese. Em um curto perodo aps a transferncia das plantas da luz para o escuro, a
protena-NR no diminuiu, embora a atividade da NR tenha diminudo em 30%. A atividade da NR
foi restabelecida com o retorno das plantas a luz. Estes resultados indicam a existncia de um
mecanismo de inativao reversvel para a regulao da NR.
Em condies de baixa energia a NR ativa pode ser fosforilada e ligada a uma protena
regulatria denominada 14-3-3, formando um complexo inativo que pode ser direcionado
destruio da NR. Entretanto, se for restabelecido o nvel energtico, a protena 14-3-3 se desligaria
da NR e a enzima posteriormente defosforilada, voltaria sua atividade normal. A NR fosforilada
tambm ativa.

ASSIMILAO DO AMNIO

Embora o nitrato e o amnio possam ser absorvidos pelas plantas, a assimilao do

nitrognio somente ocorre sob a forma reduzida (amnio). Esse amnio pode ser diretamente
absorvido pela clula atravs de um transportador do tipo uniporte presente na membrana
plasmtica ou ser formado pelas reaes do metabolismo como a fotorespirao e a reduo do
nitrato (Figura 7)
At os anos 1970 acreditava-se que em plantas o amnio era incorporado em molculas
orgnicas, atravs da enzima glutamato desidrogenase (GDH-EC.1.4.1.3), via aminao redutiva
direta do -cetoglutarato. Embora a glutamina sintetase (GS-EC.6.3.1.2) fosse conhecida, ela no
era considerada importante, porque o nitrognio era assimilado na posio amida formando
glutamina. Entretanto, em 1971, Tempest et al. (1971), detectaram uma nova enzima em bactria,
que catalisava a transferncia redutiva do grupo amida da glutamina para o -cetoglutarato,
resultando na produo de duas molculas de glutamato. Esta enzima foi denominada glutamato
sintase (GOGAT), (NADH-GOGAT-EC.1.4.1.13).
Finalmente Lea e Miflin (1974), demonstraram em cloroplastos a existncia de uma
GOGAT diferente da encontrada em bactria, que era dependente de Ferredoxina reduzida, que foi
denominada Fd-GOGAT e que catalisava reao similar da NADH-GOGAT bacteriana.
O significado da descoberta da GOGAT que, em cooperao com a GS, ela fornece uma
rota alternativa para a sntese de glutamato a partir de amnio e -cetoglutarato. Este sistema foi
chamado via GS-GOGAT (Miflin e Lea, 1977). Amnio inicialmente incorporado em glutamato,
atravs da GS, formando glutamina (O N incorporado est na posio amida da glutamina) e ento

22

transferido, pela ao da GOGAT, para o carbono-alfa do -cetoglutarato, formando duas

molculas de glutamato.
Uma caracterstica tpica da via GS-GOGAT de assimilao de amnio sua natureza
cclica, onde o glutamato ao mesmo tempo substrato e produto da assimilao (Figura 9).

Figura 9. Esquema representativo da Via Glutamina Sintetase-Glutamato sintase (GS-GOGAT)

para a assimilao de amnio. (Fd ox = ferredoxina oxidada e Fd red = Ferredoxina
reduzida)
Aps a descoberta da via GS-GOGAT, verificou-se que a enzima GDH no tinha o papel
principal na assimilao de amnio em plantas superiores (Miflin e Lea, 1977; Kumar e Abrol,
1990; Lancien et al.. 2000).
Diversas evidncias apontam para a Glutamina Sintetase como a principal enzima na
assimilao de amnio pelas plantas:

A Glutamina Sintetase tem menor KM para o NH4+ (KM de 50 M) do que a GDH (KM de
5 a 70 mM), portanto, mesmo em baixas concentraes de NH4+ a GS ativa (Lea e Miflin,
1977);
23

A glutamina o primeiro produto formado quando se usa nitrognio marcado (NH4+ ou

NO3-) (Magalhes et al., 1990);

5.1

Inibidores de GS bloqueiam a assimilao de NH4+.

Glutamina Sintetase (GS)

A enzima glutamina sintetase (GS) incorpora NH4+ formando glutamina, atravs da ligao

do NH4+ ao grupo carboxlico do glutamato, usando energia fornecida pelo ATP:

NH4+ + L-glutamato + ATP L-glutamina + ADP +Pi
A glutamina sintetase de plantas superiores se apresenta como uma protena octomrica
(constituda de 8 subunidades) (Stewart et al., 1980) ou tetramrica (4 subunidades) (Mack, 1998)
ativa.
H duas isoformas de GS: a isoforma GS1 localizada no citossol e a GS2 localizada nos
cloroplastos e outros plastdeos.
Estudos moleculares indicam que a GS1 codificada por uma pequena famlia formada por
dois a cinco genes, enquanto h um nico gene que codifica a GS2 (Ireland e Lea, 1999).
Hirel e Gadal (1980) demonstraram a existncia de trs isoformas de GS em arroz: duas
isoformas foram identificadas nas folhas: GS1 citosslica e GS2 cloroplstica; e nas razes foi
encontrada uma isoforma citosslica denominada GSr. As enzimas GS1 e GSr so codificadas por
dois genes GS1: OsGS1 e OsGSr. Entretanto, aps o sequenciamento do genoma do arroz um
terceiro gene para GS1 foi descoberto (OsGS1;3), o que levou a substituio da nomenclatura
OsGS1, OsGSr para respectivamente OsGS1;1, OsGS1;2 (Ishiyama et al., 2004).
A proporo relativa das isoformas cloroplsticas e citosslicas influenciada por vrios
fatores, inclusive o estgio de desenvolvimento e condies ambientais, tais como luz.

Hirel

et

al. (1982), observaram atividade da GS2 baixa ou ausente em folhas estioladas. Entretanto, quando
o tecido foi se tornando verde, a GS2 aumentou rapidamente, via sntese "de novo", enquanto a GS1
diminuiu. Estes resultados sugerem que a GS2 estaria restrita aos tecidos verdes e que a GS1 estaria
presente de forma mais generalizada, em folhas, razes e sementes.
Foi demonstrado que o amnio produzido durante a fotorespirao reassimilado nos
cloroplastos pela GS2. Wallsgrove et al. (1979) isolaram mutantes de cevada deficientes em GS2
cloroplstica e observaram que esses mutantes acumularam concentraes txicas de amnio
devido fotorespirao, o que enfatiza o papel da GS2 na assimilao do amnio liberado na
24

fotorrespirao. Entretanto, algumas plantas, como o espinafre e o fumo, no contm a GS

citosslica (GS1) (McNally et al., 1983), o que sugere que toda o amnio produzido na clula
vegetal possa ser assimilado pela GS2.

5.2

Glutamato Sintase (GOGAT)

Em plantas existem enzimas glutamato sintase (GOGAT) que podem utilizar NADH
(NADH-GOGAT) ou ferredoxina (Fd-GOGAT) como doadores de eltrons. Ambas as isoformas
promovem a transferncia redutiva do grupo amida da glutamina para o alfa-cetoglutarato,
formando duas molculas de glutamato:
L-glutamina + -cetoglutarato + NADH ou Fdred 2 L-glutamato + NAD+ ou Fdoxid
Uma das duas molculas de glutamato formado pode retornar via GS-GOGAT, enquanto a
outra molcula de glutamato pode ser usada nas reaes biossintticas (Miflin e Lea, 1976) (Figura
9).
Os anticorpos contra NADH-GOGAT no reconhecem Fd-GOGAT e vice-versa indicando
que as duas GOGAT so protenas imunologicamente distintas (Suzuki et al., 1982).
A glutamato sintase (GOGAT) foi detectada em plastdios tanto em razes como em folhas
(Suzuki et al., 1982; Wallsgrove et al., 1979).
Nas folhas, Fd-GOGAT a forma predominante da enzima, encontrada no estroma dos
cloroplastos. Ela especfica para ferredoxina reduzida, e inativa com NADH como doador de
eltrons (Lea e Miflin, 1974; Suzuki e Gadal, 1982). A Fd-GOGAT presente em razes similar,
mas no idntica foliar.
A isoforma NADH-GOGAT est localizada principalmente em tecidos no verdes tais como
razes, ndulos e cotildones em desenvolvimento (Chen et al 1990). Em tecidos verdes NADHGOGAT muito menos ativa que a Fd-GOGAT (Matoh et al., 1980).
A Fd-GOGAT foi a principal forma de glutamato sintase encontrada nas folhas verdes de
arroz (Suzuki e Godal, 1982; Yamaya et al., 1992), enquanto que, alta atividade de NADH-GOGAT
foi detectada em folhas que ainda no tinham emergido e, portanto, no estavam verdes e
expandidas (Yamaya et al., 1992). Entretanto, parece que uma vez atingida a expanso total da
folha, a atividade e o contedo de protena NADH-GOGAT diminuem, sugerindo que a expresso
25

do gene para NADH-GOGAT em folhas de arroz reduzida com a idade da folha e que ocorre
degradao da protena NADH-GOGAT (Yamaya et al., 1992).
Nos cloroplastos a ferredoxina utilizada pela Fd-GOGAT produzida atravs da
fotossntese.

Na raiz a ferredoxina no pode ser reduzida pelas reaes luminosas da fotossntese,

mas sim, por NADH ou NADPH proveniente da oxidao de acares, que por sua vez a mesma
fonte de poder redutor para o NADH-GOGAT (Hageman e Bellow, 1990).

5.3

Glutamato Desidrogenase (GDH)

A enzima Glutamato desidrogenase (GDH) promove a aminao redutiva reversvel do cetoglutarato formando glutamato. Foram detectadas duas isoenzimas da GDH, uma localizada na
mitocndria e dependente de NADH (E.C.1.4.1.2 - NADH-GDH) como doador de eletrons e outra
presente nos cloroplastos que utiliza a coenzima NADPH (E.C.1.4.1.4 - NADPH-GDH). A enzima
mitocondrial est associada membrana da mitocndria. A GDH est presente tanto nas razes
quanto nas folhas, utilizando como doador de eltrons: NADH ou NADPH.
NH4+ + -cetoglutarato + NAD(P)H + H+ L-Glutamato + H2O + NAD(P) +
A afinidade da GDH pelo NH4+ baixa, com Km variando de 5-70 mM, de acordo com a
localizao da enzima no tecido vegetal (Miflin e Lea, 1977). O Km pelo -cetoglutarato de 3,3
mM e pelo glutamato de 7,3 mM, na rota de desaminao.
O maior Km apresentado pela GDH para o amnio em relao a GS (Km = 50 M),
demonstra que a GDH no estaria atuando no sentido da aminao, pois a GS seria a enzima mais
apropriada, devido a sua maior afinidade pelo amnio (menor Km).
Lewis et al. (1983) verificaram que nas razes de cevada os ons NH4+ absorvidos do solo
eram assimilados, exclusivamente, atravs da via GS/GOGAT e que a GDH teria somente um papel
limitado neste processo. Esses reultado indicam que a GDH das plantas superiores seria importante
na reao de desanimao oxidativa do glutamato e no na aminao do -cetoglutarato a
glutamato. Foi observada maior atividade da GS nas regies de crescimento radicular, enquanto
que, a atividade da GDH foi consideravelmente maior nas partes mais velhas da raz (Luxov,1988)
Simpson e Dalling (1981), observaram que durante o perodo de enchimento dos gros, a
atividade da GS e da GOGAT na folha bandeira de arroz diminui. A atividade da GDH permaneceu

26

constante durante o mesmo perodo. No entanto a enzima atingiu um pico de atividade aos 25 dias
aps a antese. Esse pico coincidiu com o perodo do rpido declnio na atividade da GS.
Boggio et al. (2000) observaram em tomate que GS estava presente quase que
exclusivamente nos frutos verdes, enquanto que GDH se encontrava apenas nos frutos mais
maduros, sugerindo um modelo recproco de atividade entre GS e GDH durante o amadurecimento
e senescncia do fruto de tomate.
Aumentos na GDH, no perodo tardio da senescncia foram observados em ptalas de tulipa
senescentes e em folhas destacadas e senescentes de Lolium (Thomas, 1978).
Tem sido observado que GDH a enzima do metabolismo de N que freqentemente atinge
mais alta atividade durante a senescncia (Frith et al., 1978; Ragster e Chrispeels, 1981; Laurire e
Daussand, 1983)
De acordo com Robinson et al. (1992) as mudanas na atividade da GDH, observadas em
folhas senescentes, poderiam estar relacionadas com a diminuio da fotossntese destes tecidos, e,
portanto, ligada disponibilidade de carbono.
Deste modo, como pode ser visto na figura 10, a enzima Glutamato desidrogenase pode
atuar no sentido de:
a) Desaminao: catalisando a oxidao do glutamato a -cetoglutarato e fornecendo assim,
esqueleto de carbono para o ciclo de Krebs;
b) Aminao: incorporando amnio e formando glutamato.

27

Figura 10. Atividade da enzima Glutamato desidrogenase (GDH). Aminao: incorporando amnio
e formando glutamato; Desaminao: catalisando a oxidao do glutamato a -cetoglutarato
liberando amnio.
Em cultura de clulas de cenoura, foi observado que a GDH era ativa na oxidao do
glutamato, mas no na aminao redutiva do -cetoglutarato, que ocorreria somente via
GS/GOGAT (Robinson et al.,1990). Em outro experimento os mesmos autores observaram relao
inversa entre atividade da GDH e o suprimento de carboidrato (sacarose) ao meio de cultura.
Sahulka e Lis (1980) tambm observaram aumento da atividade da GDH em resposta limitao
de sacarose em razes de ervilha.
Estes resultados evidenciam o papel primrio da GDH na desaminao do glutamato.
Fornecendo assim, esqueletos de carbono para que o ciclo de Krebs funcione, sob condies de
limitao de carbono (Srivastava e Singh, 1987; Yamaya e Oaks, 1987; Oaks e Yamaya, 1990;
Robinson et al., 1990; 1992).

28

Sob este ponto de vista, poderia se supor que a chamada "induo da atividade da GDH" por
amnio, observada por diversos autores (Kar e Feierabend, 1984; Jain e Shargool, 1987 Shargool e
Jain, 1987; Srivastava e Singh, 1987), estaria na verdade acontecendo devido diminuio de
esqueletos de carbono e no pelo aumento de amnio no tecido da planta. A GDH est, portanto,
envolvida em uma importante funo anaplertica, unindo o metabolismo do carbono e do
nitrognio nas plantas superiores.

VISO GERAL DO METABOLISMO DE NITROGNIO

O fornecimento de energia ou poder redutor para o funcionamento das enzimas do

metabolismo de nitrognio acopla o metabolismo de N ao de carbono (C) em trs vias (Tabela 1):

Utilizao de esqueletos de carbono: como a GDH ou GOGAT.

Utilizao de doadores de eltrons: como para a NR, NiR, GOGAT e GDH.

Utilizao direta de energia: como a GS.

Tabela 1. Principais enzimas do metabolismo do nitrognio e seus doadores de eltrons ou energia.

Enzima

Reao

Nitrato redutase
(NR)
Nitrito redutase
(NiR)
Glutamina sintetase
(GS)
Glutamato sintase
(GOGAT)
Glutamato desidrogenase
(GDH)

NO3- NO2-

Doador de eltrons
ou energia
NADH
NAD(P)H

NO2- NH4+

Ferredoxina

Glutamato + NH4+ Glutamina

ATP

-cetoglutarato + Glutamina 2 Glutamato

-cetoglutarato + NH4+ Glutamato

Ferredoxina
NADH
NADH
NAD(P)H

Nas folhas essas interaes ocorrem s expensas dos produtos primrios da fotossntese
[ATP, NAD(P)H, Ferredoxina] e competem com a reduo de carbono. Por outro lado, nas razes,
os carboidratos armazenados ou translocados servem como substrato para a produo de energia e
fonte de carbono para a assimilao de N.

29

TOXIDEZ DE NH4+ EM PLANTAS

Vrios estudos demonstram que o NH4+ pode ser txico para as plantas. Algumas plantas
so muito sensveis toxidez por NH4+, mesmo em pequenas concentraes (2 mM). A toxidez de
NH4+ afeta tanto a fisiologia como a morfologia das plantas.
Embora as plantas s vezes consigam metabolizar as grandes quantidades do NH4+, liberadas
pela fotorespirao, sem mostrar sinais da toxidez, a nutrio de plantas com N- NH4+ atravs do
sistema radicular pode afetar negativamente o metabolismo vegetal, quando comparada s plantas
sob nutrio ntrica ou sob uma combinao de NH4+ e NO3-.
A absoro de excesso de NH4+ interfere com o balano de gua nas plantas, reduzindo o
fluxo de gua das razes para a parte area de modo que plantas no tolerantes acabam murchando.
Alguns sintomas de toxidez de NH4+ como folhas secas enroladas podem ser reflexo do aumento da
resistncia ao movimento radial da gua em plantas sob nutrio amoniacal. Os nveis de exudao
em plantas de tomate tratadas com NH4+ sofrem rapidamente uma reduo de at 60% quando
comparadas com plantas sob nutrio ntrica. Alguns dos efeitos da toxidez por NH4+ podem ser
revertidas por NO3-.
Sintomas de deficincia de K foram observados em plantas sob nutrio amoniacal, mas a
concluso foi de que este efeito foi devido a reduo na exudao e no por perda de K nas razes.
Potssio tem uma ao importante na ativao das enzimas de assimilao de N quando o NH4+ est
em nveis txicos nos tecidos das plantas. Plantas de tomate que tinham apresentado leses devido a
absoro de excesso de NH4+ tiveram essas leses inibidas pelo K. A produtividade de milho sob
nutrio amoniacal aumentou com a aplicao de nveis crescentes de K.
Outros sintomas de toxidez de NH4+ podem incluir a clorose, a necrose e at a morte das
plantas. O aparecimento desses sintomas depende da concentrao de NH4+ nos tecidos, da relao
NH4+/ NO3- e da concentrao de outros nutrientes. Em experimento com mistura de NH4+: NO3- o
feijo foi a planta mais severamente afetada pelo aumento da concentrao de NH4+ em relao ao
NO3-. Enquanto que, repolho, melo e milho tiveram o peso seco das folhas reduzido pelo NH4+.
Todas essas plantas apresentam uma reduo no teor de Ca com o aumento nos teores de NH4+.
Para o seu funcionamento as enzimas de assimilao de NH4+ requerem energia, doadores de
eltrons e esqueleto de carbono, para a incorporao do on. Quando se adicionou -cetoglutarato a
plantas de tomates cultivadas sob nutrio amoniacal foi observado aumento no crescimento e nos
teores de aminocidos livres, e reduo nos sintomas de toxidez. A assimilao de NH4+ formando
glutamina pela ao da GS (relao C/N 5:2) ou glutamato pela ao da GDH (relao C/N 5:1)
representa um dreno de esqueletos de carbono.
30

Britto et al. (2001) trabalhando com uma planta mais tolerante ao NH4+ (arroz) e outra mais
sensvel (cevada), identificou na cevada um mecanismo de exudao ativa de NH4+, como uma das
causas provveis da toxidez de N- NH4+. De acordo com esses autores, a cevada, ao contrrio do
arroz, no mostra alta capacidade de regulao do potencial da membrana () com a absoro de
NH4+ (principalmente atravs de mecanismo de alta afinidade (HATS)). Como resultado, cevada
acumula nveis excepcionalmente elevados de N- NH4+ no citossol. Parte deste NH4+ sofreria ento
efluxo, contra a tendncia termodinmica dominante, que seria de fora para dentro. O resultado
desse processo seria um gasto excessivo de energia (aumento de 41% nas taxas de respirao) com
efeitos negativos sobre o metabolismo das plantas, e conseqente reduo do peso. Arroz,
entretanto, mostra um eficiente sistema de controle do potencial da membrana (potencial menos
negativo), e conseqentemente acumula nveis menores de NH4+ no citossol (Wang et al. 1994;
Britto et al. 2001), e nveis mnimos de exudao de NH4+. Este mecanismo poderia ser uma das
razes da tolerncia do arroz ao NH4+.
Devido ao fato da assimilao de NH4+ ocorrer basicamente nas razes, e requerer grandes
quantidades de carboidratos, plantas sob nutrio amoniacal mostram uma reduo na taxa de
crescimento das razes. Quando houve reduo do suprimento de N s razes de milheto crescida em
soluo nutritiva por sete dias, as razes mostraram um aumento de peso 24%, enquanto que
simultaneamente as folhas tiveram uma reduo no peso de 24%. Esta reduo no peso da parte
area das plantas foi atribuda a um redirecionamento dos carboidratos que seriam usados na
assimilao do N uma vez que so necessrio cinco equivalentes de Glicose para a fixao de oito
equivalentes de N.
O acmulo de N-amino e N-amida uma das caractersticas de plantas sob excesso de N
amoniacal. Na presena de elevados nveis de NH4+, asparagina e glutamina podem responder por
mais de 80% do total de N-amino/N-amida livre. O teor de N-amino/N-amida livre pode aumentar
de 10 a 20 vezes como resposta a toxidez do NH4+. Situaes de stresses devido ao excesso de
absoro de N em plantas submetidas a condies desfavorveis de crescimento como baixa luz e
alta temperatura, mudam a composio de N-amino/N-amida em plantas, como pode ser observado
em experimento com arroz (Tabela 2).

31

TABELA 2. Efeitos de baixa luz (17,3 Klux) e alta temperatura (35C) na composio de
aminocidos e razo N-amino e N-amida em plantas de arroz submetidas a dois nveis de
nitrato e amnio (20 e 150mg/L) (Adaptado de Fernandes, 1974).
N-NO3Aminocidos

20 mg N/L

N-NH4+

150 mg N/L

20 mg N/L

150 mg N/L

___________________ % do total ___________________

Aspartato

10,6

5,1

1,4

2,3

Glutamato

25,1

16,3

5,5

5,0

Asparagina

3,9

11,2

26,7

12,5

Glutamina

12,3

21,5

54,7

70,5

Relao
N-Amino/N-amida
Total de aminocidos

5,17

2,06

0,23

0,20

12,80

17,93

124,50

173,00

(moles. g-1 peso fresco)

A acumulao de NH4+ em plantas pode ocorrer tanto devido ao aumento absoluto na

disponibilidade de NH4+, como devido ao aumento relativo do NH4+ como conseqncia de um
dficit de esqueleto de C. Ou seja, a uma deficincia dos cetocidos para sntese de N-amino e Namida. esta sntese de N-amino/N-amina que reduz o excesso de NH4+ livre nos tecidos.
Um dficit de carboidratos pode ocorrer como resultado direto da reduo da fotossntese
devido a queda de radiao fotossintaticamente ativa na superfcie do dossel (como acontece em
dias nublados ou devido ao auto-sombreamento em dossis formado por plantas com excesso de
folhas decumbentes), ou pode ser um efeito indireto devido ao consumo excessivo de C na
respirao (como por exemplo, sob condies de alta temperatura (Britto et al., 2001)). Pode
ocorrer, entretanto, uma combinao negativa de vrios fatores, como nveis elevados de NH4+,
reduo da radiao incidente, temperaturas elevadas (Figura 11).

32

Figura 11. Relaes entre os teores de N-amino e matria seca (A); N-amnio e matria fresca
(B); e N-amino e acares solveis (C) em arroz cultivado com alto nvel de N-NH4+ (150
mg/L). Adaptado de Fernandes (1990).

Em comunidades vegetais formando dossis densos, s vezes apenas a parte superior do

dossel recebe a radiao incidente total e capaz de realizar o seu potencial fotossinttico. Em
situaes como essas, o dossel como um todo pode apresentar nveis elevados de respirao
medida que a temperatura do ar aumenta. O resultado uma situao de estresse devido a
combinao de baixa fotossntese e alta respirao que resulta na queima de nveis elevados de
carboidratos, na absoro de nutrientes devido a energia disponvel atravs da respirao, ao mesmo
tempo em que diversas rotas do metabolismo de N so bloqueadas devido a reduo no suprimento
de esqueletos de C. Isso mostra que na aplicao de fertilizantes nitrogenados devem ser levados em
considerao todos os fatores que afetam a fisiologia das plantas. Sem esse tipo de considerao
pode acontecer que aplicando N na agricultura em nveis que aparentemente seriam considerados
33

adequados pode-se na verdade levar rapidamente a condies de toxidez de NH4+ ou ao acmulo de

excesso de NO3- nos tecidos.

8
8.1

REMOBILIZAO DE NITROGNIO
Senescncia
Grande parte dos nutrientes presentes nas folhas durante o seu desenvolvimento so

transferidos durante a senescncia deste tecido, para os rgos reprodutivos ou em crescimento. A

senescncia culmina com a morte foliar, no entanto esse estgio s atingido aps os processos da
senescncia remobilizarem os nutrientes presentes para outras partes da planta.
Na fase inicial da senescncia principia a hidrlise das protenas cloroplsticas e os
aminocidos liberados podem ser exportados para as regies reprodutivas, como por exemplo, os
gros em desenvolvimento. Os cloroplastos so desmontados no incio da senescncia, enquanto as
mitocndrias permanecem funcionais.
A perda da atividade fotossinttica acontece em paralelo degradao de protenas e RNA
mensageiros, enquanto N, fsforo (P) e outros nutrientes so transferidos das folhas (BuchananWollaston et al., 2003). A remobilizao de N, P, K (potssio) em folhas de Arabidopsis foi de 80%
durante a senescncia (Himmelblau e Amasino, 2001). Em plantas C3 mais de 75% do nitrognio
celular total est localizado nos cloroplastos foliares (Peoples e Dalling, 1988).
As principais substncias cloroplsticas que contribuem para a perda total de protenas
foliares durante a senescncia so a Rubisco e o Complexo coletor de luz pertencente ao
fotossistema II (Matile et al., 1997). O complexo coletor de luz faz parte das membranas tilacides
e formado de protenas e pigmentos, principalmente clorofilas.
A degradao, nos cloroplastos, das protenas das membranas tilacides associadas s
clorofilas requer o simultneo catabolismo das clorofilas. A desmontagem dos complexos
pigmentos-protenas causa a liberao de clorofilas que so potencialmente perigosas, pois podem
causar danos foto-oxidativos. As clorofilas devem ento ser degradadas at formas no reativas
atravs de pelo menos cinco reaes enzimticas (Hstensteiner e Feller, 2002).
Os produtos finais do catabolismo das clorofilas, denominados catablitos de clorofila nofluorescentes, so depositados nos vacolos, sem que ocorra a remobilizao do N presente nessas
molculas (Hinder et al., 1996; Tommasini et al., 1998). Para cada molcula de clorofila quatro
moles de N no so reciclados durante a senescncia.

34

Portanto, o N das clorofilas no exportado das folhas senescentes, permanecendo nas

clulas na forma de catablitos tetrapirrlicos lineares que so produzidos pela abertura do anel
porfirnico decorrente da introduo de oxignio por uma oxigenase. Esses derivados tetrapirrlicos
so ento transportados ativamente atravs de carreadores do tonoplasto e acumulam no vacolo
(Tommasini et al., 1998). Deste modo, a degradao das clorofilas no tem por objetivo mobilizar
nutrientes, mas sim detoxificar os compostos de clorofila altamente reativos que so liberados dos
complexos protenas-pigmentos constituintes das membranas tilacides dos cloroplastos.
Durante a senescncia as enzimas envolvidas na assimilao de N e C so degradadas e os
aminocidos derivados de seu catabolismo so exportados via floema com ou sem modificaes.
A atividade das enzimas envolvidas no metabolismo do nitrognio diminui durante a
senescncia da planta. Em geral, a atividade da nitrato redutase (NR) perdida primeiro, enquanto
que a glutamina sintetase (GS), a glutamato sintase (GOGAT) e a Glutamato desidrogenase (GDH)
permanecem ativas por um perodo mais longo (Storey e Beevers, 1978).
A degradao da Rubisco rpida e serve como fonte de N para o desenvolvimento dos
gros (Mae et al., 1983; 1985; Makino et al., 1984). Em plantas C3, como o arroz, a Rubisco
contribui com cerca de 50% do total de protena solvel das folhas (Feller, 1990).
No processo de remobilizao de N, durante a senescncia, quando as protenas foliares so
degradadas o N liberado na forma de amnio reassimilado e convertido principalmente nas amidas
glutamina e asparagina, que so translocadas para os rgos em desenvolvimento (Ghosh et al.,
1995; Nakasathien et al., 2000).
Apesar do glutamato ser o aminocido presente em maior proporo nas folhas de arroz,
durante a senescncia o teor de glutamato diminui acentuadamente e os nveis de sua amida, a
glutamina, aumentam (Kamachi et al., 1991).
Segundo Hayashi e Chino (1990) a glutamina contribui com 42% do total de aminocidos
presente na seiva do floema de arroz, tornando-se o principal aminocido de transporte durante o
desenvolvimento dos gros.
A glutamina sintetase (GS) a mais provvel enzima para a formao de glutamina, nos
tecidos senescentes (Miflin e Lea, 1977; Oaks e Hirel, 1985). No entanto, como acontece com a
RUBISCO, a atividade da GS tambm diminui durante o perodo reprodutivo (Simpson e Dalling,
1985; Hayashi e Chino, 1990; Kamachi, et al., 1991; 1992; Souza et al., 1999).
Entretanto, como a GS no tecido vegetal est presente em pelo menos duas isoformas: a GS1
localizada no citossol e a GS2 localizada no cloroplasto (Oaks e Hirel, 1985), a queda na atividade
da GS observada durante a senescncia, pode ser atribuda diminuio da isoforma GS2, que
como outras protenas cloroplsticas, sofre hidrlise preferencial durante este perodo. Em
35

cloroplastos isolados observou-se que a GS2 mais suscetvel hidrlise e degrada mais
rapidamente de que a RUBISCO e outras enzimas de assimilao de C (Mitsuhashi e Feller, 1992;
Thoenen e Feller, 1998). A GS1 citosslica, por sua vez, se mantm constante e pode at aumentar
ligeiramente durante a senescncia (Makino et al., 1983; Kamachi et al., 1991; 1992).
A GS1 converte glutamato em glutamina aumentando assim a eficincia de transporte de N,
pois a glutamina carreia dois nitrognios por cinco carbonos.
Em folhas de arroz senescente observa-se que a GS citosslica est predominantemente
localizada nas bainhas vasculares (Sakurai et al., 1996) indicando seu estreito papel para a formao
de compostos para o transporte de N. Yamaya et al. (2002) detectaram imunocitologicamente
protena GS1 citosslica em folhas senescentes de arroz, especificamente em clulas companheiras
importantes para o carregamento do floema. Estes resultados contribuem para caracterizar a
importncia da GS1 para a formao de compostos de N a serem exportados das folhas senescentes.
Segundo pode ser a responsvel pela converso de glutamato e NH4+ em glutamina.
Portanto, a GS1 das folhas senescentes seria a enzima responsvel pela sntese de glutamina, que
por sua vez seria ento Buchanan-Wollaston e Ainsworth (1997), a GS1 citosslica est envolvida
na remobilizao de compostos nitrogenados, pois a expresso de genes que codificam para a GS1
aumenta durante a senescncia. Entretanto, pode haver controle ps-traducional da GS1 por
fosforilao, o que protege a enzima da degradao, e tambm podem ocorrer interaes com
protenas 14-3-3 que aumentam a atividade da GS1 (Finnemann e Schoerring, 2000).
Enquanto a GS1 citosslica permanece ativa por mais tempo a GS2 plastidial perdida nas
folhas de cereais na fase inicial da senescncia juntamente com outras protenas cloroplsticas.
Desta maneira, durante o perodo reprodutivo, apesar da atividade da GS total (GS1 + GS2)
diminuir, a atividade da GS1 remanescente transferida para os tecidos em crescimento. A GS1
citosslica nestas circunstncias envolvida na formao de compostos de transporte, a partir do
catabolismo de protenas.
Como ocorre progressiva deteriorao das funes do cloroplasto durante a senescncia e as
enzimas cloroplsticas como RUBISCO, GS cloroplstica e Fd-GOGAT tambm so degradadas,
parece lgico que o glutamato deixe de ser o principal aminocido de transporte e essa posio
passe glutamina. A glutamina pode transportar mais N, por unidade de C do que o glutamato. Esta
modificao no metabolismo benfica no perodo da senescncia, quando a taxa fotossinttica est
declinando e a produo de esqueletos de carbono limitada. Isto pode acionar outras enzimas,
como a glutamato desidrogenase, para que, atravs de sua funo de desaminao possa suprir, em
parte, esta demanda por esqueletos de carbono (Thomas, 1978; Robinson et al., 1990, 1992).

36

Durante esses processos tem sido observado aumento da atividade da GS1 citosslica,
NADH-GOGAT e GDH, o que sugere a participao dessas isoenzimas na remobilizao do
nitrognio (Hirel, et al. 2001; Lea et al., 1990; Stewart et al., 1980). Alta atividade de GDH est
freqentemente, presente nas razes e folhas senescentes (Srivastava e Singh, 1987; Smirnoff e
Stewart, 1987).

8.2

Enchimento dos Gros

Durante o enchimento dos gros, h duas fontes de N para a planta: o N absorvido do solo e

o N remobilizado dos tecidos vegetativos (Ta e Weiland, 1992).

Inicialmente o N mobilizado das folhas e caules como parte do processo de
envelhecimento (senescncia), mas o N disponvel no solo tambm absorvido. No entanto se esses
dois processos so incapazes de sustentar a demanda de N dos gros, ento ocorre uma acelerao
no processo de senescncia com aumento da remobilizao do N das folhas e em menor extenso do
caule (Borrel e Hammer, 2000).
Durante a fase de enchimento dos gros, os fotossntetatos produzidos so canalizados
primariamente para as sementes em desenvolvimento, sendo o suprimento via razes limitado.
Ta e Weiland (1992) usando 15N para medir a taxa de remobilizao de N, sob condies de
campo, em milho, observaram que as folhas e caules forneceram cerca de 45% do N remobilizado
durante o enchimento dos gros, enquanto as razes contriburam com cerca de 10%.
Portanto, os nutrientes absorvidos atravs das razes no so suficientes para suprir as
necessidades de desenvolvimento dos gros, os nutrientes so ento translocados das folhas para os
rgos em desenvolvimento, ocorrendo a senescncia rpida das folhas.
Desta forma, a reposio de nutrientes poderia manter a taxa de fotossntese por um tempo
maior, e se refletir em aumento da produo de gros. A manuteno do metabolismo das folhas
parece importante para garantir o melhor desenvolvimento dos gros. Del Molino et al. (1989)
observaram em trigo, que aps a antese, os gros so o principal dreno para o N das folhas, portanto
a senescncia foliar que ocorre durante o enchimento do gro, tm grande importncia para a
produo de gros e contedo de protena.
Yang et al. (2000) observaram que fertilizao nitrogenada pesada atrasou a senescncia em
trigo e resultou em lento enchimento do gro e baixo ndice de colheita. Esse atraso na senescncia
pode ser revertido se as plantas forem submetidas durante o estgio tardio de enchimento dos gros
a uma retirada controlada da umidade do solo, que promove assim a remobilizao de assimilados
pr-armazenados para o enchimento dos gros e aumento da produo.
37

Sob condies de estresse abitico tais como seca e deficincia de N, a remobilizao dos
tecidos vegetativos torna-se particularmente importante para o crescimento dos gros (Ta e
Weiland, 1992).
Desde que as folhas contribuem com a maior parte dos substratos nitrogenados para o
desenvolvimento dos gros, o aumento na concentrao total de aminocidos foliares,
particularmente glutamato, aspartato e suas amidas glutamina e asparagina pode ser o responsvel
pelo aumento no contedo de protena nos gros de dois gentipos de soja que receberam 30 mM de
N (Nakasathien et al., 2000).
Barneiz e Guitman (1993) tambm observaram que a biossntese de protena em gros de
trigo substrato-dependente da quantidade de aminocidos presente nas folhas e que o aumento nos
teores de aminocidos foliares poderia intensificar a exportao de aminocidos para os gros.
Segundo Masclaux et al (2000) a taxa de senescncia e remobilizao foliar est relacionada
ao status de N e relao fonte-dreno. Em trabalho com arroz, Souza et al. (1998) observaram que a
taxa diria de perda de N entre a antese e a coleta final da parte area de uma variedade tradicional
Piau (9,94 mg N/dia) foi cerca de duas vezes maior do que a de uma variedade melhorada IAC-47
(4,66 mg N/dia). Para a variedade Piaui o N perdido da parte area correspondeu a 75% do Nacumulado nos gros e na IAC-47 a 42%. De acordo com estes resultados a variedade tradicional
Piau apresenta maior eficincia de remobilizao do N acumulado na planta o que pode indicar um
processo de adaptao a condies de disponibilidade sazonal de N, como acontece nos trpicos. As
plantas de ambas as variedades quando receberam N suplementar durante o enchimento dos gros
tiveram uma taxa diria de perda de N da parte area menor do que o das plantas sem
suplementao nitrogenada, indicando que quando h uma fonte externa de N a planta utiliza menos
de suas reservas vegetativas para o desenvolvimento dos gros.

38

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50

CAPTULO 10
POTSSIO
Egon Jos Meurer
Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Faculdade de Agronomia, Departamento de
Solos. Av. Bento Gonalves, 7712 Agronomia - 90001-970 - Porto Alegre, RS - Brasil Caixa-Postal: 776 - E-mail: egon.meurer@ufrgs.br

SUMRIO

POTSSIO ........................................................................................................... 2
1.1

Forma e modo como o nutriente est presente na rizosfera ................................. 3

1.2

Dinmica da interface solo-planta ........................................................................ 3

1.3

Liberao do potssio no trocvel por ao das razes ....................................... 7

1.4

Disponibilidade do potssio para as plantas na interface solo-planta .................. 8

1.5

Mecanismos de absoro do potssio................................................................. 10

1.5.1 O suprimento do potssio s razes..................................................................... 10

1.5.2 O influxo do potssio.......................................................................................... 13
1.5.3 Predio da absoro de potssio por modelos mecansticos............................. 17

1.6

Transporte e acmulo ......................................................................................... 19

1.7

Efeitos no crescimento........................................................................................ 21

1.8

Toxidez ............................................................................................................... 23
REFERENCIA BIBLIOGRFICA.................................................................... 25

POTSSIO

O potssio o ction mais abundante no vegetal sendo absorvido em grandes

quantidades pelas razes. Tem importante funo no estado energtico da planta, na
translocao e armazenamento de assimilados e na manuteno da gua nos tecidos
vegetais. O potssio no faz parte de nenhuma estrutura ou molculas orgnicas na planta,
como o nitrognio e fsforo que so constituintes de protenas, cidos nuclicos,
fosfolipdios, ATP entre outros. O on K+ encontra-se predominantemente com ction livre
ou como ction adsorvido e pode facilmente ser deslocado das clulas ou dos tecidos
vegetais (Lindhauer, 1985). Esta alta mobilidade nas plantas explica as principais funes
e caractersticas do K+ como o principal ction que atua na neutralizao de cargas e como
o mais importantes e ativo componente inorgnico osmtico (Clarkson & Hanson, 1980). A
alta concentrao do potssio no citoplasma e nos cloroplastos responsvel pela
manuteno do pH das clulas e tecidos entre 7 e 8. Em plantas deficientes em potssio se
o pH cai abaixo de 7 muitos processos na planta podero ser paralisados. O potssio atua
em muitos processos fisiolgicos no vegetal (Marschner, 1995): ativa mais do que 60
sistemas enzimticos (sinteases, oxidoredutases, deidrogenases, transferases, kinases), atua
na fotossntese, favorece um alto estado de energia (necessria para a produo da ATP),
mantm o turgor das clulas, regula a abertura e fechamento dos estmatos, promove a
absoro de gua, regula a translocao de nutrientes na planta, favorece o transporte e
armazenamento de carboidratos, incrementa a absoro do nitrognio e a sntese de
protenas, participa na sntese de amido nas folhas.
2

Estas mltiplas funes do potssio nos processos metablicos resultam em vrios

efeitos positivos nas plantas quando h uma adequada nutrio do potssio (Imas, 1999):
incremento no crescimento das razes, aumento da resistncia s secas, s baixas
temperaturas, resistncia a pragas e molstias, resistncia ao acamamento das plantas e
incremento na nodulao das leguminosas. A adequada nutrio do potssio promove,
tambm, qualitativamente, incremento no teor de protena, de amido nos gros e tubrculos,
na colorao e aroma dos frutos, no teor de vitamina C e de slidos solveis, na reduo de
desordens fisiolgicas. Possibilita, tambm, perodos maiores de armazenamento de
culturas como da banana, tomate, batata, cebola, e outras (Usherwood, 1985; Koo, 1985;
Mengel, 1997).

1.1

Forma e modo como o nutriente est presente na rizosfera

No solo e na regio da rizosfera (volume de solo compreendido numa distncia de

0,1 a 1,5 mm da raiz, em mdia) o potssio pode ser encontrado sob diferentes formas:
como on livre (K+) na soluo do solo, adsorvido como complexo de esfera-externa nos
minerais da argila e na matria orgnica do solo, como complexo de esfera-interna nas
entrecamadas de minerais de argila e fazendo parte da estrutura de minerais primrios
fontes de potssio (Sposito, 1984; Sparks & Huang, 1985).

1.2

Dinmica da interface solo-planta

O on potssio (K+) presente na soluo do solo a forma como as plantas absorvem

esse nutriente. A quantidade de K+ na soluo necessria para o crescimento dos vegetais
depende da espcie e do estdio de crescimento da planta. O teor do potssio na soluo do
solo pode variar desde 1 mg L-1 at 50 mg L-1, ou mais, em solos fertilizados, e depende das
caractersticas qumicas e mineralgicas dos solos.
O on potssio em soluo e o potssio trocvel so, inicialmente, as formas do
elemento prontamente disponveis para as plantas. Solos com alto teor de K-trocvel, pelo
rpido equilbrio com o K-soluo, mantm um alto gradiente de concentrao, o que
favorece a difuso do K+ para junto da superfcie radicular (item 9.3). A relao entre as
quantidades do potssio na forma trocvel e o potssio na soluo (K-trocvel / K-soluo)
denominada de poder tampo de potssio (PTK). uma relao simplificada que
possibilita uma estimativa da quantidade de K-trocvel que necessria na fase slida do
solo para manter determinada concentrao de potssio na soluo. No Quadro 9.1 so
mostrados os teores de K-soluo e de K-trocvel em algumas unidades de solos da regio
sul do Brasil.

Quadro 9.1 Teores de potssio trocvel e de potssio na soluo em solos do Estado do

Rio Grande do Sul fertilizados com potssio ( Meurer, 1991).
Solos

K-trocvel

K-solu
o

mmoles L-1 solo

mmoles L-1 soluo

Argissolo Vermelho Distrfico arnico

0,77

2,38

Latossolo Vermelho Distrfico tpico

1,43

0,62

Argissolo Vermelho-Amarelo alumnico tpico

2,08

0,31

Latossolo Vermelho Distrfico tpico

2,53

0,56

Argissolo Vermelho Distrfico tpico

3,36

0,54

Latossolo Vermelho Auminofrrico tpico

3,01

0,20

Latossolo Vermelho Distrofrrico tpico

4,23

0,24

Latossolo Bruno Dlumnico cmbico

4,49

0,43

Planossolo Hplico Eutrfico vrtico

2,68

0,38

Chernossolo Ebnico Carbontico vrtico

2,67

0,40

Vertissolo Ebnico rtico chernosslico

6,16

0,35

O potssio trocvel, forma prontamente disponvel para as plantas, o que se

encontra adsorvido na forma de complexo de esfera-externa na superficie siloxana de
tetraedros de silcio) dos minerais de argila, na forma de enxame de ons difusveis
neutralizando somente cargas superficiais em minerais silicatados do tipo 2:1, adsorvido
como complexo de superfcie de esfera-externa nos grupos funcionais aluminol e silanol da
caulinita e tambm como complexo de esfera-externa na matria orgnica do solo. O
potssio no trocvel est quimiossorvido na forma de complexo de esfera-interna nas
entrecamadas de argilominerais do tipo 2:1, como na vermiculita, por exemplo, e o que faz
parte da estrutura dos minerais primrios, como os feldspatos de potssio, micas e outros

minerais fontes de potssio em solos ( Greenland & Mott, 1978; Sposito, 1984; Sposito,
1989).
O potssio no trocvel poder estar disponvel para as plantas a curto, mdio e
longo prazos. Diversos trabalhos tm mostrado que em solos intemperizados, como os
brasileiros, o potssio nas formas no trocveis capazes de fornecer quantidades
significativas desse nutriente para as plantas (Oliveira et al., 1971; Mielniczuk & Selbach,
1978, Rosolem et al., 1988; Nachtigall & Vahl, 1991a; Nachtigall & Vahl, 1991b; Rosolem
et al., 1993; Silva & et al., 1995). No Quadro 9.2 so apresentados os resultados obtidos
num desses trabalhos onde se evidencia que a maior parte do potssio absorvido pela
cultura do azevm foi proveniente de formas no trocveis do potssio.
Quadro 9.2 Formas e quantidade de potssio absorvido por azevm perene cultivado em
solos do Estdio do Rio Grande do Sul (Oliveira et al., 1971)
Solos

Latossolo Vermelho
distrofrrico tpico
Latossolo Vermelho
distrofrrico tpico
Latossolo Bruno
alumnico cmbico
Neossolo Litlico
Eutrfico chernosslico
Neossolo
Quartzarnico rtico
tpico
Neossolo Flvico
Argissolo Vermelho
distrfico latosslico

Material
origem

Ktotal

Basalto

1.960

Basalto

4.560

45

400

445

Basalto

2.600

44

412

456

Basalto

6.400

313

427

740

Sedimentos
Costeiros

2.080

13

257

270

Sedimentos
Aluviais
Arenitoargilito

12.000

122

426

548

14.200

17

442

459

K absorvido pelo azevm (1)

do K-trocvel do K- no
Total
trocvel
17
399
416

(1) em sete cortes

6

Vrios estudos foram conduzidos para quantificar a liberao de potssio das

fraes granulomtricas dos solos (K-no trocvel). Em solos arenosos Sadusky et al.
(1987) e Parker et al. (1989) observaram que a frao areia de solos da plancie da costa
atlntica dos Estados Unidos teve importncia na liberao de potssio para as plantas,
tendo o nutriente sido liberado de feldspatos contidos nestes solos. Meurer et al. (1996)
relatam que 76% do teor total de potssio de um Latossolo Vermelho Distrofrrico tpico
do Estado do Rio Grande do Sul estava contido na frao argila; o teor de K-no trocvel
correspondeu a 12% do K-total e se encontrava na quase totalidade (84%) na frao argila
desse Latossolo.
1.3

Liberao do potssio no trocvel por ao das razes

As razes pela absoro de nutrientes e liberao de exsudatos criam o seu redor

uma rea (rizosfera) cujas caractersticas qumicas e biolgicas so bastante distintas da

massa de solo distante da raiz (fora da rizosfera). A absoro pelas razes exaure o Ksoluo (Niebes et al., 1993) e o K-trocvel rizofrico (Kuchenbuch & Jungk, 1982),
porm, sem alterar o teor de potssio do solo no rizosfrico. A exausto do potssio junto
a superfcie radicular origina um gradiente de concentrao que provoca a liberao de Kno trocvel (Hinsinger et al., 1992; Hinsinger et al., 1993; Hinsinger & Jaillard, 1993),
podendo induzir, inclusive, a transformao de minerais aps curtos perodos de cultivo.
Kuchenbuch (1985) verificou que em solo deficiente em potssio o K-no trocvel
contribuiu com 85% do total absorvido por plantas de colza com sete dias de idade e que a
baixa concentrao de K+ na soluo do solo provocou liberao de potssio da mica
presente na rizosfera do solo. Niebes et al. (1993) constataram que aps oito dias de cultivo,
ocorreu acentuada diminuio do teor de potssio em fraes granulomtricas na rizosfera
7

de plantas de Brassica napus cv Drakkar. Hissinger et al. (1993) constataram que os

exsudatos dessa mesma espcie induziram transformao irreversvel da mica flogopita em
vermiculita. Segundo os autores, o provvel mecanismo que induziu a transformao foi a
excreo de prtons que diminuiu o pH da rizosfera causando a dissoluo do mineral.
Silva et al., (1995) em dois Latossolos do Estado do Paran constataram que o potssio
trocvel no foi a nica fonte do nutriente para as plantas de soja. Nos dois Latossolos
identificaram minerais micceos nas fraes silte e argila e argilominerais 2:1HE na frao
argila que poderiam estar associados a liberao do K-no trocvel. Melo et al. (2004)
estudando a distribuio da reserva de K e Mg nas diferentes classes da frao areia de
solos do Tringulo Mineiro e o potencial de liberao de formas no-trocveis e estruturais
destes nutrientes para as plantas, verificaram que solos com teores totais elevados de K e
Mg na frao areia, geralmente, apresentaram maior capacidade de liberao de parte
desses nutrientes para a soluo do solo. A frao areia dos solos originados de arenito da
Formao Uberaba e de migmatito/micaxisto do Grupo Arax apresentaram as maiores
reservas e liberao de K e Mg. Kuchenbuch (1985) afirmou que a contribuio do K-no
trocvel no suprimento do nutriente s razes a freqente razo das relaes pouco
significativas encontradas entre os resultados das anlises convencionais de solo e o
rendimento das plantas e entre estas e as adubaes potssicas.

1.4

Disponibilidade do potssio para as plantas na interface solo-planta

No Brasil o potssio extravel (K-trocvel + K-soluo) pelas solues de Mehlich 1

(HCl 0,05 mol L-1 + H2SO4 0,0125 mol L-1) ou por acetato de amnio 1 mol L-1 tamponado
a pH 7, so os ndices mais utilizados pelos laboratrios de anlises de solos para avaliar a

disponibilidade deste nutriente para as plantas. Como a dinmica de disponibilidade do

potssio na rizosfera bem diferente daquela que ocorre no solo como um todo, o ndice Kextravel, isoladamente, no tem se mostrado adequado para estimar a disponibilidade deste
nutriente para as plantas (Grimme & Nemeth, 1979; Ritchey, 1982). o que confirmam
as pesquisas de Silva & Meurer (1988) e de Meurer & Anghinoni (1993) em solos com
diferentes caractersticas mineralgicas, qumicas e fsicas, derivados de argilito, siltito,
arenito, basalto e granito. Os resultados destes trabalhos mostraram que o K-trocvel
somente em 59% e 52% dos casos se relacionou com o potssio absorvido por plantas de
trigo e de sorgo, respectivamente (Figura 9.1).

Silva & Meurer (1988) e Meurer &

Anghinoni (1993) tambm constataram que a predio da disponibilidade do potssio para

as plantas pde ser significativamente melhorada pela discriminao dos solos segundo sua
capacidade de troca de ctions (CTC). Este procedimento j foi adotado nas recomendaes
de adubao potssica para solos do Cerrado brasileiro (Sousa & Lobato, 2002 e para solos
dos Estados de Santa Catarina e Rio Grande do Sul (Sociedade, 2004).
A avaliao da capacidade de suprimento das formas do potssio no trocvel para
as plantas tem sido feita com a utilizao do HNO3 1mol L-1 fervente (Pratt, 1973), H2SO4
concentrado (Hunter & Pratt, 1957) e pelo tetrafenilborato de sdio (Shulte & Corey, 1965)
ou por cultivos sucessivos (Oliveira et al., 1971; Crisostomo e Castro, 1970; Mielnizcuk &
Selbach, 1978). Nachtigal & Vahl (1991a), em pesquisa com 44 amostras de solos da
regio sul do Estado do Rio Grande do Sul, encontraram que a capacidade de suprimento de
potssio dos solos, medida pela extrao do K em cultivos sucessivos, correlacionou-se
significativamente com o K extravel pelo do HNO3 1mol L-1 fervente e com o K-trocvel.

POTSSIO ABSORVIDO, mmol vaso-1

5
Y = 0,27 + 0,58 Ktroc

R2 = 0,518

3
2
1
0
0

POTSSIO TROCVEL, mmol L

5
-1

Figura 9.1 Relao entre o potssio extrado por acetato de amnio 1 mol L-1 e o potssio
absorvido por plantas de sorgo aos 18 dias de idade em onze amostras de solos do
Estado do Rio Grande do Sul, derivados de argilito, siltito, arenito, basalto e granito,
fertilizados com oito nveis de potssio (Meurer & Anghinoni, 1993).
1.5
1.5.1

Mecanismos de absoro do potssio

O suprimento do potssio s razes
As plantas absorvem o on K+ da soluo do solo e para que a absoro

efetivamente ocorra necessrio que o nutriente entre em ntimo contato com a superfcie
da raiz.

A difuso e o fluxo de massa so os principais mecanismos de transporte

(suprimento) do K+ da soluo do solo at a superfcie radicular (Barber, 1995).

suprimento por fluxo de massa depende da quantidade de gua transpirada pela planta e do
teor do K+ na soluo do solo. A difuso, que o principal mecanismo de suprimento do
potssio s razes, ocorre em resposta a um gradiente resultante das diferenas de
concentrao do K+ entre a superfcie da raiz e a rizosfera. A difuso do potssio para as
razes limitada rizosfera, isto , distncias muito curtas da superfcie da raiz,
usualmente em torno de 1 a 4 mm.
10

Vargas et al. (1983) verificaram, em amostras de 12 unidades de solos com

diferentes caractersticas qumicas, fsicas e mineralgicas, que o mecanismo de difuso
supriu, na mdia, cerca de 90% da quantidade do potssio que foi absorvido por plantas de
milho. Ruiz et al., (1999) e Rosolem et al. (2003) tambm constataram que a difuso foi o
principal mecanismo de suprimento de potssio s razes de milheto e de plantas de arroz,
respectivamente.
A equao (simplificada) a seguir descreve a quantidade de nutriente que chega
superfcie radicular (Corey & Schulte, 1993; Anghinoni & Meurer, 2004):

dq / dt = D 2 A f [(C1 C2) / L]
onde:
dq / dt

a quantidade do nutriente que chega superfcie radicular na unidade

de tempo (segundo),

coeficiente de difuso do nutriente na gua; para o on K o valor de D

de aproximadamente 1,98 x 10-5 cm2 s-1,

teor de gua volumtrica do solo

fator tortuosidade; o caminho efetivo que o on deve percorrer no

solo at alcanar a superfcie da raiz. Est relacionado textura: em
solos muito argilosos, por exemplo, o caminho do on at a superfcie
da raiz mais tortuoso. Afeta o fator L descrito abaixo.

rea superficial das razes

C1

concentrao do nutriente na soluo do solo a uma distncia L da

raiz,

C2

concentrao do nutriente na superfcie da raz,

distncia entre C1 e C2 que pode variar de 0,4 a 4,0 mm,

11

Esta equao mostra que a quantidade do on que chega superfcie da raiz depende
do coeficiente de difuso desse on no solo, da tortuosidade do caminho difusivo, do teor de
gua volumtrica no solo, da rea superficial das razes e do gradiente de concentrao.
O fator A, rea superficial das razes, alm de depender das caractersticas fsicas e
qumicas do solo, dependente de caractersticas da prpria planta. Plantas que apresentam
sistema radicular extenso, com muitas razes finas, possuem uma grande rea radicular (A)
para a absoro dos nutrientes. Qualquer fator que impea o desenvolvimento das razes,
como a presena de substncias txicas, como o alumnio livre na soluo do solo,
deficincia de oxignio, compactao do solo, necessariamente diminuir a taxa de difuso
de nutrientes at s razes (Corey & Shulte, 1993).
Solos que mantm um gradiente de concentrao (C2 C1) alto podem suprir maior
quantidade do nutriente por difuso. Quanto maior for a concentrao do nutriente na
soluo solo e maior a capacidade da planta de absorv-lo, mantendo baixa a concentrao
na superfcie da raiz, maior ser a taxa de difuso (Barber, 1995).
A aplicao direta a campo da equao que descreve a quantidade de nutriente que
chega superfcie radicular pode apresentar alguma dificuldade para determinao de
algumas variveis da equao. Entretanto pode-se observar ou inferir o efeito de alguns
atributos e propriedades dos solos que podem afetar a absoro dos nutrientes.

Por

exemplo, solos argilosos possuem maior capacidade de reter a gua (fator 2) do que solos
arenosos, o que favorece a difuso dos nutrientes. Solos que apresentam propriedades
fsicas que no apresentem impedimentos mecnicos para o desenvolvimento do sistema
radicular, aumentam o termo A, o que favorece a absoro dos elementos nutrientes das
plantas.

12

1.5.2

O influxo do potssio
A taxa de absoro do potssio pela planta por unidade de superfcie radicular

denominada de influxo de entrada de potssio (In). O influxo de entrada aumenta com a

concentrao do K na soluo do solo at que um mximo alcanado (Barber, 1982;
Barber, 1995). Na Figura 9.2 mostra-se a relao entre o influxo de entrada e a

-2
-1
INFLUXO DE K, umol cm raiz s x 10E-05

concentrao de K em soluo em plantas de sorgo aos 18 dias de idade.

1,8

I max

1,6
1,4
1,2
1,0
0,8

Imax = 1,59E-05 umol L-1

0,6

Km = 12,07 umol L-1

0,4

Cmin = 1,02 umol L-1

Km

0,2
0,0
0

50

100

150

200
-1

K SOLUO, mmoles L

Figura 9.2. Influxo de potssio por plantas de sorgo aos 18 dias de idade em funo da
concentrao de potssio na soluo, descrita pela cintica de Michaelis-Menten
(Meurer &Anghinoni, 1999)

Barber (1995) prefere usar o ndice Imax, ao invs de Vmax (parmetro original da
cintica enzimtica), para descrever o influxo de nutrientes nas razes das plantas, onde foi
acrescentado o parmetro Cmin equao de Michaelis-Menten para caracterizar a

13

concentrao do nutriente na soluo externa onde o influxo liquido torna-se zero (In = 0).
Assim, o influxo liquido (In) do on descrito por (Barber, 1995):

In

Imax ( C1 Cmin )
Km ( C1 Cmin )

Onde:
In

fluxo de entrada do potssio

I max

valor mximo do influxo

concentrao do potssio na soluo

C min

concentrao do potssio na souo abaixo da qual o fluxo

cessa
Km

constante de Michaelis-Menten correponde ao valor de C quando

I = Imax. Km representa a afinidade (associao) do on
pelos

transportadores

(carregadores)

atravs

da

membrana

plasmtica. Quanto menor o valor de Km, maior a afinidade do

carregador pelo on.
No modelo cooperativo proposto por Hodges (1973), para explicar a dinmica da
absoro, o carregador de ons consiste de vrias subunidades e existe uma interao entre
estas sub-unidades que responsvel pelo decrscimo da afinidade pelos ons quando a
concentrao da soluo externa aumenta. O modelo tambm sugere que a variao do
campo eltrico dos stios de ligao dos carregadores a responsvel pela seletividade da
absoro de ons pela raz. A respirao aerbica fornece a energia necessria para a
absoro dos ons pela raiz e a ATP parece ser a fonte primria de energia para a absoro.
Estudos recentes no campo do transporte de solutos atravs da membrana plasmtica
demonstraram a existncia de canais, como uma descoberta revolucionria nesse campo
14

(Schauf, 1987).

Nissen (1991) sugere que o transporte dos ons seria feito por

transportadores que apresentam a capacidade de adquirirem formas variadas. Nessa

estrutura, h um stio de transio que fica exposto somente na parte externa do
transportador e, por conseguinte, em contato com a soluo externa. Esse sensor seria o
responsvel por induzir as mudanas conformacionais da estrutura protica transportadora.
Sob baixas concentraes, o transportador apresenta forma de transporte individual, de alta
afinidade. Em condies de altas concentraes a estrutura transportadora adquire forma de
canal, adquirindo caractersticas de alto influxo e baixa afinidade e seletividade.
Os valores de Imax, Km e Cmin so determinados experimentalmente com plantas
crescendo em soluo nutritiva, determinando-se a cintica de absoro pela taxa de
exausto da soluo em relao a sua concentrao inicial de potssio Esses ndices
caracterizam os parmetros cinticos de absoro dos nutrientes e variam acentuadamente
entre espcies, e mesmo, entre gentipos da mesma espcie, e esto associados eficincia
da absoro. Os programas de melhoramento devem selecionar espcies ou gentipos que
apresentem valores elevados para Imax e valores baixos para Km e Cmin.
Fatores inerentes prpria planta, como idade da raz, idade da planta, fatores de
natureza qumica e fsica, como interaes ou antagonismo entre ons, teor de oxignio na
rizosfera, temperatura, entre outros, podem afetar significativamente a absoro do potssio
pelas razes das plantas. As plantas mais jovens so mais eficientes do que as mais velhas
para absorver os nutrientes (Becker & Meurer, 1986). As taxas de absoro para todos os
nutrientes decrescem rapidamente com a idade da planta. Assim, razes jovens numa planta
mais velha no absorvem os nutrientes na mesma taxa que razes jovens numa planta
jovem. A idade da raiz, ou o perodo que permanecem ativas tambm afeta o influxo dos
ons. A idade da raiz aumenta com o seu crescimento, assim, nas extremidades das razes
15

que se localizam as clulas mais jovens. Diversos autores tentaram estimar a idade efetiva
da raiz, isto o tempo que permanecem ativas para a absoro. Em geral os estudos
realizados indicam que possivelmente a raz permanece ativa por 5 a 8 dias (Barber, 1995).
Nos Quadros 9.3 e 9.4 pode ser observado como a presena de outros nutrientes na
soluo, as diferenas na capacidade de absoro entre gentipos e a idade da plantas,
afetam o influxo de potssio pelas plantas.

Quadro 9.3 Prametros cinticos de absoro de potssio por dois gentipos de arroz
submetidos a trs tratamentos: A) soluo nutritiva normal; B) soluo normal +
100 mg L-1 de Fe2+ e C) soluo com 100 mg L-1 de Fe2+ e baixas concentraes de
Ca e Mg (Vahl et al., 1993)
Gentipo

Tratamento

Imax
0moles min-1 m-1

Km

Cmin

:moles L-1 de soluo

de raiz

EEA 406

BR IRGA 409

1,29

9,28

1,18

0,80

14,67

4,48

0,68

20,50

7,84

0,78

8,64

1,68

0,45

21,20

11,92

0,30

27,10

17,50

DMS 5%

0,50

4,16

7,47

16

Quadro 9.4 Parmetros cinticos de absoro de K+, de quatro cultivares de soja

submetidos a dois nveis do nutriente na soluo de crescimento, aos 20, 40 e 60
dias aps a transferncia para a soluo de crescimento (Sacramento e Rosolem,
1998)

Nveis de K (mmol L-1)

Cultivares

1,82

0,50

1,82

Vmax

0,50

1,82

Km

mol g-1 h-1

0,50
Cmin

mol L-1
20 dias

IAC 17

170,70

62,76

117,03

20,64

29,68

3,66

IAC 18

165,52

57,46

140,60

18,18

63,53

3,66

FT 2

42,56

112,93

94,11

21,80

24,41

4,33

IAC 11

240,42

64,06

136,69

19,39

28,59

4,67

40 dias
IAC 17

6,19

22,57

79,26

35,07

32,97

2,10

IAC 18

9,75

20,04

149,97

53,74

69,53

2,99

FT 2

30,06

27,71

129,70

29,70

21,72

1,71

IAC 11

10,01

31,71

136,33

58,95

102,02

2,55

60 dias
IAC 17

9,97

20,52

103,14

71,84

14,70

1,65

IAC 18

4,94

9,59

128,78

39,73

24,70

1,65

FT 2

11,25

32,35

134,15

40,09

34,36

1,65

IAC 11

7,37

15,58

104,94

36,75

35,70

1,65

1.5.3

Predio da absoro de potssio por modelos mecansticos

A absoro dos nutrientes funo da demanda pela planta e da capacidade de

suprimento do solo. Diversos modelos matemticos foram desenvolvidos com o objetivo de

17

simular a interao dinmica entre estes dois processos e so baseados essencialmente nos
mesmos princpios. Os modelos predizem a absoro integrando o suprimento potencial do
solo por difuso e fluxo de massa com o tamanho, morfologia e taxa de crescimento do
sistema radicular e com a cintica de absoro do nutriente pela raiz. Quando o modelo
descreve adequadamente a absoro ele pode ser utilizado para determinar o importncia
relativa de cada parmetro na absoro, o que pode proporcionar um entendimento mais
fundamental da dinmica de disponibilidade dos nutrientes no solo e dos fatores que a
afetam (Barber, 1995). Meurer & Anghinoni (1994) utilizaram o modelo mecanstico
desenvolvido por Barber & Cushman (1981) para avaliar a disponibilidade de potssio em
oito solos com diferentes caractersticas mineralgicas e difusivas e submetidos a diferentes
doses de adubao potssica. O modelo estimou satisfatoriamente a absoro do potssio,
nesses solos para plantas de sorgo (Figura 9.3). O modelo subestimou a absoro em
situaes em que ocorreu liberao de potssio de formas no trocveis. Mas foi muito
mais eficaz que na situao em que a predio da disponibilidade do potssio para as
plantas foi realizada utilizando-se somente o ndice K-trocvel como apresentado na Figura
9.1.
O modelo foi til para efetivao de testes de sensibilidade como parmetros de solo
(concentrao inicial de K na soluo, poder tampo e coeficiente de difuso de potssio no
solo), morfolgicos de raiz da planta (raio mdio das razes, meia-distncia entre elas,
comprimento inicial e taxa de crescimento e taxa de absoro de gua) e de solo (Imax,
Km, Cmin) podem afetar a absoro do potssio. Os resultados mostraram que entre os
parmetros de solo testados os que mais afetaram a absoro do K foram o teor de gua
volumtrica e o teor inicial de potssio na soluo do solo; dos parmetros morfolgicos de

18

planta o que mais afetou a absoro foi a taxa de crescimento das razes, que afeta

ABSORO PREDITA, mmoles vaso

-1

diretamente a rea efetiva para a absoro.

4
Y = 0,083 + 0,874 X
2
R = 0,800
3

0
0

POTSSIO ABSORVIDO, mmol vaso-1

Figura 9.3 Relao entre o potssio absorvido por plantas de sorgo aos 18 dias de idade e a
absoro predita pelo modelo de Barber-Cushman, em oito amostras de solos do
Estado do Rio Grande do Sul com diferentes caractersticas mineralgicas e
difusivas (Meurer & Anghinoni, 1994).

1.6

Transporte e acmulo
O potssio um elemento muito mvel na planta; tem alta mobilidade intracelular e

nos tecidos, translocando-se dos mais velhos para os mais novos, e no transporte longa
distncia via xilema e floema. O potssio participa ou ativa processos em diversos
compartimentos da planta. Est presente em altas concentraes no citossol e cloroplastos
(100-200 mM), neutralizando nions solveis de cidos orgnicos e inorgnicos, nions
insolveis e estabilizando o pH entre 7-8 nesses compartimentos, considerado como timo

19

para muitas reaes enzimticas. Em outros compartimentos as concentraes do K+ so

variveis, como nos vacolos e clulas guardas dos estomatos. A concentrao do potssio
no floema tambm alta; como os solutos no floema podem ser transportados para as
partes superiores e inferiores da plantas, o transporte do K+ longa distncia na planta
ocorre com facilidade. Os rgos das plantas preferencialmente supridos pelo floema so
as folhas novas, os tecidos meristemticos e os frutos frescos, e, que apresentam, assim, alta
concentrao em potssio (Mengel & Kirkby, 1987; Marschner, 1995).

Nos estgios

iniciais de crescimento das plantas os teores de potssio nas plantas so mais elevados
(Quadro 9.5), decrescendo nos estdios mais avanados devido a menor atividade da raiz e
ao menor nvel do elemento metabolicamente absorvido ( Fageria, 1982)

Quadro 9.5 Teores de potssio na planta de arroz durante vrios estgios de crescimento
(Fageria, 1982)

Estdio de crescimento

Teor de K %
Arroz de sequeiro

Arroz irrigado

inicio do perfilhamento

3,50

2,74

perfilhamento ativo

3,21

2,18

formao do primrdio floral

2,67

2,20

diferenciao da pancula

2,48

1,78

elongamento da pancula

2,10

1,53

enchimento do gro

1,79

1,40

colheita

2,00

2,21

(emborrachamento)

As necessidade de potssio para o timo crescimento das plantas situam-se na faixa

de 2-5% da massa seca das partes vegetativas da planta, frutas frescas e tubrculos.
20

Entretanto, as plantas tm a capacidade de absorver quantidades de potssio superiores s

suas necessidades, o que comumente denominado de consumo de luxo de potssio.
O primeiro sintoma visvel de deficincia de potssio nas plantas a clorose em
manchas ou marginal, que, ento evolui para necrose, principalmente nos pices foliares,
nas margens e entre nervuras. Em muitas monocotildneas, essas leses necrticas podem
formar-se inicialmente nos pices foliares e margens, e, ento, estender-se em direo a
base.
Como o potssio pode ser remobilizado para as folhas mais jovens, os sintomas de
deficincia aparecem inicialmente nas folhas mais maduras da base da planta. As folhas
podem tambm, curvar-se e secar. Os caules de plantas deficientes em potssio podem ser
delgados e fracos, com regies internodais anormalmente curtas (Taiz & Zeiger, 2004).

1.7

Efeitos no crescimento
O potssio elemento essencial para o crescimento, desenvolvimento e maturao

dos gros e frutos dos vegetais. Quando os solos apresentam baixos teores do nutriente as
plantas respondem adubao potssica. Pesquisas realizadas em solos brasileiros no tm
apresentado acentuadas respostas fertilizao com esse nutriente. Isso deve-se,
provavelmente, a fatores como teores de potssio prontamente disponveis s plantas em
quantidades adequadas no solo, a presena de minerais fontes de potssio, contribuio de
formas no trocveis do elemento, entre outros. No Quadro 9.6 apresenta-se a resposta de
plantas de soja doses crescentes de potssio em solos do Estado de So Paulo, onde podese observar que embora tenha havido resposta da cultura ao potssio, os incrementos no

21

so notveis. Resultados semelhantes so relatados em diversos trabalhos conduzidos em

solos brasileiros ( Muzilli, 1982).

Quadro 9.6 Efeitos de doses crescentes de potssio na cultura da soja, em 41 ensaios

instalados em Latossolo Roxo no Estado de So Paulo, agrupados segundo o uso
anterior (Miyasaka et al., 1970).

Agrupamento segundo uso da rea

Doses de K2O

adubada

kg ha-1

nunca adubada

rendimento de soja kg ha-1

(%)

(%)

1.743

( 92)

1.553

(87)

30

1.883

(100)

1.689

(95)

60

1.875

( 99)

1.717

(100)

90

1.883

(100)

1.777

(100)

Em solos cultivados com arroz irrigado por alagamento no Estado do Rio Grande do
Sul esta cultura apresenta alta produtividade. Entretanto, na maior parte dos experimentos
realizados no se obteve resposta adubao potssica, mesmo quando as anlises dos
solos indicavam baixos teores de potssio prontamente disponveis nesses solos. Pesquisas
conduzidas por Castilhos &Meurer (2001), Castilhos &Meurer (2002), e por Castilhos et
al., (2002), mostraram que a principal razo da ausncia de reposta adubao potssica foi
a presena de minerais fontes de potssio nesses solos.

22

1.8

Toxidez
No se tem conhecimento de toxidez de potssio em plantas, apesar deste nutriente

ser absorvido por muitas espcies em quantidades superiores s necessrias (consumo de

luxo). Entretanto o excesso de potssio pode interferir, positiva ou negativamente, na
absoro de outros ctions pelos vegetais, considerando que a taxa de absoro de um on
pode ser afetada por outro on, desde que estejam competindo diretamente pelo mesmo stio
no carregador. O teor de potssio na planta aumenta a taxa de absoro de nitrato, e pode
inibir as de clcio e magnsio (Marschner, 1995). Duarte & Anderson (1983) relatam que o
K inibiu a atividade de bactrias anaerbias utilizadas em processos de degradao
anaerbica de efluentes de esgotos.
Um exemplo clssico de antagonismo entre ons o efeito depressivo do potssio
sobre o magnsio. O incremento da concentrao do potssio na soluo tem um efeito
depressivo na absoro do magnsio, enquanto o inverso no ocorre (Fonseca & Meurer,
1997). Na figura 9.3 observa-se que a absoro do magnsio da soluo por plantas de
milho aos 18 dias de idade, foi muito baixa, mesmo quando a concentrao de potssio na
soluo foi baixa. A absoro do magnsio efetivamente passou a ocorrer quando a
concentrao do potssio na soluo foi igual ao Cmin para este nutriente. Observa-se,
tambm na Figura 9.3, que concentraes maiores do que 30 moles L-1 de magnsio na
soluo no afetaram a absoro do potssio pelas plantas de milho.

23

K NA SOLUO EXTERNA, mmol m-3

32

160
Mg
120

24

80

16
K
8

40

0
0

50

100

150

200

250

Mg NA SOLUO EXTERNA, mol m-3

40

200

0
300

TEMPO, minutos

Figura 9.4. Exausto de potsssio e de magnsio da soluo por plantas de milho aos 18
dias de idade (Fonseca & Meurer, 1997).

Indiretamente o potssio pode ter um efeito prejudicial sobre as plantas. Silva et al.,
(2001) relatam que a aplicao de potssio afetou o crescimento radicular de Capsicum

annuum, devido ao efeito salino do KCl sobre as razes. O fertilizante comercial mais
utilizado para suprir as plantas o KCl que alm do elevado teor de K (50-52% de K),
contm tambm cloro (47%), que tambm nutriente das plantas (Tisdale et al., 1993).
Porm, a aplicao de altas doses de KCl podem afetar o crescimento das plantas por
toxicidade do cloro. O fertilizante KCl no recomendado para a cultura do tabaco, que
apresenta alta suscetibilidade ao Cl- ; igualmente, deve ser evitado na fertilizao de
culturas como a da batatinha, batata-doce e citrus que tambm so suscetveis ao cloro.

24

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35

CAPTULO 11
FSFORO
Adelson Paulo Arajo(1) & Cynthia Torres de Toledo Machado(2)
(1) Professor do Departamento de Solos, UFRRJ, CEP 23890-000, Seropdica, RJ. (2)
Pesquisadora da Embrapa Cerrados, Caixa Postal 08223, CEP 73310-970, Planaltina, DF.

SUMRIO
1

Introduo................................................................................................................................. 2
1.1

Formas de fsforo no solo................................................................................................. 2

1.2

Absoro de fsforo pela membrana celular..................................................................... 3

Caracteres radiculares associados absoro de fsforo ......................................................... 7

2.1

Controle metablico da absoro de fsforo................................................................... 11

Associaes com microrganismos ......................................................................................... 14

3.1

Mudanas na rizosfera..................................................................................................... 17

3.2

Formas de fsforo na planta............................................................................................ 18

3.3

Transporte de fsforo na planta....................................................................................... 21

3.4

Interaes do fsforo com outros nutrientes ................................................................... 24

3.5

3.4.1

A interao entre fsforo e nitrognio ............................................................... 24

3.4.2

O fsforo e a fixao biolgica de N2 ................................................................ 26

A interao entre fsforo e zinco .................................................................................... 27

Efeitos do fsforo no crescimento vegetal ............................................................................. 29

REFERENCIA BIBLIOGRFICA........................................................................................ 33

INTRODUO
O fsforo participa de vrios processos metablicos em plantas, como a transferncia de

energia, sntese de , fotossntese e respiraosimbitica . Entretanto, a interao do P com

constituintes do solo como Al, Fe e Ca, sua ocorrncia em formas orgnicas, e suas lentas taxas de
difuso na soluo do solo, tornam o P o nutriente menos prontamente disponvel na rizosfera.
Mesmo quando so aplicados fertilizantes, a maior parte do P adicionado adsorvido em colides
do solo e torna-se no disponvel em compostos de baixa solubilidade, sem propiciar uma
contribuio imediata para a produo vegetal. Alm disto, o suprimento mundial de P para
fabricao de fertilizantes origina-se de depsitos minerais, constituindo um recurso natural no
renovvel, exigindo um aproveitamento consciente deste nutriente para garantir a sustentabilidade
da agricultura em um futuro prximo da humanidade.

1.1

Formas de fsforo no solo

O P constitui cerca de 0,12 % da crosta terrestre, sendo que as maiores reservas de P na

crosta esto em sedimentos marinhos, solos terrestres, fosfato inorgnico dissolvido no oceano e
rochas com minerais como apatita (Stevenson & Cole, 1999). Apesar de existirem na natureza mais
de 200 minerais de P, apenas o grupo das apatitas tem significao quantitativa. Em escala
geolgica, o intemperismo liberou P das apatitas, que foi absorvido pelas plantas e reciclado,
incorporado na matria orgnica dos solos e sedimentos, ou precipitado como minerais pouco
solveis de Ca, Fe e Al (Stevenson & Cole, 1999).
O contedo total de P nos solos est entre 0,02 e 0,5 %, mas apenas uma pequena frao est
em formas disponveis para os vegetais. O P no solo pode ser dividido em quatro amplas categorias:
P na forma inica e em compostos na soluo do solo, P adsorvido na superfcie dos constituintes
minerais do solo, minerais cristalinos e amorfos de P, e P componente da matria orgnica (Barber,
1984). As concentraes de fosfato na soluo do solo so usualmente muito baixas, variando entre
2

0,1 e 10 M. Os valores de pK para dissociao do H3PO4 em H2PO4- e HPO4-2 so de,

respectivamente, 2,1 e 7,2, ou seja, abaixo de pH 6 a maior parte do P da soluo do solo est na
forma de H2PO4-, usualmente denominada de Pi. Os teores de P orgnico nos solos podem variar
desde quase zero at mais de 0,2 %, e dependendo da classe de solo o P orgnico pode representar
de 20 a 80 % do P total do solo (Stevenson & Cole, 1999). A liberao de P orgnico para a soluo
do solo controlada pela taxa de mineralizao da matria orgnica e depende da atividade
microbiana (Barber, 1984).
Como a taxa de difuso de fosfato no solo muito baixa (10-12 a 10-15 m2 s-1), a rpida
absoro vegetal cria uma zona de depleo de P em volta da raiz, e os ons se difundem por
gradiente de potencial qumico at a superfcie radicular (Rausch & Bucher, 2002). Aps poucos
dias de absoro, a concentrao de P na rizosfera pode reduzir-se de 30 a 50 %, e a zona de
depleo estender-se at cerca de 2 mm da superfcie radicular (Jungk, 1987). O coeficiente de
difuso do fosfato funo da umidade do solo, tornando seu movimento mais difcil em solos com
baixos teores de umidade.

1.2

Absoro de fsforo pela membrana celular

Com base nos teores de nutrientes usuais em plantas jovens adequadamente nutridas, a razo

entre o influxo timo de N, P e K em razes seria de 1:0,1:1; entretanto, na maior parte dos solos
frteis, a razo entre os teores disponveis de N, P e K na rizosfera de 1:0,001:1, respectivamente
(Gahoonia & Nielsen, 2004). Portanto, a baixa concentrao de P disponvel nos solos exige um
mecanismo de absoro bastante eficiente. As plantas adquirem P contra um elevado gradiente de
concentrao atravs da membrana plasmtica: as concentraes de Pi nas clulas vegetais so
geralmente mais de 100 vezes superiores (da ordem de mM) s concentraes na soluo do solo
(da ordem de M) (Raghothama, 2000). Isto, em conjunto com a carga negativa dentro da clula,

exige que seja gerado um forte gradiente eletroqumico para que o transporte do fosfato para dentro
da clula seja possvel (Smith, 2002). A fonte de energia livre para este transporte provm da bomba
de extruso de prtons atravs da plasmalema, em que ATPases efetuam o transporte de H+ para
fora da clula, gerando tanto diferena de potencial eltrico (interior negativo), quanto diferena de
pH (exterior cido) (Glass, 1990; Figura 1). As taxas de absoro de P so maiores entre pH 4,5 e
6,0 na soluo, onde a forma H2PO4- predominante, indicando que o P preferencialmente
absorvido como H2PO4- (Sentenac & Grignon, 1985). A despolarizao da plasmalema aps a
absoro de P indica que o H2PO4- deve ser absorvido atravs de um simporte com ctions,
principalmente H+ (Schachtman et al., 1998).

Pi

Pi

PL
AS
M

AL
EM

EFLUXO Pi

VACOLO

H+

ATP

TO
NO
PL
AST

ADP

Pi

CITOPLASMA
+

Pi
+

PPi

Pi

BAIXA
AFINIDADE

ALTA
AFINIDADE

Figura 1: Transporte de fosfato atravs da plasmalema e do tonoplasto. ATPases na plasmalema e no

tonoplasto provem a energia para conduzir os processos de transporte de Pi. Os mecanismos de
efluxo contribuem para manter a homeostase nas clulas. O transporte de Pi no tonoplasto bidirecional (adaptado de Raghothama, 2000).

Estudos de cintica demonstram que as plantas possuem tanto transportadores de baixa

quanto de alta afinidade pelo fosfato: os sistemas de baixa afinidade tm Km variando entre 50 e
300 M, enquanto os sistemas de alta afinidade apresentam Km entre 2 e 10 M, mas diante das
concentraes usuais de fosfato nos solos cultivados (1-10 M), os transportadores de alta afinidade
que mediam a absoro de P (Vance at al., 2003). Os transportadores de fosfato de alta afinidade,
cujos genes codificadores j foram identificados em plantas, so protenas com cerca de 58 kDa e
525-550 aminocidos, que contm regies hidrofbicas transversas membrana celular,
constitudas de 12 domnios separados em dois grupos de 6 domnios por uma regio de alta carga
hidroflica (Smith, 2002; Vance et al., 2003; Figura 2). Os genes codificadores dos transportadores
de fosfato de alta afinidade so expressos preferencialmente em razes de plantas sob deficincia de
P, e algumas destas indues gnicas esto diretamente envolvidas no aumento da disponibilidade
de P na rizosfera e na promoo de sua absoro (Raghothama, 2000).
5

NH2

DENTRO

FORA

Figura 2: Topologia estimada de transportadores de alta afinidade de fosfato em membranas vegetais

(Vance et al., 2003).

O Pi move-se do crtex ao cilindro central das razes principalmente pelo simplasto, a uma
taxa aparente de 2 mm h-1, taxa que pode ser atingida apenas pela difuso, mas provvel que o
fluxo transpiratrio tambm contribua com este movimento (Bieleski, 1973). Aps sua absoro no
simplasma radicular, o Pi encontra cinco possveis destinos: (i) ingressa no compartimento
metablico (citoplasma celular e suas organelas), onde a maior assimilao de Pi em compostos
orgnicos ocorre via formao de uma ligao anidrida no ATP; (ii) uma pequena frao de Pi
ingressa nas vias biossintticas de P-lipdio, DNA e RNA, tornando-se um componente estrutural da
clula; (iii) uma quantidade varivel de Pi perdida pela clula via efluxo, particularmente em
condies de alto suprimento de P; (iv) ocorre o influxo e armazenamento de Pi no vacolo para
regular a homeostase de Pi no interior da clula; (v) o Pi transportado simplasticamente para as
clulas do parnquima do xilema, e posteriormente secretado no apoplasto do xilema para o
transporte a longa distncia para os tecidos da parte area (Rausch & Bucher, 2002).

CARACTERES RADICULARES ASSOCIADOS ABSORO DE FSFORO

Sistemas radiculares mais extensos aumentam a rea de contato entre as razes e o solo, e

para ons pouco mveis como o fosfato, a absoro freqentemente relacionada com o
comprimento radicular. As plantas cultivadas, que usualmente apresentam elevadas taxas de
crescimento, requerem a contnua explorao de novos volumes de solo ainda no exauridos pela
absoro radicular. A morfologia radicular apresenta grandes variaes entre espcies, e ao menos
parte desta variao est sob controle gentico, apesar de existir considervel plasticidade fenotpica
em muitas espcies, pois a morfologia radicular muito sensvel s propriedades qumicas e fsicas
do solo (OToole & Bland, 1987).
Quando alguns nutrientes limitam o crescimento vegetal, em particular o N e o P, as razes
transformam-se em forte dreno de carboidratos, causando uma maior limitao ao crescimento da
parte area do que da raiz, o que aumenta a razo entre a massa de raiz e de parte area. Razes de
plantas de feijoeiro (Phaseolus vulgaris L.) crescidas em um meio deficiente em P apresentaram
concentraes de acares muito superiores a razes de plantas em meio com adequado suprimento
de P, em virtude da maior translocao de fotoassimilados da parte area (Wanke et al., 1998). A
reduo da taxa de crescimento da parte area ocorre logo aps o incio da deficincia de P,
enquanto o crescimento da raiz s limitado aps um maior intervalo de tempo, e com menos
intensidade (Fredeen et al., 1989). Todavia, a maior destinao de C s razes sob baixo P, tanto
para produo de biomassa quanto para respirao de manuteno, pode constituir fator limitante ao
crescimento vegetal como um todo (Nielsen et al., 1998). Alm disto, os custos em termos de P
podem ser relativamente maiores para a produo de razes do que de folhas, pois as razes
apresentam uma pequena remobilizao de P para o restante da planta durante os processos
associados senescncia (Lynch & Brown, 2001).
A distribuio radicular, relacionada presena de biomassa ou comprimento de razes em
um gradiente do perfil do solo, indica a capacidade do sistema radicular de explorao de diferentes
7

camadas do solo. Plantas de soja (Glycine max (L.) Merr.) apresentam baixa densidade radicular,
monocotiledneas anuais valores mdios, e pastagens perenes grande densidade de razes (Barber,
1984). A distribuio radicular modificada pelo estdio de crescimento: aos 47 dias da
emergncia, 2/3 da rea radicular de gentipos de milho (Zea mays L.) estava concentrada na
camada superficial do solo, e 3 semanas aps este valor era inferior a 50 % (Schenk & Barber,
1980), enquanto mais de 80 % da biomassa radicular de cultivares de soja estava concentrada nos
7,5 cm superficiais do solo no incio do cultivo, e nos 15 cm superficiais no restante do ciclo
(Mitchell & Russell, 1971). Observa-se maior crescimento de razes nas profundidades do solo que
recebem adubao fosfatada, e medida que se aprofunda a aplicao do fertilizante, ocorre
aumento na biomassa de razes (Chaib et al., 1984).
A arquitetura radicular relaciona-se configurao espacial do sistema radicular, ou seja,
geometria de desenvolvimento dos eixos radiculares (Lynch, 1995). Modelos de simulao
indicaram que a maior eficincia de explorao do solo est associada com uma arquitetura
radicular do tipo espinha de peixe, onde a ramificao ocorre predominantemente no eixo
principal; entretanto, esta hiptese foi confirmada em eudicotiledneas, mas no em gramneas
(Fitter & Stickland, 1991). Uma estratgia adaptativa tambm observada em plantas crescidas em
solos com baixo P consiste na reduo do ngulo de crescimento de razes basais, em relao ao
plano horizontal, o que aumentaria a explorao de camadas superficiais do solo (Bonser et al.,
1996; Figura 3).

+P

-P
MAIS RAZES ADVENTICIAS
RAZES BASAIS MAIS
SUPERFICIAIS
RAZES LATERAIS MAIS
DISPERSAS

SOLO
SUPERFICIAL

SUBSOLO
MAIS RAZES
LATERAIS
NA PIVOTANTE

PLOS MAIS LONGOS

E DENSOS

Figura 3: Modificao na arquitetura radicular pela disponibilidade de P no solo: a baixa disponibilidade de

P ( direita) estimula a produo de razes adventcias, diminui o ngulo de crescimento das razes
basais, estimula a produo de razes laterais, e aumenta a densidade e o comprimento de plos
radiculares (adaptado de Lynch & Brown, 2001).

A morfologia radicular refere-se s caractersticas de um eixo radicular individual, incluindo

propriedades da epiderme e plos radiculares (Lynch, 1995). O dimetro radicular est associado ao
volume de solo que pode ser explorado pelas razes atravs do investimento de uma determinada
quantidade de fotoassimilados, pois razes mais finas podem explorar um maior volume de solo por
unidade de massa radicular. Sob condies de baixo suprimento de P, comum observar-se uma
diminuio do raio radicular, e um sistema radicular com razes finas poderia ser considerado mais
eficiente para absoro de P, mas no devem ser ignorados outros atributos funcionais de razes
mais grossas em determinadas condies ambientais (Eissenstat, 1992). Alm disto, o custo de
manuteno de razes finas pode ser maior, pois estas razes so repostas mais freqentemente

(Gahoonia & Nielsen, 2004). Em conseqncia da aplicao de fertilizantes e da presena de P

orgnico, comum a ocorrncia de variaes espaciais na concentrao de P nos solos, acarretando
modificaes na morfologia radicular. Nas partes de razes de cevada (Hordeum vulgare L.) que
receberam P da soluo nutritiva, ocorreu um incremento do nmero e extenso de razes laterais
(Drew & Saker, 1978), e razes de feijoeiro crescidas sob baixo teor de P alocaram mais biomassa e
produziram razes laterais mais finas em um determinado volume do solo enriquecido com P,
quando comparadas a plantas originalmente crescidas sob alto teor de P (Snapp et al., 1995).
Os plos radiculares aumentam a eficincia com que as razes exploram a rizosfera para
absoro de P: em virtude de seu pequeno raio e de seu crescimento perpendicular em relao ao
eixo radicular, a concentrao de P na superfcie do plo radicular decresce mais lentamente e o
influxo de P mantm-se mais elevado (Barber, 1984). Sob baixo suprimento de P, ocorre um
aumento no comprimento e na densidade de plos radiculares (Figura 3), que por sua vez est
associado a um aumento no nmero de clulas da epiderme radicular que se diferenciam em
triclobastos (Lpez-Bucio et al., 2003). Entre todas as alternativas de aumentar a superfcie
radicular, as mudanas na morfologia de plos radiculares so consideradas aquelas com menor
custo metablico (Gahoonia & Nielsen, 2004). O nmero, comprimento e raio dos plos radiculares
podem apresentar considervel variao entre espcies e dentro de uma mesma espcie (LpezBucio et al., 2003).
Algumas espcies vegetais adaptadas a habitats de fertilidade extremamente baixa podem
desenvolver estruturas especializadas, as razes proteides (ou cluster roots), que so agrupamentos
de razes laterais curtas que emergem do periciclo, especializadas na aquisio de P (Lpez-Bucio et
al., 2003). As razes proteides apresentam vrias caractersticas distintivas das razes laterais
tpicas de eudicotiledneas, como a iniciao em grupamentos no aleatrios, a produo
superabundante de plos radiculares, e um crescimento determinado que cessa logo aps a
emergncia (Vance et al., 2003). O elevado sincronismo do desenvolvimento das razes proteides
10

indica que sua formao um processo sob estreito controle da planta, sendo inibido sob alto
suprimento de P (Vance et al., 2003).

2.1

Controle metablico da absoro de fsforo

Vrios mecanismos foram desenvolvidos pelas plantas para permitir a aquisio e utilizao

de P em ambientes onde o suprimento deste nutriente limitante, mecanismos estes que podem ser
agrupados em duas amplas categorias: aqueles que aumentam o contedo de nutriente absorvido do
solo, e aqueles que afetam a eficincia vegetal em utilizar o nutriente absorvido para a produo de
biomassa (Elliott & Luchli, 1985). Os processos que propiciam o aumento da absoro de P
incluem o maior crescimento radicular associado a mudanas na arquitetura radicular, a expanso da
superfcie radicular atravs da proliferao de plos radiculares e da associao com fungos
micorrzicos, a maior produo e excreo de fosfatases, a exsudao de cidos orgnicos, e um
estmulo expresso dos transportadores de P (Vance et al., 2003). J os processos que conservam o
P absorvido envolvem a reduo na taxa de crescimento, a maior produo de biomassa por unidade
de P absorvido, a remobilizao do P interno, modificaes no metabolismo de C que contornem as
etapas que requerem P, e a utilizao de vias respiratrias alternativas (Vance et al., 2003).
As plantas provavelmente possuem dois diferentes mecanismos sinalizadores para manter a
homeostase de P, um operando a nvel celular, e outro envolvendo mltiplos rgos e
provavelmente oriundo da parte area (Raghothama, 2000). A nvel celular, o movimento de Pi para
dentro e fora do vacolo, e a regulao do influxo e efluxo de P, seriam os principais mecanismos
para manter a homeostase (Figura 1). J a resposta ao nvel da planta inteira muito mais complexa,
envolvendo o transporte de P dos tecidos velhos para os jovens, ou das razes para a parte area e
retornando s razes (Raghothama, 2000). Estudos em razes subdivididas indicam que as taxas de
absoro de P por razes crescidas em meio sem P respondem ao estado geral de P da planta, mais
do que concentrao externa localizada de P adjacente a esta seo das razes (Smith, 2002). Isto
11

tem sido confirmado por estudos moleculares, que indicam que a regulao transcricional dos genes
codificadores dos transportadores de P respondem primeiramente ao estado de P da planta inteira.
Desta forma, a regulao da absoro de P em razes uma resposta sistmica mais do que uma
resposta localizada (Smith, 2002).
Em clulas de plantas superiores, a concentrao de Pi no citoplasma (da ordem de mM)
mantida geralmente em um nvel constante sob diferentes nveis de fornecimento de P, enquanto a
concentrao de Pi no vacolo modifica-se substancialmente de forma a tamponar o Pi
citoplasmtico, permitindo a regulagem de etapas metablicas no citoplasma e nos cloroplastos
(Rausch & Bucher, 2002). O vacolo age como um reservatrio no metablico de P: em folhas de
plantas adequadamente supridas de P, cerca de 85 a 95 % do Pi est localizado nos vacolos,
enquanto em condies de deficincia, muito pouco Pi est presente no vacolo (Foyer & Spencer,
1986). O transporte de Pi atravs do tonoplasto requer ATP e alcalinizao do citoplasma, e o fluxo
bidirecional de Pi atravs do tonoplasto ocorre quando a concentrao de Pi alta no vacolo, no
citoplasma, ou em ambos (Raghothama, 2000; Figura 1).
H vrias evidncias de que muitos dos processos bioqumicos e fisiolgicos, e das
mudanas morfolgicas que ocorrem em resposta deficincia de P, esto associados com
alteraes da expresso gnica (Raghothama, 2000). Os transportadores de fosfato, as fosfatases, as
enzimas envolvidas na sntese de cidos orgnicos, e os canais inicos que facilitam a liberao de
cidos orgnicos, so exemplos de protenas codificadas por genes cuja expresso induzida pela
deficincia de P (Raghothama, 2000). Alguns hormnios vegetais, como auxinas, etileno e
citocininas, podem estar envolvidos na modificao da arquitetura radicular, no desenvolvimento de
razes laterais, na elongamento de plos radiculares, e na formao de razes proteides, em
condies de deficincia de P (Vance et al., 2003). J quando as plantas absorvem P em taxas que
excedem a demanda de crescimento, alguns processos atuam para prevenir a acumulao de nveis

12

txicos de P, como a converso de Pi em compostos de reserva (como o cido ftico), a reduo da

taxa de absoro de Pi da soluo do solo, ou a perda de Pi por efluxo (Schachtman et al., 1998).
Apesar das recentes evidncias sobre a expresso gnica durante a deficincia de P, pouco
ainda se sabe sobre os componentes do processo de sinalizao que ativaria a resposta das plantas
limitao de P. Porm, em um mutante de Arabidopsis foi identificado um gene que codifica uma
protena que pode estar associada ao processo de sinalizao da deficincia de P (Lpez-Bucio et
al., 2003).
A concentrao de P na parte area teria um papel central na regulao da taxa de absoro
de P por unidade de raiz, na partio de biomassa entre raiz e parte area e na taxa de crescimento
relativo da planta (Drew & Saker, 1978). Plantas crescidas sob fornecimento limitado de P, e
posteriormente supridas com o nutriente, apresentam influxos de P superiores aos de plantas
originalmente crescidas sob alto fornecimento de P (Jungk et al., 1990). As plantas adaptam sua
cintica de absoro de P de acordo com seu estado nutricional, por meio de um aumento de Imax
com a reduo do teor de P na parte area, enquanto as mudanas no Km e Cmin seriam de menor
importncia (Jungk et al., 1990).
Em geral, a taxa de absoro de nutrientes pelas razes diminui com a ontogenia vegetal
(Gao et al., 1998). Em sistemas radiculares jovens, a taxa de absoro de nutrientes diminuiu
acentuadamente com o envelhecimento das razes, mas sistemas radiculares mais velhos tiveram
pequena taxa de absoro, mas com menor declnio com o tempo (Gao et al., 1998). Partes
suberizadas do sistema radicular podem assumir importante papel na absoro de P, pois como a
absoro de P segue a via simplstica, seria pouco afetada pela suberizao da endoderme (Barber,
1984). Os genes codificadores dos transportadores de Pi de alta afinidade esto distribudos por todo
o comprimento radicular de plantas sob deficincia de P, indicando que todo o sistema radicular
mantm o potencial para absoro de P (Raghothama, 2000).

13

Quando o Pi est presente em concentraes adequadas, altas taxas de efluxo de P podem

compensar o influxo de P, indicando que sob adequado suprimento de P a homeostase celular
controlada principalmente pelo efluxo de P (Raghothama, 2000). O efluxo de P em razes ocorreria
pelo antiporte e troca inica nos stios de absoro, e pelo efluxo passivo por um gradiente de
potencial eletroqumico, e pode atingir valores equivalentes a 15-20 % do influxo de P no mesmo
perodo (Schjorring & Jensn, 1984).
3

ASSOCIAES COM MICRORGANISMOS

Enquanto habitantes da rizosfera e do solo como um todo, os microrganismos desempenham

funes primordiais no aumento da disponibilidade do P do solo para as plantas, atravs de

mecanismos que afetam a estrutura, a qumica, a bioqumica e a fisiologia do ambiente radicular.
Dentre essas aes dos organismos, destacam-se a extenso dos sistemas radiculares pelas
associaes com os fungos micorrzicos e a solubilizao e mineralizao microbianas do P por
algumas bactrias e fungos.
As micorrizas so associaes ou simbioses mutualistas entre fungos e razes das plantas
hospedeiras, em que os compostos de carbono produzidos pela fotossntese so utilizados pelo
hospedeiro e pelo fungo, e este ltimo fornece s plantas parte dos nutrientes absorvidos do solo.
Existem sete tipos distintos de associaes micorrzicas, mas as micorrizas arbusculares e as
ectomicorrizas so as mais freqentes e as mais importantes (Moreira & Siqueira, 2002). As
ectomicorrizas predominam em espcies arbreas das gimnospermas e angiospermas de clima
temperado, sendo bastante comuns em conferas. Os fungos formadores desse tipo de micorriza so
os basidiomicetos e alguns ascomicetos e ficomicetos (Harley, 1994). Nas ectomicorrizas, a
colonizao das clulas corticais acontece de forma intercelular apenas, com a formao da rede de
Hartig, que substitui a lamela mdia, e com a formao de um manto fngico ao redor das razes
(Moreira & Siqueira, 2002).

14

A micorriza arbuscular , provavelmente, a simbiose mais comum entre plantas e

microrganismos. A grande maioria das plantas terrestres so hospedeiras potenciais de fungos
micorrzicos arbusculares, que constituem um grupo de fungos biotrficos obrigatrios altamente
especializados, classificados como zigomicetos e pertencentes ordem Glomales. Quando
colonizam as clulas das razes, muitas das espcies destes fungos formam vesculas, rgos de
armazenamento que contm grande quantidade de lipdeos, e todas as espcies formam arbsculos,
estruturas constitudas por formaes de hifas altamente ramificadas que promovem as trocas
metablicas entre os fungos e as plantas (Bonfante-Fasolo, 1984).
A simbiose micorrzica considerada no especfica, uma vez que os fungos colonizam as
razes de plantas de quase todos os gneros das gimnospermas e angiospermas, alm de algumas
brifitas e pteridfitas (Harley, 1994). Todavia, tanto o desenvolvimento da associao como sua
fisiologia esto sobre controle gentico do hospedeiro (Smith et al., 1993), verificando-se uma certa
habilidade discriminatria entre os fungos e as plantas (Paula et al., 1988). Alguns atributos das
plantas, como o comprimento e massa de razes e a relao entre a massa de raiz e de parte area,
tambm afetam a simbiose micorrzica (Koide et al., 1988). Fatores ambientais tambm podem
influenciar a colonizao, como a disponibilidade de nutrientes, os pesticidas, a umidade do solo, o
pH e a intensidade luminosa (Azcn & Ocampo, 1981).
A colonizao pelos fungos micorrzicos arbusculares promove a tolerncia a estresses
biticos ou abiticos, aumentando o crescimento e a produtividade das plantas. Enquanto as plantas
fornecem carboidratos aos fungos, estes colonizam inter e intracelularmente as clulas corticais, de
onde estendem uma rede de hifas vrios centmetros para fora da rizosfera, desta forma expandindo
o volume de solo efetivamente explorado pela planta (Smith, 2002). Da os efeitos mais expressivos
da simbiose quando se considera a aquisio de nutrientes em formas pouco mveis, como o P, o Zn
e o nitrognio na forma amoniacal. A aquisio de P pelas associaes micorrzicas envolve o
transporte do fosfato da soluo do solo atravs das membranas das hifas fngicas, o movimento do
15

fosfato das hifas para os arbsculos, a liberao de fosfato dos fungos na interface entre os
arbsculos e as clulas corticais, e a absoro do fosfato pelas clulas corticais (Smith, 2002). Os
vrios mecanismos propostos para explicar o aumento da absoro de P das plantas micorrizadas
foram agrupados por Smith & Read (1997) da seguinte forma:
As hifas dos fungos micorrzicos so capazes de absorver o P da soluo do solo e transloclo para as razes em um processo muito mais rpido que o processo de difuso deste elemento no
solo, sendo capazes de transpor as zonas de depleo de P que se formam em volta das razes;
(a) a produo de hifas envolve um menor consumo de carbono por unidade de comprimento ou
rea de absoro, e seu menor dimetro permite que elas penetrem em poros do solo de dimetro
menor que as razes, aumentando assim o volume de solo explorado;
(b) as hifas so mais efetivas, em conseqncia de seu tamanho e distribuio espacial, em
competir com os microrganismos de vida livre do solo pelo P recentemente mineralizado ou
solubilizado;
(c) a cintica de absoro de P nas hifas difere da apresentada pelas razes, com valores mais
baixos de Km, possibilitando uma absoro mais efetiva de P em concentraes nas quais a
aquisio pelas razes j tenha cessado;
(d) razes micorrizadas podem usar fontes de P que no estejam disponveis para as demais
razes.
Embora a simbiose micorrzica constitua um mecanismo adaptativo que permite maximizar
a aquisio de P com um consumo de energia menor que a prpria produo de razes, o custo de
manuteno da simbiose micorrzica aprecivel, representando cerca de 5 a 10 % da fotossntese
total em endomicorrizas (Clarkson, 1985). O benefcio obtido com a colonizao micorrzica varia
com o suprimento de P: quando o P extremamente limitante, o crescimento dos simbiontes
inibido; quando a disponibilidade de P baixa, ocorre o aumento do crescimento do hospedeiro; em
doses maiores de P, a proliferao do fungo pode ocorrer s custas do hospedeiro (Bethlenfalvay et
16

al., 1982b). Em geral observa-se aumento na colonizao das razes quando as concentraes de P
no solo e nas razes so baixas, e um efeito adverso da fertilizao fosfatada no desenvolvimento de
arbsculos, vesculas, hifas externas e esporos (Sylvia & Neal, 1990). A simbiose micorrzica
tambm causa estmulos fixao biolgica de N2 em leguminosas, principalmente em virtude da
maior absoro de P (Barea & Azcn-Aguilar, 1983).
A simbiose micorrzica apresenta interaes com o desenvolvimento ontogentico do
hospedeiro, em virtude das alteraes no suprimento de fotoassimilados causadas por relaes
fonte-dreno (Bethlenfalvay et al., 1982a; Arajo et al., 1996). Pela sua importncia no processo de
absoro do P do solo, de se esperar que o efeito da colonizao pelos fungos micorrzicos seja
mais expressivo nos estdios iniciais do crescimento das plantas, quando a demanda por P intensa.
Entretanto, a infeco micorrzica tambm pode afetar a reproduo das plantas, influenciando a
produo de flores, maturao de frutos e aborto de sementes (Lu & Koide, 1994). Parece haver
uma relao entre o incio da fase reprodutiva de leguminosas de gro e a reduo do crescimento
do endfito micorrzico, pois as micorrizas utilizaram 17 % do total de fotoassimilados de plantas
de soja de 6 semanas, valor que decaiu para 8 % aps 9 semanas (Harris et al., 1985), (captulo 3
neste volume).
3.1

Mudanas na rizosfera
Mudanas do pH no solo ao redor das razes esto associadas ao balano na absoro de

ctions e nions, que particularmente afetado pelas fontes de N: como as plantas necessitam
manter o equilbrio de cargas e o pH no interior das clulas prximo da neutralidade, quando mais
ctions so absorvidos, mais H+ so liberados pelas razes e o pH decresce; similarmente, quando
mais nions so absorvidos, h um aumento de OH- e o pH aumenta (Hinsinger et al., 2003). Plantas
que absorvem N como NO3- tendem a aumentar o pH da rizosfera, enquanto plantas que absorvem
NH4+ ou utilizam N2 simbitico reduzem este pH, acarretando diferenas de 1-2 unidades de pH

17

entre a rizosfera e o solo, que podem se estender a uma distncia entre 1 e 4 mm da superfcie
radicular (Gahoonia et al., 1992). A extruso de prtons na rizosfera pode aumentar a
disponibilidade de fontes pouco solveis de P do solo e a absoro de P pelas razes, mas este
fenmeno pode depender do tipo de solo: em um Luvisol, onde o fosfato estava ligado
principalmente a Ca, a reduo do pH da rizosfera aumentou a absoro de P, enquanto em um
Oxisol, onde o P estava ligado principalmente a Al e Fe, a absoro de P foi maior nos tratamentos
com fertilizao nitrogenada que promoveram aumento do pH (Gahoonia et al., 1992).
A exsudao de cidos orgnicos por razes, como os cidos ctrico, oxlico e mlico, tem
sido associada com a acidificao da rizosfera, e poderia beneficiar a absoro de P (Hinsinger et
al., 2003). Algumas razes de plantas eudicotiledneas, e especialmente plantas no micorrizadas,
so capazes de liberar grandes quantidades de cidos orgnicos na rizosfera em resposta
deficincia de P (Jones, 1998). A exsudao de quelatos de clulas da epiderme radicular tambm
foi proposta como uma estratgia para aumentar a absoro de P, atravs da solubilizao de
fosfatos de Fe e Al (Ae & Otani, 1997).
Os tecidos vegetais contm uma alta atividade de fosfatases, uma classe de enzimas com
considervel heterogeneidade quanto sua funo e cintica, e que quando liberadas no meio
externo podem hidrolisar P-ster para Pi, aumentando a absoro de P de formas orgnicas (Yan et
al., 2001). A baixa disponibilidade de P aumenta a secreo de fosfatases cidas na rizosfera de
vrias espcies vegetais, indicando ser a secreo de fosfatases determinada pelo requerimento de P
da planta (Yan et al., 2001).

3.2

Formas de fsforo na planta

De forma diferente do nitrato e do sulfato, o fosfato no reduzido nas plantas, sendo

utilizado apenas na sua forma completamente oxidada de ortofosfato. Aps sua absoro, o fosfato
permanece como Pi, ou esterificado por meio de um grupo hidroxil em uma cadeia de C como um
18

ster simples de fosfato (como em um acar fosfato) ou preso a outro fosfato por ligaes
pirofosfato de alta energia (como no ATP) (Marschner, 1995). Em pH neutro, o fosfato ocorre tanto
como um nion mono quanto divalente, contribuindo com a capacidade tampo da clula (Clarkson
& Hanson, 1980). Nas clulas vegetais, o P pode estar presente nos nucleotdeos constituintes do
material gentico, nos fosfolipdeos presentes nas membranas celulares, nos fosfatos de adenosina
como o ATP e o ADP, e em steres de carboidratos, produtos metablicos intermedirios (Figura 4).
Uma razo tpica de 0,2:2:1,5:1 entre as formas orgnicas de P DNA, RNA, P-lipdio e P-ster,
respectivamente, observada nas clulas vegetais (Bieleski, 1973). J em sementes, o P acumula-se
preferencialmente como fosfatos de inositol, na forma de sais de cido ftico (ou fitina) (Figura 4).

19

(a)

O
C

CH2

O
R

P-

H2 C

CH3
CH3

H2
C

N+

C
H2

O
(b)
-O
O

CH3
Purinas

NH2
O

PO P
-O

Base

7
8

O -O O

N
2 ligao glicosdica

HO

(OH - Ribose)
(H - desoxiribose)
Pentose

1N
2

5
4

7
8

R
Adenina

Nucleotdeo trifosfato

R
Citosina

O
O

P
O

O
O

HC

OCH2

4
1

3N
2

H3C

5
6

OH
O

P
HO

O
H

OH

P
O

O
OH

H
OH

dR
Timina

P
OH

3N
2

OH

HO

R
Uracil

NH2

N
C

5
6

(d)
CH

3N
2

N
Guanina

NH2
5
6

NH2

1N
2

Pirimidinas

Nucleotdeo difosfato

(c)

5
4

Nucleosdeo
Nucleotdeo monofosfato

P
O OH
OH

OH

OH O
P

OH

OH

Figura 4: Exemplos de compostos orgnicos com P em plantas: (a) lecitina (fosfatidil colina, um
fosfolipdeo); (b) nucleotdeos; (c) trifosfato de adenosina (ATP); (d) cido ftico (hexafosfato de
inositol).

20

O P no DNA fortemente segregado, e de um outro lado da escala esto os grupos do ATP,

com alto turn over na clula (Bieleski, 1973). Em cevada, todas as fraes de P aumentaram com o
maior suprimento de P, mas em diferentes extenses (Pi > P-nuclico > P-lipdio > P-ster),
revelando que todas as fraes, mas principalmente o Pi, podem ter funo de armazenamento
(Chapin & Bieleski, 1982). Altos teores de P-RNA so encontrados em tecidos meristemticos,
envolvidos na sntese protica, e diferenas no tamanho desta frao podem refletir a atividade
meristemtica em resposta deficincia de P (Chisholm & Blair, 1988). A remobilizao do Plipdio pode ocorrer quando as reservas de P em outras fraes reduzem-se suficientemente, mas a
perda de P deste compartimento mostra a quebra de membranas como a plasmalema e de organelas
como as mitocndrias (Chisholm & Blair, 1988).
O suprimento de P e o gentipo vegetal governam a taxa e a extenso da incorporao do Pi
nas demais fraes orgnicas (Chisholm & Blair, 1988). A utilizao de P foi negativamente
correlacionada com a razo entre as taxas de acumulao de Pi e de P total em milho, indicando que
a utilizao de P seria limitada pela partio de P entre formas inorgnicas e orgnicas (Elliott &
Luchli, 1985). A elevada correlao entre a biomassa e os contedos de P nas fraes lipdica e
residual em estilosantes e trevo branco indica que o crescimento est relacionado com a
incorporao do P solvel nestas fraes (Chisholm & Blair, 1988).

3.3

Transporte de fsforo na planta

O Pi a principal forma de transporte de P no xilema, e o Pi que entra na raiz, aps

rapidamente incorporado em formas orgnicas, seria hidrolisado antes da transferncia de Pi para o

xilema (Loughman, 1981). A exportao de P para a parte area foi mais sensvel inibio da
sntese protica do que o influxo de P nas razes, indicando que as unidades reguladoras da
transferncia de P para o xilema devem diferir daquelas envolvidas no transporte de fosfato atravs
da plasmalema das clulas corticais (Schjorring & Jensn, 1987). Admite-se que o Pi seja a
21

principal forma de transporte de P no floema, registrando-se velocidades de transporte de 80 cm h-1

entre as lminas foliares e o floema dos pecolos (Bieleski, 1973). Entretanto, compostos orgnicos
como nucleotdeos (inclusive ATP) e hexoses-fosfatos tambm so detectados no suco floemtico
(Bieleski, 1973). Em um nutriente to mvel quanto o P, o padro de redistribuio parece ser
determinado pelas propriedades da fonte e do dreno mais do que pelo sistema de transporte
(Bieleski, 1973), e estudos com radioistopos revelam que o movimento de P determinado pelo
movimento e demanda de carboidratos dentro da planta, e no pelos requerimentos de P do dreno
(Marshall & Wardlaw, 1973).
Aps 24 horas da absoro, 68 % do

32

P do pice radicular de plntulas de trigo (Triticum

aestivum L.) havia sido translocado, assim como mais de 80 % do P das pores mdia e de
formao de razes laterais (Rovira & Bowen, 1970). Plntulas de nabo (Brassica napus L.)
mostraram acumulao de

32

P perto do pice das razes primrias e laterais, sem correspondente

depleo do solo adjacente, indicando forte translocao de P para os meristemas radiculares (Bhat
& Nye, 1974). Sob deficincia de P, ocorre uma maior proporo de P em formas orgnicas nas
razes, e uma menor concentrao de P no exsudado do xilema, o que indica que o aumento da razo
entre a massa de raiz e de parte area seria conseqncia de menos Pi disponvel para o transporte
para a parte area (Chapin & Bieleski, 1982; Alves et al., 1998).
O P aplicado por via foliar pode ser rapidamente transportado para outros tecidos vegetais de
crescimento ativo: o

32

P aplicado em folhas foi detectado nas razes aps 3 horas, e continuou a

mover-se para fora da folha tratada ao menos por 6 dias aps a aplicao (Thorne, 1958). A
absoro de nutrientes aplicados por via foliar varia com a idade da folha e com o gentipo vegetal,
mas admite-se que 50 % do P aplicado em folhas seja absorvido em torno de 5 dias aps a
pulverizao (Kannan, 1990). Entretanto, o P no tem sido utilizado comumente como adubo foliar,
pois nenhum composto de P pode ser aplicado foliarmente em quantidades que contribuam
significativamente para os requerimentos das culturas sem causar danos s folhas.
22

A senescncia foliar, e a concomitante degradao de macromolculas, permite o

reaproveitamento de nutrientes mveis como o N e o P para o crescimento vegetal posterior (Aerts,
1996). Em plantas deficientes em P, o fornecimento limitado de Pi da raiz suplementado pela
mobilizao de P de folhas velhas para as folhas jovens e as razes, processo que envolve a depleo
das reservas de Pi e a quebra de P orgnico de folhas velhas (Schachtman et al., 1998). A hidrlise
de cidos nucleicos e de fosfolipdeos contribuiu com 40-47% e 26-38%, respectivamente, do total
de P reabsorvido de folhas senescentes de espcies decduas (Aerts, 1996). Mais da metade da
demanda de P de vagens e sementes de plantas de feijoeiro foi suprida pela remobilizao das folhas
(Snapp & Lynch, 1996), sendo que a mxima exportao de P das folhas de arroz (Oryza sativa L.)
ocorreu nos estdios de desenvolvimento dos gros, decaindo aps (Mondal & Choudhuri, 1985).
Alm disto, a proporo entre a quantidade de nutrientes nos gros e a quantidade de nutrientes na
biomassa superior para o P do que para os demais macronutrientes (Haag et al., 1967), indicando
uma translocao preferencial de P para os gros. Este intenso processo de translocao de
nutrientes dos tecidos vegetativos para os rgos reprodutivos acarreta um decrscimo no teor de
nutrientes nas folhas, o que pode limitar a fotossntese do dossel em estdios posteriores de
crescimento, sugerindo que o atraso na senescncia foliar poderia ser uma estratgia para aumentar a
produtividade dos cultivos anuais (Grabau et al., 1986). Entretanto, prognies de soja apresentaram
uma relao inversa entre produo de gros e a senescncia foliar, sugerindo que as produes
mximas s podem ser obtidas em plantas cujas folhas entrem em senescncia durante o enchimento
de gros (Phillips et al., 1984).
A reduo dos teores de P nos gros tem sido proposta como uma alternativa para a
sustentabilidade da agricultura, propiciando uma maior eficincia de uso de fertilizantes e uma
menor remoo de P pelos cultivos. Alm disto, o baixo teor de P nos gros implica em um menor
teor de fitina, que est associada a sintomas de deficincia nutricional em seres humanos e animais,
diminuindo a disponibilidade de minerais e protenas (Feil et al., 1992). A concentrao de P nos
23

gros parece ser parcialmente conseqncia da quantidade de carboidratos no gro, que dilui uma
quantidade de P controlada por fatores genticos ou ambientais (Feil et al., 1992). Por outro lado,
sementes com altos teores de P originam plantas com maior crescimento da parte area, nodulao e
acumulao de N, particularmente sob baixas doses de P no solo, indicando que o P da semente
pode assumir papel relevante no estabelecimento vegetal e na fixao biolgica de N2 (Thomson et
al., 1991; Teixeira et al., 1999). A fitina est localizada exclusivamente nos globides dentro dos
corpos proticos nos vacolos das clulas das sementes, mas no em todos estes corpos proticos,
resultando em diferentes contedos relativos de N e P nos gros, e abrindo perspectivas de uma
seleo independente para os teores de N e P nos gros (Arajo & Teixeira, 2003).

3.4
3.4.1

Interaes do fsforo com outros nutrientes

A interao entre fsforo e nitrognio

Pela importncia do P nas reaes fotossintticas e no metabolismo de carbono, processos

fundamentais para a assimilao e utilizao do N, o P tem participao essencial no metabolismo
do N. O N e o P interagem de forma sinrgica, em que ambos os nutrientes em nveis adequados
promovem aumentos na produo vegetal maiores do que aqueles obtidos com cada nutriente
isoladamente (Shuman, 1994). Aumentos no fornecimento de P a plantas de milho promoveram
incrementos no contedo total de N e na eficincia de utilizao deste nutriente (Machado, 2000).
So identificados pelo menos trs tipos de efeitos gerais do suprimento limitado de P na
assimilao de N: a diminuio na absoro de NO3-; a diminuio na translocao do NO3absorvido para a parte area, indicada por uma acumulao de NO3- nas razes (aparentemente
devido restrio do transporte do simplasma da raiz para o xilema); e a acumulao de
aminocidos tanto nas folhas (mais comum) quanto nas razes, resultante ou de inibio da sntese
ou da degradao de protenas (Israel & Rufty, 1988; Rufty et al., 1990, 1993; Jeschke et al., 1997).
24

A absoro de nitrato um processo ativo, requerendo energia metablica para o transporte contra
um gradiente de potencial eletroqumico, necessitando, portanto de substncias redutoras e de ATP
(Kleinhofs & Warner, 1990). A limitao no fornecimento de P pode resultar em menor taxa de
absoro de NO3- e NH4+, sendo relatadas em milho tanto uma reduo mais acentuada na absoro
de NO3- (Magalhes et al., 1995) quanto na absoro de NH4+ (Alves et al., 1998). H tambm a
hiptese de que um efeito regulatrio especfico seja exercido pelo P na formao ou atividade do
sistema transportador de NO3- nas membranas celulares, ou atravs de inibio por feedback pelas
elevadas concentraes de NO3- e aminocidos induzidas em razes pela deficincia de P (Rufty et
al., 1990, 1993).
A limitao de P, ao restringir o transporte de NO3- da raiz para a parte area, pode tambm
induzir a limitao da sntese de protenas na parte area, resultando em aumento da proporo de N
no assimilado na parte area (Rufty et al., 1990). A omisso de P na soluo nutritiva acarretou
reduo na atividade da GS/GOGAT em folhas e razes de milho apenas aps 144 h, enquanto que a
reduo na atividade da nitrato redutase ocorreu aps 6 horas, indicando que o estresse de P teria
um efeito indireto na assimilao do nitrognio, ao inibir a reduo do nitrato e limitar a
disponibilidade de amnio para a sntese de aminocidos (Alves et al., 2000). Como a nitrato
redutase induzida pelo substrato, a diminuio na absoro de N causada pela deficincia de P
reduziria a atividade desta enzima, causando acmulo de NO3-, que por sua vez exerceria um efeito
regulatrio promovendo mecanismos de inibio do tipo feedback negativo na absoro de N (Alves
et al., 2000). Por outro lado, a deficincia de P reduziu os teores de N total nas folhas e de N total e
de nitrato nos colmos e razes em hbridos de milho, sem que tenha ocorrido acmulo de NO3- na
planta, indicando que o estresse de P diminuiu a absoro de N mais do que a assimilao de NO3(Alves et al., 1996).

25

3.4.2

O fsforo e a fixao biolgica de N2

A deficincia de P tem um impacto negativo na fixao biolgica de N2, pois tanto a reduo
do N2 atmosfrico que ocorre nos bacterides, quanto a assimilao de amnia em aminocidos e
uredos que ocorre na frao vegetal dos ndulos, so processos consumidores de energia,
dependentes da disponibilidade de ATP (Sa & Israel, 1991). A reduo na fixao de N2 em
leguminosas sob suprimento limitado de P geralmente explicada por uma diminuio no
crescimento do hospedeiro, e em conseqncia na demanda pelo N fixado, no crescimento e
funcionamento dos ndulos, ou no crescimento de ambos (Almeida et al., 2000). Entretanto, os
mecanismos responsveis pela inibio da fixao de N2 sob limitao de P permanecem incertos
(Hogh-Jensen et al., 2002): alguns estudos sugerem que a regulao ocorre no aparato fotossinttico,
afetando a produo e o suprimento de carboidratos no estruturais para os ndulos, mas outros
trabalhos indicam que a deficincia de P tem um efeito direto no metabolismo dos ndulos e na
atividade da nitrogenase.
O suprimento limitado de P pode reduzir a atividade especfica da nitrogenase e a
concentrao de ATP nos ndulos (Sa & Israel, 1991), e os teores de N, de N-amino e alantona no
exsudado xilemtico (Othman et al., 1991). A deficincia de P causa atrasos na formao e
crescimento dos ndulos (Vadez et al., 1997; Arajo & Teixeira, 2000; Hogh-Jensen et al., 2002) e
um declnio mais rpido na atividade da nitrogenase no estdio de incio de enchimento das vagens
(Vadez et al., 1997). Em soja, a carga energtica e a concentrao de ATP nos bacterides no
foram afetados pelo suprimento de P, mas as concentraes de ATP e de adenilato nas fraes
vegetais dos ndulos foram reduzidas pela deficincia de P, o que indica que a deficincia de P
prejudicou a fosforilao oxidativa na frao vegetal dos ndulos em maior extenso do que nos
bacterides (Sa & Israel, 1991).

26

Plantas dependentes da fixao de N2 apresentam maior requerimento de P para obteno de

crescimento timo do que plantas supridas com nitrato, e os parmetros associados fixao de N2
respondem mais intensamente ao suprimento de P do que o prprio crescimento vegetal (Cassman
et al., 1980; Israel, 1987). A deficincia de P em soja sob N2 simbitico afetou o equilbrio entre a
biomassa de ndulo e raiz de forma mais intensa do que o equilbrio entre raiz e parte area
(Cassman et al., 1980), e aumentou a proporo do P retido nos ndulos e razes (Lauer & Blevins,
1989). Os ndulos so um forte dreno de P, com grandes respostas s doses do nutriente e
concentraes de P cerca de 2 vezes superiores s da parte area; mesmo diante da reduo do teor
de P nos vrios tecidos vegetais sob menor suprimento de P, a concentrao de P nos ndulos pode
ser pouco afetada (Pereira & Bliss, 1987; Othman et al., 1991; Hogh-Jensen et al., 2002). Dentre as
estratgias de adaptao metablica dos ndulos em plantas sob deficincia de P, podem ser citadas:
um aumento da proporo de P alocada nos ndulos (Lauer & Blevins, 1989), uma maior absoro
de P da soluo diretamente pelos ndulos e bacterides (Al-Niemi et al., 1998), e um maior
consumo de O2 por unidade de N2 reduzido, associado maior permeabilidade do ndulo (Schulze
& Drevon, 2005).

3.5

A interao entre fsforo e zinco

Resultados controversos tm sido publicados sobre a interao entre o P e o zinco (Zn),

mostrando que: (a) o P no exerce influncia sobre a absoro de Zn; (b) o P pode aumentar a
absoro de Zn; (c) o P pode diminuir a absoro de Zn; (d) pode existir um antagonismo entre o P
e o Zn, particularmente quando um dos elementos excede o nvel crtico; (e) o P pode diminuir o
transporte de Zn da raiz para a parte area; (f) a adio de P em solo deficiente em Zn pode
estimular o crescimento das plantas, diluindo a concentrao de Zn nos tecidos; (g) um elevado
fornecimento de P pode aumentar a acumulao deste nutriente nas folhas mais velhas em

27

concentraes suficientes para causar toxicidade, sedo os sintomas dessa toxicidade identificados
erroneamente como deficincia de Zn (Loneragan et al., 1982; Webb & Loneragan, 1988).
Na interao mais comum entre P e Zn, a adio de P diminui a concentrao de Zn na parte
area. Esta interao verificada quando ambos os nutrientes se encontram em teores limitantes, e a
adio de P promove crescimento suficiente para diluir a concentrao de Zn nas plantas a nveis
que induzem a deficincia de Zn (Loneragan et al., 1979; Singh et al., 1988). So observadas
tambm situaes em que o aumento no fornecimento de P promove diminuio das concentraes
de Zn na parte area muito alm do que pode ser explicado pela diluio decorrente do crescimento,
indicando que o P pode atuar de modo a reduzir tanto a absoro de Zn pelas razes como a
translocao do Zn da raiz para a parte area. A adio de P poderia diminuir a absoro de Zn
atravs de dois mecanismos: os ons H+ gerados pela dissoluo dos fosfatos no solo inibem a
absoro de Zn, pois esta particularmente sensvel s variaes de pH da rizosfera; o P promove a
adsoro de Zn aos componentes do solo, pois a adsoro de P afeta a reteno de Zn atravs da
variao de pH ou da alterao nas cargas de superfcie (Loneragan & Webb, 1993).
Adicionalmente, tem sido proposto que o P pode induzir imobilizao do Zn nas razes atravs da
formao de fitatos de Zn, em condies de elevado suprimento de Zn (Loneragan & Webb, 1993).
H tambm situaes onde o aumento no fornecimento de P em condies de baixo
suprimento de Zn induz sintomas de deficincia deste micronutriente, reduzindo o crescimento das
plantas sem qualquer efeito na concentrao de Zn na parte area. Nesses casos, a aplicao de Zn
elimina os sintomas e restaura o desenvolvimento das plantas. Esta sndrome, atribuda a um efeito
do aumento do P dentro da planta promovendo aumentos no requerimento interno de Zn,
particularmente evidente em plantas crescidas em soluo nutritiva ou areia, mas sem relatos
vlidos sobre sua ocorrncia em solo e, por conseguinte, sem efeitos relevantes na produo das
culturas (Loneragan & Webb, 1993).

28

Uma outra situao refere-se ao efeito da deficincia de Zn promovendo a toxidez de P. Sob

condies de alto suprimento de P, a deficincia de Zn aumenta as concentraes de P nas folhas ou
parte area de muitas espcies a nveis txicos (Loneragan & Webb, 1993). A inativao do Zn nas
plantas pelo P, ou a reduo na disponibilidade fisiolgica do Zn pelo P, seria o principal
mecanismo responsvel por esta sndrome. Em todos os nveis de suprimento de Zn, o aumento da
dose de P reduziu a proporo de Zn solvel em razes, caules e folhas de plantas de algodo, sendo
que a concentrao de Zn solvel nas folhas foi associada com os sintomas visuais de deficincia de
Zn e com os teores de clorofila (Cakmak & Marschner, 1987).

EFEITOS DO FSFORO NO CRESCIMENTO VEGETAL

O P est particularmente envolvido na transferncia de energia, pois o ATP necessrio para

a fotossntese, translocao e muitos outros processos metablicos de relevncia (Shuman, 1994).

Em sua forma inorgnica, o fosfato (Pi) substrato ou produto final em muitas reaes enzimticas
importantes, incluindo as da fotossntese e metabolismo de carboidratos, sendo essencial para a
regulao das vias metablicas no citoplasma e cloroplasto, sntese de amido e sacarore, transporte
de trioses-fosfato, translocao de sacarose e sntese de hexoses (Mitra et al., 1993). Em plantas sob
deficincia de P, a alterao do metabolismo primrio para o metabolismo secundrio resulta
freqentemente na acumulao de metablitos secundrios como flavonides e indol-alcalides
(Vance et al., 2003).
Os sintomas de deficincia de P no so to marcantes como para outros macronutrientes, e
os efeitos mais evidentes so uma acentuada reduo no crescimento da planta como um todo.
Mesmo assim, pode-se observar em plantas deficientes uma colorao verde escura nas folhas mais
velhas, e em algumas espcies coloraes avermelhadas em conseqncia da acumulao de
antocianina. Outros sintomas de deficincia de P so o menor perfilhamento, atraso no

29

florescimento, gemas laterais dormentes, nmero reduzido de frutos e sementes, e pequena

nodulao em leguminosas (Malavolta et al., 1997).
O baixo suprimento de P diminui a rea foliar, em conseqncia principalmente da reduo
no nmero de folhas, e, secundariamente, da limitao expanso da folha (Lynch et al., 1991;
Rodrguez et al., 1998). Entretanto, de maneira geral, a deficincia de P tem pequena influncia nas
taxas fotossintticas (Fredeen et al., 1989), mas alguns efeitos conflitantes do P na fotossntese
podem ser observados, caso no se considerem a intensidade e a poca do estresse por deficincia
de P (Rodrguez et al., 1998). Alm disto, deve-se considerar uma possvel resposta diferenciada
entre plantas C3 e C4 deficincia de P. O crescimento de plantas C3 mais sensvel deficincia
de P do que de plantas C4, mas as espcies C3 e C4 apresentaram a mesma eficincia fotossinttica
de uso de P, e teores similares de P em folhas (Halsted & Lynch, 1996).
Em soja, a deficincia de P pode afetar a fotossntese via componentes estomticos e no
estomticos, pois a taxa fotossinttica pode ser limitada pelo baixo teor foliar de P, tanto em nveis
normais quanto de saturao de CO2 (Fredeen et al., 1989). A reduo da fixao fotossinttica de
CO2 em soja sob deficincia de P foi atribuda principalmente limitao na regenerao da
ribulose-1,5-bifosfato carboxilase (Fredeen et al., 1990). As modificaes no metabolismo
fotossinttico observadas sob moderada deficincia de P, como o estmulo recirculao de Pi
durante o metabolismo glicoltico e do fosfoenolpiruvato, aumentaram a adaptao de plantas de
feijoeiro ao baixo suprimento de P (Kondracka & Rychter, 1997).
Plantas de milho, aps 3 semanas de omisso de P, tiveram marcante diminuio nos nveis
de amido e protena solvel, e em menor extenso nos nveis de sacarose e glicose (Khamis et al.,
1990). Plantas de milho crescidas sob baixa disponibilidade de P apresentaram severa inibio da
assimilao fotossinttica do CO2 em folhas, reduo na quantidade de C na forma de amido,
reduo nas atividades das enzimas ribulose 1,5-bisfosfato carboxilase, piruvato ortofosfato
diquinase e fosfoenolpiruvato carboxilase, essenciais no metabolismo C4 e na via redutiva das
30

pentoses fosfato, e reduo na atividade da ADPG-pirofosforilase, enzima-chave da sntese do

amido (Usuda & Shimogawara, 1991a,b). J a respirao noturna de plantas de trigo no apresentou
resposta ao suprimento de P (Rodrguez et al., 1998), pois as plantas dispem de alternativas
metablicas da gliclise e do transporte de eltrons nas mitocndrias, que garantem a permanncia
da respirao em clulas sob deficincia de P (Theodorou & Plaxton, 1993).
Espcies adaptadas a solos de baixa fertilidade geralmente apresentam pequena taxa de
crescimento, taxas de absoro de nutrientes moderadas, e alta concentrao de nutrientes nos
tecidos, em comparao a espcies de rpido crescimento sob as mesmas condies (Chapin &
Bieleski, 1982). A baixa taxa de crescimento pode auxiliar na adaptao a condies de estresse,
pois um crescimento lento induz a uma menor demanda e a uma menor exausto dos recursos do
ambiente; ocorreria menor incorporao de fotoassimilados e nutrientes, permitindo a formao de
reservas dentro da planta; e espcies de menor taxa de crescimento podem sobreviver durante
perodos em que nenhum crescimento possvel (Grime & Hunt, 1975). Entretanto, o lento
crescimento no constitui necessariamente uma adaptao ao baixo suprimento de P, pois plantas
anuais necessitam de um rpido crescimento para poderem competir em seus habitats naturais
(Chapin et al., 1989).
Uma hiptese usualmente formulada que as cultivares modernas teriam baixa eficincia
nutricional, por terem sido selecionadas em condies de alta fertilidade do solo, e uma seleo
indireta para alta resposta para fertilizantes pode ter ocorrido por meio da seleo para altas
produes (Duncan & Baligar, 1990). A cevada cultivada foi mais responsiva ao P do que a cevada
silvestre adaptada baixa disponibilidade de P (Chapin & Bieleski, 1982), e populaes de trevo
branco adaptadas a condies de baixa fertilidade foram menos responsivas ao P do que populaes
adaptadas elevada fertilidade (Snaydon & Bradshaw, 1962). Todavia, gentipos silvestres de
feijoeiro mostraram menor tolerncia ao baixo suprimento de P no solo do que gentipos cultivados,
em termos de crescimento vegetativo e produo de gros, indicando que a adaptao ao baixo P foi
31

adquirida durante a domesticao da espcie (Arajo et al., 1997; Beebe et al., 1997). Alm disto, o
baixo suprimento de P reduziu a taxa de crescimento relativo mais intensamente na espcie
progenitora de cevada do que em uma cultivar, indicando que o processo de seleo no reduziu o
potencial de crescimento da espcie sob baixo suprimento de P (Chapin et al., 1989).
Nos solos de regies tropicais, bastante intemperizados e com baixos teores de P disponvel,
as grandes culturas de interesse econmico, com elevadas taxas de crescimento, normalmente
necessitam de elevadas aplicaes de fertilizante fosfatado para obteno de adequadas
produtividades. Em 774 ensaios de adubao em todas as regies do Brasil, as produes mdias de
oito culturas sem adubao fosfatada variaram de 47 a 91 % das produes com adubao (Raij et
al., 1982). Em solos com baixos teores de P disponvel, so requeridas aplicaes anuais de
manuteno da ordem de 20 a 50 kg P ha-1 para a maioria das culturas (Raij et al., 1982). Entretanto,
em virtude das fortes reaes de adsoro do fosfato nos colides minerais de carga varivel, a
adubao fosfatada tem eficincia muito baixa nas regies tropicais, registrando-se uma recuperao
pelas culturas de 5 a 20 % do P aplicado em um dado ano agrcola. Deve-se registrar que, nos atuais
ritmos de explorao, as jazidas conhecidas de apatita de baixo custo de extrao para fabricao de
fertilizantes fosfatados, devem esgotar-se dentro de 60 a 80 anos (Vance, 2001).

32

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49

CAPTULO 12
Clcio, Magnsio e Enxofre
Godofredo Csar Vitti1;Eduardo Lima2;Fernanda Cicarone1
1 - Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz, Escola Superior de Agricultura
Luiz de Queiroz, Departamento de Solos e Nutrio de Plantas. Av. Pdua Dias, 11
Agronomia- 13418900 - PIRACICABA, SP - Brasil - Caixa-Postal: 09
E-mail: gcvitti@esalq.usp.br
2 - Departamento de Solos, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, BR 465, Km
7, SEROPDICA, 23890-000, Rio de Janeiro.
E-mail: edulima@ufrrj.br

Sumrio
1

CLCIO ............................................................................................................................................3
1.1
1.2
1.3

1.4
1.5
1.6
2

CLCIO NO SOLO .......................................................................................................................3

CLCIO NA PLANTA ....................................................................................................................5
DISTRIBUIO E FUNO ...........................................................................................................5
FONTES DE CA ................................................................................................... 9
DEFICINCIA DE CA ......................................................................................... 11
SINTOMAS DE DEFICINCIA NAS PLANTAS ........................................................ 11

MAGNSIO .......................................................................................................... 12
2.1
MAGNSIO NO SOLO ........................................................................................ 12
2.2
MGNA PLANTA ................................................................................................ 15
2.2.1 Distribuio e funo.................................................................................. 15
2.3
FONTES DE MG ................................................................................................ 19
2.4
DEFICINCIA DE MG ........................................................................................ 21
2.4.1 Sintomas de deficincia .............................................................................. 22

ENXOFRE............................................................................................................. 23
3.1
ENXOFRE NO SOLO .......................................................................................... 23
3.2
ENXOFRE NA PLANTA ...................................................................................... 26
3.2.1 Distribuio e funo.................................................................................. 26
3.3
FONTES DE S.................................................................................................... 35
3.4
DEFICINCIA DE S............................................................................................ 39

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS ............................................................... 42

1.1

CLCIO

Clcio no Solo
A participao de Ca total no solo varia de 0,1 % at mais de 25 %. Os solos

calcrios, em ambiente rido, contm os maiores nveis deste nutriente (Lopes 1998).
Solos orgnicos recentemente drenados geralmente contm muito pouco Ca e
apresentam valores de pH extremamente baixos (condies freqentes em solos
tropicais). Os solos argilosos geralmente contm mais Ca do que os arenosos.
O Ca no solo apresenta-se, principalmente, nas seguintes formas: carbonatos metamrficos ou sedimentares, os ltimos sendo em parte de origem biolgica; sulfatos;
e silicatos - estando presente em teores mais altos em alguns minerais primrios como
anortita, augita, epidoto e apatita e mais baixos nos secundrios. Na realidade, minerais
como a dolomita, calcita, apatita e feldspatos clcicos so as maiores fontes de Ca no
solo (Figura 1) (Korndrfer, 2003).
Ca, Mg Material de origem
Ca, Mg Calcrios,
adubos

Ca, Mg- Fixos

Intemperismo

Adio

Troca
Ca, Mg - Soluo do Solo

Mineralizao

Ca, Mg
- Trocveis

Lixiviao, eroso
Imobilizao

Absoro

Ca, Mg Mat.Org.do Solo

Ca, Mg- Planta

Ca, Mg Drenagem
Enxurrada

Figura 1--Ciclos do Clcio e do Magnsio no sistema solo-planta. Fonte: Malavolta,1976.

O Ca pode se encontrar nas formas trocvel e solvel, sendo a primeira em solos

mais argilosos como ction dominante no complexo de troca (65 %) seguido do Mg
(20%), o potssio (5 %) e o H+ (10 %) A forma solvel ocorre na soluo do solo em
concentraes muito baixas, de modo particular nos solos cidos das regies tropicais.
Como um ction, participante do fenmeno de troca de ctions (CTC), e
retido como Ca2+ (trocvel) nas superfcies com cargas negativas das argilas e da
matria orgnica do solo. O Ca o ction normalmente dominante da CTC dos solos
cultivados, ocupando cerca de 30 % ou mais da CTC.
Como os solos das regies tropicais possuem, geralmente, baixas concentraes
de Ca e maiores de Al, poder ocorrer deficincia de Ca que limitar o crescimento das
culturas mais exigentes.

1.2

Clcio na planta

1.3

Distribuio e Funo
O Ca absorvido pelas razes como Ca2+ podendo sua absoro ser diminuda

por altas concentraes de K+, Mg2+ e N-NH+4 no meio de cultivo. Apresenta raio
inico hidratado relativamente grande (0,412 nm). Encontra-se firmemente ligado a
estruturas no apoplasma, sendo parte trocvel nas paredes celulares e membrana
plasmtica. Grande parte do Ca pode ser encontrada nos vacolos. Baixas concentraes
so encontradas no simplasma e no floema, indicando sua baixa mobilidade na planta.
Muitas das funes do Ca esto ligadas composio estrutural de macromolculas e
relacionadas a sua capacidade de coordenao, o que confere ligaes intermoleculares
estveis mas reversveis, principalmente nas paredes celulares e na membrana
plasmtica.
Na folha o Ca torna-se muito imvel e somente pode ser redistribudo em
condies especiais como: a injeo de outros ctions na nervura, tratamento com cido
triiodo tetractico (EDTA agente quelante), tratamento com cido triiodo benzico
(regulador de crescimento), cidos mlico ou ctrico.
O Ca aplicado via foliar transportado no floema preferencialmente para tecidos
novos, estando o movimento atrelado atividade metablica.
A maior parte do Ca no tecido vegetal est localizada nas paredes celulares
(apoplasto), resultante da grande quantidade de stios de ligao para este elemento
nestas clulas e ao transporte restrito do Ca no citoplasma. Na lamela mdia ligado a
radicais R-COO- das pectinas em formas mais ou menos trocveis. Quando se aumenta
o suprimento de Ca, ocorre, de modo geral, um aumento na produo de oxalato de Ca
nos tecidos vegetais. Um aumento na concentrao de Ca++ na soluo externa (soluo
do solo ou soluo nutritiva) leva a um aumento no contedo de Ca nas folhas, mas no

necessariamente em rgos como frutos e tubrculos (drenos) que so supridos

predominantemente pelo floema (em funo da sua baixa mobilidade), ocasionando, por
vezes mal desenvolvimento ou deformaes nestes rgos. Plantas desenvolveram
mecanismos que restringem o transporte de Ca para esses drenos mantendo baixas
concentraes deste nutriente nas clulas do floema ou precipitado como oxalato ao
longo dos tubos crivados ou ainda no tegumento das sementes. (Fink, 1991; Mix &
Marschner, 1976).
As baixas concentraes de Ca livre no citossol so atribudas a uma baixa
permeabilidade geral das membranas para este elemento e pela ao de transportadores
de membrana que removem Ca do citossol, colocando-o no apoplasto ou acumulando-o
em estocadores intracelulares como o retculo endoplasmtico, cloroplastos e
vacolo.(Evans et al., 1991).
O mais importante transportador de Ca na membrana plasmtica, e
provavelmente tambm no retculo endoplasmtico, a bomba de Ca-ATPase,
existindo tambm um antiporte (Ca2+/H+) (Jones et al., 1993; Kasai & Muto, 1990). O
transporte de Ca no tonoplasto tambm atribudo a um antiporte Ca++/H+, energizado
pela bomba de prtons (H+-ATPase). Em mdia, estes antiportes mantm a diferena de
concentrao da ordem de 105 entre o Ca livre no vacolo e no citossol (Schumaker &
Sze, 1990). Em clulas vacuoladas das folhas, uma grande proporo de Ca est
localizada nos vacolos, o que contribui para o balano ction-nion (Kinzel,1989). Em
espcies vegetais que preferencialmente sintetizam oxalato em resposta reduo do
nitrato, a formao de cristais de oxalato de Ca nos vacolos importante para a
manuteno da baixa concentrao de Ca livre no citossol.
Uma extruso ativa de Ca2+ (bomba de efluxo de Ca2+) tambm existe na
membrana plasmtica das clulas da raiz (Olbe & Sommarin, 1991). Desde que a

concentrao de Ca na soluo do solo apresenta-se superior a 1 mM, a bomba de

efluxo de Ca2+ deve ter uma demanda considervel de energia para evitar o transporte
de Ca atravs do gradiente eletroqumico. Entretanto, deve-se considerar tambm que
fatores fsico-qumicos como o tamanho e a valncia do Ca podem restringir bastante a
sua mobilidade ao longo do gradiente de potencial eletroqumico atravs da membrana
citoplasmtica.
A maior proporo do Ca na planta encontra-se em formas no solveis em
gua, ao contrrio do que acontece com o K. Uma grande parte do Ca insolvel est na
parede celular, na forma de pectato de Ca como o principal componente da lamela
mdia. O mesmo aumenta a rigidez da parede e dificulta o aumento do tamanho da
clula. Em clulas mais maduras o Ca pode estar na parede na forma de carbonato,
oxalato, sulfato, fosfato, tartarato ou citrato.
O Ca tambm est presente na planta na forma de sais clcicos que ocorrem
mais freqentemente nos vacolos de clulas especializadas - idioblastos. Entre esses
sais predomina o oxalato que se encontra em qualquer parte da planta. Outros sais de Ca
encontrados (fora das paredes) so: carbonato, sulfato, fosfato, silicato, citrato, tartarato,
malato e, possivelmente, complexos insolveis com cidos graxos.
A insolubilidade dos compostos de Ca na planta e sua localizao na clula
justificam, em parte, a falta de redistribuio em condies de deficincia o que provoca
o aparecimento de sintoma de deficincia em rgos ou partes mais novas como as
gemas e ponta das razes. Nas folhas o denominador comum para a falta de Ca clorose
nas mais novas; tal sintoma em geral caminha das margens para o centro. O
aparecimento de sintomas em frutos, como o do tomateiro e da macieira, acontece
devido competio do mesmo pelo Ca contido no xilema, uma vez que transpiram
mais (Minami, 1989; Trani, 1982).

Uma das funes do Ca j foi citada (componente da parede celular), mas so

conhecidas outras funes desse macronutriente secundrio. Este tem importante papel
na absoro inica, particularmente na correo do efeito desfavorvel da concentrao
hidrogeninica excessiva, sendo essencial para que tal efeito no diminua a absoro de
nutrientes que necessitam do Ca, pois indispensvel manuteno da estrutura das
membranas celulares (em particular da plasmalema). A observao de que o efeito
prejudicial da salinidade provocada por altas concentraes de adubos solveis pode ser
diminudo aumentando-se a disponibilidade de Ca, como sulfato, no substrato; talvez
tenha relao com o papel do elemento na estrutura e no funcionamento das membranas
celulares que, com pouco Ca, permitem o vazamento de compostos j absorvidos;
ATP-ases de membrana que participam da absoro inica so ativadas pelo Ca. Foi
demonstrado tambm que a toxidez devido amnia pode ser anulada em parte pelo Ca
fornecido s razes.
A falta de Ca afeta particularmente os pontos de crescimento da raiz, causando o
aparecimento de ncleos poliplides, clulas binucleadas, ncleos constritos, divises
amitticas, o crescimento paralisado e ocorre escurecimento com posterior morte da
raiz. Para a nodulao nas leguminosas h necessidade maior de Ca do que para a planta
propriamente dita, pois uma vez formados os ndulos a leguminosa pode crescer com
concentraes relativamente baixas desse nutriente (Embrapa, 1996; Malavolta, 1997).
O Ca indispensvel para a germinao do gro de plen e para o crescimento
do tubo polnico o que se deve ao fato de estar presente na sntese da parede celular ou
no funcionamento da plasmalema (Malavolta, 1980).
O Ca de grande importncia para o desenvolvimento do ginforo do amendoim
devendo estar presente em concentrao relativamente alta no solo nas proximidades

deste rgo, motivo pelo qual, s vezes, se usam adubos clcicos em cobertura (Cmara
et al., 1980).
Cerca de 60 % do Ca total das folhas encontra-se nos cloroplastos: a acumulao
deste nutriente nessas organelas dependente do suprimento de energia, o mesmo
acontecendo no caso dos mitocndrios.
So relativamente poucas as enzimas ativadas por Ca: (exemplos)
-

Em tubrculo de batata

ATP ADP + P; ATPase (aspirase)

-

Em cevada

amido n glicose; alfa amilase

-

Em repolho

lecitina + H2 colina + cido fosfatdico; fosfolipase D

1.4

Fontes de Ca
O Ca pode ser fornecido s plantas de vrias formas (Figura 2), que mostra a

adio e perda de Ca e Mg no sistema solo-planta.

Minerais no solo Restos Orgnicos

Adubos
Minerais

Calcrios

Ca e Mg disponveis no solo

Remoo na Colheita Lavagem

Eroso

.
de adio e perda de Clcio e Magnsio nos solos. Fonte: Malavolta
(1976)
Figura 2 -Processo

Em decorrncia da maior parte dos solos deficientes em Ca ser de reao cida,

um bom programa de calagem pode adicionar Ca de modo eficiente ao sistema. Tanto o
calcrio calctico como o dolomtico so fontes excelentes desse nutriente. O gesso
tambm pode suprir Ca quando o pH do solo j est suficientemente elevado e no
necessita de calagem. O superfosfato simples que contm 50 % de gesso, e tambm em
menor intensidade o superfosfato triplo, podem adicionar Ca ao solo (Vitti & Luz,
2004). No Quadro 1 so mostradas algumas fontes de Ca.
Quadro 1 - Fontes comuns de Clcio
Fonte

Ca (%)

Valor neutralizante

32

85 a 100

22 - 27

90 a 108

Escria bsica

29

50 a 70

Gesso

22

Nenhum

Margas

24

15 a 85

Cal hidratada

46

120 a 135

Cal virgem

60

150 a 175

Calcrio calctico
Calcrio dolomtico

Fonte: Lopes (1998)

Quando forem usadas fontes de Ca que no sejam os calcrios modos, deve-se

se ter cuidado com a aplicao. O excesso de cal hidratada, de acordo com Lopes
(1998), pode causar danos microbiota do solo.
A adio de grandes quantidades de Ca e Mg em solos deficientes em K, ou a
aplicao de Ca em um solo deficiente em Mg pode causar o desequilbrio nutricional e
o crescimento reduzido da cultura; portanto, necessrio o fornecimento de todos os
nutrientes de maneira equilibrada para diminuir as condies limitantes ao crescimento
das plantas.

10

O gesso, alm de ser uma excelente fonte de S e Ca para as plantas, tem

demonstrado efeitos positivos em experimentos de campo quando aplicado em
superfcie, favorecendo o aprofundamento das razes das plantas cultivadas em reas
com subsolos cidos. Isto leva melhor absoro de gua e nutrientes das camadas mais
profundas do solo (Raij, 1991).
1.5

Deficincia de Ca
A disponibilidade de Ca adequada quando os solos no so cidos (pH entre

6,0 e 6,5) ou quanto a acidez corrigida pela aplicao de calcrio em doses

adequadamente recomendadas. Quando o solo se torna cido em conseqncia da
lixiviao ou perda de bases pela eroso, adubao, e absoro e exportao de bases
pelas culturas, o crescimento e desenvolvimento das plantas freqentemente
prejudicado pelas concentraes txicas de Al, Mn e Fe, alm da falta de Ca. A anlise
de solo e um bom programa de calagem so as melhores prticas de manejo para
prevenir esses problemas (Raij et al., 1996).
1.6

Sintomas de deficincia nas plantas

O limitado crescimento do sistema radicular um sintoma comum da deficincia

de Ca. Razes deficientes, geralmente, escurecem e apodrecem, como j citado.

As folhas jovens e outros tecidos novos desenvolvem sintomas porque este
nutriente no remobilizado dentro da planta. As deficincias de Ca nesses tecidos
causam um aspecto gelatinoso nas pontas das folhas e nos pontos de crescimento. Isso
deve-se ao fato da necessidade de pectato de Ca para a formao da parede celular. Em
condies de deficincia mais severa os pontos de crescimento podem morrer (Lopes,
1998).

11

As deficincias de Ca podem no ser muito freqentes no campo porque os

efeitos secundrios de deficincia, como a acidez elevada, geralmente limitam primeiro
a produo. As deficincias so mais comuns em culturas como o amendoim e as
hortalias (a podrido estilar do tomateiro). Em alguns casos, como o do tomate, as
folhas apresentam teores normais deste nutriente, enquanto o fruto se mostra deficiente
devido pequena translocao e ao transporte unidirecional do Ca no xilema
(Castellane, 1982).
2

2.1

MAGNSIO

Magnsio no solo
O Mg no solo aparece na forma inica Mg2+, em soluo e como ction trocvel.

Alm disso, o Mg participa da estrutura de micas e minerais de argila do tipo 2:1,

encontrados em solos menos intemperizados, nos quais possvel a persistncia desses
e de outros minerais contendo esse elemento.
Em condies de boa drenagem os teores trocveis de Ca predominam na soma
de bases, vindo a seguir, em teores bem mais baixos, o Mg e depois o K.
O Mg pode aparecer no solo como carbonatos insolveis, em solos calcrios, ou
em solos que receberam calagem recente, nesses casos em partculas de granulometria
grosseira que no dissolvem rapidamente. De maneira geral, o fornecimento de Mg s
culturas depende da concentrao de Mg e da sua disponibilidade no solo (Figuras 1 e
2).
O primeiro fator determinante da atrao entre o on e a superfcie de troca a
carga do ction, o segundo o tamanho do on hidratado, os menores sendo retidos com
maior energia. Conseqentemente, em solos bem drenados, a freqncia natural de
ocorrncia dos ctions trocveis , em geral, segundo essa ordem, mesmo quando o solo
12

formou-se de rochas mais ricas em Mg ou K, por exemplo. Desvios dessa seqncia

ocorrem em condies de m drenagem ou, em alguns casos, por liberao de Mg ou K
de minerais primrios, o que mais comum em profundidade, em alguns solos (Raij,
1981).
Maior liberao (lixiviao)
Ca+2 > Mg+2 > K+ > Na+
Maior adsoro
Tal como acontece com o K e o Ca, o Mg aparece no solo, segundo Malavolta
(1981), em diferentes formas:
Minerais primrios silicatos com Mg estrutural, como o caso de piroxnios,
anfiblios, olivina e turmalina; muscovita e biotita tambm contm Mg;
Carbonatos e sulfatos a dolomita, CaMgCO3, calcrios dolomticos e
magnesianos, magnesita, MgCO3, podem ocorrer em camadas; em regies ridas e
semiridas, a epsomita (sal amargo, MgSO4.7H2O) encontrado no solo;
Minerais secundrios o Mg pode fazer parte de algumas argilas como a
montmorilonita, a ilita e a clorita, mediante substituio do Al octadrico; a vermiculita,
produto da intemperizao hidrotermal das micas, possui Mg que desloca o K, com
expanso dos espaos entre camadas;
Matria orgnica Mg em compostos orgnicos.
Teores mais altos de Mg so, de modo geral, encontrados nos solos mais
argilosos na forma de minerais ferromagnesianos facilmente intemperizveis, tais como
biotita, serpentina, hornblenda e olivina. O Mg ocorre tambm em minerais secundrios
que incluem clorita, vermiculita, ilita e montmorilonita. Alguns solos contm Mg como
magnesita (MgCO3) ou dolomita (CaMgCO3). Em regies ridas ou semi-ridas, solos

13

podem conter grandes quantidades de Mg como epsomita (MgSO4.7H2O) (Neptune,

1986).
A distribuio do Mg nos solos pode ser considerada do mesmo modo que a
distribuio do K e do Ca e pode ser dividida nas seguintes formas: no-trocvel ou
fixa, trocvel e solvel.
A frao do Mg predominante no solo a forma no trocvel, que inclui todo o
Mg nos minerais primrios e a maior parte do Mg dos minerais secundrios. Acreditase, hoje, que parte desta forma pode ser mais disponvel do que se pensava. O Mg
trocvel da ordem de aproximadamente 5 % do Mg total (0,04 0,34 % nos solos do
Estado de So Paulo); esta frao juntamente com o Mg solvel da maior importncia
no suprimento deste nutriente s plantas. Esta forma trocvel constitui de 4 a 20 % da
CTC. ento consideravelmente menor do que aquela do Ca.
Nos solos cidos das regies midas, o Mg2+ o terceiro ction mais abundante
no complexo de troca, aps o Ca2+ e o H+ e nos solos das regies semi-ridas, vem logo
depois do Ca2+, exceto nos solos alcalinos onde perde o lugar para o Na+.
Nestes solos cidos das regies midas, possvel que haja competio do H+ e
do Al3+ na absoro do Mg2+, enquanto que a competio do Ca2+ pode ocorrer em solos
onde foi aplicada alta dose de calcrio. Assim, abaixando ou elevando o pH, a absoro
do Mg2+ diminui por competio do H+, Al3+ ou Ca2+.
A deficincia de Mg no solo pode surgir sob as seguintes condies:
1) Solo cido (pH < 5,4);
2) % Mg da CTC (< 6 %);
3) Alto teor em K;
4) Relao K/Mg > 4;
5) Concentrao inferior a 48 mg.dm-3 (4 mmolc.dm-3) Mg no solo.

14

Os solos, como j citado, geralmente contm menos Mg do que Ca, porque o Mg

no adsorvido to fortemente pelas argilas e matria orgnica e, conseqentemente,
mais sujeito lixiviao. Alm disso, a maioria do material de origem contm menos
Mg do que Ca. Embora a maioria dos solos contenha Mg suficiente para suportar o
crescimento das plantas, podem ocorrer deficincias, mais freqentemente em solos
arenosos, cidos, formados sob condies de elevado ndice pluviomtrico. As
deficincias tambm podem ocorrer em solos calcrios onde a gua de irrigao contm
altos nveis de bicarbonato, ou ainda em solos alcalinos (sdicos) (Lopes, 1998).
A relao do Mg para o K pode ser um fator importante sob certas condies.
Por exemplo, adubando-se com K pode-se diminuir a absoro de Mg por gramneas
pastoreadas por gado, o que resulta em baixo teor de Mg no soro sanguneo e uma
condio conhecida como tetania das gramneas. Baixas temperaturas do solo e
adequada umidade, na presena de quantidades moderadas de K, resultam numa maior
absoro de K, em comparao com Mg, e o aparecimento de forragem de gramnea
indutora de tetania (Lopes, 1980).

2.2

2.2.1

Mg na Planta

Distribuio e funo
Considera-se como formas disponveis o Mg da soluo do solo e o adsorvido ao

complexo de troca do solo. O raio inico deste elemento da ordem de 0,428 nm. O
Mg2+ trocvel normalmente constitui 5-20 % do total da capacidade de troca inica; o
Ca2+ representa em torno de 35-45 % e o K+ cerca de 5 %; nos terrenos cidos das
regies tropicais e subtropicais, entretanto, a participao do Ca2+ e a do Mg2+ pode ser
menor. Na soluo do solo a concentrao de Mg2+ da ordem de 48 a 120 mg.dm-3; em
15

nmeros aproximados pode-se dizer que a concentrao de Mg2+ em soluo o dobro

daquela de K+. Pode haver perdas de Mg do solo por lixiviao da ordem de 2-30
kg.ha-1.ano-1 (Mengel Kirkby, 1978).
A absoro do Mg2+ pelas plantas se faz de modo semelhante ao K. Mas para
que ocorra absoro necessrio que ocorra contato do elemento com a raiz da planta,
seja por interceptao radicular, por difuso ou por fluxo de massa, sendo o fluxo de
massa o mecanismo responsvel pela maior proporo do contacto dos ctions
bivalentes, Ca2+ e Mg2+, com a raz.
A taxa de absoro de Mg pode ser muito afetada por outros ctions como K+,
NH4+, Ca2+ e Mn2+ assim como H+ em condies de baixo pH (Heenan e Campbell,
1981). Deficincia de Mg induzida pela competio com outros ctions tem sido
observada com frequncia.
As funes do Mg nas plantas esto relacionadas, principalmente, com a sua
capacidade de interagir com ligantes nucleoflicos como os grupos fosforlicos por meio
de ligaes inicas, e agindo como elemento de ligao e/ou formando complexos de
diferentes estabilidades. Embora muitas das ligaes envolvendo o Mg sejam
principalmente inicas, algumas so covalentes, como na molcula de clorofila. Mg
forma complexos ternrios com enzimas nas quais ctions de ligao so necessrios
para estabelecer a geometria precisa entre a enzima e o substrato, como ocorre na RuBP
carboxilase. (Pierce, 1986). Grande proporo do Mg total da planta est envolvida na
regulao do pH celular e no balano ction-nion.
A relao K/Mg na planta geralmente varia entre 7 e 10. Se o teor absoluto de
Mg for relativamente baixo os sintomas da falta desse elemento podero aparecer
quando a relao for da ordem de 15-20, quando o Mg2+ representa menos de 10 % do
total das bases trocveis, as condies so favorveis ao aparecimento da deficincia

16

induzida pelo excesso de K. Um excesso de Mg, por sua vez, pode causar deficincia de
K ou, principalmente, de Ca. De modo geral, os teores de Mg nas partes novas das
plantas so maiores que os encontrados nas mais velhas, embora o inverso possa ocorrer
tambm. O Mg2+ como o Ca2+ e o K+ se move para cima na corrente transpiratoria. Ao
contrrio do que se d com o Ca e de modo semelhante ao que ocorre com o K, o Mg2+
mvel no floema, ocorrendo translocao na planta (Malavolta, 1979).
Dependendo do status nutricional do Mg na planta, entre 6 e 25 % do total do
elemento faz parte da clorofila. Em geral, outros 5 a 10 % do Mg total nas folhas e
pices est ligado a pectatos nas paredes celulares ou precipitado como sais solveis de
reserva no vacolo, como por exemplo fosfatos de Mg. Os restantes 60-90 % so
extraveis em gua. Em muitos casos, o crescimento afetado e aparecem sintomas
visuais de deficincia de Mg quando a proporo do elemento na clorofila excede a 2025 %.
A distribuio de Mg entre o citossol e os cloroplastos deve ser regulada no
pool metablico. Em cloroplastos isolados, a fotossntese inibida por 5 mmol.L-1 de
Mg na soluo externa. Esta inibio causada por um decrscimo no influxo de K.
Esta inibio da fotossntese pode ocorrer em funo de altas concentraes de Mg no
pool metablico em plantas inteiras sob estresse causado pela seca.
O Mg entra na composio da fitina (sal de Ca e Mg do cido inositol fosfrico)
que se acumula nas sementes. Quando estas germinam, P e Mg migram para as
diversas partes da planta em via de crescimento, contribuindo para a formao de novos
tecidos (Neptune, 1986).
As funes do Mg no metabolismo da planta so:
1. Clorofila as clorofilas so porfirinas magnesianas e o Mg corresponde a 2,7
% do peso molecular das mesmas; representa cerca de 10 % do teor total de Mg da

17

folha. Os plastdeos, entretanto, tem mais Mg alm daquele contido na clorofila: a

converso de energia das principais funes dos cloroplastos e, como se ver logo
mais, o Mg ativador de enzimas relacionadas ao metabolismo energtico.
2. Ativao enzimtica o Mg ativa mais enzimas do que qualquer outro
elemento. Um papel principal do elemento ser cofator de quase todas as enzimas
fosforilativas, formando uma ponte entre o pirofosfato do ATP ou ADP (tri e difosfato
de adenosina, respectivamente) e a molcula da enzima. A transferncia de energia
desses dois compostos fundamental nos processos de fotossntese, respirao
(gliclise e ciclo dos cidos tricarboxlicos), reaes de sntese de compostos orgnicos
(carboidratos, lipdeos, protenas), absoro inica e trabalho mecnico executado pela
planta. Em algumas das reaes de transferncias de grupos fosfatados, o Mg2+ pode ser
substitudo por outros ons como o Mn2+, principalmente; muitas vezes, porm, mais
eficiente do que o seu substituto. A falta de Mg inibe a fixao do CO2 mesmo na
presena de clorofila suficiente: o elemento exigido em reaes de fosforilao que
limitam a regenerao da ribulose difosfato o acar que `aceita o CO2 fixado
fotossinteticamente; alm disso, necessrio para a atividade da prpria enzima que faz
isso a carboxilase da ribulose difosfato. O metabolismo do N tambm influenciado:
nas plantas deficientes em Mg o teor de N-protico menor, aumentando o de N-no
protico evidenciando que a falta de Mg afeta a sntese de protena. A ativao dos
aminocidos, passo obrigatrio no processo, exige Mg; a transferncia dos aminocidos
ativados para formar a cadeia polipeptdica ou protica tambm necessita de Mg.
3. Carregador do P encontra-se na literatura a citao que o Mg seria um
elemento carregador do P, ou seja, contribuiria para a entrada de P na planta.
Talvez possa ser atribudo a isso o aumento da absoro de fsforo na presena de Mg.
Acredita-se, tambm, que o efeito seja devido ao papel do Mg nas reaes de

18

fosforilao. Esse papel do Mg tem um possvel aspecto prtico; o de aumentar a

eficincia da absoro do fsforo pelas razes.
Diferente do Ca2+, o Mg2+ muito mvel no floema e translocado das folhas
mais velhas para as mais novas ou para os pontos de crescimento. Em frutos e tecidos
de reserva que so dependentes do floema para o suprimento mineral, encontra-se mais
K e Mg do que Ca (Schimansky, 1973).

2.3

Fontes de Mg
A fonte mais comum de Mg o calcrio dolomtico um material que contm

Ca e Mg e corrige a acidez do solo. Outras fontes incluem o sulfato de Mg, xido de

Mg, as escrias bsicas, o sulfato K e Mg e os termofosfatos. No Brasil, so bastante
comercializados os calcrios dolomticos calcinados, que apresentam 26 a 32 % de Ca e
9 a 15 % de Mg, constituindo-se em excelentes fontes desses nutrientes (Quadros 2 e 3).
As formas de sulfato de Mg so mais solveis do que calcrio dolomtico e
podem ser a fonte preferida de Mg em condies que requerem de resposta rpida a esse
nutriente.
Quadro 2. Fontes comuns de magnsio.
Material

Mg (%)

Calcrio calctico

< 5,0

Calcrio dolomtico

5,0 12,0

Magnesita (xido de Mg)

55

Sulfato de Mg heptahidratado

9,6

Sulfato de potssio e magnsio

11,2

Cloreto de magnsio

7,5

Termofosfato

7,0

Fonte: (Lopes, 1998).

19

Quadro 3. Adubos-fonte de magnsio.

Adubo

MgO%

Cianamida, clcica

0,06

Nitrato de clcio

1,5

Nitroclcio

6-8

Salitre do Chile

0,05

Tortas oleaginosas

0,3-0,5

Estercos

0,9

Resduo de esgoto

0,5-0,7

Farinha de ossos

0,4

Fosfato natural

0,2

Superfosfatos

0,2-0,3

Cloreto de potssio

0,1

Sulfato de potssio

1-2

Kieserita

18

Sulfato de magnsio

10-16

Nitrato de magnsio

14-16

Magnesita

44-46

Fonte: modificado de Malavolta (1976).

As perdas por lixiviao dependem da quantidade de gua que passa atravs do
solo e da concentrao de Mg na soluo do solo a qual pode ser aumentada pela adio
de sais solveis: a adubao com superfosfato e sais potssicos aumenta o teor de Mg na
gua de percolao.
O fornecimento de Mg atravs de calcrio deve ser realizado quando o solo
apresentar condies de acidez; caso contrrio, quando se pretende fornec-lo somente
como nutriente, prefervel utilizar sais solveis como fonte do elemento.

20

O quadro 4 apresenta as quantidades exigidas de Ca, Mg e S por vrias culturas.

Quadro 4 - Exigncias de Ca, Mg e S por vrias culturas.
Total absorvido
Cultura

Nvel de produo

Ca

Mg

-----------Kg----------Algodo

500 kg de fibra

15

12

10

Amendoim

2 t de gros

10

12

11

Arroz

3 t de gros

27

12

Caf (1)

3 t de gros

63

30

10

Cana

100 t de colmos

100

52

45

Eucalipto

100 m3 de madeira

140

35

38

Feijo

1 t de gros

58

19

26

Gramneas

1t de matria seca

Leguminosas

1t de matria seca

13

Laranja (2)

18t de frutos

160

Milho

5 t de gros

19

26

13

Soja

2,5 t de gros

42

25

Tomate

40 t

15

18

27

Trigo

3 t de gros

Forrageiras

(1) Quantidades absorvidas entre 5,5 e 6,5 anos de idade para uma produo de 50 sacas
beneficiadas.
(2) Quantidades totais contidas em um pomar produzindo 2 caixas de 40,8 kg/p, com
210 plantas.ha-1.
Fonte: Potafs, 1996.
2.4

Deficincia de Mg
A necessidade de Mg para um timo crescimento das plantas situa-se na faixa de

0,15-0,30 % do peso seco da parte vegetativa da planta.

De acordo com Arnold (1967), os solos com deficincia de Mg mais
freqentemente situam-se em trs grandes grupos:
(1) Solos com baixos teores de Mg trocvel, geralmente de textura arenosa;

21

(2) Solos cidos;

(3) Solos com alto teor de K trocvel.
No primeiro caso, a reserva de Mg pode ser insuficiente ou pode ser exaurida
por lixiviao: nos solos cidos o antagonismo por ctions em excesso (H+, Al3+, Mn2+,
Fe2+) pode causar a carncia; o alto teor de K trocvel faz com que aumente a relao
K+/Mg2+ na soluo do solo podendo causar sintomas de deficincia de Mg.
De modo parecido com o descrito para o K, o Mg no trocvel, tanto estrutural
como o fixado entre as camadas de argila, pode se tornar disponvel devido ao
intemperismo (Malavolta, 1979).
A deficincia de Mg pode ser induzida por excesso de K na adubao o que
produziria um efeito semelhante ao alto teor desse elemento no solo aumentando a
relao K/Mg. De acordo com Shone (1967), as doses muito altas de adubos potssicos
quando usadas em solos pobres em Mg++ podem, alm de causar diminuio na
absoro do Mg, provocar lavagem deste nutriente para camadas mais profundas do
perfil, fora do alcance das razes. Em solos deficientes em K, porm, a adio desse
elemento como adubo pode levar maior absoro de Mg o que acompanhado por
aumento na matria seca produzida.
O baixo nvel de umidade no solo pode provocar diminuio na sua absoro,
pois pode ocorrer menor transporte do Mg++ para a raiz pelo processo do fluxo de
massa.

2.4.1

Sintomas de deficincia
Os sintomas de deficincia de Mg geralmente aparecem primeiro nas folhas mais

velhas. Isso acontece porque o Mg redistribudo na planta. A deficincia aparece como

uma cor amarelada, bronzeada ou avermelhada, enquanto as nervuras das folhas

22

permanecem verdes (reticulado grosso). Exemplo: as folhas de milho com faixas

amarelas e com as nervuras verdes (Bll, 1993) .
O desequilbrio entre o Ca e o Mg no solo pode acentuar a deficincia de Mg.
Quando a relao Ca/Mg torna-se muito alta, a planta pode absorver menos Mg. Isto
pode ocorrer quando se usa somente calcrio calctico por muitos anos, em solos
relativamente pobres em Mg. A deficincia de Mg tambm pode ser acentuada por altas
doses de K+ ou NH4+, quando o solo esta no limite de deficincia (Lopes, 1998).

3.1

ENXOFRE

Enxofre no Solo
A crosta terrestre contm cerca de 0,11 % de S e a rocha matriz constitui a fonte

primria do elemento: ela fornece sulfetos metlicos os quais, em solos bem arejados, se
transformam rapidamente em sulfatos. A esse S mineral junta-se o S orgnico
proveniente dos restos animais e vegetais e o da matria orgnica dos solos. Outra fonte
adicional de S o SO2 da atmosfera, oriundo da queima de combustveis fsseis, da
madeira e de outros produtos orgnicos. O SO2 oxidado em parte a SO42- e trazido ao
solo pelas chuvas em quantidades que, no Brasil, correspondem a 5-30 kg.ha-1 de S em
um ano, insuficiente para atender a exigncia da maioria das culturas (Malavolta,1980).
A maior parte do S do solo est na forma orgnica que, por via microbiana,
convertido em produtos disponveis para a planta. No se considerando os solos semiridos onde, devido drenagem insuficiente, acumulam-se grandes quantidades de
sulfatos de K, Mg e Na, a matria orgnica o principal reservatrio de S para as
culturas (Freney & Swaby, 1975) .

23

Nos solos bem aerados, o S mineral aparece quase exclusivamente como sulfato
(SO4-2), enquanto que em condies anaerbicas os sulfetos (S2-) so a forma mais
comum. Em solos inundados ocorre a reao:
SO42- + 10 H+ + 8 e-

H2S + 4 H2O

O gs sulfidrico produzido poder reagir como o Fe originando sulfeto ferroso

(com o que fica afastado o perigo de toxidez cultura por conta do sulfeto):
Fe2+ + S2-

FeS

Os sulfatos existem no solo em soluo ou em outras formas: em combinaes

pouco solveis com Fe e Al e adsorvidos. A adsoro do SO42- depende dos teores de
argila, da presena de hidrxidos de ferro e de alumnio e do pH. Segundo Malavolta
(1980), acredita-se que a adsoro do sulfato implique na substituio de OH dos oxihidrxidos e da argila:
- X = 2(OH) + SO42-

- X = SO4 + 2 OH-

O aumento do pH (ou seja, adio de hidroxila OH-) deslocaria a reao para a

esquerda dessorvendo o SO42-; por isso a fixao do sulfato (adsoro) maior em
solos cidos, sendo diminuda pela calagem (Vitti, 1989).
Ao lado dos sulfatos, podem aparecer, em pequena proporo e de forma
transitria, produtos intermedirios que se formam durante as transformaes do S no
solo e que, eventualmente, vo resultar em sulfato: sulfito (SO32-); tiossulfato (S2O32-);
politionato (S4O62-) (Neptune et al., 1975). No se sabe muito a respeito dos compostos
orgnicos de S no solo. Admite-se que o S orgnico esteja repartido do seguinte modo:
1. Aminocidos livres: pequena proporo de cistena, cistina, metionina,
sulfxido de metionina, metionina sulfona, cido cisteico, cido cisteino-sulfnico,
taurina;

24

2. Sulfato orgnico: alta proporo como SO42- ligado a fenis, colina (base
nitrogenada), carboidratos e lipdeos;
3. Derivados de quinonas e aminocidos com S: alta proporo, parte do hmus
muito resistentes mineralizao por microganismos.
O processo de mineralizao pode ser ilustrado tomando-se a cistena (livre ou
oriunda da decomposio da matria orgnica) como exemplo:

microrganismos
(Cistena)
HSCH2CHNH2COOH + H2O

(Piruvato)
CH3COCOOH + H2S + NH3

Do mesmo modo que a mineralizao do N, a do S depende da relao C/S do

substrato (no caso do N um quociente C/N = 10 a 15 acelera o processo): o sulfato se
forma somente quando o teor de S da matria orgnica excede a necessidade alimentar
dos microrganismos do solo. Assim, quando C/S for menor que 200 o sulfato
geralmente se acumula; acima de 400 o SO4 2- adicionado e mais o existente no solo so
imobilizados. Estima-se que nos solos das regies temperadas midas 1-3 % do S total
seja mineralizado por ano (Malavolta, 1980).
O H2S libertado na mineralizao do S sofre oxidao:
1. em condies anaerbicas bactrias autotrficas dos gneros Beggiatoa e
Thiothrix que depositam S elementar;
2. em condies aerbicas bactrias do gnero Thiobacillus principalmente que
produzem H2SO4 no meio, como demonstram as reaes:
2 H2S + O2
2 S + 3 O2 + H2O

2 H2O + 2 S + Energia
2H2SO4 + Energia

25

De acordo com Malavolta (1980), as quantidades de S nos solos minerais vo de

0,02 0,2 %; e em solos orgnicos podem chegar a 1 %. O S orgnico nos solos
brasileiros representa 60-90 % do total.
O sulfato proveniente sobremaneira da intemperizao das rochas. No entanto,
a industrializao acrescenta fonte adicional de sulfato: a poluio atmosfrica. A
queima de combustveis fsseis libera vrias formas de S gasoso, incluindo dixido de
S, que so levados para o solo pela chuva.
Segundo Taiz & Zeiger (2004), quando dissolvido em gua, o dixido de S
hidrolisado e transforma-se em cido sulfrico (H2SO4), um cido forte, que a
principal fonte da chuva cida. As plantas podem, tambm, metabolizar o SO2, que
absorvido na forma gasosa atravs dos estmatos. Entretanto, exposies prolongadas
(mais de oito horas) a altas concentraes atmosfricas do SO2 (maiores do que 0,3
ppm) causam extensos danos aos tecidos, devido formao do cido sulfrico
3.2
3.2.1

Enxofre na planta
Distribuio e funo
A maior parte do S nas clulas de vegetais superiores deriva do sulfato (SO4 2-)

absorvido via um transportador 3H+/SO4

2-

do tipo simporte presente na membrana

plasmtica (ver captulo V neste volume).

O nion divalente SO42- absorvido pelas razes em baixas quantidades e o

transporte de sulfato ocorre principalmente pelo xilema (Figura 3). Em muitos aspectos,
a assimilao de S semelhante ao do nitrato. Por exemplo, a reduo necessria para
a incorporao de S aos aminocidos, protenas e coenzimas. Nas folhas verdes, a
ferredoxina o agente redutor para o S. Entretanto, ao contrrio do N-nitrato, o sulfato

26

pode ser utilizado sem o processo de reduo e incorporado a estruturas orgnicas

essenciais como os sulfolipdeos nas membranas ou polissacardeos como o agar.
As folhas, alm do SO42-, so capazes de absorver tambm o gs SO2 (dixido de
S) existente no ar, fazendo-o, porm, de modo pouco eficiente. A utilizao direta do S
elementar (molhvel) foi demonstrada ocorrer nas folhas e frutos de plantas ctricas:
empregando-se o produto marcado com S 35 (radioativo), muito usado como
defensivo. Verificou-se sua absoro bem como sua incorporao em protenas.

27

Figura 3. O ciclo do enxofre.

Enxofre elementar
Oxidao bacteriana

Oxidao
bacteriana
Oxidao bacteriana

cido sulfdrico
(H2S)

Sulfato SO4-2
Reduo bacteriana
Mineralizao

Digesto pelos animais

(Degradao
bacteriana)

Absoro pelas
Plantas (Imobilizao)
Compostos orgnicos
(protenas) R-SH

Fonte: Malavolta (1976).

O contato sulfato-raz se faz, principalmente, por fluxo de massa. O sulfato
transportado predominantemente na direo acrpeta, da base da planta para cima; a
capacidade da planta para translocar o S na direo baspeta muito pequena; por isso,
em casos de carncia de S os sintomas aparecem em primeiro lugar os rgos mais
novos, como as folhas mais novas (Malavolta, 1980).
.
A primeira etapa na sntese de compostos orgnicos contendo S a reduo do
sulfato ao aminocido cistena. O sulfato muito estvel e necessita ser ativado antes
que alguma reao subseqente possa ocorrer. A ativao inicia com a reao entre o
sulfato e o ATP, para formar 5-adenililsulfato (o qual , algumas vezes, referido como
adenosina-5-fosfosulfato e abreviado como APS) e pirofosfato (PPi). O processo todo
se inicia com a seguinte reao:

28

SO4-2 + Mg-ATP

APS + PPi

A enzima que catalisa essa reao, a ATP sulfurilase, apresenta duas formas: a
maior encontrada nos plastdeos e a menor, no citoplasma (Leustek & Cols., 2000,
citados por Taiz & Zeiger, 2004). A reao de ativao energeticamente desfavorvel.
Para levar essa reao adiante, os produtos APS e PPi devem ser convertidos de
imediato em outros compostos. O PPi hidrolisado a fosfato inorgnico (Pi) pela
pirofosfatase inorgnica, de acordo com a seguinte reao:

PPi + H2O

2 Pi

O outro produto, APS, rapidamente reduzido ou sulfatado, sendo predominante

a via de reduo. A reduo do APS um processo de mltiplas etapas, que ocorre
exclusivamente nos plastdeos. De incio, a enzima APS redutase, transfere dois eltrons
da glutationa reduzida (GSH) para produzir sulfito (SO3 2-):

APS + 2 GSH

SO3 2- + 2 H+ + GSSG + AMP

Onde GSSG representa a glutationa oxidada. (o SH em GSH e o SS em GSSG

representam as pontes S-H e S-S, respectivamente).
A seguir, a sulfito redutase transfere seis eltrons da ferredoxina (Fdred) para
produzir sulfeto (S-2):

SO3 2- + Fdred

S 2- + 6 Fdox

O sulfeto resultante reage com O-acetilserina (OAS) para formar cistena e

acetato. A O-acetilserina, que reage com o S 2-, formada na reao catalisada pela
serina acetiltransferase:

Serina + Acetil-CoA

OAS + CoA

A reao que produz cistena e acetato catalisada pela OAS tiol-liase:

29

OAS + S 2-

Cistena + Acetato

A sulfatao do APS, localizada no citosol, a via alternativa. Inicialmente, a

APS quinase catalisa a reao da APS com ATP, para formar 3-fosfoadenosina-5fosfossulfato (PAPS).

APS + ATP

PAPS + ADP

As sulfotransferases, ento, podem transferir o grupo sulfato do PAPS para

vrios compostos, incluindo colina, brassinosterides, flavonol, cido glico glicosdeo,
glucosinolatos, peptdeos e polissacardeos (Taiz & Zeiger, 2004).
A reduo do sulfato a cistena altera o nmero de oxidao do S de +6 para 4,
assim necessitando da transferncia de 10 eltrons. A glutationa, a ferredoxina, o
NAD(P)H ou a O- acetilserina podem atuar como doadores de eltrons em vrios passos
da rota metablica (Figura 4).
Na assimilao do S, as folhas so em geral mais ativas do que as razes,
provavelmente devido ao fato da fotossntese disponibilizar a ferredoxina reduzida e a
fotorrespirao gerar a serina, que pode estimular a produo da O-acetilserina. O S
assimilado nas folhas exportado pelo floema para os locais de sntese protica (frutos e
pices caulinares e radiculares), sobretudo na forma de glutationa. A glutationa tambm
atua como um sinal que coordena a absoro do sulfato pelas razes e a assimilao do
sulfato pela parte area. Alm disso, nas folhas, a reao muito estimulada pela luz
(Frankhauser & Brunold, 1978). Esta estimulao pela luz requerida por causa da
necessidade de ferredoxina como um redutor para o carregador de sulfito. Durante o
desenvolvimento da folha, a evoluo da reduo do sulfato semelhante reduo do
nitrato, ou seja, mxima durante o perodo de expanso foliar mas diminui
drasticamente aps a maturao da folha.
30

. A absoro do SO42- aparentemente reduzida pela presena em excesso de Cl; altos nveis de selnio em alguns solos podem induzir carncia de S. A velocidade de
absoro do SO42- depende do ction acompanhante, obedecendo seguinte srie
crescente Ca2+, Mg2+, NH4+, K+ (Malavolta, 1979).
A necessidade de S para o bom crescimento das plantas varia de 0,1 a 0,5 % do
peso seco do material vegetal. As crucferas so as mais exigentes, com teores nas
sementes entre 1,1 a 1,7 % de S na base de peso seco. O contedo de S nas protenas
varia entre fraes proticas de clulas individuais e entre espcies de plantas. Em geral,
as protenas das leguminosas contm menos S do que as protenas dos cereais, e a
relao N/S gira em torno de 40/1 e 30/1 nestas espcies, respectivamente.
As protenas so os compostos nos quais a maior parte do S (e do N,
naturalmente) se incorpora.
Quando o fornecimento de SO42- alto, a sua absoro pode ser mais rpida que
sua reduo e a assimilao dos tomos de S em compostos orgnicos.
O S constituinte dos aminocidos cistena e metionina (principalmente) e,
portanto, das protenas que os contm (Figura 4). A tiamina, a biotina e a coenzima A
(COa) so coenzimas essenciais para o metabolismo quando ligados s apoenzimas
apropriadas (protenas) que as requerem para exercer sua funo de catalisadores
orgnicos (enzimas).
As funes que o S desempenha na planta podem ser classificadas em dois
grandes grupos: estruturais e metablicas.

31

SO4-2
ATP

Reduo

Adenosina fosfossulfato (APS)

ATP

Fosfo adenosina fosfossulfato (PAPS)

SO3-2

Incorporao

S-2 R-serina

Biotina
NH2
HS-CH2CH-COOH
(cistena)

Coenzima A
Glutatione
Cistationina

CH2-CH-COOH
NH2

NH2

CH3-S-CH2-CH2-CH-COOH
(Metionina)

S
S

NH2

CH2-CH-COOH
(cistina)

Protenas

S adenosil metionina

Figura 4. Reduo, incorporao e metabolismo do enxofre na planta

Fonte: Malavolta (1979).

32

3.2.1.1 Estruturais
Os compostos de S desempenham papel muito importante na estrutura das
protenas. Como se sabe, as protenas tem estrutura primria por meio da ligao
peptdica (NH-CO) ; a estrutura secundria pode ser devida a ligaes cruzadas ou ao
desdobramento causado por ligaes de dissulfeto (S-S) covalentes e as pontes de
hidrognio entre duas cadeias; a estrutura terciria controlada por ligaes H no
peptdicas, ligaes inicas e grupos hidrfobicos ao longo das cadeias polipeptdicas.
As trs estruturas so essenciais para o funcionamento da protena. Os aminocidos
contendo S fornecem as ligaes de dissulfeto (da cistena) para a ligao de duas
cadeias ou para a formao de anis estveis numa mesma cadeia. Os grupos sulfdrico
(SH) fornecem stios para a ligao de ctions metlicos podendo por isso afetar a
estrutura secundria devido conformao da cadeia protica ao redor do metal. Os
grupos SH podem ainda funcionar como locais para a formao de pontes de H e para a
ligao de grupos protticos (no proticos) das enzimas. Os grupos tioeter (S-CH3) da
metionina, sendo hidrfobicos podem afetar a estrutura terciria mediante interao com
outros grupos hidrfobicos da cadeia.
steres de SO42- com polissacardeos so componentes estruturais importantes
das membranas das membranas celulares.

3.2.1.2 Metablicas
As funes metablicas do S so devidas a:

Aminocidos em protenas

Aminocidos livres

Outros compostos de S de baixo peso molecular.

33

Os grupos SH nas protenas enzimticas podem ser o stio de ligao do

substrato com a enzima. Muitas das enzimas do metabolismo dos carboidratos so
sensveis aos reagentes que destroem os grupos SH indicando pelos menos uma ao
indireta desses grupos em processos metablicos.
Os compostos de S: tiamina, cido lipoico e CoA funcionam como carregadores
de acila (R-CO) na oxidao de alfa cetocidos.
A biotina est associada com a fixao no fotossinttica do CO2 e com reaes
de descarboxilao.
O S componente essencial do anel de tiazol da tiamina, uma vitamina que pode
ocorrer como vitamina livre ou ligada ao pirofosfato (tiamina pirofosfato) quando atua
como coenzima na descarboxilao do piruvato a acetaldedo e na oxidao de alfa-ceto
cidos.
A S-adenosil metionina desempenha papel essencial nas reaes de transferncia
de radicais que contm um C (transmetilaes), segundo Malavolta (1979).
Devido sua participao num nmero to grande de compostos e de reaes, a
falta de S provoca uma srie de distrbios metablicos:
1.

diminuio na fotossntese e na atividade respiratria;

2.

queda na sntese de protenas com o aparecimento de altas relaes N

solvel / N protico;

3.

reduo no teor de gorduras;

4.

acmulo de carboidratos solveis com elevao da relao C solvel / C

amido;

5.

diminuio na fixao livre e simbitica do N2 atmosfrico.

Finalmente, o S desempenha funes que determinam aumentos na produo e

na qualidade do produto obtido. Como j mencionado, esse nutriente componente dos

34

aminocidos cistina, metionina e cistena, os quais so componentes da protena,

encerrando 90 % do S encontrado na planta. Alm disso, o S est ligado s vitaminas
biotina e tiamina, sendo esta ltima um problema nutricional em pases que tm como
base de alimentao o arroz (Vitti, 1986). O S componente do acetil CoA, composto
que representa o centro nervoso no ciclo de Krebs, influenciando, portanto, todo o
metabolismo de gordura e carboidratos. Participa ainda da composio de azeites de
alho livres de N (bissulfeto de alila) nas plantas bulbosas (cebola, alho) e de essncia de
mostarda com N (glucosdeo) nas crucferas; na ativao de enzimas proteolticas, como
a ficinase (figo), bromelina (abacaxi) e papana (mamo); da composio das
ferrodoxinas, complexos enzimticos envolvidos na fotossntese e na fixao do N2; e
na formao de clorofila. Os grupos sulfidrilos (-SH), no tecido vegetal, parecem
aumentar a tolerncia ao frio e seca.
Analisando as funes do S, segundo Vitti et al. (1988), observa-se que o S est
intimamente ligado ao metabolismo do N, sendo inclusive utilizada a relao N/S do
vegetal para avaliar o seu estado nutricional (Vitti & Trevisan, 2000).
3.3

Fontes de S

Mais de 95 % do S encontrado no solo esto ligados matria orgnica. Outras

fontes naturais incluem os dejetos animais, a gua e a atmosfera (Lopes, 1998).
Os dejetos de animais contm nveis de S variando de menos de 0,02 a at cerca
de 0,3 %. Obviamente, o contedo varia consideravelmente, dependendo das espcies,
do mtodo de armazenagem e aplicao.
O SO2 e outros gases da atmosfera, dissolvidos na gua da chuva e da neve,
podem contribuir com at 22 kg de S.ha-1.ano-1, ainda mais em algumas reas
industrializadas. De acordo com Lopes (1998), a gua de irrigao pode conter

35

concentraes bem altas de S. Quando o teor de S-SO4 na gua de irrigao excede 5

mg.L-1, a deficincia de S pouco provvel. Mesmo assim, aplicaes de fertilizantes
de arranque, contendo S, podem ser benficas por causa da mobilidade do sulfato
durante chuvas intensas.
A maioria das fontes de S formada por sulfatos (Quadro 5) e so
moderadamente ou muito solveis em gua. As formas solveis tambm incluem
bissulfetos, tiossulfatos e polissulfatos. A forma mais importante de S insolvel em
gua o S elementar, que precisa ser oxidado a S- SO4 antes das plantas poderem
utiliz-lo. A oxidao bacteriana do S no solo favorecida por:
-

Temperaturas do solo mais elevadas;

Teor adequado de umidade;

Aerao do solo;

Partculas menores.

36

Quadro 5. Fontes mais comuns de S

Fonte

Teor de S (%)

Sulfato de amnio

22-24

Tiossulfato de amnio

26

Polissulfeto de amnio

40-50

Sulfato de potssio

15-17

Sulfato de potssio e Mg

22-24

Gesso

12-18

Sulfato de Mg

12-14

Superfosfato simples

10-12

S elementar

> 85

Sulfonitrato de amnio

15

Torta de algodo

0,3

Esterco de curral

0,5

Resduo de esgoto

0,1-0,5

Tancage

0,9

Superfosfato triplo

0,3-1,0

Superfosfato amoniacal

12

Fosfossulfato de amnio

15

Fonte: modificado de Malavolta (1976) e Lopes (1998)

37

O quadro 6 apresenta respostas de algumas culturas aplicao de S

Quadro 6. Respostas de culturas brasileiras ao S.
Cultura
Algodo
Arroz
Caf
Cana
Citros
Colonio
Colza
Feijo
Milho
Repolho
Soja
Sorgo
Trigo

Aumento da produo
(%)
37
16
41
11
18
21
51
28
21
9
24
10
26

Os sulfatos solveis em gua so imediatamente disponveis para as plantas e

devem ser utilizados quando o S necessrio rapidamente. Segundo Lopes (1998), estas
fontes so usadas normalmente em fertilizantes slidos, apesar de solues de sulfato de
amnio tambm serem comuns.
O tiossulfato de amnio (12 % N e 26 % S) um lquido claro adequado para
uso em fertilizantes fluidos ou gua de irrigao. Ele deve ser colocado junto com a
semente; se aplicado em faixas, estas devem estar a pelo menos 2,5 cm da semente. O
polissulfeto de amnio uma fonte fluida vermelha de S, com um forte cheiro de
amnia, comumente aplicado na gua de irrigao (Lopes, 1998). O S neste ltimo
produto precisa ser oxidado para a forma de sulfato para se tornar disponvel s plantas.
Apesar do gesso (sulfato de Ca) ser menos solvel em gua do que os outros
sulfatos, ele uma fonte eficiente e barata de S.
A adubao com S elementar resulta em resposta mais lenta da cultura do que
com fontes na forma de sulfato, por causa da sua insolubilidade em gua. Para ser

38

eficiente, essa fonte deve ser incorporada ao solo com bastante antecedncia s
necessidades das culturas. Usado de maneira adequada, entretanto, o S elementar uma
fonte de S agronmica e economicamente adequada (Lopes, 1998). Uma objeo ao uso
do S finamente modo o desconforto para o usurio. Ele muito pulverulento e pode
apresentar riscos de incndio sob condies de armazenamento. O problema
usualmente evitado pela granulao do S com bentonita.
3.4

Deficincia de S
Em plantas deficientes em S, a inibio da sntese de protenas est

correlacionada com uma acumulao de compostos solveis de N e NO3-. Amidas esto

presentes em concentraes acima do normal e tambm propores de fraes solveis
de N (Karmoker et al., 1991). O contedo de SO4- extremamente baixo em plantas
deficientes e, ao fornecer S as plantas rapidamente atingem os nveis satisfatrios. O
contedo de sulfato um indicador bastante sensvel ao status nutricional da planta em
relao ao S, mais do que o contedo de S total. O melhor indicador parece ser a relao
entre o SO42- e o contedo de S total.(Freney et al., 1978).
O baixo contedo de S nas protenas influencia consideravelmente a qualidade
nutricional das plantas. A metionina um aminocido essencial para a nutrio humana
e considerada como um fator limitante quando os gros so considerados como a fonte
principal de protenas. Em brssicas, o contedo de gluconosinolatos e seus metablitos
volteis est muito relacionado com o contedo de S. O suprimento de S pode ser
considerado favorvel ou desfavorvel s plantas, do ponto de vista qualitativo. Em
alguns alimentos ocasiona um sabor mais acentuado e em outros diminui a sua
palatabilidade (Portz, 2005).
reas com solos deficientes em S tem aumentado e, de acordo com Lopes
(1998), existem vrios fatores que contribuem para isso, incluindo:

39

Aumento na produo das culturas que removem grandes quantidades de S;

Aumento do uso de fertilizantes de alta concentrao que contm pouco ou

nenhum S
-

Menor contaminao atmosfrica por S por causa de diminuio do uso de

combustveis com altos teores de S e aumento de tcnicas de remoo de S dos

gases emitidos,
-

Menor uso de pesticidas contendo S;

Imobilizao de S na matria orgnica que acumulada em decorrncia das

prticas conservacionistas (plantio direto, cultivo mnimo, etc.);

-

Maior preocupao quanto s necessidades de S para produes lucrativas das

culturas e qualidade dos produtos.

Outros fatores contribuem para o aparecimento de deficincias de S e tambm

devem ser considerados quando se pretende fazer recomendaes para o uso de S:
- Cultura a ser explorada culturas forrageiras de alta produtividade tais como hbridos
de capim bermuda e alfafa removem mais S e, em geral, respondem mais
freqentemente a esse nutriente do que a maioria das culturas produtoras de gros.
-

Textura do solo a lixiviao de SO4- nos solos arenosos mais intenso do que nos
solos argilosos.

Matria orgnica os solos com menos de 2 % de matria orgnica so os que

comumente apresentam deficincia de S. Cada 1 % de matria orgnica libera cerca
de 6 kg.ha-1.ano-1 de S (Lopes, 1998).

Qualidade da gua de irrigao os lagos e os rios usualmente contm altas

concentraes de S em comparao coma gua de poos profundos. Por isso

40

interessante analisar as fontes de gua com a finalidade de determinar suas

concentraes de S.

41

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47

CAPTULO 13
MICRONUTRIENTES
Antonio Roque Dechen(1);Gilmar Ribeiro Nachtigall(2)

(1)

Professor do Departamento de Solos e Nutrio de Plantas ESALQ/USP C.

Postal 9, 13418-900, Piracicaba, SP. ardechen@esalq.usp.br.

(2) Eng. Agr. Pesquisador da Embrapa Uva e Vinho, C. Postal 130, 95700-000, Bento
Gonalves, RS. gilmar@cnpuv.embrapa.br

SUMRIO
1
1.1
1.2
2
2.1
2.1.1
2.1.2
2.2
2.2.1
2.2.2
2.3
2.3.1
2.3.2
2.4
2.4.1
2.4.2
2.5
2.5.1
2.5.2
3
3.1
3.1.1
3.1.2
3.2
3.2.1
3.2.2
3.3
3.3.1
3.3.2
4
5

INTRODUO .................................................................................................... 3
CONSIDERAES GERAIS ..................................................................................... 3
FATORES QUE PODEM AFETAR A DISPONIBILIDADE DE MICRONUTRIENTES .......... 5
2.MICRONUTRIENTES CATINICOS.......................................................... 7
COBRE ................................................................................................................. 7
Cobre no solo ............................................................................................. 7
Cobre na planta........................................................................................... 9
FERRO ............................................................................................................... 12
Ferro no solo............................................................................................. 12
Ferro na planta.......................................................................................... 14
MANGANS ....................................................................................................... 18
Mangans no solo..................................................................................... 18
Mangans na planta.................................................................................. 20
NQUEL ............................................................................................................. 23
Nquel no solo .......................................................................................... 23
Nquel na planta ....................................................................................... 23
ZINCO ................................................................................................................ 25
Zinco no solo ............................................................................................ 25
Zinco na planta ......................................................................................... 27
MICRONUTRIENTES ANINICOS.............................................................. 32
BORO................................................................................................................. 32
Boro no solo ............................................................................................. 32
Boro na planta .......................................................................................... 33
CLORO............................................................................................................... 36
Cloro no solo ............................................................................................ 36
Cloro na planta ......................................................................................... 38
MOLIBDNIO ..................................................................................................... 39
Molibdnio no solo................................................................................... 39
Molibdnio na planta................................................................................ 41
SNTESE ............................................................................................................. 46
LITERATURA CITADA .................................................................................. 48

1
1.1

INTRODUO

Consideraes gerais
Os micronutrientes so nutrientes essenciais para o crescimento vegetal, caracterizam-

se por serem absorvidos pelas plantas em pequenas quantidades (da ordem de alguns
miligramas por quilograma de massa seca da planta). Isto se deve ao fato de que os
micronutrientes no so elementos que participam da estrutura da planta, s fazendo parte da
constituio das enzimas ou ento so seus ativadores.
A deficincia de qualquer micronutriente pode provocar problemas no crescimento da
planta e no desenvolvimento das razes, repercutindo na qualidade e quantidade da produo.
Os micronutrientes so:

- Micronutrientes catinicos:
- Cobre (Cu)
- Ferro (Fe)
- Mangans (Mn)
- Nquel (Ni)
- Zinco (Zn)
- Micronutrientes aninicos:
- Boro (B)
- Cloro (Cl)
- Molibdnio (Mo)
Os micronutrientes catinicos (Cu, Fe, Mn, Ni e Zn) so de natureza metlica e
encontram-se presentes nos solos e substratos principalmente como xidos, hidrxidos ou
como outros sais e so insolveis a pH altos. Os micronutrientes aninicos (B e Cl) so
considerados no metais, enquanto que o Mo classificado como um metal de transio.
Para o diagnstico de deficincias de micronutrientes no suficiente um exame
visual, j que as deficincias de diferentes elementos provocam sintomas externos muito
similares, sendo necessrio realizar anlise de solo e, preferencialmente, de folhas.
A carncia de micronutrientes pode ocorrer:

Pela falta do micronutriente em quantidade suficiente no solo, de modo que a planta

no consegue absorv-lo nas quantidades necessrias. Esta deficincia pode ser
denominada de absoluta e raramente ocorre.

Por no se encontrarem no solo na forma disponvel para as plantas, por estar retido
em algum componente do solo ou indisponvel pela presena de outros elementos,
caracterizando neste caso, a deficincia induzida. Como exemplo destas situaes tem-

se o bloqueio que sofre o B pelo Ca e a clorose frrica, induzida pela presena de

bicarbonato.

1.2

Fatores que podem afetar a disponibilidade de micronutrientes

So vrios os fatores que podem afetar disponibilidade, e, portanto, absoro de

micronutrientes pelas plantas. Os mais importantes so:

pH do solo: tem grande influncia na disponibilidade dos micronutrientes (Figura 1).

Em pH alto ocorre diminuio da solubilizao e da absoro de Cu, Zn, Fe e Mn. Por
outro lado, nesta condio, ocorre um aumento na disponibilidade de Mo.

Quantidade de matria orgnica: tem grande influncia sobre a disponibilidade de

micronutrientes. Diferentes autores relatam que ao aumentar o contedo de matria
orgnica do solo observaram quantidades crescentes de micronutrientes, contudo, em
algumas situaes ocorre o contrrio.

Os solos com elevados teores de matria

orgnica se encontram entre os que, com mais freqncia, apresentam deficincias de

um ou mais micronutrientes. Em alguns casos, a anlise de solo apresenta teores
elevados de micronutrientes e, no entanto, as plantas apresentam concentraes
inferiores aos de outros solos, indicando que existe, provavelmente, baixa
disponibilidade ou elevada fixao dos micronutrientes nos solos com elevado teor de
matria orgnica ou baixo teor total de micronutrientes.

log atividade, mol/litro

M
F
10

pH
Figura 1 - Influncia do pH na concentrao relativa de micronutrientes na soluo do solo
(Adaptado de Havlin et al. (1999)).

Textura: outro fator que influi no teor de micronutrientes no solo. Assim, solos de
textura arenosa apresentam, com maior freqncia, baixa disponibilidade de B, Cu,
Mn, Mo e Zn, devido ao fato de que estes elementos so lixiviados com facilidade
nestes solos.

Outros fatores: a atividade microbiolgica, a drenagem dos solos, as condies de

oxidao-reduo e as condies climticas interferem na disponibilidade de
micronutrientes. O Zn, que est presente em pequenos teores no solo, pode ter sua
deficincia provocada por microorganismos que competem com as plantas por este

elemento. Por outro lado, os microorganismos podem tambm liberar ons durante a
decomposio da matria orgnica. J o processo de oxidao-reduo interfere de
forma mais expressiva na disponibilidade de Mn e de Fe do que na disponibilidade dos
outros micronutrientes. Contudo, a reduo provocada por um alto contedo de
umidade pode aumentar a disponibilidade do Cu, Mo e Zn, podendo chegar a nveis
txicos. A temperatura afeta a disponibilidade de micronutrientes pelas plantas, j que
em temperaturas elevadas do solo a absoro de micronutrientes favorecida. J
temperaturas baixas reduzem a taxa de mineralizao da matria orgnica do solo,
reduzindo a disponibilidade de micronutrientes presentes nestes materiais orgnicos.

2.1

2.1.1

MICRONUTRIENTES CATINICOS

Cobre

Cobre no solo

O contedo mdio de Cu na crosta terrestre de aproximadamente 55 mg kg-1,

enquanto o contedo total de Cu no solo varia entre 10 a 80 mg kg-1 (Krauskopf, 1972), onde
se encontra, principalmente, na forma divalente (Cu2+), em sua maioria como constituinte das
estruturas cristalinas dos minerais primrios e secundrios. Considera-se que a principal
frao do Cu dissolvido esteja como complexo solvel de cidos orgnicos, tais como ctrico
e oxlico.
O Cu trocvel est fortemente adsorvido especialmente pela matria orgnica do solo,
onde o on, numa grande proporo, fixado pelo hmus, numa forma mais estvel do que a

forma trocvel adsorvida. A fora de ligao do Cu com os cidos hmicos diminui com o
aumento da quantidade de Cu aplicada (Goodman & Cheshire, 1976), contudo, aumenta com
a elevao do pH (Yonebayashi et al., 1994) e com o aumento do grau de humificao da
matria orgnica (Steveson & Fitch, 1981). Este Cu orgnico pode torna-se disponvel
somente depois da mineralizao da matria orgnica. O Cu total no permite fornecer uma
informao precisa sobre a disponibilidade deste elemento, sendo recomendado utilizar
mtodos de extrao, como por exemplo, o DTPA.
As deficincias de Cu ocorrem principalmente em solos orgnicos cidos, em solos
derivados de rochas gneas muito cidas e em solos lixiviados de textura grosseira. Deve-se
considerar que, em alguns sistemas de cultivo, quantidades considerveis de Cu so
adicionadas ao solo atravs de aplicao de fungicidas. Um exemplo desta situao o uso de
fungicidas cpricos no controle de doenas de videiras, por vrios anos, que tem levado ao
acmulo do Cu na superfcie do solo. Em uma regio cultivada com videiras na Frana, o
contedo de Cu total na camada superficial de solos de vinhedo variou de 31 a 250 mg kg-1,
enquanto em solos de florestas variou de 14 a 29 mg kg-1 (Brun et al., 1998). Para as
condies da Austrlia, Pietrzak & McPhail (2004), avaliaram vinhedos cultivados por 20 e
at por mais de 90 anos, observaram teores de Cu total entre 10 e 250 mg kg-1. No Brasil,
Nachtigall et al. (2005) verificaram teores de Cu total entre 1300 e 1400 mg kg-1 em dois solos
cultivados com vinhedos da regio da Serra do Rio Grande do Sul, o que se deve ao fato de
que o manejo de muitos dos vinhedos brasileiros envolver o uso contnuo de calda bordaleza
(CuSO4 + Ca(OH)2) e de outros produtos a base de Cu, para o controle de doenas em
vinhedos cultivados por longos perodos.

2.1.2

Cobre na planta

O Cu absorvido como Cu2+ e Cu-quelato, sendo pequena a sua concentrao nos

tecidos da planta, geralmente entre 2 e 20 mg kg-1 na matria seca. A absoro do Cu pelas
plantas ocorre atravs de processo ativo e existem evidncias de que este elemento iniba
fortemente a absoro do Zn e vice-versa (Bowen, 1969). Considera-se que este elemento no
prontamente mvel na planta, embora existam resultados que mostram o movimento de
folhas velhas para novas. Loneragan (1975) concluiu que o movimento do Cu no interior das
plantas dependente da sua concentrao nestas, uma vez que em plantas de trigo bem supridas
de Cu, pode ocorrer movimento dos gros para as folhas, contudo, em plantas deficientes o
Cu foi relativamente imvel.
Quanto ao transporte do Cu no interior da planta, existem resultados que indicam que
compostos nitrogenados solveis, como os aminocidos, atuam como carregadores deste
elemento no xilema e no floema, j que o Cu apresenta forte afinidade com o tomo de N do
grupo amino (Loneragan, 1981).
Na planta, uma frao considervel do Cu presente nos tecidos parece estar ligada a
plastocianina e alguma frao protica, ocorrendo, tambm, acmulo do elemento em rgos
reprodutivos das plantas, contudo, existem variaes entre espcies.
O Cu um micronutriente constituinte de certas enzimas, incluindo a oxidase do cido
ascrbico (vitamina C), citocromo-oxidase e a plastocianina, que se encontram nos
cloroplastos.
Em condies de deficincia de Cu existe uma relao ntima entre a concentrao de
Cu nas folhas e o contedo das enzimas plastocianina, diamina oxidase e ascorbato oxidase,

bem como da atividade do fotosistema I, contudo parece no afetar significativamente o

contedo de clorofila (Tabela 1). O Cu tambm participa em enzimas de xido-reduo, com
a exceo de certas amino-oxidases e galactose-oxidases, participando, assim, das reaes de
xido-reduo, onde grande parte das enzimas com Cu reagem com O2 e o reduzem a H2O2
ou H2O. O Cu, tambm, faz parte da enzima fenol-oxidase, que cataliza a oxidao de
compostos fenlicos cetonas durante a formao da lignina e da cutcula. Alm disto, o Cu
influencia a fixao do N atmosfrico pelas leguminosas, bem como, um micronutriente
essencial no balano de nutrientes que regulam a transpirao na planta.

Tabela 1. Relao entre a concentrao de Cu e alguns componentes do cloroplasto e a

atividade de enzimas que contm Cu em folhas de ervilha
Atividade de Enzimas
Cu

Clorofila

Plastocianina

Diamina oxidase

Ascorbato
oxidase

(g g-1)

(mol g-1)

(nmol mol-1 clorofila)

(mol g-1 protena h-1)

6,9

4,9

2,4

0,86

730

3,8

3,9

1,1

0,43

470

2,2

4,4

0,3

0,24

220

Fonte: Marschner (1995)

As concentraes de Cu nas plantas variam entre 2 e 75 mg kg-1 de massa seca da

planta, considerando-se concentraes entre 5 e 20 mg kg-1 como adequadas para um
crescimento normal das plantas. As plantas deficientes apresentam concentraes foliares
menores de 4 mg kg-1 enquanto que acima de 20 mg kg-1 pode-se observar sintomas de
toxicidade (Malavolta, 1980, Malavolta et al., 1989; Pais & Jones Junior, 1996; Furlani,
2004).
As plantas raramente apresentam deficincias de Cu, j que este elemento se encontra
disponvel em quase todos os solos. Contudo, a deficincia de Cu pode ocorrer em plantas

cultivadas em solos com baixo teor em Cu total ou em solos com altos teores de matria
orgnica, por no estar disponvel s plantas devido a complexao em formas orgnicas
insolveis (Abreu et al., 2001). De todos os micronutrientes, a deficincia de Cu a mais
difcil de diagnosticar devido interferncia de outros elementos (P, Fe, Mo, Zn e S). No
sistema produtivo de citros e de outras frutas, adubaes em excesso com adubos fosfatados
podem provocar deficincia de Cu.
As deficincias de Cu se manifestam como:

As folhas jovens tornam-se murchas e enroladas, ocorrendo uma inclinao de

pecolos e talos. As folhas se tornam quebradias e caem.

Clorose e outros sintomas secundrios (a clorose nem sempre aparece).

Reduo da lignificao. Os vasos no lignificados do xilema so comprimidos por

tecidos vizinhos, o que reduz o transporte de gua e solutos.

Em cereais, a deficincia de Cu provoca o abortamento de grande nmero de flores,

produzindo espigas pouco granadas.

Em casos de toxicidade (teores no solo superiores a 300 mg kg-1) as alteraes se

manifestam nas razes, que tendem a perder vigor, adquirem cor escura, apresentam
engrossamento e paralisam o seu desenvolvimento. Tambm o excesso pode provocar
deficincia em Fe, j que o Cu em excesso atua em reaes que afetam o estado de oxidao
do Fe, limitando sua absoro e translocao na planta. Outro efeito do excesso de Cu a
reduo da absoro de P.

2.2

2.2.1

Ferro

Ferro no solo

O Fe constitui cerca de 5% da crosta terrestre, sendo o segundo elemento em

abundncia depois do alumnio, entre os metais, e quarto em abundncia depois do oxignio e
silcio (Mengel & Kirkby, 1987). O Fe no solo apresenta-se na forma divalente (Fe2+) e
trivalente (Fe3+), dependendo do estado de oxi-reduo do sistema. Muitos solos cultivados
apresentam baixo teor de Fe, tanto na soluo do solo como adsorvido em forma trocvel.
O Fe no trocvel est presente em vrios minerais primrios, tais como biotita,
hornblenda, augita e olivina. xidos de Fe primrios, que ocorrem em muitos solos, incluem a
hematita (FeO3), a ilmenita (FeTiO3) e a magnetita (Fe3O4), j em rochas sedimentares, as
formas primrias so alguns xidos e a siderita. O Fe se encontra, tambm, em minerais
secundrios, sendo um elemento presente em amplo grupo de minerais de argila (Oades,
1963). Encontra-se tambm ligado a complexos orgnicos.
A colorao dos solos devida, em sua maioria, presena dos xidos livres. As cores
amarelo-pardas das zonas temperadas-frias se devem presena de xidos hidratados como a
goetita. As coloraes vermelhas de regies ridas so devidas a xidos no hidratados como
a hematita.
O Fe, na forma ferrosa, entra no complexo de troca inica dos solos. A forma frrica
fortemente adsorvida pelos colides do solo, formando complexos com os cidos hmicos e
colides orgnicos; no entanto, pode ser transportado pela gua. Os solos sob condies de
reduo ou de alagamento tm um alto contedo de Fe ferroso. O contedo de Fe frrico

aumenta com o aumento da acidez, atingindo grandes concentraes somente em solos muito
cidos, com pH menores que 3 e em solos ricos em cidos hmicos e colides capazes de
formar complexos solveis com Fe.
A influncia do pH na solubilidade dos compostos de Fe pode ser verificada na Figura
2. Verifica-se que somente em condies muito cidas os teores de Fe estariam em torno de
10-6 M, valor que poderia suprir as necessidades das plantas atravs do transporte por fluxo de
massa. J a elevao de uma unidade de pH (de 3 para 4) proporcionaria um decrscimo na
disponibilidade para 1% da necessidade das plantas. O aumento do suprimento de Fe s razes
pode ocorrer, entre outros mecanismos, pela formao de complexos solveis ou quelatos.
Esses agentes quelantes podem se originar de exsudatos de razes, de substncias produzidas
pela decomposio da matria orgnica do solo, atravs da ao de microorganismos, ou pela
adio de fertilizantes quelatizantes ao solo (Lindsay, 1974).
Os contedos de argila e matria orgnica influem tambm na disponibilidade do Fe,
j que em solos argilosos existe uma tendncia a reter o Fe, enquanto que teores adequados de
matria orgnica proporcionam um melhor aproveitamento do Fe pelas plantas, devido a suas
caractersticas acidificantes e redutoras, bem como capacidade de determinadas substncias
hmicas para formar quelatos em condies adversas de pH.

NECESSIDADE DA PLANTA

- log Fe Solvel (mol L-1)

NVEL DE 1%
Fe Solvel Total

Fe3+
Fe2+

6
pH

Figura 2. Influncia do pH do solo sobre a solubilidade do Fe (Adaptado de Lindsay, 1974).

2.2.2

Ferro na planta

O Fe pode ser absorvido como Fe2+, Fe3+ e como Fe-quelato, sendo que a sua absoro
pelas plantas metabolicamente controlada. Na absoro do Fe so envolvidos pelo menos
dois processos. No primeiro processo, que uma caracterstica das eudicotiledneas e das
gramneas no monocotiledneas, prtons so liberados do interior das razes, o que provoca
uma acidificao da rizosfera. Nestas condies, e na presena da Fe3+ redutase, o Fe3+
reduzido a Fe2+ na membrana plasmtica das clulas das razes. Este Fe reduzido
transportado para o interior da membrana plasmtica atravs de um sistema especfico de
transporte (Figura 3A). A capacidade das razes em reduzir Fe3+ para Fe2+ fundamental na
absoro deste ction para muitas plantas, j que este necessita ser reduzido antes de entrar
nas clulas (Chaney et al., 1972). O segundo processo, que ocorre em gramneas como

cevada, milho e aveia, envolve a extruso de siderforos pelas razes. Aps estes siderforos
serem liberados, estes formam complexos com o Fe3+, os quais so transportados para o
interior das clulas das razes, no ocorrendo reduo para Fe2+ (Figura 3B) (Epstein &
Bloom, 2004).

ATP

H+

ADP

Fe3+ - quelato

Partcula
do solo

siderforo

NADH
NAD+

Fe3+ - siderforo

Fe2+
Exterior

Interior
Membrana
Plasmtica

Exterior

Interior

Membrana
Plasmtica

Figura 3 - Processos de absoro de Fe. (A) Processo comum em eudicotiledneas como

ervilha tomate e soja. (B) Processo comum em cevada, milho e aveia (Adaptado de
Guerinot & Yi, 1994).

No espao livre aparente esse elemento necessita estar presente na forma inica ou
como quelato. Segundo Rmheld & Marschner (1983), o Fe3+ quelato reduzido de forma
mais rpida do que o FeCl3. A velocidade de reduo do Fe dependente do pH, de modo
que, em pH baixo a velocidade de reduo maior. Em exsudatos do xilema o Fe parece
ocorrer na forma no quelatizada, embora seu transporte seja controlado por citrato. Tanto a

absoro quanto o transporte do Fe em plantas so afetados por fatores da planta (processos

metablicos) e ambientais (pH, concentrao de clcio e fsforo).
A principal funo do Fe a ativao de enzimas, atuando como grupo prosttico.
Participa em reaes fundamentais de xido-reduo, tanto em hemoprotenas (citocromos,
leghemoglobina, catalase, peroxidase, superxido dismutase, etc) como em protenas nohmicas com ligao Fe-S como ferredoxina e enzimas redutase, nitrogenase e sulfato
redutase.
O Fe catalisa a biossntese da clorofila, j que faz parte constituinte de enzimas
responsveis pela sua formao. Na ausncia de Fe a planta s apresenta pigmentos amarelos
(xantofila e caroteno). Faz parte da ferredoxina, transportador de eltrons de natureza no
porfirnica que atua na fotossntese e na reduo dos nitratos. Outras enzimas que contm Fe,
mas nas que no atuam como xido-redutor, so a aconitase e a xantin-oxidase. A fitoferritina
[(FeO.OH)8 (FeO.OPO3H2)] apresenta aproximadamente 5000 tomos de Fe3+ uma protena
de reserva.
Admite-se que o on requerido no metabolismo o ferroso, em cuja forma absorvido
pela planta, j que a forma de maior mobilidade e disponibilidade para sua incorporao em
estruturas biomoleculares. Certamente o on frrico se forma e parte deste translocado s
folhas como um quelato aninico do citrato.
Em relao ao metabolismo do Fe na planta, deve-se levar em conta que este apresenta
baixa mobilidade nos tecidos vegetais. Esta mobilidade afetada negativamente por vrios
fatores, como o elevado contedo de P, deficincia de K, quantidade elevada de Mn e baixa
intensidade luminosa. A presena de bicarbonato no mdio radicular reduz a mobilidade do
Fe nos tecidos vegetais.

As concentraes de Fe nas plantas variam entre 10 e 1500 mg kg-1 de massa seca da

planta, dependendo da parte da planta e da espcie, considerando-se concentraes entre 50 e
100 mg kg-1 como adequadas para um crescimento normal das plantas. As plantas deficientes
apresentam concentraes foliares menores que 10 mg kg-1 enquanto que acima de 80 mg kg-1
podem-se observar sintomas de toxicidade (Malavolta, 1980, Malavolta et al., 1989; Pais &
Jones Junior, 1996; Furlani, 2004).
O efeito mais caracterstico da deficincia de Fe a incapacidade das folhas jovens
para sintetizar clorofila, tornando-se clorticas, e algumas vezes de cor branca. O Fe
considerado imvel na planta. A entrada de Fe no floema diminuda provavelmente pela
formao de compostos insolveis. Contudo, uma vez que o Fe levado a um rgo pelo
xilema, sua redistribuio fortemente limitada. Muitos dos sintomas de deficincia de Fe
ocorrem pela baixa taxa de translocao, que pode provocar acumulao de Fe nas razes e
folhas velhas, enquanto que nas folhas jovens apresentam deficincias do elemento. Os
sintomas visuais caractersticos de deficincia so:

As folhas velhas apresentam cor verde, enquanto as folhas jovens comeam a

amarelar. Diversos estudos demonstram que existe correlao entre o fornecimento de
Fe e as concentraes de clorofila nas folhas.

Conforme vai avanando a deficincia, observa-se uma clorose internerval

caracterstica, onde somente os vasos permanecem de cor verde, contrastando com a
cor amarelada ou esbranquiada do limbo.

Em casos de deficincia forte, o amarelecimento pode ser total e aparecem zonas

necrticas nos bordos do limbo, produzindo-se uma queda precoce das folhas e, em
casos muito graves, a desfolha total.

Os talos permanecem finos e curvados, levando a uma reduo do crescimento.

Em plantas anuais ocorre uma diminuio em seu crescimento, apresentando aspecto

raqutico e reduo da produo. Em plantas arbreas ocorre queda de folhas, os frutos
so pequenos e amadurecem precocemente.

Normalmente os solos esto bem providos de Fe, contudo podem ocorrer situaes de
deficincia de Fe nas plantas em decorrncia na imobilizao do Fe. Trata-se de deficincia
induzida ou secundria, manifestando-se pela falta de clorofila, sendo denominada clorose.
Em solos cidos, ricos em fosfatos solveis, pode ocorrer clorose frrica por precipitao do
Fe3+ na forma de FePO4. Na presena de MnO2 o Fe reduzido se oxida, passando a forma
frrica no assimilvel. Assim, a disponibilidade de Fe depende mais do equilbrio Fe/Mn do
que do seu teor absoluto. Tambm tem sido observada deficincia de Fe em funo da ao de
outros elementos metlicos, como o Cu, que pode substituir o Fe nos quelatos do solo,
originando sua imobilizao, bem como de Zn e Co, que apresentam efeitos similares, porm
de menos importncia.
Devido rapidez de converso do Fe solvel em compostos insolveis no disponveis
para a planta, so raros os casos de toxicidade por Fe. Solos com teores de Fe total superiores
a 5% no provocam efeitos txicos na maioria dos cultivos. Para o arroz irrigado por
inundao tem-se observado toxicidade de Fe, onde os nveis de Fe ferroso so muito
importantes.

2.3

2.3.1

Mangans

Mangans no solo

O contedo de Mn na crosta terrestre de aproximadamente 900 mg kg-1, sendo

considerado o dcimo primeiro elemento mais comum na natureza. O Mn existente no solo
proveniente de xidos, carbonatos, silicatos e sulfetos. Os xidos e sulfetos de Mn so as
formas encontradas com mais freqncia nos solos, sendo comum a sua ocorrncia em
associao com o Fe. Nos solos, os teores de Mn geralmente encontram-se na faixa de 20 a
3000 mg kg-1, com mdia de 60 mg kg-1 (Lindsay, 1979).
Devido a seus diferentes graus de oxidao (II, III e IV) e propriedade de passar com
facilidade de uma forma a para outra, o comportamento do Mn no solo complexo. As
formas mais comuns do Mn no solo so:

on mangans Mn2+ (divalente) proveniente do intemperismo do solo. trocvel e

disponvel para as plantas.

xidos e hidrxidos (MnO2 , MnOOH) ou associado a hidrxidos de Fe.

Sais pouco solveis (fosfatos de Mn(II) e Mn(III), carbonatos de Mn(II)), sobretudo

em solos calcreos e alcalinos.

Participando de compostos orgnicos.

A presena de Mn disponvel (Mn2+) depende tanto do pH como do potencial redox do

solo. Em valores de pH superior a 5,5 a oxidao por ao biolgica em solos bem arejados
favorecida, contudo, diminui sua disponibilidade. Por outro lado, as formas oxidadas se
reduzem,tornando-se mais disponveis, a pH mais cido e em solos reduzidos.
O Mn mais mvel no solo do que o Fe e, freqentemente se distribui no perfil do
solo de forma diferente deste. Considerando que as substncias hmicas reduzem o Mn
facilmente, e que o elemento se oxida com dificuldade em meio cido, tem-se, nestas
condies maior migrao do elemento no perfil do solo.

Os principais fatores do solo que determinam a disponibilidade de Mn so o pH, as

condies de xido-reduo, os teores de matria orgnica e o equilbrio com outros ctions,
principalmente Fe, Ca e Mn (Bartlett, 1988; Reisenauer, 1988). Os valores de pH entre 6,0 e
6,5 parecem ser crticos. Valores baixos de pH favorecem a reduo, enquanto valores altos
favorecem a oxidao.

2.3.2

Mangans na planta

O Mn pode ser absorvido pelas plantas como Mn2+. Considera-se que as plantas no
podem absorver o Mn4+, enquanto se desconhece sua capacidade para absorver apreciveis
propores de Mn3+, j que este muito instvel. Acredita-se que existe um equilbrio
dinmico entre as formas de Mn, sendo que os microorganismos so principalmente
responsveis de sua oxidao entre pH 5,0 e 7,9, enquanto a oxidao no biolgica ocorre
somente acima de pH 8,0.
Tem sido encontrada evidncia, em todos os trabalhos sobre absoro e distribuio de
Mn, de que a sua absoro controlada metabolicamente, possivelmente de uma forma
similar quela que ocorre para outros ctions, como o Mg e o Ca. Entretanto, a absoro
passiva deste elemento tambm pode ocorrer, principalmente quando o metal encontra-se em
nveis txicos na soluo.
O Mn ocorre na seiva das plantas na forma livre Mn2+. Goor, citado por KabataPendias & Pendias (1985), relata uma concentrao menor de Mn em exsudatos do floema do
que em tecidos das folhas, indicando que o pequeno transporte do elemento atravs do floema
responsvel pela sua baixa concentrao em frutos, sementes e rgos de reserva das razes.

Heenan & Campbell (1980) relataram que, na condio de bom suprimento de Mn, as
folhas acumulam altas concentraes conforme avana a idade da planta, sendo uma pequena
quantidade do elemento translocada das folhas velhas para as novas em desenvolvimento,
onde o elemento deficiente. Contudo, deve-se considerar que a concentrao de Mn varia
grandemente dentro da planta e durante o perodo vegetativo.
Considera-se que o Mn facilmente absorvido pelas plantas quando ocorre na forma
solvel no solo, existindo uma relao direta entre o teor solvel do elemento no solo e a
concentrao na planta. Por outro lado, existe uma correlao negativa entre a concentrao
de Mn nas plantas e o aumento do pH, e uma correlao positiva com a matria orgnica.
O Mn e um micronutriente essencial para a sntese de clorofila, sua funo principal
est relacionada com a ativao de enzimas. Participa no funcionamento do fotosistema II da
fotossntese, sendo responsvel pela fotlise da gua. O Mn pode atuar no balano inico
como um contra-on reagindo com grupos aninicos. Grande nmero de enzimas so ativadas
pelo Mn, especialmente as envolvidas em metabolismos intermedirios (Dechen et al.,
1991a). No se conhece ainda o papel que exerce o Mn nas reaes de xido-reduo.
A deficincia de Mn tem o efeito mais severo no contedo de carboidratos no
estruturais, como mostra a Tabela 2. Esta diminuio no contedo de carboidratos
particularmente evidente nas razes e , provavelmente, o fator responsvel pela reduo no
crescimento de razes de plantas deficientes neste nutriente.

Tabela 2. Efeito do Mn no crescimento e na composio do feijoeiro.

Parmetros
Produo de M.S.

Folha

Caule

Razes

- Mn

+ Mn

- Mn

+ Mn

- Mn

+ Mn

0,46

0,64

0,38

0,55

0,14

0,21

4,00

17,50

14,50

35,60

0,90

7,60

-1

(g planta )
Carboidratos
solveis (mg g-1)
Fonte: Marschner (1995)

As concentraes de Mn nas plantas variam entre 5 e 1500 mg kg-1 de massa seca da

planta, dependendo da parte da planta e da espcie, considerando-se concentraes entre 20 e
500 mg kg-1 como adequadas para um crescimento normal das plantas. Em muitas plantas, as
folhas com sintomas de deficincia possuem nveis de Mn menores de 20 mg kg-1 em base ao
peso seco, enquanto concentraes superiores a 700 mg kg-1 so consideradas txicas
(Malavolta, 1980, Malavolta et al., 1989; Pais & Jones Junior, 1996; Furlani, 2004).
Os sintomas de deficincia de Mn podem ocorrer tanto em folhas jovens como em
folhas intermedirias e compreendem uma ampla variedade de formas clorticas e manchas
necrticas. Os sintomas iniciais so, freqentemente, cloroses entre as nervuras, tanto em
folhas jovens como velhas, dependendo das espcies, seguidas de leses necrticas. As
deficincias de Mn so mais comuns em solos orgnicos que em inorgnicos, embora o
elemento se encontre presente, geralmente, nas mesmas formas nos dois tipos de solos. No
entanto, a proporo de Mn encontrada, formando complexos com a matria orgnica, muito
mais alta em solos orgnicos.
Quanto toxicidade de Mn, considera-se que a acumulao de Mn2+ txica para a
maioria das plantas cultivadas. Nas condies de solos ricos em hmus, com pH menor ou

igual a 5,5 e com elevadas condies redutoras pode ocorrer acmulo deste elemento. Isto
devido ao fato de que em valores baixos de pH, sua forma assimilvel (bivalente) muito
abundante e pode levar a absoro pelas plantas em quantidades superiores s necessrias para
seu desenvolvimento timo. O Mn parece ser o nico micronutriente que pode acumular-se
nas plantas por absoro excessiva. Os sintomas de toxicidade so mais visveis em plantas
jovens, manifestando-se como manchas marrons em folhas.

2.4

2.4.1

Nquel

Nquel no solo

O contedo de Ni na crosta terrestre de aproximadamente 0,016 %, sendo um

componente comum de rochas gneas. Segundo Pais & Jones Junior (1996), os teores no solo
variam entre 1 e 200 mg kg-1. As fontes mais importantes que contm Ni so as pentandlitas
(pirrotita e calcopirita), bem como as enlateritas (garnierita).

2.4.2

Nquel na planta

O Ni o elemento mais recentemente identificado como essencial para as plantas

superiores (Brown et al., 1987). Embora existam poucas informaes sobre os fatores que
afetam a disponibilidade do Ni, pode-se supor que os fatores que afetam a disponibilidade dos
outros metais afetam tambm a disponibilidade deste elemento.
As plantas o absorvem em forma de ction divalente (Ni2+), sendo seu teor na soluo
do solo muito pequeno, ainda que possa ser mais abundante nos solos onde ocorrem

presena de serpentinas. Neste caso, pode ocorrer toxicidade do elemento para a maior parte
das espcies, ainda que existam algumas que o toleram bem, j que podem tornar o Ni inativo
pela formao de complexos com cidos orgnicos.
Quanto ao transporte do Ni no interior da planta, este apresenta uma capacidade de
redistribuio intermediria. H, entretanto, pouca informao sobre a sua redistribuio.
Segundo Neumann & Chamel (1986), a capacidade de remobilizao no Ni em gernios foi
de 0,01%, comparada com 0,04% para 86Rb e zero para 45Ca.
O Ni faz parte da metaloenzima urease (que contm dois tomos por molcula), a qual
participa da decomposio da uria para amnio e dixido de carbono. Deste modo, este
elemento importante para as plantas que recebem adubaes com uria ou com seus
derivados (por exemplo, na adubao foliar), exercendo um papel importante no metabolismo
do N. Alguns resultados de pesquisa mostram que existem respostas das plantas, como o arroz
e a soja, com a adio de Ni quando se utilizou uria como fonte de N. Na soja o Ni pode
aumentar a atividade da urease foliar, impedindo a acumulao de nveis txicos de uria.
As concentraes de Ni nas plantas variam entre 0,3 e 3,5 mg kg-1 de massa seca da
planta, dependendo da parte da planta e da espcie, considerando-se concentraes prximas a
1,5 mg kg-1 como adequadas para um crescimento normal das plantas. Para plantas de cevada,
0,1 g kg-1 considerada uma concentrao crtica, onde concentraes nos gros menores
que 100 ng kg-1 reduzem germinao de semente significativamente e menores que 50 ng kg-1
reduzem germinao em at 70% (Brown et al.; 1987).
A concentrao de Ni na planta altamente correlacionada com a concentrao do
nutriente na planta, j que o Ni rapidamente absorvido e altamente mvel em plantas. Os
sintomas de deficincia de Ni em plantas leguminosas se caracterizam pelo acmulo de uria,
provocando necrose dos fololos. A uria produzida durante o metabolismo do N, normal

das plantas superiores, onde o Ni evita a acumulao de concentraes txicas de uria. As

folhas das plantas que contm nveis txicos de uria apresentam sintomas de necroses,
apresentando concentraes de Ni que variam entre 0,01 e 0,15 g g-1 grama de peso seco.
Plantas de tomate (Lycopersicon esculentum L.) deficientes em Ni apresentam clorose em
folhas jovens evoluindo para necrose do meristema. As deficincias de Ni afetam o
crescimento, o metabolismo, o envelhecimento e a absoro de Fe pelas plantas. O Ni tem um
papel na resistncia das plantas a doenas.

2.5

2.5.1

Zinco

Zinco no solo

O contedo de Zn na crosta terrestre de aproximadamente 70 g t-1, sendo que na

litosfera o teor mdio de 8 mg kg-1. O teor de Zn nas rochas gneas varia entre 40 mg kg-1
(granito) a 130 mg kg-1 (basalto) e nas rochas sedimentares entre 16 mg kg-1 (arenito) a 96 mg
kg-1 (folhelho) (Souza & Ferreira, 1991). Nos solos, os teores de Zn geralmente encontram-se
na faixa de 10 a 300 mg kg-1 de Zn total, o que no se correlaciona com sua disponibilidade
(Lindsay, 1979).
O Zn encontrado nos solos e nas rochas na forma divalente. Na frao mineral dos
solos o Zn se encontra principalmente em minerais ferromagnticos, tais como a biotita,
magnetita, hornblenda e sulfeto de zinco (ZnS). Estes minerais ao sofrerem intemperizao,
liberam Zn, o qual pode ser adsorvido aos colides do solo, como um ction divalente (Zn2+)
ou formar complexos com a matria orgnica.
O contedo de Zn pode ser afetado pelo pH do solo, de forma que o Zn se encontra
mais disponvel em solos com pH baixo (solos cidos) que em solos com pH alto (solos

alcalinos), apresentando sua mnima disponibilidade em pH acima de 7 (Figura 4). A calagem

excessiva pode provocar deficincia de Zn. O carbonato de clcio tambm reduz fortemente
sua disponibilidade. Nos solos com pH cido as deficincias de Zn podem aparecer depois da
aplicao de adubos com fosfatos solveis, que formam fosfatos de Zn que so muito
insolveis. Nos solos calcreos, de alto pH, geralmente ocorrem mais as deficincias de Zn.
No solo, o Zn encontrado nos horizontes superficiais, o que esta relacionado ao fato
de que: a) os resduos das plantas se depositam na superfcie, onde, atravs da decomposio,
originam pequenas quantidades deste elemento; b) o Zn apresenta baixa mobilidade
descendente no perfil, diferente de outros elementos, devido a capacidade de ser fixado pela
matria orgnica, pelas argilas e pelos xidos e hidrxidos de ferro.
Nos solos agrcolas, o teor total de Zn varia normalmente entre 10-300 mg kg-1,
apresentando teor mdio de 50 mg kg-1,.no entanto, o este teor total no serve como ndice
para prescrever a disponibilidade para as planta.

40

120
y = 7277,2e

-1

30

Zn Mehlich III (mg kg )

-1

Zn CaCl2 (mg kg )

35
-1.408**x

R = 0,99

25
20
15
10
5

y = 155,56 - 13.66**x

110

R = 0,97

100
90
80
70
60
50
40

0
3

pH CaCl2

pH CaCl2

Figura 4. Relao entre os teores de Zn em um Neossolo obtidos pelos mtodos CaCl2 0,01M
(A) e Mehlich III (B) e o pH do solo (Nogueirol et al., 2004).

No solo, o Zn apresenta-se em trs formas principais, que so responsveis pelo seu

suprimento s plantas:

Zn solvel, presente na soluo do solo;

Zn trocvel, adsorvido pelos colides;

Zn fixado. Esta forma pode atingir valores representativos, j que o Zn capaz de

substituir alguns elementos da estrutura da argila (Al, Mn e Fe), permanecendo
indisponvel para a planta.

2.5.2

Zinco na planta

O Zn absorvido na forma de Zn2+ tanto por via radicular como por via foliar. Alguns
autores consideram o Zn altamente mvel, enquanto que outros consideraram o elemento de
mobilidade intermediria. Verifica-se, contudo, que o Zn se encontra concentrado em grande
parte na raiz, enquanto nos frutos seu contedo sempre o mnimo.
O Zn um micronutriente essencial que serve como cofator enzimtico. O Zn
essencial para a atividade, regulao e estabilizao da estrutura protica ou uma combinao
destas:

Constituinte (estrutural) de enzimas deshidrogenases como lcool, lactato, malato e

glutamato deshidrogenase; superxido dismutase e anidrase carbnica. Esta ltima
cataliza a dissoluo de CO2 como passo prvio a sua assimilao:

CO2 + H2O ----> HCO3 + H+

Participa na ativao enzimtica da trifosfato-deshidrogenase, enzima essencial na

glicolise, bem como nos processos de respirao e fermentao; e da aldolases,
encarregadas do desdobramento do ster difosfrico da frutose.

Afeta a sntese e conservao de auxinas, hormnios vegetais envolvidas no

crescimento.

As concentraes de Zn nas plantas variam entre 3 a 150 mg kg-1 de massa seca da

planta. Considera-se que concentraes inferiores a 25 mg kg-1 caracterizam nveis de
deficincia do elemento nas folhas (Malavolta, 1980, Malavolta et al., 1989; Pais & Jones
Junior, 1996; Furlani, 2004).
Na deficincia de Zn a planta sofre efeito drstico sobre a atividade enzimtica,
desenvolvimento dos cloroplastos, contedo de protenas e cidos nuclicos. As deficincias
de Zn costumam apresentar-se nos cultivos plurianuais, sendo menos importantes em cultivos
anuais, ainda que ultimamente sejam encontradas deficincias neste tipo de cultivos, como o
caso do milho.
As deficincias se manifestam em falta de atividade da gema terminal, o que se traduz
num porte em forma de roseta nos cultivos herbceos, enquanto em outros cultivos se
encurtam os entrens.
Os sintomas se iniciam sempre nas folhas mais jovens, que apresentam zonas
clorticas que terminam necrosadas e afetando a todo o parnquima foliar e as nervuras. O
tamanho das folhas pequeno, permanecendo sem despregar-se. Nas folhas adultas no se
costumam apreciar estes sintomas. Em geral, plantas com deficincias em Zn apresentam
folhas com elevados contedos de Fe, Mn, nitratos e fosfatos, enquanto os contedos em
amido so baixos.

A interao entre Zn e P tem sido bastante estudada, sendo verificado que altos teores
de P induzem a deficincia de Zn. Marschner & Schropp, citados por Mengel & Kirkby
(1987), verificaram que altos nveis de P em videira, cultivada em vasos com solo calcrio,
induziram sintomas de deficincia de Zn nas folhas, apresentando baixas concentraes de Zn
nas folhas novas, bem como reduo no crescimento. Em experimentos com soluo nutritiva,
conduzidos paralelamente, no foi verificada deficincia de Zn, embora sua concentrao nas
folhas de videira tenha sido inferior a das folhas com sintomas de deficincia do experimento
com solo (Tabela 3).
Tabela 3. Produo de massa seca, concentrao de P e Zn em folhas de videira e relao
P/Zn, em funo da aplicao de nveis de P no solo e em soluo nutritiva.
P(*)

Massa Seca

(mmol kg-1)

(g)

Concentrao em folhas novas

P (mg g-1 MS)

Zn (
g g-1 MS)

Relao P/Zn

Cultivo em solo
0,3

19,9

2,63

26,6

99

3,0

19,9

2,69

19,7

137

6,0

17,2

3,06

15,5

197

Cultivo em soluo
0,1

15,7

2,72

15,7

173

1,0

15,2

8,60

13,9

678

5,0

15,5

13,47

13,8

976

(*) concentrao no solo (mmol kg-1) ou na soluo (mmol L-1).

Fonte: Marschner & Schropp (1977).

No normal a ocorrncia de toxicidade por Zn em solos com pH elevado, j que

nesta situao ocorre imobilizao do Zn. Contudo, possvel verificar toxicidade de Zn em
solos cidos ou em solos cujo material de origem so rochas ricas neste nutriente. Igualmente
pode existir contaminao por Zn por fontes industriais ou por aplicaes de resduos
orgnicos. Nos casos de toxicidade de Zn as folhas apresentam pigmentaes vermelhas no

pecolo e nas nervuras, sendo, tambm verificada clorose devido baixa concentrao de Fe
(o Zn impede a reduo do Fe, bem como pode impedir o seu transporte para o interior da
planta).

Sintomas de deficincia de Cu em citros, caf e milho.

Sintomas de deficincia de Fe em citros, caf e soja.

Sintomas de deficincia de Mn em citros, caf e milho.

Sintomas de deficincia de Zn em: citros, caf e milho.

Figura 5. Sintomas de deficincia de micronutrientes catinicos.
Fonte: Departamento de Solos e Nutrio de Plantas ESALQ/USP.

3
3.1
3.1.1

MICRONUTRIENTES ANINICOS

Boro
Boro no solo

O contedo de B na crosta terrestre de aproximadamente 0,001%, apresentando-se

combinado como brax. O contedo total de B nos solos varivel, os teores variam entre 3 e
100 mg kg-1, com valores mdios entre 10 a 20 mg kg-1 (Lindsay, 1979). Em general, os solos
de regies costeiras contm entre 10 a 50 vezes mais B que os demais solos, o que se deve
origem marinha .
Na fase slida do solo o B encontrado em trs formas:
- nos minerais silicatados e adsorvido em argilo-minerais e na matria orgnica.
- nos hidrxidos de alumnio e ferro.

O B disponvel para as plantas se encontra na soluo do solo como cido brico em

condies de pH neutro, formando complexos com Ca ou ligado a compostos orgnicos
solveis, e a forma em que este nutriente utilizado pela planta.
A determinao do teor de B no solo, disponvel para as plantas, no deve considerar o
teor total do nutriente, j que o B disponvel representa uma frao muito pequena do B total,
apresentando teores em torno de 0,1-3,0 mg kg-1.
Diversos fatores influenciam a disponibilidade de B do solo. A fixao de B pelo solo
depende do pH, sendo mxima nas condies de pH entre 8 e 9. A mineralizao da matria
orgnica constitui-se em uma fonte importante de B para planta. A textura do solo tambm
tem sua influncia, j que em solos de textura arenosa o B pode ser facilmente lixiviado,
enquanto em solos de textura argilosa sua mobilidade praticamente nula. Assim, as

aplicaes de B em solos argilosos proporcionam perdas praticamente nulas, j em solos

arenosos as perdas podem ser representativas.
Em geral, o B solvel se encontra nas camadas superficiais dos solos bem drenados,
ligado matria orgnica, o que, em condies de perodos de seca, pode dificultar a absoro
do B pelas plantas destas camadas superficiais, devido inibio das razes. Deve-se
considerar, tambm, que em condies de excesso de calagem pode ocorrer reduo na
disponibilidade de B.

3.1.2

Boro na planta

O B absorvido pela planta como cido brico (B(OH)3) e provavelmente como anion
borato (B(OH)4-) a pH elevados, tanto por via radicular como por via foliar.
Considera-se que o B em soluo mova-se at as razes atravs do fluxo de massa, at
que ocorra um equilbrio entre os nveis do nutriente nas razes e na soluo. Devido a esse
movimento passivo, podem ocorrer situaes onde quantidades txicas so absorvidas pelas
plantas quando o teor de B na soluo alto (Dechen et al. 1991b).
O B imvel nas plantas e translocado principalmente atravs do xilema, tendo
mobilidade muito limitada no floema (Raven, 1980). Acumula-se nas folhas velhas, nas quais
a concentrao maior nas pontas e margens (Jones Jr., 1970). Em geral, a parte area das
plantas apresenta maior concentrao de B do que as razes. O movimento do B junto com o
fluxo transpiratrio, provavelmente seja a razo para o aparecimento de sintomas de
deficincia nos pontos de crescimento.
As concentraes de B nas plantas variam entre 12 e 50 mg kg-1 de massa seca da
planta, considerando-se concentraes entre 30 e 50 mg kg-1 como adequadas para um

crescimento normal das plantas. As plantas deficientes apresentam concentraes foliares

menores de 15 mg kg-1 (Malavolta, 1980, Malavolta et al., 1989; Pais & Jones Junior, 1996;
Furlani, 2004).
Est comprovado que as plantas jovens absorvem o B com maior intensidade do que
as mais velhas, sendo pequena a mobilidade dos tecidos velhos para os jovens. Pode,
inclusive, existir deficincia de B numa folha enquanto em outra do mesmo ramo o contedo
adequado. Comprovou-se que o B intervm em vrios processos biolgicos importantes.
Considerando que no possvel realizar um processo biolgico sem a interveno de
enzimas, chega-se concluso que o B atua em alguns sistemas enzimticos como
constituinte ou como componente ativo e essencial do substrato onde tem lugar a reao
biolgica.
O B importante na translocao de acar e metabolismo de carboidrato.
Desempenha papel importante no florescimento, crescimento do tubo polnico, nos processos
de frutificao, no metabolismo do N e na atividade de hormnio. Quanto influncia do B
sobre o metabolismo de cidos nuclicos, demonstrou-se que a deficincia em B interrompe o
desenvolvimento e a maturao das clulas, que constitu a segunda fase do desenvolvimento
celular. Por outro lado, quando as clulas atingem a maturidade, estas no so afetadas pela
deficincia deste elemento, pelo que as deficincias se refletem numa destruio dos
meristemas terminais e tubo polnico, ou seja, nas zonas de crescimento, qualquer que seja a
planta.

Tabela 4. Efeito do B na Incorporao de Fosfato em DNA e na Sntese de Protenas em

Folhas e Razes de Girassol.
Boro (mg L-1)

Folhas

Razes

Fosfato no DNA - % do total

0

0,2

0,5

1,4

1,8

Fosfato do RNA - % do total

0

1,4

3,6

6,4

13,0

Protena mg vaso-1
0

627

713

1267

1468

Fonte: Mengel & Kirkby (1987).

O B intervm na absoro e metabolismo dos ctions, principalmente do Ca; na

formao da pectina das membranas celulares, na absoro de gua e no metabolismo de
glicdios. Tem influncia no metabolismo e transporte de carboidratos, estando comprovado
experimentalmente que uma deficincia em B provoca acmulo de acares nos tecidos. Com
relao formao da parede celular, est comprovado que as plantas com deficincia em B
tm paredes menos resistentes do que plantas sem carncia.
Os sintomas de deficincia de B podem ser distintos conforme a espcie vegetal. Os
mais comuns so:

Reduo do crescimento e deformaes nas zonas de crescimento (nas plantas com

deficincia de B as novas clulas no se diferenciam).

Diminuio da superfcie foliar, com folhas jovens deformadas, espessas, quebradias

e pequenas. Podem apresentar clorose ou inclusive uma cor verde mais intenso.

Plantas deficientes em B apresentam como conseqncia acmulo de compostos

nitrogenados nas partes mais velhas das plantas.

Crescimento reduzido de razes.

Abortamento floral.

Fendas em ramos, pecolos e, s vezes nos frutos. Estes apresentam uma formao
irregular (deformao).

Diminuio da concentrao de clorofila.

Tambm diminui a resistncia s infeces.

Diminuio

da

atividade

das

enzimas

oxidantes

(catalase,

peroxidase

polifenoloxidase).

Uma das plantas mais sensvel deficincia de B no solo o Helianthus annus

(girassol), o qual foi amplamente utilizado para detectar a disponibilidade deste elemento no
solo.
A toxidez de B to grave quanto a sua deficincia, manifestando-se nas folhas por
um amarelecimento das plantas que se estende para as margens.

3.2

3.2.1

Cloro

Cloro no solo
O Cl encontrado na natureza principalmente como nion cloreto (Cl-). O contedo

mdio na litosfera de aproximadamente 500 mg kg-1. O teor no solo, na forma de cloreto,

apresenta grande variabilidade (50 a 3.000 kg ha-1 de Cl-), dependendo dos sais presentes
(principalmente como cloreto de sdio e, em menor proporo, como cloreto de clcio e

cloreto de magnsio) (Lindsay, 1979). Em solos localizados prximo ao mar ou aqueles que
recebem tratamentos com guas com excesso de sais, estes teores de Cl podem ser muito
superiores aos listados acima.
O Cl podem ter como origem a:
- Decomposio da rocha me, principalmente das rochas gneas.
- Decomposio de restos orgnicos.
- Contribuies realizadas pelas chuvas.
- Contribuio das guas de irrigao, presena de fertilizantes e inseticidas.

A maior parte dos Cl do solo retorna ao mar, arrastados pela gua, devido a sua
grande solubilidade e ao fato de que se fixam com facilidade ao complexo coloidal. Uma
pequena parte do Cl pode se tornar insolvel na forma de cloretos de prata, mercrio, cobre
ou chumbo.
Geralmente, os teores de Cl nos solos so suficientes para atender as necessidades das
plantas. Em general, seu teor nos solos no elevado devido a sua grande mobilidade. No
entanto, podem ocorrer casos de toxicidade, principalmente em locais onde a evaporao
supera a lixiviao e no ocorre lavagem deste nion.
Em geral, no existe uma correlao proporcional entre os teores de Cl no solo e na
planta. Em solos arenosos, embora exista grande quantidade de Cl, ocorre pouca absoro
deste nutriente pelas plantas, enquanto que em solos argilosos, com baixa porosidade, mesmo
com baixos teores de Cl, ocorre maior disponibilidade do nutriente s plantas.

3.2.2

Cloro na planta

Foi o penltimo elemento a ser considerado como essencial para a vida das plantas,
cuja essencialidade foi demonstrada em tomateiro cultivado em soluo nutritiva purificada
(Broyer et al., 1954). Encontra-se sempre em quantidades suficientes j que com as chuvas
pode-se ter contribuio de at 20 kg ha-1 por ano, quantidade suficiente para as necessidades
das plantas.
O Cl absorvido pelas plantas, tanto pela raiz como por via area, na forma de Cl- e
tem grande mobilidade na planta.
As concentraes de Cl nas plantas variam entre 70 e 1000 mg kg-1 de massa seca da
planta (Furlani, 2004), considerando-se concentraes entre 20 e 100 mg kg-1 como
adequadas para um crescimento normal das plantas. As plantas deficientes apresentam
concentraes foliares menores de 2 mg kg-1.
O Cl um elemento essencial para o desenvolvimento das plantas superiores e animais
superiores, onde atua na produo do cido clordrico necessrios para a digesto, estando o
cloreto sdico normalmente includo em sua dieta para suprir estas necessidades.
S h uma funo em que se reconhece a participao fundamental do Cl na planta. O
on Cl- essencial no processo da libertao de oxignio por cloroplastos isolados, no
Fotosistema II da fotossntese.
Existem outras funes nas quais tambm poderia ser essencial: Experimentos
demonstram que o Cl essencial na fotossntese via regulao estomtica. A concentrao
ideal de Cl para fotossntese varia segundo a espcie. O incremento na concentrao de Cl
provoca abertura dos estmatos, produzindo as trocas gasosas, e por tanto, para a assimilao
do CO2 na fotossntese. O Cl necessrio para a ativao, ao menos, de trs enzimas (amilase,
asparagina-sintetase e ATPase do tonoplasto).

O Cl apresenta grande mobilidade dentro da planta, podendo migrar para as partes em

atividade fisiolgica. Os sintomas no so fceis de identificar e, poucas vezes se
desenvolvem em condies de campo. Os sintomas mais normais consistem na reduo do
tamanho das folhas, clorose, seguida por um bronzeado, evoluindo para necrose. As razes se
apresentam ans, mais espessas ou em forma de maos prximo ao pice.
Os sintomas de excesso so mais freqentes e mais graves do que os de deficincia.
Contudo, os sintomas de toxidez dependem do grau de tolerncia das plantas (as plantas mais
tolerantes so as halfitas, bem como a beterraba, o milho, a cevada, o espinafre ou o tomate).
Os sintomas de toxidez se caracterizam pela reduo da largura das folhas, que tendem a
enrolar-se, bem como por amplas necroses que provocam secamento das folhas.

3.3

3.3.1

Molibdnio

Molibdnio no solo

O teor mdio de Mo na litosfera de 2,3 mg kg-1. No solo, tem origem da

decomposio das rochas, apresentando-se fundamentalmente na forma aninica (MoO42-). As
formas em que o Mo ocorre no solo so (Davies, 1956):
a) no disponvel, estando retido no interior da estrutura de minerais primrios e
secundrios;
b) parcialmente disponvel ou trocvel, apresentando-se retido nas argilas como MoO42

e disponvel em funo do pH e do teor de fsforo assimilvel;

c) ligado matria orgnica;
d) presente na forma solvel em gua.

A frao do Mo disponvel para as plantas constituda pelo Mo da soluo do solo,

que representa teores extremamente baixos, pelo Mo adsorvido superfcie de sesquixidos
(principalmente Fe2O3 e Al2O3) e de compostos cristalinos de baixa solubilidade e pelo Mo
complexado a matria orgnica. Contudo, a maior parte do Mo do solo encontra-se ocluso
(no disponvel) em minerais (Raij et al., 1987).
Normalmente, a maior parte do Mo se encontra em formas no disponveis para a
planta. A maior ou menor disponibilidade est determinada pelo pH do solo e pelo teor de
xidos de ferro, alumnio e titnio (Figura 6). A presena de matria orgnica, bem como as
quantidades de fosfatos ou sulfatos tem menor influncia na sua disponibilidade.

Figura 6. Relao entre o pH do solo e a disponibilidade de Mo, Mn e P para a cultura do

feijoeiro (Quaggio et al., 1985).

De forma diferente dos outros micronutrientes (Fe, Mn, Cu e Zn), a disponibilidade do

Mo aumenta com o aumento do pH. Desta forma, pode-se explicar o fato de no existir

deficincias deste nutriente em solos bsicos, bem como em solos cidos que receberam
calagem, j que esta aumenta o teor de Mo disponvel.
Em solos cidos e com teores elevados de xidos de ferro e alumnio, a reteno do
nion MoO42- elevada. A fixao do Mo mais intensa quanto maior for o teor destes
xidos e quanto menor for o pH. Em relao a matria orgnica, os resultados so
contraditrios, isto , existem casos em que a disponibilidade de Mo aumenta com a matria
orgnica e outros em que diminui.
Existem resultados que comprovam que a adio de grandes quantidades de
fertilizantes fosfatados em solos cidos favorece a absoro de Mo pela planta. Entretanto, a
adio de quantidades significativas de sulfatos provoca uma ao depressora na absoro de
Mo.

3.3.2

Molibdnio na planta

O Mo absorvido na forma do nion MoO42- e sua absoro proporcional sua

concentrao na soluo do solo, que pode ser reduzida pelo efeito competitivo do SO42(Reisenauer, 1963).
Embora no existam evidncias diretas, aceito que o Mo seja absorvido
metabolicamente. Considera-se que o Mo moderadamente mvel nas plantas, contudo a
forma com que translocada na planta ainda no conhecida. Resultados sugerem que o Mo
se mova no xilema como MoO42-, como Mo-S aminocido complexo ou como molibdato
complexado com acares (Tiffin, 1972).

As plantas requerem pequenas quantidades de Mo, (menos de 1 mg kg-1 de Mo de

massa seca da planta, o que representa, em geral, 40 a 50 g ha-1 para suprir as necessidades da
maioria das culturas).
As concentraes de Mo nas plantas variam entre 0,01 e 500 mg kg-1 de massa seca da
planta, dependendo da parte da planta e da espcie, considerando-se concentraes entre 0,6 e
10 mg kg-1 como adequadas para um crescimento normal das plantas. As plantas deficientes
apresentam concentraes foliares entre 0,01 e 0,6 mg kg-1 (Malavolta, 1980, Malavolta et al.,
1989; Pais & Jones Junior, 1996; Furlani, 2004).
Grandes quantidades de molibdato podem ser absorvidas pelas plantas sem efeitos
txicos. O molibdato um cido fraco que pode formar complexos polianinicos com o
fsforo, como o fosfomolibdato, de modo que possivelmente altas concentraes so
seqestradas sob esta forma nas plantas.
Grande parte do Mo se encontra na enzima nitrato-redutase das razes e colmos das
plantas superiores, a qual cataliza a reduo do on nitrato (NO3-) a nitrito (NO2-). A nitratoredutase das plantas superiores encontrada como uma molibdoflavoproteina solvel, que nas
folhas pode estar associada no envolvimento dos cloroplastos. A enzima oxidada contm
quase sempre Mo (Mo5+). A enzima nitrato-redutase tem o Mo ligado de uma forma
reversvel. Assim, plantas com deficincia de Mo apresentam acmulo de nitratos, de modo
que a falta de Mo tem repercusses similares falta de nitrognio (Tabela 5) Ver captulo 9
neste volume.
Nas razes com ndulos das plantas fixadoras de nitrognio, o Mo se encontra quase
todo na enzima nitrato-redutase e na nitrogenase dos bacterides nodulares. Ainda que os
microorganismos possuam outras enzimas com Mo (sulfito-oxidase, aldedo-oxidase, xantinadeshidrogenase e oxidase), no existem evidncias da presena destas enzimas nas plantas

superiores. A enzima nitrogenase atualmente um constituinte das bactrias simbiticas e

actinomicetos, enquanto a nitrato-redutase a nica enzima com Mo nas plantas superiores.
As plantas superiores podem crescer na ausncia de Mo, contudo necessrio fornecer o
nitrognio na forma de on amnio (NH4+).

Tabela 5. Efeito do Mo e Fonte de Nitrognio no Desenvolvimento e no Teor de Clorofila,

Nitrato e cido Ascrbico em Tomate
Tratamentos
(CaCO3 + Formas de N)

Massa Seca
-1

(g planta )

Clorofila
-1

Nitrato
*

-1

cido Ascrbico
**

(mg 100g m.v. ) (mg g m.s. )

(mg 100g-1 m.v.)

- Mo

+ Mo

- Mo

+ Mo

- Mo

+ Mo

- Mo

+ Mo

Nitrato

9,6

25,0

8,9

15,8

72,9

8,7

99

195

Amnio

16,9

19,4

21,6

17,4

10,4

8,7

126

184

Massa verde. ** Massa seca.

Fonte: Hewitt & Cready, 1956)

O Mo tambm participa das enzimas sulfito-redutase e xantina-oxidase. A deficincia

de Mo repercute negativamente na formao de cido ascrbico, no contedo de clorofila e na
atividade respiratria.
O sintoma caracterstico de deficincia de Mo que as folhas, ainda mantendo a cor
verde, deformam-se, devido morte de alguma das clulas do parnquima. As folhas
apresentam tamanho mais reduzido, apresentando clorose e mosqueados de cor marrom (em
toda ou parte da folha), surgem zonas necrticas na ponta da folha, que se estendem aos
bordos. Por ltimo, a folha morre, provocando uma queda prematura. A deficincia em Mo
induz a uma concentrao anormal de NO3- nas folhas e, portanto, influi no metabolismo do
nitrognio. A deficincia de Mo pode influenciar na viabilidade do gro de plen e,
consequentemente na produtividade das plantas (Tabela 6).

Tabela 6. Efeito do Suprimento de Mo para Plantas de Milho, na Produo e Viabilidade do

Gro de Plen.
Molibdnio

Concentrao de Mo no

(mg kg-1)

gro de plen (g g-1)

plen por antera

plen (m)

(%)

0,01

17

1.300

68

27

0,1

61

1.937

85

51

20

92

2.437

94

86

Nmero de gros de Dimetro do Germinao

Fonte: Agarwala et al., 1979

Os casos de toxicidade por Mo no so muito freqentes, tendo-se descrito plantas

crescidas em zonas de minas com at 200 mg kg-1 em folha sem sintomas de toxicidade.
Podem surgir casos de toxicidade por Mo no gado por ingerir forragens com alto contedo
neste elemento, ocorrendo transtornos intestinais.

Sintomas de deficincia de B em videira, citros e milho.

Sintomas de deficincia de Mo em citros, caf e cana-de-acar.

Sintomas de deficincia de Cl em couve e batata e de toxidez em citros.

Figura 7. Sintomas de deficincia de micronutrientes aninicos. Fonte: Departamento de

Solos e Nutrio de Plantas ESALQ/USP.

SNTESE

Nas Tabelas 7 e 8 so apresentadas, de forma sinttica, a forma absorvida e

incorporada e a mobilidade de redistribuio de micronutrientes, bem como a concentrao
mdia, funes na planta e caractersticas de deficincia de micronutrientes. Deve-se levar em
conta que, por se tratar de um resumo simplificado do texto apresentado neste captulo, muitas
informaes importantes no foram includas, de modo que para um melhor entendimento do
tema, deve-se consultar o texto completo, onde so descritos, com mais detalhes, os temas
abortados nestas tabelas.

Tabela 7. Forma absorvida e incorporada e a mobilidade de redistribuio de micronutrientes

Mobilidade de

Nutriente

Forma absorvida

Forma incorporada

H2BO3

Imvel

Cu

Cu++

Cu++

Imvel

Fe

Fe++

Fe++

Imvel

Mn

Mn

++
--

Mn

++

MoO4

redistribuio

Imvel

--

Mo

MoO4

Mobilidade mdia

Ni

Ni++

Ni++

Imvel

Zn

Zn++

Zn++

Imvel

Tabela 8. Concentrao mdia, funes na planta e caractersticas de deficincia de

micronutrientes
Nutriente

Concentrao
mdia (mg kg-1)

30 50

Cu

5 - 20

Fe

50 100

Mn

20 - 100

Mo

0,1 10

Ni

0,1 1

Zn

20 50

Funes na planta
Transporte de sintetizados
Ativador enzimtico,
fotossntese
Ativador enzimtico,
transporte de eletros,
citocromo
Doador de eltrons, sntese
de clorofila

Caractersticas de deficincia
Deformao de folhas novas e
frutos
Pontos necrticos nas folhas
novas
Clorose (reticulado fino de
nervuras) em folhas novas

Clorose (reticulado grosso de

nervuras) em folhas novas
Folhas novas deformadas,
Nitrato-redutase, produo
amarelecimento das folhas
do gro de plen
velhas
Em leguminosas, acmulo de
Urease, hidrogenase
uria, provocando necrose dos
fololos
Clorose (reticulado grosso de
Ativador enzimtico
nervuras) das folhas novas,
folhas novas lanceoladas

LITERATURA CITADA

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CAPTULO 14
Gaspar H. Korndrfer1
1

Universidade Federal de Uberlndia, Instituto de Cincias Biomdicas, Departamento de

Agronomia. Av. Amazonas, s/n - Umuarama
38400-902 - Uberlandia, MG - Brasil - Caixa-Postal: 593
E-mail: ghk@triang.com.br

SUMRIO
1

Elementos Benficos: Si, Na e Co .........................................................................................2

1.1

12.1. Silcio (Si) .....................................................................................................................2

1.2

12.1.1. Silcio no solo.............................................................................................................3

1.2.1

12.2.2. Silcio na planta........................................................................................6

1.2.2

12.2.3. Silcio e o controle de pragas e doenas ..................................................9

1.2.3

12.2.4. Efeitos do silcio na produo vegetal. ..................................................12

1.3

12.2. Sdio (Na) ...................................................................................................................15

1.3.1
1.4

12.3. Cobalto (Co)................................................................................................................19

1.4.1
1.5
2

12.2.1. Sdio na Planta.......................................................................................16

12.3.1. Cobalto no solo ......................................................................................19

12.3.2. Cobalto na planta .....................................................................................................20

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS.................................................................................25

ELEMENTOS BENFICOS: SI, NA E CO

Alm dos elementos considerados essenciais para as plantas, existem aqueles que so
benficos apenas para algumas espcies ou que podem substituir parcialmente os elementos
essenciais. Esses elementos so importantes no desenvolvimento normal das plantas, mas a sua falta
no considerada um fator limitante. Estes elementos apresentam influncia no crescimento e
desenvolvimento de certas espcies, como o caso sdio (Na), o silcio (Si) e o cobalto (Co).

1.1

12.1. Silcio (Si)

A capacidade de absoro e acumulao de silcio varivel entre as espcies. O silcio

absorvido pelas plantas preferencialmente na forma de (H4SiO4) cido mono silcico. Praticamente
todo o cido mono silcico em solos de pH cido encontra-se na forma molecular, isto , no
dissociada, e tm sua disponibilidade afetada pelo pH, temperatura, teor de matria orgnica, e
concentrao de Si na soluo.
Em solos pobres em silcio disponvel o uso de silicatos geralmente eleva o teor de Si nas
plantas, resultando em aumentos de produtividade principalmente em gramneas (arroz, cana-deacar, sorgo, milheto, aveia, trigo, milho, etc) mas tambm em espcies no gramneas (soja,
feijo, alface, pepino, morango, etc). O silcio est normalmente associado resistncia das plantas
fatores biticos e abiticos tais como ao ataque de pragas e doenas e a resistncia ao estresse
hdrico.
Todos estes benefcios levaram o silcio a ser includo na lista de micronutrientes criada a
partir do decreto lei n 4.954 (que regulamenta a lei 6.894 de 16/01/1980), aprovado em 14 de
janeiro de 2004, que dispe sobre a produo e comercializao de fertilizantes (Brasil, 2004).

1.2

12.1.1. Silcio no solo

O Si o segundo elemento mais abundante da crosta terrestre. Apesar disso, e mesmo

sabendo que a maioria dos solos contm considerveis quantidades de Si, cultivos intensivos podem
reduzir rapidamente o nvel deste elemento no solo.
As principais formas de silcio presentes no solo so: Si "solvel" ou facilmente aproveitvel
pelas plantas, forma essa constituda primordialmente pelo cido mono silcico (Figura 1); Si
"adsorvido" ou precipitado com xidos de ferro, alumnio e mangans (Mckeague; Cline, 1963); Si
"biognica" oriunda da decomposio da matria orgnica e constituda por formas amorfas (ou
polimricas de S) (Figura 2) (Matichenkov; Ammosova, 1996). Si "estrutural" presente na
composio dos minerais silicatados.

Figura 1. cido mono silcico (H4SiO4)

Figura 2. cido poli silcico

As reaes de dissociao, polimerizao e precipitao do cido silcico dissolvido na

soluo do solo dependem principalmente da sua concentrao na soluo, do pH do solo e da
presena de xidos de Fe e Al. Assim, o cido silcico pode polimerizar-se, formando o cido poli

silcico quando a concentrao de Si for superior a 56 mg L-1 e o pH da soluo prximo da

neutralidade (McKeague; Cline,1963). Este processo funciona como um mecanismo regulador da
concentrao de Si em soluo (Iler,1979). Segundo Mckeague; Cline (1963) o H4SiO4 presente na
soluo do solo se comporta como um cido muito fraco, de tal forma que, apenas 0,2% se ioniza
na forma carregada negativamente a pH 7,0, sendo que o grau de ionizao aumenta
proporcionalmente ao aumento do pH.
O cido mono silcico resultante principalmente da decomposio de resduos vegetais. A
ciclagem do Si atravs dos restos culturais em solos intemperizados provavelmente a principal
fonte de Si para as plantas. Os principais drenos de Si incluem a polimerizao do cido silcico,
lixiviao, adsoro por xidos e hidrxidos de Fe e Al e principalmente a absoro pelas plantas
(Figura 3).
Si - Fert.

Si - biognica
(amorfa)

Minerais primrios
xidos e Hidrxidos Fe e Al

Si -gua
irrigao

Soluo
do solo
(H4SiO4)
Polmeros
Si - Lixiviado

Figura 2. Dinmica do silcio no solo, principais drenos ganhos (adaptado de Savant; Korndrfer;
Snyder; Datnoff, 1999).
No Brasil, a anlise de solo feita em 168 amostras coletadas na regio do Tringulo Mineiro
(Figura 4) mostrou que o teor de Si solvel ou extrado com cido actico 0,5 mol L-1 diretamente
proporcional ao teor de argila (Korndrfer; Nolla; Oliveira, 2004). Resultados semelhantes foram

observados para os solos da frica do Sul (Meyer; Keeping, 2001). A frao areia, apesar de ser
constituda fundamentalmente por Si (quartzo) apresenta baixo potencial de liberao desse
elemento para as plantas. Alm disso, a maior drenagem nesse tipo de solo favorece as perdas do Si
por lixiviao.

30

Si, mg dm

-3

40

20
10
0
0-15%

16-35%

35-60%

>60%

Teores de argila

Figura 3. Concentrao de Si (cido actico, 0,5 mol L-1) em solos de diferentes classes texturais
(mdia de 168 amostras de solo).
Cultivos intensivos e com alta exportao de Si como o arroz a cana e as gramneas em
geral, podem tambm reduzir rapidamente o nvel de Si no solo, at o ponto em que a reposio
atravs da adubao seja necessria. Os silicatos, alm de corretivos de acidez, so as principais
fontes de silcio para a agricultura e sua reao em solos cidos pode ser sintetizada nas equaes 1,
2 e 3 (Adaptado de Alcarde, 1992).
CaSiO3 Ca 2+ + SiO3 =

Equao [1]

SiO3 = + 2H + H2SiO3

Equao [2]

H2SiO3 + H2O H4SiO4

Equao [3]

Os silicatos podem ser aplicados ao solo em p, granulado (ex: silicato de Ca e Mg), ou

ainda na forma lquida (via solo ou via foliar exemplo: silicato de potssio e sdio). Enquanto os
silicatos em p so aplicados em rea total e incorporados, os silicatos granulados so normalmente
aplicados em mistura com outras matrias primas na composio de adubos NPK.

1.2.1

12.2.2. Silcio na planta

As plantas absorvem silcio diretamente da soluo do solo principalmente via fluxo de

massa (Jones; Handreck, 1967; Dayanadam; Kaufman; Franklin, 1983; Postek, 1981). A absoro
pode ocorrer de forma rpida ou lenta. Gramneas como o arroz, por exemplo, possuem absoro
rpida, isto , a absoro do Si ocorre mais rapidamente que a da gua, resultando na reduo do Si
na soluo do solo (Ma; Tamai; Ichii; Wu. 2002; Ma; Mitani; Nagao; Konishi; Tamai; Iwashita;
Yano, 2004.). J na maioria das eudicotiledneas esta absoro se d de forma lenta, ou seja, a taxa
de absoro de Si pelas razes similar a da gua.
As plantas de arroz possuem mecanismos especficos de absoro de Si onde protenas de
membrana sintetizadas so produzidas a partir de gen especifico para este fim (Ma & Takahashi,
2002). Como evidncia do processo rpido de absoro de Si em arroz, na seiva bruta do arroz a
concentrao de cido mono silcico muitas vezes mais alto que na soluo do solo.
Myake e Takahashi (1983) observaram que o modo de translocao do Si foi diferente entre
as espcies. Em tomateiro, por exemplo, o Si foi retido nas razes, e no se translocou facilmente
para a parte area, sendo que o teor, nessa parte da planta, foi de 0,05% a 0,24% de Si, enquanto
que nas razes foi de 0,32% a 0,59%. Ao contrrio, em pepino, os teores de Si encontrados variaram
de 1,67% e 2,86%, na parte area e de 0,13% e 0,55% nas razes (Myake; Takahashi, 1983).
Segundo Balastra; Perez; Juliano; Villareal (1989), o Si transportado pelo xilema e
depositado na parede celular na forma de slica amorfa hidratada ou opala biognica (SiO2nH20).
Uma vez depositado, o Si torna-se imvel e no mais se redistribui na planta. Mais de 94% do Si
absorvido pelo trigo foi transportado rapidamente para a parte area, concentrando-se nas folhas
mais velhas, (Jarvis, 1987). Segundo os mesmos autores, em plantas de pepino, ao cortar o
suprimento de Si na soluo, as folhas superiores apresentaram concentrao de Si marcadamente
menor que as inferiores, indicando baixa translocao ou redistribuio desse elemento.

Outro exemplo da baixa mobilidade do Si no interior do tecido pode ser observado em

plantas de pepino previamente cultivadas em soluo contendo Si, e posteriormente transferidas
para um meio deficiente nesse elemento. Essas plantas mantiveram o Si residual na base dos
tricomas foliares, mas no conseguiram desenvolver a silicificao do tecido injuriado por um
patgeno invasor (Sphaerotheca fuliginea) o que no permitiu planta resistir ao ataque da doena
(Samuels; Glass; Ehret; Menzies, 1991).
As espcies de plantas diferem entre si quanto absoro e acmulo de Si (Marschner,
1997) e podem ser divididas em 3 grupos: acumuladoras, no acumuladoras e intermedirias. As
gramneas so acumuladoras tpicas, reduzindo de forma rpida a concentrao de Si na soluo do
solo (Myake; Takahashi, 1983). Plantas consideradas no acumuladoras, como o tomateiro,
absorvem o Si mais lentamente que a absoro da gua, aumentando sua concentrao no meio
(Adatia; Besford, 1986; Myake; Takahashi, 1983).
Vrios trabalhos desenvolvidos em soluo nutritiva tm demonstrado a importncia do Si
em aliviar a toxidez causada pelo alumnio em razes de plantas (Galvez; Clark; Gourley;
Maranville, 1987; Hodson; Evans, 1995; Hodson; Sangster, 1999), por exemplo, a toxidez do Al na
cultivar de trigo Espie 66 induzida por 1,5 micromolar de Al na soluo foi superada parcialmente
pela adio de 5,0 micromolar de Si (Cocker; Evans; Hodson, 1998).
Segundo Pinheiro Filho (1999) a acumulao de Al e Si na parte area das plantas so
mutuamente exclusivas, isto , quando o primeiro elemento absorvido o segundo deixa de ser. A
tolerncia ao alumnio de algumas espcies, entre outros fatores, pode estar associada maior
absoro e acumulao de Si no tecido vegetal (Cocker; Evans; Hodson, 1998). Os mecanismos
envolvidos na interao do Si com o Al ainda so pouco conhecidos, porm, existem estudos com a
adio de Si em soluo nutritiva demonstrando a formao de hidroxi-alumino-silicatos (HAS)
como uma das hipteses, mas tambm h evidncias do Si estimular a produo de compostos

orgnicos exudados pelas razes (ex: malato) capazes de complexar o alumnio e ainda ser
responsvel pela co-deposio do Al no interior das plantas (Sangster; Hodson, 2001).
O Si tem sido considerado como nutriente essencial para certas culturas, principalmente
gramneas, nas quais, os teores do elemento chegam a ser 10 a 20 vezes maior do que em
eudicotiledneas. O teor de Si na palha de arroz inundado pode superar os 5%.
Os efeitos benficos da absoro e acumulao de Si em geral esto relacionados com as
funes estruturais e defesa das plantas, isto , o Si pode afetar a produo vegetal atravs de vrias
aes indiretas tais como: melhor arquitetura das plantas (folhas mais eretas) e assim diminuir o
auto-sombreamento; reduzindo o acamamento; aumentando a rigidez estrutural dos tecidos;
amenizando a toxidez de Fe, Mn, Al e Na; diminuindo a incidncia de patgenos e aumentando a
proteo contra herbvoros, incluindo os insetos fitfagos (Epstein, 1994; Marschner, 1997).
Segundo Okuda e Takahashi (1965), o Si aumenta o volume e rigidez do aernquima,
favorecendo tambm o suprimento de oxignio para as razes. tambm atribudo ao Si a funo
de aumentar o poder oxidante das razes de arroz; o que favorece a oxidao e deposio de Fe
insolvel na superfcie das razes, diminuindo a sua absoro e efeito txico no caso do cultivo do
arroz inundado.
O transporte do cido mono silcico no interior da planta, acontece no mesmo sentido do
fluxo de gua (transpirao). Sendo assim, os depsitos de Si ocorrem com maior freqncia nas
regies onde a gua perdida em grande quantidade, ou seja, na epiderme foliar (Dayanadam;
Kaufman; Franklin, 1983). Segundo Kitajima (2002), a maior acumulao de Si observada em
espcies da floresta tropical comparadas com as espcies da floresta temperada se deve
possivelmente, entre outros motivos, maior transpirao em climas mais quentes.
A acumulao de Si junto aos rgos de transpirao causa reduo na perda de gua por
diminuir a abertura dos estmatos (Oliveira; Castro, 2002). Nas folhas de arroz, forma-se uma
camada de slica abaixo da cutcula, a qual, dentre outras funes, tambm limita a perda de gua

(Takahashi, 1995). Segundo Marschner (1997) e Takahashi (1995), o Si acumulado junto aos
estmatos reduz a taxa de transpirao, diminuindo, assim o consumo de gua pela planta.
A deposio de silcio em material vegetal de Curatella americana ocorre principalmente
nos tricomas e junto aos estmatos como mostra a Figura 5.

(B)
(A)
Figura 5. (A) - Superfcie foliar da Curatella americana obtida com microscopia eletrnica de
varredura mostrando algumas estruturas de acumulao de Si, tricomas (TR) e estmatos
(Et). (B) - Grfico da anlise de micro sonda de Raio-X, feita na extremidade de um
tricoma de braos curtos (Tr), mostrando o alto teor de silcio (Si). (Oliveira & Castro,
2002).

1.2.2

12.2.3. Silcio e o controle de pragas e doenas

Alm do efeito na transpirao a deposio de Si abaixo da cutcula, torna a planta mais

resistente ao de fungos e insetos (Dayanadam; Kaufman; Franklin, 1983) tornando-as menos
acessveis s enzimas de degradao dificultando a penetrao de hifas de fungos pela maior
resistncia mecnica (Ma & Takahashi,).
No Brasil, aumentos significativos de peso da matria seca da parte area de arroz foram
obtidos com a aplicao de wollastonita (silicato de clcio). Esses incrementos poderiam ser

explicados pelo efeito do Si em reduzir a severidade da queima das bainhas (Rhizoctonia solani)
artificialmente inoculada.

Sendo as folhas as responsveis pela realizao da fotossntese, a

presena de leses reduz a taxa fotossinttica. Assim, quanto maiores as leses ou o seu nmero,
menor ser a taxa fotossinttica, e conseqentemente menor a produo de matria seca
(RODRIGUES, 2000).
Estudos realizados no sul da Flrida demonstraram que a adubao com silcio reduziu a
incidncia de brusone de 17 a 31% e a mancha parda de 15 a 32% em relao ao tratamento que no
recebeu silcio (Datnoff; Raid; Snyder; Jones, 1991). Esses mesmos autores tambm observaram
que nos solos com muito baixa disponibilidade de Si houve uma reduo de 73 e 86% na incidncia
de bruzone e mancha parda, respectivamente, no ano de 1987, e um aumento de 56% na
produtividade, com a aplicao de silicato de clcio. J no ano de 1988 a reduo na incidncia das
doenas acima citadas foi de 58 e 75%, respectivamente e o aumento de produtividade de 88%.
Estudos mais recentes comprovam que pode haver uma associao positiva no controle de
doenas entre o fornecimento de Si e a induo ou produo de fitoalexinas (Rodrigues; Mcnally;
Datnoff; Jones; Labb; Benhamou; Menzies; Blanger, 2004). Fitoalexinas so produtos naturais,
ausentes na planta sadia, acumulados temporariamente no local e nos arredores da infeco.
Possuem atividade inibidora sobre bactrias, fungos, nematides. O fornecimento de Si (+Si) a
plantas de arroz inoculadas com Magnaporthe grisea produziram mais mamilolactonas A e B junto
aos locais de infeco do que as que no receberam Si (-Si). Segundo Datnoff; Avila, (2005) a
maior produo de fenis (mamilolactonas) se deve em parte ao atraso no desenvolvimento do
fungo e consequentemente dos sintomas (Figura 6) quando as plantas so tratadas com silcio (+Si).
Acredita-se que a maioria das plantas seja capaz de sintetizar fitoalexinas, mas algumas a fazem de
maneira muito lenta.

Figura 6. Desenvolvimento dos sintomas da Magnaporthe

grisea (brusone) em folhas de arroz, 96 h depois de
inoculadas, com silcio (+Si) e sem silcio (+Si).

Os resultados obtidos por Carvalho; Moraes; Carvalho, (1999) com dois gentipos de sorgo
TX2567 e BR303 (respectivamente resistente e suscetvel ao pulgo-verde), na ausncia e presena
de Si concluram que as plantas que receberam a aplicao de 4 ml de soluo de silicato de sdio
foram menos preferidas pelos pulges e apresentaram cerca de 50% a mais de silcio na parte area.
Alm disso, verificou-se um efeito adverso do Si sobre a reproduo e desenvolvimento do pulgo
(Tabela 1).

Tabela 1. Nmero total de ninfas de pulgo em plantas tratadas e no tratadas com Si (silicato de
sdio) aplicado via foliar (Fonte: Carvalho; Moraes; Carvalho, 1999).
GENTIPO

Nmero total ninfas (Pulgo)

MDIA

Com Si

Sem Si

BR 303

188,3

243,6

215,9 a

TX 2567

54,7

195,1

124,9 b

MDIA

121,5 B

219,3 A

O acmulo de Si na epiderme, que normalmente deixa as folhas mais dura, tambm pode
afetar o ataque de pragas (Tabela 2). A incidncia da broca do colmo da cana-de-acar (Eldana
saccharina e Diatraea Saccharalis) pode ser diminuda com o emprego do silcio na adubao
(Elawad; Allen; Gascho, 1985; Meyer; Keeping, 2001).

Tabela 2. Influncia do Si na resistncia da cana-de-acar broca do colmo (Diatraea saccharalis

F.), no teor de Si nas folhas e no peso da matria seca. Fonte: Adaptado de Elawad (1995).
Dose

No plantas

% do

Peso

Si

Na2SiO3

atacadas

Total

Mat. Seca

Folhas

g/planta

g/vaso

1.2.3

44

73

450 c

0,29

68

12

20

482 b

1,39

136

505 a

2,39

12.2.4. Efeitos do silcio na produo vegetal.

O aumento na produo decorrente da aplicao de Si tem sido verificado em vrios

trabalhos (Savant; Korndorfer; Snyder; Datnoff, 1999; Korndrfer; Lepsch, 2001). Korndrfer;
Snyder; Uchoa; Datnoff (2001) trabalhando com arroz inundado durante o perodo de 1992-1996,
concluram que houve aumento mdio de 1.007 kg ha-1, nas parcelas tratadas (+Si) em relao a
testemunha (-Si).
A aplicao de silicatos (fonte de Si) tambm pode trazer incrementos significativos na
produo de cana-de-acar como mostra a comparao feita com o calcrio (Figuras 7). Os efeitos
positivos do Si em cana-de-acar se devem maior tolerncia da cultura ao estresse hdrico
quando bem nutrida com Si (Faria, 2000) e a melhoria na arquitetura das folhas permitindo maior
eficincia fotossinttica.

Silicato
y = -0,2405x2 + 3,0229x + 165,12
R2 = 0,47

-1

180
Produo de cana, t/ha

Produo de cana, t/ha

-1

118

176
172

y = -0,4768x 2 + 4,7843x + 104,28

R2 = 0,95

116
114
112

Calcrio

110

Silicato

108
106
104

168
Calcrio

(a)

y = -0,3253x2 + 2,2161x + 166,22

R2 = 0,52

164

102
0

6
-1

Doses aplicadas, t/ha

160
0

y = 0,205x + 105,39
R2 = 0,54

-1

(b)

Dose Aplicada, t/ha

Figura 7. Efeito da aplicao do silicato de clcio e do calcrio na produo de colmos (a - canaplanta; b - cana-soca) cultivada num Latossolo Vermelho amarelo (Fonte: Silveira Jr;
Penatti; Korndorfer; Camargo, 2003).

O silcio pode reduzir a incidncia da brusone (Pyricularia grisea) e como conseqncia

aumentar a produo de arroz inundado. Santos; Korndrfer; Reis Filho; Pelzio (2003) estudando a
ocorrncia de brusone em arroz inundado observaram que a aplicao de silicato resultou na
reduo da severidade da brusone nas folhas e aumento de 47% na produo de gros de arroz
(Tabela 3).

Tabela 3. Doses de silicato e a ocorrncia de doenas foliares, de panculas e a produtividade do

arroz irrigado, no Projeto Formoso, Tocantins, safra 1999-2000 (Fonte: adaptado de Santos;
Korndrfer; Reis Filho; Pelzio, 2003).
Severidade
Dose de silicato

Mancha
Parda*

(kg h-1)
1.2.3.1.1.1

(grau)

Incidncia

Brusone folhas*
notas de
0a9

Brusone
panculas**

Produo
de gros

% panculas

(kg ha-1)

47,6 a

5,0 a

4,6 a

2240 b

1000

58,4 a

3,8 ab

4,2 a

2490 b

2000

67,8 a

3,7 ab

4,6 a

2510 b

4000

38,6 a

3,6 ab

4,8 a

3090 a

6000

30,0 a

3,0 b

4,0 a

3290 a

C.V.(%)

29

11

est.

*(grau das leses, folha bandeira).

O efeito do Si em hortalias pouco conhecido. Investigaes recentes mostram que plantas
de pepino em soluo nutritiva contendo 47 mg L-1 de Si tiveram uma reduo na rea foliar coberta
por colnias de mldio pulverulento (Blanger; Bowen; Ehret; Menzie, 1995). Reduo na
severidade de mldio pulverulento tambm foi observada em melancia devido aplicao de Si
(Blanger; Bowen; Ehret; Menzie, 1995). Chrif; Benhamou; Menzies; Blanger (1992), ao
adicionarem Si na forma de silicato de potssio na soluo nutritiva, observaram uma reduo na
mortalidade de plantas de pepino causada por Pythium ultimum.

A aplicao de silicato de potssio (K2SiO3) via foliar em plantas de pepino inoculadas com
o fungo Erysiphe cichoracearum, causador da doena de odio, conferiu menor incidncia e
severidade desta doena, em relao ao tratamento testemunha (Figura 8) (Gama; Korndrfer;
Juliatti; Pereira; Dalto. 2003).

Figura 8. Efeito do Si aplicado via foliar no controle de odio em plantas de pepino. Fonte: Gama;
Korndrfer; Juliatti; Pereira; Dalto, 2003.

1.3

12.2. Sdio (Na)

A presena do sdio (Na) em solos tropicais e em locais de elevada precipitao

normalmente muito baixo, no constituindo problemas para a agricultura, porm nas regies ridas
e semi-ridas, o Na pode contribuir com 25% ou mais do total de ctions trocveis e, nestas
condies, as plantas cultivadas podero apresentar problemas pelo excesso desse elemento
(toxidez).
O excesso de sais de sdio pode afetar as propriedades fsicas e qumicas do solo, pois ele
aumenta a espessura da dupla camada inica difusa, proporcionando a expanso das argilas e,
conseqentemente, reduzindo a porosidade e a permeabilidade do mesmo.

Os solos sdicos

apresentam, normalmente, reao alcalina, com valores de pH superiores a 8,5 e elevada

concentrao de ctions de sdio adsorvido no complexo trocvel, resultando num solo difcil de ser
trabalhado.
A ocorrncia de solos salinos e sdicos comum em reas onde ocorre baixa precipitao e
alta evaporao. Nestas condies os sais no so lixiviados, acumulando-se em quantidades

prejudiciais ao crescimento e desenvolvimento das plantas, impedindo algumas vezes a atividade

agrcola.
Solos normais submetidos irrigao mal conduzida com guas salinas podem se tornar
improdutivos devido ao excesso de sais. Mesmo com um bom controle da qualidade da gua de
irrigao, o que raramente feito na prtica, comum o acmulo de sais no solo (Souza, 1995).
No Brasil, aproximadamente nove milhes de hectares so afetados pela presena de sais,
cobrindo sete Estados. A maior rea afetada est localizada no Estado da Bahia (44% do total),
seguido pelo Estado do Cear, com 25% da rea total do pas (Gheyi; Fageria, 1997).

1.3.1

12.2.1. Sdio na Planta

O sdio um elemento requerido apenas por algumas plantas e normalmente absorvido na

forma inica (Na+). Na planta o Na relativamente mvel. As concentraes de Na em tecidos
vegetais variam de 0,0013 a 3,51% na matria seca e de 0,016 a 16,78% nas cinzas. As plantas
halfitas so muito ricas em Na, ao contrrio plantas como o trigo, milho e girassol possuem muito
baixo teor de Na.
Em algumas espcies de plantas o Na considerado um elemento essencial enquanto que
para a maioria das espcies normalmente txico em altas concentraes.
De maneira geral os sintomas de toxicidade esto associados reduo no crescimento e
produo, alm do amarelecimento e murchamento das plantas. A funo do Na nas plantas
similar a do potssio: ativador de uma ampla gama de enzimas; ativador da ATPase (transporte
atravs da membrana); est envolvido na osmose da membrana; facilita absoro de N, P, K em
algumas plantas devido permeabilidade das clulas aos sais (ex: beterrabas e cenoura); favorece a
acumulao de frutose, promove converso de frutose glicose; aumenta o contedo de sacarose
em algumas plantas; reduz a mobilidade da aberturas de estomatos; sua absoro na presena de K

capaz de melhorar o vigor e cor de folhagem; em plantas C4 necessrio no transporte de CO2 at

as clulas onde reduzido a carboidrato.
A essencialidade do Na foi demonstrada para a Atriplex versicaria a qual cultivada em
soluo contendo baixo teor de Na (< 0,1 M) apresentava sintomas de deficincia tais como
clorose, necrose foliar e reduo no crescimento mesmo sob condies de altos nveis de K
(Marschner, 1997). A maioria das plantas halfitas tem desenvolvido adaptaes, como suculncia,
ajustamento osmtico, glndulas de sal e compartimentao inica para diluir ou contrabalanar os
efeitos da salinidade (Marschner, 1997; Cordazzo, 1999; Larcher, 2000).
Para alguns autores, o Na um micronutriente essencial para plantas C4 e no para as C3,
mas o mecanismo de sua atuao ainda no bem conhecido. H indcios de que o Na estaria
envolvido na transferncia de metablitos entre os cloroplastos das clulas do mesfilo e da bainha
vascular das plantas C4.
O principal papel do Na+ na nutrio mineral de plantas substituir o K em determinadas
funes fisiolgicas (metablicas e osmticas). Em determinadas espcies, 95% do K+ presente no
substrato pode ser substitudo pelo Na+ (Marschner, 1997).
Em relao a substituio do K pelo Na, estas espcies de plantas podem ser classificadas
em quatro grupos. No grupo A, alm do alto grau de substituio do K+ pelo Na+ um adicional
crescimento obtido, o qual no seria possvel pelo aumento do contedo de K nas plantas. No
grupo B, este efeito substitutivo menor que no grupo A. No grupo C apenas uma pequena
proporo do K pode ser substitudo pelo Na sem afetar a produo. No grupo D, nenhuma
substituio pode ocorrer sem afetar a produo.
comum ser observada uma leso causada pelo excesso de Na+ em espcies arbreas como
o abacate (Persea americana Mill), citrus (Citrus spp.) e em frutas de caroo (Prunus spp.). Aps a
absoro pelas razes, o Na+ translocado para a parte area da planta, causando a queima-das-

folhas dessas espcies. A maioria das espcies frutferas cultivadas classificada como sensvel aos
sais (Rhoades; Loveday, 1990).
A cultura do feijo, por exemplo, considerada pouco tolerante salinidade da gua de
irrigao, podendo haver reduo de at 50% na produo da cultura quando irrigada com gua com
valores acima de 2,4 dS.m-1 de condutividade eltrica (Bernardo, 1996). Por outro lado, existem
plantas como a beterraba forrageira, beterraba, espinafre que mostram efeitos positivos do sdio no
crescimento, sempre na presena de nveis adequados de potssio.

Cre scim en to Re la tiv o, %

150

G - I

100

G - II
G - III

50

G - IV

0
0

100

200

300

400

Na C l, m M

Figura 9. Resposta no crescimento de vrias espcies de plantas quando sujeitas ao aumento da

salidade no substrato. Grupo I, beneficiadas pelo Na, ex: halfitas; Grupo II, beneficiadas s
quando em baixas concentraes, ex: beterraba; Grupo III, sensveis, ex: cevada; Grupo V,
muito sensveis, ex: feijo (Marschner, 1997).

As plantas cultivadas apresentam diferentes respostas salinidade, variando desde sensveis

at tolerantes (Maas; Hoffmman, 1977). A tolerncia ao estresse salino pode ser funo do controle
da absoro e da alocao do sdio na planta, do reajustamento osmtico e de outros processos
fisiolgicos do vegetal (Cheeseman, 1988). O conhecimento da tolerncia da espcie quando

cultivada em solo salino muito importante para que tcnicas alternativas de manejo possam ser
utilizadas com a finalidade de amenizar os efeitos prejudiciais dos sais. O crescimento de plantas
halfitas mximo quando os nveis de Na so relativamente elevados. Este comportamento pode
ser explicado apenas pela presena do elemento na nutrio mineral destas espcies (Grupo I).
Apenas poucas espcies so levemente estimuladas pela baixa salinidade (Grupo II) enquanto que a
maioria das espcies possui baixa tolerncia (Grupo III), sendo algumas delas severamente afetadas
pela salinidade (Figura 9).
A resposta das plantas salinidade um fenmeno complexo, envolvendo alteraes
morfolgicas e de crescimento, alm de processos fisiolgicos e bioqumicos (Fougre, Rudulier;
Streeter, 1991).
O clcio um nutriente particularmente importante em plantas expostas ao estresse salino,
porque tm papel fundamental na manuteno da permeabilidade seletiva das membranas, extenso
da parede celular, recuperao do estresse celular e preveno da absoro do on sdio em nveis
que causam injria (Hansen; Munns, 1988).

1.4

1.4.1

12.3. Cobalto (Co)

12.3.1. Cobalto no solo

Os teores de cobalto (Co) no solo variam de 1 a 40 mg dm-3. Valores superiores podem

ocorrer em solos originrios de rochas ricas em minerais ferro-magnesianos (Mitchel, 1964). Solos
cidos normalmente apresentam teores de Co inferiores a 10 mg dm-3. Nessa condio, os solos
ricos principalmente em xidos de Mn podem apresentar deficincia de Co devido sua adsoro
pelos xidos de Mn (Taylor; McKenzie, 1966).

Os cultivos intensivos aliados ao aumento da demanda de nutrientes pela soja, tm

provocado decrscimo generalizado na disponibilidade de alguns micronutrientes e mesmo os solos
de alta fertilidade tm, atualmente, apresentado respostas positivas adio de molibdnio e cobalto
(Campo; Albino & Hungria, 1999; Campo; Hungria, 2000).

1.5

12.3.2. Cobalto na planta

A absoro do Co pela planta feita de forma lenta, principalmente na forma de Co2+, e a

sua translocao ocorre somente aps a formao de quelatos com cidos orgnicos (Malavolta;
Vitti & Oliveira, 1997). A aplicao de Co via foliar indica que o mesmo pode ser razoavelmente
translocado das folhas para outras partes da planta como foi demonstrado para o trevo e a alfafa
(Handreck; Riceman, 1969).
Em mdia o teor de Co em plantas varia de 0,05 a 0,3 mg kg-1 e normalmente maior em
leguminosas comparado s gramneas (Kubota; Welch; Van campen, 1987).
Em plantas de leguminosas, deficientes em Co, existe uma tendncia do Co se acumular nos
ndulos. Baseado na planta como um todo, so as razes que apresentam as maiores concentraes
do elemento. A proporo de Co nos ramos, ndulos e razes de 1:6:15 e em plantas deficientes
de 1:3:25.

A necessidade de Co para a fixao do N2 em leguminosas e no leguminosas foi

estabelecida por Ahmed; Evans (1960). Este trabalho mostrou que a alfafa (Medicago sativa)
cultivada sob condies controladas, no se desenvolveu adequadamente quando o Co deixou se ser
fornecido, porm, o crescimento foi normal quando o Co foi fornecido. O curioso que ao fornecer
N-NO3- o crescimento da alfafa foi normal, mesmo sem o fornecimento de cobalto (Delwiche;
Johnson & Reisenauer, 1961). Isto pode ser explicado pela interdependncia existente entre o

fornecimento de Co, a formao de leghemoglobina e coenzima cobamida (vitamina B12) presente

nas bactrias fixadoras de N (Rhizobium).

A coenzima cobamida (vitamina B12 e seus derivados) possui na sua formao o Co3+
quelatizado com 4 tomos de nitrognio. No caso do Bradyrhizobium 3 compostos so induzidos
pelo cobalto porque dependem da cobamida:
a) Metionina: a sntese deste aminocido (essencial alimentao humana) pode ser afetada
pela deficincia de Co, o que pode contribuir para reduo do tamanho dos ndulos (Tabela 4).
b) Redutase dos Ribonucleotdeos: esta enzima est envolvida na reduo dos
ribonucleotdeos e, portanto, influenciando na sntese do DNA e consequentemente na diviso
celular do Bradyrhizobium (Tabela 4).
c) Metilmalonil-coenzima A: esta enzima est envolvida na sntese da leghemoglobina.

Tabela 4. Efeito do cobalto em algumas caractersticas dos ndulos de tremoo azul (Lupinus
angustifolius).
Volume de

Teor de

METIONINA

NDULOS

DNA

(% do total de N - amino)

--- m-3 ---

-- g 10-15cel.-1 --

--- % ---

3,19

12,3

1,31

2,62

7,8

0,97

COBALTO

Adaptado de Dilworth; Bissseling (1984).

A deficincia de cobalto pode afetar o desenvolvimento e a funo ou atividade dos ndulos

(Tabela 5).

A reduo na atividade dos ndulos se reflete na atividade da nitrogenase e na

acumulao de N pelas plantas. Assim, plantas que dependem de N2 fixado, cultivadas em solos
deficientes em cobalto, normalmente apresentam sintomas de deficincia de N ( Robson; Dilworth;
Snowball, 1987).

Tabela 5. Efeitos da aplicao de cobalto em amendoim.

COBALTO

N de

Teor de N

ndulos/planta

(Mat.Seca)

Produo de vagens

---%---

-- kg ha-1--

Testemunha ( - Co)

91

2,38

1.232

Tratamento Co na semente

150

2,62

1.687

Aplicao Foliar de Co (2x)

123

3,14

1.782

166

3,38

1.844

Tratamento semente +
Aplic.Foliar de Co
Adaptado de Reddy; Raj (1975).

No caso especfico da cultura da soja, o Co um elemento essencial para o processo de FBN

(Fixao Biolgica do Nitrognio). Ele componente da vitamina B12, importante na formao da
coenzima cobamida, indispensvel ao processo de FBN por ser precursora da leghemoglobina
(Kliewer; Evans, 1963). A deficincia de Co inibe a sntese da leghemoglobina e, por conseqncia,
a FBN (Mengel; Kirkby, 1978).
Praticamente no existem evidncias do envolvimento do Co no metabolismo de plantas,
apesar disso existem trabalhos que demonstram seus efeitos no crescimento do trigo.

Estas

respostas aplicao de Co em plantas que no fixam N, so sempre pequenas e provavelmente

refletem o efeito benfico de natureza desconhecida (Wilson; Nicholas, 1967).
As principais fontes de Co so: o cloreto de cobalto, sulfato de cobalto e nitrato de cobalto.
Existem atualmente no mercado diversos produtos comerciais contendo Mo e Co em concentraes
variveis, mas sempre na proporo 10:1. Existem dados contraditrios em relao aos nveis
txicos de Co em plantas. Os valores variam de 0,4 mg kg-1 de matria seca em trevo (Ozanne;
Greenwood; Shaw, 1963) at poucos miligramas por kilograma em feijo e repolho (Bollard, 1983).
O cobalto e o molibdnio quando aplicados individualmente nas sementes ou nas folhas, so
pouco eficientes, mas quando aplicados em conjunto so muito importantes para o aumento da

eficincia do processo de FBN, ou seja, quantidades de N fixado por ndulo, no N total nos gros e
no rendimento de gros de soja (Campo; Hungria, 2002).
A adubao com cobalto em plantas ou solos deficientes no apenas aumentam a fixao do
N, mas tambm contribui para melhor qualidade nutricional das plantas forrageiras. O cobalto
essencial para os ruminantes porque a microflora capaz de sintetizar a vitamina B12 em
quantidades suficientes para atender as necessidades de animais (Asher, 1991). comum a
deficincia de Co em animais manejados sob pastos cultivados em solos pobres nesse elemento. O
nvel crtico de Co nas pastagens para ruminantes de 0,07 mg kg-1 na matria seca. Este valor
maior do que o crtico para a fixao de N em leguminosas.
Resultados experimentais mostram que o tratamento de semente com cobalto uma prtica
efetiva no sentido de incrementar a fixao de N e consequentemente o crescimento e produo de
leguminosas (Reddy; Raj, 1975 e outros). A uniformidade de distribuio de pequenas doses uma
das grandes vantagens desse mtodo de aplicao, porm altas concentraes do elemento no
produto final, aliadas alta acidez (baixo pH), implicam em problemas ainda maiores para FBN
quando esses nutrientes so aplicados nas sementes junto com o inoculante. O contato direto da
bactria com os sais que contm Co parece ser um dos fatores limitantes da FBN.
'Diversos estudos foram desenvolvidos e os resultados mostraram que a aplicao foliar
isolada de Co ou em conjunto com herbicidas ps-emergentes, baculovrus ou inseticidas para
lagartas, nos estdios V4 e V5 da cultura, apresentaram resultados similares aos da aplicao nas
sementes, sem reduzir o potencial de FBN (Campo; Albino; Hungria, 1999).
A concentrao de Co nos ndulos frescos de plantas deficientes pode variar entre 20 e 170
mg g-1, podendo ser diferente entre uma espcie vegetal e outra (Robson; Dilworth; Chatel, 1979).
A concentrao de Co nas sementes de uma mesma espcie tambm pode variar entre um local e
outro. Em Lupinus angustifolius (tremoo azul) os valores encontrados nas sementes variaram de 6
a 730 mg g-1 de semente (Robson; Mead, 1980).

Existe uma diferena considervel entre as vrias espcies de leguminosas falta de cobalto.
O tremoo (Lupinus angustifolius) praticamente mais sensvel que o trevo subterrneo (Trifolium
subterraneum) (Gladstones; Loneragan; Goodchild, 1977).
Em experimentos conduzidos no Brasil e segundo alguns autores, a aplicao de cobalto no
influenciou significativamente a absoro de nitrognio (Rosolem; Caires, 1998), a concentrao de
clorofila (Cares; Rosolem, 1999) e a produo de soja e amendoim (Galro, 1991; Cares;
Rosolem, 2000; Cares; Rosolem, 1995), possivelmente devido aos altos teores de Co reativo nos
solos de cerrado e tambm pela contaminao com cobalto de fertilizantes.

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1 Departamento de Solos, UFRRJ;
2 Departamento de Fitotecnia; UFRRJ

1. INTRODUO
O Alumnio (Al) o terceiro elemento mais abundante na litosfera, aps o oxignio e o
silcio, participando com 8 % na composio da crosta terrestre. Na fase slida do solo, o Al
ocorre na forma de minerais primrios ou secundrios, como aluminosilicatos, oxi-hidrxidos,
sulfatos e fosfatos.
A valores de pH menores que 5,5, a dissoluo das formas slidas do Al tende a
aumentar, ocorrendo a liberao de formas inicas soluo do solo (Ritchie, 1995). Portanto,
na medida em que os solos se acidificam, ons Al passam a ocupar as posies de troca
catinica, na superfcie dos colides eletronegativos, em substituio aos ctions removidos pela
lixiviao. Por ser um ction trivalente, o Al retido firmemente, e

portanto,

a sua

concentrao, na soluo do solo, baixa, dentro da faixa micromolar (Haynes e Mokolobate,

2001). Todavia, essas baixas concentraes de Al solvel so txicas para a maioria das espcies
vegetais, primariamente por lesar o funcionamento normal das razes, inibindo o seu
crescimento e bloqueando os mecanismos de aquisio e transporte de gua e nutrientes.
As relaes entre, a acidez do solo e a solubilidade do Al, assim como os efeitos txicos
do metal sobre as plantas, comearam a ser estudados nas primeiras dcadas do sculo passado
(Hartwell e Pember, 1918; Magistad, 1925). A partir dessa poca, foram conduzidas numerosas
pesquisas, em varias partes do mundo, para tentar elucidar os mecanismos responsveis tanto
pela manifestao da toxidez como da tolerncia diferencial existente entre gentipos de
diversas espcies cultivadas. Tambm, foram sendo evidenciadas algumas espcies vegetais que,

2
como o ch (Camellia sinensis), ou as hortnsias (Hydrangea macrophylla) so capazes de
acumular elevados teores de Al na sua folhagem, sem mostrar qualquer sinal de dano.
Passados quase noventa anos desde as primeiras publicaes sobre a matria, a
compreenso dos mecanismos causais da toxidez e da tolerncia ao Al em plantas ainda
bastante limitada (Rengel e Zhang, 2003; Ahn et al., 2004; Ma et al., 2005). Todavia, isso no
significa desconhecer os avanos realizados nas tentativas de elucidao desses mecanismos.
Por exemplo, nos ltimos anos, uma grande diversidade de resultados, obtidos em estudos
fisiolgicos e de mapeamento molecular, mostraram que a tolerncia vegetal ao estresse de Al
uma caracterstica multignica complexa, que pode envolver vrios mecanismos de tolerncia
(Kochian, 1995; Matsumoto, 2000; Barcel e Poschenraider, 2002; Kochian et al.,2004),
confirmando previses e hipteses formuladas com bastante antecedncia (Jones, 1961;
Clarkson, 1969; Foy, 1974; Klimashevskii e Dedov, 1976; Helyar, 1978; Fageria et al., 1988).
Ha vrias razes que explicam que o tema da toxidez do Al em plantas permanea
como um tpico to elusivo em seus aspectos bsicos, e as mesmas sero abordadas neste
captulo. Todavia, dada a extenso desta temtica multifacetada, e em ateno aos objetivos
deste volume, o presente captulo focaliza sobre os fatores qumicos que controlam as formas do
Al na soluo rizosfrica a sua atividade na interfase raiz-soluo, assim como os aspectos
toxicolgicos e a sintomatologia associada. Tambm, feita uma breve incurso nos possveis
mecanismos responsveis pela fitotoxicidade do Al. Discusses mais aprofundadas sobre
sinalizao do estresse e sua expresso gnica, assim como sobre os mecanismos de tolerncia
ou resistncia, podero ser encontradas nas referencias citadas, as quais foram selecionadas,
tanto quanto possvel, de forma a representar a evoluo dos conhecimentos ao longo da ltima
dcada, perodo no qual foram feitos avanos significativos nos conhecimentos sobre biologia
celular e molecular, o que, junto com o refinamento das tcnicas analticas, tm aberto novas
dimenses para este velho problema da agricultura sobre solos cidos.
2

3
Finalmente, deve-se observar que a temtica do Al envolve campos de estudo mais
vastos do que aqueles prprios da agricultura. Assim, o interesse por pesquisas envolvendo o Al
tem aumentado nos anos recentes, em conexo com os efeitos prejudiciais do metal no meio
ambiente e na sade humana. Exemplos so os estudos sobre aes humanas na acidificao dos
solos, o declnio das florestas, a sade de peixes em lagos e rios e o papel do Al em desordens
neuro-degenerativos como a doena de Alzheimer.

2. Os solos cidos no mundo.

Considera-se a toxidez do Al um dos principais fatores limitantes da produtividade
agrcola em solos cidos (Foy et al., 1978). Em uma escala global, os solos cidos ocupam uma
superfcie estimada em 37,8 milhes de km2, dos quais um 67 % possuem valores de pH
inferiores a 5,5 (Eswaran et al., 1997). As reas de acidez natural dos solos, se concentram em
duas amplas regies: uma no hemisfrio norte, coberta por bosques de conferas, sob clima
temperado, e uma outra, de distribuio intertropical, coberta por savanas e florestas midas
(Von Uexkll e Mutert, 1995). Alem disso, em outras partes do mundo, os nveis de acidez dos
solos esto aumentando, em decorrncia de atividades humanas. Entre os motivos da
acidificao antropognica dos solos, esto a liberao atmosfrica de poluentes industriais,
associada lixiviao de solos com chuvas cidas; as atividades de minerao, e no setor
agrcola, a nitrificao subseqente aplicao de altas doses de fertilizantes amoniacais
(Rengel e Zhang, 2003).
Dentro da faixa intertropical, e de acordo com Sanchez e Salinas (1981), 37 % dos solos
do sudeste asitico, 40 % dos da frica e 55 % dos da Amrica do Sul, apresentam limitaes ao
seu uso agrcola por excesso de acidez. No Brasil, a ocorrncia de solos com problemas de
toxidez de Al da ordem de 60 %, considerando-se as terras com potencial para a atividade

4
agrcola. Um estudo abrangendo 26 solos de regies brasileiras, mostrou que 75 % dos valores
de pH da camada superficial variaram entre 3,78 e 5,52 e que o Al3+ foi o ction trocvel
predominante em mais de um tero dos solos com pH inferior a 5,6 (Abreu Jr. et al., 2003).
A incorporao superficial de rocha calcria moda uma prtica secularmente
empregada na agricultura de clima temperado, como forma de elevar o pH e aumentar o teor de
bases trocveis da camada arvel dos solos. Na agricultura tropical, o seu uso envolve
primariamente a detoxificao do Al, mediante a sua precipitao qumica como hidrxido (item
4.1), embora, em certas regies, pelo seu custo, a prtica possa resultar economicamente
proibitiva.
A efetividade do calcrio depende do tempo decorrido da aplicao, do sistema de
preparo do solo e do volume de solo corrigido (Miranda et al., 2005). Por exemplo, no sistema
plantio direto tem sido observado que a aplicao superficial de calcrio no corrige total e
rapidamente a acidez do solo em profundidades maiores do que 10 centmetros (Schlindwein et
al., 2003). A dificuldade na neutralizao da acidez subsuperficial tem sido atribuda lenta
solubilidade do calcrio, o que limita o fluxo descendente de alcalinidade. O confinamento do
crescimento radicular ao volume do horizonte superficial tem conseqncias restritivas para o
crescimento da parte area, assim como para o pleno desenvolvimento da planta, o que resultar
em redues na produtividade das culturas. Essa limitao adquire ainda maior relevncia
durante perodos de deficincia hdrica (Fageria e Zimmermann, 1979), onde a aquisio de gua
e nutrientes das camadas mais profundas, pode ser crucial para a sobrevivncia das plantas.
Nesse sentido, o estresse hdrico e a toxidez de Al tendem a reforar os seus efeitos.
Embora existam prticas alternativas, como a incorporao profunda do calcrio, ou o
uso de sais mais solveis, como o gesso, tais opes sofrem restries de ordem tcnica ou
econmica, que podem inviabilizar a sua utilizao, particularmente no caso da chamada
agricultura de baixos insumos.
4

5
Em vista dessa situao, muitos pesquisadores, em diferentes lugares do mundo,
postulam que a seleo de variedades produtivas e tolerantes toxidez de Al, seja considerada
como um componente de grande importncia dentro das estratgias de manejo dos solos cidos.

3. Toxidez de Al e deficincias nutricionais nos solos cidos

Em ambientes tropicais, o termo acidez do solo abrange um conjunto de caractersticas
qumicas distintivas, que compreendem tanto situaes de toxidez inica (excesso de Al, H e s
vezes, Mn) como limitaes nutricionais, devidas a deficincias em Ca, Mg e Mo, aliadas a uma
baixa disponibilidade de P, produto da fixao qumica do anion fosfato por oxi-hidrxidos de
Fe e Al, carregados positivamente a valores de pH

inferiores a 5,0 (Sanchez, 1976).

Adicionalmente, os nveis de N e K em muitos solos cidos tropicais tendem deficincia,

devido ao alto grau do intemperismo ou baixos contedos de matria orgnica. Portanto, em
solos com tais propriedades qumicas, o crescimento radicular poder ser afetado por vrios
estresses, que podem atuar interativamente. Essa situao j conhecida h bastante tempo,
como mostra a Figura 1, relativa ao efeito limitante do Al, Ca e Mg sobre o crescimento
radicular de plantas de fumo, em um solo cido. Resultados similares, j foram obtidos com
uma diversidade de espcies vegetais e solos cidos, e sempre evidenciaram a dificuldade do
isolamento dos efeitos do Al per se, uma vez que a expresso da toxidez sempre aparece
modificada, em uma ou outra direo, por fatores tais como o pH, a composio inica da
soluo, o nvel de disponibilidade de bases trocveis e o teor de matria orgnica.

Alongamento radicular
(% do mximo)

100

Ca (5,8)
Mg (5,6)

75

SC (4,2)

50

25

24

48

72

Tempo (horas)
Figura 1. Crescimento radicular de plantas de fumo (Nicotiana tabacum) em um solo cido (pH
4,2) deficiente em Ca (0, 4 cmolc /kg) e com um nvel txico de Al. Em tal ambiente, as
razes cessaram o seu crescimento aps 24 horas (linha sc, sem calagem). Quando o pH
do solo foi corrigido para 5,6 com MgCO3, o Al foi precipitado, mas o crescimento
deteve-se aps 60 horas (linha Mg), devido manuteno de baixo nvel de Ca2+. S
quando o nvel de Ca2+ foi elevado para 4,4 cmolc /kg, pela adio de CaCO3 (linha Ca),
e o Al foi precipitado a pH 5,8, o crescimento radicular progrediu normalmente. Sobre
dados originais de Abrua et al (1970), citados por Snchez (1976).

Um caminho natural para contornar o problema das mudanas simultneas e no

controladas das propriedades qumicas que ocorrem nos solos com a modificao de seu nvel de
acidez, a realizao de estudos em condies de soluo nutritiva. Dada a natureza do estresse
de Al, o meio hidropnico oferece obvias vantagens, como o pronto acesso ao sistema radicular,
e a possibilidade de monitoramento e controle do pH e das concentraes de Al e de outros ons
relevantes expresso das reaes de sensibilidade e tolerncia. Justamente, um componente
importante do progresso feito nas ltimas dcadas, diz respeito simplificao das solues
nutritivas empregadas nos estudos, combinada com o uso de programas computacionais para
6

7
estimar as atividades qumicas das vrias espcies inicas em soluo, assim como as suas
interaes. Para melhor compreender as implicaes que disso decorrem, torna-se necessrio,
previamente, a considerao dos fatores que controlam as formas e espcies inicas de Al na
soluo. A esse respeito seria til a leitura prvia do capitulo 4, onde so discutidas as bases
conceituais da especiao qumica assim como diversos aspectos terico-prticos da formulao
de solues nutritivas .

4. Atividade e fitotoxicidade das espcies inicas do Al

Uma dificuldade sempre mencionada, em relao aos estudos de Al em plantas a
complexidade da qumica aqutica do metal. De fato, as pesquisas que atentam para a elucidao
dos mecanismos da fitotoxidez do Al, tm sido prejudicadas, em parte, por falta de um melhor
entendimento da especiao do elemento (Kochian, 1995).
Em soluo aquosa, o Al existe numa variedade de formas ou espcies inicas: quando a
espcie est constituda por s um tomo de Al, denominada mononuclear (ou monomrica), e
quando contem mais de um tomo, a espcie ou complexo reconhecido como uma forma
polinuclear. A ocorrncia e atividades qumicas das diversas formas de Al em soluo esto
reguladas, primariamente, pela interrelao de trs variveis: o pH, a composio, e a fora
inica total da soluo.
4.1. Efeito do pH. O Al trivalente um ction com configurao de gs nobre e alta
densidade de carga, em virtude de seu pequeno raio inico no hidratado (0,057 nm). Em
soluo aquosa, ocupa o centro de um octaedro, em coordenao com seis molculas de gua,
distribuindo, em mdia, 0,5 unidades de carga positiva para cada vrtice. Em pH inferior a 4,0,
essa forma hexahidratada (Al (H2O)63+), absolutamente predominante. Com o aumento
progressivo do pH ocorrero as seguintes reaes de hidrlise:

8
[Al (H2O)6] 3+

+ H2 O

[Al (H2O)5 (OH)]2+ + H3O+

[Al (H2O)5 (OH)] 2+ + H2O

[Al (H2O)4 (OH)2]+

+ H3 O+

[Al (H2O)4 (OH)2]+ + H2O

[Al (H2O)3 (OH)3]0

+ H3 O+

[Al (H2O)3(OH)3] 0 + H2O

[Al (H2O)2 (OH)4] -

+ H3 O+

com a formao dos complexos mononucleares Al (OH)2+ , Al (OH)2+ e Al (OH)03 , este

ltimo predominante em pH neutro, e limitante da solubilidade dos outros monmeros. Sob
condies alcalinas, existe o predomnio do anion aluminato, Al (OH)4-. A figura 2 mostra a a
relao entre a atividade qumica de cada uma dessas espcies e do pH da soluo.

Figura 2. Distribuio das atividades relativas de Al3+ e das espcies mononucleares de Al-OH
em funo do pH (a partir de Wright, 1989). Uma soluo de AlCl3, ajustada com HCl,
entre pH 3,5 e 5,5, gerar as formas inicas de Al indicadas na figura. Tal soluo se
manter estvel por muitos dias, desde que a concentrao de AlCl3 adicionada mantenha
a relao de atividades {Al+3}/{H+ }3 < 108,8, valor limite para o incio de reaes de
polimerizao e/ou precipitao do Al (Kinraide e Parker, 1989).
8

possvel observar que qualquer soluo contendo Al em forma ativa, sempre ter mais
de uma espcie inica em soluo, e que a variao da atividade de uma das espcies causar covariao nas outras, sendo impossvel manter constante a distribuio relativa das espcies
inicas resultantes da hidrlise, sem um rgido controle do pH. Um resultado prtico dessa
situao, que a quando se adicionam doses crescentes de Al a uma soluo nutritiva, mantida a
um certo pH fixo, o excesso de hidrlise impe uma acidificao adicional, em relao mesma
soluo desprovida de Al. Na ausncia de perturbao, esse efeito perdura no tempo (Figura 3).

pH da soluo

4.3
4.2
4.1

mmol/L
0,0
0,37
0,74
1,11

4.0
3.9
3.8
3.7
0

Dias
Figura 3. Variaes dirias do pH de uma soluo nutritiva, qual foram adicionados nveis crescentes
de Al (como AlK [SO4]2 .12 H2O) a partir de um valor inicial de 4,0. Modificado de Vicente et
al (1988a) .

4.2. Composio qumica da soluo. A existncia de interaes entre ons Al e radicais

aninicos (alm do OH-), atravs de pareamento inico e/ou complexao, um outro fator
relevante, uma vez que o seu efeito o de reduzir, em mdia, as cargas das espcies inicas do
Al, atenuando assim, a sua atividade fitotxica.

10
O Al possui uma alta afinidade por oxi-nions inorgnicos e orgnicos, com os quais
pode formar uma vasta srie de complexos solveis (Wright, 1989). Nesse caso se encontram
radicais inorgnicos como sulfato, fosfato, silicato e borato, assim como uma grande variedade
de ligantes orgnicos como humatos, fulvatos e cidos orgnicos simples, entre outros. Isto
significa que outros equilbrios devem ser considerados, alm daqueles prprios da hidrlise
mononuclear. Por exemplo, caso existam radicais sulfato na soluo, a soma das espcies
monomricas dever considerar, em adio s indicadas na figura 2, a contribuio das formas
AlSO4 + e Al (SO4)2-.
A presena de anions fosfato na soluo crtica, e dada a importncia nutricional do P,
as suas interaes com ons Al tem recebido muita ateno. Os mecanismos da interao Al-P na
interfase raiz-soluo envolvem reaes de precipitao e adsoro: o P pode ser precipitado na
forma de AlPO4 insolvel ou adsorvido por hidroxi-Al j precipitado, na superfcie da raiz ou no
espao livre intercelular (Foy et al.,1978; Arruda et al., 1984; Fageria et al.,1989; Vzquez et al.,
1999).
O silcio outro elemento com um papel definido na atenuao da toxidez decorrente de
ons metlicos, tanto em tecidos animais como vegetais (Hodson e Evans, 1995; Mitani e Ma,
2005). Admite-se que uma parte do efeito benfico do Si, sobre a toxidez do Al, possa ser o
resultado de co-precipitao ou inativao de Al na soluo pela formao de complexos tais
como Al [O Si (OH)3 ]2+, a valores de pH acima de 4,5 (Hodson e Evans, 1995; Corrales et al.,
1997). O papel do Si na nutrio mineral de plantas, abordado no captulo 14.
O Flor (F), elemento pertencente ao grupo dos halgenos, muito reativo, sendo capaz
de formar fluoretos de alta estabilidade, da forma geral AlFx (onde x = 1 - 6). Nveis elevados
de fluoretos (F-) na soluo de solos cidos podem ser devidos composio do material
parental, ou refletir contaminao oriunda principalmente de fertilizantes fosfatados, onde altas
concentraes de F podem ocorrer como impurezas.
10

11
4.3. Efeito da fora inica. De acordo com os princpios termodinmicos que regem as
atividades inicas em solues aquosas, de se esperar que uma reduo da fora inica total, a
pH constante, determine um aumento no coeficiente de atividade da espcie Al3+ livre, enquanto
que, na situao inversa, acontea uma reduo, aumentando assim a defasagem entre a
atividade real do on e a sua concentrao nominal. Pavan e Bingham (1982) estudaram o efeito
da diluio de uma soluo de Hoagland e Arnon, sobre a atividade das espcies de Al presentes
no meio hidropnico. Para uma dada concentrao de Al total adicionado, quando a soluo foi
diluda a um centsimo da sua fora inica original, o coeficiente de atividade da espcie Al3+
aumentou de 2,5 para 8, 07 x 10-5, e a espcie AlSO4- passou de 14 para 5 % do Al total. O
efeito da diluio ento, o de reduzir a concentrao efetiva dos contra-ions responsveis pela
formao de pares inicos ou complexos com o Al.
As estimativas de especiao e atividades inicas do Al apresentadas em Pavan e
Bingham (1982) e subseqentemente, em muitos outros trabalhos similares, foram realizadas
com auxilio de um programa computacional chamado GEOCHEM, do qual tm sido geradas
sucessivas verses (Parker et al., 1995, e Captulo 4). Esse e outros programas similares, usados
em estudos sobre especiao de solues aquosas, consideram simultaneamente os vrios
equilbrios qumicos envolvidos nas reaes responsveis pela formao de complexos, e de
dissoluo e precipitao da fase slida, calculando os coeficientes de atividade e a distribuio
das espcies inicas livres, assim como os seus complexos e precipitados.
A aplicao da fora inica nos estudos sobre toxidez de Al tem resultado em um
notrio progresso na compreenso das propriedades das solues nutritivas, permitindo estimar
o real efeito das atividades das espcies monomricas do Al nelas presentes, um aspecto
importante em vista do limitado nmero de tcnicas analticas disponveis para a sua
determinao direta. Todavia, como toda ferramenta, apresenta as suas limitaes, especialmente
quando utilizado na especiao de meios mais complexos que o das solues nutritivas. Isto
11

12
acontece porque nem sempre as constantes de equilbrio computadas correspondem s que esto
operando nos sistemas reais: por exemplo, formas amorfas dos oxi-hidrxidos de Al presentes
no solo, podem ser cerca de cem vezes mais solveis que a correspondente forma cristalina.
Nesse caso, a qualidade dos resultados obtidos depender diretamente da verossimilidade dos
dados termodinmicos utilizados (Ritchie, 1994). Podem ser igualmente problemticas, as
estimativas das atividades qumicas do Al3+, e seus complexos, no ambiente inico prevalecente
no apoplasma, na superfcie externa da membrana plasmtica, nos vacolos, ou ainda em
exudados xilemticos (Kinraide, 1991; Archambault et al., 1996; Taylor et al., 2000; Barcel e
Poschenreider, 2002). Nesse caso, alm das incertezas em algumas constantes de equilbrio, est
o fato de se tratar de ambientes onde circulam fluxos de ons (incluindo prtons) e outros
metabolitos, envolvendo processos de transporte entre apoplasma e simplasma ou, dentro da
clula, entre compartimentos delimitados por endomembranas. Independentemente desses
aspectos, tem se tornado um hbito entre muitos pesquisadores indicar, junto com as
concentraes nominais de Al total usadas nos seus experimentos, as correspondentes atividades
qumicas da espcie Al3+. Este procedimento importante, tendo em vista que

parte da

variabilidade dos resultados experimentais pode ser atribuda a diferenas nas concentraes de
Al e de ctions divalentes empregadas, assim como a ocorrncia (ou no) de fenmenos como
precipitao de fosfatos de Al; ou ainda formao, no apoplasto, de espcies insolveis de Al
polinuclear.
4.4. Al polinuclear. A formao de complexos polinucleares, em solues cidas, pode
ocorrer em resposta ao aumento gradativo do pH ou da concentrao de Al total.

polimerizao tambm afetada, experimentalmente, pela presena de certos ons, o mtodo de

neutralizao, a temperatura da soluo e o tempo de reao.
O processo de nucleao surge quando da condensao dos octaedros de Al, que passam
a compartilhar dois OH- numa aresta em comum. Esse processo no origina apenas polmeros
12

13
lineares, uma vez que cada aresta livre de um octaedro pode ser compartilhada por outro
octaedro. O efeito lquido da polinucleao a formao de complexos que acumulam Al na sua
estrutura mais no aumentam a sua carga positiva na mesma proporo, como se pode verificar
no caso, mais simples, da formao de dmeros e trmeros:

2 (Al [H2O]6) 3+ ( Al2 [OH]2 [H2O] 8) 4+

3 ( Al [H2O]6) 3+ ( Al3 [OH]4 [H2O]10) 5+

Dessa forma,

originam-se agregados macromoleculares, que com o envelhecimento

comportam-se como geles amorfos (fase slida).Quimicamente, so intermedirios metaestveis

na formao de Al (OH)3 (s), cuja sntese requer uma relao de atividades {Al+3}/{H+ }3 = 10 8,1
(Kinraide e Parker, 1989).
Um problema que sempre ronda as solues experimentais nas quais so adicionadas
elevadas concentraes de Al total, que, se uma quantidade aprecivel de Al mononuclear se
agrega de forma inesperada, ento as atividades das espcies monomricas sofrero uma reduo
no prevista, devido precipitao de Al polinuclear, e a soluo como tal perder parte da sua
fitotoxicidade. O Al polinuclear precipitado se acumular no apoplasma, o que, dependendo do
tempo de exposio, poder resultar em teores de Al radicular muito elevados. Tal situao pode
conduzir a interpretaes errneas acerca dos mecanismos de toxicidade ou tolerncia
envolvidos.
A figura 4 mostra um exemplo onde o ambiente nutricional das plantas pode favorecer o
acmulo de Al polimrico. Quarenta e oito horas aps a troca da soluo nutritiva, as plantas de
braquiria, sob nutrio ntrica, elevaram o pH do meio de crescimento, sendo que, na presena
de doses crescentes de Al, observou-se uma progressiva reduo na magnitude da alcalinizao.
Com efeito, observa-se que, 48 horas aps a troca da soluo nutritiva, as plantas, sob nutrio

13

14
ntrica, elevaram o pH da soluo, sendo que a presena de Al no meio inibiu progressivamente
tal processo de alcalinizao. Essas plantas foram, portanto, submetidas a variaes cclicas do
pH, muito favorveis polimerizao irreversvel do Al. Em contraste, sob nutrio amoniacal,
a soluo experimentou uma acidificao mais ou menos uniforme, tendo o Al, aparentemente,
pouca influencia no nvel de reduo do pH. Sugestivamente, ao final do perodo de
crescimento, as plantas cultivadas com N -ntrico, mostraram teores de Al nas suas razes, seis
vezes maiores do que aquelas cultivadas com N- amoniacal, no obstante os maiores valores de

pH da soluo

pH a que estiveram submetidas.

Brachiaria decumbens

1a. se mana
2da.se mana

N- NO34

3
1a. se mana

N-NH4+
2
0.0

2da.se mana

1.5

3.0

4.5

6.0

Al adicionado (mg/L)

Figura 4. Variaes de pH da soluo nutritiva, induzidas por plantas do capim braquiria

(Brachiaria decumbens Stapf cv. Basilik) cultivadas com N-NO-3 ou N-N+4 e cinco
nveis de Al, entre 0-6 mg /L ( 0 222 mol/ L). O pH foi medido diariamente, e
ajustado, a cada 48 horas, a um

valor basal de 4,2 (linha horizontal). Os pontos

correspondem a valores medidos nas duas primeiras semanas de exposio ao Al, 48

horas aps a troca da soluo nutritiva. Adaptado de Arruda et al. (1983).

14

15
4.5 Poder fitotxico. Devido s influencias do pH e da fora inica, o poder fitotxico
do Al no decorre diretamente da sua concentrao solvel total, seno da atividade das suas
espcies inicas na interfase raiz-soluo. Por outro lado, cada espcie, individualmente, pode
apresentar um maior ou menor grau de fitotoxicidade, e assim, a identificao do grau de
toxidez das diversas espcies tem sido uma outra rea de estudo aberta a controvrsias (Taylor
et al., 2000).
Parker e colaboradores (1988) aferiram o grau de toxicidade

das espcies de Al

resultantes de hidrlise mononuclear (Figura 2), em plntulas de trigo. Para tal, utilizaram um
bioensaio de alongamento radicular e um desenho experimental onde uma dada concentrao
fixa de Al foi combinada com nveis de pH decrescentes, a partir de 5,0. Foi observado que,
conforme aumentava a atividade do Al3+, o crescimento radicular diminua, e deduziram ser a
espcie trivalente a responsvel exclusiva pela manifestao da toxidez. Em contraste, estudos
posteriores com alface, nabo e leguminosas, levaram concluso de que as espcies inicas
complexadas com OH eram as mais txicas para essas dicotiledneas (Kinraide e Parker,
1990). Nesses estudos utilizaram-se solues onde a atividade do Al3+ ficou constante, enquanto
a atividade dos monmeros hidroxilados aumentou progressivamente, conforme o pH variou
entre 4,5 e 5,0. Em tais solues, a taxa de alongamento radicular da espcie estudada declinava
de forma continua, sugerindo ser a espcie Al (OH)2+ o principal motivo da toxicidade. Em
outros ensaios, a atividade de Al (OH)2+ foi

mantida constante,

enquanto a de Al3+ foi

aumentada, por meio da reduo do pH. Nesse caso, o alongamento radicular ou se mostrou
insensvel ou evidenciou ainda uma estimulao em resposta ao aumento da atividade do Al3+.
A aparente insensibilidade dessas dicotiledneas ao Al3+ devida a uma elevada
atividade do H+, o que reduz a densidade de cargas negativas na superfcie da parede celular
(item 4.6), bloqueando o acesso dos ons Al3+ a tais stios eletronegativos. Vrios autores
sugeriram que essa forma de atenuao da toxidez, pode conduzir a uma reduo no acmulo de
15

16
Al no apoplasma. O efeito amenizador tende a desaparecer se a atividade do H+ na superfcie
celular diminui, e dessa forma, ao aumentar o pH, o grau de toxidez aumenta, dando a impresso
de as formas inicas Al-OH serem mais fitotxicas do que a forma trivalente livre, um
fenmeno, talvez, mais aparente do que real.
Igualmente interessante o caso de estimulao da taxa de alongamento radicular,
durante os primeiros minutos ou horas aps a exposio das plantas ao Al, em resposta a baixas
concentraes de ons Al3+ na soluo. Em toxicologia, a estimulao do desempenho de um
organismo por pequenas exposies a agentes que seriam prejudiciais ou txicos a nveis altos
de exposio, fenmeno conhecido como hormese (Forbes, 2000), e as concentraes de Al
que induzem

tal efeito so consideradas sub-txicas (por estarem abaixo do limiar de

toxicidade). Os efeitos de hormese se manifestam naqueles gentipos que so sensveis a nveis

elevados de acidez no meio de crescimento. Nesses casos, os ctions Al3+, ao reduzir a
eletronegatividade da superfcie celular, amenizam os efeitos lesivos do excesso de prtons
sobre as reas sensveis, supostamente localizadas no continuum formado pela parede celular,
membrana plasmtica e citoesqueleto cortical das clulas do pice radicular (Balska et al.,
2003). Tal situao, obviamente, no opera nas solues desprovidas de Al, onde os efeitos
txicos do H+ se manifestaro plenamente, causando um atraso no alongamento radicular das
plantas utilizadas como controles. Todavia, possvel encontrar grandes diferenas nos limites
dados para os efeitos estimulantes ou inibitrios do Al, em conseqncia de fatores como fora
inica e composio das solues empregadas na experimentao. Pesquisas conduzidas com

160
140
120
100

Bico Ganga

Batatais
IAC 5544

140
amento Relativo (%)

radicular relativo (%)

variedades de arroz serviram para ilustrar este ponto (Figura 5) .

120
100
80

B
Comum Branco
IAC 899

16

17

Figura 5. Crescimento radicular de cultivares de arroz (Oryza sativa L.) de terras altas, em
solues s quais adicionou-se AlCl3 em concentraes mili ou micromolares. (A)
Comprimento mximo das razes, relativo ao das plantas controle, de trs cultivares, aps
21 dias de crescimento. [Al] : 0 2,22; [Ca2+] : 1,0; [Mg2+] : 1,65 mmol/ L,
respectivamente. pH 4 0,2. Adaptado de Fageria e Zimmermann (1979). (B) Taxa de
alongamento radicular, em relao ao das plantas controle,das cultivares Comum Branco
e IAC 899, aps

48 horas de crescimento. [Al] : 0 - 80; [Ca2+ ]: 100 mol /L,

respectivamente. pH 4,0 0,01. Adaptado de Vasconcelos et al. (2002a).

A figura 5A, mostra que a exposio dos gentipos ao menor nvel de Al adicionado
soluo nutritiva (10 mg/ L, ou 370 mol/L ) foi bastante txica para a variedade local Batatais,
mas estimulou o comprimento radicular na Bico Ganga, ou simplesmente no afetou o
crescimento das razes, como em IAC 5544. Na figura 5B, o efeito estimulante ou inibitrio de
uma baixa concentrao de Al se repete, desta vez com a variedade local Comum Branco, em
relao cultivar IAC 899, tida como um padro de sensibilidade (Furlani e Hanna, 1984).
Repare-se, todavia, nas grandes diferenas entre os experimentos, no relativo ao tempo de
exposio e concentraes de Al adicionadas , assim como o uso de solues de composio
muito diferente (item 4.8).Tendncias de resposta similares s mostradas na figura 5, foram
observadas muitas vezes, em diversas espcies vegetais, entre outras, em cultivares de trigo
(Kinraide, 1993), milho (Barcel e Poschenraider, 2002) assim como num estudo com plantas de
17

18
pepino, onde a estimulao do comprimento radicular, a pH 4,0, ocorreu apenas no nvel de 1,0
mol Al/L (Pereira et al., 2005). Em todos esses estudos, os autores atriburam os efeitos de
hormese mitigao da toxidez de prtons, em espcies ou variedades sensveis a uma alta
concentrao de H+ na regio do crescimento radicular.
Excluindo essas situaes mais especficas, admite-se, atualmente, que a

forma

trivalente a mais fitotxica entre as espcies monomricas de Al. De acordo ao comportamento

das espcies inicas mononucleares de Al em soluo, espera-se que o poder fitotxico de uma
soluo contendo Al seja maximizado a valores de pH 4,0 ou inferiores (Figura 2). Todavia,
excetuando-se algumas espcies, a maioria das plantas cultivadas no tolera nveis to altos
de acidez, de forma que as suas respostas ao Al devem ser testadas a valores pH maiores que
4,0, onde o Al3+, mesmo com a sua atividade mais reduzida, pode ainda causar srias leses nos
gentipos mais sensveis.
Sendo a toxidez de Al3+ um caso particular da toxidez dos ons trivalentes para o
crescimento vegetal, de se esperar tambm que a reduo da sua valncia, via atividade de
ligantes, implique na sua detoxificao, mesmo que parcial. De fato, o que acontece: alm da
limitada toxicidade das formas Al-OH, a pesquisa mostrou que as formas complexadas com o
radical sulfato no so txicas (Kinraide, 1991, 1998).
Com respeito aos complexos formados com fluoretos, a situao diferente, j que para
algumas formas, como AlF2+ e AlF2+ tem havido demonstrao de sua toxidez em plantas.
Faanha e Okorokova-Faanha (2002), mostraram que complexos AlFx (principalmente AlF3 e
AlF4-) foram txicos para plntulas de milho, por reduzir o seu crescimento radicular e inibir
competitivamente a absoro de fosfato.
Em princpio, pode se admitir que a formao de complexos polinucleares atenue os
efeitos txicos das formas monomricas, uma vez que o aumento da valncia positiva do
complexo menor do que o acmulo de Al no mesmo. Todavia, vrios pesquisadores sugeriram
18

19
que as formas polimricas

poderiam ser mais txicas do que as mononucleares.

Particularmente, tem causado preocupao o desenvolvimento de uma forma polimrica

sumamente txica, denominada triskaidekaaluminio ou Al13, por causa de sua formula global:
(AlO4Al12(OH)24(H2O)12) 7+ que agrega 13 Al para uma carga policatinica lquida de +7. Por
exemplo, foi demonstrado que cultivares de trigo com nveis diferenciados de sensibilidade ao
Al monomrico, no mostram comportamento similar em relao ao Al polimrico (Parker et
al., 1989). De forma similar, Comin et al. (1999) verificaram uma inverso nas tolerncias
relativas de dois hbridos simples de milho: o C525M, tolerante ao Al monomrico, foi mais
sensvel ao Al polimrico (Al13) do que o HS7777, um gentipo reconhecidamente mais sensvel
ao Al3+, tanto em soluo nutritiva como no campo (Llugany et al., 1995; Pintro et al, 1995).
Todavia no se clarificou se o Al13 ocorre naturalmente nos solos, ou se formado, sob
condies apropriadas, no espao livre radicular. Por outro lado, os desenhos experimentais
atuais, com a sua nfase em solues salinas diludas e baixas concentraes de Al (item. 4.8),
no favorecem a formao desta espcie altamente txica.
4.6. O papel dos ctions divalentes. As interaes mais estudadas entre o Al e os
ctions divalentes, so aquelas com o Ca2+ e o Mg2+. A pesquisa atual est revelando um
panorama muito mais complexo do suposto poucos anos atrs, dados os importantes papeis que
esses ctions desempenham, na transduo de sinais, no metabolismo e no crescimento vegetal.
A existncia de um certo nvel basal de Ca2+ no meio, essencial para o alongamento
radicular (Koyama et al., 2001, e Figura 1). Isto porque na parede celular, os ons Ca2+
desempenham um papel chave na manuteno da conformao espacial das redes de pectina
(fase gel), estabelecendo pontes inicas entre os grupos carboxila (COO-) no esterificados, das
cadeias poligalacturnicas adjacentes (ver captulo 5). Portanto, o deslocamento do Ca2+ ligado
s pectinas inevitavelmente alterar as propriedades fsicas da parede, incluindo a sua
extensibilidade, rigidez e permeabilidade (Rengel e Zhang, 2003).
19

20
Entre as vrias famlias de

protenas quinases caracterizadas nos ltimos anos, as

denominadas WAK (de wall- associated kinase), muito abundantes em plantas, atuam na
conexo entre a parede celular e a membrana plasmtica. WAK1, uma das cinco isoformas
encontradas em Arabidopsis thaliana, uma protena integral da membrana, em cujo domnio
extracitoplasmtico foi identificada uma seqncia de aminocidos (o peptdeo WAK67254), que
se liga ao cido poligalacturnico atravs da formao de pontes de Ca2+ (Decreux e Messiaen,
2005). O gene WAK1 se expressa em resposta a ferimentos ou infeco de patgenos, o que
sugere que a WAK1,

localizada na

zona de alongamento celular,

atua na percepo e

transferncia de estmulos externos ao citoplasma, por meio de um receptor tipo serinotreoninaquinase, localizado no domnio citoplasmtico da protena (Decreux e Messiaen, 2005). Muitas
rotas de sinalizao utilizam protenas quinases, e nesse contexto, Sivaguru e colaboradores
(2003) observaram que a exposio de plntulas de A. thaliana, ao Al, a pH 4,0, durante 12
horas, resultou, por um lado, em inibio do crescimento radicular, e por outro, em uma
rpida induo de WAKs,

um tipo de resposta cujo significado funcional ainda no foi

resolvido, embora seja significativo que estudos usando plantas transgnicas tenham revelado a
essencialidade das WAKs para o alongamento celular (Balska et al., 2003).
Como a inibio do alongamento celular envolve necessariamente o bloqueio dos
processos responsveis pelo afrouxamento da parede celular (relaxamento do estresse), foi
suposto que uma razo primria da ao fitotxica do Al poderia implicar no deslocamento de
ons Ca2+ de stios crticos no apoplasto (Rengel, 1992; Ryan et al., 1994, 1997). Essa idia, a
chamada hiptese do deslocamento, segundo a qual um ction txico porque desloca Ca2+ da
superfcie celular (Kinraide, 1998), induzindo portanto uma situao de deficincia do ction
deslocado. conhecido que os sintomas de toxidez severa de Al so similares aos induzidos
pela deficincia de Ca2+, e que podem ser revertidos ou mitigados pela elevao da atividade do
on Ca2+ no meio radicular (Foy, 1988; Rengel, 1992). No que diz respeito ao Al, no existem
20

21
dvidas de que, sendo um muito forte competidor por stios de ligao eletrosttica, o Al3+ se
liga s pectinas muito mais fortemente do que o Ca2+, chegando a deslocar, no caso da alga
Chara corallina, at 99,99 % do clcio ligado parede celular (Taylor et al., 2000).
A hiptese do deslocamento foi revisada criticamente por Ryan e colaboradores (1994,
1997), que apresentaram evidncias de que o efeito amenizador no era exclusividade do Ca2+,
podendo tambm ser obtido pela adio de quantidades apropriadas de ctions monovalentes.
Nesses experimentos, evidenciou-se igualmente que, na presena de baixas concentraes de Al,
a inibio do crescimento poderia acontecer sem envolver, necessariamente, a inibio da
absoro de Ca2+. Portanto, o bloqueio, pelo Al, de canais permeveis ao Ca2+, situados na
membrana plasmtica, embora se manifeste muito rapidamente, no parece ser a razo causal da
inibio do alongamento celular. Isto sem prejuzo de que, uma inibio prolongada da absoro
de Ca2+ em razes expostas ao Al, possa vir a causar uma sria perturbao nutrio clcica da
planta, exacerbando a sndrome da toxidez de Al (Rengel e Zhang, 2003).
H uma outra possibilidade indireta, resultante do deslocamento do clcio ligado s
pectinas, e que consistiria na interferncia do Al nos elementos do citoesqueleto (microtbulos,
filamentos de actina) via as conexes estabelecidas pelas WAKs e outras protenas com funes
similares no continuum parede celular-MP- citoesqueleto (Horst et al., 1999; Sivaguru et al.,
1999, 2003).
Como visto no captulo 5, o conhecimento das propriedades eletrofisiolgicas das
membranas, particularmente da MP, central para a compreenso dos mecanismos de transporte
inico atravs delas. Em relao aos estudos envolvendo o Al, necessrio considerar duas
dessas propriedades: o potencial eltrico atravs da membrana plasmtica (a diferena de
potencial, normalmente negativa, entre os dois lados da membrana, MP) e o chamado
potencial zeta (Z), que representa um valor aproximado do potencial eltrico da superfcie
externa da membrana plasmtica (Kinraide et al., 1998b). Nessa superfcie existe uma certa
21

22
quantidade de cargas negativas, oriunda de grupos carboxlicos e radicais fosfato, estes
integrando molculas de glicerolipdeos, componentes estruturais da membrana plasmtica
(captulo 5). Associada a essa superfcie eletronegativa, h uma camada difusa de ctions, de
forma similar ao que acontece nos colides do complexo sortivo do solo. Nos dois casos,
possvel estimar quantitativamente a distribuio dos ctions, utilizando-se modelos tericos
como o de Gouy-Chapman-Stern (Kinraide et al., 1998b).
Se ctions Al3+ esto presentes entre os solutos inicos em contato com a MP, eles agiro
seletivamente e com alta eficincia de ligao: a sua afinidade relativa por fosfatidilcolina
560 vezes maior que a do Ca2+ (Rengel, 1992). Todavia, a chance desse tipo de ligao guarda
relao com a magnitude do valor da densidade de carga existente na superfcie (, expressa em
Coulomb/ m2 ): se for alta (Z com maior valor negativo), a ligao favorecida, se ha reduo
de , ento as ligaes envolvendo Al se reduzem de forma correspondente.
possvel ento, que diferenas em

magnitude de Z

entre gentipos estejam

relacionadas, de alguma forma, com diferenas em sensibilidade ao Al. Experimentao com

trigo favorece esse ponto de vista (Kinraide et al., 1998b; Ahn et al., 2004): o valor de Z ,
estimado em vesculas de MP, isoladas de clulas radiculares, foi quase 30 % mais negativo
numa cultivar sensvel do que em outra tolerante, e em conseqncia, a primeira atraiu mais
Al do que a segunda, e expressou maior toxidez. De forma similar, em outro experimento, as
vesculas de MP da linha sensvel ES-8 tinham , in vitro e na ausncia de Al , um valor de Z
mais negativo (-18 mV) do que a linha tolerante ET-8 (-15 mV), mas evidenciaram uma
depolarizao (Z menos negativo) significativamente maior, em resposta aplicao de 10 M
Al durante 10 minutos. Essa maior depolarizao, na linhagem sensvel, deve refletir uma maior
ligao do Al membrana plasmtica, em comparao com a tolerante. As diferenas em
sensibilidade entre essas linhas, se expressam por menor inibio do crescimento radicular, e
menor acumulao apical de Al na linha tolerante, em relao sensvel (Ahn et al., 2004).
22

23
Uma forma de reduzir a negatividade de Z, e por essa via decrescer a atividade de
Al3+ na superfcie da membrana, aumentar a concentrao de ctions na soluo. justamente
a que se mostra a efetividade dos ons divalentes, especificamente do Ca2+ e Mg2+. Esses
ctions, alm de contriburem para o aumento da fora inica, estabelecem, dentro da faixa
milimolar, uma forte competio com o Al3+ pelos stios eletronegativos existentes, de forma
que um aumento da sua atividade, implica numa menor ligao do Al3+ , tanto na superfcie da
MP, como na parede celular (Kinraide, 1993, 1998a). Efeito similar foi comentado no item
anterior, em relao ao H+ .
Existe ainda a possibilidade de que os ctions divalentes atuem na amenizao da toxidez
por vias outras que no os mecanismos eletrostticos (previstos pelo modelo de Gouy-ChapmanStern), ou, no caso do Ca2+, na restaurao de um certo nvel de suficincia para o crescimento
radicular, corrigindo deficincia induzida pelo Al (Kinraide, 1998a).
Tan et al (1992) observaram, em gentipos de sorgo, que o Mg2+ foi muito mais eficiente
do que o Ca2+ na preveno ou atenuao da injria causada pelo Al ao crescimento das razes.
Da mesma forma, em uma srie de experimentos com cultivares de soja, Silva et al. (2001a,
2001b) mostraram que, dentro da faixa micromolar, o Mg2+ foi cem vezes mais efetivo na
amenizao da toxidez de Al do que o Ca2+, enquanto que a efetividade de ambos, na faixa
milimolar, foi similar. Os efeitos benficos do Mg2+ sobre o alongamento radicular, no
puderam ser explicados pelas predies do modelo de Gouy-Chapman-Stern. Os autores
sugeriram a possibilidade que o Mg2+ estimulasse eventos conducentes a uma mais eficiente
detoxificao do Al, tal como a exudao de cido ctrico (Silva et al., 2001c).
4.7. O papel dos compostos orgnicos. No curso da decomposio de resduos animais
e vegetais no solo, uma ampla variedade de compostos orgnicos liberada ou sintetizada pelos
microorganismos decompositores. Os dois grupos mais importantes em relao toxicidade de
Al so o dos materiais hmicos complexos, de alto peso molecular (cidos hmicos e flvicos),
23

24
e o representado por compostos bioqumicos de baixo peso molecular, como cidos orgnicos,
fenis, cidos fenlicos e siderforos (Haynes e Mokolobate, 2001). Ambos os grupos podem
formar complexos de estabilidade variada com formas de Al monomrico. O Al assim
complexado, perde a sua toxicidade para as plantas (Kinraide, 1991). As espcies amorfas de Al
complexado com humatos e fulvatos, devido ao seu grande tamanho, no podem permear os
poros da parede celular, nem, portanto, serem absorvidas como tais.
Os efeitos benficos dos cidos orgnicos de baixo peso molecular tm sido
demonstrados tanto em solos cidos como em soluo nutritiva (Hue et al., 1986), havendo,
entretanto, diferenas entre eles, quanto a sua efetividade. Tais diferenas resultam de suas
configuraes estruturais: os mais efetivos tm dois pares de grupos funcionais OH/ COOH
ligados a dois carbonos adjacentes (caso dos cidos ctrico e tartrico) ou dois grupos COOH
conectados diretamente (cido oxlico), configuraes essas que permitem a formao de
estruturas cclicas estveis com o Al (Hue et al., 1986). Na figura 6 se mostra um exemplo de
detoxificao, pela adio

de cido ctrico, de uma soluo contendo plntulas de arroz

expostas ao Al.

24

25
100

CRR (%)

80

Caiap

60
40
20
0

100

200

cido ctrico (
M)

Figura 6. Efeito da adio de cido ctrico sobe o Comprimento Radicular Relativo de plntulas
de arroz de terra firme, cv. Caiap. As plantas foram cultivadas em tubos, contendo
CaCl2 100 mol L-1 (controle) ou CaCl2 + AlCl3 40 mol L-1 + cido ctrico, em pH
4,1, durante cinco dias. Ao final do perodo, as razes foram digitalizadas em scanner e
sua rea e comprimento totais determinados com auxilio de um programa de anlise de
imagens. Dados no publicados de M.V. Antunes e R. Rossiello.

Alm da fonte exgena representada pela matria orgnica solvel, a detoxificao do Al

rizosfrico pode acontecer via exudao radicular de cidos orgnicos (Miyazawa et al., 1992;
Jones, 1998; Ma et al., 2001; Silva et al, 2002; Zonta et al, 2003). Tal fenmeno, evidenciado,
at agora, em razes de trigo, milho, cevada, feijo, soja e alfafa, entre outras, considerado
um dos

principais mecanismos pelos quais

as plantas podem tolerar ou resistir a nveis

elevados de Al solvel. Em plantas de trigo e de milho, tm sido identificados e caracterizados

canais aninicos (ver Captulo 5), localizados na membrana plasmtica de clulas da regio
apical das razes. Tais canais, que tm permeabilidade para malato, no caso do trigo (Kochian,
1995; Zhang et al., 2001) ou citrato, em cultivares tolerantes de milho (Kollmeier et al., 2001;
Pieros

et al., 2002), so ativados especificamente por meio do Al3+ extracelular, por

25

26
mecanismos at agora desconhecidos (Roberts, 2006). Os temas ligados ao metabolismo,
acmulo e efluxo radicular de cidos orgnicos, tm sido focalizados em numerosas pesquisas
nos ltimos anos, como evidenciam as revises preparadas por Ryan et al. (2001); Barcel e
Poschenrieder (2002); Silva et al. (2002) e Kochian et al. (2004).
4.8. O uso de solues salinas simples. Como previamente mencionado, nas solues
nutritivas com elevada fora inica, a fitotoxicidade potencial do Al encontra-se atenuada, no
somente pelo efeito da alta fora inica per se,mas tambm pelas interaes fsico-qumicas que
se estabelecem entre o Al e os outros ons, conforme os mecanismos mostrados nas sees
precedentes. Com isso, aumentam bastante a concentrao de Al e o tempo necessrio induo
de sintomas de toxidez nas plantas (Figura 5 A), resultando em uma progressiva acumulao de
formas trocveis e no trocveis de Al no apoplasto dos tecidos apicais das razes (item 5.5) as
quais podem ter pouca ou nenhuma relao com os mecanismos indutores da toxidez.
O reconhecimento dessa situao conduziu formulao de solues salinas
quimicamente mais simples, formadas pela dissoluo de cloretos de Ca e de Al, em meio cido
(tal como as usadas nas figuras 2, 5b e 6), as quais minimizam os problemas relacionados com
a precipitao e polimerizao do Al, devido ausncia de outros ligantes que no o OH-.
Tambm por essa razo, tais solues permitem uma computao mais precisa da especiao do
Al, e o nvel de fitotoxidez da espcie Al3+ pode ser facilmente regulado, atravs de variaes no
pH ou na concentrao de Ca2+. Uma vantagem adicional que tais solues simulam, de forma
mais adequada, as concentraes inicas caractersticas de solues de solos cidos, onde os
teores de Al monomrico extraveis, raramente excedem 150-200 mol/L (Schttelndreier et al.,
2001; Wenzl et al., 2003).
Esse tipo de soluo salina, uma vez que desprovida dos nutrientes essenciais (exceto
clcio), prprio para estudos de curta durao (minutos a horas de exposio), que geralmente

26

27
utilizam plntulas com poucos dias de germinao, com reservas seminais suficientes para
sustentar o seu crescimento inicial.

5. Sintomatologia do estresse de alumnio

Nos ltimos anos, estudos relativos aos mecanismos de resposta vegetal a estresses
ambientais, como baixa temperatura, deficincia hdrica, choque osmtico ou salinidade,
comprovaram que os agentes estressantes so percebidos de forma diferenciada pelos sistemas
de sinalizao das plantas,de acordo com a intensidade da sua ao (Kawasaki et al., 2001;
Pastori e Foyer, 2002). Isto significa que os roteiros de transduo assim como os seus
resultados (que incluem aes radicalmente opostas, como a aclimatao e/ ou o aumento da
tolerncia ao estresse, ou a induo de um programa de morte celular) diferiro entre clulas
que respondam a um estresse moderado ou a um estresse severo (Kacperska, 2004). No caso do
estresse de Al a situao deve ser similar, uma vez que o tempo de exposio e a atividade
do Al3+ interagem tanto na manifestao dos sintomas de toxidez quanto na expresso dos
mecanismos de tolerncia ao estresse (Parker 1995; Barcel e Poschenreider, 2002; Kochian et
al., 2004). Todavia, e muito embora estudos recentes mostrem que certas interaes do Al
com componentes das rotas na transduo de sinais possam estar relacionadas toxidez do Al
ao nvel celular, h que se reconhecer que muitos aspectos ainda permanecem como hipteses
de trabalho.
Em contraste com esse carter ncipiente dos estudos relativos s diversas etapas da
percepo e transduo dos sinais do Al, existe vasta documentao relativa descrio das
respostas induzidas (a etapa final da cadeia), especialmente as relacionadas ao crescimento
radicular e os seus reflexos na planta inteira. Na ltima dcada, e a favor de avanos no campo
da microscopia, alm da

disponibilidade de tcnicas microanalticas

mais potentes,

as

27

28
pesquisas tm aumentado em muito a sua capacidade de resoluo, revelando novos aspectos
da ao do Al, tanto em tecidos e clulas como intracelularmente, em mitocndrias e vacolos,
ou em microtbulos e microfilamentos de actina, componentes do citoesqueleto.
Embora os mecanismos causais da toxidez do Al possam parecer complicados, no
devemos esquecer que eles resultam, na sua essncia, da ligao do Al com substncias
situadas na parede celular, membrana plasmtica ou no citoplasma. Como j foi observado, o Al
possui uma forte afinidade por compostos doadores de oxignio, o que inclui uma longa lista de
ligantes, desde molculas estruturalmente simples, como os fosfatos inorgnicos, at algumas
bastante complexas, como antocianinas e outros flavonoides (Tolr et al., 2005). Isto significa
um amplo leque de oportunidades de ligao a diversos stios nos domnios apoplsmico e
simplsmico. Como a cintica de ocupao desses stios por parte do Al diferenciada, isso
afeta o tempo de aparecimento de eventuais leses nos vrios compartimentos celulares,
dificultando o discernimento sobre se uma determinada resposta reflete efeitos do Al de natureza
primria ou secundria.
Dentro da ampla variedade de reaes induzidas pelo Al nas plantas, ns selecionamos
trs que, pela sua universalidade e precocidade de expresso, se supe que estejam relacionadas
direta ou indiretamente com os mecanismos causais da toxidez. Assim, nas prximas sees
sero abordados os assuntos a seguir: i) inibio do crescimento radicular, incluindo a
localizao do stio de percepo do estresse; ii) acmulo de calose na membrana plasmtica; e
iii) o acmulo e distribuio de formas de Al nas clulas.
5.1. Sintomas visuais. Como as razes so os primeiros rgos a entrar em contato com
o Al no solo, desde as primeiras observaes foi registrado que os sintomas de toxidez
expressava-se de forma mais acentuada no sistema radicular.
O efeito da toxidez se manifesta, inicialmente, sob a forma de uma reduo na taxa de
crescimento das razes que, como tal, um fenmeno muito rpido: nos gentipos mais
28

29
sensveis, a reduo do alongamento das razes acontece entre trinta minutos e duas horas aps
o incio da exposio ao Al (Barcel e Poschenrieder, 2002). Utilizando um dispositivo digital,
Llugany et al (1995) foram capazes de monitorar o alongamento radicular de cultivares de
milho, de forma continua, com uma alta resoluo (1 m). Anlises de vdeo-imagens tambm
tem sido utilizadas com a mesma finalidade (Zonta, 2003).
A reduo da taxa de crescimento poder ter carter reversvel ou no, dependendo da
severidade do estresse. Se este for suficientemente severo, poder levar morte as clulas da
zona meristemtica, ou de tecidos corticais (Simonovicova et al., 2004). A nveis intermedirios,
pode ocorrer o aparecimento de reas manchadas de cor marrom castanho, pouco atrs da regio
meristemtica, assim como na epiderme das regies novas ou das mais velhas. Tais manchas
so indicativas do aparecimento de substncias polifenlicas (Richards et al., 1998; Nagy et al.,
2004), as quais contribuem atravs de sua oxidao, para o aumento das chamadas espcies
reativas ao oxignio, responsveis pelas reaes de peroxidao de lipdeos constituintes de
membranas celulares (Cakmak e Horst 1991; Peixoto et al., 1999). Vrias comunicaes
recentes tm confirmado que o estresse de Al pode induzir a produo de espcies reativas ao
oxignio e ativar enzimas oxidativas em clulas animais e vegetais (Yamamoto et al., 2002;
Boscolo et al., 2003; Guo et al., 2004), sugerindo que o estresse oxidativo possivelmente um
componente importante da reao vegetal toxidez de Al.
Com o passar dos dias, a exposio continua ao Al, produz alteraes morfolgicas
caractersticas: as razes engrossam e tornam-se curtas, com aspecto quebradio (Furlani e Clark,
1981), desenvolvendo uma colorao castanha, principalmente na regio apical (Figuras 7). O Al
induz tambm alteraes na arquitetura do sistema radicular, reprimindo o crescimento das
laterais, as quais tendem a iniciar mas prximas do pice da raiz principal (Foy et al., 1978;
Pavan e Bingham 1982; Costa de Macedo et al., 1997) conduzindo portanto, a sistemas

29

30
radiculares com menor rea e volume radicular (Foy et al., 1978; e Figura 8) . Da mesma forma,
h inibio da rea e volume dos pelos radiculares (Care, 1995).

Figura 7. Sintomas de toxidez de Al em razes de plantas de arroz, cultivadas em soluo

nutritiva ( A) Desenvolvimento normal, razes de plantas controle; (B) Razes sob
estresse de Al. Aspecto do sistema radicular aps quatro semanas de cultivo, a pH 4,0
0,2, com 370 mol Al/ L. Repare na colorao bronzeada indicativa da acumulao de
substncias fenlicas, assim como no engrossamento radial dos eixos primrios e na
ausncia de ramificao fina. Fonte: M.L.Mendona (1991).

Figura 8. Sintomas de toxidez de Al em plantas de feijo (Phaseolus vulgaris L. cv. Carioca

80).

crescidas em soluo nutritiva completa.

(A) Plantas

controle; (B) Plantas

expostas a 20 mol Al /L, durante vinte dias. Fonte: J. Jacob Neto, observao no
publicada.

Como mencionado previamente, nem sempre a leso primria causada pelo Al

irreversvel. Por exemplo, Wheeler e Follet (1991) observaram que as razes principais de
30

31
plantas de abbora detiveram o seu crescimento imediatamente aps a adio de Al soluo
nutritiva. Aps um perodo inibitrio inicial de 24 horas, essas razes reiniciaram o seu
crescimento, e dois dias aps, o crescimento das razes laterais tambm foi restabelecido . Em
trigo (Parker, 1995) e milho (Barcel e Poschenrieder, 2002) tambm h relatos deste padro de
comportamento, segundo o qual, certas cultivares, aps experimentar uma reduo inicial em
termos de taxas de

alongamento radicular, a baixos nveis de Al, pareceram aclimatar,

recuperando, parcial ou totalmente, as suas taxas de crescimento pr-estresse.

Em oposio aos casos de intoxicao aguda, os sintomas associados a formas crnicas
de toxidez manifestam-se dias ou semanas apos a exposio inicial ao Al, com a propagao dos
efeitos parte area das plantas. Na parte area, os sintomas resultantes da toxidez no so
claramente identificveis, e as injrias provocadas pelo Al podem ser confundidas com aquelas
decorrentes de desbalano ou deficincia nutricional (item 3), especialmente do P: reduo geral
do crescimento, folhas pequenas e verdes- escuras, com maturidade tardia e ramos com
colorao purprea. Em outros casos, os sintomas so semelhantes as deficincias de Ca e Fe,
com o enrolamento de folhas jovens ou malformaes e colapso de pecolos. Tambm tem sido
relatada a ocorrncia de reas clorticas ou necrticas sobre a superfcie foliar, lembrando
sintomas de toxidez por mangans ou mesmo de deficincia hdrica (Foy, 1974; Foy et al., 1978
Helyar,1978; Rengel,1992; Kochian, 1995).
A grande maioria das espcies vegetais estudadas, em geral culturas anuais de interesse
econmico, no acumula, na parte area, quantidades significativas de Al. Por essa razo,
improvvel que atributos como o peso ou a rea da massa foliar, o nmero de ramos, perfilhos
ou altura, sejam afetados diretamente pela presena do metal nos seus tecidos. Portanto, se
considerados isoladamente, esses atributos possuem um valor limitado como indicadores
fenotpicos. Entretanto, se combinados com indicadores ligados s razes, em modelos de
regresso, podem se transformar em ferramentas teis na avaliao da variabilidade genotpica
31

32
para a tolerncia ao Al. Um exemplo da abordagem anterior o trabalho de Vicente et al
(1998b) em arroz de sequeiro.
5.2. pice radicular: o alvo primrio. Em um estudo sobre toxidez de Al em trigo
realizados quase quatro dcadas atrs Fleming e Foy (1968) concluram, que a tolerncia
varietal dependia de trs fatores: habilidade das razes para continuar a diviso e o alongamento
celular sob estresse; modificao do ambiente rizosfrico; e a manuteno de reas
meristemticas aptas a desenvolverem novos tecidos aps o estresse. Eles perceberam que o
efeito txico era localizado, e que as diferenas varietais resultaram de uma srie de eventos que
comearam ao nvel celular, atribuindo-os principalmente a interferncias do metal com a
diviso celular, tal como fizera Clarkson (1965) previamente, pesquisando razes de alho.
Embora esses trabalhos contivessem to claras sugestes, foram necessrias mais duas
dcadas de pesquisas para demonstrar que o stio primrio de toxidez o pice.
Em 1991, R. Bennet e C.M.Breen, publicaram uma

importante reviso, na qual

introduziram a temtica dos mecanismos de sinalizao no estudo dos aspectos fisiolgicos da

toxidez do Al. Nesse trabalho, deliberadamente especulativo, os autores sugeriram que

percepo do sinal seria feita pelas clulas perifricas da coifa (CPC, Figura 9B), ao serem
danificadas pelo Al, iniciando assim uma cascata de transduo (amplificao) do sinal, que
chegaria at a populao de clulas em mitose em torno do centro quiescente (CQ, Figura 9B),
local onde seriam elaboradas as respostas ao estresse.
A seguir, Ryan et al. (1993) demonstraram que a inibio do crescimento radicular do
milho, pelo Al, requer a exposio especfica dos primeiros 10-15 mm da raiz, a partir do seu
pice. Pequenos blocos de agar, contendo Al, foram colocados sobre segmentos especficos da
raiz, permitindo assim determinar que os primeiros 2-3 mm (regio da coifa e do meristema
radicular, Figura 9 A), eram crticos para a percepo e expresso da toxidez. Em um outro
experimento, a regio da coifa foi removida, e mesmo assim, a inibio do alongamento celular
32

33
foi mantida, sugerindo que a coifa no estava envolvida na percepo do sinal de Al. Este ltimo
resultado foi confirmado em trabalhos posteriores com milho (Pieros et al., 2002).
Por alguma razo, a raiz primria do milho (e mais recentemente, a de Arabidopsis), tem
sido estudada com muito maior detalhamento que a de outras espcies (Luxov, 1992; Ishikawa
e Evans, 1993; Baluska et al., 2001; Barlow, 2003). Ishikawa e Evans (1993) propuseram a
subdiviso da regio apical da raiz primria de milho, em cinco zonas: a coifa, o meristema
apical (ZM), a zona distal de alongamento (ZDA), a zona central de alongamento (ZCA) e a
zona de maturao (Figura 9A). Tais zonas se superpem parcialmente nos primeiros 7 mm do
extremo apical onde inicia-se a zona de cessao de crescimento celular (Luxov, 1992). A zona
distal de alongamento ou zona de transio (ZT), uma regio de crescimento celular no
descrita previamente, que comea imediatamente aps terem cessado as divises mitticas e que
termina no comeo da fase de rpido alongamento celular (Ishikawa e Evans, 1993).
Sivaguru e Horst (1998) realizaram uma srie de experimentos, baseados no estdio
prvio de Ryan et al. (1993), visando aumentar a resoluo espacial da zona de mxima
sensibilidade ao Al e levando em considerao a subdiviso feita por Ishikawa e Evans (1993).
Para tal, aplicaram 90 M Al, a pH 4,3, de forma localizada, em segmentos intactos de razes de
milho, com 1,0 mm de extenso, a partir do pice. Eles observaram que a inibio radicular
comeou aps uma hora de exposio somente quando o Al foi aplicado aos trs milmetros
apicais. O Al causou a mxima inibio no segmento 1-2 mm, correspondente ZT. No
segmento inicial (0-1 mm), correspondente zona meristemtica o efeito foi significativamente
menor enquanto, que a aplicao zona de alongamento adjacente (2-3 mm) no provocou
efeito inibitrio.
A baixa sensibilidade da ZM foi atribuda ao papel protetor de substncias mucilaginosas
secretadas pelas clulas da coifa (Bennet e Breen, 1991) , as quais formam uma bainha (BM,
Figura 9B) , com um forte poder ligante do Al (Archambault et al., 1996) protegendo ento o
33

34
meristema apical da toxicidade. Todavia, a falta de inibio na zona central de alongamento,
no imediatamente compreensvel. Uma explicao foi dada por Balska et al. (2001). Esses
autores sugeriram que as populaes celulares do pice radicular mostram diversidade de
comportamento citolgico e fisiolgico de acordo posio que ocupam (Figura 9A, clulas
representadas por smbolo retangular), e que a arquitetura especfica das clulas na ZT contribui
para o monitoramento dos sinais ambientais.

34

35

Figura 9. Representao esquemtica do pice de uma raiz seminal de milho, mostrando

detalhes da sua organizao tissular e celular. A) Desenho esquemtico do eixo radicular
(0-7 mm), conforme Luxov, 1992. direita, a subdiviso feita por Ishikawa e Evans
(1993). ZM = zona meristemtica; (ZDA ou ZT = zona distal de alongamento ou zona
de transio ZAA = zona apical de alongamento; ZCA = zona central de alongamento;
ZA = zona de alongamento (> 5,6 mm). B) Acima: Representao esquemtica do
extremo pical de uma raiz de milho, indicando a localizao do meristema radicular
(MR), meristema da coifa (MC) e o centro quiescente (CQ). CC= clulas centrais da
coifa. CPC = clulas perifricas da coifa, que esto envolvidas na secreo da bainha de
mucigel (BM), junto com as clulas de borda (CB) (adaptado de Bennet e Breen, 1991 e
Barlow, 2003). Abaixo: Corte longitudinal do pice de uma raiz primria de milho, seis
dias aps a emergncia, mostrando a correspondncia com o desenho acima.

35

36
Isto porque enquanto a atividade das clulas meristemticas implica em montar e
desmontar fusos mitticos, as clulas da ZT, so caracterizadas por corpos celulares com um
ncleo centrado, que contm, na sua superfcie centros organizativos de microtbulos, que o
conectam membrana plasmtica (Figura 9A ). J nas clulas situadas dentro da zona central
de alongamento, o volume citoplasmtico ocupado por vacolos e o ncleo alongado e
comprimido lateralmente contra a parede celular (9A). Em decorrncia dessas configuraes, os
microtbulos das clulas da zona de transio transportariam sinais entre a periferia celular e o
ncleo de forma muito mais eficiente que no caso das clulas da zona de alongamento. Esta
poderia ser uma explicao para o fato de que quando o Al foi aplicado de forma localizada
zona de alongamento (ZA), no houve efeito sobre a taxa de alongamento radicular.
Em condies normais, a zona de transio no contribui significativamente com a taxa
de alongamento da regio apical como um todo, que determinada pelas taxas de alongamento
dentro da ZCA. Todavia, notvel que o Al aplicado ZT, inibisse o alongamento celular na
ZA, mesmo quando essa regio ainda no estava em contato com o Al. Tal resultado sugeriu a
existncia de uma trilha de sinalizao, mediando o sinal de Al entre as zonas de transio e de
alongamento.
Em seqncia, em uma outra srie de experimentos com plntulas de milho, Kollmeier et
al. (2000), confirmaram a maior sensibilidade da ZT em relao ZA, e observaram que havia
uma estreita relao entre o nvel de inibio na zona de transio, e os teores de Al e calose
acumulada nela. Adicionalmente, verificaram que na cultivar sensvel, o Al inibiu
significativamente o transporte basipetal de auxina (do pice para a base da raiz), aplicada
externamente, diretamente sobre a ZM ou sobre a ZCA. Esse resultado sugeriu que auxina
poderia fazer parte da trilha de sinalizao aludida acima.
Em condies naturais, o fluxo basipetal de auxina nos pices radiculares implica no
acmulo do hormnio nas clulas centrais da coifa (columela da coifa, CC, Figura 9 B,
36

37
superior), de onde redirecionada para as clulas laterais. Como se pode apreciar na Figura 9B
(inferior),

as clulas laterais ou perifricas da coifa se sobrepem s da zona distal de

alongamento, o que permite que as clulas corticais da ZDA recebam a auxina, via um
transportador aninico especfico. Uma vez no ZDA, a auxina transportada at a zona de
alongamento principal, onde exerce o seu efeito estimulante sobre a extensibilidade da parede
celular, primariamente via ativao de H+- ATPases da membrana plasmtica, conforme foi
discutido nos captulos 2 e 5. Concebivelmente, o Al pode interferir rapidamente nas varias
etapas desse processo, (Ishikawa e Evans, 1993; Horst et al, 1999; Kollmeier et al, 2000) , mas,
at o presente, os detalhes concretos do mecanismo de bloqueio do transporte da auxina,
permanece desconhecido.
A discusso precedente mostra ento que, por mais precocemente que se manifeste, a
inibio do alongamento celular no um evento primrio em relao toxidez do Al. O
crescimento radicular um processo dinmico e complexo, que, pela sua natureza , depende de
uma extensa rede de processos bioqumicos e fisiolgicos que podem ser bloqueados
previamente inibio da extensibilidade celular (Rengel e Zhang, 2003). Embora seja claro que
existem muitas possibilidades de interao entre o Al e esses processos subjacentes, h algumas
alternativas que tem merecido maior ateno, como o caso das propriedades visco-elstica da
parede celular (Ma et al., 2004) a despolarizao da membrana plasmtica (item 4.6), associada
reduo da atividade da H+-ATPase nessa membrana (Ramos, 2003); os aumentos nos teores
de Ca2+ citosslico; o acmulo de calose e as alteraes da dinmica do citoesqueleto (Rengel
e Zhang, 2003).

5.3. Estimativas das Taxas de Alongamento Radicular. Como vimos, o estresse de Al

inibe primariamente o crescimento, na regio apical das razes. Por essa razo, a magnitude da
inibio usada como uma medida da toxidez do Al, e assim, os primeiros resultados
37

38
apresentados nas pesquisas, quase sempre mostram aos efeitos do Al sobre o alongamento
radicular. E nesse ponto se evidencia uma outra dificuldade, que a falta de padronizao na
expresso dos resultados, o que, aliado ao uso de condies experimentais diferentes entre os
estudos, prejudica as comparaes e limita as possibilidades de se fazerem inferncias de ordem
mais geral (Vasconcelos et al., 2002 b).
Vamos supor o experimento mais simples possvel, onde plntulas com 4-5 dias de
idade, so selecionadas por uniformidade, atravs da medio do comprimento da raiz seminal
mais longa. Essas plntulas podem passar (ou no) por um breve perodo de aclimatao, onde o
pH da soluo, progressivamente abaixado com quantidades dosadas de HCl. Finalmente, as
plntulas so transplantadas a um meio contendo uma soluo de CaCl2 com ou sem adio de
concentraes variveis de AlCl3 (x) , sendo o pH ajustado ao valor pr-fixado com HCl. Por
ocasio do transplante s solues testes, os comprimentos radiculares de todas as plantas de
todos os tratamentos so registrados com rgua milimetrada. Nesta fase teremos ento, dois
grupos de medies de comprimento inicial:
- C i Al : comprimento inicial (mm) da raiz seminal, medido antes da exposio
0
soluo-teste sem Al .
- C i Al : comprimento inicial (mm) da raiz seminal,
x

medido antes da exposio

soluo-teste no nvel x de Al.

Aps um certo do perodo, computado em horas, sob condies ambientais controladas,
as plantas

so transferidas para outra soluo livre de Al, e o seu comprimento radicular

medido novamente, obtendo-se as seguintes leituras:

- C f Al : comprimento final (mm) medido aps o perodo de exposio soluo-teste
0
sem Al.

38

39
- C f Al : comprimento final (mm) da raiz seminal, medido aps o perodo de exposio
x
soluo-teste no nvel x de Al.
A partir dessas medies, o alongamento radicular pode ser expresso de vrias formas.
Alguns autores preferem mostrar os valores absolutos do comprimento radicular, corrigidos ou
no pelos valores iniciais (ou seja: Cf - Ci, ou apenas Cf). Com mais freqncia, se expressa o
comprimento final das razes sob Al (+ Al), como percentagem do comprimento nas razes
controle (Al 0), obtendo-se o Comprimento Radicular Relativo (veja Figuras 5 A e 6) ou seja:

CRR =

C f + Al
C f Al

100

..........................(1)

Se o intuito for realizar uma anlise das taxas do crescimento radicular, a subtrao do
valor inicial est implcita no clculo da taxa de alongamento (TA), dada pela expresso:

TA =

(C f Alx,0 C i Alx,0 )
Tf T 0

.................................(2)

onde Tf - To representa o intervalo de tempo desde o incio dos tratamentos com AlCl3,
e a TA fica expressa em mm/ hora. Os valores absolutos das taxas de elongao dos controles
podem ser comparados diretamente com as dos tratamentos, como no exemplo mostrado na
Figura 10, abaixo.

39

40

Taxa de Alongamento
(mm h-1 )

1.00

controle
Al (100
M)

0.75

0.50

0.25

0.00

100

200
Ca

2+

500

em soluo (
M)

Figura 10. Taxa de alongamento da raiz seminal de plntulas da cultivar de arroz de terra firme
Caiap, em resposta a nveis de Ca2+ na soluo, na presena ou no de 100 M Al, a
pH 4,01 0,01. F.T.Ramos e R. Rossiello, dados no publicados.

Quando as TA dos tratamentos so expressas como percentagem das taxas dos

respectivos controles,

surge uma nova taxa, que podemos chamar Taxa de Alongamento

Relativo (Parker, 1995), dada pela expresso:

TAR =

(C f Al x C i Al x )
(C f Al 0 C i Al 0 )

100

................(3)

A figura 5 B, no item 4.5, apresenta um conjunto de dados de alongamento radicular em

plntulas de arroz, utilizando a TAR, que um parmetro bastante usado na literatura.
Kinraide (1991, 1998),

apontou dois aspectos que limitam, de certa forma,

aplicabilidade geral da frmula (3). Em primeiro lugar, a hiptese de que as diferenas em

40

41
comprimento entre as razes expostas e as no expostas ao metal, sejam

atribuveis,

exclusivamente, fitotoxidez do Al, discutvel. Essa assuno pode induzir a erro quando a
espcie ou cultivar intrinsecamente intolerante a uma alta atividade de prtons na soluo.
Com efeito, embora a soluo controle e aquela +Al possam estar em um pH igualmente
baixo, o nvel de estresse de H+ ser maior nas plantas controle, porque nas expostas ao metal, o
Al3+ deslocar o H+ da superfcie da membrana plasmtica (item 4.5).
Um outro aspecto que o uso de valores de Ci na equao (3), tanto para os tratamentos
Al

como para Al0 no estritamente correto e deveria ser substitudo pelo valor do

comprimento associado ao nvel de Al que cause a mxima toxidez, isto , que sature o
processo

de inibio do alongamento da raiz . Quando tal situao acontece, a taxa de

alongamento se estabiliza, a um valor baixo, mas que no zero. Ento, para levar em conta esse
pequeno crescimento inicial, prvio ao efeito inibitrio total do Al, a equao (3) assume uma
forma, aparentemente, diferente como mostra a equao 4:

TAR =

(C
(C

Al x

Al 0

Al sat

Alsat

)
)

100

................................(4)

onde CAlsat. representa o comprimento radicular mdio concentrao de Al que satura o

processo inibitrio. Todavia, em valores absolutos, o alongamento residual verificado

na

concentrao de Al qual se verifica a saturao da inibio, usualmente pequeno. Por

exemplo, uma raiz seminal de IAC 899, severamente estressada por exposio a 160 M de Al
por 48 horas, alonga um mximo de 3 mm, o que significa uma EER de apenas de 6-7%, de
forma que, na prtica, o valor de CAlsat. aproximadamente igual ao valor do comprimento
radicular por ocasio da transferncia das plantas s solues-teste. Por outro lado, verdade

41

42
que se o valor C

Al x

tambm baixo, a no considerao de C

Al sat

pode levar a estimativas

exageradas de TAR.
Quando as taxas de alongamento so relacionadas com as atividades ou concentraes
de Al na soluo, dentro de uma ampla faixa, as curvas resultantes mostram uma tendncia de
caimento, que pode ser expressa pela equao de Weibull (Kinraide e Parker, 1989). Essa
equao aplicada descrio das relaes resposta-dose em estudos toxicolgicos (Kinraide,
1998), e possui a seguinte formulao:

TAR =

100
exp(a {Al 3+ }) b

................(5)

onde a constante b, o parmetro responsvel pela forma da equao, que mostra

carter sigmoidal para valores de b >1. Na simulao apresentada na figura 11, foram usados os
valores: a = 0,04 e b = 1,50. Um dado importante nesse grfico, o ponto correspondente
[Al3+] ou {Al3+} que diminui a TAR mxima metade (50 %) de seu mximo , que
simbolizada como [Al3+]50. Essa concentrao pode ser estimada por interpolao, ou de forma
mais precisa, atravs da seguinte expresso, derivada da equao (5):

{Al3+ }50 =

1b
ln 2
a

...................(6)

42

43

100
TAR (%)=

TAR (%)

80

100
exp (0,04 Al)1,5

60
[{Al3+}]50 = 19,6 M
40
20
0

10

20

30

40

50

60

70

Concentrao/Atividade Al (
M)

Figura 11. Representao da relao funcional entre a concentrao ou atividade do Al3+ no

meio de crescimento e a Taxa de Alongamento Relativo (TAR) da raiz principal de uma
dada espcie ou variedade, tal como descrita pela equao de Weibull. A simulao foi
feita com os parmetros a = 0,04 e b= 1,5. Os valores de [{Al}] escolhidos, esto dentro
da faixa de ocorrncia na soluo extravel de solos tropicais.

5.4. Acmulo da calose. A calose um -1,3-glucano, sintetizada nos elementos

crivados do floema, em resposta a ocorrncia de leses provocadas pela invaso de fungos ou
bactrias, e de outros estresses ambientais, tais como altas temperaturas (Sivaguru et al., 2000).
Nas respostas patognicas, a deposio de calose nos poros das placas crivadas, serve como uma
barreira fsica, bloqueando os organismos invasores e prevenindo a sua propagao ao resto da
planta.
notvel que uma das respostas mais sensveis toxidez de Al nas razes, seja a rpida
sntese desse polissacardeo, indicando que a percepo que tem a planta da injria do Al
assemelha-se a um ferimento. A formao de calose, como um marcador sensvel da toxidez de
43

44
Al, induzida primariamente nas clulas apicais do cortex perifrico (Sivaguru and Horst,
1998) precedendo ao seu efeito inibitrio sobre a diviso celular (Kochian, 1995). O acmulo
de calose est sob controle das atividades das enzimas 1-3 - -glucano-sintetase, responsvel
pela sua sntese, e 1,3- -glucanase, responsvel pela sua degradao, e que se localizam na
membrana plasmtica, mas especificamente ao redor dos plasmodesmas (Sivagur et al., 2000).
Devido sensibilidade o mecanismo de sntese da calose, a mesma considera um bom
indicativo do grau de injria, pondendo inclusive, ser utilizada como um parmetro de seleo,
conforme sugerido por Wissemeier et al. (1992). De acordo com estudos de Sivaguru e Horst
(1998), a mxima acumulao de calose acontece nas clulas perifricas da zona distal de
alongamento, coincidindo com o pico de inibio da elongao celular e de acmulo de Al nessa
regio apical.
O acmulo de calose, principalmente na face externa da membrana plasmtica e no
lumem do plasmodesmata, tem como conseqncia o bloqueio da comunicao entre clulas
contguas, impedindo o transporte de gua e solutos por via simplstica (Sivaguru et al., 2000).
possvel portanto que vrias das manifestaes de toxidez na parte area, e particularmente a
interferncia com as relaes hdricas celulares sejam reflexo desse bloqueio dos plasmodesmas
pela calose. Dada a magnitude desses efeitos secundrios, tem havido interesse em se determinar
os eventos fisiolgicos e moleculares subjacentes ao acmulo da calose. Os resultados das
pesquisas mais recentes, indicam que a induo da sntese de calose depende tanto da
despolarizao da membrana plasmtica quanto do aumento nos nveis de Al. A produo de
calose induzida pela toxidez do Al depende da despolarizao da MP e um aumento nos nveis
do Ca2+ intracelular (Sivaguru et al., 2005). Esses resultados reforam a impresso de muitos
pesquisadores, no sentido de que o aumento temporrio no teor de Ca2+ intracelular pode ter um
importante papel na expresso da toxidez do Al (Rengel e Zhang, 2003).

44

45
5.5. Acmulo apical de Al e sua distribuio entre apoplasma e simplasma. Um
sintoma caracterstico, de rpido aparecimento aps a exposio ao Al, justamente o aumento
da concentrao do metal nos tecidos radiculares. A acumulao significativa, em termos de
toxidez, aquela que se processa no extremo apical das razes, regio na qual se situam as
clulas mais sensveis, conforme visto acima. Os experimentos j citados, de Sivaguru e Horst
(1998) e Kollmeier et al. (2000), com uma cultivar sensvel de milho, mostraram que na zona de
mxima sensibilidade (zona de transio, Figura 9 A), se verificou o maior acmulo de Al, alm
do que, a induo da sntese de calose foi maximizada. Experimentao com outras espcies
(anuais ou perenes), tm mostrado consistentemente a mesma associao entre alta concentrao
de Al, inibio do crescimento radicular e acmulo de calose, nos primeiros 5-10 mm a partir
do extremo apical, dependendo da espcie. J acima dessa regio, tal relao se expressa de
maneira muito menos evidente ou simplesmente no existe. Isto lgico, j

que uma

amostragem fora da regio apical, supe a incluso de clulas maduras, que no contribuem para
o efeito inibitrio do Al, uma vez que j cessaram o seu crescimento, mantendo, todavia, a sua
capacidade de absorver Al. Samuels et al. (1997) observaram que o teor de Al, na zona entre 0 e
2 mm da raiz primria de uma cultivar tolerante de trigo, foi sempre inferior em comparao
com os das regies mais maduras, ao passo que, numa cultivar sensvel, o padro foi exatamente
o inverso, com um maior acmulo na zona apical. Esse resultado tpico, e ilustra o fato de que
o mecanismo de defesa ou proteo, se expressa na regio de mxima sensibilidade, excluindo e
neutralizando parcialmente os ons Al3+ potencialmente txicos.
O Al no trocvel definido como a somatria do Al no simplasma, precipitado ou
polimerizado na interface entre MP e parede celular, ou no prprio compartimento apoplsmico,
o qual no pode ser trocado. J o Al trocvel aquele que se encontra adsorvido pela matriz
polianinica do apoplasma, e como tal pode ser substitudo por processos de troca inica (Tice
et al., 1992).
45

46
A distino entre Al trocvel e no trocvel no apoplasma tem sido feita sobre uma base
operacional, isto , de acordo a certos protocolos experimentais. Archambault et al. (1996)
mostraram, em cultivares de trigo, que nos casos onde as concentraes aplicadas foram baixas
(50 M), na forma de AlCl3 e durante curtos perodo de tempo (3 horas), o Al da parede celular
pode ser trocado de forma muito eficiente pelo cido ctrico, definindo portanto uma condio
operacional que minimiza o acmulo de Al no trocvel no apoplasma. J o aumento da
concentrao (200 M), e uma perodo de exposio mais longo (48 horas), facilitaram o
aumento da frao no trocvel do Al. Esta ltima situao parece ser a regra geral, mas a sua
interpretao ambgua: pode tanto significar que uma parte do Al acumulado no apoplasma
tornou-se refratrio ou inacessvel dentro da prpria parede celular ou ento, atravessou a
membrana plasmtica e passou a residir intracelularmente. Ainda essa abordagem no elimina a
possibilidade de que o aumento em Al no trocvel reflita tambm um aumento do Al retido no
mucigel. O Al ligado mucilagem apical muito resistente troca, o que biologicamente, faz
sentido, uma vez que a bainha de mucigel em torno da coifa e do meristema apical (Figura B)
a primeira barreira de proteo.
O tema da distribuio celular de Al entre apoplasma e simplasma continua hoje aberto
ao debate (Eticha et al., 2005). As controvrsias neste campo

derivam , em parte,

de dois

fatores, estreitamente relacionados: por um lado, a indisponibilidade de um istopo de

27

Al,

capaz de ser detectado de forma sensvel e disponibilizado a preos acessveis (Archambault et

al., 1996), e por outro, a falta de tcnicas analticas com suficiente sensibilidade para detectar os
muito baixos nveis de Al associados aos compartimentos sub-celulares (Taylor et al., 2000). A
falta de um istopo acessvel continua a limitar os estudos sobre os mecanismos de transporte
do Al ao nvel da membrana, no se tendo certeza, ainda hoje, atualmente sob qual ou quais
formas o Al transportado, assim como o mecanismo especfico pelo qual consegue atravessar
membranas biolgicas.
46

47
Por outro lado, a procura da localizao e quantificao do Al intracelular se constituiu,
num dos grandes desafios enfrentados pelos pesquisadores na ltima dcada. Nesse perodo
foram sendo introduzidas tcnicas microanalticas que ampliaram progressivamente a resoluo
espacial, e a sensibilidade analtica, como a microscopia epifluorescente; a espectrometria de
raios X, e de ons secundrios, e mais recentemente, a microscopia confocal com varredura de
laser. Os resultados tem sido surpreendentes, uma vez que contrariamente ao suposto, em vrias
espcies, e mesmo em gentipos tolerantes, verificou-se que os ons Al3+ ascenderam ao interior
celular muito rapidamente, em 30 minutos ou menos, aps o incio da exposio ao Al. Uma
demonstrao direta e inequvoca dessa situao foi fornecida por Taylor et al. (2000), que
usaram o istopo raro 26Al e espectrometria de massa com acelerador, para estudar o transporte
de Al nas membranas plasmtica e vacuolar de clulas gigantes da alga Chara corallina .
Nesses organismos foi possvel aos pesquisadores isolar, por meio de tcnicas microcirgicas, as
fraes sub-celulares (parede celular, protoplasma e vacolos) com um risco mnimo de
contaminao cruzada. Os seus dados mostraram, que a parede celular o principal
compartimento de acumulao de Al. No entanto, o transporte de Al atravs da membrana
plasmtica ocorreu dentro de um perodo de minutos de exposio e foi reforado pelo seu
seqestro subseqente no vacolo.
Chega-se ento aos dias de hoje, a uma situao aparentemente paradoxal, mas
certamente no estranha no mundo da cincia: aqueles pesquisadores que sustentam que a
natureza das leses causadas pelo Al primariamente apoplsmica, no podem deixar de
reconhecer a possibilidade da participao de fatores citosslicos, em vista da rpida penetrao
do Al no simplasma, enquanto os que pensam que a toxidez decorre da interao do Al com
componentes citosslicos, tambm no podem descartar um papel para o apoplasma, tendo em
vista que em todos os casos at aqui estudados, o Al acumula-se em altssimas propores nesse
compartimento.
47

48
5.6. O Uso de Corantes.
Um dos mtodos mais eficientes e baratos de localizar Al no apoplasma, atravs do
uso de corantes qumicos. Para que o processo de colorao usando corantes funcione
eficientemente o Al tem que possuir alta afinidade por substncias liberadas pela planta, como o
complexo fenlico morin que e um flavanoide ou alizarim uma antraquinona (Tolr et al.,2005).
A substncia morin por exemplo, tem sido muito usado para visualizar Al no apoplasma de
razes utilizando o microscpio fluorescente. O uso de corantes tem sido reportado desde que
Link em 1807, citado por Conns (1977), usou sulfato de ferro para colorir tanino em tecido de
plantas. Para colorir o Al a hematoxilina tem sido largamente utilizada para a visualizao deste
elemento na superfcie de razes e para anlise da ultraestrutura de tecidos (McLean & Gilbert,
1927; Wright & Donahue 1953, Pole et al., 1978; Kinraide, 1988, Massot et al., 1991). Outros
corantes como quinalizarina (Kalovoulos & Misopolinos, 1983), azul de metileno (Wagatsuma
et al., 1988), aluminon (Matsumoto & Morimura, 1980), azul de molibdnio que colore Al e P
(McCormick & Borden, 1972; McCormick & Borden, 1974), violeta de pirocatecol - PVC
(Jacob-Neto, 1993) entre outros.
Estes mtodos podem ser usados na seleo de plantas tolerantes ao Al visando o
crescimento em ambientes cidos. A seleo de plantas que possam crescer nestes ambientes
tem sido uma das principais linhas de pesquisa de programas de melhoramento vegetal de
plantas cultivadas. Entretanto, a seleo de uma cultivar mais tolerante ao alumnio ainda no
fcil devido confiana nos mtodos de seleo (Foy, 1988). Seleo de plantas tolerantes ao
alumnio diretamente no campo, no seu ambiente de crescimento, seria talvez, a aproximao
mais confivel de seleo, principalmente do ponto de vista agronmico (Foy, 1988; GarlandCampbell & Carter 1990). Entretanto do ponto de vista prtico, a concentrao de alumnio no
substrato de crescimento pode no ser uniforme e ocorrer interao com outros fatores do
ambiente mascarando a expresso gentica da resistncia (Goldman et al., 1989; Garland48

49
Campbell & Carter 1990). Em um programa de melhoramento utilizando os mtodos
tradicionais, geralmente se trabalha com grandes populaes de plantas, com milhares de
linhagens, o que dificulta a seleo de cultivares tolerantes (Polle et al., 1978; Massot et al.,
1991). Uma das alternativas encontrada para a seleo de grandes populaes de plantas foi o
uso de corantes com a finalidade de colorir as razes, crescidas em meio hidropnico. Para que o
processo de seleo de plantas tolerantes ao alumnio utilizando corante, seja eficiente e
confivel, varias fatores devem ser levados em considerao, entre eles a razo H+/OH- no meio
hidropnico, o estdio de crescimento das razes, e a sua colorao natural.
Deve ser tambm levado em considerao, o provvel local de excluso do alumnio, se
o mecanismo de resistncia da espcie baseado na excluso externa ou interna na raiz, ou se a
resistncia ocorre pela acumulao na parte area (Jacob-Neto et al., 1991; Jacob-Neto, 1993;
Barcel e Poschenrieder, 2002).
Na figura 12 A , podemos observar a colorao das razes de cultivares de feijo C178,
no tolerante ao alumnio, com a cor azul caracterstica do corante PVC e da colorao menos
intensa da cultivar A222, considerada mais tolerante crescidas por um perodo de 45 dias em
uma soluo nutritiva de meia fora inica e com 30 M de alumnio. No caso, pode ser
observada uma maior acumulao de Al na superfcie das razes da cultivar mais sensvel
toxidez, o que foi caracterizado como um mecanismo que diferencia tolerncia entre cultivares
de feijo (Jacob-Neto, 1993; Kurt, 2006). Quando as plantas foram crescidas em maiores
concentraes de Al na soluo (100 M), no ocorreu distino de cores entre as razes das
cultivares que ficaram todas intensamente coloridas como mostrado na figura 12 (b), no
caracterizando mais diferenas entre elas.

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50

Figura 12- Fotografias de razes de feijo. (A) cultivares A222 (tolerante ao Al) e C178 (no
tolerante) crescidas em soluo nutritiva com Al (30 M) e coloridas com o corante
PVC. (B) cultivar A222 (tolerante ao Al) crescidas em soluo nutritiva com Al (100
M) e coloridas com o corante PVC.
Na figura 13 pode ser visualizada a diferena de colorao nas razes de plantas de arroz
crescidas em diferentes concentraes de Al e com a presena do corante de hematoxilina. Este
corante o mais utilizado para estudos de alumnio em gramneas (Polle et al., 1978), embora
tambm possa ser utilizado em leguminosas (Massot et al., 1991) e outras espcies.

Figura 13. Plantas de arroz crescidas em diferentes concentraes de alumnio e coloridas com
o corante hematoxilina.

5.7. Efeito do Alumnio na ultraestrura dos ndulos de leguminosas.

Todos os processos relatados neste captulo sobre o efeito da toxidez de Al ocorrem com
a maioria das plantas superiores. Entretanto, as leguminosas fixando o nitrognio atmosfrico,
devido simbiose, so geralmente mais sensveis toxidez de alumnio do que quando elas
esto sendo supridas com nitrognio mineral (Foy, 1988). O alumnio pode reduzir a fixao

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51
biolgica de nitrognio de trs modos: causando injurias diretamente na planta hospedeira;
reduzindo a sobrevivncia de clulas livres de rizbios ou interferindo em vrios estgios do
processo de fixao biolgica de nitrognio (Foy, 1988; Brady et al., 1990; Jacob-Neto et al.,
1991; Jacob-Neto, 1993).
Plantas noduladas com o gnero Bradyrhizobium so geralmente mais tolerantes acidez
do que aquelas noduladas com outros gneros. No caso de microorganismo, estes devem possuir
certa tolerncia a baixos valores de pH antes de serem tolerantes ao alumnio (Flis et al., 1993).
Alm do efeito direto do Al nas razes o elemento pode danificar o perfeito funcionamento dos
ndulos. Isto pode ser demonstrado em estudos de ultraestrutura do ndulo. So escassos na
literatura, os trabalhos que demonstram o efeito direto do alumnio na ultraestrutura de ndulos e
razes das leguminosas fixando nitrognio atmosfrico. Jacob-Neto (1993) observou em seus
estudos sobre o efeito de alumnio na morfologia interna de razes e ndulos de plantas de soja
(Glycine max ( L.) Merrill), que a cultivar tolerante IAC-9 apresentava mesmo sem adio de Al,
nas clulas corticais externas a camada de esclereides do ndulo, depsitos de material amorfo,
que era mais denso passagem dos eltrons (Figura 14 A). J na cultivar UFV-1 considerada
mais susceptvel ao Al, no foi encontrado esta estrutura amorfa que foi sugerida no trabalho
como sendo a razo da maior tolerncia da cultivar IAC-9 (Figura 14 B).

Figura 14- Microfotografias utilizando microscpio eletrnico de transmisso, mostrando a

presena de depsitos amorfos-D no vacolo das clulas do cortex externo dos ndulos
51

52
de soja crescidas com 300 M de Al na soluo..A) Cultivar tolerante (IAC-9) com
abundncia de depsitos - D B) Cultivar menos tolerante UFV-1 com poucos depsitos.
V vacolo.

Neste mesmo trabalho o autor tambm estudou cultivares contrastantes de feijo quanto
tolerncia ao Al. Na figura 15 pode ser observada microfotografia de corte transversal de
ndulos de plantas sadias de feijo (Phaseolus Vulgaris L.), crescidas sem adio de alumnio na
soluo nutritiva. Analisando a ultraestrutura do ndulo (Figura 15 A) pode-se observar que o
mesmo possui uma aparncia normal, com ncleo e os bacterides dentro das clulas, sem
ruptura de membranas, presena das clulas intersticiais com amido e ausncia de cordes de
infeco nas clulas infectadas completamente preenchidas com bacterides, que um sinal de
que o processo de fixao biolgico do nitrognio estava funcionando sem a ocorrncia de
estresse. J com e com as plantas crescidas com 300 M de Al na soluo ocorreram profundas
modificaes na ultraestrutura da regio infectada dos ndulos, o que certamente afetou a
eficincia do processo de fixao biolgica do nitrognio (Figura 15 B). Quando as plantas
foram crescidas em altas concentraes de Al ocorreu desorganizao na ultraestrutura dos
ndulos em todas as cultivares testadas, independe de sua capacidade de resistncia ao Al.

Figura 15 - Microfotografias (A e B) realizada utilizando microscpio tico de seo transversal

da regio infectada de ndulo de plantas de feijo cultivar A222. (a) crescida na ausncia da Al. (b)
crescida com 300 M de Al mostrando clulas infectadas anormais.

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53

6. Consideraes Finais
No presente captulo foram consideradas as respostas de algumas poucas espcies
vegetais toxidez de alumnio. Embora essas espcies sejam, quase na sua totalidade, de plantas
anuais de grande importncia econmica e alimentar, elas representam, uma amostra muito
limitada da variabilidade natural que as plantas apresentam nas suas respostas ao estresse de
alumnio. Assim, no poderamos deixar de alertar ao leitor sobre as pesquisas envolvendo
espcies arbreas, tanto aquelas utilizadas em projetos de silvicultura tradicional, como as
espcies ecologicamente adaptadas a ambientes oxdicos, como no Cerrado. Elas mostram
aspectos surpreendentes, no somente pelo fato das rvores serem, em geral, consideravelmente
mais tolerantes do que outras espcies, como pastagens e cereais (Nagy et al., 2004), mas
tambm pela forma particular de coexistncia com o Al, que algumas delas tem desenvolvido.
o caso de dicotiledneas arbustivas nativas do Cerrado, representantes dos gneros Qualea spp.,
Vochysia spp., Miconia spp. e Psychotria spp., entre outras, as quais se comportam como
acumuladoras obrigatrias ou facultativas, exibindo, em certos casos, teores de Al acima de 1, 5
% do pso seco foliar (Haridasan, 2000).
Na rea de pastagens e forragicultura, as pesquisas envolvendo Al no tem ocupado at o
presente o lugar que deveriam, mas no deixa de ser surpreendente tambm, o fato de que a
gramnea Brachiaria decumbens, to familiar nos cenrios da pecuria nacional, pela sua
elevada adaptao a solos cidos, possui mecanismos de tolerncia ao Al que no coincide com
nenhum dos at agora descritos na literatura (Wenzl et al., 2001).
Num mundo onde os recursos financeiros destinados s pesquisas cientficas

esto

sujeitos a contingenciamentos sem prvio aviso, so quase invitveis os debates sobre o

interesse econmico que uma determinada rea de conhecimento possa ter. No caso da temtica

53

54
abrangida neste captulo, ns podemos nos perguntar, como C. D. Foy (1997): qual o valor
econmico de uma planta tolerante ao estresse? Qual o valor econmico de uma espcie ou
gentipo cujas razes possam penetrar camadas sub-superfciais compactadas e oxdicas, em
termos de escape a seca, economia de custos de irrigao e benefcios ao cultivo subseqente,
num sistema de rotao de culturas? No difcil imaginar que espcies assim, resguardadas as
suas caractersticas produtivas, devam se comportar de forma eficiente, qualquer que for o
agroecossistema considerado. Para serem assim, essas plantam precisam ter, constitutivamente,
algum nvel de tolerncia ao alumnio.
A seleo de plantas que possam crescer nestes ambientes cidos tem sido uma das
principais linhas de pesquisa de programas de melhoramento ao longo dos anos. Como
observaram recentemente Barcel e Poschenreider (2002), tais programas vm recebendo, numa
escala global, montantes crescentes de fundos. Isso se constitui num reconhecimento implcito
da importncia das pesquisas orientadas elucidao dos eventos iniciais da toxidez de Al e dos
mecanismos de tolerncia que as plantas empregam para se resguardar.
Para a compreenso desses mecanismos essencial aproximao via identificao de
genes para tolerncia ao Al. Seguramente esta ser a via mais promissora no futuro prximo para
a sntese de variedades por processos biotecnolgicos. Existe, entretanto, a necessidade de muita
pesquisa adicional, posto que o objetivo final reconciliar geneticamente as estratgias vegetais
de sobrevivncia, e adaptao ao estresse,com a sua capacidade de produzir alimentos ou fibras,
o que depende, em ultima anlise, da partio de carbono na planta.
Os autores consideram que esta reviso apenas uma introduo dos conceitos bsicos
da importncia do alumnio na cincia vegetal, esperando que ela de alguma forma contribua
para a introduo de jovens pesquisadores, que contribuam com novos enfoque para este velho
problema da agricultura nos solos cidos.

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7. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

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CAPTULO 16

MECANISMOS DE TOLERNCIA DE PLANTAS A METAIS

PESADOS
Fabiana Soares dos Santos1, Nelson Moura Brasil do Amaral Sobrinho1, Nelson Mazur1
1 Departamento de Solos, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, BR 465, Km 47,
Seropdica, 23890-000, Rio de Janeiro.

SUMRIO
1

Introduo....................................................................................................................... 2

Toxicidade de metais pesados em plantas ...................................................................... 3

Tolerncia de plantas a metais pesados .......................................................................... 4

3.1

Imobilizao ........................................................................................................... 5

3.2

Excluso ................................................................................................................. 6

3.3

Quelao ................................................................................................................. 6

3.3.1

Fitoquelatinas ................................................................................................. 6

3.3.2

Metalotionenas ............................................................................................ 10

3.3.3

cidos orgnicos e Aminocidos ................................................................. 11

3.4

Compartimentalizao .......................................................................................... 12

Hipertolerncia............................................................................................................... 14

Concluses ..................................................................................................................... 16

Referncias Bibliogrficas ............................................................................................. 18

INTRODUO
Atualmente, a poluio por metais pesados tem sido considerada um dos mais srios

problemas ambientais, principalmente em reas influenciadas pela atividade antrpica. As

principais fontes antrpicas de contaminao ambiental por metais pesados so os
fertilizantes, pesticidas, gua de irrigao contaminada, combusto de carvo e leo, gases
emitidos por veculos a combusto, incinerao de resduos urbanos e industriais, e
indstrias de minerao, fundio e refinamento (Amaral Sobrinho et al., 1992).
Os metais pesados podem ser definidos como um grupo de metais, semimetais e
no-metais, que possuem densidade atmica maior que 5 g cm-3 e que esto associados
poluio ambiental e toxicidade aos seres vivos. Alguns metais pesados, incluindo Cu, Zn,
e Mn, so micronutrientes requeridos por uma ampla variedade de processos fisiolgicos
(Ver cap. X neste volume). No entanto, podem ser txicos em concentraes elevadas.
Alm disso, metais pesados como Cd, Pb ou Hg, no possuem nenhuma funo conhecida
para as plantas e so altamente txicos, devido sua reatividade com tomos de S e N
presentes nos aminocidos e protenas (Clemens, 2001).
Algumas plantas, assim como outros organismos, desenvolveram um complexo
mecanismo de homeostase para minimizar os efeitos deletrios de metais pesados,
controlando a absoro, acumulao e translocao de metais pesados no tecido vegetal.
Esses mecanismos protegem a clula evitando o acmulo de ons livres em excesso no
citossol, resultando na tolerncia de plantas a metais pesados.
Algumas plantas, no somente toleram elevadas concentraes de metais pesados mas
tambm os hiperacumulam. Cerca de 400 espcies de plantas so descritas como

hiperacumuladoras de metais pesados, sendo definidas como plantas que podem acumular
mais de 0,1% do seu peso seco em Ni, Co ou Pb, mais de 1% em Zn, e 0,01% do seu peso
seco em Cd (Baker & Brooks, 1989).
Ao contrrio dos poluentes orgnicos, os metais pesados no podem ser degradados
qumica ou biologicamente, e uma das alternativas para a limpeza de solos contaminados
a fitoextrao, que consiste na absoro e acumulao de metais pesados na parte area de
plantas hiperacumuladoras.
Nesse captulo sero estudados os diferentes mecanismos utilizados pelas plantas na
tolerncia e hiperacumulao de metais pesados.
2

TOXICIDADE DE METAIS PES ADOS EM PLANTAS

As plantas diferem na sua habilidade em retirar, acumular e tolerar metais pesados.

Diferenas marcantes podem ocorrer entre as espcies, entre variedades de uma mesma
espcie e tambm nos tecidos da planta. Sendo assim, as plantas apresentam um grau de
susceptibilidade variado aos metais pesados, e respondem a esses efeitos por diferentes
caminhos, dependendo do tipo e concentrao do on, espcie e estdio de desenvolvimento
da planta.
Muitos trabalhos tm sido publicados a respeito de danos fisiolgicos provocados pelo
excesso de metais em plantas (Peterson, 1971; Foy et al., 1978; Bowen, 1979 citados por
Kabata-Pendias & Pendias, 1992), e relatam os seguintes efeitos txicos do excesso de
metais:
mudanas na permeabilidade da membrana celular;
reaes de grupos tilicos com ctions metlicos;
afinidade com grupos fosfato do ADP e ATP;

 inativao de enzimas e/ou protenas funcionais.

Esses danos fisiolgicos provocam na planta uma srie de distrbios causando reduo
no crescimento, inibio da fotossntese e respirao, degenerao das principais organelas
celulares e, em muitos casos, morte das plantas.
Recentes estudos mostram que um dos principais mecanismos que elevadas
concentraes de metais pesados podem causar danos no tecido das plantas o estmulo na
produo de radicais livres, levando ao estresse oxidativo (Foyer et al., 1997). Alguns
metais, como Cu, Cd, Zn e Fe podem causar estresse oxidativo pela induo na produo de
espcies

ativas

de

oxignio

(EAO),

provocando

efeitos

na

fotossntese

e,

conseqentemente, srios danos a macromolculas.

O O2 utilizado pelas plantas pouco reativo devido a estrutura estvel dos eltrons na
sua camada externa. No entanto, principalmente quando as plantas so submetidas a um
estresse, entre eles os de metais pesados, podem gerar radicais livres e derivados, como
hidroxila (OH-), nion superxido (O2-) e perxido de hidrognio (H2O2), que so altamente
reativos e podem oxidar macromolculas biolgicas, levando a danos celulares como,
alterao no DNA, oxidao de protenas e peroxidao de lipdeos (Dat et al., 2000). As
plantas possuem um nmero de molculas (glutationa, ascorbato) e enzimas antioxidantes
(catalases, peroxidases, entre outras) que protegem as plantas do estresse oxidativo.
3

TOLERNCIA DE PLANTAS A METAIS PESADOS

Algumas plantas podem acumular metais pesados, dentro ou fora de seus tecidos

devido sua grande habilidade em se adaptar s propriedades qumicas do meio ambiente.

Sendo assim, podem ser consideradas reservatrios intermedirios atravs do qual os metais
pesados se movem do solo, gua e ar para o homem e animais. As plantas podem ser

receptores passivos de metais pesados, mas tambm podem exercer controle sobre a
translocao e rejeio de alguns elementos, por reaes fisiolgicas especficas.
As plantas podem apresentar diferentes mecanismos de tolerncia em resposta ao
excesso de metais pesados, incluindo a reduo do transporte atravs da membrana,
excluso, formao de peptdeos ricos em grupos tilicos (fitoquelatinas e metalotionenas),
quelao por cidos orgnicos e aminocidos, e compartimentalizao de metal em
estruturas subcelulares.
3.1

Imobilizao
A primeira barreira contra a entrada de metais pesados, se expressando principalmente

a nvel radicular, a imobilizao de metais pesados na parede celular e por carboidratos

extracelulares como mucilagem e calose (Wagner, 1993), evitando a presena de ons livres
nos tecidos radiculares e, conseqentemente, a translocao de ons para a parte area,
reduzindo assim a fitotoxicidade. As pectinas e histidinas se destacam pela imobilizao de
metais pesados na parede celular (Leita et al., 1996).
importante destacar que de uma quantidade de ons associados s razes, somente
uma parte absorvida pelas clulas. Uma frao significativa adsorvida por grupos
carregados negativamente (COO-) na parede celular das razes (ver captulo 2 neste
volume). Desse modo, possvel a existncia de plantas que acumulam uma significativa
concentrao de metal nas razes, mas expressam uma limitada concentrao na parte area.
Por exemplo, muitas plantas acumulam Pb nas razes, mas a sua translocao para a parte
area muito baixa, devido sua alta afinidade por stios ligantes na parede celular
(Blaylock & Huang, 1999).

3.2

Excluso
Prevenir a entrada de metais no citossol atravs da exudao de compostos, pela ao

da membrana plasmtica, pode teoricamente representar a melhor estratgia de defesa.

Algumas plantas, conhecidas como excludentes, possuem mecanismos especializados para
reduzir a entrada de metais pesados nas razes.
Malato, citrato e oxalato tem sido identificados como importantes quelantes secretados
pelas razes e esto envolvidos na resistncia de plantas ao Al e metais pesados
(Matsumoto, 2000).
Segundo Costa et al. (1997), o estresse ao Cd em Lactuca sativa e Lupinus albus
aumentou os nveis de asparagina em exudados de razes. No entanto, essa resposta foi mais
relacionada a uma disfuno na membrana da planta em concentraes de Cd acima de
1

M, do que por um mecanismo de defesa induzindo a formao desses aminocidos para

quelatar ons de Cd.

Uma melhor compreenso desse mecanismo necessria para aumentar o
conhecimento de excluso de metais em plantas superiores.
3.3

Quelao
Os quelantes contribuem para a detoxicao metlica pela reduo na concentrao de

metal livre no citossol, limitando a sua reatividade e solubilidade. Nas plantas, as principais
classes de quelantes de metais pesados conhecidas incluem as fitoquelatinas,
metalotionenas, cidos orgnicos e aminocidos.
3.3.1

Fitoquelatinas

Um dos mecanismos de tolerncia a metais pesados em plantas est relacionado com a

sntese de peptdeos tilicos chamados fitoquelatinas (PC), que formam complexos com
metais pesados, especialmente o Cd, no S livre presente na cistena.
As fitoquelatinas so formadas por 3 aminocidos: glutamato (Glu), cistena (Cys) e
glicina (Gly) com Glu e Cys ligados atravs de uma -carboxilamida. A estrutura das PCs
se forma com um aumento nas repeties do dipeptdeo -Glu-Cys seguido por uma Gly
terminal. Tem estrutura geral (-Glu-Cys)n-Gly (Figura 1), onde n=2-11, mas geralmente
so mais encontradas variando o n de 2 a 5. PCs tem sido identificadas em uma ampla
variedade de espcies de plantas e em alguns microrganismos (Rauser, 1995).

Figura 1: Estrutura qumica das fitoquelatinas (-Glu-Cys)n-Gly; n=2-11.

Fonte: Zenk, 1996.

Esses peptdeos so sintetizados enzimaticamente, usando glutationa (GSH) como

substrato, atravs de uma reao catalizada pela enzima -glutamilcistena dipeptidil
transpeptidase, conhecida como fitoquelatina sintase (Grill et al., 1989), que ativada pela
presena de metais pesados. Segundo Grill et al. (1989), a PC sintase ativada aps alguns
minutos de exposio a uma variedade de metais e metalides. In vitro, a atividade da PC
7

sintase foi ativada somente na presena de ons metlicos e o melhor ativador estudado foi
o Cd seguido por Ag, Bi, Pb,Zn, Cu, Hg e Au. Esses metais tambm induziram a sntese de
PCs in vivo em culturas de clulas de plantas.
As fitoquelatinas so estruturalmente relacionadas glutationa (GSH; -Glu-Cys-Gly)
e numerosos estudos fisiolgicos, bioqumicos e genticos tem confirmado que o GSH (ou,
em muitos casos, compostos relacionados) o substrato para a biosntese das PCs (Rauser,
1999). Estudos genticos tem confirmado que mutantes deficientes em GSH de
Schizosaccharomyces pombe e Arabidopsis, so, conseqentemente, deficientes em PC e
hipersensvel a metais, principalmente Cd. Estudos com culturas de clulas demonstraram a
induo de PCs na presena de Cd coincidindo com um breve decrscimo nos nveis de
GSH. Alm disso, a exposio de culturas de clulas e plantas inteiras a um inibidor da
sntese de GSH, BSO, conferiu inibio na biossntese de PC e aumento da sensibilidade ao
Cd (Howden et al., 1995).
O uso de mutantes de Arabidopsis thaliana demonstrou o papel fundamental das PCs
na detoxicao ao Cd (Howden et al., 1995). O mutante cad1, deficiente na atividade da PC
sintase, apesar de ter um nvel de GSH comparvel com outras plantas, foi mais sensvel
aos efeitos fitotxicos do Cd.
Alm das fitoquelatinas, algumas plantas podem apresentar outros peptdeos,
relacionados PC, na presena de metais pesados. As leguminosas produzem peptdeos
com estrutura (-Glu-Cys)n-Ala (Grill et al., 1986), que so formados por homo-glutationa
(h-GSH), que podem substituir parcial ou integralmente o GSH nessas plantas.
Algumas espcies da famlia Poaceae (Gramineae) produzem peptdeos contendo
serina

como

aminocido

terminal,

com

estrutura

(-Glu-Cys)n-Ser,

chamados

hidroximetil-fitoquelatinas (Klapheck et al., 1994). Esses peptdeos so formados a partir

da presena de hidroximetil-glutationa em adio glutationa nessas plantas.
O Cd o mais forte indutor de PC in vivo e o elemento que forma complexos mais
estveis com PCs, devido sua grande afinidade ao enxofre (Zenk, 1996). No entanto, a
sntese de PC no est relacionada somente a esse elemento. Grill et al. (1987) estudando a
sntese de PC em uma suspenso de cultura de clulas de R. serpentina exposta a metais,
concluram que os metais induzem a sntese de PC na seguinte ordem decrescente: Cd2+,
Pb2+, Zn2+, Sb3+, Ag+, Hg2+, As5-, Cu+, Sn2+, Au3+, Bi3+. Segundo esses mesmos autores,
ons Ni, Te, W e Se no induziram a sntese de PCs.
Plantas e culturas de clulas expostas a uma faixa de 3 a 500

M de Cd tiveram um

rpido aumento nos nveis de PC dentro de 10-15 min, seguido por um aumento na cadeia
com vrios peptdeos -Glu-Cys (Meuwly et al., 1995). Em raizes de milho, o tripeptdeo
-Glu-Cys-Glu foi induzido dentro de 2 horas de exposio ao Cd, seguido pela formao
de (-Glu-Cys)2-3-Glu (Meuwly et al., 1995).
Morelli & Scarano (2004), estudando os mecanismos de defesa celular da alga marinha
Phaeodactylum tricornutum ao Cu, mostrou que a formao de complexo Cu-PC foi
detectado logo aps 1 hora de exposio ao metal, sugerindo que esse mecanismo forma a
primeira defesa ao Cu contra a formao de espcies ativas de oxignio (EAOs).
Apesar da importncia das PCs no processo de detoxicao de plantas a metais pesados
estar bem documentada, ainda no est clara qual a principal funo das PCs em plantas. A
formao do complexo metal-PC in vivo parece ter um papel breve e passageiro no
processo de detoxicao. Leopold et al. (1999), mostraram que os complexos Cd-PC e
Cu-PC formados em Silene vulgaris desapareceram nas razes 1 a 2 semanas aps a
exposio aos metais pesados.
9

3.3.2

Metalotionenas

Metalotionenas (MT) so protenas de baixo peso molecular, no enzimticas, ricas

em cistena e eficientes na complexao de metais pela afinidade com enxofre presente na
Cys (Hamer, 1986).
As metalotionenas so classificadas baseado no arranjamento da Cys. MTs Classe I
possuem mais de 20 Cys conservadas, sendo comuns em mamferos e vertebrados, e
conhecidas por conferir tolerncia ao Cd2+. As MTs sem um arranjamento especfico de
Cys so classificadas como MTs classe II e incluem todas as encontradas em plantas,
fungos e animais invertebrados.
Apesar das metalotionenas serem mais comuns em animais, existem 4 tipos de MTs
em plantas, classificadas de acordo com o arranjamento das Cys na formao da protena.
As Cys esto presentes em metalotionenas de plantas como Cys-x-Cys, Cys-x-x-Cys (onde
x um aminocido diferente de Cys), ou grupamentos de Cys-Cys.
Vrias plantas contm genes de metalotionenas, como ervilha (Pisum sativum), soja
(Glycine max), Arabidopsis thaliana, Mimulus guttatus, milho (Zea mays), cevada (Avena
sativa), trigo (Triticum aestivum), Ricinus communis, e Brassica napus, contendo genes
codificando os 4 tipos de MTs (Prasad & Freitas, 1999).
A diversidade de MTs em plantas, sugere que elas podem diferir no somente na
seqncia de aminocidos mas tambm na funo e especificidade a determinado metal. No
entanto, ainda no se tem informao a respeito da verdadeira funo de cada MT na
planta.
Vrios estudos tem sido publicados sobre a expresso de genes de metalotionenas em
plantas. H vrias evidncias que as MTs desempenham um importante papel na

10

detoxicao de plantas ao Cu. A expresso de MTs Tipo 2 correlaciona com a tolerncia ao

Cu em Arabidopsis (Murphy & Taiz, 1995) e, mais recentemente, a tolerncia ao Cu em
populao de Silene vulgaris mostrou maior expresso na presena do gene que codifica
MT Tipo 2 (Van Hoof et al., 2001). Alm disso, as PCs no conferem tolerncia ao Cu em
Arabidopsis, indicando que um outro mecanismo, talvez envolvendo MTs, pode estar
envolvido no processo.
Em Arabdopsis thaliana, duas metalotionenas induzidas por Cu com uma massa
molecular de 4500 a 8000 (chamada MT1 e MT2) foram isoladas (Murphy et al., 1997).
Em germe de trigo, uma metalotionena foi encontrada regulando a homeostase de Zn
durante a germinao de sementes (Lane et al., 1987).
A funo das MTs em plantas ainda no bem compreendida, devido dificuldade em
obter MT purificada, devido tendncia da MT a se hidrolizar, particularmente na regio
entre as Cys na seqncia da protena. No entanto, vrias funes tem sido propostas para
as MTs em plantas, como detoxicao de metais (principalmente Cu), complexao de Zn
citosslico, secreo de metais via tricoma nas folhas (Rauser, 1999).
Plantas transgnicas expressando MTs so estratgias promissoras para aumentar a
tolerncia a metais pesados. Vrios genes de MTs de animais tm sido transferidos para
tabaco e Arabidopsis thaliana, aumentando o grau de tolerncia ao Cd (Kamnev, 2003).
3.3.3

cidos orgnicos e Aminocidos

Devido reatividade de ons metlicos com S, N e O, os cidos carboxlicos e

aminocidos representam ligantes potenciais de metais pesados.
Citrato, malato e oxalato tem sido implicado em vrios processos, incluindo tolerncia
a metais pesados, transporte de metal atravs do xilema e seqestro vacuolar (Rauser,

11

1999). O cido ctrico considerado o maior ligante de Cd2+ quando em baixas

concentraes (Wagner, 1993), forma complexos com Ni2+ em plantas hiperacumuladoras
(Sagner et al., 1998) e contribui na acumulao e tolerncia ao Zn2+ (Godbold et al., 1984).
Mathys (1977), destaca a importncia do malato como quelante de Zn citosslico em
plantas tolerantes ao Zn.
A histidina, um aminocido produzido pelas plantas em resposta a presena de metais,
est envolvido em um mecanismo de tolerncia ao Ni e, em baixas concentraes ao Co, e
em altas taxas de transporte de Ni no xilema (Krmer et al., 1996) para a hiperacumulao
na parte area em Alyssum lesbiacum.
3.4

Compartimentalizao
ons metlicos em excesso so removidos do citossol e o principal mecanismo

envolvido a compartimentalizao. O principal compartimento de armazenagem de

metais pesados em clulas de plantas o vacolo e h evidncias de seqestro vacuolar de
ons metlicos em plantas, o que previne a circulao de metais pesados no citossol e os
transporta para uma rea limitada (Vgeli-Lange & Wagner, 1990).
Transportadores potencialmente relacionados a esse processo tem sido identificados
em Saccharomyces cerevisae, S. pombe e em plantas. Em S. pombe, Ortiz et al. (1995)
encontraram o gene hmt1, que codifica a protena HMT1, capaz de transportar eficazmente
o complexo Cd-fitoquelatina para o vacolo. Uma atividade similar de transporte foi
detectada no tonoplasto de clulas radiculares de aveia, indicando a operao de um HMT1
como mecanismo de transporte em clulas de planta (Salt & Rauser, 1995). No entanto,
nenhum homlogo de HMT1 foi ainda identificado em plantas.

12

Novamente em S. pombe mutante JS237, eventos de transduo envolvendo cAMP e

ons de Ca foram importantes para a acumulao de Cd no vacolo (Ow, 1996). Alm
disso, na presena de MgATP, complexos Cd-fitoquelatinas so transportados contra o
gradiente de concentrao pelo tonoplasto, por meio de transportadores especficos, e so
acumulados dentro de vesculas do tonoplasto at 38 vezes mais que na soluo externa
(Salt & Rauser, 1995).
As fitoquelatinas so encontradas complexadas com Cd formando complexos de baixo
e alto peso molecular (LMW e HMW, respectivamente). Geralmente assume-se que
complexos LMW so formados no citossol e, posteriormente, transportados ao vacolo
quando Cd2+ e S2- so incorporados para produzir complexo HMW, que representa a
principal forma de armazenamento do Cd. No vacolo, devido ao pH cido, os complexos
de alto peso molecular se dissociam e o Cd pode ser complexado por cidos orgnicos
vacuolares, como citrato, oxalato e malato (Krotz et al., 1989) e, possivelmente, atravs de
aminocidos. As fitoquelatinas podem ser degradadas atravs de hidrolases vacuolares e/ou
voltar ao citossol onde elas podem continuar transportando Cd para o vacolo.
Vgeli-Lange & Wagner (1990), isolaram mesfilo de protoplasto de tabaco exposto
ao Cd e mostraram que todo o complexo Cd-PC formado foi transportado para o vacolo.
Esses autores consideram que a sntese de PC ocorre no citossol com transferncia do
complexo para o vacolo onde peptdeos e cidos orgnicos quelatam o Cd. O GSH foi
observado em folhas e protoplasto, mas no no vacolo. Com isso, esses autores sugerem
que os complexos Cd-PC so sintetizados extravacuolarmente e, por eles serem
encontrados predominantemente localizados no vacolo, essa molcula deve estar
envolvida no transporte de Cd para o vacolo.

13

A compartimentalizao de metais no vacolo tambm parte do mecanismo de

tolerncia de algumas hiperacumuladoras de metal (Tong et al., 2004). A hiperacumuladora
de Ni Thlaspi goesingense aumenta a tolerncia ao Ni compartimentalizando a maior parte
desse elemento da folha no vacolo (Krmer et al., 2000). Os altos nveis de expresso do
transportador de metal TgMTP1 no vacolo em T. goesingense, foi correlacionado com o
acmulo de ons metlicos dentro do vacolo nas folhas (Persans et al., 2001).
Por outro lado, h evidncias de que o Cd2+ pode ir diretamente para o vacolo por
transporte do on (Rauser, 1995). Uma das vias a atividade do antiporte Cd2+:2H+
detectada no tonoplasto de clulas de raiz de aveia (Salt & Wagner, 1993). Foi sugerido
que, molecularmente, o mesmo transporte seria possvel via antiporte Cd2+/H+ e via
antiporte vacuolar Ca2+/H+ (Salt & Wagner, 1993).
4

HIPERTOLERNCIA
Diferentes estudos demonstram que as plantas possuem vrios mecanismos de

tolerncia a elevados nveis de metais pesados, o que faz com que algumas espcies de
plantas e gentipos possam se desenvolver em solos altamente contaminados com metais
pesados. Essas plantas pertencem a uma flora especializada que coloniza solos originrios
de serpentina (ricos em Ni) e calamina (mineral que contm elevadas concentraes de Zn e
Cd) naturalmente contaminados, ou reas poludas pela atividade antrpicas, como as
atividades mineradoras. Essas plantas so selecionadas naturalmente pelo seu alto nvel de
tolerncia a um determinado metal (hipertolerncia) (Chaney et al., 1997).
Algumas plantas no somente toleram altos nveis de metal, mas tambm os
hiperacumulam, por apresentar mecanismos fisiolgicos e bioqumicos (j discutidos
anteriormente) para se adaptarem, e exibir propriedades de hipertolerncia e

14

hiperacumulao a metais pesados (McGrath et al., 2000). O termo hiperacumulador foi

introduzido por Brooks et al. (1977) e originalmente se referiu a plantas que absorviam
altas concentraes de Ni (1000 mg kg-1) em peso seco. Para outros elementos como Zn,
Mn, Pb, o limite de acumulao foi de at 10000 mg kg-1 (1%) e para Cd o nvel
correspondente foi de 100 mg kg-1.
Mais recentemente, Baker & Brooks (1989) definiram hiperacumuladoras como
plantas que acumulam > 0,1% do seu peso seco com elementos como Ni, Co ou Pb. Para
Zn o limite > 1% e Cd > 0,01% do seu peso seco. A maioria das plantas
hiperacumuladoras j identificadas so para Ni, Zn, Co, Cu e Se. Tambm existem
4 hiperacumuladoras conhecidas de Pb e 1 para Cd e As j identificadas. No entanto,
aproximadamente 75% das hiperacumuladoras caracterizadas so para Ni.
Aproximadamente 400 espcies de plantas so classificadas como hiperacumuladoras
(Baker & Brooks, 1989). So exemplos: Pteris vittata para o arsnio; Aeolanthus
biformifolius para o cobre; Thlaspi rotundifolium subsp. cepaeifolium para o chumbo;
Uncinia leptostachya para o urnio; Thlaspi calaminare para o zinco; Thalspi caerulescens
para Cd e Zn; Brassica juncea para Se; e Alyssum bertolinii para o Ni.
No Quadro 1, so apresentados as principais famlias e nmero de espcies conhecidas
como hiperacumuladoras de metais pesados.

15

Quadro 1. Plantas hiperacumuladoras j identificadas e as famlias onde so

freqentemente encontradas.
Elemento
Cd
Co
Cu
Mn
Ni
Se
Tl
Zn
As

Nmero de
espcies
1
28
37
11
300
19
2
16
1

Famlias
Brassicaceae
Lamiaceae, Scrophulariaceaea
Cyperaceae, Lamiaceae, Poaceae, Scrophulariaceae
Apocynaceae, Cunoniaceae, Proteaceae
Brassicaceae, Cunoniaceae, Flacourtiaceae, Violaceae, Euphorbiaceae
Fabaceae, Brassicaceae
Brassicaceae
Brassicaceae, Violaceae
Pteridaceae

Fonte: Baker et al., 2000; Ma et al., 2001

As hiperacumuladoras so espcies potenciais para utilizao em processos de limpeza

de solos contaminados com metais pesados (fitoextrao), por ser uma tcnica de baixo
custo e no agressiva ao ambiente. No entanto, esse potencial limitado por fatores como:
geralmente acumulam somente um elemento especfico e no tem sido identificadas
para todos os elementos de interesse;
a maioria das hiperacumuladoras se desenvolvem lentamente e produzem reduzida
biomassa;
geralmente so espcies endmicas e pouco conhecido sobre essas plantas, como
caractersticas agronmicas de cultivo e fisiologia.
5

CONCLUSES
A resposta de metais pesados em plantas um fenmeno complexo, provavelmente de

carter polignico, onde a tolerncia de plantas aos metais pode ser definida como sua
capacidade natural ou artificial, regulada por fatores genticos e ambientais, para suportar
altos nveis de metais pesados por um longo tempo, sem efeitos detrimentais considerveis
no seu metabolismo.

16

O uso de modelos para estudar a biossntese, expresso, regulao e funo dos

principais mecanismos de tolerncia a metais pesados em plantas tem tido um significativo
avano nos ltimos anos. A identificao de caminhos bioqumicos e fisiolgicos so
essenciais, mas necessrio a integrao com as respostas genticas para o melhor
entendimento do processo como um todo.
O potencial do uso de plantas para a fitorremediao de ambientes poludos
considerado promissor. O melhor entendimento das bases fisiolgicas, bioqumicas e
genticas da hiperacumulao de metais em plantas a chave para o sucesso da
fitorremediao. A compartimentalizao no vacolo e a expresso de transportadores, so
mecanismos que tem sido identificados em uma ampla variedade de organismos que
hiperacumulam metais pesados e podem ser caractersticas fundamentais nesse processo.
Apesar da fitorremediao ainda ser uma tecnologia recente, nos ltimos anos, muitas
pesquisas tem sido conduzidas nos estudos de acumulao de metais em plantas,
translocao da raiz para a parte area, compartimentalizao e detoxicao. No entanto,
ainda no est claro como essas informaes podem ser usadas eficientemente para
remover metais pesados de solos poludos. Com isso, so necessrios projetos aplicados a
nvel de campo, para evidenciar o real potencial dessa tecnologia.

17

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