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Captulo

Mtodo dose-resposta para


determinar exigncias nutricionais

1. Introduo .................................................................... 156


2. Conceito de exigncia nutricional ........................................ 156
3. Mtodo dose-resposta ....................................................... 158
3.1. Interpretao da resposta dos animais em ensaios

dose-resposta ................................................................. 159


3.2. Aplicao dos modelos para determinar exigncias
nutricionais ................................................................... 170

4. Mtodos para determinar exigncias dos aminocidos .............. 179


4.1. Conceito de protena ideal ........................................... 181
4.2 Mtodos para determinar o Perfil Ideal de Aminocidos ......... 182
4.3. Critrios respostas para definir as exigncias dos aminocidos 184
4.5. Protocolo proposto para determinar o nvel timo de lisina em
dietas formuladas com base na protena ideal ......................... 186
5. Protocolo proposto para determinar exigncias de minerais -

mtodo dose-resposta ....................................................... 190

6. Referncias bibliogrficas ................................................. 192

Mtodos de pesquisa em nutrio de monogstricos

Mtodo dose-resposta para


determinar exigncias nutricionais
Captulo

1. Introduo
Os mtodos usados para determinar as exigncias nutricionais dos animais
monogstricos tm sido: o mtodo dose-resposta, o qual determina as exigncias
com base na resposta do desempenho dos animais alimentados com dietas
contendo nveis crescentes do nutriente estudado; e o fatorial, baseado no
princpio de que o animal necessita de nutrientes para a manuteno dos processos
vitais e atividades, crescimento e/ou produo.
O mtodo tradicionalmente utilizado para definir as exigncias dos monogstricos
tem sido o dose-resposta, por ser prtico e mais fcil de ser executado. Entretanto,
fatores como ambiente, clima e gentica afetam a determinao das exigncias,
dificultando o estabelecimento dos nveis nutricionais, sendo necessrio repetir as
pesquisas em vrias condies para melhor definio das exigncias.
As Tabelas de Exigncias Nutricionais de Aves e Sunos tm estabelecido as
recomendaes nutricionais na maioria dos estudos realizados com base no
mtodo dose-resposta (NRC, 1994 e Tabelas Brasileiras para Aves e Sunos, 2005).
Por outro lado, as recomendaes nutricionais para sunos pelo NRC (1998) so
baseadas em modelos para o crescimento e reproduo. Esses modelos foram
elaborados pelo mtodo fatorial, nos quais as exigncias so estimadas pela
soma dos nutrientes utilizados para cada funo (mantena, acrscimo de
protena e produo).
Neste captulo, sero apresentados e discutidos os principais aspectos a serem
considerados ao aplicar o mtodo dose-resposta para determinar as exigncias
dos animais monogstricos.

2. Conceito de exigncia nutricional


A exigncia de um nutriente pode ser definida pela quantidade do mesmo a
ser fornecida na dieta para atender as necessidades de um animal em condies
de um ambiente compatvel com a boa sade do animal.
As necessidades do animal podem ser interpretadas como sendo as quantidades
de um nutriente para atender um determinado nvel de produo.
MtodosMtodos
de pesquisa
de pesquisa
em nutrio
em nutrio
de monogstricos
de monogstricos

Figura 1 - Resposta linear no


desempenho (Ganho de Peso) de
acordo com o consumo do nutriente.
(Adaptado de Larbier e Leclercq,
1992).

Os autores comentam que o modelo linear assume que todos indivduos so


iguais e possuem a mesma exigncia. Entretanto, existe variabilidade entre os
indivduos de uma populao, e o problema determinar as necessidades que
atendam a todos os indivduos, evitando excessos para aqueles que possuem
menores exigncias. Recomendam usar as tcnicas biomtricas, tais como o
modelo polinomial, exponencial, hiperblico e de Reading, que descrevem melhor
as respostas dos animais e proporcionam formulaes mais econmicas.
Segundo Pack (1996), o termo exigncia muitas vezes usado indevidamente,
em parte porque no definido corretamente. O autor menciona que no h
exigncia de um nutriente para um dado lote de animais. A questo entender
como o animal ou grupo de animais respondem ao aumento dos nveis de um
nutriente e, para a deciso do nvel timo do mesmo, deve ser considerada a
avaliao econmica. Apesar de parecer bvio, muitos pesquisadores no levam
em considerao essa linha de pensamento.
As exigncias nutricionais dos animais so definidas em termos de um valor
absoluto (quantidade mnima do nutriente por animal ou unidade de produo)
ou quantidade relativa (concentrao do nutriente na dieta). Na prtica, o
objetivo formular para uma certa quantidade de dieta, por exemplo 100 kg.
Dessa forma, os nutrientes so definidos em nveis percentuais, assumindo que
o consumo dirio de rao seja conhecido. No entanto, fatores como temperatura
e concentrao de energia da dieta alteram o consumo e, conseqentemente,
as especificaes nutricionais. Portanto, mais racional expressar as necessidades
dos nutrientes em termos absolutos do que relativos dieta.
Para os animais que recebem alimentao ad libitum, o consumo varia
principalmente com o nivel de energia. Nesse caso, os nveis nutricionais devem
ser estabelecidos de acordo com o nvel de energia metabolizvel, expressos em
porcentagem por 1.000 kcal de EM da rao. Para aves e sunos reprodutores, as
exigncias so estabelecidas em quantidades de nutrientes por dia por animal.
Conhecendo-se o consumo de rao dirio dos animais, calcula-se a porcentagem
dos nutrientes da dieta.
Mtodos de pesquisa em nutrio de monogstricos

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Larbier e Leclercq (1992) definem a
exigncia mnima de um nutriente como
sendo a quantidade do mesmo partir da
qual no haver resposta no desempenho
animal. Segundo esses autores, a resposta
no desempenho uma funo linear do
consumo do nutriente (Figura 1). A
inclinao da reta representa a exigncia
para o crescimento, isto , a quantidade
de nutriente necessria por unidade de
ganho; e a interseco da reta no eixo x
representa a exigncia de mantena, isto
, a quantidade do nutriente somente para
manuteno quando o ganho de peso do
animal for nulo.

Sakomura, N.K. & Rostagno, H.S.

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3. Mtodo dose-resposta
O mtodo dose-resposta baseado na resposta do animal ao aumento na
ingesto de um determinado nutriente. Segundo Euclydes e Rostagno (2001), a
adio de um nutriente limitante na rao, mantendo nveis adequados dos
demais nutrientes, promove crescimento do animal at que sua exigncia seja
atendida. A partir da, existir uma faixa de estabilizao no crescimento e, em
seguida, dependendo do nutriente, poder ocorrer uma perda de peso do animal
(Figura 2). O fenmeno resultante do acrscimo de um nutriente na rao,
partindo de nveis baixos at nveis elevados, pode ser descrito em quatro fases
distintas: a) inicial nessa fase, o acrscimo do nutriente garante apenas a
sobrevivncia do animal (mantena), pois os nveis so insuficientes para permitir
o crescimento; b) resposta os animais comeam a apresentar crescimento,
melhor eficincia alimentar, at um nvel no qual estabiliza a produo; c) estvel
- nessa fase, os nveis do nutriente no apresentam resposta produo ou
toxidez proveniente do excesso. Embora para o animal possa ser considerada
uma fase tima, do ponto de vista econmico esses nveis no so recomendveis;
d) txico o nvel elevado do nutriente pode causar reduo na produo em
conseqncia de efeitos, tais como interao, antagonismos, etc.

Figura 2 - Resposta do animal adio de um nutriente limitante na rao.

Os modelos utilizados para determinar os nveis timos dos nutrientes na


dieta so aplicveis quando os tratamentos so estabelecidos nas fases Resposta
e Estvel. Se os nveis forem avaliados somente no comeo da fase Resposta, o
nvel ideal do nutriente no poder ser determinado. Se os nveis compreenderem
o incio e o decorrer da fase Estvel, pode-se concluir que o nutriente em estudo
no essencial ou est acima da exigncia. Caso os nveis estudados se situem
na fase Txico, o resultado mostrar o efeito nocivo do nutriente (Figura 2).
O mtodo dose-resposta aplicado em ensaios de alimentao, nos quais
so avaliados o desempenho do animal. Para a conduo dos ensaios, so
necessrios conhecimentos relacionados ao delineamento experimental, dietas,
variveis avaliadas e anlises dos dados.
Mtodos de pesquisa em nutrio de monogstricos

A definio dos nveis dos nutrientes a serem avaliados fundamental


para obter a resposta no desempenho animal. As dietas experimentais devem
ser formuladas conforme critrios que permitam isolar apenas o efeito do
nutriente avaliado. Uma dieta basal formulada para atender as exigncias
nutricionais de todos nutrientes, com exceo daquele estudado. O nutriente
estudado suplementado na dieta basal. Os nveis de suplementao devem
ser definidos para promover resposta crescente no desempenho at atingir
um plat, podendo alcanar nveis que proporcionem queda no desempenho.
Para determinar os nveis nutricionais em ensaios de alimentao, Morris
(1989) estabeleceu os seguintes critrios: Primeiro, deve-se assumir que todos
os dados provenientes dos ensaios foram obtidos de um delineamento
experimental adequado. Entretanto, muitos ensaios tm sido realizados com
poucas repeties e tratamentos para ter a resposta esperada para a questo
formulada. Segundo, as escalas usadas para medir doses e respostas devem ser
consideradas. Por exemplo, em estudos para investigar as respostas dos
aminocidos com animais alimentados vontade, deve-se considerar o consumo
de aminocidos ao invs da concentrao. Terceiro, deve-se assumir que no se
estima a exigncia de um dado nutriente, porque o termo exigncia no definido
corretamente. Na prtica, o que o nutricionista precisa saber a taxa que um
animal, num contexto de nutrio e ambiente bem definido, ir responder aos
aumentos do consumo de um dado nutriente. Com essa informao, e sabendo o
custo marginal do incremento na produo, pode-se calcular a dose tima.
3.1. Interpretao da resposta dos animais em ensaios dose-resposta

A maioria dos trabalhos realizados para definir os nveis nutricionais das dietas
para os monogstricos utiliza o mtodo dose-resposta; entretanto, os
pesquisadores tm usado diferentes critrios para interpretar os resultados,
levando a variaes nas concluses dos nveis recomendados.
A seguir sero apresentadas as opes para analisar os dados obtidos em
ensaios dose-resposta, bem como sero discutidas as vantagens e limitaes de
cada procedimento. Para ilustrar, sero mostrados exemplos de experimentos com
aves alimentadas com dietas contendo diferentes nveis de aminocidos; entretanto,
os modelos matemticos podem ser usados para avaliar nveis de minerais, vitaminas
ou drogas promotoras do crescimento com qualquer espcie animal.
3.1.1. Comparao das mdias dos tratamentos

Um dos procedimentos utililizados para analisar os dados tem sido a anlise


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Mtodo dose-resposta para determinar exigncias nutricionais

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No estabelecimento do delineamento experimental, devem ser levados em
conta os aspectos mencionados no Captulo 1 (Planejamento dos experimentos),
como as diferenas entre os animais, as condies das instalaes experimentais
e o nmero de animais disponveis. importante controlar todas as fontes de
variao, definir um nmero adequado de repeties e animais por repetio
estabelecendo um delineamento adequado para isolar as fontes de variao e
detectar os possveis efeitos dos tratamentos.

Sakomura, N.K. & Rostagno, H.S.

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de varincia seguida de um teste de comparao de mdias. Conforme
mencionado no Captulo 1, h vrios testes que podem ser utilizados, como
Teste t, Scheffe, Duncan, Student-Newman-Keuls e Tukey. Contudo, h uma srie
de restries ao uso destes testes quando aplicados em dados provenientes de
ensaios dose-resposta.
Morris (1989), em sua reviso sobre os procedimentos usados para interpretar
os resultados em ensaios de alimentao, considera inadequado o teste de
comparao mltipla por dois motivos: primeiro porque no deve ser usado
quando os tratamentos so de natureza quantitativa; e segundo, porque o uso
convencional de 5% de probabilidade inapropriado para estimar o melhor ponto.
Por outro lado, necessrio um alto grau de confiana quando no se obtm
uma grande diferena entre as doses avaliadas.
Pack (1996) tambm
menciona que esses testes,
quando aplicados ao nvel
convencional de 5% de
probabilidade, so bastante
conservadores para detectar
pequenas diferenas. Por
exemplo, diferenas de 0,02
a 0,03 pontos na converso
alimentar, importante do
ponto de vista econmico, no
so detectadas pelos testes de
mdia, conforme pode ser
constatado na Figura 3.

Figura 3 - Teste de Student-Newman-Keuls


aplicado converso alimentar de frangos de 14
a 34 dias (Dados de Schutte e Pack (1995),
apresentados por Pack, 1996).

Considerando os dados
apresentados na Figura 3,
Euclides e Rostagno (2001)
comentam a dificuldade de eleger o nvel timo de metionina usando o teste
de mdias. Constata-se diferena apenas entre o nvel 0,75% e 0,88%, 0,91%
e 0,95%. Os nveis 0,77%, 0,79%, 0,82% e 0,85% so estatisticamente iguais a
0,75% e 0,95%. Dessa forma, impossvel definir o nvel timo de nutrientes
usando testes de mdias como recurso estatstico.
Segundo esses autores, dois aspectos estatsticos devem ser considerados
quando se aplica o teste de mdias para definir o nvel timo. O primeiro a
significncia do teste F. Considerando-se um exemplo hipottico apresentado na
Tabela 1, existem 7 graus de liberdade (gl) para o efeito de nvel de metionina
(oito nveis), o quadrado mdio (QM) para o efeito de metionina obtido pela
diviso da soma de quadrados pelos 7 gl. A diviso do QM do efeito da metionina
pelo QM residual fornece o F para avaliao da significncia. Se o valor de F no
apresentar significncia, nenhum teste de mdia precisa ser aplicado. Estes 7 gl
podem ter efeitos significativos de regresses lineares, quadrticas que so
ignorados se os gl no so decompostos. No segundo aspecto para aplicao do
teste de mdias, a pressuposio bsica a independncia entre os nveis ou
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Tabela 1 - Exemplo hipottico de uma anlise de varincia com teste F e decomposio


dos graus de liberdade dos tratamentos em polinmios ortogonais.
Fontes de
GL
Soma de
Quadrado
F
Significncia
Variao
Quadrados
Mdio
Blocos
4
12.000
3.000
Nveis
7
7.000
1.000
1,00
NS
Linear
1
1.000
1.000
1,00
NS
Quadrtico
1
5.000
5.000
5,00
1%
Falta de ajuste
5
1.000
200
0,20
NS
Resduo
28
28.000
1.000
Dados apresentados por Euclides e Rostagno (2001).

3.1.2. Modelo Linear Response Plateau (LRP) ou Broken Line

O modelo LRP tem como princpio a Lei de Liebig que se baseia na idia de
que a produo pode ser inibida devido a um elemento limitante. Com um
comportamento ascendente, o crescimento abruptamente se estabiliza,
representado por uma paralela ao eixo das abscissas. Dessa forma, a Lei de
Liebig uma funo formada por dois conjuntos de dados: um compe a parte
ascendente da curva, e o outro rene os dados que mantm o crescimento estvel
(Braga, 1983).
De acordo com o autor, os critrios para o ajustamento do modelo LRP aos
dados so: a inclinao da reta pode ser determinada por dois ou mais pontos; o
plat representado pela mdia aritmtica dos pontos que o compe; o nvel
timo determinado pelo ponto de interseco entre a reta e o plat; o melhor
modelo aquele cuja soma dos quadrados dos desvios a menor.
Com base nesses critrios, o autor recomenda um procedimento para o
ajustamento do LRP aos dados obtidos em ensaios dose-resposta (ver Braga,
1983). No entanto, uma maneira mais fcil e rpida para ajustar os dados ao
modelo por meio de Softwares SAS (SAS Institute, 1996) pelo procedimento
PROC NLIN ou SAEG (Universidade Federal de Viosa, 1997) segundo o
procedimento Regresses (Linear Response Plateau).
A Figura 4 ilustra esse modelo baseado no aumento linear do ganho de peso
das aves com o acrscimo do nvel de metionina+cistina da rao at alcanar um
ponto em que no h resposta adicional, isto , atinge um plat. O nvel otimo
definido pelo ponto de quebra, onde a reta encontra-se com o plat (0,645%).
Morris (1989) critica este modelo por levar a falsas dedues sobre o nvel
timo. Conforme o autor, a resposta individual do animal corresponde ao modelo
broken line e tem o mesmo princpio para calcular a exigncia de um nutriente
pelo mtodo fatorial, Y = aW + bP; em que Y a exigncia; aW a exigncia
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tratamentos. Nos ensaios dose-resposta no possvel considerar essa
independncia, uma vez que a resposta esperada a observada no nvel anterior,
acrescida ou reduzida de um valor. Portanto, os testes de mdia no se aplicam
para esse tipo de ensaio.

para manuteno proporcional ao peso corporal e bP


para a produo proporcional ao ganho de peso.
Assim, o modelo s vlido
desde que seja possvel
medir a produo (ganho de
peso) de um mesmo animal
sob as mesmas condies
fisiolgicas para ter uma
definio precisa da resposta
individual. Contudo, se o
Nvel de Met+cis digestvel (%)
modelo for aplicado a todos os
Figura 4 - Resposta do ganho de peso das aves indivduos da populao, sero
(machos Isa Label de 1 a 28 dias) alimentadas com obtidas diversas respostas, e
nveis crescentes de metionina+cistina (M) na rao. a curva que representa a
(Dados da Dissertao de Mestrado, UNESP- populao mostrada na
Jaboticabal, Nascimento, 2007).
Figura 5. A integrao de
uma srie de respostas pelo
modelo broken line, no qual h uma variao individual no desempenho
mximo, proporciona uma curva com reduo gradativa do desempenho animal
ao aumento das doses; e atinge um plat no qual o indivduo com exigncia
mais elevada pra de responder. Portanto, nos ensaios de alimentao em
que so utilizados vrios animais, a resposta real curvilnea e mostra reduo
na resposta com o aumento da dose. Esse o princpio do Modelo de Reading
descrito por Fisher, Morris e Jennings (1973).
Ganho de peso (g)

Sakomura, N.K. & Rostagno, H.S.

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Pack (1996) menciona que, embora o modelo broken line tenha um bom
ajuste estatstico, no
considera os aspectos
fisiolgicos do animal e a
lei de reduo dos retornos
e, portanto, em muitos
casos, subestima a dose
tima. Apesar do modelo
broken line estimar o nvel
timo, no considera os
aumentos que poderiam
justificar
melhorias
adicionais no desempenho. O autor recomenda
um modelo no linear
(exponencial) que pode
descrever melhor as Figura 5 -Relao entre consumo do nutriente e
pequenas melhorias no resposta na produo para uma populao, em que as
desempenho animal com respostas individuais dos animais ajustam-se ao modelo
os incrementos das doses. broken line ( Adaptado de Morris, 1989).
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3.1.3. Modelo Quadrtico

O Modelo Quadrtico expresso pela funo:


Y = a X2 + bX + c

A Figura 6 mostra a
relao do ganho de peso das
aves em funo dos nveis de
metionina + cistina da rao,
em que a resposta mxima
obtida ao nvel de 0,765% de
metionina + cistina.

Ganho de peso (g)

Onde X a dose do nutriente e Y a reposta, o modelo tem o desenvolvimento


de uma parbola, no qual o nvel timo determinado pelo ponto de mxima da
equao, que definido matematicamente igualando-se derivada da funo a
zero (0=2aX+b).

O modelo quadrtico que,


aparentemente, apresenta
vantagem no clculo da
exigncia nutricional por
possibilitar a estimativa do
Nvel de Met+cis digestvel (%)
ganho mximo possvel,
Figura 6 - Relao do ganho de peso das aves
apresenta dois problemas na
(machos Isa Label de 1 a 28 dias) em funo aos
descrio do fenmeno.
nveis de metionina+ cistina da rao (M), em que
Primeiro, em decorrncia do
a resposta mxima obtida ao nvel de 0,765% de
fato do modelo assumir
metionina + cistina. (Dados da Dissertao de
simetria bilateral da resposta
Mestrado, UNESP-Jaboticabal, Nascimento, 2007).
ao incremento do nutriente,
ou seja, o modelo quadrtico descreve a queda da produo na mesma intensidade
do acrscimo; e segundo, a funo quadrtica muito sensvel diferena entre
os nveis estudados tendendo a estimar os valores timos no intervalo dos nveis
(Euclydes e Rostagno, 2001). Para evitar o possvel problema de superestimar a
exigncia do nutriente, alguns pesquisadores optaram por aplicar o intervalo de
confiana de 95% do nvel mximo (ou mnimo) do nutriente, estimado pela
equao quadrtica. No caso da exigncia de metionina + cistina de 0,765%,
mostrada na Figura 6, aplicando esse critrio de 95%, o nvel recomendado
seria de 0,727%.
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Em um estudo para determinar exigncia de lisina para sunos, Coelho et
al. (1987) mostraram que, quando os nveis crescentes desse aminocido
promoveram crescimento linear at um plat, o modelo descontnuo LRP foi
vantajoso para estimar as exigncias. Entretanto, quando a configurao dos
dados foi do tipo contnuo cncavo ou convexo, a exigncia de lisina foi
subestimada pelo modelo. As respostas que apresentam essa configurao,
em virtude do complexo sistema fisiolgico do animal, devem usar outros
modelos para estimar as exigncias de um nutriente.

Sakomura, N.K. & Rostagno, H.S.

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Segundo Morris (1989),
um dos problemas do modelo
quadrtico que este prediz a
reduo na resposta alm da
dose tima, proporcionando um
falso ajuste aos dados. Isso
ocorre quando determinados
nutrientes reduzem a produo
quando fornecidos em excesso,
mas h uma faixa em que o
nutriente pode ser fornecido em
excesso sem causar prejuzo no
desempenho. Alm disso, a Figura 7 - Modelos quadrticos ajustados aos dados
forma da curva quadrtica pode obtidos por Morris e Blackburn (1982). Uma curva
variar com as doses escolhidas. foi ajustada com os 10 nveis e a outra curva com
Ao escolher uma faixa restrita apenas 6 nveis de met+cist (Adaptado de Morris,
de dietas, o pesquisador pode 1989).
ter uma parbola evitando um
plat mais estendido. Isso pode ser um argumento para justificar o modelo, mas
perigoso, porque pressupe que o pesquisador tenha uma idia de onde o nvel
otimo ir ocorrer. Assim, a forma da curva quadrtica varia de acordo com a
faixa dos nveis selecionados. Como pode ser observado na Figura 7, a curva
estimada com apenas 6 pontos proporciona a dose tima de 776 mg met+cist
para mxima produo de ovos, inferior dose tima (900 mg met+cist) estimada
a partir da curva obtida com todos os pontos.
3.1.4. Modelos no lineares

O modelo assinttico ou hiperblico baseia-se no conceito de que a resposta


animal reduz medida que se aproxima do mximo desempenho ou mnimo no
caso da converso alimentar. Esse modelo no prev o efeito do excesso do
nutriente, sendo importante considerar a amplitude dos nveis a serem estudados
quando se pretende us-lo. H vrias maneiras de expressar a funo exponencial,
a mais usada representada pela equao:
Y = a + b (1-e-c(x-d))
Em que Y a produo; x a dose do nutriente; a representa o desempenho ao
nvel do nutriente da dieta basal; b a diferena entre a mnima e mxima resposta
adio do nutriente; c a inclinao da curva; e d o nvel do nutriente da dieta basal.
Apesar do modelo exponencial proporcionar um excelente ajuste s respostas
biolgicas do animal, apresenta a dificuldade no estabelecimento do nvel timo.
Por definio, a curva exponencial nunca atinge o ponto assinttico, a medida
que se aumentam os nveis do nutriente (X), a resposta (Y) tende a estabilizar.
Para definir o nvel timo, atribuda uma porcentagem da resposta assinttica
que, segundo a literatura, tem variado de 95% a 99%. Dessa forma, considerandose 95%, a dose tima pode ser calculada: (ln0,05/-c) + d, em que c a inclinao
da curva e d o nvel do nutriente da basal.
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Para ilustrar a aplicao


do modelo exponencial na
definio do melhor nvel de
metionina + cistina do ponto
de vista econmico, ser
utilizada a equao exponencial ajustada para a CA de
aves Isa Label, no perodo de
1 a 28 dias de idade, de
acordo com os nveis de
metionina+cistina da dieta
(Figura 9).

Converso alimentar (g/g)

De acordo com Pack


(1996), a funo exponencial
ajusta-se bem aos dados
Nvel de Met+cis digestvel (%)
obtidos de ensaios doseresposta. O autor recomenda
Figura 8 - Modelo exponencial aplicado ao ganho
o uso da exponencial para
de peso das aves (machos Isa label de 1 a 28 dias)
determinar o nvel timo de
alimentadas com dietas com nveis crescentes de
aminocidos pelo fato do
metionina + cistina. (Dados da Dissertao de
Mestrado, UNESP-Jaboticabal, Nascimento, 2007).
modelo explicar biologicamente a reduo das respostas do animal ao aumento da ingesto dos aminocidos. Alm disso, o modelo
capaz de detectar pequenas diferenas no desempenho que so economicamente
importantes. E, por fim, permite calcular o lucro marginal em conformidade
com o custo marginal para determinar o nvel mais vivel economicamente.
^ = 2,123 - 0,250 (1-e-12,914*(M-0,53) (R2=0,98)
CA

Nvel de Met+cis digestvel (%)

Figura 9 - Modelo exponencial ajustado para a

converso alimentar das aves (machos Isa label


A Figura 10 ilustra a
de 1 a 28 dias), alimentadas com nveis crescentes
variao do custo do alimento
de metionina + cistina nas dietas. (Dados da
por kg de ganho de peso e a
Dissertao de Mestrado, UNESP-Jaboticabal,
variao da margem bruta,
Nascimento, 2007).
calculadas com base na
equao exponencial, no custo do alimento e no preo do frango. O custo do
alimento por kg de GP foi obtido somando-se o custo da dieta basal (sem DLmetionina) com o custo da quantidade de DL-metionina suplementada e
multiplicando-se esse valor pela CA estimada para aquele nvel de suplementao.
A margem bruta foi calculada pela diferena entre o preo do kg do frango e o
custo do alimento por kg de GP.
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Ganho de peso (g)

165
A relao do ganho de
peso das aves em funo do
nvel de metionina + cistina,
conforme
o
modelo
exponencial, apresentada
na Figura 8, em que o nvel
timo definido por 95% da
resposta assinttica.

166
Sakomura, N.K. & Rostagno, H.S.

Assumindo os preos
de R$0,55/kg de rao,
R$4,50/kg de DL-metionina e R$1,20 o preo
obtido por kg de frango
produzido, o nvel de
metionina + cistina na
rao que proporciona o
mnimo custo por kg de GP
(R$1,05) e a maior margem
bruta (R$0,15) de 0,77%,
conforme demonstrado na
Figura 10.
Figura 10 - Representao grfica do nvel timo de
metionina + cistina na dieta do ponto de vista
econmico, com base no custo do alimento/kg de
ganho de peso e na margem bruta para as aves Isa
Label de 1 a 28 dias (Anlises realizadas pelo psgraduando, UNESP-Jaboticabal. Jefferson Costa de
Siqueira).

Outros modelos no
lineares tm sido usados
para explicar a resposta
animal, como as funes
polinmio inverso ou
logstica.

Morris (1989) menciona


que os modelos exponenciais e hiperblicos ajustam-se bem aos dados pelo
mtodo dos quadrados mdios residual. As curvas tambm predizem pequenas
respostas na regio na qual gera dvida se qualquer resposta ocorre e, assim,
ambos superestimam a dose tima. Isto particularmente ocorre quando se avalia
metionina ou antibitico, cujo custo marginal muito pequeno em relao ao
valor produzido, assim o timo econmico prximo produo mxima. Com
produtos mais caros, como biotina ou triptofano, a funo hiperblica leva uma
estimativa satisfatria da dose tima.
De acordo com o autor, a vantagem desses modelos, quando comparados
com o quadrtico, que, os coeficientes das equaes tem significado biolgico,
como a taxa de declnio na produo, sendo possvel estimar curvas respostas
para populaes com caractersticas de produo diferentes daquelas observadas
nos experimentos. Contudo, a tendncia dessas funes em superestimar a dose
tima um srio problema. DMello e Lewis (1970) recomendam para ajuste dos
dados ao modelo assinttico a escolha de um valor arbitrrio de 95% da dose que
maximiza a produo.
Um outro modelo no linear o Modelo de Reading, descrito por Fisher,
Morris e Jennings (1973). Baseia-se no princpio de que a resposta individual de
um animal descrita pelo modelo broken line, resultando numa srie de respostas
broken line para os animais de um lote. Considerando-se que as respostas mximas
so diferentes entre os indivduos, a curva resposta da populao baseada nos
desvios padro da produo no linear, conforme pode ser observado na Figura
5. A curva resposta da populao ajustada baseada em equaes propostas
por Curnow (1973).

Mtodos de pesquisa em nutrio de monogstricos

Entretanto, a principal desvantagem do modelo que ele assume que a


produo individual dos animais normalmente distribuda em torno da mdia,
e isso requer uma estimativa da mdia de peso corporal. Essas condies so
possveis em ensaios de curta durao. Em ensaios longos, em que os pesos e
produo variam durante o ensaio, essas variveis no so normalmente
distribudas ao redor da mdia.
Por outro lado, Pack (1996) relata que o modelo permite calcular a dose
tima econmica baseada nos preos do nutriente e da produo. A limitao do
modelo, alm da complexidade matemtica, a dificuldade de considerar as
respostas de converso alimentar, caractersticas de carcaa e tambm de
combinar mais de um parmetro para o clculo econmico.
Outros procedimentos tm sido descritos com a finalidade de determinar
com preciso o nvel timo com dados provenientes de ensaios dose-resposta.
Robbins et al. (1979) descreveram a regresso segmentada de duas inclinaes
que consiste em definir a dose tima pela interseco de duas retas. Para realizar
essa anlise, necessita-se da inclinao da reta (u) que relaciona os nveis (x)
que proporcionam respostas ascendentes (y); e a inclinao da reta (v) que
relaciona os nveis (x) que
proporcionam respostas
decrescentes (y). A dose
recomendada para mxima
resposta (l=141) obtida
pela interseco das retas
(r= 102), como pode ser
observado na Figura 11.
Laberson e Firman (2002)
compararam o modelo
quadrtico com a regresso
segmentada, usando dados
de um ensaio com perus
alimentados com nove dietas

Figura 11 - Parmetros necessrios para a estimativa


da exigncia pelo procedimento da regresso
segmentada (Adaptado de Laberson e Firman, 2002).

Mtodos de pesquisa em nutrio de monogstricos

Mtodo dose-resposta para determinar exigncias nutricionais

167
A vantagem desse modelo que a curva leva em considerao a
variabilidade entre os animais, alm disso no muda entre os experimentos e
independe dos tratamentos experimentais (Morris, 1989). Assim, ao ajustar
o Modelo de Reading com apenas alguns nveis avaliados, ele proporciona a
mesma dose tima quando aplicado com todos os nveis avaliados. O contrrio
ocorre quando se ajustam os dados ao modelo quadrtico. No Modelo de
Reading, os coeficientes das equaes representam as eficincias de utilizao
dos nutrientes para mantena e produo. Conseqentemente, esse modelo
apresenta trs vantagens: a) o modelo gerado com os animais experimentais
pode ser extrapolado para estimar a curva resposta de outro grupo de animais
com diferentes potenciais de produo; b) possvel aplicar o modelo em
uma srie de dados de diversos experimentos e estimar melhor os coeficientes;
c) pode-se obter as eficincias de utilizao dos nutrientes com dados de um
ensaio de alimentao.

com nveis de um nutriente variando de 80% a 120% do recomendado. As


exigncias foram determinadas pela interseco das retas no modelo de duas
inclinaes, considerando-se 95% e 90% da dose mxima pela regresso
quadrtica. A exigncia mdia determinada foi 99,42%, e as preditas pelos
modelos foram: 102,14 0,61 para 90% da quadrtica, 107,81 0,61 para 95%
da quadrtica e 99,59 0,61 para a regresso segmentada. Segundo os autores,
a quadrtica superestimou a exigncia, e a regresso segmentada
proporcionou resultado mais prximo da exigncia real, sendo mais precisa
para estimar as exigncias.
Um outro procedimento foi descrito por Euclydes e Rostagno (2001) e Baker
et al. (2002) para determinar as exigncias de aminocidos em ensaios doseresposta realizados com animais em crescimento. Uma equao quadrtica e o
modelo broken line so ajustados aos dados, seguindo os procedimentos relatados
anteriomente. A exigncia estimada objetivamente, estabelecendo-se o
primeiro ponto de interseco da curva quadrtica com o plat do broken line.
O valor do intercepto x calculado, igualando-se a equao quadrtica com o
valor do plat (y) estabelecido pelo broken line.
O nvel timo estimado com objetividade porque determinado pela
interseco da curva quadrtica com o plat do modelo broken line devidamente
ajustado. A vantagem do uso da equao quadrtica associada ao plat que o
nvel timo encontrado no alto como aquele geralmente estimado pela
derivao
da
funo
quadrtica, nem baixo como
normalmente observado no
modelo LRP (Euclydes e
Rostagno, 2001).
Ganho de peso (g)

Sakomura, N.K. & Rostagno, H.S.

168

Nvel de Met+cis digestvel (%)

Figura 12 - Representao grfica da estimativa


da exigncia de metionina + cistina digestvel para
GP, por meio do primeiro intercepto da equao
quadrtica com o plat do LRP. (Dados da
Dissertao de Mestrado-UNESP/Jaboticabal,
Nascimento, 2007).

Na Figura 12, apresentado uma representao


grfica do procedimento que
associa o modelo quadrtico
com o LRP, usando-se os
dados de ganho de peso
obtidos pelo aumento dos
nveis de metionina + cistina
na dieta em ensaio realizado
na UNESP-Jaboticabal.

Considerando-se os exemplos mencionados, ajustados


com os dados obtidos em
pesquisa realizada na UNESPJaboticabal para determinar
o nvel timo de metionina + cistina para aves de corte de crescimento lento
(Isa label) na fase de 1 a 28 dias, o modelo LRP estimou o menor nvel (0,645%),
enquanto o quadrtico, o maior nvel (0,765%). Aplicando-se o critrio de 95%
do nvel estimado pelo modelo quadrtico (0,765% x 0,95), obtm-se o nvel
Mtodos de pesquisa em nutrio de monogstricos

Para realizar uma comparao mais apurada das diferentes metodologias,


Euclydes e Rostagno (2001) juntaram os dados de cinco experimentos com seis
nveis de lisina digestvel de duas teses de doutorado da Universidade Federal
de Viosa. Barboza (1998) e Costa (2000) utilizaram frangos de corte machos, na
fase de 15 ou 22 a 40 dias de idade, provenientes das empresas Hubbard (2
experimentos) e Ross (3 experimentos). As variveis analisadas foram: ganho de
peso, converso alimentar e peito com osso. As regresses foram ajustadas para
as variveis de desempenho em funo dos nveis de lisina digestvel, como
apresentado na Tabela 2.
Tabela 2 - Mdias de resultados de desempenho de 5 experimentos com frangos de
corte e estimativas das exigncias de lisina digestvel por diferentes modelos.
Lisina
Ganho de
Converso
Peito com
Digestvel (%)
Peso (g)
Alimentar
Osso (%)
0,772
1.362,9
1,94
28,58
0,832
1.428,9
1,87
29,43
0,892
1.500,1
1,81
29,96
0,952
1.525,3
1,77*
30,57*
1,012
1.528,9*
1,78
30,51
1,072
1.507,0
1,78
30,47
Modelos Aplicados
Exigncia de Lisina Digestvel (%)
Melhor nvel numrico*
1,012
0,952
0,952
LRP Linear response plateau
0,915
0,915
0,935
Equao quadrtica com plat
0,910
0,916
0,943
Equao quadrtica
0,992
1,002
1,015
95 % da Equao quadrtica
0,942
0,952
0,964
Exponencial + Bom senso
0,980
0,950
0,960
Adaptado de Euclydes e Rostagno (2001).

Com a aplicao de todas as metodologias propostas, a porcentagem de lisina


digestvel recomendada na formulao de raes para frangos de corte machos,
apresentou pouca variao: 0,910% a 0,992%, 0,915% a 1,002% e 0,935% a 1,015%,
para ganho de peso, converso alimentar e peito com osso, respectivamente. O LRP
mostrou tendncia a subestimar e o quadrtico a superestimar as exigncias de
lisina.
Como comentado anteriormente, a aplicao e escolha dos modelos
dependero da relao entre os nveis do nutriente em estudo e a resposta aos
mesmos. O pesquisador deve conhecer os modelos, saber as suas vantagens e
limitaes. Deve analisar seus dados, aplicar os modelos disponveis e optar por
aquele que melhor ajustar aos dados obtidos, para definir o nvel timo do
nutriente, conforme objetivo da pesquisa.

Mtodos de pesquisa em nutrio de monogstricos

Mtodo dose-resposta para determinar exigncias nutricionais

169
de 0,727%. Os modelos quadrtico com plat e o exponencial estimaram exigncias
semelhantes (0,665 e 0,666%, respectivamente). Tendo em vista que todos os
modelos proporcionaram ajustes adequados aos dados, recomenda-se nesse caso,
os dois ltimos modelos para definir o nvel timo de metionina + cistina.

Sakomura, N.K. & Rostagno, H.S.

170
3.2. Aplicao dos modelos para determinar exigncias nutricionais

Para exemplificar a aplicao dos modelos apresentados, sero usados os


dados obtidos em uma dissertao de mestrado realizada na UNESP-Jaboticabal
para determinar o nvel timo de lisina para aves de crescimento lento criadas
em sistema semiconfinado. Nesse ensaio, 480 pintos de um dia Isa Label foram
distribudos em um delineamento inteiramente ao acaso com os tratamentos
arranjados em esquema fatorial 4x2, 4 nveis de lisina (0,85%, 0,97%, 1,09% e
1,21%) em ambos os sexos, 3 repeties de 20 aves por repetio. As dietas
foram formuladas com base no conceito de protena ideal, mantendo a relao
aminocidos:lisina, conforme as recomendaes de Rostagno et al. (2005).
Os dados de ganho de peso (GP) e converso alimentar (CA) de aves da
linhagem Isa Label, de ambos os sexos, alimentadas com diferentes nveis de
lisina digestvel, no perodo de 1 a 28 dias de idade, so apresentados na Tabela
3.
Tabela 3 - Desempenho de machos e fmeas da linhagem Isa Label recebendo raes
com diferentes nveis de lisina digestvel, no perodo de 1 a 28 dias de idade.
Nveis de Lisina
Sexo
Digestvel (%)
Machos
Fmeas
Mdia
Ganho de Peso (g)
0,85
587,97#
529,17
558,57
0,97
621,85
571,67
596,76
1,09
648,09
566,88
607,49
1,21
633,73
575,15
604,44
Mdia
622,91
560,72
Converso Alimentar (g/g)
0,85
1,835
1,960
1,898
0,97
1,804
1,884
1,844
1,09
1,661
1,699
1,680
1,21
1,803
1,869
1,836
Mdia
1,776
1,853
Mdias oriundas de trs observaes.Dados provenientes da Dissertao de Mestrado
(Nascimento, 2007).

A seguir, sero descritos os procedimentos adotados para realizar a anlise


estatstica dos dados, assim como os modelos adotados para estimar as exigncias
de lisina.
Inicialmente, os efeitos do nvel de lisina digestvel da rao, do sexo e da
interao lisina x sexo, foram testados pelo teste F da anlise de varincia. O
modelo estatstico utilizado foi:
Yij = + Lisi + Sj + Lis x Sij + eijk;
em que:
Yij =
=

valor observado para a varivel de desempenho (GP ou CA) para


o i-simo nvel de lisina digestvel oferecido ao j-simo sexo;
mdia geral da varivel de desempenho (GP ou CA);
Mtodos de pesquisa em nutrio de monogstricos

efeito do i-simo nvel de lisina digestvel da rao, sendo i = 1, 2,


3, 4 nveis de lisina;
Sj =
efeito do j-simo sexo, sendo j = 1,2 sexos;
Lis x Sij = efeito da interao entre o i-simo nvel de lisina digestvel da
rao e o j-simo sexo.
eijk =
erro associado a unidade experimental, do j-simo sexo, recebendo
o i-simo nvel de lisina digestvel, i=1,2,3,4, e j=1,2.
Nas Tabelas 4 e 5, encontram-se as respectivas anlises de varincia
referentes ao ganho de peso (GP) e converso alimentar (CA).
A interao entre os nveis de lisina digestvel e o sexo no foi significativa
para as variveis GP e CA, indicando que o padro de respostas aos diferentes
nveis de lisina da rao semelhante para machos e fmeas. Com base nessa
informao, observou-se que, apesar da magnitude das respostas terem sido
diferenciadas, o nvel de lisina digestvel que proporciona o mximo desempenho
o mesmo para frangos machos e fmeas.
Tabela 4 - Anlise de varincia para a varivel ganho de peso.
Fontes de
Graus de
Soma de
Quadrados
F
Variao
Liberdade
Quadrados
mdios
calculado
Lisina
3
9.208,020
3.069,340
8,265
Sexo
1
23.707,850
23.207,850
62,490
Sexo x lisina
3
795,267
265,089
0,714
Resduo
16
5.942,121
371,383
Total
23
39.653,258

Probab.
0,00151
0,00001
NS

CV = 3,256 % NS= no significativo (P>0,05).

Tabela 5 - Anlise de varincia para a varivel


Fontes de
Graus de
Soma de
Variao
Liberdade
Quadrados
Lisina
3
0,1572251
Sexo
1
0,0358562
Sexo x lisina
3
0,0058495
Resduo
16
0,0745157
Total
23
0,2734465

converso alimentar
Quadrados
F
mdios
calculado
0,0524084
11,253
0,0358562
7,699
0,0019498
0,419
0,0046572

Probab.
0,00237
0,01353
NS

CV = 3,761 % NS= no significativo (P>0,05).

3.2.1. Ajuste dos dados pelo modelo quadrtico

Tendo em vista que modelos lineares e no lineares so os mais indicados


para ajustar os dados obtidos em ensaios dose-resposta, o prximo procedimento
foi a anlise de varincia com o desdobramento dos 3 graus de liberdade dos
tratamentos em polinmios de primeiro, segundo e terceiro graus. Os
resultados indicaram que os nveis de lisina proporcionaram respostas
quadrticas para as duas variveis (Tabelas 6 e 7).
Mtodos de pesquisa em nutrio de monogstricos

Mtodo dose-resposta para determinar exigncias nutricionais

171
Lisi =

Sakomura, N.K. & Rostagno, H.S.

172
Tabela 6 -Desdobramento dos GL de tratamento para ganho de peso.
Graus de
Soma de
Quadrados
F
Fontes de R2
Variao
Liberdade
Quadrados
mdios
calculado
Lisina
3
9.208,020
3.069,340
8,265
Linear
0,72
1
6.602,094
6.602,094
17,777
Quadrat. 0,99
1
2.549,690
2.549,690
6,865
Cbico
1,00
1
56,235
56,235
0,151
Sexo
1
23.707,850
23.207,850
62,490
Sexo x lisina
3
795,267
265,089
0,714
Resduo
16
5.942,121
371,383
Total
23
39.653,258

Probab.
0,00151
0,00066
0,01856
NS
0,00001
NS

NS= no significativo (P>0,05).

Tabela 7 - Desdobramento dos GL de tratamento para converso alimentar.


Fontes de
R2
Graus de
Soma de
Quadrados
F
Variao
Liberdade
Quadrados
mdios
calculado
Probab.
Lisina
3
0,1572251
0,0524084
11,253
0,00237
Linear
0,23
1
0,0362982
0,0362982
7,794
0,01306
Quadrat. 0,65
1
0,0656941
0,0656941
14,106
0,00173
Cbico 1,00
1
0,0552328
0,0552328
11,860
0,00334
Sexo
1
0,0358562
0,0358562
7,699
0,01353
Sexo x lisina
3
0,0058495
0,0019498
0,419
NS
Resduo
16
0,0745157
0,0046572
Total
23
0,2734465
NS= no significativo (P>0,05).

Assim, as variveis GP e CA foram ajustadas pelo modelo quadrtico,


utilizando-se todos os dados provenientes de machos e fmeas. O modelo utilizado
foi:
Y = 0 + 1Lis + 2Lis2 + e em que:
Y =
0 =
1 =
2 =
Lis=
e =

valor da varivel dependente (GP ou CA);


constante da regresso (intercepto da reta com o eixo Y);
coeficiente de regresso do componente linear;
coeficiente de regresso do componente quadrtico;
nveis de lisina digestvel da rao;
erro ou desvio associado distncia entre o valor observado Y e o
^ da equao de regresso ajustada.
valor estimado Y

A relao entre a varivel dependente (GP) e a varivel independente (Lis)


foi estabelecida pela equao:
^ = -281,998 + 1598,12 Lis 715,774 Lis2 (R2=0,99);
GP
^ = ganho de peso estimado e Lis = nvel de lisina digestvel da rao.
GP
Contudo, o estabelecimento dessa relao funcional no garante que a varivel
dependente (GP) seja influenciada pela varivel independente (Lis), sendo
necessrio realizar a anlise de varincia da regresso para confirmar se a varivel
Mtodos de pesquisa em nutrio de monogstricos

Na Tabela 8, apresentada a anlise de varincia da regresso do GP em


funo com os nveis de Lis para as aves de ambos os sexos.
Tabela 8 - Anlise de varincia da regresso do GP em funo dos nveis de Lis.
Fontes de
Graus de
Soma de
Quadrados
F
Variao
Liberdade
Quadrados
mdios
calculado
Probab.
Devido
Regresso
2
9.151,783
4.575,892
3,20
0,0611
Resduo
21
30.001,480
1.428,642

Com base na ANOVA, observa-se que a resposta de ganho de peso explicada


(P=0,0611) pela equao de regresso (modelo quadrtico), ajustada para os
dados de ganho de peso de ambos os sexos. O coeficiente de determinao
(R2) foi calculado pela razo entre a soma dos quadrados da regresso (SQReg)
e a soma dos quadrados dos tratamentos (SQTrat), representando a proporo
da variao entre tratamentos que explicada pela equao de regresso
(SQReg/SQTrat).

^ = -281,998 + 1598,12 LisPor meio da primeira derivada da equao (GP


^ = 1598,12 - 1431,548 Lis, que,
715,774 Lis2), obteve-se a equao linear GP
igualada a zero, forneceu a estimativa da exigncia de lisina digestvel para
maximizar o GP (1,116% de lisina digestvel da rao). A representao grfica
apresentada na Figura 13.
Os procedimentos relativos ANOVA, ao ajuste do modelo para os dados,
e estimativa do nvel de lisina digestvel para minimizar a CA, foram os
mesmos utilizados para
analisar o GP. Na Tabela 9,
apresentada a anlise de
varincia da regresso para a
CA em funo dos nveis de
Lis e, na Figura 14, a
representao grfica da
estimativa do nvel de lisina
digestvel adequado para
minimizar a CA das aves
(1,070% Lis). Considerando-se
95% da mxima resposta
estimada pelo modelo quadrtico, obtm-se a exigncia de
lisina digestvel de 1,060% Figura 13 - Representao grfica do modelo
quadrtico para estimar o nvel de lisina digestvel
para ganho e de 1,016% para
(Lis) adequado para maximizar o ganho de peso
CA.
(GP) das aves.
Mtodos de pesquisa em nutrio de monogstricos

Mtodo dose-resposta para determinar exigncias nutricionais

173
Lis influencia de fato, a varivel GP. Outra alternativa testar os coeficientes
s da equao de regresso, separadamente, pelo teste T. Optou-se por
analisar a equao de regresso por meio da anlise de varincia (Teste F).

Sakomura, N.K. & Rostagno, H.S.

174
Tabela 9 - Anlise de varincia da regresso da CA em funo do nvel de Lisina.
Fontes de
Graus de
Soma de
Quadrados
F
Variao
Liberdade
Quadrados
mdios
calculado Probab.
Devido a
Regresso
2
0,1019919
0,050995940
6,25
0,0074
Resduo
21
0,1714541
0,008164548

Com base na ANOVA,


observa-se que a resposta da
CA explicada (P=0,0074)
pela equao de regresso
(modelo quadrtico) ajustada
para as aves de ambos os
sexos.
3.2.2. Ajuste dos dados
pelo modelo Linear
Response Plateau
(LRP)
Figura 14 Representao grfica do modelo
O modelo LRP foi
quadrtico e da estimativa do nvel de lisina
ajustado separando-se as
digestvel (Lis) adequado para minimizar a
mdias observadas de cada
converso alimentar (CA) das aves.
tratamento
em
dois
componentes, um conjunto de dados para ajustar a reta e outro para o plat,
sendo estimado o nvel de lisina pelo intercepto da reta com o plat,
considerando-se a opo que representa o melhor ajuste dos dados.

^ =^
^ =
^
^ Lis para estimar a reta e Y
Os modelos usados foram: Y
2 para
i
0
1
i
i
^
o plat; em que: 2 = estimativa do valor mximo ou mnimo para GP ou CA,
respectivamente. O ponto de interseco das retas (break-point ou ponto de
^ - ^
^.
quebra), foi obtido por: Lis = (
0)/
2
1
No desenvolvimento do modelo, foram feitas vrias regresses e plats usandose diferentes combinaes dos pontos, sendo a combinao que melhor se ajustou
s mdias dos tratamentos definida como aquela que forneceu a menor soma de
quadrado dos desvios (Tabela 10).
Tabela 10 - Resultado das possveis combinaes de retas e plats para ajustar os
dados de GP das aves, pelo modelo LRP.
N de ptos N de ptos Soma de Quadrados Intercepto Coeficiente Plat
na equao no plat
dos Desvios
2
3
61,1338348
288,0728
318,2321 602,8954
2
2
4,6246305
288,0728
318,2321 605,9644
3
2
130,2989807
389,9078
203,8109 605,9644
3
1
125,6743469
389,9078
203,8109 604,4437
4
1
434,3201904
464,4827
123,6228 604,4437

Mtodos de pesquisa em nutrio de monogstricos

Tabela 11 - Somas de quadrados dos desvios da reta e do plat, soma de quadrados


dos desvios total para o modelo que proporcionou o melhor ajuste para o GP.
Intercepto
Coeficiente
Dados
Soma de Quadrados
SQD dos desvios
Total
Reta
288,0728
318,232
2
0,0000
4,6246
Plat
605,9644
0,000
2
4,6246

Os procedimentos relativos ao ajuste do modelo LRP


para os dados de CA e
estimativa do nvel de lisina
digestvel que minimiza a CA
foram os mesmos utilizados
para analisar o GP. Na Tabela
12, so apresentados os
resultados das possveis
combinaes de retas e
plats para ajustar os dados
de CA. Na Tabela 13, so
apre-sentadas as somas de
Figura 15 Representao grfica da estimativa
quadrados dos desvios da
do nvel de lisina digestvel (Lis) adequado para
reta e do plat, assim como maximizar o ganho de peso (GP) das aves pelo
a soma de quadrados dos modelo LRP.
desvios totais para o modelo
que proporcionou o melhor ajuste para a CA. Na Figura 16, encontra-se a
representao grfica da estimativa do nvel de lisina digestvel (Lis) que
minimiza a CA de acordo com o modelo LRP.
Tabela 12 - Resultado das possveis combinaes de retas para ajustar os dados de CA.
N de ptos N de ptos Soma de Quadrados Intercepto Coeficiente Plat
na equao no plat
dos Desvios
2
3
0,0170097
2,277123
-0,44672
1,787
2
2
0,0121165
2,277123
-0,44672
1,758
3
2
0,0141296
2,684671
-0,90464
1,758
3
1
0,0020131
2,684671
-0,90464
1,836
4
1
0,0201545
2,112932
-0,28987
1,836
Mtodos de pesquisa em nutrio de monogstricos

175
Mtodo dose-resposta para determinar exigncias nutricionais

^ = 288,0728 + 318,2321 Lis (R2=1,00) vlida para o intervalo


A equao GP
compreendido entre 0,85% e 0,999% de lisina digestvel na rao, sendo que,
para nveis de lisina superiores ao ponto de quebra (0,999%), o GP estimado
permanece constante (605,96g). O coeficiente de determinao (R2) refere-se
equao determinada pela regresso e, nesse caso, foi igual a 1,00 pelo fato da
soma de quadrados dos desvios da reta ajustada ter sido igual a zero. Na Tabela
11, so apresentadas as somas de quadrados dos desvios da reta e do plat,
assim como a soma de quadrados dos desvios total para a opo que proporcionou
o melhor ajuste para o GP. A Figura 15 ilustra a estimativa do nvel de lisina
digestvel na rao, adequado para maximizar o GP pelo modelo LRP.

Sakomura, N.K. & Rostagno, H.S.

176
Tabela 13 - Somas de quadrados dos desvios da reta e do plat, soma de quadrados dos
desvios totais para o modelo que proporcionou o melhor ajuste para o CA.
Intercepto
Coeficiente
Dados
Soma de Quadrados
SQD dos desvios
Total
Reta
2,6847
-0,905
3
0,0020
0,0020
Plat
1,8360
1
0,0000

Pela anlise da Figura 16,


observa-se que a equao que
forneceu a menor soma de
quadrados dos desvios no
possibilitou
um
ajuste
adequado dos dados de CA.
3.2.3. Ajuste dos dados
pelo modelo quadrtico
associado ao plat do LRP

Por esse mtodo, as


Figura 16 Representao grfica da estimativa
exigncias so determinadas
do nvel de lisina digestvel (Lis) para minimizar
como sendo o primeiro ponto
a converso alimentar (CA) das aves pelo modelo
em que a resposta quadrtica
LRP.
intercepta o plat do LRP. Esse
ponto pode ser definido matematicamente, igualando-se a equao quadrtica
ao valor da varivel de desempenho (GP ou CA) estabelecido pelo plat do
LRP. Considerando-se a equao quadrtica como: Y= ax2 + bx + c, os pontos
de interseco (exigncia) do plat com a curva so calculados pela equao:

X=

b b 2 4a(c y)
2a

O nvel timo de lisina foi definido por meio das respectivas equaes:
Ganho de peso: 605,9644 = -281,998+1598,12 Lis-715,774 Lis2
Converso alimentar: 1,836 = 5,90205 7,77436 Lis + 3,63325Lis2
Aplicando-se a frmula citada acima para obter as interceces das equaes
quadrticas com o plat, determinou-se a exigncia de lisina digestvel para GP
pelo primeiro intercepto (1,041%) (Figura 17). Para CA, conforme observado
na Figura 18, no foi possvel determinar o nvel de lisina por esse modelo,
uma vez que no houve intercepto da quadrtica com o plat do LRP. Isso ocorreu
em razo da falta de ajuste do LRP aos dados de CA. Apesar do modelo no
proporcionar bom ajuste para CA, para o ganho de peso teve um excelente
ajuste, o nvel timo foi intermedirio aos nveis proporcionados pelo LRP e
quadrtico. Isso demonstra a coerncia do modelo, uma vez que o LRP subestima
e o quadrtico superestima o nvel timo.

Mtodos de pesquisa em nutrio de monogstricos

Figura 17 Representao grfica da


estimativa da exigncia de lisina
digestvel para GP, por meio do primeiro
intercepto da equao quadrtica com
o plat do LRP.

Figura 18 Representao grfica da


equao quadrtica e LRP para CA, em que
no foi possvel determinar o intercepto
da quadrtica com o plat do LRP.

3.2.4. Ajuste dos dados pelo modelo exponencial

O modelo utilizado para o ajuste dos dados foi Y = a + b ( 1- e c (Lis - d)), em


que Y varivel dependente; Lis o nvel de lisina digestvel da rao; a
representa a resposta com o menor nvel de lisina na dieta; b a diferena
entre a mnima e mxima resposta adio do nutriente; c a inclinao da
curva; e d o nvel do nutriente na dieta basal.
As equaes exponenciais ajustadas para os dados de GP e CA so
apresentadas nas Figuras 19 e 20. O nvel timo de lisina na dieta foi definido
como sendo aquele correspondente a 95% da resposta mxima da varivel
dependente estimada por esse modelo, matematicamente definida pela
expresso: (ln 0,05) / -13,88 + 0,85 = 1,066% de lisina digestvel na rao
(Figura 19 ). Considerando-se os dados de CA tem-se: (ln 0,05) / -10,95 +
0,85 = 1,124% de lisina digestvel na rao (Figura 20).
3.2.5. Resumo dos resultados obtidos pela aplicao dos modelos

Na Tabela 14 e Figuras 21 e 22, so apresentados todos os modelos e as


exigncias determinadas pela sua aplicao para o ganho de peso e converso
alimentar.
Para o ganho de peso, todos os modelos tiveram bom ajuste indicado pelos
coeficientes de regresso (R2) e tambm pelas SQD. O LRP subestimou e o
quadrtico superestimou o nvel de lisina. Os nveis estimados pelo modelo
exponencial e pela interseco da quadrtica no plat do LRP foram
intermedirios. Com base nesses resultados, os melhores modelos para estimar
as exigncias de lisina foram o quadrtico + plat e o exponencial.
Para a converso alimentar, no houve bom ajuste dos procedimentos LRP,
quadrtico + plat e modelo exponencial. Como o modelo quadrtico foi o que
melhor se ajustou aos dados, este foi o mais indicado para determinar o nvel
ideal de lisina para minimizar a CA das aves.
Mtodos de pesquisa em nutrio de monogstricos

Mtodo dose-resposta para determinar exigncias nutricionais

177

Sakomura, N.K. & Rostagno, H.S.

178

Figura 19 Modelo exponencial


ajustado aos dados de ganho de peso
das aves alimentadas com diferentes
nveis de lisina.

Figura 20 Modelo exponencial ajustado


aos dados de converso alimentar das aves
alimentadas com diferentes nveis de
lisina.

Tabela 14 - Resumo dos resultados obtidos pela aplicao dos modelos.


Modelo
Equao
Nvel timo
Ganho de peso
LRP
GP = 288,0728 + 318,232 Lis
0,999
Quadrtico
GP = - 281,998 + 1598,12 Lis 715,774 Lis 2
1,116
95% Quad.
1,060*
Exponencial
GP = 558,503 + 48,132 (1 e 13,88 * (Lis 0,85))
1,066
Quad + Plat
605,9644 = -281,998+1598,12Lis-715,774Lis2
1,041
Converso alimentar
LRP
CA = 2,68467 0,904639 Lis
0,938
Quadrtico
CA = 5,90205 7,77436 Lis + 3,63325 Lis2
1,070
95% Quad.
1,016*
Exponencial
CA = 1,902 0,1328 (1 e 10,95 * (Lis 0,85))
1,124
Quad + Plat
1,836 = 5,90205 7,77436Lis + 3,63325Lis2
0,910

R2
1,00
0,99
0,99

0,92
0,65
0,41

* Exigncia considerando 95% do modelo quadrtico.

Figura 21 Representao grfica de


todos os modelos aplicados simultaneamente para o GP.

Figura 22 Representao grfica de


todos os modelos aplicados para a CA.

Mtodos de pesquisa em nutrio de monogstricos

Dentre os mtodos utilizados para determinar as exigncias dos


aminocidos destacam-se o dose-resposta e o fatorial. O mtodo fatorial ser
discutido posteriormente. O mtodo baseado na resposta do animal, mediante
variao na concentrao de um determinado aminocido na dieta, tem sido
o mais usado pelos pesquisadores, para definir os nveis dos aminocidos
recomendados em formulaes prticas.
A tcnica da suplementao do aminocido teste na dieta basal tem sido a
mais usada para formulao das dietas experimentais. Uma dieta basal
formulada para atender as exigncias nutricionais de energia, minerais, vitaminas
e dos demais aminocidos essenciais, com exceo daquele a ser estudado. Este
suplementado na dieta basal na forma de aminocido cristalino, e as doses
devem promover desde uma limitao no crescimento at atingir o mximo
desempenho. Quando o aminocido avaliado tem relaes antagnicas com outro,
os dois devem ser suplementados para evitar esse efeito. O nvel timo definido
com base na resposta animal.
A tcnica da suplementao tem sido criticada por vrios pequisadores (Fisher
e Morris, 1970, Gous, 1980, DMello, 2003 e Moughan e Fuller, 2003). Primeiro,
porque para formular uma dieta basal adequada em todos os nutrientes, supese que as exigncias nutricionais estejam bem estabelecidas. Entretanto, muitas
vezes, as dietas so formuladas com excesso de alguns nutrientes levando ao
imbalano dos mesmos, podendo afetar a resposta animal. Alm disso, para
vrias espcies animais, as exigncias ainda no esto estabelecidas. Por exemplo,
para algumas espcies de peixes, ainda no esto definidas as exigncias de
todos os aminocidos, dificultando a formulao da dieta basal que atenda a
todas as necessidades nutricionais, com exceo do aminocido em estudo.
Segundo, porque o aumento sucessivo do aminocido limitante leva ao
desbalanceamento dos demais aminocidos que pode afetar a resposta animal.
Terceiro, em altos nveis de suplementao do primeiro aminocido limitante, a
resposta a esse aminocido poderia depender de um segundo aminocido
limitante. Quarto, existe a dificuldade de se conseguir uma dieta basal deficiente
no aminocido limitante que permita a suplementao de altas doses do
mesmo. Quinto, refere-se ao modelo aplicado para definir a dose tima, o
broken line, que, alm de subestimar a dose no adequado para ajustar a
resposta de grupos de animais. Alm disso, alguns modelos definem a dose
baseado na resposta mxima, superestimando a dose; e outros estabelecem
o nvel baseados no nvel mnimo que no difere estatisticamente da resposta
mxima, subestimando a exigncia. Uma crtica final refere-se ao alto custo
dos aminocidos sintticos que podem onerar os ensaios.
Apesar de todas as dificuldades para formular as dietas e crticas, o mtodo
dose-resposta continua sendo o mais utilizado para determinar as exigncias
dos aminocidos e dos nutrientes em geral, por ser de fcil execuo, barato,
e os resultados dos experimentos correspondem razoavelmente bem com os
dados de campo observados pela indstria de raes.
Mtodos de pesquisa em nutrio de monogstricos

Mtodo dose-resposta para determinar exigncias nutricionais

179
4. Mtodos para determinar exigncias dos aminocidos

Sakomura, N.K. & Rostagno, H.S.

180
Fisher e Morris (1970) propuseram uma tcnica alternativa para avaliar
aminocidos denominada Tcnica de Diluio da Dieta. Este mtodo consiste
em diluir seqencialmente uma dieta alta em protena com uma dieta
isoenergtica, livre de protena. Gous (1980) descreve a tcnica como um mtodo
melhorado, baseando-se no princpio de que essa tcnica proporciona resultados
mais vlidos do que a tcnica de suplementao.
DMello (1982), usando dados obtidos por Gous (1980) pela tcnica da diluio
da dieta e dados oriundos da tcnica de suplementao por Boomgaardt e Baker
(1973), constatou que a resposta no crescimento dos animais com o aumento na
ingesto de lisina foi semelhante entre as duas tcnicas. O autor concluiu que
no se justificava o argumento de que a tcnica de diluio seria uma melhor
alternativa em razo das deficincias da tcnica de suplementao.
DMello (2003) menciona que as duas tcnicas tem suas limitaes, mas podem
ser usadas para determinar o nvel timo dos aminocidos. Ressalta que, apesar
das duas tcnicas proporcionarem respostas compatveis com o crescimento
animal, a tcnica da diluio promove diferenas nos nveis de protena das
dietas diludas. Alguns trabalhos tm demonstrado que as diferenas nos nveis
proticos tm refletido nas exigncias dos aminocidos (Morris et al., 1987 e
Vieira et al., 2004). A reduo da utilizao do aminocido limitante com o
aumento da protena das dietas ocorre por causa do imbalano dos aminocidos.
Por outro lado, o autor relata, conforme dados do estudo de DMello (1990)
empregando a tcnica de suplementao, que o imbalano moderado e o
severo no afetaram a utilizao do primeiro aminocido limitante. A base
bioqumica do efeito da protena sobre as respostas dos aminocidos no
crescimento das aves ainda no est esclarecida. Resultados de algumas pesquisas
realizadas com as duas tcnicas, diluio e suplementao, indicam que a variao
na concentrao de um aminocido afeta a deposio de gordura na carcaa das
aves.
Segundo DMello (2003), uma srie de fatores, como temperatura ambiente,
estresse imunolgico, sexo, idade, espcie e outros fatores da dieta podem
afetar a resposta das aves com a variao de um aminocido na dieta. O autor
menciona que alguns fatores podem afetar o consumo e outros a eficincia de
utilizao do aminocido avaliado. Fatores relacionados dieta, como energia
e imbalano dos aminocidos, afetam o consumo; outros, como antagonismos
entre os aminocidos de cadeia ramificada ou entre os bsicos, como lisina e
arginina, afetam a utilizao dos aminocidos. Para isolar esses fatores,
recomenda-se avaliar as respostas em funo do consumo do aminocido e no
da sua concentrao na dieta. Fatores que reduzem a eficincia de utilizao
desse nutriente podem ser verificados se a resposta avaliada em funo da
ingesto do aminocido e tambm pelo comportamento das curvas respostas.
Considerando-se as limitaes e crticas ao mtodo dose-resposta, outros
conceitos e mtodos tm sido propostos para estudar os aminocidos, tendo
como base o conceito de protena ideal.

Mtodos de pesquisa em nutrio de monogstricos

O conceito da protena ideal bastante antigo, proposto inicialmente por


Mitchel (1964) para otimizar a utilizao da protena da dieta (relao entre
reteno e consumo de protena) e minimizar a excreo de nitrognio. Naquele
momento foi um conceito mais terico do que prtico. Hoje, com o avano
tecnolgico na rea de produo de aminocidos sintticos, o conceito tem
sido de grande interesse.
A protena ideal pode ser definida como o balano exato, sem excessos ou
deficincias, de todos os aminocidos necessrios para a manuteno animal e
mxima deposio protica. Isso reduz o uso de aminocidos como fonte de
energia e diminui a excreo de nitrognio. O aminocido lisina foi eleito pelos
pesquisadores como referncia (Standard = 100) pelas seguintes razes: a lisina
o primeiro aminocido limitante na maioria das dietas para sunos e o segundo,
depois dos aminocidos sulfurosos, na maioria das dietas para aves. Este
aminocido encontra-se economicamente disponvel na forma cristalina para ser
utilizado nas raes prticas dos animais. Diferentemente dos aminocidos
sulfurosos, sua anlise laboratorial simples e direta e tambm possui metabolismo
orientado principalmente para deposio de protena corporal. E, por fim, existe
grande quantidade de publicaes referentes aos requerimentos de lisina em aves e
sunos sob diferentes condies nutricionais, ambientais e de composio corporal.
Atualmente, recomendado formular raes com base na protena ideal.
Ainda que as necessidades dos aminocidos sejam diferentes, a relao entre
eles afetada apenas pela idade do animal, pois, de acordo com o peso
(mantena) e com o ganho dirio de peso (deposio de protena), tem-se a
protena ideal ajustada para cada idade (Rostagno et al., 2002). Teoricamente,
deveria existir uma protena ideal para cada dia de idade do animal, o que s
seria possvel com a aplicao de equaes para predizer as exigncias dirias
para mantena e ganho de peso de cada aminocido. Do ponto de vista prtico,
so publicadas as relaes dos aminocidos com a lisina para 2 ou 3 fases da
vida do animal, ou seja, para a fase inicial, crescimento e final.
Conforme a protena diettica reduzida com a suplementao de
aminocidos industriais, o ajuste da tima relao ideal desses componentes
se torna cada vez mais importante. A ordem de limitao dos aminocidos
nas dietas que especifica quais aminocidos industriais so necessrios
suplementar, para manter o timo balano.
A idia bsica desse conceito que os animais necessitam de aminocidos
em quantidades balanceadas para se obter uma tima performance. Os
aminocidos absorvidos que esto em excesso em relao ao primeiro limitante
so oxidados e excretados como compostos nitrogenados. Segundo MacLeod
(1997), a degradao do excesso de aminocidos na rao tem alto custo energtico
para os animais. Dietas com alto contedo protico proporcionam menor contedo
de energia lquida do que dietas com baixo nvel de protena, formuladas com
base na protena ideal. Portanto, ajustando-se os aminocidos da dieta conforme
a protena ideal, ocorre a maximizao da utilizao do nitrognio da dieta e
reduo da excreo.
Mtodos de pesquisa em nutrio de monogstricos

Mtodo dose-resposta para determinar exigncias nutricionais

181
4.1. Conceito de protena ideal

Sakomura, N.K. & Rostagno, H.S.

182
A razo para o uso desse conceito nas formulaes para os animais
fundamentada no fato de que a relao entre a lisina e os outros aminocidos
essenciais permanece inalterada, em grande parte, apesar de uma srie de
fatores dietticos, ambientais e genticos poderem afetar as exigncias dos
aminocidos (Baker e Han, 1994).

Mtodos de pesquisa em nutrio de monogstricos

Sakomura, N.K. & Rostagno, H.S.

184

Lis = Intervalo linear


Lis = Nivelamento
Lis = Plat

Figura 24 - Efeito do nvel de lisina na dieta controle


sobre inclinao das respostas. (Adaptado de Lemme,
2003).

4.3. Critrios respostas para definir as exigncias dos aminocidos

A escolha das variveis utilizadas como critrio de avaliao fundamental


para definir as exigncias dos aminocidos e as relaes ideais. A maioria dos
trabalhos publicados consideram o ganho de peso e a converso alimentar para
estabelecer os nveis dos aminocidos. Em estudo realizado na UFV, Paez (2007),
com o objetivo de atualizar a relao metionina + cistina digestvel / lisina
digestvel de frangos de corte, avaliou 5 relaes variando de 64% a 80% em
dietas deficientes em lisina digestvel (1,03%) e comparou com uma rao controle
com 1,10% de lisina digestvel e 0,880% de metionina + cistina digestvel (80%
da relao). As variveis consideradas foram a converso alimentar e
rendimento de fil de peito na fase de 22 a 35 dias de idade dos machos Cobb
(Tabela 15). Observa-se que a converso alimentar permitiu estimar
adequadamente a relao metionina + cistina digestvel / lisina digestvel
dos machos Cobb, que variou de 72,6% para o modelo LRP a 77% para o modelo
quadrtico, sendo os modelos, 95% do quadrtico e o quadrtico + plat,
intermedirios, 73,2% e 73,9%, respectivamente. Para timo rendimento de
Mtodos de pesquisa em nutrio de monogstricos

Tabela 15 - Efeito da relao met. + cis. dig. / lis. dig. sobre a converso alimentar
e rendimento de fil de peito em frangos de corte Cobb machos de 22 a 35 dias de idade.
M+C / Lis (%)
Converso (g/g)
Rendimento de Fil (%)
64 (0,659)1
1,788
23,74
68 (0,700)
1,742
24,14
72 (0,742)
1,690
24,05
76 (0,783)
1,690
24,26
80 (0,824)
1,689
24,38
1,665
24,33
Controle positivo2
CV (%)
1,61
3,58
Modelos
Relao M+C/Lis (%)
Quadrtico
77,0
ns
95% da resposta quadrtica
73,2

Quadrtico + Plat
73,9

LRP
72,6

Relao M+C dig. / Lis. dig. e contedo (%) de M+C dig. entre parnteses e Lis. dig. da dieta
(1,03%). 2Controle positivo contendo M+C dig. (0,880%) e Lis dig. (1,10%) .(Paez, 2007).
1

Outros critrios podem ser usados para definir os nveis ideais de aminocidos.
Os primeiros trabalhos publicados, utilizando a excreo de uria pelos sunos e
de cido rico pelas aves para avaliar qualidade da protena ou nveis nutricionais
de aminocidos, foram publicados por Brown e Cline (1974) e por Miles e
Featheston (1976). A metodologia baseada no aumento da produo destes
compostos quando ocorre deficincia ou imbalano dos aminocidos. A
suplementao do primeiro aminocido limitante, promovendo melhor
balanceamento, aumenta a sntese de protena e reduz o catabolismo dos demais
aminocidos no limitantes, havendo reduo na excreo de uria ou cido
rico que so os produtos finais do catabolismo dos aminocidos. Dessa forma,
a excreo de uria nos mamferos ou cido rico nas aves, podem ser utilizadas
para determinar os nveis nutricionais do primeiro aminocido limitante. A uria
pode ser determinada tambm no sangue, sendo recomendado um jejum de 5
horas aps a alimentao a fim de coletar o sangue para maximizao do teor
de uria no sangue. Entretanto, Rodrigueiro et al. (2000) indicam que a
determinao da concentrao de cido rico como forma de estudar o
metabolismo dos aminocidos pode esbarrar no alto coeficiente de variao,
sendo, portanto, considerado um fator limitante para a tomada de decises
quanto s estimativas de exigncias nutricionais.
O mesmo princpio se aplica para a determinao da concentrao do
aminocido limitante no plasma dos animais. Em vrios trabalhos, foi verificado
que a adio de um aminocido na dieta, em nveis abaixo da exigncia do
animal, no ocasiona alterao significativa na concentrao do aminocido
no plasma, mas, quando a adio compatvel com a exigncia ou em excesso,
Mtodos de pesquisa em nutrio de monogstricos

Mtodo dose-resposta para determinar exigncias nutricionais

185
fil de peito, os nveis de metionina + cistina na dieta recomendados foram
menores que para converso alimentar, pois no houve efeito dos nveis de
metionina+cistina digestvel sobre o rendimento de fil de peito dos frangos
de corte.

Sakomura, N.K. & Rostagno, H.S.

186
o nvel plasmtico aumenta bruscamente. Pode-se concluir que, quando o nvel
plasmtico do aminocido em estudo comea a aumentar, este pode ser
estabelecido para definir a sua exigncia diettica.
Esses critrios foram utilizados por Pinheiro et al. (1986) para determinar a
exigncia de lisina de porcas lactantes. Os autores forneceram 5 nveis de lisina a
porcas em lactao por dois perodos de 4 dias e determinaram, no ltimo dia de
cada perodo, os nveis de lisina e uria no plasma e a excreo de uria na urina
nas ltimas 24 horas. A Tabela 16, mostra os nveis recomendados de lisina
total nas dietas de porcas em lactao com base nos resultados obtidos de uria
no plasma e na urina e de lisina plasmtica. As metodologias laboratoriais facilitam
sobremaneira as pesquisas com animais adultos, pois, para realizar medidas do
desempenho, seria necessrio um grande nmero de porcas por longos perodos,
o que dificultaria a realizao de outras pesquisas em uma granja experimental
de sunos.
Tabela 16 - Efeito do nvel diettico de lisina total sobre a uria e lisina plasmtica
e excreo urinria de uria em porcas em lactao.
Dieta Lisina
Uria Plasmtica
Uria
Lisina Plasmtica
Total (%)
(mg/100mL)
Urinria (g/dia)
(mg/100mL)
0,566
32,78 ab
40,14 ab
1,26 c
0,646
25,83 c*
34,41 b
1,21 c
0,726
30,51 b
24,68 c*
1,52 bc*
0,806
29,48 bc
24,68 c
1,77 b
0,886
32,22 ab
32,29 bc
2,06 a
* Exigncia recomendada para cada parmetro. Pinheiro et al. (1986).

Fontes et al. (2000) alimentaram leitoas (60 a 95 kg) com dietas contendo
diferentes nveis de lisina e avaliaram parmetros de desempenho, de carcaa e
a uria no soro. Os autores verificaram que a exigncia de lisina estimada com a
converso alimentar e uria no soro foram similares, entretanto a estimativa do
nvel de lisina na dieta para menor deposio de gordura na carcaa foi 15%
superior (Tabela 17). Os coeficientes de variao dos diferentes parmetros
usados para estimar as exigncias nutricionais das leitoas mostram que a
converso alimentar apresentou o menor coeficiente, e os de deposio de protena
e de gordura na carcaa os maiores valores, sendo intermediria a variao da
uria no soro. Esses resultados sugerem que, nos estudos realizados para definir
nveis nutricionais para melhoria da deposio protica e reduo na deposio
de gordura, as repeties e o nmero de animais por repetio deve ser aumentado
para poder detectar as diferenas entre os tratamentos experimentais.
4.5. Protocolo proposto para determinar o nvel timo de lisina em
dietas formuladas com base na protena ideal

Delineamento experimental
O nmero de repeties, animais por repetio e distribuio dos animais
devem seguir os princpios apresentados no Captulo 1 para cada espcie
animal. A definio dos tratamentos depende do mtodo a ser empregado.
Mtodos de pesquisa em nutrio de monogstricos

Efeito Quadrtico (P<0,01). 2ns. 3Efeito Linear (P<0,01). Fontes et al. (2000).

Dietas experimentais
As dietas podem ser formuladas pela tcnica da suplementao ou da diluio.
Pela tcnica da suplementao, formulada uma dieta basal deficiente em
lisina, mas deve atender as exigncias nutricionais de energia, vitaminas e
minerais. Os demais aminocidos devem estar em propores adequadas para
manter as relaes ideais com a lisina. A basal suplementada com lisina e os
demais aminocidos para manter a relao ideal.
Na Tabela 18, so apresentados exemplos de suplementao da lisina e
demais aminocidos na dieta basal. Entretanto, em dietas prticas, h uma
certa dificuldade em manter a mesma relao ideal dos aminocidos em todas
as dietas. Conforme exemplo apresentado, medida que os nveis de lisina das
raes so aumentados, os aminocidos que se tornam limitantes devem ser
suplementados por fontes sintticas, de forma que as relaes ideais propostas
por Rostagno et al. (2005) sejam atendidas. Por esse mtodo de formulao,
observa-se que as dietas com os nveis mais elevados so aquelas que mais se
aproximam das relaes exatas, pela necessidade de suplementao da maior
parte dos aminocidos, enquanto os primeiros nveis so aqueles que mais
extrapolam as relaes ideais.
As formulaes pela tcnica da diluio consistem em formular uma dieta
com alto nvel de lisina e, conseqentemente, dos demais aminocidos que so
estabelecidos conforme o perfil ideal; e outra dieta de diluio com os mesmos
teores de energia, minerais e vitaminas, mas isenta de protena e aminocidos
(Tabela 19). A mistura das duas dietas em propores adequadas fornece os
nveis de lisina a serem avaliados, mantendo as mesmas relaes dos aminocidos
em todas as dietas. Essa tcnica permite manter o mesmo perfil dos
aminocidos em todas as dietas, como pode ser verificado no exemplo de
formulao apresentado na Tabela 20. Entretanto, a restrio dessa tcnica
a variao dos nveis de protena da dieta que variam conforme as diluies.
Isso pode ser amenizado com a incluso, na dieta isenta de aminocidos
(diluente), de uma fonte de nitrognio, como o cido glutmico.

Mtodos de pesquisa em nutrio de monogstricos

Mtodo dose-resposta para determinar exigncias nutricionais

187
Tabela 17 - Efeito do nvel de lisina diettica sobre variveis, medidas em leitoas de 60
a 95 kg.
Lisina na Dieta,
Converso
Uria no
Deposio, g/dia
Soro1 mg/dL
Protena2
Gordura3
%
Alimentar1
0,75
2,73
35,80
153,9
232,1
0,85
2,55
33,67
156,0
238,6
0,95
2,42
30,32
153,8
226,4
1,05
2,46
27,80
156,8
161,6
1,15
2,53
32,82
161,8
182,5
Exigncia de Lis
1,00
1,00
0,75
1,15
CV, %
4,02
6,40
14,06
14,12

Sakomura, N.K. & Rostagno, H.S.

188
Tabela 18 - Dietas experimentais formuladas pela tcnica da suplementao para avaliar
os nveis de lisina, mantendo a relao ideal dos aminocidos para frangos de corte na
fase inicial. Raes isoenergticas e isoproticas com os aminocidos na proporo
ideal.
Ingredientes (%)
Nveis de lisina digestvel (%)
0,85
0,97
1,09
1,21
Basal
91,932
91,932
91,932
91,932
L-lisina HCl
0,153
0,306
0,459
DL- metionina
0,105
0,193
0,282
0,370
L-treonina
0,027
0,106
0,187
L- valina
0,064
0,155
L- Arginina
0,022
0,149
cido glutmico
7,932
7,570
6,975
5,992
Amido
0,031
0,125
0,313
0,756
Total
100,00
100,00
100,00
100,00
Aminocidos digestveis
aa/lis
aa/lis
aa/lis
aa/lis
Lisina, % (100)1
0,850 1,00 0,970 1,00 1,090 1,00 1,210 1,00
Metionina+cistina,% (72) 0,612 0,72 0,698 0,72 0,785 0,72 0,871 0,72
Triptofano,% (16)
0,195 0,23 0,195 0,20 0,195 0,18 0,195 0,16
Treonina,% (65)
0,605 0,71 0,631 0,65 0,709 0,65 0,787 0,65
Arginina,% (105)
1,123 1,32 1,123 1,16 1,145 1,05 1,271 1,05
Valina,% (75)
0,754 0,89 0,754 0,78 0,818 0,75 0,908 0,75
Fenilalanina,% (63)
0,823 0,97 0,823 0,85 0,823 0,76 0,823 0,68
Composio basal (%): milho = 58,100; Farelo de soja = 28,549; Fosfato biclcico = 1,741;
Calcrio = 1,113; Sal = 0,437; leo de soja = 1,722; Premix mineral e vitamnico = 0,200;
Cloreto de colina (70%) = 0,070. Composio Nutricional (%): EM (kcal/kg) = 3.000; PB (%)
= 22,50; Ca (%) = 0,940; Pd (%) = 0,42; Na (%) = 0,190. 1Protena Ideal recomendada por
Rostagno et al. (2005).

Tabela 19 - Raes formuladas para obter as dietas com nveis crescentes de lisina
aplicando-se a tcnica da diluio.
Ingredientes
Raes a serem misturadas
Concentrada (1,21% de lisina)
Isenta (diluente)
Milho
54,755

Farelo de soja
38,348

leo Soja
2,970

Calcrio
1,106
0,999
Fosfato biclcico
1,660
2,270
Sal comum
0,434
0,481
DL- metionina
0,270

L-lisina HCl
0,149

L-treonina
0,038

L- valina

L- Arginina

Premix mineral
0,100
0,100
Premix vitamnico
0,100
0,100
Cloreto de colina 70%
0,070
0,070
Amido

82,689
Inerte

13,291
Total
100,00
100,00

Mtodos de pesquisa em nutrio de monogstricos

Composio: EM (kcal/kg) = 3.000; Ca (%) = 0,940; Pd (%) = 0,42; Na (%) = 0,190.


1
Protena Ideal recomendada por Rostagno et al. (2005).

Critrios respostas
As respostas em ensaios dose-resposta so baseadas no desempenho
animal. Para os animais em crescimento, as caractersticas mais avaliadas
so o ganho de peso e a converso alimentar. Para frangos de corte, um
parmetro de importncia econmica o rendimento de peito; no caso de
sunos em crescimento, o rendimento de carcaa, a espessura de toucinho e
a rea de olho de lombo so variveis importantes.
A excreo de cido rico em aves ou uria nos sunos, assim como a deposio
protica, so tambm utilizadas para estimar as exigncias dos aminocidos.
A deposio protica corporal determinada pela tcnica do abate
comparativo. Um grupo de animais abatido para medir a composio corporal
inicial e, no final, um grupo de animais alimentados conforme os tratamentos
so abatidos para determinar a composio corporal final. Pela diferena entre
a composio protica final e inicial, calcula-se a deposio protica.
Anlises dos dados
O primeiro procedimento a anlise de varincia com a decomposio dos
tratamentos em regresso polinomial. Se for detectada a significncia para a
regresso, os dados podem ser ajustados pelos modelos quadrtico, exponencial
e LRP (linear response plateau). Na escolha do modelo, deve ser considerado
o ajuste dos dados e os aspectos mencionados sobre os modelos (ver 3.1.
Interpretao da resposta dos animais nos ensaios dose-resposta).
Depois de definir o modelo, o critrio para determinar o nvel timo depende
do modelo utilizado. Para o LRP, o ponto de interseco da reta com o plat.
Para o modelo quadrtico, o nvel timo estabelecido como sendo aquele que
promover a mxima resposta. Pode tambem usar o critrio de 95% do nvel que
proporcionou a mxima resposta pelo modelo quadrtico. Para o exponencial,
um valor arbitrrio de 95% a 99% da mxima resposta tem sido usado como
Mtodos de pesquisa em nutrio de monogstricos

Mtodo dose-resposta para determinar exigncias nutricionais

189
Tabela 20 - Dietas experimentais formuladas pela tcnica da diluio usando-se as
dietas da Tabela 19 para avaliar os nveis de lisina, mantendo a relao ideal dos
aminocidos. Raes isoenergticas variando os nveis de PBl.
Ingredientes (%)
Nvel de lisina digestvel (%)
0,85
0,97
1,09
1,21
Concentrada
70,248
80,138
90,083
100,000
Isenta
29,752
19,862
9,917

Total
100,00
100,00
100,00
100,00
Aminocidos digestveis
AA/lis.
AA/lis.
AA/lis.
AA/lis.
Protena Bruta (%)
15,932
18,110
20,301
22,486
Lisina,% (100)1
0,850 1,00 0,970 1,00 1,090 1,00 1,210 1,00
Metionina+cistina,% (72) 0,612 0,72 0,698 0,72 0,785 0,72 0,871 0,72
Triptofano ,% (16)
0,174 0,20 0,198 0,20 0,223 0,20 0,247 0,20
Treonina,% (65)
0,553 0,65 0,631 0,65 0,709 0,65 0,787 0,65
Arginina,% (105)
1,001 1,18 1,142 1,18 1,283 1,18 1,425 1,18
Valina,% (75)
0,655 0,77 0,747 0,77 0,840 0,77 0,932 0,77
Fenilalanina,% (63)
0,716 0,84 0,817 0,84 0,919 0,84 1,020 0,84

critrio na definio do nvel timo do aminocido. O primeiro ponto de interseco da curva


quadrtica no plat do LRP tambm pode definir a dose tima objetivamente.
Exemplo de procedimento da anlise dos dados (ver 3.2. Aplicao dos modelos para
determinar exigncias nutricionais).