Artigo

DETERMINAO DE DEMANDA BIOQUMICA DE OXIGNIO PARA TEORES 5 MG L-1 O2

Resumo
A metodologia usada para a determinao da demanda bioqumica de oxignio em cinco dias (DBO5), como descrita no Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater1999, somente pode ser empregado quando a concentrao for maior do que 5 mg L-1 O2. Principalmente quando relacionada s guas de rios, algumas normas ambientais (como por exemplo a Legislao CONAMA) estabelecem limites para DBO5 menor do que 5 mg L-1 O2. Neste mtodo, a quantidade de oxignio dissolvida importante e adaptaes na metodologia de referncia como volume de amostra e diluies foram otimizadas. Palavras-chave: DBO5, mtodo analtico, guas de rio
Leonardo da Silva e Lima, Helcio Jos Izario Filho* e Francisco Jos Morteira Chaves Escola de Engenharia de Lorena EEL-USP Departamento de Engenharia Qumica (DEQUI) *Autor para correspondncia: Rod Itajub-Lorena Km 74,5 Caixa Postal 116 CEP: 12600-000. Lorena. SP Fone: (12) 3159-5076 E-mail: helcio@dequi.faenquil.br

Summary
Analytical methodology used for the determination of the biochemical oxygen demand in five days (DBO5), as described in the Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater-1999, can only be used when the water samples prenet concentration equivalent or greater than 5 mg L-1 O2. Mainly when related to the superficial waters (CONAMA Legislation) some environmental norms establish BDO5 limits smaller than 5 mg L-1 O2. In this method, the amount of oxygen dissolved is important and adaptations in the reference methodology as sample volume and respective dilutions were optimizeds. Keywords: BDO5, analytic method, river water

Introduo
H dcadas, o planeta Terra vem demonstrando fortes sinais de transio, como se a natureza estivesse acordando o homem para um novo sentido de vida. E tudo ocorre to rapidamente, que as mudanas geram novos paradigmas, determinam novos comportamentos e exigem novos caminhos na gesto de recursos naturais. No caso da gesto de recursos hdricos, a escassez, o uso inadequado e a crescente demanda esto prenunciando a questo da gua como um dos mais graves problemas da humanidade no sculo XXI, se no for adotado um novo jeito de lidar com o meio ambiente, agora, antes que seja tarde (1,2). A partir do final da dcada de 50, o mundo despertou para os problemas ambientais. Atravs de movimentos ambientalistas, comeou-se a exigncia de empreendimentos que protegessem o meio ambiente, como a identificao de impactos ambientais, efeitos ambientais negativos, alternativas de ao e a definio quanto a possveis comprometimentos dos recursos ambientais (3).
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Concomitante aos movimentos ambientalistas, a Assemblia Geral da Organizao das Naes Unidas (ONU) elaborou planos e programas como forma de integrar as polticas ambientais (4). No Brasil, rgos como CETESB, CONAMA e FEEMA, entre outros, so os responsveis pela qualidade do meio ambiente, porm, um intenso trabalho de conscientizao ainda deve ser feito para que os problemas do meio ambiente no se tornem casos isolados, mas sim de todos, pois direta ou indiretamente seremos afetados. Apesar da crescente conscientizao da sociedade e severas multas relacionadas ao meio ambiente, existem algumas pendncias no que diz respeito legislao ambiental atual, como fiscalizao ou mtodos analticos inadequados. A Demanda Bioqumica de Oxignio (DBO5) sempre foi caracterizada como um dos principais parmetros para se saber a qualidade de uma gua. definida como a quantidade de oxignio necessria para oxidar a matria orgnica biodeRevista AnalyticaOutubro/Novembro 2006N25

gradvel sob condies aerbicas, ou seja, avalia a quantidade de oxignio dissolvido (OD) em mg L-1 de O2, que ser consumido pelos organismos aerbios ao degradarem a matria orgnica1. Define-se como matria biodegradvel, aquela que pode ser consumida e assimilada como alimento e fonte de energia pela populao de microorganismos decompositores do ambiente aqutico. Sua utilizao como alimento energtico implica na oxidao ou degradao com a finalidade de reduzir suas molculas complexas a espcies mais simples, com liberao de energia. Portanto, a DBO5 uma varivel da qualidade da gua que, de uma certa forma, quantifica a poluio orgnica pela depleo do oxignio, que poder conferir condio anaerbica ao ecossistema aqutico (1). Entretanto, a bibliografia especializada apresenta metodologias no adequadas para a determinao de DBO5 em baixos teores. Os mtodos de referncias so aplicveis somente a DBO5 da ordem de dezenas, centenas ou milhares de mg L-1 de O2, sendo inadequados para a determinao de DBO5 em concentraes menores do que 5 mg L-1. Sabidamente, o conceito de DBO5 originrio da GrBretanha: a Royal Comission escolheu cinco dias para a estimativa de DBO a 20oC porque os rios britnicos possuem um tempo de escoamento at o mar inferior a cinco dias e a mdia da temperatura no vero de 18,3oC (1,2). No Brasil, a escassez de informaes tcnicas em relao a DBO5 para baixos teores pode ser devida ao reduzido nmero de rgos responsveis pela fiscalizao da qualidade e do controle das guas dos rios, considerando-se o fato do Brasil ser um pas muito rico em bacias hidrogrficas. Este parmetro utilizado, geralmente, na determinao do grau de poluio de cursos dgua, no estudo de cargas poluidoras e na avaliao de eficincia dos sistemas de tratamento. Sua aplicao especfica para amostras de efluentes, guas residurias, despejos industriais, guas de rios, lagos e represas, desde que essas possuam DBO5 maior do que 15 mg L-1 O2 (5). De acordo com a Resoluo CONAMA 357/2005, os rios so classificados em classes diferentes, em funo de caractersticas fsico-qumicas e microbiolgicas, e um dos parmetros diferenciais a DBO5. Segundo esta norma, rios classe 1 devem apresentar DBO5 < 3 mg L-1, rios classe 2 devem apresentar DBO5 < 5 mg L-1 e rios classe 3 devem apresentar DBO5 < 10 mg L-1 O2. Porm, estes valores no so facilmente determinveis, j que o menor valor possvel de referncia apresentado pelo mtodo padro (Standard Methods for examination of water and wastewater) de 5 mg L-1 O2. Devido ao longo perodo de anlise (cinco dias de incubao), o clculo das alquotas das amostras a serem incubadas para a determinao do teor de DBO5 e obter um depleo de O2 adequada, estimado em funo do valor do teor da demanda qumica de oxignio (DQO) das mesmas, buscando equacionar uma relao DQO/DBO5 (6).
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Para uma amostra com DQO de 15 mg L-1 O2, por exemplo, a metodologia recomenda a utilizao de, aproximadamente, um volume de amostra de 330 mL (5,6). Com este volume estimado segundo as metodologias tradicionais, torna-se impossvel empreg-las, uma vez que as determinaes de DBO5 utilizam frascos calibrados com volumes aproximados de 300 mL. No caso dos rios, com DBO5 menores do que 5 mg L-1 O2, devem apresentar valores de DQO nesta mesma ordem de grandeza. Portanto, os rios que apresentam valores de DQO menores do que 15 mg L-1 O2, cujo respectivos valores de DBO5 so menores do que 5 mg L-1 O2, mostram a no aplicabilidade dos mtodos recomendados. Alm da varivel volume de amostra, outro parmetro relevante para a DBO o tempo de incubao, que diretamente proporcional depleo de oxignio pelos microorganismos, tornando-se o parmetro limitante da exatido da anlise. Tambm a determinao de oxignio dissolvido (OD) um parmetro importante na determinao de DBO. O mtodo titrimtrico de Winkler modificado pela azida sdica rpido e independe de variveis como presso e temperatura (7,8). Neste trabalho est sendo proposto aumentar-se a sensibilidade analtica do mtodo convencional, adequando-a para valores de DBO5 < 5 mg O2 L-1, atendendo aos parmetros da legislao ambiental. No h alteraes da varivel tempo de incubao de cinco dias, do volume de seed e mantm-se fixa a varivel volume de amostra, indecentemente do resultado da DQO da amostra.

Materiais e Mtodos
Materiais e reagentes O oxmetro de bancada utilizado foi da marca Orion, e a incubadora foi da Marca Marconi modelo MA415/S. Todos os reagentes utilizados foram de grau analtico (PA) e a gua foi deionizada. Para a soluo semente foi utilizada o BODseed da Bio-Systems International. Coleta e estocagem das amostras As amostras foram coletadas em frascos plsticos limpos e analisadas o mais rpido possvel. Os frascos de coleta foram preenchidos submersos, fechados, transportados e armazenados sob resfriamento. No momento da coleta, mediu-se o oxignio dissolvido (OD) inicial das amostras com o oxmetro de campo. Esta medida torna-se necessria porque a metodologia proposta depende da concentrao de OD inicial das amostras. Procedimento
Aferio da soluo padro de Na2S2O3 0,025 mol L-1

A aferio do padro secundrio Na2S2O3 0,025 mol L-1 foi feita iodometria, utilizando-se como padro primrio K2Cr2O7 0,0042 mol L-1 (7).
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Preparao e condicionamento da gua de diluio

Dez (10) litros de gua deionizada em um barrilete plstico foram aerados de forma intensa, mecanicamente, atravs de bomba de ar comprimido, provido de filtro de ar, por um perodo de trs horas. Em seguida, deixou-se repousar por 1 hora a 20oC (dentro da Incubadora).
Preparao da soluo contendo os nutrientes

Aps o repouso, adicionou-se gua destilada aerada, 10,0 mL das solues de cloreto frrico, cloreto de clcio, sulfato de magnsio e tampo fosfato pH 7,2. Para a homogenizao da soluo, agitou-se levemente, evitando-se a formao de bolhas de ar. Esta soluo foi utilizada para preparar a amostra em branco da determinao de DBO5.
Preparao da soluo SEED

Para a preparao do seed (soluo que contm os microorganismos aerbicos), separou-se 1 L da gua aerada e adicionou-se o contedo de uma cpsula do BODseed. Agitou-se a soluo durante uma hora (no ocorreu a dissoluo total do contedo da cpsula, como indicado na instruo de sua preparao, o que no acarretou problemas ao mtodo).
Procedimento para incubar o branco

L-1 O2, respectivamente. As diluies desses padres foram feitas com a gua aerada contendo os nutrientes. Utilizando-se sifo, transferiu-se um dos padres preparados at a metade de um frasco de DBO. Em seguida, adicionou-se 2,0 mL da soluo de seed ao mesmo frasco de DBO, lentamente. Completou-se ao volume com a mesma soluo padro. Repetiu-se este procedimento por mais duas vezes, em outros dois frascos de DBO. Dois destes frascos foram colocados na incubadora, denominando-os de solues padro (P2 e P3), e reservou-se o terceiro frasco (P1) para a quantificao imediata da concentrao de OD. Nesta etapa do procedimento, foram anotados com rigor os volumes dos frascos (P2 e P3). Repetiu-se o mesmo procedimento com os outros dois padres preparados.
Preparao das amostras de gua de rios

Com o auxlio de um sifo de vidro, transferiu-se cautelosamente a soluo contendo os nutrientes para trs frascos de DBO, de tal modo que minimize a formao de bolhas de ar. Certificando-se que os frascos no continham bolhas de ar, colocaram-se dois destes frascos na incubadora de DBO, onde permaneceram por cinco dias a 20oC (foram denominadas de solues branco b2 e b3); reservou-se o terceiro frasco (b1) para a quantificao imediata da concentrao de OD. Durante a permanncia dos frascos de DBO na incubadora, manteve-os submersos em gua, impedindo-se a absoro de bolhas de ar.
Procedimento para incubar o seed

Para a determinao de DBO5 em amostras reais foram selecionados trs rios de Lorena SP, que desguam no Rio Paraba: Taboo e Mandi (que passam dentro da cidade), e o Limeira. Procedeu-se como antes para as amostras destes rios, em triplicata. Conforme a concentrao de OD contida nessas amostras, tm-se dois casos distintos: OD acima de 5 mg L-1 e OD abaixo de 5 mg L-1. Nestas trs amostras, somente o Rio Limeira apresentou a concentrao de OD acima de 5 mg L-1, possivelmente por no receber despejos no seu percurso.
Procedimento para amostras com concentraes de OD acima de 5 mg L-1

Utilizando-se o sifo de vidro transferiu-se a soluo dos nutrientes at a metade de um frasco de DBO. Adicionou-se 2,0 mL de soluo seed, lentamente, para no formar bolhas de ar. Em seguida, completou-se ao volume com a mesma soluo nutrientes. Repetiu-se este procedimento por mais duas vezes, em outros dois frascos de DBO. Como antes, foram colocados dois destes frascos na incubadora, denominando-os de solues seed (s2 e s3), e reservou-se o terceiro (s1), para a quantificao imediata da concentrao de OD.
Preparao dos padres a serem incubados

Adicionou-se 1,0 mL das solues de cloreto frrico, cloreto de clcio, sulfato de magnsio e tampo pH 7,2, por litro de amostra. Utilizando-se o sifo, transferiu-se a amostra preparada at a metade de um frasco de DBO. Em seguida, adicionou-se 2,0 mL da soluo de seed ao mesmo frasco de DBO, lentamente. Completou-se ao volume com a mesma amostra preparada. Repetiu-se este procedimento por mais duas vezes, em outros dois frascos de DBO. Colocaram-se dois destes frascos na incubadora, denominando-os de solues amostras (a2 e a3), e reservou-se o terceiro frasco (a1), para a quantificao imediata da concentrao de OD. Anotou-se, tambm, com rigor os volumes dos frascos que foram incubados (a2 e a3).
Procedimento para amostras com concentraes de OD abaixo de 5mg L-1

Para a validao da metodologia de determinao de DBO5 em amostras com valores menores do que 5 mg L1 O2, utilizou-se como padro uma mistura de glicose com cido glutmico (7). O padro foi preparado por meio de dissoluo em gua destilada de 150,0 mg de glicose e 150,0 mg de cido glutmico, previamente secos. Transferiu-se quantitativamente a soluo resultante para um balo volumtrico de 1,0 L, completando-se o volume com gua deionizada. Esta soluo, assim preparada, apresenta DBO5 terica de 194 mg L-1 O2. Para a adequao da concentrao necessria neste trabalho, diluiu-se 40, 70 e 100 vezes a soluo padro preparada, obtendo-se, teoricamente, valores de 4,85; 2,77 e 1,94 mg
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Aerou-se a amostra por um perodo de 2 h, deixando-a em repouso por 1 h, a 20oC, na incubadora. Amostras assim condicionadas ficaram com concentrao de OD suficiente para a determinao da DBO5, o que permitiu, em seguida, proceder-se conforme a metodologia descrita para o procedimento com OD acima de 5 mg L-1. Determinao de oxignio dissolvido (7) Aps a retirada das solues dos selos dos frascos a1, b1, P1, s1, e os demais padres e amostras incubadas, adiRevista AnalyticaOutubro/Novembro 2006N25

cionou-se 2,0 mL da soluo de MnSO4, convenientemente (sub-superficial). Tamparam-se os frascos, agitando-se para homogenizar (a perda de pequena parte da soluo no influncia o resultado final). Em seguida, adicionou-se, tambm 2,0 mL da soluo alcalina de iodeto e azida aos mesmos frascos (tambm, subsuperficialmente). Novamente, tamparam-se os frascos, eliminando-se as sobras remanescentes nos selos, agitando-se a seguir. Deixaram-se os frascos repousarem at a sedimentao de todo o precipitado formado. Agitou-se por mais uma vez, assegurando-se a completa converso e, aps a sedimentao do precipitado, adicionou-se, cautelosamente, sub-superficialmente, 2,0 mL de H2SO4 concentrado, deixando-se escorrer pela parede interna dos frascos. Tamparam-se rapidamente, impedindo-se que ocorra perda de soluo ao agitarem-se os frascos para a dissoluo total do precipitado. A colorao amarelada da soluo devido formao de iodo (I2) livre foi quantificada pela titulao com soluo padro de Na2S2O3. As reaes de converso do OD em I2 so as seguintes:

Em seguida, adicionou-se 1,0 mL de soluo indicadora de goma de amido a 1,0 % (m/v) e titulou-se com soluo padro de Na2S2O3 0,025mol L-1. O volume da soluo de Na2S203 consumido igual concentrao de OD em cada frasco, conforme demonstrado na seqncia. Pela relao estequiomtrica tem-se:

Portanto, a relao de nmero de mols entre o Na2S2O3 e o O2 ser:

Substituindo-se os valores especficos para cada varivel, conforme a metodologia adotada, tem-se:

Ento, a concentrao de O2 determinada como: Para a determinao da concentrao de OD transferiu-se exatamente 200,0 mL de cada frasco reservado (a1, b1, P1, s1 e dos outros padres e amostras) para erlenmeyers de 500 mL.

Amostra Branco Branco Seed Seed Padro 1 Padro 1 Padro 2 Padro 2 Padro 3 Padro 3

Volume do Frasco (mL) 297,0 302,3 298,8 299,9 299,7 298,3 299,6 302,8 299,0 301,8

ODInicial mg L-1 7,10 7,10 7,00 7,00 7,05 7,00 7,05 7,05 7,05 7,00

ODFinal Mg L-1 7,00 7,10 5,85 5,90 1,05 0,95 3,20 3,15 4,05 4,00

Tabela 1. Resultados de OD obtidos com os padres de glicose e cido glutmico

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Assim, cada 1,0 mL de soluo de Na2S2O3 0,025 mol L-1 consumido na titulao das alquotas das solues corresponde a 1 mg L-1 O2. Clculo do resultado da DBO5 Aps os cinco dias de incubao repetiu-se o mesmo procedimento de determinao de OD para os frascos a2 e a3, b2 e b3, P2 e P3, s2 e s3, e para os demais frascos, com as outras amostras e padres. O primeiro parmetro calculado foi a depleo do branco, dado em funo dos valores de OD obtidos na titulao dos frascos b1, b2 e b3, utilizando-se a seguinte expresso:

O clculo final da DBO5 para os padres dado segundo a expresso:

Onde: P1 = OD inicial do padro Pn = P2 e P3 = OD final do padro X = 2 (corresponde ao volume do seed utilizado em cada frasco) O resultado final da DBO5 (mg L-1 O2) dado pela mdia aritmtica dos valores obtidos na expresso pela substituio do OD final de P2 e P3, segundo a expresso:

Onde: b1 = OD inicial no branco b2 e b3 = OD final no branco Este resultado no deve ser superior a 0,20 mg L-1 de O2, o que implicaria em possvel desvio de exatido a metodologia e impreciso no resultado final5. O segundo parmetro a ser calculado foi a depleo do seed (s1, s2 e s3), dado em funo dos valores de OD obtidos na titulao dos frascos b1, b2 e b3, utilizando-se a seguinte expresso:

Onde: a1 = OD inicial da amostra an = a2 e a3 = OD final da amostra X = 2 (corresponde ao volume do seed utilizado em cada frasco) Y = 1,2 (corresponde aos volumes das solues nutrientes adicionados por litro da amostra). O valor de Y foi estabelecido considerando-se que cada frasco tem volume mdio de 300,0 mL (diferenas no so significativas). O mesmo raciocnio foi aplicado para as demais amostras e padres.

Resultados e Discusso
Onde: s1 = OD inicial do seed s2 e s3 = OD final do seed Este valor no deve superar 1,50 mg L-1 de O2, o que tambm implicaria em possvel desvio da exatido da metodologia (6). Para a validao da metodologia foram feitas medidas em triplicata, com as solues padro preparadas com glicose e cido glutmico, em trs dias diferentes. Os resultados referentes primeira determinao esto mostrados na Tabela 1.

RESULTADO mg L-1 O2 Esperado 1o Dia 2o Dia 3o Dia Mdia Padro 1 4,85 4,94 4,78 4,70 4,810,09

PADRES Padro 2 2,77 2,74 2,65 2,61 2,670,05 Padro 3 1,94 1,81 1,97 1,75 1,840,08

Tabela 2. Resultados de DBO5 (mg L-1 O2) obtidos com os padres de glicose e cido glutmico em trs dias distintos 56 Revista AnalyticaOutubro/Novembro 2006N25

A Tabela 2 mostra os resultados finais de DBO5 dos de glicose e cido glutmico para os trs dias. A reprodutibilidade analtica variou de 1,87 a 4,35%, enquanto que o erro relativo ficou entre 0,82 e 5,15 %. Estes resultados atestam a confiabilidade da metodologia proposta. Em relao s amostras de rios, os resultados de DBO5 obtidos foram de 2,950,06, 1,960,05 e 1,930,04 mg L-1 O2, para n=3. Os resultados de DBO5 para as amostras de gua de rio mostraram boa reprodutibilidade e valores dentro do esperado segundo a legislao.

Referncias
1. MACEDO, JAB. Introduo a Qumica Ambiental. - Qumica e meio ambiente e sociedade,. 2a ed., Editora O Locutor: Belo Horizonte-MG, 2002. 2. MACEDO, JAB. guas e guas. 2a ed., Editora Ortofarma: Belo Horizonte-MG, 2000. 3. BAIRD, C. Qumica Ambiental. 2a ed., Editora Bookman: So Paulo-SP , 2004. 4. CARVALHO, CG. Legislao ambiental brasileira. 2a ed., Editora de Direito: Leme-SP, 1999. 5. BRAILE, PM; CAVALCANTI, JEWA. Manual de tratamento de guas residurias industrias. 2a ed., Hamburg Ltda: So Paulo-SP, 1979. 6. DA SILVA, MOSA. Anlises fsico-qumicas para controle das estaes de tratamento de esgotos. 1a ed., BABES: So Paulo-SP, 1995. 223p. 7. Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater. 20th ed., Washington: American Public Heath Association, 1998 (CD-ROOM). 8. VALENTE, JPS; PADILHA, PM e SILVA, AMM. Oxignio dissolvido (OD), demanda bioqumica de oxignio (DBO) e demanda qumica de oxignio (DQO) como parmetros de poluio no ribeiro Lavaps/Botucatu-SP. Eclet. Quim. 22, 1997. 1-12.

Concluso
Considerando os resultados obtidos para a DBO5 dos nos padres sintticos (glicose e cido glutmico), com boa reprodutibilidade e baixo erro relativo, fica demonstrada a aplicabilidade da metodologia proposta s amostras de guas com DBO5 com valores menores que 5 mg L-1 O2. Da mesma forma, para as amostras de gua de rio analisadas tambm foram obtidos resultados satisfatrios, esperados para um rio classe 1 e 2, conferindo a real qualidade de suas guas.