Artigo de Reviso Programa de Ps Graduao em Educao Fsica UGF

cido ltico: Fato ou Fico? Lactic Acid: Fiction or Fact?

Alexandre Pereira Mathias Carlos Ernesto Santos Ferreira Tacius Tadeu Silva Siqueira Wellington Luiz da Silva Sousa
Endereo para correspondncia: Carlos Ernesto S. Ferreira Laboratrio de Avaliao Fsica e Treinamento LAFIT - UCB Endereo: QS 07 Lote 01 EPCT Bairro guas Claras 71966-700 Taguatinga Braslia, DF Tel: (61) 356 9044

RESUMO
Objetivamos neste artigo, informar atravs de reviso da literatura existente, a diferena entre lactato e o cido ltico e suas reais funes. O exerccio intenso promove um aumento da acidose celular e sangunea. Tal fato, para muitos cientistas ainda est associado com a produo de cido ltico, e parece que, para grande parte dos cientistas escritores e profissionais da rea, lactato a mesma sustncia que o cido ltico. Como podemos observar nesta reviso foi criado um mito em funo do acmulo de cido ltico, que por sua vez tambm chamado lactato, durante o exerccio. Inicialmente parecia que o cido ltico produzido era liberado na corrente sangunea, onde era tamponado pelo sistema do bicarbonato. Posteriormente acreditou-se que liberava um prton e retornava a lactato sendo tamponado pelo sistema do bicarbonato. Novas pesquisas tm demonstrado que de fato no h nenhuma produo de cido ltico e que o produto final da via anaerbia o lactato, que no um cido e no produz acidose, alm de atuar como um tampo aumentando tambm o potencial redox da gliclise. Conclumos que o cido ltico atualmente permanece como um mito devido s condies histricas que foram impostas.

Palavras Chaves: cido Ltico, Lactato, NADH, H+ e Acidose.

Lactic Acid: Fiction or Fact?

ABSTRACT
The purpose of this article is to highlight through revision of existing literature the difference between lactate and lactic acid and their real functions. Intense exercise promotes an increase in cellular and blood acidosis. Such fact, for many scient ists is still associated with lactic acid production, and it seems that for a great deal of researches writers and professionals of exercise, lactate and lactic acid are the same. As we can observe in this review, a myth was created around lactic acid accumulation. In the beginning it seems that it was though that lactic acid was produced and released in to the blood stream were it would be buffered by the bicarbonate system. Later it was believed to release a proton and turn into lactate with subsequent buffering by the bicarbonate system. New researches have found that in fact there is no production of lactic acid and the end product of the anaerobic intermediary pathway is lactate which is not an acid nor produces acidosis and in addition works as a buffer and increases the glycolitic redox potential. We conclude that nowadays lactic acid survives as a myth because of the historical conditions and which it was found.

Key words: Lactic acid, Lactate, NADH, H+, and Acidosis.

Introduo
Por vrios anos, atravs de pesquisas fundamentadas realizadas por estudiosos de alto reconhecimento na rea da Fisiologia, entendeu-se que o cido ltico teria a mesma denominao que lactato, e que, por sua vez, seria o responsvel direto (vilo) pela acidose ocorrida nos msculos quando expostos a atividades de grande intensidade. Desde a descoberta do cido ltico em 1780, um cido carboxlico, quando o mesmo foi isolado do soro do leite azedo, da o nome ltico do latim lac = leite, o associaram com a fadiga muscular. Tal associao foi feita em virtude de sua presena estar supostamente aumentada durante a realizao de exerccios de alta intensidade ou exerccios anaerbios, ou seja, em condio de hipxia ou isquemia. Portanto, este estudo pretende fazer uma reviso na literatura existente em Fisiologia do Exerccio, com o objetivo de informar a diferena entre cido ltico e lactato e possvel associao com a acidose e fadiga durante exerccios de alta intensidade, bem como ser instrumento de auxlio s demais pessoas que possuem interesse em pesquisas sobre o metabolismo.

Reviso da Literatura

Em 1891, Araki (apud Karlsson, 1971) demonstrou elevados nveis de cido ltico no sangue e urina de uma variedade de animais submetidos a hipxia. Acreditava-se que, quando o oxignio estava ausente na gliclise, havia produo de acido lctico denominado como "Efeito Pasteur" (Brooks, 1991), nome dado por ter sido descoberto atravs de antigos estudos de um dos precursores da bioqumica, Lus Pasteur, porm, como iremos abordar mais adiante, esta afirmao carece de qualquer tipo de comprovao. Muitos estudiosos, desde 1807, quando Berzelius comeou a estudar a contrao muscular e observou a presena de cido ltico, relatam em suas pesquisas que o mesmo estaria presente na gliclise como uma substncia oriunda do cido pirvico (MCARDLE 1997, POWERS 2001), mas tal fato tambm no procede e, alm disso, utilizam indiscriminadamente os termos lactato e cido ltico como sendo a mesma substncia. Possivelmente, os principais responsveis pela sedimentao do mito da produo de cido ltico em funo do metabolismo anaerbio foram Archibald V. Hill e Otto F. Meyerhoff. Em 1922, foi concedido a esta dupla o prmio Nobel de Fisiologia ou Medicina, pelos estudos referentes descoberta da produo de calor no msculo entregue a Hill e pela descoberta do consumo de oxignio e a produo de cido ltico no msculo concedido a Meyerhoff, porm no existiam evidncias de que a forma cida do lactato, conhecida como cido ltico, era produzida, ou que os prtons liberados pelo cido ltico causariam a acidose (Robergs, 2001), isto porque, poca, no se tinha conhecimento sobre como ocorria a interao qumica cidobase. O processo de formao do cido ltico foi chamado de fermentao ltica e, at hoje, os livros de bioqumica se referem a esse processo desta forma, bem como fermentao anaerbia, associaram, ento, a provvel acidose muscular com a formao do cido ltico. Porm, para Voet, ocorre um processo chamado de fermentao homoltica. Estudos mais recentes demonstram que a produo e o acmulo de lactato muscular e sanguneo em exerccios submximos so atribudos a um desequilbrio entre a quantidade de O2 consumido e a quantidade exigida pela demanda energtica nos msculos atuantes durante o

exerccio, ou seja, nos msculos em hipxia ou isquemia controverso (BROOKS 1991, GLADDEN 2001, KATZ 1988). A demanda energtica quem determina a necessidade de energia para a realizao da contrao muscular. Em exerccios de alta intensidade, a necessidade de energia aumenta, incrementando assim a velocidade da gliclise, logo, formada grande quantidade de piruvato como produto final. Dependendo da capacidade mitocondrial de sustentar a demanda exigida, o piruvato segue para a mitocndria, onde oxidada a Acetil-CoA, sendo ento degradado no Ciclo do cido Tricarboxlico (TCA). A outra alternativa de destino do piruvato a formao de lactato, caso a demanda seja maior que a oferta energtica pela via da fosforilao oxidativa, uma vez que o acmulo de NADH+ diminui a velocidade da gliclise. Durante o exerccio, o lactato o combustvel predominante para o corao (BROOKS, 2001). Acreditava-se que o acido ltico era o culpado pela interrupo do exerccio (BROOKS 1991), mas o que veremos a seguir que o mesmo no tem culpa por no ser produzido em grandes quantidades. Porm, quando se trata de detalhar o processo glicoltico com nfase na via anaerbia, o produto final o lactato e no o cido ltico. Isso passou a gerar certa confuso entre o lactato e o cido ltico, sendo que muitos acreditam que as duas substncias sejam a mesma coisa (BROOKS, 2000), mesmo sabendo que lactato e piruvato so sais dos cidos, mas lactato e cido ltico so substncias parecidas, porm diferentes (VOET 1999, ROBERGS 2001). Primeiramente, devemos diferenciar o cido ltico do lactato. Segundo Brnsted (apud MARZZOCO 1990), cidos so substncias capazes de doar prtons, e bases so substncias capazes de receb-los. Conforme a classificao bioqumica, para que se forme um cido, a substncia deve necessariamente conter na sua estrutura COO + OH, o que no observado na molcula do lactato, porm podemos observar a veracidade da regra na estrutura do cido ltico (Figura 1).

Figura 1: Principal diferena entre o cido ltico e o lactato, observa-se a falta do H+ no Lactato (adaptado de Robergs, 2001).

O cido perde prtons ficando com a carga negativa, ligando-se a um on carga positiva (Na ou K), sal do cido. Adiciona-se ento o sufixo ato (ROBERGS, 2001), ou seja, inicialmente temos o cido ltico, que logo se associa ao on formando o lactato. Partindo do princpio que existe diferena estrutural entre cido ltico e lactato, conforme explcito na figura acima, devemos ento, para uma maior compreenso, abordar outra diferena que vai alm da estrutural. Para tanto, devemos relembrar os trabalhos Henderson e Hasselbach, onde referida diferena seria ento o que chamamos de pK: O trabalho de Henderson e Hasselbach quantifica a inter-relao do pH, pK e concentrao do tampo. O pK, segundo Lehninger, a constante de dissociao (K), ou seja, o valor do pH (pH a sigla para potencial hidrogeninico, o log negativo de base 10 da concentrao molar de ons hidrognio H+ sendo definida por - log [H+ ]), no qual as molculas do cido, bem como as molculas de sua base, esto em constante equilbrio, sendo 50% para o cido e 50% para a base. nesse ponto que ocorrem as maiores concentraes possveis de um cido e sua base conjugada (MARZZOCO 1990).

O pH o logaritmo negativo da concentrao de ons hidrognio, isto :

se pH = -log [H +] ento [H +] = antilog (-pH) = 10 - 7,4 M

Portanto, a concentrao de ons hidrognio de uma soluo no pH fisiolgico (7,4) 10 7,4

, que igual a 3,98 x 10 - 8 M. Podemos arredondar para 4 x 10 - 8 M.

Para se determinar a

quantidade de cido e a quantidade de base de uma substncia, necessrio resolver a frmula a seguir, descrita como concentraes dos reagentes sendo divididas pelas concentraes dos produtos, definida atravs da frmula:

K=[H3 0+]/[A-]/ [AH]/[H2 O] Sendo: A -= Base AH = cido

O cido ltico possui um pK de 3,86 (LEHNINGER 1995). Um cido reage com uma base, formando um sal mais forte e um cido mais fraco. O
+ fosfato de creatina e a hemoglobina tiram o H de circulao, deixando-o eletricamente neutro

(COSTILL 2001), no alterando o pH. S o bicarbonato realmente altera o pH. O fosfato de creatina e a hemoglobina s inativam o prton H+. Existem divergncias tambm quanto ao tipo de cido. Segundo Lehninger, o cido ltico seria classificado como um cido fraco, j Brooks, o classifica como um cido forte. Pelo simples fato de ser um cido, este capaz de liberar ons hidrognio prtons H+ e, quando produzido no organismo, logo se oxida. Isso propicia interpretaes equivocadas, dando ao lactato o sentido de vilo na histria, pois seria o produto da dissociao do cido ltico em lactato com liberao de um on H+ no citossol, porm o que ocorre a reduo do piruvato em lactato e no do cido pirvico em cido ltico.

Lactato desidrogenase

PIRUVATO + NADH + H

LACTATO + NAD +

Na reduo do piruvato com formao de lactato pela reao da LDH, so captados dois ons H+, um oriundo do NADH+ resultando na oxidao do NAD+, e outro, um Hidrognio livre do citoplasma, oriundo de uma das trs reaes de oxidao que liberam ons H+ na gliclise. Atravs da equao de Henderson-Hasselbalch, permitido calcular prontamente a relao entre as concentraes das molculas doadoras e aceptoras de prtons em qualquer pH, para um cido de pK conhecido (MARZZOCO 1990).

PH= pK + log [-A-]/ [AH]

No exemplo do cido lctico, comparado com lactato, utilizando a equao de HendersonHasselbalch, estimando o valor de pH sanguneo no corpo humano mais baixo encontrado, sendo em torno de 7,0 (Sete), encontraramos os seguintes valores:

7=3,86 + log [-A-]/ [AH] 3,14= log [-A-]/ [AH] 103,14 = 1.380

Observando o resultado obtido atravs da equao de Henderson-Hasselbalch, encontramos a proporo entre cido ltico e lactato no pH de 7,0. Para cada molcula de cido ltico produzida, temos 1380 molculas de lactato. Num pH como o do corpo humano, mesmo que o cido ltico fosse produzido, o que no verdade, seria quase que instantaneamente dissociado em lactato. Assim sendo, o cido ltico no o responsvel pela fadiga (BROOKS, 2000) nem pela acidose, tampouco o lactato, o que ento observamos pura fico. Ento quem seria o responsvel pela acidose? 8

Para que possamos entender melhor, vejamos a gliclise.

Glicose ATP ADP Glicognio Fosfoglucomutase Hexokinase Glicose-6-fosfato

H+

Fosfoglicose Isomerase Frutose -6-fosfato Fosfofrutokinase - PFK Frutose -1,6-bisfosfato Aldolase

ATP ADP

H+

Dihidroxiacetonafosfato Fosfotriose Isomerase NAD

+

Gliceraldedo-3-fosfato Gliceraldedo 3 -P 1,3-Bisfosfoglicerato

desidrogenase

NADH + H X2

ADP ATP X2

Fosfogliceratokinase 3-fosfoglicerato Fosfoglicerato Mutase 2-fosfoglicerato Enolase

ADP ATP X2

Fosfoenol piruvato Piruvato kinase Piruvato

(Figura 2) Gliclise durante as 02 fases. Observe a liberao de prtons. 9

Observe que, em momento algum, ocorre a presena do cido ltico, mas sim do lactato. Segundo Brooks, a quantidade de lactato em repouso dez ou mais vezes maior que a quantidade de piruvato. facilmente notvel que, durante a fase dois (2) da gliclise, na primeira reao (gliceraldedo 3 fosfato + Pi + NAD+) para a formao de 1,3 bisfosfoglicerato, h uma liberao de H+ para manter-se em equilbrio com o meio, em funo do pK ser de 2,4. As molculas se apresentam desde ento desprovidas de prtons, chamadas de sal do cido, e no na forma cida como cido fosfoglicrico por dissociao do H+. Conseqentemente, todos os outros cidos carboxlicos subseqentes da gliclise aparecem na forma de sal do cido, que, por sua vez, no so cidos e sim as bases conjugadas desses. Portanto, o produto final da gliclise o piruvato, sal do cido ou base conjugada, e no o cido pirvico, assim como a sua reduo pelas isoenzimas lactato desidrogenase (LDH) levam formao do lactato e no do cido ltico. Por conseguinte, impossvel a liberao de prtons pelo lactato, pois no existem prtons para serem liberados. O pH do meio impede a associao de prtons ao piruvato com a finalidade de formar cido pirvico, o precursor do cido ltico. Assim sendo, a formao de cido ltico ocorreria contra o gradiente provocado pelo pH em funo do pK desses cidos, o que impossvel de acontecer, pois, em um pH mais bsico do que o pK, o gradiente segue o sentido da perda de prtons e no de associao. Para que haja continuidade na gliclise, h necessidade da oxidao da NADH+ a NAD, para que o potencial redox da gliclise no se altere e para que o fluxo glicoltico seja mantido. O piruvato, aps ser reduzido a lactato, transportado para a corrente sangunea atravs dos transportadores monocarboxilato (MCT), que por sua vez transportam concomitantemente um on H+, inibindo a acidose no msculo, que durante o exerccio pode chegar a valores entre 6,0 a 6,4 (MADDEN et al. 1991, ROBERGS 2003). Contudo, a acidose transferida para o sangue ou outros tecidos, onde poder ser tamponada ou metabolizada (MAUGHAN, 2000). Se observarmos bem a gliclise, perceberemos que a mesma produz 02 prtons na fase 01 de sua via, durante a fosforilao da glicose propria mente dita, resultando em glicose 6 fosfato, assim como na reao da fosfofrutoquinase, que transforma frutose 6 fosfato em frutose 1,6 bisfosfato. Durante a fase 02 da gliclise, mais 01 prton produzido para cada reao de gliceraldedo 3 fosfato em 1,3 bisfosfoglicerato pela gliceraldedo 3-fosfato desidrogenase, todavia sabido que, durante a fase 02, a gliclise ocorre em duas vias idnticas, ou seja, se 10

produzido um prton na fase 02, deve-se multiplic- lo por 2, resultando assim em 02 prtons na fase 01, e 02 prtons na fase 02. At ento, observamos somente a liberao dos prtons que seriam os responsveis por acidificar o meio, mas devemos nos ater para o entendimento de toda a via da gliclise. Durante a fase 01 da gliclise, observa-se na figura 2 somente a liberao de prtons, sem um tamponamento dos mesmos. J na fase 02, destacamos tambm a formao de 02 prtons, entretanto, quando observamos a atuao da enzima Piruvato quinase, responsvel pela reao do fosfoenolpiruvato em piruvato e a adio de mais um grupo fosfato no ADP, transformando-o em ATP, percebemos que nesta reao consumido um prton, mas, como foi dito anteriormente que nesta fase ocorre uma duplicidade, conseqentemente so retirados 02 prtons do meio. Resumindo, so liberados no meio 04 prtons responsveis pela acidose, no entanto, na reao da Piruvato quinase, 02 prtons so consumidos. Temos ento, para cada molcula de glicose, a formao de 02 molculas de piruvato, lembrando que, durante a gliclise, restam ainda 02 prtons acidificando o meio, que esto sendo carreados por duas NADH+ reduzidas (NADH+H+ ). Para que a gliclise no pare, necessrio que NADH+H+ seja novamente oxidada e retorne a via glicoltica para dar prosseguimento gliclise, seno a mesma pra e ento necessrio diminuir a intensidade do exerccio. Para que possamos entender toda a gliclise e no mais caiamos no erro de referenciar a culpa da acidose a quem no devido, explicaremos agora a formao do lactato. O lactato formado a partir da molcula de Piruvato associado ao on H+ carreado pela NADH+H+, ou seja, a formao do lactato faz com que a acidose seja adiada, atuando ento como forma de tamponador. A acidose que encontrada durante o exerccio no pode estar relacionada ao cido ltico e tampouco ao lactato, porm podemos observar que, quando uma molcula de ATP convertida a ADP + Pi, o grupo fosfato oriundo do ATP, para se formar em fosfato inorgnico, se associa ao grupo hidroxil proveniente da molcula de H2 O, ocorrendo ento a liberao de um on H+, que por sua vez acidifica o meio. Assim como o cido ltico, o cido pirvico formado em quantidades reduzidas. O pK do cido pirvico de 2,5, mas, caso fosse formado a ponto de acidificar o meio, deveramos ento responsabiliz-lo pela acidose e no o cido ltico. Calculando a relao das concentraes de cido pirvico e piruvato, encontramos: 11

7=2,5 + log [-A-]/ [AH] 4,5= log [-A-]/ [AH] 104,5 = 31.623

Isto , para cada molcula de cido pirvico com o valor do pH sanguneo de 7,0, necessariamente encontraramos 31.623 molculas de piruvato. Pensando como pesquisadores e difusores do conhecimento da cincia e no atravs do bom senso que nos foi imposto, desde 1922, pelos estudos de Hill e Meyerhoff, culpando o cido ltico pela acidose e possvel fadiga a ponto de interrupo do exerccio, atualmente no podemos mais nos curvar a tais definies sem termos provas concretas referente questo mencionada.

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Concluso

Conclumos ento, atravs desta reviso, que o cido ltico se diferencia do lactato na sua estrutura, bem como pelos valores apresentados acima. No podemos atribuir ao cido ltico a culpa pela acidose durante o exerccio intenso, pois o mesmo no produzido a ponto de conseguir caus- la, assim como o lactato no pode s- lo simplesmente pelo fato de no ser um sal e sua atuao na gliclise serve como um tampo para dar continuidade nesta via. Portanto, o fato de culpar o cido ltico pela acidose pura fico, oriunda de estudos remotos, nos quais a bioqumica andava pouco enriquecida nos seus conhecimentos, em comparao aos dias atuais.

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