MICROSCPIO PTICO

Introduo
O olho humano tem poder de resoluo de aproximadamente 0,1 mm ou 100 m. Isto significa que se voc olhar dois pontos separados por uma distncia menor que 100 m, esses pontos aparecero como um ponto nico. Para distinguir estruturas separadas uma das outras por menos de 100 m, h necessidade de instrumentos pticos que tenham poder de resoluo aumentada. importante salientar a diferena entre poder de resoluo e poder de aumento. Se voc ampliar vrias vezes uma mesma fotografia comum, a imagem aumenta, mas os pontos separados por menos de 100 m continuaro a aparecer como um ponto s,borrado. possvel, portanto, aumentar a ampliao, sem contudo melhorar a resoluo.Os microscpios permitiram ao homem observar estruturas com ampliao maior e maior resoluo. O limite de resoluo dos microscpios pticos, que so aqueles que utilizam a luz para iluminar o objeto que est sendo analisado, de cerca de 0,2 m (ou 200 nm ou 2 000 A ); melhor que o olho humano cerca de 500 vezes. No se consegue construir microscpios pticos com desempenho melhor que este, pois o fator limitante o comprimento de onda da luz.

O APARECIMENTO DO MICROSCPIO

No final do sculo XVI, depois de quatro sculos a aperfeioar e dar novas utilizaes s lentes, foi criada a lupa por Galileu e, usando-a, efetuou as primeiras observaes de objetos e seres. Com ele os cientistas da poca foram capazes de encontrar nos seres que j conheciam novos pormenores e caractersticas. No sculo XVI, a construo de aperfeioamento do microscpio, particularmente do sistema de lentes, expandiu-se. Antonie Van Leeuwenhoek e Zacharias Jansen, fabricantes de culos, desenvolveram os primeiros microscpios simples e compostos, respectivamente. Estes aparelhos utilizavam a luz refletida pelo objeto fortemente iluminado. Vrios modelos foram a seguir construdos, entre os quais alguns de valor histrico, como por

exemplo, o de Robert Hooke. Mas teria de decorrer quase um sculo at que o microscpio ptico composto, sucessivamente aperfeioado, fosse capaz de permitir imagens de grande qualidade.

Fig.7.1 Modelos Histricos

CONSTITUIO DO Microscpio ptico Composto

Atualmente, o microscpio ptico composto (M.O.C.) constitudo por duas partes uma parte mecnica e uma parte ptica. Cada parte engloba uma srie de componentes constituintes do microscpio (fig.7. 2). A parte mecnica serve para dar estabilidade e suportar a parte ptica. Esta parte constituda por: P ou Base suporta o microscpio, assegurando a sua estabilidade. Brao ou Coluna pea fixa base, na qual esto aplicadas todas as outras partes constituintes do microscpio. Tubo ou Canho cilindro que suporta os sistemas de lentes, localizando-se na extremidade superior a ocular e na inferior o revlver com objetivas. Platina pea circular, quadrada ou retangular, paralela base, onde se coloca a preparao a observar, possuindo no centro um orifcio circular ou alongado que possibilita a passagem dos raios luminosos concentrados pelo condensador. Parafuso Macromtrico engrenagem que suporta o tubo e permite a sua deslocao a da platina. indispensvel para fazer a focagem.

Parafuso Micromtrico imprime ao tubo ou platina movimentos de amplitude muito reduzida, completando a focagem. Permite explorara a profundidade de campo do microscpio. Revlver disco adaptado zona inferior do tubo, que suporta duas a quatro objetivas de diferentes ampliaes: por rotao possvel trocar rpida e comodamente de objetiva.

Fig.7.3 - Esquema de um M.O.C

A parte ptica constituda por: Sistema de Oculares e Sistema de Objetivas o conjunto de lentes que permitem a ampliao do objeto. A ampliao dada ao microscpio igual ao produto da ampliao da objetiva pela ampliao da ocular. Fonte Luminosa existem vrios tipos de fontes luminosas (fig.7.3), podendo ser uma lmpada (iluminao artificial), ou um espelho que reflita a luz solar (iluminao natural). Condensador distribui regularmente, no campo visual do microscpio, a luz refletida pelo espelho. Diafragma regula a intensidade luminosa no campo visual do microscpio.

Fig.7.4 Parte tica de um microscpio composto.

CARACTERSTICAS DA IMAGEM DO M.O.C.

O objeto a ser observado deve ser colocado muito perto do foco objeto do sistema da objetiva, para que se forme uma imagem real, invertida, de maiores dimenses, que vai servir de objeto em relao ocular. Esta, d uma imagem virtual, invertida (nos dois sentidos) em relao ao objeto a ser observado. Sistemas de Lentes Temos cinco tipos de oculares: Huygens Hi-Point WideField Hyperplane Compensating Ultraplane Fig.7.5 Formao de Imagem

Resoluo
Segundo Raleigh dois objetos podem ser distinguidos quando o mximo central de um coincide com o primeiro minimo do outro. A intensidade entre dois picos descreve de 80% do pico inicial, . A fig-7.6 mostra este critrio para o microscpio.

Fig.7.6 A resoluo limite de um microscpio tico

A resoluo a mnima distncia entre pontos ou partes de um objeto. A equao 1 define o limite de resoluo de um microscpio ptico segundo o critrio de Raleigh:

A abertura numrica que aparece na equao acima expressa o poder de resoluo das lentes e o brilho da imagem formada, quanto maior a abertura numrica melhor a qualidade da resoluo. Em compensao h um comprimento da profundidade de foco definida pela equao 2:

As lentes objetivas, so responsveis pela ampliao da amostra. Para uma alta ampliao e uma alta resoluo necessita-se de lentes objetivas com uma grande abertura numrica (NA). Esse parmetro determina o poder separador do microscpio e dado pela equao 3:
Onde: NA := n.sen()

n o indice de refrao do meio em que est imersa a lente frontal da objetiva. o ngulo do cone de luz que penetra na objetiva.

Poder Separador
J o poder separador do microscpio a medida da capacidade de um instrumento ptico discriminar objetos pontuais muito prximos. Esta capacidade depende das figuras de difrao, desde que as aberraes tenham sido corrigidas na equao 4.

Limite do M.O.C.
''... No inicio do sculo XIX estava definido o limite de resoluo do microscpio ptico. Segundo o fsico alemo Ernst Abbe (1840-1905), esse limite dependia principalmente do comprimento de onda () da luz com que se observa o objeto. O MO no pode ver pontos do objeto mais prximos do que 0,2 micrometros (1 m = 10-3 mm), ou seja, seu aumento mximo est em torno de mil vezes. (No muito mais do que Leeuwenhoek conseguia! ) [ ] O conhecimento dos fenmenos ondulatrios permite-nos saber que a imagem de um ponto luminoso obtida atravs de uma lente formada por um circulo central luminoso cercado de anis claros, com intensidades decrescentes (difrao). Quando buscamos aumentos baixos, no observamos essa figura, mas ela que determina o limite de aumento para cada dimetro da limite e para cada cor da luz de iluminao. Quanto maior mais critica a situao. Dai concluirmos que j atingimos o aumento mximo permitido pelo MO, pois as aberraes (distores) das lentes j foram suficientemente bem corrigidas, mas o nosso olho infelizmente no v a luz com menor que o violeta. ento que entramos com um novo universo que o ME pde proporcionar.

Referncias

http://www.colegiosaofrancisco.com.br/alfa/microscopio/aparecimento-domicroscopio.php Regis Eugenio dos Santos. http://www.dsif.fee.unicamp.br/~furio/IE607A/MO.pdf Rudolf Kingslake (Ed.). Applied Optics and Optical Engeneering, Vol. IV, Parte I, Pg. 31-93, 1967.

Pieter Burggraaf, Guidelines for Optical Microscopy, Semiconductor International, Vol.8, No 2, pg 52, 1988