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Ressonncia Magntica
PRINCPIOS FSICOS DAS IMAGENS DE RESSONNCIA MAGNTICA NUCLEAR As imagens de Ressonncia Magntica Nuclear (RMN) tornaram-se, na ltima dcada, na mais rigorosa, sofisticada e promissora tcnica de diagnstico clnico. Esta constatao deve-se, fundamentalmente, excelente resoluo e contraste que estas imagens exibem e s recentes possibilidades de obteno de imagens funcionais e espectroscpicas. Em seguida, ir-se-o abordar os princpios fsicos que subjazem a este mtodo, enfatizando os parmetros dos quais depende a imagem, as suas aplicaes clnicas e algumas notas sobre a realizao de imagens funcionais. 1. Princpios fsicos Os princpios fsicos que permitem a formao de imagens de RMN so importados da Fsica Nuclear, nomeadamente, das teorias qunticas que explicam o comportamento dos spins nucleares. No entanto, a abordagem clssica deste tema , a este nvel, suficiente para compreender o mecanismo de obteno das imagens. De modo que ser esta a abordagem aqui explanada. Magnetizao dos tecidos na presena de um campo magntico - De um modo anlogo ao efeito de Zeeman nos electres1, tambm os ncleos com spin diferente de zero s adquirem valores distintos de energia, se estiverem na presena de um campo magntico. Classicamente, aceita-se que um spin pode ser compreendido como um momento magntico que processa em torno de um eixo (ver figura 1.1).
Fig. 1.1 Aproximao de um spin a um man (momento magntico que gira em torno de um eixo). (adapt. R.B. Lufkin, 1990) Concentremo-nos ncleos com spin 1/2. Quando estes no esto sujeitos a qualquer campo magntico, o eixo ao redor do qual o spin processa completamente aleatrio, de modo que a magnetizao total nula (ver figura 1.2). Fig. 1.2 Spins na ausncia de campo magntico externo (adapt. R.B. Lufkin, 1990).
Os dois eltrons que podem povoar uma orbital atmica possuem a mesma energia quer estejam no estado de spin +1/2, quer estejam no estado de spin 1/2. A sua energia s diferenciada quando se sujeita o tomo a um campo magntico exterior.
No entanto, quando um campo magntico aplicado, os spins passam a rodar em torno do eixo do campo paralela (estado de energia mais baixa spin +1/2) ou antiparalelamente (estado de energia mais alta spin 1/2) (ver figura 1.3).
Fig. 1.3 Spins num meio onde se estabeleceu um campo magntico B0. M0 tem o significado de magnetizao total do meio (adapt. R.B. Lufkin, 1990). Devido diferena de energias dos dois estados, a populao no estado de energia mais baixa mais povoado do que o estado de energia mais alta. Por este motivo, a magnetizao total deixa de ser nula e passa a ter a direo do campo z,(ver figura 1.4), pois os spins, embora faam com o eixo do campo magntico externo um determinado ngulo, no esto em fase, encontrando-se aleatoriamente distribudos sobre um cone, pelo que a sua componente xy se anula, sobrevivendo, apenas, a componente segundo z.
Fig. 1.4 Representao de spins a processarem em torno de um campo magntico externo (Bo) e magnetizao total do meio (Mo) (adapt. R.B. Lufkin, 1990). Tendo em conta o que foi dito, uma das exigncias para a utilizao desta tcnica que os ncleos em estudo apresentem spin diferente de zero e, de preferncia, com spin 1/2, visto que so os mais simples de interpretar. Na verdade, em imagens mdicas, os ncleos utilizados so os de hidrognio (protes), uma vez que cumprem estas condies e so muito abundantes, o que permite obter um sinal de grande amplitude. Aplicao de um campo de radiofreqncia: noo de ressonncia Mantendo presente o modelo clssico, possvel definir a frequncia qual os ncleos giram (tambm chamada freqncia de Larmor) como sendo proporcional a um parmetro caracterstico do ncleo (constante giromagntica - ) e amplitude do campo magntico externo aplicado aos ncleos (Bo):
f = Bo
(1.1)
Tendo em conta a ordem de grandeza da constante giromagntica dos ncleos e as amplitudes dos campos aplicados (cerca de 1T) a freqncia de Larmor corresponde gama das radiofreqncias. Deste modo, como facilmente se prev se sujeitarmos os ncleos a um campo de radiofreqncias
Nestas condies, a magnetizao total muda de direo, passando a exibir componente xy. A amplitude e a durao dos impulsos de radiofreqncia a que os spins so sujeitos, determinam os seus efeitos. So de referir os chamados impulsos de 90, que so responsveis por a magnetizao passar da direo z para o plano xy (ver figura 1.5).
Fig. 1.5 Conseqncias da aplicao de um campo de radiofreqncia na magnetizao total. Exemplo de um impulso de 90 (adapt. R.B. Lufkin, 1990). O sinal medido, nesta tcnica, no mais do que a magnetizao transversal (xy), qual se acede atravs de uma bobina colocada segundo um dos eixos (x ou y) (ver figura 1.6).
Fig. 1.6 O sinal medido corresponde componente transversal da magnetizao (adapt. R.B. Lufkin, 1990).
Com base no que at aqui foi exposto, facilmente se compreende que o sinal medido seja proporcional densidade protnica do meio ( de relembrar que os ncleos utilizados so os de hidrognio). Concentrando-nos no instante em que o impulso de radiofreqncia aplicado, o sinal medido ser tanto maior quanto maior for o nmero de spins presentes no meio em estudo (ver figura 1.7). Assim, este ser, logo partida, um parmetro de diferenciao dos tecidos: o sinal ser mais ou menos intenso, consoante a maior ou menor concentrao de hidrognio (voltar-se- a este assunto mais adiante). A este respeito deve ter-se em conta que os tecidos biolgicos no diferem significativamente quanto concentrao de tomos de hidrognio, pelo que, embora este seja um fator a considerar, no o principal responsvel pelo excelente contraste revelado por esta tcnica.
Fig. 1.7 Dependncia da magnetizao total com o nmero de prtons. Quanto maior for nmero de prtons, maior ser a magnetizao total (adapt. R.B. Lufkin, 1990). Noo de tempo de relaxao spin/spin (T2) e spin/rede (T1) Retome-se a sequncia de acontecimentos: aps a aplicao de um campo magntico esttico, responsvel pelo aparecimento de uma magnetizao segundo a sua direo; aplica-se um campo magntico oscilatrio (na gama das radiofreqncias), que roda a magnetizao de um determinado ngulo (por exemplo, de 90), devido ao fato de alterar (igualado, no caso do impulso de 90) as populaes dos spins de +1/2 e de 1/2 e os pr a rodar em fase. Logo aps o impulso de radiofreqncia ter deixado de atuar, a tendncia natural do sistema regressar ao estado inicial. Ou seja, haver reorganizao do povoamento dos spins e a defasagem dos mesmos. Na realidade estes dois processos so independentes e correspondem a diferentes fenmenos de relaxao. Concentremo-nos no mecanismo de defasagem dos spins. Repare-se que se a frequncia de cada spin fosse exatamente a mesma, estes manter-se-iam em fase. Mas o que se verifica que as frequncias de precesso de cada spin vo ser ligeiramente diferentes. Esta circunstncia deve-se, por um lado, ao fato de o campo magntico esttico imposto no ser perfeitamente uniforme, apresentando heterogeneidades no espao; por outro, o prprio meio onde os spins esto inseridos apresenta campos locais que so gerados pela presena de outros spins. Por este motivo, os spins vo-se defasar, a magnetizao no plano xy vai tornando-se menor, o que corresponde a um decaimento no sinal medido (FID Free Induction Decay) (ver figuras 1.8 e 1.9).
Fig. 1.8 Mecanismo de defasagem dos spins, com conseqente decaimento do sinal (adapt. R.B. Lufkin, 1990).
Fig. 1.9 Esquema do decaimento provocado pela defasagem dos spins (adapt. R.B. Lufkin, 1990).
Fig. 1.10 Mecanismo de recuperao da magnetizao longitudinal, devido reorganizao das populaes de spin entre os estados energticos, com conseqente libertao de energia para o meio (adapt. R.B. Lufkin, 1990). 2. Formao da imagem At aqui, tem-se abordado apenas os princpios fsicos nos quais se baseia esta tcnica de imagem. Porm, necessrio, ainda, compreender de que forma que o sinal medido, que informao contm e de como, a partir dela, a imagem construda. Comece-se por compreender o processo pelo qual ao tempo T2* retirada a contribuio das heterogeneidades do campo magntico esttico. Noo de eco de spin Como j se observou o tempo de relaxao T2* encurtado pela presena de heterogeneidades do campo magntico esttico que so constantes no tempo e cujo efeito se pretende anular. Para tanto considere-se o seguinte: alguns instantes aps a ao do impulso de radiofreqncia os spins encontram-se j com diferentes velocidades angulares, devido s diferenas no valor do campo magntico a que cada um est sujeito (ver equao 1.1). Se, em determinado momento, for aplicado um novo impulso de radiofreqncia, mas, desta vez, de 180 (ou seja, que faa a populao de spins rodar de 180), ento, inverte-se a posio relativa dos spins (os que esto a rodar com maior velocidade, encontram-se agora mais atrasados). Este procedimento implica, ento, que passado algum tempo os spins se reagrupem (fiquem, novamente, em fase) sendo responsveis por novo aumento na magnetizao 4 Transversal eco de spin (ver figura 2.1). Na verdade, esperar-se-ia que a magnetizao transversal fosse completamente recuperada se, durante este processo, as velocidades angulares dos spins fossem sempre constantes, o que no se 5 passa . Como seria de esperar, as interaes entre spins, esto sujeitas a algumas oscilaes pelo que os
Esta situao , muitas vezes, explicada, recorrendo-se imagem de uma prova entre indivduos que correm a velocidades diferentes. Nesta situao, inevitavelmente, ao fim de algum tempo encontrar-se-o escalonados. Se, nesse momento, for dado um sinal para todos os corredores regressarem ao ponto de partida e se mantiverem as mesmas velocidades, ento, chegaro todos ao mesmo tempo. 5 Retomando a analogia anterior, como se a velocidade dos corredores fosse sofrendo algumas oscilaes ao longo do percurso e, portanto, no chegariam ao ponto de partida em simultneo .
Fig. 2.1 Esquema da evoluo da magnetizao transversal com o comportamento dos spins, em resposta a um impulso de 180 (adapt. R.B. Lufkin, 1990).
constante de tempo que caracteriza este decaimento d-se o nome de tempo de relaxao spin/spin e tem o smbolo T2. Este , a par da densidade protnica e do tempo de relaxao spin/rede T1, um dos parmetros responsveis pela distino entre os tecidos.
Fig. 2.2 Esquema explicativo sobre como, atravs da tcnica de ecos de spin, possvel obter um sinal que dependente apenas das interaes entre os spins e no considera as heterogeneidades do campo magntico esttico (adapt. R.B. Lufkin, 1990). Atualmente, a formao de imagens de RMN implica sequncias de diversos impulsos que enfatizem os parmetros que mais nos interessam. Uma destas sequncias que ter sido amplamente utilizada e que, devido sua simplicidade, continua a merecer meno, corresponde repetio sequencial de um impulso de 90, seguido de vrios de 180. Nesta sequncia d-se o nome de TE ao tempo entre dois impulsos de 180 e de TR a dois impulsos consecutivos de 90. Intensidade do sinal Nos subcaptulos anteriores foram introduzidos os trs parmetros atravs dos quais as imagens so construdas. Vejamos, neste ponto, de que maneira que cada um deles influencia a intensidade do sinal. J anteriormente se referiu que o sinal medido em imagens de RMN a magnetizao transversal total dos tecidos. Seja, ento, I a intensidade desse sinal e observe-se que: 1. A intensidade do sinal tanto mais intensa quanto maior for a densidade protnica (n). In (2.1)
I=
-TE /T2)
(2.2)
(2.3)
Fig. 2.3 Esquema explicativo do comportamento da magnetizao devido a T2 e devido a T1 (adapt. R.B. Lufkin, 1990). Uma forma simples de compreender o comportamento da magnetizao devido a T1 e a T2 imaginando os casos limite em que T1 >> T2 e T1 << T2. No primeiro caso o vetor magnetizao comearia por rodar do plano xy para o eixo z direo do campo magntico esttico e, seguidamente, aumentaria a sua amplitude (figura 2.4), enquanto que no segundo, o mdulo da magnetizao aumentaria e s depois sofreria rotao (figura 2.5).
Fig. 2.4 Esquema simplificado do comportamento da magnetizao no caso em que T1 >> T2.
Fig. 2.5 Esquema simplificado do comportamento da magnetizao no caso em que T1 << T2. Refira-se, a este propsito, que a gama de valores de T1 e T2 em tecidos biolgicos so, respectivamente, [200 ms,2000 ms] e [50 ms, 500 ms]. Imagens com contraste em densidade protnica, T1 e T2. Retomando o que ficou expresso no subcaptulo anterior, pode dizer-se que o sinal medido em RMN depende da densidade protnica, do tempo de relaxao spin/spin e do tempo de relaxao spin/rede da seguinte forma: I
-TE /T2
(1
-TR /T1
(2.4)
Esta expresso permite compreender de que forma que possvel manipular o contraste das imagens, enfatizando os parmetros que se pretende. Quem j teve algum contacto com imagens de RMN sabe que existem imagens em densidade protnica, em T1 e em T2. Imagine-se que existem dois tecidos que possuem tempos de relaxao muito prximos, embora sejam caracterizados por densidades protnicas muito distintas. Nesse caso, o bom senso sugere-
Fig. 2.6 Grfico da intensidade do sinal em funo do tempo para dois tecidos caracterizados por tempos de relaxao spin/rede diferentes (adapt. R.B. Lufkin, 1990). Por fim, quando se pretende enfatizar as diferenas em T2, a sequncia a utilizar dever ser caracterizada por um TE e um TR longos. Na figura 2.7 esto ilustradas duas curvas de intensidade do sinal em funo do tempo, no caso de um tecido com um T2 curto e outro com um T2 longo. Da observao da figura, facilmente se compreende que a maior distino feita ao fim de algum tempo. Falta referir o que significam os tons de cinzento nas imagens de RMN. Perante o que ficou expresso nos pargrafos anteriores, fcil admitir que regies com uma densidade protnica elevada apaream mais brancas (intensidade de sinal elevada), como o caso de tecidos gordos e fluidos. No outro extremo, encontram-se a escuro as reas com densidade protnica baixa, sendo exemplos calcificaes, ar, tecidos fibrosos e osso cortical.
Fig. 2.7 Grfico da intensidade do sinal em funo do tempo para dois tecidos caracterizados por tempos de relaxao spin/spin diferentes (adapt. R.B. Lufkin, 1990). O valor de T1 depende, como j foi descrito, da maior ou menor facilidade que o tecido tem de receber energia na gama das radiofreqncias adequada. Verifica-se que, enquanto a gua apresenta um T1 longo, o colestrol, por exemplo, apresenta um T1 curto. Esta observao deve-se, fundamentalmente, ao fato de os movimentos no colestrol serem mais lento e, por isso, mais prximo da frequncia de Larmor dos tomos de Hidrognio. interessante observar que, em muitas situaes, a gua que se encontra livre nos tecidos se liga (ainda que por ligaes fracas) s fronteiras de muitas molculas. Em tecidos em que este mecanismo ocorre, o tempo T1 da gua tende a diminuir. Na tabela 2.1 esto apresentados os valores de T1 e de T2 para alguns tecidos orgnicos, considerando uma frequncia de 20 MHz. Repare-se que, por
Tabela 2.1 Valores de T 1 e de T 2 para alguns tecidos biolgicos para impulsos de 20 MHz. Relativamente ao tempo de relaxao spin/spin o fator determinante a presena de campos magnticos locais. Desta forma, nos slidos e nas grandes molculas, T2 , habitualmente, curto, uma vez que estas estruturas apresentam campos magnticos intrnsecos. No extremo oposto encontram-se os fluidos cujas molculas apresentam uma grande mobilidade e, por conseguinte, estes campos tendem para zero. Mais uma vez estas observaes esto de acordo com a tabela 2.1, onde tecidos como a gua e o sangue apresentam T2 superiores aos dos msculos, caracterizados por uma estrutura mais organizada ou das gorduras, constitudas por grandes molculas. Assim, nas imagens em T2, aparecem a branco os tecidos com uma grande quantidade de gua livre: neoplasmas ou inflamaes e a escuro as substncias que contm ferro. Na figura 2.8 possvel observar as diferenas obtidas na imagem do mesmo plano cerebral quando o contraste feito em densidade protnica, em T1 ou em T2. Repare-se que esta umas das grandes vantagens das imagens de RMN comparativamente com as restantes tcnicas: uma estrutura que pode no ser visvel com um dos contrastes, pode tornar-se extremamente ntida com outro dos contrastes.
a) b) c) Fig. 2.8 Comparao entre as imagens de RMN obtidas atravs de contraste em: a) densidade protnica, b) T1 e c) T2. Repare-se que o osso aparece em todas as imagens a escuro (baixa densidade protnica); o lquido cfalo-raquidiano escuro na imagem a T1 e branco na imagem em T2; a mielina branca nas imagens em T1 e escura nas imagens em T2. Agentes de contraste Mesmo apresentando uma enorme potencialidade no tocante ao contraste, a RMN permite ainda a utilizao de agentes de contraste que melhoram a visibilidade de determinado tecido. Contam-se como agentes de contraste substncias que, devido sua susceptibilidade magntica, interfiram ao nvel dos tempos de relaxao.
a) b) Fig. 2.9 Comparao entre as imagens de RMN obtidas atravs de um crebro com um glioma, utilizando: a) contraste em T1 e b) contraste em T1 com administrao de gadolneo. Nota-se que com o agente de contraste o glioma se torna mais ntido. Na figura 2.9 possvel observar as diferenas entre uma imagem obtida com contraste em T1 e uma em que esse contraste enfatizado devido administrao de gadolneo. Gradientes de campo magntico Para terminar, resta referir o modo como os pontos da imagem so determinados. Repare-se que at aqui se tem considerado a magnetizao total do tecido, no se referindo o modo como a imagem construda. Na verdade necessrio pensar num mecanismo capaz de distinguir os diversos pontos de um tecido. O modo como esta questo foi resolvida, envolve a aplicao de um gradiente de campo em substituio do campo magntico esttico (ver figura 2.10). Ao aplicar um gradiente de campo magntico numa determinada direo x , os spins vo comear a rodar com velocidades diferentes e, consequentemente, a frequncia da radiao medida vai ser diferente para cada fatia perpendicular a x.
Fig. 2.10 Representao do gradiente de campo magntico exterior responsvel pela distino entre os pontos do tecido. Ilustrao a uma dimenso (adapt. R.B. Lufkin, 1990). Utilizao dos gradientes de campo na formao da imagem Compreendido o significado do sinal de RMN, falta explorar o mecanismo atravs do qual se associa um determinado sinal a uma determinada posio, de modo a conseguir-se construir, efetivamente, uma imagem.
Figura 2.15 - Representao de uma sequncia completa de sinais com vista obteno de informao referente a uma fatia. (Curry elt al, 1990). 3 Aplicaes clnicas As aplicaes clnicas das imagens de RMN so muito diversas. Neste captulo pretende-se dar apenas alguns exemplos de como estas so teis no diagnstico e caracterizao de diversas doenas, sem a pretenso de enumerar exaustivamente as suas potencialidades. A neurologia uma das reas em que as imagens de RMN so mais utilizadas. Na figura 2.9 ilustrado o interesse da utilizao destas imagens no diagnstico de tumores, mas existem muitas outras aplicaes como sejam as doenas degenerativas, inflamatrias ou cardiovasculares (ver, por exemplo, na figura 3.1 imagens de uma hemorragia cerebral). Ainda no mbito da neurologia, as imagens da coluna vertebral so tambm amplamente utilizadas, podendo ser visveis tumores, compresses ou qualquer m formao da coluna. Na figura 3.2 encontra-se uma imagem de RMN de um indivduo paraplgico onde se observa claramente uma regio da espinal medula que se encontra danificada (a escuro).
a) b) c) Fig. 3.1 Imagens de RMN de uma hemorragia cerebral com contraste em: a) densidade protnica, b) T1 e c) T2.
Fig. 3.3 Imagem de RMN do abdmen humano. Repare-se no enorme contraste e nitidez que caracterizam esta imagem.
No que respeita estrutura ssea, em geral, a RMN no revela mais informao do que a TAC. No entanto, em estudos tumorais, a RMN poder ser muito relevante, uma vez que permite, geralmente, um grande contraste entre o tecido normal e o tumoral e diferencia muito bem os tecidos sseos, musculares e das articulaes, como se pode observar na figura 3.4.
Fig. 3.4 Imagem de RMN dos joelhos de um indivduo. , uma vez mais notrio um grande contraste entre os diferentes tecidos. Em resumo, poder-se- concluir que a RMN permite a obteno de imagens muito ntidas de praticamente todos os tecidos humanos, sendo de extrema utilidade quando se exige detalhe e nitidez de qualquer rgo. particularmente utilizada para a deteco de leses ou alteraes das estruturas dos tecidos. 4 Imagens de Espectroscopia A tcnica de imagens de espectroscopia corresponde a uma modalidade das imagens de RMN na qual se acede concentrao de determinadas substncias num volume selecionado. Na verdade, a tcnica de espectroscopia de RMN no s muito utilizada em qumica orgnica para anlise de amostras, como ter sido a precursora das IRMN, uma vez que baseada nos mesmos modelos fsicos. Assim, neste captulo, iremos explanar, brevemente, os princpios subjacentes espectroscopia de RMN, por forma a melhor se compreender as imagens obtidas com a mesma tcnica. Vizinhana do ncleo e desvio qumico Como j se ter referido em captulos anteriores, a frequncia de precesso dos ncleos depende do campo magntico ao qual ficam sujeitos. Deste modo, a frequncia do sinal medido em RMN vai depender do campo magntico esttico imposto pelo equipamento, do ncleo em estudo, mas tambm dos campos magnticos locais existentes na vizinhana desses mesmos ncleos. A existncia de eltrons na proximidade dos ncleos , indubitavelmente, uma fonte de campos magnticos. Para simplicidade do texto, ir-se- referir apenas a espectroscopia protnica, embora seja possvel realizar-se espectroscopia de
Fig. 4.1 Espectro de RMN de diversas espcies qumicas. No eixo horizontal encontra-se representado o desvio qumico em unidades de ppm - partes por milho. (adapt. de http://www.cem.msu.edu/~reusch/VirtualText/Spectrpy/nmr/nmr1.htm, a 27/10/2006) A figura 4.1 pode, ainda, ser explorada segundo alguns outros aspectos. Nomeadamente, no que respeita ao uso do composto tetrametilsilano ((CH3)4Si), como referncia. Na verdade, este o padro mais utilizado nos espectros de RMN, uma vez que cumpre os requisitos necessrios para essa funo: 1) deve ser quimicamente inativo; 2) deve ser facilmente removido da amostra; 3) deve fornecer um nico pico bem definido e 4) este deve ocorrer a uma frequncia notoriamente diferente das freqncias habitualmente observadas. H ainda dois outros aspectos dignos de nota: o primeiro corresponde ao efeito da eletronegatividade dos tomos que se encontram ligados ao hidrognio e o outro corresponde estrutura tridimensional das espcies qumicas representadas na figura 30. Se compararmos os dois ltimos compostos do grfico, verifica-se que apenas diferem no tomo central que , num dos casos, carbono e, no outro, silcio. Como facilmente se confirmar, a electronegatividade do carbono superior do silcio e, portanto, tende a atrair os eltrons na sua direo, afastando-os da influncia dos ncleos de hidrognio. Deste modo, os ncleos de hidrognio encontram-se mais blindados no caso do TMS do que no 2,2-dimetilpropano (C5H12), correspondendo, assim, a um pico de menor frequncia. Quanto estrutura tridimensional dos compostos qumicos apresentados fcil verificar que todos os tomos de hidrognio so estruturalmente equivalentes. Ou seja, sofrem iguais influncias dos
Fig. 4.2 Espectro de RMN dos ncleos de hidrognio (espectro protnico) do composto 2, 3-dicloro, 2metil propano. O pico a azul corresponde aos hidrognios assinalados a azul, enquanto que o pico vermelho corresponde aos restantes tomos de hidrognio (tambm assinalados a vermelho). A verde apresentada uma linha que corresponde integrao dos sinais. O padro utilizado , uma vez mais o composto TMS. (adapt. de http://www.cem.msu.edu/~reusch/VirtualText/Spectrpy/nmr/nmr1.htm, a 27/10/2006) Existem duas questes interessantes a ter em conta: a primeira diz respeito ao fato de o grupo hidroxilo (OH) poder apresentar picos numa gama enorme de freqncias, devido, precisamente, ao fato de se poder encontrar em variadssimas posies no interior das molculas orgnicas. Neste contexto, em alguns casos, pode ser complicado distinguir o pico correspondente a este grupo. Nessas circunstncias, existem estudos onde se procede do seguinte modo: 1) constri-se um espectro da amostra; 2) em seguida adiciona-se gua pesada soluo, de modo a que o deutrio da gua pesada substitua o hidrognio do grupo OH12; 3) constri-se novo espectro. O segundo espectro deve ser em tudo semelhante ao primeiro exceo do pico do grupo hidrxido que deixa de ressoar, uma vez que passa a ter um tomo de deutrio, em vez de hidrognio. A outra questo est relacionada com a tendncia para alguns compostos formarem ligaes de ponte de hidrognio entre as suas cadeias. Nessas circunstncias, os desvios qumicos associados a esses ncleos de hidrognio tornam-se maiores. Esta observao no estranha, uma vez que o estabelecimento de uma ligao por ponte de hidrognio reduzir a influncia do tomo de hidrognio sobre o seu eletro, desta forma, a blindagem torna-se menor e, portanto, a frequncia ser maior. Desdobramento das riscas e interaes spin/spin Um exemplo de como a interpretao dos espectros de RMN pode ser complexa, o efeito associado s interaes entre spins do mesmo composto orgnico. Verifica-se que existem interaes entre spins prximos que condicionam a resposta dos spins em estudo. Observe-se os espectros da figura 4.3. No espectro da esquerda, respeitante ao composto 1,2dicloro etano visvel um nico pico bem definido com desvio qumico de 3.73 ppm. Repare-se que, neste caso, os quatro hidrognios presentes no composto so estruturalmente equivalentes. J no espectro da direita, encontram-se os picos obtidos com uma soluo de 1,1-dicloro etano e so observados dois picos (um a 2.06 ppm) e outro a 5.89 ppm) que se desdobram, respectivamente em dois e 4 picos que apresentam pequenos desvios entre eles. Os dois picos justificam-se, como anteriormente j o fizemos, tendo em conta que nesse composto existem trs tomos de hidrognio equivalentes do ponto de vista estrutural e um diferente. Quanto aos desdobramentos dos picos, a justificao um pouco mais subtil.
Fig. 4.3 Espectros de RMN dos ncleos de hidrognio (espectro protnico) dos compostos 1,2-dicloro etano e 1,1-dicloro etano. (adapt. de http://www.cem.msu.edu/~reusch/VirtualText/Spectrpy/nmr/nmr1.htm, a 27/10/2006) J no que toca ao desdobramento do pico a 5.89 h a considerar que o tomo de hidrognio a laranja (estruturalmente no equivalente aos restantes) fica sujeito a interaes que podero corresponder a quatro situaes distintas: 1) todos os 20 restantes trs hidrognios se encontram em estados de spin com o mesmo sentido do campo magntico; 2) todos eles se encontram em estados com sentido contrrio ao do campo magntico; 3) um deles encontra-se num estado com spin com o mesmo sentido do campo magntico e os restantes dois com spins em sentidos contrrios; 4) dois deles encontram-se num estado com spin com o mesmo sentido do campo magntico e o restante com spin em sentido contrrio. Assim, os picos menores estaro relacionados com as duas primeiras situaes e os dois centrais, mais amplos, correspondero s situaes 3 e 4. Repare-se que as diferenas de alturas dos picos refletem a probabilidade de ocorrncia de cada uma das situaes que , evidentemente, de 3:1. Construo de imagens de espectroscopia de RMN Atualmente, a maior parte dos equipamentos de imagens de RMN permite a construo de imagens de espectroscopia, sendo, uma vez mais, o ncleo mais comum o de hidrognio. Os compostos que melhor se estudam com esta tcnica so a creatina, a colina e o N-acetilaspartato (importante neurotransmissor do sistema nervoso). Algumas outras substncias, como o glutamato, a glutamina ou o citrato, porm, muitas outras continuam a no ser observadas por esta tcnica quer por existirem em concentraes demasiado baixas para o seu sinal ser mensurvel, quer por apresentarem tempos de relaxao demasiado curtos, quer por apresentarem interaes demasiado fortes que dificultam em demasia a interpretao do sinal. No que respeita ao conhecimento da distribuio tridimensional destas substncias, existem essencialmente duas tcnicas a considerar: a espectroscopia de voxel nico (SVS - do ingls, Single Voxel Spectroscopy) e as imagens de desvio qumico (CSI - do ingls Chemical Shift Images). No primeiro caso, embora exista mais do que uma abordagem, a mais simples de explicar aquela onde o voxel em estudo escolhido atravs de uma sequncia que consiste num impulso de 90, seguido de dois impulsos de 180. Em simultneo com cada um dos impulsos imposto um gradiente de campo em cada uma das direes o que permite selecionar um pequeno cubo do espao (ver figura 4.4). O sinal proveniente desse volume analisado em termos espectroscpios, sendo possvel conhecer a sua composio.
Fig. 4.4 Esquema da seleo de um cubo utilizando uma sequncia conhecida por PRESS (do ingls, Point-REsolved Spectroscopy Sequence), (adapt. de Luigi et al, 2005). Quanto tcnica de imagens de desvio qumico, nela se alia o processamento do sinal em termos espectroscpios e a informao espacial obtida atravs dos mtodos de reconstruo de imagem. Na verdade, a imagem conseguida, tal como j foi anteriormente descrito, utilizando gradientes de campo. Estes impem, fundamentalmente, codificao em fase, uma vez que necessrio evitar a codificao em frequncia, visto que precisamente no processamento da frequncia que se encontra a informao referente ao espectro, ao qual se pretende aceder. Os espectros podem ser visualizados de diferentes formas. Pode sobrepor-se uma grelha imagem estrutural, selecionar-se um dos elementos da grelha e construir-se o espectro referente a esse elemento (ver figura 4.5 a)). Os espectros podem, ainda, ser mostrados em cada elemento da grelha (ver figura 4.5 b)). Ou a concentrao de um dado metabolito, aps ter sido detectado automaticamente atravs da anlise dos espectros, pode ser visualizada com um cdigo de cores sobreposto imagem estrutural do rgo (figura 4.6).
b) Fig. 4.5 Visualizao dos resultados de imagens espectroscpicas atravs da construo de espectros relativos a a) um ou b) vrios elementos de volume. (adapt. de http://www.medscape.com/viewarticle/430195, em 2/11/2006 e de http://www.med.wayne.edu/neurology/clin_programs/Labs/Epilepsy/diagnostic.html, em 2/11/2006)
Fig. 4.6 Visualizao dos resultados de imagens espectroscpicas utilizando um cdigo de cores sobreposto s imagens estruturais. (adapt. de http://www.gehealthcare.com/usen/community/mr/products/mr_lx_v9_0_software/products/3dcsi.html em 2/11/2006). 5 Imagens funcionais Como j ficou expresso no captulo anterior a RMN uma poderosa tcnica de imagem, permitindo uma enorme resoluo espacial e um detalhe sobre as diversas estruturas cerebrais no atingido por qualquer outra tcnica de imagem mdica. No entanto, at h poucos anos atrs, esta tcnica permitia apenas aceder a informao anatmica, no sendo capaz de fornecer dados acerca da funo do rgo em estudo. No entanto, o melhoramento das capacidades do equipamento de RMN, tem vindo a permitir estender esta tcnica a outros domnios, nomeadamente, a conseguir informao relevante associada ao fluxo sanguneo, revelando-se uma poderosa ferramenta, principalmente, ao nvel do estudo do funcionamento cerebral. At ento, estes estudos funcionais limitavam-se ao processamento de dados eletroencefalogrficos que, embora tendo uma enorme resoluo temporal apresentam uma fraca resoluo espacial, e a estudos de imagens de medicina nuclear (como a tomografia de emisso de posies) que, alm de exigir equipamento muito caro, devido aos radionuclidos, e envolver radiao ionizante, atinge resolues apenas de 0.5 a 1.0 cm. Esta moderna tcnica de imagem que em seguida se descreve caracterizada por ser no invasiva, possuir uma resoluo espacial de poucos milmetros e uma resoluo temporal que pode ser menor do que um milisegundo, permitindo aceder aos nveis superiores do funcionamento cerebral. Princpios fsicos Se recordarmos que desde 1936 se sabe que a susceptibilidade magntica da oxihemoglobina e da desoxihemoglobina diferente, e que o parmetro T2 da ressonncia magntica nuclear sensvel s heterogeneidades do meio, facilmente se compreende que, atravs da medio de T2, seja possvel obter alguma informao acerca dos diferentes estados da hemoglobina. Na verdade, comeou-se por observar que a taxa de decaimento, T2, era menor quando estvamos na presena de desoxihemoglobina, quando comparada com a taxa associada oxihemoglobina. Ou seja, observou-se, em 1990, que os vasos sanguneos apareciam mais brilhantes (o que pode corresponder a um aumento de T2) quando o sangue era mais oxigenado. Este efeito foi interpretado como correspondendo a um aumento das heterogeneidades locais do campo correspondente ao estado desoxigenado da hemoglobina e ficou conhecido pelas iniciais BOLD, tendo estas o significado de Blood Oxygenation Level Dependent. Um ano mais tarde, era possvel seguir este sinal no tempo, observando-se as mudanas operadas quando um animal respirava uma atmosfera pobre em oxignio. Esta observao tem permitido obter informao sobre o funcionamento cerebral uma vez que, quando uma determinada rea cerebral ativada, verifica-se um aumento de fluxo sanguneo nesse zona, esse aumento maior do que o aumento do consumo de oxignio, de tal forma que, no sangue venoso, passa a existir mais sangue oxigenado do que anteriormente, o que aumenta o sinal de RMN. Ou seja, este um mecanismo em que o prprio sangue funciona como agente de contraste endgeno. Caractersticas do Sinal A percentagem de sinal de RMN que corresponde ao sangue de aproximadamente 6% na matria cinzenta e ainda menos na matria branca. Se pensarmos que as diferenas ocorridas no fluxo sanguneo durante a ativao cerebral so entre 2-5% para campos de cerca de 1,5 T e at cerca de 15% em campos de 4 T, verifica-se que as diferenas no sinal s quais pretendemos ser sensveis, so, de fato,
Fig. 5.1 As reas assinaladas a roxo so as ativas quando se estimula o indivduo da seguinte forma: pede-se ao sujeito para observar uma sequncia de trs objetos (insetos, por exemplo) e, por fim, mostra-se um quarto objeto e o sujeito deve decidir se este pertence ou no mesma famlia de objetos (cortesia de P. Tavares, P. Fletcher e L.K. Tyler). 6 Outro tipo de imagens As potencialidades da tcnica de imagens de RMN parecem no ter fim. Para alm das variantes j discutidas, como sejam a espectroscopia e a RMN funcional, h ainda outros tipos de informao til quer para efeitos de diagnstico, quer em trabalhos de investigao. Contam-se nessa categoria, a angiografia de RMN e os tensores de difuso e sobre as quais se faro apenas breves referncias. Angiografia de RMN O movimento de fluidos no interior do organismo funciona, nas imagens de ressonncia magntica estruturais, como fator de perda de qualidade de imagens. Como facilmente se compreende, atendendo forma como as imagens so construdas, quando spins inicialmente numa determinada regio do corpo so estimulados atravs de um impulso de radiofreqncia e, em seguida se deslocam, o sinal medido no corresponde regio inicialmente selecionada, mas sim quela para a qual os spins se deslocaram. Este fenmeno, porm, pode ser utilizado com o objetivo de obter informao acerca do fluxo sanguneo, ou seja, construindo imagens angiogrficas. O mecanismo utilizado o seguinte: adquire-se uma imagem correspondente a uma determinada fatia, em seguida, excita-se (com um impulso de 180) a fatia imediatamente anterior, adquirese a mesma imagem (correspondente ao mesmo volume), mas agora com informao acerca do sangue que proveio da fatia anterior, ao fazer a diferena entre as duas imagens obtm-se uma imagem do fluxo sanguneo.
Fig. 6.1 - Imagem de angiografia de RMN. (adapt de: http://en.wikipedia.org/wiki/Magnetic_resonance_imaging, em 2/11/2006) Imagens de Difuso de RMN (Tensores de Difuso) Nestas imagens so reveladas estruturas como as fibras musculares ou as fibras nervosas, que correspondem a direes preferenciais de difuso da gua. Para a sua obteno a tcnica de gradientes de campo utilizada para o clculo da difuso da gua nas trs direes do espao, por forma a determinar em qual delas a difuso maior. De fato, a forma de obteno destas imagens pode ser vista como semelhante anteriormente descrita para a angiografia, sendo o movimento associado difuso dos fluidos avaliado nas trs direes do espao e, em seguida, determinada, em cada elemento de volume, aquela que corresponde direo preferencial de difuso. Na figura 6.2 possvel observar uma imagem muito ntida dos feixes nervosos do sistema nervoso central.