Neurofisiologia

Ddo Pablo Ramon Fruett da Costa

Introduo
A gua o principal constituinte do corpo humano.
Variao de 45% a 60%
Dissolvidos vrios ons e molculas.
Contedo de gua e eletrlitos mantido estvel.
Vida ou morte
Presso Osmtica, Osmol e Miliosmol
Osmolaridade a quantidade de partculas
dissolvidas em um determinado solvente. Quanto
maior a osmolaridade, maior a pressso osmtica do
soluto sobre o solvente.
Presso osmtica a fora de atrao que o soluto
exerce sobre o solvente, atraindo-o a fim de
equilibar as presses osmticas de dois lados de
uma membrana semi-permevel.
Osmolalidade e Tonicidade
Os termos osmolaridade e osmolalidade referem-se particulas
osmoticamente ativas.
Osmolalidade refere-se ao nmero
de partculas osmoticamente ativas de soluto presentes em
um quilograma do solvente.
Osmolaridade refere-se ao nmero de partculas osmoticamente
ativas de soluto contidas em um litro de soluo.
Desidratao, diabetes e ingesto de lcool aumentam a
osmolalidade srica. Doenas adrenais p estado ps-operatrio,
abaixam-na.
Tonicidade: a capacidade que os solutos tm de gerar uma fora
osmtica que provoca o movimento de gua de um compartimento
para outro.
Ex.: Na
+
, glicose, uria (osmis efetivos)
Difuso e Osmose
Difuso simples: passagem de ons (ou molculas)
atravs de uma membrana devido ao movimento cintico
aleatrios das partculas:
1) substncia disponvel;
2) velocidade de movimento cintico;
3) nmero de abertura na membrana celular (MP).
Difuso facilitada: h necessidade de interao com uma
protena transportadora, facilitando a passagem atravs
da membrana.
Osmose: ocorre quando duas solues de concentraes
diferentes encontram-se separadas por uma membrana
semipermevel.
Solues Isotnicas, Hipertnicas e Hipotnicas
Compartimentos Lquidos
H no corpo 2 compartimentos lquidos
importantes:
1. Compartimento Intracelular
2. Compartimento Extracelular
a. Lquido Intravascular
b. Lquido Intersticial
c. Linfa
d. gua dos ossos
e. Lquidos transcelulares (secrees glandulares)
Terceiro espao: cavidades pleural, ocular,
peritonial, LCR
Compartimentos Lquidos
Composio Eletroltica dos Compartimentos Lquidos
Composio Eletroltica dos Compartimentos
Lquidos
Distribuio dos Eletrlitos
Equilbrio de Gibbs-Donnan
A soma total de ons no plasma maior que a do lquido
intersticial.
De acordo com Gibbs-Donnan:
a) Quando h um nion pouco difusvel num dos lados
da membrana (protena intravascular), a
concentrao de um on positivo difusvel ser maior
neste lado, e a concentrao de um nion difusvel
ser menor;
b) O nmero total de ons difusveis ser maior no lado
que contiver o nion pouco difusvel.
Equilbrio de Gibbs-Donnan
Equilbrio de Gibbs-Donnan
Aps o equilbrio final, observa-se que:
1) O produto da concentrao de ons difusveis num
compartimento igual ao produto dos mesmos ons
no outro compartimento;
2) Em cada compartimento, a soma dos ctions deve
ser igual soma dos nions;
3) A concentrao de ctions difusveis ser maior no
compartimento que contm a protena no difusvel
que no outro compartimento, e a concentrao de
nions difusveis ser menor no compartimento A
que no B;
4) A osmolalidade maior no compartimento A, que
contm a protena.
Distribuio da gua entre Compartimentos
As membranas celulares permitem o movimento de gua
em qualquer direo e este movimento depende da
distribuio dos ons.
a quantidade de soluto e no de solvente que define o
volume do compartimento.
1) Volume intravascular: protenas;
2) Compartimento extracelular: sdio;
3) Compartimento intracelular: potssio.
Osmolalidade plasmtica: 289 mOsm/kg H
2
O
Osmolalidade plasmtica: 2 x [Na
+
] + [uria] + [glicose]
Homeostasia
As composies dos lquidos extracelular e intracelular
diferem uma da outra e so mantidas, na condio de
estado estvel (steady-state) por diversos processos
reguladores, chamados mecanismos homeostticos.
LEC: a composio mantida pelos sistemas
cardiovascular, pulmonar, renal, gastrintestinal,
endcrino e nervoso, atuando de forma coordenada.
LIC: mantida pela membrana celular, que medeia o
transporte de substncias entre o LIC e o LEC, por
difuso, osmose, transporte ativo e transporte vesicular.
Trocas Lquidas entre Plasma e Interstcio
A nutrio das clulas e a remoo dos produtos do
metabolismo celular somente so possveis devido
existncia de uma circulao capilar.
O transporte dos nutrientes e catablitos pelo sangue
depende da adequao da funo circulatria e do
volume lquido circulante.
Portanto, manter o volume plasmtico essencial !!!
Starling (1896) foi o primeiro que formulou o mecanismo
de distribuio de lquido entre os compartimentos
vascular e intersticial.
Lei de Starling
Edema
Edema Sinal de Godet (ou do cacifo)
Homeostasia do Lquido Intracelular
LIC: mantida pela membrana celular, que medeia o
transporte de substncias entre o LIC e o LEC, por
difuso, osmose, transporte ativo e transporte vesicular.
Todas as clulas animais so revestidas por uma
membrana celular formada por lipdios e protenas.
Membrana Celular
uma estrutura fina e elstica, lipoproteica, envolvendo a
clula.
H
i
s
t

r
i
a

d
o

M
o
d
e
l
o

d
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M
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s
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c
o
F
l
u
i
d
o
Membrana Celular
1) ~1895: C Overton refora a teoria anterior,
observando que a membrana deixava passar
substncias lipossolveis
2) ~1905: Langmuir monocamada fosfolipdica
3) ~1925: Gorter e Grendel bicamada fosfolipdica
4) ~1935: JD Davson e J Danielli propuseram o modelo
da bicamada lipoproteica
5) ~1940: D Robertson refinou este modelo
6) ~1957: Robertson membrana unitria
7) ~1970: SJ Singer e GL Nicolson propuseram o
modelo do mosaico fluido, tentando explicar a
interao de protenas de membrana com a bicamada
lipdica.
8) ~1975: Unwin e Henderson estrutura molecular das
protenas da membrana
Membrana Celular Modelo do Mosaico Fluido
Sua estrutura bsica uma bicamada lpidica com
espessura de duas molculas, 7,5 a 10 nm.
Membrana Celular
colesterol
fosfolipdio
colina
fosfato
glicerol
Membrana Celular
Valores representativos da percentagem de lipdeos em
vrias membranas celulares
Membrana Celular
Muitas das protenas integrais formam canais estruturais
difusionais, seletivos e carreadores.
Membrana Celular Transporte
As vias para o transporte atravs da membrana celular e
os mecanismos bsicos de transporte.
Membrana Celular Difuso Simples
Difuso Simples
um processo passivo, no qual as partculas sem carga
de uma soluo fluem ao longo de seu gradiente de
concentrao.
a) Processo nenhuma fonte de energia necessria
para mover as partculas. A difuso ocorre devido ao
teor de calor da soluo.
1) O movimento aleatrio;
2) O movimento efetivo cessa quando se atinge a
mesma concentrao em todas as partes da soluo
(equilbrio difusional);
3) O movimento aleatrio continua aps o equilbrio
difusional, mas concentrao permanece a mesma.
Difuso Simples
b) Intensidade a lei de Fick descreve a intensidade
(velocidade) com que uma substncia de difunde
atravs de uma membrana, em funo de seu
gradiente de concentrao:
Fluxo = - P x A (C
int
C
ext
), onde
P = coeficiente de permabilidade; A = rea da
membrana; C
int
e C
ext
so as concentraes.
c) Permeabilidade depende do soluto e da membrana,
atravs da qual est ocorrendo a difuso:
1) Partculas lipossolveis se difundem atravs da
camada e
2) Partculas hidrossolveis se difundem pelos canais.
Difuso Simples
Sistemas de Transporte
Membrana Celular Difuso Facilitada
Difuso Facilitada (Transporte Passivo)
um processo mediado por carreador e permite que as
partculas demasiadamente grandes (muitos ons e
nutrientes) possam fluir atravs da membrana.
Ex.: transporte de glicose para o interior celular
a) Processo no h a necessidade de energia
1) A protena passa por diversas alteraes
espontneas de sua conformao
2) A substncia tende a se fixar ao carreador onde est
em maior concentrao, dissociando-se onde sua
concentrao menor.
b) Intensidade aumenta medida que aumenta o
gradiente de concentrao at que todos os stios de
fixao estejam ocupados.
Difuso Facilitada - Intensidade
Osmose
o fluxo passivo de gua atravs da membrana
seletivamente permevel ao longo de um gradiente de
presso osmtica (criado pela presena de solutos em
concentraes diferentes nas duas faces da membrana).
uma propriedade coligativa das solues porque se
relaciona com o nmero de partculas dissolvidas
na soluo e no s suas dimenses, peso molecular ou
constituio qumica.
Osmose Importncia Clnica
Osmose Presso Osmtica
Embora no se saiba como o gradiente de
concentrao das partculas gera uma presso
osmtica, a presso, atravs da membrana, pode ser
calculada usando-se a equao de vant Hoff:
= C x R x T, onde
: presso osmtica (mmHg);
C : diferena entre as concentraes (mOsm/l);
R : constante universal dos gases (62 mmHg l/mmol
o
K);
T : temperatura absoluta (
o
K).
Membrana Celular Transporte Ativo
Transporte Ativo Primrio
Usa, diretamente, a energia obtida da hidrlise da
adenosina trifosfato (ATP) para transportar substncias
contra um gradiente energtico (de concentrao ou
eltrico).
Transporte Ativo Primrio
O mais comum desses sistemas de transporte ativo a
bomba de sdio-potssio (Na
+
-K
+
-ATPase) que usa a
ATPase fixada membrana como uma molcula
carreadora.
1) Funo: responsvel pela manuteno da alta
concentrao de K
+
e a baixa concentrao de Na
+
no
LIC.
2) Composio: A ATPase formada por quatro
subunidades (duas alfa e duas beta). A subunidade alfa
apresenta a atividade enzimtica (converte o ATP em
ADP e stios de fixao (binding sites) nas faces extra e
intracelular).
ATPase - Processo
Sistemas de Transporte Ativo
Outros sistemas de transporte ativo primrio que
dependem diretamente da hidrlise do ATP para
promover o transporte de ons, atravs da membrana,
so:
1) Bomba de Ca
2+
: do retculo sarcoplasmtico das
fibras musculares, que mantm a concentrao
intracelular de clcio abaixo de 0,1 mol/l;
2) Bomba de K
+
-H
+
das clulas da mucosa gstrica, que
regula a secreo de hidrognio para o lmen gstrico
durante o processo digestivo.
Transporte Ativo Secundrio
Utiliza a energia armazenada no gradiente de
concentrao do Na
+
para transportar substncias
contra gradiente de energia.
1) A glicose e os aminocidos so reabsorvidos pelo
tbulo proximal e absorvidos do lmen intestinal por um
mecanismo de transporte ativo secundrio, Na
+
-
dependente.
2) O clcio removido do citoplasma das clulas
ventriculares cardacas por um transportador ativo
secundrio, Na
+
-dependente, chamado de trocador Na
+
-
Ca
+
.
3)O H
+
produzido pelo metabolismo celular bombeado
para fora da clula por um transportador ativo
secundrio, Na
+
-dependente. Mantm o pH intracelular.
Transporte Ativo Secundrio - Simporters
Tipos de Carreadores
1) Uniporters: so carreadores que transportam uma
nica partcula em uma direo, como ocorre na difuso
facilitada da glicose;
2) Simporters: transportam duas molculas na mesma
direo, como ocorre no transporte ativo secundrio de
glicose;
3) Antiporters: transportam molculas em direes
opostas, como ocorre com os trocadores Na
+
-Ca
2+
e Na
+
-
H
+
.
Transporte Vesicular
E
n
d
o
c
i
t
o
s
e
fagocitose
Transporte Vesicular Endocitose/Exocitose
Muitas substncias so transportadas, atravs da
membrana celular, por endocitose e por exocitose.
Na endocitose, material extracelular captado no interior
de vesculas que so formadas pela invaginao da
membrana celular.
Na exocitose, material intracelular captado no interior
de vesculas.
Transporte Vesicular Endocitose
Na endocitose, fagocitose ou pinocitose, a vescula
endoctica se separa ma membrana celular, fundindo-se
com outra vescula intracelular (como um endossoma ou
lisossoma), de onde o material engolfado liberado no
LIC.
Na fagocitose, h a incluso de partculas slidas (e.g.
vrus, bactrias) pela clula.
Na pinocitose, h incluso de partculas lquidas.
Transporte Vesicular Endocitose
Na endocitose mediada por receptor, o material a ser
transportado se fixa, primeiro, a um receptor e, em
seguida, o complexo substncia-receptor ingerido por
endocitose. O ferro e o colesterol so duas substncias
importantes, transportadas para o interior das clulas por
endocitose mediada por receptor.
Neste tipo de endocitose, merece destaque o papel das
clatrinas, uma protena formada por 3 eixos (trqueto),
formando gaiolas de pentgonos e/ou hexgonos que
so conectados membrana plasmtica via um
complexo adaptador AP2, uma protena tetramrica.
Transporte Vesicular Exocitose
Na exocitose, material intracelular captado no interior
de vesculas:
1) As vesculas se fundem com a membrana celular e
liberam seu contedo para o LEC;
2) Hormnios, enzimas digestivas e transmissores
sinpticos so exemplos de substncias transportadas
para fora das clulas por exocitose.
Transporte Vesicular Exocitose
Pela hiptese SNARE (soluble NSF attachment receptor),
os compartimentos de membrana vesicular e plasmtica
possuem receptores distintos v-SNARES (VAMP ou
sinaptobravina) e os t-SNARES (azul) que medeiam o
atracamento e a fuso da vescula.
Importncia clnica: as
Protenas SNARES so alvo
das neurotoxinas
clostridiais (ttano e
botulismo)
Citosol e o Fluido Extracelular
Os fluidos salinos, a membrana e as protenas (da
membrana) contribuem para o estabelecimento do
potencial de repouso. Os ons dissolvidos nos fluidos
intra- e extracelulares so os responsveis pelos
potenciais de repouso e de ao.
gua: distribuio desigual de carga eltrica; ons
Canais Inicos
Consistem de protenas que se estendem atravs da
membrana formando um poro.
Canais Inicos
Propriedade da maioria dos canais inicos: seletividade inica e a
existncia de portes.
Gated channels significa canais ativados (pela abertura de
portes).
Voltage-gated
ion channel
Vrios Tipos de Estmulos Controlam a Abertura e o Fechamento dos Canais Inicos
Canais dependentes de ligantes. A energia proveniente da ligao do ligante leva o canal para a sua conformao aberta.
Vrios Tipos de Estmulos Controlam a Abertura e o
Fechamento dos Canais Inicos
Regulado por fosforilao: a energia para a abertura
provm da transferncia do grupo fosfato (P
i
) de alta
energia.
Vrios Tipos de Estmulos Controlam a Abertura e o
Fechamento dos Canais Inicos
Dependente de voltagem: a energia para a abertura e
fechamento do canal provm da alterao da diferena de
potencial eltrico atravs da membrana.
Vrios Tipos de Estmulos Controlam a Abertura e o
Fechamento dos Canais Inicos
Dependentes de estiramento ou presso: a energia para
a abertura e fechamento do canal pode resultar de
foras mecnicas transmitidas ao canal atravs do
citoesqueleto.
Modelos Fsicos para a Abertura e Fechamento dos
Canais Inicos
Uma alterao conformacional localizada ocorre em
uma regio do canal.
Modelos Fsicos para a Abertura e Fechamento dos
Canais Inicos
Uma alterao conformacional global ocorre ao longo
do canal.
Modelos Fsicos para a Abertura e Fechamento dos
Canais Inicos
Uma partcula bloqueadora se desloca para dentro e
para fora do canal.
Movimentos de ons
Difuso
Movimentos de ons
Eletricidade
Potencial de Repouso
das Membranas
O potencial da membrana
(V
m
) a voltagem atravs da
membrana neuronal em
qualquer momento, podendo
ser de repouso ou no,
durante o potencial de
ao.
Potenciais de Equilbrio
A diferena de potencial eltrico que contrabalana
exatamente um gradiente de concentrao inico
chamado de potencial de equilbrio inico (E
on
).
Potenciais de Equilbrio
Observaes importantes:
1) Grandes alteraes no potencial de membrana so
causadas por alteraes mnimas nas
concentraes inicas;
2) A diferena lquida na carga eltrica ocorre nas
superfcies interna e externa da membrana;
3) ons so impelidos atravs da membrana em uma
velocidade proporcional diferena entre o
potencial de membrana e o potencial de equilbrio;
4) Se a diferena de concentrao para um on atravs
da membrana conhecida, o potencial de equilbrio
para este on pode ser calculado.
Equao de Nerst
Cada on tem o seu prprio potencial, o potencial de
repouso que seria estabelecido se a membrana fosse
permevel somente aquele on.
Ex.: E
K
= - 80 mV, E
Na
= 62 mV
E
K
= ln
[K
+
]
in
[K
+
]
out
-RT
z
K
F
R = 8.31 J /(mol-deg)
T = 310
o
K
F= 96,500 coul/mol
ln to log (x2.303)
Prmio Nobel 1920
Distribuio dos ons
Distribuio dos ons Atravs da Membrana
Como surgem os gradientes de concentrao ?
Equao de Goldman-Hodgin-Katz (GHK)
importante destacar que o K
+
est mais concentrado
no meio intracelular do que no meio extracelular e o
Na
+
e Ca
2+
esto mais concentrados no meio
extracelular do que no meio intracelular.
Alm disso, em repouso, o K
+
40 vezes mais
permevel que o sdio.
P
K
[K
+
]
out
+ P
Na
[Na
+
]
out
+ P
Cl
[Cl
-
]
in
V
m
-60 mV
log
P
K
[K
+
]
in
+ P
Na
[Na
+
]
in
+ P
Cl
[Cl
-
]
out
Potencial de Ao
Potencial de Ao
O potencial de ao uma redistribuio de cargas
eltricas atravs da membrana.
Potencial de Ao
Potencial de Ao
O potencial de membrana muda pela alterao da
permeabilidade inica relativa da membrana.
Canal de Sdio Dependente de Voltagem
(voltage-gated)
A molcula do canal de sdio consiste de quatro
domnios.
Canal de Sdio Dependente de Voltagem
(voltage-gated)
Cada domnio consiste de 6 segmentos de alfa-hlice
Canal de Sdio Dependente de Voltagem
(voltage-gated)
Os domnios se organizam, formando um poro entre
eles.
Potencial de Membrana
Medida do potencial de membrana da fibra nervosa por meio
de micropipeta.
Conduo do Potencial de Ao
Aps vencer o limiar, para transferir informao de um
ponto a outro no sistema nervoso necessrio que o
potencial de ao, uma vez gerado, seja conduzido ao
longo do axnio.
O potencial de ao iniciado em uma extremidade de um
axnio apenas se propaga em uma direo (conduo
ortodrmica). Lei da Polarizao Dinmica de CAJAL.
O potencial de ao se propaga sem decaimento (no-
decremental).
Geralmente, os potenciais de ao apresentam uma
velocidade de 10 m/s.
A velocidade de conduo do potencial de ao aumenta
com o dimetro do axnio.