JUN 1995 NBR 13407

Água - Determinação de
trihalometanos em água tratada para
abastecimento por extração líquido/
líquido

ABNT
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CEET - Comissão de Estudo Especial Temporária de Meio Ambiente
CE-01:602.04 - Comissão de Estudo de Análise Orgânica
NBR 13407 - Water - Determination of trihalomethanes in drinking water by
liquid/liquid extraction - Method of test
Descriptors: Water. Environmental
Válida a partir de 31.07.1995
© ABNT 1995 Palavras-chave: Água. Meio ambiente 8 páginas
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SUMÁRIO 3.1 Trihalometanos (THM)

1 Objetivo
2 Documentos complementares Produtos orgânicos formados pela cloração no tratamento
3 Definições de águas de abastecimento.
4 Aparelhagem
3.2 Branco de amostra
5 Execução do ensaio
6 Resultados Amostra de água preparada conforme 5.1.4, que acom-
panha as amostras desde a coleta até a determinação
1 Objetivo final, para avaliação de possível contaminação durante a
amostragem e análise.
Esta Norma prescreve o método para determinação de
trihalometanos, isto é, clorofórmio, diclorobromometano, 4 Aparelhagem
dibromoclorometano e bromofórmio, em águas tratadas
A aparelhagem necessária à execução do ensaio é a
para abastecimento.
descrita em 4.1 a 4.8.
2 Documentos complementares
4.1 Tubos de cultura de borossilicato, de fundos arredon-
Na aplicação desta Norma é necessário consultar: dados, de 5 mL e 25 mL, tampas rosqueadas e com sep-
tos de silicone, faceadas com politetrafluoretileno (PTFE).
NBR 9898 - Preservação de técnicas de amostragem
de efluentes líquidos e corpos receptores - Procedi- 4.2 Frascos com tampa de vidro esmerilhada de 100 mL.
mento
4.3 Seringas diversas:
EPA Method 501.2 - The analysis of trihalomethanes
in drinking water by liquid/liquid extraction a) seringa hipodérmica de 10 mL;

EPA Method 601 - Purgeable halocarbons b) seringa hipodérmica de 5 mL, com ponteira de
metal;
EPA Method 624 - Purgeables
c) agulhas longas;
3 Definições
d) agulhas curtas;
Para os efeitos desta Norma são adotadas as definições
de 3.1 e 3.2. e) microsseringa de 25 µL;

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f) microsseringa de 50 µL;
g) microsseringa de 100 µL;
h) microsseringa de 10 µL, com guia.
4.4 Pipetas graduadas.
4.5 Balões volumétricos de 5 mL, 10 mL e 100 mL.
4.6 Pesa-filtro ou frasco de Erlenmeyer de tampa esmeri-
lhada de 20 mL.
4.7 Cromatógrafo a gás equipado com detector de captura
de elétrons.
Nota: Recomenda-se aparelho com programação de tem-
peratura.
4.8 Colunas cromatográficas: coluna de vidro borossilicato
de 2 m de comprimento e 2 mm de diâmetro interno, em-
pacotada com:
a) 10% de 2, 6, 10, 15, 19, 23 - hexametiltetracosano
(esqualano), tendo como suporte sólido terra
diatomácea lavada com ácido de 0,177/0,150 mm
(80/100 mesh);
b) 6% de metilfenilsilicona 65:35 (OV-11) + 4% me-
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tilsilicona (SP-2100), tendo como suporte sólido
terra diatomácea lavada com ácido e tratada com
dimetildiclorossilano de 0,150/0,125 mm
(100/120 mesh);
c) 4% de metilsilicona, tendo como suporte sólido
terra diatomácea lavada com ácido e tratada com
dimetildiclorossilano de 0,150/0,125 mm
(100/120 mesh);
d) 3% de carbowax e ácido tereftálico substituído
(SP-1000), tendo como suporte sólido terra dia-
tomácea lavada com ácido e tratada com dimetil-
diclorossilano de 0,150/0,125 mm (100/120 mesh).
5 Execução do ensaio
5.1 Reagentes
Os reagentes utilizados no ensaio são descritos em 5.1.1
a 5.1.7.
5.1.1 N-pentano (C5H12)
Isento de interferentes orgânicos na faixa de trabalho. Al-
ternativamente, pode-se utilizar o n-hexano (C6H14), me-
tilcicloexano (C7H14) ou 2,2,4-trimetilpentano (C8H18).
5.1.2 Metanol p.a.
5.1.3 Tiossulfato de sódio, Na2S2O3, p.a.
Alternativamente, pode-se utilizar o sulfito de sódio,
Na2SO3, p.a.
5.1.4 Água livre de orgânicos
Água deionizada livre de orgânicos pode ser obtida em
um sistema de ultrafiltração com resinas, para remoção
de componentes orgânicos. Pode ser também preparada
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fervendo-se a água destilada deionizada por 15 min.
Transferir a água, enquanto quente, para um frasco com
tampa rosqueada com septo de silicone ou de boca esme-
rilhada. A água livre de compostos orgânicos deve ser
en-saiada todos os dias antes do uso, de acordo com 5.5.
5.1.5 Recheio para coluna
5.1.5.1 Suporte sólido
Terra diatomácea lavada com ácido e tratada com dimetil-
diclorossilano de 0,150/0,125 mm (100/120 mesh) e terra
diatomácea lavada com ácido de 0,177/0,150 mm
(80/100 mesh).
5.1.5.2 Fases líquidas
As fases líquidas são as seguintes:
a) 2, 6, 10, 15, 19, 23-hexametiltetracosano (esqua-
lano);
b) metilfenilsilicona 65:35;
c) metilsilicona;
d) carbowax e ácido tereftálico substituído.
5.1.6 Padrões de trihalometanos
Os padrões são o clorofórmio, diclorobromometano, clo-
rodibromometano e bromofórmio.
5.1.7 Solução-padrão-estoque
5.1.7.1 Transferir para um balão volumétrico de 10 mL,
aproximadamente, 9,8 mL de metanol (ver 5.1.2). Deixar
este frasco aberto durante aproximadamente 10 min, para
que o solvente da parede do frasco evapore.
5.1.7.2 Pesar este balão com exatidão de 0,1 mg.
5.1.7.3 Utilizando uma microsseringa de 100 µL, adicionar
duas ou três gotas do padrão puro diretamente no metanol,
tomando-se cuidado para não molhar o gargalo do frasco.
Pesar novamente.
5.1.7.4 Acertar o volume com metanol e homogeneizar
bem, invertendo-se o balão diversas vezes.
5.1.7.5 Calcular a concentração, em mg/mL, pela diferença
de massa.
5.1.7.6 Em balões de 5 mL, fazer diluições em metanol
para as concentrações de trabalho.
Nota: As diluições devem ser feitas com microsseringa, injetando
a solução-concentração dentro do metanol, tomando-se
cuidado para minimizar as perdas por evaporação.
5.1.7.7 Transferir os padrões-estoque e de trabalho para
os tubos de 5 mL, com tampas rosqueadas e septos de
silicone, faceadas com teflon (ver 4.1), e estocar em gela-
deira a 4ºC.
Nota: Todas as soluções-padrão preparadas em metanol são
estáveis até quatro semanas, quando estocadas nestas
condições. Após este tempo, ensaiar os padrões e, caso
haja alguma alteração significativa, refazer os padrões.
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5.2 Coleta de amostra
5.2.1 Frascos utilizados
Os frascos utilizados para coleta devem ser, de prefe-
rência, os descritos em 4.1. Quando não for possível, uti-
lizar os descritos em 4.2.
5.2.2 Preparação e limpeza do material utilizado na coleta
5.2.2.1 Lavar com detergente os frascos de coleta, tampas
e septos, enxaguá-los com água de torneira e finalmente
com água destilada.
5.2.2.2 Secar a vidraria e os septos ao ar, colocá-los em
estufa a 105ºC por 1 h e guardá-los em lugar livre de
compostos orgânicos clorados.
Nota: Não aquecer por períodos maiores que 1 h, porque o sili-
cone dos septos se degrada lentamente a 105ºC.
5.2.3 Procedimento de coleta
Coletar as amostras conforme a NBR 9898.
5.3 Branco de amostras
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5.3.1 Preparar branco de amostras em duplicata, com
água conforme 5.1.4, da mesma forma que devem ser
coletadas as amostras.
5.3.2 Os brancos de amostras devem ser transportados
junto com os frascos ao local de coleta.
5.3.3 Armazenar no mesmo local amostras e os brancos
de amostra, em local livre de contaminação.
5.4 Interferentes
5.4.1 As impurezas contidas nos solventes de extração
são, na maioria das vezes, responsáveis pelos problemas
analíticos. Estes problemas podem ser resolvidos, en-
saiando os solventes diariamente antes de usá-los na
extração de amostras e fazendo-se o branco. Quando o
nível de concentração do interferente for superior a
10 µg/L, deve ser reprovado. O solvente deve ser conside-
rado livre de interferências quando a contaminação
individual dos trihalometanos for menor que 0,4 µg/L.
5.4.2 A maioria das contaminações acidentais da amostra
tem sido devido à difusão de compostos orgânicos voláteis
através do septo do frasco de amostra, durante o transpor-
te e armazenamento. O branco de reagentes tem por finali-
dade monitorar o solvente e a água utilizada para fazer
os padrões e possíveis diluições.
5.4.3 Esta técnica de extração líquido/líquido extrai, com
boa eficiência, compostos orgânicos não-polares de uma
larga faixa de ponto de ebulição e extrai, com eficiência
variada, os compostos orgânicos polares.
5.4.4 A ausência de picos na análise da água de ma-
nancial (água-testemunha) com tempo de retenção si-
milar ao dos trihalometanos é geralmente a evidência de
uma análise livre de interferentes. Devido a essas pos-
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síveis interferências, é necessário analisar não só a água
tratada como também o manancial.
5.4.5 Quando forem notadas interferências na análise de
água de manancial, a alternativa é recorrer a colunas
cromatográficas que viabilizem a análise, e, se ainda
assim, as interferências persistirem, deve-se recorrer a
técnicas mais específicas, como colunas de polaridades
diferentes e programação de temperatura. A análise con-
firmatória para níveis altos pode ser feita usando-se a
cromatografia gasosa e a espectrometria de massa. Para
níveis menores que 50 µg/L, a confirmação só pode ser
feita usando-se a técnica de purge and trap e cromato-
grafia gasosa/espectrômetro de massa, conforme a
EPA Method 601 e EPA Method 624, respectivamente.
5.5 Ensaio
5.5.1 Trocar a tampa do tubo de amostra por outra com
dois furos, com septo, e rosquear bem. Espetar uma agulha
de ponta curta, com cuidado, para que esta apenas toque
a amostra na superfície, e no outro furo uma ponta total-
mente imersa.
5.5.2 Acoplar uma seringa hipodérmica de 10 mL à agulha
de ponta longa e sugar o excesso de água até que o vo-
lume de água no tubo seja de 20 mL (ver Figura 1).
Nota: Os frascos devem ser calibrados antes do uso.
5.5.3 Transferir n-pentano ou solvente alternativo para um
pesa-filtro.
5.5.4 Retirar 4 mL de n-pentano com seringa de ponteira
de metal, acoplar à agulha de ponta longa e injetar cuida-
dosamente para que não haja perda. Agitar vigorosamen-
te por 1 min (ver Figura 2).
5.5.5 Deixar separar bem as duas fases.
5.5.6 Analisar a amostra, injetando 1 µL da fase orgânica
(superior) no cromatógrafo. Os tempos de retenção dos
trihalometanos obtidos com diversas colunas estão na
Tabela 1 e os cromatogramas estão nas Figuras 3 e 4.
5.6 Padrões de calibração
5.6.1 Preparar, a partir da solução-padrão-estoque ou de
trabalho, uma multicomponente secundária em metanol,
de maneira que 20 µL desta solução em 100 mL de água
livre de orgânicos produzam um padrão de calibração
próximo àquele da amostra (25%).
5.6.2 Extrair e analisar os padrões de calibração (ver 5.6.1)
de maneira análoga às amostras (ver 5.5).
5.6.2.1 Para preparar com margem de segurança os pa-
drões em fase aquosa, deve-se tomar as seguintes pre-
cauções:
a) não injetar mais que 20 µL de solução-padrão em
metanol em 100 mL de água livre de orgânicos;
b) usar microsseringa de 25 µL ou equivalente para
dosar o padrão, tomando cuidado para que a agu-
lha fique totalmente imersa em água, e removê-la
tão rápido quanto possível, após a injeção;
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c) homogeneizar a solução, invertendo o frasco sua- em 100 mL de água livre de orgânicos. Utilizar o mesmo
vemente por três vezes; procedimento de extração de 5.6.2.

d) não utilizar a solução contida no gargalo do balão 6 Resultados

volumétrico. Encher a seringa com solução-padrão
contida na parte expandida do balão; 6.1 Cálculo e expressão dos resultados

e) nunca utilizar pipetas para diluir ou transferir amos- 6.1.1 Calcular a concentração de cada trihalometano por
tras e padrões; comparação das áreas e/ou alturas dos seus picos com
as do padrão, conforme as seguintes equações:
f) descartar a solução restante do balão. Quando há
volume morto, a tendência é volatilizar o composto área do pico da amostra
Conc. = x conc. do padrão
orgânico, alterando a concentração da solução área do pico do padrão
após 1 h.
ou
5.6.3 Para procedimento alternativo de calibração, pre-
parar, a partir da solução-padrão-estoque ou de trabalho,
uma multicomponente secundária em metanol. Construir altura do pico da amostra
Conc. = x conc. do padrão
uma curva de calibração para cada trihalometano na faixa altura do pico do padrão
linear do detector de captura de elétrons, adicionando-
se, aproximadamente, 20 µL da solução multicomponente Nota: Conc. em μg/L.
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Figura 1 - Remoção de água

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Figura 2 - Adição de n-pentano

Tabela 1 - Tempos de retenção de THM

Tempos de retenção (min)

Trihalometano
Coluna A(B) Coluna B(C) Coluna C(D)

Clorofórmio 1,0 1,3 4,9

Diclorobromometano 1,5 2,5(A) 11,0

Dibromoclorometano 2,6 5,6 23,1

Bromofórmio 5,5 10,9 39,4

(A)
Nesta coluna, o tricloroetileno elui junto com o diclorobromometano.
(B)
Coluna A: empacotado com 3% SP-1000, gás de arraste argônio/metano 5%, fluxo
60 mL/min e temperatura do forno a 50ºC.
(C)
Coluna B: empacotado com 10% esqualano, fluxo 25 mL/min e temperatura do forno a 67ºC.
(D)
Coluna C: empacotado com 6% OV-11 + 4% SP-2100, fluxo 25 mL/min e temperatura
programada (45ºC por 12 min e 1oC/min até 70ºC).

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Coluna: 6% OV-11 + 4% SP - 2100

Fluxo de gás de arraste: 25 mL/min
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Temperatura: 45ºC por 12 min e 1ºC/min até 70ºC

Figura 3-a)

Coluna: 10% esqualano

Fluxo de gás de arraste: 25 mL/min
Temperatura: 67ºC

Figura 3-b)

Figura 3 - Cromatograma de padrões

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Coluna: 3% SP - 1000
Fluxo do gás de arraste: 60 mL/min
Temperatura: 50ºC
Figura 4 - Cromatograma do extrato obtido de água tratada
6.1.2 Alternativamente, calcular a concentração de cada
trihalometano diretamente da curva de calibração onde
se tem altura do pico x concentração do padrão, em µg/L.
6.1.3 Calcular a concentração total de THM, em µg/L, pela
soma das concentrações de clorofórmio, diclorobromome-
tano, dibromoclorometano e bromofórmio, conforme a se-
guinte equação:
THMT (µg/L) = [(conc. CHCl3) + (conc. CHCl2Br) +
(conc. CHClBr2) + (conc. CHBr3)]
6.2 Dados de recuperação
Na Tabela 2 estão indicados os dados de recuperação
para um único laboratório para os diversos THM, de acordo
com os dados obtidos pela EPA Method 501.2.
6.3 Controle de qualidade dualítico
6.3.1 Ensaiar o solvente de extração, o branco de reagen-
tes e o branco de amostras antes de se iniciar a extração
de amostras.
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6.3.2 Um padrão multicomponente de 2 µg/L deve ser ex-
traído e injetado antes das amostras serem analisadas,
para avaliar a sensibilidade do detector e confirmar o
ponto da curva de linearidade. O limite inferior de detecção
é baseado no cálculo da resposta correspondente a cinco
vezes o valor do ruído.
Notas: a)Preparar, a partir da solução-padrão de trabalho, uma
multicomponente de 10 ng/µL de cada componente em
metanol. Tomar 20 µL desta solução em 100 mL de
água livre de orgânicos. Obtém-se uma solução de
concentração 2 µg/L.
b) Calcular o limite de detecção (LD) para cada trihalome-
tano, usando a seguinte equação:
(A . At)
LD (g/L) = . (2g/L)
B.At
Onde:
2 µg/L = concentração na solução, ou seja,
10 µg/L no extrato
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A = cinco vezes o ruído, em mm, no exato
tempo de retenção do trihalometano em
questão
B = altura, em mm, do pico do padrão de
2 µg/L
At = fator de atenuação utilizado
6.3.3 As curvas de calibração devem ser checadas com
padrões dentro da faixa encontrada nas amostras. Quan-
do se notar resposta fora da faixa linear, o analista deve
diluir a amostra e reanalisá-la.
6.3.4 Analisar amostras-testemunhas para monitorar as
possíveis interferências.

Tabela 2 - Dados de recuperação

Concentração Número de Média Precisão relativa Exatidão

Composto (µg/L) amostra (µg/L%) (desvio-padrão) (recuperação)
(%)

CHCl3 9,1 5 10 11 110

CHCl3 69 3 73 5,3 106
CHBrCl2 1,2 5 1,3 9,8 108
CHBrCl2 12 2 15 1,4 125
CHBr2Cl 2,7 5 2,0 17 74
CHBr2Cl 17 3 16 9,9 94
CHBr3 2,9 5 2,2 10 76
CH3Br3 14 3 16 12 114
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