Universidade Federal do Rio Grande - FURG

16ª Mostra da Produção Universitária – MPU

Rio Grande/RS, Brasil, 04 a 06 de outubro de 2017
ISSN: 2317-4420

EFEITOS DO TRATAMENTO IN VITRO COM β-CARBOLINA HARMINA EM

CÉLULAS TUMORAIS C6 DE GLIOMA DE RATO
SEKINE, Fernanda G.; PEDRA, Nathalia S.; RAMOS, Priscila; FERRER, Edila K.;
AZAMBUJA, Juliana; SPANEVELLO, Roselia; BRAGANHOL, Elizandra; de CARVALHO,
Hudson Wander;
COGNATO, Giana de P.
fergelati@outlook.com
UFPEL
Palavras chaves: Câncer; Ayahuasca, β-carbolinas; Harmina;

1. Introdução
A ayahuasca (AYA) é uma bebida de origem ameríndia, utilizada em rituais
reliosos xamânicos. Essa bebida é feita a partir da cocção do cipó Banisteriopsis
caapi e das folhas do arbusto Psycotria viridis sendo que o cipó possui alcaloides β-
carbolinas inibidores da enzima Monoamina Oxidase (MAO) (MCKENNA, TOWERS,
ABBOT, 1984), tais como a harmina, harmalina e tetrahidroharmina as quais
recebem esses nomes, pois foram identificados pela primeira vez na planta
Peganum harmala. Tal planta por sua vez é utilizada para tratar o câncer desde os
tempos antigos (SCHENBERG, 2013).
O câncer é uma das principais causas de morte no mundo, sendo o
Glioblastoma multiforme (GBM) um dos mais comuns tumores cerebrais primários.
Atualmente, o tratamento consiste em cirurgia seguido de radioterapia juntamente
com o quimioterápico Temodal® (BUTOWSKI et al, 2006). Apesar da existência
deste tratamento, a sobrevida de pacientes acometidos por este tipo de tumor é de
12 meses (VILLODRE, 2010), sendo necessária a busca por novas modalidades
terapêuticas capazes de inibir o desenvolvimento do tumor. Neste contexto, o
objetivo deste trabalho foi realizar uma avaliação preliminar dos efeitos da β-
carbolina harmina encontrada no chá da AYA em cultivo de células tumorais C6 de
glioma de ratos.

2. Metodologia
Linhagens de glioma de rato C6 foram obtidas da American Type Culture
Collection (ATCC) e mantidas em meio DMEM suplementado com 5% de soro fetal
bovino (SFB). Após atingirem uma confluência de 90% as células foram semeadas
em uma densidade de 5x10³ células por poço e mantidas em estufa umidificada a
37ºC com 5% de CO2. Posteriormente, as células foram tratadas nas concentrações
de 1, 5, 10, 25, 50 e 100 µg/mL durante 48h com a β-carbolina harmina previamente
diluída em DMSO 0,5%. Após o término do tratamento foram feitos testes de
viabilidade celular usando o corante MTT (brometo de 3-(4,5-dimetil-2-tiazolil)-2, 5-
difenil-2H-tetrazólio), cujos valores de absorbância foram determinados a 492nm.
Após, a proliferação celular foi avaliada mediante o teste de Sulforodamina B (SRB)
cujos valores de absorbância foram determinados a 540nm. Os resultados obtidos
foram submetidos à análise estatística utilizando o programa GraphPadPrism 5, e
analisados por ANOVA de uma via e post-hoc de Tukey. Os dados foram
considerados significativos quando P˂0,05.

3. Resultados e Discussão
Nesse trabalho os resultados mostraram uma redução significativa da viabilidade
e da proliferação celular nas células C6 do glioma de rato. No teste de viabilidade
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celular foi possível observar uma atividade citotóxica nas concentrações de harmina
de 1, 5, 10, 25, 50 e 100 ug/mL, respectivamente em 28,47%, 31,52%, 44,85%,
52,63%, 60,98%, 66,48%, comparadas ao grupo controle (Figura 1A).
Da mesma forma, ao realizar o teste de proliferação celular SRB, torna-se
evidente o efeito da harmina na inibição da proliferação celular nas concentrações
de 1, 5, 10, 25, 50 e 100 ug/mL, as quais reduziram significativamente a proliferação
em 36,75%, 47,69%, 68,32%, 68,67%, 73,33%, 77,58%, respectivamente, quando
comparadas ao grupo controle (Figura 1B).
É importante ressaltar, que não houve diferença significativa em ambos os testes
entre os grupos de controle, DMSO e DMEM 5%.
A B

Figura 1. Avaliação da atividade citotóxica de linhagem de glioma de rato C6 exposta à β-

carbonila harmina. A) Análise da viabilidade celular da linhagem C6 mediante teste de MTT. B)
Avaliação da proliferação celular da linhagem C6 mediante teste de SFB. Dados expressos como
média±erro padrão, analisados por ANOVA seguido de post-hoc de Tukey (P˂0,05). ***diferença
significativa quando comparado ao grupo controle DMEM (P˂0.0001).

4. Considerações finais
Os resultados obtidos demonstram que a β-carbonila harmina possui um
importante efeito citotóxico sobre a linhagem de glioma de rato C6 de maneira dose
dependente. Neste contexto, considerando a existência de um arsenal terapêutico
insuficiente para o tratamento do GBM, a harmina demonstra ser uma ferramenta
promissora para a busca e desenvolvimento de novas modalidades terapêuticas
capazes de inibir o desenvolvimento de tumores cerebrais malignos.

5. Referências
BUTOWSKI N.A.; SNEED P.K.; CHANG S.M. Diagnosis and treatment of
recurrent highgrade astrocytoma. Journal of Clinical Oncology, p.24, n.8, p. 1273-
1280. 2006.
SCHENBERG, Eduardo E. Ayahuasca and cancer treatment. SAGE open
medicine, v. 1, p. 2050312113508389, 2013.
SKEHAN, Philip et al. New colorimetric cytotoxicity assay for anticancer-drug
screening. Journal of the National Cancer Institute, v. 82, n. 13, p. 1107-1112,
1990.
VILLODRE, E. S. Influência do Resveratrol, Quercetina e Temozolomida na
formação de Tumor-Esferas em glioma humano in vitro. 2010. Monografia
(Bacharelado em Ciências Biológicas) – Graduação em Ciências Biológicas,
Universidade Federal do Rio grande do Sul.