POTATO DEXTROSE AGAR
Finalidade:
Meio de cultura destinado ao cultivo e contagem de fungos (bolores e leveduras).
Registro ANVISA:
10097010-134
Apresentação:
540201 - POTATO DEXTROSE-AGAR-20mL-PL 90X15-10PL
1. INTRODUÇÃO
A dextrose junto à infusão de amido de batata (BEEVER e
BOLLARD 1970) promover o crescimento de bolores e leveduras,
enquanto o baixo valor de pH inibe parcialmente o crescimento da
flora bacteriana acompanhante.
O ágar Potato Dextrose é um meio de cultura em conformidade com
as especificações da Farmacopéia dos Estados Unidos (USP), bem
como a Farmacopéia Brasileira. Meio recomendado para uso no
desempenho de testes de limite microbiano.
O ágar Batata Dextrose é usado para o cultivo e enumeração de
fungos. Este meio também é recomendado pela American Public
Health Association para contagem em placas de bolores e leveduras
em análise de alimentos e laticínios.
2. COMPOSIÇÃO
Formulação Concentração/L
Infusão de amido de batata 4,0
Dextrose 20,0
Ágar Base 15,0
Água Deionizada 1L
pH 5,6 ± 0.2 a 25ºC
A fórmula pode ser ajustada e/ou suplementada, conforme
necessário, para cumprir os critérios de desempenho.
3. AMOSTRAS
a- Tipos de amostras
- Vários tipos de amostra podem ser inoculados no Potato Dextrose
Agar.
- O laboratório deve estabelecer critérios de coleta, rejeição e
conservação das amostras, conforme sua política da qualidade.
- Sempre considerar as necessidades específicas dos
microrganismos alvos das análises, microrganismos com
necessidades especiais (suplementos específicos ou ambiente
controlados) podem não apresentar crescimento adequado se
semeados em meio de cultura que não apresente os requisitos
mínimos.
4. INFORMAÇÕES GERAIS SOBRE O PRODUTO
a- Armazenamento e estabilidade
Para fins de transporte, o produto pode permanecer em temperatura
ambiente por até 72h. No laboratório as placas devem ser
armazenadas em temperatura de 2 a 25ºC, condições em que se
mantém estáveis até a data de vencimento expressa em rótulo,
desde que isento de contaminação de qualquer natureza. O uso de
refrigerador tipo frost-free não é recomendado para meios de cultura
devido ao efeito desidratante deste tipo de equipamento.
Considerando que este produto é gelatinoso e sua composição
pode apresentar até 80% de água, ao sofrer variações de
temperatura (quente-frio ou frio-quente) todo meio de cultura pode
gerar condensação, de pouca a muita, acumulando água na placa.
Recomenda-se guardar as placas com os meios de cultura virados
para cima e, quando necessário, desprezar a água acumulada e
deixar o meio de cultura estabilizar a temperatura antes de sua
utilização.
Conforme descrito em literatura, o laboratório deve retirar da
refrigeração apenas a quantidade de produto que deverá ser
utilizada em sua rotina e deixar estabilizar a temperatura, ou secar a
água condensada, antes de sua utilização, em temperatura
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ambiente, podendo utilizar a incubação em estufa (±37ºC) para
redução do tempo de secagem ou estabilização. A repetição do
processo de refrigeração/estabilização não é recomendada, a
constante troca de temperatura pode levar a desidratação do meio,
expor o produto a contaminações ou gerar um acúmulo de água
excessivo.
A água acumulada por condensação, ocasionada por alguma
variação de temperatura, não influência no desempenho do produto,
desde que este não apresente ressecamento ou diminuição de
espessura.
Devido à presença de substratos sensíveis, recomenda-se manter o
produto protegido de incidência direta de luz (natural ou artificial) e
evitar grandes variações de temperatura até a utilização.
b- Precauções e cuidados especiais
- O produto destinado apenas para o uso in vitro;
- Uso restrito por profissionais;
- Mesmo se tratando de produto livre de agentes infecciosos,
recomenda-se tratar este produto como potencialmente infeccioso,
observando o uso de equipamentos de proteção individual e
coletivo;
- Não inalar ou ingerir;
- Não utilizar placas com sinais de contaminação, ressecamento ou
com alterações de cor ou espessura;
- Não usar materiais com o prazo de validade expirado, ou que
apresentem selo de qualidade rompido ou violado;
- Recomenda-se a leitura da diretriz aprovada para “Proteção de
Trabalhadores de Laboratório e Infecções Obtidas no Trabalho -
CLSI® M29-A” para o manuseio seguro;
- O procedimento de descarte do produto se baseia na RDC 222
(ANVISA) de 28 de março de 2018, que regulamenta as boas
práticas de gerenciamento dos resíduos de serviços de saúde.
- Para acondicionamento e descarte do material usado, autoclavar a
121ºC por 20 minutos. Recomendamos o uso dos sacos Detrilab.
- Contate o serviço de vigilância sanitária de sua região para
garantir o cumprimento correto da legislação de descarte de
produtos potencialmente contaminantes.
5. MATERIAIS E EQUIPAMENTOS NECESSÁRIOS (porém não
fornecidos)
- Estufa bacteriológica;
- Alças bacteriológicas;
- Bico de Bunsen.
6. PROCEDIMENTO TÉCNICO
a- Retirar da embalagem a quantidade de placas a ser usado e
colocar os mesmos em estufa bacteriológica a 35 a 37°C até
adquirirem esta temperatura;
b- Retirar as placas da estufa e identificar cada um seguindo os
critérios adotados pelo laboratório;
c- Semear o material conforme técnica adotada.
d- Incubar em estufa entre 20 a 25°C, por período de tempo exigido
pela técnica adotada.
e- Realizar leitura analisando as colônias seguindo procedimento
padrão do laboratório.
f- Após o tempo e condições ideais de incubação, avaliar as
características das colônias e efetuar análise microscópica, se
necessário.
Observações:
1. Os períodos de incubação, também, apresentam grandes
variações frente aos fungos de interesse, podendo varias de 3 a 6
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dias. Compete ao laboratório definir os períodos de incubação - Periodicidade

adequados a sua rotina.
2. Devido ao grande número de fungos existente, não se inclui neste
documento detalhes sobre características destes, sugere-se a
utilização de literatura específica para eventuais elucidações.
7. RESULTADOS
Realizar a contagem das colônias e calcular o resultado conforme o
método de análise seguido pelo laboratório.
Testar a cada novo lote recebido ou em periodicidade estabelecida
pelo próprio laboratório.
- Análise dos resultados
O meio Potato Dextrose Agar testado com cepas padrão deve
expressar os resultados esperados. Caso se constate algum
problema, os resultados não devem ser liberados até que as causas
tenham sido apuradas devidamente e os problemas constatados
sanados.

8. LIMITAÇÕES DO MÉTODO 10. GARANTIA DA QUALIDADE

(Riscos Residuais Identificados conforme RDC 36/2015)
Os resultados falsamente positivos ou negativos podem ocorrer,
com maior frequência, nas seguintes situações:
- Algumas variações de coloração na colônia, morfologia, tamanho
ou intensidade de cor pode ocorrer, devido a características únicas
da cepa analisada.
- Tempo longo entre a semeadura da amostra e análise. Ao utilizar
colônias isoladas em um período superior a 24 horas, o
metabolismo bacteriano pode ficar comprometido e a leitura de
alguns parâmetros podem consequentemente ficar defasados ou
até mesmo não ocorrer. Em colônias recentes (inferior ao período
de 18 horas) não se encontram com o metabolismo bem definido, e
algumas provas podem não ocorrer.
- Incubação em temperatura inadequada.
- Utilização de agulha flambada não resfriada.
- Sobrecarga de inóculo ou falta de inóculo.
- Inóculos mais carregados fornecem resultados falsamente
positivos e inóculos mais fracos fornecem resultados falsamente
negativos.
- Interpretação equivocada de resultados.
- Técnica de assepsia inadequada.
- Tempo excessivo ou insuficiente de incubação.
- Tempo excessivo de incubação fornece resultados falsamente
positivos e tempo insuficiente fornece resultados falsamente
negativos.
- Utilização de material vencido, contaminado ou em condições
inadequadas.
- Contaminação cruzada por uso de acessórios não esterilizados
corretamente ou ambiente não asséptico.
- Utilização de meios de cultura com aparência alterada.
- Não aguardar para que os materiais atinjam a temperatura
ambiente no momento do uso.
- Erro na conservação do produto pode ocasionar desidratação do
meio e alteração das propriedades dos componentes.
9. CONTROLE DE QUALIDADE
- Materiais necessários
Cepas padrão: ATCC® (American Type Culture Collection) ou
derivadas).
A Laborclin obedece ao disposto na Lei 8.078/90 - Código de
Defesa do Consumidor. Para que o produto apresente seu melhor
desempenho, é necessário:
- que o usuário conheça e siga rigorosamente o presente
procedimento técnico;
- que os materiais estejam sendo armazenados nas condições
indicadas;
- que os equipamentos e demais acessórios necessários estejam
em boas condições de uso, manutenção e limpeza.
Antes de ser liberado para venda, cada lote do produto é submetido
a testes específicos, que são repetidos periodicamente conforme
calendário estabelecido pela empresa até a data de vencimento
expressa em rótulo. Os certificados de análise de cada lote podem
ser obtidos no site www.laborclin.com.br. Em caso de dúvidas ou
quaisquer problemas de origem técnica, entrar em contato com o
SAC - Serviço de Assessoria ao Cliente através do telefone 0800-
410027 ou pelo e-mail sac@laborclin.com.br. Quaisquer problemas
que inviabilizem uma boa resposta do produto, que tenham ocorrido
comprovadamente por falha da Laborclin serão resolvidos sem ônus
ao cliente, conforme o disposto em lei.
11. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. APHA: Compendium of Methods for the Microbiological
Examination of Foods. 5th ed. American Public Health Association,
Washington, D.C., 2015.
2. BEEVER, R.E., a. BOLLARD, E.G.: The nature of the stimulation
of fungal growth by potato extract. ñ J. Gen. Microbiol., 60; 273-279
(1970).
3. Difco Manual, 2nd edition 2009.
4. Farmacopéia Brasileira, 5ª edição. Agência Nacional de Vigilância
Sanitária, Brasília, 2010.
5. United States Pharmacopeial Convention, Inc. 2008. The United
States Pharmacopeia 31/The national formulary 26, Supp, 1, 8-1-08,
online. United States Pharmacopeial Convention, Inc., Rockville, Md.
6. Wehr and Frank (ed.). 2004. Standard methods for the
examination of dairy products, 17th ed, American Public Health
Association, Washington, D.C.

- Controle de qualidade recomendado:

Parâmetros
Produtividade quantitativa -
Candida albicans ATCC
10231
Produtividade quantitativa –
S. cerevisiae ATCC9763
Produtividade quantitativa –
A. brasiliensis ATCC 16404
Meio não inoculado
Resultado esperado
20-25°C <ou=5
Crescimento dias
bom Inóculo aprox.
100UFC
20-25°C <ou=5
Crescimento dias Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda
bom Inóculo aprox. CNPJ 76.619.113/0001-31
100UFC Insc. Estadual 1370012926
Rua Casimiro de Abreu, 521
20-25°C <ou=5
Pinhais/PR CEP 83.321-210
Crescimento dias
Telefone 041 36619000
bom Inóculo aprox.
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100UFC
Responsável Técnico:
Meio levemente opaco, com
Elisa Hizuru Uemura – CRF/PR-4311
coloração bege a levemente
Serviço de Assessoria ao Cliente
amarelada.
SAC 0800-410027
sac@laborclin.com.br

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