R.
Periodontia - Dezembro 2009 - Volume 19 - Número 04
PAPEL DA MMP-8 NA DOENÇA PERIODONTAL
MMP-8 E periodontal disease
Carolina Ferreira Franco1, Ana Carolina Dupim Souza1, José Eustáquio da Costa2, Patrícia Maria D‘Almeida Lima3
RESUMO
As metaloproteinases da matriz (MMP) e os inibidores
de metaloproteinase da matriz (TIMP) são enzimas extre-
mamente importantes na remodelação do tecido conjun-
tivo durante o desenvolvimento, homeostase e cicatriza-
ção. O desequilibrio entre as MMPs ativadas e seus
inibidores endógenos leva ao colapso patológico da matriz
extracelular durante a doença periodontal provocando a
degradação das fibras colágenas inseridas na raiz e a mi-
gração apical do epitélio com formação da bolsa
periodontal. A MMP-8 destaca-se entre as MMPs predomi-
nantemente presentes no tecido gengival inflamado, flui-
do gengival crevicular e saliva bem como fluido sulcular e
peri-implantar. O nível e grau de ativação desta enzima
parecem aumentar com o aumento da atividade e gravida-
de da doença periodontal e diminuir em seguida ao trata-
mento. Diante da importância dessa enzima na evolução
da doença periodontal, esse trabalho teve como objetivo
desenvolver uma revisão de literatura sobre o papel da MMP-
8 e do seu principal inibidor, TIMP-1, na degradação de
colágeno gengival durante a doença periodontal, desta-
cando suas características, mecanismo de ação e inibição,
expressão tecidual e níveis no fluido gengival crevicular.
UNITERMOS: Periodontite, Metaloproteinase, MMP-8,
TIMP-1. R Periodontia 2009; 19:51-60.
1
Mestre em Peridontia pela FO-UFMG
2
Doutor em Periodontia e Professor Adjunto de Periodontia da FO-UFMG
3
Doutora em Biologia celular e Professora Adjunta do DEPEB-UFSJ
Recebimento: 24/09/09 - Correção: 10/11/09 - Aceite: 01/12/09
periodez2009 01-02-10.pmd 51
INTRODUÇÃO
As metaloproteinases da matriz (MMPs) desem-
penham um importante papel na remodelação do
tecido conjuntivo durante o desenvolvimento,
homeostase e cicatrização (Lauer-Fields et al, 2002).
Um desequilibrio entre as MMPs ativadas e seus
inibidores endógenos derivados do hospedeiro, os
inibidores de metaloproteinase da matriz (TIMP), le-
vam ao colapso patológico da matriz extracelular du-
rante a doença periodontal (Birkedal-Hansen, 1993;
Birkedal-Hansen et al, 1993; Seguier et al, 2000).
As MMPs são endopeptidases cálcio e zinco -
dependentes que funcionam em pH neutro e cole-
tivamente são capazes de degradar a maioria, se não
todas, as moléculas da matriz extracelular (Birkedal-
Hansen, 1993). Essas enzimas guardam extensa
homologia na sequência, mas diferem em termos
de especificidade ao substrato e regulação
transcricional (Birkedal-Hansen, 1993).
Esse trabalho teve como objetivo desenvolver
uma revisão de literatura sobre o papel da MMP-8 e
do seu principal inibidor, TIMP-1 na degradação de
colágeno gengival durante a doença periodontal,
destacando suas características, mecanismo de ação
e inibição, expressão tecidual e níveis no fluido
gengival crevicular (FGC).
51
6/8/2010, 10:19 AM
 R. Periodontia - 19(4):51-60
REVISÃO DA LITERATURA
Entre outras atividades, as MMPs são enzimas respon-
sáveis pela degradação das fibras colágenas inseridas na raiz
dentária, permitindo a migração apical e a extensão lateral
do epitélio da bolsa. A sequela clínica do aumento patológi-
co da destruição do colágeno é a perda de inserção e for-
mação da bolsa periodontal (Ryan & Golub, 2000).
Existem pelo menos 25 membros da família das
metaloproteinases categorizados de acordo com a estrutu-
ra do domínio e a preferência por substratos
macromoleculares (TAB.1). A maioria delas contém um
peptídeo sinal, um domínio propeptídeo, um domínio
catalítico e um domínio C-terminal hemopexina/ vitronectina-
semelhante. Algumas MMPs apresentam, ainda, domínios
adicionais como domínio transmembrana ou citoplasmático
(Lauer-Fields et al, 2002; Sorsa et al, 2006).
Cada um dos principais tipos celulares do tecido
periodontal de humanos é capaz de expressar um grupo de
MMP quando devidamente estimulados (TAB. 2). Além dis-
to, diferentes tipos celulares expressam diferentes grupos de
MMP e diferentes citocinas geram diferentes efeitos
transcricionais na mesma célula. Entretanto, diferentes tipos
celulares não necessariamente responderão da mesma ma-
neira a uma determinada citocina. Em função disto, e das
várias interações sinergísticas e antagônicas que existem entre
duas ou mais citocinas, parece que diferentes infiltrados in-
flamatórios podem variar consideravelmente no que se refe-
re ao potencial destrutivo (Séguier et al, 2000; Reynolds et
al, 1994). Este fato pode ser a chave para entender porque a
inflamação gengival pode ou não evoluir para a destruição
tecidual e perda de inserção (Birkedal-Hansen, 1993).
Apesar das diferenças com relação às taxas de hidrólise
de colágeno entre as diferentes MMPs (Sorsa et al, 1999), os
sítios de hidrólise no colágeno têm sido determinados para
várias MMPs e ocorrem na mesma região do colágeno
intersticial. De qualquer forma três aspectos devem ser con-
siderados para a atividade colagenolítica: a habilidade de li-
gar-se ao colágeno eficientemente, a habilidade de desen-
rolar a tripla hélice e a habilidade de clivar as tiras individuais
da tripla hélice (Lauer-Fields et al, 2002).
Uma característica significativa das MMPs é que elas são
secretadas em proformas latentes, cuja ativação peri ou
extracelular é realizada pelas próprias MMPs ou por outras
moléculas, como a plasmina in vivo (Séguier et al, 2000;
Reynolds et al, 1994) ou in vitro, através de produtos quími-
cos como tiol, glutationa oxidiazida, agentes caotrópicos e
oxigênios reativos ou tratamento com calor e baixo pH (Vis-
se & Nagase, 2003).
52
periodez2009 01-02-10.pmd 52
A MMP-8 tem despertado interesse por ser encontrada,
em várias doenças inflamatórias como periodontite, bron-
quite, asma e artrite. Recentemente, tem sido demonstrado
exercer uma inesperada atividade anti-inflamatória defensi-
va e protetora contra o espalhamento de câncer de pele ex-
perimental e doença inflamatória pulmonar, provavelmente
por processar citocinas anti-inflamatórias e quimiocinas bem
como regular a apoptose de células inflamatórias e a respos-
ta imune (Lauer-Fields et al, 2002; Balbín et al, 2003; Owen
et al, 2004; Gueders et al, 2005).
Juntamente com MMP-9 derivada de neutrófilo e MMP-
13 derivada de células ósseas ou epiteliais, a MMP-8 desta-
ca-se entre as MMPs predominantemente presentes no te-
cido gengival inflamado, FGC, saliva e fluido sucular e peri-
implantar. O nível e grau de ativação destas enzimas parece
aumentar com o aumento da atividade e gravidade da do-
ença periodontal e diminuir em seguida ao tratamento com
raspagem e alisamento radicular (RAR) (Lauer-Fields et al,
2002).
De fato, resultados de análises imunoquímicas que usa-
ram anticorpos específicos para MMP-8, MMP-1 e MMP-3
são consistentes com os resultados de vários estudos
enzimológicos prévios. Esses demonstraram que a MMP-8 é
a principal colagenase intersticial no FGC de indivíduos com
periodontite crônica e no fluido sulcular perimplantar de in-
divíduos com perimplatite, respondendo por 90-95% da ati-
vidade colagenolítica (Sorsa et al, 1999), enquanto a MMP-1
é constitutivamente expressa por fibroblastos e associada à
remodelação tecidual normal (Kiili et al, 2002).
Além disso, estudos recentes através da técnica ELISA
demonstraram que os níveis de MMP-8 em portadores de
periodontite crônica fumantes, e não fumantes reduziram
significativamente após terpia periodontal de RAR (Kurtis et
al, 2007).
A MMP-8 é funcionalmente homóloga a MMP-1, porém,
diferem em termos de regulação transcricional: enquanto a
MMP-8 é rapidamente liberada de grânulos específicos de
armazenamento de neutrófilos estimulados e a resposta
mantida pelo recrutamento contínuo de novas células, a
MMP-1 é produzida a partir da demanda pelo início de sua
transcrição. Este processo faz com que a enzima seja detec-
tada no ambiente extra-celular apenas cerca de 6 a 12 horas
após o estímulo (Birkedal-Hansen, 1993; Aiba et al, 1996)
Até 1994 acreditava-se que o gene da MMP-8 era ex-
presso apenas por neutrófilos (Meikle et al, 1994). Trabalhos
posteriores mostraram que esta enzima também é expressa
por células mesenquimais como os fibroblastos e células
endoteliais (Ryan & Golub, 2000), além de células epiteliais/
queratinócitos, odontoblastos, células orais cancerígenas,
6/8/2010, 10:19 AM
 R. Periodontia - 19(4):51-60

Tabela 1
A FAMÍLIA DAS METALOPROTEINASES (HENNEY ET AL, 2000).
SUBGRUPO NOME NÚMERO SUBSTRATO
Colagenase Colagenase intersticial MMP-1 Colágeno I, II, III, VII, VIII, X gelatina agrecan,
(colagenase do fibroblasto) versican, PLP, caseína, α1PI, α2M, ovostatina, nidogênio,
mielina, proteínas de base, pro-TNFα, L-selectina,
MMP-2, MMP-9
Colagenase do neutrófilo MMP-8 Colágeno I, II, III, V, VII, VIII, X, gelatina agrecan, α1
PI, α2AP, fibronectina
Colagenase 3 MMP-13 Colágeno I, II, III, IV, gelatina agrecan,
Perlecan, tenascina, PAI-2
Gelatinase Gelatinase A MMP- 2 Gelatina, colágeno I, IV, V, VII, X, XI, XIV ,
(Colagenase tipo IV) elastina, fibronectina agrecan, versican,
PLP, proteína base da mielina, pro-TNFα, α1PI,
MMP-13, MMP-9, α-amilóide
Gelatinase B MMP-9 Gelatina, colágeno IV, V, VII, X, XIV ,
elastina, agrecan, versican, PLP, fibronectina,
nidogenênio, proteína base da mielina,
pro-TNFα, α1PI
Estromelisina Estromelisina 1 MMP-3 Colágeno III, IV, IX, X, fibronectina,
gelatina agrecan, versican, laminina, elastina,
perlecan, caseína, α1PI, α2M, ovostatina, proteínas
de base da mielina, pro-TNFα, MMP-1, MMP-7, MMP-8,
MMP- 9, MMP-13
Estromelisina 2 MMP-10 Colágeno III, IV, V, gelatina, agrecan, elastina, caseína,
fibronectina, PLP, MMP-1, MMP-8
Estromelisina 3 MMP-11, MMP-19 α1P-
Tipo MT –MMP-1 MMP-14 Colágeno I, II, III, gelatina, elastina,
memebrana fibronectina, agrecan, vitronectina, caseína,
pro-TNFα, MMP-2, MMP-13, laminina cadeia B,
sulfato dermatan, proteoglicana
MT- MMP-2 MMP-15 MMP-2, gelatina, tenascina, laminina,
fibronectina, nidogen
MT- MMP-3 MMP-16 MMP-2
MT- MMP-4 MMP- 17 -
Sem Matrilisina (PUMP-1) MMP-7 Colágeno V, X gelatina, elastina, agrecan,
classificação versican, PLP, fibronectina, laminian, caseína,
transferrina, α1PI, proteínas de base mielina,
pro-TNFα, MMP-1, MMP-2, MMP-9, entactina
Metaloelastase do MMP-12 Colágeno IV, gelatina, elastina, agrecan,
macrófago PLP, fibronectina, vitronectina, laminina,
proteínas de base mielina, pro-TNFα,

PLP proteína de ligação proteoglicana MT - transmembrana

α2M - a2 macroglobulina PAI – inibidor do ativador de plaminogênio
α1PI - á1inibidor de proteinase α2AP - a2 antiplasmina
TNFα –fator de necrose tumoral -α, PUMP -1 metaloproteinase putativa 1

monócitos/macrófagos e células plasmáticas (Kiili et al, 2002). as MMPs podem colaborar com a degradação de quase to-
Visto que já foi estabelecida uma relação entre as for- dos os tecidos e componentes estruturais da matriz do teci-
mas latente e ativa de MMPs extraídas do tecido gengival do conjuntivo e membrana basal, é importante entender que
humano e o grau de inflamação (Overall et al, 1987), e que suas atividades são estritamente controladas em diferentes

53

periodez2009 01-02-10.pmd 53 6/8/2010, 10:19 AM

 R. Periodontia - 19(4):51-60

Tabela 2
EXPRESSÃO DE METALOPROTEINASE PELOS 5 PRINCIPAIS GRUPOS CELULARES (BIRKEDAL-HANSEN, 1993).
CÉLULA ENZIMA ATIVAÇÃO MOBILIZAÇÃO TEMPO DURAÇÃO DA
EXPRESSA TRANSCRICIONAL DA ENZIMA DE RESPOSTA RESPOSTA
LEUCÓCITO MMP-8, ? Grânulos Segundos minutos
MMP-9 de liberação
FIBROBLASTO MMP-1, IL-1, TGF-α, Ativação 6 a 12 hs Dias
MMP-2, TNFα, EGF, transcricional
MMP-3, PDGF, TPA
MMP-7,
MMP-11
QUERATINÓCITO MMP-1, TNFα, TGF-α, Ativação 6 a 12 hs Dias
MMP-2, TGF-β, EGF, TPA transcricional
MMP-9,
MMP-10
MACRÓFAGO MMP-1, TPA Ativação 6 a 12 hs Dias
MMP-2, transcricional
MMP-3,
MMP-9
CÉLULA MMP-1, TPA Ativação 6 a 12 hs Dias
ENDOTELIAL MMP-2, transcricional
MMP-3,
MMP-9

EGF – Fator de crescimento endotelial TGF-β – fator de crescimento transformador β

PDGF – Fator de crescimento derivado de plaqueta TNF- α – Fator de crescimento transformador α
IL-1 – Interleucina -1 TPA – Fator de ativação tipo plasminogênio
TGF-α – fator de crescimento transformador –α

níveis (Lauer-Fields et al, 2002). São eles:
1) Regulação da transcrição genética das MMPs:
Além da tanscrição da maioria dos genes de MMPs ser
regulada por fatores de crescimento endógenos e citocinas
que podem alterar em mais de 50 vezes os níveis protéicos e
de RNAm (Birkedal-Hansen et al, 1993; Visse & Nagase, 2003)
a proximidade de placa dental microbiana viável cria uma
oportunidade inigualável para o efeito transcricional direto
dos metabólitos microbianos nas células gengivais e
periodontais (Birkedal-Hansen, 1993; Zhou & Windsor, 2006).
Em um estudo que associou os níveis de MMP-8 e MMP-
9 a presença simultânea de patógenos no FGC, verificou-se
que microrganismos específicos parecem induzir resposta do
hospedeiro caracterizada pelo aumento na liberação destas
MMPs na bolsa periodontal. Os níveis de MMP-8 variaram
entre 1,53 ± 2,1 e 6,24 ± 10,7 ng/ sítio na ausência de
Tanerella forsythia e Aggregatibacter actinomycetemcomitans
(Aa), respectivamente e entre 7,45 ± 10,9 e 15,21 ± 14,5
ng/ sítio na presença destes microrganismos simultaneamen-
te a presença de Prevotella nigrecens e Treponema denticola,
respectivamente (Soder et al., 2006).
É importante destacar que a expressão de MMPs pode
ser, também, induzida ou inibida por seus próprios substratos
como colágeno e elastina (Lauer-Fields et al, 2002).
2) Ativação do precursor:
A latência dos precursores de MMP parece ser mantida,
pelo menos em parte por uma ligação coordenada que
conecta um resíduo não pareado de Cysteína (Cys) no
propeptídeo ao sítio ativo Zn++. A quebra da ligação Cys-
Zn++ é um pré-requisito para a ativação e pode ser alcançada
de várias formas diferentes (Birkedal-Hansen et al, 1993):
interação ou modificação do resíduo de Cys por
organomercúrios, íons metálicos, reagentes tiol e oxidantes;
mudanças conformacionais no esqueleto do peptídeo
induzidas por agentes caotrópicos e detergentes; excisão de
uma porção do propeptídeo por enzimas proteolíticas
(tripsina, plasmina, elastase do neutrófilo, catepsina B).
3) Diferenças na especificidade ao substrato:
Apesar das enzimas apresentarem uma sobreposição de
especificidade ao substrato, existem também diferenças no-
táveis, principalmente no que diz respeito à clivagem de
colágeno. A MMP-8 e MMP-1 apresentam a habilidade ca-
racterística de dissolver as fibras de colágeno intersticial pela
clivagem de componentes da molécula no domínio
proteinase dependente da tripla hélice (Birkedal-Hansen,
1993).

54

periodez2009 01-02-10.pmd 54 6/8/2010, 10:19 AM

 R. Periodontia - 19(4):51-60

Tabela 3
OS INIBIDORES DE MMP(KERRIGAN ET AL, 2000)
TIMP-1 TIMP-2 TIMP-3 TIMP-4
MMP inibida Todas menos MMP-14 Todas MMP-1, 2, 3,9 e 13 MMP-1, 2, 3,7 e 9
Maior eficiência MMP-1 MMP-2 e 9 ? MMP-2 e 7
Tamanho 28,5 kDa 21 kDa 21 kDa 22 kDa
Homologia na 42% com TIMP-2 27% comTIMP-1 51% com
sequência de TIMP-2 e 3
aminoácidos
Glicosilação + - + -
Localização difundida difundida Ligada a matriz difundida
Expressão induzível constitutiva induzível ?
Principal sítio Osso, ovário Placenta Rim e cérebro coração
tecidual
Formação de Pro-MMP-9 Pro- MMP-2 Pro- MMP-2 ?
complexos MT1-MMP MT1-MMP e matriz

MT - transmembrana

4) Inibidores de metaloproteinase: OS INIBIDORES DE METALOPROTEINASE

O papel dos inibidores de metaloproteinase é particular-
mente importante, pois é justamente um desequilíbrio entre
a forma ativa das MMPs e seus inibidores endógenos que
leva ao colapso patológico da matriz extracelular durante a
periodontite. Este raciocínio levou ao desenvolvimento de
vários inibidores sintéticos que funcionariam como agentes
terapêuticos potenciais compensando o déficit dos inibidores
naturais ou TIMPs em bloquear ou retardar a destruição
proteolítica do tecido conjuntivo (Ryan & Golub, 2000).
Dentre os inibidores endógenos destacam-se as α-
macroglobulinas que podem capturar as formas ativas de
MMP desempenhando um importante papel na regulação
de sua atividade e os TIMPs que formam complexos
covalentes bimoleculares clássicos com as formas ativas de
MMPs e, em alguns casos, com os precursores latentes. En-
quanto as primeiras funcionam como reguladoras das MMPs
nos fluidos corpóreos, as segundas atuam provavelmente a
nível pericelular. Entretanto, durante a inflamação, as α-
macroglobulinas de alto peso molecular podem escapar da
circulação e atuar na matriz extracelular (Birkedal-Hansen et
al, 1993).
Além disto, a atividade enzimática pode ser modificada
por inibidores exógenos representados pelos quelantes de
metais como ácido etil diamino tetracético (EDTA) e as
tetraciclinas (TTC), o que reflete a importância dos íons cál-
cio para a atividade catalítica ótima das MMPs (Lauer-Fields
et al, 2002).
TIMPs são pequenas glicoproteínas multifuncionais que
inibem especificamente as MMPs que se ligam a elas em
uma proporção estequiométrica de 1:1. Elas possuem um
domínio N e C- terminal que apresentam cerca de 125 e 65
amino-ácidos, respectivamente. O domínio N-terminal fun-
ciona como uma unidade separada e é capaz de inibir as
MMPs (Reynolds et al, 1994; Visse & Nagase, 2003; Kerrigan
et al, 2000). Os subdomínios-C medeiam interações com os
domínios catalíticos de algumas MMPs e com o domínio
hemopexina da MMP-2 e 9 (Baker et al, 2002).
TIMPs são proteínas secretadas, mas podem ser encon-
tradas na superfície celular em associação com proteínas de
ligação da membrana. São produzidas por muitos tecidos
apesar de nem todo tecido expressar os 4 tipos (TIMP-1, TIMP-
2, TIMP-3 e TIMP-4). De uma forma geral, a maioria das célu-
las mesenquimais e epidermais é capaz de produzi-los além
de poderem ser localizados nos grânulos á das plaquetas.
São também identificados na maioria dos fluidos corpóreos
como saliva, FGC, soro e urina (Reynolds et al, 1994; Visse &
Nagase, 2003; Verstappen & Von den Hoff, 2006).
Os mamíferos possuem 4 tipos de moléculas de TIMP
(TIMP-1, TIMP-2, TIMP-3 e TIMP-4) que apresentam várias si-
milaridades básicas, porém exibem características estrutu-
rais, propriedades bioquímicas e padrões de expressão dis-
tintos (TAB. 3) (Baker et al, 2002).
Apesar da inibição da destruição da matriz extracelular

55

periodez2009 01-02-10.pmd 55 6/8/2010, 10:19 AM

 R. Periodontia - 19(4):51-60

Tabela 4
ESTUDOS QUA AVALIARAM MMP E TIMP-1 NO FLUIDO GENGIVAL CREVICULAR (FGC) DE INDIVÍDUOS COM PERIODONTITE CRÔNICA
Estudo Objetivo Técnica MMP Periodontite crônica Gengivite Controle
níveis no FGC ELISA TIMP-1 13,68 ± 9,64 ng 11,18 ± 6,3 ng 3,39± 2,91 ng
Nomura atividade ELISA MMP-8 0,623 ± 0,372 U 0,360 ± 0,387 U 0,226 ± 0,181 U
et al. (1998) colagenolítica
níveis no FGC ELISA MMP-8 28.041± 8,20 ng/ sítio
de fumantes
Söder níveis no FGC ELISA MMP-8 45,74± 10,22 ng/ sítio
et al. (2002) de não fumantes
absorbância western MMP-8 2,571
no baseline
Kiili et al. (2002) pós-terapia imuno- MMP-8 0,696
bloting
níveis no ensaio MMP-8 54,1 ± 34,6ng/µL
baseline
Kinane 2 meses imuno- MMP-8 34,2 ±28,3 ng/µL
et al. (2003) após terapia fluoro-
após 3 meses métrico MMP-8 29,5 ± 22,1ng/µL
de TPS
níveis baseline ELISA MMP-8 7,8 ng/mL 3,5 ng/mL
atividade MMP-8 90654 AU 57145 AU
colagenolítica
baseline
Figueiredo níveis pós ELISA MMP-8 2,6 ng/mL 1,3 ng/mL
et al. (2004) terapia
atividade MMP-8 43239 23530 AU
colagenolítica AU
pós terapia
níveis baseline ELISA TIMP-1 29 ng/µl 91 ng/µl
níveis pós ELISA TIMP-1 51,3 ng/µl
terapia
Tüter níveis baseline ELISA MMP-3 9 ng/µl 0,15 ng/µl
et al. (2005)
níveis pós ELISA MMP-3 5,5 ng/µl
terapia
não diabéticos western MMP-8 326±58,83 237,7±37,01
Kumar ) diabéticos bloting MMP-8 420,9± 26,83
et al. (2006
níveis no FGC western MMP-7 37,33±7,5 pg/sítio 36,68±8,5 36,81± 6,8
bloting pg/sitio pg/sítio
Emingil níveis no FGC ELISA TIMP-1 278,57± 205,4 73,99±17 42,2±10,2
et al. (2006) pg/sítio pg/sítio pg/sítio

Rai et al. (2008) níveis no FGC ELISA MMP-8 428,6 ± 432,4 312,8 ± 301,8 95,2 ± 70,2
ng/ ml ng/ ml ng/ ml

56

periodez2009 01-02-10.pmd 56 6/8/2010, 10:19 AM


ter sido considerada a função primária dos TIMPs por vários
anos, o número de suas funções biológicas tem se expandi-
do rapidamente. Além da inibição de MMPs, os TIMPs têm
sido relacionados à sua ativação, a capacidade de estímulo
mitogênico e apoptótico, ao controle indireto da pressão
sanguínea através do seu efeito sobre as MMPs e às
interações imunológicas (Verstappen & Von den Hoff, 2006).
A ação inibitória dos TIMPs sobre as MMPs é exercida
em dois níveis: através da inibição da forma cataliticamente
ativa da enzima e através da prevenção ou atraso na conver-
são dos zimógenos de MMP para a forma ativa (Bodden et
al, 1994).
Todos os quatro tipos de TIMPs inibem as formas ativas
de todas as MMPs estudadas até hoje. Apesar da TIMP-1 ser
um fraco inibidor de MMP-19 e várias MMPs transmembrana
(MT-MMPs) ele é o principal inibidor de MMP-8 (Kiili et al,
2002; Baker et al, 2002).
TIMP-1 é uma glicoproteina de 30 kDa que forma com-
postos não covalentes essencialmente irreversíveis e de alta
afinidade com as formas ativas de MMP. Ela consiste em seis
hélices mantidas em posição por seis ligações dissulfido ar-
ranjadas em três estruturas semelhantes a nós porém, sua
atividade inibitória reside nas três primeiras hélices (Reynolds
et al, 1994; Bodden et al, 1994). As moléculas de TIMP -1
têm ação antiapoptótica e potencializadora das células
progenitoras dos eritrócitos e são capazes de alterar o
fenótipo metastático de certas células tumorais prevenindo
a invasão e metástase quando expressas excessivamente.
Também apresentam atividade promotora de crescimento
sobre uma série de tipos celulares. Além de estimular os
fibroblastos a produzirem MMP-1 (Visse & Nagase, 2003;
Bodden et al, 1994), acumulam-se no núcleo dessas células
de forma ciclo celular-dependente, com atividade máxima
na fase S, sugerindo sua participação no crescimento celular
(Nagase & Woessner, 1999; Verstappen & Von den Hoff,
2006).
TIMP-1 é produzido por vários tipos de tecidos (aorta,
cartilagem, osso embrionário, tendão, polpa dental, gengi-
va, sinóvia e útero) e células em cultura (fibroblastos, células
epiteliais e endoteliais, osteoblastos, condrócitos, plaquetas,
monócitos/ macrófagos, células musculares lisas e células
tumorais). Sua expressão diminui com o envelhecimento dos
fibroblastos o que contribui para o aumento da atividade
catabólica na derme. TIMP-1 também foi encontrado em
todos os fluidos corpóreos indicando ser uma proteína fun-
damental e ubíqua (Hayakawa, 1994; Hornebeck, 2003).
Verificou-se, ainda, que TIMP-1 e 2 estimulam a ativida-
de osteoclástica, efeito esse não observado com os inibidores
sintéticos. Assim como as MMPs os TIMPs foram encontra-
periodez2009 01-02-10.pmd 57
R. Periodontia - 19(4):51-60
dos com frequência em sítios que demonstravam evidência
histológica de remodelação tecidual (Bodden et al, 1994;
Baker et al, 2002).
Os TIMPs podem ser co-expressos com as MMPs, mas
os estudos têm demonstrado uma regulação recíproca de
sua expressão, a qual depende de fatores de crescimento e
citocinas expressos endogenamente. Em resumo, o equilí-
brio entre MMP e TIMP é variável nos processos fisiológicos,
tais como crescimento e desenvolvimento, e em condições
patológica, como câncer e periodontite (Verstappen & Von
den Hoff, 2006).
PAPEL DAS METALOPROTEINASES NA
DEGRADAÇÃO DO COLÁGENO GENGIVAL
Os colágenos tipo I e III, produzidos pelos fibroblastos
do ligamento periodontal e gengiva, são os componentes
predominantes da matriz extracelular do periodonto. A
clivagem inicial do colágeno do ligamento periodontal e da
gengiva é uma peça chave das lesões periodontais progres-
sivas e ativas causada por colagenases intersticiais derivadas
de células do hospedeiro (Kiili et al, 2002). A destruição
irreversível dos tecidos periodontais normalmente associada
ao aprofundamento do sulco gengival diferencia a
periodontite da gengivite sendo refletida no FGC de sítios
com lesão periodontal por altos níveis de MMP-8 ativa. Na
gengivite pode haver níveis ligeiramente elevados de MMP-8
no FGC, mas ela estará na proforma latente e inativa. Du-
rante a fase ativa da periodontite os níveis de MMP-8 ficam
significativamente elevados e ela é quase completamente
convertida para a forma ativa (Sorsa et al, 1999).
A Tabela 4 resume os resultados de alguns estudos so-
bre os níveis de MMP-8 e TIMP-1 no FGC e gengiva de indi-
víduos com periodontite.
Em função destas evidências, vários estudos têm avalia-
do o papel e o valor diagnóstico das formas de colagenase
(e gelatinase) no tecido conjuntivo, soro e FGC de portado-
res de doença periodontal e perimplantar nas mais diversas
situações (Ryan & Golub, 2000).
É importante ressaltar que a presença de MMPs no FGC
não necessariamente indica que as MMPs medidas no flui-
do estão presentes no tecido na mesma concentração ou
na mesma forma (latente ou ativa). Já que as MMPs podem
ligar-se às proteínas da matriz sem clivagem, supõe-se que
haja variação considerável entre os níveis do fluido crevicular
e tecido. De fato, a quantidade de enzima no FGC pode
simplesmente refletir a liberação de enzimas não ligadas na
lâmina própria da gengiva ou, alternativamente, a liberação
da enzima de células presentes no FGC (Uitto et al, 2003).
57
6/8/2010, 10:19 AM
 R. Periodontia - 19(4):51-60
DISCUSSÃO
O desenvolvimento tecnológico e científico atual permi-
tiu um enorme avanço do conhecimento acerca das molé-
culas e enzimas envolvidas nos processos patológicos e seu
comportamento biológico. Ao mesmo tempo, a diversividade
de técnicas usadas para se alcançar um mesmo objetivo gera
resultados com diferentes unidades de medida e diferentes
padronizações, o que dificulta a comparação entre esses re-
sultados e até mesmo a consistência dos estudos.
Dentro desse contexto é interessante observar que, os
estudos que avaliam os níveis de MMP-8 no FGC mostram
uma tendência a níveis elevados de MMP-8 antes do trata-
mento periodontal com redução desses níveis após o trata-
mento (Kiili et al, 2002; Kinane et al, 2003; Figueredo et al,
2004; Tüter et al, 2005). Entretanto, as diferentes
metodologias empregadas não permitem a definição de um
valor que diferencie gengivite de periodontite e, nem sem-
pre distinguem a forma ativa da enzima.
Assim, o FGC pode ser visto como um produto final do
processo destrutivo e, baixos níveis destes fatores podem
simplesmente indicar altos níveis de atividade dentro dos
tecidos (Palmer et al, 2005).
Em função da complexidade das moléculas e respostas
imunoinflamatórias envolvidas na progressão da doença
periodontal, verifica-se a necessidade de se estudar várias
MMPs simultaneamente, destacando a presença da forma
ativa já que esta reflete melhor a progressão temporal da
lesão do que somente a quantidade total da enzima (UItto
et al, 2003).
CONCLUSÕES
A MMP-8 desempenha um papel importante na evolu-
ção da doença periodontal através dos mecanismos de des-
58
periodez2009 01-02-10.pmd 58
truição de colágeno desencadeados pela sua forma ativa.
Além de inibir as MMPs, TIMP-1 parece estar envolvidos em
uma série de outras atividades biológicas, inclusive a ativa-
ção dessas enzimas. É importante ressaltar que se deve ter
cuidado na análise dos resultados de estudos que empre-
gam metodologias diferentes para determinar o papel da
MMP-8 no desenvolvimento da doença periodontal. Mais
estudos precisam ser desenvolvidos para que se compreen-
da a interrelação temporal da MMP-8 com a evolução da
doença periodontal.
ABSTRACT
Matrix metaloproteinase (MMP) and tissue inhibitor of
matrix metalloproteinase (TIMP) are extremely important
enzymes in connective tissue remodeling during
development, homeostasis and healing. An imbalance
between active MMPs and TIMPs create a pathological
collapse of extracellular matrix during periodontal disease
generating degradation of collagen fibers attached to the
root surface and epithelial apical migration with pocket
formation. MMP-8 is the major class among MMPs observed
in inflammed gingival tissue, gingival crevicular fluid, saliva as
well as dental and peri-implantar sulcular fluid. The levels and
activation of this enzyme seems to increase with the activity
and severity of periodontal disease, and decrease after
treatment. Due to MMP-8 relevance in periodontal disease
development, this paper aimed to review MMP-8 and TIMP-
1 participation in gingival collagen degradation during
periodontal disease, underlining the enzyme characteristics,
action and inhibition mechanisms, tissular expression and
gingival crevicular fluid levels.
UNITERMS: Periodontitis, Metaloproteinase, MMP-8,
TIMP-1
6/8/2010, 10:19 AM

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Aiba T, Akeno N, Kawane T, Okamoto H, Horiuchi N. Matrix
metalloproteinases-1 and -8 and TIMP-1 mRNA levels in normal and
diseased human gingivae. Eur J Oral Sci. 1996;104(5-6):562-9.
2. Baker AH, Edwards DR, Murphy G. Metalloproteinase inhibitors:
biological actions and therapeutic opportunities. J Cell Sci. 2002;115(Pt
19):3719-27.
3. Balbín M, Fueyo A, Tester AM, Pendás AM, Pitiot AS, Astudillo A, Overall
CM, Shapiro SD, López-Otín C. Loss of collagenase-2 confers increased
skin tumor susceptibility to male mice. Nat Genet. 2003;35(3):252-7.
4. Birkedal-Hansen H, Moore WG, Bodden MK, Windsor LJ, Birkedal-
Hansen B, DeCarlo A, Engler JA. Matrix metalloproteinases: a review.
Crit Rev Oral Biol Med. 1993;4(2):197-250.
5. Birkedal-Hansen H. Role of matrix metalloproteinases in human
periodontal diseases. J Periodontol. 1993;64(5 Suppl):474-84.
6. Bodden MK, Harber GJ, Birkedal-Hansen B, Windsor LJ, Caterina NC,
Engler JA, Birkedal-Hansen H. Functional domains of human TIMP-1
(tissue inhibitor of metalloproteinases). J Biol Chem.
1994;269(29):18943-52.
7. Emingil G, Tervahartiala T, Mãntylã P, Määttä M, Sorsa T, Atilla G. Gingival
crevicular fluid matrix metalloproteinase (MMP)-7, extracellular MMP
inducer, and tissue inhibitor of MMP-1 levels in periodontal disease. J
Periodontol. 2006; 77 (12):2040-50.
8. Figueredo CM, Areas A, Miranda LA, Fischer RG, Gustafsson A. The
short-term effectiveness of non-surgical treatment in reducing protease
activity in gingival crevicular fluid from chronic periodontitis atients. J
Clin Periodontol. 2004;31(8):615-9.
9. Gueders MM, Balbin M, Rocks N, Foidart JM, Gosset P, Louis R, Shapiro
S, Lopez-Otin C, Noël A, Cataldo DD. Matrix metalloproteinase-8
deficiency promotes granulocytic allergen-induced airway inflammation.
J Immunol. 2005;175(4):2589-97.
10. Hayakawa T. Tissue inhibitors of metalloproteinases and their cell
growth-promoting activity. Cell Struct Funct. 1994;19(3):109-14.
11. Henney AM, Ye S, Zhang B, Jormsjo S, Whatling C, Eriksson P, Hamsten
A. Genetic diversity in the matrix metalloproteinase family. Effects on
function and disease progression. Ann N Y Acad Sci. 2000;902:27-37.
12. Hornebeck W. Down-regulation of tissue inhibitor of matrix
metalloprotease-1 (TIMP-1) in aged human skin contributes to matrix
degradation and impaired cell growth and survival. Pathol Biol.
2003;51(10):569-73.
13. Kerrigan JJ, Mansell JP, Sandy JR. Matrix turnover.J Orthod.
2000;27(3):227-33.
14. Kiili M, Cox SW, Chen HY, Wahlgren J, Maisi P, Eley BM, Salo T, Sorsa
T. Collagenase-2 (MMP-8) and collagenase-3 (MMP-13) in adult
periodontitis: molecular forms and levels in gingival crevicular fluid and
immunolocalisation in gingival tissue. J Clin Periodontol. 2002;
periodez2009 01-02-10.pmd 59
R. Periodontia - 19(4):51-60
29:224-32.
15. Kinane DF, Darby IB, Said S, Luoto H, Sorsa T, Tikanoja S, Mäntylä P.
Changes in gingival crevicular fluid matrix metalloproteinase-8 levels
during periodontal treatment and maintenance. J Periodontal Res.
2003;38(4):400-4.
16. Kumar MS, Vamsi G, Sripriya R, Sehgal PK. Expression of matrix
metalloproteinases (MMP-8 and MMP-9) in chronic periodontits patients
with and without diabetes mellitus. J Periodontol. 2006; 77 (11):
1803-8.
17. Kurtis B, Tüter G, Serdar M, Pinar S, Demirel I, Toyman U. GCF MMP-
8 levels in smokers and non-smokers with chronic periodontitis
following scaling and root planing accompanied by systemic use of
flurbiprofen. J Periodontol. 2007;78(10):1954-61.
18. Lauer-Fields JL, Juska D, Fields GB. Matrix metalloproteinases and
collagen catabolism.Biopolymers. 2002;66(1):19-32.
19. Meikle MC, Hembry RM, Holley J, Horton C, McFarlane CG, Reynolds
JJ. Immunolocalization of matrix metalloproteinases and TIMP-1 (tissue
inhibitor of metalloproteinases) in human gingival tissues from
periodontitis patients. J Periodontal Res. 1994;29(2):118-26.
20. Nagase H, Woessner JF Jr. Matrix metalloproteinases. J Biol Chem.
1999;274(31):21491-4.
21. Nomura T, Ishii A, Oishi Y, Kohma H, Hara K. Tissue inhibitors of
metalloproteinases level and collagenase activity in gingival crevicular
fluid: the relevance to periodontal diseases. Oral Dis. 1998;4(4):
231-40.
22. Overall CM, Wiebkin OW, Thonard JC. Demonstration of tissue
collagenase activity in vivo and its relationship to inflammation severity
in human gingiva. J Periodontal Res. 1987;22(2):81-8.
23. Owen CA, Hu Z, Lopez-Otin C, Shapiro SD. Membrane-bound matrix
metalloproteinase-8 on activated polymorphonuclear cells is a potent,
tissue inhibitor of metalloproteinase-resistant collagenase and serpinase.
J Immunol. 2004; 172(12):7791-803.
24. Palmer RM, Wilson RF, Hasan AS, Scott DA. Mechanisms of action of
environmental factors-tobacco smoking. J Clin Periodontol. 2005;32
Suppl 6:180-95.
25. Rai B, Kharb S, Jain R, Anand SC. Biomarkers of periodontitis in oral
fluids. J Oral Sci. 2008;50(1):53-6.
26. Reynolds JJ, Hembry RM, Meikle MC Connective tissue degradation in
health and periodontal disease and the roles of matrix
metalloproteinases and their natural inhibitors. Adv Dent Res.
1994;8(2):312-9.
27. Ryan ME, Golub LM. Modulation of matrix metalloproteinase activities
in periodontitis as a treatment strategy Periodontol 2000. 2000;
24:226-38.
28. Séeguier S, Godeau G, Brousse N. Collagen fibers and inflammatory
59
6/8/2010, 10:19 AM
 R. Periodontia - 19(4):51-60

cells in healthy and diseased human gingival tissues: a comparative

and quantitative study by immunohistochemistry and automated image
analysis. J Periodontol. 2000;71(7):1079-85.

29. Soder B, Airila Mansson S, Soder PO, Kari K, Meurman J. Levels of

matrix metalloproteinases-8 and -9 with simultaneous presence of
periodontal pathogens in gingival crevicular fluid as well as matrix
metalloproteinase-9 and cholesterol in blood. J Periodontal Res. 2006
Oct;41(5):411-7.

30. Soder B, Jin LJ, Wickholm S. Granulocyte elastase, matrix

Metalloproteinase-8 and prostaglandin E2 in gingival crevicular fluid in
matched clinical sites in smokers and non-smokers with persistent
periodontitis. J Clin Periodontol. 2002;29(5):384-91.

31. Sorsa T, Mantyla P, Ronka H, Kallio P, Kallis GB, Lundqvist C, Kinane

DF, Salo T, Golub LM, Teronen O, Tikanoja S. Scientific basis of a matrix
metalloproteinase-8 specific chair-side test for monitoring periodontal
and peri-implant health and disease. Ann N Y Acad Sci. 1999; 30
(878):130-40. .

32. Sorsa T, Tjaderhane L, Konttinen YT, Lauhio A, Salo T, Lee HM, Golub
LM, Brown DL, Mantyla P. Matrix metalloproteinases: contribution to
pathogenesis, diagnosis and treatment of periodontal inflammation.
Ann Med. 2006;38(5):306-21.

33. Tüter G, Kurtiº B, Serdar M, Yücel A, Ayhan E, Karaduman B, Ozcan

G. Effects of phase I periodontal treatment on gingival crevicular fluid
levels of matrix metalloproteinase-3 and tissue inhibitor of
metalloproteinase-1. J Clin Periodontol. 2005;32(9):1011-5.

34. Uitto VJ, Overall CM, McCulloch C. Proteolytic host cell enzymes in
gingival crevice fluid. Periodontol 2000. 2003;31:77-104.

35. Verstappen J, Von den Hoff JW. Tissue inhibitors of metalloproteinases

(TIMPs): their biological functions and involvement in oral disease. J
Dent Res. 2006;85(12):1074-84.

36. Visse R, Nagase H. Matrix metalloproteinases and tissue inhibitors of

metalloproteinases: structure, function, and biochemistry. Circ Res.
2003; 92(8):827-39.

37. Zhou J, Windsor LJ. Porphyromonas gingivalis affects host collagen

degradation by affecting expression, activation, and inhibition of matrix
metalloproteinases. Periodontal Res. 2006;41(1):47-54.

Endereço para correspondência:

Carolina Ferreira Franco
Rua do Ouro, 1571/801 - Serra
CEP: 30210-590 - Belo Horizonte - MG
E-mail: carolinaffranco@hotmail.com

60

periodez2009 01-02-10.pmd 60 6/8/2010, 10:19 AM