Assine o DeepL Pro para traduzir arquivos maiores.

Mais informações em www.DeepL.com/pro.

[Frontiers in Bioscience 16, 21-30, 1º de janeiro de

2011].

Mecanismo de regulação da osteoclastogênese por sinais de RANKL e Wnt

Naoyuki Takahashi1 , Kazuhiro Maeda1,4 , Akihiro Ishihara1,2 , Shunsuke Uehara3 , Yasuhiro Kobayashi1
1Institute
for Oral Science, Matsumoto Dental University, 1780 Gobara, Hiro-oka, Shiojiri, Nagano 399-0781, Japão,2
Department of Periodontology, Matsumoto Dental University, 1780 Gobara, Hiro-oka, Shiojiri, Nagano 399-0781, Japão,
3Department of Biochemistry, Matsumoto Dental University, 1780 Gobara, Hiro-oka, Shiojiri, Nagano 399-0781, Japão,4

Department of Orthopaedic Surgery, Jikei University, 3-25-8 Nishi-Shinbashi, Minato-ku, Tokyo 105-8461, Japão

ÍNDICE DE CONTEÚDO

1. Resumo
2. Introdução
3. Regulação da diferenciação e da função dos osteoclastos
3.1. M-CSF
3.2. RANKL
3.3 DC-STAMP
4. Transdução de sinal na osteoclastogênese
4.1. NFATc1
4.2. Sinais co-estimulatórios do ITAM
5. Vias de sinalização Wnt
5.1. Sinais Wnt canônicos e não canônicos
5.2. Papel dos sinais Wnt canônicos na reabsorção óssea
5.3. Papel dos sinais Wnt não canônicos na reabsorção óssea
6. Conclusões
7. Referências

osteoclastogênese por sinais de RANKL e Wnt.

1. RESUMO

Os osteoclastos se desenvolvem a partir de

células da linhagem de monócitos-macrófagos sob a
regulação dos osteoblastos. Os osteoblastos expressam duas
citocinas essenciais para a osteoclastogênese, o fator
estimulador de colônias de macrófagos (M-CSF) e o
ativador do receptor do ligante do fator nuclear-κB
(RANKL). Os osteoblastos também produzem
osteoprotegerina (OPG), um receptor chamariz para
RANKL, que inibe a interação entre RANKL e RANK, um
receptor de RANKL. Os fatores estimulantes da reabsorção
óssea atuam nos osteoblastos para regular a expressão de
RANKL e OPG. O fator nuclear de células T ativadas,
citoplasmático 1 (NFATc1) é um fator de transcrição
principal para a diferenciação de osteoclastos. O sinal
mediado pelo motivo de ativação baseado em tirosina do
imunorreceptor (ITAM) foi descoberto como um sinal
coestimulatório na osteoclastogênese induzida por
RANKL. As proteínas Wnt ativam duas vias: vias
canônicas dependentes de β-catenina e vias não canônicas
independentes de β-catenina. As proteínas Wnt promovem
a diferenciação dos osteoblastos por meio da v i a
canônica. A via canônica nos osteoblastos também suprime
a osteoclastogênese por meio da regulação positiva da
expressão de OPG e da regulação negativa da expressão de
RANKL. Em contrapartida, a ativação da via não canônica
nos precursores de osteoclastos aumenta a diferenciação
osteoclástica induzida por RANKL. Assim, os sinais Wnt
em osteoblastos e precursores de osteoclastos
desempenham funções importantes na osteoclastogênese.
Esta revisão resume o mecanismo regulatório da
21
[Frontiers in Bioscience 16, 21-30, 1º de janeiro de
2011].
2. INTRODUÇÃO

Osteoblastos e osteoclastos são células

especializadas responsáveis pela formação e reabsorção
óssea, respectivamente. Os osteoblastos produzem
proteínas da matriz óssea e conduzem a mineralização do
tecido. Os osteoclastos, células gigantes multinucleadas
que reabsorvem o osso, desenvolvem-se a partir de células
hematopoiéticas da linhagem de monócitos e macrófagos
(1-3). Desenvolvemos um sistema de cocultura de
camundongo de osteoblastos/células estromais e células
hematopoiéticas no qual os osteoclastos são formados em
resposta a fatores estimulantes da reabsorção óssea, como
1α,25-dihidroxivitamina D3 [1α,25(OH) D23 ], hormônio
da paratireoide (PTH), prostaglandina E2 (PGE2 ) e
interleucina 11 (IL-11) (1,4). Uma série de experimentos
usando esse sistema de cocultura estabeleceu o conceito de
que os osteoblastos/células estromais estão intimamente
envolvidos no desenvolvimento dos osteoclastos (5).

Os avanços na biologia das células ósseas

elucidaram o mecanismo preciso pelo qual os osteoblastos
regulam a diferenciação e a função dos osteoclastos. Os
osteoblastos expressam duas citocinas, o fator estimulador
de colônias de macrófagos (M-CSF, também chamado de
CSF-1) e o ativador do receptor do ligante do fator nuclear
κB (RANKL), essenciais para a diferenciação dos
osteoclastos (1,6). Todos os fatores estimulantes da
reabsorção óssea estimulam a expressão de RANKL em
osteoblastos/células estromais. A identificação do fator
nuclear de células T ativadas, citoplasmático 1 (NFATc1),
um fator de transcrição principal para a osteoclastogênese,
forneceu informações importantes sobre o mecanismo
molecular da diferenciação de osteoclastos (7). A
descoberta da ativação baseada em tirosina de
imunorreceptores

22
Osteoclastogênese e sinais RANKL/Wnt

Figura 1. Regulação da diferenciação e da função dos osteoclastos pelos osteoblastos. Os fatores estimulantes da reabsorção
óssea, como 1α,25(OH) D23 , PTH, PGE2 e IL-11, atuam nos osteoblastos para induzir a expressão de RANKL. Os osteoblastos
produzem constitutivamente M- CSF. Os precursores de osteoclastos da linhagem de monócitos e macrófagos expressam RANK
e c-Fms. Os precursores de osteoclastos reconhecem o RANKL expresso pelos osteoblastos por meio da interação célula a célula
e se diferenciam em pré-osteoclastos mononucleares na presença de M-CSF. Os pré-osteoclastos mononucleares expressam o
DC-STAMP, que é essencial para a fusão entre os pré-osteoclastos para formar osteoclastos multinucleados. Os osteoclastos
maduros também expressam RANK, e o RANKL induz a atividade de reabsorção óssea dos osteoclastos maduros por meio da
ligação ao RANK.
diferenciação osteoclástica.
motif (ITAM) como sinal coestimulatório na
osteoclastogênese induzida por RANKL confirmou que os
osteoblastos desempenham outro papel importante na
osteoclastogênese (7).

As proteínas Wnt (Wnts) são uma família de 19

glicoproteínas (8, 9). A Wnt se liga a dois complexos
receptores distintos: um complexo de Frizzled e proteína
5/6 relacionada ao receptor de lipoproteína de baixa
densidade (LRP5/6) e outro complexo de Frizzled e
receptores órfãos de tirosina quinase (Rors). A ligação de
Wnts aos receptores ativa duas classes de vias de
sinalização: uma via canônica dependente de ◻-catenina e
uma via não canônica independente de β-catenina. A
importância da via canônica na biologia óssea foi
enfatizada pela identificação de uma ligação entre a massa
óssea e as mutações no gene LRP5 (10). As mutações de
perda de função no LRP5 reduzem o número de
osteoblastos e causam osteoporose.

Descobertas recentes demonstraram que a via

canônica dependente de β-catenina em osteoblastos/células
estromais suprime a osteoclastogênese por meio da
regulação positiva da expressão de osteoprotegerina (OPG)
e da regulação negativa da expressão de RANKL (11,12).
Além disso, a ativação da via não canônica em precursores
de osteoclastos aumenta a diferenciação osteoclástica
induzida por RANKL, de maneira autônoma (13). Esses
resultados sugerem que as Wnts desempenham funções
importantes não só na formação óssea, mas também na
23
Osteoclastogênese e sinais RANKL/Wnt

também na reabsorção óssea. Nesta revisão, resumimos o

mecanismo regulatório da osteoclastogênese pelos sinais
de RANKL e Wnt. Neste artigo, a palavra "osteoblastos" é
usada como um nome genérico para células da linhagem
de osteoblastos, incluindo células estromais da medula
óssea.

3. REGULAMENTO DA
DIFERENCIAÇÃO E FUNÇÃO DOS
OSTEOCLASTOS

3.1. M-CSF
Experimentos com um modelo de camundongo
osteopetrótico op/op estabeleceram que um produto de
osteoblasto, o M-CSF, é crucial para a formação de
osteoclastos (14) (Figura 1). O gene M-CSF dos
camundongos op/op não pode codificar funcionalmente a
proteína M-CSF ativa devido a uma inserção extra de
timidina na região codificadora do gene M-CSF. A
administração de M-CSF humano recombinante restaurou
a reabsorção óssea prejudicada em camundongos op/op
(15). Os osteoblastos calvários obtidos de camundongos
op/op não conseguiram apoiar o desenvolvimento de
osteoclastos em coculturas com células normais do baço,
mas a adição de M-CSF a coculturas induziu a formação
de osteoclastos em resposta a 1α,25(OH) D23 (16). Essas
descobertas indicam que o M-CSF produzido por
osteoblastos desempenha uma função essencial no
desenvolvimento de osteoclastos. O M-CSF está envolvido
não apenas na proliferação de progenitores de osteoclastos
da linhagem de monócitos/macrófagos, mas também na
sua diferenciação em osteoclastos. Os
osteoblastos expressam constitutivamente o M-CSF (17)
(Figura 1).

24
Osteoclastogênese e sinais RANKL/Wnt

especializadas na reabsorção óssea.

3.2. RANKL
O RANKL é um membro da família do fator de
4. SINAL TRANSDUÇÃO NA
necrose tumoral (TNF) (TNF superfamily member 11,
OSTEOCLASTOGÊNESE
TNFSF11), que também é identificado como "fator de
diferenciação de osteoclastos" (18-21) (Figura 1). Em
4.1. NFATc1
contraste com o M-CSF, a expressão de RANKL por
A cauda citoplasmática do RANK interage com o
osteoblastos é induzível. Os osteoblastos expressam
TNF
RANKL como uma forma associada à membrana em
resposta a estímulos de hormônios e fatores estimulantes da
reabsorção óssea, como 1α,25(OH) D23 , PTH, PGE2 e IL-
11 (1,6,18). Os precursores de osteoclastos expressam c-
Fms (receptores de M-CSF) e RANK (membro da
superfamília de receptores de TNF 11A, TNFRSF11A). Os
precursores de osteoclastos reconhecem o RANKL por
meio de interações célula a célula com osteoblastos e se
diferenciam em osteoclastos na presença de M-CSF. O
RANKL expresso pelos osteoblastos também estimula a
sobrevivência e a atividade de reabsorção óssea dos
osteoclastos. Assim, o RANKL é uma citocina responsável
por todo o ciclo de vida dos osteoclastos. Os osteoblastos
também produzem OPG (TNFRSF11B), um receptor isca
solúvel para RANKL, que inibe a osteoclastogênese ao
bloquear a interação RANKL-RANK (1, 6, 22, 23). A
produção de OPG pelos osteoblastos também é regulada
por fatores osteotrópicos. A maioria dos hormônios
estimulantes da reabsorção óssea e das citocinas regula
negativamente a expressão de OPG nos osteoblastos (1, 6).
Tanto os camundongos com deficiência de RANKL
(RANKL-/- ) (24) quanto os camundongos RANK-/- (25)
desenvolveram osteopetrose grave sem osteoclastos nos
tecidos ósseos. Por outro lado, os camundongos OPG-/-
apresentaram grave porosidade óssea trabecular e cortical
com maior reabsorção óssea osteoclástica (26, 27). A
administração de OPG ou de anticorpos bloqueadores
contra RANKL a camundongos normais suprimiu
fortemente a atividade de reabsorção óssea dos
osteoclastos, bem como a diferenciação dos osteoclastos
(22, 28) (Figura 1). Em conjunto, esses achados confirmam
a noção de que o RANKL expresso por osteoblastos
também desempenha um papel essencial na diferenciação e
função dos osteoclastos em humanos.

3.3. DC-STAMP
Os osteoclastos multinucleados são formados pela
fusão célula-célula de pré-osteoclastos mononucleares.
Estudos recentes demonstraram que a proteína
transmembrana específica de células dendríticas (DC-
STAMP), uma proteína de sete transmembranas, é
responsável pela fusão celular dos osteoclastos (29, 30). A
expressão da DC-STAMP nos precursores de osteoclastos
foi regulada positivamente durante a diferenciação em
osteoclastos. Não foram observados osteoclastos
multinucleados em camundongos nocauteados para DC-
STAMP (DC-STAMP-/- ), mas muitos pré-osteoclastos
mononucleares que expressam marcadores específicos de
osteoclastos foram detectados nesses tecidos ósseos. A
atividade de reabsorção óssea foi consideravelmente menor
nos osteoclastos DC-STAMP-/- do que nos osteoclastos do
tipo selvagem (30). Os camundongos DC-STAMP-/-
desenvolveram osteopetrose leve. Esses resultados sugerem
que a DC-STAMP é uma molécula essencial para a fusão
de osteoclastos, e os osteoclastos multinucleados têm maior
atividade de reabsorção óssea do que os pré-osteoclastos
mononucleares. Assim, os osteoclastos são células
multinucleadas especificamente diferenciadas e
25
Osteoclastogênese e sinais RANKL/Wnt

A oscilação do cálcio intracelular é um estímulo

fator associado ao receptor 1 (TRAF1), TRAF2, TRAF3,
importante para a ativação do NFATc1. Koga et al. (46)
TRAF5 e TRAF6 (31, 32). Desses, os sinais mediados
demonstraram que as moléculas que contêm ITAM, como a
pelo TRAF6 parecem ser importantes para a diferenciação
proteína ativadora de DNAX 12 (DAP12) e a cadeia γ
e a função dos osteoclastos, pois os camundongos TRAF6-
/- desenvolvem osteopetrose (33, 34). Os sinais mediados comum do receptor Fc
pelo TRAF6 nos precursores de osteoclastos aumentam a
ativação do fator nuclear-κB (NF-κB) e da quinase c-Jun
N-terminal (JNK) e a indução de c-Fos. Os camundongos
com deficiência das subunidades p50 e p52 do NF-κB (35,
36) e aqueles sem c-Fos (37) desenvolvem osteopetrose
devido a um bloqueio precoce da diferenciação na
linhagem de osteoclastos. Usando camundongos com falta
de JNK1 ou JNK2, David et al. (38) demonstraram que a
ativação de JNK1 modula essencialmente a
osteoclastogênese. Ikeda et al. (39) também relataram que
a sinalização mediada por RANK em osteoclastos foi
inibida pela superexpressão de JNK1 dominante-negativa.
Esses resultados sugerem que a JNK1 desempenha uma
função na osteoclastogênese.

A RAW264.7, uma linha celular mieloide de

camundongo transformada, diferencia-se em osteoclastos
em resposta ao RANKL. Ishida et al. (40) relataram que
outro fator de transcrição, o NFATc1 (também chamado
de NFAT2), foi especificamente induzido nas células
RAW264.7 pelo tratamento com RANKL. A translocação
do NFATc1 para o núcleo é uma etapa essencial na
autoamplificação, seguida pelo exercício de sua função. A
calcineurina é uma fosfatase dependente de Ca2+ que é
ativada pela sinalização de cálcio-calmodulina. O inibidor
de calcineurina ciclosporina A inibiu a atividade de
NFATc1 e suprimiu a diferenciação de osteoclastos. Os
oligonucleotídeos antisense para NFATc1 também
suprimiram a diferenciação de osteoclastos. Usando um
microarray de cDNA, Takayanagi et al. (41) identificaram
independentemente o NFATc1 como um fator de
transcrição principal para a diferenciação de osteoclastos.
O RANKL evocou oscilações de Ca2+ que as levaram à
ativação de NFATc1 mediada por calcineurina (7, 41).

4.2. Sinais co-estimulatórios do ITAM

O ITAM é um importante componente de
sinalização para vários receptores do sistema imunológico,
incluindo receptores de células T, células B, células NK e
receptores Fc (42, 43). Kim et al.
(44) obtiveram sucesso na clonagem molecular de um
novo membro da família do complexo de receptores de
leucócitos (LRC), expresso especificamente por
osteoclastos, e o denominaram "receptor associado a
osteoclastos (OSCAR)" (Figura 2). Os genes da família
LRC produzem receptores de superfície semelhantes a
imunoglobulinas e desempenham funções essenciais na
regulação das respostas imunes inatas e adaptativas (45).
O OSCAR é detectado especificamente em pré-
osteoclastos mononucleares murinos ou osteoclastos
multinucleados (44). Foi demonstrado que o ligante
putativo do OSCAR é expresso por osteoblastos. A adição
de uma forma solúvel de OSCAR em coculturas com
osteoblastos inibiu a formação de osteoclastos a partir de
células precursoras da medula óssea na presença de fatores
de reabsorção óssea (44). Esses resultados sugerem que o
OSCAR pode ser um importante regulador específico do
osso da diferenciação de osteoclastos. Entretanto, a função
fisiológica do OSCAR na osteoclastogênese ainda precisa
ser elucidada.

26
Osteoclastogênese e sinais RANKL/Wnt

Figura 2. Sinais intracelulares em precursores de osteoclastos induzidos por osteoblastos. A diferenciação de osteoclastos é
induzida por sinais mediados por c-Fms, RANK e seus receptores coestimulatórios do tipo imunoglobulina, como OSCAR e
TREM-2. c-Fms tem um domínio de tirosina quinase na região citoplasmática, e os sinais mediados por tirosina quinase regulam
a proliferação de progenitores de osteoclastos e sua diferenciação em osteoclastos. A ligação do RANKL ao RANK resulta no
recrutamento de membros da família TRAF, incluindo TRAF2 e TRAF6. Os sinais mediados por RANK induzem a expressão de
c-Fos e a ativação de NF-κB. Em colaboração com os sinais mediados por c-Fms, os sinais mediados por RANK induzem a
autoamplificação de NFATc1, um fator de transcrição fundamental para a osteoclastogênese. A ativação da AP-1 é um pré-
requisito para a indução robusta do NFATc1. A ativação de RANK também induz a fosforilação de ITAM em DAP12 e FcRγ,
proteínas adaptadoras associadas a receptores do tipo imunoglobulina. Os osteoblastos expressam ligantes não identificados de
receptores do tipo imunoglobulina, que estimulam a fosforilação de ITAM em DAP12 e FcRγ. A fosforilação do ITAM resulta na
ativação da sinalização de cálcio. Os sinais induzidos pelo ITAM também ativam a calcineurina, uma fosfatase, que desfosforila o
NFATc1 (ativação do NFATc1). A indução do NFATc1 e sua ativação nos precursores de osteoclastos induzem sua diferenciação
em osteoclastos.

(FcRγ), facilitam o mecanismo de mobilização de cálcio
durante a osteoclastogênese (Figura 2). O FcRγ e o DAP12
são moléculas adaptadoras que se associam a receptores
semelhantes à imunoglobulina, como o OSCAR,
desencadeando receptores expressos em células mieloides 2
(TREM2), a proteína reguladora de sinal β1 (SIRPβ1) e o
receptor A semelhante à imunoglobulina pareada (PIR-A).
OSCAR e PIR-A usam FcRγ, enquanto TREM2 e SIRPβ1
se associam a DAP12. A deficiência de FcRγ e DAP12
causou fenótipos osteopetróticos em camundongos (46). Os
sinais mediados pelo ITAM cooperam com o RANK para
estimular a oscilação do cálcio por meio da fosforilação do
ITAM e a consequente ativação da tirosina quinase do baço
(SYK) e da fosfolipase Cγ (PLCγ). Recentemente, foi
demonstrado que a sinalização de RANK e ITAM induziu a
formação de tirosina quinases não receptoras da família Tec
[Tec/Bruton's tyrosine kinase (Btk)] e proteína de ligação
de células B (BLNK), e resultou na ativação mediada por
PLCγ, um sinal de cálcio essencial para a osteoclastogênese
(47). Como essa via é essencial para a indução robusta de
NFATc1 que leva à osteoclastogênese, esses sinais são
conhecidos como sinais coestimulatórios para RANK na
osteoclastogênese. Embora os ligantes desses receptores
tenham de ser identificados no futuro, foi proposto que os
osteoblastos
27
expressam moléculas que estimulam os sinais ITAM.
Estudos recentes mostraram que o sistema de semafoplina
6D e seu receptor plexina A1 têm funções importantes na
diferenciação de osteoclastos por meio da ativação de sinais
ITAM mediados por DAP12 (48). Essa série de
experimentos estabeleceu uma nova área de pesquisa, a
"Osteoimunologia" (7).
5. VIAS DE SINALIZAÇÃO WNT
5.1. Sinais Wnt canônicos e não canônicos
Na ausência de sinalização Wnt, a glicogênio
sintase quinase-3β (GSK-3β) fosforila a β-catenina nas
células-alvo (8,9) (Figura 3). A β-catenina fosforilada é
degradada por meio da via ubiquitina-proteassoma. Os
ligantes da classe Wnt1, como Wnt1 e Wnt3a, ativam a via
canônica por meio da formação de um complexo de Wnt,
Frizzled e LRP5 ou LRP6 (49). Esse complexo, por sua
vez, promove a fosforilação da GSK-3β, que inibe a
atividade de cinase da GSK-3β. A inativação da GSK-3β
induz o acúmulo de β-catenina nas células-alvo, seguido
pela translocação da β-catenina acumulada para o núcleo. O
acúmulo de β-catenina leva à sua translocação para o
núcleo, onde interage com a célula T
Osteoclastogênese e sinais RANKL/Wnt

Figura 3. Vias de sinalização Wnt. Via Wnt canônica: Na ausência de Wnts, a GSK-3β fosforila a β-catenina nas células-alvo. As
Wnts canônicas (Wnt3a) se ligam ao complexo receptor de Frizzled e LRP5 ou LRP6, inibem a GSK-3β e promovem o acúmulo
de β-catenina. A β-catenina acumulada é translocada para o núcleo e, juntamente com o TCF/LEF, induz a expressão de genes-
alvo da Wnt. Via Wnt não canônica: As Wnts não canônicas (Wnt5a) se ligam ao complexo receptor de Frizzled e Ror1 ou Ror2.
Essa ligação ativa a via de polaridade celular plana por meio de sinais dependentes de RhoA, Rac e JNK. As Wnts não canônicas
também ativam sinais dependentes de PKC e calcineurina.

(TCF/LEF) para iniciar a transcrição dos genes-alvo. O
LRP5 e o LRP6 atuam como coreceptores Wnt para a via
canônica (8,9,49). A importância da via canônica na
biologia óssea foi enfatizada pela identificação de uma
ligação entre a massa óssea e as mutações no gene LRP5
(10). As mutações de perda de função no LRP5 reduzem o
número de osteoblastos e causam osteoporose (10, 50). Um
relatório recente sugeriu que os sinais do LRP5 controlam a
formação óssea ao inibir a síntese de serotonina no duodeno
(51).
A sinalização Wnt não canônica é classificada
em duas subvias: as vias Wnt/Ca2+ e Wnt/planer cell
polarity (49). Ambas as vias são ativadas por ligantes da
classe Wnt5a, como Wnt5a e Wnt11. A via do Ca2+ ativa
enzimas sensíveis ao Ca2+ , como a Ca2+ - proteína quinase
II dependente de calmodulina (CAMKII) e a proteína
quinase C (PKC) (52-55). A via de polaridade das células
planas é mediada por sinais dependentes de JNK, e essa via
desempenha um papel fundamental nos processos
morfogenéticos, incluindo movimentos de extensão
convergente durante a gastrulação e o alinhamento das
células ciliadas sensoriais dos ouvidos internos (56-58). A
família Ror de mamíferos consiste em duas proteínas
estruturalmente relacionadas, Ror1 e Ror2. Ror1 e Ror2
atuam como receptores alternativos ou coreceptores para
Wnt5a (59). O Wnt5a se liga ao domínio rico em cisteína
do Ror2, que então se associa ao Frizzled2 e ativa a JNK
em células cultivadas (60). Recentemente, Sato et al. (61)
demonstraram que o Frizzled2 foi internalizado por meio
de uma rota mediada por clatrina em resposta ao Wnt5a, e
Ror1 ou Ror2
28
foram necessários para essa ação. Esses resultados sugerem
que tanto Ror2 quanto Ror1 mediam a sinalização de
Wnt5a ativando a via não canônica de Wnt.
5.2. Papel dos sinais Wnt canônicos na reabsorção óssea
Os osteoclastos são formados em coculturas de
osteoblastos e células da medula óssea na presença de
fatores estimulantes da reabsorção óssea, como 1α,25(OH)
D23 e PTH. A Wnt3a inibe fortemente a formação de
osteoclastos induzida por 1α,25(OH) D23 em coculturas de
células ST2 estromais e células da medula óssea (62).
Entretanto, a Wnt3a não inibe a formação de osteoclastos
induzida por RANKL em culturas de macrófagos da
medula óssea. Esses resultados sugerem que o efeito
inibitório da Wnt3a na formação de osteoclastos é mediado
por osteoblastos. Glass et al. (11) desenvolveram
camundongos que expressam uma forma estabilizada de β-
catenina em seus osteoblastos (camundongos mutantes de
β-catenina) e relataram que a massa óssea aumentou, mas o
número de osteoblastos e outros parâmetros da função dos
osteoblastos permaneceram inalterados nesses
camundongos (Figura 4). Curiosamente, os camundongos
mutantes da β-catenina desenvolveram osteopetrose com
defeitos de erupção dentária e um número reduzido de
osteoclastos. A desoxipiridinolina urinária, um marcador de
reabsorção óssea osteoclástica, também foi reduzida nos
camundongos mutantes para β-catenina. A análise de
microarray comparando as alterações de expressão gênica
em camundongos LRP5-/- e camundongos mutantes de β-
catenina mostrou que a OPG foi regulada positivamente em
osteoblastos nesses camundongos
(11). Quando a β-catenina foi inativada seletivamente em
osteoblastos maduros usando camundongos Cre de
Osteoclastogênese e sinais RANKL/Wnt

colágeno α1(I), a massa óssea diminuiu devido ao

aumento da reabsorção óssea. A ativação da via Wnt
canônica estimulou a OPG

29
Osteoclastogênese e sinais RANKL/Wnt

Figura 4. Regulação da diferenciação de osteoclastos por sinais Wnt. Via Wnt canônica: As Wnts canônicas (Wnt3a) se ligam ao
complexo receptor de Frizzled e LRP5 ou LRP6, inibem a GSK-3β e promovem o acúmulo de β-catenina nos osteoblastos. A β-
catenina acumulada se transloca para o núcleo e, juntamente com TCF/LEF, induz a expressão de OPG. Assim, a via canônica
nos osteoblastos suprime a osteoclastogênese por meio da regulação negativa da relação RANKL/OPG. Via Wnt não canônica:
Os osteoblastos expressam tanto RANKL quanto Wnt5a não canônico. Os precursores de osteoclastos expressam RANK e Ror2,
mas não Ror1. A Wnt5a aumenta a diferenciação osteoclástica induzida por RANKL das células precursoras. O Wnt5a se liga ao
complexo receptor de Frizzled e Ror2 e estimula os sinais Wnt não canônicos, como PKC, nos precursores de osteoclastos. A
Wnt5a aumenta a fosforilação de JNK induzida por RANKL em precursores de osteoclastos, sugerindo que a JNK está envolvida
na interferência entre os sinais mediados por RANK e Ror2. A via Wnt não canônica é um sinal co-estimulatório recentemente
proposto na osteoclastogênese.

expressão em osteoblastos. Além disso, a via Wnt canônica
suprimiu a expressão de RANKL em células MC3T3E1 e
MG-63 (12). Esses resultados sugerem que a ativação da
via Wnt canônica em osteoblastos suprime a reabsorção
óssea por meio da regulação positiva da expressão de OPG
e da regulação negativa da expressão de RANKL (Figura
4).
O LRP5 e o LRP6 são expressos em macrófagos da
medula óssea, sugerindo que o Wnt3a pode estimular as
vias Wnt canônicas em precursores de osteoclastos (13). A
Wnt3a estimulou o acúmulo de β-catenina citosólica em
macrófagos da medula óssea, mas não mostrou efeito na
formação de osteoclastos em culturas de macrófagos da
medula óssea tratados com RANKL e M-CSF (13). Quando
a β-catenina em macrófagos da medula óssea foi depletada
por RNAs de grampo curto, esses macrófagos se
diferenciaram normalmente em osteoclastos em resposta a
RANKL e M-CSF. Esses resultados sugerem que a via Wnt
canônica desempenha funções importantes nos
osteoblastos, mas não nos precursores de osteoclastos, para
regular a reabsorção óssea.
5.3. Papel dos sinais Wnt não canônicos na reabsorção
óssea
O Wnt5a estimula a via Wnt não canônica nas
células-alvo. Um estudo recente mostrou que a Wnt5a
aumentou a formação de osteoclastos induzida por RANKL
no osso de camundongos
culturas de macrófagos da medula óssea (13) (Figura 4). A
Wnt3a não mostrou efeito sobre a formação de osteoclastos
no mesmo sistema de cultura. Os macrófagos da medula
óssea de camundongos expressaram Frizzleds 2 e 5 e Ror2,
os componentes do receptor de Wnt5a. O bloqueio de Ror2
por RNA de grampo curto aboliu o efeito sinérgico de
Wnt5a na formação de osteoclastos, sugerindo que o efeito
sinérgico de Wnt5a na formação de osteoclastos é mediado
pelo eixo Wnt5a-Ror2. A Wnt5a estimulou a fosforilação
de PKC e aumentou a fosforilação de JNK induzida por
RANKL em macrófagos da medula óssea. Assim, a JNK
parecia estar envolvida no cruzamento entre os sinais
mediados por RANK e Ror2. O acúmulo de β-catenina não
foi induzido por Wnt5a em precursores de osteoclastos. A
análise de RT-PCR também revelou que os osteoblastos
expressaram quantidades maiores de Wnt5a do que os
macrófagos da medula óssea. Esses resultados sugerem que
a Wnt5a produzida por osteoblastos aumenta a
diferenciação de osteoclastos por meio da via Wnt não
canônica em precursores de osteoclastos. Também foi
relatado que os tecidos sinoviais de pacientes com artrite
reumatoide produzem grandes quantidades de Wnt5a (63).
Isso sugere que a Wnt5a secretada pelo tecido sinovial está
envolvida na destruição óssea na artrite reumatoide. Esses
resultados sugerem que a Wnt5a promove a formação de
osteoclastos induzida por RANKL por meio da Ror2
expressa por precursores de osteoclastos em situações
fisiológicas e patológicas (Figura 4).

30
Osteoclastogênese e sinais RANKL/Wnt

também patológicas, como a artrite reumatoide. Esses

Ror1 e Ror2 apresentam padrões de expressão
resultados também sugerem que a via Wnt5a-Ror2 pode ser
diferentes nos membros em desenvolvimento, onde a
um alvo terapêutico para doenças ósseas com reabsorção
expressão de Ror2 é ampla em comparação com a de Ror1
óssea anormal.
(64). Os camundongos Ror2-/- apresentam letalidade
perinatal e anormalidades esqueléticas profundas com
membros encurtados (65). O Ror2 é expresso em
condrócitos do desenvolvimento de cartilagem anlagenosa,
mas não em células osteogênicas durante a ossificação
intramembranosa. Os camundongos Wnt5a-/- também
morrem durante o período perinatal e isso está associado a
graves reduções no comprimento dos elementos
esqueléticos individuais (66). A proliferação reduzida de
células progenitoras foi observada na zona de progresso dos
membros anteriores em camundongos Wnt5a-/- , e a Wnt5a
estimulou a proliferação e a diferenciação de condrócitos.
Esses resultados sugerem que a sinalização Wnt5a-Ror2
regula a condrogênese. Entretanto, ainda não se sabe como
essa via de sinalização regula a remodelação óssea. Nossas
descobertas sugerem que os defeitos dos sinais Wnt5a-Ror2
nos precursores de osteoclastos podem estar envolvidos na
anormalidade do desenvolvimento dos membros nesses
camundongos deficientes.

6. CONCLUSÕES

Os osteoblastos regulam de perto a diferenciação e

a função dos osteoclastos por meio da expressão de duas
citocinas, M-CSF e RANKL. Os osteoblastos também
expressam OPG, um receptor isca solúvel de RANKL,
como um inibidor da osteoclastogênese. A maioria dos
fatores de reabsorção óssea aumenta a expressão de
RANKL e suprime a expressão de OPG nos osteoblastos. O
NFATc1 foi identificado como um fator de transcrição
principal para a diferenciação de osteoclastos. Estudos
recentes também demonstraram que os sinais ITAM
mediados por receptores do tipo imunoglobulina estão
envolvidos na indução robusta de NFATc1 em precursores
de osteoclastos. Foi proposto que os osteoblastos
expressam moléculas que estimulam os sinais ITAM. Os
sinais ITAM são conhecidos como sinais co-estimulatórios
para RANK na osteoclastogênese.

A sinalização Wnt regula o desenvolvimento

fisiológico dos órgãos, enquanto os sinais desregulados
induzem doenças como câncer, artrite e osteoporose. As
Wnts medeiam os processos biológicos por meio de duas
vias de sinalização: a via canônica dependente da β-
catenina e a via não canônica independente da β-catenina.
As Wnts atuam nos precursores de osteoblastos e
promovem sua diferenciação em osteoblastos maduros por
meio da via canônica. A via canônica nos osteoblastos
suprime a osteoclastogênese por meio da regulação
negativa da relação RANKL/OPG. Em contrapartida, a
ativação da via não canônica nos precursores de
osteoclastos aumenta a diferenciação osteoclástica induzida
por RANKL de forma autônoma. Os precursores de
osteoclastos expressam Ror2, um coreceptor para
sinalização não canônica, enquanto os osteoblastos
expressam Wnt5a, um ligante de Ror2. Os tecidos sinoviais
de pacientes com artrite reumatoide produzem grandes
quantidades de Wnt5a. Com base nessas descobertas,
propomos que a via Wnt não canônica é um sinal
coestimulatório recém-descoberto na osteoclastogênese.
Esse sinal coestimulatório desempenha uma função
importante não apenas em condições fisiológicas, mas
31
Osteoclastogênese e sinais RANKL/Wnt

M.S. Patel, H. Clevers, M.M. Taketo, F. Long, A.P.

7. REFERÊNCIAS
McMahon, R.A. Lang e G. Karsenty: Canonical Wnt
signaling in differentiated osteoblasts controls osteoclast
1. T. Suda, N. Takahashi, N. Udagawa, E. Jimi, M.T.
differentiation. Dev Cell 8, 751-764 (2005)
Gillespie e T.J. Martin: Modulation of osteoclast
differentiation and function by the new members of the
12. G.J. Spencer, J.C. Utting, S.L. Etheridge, T.R. Arnett e
tumor necrosis factor receptor and ligand families. Endocr
P.G. Genever: A sinalização Wnt em osteoblastos regula
Rev 20, 345-357 (1999)

2. S.L. Teitelbaum e F.P. Ross: Genetic regulation of

osteoclast development and function (Regulação genética
do desenvolvimento e da função dos osteoclastos). Nat
Rev Genet 4, 638-649 (2003)

3. G.D. Roodman: Regulation of osteoclast differentiation

(Regulação da diferenciação de osteoclastos).
Ann N Y Acad Sci 1068, 100-109 (2006)

4. N. Takahashi, T. Akatsu, N. Udagawa, T. Sasaki, A.

Yamaguchi, J.M. Moseley, T.J. Martin e T. Suda:
Osteoblastic cells are involved in osteoclast formation (As
células osteoblásticas estão envolvidas na formação de
osteoclastos). Endocrinology 123, 2600-2602 (1988)

5. T. Suda, N. Takahashi e T.J. Martin: Modulation of

osteoclast differentiation (Modulação da diferenciação de
osteoclastos). Endocr Rev 13, 66-80 (1992)

6. W.J. Boyle, W.S. Simonet e D.L. Lacey: Osteoclast

differentiation and activation (Diferenciação e ativação de
osteoclastos). Nature 423, 337-342 (2003)

7. H. Takayanagi: Osteoimmunology and the effects of the

immune system on bone (Osteoimunologia e os efeitos do
sistema imunológico no osso). Nat Rev Rheumatol 5, 667-
676 (2009)

8. J.R. Miller: The Wnts. Genome Biol 3, 3001.1-3001.15

(2002)

9. C.Y. Logan e R. Nusse: The Wnt signaling pathway in

development and disease (A via de sinalização Wnt no
desenvolvimento e na doença). Annu Rev Cell Dev Biol
20, 781- 810 (2004)

10. Y. Gong, R.B. Slee, N. Fukai, G. Rawadi, S. Roman-

Roman, A.M. Reginato, H. Wang, T. Cundy, F.H.
Glorieux,
D. Lev, M. Zacharin, K. Oexle, J. Marcelino, W. Suwairi,
S. Heeger, G. Sabatakos, S. Apte, W.N. Adkins, J.
Allgrove, M. Arslan-Kirchner, J.A. Batch, P. Beighton,
G.C. Black, R.G. Boles, L.M. Boon, C. Borrone, H.G.
Brunner, G.F. Carle, B. Dallapiccola, A. De Paepe, B.
Floege, M.L. Halfhide, B. Hall,
R.C. Hennekam, T. Hirose, A. Jans, H. Juppner, C.A. Kim,
K. Keppler-Noreuil, A. Kohlschuetter, D. LaCombe, M.
Lambert,
E. Lemyre, T. Letteboer, L. Peltonen, R.S. Ramesar, M.
Romanengo, H. Somer, E. Steichen-Gersdorf, B.
Steinmann,
B. Sullivan, A. Superti-Furga, W. Swoboda, M.J. van den
Boogaard, W. Van Hul, M. Vikkula, M. Votruba, B. Zabel,
T. Garcia, R. Baron, B.R. Olsen e M.L. Warman: LDL
receptor-related protein 5 (LRP5) affects bone accrual and
eye development. Cell 107, 513-523 (2001)

11. D.A. Glass, 2º, P. Bialek, J.D. Ahn, M. Starbuck,

32
Osteoclastogênese e sinais RANKL/Wnt

Capparelli, A. Eli, Y.X. Qian, S. Kaufman, I. Sarosi, V.

expressão do ativador do receptor do ligante NFkappaB e
Shalhoub, G. Senaldi, J. Guo, J. Delaney e W.J. Boyle:
inibe a osteoclastogênese in vitro. J Cell Sci 119, 1283-
Osteoprotegerin ligand is a cytokine that regulates
1296 (2006)

13. K. Maeda, Y. Kobayashi, T. Mizoguchi, Y. Nakamich,

T. Yamashita, S. Kinugawa, N. Udagawa, K. Marumo, N.
Takahashi: Wnt5a aumenta a osteoclastogênese induzida
por RANKL. J Bone Miner Res 22 (Suppl. 1), S43 (2007)

14. H. Yoshida, S. Hayashi, T. Kunisada, M. Ogawa, S.

Nishikawa, H. Okamura, T. Sudo e L.D. Shultz: The
murine mutation osteopetrosis is in the coding region of the
macrophage colony stimulating factor gene (A mutação
murina da osteopetrose está na região de codificação do
gene do fator estimulador de colônias de macrófagos).
Nature 345, 442-444 (1990)

15. R. Felix, M.G. Cecchini e H. Fleisch: Macrophage

colony stimulating factor restores in vivo bone resorption in
the op/op osteopetrotic mouse. Endocrinology 127, 2592-
2594 (1990)

16. N. Takahashi, N. Udagawa, T. Akatsu, H. Tanaka, Y.

Isogai e T. Suda: Deficiency of osteoclasts in osteopetrotic
mice is due to a defect in the local microenvironment
provided by osteoblastic cells. Endocrinology 128:1792-
1796 (1991)

17. S. Tanaka, N. Takahashi, N. Udagawa, T. Tamura, T.

Akatsu, E.R. Stanley, T. Kurokawa e T. Suda: Macrophage
colony-stimulating factor is indispensable for both
proliferation and differentiation of osteoclast progenitors
(O fator estimulador de colônias de macrófagos é
indispensável para a proliferação e diferenciação de
progenitores de osteoclastos). J Clin Invest 91, 257-263
(1993)

18. B.R. Wong, J. Rho, J. Arron, E. Robinson, J. Orlinick,

M. Chao, S. Kalachikov, E. Cayani, F.S. Bartlett, 3rd, W.N.
Frankel, S.Y. Lee e Y. Choi: TRANCE is a novel ligand of
the tumor necrosis factor receptor family that activates c-
Jun N-terminal kinase in T cells. J Biol Chem 272, 25190-
25194 (1997)

19. D.M. Anderson, E. Maraskovsky, W.L. Billingsley,

W.C. Dougall, M.E. Tometsko, E.R. Roux, M.C. Teepe,
R.F. DuBose, D. Cosman e L. Galibert: A homologue of
the TNF receptor and its ligand enhance T-cell growth and
dendritic-cell function (Um homólogo do receptor de TNF
e seu ligante aumentam o crescimento das células T e a
função das células dendríticas). Nature 390, 175-179
(1997)

20. H. Yasuda, N. Shima, N. Nakagawa, K. Yamaguchi, M.

Kinosaki, S. Mochizuki, A. Tomoyasu, K. Yano, M. Goto,
A. Murakami, E. Tsuda, T. Morinaga, K. Higashio, N.
Udagawa, N. Takahashi e T. Suda: Osteoclast
differentiation factor is a ligand for
osteoprotegerin/osteoclastogenesis-inhibitory factor and is
identical to TRANCE/RANKL. Proc Natl Acad Sci U S A
95, 3597-3602 (1998)

21. D.L. Lacey, E. Timms, H.L. Tan, M.J. Kelley, C.R.

Dunstan, T. Burgess, R. Elliott, A. Colombero, G. Elliott,
S. Scully, H. Hsu, J. Sullivan, N. Hawkins, E. Davy, C.
33
Osteoclastogênese e sinais RANKL/Wnt

induced DC-STAMP is essential for osteoclastogenesis. J

diferenciação e ativação de osteoclastos. Célula 93, 165-176
Exp Med 200, 941-946 (2004)
(1998)

22. W.S. Simonet, D.L. Lacey, C.R. Dunstan, M. Kelley,

M.S. Chang, R. Luthy, H.Q. Nguyen, S. Wooden, L.
Bennett, T. Boone, G. Shimamoto, M. DeRose, R. Elliott,
A. Colombero, H.L. Tan, G. Trail, J. Sullivan, E. Davy, N.
Bucay, L. Renshaw-Gegg, T.M. Hughes, D. Hill, W.
Pattison, P. Campbell, S. Sander, G. Van, J. Tarpley, P.
Derby, R. Lee e W.J. Boyle: Osteoprotegerin: a novel
secreted protein involved in the regulation of bone density
(Osteoprotegerina: uma nova proteína secretada envolvida
na regulação da densidade óssea). Cell 89, 309-319 (1997)

23. E. Tsuda, M. Goto, S. Mochizuki, K. Yano, F. Kobayashi,

T. Morinaga e K. Higashio: Isolation of a novel cytokine
from human fibroblasts that specifically inhibits
osteoclastogenesis (Isolamento de uma nova citocina de
fibroblastos humanos que inibe especificamente a
osteoclastogênese). Biochem Biophys Res Commun 234,
137- 142 (1997)

24. Y.Y. Kong, U. Feige, I. Sarosi, B. Bolon, A. Tafuri, S.

Morony, C. Capparelli, J. Li, R. Elliott, S. McCabe, T.
Wong,
G. Campagnuolo, E. Moran, E.R. Bogoch, G. Van, L.T.
Nguyen, P.S. Ohashi, D.L. Lacey, E. Fish, W.J. Boyle e
J.M. Penninger: Activated T cells regulate bone loss and
joint destruction in adjuvant arthritis through osteoprotegerin
ligand. Nature 402, 304-309 (1999)

25. W.C. Dougall, M. Glaccum, K. Charrier, K. Rohrbach,

K. Brasel, T. De Smedt, E. Daro, J. Smith, M.E. Tometsko,
C.R. Maliszewski, A. Armstrong, V. Shen, S. Bain, D.
Cosman, D. Anderson, P.J. Morrissey, J.J. Peschon e
J. Schuh: RANK is essential for osteoclast and l y m p h
node development (O RANK é essencial para o
desenvolvimento de osteoclastos e linfonodos). Genes Dev
13, 2412-2424 (1999)

26. N. Bucay, I. Sarosi, C.R. Dunstan, S. Morony, J.

Tarpley, C. Capparelli, S. Scully, H.L. Tan, W. Xu, D.L.
Lacey, W.J. Boyle e W.S. Simonet: Os camundongos
deficientes em osteoprotegerina◻ desenvolvem
osteoporose de início precoce e calcificação arterial. Genes
Dev 12, 1260-1268 (1998)

27. A Mizuno, N. Amizuka, K. Irie, A. Murakami, N.

Fujise, T. Kanno, Y. Sato, N. Nakagawa, H. Yasuda, S.
Mochizuki, T. Gomibuchi, K. Yano, N. Shima, N.
Washida, E. Tsuda, T. Morinaga, K. Higashio e H. Ozawa:
Severe osteoporosis in mice lacking osteoclastogenesis
inhibitory factor/osteoprotegerin. Biochem Biophys Res
Commun 247, 610-615 (1998)

28. P.I. Croucher, C.M. Shipman, J. Lippitt, M. Perry,

K. Asosingh, A. Hijzen, A.C. Brabbs, E.J. van Beek, I.
Holen, T.M. Skerry, C.R. Dunstan, G.R. Russell, B. Van
Camp e K. Vanderkerken: Osteoprotegerin inhibits the
development of osteolytic bone disease in multiple
myeloma. Sangue 98:3534-3540 (2001)

29. T. Kukita, Wada, A. Kukita, T. Kakimoto, F. Sandra,

K. Toh, K. Nagata, T. Iijima, M. Horiuchi, H. Matsusaki,
K. Hieshima, O. Yoshie e H. Nomiyama: RANKL-
34
Osteoclastogênese e sinais RANKL/Wnt
30. M. Yagi, T. Miyamoto, Y. Sawatani, K. Iwamoto, N.
Hosogane, N. Fujita, K. Morita, K. Ninomiya, T. Suzuki,
K. Miyamoto, Y. Oike, M. Takeya, Y. Toyama e T. Suda:
DC-STAMP is essential for cell-cell fusion in osteoclasts
and foreign body giant cells. J Exp Med 202, 345-351
(2005)
31. B.G. Darnay, V. Haridas, J. Ni, P.A. Moore e B.B.
Aggarwal: Characterization of the intracellular domain of
receptor activator of NF-kappaB (RANK). Interação com
fatores associados ao receptor do fator de necrose tumoral e
ativação de NF-kappab e c-Jun N-terminal kinase. J Biol
Chem 273, 20551-20555 (1998)
32. J. Inoue, J. Gohda e T. Akiyama: Características e
funções biológicas do TRAF6. Adv Exp Med Biol 597, 72-
79 (2007)
33. M.A. Lomaga, W.C. Yeh, I. Sarosi, G.S. Duncan, C.
Furlonger, A. Ho, S. Morony, C. Capparelli, G. Van, S.
Kaufman, A. van der Heiden, A. Itie, A. Wakeham, W.
Khoo, T. Sasaki, Z. Cao, J.M. Penninger, C.J. Paige, D.L.
Lacey, C.R. Dunstan, W.J. Boyle, D.V. Goeddel e T.W.
Mak: TRAF6 deficiency results in osteopetrosis and
defective interleukin-1, CD40, and LPS signaling. Genes
Dev 13, 1015-1024 (1999)
34. A Naito, S. Azuma, S. Tanaka, T. Miyazaki, S. Takaki,
K. Takatsu, K. Nakao, K. Nakamura, M. Katsuki, T.
Yamamoto e J. Inoue: Severe osteopetrosis, defective
interleukin-1 signalling and lymph node organogenesis in
TRAF6-deficient mice. Genes Cells 4, 353-362 (1999)
35. V. Iotsova, J. Caamano, J. Loy, Y. Yang, A. Lewin e R.
Bravo: Osteopetrose em camundongos sem NF-kappaB1 e
NF-kappaB2. Nat Med 3, 1285-1289 (1997)
36. G. Franzoso, L. Carlson, L. Xing, L. Poljak, E.W.
Shores, K.D. Brown, A. Leonardi, T. Tran, B.F. Boyce e U.
Siebenlist: Requirement for NF-kappaB in osteoclast and
B-cell development (Necessidade de NF-kappaB no
desenvolvimento de osteoclastos e células B). Genes Dev
11, 3482- 3496 (1997)
37. Z.Q. Wang, C. Ovitt, A.E. Grigoriadis, U. Mohle-
Steinlein, U. Ruther e E.F. Wagner: Bone and
haematopoietic defects in mice lacking c-fos (Defeitos
ósseos e hematopoiéticos em camundongos sem c-fos).
Nature 360, 741-745 (1992)
38. J.P. David, K. Sabapathy, O. Hoffmann, M.H.
Idarraga e F.F. Wagner EF: JNK1 modula a
osteoclastogênese por meio de c-Jun. J Cell Sci 115:4317-
4325 (2002)
39. F. Ikeda, T. Matsubara, T. Tsurukai, K. Hata, R.
Nishimura e T. Yoneda: JNK/c-Jun signaling mediates an
anti-apoptotic effect of RANKL in osteoclasts. J Bone Minr
Res 23, 907-914 (2008)
40. N. Ishida, K. Hayashi, M. Hoshijima, T. Ogawa, S.
Koga, Y. Miyatake, M. Kumegawa, T. Kimura e T.
Takeya: Análise de expressão gênica em larga escala de
35
osteoclastogênese in vitro e elucidação do NFAT2 como
um regulador importante. J Biol Chem 277, 41147-41156
(2002)
41. H. Takayanagi, S. Kim, T. Koga, H. Nishina, M.
Isshiki, H. Yoshida, A. Saiura, M. Isobe, T. Yokochi, J.
Inoue, E.F. Wagner, T.W. Mak, T. Kodama e T. Taniguchi:
A indução e a ativação do fator de transcrição NFATc1
(NFAT2) integram a sinalização de RANKL na
diferenciação terminal de osteoclastos. Dev Cell 3, 889-901
(2002)
42. J.G. Monroe, J.G: ITAM-mediated tonic signalling
through pre-BCR and BCR complexes. Nat Rev Immunol 6,
283-294 (2006)
43. A.S. Tessarz e A. Cerwenka: The TREM-1/DAP12
pathway. Immunol Lett 116, 111-116 (2008)
44. N. Kim, M. Takami, J. Rho, R. Josien e Y. Choi: A
novel member of the leukocyte receptor complex regulates
osteoclast differentiation. J Exp Med 195, 201-209 (2002)
45. J. Trowsdale, R. Barten, A. Haude, C.A. Stewart, S.
Beck e M.J. Wilson: The genomic context of natural killer
receptor extended gene families. Immunol Rev 181:20-38,
(2001)
46. T. Koga, M. Inui, K. Inoue, S. Kim, A. Suematsu, E.
Kobayashi, T. Iwata, H. Ohnishi, T. Matozaki, T. Kodama, T.
Taniguchi, H. Takayanagi e T. Takai: Costimulatory signals
mediated by the ITAM motif cooperate with RANKL for bone
homeostasis (Sinais coestimulatórios mediados pelo motivo
ITAM cooperam com RANKL para a homeostase óssea).
Nature 428, 758-763 (2004)
47. M. Shinohara, T. Koga, K. Okamoto, S. Sakaguchi, K.
Arai, H. Yasuda, T. Takai, T. Kodama, T. Morio, R.S.
Geha,
D. Kitamura, T. Kurosaki, W. Ellmeier e H. Takayanagi:
As tirosina quinases Btk e Tec regulam a diferenciação de
osteoclastos ligando os sinais RANK e ITAM. Cell
132:794-806.(2008)
48. N. Takegahara, H. Takamatsu, T. Toyofuku, T. Tsujimura,
T. Okuno, K. Yukawa, M. Mizui, M. Yamamoto, D.V. Prasad,
K. Suzuki, M. Ishii, K. Terai, M. Moriya, Y. Nakatsuji, S.
Sakoda, S. Sato, S. Akira, K. Takeda, M. Inui, T. Takai, M.
Ikawa, M. Okabe, A. Kumanogoh e H. Kikutani: Plexin-A1
and its interaction with DAP12 in immune responses and
bone homeostasis (Plexina-A1 e sua interação com DAP12
em respostas imunológicas e homeostase óssea). Nat Cell
Biol 8, 615-622 (2006)
49. M.D. Gordon e R. Nusse: Wnt signaling: multiple
pathways, multiple receptors, and multiple transcription
factors (Sinalização Wnt: múltiplas vias, múltiplos
receptores e múltiplos fatores de transcrição). J Biol Chem
281, 22429-22433 (2006)
50. M. Kato, M.S. Patel, R. Levasseur, I. Lobov, B.H. Chang,
D.A. Glass, 2º, C. Hartmann, L. Li, T.H. Hwang, C.F.
Brayton, R.A. Lang, G. Karsenty e L. Chan: Cbfa1-
independent decrease in osteoblast proliferation,
osteopenia, and persistent embryonic eye vascularization in
mice deficient in Lrp5, a Wnt coreceptor. J Cell Biol 157,
Osteoclastogênese e sinais RANKL/Wnt

303-314 (2002)

51. V.K. Yadav, J.H. Ryu, N. Suda, K.F. Tanaka, J.A.

Gingrich, G. Schutz, F.H. Glorieux, C.Y. Chiang, J.D.
Zajac, K.L. Insogna, J.J. Mann, R. Hen, P. Ducy e G.
Karsenty: Lrp5 controls bone formation by inhibiting

36
Osteoclastogênese e sinais RANKL/Wnt
síntese de serotonina no duodeno. Cell 135, 825-837 (2008)
52. A.T. Weeraratna, Y. Jiang, G. Hostetter, K.
Rosenblatt, P. Duray, M. Bittner e J.M. Trent: Wnt5a
signaling directly affects cell motility and invasion of
metastatic melanoma. Cancer Cell 1, 279-288 (2002)
53. J. Dejmek, A. Safholm, C. Kamp Nielsen, T.
Andersson e K. Leandersson: A atividade NFAT induzida
por Wnt-5a/Ca2+ é neutralizada pela sinalização Wnt-
5a/Yes-Cdc42-caseína quinase 1alfa em células epiteliais
mamárias humanas. Mol Cell Biol 26, 6024-6036 (2006)
54. T. Ishitani, S. Kishida, J. Hyodo-Miura, N. Ueno, J.
Yasuda, M. Waterman, H. Shibuya, R.T. Moon, J.
Ninomiya-Tsuji e K. Matsumoto: The TAK1-NLK
mitogen-activated protein kinase cascade functions in the
Wnt-5a/Ca2+ pathway to antagonize Wnt/beta-catenin
signaling. Mol Cell Biol, 23, 131-139 (2003)
55. L.C. Sheldahl, D.C. Slusarski, P. Pandur, J.R. Miller,
M. Kuhl e R.T. Moon: Dishevelled activates Ca2+ flux,
PKC, and CamKII in vertebrate embryos. J Cell Biol 161,
769-777 (2003)
56. A. Schambony e D. Wedlich: Wnt-5A/Ror2 regulam a
expressão de XPAPC por meio de uma via de sinalização
alternativa não canônica. Dev Cell 12, 779-792 (2007)
57. D. Qian, C. Jones, A. Rzadzinska, S. Mark, X. Zhang,
K.P. Steel, X. Dai e P. Chen: Wnt5a functions in planar cell
polarity regulation in mice (Funções de Wnt5a na regulação
da polaridade de células planas em camundongos). Dev
Biol 306, 121-133 (2007)
58. S. Yamamoto, O. Nishimura, K. Misaki, M. Nishita, Y.
Minami, S. Yonemura, H. Tarui e H. Sasaki: Cthrc1 ativa
seletivamente a via de polaridade de células planas da
sinalização Wnt por meio da estabilização do complexo
Wnt-receptor. Dev Cell 15, 23-36 (2008)
59. A. Mikels, Y. Minami e R. Nusse: Ror2 receptor
requires tyrosine kinase activity to mediate Wnt5A
signaling. J Biol Chem 284, 30167-30176 (2009)
60. I. Oishi, H. Suzuki, N. Onishi, R.Takada, S. Kani, B.
Ohkawara, I. Koshida, K. Suzuki, G. Yamada, G.C.
Schwabe, S Mundlos, H Shibuya, S Takada e Y Minami:
The receptor tyrosine kinase Ror2 is involved in non-
canonical Wnt5a/JNK signalling pathway Genes Cells 8,
645-654 (2003)
61. A. Sato, H. Yamamoto, H. Sakane, H. Koyama, A.
Kikuchi: Wnt5a regulates distinct signalling pathways by
binding to Frizzled2. EMBO J 29:41-54 (2010)
62. T. Yamane, T. Kunisada, H. Tsukamoto, H. Yamazaki,
H. Niwa, S. Takada, and S.I. Hayashi: Wnt signaling
regulates hemopoiesis through stromal cells. J Immunol
167, 765-772 (2001)
63. M. Sen, K. Lauterbach, H. El-Gabalawy, G.S. Firestein,
M. Corr, e D.A. Carson: Expression and function of
37
homólogos wingless e frizzled na artrite reumatoide.
Proc Natl Acad Sci U S A 97, 2791-2796 (2000)
64. T. Matsuda, M. Nomi, M. Ikeya, S. Kani, I. Ohishi, T.
Terashima, S. Takada e Y. Minami: Expression of the
receptor tyrosin kinase genes, Ror1 and Ror2, during mouse
development. Mech Dev 105, 153-156 (2001)
65. T.M. DeChiara, R.B. Kimble, W.T. Poueymirou, J.
Rojas, P. Masiakowski, D.M. Valenzuela, G.D.
Yancopoulos: Ror2, que codifica uma tirosina quinase
semelhante a um receptor, é necessário para o
desenvolvimento da cartilagem e da placa de crescimento.
Nat Genet 24:271-274 (2003)
66. T.P. Yamaguchi, A. Bradley, A.P. McMahon, S. Jones:
A Wnt5a pathway underlies outgrowth of multiple
structures in the vertebrate embryo. Desenvolvimento
126:1211-1223 (1999)
Abreviações: M-CSF, fator estimulador de colônias de
macrófagos; RANKL, ativador do receptor do ligante do
fator nuclear-κB; OPG, osteoprotegerina; NFATc1, fator
nuclear de células T ativadas, citoplasmático 1; ITAM,
motivo de ativação baseado em tirosina do imunorreceptor;
1α,25(OH) D23 , 1α,25- dihidroxivitamina D3 ; PTH,
hormônio da paratireoide; PGE2 , prostaglandina E2 ; IL-11,
interleucina 11; LRP, proteína relacionada ao receptor de
lipoproteína de baixa densidade; Ror, receptor órfão de
tirosina quinase; TNF, fator de necrose tumoral; DC-
STAMP, proteína transmembrana específica de células
dendríticas; TRAF, fator associado ao receptor de TNF;
NF-κB, fator nuclear-κB; JNK, c-Jun N-terminal kinase;
LRC, complexo receptor de leucócitos; OSCAR, receptor
associado a osteoclastos; DAP12, proteína 12 ativadora de
DNAX; FcRγ, cadeia γ comum do receptor Fc; TREM2,
receptores desencadeantes expressos em células mieloides
2; SIRPβ1, proteína reguladora de sinal β1; PIR-A, receptor
A semelhante à imunoglobulina pareada; SYK, spleen
tyrosine kinase; PLCγ, fosfolipase Cγ; Btk, Bruton's
tyrosine kinase; BLNK, B cell linker protein; GSK-3β,
glycogen synthase kinase-3β; TCF/LEF, T-cell
factor/lymphoid enhancer factor, CAMKII, Ca2+ -
calmodulin-dependent protein kinase II; PKC, protein
kinase C
Palavras-chave: Osteoclastos, RANKL, RANK, Wnt, Ror,
Frizzled, LRP
Enviar correspondência para: Naoyuki Takahashi,
Institute for Oral Science, Matsumoto Dental University,
1780 Hiro-oka Gobara, Shiojiri, Nagano 399-0781, Japão,
Tel: 81-263-51-2135, Fax: 81-263-51-2223, E-mail:
takahashinao@po.mdu.ac.jp
http://www.bioscience.org/current/vol16.htm