Palestra - controle da expressão gênica nos eucariotos.

SINALIZAÇÃO CELULAR:
Diretamente de célula a célula, sinalização parácrina, autócrina, sinalização endócrina.
- EXEMPLOS: Ação de hormônios esteróides - estrógeno
Via de transdução de sinal intracelular - Via Ras, Rafael Rafael Map Quinase. Forças físicas (
estiramento, shear stress - na vascularização)

CONTROLE DA EXPRESSÃO GÊNICA, NÍVEIS PRINCIPAIS

- Remodelamento da cromatina, transcrição e tradução.

DENTRO DO NÚCLEO
1- MODIFICAÇÃO DA CROMATINA
1.1 Empacotamento do DNA ao redor das histonas silencia grandes trechos do genoma (as
vezes de forma não reversível)
- Acetiltransferase quebra a ligação ligação DNA com as histonas para liberar o DNA
para ativar a transcrição gênica (molécula sinalizadora ativa a acetiltransferase)
- Histona desacetilase, ligam o DNA as histonas reprimindo a transcrição

1.2 Metilação do DNA - acontece na citosina que ganha um grupo metil (torna-se uma 5 metil
citosina), genes ficam desligados.
☆Alterações epigenéticas, que acontecem na molécula conformacional dita se vai ou não
produzir uma proteína

⅔- TRANSCRIÇÃO E MODIFICAÇÕES TRANSCRICIONAIS

2.1 Fatores gerais de transcrição - genes constitutivos (que todo mundo tem para exercer
papéis em diversas células), ativado por sinalização autócrina, endócrina e parácrina.
2.2 Sequências regulatórias: promotores, enhancers (região intensificadora) , silencers e
insulators (controla a ativação do gene pelos enhancers).
- Moléculas repressores ligam ao DNA e a maquinaria transcricional (competem os sítios
com as moléculas ativadoras)
procurar entender: Ações das moléculas ativadores e repressores no enhancer e no silencers. ||
Interações entre promotores, enhancers, silencers e insulators.

☆ A maneira como ativa e desativa está relacionado com o controle da proliferação celular.

3. Edição na molécula do RNA/MODIFICAÇÕES PÓS TRANSCRICIONAIS

- A Medida que é editado promove o controle da produção da proteína (capa e cauda
poli a - estabilidade à molécula), enzimas podem degradar o mRNA
- Splicing alternativo: dita qual ptn vai ser transcrita naquele único gene.
- Desaminação da citosina

CITOPLASMA
4. DEGRADAÇÃO DO mRNA
- MicroRNAs: promove o silenciamento de mRNA. (Drosha -DGCR8, Exportin 5, Dicer.
Enzimas).
como funcionam na oncologia: podem ser supressor de tumor (produzidos com região
complementar as proteínas oncogênicas - degradação dessas ptns), quando é perdida
as oncoproteínas permanecem.

5. TRADUÇÃO
- Ubiquitinas: que sinalizam as proteínas para o complexo de degradação para os
aminoácidos aminoácidos liberados para síntese de outras proteínas.
Ciclinas precisam ser rapidamente sintetizadas e degradadas para a manutenção do
ciclo celular (estado de parada antes de reiniciar o ciclo)
- Regulação da síntese de ferritina: proteína, Isadora do Ferro no mRna , formando uma
alça que impede a formação da proteína.
- Modulação que resulta em efeitos globais na atividade da tradução, em vez de mRNA
específico.
 ● APLICAÇÕES DA EPIGENÉTICA

- Busca de alterações genéticas que vão desencadear diagnósticos tardios (busca de

diagnóstico precoce).
- Procura por moléculas liberadas por patologias ou células liberadas por tumores,
detectar os genes dessas moléculas (RNA, DNA), extrair esses conjuntos e fazer um
mapeamento (exossomos, microRNA circulantes, DNA mutilados, fusões gênicas, DNA
livre de células

- Estudos transversais: único momento da doença (diagnóstico precoce)

- Longitudinais: acompanhar o paciente, diversos momentos de coleta de monitoramento
(resposta terapêutica, quantificação das moléculas e indícios de expressão)

- MiRNAS - aplicação em prognósticos, monitoramento de doenças

- cfDNA- prognóstico da patologia, tecido de origem de determinada molécula, metilação
de celulas/genes, alterações epigenéticas.

● IMPORTÂNCIAS DO ESTUDO
- Assinatura celular (originar diferentes tipos celulares em um mesmo organismo de
acordo com a sua função). Consegue produzir diferentes tipos de células. Cada célula
tem uma assinatura diferente devido ao DNA expresso.
Exemplo: arterialização de enxerto venoso em ponte de safena. Utilização de sistema
ex-vivo de cultura de veia safena humana (um lado mimetizar a veia com um fluxo
artérias e no outro em um fluxo venoso), ocorre uma reprogramação gênica para
assumir um fenótipo diferente para a nova condição que lhe foi imposta.
- Desenvolvimento de estudo de doenças. Células que possuem genes muito ou poucos
expressos desenvolvem patologias.
Ferramentas que auxiliam no processo terapêutico identificando quais genes levam às
alterações patológicas (janela entre a célula normal e a patologia)
- Estudo da evolução: Descobre que o tamanho do genoma e a quantidade não se
relacionam com a complexidade das espécies.
A complexidade está no número de RNAS que o são transcritos (que não são ou que são
transcritos ?) em proteínas (controle da expressão genica)

DIVERSIDADE DOS TRANSCRITOS

1 - Processamento de pré mRNas pode dar origem a diferentes mRNAs maduros
2 - um gene ou região gênica pode transcrever não só os mRNAs (outros tipos de micro RNAs
que fazem parte da regulação) resultando em outros produtos da expressão genica.

● CRISPR CAS9
Modulação do gene do indivíduo que quer que seja expresso.
Uso de enzimas que cortam moléculas de DNA é a inserção de genes específicos de interesse
(tanto para humanos, animais e bactérias). CIRURGIA MOLECULAR
- Interesse com visão ética.

Mecanismo de defesa natural que acontece em bactérias e adaptaram pra benefício.

- Enzima CAS: corte em sítio dirigido.