Crescimento e

regeneração de tecidos
vs diferenciação celular
REGULAÇÃO DA EXPRESSÃO
GÉNICA
 Tabaco

• Em 1996, investigadores que estudam o cancro do

pulmão descobriram em células pulmonares
cultivadas, um componente do fumo do tabaco,
BPDE, que se ligava a um gene chamado p53.
Este gene codifica para uma proteína que
normalmente ajuda a suprimir a formação de
tumores.
• Este trabalho liga diretamente um produto químico
do fumo do tabaco, com a formação de tumores de
pulmão humano.
 Como os genes são regulados?

• Na diferenciação celular, as células ficam

especializadas em termos
– estruturais
– funcionais.

• Certos genes são ligados e desligados num

processo de regulação génica.
 Células geneticamente iguais especializam-se

Diferenciação celular
em funções diferentes

Ficam diferentes na forma, composição e

função

Surgem células distintas que formam

estruturas, órgãos e sistemas orgânicos com
diferentes funções

As células com maior potencial de diferenciação

são as menos diferenciadas - células
indiferenciadas.

As mais diferenciadas perderam parte ou

totalmente, o seu potencial – células
diferenciadas ou especializadas.
 Se os genes estão ativos, vão ser

Diferenciação celular
transcritos, produzindo proteínas.

Se os genes estão inativos ocorre

bloqueio da transcrição desses genes.

A produção de conjuntos de proteínas

diferentes conduz à diferenciação celular.

Todas as células têm o mesmo genoma.

Depende de fatores do meio.

 Expressão génica em células diferenciadas
• Na expressão génica,
– Um gene é ligado e transcrito em mRNA
– A informação passa dos
– genes para formação de proteínas.

• As grandes diferenças entre as células de um

organismo resulta da expressão seletiva e
diferencial de genes.
 Expressão génica em células diferenciadas

Célula pancreática Leucócito Neurónio

Gene para
uma enzima
da glicólise
Gene de
anticorpo
Gene da
insulina

Gene da
hemoglobina
 O tipo de célula depende dos genes que ela
expressa e das proteínas que produz

▪ A regulação génica permite ligar e desligar

genes.

▪ A expressão do gene é o processo de

passagem da informação contida nos genes
para produzir proteínas.

▪ O controle da expressão do gene permite que

as células produzam tipos específicos de
proteínas quando e onde elas são necessárias.
 A estrutura dos cromossomas e modificações
químicas podem afetar a expressão génica
▪ Quase todas as células de um organismo
contêm um genoma igual.

▪ As diferenças entre os tipos celulares

– não são devidas à presença de diferentes
genes mas…
– à expressão seletiva de diferentes genes por
células de igual genoma.
Múltiplos mecanismos de regulação da expressão
génica em eucariontes

▪ Existem múltiplos pontos de controlo onde a

expressão génica em eucariontes pode ser
– ligada ou desligada
– acelerada, ou retardada.

▪ Os pontos de controlo da expressão génica

são como válvulas numa série de tubos de
transporte.
 Cromossoma

Descondensação
do DNA

DNA

Gene

Transcrição
do gene

Intrão Exão

pré-mRNA
 Processamento
do RNA

Controlo
ao nível do Núcleo
transporte mRNA no núcleo
do RNA

mRNA no Citoplasma
citoplasma

Degradação
do mRNA
 Exemplos de mecanismos de regulação da
expressão génica em eucariontes

▪ O empacotamento do DNA pode prevenir a

expressão génica, prevenindo que a RNA
polimerase e outras proteínas de transcrição possam
contactar com o DNA.
▪ As células parecem usar níveis elevados de
empacotamento para a longos períodos de
inativação de genes.
Dupla hélice de DNA
(2-nm diâmetro)
Cromossoma
Nucleossoma metafásico
(10-nm diâmetro)

Histonas
700 nm
Como é possível que apenas 21.000
genes humanos possam produzir
mais de 100.000 polipéptidos?
 Exemplos de mecanismos de regulação da
expressão génica em eucariontes

▪ O processamento alternativo do mRNA

– produz diferentes mRNA a partir do
mesmo gene;
– resulta na produção de mais do que uma
polipéptido a partir do mesmo gene
– é comum no Homem.
 Exões

DNA 1 2 3 4 5

Intrões Intrões

Pré-mRNA
transcrito 1 2 3 4 5

Processamento
ou
mRNA 1 2 3 5 1 2 4 5
 Exemplos de mecanismos de regulação da
expressão génica em eucariontes

• O mRNA eucariótico
– pode duram horas, semanas e mesmo
meses;
– Será degradado e os seus ribonucleótidos
reciclados.
 Inativação do cromossoma X

Embrião Adulto
Duas estirpes celulares
Divisão celular
e inativação Pelo
aleatória do X ativo
Cromossomas X laranja
cromossoma X X inativo

Alelo para o X inativo

Alelo para o
pelo laranja pelo preto X ativo Pelo
preto
 microRNAs

• Pequenas moléculas de RNA chamados de

microRNA (miRNA), ligam-se a sequências
complementares de mRNA no citoplasma.
• Alguns provocar a quebra de seu mRNA alvo, e
outros bloqueiam a tradução.
• Estimou-se que os miRNAs pode regular a
expressão até um terço de todos os genes
humanos, embora só tenham sido descobertos há
20 anos!
 Proteína
miRNA
1

Complexo
miRNA-proteína
 Proteína
miRNA
1

Complexo
miRNA-proteína

mRNA alvo com a mRNA alvo com

sequência complementar uma sequência
para todo o miRNA complementar parcial
2
 Proteína
miRNA
1

Complexo
miRNA-proteína

mRNA alvo com a mRNA alvo com

sequência complementar uma sequência
para todo o miRNA complementar parcial
2

3 4

ou

mRNA degradado Tadução bloqueada

 Precursor
Feedback
negativo
gene trpE

Enzima 1
gene trpD
Regulação
da expressão
génica
Enzima 2 gene trpC

−
gene trpB
−
Enzima 3

gene trpA

Triptofano

(a) Regulação da (b) Regulação da

atividade enzimática produção de enzimas
 Sinalização Celular

• Num organismo multicelular, a regulação

génica pode sair dos limites da célula.
• Uma célula pode produzir e secretar
substâncias químicas, tais como hormonas,
que afetam a regulação génica de outra
célula.
 CÉLULA
REGULADORA
1 Secreção
Molécula
Membrana plasmática reguladora
2

3
4
CÉLULA Proteína
ALVO recetora

Fator de
transcrição
(ativado)
 Núcleo

5 Resposta
Transcrição

Nova
proteína
mRNA

Tradução
 CLONAGEM DE
PLANTAS E ANIMAIS
A clonagem de plantas mostra que as células diferenciadas
podem reter todo o seu potencial genético

• Um clone é um organismo criado por reprodução

assexuada e, portanto, geneticamente idêntico ao
seu único progenitor.
• Um célula capaz de produzir qualquer tipo de
célula especializada de um organismo é
considerada totipotente.
• A regeneração de partes do corpo perdidas,
demonstra que a diferenciação não conduz à
perda do potencial genético de uma célula.
▪ A capacidade de clonar um animal a partir de uma
única célula demonstra que cada célula de um
adulto
– contém o genoma completo que é
– capaz de direcionar a produção de todos os tipos de
células de um organismo.
 Pode um núcleo de um animal diferenciado
dirigir o desenvolvimento de um organismo?
EXPERIÊNCIA Embrião de rã Ovo de rã Girino

UV

Célula intestinal
Célula menos completamente
diferenciada diferenciada

Transplante Transplante
do núcleo Ovo anucleado do núcleo
do dador do dador
Ovo com o núcleo do dador
ativado para começar o
desenvolvimento

RESULTADOS

A maioria desenvolve-se A maioria pára o desenvolvimento

em girinos. antes se chegar a girino
Pode um núcleo de um animal diferenciado
dirigir o desenvolvimento de um
organismo?

A capacidade que uma célula tem em

originar outros tipos de células
especializadas é tanto maior quanto
menor for o seu grau de diferenciação.
 Podem um núcleo de um animal diferenciado dirigir o
desenvolvimento de um organismo?

▪ Experiências com embriões de rã têm mostrado que

um núcleo transplantado pode permitir o
desenvolvimento normal do ovo;

▪ No entanto, quando mais antigo for o núcleo do

dador, menor a percentagem de girinos com um
desenvolvimento normal.
 A expressão diferencial de genes conduz aos diferentes
tipos de células de um organismo

▪ Durante o desenvolvimento embrionário, um ovo dá

origem a muitos tipos de células.
▪ Os tipos celulares são organizados sucessivamente
em tecidos, órgãos, sistemas de órgãos e todo o
organismo.
▪ A expressão génica direciona todo o
desenvolvimento dos seres vivos.
 50 m

(a) Ovo (b) 4 células (c) Mórula (d) Blástula

 O Programa Genético para o Desenvolvimento
Embrionário

▪ A transformação de um zigoto até chegar a um

adulto é devida à divisão celular, diferenciação
celular e morfogénese.
 1 mm 2 mm

(a) Ovo de uma rã (b) Girino recém-eclodido

 O tipo de célula depende dos genes que ela expressa e
das proteínas que produz

▪ A diferenciação celular é o processo pelo

qual as células se tornam especializadas
numa estrutura e função.

▪ Os processos físicos que dão forma a um

organismo constitui a morfogénese.
Apoptose no desenvolvimento de uma mão
humana
 A clonagem de organismos pode levar à
produção de células estaminais para a
investigação e outras aplicações

▪ A clonagem de organismos produz um ou mais

organismos geneticamente idêntico ao “progenitor"
que doou a única célula
 A clonagem permite que células diferenciadas
possam readquirir o seu potencial genético

▪ A maioria das células diferenciadas possui um

conjunto completo de genes.

▪ Esse facto surgiu da

– clonagem de plantas, em que uma célula de raiz pode
formar uma planta adulta e
– a regeneração de membros da salamandra, em que as
células no coto da perna desdiferenciam-se, dividem-
se, e, em seguida diferenciam-se, dando origem a um
novo órgão.
Nas plantas, as células podem
sofrer desdiferenciação e
originar todos os tipos de
células especializadas de um
organismo.
Uma célula totipotente pode
originar um organismo
completo.

Célula

Célula removidas Célula em meio Divisão celular Plântula

de uma orquídea de crescimento em meio de cultura Planta adulta
A clonagem de plantas mostra que as células diferenciadas
podem reter todo o seu potencial genético

Como a clonagem de plantas a partir de células

diferenciadas sustenta o conceito que a
diferenciação é baseada no controlo da expressão
génica e não em mudanças irreversíveis no
genoma?
A clonagem de plantas mostra que as células diferenciadas
podem reter todo o seu potencial genético

Como a clonagem de plantas a partir de células

diferenciadas sustenta o conceito que a
diferenciação é baseada no controlo da
expressão génica e não em mudanças
irreversíveis no genoma?

A clonagem mostra que todos os genes de uma célula

vegetal totalmente diferenciada ainda estão presentes.
 Regeneração de membros da salamandra

Um aspeto notável da regeneração de membros de

salamandras é que apenas os segmentos de membros
ausentes são regenerados. As células em regeneração
substituem apenas as partes que faltam!
 A transplantação nuclear pode ser usada para
clonar animais
Célula
dadora Núcleo da
célula dadora

Blastocisto

O núcleo é É adicionada uma A célula cresce em

removido da célula somática cultura até produzir
de um oócito. de um adulto dador. um embrião (blastocisto).
 Clonagem
reprodutiva

O blastocisto é Nasce um clone

implantado numa do dador.
mãe de aluguer.
Blastocisto
Clonagem
terapêutica
Células estaminais
As células estaminais
embrionárias são
são induzidas para
removidos do
formar células
blastocisto e crescem
especializadas.
em cultura.
TÉCNICA

Célula mamária Oócito da

da dadora dadora

1 2
Oócito
do ovário
Remoção
do núcleo
3 Fusão celular
Cultivo de
células
mamárias

Núcleo da
célula mamária
 Núcleo da
célula mamária

4 Crescimento em
cultura

Embrião precoce

5 Implantação no útero
de uma terceira ovelha

Mãe de
aluguer

6 Desenvolvimento
embrionário

RESULTADOS
“Dolly” geneticamente igual
à célula mamária da dadora
(a) O primeiro gato clonado
(b) Clonagem para fins médicos

(c) Clones de animais em perigo de extinção

Cabra montês Boi asiático Gauro Lobo cinzento

 Células estaminais animais

▪ Uma célula estaminal é uma célula

indiferenciada que pode multiplicar-se
indefinidamente, ou sob certas condições,
pode diferenciar-se num ou em mais tipos de
células especializadas.
 Célula estaminal (indiferenciada)

Divisão celular

Célula estaminal e Célula precursora

Adipócitos ou Osteócitos ou Leucócitos

 A clonagem terapêutica pode produzir células
estaminais com grande potencial médico

▪ Quando crescem em meio de cultura

laboratorial, as células estaminais
podem
– dividir-se indefinidamente
– originar muitos tipos de células diferenciadas.

▪ As células estaminais adultas podem

originar muitos (mas não todos) tipos
de células.
▪ As células estaminais embrionárias são
pluripotentes, capazes de se diferenciarem
em muitos tipos diferentes de células.

▪ O objetivo final das pesquisas com células

estaminais é fornecer células para a reparação
de órgãos danificados ☺

▪ Essas investigações apresentam problemas

éticos.
 Células sanguíneas

Células estaminais
adultas da medula
óssea

Neurónios
Cultivo de
células pluripotentes
embrionárias
Células musculares cardíacas

Diferentes condições Diferentes tipos de

de cultura células diferenciadas
1 Remoção de células
epiteliais do paciente. 2 Reprogramação das células
epiteliais a fim de as
transformar em células
estaminais pluripotentes.

Paciente com tecido

cardíaco danificado
ou outra patologia

3 Tratamento das células

estaminais pluripotentes
para se diferenciarem num
tipo específico de célula.

4 Retorno das
células ao
paciente, onde
podem reparar os
tecidos lesados.
 Células estaminais

Embrionárias Adultas

Totipotentes Pluripotentes Multipotentes

Podem originar Não podem Dão origem a

qualquer tipo originar a diferentes
de célula. totalidade do células
Ex: ovo e organismo. diferenciadas
blastómeros Ex: blastocisto Ex: blastocisto
Da totipotência à diferenciação celular
 Células de um
organismo animal adulto

Células
Especializadas
estaminais

Encontram-se
nos tecidos que Exemplos:
têm grande Medula óssea
capacidade
mitótica pele, intestino,
(substituídos testículos,…
frequentemente)
 Células de uma planta
adulta

Células
Especializadas
meristemáticas

Encontram-se Exemplos:
nos meristemas crescimento dos
- tecidos que
têm grande órgãos
capacidade renovação de
mitótica tecidos lesados
 Banco de sangue do cordão umbilical

• O sangue do cordão umbilical

– pode ser recolhido à nascença,
– contém células estaminais parcialmente
diferenciadas
– tem tido um sucesso limitado no tratamento de
algumas doenças.

• É recomendado para bebés que nascem em

famílias com risco genético conhecido.