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BILIRRUBINA
K005
INSTRUÇÕES DE USO

FINALIDADE 5- A calibração deve ser repetida periodicamente para A cor permanece estável por 30 minutos. LIMITAÇÕES DO PROCESSO
Método para determinação da Bilirrubina Direta e Total. verificar alguma alteração na resposta do colorímetro ou Os valores em mg/dL para as Bilirrubinas Direta e Total Não utilizar a técnica Micro para valores de Bilirrubina
Teste colorimétrico, somente para uso diagnóstico do espectrofotômetro. são obtidos utilizando o Fator de Calibração MACRO, inferiores a 10 mg/dL.
in vitro. 6- Hemólise, mesmo discreta, interfere na dosagem. obtido com o Kit Bilirrubina Calibração Bioclin.
7- Recomendamos aplicar as normas locais, estaduais e INTERFERENTES
PRINCÍPIO DE AÇÃO federais de proteção ambiental para que o descarte dos TÉCNICA MICRO Amostras com hemólise mesmo que discreta interferem
Metodologia: Sims - Horn reagentes e do material biológico seja feito de acordo Utilizada para dosagem de Bilirrubina com concentração na dosagem de Bilirrubina. Algumas drogas como
A Bilirrubina, através da reação de acoplamento com com a legislação vigente. Esteróides Anabolizantes, Ácido Ascórbico, Salicilatos
superior a 10 mg/dL (soro de recém-nascidos ictéricos). e Vitamina A podem elevar os valores de Bilirrubina. A
o Ácido Sulfanílico Diazotado forma um complexo 8- Para obtenção de informações relacionadas à
de coloração vermelha (Azobilirrubina). A Bilirrubina Usar micropipeta de 0,05 mL para pipetar o soro. Cafeína e as Penicilinas podem interferir nas dosagens,
biossegurança ou em caso de acidentes com o produto, diminuindo os valores de Bilirrubina.
Total (Direta e Indireta) é dosada em presença de Rotular 3 tubos de ensaio como na Técnica Macro e
consultar as FISPQ (Ficha de Informações de Segurança
um acelerador (Cafeína e Benzoato), que permite a de Produtos Químicos) disponibilizadas no site proceder como a seguir:
CONTROLE INTERNO DE QUALIDADE
solubilização da Bilirrubina Indireta (não conjugada), www.bioclin.com.br ou através de solicitação pelo SAC Branco BD BT O Laboratório Clínico deve possuir um programa interno
insolúvel em água. A Bilirrubina Direta (conjugada) é (Serviço de Assessoria ao Cliente) da Quibasa. de controle da qualidade, onde procedimentos, normas,
dosada em meio aquoso. Reagente Nº 2 150 mL --- --- limites e tolerância para variações sejam claramente
9- Não utilizar o produto em caso de danos na
embalagem. Diazo Reagente --- 150 mL 150 mL estabelecidos. É importante ressaltar que todos os
REAGENTES 10- É imprescindível que os instrumentos e equipamentos sistemas de medição apresentam uma variabilidade
Número 1 - Nitrito de Sódio - Conservar entre 15 e Água Destilada 1,8 mL 1,8 mL --- analítica característica, que deve ser monitorada pelos
utilizados estejam devidamente calibrados e próprios laboratórios. Para tanto, é recomendável a
30ºC. Contém: Nitrito de Sódio < 250 mmol/L. submetidos às manutenções periódicas. Reagente Nº 3 --- --- 1,8 mL utilização de controles, que permitem avaliar a precisão
Número 2 - Reagente Sulfanílico - Conservar entre 15 e a exatidão das dosagens.
e 30ºC. Contém: Ácido Sulfanílico < 20 mmol/L e Ácido Amostra 50 mL 50 mL 50 mL
AMOSTRAS
Clorídrico < 300 mmol/L. Soro ou plasma (EDTA ou Heparina) livres de hemólise. RASTREABILIDADE
Número 3 - Acelerador - Conservar entre 15 e 30ºC. A amostra deve ser protegida da luz. O analito é Homogeneizar por agitação, esperar por 5 minutos e ler A Bioclin recomenda o uso do kit Bilirrubina Calibração
Contém: Acetato de Sódio Anidro < 3 mol/L, Benzoato estável por 3 dias entre 2 e 8º C, e 3 meses a -20ºC. as respectivas absorbâncias das Bilirrubinas Direta e Bioclin, que é rastreável ao material de referência SRM
de Sódio < 2 mol/L, Cafeína Anidra < 700 mmol/L e A amostra para controle terapêutico deve ser colhida Total em 525 nm (500 - 550 nm), ajustando o zero com o 916A do NIST (National Institute of Standards and
surfactante. Technology).
sempre no mesmo horário. branco. A cor é estável por 30 minutos.
Os valores em mg/dL para as Bilirrubinas Direta e Total VALORES DE REFERÊNCIA
APRESENTAÇÃO DESCRIÇÃO DO PROCESSO são obtidos utilizando o Fator de Calibração MICRO, Os valores de referência, em mg/dL, para o presente
Reagente Volume obtido com o kit Bilirrubina Calibração Bioclin. método, foram obtidos através da determinação de
PREPARO DO DIAZO REAGENTE Bilirrubina em populações sadias do sexo masculino e
Nº 1 5 mL Adicionar 1 gota do Reagente Nº 1 a 1,5 mL do Reagente feminino.
CÁLCULOS
Nº 2 125 mL Nº 2. Homogeneizar bem e usar somente no dia do seu Adulto
Utilizando o kit Bilirrubina Calibração Bioclin*, efetuar o
preparo.
Nº 3 250 mL cálculo do fator. Realizar cálculos distintos para a técnica Total 0,1 - 1,2 mg/dL
TÉCNICA Macro e para a técnica Micro.
Direta até 0,4 mg/dL
EQUIPAMENTOS E INSUMOS OPERACIONAIS A Bioclin recomenda, para uso do kit, utilizar como
Espectrofotômetro ou colorímetro, relógio ou calibrador o kit Bilirrubina Calibração Bioclin e como soro Fator de = Concentração do Padrão* (10 mg/dL) Indireta 0,1 - 0,8 mg/dL
cronômetro, pipetas, tubos de ensaio, kit Bilirrubina controle os kits Biocontrol N e P Bioclin. Calibração Absorbância do Padrão* (média)
Calibração Bioclin, Biocontrol N e Biocontrol P Bioclin. Neonatos e Crianças
Encontram-se no mercado especializado de artigos para TÉCNICA MACRO mg/dL = Absorbância da Amostra x Fator de Calibração 24 h < 8,8 mg/dL
Laboratórios de Análises Clínicas. Rotular 3 tubos de ensaio como “B” (Branco), “BD”
2º dia 1,3 - 11,3 mg/dL
(Bilirrubina Direta) e “BT” (Bilirrubina Total), e proceder Bilirrubina Indireta = Bilirrubina Total – Bilirrubina Direta
CONDIÇÕES DE ARMAZENAMENTO E TRANSPORTE como a seguir: Bilirrubina Total 3º dia 0,7 - 12,7 mg/dL
A temperatura de armazenamento e transporte deverá
ser de 15 a 30ºC. Manter ao abrigo da luz e evitar Branco BD BT Exemplo: 4º ao 6º dia 10,1 - 12,6 mg/dL
umidade. Reagente Nº 2 500 mL --- ---
Absorbância Média do Padrão = 0,480 Crianças > 1 mês 0,2 - 1,0 mg/dL
Absorbância da Amostra p/ Bilirrubina Total = 0,045
CUIDADOS ESPECIAIS Diazo Reagente --- 500 mL 500 mL Absorbância da Amostra p/ Bilirrubina Direta = 0,012 Neonatos e
Bilirrubina Direta até 0,4 mg/dL
Crianças
1- Somente para uso diagnóstico in vitro profissional. Água Destilada 4,5 mL 4,5 mL ---
2- Seguir com rigor a metodologia proposta para Fator de Calibração = 10 mg/dL = 20,83 Para converter os valores de mg/dL para mmol/L (SI)
obtenção de resultados exatos. Reagente Nº3 --- --- 4,5 mL
0,480 multiplicar por 0,0171.
3- A água utilizada na limpeza do material deve ser Amostra 300 mL 300 mL 300 mL
recente e isenta de agentes contaminantes. Estes valores devem ser usados como orientação, sendo
Bilirrubina Total = 0,045 x 20,83 = 0,93 que cada laboratório deverá criar sua faixa de valores de
4- Colunas deionizadoras saturadas liberam água Homogeneizar por agitação, esperar 5 minutos e ler Bilirrubina Direta = 0,012 x 20,83 = 0,25 referência, de acordo com a população atendida.
alcalina, íons diversos e agentes oxidantes e redutores, as absorbâncias das Bilirrubinas Direta e Total em
que podem alterar de forma significativa os resultados. Bilirrubina Indireta = 0,93 - 0,25 = 0,68
525 nm (500 - 550 nm), ajustando o zero com o branco.
Os resultados fornecidos por este kit devem ser Bilirrubina Direta
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS Português 2/2
interpretados pelo profissional médico responsável, 1 - JENDRASSIK, H. T. e Grof, P. : Biochem. Zentr. 297:81,
não sendo o único critério para a determinação do Amostra 1 Amostra 2 Amostra 3 1938.
diagnóstico e/ou tratamento do paciente. Concentração 2 - MALLOY, H. T. e EVELYN, K. A .- J. Biol. Chem. 119:481,
0,22 0,32 0,84 1937.
Média (mg/dL)
DESEMPENHO DO PRODUTO 3 - MARTINEK, R. G.,Clin. Chem. Acta 13, 161, 1966.
Desvio 4 - POWELL, W. N., Am. J. Clin. Path. 8, 55, 1944.
CONTROLE DE QUALIDADE 0,01 0,01 0,01
Padrão (mg/dL) 5 - SIMS, F. H. e Horn, C., Am. J. Clin. Path. 29, 412, 1958.
Exatidão Coeficiente de 6 - TONKS, D. B., Clin. Chem. 9, 217, 1983.
2,59 1,79 0,69
RECUPERAÇÃO Variação (%)
A análise de recuperação foi feita com 05 determinações GARANTIA DE QUALIDADE
de amostras. As exatidões foram calculadas, e se Antes de serem liberados para o consumo, todos os
Bilirrubina Total
encontraram em boa concordância com os valores de reagentes Bioclin são testados pelo Departamento
referência, obtendo uma recuperação entre 95 e 103%. Amostra 1 Amostra 2 Amostra 3 de Controle de Qualidade. A qualidade dos reagentes
é assegurada até a data de validade mencionada na
Concentração
COMPARAÇÃO DE MÉTODOS E ESPECIFICIDADE 0,43 1,03 3,21 embalagem de apresentação, desde que armazenados
Média (mg/dL)
METODOLÓGICA e transportados nas condições adequadas.
Desvio
O kit Bilirrubina foi comparado com outros métodos para 0,01 0,01 0,03
Padrão (mg/dL) QUIBASA QUÍMICA BÁSICA Ltda
dosagem de Bilirrubina Total e Direta. Foram realizadas
07 análises e os resultados foram avaliados. Coeficiente de Rua Teles de Menezes, 92 - Santa Branca
1,33 0,56 0,90 CEP 31565-130 - Belo Horizonte - MG - Brasil
Para Bilirrubina Total a equação linear obtida foi Variação (%)
Y = 0,974X + 0,025 e o coeficiente de correlação 0,998. Tel.: (31) 3439.5454 - Fax: (31) 3439.5455
Para Bilirrubina Direta a equação linear obtida foi Sensibilidade E-mail:bioclin@bioclin.com.br
Y = 1,029X - 0,004 e o coeficiente de correlação 0,997. A sensibilidade foi calculada a partir de 20 determinações CNPJ: 19.400.787/0001-07 - Indústria Brasileira
de uma amostra isenta de Bilirrubina Total e Direta. EC REP OBELIS S.A.
Precisão A média de Bilirrubina Total encontrada foi
REPETIBILIDADE 0,03600 mg/dL, com desvio padrão de 0,02542 mg/dL. Bd. Général Wahis, 53
A repetibilidade foi calculada a partir de 20 determinações A sensibilidade, que indica o limite de detecção do 1030 Brussels, Belgium
sucessivas, utilizando 3 amostras com concentrações método, corresponde a média mais 3 vezes o desvio
diferentes, obtendo-se os seguintes resultados: padrão, e é igual a 0,11227 mg/dL. ATENDIMENTO AO CONSUMIDOR
A média de Bilirrubina Direta encontrada foi Serviço de Assessoria ao Cliente
Bilirrubina Direta Tel.: 0800 0315454
0,0330 mg/dL, com desvio padrão de 0,0047 mg/dL.
Amostra 1 Amostra 2 Amostra 3 A sensibilidade, que indica o limite de detecção do E-mail: sac@bioclin.com.br
método, corresponde a média mais 3 vezes o desvio
Concentração Número de registro do kit Bilirrubina na ANVISA:
Média (mg/dL)
0,22 0,32 0,84 padrão, e é igual a 0,0471 mg/dL.
10269360083
Desvio Padrão Linearidade
0,01 0,01 0,01
(mg/dL) A reação é linear até 15 mg/dL na Técnica Macro e Revisão: Janeiro/2020
Coeficiente de 45 mg/dL na Técnica Micro. Para valores maiores,
3,61 2,47 0,94 diluir a amostra com NaCl 0,85 % e repetir a dosagem.
Variação (%)
Multiplicar o resultado pelo fator de diluição.
Bilirrubina Total SIGNIFICADO DIAGNÓSTICO
Amostra 1 Amostra 2 Amostra 3 A Bilirrubina eleva-se no soro na presença de lesões
hepáticas, obstrução biliar ou quando a velocidade de
Concentração destruição dos glóbulos vermelhos está aumentada.
0,43 1,04 3,23
Média (mg/dL)
O aumento da Bilirrubina Indireta é observado na
Desvio síndrome hemolítica, na icterícia neonatal, na síndrome
0,01 0,01 0,01
Padrão (mg/dL) de Cligler- Najjar e na doença de Gilbert.
Coeficiente de
A Bilirrubina Direta está aumentada nas hepatites
Variação (%)
2,23 1,02 0,37 agudas e crônicas, nas reações tóxicas a várias drogas
(Clorpromazina, Arsenicais Orgânicos, Metiltestosterona)
REPRODUTIBILIDADE e nas obstruções do trato biliar.
A reprodutibilidade foi calculada a partir de 20
determinações sucessivas durante 3 dias consecutivos, NÚMERO DE TESTES
utilizando 3 amostras com concentrações diferentes, 110 Testes / 300 L de Amostra
obtendo-se os seguintes resultados: 276 Testes / 50 L de Amostra
REPRESENTANTE
EC REP MARCA CE
EC REP EUROPEU AUTORIZADO EC REP

NÃO UTILIZAR SE A
PROTEGER DA
PANTONE
EC
LUZ 654
E CALOR PANTONE 5435
REP EC REP EMBALAGEM ESTIVER
DANIFICADA
 Espanhol 1/2

BILIRRUBINA
K005
INSTRUCCIONES DE USO

FINALIDAD 5- La calibración debe ser repetida periódicamente para Los valores en mg/dL para las Bilirrubinas Directa y LIMITACIONES DEL PROCESO
Método para la determinación de la Bilirrubina Directa y verificar alguna alteración en la respuesta del colorímetro Total son obtenidos utilizando el Factor de Calibración No utilizar la técnica Micro para valores de Bilirrubina
Total. Test colorimétrico, solamente para uso diagnóstico o del espectrofotómetro. MACRO, obtenido con el Kit Bilirrubina Calibración inferiores a 10 mg/dL.
in vitro. 6- Hemólisis, mismo discreta, interfiere en la dosificación. Bioclin.
7- Se recomienda la aplicación de la ley local, estatal y INTERFERENTES
PRINCIPIO DE ACCIÓN federal de protección ambiental para la eliminación de Muestras con hemólisis mismo que discreta interferen
MetodologÍa: Sims - Horn reactivos y material biológico se hace de acuerdo con la TÉCNICA MICRO
Utilizada para dosificación de Bilirrubina con en la dosificación de Bilirrubina. Algunas drogas como
La Bilirrubina, atravéz de la reacción de acoplamiento legislación vigente. Esteróides Anabolizantes, Ácido Ascórbico, Salicilatos
con el Ácido Sulfanílico Diazotado forma un complejo 8- Para obtener información relacionada con la seguridad concentración superior a 10 mg/dL (suero de recién-
y Vitamina A pueden elevar los valores de Bilirrubina.
de coloración rojo (Azobilirrubina). La Bilirrubina Total biológica o en caso de accidentes con el producto, nacidos ictéricos). La Cafeina y las Penicilinas pueden interferir en las
(Directa e Indirecta) es dosificada en presencia de consultar la FISPQ (Ficha de Informaciones de la Usar micropipeta de 0,05 mL para pipetear el suero. dosificaciones, disminuyendo los valores de Bilirrubina.
un acelerador (Cafeína y Benzoato), que permite la Seguridad de Productos Químicos) disponibles en el site Rotular 3 tubos de ensayo como en la Técnica Macro y
solubilización de la Bilirrubina Indirecta (no conjugada), www.bioclin.com.br o solicitando a través del SAC proceder como sigue: CONTROL INTERNO DE CALIDAD
insoluble en agua. La Bilirrubina Directa (conjugada) es (Servicio de Asesoría al Cliente) de Quibasa. El Laboratorio Clínico debe poseer un programa interno
dosificado en medio acuoso. 9- No utilice el producto en caso de daños en su embalaje. Blanco BD BT de control de calidad, donde procedimientos, normas,
10- Es esencial que los instrumentos y equipos utilizados límites y tolerancia para variaciones sean claramente
Reactivo Nº 2 150 mL --- ---
REACTIVOS estén adecuadamente calibrados y sometidos a establecidos. Es importante resaltar que todos los
Número 1 - Nitrito de Sodio - Almacenar entre 15 y mantenimientos periódicos. Diazo Reactivo --- 150 mL 150 mL sistemas de medición presentan una variabilidad
30ºC. Contiene: Nitrito de Sodio < 250 mmol/L. analítica característica, que debe ser vigilada por los
Número 2 - Reactivo Sulfanílico - Almacenar entre MUESTRAS Agua Destilada 1,8 mL 1,8 mL ---
propios laboratorios. Por lo tanto, es recomendable la
15 y 30ºC. Contiene: Ácido Sulfanílico < 20 mmol/L y Suero o plasma (EDTA o Heparina) libres de hemólisis. Reactivo Nº3 --- --- 1,8 mL utilización de controles, que permiten la evaluación, la
Ácido Clorídrico < 300 mmol/L. La muestra debe ser protegida de la luz. El analito es precisión y la exactitud de las dosificaciones.
Número 3 - Acelerador - Almacenar entre 15 y 30ºC. estable por 3 días entre 2 y 8ºC, y 3 meses la -20ºC. Muestra 50 mL 50 mL 50 mL
Contiene: Acetato de Sodio Anhidro < 3 mol/L, Benzoato La muestra para control terapéutico debe ser cogida TRAZABILIDAD
de Sodio < 2 mol/L, Cafeína Anhidra < 700 mmol/L y siempre en el mismo horario. Homogenizar por agitación, esperar por 5 minutos y leer Bioclin recomienda el uso del kit Bilirrubina Calibración
surfactante. las respectivas absorbancias de las Bilirrubinas Directa y Bioclin, que es trazable al material de referencia SRM
DESCRIPCIÓN DEL PROCESSO Total en 525 nm (500 - 550 nm), ajustando el cero con el 916A del NIST (National Institute of Standards and
PRESENTACIÓN Technology).
Blanco. El color es estable por 30 minutos.
PREPARO DEL DIAZO REACTIVO
Reactivo Volumen Adicionar 1 gota del Reactivo Nº 1 a 1,5 mL del Reactivo Los valores en mg/dL para las Bilirrubinas Directa y
Total son obtenidos utilizando el Factor de Calibración VALORES DE REFERENCIA
Nº 1 5 mL Nº 2. Homogenizar bien y usar solamente en el día de Los valores de referencia, en mg/dL, para el presente
su preparo. MICRO, obtenido con el kit Bilirrubina Calibración
Nº 2 125 mL método, fueron obtenidos atravéz de la determinación
Bioclin. de Bilirrubina en poblaciones sanas de sexo masculino
Nº 3 250 mL TÉCNICA y femenino.
La Bioclin recomienda, para uso del kit, utilizar como CÁLCULOS
EQUIPAMIENTOS E INSUMOS OPERACIONALES calibrador el kit Bilirrubina Calibración Bioclin y como Utilizando el kit Bilirrubina Calibración Bioclin*, efectuar Adulto
Espectrofotómetro o colorímetro, reloj o cronómetro, suero control los kits Biocontrol N y Biocontrol P Bioclin.
el cálculo del factor. Realizar cálculos distintos para la Total 0,1 - 1,2 mg/dL
pipetas, tubos de ensayo, kit Bilirrubina Calibración técnica Macro y para la técnica Micro.
Bioclin, Biocontrol N y Biocontrol P Bioclin. Se TÉCNICA MACRO Directa hasta 0,4 mg/dL
encuentran en el mercado especializado de artículos Rotular 3 tubos de ensayo como “B” (Blanco), “BD”
(Bilirrubina Directa) y “BT” (Bilirrubina Total), y proceder Factor de = Concentración del Patrón* (10 mg/dL) Indirecta 0,1 - 0,8 mg/dL
para Laboratorios de Análisis Clínicos.
como a seguir: Calibración Absorbancia del Patrón* (promedio)
Neonatos e Niños
CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO Y
Blanco BD BT mg/dL = Absorbancia de la Muestra x Fator de Calibración
TRANSPORTE 24 h < 8,8 mg/dL
La temperatura de almacenamiento y transporte deberá Reactivo Nº 2 500 mL --- ---
Bilirrubina Indirecta = Bilirrubina Total - Bilirrubina Directa 2º día 1,3 - 11,3 mg/dL
ser de 15 a 30ºC. Mantener al abrigo de la luz y evitar
humedad. Diazo Reactivo --- 500 mL 500 mL
Bilirrubina Total 3º día 0,7 - 12,7 mg/dL
Agua Destilada 4,5 mL 4,5 mL --- Ejemplo:
CUIDADOS ESPECIALES 4º al 6º día 10,1 - 12,6 mg/dL
Reactivo Nº 3 --- --- 4,5 mL
Absorbancia Promedio del Patrón = 0,480
1- Solamente para el uso diagnóstico in vitro Absorbancia de la Muestra p/ Bilirrubina Total = 0,045 Niños > 1 mes 0,2 - 1,0 mg/dL
profesional. Muestra 300 mL 300 mL 300 mL
2- Seguir con rigor la metodología propuesta para Absorbancia de la Muestra p/ Bilirrubina Directa = 0,012 Bilirrubina Neonatos e
hasta 0,4 mg/dL
obtención de resultados exatos. Directa Niños
3- El agua utilizada en la limpieza del material debe ser Homogenizar por agitación, esperar 5 minutos y leer Factor de Calibración = 10 mg/dL = 20,83
reciente e exenta de agentes contaminantes. las absorbancias de las Bilirrubinas Directa y Total en 0,480 Para convertir los valores de mg/dL para mmol/L (SI)
4- Columnas deionizadoras saturadas liberan agua 525 nm (500 - 550 nm), ajustando el cero con el Blanco. multiplicar por 0,0171.
alcalina, íones diversos y agentes oxidantes y reductores, El color permanece estable por 30 minutos. Bilirrubina Total = 0,045 x 20,83 = 0,93 Estos valores deben ser usados como orientación,
que pueden alterar de forma significativa los resultados. siendo que cada laboratorio deberá crear su rango
Bilirrubina Directa = 0,012 x 20,83 = 0,25 de valores de referencia, de acuerdo con la población
Bilirrubina Indirecta = 0,93 - 0,25 = 0,68 atendida.
Los resultados proporcionados por este kit deben ser Bilirrubina Directa
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS Espanhol 2/2
interpretados por el profesional médico responsable, no 1 - JENDRASSIK, H. T. e Grof, P. : Biochem. Zentr.
siendo el único criterio para determinar el diagnóstico y/o Muestra 1 Muestra 2 Muestra 3 297:81, 1938.
tratamiento del paciente. Concentración 2 - MALLOY, H. T. e EVELYN, K. A .- J. Biol. Chem.
0,22 0,32 0,84
Promedio(mg/dL) 119:481, 1937.
DESEMPEÑO DEL PRODUCTO 3 - MARTINEK, R. G.,Clin. Chem. Acta 13, 161, 1966.
Desvio Patrón
CONTROL DE CALIDAD 0,01 0,01 0,01 4 - POWELL, W. N., Am. J. Clin. Path. 8, 55, 1944.
(mg/dL)
5 - SIMS, F. H. e Horn, C., Am. J. Clin. Path. 29,412,1958.
Exactitud Coeficiente de
2,59 1,79 0,69 6 - TONKS, D. B., Clin. Chem. 9, 217, 1983.
RECUPERACIÓN Variación (%)
El análisis de recuperación fue hecha con 05
determinaciones de muestras. Las exactitudes fueron GARANTÍA DE CALIDAD
calculadas, y se encontraron en buena concordancia con Bilirrubina Total Antes de ser liberado para el consumo, todos los
los valores de referencia, obteniedo una recuperación Muestra 1 Muestra 2 Muestra 3 reactivos Bioclin son probados por el Departamento
entre 95 y 103%. de Control de Calidad. La calidad de los reactivos es
Concentración asegurada hasta la fecha de valides mencionada en la
0,43 1,03 3,21
COMPARACIÓN DE MÉTODOS Y ESPECIFICIDAD Promedio(mg/dL)
caja de presentación, desde que sean almacenados y
METODOLÓGICA
El kit Bilirrubina fue comparado con otros métodos
Desvio Patrón
0,01 0,01 0,03 transportados en condiciones adecuadas.
(mg/dL)
para dosificación de Bilirrubina Total y Directa. Fueron
realizadas 07 análisis y los resultados fueron evaluados. Coeficiente de QUIBASA QUÍMICA BÁSICA Ltda
1,33 0,56 0,90
Para Bilirrubina Total la ecuación linear obtenida fue Variación (%) Rua Teles de Menezes, 92 - Santa Branca
Y = 0,974X + 0,025 y el coeficiente de correlación 0,998. CEP 31565-130 - Belo Horizonte - MG - Brasil
Para Bilirrubina Directa la ecuación linear obtenida fue Sensibilidad Tel.: +55 (31) 3439.5454 - Fax: +55 (31) 3439.5455
Y = 1,029X - 0,004 y el coeficiente de correlación 0,997. La sensibilidad fue calculada a partir de 20 determinaciones E-mail: bioclin@bioclin.com.br
de una muestra exenta de Bilirrubina Total y CNPJ: 19.400.787/0001-07 - Industria Brasileña
Precisión
REPETIBILIDAD Directa.
La repetibilidad fue calculada a partir de 20 El promedio de Bilirrubina Total encontrado fue EC REP OBELIS S.A.
determinaciones sucesivas, utilizando 3 muestras con 0,03600 mg/dL, con desvío patrón de 0,02542 mg/dL. SIMBOLOGÍA UNIVERSAL
Bd. Général Wahis, 53
concentraciones diferentes, obteniéndose los siguientes La sensibilidad, que indica el limite de detección del 1030 Brussels, Belgium
resultados: método, corresponde al promedio más 3 veces el desvío
Bilirrubina Directa patrón, y es igual a 0,11227 mg/dL. ATENDIMIENTO AL CONSUMIDOR
El promedio de Bilirrubina Directa encontrado fue Servicio de Asesoría al Cliente
Muestra 1 Muestra 2 Muestra 3
0,0330 mg/dL, con desvío patrón de 0,0047 mg/dL. La Tel.: 08000 315454
Concentración
0,22 0,32 0,84
sensibilidad, que indica el limite de detección del método, E-mail: sac@bioclin.com.br
Promedio(mg/dL) corresponde al promedio más 3 veces el desvío patrón, y
Desvio es igual a 0,0471 mg/dL. Número de registro del kit Bilirrubina en la ANVISA:
0,01 0,01 0,01
Patrón (mg/dL) 10269360083
Linearidad
Coeficiente de
3,61 2,47 0,94 La reacción es linear hasta 15 mg/dL en la Técnica Macro
Variación (%) Revisión: Enero/2020
y 45 mg/dL en la Técnica Micro. Para valores mayores,
diluir la muestra con NaCl 0,85 % y repetir la dosificación.
Bilirrubina Total Multiplicar el resultado por el factor de dilución.
Muestra 1 Muestra 2 Muestra 3
Concentración
SIGNIFICADO DIAGNÓSTICO
0,43 1,04 3,23 La Bilirrubina se eleva en el suero en la presencia de
Promedio(mg/dL)
lesiones hepáticas, obstrucción biliar o cuando la
Desvio velocidad de destrucción de los glóbulos rojos está
0,01 0,01 0,01
Patrón(mg/dL)
aumentada. El aumento de la Bilirrubina Indirecta es
Coeficiente de observado en el síndrome hemolítico, en la icterícia
2,23 1,02 0,37
Variación (%) neonatal, en el síndrome de Cligler- Najjar y en la
dolencia de Gilbert.
REPRODUCTIBILIDAD La Bilirrubina Directa está aumentada en las hepatitis
La reproductibilidad fue calculada a partir de 20
determinaciones sucesivas durante 3 días consecutivos, agudas y crónicas, en las reacciones tóxicas a
utilizando 3 muestras con concentraciones diferentes, várias drogas (Clorpromazina, Arsenicais Orgánicos,
obteniéndose los siguientes resultados: Metiltestosterona) y en las obstrucciones del trato biliar.
EUROPEA REPRESENTANTE
EC REP
AUTORIZADO MARCADO CE
NÚMERO DE PRUEBAS
EC REP EC REP

110 Pruebas / 300 L de Muestra

276 Pruebas / 50 L de Muestra PROTEGER DEL
NO UTILICE SI EL
PANTONE
EC
LUZ 654
Y CALOR PANTONE 5435
REP EC REP EMBALAJE ESTA
DAÑADA
 Inglês 1/2

BILIRUBIN
K005
USAGE INSTRUCTIONS
FUNCTION 5- The calibration shall be repeated periodically to The values in mg/dL for Direct and Total Bilirubin are PROCEDURE LIMITATIONS
Method for determination of Direct and Total Bilirubin. verify any change in the colorimeter response or obtained by the Calibration Factor MACRO, acquired Do not use the Macro technique for Bilirubin values
Colorimetric test, for in vitro diagnostic only. spectrophotometer. with the Bilirubin Calibration Bioclin kit. below 10 mg/dL.
6- Hemolysis, even discrete, interferes in the dosage.
PRINCIPLE OF ACTION 7- We recommend applying the local, state and federal MICRO TECHNIQUE INTERFERENCES
Methodology: Sims - Horn rules for environmental protection, so that disposal Used in bilirubin dosages with concentration superior Samples with Hemolysis, even discrete, interferes in
The Bilirubin through the reaction of attachment with the of reagents and biological material can be made in to 10 mg/dL (jaundiced recently born serum). Use a the dosage of Bilirubin.Some compounds as Anabolic
Sulphanilic Diazotized Acid forms a complex of red color accordance with current legislation. 0,05 mL micropipette to pipette the serum. Steroids, Ascorbic Acid, Salicylates and Vitamin A
(Azobilirubin). The Total Bilirubin (Direct and Indirect) is 8- To obtain information related to biosafety or in can elevate the Bilirubin values. The Caffeine and the
Label 3 test tubes and proceed as follows:
dosed in the presence of a accelerator (Caffeine and case of accidents with the product, consult the MSDS Penicillin can interfere in the dosages reducing the
Benzoate) that allows the solubilization of the Indirect (Material Safety Data Sheet) available on the website Blank BD BT Bilirubin.
Bilirubin (not conjugated) insoluble in water. The Direct www.bioclin.com.br or upon request by the SAC Reagent Nº 2 150 mL --- ---
Bilirubin (conjugated) is dosed in a wet environment. (Customer Advisory Service) of Quibasa. INTERNAL QUALITY CONTROL
9- Do not use the product in case of damaged packaging. Diazo Reagent --- 150 mL 150 mL The Clinical Laboratory must have an internal quality
REAGENTS 10- It is essential that the instruments and equipments Distilled Water 1,8 mL 1,8 mL --- control, where all procedures, rules, limits and tolerance
Number 1 - Sodium Nitrate - Store between 15 and used are properly calibrated and subjected to periodic to variations be clearly established. It is important
Reagent Nº 3 --- --- 1,8 mL to mention that all measurement systems present a
30ºC. Contains: Sodium Nitrate < 250 mmol/L. maintenance.
Sample 50 mL 50 mL 50 mL analytical variety, and it must be monitor by the laboratory.
Number 2 - Sulphanilic Reagent - Store between 15
SAMPLES Therefore, it is recommendable the use of controls,
and 30ºC. Contains: Sulphanilic Acid < 20 mmol/L and
Serum or plasma (EDTA or Heparin) free of hemolysis. Homogenize by mixing, wait 5 minutes and read the allowing the precision and accuracy of the dosages.
Chloridric Acid < 300 mmol/L.
Number 3 - Accelerator - Store between 15 and Sample must be protected from light. The analyte Direct and Total Bilirubin absorbancies at 525 nm
TRACEABILITY
30ºC. Contains: Anhydrous Sodium Acetate < 3 mol/L, Sodium is stable for 3 days between 2 and 8ºC, and 3 months (500 - 550 nm), adjusting the zero with the Blank. The
Bioclin recommends the usage of the Bioclin Bilirubin
Benzoate < 2 mol/L, Caffeine Anhydrous < 700 mmol/L and at -20ºC. The sample for therapeutical control must be color is stable for 30 minutes. Calibration kit, which is traceable to the reference material
surfactant. collected always in the same time. The values in mg/dL for Direct and Total Bilirubin are NIST (National Institute of Standards and Technology)
obtained by the Calibration Factor MACRO, acquired SRM 916A.
PRESENTATION PROCESS DESCRIPTION with the Bilirubin Calibration Bioclin kit.
Reagent Volume REFERENCE VALUES
DIAZO REAGENT PREPARATION CALCULATIONS The reference values in mg/dL, for this method were
Nº 1 5 mL Add 1 drop of Reagent Nº 1 at 1,5 mL of Reagent Nº 2. obtained through the determination of Bilirubin in healthy
Using the Bilirubin Calibration Bioclin* kit, efectuate
Homogenized well and use only on the day of preparation. populations of male and female.
Nº 2 125 mL the calculation factor. Carry out distinct calculations for
Nº 3 250 mL Macro technique and Micro technique. Adults
TECHNIQUE
Bioclin recommends using the kit Bilirubin Calibration Total 0,1 - 1,2 mg/dL
EQUIPMENTS AND OPERATIONAL INPUTS Bioclin as calibrator and as control serum, Biocontrol N Calibration Factor = Standard Concentration* (10 mg/dL)
Spectrophotometers or colorimeter, watch and Standard Absorbance* Direct up to 0,4 mg/dL
and Biocontrol P Bioclin Kits.
stopwatch, pipettes, test tubes, Bilirubin Calibration Indirect 0,1 - 0,8 mg/dL
Bioclin kit, Biocontrol N and Biocontrol P Bioclin Kits. MACRO TECHNIQUE mg/dL = Sample Absorbance x Calibration Factor
They can be found at markets specialized in laboratories Newborns and Childrens
Label 3 test tubes: “B” (Blank), “BD” (Direct Bilirubin) and
of clinical analysis.
“BT” (Total Bilirubin) and proceed as follows: Indirect Bilirubin = Total Bilirubin – Direct Bilirubin 24 h < 8,8 mg/dL
TRANSPORTATION AND STORAGE CONDITIONS Blank BD BT 2º day 1,3 - 11,3 mg/dL
The storage and transport temperature should be Example:
Reagent Nº2 500 mL --- --- Satndard Average Absorbance = 0,480 3º day 0,7 - 12,7 mg/dL
between 15 and 30ºC. Protect from light and avoid Bilirubin Total
moisture. Diazo Reagent --- 500 mL 500 mL Total Bilirubin Sample Absorbance = 0,045 4º to 6º day 10,1 - 12,6 mg/dL
Direct Bilirubin Sample Absorbance = 0,012
Dist. Water 4,5 mL 4,5 mL --- Childrens >
SPECIAL CARE 0,2 - 1,0 mg/dL
1 month
1- For professional in vitro diagnostic use only. Reagent Nº3 --- --- 4,5 mL Calibration Factor = 10 mg/dL = 20,83
2- Strictly follow the methodology proposed to obtain Newborns and
Sample 300 mL 300 mL 300 mL 0,480 Bilirubin Direct up to 0,4 mg/dL
exact results. Childrens
3- Water used in material cleaning must be recent and Homogenize by mixing, wait 5 minutes and read the Total Bilirubin = 0,045 x 20,83 = 0,93
free of contaminants. To convert the values of mg/dL to mmol/L (SI) multiply
Total and Direct Bilirubin absorbancies at 525 nm Direct Bilirubin = 0,012 x 20,83 = 0,25 by 0,0171.
4- Saturated deionizer columns release alkaline water, (500 - 550 nm), adjusting the zero with the Blank. The Indirect Bilirubin = 0,93 - 0,25 = 0,68 These values should be used as guidelines, each
many ions, oxidizing agents and reducers that may alter color is stable for 30 minutes. laboratory should establish its range of reference values,
the results significantly.
according to the population served.
The results provided by this kit must be interpreted by Direct Bilirubin
BIBLIOGRAPHIC REFERENCES Inglês 2/2
the medical professional responsible, not being the 1 - JENDRASSIK, H. T. e Grof, P. : Biochem. Zentr. 297:81,
only criterion for the determination of diagnosis and/or Sample 1 Sample 2 Sample 3 1938.
treatment of the patient. Average 2 - MALLOY, H. T. e EVELYN, K. A .- J. Biol. Chem. 119:481,
0,22 0,32 0,84
Concentration (mg/dL) 1937.
PRODUCT PERFORMANCE 3 - MARTINEK, R. G.,Clin. Chem. Acta 13, 161, 1966.
QUALITY CONTROL Standard
0,01 0,01 0,01 4 - POWELL, W. N., Am. J. Clin. Path. 8, 55, 1944.
Deviation (mg/dL)
5 - SIMS, F. H. e Horn, C., Am. J. Clin. Path. 29, 412, 1958.
Accuracy Coefficient
RECOVERY 2,59 1,79 0,69 6 - TONKS, D. B., Clin. Chem. 9, 217, 1983.
of Variation (%)
The recovery analysis was made with 5 sample
determinations. The accuracies were calculated, and if Total Bilirubin QUALITY ASSURANCE
they are found in a good concordance with the reference Before being released for consumption, all Bioclin
values, obtaining a recovery between 95 and 103%. Sample 1 Sample 2 Sample 3 reagents are tested by the Department of
Average Quality Control. The quality of reagents is assured
0,43 1,03 3,21 until expiration date stated on the presentation
COMPARISON OF METHODS AND METHODOLOGY Concentration (mg/dL)
SPECIFICITY packaging, when stored and transported under
Standard appropriate conditions.
The Bilirubin kit was compared with other commercially 0,01 0,01 0,03
Deviation (mg/dL)
available methods for measurement of Total and Direct
Bilirubin. 07 analyzes were performed and the results Coefficient QUIBASA QUÍMICA BÁSICA Ltda
1,33 0,56 0,90
were evaluated. of Variation (%) Rua Teles de Menezes, 92 - Santa Branca
For Total Bilirubin the linear equation obtained was CEP 31565-130 - Belo Horizonte - MG - Brasil
Y = 0,974X + 0,025 and correlation coefficient 0,998. Sensitivity Phone: +55 (31) 3439.5454 - Fax: +55 (31) 3439.5455
For Direct Bilirubin the linear equation obtained was of The sensitivity was calculated from twenty (20) E-mail: bioclin@bioclin.com.br
Y = 1,029X - 0,004 and correlation coefficient 0,997. determinations of a sample free of Total and Direct CNPJ: 19.400.787/0001-07 - Made in Brazil
Bilirubin.
Precision
The average of the Total Bilirubin found was OBELIS S.A.
REPEATABILITY
EC REP

The repeatability was calculated from 20 successive 0,03600 mg/dL with standard deviation of 0,02542 mg/dL.
Bd. Général Wahis, 53 UNIVERSAL SYMBOLOGY
determinations, using 3 samples with different The sensitivity, which indicates the method detection li-
1030 Brussels, Belgium
concentrations, obtaining the following results: mit, corresponds to the average plus 3 times the standard
deviation, and is equal to 0,11227mg/dL.
Direct Bilirubin CUSTOMER SERVICE
The average of the Direct Bilirubin found was
Customer Advisory Service
Sample 1 Sample 2 Sample 3 0,0330 mg/dL with standard deviation of 0,0047 mg/dL.
Phone: 0800 0315454
The sensitivity, which indicates the method detection
Average Concentration
0,22 0,32 0,84
E-mail: sac@bioclin.com.br
(mg/dL) limit, corresponds to the average plus 3 times the
standard deviation, and is equal to 0,0471 mg/dL. ANVISA registration for Bilirubin kit: 10269360083
Standard
0,01 0,01 0,01
Deviation (mg/dL)
Linearity Review: January/2020
Coefficient The reaction is linear up to 15,0 mg/dL for the Macro
3,61 2,47 0,94
of Variation (%) Technique and 45 mg/dL for Micro Technique. For
samples with higher values dilute the sample with NaCl
Total Bilirubin
0,85% and repeat the dosage. Multiply the result by
Sample 1 Sample 2 Sample 3 the dilution factor.
Average
0,43 1,04 3,23 DIAGNOSTIC SIGNIFICANCE
Concentration (mg/dL)
The Bilirubin lift on plasma in the presence of hepatic
Standard
0,01 0,01 0,01 injuries, bile obstruction or when the speed of destruction
Deviation (mg/dL)
of red globule is increased. The increase of the Indirect
Coefficient Bilirubin is observed on the hemolytic syndrome, neonatal
2,23 1,02 0,37
of Variation (%) jaundice, Cligler-Najjar syndrome, Gilbert disease.
The Direct Bilirubin is increased on acute and chronicle
REPRODUCIBILITY hepatitis, the toxic reactions to many drugs (Chlorpromazine,
The reproducibility was calculated from 20 successive
Arsenicals Organics, Methyltestosterone), in bile
determinations for 3 consecutive days, using 3 samples
with different concentrations, obtaining the following obstruction treatment.
results:
NUMBER OF TESTS
110 Tests / 300 L of Sample EC REP
EUROPEAN AUTHORIZED
CE MARK
REPRESENTATIVE
276 Tests / 50 L of Sample
EC REP EC REP

DO NOT USE IF
KEEP AWAY
PANTONE
EC 654
REP
FROM PANTONE 5435
SUNLIGHT EC REP PACKAGE IS
DAMAGED