Membranas biológicas

• Citosol

• Membranas biológicas
– constituição

– transporte de substâncias através de membranas

– conexões entre células

 Citosol
(ou matriz citoplasmática)

- Constituição:

- Localização:

O que é o citoplasma?
 Organização da membrana celular
Dois folhetos: interno e externo

Composição:

Proteína da classe 

Glicolipído
Cadeia lateral de
oligossacarídeo

Proteína
globular
Fosfolipído Segmento
hidrofóbico da
proteína Colesterol
 Organização da membrana celular
criofratura: dois folhetos

Microscopia eletrónica de transmissão Microscopia eletrónica de varrimento

Modelo do Mosaico Fluído

evidência experimental
 Modelo do Mosaico Fluído
(Singer & Nicholson, 1972)

Difusão lateral de proteínas e os lípidos

▪ rotação em torno do seu eixo

▪ ‘flip-flop’
Modelo do Mosaico Fluído
(Singer & Nicholson, 1972)
Modelo do Mosaico Fluído
(Singer & Nicholson, 1972)
Modelo do Mosaico Fluído
(Singer & Nicholson, 1972)
 Modelo do Mosaico Fluído

A estrutura em ‘mosaico’ implica que as

macromoléculas:

1. Possuam assimetria…

2. Possam transportar informação

3. Tenham liberdade de movimentos

4. Tenham distribuição aleatória

 Modelo actual
(Vereb, 2004)

Dinâmica, mas estruturada

Formação de domínios lipídicos

1. Distribuição não aleatória das proteína na membrana

2. Contactos moleculares quase permanentes
3. Domínios de membrana: difusão limitada, reorganização dinâmica
Composição química de algumas membranas
biológicas
(em percentagem)
Conclusão:

✓ membranas - constituídas…

✓ a razão lípido: proteína varia …

✓ os glúcidos encontram-se apenas …

 Funções das
Membranas Biológicas

1. Fronteira

2. Barreira seletivamente permeável

3. Compartimentação

4. Matriz

5. Controlo

6. Armazenamento de energia

7. Estabilidade mecânica
 Biossíntese de constituintes membranares

As membranas biológicas são estruturas dinâmicas – estão em constante

formação, alteração
 Lípidos Membranares

3 classes principais:
1.Glicerolípidos
- glicerofosfolípidos
- gliceroglicolípidos
2. Esfingolípidos
3. Lípidos neutros
- colesterol
- sitoesterol
- ergosterol
 Lípidos Membranares
Fosfolípidos
São constituídos por:
1 parte polar: - 1 grupo fosfato (– PO4- -) hidrofílica
- 1 grupo característico (serina, colina, inositol...)

1 parte apolar: - glicerol (ou esfingosina) hidrofóbica

- 2 cadeias de ácidos gordos (4 no caso do DPG)
Ex. PG, DPG, PC, PE, PS, PI, PIP...

moléculas anfipáticas
 Estruturas lipídicas
Estruturas possíveis de fosfolípidos numa solução polar:

Micela
Ø cabeça > Ø
cauda
polar apolar

Ø cabeça ≤ Ø
cauda
polar apolar
Bicamada
 Lípidos Membranares
Ácidos gordos
ác. gordo saturado
ác. gordo insaturado (cis)



dobra

✓ membranas com muitos ácidos gordos saturados …

✓ ácidos gordos insaturados …

Lípidos Membranares
Ácidos gordos
Lípidos Membranares
Colesterol

Funções do colesterol
 Fluidez Membranar
1. temperatura

2. ácidos gordos insaturados

3. comprimento da cadeia hidrocarbonada

4. presença de lípidos neutros

 Formação de tecidos
=> Reconhecimento celular e adesão celular
Ligação heterotípica

Ligação homotípica
 Diferenciações da membrana celular

Regiões adaptadas a diferentes funções:

absorção
secreção
transporte de fluídos
ligação mecânica
interacções com células vizinhas
 Microvilosidades
aumento da superfície de absorção

até 3000 microvilosidades/enterócito

2 x 108 /cm2 no intestino delgado

Célula do epitélio intestinal (enterócito)

 Junções intercelulares

Estruturas que ligam células adjacentes entre si

formadas por agregação de proteínas membranares

específicas

Funções:

Neunlist, M. et al. (2012) The digestive neuronal–glial–epithelial unit: a new actor in gut health and disease
Nat. Rev. Gastroenterol. Hepatol. doi:10.1038/nrgastro.2012.221
Tipos principais de junções intracelulares em células animais

•junções apertadas ou
•junções de oclusão ou
•tight-junctions

-
desmossomas

•junções de hiato ou
•gap-junctions
Junções apertadas ou impermeáveis ou tight-junctions

Célula do epitélio intestinal (enterócito)

Junções apertadas ou impermeáveis ou tight-junctions

Microscopia E. varrimento
criofratura
Junções de aderência - Desmossomas

Desmossoma circular 

Desmossoma pontual 

Hemidesmossoma 

Célula do epitélio intestinal (enterócito)

 Junções de aderência - Desmossomas

Microscopia E. transmissão
 Junções comunicantes ou de hiato ou gap-junctions

Organismos pluricelulares ➔ tecidos

➢ Repartem entre si uma reserva comum de
metabolitos pequenos e iões;
➢ A individualidade mantém-se …
 Junções comunicantes ou de hiato ou gap-junctions

Microscopia E. transmissão Microscopia E. varrimento

Junções comunicantes ou de hiato ou gap-junctions

➢ a permeabilidade do canal é
regulada pela [Ca2+ ] (e pH) do exterior
da célula;

➢ a abertura do canal depende do

fornecimento de ATP;

➢ em certas células, a comunicação

entre as células depende do potencial
de membrana;
Plasmodesmos
 Transporte membranar

1. Transporte passivo:
– Difusão simples
– Difusão facilitada

– Osmose (caso particular da difusão simples)

2. Transporte activo :
– Transporte activo primário
– Transporte activo secundário
Difusão simples
Difusão simples
Via Lipídica

• O que é?

• Quais os factores
que afectam a
difusão?
Canais iónicos
Difusão facilitada

ex. glicose
 Difusão facilitada

Sf + permease  (complexo S-permease)  Sd

 Difusão facilitada
• glicose (galactose e arabinose)

especificidade


uniporte

Km = [ ] em mM necessária para atingir ½ da Vmax

 Osmose


Caso particular da água

=> AQUAPORINAS
 Transporte membranar

Sistemas de Transporte Ativo

- primário
- secundário
 Transporte ativo primário
- processo ligado directamente ao metabolismo energético

Ex. Na+-K+-ATPase (ou bomba Na+/K+)

[K+]int  140 mM
[K+]ext  4 mM [K+]int / [K+]ext  35

[Na+]int  12 mM
[Na+]ext  145 mM [Na+]int / [Na+]ext 0.08
 Transporte ativo primário
Na+-K+-ATPase
 Transporte ativo primário

Ex. Ca2+-ATPase (ou bomba Ca2+)

[Ca2+]int <0.0005 mM (cél. em repouso)
[Ca2+]ext  1.8 mM [Ca2+]int / [Ca2+]ext >0.0001
 Classificação das ATPases

Classe
P

Classe
V

Classe
F
 Transporte ativo secundário
Cotransporte:
• Simporte:
• Antiporte:
 Transporte ativo secundário
Ex. transporte de glicose nas células do epitélio intestinal

Na+K+ -ATPase simporte Na+/glicose

(transporte activo 1ário) (transporte activo 2ário)
 Transporte ativo secundário
Ex. transporte de glicose nas células do epitélio intestinal
 Transporte ativo secundário
Ex. transporte de lactose em E. coli

Simporte lactose / H+   Bomba de H+ (redox)

 Transporte ativo secundário
Ex. transporte de HCO3- e Cl- nas células do epitélio gástrico

 3
2
 4

1  5
 Transporte membranar

Transporte de grandes moléculas e partículas de

grandes dimensões

- endocitose
- exocitose
 Transferência de moléculas e
partículas de grandes dimensões do
exterior para a citoplasma

- Endocitose:
- Fagocitose

- Pinocitose

- Endocitose mediada
por receptores
 Fagocitose
- partículas de grandes dimensões (1-2 m);

 pseudópodes

fagossoma
 Lisossomas
-função

-enzimas hidrolíticas
pH ~5

 quimotaxia
 Fagocitose

Lisossoma 1ário


Lisossoma 2ário Pseudópodes


 Fusão com lisossoma
Pinocitose
 Endocitose mediada por recetores
 um recetor específico da membrana plasmática reconhece uma
molécula extracelular e liga-se à molécula
Endocitose mediada por recetores

Vesícula revestida por clatrina, (“coated

vesicles”)
 Endocitose mediada por recetores
Ex.: transporte de Fe3+
apotransferrina – glicoproteína
plasmática não ligada a Fe3+

pH = 5,0
pH = 6,0

CURL – ‘compartment of uncoupling

of receptor and ligand’

para o citosol
 Endocitose mediada por recetores
Ex.: transporte de colesterol

Partícula LDL (‘low density lipoprotein’)

• proteína – Apo-B

• monocamada lipídica (fosfolípidos)

• colesterol não estereficado (incluido na partícula LDL

monocamada)

• ésteres de colesterol (no interior - ~1500

moléculas)
 Endocitose mediada por
receptores
Ex.: transporte de colesterol

vesícula revestida por clatrina

pH  separação de LDL

do receptor

Produtos de degradação da LDL:

- Colesterol
- Ácidos gordos
- Aminoácidos
Vírus da imunodeficiência adquirida (HIV)
Endocitose mediada por recetores
Transferência de moléculas e partículas de
grandes dimensões do citoplasma para o
exterior
- Exocitose:
 Transferência de moléculas e
partículas de grandes dimensões
do citoplasma para o exterior
- Exocitose: