Apostila de Microbiologia II

UNIVERSIDADE CATLICA DE GOIS
CURSO DE BIOMEDICINA
MICROBIOLOGIA II

Prof. CLUDIA MARIA DUQUE DE SOUZA

Universidade Catlica de Gois.
Departamento de Cincias Biolgicas e Biomdicas
Prof. Cludia Maria Duque de Souza. Microbiologia II 2
Universidade Catlica de Gois
Curso: Biomedicina
Disciplina: Microbiologia II
Professora: Cludia Maria Duque de Souza
Prof
a
Janine de Aquino Lemos
Prof
a
Alessandra Marques Cardoso
PROGRAMA:

1- Objetivo geral:
A disciplina Microbiologia II visa, fundamentalmente, demonstrar as tcnicas
micolgicas, princpios dessas tcnicas, identificao dos gneros e espcies e
suas patologias, bem como, capacitar o estudante para a pesquisa e o
reconhecimento desses microrganismos.

2- Objetivos especficos:
Habilitar o aluno de micologia para a pesquisa, reconhecimento e a diferenciao
dos microorganismos normais e patognicos nas diferentes partes do organismo
humano, tais como: orofaringe, pele e anexos, lquidos corporais, aparelhos
auditivo, visual, gastro-intestinal e genito-urinrio.

MICROBIOLOGIA II - CBB3642 - 4 CRDITOS

CONTEDO:
01- Consideraes gerais sobre os fungos
02 Diagnstico laboratorial de Dermatfitos
03-. Diagnstico laboratorial dos agentes de micoses superficiais por fungos no
Dermatfitos
04- Diagnstico laboratorial dos agentes de micoses subcutneas.
05- Diagnstico laboratorial dos agentes de micoses profundas.
06- Diagnstico laboratorial dos agentes de micoses oportunistas - Candidase
07- Diagnstico de outras micoses oportunistas e fungos contaminantes do meio
ambiente.
08- Infeces hospitalares por bactrias
09- Infeces nosocomial por fungos
10-. Antifngicos
11-. Bacteriologia e anlise microbiolgica da gua
12- Microbiologia dos alimentos e do leite

BIBLIOGRAFIA:

01. Jawetz, Ernerst. Microbiologia Mdica. Guanabara Koogan.
02. Bier, Otto. Microbiologia e Imunologia. Melhoramentos.
03. Pelczar, Reid e Chain. Microbiologia Vol I e II - McGraw-Hill do Brasil.
04. Moura. Microbiologia Clnica. Mc Will Editores.
05. Korting e Gunnter. Dermatologia. Editora Manole.
06. Cecil. Tratado de Medicina Interna. Guanabara Koogan.
07. Dowell, Allen e Koneman. Diagnstico Microbiolgico. Panamericana.
08. Neto, Amato e V. et al. Antibiticos na prtica mdica. Gnemed.
09. Parage, R. Microbiologia Clnica. Panamericana.
10. Miname. Micologia, Diagnstico Laboratorial das Micoses.
11. Reese, Richard E, Sentochnik, Deborah E., Douglas Jr, R. Gordon e Betts, Robert F.
Manual de Antibiticos.
12. Roitman, Isaac, Travassos, Luiz R. e Azevedo, Joo Lcio. Tratado de Microbiologia.
13. Mac Faddin. Pruebas bioquimicas para la identificacion de bactrias de importncia
clnica. Panamericana.
14. Lennete, Balows, Hausler e Shadony. Manual de Microbiologia Clnica.
15. Hentges, David J. Medical Microbiology.
16. Fundemberg, Hugh. Microbiology and Imunology, a positive statement manual.
Guanabara Koogan.
17. Delost, Danessa Maria. Introduction to diagnstic Microbiology, Mosby, 1997.
18. Rowland, S. Sharon. Pathogenic and Clinical Microbiology. Little, Brown and Company
, 1994.
19. Crissey, Thorne John. Manual of Medical Micology. 1995. Blackwell science.
20. Tagliavini, Ruggero. Novo Atlas prtico de Dermatologia e Venereologia. 1995,
Santos.
21. Konneman, Elmer . 5 edio. Color Atlas - Diagnostic Microbiology, 1997, Lippincott.
22. Dwight R. Johnson. Laboratory of diagnostic of Group A Streptococcal infections.
WHO (Organizao Mundial de Sade).
23. Chung, Kwon J. K. Medical mycology. 1992. Lea & Fabiger.
24. Zaitz, Clarisse. Atlas de Micologia. 1995. Medsi.

Artigos da Internet :
Peridicos: Revista Laes Haes - Mc Will Editores, News Lab, ARSCVRAND, JAMA,
Arquivos de Dermatologia (JAMA).

1. Propriedades Gerais dos Fungos
Fungos so seres dispersos no meio ambiente, em vegetais, ar atmosfrico, solo e gua
e, embora sejam estimados em 250 mil espcies, menos de 150 foram descritos como
patgenos aos seres humanos. Leveduras so fungos capazes de colonizar o homem e
animais e, frente perda do equilbrio parasita-hospedeiro, podem causar diversos quadros
infecciosos. De modo contrrio, fungos filamentosos, ou bolores, normalmente, no fazem
parte da microbiota e portanto o homem no um reservatrio importante para esse grupo de
fungos. As portas de entrada no hospedeiro so as vias areas superiores ou quebra na
barreira epidrmica aps traumatismos com objetos perfuro-cortantes.

Estruturas das clulas fngicas

Os fungos so seres eucariotos que possuem ncleo contendo seu DNA
cromossmico e um nuclolo rico em RNA, ambos envoltos por uma membrana
nuclear. O citoplasma contm ribossomos, mitocondrias, lisossomas e
microvesculas, microtbulos, aparelho de golgi e um retculo endoplasmtico com
membrana dupla. Estas estruturas esto envoltas pela membrana celular ou
plasmalema que contm lipdios, glicoprotenas e ergosterol. Na face externa da
plasmalema encontra-se uma aprede rgida contendo um polmero de N-
acetilglucosamina, quitina, recoberto de camada de polipeptdios com
polissacardios complexos que incluem mananas e glicanas. Esses microrganismos
so abundantes na natureza com uma diversidade de forma e tamanho e podem
viver em substratos e condies ambientais as mais variadas. So microrganismos
heterotrficos e se alimentam por absoro. A reproduo feita por mecanismo
sexual ou assexual. A maioria dos fungos vivem em meios ligeiramente cidos,
entre 6-6,5 de pH. A temperatura mais adequada 25-28C. A maior parte deles
necessita de oxignio para sobreviver, sendo a umidade relativa (60 a 80%)
tambm importante para seu desenvolvimento e frutificao.


2. Morfologia
Os fungos de interesse mdico, agentes de micoses, so de dois tipos morfolgicos:
leveduras, que so unicelulares e bolores ou fungos filamentosos, que so multicelulares.
Existe um subgrupo dentro dos filamentosos, chamados fungos dimrficos, que se
apresentam sob ambas as formas, dependendo principalmente da temperatura.
As leveduras tm como estrutura primria, clulas que se reproduzem por brotamento,
nico ou mltiplo, em geral, de forma arredondada. Estas clulas so esporos de origem
assexual e se denominam blastocondios. Alguns gneros de leveduras menos importantes
em micologia mdica, reproduzem-se por fisso.
Os fungos filamentosos possuem como elemento constituinte bsico a hifa ou
filamentos tubulares semelhantes a fios, ramificados, que podem ser septados ou no
septados (cenoctica). Seu crescimento apical e tendem a ramificar-se para formar o
miclio que pode ser observado a olho n quando se observa um mofo. Segundo sua funo
o miclio se divide em vegetativo e reprodutivo. O primeiro est imerso no substrato e se
encarrega da absoro dos nutrientes enquanto o reprodutivo tambm denominado de
miclio areo, se encontra livre e onde encontramos as estruturas de reproduo,esporos
ou condios, que tm funo de multiplicao e disperso dos fungos pela natureza.
Esses conceitos fundamentais representam a base para a identificao de um fungo,
pois a classificao de filamentosos feita, em regra, pelas caractersticas morfolgicas,
tanto macroscpicas (cor, aspecto, textura da colnia, etc.), quanto microscpicas (forma e
cor da hifa, presena ou no de septos, tipo e arranjo de esporos, etc.), alm da velocidade
de crescimento (lenta, moderada ou rpida).
A identificao de leveduras, ao contrrio, feita, principalmente, por caractersticas
fisiolgicas, desde que, a morfologia destes fungos no muito variada e no permite
distino entre espcies e, em regra, entre gneros.

3. Reproduo

A reproduo assexuada observada com mais freqncia quando as clulas
haplides se dividem por mitose para formar esporos, mantendo inalterado o nmero de
cromossomos. Representa o nico tipo de reproduo conhecido at hoje em alguns
fungos patognicos. A reproduo sexuada produz esporos por meio de acasalamento,
quando duas clulas haplides se fundem para se tornarem diplides e depois se dividem
por meiose. A formao de esporos ocorre dentro de um saco, chamado de asco, ou
parcialmente na superfcie de uma bolsa, chamada de basdio.

4. Micoses

As infeces fngicas (micoses) so provocadas por ao direta de fungos
microscpicos em hospedeiros, devido sua patogenicidade, algumas micoses chegam a
ser so transmitidas de pessoas a pessoa ou atravs de animais que tambm so
importantes fontes de infeco. A distribuio destas micoses mundial, atingindo
qualquer faixa etria, sexo as podendo sofrer influncias ligadas a profisso do indivduo.
A localizao da doena varia de acordo com o agente etiolgico ou de acordo com a
resistncia do hospedeiro.
As infeces fngicas podem ser classificadas de acordo com os nveis teciduais de
colonizados. As micoses superficiais so infeces limitadas s camadas mais externas
da pele e do cabelo. As micoses cutneas incluem infeces mais profundas na epiderme
e doenas invasivas dos plos e unhas. As micoses subcutneas envolvem a derme,
tecidos subcutneos, msculo e fscia. As micoses profundas ocorrem nos rgos
sistmicos.
O contato direto o mecanismo de infeco mais comum nas micoses superficiais e
se estabelecem atravs do contato da pele e das mucosas com animais enfermos, solo
ou objetos que contm o fungo patognico. A penetrao dos fungos atravs de feridas na
pele constitui o principal mecanismo de infeco das micoses subcutneas, e a inalao
dos fungos para as micoses sistmicas. As micoses oportunsticas tm mecanismos de
infeco os mais diversos.

5. Classificao das Micoses
Micoses superficias Pitirase versicolor
Piedra branca
Piedra preta
Tinea nigra

Micoses Cutneas Dermatofitoses
Candidase (carter oportunista)

Micoses Subcutneas Esporotricose
Cromomicose
Micetomas
Doena de Jorge Lobo
Rinosporidiose

Micoses Profundas Paracoccidioidomicose
Histoplasmose
Coccidioidomicose
Blastomicose

Micoses Oportunistas Criptococose
Aspergilose
Hialohifomicose
Zigomicose
Feohifomicose

FUNGOS DERMATFITOS

Infectam pele, plo e unha na espcie humana e animal, produzindo doenas
conhecidas como tineas ou tinhas, cujo tratamento, normalmente, feito com
TERBINAFINA. Em KOH tem-se hifas hialinas esverdeadas acompanhadas de formas
vegetativas (clamidsporos, corpos nodulares, etc.) e, freqentemente, com artrocondeos
(fragmentao de hifas). Para a identificao das espcies deve ser observada a
presena de micro e macrocondeas, sendo que o aspecto colonial no deve ser utilizado
isoladamente. Existem trs gneros de dermatfitos que necessitam de identificao:

1- Microsporum, sp. - Produzem macrocondeas multiseptadas, de paredes grossas, que
podem assemelhar-se a fusos ou cilindros e so provenientes de conidiforos. Acometem
pele e plo, tendo como espcies de interesse mdico:

1.1- Microsporum audouinii -- Macrocondeas bizarras e de pouca freqncia e raras
microcondeas. Apresenta clamidsporos terminais ou candelabros fvicos. Suas colnias
crescem em mdia de 7 a 14 dias com miclios areos e aveludados de cor bronze claro;
no verso apresentam-se de cor rosa salmo. No cresce em gro de arroz. Causa tinea
do couro cabeludo (em criana), transmissvel e os plos acometidos tm fluorescncia
em lmpada de Wood.

1.2- Microsporum gypseum -- Macrocondeas septadas (de 4 a 6 septos), com paredes
grossas , de formato mais alongado e menos fusiformes do que aquelas do M. canis, e
com as extremidades arredondadas. Cresce bem em meio com gro de arroz.

1.3- Microsporum canis -- Macrocondeas fusiformes multiseptadas (8 a 15 septos) e de
paredes grossas , muitas das quais tm uma das extremidades curvada, o que uma
caracterstica marcante; apresenta poucas microcondeas junto s hifas. Cresce bem em
agar de arroz e tem fluorescncia verde clara em lmpada de Wood. um fungo zooflico
que acomete ces e gatos, os quais devem ser tratados para evitar reicidiva.

2 - Trichophyton, sp. - Pode haver ou no a produo de macrocondeas que, quando
existem, esto em pequeno nmero e so em forma de basto. As microcondeas, por
sua vez, esto distribudas em grande nmero ao longo das hifas ou formando cachos. As
espcies mais isoladas em infeces humanas so:

2.1- Trichophyton tonsurans -- Est mais associado tinea capitis ou dermatofitose do
ponto negro, na qual os cabelos rompem prximo ao couro cabeludo conferindo ao plo o
aspecto de ponto negro. As suas condeas so claviformes e largas e as colnias
pulverulentas.

2.2- Trichophyton mentagrophytes -- Comumente isolado na infeco denominada p-de-
atleta. Suas colnias so pulverulentas e as aleurias em cacho de uva sobre ramos
terminais. Diferencia-se do T. rubrum por ser ureia positivo.

2.3- Trichophyton rubrum -- comumente isolado no p-de-atleta juntamente com o T.
mentagrophytes . Apresenta raras macrocondeas e grande nmero de microcondeas
baloniformes .

3 - Epidermophyton, sp. - No produz microesporos. A diferenciao do gnero se faz
com a observao de grandes macrocondeas em forma de clava, com paredes lisas, e
que se dividem em 2 a 5 clulas por septos transversais encontradas sobre 1 ou 2
conidiforos curtos.

Acomete pele e unha, sendo a espcie mais importante e de interesse mdico o
Epidermophyton floccosum , o qual acomete a queratina sem lesar o cabelo.

TINEAS DE IMPORTNCIA MDICA (DERMATOLOGIA)

1- P-de-atleta - Agentes etiolgicos: T. rubrum, T. mentagrophytes ou E. floccosum .
Aspecto clnico: fenmenos de descamao, macerao ou vesiculao disidroforme
associados formao de rgades ( fissuras) com prurido e dor.

2- Tinea da mo ou desidrose lamenosa seca - Aspecto clnico: alteraes
descamativas na regio palmo-plantar.

3- Tineas das unhas, onicomicoses ou Tinea unguium - Agentes etiolgicos: T.
rubrum, T. mentagrophytes e E. floccosum. Aspecto clnico: inicialmente, leucopatia (
turvao branco-amarelada da placa ungueal) localizada que, posteriormente, torna-se
difusa; a unha fica espessa e porosa. Quando h enegrecimento da placa ungueal
sugestivo de simbiose bacteriana.

4- Tinea do corpo ou Tinea corporis - Agentes etolgicos: M. canis ou T.
mentagrophytes. Aspectos clnicos: leses sob a forma de herpes circinado no tronco,
pescoo e face; tardiamente as leses tornam-se exsudativas na periferia e os plos
caem no centro da leso. A transmisso devida ao contato com animais domsticos.

5- Tinea inguinal, tinea cruris (virilha) e tinea glutea - Agentes etiolgicos: T. rubrum e
E. floccosum.

6- Tinea barbae - Agentes etiolgicos: T. mentagrophytes e T. rubrum. Aspectos
clnicos: supuraes foliculares lembrando uma peneira (sicose parasitria) = inflamao
dos plos da barba com formao de ppulas e crostas.

7- Tineas do couro cabeludo - Agentes etiolgicos: T. tonsurans. M. canis e T. rubrum.
Aspectos clnicos: tinea nodulosa (Kerion Celsi) = rea altamente inflamatria; tineas
folculo-granulomatosas = nas pernas de mulheres devido ao uso de meia-cala.

8- Tinea favosa do couro cabeludo - Agente etiolgico: T. schoenleinii. Aspecto clnico:
tem colorao amarelo-enxofre e odor semelhante ao de urina de rato; provoca a
formao de crostas sobre uma regio avermelhada e exsudativa que, posteriormente,
cicatriza e causa alopcia (ausncia de cabelos). As unhas tambm podem ser afetadas.

9- Eritrasma - Agentes etiolgicos: Corynebacterium minutissimum = Nocardia
minutissimum = Microsporum minutissimum. Localiza-se nas axilas, face interna da coxa e
espaos interdigitais. Acredita-se na associao com um dermatfito. O tratamento feito
com eritromicina.

Pranchas coloridas Dermatfitos

Tinea capitis Tinea corporis

Tinea pedis e manun

Onicomicose

Exame direto de raspado de pele e subungueal

Exame direto no plo


Microsporum canis

Microsporum gypseum

Trichophyton mentagrophytes


Trichophyton rubrum

Trichophyton tonsurans

Epidermophyton floccosum

RECONHECIMENTO DE AGENTES DE MICOSES SUPERFICIAIS POR FUNGOS
NO DERMATFITOS

1- Tinea versicolor ou Pitirase versicolor.

Agente etiolgico: Microsporum furfur = Malassezia furfur. encontrado no ar
(poeira); apresenta-se com miclio verdadeiro ou com estruturas leveduriformes. Alguns
estudos tentam identific-lo com o Pityrosporum orbiculare.

Aspecto laboratorial: filamentos flexuosos curtos, fragmentados com cachos ou
esporos arredondados e com brotos.

Histologicamente: filamentos parasitam a camada crnea.

Quadro clnico: leses de colorao amarelada ou vermelho - acastanhada, localizadas
na metade superior do tronco, com contornos circinados irregulares e superfcie
descamante que, quando raspada com esptula ou lmina de bisturi, destaca-se em
forma de aparas de madeira. Apresentam despigmentao quando expostas aos raios
solares (Pitirase versicolor branca).

A sudorese intensa aumenta a predisposio a esta micose cutnea (pacientes
tuberculosos, freqentadores de saunas que no se enxugam corretamente aps o
banho) que acomete ambos os sexos, sendo mais freqente na faixa etria de 20 a 30
anos, e cuja transmisso pouco conhecida (acredita-se que seja inter-humana ou
atravs de vestes ou poeira. Se no tratada evolui indefinidamente. Apresenta
fluorescncia em lmpada de Wood.

A Ptirase rsea tem evoluo limitada e comea por uma placa caracterstica
com leses eritematosas (em medalho) e margens escamosas. Na dermatite seborreica
as leses so mais vermelhas e as escamas amareladas. A forma acrmica diferencia-se
do vitiligo por ter leses grandes, simtricas, sem escamas e aparecer somente no trax.

Tratamento: Consiste na administrao de drogas de efeito anti-hidrtico (lcool e
slvia) e antimicticos de amplo espectro como clotrimazol (canasten), Miconazol e
Econazol, Diazlicos (atualmente, a droga de primeira escolha a Terbinafina (Lamisil).


2- Tinea nigra.

Agente etiolgico: Cladosporium werneckii = Pullularia werneckii.=
Phaeoannellomyces werneckii= Exophialla werneckii. encontrado nas trs Amricas
e atinge os dois sexos em todas as faixas etrias.

Quadro clnico: leses palmo - plantares e, mais raramente, no punho, com manchas de
colorao castanha ou negra, ligeiramente hiperceratsicas, lisas ou escamosas e com
contornos geogrficos. No h dor ou prurido.

Aspecto laboratorial: no exame direto das escamas (com KOH) encontram-se hifas
flexuosas septadas, ramificadas e fragmentadas, de colorao variando entre o castanho-
claro e o verde-escuro, e, s vezes, clamidsporos. As colnias so negras, unidas,
glabras e s, vezes, com penugem cinzento - esverdeada. O exame ps-cultura mostra
hifas escuras que contm clulas entumecidas com blastsporos no seu interior
(Pullularia werneckii).

3- Tinea Imbricata ou Tokelau

Agente etiolgico: Trichophyton concentricum.

Aspecto clnico: acomete a camada crnea e invade o tegumento, sendo as leses em
forma de rosetas constitudas por crculos concntricos de escamas destacadas e
esbranquiadas com bordo interno livre. transmissvel.

Aspecto laboratorial: no exame direto aparecem hifas retangulares dispostas em rede,
com artrsporos e clamidsporos isolados ou em cadeia. A cultura leva de 20 a 30 dias a
37graus C. e apresenta culturas esponjosas ou cerebriformes brancas e posteriormente
mbar. O exame de ps-cultura mostra hifas septadas com filamentos irregulares e
clamidsporos intercalados ou terminais.

4- Piedra preta

Sinonmia: Piedra negra, tinha nodosa (ndulos duros) ou tricomicose dos estudantes.

Etiologia: Piedraia hortae (Brumpt) Fonseca & Area Leo, 1928.

Quadro clnico: forma-se um ou mais ndulos duros nos plos do couro cabeludo, no
havendo grandes alteraes no plo. Pode acometer tambm macacos e chimpanzs.

Aspectos laboratoriais: no exame morfolgico do plo o ndulo escuro e visvel a olho
nu. Para o micolgico direto corta-se o plo e coloca-se o mesmo sobre lmina com KOH
cobrindo-o, em seguida, com lamnula. Observa-se a superfcie do ndulo parecendo um
tecido ou um pseudo-parnquima. Esmagando-se o ndulo previamente podem ser vistos
os ascsporos em forma de S (sigmide), com filamento em uma extremidade, so os
chamados sigmesporos ou escolesporos que se localizam dentro dos ascos.

O isolamento em cultura do Piedraia hortae pode ser feito em agar Sabouraud.
Crescem temperatura ambiente colnias esverdeadas que vo se tornando escuras,
acinzentadas, marrons e chegando at a pretas. Essas colnias so planas e com
pequena elevao central, podendo ser lisas ou enrugadas e levemente aveludadas. As
hifas so escuras, septadas e com blastsporos quando jovens; mais tarde formam-se
artrsporos. No h formao de ascos.

5- Piedra branca

Etiologia: Trichosporon beigelii (Rabenhost) Vullemin, 1902. tambm conhecido por
Trichosporon cutaneum, Trichosporon ovoide ou Trichosporon cerebriforme
(colnia em forma de crebro).

Quadro clnico: os ndulos da Piedra branca localizam-se mais comumente nos plos da
cabea, porm, podem ocorrer nos plos da barba, bigode e da pubis. Eles so branco-
amarelados, moles, geralmente nicos e localizados na extremidade do plo, mas
podendo aparecer tambm ao longo do plo.

Aspectos laboratoriais: o ndulo da Piedra branca visvel a olho nu. Para o micolgico
direto coloca-se o plo em KOH entre lmina e lamnula e verifica-se, aps a digesto,
que o ndulo composto de leveduras, as quais podem ser isoladas em Agar Sabouraud
com ou sem antibiticos.

Microscopicamente o Trichosporon apresenta forma em artrsporo, blastsporos e
pseudo-hifa. O T. beigelii no fermenta acares e a sua identificao deve ser feita com
o auxonograma de fontes de carbono.

6-Trichomicose palmelina.

Etiologia: uma infeco mista por Micrococcus, Corynebacterium tenuis e Serratia
marcescens, sendo a ltima a provocadora da cromidrose.

Quadro clnico: micose saproftica que se manifesta pela colorao anormal (amarela e
mais raramente vermelha ou preta) dos plos axilares e pubianos , os quais apresentam
uma bainha formada por massas aderentes. A cromidrose (plos avermelhados) tinge as
roupas com a mesma cor dos plos.

Tratamento: feito com lcool isoproplico.

7- Micoses superficiais provocadas por Candida, sp.

A Candida, sp a mais importante das leveduras pois acomete os tecidos
profundos, alm dos superficiais.

Candidase mucocutnea familiar crnica: se manifesta no decorrer dos
primeiros anos de vida sob a forma de sapinho na mucosa bucal, ou seja, sob a forma de
membranas e edemas avermelhados, escuros, que sangram facilmente; o dorso da
lngua fica semelhante a polvilhado de acar. Os eritemas perianais e intercrurais
tm aspecto brilhante e enverrugado, apresentando na periferia uma borda escamosa,
solta, em forma de franja e com leses satlites disseminadas.

As leses por Candida, sp so pstulas erosivas, eritematosas e, mais
raramente, granulomatosas, disseminadas por todo o corpo. Dentre essas leses
encontram-se quadros de intertrigo sob a forma de boqueira (perleche) e paronqueas
(onicomicoses); manifestaes genitais sob a forma de vulvovaginites, colpites,
balanopostitese uretrites; e ainda se discute a urticria crnea devida infeco da
mucosa intestinal por leveduras.

Pranchas coloridas de micoses superficiais no dermatofceas

Leses e exame direto de Pitirase versicolor


Piedra branca

Exame direto do plo

Aspecto macroscpico e microscpico de Trichosporon spp

Piedra preta

Exame direto e aspecto macroscpico

Tinea nigra


Exame direto e aspecto macroscpico
Eritrasma

Candidase

Manifestaes clnicas


Aspecto macroscpico e microscpico

MICOSES SUBCUTNEAS
1- Esporotricose

Agente etiolgico: Sporotrix schenckii.

Aspecto clnico: leses que praticamente se limitam derme e ao tecido adiposo
subcutneo, sendo que o foco primrio apresenta-se sob a forma de ppula ulcerada ou
disseminao ascendente linftica(Gomas). observada em pessoas que tenham tido
traumatismos leves e permaneam expostas freqentemente (jardineiros, lavradores,
mineiros,etc), por isso a esporotricose conhecida como doena do jardineiro. A leso
primria geralmente aparece na pele dos dedos, mos e antebraos, desenvolvendo-se,
em 1 a 2 semanas, na pele j ferida por espinhos de roseiras ou outro elemento cortante
de origem vegetal. A disseminao ocorre atravs de vasos linfticos regionais
produzindo ndulos subcutneos que supuram e ulceram. A forma pulmonar da doena
rara. A esporotricose mais comum nos Estados Unidos. O tratamento feito com
iodeto de potssio para infeces cutneo-linfticas e Anfotericina B endovenosa para
casos sistmicos.

Aspectos laboratoriais: o fungo se mutiplica rapidamente em meios de cultura, porm,
de difcil identificao histolgica, portanto, a inoculao em cobaias aconselhvel. No
exame direto observam-se clulas leveduriformes com brotamentos (charutiformes). No
exame direto observam-se clulas leveduriformes com brotamentos (charutiformes). No
cultivo a TA so observadas hifas hialinas e septadas de pequeno dimetro,
conidiforos finos e ramificados que partem das hifas formando ngulo reto, e
condeos pequenos que organizam-se como pequenas flores (margaridas) nas
extremidades dos conidiforos. A cultura feita a 37 graus C; as colnias tm cor
branco-creme e consistncia macia e cremosa.

Antgenos podem ser extrados e levados para testes cutneos em homens e animais.
H uma anticorpognese variada.

2- Cromomicose ou Cromoblastomicose.

Etiologia: a cromomicose provem de diversos fungos pertencentes ao grupo das
leveduras de cor marron ou negra, sendo eles: Fonsecaea pedrosoi = Phialophora
pedrosoi = Fonsecaea compacta, Phialophora verrucosa, Cladosporium carrionii,
Wangiella dermatitidis (esporulao por clamidsporos). Os pases quentes so os
locais de preferncia destes fungos.

Aspectos clnicos: a infeco devida aos ferimentos, razo pela qual as alteraes
patognicas localizam-se preferencialmente nos membros (tecido cutneo do p, perna,
membros superiores, ombros e costas); as leses tm aspecto verrucoso (couve-flor),
pedunculado em placa e os focos papilomatosos podem tornar-se sede de tumores e
infeces secundrias. Via de regra os rgos internos no so atingidos.

Sinonmia: dermatite verrucosa cromoparasitria, doena de Pedroso e Lane.

Exame histolgico: a leso verrucosa pode ser facilmente biopsiada, o fragmento cortado
pode ser fixado em formol a 10% em Borax, induzido e cortado.

Os cortes devem ser corados em HE (no se recomenda a colorao em PAS ou
Gomori) onde observam-se clulas arredondadas formando aglomerados de cor
marron-havana, com reproduo por cissiparidade , que so denominadas corpos
fumagides.

Aspectos laboratoriais: no exame direto deve-se raspar a leso com bisturi ou estilete. O
material obtido com a raspagem deve ser colocado em KOH, entre lmina e lamnula,
para a observao de clulas arredondadas marrons com divises binrias. A
cultura, feita em agar Sabouraud, de crescimento lento e a colnia verde, cinza ou
marron., que idntica para todos os agentes demceos envolvidos neste processo
infeccioso. A diferenciao vem da observao da predominncia dos esporos especiais
que estes fungos produzem em TA em gar Sabouraud: Esporulaes do tipo: Falide,
Acroteca (Rhinocladiella), Hormodendrum (Cladosporium).

3- Micetoma.

Sinonmia: Maduromicose, Eumicetoma ou p de Madura (nome utilizado devido ao
fato de ter sido descoberta na ndia).Pertence ao grupo das molstias fngicas
denominadas Micetomas, do qual fazem parte as Nocardioses e Actinomicoses, por
apresentarem leses com aumento de volume e eliminao de gros parasitrios. No
Brasil encontrada em So Paulo, Rio de Janeiro, Mato Grosso, etc.

Aspectos clnicos: uma doena de carter crnico e progressivo, com tumefao e
formao de canalculos dentro da leso, o que leva formao de pstulas exsudativas ,
com lquido claro, aquoso e seroso e presena de gros grandes e duros. A leso inicial
um pequeno ndulo fixo, com vescula, que se transforma em abcesso fistuloso; com
o tempo h formao de novas fstulas. A sua localizao tpica nos membros
inferiores, em especial nos ps, e em seguida nos braos, sendo o local da leso
endurecido. A seqncia na pele : tecido subcutneo, msculos, ossos e tendes.
A doena freqente em homens adultos e entre agricultores.

Agentes etiolgicos - grupos dos Eumicetos: 1) Pietriellidium (Allescheria) boydii; 2)
Madurella micetomi; 3) Madurella grisea; 4) Exophiala jeanselmi; 5) Acremonium
(Cephalosporium) falciforme; 6) Curvularia lunat.

Aspectos laboratoriais - exame do gro parasitrio: os gros so retirados das fstulas
retendo-os em gaze; quando so escassos, a retirada feita com auxlio de microcureta
(ala em anel) escarificando dentro da leso. Para o exame direto rompe-se o gro com
estilete e observa-se, em KOH a 10 ou 20% , a presena de hifas, que podem ser
hialinas ou escuras, septadas e emaranhadas com raros clamidsporos. A
semeadura do gro pode ser feita diretamente se ele no estiver coberto por uma capa
dura; se estiver, a capa deve ser desfeita. Quando o material est contaminado com
bactrias desinfeta-se com soluo fisiolgica, estreptomicina e penicilina. O cultivo
feito, de preferncia, em agar Sabouraud com cloranfenicol mais gentamicina (agar
Mycosel), temperatura ambiente e em aproximadamente 30 dias. O exame em HE
mostra hifas escuras mais clamidsporos; em colorao de PAS visualizam--se hifas
hialinas ( ou impregnao argentia).

Temos gros parasitrios que tem como agentes etiolgicos bacterias filamentosas
como: Actinomadura madurae, Actinomyces pellietieri, Streptomyces somaliensis,
Nocardia brasiliensis e Nocardia asteroides. Estes gro so chamados de
actinomicticos e os de origem fngica de Maduromictico.

Pranchas coloridas de micoses subcutneas

Leses de Esporotricose

Aspecto macroscpico e microscpico

Cromomicose


Micetoma

Aspecto clnico

P. boydii E. jeanselmei

MICOSES PROFUNDAS

1- Paracoccidioidomicose

Sinonmia - Blastomicose Sul-americana ou Doena de Lutz

Etiologia - Paracoccidioides brasiliensis ou Blastomyces brasiliensis (dimrfico).

Quadro clnico - tem como localizao a mucosa bucal, faringe, cordas vocais, pulmes,
tecido cutneo, gnglios linfticos, SNC, supra-renal, etc. As principais formas clnicas
so ulceraes, linfangite, adenites, leses pulmonares, inflamao das supra-renais,
laringite, meningite, etc.

As leses primrias vm da mucosa nasal com desenvolvimento de lceras que
se disseminam pelas mucosas formando leses eritematosas elevadas semelhantes
a amoras. A doena pulmonar ocorre em alta porcentagem (induo), rara para
sistema linftico, bao, intestinos e fgado e no contagiosa. Os pulmes podem
apresentar alteraes de fibrose com formao de cavidades. A populao de risco da
rea rural, sendo que acomete mais homens do que mulheres. O fungo geoflico.

Tratamento - sulfonamida e anfotericina.

Aspectos laboratoriais - os materiais para exame laboratorial so: escarro, pus, raspado
de leso, LCR, fragmento de bipsia, etc. A coleta desses materiais feita por eliminao
do escarro, bipsia, raspagem ou curetagem das ulceraes. Cada material exige um
preparo e mtodo de conservao descritos a seguir:

1) Escarro - digesto enzimtica ou auto-digesto, ou digesto com KOH;
2) Material para corte histolgico - fixao em formol a 5% ou Bouin ==> granulomas
com caseificao central = clulas gigantes;
3) Fragmentos de tecidos - macerao;
4) Conservao de pus na geladeira.

Para a realizao do exame direto pode-se fazer um exame fresco do escarro,
pus e raspado de leso, e exame de tecido macerado ou digerido utilizando as
coloraes de Grocott, Gomori (impregnao pela prata), PAS Hatckiss, Mc Manus
ou Gridley. A morfologia encontrada a de clulas arredondadas de paredes grossas
e refringentes e com brotamentos nicos ou mltiplos. O isolamento do agente
feito com cultivo em agar Sabouraud (20 a 25 graus C); se o material estiver com
contaminao deve-se cultiv-lo em agar Mycosel, mas o crescimento ser lento (40
dias) e com ferrugem na superfcie.
Podem ser feitos exames imunolgicos do tipo reao intradrmica (para fins
epidemiolgicos ou de diagnsticos), RFC (para acompanhamento teraputico e
prognstico vrias tcnicas empregam o Agar polissacride), reao de precipitao,
reao de imunofluorescncia (empregada em diagnstico e prognstico).

2- Histoplasmose

Sinonmia - Doena de Darling , Histoplasmose capsulata, Reticuloendoteliose
histoplasmtica (cresce dentro dos macrfagos e histicitos).

Etiologia - Histoplasma capsulatum ou Cryptococcus capsulatum.

Quadro clnico - de localizao no fgado, bao, medula, pulmo, mucosa, tecidos
cutneos, etc. Apresenta como formas clnicas a Histoplasmose primria aguda,
Histoplasmose Mucocutnea localizada, Histoplasmose pulmonar e Histoplasmose
disseminada. Atinge mais os pulmes, manifestando-se sob a forma de uma Sndrome
do tipo gripal (2 a 3 semanas). Podem apresentar leses cutneas do tipo molusco
contagioso em pacientes com AIDS . No momento a micose mais freqente nestes
pacientes.

A forma crnica tem leses cavitrias ou granulomas localizados que evoluem e
calcificam. Os Histoplasmas podem ser removidos cirurgicamente e so encontrados
primeiramente nos macrfagos. A forma crnica provoca, ainda, hepatoesplenomegalia
e lifadenopatia difusa. A contaminao ocorre por inalao de poeira carregada com
excrementos de galinhas, perus, pombos ou morcegos. conhecida como febre
das cavernas.

Aspectos laboratoriais - podem ser utilizados como material para exames escarro,
aspirado medular, material biptico, raspado de lcera cutnea, etc. O escarro deve
ser colhido de manh aps lavagem da boca e o aspirado de medula, por puno
medular. O micolgico direto feito com esfregao de escarro(pode negativar em
at 60%), medula ou fragmento de bipsia, corado pelo Giemsa, aonde pode-se
observar clulas circulares pequenas, com paredes grossas e citoplasma retrado,
formando aglomerados intracelulares. No exame microscpico de corte histolgico
corado por HE, Gomori modificado, Grocott ou PAS, observam-se formas intracelulares
com citoplasma circular, aglomerados e clulas com citoplasma retrado parecendo
cpsula. O isolamento do agente feito em agar Sabouraud ou Mycosel; o fungo
cresce temperatura ambiente, na forma de bolor (filamentosa) em torno de 10 dias.

No ps-cultura so observadas condeas grandes, circulares, com expanses
nos bordos (esporos mamilonados ou espiculados) dando-lhes o aspecto de coroa
(engrenagem de relgio), e tambm microcondeas. Pode ser feita a inoculao de
material triturado em camundongo, por via peritoneal, examinando posteriormente o bao
e fgado; esse procedimento importante para o isolamento de H. capsulatum a partir do
solo.
As reaes imunolgicas disponveis so: testes intradrmicos (que tm como
antgeno a Histoplasmina), cuja leitura feita em 48 horas e tem importncia como prova
epidemiolgica; RFC tendo como funo o acompanhamento teraputico e utilizando de
rotina dois antgenos (suspenso leveduriforme e histoplasmina); imunodifuso, com a
formao de duas linhas de precipitao -- a linha h indicando leso ativa e a linha m
indicando infeco ou intradermorreao recente; aglutinao e imunofluorescncia.

Tratamento - Anfotericina-B.

3- Coccidioidomicose.

Sinonmia - Doena de Posadas e Wernicke, granuloma coccidiodiano de Valey Fever,
Desert Rheumatism, Febre de San Joachim (fases evolutivas).

Agente etiolgico - Coccidioides immitis. um fungo geoflico que penetra no
organismo por inalao de poeira, vai aos pulmes aonde provoca formao de
abscessos, e de onde dissemina por via hematognica. Tem como populao de risco
agricultores; mais comum nos EUA, Mxico, Argentina, Hava e Itlia.

Quadro clnico - A leso primria acontece na rvore respiratria, o perodo de
incubao de 10 a 15 dias e as manifestaes iniciais so tosse, dor na respirao,
febre moderada, anorexia e sudorese noturna. As leses cutneas aparecem em
aproximadamente 3 semanas sob a forma de eritema nodoso ou polimorfo.
Acomete tambm o SNC.

Aspecto laboratorial - o material para exame pode ser pus, escarro, lquido pleural ou
lquido de aspirao gstrica, que, ao microscpio, mostrar quistos esfricos de
paredes grossas com esporos encapsulados. A cultura cresce de 5 a 6 dias com
colnias redondas com ferrugem branco-cinzenta; em azul de lactofenol mostra hifas em
raquete (artrsporos). A inoculao pode ser feita em cobaia, camundongo ou coelho;
inoculao no testculo leva orquite em 36 horas e inoculao intraperitoneal, a leses
generalizadas.

Para exame histolgico faz-se bipsia cutnea de abcessos e leses com
grande nmero de esfrulas tpicas contendo esporos. Os esporos tambm esto nos
macrfagos e nas clulas gigantes.

Tratamento - Anfotericina-B.

Pranchas coloridas de micose profunda

Paracoccidioidomicose

Aspecto clnico


Aspecto macroscpico

Aspecto microscpico

Histoplasmose


MICOSES OPORTUNISTAS

Criptococose

Sinonmia - Blastomicose europia, Doena de Buschke, Torulosis, Meningite fngica .

Etiologia - Cryptococcus neoformans ou Saccharomyces neoformans, Torula
neoformans, Torula histolytica ou Cryptococcus histoliticus.

Quadro clnico - localiza-se nas meninges, pulmes, pele (ppulas) e ossos, tendo
como formas clnicas a Criptococose do SNC (meningite Criptocccica),
Criptococose pulmonar e Criptococose ssea.

Quadro laboratorial - o micolgico direto pode ser feito no LCR, escarro, raspado de
lcera cutnea e fragmento de tecido. O escarro deve ser coletado de manh aps
lavagem da boca e o fragmento de tecido por bipsia. Cada material tem um modo
particular para ser examinado:
a) LCR - centrifugar, desprezar a parte superior com pipeta conta-gotas, colocar 1 ou 2
gotas de sedimento, misturar com tinta da China, examinar ao microscpio procurando
leveduras isoladas ou com brotamento com cpsula formando halo claro ao redor;
b) Escarro - retirar o material mucide ou purulento, colocar sobre lmina, misturar com
tinta nanquim e procurar ao microscpio por formas capsuladas, ou deixar o escarro
auto-digerir a 37 graus C durante 24 horas, ou digerir em KOH ou tripsina, centrifugar e
examinar o sedimento em tinta nanquim;
c) Corte histolgico - fixar o fragmento de tecido obtido por bipsia em formol a 10% ou
Bouin, cortar com micrtomo e corar pelo PAS ou colorao pela prata;
d) Raspado de leso - raspar a leso com cureta, bisturi ou ala microbiolgica, colocar o
raspado sobre uma lmina e misturar com tinta nanquim, procurar ao microscpio por
leveduras com cpsulas descoradas.

A cultura feita em agar Sabouraud ou Mycosel (sem cicloheximida) e a identificao,
pela presena de cpsulas. O crescimento a 37 graus C com produo de urease e
assimilao de nitrato. Existem conjuntos comerciais para a identificao de leveduras:
Mycotube (Roche), Minitek sistem (BBL).

Outros Cryptococcus no patognicos: C. albidus, C. gastricus, C. inigatilatus.
CANDIDASE:

chamada de oportunista porque aproveita de estados de debilitao dos
pacientes podendo provocar uma doena sistmica. A Candida albicans a levedura
isolada com mais freqncia em amostras clnicas; a produo de pseudohifas e
blastsporos encontrada em tecidos e exsudatos. Pode provocar infeces de pele,
unha, boca, genitlia feminina, pulmes e pode infectar pacientes leucmicos,
diabticos, tuberculosos e viciados. Na poca atual o uso de antibiticos de largo
espectro (tetraciclina), corticides, imunodepressores, medicamentos contra Trichomonas
e anticoncepcionais orais, explica a relativa freqncia de infeco assintomtica (no TGI,
cavidade bucal, genitlia, condutos auditivos) no homem; o tratamento com
imunossupressores tambm favorece o aparecimento de candidase. Sabemos
atualmente que tanto a deficincia imunolgica humoral, como a celular, favorece
instalao da candidase.
Antigamente, a freqncia das infeces por Candida ,sp nos pacientes com
Diabetes mellitus era atribuda elevada taxa de glicose. A agenesia do timo e o
hipoparatireoidismo (Sndrome de Di-George) parecem possuir importncia especial na
patogenia, sobretudo na forma granulomatosa da candidase (o exame histolgica mostra
que no so granulomas verdadeiros). Outros fatores capazes de favorecer instalao
da candidase so os baixos nveis de ferro srico e o hipoadrenalismo.

A transmisso das leveduras pode ocorrer no somente por utenslios midos
(luvas de lavar), mas tambm o prprio ambiente pode assumir esta funo.

Onicomicoses por Candida:

Causadas por Candida albicans, Candida tropicalis, Candida parapsilosis e,
mais raramente por Candida pseudotropicalis. Comeam com uma paronquia
(infiltrao da prega ungueal com tumefao), a pele fica fina, vermelha, brilhante e
com ligeira descamao; quando o edema pressionado podem sair gotinhas de pus, no
qual possvel encontrar as leveduras (exsudato).

As alteraes secundrias da unha podem provocar depresses cupuliformes; a
lmina ungueal amolece e pode vir a cair. Quando a pele infectada entra em contato com
a gua provoca dor intensa. Acomete os dedos dos ps e das mos. de evoluo
crnica e o tratamento, que feito com Imidasol, Cetoconazol,Terbinafina e pode durar
anos.

Pele -- Intertrigo por leveduras:

Causado por Candida albicans. Acomete os dois sexos, tendo como fatores que
favorecem o pH alcalino da prega, umidade, falta de higiene e Diabetes. Localiza-se nas
pregas inguinocrurais, submamrias, axilares, inter e subglteas e abdominais,
interdigitais (pododctilos e quirodctilos).

As leses so em forma de erupo eritemato--vesiculosa que, posteriormente,
torna-se uma placa vermelho - escura, exsudativa, com bordos arredondados limitados
com debrum esbranquiado e escamativo. As fissuras (rgades) podem aparecer na
parte interna das pregas, sendo exsudativas e recobertas por uma massa esbranquiada.

Os sintomas so dor, queimadura e prurido, podendo haver odor ftido quando
a pele fica macerada e fermentada (regio genital). Pode haver, ainda, infeco
secundria de origem bacteriana, o que prolonga a infeco e pode dar reicidiva.

Quadro laboratorial: em KOH as escamas mostram elementos leveduriformes
redondos ou ovalados, unicelulares ou somente os microesporos. Em HE
(dermopiodermite) tem-se clulas leveduriformes e pseudohifas na camada
crnea.Os intertrigos por Candida devem ser diferenciados do intertrigo por bactrias
(mais exsudativo), de um eczema de Hebra (menos exsudativo), de uma leso psoritica
(mais seca e difusa) e de dermatite seborreica (tpica do couro cabeludo).

Sapinho:

Est localizado na mucosa bucal, lngua, bochecha, palato, faringe e,
excepcionalmente, nas conjuntivas. A leso eritematosa, seca, lisa envernizada e
escamativa; na lngua h perda das papilas com surgimento de manchas irregulares
esbranquiadas e granulares semelhantes leite coalhado, a mucosa torna-se
eritematosa, sangrante e erosiva, podendo cronificar e disseminar. Os sintomas so
sede, gosto metlico na boca, secura, mastigao e suco prejudicadas. O exame direto
feito na camada esbranquiada aonde sero encontradas estruturas leveduriformes.

Boqueira, perleche ou angulos infectiosus:

Infeco das comissuras labiais com leses em forma de manchas
esbranquiadas, eritematosas, descamativas e com crostas, podendo aparecer
tambm edema labial. As leses so dolorosas e podem ser ligeiramente hemorrgicas.

Queilite

Eritema e edema dos lbios com dor em queimadura e rgades dolorosas.
Geralmente acompanha o sapinho.

Vulvo-vaginites:

A candidase na regio genital aparece como infeco aps tratamento com
antibiticos, corticides, anti-Trichomonas, etc. A infeco em adultos d-se por
relao sexual ou em; em crianas, pela passagem pelo canal de parto. So mais
acometidas mulheres na faixa etria de 20 a 45 anos, gestantes, diabticas e aquelas que
fazem uso de anticoncepcionais.

A leso em forma de eritema difuso nos grandes lbios (mucosa fina) com
formao de vesiculas e pstulas que quando sofrem ruptura provocam eroses, sulcos
inter-labiais com fissuras e leucorria cremosa, tornando a rea edemaciada e
dolorosa. As seqelas so uretrites, cistites, intertrigo inguino-crural e inter-glteos.

Os agentes so : Candida albicans, C. krusei, C. stellatoidea e C. tropicalis.

Candidase nos genitais masculinos:
1- Uretrites = Acomete homens com mais de 20 anos e so transmitidas por relaes
sexuais e em banheiros. Os sintomas aparecem sob a forma de prurido e formigamento
no meato que se torna avermelhado e com uma gota de aspecto mucoso e
esbranquiado. Distinguir-se da uretrite por Neisseria gonorrhoeae por ter corrimento
mais purulento.

2- Balanites e balanopostites = A comete qualquer idade do sexo masculino e a
transmisso se d por foco pr - existente (uretral ou digestivo) ou relaes sexuais. Os
sintomas so prurido e formigamento. A leso em placa eritematosa, vesiculosa e
com escamas na glande ou sulco balano-prepucial.

Consideraes laboratoriais:

A demonstrao da presena de colnias aracniformes em EMB ou a produo de
clamidsporos em agar-fub so mtodos aceitveis para a identificao de Candida
albicans. Entretanto, a maioria dos laboratrios prefere a prova do tubo germinativo que
fornece resultados mais rpidos, exceto para C. stellatoidea (variante da C. albicans) e
cepas de C. tropicalis.

Tubo germinativo:

Extenso filamentosa da cultura de levedura que tenha, aproximadamente, a
metade da largura e 3 a 4 vezes o comprimento da clula. O tubo germinativo de
Candida albicans no apresenta constrico no ponto de origem, em contraste com
a C. tropicalis .

Tcnica: colnia de levedura (suspeita) + soro humano = suspenso. Incubar a 37 graus
C por 3 horas. Suspenso entre lmina e lamnula (azul de lactofenol) = tubo germinativo.

uma prova presuntiva para C. albicans, porm h necessidade de provas
complementares, hoje com a grande resistncia aos antimicticos est tendo
necessidade de se ter ensaios mais acurados para a confirmao das espcies deste
gnero. Tem sido relatado, que os sistemas Automatizados como o MICROSCAN tem tido
isolamentos mais fidedignos que os sistemas comerciais baseados nas provas
bioqumicas e de fermentao de acares. Pode-se ainda inocular a colnia em agar-
fub e uria (acrescer Tewn 80 = polissorbato) no agar-fub para diminuir a tenso
superficial e permitir a tima formao de blastsporos. O TSAQ para fungos ainda no
um teste padronizado,porm est tendo uma necessidade do seu uso , devido a
resistncia as drogas pelo gnero Candida,sp .

Espcies de Candida:

1- C. albicans - glicose positiva, maltose positiva, sacarose positiva, lactose
negativa, trealose positiva, urease positiva, tubo germinativo positivo. Cresce a 37
graus C, formam psedohifas e tem cpsula em tinta nanquim. As colnias tm cor creme,
so midas, arredondadas, cremosas e em forma de lente biconvexa. Em azul de
lactofenol apresenta blastsporos arredondados ou ovais e, s vezes, pseudohifas.

2- C. tropicalis -- as colnias so branco sujo ou amareladas, arredondadas, cremosas,
amarrotadas e pregueadas. Em azul de lactofenol apresenta pseudohifas bem
desenvolvidas, leveduras em manga ou pequenas cadeias, clulas arredondadas ou
alongadas.

3- C. pseudotropicalis - colnias de cor creme, midas, arredondadas e com bordos
irregulares. Em azul de lactofenol apresenta numerosos blastsporos alongados ou
ovalados e no h pseudomiclio.

4- C. parapsilosis -- colnias branco-creme, arredondadas e midas. Em azul de
lactofenol apresenta pseudomicelio bem desenvolvido com poucos blastsporos
arredondados ou ovais.

5- C. krusei -- colnias branco-creme, cremosas, pregueadas e com contornos
irregulares. Em azul de lactofenol apresenta leveduras alongadas com clulas
arredondadas e pequeno nmero de brotos.

6- Outras sps de Candida: C. glabrata , C. guilliermondii, C. stellatidea , C. lusitaniae,
C.kefyr, etc.


Pranchas coloridas de micose oportunista

Cryptococose

Candidase



MICOSES OPORTUNISTAS
ASPERGILOSE:

Existem mais de 700 espcies de Aspergillus, porm, apenas trs so de
interesse clnico: Aspergillus flavus; Aspergillus niger e Aspergillus fumigatus, sendo
que o A. fumigatus , provavelmente, a espcie que mais causa aspergilose pulmonar ou
disseminada no homem e, em especial, nos homens debilitados. O Aspergillus
fumigatus e o Aspergillus flavus esto comumente associados a doenas pulmonares
alrgicas, enquanto que o Aspergillus niger pode estar associado a infeces do tipo
bola de fungo nos seios nasais e pulmes, sendo, tambm, o agente mais isolado em
casos de otite externa (ouvido de nadador). As outras espcies no causam infeces
no homem.

O exame direto sempre negativo; para consagrar uma espcie de
Aspergillus,sp como agente etiolgico de uma infeco clnica, esse fungo deve ser
isolado trs vezes em repetidas culturas da amostra clnica ou sua morfologia deve
ser encontrada em cortes histolgicos das leses.

Caractersticas:

So fungos geoflicos encontrados na poeira e alimentos, em particular no
queijo; so inalados na poeira e podem ser encontrados como saprfitas na cavidade
nasal. No caso de haverem leucemias, tuberculoses cavitrias ou quaisquer outras
doenas debilitantes, o Aspergillus,sp deixa de ser saprfita para ser patognico. As
populaes de risco so aquelas que lidam com cereais ou lugares poeirentos.

Manifestaes clnicas:

Pode apresentar hemoptise, leses traumticas, sinusites maxilares,
cutneas e cerebrais; a imagem ao raio-x uma imagem em forma de guizo opaco
aonde mostra o aspergiloma. O prognstico geralmente bom , porm, a sua evoluo
depende da doena que precedeu a Aspergilose. O quadro clnico pulmonar no fcil de
diferenciar das tuberculoses, abcessos pulmonares ou carcinoma.

Diagnstico laboratorial:

O isolamento do fungo do escarro no fidedigno por ser o Aspergillus ,sp
saprfita das vias areas superiores; porm, o aspirado brnquico j seguro. As
colnias, em 48 a 72 hs, podem ser aveludadas ou como flocos, inicialmente brancas e
tornando-se, posteriormente, cinza-esverdeadas; quando maduras apresentam tons
pastis. Em azul de lactofenol mostra conidiforo longo, com prolongamentos em
forma de clavas e a parte superior disposta em fila nica (aspecto de chuveiro= A.
fumigatus). Em HE mostra um infiltrado com clulas gigantes, plasmcitos e
polimorfonuceares dentro de macrfagos ou em forma de miclios com condeos.

Caractersticas diferenciais das trs espcies de Aspergillus:

A. fumigatus: a colnia verde, azul-esverdeada ou verde-amarronzada,
pulverulenta e com margem branca. Microscopicamente apresenta conidiforos longos
com vesculas em clava, esporos na metade superior e hifas hialinas.

A. niger: a colnia tem aspecto de sal com pimenta e tem o verso cor de canela
clara. Ao microscpio apresenta hifas hialinas e septadas, coniforos longos com a
vescula varivel e os esporos negros e esfricos.

A. flavus: colnia de cor amarela ou amarelo-castanho. Em azul de lactofenol
hifas hialinas e vesculas esfricas com esporos esfricos por toda a vescula.

ZIGOMICOSE

Sinonmia: Mucormicose ou Ficomicose.

Agentes etiolgicos: Mucor,sp, Rhizopus,sp, Rhizomucor,sp , Absdia, Cunningamella ,
Syncephalastrum, Saksenaea, Mortierella (Ordem dos Mucorales).

Agentes etiolgicos de Zicomicoses subcutneas: Basidiobolus ranarum e Conidiobolus
coronatus (subcutnea e mucosas - nasal )=> Ordem dos Entomophthorales

Caractersticas: so fungos considerados oportunistas por aproveitarem de estados de
debilitao dos pacientes. Podem estar presentes, causando trombose, em doenas
como o diabetes, em queimaduras extensas, leucemias e linfomas. As tromboses
causadas podem ser sinusides, paranasais, pulmonares ou do trato gastro-
intestinal, e tm como consequncia uma necrose isqumica.

Diagnstico laboratorial: os fungos podem ser visualizados, em cortes histolgicos dos
vasos das localidades citadas acima, atravs da colorao de HE. Encontram-se clulas
gigantes e polimorfonucleares. e ainda hifa larga cenoctica e tortuosa.,simulando galhos
de arvore .

Tratamento: Anfotericina B e cirurgia.


RINOSPORIDIOSE

Agente etiolgico: Rhinosporidium seeberi . um parasita de peixes de guas paradas
que, acidentalmente, parasita o homem. A infeco acomete jovens e crianas e mais
comum na ndia.

Manifestaes clnicas: leses localizadas na mucosa do vestbulo nasal ou, s vezes,
na conjuntiva. Inicialmente uma leso papulosa que progride e forma plipos
volumosos, vermelhos, ssseis ou pedunculares e de carter invasivo, apresentando-
se clinicamente sob a forma de granuloma centro facial. A evoluo crnica e a cura
espontnea.

Diagnstico laboratorial: em KOH, o exame de secrees ou esfregaos de tecidos
tumorais mostra grandes esporngios vazios ou cheios de um material sem
endosporos. O fungo maoir do que o Coccidioides immites e de difcil cultivo, mas
podem ser feitas provas sorolgicas.

Pranchas coloridas de micose oportunstica
Aspergilose


Mucor spp

Rhizopus spp

Rinosporidiose


Infeces Hospitalares
Prof
a
. Alessandra Marques Cardoso

As infeces fazem parte da histria da civilizao, mas foi com a criao de locais
de ateno aos doentes, posteriormente denominados hospitais, que os microrganismos
encontraram um ambiente propcio para a proliferao e grande facilidade de acesso aos
indivduos enfermos. Os primeiros indcios de infeco em nvel mdico-paciente nos
remetem s sociedades do Antigo Oriente. No sculo IV a.C. os sacerdotes egpcios eram
orientados a banharem-se vrias vezes ao dia, manter-se limpos, e usar trajes brancos. A
medicina Hindu (600 a.C. a 200 a.C.) adicionou a estas orientaes a utilizao de cido
frmico que funcionava como anti-sptico local, diminuindo ou evitando a infeco do stio
cirrgico.
As primeiras informaes sobre I.H. no Ocidente, data do ano 390 d.C. com o
surgimento dos nosocmios, os quais em 816, no Conclio de Aachen, receberam o nome
de hospitais. A arquitetura desses ambientes, baseada na teoria miasmtica, contribuiu
para a disseminao de infeces hospitalares. Esta situao persistiu na maioria dos
hospitais europeus at o sculo XIX. As I.H. atingiam notadamente os procedimentos
cirrgicos, j que a supurao era considerada saudvel para a boa evoluo de uma
ferida. Contudo, Heinriche Von Pfolspeundt, recomendava em seu manuscrito datado de
1460 a limpeza do material curativo e a lavagem de mos ao manipular o paciente.
Pasteur (1822 -1895) contribuiu para o conhecimento das infeces ao descobrir a
existncia de microrganismos e a associao dos mesmos s patologias. Oliver Wendell
Holmes (1809 1894), baseado nas idias de Pasteur, props que a febre puerperal era
transmitida atravs das mos dos estudantes de medicina, que aps manusearem as
peas cadavricas realizavam prticas obsttricas. A teoria de Holmes foi corroborada por
Ignaz Philipp Semmelweis (1818 1865), que alm de provar que a febre puerperal era
transmitida pelos mdicos s parturientes, sugeriu a primeira forma de anti-sepsia: a
lavagem das mos. William S. Halsted (1852 1922) foi um grande inovador no combate
s infeces de feridas operatrias, introduzindo o uso de luvas como medida preventiva
de infeco tanto do mdico quanto do paciente.
Em meados do sculo XIX, destaca-se a figura da enfermeira Florence Nightigale
(1820 1910), que lutou pela melhoria da infraestrutura hospitalar como forma de
preveno das I.H. O sculo XX trouxe inmeros avanos no campo da medicina,
Alexandre Fleming (1881 1955) com a descoberta da penicilina, iniciou a era
antimicrobiana. Na dcada de 50 surgiram na Inglaterra as primeiras enfermeiras
responsveis, exclusivamente, por tcnicas de controle de I.H. (Infection Control Sister).
Em 1958 a American Hospital Association recomenda a criao de Comisses de
Controle de Infeco Hospitalar (CCIH), com o objetivo de prover os hospitais americanos
de um sistema que lhes permitisse apurar as causas das I.H e dot-los de instrumentos
necessrios contra possveis aes legais movidas pela clientela.
No Brasil, a primeira CCIH data de 1963, instalada no Hospital Hernesto Dornelles
em Porto Alegre. O Ministrio da Sade na portaria 196 de 1983 determinou que todos os
hospitais deveriam manter uma CCIH. Esse histrico demonstra a evoluo do
conhecimento sobre I.H. Recordando os fatos de maior relevncia que marcaram a
histria da medicina, podemos concluir que muitos conhecimentos que hoje nos parecem
simples e bvios (como a lavagem das mos), mas que ainda so negligenciados pelos
profissionais de sade, resultaram de idias inovadoras que tiveram de vencer tenaz
resistncia para sua aceitao.
Entende-se por Infeco Hospitalar, tambm denominada de infeco institucional
ou nosocomial, aquela adquirida aps a admisso do paciente no hospital e que se
manifesta durante a sua permanncia neste local, ou aps a alta, quando esta infeco
puder ser relacionada com a internao ou procedimentos hospitalares. Apesar da
existncia de diversas medidas preventivas e do aprimoramento das aes de controle, as
infeces hospitalares ainda permanecem como um problema endmico que afeta no
somente o paciente, mas tambm sua famlia, as equipes de sade e a sociedade como
um todo.
As infeces hospitalares apresentam-se como um agravante de grande significado
epidemiolgico, tanto no contexto de Sade pblica como no da assistncia hospitalar, por
elevar as taxas de morbi-mortalidade, ampliar o tempo de permanncia dos pacientes no
hospital e conseqentemente, por onerar os custos do tratamento, com suas
conseqncias irreparveis, seja do ponto de vista humano, econmico ou social.
Pacientes que requerem cuidados intensivos prolongados so mais suscetveis
aquisio de microrganismos causadores de infeces. Uma das principais preocupaes
na prestao de assistncia ao paciente em Unidade de Terapia Intensiva (UTI) refere-se
ao estado imunolgico do mesmo, ou seja, o paciente debilitado apresenta maior
probabilidade de desenvolver infeco por bactrias hospitalares multirresistentes. Por
estarem debilitados, os pacientes de UTI so particularmente suscetveis colonizao e
infeco por bactrias presentes nas mos dos profissionais ou no prprio ambiente. A
insuficincia das prticas de higienizao das mos e a contaminao do meio ambiente
aumentam o risco de infeces hospitalares. A anti-sepsia das mos da equipe de
profissionais da rea da sade a operao fundamental para o controle das infeces.
Pelo fato de as mos estarem expostas ao meio ambiente, alm da microbiota residente,
esto sujeitas a apresentar microrganismos transitrios que oferecem risco de
contaminao cruzada.
Vrios estudos de vigilncia evidenciam que as principais formas clnicas das
infeces hospitalares so: infeco do trato respiratrio (pneumonia), infeco do trato
urinrio (cistite, pielonefrite), infeco de corrente sangunea (sepse), infeco em
superfcies queimadas, infeco de feridas cirrgicas e infeco gastrointestinal.
Com relao aos microrganismos causadores de processos infecciosos
hospitalares, tem-se observado uma evoluo interessante: o Streptococcus,sp beta
hemoltico foi, durante longos anos, o principal agente etiolgico das infeces
hospitalares, especialmente entre as parturientes; de 1950 a 1965, alastraram-se por todo
o mundo as infeces por Staphilococcus,sp e a sua transmisso foi objeto de
numerosos estudos. Em 1967, MacNamara e cols. j incriminavam os bacilos Gram
negativos como germes mais freqentemente isolados de processos infecciosos,
prevalncia esta verificada at os dias atuais, deixando a concluso dolorosa de que
no houve diminuio no nmero de infeces hospitalares.
Os principais microrganismos envolvidos nas infeces hospitalares nos dias atuais
so: bastonetes Gram negativos (Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter baumannii,
Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli, Serratia marcecens, Proteus mirabilis), cocos
Gram positivos (Staphylococcus aureus, Staphylococcus coagulase negativa,
Enterococcus faecium, Enterococcus faecalis) e fungos como as leveduras, sobretudo, as
do gnero Candida sp. Devido ao uso indiscriminado de antibimicrobianos de largo
espectro ocorre com freqncia seleo de microrganismos multirresistentes.
Staphylococcus aureus isolados a partir de amostras clnicas de pacientes
hospitalizados so freqentemente resistentes a vrios antimicrobianos. Cerca de 90%
dos Staphylococcus aureus produzem a enzima beta-lactamase, e cerca de 20%
apresentam resistncia a oxacilina. A resistncia oxacilina nos estafilococos resulta de
modificaes das suas PBPs (protenas de ligao da penicilina), na membrana
citoplasmtica, as quais passam a ser expressas por um gene cromossmico adquirido,
mecA, que codifica as PBPs, diferentes das originais e que possuem baixa afinidade para
ligao da oxacilina e conseqentemente a todos os outros beta-lactmicos.
Staphylococcus coagulase negativa so agentes comuns de infeces hospitalares
em UTI. Devido dificuldade de sua interpretao como agente colonizante, contaminante
ou patognico, o uso inadequado de antimicrobianos resulta em elevados ndices de
resistncia. Aproximadamente 65% dos isolados clnicos apresentam sensibilidade
unicamente vancomicina, o que revela a necessidade de controle na utilizao de
antimicrobianos no ambiente hospitalar visando reduzir a seleo de microrganismos
multirresistentes.
Alm de serem oportunistas, os bastonetes Gram negativos adquirem resistncia a
drogas antimicrobianas comumente utilizadas no hospital. Pseudomonas aeruginosa e
outros Gram negativos apresentam resistncia intrnseca a vrios antimicrobianos, alm
de realizarem processos de recombinao gentica (conjugao, transformao e
transduo). medida que os fatores de resistncia se recombinam, novos e mltiplos
fatores de resistncia so adquiridos. Estas cepas podem tornar-se parte da microbiota
dos pacientes e da equipe hospitalar, comprometendo a eficcia do tratamento
antimicrobiano.
No ambiente hospitalar, as Pseudomonas so os microrganismos mais
freqentemente isolados dentre as bactrias no fermentadoras da glicose. O gnero
Pseudomonas faz parte da famlia Pseudomonadaceae e constitudo por bastonetes
Gram negativos mveis, aerbios e citocromo-oxidase positivo. P. aeruginosa a espcie
mais isolada e de maior importncia clnica, apresentando normalmente resistncia
mltipla a antimicrobianos.
A frequncia de infeces hospitalares causadas por Klebsiella sp produtoras de
beta lactamases de espectro ampliado (ESBL) tem aumentado em todo o mundo. As
cepas de Klebsiella sp ESBL normalmente exibem resistncia cruzada com quinolonas e
as infeces causadas por esses microrganismos tm grande impacto sobre a mortalidade
dos pacientes.
As infeces causadas por Acinetobacter baumannii so de tratamento difcil,
devido resistncia difundida destas bactrias a maioria dos antimicrobianos. Surtos
causados por A. baumannii resistentes aos carbapenmicos (imipenem, meropenem) tm
sido relatados em diversos hospitais no mundo todo. A elevada resistncia a drogas como
aztreonam, cloranfenicol, cefotaxima, ceftazidima, cefepime, ciprofloxacina,
sulfametoxazol-trimetoprim, amicacina e gentamicina mostra a dificuldade teraputica nas
infeces por A. baumannii e a preocupao em relao capacidade desta espcie
sobreviver por longos perodos em ambiente hospitalar, podendo ser transmitida entre
pacientes via reservatrios humanos e objetos contaminados.
A introduo de novos antibiticos de amplo espectro nos hospitais aumentou a
importncia de bactrias Gram negativas aerbias como Stenotrophomonas maltophilia,
Burkholderia sp e Moraxella catharralis. Existe uma crescente preocupao em relao ao
uso de antimicrobianos em pacientes infectados por bactrias no fermentadoras,
principalmente S. maltophilia, que apresenta resistncia a muitos antimicrobianos,
incluindo os carbapenmicos, o que pode resultar em falha teraputica.
As infeces hospitalares so de grande importncia para a sade pblica mundial,
especialmente nos pases em desenvolvimento, tanto que no Brasil, esforos tem sido
direcionados para implementao de medidas preventivas. Como a infeco hospitalar o
resultado final de uma srie de eventos, o pleno conhecimento de fatores predisponentes
se torna fundamental medida que possibilita a criao e implantao de aes de
controle efetivas que evitem no apenas a infeco propriamente dita, mas tambm a
colonizao dos pacientes por microrganismos patognicos, contribuindo assim para a
manuteno da sade e para o aperfeioamento das atividades prestadas pelas equipes
de sade.
Foi realizada uma pesquisa de bactrias nos materiais provenientes de fossas nasais,
mos, garganta (amigdalas) e fezes de 62 funcionrios, bem como naqueles
provenientes do ambiente fsico de um Hospital Geral em So Paulo. Verificou-se a
ausncia de enteropatognicas, porm, a prevalncia de outros bacilos Gram
negativos foi elevada entre os profissionais da rea da sade, principalmente a copa,
cozinha, limpeza e lavanderia. Presenciou-se fagotipos de S. aureus tanto no ambiente,
como no pessoal, assim como a alta prevalncia de Bacillus,sp no ambiente. Conclui-
se pela participao, tanto do pessoal hospitalar, como do meio ambiente na
disseminao de microorganismos, acreditando serem necessrios procedimentos de
limpeza mais eficientes e educao mais adequada queles que vo exercer atividades
infra-estruturais dentro do hospital.

A situao no Brasil revelou incidncias de 4,1 a 13,2% com um nvel de
significncia de 356.000 casos anuais, levando 61.000 a bito. Reconhecendo este fato
grave, o governo brasileiro, atravs da portaria n 196 de 1982 do Ministrio da Sade,
tornou obrigatria a existncia de uma Comisso de Vigilncia Epidemiolgica em
hospitais.

Equipamentos de uso obrigatrio como catteres, umidificadores, ventiladores,
balanas, incubadoras, berrios e banheiros tm sido incriminados como vetores de
agentes infecciosos nosocomiais. Em relao aos profissionais da rea da sade, a
disperso de microorganismos parece ter sido do tipo mos para mos. Ateno especial
vem sendo dada aos manipuladores de alimentos, investigando a possvel participao
destes na prevalncia de germes envolvidos em infeces hospitalares

A coleta para as investigaes desses microrganismos pode ser feita em portas,
maanetas, telefones, mesas, pias, torneiras e em outros pontos diferentes do hospital.
Em relao ao pessoal podem ser investigadas as fezes, fossas nasais, mos, etc. Todos
estes materiais podem ser inoculados em caldo tripticase-soja ou tioglicolato.

Para a pesquisa de bactrias Gram negativas usam-se meios seletivos normais e,
posteriormente, so feitas as provas bioqumicas. Para a pesquisa de bactrias Gram
positivas usa-se o gar sangue, para os Staphilococcus,sp deve-se seguir o seu
fluxograma.

Algumas pesquisas mostram que nas mos dos funcionrios predominam as
bactrias Gram negativas e em especial o Citrobacter freundii (infeces alimentares,
TGU, ouvido mdio e at meningite).

O Pseudomonas aeruginosas, por ser resistente clorao, foi encontrado em
pias e torneiras; a Serratia marcenses (pigmento vermelho) foi isolada em nebulizadores,
solues intravenosas e catteres; e a maior incidncia de Enterobacter cloacae e E.
aerogenes foi verificada nas mos e a sua presena indica contaminao fecal. O gnero
Bacillus, e em especial o Bacillus subtilis e B. antracis, tem sido encontrado nas mos
do pessoal da limpeza.

Os Bacillus,sp so bactrias que sobrevivem por longo tempo, na poeira do ar,
sob a forma de esporos e o seu achado no pessoal, em mos ou fossas nasais, sugere
infeco do ambiente hospitalar. Esses microorganismos, normalmente, no so
patognicos, porm, se forem introduzidos no organismo de pacientes portadores de
doenas de base e imunodeprimidos, podem causar danos fatais. A cirurgia, ou mesmo
tcnicas mdicas mais sofisticadas como a hemodilise intermitente, so considerados
exemplos das possibilidades de introduo desses microrganismos nos tecidos dos
pacientes.

O S. aureus esteve presente nas mos e esta prevalncia, apesar de ser baixa
na literatura, pode sugerir risco de intoxicao alimentar, portanto, deve ser verificado
nas pessoas que preparam as refeies. O S. aureus do grupo III (infeco alimentar por
enterotoxina) tambm muito encontrado nas fossas nasais do pessoal de hospital.

ROTINA DE SERVIOS PARA MEIOS CONTAMINADOS E TCNICAS ESPECIAIS
PARA A LIMPEZA DE AMBIENTES HOSPITALARES.

MATERIAIS DE LIMPEZA

Esfreges, panos de cho e escovas devem ser lavados diariamente. Deve
haver dois baldes de cores diferentes, ambos contendo soluo a 3 %, sendo o
primeiro para aplicaes do produto e o segundo para enxaguar os panos. Os rodos de
borracha e panos de cho devem ser diferenciados para a lavagem de sanitrios, centro
cirrgico, centro obstetrcio, berrio, CTI e PS. As solues desinfetantes e detergentes
devem ser aplicadas sem diluio prvia, caso haja necessidade de diluir, esta diluio
deve ser feita no momento da limpeza, no prprio local e diretamente no balde. Usar
hipoclorito de sdio a 5 % para baldes e pias, o funcionrio dever usar um medidor
de 200 ml para ralos e 100 ml para pisos. Nas reas crticas e semi - crticas dever
ser utilizado o Tersyl a 3 %. Nenhum material de limpeza dever ser guardado na rea
interna do hospital e sim na rea de limpeza. Deve-se fazer a limpeza e desinfeco dos
materiais de limpeza aps o seu uso.

AGENTES DE LIMPEZA

De acordo com a portaria 196 de 24/06/83 do Ministrio da Sade, devem ser
usados compostos base de dois ou mais fenois sintticos (ortofenil-fenol
paratercirio, bi-fenol) na concentrao de 0,3 %, aps diluio, associados ao sabo
ou detergente amnico, EDIA e antioxidantes.

USOS:

#Centro cirrgico, CTI, berrio e unidade internacional - compostos diquaternrios
associados a monoquaternrios de amnio, dicloreto de acetil-dimetil amnio, cloreto de
alquil-dimetil-benzil amnio, soluo de hipoclorito de sdio.
#Ralos, pias e sanitrios - 200 ml do agente, na concentrao de 5 %, uma vez por
semana e, quando houver suspeita ou confirmao de hepatite, usar diariamente. Para
a desinfeco de artigos contaminados por vrus us-lo a 1 %.

REAS

#Centro cirrgico - a limpeza deve ser efetuada: aps o trmino de cada cirurgia e
uma vez por dia aps todas as cirurgias programadas, geralmente no perodo
noturno ou aps uma cirurgia contaminada.

#Vestirios - deve ser feita a limpeza de armrios, paredes, cho, vidros e portas
diariamente. A roupa suja no deve ficar exposta no vestirio ou em qualquer rea do
centro cirrgico, devendo ser recolhida vrias vezes por dia. A roupa limpa tambm no
deve ficar exposta.

#Sala de expurgo - lavar diariamente com gua e sabo, enxaguar e passar pano
embebido em soluo desinfetante.

#Berrio - limpar duas vezes ao dia, recolher os sacos de lixo em um saco nico e
grande (os cestos de lixo devem ter tampa e pedal). Para fazer a limpeza dos pisos deve-
se fazer varredura mida: umedecer o pano em soluo desinfetante (dois baldes), passar
no piso no sentido do fundo para a porta da frente sem encostar nos beros, que devem
ser removidos por outra pessoa que no o faixineiro. Os mveis dos bebs devem ser
limpos no local de higienizao dos bebs e com um pano de limpeza embebido em
desinfetante. Portas e vidros limpar uma vez por semana com gua e sabo, soluo
desinfetante da parede ao teto.

#CTI - deve ser limpa duas vezes por dia, sala e corredor, o piso deve ser limpo com
soluo desinfetante do fundo para a porta e o lixo deve ser recolhido Paredes, portas e
vidros devem ser limpos uma vez por semana com gua e sabo, e, diariamente, passar
pano com desinfetante.

INFECES NOSOCOMIAIS POR FUNGOS

Prof
a

As infeces fngicas nosocomiais foram durante alguns anos consideradas como
eventos espordicos, que comprometiam basicamente pacientes com doenas terminais.
O National Nosocomial Infections Surveillance Systems (NNIS) notificou um aumento
considervel da infeces fngicas de corrente sangunea que passaram de 6% em 1980
para 10,4% em 1990, sendo que 79% dessas infeces fngicas foram causadas por
leveduras, predominando a Candida albicans.Essas infeces podem ser classificadas em
dois tipos: O tipo I compreende as micoses exgenas adquiridas do ambiente externo,
durante uma hospitalizao, sendo a aspergilose um exemplo clssico; o tipo II no qual a
micose tambm est associada hospitalizao e constitudo por dois subgrupos; o
primeiro (IIa) caracterizado por uma infeco adquirida d forma endgena, isto , um
fungo da microbiota do paciente passa a causar doena, como no caso da candidase
oral; o segundo subgrupo (IIb) se caracteriza por infeces, tambm endgenas, em que o
paciente tem uma micose em fase latente e por queda da imunidade ela se manifesta,
como na histoplasmose.
A mortalidade atribuda candidemia, uma das principais infeces fngicas
nosocomiais, da ordem de 38%. Diversos fatores de risco so atribudos candidemia
como quimioterapia, imunossupressores, utilizao de antibiticos de amplo espectro,
nutrio parenteral, , hospitalizao prolongada em unidades de tratamento intensivo,
presena de cateter venoso central, enterocolite necrosante no recm-nascido,
neutropenia severa. E os fatores ligados ao paciente para candidase sistmica so
portadores de leucemia e tumores slidos, pacientes com AIDS transplantados de rgos
slidos e medula ssea, prematuro de baixo peso, pacientes submetidos cirurgia de
grande porte como cardiotorcica e abdominal, queimaduras etc...
No paciente internado a fonte de infeco por Candida spp a prpria colonizao
endgena de TGI e da pele dos pacientes. As vias de acesso corrente sangunea mais
implicadas na candidemia so a translocao intestinal, intubao e cateterizao
intravenosa. A transmisso nosocomial pode decorrer de uma contaminao extrnseca
ou intrnseca de solues ou artigos mdico-hospitalares. As mos dos profissionais de
sade podem ser responsveis pela contaminao extrnseca e a maioria dos surtos
nosocomiais de Candida so atribudos contaminao de solues de irrigao,
monitores de presso intravasculares e nutrio parenteral.
A aquisio de Candida spp em uma unidade de tratamento intensivo neonatal,
ocorre preferencialmente de forma nosocomial mais que por via maternal. Uma
investigao recente atravs de tcnicas de biologia molecular demonstrou que uma
mesma cepa de C. tropicalis , envolvida com um surto de fugemia em uma unidade de
terapia intensiva neonatal, foi detectada nas mos de profissionais de sade da unidade.
A apresentao clnica da candidase nosocomial varia desde a forma mucosa at o
envolvimento sistmico com aparecimento de endocardite, meningite, microabcessos no
sistema nervoso central, formas hepatoesplnicas, endoftalmite, candidase renal. No
paciente neutropnico a fungemia pode manifestar-se apenas como febre no responsiva
aos antibiticos ou de incio abrupto, simulando spsis bacteriana.
A associao de suspeita clnica, hemocultura positiva,diagnstico por imagem e
histopatolgico, conjuntamente corroboram o diagnstico. O padro-ouro de diagnstico
se baseia na demonstrao morfolgica da levedura ou da hifa associada a uma cultura
positiva.
A aquisio de aspergillus se faz por inalao dos condios que se encontram
disseminados de forma universal, podendo tambm ocorrer colonizao de ferimentos,
bem como a penetrao nos tecidos por ocasio de incises cirrgicas. Os fatores de
risco para a infeco nosocomial so neutropenia prolongada, AIDS, uso de
corticoesterides, transplantados, construo civil prxima a enfermarias de pacientes
imunodeprimidos, usualmente neutropnicos graves, doenas pulmonares obstrutivas
crnicas, entre outras. Em pacientes imunodeprimidos a forma invasiva de aspergilose
possui uma taxa de mortalidade global muito elevadas alcanando 74%.
A apresentao clnica mais freqente da infeco pelo Aspergillus a forma
pulmonar, seguida de sinusite e invaso do SNC, determinando as formas rinocerebrais
da aspergilose.
Diversos outros fungos podem comprometer pacientes imunodeprimidos como
Cryptococcus neoformans, Coccidioides immitis, Histoplasma capsulatum, Blastomyces
dermatitidis, Pseudallescheria boydii, Fusarium etc...
As infeces nosocomiais por fungos dematiceos em pacientes submetidos a
transplantes de rgos slidos usualmente so complicaes tardias ps- transplantes. As
apresentaes clnicas so diversas, variando desde as leses de pele at quadros de
invaso sistmica.
A preveno das infeces oportunistas se baseia na restaurao mais rpida
possvel dos fatores que causam imunossupresso, como neutropenia e no grau e
durao da imunossupresso. Lavagem das mos, rigorosas tcnicas de assepsia, anti-
sepsia, desinfeco e esterelizao so necessrias para a preveno de infeces.

ANTIFNGICOS

Prof
a

O arsenal teraputico antifngico tem aumentado muito nesses ltimos anos,
buscando atender a uma demanda crescente na micologia mdica. As drogas antifngicas
surgiram mais tarde que os agentes antibacterianos, em decorrncia de serem os fungos,
a exemplo do hospedeiro, agentes eucariticos. Assim, em razo dessa coincidncia,
muitas substncias com propriedades antifngicas causam aes deletrias inespecficas,
podendo acarretar uma srie de efeitos colaterais terapia, sendo portanto um dos
fatores que retardaram o surgimento desses frmacos, bem como continuam limitando os
avanos no campo da terapia antifngica.
A terapia antifngica inicial era pouco efetiva e no- especfica, tendo sido o iodeto
de potssio o primeiro composto utilizado em 1903. A partir da iniciou-se a busca por
frmacos mais efetivos e menos txicos para o hospedeiro. Em 1939 surgiu a griseoflvina,
porm s foi usada clinicamente em 1958, aps a comprovao da sua eficcia.
No incio da dcada de 1950 surgiram os derivados polinicos representados pela
nistatina (1951) e depois pela anfotericina B (1956) a droga mais comprovadamente eficaz
no tratamento das micoses profundas at hoje. Em 1964 foi descoberta a atividade
antimictica de um derivado pirimidnico a flucitosina.
A teraputica antifngica teve grande impulso com a descoberta da propriedade
antimictica do benzimidazol, e a partir da descobriu-se outros derivados azlicos com
essa atividade. Assim surgiram inicialmente os derivados imidazlicos: miconazol (1967);
clotrimazol (1969); econazol (1975); isoconazol (1979); ticonazol (1979); cetoconazol
(1981); tioconazol (1984); oxiconazol (1986). Posteriormente com o avano das pesquisas
descobriram-se os derivados triazlicos : fluconazol (1990); itraconazol (1992); voriconazol
(2002); ravuconazol e posaconazol, que exercem menos efeitos deletrios no
hospedeiro,e apresentam propriedades farmacocinticas mais favorveis produzindo uma
terapia antifngica mais segura e eficaz.
A partir da dcada de 1990 surgiram os derivados morfolnicos: amorolfina (1994);
alilaminas (naftifina e terbinafina (1993)).Por ltimo em 2001 a Food and Drug
Administration (FDA) aprovou a caspofungina membro da classe das equinocandinas que
tem mostrado um papel importante no tratamento da aspergilose invasiva.

Mecanismo de ao e efeitos colaterais de alguns antifngicos

Griseofulvina: Penetra na clula fngica por um processo energia dependente,
onde no ncleo interage com microtbulos desfazendo o fuso mittico e inibindo o
processo de multiplicao do fungo. Principais efeitos colaterais so distrbios
gastrointestinais.
Derivados polinicos: Alterao da permeabilidade celular da membrana
fngica. Ligam-se ao ergosterol presente na membrana da clula fngica
produzindo poros e ou canais que resultam no aumento da permeabilidade da
membrana e por conseguinte em uma grande perda de pequenas molculas e
eletrlitos do meio intracelular, que altera a homeostase do microrganismo. Efeitos
colaterais renais, calafrios, tromboflebite, anemia.
Flucitosina: penetra na clula fngica por intermdio de uma citosina-permease
especfica (citosina-desaminase). Em seguida convertida em 5-fluoracil que um
antimetablico que inibe a enzima timidilato-sintetase inibindo, portanto a sntese
de DNA. Distrbios gastrointestinais e em raros casos neutropenia.
Derivados azlicos: interferem na sntese do ergosterol bloqueando a enzima
14-demetilase, presente no citocromo P-450 da clula fngica e, por conseguinte
impedindo a demetilao do precursor lanosterol em ergosterol. Efeitos colaterais
no TGI e longo prazo hepatoxicidade.
Alilaminas: inibem a enzima esqualeno epoxidase e bloqueiam uma etapa
precoce da biossntese do ergosterol e causam acmulo txico de esqualeno na
parede da clula fngica, cujo resultado a morte celular. Efeitos colaterais como
distrbios no TGI, reaes dermatolgicas.
Derivados morfolnicos: bloqueiam 2 etapas suscessivas da biossntese do
ergosterol mediadas pelas enzimas
14
redutase e
7
-
8
isomerase. Induzem a um
drstico efeito sobre o metabolismo do microrgansimo. Os efeitos adversos mais
evidentes so reaes dermatolgicas.


BACTERIOLOGIA DA GUA = PURIFICAO DA GUA

gua no potvel = gua com dejetos domsticos e/ou industriais.
gua potvel = gua sem dejetos domsticos e/ou industriais.

As guas de origem profunda (poos e fontes) so aquelas que devem abastecer
residncias e reas rurais; as guas de cisternas (provenientes de chuvas) e as guas de
superfcie no devem ser ingeridas sem prvia purificao devido ao perigo de
transmisso de agentes infecciosos para a espcie humana.

A qualidade sanitria da gua determinada por seu aspecto fsico, isto , se est
perfeitamente clara e livre de odores e de sabores (incolor, inodora e inspida). Mas a
gua pode apresentar todas essas caractersticas e estar contaminada, o que nos leva a
afirmar que a qualidade sanitria da gua se apia em outros processos especiais. Um
desses processos a vigilncia sanitria, ou seja, a inspeo no abastecedor de gua,
feita por um sanitarista (engenheiro especializado no sistema). Para a anlise dessas
guas existem testes qumicos e bacteriolgicos e somente com a liberao dos
resultados desses testes que podemos considerar a gua potvel ou no.

Bacteriologia da gua:

Quando as amostras de gua so encaminhadas para anlise de
microorganismos deve-se ter o cuidado de transportar a amostra rapidamente para no
haver morte desses organismos porque, quando os agentes patognicos esto em
nmero reduzido, podem escapar ao diagnstico. O perodo mdio para a deteco dos
organismos e liberao dos resultados de 24 horas.

Os microrganismos patognicos tm acesso s guas atravs de excrees
intestinais do homem e de animais. A E. coli, S. faecalis e C. perfringes so
componentes da flora autctone do intestino grosso do homem e de animais, portanto,
a presena de um destes microorganismos vem afirmar que h uma poluio fecal.
Pode-se observar ainda que estes microorganismos fecais vivem por mais tempo na gua
do que as espcies enteropatognicas e que a presena de enterobactrias
(coliformes) na gua um sinal de alarme.

Grupo dos coliformes: esto includos neste grupo os bacilos aerbios e anaerbios
facultativos no esporulados, Gram negativos, CO2 positivo, cido positivo, fermentadores
de lactose. As bactrias clssicas so a E. coli e o Aerobacter,sp (Enterobacter,sp);
porm faremos referncia s Salmonellas, Shiguellas, Proteus, Vibrios, Brucellas,
Alcalgenes fecalis e Pseudomonas.

a) Escherichia coli: considerada habitante normal do TGI e em especial a espcie
chamada de oportunista. Apresenta prova de indol positiva, produz cido a partir de
glicose, provoca alterao de cor pelo indicador de pH, no forma acetil-metil-carbinol em
meios com glicose e peptonas (Vogues-Proskawer), na reao de citrato no utiliza o
citrato de sdio como nica fonte de carbono e, portanto, cresce nessas condies,
Vermelho de Metila positivo, mvel, TAF positivo (acidula o meio por completo) e CO2
e lactose positivos. A E. coli pode causar doenas no sangue, TGU e feridas. Pode ser
separada sorologicamente em 160 grupos antignicos somticos O, 80 sorotipos
baseados no antgeno K (bainha ou capsular) e em 56 sorotipos baseados no antgeno H
(flagelar).

Certos sorotipos de E. coli so conhecidos por invadirem a mucosa intestinal
produzindo uma sndrome semelhante causada pela Shiguella,sp. Os sorotipos so
produtores de enterotoxinas termolbeis e termoestveis, semelhante do Vibrio
cholerae, que resultam em casos espordicos de diarria humana; a produo de
enterotoxinas controlada por um plasmdio que pode ser transferido para qualquer cepa
de E. coli, podendo esta tornar-se enterotxica. Os sorotipos produtores de enterotoxinas
so: O 6, O 8, O 25, O 27, O 78, O 148 e O 159. A sorotipagem, feita antigamente em
muitos laboratrios com pools de antisoros A, B e C, considerada enganosa; o Center
Diseases Control determinou que somente em cepas provenientes de crianas de
berrios (diarrias infantis) deve ser usada a sorotipagem de Farmer Etall que
detalhada.

Algumas espcies de Escherichia,sp produzem uma toxina denominada colicina
e algumas so hemolticas em gar-sangue. Atualmente o conceito dos antgenos K foi
redefinido, incluindo a diferenciao de acordo com a natureza qumica, portanto, tem-se
duas variedades de ag K: a variedade L, cuja ligao ag-ac inativada pelo aquecimento
100 graus C; e a variedade B, cuja ligao no quebrada.

1) E. coli enteropatognica (EPEC) - em laboratrio clnico, pesquisamos a sua
presena em crianas de 0 a 2 anos independente de pedido de exame; os adultos s so
afetados quando muito debilitados. O paciente com infeco pode apresentar tenesmo
(calafrios e abdomem endurecido) e, no ID, a infeco pode formar abcessos localizados.
As fezes apresentam-se lquidas e mucopiosanguinolentas e devem ser semeadas
primeiro em meio no inibidor (agar sangue ou agar simples, dando preferncia ao agar
sangue), j que os meios seletivos podem impedir o crescimento de algumas desta cepas.

2) E. coli enterotoxinognica (ETEC) - raramente invade a mucosa do ID e/ou IG, porm
produz uma exotoxina que atua na mucosa do intestino provocando grande eliminao de
gua. As diarrias so copiosas e no contm sinais de picitos, nem hemcias e tm
como conseqncia uma desidratao sem febre. Algumas estirpes de E. coli, produtoras
de exotoxinas, contm fimbrias (fatores de colonizao e adeso mucosa). As tcnicas
de ELISA (imunoabsoro ligada a enzimas) so positivas para os antgenos termolbeis
e negativas para os antgenos termoestveis. A E. coli a principal causa de infeco no
trato urinrio e se propaga por via hematognica.

3) EIEC (enteroinvasiva)= invade clulas epiteliais (febre + colite + diarria e PMN nas
fezes + tenesmos).

4) EHEC (enterohemorrgica)= elaborao de citoxinas = diarria com S.G. e sem febre
+ dor dor abdominal.

5) EaggEC (enteroagregativa)= pode durar at 14 dias o processo diarrico aquoso e
promove desidratao grave .Este patgeno adere as clulas epiteliais.

b) Shigella,sp: esse gnero constitudo por quatro sorotipos subagrupados como: A (S.
dysenteriae); B (S. flexneri); C (S. boydii) e D (S. sonnei). A sorotipagem com antisoros
polivalentes ou grupo-especficos o mtodo mais adequado para a identificao de um
microorganismo isolado que tenha as caractersticas morfolgicas e bioqumicas
parecidas com a Shigella,sp. Existem biotipos de E. coli pertencentes ao grupo do
Alkalifascens - Dipar, imveis e no produtores de gs, que podem se assemelhar s
Shigellas (que so imveis e no produzem gs a partir da glicose, com exceo
dos sorotipos Newcastle e Manchester de S. flexneri que diferem dos biogrupos 1-5
por serem indol e arginina negativos e CO2 positivo), portanto, no se deve dispensar
a sorotipagem (A-D). As Shigellas permanecem restritas ao TGI e a septicemia rara.

As Shigellas causam no homem uma doena debilitante, a disenteria bacilar, cujo
quadro clnico foi descrito entre os militares no sculo IV A.C.; so menos invasivas do
que as Salmonellas; possuem antgeno O especfico e algumas estirpes tm antgeno K
termolbil, cuja remoo facilita a aglutinao com soros anti-O (estas no apresentam
antgeno H). A identificao fica confusa com outros gneros como a Hafnia alvei,
Providencia, Aeromonas e E. coli, sendo que as Shiguellas exigem um nmero maior de
provas bioqumicas devido sua quase total negatividade nesses testes.

Todas as espcies de Shigella produzem enterotoxinas e uma delas, a S.
dysenteriae, produz uma exotoxina conhecida como neurotoxina de Shiga que potente
responsvel pela patogenia da espcie. As Shigellas causam desde infeces inaparentes
pequenas infeces com algum desconforto e pouca diarria, sendo que o incio das
infeces sbito com tenesmo, diarria e febre, aps um perodo de incubao de 1 a 4
dias. Todas as espcies so patognicas para o homem causando leses no epitlio e
mucosas, inflamao aguda, restos celulares, sendo a S. flexneri a responsvel pelas
leses. As leses superficiais de mucosas do TGI so devidas ineficincia de Ig C. Os
anticorpos da classe Ig A tm efeito de proteo.

As fezes devem ser colhidas na fase aguda, antes do incio do tratamento, e
devem ser colocadas em meio de enriquecimento (caldo selenito) para depois serem
semeadas no MacConkey e no agar SS. O seu crescimento ruim, mesmo em casos de
disenteria aguda. As Shigellas so anaerbias facultativas, porm crescem bem em
aerobiose; apresentam variaes coloniais (lisa - S e rugosa - R no invasiva). H um
aspecto a ressaltar sobre a formao de uma pseudomembrana nas reas ulceradas do
TGI: esta pseudomembrana composta por fibrina, restos celulares, bactrias e mucosa
necrosada e, posteriormente, substituda por um tecido de granulao e
conseqentemente por cicatrizao. O paciente que foi acometido por infeco causada
por Shigellas est sujeito reinfeco.

O tratamento feito com Cloranfenicol, Quinolonas que so antibiticos
bacteriostticos. A administrao de Lactobacillus acidophilus (250 - 500 mL) produz uma
acidulao do meio intestinal tornando-o imprprio para o crescimento do microorganismo
patognico ou Leites fermentados. As vacina no tm efeito teraputico.

c) Salmonella,sp: suas espcies so mais complexas apresentando mais de 2.200
sorotipos diferentes descritos por Kawffman - White, sendo agrupadas (A, B ... etc.) de
acordo com o antgeno H (flagelar). A contaminao ocorre, normalmente, pela ingesto
de gua, leite ou alimentos infectados por fezes humanas ou de animais. Os tipos clnicos
das infeces podem ser:

1) Gastroenterites - varia desde uma diarria leve a fulminante, febre baixa, nuseas e
vmitos;
2) Septicemia ou bacteremia - febre alta com hemocultura positiva (S. cholerae-suis a
espcie invasiva);
3) Febre entrica - febre amena e diarria causada por qualquer tipo de Salmonella.
Existe uma exceo para a febre tifide (S. typhi) que apresenta febre e constipao,
nesses casos, quando a hemocultura positiva e em 7 a 10 dias ocorre diarria
sanguinolenta, as culturas de fezes e urina so positivas. H casos de S. typhi nos quais o
indivduo continua eliminando o microorganismo um ano aps o desaparecimento da
clnica.

As Salmonellas no fermentam a lactose e produzem H2S no TAF, so citrato
positivo e ureia negativa, so mveis, no crescem em KCN e so lisina negativas. Suas
principais espcies so: S. typhi, S. cholerae-suis e S. enteritidis. Os mais de 2.200
sorotipos pertencem S. enteritidis. As espcies podem ser subdivididas em 6 subgrupos
(O, A, B, C2 e E), pela maioria dos laboratrios clnicos, atravs da utilizao de antisoros
disponveis no comrcio, contudo, tipagens adicionais requerem servios de um
laboratrio de referncia.

As espcies de Arizona e Citrobacter possuem caractersticas semelhantes s
das espcies de Salmonella; a Arizona hinshawii passou a ser subespcie da S.
enteritidis e causa gastroenterites no homem e animais e a bactria Citrobacter
oportunista no homem. Alguns autores ainda citam outras espcies de Salmonellas: S.
pullorum (diarria em pintos), S. galinarum, S. shattmlleri e S. paratyphi A, B e C;
porm, a taxonomia atual aceita somente as trs espcies citadas anteriormente.
As doenas causadas pelas Salmonellas so denominadas salmoneloses e
apresentam-se sob as formas de:

1) Febre tifo - S. typhi;
2) Febre paratifide - no homem provocada pela S. paratyphi B (gastroenterite aguda),
nos animais pela S. cholerae-suis ( infeces tipo paratifo em leites).

Alguns autores citam antgenos R e Vi (polissacrides resistentes ao calor, lcool
e fenol), alm dos antgenos O que so os mais importamtes, e dos antgenos H que so
de natureza protica e so termolbeis 100 graus C. A identificao sorolgica feita
pingando uma gota de suspenso de Salmonella mais uma gota do antisoro diludo a
identificar.

A S. typhi multiplica-se no tecido linfide da submucosa intestinal (placas de
Peyer) e linfonodos, propaga-se no fgado, bao e medula ssea e volta ao sangue com
liberao de endotoxina. A hemocultura positiva na primeira semana e negativa na
segunda semana devido a anticorpos opsonizantes. Na convalescncia a coprocultura fica
positiva e o indivduo torna-se um portador. O diagnstico laboratorial compreende duas
reaes: a hemocultura e soro aglutinao (reao de Widal - pesquisa de Acs anti O
e anti H - que positiva mais tardiamente).

Hemocultura - em caldo com bile (200ml) --> 24 a 48 horas --> 37 graus C -->
turvou --> esfregaos (Gram) --> placas --> sorologia e bioqumica.Ou em sistema
automatizadoa (Bactec 9000).

A coprocultura tem valia nos casos de infeces alimentares; a semeadura feita
em caldo selenito e depois em agar SS ou agar Sulfito - Bismuto (inibe a E. coli) , ou
sistema de automao (Microscan ou Vitek).

A imunidade, celular e humoral, slida e duradoura.

BACTERIOLOGIA DA GUA - II

d) Campylobacter jejuni: a infeco causada por este microorganismo se apresenta sob
a forma de diarria, febre, dor abdominal, dor de cabea, vmitos, mialgia e artralgia; a
transmisso por gua e alimentos contaminados e acomete mais indivduos na faixa
etria de 20 anos. As fezes diarricas, material para anlise, devem ser transportadas
temperatura ambiente se a semeadura for imediata, se no, as fezes devem ficar no
refrigerador.

Cultura - no cresce a 25 nem a 37 graus C, crescendo somente a 42 - 43 graus
C. Requer atmosfera gasosa (de 2 a 3 % de CO2), mas no se deve usar as jarras de
anaerobiose porque a quantidade de O2 necessria de 12 a 17 % e no de 3 a6 %. O
meio mais utilizado o Campy BAP a 42 graus C e, aps o crescimento de 24 horas,
avaliar com 48 e 72 hs; avaliao esta que pode ser feita pelo Gram que mostra
bastonetes curvos, Gram negativos caractersticos. S e o material vier de agar no inibidor
a 35 graus C , fazer o Gram e a montagem fresco (ver se h motilidade em flecha) para
se obter os mesmos aspectos dos microorganismos em estudo. Aps isto, passar o
material para o agar sangue e observar se h ou no crescimento (o C. jejuni no cresce
em agar sangue, sensvel ao cido nalidixico, cefalotina e hidrolisa o hipurato).

e) Helicobacter pylori: um novo microorganismo associado gastrite e lcera
gastroduodenal; apresenta-se em espiral, porm mais semelhante ao gnero Spirillum
do que ao gnero Campylobacter . Tem susceptibilidade ao bismuto, produz urease com
atividades fortes (fator de patogenicidade) no muito ativo bioquimicamente, no
fermenta carboidratos e nem reduz o nitrato e no hidroliza o hipurato de sdio. Sua
morfologia em espiral vista no tecido gstrico (Gram, HE, Acridina orange), mas a
colorao da prata de Warthin-Starry obteve melhores resultados. Para a cultura usado
o gar chocolate e o gar Campylobacter de Skirrow (7% de sangue de cavalo,
vancomicina, cido nalidixico e trimetropin).

Outras sps de Helicobacter,sp : H. cinaedi (swabs retais em homossexuais), H.
fennelliae (swabs retais em homo e bissexuais), Flexipira rappini (semelante ao H.
pylory), pacientes com ou sem AIDS, Gastropirillum hominis (gastrite em humanos
semelhantes a H. pylori).

f) Vibrio,sp: a espcie tipo do gnero o V. cholerae que foi causa de diarrias
potencialmente graves durante sculos, mas que hoje no aparece com freqncia. As
fezes so lquidas, acinzentadas e podem ter cogulos. A doena evolui com diarria,
desidratao, choque e morte. Existem cepas que no so de V. cholerae, mas que so
causadoras de diarrias severas e infeces intraintestinais que resultam em septicemia
fatal, tais como: V. parahaemoliticus - frutos do mar contaminados e mal cozidos - V.
mimicus - mariscos = diarria - V. alginolyticus - feridas e ouvido.

A clera clssica, quando aparece, tem como microorganismo responsvel o V. El
Tor, que uma variante ou um biotipo do V. cholerae. Os microorganismos podem ser
isolados do vmito quando o indivduo se encontra na fase aguda da doena; para o
isolamento deve ser usado o meio TCBS (Tiossulfato - Citrato - Bile - Sacarose). O
Vibrio cholerare tem 3 sorogrupos: Inaba (EUA, Peru, Chile, Brasil, Equador = variedades
EL TOR) Ogawa (sudeste da sia) e Hikojima. Pode ser tratado com Tetraciclina. As
provas ps cultura que so confirmatrias par V.cholerae so: Gelatinase + , aglutinao
de eritrcitos de galinha + .

g) Clostridium difficile so bacilos gram positivos muito encontrados em adultos
hospitalizados (os agentes antimicrobianos implicam na doena gastrointestinal) e esto
associados : colite pseudomembranosa, doena intestinal inflamatria inespecfica,
obstruo e estrangulamento do intestino; so microorganismos que eliminam a flora
normal pela competio, produzem toxina A (enterotoxina) e toxina B (citotoxina).

h) Staphylococcus,sp: causam, atravs de uma enterotoxina, uma infeco que fica
incubada de 1 a 8 horas e provoca nuseas, vmitos, diarria e convalescncia rpida,
no havendo febre.

i) Enterobacter,sp: so mveis, alguns tm cpsula, so citrato positivo, CO2 positivo,
glicose positiva, VP, VM e H2S positivos. As espcies de interesse so:

1) E. cloacae - mais isolado na urina, escarro, pus, sangue e LCR. D reo cruzada com
E. coli;
2) E. sakazaki - presente no meio ambiente e alimentos, causa meningite em recm
nascido;
3) E. aglomerans - hemoculturas, aps cateterizao e atos cirrgicos;
4) E. aerogenes - fezes, esgotos, leite, gua, TGU, pus e sangue.

Algumas espcies so capsuladas, so mveis, citrato positivo, CO2 positivo,
glicose positiva, VP positiva, VM negativa e H2S positivo.

Antigamente a espcie tipo era denominada Aerobacter aerogenes; o Enterobacter
hafnia agora Hafnia alvei e as espcies de interesse so: E. cloacae, E. aerogenes, E.
aglomerans, E. sakazakii e E. gergoviae (E. aerogenes atypical) = uria positiva).

O E. cloacae (E. cloacae - like unemed sps 1,2,3) mais isolado na urina, escarro,
pus, sangue e lquor; faz reao cruzada com E. coli.

O E. sakazakii, que antes era E. cloacae,
O E. aglomerans (E. agglomerans complex: Erwinia herbcola, E. melletiae e ainda:
Pantoea agglomerans (E.agglomerans HGXIII); Pantoea ananas (E.agglomerans HGVI)
Pantoea dispersa (E. agglomerans HGIII), aps atos cirrgicos e cauterizao positiva
hemoculturas.

O E. aerogenes encontrado em fezes humanas, esgotos, leite, gua, VGU, pus e
sangue.

j) Yersinia enterocolitica: um bacilo Gram negativo (enterobactria). Outras espcies
de interesse so: Y. intermedia, Y. frederiksenii e Y. kristensenii (so Y.
enterocoliticas atpicas). As manifestaes clnicas dependem do sorotipo, de fatores
genticos e das condies do indivduo.

Quadro clnico primrio - enterite, linfadenite mesentrica e ilete terminal.

Quadro clnico secundrio - eritema nodoso, prpuras, artralgias e glomerulonefrites. A
gastroenterite e linfadenite mesentrica so sintomas predominantes em crianas e
adolescentes.

Quadro laboratorial - a semeadura deve ser feita em meios seletivos como o gar
tripticase (TSA), os sorotipos 03, 08 e 09 crescem em gar bismuto-sulfato,
MacConckey, gar soja, HE e XLD. O crescimento em 4 graus C com enriquecimento
em tampo fosfato frio.

Bioqumica - sacarose, uria, ornitina, lisina, arginina e motilidade a 37 graus C.
Confirmar com a sorotipagem. Os sorotipos O 3, O 8 e O 9 crescem em gar sulfito-
bismuto, MacConckey, SS, XLD e Hektoen. H relatos de contaminao por transfuso
sangnea e preparados caseiros com tripas e em alimentos dessa natureza que foram
armazenados em supermercados.

Outras sps de Yersnia,sp: Yersnia pestis, Yersinia pseudotuberculosis (linfadenite
mesentrica em crianas, simulando apendicite)

k) Clostridium difficile: espcie toxinognica com enterocolite e diarria associada a
antibiticos (outra causa o S. aureus do grupo III). um bacilo anaerbio grosseiro,
encontrado na gua, intestinos de animais, vagina e uretra de humanos e fezes de
crianas sadias, mas em apenas 3% de fezes de adultos sadios. Clostridium difficile
so bacilos gram positivos muito encontrados em adultos hospitalizados (os agentes
antimicrobianos implicam na doena gastrointestinal) e esto associados : colite
pseudomembranosa, doena intestinal inflamatria inespecfica, obstruo e
estrangulamento do intestino; so microorganismos que eliminam a flora normal pela
competio, produzem toxina A (enterotoxina) e toxina B (citotoxina).

l) Pseudomonas,sp: so cocobacilos Gram negativos (no so enterobactrias), mveis
(a nica espcie imvel P. mallei que citocromo oxidase positivo) e catalase positiva,
cuja espcie mais patognica a P. aeruginosa. So flageladas e o nmero de flagelos
serve para separar as espcies, mas no a nvel de rotina laboratorial; contm fmbrias
que facilitam a fagocitose,. So encontradas nos olhos, urina, lavados broquicos e TGU
femino , no homem pode causar estenose de uretra. As espcies de interesse so: P.
aeruginosa, P.fluorescentes, P. putido, P. cepatica, P. stuzei e P. malthophila. Produzem
pigmentos solveis, a pioverdina (P. fluorescens) e a piocinina (P. aeruginosa - azul) e
odor adocicado semelhante ao da uva.

As espcies de interesse so: P. aeruginosa (mais patognica, que cresce a
42C), P. fluorescens, P. putida, P. cepacia (Burholderia cepatia, encontrada na
putrefao da cebola , em leses lcero-necroticas em humanos, em pacientes com
fibrose cstica e pacientes com estenose de uretra, aps o uso de sondas), P. stutzeri
(gua e solo, raro em infeces) e P. maltophilia (Stenotophomonas maltophila,
encontrada no aparelho respiratrio, sangue, feridas e urina e pacientes com infeces
oportunistas), P. pseudomallei (Burkholderia pseudomallei)

m) Proteus,sp: so fenil-alanina positivo, VM positivo, H2S positivo e CO2 positivo. As
espcies de interesse so: P. mirabilis, P. vulgaris, P. retteri e P. penneri, sendo que
as Providencias stuartii e P. alcalifasciens esto includas como P. morganii e foram
para o novo gnero Morganela,sp. Recentemente o nome P. peneri foi proposto para o
organismos P. vulgaris biogrupo I ou P. vulgaris indol negativo. No TAF apresentam
colnias no pigmentadas e em meios seletivos podem ser confundidas com colnias no
fermentadoras de lactose.

A espcie de Proteus mais relacionada s infeces humanas P. mirabilis,
comumente encontrado em pacientes com antibioticoterapia longa, pacientes
cateterizados e ps-cirrgicos, alm de estar presente em 25% da populao (portadores
sadios que albergam o germe no intestino); encontrado no solo, gua e fezes
contaminadas. So bactrias pleomrficas, no capsuladas, mveis e apresentam
crescimento em vu. Podem ser encontrados em feridas, olhos e trato respiratrio e so
sensveis ampicilina e cefalosporina; o P. vulgaris, por sua vez, resistente
penicilina e cefalosporina. A famlia Proteae tem como espcies de interesse: P.
mirabillis, P. vulgaris (P vulgaris biogrupo 2), P. rettigeri (passou para P.vulgaris
biogrupo 1), P. penerii e P. inconstans.

As Providencia stuart e Providencia alcalifaciens esto includas como
Proteus inconstans. O Proteus morganii foi transferido para o novo gnero Morganella
morganii(subespcie morganii e . Recentemente o nome Proteus penerii foi proposto
para o organismo P. vulgaris indol negativo. O P. mirabillis, P. penerii e P. vulgaris so
H2S positivos e podem ser confundidos com Salmonella,sp.

EVIDNCIA BACTERIOLGICA DE POLUIO

# Pode-se perder as bactrias no transporte das amostras de gua.
# As bactrias podem estar em pequeno nmero.
#H urgncia nos resultados devido ao fato de indivduos terem ingerido a gua.
Tcnicas bacteriolgicas para a gua:

# A amostra deve ser colhida em recipiente estril;
# A amostra deve ser representativa do universo do qual foi colhida;
# Deve-se evitar contaminao da amostra durante e aps a coleta;
# A amostra deve ser analisada logo aps a sua obteno;
# Havendo necessidade de demora para a anlise, a amostra deve ser guardada
entre 0 e 10 graus C.

Mtodos:

Contagem em placa padronizada - pode ser feita antes e depois de um
tratamento sanitrio. As gua de boa qualidade tm uma contagem de colnias baixa
(menor do que 100 col/ml). um mtodo til para determinar a eficincia das operaes
destinadas remoo ou destruio dos microorganismos (tais como sedimentao,
filtrao e clorao).
Tcnica: transferir 1,0 ml da gua amostra para um frasco contendo 9,0 ml de gua
estril, agitar, fazer diluies at 10 elevado a menos 5 ( 1/100000). Vrias amostras de
1,0 ml so semeadas em agar EMB e devem ser contadas as placas que contenham de
30 300 colnias (acima de 300 a placa est cheia demais e abaixo de 30 passa a ter
erros nos percentuais).

Prova da presena de bactrias coliformes

**Teste presuntivo - inoculao no caldo lactosado; se o resultado for positivo
h evidncia presuntiva de coliformes e deve-se prosseguir com o exame, caso o teste d
negativo indica ausncia de coliformes e o exame no prossegue.

**Teste de confirmao - transferir do caldo lactosado para caldo lactose-bile
(verde brilhante = gs = coliformes [inibe as bactrias que no so coliformes] ) e para
agar EMB (Escherichia = brilho verde metlico e Enterobacter = colnias grandes,
mucides e rseas).

**Teste completo - colnias mais tpicas vindas do EMB so inoculadas em caldo
lactosado = gs = coliformes. Fazer Gram lembrando que os coliformes so Gram
negativos, fazer tambm as provas bioqumicas.

**Mtodo da filtrao em membrana - grande volume de gua filtrado atravs de um
tipo de membrana esterilizadas capaz de reter bactrias na sua superfcie e deixar passar
rapidamente partculas menores e gua. Em seguida a membrana transferida para um
meio seletivo indicado para bactrias coliformes (EMB), levada para incubao e
posteriormente podem ser observadas colnias na superfcie da membrana. A vantagem
que o nmero de coliformes determinado para um volume conhecido de gua.

Existem ainda os mtodos chamados Testes para a diagnstico de coliformes ou
Provas IMVIC:

* Prova de Indol - bactrias que possuem triptofanase hidrolisam o triptofano
produzindo indol, cido pirvico e NH3; para enterobactrias esse meio deve conter
peptonas ou tripticase, NaCl, gua destilada e pH 7,1. Usa-se reagente de Kovacs ou
Erlich.

* Vermelho de metila - se baseia no uso de um indicador de pH (vermelho de
metila) que em pH 6,0 amarelo e em pH 4,4 vermelho. Este indicador revela se o
germe produz ou no grandes quantidades de cido, a partir da glicose, atravs da via
cido-mista de fermentao. S os germes que mantm o pH baixo aps 48 a 72 horas e
ultrapassam o sistema de tampo do meio so chamados de VM positivos. O meio
utilizado de Clarck e Lubs. O controle positivo feito com E. coli e o negativo com
Enterobacter aerogenes.

* Vogues Proskauer - as bactrias utilizam a glicose para produzir cido pirvico
e acetil-metil-carbinol (acetona) em 24 a 48 horas. O meio utilizado o de Clarck e Lubs
com pH abaixo de 6,3 (passa de vermelho a amarelo). Utiliza como catalizadores o alfa-
naftol a 5% (intensifica a cor) e o KOH a 40% (agente oxidante).

* Prova do citrato - utilizao do citrato como nica fonte de carbono. O meio
passa de verde a azul quando a bactria citrato positiva.

Observao: E. coli ( + + - - ) e Enterobactrias ( - - + + ).

MICROBIOLOGIA DO LEITE

O leite tem sido considerado o alimento humano mais prximo da refeio. O seu
excepcional valor nutritivo devido aos seus principais constituintes (protenas,
carboidratos, gorduras, sais minerais, vitaminas e gua) e, por este motivo, um
excelente meio de cultura para crescimento de vrias bactrias. O leite desnatado estril
, inclusive, utilizado em laboratrios para o desenvolvimento e manuteno de bactrias
(leite tornasolado).

O leite contm microorganismos no momento em que tirado da vaca e pode ser,
posteriormente, contaminado durante o seu manuseio e processamento, sendo tambm
susceptvel contaminao por germes patognicos. O conhecimento sobre o contedo
microbiano do leite pode ser usado no julgamento de sua qualidade sanitria e das
condies de sua produo, j que, quando as bactrias do leite causam alteraes
qumicas, tais como degradao de gorduras, protenas ou carboidratos, tornam este leite
inaceitvel para o consumo. Certos germes produzem alteraes qumicas desejveis
na fabricao de laticnios (leite fermentado, queijo,) mas as fontes de microorganismos
do leite e as precaues devem ser observadas com o objetivo de reduzir a
contaminao, os rebanhos devem receber inspeo peridica para analisar a sade de
cada animal, o leite deve ser retirado assepticamente e deve conter um nmero pequeno
de bactrias de natureza saprfita. Para que tudo isso acontea faz-se necessrio uma
constante manuteno na limpeza da rea de ordenha e uma reduo nas operaes que
gerem poeira (alimentao, por exemplo). A fonte de contaminao mais importante o
equipamento que entra em contato com o leite (latas, canalizaes, tanques, etc.). Utiliza-
se para a desinfeco gua quente, vapor, cloro e compostos quaternrios de amnia e o
pessoal envolvido no processo de ordenha deve possuir boa sade.

TIPOS DE MICROORGANISMOS DO LEITE

1-Tipos bioqumicos: so aqueles que promovem, no leite bruto, a fermentao
da lactose em cido ltico, desenvolvendo no mesmo um sabor azedo. Os
microorganismos representativos so: Streptococcus lactis, Streptococcus cremoris,
Lactobacilos casei, Lactobacilos plantarum e Microbacterium lacticum, sendo que os
Lactobacilos provm das forragens e do estrume e o Microbacterium, que vem de
utenslios e estrume, pode resistir temperatura de 80 a 85 graus C. A E. coli e
Enterobacter aerogenes so indicadores de qualidade sanitria (lactose - cidos e
gases).

2- Tipos trmicos: so aqueles que obedecem a um timo de temperatura para
crescer e tambm apresentam resistncia trmica. A temperatura elevada (pasteurizao)
provoca a reduo dos microorganismos; a temperatura baixa previne modificaes
qumicas pelos microorganismos. A bactria do leite pode ser psicrfilas, mesfilas,
termfilas e termodricas (resistem pasteurizao e so prejudiciais ao leite - Ex.
Streptococcus termophilus, Bacillus subtilis e Clostridium,sp). A perda do leite na
geladeira d-se pelo acmulo de produtos metablicos de bactrias psicrfilas.

EXAME MICROBIOLGICO DO LEITE

As altas contagens bacterianas nem sempre indicam que h bactrias
patognicas, mas sim que houve uma refrigerao indequada, armazenamento imperfeito
ou contaminao excessiva. Os testes rotineiros do leite bruto foram estipulados pela
Standard Methodes for Examination of Dary Products, e neles esto inclusos testes
microbiolgicos e qumicos.

#Contagem em placa padronizada - utiliza gar em placas para determinao das
populaes bacterianas:
# diluio da amostra at 10 elevado a menos 5 (100000);
# adio de uma quantidade exata da amostra diluda a uma placa de Petri;
# acrscimo do meio com gar, liqefeito e parcialmente resfriado a 43-45 graus
C;
# mistura vigorosa do meio com a amostra;
# incubao a 32 graus C aps solidificao do meio;
# contagem de colnias aps 48 horas de incubao.

O nmero de colnias para ml de leite relatado com a contagem em placa
padronizada por unidade de volume. A contagem obtida no representa todas as
bactrias viveis presentes , mas sim aquelas que so capazes de crescer no meio
fsico particular e na presena do alimento fornecido. Este mtodo fornece uma
estimativa da populao total da amostra.

#Contagem microscpica direta

# marca-se uma lmina com uma rea de 1 cm quadrado;
# sobre esta rea espalha-se uniformemente 0,01 ml de leite;
# seca o esfregao, cora e leva ao microscpio ptico para determinar o nmero
de bactrias.
# Resultado: mdia de bactrias contadas em 10 campos multiplicada pela
constante microscpica ou fator microscpico, multiplicada pela diluio e multiplicada por
100 (amostra de 0,01).

Esta tcnica tem a desvantagem de contar clulas bacterianas, ou seja, conta as
bactrias vivas e as mortas.

#Teste da redutase - o leite, aps expor-se ao ar, adquire um potencial de xido-
reduo de aproximadamente 300mV positivos. Como as bactrias crescem no leite,
elas consomem oxignio e produzem substncias redutoras que baixam o potencial de
oxido-reduo a um valor negativo. A taxa de desvio do potencial de oxido-reduo
depende do nmero e da espcie da bactria; esse desvio pode ser acompanhado pela
adio de um indicador aproriado amostra de leite e posterior incubao sob condies
pre-determinadas. O azul de metileno e a rezasurina so dois indicadores teis no
teste da redutase.

# Transformaes entre as formas oxidadas e reduzidas destes compostos.

1) Azul de metileno: forma oxidvel do leite = azul - forma reduzida do leite = leuco azul
de metileno (incolor).
2) Rezasurina: azul ardsia, forma a resorfina que rosa e em seguida a dihidroresorfina
que incolor.

O tempo de reduo inversamente proporcional ao contedo bacteriano inicial
da amostra. As desvantagens incluem as condies mais favorveis para
organismos mesfilos do que psicrfilos e termfilos.

#Teste da fosfatase - a fosfatase uma enzima que est presente no leite cru e
destruda por uma pasteurizao correta. Pode-se testar a pasteurizao do leite
averiguando a presena ou ausncia desta enzima.

# leite bruto (enzima fosfatase ?);
# acrescenta dissdio-fenil-fosfato (substrato);
# forma fenol e fosfato (produto);
# a quantidade de fenol liberado pode ser avaliada pela adio de um
reagente que se mostra azul na presena do composto.

DOENAS TRANSMITIDAS PELO LEITE

Diversas doenas podem ser transmitidas pelo leite, sendo as fontes de
contaminao a vaca, o homem ou ambos.

# Primeira seqncia: agente patognico da vaca infectada -- leite -- homem ou vaca (
brucelose, tuberculose e mastite).
# Segunda seqncia: agente patognico do homem (doente ou portador) -- leite --
homem (febre tifide, difteria, disenteria e escarlatina).

A vaca est sujeita a infeces por Streptococcus dos grupos A e B,
Salmonella,sp; Staphilococcus aureus do grupo III e Coxiella burnett (febre Q), que
podem sair do bere da vaca para o leite causando mastites nas vacas e gastroenterites
no homem; alm das espcies de Brucella: B. melitensis (caprinos), B. suis (sunos) e
B. abortus no gado. As Brucella, sp tm crescimento lento e devem ser mantidas por
pelo menos 3 semanas para serem decantadas, devem ser semeadas em meios
enriquecidos [aconselha-se o uso de gar tripticase - soja (4 a 7 dias); so cocobacilos
Gram negativos, catalase positiva, citocromo-oxidase positivo, lactose negativa,
sacarose negativa, manitol negativo, so mveis e no so hemolticas.

Os germes proteolticos (ex. Bacillus subtilis, B. cereus, Pseudomonas,sp e
Proteus,sp) degradam a casena at peptdeos que podem ser, ainda, decompostos em
aminocidos. A protelise pode ser precedida de coagulao de casena pela ao
enzimtica da renina.

Os microrganismos lipolticos do leite (ex. Pseudomonas fluorescens, Candida
lipolitica e Penicillium,sp) hidrolizam a gordura do leite at glicerol e cidos graxos
dando gosto ranoso ao leite.

BACTERIOLOGIA DOS ALIMENTOS

Os alimentos passam por vrias etapas de preparao. Numa dessas etapas eles
podem ser contaminados por microorganismos e, a menos que o crescimento e
metabolismo desses germes possam ser controlados, esses alimentos sofrero um
processo de deteriorao (existem vrios tipos de deteriorao). Os alimentos so
compostos por protenas, carboidratos e gordura, todos possveis substratos nutritivos
para um ou outro tipo de germe, lembrar que alguns microorganismos so teis na
preparao de tens alimentares especiais (produtos fermentados como pickles,
azeitonas, chucrutes,etc.). Os mtodos de preservao de alimentos empregam
processos fsicos ou qumicos.

FLORA BACTERIANA DOS ALIMENTOS FRESCOS

As superfcies dos vegetais, carnes e frutas so contaminadas por vrios
micrbios, sendo que a quantidade desta contaminao mostra a populao microbiana
do ambiente, a condio do produto bruto, os mtodos de manipulao, o tempo e as
circunstncias de armazenamento do alimento. bom que o nvel de contaminao do
alimento bruto seja pequeno porque, se for grande, sugere deteriorao do mesmo.

# Carnes - o alimento abatido tem uma contaminao externa pequena e os tecidos
internos so estreis. Os microorganismos de carnes cortadas e refrigeradas so os
mesmos do ambiente e instrumentos de corte. Bactrias comuns na contaminao de
carnes: Pseudomonas,sp; Staphilococcus,sp; Enterobacterias e Coliformes.

# Aves - aves depenadas e visceradas possuem flora bacteriana de superfcie (pele), que
se origina dos germes normalmente presentes nas aves vivas, e de manipulaes durante
o abate. A contagem de colnias para 2 cm quadrado de pele deve ser entre 100 e 1000
col/cm quadrado. A contagem de colnias nunca pode ficar at 100 vezes maior.

# Ovos - o interior do ovo estril. Qualquer contaminao se deve s condies
sanitrias sob as quais o ovo foi manipulado, ou s condies de armazenamento.
Bactrias e bolores podem entrar no ovo atravs de fraturas na casca. Ex:Salmonella,sp

# Frutas e vegetais - so normalmente suceptveis s infeces bacterianas, micticas ou
virais. A quebra dos tecidos na colheita pode facilitar a entrada de microorganismos. O pH
entre 2,3 e 5,0 das frutas ajuda o crescimento de fungos e o pH variando entre 5,0 e
7,0 dos vegetais possibilita o crescimento das bactrias.

# Peixes e moluscos - a flora bacteriana destes reflete a qualidade das guas nas quais
foram colhidos. Os frutos do mar so grandes transmissores de agentes patognicos. Os
moluscos podem ser fontes de hepatites virais, os camares e ostras albergam o Vibrio
parahaemolyticus, o qual causa gastroenterite.

# Po - apesar do cozimento no forno, ainda persistem esporos de Bacillus,sp;
Clostridium,sp e fungos que germinaro para produzir uma nova flora caso no haja
preservao.

DETERIORAO DOS ALIMENTOS

A maior parte dos alimentos serve como meio de cultura para o crescimento de
muitos microorganismos diferentes. Uma vez garantida a oportunidade de crescimento, os
microorganismos produziro alteraes no aspecto, sabor, cheiro e outras caractersticas
dos alimentos. Estes processos de degradao podem ser descritos como abaixo:
1) Alimentos proteicos mais germes proteolticos = aminocidos, aminas,
amnia e sulfeto de hidrognio.
2) Alimentos carboidratados mais germes fermentadores de carboidratos =
cidos, lcool e gases.
3) Alimentos gordurosos mais germes lipolticos = cidos graxos e glicerol.

Alguns germes alteram a colorao de alimento produzindo pigmentos e algumas
substncias muciloginosas podes se desenvolver em alimentos contaminados por
germes capazes de sintetizar polissacrides.

OS ALIMENTOS ENLATADOS - TIPOS DE DETERIORAO LIGADOS AO pH

#Termfilos - acidificao (flat sour) - pH 5,3 e acima: ex. milho e ervilha (Bacillus
stearothermophilus). O lquido torna-se turvo, azedo e com odor levemente anormal.

#Anaerbios termfilos - pH 4,8 e acima: ex. milho e espinafre (Clostridium
thermosacarolyticum). Odor butrico, azedo.

#Deteriorao sulfdrica - pH 5,3 e acima: ex. milho e ervilha (Clostridium sporogenes).
Cheiro de ovo podre.

# Mesfilos

#Anaerbios putrefativos - pH 4,8 e acima : ex. milho e aspargo (Clostridium
sporogenes). Odor ptrido.

#Anaerbios butricos - pH 4,0 e acima: ex. tomate e pera (Clostridium butyricum).
Alimento fermentado, odor butrico.

#Acidificantes (flat sour) - ex. suco de tomate (Bacillus thermoacidurons). Ausncia de
odor e sabor.

#Lactobacilus,sp - pH 3,7 a 4,5: ex. frutas, lata estufada.

#Leveduras - pH 3,7 e abaixo: ex. frutas e latas estufadas. Odor de fungos.

#Bolores - pH 3,7 e abaixo: ex. frutas, lata plana. Odor de mofo.

EXAME MICROBIOLGICO DOS ALIMENTOS

Esquema geral - amostra do alimento (preparao do homogeneizado).
Exame microscpico - a fresco e corado pelo Gram

# Contagem total de colnias - identificao de gneros ou espcies de: Coliformes, S.
faecalis, S. aureus, Salmonella,sp; Shiguella,sp; Vibrio parahaemolitycus;
Clostridium bolutium; C. perfringes; Bacillus cereus e outros.

# Contagem diferencial - categoria de microorganismos.

# Tipos fisiolgicos - aerbios, anaerbios, psicrfilos, mesfilos ou termfilos.

# Tipos metablicos - proteolticos, lipolticos ou sacarolticos.

As tcnicas fluorescentes so altamente seguras e rpidas.

CONTROLE DAS BACTRIAS DOS ALIMENTOS

* Irradiao ultravioleta ou com raios gama;
* Dissecao (desidratao) - uvas, leite em p;
* Baixa temperatura;
* Calor - 121 graus C por 15 minutos;
* Sal - carnes salgadas;
* Acar - concentraes elevadas - no cresce bactrias, mas deixa crescer
fungos;
* Defumao - primeiro salga e depois defuma;
* Qumicos - propionato de clcio (po), benzoato de sdio (cidra e vegetais),
nitratos (carnes), cido srbico (queijos - no cresce fungo - evita o Aspergillus,sp).


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