de Nitrognio 281 ISSN 1517-5111 ISSN online 2176-5081 Fevereiro, 2010 Documentos ISSN 1517-5111 ISSN online 2176-5081 Fevereiro, 2010 Documentos 281 Ida de Carvalho Mendes Fbio Bueno Reis Junior Mariangela Hungria da Cunha Embrapa Cerrados Planaltina, DF 2010 20 Perguntas e Respostas sobre Fixao Biolgica de Nitrognio Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuria Embrapa Cerrados Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento Exemplares desta publicao podem ser adquiridos na: Embrapa Cerrados BR 020, Km 18, Rod. Braslia/Fortaleza Caixa Postal 08223 CEP 73310-970 Planaltina, DF Fone: (61) 3388-9898 Fax: (61) 3388-9879 http://www.cpac.embrapa.br sac@cpac.embrapa.br Comit de Publicaes da Unidade Presidente: Fernando Antnio Macena da Silva Secretria-Executiva: Marina de Ftima Vilela Secretria: Maria Edilva Nogueira Superviso editorial: Jussara Flores de Oliveira Arbus Equipe de reviso: Francisca Elijani do Nascimento Jussara Flores de Oliveira Arbus Assistente de reviso: Elizelva de Carvalho Menezes Normalizao bibliogrfca: Paloma Guimares Correa de Oliveira Editorao eletrnica: Leila Sandra Gomes Alencar Capa: Leila Sandra Gomes Alencar Foto(s) da capa: Ida de Carvalho Mendes Impresso e acabamento: Divino Batista de Sousa Alexandre Moreira Veloso 1 a edio 1 a impresso (2010): tiragem 100 exemplares Edio online (2010) Todos os direitos reservados A reproduo no-autorizada desta publicao, no todo ou em parte, constitui violao dos direitos autorais (Lei no 9.610). Dados Internacionais de Catalogao na Publicao (CIP) Embrapa Cerrados M538v Mendes, Ida de Carvalho. 20 perguntas e respostas sobre fxao biolgica de nitrognio / Ida de Carvalho Mendes, Fbio Bueno Reis Junior, Mariangela Hungria da Cunha. Planaltina, DF : Embrapa Cerrados, 2010. 19 p. (Documentos / Embrapa Cerrados, ISSN 1517-5111, ISSN online 2176-5081 ; 281). 1. Perguntas e respostas. 2.Nitrognio - fxao. I. Reis Junior, Fbio Bueno. II. Hungria, Mariangela. III. Ttulo. IV. Srie. 631.417 - CDD 21 Embrapa 2010 Autores Ida de Carvalho Mendes Engenheira Agrnoma, Ph.D. Pesquisadora da Embrapa Cerrados mendesi@cpac.embrapa.br Fbio Bueno dos Reis Junior Engenheiro Agrnomo, Ph.D. Pesquisador da Embrapa Cerrados fabio@cpac.embrapa.br Mariangela Hungria da Cunha Engenheira Agrnoma, Ph.D. Pesquisadora da Embrapa Soja hungria@cnpso.embrapa.br Apresentao Entre os nutrientes minerais essenciais s plantas, o nitrognio (N) o mais caro, o que consome mais energia e, potencialmente, o mais poluente, sendo geralmente o mais limitante produo vegetal. No entanto, no Brasil, o uso do nitrognio bem menor quando comparado a outros pases, o que se deve, em parte, utilizao e busca por sistemas produtivos que se benefciem da fxao biolgica do nitrognio atmosfrico. Neste documento, so disponibilizadas informaes bsicas e atualizadas sobre esse importantssimo processo biolgico, seus benefcios e sua utilizao na agricultura brasileira. Jos Robson Bezerra Sereno Chefe-Geral da Embrapa Cerrados Sumrio Introduo ................................................................................... 9 20 Perguntas Bsicas ................................................................. 10 Abstract ................................................................................... 19 20 Perguntas e Respostas sobre Fixao Biolgica de Nitrognio Ida de Carvalho Mendes Fabio Bueno Reis Junior Mariangela Hungria da Cunha Introduo O grupo de pesquisa em Microbiologia do Solo da Embrapa Cerrados foi criado em 1975. O incio dos trabalhos coincidiu com a expanso da cultura da soja no Cerrado e concentrou-se exatamente na busca por estirpes de bactrias fxadoras de nitrognio efcientes e adaptadas s condies do Brasil Central. O objetivo principal desses estudos foi colaborar para o aumento da produtividade da soja, visando fornecer todo o nitrognio necessrio para as plantas via fxao biolgica (FBN). Esse trabalho culminou com a seleo e lanamento das estirpes de Bradyrhizobium elkanii, 29W e SEMIA 587, em 1980, e das estirpes de Bradyrhizobium japonicum, CPAC-7 (SEMIA 5080) e CPAC-15 (SEMIA 5079), em 1993, que hoje so recomendadas para a formulao dos inoculantes comerciais produzidos no Brasil para a cultura da soja. Ainda nas dcadas de 1980 e 1990, foram lanadas estirpes para o cultivo do feijoeiro (CPAC V-23), da ervilha (CPAC EV-5 e CPAC EV-6 ) e da lentilha (CPAC L-3 e CPAC L-12). A parceria com a Embrapa Soja, desde o incio da dcada 1990, tem sido fundamental para o sucesso desses estudos e resultaram, entre outros, no lanamento da estirpe CPAC H-12 para o cultivo do feijo em 2008 e no sequenciamento da estirpe CPAC-15. 10 20 Perguntas e Respostas sobre Fixao Biolgica de Nitrognio A importncia da FBN em temas como a segurana alimentar e as mudanas climticas globais cresce a cada ano. Em 2009, a FBN foi selecionada pela plataforma ABC (Agricultura de Baixo Carbono) como um dos mecanismos a serem adotados pelo Brasil para mitigar os efeitos de gases de efeito estufa juntamente com o plantio direto, a integrao lavoura/pecuria e a recuperao de pastos degradados. Este documento voltado para estudantes e o pblico em geral que pretendem obter informaes bsicas e atualizadas sobre a FBN, e busca, alm de informar, chamar a ateno das pessoas para esse processo biolgico to importante quanto fascinante. 20 Perguntas Bsicas O que a fxao biolgica do nitrognio (FBN)? o processo por meio do qual o nitrognio presente na atmosfera (N 2 ) convertido em formas que podem ser utilizadas pelas plantas. A reao catalisada pela enzima nitrogenase, que encontrada em todas as bactrias fxadoras. Em termos de agricultura, a simbiose entre bactrias fxadoras de nitrognio (denominadas rizbios) e leguminosas (famlia de plantas qual pertencem a soja, o feijo, a ervilha entre outras) a mais importante. Todas as plantas fxam nitrognio biologicamente em simbiose com os rizbios? Infelizmente no. A simbiose praticamente restrita s leguminosas e se caracteriza pela formao de estruturas especializadas nas razes, chamadas ndulos, nos quais ocorre o processo de FBN. Aps a formao de ndulos nas razes, a bactria passa a fxar o nitrognio atmosfrico em compostos orgnicos que so utilizados pelas plantas, eliminando ou diminuindo a necessidade de uso de adubos nitrogenados. Isso quer dizer que apenas as leguminosas so benefciadas pela FBN? No. Outras espcies de bactrias capazes de fxar o N 2 atmosfrico j foram encontradas em associao com gramneas como o milho, o trigo e a cana-de-acar. Nessas plantas, no ocorre a formao de ndulos nas razes e as quantidades de N fxadas so mais baixas. Por essa razo, no possvel dispensar a utilizao de adubos nitrogenados 11 20 Perguntas e Respostas sobre Fixao Biolgica de Nitrognio nessas lavouras. Microrganismos fxadores de nitrognio tambm j foram encontrados em plantas como o caf, dend, mandioca, mamo e banana, e a sua contribuio para essas plantas tem sido objeto de vrios trabalhos de pesquisa. J que no h formao de ndulos, onde fcam localizadas as bactrias que se associam com plantas no leguminosas? Localizam-se preferencialmente na regio rizosfrica, na superfcie das razes ou at mesmo dentro dos tecidos de razes, colmos e folhas, quando so conhecidas como bactrias endftas ou endofticas. Em que consiste o processo de inoculao? A inoculao o processo por meio do qual bactrias fxadoras de nitrognio, selecionadas pela pesquisa, so adicionadas s sementes das plantas antes da semeadura. A inoculao feita com um produto chamado inoculante. Como a tecnologia da inoculao chega ao agricultor? O agricultor compra um produto chamado inoculante. No inoculante, um caldo com elevada concentrao de bactrias misturado a um veculo, que pode ser um solo muito rico em matria orgnica denominado turfa (inoculante em p), formulaes lquidas (inoculante lquido), ou combinaes de turfa-lquido ou gis. O produto fnal deve conter no mnimo 1 bilho de clulas de bactrias fxadoras de N 2 vivas por cada g ou ml de inoculante. Como deve ser feita a inoculao? A operao de inoculao deve ser feita sombra, nas horas mais frescas do dia (pela manh ou noite). Devem-se seguir as recomendaes de dosagem e aplicao fornecidas pelo fabricante do inoculante. Em solos de primeiro ano de plantio, a dose recomendada o dobro da dose normal. Sementes bem inoculadas fcam recobertas, por uma camada fna e uniforme de inoculante. Aps a inoculao, as sementes devem ser secas sombra e semeadas em, no mximo, 24 horas, desde que fquem protegidas do sol e umidade. Caso isso no seja possvel, deve-se repetir a inoculao no dia do plantio. 12 20 Perguntas e Respostas sobre Fixao Biolgica de Nitrognio O tratamento das sementes com fungicida e (ou) micronutrientes deve ser feito antes ou depois da inoculao? Antes. muito importante que o produtor atente para o fato de que o inoculante no pode ser misturado com os fungicidas e micronutrientes, pois os mesmos so, em maior ou menor grau, txicos para as bactrias. De maneira geral, fungicidas base de metais pesados, como o zinco e o cobre, e alguns inseticidas organofosforados prejudicam a nodulao de leguminosas. Os herbicidas e os defensivos contra nematoides so menos txicos. No caso de sementes tratadas com fungicidas e inoculadas, a semeadura deve ser efetuada em, no mximo, 12 horas. Caso isso no seja possvel, as sementes devem ser inoculadas novamente. Quais os cuidados que se deve ter ao comprar os inoculantes? a) Verifcar se o produto registrado pelo Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento (Mapa), evitando produtos sem a garantia de estirpes (tambm conhecidas como cepas) recomendadas pela pesquisa e de qualidade duvidosa. b) Verifcar o prazo de validade do inoculante, que deve constar na embalagem. c) Certifcar-se de que o produto estava conservado em condies adequadas de temperatura (no mximo 30 C) e umidade. Aps a aquisio, conservar o inoculante em local arejado e protegido do sol at o momento de sua utilizao, uma vez que o inoculante contm bactrias sensveis ao calor. d) No utilizar um inoculante registrado para uma cultura especfca em outra planta. Por exemplo, no utilizar inoculante para soja no plantio de feijo. e) Em caso de dvida sobre a qualidade ou procedncia do inoculante, acionar o fscal do Mapa responsvel pela sua rea, para retirar amostras do local de venda e envi-las para anlise em laboratrios credenciados. 13 20 Perguntas e Respostas sobre Fixao Biolgica de Nitrognio Quais os principais fatores responsveis pelo insucesso da inoculao? a) Utilizao de inoculantes de m qualidade: os inoculantes devem ser produzidos com veculo esterilizado e conter no mnimo um bilho de clulas por g ou ml do produto, quando do momento da inoculao. Muitas vezes a m qualidade do inoculante pode ser atribuda s condies inadequadas de armazenamento e transporte. b) Realizao do processo de inoculao de forma inadequada. c) Problemas de acidez do solo e defcincia nutricionais, promovidas por calagem e (ou) adubao de plantio realizadas de forma incorreta. d) Adio de produtos txicos s sementes, tais como fungicidas, inseticidas e nematicidas. e) Temperaturas elevadas e defcincia hdrica logo aps a semeadura. Existem alternativas para a inoculao das sementes? Recentemente, a inoculao no sulco de plantio vem ganhando popularidade. Essa pode ser uma boa alternativa principalmente no caso de sementes tratadas com agrotxicos e micronutrientes. Resultados de pesquisas indicam que a dose de inoculante necessria para a aplicao no sulco deve ser, no mnimo, seis vezes superior dose indicada para a inoculao das sementes. Essa tecnologia j recomendada para a cultura da soja desde a safra 2003/2004. Qual a importncia e as principais vantagens do processo de inoculao para a lavoura da soja? No Brasil, graas ao processo de FBN, a inoculao substitui totalmente a necessidade do uso de adubos nitrogenados nas lavouras de soja. O inoculante contm bactrias selecionadas do gnero Bradyrhizobium que, quando associadas s razes de soja, conseguem converter o N 2 da atmosfera em compostos nitrogenados, em quantidades de at 300 kg de N/ha, que sero utilizados pela planta. 14 20 Perguntas e Respostas sobre Fixao Biolgica de Nitrognio Alm da grande economia obtida quando se substitui a utilizao de fertilizantes nitrogenados industriais pela inoculao da soja com bactrias do gnero Bradyhrizobium, essa uma tecnologia extremamente simples e que no polui o meio ambiente. Devido a sua baixa efcincia de aproveitamento pelas plantas, em torno de 50% dos adubos nitrogenados aplicados ao solo perdido por processos como a lixiviao, desnitrifcao e volatilizao, causando a poluio de mananciais hdricos (rios, lagos, lenis freticos) e contribuindo para a reduo da camada de oznio que envolve o planeta, com consequente efeito no aquecimento global. Qual o custo desse inoculante para o produtor? Apesar do investimento em pesquisa e tecnologia, o custo do inoculante, sufciente para o plantio de um hectare, geralmente no ultrapassa o valor de R$ 8,00. A utilizao de adubos nitrogenados na lavoura da soja necessria? No. Desde que o agricultor utilize um inoculante de boa qualidade e faa a inoculao da forma adequada, no necessria a utilizao de adubos nitrogenados nessa cultura. O uso de pequenas doses de N no sulco de plantio, como doses de arranque (20 a 30 kg de N/ha na semeadura), ou mesmo altas doses de N (200 kg/ha), no promove nenhum benefcio em termos de aumentos de produtividade da lavoura. Alis, resultados recentes da pesquisa indicam que no existe razo para a utilizao desses insumos em nenhum estgio do cultivo da soja no Brasil. Alm disso, doses de N no sulco superiores a 30 kg de N/ha podem promover inibio na nodulao, retardando o processo de formao de ndulos, o que no desejvel. O que reinoculao da soja? Ela necessria? Reinoculao o termo utilizado para descrever a inoculao da soja em reas que j haviam sido cultivadas com soja e recebido inoculantes anteriormente. Solos brasileiros que nunca foram cultivados com soja no possuem populaes nativas de rizbio capazes de nodular a soja. Nesses solos, se a soja for plantada sem inoculao, no haver 15 20 Perguntas e Respostas sobre Fixao Biolgica de Nitrognio formao de ndulos. Entretanto, aps o plantio sucessivo de soja inoculada, ocorre o estabelecimento de populaes da bactria no solo. Por essa razo, quando a soja no-inoculada plantada em reas que j foram inoculadas anteriormente, ocorre a formao de ndulos nas razes. Contudo, os resultados de pesquisa tm mostrado que vantajoso inocular as reas de produo de soja a cada safra e que os incrementos mdios na produo de gros giram em torno de 4% a 9%. O feijo pode ser inoculado com rizbio? Pode. Entretanto, devido a uma srie de fatores relacionados bactria, planta e ao meio-ambiente, no feijoeiro, de modo diferente da cultura da soja, a inoculao com bactrias fxadoras de N nem sempre sufciente para fornecer todo o N exigido pela cultura. Mesmo assim, vrios resultados de pesquisa indicam que o feijoeiro pode se benefciar consideravelmente do processo biolgico, principalmente porque os inoculantes incluem estirpes mais efcientes. Em Latossolos de Cerrado, sob condies de sequeiro, trabalhos conduzidos na Embrapa Cerrados evidenciaram ganhos mdios com a inoculao de 63 a 290 kg/ha, dependendo da cultivar. Quando o feijoeiro cultivado sob condies irrigadas, onde todo o investimento tecnolgico feito no sentido de maximizar o rendimento da cultura, geralmente o uso da inoculao no garante todo o N necessrio para que tetos de produtividade sejam atingidos, sendo necessria a suplementao com adubao nitrogenada. Entretanto, trabalhos conduzidos no Distrito Federal, sob condies irrigadas, em um solo Gley Hmico de vrzea sem populaes nativas de rizbio, reportaram ganhos de at 1.500 kg/ha em relao testemunha no inoculada em cultivares responsivas nodulao (esses ganhos foram semelhantes aos obtidos com 100 kg N/ha). Tambm no Paran, experimentos da Embrapa Soja apresentaram respostas expressivas do feijoeiro inoculao, com ganhos mdios de 450 kg gros/ha, utilizando as estirpes de Rhizobium tropici CPAC H12 e CPAC H20. As produtividades obtidas com a inoculao foram comparadas a das plantas que receberam 60 kg de N/ha. 16 20 Perguntas e Respostas sobre Fixao Biolgica de Nitrognio Atualmente, trs estirpes de Rhizobium so autorizadas para a fabricao de inoculante comercial de feijo no Brasil, a CIAT 899 (ou SEMIA 4077), isolada pelo CIAT, na Colmbia; a PRF 81(ou SEMIA 4080), isolada no Paran pelo IAPAR e pela Embrapa Soja, e que permitiu ganhos de at 906 kg/ha em relao ao controle no-inoculado nos trabalhos de seleo; e a CPAC H-12 (ou SEMIA 4088) isolada no Distrito Federal. Pode-se afrmar que a FBN nessa cultura realmente importante, pois se estima que mesmo as estirpes nativas podem contribuir com at 40% do N presente na planta. A adoo da tcnica de inoculao com estirpes selecionadas pela pesquisa, aliada ao uso de cultivares melhoradas, tcnicas de manejo integrado de pragas e doenas e de correo e adubao do solo poder, no mnimo, duplicar a mdia de produtividade nacional a um baixo custo para o agricultor. Tambm importante ressaltar que, tanto sob condies experimentais, como ao nvel de fazenda, tm-se observado que os nveis de produtividade dos tratamentos inoculados e suplementados com N (doses de at 80 kg N/ ha) so superiores aos nveis de produtividade dos tratamentos onde somente se utiliza a adubao nitrogenada. Alm da soja e do feijo, quais as outras leguminosas que se benefciam da inoculao com rizbio? A ervilha, lentilha, feijo-caupi, leguminosas forrageiras, arbreas e de adubo verde. No caso da ervilha e da lentilha, a Embrapa Cerrados selecionou e lanou estirpes de rizbio adaptadas s condies de Cerrado, capazes de substituir totalmente o uso de adubos nitrogenados nessas culturas, de modo semelhante ao que ocorre com a soja. Para o feijo-caupi, em trabalhos coordenados pela Embrapa Agrobiologia, a seleo de estirpes efcientes e adaptadas s condies regionais culminou com o lanamento da estirpe BR 3267, que possibilitou incrementos de produtividade de at 40% em condies experimentais e de at 52% nas reas de agricultores experimentadores. 17 20 Perguntas e Respostas sobre Fixao Biolgica de Nitrognio Em relao ao uso de leguminosas forrageiras, dados experimentais indicam que pastagens com uma composio botnica contendo, aproximadamente, 30% de leguminosas consorciadas com gramneas seriam sufcientes para manter a produtividade vegetal e animal, assim como a fertilidade do solo no longo prazo. Alm de incorporarem N fxado simbioticamente, as leguminosas contribuem efetivamente para a produo e sustentabilidade dos sistemas de pastejo, especialmente em regies com limitaes ambientais. A utilizao de leguminosas arbreas nos programas de recuperao de reas degradadas outro exemplo de sucesso onde a FBN tem papel de destaque. O uso de leguminosas nativas ou introduzidas, como Acacia spp., Albizia spp. e Mimosa spp., entre outras, em associao com bactrias diazotrfcas selecionadas pela pesquisa e fungos micorrzicos, tem sido preconizado para a revegetao de solos depauperados, com o objetivo de restabelecer sua fertilidade. No Brasil j existem inoculantes recomendados para gramneas? No Brasil, em 2009, foi lanado o primeiro inoculante para no- leguminosas, recomendado para as culturas do milho e do arroz e contendo bactrias Azospirillum brasilense selecionadas pela Embrapa Soja e pela Universidade Federal do Paran (UFPR). Os fabricantes apontam um potencial para economia de at 50% na utilizao de fertilizantes nitrogenados industriais pelo uso desses inoculantes e o lanamento de novos produtos comerciais para essas gramneas, e o trigo esperado para 2010. Acredita-se que esse seja apenas o comeo de uma srie de inoculantes para plantas no leguminosas a serem comercializados no Brasil. A cana-de-acar, por exemplo, naturalmente colonizada por bactrias fxadoras de N 2 , mas trabalhos recentes tm mostrado o potencial da inoculao dessas plantas com bactrias selecionadas pela pesquisa. Como desdobramento dos resultados alcanados nesses estudos, a Embrapa Agrobiologia lanou um produto que vem sendo utilizado em reas experimentais e avaliado em usinas produtoras de lcool e acar espalhadas pelo pas. A princpio, a utilizao da inoculao 18 20 Perguntas e Respostas sobre Fixao Biolgica de Nitrognio tem como principal impacto a substituio de parte do N utilizado na cana de primeiro ano. Os resultados tm mostrado que, com o uso do inoculante, cerca de 30 kg de N/ha/ano podem deixar de ser aplicados. A previso de que o inoculante esteja disponvel brevemente para o mercado. Alm da nutrio nitrogenada, a inoculao com as bactrias fxadoras de N 2 pode trazer outros benefcios para as plantas? Alm da FBN, a maioria dessas bactrias tambm conhecida pela sua capacidade de produzir hormnios de crescimento das plantas. A produo dessas substncias promotoras de crescimento pode estimular o aumento da densidade de pelos radiculares, da taxa de aparecimento de razes secundrias e da superfcie radicular. Esse incremento resulta em melhoria na absoro de gua e nutrientes, aumentando assim a capacidade de a planta produzir e suportar estresses ambientais. O que deve ser feito para obtermos ainda mais benefcios da associao entre as bactrias fxadoras de nitrognio e as plantas? As abordagens de pesquisa devem priorizar a realizao de estudos que permitam o aprimoramento contnuo da FBN em plantas cultivadas. Assim, deve-se garantir que as novas variedades e cultivares estabeleam associaes mais efcazes com as bactrias. Em relao s estirpes, os programas de seleo devem continuar. Finalmente, necessrio dar continuidade ao desenvolvimento e validao de novos inoculantes e tecnologias de inoculao, dos quais se pode citar como exemplos a inoculao no sulco, para a compatibilizao com o tratamento de sementes com fungicidas e o enriquecimento das sementes em molibdnio, para garantir maiores taxas de FBN. O investimento na pesquisa e difuso da FBN, por meio de estudos multidisciplinares e integrados, em reas como microbiologia, cincia do solo, melhoramento de plantas, manejo de culturas, etc., pode trazer um grande benefcio para o planeta, aumentando a produo de alimentos e reduzindo o uso de combustveis fsseis, graas diminuio do uso de fontes externas de fertilizantes nitrogenados. 19 20 Perguntas e Respostas sobre Fixao Biolgica de Nitrognio 20 Questions and Answers about Biological Nitrogen Fixation Abstract Among the mineral nutrients essential to plants, nitrogen (N) is the most expensive, energy consuming and, potentially, the most pollutant, generally being the most limiting to the vegetal production. Nevertheless, in Brazil, the use of nitrogen is much lower when compared to other countries, partially due to the search and utilization of agricultural production systems based on the biological nitrogen fxation. This document ofers basic and actualized information about this important biological process, its benefts and utilization in the Brazilian agriculture. Index Terms: diazotrophic bacteria, growth promotion, inoculant, soybean, common bean, gramineaceous.
Métodos Quantitativos para Determinação de Características Bioquímicas e Fisiológicas Associadas Com Bactérias Promotoras de Crescimento Vegetal - Embrapa