Você está na página 1de 6

lteo (Armstrong et aI., 1983).

Deve-se considerar a qualidade dos corpos lteos quanto


a morfologia e a colorao e, em princpio,
evitar usar qualquer possvel receptora que
apresente um ou mais folculos de tamanho
grande, luteinizado ou no. Esse tipo de folculo responsvel por um perftl hormonal atpico conforme descrito por Baril et alo(1993).
Consideraes
Finais
A TE constitui-se de uma sucesso de etapas tcnicas bem definidas. Os rendimentos
parciais de cada etapa sendo satisfatrios podem levar ao nascimento de dois a seis produtos oriundos de transferncia por doadora
tratada. A complexidade do mtodo, associado a esse resultado final, relativamente modesto quanto a produo de crias, limita o
interesse econmico da TE em caprinos.
A etapas tcnicas sendo adequadas, a eficincia das mesmas fica condicionada perfeita realizao prtica. A equipe dever ter
completo controle de cada etapa da cadeia,
pois uma boa formao terica e prtica
um pr-requisito para constituio de uma
equipe de TE. Ressalta-se que o sucesso da
TE tambm, guarda relao positiva com a
condio corporal e a sade das doadoras e
receptoras. Finalmente, o desenvolvimento
de novas biotcnicas, tais como a sexagem,
a clonagem e a transgnese oferecero TE
uma maior abrangncia de suas aplicaes,
favorecendo ampliao do uso deste mtodo de reproduo em caprinos.

Referncias Bibliogrficas
AGRAWAL,K.P.,BHATTACHARYA,
N.K. Nonsurgical transplantation of embryos in goats.
In: 11INTERNATIONAL CONFERENCE
ON GOATS PRODUCTION AND DISEASE, 1982, Tucson. Proceedings... Tucson:
Universityof Arizona. 1982. p.340.
AKBAR,AM., NETT, RM., NISWENDER,
G.D. Metabolic clearence and secretion rates
of gonadotrophin at different stages of the es192

trous cyclein ewes. Endocrinology, Bethesda,


v. 94, n.5, p.1318-1324, 1974
AMOROSO, E.C., GRIFFITHS, w.F.B., HAMILTON, w.J, The early development ofthe
goat (Capra hircus). Journal of Anatomy,
London, v.76, n.3, p.377-406, 1942.
ANDRIOLI-PINHEIRO, A Mtodos de colheita
e de inovulao de embries caprinos (Capra hircus, LINNAEUS, 1758) e os efeitos
de re-petidas colheitas na vida reprodutiva
de doadoras. So Paulo, 1993. 100 p. Dissertao Mestrado. Curso de Ps-Graduao em
Medicina Veterinria, Universidade de So
Paulo, 1993.
ARMSTRONG, D.T., EVANS, G. Factors in.,:fluencing success of embryo transfer in goats.
Theriogenology, Los Altos, v.19, n.l, p.3142, 1983.
ARMSTRONG, D.T.; PFITZNER, AP., WARNES, G.M., et aI. Superovulation treatment
and embryotransfer inAngora goats. Journal
of Reproduction and Fertility, Cambridge,
v.67, nA, pA03-41O, 1983.
BARIL, G., VALLET,J.C. Time of ovulation in
dairy goats induced to superovulate with pordne folliclestimulating hormone .during and
out of the breeding season. Theriogenology,
Los Altos, v.34, n. 3, p.303-311, 1990.
BARIL,G., CASAMITJANA,P., PERRIN, J., et
aloEmbryo production, freezing and transfer
inAngora,Alpineand Saanen goats. Zuchthygenie, Hamburg, v.24, n.3, p.1O1-115, 1989.
BARIL,G., CHEMINEAU, P., COGNI, Y., et
aloManuel de formarion pour I'insminarion
artificielle chez les ovins et les caprins. Rome: Italie, 1993a. 231p.
BARIL,G., POUGNARD, J.L., FREITAS,Y.J.F.,
et a!.A new method for controllingthe precise
time of occurrence of the preovulatory
gonadotropin surge in superovulated goats.
Theriogenology, LosAltos, vA5, n. 4, p.697706, 1996.
BARRY,D.M., VANNIEKERK, C.H., RUST, J.,
et aloCervicalembryo collectionin sheep after
ripening of the cervix with prostaglandin E2
and estradiol. Theriogenology, Los Altos,
v.33, n.l, p.190, 1990.
BATTYE,K.M., FAIRCLOUGH, RJ., CAMERON, Aw.N., et aI. Evidence for prostaglan-

din involvement in early luteal regression of


the superovulated nany goats (Capra hircus).
Journal ofReproduction and Fertility, Cambridge, v.84, n. 3, p.425-430, 1988.
BETTERIDGE, K.J. A historicallook at embryo
transfer. Journal of Reproduction and Fertility, Cambridge, v.62, n. 1, p.I-13. 1981.
BILTON, RJ., MOORE, N.w' In vitro culture,
storage and transferof goat embryos.Australian Journal of Biological Science, Collingwood, v.29, n. 2, p.125-129. 1976.
BOLAND, M.P., CROSBY, T.E, GORDON, I.
Factors influencing the superovulatory respouse in sheep. Theriogenology, Los Altos,
v.19, n. 2, p.114, 1983.
BONDURANT, RH., SKIRROW, S., ANDERSON, G.B., et aI. Non-sirurgical collectionof
blastocyst eram dairy goats. Theriogenolgy,
Los Altos, v. 22, n. 3, p.423-431, 1984.
BREBION, P., BARIL, G., COGNI, Y., et aI.
Embry transfer in sheep and goat. Annales
de Zoothecnie, Paris, v. 41, n. 3-4, p. 331339, 1992.
CHEMINEAU,P.,PROCUREUR, R, COGNI,
Y., et aI. Production, freezing and transfer of
embryos eram a blue tongue infected goat
herd without blue tongue transmission. Theriogenology, LosAltos,v.31, n. 4, p.419-423,
1986.
FLORES-FOXWORTH, G., McBRIDGE, B.M.,
KRAEMER, D.C., et aI. A comparison
between laparoscopic and transcervical embryo collectionand transfer in goats. Theriogenology, LosAltos, v.37, n.,2, p.213, 1992.
HUNTER, G.L.,ADAMS,C.E., ROWSON, L.E.
Inter-bred ovum transfer in sheep. Journal of
Agricultural Science, Sydney, v.46, n. 1,
p.143-149,1955.
ISHWAR,AK., MEMON, MA Embryo transfer in sheep and goats: a review. Small Ruminant Research, Amsterdam, v.19, n. 1,
p.35-43, 1996.
LIMA, P.E, OLIVEIRA, MAL., GUERRA, M.
M.P., et aI. Eficincia de diferentes mtodos
de colheitaembrionria em caprinos (resultados preliminares). Revista Brasileira de Reproduo Animal, Belo Horizonte, v.20, n.
2, p.63-68, 1996.

LIN, A, LEE, K., CHANG, S., et aI. Non-surgical embryo transrer in goats. Taiwan:College of Agriculture, 1979, 75 p.
MANI,AU., McKELVEY,w'AC., WATSON,E.
D. The effects of low leveiof feeding on respouse to synchronization of estrus, ovulation
rate and embryo loss in goats. Theriogenology, LosAltos, v.38, n. 4, p.l013-1022, 1992.
MANI, AU., WATSON, E.D., McKELVEY,
w'AC. The effects of subnutrition before or
after embryo transfer on pregnancy rate and
embryo survival.Theriogenology, Los Altos,
v.41, n. 6, p.1673-1678, 1994.
McKELVEY, w'A.C., ROBINSON, J.J., AITKEN, RP., et aI. Repeated recovery of embryos from ewesby laparoscopy.Theriogenology, Los Altos,v.25, n. 4, p.855-865, 1986.
McKELVEY, w'AC., ROBINSON, J.J., AITKEN, R.P. The use of reciprocal embryo
transfer to separatethe effectsof pre- and posmating nutrition on embryo survival and
growth of the ovineconceptus. In: XI INTERNATIONALCONGRESS ON ANIMALREPRODUCTION AND ARTIFICIAL INSEMINATION, 1988. Dublin. Proceedings...
Dublin, 1988, p. 176.
MOORE, N.w', EPPLESTON, J. Embryo
transfer in the Angora goat. Australian JourDai or Agricultural Research, Collingwood,
v.30, n. 5, p.973-981, 1979.
OTSUKI, K., SOMA,T.Transferof fertilizedova
through the cervix in goats. Bulletin of National Institute or Animal Industry, Tokyo,
v.6, n. 1, p.27-33, 1964.
PARLOW,AF., REICHERT, L.E. Species differences in FSH as revealed by the slope in the
Steelman Pholey assar. Endocrinology, Bethesda, v.73, n. 5, p.740-743, 1963.
PEREIRA, RJ.TA, LIMA, P.E, SILVA,MAY.,
et aI. Colheita de embries caprinos por via
transcervical. In: IX CONGRESSO BRASILEIRO DE REPRODUO ANIMAL,
1991. Anais... BeloHorizonte:ColgioBrasileiro de Reproduo Animal, 1991. p.314.
PEREIRA,RJ.T.A, SOHNREY,B., HOLTZ, W,
Influnciada PGFp.e oxitocinaexgenassobre
colheitasde embriespor via transcervicalna
espciecaprina.In:XXIVCONGRESSOBRASILEIRO DE MEDICINA VETERINRIA,
193

1996, Goinia. Anais... Goinia: Sociedade


Goiniade Veterinria,1996. p.l03-1O4.
PTAK,G., DATENA, M., LOl, P. Ovum pick-up
in sheep: efficiencyof in vitro production, vitrificationand birth offspring. Theriogenology, LosAltos,v.52, n. 6, p.ll 05-1114. 1999.
ROSHINA, RJ., JAINUDEEN, M.R, NlHAYAH,M. Superovulation and egg recoveryin
goats in goats in the tropics. Veterinary Record, London, v.130, n. 2, p.93-97, 1992.
SALLES, H.O., ANDRIOLl-PINHEIRO, A,
SOARES,AT. Utilizaoda semi-laparoscopia na transferncia de embriesem caprinos.
In: XI REUNIOANUALDASOCIEDADE
BRASILEIRA DE TRANSFERNCIA DE
EMBRIES, 1996, Canela, RS. Anais... Canela: SociedadeBrasileirade Transfernciade
Embries, 1996. p. 215.
SENN, B.J., RICHARDSON, M.E. Seasonal
effectson caprineresponse to synchronization
ofestrusand superovulatorytreatment.Theriogenology, Los Altos, v.37, n. 3, p.679-685,
1992.
SOARES,AT., SIMPLCIO, AA, ANDRIOLlPINHEIRO, A, et aloEficincia do flunixin
meglumineno controleda regressoltea prematura em cabras superovuladas. Arquivo
Brasileiro de MedicinaVeterinria e ZootecDia,BeloHorizonte,v.50, n. 1,p.35-39, 1998.
SUYADI,O., SOHNREY,B.,HOLTZ,W Transcervical embryo collection in Boer goats.
Small Ruminant Research, Amsterdam,
v.36, n. 3, p.195-200, 2000.
TERVIT, H.R Factors affecting the success of
goat embryo transfer. In: IV ANIMAL
SCIENCE CONGRESS, 1987. Sydney,Proceedings... Sydney, 1987, p. 262-266.
TERVlT,H.R, GOOLD, P.G.,McKENZIE,RD.,
et aI.Techniquesand successof embryotransfer in Angora goats. New Zealand Veterinary
Joumal, Camberra,v.31, n. 2, p.67-70,1983.

194

TERVlT,H.R, GOLD, P.G.; McKENZIE, RD.


Development of an effective goat embryo
transfer regime.Proceedings of New Zealand
Society for Animal Production, Camberra,
v.46, n. p.233-236. 1986.
TRALDI, AS., LEBOEUF, B., COGNI, Y., et
aloGoat embryo cryopreservation using slow
freezing or vitrification. In: VII INTERNATIONAL CONFERENCE ON GOATS,
2000. Tours. Proceedings... Louisiana:International Goat Society, 2000, p. 493.
VALLET,J.C., BARIL,G. Effect oftime oflaparoscopic intrauterine insemination in superovulated dairy goats. In: VI SCIENTIFIC
MEETING OF ASSOCIATION EUROPENNE DE TRANSFERT EMBRYONNAIRE, 1990. Proceedings... Lyon: Association
Europeenne de Transfert Embryonnaire,
1990, 188 p.
VALLET,J.C., CASAMIT~A, P., BREBION,
P.,et aloTechniquesde production, de conservation et de transferi d'embryons chez les petits ruminants. Recueil de Mdicine Vtrinaire, Paris, v.l, n. 3, p.293-301, 1991. .
VAN NIEKERK, C.H., BARRY,D.M., RUST,
J.M.,et aloCervicalsofteningwith prostaglandin E2and estradiol cypionatefor embryo collection in goats. Theriogenology, Los Altos,
v.33, n.3, p.348, 1990.
WARWICK,B.L.,BARRY,RO., HORlACHER,
WR Resultsof mating rams to Angora female
goats. In: XXVIIANNUAL MEETING OF
AMERICANSOCIETYFORANIMALPRODUCTION, 1934. Louisiana: American SocietyforAnimalProduction, 1934,p. 225-227.
WHITTINGHAM,D.G.,LEIBO,S.P.;MAZUR,P.
Survivalof mouse embryos frozen to - 196C
and - 296C.Science,v.178,p.411-414, 1972.
WINTERBERGER-TORRES,S., SEVELLEC,W
Adas du dve1oppementembryonnaireprcoce
chez les ovins. Versailles:INRA, 1987, 51p.

Captulo 1O

Produo in vitro de Embries


Paulo Bayard Dias Gonalves, Jos Antnio Visintin,
Marcos Antnio Lemosde Oliveira, Marcelo Marcos Montagner,
LusFabiano Santos da Costa

Introduo

A produo in vitro de embries (PIV)


envolve as etapas de colheita, maturao
(MIV) e fecundao (FIV) de ocitos, bem
como cultivo ou co-cultivo (CIV) de zigotos
e estruturas embrionrias. uma biotcnica
utilizada, alternativamente, para acelerar a
produo de animais geneticamente superiores e impedir, pela aspirao in vivo de
folculos guiada por ultra-sonografia, especialmente em bovinos, o descarte precoce
de fmeas geneticamente privilegiadas portadoras de alteraes adquiridas que impedem que a reproduo ocorre de forma
natural ou at mesmo pela transferncia de
embries. Alm desses aspectos, a PIV
tambm permite o aprofundamento dos conhecimentos relativos aos processos fisiolgicos,bioqumicos e biotecnolgicosda
espcie de interesse do estudo, sem a necessidade de extrapolar resultados pertinentes a animais de laboratrio.
Este captulo tem a finalidade de abordar
as diferentes etapas da PIV e de propiciar
uma noo geral dos processos fisiolgicos
da maturao e da fecundao de ocitos necessriospara a implementaodessa biotcnica, ressaltando-se que ser dada maior n-

fase espcie bovina em conseqncia da sua


importncia econmico-zootcnica. Entretanto, alguns tpicos sero examinados com
base em estudos conduzidos com animais de
laboratrio, assim como sero citados alguns
aspectos da PIV em sunos e ovinos. Ao final
do captulo, as fases crticas para o entendimento dos mecanismos e das tcnicas bsicas conhecidas para PIV tero sido discutidas
de maneira a possibilitar sua execuo, sendo oportuno relatar que muitas etapas desse
processo ainda no so bem compreendidas
e que, por esse motivo, torna-se difcil manter um sistema de PIV que produza embries
de forma eficiente e regular.
Histrico
H mais de um sculo, foi observada, pela
primeira vez, a fecundao de um vulo de
estrela do mar com a posterior formao da
primeira clula do futuro embrio. Os invertebrados marinhos foram objetos das primeiras investigaes porque, ao contrrio dos
mamferos, a fecundao ocorre externamente ao sistema reprodutor da fmea. Nos
mamferos, ainda no final da dcada de 20,
surgiu o primeiro relato sobre a possibilidade
de se cultivar embries de coelhos desde os

195

primeiros estdios de clivagem e na dcada


seguinte foi registrada a primeira evidncia
do nascimento de lparos resultantes do cultivo in vitro de embries. Todavia, somente
na dcada de 50, marco na histria da FIV,
que foi registrado o nascimento do primeiro
animal (coelho) gerado a partir da FIY. No
que concerne aos animais de produo, apenas no final dos anos 70 que surgiu o primeiro informe sobre a MIV e FIV de ocitos
bovinos e j no incio de 80 constatava-se o
nascimento do primeiro animal dessa espcie. A PIV em bovinos recebeu grande impulso ainda no final da dcada de 80 por ter sido

verificado que poderia ser integralmente viabilizada sob condies artificiais. Nessa mesma dcada, mas sem grande repercusso,
houveram tambm relatos de nascimento de
outras espcies ruminantes como ovinos e
caprinos. Por todo potencial de aplicao que
a PIV representa para as espcies humana e
animal, como pela sua expressividade tanto
para a cincia bsica quanto para a aplicada,
tem sido muito difundida e utilizada em diversos pases, inclusive de forma destacada
no Brasil, a partir da dcada de 90. A tabela
10.1 contm uma sntese de toda evoluo
dessa biotcnica.

Tabelo 1O.1. Evoluodos Merentes etapas do produo in vilTode embries.


1f

ANO

EPISDIO

AUTORES

- Penetroode espermotozideem ocito de estrelo do mar e formoodo primeiro clulaembrionrio

1800

HermanFoi

. Desenvolvimentode embriode coelhoin vitro at o estdiode blastocisto

1929

Lewis & Gregory

. Nascimentode coelhoresultantede embrio cultivadoin vitro

1935
1955
1959
1977
1978

- Nascimento

de coelho oriundo de ocito cultivado in vitro

- Nascimento

do primeiro coelho originado de ocito fecundado in vitro

- Maturoo

e fecundao in vitro de ocito bovino

. Louise Brown, primeiro beb nascido de fecundao in vitro em humano.

Pincus & Enzmann

Chang
Chang
Iritani
&Niwa
Steptoe & Edwards

- Noscimento de bezerro proveniente de ocito fecundado in vitro, vencendo a copacitao


espermtica em bovinos

- Completoprocessode PIVem bovinos-

1982

Brockett
et01.

1987

Luet01.

Inciodosanos90

Brosil- VriosEquipes

Atual

Diversos

maturooe fecundaode ocitos,

assimcomodesenvolvimento
embrionrio

- Estabelecimentodas tcnicosde produoin vitro de embriesem bovinos


. Utilizao das tcnicosde produode embries in vitro para pesquisae multiplicaode material
gentico no produoanimal

Aplicaes e limitaes da PIV


As tcnicas de PIV tm sido utilizadas nos
diferentes seguimentos da reproduo assistida das reas humana e animal. Inicialmente,
essas tcnicas foram empregadas unicamente
na pesquisa fundamental como instrumento
para estudar fenmenos fisiolgicos relacionados aos gametas feminino e masculino. Esses estudos permitiram o melhor entendimento dos fenmenos de crescimento, matu196

rao e fecundao de ocitos, da capacitao espermtica, bem como do desenvolvimento embrionrio precoce e de seus mecanismos de regulao. Apesar do elevado nmero de trabalhosque contriburam para elucidar muitos questionamentos cientficos,
pouco se conhece sobre a regulao desses
fenmenos fisiolgicos, principalmente no
mbito molecular. Assim sendo, a PIV tem
sido importante instrumento no esclareci-