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por
MACEI-AL
2008
i
Catalogao na fonte
Universidade Federal de Alagoas
Biblioteca Central
Diviso de Tratamento Tcnico
Bibliotecria Responsvel: Helena Cristina Pimentel do Vale
Bibliografia: f. 55-61.
Apndices: f. 62-77.
CDU: 661.722
i
Qualquer sucesso exige, ao mesmo tempo, talento e sorte.
E a sorte tem de ser ajudada e proporcionada por algum.
Se alguma coisa pode dar certo, faa-a dar certo.
iii
A minha famlia, por terem me ensinado
valores os quais nunca vo mudar e
sempre traro bons frutos.
A minha querida e amada filha Annie Camille razo
do meu viver
iv
AGRADECIMENTOS
Deus, pela presena constante em minha vida e sem o qual nada seria possvel.
minha famlia, pelo apoio, pacincia e afeto, sempre.
Prof. Dra. Renata, pela sabedoria na orientao, amizade e confiana constante ao
longo do trabalho.
Ao Prof. Dr. Joo Nunes, pela participao e sugestes.
Ao Prof. Evandir Gonalves, pela amizade, incentivo e pelas valiosas sugestes.
Margarete, pelo amparo em algumas anlises fsico-qumicas.
Aos colegas do curso Isolda, Carlos Melo e Antnio, pelas alegrias compartilhadas.
Fundao de Amparo a pesquisa (FAPEAL), pela concesso da bolsa de estudo e
pelo auxlio financeiro execuo do projeto.
Agradeo ao Eng. Qumico Aldevan da Usina Marituba, pela utilizao do densmetro
digital Anton-Paar para a realizao das anlises de teor alcolico.
Usina Cachoeira pelo melao cedido e indstria QUIMATEC produtos qumicos
LTDA pelos nutrientes cedidos.
Agradeo ainda, aqueles que no foram citados, mas que de uma forma ou outra
contriburam para a realizao deste trabalho.
v
RESUMO
vi
ABSTRACT
The transformation of sugar (glucose) into ethanol and CO2 involves 11 reactions in
orderly sequence, each catalyzed by a specific enzyme from yeast producing ethanol, for
example, Saccharomyces cerevisiae. These yeast require a source of carbon, which can be
another glucose or sugar, but also require vitamins and other nutrients such as nitrogen,
phosphorus, sulfur, potassium, magnesium, calcium, zinc, manganese, copper, iron, cobalt,
iodine and other elements in small quantities. The nutritional needs of yeast during
alcoholic fermentation influence the proliferation and cell growth and efficiency of
transformation of sugar into alcohol.
This study aimed to investigate the effect of supplementation of nutrients in grape juice
from the sugar cane to 14 Brix and mash of molasses to 15 Brix on the process of
alcoholic fermentation in batch simple, using the commercial formulations A, B and C.
These formulations commercial showed in their compositions P2O5, N, MgSO4, MnSO4
and ZnSO4 in different doses for each of the three nutrients trade. The fermentations were
conducted in erlenmeyers and shaker type Shaker with agitation (200 rpm) and
temperature ( 32C) controlled with weighing of an hour in hour of erlenmeyers to
determine the end of fermentation. The analyses used to evaluate the efficiency of the
fermentation process were: "Reducing sugars Totals (ART), sulfuric acidity, pH and
alcohol content. The concentrations of nutrients tested were determined trade based on
deficiencies of musts.
To complement the mash of molasses, it was found that concentrations of nutrients that
commercial maximizes the efficiency and productivity in the fermentation process were:
0.20 grams of A / litre of must, 0.50 grams of B / litre of must and 0,30 g of C / liter of
juice. And in the mash of broth of cane were: 0.50 grams of A / litre of must, 1 g of B / litre
of must and 2 grams of C / liter of juice.
vii
LISTA DE FIGURAS
Figura 5 Curva tpica de crescimento celular. (A) fase lag; (B) fase exponencial de
crescimento; (C) fase estacionria; (D) fase de morte............................................................ 9
Figura 8 Valores de ART residual (g/L) e Etanol produzido (g/L) para os ensaios com
mosto de melao contendo diferentes concentraes de acares. ...................................... 27
Figura 9 Valores de ART residual (g/L) e Etanol produzido (g/L) para os ensaios com
mosto de caldo de cana contendo diferentes concentraes de acares. ............................ 28
Figura 13 Valores de Produtividade (g/L.h) para os ensaios com mosto de caldo de cana
contendo diferentes concentraes de acares.................................................................... 31
viii
Figura 14 Valores de pH e acidez sulfrica (g/L de H2SO4) para os ensaios com mosto de
melao contendo diferentes concentraes de acares. ...................................................... 31
Figura 15 Valores de pH e acidez sulfrica (g/L de H2SO4) para os ensaios com mosto de
caldo de cana contendo diferentes concentraes de acares............................................. 32
Figura 16 Etanol produzido e ART residual, obtidos aps a fermentao com mosto de
melao em batelada simples complementado com o nutriente comercial A........................ 33
Figura 17 Etanol produzido e ART residual, obtidos aps a fermentao com mosto de
melao em batelada simples complementado com o nutriente comercial B. ....................... 34
Figura 18 Etanol produzido e ART residual, obtidos aps a fermentao com mosto de
melao em batelada simples complementado com o nutriente comercial C. ....................... 34
ix
Figura 25 Variao da acidez sulfrica e pH, em funo da complementao dos
nutrientes comerciais A, B e C, em ensaios conduzidos com mosto de melao em batelada
simples.................................................................................................................................. 40
x
Figura 36 Produtividade (g/L.h), em funo da complementao do nutriente comercial
C, em ensaios conduzidos com mosto de caldo de cana em batelada simples. .................... 49
xi
LISTA DE TABELAS
Tabela 4 Composio qumica dos produtos utilizados como nutrientes, de acordo com o
manual do fabricante.............................................................................................................19
xii
Tabela A7 Fermentao desenvolvida pelo fermento Fleischmann (levedura
Saccharomyces cerevisiae) no mosto de caldo de cana a 16Brix, no tempo total de 12
horas .................................................................................................................................... .65
xiii
Tabela A16 Eficincia de fermentao e de processo, fator de rendimento e produtividade
em etanol dos ensaios com complementao do nutriente comercial A...............................69
xiv
SUMRIO
1 INTRODUO .......................................................................................................... 1
2 REVISO DA LITERATURA.................................................................................. 3
2.1 BIOQUMICA DA FERMENTAO ALCOLICA.............................................. 3
2.2 MEIO DE FERMENTAO..................................................................................... 4
2.3 AGENTES DA FERMENTAO LEVEDURAS ................................................ 6
2.4 MULTIPLICAO CELULAR ................................................................................ 7
2.5 CRESCIMENTO CELULAR .................................................................................... 8
2.6 IMPORTNCIA DOS NUTRIENTES PARA A FERMENTAO ALCOLICA9
2.7 COMPLEMENTAO DE NUTRIENTES NO MOSTO ..................................... 14
3 JUSTIFICATIVA E OBJETIVOS.......................................................................... 17
3.1 JUSTIFICATIVA ..................................................................................................... 17
3.2 OBJETIVOS............................................................................................................. 17
3.2.1 Geral ............................................................................................................. 17
3.2.2 Especficos.................................................................................................... 17
4 METODOLOGIA..................................................................................................... 19
4.1 MATERIAIS ............................................................................................................ 19
4.1.1 Mosto ............................................................................................................ 19
4.1.2 Microrganismo ............................................................................................. 19
4.1.3 Nutrientes ..................................................................................................... 19
4.2 MTODOS............................................................................................................... 20
4.2.1 Determinao do Brix Refratomtrico ......................................................... 20
4.2.2 Determinao do pH..................................................................................... 20
4.2.3 Determinao do Teor Alcolico ................................................................. 20
4.2.4 Determinao do Desprendimento de CO2 durante a Fermentao ............. 20
4.2.5 Determinao da Acidez Sulfrica ............................................................... 20
4.2.6 Determinao dos Acares Redutores Totais (ART) no Mosto ................. 21
4.2.7 Determinao dos Acares Redutores Totais (ART) no Vinho ................. 21
4.2.8 Experimentos fermentativos......................................................................... 22
xv
4.2.9 Parmetros de fermentao........................................................................... 23
5 RESULTADOS E DISCUSSO.............................................................................. 26
5.1 CARACTERIZAO DOS MEIOS DE FERMENTAO .................................. 26
5.2 EXPERIMENTOS FERMENTATIVOS SEM ADIO DE NUTRIENTES........ 27
5.3 EXPERIMENTOS FERMENTATIVOS COM COMPLEMENTAO DE
NUTRIENTES ..................................................................................................................... 32
5.3.1 Fermentao com mosto de melao a 15Brix ............................................. 32
5.3.2 Fermentao com mosto de caldo de cana a 14Brix ................................... 42
6 CONCLUSES......................................................................................................... 53
7 SUGESTES ............................................................................................................ 54
8 REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS ................................................................... 55
APNDICES ..................................................................................................................... 62
xvi
1 INTRODUO
A fermentao alcolica vem sendo utilizada desde a mais remota antigidade; h mais
de 4.000 anos os egpcios fabricavam o po e produziam bebidas alcolicas a partir de
cereais e frutas. No entanto, apenas recentemente que se pde relacionar a fermentao
com as leveduras, fungos amplamente distribudos na natureza e com capacidade de
sobrevivncia tanto em condies aerbias como anaerbias (LIMA et al., 2001). Segundo
estes autores, as leveduras beneficiaram a humanidade por um longo perodo, mesmo sem
saber de sua existncia, notada pela primeira vez por Antoine Van Leewenhoek (1623-
1723), ao observar amostra de cerveja em fermentao, com seu microscpio rudimentar.
Segundo Lima et al. (2001) aps a formulao da estequiometria da fermentao,
desenvolvida por Gay-Lussac em 1815, Pasteur em 1863 demonstrou a natureza
microbiolgica da fermentao alcolica como sendo um processo anaerbico e ainda,
durante as primeiras dcadas de 1900 as pesquisas culminaram com a elucidao das
reaes enzimticas catalisadas por enzimas especficas responsveis pela transformao
qumica do acar em etanol e gs carbnico no interior da levedura. De acordo com Stryer
(1996) e Lima et al. (2001) a via glicoltica completa foi elucidada por volta de 1940,
principalmente devido s contribuies de Gustav Embden, Otto Meyerhof, Cal Neuberg,
Jacob Parmas, Otto Warburg, Gerty Cori e Carl Cori.
Atualmente entende-se por fermentao, o processo de metabolismo anaerbico de
produo de energia em que os microrganismos oxidam parcialmente o substrato, atuando
sobre um ou mais componentes, gerando produtos modificados de forma a obter
caractersticas desejveis. Nos processos fermentativos, as clulas vivas agregam os
sistemas multienzimticos, e seu funcionamento depende de uma srie complexa de
reaes. Integraes altamente coordenadas dessas reaes definem as vias metablicas de
utilizao do substrato pelos microrganismos. A fermentao alcolica tem seu incio
devido ao das leveduras que usam os acares do mosto para seu crescimento e
multiplicao, dando como resultado a formao de lcool e anidrido carbnico. Enquanto
existe oxignio no mosto, a levedura cresce e se multiplica. Quando este acaba comea a
produo de lcool e CO2 (AQUARONE et al., 1983).
1
Durante o processo fermentativo, o meio de fermentao esquenta devido energia
liberada e so desprendidas bolhas de CO2. A Figura 1 ilustra o desprendimento de bolhas
de CO2 durante a fermentao.
2
2 REVISO DA LITERATURA
No que diz respeito ao rendimento terico (YP/S) sabe-se que a partir do fator
estequiomtrico (0,511), obtm-se valor do rendimento na ordem de 90%, uma vez que se
estima, que parte do acar metabolizado pela levedura seja desviado para gerar produtos
como glicerol, lcoois superiores e outros, alm do necessrio para manuteno celular
(SCHMIDELL; BONOMI, 2001; LIMA et al., 2001; WARD, 1991).
3
Figura 2 Seqncia de reaes enzimticas pela fermentao alcolica (LIMA et al.,
2001).
4
As concentraes dos mostos, nas destilarias brasileiras, so comumente expressas em
graus Brix (GAVA, 1998), quantidade de slidos totais dissolvidos em uma soluo
aucarada a 20C expressos em g/100g. O caldo de cana-de-acar servindo diretamente
como matria-prima para a fermentao, tem que ser diludo do seu Brix inicial de 16 18
para 14Brix (RASOVSKY, 1973). Entretanto, para outros autores, a concentrao de
acares no mosto deve estar entre 16 a 20Brix (GAVA, 1998). Alm disso, durante a
fermentao necessrio o controle de sua densidade, acidez, componentes nutritivos
necessrios ao crescimento das leveduras e temperatura que deve ser mantida entre 28
30C (RASOVSKY, 1973; GAVA, 1998).
Na utilizao de melaos preciso fazer sua diluio com gua. A diluio faz-se de
modo contnuo, em misturadores especiais, com freqente superviso para garantir as
concentraes adequadas, diluindo-se os melaos entre 15 e 25Brix, com mdias de 18 a
20Brix (LIMA et al., 2001).
A composio da cana-de-acar muito varivel, chegando a divergir dentro de uma
mesma regio, em diferentes anos, variando, especialmente em funo das condies
climticas, com as propriedades fsicas, qumicas e microbiolgicas do solo, com o tipo de
cultivo empregado, com a variedade, o estgio de maturao e a idade da cana, com a
irrigao ou ainda com a irrigao-fertilizada (vinhaa) e com muitos outros fatores. Tal
variao na composio qumica da cana-de-acar ocorre quantitativamente, porm
qualitativamente ela semelhante em todas as variedades. As composies qumicas do
melao e do caldo de cana dependem muito da cana utilizada, portanto so tambm
extremamente variveis. A Tabela 1 apresenta essas composies segundo Stupiello (1974).
5
Tabela 1 Composio qumica do caldo de cana e do melao (STUPIELLO, 1974).
Componente Caldo de cana (%) Melao (%)
gua 81,00 17,33
Slidos totais 19,00 82,00
Brix 19,50 88,00
Sacarose 16,00 40,00
Glicose 0,30 12,00
Frutose 0,10 9,00
Acares Totais 18,00 65,00
Matria nitrogenada 0,03 8,00
Acidez sulfrica 0,50 3,00
pH 5,5 6,50
Cinzas 0,40 8,50
P2O5 0,02 0,15
K 2O 0,15 3,80
CaO 0,02 1,05
MgO 0,02 0,50
Vitaminas Varivel Varivel
6
Figura 3 Morfologia da clula de levedura (NAKANO, 2000).
7
para junto da membrana celular, onde surge uma gmula (Figura 4). O ncleo se alonga,
penetrando na gmula. Posteriormente quando a gmula alcana o tamanho aproximado da
clula me, o ncleo em ambas as clulas se divide, gerando duas clulas filhas. Durante os
perodos de reproduo contnua, os brotos podem permanecer ligados, formando, assim,
uma cadeia de clulas ou, eventualmente separados, formando clulas unicelulares ou
clulas me-filha (MADRID et al., 1995; SIMPSON, 1996; NAKANO, 2000).
8
Na Figura 5 temos o perfil caracterstico do crescimento de um microrganismo
unicelular. A fase A, chamada de lag, corresponde a uma fase de adaptao fisiolgica
das clulas ao novo meio de cultura no qual elas foram introduzidas. Nesta fase o
metabolismo est ativo (sintetizando enzimas e coenzimas) de modo a criar as condies
para que elas possam se dividir. Portanto, na fase lag as clulas no esto se dividindo. A
fase B conhecida como a fase exponencial de crescimento porque o nmero de clulas
aumenta exponencialmente com o tempo. A fase C a fase estacionria, onde o nmero de
clulas viveis se mantm constante, isto , so iguais os nmeros correspondentes s
clulas que nascem e as que morrem. A fase D a fase de morte, pois as condies do meio
vo se tornando cada vez mais imprprias para as clulas sobreviverem (PELCZAR et al.,
1980).
Figura 5 Curva tpica de crescimento celular. (A) fase lag; (B) fase exponencial de
crescimento; (C) fase estacionria; (D) fase de morte (RETTORI; VOLPE, 2000).
9
Os micronutrientes (enxofre, magnsio, mangans, zinco, cobre, cobalto, dentre
outros.) tm uma funo importante no metabolismo celular, principalmente devido aos
seus requerimentos como cofatores para vrias enzimas (STEHLIK-TOMAS et al., 2004).
Aparentemente, ons metlicos so vitais para todos os organismos, e desta forma,
transportadores destes ons tm um papel crucial na manuteno da homeostase. Todavia,
quantidades excessivas destes mesmos ons so txicos e podem causar danos s funes s
quais se prestam (NELSON, 1999; COHEN et al., 2000 apud por STEHLIK-TOMAS et al.,
2004). Jones & Greenfield (1984) definem as funes destes ons como: enzimtica e
estrutural. Na funo enzimtica, alguns ons so o centro cataltico de uma enzima, como
um ativador ou estabilizador da funo enzimtica, ou mantm controle fisiolgico por
2+ 2+ 2+ 2+
antagonismo entre ativadores e desativadores. Dentre estes, Zn , Co , Mn e Cu so
comumente centros catalticos. A funo estrutural desempenhada pelos ons que agem
neutralizando foras eletrostticas presentes nas muitas unidades celulares aninicas. Na
+ 2+
maioria das vezes, K e Mg so encontrados em polifosfatos, RNA, DNA e protenas.
Segundo Lima (2001), a adio de sais minerais vantajosa para corrigir deficincias que o
caldo normalmente apresenta.
A composio elementar de uma clula microbiana depende de muitos fatores, como
condies de cultivo, espcie do microrganismo, e at mesmo do substrato utilizado para
seu crescimento (CARVALHO; SATO, 2001). Zinco, cobre e mangans so muito
interessantes devido ao efeito positivo na atividade respiratria e na taxa de crescimento da
levedura Saccharomyces cerevisiae (JONES; GADD, 1990, apud por STEHLIK-TOMAS
et al., 2004).
Segundo Aiba et al. (1973), fsforo, potssio, enxofre e magnsio so os minerais mais
encontrados na composio de microrganismos, e estes e outros elementos presentes em
quantidades significativas devem ser suplementados ao meio de cultura. Na Tabela 2, so
mostrados os constituintes inorgnicos de leveduras, segundo Aiba et al. (1973), Reed &
Nagodawithana (1991) e Harrison (1971).
10
Tabela 2 Constituintes inorgnicos das leveduras
Elementos AIBA et al., REED & NAGODA HARRISON ( 1971)
(g/100g peso seco) (1973) WITHANA (1991)
Fsforo 0,8 2,6 1,35 1,10 2,00
Enxofre 0,01 0,24 0,39 0,30 0,50
Potssio 1,0 4,0 2,1 0,90 3,50
Magnsio 0,1 0,5 0,165 0,15 0,50
Sdio 0,01 0,1 0,012 0,02 0,20
Clcio 0,1 0,3 0,075 0,04 0,90
Ferro 0,01 0,5 0,002 0,003 0,10
Zinco 0,017 0,004 0,13
Cobre 0,002 0,01 0,0008 0,002 0,012
Mangans 0,0005 0,007 0,000002 0,0004 0,0035
Molibdnio 0,0001 0,0002 0,00004 0,000005 0,000009
11
deficincia de alguns nutrientes como concentraes excessivas de outros (LIMA et al.,
2001).
Segundo Novaes et al. (1971 apud VASCONCELOS, 1987), a anlise do caldo de cana
revela que esta matria-prima exige uma suplementao adequada de certos sais minerais
para que a fermentao se processe com maior vigor, pois, embora seja rica em certos
elementos, possui um desequilbrio entre os mesmos. Um elemento importante para a
qualidade do produto final o nitrognio amoniacal. Na ausncia deste, a levedura ir
metabolizar outros compostos, como os aminocidos, cujo desdobramento resultam
substncias indesejveis, verificando um sensvel aumento no teor de lcoois superiores
(NOGUEIRA & VENTURINI FILHO, 2005). O fsforo, na forma de P2O5, de extrema
importncia para que ocorra a formao de lcool durante a fermentao. Alm de
favorecer a ao das leveduras, o fsforo tambm aumenta o rendimento alcolico da
fermentao.
A importncia dos nutrientes no processo fermentativo pode ser ressaltada atravs de
Novaes et al. (1971 apud VASCONCELOS, 1987), que afirmam que Os sais minerais
tanto sob o ponto de vista qualitativo como quantitativo, devem ser considerados, pois,
certas reaes enzimticas da fermentao alcolica podem ser favorecidas por
12
determinados elementos, tais como: fosfato de amnio, fosfato de clcio, fluoreto de
amnio, sulfato de magnsio, sulfato de mangans e sulfato de cobalto.
Segundo Codistil (1978 apud VASCONCELOS, 1987), o melao apresenta uma
concentrao de nutrientes bem mais elevada do que os mostos de caldo de cana, porm
no apresenta o nitrognio em forma adequada para as leveduras, podendo inclusive
comprometer a qualidade do lcool.
Devido importncia dos sais minerais no processo fermentativo, alguns autores
descreveram as funes de alguns elementos minerais (AMORIM, 1977; SUOM ALAINE
& OURA, 1971 apud VASCONCELOS, 1987): Nitrognio um elemento essencial para
os organismos vivos, pois um componente para a sntese de protenas e cidos nuclicos.
As leveduras utilizam uma ampla variedade de compostos nitrogenados, porm nem todas
as fontes propiciam crescimento igualmente eficiente. Fsforo essencial para o
metabolismo energtico e na sntese de cidos nuclicos. Tem importncia na
transformao do acar em lcool e na produo de ATP, tanto na gliclise como na
cadeia respiratria. Potssio atua como ativador em uma srie de reaes da gliclise e em
outros passos do metabolismo. A quantidade de potssio absorvida pela levedura durante a
fermentao o dobro da quantidade exigida na sua multiplicao e crescimento.
Magnsio desempenha um papel importante no crescimento das leveduras como co-fator de
muitas reaes metablicas. Cobre e ferro so necessrios em pequenas quantidades, na
fase de multiplicao e crescimento da levedura. Zinco, mangans e cobalto atuam como
ativadores enzimticos na gliclise. Clcio embora no seja aparentemente necessrio para
o crescimento de clulas de leveduras, ele estimula a fermentao (AMORIM, 1977;
SUOM ALAINE & OURA, 1971 apud VASCONCELOS, 1987; PEREIRA, 2007; SILVA,
2007).
O processo fermentativo pode ser inibido pelos metablitos primrios e/ou secundrios
produzidos pelos microrganismos, como o etanol, alm de outras substncias que podem
estar presentes nos mostos. Assim, a falta ou o excesso de alguns minerais em mostos de
melao ou de caldo de cana pode acarretar efeitos negativos fermentao. Recentemente,
o alumnio foi identificado como elemento estressante da levedura, em condies de
fermentao industrial, acarretando queda simultnea da viabilidade e dos teores de trealose
da levedura. Melaos com altos teores de sulfito, proveniente da clarificao do caldo
13
tambm acarretam efeitos txicos levedura, comprometendo a fermentao e aumentando
a acidez do lcool obtido (LIMA et al., 2001).
Segundo Arajo (1982 apud VASCONCELOS, 1987), para a complementao de
nutrientes nos mostos, deve-se levar em considerao as seguintes variveis:
Quantidade de nutrientes na matria-prima;
Tipos de nutrientes a serem adicionados ao mosto;
Dosagem de cada nutriente a ser adicionado no mosto;
Momento da fermentao em que deve-se adicionar os nutrientes ao mosto;
Fontes dos nutrientes.
14
compostos fosfatados possuem substancial importncia no processo de fabricao de acar
(HONIG, 1969), principalmente na clarificao do caldo precipitando impurezas
(KORNDORFER, 2003). No processo de clarificao o fsforo livre reage com a cal
[Ca(OH)2] formando fosfato triclcico [Ca(PO4)2] o qual, ao flocular e sedimentar, realiza o
arraste das impurezas, que se depositam no fundo do decantador (KORNDORFER, 1990).
Segundo Honig, (1969), os teores de fosfato no caldo podem variar de 200 a 1000 mg
de P2O5 por litro de caldo, teores de fosfato (P2O5) menores que 150 mg/L so considerados
baixos, teores entre 150 e 500 mg/L so considerados normais e teores maiores que 500
mg/L so considerados altos. Delgado & Csar (1984) relatam uma variao de 70 a 800
mg de P2O5 por litro de caldo.
Segundo Meade (1963), Honig (1969), Delgado et al., (1973) e Delgado & Csar
(1977) o teor necessrio de fosfato (P2O5) no caldo para uma boa clarificao de 300 a
350 mg/L, sendo recomendado a adio do mesmo sempre que valores inferiores a estes
forem encontrados.
No colmo da cana-de-acar, 95% do fsforo contido se apresenta como solvel e,
portanto, passvel de ser extrado por uma moenda de laboratrio. As quantidades de
fsforo total e inorgnico residuais no bagao so proporcionais do acar no extrado, o
qual representa apenas de 2 a 4% do acar total da cana. Pode-se ento restringir anlise
do fsforo somente ao caldo extrado pela moenda (HONIG, 1960).
Os fosfatos orgnicos podem ser divididos nos seguintes grupos: fosfatos de inositol
(cido ftico), fosfatos de hexoses, nucleotdeos (compostos complexos de cido fosfrico
com carboidratos e bases purnicas ou pirimidnicas), fosfo-protenas (cido fosfrico
combinado com hidroxiaminocidos) e fosfolipdeos. Durante o tratamento do caldo os
fosfatos orgnicos tendem a se decompor, transformando-se em fosfatos inorgnicos
(MALAVOLTA; HAAG, 1964 e HONIG, 1969).
A forma orgnica do fsforo ocorre numa quantidade de cerca de 10% do fsforo total
(KORNDORFER, 1990). O nvel de fsforo orgnico no caldo , principalmente, funo do
grau de maturao da cana-de-acar, ou seja, em estgio de crescimento fisiolgico, o teor
de fsforo orgnico mais alto, chegando a 60-70 mg/L, e em estgio de maturao, o teor
de fsforo orgnico encontra-se na faixa de 25-45 mg/L (HONIG, 1960).
15
O fsforo absorvido pela levedura tem sua principal funo relacionada com a
transferncia de energia na clula. Este elemento considerado indispensvel absoro do
carboidrato e a sua posterior converso em etanol. Para uma fermentao eficiente, isto ,
rpida e com alto rendimento em transformaes dos acares redutores totais em lcool,
necessrio que o mosto destinado fermentao possua uma concentrao de fsforo na
faixa de 50 a 100 ppm (AMORIM, 1985).
Alguns autores realizaram fermentaes com suplementao de nutrientes no mosto.
Vasconcelos (1987) estudou a complementao de compostos nitrogenados e fosfatados na
fermentao alcolica em laboratrio e concluiu que as doses de nitrognio e fsforo que
maximizaram a eficincia de fermentao foram 0,11g/L de sulfato de amnio e 0,11 g/L
de superfosfato triplo, respectivamente. Dragone et al. (2004) investigaram diferentes
fatores de fermentao de xarope de maltose no aumento da produo de etanol pela
Saccharomyces Cerevisiae, dentre estes fatores estavam a suplementao do mosto com
nutrientes (extrato de levedura, ergosterol). Esses autores concluram que a produo de
etanol aumentou com a adio dos nutrientes, porm a concentrao desses nutrientes no
foi avaliada. J Pereira (2007) estudou a suplementao de diferentes fontes e
concentraes de nitrognio sobre a fermentao alcolica na produo de cachaa, cerveja
e vinho e concluiu que o maior rendimento da fermentao foi obtido pela linhagem de
levedura de baixa fermentao na fonte de nitrognio sulfato de amnio em 5g/L.
16
3 JUSTIFICATIVA E OBJETIVOS
3.1 JUSTIFICATIVA
3.2 OBJETIVOS
3.2.1 Geral
3.2.2 Especficos
17
como: tempo de fermentao alcolica, quantidade de fermento a ser utilizada e a
escolha da concentrao inicial do mosto a ser complementado com nutrientes;
Complementar os mostos de caldo de cana e melao com os nutrientes A, B e C, de
modo a proporcionar uma condio ideal para o desenvolvimento da levedura;
Avaliar o processo de fermentao alcolica diante da complementao de
nutrientes, atravs da eficincia e produtividade;
Estabelecer as concentraes ideais dos nutrientes comerciais a serem adicionados
nos mostos de melao e de caldo de cana.
18
4 METODOLOGIA
4.1 MATERIAIS
4.1.1 Mosto
4.1.2 Microrganismo
4.1.3 Nutrientes
Tabela 4 Composio qumica dos produtos utilizados como nutrientes, de acordo com o
manual do fabricante.
Composio A B C
(g/kg)
P2O5 530,0 210,0 210,0
N 100,0 234,0 288,0
MgSO4 10,0 105,0 45,0
MnSO4 2,3 55,0 6,0
ZnSO4 2,1 15,0 6,0
19
4.2 MTODOS
4.2.2 Determinao do pH
20
4.2.6 Determinao dos Acares Redutores Totais (ART) no Mosto
21
obtida atravs de uma curva padro utilizando solues de concentraes rigorosamente
conhecidas (VASCONCELOS, 2000).
22
Figura 7 Agitador rotatrio tipo Shaker com controle de agitao e temperatura
Para cada formulao utilizada foi realizado um ensaio chamado de branco apenas com
o mosto correspondente, sem nenhuma complementao para efeito de comparao. Porm
antes da complementao com os nutrientes comerciais, amostras de mosto de caldo de
cana a 14Brix e o mosto de melao a 15Brix foram analisadas no Laboratrio da Central
Analtica (Macei-AL), realizando primeiramente uma digesto ntrica-perclrica nas
amostras para posterior determinao da concentrao dos micro e macronutrientes:
nitrognio, fsforo, sdio, clcio, magnsio, potssio, ferro, zinco, cobre e mangans
atravs de um equipamento de absoro atmica. Os nutrientes comerciais utilizados na
complementao foram acrescentados trs a seis nveis de concentrao, tomando-se como
ponto central dados encontrados na literatura, os clculos desses nveis testados, podem ser
visualizados nos apndices B1 a B6. O desempenho das fermentaes alcolicas utilizando
nutrientes comercias foi avaliado quanto a maximizao dos valores de eficincia de
fermentao e de processo, produtividade e rendimento no processo de produo de etanol.
A partir dos resultados obtidos das determinaes analticas do mosto inicial e mosto
fermentado, foram realizados os clculos dos seguintes parmetros de fermentao,
utilizando as equaes de (1) a (6) (RIBEIRO; HORII, 1999).
23
Acar consumido:
Onde:
Etanol produzido:
P = Pf - Pi (2)
Onde:
P
YP/S = (3)
S
Onde:
Produtividade em etanol:
(4)
Onde:
PR = produtividade em etanol (g/L.h),
t = tempo de fermentao (h).
24
Eficincia de fermentao (b(%)), com base no rendimento terico proveniente da
equao de Gay-Lussac (0,511 g etanol . 1g glicose-1):
Y
P/S
b(%) = X 100 (5)
O,511
Pf
p(%) = X 100 (6)
0,511xS 0
25
5 RESULTADOS E DISCUSSO
26
5.2 EXPERIMENTOS FERMENTATIVOS SEM ADIO DE NUTRIENTES
Os resultados obtidos a partir de mosto de melao e mosto de caldo de cana sem adio
de nutrientes foram conduzidos em batelada simples a fim de determinar alguns parmetros
iniciais de fermentao. O principal parmetro analisado foi a concentrao inicial de
slidos solveis, em especial a sacarose, presente nos mostos e verificou-se qual destas
concentraes maximizava a eficincia de fermentao. Para o mosto de caldo de cana
foram testadas trs concentraes iniciais 12, 14 e 16Brix e para o mosto de melao foram
testas as concentraes de 15, 18 e 21Brix. Os resultados desses experimentos podem ser
visualizados nas Figuras 8 a 15 e com maiores detalhes nas Tabelas A1 a A8 (Apndice).
As Figuras 8 e 9 mostram os valores de ART residual (g/L) e etanol produzido (g/L) nas
trs concentraes do mosto de melao e de caldo de cana, respectivamente.
60
ART residual (g/L) - Etanol (g/L)
50
40
30
20
10
15 16 17 18 19 20 21
Brix
ART residual (g/L)
Etanol (g/L)
Figura 8 Valores de ART residual (g/L) e Etanol produzido (g/L) para os ensaios com
mosto de melao contendo diferentes concentraes de acares.
27
70
60
40
30
20
10
0
12 13 14 15 16
Brix
Figura 9 Valores de ART residual (g/L) e Etanol produzido (g/L) para os ensaios com
mosto de caldo de cana contendo diferentes concentraes de acares.
28
Eficincia de fermentao (%) - Eficincia de processo (%)
78
76
74
72
70
68
66
64
15 16 17 18 19 20 21
Brix
86
85
84
83
82
81
80
79
78
77
12 13 14 15 16
Brix
29
Observando as Figuras 10 e 11, tem-se que a concentrao de 15Brix de mosto de
melao e 14Brix de mosto de caldo de cana proporcionaram maiores eficincias de
fermentao e de processo, porque o lcool produzido e outros componentes provavelmente
no foram suficientes para uma inibio significativa da fermentao.
As Figuras 12 e 13 mostram a produtividade em etanol para os mostos de melao e
caldo de cana, respectivamente. Analisando estas Figuras pode-se observar que o mosto de
melao a 15Brix apresentou produtividade 4,87g/L.h (41,36 g/L, com tempo de
fermentao 8,5 h) e o mosto de caldo de cana a 14Brix apresentou produtividade
5,64g/L.h (59,2 g/L, com tempo de fermentao 10,5 h).
A variao do pH com o Brix do mosto est mostrada na Figura 14 para o mosto de
melao e na Figura 15 para o mosto de caldo de cana. Analisando as Figuras 14 e 15
verificou-se em relao ao pH que os mostos de melao (15, 18 e 21Brix) e de caldo de
cana (12, 14 e 16Brix) permaneceram numa faixa irregular, o que provavelmente pode ser
explicado por variaes nas respectivas leituras no potencimetro, causada por oscilaes
na corrente eltrica.
4,96
4,94
Produtividade (g/L.h)
4,92
4,90
4,88
4,86
15 16 17 18 19 20 21
Brix
Produtividade (g/L.h)
30
6,2
6,1
6,0
5,9
5,7
5,6
5,5
5,4
5,3
12 13 14 15 16
Brix
Produtividade (g/L.h)
Figura 13 Valores de Produtividade (g/L.h) para os ensaios com mosto de caldo de cana
contendo diferentes concentraes de acares.
5,1
5,0
4,9
pH - Acidez sulfrica (g/L de H2SO4)
4,8
4,7
4,6
4,5
4,4
4,3
4,2
4,1
4,0
3,9
3,8
3,7
3,6
3,5
15 16 17 18 19 20 21
Brix
pH
Acidez sulfrica (g/L de H2SO4)
Figura 14 Valores de pH e acidez sulfrica (g/L de H2SO4) para os ensaios com mosto de
melao contendo diferentes concentraes de acares.
31
4,0
3,6
3,4
3,2
3,0
12 13 14 15 16
Brix
pH
Acidez sulfrica ( g/L de H2SO4)
Figura 15 Valores de pH e acidez sulfrica (g/L de H2SO4) para os ensaios com mosto de
caldo de cana contendo diferentes concentraes de acares.
32
32C e agitao 200 rpm. Esto apresentados graficamente nas Figuras 16 a 27, pela
facilidade de visualizao, quando se comparam os dados obtidos com as diferentes
concentraes avaliadas. Os dados so mostrados nas Tabelas A9 a A14, apresentadas no
apndice. Nas Figuras 16, 17 e 18 esto apresentados graficamente os valores de ART
residual (g/L) e etanol produzido (g/L) nos ensaios de complementao do mosto de melao
com os nutrientes A, B e C, respectivamente.
45
40
ART residual (g/L) - Etanol (g/L)
35
30
25
20
15
10
0
0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5
Nutriente A (g/L)
Figura 16 Etanol produzido e ART residual, obtidos aps a fermentao com mosto de
melao em batelada simples complementado com o nutriente comercial A.
33
45
40
30
25
20
15
10
5
0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8
Nutriente B (g/L)
Etanol (g/L)
ART residual (g/L)
Figura 17 Etanol produzido e ART residual, obtidos aps a fermentao com mosto de
melao em batelada simples complementado com o nutriente comercial B.
45
40
ART residual (g/L) - Etanol (g/L)
35
30
25
20
15
10
5
0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8
Nutriente C (g/L)
Etanol (g/L)
ART residual (g/L)
Figura 18 Etanol produzido e ART residual, obtidos aps a fermentao com mosto de
melao em batelada simples complementado com o nutriente comercial C.
34
A Figura 17 demonstra os resultados obtidos de Etanol produzido e ART residual
utilizando o nutriente comercial B. Notou-se ento, que a concentrao de 0,50 g de B/litro
de mosto proporcionou maior formao de etanol. Concentrao esta maior que a
concentrao ideal de A, ou seja, analisando as composies dos nutrientes A e B,
verificou-se que o elemento presente nas composies desses dois nutrientes comerciais
com maior diferena de doses o fsforo, que um elemento considerado de grande
importncia na transformao do acar em lcool e na produo de ATP.
Portanto, como o nutriente A tem mais fsforo, pelos resultados obtidos podem ser
usadas quantidades menores, entre 0,2 e 0,4 g/L, para obter uma eficincia de 78,9%,
prxima a do nutriente B, cuja eficincia de 79,2%. J na Figura 18, a concentrao de C
que proporcionou maior concentrao de etanol, foi a de 0,30 g de C/ litro de mosto,
concentrao esta menor que a concentrao ideal do nutriente B, devido diferena de
dose de nitrognio (Nutriente C: 288 g de nitrognio/kg e o Nutriente B: 234 g de
nitrognio/kg) presente nas composies dos nutrientes comerciais, motivo este o que pode
ter contribudo para essa diferena de taxas ideais dos nutrientes comerciais, ou seja, apesar
do nutriente C ter quantidades menores dos micronutrientes (MgSO4: 6g/kg, MnSO4: 6
g/kg, ZnSO4: 45 g/kg) do que o nutriente B (MgSO4: 105 g/kg, MnSO4: 55 g/kg, ZnSO4: 15
g/kg), o elemento que provalvemente influenciou na diferena do etanol produzido,
utilizando 0,50 g de B/litro de mosto e 0,30 g de C/ litro de mosto foi o nitrognio.
Com relao ao acar residual, observou-se que, quanto menor os ART remanescentes
no final da fermentao, maior foi a concentrao de etanol produzido no meio
fermentativo. Como conseqncia houve maior converso de ART para produo de etanol.
Os dados de avaliao da eficincia da fermentao alcolica utilizando os nutrientes
comerciais A, B e C, podem ser observados nas Figuras 19, 20 e 21, respectivamente. So
apresentados dois tipos de eficincia. A primeira, denominada de eficincia fermentativa ou
de fermentao b(%), os clculos so feitos considerando-se os acares efetivamente
consumidos e , portanto, maior que a eficincia do processo fermentativo p(%) que tem
como base de clculo os acares adicionados e, portanto, seu valor menor que o anterior.
Analisando os resultados das eficincias de fermentao e de processo, pde-se
observar que as concentraes do nutriente comercial A que mais supriram as deficincias
do meio favorecendo o desenvolvendo da levedura e, portanto, aumentando tais eficincias
35
foram as de 0,20, 0,3 e 0,4 g de A/L de mosto. Por razes econmicas, a melhor 0,2g/L.
Enquanto que utilizando o nutriente B no mosto, nota-se que a concentrao que
proporcionou maiores eficincias foi 0,50 g de B/litro de mosto. Utilizando taxas crescentes
a de 0,50 g de B/litro de mosto, comea a haver comprometimento do metabolismo da
levedura, evidenciado provavelmente pela menor produo de etanol. Por razes
semelhantes, fica estabelecida que a concentrao do nutriente C seja 0,30 g de C/litro de
mosto.
Eficincia de fermentao (%) - Eficincia de processo (%)
85
84
83
82
81
80
79
78
77
36
Eficincia de fermentao (%) - Eficincia de processo (%)
85
84
83
82
81
80
79
78
77
85
84
83
82
81
80
79
78
77
37
Outro parmetro avaliado foi a produtividade, que representa a produo de etanol por
unidade de volume na unidade de tempo. Esses resultados esto apresentados nas Figuras
22, 23 e 24 utilizando os nutrientes comerciais A, B e C, respectivamente.
7
Produtividade (g/L.h)
4
0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5
Nutriente A (g/L)
Produtividade(g/L.h)
7
Produtividade (g/L.h)
4
0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8
Nutriente B (g/L)
Produtividade (g/L.h)
38
7
Produtividade (g/L.h)
6
4
0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8
Nutriente C (g/L)
Produtividade (g/L.h)
39
na concentrao de 0,3 g de C/L obteve-se maiores eficincia de fermentao e produo de
etanol.
O pH importante nas fermentaes alcolicas industriais por causa de sua atuao no
controle de bactrias contaminantes e seu efeito sobre as taxas de fermentao, de formao
de subprodutos e de crescimento das leveduras (JONES et al., 1981; BUZAS et al., 1989).
Segundo Novaes et al. (1971), uma boa fermentao, para um mesmo tipo de mosto de
uma determinada matria-prima, a acidez final maior do que a inicial de 30 a 50%;
aumentos maiores que esta ordem indicam ocorrncia de infeces.
Os valores de pH e acidez sulfrica no final da fermentao complementando-se o
mosto de melao com diferentes concentraes dos nutrientes comerciais A, B e C, podem
ser visualizados graficamente na Figura 25.
6
pH - Acidez sulfrica (g/L de H2SO4)
4
0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8
Nutrientes A, B e C (g/L)
pH: nutriente A
Acidez sulfrica (g/L de H2SO4): nutriente A
pH: nutriente B
Acidez sulfrica (g/L de H2SO4): nutriente B
pH: nutriente C
Acidez sulfrica (g/L de H2SO4): nutriente C
40
Na Figura 25, pode-se observar que os resultados de pH e acidez so normais nas
condies de fermentao comentadas anteriormente. Por outro lado, a diferena entre o pH
inicial (4,5) e o pH do vinho no mostrou diferena significativa em virtude do elevado
poder tamponante do melao.
87
C
A B
Sem
84 Complemento
Eficincia (%)
81
78
75
0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5
Nutrientes Comerciais (g/L)
41
que as eficincias obtidas utilizando os nutrientes comerciais B e C so prximas, pois a
composio de nitrognio nesses nutrientes diferem pouco um do outro.
B
Sem A
5
Complemento
C
4
Produtividade (g/L.h)
0
0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5
Nutrientes Comerciais (g/L)
Com relao produtividade, notou-se que, utilizando 0,20 g de A/L de mosto obteve-
se produtividade de 5,03 g/L.h, ou seja, produziu-se 45,3 g/L de etanol em 9 h de processo
e na concentrao de 0,50 g de B/L de mosto a produtividade foi de 5,35 g/L.h, ou seja,
produziu-se 45,5 g/L de etanol em 8,5 h de processo; na concentrao de 0,30 g de C/L de
mosto a produtividade foi de 4,39 g/L.h, ou seja, produziu-se 46,1 g/L de etanol em 10,5 h
de processo. Ento, apesar de que com o nutriente B ter-se constatado maior produtividade,
com o nutriente C obteve-se maior quantidade de etanol produzido. Ento complementando
o mosto de melao a 15Brix com 0,30 g do nutriente C/L, tornaria mais conveniente para o
processo, por ter obtido maior eficincia e etanol produzido.
Com base nos dados da composio qumica do mosto de caldo de cana a 14Brix,
observada na Tabela 5, foram realizadas complementaes com os nutrientes comerciais A
(0,50; 1,00 e 2,00 g/L), B (0,50; 1,00; 2,00; 3,00; 4,00 e 5,00 g/L) e C (0,50; 1,00; 2,00;
42
3,00; 4,00 e 5,00 g/L) cedidos pela QUIMATEC Produtos Qumicos LTDA, com suas
respectivas composies em termos de N, P, Mg, Mn e Zn.
Todos os ensaios apresentados foram realizados nas seguintes condies (mdia de 2
ensaios em perodos distintos): mosto a 14Brix, pH = 4,7 e ART = 136 g/L, temperatura
32C e agitao 200 rpm. Esto apresentados graficamente nas Figuras 28 a 39, pela
facilidade de visualizao, quando se comparam os dados obtidos com as diferentes
concentraes avaliadas. Os dados so mostrados nas Tabelas A15 a A20, apresentadas no
apndice.
Nas Figuras 28, 29 e 30 esto apresentados graficamente os valores de ART residual
(g/L) e etanol produzido (g/L) nos ensaios de complementao do mosto com os nutrientes
A, B e C, respectivamente.
60
50
ART residual (g/L) - Etanol (g/L)
40
30
20
10
0
0,0 0,5 1,0 1,5 2,0
Nutriente A (g/L)
Etanol (g/L)
ART residual (g/L)
43
60
40
30
20
10
0
0 1 2 3 4 5
Nutriente B (g/L)
Etanol (g/L)
ART residual (g/L)
60
50
ART residual (g/L) - Etanol (g/L)
40
30
20
10
0
0 1 2 3 4 5
Nutriente C (g/L)
Etanol (g/L)
ART residual (g/L)
44
Observando-se a Figura 28, nota-se que complementando o mosto de caldo de cana com
o nutriente comercial A na concentrao de 0,50 g de A/litro de mosto, h aumento no teor
alcolico com relao ao mosto sem complementao, porm em valores acima dessa
concentrao observou-se um decrscimo na concentrao de etanol, o que provavelmente
tenha sido proveniente da inibio da levedura pelo prprio etanol produzido e at mesmo
os componentes secundrios que se formam durante o processo fermentativo. Algo
semelhante acontece complementando o meio com o nutriente comercial B, onde observou-
se que utilizando a concentrao de 1 g de B/litro de mosto, a quantidade de etanol
produzido foi maior, em concentraes superiores a esta houve diminuio na produo de
etanol (Figura 29). J na Figura 30, notou-se que a concentrao de 2 g de C/litro de mosto
proporcionou maior obteno de etanol havendo um decrscimo em concentraes
superiores a esta. Com relao aos Acares Redutores Totais (ART) no final do processo,
notou-se o aproveitamento quase que total da levedura para converso dos acares do
mosto em etanol e outros componentes formados, restando apenas concentraes prximas
de zero.
Os dados de avaliao da eficincia da fermentao alcolica utilizando os nutrientes
comerciais A, B e C, podem ser observados nas Figuras 31, 32 e 33, respectivamente. Esta
eficincia diz respeito ao etanol formado em relao ao acar consumido. A eficincia
nada mais que o fator YP/S transformado em porcentagem.
45
Eficincia de fermentao (%) - Eficincia de processo (%)
83,6
83,4
83,2
83,0
82,8
82,6
82,4
82,2
82,0
81,8
81,6
81,4
0,0 0,5 1,0 1,5 2,0
Nutriente A (g/L)
87
86
85
84
83
82
81
80
0 1 2 3 4 5
Nutriente B (g/L)
46
Eficincia de fermentao (%) - Eficincia de processo (%)
84,0
83,5
83,0
82,5
82,0
81,5
81,0
80,5
0 1 2 3 4 5
Nutriente C (g/L)
47
Outro parmetro avaliado foi a produtividade, que representa a produo de etanol por
unidade de volume na unidade de tempo. Esses resultados esto apresentados nas Figuras
34, 35 e 36 utilizando os nutrientes comerciais A, B e C, respectivamente.
5,2
5,0
Produtividade (g/L.h)
4,8
4,6
4,4
4,2
Produtividade (g/L.h)
5,8
5,6
5,4
Produtividade (g/L.h)
5,2
5,0
4,8
4,6
4,4
0 1 2 3 4 5
Nutriente B (g/L)
Produtividade (g/L.h)
48
7,0
6,0
5,5
5,0
0 1 2 3 4 5
Nutriente C (g/L)
Produtividade (g/L.h)
49
4,5
4,4
4,3
pH: nutriente A
Acidez sulfrica (g/L de H2SO4): nutriente A
pH: nutriente B
Acidez sulfrica (g/L de H2SO4): nutriente B
pH: nutriente C
Acidez sulfrica (g/L de H2SO4): nutriente C
50
Sem B
A C
Complemento
80
Eficincia (%)
60
40
20
0
0,0 0,5 1,0 1,5 2,0
Nutrientes Comerciais (g/L)
6 B C
Sem
Complemento A
5
Produtividade (g/L.h)
0
0,0 0,5 1,0 1,5 2,0
Nutrientes Comerciais
51
Analisando as Figuras 38 e 39, verificou-se que em termos de eficincia de fermentao
e eficincia de processo o nutriente comercial que favoreceu melhor desempenho
fermentativo da levedura foi o nutriente B, aumentando as eficincias em at 5,8% com
relao ao ensaio sem complementao de nutrientes.
O comportamento dos trs nutrientes comerciais na fermentao do mosto de caldo de
cana a 14Brix pode ser explicado, pelo fato de que os micronutrientes (Mg, Mn e Zn) esto
em quantidades maiores na composio do nutriente B, elementos estes responsveis por
uma srie de reaes da via glicoltica. Essa afirmativa pode ser constatada comparando-se
as concentraes dos nutrientes B (1g/L) e C (2g/L). Em relao produtividade, observou-
se na Figura 39 que, utilizando o nutriente comercial C na fermentao do mosto de caldo
de cana obteve-se uma produtividade de 5,81 g/L.h, aumentando cerca de 18% com relao
a fermentao do mosto sem complementao de nutriente. No entanto, vale ressaltar que
utilizando o nutriente C produziu-se 58,1 g/L de etanol em 10 h de processo (PR = 5,81
g/L.h), o nutriente B produziu-se 60,0 g/L de etanol em 10,5 h de processo (PR = 5,71
g/L.h) e o nutriente A produziu-se 57,9 g/L de etanol em 11,5 h de processo (PR = 5,04
g/L.h). Ento complementando o mosto de caldo de cana a 14Brix com 1 g do nutriente
B/L, tornaria mais conveniente para o processo, por ter obtido maior quantidade de etanol,
em menor tempo de processo.
52
6 CONCLUSES
53
7 SUGESTES
54
8 REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
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61
APNDICES
62
APNDICE A DADOS DOS ENSAIOS DE FERMENTAO
63
Tabela A4 Fatores de rendimento, eficincia de fermentao e produtividade de etanol
para mosto de melao a 15, 18 e 21Brix.
PARMETROS BRIX
15 18 21
PRODUTIVIDADE EM ETANOL (PR)
(g/L.h) 4,87 4,93 4,95
FATOR DE RENDIMENTO (YP/S)
(g de glicose/g de etanol) 0,398 0,366 0,349
EFICINCIA DE FERMENTAO (b%) 77,9 71,6 68,3
EFICINCIA DE PROCESSO (p%) 72,0 66,93 64,0
64
Tabela A7 Fermentao desenvolvida pelo fermento Fleischmann (levedura
Saccharomyces cerevisiae) no mosto de caldo de cana a 16Brix, no tempo total de 12
horas.
INCIO DA FINAL DA
ANLISES FERMENTAO (*) FERMENTAO (*)
ART (g/L) 162,6 0,55
Acidez sulfrica (g/L de H2SO4) 4,3 3,0
pH 4,66 3,95
Etanol(g/L) 0 64,34
(*) Mdia de 2 ensaios em perodos distintos
65
Tabela A9 Resultados da complementao do nutriente comercial A. O volume de mosto
de melao utilizado para cada ensaio foi de 1000 mL (mosto com 15Brix, pH = 4,5 e ART
= 112,4 g/L).
Vinho (*)
Nutriente A
(g/L de
pH Acidez Etanol ART
mosto)
sulfrica (g/L) (g/L) Tempo de Fermentao (h)
(g/L H2SO4)
66
Tabela A11 Resultados da complementao do nutriente comercial B. O volume de mosto
de melao utilizado para cada ensaio foi de 1000 mL (mosto com 15Brix, pH = 4,5 e ART
= 112,4 g/L).
Vinho (*)
Nutriente B
pH Acidez Etanol ART
(g/L de
sulfrica (g/L) (g/L) Tempo de fermentao (h)
mosto)
(g/L H2SO4)
67
Tabela A13 Resultados da complementao do nutriente comercial C. O volume de mosto
de melao utilizado para cada ensaio foi de 1000 mL (mosto com 15Brix, pH = 4,5 e ART
= 112,4 g/L).
Vinho (*)
68
Tabela A15 Resultados da complementao do nutriente comercial A. O volume de
mosto de caldo de cana utilizado para cada ensaio foi de 1000 mL (mosto com 14Brix, pH
= 4,7 e ART = 136 g/L).
Vinho (*)
Nutriente A
(g/L de mosto)
pH Acidez Etanol ART Tempo de fermentao (h)
sulfrica (g/L) (g/L)
(g/L H2SO4)
69
Tabela A17 Resultados da complementao do nutriente comercial B. O volume de mosto
de caldo de cana utilizado para cada ensaio foi de 1000 mL ( mosto com 14Brix, pH = 4,7
e ART = 136 g/L).
Vinho (*)
Nutriente B
(g/L de mosto)
pH Acidez Etanol ART
sulfrica (g/L) (g/L) Tempo de fermentao (h)
(g/L H2SO4)
70
Tabela A19 Resultados da complementao do nutriente comercial C. O volume de mosto
de caldo de cana utilizado para cada ensaio foi de 1000 mL (mosto com 14Brix, pH = 4,7 e
ART = 136 g/L).
Vinho (*)
Nutriente C
(g/L de mosto)
pH Acidez Etanol ART Tempo de fermentao (h)
sulfrica (g/L) (g/L)
(g/L H2SO4)
71
APNDICE B1 CLCULO DO NUTRIENTE A PARA COMPLEMENTAO DO
MOSTO DE MELAO A 15BRIX.
mL de fsforo g
0,141 x 2,3 = 0,3243 g/L
mL L
g de fsforo
530
Kg de nutriente
Suposies:
y = 0,0265 g de P2O5
72
APNDICE B2: CLCULO DO NUTRIENTE B PARA COMPLEMENTAO DO
MOSTO DE MELAO A 15BRIX.
mL de nitrognio g
0,166 x 1,250 = 0,2075 g/L
mL L
g de fsforo
234
Kg de nutriente
Suposies:
y = 0,0234 g de N
73
APNDICE B3: CLCULO DO NUTRIENTE C PARA COMPLEMENTAO DO
MOSTO DE MELAO A 15BRIX.
mL de nitrognio g
0,166 x 1,250 = 0,2075 g/L
mL L
g de fsforo
288
Kg de nutriente
Suposies:
y = 0,0288 g de N
74
APNDICE B4: CLCULO DO NUTRIENTE A PARA COMPLEMENTAO DO
MOSTO DE CALDO DE CANA A 14BRIX.
mL de fsforo g
0,015 x 2,3 = 0,0345 g/L
mL L
g de fsforo
530
Kg de nutriente
Suposies:
y = 0,265 g de P2O5
75
APNDICE B5: CLCULO DO NUTRIENTE B PARA COMPLEMENTAO DO
MOSTO DE CALDO DE CANA A 14BRIX.
mL de nitrognio g
0,022 x 1,250 = 0,0275 g/L
mL L
g de fsforo
234
Kg de nutriente
Suposies:
y = 0,117 g de N
76
APNDICE B6: CLCULO DO NUTRIENTE C PARA COMPLEMENTAO DO
MOSTO DE CALDO DE CANA A 14BRIX.
mL de nitrognio g
0,022 x 1,250 = 0,0275 g/L
mL L
g de fsforo
288
Kg de nutriente
Suposies:
y = 0,144 g de N
77