Recuperação e purificação de bioprodutos

É a área da biotecnologia responsável pelos processos de separação e

purificação de produtos obtidos por fermentação.

Considerações:

- diversidade de produtos obtidos em processos fermentativos.

- localização relação a célula ;

- não há processos de recuperação de produtos biotecnológicos de

aplicação geral.

- a cada operação unitária ocorre a redução do rendimento do produto.

A definição das operações unitárias de um processo de purificação

depende do uso da molécula alvo, suas características físico-químicas, bem
como aquelas impurezas.

1 – Clarificação

Separação de células suspensas em um meio de cultivo.

1.1 – Filtração convencional

- utilizada para grandes volumes de suspensão de células.

- empregada quando a assepsia não é necessária.

Fig 3.3

1.2 – Filtração tangencial

Processo de microfiltração nos quais o fluido de alimentação
escoa tangencial mente à superfície do meio filtrante.
Vantagem:
- a tensão de cisalhamento do fluido minimiza o acúmulo de
células e seus fragmentos na superfície das membranas.

1.3 – Centrifugação

Aceleração da sedimentação por ação de um campo gravitacional

Centrifugo. Baseia-se na diferença de densidade entre célula e meio liquido.

2 – Rompimento celular
A escolha do método depende do rendimento, especificidade,
necessidades de controle de T e pH, e custo operacional.
2.1 – Métodos enzimáticos
Utilizados para a recuperação de biomoléculas sensíveis a tensão de
cisalhamento ou pressões de trabalho gradas pelos métodos
mecânicos.
Remoção de parte da parede celular

Pressão osmótico interna aumenta

Rompimento da membrana citoplasmática

Liberação do conteúdo intracelular para o meio.

Vantagens:

- facilidade de controle de pH e T

- baixo investimento em equipamentos

- alta especificidade p/ degradação da parede celular

Desvantagens

- alto custo de enzimas

- variação de eficiência da lise enzimática com o estado fisiológico do m.o.

2.2 – métodos mecânicos

- método mais utilizado em escala industrial

- homogeneizador de alta pressão.

3 – Purificação de Baixa Resoluçao

3- 1 Precipitação

- método mais tradicional.

- pouco poder de purificação.

- “Salting – out”: precipitação com altas concentrações salinas.

Sais mais utilizados

- citrato de sódio

- sulfato de sódio

- sulfato de amônia

Também podem ser utilizados solventes orgânicos:

- álcoois

- acetonas

3.2 – Ultrafiltração

Transporte de soluções através de membranas sob pressões.

- membranas com poros de 0,0001 a 0,1um.

Vantagens:

- Separa bioprodutos de caldos fermentados diluídos

- promove a concentração de compostos a baixa T e P

- possibilita a retirada de sais e outras moléculas pequenas

- mantem constante o pH do meio

Desvantagem:

- baixa resolução

3.3 – Extração em sistemas de 2 fases aquosas (SDFA)

A molécula alvo e impurezas são separadas como resultado de suas diferentes
solubilidades nas fases liquidas.

- moinho de bolas.