Universidade Estácio de Sá

Graduação: Área de Saúde Disciplina: Bioquímica Aplicada

Prof.ª Roteiro de Atividade Prática –

Laboratório de Bioquímica
Prática – Proteínas

Título: Identificação de PROTEÍNAS por ação de agente físico (calor) ou químicos (ácido
e base).

Objetivo: observar a desnaturação de proteínas de carne em presença desses

agentes desnaturantes.

Procedimento:
Pipetar 2 mL de solução rica em proteína (carne macerada com solução fisiológica) em
quatro tubos de ensaio.
Ø o tubo 1 será utilizado como controle (padrão de comparação para os outros
tubos)
Ø O tubo 2 será aquecido em banho-maria, aquecer a 100°C por 10 minutos.
Ø ao tubo 3 serão acrescentados 2 mL de ácido nítrico (HNO3)
Ø ao tubo 4 serão acrescentados 2 mL de hidróxido de sódio (NaOH)
Ø observar os resultados, anotar, refletir sobre o conteúdo teórico da aula
(desnaturação) para tirar as conclusões

tubo 1 2 mL solução proteína CONTROLE

tubo 2 2 mL solução proteína aquecer por 10 min a 100°C

tubo 3 2 mL solução proteína 2 mL HNO3

tubo 4 2 mL solução proteína 2 mL NaOH

Fundamentação teórica:
Temperatura: o efeito da temperatura promove a destruição de pontes de
hidrogênio e interações hidrofóbicas, o que levaria a um desnovelamento da
molécula, em geral há coagulação da proteína (formação de um coágulo
branco). A coagulação e a precipitação por aquecimento é o meio mais comum
de desnaturação proteica.

Ácidos e bases fortes: levam a alteração da carga líquida da proteína. Em

determinados valores de pH, as cargas positivas e negativas das proteínas
desequilibram a estrutura das proteínas. A conformação nativa da proteína é
estável apenas em uma faixa estreita de pH. Em geral, também ocorre a
coagulação das proteínas (formação de um coágulo branco).

Recomendações:
• Execute todos os procedimentos com cuidado.
• Lembre-se das normas de segurança. Uma delas é ter à mão a solução de bicarbonato
de sódio quando vamos trabalhar com ácido forte e solução de ácido acético (quando
trabalharmos com hidróxido de sódio (=base forte).
• Anote seus resultados para finalizar confeccionando o relatório.
• Num relatório devem constar: Título, Objetivos, Material Utilizado, Procedimento
Experimental (Métodos), Resultados (observados) e finalmente a Conclusão, quando
se reflete sobre os resultados observados para chegarmos a alguma(s) dedução(ões).
Boa Atividade Prática