05-Jun-19

Celula, núcleo e genes

Por
Carlos J. Quembo, PhD

Biotecnologia
Biotecnologia é o uso de organismos vivos ou parte
deles, para a produção de bens e serviços.
Nesta definição se enquadram um conjunto de
actividades que o homem vem desenvolvendo há
milhares de anos, como a produção de alimentos
fermentados (pão, vinho, iogurte, cerveja, e outros).
Por outro lado a biotecnologia moderna se
considera aquela que faz uso da informação
genética, incorporando técnicas de DNA
recombinante.

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Biotecnologia
A biotecnologia
combina disciplinas tais
como genética, biologia
molecular, bioquímica,
embriologia e biologia
celular, com a
engenharia química,
tecnologia de
informação, robótica,
bioética, investigação
forense, biodireito.

A Célula
É a unidade fundamental dos seres vivos,ou a
menor unidade capaz de manifestar as
propriedades de um ser vivo. A Célula é capaz
de:
sintetizar seus componentes,
Crescer e multiplicar-se.

Todos os seres vivos são compostos desta

unidade fundamental, desde:
As mais simples estruturas unicelulares,
As bactérias
Os protozoários,
Mais complexos, como o ser humano e as plantas

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Organelos celulares
São estruturas subcelulares comuns a muitos
tipos de células

Organelos desenvolvem funções distintas, que,

no total, produzem as características de vida
associada com a célula

Na célula animal eucariotica existem três

componentes básicos:
membrana celular,
citoplasma e
núcleo

O Núcleo
O núcleo controla todas as actividades celulares:
representa assim o centro de coordenação
celular.

Este organelo é constituido pelos cromossomas,

cromatina que apresenta o DNA

É no DNA onde estão localizados a maioria dos

genes, que contém a informação genética
responsável pela actividade celular

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O Núcleo (Cont...)

Tais informações são transmitidas ao citoplasma

atravês do RNA-mensageiro, que é sintetizado
por uma série de enzimas tendo como molde o
DNA (cromatina), onde irá regular atravês dos
ribossomas toda a síntese de proteínas
específicas(estruturais e enzimáticas),
responsáveis pela arquitetura e fisiologia
celulares.

Os cromossomas e os genes

O gene compreende a região da molécula de

DNA que contém no seu segmento uma
informação genêtica codificada através de bases
nitrogenadas adenina (A), guanina (G), citosina
(C) e timina (T)

O conjunto de genes e outras nucleo-proteinas

forma a unidade cromossômica

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Os cromossomas e os genes

Fonte: Merck Manual

Função dos genes

Os genes são os repositorios da informação
genética dos seres vivos
Esta informação pode ser descodificada (processo de
transcrição) pelo RNA e que termina com a produção de
moléculas de proteinas (processo de translação) e se
expressar em caracteristcas fenotipicas

Os genes podem se replicar (multiplicar em

copias iguais). Estes transmitem hereditariamente
todas as características de um organismo,
conforme a propagação da espécie
Os genes podem ter algumas mudanças ou
sofrer mutações que podem resultar em
alterações genotipicas ou fenotipicas

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Função dos genes

Devido à compartimentalização das células
eucarióticas, a transferência de informação do
núcleo para o citoplasma é um processo muito
complexo.
Enquanto o DNA se forma e se replica no núcleo da
célula,
no citoplasma ocorre a síntese de proteínas.
A informação contida no DNA deve, portanto, ser
transportada para o citoplasma e, assim, usada para ditar
a composição das proteínas.

O código do DNA é transcrito para o RNA

mensageiro, que, então, deixa o núcleo para ser
traduzido em proteínas.

RNA (Acido Ribonucleico)

Existem três tipos principais de RNA que
participam do processo da síntese protéica:
RNA ribossômico (RNAr),
RNA transportador (RNAt) e
RNA mensageiro (RNAm).

Os três principais tipos de RNA diferem um do

outro em termos de tamanho, função e
modificações estruturais especiais.

O RNAm transporta a informação genética do

DNA ao citoplasma, onde é usado como molde
para a síntese de proteínas.

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RNA (Acido Ribonucleico)

Cada RNAt serve como um "adaptador", que

transporta seu aminoácido específico ao sítio de
síntese de proteínas (que ocorre nos ribossomas),
onde reconhece o códon que especifica a adição de seu aminoácido
à cadeia peptídica em formação

RNAr é encontrado em associação com uma série

de proteínas diferentes, como componente dos
ribossomas; forma a estrutura complexa que serve
como sítio para a síntese de proteínas

Transcrição, transdução e translação

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Transcrição, transdução e translação

Três nucleotídeos codificam um aminoácido

As proteínas são construídas a partir de um

conjunto básico de 20 aminoácidos, mas existem
apenas quatro bases

Experiências genéticas mostraram que um

aminoácido é de facto codificado por um grupo de
três bases, ou códon

Transcrição, transdução e translação

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Código genético

Aminoácidos e proteinas
As proteínas são as moléculas orgânicas mais
abundantes e importantes nas células e
perfazem 50% ou mais da sua materia seca.

São encontradas em todas as partes de todas as

células, uma vez que são fundamentais sob todos
os aspectos da estrutura e função celulares.

Existem muitas espécies diferentes de proteínas,

cada uma especializada para uma função
biológica diversa. Além disso, a maior parte da
informação genética é expressa pelas proteínas.

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Aminoácidos e proteinas
As proteínas pertencem à classe dos
peptídeos, pois são formadas por aminoácidos
ligados entre si por ligações peptídicas.
Uma ligação peptídica é a união do grupo amina (-NH 2 )
de um aminoácido com o grupo carboxila (-COOH) de
outro aminoácido, através da formação de uma amida.
São os constituintes básicos da vida: tanto que seu nome
deriva da palavra grega "proteios", que significa "em
primeiro lugar".
Nos animais, as proteínas correspondem a cerca de 80%
do peso dos músculos desidratados, cerca de 70% da
pele e 90% do sangue seco.

Importância das proteínas,

Está relacionada com suas funções no organismo,
e não com sua quantidade.

Todas as enzimas conhecidas são proteínas ou tem

base proteica;
Muitas vezes, as enzimas existem em porções muito
pequenas. Mesmo assim, estas substâncias catalisam
todas as reações metabólicas
Capacitam aos organismos a construção de outras
moléculas - proteínas, ácidos nucléicos, carboidratos
e lípidos - que são necessárias para a vida.

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DIAGNOSTICO MOLECULAR
PCR

Passos principais para a extração de

DNA
Para cada tipo de amostra, vários protocolos
podem ser testados, adaptados e optimizados, de
maneira a se conseguir DNA de boa qualidade.

Lise das membranas plasmáticas e nucleares;

Degradação de proteínas;

Precipitação e purificação do DNA

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Lise da membrana citoplasmática e

nuclear
Lise das membranas plasmáticas e nucleares;
◦ Substancias que provocam o rompimento das ligações
hidrofóbicas e destruam a bicamada lipídica

• Proteinase k e SDS: Lise + degradação das

proteinas

• Fenol: Provoca a desnaturação das proteínas de

maneira eficiente, remove as partes orgânicas e se
extrai o DNA

• Clorofórmio: Retira resíduos de fenol

Aviso: O fenol é um produto altamente tóxico, irritante para a pele e
mucosas

Purificação do DNA (eliminação de resíduos

orgânicos)

• Uso de Acetato de Sodio e Isopropanol para a

precipitação do DNA e formação do Pellet pois:
– A molécula de DNA não é solúvel nestas substancias incluindo
o álcool e, desta maneira, tende a formar um aglomerado
(Pellet)
– O Pellet formado é lavado em álcool (absoluto ou 70%)
molecular grade

• Quantificação DNA/RNA num espectrofotômetro

a um comprimento de onda de 260nm (DNA)
– Qualidade da extração está entre 1,7 e 1,9 amostra de DNA
com pureza adequada
– Um valor inferior indica contaminação com proteínas e um
valor superior indica contaminação com RNA

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Passos basicos de extracao do DNA a

partir do sangue

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