Aplicação da embriologia de peixes

na ecotoxicologia aquática

Dra. Maria do Carmo Faria Paes

Disciplina de Biologia do desenvolvimento de peixes
• Conceitos gerais

• Conhecimentos sobre o
desenvolvimento
embrionário/larval de
teleósteos aplicados nos
testes ecotoxicológicos

• Tipos de análises mais

comuns

• Meu projeto de
postdoc na Alemanha
Conceito:
Ecologia Toxicologia

Ciência que estuda a Ciência que estuda o

relação dos seres vivos efeito de um agente
entre si e com o ambiente químico em uma dada
que os cerca. espécie

Ecotoxicologia

Ciência que estuda os efeitos de um ou mais agentes

químicos sobre uma população ou comunidade de
organismos e seus reflexos sobre um ecossistema.
 Breve
histórico:
1962: Silent Spring – Rachel Carson
Alertou sobre os efeitos catastróficos do uso
indiscriminado de pesticidas (1940/50). - DDT
 O termo ECOTOXICOLOGIA foi sugerido pela primeira vez em
1969 por René Truhaut, reunindo a designação eco (do grego
oikos: casa, habitat) e a palavra toxicologia (ciência dos
agentes tóxicos).

NO MUNDO...

- A partir dos anos 70: aplicação de testes ecotoxicológicos.

- Na década de 80: testes comecaram a ser padronizados.

NO BRASIL...

- A partir da década de 70: primeiros trabalhos.

- 1975 CETESB: elaboração de normas técnicas.
- 2000: Sociedade Brasileira de Ecotoxicologia - SETAC Brasil.
 APLICAÇÕES
• Avaliação de áreas contaminadas;
• Avaliação da eficiência do tratamento de esgoto;
• Ecotoxicidade de novos químicos;
• Monitoramento de efluentes;
• Acidentes ambientais.
 Principais fontes de contaminacao
Chuvas contaminadas Agrotóxicos, fertilizantes,
Esgoto doméstico e pesticidas
industrial

2,1 bilhões de pessoas no Despejos industriais, Fossas e aterros

mundo não têm acesso a metais pesados, petróleo
água potável em casa!
4,5 bilhões nao tem acesso a
um saneamento seguro
Cenário brasileiro
Apenas 50,3% da população tem acesso à coleta de esgoto mais de 100
milhões de pessoas utilizando medidas alternativas para lidar com os dejetos
(fossas ou diretamente nos rios) (SNIS, 2016).

Tratamento de esgoto convencional é deficiente em remover inúmeras

substâncias químicas potencialmente tóxicas da água (Koerich, 2015; Tousova
et al., 2017).

• Sabe-se que existem milhares de substâncias

presentes nos ecossistemas aquáticos, cujos efeitos
tóxicos ainda são completamente desconhecidos.

• SUBSTÂNCIAS EMERGENTES: agrotóxicos, medicamentos,

plastizantes, produtos de limpeza e higiene, químicos em
geral (conservantes, corantes), etc.
Como podemos avaliar a toxicidade de uma substância
no ambiente aquático?
• Escolha da substância;

• Avaliação da presença e concentração desta no ambiente aquático;

• Organismo teste;

• Concentrações letal (CL50) e subletal.

*Europa: ética e embriões

Organismo teste
Embriologia de teleósteos
nos testes ecotoxicológicos
Análises de Toxicidade Aguda
Quando a substância causa danos
ou morte em curto
espaço de tempo.
 Fish Experimental tests (FET)
1. Preparo da água artificial (3 dias);
2. Preparo das substâncias – solução estoque e solução para uso;
3. Preparo de solução de solvente, quando for o caso;
4. Preparo da solução de controle positivo (3,4-dichloroaniline).
Fish Experimental tests (FET)

> 90%
Fish Experimental tests (FET)

nC: Negative control (artificial water), pC: positive control (4.0 mg/L
of 3,4-dichloroaniline, recommended for zebrafish), iC: internal plate
control; sC: solvent control and 5 concentrations of test substance.
Endpoints
 Endpoints

From 24 hours From 48 hours From 72, 96 and 120 hrs

Coagulation of embryos No pigmentation Hatched/ no hatched

No somites No eye pigments Fin deformed
No detachment of the tail Spine deformation Swimming behavior
bud unnormal
No spontaneous Slow/no heartbeats Apoptosis
movements
Malformed embryo No blood circulation
Underdevelopment Edemas
Tipos de análises
complementares
mais comuns
• Microscopia de fluorescencia

Corantes vitais – acridine orange

(apoptoses)

(zebrafish sob efeito de etanol 0.3%/96h)

• Histologia

Medicamento para epilepsia afetando formacao dos olhos em zebrafish

Propylgallate no sistema nervoso de zebrafish (pesticida)

Comportamento (neurotoxicidade)

• Parâmetros de locomoção: velocidade,

distancia;
• Frequência cardiovascular;
• Respostas à estímulos de luz/escuridão.