SP4 – Medicina Molecular

Fechamento

1. Listar os tipos e as características das células tronco.

 Ainda tem a capacidade de se diferenciar, originando outras células
tronco ou uma célula em processo final de diferenciação
 Divisão simétrica, duas filhas equivalentes. Assimétrica dando origem
a células que podem estar em fase final de diferenciação.
 Quanto mais adulta menos capacidade de diferenciação
 Células tronco
o Embrionárias: Retirada do blastocisto na região do epiblasto,
para elas serem diferenciadas o resultado será um corpo
embrionário, formando diferentes tipos de tecidos.
 Pluripotente: retirada no quarto dia, retirada do
embrioblasto quando começa a se diferenciar (qualquer
tecido mas sem originar um organismo completo)
 Totipotente: origina todas as partes, retirada da fase de
mórula (tanto um organismo completo ou qualquer
tecido), epiderme, espermatogonias de tecidos.
o Adultas:
 Multipotentes: as da pele, intestino, são chamadas de
multipotente por serem menos versáteis do que as
embrionárias, tem diferenciação limitada a alguns tipos
de células. Diferenciam-se de acordo com o local onde
elas estão.

 Pluri se diferencia da multi pela presença do fator de transcrição,

contendo fosfatase alcalina.

 Pluripotente induzida: Célula multi volta ao estado de pluri, ativando

alguns genes e permitindo ela fazer parte de outros tecidos.
 Proteína WNT(wingless / integrated) da o sinal para a célula tronco de
diferenciar.
  Células tronco tumorais, CD-133 são mais resistente a tratamentos de
câncer, como quimioterapia e radioterapia.
 Células tronco neurais podem originar neurônios, são multipotentes
 Risco da formação de tumores em casos de terapia (Teratoma: tumor
germinativo formado por um ou mais tecidos embrionários, geralmente
encontrado no ovário ou testículo).

2. Compreender a técnica do PCR baseado na replicação do DNA.

 A técnica da PCR possibilita a síntese do fragmento de DNA, gerando
uma quantidade ilimitada de uma sequencia que temos interesse.

 Duas coisas são necessárias, uma DNA polimerase(Ataque

Polimerase, derivada da Thermus Aquaticus), e os primers que são
responsáveis por identificar qual parte do material genético vai ser
replicada.

 A reação acontece dentro de um tubo em uma solução de Cloreto de

Magnésio, e deve ser feita dentro de um termociclador que irá regular
a temperatrura automaticamente para a realização do experimento.

 Há um aquecimento inicial para desfazer a dupla hélice, após isso ia

se adiciona uma quantidade enorme de nucleotídeos para ocorrer a
ligação, após isso vem a ataque polimerase para fazer o nucleotídeo
se ligar no lugar correto, a partir da demarcação do primer.

 Etapas:

o 1º Desnaturação (90ºC), se repete 30/40 vezes, separação da

dupla hélice em duas fitas simples.
o 2ºEtapa de Tampão (1 min)
 o 3º Anelamento - Pareamento dos primers por meio de ligações
de hidrogênio ao DNA alvo de fita simples.
o 4º extensão – síntese da cadeia alimentar de cada cadeia
molde, catalisada pela DNA polimerase.

 Existem dois tipos de primers um que lê 3’ -> 5’ e outro 5’ -> 3’.

 É possível replicar o que já foi replicado no primeiro experimento,
tornando a reação mais rápida.

3. Reconhecer as aplicações da técnica do PCR na área de saúde.

 Detecção do HIV, patógenos que demoram para se pronunciar.
 Medicina forense, pois precisa de pouco material para poder fazer a
técnica.
 Detecção de mutações associadas a anemia caliciforme, talacemia,
fenilcetomuria, fibrose cística.
 Suscetibilidade de medicamentos.
 Na odontologia favorece a detecção de pacientes com pré disposição
de câncer bucal, caries, etc.
 Estudo da expressão genica.
 Origem de alimentos.
 Diagnostico pré-natal em casos de risco.

4. Reconhecer no CEM e na legislação o direcionamento sobre o uso de células

tronco.
 Pode utilizar para fins de pesquisa embriões:
o produzidos artificialmente,
o com 3 anos de congelamento,
o consentimento dos progenitores,
o embriões inviáveis.
 Veta a clonagem, mesmo sendo terapêutica
  Proibida engenharia genética em células, proibida no Brasil e
autorizado em alguns países.
 No CEM, os médicos não podem desrespeitar a legislação no sentido
da doação de órgão e tecidos (transplantes) e não pode criar seres
humanos geneticamente modificados (não pode escolher sexo,
originar híbridos; proibida eugenia).
 Fertilizar somente os embriões que serão utilizados na fertilização in-
vitro

Tema da Síntese

Compreender a técnica de análise molecular baseada na replicação de DNA – PCR

e relacionar com os direcionamentos sobre o uso das células-tronco no CEM e na
legislação.