IIII JORNADA DE INICIAÇÃO CIENTIFICA & TECNOLÓGICA DO INMETRO

ATIVIDADES TÉCNICAS DESENVOLVIDAS NO ESTÁGIO

OBRIGATÓRIO SUPERVISIONADO

Maria Eduarda de Sousa Amorim¹ ² ³, Mayara Fortes de Oliveira dos Santos¹ ² ³, Micaella dos Santos Carriço¹ ² ³
Daniela Toma de Moraes Akamine²

1. Curso Técnico em Biotecnologia – Instituto Nacional de Metrologia, Qualidade e Tecnologia (Inmetro);

2. Laboratório de Microscopia Aplicada às Ciências da vida do Inmetro/Dimav/Lamav;
3. Ce Círculo Operário.

Introdução
 Técnicas de Pipetagens:
O Curso Técnico em Biotecnologia é uma especialização técnica coincidida ao ensino • Materiais:
médio e dada pelo Inmetro juntamente com o Colégio Estadual Círculo Operário. Essa • Água Destilada;
formação tem como objetivo principal formar profissionais qualificados para um ambiente • Balança analítica;
laboratorial. • Becker;
Em resumo, esse trabalho visa descrever atividades realizadas no último período do • Etanol;
ensino técnico, que é voltado para o estágio obrigatório. Esse período requer do estagiário • Óleo;
uma carga horária de 20 horas semanais, que totaliza 800 horas ao final do ano. • Pipetas de 10µl - 100µl - 1000µl;
Esse apoio técnico é realizado no Inmetro, mais especificamente no Laboratório de • Sacarose.
Microscopia Aplicada às Ciências da Vida no qual a sua diretoria é a DIMAV. Esse laboratório
fica localizado no prédio 47 e tem como função realizar medições baseadas em técnicas de Nesse treinamento foi realizado atividades para desenvolver conhecimentos sobre as
microscopia. técnicas de pipetagem de modo direto e reverso.
Na ala direita do prédio ficam localizadas as salas de processamento de amostra, A Pipetagem Direta é o modo padrão, normalmente utilizado em amostras com
lavagem e esterilização, bioquímica, cultivo, difração de Raio-x e estoque. Na ala esquerda viscosidade normal, nessa técnica o segundo estágio é usado para a dispensa total do
ficam localizadas as salas de criotécnicas, crioultramicrotomia, ultramicrotomia, microscopia líquido. Já a Pipetagem Reversa é empregada em líquidos voláteis e viscosos, diminuindo
eletrônica de transmissão e varredura, plataforma de citometria de fluxo, preparo de amostra assim erros na transferência de volumes, diferencialmente da direta, essa técnica usa o
forense, microscópio de força atômica, microscopia confocal de varredura à laser, microscópio segundo estágio para a etapa de aspiração da amostra
de super resolução e microscopia óptica II conforme descrito na NIT-LAMAV-007.

Materiais e Métodos
 Treinamento em cultivo de fungos:
• Materiais:
• Ágar;
• Agitador Magnético;
• Água Destilada;
• Autoclave;
• Balança Analítica;
• Becker;
• Bisturi;
• Cabine de Segurança Biológica;
• Esterilizador;
• Parafilm;
• Placa de Petri; Figura 3. Demonstração do método direto e reverso. Fonte: NIT-LABIO-032.
• Potato Dextrose;
 Treinamentos em normas da Dimav e do Lamav:
Para a preparação do meio sólido pesaram-se, na balança analítica, 13g de Ágar e 7,8g
de Potato Dextrose. Em seguida, ambos foram adicionados aos poucos em 200ml de água • NIE-DIMAV-055 – Procedimento para Checagem Intermediária de Instrumentos de
destilada dentro de um becker de 500ml e levados para o agitador magnético na velocidade 5 Medição;
em 70ºC por cinco minutos, onde permaneceram até serem dissolvidos completamente. Após • NIE-DIMAV-048 – Política de Uso da Sala de Lavagem e Esterilização do Prédio 47;
ficar homogêneo, o meio foi conduzido para a autoclave, onde ficou em 120ºC por 20 minutos • NIE-DIMAV-031 – Descarte de Resíduos Biológicos;
para ser esterilizado. • NIT-LAMAV-007 – Política de Uso do Lamav;
Ao sair da autoclave, o meio foi colocado nas placas de petri e inseridos na geladeira • NIE-DIMAV-058 – Descarte, Identificação e Acondicionamento de Resíduos Químicos.
para ficarem consistentes. • Capacitação em biossegurança.
Em seguida, a técnica de repique foi realizada (Figura 1). Essa técnica consiste em
cortes feitos através de um bisturi que necessita passar sempre por um esterilizador. Esses Resultados
corte são executados em meios onde já estão os microrganismos, e em seguida são Pipetagem com água Pipetagem com óleo
Direta Reversa Direta Reversa
transferidos para outras placas com o intuito de crescimento e armazenamento fúngico. P10 P100 P1000 P10 P100 P1000 P10 P100 P1000 P10 P100 P1000
Posteriormente as placas são envolvidas por um parafilm e todo esse processo é realizado na 8283,8 8372,1 9269,9 7699,3 7850,4 8929,2 8284,8 8344,7 9203,4 8288,5 8383,9 9284
Cabine de Segurança Biológica (Figura 2). 8284,9 8373,4 9280,9 7698,7 7803,5 8936,3 8284,7 8340,2 9103 8287,8 8386 9369,1
8383,7 8375,1 9263,2 7698,3 7803,7 8922 8287 8352,2 9010,1 8286,6 8379,4 9310,5
8284,6 8374,4 9280,7 7698,8 7803 8832,7 8286 8334,6 8984,8 8285,8 8430,7 9332,1
8283,6 8373,8 9280 7698,9 7805,1 8928,6 8282,7 8321,5 9033,6 8286,8 8374,8 9103,7
8283,7 8378,2 9254,3 7698,7 7803,2 8932,9 8283,9 8384 9067,4 8286,2 8368,4 9151,1
8284 8373,9 9292 7699,1 7803,3 8932,8 8282,4 8373,7 9121,4 8277,3 8394,1 9347,8
8284,2 8373,7 9290,4 7698,6 7802,5 8931,1 8284,8 8340,4 9072 8287,8 8380 9270,5
8282,7 8373,7 9293,1 7699 7804,3 8931,8 8284,4 8342,1 9022,9 8278,5 8375,3 9259,9
8284,9 8374,8 9293,3 7698,8 7803,9 8927,7 8281,6 8365,7 8989 8281,4 8365,8 9206,8

Valor M: Valor M: Valor M: Valor M: Valor M: Valor M: Valor M: Valor M: Valor M: Valor M: Valor M: Valor M:
8294,01 8374,31 9279,78 7698,82 7808,29 8920,51 8284,23 8349,91 9060,76 8284,67 8383,84 9263,55
Desvio P: Desvio P: Desvio P: Desvio P: Desvio P: Desvio P: Desvio P: Desvio P: Desvio P: Desvio P: Desvio P: Desvio P:
31,52087 1,594748 13,52453 0,278089 14,81347 31,08942 1,64725 19,14 68,0155 4,07187 18,4353 86,3067
Figura 4. Resultado das pipetagens com água. Figura 5. Resultado das pipetagens com óleo.

De acordo com os cálculos realizados pelo desvio padrão (Figura 4 e 5), é possível
visualizar que a pipetagem direta é mais precisa quando se trata de substâncias líquidas. Já
a reversa possui uma maior exatidão relacionada a substâncias viscosas e voláteis.

Figura 1. Cortes do método de repique.
Fonte: Cogusbox, 2014.
Referências
SANCHES, Cristina. A IMPORTÂNCIA DA PIPETAGEM NOS PROCESSOS ANALÍTICOS.
2016. Disponível em: https://www.labnetwork.com.br/especiais/a-importancia-da-pipetagem-
Figura 2. Método repique.
nos-processos-analiticos. Acesso em: 09/09/2022.
Fonte: Dimav/Lamav, 2022.