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INTRODUÇÃO
Corynebacterium striatum é um microorganismo emergente potencialmente patogênico e
multirresistente a drogas (MDR) que causa infecção hospitalar em pacientes que sofreram
longas internações hospitalares, aqueles que receberam vários cursos de antibióticos (Camello
et al., 2003, Otsuka et al., 2006, Renom et al. de 2007, Baio et al. 2013), aqueles com síndrome
de imunodeficiência adquirida (AIDS) ou câncer e aqueles que receberam um transplante (Tarr
et al., 2003, Martins et al. 2009). Casos de infecções graves em indivíduos
imunocomprometidos e imunocompetentes e surtos nosocomiais devido a MDR C. striatum
estão aumentando tanto em países industrializados e em desenvolvimento. C. striatum tem
sido associada com casos de infecções pulmonares, septicemia, endocardite, meningite,
artrite, osteomielite, sinusite, feridas da pele e infecções intra-uterinas.
Análise de Genotipagem por eletroforese em gel de campo pulsado (PFGE) identificou tipos
de PFGE associados com surtos nosocomiais de origem respiratória e com resistência a uma
ampla gama de antibióticos (fenótipo MDR). Na Itália, MDR C. striatum isolados foram
recuperados de pacientes hospitalizados que foram submetidos à cirurgia ou tenham sido
admitidos em unidades de terapia intensiva (UTI). Estes isolados foram responsáveis por casos
de pneumonia associada à ventilação mecânica e traqueobronquite, sepse relacionada ao
cateter e infecções de feridas. As infecções causadas por esta espécie têm sido fortemente
associadas com dispositivos, incluindo não só os tubos e cateteres, mas também fios da ferida
cirúrgica esternal.
Estudos anteriores do genótipo confirmaram que a C. striatum podem ser transmitidos entre
os pacientes, de pessoa para pessoa e através de cuidadores (Leonard et al., 1994).
Recentemente, um surto nosocomial causada por C. striatum foi documentada em Rio de
Janeiro (RJ), Brasil. Análise PFGE (Pulsed-field gel electrophoresis) indicou a presença de quatro
perfis de PFGE, incluindo dois clones relacionados às amostras de MDR (PFGE I e II). Os
resultados destes estudos demonstram a predominância de PFGE de tipo I MDR isolados que
são isoladas principalmente de UTI e enfermarias cirúrgicas. As amostras de C. striatum foram
em grande parte isoladas em cultura pura a partir de secreção traqueal de pacientes
submetidos a procedimentos de intubação traqueal (Baio et al. 2013).
Atualmente, mais de metade das doenças infecciosas que afetam levemente doentes
imunocomprometidos envolvem espécies bacterianas que são vulgarmente encontrados no
meio ambiente ou constituem a flora normal do corpo, incluindo várias espécies da bactéria
Corine. (Martins et al. 2009). Patógenos oportunistas podem ser dotados de um conjunto de
fatores de virulência que facilitam a sua capacidade de sobreviver dentro de tecidos do
hospedeiro e conferir resistência a folga por mecanismos imunes do hospedeiro e matando
antimicrobiana.
MATERIAIS E MÉTODOS
Amostras bacterianas - Tabela mostra as características epidemiológicas e microbiológicas das
estirpes estriado C. parcialmente estudados utilizados neste investigação (Baio et al 2013).. C.
identificação striatum foi estabelecida por 16S rRNA e seqüenciamento do gene rpoB. C.
pulsotipos estriado I e II exibiram perfis de MDR que mostram sensibilidade somente à
vancomicina, linezolida e tetraciclina, enquanto que C. estriado pulsotipos III e IV mostrou
susceptibilidade a maioria dos 21 agentes antimicrobianos testados e resistência apenas à
fosfomicina e ticarcilina / clavulanato. A estirpe de C. diphtheriae CAT5003748 foi usada como
um controlo positivo em todas as experiências (Gomes et al. 2009). (TABELA 1)
Análise estatística - Cada experimento foi realizado em triplicada e repetido três vezes. A
formação de biofilme por cada cepa pulsotype representante foi comparada por ANOVA com
pós-teste de Tukey. Teste t de Student foi utilizado para comparar os meios de formação de
biofilme (OD) na presença da FBG para cada pulsotype e um p <0,05 foi considerado
estatisticamente significativo. As análises estatísticas foram realizadas utilizando GraphPad
Prism v.6 (EUA).
RESULTADOS
A aderência bacteriana à superfície hidrofílica do tubo de vidro - Bactérias bem sucedidas
podem sobreviver no ambiente hospitalar devido à sua capacidade de aderir a diferentes
substratos. Para determinar se C. striatum é capaz de aderir ao vidro, que quantificada a
quantidade de formas sésseis viáveis de bactérias associadas com o vidro. Células bacterianas
sésseis viáveis foram observadas em superfícies de vidro às 48 h pós-incubação com amostras
de C. striatum de PFGE tipos I, II, III e IV, em diferentes níveis (Fig. 1). Na Fig. 1, um lado figura
representativa ilustra sésseis bactérias coradas com violeta de cristal, indicando a formação de
uma lama positiva / biofilme sobre a superfície de vidro. Todas as amostras foram capazes de
aderir fortemente à superfície do vidro, no entanto, a estirpe 1987 C. striatum / I-MDR
apresentou a maior capacidade para aderir a esta superfície hidrofílica abiótica (p <0,05).
Vários microorganismos utilizam proteínas da matriz extracelular, tais como Fbg, para
aumentar a sua capacidade de interagir com diferentes células e também com superfícies
abióticos. Para investigar a influência da FBG sobre a capacidade de C. striatum para aderir a
placas de microtítulo de plástico, as placas foram pré-tratadas com Fbg plasmático humano
antes da colonização bacteriana. Como mostrado na Fig. 4, Fbg humano aumento da formação
de biofilmes em superfícies de poliestireno por o C. striatum 1987 / I-MDR (p = 0,00362),
2369 / II-MDR (p = 0,0022) e 1961 / III-MDS (p = 0,0105) amostras, sugerindo que esta proteína
de matriz pode contribuir para a interação de diferentes clones deste agente patogênico
humano com superfícies hidrofóbicas abióticas.
DISCUSSÃO
A formação de Biofilme bacteriano esta em associação com muitas atividades humanas,
incluindo processamento de alimentos, transporte, infra-estrutura pública e, mais importante,
saúde (Rzhepishevska et al. 2013). Os biofilmes foram encontrados em numerosos dispositivos
médicos (por exemplo, cateteres urinários, cateteres venosos centrais e endoscópios). A sua
presença pode ter sérias implicações para pacientes imunocomprometidos e aqueles com
dispositivos médicos de demora (Brown & Williams 1985, Russell e Russell 1995, Rutala et al.
2008, Al Akhrass et al. 2012). A aquisição da capacidade de formar biofilmes pode representar
uma boa estratégia para um microorganismo em adquirir a sobrevivência melhorada sob
condições de stress, por exemplo, durante a invasão hospedeira ou após o tratamento
antibiótico, porque as células que crescem nos biofilmes são altamente resistentes aos
componentes do sistema imune humano e a numerosos tipos de agentes antimicrobianos.
Além disso, a capacidade de células bacterianas para transferir genes horizontalmente é
melhorada dentro de comunidades de biofilme, facilitando assim a disseminação de
resistência aos antibióticos (Stewart & Costerton 2001, Lee et al. 2008).
Nossos resultados revelam as capacidades dos diversos C. striatum isolados a aderir a várias
superfícies abióticas e formar biofilmes em um modelo in vitro do cateter. Os dados revelaram
variações entre as capacidades dos diversos clones de amostras C. striatum MDR e MDS
identificados durante um surto nosocomial no RJ para aderir e sobreviver em superfícies
abióticas positiva e negativamente carregadas. Notavelmente, identificamos uma associação
de aumento da formação de biofilme, multirresistência antimicrobiana e clonalidade das
amostras C. striatum. No presente estudo, os tipos C. striatum MDR PFGE I e II foram
predominantemente isolados durante o surto nosocomial de pacientes submetidos a
procedimentos de intubação traqueal na UTI ou em enfermarias cirúrgicas. Os isolados clínicos
destes tipos de PFGE expressam uma alta capacidade de formar biofilmes sobre hidrofílico
(vidro; carregado positivamente) e hidrofóbicas (poliestireno; carregado negativamente)
superfícies abióticas, incluindo poliuretano (carga positiva) superfícies de cateter.
Em conclusão, C. striatum pode formar biofilmes in vivo por um modo de biofilme aderente de
crescimento in vitro, como foi demonstrado em superfícies abióticas hidrófilas e hidrófobas,
incluindo cateteres de poliuretano. A afinidade de C. striatum para Fbg humano foi
determinada como sendo uma característica potencial de virulência adicional deste organismo.
Além de sua multirresistência aos agentes antimicrobianos utilizados na terapia, a capacidade
de produzir um "filme condicionado" pode contribuir para a criação e disseminação de
infecções hospitalares causadas por este organismo, incluindo os doentes com dispositivos
médicos residente. Assim, as amostras de C. striatum capazes de formar biofilmes pode ser
selecionado sob pressão antibiótica, ou, inversamente, C. striatum pode adquirir resistência a
múltiplas drogas nas comunidades biofilme. Em qualquer dos casos, a elevada capacidade de
colonização de C. striatum combinada com a sua resistência a múltiplas drogas irá contribuir
para a sobrevivência e subsequente disseminação deste organismo no ambiente hospitalar.