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Aspectos Epidemiológicos e Sanitários

relacionados a Micobactérias

Micobactérias Atípicas e
Saúde Pública
Alessandra Marques Cardoso
Mestre e Doutoranda em Medicina Tropical - Microbiologia
Laboratório de Bacteriologia Molecular
Instituto de Patologia Tropical e Saúde Pública
Universidade Federal de Goiás

Goiânia, 03.10.2008
Espécies de Mycobacterium: patogenia ao homem
Patogênicas Patogênicas em Saprófitas
potencial
M. tuberculosis M. kansasii M. gordonae
M. bovis M. marinum M. flavenscens
M. africanum M. avium M. gastri
M. caprae M. paratuberculosis M. nonchromogenicum
M. microti M. ammoense M. thermoresistible
M. pinnipeddi M. simiae M. triviale
M. scrofulaceum M. phlei
M. azulgai M. smegmatis
M. leprae M. chelonae M. vaccae
M. abscessus
M. massiliense

Complexo M. tuberculosis
PAREDE CELULAR DAS MICOBACTÉRIAS

Cápsula
glicolipídios

Ácidos micólicos ou
Mycomembrana

peptideoglicana
arabinogalactana
membrana
citoplasmática
PROPRIEDADES FÍSICAS DAS MICOBACTÉRIAS

• Grande resistência ao ambiente seco.

• Baixa resistência aos agentes físicos (calor, luz).

• Resistência variável aos agentes químicos:


- fenóis, iodo, álcool e gluteraldeído são relativamente ativos.
- mercúrio, bisfenol, amônia quaternária não tem atividade.
- clorohexidina e cloro baixa atividade.

• MNT são naturalmente resistentes à: RIF, PZA, INH,


sulfonamidas, tetraciclinas e fluoroquinolonas.
Árvore filogenética baseada nas sequências
do gene hsp65 de MNT

M. fortuitum
M. senegalense
M. mucogenicum
M. peregrunum

M. smegmatis

M. abscessus

M. chelonae

A barra indica 1% de divergência estimada


Micobactérias Atípicas e Saúde Pública

• O complexo M. tuberculosis e o M. leprae são


patógenos humanos conhecidos.

• Outras espécies de micobactérias são usualmente


saprófitas, enquanto algumas podem ser
oportunistas e até letais.

• Existem mais de 50 espécies de micobactérias


associadas a doenças em humanos.
Jordan et. al., 2007
Mycobacterium tuberculosis
Mycobacterium leprae
Micobactérias Atípicas e Saúde Pública

• Anteriormente as espécies de micobactérias que


não causavam tuberculose eram descritas como:
micobactérias atípicas ou “mycobacteria other than
tubercle bacilli” (MOTT).

• A nomenclatura corrente, adotada pela American


Thoracic Society, descreve esses microrganismos
como micobactérias não-tuberculosas (MNT).

Jordan et. al., 2007


Micobactérias Atípicas e Saúde Pública

• MNT estão associadas a determinados ambientes (água,


solo) e têm emergido como uma das principais causas de
infecções respiratórias oportunistas.

• Entre as diferentes MNT, o complexo M. chelonae-


abscessus destaca-se como importante grupo que consiste
em três membros proximamente relacionados:

M. chelonae
M. abscessus
M. immunogenum
Wilson et. al., 2001
Micobactérias Atípicas e Saúde Pública
Micobactérias Atípicas e Saúde Pública

Mycobacterium abscessus

• Causa infecções cutâneas localizadas e∕ou generalizadas.

• MNT mais freqüente nas infecções de tecidos moles e nas


infecções em pacientes respiratórios crônicos (FC).

• Infecções associadas a trauma com materiais


contaminados, injeções, procedimentos cirúrgicos não
estéreis e implantação de corpos estranhos.
Micobactérias Atípicas e Saúde Pública
Mycobacterium massiliense

• Descrito como uma nova espécie por Adékambi et al., 2004


(Marseille → Massilia → massiliense).

• Patógeno oportunista, envolvido em infecção de ferida,


Árvore filogenética da combinação da seqüência dos genes rpoB e recA de
M. massiliense e outras espécies. Barra indica 2% de divergência na seqüência
de nucleotídeos. Adékambi et al., 2004.
Micobactérias Atípicas e Saúde Pública
Mycobacterium bolletii

• Recentemente caracterizado e reconhecido como espécie


distinta por Adékambi et al., 2006.
Árvore filogenética do gene rpoB de M. bolletii e outras espécies. Barra indica
2% de divergência na seqüência de nucleotídeos. Adékambi et al., 2006.
Micobactérias Atípicas e Saúde Pública

• Surtos de infecção hospitalar por M. abscessus e M.


chelonae têm sido descritos desde 1970.

• Por que as MNT podem causar infecções hospitalares?

1. Presença destes microrganismos na água do hospital;


2. Relativa resistência ao glutaraldeído ou cloro;
3. Habilidade para sobreviver e crescer em água destilada e
em amebas;
4. Envolvimento na formação de biofilmes;
Adékambi et. al., 2006; Zhang et. al., 1997
Micobactérias Atípicas e Saúde Pública
Existem vários relatos de infecção por MNT após...
• Traumas • Implante de mama
• Cirurgias diversas • Pedicure
• Cirurgia cardíaca • Injeção subcutânea
• Cirurgia plástica facial • Injeção de antibióticos
• Cirurgia dermatológica • Injeção de corticóides
• Mamoplastia • Injeção de medicamentos
• Acupuntura alternativos
• Lipoaspiração • Implantação de próteses
• Injeção de silicone • etc...
Brown-Elliott et al., 2002; Uslan et al., 2006
Micobactérias Atípicas e Saúde Pública

Têm sido reportados surtos e pseudo-surtos relacionados a:

• Úlceras de pele e tecido subcutâneo;

• Infecções pulmonares;

• Bacteremia relacionada a diálise e cateteres;

• Procedimentos de broncoscopia, laparoscopia e artroscopia;

• LASIK (keratitis after laser in situ keratomileusis).


Freitas et al., 2003
Micobactérias Atípicas e Saúde Pública

• Relatos de surtos de infecções causadas por MNT


estão aumentando em todo o mundo.

• Informações sobre a relação genética dos isolados


obtidos durante o surto podem prover oportunidades
para rápida intervenção.
Emergence of nosocomial Mycobacterium massiliense infection in Goiás, Brazil.
Cardoso et al., 2008, Microbes and Infection.
Micobactérias Atípicas e Saúde Pública
Diagnóstico Laboratorial

• Coleta: biópsia ou amostra de tecido, secreção de


abscessos (tubo estéril sem conservante ou fixador).

• Amostras não aceitáveis: em swab; em formol.

• Coloração de Ziehl-Neelsen: sensibilidade - 104 céls./mL.

• Cultura em Lowenstein-Jensen: 37°C e 25°- 30°C.


Micobactérias Atípicas e Saúde Pública
Diagnóstico Laboratorial – identificação por testes fenotípicos:
tempo e temperatura de crescimento, produção de pigmento

MCR < 7 dias


MCL > 7 dias
Micobactérias Atípicas e Saúde Pública

Jordan et al., 2007 (The society for Applied Microbiology, Letters in Applied Microbiology)
Micobactérias Atípicas e Saúde Pública
Diagnóstico Laboratorial
Testes fenotípicos - Identificação bioquímica

• Acúmulo de niacina: M. tuberculosis (+).

• Redução do nitrato: M. tuberculosis (+).

• Ácido p-nitrobenzóico (PNB-500 µg/mL): inibe crescimento


das espécies do complexo M. tuberculosis.

• TCH (hidrazina do ácido tiofeno): distingue M. tuberculosis


(resistente) das outras espécies do complexo M. tuberculosis
(sensíveis).
Micobactérias Atípicas e Saúde Pública
Diagnóstico Laboratorial
Identificação molecular por PRA-hsp65

Produto da PCR hsp65 submetido à digestão enzimática

Telenti et. al. 1993 J. Clin. Microbiol.


Micobactérias Atípicas e Saúde Pública
M. massiliense
ou
M. bolletii
210 e 60

160 e 60
M. abscessus

Devallois et. al, 1997


Micobactérias Atípicas e Saúde Pública
Tratamento

• Sensíveis à amicacina e claritromicina.

• Teste de suscetibilidade in vitro pelo método de microdiluição em caldo.

• NCCLS, 2003 (M24-A) – Antimycobacterial Susceptibility Testing for


Rapidly Growing Mycobacteria: amicacina, cefoxitina, ciprofloxacina,
claritromicina, doxiciclina, sulfametoxazol, tobramicina, linezolida.

*ANVISA/OPAS/OMS, Edital n°13 - Monitoramento e Prevenção da Resistência Bacteriana em Serviços de Saúde.


Micobactérias Atípicas e Saúde Pública
Genotipagem por PFGE

Emergence of nosocomial Mycobacterium massiliense infection in Goiás, Brazil.


Cardoso et al., 2008, Microbes and Infection.
Agradecimentos
• Laboratório de Bacteriologia molecular - IPTSP – UFG
Dr. André Kipnis

• Laboratório de Imunopatologia – IPTSP - UFG


Dra. Ana Paula Junqueira-Kipnis
Eduardo Martins

• Laboratório de Micobactérias – EPM - UNIFESP


Dra. Sylvia Cardoso Leão
Dra. Cristina Viana-Niero

• LACEN - GO
Sueli Lemes Alves

• COMCIES – SMS – Goiânia - GO


Zilah Cândida Pereira das Neves

• Apoio financeiro: CNPq, OPAS-ANVISA


“O mais importante da vida não é a situação
em que estamos, mas a direção para a qual
nos movemos.”

Oliver W. Holmes, 1809 -1894

Obrigada!

alemarques5@yahoo.com.br

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