Fabiano Kauer, Clique para ShimadzuPh.D. editar Brasil o estilo do CSC kauer@shimadzu.com.br subttulo mestre
Lima, 17 de maro de 2010
1
Espectrometria
Espectrofotometria
Molculas e tomos absorvem energia, de diferentes
formas e comprimento de onda, em regies especficas do espectro eletromagntico. Existem inmeros comprimentos de onda de radiao no espectro eletromagntico e o estudo de cada regio
do espectro pode oferecer informaes nicas a respeito da estrutura, composio e configurao eletrnica da molcula.
Copyright Shimadzu do Brasil 2009. Distribuio no permitida.
Espectro Eletromagntico
Comprimento de onda Energia Nmero de onda Freqncia
R-
R-X
UV
Vis
IV
MO
RF
Espectrofotometria
regio do espectro
raio-
raio-X
UV-vis
IV vibrao molecular
tipo de interao
absoro emisso
absoro
absoro
absoro
slido
gs
lquido
tomo
molcula
molcula
BioSpec-nano?
UV-Vis dedicado para life science Utilizado para quantificao de cidos nuclicos Aplicaes em genmica, biologia molecular, anlise de DNA Linha Shimadzu Life Science, MultiNA
Vantagens do BioSpec-nano
Pequena quantidade de amostra somente 1 L ou 2 L
BioSpec-nano
lmpada de Xe sistema de montagem automtica
janela superior
seletor de caminho tico (0,7mm, 5 mm ou 0,2 mm) posio 5 mm para utilizao com cubeta de 5 mm opcional
11
Aplicaes
Quantificao de cidos nuclicos simples
RNA dsDNA (dupla fita DNA) ssDNA (fita simples DNA) OligoDNA
OD260/OD280: OD260/OD280 o indicador de pureza de DNA e RNA. Se a pureza for alta a razo maior do que 1,8. Contamintes de protenas diminuem a razo OD. OD260/OD230: OD260/OD230 indicador de pureza de RNA. Se a pureza for alta a razo maior do que 2. Contaminantes de protenas e compostos como EDTA e fenol diminuem a razo OD.
OD? OD (Optical Density, densidade tica) a absorbncia correspondente a um caminho tico de 10 mm OD = Absorbncia *10 / caminho tico (mm)
12
Aplicaes
Modo: Quantificao de cidos nuclicos simples
Concentrao de cido nuclico (ng /L= fator de diluio * NACF * (OD260 - OD320) OD260 / OD280 = (OD260 - OD320) / (OD280 - OD320)
Aplicaes
Clulas, tecidos, sangue.. Extrao e purficao RNA total/mRNA Transcrio reversa e purificao
cDNA
Marcadores DNA/RNA
14
Preciso de : 0,3 nm
Display LCD incluso UVProbe incluso (gratuito) Permite transferncia de dados por pendrive Funes de validao inclusas
Copyright Shimadzu do Brasil 2009. Distribuio no permitida.
16
Caractersticas do UV-1800
Equipamento UV integrado que permite a transferncia de dados obtidos para pen drive USB, e posterior anlise dos resultados obtidos em, um PC no conectado, atravs da utilizao de software UVProbe. Compacto e robusto: a menor rea ocupada por equipamentos de sua categoria. Equipamento UV integrado com interface tipo USB para conexo direta a impressora. Equipamento UV integrado que permite o controle atravs de PC via interface tipo USB.
Copyright Shimadzu do Brasil 2009. Distribuio no permitida.
17
18
L: lentes
P.D.: detector de fotodiodo
Copyright Shimadzu do Brasil 2009. Distribuio no permitida.
19
20
Acessrios
21
difenilcarbazida
leo vegetal com alto teor de P (fosfolipdios de origem vegetal). Controle de qualidade de matria prima. Calcinao de matriz orgnica. Medio indireta com molibdato de sdio, formando um complexo de colorao azulada. Espectro de absoro caracterstico do complexo de transio formado apresenta absoro em 650 nm.
Absorbncia (ABS)
0.2000
0.1000 0.0000 0.00 0.02 0.04
0.06
0.08
0.10
0.12
23
Caractersticas do IRAffinity-1
25
S/N ratio
30.000:1 20.000:1 25.000:1
JASCO FTIR-4100
JASCO FTIR-4200
22.000:1
30.000:1
26
2. Facilidade de manuteno
O novo IRAffinity-1 utiliza sistema auto dryer que decompe a umidade presente no interior do interfermetro atravs de um eletrlito contido em um filme polimrico. O consumo de energia do equipamento quando em modo de espera de apenas 4,5V. A performance deste sistema a mesma obtida com o sistema tipo peltier, utilizada, por exemplo, no IRPrestige-21.
meio externo
Eletrlise
Retirada de umidade
interfermetro
27
3. Equipamento compacto
28
4) Pode identificar mltiplos componentes em um contaminante, atravs dos dados de bibliotecas e tabela de picos de absoro.
Copyright Shimadzu do Brasil 2009. Distribuio no permitida.
29
5. S/W PharmaReport
Determinao rpida de
qualidade de matrias primas, sem necessidade de estocagem de produto para posterior liberao de carga.
Peak wavenumber Sample Standard goods Tolerance Error
30
Acessrios
31
Aplicaes de FTIR
Anlise de compostos orgnicos:
Controle de matria primas Identificao de contaminantes Controle de processos Anlise quantitativa
90
%T
75
60
45
30
15
3500
3000
2500
2000
1750
1500
1250
1000
750
500 1/cm
1,2 Abs 1
CEMPEQC33\curva 2 0% 0,1 mm CEMPEQC32\curva 2 0.7% 0,1 mm CEMPEQC34\curva 2 1,4% 0,1 mm CEMPEQC35\curva 2 2,1% 0,1 mm CEMPEQC36\curva 2 2.8% 0,1 mm CEMPEQC37\curva 2 3.5% 0,1 mm CEMPEQC38\curva 2 4.2% 0,1 mm CEMPEQC39\curva 2 4.9% 0,1 mm
Controle de qualidade
Informao de grupos funcionais
0,8
0,6
0,4
0,2
-0,2 1775 1770 1765 curva 2 0% 0,1 mm 1760 1755 1750 1745 1740 1735 1730 1725 1/cm
32
Aplicaes de FTIR
Anlise de compostos orgnicos:
90
%T
75
60
45
30
Controle de qualidade
Informao de grupos funcionais
15
3500
3000
2500
2000
1750
1500
1250
1000
750
500 1/cm
33
Anlise de Plsticos
Anlise de plsticos multicamadas.
Filmes multicamadas so utilizados em embalagens de produtos industrializados, tendo como funo bsica conter, proteger e apresentlos de maneira atrativa ao consumidor final
34
Anlise de Frmacos
Anlise quantitativa de dimeticona.
Anlise por mtodo de transmisso com cela selada para anlise quantitativa. Padro de dimeticona em soluo aquosa. Quantificao em nvel de %. Anlise rpida e sem preparao de amostra. Controle de qualidade de produto final.
1,2 Abs 1
CEMPEQC33\curva 2 0% 0,1 mm CEMPEQC32\curva 2 0.7% 0,1 mm CEMPEQC34\curva 2 1,4% 0,1 mm CEMPEQC35\curva 2 2,1% 0,1 mm CEMPEQC36\curva 2 2.8% 0,1 mm CEMPEQC37\curva 2 3.5% 0,1 mm CEMPEQC38\curva 2 4.2% 0,1 mm CEMPEQC39\curva 2 4.9% 0,1 mm
0,8
0,6
0,4
0,2
-0,2 1775 1770 1765 curva 2 0% 0,1 mm 1760 1755 1750 1745 1740 1735 1730 1725 1/cm
35
Clique para editar Anlise Elementar o estilo do ttulo AAS & ICP-AES mestre
Clique para editar o estilo do subttulo mestre
36
AA Forno de Grafite
LD: 10 ppt
ICP-AES
LD: 100 ppt
ICP-MS
LD: 1 ppt
Aplicaes
Alta
ICP-MS Al, As, B, Cd, Cr, Cu, Mn, Na, Pb, Se, Zn AA GFA Al, As, Cd, Cr, Cu, Fe , Mn, Na, Pb, Se, Zn
Sensibilidade
ICP-AES Al, B, Cd, Cr, Cu, Fe, Mn, Na, Pb, Zn, Ca, Mg
Baixa Nmero de muitos elementos poucos Copyright Shimadzu do Brasil 2009. Distribuio no permitida. poucos
38
1. Novo design
Produto final
Desenhos iniciais
40
2. Elevada Sensibilidade
GFA Elemento As Cd Cr Cu Mn Ni Pb Se V 3(ppb) (nm) 193,7 228,8 357,9 324,8 279,5 232 283,3 196 318,4 AA-7000 0,12 0,0025 0,013 0,03 0,008 0,1 0,05 0,13 0,13 SHIMADZU AA-6300 0,4 0,005 0,02 0,04 0,02 0,2 0,08 0,4 0,3 AA-6800 0,2 0,003 0,02 0,04 0,01 0,13 0,06 0,2 0,2 Hitachi Z-2010 0,15 0,006 0,013 0,04 0,013 0,1 0,08 0,44 0,1 Thermo iCE3400 iCE3500 0,325 0,01 0,025 0,065 0,03 0,065 0,075 0,32 0,65 Perkin Elmer AAnalyst 400 0,65 0,01 0,2 0,15 0,25 0,45 0,8 0,75 AAnalyst 800 0,14 0,0035 0,0095 0,0375 0,011 0,18 0,105 0,115 Varian 240Z 280Z 0,12 0,0025 0,026 0,1015 0,012 0,037 0,0795 0,3
Chama
Elemento Al Cu
3(ppm)
(nm) 309,3 324,8
SHIMADZU
AA7000 0,03 0,0015 AA-6300 0,1 0,005 1st 2nd
41
3. Equipamento compacto
SHIMADZU AA-6300 SHIMADZU AA-6300+GFA
SHIMADZU AA-7000
700x580x460
SHIMADZU AA-7000+GFA
920x580x460
HITACHI Z-2300
HITACHI Z-2000
PE AAnalyst 400
PE AAnalyst 700/800
Varian AA-240FS/280FS
42
4. Elevada de Estabilidade
Atenuador Varivel
lmpada de D2
Lampada de catodo oco Novo sistema tico, com sistema Copyright Shimadzu do Brasil chama. tridimensional e duplo feixe para 2009. Distribuio no permitida. 43
4. Elevada Estabilidade
Novo sistema tico tri-dimensional
44
45
AA-7000F
AA-7000G + GFA
46
47
Acessrios
Lmpada de ctodo oco L-233 (normal) L-2433 (mtodo SR) GFA-7000 Atomizador por forno de grafite Tubos de grafite: normal, PyC, plataforma Cmera para forno de grafite ASC-7000 Autoamostrador: ASK-7000 (GFA) ASC Stand kit (chama) Kit de micro amostragem Medidor de fluxo para gs oxidante Atom booster Queimador para altas temperatura Compressor de ar e reguladores de presso HVG-1 Gerador de Vapor de Hidreto MVU-1A Sistema de Vapor Frio Copyright Shimadzu do Brasil 2009. Distribuio no permitida. SARF-16C Forno eltrico
O que ICP-AES?
Nome da Tcnica?
50
O que ICP-AES?
O que o equipamento faz? Determina a concentrao de elementos existentes em soluo. Slidos so pr-processados e transformados soluo. Quais os princpios? Sob alta temperatura (~6000-10.000 K), molculas e tomos so conduzidos ao seu nvel atmico fundamental, sendo excitados e at ionizados. tomos de diferentes elementos, ao serem excitados no plasma, emitem radiao em comprimentos de onda especficos quando do processo de relaxao, e a intensidade desta emisso dependente da concentrao dos mesmos.
Copyright Shimadzu do Brasil 2009. Distribuio no permitida.
51
ICP Espectrmetro
(Divide radiao emitida em vrios comprimentos de onda) (Responsvel pelo processo de emisso de radiao)
52
ICP-AES Simultneo
Detector CCD
ICP
53
alta
pequeno
54
104
ordem 105
ordem 106
Copyright Shimadzu do Brasil 2009. Distribuio no permitida.
55
Caractersticas do ICPE-9000
Elementos como P, As, S, B possuem linhas de emisso de elevada sensibilidade no UV-vcuo. Entretanto, em funo da absoro por oxignio, anlise no possvel em espectrmetros atmosfricos. Purga interna de oxignio necessria para obteno de resultados. Concorrentes utilizam purga do espectrmetro com nitrognio de alta pureza. Utilizao de espectrmetro a vcuo (exclusividade Shimadzu)
Linhas tpicas da faixa do ultravioleta vcuo
Al P S As B 167 nm 178 nm 180 nm 189 nm 182 nm
56
57
Tempo de Iniciao
Purga vcuo versus purga a gs
variao de intensidade espectral
120
intensidade espectral
100 80
20
0 0 50 100 150 200 250 300 350 400
purga
ICPE-9000
tempo (minutos) 58
25
20
15 10 5 0
12L/min
mini tocha
tocha convencional
59
Anlise Elementar
Determinao de metais/semi-metais: gua potvel Resduo de efluentes Anlise preditiva, leos e graxas Industria farmacutica Solos e plantas Tecidos biolgicos Minrio Ligas metlicas Combustveis (gasolina, diesel, biodiesel)
Copyright Shimadzu do Brasil 2009. Distribuio no permitida.
60
50000
Intensity
40000
30000 20000
10000
c = 8.570199e-005 d = 0.0129781
61
Determinao de Se e Hg em
Intensity
1250
1000
750
500
250
ntrico e H2O2.
Anlise em ppb. Produtos metabolizados em
Se 203.985 nm (1)
Intensity
400 300
200 100 0
Equation: Conc = a * I ^ 3 + b * I ^ 2 + c * I + d Factor: a = 0.0000000 b = 0.0000000 c = 0.1504391 d = -0.5210548 Weight: None Origin: None
62
Anlise de Polivitamnicos
Controle de qualidade de polivitamnicos. 3-4 metais em nveis ppm. Soluo aquosa.
63
Padres organometlicos em leo mineral. A determinao de detritos em leo lubrificante usado um mtodo de diagnstico importante em programas de monitoramento de condies de operao de maquinrio.
Intensity
20000 17500 15000 12500 10000 7500 5000 2500 0 0 50 Concentration (ppm) Equation: Conc = a * I ^ 3 + b * I ^ 2 + c * I + d Factor: a = 0.0000000 b = 0.0000000 c = 0.0079784 d = -1.409089 Weight: None Origin: None 100 r = 0.99899 150
65