Biologia e Geologia - 11º ano

Atividade Laboratorial nº1

Revisões 10º: Microscopia, Célula e Osmose - CC

A- Características da imagem ao Microscópio ótico composto (M.O.C.)

Funcionamento do MOC
I- Cuidados a ter com o manuseamento do microscópio
1. Transportá-lo com ambas as mãos, apoiando a base numa delas e segurando o braço do aparelho com a
outra.
2. Ao colocá-lo sobre a mesa, mantê-Io a alguma distância do bordo.
3. Evitar molhar ao usar preparações temporárias.
4. As lentes são peças muito caras. Para as limpar, deve usar a flanela que normalmente acompanha o
aparelho.
5. Após a utilização, encaixar a objetiva de menor ampliação alinhada com a ocular.
6. Se durante a observação tiver utilizado óleo de imersão deve limpar a objetiva e a lamela com xilol.

II- Iluminação do microscópio

O mecanismo de iluminação, vulgarmente chamado sistema de iluminação ou aparelho iluminador, consta,
essencialmente, de uma fonte luminosa e de um diafragma. Nos modelos de categoria média e superior,
este dispositivo completa-se com a presença do condensador. Todo o conjunto em referência, que está
situado no centro e por baixo da platina, tem por função iluminar o campo visual do aparelho.
Para proceder a uma correta iluminação do microscópio deverá:
1.Verificar se as lentes estão limpas.
2. Observar se a objetiva de menor poder de ampliação está alinhada com a ocular (se necessário, girar o
revólver até ouvir um 'clic").
3. Verificar se o diafragma, que permite regular a entrada da luz, está aberto. No entanto este deve ser
usado de acordo com o objeto a observar, de forma a obter-se melhor imagem.
4. Visualizar o campo do microscópio (círculo iluminado). O microscópio encontra-se, assim, preparado para
permitir uma primeira observação, sendo necessário proceder à focagem.

III- Focagem do objecto

1. Colocar a preparação na platina, fixando-a com o auxílio das pinças.
2. Com o parafuso macrométrico, ajustar a platina para a posição mais próxima da objetiva (de menor
poder de ampliação). Descê-la lentamente, de modo a obter a primeira imagem.
3. Utilizando apenas o parafuso micrométrico, corrigir a focagem até obter uma imagem nítida.

Fases de montagem de uma preparação microscópica

Figura 1

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Características da imagem ao MOC

Protocolo experimental:

MATERIAL
MOC; Tesoura; Conta-gotas; Lâminas; Lamelas; Pinça; Papel; Agulhas de dissecação; Água destilada.

METODOLOGIA
1. Coloque uma gota de água sobre uma lâmina.
2. Recorte, de uma folha de jornal, a letra F.
3. Coloque a letra, com o auxílio da pinça, sobre a gota de água.
4. Cubra o fragmento de papel com uma lamela de modo a fazer um ângulo de 45° com a lâmina,
deixando-a cair lentamente e utilizando a agulha de dissecação, como mostra a figura 1.
5. Retire o excesso de água com o papel de filtro.
6. Ilumine o microscópio e posteriormente coloque a preparação, com a letra F na posição real, sobre a
platina, de modo a ocupar o centro do orifício desta.
7. Proceda à focagem selecionando a objetiva de menor poder ampliador.
8. Desenhe, no caderno diário, a imagem obtida no campo do microscópio.
9. Desloque a preparação na platina, para a direita e para a esquerda, para a frente e para trás, registando
o sentido de deslocação da imagem.
10. Selecione uma objetiva de ampliação imediatamente superior e proceda à observação da preparação,
corrigindo a focagem.

QUESTÕES:
1. Que pode concluir quanto ao sentido de deslocação da imagem, relativamente ao sentido de
deslocação do objeto?
2. Tire conclusões relativamente às características da imagem obtida, relativamente ao objeto.
3. Relacione a área do objeto observada com a ampliação utilizada, explicando por que razão se deve
começar uma observação pela objetiva de menor ampliação.
O sentido de deslocação da imagem é contrário ao sentido de deslocação do objeto. A imagem fornecida
pelo M.O.C é virtual, ampliada (ampliação da imagem é o produto da ampliação da objetiva utilizada em
cada observação pela ampliação da ocular), invertida e simétrica relativamente ao objeto.
Quanto maior é a ampliação utilizada menor é a área do objeto observada. Assim, deve iniciar-se a
observação microscópica utilizando a objetiva de menor ampliação, que permite captar uma ideia
do conjunto, e selecionar a zona de interesse; de seguida desloca-se esta para o centro do campo
microscópico e passa-se para as objetivas de maior poder ampliador que, apesar de reduzir a área
observada, revelam pormenores que não são visíveis com ampliações menores

Profundidade de campo do MOC

1. Sobre uma gota de água numa lâmina cruze dois cabelos de cores diferentes.
2. Observe ao microscópio com as objetivas de poder ampliador diferente, por ordem crescente.
3. Este procedimento tem como objetivo destacar a profundidade de campo do M.O.C. O que significa
esta afirmação?
A profundidade de campo é a capacidade que o M. O.C. tem de focar diferentes planos.
Os cabelos na zona de cruzamento encontram-se sobrepostos, ou seja, em planos diferentes. Quando se
observa com a objetiva de menor ampliação, normalmente, consegue-se focar os cabelos em simultâneo.
Quando se observa com objetivas de maior poder de ampliação verifica-se que não é possível focar
simultaneamente os dois cabelos, pois ao focar um dos cabelos o outro aparece desfocado. Isto deve-se ao

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facto de o M.O.C. ter reduzida profundidade de campo, principalmente, quando se utilizam objetivas de
maior poder de ampliação, assim, em cada momento foca um plano e os planos que se encontram acima e
abaixo deste ficam desfocados. É necessário utilizar o parafuso micrométrico de modo a poder visualizar
pormenores que se encontram em diferentes planos.
B- Observação de células da epiderme interior da túnica da cebola
Protocolo experimental:
MATERIAL
MOC; Tesoura; Conta-gotas; Lâminas; Lamelas; Pinça; Papel; Agulhas de dissecação; Bisturi; Água destilada;
Água iodada (soluto de lugol); cebola.
METODOLOGIA
1. Coloque uma gota de água iodada sobre uma lâmina.
2. Com o auxílio da pinça, destaque um fragmento de epiderme da face concava de uma túnica de cebola
e coloque-o sobre o corante.
3. Cubra o fragmento de epiderme com uma lamela e observe ao MOC com as objetivas de poder
ampliador diferente, por ordem crescente.
4. Desenhe a observação efetuada com a objetiva de 10X e legende as estruturas celulares observadas.

C- Osmose em células vegetais

Protocolo experimental:
MATERIAL
MOC; Tesoura; Conta-gotas; Lâminas; Lamelas; Pinça; Papel; Agulhas de dissecação; Bisturi; Água destilada;
Solução aquosa de cloreto de sódio; Pétalas vermelhas de sardinheira (ou outras flores) / couve roxa.
METODOLOGIA
1. Com o auxílio da pinça, destaque um fragmento de epiderme superior da pétala e coloque-o numa
lâmina sobre uma gota de água destilada (A), cobrindo-o com uma lamela.
2. Observe ao MOC com as objetivas de poder ampliador diferente, por ordem crescente.
3. Registe as observações efetuadas.
4. Repita os passos 1, 2 e 3, mas utilizando uma lâmina com uma gota de solução aquosa de cloreto de
sódio (B).
5. Com o conta-gotas, coloque uma gota de água destilada num dos bordos da lamela B. No bordo oposto
da lamela, absorva o meio de montagem, de modo a substituir a solução de cloreto de sódio pela água
destilada. Registe as alterações que se vão verificando.
QUESTÕES:
1. Classifique as soluções A e B quanto à tonicidade.
A. (água destilada) Solução hipotónica; B. (solução cloreto sódio) Solução hipertónica.
2. Designe o estado em que as células ficaram nas preparações A e B.
A. Célula túrgida; B. Célula plasmolisada
3. Interprete os diferentes aspetos das células nas preparações A e B.
A. Quando a célula é colocada em água destilada, a água entra para o vacúolo que aumenta de volume
e reduz a coloração vermelha (há mais água no interior do vacúolo para o mesmo pigmento).
B. Quando a célula é colocada numa solução concentrada de cloreto de sódio, ocorre um movimento
de água do vacúolo para o exterior da célula, o que faz com que o vacúolo diminua de volume e
fique com uma cor mais intensa.
4. Explique as alterações observadas no passo 5.
As células que se encontravam plasmolisadas, por estarem colocadas numa solução de cloreto de sódio
(meio hipertónico), vão ficar túrgidas, devido à substituição desse meio de montagem por água destilada
(meio fortemente hipotónico).