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FACULDADE ASSIS GURGACZ – FAG

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AGRONOMIA
APOSTILA DE AULA PRÁTICA
BIOLOGIA CELULAR

Docente: Me. Bianca Pierina Carraro Vicente

Acadêmico(a):__________________________________________________________
Curso:____________Período:________Turma:_______________________________
Roteiro de Aula Prática nº 01
Data:
1. Introdução: Descrição do microscópio fotônico
A palavra microscópio é de origem grega (micros =pequeno, scopein =observar, olhar com
atenção). É um instrumento óptico que amplia a imagem de um pequeno objeto utilizando um
sistema de lentes e fontes de iluminação.
Todo microscópio é composto de partes mecânicas e partes ópticas, que juntas nos
permitem a observação detalhada de materiais em estudo.

1.1. Partes mecânicas:


• Base ou pé: é o suporte do microscópio, peça que sustenta todas as outras partes do
aparelho.
• Braço ou coluna: peça que liga o pé à parte superior do microscópio.
• Mesa ou platina: peça de apoio da lâmina contendo o material para estudo, no
centro da mesa existe um orifício para a passagem da luz.
• Charriot: peça ligada à platina que permite movimentar a lâmina no plano horizontal da
esquerda para a direita e vice-versa, e de trás para frente e vice-versa.
• Parafuso macrométrico: localiza-se em ambos os lados do braço, serve para
ajustar o foco grosseiramente através de avanço ou recuo da mesa em relação à objetiva.
• Parafuso micrométrico: ajusta o foco finamente através de pequenos avanços
ou recuos da mesa.
• Canhão: parte superior do microscópio constituída por um tubo contendo um
prisma. Sustenta lentes objetivas e oculares, e serve para focalização do material.
• Revolver: peça onde se encaixam as lentes objetivas. É composto por um disco
de ranhuras que permite a mudança das objetivas.
1.2. Partes ópticas:
• Condensador: conjunto de lentes situado abaixo da platina que concentra a luz e fornece
iluminação uniforme à preparação biológica.
• Botão do condensador: permite a movimentação do condensador.
• Diafragma: regula a intensidade de luz que atinge a preparação através de uma
alavanca para sua abertura ou fechamento.
• Objetivas: conjunto de 4 ou mais lentes superpostas que proporcionam
aumentos diferentes para observação do material. O valor do aumento está gravado na
objetiva.
• Oculares: possui 2 lentes convergentes que ampliam e corrigem os defeitos da
imagem. O valor do aumento proporcionado está gravado na ocular.
MICROSCÓPIO ÓTICO

OCULAR

BOTÃO PARA MOVER O


CANHÃO CANHÃO

REVÓLVER BRAÇO
OBJETIVA

PRESILHA
MESA BOTÃO DO
CONDENSADOR
CONDENSADOR
MACROMÉTRICO
DIAFRAGMA
MICROMÉTRICO
FILTRO
ILUMINAÇÃO DO CHARRIOT
CONDENSADOR

CONTROLE
BASE DE LUZ

2. Assunto: Microscopia e a utilização do microscópio

3. Objetivos:
3.1. Conhecer os componentes do microscópio identificando suas partes.
3.2. Fazer observações de materiais ao microscópio relacionando as imagens formadas e
os aumentos obtidos com seu funcionamento.

4. Materiais, equipamentos e reagentes:


4.1.Microscópio óptico comum;
4.2.Letras recortadas do jornal;
4.3.Lâminas e lamínulas;
4.4. Copo com água;
4.5.Papel filtro.

5. Procedimento:
5.1.Lâminas com letras:
• Coloque sobre a lâmina uma letra que você recortou do jornal;
• Coloque esta lâmina sobre a platina do microscópio, de modo a manter a letra na
posição em que é lida por você;
• Focalize a letra, conforme o procedimento descrito anteriormente;
• Observe a posição da letra, na imagem formada pelo microscópio com a objetiva
de 4X e 10X;
• Desenhe o observado.

6. Fechamento:
6.1. Que diferenças você observou entre a posição das letras a olho nu e na imagem ao
MO?
6.2. Nas objetivas de diferentes aumentos, o que você notou quanto ao tamanho da imagem
e quanto à área do campo de observação?
6.3. Por que a lamínula deve estar sempre voltada para cima quando se observa o material
ao microscópio?
6.4. Por que é necessário o uso do óleo de imersão na objetiva de 100X?
Roteiro de Aula Prática nº 02
Data:

1. Assunto: Identificação de componentes químicos celulares

2. Objetivos:
2.1. Identificar macromoléculas constituintes das células em batata-inglesa, laranja leite em
pó.

3. Materiais, equipamentos e reagentes:


3.1. Experimento 1: batata inglesa, lugol, lâmina, lamínula, bisturi, microscópio óptico, papel
filtro.
3.2. Experimento 2: açúcar, água, reagente de benedict, leite em pó, suco de laranja, bico
de bunsen, tubo de ensaio, grampo de madeira.
3.3. Experimento 3: laranja, bisturi, azul de metileno, vidro de relógio, pincel, lâmina e
lamínula.

4. Procedimento:
4.1. Experimento 1:
• Cortar uma fatia de batata com bisturi. A espessura deverá ser muito fina.
• Colocar esta fatia em uma lâmina. Pingar 1 a 2 gotas de lugol e deixar corar por 3
minutos.
• Cobrir com lamínula e observar nas objetivas de 4x, 10x e 40x. Desenhar apenas na de
40x.
• Observar a coloração dos grãos de amiloplasto, morfologia, estrutura celular (parede
celular).

4.2. Experimento 2:
• Numerar tubos de ensaio de 1 a 3.
• Colocar no tubo 1: um grama de açúcar comum, 1 ml de água e 5 gotas de reagente de
benedict.
• Colocar no tubo 2: 1ml de leite em pó já dissolvido em água e 5 gotas de reagente de
benedict.
• Colocar no tubo 3: 1ml de suco de laranja e 5 gotas de reagente de benedict.
• Acender o bico de bunsen e aquecer os tubos com auxílio do grampo de madeira até
levantar fervura.
• Observar possíveis alterações nas colorações e descrevê-las.

4.3. Experimento 3:
• Fazer um corte tangencial na casca da laranja. A espessura do corte deverá ser fina de
tal maneira que possa transpassar a luz que nela incidirá.
• Pingar algumas gotas de ou azul de metileno em um vidro de relógio e acrescentar a
este o corte efetuado na laranja.
• Aguardar aproximadamente 7 minutos.
• Retirar o corte com um pincel e transferi-lo para uma lâmina.
• Cobrir com lamínula e observar nas objetivas de 4x e 10x. Desenhar em ambas.

5. Fechamento:
5.1. Como podemos perceber a presença de bolsas de lipídios ao descascar uma
laranja?

5.2. Qual é a importância dos carboidratos, lipídios e proteínas na composição


macromolecular da célula?
Roteiro de Aula Prática nº 03
Data:

1. Assunto: Permeabilidade seletiva e osmose

2. Objetivos:
2.1. Demonstrar a presença da membrana em células vegetais e animais;
2.2. Observar o comportamento da membrana quanto a sua permeabilidade seletiva a
diferentes substâncias e tratamentos.

3. Materiais, equipamentos e reagentes:


3.1. Beterraba (Beta vulgaris);
3.2. Leveduras (fermento biológico);
3.3. Epiderme de cebola (Allium cepa);
3.4. Tubos de ensaio;
3.5. Acetona
3.6. Vermelho Congo 1%;
3.7. Lâmina, lamínula, bisturi;
3.8. Água destilada, NaCl 3.0%;
3.9. Banho Maria, M.O.

4. Procedimento:
4.1. Experimento 1: efeito da acetona
• Numere os tubos de ensaio e coloque em cada um deles 5ml das seguintes
soluções, respectivamente:
o água destilada
o acetona 25%
o acetona 50%
o acetona 75%
o acetona pura
• Adicione a cada tubo um pequeno pedaço de beterraba (1cm 3);
• Espere cerca de 1 hora e observe o que ocorreu em cada tubo.

4.2. Experimento 2: Efeito do calor


• Numere 2 tubos de ensaio e coloque em cada um 5ml da solução de vermelho
Congo 1%;
• Adicione 5ml de suspensão de fermento nos 2 tubos;
• O tubo 1 deixe à temperatura ambiente. O tubo 2 incube a 50ºC por 5 minutos.
• Monte uma lâmina com a suspensão do tubo 1 e observe ao MO, nas objetivas de
10X e 40X.
• Faça o mesmo com o tubo 2. Desenhe e anote o que observou nos dois casos.

4.3. Experimento 3: Efeito da diferença de concentração


• Retire um fragmento da epiderme inferior de cebola e coloque-a sobre a lâmina;
• Cubra co uma gota de água e lamínula;
• Observe ao MO em 10X e 40X.
• Desenhe o que observou.
• Em seguida retire a lamínula, seque o excesso de água e coloque uma gota de
solução NaCl 3.0% sobre a epiderme;
• Observe ao MO em 10X e 40X e desenhe.
• Agora retire a lamínula e a epiderme que você observou. Coloque-a em outra lâmina
limpa com duas gotas de água destilada;
• Observe ao MO em 10X e 40X e desenhe.

5. Fechamento:
5.1. Anote os resultados observados, comparando as soluções de cada tubo.
5.2. Explique o efeito da água destilada e das diferentes concentrações de acetona sobre a
membrana plasmática.
5.3. Que diferenças você observou nas células submetidas aos dois tratamentos?
5.4. Explique o efeito do calor sobre a membrana. E quanto à difusão do vermelho Congo?
5.5. Que nome se dá ao movimento de água através da membrana plasmática?
5.6. Qual a diferença entre os fenômenos de difusão e osmose?
Roteiro de Aula Prática nº 04
Data:

1. Assunto: Movimento celular – cílios e flagelos

2. Objetivo:
2.1. Observar a estrutura dos cílios e flagelos no material em estudo.
2.2. Relacionar as estruturas responsáveis pelos movimentos com as funções que estas
desempenham nos diferentes tipos celulares.

3. Materiais, equipamentos e reagentes:


3.1. Lâmina permanente de traquéia de coelho em corte transversal;
3.2. Preparação a fresco de cultura de protozoários ciliados e flagelados;
3.3. Lâmina;
3.4. Lamínula;
3.5. Pipeta de Pasteur;
3.6. Microscópio ótico.

4. Procedimento:
4.1. Observação da lâmina de traquéia:
Focalize a lâmina ao microscópio com o menor aumento (4X);
Encontre o epitélio de revestimento voltado para a luz da traquéia, escolha uma região
bem preservada e coloque-a sob a objetiva de 40X;
Observe os cílios e esquematize.

4.2. Movimento de protistas:


Coloque sobre um lâmina uma gota de cultura de protozoários e cubra com lamínula;
Observe ao MO com o diafragma fechado nas objetivas de 4X, 10X e 40X;
Esquematize os protozoários que encontrar e indique se é ciliado ou flagelado.

5. Fechamento:
5.1. Quias as diferenças morfológicas que puderam ser detectadas entre cílios e flagelos?
5.2. A forma de deslocamento dos protozoários ciliados é a mesma que a dos flagelados?
Como eles se deslocam?
5.3. Qual é a estrutura responsável pelo movimento dos cílios e dos flagelos? Do que é
composta? Como estão arranjados estes componentes na estrutura?
Roteiro de Aula Prática nº 05
Data:
1 Assunto: Sistema de endomembranas

2 Objetivo: Reconhecer a estrutura das organelas componentes do sistema de


endomembranas.

3 Materiais:
3.1 Eletromicrografias do retículo endoplasmático e do complexo de Golgi.

4 Procedimento:
4.1 Observar as eletromicrografias e desenhá-las a lápis.
4.2 Identificar as estruturas.

5 Fechamento:
5.1 Quais são as principais funções do sistema de endomembranas?
5.2 Como ocorre a síntese de macromoléculas?
Roteiro de Aula Prática nº 06
Data:
1 Assunto: Mitocôndrias

2 Objetivo: Reconhecer a estrutura das mitocôndrias.

3 Materiais:
3.1 Eletromicrografias de mitocôndrias.

4 Procedimento:
4.1 Observar as eletromicrografias e desenhá-las a lápis.
4.2 Identificar as estruturas.

5 Fechamento:
5.1 Quais são as principais funções da mitocôndria?
Roteiro de Aula Prática nº 07
Data:
1 Assunto: Identificação de núcleo e nucléolo

2 Objetivo: Identificar a estrutura de núcleo e nucléolo.

3 Materiais, equipamentos e reagentes:


3.1 Fígado bovino fresco;
3.2 Lâmina;
3.3 Lamínula;
3.4 Azul de metileno;
3.5 Algodão;
3.6 Álcool iodado;
3.7 Etanol absoluto;
3.8 Lanceta;
3.9 Microscópio ótico.

4 Procedimento:
4.1 Experimento 1:
4.1.1 Tocar uma lâmina levemente na superfície do fígado bovino;
4.1.2 Deixar secar as células sobre a lâmina;
4.1.3 Corar o material por 5 minutos com Azul de metileno;
4.1.4 Cobrir com lamínula, e observar ao MO em 4X, 10X e 40X;
4.1.5 Esquematizar.

4.2 Experimento 2:
4.2.1 Limpar a ponta do dedo indicador com um pedaço de algodão embebido em
álcool iodado;
4.2.2 Picar a ponta do dedo com uma lanceta;
4.2.3 Colocar uma gota de sangue próxima a borda de uma lâmina;
4.2.4 Colocar uma das bordas da lamínula sobre a gota de sangue fazendo um
ângulo de 45° entre a lâmina e a lamínula;
4.2.5 Nesta posição deslize a lamínula sobre a lâmina mergulhando a lâmina por 4
minutos em uma cubeta com álcool absoluto;
4.2.6 Deixar secar a lâmina;
4.2.7 Corar por 5 minutos em uma cubeta com azul de metileno;
4.2.8 Enxaguar em água corrente na torneira, deixar secar;
4.2.9 Observar ao MO em 4X, 10X, 40X e 100X.
4.2.10 Esquematizar o material observado.

5 Fechamento:
5.1 Qual a importância do núcleo para uma célula?
5.2 O que o nucléolo representa em uma célula eucarionte?
5.3 Identifique e desenhe os tipos de leucócitos encontrados no esfregaço
sangüíneo.
Roteiro de Aula Prática nº 8
Data:

1. Assunto: Mitose

2. Objetivos:
2.1. Identificar as diferentes fases da mitose através de observação ao MO.

3. Materiais, equipamentos e reagentes:


3.1.Lâminas permanentes em corte longitudinal de pontas de raiz de Allium cepa (cebola).

4. Procedimento:
4.1. Utilizando a objetiva de 4X localize a região meristemática da raiz que fica entre a coifa,
bem na extremidade, e a zona de alongamento e diferenciação celular, na parte
posterior do corte.
4.2. Centralize o tecido meristemático e passe para as objetivas de 10X e 40X.
4.3. Ao longo do tecido meristemático, identifique células nas diferentes fases do ciclo
celular, com objetiva de 40X ou 100X (imersão).
4.4. Esquematize cada uma das fases.

5. Fechamento:
5.1. Como pode-se diferenciar prófase, anáfase e metáfase na mitose?
5.2. Por que se diz que a mitose é um processo conservativo, do ponto de vista genético?

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