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Universidade Federal de São Carlos

Cam pus Araras


Departamento de Ciências da Natureza, Matemática e CENTRO DE CIÊNCIAS
Educação AGRÁRIAS

Via Anhangüera, km 174, Araras-SP, CEP 13600-970, Fone: (19) 3543-2588


e-mail: dcnme@cca.ufscar.br

Apostila de aulas práticas de Biologia Celular


Licenciatura em Ciências Biológicas
Departamento de Ciências da Natureza, Matemática
e Educação
Centro de Ciências Agrárias – UFSCar – Araras
Profa. Roberta C. F. Nocelli
roberta@ufscar.br

(http://www.profesorenlinea.cl/Ciencias/celula_animal_y_vegetal.htm)

Araras, outubro de 2023


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CONDUTA NO LABORATÓRIO
1 – Sempre trazer o jaleco;
2 – Utilizar calça comprida, sapatos fechados e cabelos presos;
3 – Não manusear o equipamento com as mãos sujas ou molhadas;
4 – Jamais beber ou comer dentro do laboratório e próximo ao microscópio;
5 – NUNCA arrastar o microscópio, deslocar o aparelho com a lâmpada acesa ou logo
depois de apagada;
6 – Observar os materiais com atenção;
7 – Registrar todas as observações na apostila;
8 – Não deixar materiais desnecessários sobre a bancada;
9 – Limpar todos os materiais utilizados;
10 – Ao acabar de utilizar o microscópio, reduza ao máximo o botão de intensidade
luminosa, desligando o aparelho da tomada e, depois de limpo, revesti-lo com a capa
protetora.

INSTRUÇÕES PARA FOCALIZAR SEU MATERIAL


1 – Na observação de uma lâmina, SEMPRE inicie pela objetiva de menor aumento e só
depois passe para focalizar com as de 10 ou 40 vezes;
2 – Para começar as observações abaixe a mesa e desloque-a para a lateral. Identifique se
a Objetiva de 4x está na posição correta;
3 – Coloque a lâmina (com a lamínula virada para cima!) sobre a Platina. Ajustar o
Charriot de modo que o orifício da Platina coincida com a abertura do condensador;
4 – Olhar pelas Oculares ao mesmo tempo em que se eleva lentamente a platina, girando o
parafuso macrométrico até que a preparação apareça focalizada (atenção para não
encostar a Objetiva na lâmina, evitando acidentes);
5 – Os ajustes finais de focalização devem ser efetuados com o parafuso micrométrico;
6 – Após focalizar qualquer material, basta mudar de objetiva e utilizar apenas o
PARAFUSO MICROMÉTRICO para focalizar o material;
7 – Deslocar a lâmina sobre a Platina a fim de efetuar observações em toda a extensão da
lâmina, utilizando o Charriot;
8 – Ao desejar retirar a lâmina do microscópio, girar o revólver de modo a deixar em posição
de observação de 40x (sempre no sentido contrário a da lente de 100x). Abaixar e deslocar
lateralmente a Platina, girando o parafuso macrométrico e, então, retirar a lâmina da
Presilha;
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9 – IMPORTANTE: NUNCA USE A OBJETIVA 100x sem óleo de imersão e prévia
anuência do Professor.
INSTRUÇÕES PARA A CONFECÇÃO DAS ATIVIDADES
1 – Leia todo o roteiro da aula que será realizada antes de iniciar o trabalho;
2 – Verifique se dispõe de todo o material necessário antes de começar o trabalho;
3 – Siga todas as indicações do roteiro;
4 – Após usar, limpe e coloque todo material no local indicado para não misturar
componentes;
5 – Só esquematize/fotografe o que você de fato vê. Se alguma estrutura deveria ser exibida
e não aparece, anote o sucedido por escrito em seu roteiro, porém procure bem antes de
proceder desta forma;
6 – Anote todos os dados. Na hora eles podem não parecer importantes, mas o serão para
as conclusões e para estudo posterior;
7 – Sempre anote a técnica utilizada e o aumento usado para a observação do que foi
desenhado;
8 – Responda todas as questões propostas com indicação da bibliografia utilizada;
9 – Não se esqueça: o AUMENTO FINAL = Aumento da Objetiva x Aumento da Ocular;
10 – Utilize o verso das folhas para respostas e anotações;
11 – Nas avaliações serão feitas questões sobre as aulas práticas!
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Aula prática nº 1 – data: ____/____/____


A finalidade dessa prática é aumentar a destreza no uso do microscópio de luz e
mostrar tipos diferentes de células em preparações a fresco e permanentes.
Atividade 1 - Partes de um microscópio de luz.
Indique o nome e função das estruturas apontadas no microscópio.

http://www.nikon.com/
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Métodos de estudo em Biologia Celular
A finalidade dessa prática é identificar diferentes estruturas e acúmulo de substâncias
celulares por meio da utilização de diferentes técnicas de coloração.

Atividade 2– Evidenciando estruturas:


Observe e esquematize a lâmina permanente nº 7 de epidídimo de rato corado com
Hematoxilina e eosina e a lâmina permanente nº 8 de epidídimo de rato submetido à
impregnação por prata.

Aumento: Aumento:
Corante: Corante:

Atividade 3 – Esfregaço de mucosa oral. Esfregar gentilmente um cotonete na parede


interna da bochecha e passar o material sobre duas lâminas. Secar e fixar o material do
esfregaço com álcool metílico. Observar ao microscópio. Umas das lâminas corar com
Hematoxilina (10 minutos) e deixar em água corrente por cinco minutos, posterirormente
corar com Eosina (5 minutos) e lavar rapidamente em água corrente. Em seguida, colocar a
lamínula. A outra lâmina deve ser corada com azul de metileno por 5 minutos, lavada em
água corrente e observada sob ML.

Aumento: Aumento: Aumento:


Corante: Corante: Corante:
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Atividade 4 – Observe as diferentes colorações abaixo de um mesmo tecido. Pesquise


sobre as técnicas utilizadas e explique o que cada uma destaca, além das principais
diferenças observadas nas fotografias.

Aula prática nº 2 – data: ____/____/____


Membrana Plasmática - Estrutura
Identificar a estrutura, organização, características e especializações da Membrana
Plasmática.

Atividade 1 - Observe uma lâmina de esfregaço sanguíneo corado com Giensa e observe
os diferentes tipos de células animais. Observe os formatos das células e de seus núcleos.

Aumento: Aumento:
Corante: Corante:
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Atividade 2 – Observação de células vegetais. Com uma pinça, retire uma fina película da
epiderme do bulbo de cebola, coloque uma gota de água sobre a lâmina, cubra com
lamínula e observe ao microscópio. Observe os formatos das células, dos núcleos e outras
membranas, caso seja possível

Aumento:
Corante:

Atividade 3 - Observe o esquema da membrana plasmática abaixo e as micrografias feitas


com o microscópio eletrônico. Assinale quais estruturas presentes no esquema podem ser
visualizadas nas micrografias.
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Atividade 4 – Quantas e quais os tipos de junções celulares aparecem na micrografia


eletrônica? Qual função desempenham?
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Atividade 5 - Retire 5 mL de sangue de mamífero e misture com 5 mL de anticoagulante
(preparado pelo técnico previamente). Coloque uma gota de sangue em uma lâmina e 1 gota
de solução de NaCl 0,9%, cubra com lamínula e observe ao microscópio. Em uma segunda
lâmina coloque uma gota de sangue e 1 gota de solução de NaCl 1,5%, cubra com lamínula
e oberve ao microscópio. Na terceira lâmina coloque uma gota de sangue e 1 uma gota de
água destilada, cubra com lamínula e observe ao microscópio. Compare o formato das
hemácias e explique o que aconteceu em cada um dos casos.

Aumento:
Corante:

Atividade 6 – Faça uma pequena pesquisa e explique os fenômenos que ocorreram em


cada uma das observações.

Aula prática nº 3 – data: ____/____/____


Observação de mitocôndrias e cloroplastos
Atividade 1 – Observação de mitocôndrias. Fazer uma suspensão de levedo (fermento para
pão) em água morna e açúcar e aguardar 5 minutos. Colocar uma gota da suspensão sobre
uma lâmina, adicionar uma gota do corante verde janus, cobrir com lamínula e observar sob
objetiva de 100x com óleo de imersão.

Aumento:
Coloração:
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Atividade 2 - Pegue uma folha da extremidade de uma elódea (planta de aquário) e coloque
uma gota de lugol. Coloque em uma lâmina, cubra com lamínula, espere 1 minuto, observe e
esquematize.

Aumento:
Coloração:

Atividade 3 - Observe as micrografias eletrônicas abaixo e coloque as legendas de forma


correta nas estruturas indicadas.
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Atividade 4 – Faça uma pequena pesquisa sobre a teoria de surgimento das organelas
estudadas hoje.

Aula prática nº 4 – data: ____/____/____


Observação de mitocôndrias e clomoplastos

A finalidade dessa aula é: verificar a presença das mitocôndrias no citoplasma dos


leucócitos; ¬ Conhecer a morfologia dessas organelas citoplasmáticas (semelhantes a
células procarióticas, o que explica sua origem por endossimbiose de bactérias aeróbias); ¬
Conhecer a morfologia dos leucócitos.

Atividade 1 - Colocar uma gota do corante verde janus sobre uma lâmina e esperar cerca
de 10 minutos; 2. Passar algodão embebido em álcool no dedo indicador para desinfecção;
3. Com o auxílio de microlanceta descartável, furar a ponta do dedo indicador; 4.
Acrescentar uma gota de sangue sobre o resíduo do corante na lâmina, misturando com
palito de madeira; 5. Cobrir cuidadosamente com lamínula, evitando a formação de bolhas
de ar; 6. Caso haja excesso de líquido, retirar com papel absorvente; 7. Esquematizar o que
for observado nos aumentos de, no mínimo, 400x.
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Aumento:
Coloração:

Atividade 2 – Normalmente, estamos mais acostumados a estudar os cloroplastos, por


causa de seu papel na fotossíntese, mas existem diferentes tipos de plastos com diferentes
colorações, todos chamados de cromoplastos, de acordo com o pigmento que possuem. Os
cloroplastos possuem clorofila, que confere a coloração verde. Na atividade 2 vamos
observar outros tipos de plastos. Parte 1 - Fazer um corte fino, pequeno e transparente na
casca do pimentão amarelo; 2. Depositar sobre a lâmina e adicionar uma gota de água
destilada; 3. Cobrir com a lamínula (retirar excesso de água com papel filtro, se necessário);
4. Observar ao microscópio nos aumentos totais de, no mínimo, 400x. 6. Identificar as
estruturas celulares reconhecidas, com foco nos cromoplastos. Parte 2 - Fazer outro corte,
agora na casca do pimentão vermelho; 2. Seguir os mesmo passos do procedimento
anterior; 3. Observar ao microscópio como anteriormente. Esquematizar as observações
identificando as estruturas celulares reconhecidas.

Aumento: Aumento:
Coloração: Coloração:
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Aula prática nº 5 – data: ____/____/____
Síntese e Secreção de Macromoléculas

Objetivos: Observar células especializadas na síntese e secreção de macromoléculas


através de técnicas citoquímicas.
Atividade 1 - Lâmina nº 4 – Intestino de coelho corada pelo método de PAS. Observar as
células caliciformes, que secretam muco. Elas são PAS positivo, ou seja, são fortemente
coradas de rosa forte. Elas recebem esse nome por terem a forma de um cálice. Além disso,
existem outras células ao seu redor PAS – negativo, ou seja, com coloração bem mais fraca.
Esquematize as duas separadamente.

Aumento:
Coloração:

Atividade 2 - Lâmina nº 9 – Pâncreas de rato corada por HE/Orange G. Observação da


célula acinosa do pâncreas, que tem a base larga voltada para os capilares sanguíneos e o
ápice estreito voltado para a luz (forma de pirâmide). O conjunto de várias células forma o
ácino pancreático. Observe a presença de RER destacado pela coloração na parte basal da
célula.

Aumento:
Coloração:
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Atividade 3 - Lâmina nº 8 – Epidídimo de rato – Impregnação por prata. Observação de
complexo de Golgi. Os complexos aparecem amarronzados voltados para a luz do duto.
Procure identificar também, o citoplasma e o núcleo das células.

Aumento:
Coloração:

Atividade 4 – Descreva as diferenças e funções das organelas apresentadas nas


micrografias eletrônicas.
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Atividade 5 - Responda as questões referentes à aula:


a. Quais as funções das diferentes colorações utilizadas?
b. Qual a relação funcional entre as estruturas observadas nos exercícios 2 e 3?
c. Pesquise qual a relação entre a função das células observadas em nossa aula
prática e as organelas presentes em seu citoplasma.

Aula prática nº 6 – data: ____/____/____


Digestão intracelular
Atividade 1 - Observe a lâmina nº 13 de pulmão humano – HE – e procure identificar os
macrófagos que geralmente estão cheios de material digerido.

Aumento:
Coloração:

Atividade 2 – Observação da ação dos radicais livres. Faça um creme de abacate com
água. Em um Becker coloque o creme puro e em outro adicione limão, etiquete o primeiro
Becker como CONTROLE e o segundo como EXPERIMENTAL. Após 1 hora, observe o que
acontece entre os dois procedimentos. Descreva o que aconteceu e explique o porquê da
diferença entre os dois, tendo em vista a composição do abacate e a ação do principal
componente do limão.

Atividade 3 – Ação da catalase – Os peroxissomos são organelas importante, apesar de


pouco “famosos” que desempenham importantes funções celulares, como produção de
energia e desintoxicação celular. A principal enzima em seu interior é a catalase. Para
observar a sua ação: corte duas fatias finas de tubérculo de batata; em seguida ferva uma
delas por 5 minutos; posteriormente, coloque em placas de Petri separadas e cubra-as com
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peróxido de hidrogênio (H2O2). Descreva o que acontece e explique o processo e qual a
reação química que está ocorrendo.

Atividade 4 – Observe as fotomicrografias eletrônicas de transmissão e identifique os


lisossomos e peroxissomos e explique suas diferenças estruturais e funcionais.

Aula prática nº 7 – data: ____/____/____


Citoesqueleto

Objetivos: observar diferenças no citoesqueleto e discutir seu papel nas células.


Atividade 1 – Observação de espermatozoides e a mobilidade dos flagelos. Observação de
espermatozóides a fresco. Colocar uma gota do material previamente coletado e mantido
em solução fisiológica enriquecida com frutose em uma lâmina, cobrir com lamínula e
observar ao microscópio.

Aumento:
Corante:
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Atividade 2 - Observação de células ciliadas e flageladas em material coletado do lago.


Colocar uma gota do material disponibilizado sobre uma lâmina, cobrir com lamínula e
observar ao microscópio. Procurar em material coletado previamente no lago do Centro de
Ciências Agrárias protozoários que apresentem cílios ou flagelos. Identifique e esquematize
os diferentes organismos observados abaixo.

Aumento: Aumento: Aumento:

Célula:_______________ Célula:_____________ Celula:_______________

Atividade 3 – Identifique as estruturas apresentadas nas micrografias eletrônicas abaixo e


discuta a função de cada uma delas nas células.
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Aula prática nº 8 – data: ____/____/____
Comunicação celular
Objetivos: através de uma analogia estabelecida com diferentes grãos de pólen, discutir
como acontece a sinalização entre os diferentes tipos de células e moléculas sinalizadoras.

Atividade 1 - Retirar os estames (parte masculina das flores), remover as anteras e colocar
em álcool 70%. Colocar em um pistilo e macerar com a ajuda de um bastão. Retirar um
pouco do material, colocar sobre uma lâmina, observar e comparar as diferentes espécies
disponíveis.
Aumento:
Coloração:

_______________________ _____________________ ____________________

Atividade 2 – Atividade lúdica sobre sinalização celular. A professora da disciplina levará


todo o material necessário no dia, além das explicações. Será surpresa!!!!

Atividade 3 – Busque/proponha outras analogias que podem ser utilizadas para a


explicação sobre a sinalização celular.

Aula prática nº 9 – data: ____/____/____


Núcleo
Objetivos: Analisar diferentes tipos de núcleo e procurar relacioná-los às funções
desempenhadas pelas células.
Atividade 1 - Observação de esfregaço sanguíneo humano corada com Giemsa para
identificação de diferentes formatos do núcleo. Faça uma pequena pesquisa e procure
identificar as células observadas e suas funções.
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Aumento:
Coloração:

Célula:_______________ Célula:_______________ Celula:_______________

Atividade 2 - Observação de esfregaço de sangue de peixe através da lâmina nº 11 corada


com HE. Observe e esquematize as hemácias encontradas nesse esfregaço. Qual a
principal diferença com as hemácias do sangue humano?

Aumento:
Coloração:

Atividade 3 - Observe a lâmina nº 2 de fígado de rato – HE – procure identificar o núcleo


dos hepatócitos e os nucléolos em seu interior.
Aumento:
Coloração:
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Atividade 4 – Observe as micrografias eletrônicas abaixo e coloque legenda.

Aula prática nº 10 – data: ____/____/____


Morte celular
Objetivos: Observar alterações metabólicas sofridas pelas células durante o processo de
morte.
Atividade 1 – Teste de exclusão do corante vital azul de tripan por células de
Saccharomyces cereviseae. Dissolva um pouco de fermento biológico contendo células de
Saccharomyces cereviseae em água com um pouco de açúcar e separe em duas porções.
Aqueça a primeira porção até 30ºC e ferva a outra. A seguir, acrescente o corante azul de
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tripan 0,4% preparado com soro fisiológico, aguarde 1 minuto e coloque as amostras uma
em cada lâmina, cubra com lamínula e observe. Explique o que está acontecendo.

Aumento:
Corante:

Atividade 2 – Diferenças entre os tipos de morte celular. Observe as duas células


apresentadas abaixo e descreva as principais diferenças observadas e o significado de cada
uma delas. Procure esquemas que mostrem as diferenças entre as mortes por necrose e
apoptose.
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Referências Recomendadas
ABDALLA, F.C.; DOMINGUES, C.E.C. Roteiros de aulas práticas em Biologia Celular.
Universidade Federal de São Carlos campus Sorocaba. Disponível em:
http://www.academia.edu/7185088/ROTEIRO_DE_AULAS_PR%C3%81TICAS_EM_BIOLO
GIA_CELULAR acesso em: 12/08/2015
ALBERTS, B. e colaboradores. Biologia Molecular da Célula. 5ª Ed. Porto Alegre, Artmed,
2010.
COOPER, G.M. A célula. Uma abordagem molecular. 2ª Ed. Porto Alegre, Artmed, 2005.
JUNQUEIRA, L.C., CARNEIRO, J. Biologia Celular e Molecular. 8. ed. Rio de Janeiro:
Guanabara Koogan, 2005. 332 p.
POLIZELI, M. L. T. M. Manual Prático de Biologia Celular. Holos Editora Ltda-ME, 1999.
72 p.

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