Departamento de Zoologia e Botânica - IBILCE - UNESP

Curso: Ciências Biológicas - Disciplina: Morfologia Vegetal:

º
Órgãos Vegetativos 1 Semestre de 2024 - Turmas 1 e 2
Prof. Dr. Nelson S. Bittencourt Jr

Roteiro da aula prática – Célula vegetal: plastídios, vacúolo, parede celular e inclusões minerais

Objetivo: Investigar a célula vegetal de modo a reconhecer suas características e os principais componentes do
protoplasto e da parede celular, visíveis em microscópio óptico, incluindo alguns tipos de substâncias
ergásticas.

1. Cloroplastos, cromoplastos e leucoplastos

O foco desta parte da aula será no reconhecimento de diferentes tipos de plastídios em cortes de material
fresco.

a. Tome uma folha de Sansevieria trifasciata (espada-de-são-jorge) e, utilizando lâmina de barbear (gilete), faça vários
cortes transversais e armazene-os em um vidro de relógio contendo água. Selecione um ou dois cortes mais finos
(os mais translúcidos), coloque-os numa lâmina de vidro com uma ou duas gotas de água e cubra com lamínula.
Observe os cortes no microscópio de luz, identificando o tecido contendo células de paredes delgadas e
cloroplastos. Após as observações, reserve esta lâmina para a execução do item 4b.

1 Identifique as estruturas apontadas na figura ao lado (utilize a objetiva

de 40x para observação dos detalhes):

1. _________________________________________
2
2. _________________________________________

3. _________________________________________
3

b. Retire um pequeno pedaço (mais ou menos 1 cm de largura) do pericarpo de Capsicum annuum (pimentão) verde.
Com uma lâmina de barbear, faça vários cortes bem finos deste material (os cortes podem ser transversais ou
longitudinais) reservando-os num vidro de relógio contendo água. Monte uma lâmina segundo as instruções
apresentadas no item a. Examine o(s) corte(s) no microscópio.

1 Identifique as estruturas apontadas na figura ao lado (utilize a

objetiva de 40x):
2
1. _______________________________________

2. _______________________________________

3. _______________________________________
3 4. _______________________________________
4

c. Execute o mesmo procedimento indicado acima no item b, porém utilizando o pimentão maduro (vermelho). No
microscópio, verifique os cromoplastos no interior das células (utilize a objetiva de 40x). Tente identificar as
mesmas estruturas observadas no corte anterior (exceto cloroplastos).

Questões: (1) Por que os cloroplastos e os cromoplastos são organelas visíveis ao microscópio de luz, mesmo em
cortes de material fresco que não foram submetidos a nenhum outro tratamento? (2) Por que, em algumas variedades
de Capsicum annuum, o fruto que inicialmente apresenta cor verde torna-se vermelho ao amadurecer (o que acontece
ao nível celular), e qual é o papel biológico dos cromoplastos no pimentão maduro?

d. Tome um fragmento do tubérculo de Solanum tuberosum (batata-inglesa). Tal como indicado no item a acima, faça
vários cortes manuais, selecione um corte bem fino e monte uma lâmina com água. Selecione um segundo corte,

1
 1
estenda-o sobre outra lâmina, pingue sobre ele uma gota de lugol e cubra com a lamínula. Observe ambos os
cortes no microscópio e identifique: (1) parede celular (primária), (2) amiloplastos, (3) hilo, (4) camadas de
deposição (lamelas) do amido. Utilize a objetiva de 40x para fotografar e desenhar algumas células, indicando no
desenho as estruturas citadas.

e. Execute o mesmo procedimento indicado acima no item d, porém utilizando a raiz de Ipomoea batatas (batata-
doce). Identifique as mesmas estruturas citadas no item anterior e, usando a objetiva de 40x, fotografe e desenhe
algumas células, indicando no desenho as estruturas citadas.

Espaço reservado para o desenho – Solanum tuberosum Espaço reservado para o desenho – Ipomoea batatas

Questões: (1) Que diferença existe entre os amiloplastos da batata-inglesa e os da batata-doce, e como um e outro são
denominados? (2) A que se deve a lamelação observada nos grãos de amido?

2. Vacúolo e corrente citoplasmática

O foco desta atividade será no estudo do vacúolo e no reconhecimento da ciclose (corrente citoplasmática).

a. Retire uma folha do ramo de Egeria najas (elódea) e coloque-a numa lâmina contendo algumas gotas de água.
Cubra com lamínula e observe ao microscópio por alguns minutos. O que está acontecendo com os cloroplastos?
Empregando a objetiva de 40x, fotografe a imagem do microscópio (se possível, filme) e faça um desenho do
material observado, indicando no mesmo (1) parede celular e (2) cloroplastos.

b. Examine uma flor de Tradescantia pallida (trapoeraba-roxa) na lupa. Com uma pinça, retire alguns tricomas
existentes na base dos estames, coloque-os sobre uma lâmina com uma gota d’água, cubra com a lamínula e
observe as células do tricoma ao microscópio. O que está acontecendo com as partículas (organelas) em
suspensão no citoplasma? Identifique (1) parede celular, (2) núcleo e (3) os cordões citoplasmáticos. Fotografe (se
possível, filme) e desenhe o material observado, indicando no desenho as estruturas citadas.

Espaço reservado para o desenho – Egeria najas Espaço reservado para o desenho – Tradescantia pallida

Questões: (1) Por que os cloroplastos nas células da folha de elódea e as minúsculas organelas nas células dos
tricomas da flor de trapoeraba apresentam um posicionamento periférico no protoplasto, próximos à parede celular? (2)
Explique o fenômeno da ciclose (como e por que esse movimento acontece e quais componentes do citoesqueleto
estão nele envolvidos). (3) A que se deve a cor rosa/roxa observada no interior da célula do tricoma e em que organela
esse componente se encontra? (4) O que é movimento browniano e como ele se manifesta no citoplasma das células
da folha de elódea e do tricoma de trapoeraba?

1
O lugol (iodeto de potássio – I2KI) é um reagente utilizado para identificação do amido (Berlyn & Miksche 1976). Não deixe o
reagente entrar em contato com a sua pele, ou com as peças do microscópio. Limpe o microscópio imediatamente em caso de
contato acidental das peças do mesmo com o reagente.

2
c. Obtenha cortes paradérmicos do tecido de revestimento (epiderme) da folha de Tradescantia pallida (trapoeraba-
roxa). Para tanto, rasgue uma folha de modo a obter pequenos fragmentos de epiderme (tecido translúcido aderido
à margem rasgada). Utilizando gilete e pinça histológica, recorte alguns fragmentos de epiderme transferindo-os
para um vidro de relógio com água. Com o pincel, selecione um desses cortes, estenda-o sobre uma lâmina de
vidro, pingue algumas gotas de água sobre o corte, cubra-o com lamínula e leve ao microscópio. Identifique as
células epidérmicas pigmentadas (isto é, apresentando conteúdo de cor rosa/roxa). Se possível, fotografe as
células observadas (utilize objetiva com aumento apropriado).

Agora, retire a lâmina do microscópio. Caso haja excesso de água em sua preparação, encoste levemente um
pedacinho de papel absorvente na aresta da lamínula para remover esse excesso. Retorne a lâmina ao
microscópio e focalize novamente as células pigmentadas. Observando fixamente as células, solicite a um colega
de grupo que pingue com um conta-gotas uma gota de água saturada com cloreto de sódio na aresta da lamínula.
Observe o que acontece com as células pigmentadas. Se possível, fotografe as células afetadas.

Questões: (1) Explique e cite o nome do fenômeno observado nas células epidérmicas após a adição da solução de
cloreto de sódio ao meio em que as mesmas se encontravam. (2) Em que local do citoplasma celular encontra-se o
pigmento que lhe confere a cor característica e por que a saturação desta cor gradativamente se intensifica após a
adição do cloreto de sódio?

3. Inclusões minerais

Nesta etapa da aula, nosso foco será na verificação de algumas inclusões minerais da célula vegetal.

a. Tome partes da folha de Diffembachia amoena (comigo-ninguém-pode) e faça vários cortes longitudinais e
transversais da nervura foliar mediana. Armazene os cortes em um vidro de relógio com água, selecione os mais
finos e monte-os entre lâmina e lamínula com água. Observe os cortes ao microscópio e identifique e desenhe as
células contendo inclusões sólidas.

Espaço reservado para os desenhos dos cortes da folha de Diffembachia amoena

Corte longitudinal Corte transversal

Questões: (1) Quais os tipos de inclusões minerais encontradas? (2) De que substância inorgânica estas inclusões são
constituídas e em que organela da célula vegetal elas se formam?

b. Tome um pedaço de folha de Ficus elastica (seringueira-de-jardim), faça cortes perpendiculares às nervuras
secundárias desta folha conforme as orientações do professor. Coloque uma ou duas gotas d’água no centro de
uma lâmina de vidro, mergulhe um dos cortes obtidos e cubra com lamínula. Leve ao microscópio e observe na
epiderme (tecido de revestimento) células mais volumosas contendo uma “grande” inclusão sólida. Identifique as
estruturas apontadas na figura que se segue.

1. (nome da célula) _______________________________________

1 2. (nome da inclusão mineral) _______________________________

2 Após identificar as estruturas, retire o excesso de água da preparação

encostando um pedaço de papel absorvente na aresta da lamínula e,
observando atentamente no microscópio a célula contendo a inclusão
sólida, solicite a um colega que pingue cuidadosamente uma gota de
2
ácido clorídrico na aresta da lamínula. O que acontece quando o ácido
clorídrico entra em contato com as células que contêm a inclusão?

2
ATENÇÃO: embora o ácido clorídrico esteja diluído nesta solução, trata-se de um reagente corrosivo, que não deve entrar em
contato com as peças de metal do microscópio. Tome muito cuidado para que o preparado não toque nas lentes objetivas.

3
Questões: (1) Explique a reação química observada e responda: de que substância é formada a inclusão mineral das
células da folha de seringueira-de-jardim? (2) Com base na literatura, em que parte da célula ocorre a deposição desse
mineral?

4. Parede celular

O foco desta etapa da aula será nas paredes celulares primária e secundária.

a. Retire um pedaço do pericarpo do fruto de pimentão (vermelho ou verde). Utilizando uma pinça de ponta fina, tente
arrancar fragmentos da epiderme interna do pericarpo, segundo as indicações do professor. Coloque um
fragmento de epiderme numa lâmina de vidro contendo uma gota d’água e cubra com lamínula. Observe as
células da epiderme em vista frontal no microscópio e identifique nestas células a parede primária (espessada) e
os campos primários de pontoação (em vista frontal e de perfil), conforme indicado na figura abaixo.

1. ______________________________________
3 2. ______________________________________

3. ______________________________________

Questão: (1) Por que devemos reconhecer as descontinuidades nos espessamentos das paredes das células
epidérmicas do pericarpo do pimentão como campos primários de pontoação e não como pontoações? (2) O que são
esses campos primários de pontoação e de que modo eles estão relacionados com o intercâmbio de substâncias entre
células vizinhas?

b. Obtenha outra lâmina do corte transversal da folha de Sansevieria trifasciata (espada-de-são-jorge) conforme as
instruções fornecidas no item 1a deste roteiro. Porém, em vez de água, pingue uma gota de solução de alcoólica
de floroglucinol e uma gota de ácido clorídrico diluído sobre os cortes e cubra com a lamínula. No microscópio,
observe primeiro o corte da lâmina montada apenas com água (aquela que você montou ao executar o item 1a).
Encontre o tecido apresentando células com paredes espessas e lume reduzido.

Identifique as estruturas apontadas na figura ao lado

(utilize a objetiva de 40x):

3 5 1. ___________________________________

2. ___________________________________
2
3. ___________________________________

4 4. ___________________________________
1
5. ___________________________________

Agora observe o corte tratado com floroglucinol e ácido clorídrico. O que aconteceu no tecido contendo células de
paredes espessas?

Questões: (1) O que o resultado do teste histoquímico com o floroglucinol acidificado indica sobre a composição
química da parede celular no tecido observado? (2) Por que podemos inferir das observações realizadas que as células
em questão apresentam, além de parede primária, também parede secundária?

Leitura recomendada

Capítulos 2 (A Célula Vegetal) do livro:

Appezzato-da-Glória, B. & Carmello-Guerreiro, S. M. (eds.) 2022. Anatomia Vegetal. 4ª ed. Viçosa: Editora UFV.

Capítulos 2 (O protoplasto: membrana plasmática, núcleo organelas citoplasmáticas), 3 (O protoplasto: sistema de endomembranas,
vias secretoras, citoesqueleto e compostos armazenados) e 4 (Parede celular) do livro:

Evert, R. F. 2013. Anotomia das Plantas de Esau – Meristemas, Células e Tecidos do Corpo da Planta: Sua Estrutura, Função e
Desenvolvimento. Traduação da 3ª ed. Americana. São Paulo: Edgard Blücher.