Materia: Biología General Fecha de Entrega: 29/03/23

Grupo No.: 13
Integrantes: Saldivias Mendez Pedro Ignacio
Sandoval Uriona Alezia Gisel
Rojas García Roberto Anthony
Salazar García Mirella
Informe de Laboratorio
CITOLOGIA: BIENVENIDA AL MUNDO CELULAR
1. INTRODUCCIÓN
En 1665, Robert Hooke optimiza el microscopio óptico y observa un corcho natural de vino, Quercus
suber, bajo el mismo. En este, se encuentra con estructuras compuestas por pequeños poros de aspecto
similar a las celdas de un monasterio (en inglés, “cells”). Registra sus observaciones en su libro
Micrographia, y este se convierte en el primer registro del avistamiento de células (National
Geographic Society, 2022).
Actualmente, la teoría celular, propuesta por primera vez en 1838 por Schwann y Schleiden, es un
principio fundamental en las ciencias biológicas. Esta indica que la célula es la unidad fundamental
de vida de organismos biológicos; además, estipula que toda la vida proviene de vida preexistente
(Feher, 2017). La motivación de comprender estas unidades biológicas, tanto de sus componentes
como de los procesos que realizan, potenció el desarrollo de la microscopia. Hoy en día, es posible
observar tridimensionalmente cada uno de sus componentes estructurales y verlos en acción
utilizando técnicas como la microscopia electrónica y la microscopia de transmisión (Allen, 2015).
Esta práctica se realiza para presentar la citología a los científicos del futuro. La observación de
células eucariotas vegetales bajo el microscopio óptico, como aquellas presentes en el Quercus suber
y Allium cepa, permite distinguir con facilidad estructuras celulares principales como la pared celular,
la membrana celular y el núcleo. De esta manera, se establece un primer contacto con la unidad
fundamental de la vida, la célula.
2. OBJETIVOS
2.1. Objetivo General
 Analizar características morfológicas de las células vegetales observadas en el microscopio
óptico.
2.2. Objetivos Específicos
 Describir aspectos morfológicos observados en células vegetales de Quercus suber y Allium
cepa.
 Comparar el uso de distintos agentes de tinción para la visualización de células vegetales.
3. MATERIALES
3.1. Materiales Biológicos
- Corcho natural de Vino (muestra de Quercus suber)
- Cebolla (Allium cepa)
3.2. Materiales de Laboratorio
 - Portaobjetos
- Cubreobjetos
- Aguja enmangada
- Hoja de navaja de afeitar
- Pipetas Pasteur Desechables
- Pinzas de metal
- Kleenex
3.3. Reactivos y Equipos
- Violeta de Genciana
- Azul de Metileno
- Microscopio Óptico
4. MÉTODOS
4.1. Preparación de Muestra
4.1.1. Preparación de Muestra de Quercus suber
Se utilizó la hoja de navaja para rebanar una muestra del corcho natural lo mas delgada posible. Se
comparó la finura de la muestra con el aspecto de una pelusa como criterio de aceptación.
4.1.2. Preparación de Muestras de Allium cepa
Tabla 1. Procedimientos de laboratorio para la Preparación de muestras de Allium cepa

METODO SIN TINCION METODO CON TINCION

1) Se cortó con la hoja de navaja un recuadro de
una capa de cebolla.
2) Se separó la epidermis de la capa con ayuda
de la pinza.
3) Se localizó la epidermis en un portaobjetos y
se dejó caer una gota de agua de una pipeta
Pasteur sobre el tejido
4) Se colocó el cubreobjetos sobre el tejido con
un ángulo de inclinación de 45° respecto a la
horizontal del portaobjetos.
5) Se retiró el exceso de agua de la muestra con
ayuda de un Kleenex.
Fuente: Elaboración propia
1) Se repitió los pasos 1 y 2 del método con
tinción 2 veces, para obtener 2 muestras de
epidermis.
2) Se remojó cada epidermis durante 2 minutos
en diferentes agentes de tinción en un vidrio de
reloj (una en violeta de genciana, la otra en azul
de metileno).
3) Se localizó el tejido en un portaobjetos con
ayuda de la pinza y la aguja enmangada
4) Se enjuagó el exceso de tinte del tejido con
abundante agua.
5) Se repitió el paso 4 y 5 del método sin tinción.

4.2. Visualización en Microscopio Óptico

Todas las muestras fueron visualizadas en un microscopio óptico. Se utilizó los objetivos 4x, 10x y
40x y un ocular de 10x (aumento total de 40, 100 y 400 veces el diámetro, respectivamente). Además,
se fotografió lo visualizado con una cámara de celular cuyo zoom era de 1x a 2x veces de ampliación.
5. RESULTADOS
Los resultados de la observación de cada muestra, usando el microscopio óptico, se exponen en la
Tabla 2 y la Tabla 3. En el caso de las muestras de Quercus suber, se visualiza la parte de menor
espesor de la muestra para poder exponer las estructuras celulares rígidas de las células vegetales.
Por otra parte, respecto a las muestras de Allium cepa, se utilizan agentes de tinción diferentes para
visualizar aspectos diferentes de la estructura celular de las células en su epidermis.
5.1. Visualización de Componentes Celulares Principales en Quercus suber
 Tabla 2. Muestra de Quercus suber observada en el microscopio óptico con diferentes aumentos

Aumento 40x Aumento 100x Aumento 400x

Fuente: Elaboración propia

5.2.Visualización de Componentes Celulares Principales en Allium cepa

Tabla 3. Muestra de Allium cepa observada en el microscopio óptico con diferentes objetivos y agentes de tinción
OBJE-
TIVO

TINCIÓN CON VIOLETA TINCIÓN CON AZUL DE

SIN TINCIÓN
DE GENCIANA METILENO

4x

10x

40x

Fuente: Elaboración propia

6. DISCUSIÓN
6.1. Resultados Quercus suber
Observando las células del borde la muestra utilizada, resaltamos el patrón estructural de las
células de la corteza del árbol de alcornoque (Quercus suber). Cuando la luz del microscopio
atraviesa la muestra se pueden observar gruesas paredes celulares, aparentemente, vacías en su
interior (Columna 3 – Tabla 2); sin embargo, no están realmente vacías, comúnmente poseen aire
adentro. Esta característica otorga al corcho propiedades como aislante de sonido y calor (Gibson
et al., 1981).
De igual manera, se menciona que este tejido poseía un aspecto similar al patrón hexagonal de un
panal de cera de abejas (Crouvisier-Urion et al., 2019). Esto se comprueba cuando uno observa
en la cercanía de los bordes de la muestra. Ahí, se pueden observar algunas formas geométricas;
principalmente, se distinguen hexágonos y pentágonos.
Para finalizar, es interesante notar la capacidad de estas células de deformarse, pero no colapsar
totalmente frente a la compresión. Sus gruesas y resistentes paredes celulares, otorgan esta
propiedad al corcho que le permite ser utilizado como material para la absorción de impactos
(Gibson et al., 1981).
6.2. Resultados Allium cepa
De manera general, las células de Allium cepa tenían una forma cuadrangular. Ademas, poseian
un aspecto similar al de una pared de ladrillos; donde cada ladrillo es una celula y el cemento que
las separa, la pared celular. Todas se encontraban organizadas de una manera muy compacta,
ocupando todo el espacio visible de la muestra, sin intersticios vacios.
Al usar el método sin tinción, se visualiza las paredes celulares con claridad. No obstante, los
demás componentes celulares no sobresalen durante la observación (Columna 1-Tabla 3). En
cambio, con agentes de tinción, con un aumento de 40x ya se distinguen claramente las paredes
celulares y basta usar un aumento de 100x para distinguir los núcleos de cada célula en el tejido.
El uso de azul de metileno sobresale, entre los agentes de tinción, por su capacidad de permitir la
diferenciación de mayor cantidad de componentes celulares con mayor resolución (Figura 1).
Además, debido a la opacidad del tinte, su visualización en el microscopio es más amena a la
vista del experimentador (comparar luminosidad en las imágenes de la columna 2 y columna 3
de la Tabla 3).

(A) (B)
a

Figura 1. Células de la Epidermis de Allium cepa teñidas con Azul de Metileno. (A) Aumento total 40x (B)
Aumento total 100x
 Fuente: Elaboración Propia

7. CONCLUSIONES
Se observaron los componentes principales de las células vegetales en los tejidos de Quercus
suber y Allium cepa. Entre ellos, se observa la característica común de una alta organización del
espacio ocupado por las células. En el caso de Quercus suber, sus células se encontraban
compactadas entre sí, pero ocupando todo el espacio disponible sin que colapse la estructura
individual de cada célula. Por su parte, en Allium cepa, la organización de las células en el tejido
se asemejaba a la disposición de ladrillos en una pared separadas por la pared celular.
Después, el uso de agentes de tinción durante la observación de células vegetales bajo el
microscopio, mejora significativamente el proceso de visualización de componentes.
Especialmente, la observación de paredes celulares y núcleos, con los objetivos utilizados.
Además, la selección del tipo de agente de tinción es importante. Si bien los componentes
observados eran prácticamente los mismos con ambos agentes de tinción, la opacidad del azul de
metileno define más los contornos y es más ameno a la vista.
Para concluir, el uso de aumentos 40x, 100x y 400x fue suficiente para distinguir aspectos
morfológicos del tejido y de los componentes principales de las células vegetales observadas.
Además, utilizando agentes de tinción para la observación, se facilita significativamente la
diferenciación de los componentes celulares. Sin embargo, la selección del tipo de tinte influirá
en la nitidez de lo observado.
8. BIBLIOGRAFÍA
Allen, T. (2015). Microscopy: A Very Short Introduction (1.a ed.). Oxford University Press.
Crouvisier-Urion, K., Chanut, J., Lagorce, A., Winckler, P., Wang, Z., Verboven, P., Nicolai, B.,
Lherminier, J., Ferret, E., Gougeon, R. D., Bellat, J.-P., & Karbowiak, T. (2019). Four
hundred years of cork imaging: New advances in the characterization of the cork structure.
Scientific Reports, 9(1), Article 1. https://doi.org/10.1038/s41598-019-55193-9
Feher, J. (2017). 1.1—The Core Principles of Physiology. En J. Feher (Ed.), Quantitative Human
Physiology (Second Edition) (pp. 3-14). Academic Press. https://doi.org/10.1016/B978-0-12-
800883-6.00001-X
Gibson, L. J., Easterling, K. E., & Ashby, M. F. (1981). The Structure and Mechanics of Cork.
Proceedings of the Royal Society of London. Series A, Mathematical and Physical Sciences,
377(1769), 99-117.
National Geographic Society. (2022). History of the Cell: Discovering the Cell.
https://education.nationalgeographic.org/resource/history-cell-discovering-cell/