BIOLOGIA Sessão Prática Laboratorial e de Orientação Tutorial Semana 4

I - Organização Celular Eucariota

Introdução
As células constituem a unidade estrutural e funcional dos seres celulares. As células
eucariotas são a unidade estrutural de organismos unicelulares e pluricelulares eucariontes
(fungos, protozoários, algas, plantas, animais). A organização celular eucariota caracteriza-
se pela compartimentação interna definida por membranas que individualizam espaços
funcionalmente diferentes (organitos/organelos celulares).
As células eucariotas mantêm seu DNA em um compartimento separado por um sistema
membrana, o núcleo. Além disso, elas têm um citoesqueleto, para suporte e movimento, e
outros compartimentos como mitocôndrias e cloroplastos (só nas algas e plantas),
essenciais na bioconversão de energia. A membrana plasmática e, nalguns casos, a parede
celular definem o limite celular (Figura 1).

Figura 1 - Representação esquemática de dois tipos de células eucariotas: (a) célula animal e (b) célula
vegetal. Retirado de http://www.bioinfo.org.cn/book/biochemistry/chapt02/bio2.htm

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Palavras-chave
Célula eucariota; membrana plasmática; parede celular; núcleo; cromatina.

Bibliografia
Alberts, B., Johnson, A., Lewis, J., Morgan, D., Raff, M., Roberts, K. & Walter, P.( 2015).
Molecular Biology of the Cell, 6th ed.. Garland Science, 1464 pp.. Ver Parte III, Capítulo 19

Procedimento Experimental

Objetivos
Observar células vegetais e animais e conhecer as estruturas visíveis em microscopia ótica.

Equipamento e Material
Microscópio ótico binocular Leitz (HM-LUX 3 ou outro)
Lâmina de bisturi
Cebola (Allium cepa)
Corante (carmim acético)
Lâminas
Lamelas

Segurança
É necessário tomar os cuidados relativos à utilização de um equipamento elétrico, lâmina de
bisturi e ao manuseamento de material de vidro (lâminas e lamelas).
O corante (carmim acético) é uma solução preparada a partir de reagentes químicos. Não
ingerir e evitar o contacto com a pele e olhos.

Procedimento
A - Seguir as indicações do docente responsável pela sessão de ensino prático e
laboratorial para a montagem da preparação (ver esquema):
- separar uma escama do bolbo da cebola
- e, com o auxílio da lâmina do bisturi, retirar uma porção da epiderme interior;
- colocar numa lâmina de microscópio e, de imediato, colocar uma gota de corante
(carmim acético) sobre o tecido;
- colocar a lamela evitando a formação de bolhas sobre o tecido.

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C - Para a observação das células animais serão utilizadas preparações definitivas.

B - Seguir as indicações do docente responsável pela sessão de ensino prático e laboratorial
para a observação da preparação a fresco, utilizando as objetivas de x10 e x40. Com a
ampliação de x400 observar: parede celular, membrana plasmática, citoplasma, núcleo e
cromatina.

Registo da Observação

Orientação Tutorial
1.Qual a estrutura celular observada nas células vegetais que não se encontra nas células
animais?
2. Em que tipo de célula é mais difícil observar a membrana plasmática?
3. Qual o papel do corante nas preparações microscópicas observadas?

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II - Regulação Osmótica

Introdução
A osmose é o movimento da água através de uma membrana semipermeável, de um meio
de mais baixa concentração de soluto para um meio de mais alta concentração de soluto.
A osmose é fundamental em vários processos biológicos e, frequentemente, ocorre ao
mesmo tempo em que os solutos difundem-se ou são transportados. Todos os seres vivos
celulares necessitam de manter o equilíbrio osmótico.
Os seres pluricelulares apresentam sistemas complexos de órgãos que mantêm esse
equilíbrio, enquanto um organismo unicelular depende da sua estrutura celular. Em qualquer
dos casos o papel da membrana plasmática é determinante para o transporte de substâncias
entre os meios intracelular e extracelular.
As soluções que possuem pressões osmóticas iguais são chamadas de isotónicas. Se a
solução possuir pressão osmótica menor, é hipotónica; as soluções com pressões osmóticas
elevadas são hipertónicas. O comportamento das células animais e vegetais em relação ao
meio extracelular, sendo semelhante, varia de acordo com a suas características estruturais
(Figura 2).

Figura 2 – Comportamento de células animais e vegetais em diferentes meios extracelulares. As setas indicam
o movimento da água, depois das células serem colocadas pela primeira vez nessas soluções: (a) Exemplo de
células animais; (b) Exemplo de células vegetais.

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Retirado de https://chromoscience.com/2019/12/20/water-balance-of-cells-without-cell-walls/

Palavras-chave
Osmose; meio hipertónico; membrana plasmática; transporte.

Bibliografia de Apoio
Alberts, B., Johnson, A., Lewis, J., Morgan, D., Raff, M., Roberts, K. & Walter, P.(2015).
Molecular Biology of the Cell, 6th ed.. Garland Science. Ver Parte IV, Capítulo 11.
Azevedo, C. & Sunkel, C. (2012). Biologia Celular e Molecular, 5ª Edição, Lidel.

Procedimento Experimental

Objetivos
Examinar como a osmose funciona, através da plasmólise em células vegetais.
Verificar a importância da membrana plasmática no controlo do transporte de solutos do
meio extracelular, através do controlo da viabilidade de Saccharomyces cerevisiae após um
processo de aquecimento.

Equipamento e Material
Microscópio ótico binocular Leitz (HM-LUX 3 ou outro)
Lâmina de bisturi
Pipetas
Cebola (Allium cepa)
Culturas de Saccharomyces cerevisiae em meio líquido:
- cultura de 24 horas (B I);
- cultura de 24 horas após tratamento térmico (B II) (tubo da cultura colocado em água a
ferver durante 10 minutos).
Corantes: carmim acético; azul de metileno
Solução saturada de sacarose
Lâminas
Lamelas

Segurança
É necessário tomar os cuidados relativos à utilização de um equipamento elétrico, lâmina de
bisturi e ao manuseamento de material de vidro (lâminas e lamelas). Os corantes (carmim
acético; azul de metileno) são soluções preparadas a partir de reagentes químicos. Não
ingerir e evitar o contacto com a pele e olhos.

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Procedimento
A – Observação de plasmólise em células vegetais:
- separar uma escama do bolbo da cebola e, com o auxílio da lâmina do bisturi, retirar duas
porções da epiderme interior;
- colocar numa lâmina de microscópio e, de imediato, colocar, numa porção de tecido, uma
gota de água destilada e de carmim acético (A I) e, na outra porção de tecido, uma gota da
solução saturada de sacarose e de carmim acético (A II);
- colocar as lamelas evitando a formação de bolhas sobre o tecido.

B – Observação do comportamento da membrana plasmática em células vivas e mortas:

- sobre uma lâmina colocar uma gota da cultura de células B I e outra da B II;
- colocar as lamelas evitando a formação de bolhas;
- colocar uma gota de azul de metileno junto a cada lamela e fazer penetrar o corante na
preparação absorvendo com papel de filtro colocado no lado oposto da lamela.
C – Seguir as indicações do docente responsável pela sessão de ensino prático e laboratorial
para a observação das preparações a fresco, utilizando as objetivas de x10 e x40.

Registo das observações

AI AII

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BI BII

Orientação Tutorial

1. Qual a alteração da estrutura celular das células vegetais em A II?

2. Explique o movimento da água em A I e A II.

3. Qual a principal diferença entre as células de levedura das preparações BI e BII?

4. Como explica a diferença de comportamento?

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