LICENCIATURA EM ENFERMAGEM

1º Ano
Unidade Curricular - Biologia Celular e Molecular
2023/2024

Docente
Ana M. Mesquita
d3740@ese.uminho.pt
 Prática Laboratorial 1

Objetivo 1 - Atividade 1: Descobrir o microscópio, cuidados e funcionamento -

identificação das partes do microscópio e respetiva função.
Objetivo 2 - Atividade 2: Verificar a especificidade dos corantes - preparação de materiais
simples para observação (coloração e montagem).
Objetivo 3 - Atividade 3: Identificações de estruturas celulares das células vegetais e
animais -observação ao microscópio.
Objetivo 4 - Atividade 4: Identificação de bactérias Gram positivas e Gram negativas -
observação de preparação definitivas (associação a patologias).
REGRAS BÁSICAS PARA USO DOS LABORATÓRIOS DURANTE AULAS PRÁTICAS

1. Uso obrigatório de bata e calçado fechado;

2. Uso de bata restrito ao laboratório, nunca nos corredores, bar, espaços comuns.
3. Acomodação do material (livros, cadernos, mochilas, etc.) em bancada livre, e nunca
na bancada onde são realizados os procedimentos práticos;
4. Lavagem das mãos antes e após a realização das experiências;
5. Proibição de comer e beber no laboratório;
6. Pipetagem com dispositivo apropriado, nunca com a boca - nunca levar nada à boca
ou inspirar produtos;
7. Utilização de luvas em caso de ferimentos na pele das mãos; e no caso de
manipulação de produtos/amostras que assim o exijam (agentes infeciosos, p. ex);
8. Precaução em relação a qualquer objeto cortante (seringas e agulhas, lâminas,
pipetas e bisturis);
9. Utilização de óculos protetores em procedimentos que produzam borrifos de
microorganismos ou de materiais perigosos;
10. Descarte do material segundo as normas vigentes, em recipientes apropriados.

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Introdução

As células apresentam uma grande diversidade morfológica e funcional. Existem dois tipos
de células: as células eucarióticas (animais e vegetais) e as células procarióticas. Os
eucariontes são organismos muito mais complexos do que os procariontes e distinguem-se
destes pelo facto de possuírem o seu material genético organizado num compartimento da
célula, o núcleo, que se encontra separado do resto da célula por uma membrana. As células
vegetais possuem organelos similares aos das células animais, no entanto possuem
organelos únicos como a parede celular, os vacúolos.

O epitélio é um tecido celular existente nos animais que limita as superfícies externas e
internas do corpo formado. É formado por uma só ou várias camadas e pode apresentar
aspeto pavimentoso, cilíndrico e cubico. O epitélio bucal é o tecido animal que reveste a
mucosa bucal, essencialmente caracterizado por apresentar células arredondadas ou
alongadas que apresentam os bordos dobrados devido ao facto de não possuírem uma
parede celular rígida como as células vegetais.

A coloração é uma técnica importante em microscopia, pois permite evidenciar estruturas

celulares pouco perceptíveis (células de reduzidas dimensões e sem contraste entre os seus
constituintes). Isto torna-se viável visto que determinados constituintes tendem a absorver
certos corantes enquanto outros não têm essa capacidade. Nesta actividade experimental
vamos utilizar a solução de vermelho neutro, soluto de Lugol e a solução de azul metileno.
O vermelho neutro é um corante que, usado em baixa concentração, penetra na célula
(corante vital) corando apenas os vacúolos de vermelho, ficando o citoplasma e alguns
organelos incolores. Pelo contrário, o azul metileno é um corante básico que actua
preferencialmente sobre o núcleo, corando-o de azul. O soluto de Lugol identifica os
amiloplastos, já que é um corante que cora o amido.
Cuidados no manuseamento dos materiais
No manuseamento dos materiais, devemos ter em conta que:
• Pinças, lâminas, lamelas e corantes são objetos cortantes;
• Não se deve deixar a objetiva de maior ampliação tocar na preparação;
• Não se deve comer ou beber durante a realização da actividade;
• O azul de metileno deve ser guardado longe de substâncias incompatíveis, de fontes
de ignição.

O microscópio

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Material
Cebola; células de epitélio lingual, células da batata
Microscópio
Palito
Lâminas e Lamelas
Bisturi e Pinça
Solução de azul de metileno
Papel de filtro
Água iodada, vermelho Neutro
Conta-gotas

Procedimento
A. Observação de células da epiderme da túnica da cebola – Allium cepa (células
vegetais)
1. Coloque sobre três lâminas uma gota de vermelho neutro; uma gota de azul de
metileno; uma gota de água iodada;
2. Com o auxílio de uma pinça, retire um fragmento de epiderme da face côncava de
uma túnica da epiderme da cebola;
3. Divida o fragmento em três porções com o bisturi, e coloque cada uma delas
distendida sobre o corante em cada lâmina;
4. Cubra as três preparações com as lamelas e observe-as ao microscópio;
5. Desenhe o que observa, legendando correctamente.

B. Observação de amiloplastos nas células da batata (células vegetais)

1. Faça um corte transversal (o mais fino possível) na batata já cortada;
2. Raspe a substância aquosa;
3. Transfira uma gota da substância para a lâmina;
4. Adicione uma gota de lugol (pode ser bastante diluído em água - quase
transparente);
5. Aguarde 1 minuto;
6. Desenhe o que observa, legendando.
C. Células do epitélio lingual (células animais)
1. Com um palito desinfetado raspe levemente a superfície da língua;
2. Coloque o produto obtido sobre uma lâmina e espalhe as células com a ajuda da
lamela de modo a obter uma camada fina (técnica de esfregaço);
3. Cubra com a lamela e entre a lâmina e a lamela coloque uma gota de azul de
metileno pela técnica de irregação;
4. Retire o excesso colocando um pouco de papel de filtro junto ao bordo da lamela;
5. Observe a preparação utilizando diferentes preparações;
6. Desenhe o que observa, legendando.