Ramesh C.

Gupta • Ajay Srivastava • Rajiv Lall

Nutracêuticos em Medicina Veterinária

1
Editores

Ramesh C. Gupta – Department of Toxicology, Breathitt – Veterinary Center Murray State

University Hopkinsville, KY, USA
Ajay Srivastava – Vets Plus Inc. University of Wisconsin – Stout Menonomie, WI, USA
Rajiv Lall - Vets Plus Inc. Menomonie, WI, USA

ISBN 978-3-030-04623-1 ISBN 978-3-030-04624-8 (e-book)

https://doi.org/10.1007/978-3-030-04624-
© Springer Nature Switzerland AG 2019, publicação corrigida 2019

Este trabalho está sujeito a direitos autorais. Todos os direitos são reservados pela Editora, seja
todo ou parte do material em causa, especificamente os direitos de tradução, reimpressão,
reutilização de ilustrações, recitação, transmissão, reprodução em microfilmes ou de qualquer outra
forma física, e transmissão ou armazenamento de informações e recuperação, adaptação
eletrônica, software de computador ou por metodologia semelhante ou diferente agora conhecida ou
desenvolvida no futuro.
O uso de nomes descritivos gerais, nomes registrados, marcas comerciais, marcas de serviço, etc.
nesta publicação não implica, mesmo na ausência de uma declaração específica, que tais nomes
estão isentos das leis e regulamentos de proteção relevantes e, portanto, livres para uso geral usar.
O editor, os autores e os editores podem assumir com segurança que os conselhos e as
informações neste livro são considerados verdadeiros e precisos na data da publicação. Nem o
editor, nem os autores ou editores oferecem garantia, expressa ou implícita, com relação ao
material aqui contido ou por quaisquer erros ou omissões que possam ter sido cometidos.
O editor permanece neutro em relação a reivindicações jurisdicionais em mapas publicados e
afiliações institucionais.
Esta impressão da Springer é publicada pela empresa registrada Springer Nature Switzerland AG. O
endereço registrado da empresa é: Gewerbestrasse 11, 6330 Cham, Suíça

Dedicado à minha esposa Denise, filha Rekha e aos pais do falecido

Chandra e Triveni Gupta.
Ramesh C. Gupta

Dedicado à minha esposa Garima, filho Sankalp, filha Ayana, minha

mãe, meu irmão Sanjay e meus amigos.
Ajay Srivastava

Dedicado à minha esposa Swati Lall, filhos Dr. Rohan Lall e Dr. Rishi
Lall, mãe Kanak Lata Lall, e falecido pai Professor R.B. Lall.
Rajiv Lall

2
Introdução
De acordo com o Conselho Nutracêutico Veterinário da América do Norte, um nutracêutico
veterinário é definido como “uma substância que é produzida na forma purificada ou
extraída e administrada por via oral aos pacientes para fornecer agentes para a estrutura
e função normal do corpo e administrada com a intenção de melhorar a saúde e bem-
estar dos animais.” Esta definição difere ligeiramente de país para país. Parece que os
nutracêuticos ficam em algum lugar entre os nutrientes dos alimentos/rações e as drogas.
Embora os medicamentos fitoterápicos tenham sido usados por milhares de anos em
sistemas Ayurvédico, Homeopático, Siddha, Unani, Chinês, Tibetano, Egípcio, Russo,
Africano, Amazônico e muitos outros, na virada do século XXI, seu uso tornou-se ainda
mais popular em todo o mundo devido ao seu fácil acesso, acessibilidade e maior
tolerabilidade com uma ampla margem de segurança. Fora dos EUA e da Europa, mais
de 80% da população depende de medicamentos fitoterápicos porque eles estão
disponíveis sem prescrição e têm menos efeitos colaterais. Atualmente, a indústria de
nutracêuticos totaliza mais de US $ 250 bilhões por ano, e o uso de nutracêuticos na
saúde e doenças animais é mais popular do que em humanos. Devido a fatores
primordiais, como baixo custo e segurança, os veterinários de hoje podem preferir
nutracêuticos aos medicamentos modernos. Ao contrário dos produtos farmacêuticos
sintéticos, os nutracêuticos geralmente consistem em muitos compostos bioativos que
atingem múltiplos alvos e vias. Como resultado, os nutracêuticos podem exercer várias
atividades, como eliminação de radicais livres e antioxidantes, anti-inflamatórios,
imunomoduladores, adapto gênicos, sedativos, antimicrobianos, etc., com diversos efeitos
farmacológicos (Gupta 2016; Attiq et al. 2018). Por terem tais atividades biológicas e
farmacológicas, os nutracêuticos parecem ter ampla aplicação em muitas doenças
humanas e animais, como diabetes, hipertensão, periodontite, disfunção cognitiva, artrite,
alergias, gastrointestinais, hepáticas, renais, cardiovasculares, respiratórias, geniturinárias
e outras disfunções relacionadas a órgãos/sistemas do corpo e câncer. Um grande
número de nutracêuticos na forma de prebióticos, probióticos e simbióticos são usados
para promover a saúde intestinal dos animais, mas parecem influenciar favoravelmente a
funcionalidade de outros órgãos vitais também. Por ter vários constituintes bioativos, os
nutracêuticos costumam fornecer efeitos sinérgicos e impedir a resistência aos
medicamentos aos antibióticos, o que é um problema de saúde global (Lillehoj et al.
2018). Na atual situação mundial, devido à crise da saúde e à redução dos recursos
financeiros, a indústria de nutracêuticos enfrenta muitos desafios. Para um grande
número de nutracêuticos, não há dados disponíveis sobre segurança e toxicidade devido
à falta de estudos farmacocinéticos, farmacodinâmicos, farmacológicos e toxicológicos
3
(Gupta 2016). Enquanto alguns nutracêuticos gozam do status GRAS (geralmente
reconhecido como seguro) do FDA dos EUA, outros representam uma ameaça tóxica à
saúde humana e animal (Gupta et al. 2018). Devido ao controle de qualidade inadequado,
a contaminação de nutracêuticos com metais, micotoxinas e alcalóides vegetais
inerentemente tóxicos e a adulteração com drogas de abuso não apenas comprometem
sua qualidade, mas levantam sérios problemas de saúde, além de dar uma má imagem à
indústria nutracêutica. Os pacientes que recebem nutracêuticos também consomem
drogas terapêuticas e, com a tendência crescente de politerapia, ocorrem interações
adversas e resultados devido a perturbações metabólicas de interações
alimentos/nutracêuticos/drogas (Doorman et al. 2016; Gupta et al. 2018). Além disso, em
muitos casos, as alegações de uso de nutracêuticos são exageradas ou afirmadas sem
mérito científico sólido.

Os nutracêuticos são derivados principalmente de fontes biológicas (plantas,

invertebrados e animais vertebrados, peixes e pássaros) e são bem caracterizados por
constituintes químicos e propriedades biológicas e farmacológicas. Mas, ao contrário dos
produtos farmacêuticos, os nutracêuticos carecem de esforços incessantes para a
estrutura básica do núcleo, mecanismo de ação (vias essenciais e adversas),
bioinformática, farmacovigilância, estrutura/atividade, dose/resposta, relações temporais e
estudos clínicos. Ao contrário dos medicamentos modernos, os nutracêuticos não são
estritamente regulamentados em nenhum país. Nos Estados Unidos, a única
regulamentação importante relacionada aos nutracêuticos é a aprovação de 1994 pelo
Congresso dos Estados Unidos da Lei de Educação em Saúde de Suplementos
Dietéticos. Com base nessa lei vagamente regulamentada, os suplementos dietéticos são
classificados como alimentos, não como medicamentos, permitindo que sejam vendidos
sem prova de segurança e eficácia (US FDA 1994). No entanto, ao contrário dos
alimentos, os nutracêuticos geralmente não são reconhecidos como seguros, nem se
pode presumir que todos sejam seguros (Gupta et al. 2018). A partir de agora, a posição
do FDA é claramente afirmada que este ato não se aplica a animais, e a American
Veterinary Medical Association (AVMA) não acredita que o ato deva ser modificado para
incluir animais (Burns 2017). Na União Europeia, os regulamentos atuais exigem
evidências de que os medicamentos fitoterápicos atendem aos padrões aceitáveis de
qualidade, segurança e eficácia antes que uma licença de produto possa ser emitida. O
controle de qualidade e as diretrizes regulatórias para nutracêuticos, desde a produção,
distribuição e comércio nacional e internacional até o nível do usuário final, parecem
variar amplamente de país para país e, atualmente, não são estritamente respeitadas
como para produtos farmacêuticos. Em conferências nacionais e internacionais recentes
4
(American Veterinary Medical Association, International Veterinary Congress, World
Veterinary Association Congress, Nutracêuticos europeus e muitos outros), um grande
número de veterinários, nutricionistas, cientistas de alimentos e profissionais de saúde
animal reconheceram a importância dos nutracêuticos para saúde e doenças animais.
Consequentemente, Nutracêuticos em Medicina Veterinária foi preparado para enfrentar
os desafios dos veterinários de hoje, amantes de animais de estimação, profissionais de
saúde animal, produtores de animais de fazenda e a indústria de nutracêuticos
veterinários. O livro contém mais de sessenta capítulos, organizados em sete seções.
Cada capítulo é preparado usando um formato muito amigável para fornecer uma visão
científica para acadêmicos e médicos veterinários com interesse em nutrição animal,
medicina veterinária complementar e desenvolvimento e pesquisa de produtos
nutracêuticos. As declarações factuais são fundamentadas com referências pertinentes
para leitura posterior. Alguns capítulos são preparados de uma perspectiva de saúde,
abrangendo saúde animal e humana e estudos experimentais.

Após uma breve introdução, o livro começa com a Seção I sobre nutracêuticos comuns
que são usados nas formulações de centenas de produtos nutracêuticos. Segue-se a
Seção II sobre prebióticos, probióticos, simbióticos, enzimas, alternativas antibacterianas
e aditivos para rações. A maior parte deste livro (20 capítulos) encontra-se na Seção III,
que trata dos nutracêuticos em doenças e distúrbios relacionados a órgãos/sistemas.
Seção IV cobre capítulos dedicados a nutracêuticos para espécies específicas, incluindo
gado, equinos, camelídeos e aves. Segue-se a Seção V sobre avaliação de segurança e
toxicidade de nutracêuticos e alimentos funcionais usando modelos in vitro, in vivo e
outros, biomarcadores para alimentos e nutracêuticos selecionados e interação tóxica de
nutracêuticos com alimentos e produtos farmacêuticos. A seção VI trata das tendências
mais recentes em pesquisa nutracêutica e desenvolvimento de produtos, cobrindo
capítulos sobre proteômica e foodomics1, biodisponibilidade baseada em nanopartículas
de ingredientes nutracêuticos e nanouplementos e testes veterinários de estabilidade de
nutracêuticos. Por último, a Seção VII cobre extensivamente capítulos sobre aspectos
regulatórios de nutracêuticos em diferentes continentes e países, incluindo América do
Norte, União Europeia, Índia, China, Austrália, Nova Zelândia, Turquia, Filipinas e África
do Sul. Nutracêuticos em Medicina Veterinária é o livro mais completo no campo dos
nutracêuticos veterinários e oferece muitos capítulos sobre novos tópicos que não são
abordados em nenhum livro publicado anteriormente. Este livro servirá aos setores
acadêmico, industrial e governamental. Os editores continuam gratos aos contribuintes

1 Disciplina que estuda os domínios da Alimentação e Nutrição através da aplicação e integração de tecnologias avançadas de ômica
para melhorar o bem-estar, a saúde e o conhecimento do consumidor. Ômica é um neologismo da língua inglesa informalmente
refere-se a um campo de estudo em biologia que termina em -ômica, como genômica, proteômica ou metabolômica.
5
deste livro de muitos países (EUA, Austrália, Canadá, China, Índia, Filipinas, Rússia,
Arábia Saudita, África do Sul, Turquia e Reino Unido) por seu árduo trabalho e dedicação.
Esses autores são altamente qualificados e treinados em diversas disciplinas (medicina
veterinária, nutrição, ciência alimentar, ciência animal, farmacologia, toxicologia, biologia
molecular e tecnologia, ômicas, química, bioquímica e outras), que moldaram este livro
usando uma estrutura de integração aproximação. Os editores gostariam de agradecer a
Sra. Annette Klaus, editora associada, o Sr. Bibhuti Sharma, coordenador do projeto
(Springer Nature), e a Sra. Krithika Shivakumar, gerente de projeto, por seu apoio
incansável na produção deste livro. Por último, mas não menos importante, os editores
também gostariam de agradecer a Sra. Robin B. Doss por verificar criticamente o texto e
as referências.

Ramesh C. Gupta - Departamento de Toxicologia, Breathitt Veterinary Center, Murray

State University, Hopkinsville, KY, EUA

Ajay Srivastava - Vets Plus Inc., University of Wisconsin – Stout, Menomonie, WI, EUA

Rajiv Lall - Vets Plus Inc., Menomonie, WI, EUA

Referências
Attiq A, Jalil J, Husain K, et al (2018) Raging the war against inflammation with natural products. Front Pharmacol
9:976
Burns K (2017) Assessing pet supplements. Use widespread in dogs and cats, evidence and regulation lacking. J Am
Vet Med Assoc 250(2):117–121
Doorman G, Flachner B, Hajdu I, András CD (2016) Target identification and polypharmacology of nutraceuticals. In:
Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity, Academic Press/Elsevier, Amsterdam, pp 263–286
Gupta RC (2016) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity. In: Gupta RC (ed) Academic Press/Elsevier, Amsterdam,
p 1022
Gupta RC, Srivastava A, Lall R (2018) Toxicity potential of nutraceuticals. In: Nicolotti O (ed) Computational toxicology:
methods and protocols. Springer, New York, NY, pp 367–394
Lillehoj H, Liu Y, Calsamiglia S, et al (2018) Phytochemicals as antibiotic alternatives to promote growth and enhance
host health. Vet Res 49(1):76
US FDA (1994) Dietary supplement health and education act of 1994. Congress, Pub. L.
www.fda.gov/DietarySupplement/default.htm

6
Conteúdo

Parte I Nutracêuticos comuns

Cúrcuma e curcumina padronizados …………………………………………………………………….………… 14
Feno-grego em Saúde e Doença …………………………………………………………………………….....….. 56
Extrato de Neem ……………………………………………………………………………………………………... 75
Potencial nutracêutico do gengibre…………………………………………………………………………….…. 103
Berberine ……………………………..………………………………………………………………...…………….134
Nutracêuticos à base de espinheiro marítimo e damasco ……………………………………...……..………. 154
Nigella sativa …………………………………………………………………………………………………..……. 166
Babool (Acacia nilotica) ………………………………………………………………………...…………….……. 184
Glucosinolatos e Compostos Organossulfurados ………………………………………………………...….…. 197
Cannabis in Veterinary Medicine: Cannabinoid Therapies for Animals ……………………………...……….. 212
Óleos essenciais ………………………………………………………………………………………...………….. 283
Ácidos graxos ômega ……………………………………………………………………………...………….……. 311
Polifenóis e flavonóides …………………………………………………...…………………………………….…. 330
Antioxidantes na Prevenção e Tratamento de Doenças e Toxicidade …………………...…...…………….... 360
Resveratrol: Atividades biológicas e uso potencial na saúde e na doença ……………………………….….. 377
Membranas de casca de ovo para usos veterinários …………………………………………………………... 395
Ovotransferrinas e lactoferrinas derivadas de ovo …………………………………….………………………... 235
Anticorpos de colostro, anticorpos de ovo e anticorpos monoclonais fornecendo imunidade passiva para
animais ………………………………………………………………………………………………………………. 407
Parte II Prebióticos, probióticos, simbióticos e antimicrobianos
Prebióticos e probióticos em alimentos para animais e saúde animal …………………………....………….. 447
Simbióticos em Saúde Animal e Produção ……………………………………………….……………………… 498
Enzimas em Alimentos e Saúde Animal ……………………………………………...………….………………. 525
Nutracêuticos usados como alternativas antibacterianas na saúde e doença animal ……………………… 547
Aditivos para rações em saúde animal ………………………………………………………………………...… 607
Parte III Nutracêuticos em doenças de órgãos e sistemas
Nutracêuticos na artrite …………………………………………………………………………………………….. 642
Nutracêuticos para Antienvelhecimento ………………………………………………………………………….. 671
Nutracêuticos para disfunção cognitiva ………………………………………………………………………….. 690
Nutracêuticos para calmantes e estresse ……………………………………………………………………….. 730
Nutracêuticos em doenças cardiovasculares …………………………………………….……………………… 746
Nutracêuticos em Doenças Hepáticas e Pancreáticas …………………………………..…………………….. 763
Nutracêuticos na saúde e doenças periodontais em cães e gatos ………………………………..………….. 782
Nutracêuticos em Condições Gastrointestinais …………………………………………………………………. 816
Nutracêuticos em distúrbios reprodutivos ……………………………………………………….……………….. 840
Nutracêuticos em doenças geniturinárias ……………………………………………………………………..… 855
Nutracêuticos em Obesidade e Desordens Metabólicas ………………………………………………..…….. 906
Nutracêuticos para diabetes em cães e gatos …………………………………………………………..……… 921
Nutracêuticos para cicatrização de feridas: um foco especial na Chromolaena odorata como guardiã da
saúde com amplo espectro de atividades biológicas …………………………………………………..………. 950
Nutracêuticos em doenças dermatológicas ……………………………………………………………………… 987
Nutracêuticos em Mastite ………………………………………………………………………………………….. 999
Nutracêuticos em doenças imunológicas ………………………………………………………………………. 1031
7
Imunomoduladores derivados de plantas e alimentos como nutracêuticos para atividades de melhoria de
desempenho …………………………………………………………………………………..…………………… 1041
Nutracêuticos para a prevenção e cura do câncer ……………………………………………………………. 1057
Expandindo os alvos metabólicos no câncer por combinações selecionadas de vitamina C e EGCG com
diferentes compostos naturais …………………………………………………………….………………………1070
Nutracêuticos para o controle de carrapatos, pulgas e outros ectoparasitas ………………………………. 1095
Parte IV Nutracêuticos em espécies animais específicas
Nutracêuticos em Saúde e Doenças do Gado ………………………………………….……………………… 1112
Nutracêuticos em Medicina Equina…………………………………………………………………………….... 1134
utracêuticos para Camelídeos …………………………………………………………………………………... 1148
Nutracêuticos em Saúde e Doença Avícola ………………………………………………………………….… 1156
Parte V Avaliação de Segurança e Toxicidade de Nutracêuticos e Alimentos
Funcionais
Avaliação de Segurança e Toxicidade de Nutracêuticos em Modelos Animais ………………………….… 1179
Avaliação da segurança e eficácia do uso de nutracêuticos, Drosophila como uma ferramenta in vivo
…………………………………………………………………………………………………………………….…. 1198
Biomarcadores de Alimentos e Nutracêuticos: Aplicações em Eficácia, Segurança e Toxicidade
……………………………………………………………………………………………………………………..… 1212
Toxicologia e Interações Medicamentosas de Nutracêuticos ………………………………………………… 1238
Parte VI Novas Tendências em Pesquisa Nutracêutica e Desenvolvimento de
Produto
Proteômica na Avaliação de Nutracêuticos e Alimentos Funcionais ………………………………………... 1263
Nanopartículas e Sistema de Entrega Molecular para Biodisponibilidade de Nutracêuticos
………………………………………………………………………………………………………………………. 1273
Nanossuplementos e Saúde Animal ……………………………………………………………………………. 1294
Teste de estabilidade de nutracêuticos veterinários ………………………………………………………….. 1325
Parte VII Aspectos regulatórios e requisitos específicos do país para nutracêuticos
Diretrizes regulatórias básicas para nutracêuticos veterinários …………………………………….……….. 1344
spectos regulatórios dos nutracêuticos veterinários nos EUA e Canadá …………………………………… 1360
Diretrizes regulatórias para nutracêuticos na União Europeia ……………………………………………….. 1374
Diretrizes regulatórias para nutracêuticos e suplementos alimentares na Índia …………………………… 1396
Usos e diretrizes regulatórias para nutracêuticos na China ………………………………………………..… 1410
Regulamentação de Nutracêuticos na Austrália e Nova Zelândia …………………………………………… 1421
Diretrizes regulatórias para nutracêuticos e suplementos dietéticos para animais na Turquia
……………………………………………………………………………………...…..……………………………..1431
Usos e regulamentação de nutracêuticos para animais nas Filipinas ………………………………….…… 1447
Diretrizes regulatórias para nutracêuticos na África do Sul ……………………………………………..……. 1454
Correção para: Avaliação da Segurança e Eficácia do Uso de Nutracêuticos Drosophila como ferramenta in
vivo ……………………………..………………………………………………………………….……………….. 1464

Lista de contribuintes

A. Sankaranarayanan Vivo Bio Tech Ltd, Hyderabad, Telangana, India

Academy of Sciences for Animal Welfare, Bareilly, Uttar Pradesh, India
Ajay Srivastava Vets Plus Inc., Menomonie, WI, USA Anil K. Srivastava Agricultural Scientists Recruitment
Board, Indian Council of Agricultural Research, New Delhi, India
Aleksandra Niedzwiecki Dr. Rath Research Institute, Santa Clara, CA, USA
8
 Alessia Bertero Department of Veterinary Medicine, Università degli Studi di Milano, Milan, Italy
Alexandros Makriyannis Northeastern University, Boston, MA, USA
Amit Kumar Pandey Ayurvet, Ghaziabad, UP, India
Amit Shukla Department of Pharmacology and Toxicology, College of Veterinary Science and Animal
Husbandry, U.P. Pandit Deen Dayal Upadhyaya Veterinary University (DUVASU), Mathura, Uttar Pradesh,
India
Amul Jain Department of Chemistry, Center for Basic Sciences, Pt. Ravishankar Shukla University, Raipur,
India
Andrew Pham BelCosta Labs, Long Beach, CA, USA
Anita Sinha Vets Plus Inc., Menomonie, WI, USA
Anitha Alex Salt Lake City, UT, USA
Anshuman Sharma Center for Basic Sciences, Pt. Ravishankar Shukla University, Raipur, Chhattisgarh,
India
Anu Rahal Central Institute for Research on Goat (CIRG), Mathura, Uttar Pradesh, India
Anurag Sharma Division of Environmental Health and Toxicology, Nitte University Centre for Science
Education and Research (NUCSER), Mangaluru, India
Arturo Anadón Universidad Complutense de Madrid, Madrid, Spain
Arup Giri Arni University, Kathgarh, Himachal Pradesh, India
Arvind Kumar Geda Department of Plant Physiology, Agril. Biochemistry, Medicinal and Aromatic Plants,
Indira Gandhi Agricultural University, Raipur, Chhattisgarh, India
Atul Prakash Department of Pharmacology and Toxicology, College of Veterinary Science and Animal
Husbandry, UP Pandit Deen Dayal Upadhyay Pashu Chikitsa Vigyan Vishwavidyalaya Evam Go-
Anusandhan Sansthan, Mathura, UP, India
Ayhan Filazi Department of Pharmacology and Toxicology, Faculty of Veterinary Medicine, Ankara
University, Ankara, Turkey
Begüm Yurdakok-Dikmen Department of Pharmacology and Toxicology, Faculty of Veterinary Medicine,
Ankara University, Ankara, Turkey
Bhanushree Gupta Department of Chemistry, Center for Basic Sciences, Pt. Ravishankar Shukla
University, Raipur, India
Bhupesh Kumar Center for Basic Sciences, Pt. Ravishankar Shukla University, Raipur, Chhattisgarh, India
Bhuvnesh Kumar DRDO-Defence Institute of Physiology and Allied Sciences, Timarpur, Delhi, India
Bilwa Bhanap Dr. Rath Research Institute, Santa Clara, CA, USA
Camillo La Mesa Department of Chemistry “Stanislao Cannizzaro”, Sapienza University of Rome, Rome,
Italy
Christina Wilson-Frank Department of Comparative Pathobiology, Animal Disease Diagnostic Laboratory,
College of Veterinary Medicine, Purdue University, West Lafayette, IN, USA
Clinton D’Souza Division of Environmental Health and Toxicology, Nitte University Centre for Science
Education and Research (NUCSER), Mangaluru, KA, India
College of Veterinary Medicine (CVM), Pampanga State Agricultural University (PSAU), Magalang,
Pampanga, Philippines
Csaba K. Zoltani Emeritus US Army Research Lab, Aberdeen Proving Ground, Aberdeen, MD, USA
Daljit Vudathala PADLS New Bolton Center Toxicology Laboratory, Department of Pathobiology, School of
Veterinary Medicine, University of Pennsylvania, Kennett Square, PA, USA
Dan DuBourdieu Vets Plus Inc., Menomonie, WI, USA
Deeksha Sori Center for Basic Sciences, Pt. Ravishankar Shukla University, Raipur, Chhattisgarh, India
Dejan Milatovic Alexandria, VA, USA
Denise M. Gupta Hopkinsville, KY, USA
Dharmendra Khokhar Department of Plant Physiology, Agril. Biochemistry, Medicinal and Aromatic Plants,
Indira Gandhi Agricultural University, Raipur, Chhattisgarh, India

9
 Dinesh Kumar Division of Pharmacology & Toxicology, Indian Veterinary Research Institute, Bareilly, Uttar
Pradesh, India
Division of Pharmacology and Toxicology, (IVRI), Bareilly, Uttar Pradesh, India
Doriana Eurosia Angela Tedesco Department of Environmental Science and Policy, Università degli Studi
di Milano, Milano, Italy
E. Mokantla Department of Agriculture, Forestry and Fisheries, Pretoria, South Africa
Ekaterina Korf Sechenov Institute of Evolutionary Physiology and Biochemistry, St. Petersburg, Russia
Feng Wang Amlan Trading (Shenzhen) Company, Ltd., Shenzhen, Guangdong, P.R. China
Francesca Caloni Department of Veterinary Medicine, Università degli Studi di Milano, Milan, Italy
Geraldine C. Sanchez Nutraceutical Research Laboratory, Pampanga State Agricultural University (PSAU),
Magalang, Pampanga, Philippines
Gianfranco Risuleo Department of Biology and Biotechnologies “Charles Darwin”, Sapienza University of
Rome, Rome, Italy
International Union of Toxicology, Reston, VA, USA
Irma Ares Universidad Complutense de Madrid, Madrid, Spain
Jacob Anderson C. Sanchez College of Arts and Sciences (CAS), Pampanga State Agricultural University,
Magalang, Pampanga, Philippines
Jamil Talukder Vets Plus, Inc., Menomonie, WI, USA
Jianhua Sun Academy of Sciences, Shanghai Institute of Materia Medica, Center for Drug
Jitendra K. Malik IVRI, Dehradun, Uttarakhand, India
Joshua A. Hartsel Delta-9 Technologies, LLC, Lake Forest, CA, USA
Kallol K. Ghosh School of Studies in Chemistry, Pandit Ravishankar Shukla University, Raipur (C.G.), India
Karyn Bischoff New York State Animal Health Diagnostic Center, Cornell University, Ithaca, NY, USA
Kavitha Vijayaraghavan Department of Chemical Engineering, Agni College of Technology, Chennai, Tamil
Nadu, India
Krishnamoorthy Srinivasan Department of Pharmacology and Toxicology, National Institute of
Pharmaceutical Education and Research (NIPER), Mohali, Punjab, India
Kyle Boyar Medicinal Genomics, Woburn, MA, USA
Leena Dhruw Department of Chemistry, Center for Basic Sciences, Pandit Ravishankar Shukla University,
Raipur (C.G.), India
Leon J. Spicer Department of Animal and Food Sciences, Oklahoma State University, Stillwater, OK, USA
Likun Gong Academy of Sciences, Shanghai Institute of Materia Medica, Center for Drug Safety Evaluation
and Research, Pudong, Shanghai, P.R. China
M. J. Saxena Ayurvet, Ghaziabad, UP, India
M. Waheed Roomi Dr. Rath Research Institute, Santa Clara, CA, USA
Maria Aŕanzazu Martínez Universidad Complutense de Madrid, Madrid, Spain
Maria Rosa Martínez-Larrañaga Universidad Complutense de Madrid, Madrid, Spain
Matthias Rath Dr. Rath Research Institute, Santa Clara, CA, USA
Maxim Terpilowski Sechenov Institute of Evolutionary Physiology and Biochemistry, St. Petersburg, Russia
Moges Woldemeskel Tifton Veterinary Diagnostic and Investigational Laboratory, Department of Pathology,
College of Veterinary Medicine, University of Georgia, Tifton, GA, USA
Mohamed Ali-Seyed Faculty of Medicine, Department of Clinical Biochemistry, University of Tabuk, Tabuk,
Saudi Arabia
Naresh Chand ADRx Synergy, North Potomac, MD, USA
Neha Meshram Department of Chemistry, Center for Basic Sciences, Pandit Ravishankar Shukla
University, Raipur (C.G.), India
Nikee Awasthee Laboratory for Translational Cancer Research, Department of Biochemistry, Institute of
Science, Banaras Hindu University, Varanasi, India

10
 Nikolay Goncharov Research Institute of Hygiene, Occupational Pathology and Human Ecology, Leningrad
Region, Russia
Nutraceutical Research Laboratory, Pampanga State Agricultural University (PSAU), Magalang,
Pampanga, Philippines
P. K. Gupta Toxicology Consulting Group, Bareilly, Uttar Pradesh, India
Petra Cagnardi Department of Health, Animal Science and Food Safety, Università degli studi di Milano,
Milano, Italy
Prafulla Kumar Ayurvet, Ghaziabad, UP, India
Pratik Adhya Department of Pharmacology and Toxicology, National Institute of Pharmaceutical Education
and Research (NIPER), Mohali, Punjab, India
Pushpkant Sahu Department of Chemistry, Center for Basic Sciences, Pt. Ravishankar Shukla University,
Raipur, India
Rahul Sharma Department of Plant Physiology, Agril. Biochemistry, Medicinal and Aromatic Plants, Indira
Gandhi Agricultural University, Raipur, Chhattisgarh, India
Rajiv Lall Vets Plus Inc., Menomonie, WI, USA
Ramdas Singh Wangkheirakpam Department of Pharmacology & Toxicology, College of Veterinary
Sciences & Animal Husbandry, R.K. Nagar, West Tripura, India
Ramesh C. Gupta Toxicology Department, Breathitt Veterinary Center, Murray State University,
Hopkinsville, KY, USA
Rhian B. Cope Australian Pesticides and Veterinary Medicines Authority, Armidale, NSW, Australia
Richard Jenkins School of Allied Health Sciences, De Montfort University, Leicester, UK
Robert J. Silver RX Vitamins, Elmsford, NY, USA
Robert W. Coppock DVM, Toxicologist and Assoc. Ltd, Vegreville, AB, Canada
Robin B. Doss Toxicology Department, Breathitt Veterinary Center, Murray State University, Hopkinsville,
KY, USA
Safety Evaluation and Research, Pudong, Shanghai, P.R. China
Sahil Kalia DRDO-Defence Institute of High Altitude Research, Leh-Ladakh, India
Satish Kumar Garg Department of Pharmacology and Toxicology, College of Veterinary Science and
Animal Husbandry, U.P. Pandit Deen Dayal Upadhyaya Veterinary University (DUVASU), Mathura, Uttar
Pradesh, India
Saumya Mehta School of Pharmaceutical Sciences, Jamia Hamdard University, New Delhi, India
Sechenov Institute of Evolutionary Physiology and Biochemistry, St. Petersburg, Russia
Sechenov Institute of Evolutionary Physiology and Biochemistry, St. Petersburg, Russia
Sharon M. Gwaltney-Brant Veterinary Information Network, Mahomet, IL, USA
Shruti Mishra Laboratory for Translational Cancer Research, Department of Biochemistry, Institute of
Science, Banaras Hindu University, Varanasi, India
Shukla University, Raipur (C.G.), India
Shyam Sunder Sharma Department of Pharmacology and Toxicology, National Institute of Pharmaceutical
Education and Research (NIPER), Mohali, Punjab, India
Society of Toxicology of India, Ludhiana, Punjab, India
Soumen Choudhury Department of Pharmacology and Toxicology, College of Veterinary Science and
Animal Husbandry, U.P. Pandit Deen Dayal Upadhyaya Veterinary University (DUVASU), Mathura, Uttar
Pradesh, India
Subash Chandra Gupta Laboratory for Translational Cancer Research, Department of Biochemistry,
Institute of Science, Banaras Hindu University, Varanasi, India
Surabhi Verma Department of Chemistry, Center for Basic Sciences, Pandit Ravishankar Shukla
University, Raipur (C.G.), India
Szabina A. Stice Rockville, MD, USA
Tarun K. Gahlot Rajasthan University of Veterinary and Animal Sciences, Bikaner, Rajasthan, India

11
 Teresa Coccini Laboratory of Clinical and Experimental Toxicology, Toxicology Unit, ICS Maugeri SpA-BC,
IRCCS, Pavia, Italy
V. Naidoo Faculty of Veterinary Science, Department of Paraclinical Science, University of Pretoria,
Pretoria, South Africa
Vidya Rani Singh Department of Chemistry, Center for Basic Sciences, Pandit Ravishankar
Vijay K. Bharti DRDO-Defence Institute of High Altitude Research, Leh-Ladakh, India
Vipin Rai Department of Biochemistry, Laboratory for Translational Cancer Research, Institute of Science,
Banaras Hindu University, Varanasi, UP, India
Vivek Kumar Department of Chemistry, Center for Basic Sciences, Pt. Ravishankar Shukla University,
Raipur, India
Vladislav Sobolev Research Institute of Hygiene, Occupational Pathology and Human Ecology, Leningrad
Region, Russia
World Health Organization, Geneva, Switzerland
Zhongqi Jiang Department of Veterinary Medicine, College of Animal Science, Zhejiang University,
Hangzhou, Zhejiang, P.R. China

12
 Parte I

Nutracêuticos comuns

13
 Cúrcuma e curcumina padronizados
Naresh Chand

RESUMO
A raiz de cúrcuma é uma erva ayurvédica antiga e é usada como condimento e, em doses
muito baixas, pode modular doenças imunoinflamatórias do intestino, articulações,
cérebro e corpo em partes do mundo que consomem cúrcuma. A cúrcuma contém mais
de 235 ingredientes ativos, incluindo óleos essenciais, curcuminóides (> 89) e
turmerosacarídeos, bem como fibras e ingredientes sem curcuminóides. Esses
fitoquímicos e fibras, bem como seus metabólitos e produtos de degradação microbiana,
podem atuar de forma aditiva ou sinérgica como um modulador de inflamação
imunológica crônica desregulada persistente e dor em cavalos, animais de estimação e
pessoas. Os dados pré-clínicos limitados suportam que doses baixas de cúrcuma ou seu
ingrediente ativo (curcumina/curcuminóides) podem ter aplicações modulatórias na
prevenção ou tratamento de doenças inflamatórias imunológicas dos olhos, cérebro,
articulações e intestino em animais de estimação e pessoas. O açafrão padronizado (ST)
é um conceito novo; é baseado em uma patente recentemente registrada. ST pode
reduzir a necessidade de analgésicos (opiáceos), antidepressivos, esteróides e
medicamentos anticâncer. Usando a mais recente distribuição direcionada a drogas e
estratégias de ensaios clínicos confiáveis, ST pode ser considerado para P&D 2 para a
prevenção e tratamento de OA 3, demência e outras doenças relacionadas à idade dos
olhos, cérebro, intestino e articulações em animais de estimação e humanos. Os
consumidores precisam estar cientes das adulterações da cúrcuma e seus extratos.

Palavras-chave: Cúrcuma padronizada · Curcumina · Modulador de inflamação e dor

imune crônica desregulada persistente · Animais de estimação

N. Chand - ADRx Synergy, North Potomac, MD, USA

1. Introdução
Cúrcuma é o rizoma seco (raiz) de três variedades principais da planta Cúrcuma longa –
Cúrcuma aromática (cúrcuma selvagem, Sul da Ásia), Cúrcuma wenyujin (China) e
Cúrcuma doméstica (Tailândia). É uma planta herbácea perene que pertence à família do

2 Pesquisa e Desenvolvimento
3 Osteo artrite
14
gengibre, Zingiberaceae. A cúrcuma é nativa do sudeste da Ásia, especialmente do
subcontinente indiano. É cultivado na Índia, China, Tailândia, Indonésia, Japão e outras
regiões tropicais, incluindo a África (Gopinath e Karthikeyan 2018). Mais de 133 espécies
diferentes de açafrão foram identificadas (Prasad e Aggarwal 2011). A composição da
cúrcuma foi resumida na Tabela 1. A raiz da cúrcuma contém curcuminóides, ingredientes
sem curcumina, óleos essenciais, sacarídeos de açafrão solúveis em água e fibra. A
quantidade de ingredientes medicinais como a curcumina/curcuminóides no açafrão em
pó pode variar consideravelmente de região para região (Ashraf et al. 2015). Isso pode
depender da espécie, filogenética e epigenética da planta açafrão, práticas de cultivo,
nutrição do solo, precipitação e exposição ao sol, bem como diferentes métodos de
extração. Mais de 235 fitoquímicos complexos da cúrcuma nativa se agrupam
naturalmente nas raízes e podem exercer efeitos benéficos para a saúde, aditivos ou
sinérgicos (Aggarwal et al. 2013; Javeri e Chand 2016; Li et al. 2011). A cúrcuma pode ser
considerada a “aspirina do homem pobre”, pois está disponível em todas as casas
indianas e é acessível como alimento (especiaria). A raiz de açafrão pulverizada é uma
antiga erva ayurvédica (especiaria) frequentemente usada para festividades cosméticas,
religiosas e espirituais, bem como para dar sabor e colorir alimentos na culinária
tradicional. Também é usado como um medicamento fitoterápico tradicional desde os
tempos antigos na Índia e em outras partes do mundo que consomem cúrcuma. Além
disso, pequenas quantidades de açafrão são usadas duas ou três vezes ao dia como
tempero condimentado no subcontinente indiano e no sudeste da Ásia. A cúrcuma
sozinha ou em combinação com outras ervas é temperada fritando em óleo de cozinha ou
ghee (manteiga clarificada) antes de adicionar feijão, grãos, arroz e vegetais. Este método
faz parte da lipidação (solubilização), ativação e estabilização dos ingredientes ativos da
cúrcuma. É usado como alimento e pode oferecer alguns benefícios à saúde nos estágios
iniciais de doenças crônicas. Este método de formulação antigo (pode se assemelhar à
nanotecnologia da era moderna) é usado nas cozinhas tradicionais indianas. Pode
melhorar a biodisponibilidade de fitoquímicos na cúrcuma. A cozinha tradicional indiana é
uma polifarmácia viva e funcional. O uso da cúrcuma foi descrito para prevenir alergias
alimentares e pulmonares, dores, gripe, resfriado comum, feridas na pele e distúrbios
digestivos e outros; tem sido usado para superar os efeitos de concussões (TBI) e tem
sido usado em muitas formulações de ervas (> 800) em suplementos dietéticos para a
prevenção de uma ampla variedade de doenças (Gopinath e Karthikeyan 2018). A
segurança e eficácia dessas combinações (nutracêuticos ou suplementos dietéticos no
mercado) não foram submetidas a testes rigorosos em animais e pessoas que sofrem de
doenças imunoinflamatórias das articulações, intestino e cérebro.
15
 Tabela 1 Composição de açafrão e curcuminóides principais
Constituintes da cúrcuma Curcuminóides
% (P/P) %
a
Curcuminóides 1,4-5 Curcumina 60-70
Óleos essenciais 3-7 Demetoxicurcumina 20-27
Fibra 2-7 Bismetoxicurcumina 10-15
Minerais 3-7
Gordura 5-10
Proteína 6-8 Turmerosacarídeos 10
Carboidrato 60-70
Umidade 6-13
Modificado após Nelson et al. A química medicinal essencial da curcumina. Miniperspectiva. J Med Chem
60, 1620-1637a Ashraf et al. (2015)

O benefício para a saúde da cúrcuma ou de seus ingredientes ativos, como a curcumina,

pode ser mais pronunciado durante os primeiros estados da doença (Javeri e Chand
2016; Sundaram et al. 2017; Kumar et al. 2018). Portanto, açafrão ou curcuminóides e
outros ingredientes provavelmente farão parte das estratégias preventivas, em vez de
uma cura. A cúrcuma padronizada (ou seja, contendo 1,4, 3, 5% de curcumina, Chand
2018) e outros ingredientes em baixas doses podem ser usados como terapia adjuvante
no tratamento de doenças imunoinflamatórias crônicas persistentes desreguladas das
musculoesqueléticas, gastrointestinais (digestivas), pulmonares, sistemas cardiovascular
e nervoso. Ayurveda é uma antiga arte de restaurar a “homeostase” nos primeiros estados
de doença. Ele propõe que a quantidade de condimento ou de seu(s) ingrediente(s)
ativo(s) não segue uma relação perfeita com a eficácia (modelagem
farmacocinética/farmacodinâmica (PK/PD)) - o que significa que mais não é melhor.
Estudos pré-clínicos em modelos de camundongos com Alzheimer suportam este conceito
(Lim et al. 2001; Begum et al. 2008). Na verdade, a situação oposta pode ocorrer com
doses mais altas, o que significa que doses mais altas podem anular seus próprios
benefícios à saúde (Dra. Frautschy UCLA; comunicação pessoal). Um dos princípios
básicos da medicina ayurvédica é que a eficácia não pode ser relacionada aos níveis
plasmáticos de um ingrediente importante em uma especiaria (erva), e a erva inteira
costuma ser mais eficaz do que seus ingredientes individuais. Na maioria dos estudos
pré-clínicos, a distribuição do(s) ingrediente(s) ativo(s) da cúrcuma no local de ação
(inflamação ou doenças) não é investigada cuidadosamente. Os ingredientes ativos da
cúrcuma parecem ser preferencialmente administrados no local da inflamação
(observação pessoal) e no cérebro de camundongos com doença de Alzheimer
progressiva (Begum et al. 2008). A curcumina, quimicamente conhecida como (1E, 6E) -
16
1,7-bis (4-hidroxi-3-metoxifenil) hepta-1,6-dieno-3,5-diona, é um produto químico
polifenólico natural altamente pleiotrópico (Fig. 1) Recentemente, Kumar et al. (2018)
resumiu o uso potencial de curcumina em doenças relacionadas ao envelhecimento. A
curcumina é um dos ingredientes ativos da especiaria açafrão – uma especiaria usada
rotineiramente na cozinha tradicional indiana. A curcumina é conhecida por exercer
inúmeras atividades farmacológicas in vitro e in vivo em animais experimentais, muitas
vezes em doses (concentrações) relativamente altas. O amplo perfil farmacológico da
curcumina em animais experimentais tende a sugerir que ela pode exercer efeitos
benéficos à saúde; no entanto, ainda faltam evidências clínicas claras de eficácia em
qualquer estado de doença. Na última década, o campo fez um enorme progresso na
melhoria da biodisponibilidade da curcumina (Gopi et al. 2017). Além da melhora da
biodisponibilidade da curcumina (farmacocinética), altas doses de curcumina foram
utilizadas na maioria dos ensaios clínicos realizados até agora. Nem a melhoria da
biodisponibilidade nem o aumento da dose melhoraram a eficácia da curcumina na
doença de Alzheimer em humanos (Mazzanti e Di Giacomo 2016). Isso está de acordo
com o princípio ayurvédico – mais de um ingrediente ativo não é melhor (Begum et al.
2008; Chand 2018). A estrutura química dos principais curcuminóides – curcumina,
desmetoxicurcumina e bisdemetoxicurcumina – e os principais metabólitos da curcumina
são mostrados na Fig. 1.

A curcumina é um produto físico-químico instável, reativo e não biodisponível e, portanto,

não é um dos principais candidatos para P&D. Este conceito é provavelmente verdadeiro
quando altas doses “astronômicas” de curcumina são utilizadas em animais ou pacientes,
mas baixas doses de açafrão ou curcumina padronizados podem apresentar
oportunidades de P&D que devem ser exploradas. Neste capítulo do livro, eu (como um
estudioso de Ayurveda ao longo da vida e um farmacologista de P&D desde 1981) tenho
uma perspectiva diferente sobre este assunto de grande importância econômica e de
saúde para populações em envelhecimento. Açafrão padronizado (contendo 3, 9, 27 ou
81 mg de curcuminóides) ingerido com alimentos duas a três vezes ao dia durante a vida
pode ter algum potencial de longo prazo para retardar a progressão relacionada à idade
de doenças crônicas em animais de estimação, incluindo cavalos e pessoas. Este capítulo
descreve os efeitos do açafrão ou de baixas doses de curcumina em animais, que podem
ter alguma relevância clínica na prevenção de doenças crônicas das articulações, sistema
digestivo, olhos, cérebro, etc.

17
Fig. 1 Estruturas químicas da curcumina (1), desmetoxicurcumina (2), bisdemetoxicurcumina (3), curcumina-
O-sulfato (4), curcumina-O-glucuronídeo (5) e o padrão interno, urolitina B (6)

A curcumina pode atuar como um modulador imunológico (Mollazadeh et al. 2017). Baixas
doses de açafrão ou curcumina padronizada (curcuminóides) tomadas como suplemento
dietético (como alimento/condimento) por longa duração (exposição ao longo da vida)
podem exercer modulação da inflamação imunológica em muitos estados de doença
crônica, incluindo dor crônica, doença inflamatória intestinal (DII), osteoartrite e doença de
Alzheimer (Javeri e Chand 2016; Lim et al. 2001; Begum et al. 2008; Sundaram et al.
2017). Além disso, a cúrcuma, que contém diversos fitoquímicos complexos (> 235; 69
curcuminóides), pode servir como um agente preventivo (modulador) ou como uma
terapia adjuvante. Pode reduzir a necessidade de medicamentos como opiáceos, AINEs,
esteróides, antiartríticos ou antigota, bem como agentes anticâncer. Em outras palavras,
baixas doses de ST, especialmente quando tomadas como tempero (erva em baixas
doses) adicionadas aos alimentos regularmente – em vez de uma pílula (cápsula) -
podem atuar como uma terapia adjunta em muitas doenças com persistência desregulada
subjacente inflamação imunológica crônica em animais de estimação, cavalos e pessoas
18
que estão envelhecendo. Os produtos de degradação bioativa e metabolismo microbiano
de curcuminóides, polissacarídeos, fitoquímicos livres de curcumina e fibras no sistema
digestivo podem exercer efeitos regulatórios sobre a genética, epigenética, protostomes e
função da microbiota no sistema digestivo. Os metabólitos fotoquímicos do fígado e do
processamento da microbiota podem exercer atividade aditiva ou sinérgica na modulação
do eixo intestino – imune – cérebro, o cólon e seus arredores – funções de
permeabilidade e barreira do epitélio em doenças imunoinflamatórias do trato
gastrointestinal e infecções, constipação e diarreia. Na medicina ayurvédica, os efeitos
laxantes leves da cúrcuma ou ST e sua interação com a microbiota no sistema digestivo
foram sugeridos para melhorar o funcionamento do cérebro do intestino (Shen et al.
2017).

Baixas doses de açafrão (~ 200–300 mg, uma vez ao dia, BID) e curcumina (~ 3-30 mg
uma vez ao dia, BID, nos alimentos) são frequentemente consideradas seguras. Além
disso, muitas pessoas em países que não consomem cúrcuma podem estar usando
muitos desses suplementos dietéticos – curcumina (curcuminóides) e açafrão sozinho ou
em combinação com outros suplementos dietéticos e medicamentos. Eles podem não
estar se beneficiando com o uso dessas doses mais altas e, de fato, alguns podem
enfrentar consequências adversas, especialmente entre os idosos que tomam de três a
dez medicamentos. Essas interações medicamentosas ainda precisam ser avaliadas. A
eficácia e segurança da cúrcuma padronizada (ST) em estados de doença em animais de
estimação e pessoas que tomam vários outros medicamentos ou suplementos são
garantidas. O nível de vários ingredientes no local inflamatório ou no cérebro ou em
tecidos cancerígenos nos estados de doença em cães, gatos ou cavalos pode oferecer
uma melhor compreensão da absorção, distribuição, metabolismo e excreção (AINEs;
farmacocinética – PK) e problemas de entrega de drogas no uso de ervas (“suplementos
dietéticos” nutracêuticos) em alimentos e também em medicamentos auxiliares. O uso a
longo prazo de baixas doses de ST como suplemento oral ou como nanopartículas em
estados de doença em animais de estimação e pessoas pode ajudar a reduzir as doses
de medicamentos como AINEs, opiáceos, esteróides, anticâncer, antigota, anti-AR 4, e
drogas que atuam no SNC. Portanto, o ST e outras formulações de curcumina
(curcuminóides, turmerosacarídeos, fitoquímicos sem curcumina) podem exercer efeitos
poupadores sobre a morfina, esteróides e outros medicamentos.

4 Artrite reumatóide
19
2. Composição Química
Jia et al. (2017) revisou e ofereceu detalhes sobre os constituintes químicos da cúrcuma.
Ela contém curcuminóides, esteróides, terpenóides, flavonóides e derivados e alcalóides
do fenilpropeno. O principal curcuminóide (curcumina) foi extensivamente estudada em
modelos animais pré-clínicos. Além dos três principais curcuminóides da cúrcuma,
existem vários curcuminóides menores, que podem exercer bioatividades significativas.
Eles identificaram 89 curcuminóides nas amostras de açafrão usando cromatografia
líquida de desempenho ultra-alta – espectrometria de massa em tandem de tempo de voo
quadrupolo. Ashraf et al. (2015) demonstrou que o conteúdo de curcuminóides no açafrão
varia significativamente de região para região da Índia (1,4–5,0%). A curcumina disponível
comercialmente contém, pelo menos, três compostos de curcumina, incluindo curcumina,
desmetoxicurcumina (DMC) e bisdemetoxicurcumina (BDMC) em uma proporção de 66,
23, 11, respectivamente.

3. Consumo de cúrcuma
Prasad e Aggarwal (2011) resumiram os múltiplos usos do açafrão na culinária asiática e
seu consumo. É utilizado como conservante e agente antimicrobiano e na preparação de
picles (manga, lima, limão e outros) e pratos salgados e doces, sendo amplamente
utilizado nas especialidades da culinária oriental. O consumo de açafrão nos países
asiáticos em humanos está na faixa de 200–1000 mg/dia (160–440 g/pessoa/ano,
geralmente custando menos de $ 1 dólar). A ingestão nas áreas urbanas é menor (200
mg/dia/pessoa) do que nas áreas rurais (600 mg/dia/pessoa). Esta informação pode ser
usada em ciências translacionais, significando que o consumo de curcumina de açafrão
em países asiáticos em humanos está na faixa de 2,8-30 mg/dia (média de 15 mg/dia;
Chand 2018). Nos EUA, a maioria das pessoas (entusiastas saudáveis) está usando 1–5
g de açafrão todos os dias, o que é > 5–25 vezes o usado na Índia. Altas doses de ervas
frequentemente atuam como pró-oxidantes e pró-inflamatórias. Por causa do alto
consumo e da demanda por açafrão-da-índia nos países ocidentais, a adulteração com
chumbo e outros produtos se tornou uma prática comum.

3.1 Segurança

O uso de cúrcuma (dose baixa) como tempero em alimentos é seguro para consumo
humano. No entanto, altas doses podem alterar o paladar e perturbar as funções
gastrointestinais, causando náuseas, diarreia e vômitos. Gupta et al. (2013) resumiu que a
curcumina é segura em roedores, primatas, cavalos, coelhos, gatos e humanos. A
20
curcumina inibe a atividade de enzimas metabolizadoras de drogas, como citocromo
P450, GST e UDP-glucuronosiltransferase in vitro e em modelos animais. Portanto, existe
a possibilidade de que a interação droga/droga em pacientes que tomam medicamentos
como paracetamol, digoxina e morfina pode aumentar as concentrações plasmáticas após
a dosagem de curcumina. Isso pode levar a possíveis preocupações com a segurança do
medicamento. A curcumina é um quelante de ferro ativo e induz anemia em ratos
alimentados com dietas pobres em ferro. Essas possibilidades, como efeitos
gastrointestinais – náusea, diarreia e vômito – anemia e sangramento, em algumas
circunstâncias, precisam ser mantidas em mente ao avançar o P&D sobre cúrcuma e
curcumina padronizados (Gupta et al. 2013; Chand 2018).

Resta explorar se a cúrcuma padronizada (contendo > 235 fitoquímicos, óleos essenciais
e fibra) oferece melhor eficácia e segurança do que a curcumina sozinha.

4. Farmacocinética
Apesar de uma vasta quantidade de publicações sobre a curcumina, ainda faltam estudos
farmacocinéticos orais detalhados usando açafrão e curcumina/curcuminóides (muitas
formulações e marcas). Seguindo as técnicas analíticas e de modelagem PK/PD mais
recentes, estudos farmacocinéticos orais detalhados usando cúrcuma ou
curcumina/curcuminóides (muitas formulações e marcas) no sangue (células) e tecidos de
gatos, cães e cavalos que vivem com doenças imunoinflamatórias crônicas são
garantidos. Essas investigações ajudariam a encontrar nutracêuticos seguros, eficazes,
preventivos e terapêuticos para muitas doenças de animais de estimação e pessoas. A
curcumina é insolúvel em meio aquoso; é instável em condições de luz ambiente,
temperatura ambiente e pH básico; e é prontamente metabolizado ou degradado após
administração oral (Matabudul et al. 2012). Estudos farmacocinéticos limitados em
camundongos (Begum et al. 2008), ratos (Suresh e Srinivasan 2010), cães (Bolger et al.
2017, 2018; Matabudul et al. 2012) e humanos (Schiborr et al. 2014; Small et al. 2017;
Bolger et al. 2018) foram relatados. Matabudul et al. (2012) estudaram perfis de
farmacocinética após infusão intravenosa prolongada de curcumina (10 mg/kg de
Lipocurc™, tanto por 2 h quanto por 8 h) em cães. A proporção de tetrahidrocurcumina
(THC)/curcumina foi mais alta no hipocampo > tronco cerebral > tecido estriado > baço.
Com base nos dados obtidos neste estudo, eles levantaram a possibilidade de que esta
formulação pode facilitar a distribuição nos tecidos por meio de um mecanismo
dependente do transportador e que as concentrações elevadas de curcumina nos tecidos

21
podem inibir ou saturar uma enzima redutase putativa que converte curcumina em THC
no corpo.

Bolger et al. (2017) investigaram a distribuição de curcumina (Lipocurc™) e seu principal

metabólito tetrahidrocurcumina (THC) em cães (Beagles) e glóbulos vermelhos humanos,
células mononucleares do sangue periférico (PBMC) e hepatócitos. Eles observaram uma
boa correlação entre as diferenças, entre as espécies, do metabolismo dos glóbulos
vermelhos da curcumina para THC e os níveis plasmáticos in vivo de curcumina e THC de
estudos clínicos. Eles descobriram que a distribuição da curcumina e o metabolismo pelos
glóbulos vermelhos impacta significativamente a ADME 5 (farmacocinética) da curcumina.
Eles relataram muitas diferenças relacionadas às espécies na distribuição de curcumina e
THC em cães e humanos. O metabolismo da curcumina em THC foi semelhante. A
distribuição da curcumina em PBMC de pacientes com leucemia linfocítica crônica
(câncer) foi maior em comparação com PBMC de indivíduos saudáveis. A maior
distribuição de curcumina em PBMC em pacientes com câncer pode ter vantagem
terapêutica (Bolger et al. 2018). Suresh e Srinivasan (2010) estudaram a farmacocinética
após a administração oral de piperina (170 mg/kg) e curcumina (500 mg/kg) em ratos. As
concentrações de curcumina e piperina nos tecidos foram determinadas por HPLC 6. A
biodisponibilidade da curcumina foi de 63,5% com uma C max em 1 h (intestino) e 6 h
(sangue) e permaneceu em um nível significativamente maior mesmo em 24 h. Apenas
uma pequena porção da curcumina (0,2%) foi excretada na urina. A administração
concomitante por via oral com piperina melhorou a absorção intestinal da curcumina e
permaneceu significativamente mais tempo nos tecidos do corpo. A curcumina foi
detectada no cérebro às 24, 48 e 96 horas com um máximo de 48 horas. Eles concluíram
que a curcumina pode ser rastreada no cérebro após sua administração oral, e sua
biodisponibilidade pode ser melhorada pela coadministração com piperina. Os estudos
clínicos de longo prazo usando açafrão ou curcumina em baixas doses são necessários
em animais de estimação, cavalos e pessoas.

Schiborr et al. (2014) conduziram um pequeno estudo cruzado randomizado em

indivíduos saudáveis (13 mulheres, 10 homens). Foi utilizada uma dose oral única de 500
mg de curcuminóides como pó nativo, pó micronizado ou micelas líquidas. Amostras de
sangue e urina foram coletadas por 24 horas, e os curcuminóides totais e parâmetros de
segurança foram quantificados. Na área sob a curva de concentração de plasma x tempo
(AUC), a curcumina micronizada indicou 14, 5 e 9 vezes e a curcumina micelar 277, 114 e

5 ADME é um acrônimo utilizado na farmacocinética e na farmacologia para “absorção, distribuição, metabolismo e excreção”, e
descreve a disposição de um composto farmacêutico em um organismo.
6 HPLC - cromatografia líquida de alta eficiência é um método de separação de compostos químicos em solução, a qual é utilizada na
química analítica para identificar e quantificar cada componente em uma mistura.
22
185 vezes melhor biodisponibilidade do que a curcumina nativa em mulheres, homens, e
todos os assuntos, respectivamente. A curcumina foi melhor absorvida pelas mulheres do
que pelos homens. Tanto o pó micronizado quanto, em particular, a formulação micelar
líquida de curcumina melhoraram significativamente sua biodisponibilidade oral sem
alterar os parâmetros de segurança. A formulação micelar líquida de curcumina ou
nanopartícula pode ser bem adequada para entregar curcumina em ensaios de
intervenção humana. Todos os parâmetros de segurança permaneceram dentro dos
intervalos de referência após o consumo dessas formulações. As diferenças observadas
na absorção da curcumina (farmacocinética) justificam uma investigação adicional do
ADME em animais de estimação e cavalos de ambos os sexos.

5. Mecanismo de Ação
O modo preciso de ação do açafrão e da curcumina (curcuminóides) permanece
desconhecido. Javeri e Chand (2016) e Kumar et al. (2018) resumiu que a curcumina
pode atuar por meio de vários modos de ação. Pode atuar como modulador da inflamação
imunológica desregulada. A curcumina é bem conhecida por influenciar muitos genes,
etapas epigenéticas, enzimas e vias. Este perfil pode ser relevante para seu amplo
espectro de farmacologia (Javeri e Chand 2016; Cavaleri 2018; Kumar et al. 2018;
McCubrey et al. 2017). Colitti et al. (2012) avaliaram os efeitos da curcumina dietética
(CurcuVet, 4 mg/kg BID por 20 dias, n = 6) e comparou-o com AINEs (Firocoxib, 5 mg/kg
BID por 20 dias, n = 6) em cães que sofrem de osteoartrite (OA). Este pequeno ensaio
clínico foi desenhado para estudar os efeitos do AINE ou da administração dietética de
curcumina no transcriptoma canino usando leucócitos circulantes. Este estudo destaca as
complexidades do modo de ação da curcumina em nível de gene usando um modelo de
doença crônica. No final do tratamento, no dia 20, foi observada pelos veterinários uma
redução da dor e uma recuperação parcial da função articular. No dia 20, esses
pesquisadores descobriram que o tratamento com curcumina reduziu 228 genes
regulados negativamente para 110 e reduziu 271 genes regulados positivamente para 31.
O tratamento com curcumina (CurcuVet, 4 mg/kg BID por 20 dias, n = 6) alterou a
expressão gênica, inibiu a proliferação de macrófagos, genes regulados negativamente
envolvidos na resposta inflamatória (TNFα, TLR4, IL8, IL18 e MAPK14) e Ikβ regulado
positivamente na via de sinalização TNRF1 (melhorando a comunicação entre as células
imunes), bem como genes ativados envolvidos na fibrinólise. No entanto, os genes
regulados positivamente de AINEs (TNFα, TLR4, IL8), mas não influenciaram os genes
(IL18 e Ikβ) na via de sinalização do TNRF1. Esses achados mostram modulação
23
diferencial de genes por curcumina e AINEs. Um grande ensaio clínico de longo prazo é
garantido em gatos, cães, cavalos e pessoas que sofrem de OA e outras doenças
imunoinflamatórias crônicas desreguladas das articulações, cérebro, olhos e sistema
digestivo. Neste estudo, o tamanho do efeito foi altamente variável. Estes investigadores
concluíram que, devido ao pequeno número de cães (seis) no estudo e ao tamanho do
efeito clínico altamente variável, não foi possível estabelecer a prova clara da eficácia
clínica.

No cérebro, diversos mecanismos de ação podem envolver a modulação das vias de

transcrição, protostômios, neurogênese e o eixo hipotálamo-pituitária-adrenal, bem como
vias inflamatórias imunológicas (Seo et al. 2015). Os potenciais efeitos antiartríticos da
cúrcuma ou de seus extratos podem estar relacionados ao estabelecimento do equilíbrio
entre o catabolismo e o anabolismo da cartilagem articular, bem como seu amplo espectro
bem conhecido de atividades anti-inflamatórias. Em 2016, de Oliveira et al. forneceram
evidências de que a curcumina melhora a dinâmica mitocondrial – biogênese mitocondrial
e mitofagia7 (um passo fundamental para manter a célula saudável). Eles também
resumiram elegantemente a biossíntese, a fonte, a biodisponibilidade e o metabolismo da
curcumina. O efeito de longo prazo de suplementos dietéticos contendo cúrcuma ou
curcumina (nutracêuticos) e medicamentos usando amplas faixas de dosagem e maior
duração de tratamento na transcrição do gene (expressão e função em leucócitos
circulatórios ou no local da inflamação, como as articulações ou o cérebro) em cavalos,
animais de estimação e pacientes que vivem com doenças específicas podem oferecer
biomarcadores confiáveis, reprodutíveis e viáveis de eficácia clínica e segurança. Esse
conhecimento pode ajudar os especialistas em P&D a descobrir e formular combinações
mais seguras e eficazes de ervas ou seus ingredientes ativos.

6. Sistema Digestivo
A doença inflamatória intestinal (DII), um distúrbio imunológico crônico do sistema
digestivo, é muito comum em gatos e humanos. A DII pode ser dividida em dois
subgrupos: doença de Crohn (DC) e colite ulcerativa (CU). As abordagens farmacológicas
atuais para o tratamento de DII geralmente não são curativas e estão frequentemente
associadas a efeitos colaterais graves. Os medicamentos que alteram a doença, como
tiopurinas, metotrexato, tacrolimus, talidomida, ciclosporina e infliximabe, são caros.
Brumatti et al. (2014) e Neto et al. (2018) revisaram e resumiram a patogênese da DII e
suas abordagens terapêuticas atuais e potencial utilidade terapêutica da curcumina.
7 Mitofagia é a degradação seletiva das mitocôndrias pela autofagia. Ocorre frequentemente nas mitocôndrias defeituosas após danos
ou estresse.
24
Frequentemente, há uma forte relação entre nutrição e patogênese de DII. Portanto, o
desenvolvimento de novas estratégias dietéticas usando açafrão ou seus fitoquímicos
ativos, como a curcumina, pode abrir uma porta para encontrar uma terapia adjuvante
acessível e abordagem de prevenção para os estágios iniciais da DII. Eles concluíram que
é necessário encontrar a dose adequada de curcumina e a duração ideal do tratamento
para prevenir ou tratar a recorrência da DII. A cúrcuma ou seus ingredientes ativos podem
agir diminuindo a inflamação imunológica da mucosa e a disbiose na DII aguda e crônica.

A cúrcuma tem sido usada na medicina popular ayurvédica e tradicional no tratamento de

doenças inflamatórias, incluindo DII. A concentração terapêutica de açafrão e seus
ingredientes ativos, como a curcumina, pode ser alcançada no trato gastrointestinal após
a dosagem oral. Isso pode torná-lo um bom candidato para a prevenção e o tratamento da
DII (Hanai et al. 2006; Brumatti et al. 2014; Lang et al. 2015; Neto et al. 2018; Bastaki et
al. 2016; Yang et al. 2018 ) A baixa solubilidade aquosa, má absorção, biodistribuição,
metabolismo rápido e eliminação rápida da curcumina podem causar limitações em seu
desenvolvimento clínico (Brumatti et al. 2014; Javeri e Chand 2016). No entanto, este
perfil pode ser desejável para P&D para DII. Resta descobrir se a cúrcuma padronizada
pode superar esses desafios no tratamento de doenças digestivas (DII e diarréia) em
gatos, cães e pessoas.

Bastaki et al. (2016) avaliaram o efeito da cúrcuma na histologia do cólon, peso corporal,
úlcera, IL23, mieloperoxidase e glutationa na DII induzida por ácido acético em ratos. Pó de
cúrcuma (1, 10 e 100 mg/kg/dia) foi administrado por via oral por 3 dias antes ou 30
minutos após a indução de DII. Este tratamento foi encontrado para reduzir úlceras
macroscópicas e microscópicas, IL23, mieloperoxidase e GSH (glutationa peroxidase
reduzida). A dose mais baixa de cúrcuma (1 mg/kg) causou uma diminuição significativa
na úlcera macroscópica média e pontuação após o dia 7, quando comparada aos grupos
não tratados. Curiosamente, uma dose elevada (100 mg/kg) também causou uma
redução significativa (~ 50%) após 2 dias. A dose elevada não teve efeito significativo na
úlcera macroscópica média e na pontuação após 4 e 7 dias de DII. Eles também
observaram que esse tratamento aumentou o peso corporal e reduziu o estresse oxidativo
relacionado à colite. A dose de 10 mg/kg pareceu ser a dose ideal no modelo de DII de
rato. Esses pesquisadores sugeriram a possibilidade de desenvolver C. longa (cúrcuma)
como um remédio fitoterápico anti-inflamatório e antioxidante seguro e potente no
tratamento da DII.

Hanai et al. (2006) estudou o efeito da curcumina na colite ulcerosa. Pacientes que
sofrem de colite ulcerosa receberam sulfassalazina (1,0–3,0 g/dia) ou mesalazina (1,5–3,0
25
g/dia) mais 2 g de curcumina (1 g tomado após o café da manhã e 1 g após a refeição
noturna), ou placebo, por 6 meses. Os pacientes foram acompanhados por mais 6 meses,
durante os quais o sulfassalazina ou a mesalazina foi continuado. Todos os
medicamentos, exceto sulfassalazina ou mesalazina, foram interrompidos 4 semanas
antes do início deste estudo. Oito dos 39 pacientes no grupo do placebo tiveram recaída,
enquanto 2 dos 43 pacientes com curcumina tiveram recaída durante os 6 meses de
terapia. Esses autores concluíram que a curcumina pode ser um medicamento seguro e
eficaz para manter a remissão em pacientes com doença de Crohn ou colite ulcerosa. Em
outro estudo, os pacientes com DII receberam curcumina (360 mg/dose) três a quatro
vezes ao dia durante 3 meses. Este tratamento reduziu significativamente a recaída
clínica em pacientes com DII quiescente. Os efeitos inibitórios da curcumina sobre os
mecanismos inflamatórios como NFkB, COX2, LOX e TNFα e seu perfil de segurança
sugerem que a curcumina ou açafrão podem ter algumas perspectivas no tratamento de
DII. Eles recomendaram que as investigações clínicas controladas randomizadas em
grandes coortes de pacientes são garantidas para avaliar completamente o potencial
clínico da curcumina (Hanai e Sugimoto 2009). Estudos clínicos de longo prazo bem
planejados semelhantes usando açafrão ou seus ingredientes ativos precisam ser
conduzidos em cães e gatos que sofrem de doenças digestivas, como diarréia e DII.

Posteriormente, Lang et al. (2015) demonstraram que a adição de curcumina à

mesalazina foi superior à combinação de placebo e mesalazina na indução da remissão
clínica e endoscópica em pacientes com colite ulcerativa ativa leve a moderada. Os
pacientes receberam 1 mês de terapia adjuvante de 3 g de cápsulas orais de curcumina
ou um placebo idêntico em duas doses diárias divididas (consistindo em três cápsulas
duas vezes ao dia antes das refeições). Esta adição não produziu nenhum efeito adverso
aparente. Eles concluíram que a curcumina pode ser um agente seguro e eficaz para o
manejo e tratamento da colite ulcerativa.

Shen et al. (2017) avaliaram os efeitos da administração de curcumina oral na microbiota

intestinal de camundongos C57BL/6. A curcumina afetou significativamente a abundância
de várias famílias representativas nas comunidades microbianas do intestino, incluindo
Prevotellaceae, Bacteroidaceae e Rikenellaceae. Dou et al. (2018) estudaram o efeito da
curcumina (100 mg/kg/dia PO por 14 dias) na artrite induzida por colágeno em ratos. Eles
demonstraram que a curcumina atenua a artrite induzida por colágeno por meio da
modulação da função do sistema colinérgico no eixo intestino – cérebro.

Yang et al. (2018) administraram curcumina ou tetrahidrocurcumina por via oral (0,1 ou
0,25 mmol/kg por dia) por 7 dias antes e junto com sulfato de dextrano de sódio (3% em
26
água da torneira) em camundongos. A dosagem oral de curcumina reduziu
significativamente a gravidade da colite induzida por sulfato de dextrano de sódio. Este
tratamento também reduziu a ativação de NFkB e STAT3, bem como a expressão de
COX2 e óxido nítrico sintase induzível. A tetrahidrocurcumina exerceu efeitos inibitórios
fracos. Este grupo de cientistas concluiu que a administração oral de curcumina inibe a
colite murina induzida experimentalmente. Este efeito foi associado à inibição da
sinalização pró-inflamatória mediada por NFkB e STAT3.

Ohno et al. (2017) estudaram o efeito da curcumina em nanopartículas no

desenvolvimento de colite induzida por sulfato de dextrano de sódio em camundongos. A
dieta do roedor foi misturada com nanopartículas de curcumina (0,2%). A administração
de nanopartículas de curcumina foi iniciada 7 dias antes da administração de sulfato de
dextrano de sódio. Este tratamento melhorou significativamente a permeabilidade da
mucosa e reduziu a perda de peso corporal, o índice de atividade da doença e a
pontuação histológica da colite. Este tratamento reduziu significativamente a ativação de
NFkB em células epiteliais do cólon e a expressão de mRNA da mucosa de mediadores
inflamatórios e aumentou a abundância de bactérias produtoras de butirato e o nível de
butirato fecal. Isto foi acompanhado por uma expansão aumentada de células-T
reguladoras + CD4 + Foxp3 + células dendríticas reguladoras CD103 + CD8α na mucosa
do cólon. Eles concluíram que as nanopartículas de curcumina podem ser um candidato
promissor como uma opção terapêutica para a prevenção e tratamento da DII.

McCann et al. (2014) demonstraram que a cúrcuma, em parte devido ao seu conteúdo de
curcumina, exerce um efeito benéfico em duas variantes do gene ligadas à gravidade da
DII. A cúrcuma reduz a função de transporte anormal da variante SLC22A4 503F (linhas
celulares autenticadas Flp-In™ 293 (Flp293) e 293/TLR4-MD2-CD14). Também aumenta
a atividade da variante do promotor IL 10, que foi reduzida na DII. Eles sugeriram que quem
sofre de DII com as variantes do gene defeituoso pode se beneficiar do consumo de
açafrão. Estas observações in vitro sugerem a necessidade de realização de estudos
clínicos de longo prazo usando cúrcuma padronizada e/ou outras formulações de
curcumina em animais de estimação, cavalos e pessoas que sofrem de DII.

Bland et al. (2017) estudaram os efeitos da curcumina lipossomal em cinco cepas

bacterianas oportunistas no intestino posterior de equinos. Os cavalos frequentemente
sofrem de doenças do trato gastrointestinal, como cólica, enterocolite, diarreia e doença
inflamatória intestinal. O trato intestinal em equinos é sensível e contém uma população
microbiana altamente complexa. Infecções, inflamação imunológica e cólicas podem
ocorrer como resultado de uma mudança na população microbiana ou disbiose. O uso de
27
nutracêuticos na indústria equina está em alta e a curcumina possui propriedades
antimicrobianas que podem ajudar a minimizar a proliferação de bactérias oportunistas.
C. perfringens, C. difficile, E. coli em geral e K-12 e complexo de Streptococcus
bovis/equinus são bactérias oportunistas comuns encontradas no intestino posterior de
cavalos. A curcumina lipossomal em doses mais altas têm o potencial de aumentar a
concentração de bactérias oportunistas, o que contribuiria para a disbiose microbiana em
vez de atenuá-la. O uso de açafrão padronizado ou seus ingredientes ativos como
nanopartículas e uma ampla gama de doses baixas com um período de tratamento mais
longo pode restaurar a homeostase no sistema gastrointestinal durante estados de
doença, como enterocolite, diarreia e doença inflamatória intestinal e disbiose. Pode
exercer propriedades antimicrobianas sem afetar adversamente as características cecais.

A cúrcuma, ou seus curcuminóides (curcumina) e outros ingredientes ativos, podem

retardar a progressão da inflamação imunológica crônica persistente desregulada na
parede do intestino se o tratamento for iniciado nos estágios iniciais da DII. O uso regular
de baixas doses de açafrão ou de seus extratos como suplemento dietético ou como
tempero (como alimento) também pode reduzir a necessidade de medicamentos que
alteram a doença no trato gastrointestinal. Estudos clínicos de longo prazo usando uma
ampla gama de doses de açafrão ou curcumina em animais de estimação, cavalos e
pessoas que vivem com DII leve a moderada são necessários.

Em conclusão, a curcumina, ou suas novas nanoformulações, ou cúrcuma padronizada

(contendo > 235 fitoquímicos, fibras e seus produtos de degradação pela microbiota
intestinal) pode alterar a permeabilidade e a função de barreira epitelial do trato
gastrointestinal, alterando o macro e microambiente em DII (colite ulcerativa e doença de
Crohn) em gatos, cães e pessoas. A cúrcuma, ou o amplo espectro de seus ingredientes
ativos do mecanismo de ação, especialmente em estados inflamatórios imunológicos no
trato gastrointestinal, pode restaurar a homeostase e pode retardar a progressão da DII,
se o tratamento for iniciado nos estágios iniciais.

7. Resfriado comum e infecções

Gatos e cães frequentemente sofrem de infecções nos ouvidos, pele, urinária e bexiga e
resfriado comum. As atividades anti-inflamatórias, antibacterianas e antivirais da cúrcuma
e da curcumina podem ajudar na prevenção ou no tratamento de infecções em animais de
estimação e pessoas. A tosse do canil (resfriado comum) é comum em cães e gatos. É
necessário encontrar produtos ou extratos naturais para lidar com o surgimento de vírus

28
da gripe resistentes a medicamentos e a ameaça de pandemias em animais de estimação
e pessoas. A cúrcuma e a curcumina podem atuar de forma aditiva ou sinérgica com
agentes anti-infecciosos.

As três novas entidades químicas e dez curcuminóides conhecidos isolados de um extrato

de metanol de açafrão inibiram fortemente as neuraminidases de duas cepas do vírus da
gripe, H1N1 e H9N2. Esta inibição foi não competitiva com valores de IC 50 variando de
6,18 ± 0,64 a 40,17 ± 0,79 μg/ml e 3,77 g/ml e 3,77 ± 0,75 a 31,82 ± 1,33 μg/ml e 3,77 g/ml, respectivamente.
Três compostos (4, 5 e 13) também exibiram atividade inibitória significativa contra as
neuraminidases do novo H1N1 da gripe e do novo H1N1 resistente ao oseltamivir
(mutante H274Y) expresso em 293 células-T. Esses achados sugerem que a cúrcuma ou
seus curcuminóides podem ter potencial preventivo e terapêutico na prevenção e no
tratamento de doenças causadas pelos vírus influenza.

Recentemente, Han e sua equipe (2018) demonstraram que a dose oral diária de
curcumina (100 mg/kg por 7 dias) inibiu o vírus da influenza A in vitro e reduziu a
gravidade da doença em camundongos. Foi descoberto que a curcumina desencadeia a
expressão de heme oxigenase-1 in vivo e atenua a lesão pulmonar induzida pelo vírus da
influenza A. Além disso, a curcumina regulou a resposta imune após a infecção pelo vírus
da influenza A por meio da inibição da produção de citocinas inflamatórias locais e da
sinalização de NFkB em macrófagos e pelo aumento de IκBα e AMPK. Esses dadosBα e AMPK. Esses dados
sugerem que a cúrcuma ou seu extrato podem ter eficácia promissora na pneumonia viral.

Feridas traumáticas não cirúrgicas levam a infecções bacterianas. Essas infecções podem
ser uma situação médica com risco de vida, especialmente aquelas causadas por
bactérias multirresistentes (MDR) com opções terapêuticas limitadas. A atividade
antimicrobiana da polimixina B e da curcumina, sozinhas e em combinação, foi
determinada como eficaz contra isolados bacterianos MDR associados a infecções
traumáticas de feridas. Na presença de curcumina, as concentrações inibitórias mínimas
de polimixina B foram significativamente reduzidas por um fator de 3 a 10 vezes, e reduziu
a excitotoxicidade do antibiótico. Esses achados demonstram que a curcumina exerce
efeitos poupadores de antibióticos e essa combinação atua de forma sinérgica (Betts et al.
2016). Esses estudos sugerem o desenvolvimento de formulações de combinação
contendo cúrcuma ou curcumina com antibióticos. Essa abordagem pode ajudar a reduzir
a prevalência de bactérias multirresistentes em ambientes hospitalares.

29
8. Osteoartrite (OA)
As doenças associadas ao envelhecimento mais comuns em animais de estimação e
pessoas incluem inflamação imunológica crônica desregulada e persistente, osteoartrite,
artrite reumatóide, diabetes, obesidade, aterosclerose, doenças neurodegenerativas,
hipertensão, doenças oculares, osteoporose, câncer, doenças cardiovasculares e
doenças renais crônicas, bem como infecções. Um vasto corpo de literatura sobre a
cúrcuma e seu ingrediente ativo, a curcumina, mostra que eles têm potencial para
medicina preventiva em doenças associadas ao envelhecimento. Dende et al. (2017)
demonstraram que a curcumina nanoformulada tem um índice terapêutico melhor do que
a forma nativa da curcumina. Kumar et al. (2018) revisou o papel potencial da curcumina
e nanocurcumina com melhor estabilidade e biodisponibilidade oral e seu mecanismo de
ação putativo e avanços recentes no gerenciamento e tratamento de doenças associadas
ao envelhecimento.

Equinos idosos apresentam inflamação crônica de baixo grau, que costuma estar
associada a muitas doenças, incluindo laminite e osteoartrite. Os anti-inflamatórios não
esteroidais (AINEs, incluindo flunixina, meglumina e fenilbutazona) são eficazes no
tratamento de condições inflamatórias agudas. O tratamento crônico de longo prazo com
AINEs pode resultar em efeitos colaterais negativos. A curcumina (20 μg/ml e 3,77 g/ml) inibiu a
produção de citocinas pró-inflamatórias de linfócitos em cavalos envelhecidos in vitro
(Siard et al. 2016). O efeito preventivo e terapêutico de longo prazo da cúrcuma,
curcumina e nanocurcumina padronizada (tecnologias de distribuição de drogas
direcionadas) em doenças associadas ao envelhecimento em animais de estimação,
cavalos e pessoas idosos são garantidos.

Em cães, a osteoartrite (OA) é uma das causas mais comuns de claudicação. A OA é

causada por uma deterioração da cartilagem nas articulações. Isso causa inflamação,
perda de amplitude de movimento da articulação e dor. Mais de dez milhões de cães
sofrem de OA apenas nos EUA. Insultos traumáticos repetidos nas articulações (quadril
ou cotovelo), displasia articular, envelhecimento, obesidade e pulos excessivos, corrida,
brincadeira ou caça ou outros fatores de risco genéticos podem resultar em osteoartrite
em cães. É uma doença multifatorial das articulações. Akuri e seus associados (2017)
resumiram a fisiopatologia da OA. Uma série de eventos biomecânicos e fisiopatológicos
perpetuam mudanças degenerativas estruturais na articulação, o que geralmente leva à
dor incapacitante, incapacidade de longo prazo e baixa qualidade de vida. Boa nutrição,
alimentos funcionais, restrição calórica, exercícios e ervas (suplementos dietéticos como
alimentos) podem reduzir a necessidade de analgésicos (opiáceos) e agentes anti-
30
inflamatórios (AINEs e cortisona) em animais de estimação e pessoas que sofrem de OA.
Para estratégias preventivas, o diagnóstico precoce e a intervenção da OA e
comorbidades são absolutamente necessários. Além de estratégias preventivas (nutrição
adequada, exercícios, perda de peso, restrição calórica), os suplementos de ervas
aiurvédicos em óleos (óleo de emu, óleo de coco, óleo de cânhamo ou óleo de peixe,
ômega-3) podem ser promissores no controle da OA crônica.

Analgésicos (opiáceos), AINEs e cortisona são frequentemente usados no tratamento de

OA em animais de estimação e pessoas idosas. Sua utilidade clínica é limitada por efeitos
adversos, baixa absorção sistêmica e altos custos. Resta ser descoberto se a curcumina
ou açafrão reduziria a necessidade de AINEs, cortisona e opiáceos no tratamento da OA.

A patogênese da osteoartrite envolve processos como inflamação, osteoclastogênese e

degradação proteolítica da cartilagem. A cúrcuma e seus extratos (curcumina ou
curcuminóides e ingredientes sem curcumina) têm um perfil farmacológico amplo que
pode modificar muitos aspectos da OA e pode retardar a progressão da OA reduzindo a
inflamação e a destruição da cartilagem e do osso, especialmente nos estágios iniciais de
OA. A vasta literatura resumida nesta revisão sugere que os curcuminóides na cúrcuma
podem ter potencial para beneficiar pacientes que sofrem de osteoartrite (Akuri et al.
2017). A osteoartrite natural canina é um modelo realista para encontrar doses seguras e
eficazes de suplementos dietéticos como nutracêuticos e/ou nutracêuticos de grau
prescrito para uso veterinário e humano.

Innes et al. (2003) estudaram o efeito de P54FP (um extrato de cúrcuma indiana e
javanesa). Cada cápsula continha 20 mg de curcuminóides (curcumina e
desmetoxicurcumina, 50 mg de óleo volátil de C. xanthorrhiza e 150 mg de óleo essencial
de C. domestica), e os cães foram tratados duas vezes ao dia durante 8 semanas. Eles
relataram que esse tratamento produziu remissão da dor e recuperação do movimento
articular em cães.

Zhang et al. (2016) investigaram o efeito da curcumina usando modelo de rato com
desestabilização de menisco medial. Imediatamente após a desastibilização, os
camundongos foram tratados por via oral com 50 mg/kg de curcumina dissolvida em óleo
de milho ou veículo (apenas óleo de milho) por 8 semanas. A aplicação tópica de
nanopartículas de curcumina ou controle de veículo (óleo de coco) na pele, em uma área
de 5 mm2 diretamente acima do joelho operado, uma vez ao dia durante 8 semanas. Os
dados obtidos neste estudo demonstraram que a administração oral e tópica de
curcumina retarda a progressão da OA neste modelo de camundongo com osteoartrite
pós-traumática. Isso pode ser traduzido em uma dose equivalente oral humana de
31
curcumina de ~ 4 mg/kg/dia por 8 semanas ou mais. A entrega de baixas doses de
cúrcuma ou curcuminóides usando nanotecnologia ou entrega de drogas específicas pode
oferecer estratégias acessíveis, seguras e eficazes ou terapia adjuvante para o
gerenciamento e tratamento de longo prazo de OA e outras doenças inflamatórias
crônicas das articulações, intestino, cérebro, e corpo.

Jeengar et al. (2016) relataram que a aplicação tópica de curcumina com óleo de emu
inibiu o edema de pata de rato induzido por carragenina e a artrite induzida por adjuvante
completo de Freund em ratos. Essa combinação foi eficaz em trazer alterações
significativas nos parâmetros funcionais, bioquímicos, histopatológicos e radiológicos em
pata de rato. Suas descobertas proeminentes sugerem que a aplicação tópica de
curcumina com óleo de emu pode oferecer intervenção não invasiva para o tratamento de
artrite inflamatória em animais de estimação e pessoas.

Um extrato polar de cúrcuma produziu uma diminuição dependente da dose na

osteoartrite induzida por iodoacetato monossódico em ratos. Esta atividade foi
correlacionada pela regulação positiva do gene do colágeno tipo II (COL2A1), bem como
pela regulação negativa de MMP-3 e MMP-7. Os efeitos benéficos do extrato polar de
açafrão podem estar relacionados ao estabelecimento do equilíbrio entre o catabolismo e
o anabolismo da cartilagem articular (Murugan et al. 2017; Velusami et al. 2018).

Recentemente, Liu et al. (2018a, b) revisaram a vasta literatura sobre a eficácia e

segurança de suplementos dietéticos para pacientes com osteoartrite. Sete suplementos
(picnogenol, extrato de casca de maracujá, extrato de Curcuma longa, L-carnitina, extrato
de Boswellia serrata, curcumina e MSM8) foram encontrados para exercer grandes efeitos
clinicamente significativos na função física a curto prazo em pacientes que vivem com OA.
Del Grossi Moura et al. (2017) concluíram que ainda faltam pesquisas clínicas de boa
qualidade e não apóiam o uso de curcumina e fitoterápicos no tratamento da OA. A baixa
adesão e adesão do paciente tornam muito difícil encontrar a eficácia de curto ou longo
prazo de suplementos dietéticos como com medicamentos farmacêuticos (Liu et al.
2018a, b).

Recentemente, Haroyan et al. (2018) estudaram os efeitos das cápsulas CuraMed® 500
mg (333 mg de curcuminóides) e das cápsulas de Curamin® 500 mg (350 mg de
curcuminóides e 150 mg de ácido boswélico), administrados por via oral três vezes ao dia
durante 12 semanas, em 201 pacientes vivendo com OA. Esta combinação pareceu
exercer eficácia sinérgica em pacientes de 40 a 70 anos de idade que sofrem de OA.
Esses estudos sugerem que o uso a longo prazo de açafrão e/ou seus ingredientes
8 Metil Sulfonil Metano é o suplemento alimentar com o enxofre necessário para manter a síntese do colágeno, prevenindo rugas e
cicatrizes na pele.
32
principais como suplemento dietético ou como alimentos pode retardar a progressão da
OA em animais de estimação e pessoas.

8. Dor
Várias abordagens complementares e integrativas, incluindo atividade física, exercícios,
ervas (açafrão, pimenta, etc.) ou seus ingredientes (curcumina, capsaicina, etc.), vitamina
D, ácidos graxos ômega-3, ácido lipóico, acupuntura, ioga, ioga aquático, meditação e
meditação consciente podem desempenhar papéis importantes no controle da dor crônica
nas pessoas. A alta variabilidade interindividual entre os pacientes é esperada nas
respostas a essas modalidades de controle da dor (Wojcikowski et al. 2018). As ervas ou
seus extratos (ingredientes como curcuminóides), vitamina D, ácidos graxos ômega-3,
óleo de emu e ácido lipóico como aplicação oral ou tópica podem ser utilizados como
nutracêuticos veterinários e suplementos dietéticos para o controle da dor crônica.

Foi relatado que a curcumina exerce efeito analgésico em modelos animais e em

humanos (Cheppudira et al. 2013; Lin et al. 2011; Motaghinejad et al. 2015; Gaffey et al.
2015; Zhu et al. 2014). Pode atuar como um potencial receptor transitório vanilloid-1
(TRPV1) antagonista do receptor (Nalli et al. 2017; Zhi et al. 2013; Yeon et al. 2010).

Jhi et al. descobriram que a curcumina (4 mg/kg/min IV por mais de 3 min) causou uma
inibição acentuada e rapidamente reversível das respostas visceromotoras induzidas por
distensão colorretal (VMRs) em ratos anestesiados. No jejuno do camundongo, a resposta
do nervo aferente mesentérico à distensão da rampa foi atenuada pela curcumina (3 e 10
μg/ml e 3,77 M). Além disso, a curcumina (1–30 μg/ml e 3,77 M) inibiu as respostas aferentes à capsaicina de
uma maneira dependente da concentração. A hipersensibilidade induzida por ácido
trinitrobenzenossulfônico de aferentes jejunais também foi atenuada pela curcumina. A
curcumina inibiu potentemente o aumento induzido pela capsaicina no cálcio intracelular e
as correntes internas em neurônios dos gânglios da raiz dorsal de camundongos ou ratos
(DRG). Estes estudos demonstram que a curcumina inibe a nocicepção visceral por meio
da antagonização do receptor do potencial transiente vaniloide-1 (TRPV1) do receptor
TRPV1. Isso sugere que a curcumina ou açafrão podem ajudar no tratamento de doenças
gastrointestinais, como esôfago hipersensível e azia.

Cheppudira et al. (2013) revisou os efeitos da curcumina em vários modelos de dor e

cicatrização de feridas em estudos pré-clínicos. Pacientes que sofrem de neuropatia
periférica (NP) frequentemente experimentam dor espontânea aguda, alodinia e
hiperalgesia. Opioides, anticonvulsivantes e antidepressivos tricíclicos são
33
frequentemente usados para tratar a dor neuropática. Esses medicamentos são
frequentemente insatisfatórios devido à eficácia limitada e aos efeitos colaterais adversos.
Há uma necessidade médica não atendida de encontrar novas entidades químicas ou
suplementos dietéticos (nutracêuticos) para controlar a dor crônica e a cicatrização de
feridas em animais de estimação e pessoas. Os estudos pré-clínicos resumidos abaixo
sugerem que a cúrcuma ou a curcumina podem ter algum potencial para tratar a dor e
feridas. O uso oral de curcumina, sozinho ou como terapia adjuvante, pode ser útil no
manejo da dor pós-operatória e da dor neuropática (Cheppudira et al. 2013; Zhu et al.
2014).

Lin et al. (2011) demonstraram que injeções de morfina (10 mg/kg, SC) por 7 dias
produzem tolerância em camundongos. A tolerância à morfina é atenuada pela
coadministração de curcumina em baixa dosagem (25 mg/kg, IP) por 7 dias. Por outro
lado, a tolerância à morfina é agravada pela curcumina em altas doses crônicas (400
mg/kg/dia por 7 dias). A curcumina em dose baixa aguda não aumentou a atividade
analgésica da morfina. Essas observações tendem a sugerir que altas doses de
curcumina podem ser pró-inflamatórias e podem agir negando outros efeitos benéficos,
como inibir a expressão de citocinas antiapoptóticas e fatores neuroprotetores.

Zhu et al. (2014) resumiu os resultados de muitos estudos pré-clínicos publicados

anteriormente. Em um modelo de lesão de constrição crônica (CCI) de dor neuropática
em ratos, a dosagem única com curcumina não influenciou a hiperalgesia mecânica e
térmica, mas o tratamento repetido com curcumina progressivamente e reverteu
completamente a hipersensibilidade induzida por CCI. A dosagem diária de curcumina
reverte a neuropatia diabética induzida por estreptozotocina. No entanto, o tratamento
agudo com curcumina reduz os comportamentos defensivos induzidos pela formalina, a
dor visceral medida pela resposta de contorção induzida pelo ácido acético, hiperalgesia
térmica induzida pela capsaicina e comportamentos do tipo fibromialgia induzida pela
reserpina. Eles também demonstraram que uma incisão cirúrgica na pata traseira direita
de ratos induz uma hiperalgesia mecânica sustentada. Durou 5 dias. A curcumina (10–40
mg/kg administrado pela boca), aparentemente de forma dependente da dose, reverteu a
hiperalgesia mecânica em ratos. Além disso, o tratamento repetido com curcumina
facilitou a recuperação da cirurgia. O tratamento repetido com curcumina antes da cirurgia
não impactou o limiar de dor pós-operatória e a taxa de recuperação. No entanto, o
tratamento repetido com curcumina após a cirurgia reduziu o limiar de dor pós-operatória
e melhorou a taxa de recuperação. O uso oral de curcumina, sozinho ou como terapia
adjuvante, pode ser útil no tratamento da dor pós-operatória (Zhu et al. 2014).

34
Motaghinejad et al. (2015) demonstraram que a curcumina atenua a síndrome de
abstinência da morfina. A atividade antinociceptiva da curcumina em um modelo de
camundongo com dor visceral é mediada pelos sistemas opioidérgico e serotonérgico.
Eles sugeriram que a curcumina pode ser eficaz na atenuação da dor durante o período
de abstinência dos opióides.

Gaffey et al. (2015) revisou os efeitos da curcumina na dor musculoesquelética. Os

curcuminóides encontrados na cúrcuma foram eficazes em aumentar a cicatrização de
feridas e no tratamento de queimaduras e dores neuropáticas diabéticas. O uso de
curcuminóides para tratar a dor associada à osteoartrite do joelho mostrou maiores
reduções da dor em comparação com o placebo, e a eficácia foi comparável ao uso de
ibuprofeno. Uma eficácia significativa foi encontrada com o uso de extrato de cúrcuma em
combinação com outros nutracêuticos (garra do diabo e bromelaína) para tratar a dor
aguda e crônica da osteoartrite. Uma formulação proprietária de lecitina de curcumina
exerceu redução significativa na dor muscular de início retardado e a eficácia foi
comparada a uma dose-padrão de acetaminofen no tratamento da dor aguda.

O uso prolongado de opioides para o tratamento da dor crônica induz hiperalgesia

induzida por opioides (HIO). É um dos principais problemas clínicos. Uma nanoformação
PLGA-curcumina recentemente desenvolvida (PLGA curcumina) administrada por via
intratecal ou oral atenuou significativamente a hiperalgesia em camundongos com OIH
induzida por morfina. Isso foi associado à supressão da ativação crônica de CaMKIIα
induzida por morfina nas lâminas superficiais do corno dorsal espinhal. Esses dados
sugerem que PLGA curcumina pode reverter OIH, possivelmente, inibindo CaMKIIα e sua
sinalização (Hu et al. 2016).

Anteriormente, Agarwal et al. (2011) relataram que a curcumina (cápsula de 500 mg a

cada 6 horas por 3 semanas) melhorou a dor pós-operatória e a fadiga em pacientes em
recuperação pós-operatória. O efeito foi mais pronunciado nos dias 7 e 14. Além disso, a
administração oral de curcumina reduziu significativamente a progressão da osteoartrite
(OA) na desestabilização do modelo de camundongo com menisco medial. No entanto,
não influenciou na dor. Além disso, a aplicação tópica de nanopartículas (curcumina) não
apenas reduziu a patogênese da OA, mas também aliviou a dor relacionada à OA. As
nanopartículas reduziram a hipersensibilidade tátil e melhoraram o comportamento
locomotor. Gera et al. (2017) revisou o campo de nanoformulações de curcumina. Estas
novas formulações de cúrcuma ou curcumina podem ser uma mudança de paradigma
emergente para aplicações de remediação melhoradas em ambientes nutracêuticos e
farmacêuticos.
35
O efeito de doses orais repetidas diárias de curcuminóides (extrato de C. longa, a 5, 20 ou
80 mg/kg/dia) foi avaliado no teste da placa quente em camundongos. No dia 11, todos os
animais foram submetidos ao estresse por choque nas patas desencadeado por um teste
de hipertermia e no dia 12 a um teste de suspensão na cauda para antidepressivos. C.
longa produziu atividade analgésica dependente da dose. Curiosamente, apenas baixas
doses de C. longa foram eficazes no alívio da dor central (Verma et al. 2017).

Bethapudi et al. (2017) avaliaram o efeito analgésico da fração rica em turmerosacarídeos

na dor induzida por iodoacetato monossódico em modelo de rato que imita a OA humana.
A administração oral da fração rica em turmerosacarídeos a 45 e 90 mg/kg diminuiu a dor
de OA em 1, 3, 6 e 24 horas após a administração do teste no dia 5. O efeito da fração
rica em turmerosacarídeos na dor de OA foi superior aos turmerosacarídeos de menos
fração.

Alveolite (osteíte alveolar) é uma condição dentária dolorosa que ocorre após a extração
de um dente adulto permanente, quando o coágulo sanguíneo no local da extração do
dente não se desenvolve ou se desloca ou se dissolve antes que a ferida cicatrize. Em um
estudo recente, Lone et al. (2018) demonstrou uma redução significativa na dor na boca,
inflamação e desconforto após curativo de cúrcuma em 178 pacientes com diagnóstico de
síndrome de alvéolo seco. A cicatrização da ferida progrediu mais rápido do que o curativo
com ZOE9. Esses estudos sugerem que o efeito da curcumina (curcuminóides) pode
depender do tempo de início do tratamento, duração do tratamento, dose de curcumina,
etc. Estudos clínicos duplos cegos controlados por placebo são necessários em animais
de estimação e pessoas que sofrem de NP, OA e dor pós-cirúrgica.

A curcumina (nanopartículas) pode representar um novo antimicrobiano tópico

(antibacteriano, antiviral e antifúngico) e adjuvante de cicatrização de feridas para
queimaduras infectadas e outras lesões cutâneas e musculares e condições de dor
relacionadas (Krausz et al. 2015; Gera et al. 2017). Estudos clínicos de longo prazo são
necessários para estabelecer a atividade analgésica de nanopartículas de açafrão ou
curcuminóide (baixas doses e longa duração do tratamento em condições relacionadas à
dor).

10. Medicina Esportiva

Lesões musculares traumáticas (traumas de tecidos moles, hematomas e contusões) são
muito comuns em cães e cavalos. A suplementação dietética com ST ou curcumina e

9 Óxido de Zinco e Eugenol

36
outras estratégias para reduzir a dor muscular e melhorar a recuperação (física) muscular
são de grande interesse para atletas e pessoas que cuidam de cavalos e cães. ST ou
curcumina pode ser uma alternativa adequada aos medicamentos anti-inflamatórios não
esteroidais para o tratamento de doenças dos sistemas músculo-esqueléticos, como dor
muscular e OA (Heaton et al. 2017).

Tanabe et al. (2015) estudaram o efeito de 150 mg de curcumina (administrado por via
oral antes e 12 horas após cada sessão de exercícios em um estudo cruzado e
randomizado em 14 homens jovens não treinados). Este tratamento reduziu o torque de
contração voluntária máxima (MVC) e os músculos se recuperaram mais rápido (por
exemplo, 4 dias após o exercício 31 ± 13% vs. 15 ± 15%); o pico de atividade da creatina
quinase (CK) sérica foi menor para aqueles tratados com curcumina do que com placebo
(P < 0,05). Os pesquisadores concluíram que a ingestão de teracurmina pode reduzir
alguns aspectos do dano muscular.

McFarlin et al. (2016) avaliaram o efeito da suplementação de curcumina (Longvida®; 400

mg/dia). Reduziu a CK (um biomarcador de lesão muscular) em 48% após os indivíduos
consumirem curcumina por 2 dias antes e 4 dias após um protocolo de indução de dano
muscular de alta intensidade. Eles concluíram que o consumo de curcumina reduziu um
biomarcador de lesão muscular, mas não a dor muscular do quadríceps ou biomarcadores
inflamatórios, durante a recuperação após dano muscular induzido por exercício. O
biomarcador de lesão muscular reduzido observado pode se traduzir em recuperação
mais rápida e melhora da capacidade funcional durante as sessões de exercícios
subsequentes. Esta conclusão precisa ser explorada usando um grande número de
participantes de esportes.

Heaton et al. (2017) revisaram estratégias nutricionais para regeneração muscular, fadiga
muscular, saúde física e imunológica e preparação para sessões de treinamento
subsequentes em medicina esportiva. Eles concluíram que as atividades anti-inflamatórias
e antioxidantes da cúrcuma e seus ingredientes ativos sugerem que esses agentes em
baixas doses apropriadas podem ter um papel na medicina esportiva, especialmente na
prevenção das consequências de contusões e lesões musculares.

A curcumina ou açafrão podem fornecer algum benefício de recuperação ou redução do

dano muscular durante as atividades esportivas intensas. Portanto, a pesquisa clínica
usando grandes doses de ST ou curcumina é garantida antes de incorporar dosagens
suplementares na dieta do atleta ou em suplementos para animais de estimação.

37
11. Efeitos no SNC
Sarker e Franks (2018) revisaram estudos pré-clínicos e clínicos publicados relacionados
à eficácia da curcumina no declínio cognitivo associado à idade. Ramkumar et al. (2018)
resumiu as atividades antioxidante, anti-inflamatória, neuroprotetora e antiproliferativa da
curcumina, desmetoxicurcumina (DMC) e bisdemetoxicurcumina (BDMC). O DMC pode
ter melhor atividade anticâncer e anti-inflamatória em comparação com a curcumina.
Recentemente, DMC (5, 10 e 20 mg/kg, i.p., por 7 dias) foi mostrado para anular a
depleção de dopamina induzida por rotenona e déficits motores por suas propriedades
antioxidantes e antinflamatórias em modelo de rato parkinsoniano. Eles concluíram que o
DMC pode ser uma liderança terapêutica promissora para o tratamento de doenças
neurodegenerativas, incluindo a doença de Parkinson.

12. Diabetes
Nos países em desenvolvimento, cerca de 80% das pessoas dependem da medicina
tradicional à base de ervas para atender às suas necessidades de saúde. A cúrcuma tem
sido usada no controle do diabetes na medicina ayurvédica e na medicina tradicional
chinesa. A curcumina reduz a glicemia e hiperlipidemia em modelos de roedores com
diabetes (Zhang et al. 2013). A curcumina dietética alivia o estresse no tecido metabólico,
levando a melhorias no diabetes e complicações de doenças associadas em modelos de
roedores e em estudos clínicos. Novos métodos melhorados de entrega de curcumina
(nanopartículas e formulações de lipídios/lipossomas) podem ajudar no direcionamento
direcionado a células e podem oferecer melhores resultados terapêuticos em diabetes
(Maradana et al. 2013). Além disso, foi relatado que a suplementação de curcumina ou
curcuminóide é eficaz na redução das concentrações de glicose no sangue em jejum em
pessoas com pré-diabetes, diabetes ou síndrome metabólica. A curcumina produziu
diminuição significativa na HbA1c em comparação com o placebo. de Meloa concluiu que
a suplementação de curcumina pode ser uma ajuda adjuvante no tratamento de pacientes
disglicêmicos.

Recentemente, Yang et al. (2018) estudaram os efeitos da curcumina no dano retinal em

ratos diabéticos induzidos por STZ10. A curcumina (100 e 200 mg/kg, PO, diariamente por
16 semanas) foi encontrada para reduzir a perda de peso corporal induzida por diabetes,
glicose no sangue e retinopatia. Essa atividade pode ser atribuída às propriedades
hipoglicêmicas, antioxidantes, de regulação negativa de VEGF e neuroproteção da

10 Streptozotocina
38
curcumina. Eles sugeriram que a curcumina pode ter um potencial no tratamento da
retinopatia diabética.

A curcumina suprime as atividades das enzimas gliconeogênicas e aumenta o

armazenamento de glicogênio no fígado e reduz a glicose no sangue em camundongos
db/db (Fujiwara 2000). Wickenberg demonstrou que 6 g de açafrão ingerido por via oral
aumentaram os níveis de insulina pós-prandial em indivíduos saudáveis. O aumento da
resposta à insulina pode ser devido à estimulação da função das células β pela
curcumina. Além disso, a administração oral de 10 mg de curcumina (duas vezes ao dia
durante 28 dias) reduziu os níveis de LDL e aumentou os níveis de HDL em pacientes
com aterosclerose (Ramirez et al. 2000). Neste estudo, a dose baixa de curcumina parece
ser relevante para o que as pessoas obtêm enquanto tomam doses baixas de ST ou
açafrão nos países consumidores de açafrão.

A inibição de enzimas como a a-amilase pode desempenhar um papel fundamental no

controle do diabetes ao retardar a digestão do amido. Os inibidores da a-amilase
pancreática podem ser de grande importância terapêutica no tratamento do diabetes
mellitus. A bisdemetoxicurcumina (BDMC) inibe a a-amilase pancreática porcina e
humana com um valor de IC50 de 26 e 25 μg/ml e 3,77 M, respectivamente. Isso pode transmitir a
atividade antidiabética do açafrão e seus metabólitos em animais de estimação e
pessoas. O BDMC pode ser um bom candidato a medicamento para reduzir a
hiperglicemia pós-prandial (Ponnusamy et al. 2012).

Arun e Nalini (2002) estudaram o efeito da cúrcuma e da curcumina no diabetes mellitus

em diabetes induzido por aloxana em ratos. A administração de cúrcuma ou curcumina
reduziu os níveis de açúcar no sangue e de hemoglobina glicosada, bem como a
atividade da sorbitol desidrogenase, que catalisa a conversão de sorbitol em frutose. A
curcumina foi mais eficaz do que a cúrcuma na atenuação das alterações relacionadas ao
diabetes mellitus. Esses resultados sugerem que a curcumina pode ser eficaz na
atenuação das alterações relacionadas ao diabetes mellitus.

Ratos normais e diabéticos foram tratados com curcumina (90 mg/kg/dia) incorporada ao
iogurte. Após 15 dias de tratamento, a tolerância à glicose e a sensibilidade à insulina
melhoraram significativamente em ratos diabéticos. Essa melhora pode estar associada a
um aumento nos níveis de fosforilação de AKT e translocação de GLUT4 nos músculos
esqueléticos. Eles sugeriram que o(s) metabólito(s) da curcumina podem ser
responsáveis pela atividade antidiabética (Gutierres et al. 2015).

39
ST, curcumina e outros ingredientes presentes na cúrcuma e seus metabólitos podem
exercer propriedades antioxidantes e antinflamatórias, o que pode ajudar a aliviar as
complicações no diabetes (Gutierres et al. 2015). Além disso, a curcumina exerce efeitos
protetores da retina (Xu et al. 2018; Yang et al. 2018).

13. Síndrome Metabólica

A curcumina é bem conhecida por exercer um efeito antinflamatório por meio da
regulação negativa de citocinas inflamatórias, fatores de transcrição, proteínas quinases e
enzimas que promovem a inflamação e participam do desenvolvimento de doenças
crônicas. Essa multiplicidade de efeitos da curcumina na permeabilidade intestinal e
função de barreira, eixo intestino – cérebro, genes, alvos epigenéticos e moleculares na
mitocôndria e tecidos – alvos específicos para doenças podem oferecer alguns benefícios
à saúde em estados de doença crônica, incluindo síndrome metabólica (Shehzad et al.
2017; Ghosh et al. 2018).

Di Pierro et al. (2015) mostraram a capacidade da curcumina (complexada com

fosfatidilserina na forma de fitossoma ou com fosfatidilserina pura) para reduzir o peso e
tecido adiposo omental em pessoas com sobrepeso com síndrome metabólica em um
estudo clínico preliminar. No final dos primeiros 30 dias de intervenção no estilo de vida,
os participantes com excesso de peso foram aleatoriamente designados para um dos dois
grupos para a fase de tratamento de 30 dias. Vinte e dois participantes foram
suplementados duas vezes ao dia durante 1 mês com um suplemento nutricional
formulado para ser revestido entérico e contendo 800 mg/dose/dia de extrato de Curcuma
longa (95% de curcumina), complexado com fosfolipídios de girassol (20% de
fosfatidilserina) e misturado com 8 mg/dose/dia de piperina do extrato de Piper nigrum
(Bioperina). Após 60 dias, a perda de peso coletiva foi de 6,7%, a diminuição do IMC foi
de 8,4% com o percentual de gordura reduzido em mais de 9%, e mais de 6 cm foram
perdidos na cintura e 3 cm perdidos na circunferência do quadril. Essas observações
preliminares interessantes de Di Pierro et al. (2015) sugerem que grandes ensaios
clínicos randomizados duplos-cegos controlados por placebo de longo prazo usando uma
ampla gama de doses e formulações de açafrão e curcumina em cães, gatos e pessoas
com excesso de peso são necessários.

Sohrabi et al. (2018) resumiram que as citocinas pró-inflamatórias, como a interleucina-

17F (IL-17F), tem uma associação com a indução de inflamação do tecido e obesidade.
IL-17F é produzida por células-T auxiliares 17 (Th), células “natural killer”, células-T gd,

40
células-T CD4+ e CD8+. O consumo de alta frutose frequentemente aumenta o peso
corporal e o nível sérico de IL-17. A suplementação de canela e curcumina diminui a IL-
17F com a dieta padrão. A alimentação com canela e açafrão (extrato solúvel em água)
causou um declínio no peso corporal, mas, surpreendentemente, aumentou a IL-17F em
ratos com dieta rica em frutose (Sohrabi et al. 2018).

Uma dieta rica em gordura levando à hiperlipidemia e inflamação pós-prandial parece ser
o fator etiológico chave que contribui para o desenvolvimento de aterosclerose e
subsequente doença arterial coronariana (Alipour et al. 2007). A suplementação aguda
com resveratrol (200 mg e curcumina 100 mg) não modificou os marcadores inflamatórios
circulantes pós-prandiais induzidos por dieta rica em gordura (proteína C reativa, IL-6, IL-
8, proteína quimioatraente de monócitos-1), moléculas de adesão [E-selectina solúvel,
molécula-1 de adesão de células vasculares solúveis] ou molécula-1 de adesão
intercelular solúvel em adultos mais velhos com obesidade abdominal (Vors et al. 2018).
Este estudo sugere que a ingestão conforme a necessidade de suplementos dietéticos
(base PRN) pode não oferecer a eficácia desejada na maioria dos ambientes clínicos em
animais de estimação e pessoas. Estudos clínicos de longo prazo são necessários para
examinar a resposta à dose e as formulações mais recentes de curcumina e cúrcuma,
isoladamente ou em combinação com outros fitonutrientes.

A administração intragástrica de curcumina a 250 mg/kg por dia durante 8 semanas

diminuiu o nível de ácido graxo livre e TNF-a no soro de ratos DM tipo II. Este tratamento
também melhorou o distúrbio metabólico de glicose e lipídios, aumentou a sensibilidade à
insulina e melhorou a resistência à insulina em ratos (Su et al. 2017).

Mantzorou et al. (2018) revisaram estudos clínicos recentes e bem elaborados e

mostraram que a curcumina parece oferecer alguns benefícios à saúde contra obesidade,
síndrome metabólica e diabetes. Além disso, a curcumina pode exercer um efeito benéfico
para a saúde em pessoas que sofrem de artrite, doenças de pele, inflamação intestinal
IBD11, UC, câncer, doença hepática gordurosa, depressão e sintomas de síndrome pré-
menstrual. A recomendação concreta e precisa não pode ser feita com relação à dose,
formulações e duração do tratamento. Eles sugeriram que grandes estudos prospectivos
são necessários usando ensaios clínicos bem planejados com considerações adequadas
a respeito dos tempos de acompanhamento, dosagem, formulação e duração da
curcumina ou suplementação de ST, adesão à medicação e adesão do paciente. Além
disso, uma consideração cuidadosa é necessária para fatores de confusão em cada
doença crônica específica de animais de estimação e pessoas.

11 Doença inflamatória intestinal

41
Recentemente, Jin (2018) revisou a abordagem mecanicista complexa da curcumina para
a descoberta de drogas em distúrbios metabólicos. A curcumina demonstrou melhorar a
sinalização da insulina.

A injeção de dexametasona induz resistência à insulina, enquanto a gavagem 12 de

curcumina concomitante melhora a tolerância à insulina (Tian et al. 2015). O efeito
atenuante da resistência à insulina da curcumina parece estar dissociado de seu efeito
antiinflamatório. A longo prazo, esse efeito protetor pode ser atribuído aos seus efeitos
antiinflamatórios, antioxidantes e de redução do peso corporal (Jin 2018).

14. Retinopatias
Peddada et al. (2018) revisou a etiologia das doenças oculares e o mecanismo de ação
da curcumina nas doenças oculares. Eles revisaram a literatura sobre o potencial
terapêutico da curcumina nas principais patologias da retina. A retina tem um rico
suprimento de sangue e numerosas mitocôndrias e é constantemente exposta a
poluentes e à luz ultravioleta (exposição ao sol, fótons de luz), que atinge sua superfície
tornando a retina um alto risco de desenvolver patologias oculares, particularmente em
populações idosas. O estresse oxidativo e as vias inflamatórias imunológicas são bem
conhecidas por contribuir para a patologia retiniana. A curcumina é conhecida por possuir
propriedades antiinflamatórias, antitumorais, antioxidantes e de inibição de VEGF por
meio da modulação de vários processos bioquímicos e de transcrição. Foi relatado que a
curcumina diminui, e em alguns casos até reverte, degeneração macular relacionada à
idade, retinopatia diabética, retinite pigmentosa, vitreorretinopatia proliferativa e cânceres
de retina. Os autores concluíram que a curcumina exerce eficácia limitada, principalmente
em estudos experimentais com animais.

O uso de açafrão padronizado como suplemento dietético administrado por via oral pode
retardar a progressão de doenças oculares relacionadas à idade. A administração
direcionada de drogas de novas formulações de cúrcuma ou curcuminóides no olho pode
reduzir a inflamação imunológica (síndrome de HKH, uveíte). A aplicação oral ou tópica de
açafrão ou de seus curcuminóides pode reduzir a necessidade de esteróides no
tratamento de doenças inflamatórias oculares em animais de estimação e pessoas.

12 Alimentação forçada ou gavagem é a prática de alimentar, introdução de alimentos líquidos no estômago através de um tubo
colocado pelo nariz ou boca. Usado para alimentação de recém-nascidos ou animais de experimentação
42
15. Alergia
A asma alérgica é uma doença complexa, multifatorial, crônica doença imunoinflamatória
das vias respiratórias. As respostas alérgicas nos pulmões são mediadas por múltiplas
vias complexas que levam à liberação de uma série de mediadores inflamatórios
(histamina, citocinas e enzimas) por ativação de mastócitos, eosinófilos e linfócitos T.
Subhashini et al. (2013, 2016) resumiu brevemente a fisiopatologia e as estratégias de
tratamento da asma alérgica. Os medicamentos disponíveis (esteróides e
broncodilatadores) estão associados a limitações, como efeitos colaterais graves. Os
estudos resumidos aqui sugerem que a cúrcuma e a curcumina podem ter utilidade
terapêutica potencial na modulação (prevenção e tratamento) da alergia pulmonar (asma).

Kurup e Barrios (2007) demonstraram que a curcumina administrada por via oral suprimiu
a resposta Th2 induzida por alérgenos de látex em camundongos. A supressão de
respostas alérgicas mediadas por Th2 foi evidente pela produção reduzida de IL-4 e IL-13,
bem como infiltração reduzida de eosinófilos nos pulmões e expressão reduzida de
moléculas como metaloproteinase de matriz (MMP-9), linfopoietina estromal tímica (TSLP)
e ornitina aminotransferase (OAT). Eles concluíram que a curcumina pode ter utilidade
terapêutica potencial na alergia pulmonar (asma).

Subhashini et al. (2013) conduziram um elegante estudo pré-clínico usando curcumina em

um modelo de camundongo com inflamação alérgica das vias aéreas (asma). A curcumina
foi dissolvida em dimetilsulfóxido (DMSO) e administrada uma hora antes de cada desafio
com ovalbumina (dias 19-22). Eles descobriram que a aplicação intranasal de curcumina
(2,5 e 5 mg/kg) foi prontamente absorvida pela mucosa das vias aéreas e foi eficaz na
supressão da inflamação das vias aéreas e asma alérgica.

A curcumina intranasal inibiu significativamente o recrutamento de leucócitos e eosinófilos

para os pulmões e diminuiu os níveis de peroxidase eosinófila e histamina no fluido de
lavagem broncoalveolar. Estas observações podem sugerir que a curcumina (gota ou
spray intranasal) pode reduzir a necessidade de esteróides orais ou inalados e b-
agonistas, reduzindo a inflamação alérgica crônica das vias aéreas em animais de
estimação e pessoas. Posteriormente, esses pesquisadores demonstraram que a
curcumina intranasal (2,5 e 5,0 mg/kg) reduz a inflamação das vias aéreas e
broncoconstrição, modulando os níveis de citocinas (IL-4 e IL-5 e IFN-g e TNF-a) e a
atividade de sPLA2 e inibindo a liberação de PGD2 e Expressão COX-2. A atividade
antialérgica (antiasma) da curcumina é mediada pela supressão da ativação de p38
MAPK, ERK 42/44 e JNK54/56 durante a resposta alérgica no pulmão. Eles sugeriram

43
que a curcumina pode oferecer uma alternativa para o desenvolvimento de formulações
nasais e inaladores para o controle da asma (Subhashini et al. 2016).

Shin et al. (2015) sensibilizaram camundongos com injeção intraperitoneal de ovalbumina

(OVA) e alúmen. Os camundongos foram sensibilizados oralmente com 50 mg de OVA e
tratados com extrato de cúrcuma (100 mg/kg) ou curcumina (3 mg/kg ou 30 mg/kg) por 16
dias. Os sintomas de alergia alimentar diminuíram, assim como a temperatura retal,
diarréia e anafilaxia. O extrato de cúrcuma diminuiu significativamente os sintomas de
alergia alimentar (diminuição da temperatura retal e resposta anafilática). No entanto, o
tratamento com curcumina mostrou pouca melhora. O extrato de cúrcuma também inibiu
os níveis de IgE, IgG1 e mMCP-1. O extrato de cúrcuma reduziu as citocinas relacionadas
com a célula auxiliar tipo 2 (Th2) e aumentou as citocinas relacionadas com Th1. O
extrato de cúrcuma melhorou a alergia alimentar induzida por OVA em camundongos,
restaurando o equilíbrio Th1/Th2. Eles concluíram que o extrato de cúrcuma melhorou
significativamente os sintomas alérgicos alimentares neste modelo de rato de alergia
alimentar, promovendo respostas Th1 sobre as respostas imunológicas Th2-dominante. O
extrato de açafrão administrado por via oral incluindo vários componentes pode ser útil
para melhorar distúrbios alérgicos mediados por Th2, tais como alergia alimentar,
dermatite atópica e asma.

A interleucina-10 (IL-10) é uma citocina pleiotrópica antiinflamatória e imunossupressora

produzida por células de imunidade inata e adaptativa, incluindo macrófagos, células
dendríticas, mastócitos, células “natural killer”, eosinófilos, neutrófilos, células B, células-T
CD8+, e TH1, TH2, TH17 e células-T reguladoras. SNC, astrócitos, micróglia e neurônios
são as principais fontes de produção de IL-10. A principal fonte de IL-10 na periferia são
os macrófagos. Foi relatado que a curcumina aumenta a liberação de IL10. Este
mecanismo pode desempenhar um papel nas ações da curcumina – gerenciando ou
tratando doenças inflamatórias imunológicas do intestino, articulações, pulmões, coração,
vasos sanguíneos e cérebro (Mollazadeh et al. 2017).

16. Psoríase
As células dendríticas (células apresentadoras de antígenos) desempenham um papel
crítico para iniciar a ativação e diferenciação das células-T em doenças inflamatórias,
incluindo psoríase. Diarilheptanoide de C. kwangsiensis (DCK) modulou múltiplas funções
das células dendríticas na imunopatogênese da psoríase. Muitas etapas foram
modificadas por DCK, incluindo a captação de antígeno, maturação, migração e produção

44
de citocinas pró-inflamatórias, e também diminuiu a proliferação e diferenciação de Th1 e
TH17 e sua produção de citocinas efetoras. Esses mecanismos, em parte, podem
contribuir para a eficácia da cúrcuma no tratamento da psoríase (Liu et al. 2018a, b).

17. Pedras nos rins

Bas et al. (2009) administraram curcumina por via oral a 75 mg/kg/dia dissolvido em álcool
etílico a 10% por 6 dias (1 dia antes e 5 dias após litotripsia por onda de choque, SWL)
em ratos. Este tratamento produziu diferenças significativas nas alterações histológicas
sob microscópio de luz (P < 0,02) entre SWL e grupos de controle nos dias 7 e 35. Este
tratamento foi encontrado para reduzir a fibrose do tecido, expressões de iNOS e p65 e
níveis de óxido nítrico sérico e também preveniu lesões celulares intersticiais,
glomerulares, tubulares epiteliais e endoteliais. Eles sugeriram que a curcumina pode ser
usada como um agente antioxidante protetor para prevenir lesão renal induzida por SWL.

Em outro estudo, a curcumina (60 mg/kg de peso corporal) foi administrada por via oral
uma vez ao dia durante 28 dias em ratos. Os níveis de cálcio e oxalato na urina e
homogenato de tecido renal foram medidos, e o exame histopatológico renal foi realizado.
O tratamento com curcumina inibiu o desenvolvimento de pedras nos rins, mas falhou em
reverter as alterações causadas pelas pedras nos rins (Ghodasara et al. 2010). Extrato de
ervas de açafrão (curcumina), entre muitos outros extratos de plantas, foi encontrado para
inibir a formação de estruvita (Das et al. 2017). Polifenóis dietéticos, incluindo a
curcumina, podem ser suplementos dietéticos promissores para a prevenção da urolitíase
(Nirumand et al. 2018). Esta pesquisa limitada sugere que a curcumina pode retardar a
progressão da formação de cálculos renais e fibrose e também pode exercer efeitos
protetores nos rins.

18. Câncer
O câncer é uma das causas de morte mais comuns em todo o mundo. Parece haver uma
ligação entre câncer e dieta alimentar. A modulação dietética da microbiota intestinal e
mRNAs pode desempenhar um papel importante no desenvolvimento e prevalência do
câncer. Vários componentes da dieta, como açafrão (curcumina), ácidos graxos,
resveratrol e isotiocianato, são frequentemente utilizados na prevenção e tratamento do
câncer; componentes dietéticos e fibras servem como probióticos e alteram a expressão
de mRNA. Esta interação vital de alimentos funcionais, ervas, fibras e suplementos

45
dietéticos modula as vias vitais envolvidas na metástase, invasão, apoptose, crescimento
tumoral e proliferação celular (Riaz Rajoka et al. 2018).

A curcumina pode aumentar o efeito da terapia de radiação, inibir a angiogênese e a

proliferação celular pela supressão de NFkB e seus genes-alvo em células de câncer de
cólon e inibir o crescimento celular por meio da modulação das vias Akt/mTOR através da
regulação negativa de EGFR. Além disso, as células pancreáticas tratadas com
curcumina resultaram na regulação negativa de 18 mRNAs e na regulação positiva de 11
mRNAs; a regulação positiva de mR-22 levou à supressão de ESR-1 (receptor de
estrogênio 1) e fatores de transcrição SP1.

O glioma é o mais agressivo, letal e mais prevalente dos tumores cerebrais primários. O
glioblastoma (glioblastoma multiforme) é um glioma maligno que é quase impossível de
curar devido ao transporte insuficiente do medicamento através da barreira
hematoencefálica (BHE) e à existência de células-tronco de glioma. Recentemente, Zhao
et al. (2018) descobriram que o lipossoma modificado com RDP carregado com
curcumina (RCL) inibiu a proliferação de células de glioma e o crescimento do tumor
usando um modelo de camundongo com glioma intracraniano. RCL prolongou o tempo de
sobrevivência dos camundongos portadores de glioma de 23 para 33 dias; o mecanismo
de inibição de RCL em células de glioma pode envolver a parada do ciclo celular na fase
S e a indução da apoptose celular. Este estudo fornece evidências de que a
nanotecnologia (entrega de curcumina às células cancerosas do cérebro) tem potencial
para o tratamento de gliomas malignos humanos.

19. Translação Epidemiológica Populacional e Clínica para Banco de

dados
O consumo humano médio diário estimado de açafrão (ST) na Índia é de
aproximadamente 200–600 mg (~ 1–3 mg/kg, BID, TID). Isso pode ser traduzido em uma
dose humana diária estimada de curcuminóides de aproximadamente 3-30 mg. Este
consumo de uma dose baixa de cúrcuma e seus ingredientes ativos pode explicar a baixa
prevalência da doença de Alzheimer (DA) na Índia (1/4 dos EUA) e o subsequente baixo
custo dos cuidados de saúde na Índia. Tradicionalmente, o açafrão em pó é primeiro
temperado em óleo ou ghee até que fique marrom por 1–2 min antes de ser usado em
feijão, grãos inteiros, arroz ou vegetais (observação pessoal da culinária indiana durante a
infância). Este método pode ser um reflexo da antiga arte de nanoformulação e ativação
de > 235 ingredientes em açafrão e outras espécies.
46
Em países que não consomem cúrcuma, incluindo os EUA, muitas pessoas estão usando
doses mais altas de suplementos dietéticos (curcumina ou cúrcuma), conforme
recomendado por não-cientistas e não crentes no Ayurveda. Doses altas podem anular
seus próprios efeitos benéficos à saúde. Portanto, há uma necessidade de desenvolver
formulações de baixa dosagem consistindo de açafrão ou curcumina/curcuminóides
isoladamente ou em combinação com outras ervas ou medicamentos. Essas novas
combinações precisam ser avaliadas clinicamente em cães idosos, gatos e pessoas que
sofrem de osteoartrite, dor e/ou déficits cognitivos (AD) leves a moderados e
comorbidades, como depressão. No entanto, esses estudos clínicos requerem
financiamento e o incentivo para seguir este longo caminho para encontrar uma erva
acessível para a prevenção de doenças inflamatórias crônicas das articulações, intestino,
cérebro e pele.

Como exemplo, a aspirina (81 mg por dia durante décadas) reduz o risco de ataque
cardíaco e derrame. Olhando para a farmacologia da aspirina, ninguém poderia ter
previsto um resultado clínico tão bom. Uma combinação de ácido salicílico (e outros
ácidos tricarboxílicos) e cúrcuma em doses baixas usadas ao longo de décadas na meia-
idade pode reduzir a progressão da AD e OA em populações de alto risco e animais de
estimação.

20. Translação: Pré-clínica para clínica

Dados pré-clínicos de pesquisas anteriores da UCLA demonstram claramente que a
curcumina em baixas doses têm distribuição seletiva no cérebro. Esse achado pode ter
grandes implicações clínicas em termos de farmacocinética não convencional e eficácia.

A dose baixa (500 ppm) e alta (2000 ppm) de curcumina na ração por 6 meses aumenta o
nível plasmático de forma relacionada à dose em camundongos, produzindo 35 ± 14 e
171 ± 19 ng/ml, respectivamente. No entanto, o nível cerebral de curcumina após dose
baixa e alta foi de 469 ± 22 e 525 ± 125 ng/g, respectivamente. A razão cérebro/plasma foi
de 13,4 na dose baixa e 3 na dose alta. A meia-vida da curcumina é > 10 dias no cérebro
e menos de 7 h no plasma (Dr. S. Frautschy, UCLA, comunicação pessoal). A meia-vida
longa sugere que os ingredientes ativos (curcumina e outros) se acumulam no cérebro e
em outros tecidos adiposos ao longo de dias ou semanas.

Esses dados podem sugerir que há farmacocinética relacionada à dose no plasma, mas
não no cérebro. Os transportadores de pGp 13 na BBB14 podem ser ativados por altos

13 Transportadores de drogas
14 Barreira hematoencefálica
47
níveis de plasma levando à promoção do efluxo de curcumina do cérebro. Este fenômeno
pode explicar a falta de eficácia em ensaios clínicos usando doses “industriais” de
curcumina. A eficácia de 160 ppm e 500 ppm na ração por 6 meses ofereceu eficácia
quase semelhante em um modelo de camundongo da doença de Alzheimer (referências).
Aumentar a dose para 2.000 ou 5.000 ppm não produziu melhor eficácia no modelo de
camundongo. O esforço de tradução de camundongos para humanos falhou no
desenvolvimento da curcumina como uma terapia potencial para Doença de Alzheimer.
No entanto, a falha em ensaios clínicos em humanos pode nos ajudar a desenvolver
formulações de açafrão mais seguras e eficazes para uso veterinário, particularmente
para osteoartrite e declínio cognitivo (demência) em cães e gatos idosos.

Na depressão, AD, dor e inflamação ocular em modelo animal demonstram que a baixa
dose de cúrcuma ou curcumina em rações ou alimentos, durante a vida, pode oferecer
uma maneira acessível de reduzir a carga de doença inflamatória crônica em animais de
estimação idosos e pessoas. Junto com as mudanças no estilo de vida – exercícios e
alimentação saudável – uma dose baixa de cúrcuma (ST) pode reduzir a necessidade de
opiáceos e outros medicamentos.

21. Lacunas e oportunidades

• Recentemente, Cavaleri (2018) elegantemente discutiu e resumiu as lacunas, desafios e
oportunidades em fazer açafrão ou seus principais fitoquímicos (por exemplo, curcumina,
curcuminóides) e seus metabólitos ativos suplementos dietéticos eficazes e seguros
(nutracêuticos) e medicamentos.

• A pureza, adulteração, contaminação por chumbo, metal pesado, estabilidade e vida de

prateleira do açafrão (açafrão padronizado) e seus principais componentes em
suplementos dietéticos precisam ser mantidos na linha de frente em P&D.

• O conteúdo de fitoquímicos na cúrcuma pode variar drasticamente de região para região

dentro de um país ou em todo o mundo. Essa variação pode contribuir para as diferenças
na eficácia de muitos suplementos dietéticos à base de ervas (como nutracêuticos,
incluindo açafrão-da-índia padronizada e seus componentes principais). Portanto, a
padronização das preparações (combinações) de açafrão não é apenas desejável, mas é
justificada.

• Estudos de distribuição tecidual (ADME, PK) após a administração crônica de doses

terapêuticas (baixas) de cúrcuma (cúrcuma padronizada) e seus componentes principais

48
após 3, 7 ou 30 dias de administração em estados de doença crônica precisam ser
avaliados em cães, gatos, cavalos e animais do zoológico.

• As atividades in vitro e in vivo da curcumina em vários modelos experimentais até agora

não foram reproduzíveis em ambientes clínicos. O estudo de populações maiores de
gatos, cães e cavalos vivendo com progressão natural de doenças crônicas desreguladas
relacionadas à idade e uma maior duração do tratamento com uma ampla gama de doses
de ST e formulações variadas de curcumina podem oferecer dados mais confiáveis, que
pode ter um melhor valor preditivo no desenho de ensaios clínicos de longo prazo em
animais de estimação e pessoas.

• O uso de cúrcuma padronizada e seus componentes principais, isoladamente ou em

várias doses, em estudos clínicos de longo prazo é necessário em animais de estimação
e cavalos idosos.

• Os efeitos neuroprotetores de formulações IV, nasal ou oral de ST ou curcumina em acidente

vascular cerebral e concussão e em vítimas de PTSD precisam ser avaliados.

• A cúrcuma padronizada e seus componentes principais podem ser distribuídos

preferencialmente no local terapêutico (inflamação imunológica) e podem ter um papel
preventivo (modulador) em animais de estimação e cavalos idosos.

• Cães, gatos e cavalos, bem como animais de zoológico, que sofrem de OA, inflamação
imunológica desregulada crônica relacionada à idade e condições do tipo AD são modelos
naturais de doença. A eficácia da cúrcuma padronizada e de seus componentes principais
deve ser estabelecida em animais de estimação e cavalos idosos. Esses estudos são
necessários para estabelecer mudanças mais confiáveis e reprodutíveis nos
biomarcadores de doenças ao longo do tempo.

• Estudos de longo prazo usando cúrcuma (cúrcuma padronizada) e seus componentes

principais, isoladamente ou em combinação, com outros nutracêuticos (suplementos de
ervas) e medicamentos em animais de estimação, fazendas e animais do zoológico que
sofrem de doenças inflamatórias imunológicas desreguladas crônicas são necessários. O
tratamento de longo prazo com cúrcuma (cúrcuma padronizada) e seus componentes
principais produziria alterações significativas (regulação para cima ou para baixo da
transcrição e tradução de genes e mecanismos epigenéticos, proteínas, mRNAs e
enzimas e seus receptores e vias). Ainda faltam esses tipos de estudos de medicina
clínica de precisão. Esta abordagem terapêutica em P&D pode oferecer biomarcadores
melhores e mais confiáveis de modificação de doenças na saliva, linfócitos, sangue,

49
cérebro, articulações e olhos de animais e pessoas tratados com suplementos dietéticos e
tratados com placebo (veículo).

• Pessoas idosas e animais de estimação com alto risco de AD, OA e outras doenças
inflamatórias imunológicas podem estar recebendo pouca ou nenhuma quantidade (e às
vezes muito) de açafrão-da-índia padronizada e seus principais componentes. Estudos de
prevenção são necessários nessas populações de alto risco para identificar as doses
apropriadas e a duração do tratamento.

• É necessária a modelagem de base populacional, ampla dose e resposta e PK/PD na

presença e ausência de medicamentos para dor, depressão e outras doenças comuns em
populações idosas. Há ativação potencial de transportadores de drogas (Pgp) em tecidos-
alvo, como a BBB e o sistema gastrointestinal e nas articulações, durante o uso de uma
alta dose de cúrcuma (cúrcuma padronizada) e seus componentes principais. Este campo
precisa ser mais explorado.

• O uso de cúrcuma (cúrcuma padronizada) pode ser uma abordagem preventiva

acessível para retardar a progressão de doenças crônicas relacionadas ao
envelhecimento. Seu uso vitalício como alimento, em vez de comprimido ou cápsula, pode
ser uma abordagem viável para reduzir a necessidade de medicamentos caros com
efeitos colaterais graves em animais de estimação e pessoas. Cúrcuma (açafrão
padronizado) e seus principais componentes podem servir como terapia adjuvante no
tratamento de doenças do sistema digestivo, cérebro, articulações, olhos e corpo em
animais de estimação e pessoas idosas.

• Nanotecnologia e outros sistemas de entrega de medicamentos em animais de

estimação podem oferecer novas abordagens na prática veterinária.

22. Comentários Finais e Orientações Futuras

Cúrcuma é o rizoma seco (raiz) de Curcuma longa ou Curcuma aromatica (açafrão
selvagem), Curcuma wenyujin (China) e Curcuma domestica (Tailândia). É uma planta
herbácea perene rizomatosa pertencente à família do gengibre, Zingiberaceae. Mais de
133 espécies diferentes de açafrão foram identificadas. É nativo do subcontinente indiano
e do sudeste da Ásia. A cúrcuma contém mais de 235 ingredientes ativos naturalmente
embalados em sua raiz, de forma otimista em proporções adequadas. Esses fitoquímicos
complexos (> 235), incluindo óleos essenciais, curcuminóides (> 89) e turmerosacarídeos,
bem como ingredientes livres de curcuminóides, fibras e seus metabólitos e produtos de
degradação microbiana de açafrão-da-índia padronizada, podem agir de forma aditiva ou
50
sinérgica como um modulador da inflamação imunológica crônica desregulada e da dor
em estados de doença em pessoas, animais de estimação e cavalos.

O consumo humano médio de açafrão na Índia é de aproximadamente 81 mg duas ou

três vezes ao dia por toda a vida (~ 1–3 mg / kg, BID, TID). Isso pode ser traduzido na
dose humana estimada dos curcuminóides de ~ 3-15 mg BID, TID por toda a vida. O
consumo de baixas doses de açafrão nos alimentos pode ser responsável pela baixa
prevalência de AD na Índia (um quarto dos EUA). Deve-se ter cuidado quando estatísticas
e dados epidemiológicos estão sendo considerados para possível tradução de uma
cultura ou nação para outra.

Um dos princípios básicos da medicina ayurvédica é que a eficácia não pode ser
relacionada ao nível plasmático de um ingrediente ativo importante em uma especiaria ou
erva, e a erva inteira costuma ser mais eficaz do que seus ingredientes individuais.
Contrariamente a este princípio básico, as equipes de P&D nas últimas décadas
melhoraram drasticamente a biodisponibilidade da curcumina, o principal ingrediente ativo
da cúrcuma. Além de melhorar a farmacocinética da curcumina, os pesquisadores
também aumentaram a dose de curcumina na maioria dos ensaios clínicos realizados até
agora sem melhorar sua eficácia no câncer e na AD.

Açafrão padronizado contendo curcumina (3, 9, 27 ou 81 mg uma vez por dia ou BID ou
TID) pode atingir o nível terapêutico de estado estacionário dentro de 3-10 dias no
cérebro de pacientes ou animais de estimação que sofrem de AD ou outras doenças
inflamatórias imunológicas crônicas desreguladas persistentes. Este conceito pode ser
explorado em cães idosos, gatos e cavalos que vivem com OA e demência leve. Este
conceito é baseado em estudos pré-clínicos publicados – efeitos semelhantes da aspirina
e da curcumina in vitro e in vivo. Vinte ou trinta anos atrás, era imprevisível que 81 mg de
aspirina pudesse reduzir o risco de derrame e ataque cardíaco.

Baixa dose de cúrcuma padronizada (3-4 mg/kg, BID, TID) misturada com óleo de coco
ou óleo de peixe pode domar a inflamação imune crônica persistente, desregulada e
relacionada à idade no cérebro, olhos, pele, músculos, intestinos e outros órgãos internos
em animais de estimação. Pode retardar a progressão do transtorno do declínio cognitivo
(CCD) em cães e gatos. Uma dose baixa de açafrão-da-índia padronizada pode servir
como terapia adjuvante no controle de muitos estados de doença em animais de
estimação idosos – em cães e gatos, bem como em cavalos. Os ingredientes da cúrcuma
podem restaurar a homeostase no cérebro, nas articulações, no intestino e em outros
tecidos apenas em estados de doença agindo por meio de muitos mecanismos de ação
inter-relacionados.
51
Em países que não consomem cúrcuma, incluindo os EUA, muitas pessoas e animais de
estimação podem estar usando doses mais altas de suplementos dietéticos contendo
curcumina ou cúrcuma. Isso pode anular seus próprios efeitos benéficos à saúde.
Portanto, há uma necessidade de desenvolver formulações de baixa dosagem consistindo
de açafrão ou curcumina/curcuminóides, isoladamente ou em combinação com outras
ervas ou medicamentos. Essas novas combinações precisam ser avaliadas clinicamente
em cães idosos, gatos, cavalos e pessoas que sofrem de osteoartrite e/ou demência leve
a moderada, doença de Alzheimer e comorbidades.

As novas formulações padronizadas de açafrão-da-índia em doses baixas podem exercer

efeitos benéficos leves a moderados na osteoartrite, dor, depressão e doenças
neurodegenerativas. Pode reduzir a necessidade de analgésicos (opiáceos),
antidepressivos, anti AD, esteróides e medicamentos anticâncer. A possibilidade de que
muitos ingredientes ativos em formulações de açafrão podem atuar de forma aditiva ou
sinérgica precisa ser explorada e tratada. Os dados pré-clínicos apóiam esse conceito.
Usando a mais recente distribuição direcionada a medicamentos (nanotecnologia) e
estratégias de ensaios clínicos confiáveis, a cúrcuma padronizada pode ser considerada
para P&D para a prevenção e, possivelmente, para o tratamento de OA e demência e
outras doenças relacionadas ao envelhecimento dos olhos, cérebro, intestino e
articulações em animais de estimação e humanos.

Referências
Agarwal KA, Tripathi CD, Agarwal BB et al (2011) Efficacy of turmeric (curcumin) in pain and postoperative fatigue after
laparoscopic cholecystectomy: a double-blind, randomized placebo-controlled study. Surg Endosc 25(12):3805–3810
Aggarwal BB, Yuan W, Li S et al (2013) Curcumin-free turmeric exhibits anti-inflammatory and anticancer activities:
identification of novel components of turmeric. Mol Nutr Food Res 57 (9):1529–1542
Akuri MC, Barbalho SM, Val RM et al (2017) Reflections about osteoarthritis and Curcuma longa. Pharmacogn Rev
1(21):8–12
Alipour A, Elte JW, van Zaanen HC et al (2007) Postprandial inflammation and endothelial dysfunction. Biochem Soc
Trans 35 (Pt 3):466–469
Arun N, Nalini N (2002) Efficacy of turmeric on blood sugar and polyol pathway in diabetic albino rats. Plant Foods
Hum Nutr 57(1):41–52
Ashraf K, Mujeeb M, Ahmad A et al (2015) Determination of curcuminoids in Curcuma longa Linn. by UPLC/Q-TOF–
MS: an application in turmeric cultivation. J Chromatogr Sci 53 (8):1346–1352
Bas M, Tugcu V, Kemahli E et al (2009) Curcumin prevents shockwave lithotripsy-induced renal injury through
inhibition of nuclear factor kappa-B and inducible nitric oxide synthase activity in rats. Urol Res 37(3):159–164
Bastaki SMA, Ahmed MMA, Zaabi AA et al (2016) Effect of turmeric on colon histology, body weight, ulcer, IL-23, MPO
and glutathione in acetic-acid-induced inflammatory bowel disease in rats. BMC Complement Altern Med 16:72
Begum AN, Jones MR, Lim GP et al (2008) Curcumin structurefunction, bioavailability, and efficacy in models of
neuroinflammation and Alzheimer’s disease. J Pharmacol Exp Ther 326(1):196–208
Bethapudi B, Murugan S, Illuri R et al (2017) Bioactive turmerosaccharides from Curcuma longa extract (NR-INF-02):
potential ameliorating effect on osteoarthritis pain. Pharmacogn Mag 13 (Suppl 3):S623–S627
Betts JW, Sharili AS, La Ragione RM (2016) In vitro antibacterial activity of curcumin–polymyxin B combinations
against multidrug-resistant bacteria associated with traumatic wound infections. J Nat Prod 79(6):1702–1706
Bland SD, Venable EB, McPherson JL et al (2017) Effects of liposomalcurcumin on five opportunistic bacterial strains
found in the equine hindgut – preliminary study. J Anim Sci Technol 59:15
52
 Bolger GT, Licollari A, Tan A et al (2017) Distribution and metabolism of Lipocurc™ (liposomal curcumin) in dog and
human blood cells: species selectivity and pharmacokinetic relevance. Anticancer Res 37(7):3483–3492
Bolger GT, Licollari A, Tan A et al (2018) Distribution of curcumin and THC in peripheral blood mononuclear cells
isolated from healthy individuals and patients with chronic lymphocytic leukemia. Anticancer Res 38(1):121–130
Brumatti LV, Marcuzzi A, Tricarico PM et al (2014) Curcumin and inflammatory Bowel disease: potential and limits of
innovative treatments. Molecules 19:21127–21153
Cavaleri F (2018) Presenting a new standard drug model for turmeric and its prized extract, curcumin. Int J Inflam
1(15):5023429
Chand N (2018) Composition of containing standardized turmeric for reducing inflammation. Provisional Patent
Application # 626136994, Jan 4, 2018
Cheppudira B, Fowler M, McGhee L et al (2013) Curcumin: a novel therapeutic for burn pain and wound healing.
Expert Opin Investig Drugs 22:295–1230
Colitti M, Gaspardo B, Della Pria A et al (2012) Transcriptome modification of white blood cells after dietary
administration of curcumin and non-steroidal anti-inflammatory drug in osteoarthritic affected dogs. Vet Immunol
Immunopathol 147:136–146
Das P, Gupta G, Velu V et al (2017) Formation of struvite urinary stones and approaches towards the inhibition – a
review. Biomed Pharmacother 96:361–370
Del Grossi Moura M, Lopes LC, Biavatti MW et al (2017) Oral herbal medicines marketed in Brazil for the treatment of
osteoarthritis: a systematic review and meta-analysis. Phytother Res 31:1676–1685
Dende C, Meena J, Nagarajan P et al (2017) Nanocurcumin is superior to native curcumin in preventing degenerative
changes in Experimental Cerebral Malaria. Sci Rep 7(1):10062
Di Pierro F, Bressan A, Ranaldi D et al (2015) Potential role of bioavailable curcumin in weight loss and omental
adipose tissue decrease: preliminary data of a randomized, controlled trial in overweight people with metabolic
syndrome. Preliminary study. Eur Rev Med Pharmacol Sci 19:4195–4202
Dou Y, Luo J, Wu X (2018) Curcumin attenuates collagen-induced inflammatory response through the “gut-brain axis”.
J Neuroinflammation 15(1):6
Farinacci M, Colitti M, Stefanon B (2009) Modulation of ovine neutrophil function and apoptosis by standardized
extracts of Echinacea angustifolia, Butea frondosa and Curcuma longa. Vet Immunol Immunopathol 128(4):366–373
Fujiwara H (2000) Curcumin inhibits glucose production in isolated mice hepatocytes. Diabetes Res Clin Pract 80:185–
190
Gaffey A, Campbell J, Porritt K et al (2015) The effects of curcumin on musculoskeletal pain: a systematic review
protocol. JBI Database System Rev Implement Rep 13:59–73
Gera M, Sharma N, Ghosh M et al (2017) Nanoformulations of curcumin: an emerging paradigm for improved remedial
application. Oncotarget 8:66680–66698
Ghodasara J, Pawar A, Deshmukh C et al (2010) Inhibitory effect of rutin and curcumin on experimentally-induced
calcium oxalate urolithiasis in rats. Pharmacogn Res 2:388–392
Ghosh SS, He H, Wang J et al (2018) Curcumin-mediated regulation of intestinal barrier function: the mechanism
underlying its beneficial effects. Tissue Barriers 6(1):e1425085
Gopi S, Jacob J, Varma K et al (2017) Comparative oral absorption of curcumin in a natural turmeric matrix with two
other curcumin formulations: an open-label parallel-arm study. Phytother Res 31:1883–1891
Gopinath H, Karthikeyan K (2018) Turmeric: a condiment, cosmetic and cure. Indian J Dermatol Venereol Leprol
84:16–21
Gupta SC, Kismali G, Aggarwal BB (2013) Curcumin, a component of turmeric: from farm to pharmacy. Biofactors
39:2–13
Gutierres VO, Campos ML, Arcaro CA et al (2015) Curcumin pharmacokinetic and pharmacodynamic evidences in
streptozotocindiabetic rats support the antidiabetic activity to be via metabolite(s). Evid Based Complement Alternat Med
2015:678218
Han S, Xu J, Guo X et al (2018) Curcumin ameliorates severe influenza pneumonia via attenuating lung injury and
regulating macrophage cytokines production. Clin Exp Pharmacol Physiol 45(1):84–93
Hanai H, Sugimoto K (2009) Curcumin has bright prospects for the treatment of inflammatory Bowel disease. Curr
Pharm Des 15 (18):2087–2094
Hanai H, Iida T, Takeuchi K et al (2006) Curcumin maintenance therapy for ulcerative colitis: randomized, multicenter,
double-blind, placebo-controlled trial. Clin Gastroenterol Hepatol 4(12):1502–1506
Haroyan A, Mukuchyan V, Mkrtchya N et al (2018) Efficacy and safety of curcumin and its combination with boswellic
acid in osteoarthritis: a comparative, randomized, double- blind, placebo-controlled study. BMC Complement Altern Med
18(1):7
Heaton LE, Davis JK, Rawson ES et al (2017) Selected in-season nutritional strategies to enhance recovery for team
sport athletes: a practical overview. Sports Med 47(11):2201–2218
Hu X, Huang F, Szymusiak M et al (2016) PLGA-Curcumin attenuates opioid-induced hyperalgesia and inhibits spinal
CaMKIIα. PLos One 11:e0146393
Innes JF, Fuller CJ, Grover ER et al (2003) Randomized, double- blind, placebo controlled parallel group study of
P54FP for the treatment of dogs with osteoarthritis. Vet Rec 152:457–460
Javeri I, Chand N (2016) Curcumin. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity. Academic Press,
Amsterdam, pp 435–445
53
 Jeengar MK, Shrivastava S, Mouli Veeravalli SC (2016) Amelioration of FCA induced arthritis on topical application of
curcumin in combination with emu oil. Nutrition 32:955–964
Jia S, Du Z, Song C et al (2017) Identification and characterization of curcuminoids in turmeric using ultra-high-
performance liquid chromatography-quadrupole time of flight tandem mass spectrometry. J Chromatogr A 1521:110–122
Jin TR (2018) Curcumin and dietary polyphenol research: beyond drug discovery. Acta Pharmacol Sin 39(5):779–786
Krausz AE, Adler BL, Cabral V (2015) Curcumin-encapsulated nanoparticles as innovative antimicrobial and wound
healing agent. Nanomedicine 11:195–206
Kumar SSD, Houreld NN, Abrahamse H (2018) Therapeutic potential and recent advances of curcumin in the
treatment of aging-associated diseases. Molecules 23(4):835–849
Kurup V, Barrios CS, Barrios R et al (2007) Immune response modulation by curcumin in a latex allergy model. Clin
Mol Allergy 5(1):1
Lang A, Salomon N, Wu JC et al (2015) Curcumin in combination with mesalamine induces remission in patients with
mild-to-moderate ulcerative colitis in a randomized controlled trial. Clin Gastroenterol Hepatol 13(8):1444–1449
Lim GP, Chu T, Yang F et al (2001) The curry spice curcumin reduces oxidative damage and amyloid pathology in an
Alzheimer transgenic mouse. J Neurosci 21:8370–8377
Lin J-A, Chen J-H, Lee Y-W et al (2011) Biphasic effect of curcumin on morphine tolerance: a preliminary evidence
from cytokine/chemokine protein array analysis. Evid Based Complement Alternat Med 2011:452153.
https://doi.org/10.1093/ecam/neq018
Liu Q, Yin W, Han L et al (2018a) Diarylheptanoid from rhizomes of Curcuma kwangsiensis (DCK) inhibited imiquimod-
induced dendritic cells activation and Th1/Th17 differentiation. Int Immunopharmacol 56:339–348
Liu X, Machado GC, Eyles JP et al (2018b) Dietary supplements for treating osteoarthritis: a systematic review and
meta-analysis. Br J Sports Med 52:167–175
Lone PA, Ahmed SW, Prasad V et al (2018) Role of turmeric in management of alveolar osteitis (dry socket): a
randomized clinical study. J Oral Biol Craniofac Res 8:44–47
Mantzorou M, Pavlidou E, Vasios G et al (2018) Effects of curcumin consumption on human chronic diseases: a
narrative review of the most recent clinical data. Phytother Res 32:957–975. https://doi.org/10.1002/ptr.6037
Maradana MR, Thomas R, O’Sullivan BJ (2013) Targeted delivery of curcumin for treating type 2 diabetes. Mol Nutr
Food Res 57:550–1556
Matabudul D, Pucaj K, Bolger G et al (2012) Tissue distribution of (Lipocurc™) liposomal curcumin and
tetrahydrocurcumin following two- and eight-hour infusions in Beagle Dogs. Anticancer Res 32:4359–4364
Mazzanti G, Di Giacomo S (2016) Curcumin and resveratrol in the management of cognitive disorders: what is the
clinical evidence? Molecules 21:1243–1270
McCann MJ, Johnston S, Reilly K et al (2014) The effect of turmeric (Curcuma longa) extract on the functionality of the
solute carrier protein 22 A4 (SLC22A4) and interleukin-10 (IL-10) variants associated with inflammatory bowel disease.
Nutrients 6:4178–4190
McCubrey JA, Lertpiriyapong K, Steelman LS et al (2017) Regulation of GSK-3 activity by curcumin, berberine and
resveratrol: potential effects on multiple diseases. Adv Biol Reg 65:77–88
McFarlin BK, Venable AS, Henning AL et al (2016) Reduced inflammatory and muscle damage biomarkers following
oral supplementation with bioavailable curcumin. BBA Clin 5:72–78
Mollazadeh H, Cicero AFG, Blesso CN et al (2017) Immune modulation by curcumin: the role of interleukin-10. Crit
Rev Food Sci Nutr:1–13. https://doi.org/10.1080/10408398.2017.1358139
Motaghinejad M, Bangash MY, Hosseini P (2015) Attenuation of morphine withdrawal syndrome by various dosages of
curcumin in comparison with clonidine in mouse: possible mechanism. IJMS 40:125–132
Murugan S, Bethapudi B, Purusothaman D et al (2017) Anti-arthritic effect of polar extract of Curcuma longa on
monosodium iodoacetate induced osteoarthritis in rats. Antiinflamm Antiallergy Agents Med Chem 16(3):193–202
Nalli M, Ortar G, Schiano Moriello A et al (2017) Effects of curcumin and curcumin analogues on TRP channels.
Fitoterapia 122:126–131
Neto FC, Marton LT, de Marqui SV et al (2018) Curcuminoids from Curcuma Longa: new adjuvants for the treatment of
Crohn’s disease and ulcerative colitis? Crit Rev Food Sci Nutr 22:1–36
Nirumand MC, Hajialyani M, Rahimi R et al (2018) Dietary plants for the prevention and management of kidney stones:
preclinical and clinical evidence and molecular mechanisms. Int J Mol Sci 19:765
Ohno M, Nishida A, Sugitani S et al (2017) Nanoparticle curcumin ameliorates experimental colitis via modulation of
gut microbiota and induction of regulatory T cells. PLoS One 12(10):e0185999
Peddada KV, Brown A, Verma V et al (2018) Therapeutic potential of curcumin in major retinal pathologies. Int
Ophthalmol. https://doi.org/10.1007/s10792-018-0845-y
Ponnusamy S, Zinjarde S, Bhargava S et al (2012) Discovering Bisdemethoxycurcumin from Curcuma longa rhizome
as a potent small molecule inhibitor of human pancreatic α-amylase, a target for type-2 diabetes. Food Chem 135:2638–
2642
Prasad S, Aggarwal BB (2011) Chapter 13: Turmeric, the golden spice. From traditional medicine to modern medicine.
In: Benzie IFF, Wachtel-Galor S (eds) Herbal medicine: biomolecular and clinical aspects. CRC Press, Boca Raton, FL
Ramirez BA, Soler A, Carrion-Gutierrez MA et al (2000) An hydroalcoholic extract of Curcuma longa lowers the
abnormally high values of human-plasma fibrinogen. Mech Ageing Dev 114 (3):207–210

54
 Ramkumar M, Rajasankar S, Gobi VV et al (2018) Demethoxycurcumin, a natural derivative of curcumin abrogates
rotenoneinduced dopamine depletion and motor deficits by its antioxidative and anti-inflammatory properties in
Parkinsonian rats. Pharmacogn Mag 14(53):9–16
Riaz Rajoka MS, Jin M, Haobin Z et al (2018) Impact of dietary compounds on cancer-related gut microbiota and
microRNA. Appl Microbiol Biotechnol 102(10):4291–4303
Sarker MR, Franks SF (2018) Efficacy of curcumin for age-associated cognitive decline: a narrative review of
preclinical and clinical studies. Geroscience 40(2):73–95
Schiborr C, Kocher A, Behnam D et al (2014) The oral bioavailability of curcumin from micronized powder and liquid
micelles is significantly increased in healthy humans and differs between sexes. Mol Nutr Food Res 58:516–527
Seo HJ, Wang SM, Han C et al (2015) Curcumin as a putative antidepressant. Expert Rev Neurother 15(3):269–280
Shehzad A, Qureshi M, Anwar MN et al (2017) Multifunctional curcumin mediate multitherapeutic effects. J Food Sci
82:2006–2015
Shen L, Liu L, Ji HF (2017) Regulative effects of curcumin spice administration on gut microbiota and its
pharmacological implications. Food Nutr Res 61:1361780
Shin HS, See HJ, Jung SY et al (2015) Turmeric (Curcuma longa) attenuates food allergy symptoms by regulating type
1/type 2 helper T cells (Th1/Th2) balance in a mouse model of food allergy. J Ethnopharmacol 175:21–29
Siard MH, McCurry KE, Adams AA (2016) Effects of polyphenols including curcuminoids, resveratrol, quercetin,
pterostilbene, and hydroxypterostilbene on lymphocyte pro-inflammatory cytokine production of senior horses in vitro. Vet
Immunol Immunopathol 173:50–59
Small GW, Siddarth P, Li Z et al (2017) Memory and brain amyloid and tau effects of a bioavailable form of curcumin in
non-demented adults: a double-blind, placebo-controlled 18-month trial. Am J Geriatr Psychiatr 26:266–277
SohrabiM, Alahgholi-HajibehzadM,Mahmoodian ZMet al (2018) Effect of cinnamon and turmeric aqueous extracts on
serum interleukin-17F level of high fructose-fed rats. Iran J Immunol 15:38–46
Su L-Q, Di Wang Y, Chi H-Y (2017) Effect of curcumin on glucose and lipid metabolism, FFAs and TNF-α in serum of
type 2 diabetes mellitus rat models. Saudi J Biol Sci 24:1776–1780
Subhashini PS, Chauhan S, Kumari S et al (2013) Intranasal curcumin and its evaluation in murine model of asthma.
Int Immunopharmacol 17(3):733–743
Subhashini PS, Chauhan S, Dash D et al (2016) Intranasal curcumin ameliorates airway inflammation and obstruction
by regulating MAPKinase activation (p38, Erk and JNK) and prostaglandin D2 release in murine model of asthma. Int
Immunopharmacol 31:200–200
Sundaram JR, Poore CP, Sulaimee NHB et al (2017) Curcumin ameliorates neuroinflammation, neurodegeneration,
and memory deficits in p25 transgenic mouse model that bears hallmarks of Alzheimer’s disease. J Alzheimers Dis
60:1429–1442
Suresh D, Srinivasan K (2010) Tissue distribution and elimination of capsaicin, piperine and curcumin following oral
intake in rats. Indian J Med Res 131:682–691
Tanabe Y, Maeda S, Akazawa N (2015) Attenuation of indirect markers of eccentric exercise-induced muscle damage
by curcumin. Eur J Appl Physiol 115(9):1949–1957
Tian L, Zeng K, Shao W et al (2015) Short-term curcumin gavage sensitizes insulin signaling in dexamethasone-
treated C57BL/6 mice. J Nutr 145:2300–2307
Velusami CC, Richard EJ, Bethapudi B (2018) Polar extract of Curcuma longa protects cartilage homeostasis: possible
mechanism of action. Inflammopharmacology 26(5):1233–1243
Verma S, Mundkinajeddu D, Agarwal A et al (2017) Effects of turmeric curcuminoids and metformin against central
sensitivity to pain in mice. J Traditional and Compl Med 7:145–151
Vors C, Couillard C, Paradis ME et al (2018) Supplementation with resveratrol and curcumin does not affect the
inflammatory response to a high-fat meal in older adults with abdominal obesity: a randomized, placebo-controlled
crossover trial. J Nutr 148: 379–388
Wojcikowski K, Vigar VJ, Oliver CJ (2018) New concepts of chronic pain and the potential role of complementary
therapies. Altern Ther Health Med. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/29428928
Xu X, Cai Y, Yu Y (2018) Effects of a novel curcumin derivative on the functions of kidney in streptozotocin-induced
type 2 diabetic rats. Inflammopharmacology. https://europepmc.org/abstract/med/29582239
Yang JY, Zhong X, Kim SJ et al (2018) Comparative effects of curcumin and tetrahydrocurcumin on dextran sulfate
sodiuminduced colitis and inflammatory signaling in mice. J Cancer Prev 23(1):18–24
Yeon KY, Kim SA, Kim YH et al (2010) Curcumin produces an antihyperalgesic effect via antagonism of TRPV1. J Dent
Res 89: 170–174
Zhang DW, Fu M, Gao SH et al (2013) Curcumin and diabetes: a systematic review. Evid Based Complement Alternat
Med:636053. https://doi.org/10.1155/2013/636053. https://www.hindawi.com/journals/ecam/2013/636053/
Zhang Z, Leong DJ, Xu L et al (2016) Curcumin slows osteoarthritis progression and relieves osteoarthritis-associated
pain symptoms in a post-traumatic osteoarthritis mouse model. Arthritis Res Ther 18:128–140
Zhao M, Zhao M, Fu C et al (2018) Targeted therapy of intracranial glioma model mice with curcumin nanoliposomes.
Int J Nanomedicine 13:1601–1610
Zhi L, Dong L, Kong D et al (2013) Curcumin acts via transient receptor potential vanilloid-1 receptors to inhibit gut
nociception and reverses visceral hyperalgesia. Neurogastroenterol Motil 25(6): e429–e440
Zhu Q, Sun Y, Yun Z et al (2014) Antinociceptive effects of curcumin in a rat model of postoperative pain. Sci Rep
4:4932–4936
55
 Feno-grego em Saúde e Doença
Dinesh Kumar, Ramdas Singh Wangkheirakpam, Anu Rahal,

and Jitendra K. Malik

RESUMO
O feno-grego é uma erva que tem sido usada na medicina tradicional por séculos na
cicatrização de feridas, como afrodisíaco, para promover a lactação, etc. O consumo das
sementes como condimento resulta em diferentes efeitos medicinais como
hipocolesterolemiante, antidiabético, hepatoprotetor, antibacteriano, anti-helmíntico,
anticâncer e galactagogo. Flavonóides, saponinas, alcalóides piridínicos e sapogeninas
esteróides são alguns dos fitoquímicos presentes na planta. A planta também é adotada
por seu alto teor de vitaminas, minerais, proteínas e aminoácidos importantes e fibras,
tornando-a uma forragem nutritiva para o gado. Os extratos das folhas e sementes de
feno-grego são considerados seguros e têm potencial explicabilidade terapêutica no
tratamento e/ou gerenciamento de diabetes, câncer, toxicidades, doenças
cardiovasculares, lesões físicas e desequilíbrios hormonais. As sementes e folhas desta
planta estão agora sendo incorporadas em alimentos para animais, pássaros e peixes
para aumentar o consumo de ração, promover ganho de peso e diminuir a taxa de
conversão alimentar. A adição de feno-grego na água de beber das aves reduz o estresse,
e esta pode ser uma estratégia importante para substituir o uso de antibióticos como
enrofloxacino como agente antiestresse e, portanto, os problemas de resíduos de
antibióticos na carne, bem como desenvolver resistência a antibióticos, seria menor.

Palavras-chave: Nutracêutico · Feno-grego (Trigonella foenum-graecum) · Fitoquímicos ·

Sapogeninas · Trigonelina · Diosgenina · Galactomanano

D. Kumar – Division of Pharmacology & Toxicology, Indian Veterinary Research Institute, Bareilly, Uttar
Pradesh, India
R. S. Wangkheirakpam – Department of Pharmacology & Toxicology, College of Veterinary Sciences &
Animal Husbandry, R.K. Nagar, West Tripura, India
A. Rahal – Central Institute for Research on Goat (CIRG), Mathura, Uttar Pradesh, India
J. K. Malik – IVRI, Dehradun, Uttarakhand, India

1. Introdução
Feno-grego (Trigonella foenum-graecum L.) é uma erva leguminosa aromática forrageira
anual. A planta já foi nativa da região do Mediterrâneo, Índia, China, Norte da África e
Ucrânia, mas agora é amplamente cultivada em muitas partes do mundo. Tem cerca de
56
30-60 cm de altura com espiculado ereto e alisado e folíolos de 2-2,5 cm de comprimento.
Existem 1–2 flores que são axilares e sésseis. Os dentes do cálice são lineares e as
vagens medem cerca de 5–7,5 cm de comprimento com um bico longo e persistente,
muitas vezes com 10–29 sementes de tamanho pequeno sem reticulações transversais
(Kirtikar e Basu 2002). A semente tem 4,01–4,19 mm de comprimento, 2,35–2,61 mm de
largura e 1,49–1,74 mm de espessura (Altuntaş et al. 2005). As folhas e sementes da
planta são usadas como erva e as sementes como tempero. A Índia lidera entre os países
que produzem feno-grego, compartilhando 70-80% da exportação global (Edison 1995). O
feno-grego também é considerado uma das mais antigas plantas medicinais conhecidas
na história (Lust, 1986). Esta planta medicinal é usada em vários medicamentos
tradicionais, incluindo ayurvédica indiana, medicamentos tradicionais chineses e medicina
egípcia para a cura de feridas, como afrodisíaco, para promoção da lactação e muitos
mais (Tiran, 2003). Fitoquímicos como flavonóides, saponinas, sapogeninas esteróides,
aminoácidos e alcalóides são alguns dos constituintes importantes encontrados nos
extratos de folhas, caule e sementes de Trigonella foenum-graecum L. (feno-grego). O
consumo das sementes como condimento resulta em diferentes efeitos medicinais, como
hipocolesterolêmico (Mathern et al. 2009), antidiabético (Ajabnoor e Tilmisany 1988),
hepatoprotetor (Pribac et al. 2009), antibacteriano (Sharma et al. 2017), anti-helmíntico
(Khadse e Kakde 2010), anticâncer (Alsemari et al. 2014) e galactagogo (Betty 2008).
Esses fitoquímicos também servem como matéria-prima para a fabricação de várias
drogas terapêuticas e hormonais (Priya et al. 2011). O feno-grego também é uma boa
fonte de fibra alimentar, onde as proporções de fibras solúveis e insolúveis presentes em
suas sementes são 13% e 32%, respectivamente (Roberts 2011). Efeitos antidiabéticos e
hipocolesterolêmicos são atribuídos a vários componentes. No entanto, esses efeitos,
especialmente o efeito hipoglicêmico, podem ser parcialmente secundários ao conteúdo
de fibra que é conhecido por afetar o esvaziamento gástrico e diminuir o nível de glicose
pós-prandial no sangue (Srinivasan 2006; Benzie e Wachtel-Galor 2011).

57
Classificação Científica
Reino: Plantae
Sub-reino: Tracheobionta
Super-reino: Spermatophyta
Divisão: Magnoliophyta
Classe: Magnoliopsida
Subclasse: Rosidae
Ordem: Fabales
Família: Leguminosae/Fabaceae
Gênero: Trigonella
Espécie: T. foenum-graecum (Kirtikar e Basu 2003; Dymock et al. 2005)

2. Fito constituintes
2.1 Folhas

As folhas verdes do feno-grego contêm numerosos fitoquímicos, incluindo vários

nutrientes e vitaminas. As folhas frescas são utilizadas como vegetais em dietas
principalmente pelo seu rico conteúdo em vitaminas e minerais, e também têm sido
utilizadas como forragem verde para o gado. Os teores de umidade, nutrientes e minerais
nas folhas do feno-grego são mostrados na Tabela 1. Os teores de ácido ascórbico e β-
caroteno nas folhas frescas do feno-grego são cerca de 220,97 mg e 19 mg/100 g de
folhas, respectivamente (Yadav e Sehgal 1997). Minerais como zinco, ferro, fósforo,
cálcio, etc. e vitaminas como riboflavina, caroteno, tiamina, niacina, vitamina C, etc.
também estão presentes nas folhas (Rao 2003) (Tabela 2).

Tabela 1 Conteúdo de nutrientes das folhas de feno-grego (Rao 2003)

Umidade 86,1%
Proteína 4,4%
Gordura 0,9%
Minerais 1,5%
Fibra 1,1%
Carboidratos 6%

Tabela 2: Saponinas, alcalóides piridínicos e sapogeninas esteroidais em sementes de feno-grego

Flavonóides Vitexin, Tricina, Naringenin, Quercetina.
Saponinas Graecunins, Fenugrin B, Feno-grego, Trigofoenosídeos A – G.
Alcalóides piridínicos Trimetilamina, Neurin, Colina, Gentianina, Carpaine, Betaína, Trigonelina.
Yamogenins, Diosgenina, Smilagenina, Sarasapogenina
Saponinas esteróides
Trigogenina, Neotigogenina, Gitogenina, Yucagenina, Saponaretina

Fonte: Artigo de revisão de Khorshidian et al. (2016)

58
2.2 Sementes

Os constituintes fitoquímicos nas sementes, casca e cotilédones de feno-grego diferem. O

endosperma mostra o maior teor de saponinas e proteínas, enquanto a casca mostra um
maior teor de polifenóis. As sementes maduras contêm cerca de 0,1-1,5% de diosgenina
(uma sapogenina esteróide) e são extraídas comercialmente (Saxena et al. 2013). Óleos
fixos e voláteis também estão presentes em sementes de feno-grego em pequenas
quantidades (Sowmya e Rajyalakshmi 1999). Entre os múltiplos glicosídeos flavonóides
isolados das sementes de feno-grego, a isoorientina foi encontrada em quantidade
significativa (Luan et al. 2018). As tabelas 3 e 4 mostram a lista de produtos químicos
presentes nas sementes de feno-grego.

Tabela 3 Proteínas e aminoácidos, vitaminas e minerais em sementes de feno-grego

Composição química Valor do nutriente (por 100 g)
Globulina -
Albumina -
Lecitina Totalmente 25,4 g
Proteína e aminoácidos
Histidina -
Lisina -
4-hidroxiisoleucina -
Vitamina A 1040 UI
Vitamina C 12 mg
Niacina 6 mg
Piridoxina 0,6 mg
Vitaminas
Tiamina 0,41 mg
Riboflavina 0,36 mg
Ácido nicotínico 1,1 mg
Folato 57 μg/ml e 3,77 g
Cálcio 176 mg
Ferro 33,5 mg
Zinco 2,5 mg
Minerais Fósforo 296 mg
Magnésio 191 mg
Manganês 1,22 mg
Selênio 6,3 μg/ml e 3,77 g
Fonte: Artigo de revisão de Khorshidian et al. (2016)

Outros constituintes dos extratos de sementes incluem fibras, goma e fibra em detergente
neutro (Yadav et al. 2011) e lipídios, triacilgliceróis, diacilgliceróis, monoacilgliceróis,
fosfatidilcolina, fosfatidiletanolamina, fosfatidilinositol, ácidos graxos livres (Chatterjee et
al. 2010) e muitos ácidos graxos livres (Chatterjee et al. 2010) e muitas outras. As
59
estruturas químicas de alguns dos fitoquímicos bioativos presentes no feno-grego são
mostradas nas Figuras 1 e 2.

Tabela 4 Composição química da semente de feno-grego (FK) (AOAC 1990)

Itens Porcentagem
Umidade 7,15
Matéria seca 92,85
Matéria orgânica 33,03
Proteína bruta 16,51
Extrato de éter 9,49
Cinza total 7,15
NFE 33,82
ME (kcal/kg) 38,52

Fig. 1 Estruturas de alguns dos fitoquímicos importantes presentes no

feno-grego. Fonte: Artigo de revisão de Venkata et al. (2017)

Fig. 2 Flavonóides e seus derivados presentes no feno-grego. Fonte: Artigo de revisão de Venkata et al.
2017

3. Usos do feno-grego
A alimentação é um fator determinante para a saúde dos animais, incluindo pássaros e
peixes. Não só ajuda a manter o funcionamento normal do corpo e o estado metabólico,
mas também os vários constituintes dos alimentos, como antioxidantes, minerais,
vitaminas, fibras, etc. auxiliam na prevenção de doenças.
60
3.1 Usos Etno-históricos do Feno-grego

O feno-grego é uma das plantas medicinais mais antigas usadas para muitas doenças. A
planta era tradicionalmente usada como galactagogo no subcontinente indiano (Betty
2008), como analgésico no trabalho de parto/nascimento na Roma antiga, como um
tônico para a saúde e no tratamento de edema e fraqueza nas pernas na medicina
tradicional chinesa (Yoshikawa et al. 2000). As folhas e sementes são usadas como
forragem vegetal ou verde para o gado (Ahmad et al. 2016) e como tempero (Wani e
Kumar 2016), respectivamente, em muitas partes do mundo.

3.2 Usos do feno-grego na saúde animal

Extratos de sementes, brotos, raízes e folhas de feno-grego mostraram múltiplas

propriedades farmacológicas, como antimicrobiana (Wagh et al. 2007; Norziah et al. 2015;
Adil et al. 2015), antifúngico (Haouala et al. 2008), anticâncer (Raju et al. 2004; Shabbeer
et al. 2009; Alsemari et al. 2014), hepatoprotetor (Pribac et al. 2009), antidepressivo
(Kalshetti et al. 2015), antidiabético (Sauvaire et al. 1998; Naicker et al. 2016),
antiulcerogênico (Pandian et al. 2002), hipotensivo (Moradi e Moradi 2013),
antiinflamatório, antipirético e analgésico (Malviya et al. 2010).

3.2.1 Diabetes

Diabetes, um grupo de distúrbios metabólicos, não se limita a humanos. Muitos animais,

incluindo animais de estimação, pássaros e animais selvagens, também sofrem de
diabetes naturalmente ou por outras influências. O efeito hipoglicêmico das sementes de
feno-grego em pacientes humanos, bem como em animais diabéticos quimicamente
induzidos (ratos, cães), foi descrito por muitos pesquisadores. Decocção e extrato de
etanol de sementes de feno-grego produziram efeitos anti-hipoglicêmicos em
camundongos aloxanizados de maneira dependente da dose (Ajabnoor e Tilmisany 1988).
Este efeito no nível de glicose no sangue em parte foi atribuído à presença de esteróides,
saponinas, alcalóides e conteúdo de fibra nas sementes. A fibra dietética solúvel (FDS) -
galactomanana da planta – pode melhorar a homeostase da glicose no diabetes tipo I e
tipo II, retardando a digestão e absorção de carboidratos e aumentando a ação da
insulina. As propriedades viscosas e formadoras de gel da FDS evitam a absorção de
macronutrientes, reduzem a resposta pós-prandial à glicose e afetam beneficamente
certos lipídios do sangue (Ou et al. 2001). A trigonelina, um alcalóide piridínico, além de
seus efeitos antioxidantes, pode alterar as atividades de enzimas envolvidas no
metabolismo da glicose, regeneração das células β e secreção de insulina (Zhou et al.
2012). O tratamento de ratos diabéticos induzidos por aloxana com pó de semente de
feno-grego modulou enzimas-chave como enzimas glicolíticas, gliconeogênicas e
61
lipogênicas ligadas a NADH no fígado e rim necessárias para normalizar o nível de
glicose (Raju et al. 2001). Furostanol, um constituinte da saponina do extrato de feno-
grego, aumenta a ingestão de ração e o ganho de peso em ratos diabéticos (Petit et al.
1995). As saponinas também modulam as atividades das enzimas dissacaridase e
glicogênio no intestino, o que resulta em aumento do conteúdo de glicogênio hepático e
supressão do nível de glicose no sangue. A diosgenina, uma sapogenina esteróide
bioativa pertencente ao grupo dos triterpenos, é um produto da hidrólise das saponinas. O
conteúdo de diosgenina em sementes de feno-grego é maior do que em suas partes
aéreas (Dangi et al. 2014). Este composto é um precursor de vários hormônios e é
extraído comercialmente para a produção de hormônios sexuais e outras drogas
esteróides importantes. O potencial antidiabético da diosgenina pode ser atribuído a seus
múltiplos efeitos, incluindo renovação de células β pancreáticas, estimulação da secreção
de insulina, efeitos antioxidantes, estimulação da diferenciação de adipócitos e aumento
da glicose independente de insulina (Son et al. 2007; Uemura et al. 2010; Kalailingam et
al. 2014). A diosgenina também exibe proteção renal em ratos diabéticos por meio de
suas ações antiinflamatórias e antioxidantes (Kanchan et al. 2016). A redução
subsequente da peroxidação lipídica no fígado de ratos diabéticos após o tratamento com
feno-grego também foi atribuída às suas ações antioxidantes (Jin et al. 2014). Um
aminoácido não proteico, 4-hidroxiisoleucina (4-HIL), é um dos fitoquímicos amplamente
estudados presentes no feno-grego que tem ação semelhante à insulina e pode estimular
a produção de insulina, controlando assim os níveis de açúcar no sangue em pacientes
diabéticos, bem como em estudos in vitro (Gupta et al. 2001). Este aminoácido incomum é
ainda mais seguro e eficaz do que muitos dos medicamentos atuais disponíveis para o
tratamento de diabetes mellitus tipo 2 (Zafar e Gao 2016).

As consequências neurológicas associadas a esta doença metabólica no SNC estão

agora recebendo considerável atenção (Kamboj et al. 2009). O estresse oxidativo tem
sido implicado na patogênese de muitas doenças neurodegenerativas (Chen et al. 2012).
A hiperglicemia gera muitos radicais livres no paciente diabético, levando ao aumento do
dano às membranas plasmáticas e à redução simultânea dos níveis de antioxidantes
(Preet et al. 2005). Há também um aumento nos níveis de Ca 2+ concomitantemente com
os radicais livres, o que realmente se correlaciona com o aumento da peroxidação lipídica
celular da membrana sinaptossomal e inibição da atividade Ca 2+ ATPase (Pekiner et al.
2005; Kamboj et al. 2009). A administração de feno-grego também reduz algumas das
aberrações que ocorrem no cérebro durante o diabetes, principalmente devido às suas
atividades antioxidantes e efeitos neuroprotetores.

62
3.2.2 Redução do colesterol e proteção cardiovascular

As doenças cardiovasculares (DCV) são a principal causa de morte e morbidade humana

em todo o mundo (Mendis et al. 2011). O manejo adequado do nível de colesterol no
paciente hipercolesterolêmico é essencial para prevenir doenças cardiovasculares. As
estatinas sozinhas ou em combinação com alguns outros medicamentos são comumente
usadas para controlar os níveis elevados de colesterol. Centenas de medicamentos à
base de plantas também são usados isoladamente ou em combinações em sistemas
tradicionais de medicina para o tratamento de doenças cardíacas coronárias (Mahady
2009). Sementes de feno-grego reduzem o colesterol sérico, triglicerídeos e lipoproteína
de baixa densidade em pacientes hipercolesterolêmicos e diabéticos (Sharma et al. 1996;
Mathern et al. 2009) e animais (Sauvaire et al. 1991; Boban et al. 2009). Administração de
feno-grego em ratos obesos também reduz o acúmulo de triglicerídeos no fígado
enquanto aumenta a bile fecal e a excreção de colesterol (Rashmi e Rahul 2011). Esse
aumento da excreção de bile e colesterol é considerado uma consequência da reação
entre o ácido biliar e as saponinas derivadas do feno-grego no intestino, causando a
formação de micelas grandes que não podem ser absorvidas facilmente do intestino
(Olaiya e Soetan 2014). O potencial de redução do colesterol do feno-grego também é
atribuído ao seu alto teor de fibra. A fibra solúvel do feno-grego parecia reduzir a
reabsorção dos constituintes da bile no intestino delgado por meio da ligação do colesterol
e dos ácidos biliares e da interrupção do ciclo entero-hepático in vivo. Isso aumenta a
utilização do colesterol na biossíntese de ácidos biliares, subsequentemente reduzindo
seu nível (Muraki et al. 2011).

3.2.3 Câncer

Muitos constituintes do feno-grego demonstraram exibir atividades antitumorais ou

anticâncer in vivo e in vitro. Alguns desses constituintes importantes incluem diosgenina
(Raju et al. 2004), trigonelina (Bhalke et al. 2009) e flavonóides (Ahmed et al. 2017).
Fitoestrogênios e saponinas presentes em extratos de feno-grego possuem atividade
anticâncer in vitro (Raju et al. 2004). As saponinas nos extratos não apenas inibem
seletivamente a divisão celular nas células tumorais, mas também podem iniciar a
apoptose das células (Francis et al. 2002). A diosgenina, uma saponina esteróide,
mostrou atividades antitumorigênicas no câncer colorretal, osteossarcoma, carcinoma
hepatocelular, câncer de mama e leucemia. Os efeitos da diosgenina são mediados por
várias vias, como a via STAT (Li et al. 2010), ativação de p53 e caspase-3 (Liu et al. 2005)
e a indução do ligante indutor de apoptose relacionado ao fator de necrose tumoral
receptor de morte DR5 (Lepage et al. 2011). Um estudo em ratos revelou a atividade
63
anticâncer da diosgenina por sua capacidade de inibir a formação de focos de cripta
aberrante, que são agrupamentos de glândulas semelhantes a tubos anormais no
revestimento do cólon e reto e podem ser observados como lesão pré-neoplásica (Raju et
al. 2004). A diosgenina suprimiu a expressão de bcl-2, uma proteína pró-apoptótica, e
aumentou a expressão de caspase-3, uma proteína anti-apoptótica (Raju et al. 2004). A
citocina TNF-a é conhecida por promover a proliferação celular, um evento comum no
início e promoção de doenças malignas. A diosgenina também pode atuar contra o câncer
ósseo por meio da inibição da TNF-a, suprimindo assim a proliferação e o
desenvolvimento das células ósseas (Shishodia e Aggarwal 2006). A eficácia da planta do
feno-grego também foi observada no câncer de cólon através da modulação das
atividades da β-glucuronidase e da mucinase (Devasena e Menon 2003). Limitar as
atividades da β-glucuronidase e da mucinase na mucosa do cólon pode aumentar a
eficácia da quimioterapia no câncer de cólon. As atividades aumentadas da β-
glucuronidase promovem a liberação de carcinógenos livres de conjugados de
carcinoglicuronídeo, aumentando o processo de hidrólise dentro do lúmen do cólon, e a
mucinase auxilia hidrolisando a mucina protetora no intestino (Beaud et al. 2005;
Booupathy et al. 2016) O feno-grego pode diminuir as atividades da β-glucuronidase e da
mucinase na mucosa do cólon e pode, subsequentemente, impedir que os carcinógenos
livres atuem sobre os colonócitos (Devasena e Menon 2003).

3.2.4 Efeitos antibacteriano e antifúngico

As atividades antibacteriana e antifúngica do feno-grego foram relatadas por muitos

pesquisadores nos últimos anos. O exame de metanol, acetona e extratos aquosos de
folhas, sementes e caules de feno-grego contra E. coli e Staphylococcus isolados de
repolho estragado revelou a propriedade antibacteriana da erva. O extrato metanólico das
folhas demonstrou o maior efeito, enquanto os extratos aquosos apresentaram o menor
(Sharma et al. 2017). Mercan et al. (2007) relataram um achado interessante de que as
amostras de mel com a maior atividade antibacteriana contra várias bactérias, como
Staphylococcus aureus, Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa exibiram pólen
máximo de feno-grego em comparação com outras plantas. Os extratos também foram
eficazes contra o Helicobacter pylori (Randhir et al. 2004).

Os extratos de feno-grego também são eficazes contra várias cepas de fungos, incluindo
Fusarium graminearum, Rhizoctonia solani, Botrytis cinerea, Alternaria sp., e Pythium
aphanidermatum (Haouala et al. 2008). No entanto, a potência dos extratos varia com as
diferentes partes da planta do feno-grego e também com as espécies de fungos. As
64
defensinas são pequenas proteínas catiônicas ricas em cisteína e funcionam como
peptídeos de defesa do hospedeiro. Um peptídeo semelhante à defensina, Tf-AFP, com
massa molecular de 10,3 kDa está presente no feno-grego e foi isolado de sementes de
feno-grego por Oddepally e Guruprasad (2015). Essas defensinas são ativas contra
bactérias, fungos e muitos vírus (Kagan et al. 1990).

3.2.5 Cicatrização de feridas cutâneas

Muitos extratos de ervas e especiarias contêm numerosos constituintes que melhoram a

cicatrização de feridas cutâneas. A atividade antioxidante é um dos principais efeitos
desses constituintes bioativos, que podem eventualmente reduzir a inflamação excessiva
ou crônica durante a lesão e, subsequentemente, promover a cicatrização. A aplicação
tópica de pomada de semente de feno-grego a 10% promoveu a formação de tecido
conjuntivo fibroso celular, tecido de granulação e maturação precoce de tecidos
conjuntivos fibrosos e, assim, melhorou a cicatrização de feridas em coelhos (Muhammed
e Salih 2012). Em outro estudo em ratos, a administração tópica ou oral da suspensão de
sementes de feno-grego acelerou a contração e epitelização da ferida cutânea (Sumitra et
al. 2000). Além de suas ações antioxidantes, vários outros constituintes presentes nos
extratos são capazes de modular as diferentes fases da cicatrização, que incluem
inflamação, proliferação e migração celular, angiogênese e maturação. As atividades
antioxidantes e antibacterianas exercidas por vários constituintes dos extratos de feno-
grego são consideradas fatores importantes que aumentam os processos de cura
(Muhammed e Salih 2012; Ktari et al. 2017). Além disso, os ácidos graxos presentes na
semente de feno-grego ajudam na construção de colágeno e, consequentemente,
promovem a cicatrização de feridas e a manutenção da elasticidade da pele (Dixit et al.
2005).

3.2.6 Melhoria da Toxicidade

O feno-grego é hepatoprotetor (Kaviarasan e Anuradha 2007). Acredita-se que o

antioxidante (Reddy e Srinivasan 2011), o antirradical e o efeito normalizador do
metabolismo do ferro do feno-grego conferem hepatoproteção (Kaviarasan et al. 2007). A
incorporação de pó de sementes de feno-grego (FSP) (5%) na dieta peletizada melhorou
a lesão hepática crônica induzida por AlCl 3 em ratos Wistar (Belaïd-Nouira et al. 2013a).
As enzimas hepáticas alteradas e os níveis de proteína voltaram ao normal após a
alimentação com FSP. Além disso, o feno-grego pode reduzir a nefrotoxicidade (Belaïd-
Nouira et al. 2013b). O feno-grego demonstrou eficácia na prevenção da necrose de
células hepáticas em cultura de hepatócitos primários de rato contra a toxicidade de N-
metil-N-nitro-Nnitrosoguanidina (MNNG) in vitro (Khader et al. 2007). Além disso, a planta
65
tem potencial para iniciar a regeneração de hepatócitos durante a lesão. Kaviarasan et al.
(2006) relataram que no dano hepático induzido por etanol, a proteção da estrutura e
função dos hepatócitos pelo extrato aquoso da semente de feno-grego ocorreu de
maneira dependente da dose. O extrato etanólico da semente de feno-grego reduziu o
dano pancreático induzido por dimetoato (um composto de OP) (Mesallam et al. 2018). No
entanto, os extratos de feno-grego foram encontrados para potencializar a apoptose de
células induzida por radiação, e essa excitotoxicidade foi pronunciada em células-T de
humanos. O efeito potenciador citotóxico deste extrato pode ser de grande utilidade na
pesquisa e no tratamento do câncer, reduzindo os efeitos colaterais indesejados em
pacientes que são mais sensíveis à radiação. No entanto, mais estudos in vivo e in vitro
são necessários para apoiar esses achados para a validação final dos efeitos (Tavakoli et
al. 2015).

3.2.7 Proteção gástrica

O extrato aquoso de sementes de feno-grego e uma fração de gel isolada das sementes
têm potencial protetor de úlcera quando comparados ao omeprazol em úlcera gástrica
induzida por etanol em ratos experimentais (Pandian et al. 2002). Um resultado
semelhante foi observado em úlcera gástrica induzida por aspirina em ratos usando
ranitidina como medicamento padrão (Thirunavukkarasu e Anuradha 2007). Este efeito
citoprotetor não foi apenas devido à ação anti-secretora da semente, mas também
atribuído aos efeitos nas glicoproteínas da mucosa. O desenvolvimento de uma camada
de gel semelhante à mucina de galactomanana na superfície da mucosa gástrica forma
uma barreira, protegendo a mucosa de agentes ulcerogênicos, bem como da pepsina do
suco gástrico no estômago (Madar e Shomer 1990). Além disso, as ações antioxidantes
do extrato da semente também podem contribuir para diminuir a lesão da mucosa
(Narender et al. 2006). Figer et al. (2017) demonstraram que o extrato aquoso de feno-
grego em diferentes concentrações inibiu significativamente a morte celular melhor do que
o misoprostol de sódio contra danos induzidos por etanol em linhagem de células
epiteliais de carcinoma gástrico humano in vitro. Concentrações mais altas além de 5,0
μg/ml e 3,77 g/ml resultaram em uma diminuição da atividade. A análise in silico15 revelou um grau
notável de interação dos constituintes dos flavonóides com os locais de ligação do
receptor H+/K+ ATPase, demonstrando o potencial terapêutico promissor do extrato de
semente de feno-grego como gastroprotetor (Figer et al. 2017).

15 Em biologia e outras ciências experimentais, um experimento in silico é aquele realizado no computador ou via simulação em
computador
66
3.2.8 Outros benefícios do feno-grego

Além dos usos discutidos acima, o feno-grego é bem conhecido por suas múltiplas ações
farmacológicas. Alterações no metabolismo lipídico hepático podem resultar no
desenvolvimento de doença hepática crônica (Corey e Cohen 2015). O feno-grego pode
reduzir os lipídios hepáticos no corpo devido ao seu potencial para modificar as atividades
de várias enzimas, incluindo enzimas relacionadas ao metabolismo da glicose e dos
lipídios (Madar e Shomer 1990).

O feno-grego é anti-helmíntico, pois causa a evacuação de vermes intestinais parasitas. O

extrato alcoólico de sementes de feno-grego mostrou atividade anti-helmíntica contra os
vermes comparável ao albendazol in vitro (Khadse e Kakde 2010). No entanto, o extrato
aquoso foi menos potente do que o albendazol (Buchineni e Kondaveti 2016). A eficácia
dos extratos também é relatada contra Hymenolepis nana, Syphacia obvelata e Moniezia
expansa (Ghafagaai et al. 1980).

O feno-grego é um imunoestimulante potente que pode estimular os mecanismos

imunológicos humorais (Tripathi et al. 2012) e mediados por células (Anarthe et al. 2014).
O efeito imunomodulador foi relatado por muitos investigadores (Bin-Hafeez et al. 2003;
Tripathi et al. 2012; Meghwal e Goswamy 2012; Wani e Kumar 2016). O extrato aumentou
o índice fagocítico, a capacidade fagocítica dos macrófagos, bem como a
linfoproliferação, o que sugere fortemente seu efeito estimulador sobre as funções
imunológicas em camundongos (Bin-Hafeez et al. 2003). A ação neuroprotetora do feno-
grego também foi relatada (Moghadam et al. 2013; Hamden et al. 2010; Ahmed et al.
2017). O pó feito com esta erva mostrou efeito neuroprotetor na doença de Alzheimer
induzida por cloreto de alumínio em ratos, que pode ser o resultado de atividades
sinérgicas de vários constituintes presentes no pó da semente. Este efeito resultou na
atenuação de déficits de memória induzidos por AlCl 3, patologia de amiloide e tau16,
estresse oxidativo e inflamação na doença de Alzheimer em ratos (Prema et al. 2017).

4. Feno-grego em rações para animais, aves e peixes

O uso de antibióticos, hormônios e muitos outros produtos químicos como aditivos para
rações em criações de gado, aves e peixes está geralmente associado a muitos efeitos
indesejáveis, bem como a problemas de resíduos em carne, leite, ovos e peixe para
consumo humano. Muitos materiais naturais, como plantas/ervas medicinais, podem ser
usados como aditivos para rações em dietas de animais, aves e peixes para aumentar a

16 Unidade associada à tubulina

67
eficácia da utilização da ração e o desempenho da produção. Foi relatado que ervas ou
especiarias têm o potencial de aumentar várias funções fisiológicas, como estimulação do
apetite, crescimento, antiestresse, funções imunológicas e assim por diante. A
incorporação de 10% de um extrato de uma mistura de plantas herbáceas, incluindo
sementes de feno-grego, na alimentação animal reduziu a produção de aflatoxina por
Aspergillus flavus em cerca de 85-90% (El-Shayeb e Mabrouk 1984). O feno-grego
estimula a secreção biliar aumentando a conversão do colesterol em sais biliares (Bhat et
al. 1985). A melhora no consumo de ração após a incorporação de sementes de feno-
grego na dieta também foi relatada em ratos (Petit et al. 1993).

4.1 Produção de Aves

A incorporação de muitas ervas ou temperos nas rações melhora a digestibilidade, a

absorção de nutrientes e até a eliminação de patógenos do trato gastrointestinal, e isso,
por sua vez, aumenta o crescimento e a produtividade das aves. A suplementação de
ração para frangos de corte com feno-grego aumentou o consumo de ração e o ganho de
peso corporal e diminuiu a taxa de conversão alimentar (Elbushra 2012). Ao lado disso,
também houve redução na taxa de mortalidade de aves (Alloui et al. 2012). O feno-grego
também pode ser adicionado à água potável como um agente antiestresse. Essa seria
uma etapa importante na substituição do uso de um antibiótico como o enrofloxacino
(Saber et al. 2017). A inclusão de sementes de feno-grego na dieta de frangos não é
apenas econômica por aumentar a taxa de conversão alimentar, mas também contribui
para a redução da deposição de gordura abdominal nas aves (Yesuf et al. 2017). Esta é
uma descoberta importante que seria de grande benefício para a produção de carne
magra de frango.

4.2 Produção Animal

O feno-grego produz forragens de alta qualidade em todas as fases de crescimento.

Possui um alto teor de muitos nutrientes, bem como fitoquímicos (diosgenina) que
promovem o crescimento e a produção de leite no gado. (Acharya et al. 2007; Żuk-
Gołaszewska e Wierzbowska 2017). O valor nutritivo da forragem em todos os estágios
de crescimento é comparável ao da floração precoce da alfafa (Medicago sativa L.) (Mir et
al. 1998). A incorporação do feno-grego na dieta do gado resultou na melhoria dos
parâmetros de qualidade do leite e do metabolismo animal (Rjat e Taparia 1990). A
semente de feno-grego na dieta do búfalo melhora a matéria seca total e o consumo
diário de concentrados, aumentando assim a produção de leite (Degirmencioglu et al.
2016). O feno-grego afeta de forma insignificante os constituintes do leite, como SNF,
proteínas, contagem de células somáticas (SCC), gorduras, etc. (El-Nor et al. 2007;
68
Degirmencioglu et al. 2016). No entanto, uma ligeira redução no teor de gordura do leite,
conforme relatado por alguns pesquisadores, pode estar relacionada ao aumento da
produção de leite (Degirmencioglu et al. 2016). O desempenho aprimorado de ovelhas
após a adição de sementes de feno-grego em sua alimentação também foi relatado
(Ismail 2000).

4.3 Produção de Peixes

Os peixes são considerados uma das melhores e menos caras fontes de carne magra.
Em um estudo de 2010, 16,7% da proteína animal e 6,5% de todas as proteínas
consumidas globalmente vêm de peixes (Barik 2017). Na produção comercial de peixes,
antibióticos e hormônios são cada vez mais adicionados à dieta dos peixes para uma taxa
de crescimento mais rápida e outras finalidades. No entanto, existem regulamentos
rígidos sobre a aplicação de antibióticos e quimioterápicos em alimentos aquáticos devido
à preocupação com a bioacumulação (Lim et al. 2013). Portanto, a substituição de tais
produtos químicos por muitos materiais naturais, como ervas / condimentos, que têm valor
medicinal, deve ser incentivada e praticada. A adição de diferentes porcentagens de
farinha de semente de feno-grego (FSM) na dieta de alevinos de carpa comum resultou
em uma diminuição na taxa de conversão alimentar e uma taxa de crescimento mais
rápida (Roohi et al. 2017).

5. Perfil de Toxicologia e Segurança

Os vários extratos de feno-grego têm sido usados desde os tempos antigos em diferentes
condições médicas de humanos e animais e são geralmente considerados seguros. Os
estudos de toxicidade aguda e subaguda de feno-grego em ratos (até 5 g/kg de peso
corporal) e camundongos (até 2 g/kg de peso corporal) não produziram toxicidade
significativa em nenhum dos sexos (Narasimhamurthy et al. 1999). O LD 50 do extrato
aquoso de feno-grego em camundongos é de 10 g/kg de peso corporal (Abdel-Barry et al.
1997). A administração de um extrato glicosídico por via oral a camundongos por 28 dias
tem um LD50 inferior (4,25 g/kg de peso corporal) (Kandhare et al. 2015). Evidências
recentes sugerem que o feno-grego pode ter efeitos colaterais neurodesenvolvimentais,
neurocomportamentais e neuropatológicos e, portanto, seu consumo deve ser evitado
durante a gravidez e lactação (dados de humanos, roedores, coelhos e pintinhos
revisados em Ouzir et al. 2016).

69
6 – Comentários Finais e Orientações Futuras
Estudos realizados nos últimos anos com feno-grego revelaram seus variados valores
nutritivos e medicinais. O feno-grego, uma fonte rica em proteínas, fibras, vitaminas e
minerais, pode ser oferecido a animais, pássaros e peixes como suplemento alimentar
para melhorar sua saúde e desempenho. As atividades antidiabética, hipoglicêmica,
hipocolesterolêmica, antioxidante, antiulcerogênica, antimicrobiana, anticarcinogênica e
neuroprotetora são alguns dos principais efeitos medicinais exibidos pelo feno-grego. A
substituição de antibióticos e hormônios prejudiciais por feno-grego e/ou outras
plantas/ervas medicinais em rações para animais, aves e peixes tem mostrado benefício
definitivo na tentativa de melhorar a quantidade e qualidade da produção de gado, aves e
peixes. Além disso, os problemas de resíduos de drogas em carne, leite, peixe e ovos e
seus produtos para consumo humano, bem como o desenvolvimento de resistência a
antibióticos que ocorrem principalmente devido ao uso indiscriminado de agentes
antimicrobianos podem ser resolvidos até certo ponto. No entanto, o conhecimento atual
sobre os mecanismos moleculares envolvidos na exibição dos vários efeitos
farmacológicos da maioria dos fitoquímicos bioativos em extratos de feno-grego é
limitado, e mais pesquisas são necessárias para a validação científica dos efeitos
múltiplos, bem como para explorar quaisquer outros potenciais terapêuticos distintos da
erva.

Agradecimentos Os autores agradecem a todos os cientistas, acadêmicos e funcionários da

Divisão de Farmacologia e Toxicologia, Instituto Indiano de Pesquisa Veterinária (IVRI),
Izzatnagar, Bareilly, Índia, por seu apoio e cooperação na conclusão deste capítulo do livro.

Referências
Abdel-Barry JA, Abdel-Hassan IA, Al-Hakiem MH (1997) Hypoglycemic and antihyperglycemic effects of Trigonella
foenum-graecum leaf in normal and alloxan induced diabetic rats. J Ethnopharmacol 58(3):149–155
Acharya SN, Basu SK, Thomas JE (2007) Medicinal properties of fenugreek (Trigonella foenum-graecum L.): a review
of the evidence based information. Adv Med Plant Res:81–122
Adil S, Qureshi S, Pattoo RA (2015) A review on positive effects of fenugreek as feed additive in poultry production. Int
J Poult Sci 14 (12):664–669
Ahmad A, Alghamdi SS, Mahmood K et al (2016) Fenugreek a multipurpose crop: potentialities and improvements.
Saudi J Biol Sci 23 (2):300–310
Ahmed SI, Hayat MQ, Zahid S et al (2017) Isolation and identification of flavonoids from anticancer and
neuroprotective extracts of Trigonella foenum graecum. Trop J Pharm Res 16(6):1391–1398
Ajabnoor MA, Tilmisany AK (1988) Effect of Trigonella foenum graceum on blood glucose levels in normal and alloxan-
diabetic mice. J Ethnopharmacol 22(1):45–49
Alloui N, Aksa SB, Alloui MN et al (2012) Utilization of fenugreek (Trigonella foenum-graecum) as growth promoter for
broiler chickens. J World Poult Res 2(2):25–27
Alsemari A, Alkhodairy F, Aldakan A et al (2014) The selective cytotoxic anti-cancer properties and proteomic analysis
of Trigonella foenum-graecum. BMC Complement Altern Med 14(1):114
Altuntaş E, Özgöz E, Taşer ÖF (2005) Some physical properties of fenugreek (Trigonella foenum-graceum L.) seeds. J
Food Eng 71 (1):37–43
Anarthe SJ, Sunitha D, Raju MG (2014) Immunomodulatory activity for methanolic extract of Trigonella foenum
graecum whole plant in wistar albino rats. Am J Phytomed Clin Ther 2(9):1081–1092

70
 Association of Official Analytical Chemists (A.O.A.C) (1990) Official methods of analysis, 15th edn. Association of
Official Analytical Chemists, Washington, DC
Barik NK (2017) Freshwater fish for nutrition security in India: evidence from FAO data. Aquacult Rep 7:1–6
Beaud D, Tailliez P, Anba-Mondoloni J (2005) Genetic characterization of the β-glucuronidase enzyme from a human
intestinal bacterium, Ruminococcus gnavus. Microbiology 151(7):2323–2330
Belaïd-Nouira Y, Bakhta H, Haouas Z et al (2013a) Fenugreek seeds, a hepatoprotector forage crop against chronic
AlCl3 toxicity. BMC Vet Res 9(1):22
Belaïd-Nouira Y, Bakhta H, Haouas Z et al (2013b) Fenugreek seeds reduce aluminum toxicity associated with renal
failure in rats. Nutr Res Pract 7(6):466–474
Benzie IF, Wachtel-Galor S (2011) Herbal medicine: biomolecular and clinical aspects, 2nd edn. CRC Press, Boca
Raton, FL, p 410
Betty R (2008) The many healing virtues of fenugreek. Spice India 1:17–19
Bhalke RD, Anarthe SJ, Sasane KD et al (2009) Antinociceptive activity of Trigonella foenum graecum leaves and
seeds (Fabaceae). Int J Pharm Technol 8(2):57–59
Bhat BG, Sambaia K, Chandrasekhara N (1985) The effect of feeding fenugreek and ginger on bile composition in the
albino rats. Nutr Rep Int 32:1145–1151
Bin-Hafeez B, Haque R, Parvez S et al (2003) Immunomodulatory effects of fenugreek (Trigonella foenum graecum L.)
extract in mice. Int Immunopharmacol 3(2):257–265
Boban PT, Nambisan B, Sudhakaran PR (2009) Dietary mucilage promotes regression of atheromatous lesions in
hypercholesterolemic rabbits. Phytother Res 23(5):725–730
Booupathy LK, Venkatachalam S, Natarajan N (2016) Chemopreventive effect of myrtenal on bacterial enzyme activity
and the development of 1, 2-dimethyl hydrazine-induced aberrant crypt foci in Wistar rats. J Food Drug Anal 24(1):206–
213
Buchineni M, Kondaveti S (2016) In-vitro anthelmintic activity of fenugreek leaves (aqueous extract) in Indian
earthworms. Pharm Innov J 5(4, Part B):70–72
Chatterjee S, Variyar SP, Sharma A (2010) Bioactive lipid constituents of fenugreek. Food Chem 119(1):349–353
Chen X, Guo C, Kong J (2012) Oxidative stress in neurodegenerative diseases. Neural Regen Res 7(5):376–385
Corey KE, Cohen DE (2015) Lipid and lipoprotein metabolism in liver disease. In: De Groot LJ, Chrousos G, Dungan
K, et al. (ed) Endotext (Internet), MDText.com, Inc., South Dartmouth, MA, 2000-.
(Updated 2015 Jun 27). Available from https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK326742
Dangi R, Misar A, Tamhankar S, Rao S (2014) Diosgenin content in some Trigonella species. Indian J Adv Plant Res
1:47–51
Degirmencioglu T, Unal H, Ozbilgin S et al (2016) Effect of ground fenugreek seeds (Trigonella foenum-graecum) on
feed consumption and milk performance in Anatolian water buffaloes. Arch Anim Breed 59(3):345–349
Devasena T, Menon VP (2003) Fenugreek affects the activity of β-glucuronidase and mucinase in the colon. Phytother
Res 17 (9):1088–1091
Dixit P, Ghaskadbi S, Mohan H et al (2005) Antioxidant properties of germinated fenugreek seeds. Phytother Res
19(11):977–983
Dymock W, Warden CJH, Hooper D (2005) Pharmacographic indica. Srishti Book Distributors, New Delhi, pp 401–404
Edison S (1995) Spices-research support to productivity. In: Ravi N (ed) The Hindu. survey of Indian agriculture.
Kasturi and Sons Ltd., Madras, pp 101–105
Elbushra ME (2012) Effect of dietary Fenugreek seeds (Trigonella foenum) as natural feed addition on broiler chicks
performance. J Sci Technol 13:27–31
El-Nor SAH, Khattab HM, Al-Alamy HA et al (2007) Effects of some medicinal plants seeds in the rations on the
productive performance of lactating buffaloes. Int J Dairy Sci 2:348–355
El-Shayeb NMA, Mabrouk AM (1984) Utilization of some edible and medicinal plants to inhibit aflatoxin formation. Nutr
Rep Int 29:273–282
Figer B, Pissurlenkar R, Ambre P et al (2017) Treatment of gastric ulcers with fenugreek seed extract; In-Vitro, In-Vivo
and In-Silico approaches. Indian J Pharm Sci 79(5):724–730
Francis G, Kerem Z, Makkar PS et al (2002) The biological action of saponins in animals systems: a review. Br J Nutr
88(6):587–605
Ghafagaai T, Farid H, Pourafkari A (1980) In-vitro study of the anthelmintic action of Trigonella foenum graecum L.
grown in Iran. Iran J Publ Health 9(1–4):21–26
Gupta A, Gupta R, Lal B (2001) Effect of Trigonella foenum-graecum (fenugreek) seeds on glycaemic control and
insulin resistance in type 2 diabetes. J Assoc Physicians India 49:1057–1061
Hamden K, Masmoudi H, Carreau S et al (2010) Immunomodulatory, β-cell, and neuroprotective actions of fenugreek
oil from alloxaninduced diabetes. Immunopharmacol Immunotoxicol 32(3):437–445
Haouala R, Hawala S, El-Ayeb A et al (2008) Aqueous and organic extracts of Trigonella foenum-graecum L. inhibit the
mycelia growth of fungi. J Environ Sci (China) 20(12):1453–1457
Ismail A (2000) Effect of fenugreek seeds (Trigonella Foenum-graecum L.) as feed additive on sheep performance in
the North Western coast of Egypt. In: Proc 3rd all Africa Conf. Anim. Agric. 811th Conf, Egyptian Soc. Anim. Prod.
Alexandria, Egypt, pp 6–9

71
 Jin Y, Shi Y, Zou Y et al (2014) Fenugreek prevents the development of STZ-induced diabetic nephropathy in a rat
model of diabetes. Evid Based Complement Alternat Med 2014. https://doi.org/10.1155/2014/259368
Kagan BL, Selsted ME, Ganz T, Lehrer RI (1990) Antimicrobial defensin peptides form voltage-dependent ion-
permeable channels in planar lipid bilayer membranes. Proc Natl Acad Sci 87 (1):210–214
Kalailingam P, Kannaian B, Tamilmani E et al (2014) Efficacy of natural diosgenin on cardiovascular risk, insulin
secretion, and beta cells in streptozotocin (STZ)-induced diabetic rats. Phytomedicine 21(10):1154–1161
Kalshetti PB, Alluri R, Mohan V et al (2015) Effects of 4-hydroxyisoleucine from fenugreek seeds on depression-like
behavior in socially isolated olfactory bulbectomized rats. Pharmacogn Mag 11(Suppl 3):S388
Kamboj SS, Chopra K, Sandhir R (2009) Hyperglycemia-induced alterations in synaptosomal membrane fluidity and
activity of membrane bound enzymes: beneficial effect of N-acetylcysteine supplementation. Neuroscience 162(2):349–
358
Kanchan DM, Somani GS, Peshattiwar VV et al (2016) Renoprotective effect of diosgenin in streptozotocin induced
diabetic rats. Pharmacol Rep 68(2):370–377
Kandhare AD, Bodhankar SL, Mohan V et al (2015) Acute and repeated doses (28 days) oral toxicity study of
glycosides based standardized fenugreek seed extract in laboratory mice. Regul Toxicol Pharmacol 72(2):323–334
Kaviarasan S, Anuradha CV (2007) Fenugreek (Trigonella foenum graecum) seed polyphenols protect liver from
alcohol toxicity: a role on hepatic detoxification system and apoptosis. Pharmazie 62 (4):299–304
Kaviarasan S, Ramamurty N, Gunasekaran P et al (2006) Fenugreek (Trigonella foenum graecum) seed extract
prevents ethanol-induced toxicity and apoptosis in Chang liver cells. Alcohol Alcohol 41 (3):267–273
Kaviarasan S, Naik GH, Gangabhagirathi R et al (2007) In-vitro studies on antiradical and antioxidant activities of
fenugreek (Trigonella foenum graecum) seeds. Food Chem 103(1):31–37
Khader M, Eckl PM, Bresgen N (2007) Effects of aqueous extracts of medicinal plants on MNNG-treated rat
hepatocytes in primary cultures. J Ethnopharmacol 112(1):199–202
Khadse CD, Kakde RB (2010) In-vitro anthelmintic activity of Fenugreek seeds extract against Pheritima posthuma. Int
J Res Pharm Sci 1(3):267–269
Khorshidian N, Yousefi Asli M, Arab M et al (2016) Fenugreek: potential applications as a functional food and
nutraceutical. Nutr Food Sci Res 3(1):5–16
Kirtikar KR, Basu BD (2002) Indian medicinal plants, vol I. International Book Distributors, Dehradun, India, pp 700–
701
Kirtikar KR, Basu BD (2003) Indian medicinal plants with illustrations, vol 3, 2nd edn. Oriental Enterprises, Dehradun,
India, pp 982–983
Ktari N, Trabelsi I, Bardaa S et al (2017) Antioxidant and hemolytic activities, and effects in rat cutaneous wound
healing of a novel polysaccharide from fenugreek (Trigonella foenum-graecum) seeds. Int J Biol Macromol 95:625–634
Lepage C, Léger DY, Bertrand J et al (2011) Diosgenin induces death receptor-5 through activation of p38 pathway
and promotes TRAILinduced apoptosis in colon cancer cells. Cancer Lett 30(2):193–202
Li F, Fernandez PP, Rajendran P et al (2010) Diosgenin, a steroidal saponin, inhibits STAT3 signaling pathway leading
to suppression of proliferation and chemosensitization of human hepatocellular carcinoma cells. Cancer Lett 292(2):197–
207
Lim SJ, Jang E, Lee SH et al (2013) Antibiotic resistance in bacteria isolated from freshwater aquacultures and
prediction of the persistence and toxicity of antimicrobials in the aquatic environment. J Environ Sci Health 48(6):495–
504
Liu MJ, Wang Z, Ju Y et al (2005) Diosgenin induces cell cycle arrest and apoptosis in human leukemia K562 cells with
the disruption of Ca2+ homeostasis. Cancer Chem Pharmacol 55(1):79–90
Luan G, Wang Y, Wang Z et al (2018) Flavonoid glycosides from fenugreek seeds regulate glycolipid metabolism by
improving mitochondrial function in 3T3-L1 adipocytes in vitro. J Agric Food Chem 66:3169–3178
Lust JB (1986) The herb book. Bantam Books Inc, New York, pp1–55
Madar Z, Shomer IJ (1990) Polysaccharide composition of a gel fraction derived from fenugreek and its effect on
starch digestion and bile acid absorption in rats. J Agric Food Chem 38(7):1535–1539
Mahady GB (2009) Medicinal plants for the prevention and treatment of coronary heart disease. Ethnopharmacology
II:75–99
Malviya KG, Babhulkar MW, Mali P et al (2010) Evaluation of antiinflammatory potential of Trigonella foenum-graecum
(fenugreek) seed extracts by using carrageenan induced rat paw edema. Drug Invent Today 2(2):109–111
Mathern JR, Raatz SK, Thomas W et al (2009) Effect of fenugreek fiber on satiety, blood glucose and insulin response
and energy intake in obese subjects. Phytother Res 23(11):1543–1548
Meghwal M, Goswamy TK (2012) A review on the functional properties, nutritional content, medicinal utilization and
potential application of fenugreek. J Food Process Technol 3:9
Mendis S, Puska P, Norrving B et al (2011) Global atlas on cardiovascular disease prevention and control. World
Health Organization, Geneva, pp 3–18
Mercan N, Guvensen A, Celik A et al (2007) Antimicrobial activity and pollen composition of honey samples collected
from different provinces in Turkey. Nat Prod Res 21(3):187–195
Mesallam DI, Hamid OIA, Ibrahem NE (2018) Ethanolic extract of fenugreek seeds moderates dimethoate-induced
pancreatic damage in male rats. Environ Sci Pollut Res 25(4):3894–3904

72
 Mir Z, Mir PS, Acharya SN et al (1998) Comparison of alfalfa and fenugreek (Trigonella foenum-graecum) silages
supplemented with barley grain on performance of growing steers. Can J Anim Sci 78 (3):343–349
Moghadam FH, Vakili-Zarch B, Shafiee M et al (2013) Fenugreek seed extract treats peripheral neuropathy in
pyridoxine induced neuropathic mice. Excli J 12:282–290
Moradi N, Moradi K (2013) Physiological and pharmaceutical effects of fenugreek (Trigonella foenum-graecum L.) as a
multipurpose and valuable medicinal plant. Global J Med Plant Res 1(2):199–206
Muhammed DO, Salih NA (2012) Effect of application of Fenugreek (Trigonella foenum-graecum) on skin wound
healing in rabbits. AL-Qadisiya J Vet Med Sci 11(2):86–93
Muraki E, Hayashi Y, Chiba H et al (2011) Dose-dependent effects, safety and tolerability of fenugreek in diet-induced
metabolic disorders in rats. Lipids Health Dis 10(1):240
Naicker N, Nagiah S, Phulukdaree A et al (2016) Trigonella foenumgraecum seed extract, 4- hydroxyisoleucine, and
metformin stimulate proximal insulin signaling and increase expression of glycogenic enzymes and GLUT2 in HepG2
cells. Metab Syndr Relat Disord 14 (2):114–120
Narasimhamurthy K, Viswanatha S, Ramesh BS (1999) Acute and subchronic toxicity assessment of debitterized
fenugreek powder in the mouse and rat. Food Chem Toxicol 37(8):831–838
Narender T, Puri A, Khaliq T et al (2006) 4-Hydroxyisoleucine an unusual amino acid as antidyslipidemic and
antihyperglycemic agent. Bioorg Med Chem Lett 16(2):293–296
Norziah MH, Fezea FA, Bhar R et al (2015) Effect of extraction solvents on antioxidant and antimicrobial properties of
fenugreek seeds (Trigonella foenum-graecum L.). Int Food Res J 22(3): 1261–1271
Oddepally R, Guruprasad L (2015) Isolation, purification, and characterization of a stable defensin-like antifungal
peptide from Trigonella foenum-graecum (fenugreek) seeds. Biochem (Moscow) 80(3):332–342
Olaiya CO, Soetan KO (2014) A review of the health benefits of fenugreek (Trigonella foenum-graecum L.): nutritional,
Biochemical and pharmaceutical perspectives. Am J Soc Issues Human:3–12
Ou S, Kwok KC, Li Y et al (2001) In-vitro study of possible role of dietary fiber in lowering postprandial serum glucose.
J Agr Food Chem 49(2):1026–1029
Ouzir M, El Bairi K, Amzari S (2016) Toxicological properties of fenugreek (Trigonella foenum graecum). Food Chem
Toxicol 96:145–154
Pandian RS, Anuradha CV, Viswanathan P (2002) Gastroprotective effect of fenugreek seeds (Trigonella foenum
graecum) on experimental gastric ulcer in rats. J Ethnopharmacol 81(3):393–397
Pekiner DB, Evcimen DN, Nebioğlu S (2005) Diabetes-induced decrease in rat brain microsomal Ca2+-ATPase
activity. Cell Biochem Funct 23(4):239–243
Petit P, Sauvaire Y, Ponsin G et al (1993) Effects of a fenugreek seed extract on feeding behaviour in the rat: metabolic
endocrine correlates. Pharmacol Biochem Behav 45(2):369–374
Petit PR, Sauvaire YD, Hillaire-Buys DM et al (1995) Steroid saponins from fenugreek seeds: extraction, purification,
and pharmacological investigation on feeding behavior and plasma cholesterol. Steroids 60(10):674–680
Preet A, Gupta BL, Siddiqui MR et al (2005) Restoration of ultrastructural and biochemical changes in alloxan-induced
diabetic rat sciatic nerve on treatment with Na3VO4 and Trigonella—a promising antidiabetic agent. Mol Cell Biochem
278(1–2):21–31
Prema A, Justin Thenmozhi A, Manivasagam T et al (2017) Fenugreek seed powder attenuated aluminum chloride-
induced tau pathology, oxidative stress, and inflammation in a rat model of Alzheimer’s disease. J Alzheimer’s Dis
60(s1):S209–S220
Pribac G, Ardelean A, Czapar M et al (2009) Trigonella foenumgraecum and Trigonella policreata seeds extract exert a
protective action of alcohol toxicity in BRL3A rat liver cells. Stud Univ Vasile Goldis Arad Stiintele Vietii 19(1):87–93
Priya V, Jananie RK, Vijayalakshmi K (2011) GC/MS determination of bioactive components of Trigonella foenum-
grecum. J Chem Pharm Res 3(5):35–40
Raju J, Gupta D, Rao AR et al (2001) Trigonella foenum graecum (fenugreek) seed powder improves glucose
homeostasis in alloxan diabetic rat tissues by reversing the altered glycolytic, gluconeogenic and lipogenic enzymes. Mol
Cell Biochem 224(1–2):45–51
Raju J, Patlolla JMR, Swamy MV et al (2004) Diosgenin, a steroid saponin of Trigonella foenum graecum (Fenugreek),
inhibits azoxymethane-induced aberrant crypt foci formation in F344 rats and induces apoptosis in HT-29 human colon
cancer cells. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev 13(8):1392–1398
Randhir R, Lin YT, Shetty K (2004) Phenolics, their antioxidant and antimicrobial activity in dark germinated fenugreek
sprouts in response to peptide and phytochemical elicitors. Asia Pac J Clin Nutr 13(3):295–307
Rao AV (2003) Herbal cure for common diseases. Fusion Books, New Delhi
Rashmi Y, Rahul K (2011) Study of phytochemical constituents and pharmacological actions of Trigonella foenum-
graecum: a review. Int J Pharm Technol 3:1022–1028
Reddy RR, Srinivasan K (2011) Hepatoprotective and antioxidant effect of fenugreek (Trigonella foenum-graecum)
seeds in mice under lithogenic condition. J Food Biochem 35(6):1619–1626
Rjat H, Taparia A (1990) Utilization of methi straw by cattle. Indian J Anim Sci 60(11):1380–1381
Roberts KT (2011) The potential of fenugreek (Trigonella foenumgraecum) as a functional food and nutraceutical and
its effects on glycemia and lipidemia. J Med Food 14(12):1485–1489
Roohi Z, Imanpoor MR, Jafari V et al (2017) The use of fenugreek seed meal in fish diets: growth performance,
haematological and biochemical parameters, survival and stress resistance of common carp (Cyprinus carpio L.). Aquac
Res 48(3):1209–1215
73
 Saber B, Abdeldjelil MC, Benazzouz H et al (2017) Fenugreek (Trigonella foenum-graecum): an alternative antistress
in broiler chickens in Algeria. Der Pharm Lett 9(1):64–69
Sauvaire Y, Ribes G, Baccou JC et al (1991) Implication of steroid saponins and sapogenins in the
hypocholesterolemic effect of fenugreek. Lipids 26(3):191–197
Sauvaire Y, Petit P, Broca C et al (1998) 4-Hydroxyisoleucine: a novel amino acid potentiator of insulin secretion.
Diabetes 47(2):206–210
Saxena R, Rathore SS, Barnwal P et al (2013) Effect of cryogenic grinding on recovery of diosgenin content in
fenugreek (Trigonella foenum-graecum L.) genotypes. Int J Seed Spices 3(1):26–30
Shabbeer S, Sobolewski M, Anchoori RK et al (2009) Fenugreek: a naturally occurring edible spice as an anticancer
agent. Cancer Biol Ther 8(3):272–278
Sharma RD, Sarkar A, Hazra DK et al (1996) Hypolipidemic effect of fenugreek seeds: a chronic study in non-insulin
dependent diabetic patients. Phytother Res 10(4):332–334
Sharma V, Singh P, Rani A (2017) Antimicrobial activity of Trigonella foenum-graecum L. (Fenugreek). Eur J Exp Biol
7(1):4
Shishodia S, Aggarwal BB (2006) Diosgenin inhibits osteoclastogenesis, invasion, and proliferation through the
downregulation of Akt, IκBα e AMPK. Esses dadosB kinase activation and NF-κBα e AMPK. Esses dadosB-regulated gene expression. Oncogene 25(10):1463–1473
Son IS, Kim JH, Sohn HY et al (2007) Antioxidative and hypolipidemic effects of diosgenin, a steroidal saponin of yam
(Dioscorea spp.), on high-cholesterol fed rats. Biosci Biotechnol Biochem 71 (12):3063–3071
Sowmya P, Rajyalakshmi P (1999) Hypocholesterolemic effect of germinated fenugreek seeds in human subjects.
Plant Food Hum Nutr 53(4):359–365
Srinivasan K (2006) Fenugreek (Trigonella foenum-graecum): a review of health beneficial physiological effects. Food
Rev Int 22 (2):203–224
Sumitra M, Manikandan P, Suguna L et al (2000) Study of dermal wound healing activity of Trigonella foenum graceum
seeds in rats. J Clin Biochem Nutr 28(2):59–67
Tavakoli MB, Kiani A, Roayaei M (2015) The effects of fenugreek on radiation induced toxicity for human blood T-cells
in radiotherapy. J Med Signals Sens 5(3):176
Thirunavukkarasu V, Anuradha CV (2007) Gastroprotective effect of fenugreek seeds (Trigonella foenum graecum) on
experimental gastric ulcer in rats. J Herbs Spices Med Plants 12(3):13–25
Tiran D (2003) The use of fenugreek for breast feeding woman. Comp Ther Nurs Midwifery 9(3):155–156
Tripathi S, Maurya AK, Kahrana M et al (2012) Immunomodulatory property of ethanolic extract of Trigonella foenum-
graecum leaves on mice. Der Pharm Lett 4(2):708–713
Uemura T, Hirai S, Mizoguchi N et al (2010) Diosgenin present in fenugreek improves glucose metabolism by
promoting adipocyte differentiation and inhibiting inflammation in adipose tissues. Mol Nutr Food Res 54(11):1596–1608
Venkata KCN, Bagchi D, Bishayee A (2017) A small plant with big benefits: fenugreek (Trigonella foenum-graecum
Linn.) for disease prevention and health promotion. Mol Nutr Food Res 61(6). https://doi.org/10.1002/mnfr.201600950
Wagh P, Rai M, Deshmukh SK et al (2007) Bio-activity of oils of Trigonella foenum-graecum and Pongamia pinnata. Afr
J Biotechnol 6(13):1592–1596
Wani SA, Kumar P (2016) Fenugreek: a review on its nutraceutical properties and utilization in various food products. J
Saudi Soc Agric Sci 17(2):97–106
Yadav S, Sehgal S (1997) Effect of home processing and storage on ascorbic acid and β-carotene content of bathua
(Chenopodium album) and fenugreek (Trigonella foenum graecum) leaves. Plant Food Hum Nutr 50(3):239–247
Yadav R, Kaushik R, Gupta D (2011) The health benefits of Trigonella foenum-graecum: a review. Int J Eng Res Appl
1(1):32–35
Yesuf K, Mersso B, Bekele T (2017) Effects of different levels of turmeric, fenugreek and black cumin on carcass
characteristics of broiler chicken. J Livestock Sci 8:11–17. ISSN: 2277-6214
Yoshikawa T, Toyokuni S, Yamamoto Y et al (2000) Free radicals in chemistry biology and medicine. OICA
International, London, p 580
Zafar MI, Gao F (2016) 4-Hydroxyisoleucine: a potential new treatment for type 2 diabetes mellitus. BioDrugs
30(4):255–262
Zhou J, Chan L, Zhou S (2012) Trigonelline: a plant alkaloid with therapeutic potential for diabetes and central nervous
system disease. Curr Med Chem 19(21):3523–3531
Żuk-Gołaszewska K, Wierzbowska J (2017) Fenugreek: productivity, nutritional values and uses. J Elementol
22(3):1067–1080

74
 Extrato de Neem
Anu Rahal, Dinesh Kumar, and Jitendra K. Malik

Resumo
Neem se tornou o centro de referência do estilo de vida moderno e encontra amplo uso na
medicina ayurvédica, unani e homeopática. Elabora uma vasta coleção de compostos
bioativos quimicamente diversos e estruturalmente complexos que apresentam
propriedades imunomoduladoras e anti -inflamatórias, -hiperglicêmicas, -úlcera, -
maláricas, -fúngicas, -bacterianas, -virais, -oxidantes, -mutagênicas -carcinogênicas. As
folhas são um alimento habitual para ruminantes em terras áridas; as sementes são uma
fonte rica em ácidos graxos e proteínas, mas permanecem amplamente inexploradas
devido aos princípios tóxicos amargos nelas presentes. Se os princípios tóxicos puderem
ser reduzidos substancialmente, a toxicidade das partes do neem pode ser superada e
suas diferentes partes podem ser totalmente utilizadas como um excelente nutracêutico.
Sua bioatividade, segurança do gado e temperamento ecológico são bastante
encorajadores para prospectar seu futuro brilhante no campo dos nutracêuticos.

Palavras-chave: Neem · Folhas · Grão · Semente · Óleo de Neem · Ração animal ·

Segurança

A. Rahal - Division of Animal Health, ICAR-Central Institute for Research on Goats, Mathura, Uttar Pradesh,
India
D. Kumar - Division of Pharmacology and Toxicology, Indian Veterinary Research Institute, Bareilly, Uttar
Pradesh, India
J. K. Malik - Division of Pharmacology and Toxicology, Indian Veterinary Research Institute, Dehradun,
Uttarakhand, India

1. Introdução
Neem (Azadirachta indica; família, Meliaceae; subfamília, Meliodeae; ordem, Meliales) é
uma árvore perenifólia não lenhosa nativa do subcontinente indiano. Ela cresce
amplamente em quase todos os tipos de solos, incluindo salinos e alcalinos e outras
terras devastadas em vários países da Ásia, Austrália, África e América Central e do Sul.
É, portanto, muito utilizado em programas de arborização, principalmente em regiões
semiáridas, e cresce larga para plantações ornamentais e agroflorestais ou como sombra
de beira de estrada. É uma árvore de crescimento rápido, às vezes até 30 metros de
altura, com galhos exuberantes, e permanece verde durante todo o ano. Com uma idade
de 2–3 anos, ele dá flores brancas, que cheiram a mel, e frutas 1–2 anos depois. As frutas

75
são verdes quando cruas, amarelando após o amadurecimento e aromáticas com odor de
alho. Os frutos maduros são drupas amarelas, elipsóides e glabras, com 12–20 mm de
comprimento. Folhas e flores frescas vêm de março a abril. Os frutos amadurecem entre
abril e agosto, dependendo dos fatores ambientais.

Neem é comumente conhecido como dispensário de aldeia da Índia. Possui alto valor
devido às suas propriedades medicinais e inseticidas nos sistemas de medicamentos
ayurvédicos e Unani. Cada parte do neem (folha, flor, fruto, semente, casca do caroço,
raiz, madeira, galho e óleo) e seus produtos fracionados possuem propriedades curativas
e encontram lugar nos remédios tradicionais. As Nações Unidas declararam a árvore de
nemm como a “Árvore do século 21”, enquanto em um relatório publicado em 1992, a
Academia Nacional de Ciências dos Estados Unidos a designou como “Neem: uma árvore
da solução de problemas globais”. A literatura europeia “Matéria médica” também
considera o neem como “Panacéia de todas as doenças”. Neem encontra uso variado em
setores ecológicos, medicinais e agrícolas, incluindo ração animal, medicamentos,
indústria de sabão, inibição de nitrificação, esterco de liberação lenta de nutrientes,
combustível, energia, controle de pragas, etc. Um grande número de produtos de saúde e
controle de pragas à base de neem têm desenvolvido no mercado internacional. O
conteúdo da planta do Neem é bioinseticida eficaz e útil no controle de muitas espécies
de insetos de importância médica e veterinária, como os piolhos e o mosquito Anopheles.
Devido às suas características de atividade diversa e segurança relativa aos organismos
não-alvo, hoje, o neem está sendo reconhecido como a fonte mais importante de
biopesticidas e produtos associados. A pesquisa médica tem se concentrado,
ultimamente, em suas aplicações como espermicida e no tratamento da sarna, embora a
propriedade anticarcinogênica da árvore também tenha recebido atenção.

2. Extrato de Neem
Diversas técnicas cromatográficas, como cromatografia em coluna simples, cromatografia
preparativa em camada fina, cromatografia líquida a vácuo e cromatografia líquida
preparativa de média ou alta pressão de fase reversa, foram descritas na literatura para
isolar princípios bioativos do neem em escala industrial. Dependendo do uso final,
diferentes tipos de procedimentos de extração são realizados para diferentes partes da
planta. A escolha do solvente e do método depende do composto a ser concentrado. As
tecnologias para a preparação de concentrados de azadiractina de vários níveis de
concentração foram desenvolvidas para uso doméstico e industrial. Os métodos indígenas
incluem extração aquosa, maceração a frio, destilação a vapor e extração com solvente
76
orgânico. A maceração é um processo de extração a frio de grãos desengordurados por
imersão em metanol com agitação intermitente por 3 dias, após o qual é filtrado e o
solvente evaporado sob vácuo para obtenção do extrato bruto seco. Na extração por
agitação em lote, um pellet magnético é colocado no frasco e a mistura é agitada por 8 h
em uma placa de agitador magnético, seguido por secagem a vácuo para obter o extrato
bruto.

Um único fruto de neem maduro semeado contém 23,8% de casca, 47,5% de polpa,
18,6% de casca e 10,1% de caroço. A semente despolpada e descoutada rende cerca de
26% de kernel, o que dá 45–50% de óleo, deixando o resto como bolo de kernel de
caraço (NKC). O NKC é preparado mergulhando os frutos secos do neem em água por 3–
4 dias e despolpando com máquina de despolpador. As sementes são então secas por 7
dias antes de serem decorticadas em uma máquina de triturar e, em seguida, esmagadas
após uma nova secagem por 3 dias (Bawa et al. 2007). O NKC também pode ser
preparado espalhando o fruto do neem ao sol por 15 dias e depois mergulhando em água
por 3 dias, seguido de despolpa. As sementes despolpadas são lavadas e secas ao sol
por um período de 10 dias. As sementes secas são decorticadas, posteriormente secas
por 5 dias e trituradas, seguido pela remoção manual do óleo para produzir a torta de
caroço de neem (Aruwayo 2011).

Outro método de preparação do NKC é espalhar as sementes ao sol para obter um peso
constante. As sementes secas são embebidas em água em uma bacia aberta por 72 h. As
sementes são colocadas em um saco de juta para drenar a água e posteriormente secas
ao sol até peso constante. Em seguida, as sementes embebidas em água e as não
tratadas são moídas separadamente para a extração do óleo. A torta obtida na extração
do óleo é então moída em um moinho de martelos.

NKC é intragável em bezerros (Bedi et al. 1975), touros mestiços (Ananthasubramainiam

et al. 1979) e ovelhas (Gupta e Bhaid 1980) devido ao seu sabor amargo e odor
pungente, mas possui antiparasitário (Ogbuewu et al. 2011a), inseto repelente, inibidores
de crescimento e outras propriedades inseticidas. Os princípios bioativos são ligeiramente
hidrofílicos, mas livremente lipofílicos e altamente solúveis em solventes orgânicos como
hidrocarbonetos, álcoois, cetonas e ésteres (Schmutterer 1995; NRC 1992). Existem
vários métodos de remoção do óleo da torta de sementes de neem. Para expelir NKC, o
grão triturado é cozido no vapor e o óleo é extraído com uma máquina de expulsão. O
processamento NKC por prensa hidráulica é desprovido de calor. O kernel moído é
prensado a frio usando a máquina de prensa hidráulica até que o teor de óleo do resíduo
(torta) seja mínimo. O NKC pode ser ainda mais desengordurado usando hexano.
77
Para facilitar a aceitação do NKC como ração animal, a remoção do amargor dos
bioativos dos grãos de neem é essencial e pode ser feita usando técnicas simples como:

• Extração em água: Esta é a técnica mais simples de triturar ou moer os grãos e extraí-
los com água. Eles podem ser mergulhados durante a noite em um saco de pano
suspenso em um barril de água, ou água pode ser despejada no saco e o extrato pode
ser coletado assim que emergir. Usando a extração em água, estimou-se que sementes
de neem de 20-30 kg podem normalmente tratar um hectare de terra.

• Extração em hexano: os grãos são ralados e mergulhados no solvente hexano para

extrair apenas óleo. O resíduo deixado após a extração com hexano ainda contém
ingredientes ativos limonóides, e a subsequente extração com água ou álcool produz
limonóides limpos não contaminados por óleo.

• Extração em álcool: É o processo mais curto para a geração de pesticidas à base de

neem na forma concentrada. Limonóides são altamente solúveis em álcool. Os grãos
ralados são geralmente embebidos em etanol, mas às vezes também se usa metanol. Ele
extrai os ingredientes ativos na faixa de 0,2–6,2%.

Além dessas técnicas, outras tentativas podem ser feitas para remover os princípios
amargos do bolo para melhorar a palatabilidade. O óleo do NKC triturado pode ser
extraído usando solvente orgânico de alta polaridade misturado com água. Outros
métodos incluem tratamento com álcool e tratamento alcalino (0,8% de hidróxido de
sódio, p/p) junto com fervura aquosa (na proporção de 1:2,5 p/v) do bolo seguido de
lavagem com água e drenagem. Dentre esses vários métodos usados para desintoxicar o
NKC, a lavagem com água é mais eficaz, apesar da perda de 22% de matéria seca. Para
evitar essa perda de matéria seca da lavagem com água, NKC tratado com álcali (20 g de
hidróxido de sódio/kg de bolo, p/p) sem lavagem também é bastante palatável para
bovinos adultos e búfalos (Katiyar et al. 1993), futuro promissor na alimentação de
bezerros búfalos, cordeiros Uda e carneiros (Aruwayo 2011).

3. Fitoconstituintes
Neem é uma fonte de vários triterpenóides bioativos incluindo azadiractina, nimbina,
nimbinina, nimbidina, 6-desacetilnimbina, salanino e beta sitosterol (Dasgupta et al. 2004).
O composto mais biologicamente ativo é a azadiractina, que na verdade é uma mistura de
sete compostos isoméricos rotulados como azadiractina A – G, dos quais a azadiractina E
é mais eficaz (Verkerk e Wright 1993). Outros compostos que possuem atividade biológica
são salanino, óleos voláteis, meliantriol e nimbina (NRC 1992).
78
Os grãos de neem contêm 30–50% de óleo rico em triterpeno ou limonóides usados
principalmente pelas indústrias de sabão, pesticidas e farmacêutica (Djenontin et al.
2012). Os quatro melhores compostos limonóides são azadiractina, salannin, meliantriol e
nimbin. Limonóides contêm atividade inseticida e pesticida. A semente também contém
ácido tígnico responsável pelo odor característico do óleo (Sharma et al. 2011).

O pó da casca contém proteínas, açúcar, aminoácidos e óleo (Subramanian e

Lakshmanan 1996). O extrato da casca também é rico em fenóis, esterol insaturado,
triterpeno (incluindo diterpenóides, limonóides, cseco-meliacinas, csecolimonóides, etc.) e
saponina. Polissacarídeos como arabinofucoglucanos e fucogalactoglucoarabinanos
também foram isolados (Fujiwara et al. 1984). Flavonóides, flavonolglicosídeos,
dihidrocalconas, taninos e outros também são constituintes importantes da casca, folhas,
frutos e flores do neem.

4. Usos medicinais
A literatura indígena indica aplicações de várias partes do neem como ração e em um
grande número de prescrições e formulações para fornecer cobertura de saúde para o
gado em várias formas. Os irmãos Pandava Nakul e Sahadev usaram neem para tratar
cavalos e elefantes doentes e feridos usando cataplasmas preparadas com folhas de
neem e óleo, durante a batalha de Mahabharata. Várias preparações de neem foram
padronizadas na forma de pós, óleos, líquidos e linimentos. Foi constatado que várias
preparações obtidas de diferentes partes do neem exercem atividades antibacteriana,
antiviral, antimalárica, antioxidante, antifúngica, antimutagênica, anticarcinogênica,
antiinflamatória, contraceptiva e antiúlcera (Subapriya e Nagini 2005). A azadiractina
interrompe a metamorfose das larvas dos insetos e é, portanto, usada como um
impedimento alimentar (NRC 1992). A nimbidina é bastante eficaz no tratamento de
doenças de pele como eczema, furunculose, dermatite arsênica, sarna e dermatite
seborréica (Dasgupta et al. 2004). Extratos de folhas, sementes e cascas de neem
também atuam como inibidores de nitrificação (Abbasi et al. 2011).

4.1 Doenças bacterianas

O óleo de neem é eficaz contra um amplo espectro de bactérias, como Staphylococcus

aureus, Bacillus cereus, Bacillus pumilus, Escherichia coli, Pasteurella vulgaris,
Mycobacterium tuberculosis, Klebsiella pneumoniae, Salmonella typhi, Salmonella
dysenteriae, Enterococcus faeceptoccus muteocus, Streptoceptocius,
Streptoceptoceptocus, Streptococcus sanguis e mesmo cepas resistentes à
79
estreptomicina (SaiRam et al. 2000; Prashant et al. 2007; Mehrotra et al. 2010; Sarmiento
et al. 2011; Maragathavalli et al. 2012; Vinoth et al. 2012; Chava et al. 2012; Rosaline et
al. 2013). É uma medida de precaução convencional contra epidemias de leptospira nos
trópicos, especialmente em áreas alagadas. Ele atua como um filme antibacteriano
impermeável na camada de pele que impede a entrada de bactérias no portal. Além disso,
ao ser misturado à água, o óleo de neem, mesmo em baixas concentrações, torna-se
ácido e pode virar leptospiricida.

O extrato da casca é imunomodulador. Os extratos da casca, folhas, frutos, óleo e raiz

são usados para controlar a lepra, úlceras intestinais e doenças respiratórias (Ketkar e
Ketkar 1995; Kartikar e Basu 1935). A fração de antraquinona da folha, flor seca e fruta é
administrada por via oral para a hanseníase. Triterpenóides tricíclicos, margolona,
margolonona e isomargolonona inibem o crescimento das espécies de Klebsiella,
Staphylococcus e Serratia. Os extratos de clorofórmio de neem inibem o crescimento de
Listeria monocytogenes, enquanto os extratos etanólicos inibem o Staphylococcus aureus
(Mahfuzul et al. 2007). Até mesmo extratos de torta de neem, um subproduto residual da
extração de óleo, podem inibir Campylobacter jejuni (Del Serrone e Nicoletti 2013).

Aquaneem, um produto emulsionado de grãos de neem, inibe patógenos de peixes

(Aeromonas hydrophila, Pseudomonas fluorescens e Escherichia coli) (Das et al. 1999). O
extrato de folha de Neem reduz a carga bacteriana de Streptococcus sp., Aeromonas
hydrophila, Enterobacter sp., Escherichia coli, Pseudomonas sp., Proteus sp., Vibrio sp. e
Yersinia enterocolitica em peixes marinhos decorativos (Dhayanithi et al. 2010). Inibe a
formação de biofilme em Pseudomonas aeruginosa (Harjai et al. 2013). Sulfonoquinovosil
diacilglicerídeo, um glicolipídeo solúvel em água isolado das folhas de neem, inibe
Salmonella typhi, Shigella dysenteriae, Escherichia coli e Vibrio cholerae (Bharitkar et al.
2014).

4.2 Doenças virais

Um extrato aquoso de folhas tenras protege contra vaccinia (doença viral em bovinos),
varíola e doenças de Newcastle, enquanto sua pasta é usada para lesões ulcerativas de
varíola bovina. Inibe o poliovírus, o vírus infeccioso do herpes, o vírus do grupo coxsackie
B e o vírus da dengue em uma etapa inicial da replicação do genoma viral (Badam et al.
1999; Parida et al. 2002; SaiRam et al. 2000). Possivelmente pela inativação do vírus,
além de interferir em um evento inicial de seu ciclo de replicação. O extrato da casca
também bloqueia significativamente o acesso do vírus herpes simplex tipo 1 (HSV-1) às
células em concentrações de 50–100 μg/ml e 3,77 g/ml (Tiwari et al. 2010). A inibição da fusão celular
mediada pela glicoproteína HSV-1 e a formação de policariócitos indicam um papel
80
adicional do extrato na etapa de fusão viral, abrindo novas perspectivas para o
desenvolvimento do extrato da casca como um novo microbicida anti-herpético.

4.3 Doenças Fúngicas

A nimbidina inibe o crescimento de Tinea rubrum, enquanto a gedunina pode tratar uma
variedade de infecções fúngicas, incluindo Aspergillus fumigatus, Aspergillus flavus,
Aspergillus niger, Candida albicans, Microsporum gypseum, Microsporum canis,
Trichophyton rubrum, Trichophyton mentagrophytes, Fusarium oxysporum, Cladosporium
spp., Penicillium notatum e Penicillium citrinum (SaiRam et al. 2000; Asif 2012; Al-
Samarrai et al. 2012). Os trissulfetos e tetrassulfetos cíclicos de destilados a vapor de
folhas maduras podem ser usados contra Trichophyton mentagrophytes (Pant et al. 1986).

4.4 Úlcera, estresse oxidativo e inflamação

O extrato aquoso da casca é um tônico adstringente usado no alívio de febre, sede,

náuseas, vômitos e doenças de pele. Ele também bloqueia úlcera gástrica devido ao
estresse, indometacina e etanol de forma eficaz. Aumento da peroxidação lipídica,
aumento do conteúdo de carbonil de proteína e diminuição do nível de GSH endógeno
são as características do dano oxidativo da mucosa gástrica durante a ulceração
(Bandyopadhyay et al. 2000), que são efetivamente revertidos pelo extrato da casca. A
atividade anti-secretora e antiúlcera é devida ao seu glicosídeo fenólico e é superior à de
outros antioxidantes naturais, como vitamina E, ascorbato e do antioxidante fisiológico,
melatonina (Bandyopadhyay et al. 2000). A nimbidina suprime a liberação de ácido
gástrico basal e estimulada, junto ao bloqueio dos receptores H 2 da histamina. Ele mostra
uma potente atividade antioxidante eliminando diretamente os radicais livres e os danos
ao DNA associados, que são observados na morte celular por apoptose na lesão de
células da mucosa gástrica. Ele também protege a mucosa, evitando o esgotamento do
muco aderido a ela (Wallace e Grangers 1996). O extrato de folhas em etanol também
inibe a fase proliferativa da inflamação (Chattopadhyay 1998). O extrato em metanol da
casca e das folhas é antipirético em uma dose ligeiramente superior. Sua fração solúvel
em éter é um bom analgésico na dor inflamatória aguda (Tandan et al. 1990). O extrato da
casca também mostra um efeito antitrombótico em camundongos (Olajide 1999).

4.5 Câncer

Neem pode prevenir ou reverter o acúmulo de metabólitos reativos de oxigênio induzido

por carcinógenos, que desempenham um papel fundamental na carcinogênese
(Androutsopoulos et al. 2009). Um pré-tratamento de 5 dias com extrato de folha diminuiu
a formação de peróxidos lipídicos e aumentou os níveis de antioxidantes e enzimas

81
desintoxicantes no estômago, fígado e circulação (Arivazhagan et al. 2000). A azadiractina
e a nimbolida apresentam atividade de eliminação antirradical dependente da
concentração e potencial redutor na ordem: nimbolida > azadiractina > ascorbato. Além
disso, a azadiractina e a nimbolida inibem o desenvolvimento de carcinomas de bolsa
bucal de hamster induzidos por DMBA [7,12-dimetilbenzantraceno] por meio da prevenção
da ativação do pró carcinogêneo e do dano oxidativo do DNA e da regulação positiva das
enzimas de desintoxicação antioxidante e carcinogênica (Priyadarsini et al. 2009).

O extrato etanólico da folha de neem inibe o crescimento de células cancerosas de uma

maneira dependente da dose e do tempo. Não afeta a viabilidade dos linfócitos, indicando
significativamente sua excitotoxicidade seletiva para as células cancerosas e, portanto,
fornecendo uma justificativa para o desenvolvimento do neem como um agente
quimiopreventivo bioseguro (Sharma et al. 2014). Esta ação antiproliferativa está
associada à regulação negativa da expressão da ciclina D1 em células cancerosas
(Kumar et al. 2010; Priyadarsini et al. 2010; Gunadharini et al. 2011) e regulação positiva
dos genes e proteínas pró-apoptóticos, incluindo p53, Bax, Bcl-2 – proteína promotora de
morte associada (Bad) caspases, fosfatase e gene homólogo de tensina (pTEN) e c-Jun
N-terminal quinase (JNK) (Arumugam et al. 2014). O extrato etanólico em doses de EC 50
causa um aumento significativo dependente do tempo na expressão do gene Bax.

No sarcoma murino, a glicoproteína da folha do neem causa alteração no perfil de

citocinas no microambiente tumoral, isto é, a partir da interleucina (IL) -10 e do fator de
crescimento transformador b (TGF). Os caracteres do tipo 2 ricos em IL-6 foram trocados
para o microambiente do tipo 1 com dominância da secreção de interferon g (IFN) (Barik
et al. 2013). A população de células-T CD8 + aumenta bastante com uma maior expressão
de moléculas relacionadas à excitotoxicidade, perforina e granzima B, junto a uma baixa
expressão de células FasR+, simbolizando a prevenção da morte celular induzida por
ativação.

4.6 Saúde reprodutiva e fertilidade

A atividade contraceptiva dos extratos de neem em animais machos, fêmeas e seres

humanos é bem conhecida. Reduz o peso dos ovários e do útero, junto ao aumento da
incidência de alterações estruturais dos cromossomos metafásicos. Um fitoconstituinte do
extrato provavelmente interfere com o DNA para produzir a quebra da fita do cromossomo
ou produzir distúrbios do fuso, induzindo efeitos genotóxicos. Em uma dose subcrônica, o
pó da folha causa uma diminuição na contagem total de espermatozoides e na motilidade
espermática em ratos com um aumento na porcentagem relativa de espermatozoides
anormais, que pode ser revertida pela administração simultânea de testosterona,
82
sugerindo que os efeitos são devidos a um androgênio deficiência, afetando assim a
maturação fisiológica dos espermatozóides (Aladakatti et al. 2001). Extratos de casca, flor
e óleo de semente induzem infertilidade reversível em ratos machos, como diminuição no
número de espermátides. O extrato alcoólico das folhas reduz a contagem de
espermatozoides e aumenta a frequência de espermatozóides com morfologia anormal da
cabeça (Awasthy 2001).

A fração volátil do óleo de neem destilado a vapor é espermicida. Uma concentração

mínima de 0,25 e 25 mg/ml causa inibição dependente da dose da motilidade dos
espermatozóides em sêmen de rato e humano, respectivamente, que permanece não
afetado pela presença de muco vaginal ou cervical. Uma dose de 15 mg/kg de extrato de
neem retarda a reprodução em ratos machos em até 60 dias (o ciclo de reprodução
normal é de 20 a 23 dias). Com uma dose de 25 mg / kg de extrato, 50% de mortalidade
foi observada junto à reprodução reversivelmente retardada (até 3 meses) nos animais
restantes. Estudos histológicos dos testículos indicaram aberrações na espermatogênese
e produção de esperma em alguns dos túbulos seminíferos. A lubrificação vaginal in vivo
de óleo de neem antes do coito é 100% eficaz na prevenção da gravidez (Jacobson
1995). Em ratos, a interrupção do ciclo estral levando ao bloqueio parcial da ovulação
ocorre após o tratamento com extrato alcoólico de flor de neem (Gbotolorunet al. 2008).

Uma formulação contraceptiva intravaginal altamente segura e eficaz foi desenvolvida a

partir de neem para coelhos e macacos. Sua concentração espermicida efetiva mínima é
de 25%, com imobilização completa dos espermatozoides em 20 s (Garg et al. 1994). Em
ratas grávidas, a formulação causou reabsorção completa dos embriões em
desenvolvimento no dia 15 de gravidez. Os efeitos foram reversíveis e os animais
recuperaram a fertilidade.

4.7 Usos Diversos

Árvores de neem com grande suprimento de água exalam uma seiva pela ponta do caule.
A seiva é um tônico refrigerante e particularmente útil em doenças de pele, indigestão e
debilidade geral. A casca exala uma goma brilhante e de cor âmbar que é um poderoso
estimulante, demulcente e tônico e é usada em infecções catarrais e outras. O extrato de
água quente da casca é um tônico oral e emenagogo para a mulher adulta, enquanto a
flor e a folha se tomadas por via oral funcionam como um remédio anti-histérico e
externamente para tratar feridas. As flores secas são úteis por via oral no diabetes,
enquanto a água quente é usada para hemorróidas, doenças de pele e úlceras. A fruta é
um tônico, emoliente, purgante e anti-helmíntico. O fruto seco é amassado em água para
tratar doenças de pele. As folhas são carminativas e auxiliam na digestão. As folhas
83
tenras são usadas junto com Piper nigrum Linn 17 para remover as helmintíases intestinais.
As folhas também são eficazes no tratamento de venenos de cobra e picadas de insetos
devido a fitoconstituintes anticoagulantes. O extrato de água quente de toda a planta é um
anti-helmíntico eficaz, um inseticida e purgante.

Neem induz radioterapia de radiossensibilização (Veeraraghavan et al. 2011). Foi

demonstrado que a preparação aquosa da folha previne as complicações hematológicas
induzidas por ciclofosfamida, cisplatina e 5-fluorouracil (Ezz-Din et al. 2011). O
nimbidinato de sódio produz ainda diurese facilitando a eliminação do medicamento. O
extrato aquoso de folhas normalizou a aparência macroscópica e as alterações
histopatológicas do fígado em ratos tratados com paracetamol, junto a uma redução nos
níveis séricos de aspartato aminotransferase (AST), alanina aminotransferase (ALT) e g
glutamil transpeptidase (Bhanwra et al. 2000). A administração subcrônica de extrato de
folha é mais eficaz do que o óleo de semente no controle dos níveis de açúcar no sangue
em coelhos normais e diabéticos (Khosla et al. 2000b).

O óleo de Neem contém vitamina E além de muitos outros aminoácidos essenciais que
ajudam a restaurar a umidade e a elasticidade da pele. Neem pode ser usado contra
mosquitos, piolhos, ácaros e moscas, para pequenas feridas, redução de cicatrizes e
crescimento de cabelo. Em feridas menores, promove o desenvolvimento de uma pele
nova e saudável e reduz o tecido cicatricial. Para fazer uma solução de enxágue ou spray,
o óleo de neem pode ser diluído adicionando uma pequena quantidade de um detergente
neutro junto com água. Uma diluição de 1:20 é sugerida para um spray contra mosca. O
óleo de neem pode ser esfregado diretamente na área do problema, até duas vezes ao
dia para amolecer e remover as crostas (sem lavar), para acalmar e matar as bactérias. O
extrato aquoso de folhas de neem tem proficiência acaricida parecida com a ivermectina
(Seddieket al. 2013), mas a atividade antinematodial variou com a estação e a
composição (teor de proteína) da dieta, ofereceu melhores resultados na estação chuvosa
em comparação à estação seca (Chagas et al. 2008).

In vitro, tanto o óleo quanto os extratos aquosos das sementes produzem esterilização
dependente da concentração e desenvolvimento perturbado de carrapatos larvais,
Boophilus microplus, Hyalomma excavatum anatolicum e Amblyomma variegatum. A uma
concentração de 10.000 ppm, a azadiractina e outros limonóides interrompem a
reprodução de fêmeas de Rhipicephalus microplus. A uma dose de 1000 mg/kg de peso
corporal, o extrato de neem verifica os níveis de parasitemia, previne a perda de peso e
estende a vida útil do hospedeiro ao mesmo tempo que a suramina, uma droga

17 Pimenta preta
84
tripanocida bem conhecida. Foi sugerido que o extrato de folha de neem (125 mg/kg de
peso corporal) potencializa, sinergiza e aumenta a meia-vida do diaceturato de
diminazeno (7 mg/kg) e remove rapidamente o Trypanosoma brucei brucei e previne
recaídas (Omoja et al. 2011). Os extratos metanólicos de sementes são profilaticamente
superiores.

A azadiractina, presente no neem, é um antialimentante primário e secundário para

insetos lepidópteros na concentração de 1–50 ppm. Também diminui o nível de hemolinfa
ecdiesteróide em insetos larvais, bloqueando a liberação de hormônio protoracicotrófico
do complexo cérebro/corpo cardíaco, levando a um crescimento desordenado, como
muda interrompida, inibição do crescimento e malformação levando à mortalidade.

5. Neem como ração para gado

5.1 Neem como alimentação animal

Um grande obstáculo para a produção de gado ruminante na maioria dos ecossistemas

tropicais é a flutuação sazonal na disponibilidade e qualidade da forragem devido aos
diversos padrões de chuva. Para pastagens cultivadas e naturais, os rendimentos e a
qualidade da biomassa forrageira diminuem drasticamente na estação seca. Por exemplo,
baixo teor de proteína bruta (5–7%) foi relatado para leguminosas forrageiras durante a
estação seca (Peters et al. 1997). Da mesma forma, o declínio da proteína bruta e o
aumento da fibra em detergente neutro de leguminosas forrageiras ocorrem com a
mudança de estação (Fujihara et al. 2004). As perdas reprodutivas, junto à redução do
crescimento durante o período árido, afetam adversamente sua produtividade. Isso pode
ser superado pela suplementação das dietas de ruminantes, especialmente durante o
período árido com constituintes de alta proteína bruta que podem sustentar a produção
(Adjorlolo et al. 2016).

A exploração de folhas de árvores para alimentação de animais é uma prática antiga. A

proteína bruta das gramíneas torna-se o principal fator limitante da dieta de ruminantes
durante o clima árido; as folhas das árvores, com alto teor de proteína bruta, deram
alguns resultados encorajadores em ruminantes que pastam (Ansah e Nabilla 2011).
Folhas de plantas leguminosas são de particular importância devido ao seu maior teor de
proteína bruta em comparação com outra vegetação (Adjorlolo et al. 2016). No entanto,
sua utilização como forragem também é afetada por sua digestibilidade comparativa,
palatabilidade e tolerância à seca, que determina a disponibilidade de biomassa forrageira
durante a estação irregular.
85
5.1.1 – Folhas

Neem ocupa uma posição elevada entre as árvores forrageiras na Índia. Uma árvore de
neem madura produz de 3 a 4 quintais 18 de folhas por ano, que são alimentam
rotineiramente cabras e gado durante a fome. Folhas de neem são aceitáveis para
ovelhas (Chandrawathani et al. 2006) e cabras (Seresinhe e Marapana 2011). No distrito
de Talensi-Nabdam de Gana, aproximadamente um quinto dos agricultores usa folhas e
frutas de neem como forragem (Ansah e Nagbila 2011). Folhas de neem com alto teor de
proteína bruta variando de 17,5 a 18,7% foram relatadas (Bhowmik et al. 2008), em
comparação com 10 a 15% em folhas de árvores forrageiras não lenhosas. Eles contêm
minerais e uma quantidade adequada de minerais, exceto zinco e aliviam a deficiência de
cobre em animais alimentados com palha e forragem seca. As folhas do neem
incorporadas na alimentação dos ruminantes podem facilitar a utilidade da planta e ajudar
a aliviar a severa inadequação da alimentação experimentada nos trópicos mais secos
durante a estação seca. Eles têm baixo teor de fibra bruta (11,3%) (Bhowmik et al. 2008)
junto com 38,0% de fibra em detergente neutro (NDF) e 27,0% de fibra em detergente
ácido (ADF) (Ramana et al. 2000). Estes são bastante baixos em comparação com as
faixas de NDF e ADF de 27,40 - 55,23 e 18,87 - 46,30, respectivamente, para a maioria
das árvores forrageiras tropicais (Kumar e Sharma 2003). O baixo teor de fibra de neem,
juntamente com o extrato relatado de alto teor de nitrogênio de até 53,9% (Bhowmik et al.
2008), o torna uma fonte importante de carboidratos prontamente fermentáveis na
alimentação de ruminantes. Cabras e camelos comem folhas de neem picadas, mesmo
como alimento único. Uma única dieta de folhas de neem para cabras aumenta a ingestão
voluntária de ração em até 3,12% do peso corporal. O gado geralmente é alimentado com
galhos e folhas misturados com outros alimentos.

Vários fatores antinutricionais, como taninos, compostos fenólicos e oxalatos, foram

identificados nas folhas do neem, mas suas concentrações são semelhantes às relatadas
para outras espécies de forragem lenhosa. O conteúdo de lignina está na faixa de 4,2-
11,7, conforme relatado para Leucaena (Garcia et al. 1996). O amargor nas folhas é
conferido pela presença de triterpenóides, principalmente azadiractina, mas a
concentração varia com a estação e os ecótipos (Dhaliwal et al. 2004). No entanto,
ruminantes, especialmente cabras, podem tolerar o sabor amargo devido à sua
capacidade de desintoxicar compostos secundários de plantas por meio de reações do
tipo aleloquímico que ocorrem dentro deles.

18 Quintal equivale a 100 kg

86
Folhas de neem como suplemento alimentar, para dietas basais de resíduos de colheita,
melhoram a utilização da ração e o desempenho animal em ruminantes. A substituição de
30% da palha de mostarda por folhas de neem aumenta a ingestão de matéria seca e
proteína bruta com aumentos concomitantes na produção de ácidos graxos voláteis
(Raghuvansi et al. 2007), indicando que as folhas de neem fornecem nutrientes
essenciais necessários para aumentar o crescimento microbiano ruminal de alimentação.
As folhas de neem podem substituir até metade do farelo de soja na dieta de ruminantes,
sem efeitos negativos sobre o consumo de ração, matéria seca e digestibilidade da fibra,
bem como ganho de peso corporal (Paengkoum 2010). A melhoria no desempenho de
ruminantes alimentados com folhas de neem é parcialmente atribuível aos efeitos
antiparasitários dos compostos bioativos nas folhas sobre parasitas intestinais como
Haemonchus contortus (Chandrawathani et al. 2006; Tiwary e Pandey 2010). Além disso,
a ação mimetizadora de hormônios dos extratos de neem causa interferência no ciclo de
vida do parasita, inibindo assim sua ingestão nutricional, bem como a eclosão dos ovos
(Kumar e Navaratnam 2013).

5.1.2 – Semente

Várias sementes de plantas foram testadas como fonte de proteína na alimentação animal
(Gowda e Sastry 2000; Aruwayo et al. 2011; Ogbuewu et al. 2011a). As sementes podem
ser utilizadas como farinha de sementes, torta de caroço ou até mesmo como torta de
frutas. A semente de neem está prontamente disponível no nordeste da Índia e, talvez, na
maior parte da Ásia e no norte da Nigéria, Austrália, África e América Central e do Sul, lar
do maior número de ruminantes no país. O bolo de sementes de Neem, com uma
disponibilidade de aproximadamente 0,9 milhão de toneladas na Índia (Singh 1993), é
uma excelente fonte de proteína (30–40%) para o gado. Ele contém todos os aminoácidos
essenciais e não essenciais, incluindo aminoácidos contendo enxofre, mas com pequenas
quantidades de valina e triptofano. O teor de enxofre é 1,07–1,36%, o que é mais do que
outros bolos. O conteúdo de nitrogênio varia de 2 a 3%. Seu perfil equilibrado de
aminoácidos e minerais (Gowda e Sastry 2000) em relação a outras sementes de plantas
carrega um tremendo potencial para compensar a escassez de suplementos de proteína
na indústria pecuária. A única preocupação a este respeito é a sua aceitabilidade devido
ao seu cheiro pungente e amargo causado pela presença de triterpenóides amargos e
tóxicos, principalmente nimbina, nimbidina, azadiractina e salanino que conferem sabor ou
cheiro desagradável à carne (Clausen et al. 1985). A remoção desses fitoconstituintes
amargos por meio de extração com solvente, lavagem com água, imersão em álcali e

87
amonização com uréia alcançou um sucesso considerável na melhoria da aceitabilidade
do gado (Gowda e Sastry 2000).

A palatabilidade do bolo de semente de neem pode ser melhorada removendo os

princípios bioativos ou inserindo cevada, melaço e farinha de amendoim, mas pode
resultar em consumo reduzido (de 79 a 39%) da mistura de concentrado quando os níveis
de bolo de semente de neem são aumentados de 59 a 90% (Bhandari e Joshi 1974).
Ovelhas com um ano podem utilizar completamente a mistura de concentrado com 75
partes de bolo de semente de neem e 25 partes de milho, mas seu consumo de ração
reduz para um terço se o bolo de semente de neem for o único alimento (Gupta e Bhaid
1980). Os bezerros búfalos aceitam prontamente 5–15 partes de bolo de semente de
neem quando alimentados com 7 partes de melaço e 20 partes de farinha de amendoim,
mas o consumo geral de ração reduz-se à metade após a retirada do melaço. Além disso,
a qualidade de conservação é boa com uma longa vida útil.

5.1.3 – Óleo de Neem

O óleo de neem sem amargor é bastante útil como ração animal. É rico em ácidos graxos
de cadeia longa e contém azadiractina, meliantriol e salanino. Sementes sem óleo são
utilizadas como fertilizantes no setor agrícola. A palatabilidade e a utilização de tais
alimentos alternativos podem ser melhoradas incorporando-os em dietas completas e
processando em pellet (Reddy e Reddy 1999).

5.2. Neem como ração para aves

O óleo de Neem é usado em rações para aves. A composição aproximada da farinha de

folhas de neem indica que também é uma boa fonte de proteína para aves.
Principalmente, o neem não processado não é adequado para a alimentação de aves,
devido à sua toxicidade e à presença de compostos amargos que prejudicam o consumo
de ração (Gowda e Sastry 2000; Uko e Kamalu 2008). A melhora no desempenho após a
suplementação de folhas de neem também é relatada para aves. As propriedades
específicas destes compostos ativos tornam-no potencialmente interessante na medicina
veterinária, e. contra parasitas externos. Da mesma forma, sementes ou extratos de neem
podem ser usados em baixas taxas de incorporação em rações como substituição de
antibióticos (Landy et al. 2011). Os níveis máximos de tolerância da farinha de folhas de
neem como fonte de proteína descritos na literatura são 10% em frangos de corte
(Obikaonu et al. 2012) e 15% em aves poedeiras (Esonu et al. 2006) e coelhos (Ogbuewu
et al. 2010a, b, 2011b), pois contém diversos compostos bioativos (azadiractina, nimbina,
salanino, limonóides e tanino) que podem afetar a utilização de nutrientes. Os princípios

88
tóxicos bioativos podem ser reduzidos por secagem ao sol (Obikaonu et al. 2012; Esonu
et al. 2006; Ogbuewu et al. 2010a, b, 2011a).

Quando usados crus, sementes de neem ou farinha de óleo diminuem o consumo de

ração e o desempenho do frango (Gowda e Sastry 2000). Imersão, cozimento,
tratamentos alcalinos ou ácidos e extração com um ou vários solventes foram
investigados (Gowda e Sastry 2000) para melhorar a aceitabilidade geral. Alguns
resultados aceitáveis em taxas de incorporação relativamente baixas também são
observados. O tratamento com álcali ou uréia mantém um desempenho razoável na
incorporação de 13% (Nagalakshmi et al. 1996, 1999). Da mesma forma, torrar ou
autoclavar alivia os efeitos negativos do neem (Uko e Kamalu 2008). No geral, o neem
não é recomendado na alimentação de frangos. No entanto, pode ser usado com cautela
em taxas de incorporação abaixo de 5% com protocolo de desintoxicação rigoroso.

A farinha de óleo de neem crua reduz o consumo de ração e o desempenho de postura

quando usada a 15 ou 20% nas dietas de postura, enquanto a 10% o desempenho
permanece inalterado (Gowda et al. 1998). O Neem deve ser usado com cautela em
camadas, dados os possíveis efeitos a longo prazo na saúde. Em criadores machos ou
fêmeas, o neem deve ser estritamente evitado por causa de seus efeitos potenciais na
reprodução (Gowda e Sastry 2000). Em codornas em crescimento, a incorporação de 5-
10% de farinha de óleo descascado (extraído com solvente) diminui ligeiramente o
desempenho do crescimento, enquanto induz efeitos patológicos leves (Elangovan et al.
2000b). Em codornas poedeiras, o desempenho foi mantido com 5–10% de farinha de
óleo na dieta, mas com eficiência alimentar reduzida (Elangovan et al. 2000a).

5.3 Neem como ração para peixes

A dieta suplementada com folhas de Neem é um imunoestimulante para peixes (Talpur e

Ikhwanuddin 2013) devido a centenas de compostos bioativos, com propriedades
comprovadas antiinflamatórias, antiartríticas, antipiréticas, hipoglicêmicas, antiúlcera,
antimicrobianas e diuréticas (Girish e Shankara 2008). Ele produz respostas mediadas por
células e humorais durante a imunoestimulação. Há um aumento do nível de atividade
fagocítica, que é um módulo do sistema imunológico não específico em peixes (MacArthur
e Fletcher 1995). O extrato da planta é antioxidante e forrageia o ânion superóxido que
elimina os radicais reativos de forma eficaz para fornecer uma possível proteção contra
autotoxicidade e fatalidade (Nya e Austin 2009; Kim et al. 2007).

89
5.4 Qualidade Nutricional do Bolo de Semente de Neem

A torta de sementes de Neem (NSC) é um ingrediente alimentar não convencional com

grande potencial para alimentação de gado (Bawa et al. 2005). A composição química do
NSC e da farinha de semente de neem (NSM) varia consideravelmente dependendo do
método de processamento. É uma rica fonte de proteína com 34-38% de proteína bruta
(CP) (Bawa et al. 2007) e 33,20% e 32,90% para torta de semente de neem tratada com
alcalino (ATNSC) e NSC, respectivamente (Aruwayo 2011). É balanceado em Ca, P, mas
com teor de ferro excepcionalmente alto. O bolo de neem é uma fonte rica em
aminoácidos essenciais e não essenciais, incluindo aqueles que contêm enxofre, com
pouca histidina, lisina e tirosina (Gowda e Sastry 2000). O NSC não descorticado contém
6,5-11,6% de CP digerível (Ananthasubramainiam et al. 1979). A farinha de semente de
neem crua tem o maior CP (23,19%), seguida por NSC extraído com solvente (23,06%),
prensa hidráulica NSC (22,69%) e NSC de expulsão (22,5%) (Bawa et al. 2007), e a
qualidade é comparável ao da farinha de amendoim (PNM) (Gowda e Sastry 2000). Muito
mais alto CP está presente em ATNSC (33,76%) e bolo de sementes de neem tratado
com uréia (UANSC) (40,91%) (Katiyar et al. 1993). Portanto, o ATNSC pode ser
considerado um substituto integral do PNM em termos de desempenho.

O conteúdo de fibra bruta mais alto (40,50%) é visto no NSM completo (FFNSM) (Salawu
et al. 1994), enquanto o valor mais baixo é relatado no NSC com 11,40% (Reddy et al.
1988). O extrato etéreo (EE) é de 0,38% em NSC sem óleo (Garg 1989) e 27% em
FFNSM (Salawu et al. 1994). O extrato livre de nitrogênio foi o mais baixo em FFNSM
(Fajinmi et al. 1989) com 14% e o mais alto em NSC (Bedi et al. 1975) com 52,52%. Entre
todos, UANSC parece ser o melhor por causa da proteína bruta alta de 40,91% e fibra
bruta relativamente baixa de 11,43%.

A farinha de sementes de neem com amoníaco de uréia (UANSM) provou ser um

substituto satisfatório, econômico e saudável para a substituição completa do suplemento
proteico tradicional, torta de amendoim sem óleo (DGNC), em rações de cabras em
crescimento (Anandan et al. 1996) com base em valor nutritivo, parâmetros bioquímicos e
economia alimentar. O desvio alimentar não influenciou significativamente a eficiência da
utilização de matéria seca (MS) (8,7 vs. 9,1 g), proteína (1,2 vs. 1,2 g PB) e energia
metabólica (22,9 vs. 22,8 kcal EM) por ganho unitário. O ganho de peso corporal total
(kg), ganho médio diário (g), eficiência de conversão alimentar (alimentação/ganho) e
custo de alimentação (Rs.) Por ganho de kg no grupo UANSM foram 5,6 ± 0,59, 31,0 ±
3,25, 9,1 ± 0,57 e 25,6 ± 1,62, respectivamente, em comparação com os valores
correspondentes de 6,0 ± 0,56, 32,8 ± 3,20, 8,7 ± 0,55 e 29,8 ± 1,83, respectivamente, no
90
grupo DGNC. O perfil hemato bioquímico (hemoglobina, glicose e nitrogênio da uréia) e a
atividade de várias enzimas (transaminases e fosfatase alcalina) mostraram variação
insignificante, mas o custo de alimentação por kg de ganho da dieta UANSM é mais
barato do que a dieta DGNC em 14,2%. O custo de alimentação por ganho de peso
unitário e o ganho médio diário geral foram ligeiramente melhores nos machos do que nas
fêmeas.

6. Neem como nutracêutico

A folha do neem é responsável por uma ampla gama de atividades farmacológicas,
incluindo antibacteriana, anticarcinogênica, antifúngica, antihiperglicêmica,
antiinflamatória, antimalárica, antimutagênica, antioxidante, antiúlcera, antiviral e
imunomoduladora (Subapriya e Nagini 2005) e, além disso, mastigar folhas frescas atua
como um sedativo e relaxante. O extrato aquoso de folhas de neem tem notável atividade
antiúlcera e causa redução da gravidade da lesão gástrica e previne a degranulação dos
mastócitos e depleção de muco. As folhas do neem são bastante prósperas em elementos
nutritivos, em comparação com qualquer outra vegetação semelhante que tenha sido
submetida a análises químicas anteriormente. O molho picante de folha de Neem era uma
característica regular da dieta diária de Mahatma Gandhi. Um chá nutracêutico de neem
seria indiscutivelmente a bebida favorita de Gandhi. O Neem também pode ser misturado
com chá verde ou preto. O extrato da folha também foi relatado como vantajoso no
tratamento de danos ao fígado induzidos por tetracloreto de carbono (Mujumdar et al.
1998).

Na Ayurveda, o neem é sempre misturado com outras ervas para aumentar sua eficácia e
tornar o sabor mais favorável. Ervas boas para o pitta dosha 19, como alcaçuz, mel, açúcar,
suco de limão e/ou especiarias como o cardamomo, podem ser usadas para amplificar a
eficácia ou reduzir os efeitos colaterais. O amargor também pode ser contrabalançado
com ervas e especiarias como canela, casca de laranja, raiz de alcaçuz e semente de
erva-doce. O Neem é indicado no Ayurveda contemporâneo para diabetes mellitus, talvez
por aumentar a sensibilidade do receptor de insulina. A administração oral de extrato de
folhas reduz significativamente a necessidade de insulina para pacientes com diabetes
não insulinodependentes. O nimbidiol presente na raiz e na casca da árvore do neem
pode inibir as glicosidases intestinais, portanto, útil no controle do diabetes (Mukherjee e
Sengupta 2013). As folhas maduras frescas, junto com as sementes de Psoralea

19 Os doshas são os nossos “humores”, ou seja, mecanismos que governam o nosso organismo. Eles são formados por 5 elementos,
sendo que os elementos Éter e Ar se manifestam no Vata Dosha, o elemento fogo e água se manifestam no Pitta Dosha e os
elementos terra e água se manifestam no Kapha Dosha.
91
corylifolia e Cicer arietinum, são eficazes na leucodermia. Folhas macias, junto com
pimenta-do-reino, são eficazes em infecções intestinais por helmintos (Kumar et al. 2016).

Com a proibição de quatro promotores de crescimento de antibióticos comumente usados

na ração (monensina, salinomicina, avilamicina e flavofosfolipol) pela Comissão Europeia,
a farinha de folhas de neem (NLM) pode ser aproveitada como ingrediente na dieta de
frangos de corte devido à sua importância terapêutica e dietética (Bonsu et al. 2012), mas
o nível de inclusão varia com a idade e o estado fisiológico. O Neem demonstrou exercer
suas propriedades antioxidantes diminuindo o fator de necrose tumoral a, aumentando o
interferon g e modulando enzimas antioxidantes, como a glutationa S-transferase (GST) e
certas monooxigenases dependentes do citocromo P450 hepático (Manikandan et al.
2008; Kusamran et al. 1998; Schumacher et al. 2011; Vasenwala et al. 2012). Ele induz a
apoptose por meio de ambas as vias intrínseca e extrínseca e estimula a parada do ciclo
celular por meio do acúmulo de p21 dependente de p53 e da regulação negativa das
proteínas reguladoras do ciclo celular ciclina B, ciclina D1, p53 e antígeno nuclear celular
em propagação (Kumar et al. 2010; Priyadarsini et al. 2010).

O Neem, em combinação com o extrato de folhas de tulsi, ativa a resposta imunológica

mediada por células e, portanto, cria uma resposta aprimorada a quaisquer desafios
futuros ocorridos por organismos causadores de doenças. Assim, a alimentação de folhas
de neem e tulsi para aves imunossuprimidas aumenta suas respostas imunológicas
humorais e mediadas por células. Extrato de folhas de neem em baixas doses tem ação
inibitória em amplo espectro de microrganismos. A infusão (4%) de folhas de neem a uma
concentração de 50 ml/l de água potável pode ser usada efetivamente como um potencial
promotor de crescimento natural e como imunoestimulante, contribuindo para um melhor
ganho de peso corporal, taxa de conversão alimentar, retorno bruto, menor mortalidade e
maior título de anticorpos contra a doença infecciosa da bolsa (Durrani et al. 2008; Kumar
et al. 2016).

6.1 Eficácia como nutracêutico

As folhas de neem podem ser consumidas regularmente. Neem é um potente purificador

e desintoxicante do sangue no Ayurveda. As folhas de neem podem tratar sintomas
associados a infecções virais como febre, resfriado comum, herpes, gripe e catapora. Eles
contêm inibidor da fosfolipase A2, que pode ser usado como um inibidor do veneno de
cobra (Mukherjee et al. 2008).

Aves de aves suplementadas com extrato de folha de neem e tulsi (1–3 ml/kg de ração de
ave) mostram um efeito benéfico significativo no peso corporal, ganho semanal de peso,

92
consumo de ração e eficiência alimentar (Prasannabalaji et al. 2012). Esses efeitos
podem ser devidos às suas propriedades antimicrobianas e antiprotozoárias (Kale et al.
2003), que auxiliam na redução da carga microbiana das aves e resultam em melhor
absorção dos nutrientes presentes no intestino e conduzindo finamente à melhora na taxa
de conversão alimentar das rações.

Fusarium é um fungo filamentoso amplamente distribuído no solo e produz micotoxinas

como tricotecenos e zearalenona em cereais usados como ração para animais e aves e
pode afetar a saúde humana e animal, uma vez que entram na cadeia alimentar. A
zearalenona desencadeia distúrbios de reprodução, incluindo síndromes
hiperestrogênicas e produção de tumor, enquanto os tricotecenos são epóxidos
sesquiterpenóides que atuam como inibidores potentes da síntese de proteínas
eucarióticas. O extrato de óleo de neem diminui a produção de zearalenona em uma
concentração de 0,1–0,5%, mas a inibição máxima (59,05%) ocorre em 0,1% (Geraldo et
al. 2011).

As flores do neem contêm compostos capazes de induzir a enzima monofuncional de fase

II e reprimir as monooxigenases, principalmente aquelas envolvidas na ativação
metabólica de xenobióticos químicos. A alimentação com dietas contendo 12,5% de flores
de neem por 2 semanas aumenta fortemente a atividade de GST em quase 2,7 vezes e
uma redução acentuada nos níveis de reações de fase I, aumentando assim o limite de
toxicidade xenobiótica geral (Kusamran et al. 1998).

O Neem está sendo usado com lucro em sistemas de aquicultura para controlar peixes
predadores (Dunkel e Ricilards 1998). Martinez (2002) relatou que o extrato aquoso de
folhas de neem e outros produtos à base de neem são alternativas eficazes para o
controle de parasitas de peixes e predadores de moscas de peixe, como larvas de libélula
em fazendas de peixes. Embora o extrato de neem seja considerado de baixa toxicidade
para a vida aquática não alvo, os extratos de água da casca da planta de neem causaram
problemas respiratórios em Tilapia zillii (Omoregie e Okpanachi 1997), enquanto a longa
exposição a baixas concentrações do extrato bruto atrasou o crescimento deste peixe
ciclídeo (Omoregie e Okpanachi 1992).

7. Segurança
Neem tem atraído distinção mundial devido à sua vasta gama de propriedades medicinais
como antibacteriana, antiviral, antifúngica, antiprotozoária, hepatoprotetora e várias outras
propriedades sem apresentar quaisquer efeitos adversos (Kale et al. 2003). Seu amplo
93
uso convencional confirma a segurança. Mais de 75% dos remédios ayurvédicos contêm
neem, geralmente na forma de folha (ou extrato), às vezes a casca/fruta/flores, e quase
nunca o óleo. A maioria dos estudos científicos de neem foi conduzida com folhas ou
extratos de folhas de neem. Folhas de neem tomadas internamente em uma base regular
ou diária são consideradas seguras, a menos que qualquer estresse fisiológico seja
indicado. No uso milenar indígena, nenhum relato de efeitos colaterais negativos das
folhas de neem foi reconhecido. Embora o neem tenha sido considerado adequadamente
seguro para uso como inseticida, estudos em animais sugerem que a ingestão persistente
de óleo de neem pode gerar efeitos tóxicos. No entanto, uma avaliação abrangente de
segurança das diferentes formulações de neem também não foi realizada (Kumar et al.
2016). O teste formal de segurança foi feito apenas para o óleo de neem, sendo um
importante produto inseticida. Além disso, o extrato de neem inteiro pode produzir danos
genotípicos com o uso prolongado ou em doses mais altas (Badam et al. 1999; Awasthy
2001). Por todas essas razões, o uso de neem não é recomendado em animais jovens,
grávidas ou amamentando ou em animais com doença renal ou hepática grave. Em ratos,
a administração de óleo de neem durante os primeiros dias de gravidez é abortiva e a
atividade diminui com o avanço da gestação. Com uma dose de 6ml/kg de peso corporal,
mesmo a mortalidade pode ser observada em até 25% (Lal et al. 1987). A administração
de óleo aumentou o tempo de reação do movimento da cauda e reduziu as contorções
induzidas (Khosla et al. 2000a). Em ratos normais e hiperglicêmicos, a administração de
óleo causa uma redução da glicose no sangue.

Na dose oral mais alta (100 mg/kg de peso corporal por 20 dias), o extrato de folha de
neem diminuiu as concentrações séricas de triiodotironina (T3) e aumentou as
concentrações de tiroxina sérica (T4), mas não produziu tais alterações na dose oral mais
baixa (40 mg/kg corporal em peso por 20 dias). Isso indica que altas concentrações de
extrato de neem podem ser inibidoras da função da tireoide, particularmente na conversão
de T4 em T3, a principal fonte de geração de T3 (Panda e Kar 2000). Um aumento
concomitante na peroxidação lipídica hepática e uma diminuição na atividade da glicose-
6-fosfatase no grupo de dose mais elevada também indicou o efeito adverso do extrato de
neem, apesar de um aumento nas atividades das enzimas defensivas, superóxido
dismutase (SOD) e catalase. Assim, parece que o extrato de neem em doses mais altas
pode apresentar sintomas de função tireoidiana e peroxidação lipídica.

94
8. Toxicidade
Os dados toxicológicos de diferentes preparações à base de neem foram recentemente
revisados por Kumar et al. (2016). A administração oral diária de extrato de éter de
petróleo de semente inteira de neem (566 mg/kg de peso corporal) e casca (360 mg/kg de
peso corporal) por um período de 60 dias não produziu alteração na hemoglobina, volume
de células compactadas, contagem de leucócitos e hemoglobina corpuscular média e
glicose no sangue, mas AST e ALT diminuíram. Proteína sérica, colesterol sérico, lipídios
totais plasmáticos e GST foram aumentados, enquanto fosfolipídios plasmáticos e
acetilcolinesterase eritrocitária diminuíram (Gupta et al. 2001). Gandhi et al. (1988)
relataram efeitos dependentes da dose e do tempo na atividade motora, respiração e na
orientação dentro da gaiola após a ingestão do óleo de neem por ratos e coelhos. Os
animais tiveram diarreia, tremores e convulsões. A dose letal média (DL 50) foi de 14 ml/kg
de peso corporal para ratos e, apresentando sintomas semelhantes, de 24 ml/kg de peso
corporal para coelhos.

O tempo de reação do movimento da cauda aumentou, enquanto as contorções induzidas

diminuíram em ratos após a administração do extrato da folha. O pré-tratamento com
naloxona reverteu parcialmente os efeitos. Os efeitos do extrato da folha foram mais
pronunciados do que os do óleo de semente (Khosla et al. 2000a). O peso corporal das
cabras e das cobaias diminuiu com a adição de folhas à água de beber. As toxicidades
agudas e crônicas foram evidentes por meio de sinais de fraqueza, perda de condição e
depressão. Foram observadas diminuições nas taxas de coração, pulso e respiratório, e
diarreia, tremores e ataxia ocorreram em alguns animais. A contagem total de eritrócitos,
hematócrito e hemoglobina diminuíram levemente, enquanto as atividades de AST,
sorbitol desidrogenase e as concentrações de colesterol, uréia, creatina e potássio
aumentaram. O fígado e os rins foram os mais afetados (Ali 1987). No entanto, o
tratamento de ratos com extrato de folhas resultou em reduções na testosterona total,
bilirrubina total e potássio no soro. Houve aumento no hematócrito, concentração média
de hemoglobina corpuscular, contagem de glóbulos vermelhos, leucócitos e linfócitos,
mas nenhum efeito citotóxico foi observado (Parshad et al. 1994).

Os efeitos dos extratos aquosos são ambíguos. Muitos dos estudos não relatam relações
dose/efeito. A maioria dos efeitos positivos são mencionados, mesmo após a
administração de altas doses, mas os efeitos tóxicos são observados em concentrações
de 200 mg/kg de peso corporal, resultando na morte de cabras tratadas (Ali 1987). Os
efeitos na reprodução são mencionados apenas indiretamente como uma diminuição na
testosterona (Parshad et al. 1994). O nível de efeito adverso não observado mais
95
relevante (NOAEL) é 30 mg/kg peso corporal por dia, no qual não há modulação das
respostas imunes (Ray et al. 1996).

Os extratos não aquosos são mais repelentes que os pós. A toxicidade aguda do extrato
de folhas em éter de petróleo causou uma diminuição na atividade espontânea,
frequência respiratória e tônus corporal e dos membros em camundongos, junto à
respostas diminuídas ao ambiente, pilo ereção e hipotermia dependente da dose (Singh et
al. 1987). Duas frações de um extrato de folha em éter de petróleo mostraram atividade
depressora do sistema nervoso central em camundongos, como evidenciado por uma
redução na atividade locomotora. Ambas as frações causaram reduções na pressão
arterial e na frequência cardíaca em ratos, sem apresentar atividade diurética. A
toxicidade aguda do extrato de éter de petróleo das folhas foi evidente na atividade
motora, na orientação, redução da reação à dor e convulsões em camundongos com DL 50
oral de 22g/kg de peso corporal (Koley et al. 1994).

O extrato de folhas em etanol induziu anormalidades cromossômicas mitóticas

dependentes da dose em células da medula óssea de camundongos. As anomalias do
tipo macroscópicas apareceram mesmo com a dose mais baixa e permaneceram
inalteradas na frequência com as doses mais altas. O extrato causou aumento na
incidência de alterações estruturais dos cromossomos metafásicos. Um constituinte do
extrato provavelmente interfere com o DNA para produzir a quebra da cadeia
cromossômica ou distúrbios do fuso produzidos, induzindo efeitos genotóxicos (Awasthy
et al. 1999). O extrato de folhas em etanol por si só não teve efeito na utilização periférica
de glicose (Chattopadhyay 1996). Em doses superiores a 50 mg/kg de peso corporal, o
extrato diminuiu o nível de açúcar no sangue. O valor de DL 50 em camundongos foi de 4,6
g/kg de peso corporal (Chattopadhyay 1999). O extrato de folhas em etanol não alterou o
conteúdo de glicogênio hepático em ratos normais, mas em ratos alimentados com
glicose ou em combinação com insulina, reduziu o conteúdo de glicogênio hepático
(Chattopadhyay et al. 1993). O exame em roedores previamente tratados com extratos de
sementes revelou reabsorção completa de embriões no dia 15 de gravidez (Mukherjee et
al. 1996). O extrato de semente em hexano, em contraste com os extratos em etanol e
água, anulou completamente a gravidez. A restauração da fertilidade foi observada em
ciclos subsequentes, e nenhum efeito tóxico adicional foi encontrado (Mukherjee et al.
1999).

96
9. Observações Finais e Orientações Futuras
Neem é atualmente uma das árvores mais exploradas cientificamente do mundo. As
perspectivas domésticas, comerciais e industriais do neem são ilimitadas e estimulantes.
Pode ajudar a humanidade a resolver questões abrangentes ambientais e de saúde. Tem
sido amplamente utilizado em medicamentos chineses, ayurvédicos e unani em todo o
mundo, especialmente no subcontinente indiano, no tratamento e prevenção de várias
doenças por meio de seu papel na eliminação da produção de radicais livres e na
prevenção do início da patogênese da doença. É tolerante à seca com forragem rica,
mesmo durante a estação seca. Atualmente, a redução do crescimento dos recursos para
alimentação animal é uma preocupação séria para a saúde e produtividade do gado.
Nesse cenário, as folhas de neem podem ser fornecidas como suplemento durante a
estação seca para aumentar o consumo de ração, bem como a qualidade da dieta. A
pesquisa com folhas de neem como forragem deve, portanto, receber atenção adequada
para encontrar maneiras de utilizar este recurso abundante, especialmente nas áreas de
baixa precipitação da sub-região onde a alimentação da estação seca continua a ser um
grande desafio. Seu bolo de grãos também é bastante palatável para bovinos e bubalinos
adultos mesmo sem lavagem, prometendo futuro na alimentação de búfalos bezerros,
cordeiros e carneiros. Para melhor utilização, a descorticação das sementes de neem
pode ser feita de forma eficaz em nível industrial com recuperação de óleo maximizada. O
subproduto do bolo proteico processado carrega o potencial de um suplemento proteico
não convencional mais barato. No entanto, mais pesquisas são necessárias para a
validação científica dos múltiplos efeitos, bem como para explorar qualquer outro
potencial terapêutico distinto dos extratos para otimizar sua utilização.

Referências
Abbasi MK, Hina M, Tahir MM (2011) Effect of Azadirachta indica (neem), sodium thiosulphate and calcium chloride on
changes in nitrogen transformations and inhibition of nitrification in soil incubated under laboratory conditions.
Chemosphere 82:1629–1635
Adjorlolo LK, Timpong-Jones EC, Boadu S, Adogla-Bessa T (2016) Potential contribution of neem (Azadirachta indica)
leaves to dry season feeding of ruminants in West Africa. Livestock Res Rural Develop 28:75.
http://www.lrrd.org/lrrd28/5/adjo28075.htm. Retrieved 10 Jan 2019
Aladakatti RH, Ahamed RN, Ahmed M et al (2001) Sperm parameters changes induced by Azadirachta indica in albino
rats. J Basic Clin Physiol Pharmacol 12:69–76
Ali BH (1987) Toxicity of Azadirachta indica leaves in goats and guinea pigs. Vet Hum Toxicol 29:16–19
Al-Samarrai G, Singh H, Syarhabil M (2012) Evaluating eco-friendly botanicals (natural plant extracts) as alternatives
to synthetic fungicides. Ann Agric Environ Med 19:673–676
Anandan S, Sastry VRB, Musalia LM et al (1996) Growth rate and nutrient efficiency of growing goats fed urea
ammoniated neem (Azadirachta indica) seed kernel meal as protein supplement. Small Rumin Res 22:205–212
Ananthasubramainiam CR, Menacherry M, Devasia PA (1979) Studies on the feeding value of neem (Azadirachta
indica) seed cake for cattle. Kerala J Vet Sci 10:182–185
Androutsopoulos VP, Tsatsakis AM, Spandidos DA (2009) Cytochrome P450 CYP1A1: wider roles in cancer
progression and prevention. BMC Cancer 9:187
Ansah T, Nagbila DA (2011) Utilization of local trees and shrubs for sustainable livestock production in the Talensi-
Nabdam district of the upper east region of Ghana. Livest Res Rural Develop 23(4):75

97
 Arivazhagan S, Balasenthil S, Nagini S (2000) Modulatory effects of garlic and neem leaf extracts on N-methyl-N$-
nitro-Nnitrosoguanidine (MNNG)-induced oxidative stress in Wistar rats. Cell Biochem Funct 18:17–21
Arumugam A, Agullo P, Boopalan T et al (2014) Neem leaf extract inhibits mammary carcinogenesis by altering cell
proliferation, apoptosis, and angiogenesis. Cancer Biol Ther 15(1):26–34
Aruwayo A (2011) Effect of evaluation of alkali treated neem kernel cake fed to Uda Sheep in a Semi-Arid zone of
Nigeria. Unpublished Ph.D thesis, p 131
Aruwayo A, Maigandi SA, Malami BS et al (2011) Haematological and biochemical parameters of Uda lambs fed
graded levels of alkalitreated neem kernel cake. Niger J Basic Appl Sci 19(2):277–284
Asif M (2012) Antimicrobial potential of Azadirachta indica against pathogenic bacteria and fungi. J Pharmacog
Phytochem 1:78–83
Awasthy KS, Chaurasia OP, Sinha SP (1999) Prolonged murine genotoxic effects of crude extracted from neem.
Phytother Res 13:81–83
Awasthy KS (2001) Genotoxicity of a crude leaf extract of neem in male germ cells of mice. Cytobios 106(2):151–164
Badam L, Joshi SP, Bedekar SS (1999) In vitro antiviral activity of neem (Azadirachta indica, A. Juss) leaf extract
against group B Coxsackie viruses. J Commun Dis 31:79–90
Bandyopadhyay D, Biswas K, Bandyopadhyay U et al (2000) Melatonin protects against stress-induced gastric lesions
by scavenging the hydroxyl radical. J Pineal Res 29:143–151
Barik S, Banerjee S, Sarkar M et al (2013) Normalization of tumor microenvironment by neem leaf glycoprotein
potentiates effector T cell functions and therapeutically intervenes in the growth of mouse sarcoma. PLoS One
8(6):e66501
Bawa GS, Orunmuyi M, Onabanjo OA (2005) Effect of dietary inclusion levels of mechanically extracted neem seed
cake on performance of young rabbits. Niger J Anim Prod 32:233–239
Bawa GS, Orunmuyi M, Agbaji AS et al (2007) Effect of different methods of processing neem (Azadirachta indica)
seeds on performance of young rabbits. Pak J Nutr 6(3):213–216
Bedi SPS, Vijjan VK, Ranjhan SK (1975) Utilization of neem (Azadirachtaindica) seed cake and its influence on
nutrients digestibility in buffaloes. Indian J Sci 28:104–107
Bhandari AS, Joshi MS (1974) The effect of feeding deoiled neem cake on health of sheep. Indian Vet J 51:659–660
Bhanwra S, Singh J, Khosla P (2000) Effect of Azadirachtaindica (NEEM) leaf aqueous extract on paracetamol-
induced liver damage in rats. Indian J Physiol Pharmacol 44:64–69
Bharitkar YP, Bathini S, Ojha D et al (2014) Antibacterial and antiviral evaluation of sulfonoquinovosyldiacylglyceride: a
glycolipid isolated from Azadirachta indica leaves. Lett Appl Microbiol 58:184–189
Bhowmik S, Chowdhury SD, Kabir MH et al (2008) Chemical composition of some medicinal plant products of
indigenous origin. Bangladesh Vet 25(1):32–39
Bonsu FRK, Kagya-Agyemang JK, Kwenin WKJ et al (2012) Medicinal response of broiler chickens to diets containing
neem (Azadirachta indica) leaf meal, haematology and meat sensory analysis. World Appl Sci J 19:800–805
Chagas ACS, Vieira LS, Freitas AR et al (2008) Anthelmintic efficacy of neem (Azadirachta indica A. Juss) and the
homeopathic product Fator Vermes® in Morada Nova sheep. Vet Parasitol 151:68–73
Chandrawathani P, Chang KW, Nurulaini R et al (2006) Daily feeding of fresh Neem leaves (Azadirachta indica) for
worm control in sheep. Trop Biomed 23(1):23–30
Chattopadhyay RR (1996) Possible mechanism of antihyperglycemic effect of Azadirachta indica leaf extract. Part IV.
Gen Pharmacol 27:431–434
Chattopadhyay RR (1998) Possible biochemical mode of antiinflammatory action of Azadirachta indica A. Juss. in rats.
Indian J Exp Biol 36:418–420
Chattopadhyay RR (1999) A comparative evaluation of some blood sugar lowering agents of plant origin. J
Ethnopharmacol 67:367–372
Chattopadhyay RR, Chattopadhyay RN, Maitra SK (1993) Possible mechanism of antihyperglycaemic effect of
Azadirachta indica leaf extract. Part III. Fitoterapia 64:535–538
Chava VR, Manjunath SM, Rajanikanth AV et al (2012) The efficacy of neem extract on four microorganisms
responsible for causing dental caries viz Streptococcus mutans, Streptococcus salivarius, Streptococcus mitis and
Streptococcus sanguis: an in vitro study. J Contemp Dental Pract 13:769–772
Clausen S, Larsen LM, Ploger A et al (1985) Advances in the production and utilization of cruciferous crops. Junk
Publications, The Netherlands
Das BK, Mukherjee SC, Sahu BB et al (1999) Neem (Azadirachta indica) extract as an antibacterial agent against fish
pathogenic bacteria. Indian J Exp Biol 37:1097–1100
Dasgupta T, Banerjee S, Yadava PK et al (2004) Chemopreventive potential of Azadirachta indica (Neem) leaf extract
in murine carcinogenesis model systems. J Ethnopharmacol 92:23–36
Del Serrone P, Nicoletti M (2013) Antimicrobial activity of a neem cake extract in a broth model meat system. Int J
Environ Res Public Health 10:3282–3295
Dhaliwal GS, Arora R, Koul O (2004) Neem research in Asian continent: present status and future outlook. In: Koul O,
Wahab S (eds) Neem: today and in the New Millennium. Kluwer Academic, New York
Dhayanithi NB, Ajith Kumar TT, Kathiresan K (2010) Effect of neem extract against the bacteria isolated from marine
fish. J Environ Biol 31:409–412

98
 Djenontin TS, Amusant N, Dangou J, KCD et al (2012) Screening of repellent, termiticidal and preventive activities on
wood, of Azadirachta indica and Carapaprocera (Meliaceae) seeds oils. ISCA J Biol Sci 1(3):2529
Dunkel FV, Ricilards DC (1998) Effect of an Azadirachtin formulation on six non target aquatic macroinvertebrates.
Environ Entomol 27:667–673
Durrani FR, Chand N, Jan M et al (2008) Immunomodulatory and growth promoting effects of neem leaves infusion in
broiler chicks. Sarhad J Agric 24(4):655–660
Elangovan AV, Verma SVS, Sastry VRB et al (2000a) Laying performance of Japanese quail fed graded levels of neem
(Azadirachta indica) kernel meal incorporated diets. Anim Feed Sci Technol 88 (1–2):113–120
Elangovan AV, Verma SVS, Sastry VRB et al (2000b) Effect of feeding neem (Azadirachta indica) kernel meal on
growth, nutrient utilization and physiology of Japanese quails (Coturnixcoturnix japonica). Asian-Australas J Anim Sci
13(9):1272–1277
Esonu BO, Opara MN, Okoli IC et al (2006) Physiological responses of laying birds to neem (Azadirachta indica A.
juss) leaf meal based diets, body weight, organs characteristics and haematology. Online J Health Sci 2:4
Ezz-Din D, Gabry MS, Farrag ARH et al (2011) Physiological and histological impact of Azadirachtaindica (neem)
leaves extract in a rat model of cisplatin-induced hepato and nephrotoxicity. J Med Plants Res 5(23):5499–5506
Fajinmi AO, Adedeji SK, Hassan WA et al (1989) Inclusion of non-conventional feedstuffs in rabbit concentrate ration, a
case of neem seeds. Appl Rabbit Res 13:125–128
Fujihara T, Abdulrazak SA, Ichinohe T et al (2004) Comparative rumen degradability of some legume forages between
wet and dry season in West Sumatra, Indonesia. Asian-Australas J Anim Sci 17 (8):1107–1111
Fujiwara T, Sugishita EY, Takeda J et al (1984) Further studies on the structure of polysaccharides from the bark of
Melia azadirachta. Chem Pharm Bull 32:1385–1391
Gandhi M, Lal R, Sankaranarayanan A et al (1988) Acute toxicity study of the oil from Azadirachta indica seed (neem
oil). J Ethnopharmacol 23:39–51
Garcia GW, Ferguson TU, Neckles FA et al (1996) The nutritive value and forage productivity of
Leucaenaleucocephala. Anim Feed Sci Technol 60(1-2):29–41
Garg AK (1989) Studies on deoiled neem (Azadirachta indica) seed cake as a cattle feed. Unpublished PhD thesis,
IVRI, Izatnagar, India, pp 129–175
Garg S, Doncel G, Chabra S et al (1994) Synergistic spermicidal activity of neem seed extract, reetha saponins and
quinine hydrochloride. Contraception 50:185–190
Gbotolorun SC, Osinubi AA, Noronha CC et al (2008) Antifertility potential of neem flower extract on adult female
Sprague-Dawley rats. Afr Health Sci 8:168–173
Geraldo MR, Da Costa CL, Arrotéia CC, Kemmelmeier C (2011) The neem [Azadirachta indica A. juss (meliaceae)] oil
reduction in the in vitro production of zearalenone by Fusarium graminearum. Braz J Microbiol 42:707–710
Girish K, Shanakara BS (2008) Neem—a green treasure. Electron J Biol 4(3):102–111
Gowda SK, Sastry VRB (2000) Neem (Azadirachta indica) seed cake in animal feeding-scope and limitations: review.
Asian-Australas J Anim Sci 13(5):720–728
Gowda SK, Verma SVS, Elangovan AV et al (1998) Neem (Azadirachta indica) kernel meal in the diet of White
Leghorn layers. Br Poult Sci 39(5):648–652
Gunadharini DN, Elumalai P, Arunkumar R et al (2011) Induction of apoptosis and inhibition of PI3K/Akt pathway in PC-
3 and LNCaP prostate cancer cells by ethanolic neem leaf extract. J Ethnopharmacol 134(3):644–650
Gupta RS, Bhaid MV (1980) A study on the effect of feeding different levels of deoiled neem fruitcake in the
concentrate mixture on water consumption in lambs. Rev Agro Anim Sci Health 121
Gupta S, Kataria M, Gupta PK et al (2001) Effect of petroleum ether extracts of different parts of neem seed
(Azadirachta indica) on haematological and biochemical parameters in rats. Indian J Anim Res 35:21–26
Harjai K, Bala A, Gupta RK et al (2013) Leaf extract of Azadirachta indica (neem): a potential antibiofilm agent for
Pseudomonas aeruginosa. Pathog Dis 69:62–65
Jacobson M (1995) Antifertility effects and population control. In: Schummtterer H (ed) The neem tree. VCH
Publication, Hoshenheim, pp 526–530
Kale BP, KothekarMA THP et al (2003) Effect of aqueous extract of Azadirachtaindica leaves on hepatotoxicity induced
by antitubercular drugs in rats. Indian J Pharmacol 35:177–180
Kartikar KR, Basu BD (1935) Azadirachta indica, vol 1 (2nd ed). Indian medicinal plants. Lalitha Mohan Basu,
Allahabad
Katiyar RC, Sastry VRB, Agrawal DK (1993) Nutrient utilization from alkali treated neem seed kernel cake by cattle and
buffalo. Indian J Anim Nutr 10(4):223–226
Ketkar AY, Ketkar CM (1995) Various uses of neem product: medicinal uses including pharmacology in Asia. In:
Schmutterer H (ed) The neem tree. Weinheim, Federal Republic of Germany, pp 518–525
Khosla P, Sangeeta B, Singh J et al (2000a) Antinociceptive activity of Azadirachta indica (Neem) in rats. Indian J
Pharmacol 32:372–374
Khosla P, Bhanwra S, Singh J et al (2000b) A study of hypoglycamic effects of Azadirachta indica (NEEM) in normal
and alloxan diabetic rabbits. Indian J Physiol Pharmacol 44:69–74
Kim JK, Kim Y, Na KM et al (2007) (6)-Gingerol prevents UVB-induced ROS production and COX-2 expression invitro
and invivo. Free Radic Res 41:603e14

99
 Koley KM, Lal J, Tandan SK (1994) Anti-inflammatory activity of Azadirachta indica (neem) leaves. Fitoterapia 65:524–
528
Kumar VS, Navaratnam V (2013) Neem (Azadirachta indica): prehistory to contemporary medicinal uses to
humankind. Asian Pac J Trop Biomed 3:505–514
Kumar A, Sharma SD (2003) Nutritive evaluation of some fodder tree leaves for ruminants in Tarai region of
Uttaranchal. Indian J Anim Nutr 20(2):161–167
Kumar GH, Vidya Priyadarsini R, Vinothini G et al (2010) The neem limonoids azadirachtin and nimbolide inhibit cell
proliferation and induce apoptosis in an animal model of oral oncogenesis. Invest New Drugs 28:392–401
Kumar D, Rahal A, Malik JK (2016) Neem extract. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity.
Academic, Amsterdam, pp 585–597
Kusamran WR, Ratanavila A, Tepsuwan A (1998) Effects of neem flowers, Thai and Chinese bitter gourd fruits and
sweet basil leaves on hepatic monooxygenases and glutathione S-transferase activities, and in vitro metabolic activation
of chemical carcinogens in rats. Food Chem Toxicol 36(6):475–484
Lal R, Gandhi M, Sankaranarayanan A et al (1987) Antifertility effect of Azadirachta indica oil administered per os to
female albino rats on selected days of pregnancy. Fitoterapia 58:239
Landy N, Ghalamkari G, Toghyani M (2011) Performance, carcass characteristics, and immunity in broiler chickens fed
dietary neem (Azadirachta indica) as alternative for an antibiotic growth promoter. Livest Sci 142(1–3):305–309
MacArthur JI, Fletcher TC (1995) Phagocytosis in fish. In: Manning MJ, Tatner MF (eds) Fish immunology. Academic,
London, pp 29–46
Mahfuzul HMD, Bari ML, Inatsu Y et al (2007) Antibacterial activity of guava (Psidium guajava L.) and neem
(Azadirachta indica A. Juss.) extracts against foodborne pathogens and spoilage bacteria. Foodborne Pathog Dis 4:481–
488
Manikandan P, Letchoumy PV, Gopalakrishnan M et al (2008) Evaluation of Azadirachta indica leaf fractions for in vitro
antioxidant potential and in vivo modulation of biomarkers of chemoprevention in the hamster buccal pouch
carcinogenesis model. Food Chem Toxicol 46(7):2332–2343
Maragathavalli S, Brindha S, Kaviyarasi NS et al (2012) Antimicrobial activity in leaf extract of neem (Azadirachta
indica Linn.). Int J Sci Nat 3:110–113
Martinez SO (2002) NIM-Azadirachta indica: natureza, usosmúltiploseprodução. InstitutoAgronômico do Paraná
(IAPAR), Londrina
Mehrotra S, Srivastava AK, Nandi SP (2010) Comparative antimicrobial activities of neem, amla, aloe, Assam tea and
clove extracts against Vibrio cholera, Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa. J Med Plants Res 4:2473–
2478
Mujumdar AM, Upadhye AS, Pradhan AM (1998) Effect of Azadirachta indica leaf extract on CCl4 induced hepatic
damage in albino rats. Indian J Pharm Sci 60:363–367
Mukherjee A, Sengupta S (2013) Characterization of nimbidiol as a potent intestinal disaccharidase and glucoamylase
inhibitor present in Azadirachta indica (neem) useful for the treatment of diabetes. J Enzyme Inhib Med Chem 28:900–
910
Mukherjee S, Garg S, Pal R et al (1996) Effect of neem Azadirachta indica seed extracts given orally in on
implantations in rodents. Indian J Pharmacol 28:49
Mukherjee S, Garg S, Talwar GP (1999) Early post implantation contraceptive effects of a purified fraction of neem
(Azadirachta indica) seeds, given orally in rats: possible mechanisms involved. J Ethnopharmacol 67:287–296
Mukherjee AK, Doley R, Saikia D (2008) Isolation of a snake venom phospholipase A2 (PLA2) inhibitor (AIPLAI) from
leaves of Azadirachta indica (neem): mechanism of PLA2 inhibition by AIPLAI in vitro condition. Toxicon 51:1548–1553
Nagalakshmi D, Sastry VRB, Agrawal DK et al (1996) Performance of broiler chicks fed on alkali-treated neem
(Azadirachta indica) kernel cake as a protein supplement. Br Poult Sci 37(4):809–818
Nagalakshmi D, Sastry VRB, Katiyar RC et al (1999) Performance of broiler chicks fed on diets containing urea
ammoniated neem (Azadirachta indica) kernel cake. Br Poult Sci 40(1):77–83
NRC (National Research Council) (1992) Neem: a tree for solving global problems. National Academy Press,
Washington, DC
Nya EJ, Austin B (2009) Use of garlic, Allium sativum, to control Aeromonas hydrophila infection in rainbow trout,
Oncorhynchus mykiss (Walbaum). J Fish Dis 32:963–970
Obikaonu HO, Opara MN, Okoli IC et al (2012) Haematological and serum biochemical indices of starter broilers fed
leaf meal of neem (Azadirachta indica). J Agric Technol 8(1):71–79
Ogbuewu IP, Okoli IC, Iloeje MU (2010a) Evaluation of toxicological effects of leaf meal of an ethnomedicinal plant-
neem on blood chemistry of puberal Chinchilla rabbit does. Rep Opin 2(2):29–34
Ogbuewu IP, Okoli IC, Iloeje MU (2010b) Evaluation of toxicological effects of leaf meal of an ethnomedicinal plant-
neem on blood chemistry of puberal Chinchilla rabbit does. Rep Opin 2(2):54–57
Ogbuewu IP, Odoemenam VU, Obikaonu HO et al (2011a) The growing importance of neem (Azadirachta indica A.
juss) in Agriculture, industry, medicine and environment: a review. Res J Med Plants 5 (3):230–245
Ogbuewu IP, Okoli IC, Iloeje MU (2011b) Evaluation of dried leaf meal of anethnomedicinal plant neem on linear
growths and reproductive tract morphometry of rabbit does. Electron J Environ Agric Food Chem 10(4):2153–2159
Olajide OA (1999) Investigation of the effects of selected medicinal plants on experimental thrombosis. Phytother Res
13:231–232

100
 Omoja VU, Anaga AO, Obidike IR et al (2011) The effects of combination of methanolic leaf extract of Azadirachta
indica and diminazenediaceturate in the treatment of experimental Trypanosoma brucei brucei infection in rats. Asian
Pac J Trop Med 4(5):337–341
Omoregie E, Okpanachi MA (1992) Growth of Tilapiazilli exposed to sublethal concentrations of crude extracts of
Azadirachtaindica. Acta Hydrobiol 34:281–286
Omoregie E, Okpanachi MA (1997) Acute toxicity of water extracts of bark of the Neem plant, Azadirachta indica
(Lodd) to the cichlid Tilapia zillii (Gervais). Acta Hydrobiol 39:47–51
Paengkoum P (2010) Effect of neem (Azadirchta indica) and leucaena (Leucaenaleucocephala) fodders on
digestibility, rumen fermentation and nitrogen balance of goats fed corn silage. J Anim Vet Adv 9 (5):883–886
Panda S, Kar A (2000) How safe is neem extract with respect to thyroid function in male mice? Pharmacol Res
41:419–422
Pant N, Garg HS, Madhusudanan KP et al (1986) Sulforous compounds from Azadiracta indica leaves. Fitoterapia
57:302–304
Parida MM, Upadhyay C, Pandya G et al (2002) Inhibitory potential of neem (Azadirachta indica Juss) leaves on
Dengue virus type-2-replication. J Ethnopharmacol 79:273–278
Parshad O, Singh P, Gardner M et al (1994) Effects of aqueous neem (Azadirachta indica) extract on testosterone and
other blood constituents in male rats, a pilot study. West Indian Med J 43:71–74
Peters M, Tarawali SA, Alkamper J (1997) Dry season performance of four tropical pasture legumes in subhumid West
Africa as influenced by superphosphate application and weed control. Trop Grassl 31:201–213
Prasannabalaji N, Muralitharan G, Sivanandan RN et al (2012) Antibacterial activities of some Indian traditional plant
extracts. Asian Pacific J Trop Dis 2:S291–S295
Prashant GM, Chandu GN, Murulikrishna KS et al (2007) The effect of mango and neem extract on four organisms
causing dental caries: Streptococcus mutans, Streptococcus salivarius, Streptococcus mitis and Streptococcus sanguis:
an in vitro study. Indian J Dent Res 18:148–151
Priyadarsini RV, Manikandan P, Kumar GH et al (2009) The neem limonoids azadirachtin and nimbolide inhibit hamster
cheek pouch carcinogenesis by modulating xenobiotic metabolizing enzymes, DNA damage, antioxidants, invasion and
angiogenesis. Free Radic Res 43(5):492–504
Priyadarsini RV, Murugan RS, Sripriya P et al (2010) The neem limonoids azadirachtin and nimbolide induce cell cycle
arrest and mitochondria-mediated apoptosis in human cervical cancer (HeLa) cells. Free Radic Res 44(6):624–634
Raghuvansi SKS, Prasad R, Mishra AS et al (2007) Effect of inclusion of tree leaves in feed on nutrient utilization and
rumen fermentation in sheep. Biores Technol 98:511–517
Ramana DBV, Singh S, Solanki KR et al (2000) Nutritive evaluation of some nitrogen and nonnitrogen fixing
multipurpose tree species. Anim Feed Sci Technol 88:103–111
Ray A, Banerjee BD, Sen P (1996) Modulation of humoral and cellmediated immune responses by Azadirachta indica
(neem) in mice. Indian J Exp Biol 34:698–701
Reddy GVN, Reddy MR (1999) Effect of feeding extruded complete diet containing maize cobs in Ongole bull calves.
Indian J Anim Nutri 16:210–214
Reddy VR, Rao PV, Reddy CV (1988) Utilization of chemically treated neem oil in broiler in broiler chicks. Indian J
Anim Sci 58:830–834
Rosaline H, Kandaswamy D, Gogulnath D et al (2013) Influence of various herbal irrigants as a final rinse on the
adherence of Enterococcus faecalis by fluorescence confocal laser scanning microscope. J Conserv Dent 16:352–355
SaiRam M, Ilavazhagan G, Sharma SK et al (2000) Anti-microbial activity of a new vaginal contraceptive NIM-76 from
neem oil (Azadirachta indica). J Ethnopharmacol 71:377–382
Salawu MB, Adedeji SK, Hassan WH (1994) Performance of broilers and rabbits given diets containing full fat neem
(Azadirachta indica) seed meal. Anim Prod 58:285–289
Sarmiento WC, Maramba CC, Gonzales MLM (2011) An in-vitro study on the antibacterial effect of neem (Azadirachta
indica) leaf extract on methicillin-sensitive and Methicillin-resistant Staphylococcus aureus. PIDSP J 12:40–45
Schmutterer H (1995) The neem tree source of unique national product for IPM, Medine, industry and other purposes.
VCH Publication, New York
Schumacher M, Cerella C, Reuter S et al (2011) Anti-inflammatory, pro-apoptotic, and anti-proliferative effects of a
methanolic neem (Azadirachta indica) leaf extract are mediated via modulation of the nuclear factor-κBα e AMPK. Esses dadosB pathway. Genes
Nutr 6(2):149–160
Seddiek SA, Khater HF, El-Shorbagy MM et al (2013) The acaricidal efficacy of aqueous neem extract and ivermectin
against Sarcoptesscabiei var. Cuniculi in experimentally infested rabbits. Parasitol Res 112:2319–2330
Seresinhe T, Marapana RAUJ (2011) Goat farming systems in the southern province of Sri Lanka: feeding and
management strategies. World J Agri Sci 7(4):383–390
Sharma P, Tomar L, Bachwani M et al (2011) Review on neem (Azadirachtaindica): thousand problems one solution.
Int Res J Pharmacy 2(12):97–102
Sharma C, Vas AJ, Goala P et al (2014) Ethanolic neem (Azadirachta indica) leaf extract prevents growth of MCF-7
and HeLa cells and potentiates the therapeutic index of cisplatin. J Oncol 2014:321754
Singh K (1993) Livestock production and health. In: Neem research and development, Publication No. 3, Soc Pesticide
Sci India, pp 187–198
Singh PP, Junnarkar AY, Reddi GS, Singh KV (1987) Azadirachta indica: neuro-psychopharmacological antimicrobial
studies. Fitoterapia 58:235–238
101
 Subapriya R, Nagini S (2005) Medicinal properties of neem leaves: a review. Curr Med Chem Anticancer Agents
5:149–146
Subramanian MS, Lakshmanan KK (1996) Azadirachta indica A. Juss. Stem bark as an anti-leprosy source. In: Singh
RP, Chari MS, Raheja AK, Kraus W (eds) Neem and environment, vol 2. Oxford & IBH Publishing, New Delhi, pp 1143–
1150
Talpur AD, Ikhwanuddin M (2013) Azadirachta indica (neem) leaf dietary effects on the immunity response and disease
resistance of Asian seabass, Latescalcarifer challenged with Vibrio harveyi. Fish Shellfish Immunol 34:254–264
Tandan SK, Chandra S, Gupta S et al (1990) Pharmacological effects of Azadirachtaindica leaves. Fitoterapia 61:75–
78
Tiwari V, Darmani NA, Yue BY et al (2010) In vitro antiviral activity of neem (Azardirachta indica L.) bark extract against
herpes simplex virus type-1 infection. Phytother Res 24:1132–1140
Tiwary MK, Pandey A (2010) Feeding neem (Azadirachtaindica) products to small ruminants as anthelmintics. Food
Sci Tech Lett 1 (1):10
Uko OJ, Kamalu TN (2008) Trend of feed consumption and efficiency of broiler production with raw or heat-treated
neem kernels. Arch Zootec 57(220):489–496
Vasenwala SM, Seth R, Haider N et al (2012) A study on antioxidant and apoptotic effect of Azadirachta indica (neem)
in cases of cervical cancer. Arch Gynecol Obstet 286(5):1255–1259
Veeraraghavan J, Natarajan M, Lagisetty P et al (2011) Impact of curcumin, raspberry extract, and neem leaf extract
on rel proteinregulated cell death/radiosensitization in pancreatic cancer cells. Pancreas 40(7):1107–1119
Verkerk RHJ, Wright DJ (1993) Biological activity of neem seed kernel extract and synthetic azadirachtin against larvae
of Plutellaxylostellal. Pesticide Sci 37:83–91
Vinoth B, Manivasagaperumal R, Rajaravindran M (2012) Phytochemical analysis and antibacterial activity of
Azadirachta indica A juss. Int J Res Plant Sci 2:50–55
Wallace JL, Grangers DN (1996) The cellular and molecular basis of gastric mucosal defense. FASEB J 10:731–740

102
 Potencial nutracêutico do gengibre
Krishnamoorthy Srinivasan, Pratik Adhya, and Shyam Sunder Sharma

Resumo
Nos últimos anos, a maioria das pessoas em todo o mundo tornou-se consciente da
saúde e, recentemente, os países foram até classificados com base no grau de
consciência de seus cidadãos sobre a saúde. De acordo com a classificação dos
melhores países de 2018, a Suécia é considerada o país mais preocupado com a saúde
do mundo. Pessoas em todo o mundo gostariam de ter um estilo de vida saudável e não
desejam nenhuma doença que possa criar angústia em suas vidas. A fim de melhorar sua
saúde, as pessoas começaram a consumir suplementos alimentares ou nutracêuticos que
trazem muitos benefícios à saúde para a prevenção de doenças. Fibras dietéticas,
probióticos, prebióticos, ácidos graxos poli-insaturados (PUFA), antioxidantes, vitaminas,
polifenóis e especiarias estão todos sendo usados como nutracêuticos. O gengibre é um
tempero usado em todo o mundo para fins culinários e também por seus benefícios para a
saúde de animais e humanos. A rica composição fitoquímica do gengibre o torna eficaz
contra um amplo espectro de doenças crônicas. Os fitoconstituintes do gengibre fornecem
benefícios à saúde, não apenas modulando vários sistemas antioxidantes intrínsecos do
corpo, mas também agindo como eliminadores de radicais livres. As propriedades
nutracêuticas do gengibre incluem antioxidante, antiinflamatória, gastroprotetora,
imunomoduladora, neuroprotetora, cardioprotetora a quimiopreventiva e antidiabética. Na
verdade, os efeitos benéficos do gengibre impulsionaram seu estudo em vários ensaios
clínicos em diferentes países para testar sua eficácia em várias doenças. Mesmo as
diferentes formulações com extrato de gengibre ou seus constituintes, como o gingerol,
estão disponíveis comercialmente para melhorar a saúde de humanos e animais. Neste
capítulo, revisamos as evidências dos efeitos benéficos do gengibre como suplemento
dietético, acompanhado de estudos científicos em animais e humanos que comprovam
seus benefícios na melhoria da saúde.

Palavras-chave: Nutracêuticos veterinários · Gengibre

K. Srinivasan · P. Adhya · S. S. Sharma (*) Department of Pharmacology and Toxicology, National Institute of
Pharmaceutical Education and Research (NIPER), Mohali, Punjab, India. e-mail: sssharma@niper.ac.in

103
1. Introdução
O gengibre (Zingiber officinale, Família: Zingiberaceae) é uma planta tropical com flores, e
suas raízes ou rizoma têm sido amplamente utilizadas como especiaria em todo o mundo
para fins culinários, especialmente por seu aroma e pungência característicos (Kubra e
Rao 2012). O nome genérico, Zingiber, é derivado da palavra grega “zingiberis”, que veio
do nome sânscrito da especiaria “singabera”. O nome sânscrito, singabera, significa “em
forma de chifre” devido à semelhança de sua raiz com o chifre de um cervo (Sharma
2017). Especificamente, o gengibre é amplamente considerado como uma planta de
potente valor medicinal em muitos sistemas de medicina antigos, incluindo a medicina
chinesa, a fitoterapia Tibb-Unani e a medicina ayurvédica. Na verdade, o gengibre é
descrito como Mahaoushadha (grande remédio) na medicina tradicional indiana por causa
de seus amplos benefícios médicos. Os sistemas de medicamentos tradicionais têm
usado o rizoma do gengibre em sua forma fresca ou seca para o tratamento de várias
doenças como náuseas, vômitos, perda de apetite, cólicas estomacais, azia, flatulência,
indigestão, resfriado comum, gripe, tosse, catarro, doenças do sistema nervoso, gengivite,
dor de dente, asma, acidente vascular cerebral, constipação, diabetes, artrite,
reumatismo, enxaqueca, dores de cabeça, palpitações cardíacas, hipertensão e
impotência (Ali et al. 2008; Kubra e Rao 2012). Ele também pode ajudar na prevenção de
várias doenças como doença arterial coronariana, úlceras, câncer e vários distúrbios
inflamatórios. O estilo de vida dos seres humanos mudou tremendamente nas últimas
décadas por causa da industrialização e da mudança na cultura de trabalho que levou a
uma cultura de comer fast-food. Essas refeições são instantâneas e mais saborosas, mas
têm pouco valor nutritivo. Isso levou ao aumento da incidência de várias doenças crônicas
e relacionadas ao estilo de vida, como diabetes, obesidade, câncer, doenças
cardiovasculares e neurodegenerativas e disfunção imunológica. Consequentemente, tem
havido um crescente interesse global por produtos alimentícios que promovem a saúde,
os chamados nutracêuticos, por consumidores em todo o mundo. Nutracêutico é o novo
termo híbrido entre nutriente e farmacêutico, cunhado pelo Dr. Stephen L. DeFelice em
1989 (Prabu et al. 2012). Numerosos estudos de validação clínica e experimental in vitro,
e in vivo comprovaram os vários efeitos farmacológicos do gengibre e sua segurança
(Semwal et al. 2015; Srinivasan 2017). Determinadas moléculas bioativas e princípios
ativos também foram identificados como sendo responsáveis por sua atividade. Além de
suas indicações terapêuticas, o gengibre e seus constituintes fitoquímicos podem ser
usados para vários benefícios de promoção da saúde, abrangendo a prevenção e o
tratamento de doenças em humanos e também em animais (Srinivasan 2017). Este
capítulo do livro descreve a evidência dos benefícios do gengibre dietético na promoção
104
da saúde em uma base farmacológica e seu potencial para ser rotulado como
nutracêutico em um futuro próximo.

2. Composição Fitoquímica do Gengibre

A ocorrência, cultivo, colheita, características morfológicas e constituintes químicos do
gengibre foram descritos recentemente (Sharma 2017). Os constituintes químicos dos
rizomas de gengibre são numerosos e a quantidade de tais constituintes depende do local
de origem e da condição dos rizomas (frescos ou secos) (Ali et al. 2008; Kubra e Rao
2012). Em termos gerais, os constituintes químicos do gengibre podem ser classificados
nas categorias listadas na Tabela 1. É relatado que o rizoma contém 3-6% de óleo graxo,
9% de proteína, 60-70% de carboidratos, 3-8% de fibra bruta, cerca de 8% de cinzas, 9–
12% de água e 2–3% de óleo volátil. O odor do gengibre é principalmente devido ao seu
óleo volátil. Até o momento, mais de 70 componentes do óleo foram relatados e
caracterizados e podem ser classificados em dois grupos: monoterpenóides [b felandreno,
(+)- canfeno, cineol, geraniol, curcumeno, citral, terpineol, borneol] e sesquiterpenóides [a
gingibereno (30-70%), β-sesquifelandrene (15-20%), b bisaboleno (10-15%), (E-E)-a
farneseno, arcurcumeno, zingiberol]. Entre os quais o zingiberol é o principal responsável
pelo aroma distinto do rizoma de gengibre (Ali et al. 2008; Baliga et al. 2011).

Tabela 1 Constituintes fitoquímicos de gengibre

Categoria Componentes
Geraniol, curcumeno, b felandreno, (+)- canfeno, 1,8-cineol,
Monoterpenóides
citral, terpineol, borneol, linalool, neral
Zerumbone, a zingibereno, b sesquifelandreno, b bisaboleno,
Sesquiterpenóides
(E-E)-a farneseno, arcurcumênio, zingiberol
Componentes pungentes não voláteis Gingerols, shogaols, paradols, zingerone, desidrozingerona
Diversos Zingibain

O gengibre também possui componentes pungentes não voláteis, incluindo gingerols,

shogaols, paradols, zingerone e dehydrozingerone, que têm atividades biológicas
potentes, como mostrado na Fig. 1.

Destes componentes, os gingeróis [1- (30-metoxi-40-hidroxifenil) -5-hidroxialcan-3-onas]

são os fitoconstituintes mais importantes e são responsáveis pelo seu sabor picante e
várias propriedades farmacológicas. Entre os gingeróis, 6-gingerol([5]-hidroxi-1-(4-hidroxi-
3-metoxifenil) decan-3-ona) é o mais abundante (Baliga et al. 2012; Kubra e Rao 2012).
Outros componentes não voláteis mais pungentes presentes em concentrações mais
baixas no gengibre são os shogaols (fenilalcanonas), que têm ampla utilidade
105
farmacológica. Os shogaols vêm da desidratação de gingerols e sua concentração
aumenta durante a secagem e armazenamento (Baliga et al. 2012; Haniadka et al. 2013).
Gingeróis são termicamente lábeis por causa da presença de um grupo b hidroxi ceto e
rapidamente sofrem desidratação para formar os shogaols correspondentes (Semwal et
al. 2015). Esses shogaols podem ser posteriormente convertidos em paradóis por
hidrogenação. Outros compostos, como gingedióis, gingediacetatos, gingerdiona e
gingerenonas, também estão presentes na fração pungente 20 do gengibre em
concentrações variadas. Alguns outros constituintes relatados como estando presentes no
rizoma de gengibre em pequenas quantidades incluem zingibain (enzima proteolítica
potente), capsaicina, gingediol, galanolactona, ácido gingesulfônico, galactosilgliceróis,
gingerglicolipídeos, diarilheptanoides, fitoesteróis, vitaminas e minerais (Baliga et al. 2011;
Haniadka et al. 2013). Os compostos nutracêuticos que afirmam ter valor medicinal
incluem gengibre, shogaol, dióis de gengibre, eugenol, paradóis e zingerona. Destes, os
gingeróis são considerados os componentes mais farmacologicamente ativos (Mekuriya e
Mekibib 2018).

Fig. 1 Constituintes fitoquímicos de gengibre com

propriedades farmacológicas

3. Perfil Farmacológico do Gengibre

3.1 Benefícios potenciais em doenças gastrointestinais

O gengibre tem sido amplamente utilizado desde os tempos antigos para melhorar certos
sintomas gastrointestinais, como dispepsia e hemorragia gastrointestinal; é usado

20 Ponta
106
principalmente em indigestão, pois adsorve e neutraliza certas toxinas no estômago e
melhora a produção e secreção de bile do fígado e da vesícula biliar. A bile auxilia na
digestão das gorduras, o que por sua vez ajuda a diminuir os níveis de colesterol. O
gengibre tem sido usado como carminativo para melhorar a digestão e reduzir gases
gastrointestinais e flatulência (Qin e Xu 2008; Sharma 2017). Complicações gástricas
como constipação, dispepsia, arrotos, inchaço, gastrite, desconforto epigástrico, úlcera
gástrica, indigestão, náusea e vômito foram efetivamente mitigadas com extrato de
gengibre em vários estudos pré-clínicos e clínicos (Haniadka et al. 2013; Keng-Liang et al.
2008). Extrato de gengibre, [6]-gingerol e zingerone demonstraram inibir as contrações
induzidas por ACh do intestino de rato e a diarreia induzida por hipermotilidade, apoiando
sua aplicação clínica de gengibre em distúrbios da motilidade gastrointestinal (Chatturong
et al. 2018; Iwami et al. 2011). Mecanicamente, os efeitos da zingerona como um agente
pró cinético foram recentemente atribuídos à inibição dos potenciais de marcapasso das
células intersticiais de Cajal (ICCs) (responsáveis por ondas lentas no trato
gastrointestinal (GI)) via óxido nítrico/monofosfato de guanosina cíclico (NO/Canais de K +
sensíveis a trifosfato de adenosina dependente de cGMP (ATP) através de vias
dependentes de proteína quinase mitogenada (MAPK) in vitro (Kim et al. 2018).

Também é amplamente relatado que o gengibre possui propriedades antieméticas

poderosas na hiperemese gravídica, enjoo, quimioterapia do câncer, náuseas pós-
operatórias, vômitos e vômitos associados à gravidez (Ali et al. 2008). Os pesquisadores
também relataram o efeito benéfico do extrato de gengibre na cisplatina (um agente
quimioterápico) - êmese induzida e esvaziamento gástrico retardado (Sharma et al. 1997).
Notavelmente, foi determinado que o extrato alcoólico de acetona do gengibre é mais
eficaz do que o extrato aquoso (Sharma e Gupta 1998; Sharma et al. 1997). No entanto,
em estudos clínicos conduzidos em pacientes com câncer recebendo agentes
quimioterápicos (cisplatina, doxorrubicina), o extrato de pó de gengibre não apresentou
eficácia significativa, o que pode ser devido ao uso de um extrato aquoso em tais
pacientes (Arslan e Ozdemir 2015; Li et al. 2018a; Lua et al. 2015). Extrato de gengibre e
sua essência são considerados eficazes na gravidez em mulheres submetidas a
cesariana (Zeraati et al. 2016), com náuseas e vômitos pós-operatórios associados a
nefrectomias (Hosseini e Adib-Hajbaghery 2015) e com náuseas e vômitos induzidos por
antirretrovirais (Dabaghzadeh et al. 2014), significando um mecanismo diferente para
estímulos de vômito em diferentes configurações. Alguns ensaios clínicos sobre a eficácia
do gengibre em distúrbios gastrointestinais foram e estão sendo realizados em diferentes
países. Foi relatado que os extratos de gengibre aumentam a eficiência da digestão,
aumentando a atividade das lipases e amilases pancreáticas. O gengibre também
107
melhora a saúde geral do trato gastrointestinal por meio de suas ações gastroprotetoras e
por aumentar o crescimento de bactérias benéficas no intestino (Butt e Sultan 2011;
Haniadka et al. 2013). O gengibre exibe propriedades antiulcerogênicas em modelos
animais de úlceras gástricas induzidas por etanol, antiinflamatórios não esteróides
(AINEs) e ácido clorídrico (Liju et al. 2015; Salah Khalil 2015). Além disso, também inibe o
crescimento de Helicobacter pylori, um importante ulcerogênico, e as lesões inflamatórias
associadas, protegendo assim o intestino (Gaus et al. 2009; Mahady et al. 2003). Além
disso, o óleo volátil de gengibre e os gingeróis mostraram-se eficazes em diferentes
modelos animais com colite ou colite ulcerosa (Fig. 2) (Rashidian et al. 2014; Zhang et al.
2017).

Fig. 2 Vários efeitos farmacológicos do gengibre

Estudos realizados com seus títulos; patrocinadores; técnica, resultados e referências (os
estudos cujos resultados não foram publicados foram omitidos):

* Eficácia do gengibre na náusea intra e pós-operatória e vômitos em pacientes de

cesariana eletiva (2013) - Hospital Metodista de Nova York, Brooklyn, NY 11215, EUA.

108
239 mulheres foram divididas em 2 grupos: pó seco de gengibre (n = 116) e grupo
placebo (n = 123). Cada uma recebeu 1 g de cápsula antes da indução da raquianestesia.
O grupo de pó de gengibre seco relatou número reduzido de episódios de náusea intra-
operatória, mas não de náusea pós-operatória, em comparação com o grupo placebo
Kalava et al. (2013). Testes clínicos. Identificador gov: NCT01733212)
* Um estudo para avaliar a eficácia antiemética do gengibre em crianças e adolescentes
recebendo quimioterapia (2009-2011). All India Institute of Medical Sciences, Nova Delhi,
Índia. 32 crianças que receberam agentes quimioterápicos altamente emetogênicos
receberam cápsulas de pó de raiz de gengibre em diferentes doses 1 h, 3 h e 8 h após a
quimioterapia. Seu efeito foi comparado à cápsula de placebo do pó de raiz de gengibre
foi relatado como eficaz na redução da gravidade de náuseas e vômitos induzidos por
agentes quimioterápicos agudos e retardados, mas não eliminou completamente. Pillai et
al. (2011) ClinicalTrials. Identificador gov: NCT00940368
* Enxaqueca: Ensaio clínico randomizado duplo-cego controlado por placebo de adição de
gengibre. no tratamento da enxaqueca aguda (2018). Universidade Federal de Minas
Gerais, Brasil. 60 pacientes receberam cápsula de extrato de gengibre de 400 mg, além
de uma droga intravenosa (100 mg de cetoprofeno), e o resultado foi comparado ao grupo
controlado com placebo. O estudo mostrou que a adição de extrato de gengibre ao
cetoprofeno intravenoso pode contribuir para o tratamento da crise de enxaqueca. Martins
et al. (2018) ClinicalTrials. Identificador gov: NCT02568644
* Câncer colorretal: Estudo clínico piloto dos efeitos do extrato de raiz de gengibre sobre
os eicosanóides na mucosa do cólon de indivíduos com risco aumentado de câncer
colorretal (2015). Escola de Medicina da Universidade de Michigan, EUA. 21 pacientes
com risco aumentado de câncer colorretal receberam 2 g de extrato de raiz de gengibre
encapsulado diariamente por 28 dias, e o efeito foi comparado com placebo. O gengibre
tem efeitos quimiopreventivos e é tolerável e seguro. Zick et al. (2015).

O gengibre não apenas melhora a funcionalidade do trato gastrointestinal, mas também

dá um grande impulso à saúde do fígado (Abdulaziz Bardi et al. 2013; El-Sharaky et al.
2009; Emrani et al. 2016). É relatado que possui valor nutracêutico na prevenção da
fibrose hepática (Motawi et al. 2011), doença hepática gordurosa não alcoólica (Lai et al.
2016; Sahebkar 2011) e cirrose hepática induzida por álcool (Zhuang et al. 2015).
Também foi relatado que possui uma propriedade anti-hepatotóxica em vários modelos
pré-clínicos de hepatotoxicidade induzida por produtos químicos (Abdulaziz Bardi et al.
2013; Baiomy e Mansour 2016; Sabina et al. 2011).

109
3.2 Benefícios potenciais como antioxidante

As reações redox estão constantemente acontecendo dentro de cada tecido vivo para
fornecer energia. Consequentemente, tais reações estão liberando radicais livres como
espécies reativas de oxigênio (ROS) e espécies reativas de nitrogênio (RNS). É relatado
que o aumento da geração desses radicais livres dá origem a uma condição conhecida
como estresse oxidativo, que é citotóxica e mutagênica para as células. Em
circunstâncias normais, as enzimas antioxidantes das células como superóxido dismutase
(SOD), glutationa peroxidase (GPx) e catalase (CAT) ajudam a manter a homeostase
normal do oxidante. Durante o aumento da geração de radicais livres e estresse oxidativo,
no entanto, essa atividade enzimática é reduzida, exigindo suplementação antioxidante
por meio da dieta (Ali et al. 2008; Chandel e Schieber 2014).

Vários estudos relataram as fortes propriedades antioxidantes do extrato de gengibre e

seus constituintes fitoquímicos (Ahmad et al. 2015; Mashhadi et al. 2013). O gengibre
exerce efeitos antioxidantes contra todo o estresse oxidativo induzido pelos diferentes
agentes, desde agentes químicos a biológicos e até radiação (Jeena et al. 2016; Saberi et
al. 2017). Por exemplo, relatou-se que o gengibre alivia o estresse oxidativo e danos a
órgãos induzidos por agentes químicos como tetracloreto de carbono (Ali et al. 2008),
malation, lindano (Butt e Sultan 2011), l cialotrina (Al-Amoudi 2018), peróxido de
hidrogênio (Peng et al. 2015), clorpirifos (Abolaji et al. 2017), cloreto mercúrico (Al Hroob
et al. 2018; Joshi et al. 2017), arsenito de sódio (Chakraborty et al. 2012), sulfito (Afkhami
Fathabad et al. 2018), acetato de chumbo (Mohamed et al. 2016), carbendazim (Salihu et
al. 2017) e aflatoxina B1 (Vipin et al. 2017). Ele também tem propriedades antioxidantes
contra toxicidades induzidas por drogas, como acetaminofen (Abdel-Azeem et al. 2013;
Sabina et al. 2011), vancomicina (Kandemir et al. 2018), piroxicam (Badawi 2018),
gentamicina (Hegazy et al. 2016) e cisplatina (Ali et al. 2008; Alibakhshi et al. 2018) em
vários órgãos de animais experimentais. Hiperglicemia (Al Hroob et al. 2018), etanol
(Akbari e al. 2017; Heshmati et al. 2018; Shirpoor et al. 2017, 2018), lipopolissacarídeo (Li
et al. 2012a), lipídios (Si et al. 2018), danos oxidativos associados à interleucina-1 b
(Hosseinzadeh et al. 2017) - e isquemia (Jittiwat e Wattanathorn, 2012; Li et al. 2017)
também são amenizados por extratos de gengibre. Portanto, o gengibre possui
propriedades antioxidantes em vários órgãos, desde o cérebro até os testículos em
animais experimentais, significando seu valor nutracêutico no combate ao estresse
oxidativo induzido por diversos agentes. Na verdade, a propriedade de redução do
estresse oxidativo do gengibre é comparável à dos antioxidantes químicos e eliminadores
de radicais livres, como hidroxiltolueno butilado (BHT) e hidroxil anisol butilado (BHA)

110
(Kubra e Rao 2012). A propriedade antioxidante do extrato de gengibre e seus
fitoconstituintes é atribuída ao aumento de enzimas antioxidantes (SOD, catalase, GPx),
ação de eliminação de radicais livres e redução da peroxidação lipídica (Butt e Sultan
2011; Kubra e Rao 2012; Zhuang et al. 2015). Os outros mecanismos moleculares
subjacentes às propriedades antioxidantes do gengibre incluem a ativação do fator 2
relacionado ao eritroide 2 do fator nuclear (NRF-2) e a via da heme oxigenase-1 (HO-1)
(Peng et al. 2015; Zhu et al. 2016).

3.3 Benefícios potenciais como antiinflamatório e imunomodulador

Desordens inflamatórias e doenças relacionadas, como condições reumáticas, têm sido

tratadas com gengibre ou formulações derivadas de gengibre há anos em todo o mundo
por causa de suas amplas ações antiinflamatórias. Experimentalmente, o gengibre e seus
constituintes exibiram efeitos antiinflamatórios em vários modelos de inflamação aguda e
crônica (Banji et al. 2014; Mashhadi et al. 2013; Song et al. 2016; Xie et al. 2014). Por
exemplo, é relatado que a zerumbona inibe a inflamação pulmonar induzida por
endotoxina em camundongos (Ho et al. 2017), enquanto o 6-shogaol reduz a neuro
inflamação associada ao comprometimento cognitivo (Moon et al. 2014) e à doença de
Parkinson ao inibir o nível plasmático do tumor fator de necrose-a (TNFa) (Park et al.
2013, Luettig et al. 2016). O gengibre suprime a síntese de prostaglandinas por meio da
inibição da ciclo oxigenase COX-1 e COX-2. Ele também suprime a biossíntese de
leucotrieno ao inibir a 5-lipo-oxigenase (5-LOX). Esta propriedade farmacológica distingue
o gengibre como um inibidor duplo de COX e 5-LOX dos antiinflamatórios não esteróides
que podem ter um melhor perfil terapêutico com menos efeitos colaterais. Foi
demonstrado que os extratos de gengibre inibem a indução de vários genes que codificam
para citocinas, quimiocinas e a COX-2 induzível envolvida na resposta inflamatória
(Grzanna et al. 2005). A imunomodulação se refere a um processo e curso de ação em
que uma resposta imune é alterada para um nível desejado. As ervas exibem uma
variedade de atividades biológicas diversas, como atividade antiestresse, adaptogênica,
antienvelhecimento e imunomoduladora (Mahima et al. 2012). O gengibre tem uma
excelente propriedade imunomoduladora em muitos ambientes experimentais induzidos
por agentes infecciosos, alergias, drogas, inflamação e câncer (Carrasco et al. 2009). Foi
indicado que o extrato alcoólico de Z. officinale também melhorou as funções
imunológicas em camundongos com tumor de insuficiência imunológica. Em contraste,
também foi relatado que o gengibre inibiu a proliferação de linfócitos e suprimiu a
produção de interleucinas (IL-2 e IL-10) em linfócitos humanos (Wilasrusmee et al.
2002b). Além disso, o gengibre pode inibir a proliferação de linfócitos estimulada por

111
mitógenos e aloantígenos em camundongos (Wilasrusmee et al. 2002a). Os efeitos do
óleo volátil de gengibre na resposta imune também foram avaliados in vitro e in vivo em
camundongos, e o mecanismo subjacente de sua atividade antiinflamatória foi explorado.
O extrato de gengibre reduz a expressão de IL-17 e IL-23 e também modula a expressão
das quimiocinas CCL20 e CCL22 e seus receptores (CCR6 e CCR4) no sistema nervoso
central (SNC) de camundongos com encefalomielite autoimune experimental (Jafarzadeh
et al. 2015, 2017b). [6]-Gingerol e [6]-shogaol, ingredientes ativos da medicina tradicional
japonesa hangeshashinto, aliviam a dor induzida por mucosite ulcerativa oral por meio da
ação nos canais de Na+ (Hitomi et al. 2017).

3.4 Benefícios Potenciais em Diabetes

Diabetes mellitus (DM) é um dos principais distúrbios metabólicos crônicos e, atualmente,

mais de 420 milhões de pessoas vivem com diabetes (IDF 2017). Os medicamentos
alopáticos atualmente disponíveis para diabetes são limitados e ainda associados a
efeitos adversos. A atividade antidiabética do gengibre em pó foi promovida recentemente,
com a recomendação de que seja incluído como um dos suplementos dietéticos para
pacientes diabéticos (Bi et al. 2017; Medagama e Bandara 2014). Pode ser útil na
redução das dosagens de medicamentos antidiabéticos e efeitos colaterais associados
por meio de seus efeitos antidiabéticos e antioxidantes. Dados de ensaios in vitro, in vivo
e clínicos demonstraram o efeito anti-hiperglicêmico do gengibre. Propriedades
preventivas e protetoras do gengibre em diabetes mellitus, complicações diabéticas e
lipídios associados e outros distúrbios metabólicos também foram relatados (Li et al.
2012c). Múltiplos mecanismos têm sido propostos subjacentes aos efeitos antidiabéticos
do gengibre, que são devidos às suas ações de sensibilização à insulina, incluindo
aumento da captação de glicose via transportador de glicose de superfície celular 4
(GLUT4) e restauração do metabolismo alterado de carboidratos e lipídios. Também inclui
a inibição de várias vias de transcrição em nível molecular, peroxidação lipídica, enzimas
metabolizadoras de carboidratos, aumento da fosforilação de adenosina monofosfato
quinase (AMPK) e 3-hidroxi-3-metil-glutarilcoenzima A (HMG-CoA) redutase, e a ativação
da capacidade da enzima antioxidante e dos receptores de lipoproteína de baixa
densidade (Akash et al. 2015; Li et al. 2012b; Rani et al. 2012).

O extrato aquoso de gengibre administrado por via oral (diariamente) em três doses
diferentes (100, 300, 500 mg/kg de peso corporal) por um período de 30 dias melhorou o
metabolismo dos carboidratos em ratos diabéticos tipo 1 induzidos por STZ por meio de
seus efeitos nas atividades das enzimas glicolíticas (Abdulrazaq et al. 2012). O gengibre
exibiu ações inibitórias na a glicosidase e a amilase intestinal que ajudam a melhorar a
112
hiperglicemia (Rani et al. 2011, 2012). A administração de extratos de gengibre melhorou
significativamente a hiperglicemia e hiperlipidemia, bem como a função renal prejudicada
e o hemograma em coelhos diabéticos tipo 1 induzidos por aloxana (Elkirdasy et al. 2015).
Extratos de polifenol de rizoma de gengibre exibiram melhora de distúrbios pancreáticos e
renais em ratos diabéticos induzidos por STZ (Kazeem et al. 2015). Uma vez que o
estresse oxidativo está envolvido na fisiopatologia do diabetes, o efeito do gengibre nos
marcadores de estresse oxidativo foi investigado em ratos diabéticos STZ. O gengibre
aumentou significativamente os efeitos antioxidantes em comparação com a
glibenclamida (Ahmadi et al. 2013). Em outro estudo, a combinação de mel gelam e
gengibre melhorou significativamente o estresse oxidativo e o perfil metabólico em ratos
diabéticos STZ tipo 1 (Sani et al. 2014).

[6]-Gingerol, um constituinte principal do gengibre, foi relatado para melhorar a

hiperglicemia em camundongos Lepr (db/db) diabéticos tipo 2. A sinalização endócrina
envolvida na secreção de insulina é perturbada nesses camundongos diabéticos. O
tratamento de quatro semanas com [6]-gingerol levou a um aumento significativo na
secreção de insulina estimulada por glicose e melhor tolerância à glicose envolvendo a via
de secreção de insulina mediada por peptídeo semelhante ao glucagon-1 (GLP) (Samad
et al. 2017). Suplementação de 6-Paradol e [6]-gingerol reduziu significativamente a
glicose plasmática, alanina aminotransferase, aspartato aminotransferase, produtos finais
de glicação avançada (AGEs) e níveis de insulina em camundongos em dieta rica em
gordura (Sampath et al. 2017; Wei et al. 2017).

3.5 Benefícios potenciais em complicações diabéticas

Foi relatado que o gengibre oferece benefícios à saúde em certas complicações

diabéticas micro e macrovasculares relacionadas aos rins, fígado, nervos periféricos e
sistemas cardiovasculares (Li et al. 2012c). Investigações recentes revelaram que o
gengibre alivia o estresse oxidativo induzido pela hiperglicemia, inflamação e apoptose e
protege ratos contra a nefropatia diabética induzida por STZ (Al Hroob et al. 2018).
Extrato de gengibre e zingerona mostraram exercer efeitos nefroprotetores ao melhorar
vários parâmetros bioquímicos e lesões patológicas dos rins em diferentes modelos
animais de nefropatia diabética (Ramudu et al. 2011; Rehman et al. 2018; Cui et al. 2018).
O tratamento crônico com uma dose diária de 50 mg de extrato de gengibre por via
intragástrica por 6 semanas reduziu significativamente as anormalidades estruturais do
coração em ratos diabéticos, e isso sugeriu que esses efeitos podem estar associados a
melhorias nos níveis séricos de leptina, catepsina G e homocisteína (Ilkhanizadeh et al.
2016). Extrato hidroalcoólico de gengibre e zerumbone, um fitoquímico de gengibre
113
subtropical, aliviou a retinopatia diabética por meio da redução da atividade da arginase I,
bloqueando a via de AGEs/ RAGE/NFkB (fator nuclear kB) na retina e também por meio
de ações antiinflamatórias e antiangiogênicas (Dongare et al. 2016; Lamuchi -Deli et al.
2017; Tzeng et al. 2016). O potencial antiglicante do gengibre e o retardo da catarata
diabética em ratos também foram relatados (Saraswat et al. 2010). Zingerone melhora a
contração vascular aumentada na aorta diabética, que pode ser mediada por seu efeito
vasodilatador por meio da estimulação de NO - e guanilato ciclase (Ghareib et al. 2016).
Isso é de importância significativa para as intervenções terapêuticas no
tratamento/controle complementar das complicações relacionadas ao diabetes. O
tratamento com ingredientes de gengibre como zingerone, geraniol e 6-gingerol em doses
de 20, 200 e 75 mg/kg, respectivamente, alivia as complicações prostáticas diabéticas por
meio da supressão do estresse oxidativo e da fibrose tecidual (Eid et al. 2017). A
combinação de gengibre e canela tem efeitos benéficos significativos na viabilidade e
motilidade do esperma, testosterona total sérica, hormônio luteinizante (LH), hormônio
folículo estimulante (FSH) e níveis de antioxidantes séricos em animais diabéticos (Khaki
et al. 2014). O tratamento com extratos de gengibre causou alívio das lesões testiculares
em camundongos diabéticos, sugerindo que a ingestão de raízes de gengibre como
bebida pode ser útil para pacientes diabéticos que sofrem de impotência sexual (Shalaby
e Hamowieh 2010).

3.6 Estudos Clínicos

Alguns estudos clínicos relataram e comprovaram os benefícios do gengibre para a saúde

em pacientes diabéticos. Um ensaio randomizado, duplo-cego e controlado por placebo
demonstrou que o consumo diário de três cápsulas de gengibre em pó de 1 grama por 8
semanas é útil para pacientes com diabetes tipo 2 devido à redução do açúcar no sangue
em jejum (FBS) e HbA1c e melhora os índices da resistência à insulina como o índice
QUICKI (Mozaffari-Khosravi et al. 2014). O gengibre melhorou a sensibilidade à insulina e
algumas frações do perfil lipídico e reduziu a PCR e a PGE 2 em pacientes diabéticos tipo
2 (Arablou et al. 2014). O gengibre exibiu efeitos melhoradores no controle da glicose,
sensibilidade à insulina e perfil lipídico e provou ser uma terapia adjuvante promissora
para DM2 e síndrome metabólica (Makhdoomi Arzati et al. 2017; Zhu et al. 2018). A
suplementação de gengibre por três meses melhorou os índices glicêmicos, capacidade
antioxidante total, malonildialdeído (MDA), proteína C reativa (CRP) e atividade da
paraoxonase sérica (PON-1) em pacientes com DM2 (Shidfar et al. 2015). A
administração diária de 1000 mg de gengibre reduz a glicose sérica de jejum, que é um
fator de risco para hiperinsulinemia, dislipidemia, fibrose da membrana peritoneal e

114
doença cardiovascular em pacientes em diálise peritoneal (Imani et al. 2015). Pacientes
com diabetes tipo 2 são propensos a doenças cardiovasculares (DCV) devido ao
processo de inflamação e estresse oxidativo. ADMA (dimetilarginina assimétrica) e ICAM-
1 (molécula de adesão intercelular-1) desempenham um papel importante na patogênese
das DCV. Demonstrou-se que o gengibre como um agente antioxidante e antiinflamatório
tem um efeito nesses biomarcadores (Zarezadeh et al. 2018). A suplementação de
gengibre melhorou a sensibilidade à insulina e algumas frações do perfil lipídico em
pacientes com DM2. Portanto, pode ser considerado um remédio útil para reduzir as
complicações secundárias do DM2 (Mahluji et al. 2013). Alimentos funcionais como o
gengibre podem ser eficazes na prevenção da síndrome metabólica e,
subsequentemente, no aparecimento de doenças cardiovasculares e DM2, conforme
observado em testes de intervenção em humanos (van den Driessche et al. 2018). O
estudo também revelou o efeito do spray de ervas de gengibre na redução da xerostomia
em pacientes com DM2 (Mardani et al. 2017).

3.6.1 – Benefícios potenciais na obesidade

A obesidade é uma doença complexa, multifatorial e amplamente evitável, que afeta mais
de um terço da população mundial atualmente. Se as tendências seculares continuarem,
em 2030, cerca de 38% da população adulta do mundo estará acima do peso e outros
20% serão obesos (Hruby e Hu 2016). A obesidade, que descreve a condição de acúmulo
anormal de massa gorda corporal, está diretamente relacionada a um risco aumentado de
várias doenças crônicas, incluindo intolerância à glicose, hipertensão por doenças
cardiovasculares, hiperlipidemia, variáveis hemostáticas e aumento da resistência à
insulina. O gengibre fornece efeitos antiobesidade ao acelerar a perda de peso e o
metabolismo. Os efeitos benéficos do gengibre na obesidade e na síndrome metabólica
foram revisados recentemente (Ebrahimzadeh Attari et al. 2018; Wang et al. 2017). A
maioria dos estudos pré-clínicos tem apoiado o efeito de redução de peso do extrato ou
pó de gengibre em modelos animais obesos. O gengibre pode modular a obesidade por
meio de vários mecanismos, incluindo aumento da termogênese, aumento da lipólise,
supressão da lipogênese, inibição da absorção de gordura intestinal e controle do apetite
(Ebrahimzadeh Attari et al. 2018). Ratos alimentados com uma dieta rica em gordura
suplementada com 5% de gengibre em pó exibiram uma capacidade significativamente
maior de reduzir o peso corporal sem inibir o nível de lipase pancreática ou afetar a
concentração de bilirrubina, com efeito positivo no aumento do nível de catalase
peroxisomal e colesterol HDL em comparação com a suplementação de orlistat (Dieta de
200 mg/kg) (Mahmoud e Elnour 2013). de Las Heras et al. (2017) investigaram

115
recentemente os fatores moleculares envolvidos nos efeitos antiobesidade e
hipolipemiantes de um extrato hidroetanólico de gengibre em ratos alimentados com
HFD21. Os efeitos hipolipemiantes e de sensibilização à insulina do extrato de gengibre
foram associados à maior expressão hepática de fatores de transcrição, receptor ativado
de proliferador de peroxissoma PPAR a, PPAR g, GLUT-2 e colágeno em níveis
moleculares e ao aumento dos níveis de adiponectina plasmática (de Las Heras et al.
2017). O potencial de melhora do gingerol via modulação de fatores inflamatórios e
enzimas envolvidas no metabolismo do colesterol e direcionamento da via AMPK NFkB
por meio da elevação da sirutina (SIRT)-6 e redução dos níveis de resistina foi
demonstrado em ratos obesos induzidos por HFD (Brahma Naidu et al. 2016; Hashem et
al. 2017). A atividade redutora do colesterol plasmático do extrato enriquecido com
gengibre e shogaol também foi demonstrada em um modelo de hamster, que foi mediado
pelo aumento da excreção de colesterol fecal e ácidos biliares por meio da regulação
positiva de CYP7A1 hepático e da regulação negativa de mRNA de Niemann-Pick C1
intestinal (NPC1L1), acetil CoA: colesterol acetil transferase 2 (ACAT2) e proteína de
transporte de triacilglicerol microssomal (MTP) (Lei et al. 2014). Gingerenona A, outro
polifenol presente no gengibre, demonstrou atenuar a obesidade e a inflamação do tecido
adiposo em camundongos alimentados com HFD (Suk et al. 2017).

3.6.2 – Benefícios potenciais em câncer

Apesar do enorme avanço nas últimas duas décadas na pesquisa do câncer, o câncer
continua sendo a segunda principal causa de morte no mundo, depois de doenças
cardíacas, e foi responsável por cerca de 9,6 milhões de mortes até agora em 2018.
Globalmente, cerca de uma em cada seis mortes é devido ao câncer. Estudos
epidemiológicos relatam que os asiáticos têm uma incidência menor de câncer do que os
países ocidentais, o que pode ser devido ao consumo de uma dieta rica em plantas entre
a população asiática (Prasad e Tyagi 2015). Uma grande variedade de compostos
fenólicos derivados de especiarias possuem potentes atividades antioxidantes,
antiinflamatórias, antimutagênicas e anticarcinogênicas. O potencial protetor e terapêutico
do extrato de gengibre e vários outros constituintes do gengibre contra diferentes tipos de
câncer foram revisados e são mostrados na Tabela 2 (de Lima et al. 2018; Poltronieri et al.
2014; Prasad e Tyagi 2015; Shukla e Singh 2007).

21 Dieta rica em lipídeos

116
 Tabela 2 Propriedades anticâncer do gengibre
Câncer Linha celular Composto Resultado Referências
Potencial quimiopreventivo de 6-
HT-29 6-Shogaol Li e Chiang (2017)
Shogaol
Induz a morte de células de câncer
Yogosawa et al.
HCT-116, SW-480 6-Shogaol de cólon induzindo apoptose e (2012)
Colorretal
parada do ciclo celular G2 / M
Extrato de
HCT116, SW480, e Propriedades quimiopreventivas
folha de Park et al. (2014)
LoVo do câncer de cólon
gengibre
Células de
adenocarcinoma É relatado como eficaz no câncer Mansingh et al.
6-Gingerol (2018)
gástrico humano gástrico por induzir apoptose
Gástrico (AGS)
MKN1, MKN28,
É relatado como eficaz para o
MKN45, MKN74, Zerumbone Tsuboi et al. (2014)
tratamento de câncer gástrico
NUGC4, e AGS
Câncer de pulmão
induzido por uretano
Previne a carcinogênese
em camundongos
Pulmão 6-Gingerol pulmonar, agindo como um inibidor Yao et al. (2018)
fêmeas e células de
da arginase
carcinoma pulmonar
de Lewis (LLC)
É considerado eficaz ao modular a Eren and Betul
A549 6-Shogaol
Câncer de atividade da enzima mPGES-1 (2016)
pulmão de
A549 Zerumbone Previne metástases de NSCLC Kang et al. (2016)
células não
pequenas22 NCI-H1650 e
6-Shogaol É relatado para prevenir NSCLC Kim et al. (2014)
camundongos nus23
Inibe células de câncer prostáticas
Próstata SNU182 Zerumbone refratárias a hormônios, induzindo Chan et al. (2015)
apoptose e autofagia
Previne a metástase da linha
SNU182 Zingerone Kim et al. (2017)
celular do carcinoma hepatocelular

Fígado SMMC-7721 in vitro e

É eficaz em células de carcinoma
in vivo em
6-Shogaol hepatocelular humano, induzindo Hu et al. (2012)
camundongos
estresse e apoptose
xenoenxertados
Hepatoma humano 6-Shogaol e É relatado para prevenir o câncer
Fígado Weng et al. (2010)
Hep3B 6-gingerol por mecanismo antiangiogênico
É relatado como eficaz no câncer
MDA-MB-231 e MDA-
10-Gingerol de mama triplo negativo, causando Bernard et al. (2017)
MB-468
Mama parada do ciclo celular
MCF-7 e MDA-MB- Ele inibe as células do câncer de
6-Shogaol Ray et al. (2015)
231 mama ativando a via Notch
U 937 – Leucemia
humana in vitro e in É relatado como eficaz em
Leucemia 6-Shogaol Liu et al. (2013b)
vivo (camundongo doenças hematológicas malignas
xeno enxerto)

22 Câncer de pulmão de células não pequenas é um grupo de cânceres de pulmão que se comportam de forma semelhante, como
carcinoma de células escamosas e adenocarcinoma.
23 Um camundongo nu é um camundongo de laboratório de uma cepa com uma mutação genética que causa um timo deteriorado ou
ausente, resultando em um sistema imunológico inibido devido a um número muito reduzido de células T. O fenótipo do mouse é a falta
de pêlos no corpo, o que lhe dá o apelido “nu”
117
 Tabela 2 Propriedades anticâncer do gengibre
Foi relatado que possui atividade
Renal Células claras 6-Shogaol anticâncer contra o câncer renal, Han et al. (2015)
promovendo apoptose
Panc-1, AsPC-1,
BxPC-3, CAPAN-2,
CFPAC-1, MIAPaCa-2 Eficaz no câncer pancreático por
Extrato de
e SW1990, e células meio da morte celular apoptótica Akimoto et al. (2015)
gengibre
de câncer pancreático induzida pelo estresse oxidativo
de camundongo,
Panc02
Pâncreas
É relatado que exibe atividade Shamoto et al.
BxPC-3 e MIA PaCa-2 Zerumbone (2014)
anticâncer ao inibir a angiogênese
Atua como um importante
adjuvante ao inibir o crescimento
PANC-1 e BxPC-3 6-Shogaol de tumores pancreáticos humanos Zhou et al. (2014)
e os sensibiliza ao tratamento com
gencitabina
É demonstrado que inibe a
proliferação de células de câncer
HeLa, CaSki, e SiHa 6-Gingerol Rastogi et al. (2015)
cervical positivas para HPV por
Cervical meio da ativação de proteassoma
Óleos Junto com a mitomicina C relatou
HeLa essenciais de aumento da excitotoxicidade e Al-Otaibi et al. (2018)
gengibre apoptose no câncer cervical
Linhas celulares de
Eficaz no OSCC ao inibir a
Cavidade carcinoma
Zerumbone proliferação, migração e invasão Zainal et al. (2018)
Oral epidermoide oral
celular
(OSCC)
Hamsters sírios
dourados com idades
entre 8–10 semanas.
O câncer foi induzido
por tinta com 7, 12-
dimetilbenz [a]
Melhoria da inflamação induzida
Cavidade antraceno (0,5%) em Annamalai et al.
6-Shogaol por DMBA e tumorigênese (2016)
Oral parafina líquida
mediada pela proliferação celular
usando um pincel de
zibelina nº 4, três
vezes por semana
durante 16 semanas
nas bolsas bucais
direitas de hamsters
Células de melanoma
Melanogênese inibida em células
De Pele de camundongo 6-Shogaol Yao et al. (2013)
de melanoma por ativação ERK
B16F10

As propriedades anticâncer do gengibre e seus constituintes foram relatadas como

associadas às propriedades antioxidantes, antiinflamatórias e antimutagênicas, bem como
outras atividades biológicas, conforme mostrado na Tabela 3. [6]-Gingerol é o principal
princípio pungente do gengibre, com numerosos propriedades farmacológicas. O modo
proposto de ações moleculares de gingerol inclui, mas não está limitado a: (1) diminuição
na expressão de iNOS e TNFa, (2) translocação nuclear de NFkB, (3) a liberação de

118
citocromo c, (4) ativação de caspases, e (5) aumento no fator 1 de ativação da protease
apoptótica (Apaf-1) como um mecanismo de indução de apoptose. Além disso, o 6-
gingerol também estimula a apoptose por meio da regulação positiva do gene-1 ativado
por AINE (NAG-1) e pela modulação das vias b-catenina, proteína C quinase (PKCz) e
GSK-3b (Lee et al. 2008). Recentemente, os novos derivados de gingerol foram avaliados
por suas atividades citotóxicas contra células cancerosas humanas (Li et al. 2018b).
Tomados em conjunto, os potenciais quimiopreventivos de [6] -gingerol apresentam uma
alternativa futura promissora aos agentes terapêuticos que são caros, tóxicos e
possivelmente até carcinogênicos (Oyagbemi et al. 2010). Recentemente, o aspirinato de
[6] -gingerol como um novo pró-fármaco quimiopreventivo de aspirina para câncer de
cólon foi investigado in vitro e in vivo que mostrou propriedades anticâncer aprimoradas
associado a efeitos gastroprotetores (Zhu et al. 2017). O uso de nanotecnologia para
entrega de medicamentos tem se mostrado uma grande promessa para melhorar o
tratamento do câncer. No entanto, a toxicidade potencial, os efeitos ambientais perigosos,
os problemas com a produção em grande escala e os custos excessivos potenciais são
desafios que confrontam suas futuras aplicações clínicas. Nanopartículas comestíveis
derivadas de gengibre foram relatadas como uma nova abordagem terapêutica para a
prevenção e tratamento de doenças inflamatórias do intestino e câncer associado à colite.
Além disso, um nano vetor feito de lipídios derivados de gengibre como uma plataforma
de entrega para o agente terapêutico doxorrubicina para tratar câncer de cólon também
foi relatado (Zhang et al. 2016a, b).

3.7 Benefícios potenciais em distúrbios do SNC

O extrato de gengibre também é relatado como eficaz em várias doenças do SNC, como
doenças neurodegenerativas relacionadas à idade (doença de Alzheimer, doença de
Parkinson) (Choi et al. 2018), esclerose múltipla (Sapkota et al. 2018), encefalomielite
autoimune experimental (Jafarzadeh et al. 2015, 2017a), disfunção cognitiva (Wattanthorn
e Sutalangka 2017), neuro inflamação (Ho et al. 2013) e enxaqueca (Choi et al. 2018;
Maghbooli Mehdi et al. 2013), bem como alterações do SNC induzidas por diabetes
(Shanmugam et al. 2011). Foi demonstrado experimentalmente que o gengibre e seus
constituintes, como 6-gingerol, 6-shogaol, 6-paradol, zingerona e dehidrozingerona, são
eficazes para melhorar os sintomas neurológicos e as condições patológicas de doenças
neurodegenerativas relacionadas à idade por meio da modulação da morte celular ou
moléculas de sinalização de sobrevivência celular (Choi et al. 2018). [6]-shogaol tem
efeitos protetores significativos em vários modelos de cultura de células neuronais e de
astrócitos através da indução da proteína de choque térmico 70 (HSP70), inibição da

119
histona desacetilase (HDAC) (Shim et al. 2011) e regulação positiva de fatores
neurotrópicos (Kim e Kwon 2013) in vitro. Além de suas ações antiinflamatórias e
antioxidantes, 6-shogaol também demonstrou ter atividade antiamiloidogênica. Esta
atividade de 6-shogaol melhora a doença de Alzheimer por meio do receptor de cisteína
leucotrieno 1 (CysLT1R) - inibição mediada da catepsina B e ativação do receptor 1
relacionado à sortilina, resultando em maior sobrevivência das células neuronais por meio
da inibição da produção de Ab (Na et al. 2016a, 2017)

6-shogaol demonstrou atenuar os danos cerebrais no AVC isquêmico após a oclusão da

artéria cerebral média em camundongos (Na et al. 2016b). A administração tardia de
zingerone mitiga a alteração comportamental e histológica por meio da repressão do
estresse oxidativo e morte celular programada intrínseca em ratos isquêmicos transitórios
focais (Vaibhav et al. 2013). O extrato de gengibre e seus componentes exibiram
propriedades neuroprotetoras e funções cognitivas melhoradas em diferentes modelos
pré-clínicos de comprometimento cognitivo (Lim et al. 2014; Moon et al. 2014).
Recentemente, o gengibre fermentado com Schizosaccharomyces pombe alivia o
comprometimento da memória por meio da proteção das células neuronais do hipocampo
em camundongos injetados com placa amilóide β1–42 (Huh et al. 2018). O extrato de
gengibre também tem uma propriedade de não dependência contra a morfina em
ambientes pré-clínicos. Na enxaqueca, o perfil de eficácia do extrato de gengibre é
comparável ao do sumatriptano prescrito, embora tenha menos efeitos colaterais que o
sumatriptano em 100 pacientes iranianos. No entanto, o constituinte químico responsável
por sua propriedade não neuro inflamatória ainda é discutível. Alguns pesquisadores o
atribuem ao 6-shogaol (Sapkota et al. 2018; Ha et al. 2012), mas outros o atribuem ao 10-
gingerol (Ho et al. 2013). Assim, o extrato de gengibre tem potencial para ser usado para
vários distúrbios do SNC; no entanto, muitas pesquisas ainda precisam ser realizadas
antes que ele possa ser usado.

3.8 Benefícios potenciais em doenças cardiovasculares

O efeito benéfico do gengibre como nutracêutico também é relatado em complicações

cardiovasculares. A doença cardiovascular é relatada como a principal causa de morte no
mundo (Aimin Shi et al. 2016). O extrato de gengibre é relatado para interromper e tratar
esses eventos, acompanhado de modificações no estilo de vida e da dieta. O extrato
aquoso de gengibre tem um efeito anti-hipertensivo (Akinyemi et al. 2014; Liu et al.
2013a). Gengibre também tem propriedades antiplaquetárias (Lee et al. 2017; Nicoll e
Henein 2009), antitrombótica (Nicoll e Henein 2009) e propriedades hipolipemiantes em
pacientes dislipidêmicos (El-Seweidy et al. 2015; Khosravani et al. 2016; Pourmasoumi et
120
al. 2018). O gengibre confere proteção significativa contra acidente vascular cerebral e
ataque cardíaco devido à sua capacidade de ajudar a prevenir a coagulação do sangue.
Também foi relatado que possui um efeito inotrópico positivo (Nicoll e Henein 2009) e,
portanto, pode ser muito eficaz na redução da insuficiência cardíaca congestiva em
estudos pré-clínicos.

O papel benéfico do extrato de gengibre no coração, combinado com suas potentes

propriedades antiinflamatórias e antioxidantes, o torna um nutracêutico muito útil no alívio
de complicações cardiovasculares (Nicoll e Henein 2009). [6]-shogaol exerce seu efeito
antiproliferativo das células do músculo liso vascular através do acúmulo de células na
fase do ciclo celular G0/G1 associada à ativação da via Nrf2/HO-1 que ajuda a aliviar a
patogênese de certas doenças cardiovasculares (Liu et al. 2015). Na verdade, estudos
clínicos recentes conduzidos no Irã mostraram que a suplementação dietética de gengibre
foi capaz de reduzir o nível plasmático de triglicerídeos e colesterol de lipoproteína de
baixa densidade, reduzindo assim o risco de aterosclerose (Pourmasoumi et al. 2018). Na
verdade, esses relatórios estão bem alinhados aos achados pré-clínicos anteriores em
vários modelos animais (El-Seweidy et al. 2015; Elseweidy et al. 2015; Khosravani et al.
2016). Além disso, o extrato de gengibre também forneceu proteção contra danos
miocárdicos induzidos por isoproterenol em ratos (Amran et al. 2015).

4. Uso veterinário de gengibre

O gengibre tem sido usado na medicina veterinária há milhares de anos para vários
distúrbios gastrointestinais em animais. Tem sido usado no tratamento de constipação,
intoxicação alimentar, diarreia, doenças oculares, hematúria, para melhorar a resistência,
indigestão, timpanismo, disenteria, dor de estômago e doenças de pele (Tiwari e Pande
2010). Algumas investigações clínicas validaram experimentalmente seu uso.

Gado: Produtos de gengibre para gado são usados na medicina veterinária para o
tratamento de problemas digestivos em bovinos. O efeito benéfico do gengibre é
provavelmente devido a uma síntese elevada de ácidos biliares no fígado e sua excreção
na bile, resultando em um aumento na digestão e absorção de lipídios. Também ajuda a
aumentar a absorção de nutrientes essenciais e a aumentar a estabilidade da ração e
influenciar de forma benéfica o ecossistema gastrointestinal por meio da inibição do
crescimento de microrganismos patogênicos (Mekuriya e Mekibib 2018). Nos últimos 10
anos, pesquisadores da área de ciência animal usaram materiais naturais alternativos,
como ervas medicinais, na alimentação de gado leiteiro para substituir ou minimizar o uso

121
de compostos químicos como antibióticos. Esses compostos químicos podem causar
efeitos colaterais desfavoráveis e ser perigosos para animais e humanos (Al-dain e Jarjeis
2015). Além da ação pró cinética do gengibre demonstrada em animais de laboratório e
humanos, o efeito de um extrato hidroalcoólico de gengibre também foi avaliado na
contração e motilidade do retículo e rúmen de ruminantes. Os resultados de um estudo in
vitro indicaram que o extrato hidroalcoólico de gengibre continha constituintes
espasmogênicos e espasmolíticos, onde um estudo in vivo apresentou evidências de que
o extrato pode ter um efeito estimulante na motilidade do retículo em uma concentração
de 40 mg/kg (Mamaghani et al. 2013). Recentemente, o efeito melhorador do pó de
gengibre foi demonstrado contra a toxicidade do arsênio induzida experimentalmente em
bezerros (Biswas et al. 2017). O gengibre forneceu atividade anti-helmíntica in vivo em
ovelhas, justificando assim o uso tradicional desta planta em infestações de helmintos
(Iqbal et al. 2006).

Equinos: Os efeitos do extrato de gengibre foram estudados na resposta fisiológica ao

exercício, bem como marcadores de dano muscular e expressão de mRNA para as
citocinas inflamatórias TNF-a, interferon (IFN) -g e IL-6 após uma sessão exaustiva de
exercício em cavalos. O extrato de gengibre reduziu o tempo de recuperação
cardiovascular em cavalos que completaram uma sessão curta e extenuante de
exercícios. O efeito positivo do extrato de gengibre no tempo de recuperação pode torná-
lo uma ferramenta útil para cavalos que competem em eventos de resistência, salto ou
corrida. No entanto, uma análise mais aprofundada dos compostos presentes no extrato
de gengibre é necessária para determinar se esses compostos seriam detectados por
testes de drogas frequentemente realizados em competições (Liburt et al. 2009). O efeito
antiinflamatório de uma única dose de gengibre também foi demonstrado no pós-exercício
em cavalos (Williams e Lamprecht 2008). Na prática veterinária atual, muitos profissionais
e proprietários de cavalos preferem preparações à base de ervas, incluindo gengibre,
para tratar casos de úlcera em comparação com a medicina alopática.

Cães: O uso de nutracêuticos vem ganhando interesse na medicina veterinária para

animais de estimação. Quase 30% dos proprietários de animais de estimação usaram ou
consideraram o uso de novos ingredientes como nutracêuticos e ervas/botânicos em seus
animais (Boothe 2014). Como em humanos, o uso de gengibre (por exemplo, biscoitos de
gengibre, refrigerante de gengibre) parece ter algum benefício contra o enjôo em cães
(Mowrey e Clayson 1982; Plumb 2015).

Aves: Nutricionistas avícolas descobriram que as ervas são uma das alternativas após a
proibição da União Europeia sobre o uso de aditivos antibióticos como promotores de
122
crescimento. O rizoma de gengibre em pó é uma dessas ervas potenciais com uma ampla
gama de efeitos medicinais. Em frangos de corte e poedeiras, esta planta tem sido usada
em diferentes formas, doses e durações. A alimentação com gengibre promoveu
desempenho de crescimento e ganho de peso em frangos de corte e características de
postura de ovos em galinhas e também melhorou a função intestinal e a antioxidação em
aves. Houve melhorias na qualidade do sêmen, ácidos graxos do esperma e desempenho
reprodutivo em galos reprodutores Cobb 500 envelhecidos alimentados com dietas
contendo rizomas secos de gengibre (Akhlaghi et al. 2014). A suplementação dietética de
gengibre em pó apresentou melhora no desempenho de postura, melhora no status
antioxidante do soro e da gema de ovo e reduziu o colesterol do ovo de maneira
dependente da dose. A taxa de suplementação ideal de gengibre em pó na dieta de
galinhas poedeiras é de 10–15 g/kg de dieta (Akbarian et al. 2011; Zhao et al. 2011). A
suplementação dietética com gengibre ou probióticos mostrou uma influência significativa
na resposta imunológica das aves, provavelmente porque o gengibre tem uma forte
atividade antioxidante e os probióticos estimulam a produção de anticorpos naturais
(Qorbanpour et al. 2018).

Peixes: Para evitar o surgimento de bactérias resistentes a antibióticos e a geração de

tóxicos após o uso extensivo de antibióticos na aquicultura, o uso de aditivos alimentares
alternativos naturais, como o gengibre, ganhou atenção nas estratégias de controle de
doenças. A aplicação do gengibre na aquicultura é defendida como uma abordagem
inovadora para melhorar a saúde dos peixes e prevenir doenças. Uma dose de 0,50 g/kg
de ração reduziu significativamente a mortalidade associada ao aumento da taxa de
crescimento, conversão alimentar e eficiência proteica (Mekuriya e Mekibib 2018). Ele
fornece proteção contra micro-organismos invasores, incluindo E. coli e Staphylococcus
aureus (uma causa comum de infecções de pele) e fungos, incluindo Candida albicans. O
gengibre é uma substância antioxidante forte e pode mitigar ou prevenir a geração de
radicais livres que aliviam a putrefação/ranço dos peixes e aumentam sua
consumibilidade e comercialização.

5. Perfil de segurança do gengibre

Recentemente, aumentou o uso de plantas medicinais para a prevenção e tratamento de
diversas doenças. Embora sua eficácia seja comprovada em estudos pré-clínicos, um
perfil científico completo enfatizando a relação risco e benefício é necessário (Talalay e
Talalay 2001). Atualmente, há um interesse crescente entre as pessoas em consumir o
gengibre não apenas como tempero, mas também como suplemento alimentar para
123
prevenir doenças crônicas (Ali et al. 2008). Embora o gengibre seja considerado seguro
com um DL50 de 10,25 g/kg e 11,75 g/kg de seu extrato metanólico e aquoso,
respectivamente, em camundongos administrados por via oral (Li et al. 2012c), ainda
alguns países não recomendam seu uso para a prevenção de náuseas e vômitos
associados à gravidez. Um estudo conduzido na França relatou que a raiz de gengibre é
segura e eficaz na dose de 1 g/dia por 4 dias e não apresenta risco para o feto ou a mãe
(Stanisiere et al. 2018). Na verdade, o valor seguro recomendado de metabólitos de
gengibre como 6-gingerol e 6-shogaol em humanos saudáveis é de até 2.000 mg (Zick et
al. 2008), e seus valores de LD 50 são 250 e 687 mg/kg, respectivamente (Li et al. 2012c).
No entanto, altas doses de extrato de gengibre podem causar vários distúrbios
gastrointestinais, depressão do sistema nervoso central, arritmias cardíacas e
sangramento devido à sua potente propriedade antiplaquetária (Gunathilake e
Rupasinghe 2015). Além disso, há também o risco de interações medicamentosas/ervas
em ambientes clínicos (Agbabiaka et al. 2017). Assim, um estudo científico detalhado
verificando o mecanismo de ação e segurança do gengibre é necessário antes que ele
possa ser tomado com segurança para prevenir ou proteger contra condições patológicas
(Bode e Dong 2011).

6. Comentários Finais e Orientações Futuras

Pó de gengibre, extrato de raiz de gengibre e extrato de gengibre padronizado (5-7% de
gengibre) disponíveis em várias formulações (comprimido, cápsula, xarope) e dosagens
(30, 280, 500 e 1000 mg ou mais) estão disponíveis como um suplemento dietético no
mercado para melhorar várias condições de doença (Tabela 3). Um número considerável
dos estudos científicos citados sugere seu valor nutracêutico. Além dos distúrbios
gastrointestinais, o gengibre apresenta benefícios para a saúde em casos de câncer,
diabetes, doenças coronárias, obesidade, osteoporose e doenças neurodegenerativas. Os
efeitos farmacológicos benéficos do gengibre nessas doenças podem ser atribuídos à
ativação de defesas antioxidantes, vias de transdução de sinal, expressão gênica
associada à sobrevivência celular, proliferação e diferenciação celular e preservação da
integridade mitocondrial. Parece que essas propriedades desempenham um papel central
na proteção e no fornecimento de benefícios à saúde. A maioria dos estudos pré-clínicos
em modelos de doenças indica o papel benéfico do gengibre. Vários estudos clínicos
também foram realizados em voluntários saudáveis e em pacientes que usam gengibre e
suas formulações. Embora vários estudos clínicos tenham mostrado efeitos benéficos,
alguns mostraram resultados mistos e os resultados de alguns estudos clínicos ainda não
124
foram publicados. Para aumentar os benefícios do gengibre para a saúde, é necessário
investigar mais a fundo o efeito benéfico do gengibre com outros nutracêuticos. São
necessários esforços científicos mais focados para explorar o verdadeiro valor
nutracêutico do gengibre.

Tabela 3 Alguns dos produtos comerciais disponíveis de gengibre

Nome do produto Fabricante Valor nutracêutico
Focalgin B Method Pharmaceuticals, LLC, EUA Alivia náuseas e vômitos
B-Nexa Upsher-Smith Laboratories, EUA Náuseas e vômitos
Tônico circulatório e agente de
Ginger Root Gaia Herbs, India
aquecimento
Ajuda na digestão, ajuda a saúde
Ginger Supreme Gaia Herbs, Índia
cardíaca e alivia as náuseas
Macao Boost-Cacao-Ginger Gaia Herbs, India Ajuda na digestão
Melhora a saúde gastrointestinal e
Jarrow Formulas Ginger Jarrow Formulas, EUA
propriedades antioxidantes
Now Ginger Essential Oils Now Foods, EUA Náuseas e vômitos
Sunthi (Ginger) The Himalaya Drug Company, Índia Anti-náusea em humanos
Dabur Honey-Ginger Dabur India Ltd. Tosse e resfriado em humanos
Cúrcuma-curcumina e gengibre Melhora a pele, o cérebro, a
Vimerson Health, EUA
com Bioperine digestão e a saúde imunológica
Sea-Band Anti-Náusea
Sea-Band, EUA Alívio da náusea
Gengibre Gum
Digestão diária (gengibre e
Animal Essentials, EUA Melhora a digestão em cães e gatos
hortelã)

Referências
Abdel-Azeem AS, Hegazy AM, Ibrahim KS et al (2013) Hepatoprotective, antioxidant, and ameliorative effects of ginger
(Zingiber officinale Roscoe) and vitamin E in acetaminophen treated rats. J Diet Suppl 10:195–209
Abdulaziz Bardi D, Halabi MF, Abdullah NA et al (2013) In vivo evaluation of ethanolic extract of Zingiber officinale
rhizomes for its protective effect against liver cirrhosis. Biomed Res Int 2013:918460.
https://doi.org/10.1155/2013/918460
Abdulrazaq NB, Cho MM, Win NN et al (2012) Beneficial effects of ginger (Zingiber officinale) on carbohydrate
metabolism in streptozotocin-induced diabetic rats. Br J Nutr 108:1194–1201
Abolaji AO, Ojo M, Afolabi TT et al (2017) Protective properties of 6-gingerol-rich fraction from Zingiber officinale
(Ginger) on chlorpyrifos-induced oxidative damage and inflammation in the brain, ovary and uterus of rats. Chem Biol
Interact 270:15–23
Afkhami Fathabad A, Shekarforoush S, Hoseini M et al (2018) Attenuation of sulfite-induced testicular injury in rats by
Zingiber officinale Roscoe. J Diet Suppl 15:398–409
Agbabiaka T, Wider B, Watson L et al (2017) Concurrent use of prescription drugs and herbal medicinal products in
older adults: a systematic review. Drugs Aging 34:891–905. https://doi.org/10.1007/s40266-40017-40501-40267
Ahmad B, Rehman MU, Amin I et al (2015) A review on pharmacological properties of zingerone (4-(4-hydroxy-3-
methoxyphenyl)-2-butanone). Sci World J 2015:816364. https://doi.org/10.1155/2015/816364
Ahmadi R, Pishghadam S, Mollaamine F et al (2013) Comparing the effects of ginger and glibenclamide on
dihydroxybenzoic metabolites produced in stz-induced diabetic rats. Int J Endocrinol Metab 11:e10266
Aimin Shi ZT, Wei P, Zhao J (2016) Epidemiological aspects of heart diseases. Exp Ther Med 12:1645–1650.
https://doi.org/10.3892/etm.2016.3541
Akash MS, Rehman K, Tariq M et al (2015) Zingiber officinale and Type 2 diabetes mellitus: evidence from
experimental studies. Crit Rev Eukaryot Gene Expr 25:91–112
Akbari A, Nasiri K, Heydari M et al (2017) The protective effect of hydroalcoholic extract of Zingiber officinale Roscoe
(Ginger) on ethanol-induced reproductive toxicity in male rats. J Evid Based Complement Altern Med 22:609–617

125
 Akbarian A, Golian A, Sheikh Ahmadi A et al (2011) Effects of ginger root (Zingiber officinale) on egg yolk cholesterol,
antioxidant status and performance of laying hens. J Appl Anim Res 39:19–21
Akhlaghi A, Ahangari YJ, Navidshad B et al (2014) Improvements in semen quality, sperm fatty acids, and reproductive
performance in aged Cobb 500 breeder roosters fed diets containing dried ginger rhizomes (Zingiber officinale). Poult Sci
93:1236–1244
Akimoto M, Iizuka M, Kanematsu R et al (2015) Anticancer effect of ginger extract against pancreatic cancer cells
mainly through reactive oxygen species-mediated autotic cell death. PLoS One 10:e0126605
Akinyemi AJ, Ademiluyi AO, Oboh G (2014) Inhibition of angiotensin-1-converting enzyme activity by two varieties of
ginger (Zingiber officinale) in rats fed a high cholesterol diet. J Med Food 17:317–323
Al Hroob AM, Abukhalil MH, Alghonmeen RD et al (2018) Ginger alleviates hyperglycemia-induced oxidative stress,
inflammation and apoptosis and protects rats against diabetic nephropathy. Biomed Pharmacother 106:381–389
Al-Amoudi WM (2018) Toxic effects of Lambda-cyhalothrin, on the rat thyroid: involvement of oxidative stress and
ameliorative effect of ginger extract. Toxicol Rep 5:728–736
Al-Dain QZS, Jarjeis EA (2015) Vital impact of using ginger roots powder as feed additive to the rations of local
Friesian dairy cows and its effect on production & economic efficiency of milk and physiological of blood. Kufa J Vet Med
Sci 6:154–165
Ali BH, Blunden G, Tanira MO et al (2008) Some phytochemical, pharmacological and toxicological properties of ginger
(Zingiber officinale Roscoe): a review of recent research. Food Chem Toxicol 46:409–420
Alibakhshi T, Khodayar MJ, Khorsandi L et al (2018) Protective effects of zingerone on oxidative stress and
inflammation in cisplatininduced rat nephrotoxicity. Biomed Pharmacother 105:225–232
Al-Otaibi WA, Alkhatib MH et al (2018) Cytotoxicity and apoptosis enhancement in breast and cervical cancer cells
upon coadministration of mitomycin C and essential oils in nanoemulsion formulations. Biomed Pharmacother 106:946–
955
Amran AZ, Jantan I, Dianita R et al (2015) Protective effects of the standardized extract of Zingiber officinale on
myocardium against isoproterenol-induced biochemical and histopathological alterations in rats. Pharm Biol 53:1795–
1802
Annamalai G, Kathiresan S, Kannappan N (2016) [6]-Shogaol, a dietary phenolic compound, induces oxidative stress
mediated mitochondrial dependant apoptosis through activation of proapoptotic factors in Hep-2 cells. Biomed
Pharmacother 82:226–236
Arablou T, Aryaeian N, Valizadeh M, Sharifi F, Hosseini A, Djalali M (2014) The effect of ginger consumption on
glycemic status, lipid profile and some inflammatory markers in patients with type 2 diabetes mellitus. Int J Food Sci Nutr
65:515–520
Arslan M, Ozdemir L (2015) Oral intake of ginger for chemotherapyinduced nausea and vomiting among women with
breast cancer. Clin J Oncol Nurs 19:E92–E97
Badawi MS (2018) Histological study of the protective role of ginger on piroxicam-induced liver toxicity in mice. J Chin
Med Assoc. https://doi.org/10.1016/j.jcma.2018.06.006
Baiomy AA, Mansour AA (2016) Genetic and histopathological responses to cadmium toxicity in rabbit’s kidney and
liver: protection by ginger (Zingiber officinale). Biol Trace Elem Res 170:320–329
Baliga MS, Haniadka R, Pereira MM et al (2011) Update on the chemopreventive effects of ginger and its
phytochemicals. Crit Rev Food Sci Nutr 51:499–523
Baliga MS, Haniadka R, Pereira MM et al (2012) Radioprotective effects of Zingiber officinale Roscoe (ginger): past,
present and future. Food Funct 3:714–723
Banji D, Banji OJ, Pavani B et al (2014) Zingerone regulates intestinal transit, attenuates behavioral and oxidative
perturbations in irritable bowel disorder in rats. Phytomedicine 21:423–429
Bernard MM, McConnery JR, Hoskin DW (2017) [10]-Gingerol, a major phenolic constituent of ginger root, induces cell
cycle arrest and apoptosis in triple-negative breast cancer cells. Exp Mol Pathol 102:370–376
Bi X, Lim J, Henry CJ (2017) Spices in the management of diabetes mellitus. Food Chem 217:281–293
Biswas S, Maji C, Sarkar PK et al (2017) Ameliorative effect of two ayurvedic herbs on experimentally induced arsenic
toxicity in calves. J Ethnopharmacol 197:266–273
Bode AM, Dong Z (2011) The amazing and mighty ginger. In: Benzie IFF, Wachtel-Galor S (eds) Herbal medicine:
biomolecular and clinical aspects. CRC Press, Boca Raton, FL
Boothe D (2014) Medical and nutritional issues of nutraceuticals in veterinary medicine: a focus on quality and safety.
World Small Animal Veterinary Association World Congress Proceedings. pp 1–4
Brahma Naidu P, Uddandrao VV, Ravindar Naik R et al (2016) Ameliorative potential of gingerol: promising modulation
of inflammatory factors and lipid marker enzymes expressions in HFD induced obesity in rats. Mol Cell Endocrinol
419:139–147
Butt MS, Sultan MT (2011) Ginger and its health claims: molecular aspects. Crit Rev Food Sci Nutr 51:383–393
Carrasco FR, Schmidt G, Romero AL, Sartoretto JL, Caparroz-Assef SM, Bersani-Amado CA, Cuman RK (2009)
Immunomodulatory activity of Zingiber officinale Roscoe, Salvia officinalis L. and Syzygium aromaticum L. essential oils:
evidence for humor- and cell-mediated responses. J Pharm Pharmacol 61:961–967
Chakraborty D, Mukherjee A, Sikdar S et al (2012) [6]-Gingerol isolated from ginger attenuates sodium arsenite
induced oxidative stress and plays a corrective role in improving insulin signaling in mice. Toxicol Lett 210:34–43

126
 Chan ML, Liang JW, Hsu LC et al (2015) Zerumbone, a ginger sesquiterpene, induces apoptosis and autophagy in
human hormonerefractory prostate cancers through tubulin binding and crosstalk between endoplasmic reticulum stress
and mitochondrial insult. Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol 388:1223–1236
Chandel NS, Schieber M (2014) ROS function in redox signaling and oxidative stress. Curr Biol 24:R453–R462.
https://doi.org/10.1016/j.cub.2014.1003.1034
Chatturong U, Kajsongkram T, Tunsophon S et al (2018) Ginger extract and [6]-gingerol inhibit contraction of rat entire
small intestine. J Evid Based Integr Med 23. https://doi.org/10.1177/2515690X18774273
Choi JG, Kim SY, Jeong M et al (2018) Pharmacotherapeutic potential of ginger and its compounds in age-related
neurological disorders. Pharmacol Ther 182:56–69
Cui Y, Shi Y, Bao Y et al (2018) Zingerone attenuates diabetic nephropathy through inhibition of nicotinamide adenine
dinucleotide phosphate oxidase 4. Biomed Pharmacother 99:422–430
Dabaghzadeh F, Khalili H, Dsahti-Khavidaki S, Abbasian L et al (2014) Ginger for prevention of antiretroviral-induced
nausea and vomiting: a randomized clinical trial. Expert Opin Drug Saf13:859–866.
https://doi.org/10.1517/14740338.14742014.14914170
de Las Heras N, Valero-Munoz M, Martin-Fernandez B et al (2017) Molecular factors involved in the hypolipidemic-
and insulinsensitizing effects of a ginger (Zingiber officinale Roscoe) extract in rats fed a high-fat diet. Appl Physiol Nutr
Metab 42:209–215
de Lima RMT, Dos Reis AC, de Menezes APM et al (2018) Protective and therapeutic potential of ginger (Zingiber
officinale) extract and [6]-gingerol in cancer: a comprehensive review. Phytother Res 32 (10):1885–1907
Dongare S, Gupta SK, Mathur R et al (2016) Zingiber officinale attenuates retinal microvascular changes in diabetic
rats via antiinflammatory and antiangiogenic mechanisms. Mol Vis 22:599–609
Ebrahimzadeh Attari V, Malek Mahdavi A, Javadivala Z et al (2018) A systematic review of the anti-obesity and weight
lowering effect of ginger (Zingiber officinale Roscoe) and its mechanisms of action. Phytother Res 32:577–585
Eid BG, Mosli H, Hasan A et al (2017) Ginger ingredients alleviate diabetic prostatic complications: effect on oxidative
stress and fibrosis. Evid Based Complement Alternat Med 2017:6090269. https://doi.org/10.1155/2017/6090269
Elkirdasy A, Shousha S, Alrohaimi AH et al (2015) Hematological and immunobiochemical study of green tea and
ginger extracts in experimentally induced diabetic rabbits. Acta Pol Pharm 72:497–506
Elseweidy MM, Younis NN, Elswefy SE et al (2015) Atheroprotective potentials of curcuminoids against ginger extract
in hypercholesterolaemic rabbits. Nat Prod Res 29:961–965
El-Seweidy MM, Asker Mel S, Eldahmy SI et al (2015) Haemostatic risk factors in dyslipidemic rabbits: role of 10-
dehydrogingerdione as a new hypolipemic agent. J Thromb Thrombolysis 39:196–202
El-Sharaky AS, Newairy AA, Kamel MA et al (2009) Protective effect of ginger extract against bromobenzene-induced
hepatotoxicity in male rats. Food Chem Toxicol 47:1584–1590
Emrani Z, Shojaei E, Khalili H (2016) Ginger for prevention of antituberculosis-induced gastrointestinal adverse
reactions including hepatotoxicity: a randomized pilot clinical trial. Phytother Res 30:1003–1009
Eren D, Betul YM (2016) Revealing the effect of 6-gingerol, 6-shogaol and curcumin on mPGES-1, GSK-3beta and
beta-catenin pathway in A549 cell line. Chem Biol Interact 258:257–265
Gaus K, Huang Y, Israel DA et al (2009) Standardized ginger (Zingiber officinale) extract reduces bacterial load and
suppresses acute and chronic inflammation in Mongolian gerbils infected with cagA Helicobacter pylori. Pharm Biol
47:92–98
Ghareib SA, El-Bassossy HM, Elberry AA et al (2016) Protective effect of zingerone on increased vascular contractility
in diabetic rat aorta. Eur J Pharmacol 780:174–179
Grzanna R, Lindmark L, Frondoza CG (2005) Ginger-an herbal medicinal product with broad anti-inflammatory actions.
J Med Food 8:125–132
Gunathilake K, Rupasinghe V (2015) Recent perspectives on the medicinal potential of ginger. Bot Targets Ther 5:55–
63
Ha SK, Moon E, Ju MS et al (2012) 6-Shogaol, a ginger product, modulates neuroinflammation: a new approach to
neuroprotection. Neuropharmacology 63:211–223
Han MA, Woo SM, Min KJ et al (2015) 6-Shogaol enhances renal carcinoma Caki cells to TRAIL-induced apoptosis
through reactive oxygen species-mediated cytochrome c release and down-regulation of c-FLIP(L) expression. Chem
Biol Interact 228:69–78
Haniadka R, Saldanha E, Sunita V et al (2013) A review of the gastroprotective effects of ginger (Zingiber officinale
Roscoe). Food Funct 4:845–855
Hashem RM, Rashed LA, Hassanin KMA et al (2017) Effect of 6-gingerol on AMPK- NF-kappaB axis in high fat diet fed
rats. Biomed Pharmacother 88:293–301
Hegazy AM, Mosaed MM, Elshafey SH et al (2016) 6-gingerol ameliorates gentamicin induced renal cortex oxidative
stress and apoptosis in adult male albino rats. Tissue Cell 48:208–216
Heshmati E, Shirpoor A, Kheradmand F et al (2018) Chronic ethanol increases calcium/calmodulin-dependent protein
kinase II delta gene expression and decreases monoamine oxidase amount in rat heart muscles: rescue effect of
Zingiber officinale (ginger) extract. Anatol J Cardiol 19:19–26
Hitomi S, Ono K, Terawaki K et al (2017) [6]-gingerol and [6]-shogaol, active ingredients of the traditional Japanese
medicine hangeshashinto, relief oral ulcerative mucositis-induced pain via action on Na(+) channels. Pharmacol Res
117:288–302

127
 Ho SC, Chang KS, Lin CC (2013) Anti-neuroinflammatory capacity of fresh ginger is attributed mainly to 10-gingerol.
Food Chem 141:3183–3191
Ho YC, Lee SS, Yang ML et al (2017) Zerumbone reduced the inflammatory response of acute lung injury in endotoxin-
treated mice via Akt-NFkappaB pathway. Chem Biol Interact 271:9–14
Hosseini F, Adib-Hajbaghery M(2015) Ginger essence effect on nausea and vomiting after open and laparoscopic
nephrectomies. Nurs Midwifery Stud 4:e28625. https://doi.org/10.17795/nmsjournal28625
Hosseinzadeh A, Bahrampour Juybari K, Fatemi MJ et al (2017) Protective effect of ginger (Zingiber officinale Roscoe)
extract against oxidative stress and mitochondrial apoptosis induced by Interleukin-1beta in cultured chondrocytes. Cells
Tissues Organs 204:241–250
Hruby A, Hu FB (2016) The epidemiology of obesity: a big picture. Pharmacoeconomics 33:673–689
Hu R, Zhou P, Peng YB et al (2012) 6-Shogaol induces apoptosis in human hepatocellular carcinoma cells and exhibits
anti-tumor activity in vivo through endoplasmic reticulum stress. PLoS One 7: e39664
Huh E, Lim S, Kim HG et al (2018) Ginger fermented with Schizosaccharomyces pombe alleviates memory impairment
via protecting hippocampal neuronal cells in amyloid beta1-42 plaque injected mice. Food Funct 9:171–178
IDF (2017) Diabetes atlas, 8th edn. IDF, Brussels
Ilkhanizadeh B, Shirpoor A, Khadem Ansari MH et al (2016) Protective effects of ginger (Zingiber officinale) extract
against diabetesinduced heart abnormality in rats. Diabetes Metab J 40:46–53
Imani H, Tabibi H, Najafi I et al (2015) Effects of ginger on serum glucose, advanced glycation end products, and
inflammation in peritoneal dialysis patients. Nutrition 31:703–707
Iqbal Z, Lateef M, Akhtar MS et al (2006) In vivo anthelmintic activity of ginger against gastrointestinal nematodes of
sheep. J Ethnopharmacol 106:285–287
Iwami M, Shiina T, Hirayama H et al (2011) Inhibitory effects of zingerone, a pungent component of Zingiber officinale
Roscoe, on colonic motility in rats. J Nat Med 65:89–94
Jafarzadeh A, Azizi SV, Nemati M et al (2015) Ginger extract reduces the expression of IL-17 and IL-23 in the sera and
central nervous system of EAE mice. Iran J Immunol 12:288–301
Jafarzadeh A, Arabi Z, Ahangar-Parvin R et al (2017a) Ginger extract modulates the expression of chemokines CCL20
and CCL22 and their receptors (CCR6 and CCR4) in the central nervous system of mice with experimental autoimmune
encephalomyelitis. Drug Res (Stuttg) 67:632–639
Jafarzadeh A, Arabi Z, Ahangar-Parvin R et al (2017b) Ginger extract modulates the expression of chemokines CCL20
and CCL22 and their receptors (CCR6 and CCR4) in the central nervous system of mice with experimental autoimmune
encephalomyelitis. Drug Res (Stuttg) 67:632–639
Jeena K, Liju VB, Ramanath V et al (2016) Protection against whole body gamma-irradiation induced oxidative stress
and clastogenic damage in mice by ginger essential oil. Asian Pac J Cancer Prev 17:1325–1332
Jittiwat J, Wattanathorn J (2012) Ginger pharmacopuncture improves cognitive impairment and oxidative stress
following cerebral ischemia. J Acupunct Meridian Stud 5:295–300
Joshi D, Srivastav SK, Belemkar S et al (2017) Zingiber officinale and 6-gingerol alleviate liver and kidney dysfunctions
and oxidative stress induced by mercuric chloride in male rats: a protective approach. Biomed Pharmacother 91:645–
655
Kalava A, Darji SJ, Kalstein A et al (2013) Efficacy of ginger on intraoperative and postoperative nausea and vomiting
in elective cesarean section patients. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol 169:184–188
Kandemir FM, Yildirim S, Kucukler S et al (2018) Therapeutic efficacy of zingerone against vancomycin-induced
oxidative stress, inflammation, apoptosis and aquaporin 1 permeability in rat kidney. Biomed Pharmacother 105:981–991
Kang CG, Lee HJ, Kim SH et al (2016) Zerumbone suppresses osteopontin-induced cell invasion through inhibiting the
FAK/AKT/ROCK pathway in human non-small cell lung cancer A549 cells. J Nat Prod 79:156–160
Kazeem MI, Akanji MA, Yakubu MT (2015) Amelioration of pancreatic and renal derangements in streptozotocin-
induced diabetic rats by polyphenol extracts of Ginger (Zingiber officinale) rhizome. Pathophysiology 22:203–209
Keng-Liang CKR, Chuah S-K, Chi-Sin C et al (2008) Effects of ginger on gastric emptying and motility in healthy
humans. Eur J Gastroenterol Hepatol 20:436–440
Khaki A, Khaki AA, Hajhosseini L et al (2014) The anti-oxidant effects of ginger and cinnamon on spermatogenesis
dys-function of diabetes rats. Afr J Tradit Complement Altern Med 11:1–8
Khosravani M, Azarbayjani MA, Abolmaesoomi M et al (2016) Ginger extract and aerobic training reduces lipid profile
in high-fat fed diet rats. Eur Rev Med Pharmacol Sci 20:1617–1622
Kim S, Kwon J (2013) [6]-shogaol attenuates neuronal apoptosis in hydrogen peroxide-treated astrocytes through the
up-regulation of neurotrophic factors. Phytother Res 27:1795–1799
Kim MO, Lee MH, Oi N et al (2014) [6]-shogaol inhibits growth and induces apoptosis of non-small cell lung cancer
cells by directly regulating Akt1/2. Carcinogenesis 35:683–691
Kim YJ, Jeon Y, Kim T et al (2017) Combined treatment with zingerone and its novel derivative synergistically inhibits
TGF-beta1 induced epithelial-mesenchymal transition, migration and invasion of human hepatocellular carcinoma cells.
Bioorg Med Chem Lett 27:1081–1088
Kim JN, Kim HJ, Kim I et al (2018) The mechanism of action of zingerone in the pacemaker potentials of interstitial
cells of cajal isolated from murine small intestine. Cell Physiol Biochem 46:2127–2137
Kubra IR, Rao LJ (2012) An impression on current developments in the technology, chemistry, and biological activities
of ginger (Zingiber officinale Roscoe). Crit Rev Food Sci Nutr 52:651–688

128
 Lai YS, Lee WC, Lin YE et al (2016) Ginger essential oil ameliorates hepatic injury and lipid accumulation in high fat
diet-induced nonalcoholic fatty liver disease. J Agric Food Chem 64:2062–2071
Lamuchi-Deli N, Aberomand M, Babaahmadi-Rezaei H et al (2017) Effects of the hydroalcoholic extract of Zingiber
officinale on arginase I activity and expression in the retina of streptozotocin-induced diabetic rats. Int J Endocrinol Metab
15:e42161
Lee SH, Cekanova M, Baek SJ (2008) Multiple mechanisms are involved in 6-gingerol-induced cell growth arrest and
apoptosis in human colorectal cancer cells. Mol Carcinog 47:197–208
Lee DH, Kim DW, Jung CH et al (2014) Gingerol sensitizes TRAILinduced apoptotic cell death of glioblastoma cells.
Toxicol Appl Pharmacol 279:253–265
Lee W, Ku SK, Kim MA et al (2017) Anti-factor Xa activities of zingerone with anti-platelet aggregation activity. Food
Chem Toxicol 105:186–193
Lei L, Liu Y, Wang X et al (2014) Plasma cholesterol-lowering activity of gingerol- and shogaol-enriched extract is
mediated by increasing sterol excretion. J Agric Food Chem 62:10515–10521
Li TY, Chiang BH (2017) 6-shogaol induces autophagic cell death then triggered apoptosis in colorectal
adenocarcinoma HT-29 cells. Biomed Pharmacother 93:208–217
Li F, Nitteranon V, Tang X et al (2012a) In vitro antioxidant and antiinflammatory activities of 1-dehydro-[6]-gingerdione,
6-shogaol, 6-dehydroshogaol and hexahydrocurcumin. Food Chem 135:332–337
Li Y, Tran VH, Duke CC et al (2012b) Gingerols of Zingiber officinale enhance glucose uptake by increasing cell
surface GLUT4 in cultured L6 myotubes. Planta Med 78:1549–1555
Li Y, Tran VH, Duke CC et al (2012c) Preventive and protective properties of Zingiber officinale (Ginger) in diabetes
mellitus, diabetic complications, and associated lipid and other metabolic disorders: a brief review. Evid Based
Complement Alternat Med2012:516870
Li Y, Xu B, XuMet al (2017) 6-Gingerol protects intestinal barrier from ischemia/reperfusion-induced damage via
inhibition of p38 MAPK to NF-kappaB signalling. Pharmacol Res 119:137–148
Li X, Qin Y, LiuWet al (2018a) Efficacy of ginger in ameliorating acute and delayed chemotherapy-induced nausea and
vomiting among patients with lung cancer receiving cisplatin-based regimens: a randomized controlled trial. Integr
Cancer Ther 17:747–754
Li Z, Wang Y, Gao M et al (2018b) Nine new gingerols from the Rhizoma of Zingiber officinale and their cytotoxic
activities. Molecules 23. https://doi.org/10.3390/molecules23020315
Liburt NR, McKeever KH, Streltsova JM et al (2009) Effects of ginger and cranberry extracts on the physiological
response to exercise and markers of inflammation in horses. Comp Exercise Physiol 6:157–169
Liju VB, Jeena K, Kuttan R (2015) Gastroprotective activity of essential oils from turmeric and ginger. J Basic Clin
Physiol Pharmacol 26:95–103
Lim S, Moon M, Oh H et al (2014) Ginger improves cognitive function via NGF-induced ERK/CREB activation in the
hippocampus of the mouse. J Nutr Biochem 25:1058–1065
Liu Q, Liu J, Guo H et al (2013a) [6]-gingerol: a novel AT(1) antagonist for the treatment of cardiovascular disease.
Planta Med 79:322–326
Liu Q, Peng YB, Zhou P et al (2013b) 6-Shogaol induces apoptosis in human leukemia cells through a process
involving caspase-mediated cleavage of eIF2alpha. Mol Cancer 12:135
Liu R, Heiss EH, Sider N et al (2015) Identification and characterization of [6]-shogaol from ginger as inhibitor of
vascular smooth muscle cell proliferation. Mol Nutr Food Res 59:843–852
Lua PL, Salihah N, Mazlan N (2015) Effects of inhaled ginger aromatherapy on chemotherapy-induced nausea and
vomiting and healthrelated quality of life in women with breast cancer. Complement Ther Med 23:396–404
Luettig J, Rosenthal R, Lee IM et al (2016) The ginger component 6-shogaol prevents TNF-alpha-induced barrier loss
via inhibition of PI3K/Akt and NF-kappaB signaling. Mol Nutr Food Res 60:2576–2586
Maghbooli Mehdi GPF, Moghimi Esfandabadi A, Mehran Y (2013) Comparison between the efficacy of ginger and
sumatriptan in the ablative treatment of the common migraine. Phytother Res 28:412–415
Mahady GB, Pendland SL, Yun GS et al (2003) Ginger (Zingiber officinale Roscoe) and the gingerols inhibit the growth
of Cag A+ strains of Helicobacter pylori. Anticancer Res 23:3699–3702
Mahima, Rahal A, Deb R, Latheef SK et al (2012) Immunomodulatory and therapeutic potentials of herbal,
traditional/indigenous and ethnoveterinary medicines. Pak J Biol Sci 15:754–774
Mahluji S, Ostadrahimi A, Mobasseri M et al (2013) Anti-inflammatory effects of zingiber officinale in type 2 diabetic
patients. Adv Pharm Bull 3:273–276
Mahmoud RH, Elnour WA (2013) Comparative evaluation of the efficacy of ginger and orlistat on obesity management,
pancreatic lipase and liver peroxisomal catalase enzyme in male albino rats. Eur Rev Med Pharmacol Sci 17:75–83
Makhdoomi Arzati M, Mohammadzadeh Honarvar N, Saedisomeolia A et al (2017) The effects of ginger on fasting
blood sugar, hemoglobin A1c, and lipid profiles in patients with Type 2 diabetes. Int J Endocrinol Metab 15:e57927
Mamaghani A, Maham M, Dalir-Naghadeh B (2013) Effects of ginger extract on smooth muscle activity of sheep
reticulum and rumen. Vet Res Forum 4:91–97
Mansingh DP, O JS, Sali VK et al (2018) [6]-Gingerol-induced cell cycle arrest, reactive oxygen species generation,
and disruption of mitochondrial membrane potential are associated with apoptosis in human gastric cancer (AGS) cells. J
Biochem Mol Toxicol 32(10): e22206
Mardani H, Ghannadi A, Rashnavadi B et al (2017) The effect of ginger herbal spray on reducing xerostomia in
patients with type II diabetes. Avicenna J Phytomed 7:308–316
129
 Martins LB, Rodrigues AMDS, Rodrigues DF et al (2018) Double-blind placebo-controlled randomized clinical trial of
ginger (Zingiber officinale Rosc.) addition in migraine acute treatment. Cephalalgia:333102418776016.
https://doi.org/10.1177/0333102418776016
Mashhadi NS, Ghiasvand R, Askari G et al (2013) Anti-oxidative and anti-inflammatory effects of ginger in health and
physical activity: review of current evidence. Int J Prev Med 4:S36–S42
Medagama AB, Bandara R (2014) The use of complementary and alternative medicines (CAMs) in the treatment of
diabetes mellitus: is continued use safe and effective? Nutr J 13:102
Mekuriya W, Mekibib B (2018) Review on the medicinal values of ginger for human and animal ailments. J Vet Sci
Technol 9:2
Mohamed OI, El-Nahas AF, El-Sayed YS et al (2016) Ginger extract modulates Pb-induced hepatic oxidative stress
and expression of antioxidant gene transcripts in rat liver. Pharm Biol 54:1164–1172
Moon M, Kim HG, Choi JG et al (2014) 6-Shogaol, an active constituent of ginger, attenuates neuroinflammation and
cognitive deficits in animal models of dementia. Biochem Biophys Res Commun 449:8–13
Motawi TK, Hamed MA, Shabana MH et al (2011) Zingiber officinale acts as a nutraceutical agent against liver fibrosis.
Nutr Metab (Lond) 8:40
Mowrey DB, Clayson DE (1982) Motion sickness, ginger, and psychophysics. Lancet 1:655–657
Mozaffari-Khosravi H, Talaei B, Jalali BA et al (2014) The effect of ginger powder supplementation on insulin resistance
and glycemic indices in patients with type 2 diabetes: a randomized, double-blind, placebo-controlled trial. Complement
Ther Med 22:9–16
Na JY, Song K, Lee JW et al (2016a) 6-Shogaol has anti-amyloidogenic activity and ameliorates Alzheimer’s disease
via CysLT1R-mediated inhibition of cathepsin B. Biochem Biophys Res Commun 477:96–102
Na JY, Song K, Lee JW et al (2016b) Pretreatment of 6-shogaol attenuates oxidative stress and inflammation in middle
cerebral artery occlusion-induced mice. Eur J Pharmacol 788:241–247
Na JY, Song K, Lee JW et al (2017) Sortilin-related receptor 1 interacts with amyloid precursor protein and is activated
by 6-shogaol, leading to inhibition of the amyloidogenic pathway. Biochem Biophys Res Commun 484:890–895
Nicoll R, Henein MY (2009) Ginger (Zingiber officinale Roscoe): a hot remedy for cardiovascular disease? Int J Cardiol
131:408–409
Oyagbemi AA, Saba AB, Azeez OI (2010) Molecular targets of [6]-gingerol: its potential roles in cancer
chemoprevention. Biofactors 36:169–178
Park G, Kim HG, Ju MS et al (2013) 6-Shogaol, an active compound of ginger, protects dopaminergic neurons in
Parkinson’s disease models via anti-neuroinflammation. Acta Pharmacol Sin 34:1131–1139
Park GH, Park JH, Song HM et al (2014) Anti-cancer activity of Ginger (Zingiber officinale) leaf through the expression
of activating transcription factor 3 in human colorectal cancer cells. BMC Complement Altern Med 14:408
Peng S, Yao J, Liu Y, Duan D, Zhang X, Fang J (2015) Activation of Nrf2 target enzymes conferring protection against
oxidative stress in PC12 cells by ginger principal constituent 6-shogaol. Food Funct 6:2813–2823
Pillai AK, Sharma KK, Gupta YK et al (2011) Anti-emetic effect of ginger powder versus placebo as an add-on therapy
in children and young adults receiving high emetogenic chemotherapy. Pediatr Blood Cancer 56:234–238
Plumb D (2015) Plumb’s veterinary drug handbook, 8th edn. Wiley, Hoboken, NJ
Poltronieri J, Becceneri AB, Fuzer AM et al (2014) [6]-gingerol as a cancer chemopreventive agent: a review of its
activity on different steps of the metastatic process. Mini Rev Med Chem 14:313–321
Pourmasoumi M, Hadi A, Rafie N et al (2018) The effect of ginger supplementation on lipid profile: a systematic review
and metaanalysis of clinical trials. Phytomedicine 43:28–36
Prabu SL, Suriyaprakash TNK, Kumar CD et al (2012) Nutraceuticals and their medicinal importance. Int J Health
Allied Sci 1:47
Prasad S, Tyagi AK (2015) Ginger and its constituents: role in prevention and treatment of gastrointestinal cancer.
Gastroenterol Res Pract 2015:142979
Qin F-F, Xu H-L (2008) Active compounds in gingers and thier therapeutic use in complimentary medication. Med
Aromat Plant Sci Biotechnol 2:72–78
Qorbanpour M, Fahim T, Javandel F et al (2018) Effect of dietary ginger (Zingiber officinale Roscoe) and multi-strain
probiotic on growth and carcass traits, blood biochemistry, immune responses and intestinal microflora in broiler
chickens. Animals (Basel) 8:117
Ramudu SK, Korivi M, Kesireddy N et al (2011) Nephro-protective effects of a ginger extract on cytosolic and
mitochondrial enzymes against streptozotocin (STZ)-induced diabetic complications in rats. Chin J Physiol 54:79–86
Rani MP, Padmakumari KP, Sankarikutty B et al (2011) Inhibitory potential of ginger extracts against enzymes linked to
type 2 diabetes, inflammation and induced oxidative stress. Int J Food Sci Nutr 62:106–110
Rani MP, Krishna MS, Padmakumari KP et al (2012) Zingiber officinale extract exhibits antidiabetic potential via
modulating glucose uptake, protein glycation and inhibiting adipocyte differentiation: an in vitro study. J Sci Food Agric
92:1948–1955
Rashidian A, Mehrzadi S, Ghannadi AR et al (2014) Protective effect of ginger volatile oil against acetic acid-induced
colitis in rats: a light microscopic evaluation. J Integr Med 12:115–120
Rastogi N, Duggal S, Singh SK et al (2015) Proteasome inhibition mediates p53 reactivation and anti-cancer activity of
6-gingerol in cervical cancer cells. Oncotarget 6:43310–43325

130
 Ray A, Vasudevan S, Sengupta S (2015) 6-Shogaol inhibits breast cancer cells and stem cell-like spheroids by
modulation of notch signaling pathway and induction of autophagic cell death. PLoS One 10:e0137614
Rehman MU, Rashid SM, Rasool S et al (2018) Zingerone (4-(4-hydroxy-3-methylphenyl)butan-2-one) ameliorates
renal function via controlling oxidative burst and inflammation in experimental diabetic nephropathy. Arch Physiol
Biochem:1–9. https://doi.org/10.1080/13813455.2018.1448422
Saberi H, Keshavarzi B, Shirpoor A et al (2017) Rescue effects of ginger extract on dose dependent radiation-induced
histological and biochemical changes in the kidneys of male Wistar rats. Biomed Pharmacother 94:569–576
Sabina EP, Pragasam SJ, Kumar S et al (2011) 6-Gingerol, an active ingredient of ginger, protects acetaminophen-
induced hepatotoxicity in mice. Zhong Xi Yi Jie He Xue Bao 9:1264–1269
Sahebkar A (2011) Potential efficacy of ginger as a natural supplement for nonalcoholic fatty liver disease. World J
Gastroenterol 17:271–272
Salah Khalil M (2015) The postulated mechanism of the protective effect of ginger on the aspirin induced gastric ulcer:
histological and immunohistochemical studies. Histol Histopathol 30:855–864
Salihu M, Ajayi BO, Adedara IA et al (2017) 6-Gingerol-rich fraction from Zingiber officinale ameliorates carbendazim-
induced endocrine disruption and toxicity in testes and epididymis of rats. Andrologia 49:e12658.
https://doi.org/10.1111/and.12658
Samad MB, Mohsin M, Razu BA et al (2017) [6]-Gingerol, from Zingiber officinale, potentiates GLP-1 mediated
glucose-stimulated insulin secretion pathway in pancreatic beta-cells and increases - RAB8/RAB10-regulated membrane
presentation of GLUT4 transporters in skeletal muscle to improve hyperglycemia in Lepr (db/db) type 2 diabetic mice.
BMC Complement Altern Med 17:395
Sampath C, Rashid MR, Sang S et al (2017) Specific bioactive compounds in ginger and apple alleviate
hyperglycemia in mice with high fat diet-induced obesity via Nrf2 mediated pathway. Food Chem 226:79–88
Sani NF, Belani LK, Sin CP et al (2014) Effect of the combination of gelam honey and ginger on oxidative stress and
metabolic profile in streptozotocin-induced diabetic Sprague-Dawley rats. Biomed Res Int 2014:160695
Sapkota A, Park SJ, Choi JW (2018) Neuroprotective effects of 6-shogaol and its metabolite, 6-paradol, in a mouse
model of multiple sclerosis. Biomol Ther. https://doi.org/10.4062/biomolther.2018.089
Saraswat M, Suryanarayana P, Reddy PY et al (2010) Antiglycating potential of Zingiber officinalis and delay of
diabetic cataract in rats. Mol Vis 16:1525–1537
Semwal RB, Semwal DK, Combrinck S et al (2015) Gingerols and shogaols: important nutraceutical principles from
ginger. Phytochemistry 117:554–568
Shalaby MA, Hamowieh AR (2010) Safety and efficacy of Zingiber officinale roots on fertility of male diabetic rats. Food
Chem Toxicol 48:2920–2924
Shamoto T, Matsuo Y, Shibata T et al (2014) Zerumbone inhibits angiogenesis by blocking NF-kappaB activity in
pancreatic cancer. Pancreas 43:396–404
Shanmugam KR, Mallikarjuna K, Kesireddy N et al (2011) Neuroprotective effect of ginger on anti-oxidant enzymes in
streptozotocin-induced diabetic rats. Food Chem Toxicol 49:893–897
Sharma Y (2017) Ginger (Zingiber officinale)-an elixir of life a review. Pharm Innov 6:22
Sharma SS, Gupta YK (1998) Reversal of cisplatin-induced delay in gastric emptying in rats by ginger (Zingiber
officinale). J Ethnopharmacol 62:49–55
Sharma SS, Kochupillai V, Gupta SK et al (1997) Antiemetic efficacy of ginger (Zingiber officinale) against cisplatin-
induced emesis in dogs. J Ethnopharmacol 57:93–96
Shidfar F, Rajab A, Rahideh T et al (2015) The effect of ginger (Zingiber officinale) on glycemic markers in patients with
type 2 diabetes. J Complement Integr Med 12:165–170
Shim S, Kim S, Choi DS et al (2011) Anti-inflammatory effects of [6]-shogaol: potential roles of HDAC inhibition and
HSP70 induction. Food Chem Toxicol 49:2734–2740
Shirpoor A, Zerehpoosh M, Ansari MHK et al (2017) Ginger extract mitigates ethanol-induced changes of alpha and
beta – myosin heavy chain isoforms gene expression and oxidative stress in the heart of male wistar rats. DNA Repair
(Amst) 57:45–49
Shirpoor A, Heshmati E, Kheradmand F et al (2018) Increased hepatic FAT/CD36, PTP1B and decreased HNF4A
expression contributes to dyslipidemia associated with ethanol-induced liver dysfunction: rescue effect of ginger extract.
Biomed Pharmacother 105:144–150
Shukla Y, Singh M (2007) Cancer preventive properties of ginger: a brief review. Food Chem Toxicol 45:683–690
Si W, Chen YP, Zhang J et al (2018) Antioxidant activities of ginger extract and its constituents toward lipids. Food
Chem 239:1117–1125
Song J, Fan HJ, Li H et al (2016) Zingerone ameliorates lipopolysaccharide-induced acute kidney injury by inhibiting
Tolllike receptor 4 signaling pathway. Eur J Pharmacol 772:108–114
Srinivasan K (2017) Ginger rhizomes (Zingiber officinale): A spice with multiple health beneficial potentials.
PharmaNutrition 5:18–28
Stanisiere J, Mousset PY, Lafay S (2018) How safe is ginger Rhizome for decreasing nausea and vomiting in women
during early pregnancy? Foods 7. https://doi.org/10.3390/foods7040050
Suk S, Kwon GT, Lee E et al (2017) Gingerenone A, a polyphenol present in ginger, suppresses obesity and adipose
tissue inflammation in high-fat diet-fed mice. Mol Nutr Food Res 61. https://doi.org/10.1002/mnfr.201700139
Talalay P, Talalay P (2001) The importance of using scientific principles in the development of medicinal agents from
plants. Acad Med 76:238–247
131
 Tiwari L, Pande PC (2010) Ethnoveterinary medicines in Indian perspective: reference to Uttarakhand, Himalaya.
Indian J Tradit Knowle 9(3):611–617
Tsuboi K, Matsuo Y, Shamoto T et al (2014) Zerumbone inhibits tumor angiogenesis via NF-kappaB in gastric cancer.
Oncol Rep 31:57–64
Tzeng TF, Liou SS, Tzeng YC et al (2016) Zerumbone, a phytochemical of subtropical ginger, protects against
hyperglycemia-induced retinal damage in experimental diabetic rats. Nutrients 8. https://doi.org/10.3390/nu8080449
Vaibhav K, Shrivastava P, Tabassum R et al (2013) Delayed administration of zingerone mitigates the behavioral and
histological alteration via repression of oxidative stress and intrinsic programmed cell death in focal transient ischemic
rats. Pharmacol Biochem Behav 113:53–62
van den Driessche JJ, Plat J, Mensink RP (2018) Effects of superfoods on risk factors of metabolic syndrome: a
systematic review of human intervention trials. Food Funct 9:1944–1966
Vipin AV, Rao R, Kurrey NK, KA AA (2017) Protective effects of phenolics rich extract of ginger against Aflatoxin B1-
induced oxidative stress and hepatotoxicity. Biomed Pharmacother 91:415–424
Wang J, Ke W, Bao R et al (2017) Beneficial effects of ginger Zingiber officinale Roscoe on obesity and metabolic
syndrome: a review. Ann N Y Acad Sci 1398:83–98
Wattanthorn J, Sutalangka C (2017) Neuroprotective and cognitiveenhancing effects of the combined extract of
Cyperus rotundus and Zingiber officinale. BMC Complement Altern Med 17:135. https://doi.org/10.1186/s12906-12017-
11632-12904
Wei CK, Tsai YH, Korinek M et al (2017) 6-Paradol and 6-Shogaol, the pungent compounds of ginger, promote glucose
utilization in adipocytes and myotubes, and 6-Paradol reduces blood glucose in high-fat diet-fed mice. Int J Mol Sci
18(1):168
Weng CJ, Wu CF, Huang HW et al (2010) Anti-invasion effects of 6-shogaol and 6-gingerol, two active components in
ginger, on human hepatocarcinoma cells. Mol Nutr Food Res 54:1618–1627
Wilasrusmee C, Kittur S, Siddiqui J et al (2002a) In vitro immunomodulatory effects of ten commonly used herbs on
murine lymphocytes. J Altern Complement Med 8:467–475
Wilasrusmee C, Siddiqui J, Bruch D et al (2002b) In vitro immunomodulatory effects of herbal products. Am Surg
68:860–864
Williams CA, Lamprecht ED (2008) Some commonly fed herbs and other functional foods in equine nutrition: a review.
Vet J 178:21–31
Xie X, Sun S, Zhong W et al (2014) Zingerone attenuates lipopolysaccharide-induced acute lung injury in mice. Int
Immunopharmacol 19:103–109
Yao C, Oh JH, Oh IG et al (2013) [6]-Shogaol inhibits melanogenesis in B16 mouse melanoma cells through activation
of the ERK pathway. Acta Pharmacol Sin 34:289–294
Yao J, Du Z, Li Z et al (2018) 6-Gingerol as an arginase inhibitor prevents urethane-induced lung carcinogenesis by
reprogramming tumor supporting M2 macrophages to M1 phenotype. Food Funct 9 (9):4611–4620.
https://doi.org/10.1039/c1038fo01147h
Yogosawa S, Yamada Y, Yasuda S et al (2012) Dehydrozingerone, a structural analogue of curcumin, induces cell-
cycle arrest at the G2/M phase and accumulates intracellular ROS in HT-29 human colon cancer cells. J Nat Prod
75:2088–2093
Zainal NS, Gan CP, Lau BF et al (2018) Zerumbone targets the CXCR4-RhoA and PI3K-mTOR signaling axis to
reduce motility and proliferation of oral cancer cells. Phytomedicine 39:33–41
Zarezadeh M, Saedisomeolia A, Khorshidi M et al (2018) Asymmetric dimethylarginine and soluble inter-cellular
adhesion molecule-1 serum levels alteration following ginger supplementation in patients with type 2 diabetes: a
randomized double-blind, placebo-controlled clinical trial. J Complement Integr Med. https://doi.org/10.1515/jcim-2018-
0019
Zeraati H, Shahinfar J, Hesari S et al (2016) The effect of ginger extract on the incidence and severity of nausea and
vomiting after cesarean section under spinal anesthesia. Anesth Pain Med 6:e38943.
https://doi.org/10.5812/aapm.38943
Zhang M, Viennois E, Prasad M et al (2016a) Edible ginger-derived nanoparticles: a novel therapeutic approach for the
prevention and treatment of inflammatory bowel disease and colitis-associated cancer. Biomaterials 101:321–340
Zhang M, Xiao B, Wang H et al (2016b) Edible ginger-derived nanolipids loaded with doxorubicin as a novel drug-
delivery approach for colon cancer therapy. Mol Ther 24:1783–1796
Zhang F, Thakur K, Hu F et al (2017) 10-Gingerol, a phytochemical derivative from “tongling white ginger”, inhibits
cervical cancer: insights into the molecular mechanism and inhibitory targets. J Agric Food Chem 65:2089–2099
Zhao X, Yang ZB, Yang WR et al (2011) Effects of ginger root (Zingiber officinale) on laying performance and
antioxidant status of laying hens and on dietary oxidation stability. Poult Sci 90:1720–1727
Zhou L, Qi L, Jiang L et al (2014) Antitumor activity of gemcitabine can be potentiated in pancreatic cancer through
modulation of TLR4/NfkappaB signaling by 6-shogaol. AAPS J 16:246–257
Zhu Y, Wang P, Zhao Y et al (2016) Synthesis, evaluation, and metabolism of novel [6]-shogaol derivatives as potent
Nrf2 activators. Free Radic Biol Med 95:243–254
Zhu Y, Wang F, Zhao Y et al (2017) Gastroprotective [6]-gingerol aspirinate as a novel chemopreventive prodrug of
aspirin for colon cancer. Sci Rep 7:40119

132
 Zhu J, Chen H, Song Z et al (2018) Effects of ginger (Zingiber officinale Roscoe) on Type 2 diabetes mellitus and
components of the metabolic syndrome: a systematic review and meta-analysis of randomized controlled trials. Evid
Based Complement Alternat Med 2018:5692962. https://doi.org/10.1155/2018/5692962
Zhuang X, Deng ZB, Mu J et al (2015) Ginger-derived nanoparticles protect against alcohol-induced liver damage. J
Extracell Vesicles 4:28713. https://doi.org/10.3402/jev.v4.28713
Zick SM, Djuric Z, Ruffin MT et al (2008) Pharmacokinetics of 6-gingerol, 8-gingerol, 10-gingerol, and 6-shogaol and
conjugate metabolites in healthy human subjects. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev 17:1930–1936
Zick SM, Turgeon DK, Ren J et al (2015) Pilot clinical study of the effects of ginger root extract on eicosanoids in
colonic mucosa of subjects at increased risk for colorectal cancer. Mol Carcinog 54:908–915

133
 Berberina
Ajay Srivastava, Anita Sinha, Rajiv Lall, and Ramesh C. Gupta

Resumo
A berberina (BBR) é um alcalóide isoquinolina que pode ser obtido de muitas plantas do
gênero Berberis, Hydrastis, Coptis e Argemone. Plantas comuns que são fontes de BBR
incluem B. vulgaris (bérberis), B. aristata (cúrcuma), B. aquifolium (uva Oregon), B.
thunbergii, C. chinensis (Coptis ou fio de ouro chinês), C. trifolia (fio de ouro americana),
C. japonica, H. canadensis (goldenseal), Argemone mexicana (papoula espinhosa) e
Thalictrum lucidum. Após a administração oral, o BBR é instável no trato GI e pouco
biodisponível. Possui amplas aplicações farmacológicas e terapêuticas devido aos seus
múltiplos mecanismos e efeitos-alvo. O uso terapêutico de BBR foi descrito na obesidade,
diabetes tipo 2, hiperlipidemia, hipertensão, insuficiência cardíaca congestiva, doenças
neurodegenerativas, doenças hepáticas, tracoma crônico e câncer. Este capítulo descreve
a farmacocinética, as aplicações farmacológicas e terapêuticas e a avaliação da
segurança e toxicidade do BBR e seus principais metabólitos.

Palavras-chave: Berberina · Diidroberberina · Talifendina · Jatrorrizina · Diabetes tipo 2 ·

Hipertensão · Síndrome de distúrbio cognitivo · Obesidade · Tracoma crônico · Diarreia
bacteriana

A. Srivastava · A. Sinha · R. Lall Vets Plus Inc., Menomonie, WI, USA

R. C. Gupta (*) Toxicology Department, Breathitt Veterinary Center, Murray State University, Hopkinsville, KY,
USA e-mail: rgupta@murraystate.edu

1. Introdução
O uso de plantas contendo berberina (BBR) remonta a 3000 anos nos sistemas de
medicina ayurvédica e chinesa. BBR é um alcalóide isoquinolina (2,3-metilenodioxi-9,10-
di-metoxiprotoberberina) naturalmente encontrado nas raízes, rizomas e cascas do caule
de plantas, incluindo Berberis vulgaris (bérberis), B. aristata (cúrcuma), B. aquifolium (uva
Oregon), Hydrastis canadensis (goldenseal), Coptis chinensis (fio de ouro chinês), C.
trifolia (fio de ouro americano), C. japonica, Argemone mexicana (papoula espinhosa),
Thalictrum lucidum e outros. Ele tem uma fórmula química de C 20H18NO4+ com um peso
molecular de 336.361. A estrutura química do BBR é mostrada na Fig. 1.

134
 Fig. 1 Estrutura química da
berberina

BBR é usado isoladamente ou em combinação com outros suplementos/drogas em várias

doenças, incluindo comprometimento cognitivo, diabetes tipo 2, síndrome metabólica,
arritmia cardíaca, insuficiência cardíaca congestiva, hiperlipidemia, diarreia bacteriana,
obesidade, tracoma crônico e câncer. Como o BBR exerce atividade antimicrobiana, é
considerado antibiótico. Estudos pré-clínicos estabeleceram bem suas potentes
propriedades antimicrobiana, antiprotozoária, antifúngica, antioxidante, antiinflamatória,
antitumoral/anticâncer, imunomoduladora, neuroprotetora, hepatoprotetora,
nefroprotetora, carminativa, uterotônica e antipirética. Estudos recentes in vitro sugerem a
possibilidade da berberina ser usada na osteoartrite (Liu et al. 2015). O BBR exerce seus
efeitos terapêuticos por meio de vários mecanismos farmacológicos, visando vários
receptores, transmissores, enzimas e outras biomoléculas significativas. As doses para
eficácia terapêutica e segurança de BBR podem variar dependendo da doença e da
espécie animal. Este capítulo descreve vários aspectos da BBR, incluindo
farmacocinética, farmacologia, terapêutica, e avaliação de toxicidade e segurança.

2. Farmacocinética e Farmacodinâmica
A biodisponibilidade oral do BBR é baixa (<1%) devido à sua baixa solubilidade aquosa,
eliminação de primeira passagem, interação com glicoproteína P e dissolução (Pan et al.
2002; Chen et al. 2011; Fratter e De Servi 2014; Imenshahidi e Hosseinzadeh 2015; Liu et
al. 2015). Kheir et al. (2010) observaram uma diferença significativa na biodisponibilidade
entre as diferentes vias de administração (oral, intravenosa e intraperitoneal). Após a
administração oral, o BBR é geralmente convertido no intestino em di-hidroberberina
(dhBBR), que é cinco vezes mais absorvível (Feng et al. 2015). BBR e seus 14
metabólitos são mostrados na Fig. 2.

135
 Fig. 2 Berberina e seus 14 metabólitos em cães (Cortesia de Feng et al. 2018)

Com uma dose oral única de BBR (200 mg/kg) em ratos, Tan et al. (2013) observaram
que o BBR foi rapidamente destribuído no fígado, rins, músculos, pulmões, cérebro,
coração, pâncreas e gordura em ordem decrescente de quantidade. O perfil
farmacocinético indicou que o nível de BBR na maioria dos tecidos estudados era maior
do que no plasma 4 h após a administração. Os principais metabólitos do BBR são a
talifendina, a berberrubina, a jatrorrizina e a desmetilenoberberina. No plasma de rato,
esses metabólitos podem estar presentes como conjugados livres e glicuronídeos (Zuo et
al. 2006). Após a administração oral de BBR, as concentrações mais altas de BBR e seus
metabólitos são encontradas no fígado, local de produção e metabolismo de colesterol,
triglicerídeos e glicose e efeitos farmacológicos.

Em um modelo não compartimental de rato, o BBR não ligado é transportado para a bile
por meio de transporte ativo e é metabolizado por um sistema enzimático do citocromo
P450 no fígado, com desmetilação de fase I e glucuronidação de fase II (Tsai e Tsai
2003). BBR tem quatro metabólitos principais identificados em ratos (berberrubina,
talifendina, desmetileneberberina e jatrorrizina), todos com conjugados de glucuronídeo.
Após uma dose oral de cloreto de BBR (0,9 g/dia por 3 dias) em adultos saudáveis, três

136
metabólitos de sulfato (jatrorrizina-3-sulfato, talifendina-10-sulfato e desmetilenoberberina-
2-sulfato) foram identificados na urina (Qiu et al. 2008). Esses autores também
identificaram seis metabólitos adicionais (jatrorrizina-3-O-β-D-glucuronídeo, talifendina-10-
O-β-D-glucuronídeo, berberrubina-9-O-β-D-glucuronídeo, 3,10-desmetilpalmatina-10-O-
sulfato, columbamin-2-O-β-D-glucuronídeo e desmetileneberberina-2,3-dpi-O-b-D-
glucuronídeo) após a administração de BBR em ratos (100 mg/kg, po) e humanos (300
mg, po). A administração oral de BBR na dose de 200 mg/kg em ratos resultou na
excreção de BBR e seus metabólitos na bile, urina e fezes com uma taxa de recuperação
total de 22,83% BBR (19,07% do protótipo e 3,76% de seus metabólitos) dentro 48 h
(revisado em Kumar et al. 2015). A quantidade máxima de BBR (84%) e seus metabólitos
foram excretados nas fezes. Aproximadamente 83% do BBR foi excretado na bile, e 78%
da excreção urinária foi talifendina e berberrubina (Ma et al. 2013).

Estudos farmacocinéticos foram conduzidos com BBR em cães após administração oral
ou intravenosa (Shen et al. 1993; Feng et al. 2018). Feng et al. (2018a) estudaram a
farmacocinética de BBR e seus metabólitos ativos em Beagles após doses únicas (50 mg/
kg) ou múltiplas (50 mg/kg/dia) por 7 dias. Esses pesquisadores mediram dhBBR, butirato
e BBR, bem como seus metabólitos de fase I e fase II. Os resultados mostraram que o
dhBBR não foi detectado no plasma do cão, mas foi excretado em pequenas quantidades
nas fezes nos dias 3 e 7. Onze metabólitos foram detectados no plasma e nas fezes após
a administração de BBR, dos quais oito metabólitos eram fase I e três metabólitos eram
fase II. O perfil farmacocinético indicou que a concentração de BBR no plasma era baixa,
com Cmáx de 36,88 23,45 ng/mL. O conteúdo relativo dos conjugados de ácido glucurônico
foi maior do que o de outros metabólitos no plasma. Em fezes de cães, BBR foi detectado
com altas concentrações no dia 3 (2625,04 ± 1726,94 μg/ml e 3,77 g/g) e no dia 7 (2793,43 ± 488,10
μg/ml e 3,77 g/g). Em ratos, hamsters e cães, foi demonstrado que a microbiota intestinal regula a
farmacocinética de BBR e seus metabólitos (Zuo et al. 2006; Gu et al. 2015; Feng et al.
2018a).

A flora bacteriana intestinal desempenha um papel na circulação enterohepática de BBR e

seus metabólitos conjugados, enquanto uma quantidade muito pequena de BBR
inalterado é eliminada na urina. Zuo et al. (2006) enfatizou que a flora intestinal de rato
pode não exercer atividade metabólica significativa contra BBR e seus metabólitos, mas
pode desempenhar um papel significativo na circulação enterohepática de metabólitos. As
bactérias hepáticas e intestinais participam do metabolismo e da disposição do BBR in
vivo.

137
Em um estudo in vitro, Fratter e De Servi (2014) descreveram um novo sistema de
administração oral contendo um sal de quitosana-N-acetilcisteína capaz de interagir com
a glicoproteína P, inibindo parcialmente o processo de extrusão do cloreto BBR. O
succinato de D-a-tocoferol polietilenoglicol 1000 (TPGS) também foi relatado como
inibidor da glicoproteína P (Dintaman e Silverman 1999). Chen et al. (2011) demonstraram
que 2,5% de TPGS melhorou a concentração de pico e a área sob a curva de BBR em 2,9
e 1,9 vezes, respectivamente, devido à sua capacidade de inibir a atividade da
glicoproteína P, reduzindo assim a excreção de BBR absorvida no lúmen intestinal de
ratos.

Em uma série de relatórios, o BBR e seus metabólitos exibiram propriedades anticâncer

(Li et al. 2015b; Bhattacharyya et al. 2017; Wang et al. 2017). Wang et al. (2017)
prepararam lipossomas BBR de longa circulação, modificados com polietilenoglicol e
avaliaram sua eficácia e segurança como potenciais agentes antitumorais. Os resultados
revelaram que os lipossomas BBR podem fornecer uma forma segura de terapia com
drogas intravenosas para fortalecer os efeitos antitumorais de BBR.

3. Potencial Farmacológico e Terapêutico do BBR

A berberina é conhecida por exercer vários efeitos farmacológicos por ter propriedades
antioxidantes, antiinflamatórias e inibidoras da enzima que metaboliza drogas em
microssomas. Seu potencial terapêutico foi reconhecido em várias doenças e síndromes.
A aplicação da berberina em algumas condições de saúde foi descrita resumidamente.

3.1 Doenças neurodegenerativas

O uso de BBR está implicado na doença de Alzheimer (DA), doença de Parkinson (DP),
ansiedade, depressão e epilepsia (Peng et al. 2007; Ye et al. 2009; Kumar et al. 2015
também revisado no capítulo “Disfunção cognitiva”). Embora a biodisponibilidade do BBR
seja pobre, ele atravessa a barreira hematoencefálica (BBB) em concentrações
adequadas e se acumula no hipocampo, onde fornece bloqueio dos canais de potássio,
efeitos antiapoptóticos e neuroprotetores (Wang et al. 2004, 2005, 2009; Ye et al. 2009).
Além disso, o BBR exerce outras ações farmacológicas e biológicas, como antioxidante,
antiinflamatória, analgésica, ansiolítica e imunomoduladora, proporcionando efeitos
preventivos e terapêuticos em condições neurológicas (Kumar et al. 2015; Hussein et al.
2018).

Foi relatado que o BBR melhora o aprendizado e a memória e protege os neurônios da

morte ao inibir a AChE (Bhutada et al. 2011; Abd El-Wahab et al. 2013) e normalizar as
138
atividades e citocinas ChAT, SOD e MAO-B, MDA, e neurotransmissores (norepinefrina,
dopamina e 5-HT) em regiões discretas do cérebro (Kulkarni e Dhir 2008a, b; Zhang et al.
2009; Kumar et al. 2015). Zhu e Qian (2006) demonstraram que o tratamento com BBR
(50 mg/kg, intragástrica uma vez ao dia) por 14 dias melhorou o comprometimento da
memória espacial no modelo de rato de AD. Kong et al. (2001) relataram que o BBR inibiu
competitivamente a MAO A em mitocôndrias de cérebro de rato, com um valor de IC 50 de
126 μg/ml e 3,77 M. Yoo et al. (2006) descobriram que o BBR protege a região CA1 do hipocampo da
lesão isquêmica ao inibir a imunorreatividade do receptor 1 de NMDA no cérebro do gerbil
isquêmico.

BBR também demonstrou prevenir ou atrasar o processo de AD ao inibir a formação de

Aβ1–42, além de reduzir o estresse oxidativo e o colesterol (Abd El-Wahab et al. 2013;
Cai et al. 2016). Asai et al. (2007) relataram que o BBR reduziu os níveis de Aβ ao
modular o processamento da proteína precursora de amiloide (APP) em células H4 de
neuroglioma humano. Além disso, alcalóides de protoberberina quaternários, como a
esteparanina, a ciclanolina e a N-metil-estefolidina, de Stephania24 venosa, foram
encontrados para expressar atividade inibitória da AChE (Ingkaninan et al. 2006). No
modelo de rato diabético induzido por estreptozotocina, o tratamento com BBR (25-100
mg/kg, po, duas vezes ao dia por 30 dias) melhorou o desempenho cognitivo
normalizando o nível de AChE e atenuando o estresse oxidativo (Bhutada et al. 2011).

BBR parece ser uma nova modalidade preventiva e terapêutica para CDS em caninos e
felinos.

3.2 Efeitos cardiovasculares

BBR foi amplamente estudado por seus efeitos no sistema cardiovascular (Lau et al.
2001; Affuso et al. 2010a; Xia e Luo 2015; Bagade et al. 2017). Xu et al. (1989) investigou
os efeitos do BBR (5 mg/kg, IV) em taquiarritmias ventriculares e consequências
eletrofisiológicas no miocárdio normal e isquêmico em cães com peito aberto submetidos
a estimulação elétrica programada (PES). A taquicardia ventricular induzida por PES ou
fibrilação ventricular foi evitada em quatro de seis cães tratados com BBR. BBR alongou o
intervalo QTc e o período refratário efetivo. Estes dados sugerem que o BBR pode ser
eficaz na prevenção do aparecimento de taquiarritmia ventricular reentrante e morte
coronária súbita após lesão isquêmica do miocárdio em cães. Em outro estudo, Huang et
al. (1992) relataram que em cães com insuficiência ventricular esquerda isquêmica, o
tratamento com BBR (1 mg/kg IV em bolus, seguido por uma infusão constante de 0,2 mg/
kg/min por 30 min) melhorou a função ventricular esquerda por seu efeito inotrópico

24 Stephania é um gênero botânico pertencente à família Menispermaceae

139
positivo e leve vasodilatação sistêmica. Os cães tratados com BBR apresentaram
aumento do débito cardíaco e diminuição da pressão diastólica final do ventrículo
esquerdo e da resistência vascular sistêmica. BBR aumentou o fluxo da artéria coronária
em caninos, de peito aberto, anestesiados e corações de cobaia isolados. Uma forte
atividade inotrópica positiva foi observada para BBR em cães (Vik-Mo et al. 1983), ratos,
coelhos, porquinho-da-índia (Sabir et al. 1978) e humanos (Maroko e Ruzyllo 1983;
Martin-Neto et al. 1988).

O BBR pode prolongar a duração do potencial de ação ventricular. Em estudo in vitro,

Riccioppo (1993) demonstrou que o BBR, de forma dependente da concentração,
aumenta a duração do potencial de ação (PA) em células de Purkinje e fibras musculares
ventriculares caninas sem afetar outros parâmetros do PA. O BBR na concentração de 3–
30 μg/ml e 3,77 M produziu um prolongamento significativo da duração PA em fibras ventriculares
isoladas de cobaia sem afetar o potencial de membrana em repouso e a amplitude PA
(Wang e Zheng 1997). Descobertas semelhantes foram observadas em ratos (Chi et al.
1996), gatos (Sanchez-Chapula 1996), coelhos (Riccioppo 1993) e humanos (Martin-Neto
et al. 1988; Chi et al. 1996). BBR exerce ações antiarrítmicas e pró-arrítmicas de classe III
no músculo cardíaco do cão. Além disso, espasmos de anéis arteriais coronários de
suínos isolados foram evitados e tratados de forma eficaz por BBR (Birdsall e Kelly 1997).
BBR pode exercer seu efeito antiarrítmico agindo como um agonista Ca 2+ e/ou um
bloqueador do canal de K +. Os canais cardíacos de K + sensíveis ao ATP (KATP) são
considerados alvos potenciais para a ação do BBR. Lau et al. (2001) reiterou ainda que
alguns dos efeitos cardiovasculares do BBR e seus derivados são atribuídos ao bloqueio
dos canais de K+ (retificador retardado e KATP) e estimulação do trocador Na + - Ca2+. As
evidências também sugerem que o BBR, ao reduzir a atividade da tirosina hidroxilase,
tem um efeito inibitório na biossíntese de catecolaminas (Lee e Kim 1996).

As ações vasodilatadoras e hipotensivas do BBR podem ser explicadas por vários

mecanismos. Ko e Lim (1980) relataram que o BBR causou hipotensão em coelhos ao
bloquear os adrenorreceptores a. No entanto, em cães, esse efeito parece ser devido à
ação vascular direta do BBR, que é independente dos mecanismos adrenérgicos,
colinérgicos ou histaminérgicos (Sabir e Bhide 1971). O BBR reduz a pressão sanguínea
ao inibir competitivamente os receptores a1 das células do músculo liso vascular
(VSMCs), bloqueando assim a liberação da enzima adenilato ciclase, o que resulta em
vasodilatação e aumento da atividade da acetilcolina (Zhang 2004). O efeito hipotensor do
BBR foi atribuído ao seu efeito inibitório sobre a acetilcolinesterase (Chun et al. 1979).
BBR induz relaxamento do músculo liso dependente do endotélio, aumentando a

140
liberação de NO endotelial (Ko et al. 2000). Em um modelo de rato hipertenso, Zhao et al.
(2007) demonstraram que o BBR em uma dose de 5–10 mg/kg melhorou a contratilidade
cardíaca, inibiu a fibrose miocárdica e reduziu a atrofia cardíaca.

BBR é amplamente utilizado para o tratamento de insuficiência cardíaca congestiva (ICC)

(Martin-Neto et al. 1988; Zeng et al. 2003). Martin-Neto et al. (1988) examinaram os
efeitos hemodinâmicos agudos da administração intravenosa de BBR (0,2 mg/kg/min por
30 min) em pacientes com ICC. Uma redução acentuada na resistência vascular sistêmica
e pulmonar, acompanhado de aumento do débito cardíaco, resultou em reduções
significativas nas pressões arteriais sistêmica e pulmonar. Evidências adicionais de
melhora na função cardiovascular foram mostradas por efeitos favoráveis do BBR em
vários índices hemodinâmicos e ecocardiográficos de desempenho ventricular esquerdo.
Em outro estudo, Zeng et al. (2003) trataram pacientes com ICC com BBR (1,2–2/dia),
além da terapia convencional (incluindo inibidores da ECA, digoxina, diuréticos e nitratos),
por 8 semanas. Os pacientes tratados com BBR mostraram um aumento
significativamente maior na fração de ejeção do ventrículo esquerdo, capacidade de
exercício, melhora do índice de dispnéia/fadiga e uma diminuição da frequência e
complexidade dos complexos ventriculares prematuros em comparação com o grupo
placebo.

Hong et al. (2002) investigaram o efeito inibitório do BBR na hipertrofia cardíaca

experimental em ratos, que é considerada um fator de risco para insuficiência cardíaca
crônica e outras doenças cardíacas. A hipertrofia cardíaca foi induzida por constrição dos
dados abdominais suprarrenais (bandagem). Os ratos foram tratados por 8 semanas com
BBR (10 mg/kg de peso corporal, po) e captopril (50 mg/kg de peso corporal, po)
começando 4 semanas após a cirurgia. Os resultados revelaram que (1) a pressão
ventricular esquerda e diastólica elevada foi ligeiramente diminuída e (2) as taxas
máximas de contração e relaxamento (± dp/dtmáx) foram encurtadas, indicando que as
funções do coração, tanto contração quanto relaxamento, foram melhorados. Além disso,
(1) todo o peso do coração e do ventrículo esquerdo e (2) o tamanho das células do
miocárdio do ventrículo esquerdo foram diminuídos em comparação com os ratos com
bandagem. Esses dados sugerem que o BBR pode melhorar a função cardíaca anormal e
pode prevenir o desenvolvimento de hipertrofia ventricular esquerda.

3.3 Efeitos anti-hiperlipidêmicos

Foi demonstrado que o BBR exerce um efeito anti-hiperlipidêmico ao reduzir os níveis de

colesterol total (TC), triglicerídeos (TG) e colesterol de lipoproteína de baixa densidade
(LDL-C) em humanos e animais (Kong et al. 2004; Bagade et al. 2017) O BBR (500 mg)
141
administrado duas vezes ao dia por 3 meses para pacientes hiperlipidêmicos reduziu
significativamente o colesterol total em 29%, os triglicerídeos em 35% e o LDL-C em 25%
(Zhang et al. 2008). Dong et al. (2011) relataram que o BBR atenua a disfunção cardíaca
em ratos hipercolesterolêmicos e hiperglicêmicos. Em ratos aterogênicos, o tratamento
com BBR (50-150 mg/kg) reduziu o colesterol total em 29-33% e a lipoproteína de alta
densidade (não HDL) em 31-41%. Huang et al. (1992) descobriram que o BBR
proporcionou efeitos benéficos na hemodinâmica durante a insuficiência ventricular
esquerda isquêmica aguda em cães. O BBR, quando combinado com arroz com fermento
vermelho e policosanol, induziu um efeito positivo na vasodilatação mediada por fluxo em
um ensaio duplo-cego controlado por placebo em indivíduos com hipercolesterolemia
(Cicero et al. 2007; Affuso et al. 2010b; Marazzi et al. 2011). Marazzi et al. (2011)
observaram redução estatisticamente significativa no colesterol total (20%) e LDL-C (31%)
em humanos ou animais idosos hipercolesterolêmicos e sugeriram que esta combinação
de nutracêuticos é uma estratégia melhor para aqueles que são intolerantes às estatinas.

O BBR pode diminuir os níveis de colesterol por vários mecanismos, e alguns desses
mecanismos podem diferir daqueles que estão envolvidos nas estatinas (Kong et al.
2004). As estatinas regulam positivamente o receptor de lipoproteína de baixa densidade
(LDLR) por meio da inibição da síntese de colesterol. As estatinas inibem a atividade da 3-
hidroxi-3-metilglutaril-coenzima A (HMG-CoA) redutase. BBR induz a regulação negativa
de LDL-C por regulação positiva da expressão de LDLR. A BBR estabiliza o LDLR por
uma via dependente de quinase regulada por sinal extracelular (ERK) e também pelo
aumento da atividade transcricional do promotor LDLR via uma via de quinase N-terminal
c-Jun (JNK) (Abidi et al. 2005; Choi et al. 2006; Lee et al. 2007; Tan et al. 2013; Xia e Luo
2015). Choi et al. (2006) relataram que na leptina celular 3T3-L1, fatores de transcrição
como proteína de ligação ao elemento regulador de esterol-1c (SREBP-1c) e proteína de
ligação ao potenciador CCAAT-a (C/EBP-a), receptor ativado por proliferador g (PRAR-g),
ácido graxo sintase, acetil-coenzima A carboxilase, acil-CoA sintase e lipoproteína lipase
são reduzidos por BBR. BBR também é conhecido por ativar 50-adenosina monofosfato
(AMP) quinase (AMPK) enquanto bloqueia a via MAPK/ERK, resultando na inibição da
síntese de lipídios (Brusq et al. 2006; Xia e Luo 2015; Bagade et al. 2017). BBR também é
relatado para inibir a diferenciação de pré adipócitos, reduzir o acúmulo de gotículas de
lipídios e diminuir os níveis de triglicerídeos (Huang et al. 2006; Zhou et al. 2008).

Wang et al. (2014) relataram que o BBR produziu uma diminuição nos níveis de colesterol
ao inibir a absorção do colesterol (40–51%). O BBR interferiu na micelização do colesterol
e diminuiu a captação de colesterol pelas células Caco-2 e a permeabilidade através da

142
monocamada Caco-2. BBR também inibiu a expressão de genes e proteínas da
acetilcoenzima A colesterol acetil transferase-2 no intestino delgado de ratos e células
Caco-2. Em hamsters hiperlipidêmicos, Wang et al. (2010) descobriram que o uso
combinado de BBR e esteróis vegetais têm um maior efeito sinérgico na inibição da
absorção de colesterol do que BBR ou esteróis isoladamente. Além disso, Li et al. (2015a,
b) relataram que hamsters hiperlipidêmicos tratados com BBR (50 ou 100 mg/kg)
mostraram diminuição gradual nos níveis de colesterol no fígado e um aumento nos níveis
de colesterol biliar, sugerindo que o BBR promove a excreção de colesterol do fígado para
a bile. Em hamsters, Gu et al. (2015) demonstraram que o BBR administrado por via oral
modulou a microbiota intestinal e o BBR mostrou uma inibição significativa da conversão
de 7α-desidroxilação de ácido cólico em ácido desoxicólico, indicando uma diminuição da
eliminação de ácidos biliares no intestino. Em conclusão, o BBR pode ser usado como
nutracêutico em hiperlipidemia, hipercolesterolemia e doenças metabólicas.

3.4 Efeitos antihiperglicêmicos e antidiabéticos

O diabetes mellitus tipo 2 é a forma mais comum de diabetes. As alterações da

homeostase endotelial, principalmente devido às citocinas pró-inflamatórias e à redução
da secreção de adiponectina, parecem ser dois eventos-chave na resistência à insulina e
hiperglicemia. Essas condições estão associadas à expressão gênica alterada e à
sinalização celular no endotélio vascular, afetando assim a liberação de fatores derivados
do endotélio, ativação da NADPH oxidase, desacoplamento da NOS endotelial (eNOS) e
expressão da endotelina-1 (Bagade et al. 2017). Esta cascata de eventos frequentemente
resulta em um desequilíbrio entre a produção de vasodilatadores e mediadores
vasoconstritores e a indução de moléculas de adesão (Rask-Madsen e King 2007).

O BBR foi considerado eficaz no diabetes tipo 2. Chen e Xie (1986) relataram que Coptis
chinensis e BBR exercem um efeito hipoglicêmico. Em uma meta-análise, Dong et al.
(2012) confirmaram resultados semelhantes. BBR produz efeito antihiperglicêmico em
diabetes por vários mecanismos:

1. Diminui a absorção de glicose pela inibição da a-glicosidase e reduz o transporte de

glicose através do epitélio intestinal (Pan et al. 2003)

2. Ativa a proteína quinase ativada por adenosina 50-monofosfato (AMPK) (Lee et al.
2006; Yin et al. 2008a, b; Zhang e Chen 2012)

3. Induz o transporte de glicose aumentando a expressão do gene GLUT1 (Kim et al.

2007)

143
4. Aumenta a captação de glicose do sangue para os órgãos-alvo, como o músculo
esquelético e o tecido adiposo (Zhang e Chen 2012)

5. Aumenta a expressão do receptor de insulina e melhora a secreção e sensibilidade à

insulina e, assim, reduz a resistência à insulina (Kong et al. 2009; Zhang et al. 2010a, b;
Pérez-Rubio et al. 2013; Derosa et al. 2014; Xia e Luo 2015)

6. Inibe diretamente a gliconeogênese no fígado (Xia et al. 2011; Zhang e Chen 2012)

Além disso, Yin et al. (2008b) relataram que o BBR aumentou o metabolismo da glicose
pela estimulação da glicólise, o que está relacionado à inibição da oxidação da glicose na
mitocôndria e, consequentemente, à indução da ativação da AMPK.

Em um estudo in vitro, Wang et al. (2008) relataram que o BBR aumentou a secreção de
insulina estimulada pela glicose em ilhotas pancreáticas de rato, e tanto as expressões de
mRNA quanto de proteínas do fator nuclear hepático 4-alfa (HNF4a) foram reguladas
positivamente por BBR de uma maneira dependente da dose. Verificou-se que a atividade
da glucoquinase aumentou em conformidade. Recentemente, Bagade et al. (2017) ecoou
ainda mais sobre o mecanismo subjacente no efeito do BBR sobre a sensibilidade à
insulina, aumentando a expressão do receptor de insulina (InsR) de uma maneira
dependente da dose e do tempo. Isso levou à promoção da captação de glicose na
presença de insulina. BBR induz a expressão do gene InsR via regulação da transcrição
através da proteína quinase C (PKC) (Zhang et al. 2010a). Além disso, o BBR inibe o
acúmulo intracelular de ROS, apoptose celular e inflamação que caracterizam a lesão
vascular, e estes são principalmente desencadeados por hiperglicemia (Affuso et al.
2010b; Bagade et al. 2017).

Em um estudo clínico, o BBR reduziu significativamente a glicose no sangue em jejum, a

hemoglobina A1c, os triglicerídeos e a expressão do receptor de insulina em pacientes
com diabetes tipo 2 (Zhang et al. 2010a, b). Em um ensaio clínico multicêntrico, Li (2007)
também relatou que pacientes diabéticos tipo 2 com dislipidemia recebendo BBR (1 g por
dia) por 3 meses apresentaram níveis significativamente reduzidos de glicose no sangue,
hemoglobina A1c, triglicerídeo, colesterol total e LDL-C em comparação ao placebo. Em
outro estudo clínico, o BBR administrado três vezes ao dia na dose de 500 mg em
pacientes com diabetes tipo 2 causou redução significativa na hemoglobina A1c (2%),
glicose plasmática em jejum (44%) e glicose pós-prandial (45%), insulina plasmática em
jejum (28%) e avaliação do modelo de homeostase do índice de resistência à insulina
(44,7%) (Yin et al. 2008a). Em um estudo in vitro, Hui et al. (1991) mostraram que o BBR
atua tanto nas células endoteliais quanto nas células do músculo liso vascular subjacente
para induzir a vasodilatação via eNOS levando à produção de NO.
144
BBR tem efeitos positivos no tratamento da nefropatia diabética, neuropatia diabética e
cardiomiopatia diabética (Pang et al. 2015; Imenshahidi e Hosseinzadeh 2015). A
nefropatia diabética é uma doença renal progressiva, que é patologicamente
caracterizada por espessamento das membranas basais glomerular e tubular, acúmulo da
matriz celular e hipertrofia mesangial aumentada. A doença é induzida por fatores como
dislipidemia, hiperglicemia, anormalidades hemodinâmicas e estresse oxidativo. Ni et al.
(2015) sugeriram que, ao diminuir a glicose no sangue, regular os lipídios do sangue e
reduzir o estresse oxidativo e a inflamação, o BBR tem potencial para tratar a nefropatia
diabética. Em revisões sistemáticas e meta-análises, Zhang e Chen (2012) e Lan et al.
(2015) descobriram que o BBR é altamente eficaz no diabetes mellitus tipo 2 e
complicações diabéticas, sem efeitos colaterais graves.

3.5 Efeitos hepatoprotetores

O BBR demonstrou ser eficaz contra doença hepática e toxicidade. Feng et al. (2010)
determinaram os efeitos hepatoprotetores do BBR nos níveis de superóxido dismutase
(SOD) sérico e tecidual e histopatologia em lesão hepática induzida por tetracloreto de
carbono em ratos. Os mecanismos hepatoprotetores de BBR podem estar relacionados à
elevação da atividade antioxidante e atenuação do estresse oxidativo/nitrosativo e
eliminação de radicais livres, bem como à inibição das atividades de TNF-a, iNOS e COX-
2 (Domitrovic et al. 2011). Li et al. (2014) mostraram que o BBR melhorou a fibrose
hepática em camundongos com lesão hepática induzida por tetracloreto de carbono e
inibiu a proliferação de células estreladas hepáticas de uma maneira dependente da dose
e do tempo. O BBR diminuiu a liberação de enzimas de ALT, AST e ALP no soro, elevou
SOD e reduziu o conteúdo de MDA do fígado. O tratamento com BBR ativou a atividade
de AMPK e diminuiu a expressão da proteína Nox4 e TGF-β1 e a Akt fosforilada. O
tratamento com BBR também reduziu a expressão da actina do músculo liso (a-SMA), o
marcador da célula estrelada hepática. Em outro estudo, Janbaz e Gilani (2000) relataram
que o pré-tratamento de ratos com BBR (4 mg/kg, po, duas vezes ao dia) por 2 dias
preveniu o aumento induzido por acetaminofen ou tetracloreto de carbono nos níveis
séricos de ALT, AST e ALP, sugerindo hepatoproteção. Além disso, o pós-tratamento com
três doses orais sucessivas de BBR (4 mg/kg a cada 6 h) reduziu o dano hepático
induzido pelo acetominofeno, enquanto a hepatotoxicidade induzida por tetracloreto de
carbono não foi modificada, sugerindo um efeito curativo seletivo contra o acetominofeno.

O metotrexato, um medicamento anticâncer e imunossupressor comumente usado, é

conhecido por causar hepatotoxicidade. Em um estudo recente, Mehrzadi et al. (2018)
ratos Wistar machos pré-tratados com BBR (100 mg/kg peso corporal) por 10 dias
145
consecutivos e ratos tratados com metotrexato (20 mg/kg, ip) no nono dia. Os ratos foram
sacrificados no dia 11, e o soro e o fígado foram analisados para vários parâmetros
bioquímicos. Os resultados revelaram que o BBR pode ser útil para a prevenção da
hepatotoxicidade induzida pelo metotrexato por meio de efeitos melhoradores nos índices
bioquímicos, inflamatórios e oxidativos.

A doxorrubicina, uma droga anticâncer antraciclina, é amplamente utilizada na

quimioterapia devido à sua eficácia no combate a um amplo espectro de doenças
malignas. Além da cardiotoxicidade, a doxorrubicina causa hepatotoxicidade em
aproximadamente 40% dos pacientes. Os principais efeitos tóxicos sobre os hepatócitos
incluem (1) interrupção do ciclo celular dos hepatócitos (Kassner et al. 2008), (2) estresse
oxidativo e (3) interrupção da cadeia de transporte de elétrons (Zhao et al. 2012). Zhao et
al. (2012) camundongos pré-tratados com BBR (60 mg/kg, ip) 1 h antes da doxorrubicina
(2,5 mg/kg, ip) em dias alternativos por 7 dias. Os resultados revelaram que o pré-
tratamento com BBR preveniu significativamente o declínio induzido pela doxorrubicina no
peso corporal, aumento nas atividades de ALT e AST e alterações histopatológicas
atenuadas, como congestão vascular, infiltração de células inflamatórias, degeneração
hepatocelular, necrose e fibrose no fígado.

Metais como mercúrio e chumbo induzem hepatotoxicidade por múltiplos mecanismos,

incluindo estresse oxidativo. Othman et al. (2014) relataram que camundongos tratados
com cloreto de mercúrio (0,4 mg/kg de peso corporal) por 7 dias causaram estresse
oxidativo, aumentando a peroxidação lipídica e a produção de NO com uma diminuição
concomitante da glutationa e várias enzimas antioxidantes (SOD, catalase, glutationa
peroxidase e glutationa redutase). As enzimas hepáticas e a bilirrubina também estavam
aumentadas no soro. O tratamento com BBR (100 mg/kg de peso corporal) inibiu a
peroxidação lipídica e a produção de NO, restaurou as enzimas antioxidantes em
comparação com o controle e aumentou o conteúdo de glutationa. O exame
histopatológico do fígado revelou os efeitos protetores do BBR contra a hepatotoxicidade
induzida por mercúrio.

Laamech et al. (2017) investigaram o efeito protetor do extrato aquoso de B. vulgaris

contra hepatotoxicidade induzida por chumbo em camundongos. Os camundongos
receberam acetato de chumbo (5 mg/kg de peso corporal) em água por 40 dias. Em outro
grupo, os camundongos também receberam extrato de B. vulgaris (25, 50, 100 e 150 mg/
kg de peso corporal) diariamente por 30 dias a partir do dia 11 após o início da exposição
ao acetato de chumbo. O tratamento com B. vulgaris preveniu significativamente o
acúmulo de chumbo; aumento de ALT, AST, bilirrubina total e colesterol total; inibiu a
146
peroxidação lipídica e a formação de carbonil de proteína; e enzimas antioxidantes
normalizadas (SOD, catalase e glutationa peroxidase) e arquitetura do tecido hepático.

Em pacientes com doença hepática gordurosa não alcoólica (NAFLD), Yan et al. (2015)
descobriram que o BBR (0,5 g três vezes ao dia) resultou em uma redução significativa da
NAFLD e distúrbios metabólicos relacionados. Recentemente, em um estudo
experimental, Feng et al. (2018b) relataram que ratos tratados com BBR (50 mg/kg de
peso corporal) mais curcumina (50 mg/kg de peso corporal) exibiram menor peso corporal
e peso de gordura em comparação com aqueles tratados com lovastatina (100 mg/kg de
peso corporal). O grupo tratado com nutracêuticos também apresentou níveis mais baixos
de LDL-C, ALT, AST, ALP, MDA e LSP em comparação com o grupo da lovastatina. A
expressão mais baixa de SREBP-1c, pERK, TNF-a e pJNK também foi observada no
grupo BBR + curcumina. Os autores concluíram que a combinação de BBR e curcumina
exibiu melhores efeitos de melhora no tratamento da NAFLD do que a lovastatina, e esse
efeito aumentado está associado ao estresse oxidativo, inflamação hepática e
metabolismo lipídico.

3.6 Efeitos Antimicrobianos

BBR demonstrou atividade antimicrobiana significativa contra bactérias, fungos,

protozoários, helmintos, clamídia e vírus (Birdsall e Kelly 1997). Uma vez que BBR exerce
atividade antimicrobiana, é considerado um antibiótico. Seus usos clínicos mais comuns
têm sido para diarreia bacteriana, parasitas intestinais e infecções oculares por tracoma.
O BBR demonstrou inibir a resposta secretória intestinal devido às toxinas da cólera.
Usando um modelo de alça intestinal de coelho ligado, Sack e Froehlich (1982)
demonstraram uma supressão significativa da resposta secretora intestinal após a
exposição à enterotoxina bruta de Vibrio cholerae. Foi sugerido que o BBR pode exercer
efeitos antidiarreicos inibindo a formação de certos organismos; inibir a formação de
toxinas, antagonismo direto das toxinas; inibir a secreção de íons intestinais; e inibindo a
contração do músculo liso (revisado em Birdsall e Kelly 1997). Os efeitos antidiarreicos do
BBR também podem ser mediados por sua capacidade de atrasar o tempo de trânsito
intestinal devido ao bloqueio dos receptores muscarínicos de acetilcolina (ACh), inibindo
assim a peristalse intestinal espontânea (Eaker e Sninsky 1989).

Foi relatado que o sulfato de BBR é eficaz contra Giardia lamblia, Trichomonas vaginalis e
Entamoeba histolytica (Kaneda et al. 1991). O extrato bruto foi considerado mais eficaz do
que o sal de sulfato de BBR. Em ambos os modelos de rato e hamster dourado, o sulfato
de BBR forneceu proteção contra abcessos hepáticos induzidos por E. histolytica
(revisado em Birdsall e Kelly 1997). Ahuja et al. (1993) descobriram que o sulfato de BBR
147
é muito eficaz contra a leishmaniose cutânea em cães domésticos quando o sulfato de
BBR (1%) foi inoculado por via intralesional. Ghosh et al. (1985) relataram que hamsters
dourados infectados com L. donovani apresentaram redução do parasita de até 90% no
fígado e baço quando tratados com BBR (50 ou 100 mg/kg i.p./dia por 5 dias).

3.7 Osteoartrite

A osteoartrite (OA) é uma doença debilitante crônica que afeta toda a articulação e sua
fisiopatologia é muito complexa (revisado em Gupta 2016; Gupta et al. 2019; Appleton
2018). Um dos primeiros gatilhos no desenvolvimento e progressão da OA é a inflamação
sinovial. Os mediadores bioquímicos encontrados em fibroblastos sinoviais de OA
(OASFs) que afetam as funções celulares dos tecidos incluem citocinas, quimiocinas,
fatores de crescimento e metaloproteinases de matriz (MMPs). Esses mediadores, como
as interleucinas (IL) produzidas por OASFs, promovem inflamação, neovascularização e
degradação da cartilagem, contribuindo assim para a destruição das articulações (Liu et
al. 2015; Appleton 2018; Peffers et al. 2018; Watt 2018).

O fator de crescimento do tecido conjuntivo (CTGF, também conhecido como CCN2) é um

mediador inflamatório que é abundantemente expresso em OA. IL-1β desempenha um
papel fundamental na patogênese da OA. Liu et al. (2015) relataram que a expressão de
IL-1β induzida por CCN2 é mediada pela ativação da geração de ROS dependente de
integrina avβ3/avβ5 e subsequente ativação da quinase 1 reguladora de sinal de
apoptose (ASK1), p38/JNK e vias de sinalização NFkB Foi relatado que a expressão de
IL-1β em OASFs é atenuada por N-acetilcisteína, inibidores de ASK1, p38 ou JNK ou
tratamento com BBR. BBR também foi relatado para reverter os danos da cartilagem em
um modelo experimental de OA induzida por colagenase.

Em estudos in vitro e in vivo em modelo de OA de rato, Hu et al. (2011) demonstraram

que o BBR inibiu a expressão das metaloproteinases da matriz (MMP-1, MMP-3 e MMP-
13) e aumentou o nível do inibidor tecidual da metaloproteinase-1 no nível do mRNA de
maneira dose dependente. Em condrócitos articulares de rato induzidos por IL-1β, o BBR
diminuiu a liberação de glicosaminoglicanos induzidos por IL-1β e a produção de NO,
sugerindo um efeito condroprotetor. Em altas doses, o BBR exibiu um efeito anticatabólico
em um modelo de OA de rato induzido por IL-1-β. Esses achados sugerem que o BBR
pode desempenhar um papel antiinflamatório, condroprotetor e anticatabólico no
desenvolvimento da OA, e o BBR pode ser útil no tratamento da OA em animais.

148
4. Segurança e Toxicidade do BBR
Em geral, o BBR mostra toxicidade e efeitos colaterais muito baixos (Pang et al. 2015;
Imenshahidi e Hosseinzadeh 2015). Os dados de segurança do BBR relatam seu LD 50
oral > 29.586 e > 15.000 mg/kg em camundongos e ratos, respectivamente. O LD 50 de
BBR em camundongos de injeções intravenosas (IV) e intraperitoneais (IP) é 9,03 e 57,61
mg/kg, respectivamente (Kheir et al. 2010). Após doses orais intragástricas de BBR (10,4,
20,8, 41,6 e 83,2 g/kg), o LD50 não pôde ser determinado, embora uma taxa de
mortalidade de 30% tenha sido encontrada entre os camundongos nos dois grupos de
dosagem mais alta. Em diabéticos tipo 2, os humanos receberam até 1500 mg de BBR
(em três doses divididas de 500 mg cada) por dia, sem quaisquer efeitos adversos graves.
Em altas doses, o BBR foi associado a hipotensão arterial, dispneia, sintomas
semelhantes aos da gripe, desconforto gastrointestinal leve a moderado, constipação e
dano cardíaco (Imenshahidi e Hosseinzadeh 2008, 2015).

Não foi relatado que BBR produz efeitos genotóxicos, citotóxicos ou mutagênicos com
suas doses clínicas (Birdsall e Kelly 1997). Foi relatado que a berberina atravessa a
placenta e causa danos ao feto em desenvolvimento. Também foi demonstrado que
exerce um efeito estimulador uterino; portanto, seu uso na gravidez é advertido. BBR
pode ser transferido através do leite materno; portanto, é necessário cuidado para o uso
de BBR durante a amamentação.

5. Observações finais e direções futuras

O BBR pode ser obtido a partir de várias plantas do gênero Berberis, Hydrastis, Coptis,
Argemone e Thalictrum. BBR tem um forte potencial para melhorar doenças crônicas,
como doenças neurodegenerativas, distúrbios cardiovasculares/metabólicas, diabetes
mellitus tipo 2, diarreia bacteriana, tracoma, gastroenterite, etc., uma vez que exerce
múltiplas ações farmacológicas. Embora haja pouca preocupação sobre os efeitos
colaterais do uso de BBR, os dados de segurança de estudos pré-clínicos e clínicos
validados são garantidos. Com base nos dados de toxicidade aguda, o BBR pode ser
classificado como uma substância não tóxica. Grande parte da literatura é derivada de
estudos in vitro e ensaios clínicos em humanos, enquanto faltam dados de segurança
baseados em estudos em animais. O BBR não deve ser usado por fêmeas grávidas ou
lactantes, pois pode causar danos ao feto ou ao recém-nascido.

149
Agradecimentos Os autores gostariam de agradecer a Sra. Robin B. Doss por sua
assistência técnica na preparação deste capítulo.

Referências
Abd El-Wahab AE, Ghareeb DA, Sarhan EEM et al (2013) In vitro biological assessment of Berberis vulgaris and its
active constituent, berberine: antioxidant, anti-acetylcholinesterase, anti-diabetic and anticancer effects. BMC
Compliment Altern Med 13:218–244
Abidi P, Zhou Y, Jiang JD et al (2005) Extracellular signal regulated kinase-dependent stabilization of hepatic low
density lipoprotein receptor mRNA by herbal medicine berberine. Arterioscler Thromb Vasc Biol 25:2170–2176
Affuso F, Mercurio V, Fazio V et al (2010a) Cardiovascular and metabolic effects of berberine. World J Cardiol 2:71–77
Affuso F, Ruvolo A, Micillo F et al (2010b) Effects of a nutraceutical combination (berberine, red yeast rice and
policosanols) on lipid levels and endothelial function in randomized, double-blind, placebo-controlled study. Nutr Metab
Cardiovasc Dis 20:656–661
Ahuja A, Purohit SK, Yadav JS et al (1993) Cutaneous leishmaniasis in domestic dogs. Indian J Public Health 37:29–
31
Appleton FE (2018) Osteoarthritis biomarkers: year in review. Osteoarthr Cart 26:312–318
Asai M, Iwata N, Yoshikawa A et al (2007) Berberine alters the processing of Alzheimer’s amyloid precursor protein to
decrease Aβ secretion. Biochem Biophys Res Commun 352(2):498–502
Bagade A, Tumbigeremutt V, Pallavi G (2017) Cardiovascular effects of berberine: a review of the literature. J Retroact
Med 6:37–45
Bhattacharyya R, Saha B, Tyagi M et al (2017) Differential modes of photosensitization in cancer cells by berberine
and coralyne. Free Radic Res 51(7–8):723–738
Bhutada P, Mundhada Y, Bansod K et al (2011) Protection of cholinergic and antioxidant system contributes to the
effect of berberine ameliorating memory dysfunction in rat model of streptozotocininduced diabetes. Behav Brain Res
220(1):30–41
Birdsall TC, Kelly GS (1997) Berberine: therapeutic potential of an alkaloid found in several medicinal plants. Altern
Med Rev 2 (2):94–103
Brusq JM, Ancellin N, Grondin P et al (2006) Inhibition of lipid synthesis through activation of AMP kinase: an additional
mechanism for the hypolipidemic effects of berberine. J Lipid Res 47:1281–1288
Cai Z, Wang C, Yang W (2016) Role of berberine in Alzheimer’s. Neuropsychiatr Dis Treat 12:2509–2520
Chen QM, Xie MZ (1986) Studies on the hypoglycemic effect of Coptis chinensis and berberine. Acta Pharm Sin
21:401–406
Chen W, Miao Y-Q, Fan D-J et al (2011) Bioavailability study of berberine and the enhancing effects of TPGS on
intestinal absorption in rats. AAPS PharmSciTech 12(2):705–711
Chi JF, Chu SH, Lee CS et al (1996) Mechanical and electrophysiological effects of 8-oxoberberine (JKL1073A) on
atrial tissue. Br J Pharmacol 118:503–512
Choi BH, Ahn IS, Kim YH et al (2006) Berberine reduces the expression of adipogenic enzymes and inflammatory
molecules of 3T3L1 adipocyte. Exp Mol Med 38:599–605
Chun YT, Yip TT, Lav KL et al (1979) A biochemical study of the hypotensive effect of berberine in rats. Gen Pharmacol
10:177–182
Cicero AF, Rovati LC, Sentikar I (2007) Epidemic effects of berberine administered alone or in combination with other
natural cholesterollowering agents: a single-blind clinical investigation. Arzneim Forsch 57:26–30
Derosa G, Limas CP, Macías PC et al (2014) Dietary and nutraceutical pproach to type 2 diabetes. Arch Med Sci
10:336–344
Dintaman JM, Silverman JA (1999) Inhibition of P-glycoprotein by Dalpha-tocopheryl polyethylene glycol 1000
succinate (TPGS). Pharm Res 16(10):1550–1556
Domitrovic R, Jakovac H, Blagojevic G (2011) Hepatoprotective activity of berberine is mediated by inhibition of TNF-
alpha, COX-2, and iNOS expression in CCL4-intoxicated mice. Toxicology 280:33–43
Dong SF, Hong Y, Liu M et al (2011) Berberine attenuates cardiac dysfunction in hyperglycemic and
hypercholesterolemic rats. Eur J Pharmacol 660:368–374
Dong H, Wang N, Zgao L, Lu F (2012) Berberine in the treatment of type 2 diabetes mellitus: a systemic review and
meta-analysis. Evid Based Complement Alternat Med 2012:591654
Eaker EY, Sninsky CA (1989) Effect of berberine on myoelectric activity and transit of the small intestine in rats.
Gastroenterology 96:1506–1513
Feng Y, Siu KY, Ye X et al (2010) Hepatoprotective effects of berberine on carbon tetrachloride-induced acute
hepatotoxicity in rats. Chin Med 5:33
Feng R, Shou JW, Zhao ZX et al (2015) Transforming berberine into its intestine-absorbable form by the gut
microbiota. Sci Rep 5:12155
Feng R, Zhao Z-X, Ma S-R et al (2018a) Gut microbiota-regulated pharmacokinetics of berberine and metabolites in
beagle dogs after oral administration. Front Pharmacol 9:214

150
 Feng W-W, Kuang S-Y, Tu C et al (2018b) Natural products berberine and curcumin exhibited better ameliorative
effects on rats with non-alcohol fatty liver disease than lovastatin. Biomed Pharcother 99:325–333
Fratter A, De Servi B (2014) New oral delivery system to improve absorption of berberine: likely interaction of
cationized chitosan with PG-P pump. Int J Drug Deliv Technol 591:33–42
Ghosh AK, Bhattacharyya FK, Ghosh DK (1985) Leishmania donovani: amastigote inhibition and mode of action of
berberine. Exp Parasitol 60:404–413
Gu S, Cao B, Sun R et al (2015) A metabolomic and pharmacokinetic study on the mechanism underlying the lipid-
lowering effect of orally administered berberine. Mol BioSyst 11(2):463–474
Gupta RC (2016) Nutraceuticals in arthritis. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity. Academic,
Amsterdam, pp 161–176
Gupta RC, Srivastava A, Lall R, Sinha A (2019) Osteoarthritis biomarkers. In: Gupta RC (ed) Biomarkers in toxicology,
2nd edn. Academic, Amsterdam, pp 929–943
Hong Y, Hui S-C, Chan T-Y et al (2002) Effect of berberine on regression of pressure-overload induced cardiac
hypertrophy in rats. Am J Chin Med 30(4):589–599
Hu P-F, Chen W-P, Tang J-L et al (2011) Protective effects of berberine in an experimental rat osteoarthritis model.
Phytother Res 25:878–885
Huang WM, Yan H, Jin JM et al (1992) Beneficial effects of berberine on hemodynamics during acute ischemic left
ventricular failure in dogs. Chin Med J 105:1014–1019
Huang C, Zhang Y, Gong Z et al (2006) Berberine inhibits 3T3-L1 adipocyte differentiation through the PPAR gamma
pathway. Biochem Biophys Res Commun 348:571–578
Hui KK, Yu JL, Chan WF et al (1991) Interaction of berberine with human platelet alpha 2 adrenoceptors. Life Sci
49:315–324
Hussein HM, Abd-Elmegied A, Ghareeb DA et al (2018) Neuroprotective effect of berberine against environmental
heavy metals-induced neurotoxicity and Alzheimer’s-like disease in rats. Food Chem Toxicol 111:432–444
Imenshahidi M, Hosseinzadeh H (2008) Pharmacological and therapeutic effects of Berberis vulgaris and its active
constituent, berberine. Phytother Res 22:999–1012
Imenshahidi M, Hosseinzadeh H (2015) Berberis vulgaris and berberine: an update review. Phytother Res 30:1745–
1764
Ingkaninan K, Phengpa P, Yuenyongsawad S et al (2006) Acetylcholinesterase inhibitors from Stephania venosa tuber.
J Pharm Pharmacol 58(5):695–700
Janbaz KH, Gilani AH (2000) Studies on preventive and curative effects of berberine on chemical-induced
hepatotoxicity in rodents. Fitoterapia 71:25–33
Kaneda Y, Torii M, Tanaka T (1991) In vitro effects of berberine sulfate on the growth and structure of Entamoeba
histolytica, Giardia lamblia and Trichomonas vaginalis. Ann Trop Med 15:417–423
Kassner N, Huse K, Martin HJ et al (2008) Carbonyl reductase 1 is a predominant doxorubicin reductase in the human
liver. Drug Metab Dispos 36:2113–2120
Kheir MM, Wang Y, Hua L et al (2010) Acute toxicity of berberine and its correlation with the blood concentration in
mice. Food Chem Toxicol 48:1105–1010
Kim SH, Shin EJ, Kim ED et al (2007) Berberine activates GLUT1-mediated glucose uptake in 3T3-L1 adipocytes. Biol
Pharm Bull 30:2120–2125
Ko ST, Lim DY (1980) Influence of berberine on the blood pressure of rabbits. Arch Pharm Res 3:23–30
Ko WH, Yao XQ, Lau CW et al (2000) Vasorelaxant and antiproliferative effects of berberine. Eur J Pharmacol
399:187–196
Kong LD, Cheng CH, Tan RX (2001) Monoamine oxidase inhibitors from rhizoma of Coptis chinensis. Planta Med
67:74–76
Kong W, Wei J, Abidi P et al (2004) Berberine is a novel cholesterollowering drug working through a unique
mechanism distinct from statins. Nat Med 10:1344–1351
Kong WJ, Zhang H, Song DQ et al (2009) Berberine reduces insulin resistance through protein kinase C-dependent
up-regulation of insulin receptor expression. Metabolism 58:109–119
Kulkarni SK, Dhir A (2008a) On the mechanism of anti-depressant like action of berberine chloride. Eur J Pharmacol
589(1–3):163–172
Kulkarni SK, Dhir A (2008b) Berberine: a plant alkaloid with therapeutic potential for central nervous system disorders.
Phytother Res 24 (3):317–324
Kumar A, Chopra EK, Mukherjee M et al (2015) Current knowledge and pharmacological profile of berberine: an
update. Eur J Pharmacol 761:288–297
Laamech J, El-Hilaly J, Fetoui H et al (2017) Berberis vulgaris L. effects on oxidative stress and liver injury in lead-
intoxicated mice. J Complement Integr Med. https://doi.org/10.1515/jcim-2015-0079
Lan J, Zhao Y, Dong F et al (2015) Meta-analysis of the effect and safety of berberine in the treatment of type 2
diabetes mellitus, hyperlipidemia and hypertension. J Ethnopharmacol 161:69–81
Lau C-W, Yao X-Q, Chen Z-Y et al (2001) Cardiovascular actions of berberine. Cardiovasc Drug Rev 19(3):234–244
Lee MK, Kim HS (1996) Inhibitory effects of protoberberine alkaloids from the roots of Coptis japonica on
catecholamine biosynthesis in PC12 cells. Planta Med 62:31–34

151
 Lee YS, Kim WS, Kim KH et al (2006) Berberine, a natural plant product, activates AMP-activated protein kinase with
beneficial metabolic effects in diabetic and insulin-resistant states. Diabetes 55:2256–2264
Lee S,LimHJ, Park JHet al (2007)Berberine induced LDLRup-regulation involves JNK pathway. Biochem Biophys Res
Commun 362:853–857
Li X-Y (2007) Efficacy and safety of berberine in the treatment of diabetes with dyslipidemia. US ClinicalTrialsgov
Li J, Pan Y, Kan Met al (2014) Hepatoprotective effects of berberine on liver fibrosis via activation of AMP-activated
protein kinase. Life Sci 98(1):24–30
Li W, Hua B, Saud SM et al (2015a) Berberine regulates AMP activated protein kinase signaling pathways and inhibits
colon tumorigenesis in mice. Mol Carcinog 54:1096–1109
Li XY, Zhao ZX, Huang M et al (2015b) Effect of berberine on promoting the excretion of cholesterol in high-fat diet-
induced hyperlipidemic hamsters. J Transl Med 13:278
Liu S-C, Lee H-P, Hung C-Y et al (2015) Berberine attenuates CCN2-induced IL-1β expression and prevents cartilage
degradation in a rat model of osteoarthritis. Toxicol Appl Pharmacol 289:20–29
Ma JY, Feng R, Tan XS et al (2013) Excretion of berberine and its metabolites in oral administration in rats. J Pharm
Sci 102 (11):4181–4192
Marazzi G, Cacciotti L, Pelliccia F et al (2011) Long-term effects of nutraceuticals (berberine, red yeast rice,
policosanol) in elderly hypercholesterolemic patients. Adv Ther 28(12):1105–1113
Maroko PR, Ruzyllo W (1983) Hemodynamic effects of berberine, a new inotropic drug, in patients with congestive
heart failure. Circulation 68:374
Martin-Neto JA, Maciel BC, Secches AL et al (1988) Cardiovascular effects of berberine in patients with severe
congestive heart failure. Clin Cardiol 11:253–260
Mehrzadi S, Fatemi I, Esmaeilizadeh M et al (2018) Hepatoprotective effect of berberine against methotrexate induced
liver toxicity in rats. Biomed Pharmacother 97:233–239
Ni WJ, Ding HH, Tang LQ (2015) Berberine as a promising antidiabetic nephropathy drug: an analysis of its effects and
mechanisms. Eur J Pharmacol 760:103–112
Othman MS, Safwath G, Aboulkhair M et al (2014) The potential effect of berberine in mercury-induced hepatorenal
toxicity in albino rats. Food Chem Toxicol 69:175–181
PanGY,Wang GJ, LiuXDet al (2002) The involvement of P-glycoprotein in berberine absorption. Pharmacol Toxicol
91:193–197
Pan GY, Huang ZJ, Wang GJ (2003) The antihyperglycemic activity of berberine arises from a decrease of glucose
absorption. Planta Med 69:632–636
Pang B, Zhao LH, Zhou Q et al (2015) Application of berberine on treating type 2 diabetes mellitus. Int J Endocrinol
2015:905749
Peffers M, Balaskas P, Smagul A (2018) Osteoarthritis year in review: genetics and epigenetics. Osteoarthr Cart
26:304–311
Peng WH, Lo KL, Le YH et al (2007) Berberine produces antidepressant-like effects in the forced swim test and in the
tail suspension test in mice. Life Sci 81(11):933–938
Pérez-Rubio KG, González-Ortiz M, Martínez-Abundis E et al (2013) Effect of berberine administration on metabolic
syndrome, insulin sensitivity, and insulin secretion. Metab Syndr Relat Disord 11 (5):366–369
Qiu F, Zhu Z, Kang N et al (2008) Isolation and identification of urinary metabolites of berberine in rats and humans.
Drug Metab Dispos 36 (11):2159–2165
Rask-Madsen C, King GL (2007) Mechanisms of disease: endothelial dysfunction in insulin resistance and diabetes.
Nat Clin Pract Endocrinol Metab 3:46–56
Riccioppo NF (1993) Electropharmacological effects of berberine on canine cardiac Purkinje fibers and ventricular
muscle and atrial muscle of the rabbit. Br J Pharmacol 108:534–537
Sabir M, Bhide NK (1971) Study of some pharmacological action of berberine. Indian J Physiol Pharmacol 15:111–132
Sabir M, Akhter MH, Bhide NK (1978) Further studies of some pharmacology of berberine. Indian J Physiol Pharmacol
15:111–132
Sack RB, Froehlich JL (1982) Berberine inhibits intestinal secretory response of Vibrio cholerae and Escherichia coli
enterotoxins. Infect Immun 35:471–475
Sanchez-Chapula J (1996) Increase in action potential duration and inhibition of the delayed rectifier outward current Ik
by berberine in cat ventricular myocytes. Br J Pharmacol 117:1427–1434
Shen MP, Sun Q, Wang H (1993) Studies on the intravenous pharmacokinetics and oral absorption of berberine HCl in
beagle dogs. Chin Pharmacol Bull 9:64–67
Tan XS, Ma JY, Feng R et al (2013) Tissue distribution of berberine and its metabolites after oral administration in rats.
PLoS One 8(10): e77969
Tsai PL, Tsai TH (2003) Hepatic excretion of berberine. Drug Metab Dispos 32:405–412
Vik-Mo H, Faria DB, Cheung WM et al (1983) Beneficial effects of berberine on left ventricular function in dogs with
congestive heart failure. Clin Res 31:224A
Wang YX, Zheng YM (1997) Ionic mechanism responsible for prolongation of cardiac action-potential duration by
berberine. J Cardiovasc Pharmacol 30:214–222
Wang F, Zhao G, Cheng L et al (2004) Effects of berberine on potassium currents in acutely isolated CA1 pyramidal
neurons of rat hippocampus. Brain Res 999:91–97
152
 Wang X, Wang R, Xing D et al (2005) Kinetic difference of berberine between hippocampus and plasma in rat after
intravenous administration of Coptidis rhizoma extract. Life Sci 77(24):3058–3067
Wang Z-Q, Lu F-R, Leng S-H et al (2008) Facilitating effects of berberine on rat pancreatic islets through modulating
hepatic nuclear factor 4 alpha expression and glucokinase activity. World J Gastroenterol 14(39):6004–6011
Wang X, Su B, Zheng L et al (2009) The role of abnormal mitochondrial dynamics in the pathogenesis of Alzheimer’s
disease. J Neurochem 109:153–159
Wang Y, Jia X, Ghanam K et al (2010) Berberine and plant stanols synergistically inhibit cholesterol absorption in
hamsters. Atherosclerosis 209:111–117
Wang Y, Yi X, Ghanam K et al (2014) Berberine decreases cholesterol levels in rats through multiple mechanisms,
including inhibition of cholesterol absorption. Metabolism 63:1167–1177
Wang X, Wang Q, Liu Z et al (2017) Preparation, pharmacokinetics and tumor-suppressive activity of berberine
liposomes. J Pharm Pharmacol 69:625–632
Watt EF (2018) Osteoarthritis biomarkers: year in review. Osteoarthr Cart 26:312–318
Xia L-M, Luo MH (2015) Study progress of berberine for treating cardiovascular disease. Chronic Dis Transl Med
1:231–235
Xia X, Yan J, Shen Y et al (2011) Berberine improves glucose metabolism in diabetic rats by inhibition of hepatic
gluconeogenesis. PloS One 6:e16556
Xu Z, Cao HY, Li Q (1989) Protective effects of berberine on spontaneous ventricular fibrillation in dogs after
myocardial infarction. Acta Pharmacol Sin 10:320–324
Yan HM, Xia MF, Wang Y et al (2015) Efficacy of berberine in patients with non-alcoholic fatty liver disease. PLoS One
10:e0134172
Ye M, Fu S, Pi R et al (2009) Neuropharmacological and pharmacokinetic properties of berberine: a review of recent
research. J Pharm Pharmacol 61:831–837
Yin J, Xing H, Ye J (2008a) Efficacy of berberine in patients with type 2 diabetes mellitus. Metabolism 57:712–717
Yin J, Gao Z, Liu D et al (2008b) Berberine improves glucose metabolism through induction of glycolysis. Am J Physiol
Endocrinol Metab 294:E148–E156
Yoo KY, Hwang IK, Lim BO et al (2006) Berberry extract reduces neuronal damage and N-methyl-D-aspartate receptor
1 immunoreactivity in the gerbil hippocampus after transient forebrain ischemia. Biol Pharm Bull 29:623–628
Zeng X-H, Zeng X-J, Li Y-Y (2003) Efficacy and safety of berberine for heart failure secondary to ischemic or idiopathic
dilated cardiomyopathy. Am J Cardiol 92:173–176
Zhang LS (2004) Clinical usage of berberine. Chin Rem Clin 41:78
Zhang M, Chen L (2012) Berberine in type 2 diabetes therapy: a new perspective for an old antidiarrheal drug? Acta
Pharm Sin B 2 (4):379–386
Zhang Y, Li X, Zou D et al (2008) Treatment of type 2 diabetes and dyslipidemia with the natural plant alkaloid
berberine. J Clin Endocrinol Metab 93:2559–2565
Zhang J, Yang JQ, He BC et al (2009) Berberine and total base from rhizoma Coptis chinensis attenuate brain injury in
an aluminuminduced rat model of neurodegenerative disease. Saudi Med J 30 (6):760–766
Zhang H, Kong WJ, Shan YQ et al (2010a) Protein kinase D activation stimulates the transcription of the insulin
receptor gene. Mol Cell Endocrinol 330:25–32
Zhang H, Wei J, Xue R et al (2010b) Berberine lowers blood glucose in type 2 diabetes mellitus patients through
increasing insulin receptor expression. Metabolism 59:285–292
Zhao HP, Hong Y, Xie JD et al (2007) Effect of berberine on left ventricular remodeling in renovascular hypertensive
rats. Yao Xue Xue Bao 42:336–341
Zhao X, Zhang J, Tong N et al (2012) Protective effects of berberine on doxorubicin-induced hepatotoxicity in mice.
Biol Pharm Bull 35 (5):796–800
Zhou JY, Zhou SW, Zhang KB et al (2008) Chronic effects of berberine on blood, liver glucolipid metabolism and liver
PPARs expression in diabetic hyperlipidemic rats. Biol Pharm Bull 31:1169–1176
Zhu F, Qian C (2006) Berberine chloride can ameliorate the spatial memory impairment and increase the expression of
interleukin-1 beta and inducible nitric oxide synthase in the rat model of Alzheimer’s disease. BMC Neurosci 7:78
Zuo F, Nakamura N, Akao T et al (2006) Pharmacokinetics of berberine and its main metabolites in conventional and
pseudo germ-free rats determined by liquid chromatography/ion trap mass spectrometry. Drug Metab Dispos 34:2064–
2072

153
 Nutracêuticos à base de espinheiro marítimo e
damasco
Vijay K. Bharti, Sahil Kalia, Arup Giri, and Bhuvnesh Kumar

Resumo
Um ambiente de alta altitude é caracterizado por hipóxia hipobárica, variação extrema de
temperatura, baixa umidade, radiação ultravioleta intensa, baixa pluviosidade e alta
velocidade do vento. Esses tipos de condições climáticas extremas podem resultar em
estresse oxidativo em animais. Esse estresse leva a um aumento acentuado na disfunção
celular e um declínio na produção de moléculas de defesa antioxidantes que afetam a
saúde e a produtividade do gado, especialmente em grandes altitudes. Portanto, o médico
veterinário é obrigado a induzir uma regulação positiva dos antioxidantes e do sistema
imunológico para melhorar o estresse oxidativo. Atualmente, os nutracêuticos são usados
na terapia nutricional para controlar várias doenças e melhorar a produtividade de animais
domésticos e de criação. Nutracêuticos referem-se a alimentos funcionais naturais ou
fitoquímicos bioativos que têm propriedades de promoção da saúde e prevenção de
doenças. Esses nutracêuticos em geral contêm alcalóides, flavonóides, algumas
vitaminas, minerais, etc. Vários estudos revelaram que bolo de sementes de damasco,
folhas de espinheiro marítimo, bagaço de frutas e polpa de frutas são ricos em fito
moléculas que modulam o sistema imunológico e regulam positivamente a defesa
antioxidante sistema em frangos de corte, ovelhas e cabras. Este capítulo discute o valor
dos nutracêuticos e a utilidade do damasco (Prunus armeniaca) e do espinheiro marítimo
(Hippophae rhamnoides) no manejo da saúde dos frangos de corte e na melhoria do
ganho de peso em regiões de grande altitude.

Palavras-chave Antioxidante · Damasco · Alta altitude · Nutracêuticos · Espinheiro

marítimo
V. K. Bharti (*) · S. Kalia – DRDO-Defence Institute of High Altitude Research, Leh-Ladakh, India
A. Giri – Arni University, Kathgarh, Himachal Pradesh, India
B. Kumar – DRDO-Defence Institute of Physiology and Allied Sciences, Timarpur, Delhi, India

1. Ambiente de Alta Altitude

Um ambiente de alta altitude é caracterizado por hipóxia hipobárica, variação extrema de
temperatura, baixa umidade, radiação ultravioleta intensa, baixa pluviosidade e alta
velocidade do vento. Fisiologicamente, este ambiente não é adequado para a boa saúde
154
e desempenho de animais e seres humanos. O desempenho do crescimento dos animais
de criação criados em locais frios, áridos e de grande altitude é muito pobre devido às
condições ambientais estressantes. Os adversários climáticos contribuem para o estresse
oxidativo em grandes altitudes, o que acaba prejudicando a taxa de crescimento do gado
ao induzir suas atividades catabólicas, produzindo um baixo retorno financeiro (Biswas et
al. 2011; Kalia et al. 2017). A principal consequência do estresse oxidativo é o aumento
acentuado da disfunção celular e o declínio do sistema de defesa antioxidante devido ao
aumento da geração de espécies reativas de oxigênio (Miller et al. 2013). O estresse
oxidativo resulta de uma geração excessiva de espécies reativas de oxigênio (ROS) como
O2●-, H2O2 e ROO- que levam a danos celulares devido à interação de ROS com
constituintes celulares. Para manter um sistema biológico saudável, é importante
equilibrar a presença dessas espécies com a defesa antioxidante (Halliwell 1996; Valko et
al. 2007). Antioxidantes como os polifenóis estão na linha de frente da investigação não
só por causa de sua origem natural, mas também por sua capacidade de agir como
eliminadores de radicais livres, auxiliando o sistema antioxidante endógeno (Katalinic et
al. 2006; Ferreira et al. 2009). Uma ampla gama de suplementos dietéticos derivados de
plantas, fitoquímicos e provitaminas que auxiliam na manutenção da boa saúde e no
combate a doenças estão agora sendo descritos como alimentos funcionais e
nutracêuticos (Bernal et al. 2011). Nutracêutico é um termo cunhado em 1989 por
Stephen DeFelice. É definido como um alimento ou partes de alimentos que fornecem
benefícios médicos ou de saúde, incluindo a prevenção e o tratamento de doenças. Os
nutracêuticos variam de nutrientes isolados, produtos à base de ervas, suplementos
dietéticos e dietas com alimentos geneticamente modificados e produtos processados,
como cereais, sopas e bebidas. Um nutracêutico é qualquer suplemento de extrato
alimentar não tóxico que tenha benefícios para a saúde cientificamente comprovados para
o tratamento e prevenção de doenças. Nutracêutico também se refere a alimentos
naturais funcionais/médicos ou fitoquímicos bioativos que têm propriedades medicinais,
de prevenção de doenças ou de promoção da saúde. Esses nutracêuticos, em geral,
incluem vitaminas, lipídios, proteínas, carboidratos, minerais e outros nutrientes
necessários, dependendo de suas ênfases (Zeisel 1999; Whitman 2001). Esses
nutracêuticos são usados na terapia nutricional com base em suas estruturas químicas e
funções biológicas (Brower 1998). Fitomoléculas como polifenóis, flavonóides, vitaminas,
carotenóides, etc. são amplamente utilizados como agentes profiláticos e terapêuticos no
combate a problemas de saúde associados à altitude (Kala 2006). Esses aditivos
fitogênicos para rações seriam menos tóxicos e ideais para substituir os promotores de
crescimento de antibióticos na dieta de frangos de corte (Kalia et al. 2017, 2018).
155
Este capítulo descreve o suplemento alimentar de espinheiro marinho e plantas de
damasco em aves para um melhor gerenciamento da saúde e níveis mais altos de
produção em grandes altitudes.

2. Restrições e Perspectivas da Produção de Aves na Região de Alta

Altitude
A temperatura crítica é aquela na qual os animais são sustentados adequadamente e, se
a temperatura variar ligeiramente, o animal poderá enfrentar dificuldades. Em altitudes
mais elevadas, a temperatura flutua significativamente ao longo do ano. À medida que a
altitude aumenta, a pressão parcial de oxigênio é muito baixa, e isso causa efeitos
significativos na saúde animal e também na agricultura da região. As aves também
enfrentam outros problemas relacionados à baixa umidade, estresse pelo frio no inverno e
alta radiação UV. Todos esses fatores ambientais são responsáveis pela pouca
sustentabilidade da avicultura em regiões de grande altitude. A indisponibilidade de
alimentos, a falta de manejo adequado do alojamento e a indisponibilidade de
germoplasma adequado também são fatores críticos na regulamentação da avicultura
(Biswas et al. 2010; Kalia et al. 2017, 2018).

3. Doenças Importantes e Condições Clínicas de Aves em Alta Altitude

O ambiente de alta altitude não é adequado para a produção de gado, incluindo a criação
de aves, devido ao clima rigoroso e à incidência de várias condições fisiológicas, como
ascite, infecção respiratória, impactação, coccidiose, canibalismo, ingestão insuficiente de
ração, crescimento atrofiado, extremamente baixa eclodibilidade, hemorragia cecal, etc.
(Biswas et al. 2011).

4. Fontes não convencionais para alimentação de aves no deserto frio

de alta altitude
As regiões de alta altitude não têm rações econômicas para aves disponíveis localmente
devido ao clima extremo e produção limitada de safras. Portanto, os alimentos para aves
são trazidos de outras áreas, os quais são formulados com base nas necessidades de
nutrientes dos frangos criados em áreas específicas, como as planícies. Aves criadas em
grandes altitudes requerem uma ração especial formulada especificamente para essas

156
condições. Infelizmente, a disponibilidade desta ração especial é muito limitada. Portanto,
os agricultores estão suplementando a ração de aves com antioxidantes e outros recursos
alimentares disponíveis localmente, como folhas de alfafa, extrato de folha de salgueiro
hidroalcoólico, aveia triturada, bagaço e folhas de espinheiro marítimo e torta de semente
de damasco e extrato de semente (Biswas et al. 2011). Essas partes das plantas podem
ser misturadas com a base da dieta de aves existente de acordo com a palatabilidade e
aceitação. Esta suplementação de ração com nutracêuticos melhora a defesa antioxidante
das aves e os requisitos do sistema imunológico para a redução do estresse de altitude
prevalente na região. A formulação de uma ração para aves com base em nutrientes é
muito necessária para regiões de grande altitude, considerando suas necessidades de
nutrientes. Isso melhorará as condições de saúde e a produtividade das aves nessas
regiões.

5. Espinheiro marítimo como fonte de fito moléculas e seu valor

terapêutico
Hippophae rhamnoides (atualmente, Elaeagnus rhamnoides), também chamado de
espinheiro marítimo (SBT), pertence à família Elaeagnaceae (Fig. 1). É uma importante
planta medicinal à base de ervas do deserto frio do Transimalaia (cordilheira) e é
comumente encontrada a uma altitude de 3.000 a 4.500 m acima do nível do mar (Saggu
et al. 2007). É uma planta resistente que pode tolerar temperaturas extremas de 43 a 40
C, e contém barreiras de cores diferentes. Cada parte da planta do SBT é uma boa fonte
de um grande número de fitomoléculas, como polifenóis, flavonóis, flavonóides,
proantocianidinas, vitaminas, carotenóides, ácidos orgânicos, ácidos graxos
poliinsaturados e aminoácidos (Beveridge et al. 1999; Saggu et al. 2007; Ma et al. 2017;
Puganen et al. 2018). Na medicina ayurvédica tradicional, o extrato das frutas do SBT tem
sido usado para o tratamento de vários tipos de distúrbios de saúde (Saggu et al. 2007).
Muitas fitomoléculas bioativas, como Hippophae cerebroside25, vitamina C, vitamina E,
ácido gálico, kaempferol 3-O-sophoroside-7-O-rhamnoside, quercetina, etc. foram
identificadas nas bagas de SBT que são responsáveis por suas propriedades
farmacológicas (Chen et al. 2003; Zheng et al. 2009; Upadhyay et al. 2010). As folhas são
uma fonte rica em antioxidantes, incluindo β-carotenóides, vitamina E, catequinas e ácido
fólico e uma quantidade insignificante de cálcio, magnésio e potássio (Upadhyay et al.
2010).

25 É o nome comum para um grupo de glicoesfingolipídeos chamados monoglicosilceramidas, que são

componentes importantes no músculo animal e nas membranas das células nervosas
157
 Fig. 1 Planta de espinheiro marítimo (Hippophae
rhamnoides) com frutos maduros

Várias atividades farmacológicas do SBT, incluindo antioxidante, imunomodulador, anti-

estresse, anticâncer, hepatoprotetor e radioprotetor, foram relatados em humanos e
animais (Geetha et al. 2002; Goel et al. 2002; Yasukawa et al. 2009; Tulsawani 2010;
Maheshwari et al. 2011, Olas et al. 2018). As sementes, folhas e frutos do SBT são
relatados como um material de alimentação ideal para gado e aves na região do
Transimalaia de alta altitude (Biswas et al. 2011). A suplementação de flavonóides SBT na
dieta de frangos de corte mostrou uma influência positiva em seu desempenho de
crescimento, composição de ácidos graxos e metabolismo lipídico no fígado (Ma et al.
2015). Vários estudos relatam a utilidade de uma formulação de ração à base de planta
de espinheiro na melhoria das condições de saúde por meio da modulação de vários
índices físicos e bioquímicos. Esses estudos estão resumidos na Tabela 1.

A potente atividade hepatoprotetora dos óleos de baga SBT contra aflatoxina B1 (AFB1)
foi relatada em frangos de corte (Solcan et al. 2013). Além disso, a suplementação de
barreiras de SBT em frangos de corte em diferentes concentrações de tratamento
melhorou sua resposta imune humoral e mediada por células contra os efeitos adversos
da toxina T-2 (Lavinia et al. 2009; Ramasamy et al. 2010). Da mesma forma, o aumento
da atividade proliferativa de linfócitos do sangue periférico de frango com a
suplementação de extrato de fruta SBT foi relatado em estudos recentes (Kalia et al.
2018). A suplementação de SBT como aditivo alimentar na dieta de frangos de corte
elevou o nível de atividade de eliminação de radicais livres e diminuiu o nível de
peroxidação lipídica no soro sanguíneo em altitudes mais elevadas (Kalia et al. 2018).
Essas atividades farmacológicas do SBT em aves podem ser devidas ao efeito sinérgico
de certas fitomoléculas bioativas presentes nos frutos do SBT (Tabela 1).

158
 Tabela 1 Efeitos do espinheiro marítimo (SBT) nas aves
Animal Dose e via de
Nº Duração Efeito Referências
Experimental administração
3% de óleo de
↑a-tocoferol, ingestão de ração, taxa
linhaça e 3% de Orczewska-
Frango de de conversão alimentar e peso corporal
1 42 dias bagaço de SBT Dudek et al.
corte ↓ Oxidação lipídica, mortalidade,
seco na mistura de (2018)
triglicerídeos, colesterol, glicose, T3, T4
ração
SBT farinha de ↑Peso corporal, taxa de conversão
Pintos de folhas em pó a alimentar e zinco Sharma et al.
2 56 dias
perus26 0,5% na mistura de ↓Ácido úrico plasmático, fosfatase (2018)
ração alcalina
↑Proteína total e albumina
Codorna 2% SBT folha em ↓Mortalidade, alanina Patial et al.
3 21 dias
japonesa pó em água potável aminotransferase, ácido úrico e (2015)
colesterol
0,25%, 0,5%, 1%
Frangos Arbor ↑Monofosfato de inosina muscular 2 e Zhao et al.
4 28 dias SBT em pó na
Acres (AA) adenilossuccinato liase (2012)
mistura de ração
5% de resíduos de ↑Peso corporal e taxa de conversão Ben-
Frangos de
5 49 dias frutas SBT na alimentar Mahmoud et
corte
mistura de ração ↓Mortalidade al. (2014)
Sementes de SBT,
Frangos de folhas e resíduos ↑Peso corporal e taxa de postura de Biswas et al.
6 56 dias
corte de frutas na ovos (2010)
mistura de ração
A dieta do Grupo II
continha 1000 ppm
de extrato de folha
↑Peso corporal, sem alterações na taxa
de SBT, o grupo III
de conversão alimentar, características
Frango de continha 400 ppm Pathak et al.
7 42 dias de carcaça como peso refrigerado,
corte de polpa de SBT e (2011)
peso do peito, peso da coxa e peso da
o grupo IV continha
coxa foram melhorados
0,5 mL / kg de óleo
de semente de
SBT na ração
↑Gordura, ingestão média diária de
ração, ganho médio diário, peso
corporal final, carne da coxa e músculo
0,05%, 0,10% e
Frangos de do peito e efeito quadrático no
0,15% de frutas Ma et al.
8 corte machos 42 dias percentual de gordura abdominal
SBT na mistura de (2015)
Arbor Acres ↓porcentagem de gordura abdominal,
ração
intramuscular, níveis de triglicerídeos,
colesterol e colesterol de lipoproteína
de baixa densidade
↓Produtividade do ovo e peso do ovo,
5% e 13% de SBT cor da gema aumentou Pebriansyah
Galinhas
9 21 dias na mistura de significativamente, o consumo de ração e Silberov
poedeiras
ração foi o mais alto, sem alteração na (2014)
conversão alimentar

26 Perus muito jovens, também conhecidos como “perus perus” ou pintos de peru
159
 Tabela 1 Efeitos do espinheiro marítimo (SBT) nas aves
Número total de ovos postos e cor da
gema foram detectados, um efeito não
significativo do SBT foi encontrado no
desempenho da galinha ou na
Galinhas Resíduos de frutas qualidade do ovo, incluindo peso do
Shaker et al.
10 poedeiras Isa 322 dias SBT na mistura de ovo, peso da gema, força da casca do
(2018)
Brown ração ovo e índice de forma do ovo,
espessura da casca do ovo, unidades
Haugh, cor da casca do ovo e mancha
de sangue, peso do albúmen,
proporção
Bagas de SBT em
Aumento significativo no título de
Aves pó foram Ramasamy et
11 28 dias inibição da hemaglutinação e Ig no
domésticas adicionadas a 400 al. (2010)
soro total
e 800 ppm.
↑Peso corporal, taxa de conversão
Frangos de H. rhamnoides alimentar, TAC, proteína total,
Kalia et al.
12 corte mestiços 42 dias extrato de fruta em albumina, globulina, HDL e creatinina
(2018)
RIR água potável ↓Mortalidade, DPPH, LPO, colesterol,
triglicerídeo, LDL, glicose, AST e ALT
Linfócitos de
Extrato 100 ng/ml – Redução do estresse oxidativo Kalia et al.
13 sangue 24 h
400 μg/ml e 3,77 g/ml induzido por H2O2 em linfócitos (2018)
periférico
↑regulação positiva/aumento/melhoria, ↓ regulação negativa/diminuição/deterioração
LPO: peroxidase lipídica, TAC: capacidade antioxidante total, DPPH: 2,2-difenil-1-picrilhidrazil

6. Damasco como fonte de várias fitomoléculas e seu valor terapêutico

O damasco, amplamente conhecido como Prunus armeniaca, é uma fruta comestível
pertencente à família das Rosáceas (Fig. 2), e é cultivada em climas com invernos muito
frios. O damasco pode tolerar temperaturas tão baixas quanto -30 °C (Ahmadi et al.
2008). As principais áreas de cultivo de damasco estão na Índia e incluem as áreas
montanhosas de Himachal Pradesh, as regiões do nordeste de Jammu e Caxemira e a
principal área de cultivo de Leh-Ladakh (Wani et al. 2015).

Fig. 2 Planta de damasco (Prunus armeniaca) na frutificação

Um grande número de diversos fitomoléculas bioativas, como polifenóis, flavonóides,

carotenóides, vitaminas, ácidos graxos, etc., foram encontrados no damasco, dando a
esta planta propriedades farmacológicas antioxidantes (Dragovic-Uzelac et al. 2007; Yigit

160
et al. 2009; Kan et al. 2014). As sementes de damasco são uma fonte abundante de
proteínas dietéticas, associado a uma quantidade significativa de óleo e fibras (Nout et al.
1995). Vários efeitos farmacológicos do damasco foram relatados, incluindo antioxidante
(Gomaa 2013), antimicrobiano (Yigit et al. 2009), antitumoral (Gomaa 2013),
imunomodulador (Tian et al. 2016), antiinflamatório (Minaiyan et al. 2014 ), hepatoprotetor
(Yilmaz et al. 2015), radioprotetor (Kurus et al. 2013) e cardioprotetor (Parlakpinar et al.
2009).

A alimentação de torta de sementes de damasco para cordeiros nas condições climáticas

de altitude de Leh-Ladakh forneceu nutrição adequada para apoiar o crescimento corporal
normal e não teve efeitos adversos no desempenho (Jadhav et al. 2011). Também foi
relatado que a suplementação de farinha de caroço de damasco na dieta de frangos de
corte produziu um efeito positivo no desempenho e na microbiota intestinal (Samli et al.
2014). Além disso, foi relatada melhora na composição de ácidos graxos na carne de
frango após a administração de damasco, sem qualquer efeito deletério no desempenho
(Tekeli 2012).

A suplementação de extrato de damasco na dieta de frangos de corte estimula o aumento

da digestão e do metabolismo de nutrientes, resultando em melhor desempenho de
crescimento dos frangos em altitudes mais elevadas (Kalia et al. 2017). O aumento da
atividade proliferativa de linfócitos do sangue periférico de frango após a suplementação
com extrato de damasco foi relatado (Kalia et al. 2017). A suplementação de damasco
como aditivo para rações para frangos de corte também melhorou os perfis imunológicos,
antioxidantes e bioquímicos do sangue em condições de estresse em alta altitude (Kalia
et al. 2017). Essas atividades farmacológicas em aves podem ser devidas ao efeito
sinérgico de certas fitomoléculas bioativas presentes no damasco (Tabela 2).

7. Mecanismo do valor terapêutico dos nutracêuticos com base em

espinheiro marítimo e damasco
Alguns dos estudos sobre suplementos alimentares de espinheiro marítimo e produtos de
plantas de damasco indicam que o desempenho do crescimento, a taxa de sobrevivência,
os índices físicos e bioquímicos e a economia são afetados positivamente. Porém, o
mecanismo de ação desses suplementos alimentares ainda não foi elucidado. Kalia et al.
(2017) descobriram que alimentar um extrato aquoso de P. armeniaca produziu
capacidade antioxidante total significativamente maior, atividade de eliminação livre,
interleucina-2, proteína total, albumina e níveis de globulina, bem como menor

161
malonildialdeído, interleucina-6, glicose, colesterol níveis de triglicerídeos, ALT e AST em
comparação com o grupo de controle. Outro estudo descobriu que o extrato de P.
armeniaca reduziu o nível de citocina pró-inflamatória IL-6 em grupos de tratamento. Esta
redução pode ser devida à atividade antiinflamatória dos compostos polifenólicos de P.
armeniaca regulando negativamente a via de sinalização de NFkB via diminuição da
fosforilação de NFkB. Além disso, os extratos de P. armeniaca estimulam a produção de
IL-2 por meio da ativação das células-T helper 1 (Th1) e também desempenham um papel
central na imunidade mediada por células. Isso sugere que o extrato de P. armeniaca
exerce efeitos imunomoduladores em frangos de corte por meio da mediação da
imunidade celular e humoral. Essas mesmas descobertas também foram relatadas no
estudo de suplementos de ração para espinheiro marítimo em frangos de corte. Portanto,
pode-se concluir que ambos os suplementos alimentares têm um papel imunomodulador
acompanhado de propriedades antioxidantes que, em última análise, levam a um melhor
desempenho de crescimento e sobrevivência (Tekeli 2012; Kalia et al. 2017, 2018). O
mecanismo de ação mais provável da alimentação do suplemento de espinheiro marítimo
e damasco está representado na Fig. 3.

Fig. 3 Provável mecanismo de ação terapêutica de nutracêuticos à base de espinheiro marítimo e damasco

8. Formulação de ração à base de plantas de espinheiro marítimo e

damasco disponível
Diferentes tipos de formulações de rações e produtos à base de plantas foram
desenvolvidos por várias instituições e fabricantes privados para uso humano e animal.
Os cientistas também desenvolveram um bolo alimentar (DB-LactoMax, um espinheiro

162
marinho e preparação de damasco) para gado leiteiro (90–100 g ou 1 bolo diário/vaca).
Além disso, melhora a produção de leite e a condição corporal e reprodutiva. Uma
preparação líquida (Immunobooster, 5–10 ml/100 aves) foi desenvolvida para frangos de
corte e camadas que é composta de espinheiro marítimo, semente de damasco e extratos
de folhas de salgueiro em uma proporção de peso preferível. Aumenta as citocinas, o
estado imunológico e a regulação positiva do estado antioxidante em aves de corte sob
condições de estresse em alta altitude e, posteriormente, melhora a saúde geral, o
desempenho do crescimento (150 g em 42 dias) e o FCR. Produtos de panificação como
biscoitos, pãezinhos, pães, bolos, geleias, bebidas saudáveis, vinho, corantes alimentícios
e iogurte foram feitos para uso humano também usando polpa e folhas de espinheiro
marítimo. Algumas dessas formulações são fornecidas na Tabela 3.

Tabela 3 Formulação de ração com base em espinheiro marítimo e damasco

Nome comercial Composição Fabricante
Monosaturated sea Ácido linoleico 4,7%, ácido oleico 66,8%, ácidos
Natures Natural India
buckthorn berry oil graxos insaturados 25,2%, fenólico 19%
Ácido linoléico, ácido oleico, ácidos graxos
Sea buckthorn oil Arian Enterprises
insaturados, etc.
Sea buckthorn Omega7 oil ômegas, flavonóides, ômega-7 MNC Globle Multitrade
Apricot oil Ácidos graxos mistos Shri Hari Aromatics
Ácido oleico 64,2%, palmítico 5,0%, linoleico 28,3%,
Apricot oil Bo International
linolênico 0,2%, esteárico 1,0%
Suprimentos
Arginina, histidina, lisina, fenilalanina, valina, leucina,
Apricot oil cosméticos naturais
cistina e triptofano e metionina
(unidade de ervas-mãe)

9. Observações Finais e Orientações Futuras

Este capítulo descreve o valor dos nutracêuticos e o potencial terapêutico do espinheiro
marítimo e do damasco nas aves para a melhoria de sua saúde e produtividade em
regiões de altitude elevada. Vários resultados de pesquisas sugerem a regulação positiva
da defesa antioxidante celular e extracelular e a eliminação de radicais livres.
Descobertas recentes indicam seu efeito imunomodulador, que também pode ser benéfico
no controle de doenças imunossupressoras. Esses produtos à base de plantas podem ser
úteis em áreas planas sob diferentes condições agrícolas. No entanto, mais estudos são
necessários para estabelecer seu regime de dosagem. Além disso, pesquisas contínuas
são necessárias para melhor compreender os mecanismos e vias específicas envolvidas
nas doenças induzidas por ROS e para determinar a combinação mais racional e eficaz
de antioxidantes no uso clínico veterinário para o manejo de várias doenças.

163
Referências

Ahmadi H, Fathollahzadeh H, Mobli H (2008) Some physical and mechanical properties of apricot fruits, pits and
kernels (C.V. Tbarzeh). Am – Euras J Agric Environ Sci 3:703–707
Ben-Mahmoud Z, Mohamed MS, Bláha J et al (2014) The effect of sea buckthorn (Hippophae rhamnoides l.) Residues
in compound feeds on the performance and skin color of broilers. Indian J Anim Res 48:548–555
Bernal J, Mendiola JA, Ibáñez E et al (2011) Advanced analysis of nutraceuticals. J Pharm Biomed Anal 55:758–774
Beveridge T, Li TSC, Oomah BD (1999) Seabuckthorn products: manufacture and composition. J Agric Food Chem
47:3480–3488
Biswas A, Bharti VK, Acharya S et al (2010) Seabuckthorn: new feed opportunity for poultry at cold arid Ladakh region
of India. World’s Poult Sci J 66:707–714
Biswas A, Bharti VK, Deshmukh PB et al (2011) Commercial poultry farming in cold arid region of Leh-Ladakh. In:
Srivastava RB, Selvamurthy W (eds) Innovatives in agro animal technologies. Satish Serial Publishing House, New
Delhi, pp 216–233
Brower V (1998) Nutraceuticals: poised for a healthy slice of the healthcare market? Nat Biotechnol 16:728–731
Chen Y, Zhong X, Liu T et al (2003) The study on the effects of the oil from Hippophae rhamnoides in hematopoiesis.
Zhong Yao Cai 26:572–575
Dragovic-Uzelac V, Levaj B, Mrkic V et al (2007) The content of polyphenol and carotenoids in three apricot cultivars
depending on stage of maturity and geographical region. Food Chem 102:966–975
Ferreira ICFR, Barros L, Abreu RMV (2009) Antioxidants in wild mushrooms. Curr Med Chem 16:1543–1560
Geetha S, Ram MS, Singh V et al (2002) Anti-oxidant and immunomodulatory properties of seabuckthorn (Hippophae
rhamnoides) – an in vitro study. J Ethnopharmacol 79:373–378
Goel HC, Prasad J, Singh S et al (2002) Radioprotection by a herbal preparation of Hippophae rhamnoides RH-3,
against whole body lethal irradiation in mice. Phytomedicine 9:15–25
Gomaa EZ (2013) In vitro antioxidant, antimicrobial and antitumor activities of bitter almond and sweet apricot (Prunus
armeniaca L.) kernels. Food Sci Biotechnol 22:455–463
Halliwell B (1996) Antioxidants in human health and disease. Annu Rev Nutr 16:33–50
Jadhav SE, Charan G, Raj T, Bharti VK et al (2011) Performance and blood biochemical profile of lambs fed local
unconventional feed ingredients at cold and high altitude conditions of Ladakh. Indian J Anim Sci 81:730–734
Kala CP (2006) Medicinal plants of the high altitude cold desert in India: diversity, distribution and traditional uses. Int J
Biodiv Sci 2:43–56
Kalia S, Bharti VK, Gogoi D et al (2017) Studies on the growth performance of different broiler strains at high altitude
and evaluation of probiotic effect on their survivability. Sci Rep 46074. https://doi.org/10.1038/srep46074
Kalia S, Bharti VK, Giri A et al (2018) Hippophae rhamnoides as novel phytogenic feed additive for broiler chickens at
high altitude cold desert. Sci Rep 8:5954
Kan T, Gundogdu M, Ercisli S et al (2014) Phenolic compounds and vitamins in wild and cultivated apricot fruit grown
in irrigated and dry farming conditions. Biol Res 47:46. https://doi.org/10.1186/0717-6287-47-46
Katalinic V, Milos M, Kulisic T et al (2006) Screening of 70 medicinal plant extracts for antioxidant capacity and total
phenols. Food Chem 94:550–557
Kurus M, Ertan C, Celi MR et al (2013) Protective effect of apricot feeding in the pulmonary tissues of rats exposed to
low dose X-Ray radiation. Indian J Appl Res 3:1–5
Lavinia S, Gabi D, Daniela Met al (2009) The effect of medicinal plants and plant extracted oils on broiler duodenum
morphology and immunological profile. Romania Biotechnol Lett 14:4606–4614
Ma JS, Chang WH, Liu GH et al (2015) Effects of flavones of seabuckthorn fruits on growth performance, carcass
quality, fat deposition and lipometabolism for broilers. Poult Sci 94:2641–2649
Ma X, Yang W, Laaksonen O et al (2017) Role of flavonols and proanthocyanidins in the sensory quality of sea
buckthorn (Hippophae rhamnoides L.) berries. J Agric Food Chem 65:9871–9879
Maheshwari DT, Yogendra K, Verma MS et al (2011) Antioxidant and hepatoprotective activities of phenolic rich fraction
of seabuckthorn (Hippophae rhamnoides) leaves. Food Chem Toxicol 49:2422–2428
Miller LE, McGinnis GR, Kliszczewicz B et al (2013) Blood oxidativestress markers during a high-altitude trek. Int J
Sport Nutr Exerc Metab 23:65–72
Minaiyan M, Ghannadi A, Asadi M et al (2014) Anti-inflammatory effect of Prunus armeniaca L. (apricot) extracts
ameliorates TNBS-induced ulcerative colitis in rats. Pharm Res 9:225–231
Nout MJ, Tuncel G, Brimer L (1995) Microbial degradation of amygdalin of bitter apricot seeds (Prunus armeniaca). Int
J Food Microbiol 24:407–412
Olas B, Skalski B, Ulanowska K (2018) The anticancer activity of sea buckthorn (Elaeagnus rhamnoides L., A. Nelson).
Front Pharmacol 9:232
Orczewska-Dudek S, Pietras M, Nowak J (2018) The effect of amaranth seeds, sea buckthorn pomace and black
chokeberry pomace in feed mixtures for broiler chickens on productive performance, carcass characteristics and
selected indicators of meat quality. Ann Anim Sci 18:501–523
Parlakpinar H, Olmez E, Acet A et al (2009) Beneficial effects of apricot-feeding on myocardial ischemia-reperfusion
injury in rats. Food Chem Toxicol 47:802–808

164
 Pathak NL, Kasture SB, Bhatt NM et al (2011) Phytopharmacological properties of Coriandrum sativum as a potential
medicinal tree: an overview. J Appl Pharm Sci 1:20–25
Patial V, Asrani RK, Patil RD et al (2015) Protective effect of sea buckthorn (Hippophae rhamnoides L.) leaves on
ochratoxin-A induced hepatic injury in Japanese quail. Vet Res Int 3:98–108
Pebriansyah A, Silberov P (2014) The impact of the sea buckthorn (Hippophae rhamnoides) supplement in the feed
ration on the quality of poultry products. Tropentag, Prague
Puganen A, Kallio HP, Schaich KM et al (2018) Red/green currant and sea buckthorn berry press residues as potential
sources of antioxidants for food use. J Agric Food Chem 66(13):3426–3434
Ramasamy T, Varshneya C, Katoch VC (2010) Immunoprotective effect of seabuckthorn (Hippophae rhamnoides) and
glucomannan on T-2 toxin-induced immunodepression in poultry. Vet Med Int 2010. Article ID: 149373.
https://doi.org/10.4061/2010/14973
Saggu S, Divekar HM, Gupta V et al (2007) Adaptogenic and safety evaluation of seabuckthorn leaf extract: a dose
dependent study. Food Chem Toxicol 45:609–617
Samli HE, Terzioglu M, Okur AA et al (2014) Effects of sweet apricot kernel meal on performance and intestinal
microbiota in broiler chickens. J Teki Agric Fac 11:38–43
Shaker MM, Al-Beitawi NA, Bláha J et al (2018) The effect of sea buckthorn (Hippophae rhamnoides L.) fruit residues
on performance and egg quality of laying hens. J Appl Anim Res 46:422–426
Sharma A, Shukla PK, Bhattacharyya A et al (2018) Effect of dietary supplementation of sea buckthorn and giloe leaf
meal on the body weight gain, feed conversion ratio, biochemical attributes and meat composition of turkey poults. Vet
World 11:93–98
Solcan C, Gogu M, Floristean V et al (2013) The hepatoprotective effect of seabuckthorn (Hippophae rhamnoides)
berries on induced aflatoxin B1 poisoning in chickens. Poult Sci 92:966–974
Tekeli A (2012) Effect of apricot kernel on selected performance and blood parameters and meat fatty acid composition
of broilers. J Anim Vet Adv 11:3697–3704
Tian H, Yan H, Tan S et al (2016) Apricot kernel oil ameliorates cyclophosphamide-associated immunosuppression in
rats. Lipids 51:931–939
Tulsawani R (2010) Ninety days repeated gavage administration of Hippophae rhamnoides extract in rats. Food Chem
Toxicol 48:2483–2489
Upadhyay NK, Kumar MSY, Gupta A (2010) Antioxidant, cytoprotective and antibacterial effects of seabuckthorn
(Hippophae rhamnoides) leaves. Food Chem Toxicol 48:3443–3448
Valko M, Leibfritz D, Moncol J et al (2007) Free radicals and antioxidants in normal physiological functions and human
disease. Int J Biochem Cell Biol 39:44–84
Wani SM, Masoodi FA, Wani TA et al (2015) Physical characteristics, mineral analysis and antioxidant properties of
some apricot varieties grown in North India. Food Sci Technol 1:1–10
Whitman M (2001) Understanding the perceived need for complementary and alternative nutraceuticals: lifestyle
issues. Clin J Oncol Nurs 5:190–194
Yasukawa K, Kitanaka S, Kawata K et al (2009) Anti-tumor promoters phenolics and triterpenoid from Hippophae
rhamnoides. Fitoterapia 80:164–167
Yigit D, Yigit N, Mavi A (2009) Antioxidant and antimicrobial activities of bitter and sweet apricot (Prunus armeniaca L.)
kernels. Braz J Med Biol Res 42:346–352
Yilmaz I, Cetin A, Bilgic Y (2015) Hepatoprotective effects of apricot against acetaminophen induced acute
hepatotoxicity in rats. Am J Pharmacol Sci 3:44–48
Zeisel SH (1999) Regulation of “nutraceuticals”. Science 285:185–186
Zhao W, Chen X, Yan C et al (2012) Effect of sea buckthorn leaves on inosine monophosphate and
adenylosuccinatelyase gene expression in broilers during heat stress. Asian-Australas J Anim Sci 25:92–97
Zheng RX, Xu XD, Tian Z et al (2009) Chemical constituents from the fruits of Hippophae rhamnoides. Nat Prod Res
23:1451–1456

165
 Nigella sativa
Rahul Sharma, Pushpkant Sahu, Amul Jain, Vivek Kumar, Dharmendra Khokhar,
Arvind Kumar Geda, and Bhanushree Gupta

Resumo
A grande versatilidade das plantas medicinais tornou-as de grande interesse em todo o
mundo. Nigella sativa (NS, comumente chamada de semente preta), um membro da
família Ranunculaceae, é uma das plantas medicinais mais importantes. A NS é relatada
no tratamento de uma ampla variedade de doenças médicas devido aos seus
constituintes químicos que podem aumentar a fonte de alimentos funcionais e nutritivos.
Os constituintes da NS têm competência para curar muitas doenças biológicas, incluindo
asma, diabetes, doenças digestivas, doenças inflamatórias e artrite reumatóide. Diversas
atividades farmacológicas, incluindo analgésica, antidiabética, anticâncer, antiinflamatória,
antimicrobiana, imunoestimuladora, broncodilatadora, espasmolítica, anti-histamínica e
hepatoprotetora, foram relatadas para as sementes e extrato oleoso de NS. Ela afeta o
sistema reprodutivo, o sistema nervoso central e o sistema imunológico como
anticonvulsivante e mediadores na cicatrização de feridas. NS pode ser explorado para a
produção de uma série de medicamentos para a medicação de inúmeras doenças. No
presente capítulo, discutimos a introdução geral de NS e sua localização geográfica
seguida de constituintes químicos. Além disso, algumas atividades farmacológicas
cruciais e efeitos toxicológicos de NS também são descritos.

Palavras-chave: Nigella sativa · Planta medicinal · Nutracêutico · Timoquinona ·

Fitoquímico

O autor contribuiu igualmente com todos os outros contribuidores. Pushpkant Sahu, Amul Jain and Vivek
Kumar
R. Sharma · D. Khokhar · A. K. Geda Department of Plant Physiology, Agril. Biochemistry, Medicinal and
Aromatic Plants, Indira Gandhi Agricultural University, Raipur, Chhattisgarh, India
P. Sahu · A. Jain · V. Kumar · B. Gupta Department of Chemistry, Center for Basic Sciences, Pt. Ravishankar
Shukla University, Raipur, India

1. Introdução
As plantas medicinais são uma fonte importante para o tratamento de doenças humanas
em todo o mundo desde os tempos antigos. Essas plantas são recursos inestimáveis,
166
úteis na vida diária como pigmentos, aditivos alimentares, sabores, fragrâncias e produtos
farmacêuticos. Hoje os cientistas estão interessados na identificação de seus principais
constituintes e na elucidação de seu mecanismo de ação. Muitos estudos concluíram que
compostos como fenólicos, flavonóides, alcalóides, terpenóides, saponinas, taninos e
antraquinonas têm efeitos benéficos como antioxidantes, antiinflamatórios,
imunomoduladores, antimicrobianos, anticâncer, antidiabéticos, etc. (Omojate et al. 2014).
Segundo estudo (Vuorelaa et al. 2004), nos últimos 20 anos, mais de 25% dos
medicamentos são isolados diretamente de plantas, e os outros 25% são obtidos de seus
derivados químicos. A planta NS, conhecida localmente como “kalonji”, é usada como um
medicamento tradicional para curar muitas doenças, como diarreia, asma, etc. (Tasawar
et al. 2011; Gilani et al. 2001; Benhaddou-Andaloussi et al. 2011). Os diversos
componentes químicos das sementes NS oferecem excelente oportunidade de
desenvolvimento e inovação na área de medicamentos.

A semente de Nigella sativa (Ranunculaceae) tem sido usada por muitos anos como
tempero, conservante de alimentos e medicamento medicinal para curar muitas doenças
(Abdulelah e Zainal-Abidin 2007; Goreja 2003). São conhecidas como sementes pretas
porque, quando expostas ao ar, transformam-se em sementes de cor preta (Goreja 2003).
É uma erva anual com uma altura média de cerca de 20–90 cm. Suas folhas têm cerca de
2,5–5,0 cm de comprimento e formato linear de hastes. Suas flores são de cor azul-claro
e as sementes são pretas, geralmente achatadas, oblongas, angulares, em forma de funil
com 0,2 cm de comprimento e 0,1 cm de largura.

Sementes de NS contêm vários componentes, como proteína (20-27%), gordura (34,5-

38,7%), carboidratos (23,5-33,2%), fibra bruta (8,4%) e cinzas (4,8%) (Babyan et al.
1978). Eles também contêm muitas vitaminas e minerais, como Zn, Cu, P e F. Além disso,
o NS também contém caroteno, que ainda se converte em vitamina A no fígado (Ahmad et
al. 2013). As sementes também contêm muitos compostos ativos, como nogelleona, timo
quinona e timo hidroquinona, que são relatados por fornecer atividade benéfica, como
antimicrobiana, antitóxica e outras atividades farmacológicas (Forouzanfar et al. 2014).

Sementes NS são relatadas como tendo 20% de extrativos solúveis em álcool, 15% de
extrativos solúveis em água, 25-32% de óleo fixo total, 0,42% de óleo volátil e 3,91% de
matéria orgânica (expresso em peso / peso) (Sharma et al.).

167
2. Localização Geográfica
A origem da Nigella sativa não está bem estabelecida. A planta certamente estava sob
amplo cultivo há mais de 3.000 anos. NS é inerente ao sudeste da Europa, norte da África
e sudoeste da Ásia. É cultivado em países como a região do Oriente Médio Mediterrâneo,
Sul da Europa, Índia, Paquistão, Omã, Arábia Saudita, Israel, Síria e Turquia (Fig. 1)
(Gilani et al. 2004; Khare 2004).

Fig. 1 Representação da distribuição geográfica de NS em todo o mundo

3. Classificação Taxonômica
A classificação taxonômica de Nigella sativa é a seguinte: Reino, Plantae; sub-reino,
Tracheobionta; superdivisão, Spermatophyta; filo, Magnoliophyta; classe, Magnoliopsida;
ordem, Ranunculales; família, Ranunculaceae; gênero, Nigella; espécie, sativa (Fig. 2).

Fig. 2 Sementes de N. sativa

O NS é reconhecido como cominho preto, semente preta, damascena, diabo-no-arbusto,

flor de funcho, haba-al-barka, kalonji, kalajeera, noz-moscada e muitos mais. É uma
planta com floração anual caracterizada por pétalas finamente divididas (amplamente
coloridas como rosa, azul-claro, roxo, branco e amarelo) e com 5-10 pétalas.
168
4. Constituintes Químicos de NS
Foi descoberto que o óleo essencial da semente NS contém numerosos constituintes
químicos, confirmados por técnicas de cromatografia gasosa (GC) e cromatografia gasosa
com espectrometria de massa (GC-MS). Poucos compostos foram representados na Fig.
3. A extração do óleo essencial de NS é feita usando o aparelho de Clevenger. Existem
dois tipos de técnicas de extração disponíveis usando o aparelho de Clevenger, um é a
destilação a vapor em micro-ondas 1 (MSD1) em que as sementes são colocadas dentro
do aparelho do forno, e o segundo é a destilação a vapor em micro-ondas 2 (MSD2) em
que as sementes foram colocadas fora do aparelho de forno (Akloul et al. 2014). Além
deste método GC também foi usado para a extração de óleo. Nos métodos GC, o
processo é realizado por MSD1-GC ou MSD2-GC. Akloul et al. (2014) relataram que o
óleo essencial contém mais quantidade de compostos oxigenados e menos quantidades
de hidrocarbonetos mono terpênicos extraídos usando MSD1 e MSD2 do que MSD1-GC
e MSD2-GC. O extrato de óleo MSD1 contém uma quantidade comparativa de cetonas e
álcoois do que o extrato de óleo MSD2, enquanto os extratos de óleo MSD2 contêm mais
hidrocarbonetos mono terpênicos do que os extratos de óleo MSD1. A quantidade de
hidrocarbonetos sesquiterpênicos tem quantidade aproximadamente semelhante em
ambos. Usando MSD1-GC e MSD2-GC, resultados semelhantes foram observados.
Alguns hidrocarbonetos sesquiterpênicos, como longifoleno, a-longipineno e Z-g-
bisaboleno, foram relatados em óleo essencial usando métodos MSD1 e MSD1-GC.

Uma avaliação qualitativa das sementes NS revelou a presença de triterpenos, esteróis,

flavonóides, taninos, alcalóides, glicosídeos cardíacos, cumarinas, saponinas, óleos
voláteis, bases voláteis, antraquinonas e glucosinolatos (Al-Yahya 1986). Foi relatado que
as sementes de NS contêm mais de 30% de óleo fixo e 0,40-0,50% de óleo volátil (p/p). A
estimativa qualitativa do óleo essencial de sementes de NS pela técnica de cromatografia
gasosa com espectrometria de massa (GC-MS) mostrou cerca de 65-67 compostos
químicos diferentes. Quando tais compostos foram submetidos a vários grupos funcionais,
os seguintes resultados foram obtidos: compostos carbonílicos (25%), fenóis (1,7%),
álcoois (0,9%), monoterpenos (46%) e ésteres (16%) (Acerca de et al. 1986).
Aproximadamente 18–24% de timo quinona e um total de 46% de vários monoterpenos,
como pineno e p-cimeno, foram relatados em óleo volátil (El-Tahir et al. 1993).

169
 Fig. 3 Estruturas de constituintes químicos de sementes NS

Omar et al. (1999) forneceu um breve relato sobre a presença de ditimoquinona,

timohidroquinona, timo quinona, carvacrol, timol, 6-metoxi-cumarina e 7-hidroxicumarina,
oxicumarina, esteril-glucosídeo e a-hedrina, bem como quantidades suficientes de
taninos, ácidos graxos essenciais, flavonóides, ácido ascórbico, aminoácidos e poucas
substâncias inorgânicas, como ferro e cálcio. Conforme artigo de Weiss (2002), as
sementes contêm cerca de 0,5% de óleo volátil que possui sete fitoconstituintes
principais, e suas proporções estimadas são as seguintes: timoquinona (25%), p-cimeno
(31%), hexadecanoato de etila (3%), a-pineno (9%), linoleato de etila (9%), oleato de etila
(3%) e b-pineno (2%). Da mesma forma, Sharma et al. (2009) relataram que a
timoquinona foi identificada como o principal componente (até 50%) ao lado do p-cimeno
(40%), pineno (até 15%), éster etílico de ácido graxo (10%), ditimoquinona e
timohidroquinona. Outros derivados de terpeno foram encontrados apenas em pequenas
quantidades: carvacrol, carvona, limoneno, 4-terpineol e citronelol no óleo essencial de
NS (média de 0,5%, máx. 1,5%). A conversão de timoquinona em ditimoquinoneno e
produtos de alta condensação de oligo no armazenamento resulta no sabor aromático de
NS. Nickavara et al. (2003) do Irã usaram métodos de GC e GC-MS para investigar a
170
composição química do óleo volátil de sementes NS e relataram 32 compostos (86,7%).
Entre eles, os principais compostos foram transanetol (38,3%), p-cimeno (14,8%),
limoneno (4,3%) e carvona (4,0%). Os resultados de GC e GC-MS são apresentados na
Tabela 1 (Nickavara et al. 2003).

Tabela 1 Composição química dos constituintes voláteis

Composto % Composto % Composto %
1,3,5-Trimetil benzeno 0,5 1-Etil-2,3-dimetil benzeno 0,2 1-Metil-3-propil benzeno 0,5
3-Metil nonano 0,3 Anisaldeído 1.7 Apiole 1.0
Carvacrol 1.6 Carvone 4.0 Diidrocarvona 0,3
Dill apiole 1.8 Estragole 1,9 Fenchone 1,1
Limoneno 4,3 Longifolene 0,7 Myrcene 0,4
Myristicin 1.4 n-Decano 0,4 n-hexadecano 0,2
n-Nonano 1.7 n-tetradecano 0,2 p-Cymene 14,8
p-Cymene-8-ol 0,4 Sabinene 1,4 Terpinen-4-ol 0,7
Álcoois monoterpenóides Hidrocarbonetos
Timoquinona 0,6 2,7 26,9
totais monoterpenóides totais
Cetonas monoterpenóides Hidrocarbonetos não Compostos
6,0 4,0 46,1
totais terpenóides totais fenilpropanoides totais
Hidrocarbonetos 38,
1,0 trans-anetol α-Longipineno 38,3
sesquiterpênicos totais 3
α-Felandrene 0,6 α-Pineno 1.2 α-Thujene 2,4
β-Pineno 1,3 γ-Terpineno 0,5 Compostos totais 86,7
Fonte: Malhotra (2012)

Os principais componentes da SN foram p-cimeno (33,8%) e timol (26,8%), com apenas

uma pequena quantidade de timoquinona (3,8%) relatada por Moretti et al. (2004).
Rajkapoor et al. (2002) relataram que os alcalóides presentes nas sementes são
nigelidina, nigelicina, tanino, esteróide α-espinasterol, quinazolina, colesterol,
campesterol, estigmas 7-en-3-β-ol, estigmasterol e flavonóides de trigilina quercetina-3-
glucosídeo. Morikawa et al. (2004 a, b) relataram o isolamento de quatro alcalóides
diterpênicos do tipo dolabelano das sementes de NS. Os constituintes ativos, nigelidina e
nigelona, foram relatados como contendo um núcleo indazol (Rahman et al. 1995). Três
flavonóides glicosídeos e saponinas triterpênicas também foram isolados e identificados
de NS acompanhada de quatro classes de fosfolipídeos: fosfatidiletanolamina,
hosfatidilcolina, fosfatidilserina e fosfatidilinositol (Merfort et al. 1997; Ramadan e Morsel
2002).

171
5. Estudos farmacológicos
Os extratos de NS mostraram muitas atividades farmacológicas importantes. A
notabilidade da planta se deve às suas propriedades de curar muitos distúrbios. Os
estudos farmacológicos detalhados de NS são fornecidos abaixo:

5.1 Atividade antioxidante

Foi descoberto que o óleo essencial de NS possui grande atividade antioxidante. Foi
observado que o óleo essencial de NS afeta o status da enzima antioxidante e o
miocárdio de ratos tratados com ciclosporina A. Também foi relatado que, quando o pré-
tratamento com óleo essencial de NS foi realizado, ele diminuiu a ciclosporina
subsequente. O óleo essencial de NS apresentou atividade antioxidante, pois reduz a
peroxidação lipídica, o desenvolvimento do estado de enzimas antioxidantes e a oxidação
de proteínas celulares (Ebru et al. 2008). O óleo essencial de NS apresentou muitas
atividades antioxidantes verificadas pelo difenilpicril hidracil. A timoquinona (TQ) e outros
componentes químicos de NS, como carvacrol, anetol e 4-terpineol, possuem propriedade
de eliminação de radicais, o que é comprovado pelo uso de dois métodos de triagem por
cromatografia em camada delgada (TLC). Também se verificou que estes componentes
são agentes eliminadores de radicais OH eficazes, verificados para peroxidação lipídica
não enzimática em lipossomas e também para degradação de desoxirribose (Burits e
Bucar 2000). Os constituintes químicos de NS como timol, TQ e ditimoquinona mostraram
efeito de eliminação de radicais livres atenuando espécies reativas de oxigênio (ROS),
como radical hidroxila, radical superóxido e oxigênio nascente, determinado por
quimiluminescência e métodos espectrofotométricos (Kruk et al. 2000). Devido à atividade
antioxidante do TQ, ele mostrou efeito protetor contra a nefrotoxicidade induzida pela
doxorrubicina (Badary et al. 2000) e cardiotoxicidade induzida pela doxorrubicina (Al-
Shabanah et al. 1998; Nagi e Mansour 2000). Mostra efeito modulador e efeito antitumoral
no câncer induzido por benzo(a)pireno em camundongos (Badary et al. 1999) e na
gênese do tumor de fibrossarcoma induzido por 20-metil colantreno (Badary e Gamal-el-
Din 2001), respectivamente, devido à atividade antioxidante. Foi relatado que as
sementes NS e seus extratos apresentam propriedades antioxidantes, pois proporcionam
proteção contra danos causados pela oxidação. Lado et al. (2004), Nagwa et al. (2006) e
Adamu et al. (2010) observaram que os óleos de Nigella podem ser usados como
antioxidantes, enquanto Musa et al. (2004) relataram que o extrato de álcool etílico
também pode produzir antioxidantes e foi capaz de estender a vida útil de camundongos.
Recentemente, Ibraheem et al. (2010) relataram que o NS possui propriedades
antioxidantes e antagonistas do cálcio.
172
5.2 Atividade Antibacteriana

O óleo essencial extraído da semente NS seguindo várias técnicas, como destilação a

vapor (SD), destilação a vapor seco (DSD), hidrodestilação (HD), extração com solvente
(SE) e extração com fluido supercrítico (SFE-SD), foi relatado para exercer atividades
antibacterianas (Islam et al. 2013). Verificou-se que os valores de MIC (concentração
inibitória mínima) dos extrativos HD e SD são 256 e 32 μg/ml e 3,77 g/ml, respectivamente, enquanto
para SE-SD e SFE-SD, o valor foi de 4 μg/ml e 3,77 g/ml. Foi observado que todas as amostras de
óleo essencial de NS possuem maior atividade contra bactérias gram-positivas do que
gram-negativas (Kokoska et al. 2008). As atividades antibacterianas da NS contra
isolados clínicos de Staphylococcus aureus resistentes à meticilina foram estudadas por
Hannan et al. (2008). Foi descoberto que diferentes extratos de NS apresentam atividade
antibacteriana contra diferentes bactérias. Diferentes extratos de NS mostraram atividade
antibacteriana contra 16 bactérias gram-negativas e 6 gram-positivas. Foi descoberto que
os extratos mais eficazes para a atividade antibacteriana são alcalóides e extratos
aquosos. Além disso, as bactérias gram-negativas são mais afetadas do que as bactérias
gram-positivas (Hanafy e Hatem 1991; Sokmen et al. 1997). Os extratos metanólicos das
sementes apresentam ação antiplaca por inibição de Streptococcus mutans. Os extratos
alcoólicos apresentam atividade antibacteriana contra a bactéria Micrococcus pyogenes
var. aureus, Shigella dysenteriae, S. sonnei, S. boydii, Vibrio cholera e E. coli (Ferdous et
al. 1992). Extratos alcoólicos de sementes NS mostraram atividade inibitória contra o
crescimento de Staphylococcus aureus em uma concentração de 4 mg/disco com MIC
varia de 0,2 a 0,5 mg/ml (Hannan et al. 2008).

5.3 Atividade Antifúngica

O óleo essencial de sementes NS é relatado como tendo atividade apreciável contra um

grande número de fungos (Agarwal et al. 1979; Bourrel et al. 1995; Aboul Ela et al. 1996).
A inibição da formação de substância tóxica denominada “aflatoxina” por uma série de
plantas medicinais, incluindo NS em diferentes concentrações, foi estudada no passado.
Em um desses estudos, a semente em pó e o óleo essencial de NS inibiram
eficientemente o crescimento e a produção de aflatoxina da cepa toxigênica de
Aspergillus flavus (El-Shayeb e Mabrouk 1984; El-Sayed et al. 1997; Ozcan 1998).

Os extrativos aquosos de sementes NS têm efeito inibitório contra candidíase em

camundongos (Bita et al. 2012). O extrato etéreo de NS e TQ foi testado quanto à
atividade antidermatófita contra oito espécies de dermatófitos, em que quatro espécies
são de Trichophyton rubrum e uma de cada Trichophyton interdigitale, Trichophyton
mentagrophytes, Epidermophyton floccosum e Microsporum canis usando o método de
173
difusão de agar et al. 2013). Os extratos TQ e etéreo de NS também mostram atividade
inibitória contra cepas de fungos (Aljabre et al. 2005). TQ exibiu alta atividade antifúngica
contra Aspergillus niger, Fusarium solani e Scopulariopsis brevicaulis, e a atividade é
considerada semelhante à da droga anfotericina B (Aljabre et al. 2015a, b).

Verificou-se que o MIC dos extratos etéreos de NS e TQ variam entre 10 e 40 mg/ml e

0,125 e 0,25 mg/ml, respectivamente (Aljabre et al. 2005). Foi descoberto que o óleo de
semente de NS possui atividades antifúngicas contra 20 fungos, incluindo cepas
patogênicas e industriais. Muitos pesquisadores descobriram que todos os extratos de
óleo de NS têm atividades antifúngicas, mas uma gama mais forte e mais ampla de
atividades antifúngicas foi demonstrada apenas pelo óleo volátil. Os valores de MIC do
óleo volátil das sementes NS foram determinados contra três fungos patogênicos, e o MIC
mais baixo foi encontrado contra Aspergillus fumigatus (Islam et al. 1989).

5.4 Atividade anticâncer

Há uma série de componentes químicos ativos que foram extraídos de NS, como
timoquinona (TQ) e alfa hederina, que possuem atividades anticâncer (Aljabre et al.
2015a, b). Vários experimentos foram realizados em camundongos e ratos para explorar a
atividade anticâncer da NS. A atividade anticancerígena da semente preta foi observada
com atividade de células assassinas naturais em 200–300% em pacientes com câncer
avançado (Salim 2010). Os extratos de óleo essencial (IC 50 = 0,6% v/v) e acetato de etila
(IC50 = 0,75%) de NS foram considerados mais tóxicos contra a linha celular P815 do que
seus extrativos de butanol (IC 50 = 2%). Verificou-se que os testes na linha celular BSR
manifestam um efeito citotóxico mais alto do extrativo de acetato de etila (IC 50 = 0,2%) do
que o óleo essencial (IC50 = 1,2%) (Ait et al. 2007). Os extratos de álcool etílico de
sementes NS foram relatados para inibição in vitro de células cancerosas e progressão de
células endoteliais (Medenica et al. 1997; Swamy e Tan 2000). O efeito defensivo de
sementes NS contra o estresse oxidativo e carcinogênese induzido pelo uso de
metilnitrosoureia em ratos tem sido estudado. Sua capacidade protetora é alta (80%)
contra estresse oxidativo induzido por metilnitrosoureia e carcinogênese (Mabrouk et al.
2002). Os extratos aquosos e alcoólicos, que são sozinhos ou em combinação com H 2O2,
foram considerados eficazes in vitro na desativação do câncer de mama MCF-7 (Farah e
Begum 2003). Portanto, os dados acima elucidam o efeito tóxico de cada extrato contra
vários tipos de células tumorais.

5.5 Propriedades Antidiabéticas

Descobriu-se que as sementes e extratos de óleo de NS possuem propriedades

antidiabéticas. Os efeitos sobre a tolerância oral à glicose do extrato bruto aquoso de NS
174
foram investigados usando a técnica de eletrochoque. Verificou-se que o extrato bruto
aquoso de NS inibe diretamente a absorção intestinal. Portanto, a melhora da tolerância a
carboidratos e do peso corporal em ratos experimentais após a ingestão oral de sementes
certifica o uso de SN como agentes antidiabéticos (Meddah et al. 2009). Vários inibidores
da protease do HIV, como nelfinavir e atazanavir (Fig. 4), foram expostos junto com os
extratos de sementes NS. Foi relatado que a combinação diminui a secreção de insulina
em ratos. Devido à redução da secreção de insulina, houve um rápido declínio na taxa de
mortalidade nos pacientes HIV-I positivos (Chandra et al. 2009).

Fig. 4 Estrutura do atazanavir (A) e nelfinavir (B) como

drogas antidiabéticas, respectivamente

Os extratos inteiros desengordurados de sementes foram avaliados quanto aos efeitos do

secretário de insulina em ratos. O extrato desengordurado foi dividido em duas
subcategorias, uma com moléculas ácidas e neutras e a outra com moléculas básicas.
Essas subcategorias foram testadas in vitro em ilhotas pancreáticas de ratos. O estudo
revelou que as subcategorias com moléculas básicas aumentaram significativamente a
liberação de insulina induzida por glicose em ratos, indicando atividade antidiabética do
extrato de NS (Rchid et al. 2004). Portanto, a NS exibe um efeito protetor no rato
diabético, preservando as células pancreáticas produtoras de insulina e inibindo o
estresse oxidativo nas células (Kanter et al. 2004).

5.6 Atividade na fertilidade

Uma variedade de respostas reprodutivas de SN foi relatada, incluindo qualidade do

sêmen, desenvolvimento do folículo e efeitos relacionados à gravidez em indivíduos do
sexo masculino e feminino (Babazadeh et al. 2012). As sementes e extratos de NS têm
sido usados em ratas albinas para observar os efeitos nos parâmetros da pós-
menopausa. Verificou-se que o NS pode ser usado para substituir a terapia hormonal
devido à presença de vários efeitos benéficos (Parhizkar et al. 2016). A dieta proteica da
175
ovelha Rahmani foi substituída pela dieta proteica rica em NS. Foi observado que a
mistura de proteína NS tem uma ampla gama de papéis benéficos na alteração da
duração do ciclo estral e na taxa de concepção (El-Harairy et al. 2006). Verificou-se que o
desempenho de cordeiros machos aumenta quando suplementado com NS (100–200 mg/
kg de peso corporal). A concentração de testosterona sérica foi aumentada por NS. Um
grupo de frangos de corte suplementado com as sementes e extratos de óleo de NS
apresentou melhores características do sêmen, que incluem aumento na motilidade da
massa espermática, volume de ejaculação, contagem, produção total de esperma e
porcentagem de viabilidade (Zanouny et al. 2013).

5.7 Atividade Antiinflamatória

TQ e outros extratos de NS têm atividade antiinflamatória significativa. Foi estudado que

os extratos de etanol de sementes NS são usados no tratamento da psoríase, que é uma
doença geral da pele devido a distúrbio de pele hiperproliferativo e autoimune, e às vezes
é com coceira e dolorosa (Dwarampudi et al. 2012). Ahmed et al. (2014) relataram que os
extratos etanólicos de NS apresentaram efeito antipsoriático. Além disso, o óleo NS é
geralmente usado em duas formas que podem ser em forma de bálsamo e de dosagem
oral. O valor IC50 do óleo NS é relatado como 23,9 μg/ml e 3,77 g/ml, que é aproximadamente igual ao
valor IC50 do asiaticosídeo (IC50 = 20,13 μg/ml e 3,77 g/ml) (Jawad et al. 2014). O óleo NS também é
usado para curar a acne vulgar, que é a doença de pele mais comum. Hadi e Ashor
(2010) observaram que o uso de extratos de óleo de 20% NS é melhor e menos
prejudicial na formulação da loção do que o uso de peróxido de benzoíla. Isso é utilizado
no tratamento de estágio leve a médio da acne vulgar (Hadi e Ashor 2010).

5.8 Propriedades Gastroprotetoras

Foi observada uma ampla atividade gastroprotetora da SN. Os ratos foram induzidos com
úlcera gástrica pelo uso de produtos químicos nocivos. Verificou-se que os efeitos dos
extratos aquosos são significativamente benéficos na prevenção da úlcera gástrica e na
melhora da secreção gástrica basal. O extrato aquoso repõe o conteúdo de muco
esgotado na mucosa gástrica, indicando a atividade gastroprotetora do extrato aquoso
(Mofleh et al. 2008). A timoquinona foi usada contra a úlcera induzida por produtos
químicos nocivos em ratos e descobriu-se que protege a mucosa gástrica contra os
efeitos nocivos de produtos químicos nocivos e auxilia na cura da úlcera (Kanter et al.
2005; El-Dakhakhny et al. 2000). O extrato aquoso de NS diminuiu a acidez no suco
gástrico exibindo atividade gastroprotetora na úlcera induzida por ácido acetilsalicílico em
ratos (Akhtar et al. 1996).

176
5.9 Atividade Cardiovascular

As sementes e extratos de NS têm sido empregados para estudar as respostas na

estimulação da atividade cardíaca. As sementes de NS foram administradas por via oral a
ratos normais para estudar seu efeito. As sementes aumentaram as propriedades
contráteis inerentes do coração sem aumentar a carga de trabalho cardíaca (Al-Hariri et
al. 2009; El-Bahai et al. 2009). Os extratos aquoso e macerado de NS foram empregados
para examinar seus efeitos na frequência cardíaca e na contratilidade do coração. O
poderoso efeito inibitório sobre a frequência cardíaca e contratilidade foi observado e
considerado mais eficaz do que o diltiazem (Fig. 5). O efeito é atribuído à inibição dos
canais de cálcio, e nas plantas é devido à abertura dos canais de potássio (Boskabady et
al. 2005; Shafei et al. 2005).

Fig. 5 Estrutura do diltiazem,

droga cardiovascular

Por meio do bloqueio do canal de íons de cálcio, o ingrediente ativo timol reduz a pressão
arterial (Gialni et al. 2001). Diferentes doses de sementes em pó de NS foram
administradas a ratos albinos para analisar o efeito sobre a densidade do nível de
colesterol. Essas sementes em pó diminuíram o nível da lipoproteína de baixa densidade
e aumentaram o nível de lipoproteínas de alta densidade, que são essenciais para
atividades cardiovasculares regulares (Kocyigit et al. 2009).

5.10 Atividades imunomoduladoras

Vários antibióticos sintéticos são usados contra vários organismos patogênicos. Foi
descoberto que organismos patogênicos desenvolvem resistência aos medicamentos
contra os antibióticos sintéticos administrados. Portanto, em comparação com os
antibióticos sintéticos, alternativas naturais, como extratos de óleo e sementes de NS
podem ser úteis. As sementes e os constituintes purificados do NS têm sido usados no
tratamento de várias doenças (Zeweil et al. 2008). Aumento da proteína plasmática total,
albumina e globulina foram relatados em coelhos após a suplementação com

177
óleo/extratos de NS (Tousson et al. 2011). A atividade radioprotetora de extratos de óleo
de NS tem sido observada contra o efeito prejudicial hematopoiético da radiação gama.
Antes da irradiação, os extratos de óleo de NS foram administrados por via oral, o que
normalizou a concentração amplificada de malonildialdeído, diminuindo as concentrações
de catalase, glutationa plasmática e atividades de superóxido dismutase eritrocitária.
Portanto, os extratos de óleo foram encontrados para possuir atividade radioprotetora
natural e efeitos imunossupressores sobre a radiação ionizante (Ensaiado 2010).
Declínios significativos na motilidade espontânea, modificação no comportamento geral e
temperatura corporal normal foram observados em extratos de óleo aquosos e em
metanol, sugerindo atividade depressora no sistema nervoso central (Khanna et al. 1993).

5.11 Atividades de Memória e Aprendizagem

Em comparação com os outros extratos de plantas, o óleo de semente de NS e seus

extratos são eficazes no SNC e em outras ações relacionadas à memória espacial que
envolvem informações especiais, reconhecimento, codificação, armazenamento e
recuperação pelo cérebro (Kalat 2007). Os extratos NS são aplicados para a inibição da
atividade da acetilcolinesterase (AChE).

Os extratos hidroalcoólicos de NS estão envolvidos no aumento colinérgico central contra

a amnésia induzida por escopolamina (Hosseini et al. 2015). O óleo extrativo NS mostra
efeito mnemônico, modulação colinérgica e mitigação do estresse oxidativo (Raza et al.
2006). Khan et al. (2008) relataram que o extrato de TQ de NS tem propriedades
neuroprotetoras em danos de percepção e outras demências relacionadas. Também foi
descoberto que o NS tem efeito ansiolítico (Perveen et al. 2009). Os extratos
hidroalcoólicos de NS foram relatados como úteis na prevenção da decadência de
atividades de aprendizagem e memória mostradas no modelo epiléptico induzido por
pentilenotetrazol (PTZ) (Vafaee et al. 2015). Os extratos hidroalcoólicos de NS também
reverteram os danos do hipotireoidismo vinculado ao aprendizado e memória em animais
neonatais (Beheshti et al. 2016a, b). A NS também afeta o humor, a ansiedade e a
cognição humanos (Sayeed Bin et al. 2014).

5.12 Atividade anticonvulsivante

Desde a antiguidade, a epilepsia é uma das doenças letais que se caracteriza por
convulsões frequentes. No tratamento da epilepsia, as sementes e extratos de óleo de NS
têm sido usados desde a antiguidade. Na tumba de Tutancâmon, foi selecionado como
um dos produtos sepultados, pois se acreditava que curaria a malária cerebral e a
epilepsia (Tahan e Bayram 2011; Mathur et al. 2011). As técnicas como eletrochoque
máximo (MES) associado a pentilenotetrazol (PTZ) têm sido utilizadas para determinar a
178
atividade anticonvulsivante das sementes e do extrato oleoso de NS. Foi constatado que
a inserção intraperitoneal de timoquinona diminui a duração das convulsões (Yaman et al.
2010). Valproato (um dos principais constituintes entre as drogas antiepilépticas) e
extratos de óleo de NS foram testados simultaneamente quanto à sua capacidade de
suprimir os efeitos letais e convulsivos do PTZ em camundongos. A atividade de
supressão foi encontrada para ser mais pronunciada no caso de extrato de óleo de NS do
que valproato na inibição de convulsões induzidas por PTZ (Abu-Zinadah 2009). Vários
constituintes de NS, como óleo fixado, óleo aquoso e extratos de óleo, foram investigados
contra a convulsão induzida por MES e PTZ. Observa-se que, exceto os óleos fixos,
outros constituintes foram considerados eficazes contra a convulsão PTZ (Ali e Meitei
2011).

6. Propriedades Toxicológicas
Observou-se que as sementes, extratos e constituintes da NS apresentam baixa
toxicidade. As administrações intraperitoneais de extrato NS (50 mg/kg) a ratos mostraram
possuir efeito menos significativo nas atividades de várias enzimas (el-Daly 1998). O
principal constituinte da timoquinona é caracterizado por um valor de dosagem letal muito
alto, variando entre 1,52 e 3,77 g/kg (Badary et al. 1998). A suplementação de altas doses
de extrato NS causa hipoatividade e obstrução respiratória. Essas altas dosagens
diminuíram a concentração do hormônio estimulador do crescimento (GSH) no fígado, rim
e coração. Devido à diminuição da concentração de GSH no rim e no fígado, os
metabólitos e enzimas do plasma aumentaram e causaram danos aos órgãos (Badary et
al. 1998). Os ratos foram tratados com os extratos de óleo fixados com NS para
determinar o nível de toxicidade, e nenhum efeito significativo foi encontrado nos níveis de
enzimas hepáticas. No entanto, os níveis de tireoglobulina (TG), colesterol e glicose e a
contagem de leucócitos e plaquetas diminuíram. Portanto, as sementes e extratos de óleo
de NS são de imensa importância, pois possuem baixo nível de toxicidade (Zaghlol et al.
2012).

7. Observações finais e orientações futuras

A etnobotânica e a ampla aplicação de compostos naturais especialmente derivados de
plantas têm recebido grande atenção nos últimos anos. O uso de sementes NS e seus
constituintes demonstrou exercer múltiplos efeitos úteis no tratamento de várias doenças.
Ele contém uma ampla gama de propriedades farmacêuticas, incluindo antidiabética,
179
anticâncer, imunomoduladora, gastroprotetora e muito mais. O óleo da semente/extratos
de NS têm sido utilizados como agentes terapêuticos desde os tempos antigos devido ao
seu menor efeito tóxico. N. sativa tem um grande potencial nutracêutico e está sujeita a
futuras investigações.

Referências

Abdulelah HAA, Zainal-Abidin BAH (2007) In vivo antimalarial tests of Nigella sativa (Black Seed) different extracts.
Am J Pharmacol Toxicol 2:46–50
Aboul Ela MA, El-Shaer NS, Ghanem NB (1996) Antimicrobial evaluation and chromatographic analysis of some
essential and fixed oils. Pharmazie 51:993–994
Aboutable EA, El-Azzouny AA, Hammerschmidt FJ (1986) Aroma volatiles of Nigella sativa L. seeds. In: Brunke EJ
(ed) Progress in essential oil research. Proceedings of the international symposium on essential oils. de Gruyter, Berlin,
pp 44–55
Abu-Zinadah O (2009) Using nigella sativa oil to treat and heal chemical induced wound of rabbit skin. J King
Abdulaziz Univ Sci 21:335–346
Adamu HM, Ekanem EO, Bulama S (2010) Identification of essential oil components from Nigella sativa seed by gas
chromatography mass spectroscopy. Pak J Nutr 9:966–967
Agarwal R, Md K, Shrivastava R (1979) Antimicrobial and anthelmintic activities of the essential oil of Nigella sativa
Linn. Indian J Exp Biol 17:1264–1265
Ahmad A, Husain A, Mujeeb M et al (2013) A review on therapeutic potential of Nigella sativa: a miracle herb. Asian
Pac J Trop Biomed 3:337–352
Ait ML, Ait MH, Elabbadi N et al (2007) Anti-tumor properties of blackseed (Nigella sativa L.) extracts. Braz J Med Biol
Res 40:893–847
Akhtar Ah, Ahmad KD, Gilani SN et al (1996) Antiulcer effect of aqueous extracts of Nigella sativa and Pongamia
pinnata in rats. Fitoterapia 67:195–199
Akloul R, Benkaci-Ali F, Zerrouki M et al (2014) Composition and biological activities of the essential oil of Nigella
sativa seeds isolated by accelerated microwave steam distillation with cryogenic grinding. Am J Essent Oil Nat Prod
1:23–33
Al-Hariri MT, Yar T, Bamosa AO et al (2009) Effects of two-months Nigella sativa supplementation on cardiac
hemodynamics and adrenergic responsiveness. J Pak Med Assoc 59:363–368
Ali SA, Meitei KV (2011) Nigella sativa seed extract and its bioactive compound thymoquinone: the new melanogens
causing hyperpigmentation in the wall lizard melanophores. J Pharm Pharmacol 63:741–746
Aljabre SH, Randhawa MA, Akhtar N et al (2005) Antidermatophyte activity of ether extract of Nigella sativa and its
active principle, thymoquinone. J Ethnopharmacol 101:116–119
Aljabre SHM, Alakloby OM, Randhawa MA (2015a) Dermatological effects of Nigella sativa. J Dermatol Dermatol Surg
10:92–98
Aljabre SHM, Alakloby OM, Randhawa MA (2015b) Dermatological effects of Nigella sativa. J Dermatol Dermatol Surg
19:92–98
Al-Shabanah OA, Badary OA, Nagi MN et al (1998) Thymoquinone protects against doxorubicin induced cardiotoxicity
without compromising its antitumor activity. J Exp Clin Cancer Res 17:193–198
Al-Yahya MA (1986) Phytochemical studies of the plants used in traditional medicine of Saudi Arabia. Fitoterapia
57:179–182
Assayed ME (2010) Radioprotective effects of black seed (Nigella sativa) oil against hemopoietic damage and
immunosuppression in gamma-irradiated rats. Immunopharmacol Immunotoxicol 32:284–296
Babazadeh B, Sadeghnia HR, Safarpour Kapurchal E et al (2012) Protective effect of Nigella sativa and thymoquinone
on serum/glucose deprivation induced DNA damage in PC12 cells. Avicenna J Phytomed 2:125–132
Babyan VK, Kottunga D, Halaby GA (1978) Proximate analysis, fatty acid and amino acid composition of Nigella sativa
seeds. J Food Sci 43:1314–1315
Badary OA, Gamal-el-Din AM (2001) Inhibitory effects of thymoquinone against 20-methylcholanthrene induce
fibrosarcoma tumoriogenesis. Cancer Detect Prev 25:362–368
Badary OA, Al-Shabanah OA, Nagi MN et al (1998) Acute and subchronic toxicity of thymoquinone in mice. Drug Dev
Res 44:56–61
Badary OA, Al-Shabanah OA, Nagi MN et al (1999) Inhibition of benzopyrene induced forestomach carcinogenesis in
mice by thymoquinone. Eur J Cancer Prev 8:435–440
Badary OA, Abdel-Naim AB, Abdel-Wahab MH et al (2000) The influence of thymoquinone on doxorubicin-induced
hyperlipidemic nephropathy in rats. Toxicology 143:219–226
Beheshti F, Hosseini M, Vafaee F et al (2016a) Feeding of Nigella sativa during neonatal and juvenile growth improves
learning and memory of rats. J Tradit Complement Med 6:146–152
Beheshti F, Hosseini M, Shafei MN et al (2016b) The effects of Nigella sativa extract on hypothyroidism-associated
learning and memory impairment during neonatal and juvenile growth in rats. Nutr Neurosci 20:49–59
180
 Benhaddou-Andaloussi A, Martineau L, Vuong T et al (2011) The in vivo antidiabetic activity of Nigella sativa is
mediated through activation of the AMPK pathway and increased muscle Glut4 content. Evid-Based Complement
Alternat Med 2011:1–9
Bita A, Rosu AF, Calina D et al (2012) An alternative treatment for Candida infections with Nigella sativa extracts. Eur J
Hosp Pharm 19:162
Boskabady MH, Shafei MN, Parsaee H (2005) Effects of aqueous and macerated extracts from Nigella sativa on
guinea pig isolated heart activity. Pharmazie 60:943–948
Bourrel C, Dargent R, Vilrem G et al (1995) Chemical analysis and fungistatic properties of some essential oils in a
liquid medium. Effects on hyphal morphogenesis. Riv Ital EPPOS 6:31–42
Burits M, Bucar F (2000) Antioxidant activity of Nigella sativa essential oil. Phytother Res 14(5):323–328
Chandra S, Mondal D, Agrawal KC (2009) HIV-1 protease inhibitor induced oxidative stress suppresses glucose
stimulated insulin release: protection with thymoquinone. Exp Biol Med 234:442–453
Dwarampudi LP, Palaniswamy D, Nithyanantham M et al (2012) Antipsoriatic activity and cytotoxicity of ethanolic
extract of Nigella sativa seeds. Pharmacogn Mag 8:268–272
Ebru U, Burak U, Yusuf S et al (2008) Cardioprotective effects of Nigella sativa oil on cyclosporine A-induced
cardiotoxicity in rats. Basic Clin Pharmacol Toxicol 103:574–580
El-Bahai MN, Al-Hariri MT, Yar T et al (2009) Cardiac inotropic and hypertrophic effects of Nigella sativa
supplementation in rats. Int J Cardiol 31:115–117
El-Dakhakhny M, Barakat M, El-Halim MA et al (2000) Effects of Nigella sativa oil on gastric secretion and ethanol
induced ulcer in rats. J Ethnopharmacol 72:299–304
el-Daly ES (1998) Protective effect of cysteine and vitamin E, Crocus sativus and Nigella sativa extracts on cisplatin
induced toxicity in rats. J Pharm Belg 53:87–95
El-Harairy MA, Gabr MG, El-Ayouty SA et al (2006) Effect of feeding level and replacement of Nigella sativa meal in
diet of Rahmani ewe lambs on: 2. Onset of puberty, oestrous activity and conception rate. Egypt J Sheep Goat Desert
Anim Sci 1:171–186
El-Sayed AAAM, Hussiney HA, Yassa AI (1997) Constituents of Nigella sativa oil and evaluation of its inhibitory effect
on growth and aflatoxin production by Aspergillus parasiticus. Dtsch Lebensm Rundsch 93:149–152
El-Shayeb NMA, Mabrouk SS (1984) Utilization of some edible and medicinal plants to inhibit aflatoxin formation. Nutr
Rep Int 29:273–282
El-Tahir KEH, Ashour MMS, Al-Harbi MM (1993) The respiratory effects of the volatile oil of the black seed in guinea
pigs – elucidation of the mechanism of action. Gen Pharmacol 24:1115–1122
Farah IO, Begum RA (2003) Effect of Nigella sativa and oxidative stress on the survival pattern of MCF-7 breast
cancer cells. Biomed Sci Instrum 39:359–364
Ferdous AJ, Islam SN, Ahsan M et al (1992) In vitro antibacterial activity of the volatile oil of Nigella sativa seeds
against multiple drug resistant isolates of Shigella species and isolates of Vibrio cholera and Escherichia coli. Phytother
Res 6:137–140
Forouzanfar F, Bazzaz BSF, Hosseinzadeh H (2014) Black cumin (Nigella sativa) and its constituent (thymoquinone): a
review on antimicrobial effects. Iran J Basic Med Sci 17:929–938
Gialni AH, Shaheen F, Shakir T (2001) Thymol lowers blood pressure through blockade of calcium channels. Fund Clin
Pharmacol 15:163
Gilani AH, Aziz N, Khurram IM, Chaudhary KS et al (2001) Bronchodilator, spasmolytic and calcium antagonist
activities of Nigella sativa seeds (Kalonji): a traditional herbal product with multiple medicinal uses. J Pak Med Assoc
51:115–120
Gilani A, Jabeen Q, UllahkhanM(2004) A review of medicinal uses and pharmacological activities of Nigella sativa. Pak
J Biol Sci 7:441–451
Goreja WG (2003) Black seed: nature’s miracle remedy. Amazing Herbs Press, New York
Hadi NA, Ashor AW (2010) Nigella sativa oil lotion 20% vs. Benzoyl peroxide lotion 5% in the treatment of mild to
moderate acne vulgaris. Iraq Postgrad Med J 9:371–376
Hanafy MS, Hatem ME (1991) Studies on the antimicrobial activity of Nigella sativa seed (black cumin). J
Ethnopharmacol 34:275–327
Hannan A, Saleem S, Chaudhary S et al (2008) Antibacterial activity of Nigella sativa against clinical isolates of
methicillin resistant Staphylococcus aureus. J Ayub Med Coll Abbottabad 20:72–74
Hosseini M, Mohammadpour T, Karami R et al (2015) Effects of the hydroalcoholic extract of Nigella sativa on
scopolamine-induced spatial memory impairment in rats and its possible mechanism. Chin J Integr Med 21:438–444
Ibraheem NK, Ahmed JH, Hassan MK (2010) The effect of fixed oil and water extracts of Nigella sativa on sickle cells:
an in vitro study. Singapore Med J 51:230–234
Islam SK, Ahsan M, Hassan CM et al (1989) Antifungal activities of the oils of Nigella sativa seeds. Pak J Pharm Sci
2:25–28
Islam MH, Ahmad IZ, Salman MT (2013) Antibacterial activity of Nigella sativa seed in various germination phases on
clinical bacterial strains isolated from human patients. E3 J Biotechnol Pharm Res 4:8–13
Jawad HA, Azhar YI, Khalil IAH (2014) Evaluation of efficacy, safety and antioxidant effect of Nigella sativa in patients
with psoriasis: a randomized clinical trial. J Clin Exper Invest 5:186–193
Kalat JW (2007) Biological psychology, 9th edn. Thomson Wadsworth, Toronto

181
 Kanter M, Coskun O, Korkmaz A et al (2004) Effects of Nigella sativa on oxidative stress and beta-cell damage in
streptozotocin-induced diabetic rats. Anat Rec A Discov Mol Cell Evol Biol 279:685–691
Kanter M, Demir H, Karakaya C et al (2005) Gastroprotective activity of Nigella sativa L oil and its constituent,
thymoquinone against acute alcohol-induced gastric mucosal injury in rats. World J Gastroenterol 11:6662–6666
Khan A, Khuwaja G, Khan MB et al (2008) Effect of thymoquinone on streptozotocin model of cognitive impairment in
rats. Ann Neurosci 15:94
Khanna Y, Zaidi FA, Dandiya PC (1993) CNS and analgesic studies on Nigella sativa. Fitoterapia 64:407–410
Khare CP (2004) Encyclopedia of Indian medicinal plants. Springer, New York
Kocyigit Y, Atamer Y, Uysal E (2009) The effect of dietary supplementation of Nigella sativa L. on serum lipid profile in
rats. Saudi Med J 30:893–896
Kokoska L, Havlik J, Valterova I et al (2008) Comparison of chemical composition and antibacterial activity of Nigella
sativa seed essential oils obtained by different extraction methods. J Food Prot 71:2475–2480
Kruk I, Michalska T, Lichszteld K et al (2000) The effect of thymol and its derivatives on reactions generating reactive
oxygen species. Chemosphere 41:1059–1064
Lado CM, Then I, Varga ES et al (2004) Antioxidant property of volatile oils determined by ferrous reducing agent. Z
Naturforsch 59c:354–358
Mabrouk GM, Moselhy SS, Zohny EM et al (2002) Inhibition of methylnitrosourea induced oxidative stress and
carcinogenesis by orally administered bee honey and Nigella grains in Sprague Dawley rats. J Exp Clin Cancer Res
21:341–346
Malhotra SK (2012) Nigella. In: Handbook of herbs and spices, 2nd edn. Woodhead Publishing, Cambridge, pp 391–
416
Mathur ML, Gaur J, Sharma R et al (2011) Antidiabetic properties of a spice plant Nigella sativa. J Endocrinol Metab
1(1):1–8
Meddah B, Ducroc R, El-Abbes-Faouzi M et al (2009) Nigella sativa inhibits intestinal glucose absorption and improves
glucose tolerance in rats. J Ethnopharmacol 21:419–424
Medenica R, Janssens J, Tarsenko A et al (1997) Anti-angiogenic activity of Nigella sativa plant extract in cancer
therapy. Proc Annu Meet Am Assoc Cancer Res 38:A1377
Merfort I, Wray V, Barakat HH et al (1997) Flavonol triglycosides from seeds of Nigella sativa. Phytochemistry 46:359–
363
Mofleh IAA, Alhaider AA, Mossa JS et al (2008) Gastroprotective effect of an aqueous suspension of black cumin
Nigella sativa on necrotizing agents-induced gastric injury in experimental animals. Saudi J Gastroenterol 14:128–134
Moretti A, Antuono D, Fi Lippo L et al (2004) Essential oil of Nigella sativa L. and Nigella damascena L. seed. J Essent
Oil Res 16:182–183
Morikawa T, Xu F, Kashima Y et al (2004a) Novel dolabellane type diterpene alkaloid with lipid metabolism promoting
activities from the seeds of Nigella sativa. Org Lett 6:869–872
Morikawa T, Xu F, Ninomiya K et al (2004b) Nigellamines A3, A4, A5 and C ne dolabellane type diterpene alkaloid with
lipid metabolism promoting activities from the Egyptian medicinal food black cumin. Chem Pharm Bull 52:494–497
Musa D, Dilsiz N, Gumushan H, Ulakoglu G et al (2004) Antitumor activity of an ethanol extract of Nigella sativa seeds.
Biol Brat 59:735–740
Nagi MN, Mansour MA (2000) Protective effect of thymoquinone against doxorubicin induced cardiotoxicity in rats: a
possible mechanism of protection. Pharmacol Res 41:283–289
Nagwa M, El-Sawi, Hana GM (2006) Effect of Nigella sativa and activated charcoal as antioxidant on verrucarin
induced hepatotoxicity in male rats. Adv Phytomed 2:133–153
Nickavara B, Mojaba F, Javidniab K et al (2003) Chemical composition of the fixed and volatile oils of Nigella sativa L.
from Iran. Z Naturforsch 58c:629–631
Omar A, Ghosheh S, Abdulghani A et al (1999) High performance liquid chromatographic analysis of the
pharmacologically active quinones and related compounds in the oil of the black seed. J Pharm Biomed Anal 19:757–
762
Omojate GC, Enwa FO, Jewo AO et al (2014) Mechanisms of antimicrobial actions of phytochemicals against enteric
pathogens – a review. J Pharm Chem Biol Sci 2:77–85
Ozcan M (1998) Inhibitory effects of spice extracts on the growth of Aspergillus parasiticus. NRRL2999 strain. Z
Lebensm Unters Forsch 207:253–255
Parhizkar S, Latiff LA, Parsa A (2016) Effect of Nigella sativa on reproductive system in experimental menopause rat
model. Avicenna J Phytomed 6:95–103
Perveen T, Haider S, Kanwal S (2009) Repeated administration of Nigella sativa decreases 5-HT turnover and
produces anxiolytic effects in rats. Pak J Pharm Sci 22:139–144
Rahman A-U, Malik S, Sadiq HS et al (1995) Nigellidine – a new indazole alkaloid from the seeds of Nigella sativa.
Tetrahedron Lett 36:1993–1996
Rajkapoor B, Anandan, Jayakar B (2002) Anti-ulcer effect of Nigella sativa L. against gastric ulcers in rats. Curr Sci
82:177–179
Ramadan RF, Morsel JT (2002) Characterization of phospholipid composition of black cumin (Nigella sativa L.) seed
oil. Nahrung 46:240–244

182
 Raza M, El-Hadiyah TM, Al-Shabanah OA (2006) Nigella sativa seed constituents and anxiety relief in experimental
models. J Herbs Spices Med Plants 12:153–164
Rchid H, Chevassus H, Nmila R et al (2004) Nigella sativa seed extracts enhance glucose-induced insulin release from
rat-isolated Langerhans islets. Fundam Clin Pharmacol 18:525–529
Salim EI (2010) Cancer chemopreventive potential of volatile oil from black cumin seeds, Nigella sativa L., in a rat
multiorgan carcinogenesis bioassay. Oncol Lett 1:913–924
Sayeed Bin MS, Shams T, Fahim Hossain S et al (2014) Nigella sativa L. seeds modulate mood, anxiety and cognition
in healthy adolescent males. J Ethnopharmacol 152:156–162
Shafei MN, Boskabady MH, Parsaee H (2005) Effect of aqueous extract from Nigella sativa L. on guinea pig isolated
heart. Indian J Exp Biol 43:635–639
Sharma PC, Yelne MB, Dennis TJ (2005) Database on medicinal plants used in Ayurveda, vol 6. CCRAS, New Delhi,
pp 420–440
Sharma NK, Ahirwar D, Jhade D et al (2009) Medicinal and pharmacological potential of Nigella sativa: a review.
Ethnobot Rev 13:946–955
Sokmen A, Jones BM, Erturk M (1997) The in vitro antibacterial activity of Turkish medicinal plants. J Ethnopharmacol
67:79–86
Swamy SMK, Tan BHH (2000) Cytotoxic and immunopotentiating effects of ethanolic extract of Nigella sativa. J
Ethnopharmacol 70:1–7
Tahan M, Bayram I (2011) Effect of using black cumin (Nigella sativa) and parsley (Petroselinum crispum) in laying
quail diets on egg yield, egg quality and hatchability. Archiva Zootechnica 14(4):39–44
Tasawar Z, Siraj Z, Ahmad N et al (2011) The effects of Nigella sativa (Kalonji) on lipid profile in patients with stable
coronary artery disease in Multan, Pakistan. Pak J Nutr 10:162–167
Tousson E, El-Moghazy M, El-Atrsh E (2011) The possible effect of diets containing Nigella sativa and Thymus vulgaris
on blood parameters and some organs structure in rabbit. Toxicol Ind Health 27:107–116
Vafaee F, Hosseini M, Hassanzadeh Z et al (2015) The effects of Nigella sativa hydro-alcoholic extract on memory and
brain tissues oxidative damage after repeated seizures in rats. Iran J Pharm Res 14:547–557
Vuorelaa P, Leinonenb M, Saikkuc P et al (2004) Natural products in the process of finding new drug candidates. Curr
Med Chem 11:1375–1389
Weiss EA (2002) Spices crops. CABI, Wallingford, pp 356–360
Yaman I, Durmus AS, Ceribasi S et al (2010) Effects of Nigella sativa and silver sulfadiazine on burn wound healing in
rats. Vet Med 55:619–624
Zaghlol DAA, Kamel ES, Mohammed DS et al (2012) The possible toxic effect of different doses of Nigella sativa oil on
the histological structure of the liver and renal cortex of adult male albino rats. Egypt J Histol 35:127–136
Zanouny AI, Abd-El moty AKI, El-Barody MAA et al (2013) Effect of supplementation with Nigella sativa seeds on some
blood metabolites and reproductive performance of Ossimi male lambs. Egypt J Sheep Goats 8:47–56
Zeweil HS, Ahmed MH, El-Adawy MM (2008) Evaluation of substituting nigella seed meal as a source of protein for
soybean meal in diets of New Zealand white rabbits. In: 9th World Rabbit Congress, 10–13 June, Verona, pp 863–868

183
 Acacia nilotica (Babool)
Ramesh C. Gupta, Robin B. Doss, Rajiv Lall, Anita Sinha, Ajay
Srivastava, and Jitendra K. Malik

Resumo
A importância das plantas de Acacia na alimentação animal e na prevenção e tratamento
de doenças humanas e animais é reconhecida há séculos. O extrato de babool, obtido da
Acacia nilotica (também conhecida como árvore de goma arábica), é muito rico em
metabólitos secundários, como taninos, flavonóides, alcalóides, terpenos, ácidos graxos,
etc. Esses compostos exercem ação antioxidante, antiinflamatória, anti-helmíntica,
antidiarreica, antiplasmódico, anti-hipertensivo, antibacteriano, antifúngico, antidiabético,
antiplaquetário agregador, antiplasmódico, antimutagênico, anticâncer, inibidor da
acetilcolinesterase, diurético, antipirético, analgésico e muitos outros efeitos. Este capítulo
descreve vários aspectos do babool com ênfase especial em seu valor nutricional e
aplicações na prevenção e tratamento de doenças em animais.

Palavras-chave Nutracêuticos · Nutracêuticos veterinários · Babool · Saúde animal

R. C. Gupta · R. B. Doss – Toxicology Department, Breathitt Veterinary Center, Murray State University,
Hopkinsville, KY, USA e-mail: rgupta@murraystate.edu
R. Lall · A. Sinha · A. Srivastava – Vets Plus Inc., Menomonie, WI, USA
J. K. Malik – Division of Pharmacology and Toxicology, Indian Veterinary Research Institute, Dehradun,
Uttarakhand, India

1. Introdução
Babool (Acacia nilotica) é uma árvore tropical, que pode ter de 15 a 18 m de altura e 2 a 3
m de diâmetro. A árvore é nativa dos subcontinentes indiano e africano. Outros nomes
para babool são babul, booni, babbula, espinho egípcio, acácia egípcia, goma arábica
indiana, mimosa espinhosa, acácia de cayenne, acácia espinhosa, kikar, árvore sant,
goma arabica, gommier rouge e muitos outras. Acacia nilotica tem vários sinônimos, como
Acacia arabica (Lam.) Wild, Acacia arabica var. cupressiformis J. Stewart, Acacia arabica
var. Indica Benth., Acacia arabica var. tomentosa Benth., Acacia benthamii Rochebr.,
Acacia nilotica subsp. adansonii (Guill. e Perr.) Brenan, Acacia scorpioides (L.) W. Wight,
Acacia subalata Vatke, Acacia vera Wild., e muitos outros.

Babool tem muitos compostos químicos, incluindo taninos, flavonóides, alcalóides,

terpenos, ácidos graxos, etc. Esses compostos exercem ação antioxidante,
184
antiinflamatória, anti-helmíntica, antidiarreica, antiespasmódica, anti-hipertensiva,
antibacteriana, antiviral, antifúngica, antidiabética, antiplaquetária agregadora,
antiplaquetária, antimutagênico, anticâncer, inibidor da acetilcolinesterase, diurético,
antipirético, analgésico e muitos outros efeitos biológicos e farmacológicos (Rather et al.
2015). Atualmente, muitos fitoconstituintes desta planta são usados como drogas
terapêuticas, enquanto outros estão sob investigação para novos usos. Este capítulo
descreve vários aspectos do babool, especialmente seu valor nutricional e efeitos
biológicos e farmacológicos na saúde e doenças dos animais.

2. Componentes químicos em Babool

Babool (Acacia nilotica) é de significativa importância nutricional, nutracêutica e
farmacêutica. Abbasian et al. (2015) relataram que as sementes maduras e secas de
babool contêm potássio, ferro, zinco, cobre e manganês (2,1, 203,1, 108,7, 322,7 e 1,09 g
/100 g, respectivamente). Os teores de óleo, proteína bruta e fibra bruta nas sementes
foram de 4,1, 25,3 e 28,4% (peso fresco), respectivamente. Pelo menos 66 compostos
químicos foram identificados em várias partes do babool (Rather et al. 2015). Os
principais alcalóides e aminas presentes incluem dimetil triptamina, 5-metoxi dimetil
triptamina e N-metil triptamina. O extrato contém D-pinitol, kaempferol, ácido gálico, ácido
elágico, (+/-) catequina, (-) epigalocatequina e rutina. O extrato de Babool tem um
composto antiinflamatório, o esteróide androstene. Além disso, o extrato contém ciclitóis,
ácidos graxos (ácido palmítico, ácido esteárico, ácido araquídico, ácido oleico, ácido
linoleico e ácido coronarico), óleos de sementes, aminoácidos não proteicos, terpenos
(niloticane, lupenona e lupeol), saponinas, taninos hidrolisáveis, flavonóides e niloticane
(Malviya et al. 2011). O extrato também contém um conteúdo fenólico total variando de
9,2 a 16,5% (Bushra et al. 2007) e taninos e ácido gálico de 24 a 42% (Rahaman 2010).
Em alguns estudos, o conteúdo de tanino em A. nilotica é relatado em 18–27%, mas em
A. nilotica sub sp. indica, o nível pode chegar a 50% (Kumari et al. 2014). Descobriu-se
que os frutos de babool contêm ácido gálico, ácido m-digálico, (+)-catecina, ácido
clorogênico, galolilado flaven-3, 4-diol robidandiol (7, 3, 4, 5-tetrahidroxiflavan-3,4-diol),
kaempferol, umbeliferona, esteróide androsteno, D-pinitol, carboidrato e éster de
catequina-5-galoil (Singh et al. 2009a, b; Prathapa Reddy et al. 2018).

Os metabólitos secundários descritos em Acacia nilotica Delile incluíam naringenina,

niloticane e vários derivados de galoil e catequina isolados da casca (Khalid et al. 1989;
Malan 1991; Eldeen et al. 2010), um esteróide androsteno das partes aéreas (Chaubal et
al. 2003), flavonóis glicosídeos das sementes (Chauhan et al. 2000), triterpenos botulina e
185
β-amirina das raízes (Prakash e Garg 1981), arabinobioses da goma (Chalk et al. 1968) e
acanilol A e B (Ahmadu et al. 2009), junto ao conhecido triterpeno lupenona, da casca do
caule. Para obter mais detalhes sobre os constituintes químicos em diferentes partes do
babool, os leitores devem consultar as publicações recentes (Rana 2018; Prathapa Reddy
et al. 2018).

3. Valor Nutricional do Babool

Nos subcontinentes da Índia e da África, e outras regiões tropicais, babool (Acacia
nilotica) é usado como uma fonte barata de proteína para gado (Mlambo 2003; Mousa
2011; Paswan et al. 2016). Babool contém cerca de 13% de proteína bruta e cerca de
87% ou mais de matéria orgânica. Bargali e Bargali (2009) descobriram que a fruta babool
(vagens e sementes) continha 12% de proteína, 2% de gordura, 15,36% de fibra bruta,
5,26% de cinzas, 5,45% de taninos, 0,26% de fósforo, 0,64% de cálcio, 0,13% de
magnésio, 1,28 % potássio, 6,43% cobre, 28,50 mg/kg de zinco, 2650 mg/kg de
manganês e 100 mg/kg de ferro. Recentemente, Abdullah et al. (2018) avaliaram o efeito
das vagens de babool na digestibilidade de nutrientes, balanço de nitrogênio e parâmetros
do licor ruminal (pH, contagem total de protozoários, concentração de proteína e atividade
enzimática) em carneiros. Os resultados revelaram que a inclusão de vagens de babool
na taxa de 1,5 ou 3,0% do concentrado (equivalente a uma concentração de tanino de 2,9
e 4,6 g/kg) por 3 semanas melhorou significativamente o consumo total de ração e a
digestibilidade da proteína bruta, enquanto a digestibilidade da matéria seca e da fibra
bruta diminuiu significativamente. Os valores de ingestão de nitrogênio e nitrogênio retido
aumentaram significativamente com o suplemento de babool. Os carneiros que
receberam babool apresentaram baixa contagem de protozoários, concentração de
proteínas e enzimas (a-amilase, celulase e protease) no conteúdo ruminal, sem alteração
do pH. Concluiu-se que o suplemento de babool pode ser usado como protetor natural de
proteína em ruminantes, formando complexos tanino/proteína no rúmen para maximizar a
disponibilidade de aminoácidos no trato digestivo inferior. A importância dos taninos de A.
nilotica e outras plantas de acácia na ração de ruminantes está bem documentada
(Mangan 1988; Scalbert 1991; Mlambo 2003; Mueller 2006). Além disso, os frutos de
babool na proporção de 1,5 ou 3,0% podem aumentar a digestibilidade da proteína, bem
como o nitrogênio retido no corpo. Abbasian et al. (2015) encontraram níveis significativos
de minerais nas sementes de babool. Portanto, as vagens/sementes de babool podem ser
recomendadas como um suplemento dietético com alto teor de proteína e minerais
essenciais para o gado.
186
4. Efeitos Farmacoterápicos
As folhas, raízes, cascas, flores, vagens/sementes, ramos e extratos de goma de babool
têm sido usados em vários medicamentos ayurvédicos, Unani, chineses, egípcios e outros
por séculos. Em geral, as acácias são muito ricas em compostos secundários bioativos
que podem ser indicados na promoção da saúde e prevenção e tratamento de
enfermidades humanas e animais. Esse fato pode ser comprovado com alguns exemplos,
como triterpenóides e saponinas no câncer; glucosídeos como diuréticos e natriuréticos;
saponinas, taninos e flavonóides em distúrbios digestivos; polifenóis como antioxidantes;
e triptamina, taninos, saponinas e ácidos orgânicos como antipllasmódicos (Saini et al.
2008). Embora A. nilotica tenha muitas propriedades medicinais, algumas delas são
descritas aqui resumidamente, enquanto outras são listadas na Tabela 1.

Tabela 1 Fitoconstituintes em babool (Acacia nilotica) e suas propriedades biológicas e

farmacológicas
Atividade
Fitoconstituintes bioativos Referências
biológica/farmacológica
Singh et al. (2008, 2009a), Kalaivani e
Kaempferol, umbeliferona, ácido Mathew (2010), Rajbir et al. (2010), El-
Antioxidante e eliminador
gálico, ácido elágico, Toumy et al. (2011), Abuelgassim (2013a),
de radicais livres
epicatequina, rutina, taninos Rasool et al. (2013), Sokeng et al. (2013),
Mohan et al. (2014)
Androstene, peltoginoides Dafallah e Al-Mustafa (1996), Chaubal et al.
(acanilol A e B), diterpeno (2003), Ahmadu et al. (2009), Eldeen et al.
Antiinflamatório
cassane (niloticane), triterpeno (2010), Jigam et al. (2010), Sokeng et al.
(lupenona) (2013)
Flavonóides, alcalóides,
Imunoestimuladores fenólicos, esteróides, Umaru et al. (2016)
terpenóides, saponinas e taninos
Bhargava et al. (1998), Mustafa et al.
(1999), Hussein et al. (2000), Elizabeth et al.
(2005), Banso (2009), Mohamed et al.
Terpenóides, polifenóis, taninos, (2010), Pai et al. (2010), Vijayasanthi et al.
Antibacterianos, antivirais alcalóides, saponinas, (2011), Fatima et al. (2012), Mbatchou e
e antifúngicos glicosídeos, flavona, quercetina Oumar (2012), Oladosu et al. (2013), Raheel
3-galato, nilobamato et al. (2013), Bashir et al. (2014), Dev et al.
(2014), Rai et al. (2014), Shanker et al.
(2014), Sharma et al. (2014a, b), Srivastava
et al. (2014), Abbas e Elhag (2015)
Pai et al. (2010), Sharma et al (2014)
Antidiarrheal and anti-helmintic Tannins
Periodontite e otite Taninos
Agunu et al. (2005), Misar et al. (2008),
Bachaya et al. (2009)
El-Tahir et al. (1999), Jigam et al. (2010), Alli
Antiplasmódicos Alcalóides, taninos, terpenóides
et al. (2011, 2016), Bapna et al. (2014)
Shah et al. (1997), Liu et al. (2005), Ahmad
Antidiabético,
Taninos, ácido tânico, et al. (2008), Asad et al. (2011), Omara et al.
hipoglicêmico e
kaempferol, umbeliferona (2012), Abuelgassim (2013b), Kumari et al.
antiagregante plaquetário
(2014), Roozbeh et al. (2017)
Anti-hipertensivo e
Triterpenóides Gilani et al. (1999), Jangade et al. (2014)
antiplasmódico

187
 Tabela 1 Fitoconstituintes em babool (Acacia nilotica) e suas propriedades biológicas e
farmacológicas
Anti-
hipercolesterolêmico / Saponinas, glicosídeos, tanino Ahmad et al. (2008), Tanko et al. (2014)
hipolipidêmico
Polissacarídeos, ácidos Dafallah e Al-Mustafa (1996), Jigam et al.
Antipirético e analgésico
orgânicos, flavonóides (2010), Alli et al. (2014), Safari et al. (2016)
Gastroprotetor Polifenóis Bansal e Goel (2012)
Flavonóides, alcalóides,
Hepatoprotetor fenólicos, esteróides, Kannan et al. (2013)
terpenóides, saponinas, taninos
Saponinas, alcalóides,
Diurético Krishna et al. (2011)
glicosídeos
Antiasmático Sonibare e Gbile (2008)
Anti-acetilcolinesterase Diterpeno niloticane Eldeen et al. (2005), Krowch e Okello (2009)
Meena et al. (2006), Singh et al. (2009b),
Antimutagênico e Polifenóis, γ-sitosterol,
Sakthivel et al. (2012), Sundarraj et al.
anticâncer galocatequina-5-0-galato
(2012)
Liberação de prolactina e Sawadogo et al. (1989), Lompo-Ouedraogo
produção de leite et al. (2004)
Moluscicidas Taninos fenólicos Hussein Ayoub (1982), Hussein (1982)
Larvicida p-Pinitol Chaubal et al. (2005)
Quelação de metais Compostos fenólicos Singh et al. (2009a)

4.1 Antioxidante e Antiinflamatório

Os extratos de várias partes do babool contêm muitos constituintes químicos que

possuem quelação de metais, eliminação de radicais livres e propriedades antioxidantes.
A atividade antioxidante pode ser atribuída ao kaempferol, umbeliferona e muitos
compostos fenólicos presentes nos extratos de babool. Em estudos in vitro, Singh et al.
(2008, 2010) demonstraram que o kaempferol e a umbeliferona exibiram atividade
antioxidante de forma dose dependente. Singh et al. (2009a) também relataram os efeitos
de eliminação de radicais livres e quelação de metal dos extratos de vagem verde de
babool.

Os frutos e sementes de Babool são uma fonte facilmente acessível de antioxidantes

naturais, que podem ser usados como suplemento para auxiliar na terapia de doenças
mediadas por radicais livres, como câncer, diabetes, inflamação, etc. (Amos et al. 1999;
Pareek e Choudhry 2013). Em vários outros estudos, foi relatado que os extratos de
babool têm forte atividade antioxidante e de eliminação de radicais livres, o que pode ser
devido aos grupos hidroxila existentes nos compostos fenólicos (Kalaivani e Mathew
2010; Sultana et al. 2007; Singh e Arora 2007). Vadivel e Biesalski (2012) também
descobriram que o extrato metanólico das sementes de A. nilotica contém um conteúdo
fenólico livre total de 14,57 ± 1,69 g equivalente de catequina/100 g de extrato. Os níveis
188
de poder antioxidante redutor férrico (FRAP, 1840 mmol Fe 2+/mg de extrato), inibição da
degradação do β-caroteno (53,26%) e atividade de eliminação de radicais contra DPPH
(64,91%) e radicais superóxidos (53,23%) foram relatados (revisado em Pareek e
Choudhry 2013). Alguns estudos também forneceram evidências de que, entre todos os
extratos, o extrato de acetona exibiu a maior atividade antioxidante, e isso estava
relacionado ao conteúdo fenólico total (Sundaram e Mitra 2007; Rather et al. 2015).

Fitoconstituintes, como androsteno, peltoginoides (acanilol A e B) e triterpeno (lupenona),

presentes na casca do caule de Acacia nilotica (L.) Delile são relatados por exercer
atividade antiinflamatória (Ahmadu et al. 2009). Ahmadu et al. (2009) testaram acanilol A e
B como inibidores da quinase contra CDK1, GSK3, CK1 e DYRK1A e encontraram
acanilol B como um inibidor de DYRK1A com um valor de IC 50 de 19 μg/ml e 3,77 M. Eldeen et al.
(2010) demonstraram que cassane diterpeno niloticane do extrato da casca exibiu efeito
inibitório do COX-1 e COX-2 com valores de IC 50 de 3,6 μg/ml e 3,77 M e 189 μg/ml e 3,77 M, respectivamente.
Chaubal et al. (2003) atribuíram atividade antiinflamatória ao 3-β-acetoxi-17-β-
hidroxiandrost-5-eno presente nas partes aéreas do babool. Em estudos in vivo, modelo
de edema de pata induzido por carragenina ou formalina e modelo de granuloma induzido
por pellet de algodão em ratos, o extrato de A. nilotica reduziu significativamente a reação
inflamatória (Dafallah e Al-Mustafa 1996; Sokeng et al. 2013; Safari et al. 2016).

4.2 Antimicrobiano

As folhas, flores, frutos/sementes, cascas e raízes de A. nilotica foram extensivamente

estudadas quanto à sua atividade antimicrobiana (antibacteriana, antiviral e antifúngica).
Banso (2009) relatou que o extrato da casca do caule da planta possuía certos
constituintes bioativos, incluindo terpenóides, taninos, saponinas e glicosídeos. A
atividade antimicrobiana dos extratos foi testada contra Streptococcus viridans,
Staphylococcus aureus, E. coli, Bacillus subtilis e Shigella sonnei. O extrato da planta
exibiu atividade antimicrobiana contra todos os microrganismos testados. B. subtilis foi
considerada a mais suscetível e Candida albicans foi a mais resistente ao extrato da
planta. A concentração inibitória mínima do extrato variou entre 35 e 50 mg/ml, enquanto a
concentração bactericida mínima variou entre 35 e 60 mg/ml. Fatima et al. (2012)
avaliaram a atividade antibacteriana da casca da folha e extratos de raiz (aquoso e
acetato de etila) de A. nilotica (L.) Del. Contra a bactéria Xanthomonas malvacearum e
descobriram que os extratos de acetato de etila da raiz parecem conter maiores
componentes antibacterianos do que os puros antibióticos (estreptomicina ou tetraciclina),
com concentração de 500 μg/ml e 3,77 g/ml. Saini et al. (2008) relataram que o extrato metanólico de
vagens de A. nilotica mostra atividade antimicrobiana contra E. coli, S. aureus e A. niger.
189
Dev et al. (2014) examinou a atividade antimicrobiana de extratos aquoso, clorofórmico,
etílico e metanólico de diferentes partes (caule, folha, semente) de A. nilotica (L.) Del.
Contra E. coli, Agrobacterium tumefaciens, Bacillus aureus, Candida glabrata e
Aspergillus niger. Apenas o extrato metanólico apresentou boa atividade contra todas as
bactérias e fungos (exceto A. niger) devido à presença de alcalóides, saponinas,
flavonóides, taninos e glicosídeos no extrato das folhas. Rani e Khullar (2004) observaram
atividade antimicrobiana moderada de metanol e extratos aquosos de A. nilotica em
relação a Salmonella typhi multirresistente.

Em alguns estudos, a atividade antimicrobiana de A. nilotica foi relatada contra patógenos

envolvidos na periodontite (incluindo Streptococcus mutans; Sharma et al. 2014a, b) e
otite (Pai et al. 2010).

Como alguns outros produtos vegetais (Vanden Berghe et al. 1986; Vlietinck e Vanden
Berghe 1991; Vlietinck et al. 1997), foi relatado que o extrato de A. nilotica exerce
atividade antiviral contra varíola aviária, doença de Newcastle e vírus da hepatite C
(Hussein et al. 2000; Mohamed et al. 2010).

A atividade antimicrobiana dos extratos de babool parece ser devida a compostos

hidrofílicos, como polifenóis, polissacarídeos, terpenóides, taninos, alcalóides, saponinas,
glicosídeos, flavona e quercetina 3-galato. A atividade antifúngica pode ser atribuída a
polifenóis e nilobamato (Bhargava et al. 1998; Mbatchou e Oumar 2012; Rai et al. 2014).

Uma formulação para mastigar odontológico ACANIL (Vets Plus Inc, Menomonie, WI,
EUA), que contém extrato de babool e curcumina branca, mostrou um grande efeito na
redução da halitose em cães. Em estudos in vitro, ACANIL mostrou uma zona de inibição
em colônias microbianas, e o efeito foi comparável à clorexidina (dados apresentados no
26º American Dental Congress 2017, Filadélfia, PA, EUA). Em estudos clínicos de prova
de conceito, ACANIL foi considerado significativamente eficaz (não publicado).

É sugerido que o extrato de babool pode ser usado como um nutracêutico antimicrobiano
em humanos e animais.

4.3 Antiplasmódicos

Foi descoberto que um bom número de extratos de plantas possui atividade

antiplasmódica (Ibrahim et al. 1991; El-Tahir et al. 1999; Alli et al. 2016). El-Tahir et al.
(1999) relataram que o extrato de acetato de etila de A. nilotica, por possuir taninos e
terpenóides, exerceu um potencial inibitório muito forte (IC 50 = 1,5 μg/ml e 3,77 g/ml) contra
Plasmodium falciparum. O extrato metanólico da semente de A. nilotica exerceu alta
atividade com um valor de IC 50 de 0,9 μg/ml e 3,77 g/ml. A casca também revelou atividade
190
antiplasmódica altamente potente, onde o extrato de metanol e o extrato de água
apresentaram valores de IC50 de 4,9 e 7,5 μg/ml e 3,77 g/ml, respectivamente. Recentemente, Alli et
al. (2016) demonstraram que uma fração particular (F-1 rica em alcalóides e fenólicos) da
raiz de A. nilotica (50 e 100 mg/kg de peso corporal) produziu uma redução significativa e
dependente da dose em camundongos infectados com Plasmodium berghei em
comparação com os controles e também aumentou significativamente o tempo de
sobrevivência dos camundongos em comparação ao grupo controle. A mesma fração
também melhorou a anemia induzida por malária, melhorando o PCV em camundongos
tratados. No entanto, esta fração de A. nilotica não foi capaz de reverter a temperatura
corporal reduzida e a perda de peso associada à malária em roedores. Em vários outros
estudos, raízes, galhos e outras partes de extratos de A. nilotica mostraram forte potencial
antiplasmódico (Alli et al. 2011; Bapna et al. 2014). Levando todos os resultados em
consideração, o extrato de A. nilotica (particularmente a Fração-1) parece ser uma terapia
alternativa aos medicamentos convencionais que apresentam um problema de resistência
aos medicamentos.

4.4 Anticolinesterase

Eldeen et al. (2005) relataram que A. nilotica possui propriedades anticolinesterásicas.

Krowch e Okello (2009) demonstraram ainda que a atividade da raiz de A. nilotica em uma
extração aquosa (IC50 0,079 mg/ml) é cerca de dez vezes mais potente do que com folha
(IC50 0,7 e 0,5 mg/ml para extratos de acetato de etila e etanol, respectivamente) e casca
(IC50 extração de 1,3 mg/ml com acetato de etila). A cinética de inibição da
acetilcolinesterase revelou uma inibição do tipo misto dependente da concentração (não
competitiva/não competitiva), semelhante à encontrada com a galantamina. O extrato de
A. nilotica não foi considerado um inibidor de AChE tão forte quanto a galantamina. No
entanto, por ter propriedades antioxidantes, antiinflamatórias e de acetilcolinesterase
(AChE), A. nilotica poderia fornecer a base como um novo tratamento poli farmacológico
da síndrome de cognição crônica em cães e gatos idosos.

4.5 Antidiabético, Hipoglicêmico e Hipolipemiante

Atualmente, uma variedade de tratamentos com ervas são recomendados para o controle
do diabetes tipo 2. Karau (2013) relatou que o extrato aquoso de A. nilotica exerce um
efeito antidiabético que pode ser devido à liberação de insulina das células β
pancreáticas. Babool é conhecido por ter um conteúdo muito alto de taninos, e o ácido
tânico estimula o transporte de glicose e inibe a diferenciação dos adipócitos, produzindo
assim um efeito antidiabético (Liu et al. 2005; Kumari et al. 2014). Em coelhos diabéticos
induzidos por aloxana, o extrato de metanol de vagens de A. nilotica (400 mg/kg de peso
191
corporal) mostrou reduções significativas na glicose sanguínea, colesterol total no plasma,
triglicerídeos e lipídios de baixa densidade. Em um estudo semelhante conduzido em
ratos diabéticos induzidos por aloxana, o extrato metanólico dos frutos desta planta não
reduziu significativamente a glicose sérica, mas reduziu os níveis séricos de triglicerídeos
e colesterol de lipoproteína de baixa densidade (Abuelgassim 2013a, b). No entanto, no
modelo de rato diabético induzido por estreptozotocina, o extrato metanólico da vagem de
A. nilotica (150 e 300 mg/kg peso corporal/dia por 60 dias) reduziu os níveis de glicose no
sangue, restaurou os níveis de uréia sérica e creatinina, bem como a arquitetura
histopatológica normal do rim (Omara et al. 2012). Asad et al. (2011) descobriram que o
extrato da folha de A. nilotica (300 mg/kg de peso corporal) produziu efeitos
hipoglicêmicos e de agregação antiplaquetária em ratos diabéticos induzidos por
estreptozotocina.

Pareek e Choudhry (2013) avaliaram o efeito do pó de vagens de babool (2, 3 ou 4 g/dia)

sobre a glicose no sangue e os níveis de lipídios em indivíduos com diabetes tipo 2. Após
4 semanas de tratamento, os pacientes apresentaram redução da glicemia de jejum (10–
19%), pós-prandial (7–35%), triglicerídeos (6–18%), LDL (7–10%), colesterol total (5–11
%), VLDL (7–15%), colesterol HDL (5–10%) e pressão arterial (8–13%). Mudanças
significativas ocorreram na glicose pós-prandial, triglicerídeos, colesterol VLDL e pressão
arterial dos indivíduos que receberam a dose de 4 g/dia. Em vários outros estudos,
verificou-se que os produtos da vagem de babool exercem efeitos antidiabéticos,
hipoglicêmicos e hipolipemiantes (Ahmad et al. 2008; Rahaman 2010; Roozbeh et al.
2017). O efeito antihiperglicêmico observado dos extratos de A. nilotica no diabetes pode
ser devido a vários mecanismos: (1) aumento da liberação de insulina das células β
pancreáticas, (2) efeito antioxidante, (3) efeito antiinflamatório e (4) aumento do transporte
da glicose para os tecidos da circulação. Em conclusão, pode-se sugerir que uma dieta
suplementada com produtos babool produzirá efeitos antidiabéticos e reduzirá os fatores
de risco associados a doenças cardiovasculares e renais.

4.7 Anti-hipertensivo e antiespasmódico

Gilani et al. (1999) relataram que um extrato de metanol de vagens de babool causou uma
queda dependente da dose (3-30 mg/kg) na pressão arterial, e o efeito observado foi
independente da estimulação do receptor muscarínico ou bloqueio do receptor
adrenérgico. Nos estudos in vitro, esses pesquisadores descobriram que o extrato da
planta produziu um efeito inibitório dependente da dose (0,3–3 mg/ml) na força e na taxa
de contrações espontâneas em átrios de cobaias. Da mesma forma, inibiu a contração
espontânea do jejuno de coelho de uma forma dependente da concentração (0,1–3
192
mg/ml). O extrato inibiu as contrações induzidas por K + no jejuno de coelho em uma faixa
de concentração semelhante, o que sugere que a ação antiespasmódica do babool é
mediada pelo bloqueio dos canais de cálcio, e isso também pode ser responsável pelo
efeito anti-hipertensivo.

4.8 Antimutagênico e Anticâncer

Este efeito anti-hipertensivo parece ser independente da estimulação do receptor

muscarínico da acetilcolina ou do bloqueio do receptor adrenérgico. O mesmo extrato
também é conhecido por exercer atividade antiespasmódica (Gilani et al. 1999). Lompo-
Ouedraogo et al. (2004) demonstraram que um extrato aquoso de babool estimulou a
produção de leite (59% maior) e a liberação de prolactina em ratas. Consequentemente,
isso poderia ser útil para animais e mulheres em lactação. Na África, o extrato de babool
tem sido usado para tosse, asma, diarréia, disenteria, conjuntivite, doenças de pele,
tumores, câncer e tratamento da hanseníase, e no Egito para tratamento de diabetes
mellitus.

Em um estudo recente, Umaru et al. (2016) trataram ratos com extrato aquoso de babool
pod (50, 100, 200 e 400 mg/kg) diariamente por 21 dias e descobriram que o extrato tinha
propriedades imunoestimulantes e anti-hemostáticas.

Outras reivindicações etnofarmacológicas incluem antimicrobiano (antibacteriano,

antifúngico, antimalárico), antidiarreico, antioxidante, antiespasmódico, anti-hipertensivo,
antidiabético, antimutagênico, antiinflamatório, analgésico, antiplaquetário, anticâncer, e
atividades moluscicidas (Amos et al. 2015; Rajvaidya et al. 2015). Tem sido usado como
um anti-helmíntico na medicina etnoveterinária (Bachaya et al. 2009). Um extrato
etanólico de 50% da casca do caule em uma triagem biológica preliminar exibiu atividade
antiprotozoária contra Entamoeba histolytica em cães e gatos.

5. Toxicidade e Segurança
Al-Mustafa (2000) encontrou um baixo potencial de toxicidade do extrato de babool em
ratos recebendo dieta de acácia de 2% e 8% por 2 e 4 semanas. Não houve alteração nos
biomarcadores séricos das funções hepática e renal, glicemia de jejum e triglicerídeos.
Nenhuma alteração histopatológica nas seções do fígado e nenhuma morte em animais
foram observadas. Alli et al. (2015) relataram que o extrato aquoso da raiz de Acacia
nilotica foi considerado seguro em uma única dose aguda (50, 300 e 2000 mg/kg de peso
corporal) em camundongos. O LD50 oral estimado em camundongos é de 5000 mg/kg. O
IP LD50 em camundongos foi relatado como sendo 500 mg/kg (Bhakuni et al. 1969). Em
193
um estudo subagudo de 28 dias (125, 250 e 500 mg/kg de extrato de babool) em ratos,
doses superiores a 250 mg/kg de peso corporal pareceram causar hepatotoxicidade (Alli
et al. 2015). Não houve evidência de nefrotoxicidade no estudo de toxicidade subaguda.
Esses autores sugeriram NOAEL < 250 mg/kg de peso corporal.

6. Comentários Finais e Orientações Futuras

Babool tem sido amplamente utilizado para fins polivalentes (nutricional, nutracêutico e
farmacológico) na medicina humana e animal há séculos. Diferentes partes do babool
(casca, raiz, frutos/vagens, folhas e goma) têm diferentes constituintes químicos e,
consequentemente, suas aplicações diferem nas condições de doença. A porção da raiz
da árvore é amplamente utilizada no tratamento tradicional de doenças devido à sua
ampla margem de segurança. As propriedades antioxidantes e antiinflamatórias de A.
nilotica desempenham papéis significativos na melhoria de várias doenças. Com base na
toxicidade aguda em camundongos, o extrato aquoso do extrato da raiz de babool é
seguro até uma dose de 2.000 mg/kg; e seu NOEL em ratos é relatado como < 250
mg/kg/dia. A exposição repetida em doses mais altas pode causar hepatotoxicidade.

Referências

Abbas ZTEM, Elhag WI (2015) In vitro antibacterial activity of Acacia nilotica methanolic extract against wound
infection pathogen. Am J Res Commun 3:111–121
Abbasian K, Asgarpanah J, Ziarati P (2015) Chemical composition profile of Acacia nilotica seed growing wild in south
of Iran. Orient J Chem 31(2):1027–1033
Abdullah MAM, Farghaly MM, Youssef IMI (2018) Effect of feeding Acacia nilotica pods to sheep on nutrient
digestibility, nitrogen balance, ruminal protozoa and rumen enzymes activity. J Anim Physiol Anim Nutr 102:662–669
Abuelgassim AO (2013a) Antioxidant potential of date palm leaves and Acacia nilotica fruit in comparison with other
four common Arabian medicinal plants. Life Sci J 10:3405–3410
Abuelgassim AO (2013b) Effect of Acacia nilotica fruit extract on serum glucose and lipid concentrations in alloxan-
induced diabetic rats. Pak J Biol Sci 16(21):1398–1402
Agunu A, Yusuf S, Andrew GO et al (2005) Evaluation of five medicinal plants used in diarrhea treatment in Nigeria. J
Ethnopharmacol 101:27–30
Ahmad M, Zaman F, Sharif T et al (2008) Antidiabetic and hypolipidemic effects of aqueous methanolic extract of
Acacia nilotica pods in alloxan-induced diabetic rabbits. Scand J Lab Anim Sci 35(1):29–34
Ahmadu A, Abdulkarim A, Grougnet R et al (2009) Two new peltogynoids from Acacia nilotica Delile with kinase
inhibitory activity. Planta Med 75:1–3
Alli LA, Adesokan AA, Salawu OA et al (2011) Antiplasmodial activity of aqueous root extract of Acacia nilotica. Afr J
Biochem Res 5:214–219
Alli LA, Nafiu MO, Adesokan AA et al (2014) Antipyretic and analgesic activities of aqueous extract of Acacia nilotica
root. Biokemistri 26:55–62
Alli LA, Adesokan AA, Salawu OA, Akanji MA (2015) Toxicological studies of aqueous extract of Acacia nilotica root.
Interdisc Toxicol 8 (1):48–54
Alli A, Adesokan AA, Salawu AO (2016) Antimalarial activity of fractions of aqueous extract of Acacia nilotica root. J
Intercult Ethnopharmacol 5(2):180–185
Al-Mustafa ZH (2000) A study on the toxicology of Acacia nilotica. Am J Chin Med 28:123–129
Amos S, Akah CJ, Odukwe KS, Wambede C (1999) The pharmacological effects of an aqueous extract from Acacia
nilotica seeds. Phytother Res 13:683–685
Asad M, Munir TA, Afzal N (2011) Acacia nilotica leave extract and glyburide: comparison of fasting blood glucose,
serum insulin, β-thromboglobulin levels and platelet aggregation in streptozotocin induced diabetic rats. J Pak Med
Assoc 61:247–251

194
 Bachaya HA, Iqbala Z, Khan MN et al (2009) Anthelmintic activity of Ziziphus nummularia (bark) and Acacia nilotica
(fruit) against Trichostrongylid nematodes of sheep. J Ethnopharmacol 123:325–329
Bansal VK, Goel RK (2012) Gastroprotective effect of Acacia nilotica young seedless pod extract: role of polyphenolic
constituents. Asian Pac J Trop Med 5:523–528
Banso A (2009) Phytochemical and antibacterial investigation of bark extracts of Acacia nilotica. J Med Pants Res
3:82–85
Bapna S, Ramaiya M, Chowdhary A (2014) Antimalarial potential of plants used as chewing sticks for oral hygiene in
rural areas of Rajasthan, India. Am J Ethnomed 1:319–325
Bargali K, Bargali SS (2009) Acacia nilotica: a multipurpose leguminous plant. Nat Sci 7(4):11–19
Bashir HS, Mohammed AM, Magsoud AS et al (2014) Isolation and identification of two flavonoids from Acacia nilotica
(Leguminoseae) leaves. J Forst Prod Indust 3(5):211–215
Bhakuni DS, Dhar ML, Dhar MM et al (1969) Screening of Indian plants for biological activity. Part II. Indian J Exp Biol
7:250–262
Bhargava A, Srivastava A, Kumbhare VC (1998) Antifungal activity of polyphenolic complex of Acacia nilotica bark.
Indian Forest 124:292–298
Bushra S, Farooq A, Roman P (2007) Antioxidant activity of phenolic components present in barks of Azarichta indica,
Terminalia arjuna, and Acacia nilotica, and Eugenia jambolana Lam trees. Food Chem 104(3):148–161
Chalk RC, Stoddart JF, Szarek WA et al (1968) Isolation of two arabinobioses from Acacia nilotica gum. Can J Chem
46:2311–2313
Chaubal R, Mujumdar AM, Puranik VG et al (2003) Isolation and X-ray study of an anti-inflammatory active androstene
steroid from Acacia nilotica. Planta Med 69:287–288
Chaubal R, Pawar PV, Hebbalkar GD et al (2005) Larvicidal activity of Acacia nilotica extracts and isolation of p-pinitol-
a bioactive carbohydrate. Chem Biodivers 2:684–688
Chauhan D, Singh J, Siddiqui IR (2000) Isolation of two flavonol glycosides from the seeds of Acacia nilotica. Indian J
Chem 39 (B):719–722
Dafallah AA, Al-Mustafa Z (1996) Investigation of the antiinflammatory activity of Acacia nilotica and Hibiscus
sabdariffa. Am J Chin Med 24:263–269
Dev SNC, De K, Singh S (2014) Antimicrobial activity and phytochemical analysis of Acacia nilotica (L.) Del. Indian J
Appl Pure Biol 29:331–332
Eldeen IMS, Elgorashi EE, Staden J (2005) Antibacterial, antiinflammatory, and anti-cholinesterase and mutagenic
effects of extracts from some trees used in South African traditional medicine. J Ethnopharmacol 102:457–464
Eldeen IM, Heerden V, Staden JV (2010) In vitro biological activities of niloticane, a new bioactive cassane diterpene
from the bark of Acacia nilotica subsp. kraussiana. J Ethnopharmacol 128:555–560
Elizabeth KM, Sireesha D, Rao KN et al (2005) Antimicrobial activity of Acacia nilotica. Asian J Chem 18:191–195
El-Tahir A, Satti GMH, Khalid SA (1999) Antiplasmodial activity of selected Sudanese medicinal plants with emphasis
on Acacia nilotica. Phytother Res 13:474–478
El-Toumy SA, Mohamed SM, Hassan EM et al (2011) Phenolic metabolites from Acacia nilotica flowers and evaluation
of its free radical scavenging activity. J Am Sci 7:287–295
Fatima S, Baig MR, Baig M et al (2012) Antimicrobial activity of Acacia nilotica (L.) Del. Plant extract against
Xanthomonas malvacearum bacteria. Int Multidiscipl Res J 2:48–49
Gilani AH, Shaheen F, Zaman M et al (1999) Studies on antihypertensive and antispasmodic activities of methanol
extract of Acacia nilotica pods. Phytother Res 13:665–669
Hussein A (1982) Molluscicidal properties of Acacia nilotica. Planta Med 46:181–183
Hussein Ayoub SM (1982) Molluscicidal properties of Acacia nilotica subspecies tomentosa and astringens II. J Trop
Med Hyg 88 (3):201–203
Hussein G, Miyashiro H, Nakamura N et al (2000) Inhibitory effects of Sudanese medicinal plant extracts on hepatitis C
virus (HCV) protease. Phytother Res 14:510–516
Ibrahim AM, Phillipson JD, Warhurst DC et al (1991) The potential antimalarial activity of some Sudanese plants. Trans
Roy Soc Trop Med Hyg 85:310–318
Jangade NM, Nagargoje PB, Shirote PJ (2014) Isolation, phytochemical and biological evaluation of Acacia nilotica (L.)
Wild. leaf extract. Int J Pharmacog Phytochem Res 6:179–182
Jigam AA, Akanya HO, Ogbadoyi EO et al (2010) In vivo antiplasmodial, analgesic and anti-inflammatory effects of the
root extracts of Acacia nilotica Del (Leguminoseae). Asian J Exp Biol Sci 1:315–320
Kalaivani T, Mathew L (2010) Free radical scavenging activity from leaves of Acacia nilotica (L.) Wild. ex Delile, an
Indian medicinal tree. Food Chem Toxicol 48:298–305
Kannan LN, Sakthivel KM, Guruvayoorappan C (2013) Protective effect of Acacia nilotica (L.) against acetaminophen-
induced hepatocellular damage in Wistar rats. Adv Pharmacol Sci 2013:987692
Karau GM (2013) Biosprospecting of antidiabetic compounds from selected medicinal plants for the management of
diabetes mellitus in Mbeere and Meru, Kenya. PhD Thesis
Khalid SA, Yagi SM, Khritova P et al (1989) (þ)-Catechin-5-galloyl ester as a novel natural polyphenol from the bark of
Acacia nilotica of Sudanese origin. Planta Med 55:556–558
Krishna PSR, Lavanya B, Sireesha P et al (2011) Comparative study of Acacia nilotica and Acacia sinuata for diuretic
activity. Der Pharmacia Sinc 2(6):17–22
195
 Krowch CM, Okello EJ (2009) Kinetics of acetylcholinesterase inhibitory activities by aqueous extracts of Acacia
nilotica (L.) and Rhamnus prinoides (L’Hér.). Afr J Pharm Pharmacol 3:469–475
Kumari M, Jain S, Dave R (2014) Babul (Acacia nilotica) a potential source of tannin and its suitability in management
of type II diabetes. Nutr Food Sci 44(2):116–119
Liu X, Kim J-K, Li Y et al (2005) Tannic acid stimulates glucose transport and inhibits adipocyte differentiation in 3T3-L1
cells. Am Soc Nutr Sci 135:165–171
Lompo-Ouedraogo Z, van der Heide D, van der Beek EM et al (2004) Effect of aqueous extract of Acacia nilotica ssp
adansonii on milk production and prolactin release in the rat. J Endocrinol 182:257–266
Malan E (1991) Derivatives of (þ)-catechin-5-gallate from the bark of Acacia nilotica. Phytochemistry 30:2737–2739
Malviya S, Rawat S, Kharia A, Varma M (2011) Medicinal attributes of Acacia nilotica Linn. A comprehensive review on
ethnopharmacological claims. Int J Pharm Life Sci 2(6):830–837
Mangan J (1988) Nutritional effects of tannins in animal feeds. Nutr Res Rev 1:209–231
Mbatchou VC, Oumar AA (2012) Antifungal activity of nilobamate isolated from Acacia nilotica Wild.
Phytopharmacology 3:208–213
Meena PD, Kaushik P, Shukla S et al (2006) Anticancer and antimutagenic properties of Acacia nilotica (Linn.) on 7,12-
dimethylbenz(a)anthracene-induced skin papillomagenesis in Swiss albino mice. Asian Pac J Cancer Prev 7(4):627–632
Misar A, Bhagat R, Mujumdar AM (2008) Antidiarrheal activity of Acacia nilotica Wild. bark methanol extract. Hindustan
Antibiot Bull 50:14–20
Mlambo V (2003) Modifying the nutritional effects of tannins present in Acacia and other tree fruits offered as protein
supplements to goats in Zimbabwe. PhD Thesis, University of Reading, Reading, UK, p 273
Mohamed LT, Bushra EIS, Abdelrahman MN (2010) The antibacterial, antiviral activities and phytochemical screening
of some Sudanese medicinal plants. Eur Asian J Biosci 4:8–16
Mohan S, Thiagarajan K, Chandrasekaran R et al (2014) In vitro protection of biological macromolecules against
oxidative stress and in vivo toxicity evaluation of Acacia nilotica (L.) and ethyl gallate in rats. BMC Complement Altern
Med 14:257–270
Mousa M (2011) Effect of feeding acacia as supplements on the nutrient digestion, growth performance, carcass traits
and some blood constituents of Awassi lambs under the conditions of North Sinai. Asian J Anim Sci 5:102–117
Mueller H (2006) Unravelling the conundrum of tannins in animal nutrition and health. J Sci Food Agr 86:2010–2037
Mustafa NK, Tanira MOM, Dar FK et al (1999) Antimicrobial activity of Acacia nilotica subsp. nilotica fruit extracts.
Pharm Pharmacol Commun 5:583–586
Oladosu P, Isu NR, Ibrahim K et al (2013) Time kill-kinetics antibacterial study of Acacia nilotica. Afr J Microbiol
7:5248–5252
Omara EO, Nadab SA, Farraga ARH et al (2012) Therapeutic effect of Acacia nilotica pods extract on streptozotocin
induced diabetic nephropathy in rat. Phytomedicine 19(12):1059–1067
Pai MBP, Prashant GM, Murlikrishna KS et al (2010) Antifungal efficacy of Punica granatum, Acacia nilotica, Cuminum
cyminum and Foeniculum vulgare on Candida albicans: an in vitro study. Indian J Dent Res 21:334–336
Pareek P, Choudhry M (2013) Management of type 2 diabetics by Indian gum arabic (Acacia nilotica) pods powder. Int
J Food Nutr Sci 2(2):77–83
Paswan JK, Kumar K, Kumar S et al (2016) Effect of feeding Acacia nilotica pod meal on hematobiochemical profile
and fecal egg count in goats. Vet World 9:1400–1406
Prakash L, Garg G (1981) Chemical constituents of the roots of Millingtonia hortensis L. and Acacia nilotica (L.) Del. J
Indian Chem Soc 58:96–97
Prathapa Reddy M, Shantha TR, Naveen Kumar SP et al (2018) Pharmacognostical studies on fruits of babbula-
Acacia nilotica (L.) Delile. Int J Herbal Med 6(2):115–120
Rahaman O (2010) A review of uses Acacia nilotica (Booni) in alternative medicine. SearchWarp.com
Raheel R, Ashraf M, Ejaz S et al (2013) Assessment of the cytotoxic and antiviral potential of aqueous extracts from
different parts of Acacia nilotica (Linn) Delile against Peste des petits ruminants virus. Environ Toxicol Pharmacol 35:72–
81
Rai SP, Prasad MS, Singh K (2014) Evaluation of the antifungal activity of the potent fraction of hexane extract
obtained from the bark of Acacia nilotica. Int J Sci Res 3:730–738
Rajbir S, Bikram S, Sukhpreet K et al (2010) Umbelliferone-an antioxidant isolated from Acacia nilotica (L.) Wild. ex
Del. Food Chem 120 (3):825–830
Rajvaidhya S, Nagori BP, Singh GK et al (2015) A review of Acacia arabica – an Indian medicinal plant. Int J
Pharmaceut Sci Res 1.11:90.2
Rana D (2018) A review of ethnomedicine, phytochemical and pharmacological properties of Acacia nilotica
(babool/kikar). Int J Biol Pharmac Allied Sci 7(5):856–863
Rani P, Khullar N (2004) Antimicrobial evaluation of some medicinal plants for their anti-enteric potential against multi-
drug resistant Salmonella typhi. Phytother Res 18:670–673
Rasool N, Tehseen H, Riaz M et al (2013) Cytotoxicity studies and antioxidant potential of Acacia nilotica roots. Int J
Chem Biochem Sci 3:34–41
Rather LJ, Islam S-U, Mohammad F (2015) Acacia nilotica (L.): a review of its traditional uses, phytochemistry, and
pharmacology. Sustain Chem Pharm 2:12–30

196
 Roozbeh N, Darvish L, Abdi F (2017) Hypoglycemic effects of Acacia nilotica in type II diabetes: a research
proposal.BMC ResNotes 10:331
Safari VZ, Kamau JK, Nthiga PM et al (2016) Antipyretic, antiinflammatory and antinociceptive activities of aqueous
bark extract of Acacia nilotica (L.) Delile in albino mice. J Pain Manage Med 2 (2):113
Saini ML, Saini R, Roy S et al (2008) Comparative pharmacognostical and antimicrobial studies of acacia species
(Mimosaceae). J Medic Plant Res 2(12):378–386
Sakthivel KM, Kannan N, Angeline A et al (2012) Anticancer activity of Acacia nilotica (L.) Wild ex. Delile subsp. indica
against Dalton’s ascitic lymphoma induced solid and ascitic tumor model. Asian Pac J Cancer Prev 13(8):3989–3995
Sawadogo L, Sepehri H, Houdebine LM (1989) Mise en evidence d’un facteur stimulant la sécrétion de PRL et
d’hormone de croissance dans la drè che de brasserie. Reprod Nutr Dev 29:139–146
Scalbert A (1991) Antimicrobial properties of tannins. Phytochemistry 30:3875–3883
Shah BH, Safdar B, Virani SS et al (1997) The antiplatelet aggregatory activity of Acacia nilotica is due to blockade of
calcium influx through membrane calcium channels. Gen Pharmacol 29:251–255
Shanker K, Krishna MG, Bhagavan RM et al (2014) Efficacy of leaves extract of Acacia nilotica against Pseudomonas
aeruginosa with reference to disc diffusion method. Res J Pharmacogn Phytochem 6:96–98
Sharma A, Sankhla B, Parker SM et al (2014a) Effect of traditionally used neem and babool chewing stick (datum) on
Streptococcus mutans: an in vitro study. J Clin Diagn Res 8(7):ZC15–ZC17
Sharma C, Aneja KR, Surain P et al (2014b) In vitro evaluation of antimicrobial spectrum of Acacia nilotica leaves and
bark extracts against pathogens causing otitis infection. J Innov Biol 1(1):051–056
Singh R, Arora S (2007) Attenuation of free radicals by acetone extract/fraction of Acacia nilotica Wild (L.) ex Del. J
Chin Clin Med 2:196–203
Singh R, Singh B, Singh S et al (2008) Anti-free radical activities of kaempferol isolated from Acacia nilotica (L.) Wild.
ex. Del. Toxicol In Vitro 22(8):1965–1970
Singh BN, Singh BR, Singh RL et al (2009a) Antioxidant and antiquorum sensing activities of green pods of Acacia
nilotica L. Food Chem Toxicol 47:778–786
Singh BN, Singh BR, Sarma BK et al (2009b) Potential chemoprevention of N-nitrosodiethylamine- induced hepato-
carcinogenesis by polyphenolics from Acacia nilotica bark. Chem Biol Interact 181 (1):20–28
Singh R, Singh B, Singh S et al (2010) Umbelliferone-an antioxidant isolated from Acacia nilotica (L.) Wild. ex Del.
Food Chem 120:825–830
Sokeng SD, Koubé J, Dongmo F et al (2013) Acute and chronic antiinflammatory effects of the aqueous extract of
Acacia nilotica (L.)
Del. (Fabaceae) pods. Acad J Med Plants 1:001–005
Sonibare MA, Gbile ZO (2008) Acacia nilotica is good for the treatment of asthma. Afr J Tradit Complement Altern Med
5:345
Srivastava M, Kumar G, Mohan R et al (2014) Phytochemical studies and antimicrobial activity of babool seeds. J Sci
Ind Res 73:724–728
Sultana B, Anwar F, Przybylski R (2007) Antioxidant activity of phenolic components present in bark of Azadirachta
indica, Terminalia arjuna, Acacia nilotica, and Eugenia jambolana Lam. trees. Food Chem 104:1106–1114
Sundaram R, Mitra SK (2007) Antioxidant activity of ethyl acetate soluble fraction of Acacia nilotica bark in rats. Indian
J Pharmacol 39:33–38
Sundarraj S, Thangam R, Sreevani V et al (2012) γ-Sitosterol from Acacia nilotica L. induces G2/M cell cycle arrest
and apoptosis through c-Myc suppression in MCF-7 and A549 cells. J Ethnopharmacol 141(3):803–809
Tanko Y, Abdulazeez A, Muhammad A et al (2014) Effect of methanol crude leaves extract and aqueous fraction of
Acacia nilotica on lipid profile and liver enzymes on alloxan-induced diabetic rats. Ann Exp Biol 2:36–40
Umaru B, Mahre S, Dogo HM et al (2016) Effects of aqueous pod extract of Acacia nilotica on white blood cells,
platelets and clotting time in albino rats. Am J Pharmacol Pharmacother 3 (3):1–6
Vadivel V, Biesalski HK (2012) Total phenolic content, in vitro antioxidant activity and type II diabetes relevant enzyme
inhibition properties of methanolic extract of traditionally processed underutilized food legume, Acacia nilotica (L.) Wild
ex. Delile. Int Food Res J 19(2):593–601
Vanden Berghe DA, Vlietinck AJ, Van Hoof L (1986) Plant products as potential antiviral agents. Bull de l’institut
Pasteur 84:101–147
Vijayasanthi M, Kannan V, Venkataswamy R, Doss A (2011) Evaluation of the antibacterial potential of various solvent
extracts of Acacia nilotica Linn. leaves. J Drug Med 4:91–96
Vlietinck AJ, Vanden Berghe DA (1991) Can ethnopharmacology contribute to the development of antiviral drugs. J
Ethnopharmacol 32:141–153
Vlietinck AJ, de Bruyne T, Vanden Berghe DA (1997) Plant substances as antiviral agents. Curr Organ Chem 1:307–
344

197
 Glucosinolatos e compostos organossulfurados
Karyn Bischoff

Resumo
Os glucosinolatos são compostos comumente encontrados em plantas da família
Brassicaceae. Muitas plantas comestíveis comuns, como brócolis, repolho, couve-flor,
mostarda e raiz-forte, são membros da família das Brassicaceae, e os sabores fortes
dessas plantas se correlacionam com altas concentrações de glucosinolato. Estudos
recentes encontraram efeitos benéficos dos glucosinolatos, incluindo funções regulatórias
na inflamação, resposta ao estresse, metabolismo da fase I, atividades antioxidantes e
propriedades antimicrobianas diretas. Sem dúvida, estudos futuros encontrarão mais
benefícios desses produtos químicos. No entanto, alimentar rações com alto teor de
brássicas para o gado pode ter efeitos adversos, alguns com risco de vida, e pode
adicionar sabores indesejáveis aos produtos animais. O alto teor de enxofre de muitas
brássicas pode causar deficiências minerais e polioencefalomalácia. Portanto, embora os
alimentos derivados de Brassicaceae possam ser uma boa fonte de nutrição, é melhor
evitar o uso excessivo.

Palavras-chave Glucosinolatos · Brassica · Canola · Colza · Ácido erúcico · Brócolis ·

Couve · Couve-flor · Mostarda

K. Bischoff. New York State Animal Health Diagnostic Center, Cornell University, Ithaca, NY, USA. e-mail:
KLB72@cornell.edu

1. Introdução
O primeiro glucosinolato conhecido foi isolado em 1831 (Dinkova-Kostova e Kostov 2012).
Glucosinolatos e outros compostos organossulfurados são encontrados na família de
plantas da Brassica, que inclui os vegetais crucíferos: repolho, brócolis, couve-flor, couve,
mostarda, etc. A família das Brassicaceae também inclui a importante oleaginosa canola
ou colza, Brassica napus (Burel et al. 2000). Muitas brassicas são safras de final de
temporada; assim, eles permanecem palatáveis após a morte de outras plantas (Burrows
e Tyrl 2013). Os glucosinolatos estão presentes em todas as espécies da família
Brassicaceae. Diferentes espécies normalmente podem produzir até pelo menos 40
glucosinolatos (Halkier e Gershenzon 2006). As concentrações de glucosinolatos e
produtos químicos relacionados dependem da porção da planta (folhas, flores, raízes,

198
caules, sementes, etc.), espécie e variedade da planta, estação e condições ambientais.
Condições quentes e secas provavelmente aumentam as concentrações de
glucosinolatos nas plantas (Tripathi e Mishra 2007). As concentrações de glucosinolato na
folhagem podem variar de 1000 ppm a pelo menos 3000 ppm, dependendo da espécie.
As concentrações nas raízes e sementes costumam ser maiores, até 60.000 ppm na
semente de mostarda (B. nigra). Metabólitos de glucosinolato, compostos contendo
enxofre e ácido erúcico em Brassica são os produtos químicos defensivos das plantas
(Cavaiuolo e Ferrante 2014; Vig et al. 2009). Consequentemente, esses produtos
químicos são bioativos e podem ter efeitos benéficos e prejudiciais em pessoas e animais
domésticos (Bischoff 2016).

Estruturalmente, os glucosinolatos consistem em uma β-Dglicopiranose com uma oxima

sulfonada e um grupo R (Tripathi e Mishra 2007; Dinkova-Kostova e Kostov 2012; Vig et
al. 2009). O grupo R é um aminoácido (Collett et al. 2014). Enquanto os próprios
glucosinolatos são minimamente biologicamente ativos, seus metabólitos são bioativos
(Tripathi e Mishra 2007; Vig et al. 2009). Os glucosinolatos de indol são metabolizados em
isotiocianatos, que estão associados a sabores amargos (Halkier e Gershenzon 2006). Os
sabores amargos podem diminuir a palatabilidade quando a Brassica spp. são usados na
alimentação do gado, o que pode ser associado a ganho reduzido (Woyengo et al. 2014).
Além disso, os glucosinolatos dietéticos foram associados a sabores estranhos no leite e
nos ovos (Bell 1984; Burrows e Tyrl 2013; Tripathi e Mishra 2007). Outros glucosinolatos
interrompem o metabolismo do iodo e a função tireoidiana ou têm efeitos hepatotóxicos
ou nefrotóxicos (Tripathi e Mishra 2007).

Forragens e subprodutos das indústrias de sementes oleaginosas são as fontes mais

comuns de glucosinolatos nas dietas dos animais (Tripathi e Mishra 2007). Farinhas de
sementes oleaginosas, como canola, são uma boa fonte de proteína, mas as
concentrações de glucosinolato limitam a quantidade que pode ser adicionada às dietas
dos animais. Pennycress é uma erva daninha comum na América do Norte que se
originou na Europa e na Ásia. Por ter cerca de 36% de óleo, tem potencial para uso na
produção de biodiesel, e farinhas e bolos de agrião com alto teor de proteína foram
propostos para uso em rações animais (Alhotan et al. 2017).

Variedades de sementes oleaginosas foram cultivadas para diminuir as concentrações de

glucosinolato. Variedades de canola com baixo e muito baixo glucosinolato (conhecidas
como duplo zero ou duplo baixo) produzem uma refeição que pode ter menos de um
quarto das concentrações de glucosinolato vistas em variedades mais antigas
(Flachowsky et al. 2014; Tripathi e Mishra 2007; Olukosi et al. 2017). Além disso, farinhas
199
de canola com alto teor de proteína e baixo teor de fibra foram desenvolvidas para torná-
las mais adequadas para alimentação animal (Pedersen et al. 2016). Os bolos de
sementes oleaginosas têm a vantagem de apresentar mais óleo residual do que as
farinhas, tornando-os alimentos adequados para algumas espécies de gado (Drażbo et al.
2018). As concentrações de glucosinolato em farinhas de sementes oleaginosas variam
com base nos processos de extração (Tripathi e Mishra 2007). O tratamento térmico
diminui o glucosinolato nas farinhas de sementes, e o calor úmido e a pressão diminuem
as concentrações de glucosinolato mais do que o aquecimento a seco. O tratamento
térmico também reduziu a atividade da mirosinase vegetal, a enzima que metaboliza os
glucosinolatos em produtos mais bioativos (Alhotan et al. 2017). As condições de
armazenamento também podem afetar as concentrações de glucosinolato em bolos e
refeições, que podem aumentar no curto prazo, mas diminuir no longo prazo (Cavaiuolo e
Ferrante 2014). A fermentação está documentada para diminuir as concentrações de
glucosinolato em farinha de canola convencional e bolo usado para alimentação animal
(Shi et al. 2015; Drażbo et al. 2018). A fermentação por 10 dias pode diminuir as
concentrações de glucosinolato em mais de 40%, e a fermentação por 30 dias diminui as
concentrações de glucosinolato dez vezes em Brassica napus (Burrows e Tyrl 2013;
Drażbo et al. 2018). Isso é provavelmente devido à utilização de grupos de enxofre em
glucosinolatos por enzimas microbianas (Tripathi e Mishra 2007; Drażbo et al. 2018). A
fermentação também aumenta a disponibilidade de proteínas e promove a produção de
vitaminas e antioxidantes (Drażbo et al. 2018).

2. Metabolismo de glucosinolatos
Os glucosinolatos estão ligados a uma porção de açúcar e, portanto, são glicosídeos.
Enquanto os glucosinolatos são minimamente biologicamente ativos, os metabólitos da
aglicona (metabólitos com o açúcar removido) são instáveis e frequentemente possuem
propriedades biológicas. Os compostos originais são armazenados nos vacúolos celulares
da planta (Cavaiuolo e Ferrante 2014). Idioblastos, estruturas dentro das células vegetais,
contêm a enzima mirosinase (Burel et al. 2000; Cavaiuolo e Ferrante 2014; Collett et al.
2014; Halkier e Gershenzon 2006; Vig et al. 2009). O dano à célula libera a mirosinase
que, em um pH neutro, causa a hidrólise dos glucosinolatos (Cavaiuolo e Ferrante 2014;
Ahlin et al. 1994). Este sistema tem um papel importante na defesa das plantas contra
fungos, bactérias e pragas de insetos e também evita a deterioração das plantas colhidas
(Vig et al. 2009). O metabolismo do glucosinolato pela mirosinase vegetal pode ocorrer no
rúmen de ruminantes e no trato intestinal de pássaros e outros animais monogástricos
200
(Burrows e Tyrl 2013; Pekel et al. 2015; Tripathi e Mishra 2007). Além disso, organismos
comuns da microflora gastrointestinal podem produzir sua própria mirosinase (Tripathi e
Mishra 2007; Kiebooms et al. 2014; Velayudhan et al. 2017). Consequentemente, foi
relatado que o tratamento com antibióticos em humanos diminui o metabolismo dos
glucosinolatos (Dinkova-Kostova e Kostov 2012). Metabólitos de glucosinolatos incluem
isotiocianatos, tiocianatos, nitrilos, sulfatos e goitrinas (Burel et al. 2000; Cavaiuolo e
Ferrante 2014; Burrows e Tyrl 2013; Wight et al. 1987).

Os glucosinolatos e seus metabólitos não se acumulam no tecido animal, mas podem ser
encontrados no leite e nos ovos, onde produzem sabores estranhos (Bell 1984; Burrows e
Tyrl 2013).

3. Glucosinolatos importantes
Alguns exemplos de glucosinolatos relativamente bem caracterizados são listados abaixo.
Metabólitos destes incluem isotiocianatos reativos ou óleos de mostarda, que transmitem
os odores pungentes de mostarda ou alho associados à mostarda e raiz-forte, e também
incluem tiocianatos, nitrilos, sulfatos e goitrinas (Burrows e Tyrl 2013).

• A glucobrassicina (3-indolilmetil glucosinolato), encontrada em toda a família das

Brassicaceae, é hidrolisada a um isotiocianato. Um metabólito é o indol-3-carbinol, que
inibe o fator nuclear κβ (Wagner et al. 2013).

• A glucorafanina (4-metilsulfinilbutil glucosinolato), encontrada em brócolis e outros

vegetais, é hidrolisada em um isotiocianato, especificamente o sulforafano (4-metil sulfonil
butil isotiocianato), que tem propriedades preventivas de tumor e outras. O sulforafano
bloqueia o ciclo celular e promove a apoptose (Halkier e Gershenzon 2006; Fimognari et
al. 2012). O sulforafano também induz proteínas cito protetoras de mamíferos através da
via Keap1-NrF2-ARE (Dinkova-Kostova e Kostov 2012).

• A progoitrina, encontrada na colza e em vários vegetais, é hidrolisada em tiocianato e

goitrina (L-5-vinil-2-tio oxazolidina), que é chamada por seus efeitos antitireoidianos. A
ingestão de longo prazo está associada à formação de bócio. O tiocianato inibe o
simportador de iodeto de sódio, a molécula de transporte responsável pela captação de
iodo pela tireoide, glândula mamária e alguns outros tecidos (Flachowsky et al. 2014).
Goitrina bloqueia a iodação da tirosina e inibe a formação de T4 (Burrows e Tyrl 2013).

• Sinigrina (prop-3-enal glucosinolatos), encontrado em uma série de vegetais e

sementes, é hidrolisado em alil isotiocianato, que se acredita inibir a expressão de mRNA

201
e ativar o fator de transcrição Nrf2 (Fimognari et al. 2012; Wagner et al. 2013; Alhotan et
al. 2017).

4. Efeitos dos glucosinolatos

Os glucosinolatos são metabolizados em isotiocianatos e compostos relacionados. Os
efeitos desses metabólitos se dão por meio de interações com proteínas celulares, como
aquelas envolvidas na sinalização intracelular (Fimognari et al. 2012). Esses compostos
biologicamente ativos têm uma variedade de efeitos benéficos e prejudiciais conhecidos.

Benefícios: Os metabólitos dos glucosinolatos protegem a própria planta e evitam a

deterioração das plantas colhidas. Eles podem ter uma variedade de atividades biológicas
benéficas em humanos e outros animais (Vig et al. 2009). Foram relatados efeitos
antiinflamatórios e imunomoduladores dos glucosinolatos. Os isotiocianatos são capazes
de inibir a ciclo-oxigenase-2, evitando a produção inflamatória de prostaglandinas
(Fimognari et al. 2012). Os isotiocianatos podem diminuir o fator de crescimento endotelial
vascular (VEGF) e o sulforafano pode inibir a resposta das células endoteliais ao VEGF.
Esses compostos também podem regular negativamente citocinas pró-inflamatórias,
como interleucina (IL) -1b, IL6, fator estimulador de colônias de granulócitos e
macrófagos, fator de necrose tumoral α e fator inibitório migratório de macrófagos
(Dinkova-Kostova e Kostov 2012; Fimognari et al. 2012). Certos isotiocianatos são
conhecidos por inibir a atividade do regulador de transcrição NFkB, que está envolvido na
resposta ao estresse e inflamação (Wagner et al. 2013). Alguns ativam fator nuclear (2
derivado de eritroide) 2 (NFE2L2), que promove a síntese da proteína reguladora Nrf2,
importante no metabolismo microssomal de fase II (Wagner et al. 2013; Cavaiuolo e
Ferrante 2014; Vig et al. 2009).

Os glucosinolatos e isotiocianatos são considerados antioxidantes indiretos (Vig et al.

2009). Eles podem inibir enzimas metabólicas de fase I (citocromo P450), que atuam
sobre xenobióticos e compostos endógenos e geram moléculas reativas. Sulforafano e
outros isotiocianatos induzem enzimas metabólicas da fase II, que desativam os produtos
do metabolismo da fase I e promovem a excreção, aumentando a transcrição da
sequência do elemento de resposta antioxidante (ARE) no genoma (Vig et al. 2009).

O sulforafano também induz outras enzimas antioxidantes através da via Nrf-w, incluindo
catalase, superóxido dismutase, glutationa peroxidase, glutationa redutase, glutationa S
transferase e glutationa (Dinkova-Kostova e Kostov 2012; Fimognari et al. 2012). O

202
sulforafano também inibiu a produção de metaloproteinases da matriz e aumentou a
atividade antioxidante associada à osteoartrite in vitro (Fimognari et al. 2012).

As atividades antioxidantes e a enzima de fase II são um mecanismo responsável pela

anticarcinogenicidade dos glucosinolatos e seus metabólitos (Vig et al. 2009). Os
isotiocianatos foram protetores contra a carcinogênese em modelos de roedores e a
proteção não era específica para órgãos (Dinkova-Kostova e Kostov 2012). Há uma
diminuição do risco de câncer de bexiga relacionado ao aumento da ingestão de vegetais
crucíferos crus em humanos (Dinkova-Kostova e Kostov 2012). Também há evidências de
que vegetais crucíferos na dieta são protetores contra câncer de pulmão, colorretal,
mama, próstata e pancreático (Fimognari et al. 2012). A inibição de isotiocianato de
enzimas de fase I impede a ativação de procarcinogênios (Dinkova-Kostova e Kostov
2012; Fimognari et al. 2012). A ingestão de glicorafanina foi associada à excreção
aumentada de conjugados de glutationa de aflatoxina e certos poluentes transportados
pelo ar nas pessoas (Dinkova-Kostova e Kostov 2012). Os isotiocianatos também são
relatados como indutores de apoptose em células cancerosas, possivelmente por meio da
ligação covalente a proteínas estruturais, levando à interrupção do ciclo celular (Dinkova-
Kostova e Kostov 2012; Fimognari et al. 2012). Os efeitos epigenéticos dos isotiocianatos
incluem inibição da histona desacetilase, inibição da metilação do DNA e inibição da
expressão de mRNA (Dinkova-Kostova e Kostov 2012; Wagner et al. 2013).

Os isotiocianatos têm efeitos antimicrobianos diretos (Cavaiuolo e Ferrante 2014). A

função antifúngica dos isotiocianatos parece ser devido ao desacoplamento da
fotofosforilação oxidativa nas mitocôndrias fúngicas (Vig et al. 2009). Os isotiocianatos
têm atividade antibacteriana, embora as bactérias gram-negativas sejam menos
suscetíveis do que as gram-positivas (Vig et al. 2009). Borges et al. (2015) postulou que
os efeitos antibacterianos são devidos a interações com moléculas de membrana celular
bacteriana, levando a alterações no potencial de membrana e hidrofobicidade e,
eventualmente, à ruptura da membrana. Um metabólito da sinigrina, 2-propenil (alil)
isotiocianato, tem alguma atividade antimicrobiana in vitro contra E. coli 0157: H7. Tanto o
isotiocianato de benzila, um metabólito da glucotropaeolina (benzilglucosinolato), quanto o
2-feniletil isotiocianato, um metabólito da gluconasturtiína (2-feiletilglucosinoato), são
eficazes, in vitro, contra bactérias gram-positivas e gram-negativas em baixas
concentrações. No entanto, a combinação de 2-propenil (alil) isotiocianato, benzil
isotiocianato e feniletil isotiocianato é mais eficaz do que qualquer um dos isotiocianatos
sozinho (Saavedra et al. 2012). Saavedra et al. (2012) também descobriram que alguns
dos metabólitos de glucobrassicina, incluindo indol-3-carbinol e indol-3-acetonitrila, tinham

203
atividade antimicrobiana in vitro contra organismos gram-negativos e ascorbígeno tinha
atividade contra organismos Gram-positivos, mas apenas em altas concentrações.

O sulforafano tem atividade bacteriostática e bactericida in vitro contra o Helicobacter

pylori (Dinkova-Kostova e Kostov 2012; Vig et al. 2009). Em pacientes com doença
pulmonar obstrutiva crônica e em modelos animais, o sulforafano aumentou a resistência
a patógenos bacterianos pulmonares (Fimognari et al. 2012). Os glucosinolatos têm sido
implicados em melhorias na microflora intestinal em aves, bem como na melhoria do
status antioxidante (Drażbo et al. 2018).

Isotiocianatos e nitrilos são tóxicos para insetos e alguns outros invertebrados, que
oferecem proteção às plantas em crescimento. Os mecanismos inseticidas e anti-
nematóides propostos incluem desacoplamento da fosforilação oxidativa, ligação a grupos
tiol e DNA alquilante (Vig et al. 2009). Os nitrilos podem atuar como reguladores de
crescimento de insetos (Vig et al. 2009). O trabalho com o salmão do Atlântico determinou
que as infestações de piolhos do mar podem ser reduzidas em cerca de 25% quando os
peixes são alimentados com dietas contendo uma planta não especificada contendo
glucosinolato da família Brassicaceae (Holm et al. 2016). As possíveis causas da
diminuição da carga parasitária incluem efeitos tóxicos diretos de glucosinolatos em
invertebrados, modulação da imunidade do hospedeiro e mudanças no muco da pele do
hospedeiro, tornando-o menos atraente ou menos nutritivo para os piolhos.

Os glucosinolatos foram recentemente investigados por suas propriedades

antimicrobianas devido à crescente preocupação com a resistência aos antibióticos em
patógenos zoonóticos e de origem alimentar, e alguns metabólitos de glucosinolato têm
propriedades antimicrobianas. Infelizmente, sua excitotoxicidade pode impedir seu uso
como antimicrobianos in vivo (Borges et al. 2015). Os metabólitos de isotiocianato podem
reagir com grupos sulfidrila, por exemplo, da glutationa, para produzir ditiocarbamatos,
que promovem a oxidação (Nobel et al. 1997). Esses metabólitos podem reagir com
grupos sulfidrila em proteínas, levando à inibição enzimática e morte celular (Saavedra et
al. 2012). Os metabólitos podem reagir com aminoácidos para formar radicais tiocianato
reativos (Borges et al. 2015). Borges et al. (2015) postulou que os efeitos antibacterianos
são devidos a interações com moléculas de membrana celular bacteriana, levando a
mudanças no potencial de membrana e hidrofobicidade e, eventualmente, à ruptura da
membrana.

Um metabólito da sinigrina, 2-propenil(alil)isotiocianato, tem alguma atividade

antimicrobiana in vitro contra E. coli 0157: H7. Tanto o benzil isotiocianato, um metabólito
da glucotropaeolina (benzilglucosinolato), quanto o 2-feniletil isotiocianato, um metabólito
204
da gluconasturtiína (2-feniletil glucosinolato) são eficazes, in vitro, contra bactérias gram
positivas e gram negativas em baixas concentrações. No entanto, a combinação de 2-
propenil (alil) isotiocianato, benzil isotiocianato e feniletil isotiocianato é mais eficaz do que
qualquer um dos isotiocianatos sozinho (Saavedra et al. 2012). Saavedra et al. (2012)
também descobriram que alguns dos metabólitos de glucobrassicina, incluindo indol-3-
carbinol e indol-3-acetonitrila, tinham atividade antimicrobiana in vitro contra organismos
Gram-negativos e o ascorbígeno tinha atividade contra organismos Gram-positivos, mas
apenas em altas concentrações.

Trabalhos recentes sugerem que, quando usados como forragem de gado, cordeiros
alimentados com canola tiveram taxas de crescimento mais rápidas em comparação com
ovelhas com azevém, produziram menos metano e seus resíduos fecais e urinários
produziram menos poluição de dióxido de nitrogênio (Luo et al. 2014; Sun et al. 2015).
Metano e dióxido de nitrogênio são gases importantes de efeito estufa, e os ruminantes
contribuem significativamente para a produção antropogênica total de gases de efeito
estufa (Sun et al. 2015; Durge et al. 2016). A produção reduzida de metano pode ser
devido à rápida fermentação e maior digestibilidade de concentrados de ração à base de
Brassica spp., aumento do pH ruminal e consequente mudança na microflora para
bactérias formadoras de propionato, em cordeiros alimentados com forragem de canola
(Sun et al. 2015; Durge et al. 2016).

Efeitos adversos: Infelizmente, alimentar um excesso de vegetais e sementes de Brassica

está associado a efeitos tóxicos. Os glucosinolatos estimulam o apetite em baixas
concentrações e aumentam a palatabilidade de alguns alimentos, como raiz-forte,
mostarda e pimenta-do-reino, para as pessoas (Burrows e Tyrl 2013). No entanto, os
glucosinolatos também têm sido associados à redução da palatabilidade e do consumo de
ração em animais e, consequentemente, diminuição da taxa de crescimento e
desempenho reprodutivo. Além disso, os efeitos endócrinos dos glucosinolatos são bem
conhecidos, e os nitrilos da Brassica podem causar disfunções hepáticas e renais (Tripathi
e Mishra 2007; Pearson et al. 1983). O aumento do iodo e do cobre na dieta pode diminuir
alguns dos efeitos adversos dos glucosinolatos na dieta.

Como eletrófilos potentes, os isotiocianatos podem ser genotóxicos (Fimognari et al.

2012). Ensaios bacterianos com extratos brutos de vegetais crucíferos encontraram
efeitos genotóxicos causados por glucosinolatos (Fimognari et al. 2012).

O aumento da tireoide pode ocorrer com a exposição prolongada especificamente à

goitrina, mas os tiocianatos podem formar tioureias com aminoácidos que afetam a
captação de iodeto pela tireoide (Saavedra et al. 2012). Os efeitos antitireoidianos dos
205
glucosinolatos podem resultar em bócio, mas os efeitos subclínicos podem incluir baixo
desempenho reprodutivo e diminuição do crescimento (Taljaard 1993). Estudos com
roedores encontraram mortes fetais associadas à hipertrofia epitelial folicular da tireoide
fetal com diminuição da presença de coloides (Burrows e Tyrl 2013). Hipotireoidismo
também foi relatado em peixes (Burel et al. 2000).

A superalimentação de Brassicaceae em gado é comumente associada à anemia corporal

de Heinz, embora o mecanismo seja ligeiramente diferente entre cavalos e ruminantes.
Os glucosinolatos causam diretamente a formação do corpo de Heinz em cavalos, mas a
microflora ruminal adaptada é mais capaz de degradar os glucosinolatos, diminuindo a
suscetibilidade dos ruminantes à hemólise direta do corpo de Heinz (Burrows e Tyrl 2013;
Cox-Ganser et al. 1994). No entanto, dimetilsulfóxidos produzidos no rúmen pelo
metabolismo de Brassicaceae também podem causar a formação de corpos de Heinz e
hemólise (Taljaard 1993). As aves também são suscetíveis à anemia causada por
Brassicaceae na dieta (Woyengo et al. 2011).

Os nitrilos são hepatotóxicos e foram associados a lesões, incluindo megalocitose,

necrose de hepatócitos, hiperplasia do ducto biliar e fibrose (Collett et al. 2014). A química
do soro em animais afetados será dano hepatocelular consistente e estase biliar.
Congestão hepática e hemorragia foram relatadas em galinhas poedeiras alimentadas
com farinha de colza (Wight et al. 1987). A hemorragia provavelmente causa necrose por
pressão do parênquima hepático (Martland et al. 1984). A megalocitose foi relatada nos
rins (Collett et al. 2014).

A alta concentração de enxofre na couve e outras brássicas inibe a absorção de cobre e

selênio e causa deficiência desses minerais (Taljaard 1993). O enxofre excessivo em
ruminantes é relatado como uma causa de polioencefalomalácia (Burrows e Tyrl 2013;
Taljaard 1993).

O ácido erúcico é um ácido graxo monoinsaturado presente na semente de colza,

mostarda (B. napus, B. campestris, B. juncea, B. sarson) e algumas plantas relacionadas.
O ácido erúcico causa lesões cardíacas em bovinos e, experimentalmente, em roedores
(Burrows e Tyrl 2013). O óleo de canola contém menos de 5% de ácido erúcico, mas o
farelo de canola pode conter altas concentrações, dependendo do método de extração
usado na produção (Burrows e Tyrl 2013; Woyengo et al. 2011).

Alguns outros efeitos específicos de espécies de Brassica spp. na ração são descritos
abaixo.

206
• Suínos: os porcos são considerados altamente sensíveis aos glucosinolatos dietéticos, e
os porcos mais jovens são mais suscetíveis do que os mais velhos (Tripathi e Mishra
2007). Os glicosinolatos em dietas para suínos reduzem o ganho em leitões devido à
palatabilidade reduzida e aos efeitos da tireoide (Woyengo et al. 2014). Atualmente,
recomenda-se que as concentrações totais de glucosinolato nas dietas para suínos sejam
inferiores a 2 μg/ml e 3,77 mol/g, matéria seca (Kim et al. 2017; Tripathi e Mishra 2007).
Concentrações mais altas de glucosinolato na dieta têm sido algumas vezes associadas à
hipertrofia da tireoide devido à capacidade reduzida de absorver iodo (Pedersen et al.
2016). Recomenda-se que o iodo seja suplementado a uma taxa de 1000 μg/ml e 3,77 g/kg ao usar
alimentos contendo glucosinolato na ração (Tripathi e Mishra 2007). Anemia e danos
hepáticos e renais também foram relatados em suínos alimentados com glucosinolatos
(Velayudhan et al. 2017). Foi descoberto na Europa que o tiouracil, uma droga proibida
em animais produtores de carne devido aos possíveis efeitos carcinogênicos e
teratogênicos e ao aumento do teor de água dos tecidos comestíveis, foi detectado em
animais alimentados com canola ou repolho (Kiebooms et al. 2014). O tiouracil é
produzido a partir de certos glucosinolatos pela flora intestinal madura e ocorre mais
comumente em porcas mais velhas do que em porcas alimentadoras (Kiebooms et al.
2014).

• Aves: galinhas poedeiras e perus são mais suscetíveis aos efeitos adversos de Brassica
spp. na dieta do que frangos, e os efeitos clínicos incluíram diminuição do crescimento e
produção de ovos e aumento da mortalidade (Tripathi e Mishra 2007). A diminuição do
crescimento e a redução da produção de ovos são devidas à diminuição da ingestão de
alimentos e fatores não nutritivos, incluindo glucosinolatos (Woyengo et al. 2011; Martland
et al. 1984; Wight et al. 1987; Olukosi et al. 2017) O crescimento reduzido em aves
alimentadas com uma dieta contendo 30% de farinha de canola foi mais notável em
pintinhos com menos de 3 semanas de idade em comparação com frangos mais velhos e
foi atribuído à falta de desenvolvimento da tireoide em aves jovens (Mushtaq et al. 2007).
O bolo de pennycress27 contendo 59 a 68 μg/ml e 3,77 mol/g de sinigrina e 1,62-1,73% de ácido
erúcico causou um crescimento reduzido em pintinhos quando alimentados a uma taxa de
5% para pintos com menos de 10 dias de idade ou 8,5% da dieta para pintos mais velhos
(Alhotan et al. 2017). Há alguma diminuição no crescimento relatada em concentrações
de glucosinolato maiores que 2 μg/ml e 3,77 mol/g na ração, e depressão severa no crescimento é
relatada em concentrações de glucosinolato maiores que 8 μg/ml e 3,77 mol/g (Tripathi e Mishra
2007). A hipertrofia da tireóide devido aos glucosinolatos foi relatada em aves (Martland et
al. 1984; Wight et al. 1987). Quando os perus foram alimentados com torta de canola

27 Thlaspi arvense, conhecido pelo nome comum de campo pennycress, é uma planta da família do repolho, Brassicaceae.
207
convencional a 15% da dieta, aqueles alimentados com torta não fermentada tinham
concentrações de T4 mais baixas do que aqueles alimentados com torta fermentada
(Drażbo et al. 2018). O aumento hepático também foi relatado em frangos alimentados
com dietas com altas concentrações de glucosinolato (Velayudhan et al. 2017).
Recomenda-se que os alimentos para aves contenham menos de 2,5 μg/ml e 3,77 mol de
glucosinolatos por grama (Mushtaq et al. 2007; Pekel et al. 2015; Drażbo et al. 2018).

A farinha de canola convencional foi fornecida aos patos com um pouco mais de 6% da
dieta sem efeitos adversos, mas os produtos com alto teor de glucosinolato (7,57 μg/ml e 3,77 mol de
glucosinolatos/g de dieta) tiveram efeitos adversos no crescimento em concentrações
mais baixas (Qin et al. 2017). Os efeitos adversos relatados em patos alimentados com
concentrações mais altas de glucosinolato na dieta incluíram diminuição do crescimento,
prejuízo do crescimento das penas, aumento do peso da tireoide e evidência de síntese
de proteína hepática (Qin et al. 2017).

• Cavalos: os isotiocianatos de alila são irritantes diretos do trato gastrointestinal,

causando cólicas potencialmente letais em cavalos (Taljaard 1993; Mason e Lucas 1983;
Woyengo et al. 2011).

• Ruminantes: os ruminantes são menos sensíveis aos glucosinolatos do que outras

espécies devido à digestão ruminal (Tripathi e Mishra 2007). Animais jovens são mais
sensíveis do que animais maduros. O uso prolongado de alimentos contendo
glucosinolato, entretanto, tem sido associado ao bócio, diminuição da tiroxina plasmática,
desempenho reprodutivo pobre em vacas e touros e diminuição da produção de leite em
vacas leiteiras (Tripathi e Mishra 2007). Goitrogênicos 28 e tiocianatos de glucosinolatos
também podem reduzir as concentrações de iodo no leite em vacas leiteiras por meio da
diminuição da captação de iodeto pela glândula mamária (Flachowsky et al. 2014). A
farinha de canola convencional em rações lácteas diminuiu a concentração de iodo no
leite pela metade a três quartos, e essa diminuição não foi evitada pela adição de mais
iodo à dieta. Os glucosinolatos em dietas de gado leiteiro também produziram leite com
sabor estranho (Tripathi e Mishra 2007). Embora a qualidade da carcaça não seja afetada
em ruminantes alimentados com glucosinolatos, sabores estranhos foram relatados em
cordeiros alimentados com farinha de canola (Tripathi e Mishra 2007).

Efeitos irritantes graves devido a altos níveis de glucosinolatos na dieta foram relatados e
podem incluir descamação do epitélio ruminal. O tratamento sintomático, incluindo
controle da dor e uma dieta limpa sem Brassica, é o tratamento para severos sinais
gastrointestinais agudos (Burrows e Tyrl 2013).

28 Substâncias que dificultam a absorção de iodo.

208
Curiosamente, o tiouracil, um contaminante ilegal de produtos de origem animal, foi
detectado em bovinos alimentados com Brassica spp. Semelhante à suína, a microflora
gastrointestinal em bovinos produziu uma enzima semelhante à mirosinase que leva à
formação de tiouracil a partir de glucosinolatos (Kiebooms et al. 2014). Os ruminantes
podem tolerar até 4,22 μg/ml e 3,77 mol de glucosinolatos por grama de dieta, embora os cordeiros
alimentados com glucosinolatos nessa taxa tenham desenvolvido evidências de
deficiência de iodo (Tripathi e Mishra 2007). A suplementação de iodo pode aumentar a
tolerância ao glucosinolato.

• Coelhos: os coelhos alimentados com farinha de mostarda diminuíram a ingestão e o

crescimento de ração e hipertrofia do fígado. Os coelhos podiam tolerar menos de 8 μg/ml e 3,77 mol/
g de glucosinolatos por grama de ração, mas concentrações de ração acima de 17,6
μg/ml e 3,77 mol/g foram associadas ao aumento da mortalidade (Tripathi e Mishra 2007). A
diminuição do hematócrito também foi relatada em coelhos alimentados com dietas ricas
em glucosinolato (Velayudhan et al. 2017).

• Peixes: baixas concentrações de glucosinolatos na dieta foram associadas ao

crescimento reduzido e lesões da tireoide na truta arco-íris, e a concentração máxima
recomendada de glucosinolato na alimentação para peixes é 1,4 μg/ml e 3,77 mol/g, que ainda pode
estar associada ao bócio (Tripathi e Mishra 2007).

5. Observações finais e orientações futuras

À medida que mais pesquisas estão sendo realizadas sobre a miríade de compostos
bioativos em plantas da família Brassicaceae, mais benefícios potenciais são
encontrados. No entanto, esses compostos também podem ter efeitos adversos e causar
contaminação alimentar quando usados em rações para gado. As interações entre os
glucosinolatos e outros compostos vegetais e processos biológicos em animais
domésticos são extremamente complexas e difíceis de prever; portanto, mais pesquisas
são necessárias para determinar as maneiras mais benéficas de usar alimentos contendo
glucosinolato na dieta de animais para promover a saúde e minimizar os riscos.

Referências

Ahlin KA, Emanuelson M, Wiktorsson H (1994) Rapeseed products from double-low cultivars as feed for dairy cows:
effects of longterm feeding on thyroid function, fertility and animal health. Acta Vet Scand 35(1):37–53
Alhotan RA, Wang RL, Holser RA et al (2017) Nutritive value for maximum inclusion level of pennycress meal for
broiler chickens. Poult Sci 96:2281–2293
Bell JM (1984) Nutrients and toxicants in rapeseed meal: a review. J Anim Sci 58(4):996–1010
Bischoff KL (2016) Glucosinolates. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity. Academic,
Amsterdam, pp 551–554
Borges A, Abreu AC, Ferreira C et al (2015) Antibacterial activity and mode of action of selected glucosinolate
hydrolysis products against bacterial pathogens. J Food Sci Technol 52(8):4737–4748
209
 Burel C, Boujard T, Escaffre AM et al (2000) Dietary low-glucosinolate rapeseed meal affects thyroid status and
nutrient utilization in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss). Br J Nutr 83(6):653–664
Burrows GE, Tyrl RJ (2013) Toxic plants of North America, 2nd edn. Wiley-Blackwell, Ames, IA
Cavaiuolo M, Ferrante A (2014) Nitrates and glucosinolates as strong determinants of the nutritional quality in rocket
leafy salads. Nutrients 6(4):1519–1538
Collett MG, Stegelmeier BL, Tapper BA (2014) Could nitrile derivatives of turnip (Brassica rapa) glucosinolates be
hepatoand/or cholangiotoxic in cattle? J Agric Food Chem 62 (30):7370–7375
Cox-Ganser JM, Jung GA, Pushkin R et al (1994) Evaluation of Brassicas in grazing systems for sheep: II. Blood
composition and nutrient status. J Anim Sci 72(7):1832–1841
Dinkova-Kostova AB, Kostov RV (2012) Glucosinolates and isothiocyanates in health and disease. Trends Mol Med 18
(6):337–348
Drażbo A, Ognik K, Zaworska A et al (2018) The effect of raw and fermented rapeseed cake on the metabolic
parameters, immune status, and intestinal morphology of turkeys. Poult Sci 97 (11):3910–3920.
https://doi.org/10.3382/ps/pey250
Durge SM, Tripathy MK, Dutta N (2016) In-vitro fermentation characteristics and methane reduction potential of
mustard cake (Brassica juncea L.). Vet World 9(10):1141–1146
Fimognari C, Turrini E, Furruzzi L et al (2012) Natural isothiocyanates: genotoxic potential versus chemoprevention.
Mutat Res 750:107–131
Flachowsky F, Franke K, Meyer U, Leiterer M, Schöne F (2014) Influencing factors on iodine content of cow milk. Eur J
Nutr 53(2):351–365
Halkier BA, Gershenzon J (2006) Biology and biochemistry of glucosinolates. Annu Rev Plant Biol 57:303–333
Holm HJ, Wadsworth S, Bjelland A-K et al (2016) Dietary phytochemicals modulate skin gene expression profiles and
result in reduced lice counts after experimental infection in Atlantic salmon. Parasites Vectors 9:271
Kiebooms JAL, Wauters J, Vamden Bussche J et al (2014) Thiouracilforming bacteria identified and characterized
upon porcine in vitro digestion of Brassicaceae feed. Appl Environ Microbiol 80 (23):7433–7442
Kim JW, Koo B, Nyachoti CM (2017) Digestible, metabolizable, and net energy of camelina cake fed to growing pigs
and additivity of energy in mixed diets. J Anim Sci 95:4037–4044
Luo J, Sun XZ, Pacheco D et al (2014) Nitrous oxide emission factors for urine and dung from sheep fed either fresh
forage rape (Brassica napus L.) or fresh perennial ryegrass (Lolium perenne L.). Animal 9 (3):534–543
Martland MF, Butler EJ, Fenwick GR (1984) Rapeseed induced liver haemorrhage, reticulolysis and biochemical
changes in laying hens: the effects of feeding high and low glucosinolate meals. Res Veter Sci 36(3):298–309
Mason RW, Lucas P (1983) Acute poisoning in cattle after eating old non-viable seed of chou moellier (Brassica
oleracea convar. acephala). Aust Vet J 60(9):272–273
Mushtaq T, Sarwar M, Ahmed G et al (2007) Influence of canola mealbased diets supplemented with exogenous
enzyme and digestible lysine on performance, digestability, carcass, and immunity responses of broiler chickens. Poult
Sci 86(10):2144–2151
Nobel CS, Burgess DH, Zhivotovski B et al (1997) Mechanism of dithiocarbamate inhibition of apoptosis: thiol oxidation
by dithiocarbamate disulfides directly inhibits processing of the caspase-3 proenzyme. Chem Res Toxicol 10(6):636–643
Olukosi OA, Kasprzak MM, Kightley S et al (2017) Investigations of the nutritive value of meals of double-low rapeseed
and its influence on growth performance of broiler chickens. Poult Sci 96:3338–3350
Pearson AW, Greenwood NM, Butler EJ et al (1983) Biochemical changes in layer and broiler chickens when fed on a
highglucosinolate rapeseed meal. Br Poult Sci 24(3):417–427
Pedersen TF, Liu Y, Stein HH (2016) Effects of diet energy concentration and an exogenous carbohydrase on growth
performance of weanling pigs fed diets containing canola meal produced from high protein or conventional canola seeds.
J Anim Sci 94:5206–5218
Pekel AY, Kim JI, Chapple C et al (2015) Nutritional characteristics of camelina meal for 3-week-old broiler chickens.
Poult Sci 94:371–378
Qin S, Tian G, Zhang K et al (2017) Influence of dietary rapeseed meal levels on growth performance, organ health
and standardized ileal amino acid digestibility in meat ducks from 15 to 35 days of age. J Anim Physiol Anim Nutr
101:1297–1306
Saavedra MJ, Dias CSP, Martinez-Murcia A et al (2012) Antibacterial effects of glycosinolate-derived hydrolysis
products against Enterobacteraiceae and Enterocci isolated from pig ileum segments. Foodborne Pathog Dis 9(4):338–
345
Shi C, He J, Yu J et al (2015) Amino acids, phosphorus, and energy digestibility of Aspergillus niger fermented
rapeseed meal fed to growing pigs. J Anim Sci 93:2916–2925
Sun X, Henderson G, Cox F et al (2015) Lambs fed fresh winter forage rape (Brassica napus L.) emit less methane
than those fed perennial ryegrass (Lolium perenne L.), and possible mechanisms behind the difference. PLoS One
10(3):e0119697
Taljaard TL (1993) Cabbage poisoning in ruminants. J S Afr Vet Assoc 64(2):96–100
Tripathi MK, Mishra AS (2007) Glucosinolates in animal nutrition: a review. Anim Feed Sci Technol 132:1–27
Velayudhan DE, Schuh K, Woyengo TA et al (2017) Effects of expeller extracted canola meal on growth performance,
organ weights, and blood parameters of growing pigs. J Anim Sci 95:302–307

210
 Vig AP, Rampal G, Thind TS et al (2009) Bio-protective effects of glucosinolates – a review. LWT – Food Sci Technol
42: 1561–1572
Wagner AE, Terschluesen AM, Rimbach G (2013) Health promoting effects of brassica-derived phytochemicals: from
chemopreventive and anti-inflammatory activities to epigenetic regulation. Oxid Med Cell Longev [Online] 2013:964539.
http://www.pubmedcentral.nih.gov/articlerender.fcgi?artid¼3885109&tool¼pmcentrez&rendertype¼abstract. Accessed
22 Apr 2014
Wight PA, Scougall RK, Shannon DW et al (1987) Role of glucosinolates in the causation of liver haemorrhages in
laying hens fed water-extracted or heat-treated rapeseed cakes. Res Vet Sci 43(3):313–319
Woyengo TA, Beltenena E, Ziglstra RT (2014) Nonruminant nutrition symposium: controlling feed costs by including
alternative ingredients into pig diets: a review. J Anim Sci 72:1293–1305
Woyengo TA, Kiarie E, Nyachoti CM (2011) Growth performance, organ weights, and blood parameters of broilers fed
diets containing expeller-extracted canola meal. Poult Sci 90(11):2520–2527

211
 Cannabis na medicina veterinária: terapias canabinóides
Joshua A. Hartsel, Kyle Boyar, Andrew Pham, Robert J. Silver, and Alexandros
Makriyannis

Resumo
O uso de cannabis para espécies animais é uma área de crescente interesse, em grande
parte devido aos benefícios terapêuticos observados para humanos e animais na era da
legalização da cannabis. O relacionamento próximo que os humanos têm com seus
animais de estimação e outras espécies veterinárias gerou um interesse renovado na
possibilidade e na promessa da cannabis para tratar problemas de saúde semelhantes na
comunidade animal. Este capítulo explora a literatura disponível sobre cannabis, suas
interações com o sistema endocanabinóide e como as espécies animais interagem com
várias formulações e tratamentos de cannabis. Uma breve visão geral da biologia,
química e história da cannabis é discutida com a relevância para as espécies veterinárias
em mente. Os componentes farmacologicamente ativos são discutidos com dados
anedóticos29 e objetivos, baseados em evidências e clínicos.

Palavras-chave: Cannabis · Canabidiol · CBD · canabinóides · Suplemento nutricional ·

Nutracêutico · Medicina veterinária · Animais · Médico Veterinário

J. A. Hartsel. Delta-9 Technologies, LLC, Lake Forest, CA, USA. e-mail: jhartsel@delta9technologies.com;
http://www.delta9technologies.com
K. Boyar. Medicinal Genomics, Woburn, MA, USA. e-mail: kyle.boyar@medicinalgenomics.com
A. Pham. BelCosta Labs, Long Beach, CA, USA. e-mail: andrew@belcostalabs.com
R. J. Silver. RX Vitamins, Elmsford, NY, USA. e-mail: rsilver@drsilverdvm.com; http://www.rxvitamins.com
A. Makriyannis. Northeastern University, Boston, MA, USA. e-mail: a.makriyannis@neu.edu

1. Introdução
O sistema endocanabinóide (ECS) foi identificado em quase todos os animais, desde
mamíferos complexos como primatas até animais filogeneticamente primitivos como os
cnidários30. A presença quase universal e o surgimento precoce do ECS, evolutivamente,
é um forte indicador de sua importância biológica. Os receptores canabinóides são
expressos na maioria dos animais, incluindo vertebrados (mamíferos, pássaros, répteis e
peixes) e invertebrados (ouriços-do-mar, sanguessugas, mexilhões, nematóides e outros).
O animal mais primitivo em que um ECS foi observado é a Hydra (H. vulgaris), um

29 Não necessariamente verdadeiro ou confiável, porque se baseia em relatos pessoais e não em fatos ou pesquisas.
30 Cnidaria é um filo de animais exclusivamente aquáticos, agrupando os organismos conhecidos pelo nome comum de cnidários,
entre os quais estão as medusas e as alforrecas, as caravelas, as anêmona-do-mar, os corais-moles e as hidras de água-doce.
212
cnidário da classe Hydrozoa, que é o primeiro animal a desenvolver uma rede neural. De
Petrocellis et al. (1999) determinaram que a principal função do ECS na Hydra é controlar
a resposta de alimentação. É evidente, a partir desses dados, que todas as espécies
veterinárias contêm um ECS. Portanto, a compreensão do ECS nessas espécies é
fundamental para o desenvolvimento de aplicações clínicas para endocanabinóides e
fitocanabinóides derivados principalmente de Cannabis sativa L.

Ensaios clínicos detalhando os benefícios e a segurança dos fitocanabinóides em animais

de companhia estão finalmente sendo realizados em instituições acadêmicas, após anos
de supressão de pesquisas devido ao status controverso da cannabis. O interesse público
e comercial nesta terapia estimulante e emergente para animais resultou em uma série de
estudos e ensaios clínicos sendo publicados ou em vias de publicação. Este capítulo
relata as descobertas desses estudos que já foram publicados, estão no prelo ou estão
em seus estágios iniciais; este capítulo fornecerá comunicações pessoais com os
investigadores principais relatando os resultados até a data de seus estudos em
andamento.

Uma revisão completa da literatura não revela nenhum ensaio clínico publicado antes dos
estudos relatados neste capítulo envolvendo fitocanabinóides em cães, gatos ou cavalos.
Existem, no entanto, alguns estudos em um ambiente de laboratório usando espécies de
laboratório para estudar os efeitos de fitocanabinóides, ou para medir aspectos do ECS
em uma espécie específica.

Apesar da escassez de estudos controlados publicados em espécies veterinárias, os

cuidadores de animais têm usado cannabis para seus cães, gatos e cavalos desde antes
da legalização da maconha medicinal em 1996 e provavelmente muito antes. Os
benefícios observados do uso de cannabis incluem a redução da ansiedade; alívio da dor;
melhora da mobilidade em animais com osteoartrite; redução no tamanho do tumor;
apetite melhorado; melhor controle do diabetes tipo 2, condições inflamatórias e
problemas digestivos; e melhor controle das crises epilépticas. Esses benefícios não têm
sido universais e os tratamentos bem-sucedidos são baseados em dosagens relativas ao
tipo de condição, gravidade da condição, tamanho e metabolismo, e fatores relacionados
à diversidade bioquímica e densidade e distribuição do ECS entre membros da mesma
espécie.

Veterinários, pesquisadores veterinários e cuidadores de animais estão todos ansiosos

para adotar terapias à base de cannabis e têm procurado evidências para apoiar o uso
seguro e eficaz de terapias com canabinóides para seus animais de estimação ou seus
pacientes. Vamos nos concentrar em fornecer esses dados neste capítulo.
213
2. Cannabis sativa L.: Alimentos, Fitoterápicos, Farmacêuticos e
Nutracêuticos
Muitos dos constituintes da Cannabis sativa podem ser classificados como um ingrediente
farmacêutico, um nutriente, um nutracêutico ou um produto à base de plantas.
Nutracêutico é um termo que foi criado em 1989 pelo DeFelice ao juntar as duas palavras,
“nutrição” e “farmacêutico” (Kalra 2003). Não tem definição legal, mas se refere aos
compostos que não são nutrientes nem produtos farmacêuticos. O Conselho Nutracêutico
Veterinário da América do Norte em 1996 definiu um nutracêutico veterinário como uma
substância "[não medicamentosa] produzida em uma forma purificada ou extraída e
administrada por via oral a um paciente para fornecer os agentes necessários para a
estrutura e função normal do corpo e administrada com a intenção de melhorar a saúde e
o bem-estar dos animais (Booth 2009).”

2.1 Considerações Regulatórias e Legais

O Centro de Medicina Veterinária da Administração de Alimentos e Drogas (FDA-CVM)

afirma que a Lei de Saúde e Educação de Suplementos Dietéticos (1994), que
regulamenta os suplementos dietéticos para humanos, não se aplica a animais. Isso
significa que, legalmente, existem apenas duas opções para regulamentar produtos que
são semelhantes aos suplementos dietéticos humanos sob a lei; com base no uso e
conteúdo pretendidos, os produtos são regulamentados como alimentos ou
medicamentos para animais. Não há outra escolha. A comercialização desses
alimentos/rações para animais ou produtos de remédios para animais também pode
ocorrer em uma base de estado a estado e, como tal, pode estar sujeita à aprovação
regulamentar pelos Oficiais de Controle de Rações (FCOs) locais.

A Associação Americana de Controle de Alimentos Oficial (AAFCO) não tem poderes

regulatórios, mas fornece diretrizes para estados individuais com relação a produtos de
nutrição animal. Suas diretrizes são seguidas na maioria dos estados, embora as
interpretações, especialmente de reivindicações permitidas, variem de estado para estado
e de indivíduo para indivíduo. Se um produto nutricional contém ingredientes que não são
aprovados como ingredientes alimentícios pelo FDA-CVM, ou as alegações são
violadoras, o FCO estadual local pode recomendar que um produto não seja vendido ou
realmente emitir um aviso de interrupção da venda ou confisco do produto do fornecedor
e pontos de venda.

214
Em 2000, os FCO de Iowa começaram a retirar produtos nutricionais que continham
ingredientes não aprovados das prateleiras dos consultórios veterinários porque não
tinham a aprovação do FDA-CVM. Naquela época, um grupo comercial foi formado, o
Conselho Nacional de Suplemento Animal (www.NASC.cc) para trabalhar com os
reguladores nos níveis estadual e federal para desenvolver diretrizes viáveis a serem
seguidas pelos fornecedores que satisfizessem as preocupações dos reguladores sobre
estes produtos comumente chamados de nutracêuticos.

Como resultado dos esforços da NASC, ambos os produtos para fins de saúde são
referidos como “produtos de saúde animal em forma de dosagem” e podem ser
comercializados sob descrição da aplicação, desde que as empresas ajam com
responsabilidade. As diretrizes para o comportamento responsável da empresa incluem,
mas não se limitam a, rotular os produtos de maneira adequada; fazer reivindicações que
não violem a Seção 201 (g) (1) (b) da Lei Federal de Alimentos, Medicamentos e
Cosméticos (FFDCA); seguir os Padrões de Boas Práticas de Fabricação e implementar
sistemas eficazes de monitoramento/gerenciamento de riscos; garantindo a segurança do
produto; e proteger a saúde dos animais e das pessoas, que são sempre a consideração
mais importante para qualquer funcionário regulador.

O FDA-CVM desenvolveu confiança no trabalho do NASC quando este grupo comercial

estabeleceu um site para relatos de eventos adversos nutracêuticos veterinários. Este
banco de dados, NAERS™, agora contém dados de gerenciamento de risco, rótulos de
produtos e análises estatísticas sobre centenas de produtos nutracêuticos e nutricionais e
ingredientes. NAERS contém muitos milhões de administrações registradas e pode
fornecer com precisão a porcentagem e o tipo de eventos adversos registrados para um
determinado material durante este grande número de administrações de animais. O
NASC (Adverse Event Reporting System) é atualmente o banco de dados mais avançado
do mundo para produtos em forma de dosagem para cães, gatos e cavalos.

O NASC começou com 18 membros em 2001 e agora em 2018 tem mais de 175
membros. As empresas associadas devem cumprir os padrões cGMP, seguir as diretrizes
dos modelos de rótulos e não fazer alegações médicas, mas podem usar declarações de
estrutura e função em seus materiais de marketing e rótulos. Os membros devem passar
por auditorias regulares por terceiros, que incluem testes aleatórios de seus produtos para
verificar se atendem às declarações do rótulo. As empresas associadas que passam na
auditoria têm permissão para exibir o selo NASC em suas garrafas, ou outros materiais de
marketing, o que, para o consumidor, se tornou um sinal de qualidade, e muitos donos de
animais selecionam apenas os produtos que exibem esse selo.
215
O FDA-CVM regula rigidamente quais ingredientes são aprovados para alimentação
animal. O cânhamo não é atualmente um ingrediente aprovado para ração animal de
acordo com o FDA-CVM e a AAFCO (Association of American Feed Control Officials;
www.AAFCO.org). Além disso, de acordo com o FDA, para que um material seja
considerado um suplemento (para humanos) versus um produto farmacêutico, ele precisa
ter sido usado como suplemento antes de outubro de 1994, quando o DSHEA foi
aprovado, ou a empresa deve apresentar uma aplicação NDI (Novo Ingrediente Dietético).
Atualmente, o FDA afirma que não havia uso reconhecido de cânhamo como nutracêutico
antes que a GW Pharmaceuticals apresentasse seu NDI para Epidiolex, seu medicamento
contendo CBD recentemente aprovado pelo FDA para tratar epilepsia pediátrica resistente
devido à síndrome de Dravet31. Os limites em torno dessa questão estão sendo avaliados
e provavelmente serão discutidos no tribunal.

A Drug Enforcement Agency persistiu em sua classificação de substância controlada das

resinas não – THC encontradas na planta de cannabis, seja da cannabis medicinal legal
para o estado com alto THC (também conhecido como: maconha) ou do baixo THC
legalmente legal (também conhecido como cânhamo) Isso ocorre apesar do fato de que
os fitocanabinóides não – THC não atendem a nenhum dos requisitos para uma
substância controlada que é um Anexo I. Esta categoria de planejamento afirma que os
materiais desta categoria não têm aplicações médicas e um grande potencial para abuso
e/ou toxicidade. Esta classificação do Anexo I ocorre apesar do fato de que o Governo
Federal detém uma patente para os pedidos medicinais de CBD para neuroproteção
(Hampson et al. 2003; Patente dos EUA nº 6630507). Esta classificação das resinas não –
THC no cânhamo como uma planta de Cronograma I precisa ser alterada para uma
classificação não programada para que a indústria de cânhamo nascente e florescente se
desenvolva totalmente economicamente. No verão de 2018, há um projeto de lei
apresentado no Congresso para remover o status de substância controlada para o
cânhamo e todos os seus derivados como parte do projeto de lei agrícola de 2018.

O FDA-CVM, em uma declaração pública em abril de 2018 sobre o uso médico de

cannabis em animais, aponta para o fato de que atualmente não existem medicamentos
aprovados pela FDA para animais que contenham cannabis, e não há evidências
científicas, a partir da primavera 2018, que apóia o uso de cannabis e/ou CBD em
animais. No entanto, com uma série de estudos veterinários universitários agora
mostrando segurança e eficácia, isso pode mudar. O FDA aprovou o Epidiolex™ em junho
de 2018, mas ainda não foi reprogramado pela DEA. O uso do termo “CBD” ou
“canabidiol” em um rótulo ou na comercialização de um produto de maconha para
31 Encefalopatia progressiva associada à convulsões de difícil controle
216
pessoas ou animais de estimação agora se tornou uma alegação médica, uma vez que o
CBD é um medicamento aprovado, e isso pode deixar o produto aberto à aplicação pelo
FDA. As empresas precisam evitar o uso dessas duas palavras e devem escolher outro
idioma ao descrever o conteúdo de um produto e sua atividade pretendida para o usuário
final. Atualmente não há limite estabelecido para o CBD de ocorrência natural em
produtos de cânhamo, embora tenha sido considerado pelas agências regulatórias manter
o teor de CBD igual ou inferior ao que ocorre naturalmente na planta do cânhamo, que em
alguns cultivares pode atingir a média de 18% nas flores. Este limite de potência ainda
não foi estabelecido, no entanto.

A Lei Agrícola dos EUA de 2018 e a Lei de Substâncias Controladas de 1970

Sect. 7606 do US Farm Bill 2013 permitiu a pesquisa sobre cultivo de cânhamo e
pesquisa de mercado para a comercialização de cânhamo em uma base estado a estado,
para cada estado que aprovou uma legislação relativa ao cultivo e comercialização de
cânhamo naquele estado. Atualmente, existem 34 estados que possuem legislação em
vigor permitindo o cultivo de cânhamo, sendo Kentucky e Colorado os maiores
produtores.

A Farm Bill 2018 contém a emenda McConnell que remove o status de substância
controlada do cânhamo cultivado legalmente, novamente, em uma base estado por
estado. Cada estado pode decidir como eles regulam o cânhamo dentro de seu estado de
acordo com esta emenda. Assim que a Farm Bill for aprovada com essa emenda, ela
removerá qualquer impedimento legal à comercialização de cânhamo e seus derivados
nos Estados Unidos.

Esta alteração é necessária porque a Drug Enforcement Administration (DEA) programou

toda a cannabis (cânhamo e maconha) como uma substância controlada de Tabela I, o
que significa que não tem aplicações médicas e é potencialmente tóxica e/ou viciante.
Substâncias controladas não podem ser transportadas através das fronteiras estaduais,
então muitas empresas (especialmente as maiores) que normalmente comercializariam
um suplemento popular como o CBD não se envolverão com a comercialização de
cânhamo até que esta última barreira ao comércio seja removida.

2.2 Cânhamo na alimentação animal

O cânhamo está se tornando uma commodity agrícola novamente nos Estados Unidos, à
medida que os estigmas e as restrições à pesquisa e comercialização estão sendo
gradualmente removidos como resultado da Lei Agrícola dos EUA de 2013, Seção 7606.
Este projeto de lei de gastos abrangentes estabeleceu o status legal do cultivo cânhamo

217
nos Estados Unidos e, como resultado, desenvolveu-se um interesse no uso do cânhamo
para alimentação animal. A legislatura do Colorado aprovou um projeto de lei formando
um comitê de partes interessadas sob a orientação do Departamento de Agricultura do
Colorado para examinar o uso de cânhamo e derivados de cânhamo para ração animal,
tanto para animais de companhia quanto para alimentos. O relatório final dessa comissão
de partes interessadas foi publicado em 29 de dezembro de 2017 (Glenn 2017).

Para resumir as conclusões deste relatório do comitê de partes interessadas

O FDA e a AAFCO afirmaram que estariam receptivos a uma Petição de Aditivo para
Alimentos (FAP) apresentada ao FDA para o uso da substância não controlada parte da
planta, o grão ou semente esterilizada, incluindo o óleo e sua torta de proteína. Esta
aprovação da FDA é solicitada para cães, gatos, cavalos e alimentação animal. Em
animais destinados a entrar na cadeia alimentar humana, serão necessários estudos que
demonstrem de forma conclusiva a segurança de nosso suprimento alimentar para
alimentar um alimento que contenha canabinóides, até com vestígios de fitocanabinóides
não psicoativos.

A Hemp Industries Association of Colorado formou um comitê diretivo para criar uma
Petição de Aditivo de Ração para Semente de Cânhamo a ser submetida ao FDA-CVM
para aprovação da semente de cânhamo como ingrediente de ração animal. Atualmente,
o cânhamo é um ingrediente nutricional não aprovado de acordo com o FDA e, como tal,
quando contido na ração animal é considerado adulterado, e pode estar sujeito a ações
regulatórias quando comercializado como alimento. Após uma revisão da literatura,
estudos de alimentação de segurança de 6 meses precisarão ser realizados antes que o
FDA concorde em aprovar o cânhamo como ingrediente alimentar. Esse processo
geralmente leva de 2 a 3 anos e uma quantidade considerável de recursos.

Atualmente, qualquer produto de alimentação animal que contenha cânhamo rotulado

como produto nutricional com análise garantida e o cânhamo rotulado como nutriente será
considerado adulterado até que o cânhamo seja um ingrediente alimentar aprovado. Por
enquanto, o cânhamo terá que ser incluído em um produto como nutracêutico e ter a
linguagem do rótulo refletindo o suporte que o cânhamo oferece à estrutura e função
saudáveis do corpo e ser comercializado como um produto de saúde animal em forma de
dosagem. Isso é feito desde que o produto atenda aos limites mínimos de THC e não
contenha concentrações de fitocanabinóides maiores do que as normalmente
encontradas em toda a planta de cânhamo, em média.

O valor nutricional da Cannabis sativa L.

218
A semente de cannabis, também conhecida como “grão”, contém ácidos graxos valiosos e
proteínas de alta qualidade. A semente é particularmente nutritiva e costuma ser
consumida inteira ou usada em preparações alimentícias. Um bolo de proteína feito a
partir da semente tem sido usado para ração animal na Europa. A semente de cânhamo
inteira contém aproximadamente 20–25% de proteína, 20–30% de carboidratos e 10–15%
de fibra insolúvel (Callaway 2004; Deferne e Pate 1996). Além disso, ele contém uma
mistura dos ácidos graxos saturados palmítico e esteárico, bem como ácido oleico. O óleo
de semente de cânhamo é uma fonte extremamente rica de ácidos graxos insaturados,
especialmente os ácidos graxos essenciais, ácido linoleico (LA) e ácido alfa linolênico
(ALA) (Callaway 2004; Leizer et al. 2000).

Os ácidos graxos essenciais (EFAs) não podem ser produzidos naturalmente pelo corpo
de um animal e devem ser provenientes da dieta. LA e ALA são ácidos graxos ômega-6 e
ômega-3, respectivamente, e, no cão, são considerados essenciais, uma vez que o cão
não consegue sintetizá-los. Em gatos, esses dois ácidos graxos também são essenciais;
entretanto, devido à sua função hepática, os gatos não podem desnaturar e alongar o
ácido linoleico para formar ácido araquidônico (Hand et al. 2010).

O óleo de semente de cânhamo também tende a conter grandes quantidades de ácido

gama-linolenico (GLA) e ácido estearidônico (SDA), que são metabólitos de LA e ALA
(Callaway 2004). Uma vez que esses metabólitos são produzidos pela quebra de LA e
ALA dietéticos, eles não são considerados EFAs. No entanto, a suplementação na dieta
pode ser extremamente benéfica. Muitas doenças crônicas da sociedade moderna,
incluindo câncer, diabetes, doenças cardíacas, artrite, atopia, doença de Alzheimer e
outras, têm um componente inflamatório (Kapoor e Huang 2006). As dietas enriquecidas
em GLA mostraram reduzir a inflamação (Tate et al. 1989) e, portanto, o valor nutricional
do GLA do óleo de semente de cânhamo é claro.

O óleo de semente de cannabis tem a proporção adequada (4:1) de ácidos graxos

ômega-6 para ômega-3 para uma saúde ideal. A cascata de eicosanóides pró-
inflamatórios é promovida por uma alta proporção de ácidos graxos ômega-6/ômega-3.
Isso resulta em aumento da prostaglandina 2a (PG2α), que é um eicosanóide pró-
inflamatório. Dietas ricas em ômega-3 e pobres em ômega-6 têm um perfil de nutrientes
menos pró-inflamatório, que pode ser antiinflamatório com níveis suficientemente
elevados de ácidos graxos ômega-3 poliinsaturados de cadeia longa (LCPUFA) e/ou o
anti LCPUFA ômega-6 inflamatório, ácido gama-linolenico (GLA). A dieta ocidental, rica
em carnes alimentadas com grãos e grãos ricos em ácidos graxos ômega-6 e pobres em
ácidos graxos ômega-3, resulta em uma proporção de 20:1 de ômega-6/ômega-3. É essa
219
alta razão ômega-6/ômega-3 que desvia a cascata de eicosanóides para o lado pró-
inflamatório e que os ácidos graxos ômega-6 e GLA da dieta servirão para reduzir as
tendências inflamatórias no corpo (Bauer 2011).

Três exemplos clínicos em que a proporção mais baixa de ômega-6/ômega-3 tende a um

ambiente menos inflamatório no corpo são os seguintes: (1) uma proporção de 4:1
ômega-6/ômega-3 foi associada a uma redução de 70% na mortalidade total por doença
cardiovascular em pacientes humanos; (2) no câncer colorretal, uma diminuição na
proliferação de células retais foi observada com uma proporção inferior de 2,5:1; e (3)
uma proporção de 5:1 foi considerada benéfica em pacientes com asma (Simopoulos
2002).

3. História Moderna da Farmacologia canabinóide

As propriedades terapêuticas da cannabis foram apreciadas ao longo de vários milênios e
suas propriedades farmacológicas estudadas desde meados do século XX. Este esforço
foi intensificado na década de 1960 com o isolamento, caracterização e síntese
subsequente de seu principal ingrediente psicoativo (-) -Δ 9-THC por Mechoulam e Gaoni,
e atenção significativa foi dada ao desenvolvimento de compostos sintéticos com efeitos
terapêuticos mais potentes e direcionados (Gaoni e Mechoulam 1964). Abordagens
simultâneas por laboratórios de pesquisa individuais e pela indústria farmacêutica
produziram uma série de novos compostos estruturalmente relacionados, que foram
chamados coletivamente de canabinóides. Um desses projetos de desenvolvimento de
drogas da Eli Lilly levou ao primeiro canabinóide sintético, nabilona (Cesamet), que foi
usado para tratar náuseas, dor e apetite reduzido associados à quimioterapia do câncer
(Makriyannis 2014; Pertwee 2008). O grande avanço na compreensão do mecanismo de
ação da cannabis, e mais especificamente do Δ 9-THC, veio com a descoberta dos
primeiros alvos biológicos para este composto. Após uma reunião de pesquisa muito bem-
sucedida em 1987 pelo Instituto Nacional de Abuso de Drogas em Bethesda, Maryland, o
trabalho colaborativo entre os laboratórios participantes levou à descoberta de um novo
receptor acoplado à proteína G (GPCR), que foi denominado CB 1, a ser seguido 2 anos
depois por um segundo GPCR denominado CB2 (Makriyannis 2014). O receptor
canabinóide CB2 é encontrado principalmente em células relacionadas à imunidade e está
amplamente envolvido na regulação do sistema imunológico e em condições
inflamatórias. Embora em condições “homeostáticas” normais os receptores CB2 tenham
uma presença muito baixa nos neurônios, em situações “não homeostáticas” como
inflamação, doenças neurodegenerativas como Alzheimer, Parkinson, ALS, bem como em
220
cânceres como gliomas, sua presença no cérebro está dramaticamente aumentada nos
astrócitos, bem como nas células endoteliais microgliais e cérebro microvasculares.
Trabalhos publicados recentes forneceram evidências de que esse receptor também pode
ter um papel na modulação de transtornos viciantes (Xi et al. 2011).

Ambos os receptores CB1 e CB2 desempenham papéis importantes em muitos processos,

incluindo plasticidade neuronal, dor, ansiedade, neuro inflamação, função imunológica,
regulação metabólica, recompensa, desejo e crescimento ósseo (Mackie 2006).

4. Química de endocanabinóide (eCB)

A próxima descoberta no ECS foi um grupo de compostos encontrados em tecidos de
mamíferos, que foram chamados de endocanabinóides (eCBs). Os mais representativos
dos quais foram araquidonoil etanolamina ou anandamida (AEA, por volta de 1992), uma
amida de ácido graxo de cadeia longa e 2-araquidonoil glicerol (2-AG por volta de 1995),
o respectivo éster (Devane et al. 1992; Mechoulam et al. 1995; Pertwee 2000). Essas
novas substâncias são capazes de ativar os receptores CB1 e CB2 e, quando testadas
em animais, produziram efeitos biológicos semelhantes aos do Δ 9-THC (fig. 2).

Fig. 2 Os endocanabinóides AEA e 2-AG se ligam aos

receptores CB que são produzidos endogenamente

Os eCBs são produzidos sob demanda por uma série de enzimas que estão presentes na
membrana celular e são ativadas por níveis elevados de íons de cálcio. Os níveis de eCB,
também chamados de “tônus endocanabinóide”, são dependentes do tecido e são
regulados por outro conjunto de enzimas, as mais proeminentes das quais são: amida
hidrolase de ácido graxo (FAAH) e monoacilglicerol lipase (MAGL), cujo papel é desativar
AEA e 2-AG e seus congêneres, respectivamente. Um recurso adicional na regulação do
tom do eCB é um mecanismo de transporte que está envolvido no transporte de eCBs
liberados para a célula (Fig. 3) (Vemuri e Makriyannis 2015).

221
A anandamida é sintetizada a partir de seu precursor de membrana N-araquidonil
fosfatidiletanolamina (NAPE) por meio da clivagem por uma fosfolipase D (NAPE-PLD).
Em contraste, a anandamida é degradada pela enzima amida hidrolase de ácido graxo
(FAAH) em ácido araquidônico (AA) e etanolamina. O 2-AG é produzido por meio das
atividades da diacilglicerol lipase (DAGL) ou da fosfolipase C (PLC) usando um precursor
AA. 2-AG é então subsequentemente degradado pela monoacilglicerol lipase (MAGL) em
glicerol e AA (Hartsel et al. 2016).

Os eCBs são liberados do neurônio pós-sináptico e atuam nos receptores canabinóides

do neurônio pré-sináptico. Os eCBs inibem o influxo de cálcio intracelularmente,
resultando na inibição da liberação de neurotransmissores. As ações dos eCBs têm vida
relativamente curta, pois sofrem rápida recaptação pela célula e, em seguida, são
degradados. A produção de eCBs pode ser estimulada de várias maneiras, como lesão
neuronal ou disparo neuronal excessivo (Basavarajappa 2007).

A sinalização ECS vem em duas formas – tônica e fásica. A sinalização tônica estabelece
o tom eCB ou um nível basal de sinalização, enquanto a sinalização fásica envolve
perturbações temporais nos níveis eCB. Os pesquisadores demonstraram que os ácidos
graxos ômega-3 são essenciais para a regulação adequada do tom do ECS, uma vez que
esses ácidos graxos poliinsaturados alimentam-se diretamente nas vias de sinalização do
eCB (Lafourcade et al. 2011).

Essas novas descobertas abriram a porta para a caracterização dos dois receptores
canabinóides, as proteínas que modulam sua função e a família eCB de compostos que
englobam o sistema ECS. O ECS desempenha um papel importante na regulação de
muitos aspectos da fisiologia humana. Hoje sabemos que o receptor canabinóide CB 1 é o
GPCR mais abundante no cérebro, mas também está presente em muitos outros órgãos,
como coração, vasos sanguíneos, fígado, pulmões e sistema digestivo, bem como células
de gordura e espermatozóides (Mackie 2008).

222
 Fig. 3 O ciclo de feedback para o
sistema de sinalização
endocanabinóide é mostrado acima.
Receptor de canabinóide CB1 1,
receptor de canabinóide CB2 2, amida
hidrolase de ácido graxo FAAH, MGL
monoacilglicerol lipase, proteína 6
contendo domínio ABHD6 α-β-
hidrolase, proteína 12 contendo
domínio ABHD12 α-β-hidrolase 12,
NAPE N-araquidonoil fosfatidiletanol,
PE fosfatidiletanolamina, PC
fosfolipase C, PD fosfolipase D, DGL
diacilglicerol lipase, proteína de
ligação de ácido graxo FABP, AEA
araquidonoil etanolamina, 2-G 2-
araquidonoilglicerol, retículo
endoplasmático ER. Fonte: Adaptado
de Vemuri e Makriyannis (2015)

4.1 O ECS Explicado

O receptor CB1 pertence à família de GPCRs do tipo rodopsina Classe A. É encontrada

principalmente no sistema nervoso central, sendo enriquecida no córtex, hipocampo, fluxo
de saída dos gânglios da base e cerebelo. Pode haver diferenças intra e interespécies na
localização anatômica dos receptores canabinóides no ECS. É importante observar que
CB1 em humanos não é prevalente no tronco cerebral ou na medula oblonga, os órgãos
responsáveis pelo controle de funções autonômicas vitais, como respiração e batimento
cardíaco. Este é um forte fator que contribui para o perfil de segurança dos canabinóides
em humanos e a principal razão pela qual é quase impossível uma overdose de THC. No
entanto, para os cães, isso não é verdade. Este receptor também é encontrado em menor
extensão na periferia dos tecidos cardiovascular, imunológico, gastrointestinal e
reprodutivo. Os receptores CB2 estão localizados principalmente nas células do sistema
imunológico, entre elas os leucócitos e os do baço e amígdalas (Pertwee 2001). Os
receptores CB1 e CB2 compartilham um grau significativo de homologia apesar de estarem
223
localizados principalmente no SNC e no sistema imunológico, respectivamente. Uma das
funções dos receptores canabinóides no sistema imunológico é a modulação da liberação
de citocinas. A ativação dos receptores CB 2 das células B e T pelos canabinóides leva à
inibição da adenilil ciclase nessas células e a uma resposta reduzida ao desafio
imunológico (Condie et al. 1996). Ambos CB 1 e CB2 são acoplados às proteínas Gi/o e
causam uma diminuição na atividade da adenilil ciclase e na via do cAMP. Eles também
estimulam cascatas de proteína quinase ativada por mitogênio (MAPK), modulam canais
iônicos e modificam os níveis de cálcio intracelular e, portanto, a liberação de
neurotransmissores (Howlett e Fleming 1984; Howlett 2002; Marcu and Schechter 2016;
Pertwee 2005). Os canais de potássio de retificação interna também podem servir como
um mecanismo de sinalização para o receptor CB 2 (Griffin et al. 1999; Ho et al. 1999).

A ação dos canabinóides não se limita à sinalização fora da célula. As proteínas de

ligação de ácidos graxos (FABP) demonstraram ser essenciais para o transporte de
canabinóides para a célula, onde podem interagir com os receptores de canabinóides na
membrana mitocondrial ou recrutar diferentes fatores de transcrição e são translocados
para o núcleo onde modificam a expressão do gene (Elmes et al. 2015). Além disso,
existem outras proteínas que modificam a sinalização de canabinóides, como CRIP1a,
que inibe a sinalização constitutiva de eCB (Smith et al. 2015). O receptor canabinóide
CB1 também foi encontrado intracelularmente, onde se localiza na membrana mitocondrial
e regula o metabolismo energético neuronal (Bénard et al. 2012).

O CB1 mitocondrial modifica a respiração celular por meio de suas ações inibitórias sobre
a adenilil ciclase solúvel e redução da atividade do complexo I na cadeia de transporte de
elétrons. Além disso, esses receptores mitocondriais também podem desempenhar um
papel nos mecanismos pró-apoptóticos dos canabinóides nas células cancerosas.

4.2 Interações de receptor não canabinóide e dimerização

Os canabinóides não têm como alvo apenas CB 1 e CB2 e podem atuar por meio de outros
sistemas receptores. Camundongos knockout para esses dois receptores canabinóides
foram criados; no entanto, esses camundongos ainda exibem respostas comportamentais,
bioquímicas e eletrofisiológicas quando os canabinóides são aplicados, sugerindo a
presença de outros subtipos de receptores de canabinóides. Por exemplo, recentemente
foi demonstrado que o canabidiol (CBD) atua como um agonista inverso em GPR3 e
GPR6 (Laun e Song 2017). Atualmente, existem alguns outros GPCR que estão sob
investigação como potenciais receptores de canabinóides. Um desses receptores é o
GPR18, que se demonstrou ser ativado pelo ligando eCB N-araquidonoilglicina (NAGly).

224
Acredita-se que este receptor desempenhe um papel fundamental na ativação da
micróglia e, portanto, na resposta à lesão neuronal (McHugh et al. 2010).

O GPR55 é outro receptor canabinóide putativo ativado pelo lisofosfatidilinositol (LPI) e

antagonizado pelo CBD que demonstrou desempenhar um papel na regulação da
fisiologia óssea ao regular o número e a função dos osteoclastos (Whyte et al. 2009).
Similarmente ao GPR18, também parece desempenhar um papel na função microglial,
mediando especificamente algumas de suas atividades neuroprotetoras (Kallendrusch et
al. 2013). O GPR119 é considerado outro componente do ECS. Especificamente, este
receptor regula vários processos fisiológicos que melhoram a homeostase da glicose,
incluindo a secreção de insulina dependente de glicose das células β pancreáticas,
secreção do hormônio incretina gastrointestinal, controle do apetite, homeostase de
eletrólitos epiteliais, esvaziamento gástrico e proliferação de células β e citoproteção.
Essas propriedades tornam esse receptor um candidato atraente como alvo de drogas
para condições metabólicas, como diabetes (Mo et al. 2014).

Outros alvos biológicos potenciais que interagem com canabinóides incluem PPARγ, onde
CBD foi mostrado para atenuar a inflamação beta e aumentar a neurogênese hipocampal
através de ações neste local (Esposito et al. 2006). O receptor de dor TRPV1, famoso por
suas interações com a capsaicina encontrada na pimenta malagueta, também interage
com os canabinóides para reduzir a nocicepção. Este alvo também parece estar implicado
na síndrome de hiperemese canabinóide (CHS), que recentemente ganhou atenção da
mídia. O tratamento de pacientes com CHS com capsaicina tópica, um conhecido
agonista do TRPV1, bem como alternância de chuveiros quentes e frios, tende a resolver
os sintomas (Moon et al. 2018).

Dimerização do receptor opiáceo canabinóide

CB1 demonstrou dimerizar com os receptores opióides mu e delta (Fig. 4). O heterodímero
do receptor opioide mu tem propriedades interessantes e, quando cada componente
individual é ativado, a sinalização do eCB é aumentada. No entanto, quando ambos são
ativados simultaneamente, isso resulta em uma diminuição na sinalização. No caso de
heterodímeros opióides delta, esses receptores tendem a se antagonizar se algum estiver
ausente.

225
 Fig. 4 Foi demonstrado que os
receptores canabinóides formam
dímeros com outros tipos de
receptores opióides, serotonina,
dopamina, adenosina, orexina e
quimiocina. Com permissão do
Professor de Pot

Por exemplo, se o receptor opioide delta está faltando neste complexo CB 1, a sinalização
aumenta e vice-versa (Fujita et al. 2014).

Dimerização do sistema serotonérgico e do receptor de canabinóide

Foi demonstrado que o CBD produz atividade agonista no receptor de serotonina 5-HT1A,
o que pode ser em parte responsável por suas propriedades ansiolíticas. Foi demonstrado
que o receptor canabinóide CB1 forma complexos heteroméricos com o receptor da
serotonina (5-HT2A). A atividade desse complexo receptor foi implicada nas propriedades
de aumento da memória dos canabinóides (Viñals et al. 2015). Curiosamente, a
prevalência desta classe específica de complexo heteromérico aumenta em usuários
pesados à medida que envelhecem e estão implicados em certas condições, como a
esquizofrenia (Galindo et al. 2018). Além disso, os agonistas canabinóides também inibem
a sinalização no receptor 5-HT3, onde produzem efeitos antieméticos (Fan 1995).

Outros sistemas receptores

226
Para uma excelente revisão sobre este tópico, consulte o artigo do Prof Pot sobre
“Dimerização do receptor de canabinóide”, do qual esta figura foi retirada. Consulte http://
profofpot.com/cannabinoid-recep tor-dimerization/

4.3 ECS em Saúde e Doença

A maior parte do que sabemos sobre os benefícios médicos e de saúde da cannabis diz
respeito aos humanos e não aos animais. Mais adiante neste capítulo, vamos nos
concentrar no que sabemos sobre a cannabis no que se refere aos animais, mas muitas
das interações biológicas ocorrem entre as espécies animais. Abaixo, destacamos muitas
áreas em que a cannabis pode ser útil e atua como um ponto de partida para avaliar a
cannabis como um agente terapêutico em espécies veterinárias.

4.3.1 - Sono

Os primeiros estudos da década de 1970 indicam que o THC causa um aumento drástico
na produção de melatonina, de até 4000% em alguns casos (Lissoni et al. 1986). Não
deve ser surpresa, então, que tem um efeito profundo no sono (Babson et al. 2017). Além
disso, os canabinóides afetam as diferentes fases do sono e, em particular, atuam como
supressores do sono REM (Roehrs e Roth 2017).

4.3.2 - Ansiedade e Estresse

Deficiências na sinalização de eCB têm sido implicadas na etiologia de uma variedade de

condições, incluindo PTSD, enxaqueca e fibromialgia. Em particular, os níveis circulantes
de eCBs estão marcadamente diminuídos em todos esses distúrbios. Esse declínio nos
eCBs circulantes também tende a estar correlacionado com comportamentos
semelhantes à ansiedade. Uma ampla variedade de estudos demonstrou que o estresse
ambiental crônico leva de forma confiável a uma regulação negativa dos receptores CB 1 e
níveis reduzidos de AEA, aumentando os níveis de 2-AG (Morena et al. 2016).

Quando testado em modelos animais, o CBD demonstrou ter propriedades ansiolíticas

(Zuardi e Karniol 1983), conforme confirmado em vários estudos em humanos. Em um
estudo inicial usando voluntários humanos saudáveis submetidos a um teste estressante
de falar em público (SPST), uma dose de 300 mg reduziu a ansiedade subjetiva dos
voluntários a um nível comparável ao diazepam ansiolítico padrão (Zuardi et al. 1993). A
neuroimagem confirmou esses efeitos em estudos de acompanhamento (Bergamaschi et
al. 2011; Crippa et al. 2009). O CBD também demonstrou melhorar alguns dos efeitos
indesejáveis do THC e pode ser responsável pelas propriedades melhoradas da cannabis
fumada em comparação com a administração do THC.

227
4.3.3 - Obesidade e doenças metabólicas

Os neurônios hipotalâmicos pró-opiomelanocortina são responsáveis pela sensação de

saciedade. A ativação do receptor CB 1 nesses neurônios induz uma atividade que faz com
que os efeitos desses neurônios sejam silenciados. Esta redução na saciedade pode ser
atribuída aos efeitos inibitórios dos canabinóides na liberação do hormônio estimulador
dos melanócitos α (α-MSH), que normalmente produz efeitos supressores do apetite.
Estudos recentes também demonstraram uma correlação inversa entre os níveis de
orexina-A e α-MSH, o que levou à descoberta de que a orexina-A induz hiperfagia ao
aumentar os níveis de eCB 2-AG. O bloqueio do receptor OX-A tipo 1 mitigou o
comprometimento da sinalização de α-MSH que pode servir como um alvo para controlar
as respostas de fome (Morello et al. 2016). Como os terminais pré-sinápticos Gabaérgicos
e glutamatérgicos nos neurônios POMC expressam CB 1, é razoável supor que o efeito
bimodal dos canabinóides na alimentação é devido à sensibilidade diferencial dos axônios
Gabaérgicos versus glutamatérgicos à ativação do CB1 (Koch et al. 2015).

Acredita-se que os usuários de cannabis com tendência à larica comam em quantidades

maiores do que seus colegas que usam cannabis. Em média, os usuários de cannabis
apresentam uma cintura mais fina e IMC mais baixo do que os não usuários. Embora
aparentemente paradoxal, Le Foll et al. (2013) descobriram que a prevalência de
obesidade é menor em usuários regulares de cannabis em comparação com não
usuários, mesmo após o ajuste para variáveis importantes como idade, sexo e tabagismo.
Um estudo em 3 adipócitos T3-L1 dá algumas dicas sobre um possível mecanismo pelo
qual os usuários de cannabis mantêm seu peso sob controle e mostra que o tratamento
dessas células com CBD causa mudanças na expressão de certos sinais de sinalização
que levam ao escurecimento dessas células (Parray e Yun 2016). Além disso, os usuários
de cannabis também exibem níveis mais baixos de insulina em jejum e apresentam
melhor sensibilidade à insulina do que seus homólogos que não usam (Muniyappa et al.
2013).

Certos canabinóides demonstraram efeitos que podem ser úteis para o tratamento e
prevenção da obesidade. O uso do canabinóide THCV se correlacionou com a perda de
peso, bem como com a redução das concentrações de gordura corporal e leptina sérica
em camundongos obesos (Riedel et al. 2009; Wargent et al. 2013). Suporte adicional para
essa ideia vem de um artigo recente de Silvestri et al., No qual o THCV e o CBD
mostraram reduzir os níveis de lipídios acumulados nos adipócitos e em um modelo de
hepato esteatose (Silvestri et al. 2015).

228
4.3.4 – Câncer

O ECS desempenha um papel fundamental na modulação da diferenciação celular,

proliferação celular e morte celular. Além disso, os canabinóides como o THC estimulam o
apetite e reduzem as respostas eméticas vistas na quimioterapia. Essas qualidades
tornam o ECS um alvo atraente para uso na terapia do câncer. Os canabinóides também
podem ser benéficos em certos tipos de câncer por meio da modulação da expressão
gênica. Por exemplo, em cânceres de pulmão, a aplicação de CBD resulta em uma
regulação positiva da expressão das moléculas de adesão intracelular (ICAM) que, por
sua vez, evita a metástase de células cancerosas além do local do tumor (Haustein et al.
2014). Em gliomas, a administração de CBD resulta em uma redução dependente da
dose na expressão de fatores pró-angiogênicos (Vaccani et al. 2005). O THC, quando
administrado em conjunto com o CBD, fornece efeitos sinérgicos na inibição da
proliferação e sobrevivência de células de glioblastoma humano. Outro exemplo de tais
mudanças na expressão gênica ocorre em células de câncer de mama, onde McAllister et
al. demonstraram que a aplicação deste canabinóide regula negativamente a expressão
de ID-1, que é um grande contribuinte para a metástase do câncer de mama (McAllister et
al. 2007).

4.3.5 – Condições inflamatórias

A inflamação é uma condição altamente prevalente que contribui para o desenvolvimento

e progressão de muitas doenças e problemas de saúde. Foi demonstrado que o ECS in
vivo e in vitro está envolvido na regulação do sistema imunológico por meio de suas
propriedades imunomoduladoras. Os canabinóides foram testados em vários modelos
experimentais de doenças autoimunes, como esclerose múltipla, artrite reumatóide, colite
e hepatite.

Como o receptor de canabinóide CB 2 é encontrado principalmente na superfície das

células imunes, não deve ser surpresa que esses receptores modifiquem a resposta
inflamatória. Foi demonstrado que esses receptores protegem o hospedeiro da
patogênese dessas condições por meio da indução de múltiplas vias antiinflamatórias,
como a supressão de respostas imunes mediadas por células-T, induzindo principalmente
apoptose e suprimindo citocinas e quimiocinas inflamatórias. No entanto, alguns estudos
mostraram efeitos pró-inflamatórios e anti-inflamatórios, sugerindo diferentes limiares para
diferentes populações de células.

Os compostos encontrados na cannabis que reduzem a inflamação são abundantes e

diversos. Os fitocanabinóides mais abundantes na cannabis, THC e CBD, têm fortes
propriedades antiinflamatórias, enquanto CBC, CBG e THCV também demonstraram
229
propriedades antiinflamatórias. Os canabinóides atuam como agentes antiinflamatórios
induzindo apoptose, inibindo a proliferação celular, suprimindo a produção de citocinas e
induzindo células-T reguladoras. Os mecanismos apoptóticos induzidos por canabinóides
em células imunes incluem a ativação de CD95 para induzir cascatas de Bcl-2 e caspase
em células imunes. Os canabinóides também demonstraram promover a produção de
interleucinas anti-inflamatórias, como IL-10, enquanto inibem a produção de citocinas pró-
inflamatórias, como TNF-a, de uma forma dependente de CB1 (Klein et al. 2000).

Veterinários e médicos podem achar intrigante que os antiinflamatórios não esteróides

(AINEs) produzam sua resposta antiinflamatória por meio de interações com o ECS.
Especificamente, no caso do paracetamol, seu metabolismo pelo fígado leva à produção
de N-arachidonoil fenol amina (AM-404), que atua como um agonista do receptor
canabinóide e inibidor da recaptação de eCB (Ottani et al. 2006). Essas interações
também bloqueiam a conversão do ácido araquidônico em prostaglandinas promotoras de
inflamação e dor (Saliba et al. 2017).

Além disso, certos terpenos também exibem atividade antiinflamatória. Entre os terpenos,
α-pineno, β-mirceno e β-cariofileno parecem atuar através dos receptores de
prostaglandina (PGE1 e/ou PGE2) para ter um efeito antiinflamatório. Além disso, o beta-
cariofileno é o único terpeno atualmente conhecido por se ligar aos receptores
canabinóides, atenuando a inflamação de uma forma dependente do receptor CB 2 (Klauke
et al. 2014). Os terpenos hidrogenados e os canabinóides frequentemente exibem
também características diferentes e podem existir em extratos de canabinóides em níveis
baixos como resultado da variedade de técnicas de destilação e refinamento empregadas
(USP # 20160324909) (Scialdone 2017).

4.3.6 – Efeitos pulmonares

Estudos realizados na década de 1970 na Universidade da Califórnia, em Los Angeles,

por Donald Tashkin, mostraram que o THC inalado e ingerido por via oral produzem
broncodilatação por até 2 horas após a administração (Tashkin et al. 1974). Investigações
adicionais do Laboratório de Farmacologia Respiratória de Paris mostraram que a
ativação do receptor CB1 inibe a contração colinérgica de uma forma dependente da
concentração, oferecendo um possível mecanismo para a inibição de broncoespasmos.
Estudos adicionais realizados na Universidade de São Paulo usando CBD também
mostraram algum potencial para melhorar os sintomas da DPOC. Eles encontraram
diminuição da inflamação pulmonar e melhorias na função pulmonar em modelos murinos
de doença inflamatória pulmonar usando o agente inflamatório lipopolissacarídeo (Ribeiro
et al. 2015). Outros achados usando modelos murinos mostraram que a administração
230
intraperitoneal de THC resulta em uma redução da produção de muco induzida por
alérgeno (Reddy et al. 2012).

4.3.7 – Efeitos cardiovasculares

Os canabinóides podem aumentar e diminuir a pressão arterial e a frequência cardíaca,

dependendo do contexto específico em que estão sendo usados. Esses efeitos estão se
tornando mais bem compreendidos apenas recentemente, à medida que mais estudos
estão sendo conduzidos sobre esses efeitos (Dewey 1986; Wagner et al. 1998;
Niederhoffer e Szabo 1999, 2000). Verificou-se especificamente que o CBD tem efeitos
diretos nas artérias, influenciando o vaso-relaxamento, o que é clinicamente observado
como um leve efeito hipotensivo quando o CBD é administrado. O CBD tem efeito protetor
contra o dano vascular causado pela hiperglicemia, como no diabetes tipo 2, angiopatias
diabéticas e processos inflamatórios sistêmicos. São os efeitos antioxidantes e
antiinflamatórios do CBD que medeiam esses benefícios (Stanley et al. 2013). Foi
descoberto que o CBD tem efeitos antiarrítmicos em um modelo de rato in vivo de oclusão
da artéria coronária, que pode não ser mediado através dos receptores CB1 encontrados
nas membranas celulares do miocárdio, mas pode ter outras vias não mediadas por
receptor que permitem seu controle sobre ritmo cardíaco (Hepburn et al. 2011).

Foi determinado em ratos espontaneamente hipertensos (SHR) que os antagonistas CB1

aumentaram a pressão arterial e o desempenho contrátil do ventrículo esquerdo. Além
disso, ao prevenir a degradação do endocanabinóide anandamida pela amida hidrolase
de ácidos graxos (FAAH), como é encontrado no CBD, foram encontradas reduções na
pressão arterial, contratilidade cardíaca e resistência vascular em ratos normotensos.
Esses efeitos foram inibidos pelos antagonistas CB 1. Verificou-se que os antagonistas CB 1
reduzem a pressão arterial muito mais em SHI do que em ratos normotensos Wistar-
Kyoto. Além disso, os receptores CB1 são regulados positivamente no coração e no
endotélio aórtico em SHR versus a coorte de ratos normotensos (Bátkai et al. 2004).

4.3.8 – Antioxidantes e Neuroproteção

O NIH detém uma patente sobre canabinóides como antioxidantes e neuroprotetores

(Hampson et al. 2003; USP: 6630507). Foi demonstrado que THC, CBD e CBG têm
propriedades antioxidantes (Hampson et al. 1998; Borrelli et al. 2013). Por meio de suas
ações como antioxidantes, os canabinóides podem neutralizar as espécies reativas de
oxigênio. O THC e o CBD reduziram as ROS in vitro, com potência semelhante aos
antioxidantes conhecidos, como ascorbato e hidroxitolueno butilado. Além disso, ao inibir
os canais de cálcio dependentes de voltagem, os canabinóides podem inibir a liberação
de glutamato, reduzindo assim a excitotoxicidade devido ao disparo neuronal excessivo.
231
Durante os períodos de isquemia e outros eventos cerebrais traumáticos, o
neurotransmissor glutamato é liberado. O glutamato em si é tóxico em excesso e pode
levar à morte de células neuronais em um processo conhecido como estresse citotóxico.
Os compostos com propriedades antioxidantes são frequentemente neuroprotetores, o
que se acredita ser devido à redução de ROS tóxicas produzidas durante o metabolismo
isquêmico. O efeito neuroprotetor desses compostos foi encontrado para ser
independente de sua atividade de ligação ao receptor CB. O CBD, em particular, mostrou
proteger contra lesão isquêmica cerebral (Hayakawa et al. 2008) e também atenua a
neuro inflamação relacionada ao Alzheimer em modelos animais (Esposito et al. 2007).

Antioxidantes de plantas como ácido ascórbico e tocoferóis, compostos polifenólicos,

terpenos e numerosos mono e sesquiterpenos são importantes para a saúde humana. Os
terpenos de cannabis com propriedades antioxidantes demonstradas incluem β-cariofileno
(Calleja et al. 2013), limoneno e β-mirceno (Ciftci et al. 2011). Em um estudo com
camundongo de isquemia cerebral (Ciftci et al. 2011), o β-mirceno protegeu contra o
estresse oxidativo e o dano histológico induzido por isquemia-reperfusão e é, portanto, um
neuroprotetor eficaz. Além disso, o composto é sugerido como um bom candidato para o
tratamento de acidente vascular cerebral isquêmico.

O ECS está implicado na etiologia de uma variedade de condições neurodegenerativas, e

os canabinóides demonstraram ter qualidades neuroprotetoras e a capacidade de atenuar
a neuroinflamação e promover a neurogênese (Jiang et al. 2005; Saito et al. 2012; Van
der Stelt et al. 2001). No caso da doença de Alzheimer (DA), os canabinóides têm se
mostrado promissores por sua capacidade de limpar as placas tóxicas de beta amiloide
(Aβ) que se acumulam no cérebro em pacientes com a doença. Considerando que os
pacientes tratados com canabinóides demonstram melhora nos sintomas, não deve ser
surpresa que um precursor dessa doença debilitante seja a perda da produção natural de
eCBs pelo corpo. O CBD também demonstrou reduzir a expressão de genes implicados
na fosforilação da proteína tau, cuja fosforilação muito elevada leva à formação de
emaranhados neurofibrilares que contribuem ainda mais para a progressão da doença
(Esposito et al. 2006). Além disso, foi demonstrado que os canabinóides aumentam a
depuração de Aβ do cérebro, bem como evitam a cascata inflamatória que é produzida
pelo acúmulo dessas proteínas mal dobradas intracelularmente (Eubanks et al. 2006).

4.3.9 – Cannabis, Memória e o ECS

Michael Pollan em seu livro, The Botany of Desire: A Plant's-Eye View of the World,
aborda os problemas de memória de curto prazo, associados ao uso de THC e
especialmente o valor da cannabis no tratamento do transtorno de estresse pós-
232
traumático (PTSD) (Pollan 2001). Nem todas as memórias precisam ser retidas. Alguns
podem ser traumáticos e tóxicos quando lembrados, como acontece com o PTSD. Pollan
faz uma pergunta ao leitor: “Você realmente quer se lembrar de todos os rostos que viu no
metrô esta manhã?”

O ECS atua como um filtro para a memória, promovendo a retenção de memórias úteis e
a remoção das desnecessárias. Essa capacidade de esquecer é crítica para a
sobrevivência e dá errado em certas condições, como o PTSD. A capacidade do THC de
aumentar esse processo de esquecimento é em parte devido às alterações na depressão
de longo prazo (LTD) no circuito CA1-CA3 do hipocampo, que é especificamente
dependente de CB1 da astroglial em vez de células neuronais – sugerindo a limpeza do a
sinapse está prejudicada (Han et al. 2012). Pesquisas mais recentes demonstram que os
déficits de memória da cannabis também estão associados ao aumento da atividade da
COX-2 no hipocampo (Chen et al. 2013).

Também foi sugerido que o uso crônico de cannabis está associado a mudanças
estruturais no hipocampo, como redução da massa cinzenta e alterações na forma. Um
estudo específico mostrou que os usuários de cannabis de longo prazo tiveram uma
redução de 12% no volume do hipocampo, em média. No entanto, esses resultados
podem ser falhos, uma vez que houve um tamanho de amostra muito pequeno usado (n =
15) (Demirakca et al. 2011; Solowij et al. 2013; Yücel et al. 2008). Se essas mudanças
forem válidas, elas podem ter uma influência na formação da memória em usuários de
cannabis. No entanto, pesquisas mais recentes refutam esses achados, mostrando que o
uso diário de cannabis não causa alterações em adolescentes ou adultos. Este estudo
também usou um tamanho de amostra muito maior do que estudos anteriores,
comparando a morfologia do cérebro de 29 usuários adultos e não usuários, bem como
50 usuários adolescentes e não usuários usando exames de ressonância magnética de
alta resolução (Weiland et al. 2015). Outros estudos de acompanhamento lançam alguma
luz sobre as razões por trás dessas discrepâncias, demonstrando que essas mudanças
no volume e na morfologia do hipocampo são ablacionadas quando coadministrados com
CBD, exibindo um efeito protetor deste canabinóide contra alterações induzidas por THC
(Yücel et al. 2016). Beale et al. examinou esse efeito mais detalhadamente e descobriu
que seus efeitos restauradores estavam limitados a apenas certas regiões do hipocampo,
especificamente o complexo subicular esquerdo (parassubículo, pré-subículo e subículo)
(Beale et al. 2018).

233
4.3.10 – Deficiência de Endocanabinoide Clínica (CECD)

Deficiências na sinalização eCB foram implicadas na etiologia de uma variedade de

condições, incluindo PTSD, enxaqueca e fibromialgia (Russo 2016a, b). Existem
mutações conhecidas nos genes ECS que contribuem para essas deficiências. Por
exemplo, pacientes com mutações em CNR1 e DAGLA exibem fenótipos CECD (Smith et
al. 2017). Outro exemplo disso é visto em pacientes com IBS, onde a variante rs806378
CT/TT no gene CNR1 mostrou uma associação estatisticamente significativa com as
taxas de trânsito colônico (Camilleri et al. 2013). Especificamente, no contexto de PTSD, a
extinção do medo é prejudicada em pacientes que eram homozigotos para a variante
CNR1 rs2180619 (Heitland et al. 2012).

Em particular, os níveis circulantes de eCBs estão marcadamente diminuídos em todos

esses distúrbios. Este declínio nos eCBs circulantes também tende a estar correlacionado
com comportamentos semelhantes aos da ansiedade. Uma ampla variedade de estudos
demonstrou que o estresse ambiental crônico leva de forma confiável a uma regulação
negativa dos receptores CB1 e níveis reduzidos de 2-AG e AEA (Hill et al. 2009).
Igualmente previsível é um aumento transitório de 2-AG na amígdala após estresse
crônico, mostrando aumentos após 30 minutos que retornam à linha de base após 60
minutos (Patel et al. 2009).

4.3.11 – Limitações do ECS como um alvo terapêutico

O envolvimento do ECS em uma ampla variedade de processos fisiológicos torna

atraente, da perspectiva do médico, entender como manipular este sistema. Embora o
ECS possa ser visto como uma panacéia para o tratamento de várias doenças, não é sem
limitações. Em particular, os agonistas do receptor canabinóide, como o THC, carregam
efeitos psicoativos que podem ser indesejáveis em certas populações. Além disso, a
ativação persistente dos receptores canabinóides resulta na dessensibilização do
receptor, o que acaba levando à tolerância e à necessidade de dosagens mais altas, o
que também aumenta a probabilidade de respostas adversas. As consequências não
intencionais da estimulação do ECS incluem déficits de memória e o desenvolvimento de
sintomas de abstinência. Uma desvantagem da estimulação prolongada com ECS que
recentemente ganhou atenção é o desenvolvimento da síndrome de hiperemese
canabinóide (Chang e Windish 2009). Este distúrbio só se desenvolve em certos
subconjuntos da população e resulta em vômitos cíclicos que só podem ser absolvidos
pela administração de banhos alternados de água quente e fria ou um agonista do
TRPV1, como a capsaicina. Uma dessas áreas de foco de pesquisa foi a do apetite e do
metabolismo, e as tentativas de aproveitar esse caminho tomaram a forma de uma droga
234
chamada SR141716A (Rimonabanto), um agonista inverso do receptor CB1. O uso de
rimonabanto teve resultados negativos, fazendo com que alguns tivessem pensamentos e
ideações negativas de suicídio, sendo que alguns pacientes realmente o realizaram. Mais
tarde, foi descoberto que tais problemas foram atribuídos a efeitos no sistema nervoso
central; portanto, os pesquisadores agora estão trabalhando no desenvolvimento de
agonistas inversos CB1 que são restritos à periferia. Há também a possibilidade de
problemas de síntese produzindo subprodutos fora do alvo, que ainda está sendo
investigado pelo FDA.

4.4 ECS veterinário: Nosso estado atual de conhecimento

O receptor CB1 é altamente conservado em todas as espécies de mamíferos, mas

existem diferenças significativas na sequência primária que foram descobertas entre os
receptores CB2 de canabinóides humanos e de rato e o receptor canabinóide canino
recém-clonado, CB2. Verificou-se que as afinidades de ligação para o receptor CB2
canino eram 30 vezes menores do que as medidas para os receptores CB2 humanos e de
rato. As propriedades funcionais do receptor canabinóide CB2 foram consideradas
altamente dependentes do nível de expressão do receptor e da natureza da via de
sinalização selecionada (Ndong et al. 2011).

4.4.1 – Localização anatômica de receptores de canabinóides no cão

Receptor de canabinóide 1

Um estudo recente utilizou imuno-histoquímica para localizar anatomicamente o receptor

CB1 no sistema nervoso canino normal. Os sistemas nervosos foram examinados em um
cachorro saudável de 4 semanas, três cachorros de 6 meses e um cachorro de 10 anos.
Forte “imunorreatividade em forma de ponto” foi encontrada nos neutrófilos do córtex
cerebral, cornu ammonis (CA) e giro dentado do hipocampo, mesencéfalo, cerebelo,
medula oblonga e substância cinzenta da medula espinhal. A expressão densa de CB1 foi
encontrada nas fibras do globo pálido e da substância negra em torno dos neurônios
imunonegativos. Os astrócitos foram consistentemente positivos em todas as regiões
examinadas. No PNS, a imuno-histoquímica CB 1 corou neurônios e células satélites dos
gânglios da raiz dorsal e células de Schwann mielinizantes no PNS.

O cão mais jovem examinado tinha uma expressão geral de CB 1 mais baixa no cérebro,
mostrando que a densidade da expressão do receptor era menor do que a observada no
tecido cerebral fetal humano e neonatal. A expressão de CB 1 mais baixa foi encontrada
em ratos idosos em regiões específicas, sendo mais proeminente o cerebelo, córtex
cerebral e gânglios da base e menos proeminente no hipocampo. Esta redução na

235
densidade de CB1 com a idade nesses ratos foi consistente com os achados no cão mais
velho examinado neste estudo (Freundt-Revilla et al. 2017). Estudos anteriores
identificaram receptores CB1 em glândulas salivares (Dall’Aglio et al. 2010), folículos
capilares (Mercati et al. 2012), pele e hipocampo em cães (Campora et al. 2012).

A imuno-histoquímica foi usada para estudar a localização dos receptores CB 1 no embrião

canino em desenvolvimento (30 dias de idade) com um anticorpo disponível
comercialmente. A imunorreatividade do receptor CB 1 foi encontrada principalmente em
tecidos epiteliais e incluiu a maioria das estruturas do sistema nervoso central e periférico,
ouvido interno, epitélio olfatório e estruturas relacionadas, olho e glândula tireoide (Pirone
et al. 2015).

Localização do receptor canino CB1

• Citoplasma das células da camada basal e suprabasal.

• Bainhas da raiz epitelial interna do folículo piloso e músculos eretores do pêlo.

• Sebócitos indiferenciados na periferia das glândulas sebáceas.

• Células secretoras e ductais das glândulas sudoríparas.

• Mastócitos e fibroblastos.

• Regulado positivamente na dermatite atópica.

Receptor de canabinóide 2

Em comparação com as amostras de pele humana, os cães clinicamente normais

apresentam uma distribuição homogênea dos receptores CB 1 e CB2 em todas as
camadas epidérmicas. Em humanos, CB1 é detectado principalmente em camadas
epidérmicas espinhosas e granulosas, e CB 2 é detectado principalmente em queratócitos
basais. Ambos os receptores CB1 e CB2 foram encontrados na pele de cães saudáveis e
de cães com dermatite atópica. A epiderme dos cães é mais fina do que a dos humanos
(2–3 camadas nucleadas no cão versus 6–7 no humano), o que pode ser responsável por
essa diferença. Em cães com dermatite atópica, foram encontradas alterações
epidérmicas hiperplásicas, com forte imunorreatividade CB 1 e CB2 em queratinócitos
suprabasais e imunorreatividade CB 1 fraca e forte CB2 em queratinócitos basais,
indicando suprarregulação desses receptores durante a inflamação. Os agonistas CB 1 e
CB2 diminuem a desgranulação dos mastócitos (Campora et al. 2012). Para resumir, a
localização do receptor canabinóide na pele do cão foi encontrada no citoplasma dos
queratinócitos epidérmicos e foliculares, suor e células epiteliais das glândulas sebáceas
e células dérmicas mesenquimais.

236
Localização do receptor canino CB2

• Epiderme.

• Citoplasma de células nas camadas basal e suprabasal.

• Folículos capilares nas células basais e suprabasais das bainhas epiteliais externas e
internas da raiz.

• Imunorreatividade leve nas células dos músculos eretores do pêlo e nas células
secretoras e ductais das glândulas sudoríparas.

• Glândulas sebáceas no citoplasma e células de reserva periféricas.

• Mastócitos, fibroblastos e células endoteliais.

• Linfonodos.

• Forte imunorreatividade da zona de células B, principalmente em centros germinativos

de folículos secundários.

• Regulado positivamente na dermatite atópica.

4.4.2 – ECS dos invertebrados

Os dois receptores canabinóides, CB1 e CB2, foram encontrados em mamíferos, pássaros,

répteis e peixes. Em um estudo de sete espécies representativas de invertebrados,
McPartland usou ensaios de ligação de ligante tritiado para caracterizar os receptores
canabinóides em Ciona intestinalis (Deuterostomia), Lumbricus terrestris
(Lophotrochozoa), Peripatoides novaeziae novaezealandiae (Onychophora, Panagrellus
edwardi Nematode) [o nematóide da esteira de cerveja], Actinothoe albocincta [anêmona
listrada branca] (Cnidaria) e Tethya aurantium (Porifera) [esponja Orange Puffball]
(McPartland et al. 2006).

A ligação dos canabinóides foi detectada em todas as espécies estudadas, exceto na

anêmona do mar (A. albocincta) e na esponja (T. aurantium). Os receptores eram
consistentes com os receptores CB 1, mas não com os receptores CB 2. Três dos
organismos testados, minhoca (L. terrestris), verme veludo (P. novaezealandiae) e
nematódeo da esteira (P. redivivus), foram comparados a um ortólogo CB 1 padrão em
tecido cerebelar de rato. Uma interação de ligação de alta afinidade foi observada em
várias concentrações características de receptores CB 1.

Os autores deste estudo levantam a hipótese de que os receptores canabinóides

evoluíram no último ancestral comum dos bilaterianos, com perda secundária em insetos
e outros clados. Após realizar uma revisão sistemática da literatura, os autores

237
descobriram que os receptores canabinóides foram identificados em ouriços-do-mar,
sanguessugas, minhocas, hidra, lagosta (H. americanus e J. edwardi) e o nematóide da
esteira de cerveja (P. redivivus), mas não o nematóide C. elegans. Não foi observada
ligação em esponjas (Porifera).

Em um estudo separado, McPartland descobriu que insetos (Apis mellifera [abelha

melífera ocidental], Drosophila melanogaster [mosca-das-frutas], Gerris marginatus
[strider de água], Spodoptera frugiperda [larva da traça da lagarta-do-cartucho] e
Zophobas atratus [besouro escuro]) são desprovidos de receptores canabinóides. Essa
perda de receptores CB é exclusiva da neurobiologia comparativa, em que nenhum outro
neuroreceptor conhecido em mamíferos foi encontrado ausente em insetos (Ecdysozoa).
Os autores sugerem que a falta de receptores de canabinóides em insetos se deve à falta
de ligantes, em que os insetos produzem pouco ou nenhum ácido araquidônico, o
precursor da biossíntese de endocanabinóides (McPartland et al. 2001).

5. Química da Cannabis sativa

Os fascinantes efeitos que os constituintes da planta da cannabis têm na experiência
humana levaram à descoberta de 113 fitocanabinóides, cada um com um perfil
farmacológico único (C. sativa. Pertwee Handbook of Cannabis 2014; Radwan et al.
2008). Há um interesse emergente em outro grupo farmacologicamente ativo de 140
terpenos que foram identificados na cannabis. Os terpenos demonstraram modular
sinergicamente os efeitos terapêuticos dos canabinóides e também definir o perfil do
aroma aromático dos diferentes cultivares (Brenneisen e ElSohly 1988). Os efeitos
específicos da cepa são atribuídos à quimiotaxonomia única de canabinóides e terpenos
(Russo 2011). Mais de 750 compostos produzidos naturalmente foram encontrados na
cannabis (Upton et al. 2014), que podem ser divididos em muitas classes químicas
diferentes. Cobrir cada componente de C. sativa está além do escopo deste capítulo e
não é relevante para a atividade terapêutica da cannabis. Uma excelente revisão da
química de C. sativa pode ser encontrada no corpo do trabalho compilado na Tabela 1
(Brenneisen e ElSohly 1988; Callaway 2004; ElSohly e Slade 2005; Turner et al. 1980;
Upton et al. 2014).

Tabela 1 Componentes químicos identificados em Cannabis sativa

Classe química Compostos identificados
Terpenos 140
Canabinóides 113
Hidrocarbonetos 50

238
 Tabela 1 Componentes químicos identificados em Cannabis sativa
Açúcares e compostos relacionados 34
Compostos nitrogenados 27
Fenóis não canabinóides 25
Ácidos graxos 23
Flavonóides 23
Ácidos simples 20
Cetonas simples 13
Éster simples e lactonas 13
Aldeídos simples 12
Proteínas, enzimas e glicoproteínas 11
Esteroides 11
Elementos 9
Álcoois simples 7
Vitaminas 3
Pigmentos 2

5.1 Fitocanabinóides

Canabinóides derivados de plantas, ou fitocanabinóides, referem-se a produtos químicos

derivados de fontes botânicas que interagem com o ECS. O termo é frequentemente
sinônimo de compostos farmacologicamente ativos isolados da Cannabis sativa. Os
fitocanabinóides diferem dos eCBs no que diz respeito ao seu perfil farmacocinético de
longa duração em comparação com a vida de ação relativamente rápida, curta e
intermitente dos eCBs.

Dos 113 canabinóides identificados em C. sativa, a maioria pode ser catalogada como
análogos de Δ9-tetrahidrocanabinol (Δ9-THC), CBD, canabichromene (CBC), cannabigerol
(CBG), canabinol (CBN), canabiciclol (CBL), canabielsoina (CBE) e canabitriol (CBT).
Existem pontos comuns de variabilidade no andaime de fitocanabinóides que são
destacados na Fig. 5. Os pontos de variabilidade estrutural existentes nas classes de
fitocanabinóides seguem algumas tendências gerais e rapidamente somam mais de 100
canabinóides potenciais quando repetidos nos análogos comuns mostrados na Fig. 5. O
comprimento da cadeia lateral de alquil é um local comum de variabilidade e pode variar
de um a cinco carbonos de comprimento (por exemplo, R1, CBD, Fig. 5). Os canabinóides
mais reconhecíveis e abundantes contêm cadeias laterais de n-pentil (n = 5), mas as
cadeias laterais de n-butil, n-propil, etil e metil também foram identificadas em
concentrações mais baixas (ElSohly e Slade 2005; Turner et al. 1980). As canabivarinas
contêm uma cadeia lateral de 3 carbonos e também são comumente observadas. A
presença ou ausência de um grupo funcional de ácido carboxílico é outro ponto de
239
variabilidade estrutural comum. Embora o THC e o CBD sejam os canabinóides mais
conhecidos, é importante observar que eles não são sintetizados diretamente na flor da
cannabis. Em vez disso, eles são sintetizados em suas formas ácidas na planta, que são
ácido tetrahidrocanabinólico (THCA, R=COOH, R1=n-pentil, R2=H) e ácido canabidiólico
(CBDA, R=COOH, R1=n-pentil). Esses compostos podem ser convertidos em THC e CBD
por aquecimento. A aplicação de maior calor acelera a reação na qual uma molécula de
CO2 é liberada do THCA para formar o THC em um processo denominado
descarboxilação. Embora algumas pessoas se refiram a essa reação como “ativação” dos
canabinóides, é um pouco incorreto, pois as versões ácidas desses compostos também
mostraram induzir benefícios médicos, principalmente propriedades antiinflamatórias
(Veress et al. 1990). As formas microbianas hidroxiladas também existem em níveis
baixos e permanecem relativamente não estudadas (Rashidi et al. 2009). A escolha de
descarboxilar pode ter efeitos importantes na aplicação terapêutica.

O tetraidrocanabinol, ou Δ9-THC, é o principal canabinóide responsável pelos efeitos

psicoativos característicos da cannabis, com os quais a maioria das pessoas está
familiarizada. A atividade de ligação do THC ao receptor CB 1 pode causar mudanças
fisiológicas a jusante, como euforia mental, aumento do apetite e funcionamento cognitivo
mais lento. Uma versão sintética isolada do THC chamada Marinol foi aprovada pelo FDA
no final dos anos 1990 por seus efeitos antieméticos e prescrita para pacientes com
câncer submetidos à quimioterapia.

240
 Fig. 5 Análogos canabinóides comuns encontrados em Cannabis
sativa. Esta figura ilustra os pontos comuns de variabilidade dentro de
cada classe e quantos análogos foram descobertos

O canabidiol, ou CBD, tem recebido um surto de interesse na última década por muitas
partes interessadas, desde pesquisadores acadêmicos a desenvolvedores de
medicamentos farmacêuticos e, até mesmo, fabricantes de suplementos nutricionais.
Parte disso se deve aos benefícios médicos bem estudados. No momento da redação
deste capítulo, um medicamento farmacêutico à base de CBD (Epidiolex) acaba de ser
aprovado como medicamento pelo FDA em 25 de junho de 2018.

Começando na década de 1970, os investigadores identificaram as propriedades

anticonvulsivantes do CBD em ratos (Consroe e Wolkin 1977) e conduziram um teste
inicial em humanos em pequenos grupos (Carlini e Cunha 1981). Isso foi seguido por um
estudo maior em humanos usando 900–1200 mg/kg por dia, que mostrou que o CBD foi
eficaz no tratamento de crises convulsivas (Trumbly 1990). No geral, o CBD exibe os
efeitos anticonvulsivantes mais confiáveis dos constituintes da cannabis. Em relatórios
muito recentes que descrevem seu uso em crianças com condições epileptiformes, o CBD
demonstrou melhorar muito esses efeitos. Além disso, os resultados iniciais de uma ampla
avaliação clínica do CBD em uma condição associada a convulsões em crianças são
muito promissores. Em pacientes epilépticos, há uma desregulação do disparo neuronal,
resultando em convulsões e excitotoxicidade. Níveis aumentados de AEA foram

241
encontrados no líquido cefalorraquidiano de cães que sofrem de epilepsia idiopática em
comparação com cães saudáveis (Gesell et al. 2013).

Ligresti et al. (2006) examinaram os efeitos antitumorais de uma variedade de

canabinóides, incluindo as formas neutra e ácida. Enquanto o CBD foi determinado como
o canabinóide antitumoral mais potente testado, o CBD-A foi o menos testado. A atividade
do CBD deveu-se à sua capacidade de induzir apoptose por meio da ativação direta ou
indireta do CB2 e dos receptores vanilóides do tipo 1 em potencial (Ligresti et al. 2006)
(Fig. 6).

Fig. 6 Ilustra que o CBD e o THC têm a mesma fórmula empírica e

peso molecular. No entanto, o THC é conformacionalmente restrito
por meio de uma ligação éter e interage com os receptores de uma
maneira ligeiramente diferente em comparação com o CBD

Uma distinção estrutural chave entre THC e CBD é a ponte livremente giratória entre os
sistemas cíclicos aromáticos e não aromáticos que só existe no CBD. O THC e o CBD
têm a mesma fórmula empírica e também o peso molecular. No entanto, o THC é
conformacionalmente restrito de uma forma que não permite que esta região da molécula
“gire”. Eles são diferentes no espaço tridimensional, mas o CBD também tem um grupo
hidroxila livre adicional que resulta em interações distintas com os receptores CB e outros
alvos biologicamente ativos.

(-) Δ9-Tetrahidrocanabivarina (THCV) é o análogo de propil do THC em que a cadeia

lateral de 5 carbonos é encurtada por duas unidades de metileno. Suas propriedades
farmacológicas foram estudadas desde o início dos anos 1970, quando foi reconhecido
que ele se comportava como um agonista significativamente mais fraco
(aproximadamente cinco vezes) em comparação com o THC.

Assim, como com o THC, o THCV produz efeitos analgésicos, mas também catalépticos
em animais (Hill et al. 2012; Pertwee 2008). Esses efeitos podem ser antagonizados por
antagonistas CB1 sintéticos, como SR1716A ou AM251. Esta propriedade de ser um
agonista mais fraco do que o THC é consistente com um extenso trabalho de química
242
medicinal que mostra a diminuição da potência da família da cannabivarina em relação
aos análogos da cadeia lateral mais longa. A potência máxima é observada com cadeias
laterais de 7-8 carbonos (Makriyannis 2014).

Embora o THCV possa se comportar como um agonista CB 1 in vitro, ele também pode
atuar como um antagonista CB1 capaz de bloquear os efeitos de agonistas CB 1 sintéticos
mais potentes, bem como do THC e dos eCBs AEA e 2-AG. Por esta razão, o Δ9-THCV
pode atuar como um antagonista CB 1 in vivo. No receptor CB2, o Δ 9-THCV se comporta
como um agonista parcial e é capaz de ativar esse receptor, embora apenas em extensão
limitada. Foi demonstrado que a ativação do receptor CB2 está associada à atenuação da
inflamação. Os efeitos antiepilépticos deste composto estão sendo testados em humanos
atualmente.

O canabigerol (CBG), na sua forma ácida (CBGA), é o principal precursor e intermediário

convergente de todos os fitocanabinóides. CBG não é psicoativo e é um agonista parcial
relativamente fraco para CB1 e CB2. Por causa de sua baixa potência de receptor de
canabinóide, pode antagonizar funcionalmente os efeitos CB 1 do THC. Foi demonstrado
que ele alivia a pressão intraocular, potencialmente útil no tratamento do glaucoma. Além
disso, suas propriedades antioxidantes e antiinflamatórias o tornam um candidato
potencial para doença inflamatória intestinal. Evidências recentes identificam o CBG como
um candidato potencial para o tratamento do câncer de cólon (Ligresti et al. 2006).

Existem algumas informações sobre o ácido tetrahidrocanabinólico (Δ 9-THCA) e o ácido

canabidiólico (CBDA), os dois precursores naturalmente não psicotrópicos de Δ 9-THC e
CBD, respectivamente, que mostram que seu valor terapêutico é derivado de mecanismos
diferente da ligação clássica ao receptor CB1/CB2 (Ahmed et al. 2008). O THCA in vitro é
capaz de modular as funções de dois receptores do canal TRP atuando como um potente
agonista TRPA1 e antagonista TRPM8, inibindo ambas as enzimas ciclo-oxigenase, COX-
1 e COX-2. Quando testado em modelos de ratos de náusea, o THCA parece ser uma
alternativa melhor para o tratamento de náuseas e vômitos associados à quimioterapia do
câncer (Rock et al. 2013, 2014). O THCA também demonstrou reduzir os níveis de TNF-a
in vitro, sugerindo um mecanismo de modulação imunológica (Ligresti et al. 2006). Esta
redução no TNF-a foi demonstrada em sobrenadantes de cultura de macrófagos U937 e
macrófagos do sangue periférico após estimulação com LPS de uma forma dependente
da dose (Verhoeckx et al. 2006). Além disso, o THCA também demonstrou ter uma
atividade potente como um agonista do PPARγ (Nadal et al. 2017). No entanto, essas
descobertas podem ter implicações apenas para a periferia, pois há algumas evidências
que sugerem que o acesso do THCA ao sistema nervoso central é restrito devido à
243
interação com o BBB (Moreno-Sanz 2016). CBDA demonstrou ser um inibidor seletivo da
COX-2 (Takeda et al. 2008), implicando em atividade antiinflamatória. Também foi
demonstrado ser um agonista potente em 5-HT1A (Bolognini et al. 2013). Ao contrário de
seu congênere, o CBDA reduziu efetivamente a náusea antecipatória e pode ser útil
contra a náusea aguda induzida pela quimioterapia (Rock e Parker 2013).

O canabinol (CBN) é um produto de degradação do Δ 9-THC causado pela oxidação;

portanto, não é surpreendente que tenha sido o primeiro fitocanabinóide a ser isolado na
forma pura. CBN pode ativar os receptores CB 1 e CB2 com uma potência
aproximadamente dez vezes menor do que Δ 9-THC. Portanto, pode ser visto como um
parente de Δ9-THC fraco (Izzo et al. 2009). Menos se sabe sobre a farmacologia da
diversidade de fitocanabinóides, de baixa abundância, encontrados na cannabis. A
pesquisa sobre fitocanabinóides raros está se expandindo rapidamente e é uma área
ativa de investigação (Hartsel et al. 2016).

5.2 Quimiotaxonomia de C. sativa

Os fenótipos químicos podem ser úteis para classificar C. sativa como variedades do tipo
droga ou fibra. O Escritório das Nações Unidas sobre Drogas e Crime categoriza C. sativa
em três fenótipos químicos com base na proporção de THC e CBN em relação ao CBD
[Eq. (1)] (Drugs 2009). Os cultivares do fenótipo químico I (tipo droga) são caracterizados
por valores X maiores que um, enquanto os valores menores que um são representativos
dos cultivares do fenótipo químico III (tipo fibra). Os cultivares ricos em CBD contendo
baixos níveis de THC são considerados cultivos do tipo fibra ou fenótipo químico III. A
evidência sugere que cultivares de C. sativa do tipo droga ou fenótipo químico I com altos
níveis de Δ9-THC se originaram abaixo da latitude 30ºN (Hillig e Mahlberg 2004). Níveis
equivalentes de Δ9-THC e CBD são conhecidos como fenótipo químico III e são
normalmente encontrados acima da latitude 30ºN. Hillig e Mahlberg (2004) usaram uma
abordagem estatística para definir as tendências quimiotaxonômicas em C. sativa e
descobriram que a maioria dos cultivos estava fora dos valores arbitrários estabelecidos
pelo Escritório das Nações Unidas sobre Drogas e Crime. Eles demonstraram que a
maioria dos cultivos se agrupou em fenótipo químico I (X> 10), fenótipo químico II (0,2 <X
<10) ou fenótipo químico III (X <0,2). Os níveis relativos de canabinóides em C. sativa
permanecem constantes desde o estágio de plântula 32 ao longo do ciclo de vida da planta
(Broséus et al. 2010), tornando possível determinar o fenótipo químico nos estágios
iniciais de desenvolvimento antes da floração (Barni-Comparini et al. 1984; Vogelmann et
al. 1988). Até o momento, 52 cultivos de cânhamo que caem abaixo do limite legal de

32 A plântula é o embrião vegetal já desenvolvido e ainda encerrado na semente ou também, planta recém-nascida.
244
0,3% para o cânhamo foram aprovadas para uso comercial pela União Europeia (Diretiva
2013). Essas variedades registradas são originárias de nações europeias de latitudes
elevadas, que não estão aclimatadas para as regiões equatoriais do mundo. Pouco se
sabe sobre a viabilidade das cultivares europeias nos Estados Unidos, e isso está sendo
examinado por agrônomos. Nos últimos anos, várias cepas com alto teor de CBD
surgiram online nos Estados Unidos e que estão sendo cultivadas legalmente de acordo
com a Farm Bill. Algumas dessas cepas apresentam teores de CBD acima de 15% e
tornam os cultivares europeus tradicionais obsoletos para a produção de óleo e resina.

THC +CBN
X= Equação 1 A quimiotaxonomia é calculada dividindo a soma da concentração de THC
CDB
e CBN pela concentração de CBD

Nas últimas décadas, o pool genético da cannabis sofreu pressão seletiva para maximizar
a produção de THC em detrimento do CBD e de outros canabinóides menores ou não
psicoativos. A observação de que diferentes cultivos de cannabis com alto teor de THC
produzem uma variedade de efeitos, levou os pesquisadores a examinar mais a fundo os
outros constituintes químicos que podem estar impactando os efeitos terapêuticos.
Acontece que existe um amplo espectro de efeitos encontrados quando diferentes perfis
de terpeno são administrados com THC. Este tem sido um grande foco de pesquisa
recentemente, e existem inúmeras publicações que demonstram a variabilidade e
assinaturas exclusivas de perfis de terpeno em diferentes cultivos (Fischedick et al. 2010;
Henry 2017; Lewis et al. 2018).

5.3 Canabimiméticos: Canabinóides de espécies não – C. sativa

Além da cannabis, há uma variedade de outras plantas que produzem compostos que
interagem com o ECS do corpo. Esses compostos são classificados como
canabimiméticos ou compostos imitadores de canabinóides. Algumas das plantas que
produzem canabimiméticos são amplamente utilizadas na medicina fitoterápica e algumas
fazem até mesmo parte de nossa dieta regular.

Existe uma classe de compostos lipídicos amplamente difundida no reino vegetal,

denominada N-aciletanolaminas (NAE). Em vez de se ligar diretamente aos receptores
canabinóides do corpo, esses compostos inibem as ações das enzimas degradantes do
eCB, como a amida hidrolase de ácido graxo (FAAH) (Gertsch 2017). Há também um
composto tri terpenóide chamado pristimerina encontrado em uma família de arbustos
chamados Celastraceae que inibe reversivelmente outra enzima degradadora de eCB, a
monoacilglicerol lipase (MAGL) (King et al. 2009). Esses compostos são significativos
porque esse tipo de atividade indica que sua presença pode modificar o tom do eCB.
245
Pesquisas mais recentes sobre compostos com componentes estruturais semelhantes
sugerem que as N-alquilamidas e seus derivados também podem interagir com o terceiro
receptor canabinóide putativo GPR55 (Dalle Carbonare et al. 2008).

Estudos com trufas negras mostraram que os eCBs não são exclusivos dos mamíferos.
As enzimas necessárias para a produção de anandamida, bem como o próprio composto,
são encontradas em certas espécies de trufas (Pacioni et al. 2015).

Pesquisadores de Zurique têm investigado uma classe de compostos em Echinacea

chamados N-alquilamidas, que possuem propriedades imunomoduladoras (Gertsch et al.
2008b; Raduner et al. 2006). Em particular, as raízes de Echinacea produzem moléculas
semelhantes a endocanabinóides que se mostraram ligadas a receptores canabinóides
em roedores (Woelkart e Bauer 2007). Especificamente, foi demonstrado que a N-
isobutilamida se liga a ambos os receptores canabinóides, mas mostra preferência por
CB2. Foi demonstrado que suas ações ali causam uma diminuição na expressão do
mediador pró-inflamatório TNF-a (Gertsch et al. 2004).

Foi demonstrado que o Helichrysum umbraculigerum da África do Sul contém CBGA,

CBG e outros dibenzilos prenilados semelhantes aos canabinóides em C. sativa.
Moléculas semelhantes a canabinóides derivadas de Helichrysum e outros gêneros
Asteracea geralmente têm um grupo fenetil na posição n-pentil e têm sido usadas na
medicina tradicional para tratar uma série de inflamações e infecções (Pollastro et al.
2017).

Piper methysticum, também conhecido como kava kava, contém yangonina, uma
kavalactona que exibe afinidade de ligação significativa para CB1 (Russo 2016a, b).

Liverwort (Radula marginata) também mostrou produzir um composto chamado ácido

perrotetinênico, que se assemelha muito ao Δ 9-THC (Toyota et al. 2002).

O rododendro chinês também demonstrou produzir compostos que são estruturalmente

semelhantes aos canabinóides CBC, CBL e canabicitrana, embora suas atividades
farmacológicas nos receptores de canabinóides ainda não tenham sido exploradas (Iwata
e Kitanaka 2011).

5.4 Terpenos de Cannabis

Os terpenos são os compostos aromáticos da cannabis que contribuem para seus cheiros
e aromas únicos. Mais de 100 compostos mono-, di- e sesquiterpênicos diferentes são
produzidos nos tricomas resinosos das flores de cannabis. Os terpenos são produzidos
junto com os canabinóides, que compartilham vias biossintéticas e intermediários comuns
(Fig. 7). Acredita-se que os terpenos modulem os efeitos terapêuticos dos canabinóides e
246
são chamados de efeito conjunto, uma referência na literatura a um grande corpo de
evidências que sugere que a cannabis de planta inteira é mais eficaz do que os
compostos canabinóides isolados por si só. O complexo perfil aromático dos terpenos é
frequentemente um fator de distinção entre as cepas de cannabis e contribui para os
efeitos fisiológicos pluripotentes. Apesar do fato de que o perfil de terpeno pode tornar
uma variedade de cannabis única, os próprios terpenos são comumente encontrados em
outras plantas. Na verdade, muitos desses terpenos têm sido usados na aromaterapia há
milênios. Nesta seção, cobriremos cinco dos monoterpenos mais comuns e dois
diterpenos comuns.

A Fig. 7 mostra cinco monoterpenos comuns e dois diterpenos encontrados na Cannabis sativa

O β-cariofileno é o principal sesquiterpeno da pimenta-do-reino que contribui para seu

sabor picante. Também é um dos principais constituintes do cravo, do lúpulo, do alecrim e,
claro, da cannabis. Certas cepas de cannabis, como os Cookies Girl Scout, podem ter
níveis de β-cariofileno de até 5% em massa. É o único que demonstrou interagir
diretamente e se ligar ao receptor CB 2, tornando-o um dos canabinóides não-cannabis
mais onipresentes encontrados na natureza. CB 2, particularmente em tecidos periféricos

247
do corpo, é um alvo terapêutico para o tratamento de inflamação, dor, aterosclerose e
osteoporose (Gertsch et al. 2008a, b).

O próprio β-cariofileno tem mostrado resultados promissores em modelos animais para

colite, osteoartrite, diabetes, ansiedade, depressão, fibrose hepática e isquemia cerebral.
Em apoio à hipótese do efeito de entorno, a coadministração de β-cariofileno com o
medicamento de quimioterapia Paclitaxel em células cancerosas in vitro estimulou o
aumento da morte das células cancerosas e diminuiu o crescimento do tumor. O β-
cariofileno recebeu o status GRAS pelo FDA, o que significa que é geralmente
reconhecido como seguro para consumo oral em humanos. Mirceno é conhecido como o
princípio ativo sedativo do lúpulo, capim-limão, manjericão e manga. Myrcia
sphaerocarpa, do qual o mirceno é derivado, é um arbusto medicinal do Brasil
tradicionalmente usado para tratar diabetes, diarreia, disenteria e hipertensão (Ulbricht
2011). O aroma terroso, frutado e de cravo do Mirceno é pungente em concentrações
mais altas e comumente usado em preparações culinárias e de perfumes. Mirceno
demonstrou aumentar a absorção transdérmica (Schmitt et al. 2009). Ele também tem um
efeito analgésico significativo, que é bloqueado pela ação da naloxona, um antagonista
opioide, sugerindo um mecanismo de ação por meio do receptor opioide (Rao et al. 1990).
O mirceno não tem afinidade para os receptores opióides, apontando para a liberação de
opiáceos endógenos estimulada pelos adrenorreceptores alfa 2. Nenhuma tolerância foi
observada após dosagem repetida em ratos, o que está em contraste com a morfina
(Lorenzetti et al. 1991). Mirceno foi um sedativo comparável ao fenobarbital em doses
muito altas em ratos (Do Vale et al. 2002), um efeito aumentado pela administração
simultânea de citral, uma mistura de outros terpenos. Mirceno também demonstrou
melhorar a tolerância à glicose em ratos diabéticos com aloxana comparável à metformina
(Al-Omari 2007), sem efeito nos níveis de glicose em ratos normais. Além disso, o
mirceno mostrou efeitos antiinflamatórios e anticatabólicos poderosos em um modelo de
osteoartrite de condrócitos humanos (Rufino et al. 2015). Mirceno é o assunto de uma
ampla gama de pesquisas atuais, uma vez que a inflamação é a causa subjacente de
várias doenças.

Limoneno é um dos terpenos mais abundantes na cannabis e foi relatado em

concentrações de até 16% da fração do óleo essencial. Limoneno é um monoterpeno
comumente encontrado na casca cítrica e usado em perfumes, produtos de limpeza
doméstica, alimentos e medicamentos. O limoneno tem inúmeros benefícios medicinais
potenciais demonstrados em estudos em humanos e animais. As propriedades
antioxidantes e anticâncer do limoneno o tornam uma excelente fonte dietética para a

248
prevenção do câncer (Aggarwal e Shishodia 2006). Vários modos de atividade anticâncer
e quimioprevenção foram observados para o limoneno (Crowell e Gould 1994). O álcool
perílico é um produto metabólico do limoneno, que também é objeto de vários estudos
relacionados ao câncer (Prates Ong et al. 2012). Efeitos antiinflamatórios em modelos de
osteoartrite (Rufino et al. 2015) e asma também foram observados (Hirota et al. 2012). Os
efeitos ansiolíticos em um modelo de labirinto de camundongo não foram antagonizados
pelo flumazenil e comparáveis ao diazepam, implicando em um alvo biológico não
benzodiazepínico (Lima et al. 2013). Resultados anteriores que também demonstraram
atividade antidepressiva por meio da via do receptor 5-HT1A (Komiya et al. 2006) estão
em contraste com os efeitos ansiolíticos no modelo de labirinto de camundongo.

Humuleno é o terpeno característico do lúpulo, Humulus lupulus, que também é

abundante na cannabis. Também é encontrado na sálvia e no ginseng, entre outras
espécies de plantas. O humuleno, também conhecido como a-cariofileno, é um isômero
de anel aberto do β-cariofileno, que carece da atividade CB 2 deste último. Foi
demonstrado que o β-cariofileno e o humuleno interagem de maneira sinérgica em um
estudo (Legault e Pichette 2007). O Humuleno também possui poderosa atividade
antiinflamatória, igual à dexametasona em modelo animal (Fernandes et al. 2007).
Propriedades antiinflamatórias tópicas e sistêmicas (Chaves et al. 2008), bem como
métodos de administração tópica, oral e aerossol como analgésico também foram
observadas para humuleno (Rogerio et al. 2009). Ele também tem potencial para auxiliar
na cicatrização de feridas (Satsu et al. 2004) a partir do aumento da secreção de IL-8,
uma quimiocina com várias funções, incluindo a promoção da angiogênese.

a-pineno é um terpeno comumente encontrado em agulhas de pinheiro, e suas

propriedades farmacológicas têm sido bem estudadas. Em particular, o a-pineno atua
como um inibidor da acetilcolinesterase (AChE) que pode ajudar na função da memória
(Miyazawa e Yamafuji 2005). Também exibe propriedades antiinflamatórias por meio de
numerosas vias, diminuindo os níveis de interleucina-6 (IL-6) e fator de necrose tumoral
alfa (TNF-a). Também reduz a síntese de prostaglandinas por meio de sua potente
inibição da prostaglandina E1 (PGE1) e, como muitos terpenos, também exibe efeitos
antimicrobianos (Nissen et al. 2010; Russo 2011).

Terpinoleno carrega um odor amadeirado e floral e é comumente encontrado em

variedades “sativa” de cannabis. Estudos em camundongos realizados com Microtoena
patchoulii, que tem terpinoleno como constituinte ativo primário, mostram que ele exibe
propriedades sedativas (Ito e Ito 2011). Ele também exibe propriedades anticâncer nas
células cerebrais de ratos (Aydin et al. 2013).
249
O linalol é um terpeno comumente encontrado na lavanda que produz efeitos ansiolíticos
e antidepressivos. Estudos realizados em camundongos sugerem que essas propriedades
são, principalmente, devido à sua ação nas vias monoaminérgicas, em particular o
receptor da serotonina 5-HT1A (Chioca et al. 2013; Guzmán-Gutiérrez et al. 2015).

5.5 O efeito Entourage/Ensemble (conjunto) na Cannabis: Por que é importante

A ideia de um efeito de entourage ou conjunto na sinalização eCB foi proposta pela

primeira vez por Ben-Shabat em 1998. Desde então, houve vários estudos que apóiam
essa teoria. O trabalho inicial de Ben-Shabat demonstrou esse fenômeno com ácidos
graxos tipicamente inativos na presença de eCBs. Alguns anos depois, em 2001,
McPartland e Russo publicaram um artigo intitulado “Cannabis and Cannabis Extracts:
Greater Than the Sum of their Parts”, que estendeu este conceito de entourage
apresentando evidências iniciais de que os terpenos aumentavam os efeitos dos
canabinóides (McPartland et al. 2001) Este trabalho foi posteriormente refinado por Russo
em agosto de 2011, quando ele publicou “Taming THC: Potential cannabis synergy and
phytocannabinoid terpene entourage effects” no British Journal of Pharmacology (Russo
2011). Este artigo propôs que os terpenos na cannabis eram capazes de modular os
efeitos dos canabinóides e ofereceu muitos mecanismos possíveis pelos quais os
terpenos poderiam induzir essa ação.

Os terpenóides são moduladores potentes da consciência e têm sido usados há milhares

de anos na aromaterapia para uma série de condições. Um trabalho recente usando óleos
essenciais derivados de cannabis sem quaisquer canabinóides ilustra esses efeitos, onde
os resultados revelaram diminuição da pressão arterial diastólica, aumento da frequência
cardíaca e aumento significativo da temperatura da pele. Também houve mudanças na
amplitude das ondas cerebrais alfa, delta e teta (Gulluni et al. 2018).

Trabalhos mais recentes confirmam o conceito de efeito de conjunto. Um desses estudos

demonstra que o CBD administrado em um extrato de planta inteira, em vez de em uma
forma isolada, permite que a curva de dose/resposta em forma de sino seja superada e
resulta em eficácia terapêutica muito aumentada no contexto da produção de TNF- a
(Gallily et al 2015).

Vários estudos descobriram que, embora haja potência clínica definida para os
fitocanabinóides isolados, como THC ou CBD, quando são fornecidos em um extrato de
planta inteira contendo terpenos, flavonóides e outros canabinóides, eles têm um efeito
maior. Romano et al. (2014) descobriram que um extrato de cannabis padronizado com
alto teor de CBD foi capaz de inibir a carcinogênese do cólon tanto in vitro quanto in vivo.
Verificou-se que todo o extrato da planta reduziu a proliferação celular em células
250
cancerosas, mas não em células saudáveis. O CBD puro reduziu a proliferação celular
apenas de um modo antagonista sensível ao CB 1. In vivo, o CBD à base de plantas
reduziu as lesões e pólipos pré-neoplásicos induzidos por azoximetano (AOM), bem como
o crescimento do tumor no modelo de xenoenxerto de câncer de cólon. Os autores
concluíram que o CBD à base de plantas em todo o contexto da planta atenua a
carcinogênese do cólon e inibe a proliferação de células de câncer colorretal por meio da
ativação dos receptores CB1 e CB2 (Romano et al. 2014).

6. Estudos em Animais e Ensaios Clínicos Veterinários

Por razões legais, embora a cannabis para uso medicinal tenha sido aplicada de forma
descontrolada (e possivelmente ilegal) a animais de estimação e fazendas por muitos
anos, desde meados de 1800, não houve nenhuma pesquisa básica e fundamental sobre
o segurança, eficácia ou farmacocinética de fitocanabinóides, e especificamente CBD, em
nossas espécies de animais domésticos ou selvagens. Com a legalização federal do
cânhamo na Farm Bill 2014, conforme mencionado anteriormente, houve um
afrouxamento das restrições à pesquisa em estados que têm cultivo e comercialização de
cânhamo legais.

Como resultado desse afrouxamento legal da pesquisa sobre a cannabis, várias

instituições acadêmicas veterinárias concluíram ou quase concluíram estudos sobre a
segurança do uso de altas doses e longo prazo (6 semanas) de CBD em cães, a
farmacocinética relativa de três vias diferentes de administração (transmucosal, oral e
transdérmico) e a eficácia do uso de CBD para dor osteoartrítica e epilepsia refratária em
uma dosagem específica. Os estudos de eficácia são ensaios clínicos randomizados,
prospectivos, duplo-cegos, controlados por placebo. Além disso, várias pesquisas /
estudos com proprietários de animais de estimação foram concluídos. Um foi publicado
em uma revista revisada por pares, e a segunda foi revisada e está programada para
publicação no final de 2018 pela mesma revista revisada por pares. Essas pesquisas são
do College of Veterinary Medicine da Colorado State University. Um resumo dos
resultados do estudo comparativo de farmacocinética da CSU é relatado aqui. Os estudos
de segurança e eficácia para epilepsia e osteoartrite serão publicados posteriormente em
2018. Os dados preliminares dos dois estudos são relatados aqui com base na
apresentação desses dados de anais de conferências.

O College of Veterinary Medicine da Cornell University acaba de lançar um estudo de

farmacocinética, segurança e eficácia do CBD usado em cães com osteoartrite. Este

251
documento foi apresentado na pista de Reabilitação e Medicina Esportiva Veterinária do
Colégio Americano na Cúpula Mundial de Reabilitação (IAVRPT) em Knoxville, TN, 31 de
julho de 2018. Os resultados deste estudo também são relatados neste capítulo. Ambos
os estudos Cornell e CSU usaram “macros dosagens”, que são substancialmente mais
altas (4-5 vezes) do que as relatadas como eficazes por veterinários e donos de animais
de estimação com base em dados anedóticos e observacionais.

6.1 Experiências de proprietários de animais de estimação com produtos de

cânhamo

Kogan et al. (2015, 2018), Colorado State University (CSU), conduziu uma pesquisa com
proprietários de animais de estimação que visitaram um site de comércio eletrônico para
comprar produtos de maconha animal. O objetivo da pesquisa era informar pesquisas
futuras sobre as melhores aplicações veterinárias para a cannabis com baixo THC,
também conhecida como “cânhamo industrial”. Este estudo foi desenvolvido para
determinar quais produtos de maconha os proprietários de animais de estimação estão
comprando, os motivos de suas compras e o valor percebido desses produtos na saúde
de seus animais de estimação. Uma pesquisa anônima foi feita com donos de animais de
estimação que compraram produtos de uma única empresa de maconha online. Um total
de 632 respostas foram registradas, e 58,8% delas indicaram que atualmente usam um
produto de maconha para seus cães. A maioria dos proprietários de cães (77,6%) indicou
que usa o produto para uma doença ou condição diagnosticada por um veterinário, com
as condições mais comuns, incluindo convulsões, câncer, ansiedade e artrite.

Do total de respostas, menos participantes indicaram que usam atualmente os produtos

de maconha para seus gatos (11,93%), com 81,8% indicando que usam o produto para
uma doença ou condição diagnosticada por um veterinário. As condições mais comuns
tratadas pelos produtos de maconha incluíam câncer, ansiedade e artrite. Este estudo
fornece um guia para pesquisadores que buscam realizar estudos clínicos em cânhamo
em termos de suas melhores áreas de eficácia e resultados adversos potenciais com seu
uso. Os autores sugerem, para esta primeira publicação baseada em evidências no
campo veterinário dos efeitos clínicos dos canabinóides, considerar os ensaios clínicos
controlados em áreas que incluem tratamento da dor, intervenções comportamentais para
distúrbios do sono e ansiedade para cães, redução da inflamação e melhora nos padrões
de sono para gatos (Kogan et al. 2015).

252
6.2 Demografia e percepções do dono do cão sobre a Cannabis

Em um estudo de seguimento baseado em questionário para a publicação de 2015 citada

acima, Kogan et al. criou uma segunda pesquisa online para avaliar a percepção dos EUA
em relação aos produtos de maconha e maconha para seus cães. A pesquisa foi
originada da CSU, em colaboração com pesquisadores da North Carolina State University.
Os participantes da pesquisa foram recrutados por meio das redes sociais no final de
2017. Os dados foram coletados de forma anônima. Proprietários de cães residentes nos
Estados Unidos foram os únicos fatores de inclusão usados neste estudo. Os
participantes da pesquisa foram questionados sobre seus dados demográficos; o estado
em que viviam foi comparado aos estados que atualmente têm leis sobre a maconha
medicinal que permitem o uso legal da maconha para fins medicinais e/ou recreativos.
Questionamentos posteriores determinaram se eles haviam dado a seus animais de
estimação um produto de maconha ou não e as razões para o uso ou não. Finalmente, os
participantes da pesquisa foram questionados sobre os motivos pelos quais deram os
produtos de maconha a seus animais de estimação.

Um total de 1196 respostas foi coletado e, após a eliminação de donos de cães não
residentes nos Estados Unidos, houve 1068 respostas. Oitenta e quatro por cento eram
mulheres, o restante, homens. Oitenta por cento dos entrevistados usaram cannabis para
seus cães. Aqueles que não usaram cannabis não citaram razões médicas para fazê-lo ou
não sabiam que isso poderia ajudar. O alívio da dor, a redução da ansiedade e a redução
da inflamação foram os motivos mais comuns para o uso de cannabis em cães neste
estudo. Outros motivos (total 36%) menos comumente selecionados foram para epilepsia
(11,5%), câncer (9,4%), artrite (1,9%) e alergias (1,3%).

O tipo de produto de cannabis mais comumente usado no estudo foram cápsulas ou

pílulas comercializadas para animais (57%), em comparação com cápsulas ou pílulas
comercializadas para humanos (3,9%). Para comestíveis, essa mesma tendência foi
observada, com mais produtos com rótulos animados sendo usados em cães do que
comestíveis rotulados para pessoas. Nenhuma menção foi feita neste estudo ao formato
mais comumente usado que é a infusão de óleo líquido, também conhecido como
“tintura”. Os efeitos colaterais associados ao uso de cannabis em cães foram relatados
apenas por uma minoria de proprietários de cães (<5%), sendo os efeitos adversos mais
comuns: sedação, xerostomia e polidipsia associada.

6.3 Segurança da exposição a longo prazo de alta dose ao CBD em cães

Um estudo avaliando a segurança do canabidiol em cães foi publicado no outono de

2018. Ele foi conduzido na Faculdade de Medicina Veterinária da Universidade Estadual
253
do Colorado, Departamento de Neurologia. A investigadora principal, Dra. Stephanie
McGrath, que é neurologista veterinária e professora-assistente no Veterinary Teaching
Hospital da CSU, conduziu uma avaliação da tolerabilidade de alta dose de 6 semanas de
CBD em cães Beagles saudáveis. Uma amostra da população de 30 cães Beagles
saudáveis foi designada aleatoriamente para receber 1 de 3 formulações: microgrânulos
de óleo encapsulados, óleo infundido com CBD ou creme transdérmico infundido com
CBD por 6 semanas. Dois níveis de dosagem foram avaliados neste estudo, 10 mg/kg/dia
e 20 mg/kg/dia. Essas dosagens excedem em muito as dosagens usadas nos dois
estudos de eficácia que se seguiram por um fator de 2 e 4 vezes maior. Os dois estudos
de eficácia avaliaram o uso de CBD para epilepsia refratária e osteoartrite em cães.

Hemogramas completos, painéis químicos, urinálise e ácidos biliares pré e pós-prandiais

foram realizados em 0, 2, 4 e 6 semanas. Elevações na fosfatase alcalina o dobro do
limite superior do intervalo de referência (140 IU/l) foram observadas em alguns cães
(11/30: 36%) após estar no CBD por 4 semanas, embora tenha aumentado em alguns
cães em 2 semanas, especialmente no nível de dosagem mais alto. A toxicidade hepática
a longo prazo não foi avaliada neste estudo, embora os ácidos biliares e as enzimas
hepáticas tenham permanecido normais para todos os cães ao longo do estudo. Nenhum
dos cães que receberam a formulação transdérmica desenvolveu valores elevados de
fosfatase alcalina. Todos os cães tiveram diarreia leve, embora não tenha havido
correlação com a formulação ou dose. Seis dos 30 cães desenvolveram vômito, mas não
houve diferença significativa entre a ocorrência de vômito e a dose ou formulação de
CBD.

As orelhas eritematosas foram o próximo sinal clínico mais comumente relatado neste
estudo. Estas alterações óticas foram observadas em 36% dos cães, com as alterações
óticas tornando-se mais graves após 2 semanas no grupo de dosagem de 10 mg/kg/dia
para todas as três formulações. O creme transdérmico teve mais incidência de alterações
óticas do que as vias de administração transmucosa ou oral, o que é compreensível, uma
vez que o creme transdérmico foi aplicado no interior do pavilhão auricular. Achados
menos comuns incluíram secreção ocular em 10/30 cães (33%) e secreção nasal em
10/30 cães (33%). Cinco cães (17%) apresentavam coloração salivar nas patas e,
ocasionalmente, no abdome ventral. Dois cães tiveram glândulas de nictitanos
prolapsadas espontâneas. Um cão teve uma temperatura corporal elevada transitória
(104,2 F). Também foi observado que alguns cães salivaram após a administração das
formulações de óleo infundido com CBD em ambas as doses. O estudo conclui que o
CBD parece ser bem tolerado em cães com essas altas dosagens, mas enfatiza que um

254
estudo de segurança maior e mais duradouro é necessário para avaliar o efeito de muito
longo prazo do CBD no fígado e sua associação com diarreia (McGrath et al. 2018).

6.4 Farmacocinética, segurança e eficácia clínica do tratamento com CBD em cães

com osteoartrite

Os objetivos de um recente estudo Cornell foram determinar a farmacocinética oral e a

segurança, bem como a eficácia analgésica, do uso de CBD em cães com osteoartrite
(OA). A farmacocinética de dose única foi realizada usando duas doses diferentes de 2
mg/kg e 8 mg/kg de CBD em um óleo carreador. A partir desses dados, um estudo
prospectivo, randomizado, controlado por placebo e duplo-cego foi conduzido usando 16
cães de propriedade de clientes com evidência radiograficamente confirmada de
osteoartrite que foram inscritos e que completaram este estudo. Os cães foram
randomizados para receber 2 mg/kg a cada 12 h, por via oral, de óleo de CBD ou um
placebo que consiste em azeite de oliva com um extrato de ervas benigno em um volume
semelhante a cada 12 h por 4 semanas. Os indivíduos fizeram um período de eliminação
de 2 semanas e, em seguida, os tratamentos foram cruzados, e cada indivíduo recebeu o
outro tratamento duas vezes ao dia durante 4 semanas.

Avaliação veterinária de claudicação, movimento e resposta à manipulação, questionários

do proprietário (Canine Brief Pain Inventory (CBPI), escala de atividade de Hudson),
análise cinética objetiva em uma passarela sensível à pressão, hematologia e análise
química foram obtidas nas semanas 0, 2 e 4 para ambos os óleos. A análise estatística
dos resultados foi realizada, sendo p < 0,05 considerado significativo. A farmacocinética
mostrou meia-vida de eliminação de 4-5 horas em ambas as doses e nenhum efeito
colateral observável. A concentração máxima média de óleo CBD foi de 102 ng/ml (61–
132 ng/ml), e esse pico foi atingido 90 minutos após a administração da dose única de 2
mg/kg. Os pesquisadores neste estudo decidiram que, uma vez que a farmacocinética
das doses de 2 mg e 8 mg eram tão semelhantes, eles usariam a menor das duas doses
para a ala de eficácia deste estudo.

A avaliação da dor e da mobilidade mostrou uma diminuição significativa na dor e

aumento na atividade (p < 0,001) nas semanas 2 e 4 durante o tratamento com CBD em
comparação com a linha de base em cada avaliação quinzenal. Verificou-se que o óleo
CBD resultou em escores de dor reduzidos em comparação à linha de base em ambos os
exames quinzenais (p = 0,03). Nenhum efeito colateral foi relatado pelos proprietários,
mas a química do soro demonstrou um aumento na fosfatase alcalina sérica (9/16 cães,
56%) durante o recebimento do óleo CBD, que atingiu significância na semana 4 (p <
0,005).
255
Os autores deste estudo concluíram que os cães com OA que receberam 2 mg/kg a cada
12 horas se mostraram mais confortáveis e ativos com muito poucos efeitos colaterais
indesejáveis em comparação com o placebo. Os autores observam que o óleo CBD
usado neste estudo era um extrato “específico para cepas” e outros produtos que não têm
a mesma especificidade para cepas podem não ter a mesma eficácia medida para este
produto patenteado (Gamble et al. 2018).

6.5 Avaliação das tendências de toxicose por maconha em cães que vivem em um
estado com maconha medicinal legalizada: 125 cães (2005–2010)

Este estudo correlacionou o número de licenças de maconha medicinal emitidas no

estado do Colorado entre 2005 e 2010 e o número de admissões no pronto-socorro por
intoxicação por maconha. Esta é uma série de casos retrospectivos de 1º de janeiro de
2005 a 1º de outubro de 2010. Um total de 125 cães de propriedade de clientes
apresentaram-se por intoxicação por maconha conhecida ou suspeita com ou sem um
teste de triagem de drogas na urina (UDST). Uma correlação significativa foi encontrada
entre o número de licenças de maconha medicinal e casos de intoxicação por maconha,
observados em dois hospitais veterinários no Colorado. A ingestão de produtos de
panificação feitos com extrações de manteiga de THC de alta potência resultou em duas
mortes registradas. Os autores observam que, devido à diferença nos metabólitos da
urina no cão, em comparação com o humano, o teste UDST pode não ser válido em cães.
Também é importante notar aqui que não houve registro de mortes nas muitas centenas
de anos de uso humano de maconha. Essas duas mortes caninas foi devido à toxicidade
do chocolate em cães combinada com os efeitos cardiovasculares do THC no miocárdio.
Em cada caso, bolos ou biscoitos de chocolate foram feitos com grandes quantidades de
manteiga de THC, e os dois cachorros, cada um bem pequeno, comeram grandes
quantidades de chocolate com cannabis. Os autores não foram capazes de atribuir ambas
as mortes apenas ao THC e sentiram que havia uma grande influência do chocolate
contribuindo para suas mortes (Meola et al. 2012).

6.6 Estudo Farmacocinético Comparativo de Três Vias de Administração de CBD em

Cão Beagle

Este estudo foi desenhado para determinar a farmacocinética do CBD em cães

saudáveis. Uma amostra da população de 30 cães de pesquisa saudáveis foi designada
para receber 1 de 3 formulações diferentes a uma dose de 75 ou 150 mg a cada 12 horas
por 6 semanas. Os formatos de dosagem foram (1) infusão de óleo líquido administrado à
mucosa oral; (2) cápsulas orais com esferas de óleo microencapsuladas; e (3) aplicação
transdérmica. As concentrações plasmáticas em série de CBD foram medidas nas
256
primeiras 12 horas e repetidas em 2, 4 e 6 semanas. Concentrações plasmáticas maiores
foram medidas com a formulação oral com infusão de óleo de CBD. A meia-vida
plasmática do CBD administrado por esta via após doses de 75 mg e 150 mg,
respectivamente, foi de 199,7 ± 55,0 e 127,5 ± 32,2 min. Este estudo descobriu que os
níveis sanguíneos são proporcionais à dose, como esperado, e o CBD líquido oral
absorvido pela mucossa foi a formulação superior das três formulações testadas, com os
grânulos microencapsulados administrados por via oral a segunda melhor formulação em
termos de perfil farmacocinético (Bartner et al. 2018).

6.7 Eficácia clínica do CBD para o tratamento da osteoartrite e da epilepsia

refratária no cão: um estudo piloto

A ala com osteoartrite (OA) deste estudo de eficácia consistiu em 24 cães de clientes com
evidência clínica de OA radiograficamente e que apresentavam claudicação identificável.
Um desenho de estudo duplo-cego, randomizado e controlado por placebo foi utilizado,
com cada grupo de estudo recebendo medicação por 6 semanas e um placebo por 6
semanas. O grupo de tratamento recebeu 2,5 mg de óleo CBD a cada 12 h. A análise da
marcha e um monitor de atividade foram usados para obter dados objetivos, e um
questionário comportamental foi dado aos donos dos cães que forneceu informações
subjetivas. Os resultados do estudo para OA ainda não estavam disponíveis no momento
desta publicação (McGrath 2018).

O segmento de epilepsia do estudo consistiu em 16 cães de clientes que foram

diagnosticados com epilepsia refratária idiopática, tendo 2 ou mais crises epilépticas por
mês enquanto recebiam terapias anticonvulsivantes convencionais. Os critérios de
inclusão incluíram um exame neurológico normal e uma investigação normal da epilepsia
com ressonância magnética e análise do fluido cérebro-espinhal. Nove cães foram
designados aleatoriamente para o grupo de tratamento e sete para o grupo de controle
(placebo). O grupo de tratamento recebeu 2,5 mg/kg de óleo de CBD a cada 12 horas por
via oral. O grupo controle recebeu óleo placebo por 12 semanas. Os participantes do
estudo foram obrigados a permanecer em seus medicamentos anticonvulsivantes padrão
(AED). Os exames de sangue de rotina e os níveis de CBD foram determinados a cada 4
semanas. Os níveis de AED foram medidos na conclusão do ensaio.

Sessenta e sete por cento (6/9) dos cães no grupo de tratamento experimentaram uma
redução superior a 40% nas convulsões mensais médias durante o estudo, enquanto
apenas 29% (2/7) dos cães no grupo de controle tiveram uma redução maior redução de
40% na média mensal de apreensões.

257
Elevações na fosfatase alcalina (ALP) foram registradas para o grupo de tratamento e um
cão no grupo de controle. O único cão de controle havia medido previamente as
elevações no ALP, portanto, essa elevação não foi considerada relevante para o estudo.
Seis cães (67%) no grupo de tratamento tiveram elevações na ALP medidas no final do
estudo. O valor médio de ALP foi de 619 UI/l (intervalo de 15-140 UI/l).

As concentrações de AED no grupo de tratamento com fenobarbital diminuíram em 2/7

cães (29%) e aumentaram em 5/7 cães (71%). No grupo controle, os níveis de
fenobarbital diminuíram em 3/5 cães (60%) e aumentaram em 2/5 cães (40%); não houve
mudança significativa em nenhum dos grupos. Este é um achado interessante de se
observar, porque existe uma preocupação de que o CBD, que é metabolizado por meio do
grupo P450 de citocromos, possa interferir na distribuição de fármacos que também são
metabolizados por essa via. A partir dos resultados deste estudo piloto, esse efeito não é
aparente, pelo menos no que diz respeito aos níveis de fenobarbital.

Os níveis de brometo de potássio (KBR) no grupo de tratamento diminuíram em 2/3 cães

(67%) e aumentaram em 1/3 cães (33%). No grupo de controle, os níveis de KBR
diminuíram em um de dois cães (50%) e aumentaram em um de dois cães (50%). Não
houve mudança significativa em nenhum dos grupos, embora o número total de sujeitos
do estudo fosse baixo neste estudo piloto. Esta pesquisa e a seção de osteoartrite deste
estudo ainda não foram publicadas, enquanto se aguarda os resultados da análise de
plasma dos níveis de canabinoides que foram medidos em 0, 4, 8 e 12 semanas e a
conclusão do estudo de eficácia dos efeitos do CBD na osteoartrite.

A American Kennel Club Canine Health Foundation concedeu quase US $ 400.000 em

financiamento para este grupo de pesquisa na CSU para um estudo maior e expandido
com 60 cães, como resultado dos resultados positivos deste trabalho piloto, com relação
ao uso de óleo de CBD para tratar a epilepsia refratária. Este estudo também analisará
epilépticos não controlados tendo duas ou mais convulsões por mês enquanto recebem a
terapia padrão. Neste estudo expandido, que usará um desenho cruzado, cada sujeito
receberá 12 semanas de tratamento ou placebo com um período de eliminação de 4
semanas entre os tratamentos. Este estudo começou em janeiro de 2018 e atualmente
está inscrevendo pacientes (McGrath 2018).

258
7. Orientações sobre produtos veterinários de cannabis no mercado
dos EUA
As preparações de cannabis têm sido historicamente utilizadas para remédios caseiros,
como remédio, como alimento funcional e como fonte de nutrição, principalmente para
humanos. No entanto, houve relatos de produtos de cannabis sendo usados em animais
desde 1800, quando a cannabis se tornou um remédio popular à base de ervas em um
momento anterior ao desenvolvimento da indústria farmacêutica. Remédios patenteados
contendo cannabis, geralmente em uma tintura de álcool, eram vendidos a proprietários
de cavalos para cólicas e outras doenças equinas, e linimentos tópicos eram usados
externamente para problemas de juntas e claudicação.

À medida que a cannabis foi difamada e estigmatizada na década de 1930, e à medida

que os medicamentos farmacêuticos se tornaram mais disponíveis como substitutos dos
produtos da cannabis, o uso da cannabis em cavalos tornou-se menos comum ou
inexistente. Para as nossas espécies animais de companhia, cães, gatos e cavalos, o uso
de produtos de cannabis não ganhou popularidade até que a legalização estado a estado
da cannabis para fins medicinais começou em meados da década de 1990. Os donos de
animais de estimação, sabendo dos muitos benefícios que a cannabis criou para as
pessoas, naturalmente começaram a explorar seu uso em seus animais de estimação
para problemas médicos que não eram facilmente resolvidos pela medicina veterinária
convencional. Esses são problemas como a epilepsia, que são resistentes à remediação
farmacêutica; dor que é pouco responsiva a opiáceos, esteróides e antiinflamatórios não
esteróides; efeitos colaterais do tratamento do câncer, como náuseas e vômitos; e para
tratar o câncer. Alguns pacientes veterinários respondem bem aos AINEs para
osteoartrite, mas os próprios medicamentos podem causar toxicidade em pacientes
sensíveis. O uso de cannabis como meio alternativo de remediar a dor da artrite pode
substituir essas drogas ou permitir dosagens mais baixas e seguras dos medicamentos.
Vários ensaios clínicos veterinários randomizados controlados por placebos que foram
conduzidos demonstraram objetivamente o benefício da cannabis para a dor osteoartrítica
em cães (McGrath 2018; Gamble et al. 2018).

7.1 Formatos de produtos de cannabis e métodos de entrega

Existem vários formatos de produtos de cannabis para animais de companhia, atualmente

no mercado, e vários formatos emergentes atualmente em pesquisa e esforços de
desenvolvimento por empresas com visão de futuro. A via de administração é o principal
fator que contribui para a eficácia de qualquer medicamento, natural ou não. A escolha do
método de administração apropriado para o paciente pode afetar muito os resultados
259
médicos. A biodisponibilidade associada do medicamento deve ser equilibrada com as
necessidades práticas do paciente.

Os cães provaram ser altamente sensíveis aos efeitos neurológicos adversos do THC
descarboxilado psicoativo. Eles podem se beneficiar do uso de THCA não-descarboxilado
e não psicoativo, sem medo de uma visita ao pronto-socorro veterinário. O THCA, embora
não seja psicoativo, ainda é uma substância controlada de Classe I, de acordo com a
Drug Enforcement Agency. Embora o THCA não se ligue aos receptores CB1 no cérebro,
razão pela qual ele é psicoativo, ele é regulado por meio de muitas outras vias mediadas
por receptores não canabinóides.

O suco de folhas de cannabis está ganhando popularidade como método de preparação e

consumo. A extração a frio da cannabis crua preserva os canabinóides ácidos sensíveis
ao calor THCA e CBDA que rapidamente sofrem degradação através da via de
descarboxilação. A descarboxilação normalmente ocorre em temperaturas acima de 100
ºC, comuns para combustão (fumaça), vaporização ou extração a quente. O THCA tem
uma afinidade significativamente menor para o receptor canabinoide endógeno CB 1 e não
tem os mesmos efeitos psicoativos que as preparações contendo THC “ativado” ou
“descarboxilado”. O consumo de preparações de cannabis não aquecidas permite a
administração de doses significativamente maiores de canabinóides ácidos, sem os
efeitos psicoativos do THC. O suco de cannabis crua teria a vantagem de reter terpenos
voláteis, que também têm propriedades medicinais importantes. Perfis de terpeno
originais são geralmente alterados em métodos de extração envolvendo calor.

7.1.1 Via Oral de Administração

A via de ingestão é muito comum e ainda bastante eficaz, apesar de sua baixa
biodisponibilidade. Estudos farmacocinéticos (pK) que documentam a biodisponibilidade
de extratos de cannabis orais, especificamente os principais canabinoides THC e CBD em
humanos e cães, demonstram que apenas 5–10% da droga lipofílica atinge seu sítio ativo
pretendido. Apesar desta biodisponibilidade relativamente baixa, boas respostas clínicas
foram documentadas em ambas as espécies. Estudos de pK que documentam a
biodisponibilidade de canabinóides na espécie equina ainda precisam ser realizados, bem
como em outras espécies veterinárias. A maioria dos produtos atualmente disponíveis
para espécies animais é direcionada a produtos formulados para ingestão. Alguns
exemplos dessas formulações são destacados a seguir.

Cápsulas – O primeiro produto de cannabis de companhia animal a ser lançado nos

Estados Unidos, logo após a legalização federal da cannabis com baixo teor de THC

260
(“cânhamo”), continha farinha de sementes de cânhamo em pó infundida com os extratos
lipofílicos da planta de cannabis e foi fabricada em cápsulas.

As cápsulas contêm um volume fixo de materiais ativos e são limitadas em eficácia a

faixas de peso específicas dos pacientes. Essa limitação exige a fabricação e embalagem
de vários tamanhos de cápsulas para acomodar os diversos tamanhos de espécies
veterinárias, de Chihuahua a Dogue Alemão para cavalos de tração. As cápsulas são
convenientes para guardar e administrar e são uma forma de dosagem familiar para a
maioria dos consumidores. Eles podem ser escondidos em uma pequena quantidade de
comida para facilitar a absorção com o estômago vazio, mas também são submetidos a
um metabolismo hepático de primeira passagem rápido e, com base no estudo pK
publicado da CSU, são menos biodisponíveis do que um líquido lipofílico absorvido
através da mucosa oral (Bartner et al. 2018).

Tinturas – O segundo formato de produto de cannabis introduzido no mercado de saúde

animal dos EUA foi um produto que se tornou comumente conhecido na indústria de
cannabis como uma “tintura”. Essas são infusões de óleo de extratos lipofílicos da planta
de cannabis e podem conter cannabis com alto teor de THC (“maconha”) ou cannabis
com baixo teor de THC (“cânhamo”). Óleos veiculares podem ser qualquer óleo, mas mais
comumente óleo de semente de uva, óleo de semente de cânhamo e triglicerídeos de
cadeia média são usados nessas formulações. Vale ressaltar que a palavra “tintura” foi
derivada da medicina botânica e, nesse contexto, denota um extrato etanólico de um
material botânico.

As tinturas podem conter apenas cannabis ou podem ser combinadas com terpenos
adicionais e outros botânicos e nutracêuticos ou mesmo produtos farmacêuticos para um
efeito mais direcionado. Os rótulos da tintura devem incluir a potência da formulação em
miligramas totais de CBD e THC e outros níveis mensuráveis de canabinoides, bem como
listar as outras quantidades dos ingredientes ativos na embalagem e quaisquer
conservantes que foram adicionados para melhorar a vida útil.

As tinturas têm a vantagem de serem escaláveis no sentido de poder dosar diferentes

tamanhos de animais, já que para um paciente maior ou menor tudo que seria necessário
seria maior ou menor volume, respectivamente. As tinturas também podem ser
adicionadas ou misturadas com uma pequena quantidade de alimento saboroso para
facilitar a administração, mas são absorvidas mais eficientemente por via transmucosa da
cavidade oral.

Um estudo farmacocinético comparando a biodisponibilidade das vias de administração

transmucosa, oral e transdérmica para o CBD foi recentemente concluído (Bartner et al.
261
2018). Verificou-se que a administração transmucosa de um líquido lipofílico produziu os
maiores valores de Cmáx neste estudo. Assim, a tintura proprietária à base de óleo neste
estudo, aplicada via trans mucosa às membranas mucosas orais, gengivas, lábios
internos, língua e bolsa bucal, seria o meio de administração mais biodisponível em
comparação com os outros dois materiais avaliados neste estudo.

Estudos de estabilidade prolongados de produtos de cannabis são necessários para

determinar a vida útil da formulação, que geralmente varia de 12 a 24 meses. Essa
“desatualização” deve ser expressa no rótulo como uma data de fabricação ou uma data
de validade para informar ao consumidor a data de fabricação do produto. Esta datação
da formulação orienta o consumidor na seleção de um produto onde sua potência deve
atender às reivindicações do rótulo com base em seu envelhecimento ao longo do tempo
e a subsequente deterioração gradual dos delicados materiais ativos nele contidos. Para
um paciente que não precisa de muito extrato diariamente, um frasco contendo uma
grande quantidade de material pode expirar antes de terminar.

Dosagem – Produtos de saúde animal em forma de dosagem são comumente usados

para administrar produtos farmacêuticos e nutracêuticos. As guloseimas que contêm
nutracêuticos ou farmacêuticos, também conhecidas como “guloseimas em forma de
dosagem”, tornaram-se muito populares entre os consumidores que possuem animais de
estimação. Os deleites na forma de dosagem precisam ter a intenção e ser rotulados
como nutracêuticos, não como compostos nutricionais. Nem a cannabis nem o cânhamo
são ingredientes de ração aprovados pelo FDA-CVM e AAFCO. Isso significa que a
análise garantida (AG) e uma declaração nutricional no rótulo e/ou embalagem do produto
com o total de calorias e calorias da gordura não é apropriado para um tratamento em
forma de dosagem e pode causar uma carta de “interrupção da venda” a ser emitida pelo
FDA-CVM para a venda de um produto nutricional adulterado.

O rótulo das formas farmacêuticas, com base nas diretrizes do NASC e do FDA-CVM,
deve conter uma listagem na ordem de pesos decrescentes dos materiais que são os
“ingredientes ativos” e os “ingredientes inativos”. Esta segunda categoria incluiria os
componentes nutricionais do tratamento no rótulo.

Biscoitos duros e mastigáveis são atualmente as formas de dosagem mais populares

disponíveis no mercado. Como as cápsulas, esses produtos podem conter apenas uma
quantidade fixa dos ingredientes ativos, limitando assim as faixas de peso abordadas por
um tamanho de tratamento de forma de dosagem única. As vantagens dos tratamentos
em forma de dosagem são a relativa facilidade de sua administração. As desvantagens
potenciais podem ser a hipersensibilidade do paciente aos ingredientes no tratamento, a
262
necessidade de vários tratamentos de uma vez para tratar um paciente de peso maior, a
vida útil reduzida e o potencial do processo de fabricação que envolve cozimento ou
aquecimento e extrusão do material pode causar adulteração térmica do produto. As
análises de pós-produção do produto são críticas para garantir que a potência do produto
não seja comprometida pelo processo de fabricação.

Pellets e pós são escalonáveis para dosar uma ampla variedade de pesos de espécies-
alvo. Existem alguns pós feitos de cannabis (“cânhamo”) com baixo teor de THC. Estes
pós podem ser fabricados a partir do material vegetal em pó ou a partir da modificação
farmacêutica do extrato lipofílico do material vegetal em um formato de pó ou podem usar
um pó inerte que é infundido com o extrato lipofílico da planta de cannabis. Para a maioria
das aplicações para animais, a variedade de cannabis com baixo THC é a matéria-prima
preferida para a fabricação deste pó devido ao potencial de problemas com a cannabis
com alto THC tanto no que diz respeito à resposta do paciente quanto no que diz respeito
ao ambiente regulatório mais estrito para alto THC cannabis.

Os pós podem ser acondicionados em frascos de boca larga com uma medida que pode
ser usada para estimar as dosagens eficazes. Colheres de medida padrão de cozinha
também podem ser usadas para colher a dosagem apropriada para o tamanho e a
condição do paciente. Os pós podem ser embalados em embalagens duras, bem como
bastões, sachês e, é claro, cápsulas. Porções individuais tornam os palitos, sachês e
cápsulas mais convenientes para a dosagem, mas removem o benefício da escalabilidade
do pó em relação às formas farmacêuticas.

Os pellets são prensados a partir de material vegetal de cannabis seco, mais comumente
usando a variedade de cannabis com baixo teor de THC (“cânhamo”). Essas pelotas
podem ser dadas a cavalos, cabras, ovelhas e outros animais de fazenda, bem como
aves, suínos, animais de zoológico, pássaros enjaulados e animais domésticos. Uma
grande preocupação em dar cannabis a cavalos, mesmo cannabis com baixo THC, é que
haveria THC suficiente, para que o cavalo testasse positivo para THC nos testes de
drogas e fosse desqualificado de qualquer evento para o qual estava sendo testado.

Os canabinóides solúveis em água aplicam a tecnologia existente usando emulsionantes

lipídicos e reduzindo o tamanho das gotículas de óleo para o menor tamanho possível,
geralmente na faixa de nanômetros. A solubilidade em água aumenta as concentrações
plasmáticas e ajuda o fármaco lipofílico a atingir o sítio ativo. Além disso, um rápido início
é observado com formulações solúveis em água que não têm os mesmos efeitos de longa
duração. Embora não existam estudos de pK publicados comparando a biodisponibilidade
de preparações lipofílicas e hidrofílicas de canabinóides administrados pela mesma via,
263
existem estudos de pK confiáveis usando outros materiais lipofílicos, como a coenzima
Q10, que documentam a biodisponibilidade melhorada em até 5–8 vezes melhor do que o
material lipofílico com esta abordagem. O impacto do aumento da biodisponibilidade nos
resultados clínicos ainda precisa ser medido à medida que esses canabinóides solúveis
em água se tornam mais disponíveis; no entanto, menos canabinóides são necessários
em formulações solúveis em água para atingir concentrações de sítios ativos em
comparação com soluções à base de óleo.

Transmucosa Essa via de administração podem ser muito eficazes na maioria dos
contextos, pois é bastante fácil aplicar os canabinoides líquidos nas membranas mucosas
orais. Bartner mediu a biodisponibilidade comparativa da transmucosa com as vias oral e
transdérmica em 30 cães Beagle. O método transdérmico de administração foi de 12–
32% tão biodisponível quanto a abordagem transmucosa entre 75 mg e 150 mg/dia, com
base nos valores de Cmáx. A abordagem oral foi de 55-68% tão biodisponível quanto a
abordagem transmucosa. Concluiu-se a partir deste estudo que a via de administração
mais biodisponível entre esses três formatos de dosagem era a abordagem transmucosa
(Bartner et al. 2018).

7.1.2 – Administração Tópica

As aplicações tópicas de canabinóides apresentam baixa biodisponibilidade sistêmica,

mas penetram localmente para beneficiar a anatomia regional. Para a maioria das
espécies veterinárias que possuem pelos ou penas cobrindo o corpo, “unguentos” e
“bálsamos” à base de óleo correm o risco de emaranhar o cabelo e interferir na aplicação
na epiderme, onde será absorvido localmente. Produtos que estão em solventes como
álcool ou usam emulsificantes para criar um creme ou loção solúvel em água têm uma
chance melhor de penetrar no cabelo ou nas penas e, por fim, penetrar na pele. Eles são
chamados de “linimentos” se contiverem álcool e “cremes” ou “loções” se forem
emulsificados e solúveis em água. As aplicações transdérmicas envolvem o uso de um
material bipolar, como um fosfolipídeo, para transportar os canabinóides para a circulação
local e a partir daí para a circulação sistêmica. Os transdérmicos podem ser cremes ou
em “adesivos” que usam uma membrana para separar a solução transdérmica da pele.
Para as espécies veterinárias, os líquidos transdérmicos e os adesivos precisam ter uma
ponta de cabelo aparada antes da aplicação. Alguns sítios anatômicos sem pelos, como a
parte interna do pavilhão auricular e as regiões inguinais ventrais, não precisam de
tosquia e facilitam a administração. É recomendado antes da reaplicação do creme
transdérmico limpar o local de aplicação para melhorar a absorção. A administração na
parte interna da orelha evita que o paciente veterinário lamber o creme transdérmico de
264
uma área acessível, como a região inguinal. A absorção transdérmica do medicamento
depende da quantidade de vascularização local para transportar o medicamento da pele
para a circulação sistêmica.

7.1.3 – Inalação

A inalação é um método de administração impraticável para espécies veterinárias, exceto

talvez primatas ou animais de laboratório conectados a máscaras respiratórias. Como
versões solúveis em água de canabinóides são desenvolvidas, existe a possibilidade de
que um método de nebulização possa ser empregado para permitir a absorção através da
grande área de superfície dos pulmões. Os métodos de inalação são de início rápido e
contornam o metabolismo de primeira passagem no fígado.

7.2 Extratos de cânhamo Zero THC

Embora a cannabis com baixo THC, que é chamado de “cânhamo”, já tenha menos de
0,3% de THC em uma base de matéria seca no momento da colheita, há uma série de
situações em que reduzir significativamente a quantidade de THC a níveis indetectáveis
têm vantagens distintas para espécies veterinárias. Os cães são mais sensíveis aos
efeitos neurológicos adversos do THC quando são virgens de exposição e não
desenvolveram tolerância. Alguns cães são mais sensíveis do que outros, e relatos
anedóticos de clientes veterinários (comunicação pessoal) indicam que há uma pequena
porcentagem de cães que reage adversamente à pequena quantidade de THC presente
em cultivares de cânhamo. Para esses cães, um produto com zero THC seria vantajoso.

Os cavalos podem ter respostas imprevisíveis ao THC, aumentando potencialmente o

risco para o cavalo, o proprietário do cavalo e o veterinário. Além disso, cavalos e cães
em eventos competitivos são comumente testados com drogas para se qualificar para
competir. O uso de um produto com zero THC tornaria menos provável que o animal fosse
reprovado no teste de drogas devido aos níveis detectáveis de THC. Os laboratórios de
teste de drogas geralmente testam a urina e o sangue para muitas substâncias, incluindo
THC e CBD. A maioria dos locais desqualificará se algum THC for detectado (tolerância
zero), mas muitos não desqualificam para a detecção de CBD. Cabe ao evento individual
decidir quais são os parâmetros de desqualificação. A Agência Mundial Antidopagem
(www.WADA-ama.org) permite o uso de CBD em atletas desde janeiro de 2018. Ainda é
desqualificado para THC, canabinóides sintéticos e agentes canabimiméticos. Por esse
motivo, os atletas olímpicos que estiverem usando uma fonte zero THC de CBD não
serão desclassificados, a exemplo do vencedor da medalha de ouro, Michael Phelps.

265
O veterinário coautor deste capítulo distribuiu mais de 40.000 frascos de tintura zero THC
para veterinários nos últimos 2 anos. Relatórios de centenas desses veterinários
documentaram a força clínica da formulação zero THC para reduzir a dor, melhorar a
mobilidade, trazer alguns tumores à remissão e tratar com sucesso a epilepsia não
complicada, diabetes tipo 2 e problemas de comportamento relacionados à ansiedade,
como fobias de ruído.

Antes da descoberta e uso de todos os muitos canabinóides não THC no cânhamo,

pensava-se que o THC era absolutamente necessário para quaisquer benefícios clínicos.
Sabe-se agora, a partir desses muitos casos que foram tratados com sucesso com
extratos de THC zero, que o efeito de conjunto não precisa do THC para ser ativado. Em
pacientes com tônus endocanabinoide reduzido, pode ser necessário o uso de uma
pequena quantidade de THC para substituir o ligante endógeno para melhor resposta
clínica. Casos de dor intensa e cânceres agressivos também podem se beneficiar do
THC, mas para a maioria dos outros casos clínicos, o THC não é necessário.

7.3 Considerações de dosagem e estratégias para espécies veterinárias

A determinação de dosagens baseadas em evidências por meio de estudos de Fase I

com níveis de dosagem em qualquer espécie veterinária ainda não foi realizada. Vários
dos ensaios clínicos randomizados recentemente publicados de instituições acadêmicas
veterinárias usaram dosagens extrapoladas de estudos publicados em humanos e
animais de laboratório, verificados por farmacocinética de dose única para garantir níveis
sanguíneos detectáveis durante um período terapêutico de tempo. Esses estudos
veterinários em cães usaram uma dosagem única, que é bastante alta, mas essas altas
dosagens tiveram resultados estatisticamente significativos com melhora clínica em
resposta a pacientes clínicos com OA e epilepsia refratária. No entanto, não foram
realizados estudos incrementais de dose e resposta para verificar se uma dose mais
baixa também pode beneficiar pacientes veterinários e ser mais econômica para o público
que possui animais de estimação.

As dosagens em pacientes humanos foram derivadas de estudos objetivos publicados e

das impressões clínicas de centenas de médicos que foram treinados em cannabis
medicinal nos 29 estados com legislação sobre cannabis medicinal desde 1996, quando a
cannabis foi legalizada pela primeira vez para fins médicos nos Estados Unidos Estados
(MacCallum e Russo 2018). Devido às considerações legais que afetam o uso clínico de
cannabis pelos veterinários, não houve esse tipo de definição de dosagem empírica
prática por médicos veterinários. Em vez disso, as dosagens foram empiricamente e
anedoticamente determinadas em grande parte por donos de animais de estimação e por
266
alguns veterinários dispostos a arriscar suas licenças veterinárias para empregar
canabinoides em seus pacientes.

Os dados de veterinários que recomendam fitocanabinóides para seus pacientes mostram

que as espécies veterinárias têm uma “resposta bifásica” às dosagens de cannabis da
mesma forma que os humanos. “Bifásico” significa que uma dose baixa (ou “microdose”)
gerará um conjunto de efeitos e abordar um conjunto de problemas clínicos e uma dose
alta (ou “macrodose”) produzirá um segundo conjunto de efeitos e abordar um segundo
conjunto de questões clínicas.

As microdoses são consideradas inferiores a 0,5 mg/kg BID de canabinóides. As

macrodoses seriam maiores que 2,0 mg/kg BID. As respostas individuais aos níveis de
dosagem podem variar. Com base em relatos anedóticos de veterinários e donos de
animais de estimação que estão usando microdoses, as dosagens eficazes usadas em
cães e gatos foram até 40 vezes menores do que as macrodoses usadas no estudo de
segurança da CSU ou 5 vezes menos do que as utilizadas em o estudo de eficácia da
CSU. Haverá uma pequena porção de animais que desenvolverá os efeitos colaterais
relatados de diarréia, sedação ou fosfatase alcalina sérica elevada, mesmo com essas
doses mais baixas.

McGrath avaliou a segurança da administração de altas doses de CBD por um período de

6 semanas. Os resultados descobriram que no nível de macrodose (10–20 mg/kg/dia),
houve uma maior frequência de reações adversas aos extratos de maconha. Diarréia,
sedação e elevações da fosfatase alcalina sérica foram registradas nos indivíduos que
receberam 10 e 20 mg/kg/dia (McGrath et al. 2018).

Tischler em sua apresentação na Segunda Conferência Anual no Instituto de Pesquisa de

Cannabis da CSU em Pueblo discutiu o valor das microdoses no paciente humano sobre
o uso de macrodoses. A microdose serve para reduzir ou eliminar o efeito psicotrópico do
THC por meio de dosagem sub-psicotrópica e pelo desenvolvimento de tolerância durante
um período de 2 semanas. Pacientes veterinários, para os quais o uso do THC é
necessário e terapêutico (dor intensa, estimulação do apetite ineficaz com o CBD, certos
tipos de neoplasia), o uso da estratégia de microdose inicialmente facilitará o
desenvolvimento de tolerância aos efeitos adversos do THC. Uma vez que isso seja
alcançado, as dosagens de THC podem ser aumentadas para atingir o(s) benefício(s)
clínico(s) desejado(s) (Tischler 2018).

Em um estudo não publicado, o veterinário coautor deste texto deu a 30 cavalos, em 3

estábulos diferentes, dosagens de 25-50 mg de CBD em um extrato de cânhamo zero
THC uma ou duas vezes ao dia para tratar de queixas de ansiedade, anormalidades da
267
marcha, laminite leve a grave e síndrome metabólica. Os assuntos do estudo tinham uma
média de cerca de 1000 libras. Verificou-se que para ansiedade e casos leves de
claudicação ou anormalidades da marcha, a administração de 25 mg uma ou duas vezes
ao dia foi adequada para induzir uma resposta em relação à ansiedade de carregar em
um trailer, ou em eventos, ou para anormalidades leves da marcha. Em um estábulo, os
cavalos só puderam receber sua dose uma vez ao dia, mas essa dose única ainda
produziu bons resultados clínicos.

Para condições mais graves, como laminite moderada, outras fontes de claudicação ou
síndrome metabólica, verificou-se que 50 mg uma ou duas vezes ao dia era suficiente
para a resposta clínica. Quando os proprietários de cavalos foram solicitados a
interromper a administração de extratos de cânhamo para determinar os tempos de
retirada do CBD, para situações em que os cavalos podem ser testados para drogas para
um evento, muitos se recusaram a interromper a administração do cânhamo, pois
estavam muito satisfeitos com sua resposta dos cavalos aos extratos de cânhamo. Os
cavalos evoluíram para ser muito eficientes na absorção de gorduras de sua dieta, pois
sua dieta natural de forragem é muito pobre em gorduras e óleos. Os estudos de pK em
equinos são muito necessários para entender melhor os intervalos e níveis de dosagem.

Para a maioria dos outros animais, usamos a faixa de dosagem estabelecida

empiricamente por meio de milhares de usos veterinários, começando com uma dosagem
baixa e aumentando lentamente a dosagem ao longo do tempo. Recomenda-se
administrar uma dose de 10-14 dias para permitir a regulação positiva dos receptores CB,
e se após 2 semanas a resposta clínica do paciente for inadequada, o aumento da
dosagem duas vezes maior do que a dose inicial pode produzir uma resposta melhor em
um determinado paciente. Seguir com o aumento da dosagem, lentamente ao longo do
tempo, produzirá os melhores resultados clínicos. “Comece devagar, vá devagar, fique
baixo” é o mantra para a dosagem de um paciente, seja humano ou veterinário, e este
protocolo, combinado com os estudos de segurança e eficácia de McGrath, permite que o
médico seja capaz de fornecer uma dosagem de até 20 mg/kg/dia com segurança
(MacCallum e Russo 2018; McGrath et al. 2018).

7.3.1 – Proporção de dosagem

A dosagem de proporção é o uso de formulações de cannabis que contêm THC e CBD

em proporções específicas entre si. O objetivo desta abordagem é duplo:

1. Permite o desenvolvimento de tolerância ao THC por meio do uso inicial de uma razão
de CBD alta para THC baixa (THC : CBD / 1:25) para evitar a psicoatividade enquanto a
tolerância aos efeitos adversos do THC está sendo estabelecida.
268
2. Uma vez que a tolerância tenha sido estabelecida, a dosagem da fração de THC nesta
fórmula combinada pode então ser aumentada com segurança. O aumento da dose de
THC também aumentará a dose de CBD administrada, que pode ser a abordagem
desejada para as necessidades clínicas de um determinado paciente.

Se for determinado que um paciente precisa de uma quantidade maior de THC para
fornecer melhores benefícios médicos, mas pode não precisar de tanto CBD quanto o
aumento da dose de THC em uma fórmula de baixa proporção forneceria, então, passar
para uma formulação de proporção com uma quantidade igual de THC e CBD pode ser
mais eficaz. Formulações de proporção equivalente de THC e CBD (1:1) estão sendo
usadas empiricamente e efetivamente para dor moderada a grave e em pacientes
oncológicos para os quais o produto de baixa proporção de THC não fornece atividade
antineoplásica suficiente ou remediação de efeitos colaterais oncológicos da terapêutica
ou do a própria doença.

Em raras situações em espécies veterinárias, pode ser necessário fornecer uma

formulação de alto THC para melhor controle da dor ou para melhor atender às
necessidades do paciente oncológico. THC e CBD na proporção 4:1 é normalmente a
proporção que está sendo usada clinicamente. A necessidade e o uso em pacientes
veterinários têm um potencial maior para efeitos adversos do que as formulações de
menor proporção de THC. Em todos os casos de uso de THC em espécies veterinárias, é
importante desenvolver tolerância primeiro usando os produtos com THC baixo ou sem
THC mencionados anteriormente nas primeiras 2 semanas de terapia para evitar reações
adversas ou idas ao pronto-socorro veterinário.

7.3.2 – Eventos adversos (AEs) e dosagem

McGrath relatou que o estudo de segurança do CBD determinou que uma dosagem de 10
ou 20 mg/kg/dia de um CBD de espectro completo dividido BID produziu uma maior
incidência de eventos adversos do que o relatado em dosagens mais baixas. Diarréia e
sedação foram os dois As dominantes. A elevação dos níveis séricos de fosfatase alcalina
também foi observada como sendo eventos significativos nessas dosagens mais altas.
Outros testes de função hepática, como ácidos biliares e ALT, estavam dentro dos limites
normais (McGrath et al. 2018).

Sellers et al. (2013) descobriram que o uso de uma proporção de 1:1 de THC e CBD em
seu spray sublingual, Sativex™, foi associado a significativamente menos AEs do que a
cápsula de THC sintético 100% puro, Marinol™. Isso ilustra a redução de danos que vem
com a adição de CBD a uma formulação contendo THC ou um THC sintético (Sellers et al.
2013).
269
Russo relatou que a incidência de EA associada ao medicamento Sativex ™, aprovado
em todo o mundo para espasticidade muscular com esclerose múltipla, foi
significativamente menor quando o medicamento foi gradualmente titulado de acordo com
a resposta do paciente. Este estudo descobriu que a maioria dos AEs serão precoces e
transitórios, usando uma modificação da estratégia de dosagem, começando com uma
dose mais baixa, aumentando-a lentamente para atingir o efeito clínico (Russo et al.
2011). Em um artigo posterior, MacCallum e Russo afirmam, “As doses do medicamento
de cannabis devem ser determinadas individualmente, as (a dosagem efetiva para um
paciente específico)… depende do tônus endocanabinoide daquele paciente” (MacCallum
e Russo 2018).

7.3.3 – Interações medicamentosas com cannabis

É relatado que em pacientes humanos de maconha medicinal, os médicos raramente

observaram interações medicamentosas clinicamente significativas. MacCallum e Russo
(2018) afirmam, “não existe droga que não possa ser usada com cannabis, se necessário”
(MacCallum e Russo 2018). Dependendo da força da afinidade do metabólito para o
citocromo metabolizante, os níveis séricos de canabinóides ou produtos farmacêuticos
podem aumentar com inibidores ou diminuir com indutores enzimáticos. Sabe-se que o
THC e o CBD em humanos são oxidados pelos citocromos p450 (CYP2C9, 2C19 e 3A4).
Presume-se que seja semelhante às vias metabólicas no cão e em outras espécies
veterinárias, mas estudos ainda precisam ser conduzidos em cada espécie para detalhar
as possíveis variações entre espécies.

Em pacientes humanos, os principais AEs foram associados ao uso concomitante de

outros depressores do SNC com cannabis. Foi constatado que o CBD em altas doses em
humanos interfere no metabolismo do clobazam, exigindo potencialmente uma redução
da dose desse medicamento quando usado com o CBD (Devinsky et al. 2017). Faltam
estudos de interação medicamentosa para cada droga individual e canabinoide, mas os
estudos atualmente existentes não encontraram aumento da toxicidade ou perda de efeito
com medicamentos concomitantes. É uma boa prática médica, entretanto, continuar
testando essas interações, pois as respostas individuais podem não ser as mesmas ou
previsíveis a partir das respostas da população.

McGrath em seu estudo de epilepsia refratária mediu os níveis de fenobarbital pós-pílula e

os níveis de brometo de potássio (KBR) em seus assuntos de estudo no final do período
de estudo de 6 semanas. Ela não encontrou nenhuma diferença estatística entre os
grupos de tratamento e placebo para nenhum dos anticonvulsivantes. Isso pode indicar
que, apesar do potencial teórico para interação erva-droga entre CBD e drogas
270
metabolizadas pelo P450, pelo menos em cães em uso de anticonvulsivantes, a
interferência pode não ser clinicamente relevante. Independentemente disso, é uma boa
prática médica testar novamente os níveis séricos importantes da droga 2 semanas após
o início da terapia com CBD, especialmente se estiver usando protocolos de macrodose.
McGrath mencionou o pequeno tamanho do grupo de estudo neste trabalho piloto como
possivelmente não dando uma indicação precisa se realmente há interação droga/erva ou
não, e ela mencionou que analisará esses níveis não apenas no final de seu estudo
clínico financiado pelo AKC, mas em intervalos regulares durante o ensaio (McGrath
2018).

8. Boas Práticas de Fabricação Atuais (cGMP)

O Conselho Nacional de Suplemento Animal (NASC.cc), em parceria com o FDA-CVM,
estabeleceu diretrizes cGMP para nutracêuticos animais. Estes foram atualizados
recentemente para incluir a recentemente promulgada FDA Food Safety Modernization
Act (FSMA). A NASC fornecerá inspeções terceirizadas das instalações de fabricação de
seus membros para garantir que atendam aos padrões cGMP. As empresas membros da
NASC que passam em suas auditorias com sucesso podem exibir o selo NASC nos
rótulos dos produtos, o que pode orientar o consumidor a localizar produtos que atendam
aos mais altos padrões de qualidade e transparência.

Os rótulos dos produtos precisam conter informações sobre o lote ou número do lote do
processo de fabricação, desatualização, informações de contato da empresa, precauções
e contraindicações e o uso pretendido do produto, que, como nutracêutico, não pode ter
nenhuma alegação médica feita no rótulo ou material de marketing ou mesmo no nome do
produto. Por exemplo, um produto que contém as letras CBD, ou a palavra “canabidiol”
em seu nome ou no rótulo, corre o risco de ser fiscalizado pelo FDA. Isso ocorre porque o
FDA aprovou recentemente o CBD como um medicamento para tratar a epilepsia
pediátrica resistente. Alegações médicas são um motivo comum para as cartas de
interrupção de vendas da FDA-CVM.

8.1 Teste de Laboratório de Terceiros

O teste de controle de qualidade é um aspecto crítico de qualquer processo de fabricação.

Sem o teste de CQ, os fabricantes não seriam capazes de fabricar produtos com
concentrações padronizadas.

Além disso, a contaminação pode ser introduzida, e a única maneira de garantir que o
produto permaneça inalterado é por meio de métodos de teste validados. Outras coisas
271
importantes a se considerar incluem métodos de cultivo orgânico, Boas Práticas Agrícolas
(GAP) e protocolos cGMP.

O laboratório analítico que realiza a análise deve ser validado quanto à exatidão e
precisão em suas medições para que a padronização da potência do produto seja eficaz.
As empresas que usam laboratórios internos devem ter esses resultados validados por
meio do uso de laboratórios analíticos de terceiros validados. Também cabe aos
laboratórios aplicar métodos de amostragem estatisticamente válidos para obter uma
amostra representativa de um lote, a fim de gerar dados significativos.

Existem algumas preocupações principais que os testes de terceiros podem aliviar:

Teste de Potência de Canabinóide e Terpeno – Isso é absolutamente essencial para obter

uma dosagem eficaz e consistente para um paciente. Uma análise precisa para cada lote
fabricado é necessária para atender às diretrizes rígidas de alimentos e medicamentos. O
conteúdo deve ser listado no rótulo do produto e nos materiais de marketing para permitir
que o médico estabeleça com mais precisão uma estratégia de dosagem eficaz para o
paciente. Além disso, permite ao consumidor que possui um animal de estimação
selecionar melhor a potência apropriada do produto para o tamanho do animal e a
duração potencial da terapia necessária para esse produto. Os fabricantes podem fazer
declarações no rótulo em relação ao conteúdo de canabinoides e terpeno de seus
produtos, a fim de enganar os consumidores e aumentar o valor percebido de seus
produtos. Isso pode representar um sério risco à saúde se o paciente não estiver
recebendo a dosagem necessária para aliviar suas condições. Os certificados de análise
de produtos derivados da cannabis indicam a potência e as dosagens potenciais dos
produtos.

Contaminação com pesticidas – A aplicação de pesticidas tem sido uma prática padrão no
cultivo de plantas de cannabis, apesar da demanda do mercado por produtos orgânicos.
Os pesticidas que são comumente vendidos em lojas hidropônicas podem apresentar um
risco específico para a saúde de animais e humanos. Por exemplo, um fungicida
comumente vendido chamado Eagle 20 tem um ingrediente ativo principal chamado
myclobutanil, um composto que, quando exposto ao calor, pode gerar cianeto de
hidrogênio como subproduto reativo. Outro fungicida e regulador de crescimento de planta
chamado paclobutrazol demonstrou causar danos aos rins e fígado em estudos de caso
com animais, e o estado da Califórnia o designou como um pesticida de Categoria I, o que
significa que absolutamente nenhuma quantidade detectável é permitida em um produto
de cannabis. Certifique-se de pedir uma análise robusta de pesticidas multi resíduos de
um laboratório terceirizado para qualquer produto de cannabis orgânico.
272
Contaminação microbiológica – Os testes de alimentos há muito definem o padrão para
garantir que os microrganismos não estejam presentes em produtos destinados ao
consumo, mas certas operações de maconha ainda não mitigaram totalmente esse risco.
Embora seja bastante raro encontrar organismos como E. coli ou Salmonella na cannabis,
é muito comum encontrar Aspergillus, um certo tipo de fungo que é muito comum na
cannabis ao ar livre. O Aspergillus representa um risco de saúde muito específico,
especialmente para pacientes com sistema imunológico comprometido. Isso se deve a um
tipo de subproduto neurotóxico produzido nos esporos, chamados coletivamente de
micotoxinas. Se o paciente veterinário apresentar algum tipo de distúrbio imunológico, é
imprescindível que todos os produtos adquiridos venham com certificado de análise
atestando a ausência de microrganismos.

Contaminação por metais pesados – A cannabis é conhecida por ser um bioacumulador, o

que significa que absorve contaminantes do solo. Embora isso possa ser útil em algumas
aplicações, como remediar solos pobres, pode causar um grande risco se o cânhamo ou
a planta de cannabis forem cultivados em solos contaminados. Arsênio, cádmio, chumbo
e mercúrio são os principais perigos, e testes de metais pesados devem ser realizados
em qualquer produto à base de plantas para garantir um produto limpo. Fique
especialmente atento se as plantas forem cultivadas em um país com regulamentos
ambientais deficientes.

9. Observações Finais e Orientações Futuras

A medicina veterinária não viu os mesmos avanços em comparação com a medicina
humana para evidências científicas objetivas e não tendenciosas para o uso de cannabis
medicinal em espécies veterinárias. Isso se deve, em parte, ao fato de que os estatutos
de legalização, estado por estado, não oferecem privilégios legais semelhantes para
veterinários e seus pacientes, como os médicos têm para recomendar cannabis para seus
pacientes humanos.

No entanto, existem agora vários estudos clínicos randomizados, prospectivos, duplos

cegos, controlados por placebo e baseados em universidades que examinam o CBD de
extratos de cânhamo para medir sua segurança e farmacocinética. Incluído nesses
estudos, uma vez que a segurança foi confirmada, está a medição da eficácia dos
extratos de óleo de cânhamo sobre as condições veterinárias diagnosticadas, como
osteoartrite e epilepsia. Alguns desses estudos já foram publicados, alguns foram

273
apresentados em conferências profissionais e alguns estão no prelo. Esses estudos
marcantes foram todos relatados e resumidos neste capítulo.

Devido à distribuição quase universal do sistema endocanabinóide em todos os cordados

e em muitos invertebrados, os mesmos benefícios ou semelhantes dos canabinóides
encontrados em humanos também podem ser aplicados à maioria das espécies
veterinárias. Este capítulo destaca o que sabemos sobre os canabinoides e suas
interações com o sistema endocanabinoide em animais. Uma revisão completa da
literatura científica foi compilada aqui para veterinários e cientistas veterinários para
entender melhor esta terapia fascinante e emergente e, ao compreendê-la, ser mais
capaz de implantar terapias canabinoides para seus pacientes e formular medicamentos
canabinoides mais eficazes.

Agradecimentos Os autores deste capítulo gostariam de agradecer aos muitos indivíduos e

instituições que tiveram a coragem e o discernimento de trabalhar incansavelmente neste campo da
terapêutica com canabinoides para contribuir com um entendimento substancial para a literatura
científica mundial dos muitos benefícios e poucos riscos associados ao uso de cannabis e seus
derivados, em espécies humanas e veterinárias. Em particular, os autores deste capítulo desejam
expressar sua gratidão às equipes de pesquisa clínica veterinária do Estado do Colorado (sob a
orientação de Stephanie McGrath) e das Universidades Cornell (sob a orientação de Joe Wakslag) por
terem concluído no primeiro paciente canino sempre estudos de segurança, estudos comparativos de
farmacocinética e estudos de eficácia para determinar a capacidade dos canabinóides em reduzir o
desconforto osteoartrítico e ajudar os pacientes com epilepsia refratária. Os autores também gostariam
de estender sua gratidão ao Dr. Ethan Russo, Dr. Jahan Marcu e Kevin McKernan por suas reflexões e
revisão do capítulo. Esperamos continuar a desenvolver evidências que apóiem o uso clínico da
cannabis e seus derivados para muitas aplicações valiosas em espécies veterinárias. Esperamos
fervorosamente que as informações apresentadas neste capítulo ajudem os esforços de pesquisas
futuras a trazerem dados mais detalhados sobre a gama de aplicações dos canabinóides em espécies
veterinárias.

Referências

Aggarwal BB, Shishodia S (2006) Molecular targets of dietary agents for prevention and therapy of cancer.
Biochem Pharmacol 71:1397–1421
Ahmed SA, Ross SA, Slade D et al (2008) Cannabinoid ester constituents from high-potency Cannabis
sativa. J Nat Prod 71:536–542
Al-Omari SM (2007) The effect of thujone and myrcene on diabetes mellitus in albino rats. Faculty of
Graduate Studies University of Jordan
Aydin E, Türkez H, Taşdemir Ş (2013) Anticancer and antioxidant properties of terpinolene in rat brain
cells. Arch Ind Hyg Toxicol 64:415–424
Babson KA, Sottile J, Morabito D (2017) Cannabis, cannabinoids, and sleep: A review of the literature. Curr
Psychiatry Rep 19:23
Barni-Comparini I, Ferri S, Centini F (1984) Cannabinoid level in the leaves as a tool for the early
discrimination of cannabis chemiovariants. Forensic Sci Int 24:37–42
Bartner LR, McGrath S, Rao S, Hyatt LK et al (2018) Pharmacokinetics of cannabidiol administered by
three delivery methods at 2 different dosages to healthy dogs. Can J Vet Res 82:178–183
274
 Basavarajappa BS (2007) Neuropharmacology of the endocannabinoid signaling system-molecular
mechanisms, biological actions and synaptic plasticity. Curr Neuropharmacol 5:81–97
Bátkai S et al (2004) Endocannabinoids acting at cannabinoid-1 receptors regulate cardiovascular function
in hypertension. Circulation 110:1996–2002
Bauer JE (2011) Therapeutic use of fish oils in companion animals. J Am Vet Med Assoc 239:1441–1451
Beale C, Broid SJ, Chye Y et al (2018) Prolonged cannabidiol treatment effects on hippocampal subfield
volumes in current cannabis users. Cannabis Cannabinoid Res 3:94–107
Bénard G, Massa F, Puente N et al (2012) Mitochondrial CB 1 receptors regulate neuronal energy
metabolism. Nat Neurosci 15:558–564
Bergamaschi MM, Queiroz RH, Chagas MH et al (2011) Cannabidiol reduces the anxiety induced by
simulated public speaking in treatment-naive social phobia patients. Neuropsychopharmacology 36(6):1219–
1226
Bolognini D et al (2013) Cannabidiolic acid prevents vomiting in suncus murinus and nausea-induced
behaviour in rats by enhancing 5-HT1A receptor activation. Br J Pharmacol 168:1456–1470
Booth D (2009) Evaluating the quality of nutraceuticals to help improve your patient’s quality of life. Paper
presented at the Proceedings North American Veterinary Conference
Borrelli F, Fasolino I, Romano B et al (2013) Beneficial effect of the non-psychotropic plant cannabinoid
cannabigerol on experimental inflammatory bowel disease. Biochem Pharmacol 85(9):1306–1316
Brenneisen R, ElSohly MA (1988) Chromatographic and spectroscopic profiles of cannabis of different
origins: Part I. J Forensic Sci 33:1385–1404
Broséus J, Anglada F, Esseiva P (2010) The differentiation of fibre- and drug type cannabis seedlings by
gas chromatography/mass spectrometry and chemometric tools. Forensic Sci Int 200:87–92
Callaway JC (2004) Hempseed as a nutritional resource: an overview. Euphytica 140:65–72
Calleja MA, Vieites JM, Montero-Meterdez T et al (2013) The antioxidant effect of β-caryophyllene protects
rat liver from carbon tetrachloride-induced fibrosis by inhibiting hepatic stellate cell activation. Br J Nutr
109:394–401
Camilleri M, Kolar GJ, Vazquez-Roque MI et al (2013) Cannabinoid receptor 1 gene and irritable bowel
syndrome: phenotype and quantitative traits. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol 304(5): G553–G560
Campora L, Miraqliotta V, Ricci E et al (2012) Cannabinoid receptor type 1 and 2 expression in the skin of
healthy dogs and dogs with atopic dermatitis. Am J Vet Res 73:988–995
Carlini EA, Cunha JM (1981) Hypnotic and antiepileptic effects of cannabidiol. J Clin Pharmacol 21:417S–
427S
Chang YH, Windish DM (2009) Cannabinoid hyperemesis relieved by compulsive bathing. In: Mayo Clinic
Proceedings, vol 1. Elsevier, Amsterdam, pp 76–78
Chaves JS, Leal PC, Pianowisky L et al (2008) Pharmacokinetics and tissue distribution of the
sesquiterpene α-humulene in mice. Planta Med 74:1678–1683
Chen R et al (2013) Δ9-THC-caused synaptic and memory impairments are mediated through COX-2
signaling. Cell 155:1154–1165
Chioca LR et al (2013) Anxiolytic-like effect of lavender essential oil inhalation in mice: participation of
serotonergic but not GABAA/benzodiazepine neurotransmission. J Ethnopharmacol 147:412–418
Ciftci O, Ozdemir I, Tanyildizi S et al (2011) Antioxidative effects of curcumin, β-myrcene and 1, 8-cineole
against 2, 3, 7, 8-tetrachlorodibenzo- p-dioxin-induced oxidative stress in rats liver. Toxicol Ind Health
27:447–453
Condie R, Herring A, Koh WS et al (1996) Cannabinoid inhibition of adenylate cyclase-mediated signal
transduction and interleukin 2 (IL-2) expression in the murine T-cell line, EL4. IL-2. J Biol Chem 271:13175–
13183
Consroe P, Wolkin A (1977) Cannabidiol—antiepileptic drug comparisons and interactions in experimentally
induced seizures in rats. J Pharmacol Exp Ther 201:26–32
Crippa JA, Zuardi AW, Martin-Santos R et al (2009) Cannabis and anxiety: a critical review of the evidence.
Hum Psychopharmacol 24(7):515–523
Crowell PL, Gould MN (1994) Chemoprevention and therapy of cancer by d-limonene. Crit Rev Oncog
5(1):1–22
Dall’Aglio C, Mercati F, Pascucci L et al (2010) Immunohistochemical localization of CB1 receptor in canine
salivary glands. Vet Res Commun 34:9–12
Dalle Carbonare M, Del Giudice E, Stecca A et al (2008) A saturated N-acylethanolamine other than N-
palmitoyl ethanolamine with antiinflammatory properties: a neglected story. J Neuroendocrinol 20:26–34
De Petrocellis L, Melck D, Bisogno T et al (1999) Finding of the endocannabinoid signalling system in
Hydra, a very primitive organism: possible role in the feeding response. Neuroscience 92:377–387
275
 Deferne JL, Pate DW (1996) Hemp seed oil: a source of valuable essential fatty acids. J Int Hemp Assoc
3(1):4–7
Demirakca T, Sartorius A, Ende G et al (2011) Diminished gray matter in the hippocampus of cannabis
users: Possible protective effects of cannabidiol. Drug Alcohol Depend 114:242–245
Devane WA, Hanus L, Breuer A et al (1992) Isolation and structure of a brain constituent that binds to the
cannabinoid receptor. Science 258:1946–1949
Devinsky O, Cross JH, Wright S (2017) Trial of cannabidiol for drugresistant seizures in the Dravet
syndrome. N Engl J Med 376 (21):2011–2020
Dewey WL (1986) Cannabinoid pharmacology. Pharmacol Rev 38 (2):151–178
Directive C (2013) Common catalogue of varieties of agricultural plant species. Off J Eur Union 379
Do Vale TG, Furtado EC, Santos J Jr et al (2002) Central effects of citral, myrcene and limonene,
constituents of essential oil chemotypes from Lippia alba (Mill.) NE Brown. Phytomedicine 9:709–714
Drugs UNOo (2009) Recommended methods for the identification and analysis of cannabis and cannabis
products. United Nations Publications, Vienna
Elmes MW, Kaczocha M, Berger ST et al (2015) Fatty acid-binding proteins (FABPs) are intracellular
carriers for Δ9-tetrahydrocannabinol (THC) and cannabidiol (CBD). J Biol Chem 290:8711–8721
ElSohly MA, Slade D (2005) Chemical constituents of marijuana: the complex mixture of natural
cannabinoids. Life Sci 78:539–548
Esposito G, De Filippis D, Carnuccio R et al (2006) The marijuana component cannabidiol inhibits β-
amyloid-induced tau protein hyperphosphorylation through Wnt/β-catenin pathway rescue in PC12 cells. J
Mol Med 84:253–258
Esposito G, Scuderi C, Savani C (2007) Cannabidiol in vivo blunts β-amyloid induced neuroinflammation
by suppressing IL-1β and iNOS expression. Br J Pharmacol 151:1272–1279
Eubanks LM, Rogers CJ, Beuscher AE IV et al (2006) A molecular link between the active component of
marijuana and Alzheimer's disease pathology. Mol Pharm 3:773–777
Fan P (1995) Cannabinoid agonists inhibit the activation of 5-HT3 receptors in rat nodose ganglion
neurons. J Neurophysiol 73
(2):907–910
Fernandes ES, Passos GF, Medeiros R et al (2007) Anti-inflammatory effects of compounds alpha-
humulene and ()-trans-caryophyllene isolated from the essential oil of Cordia verbenacea. Eur J Pharmacol
569:228–236
Fischedick JT, Hazekamp A, Erkelens T et al (2010) Metabolic fingerprinting of Cannabis sativa L.,
cannabinoids and terpenoids for chemotaxonomic and drug standardization purposes. Phytochemistry
71:2058–2073
Freundt-Revilla J, Kegler K, Baumgärtner W et al (2017) Spatial distribution of cannabinoid receptor type 1
(CB1) in normal canine central and peripheral nervous system. PLoS One 12:e0181064
Fujita W, Gomes I, Devi LA (2014) Revolution in GPCR signalling: opioid receptor heteromers as novel
therapeutic targets: IUPHAR review 10. Br J Pharmacol 171(18):4155–4176
Galindo L, Moreno E, López-Armenta F et al (2018) Cannabis users show enhanced expression of CB1-
5HT2A receptor heteromers in olfactory neuroepithelium cells. Mol Neurobiol:1–15
Gallily R, Yekhtin Z, Hanuš LO (2015) Overcoming the bell-shaped dose-response of cannabidiol by using
cannabis extract enriched in cannabidiol. Pharmacol Pharm 6:75–85
Gamble L-J et al (2018) Pharmacokinetics, safety, and clinical efficacy of cannabidiol treatment in
osteoarthritic dogs. In: Proceedings of the World Rehabilitation Summit (IAVRPT), ACVSMR track; July 31,
Knoxville, TN
Gaoni Y, Mechoulam R (1964) Isolation, structure, and partial synthesis of an active constituent of hashish.
J Am Chem Soc 86:1646–1647
Gertsch J (2017) Cannabimimetic phytochemicals in the diet–an evolutionary link to food selection and
metabolic stress adaptation? Br J Pharmacol 174:1464–1483
Gertsch J, Schoop R, Kuenzle U et al (2004) Echinacea alkylamides modulate TNF-α gene expression via
cannabinoid receptor CB2 and multiple signal transduction pathways. FEBS Lett 577:563–569
Gertsch J, Leonti M, Raduner S et al (2008a) Beta-caryophyllene is a dietary cannabinoid. Proc Natl Acad
Sci 105:9099–9104
Gertsch J, Raduner S, Tytgat J et al (2008b) Analgesic and neuropsychological effects of Echinacea N-
alkylamides. Planta Med 74 (9):1014–PA302
Gesell FK, Zoerner AA, Brauer C et al (2013) Alterations of endocannabinoids in cerebrospinal fluid of
dogs with epileptic seizure disorder. BMC Vet Res 9:262

276
 Glenn H (2017) A stakeholder review of the feasibility of industrial hemp by-products as animal feed
ingredients: a report to the Colorado legislature in response to SB17–109
Griffin G, Wray EJ, Tao Q et al (1999) Evaluation of the cannabinoid CB2 receptor-selective antagonist,
SR144528: further evidence for cannabinoid CB2 receptor absence in the rat central nervous system. Eur J
Pharmacol 377:117–125
Gulluni N, Re T, Aoiacono I et al (2018) Cannabis essential oil: a preliminary study for the evaluation of the
brain effects. Evid Based Complement Altern Med 2018:1709182
Guzmán-Gutiérrez SL, Bonilla-Jaime H et al (2015) Linalool and β-pinene exert their antidepressant-like
activity through the monoaminergic pathway. Life Sci 128:24–29
Hampson A, Grimaldi M, Axelrod J et al (1998) Cannabidiol and () Δ9-tetrahydrocannabinol are
neuroprotective antioxidants. Proc Natl Acad Sci USA 95:8268–8273
Hampson AJ, Axelrod J, Grimaldi M (2003) Cannabinoids as antioxidants and neuroprotectants. Google
Patents
Han J et al (2012) Acute cannabinoids impair working memory through astroglial CB 1 receptor modulation
of hippocampal LTD. Cell 148:1039–1050
Hand M, Thatcher C, Remillard R et al (2010) Small animal clinical nutrition. Mark Morris Institute, Topeka
Hartsel JA, Eades J, Hickory B, Makriyannis A (2016) Nutraceuticals, efficacy, safety and toxicity: Cannabis
sativa and Hemp. Elsevier, Amsterdam, pp 735–754
Haustein M, Ramer R, Linnebacher M et al (2014) Cannabinoids increase lung cancer cell lysis by
lymphokine-activated killer cells via upregulation of ICAM-1. Biochem Pharmacol 92:312–325
Hayakawa K et al (2008) Cannabidiol prevents a post-ischemic injury progressively induced by cerebral
ischemia via a high-mobility group box1-inhibiting mechanism. Neuropharmacology 55:1280–1286
Heitland I, Klumpers F, Oosting RS et al (2012) Failure to extinguish fear and genetic variability in the
human cannabinoid receptor 1. Transl Psychiatry 2:e162
Henry P (2017) Cannabis chemovar classification: terpenes hyperclasses and targeted genetic markers for
accurate discrimination of flavours and effects. Peer J Prepr 5:e3307v3301
Hepburn C, Walsh S, Wainwright C (2011) 17 Cannabidiol as an antiarrhythmic, the role of the CB1
receptors. Heart 97:e8
Hill MN, McLaughlin RJ, Morrish AC et al (2009) Suppression of amygdalar endocannabinoid signaling by
stress contributes to activation of the hypothalamic–pituitary–adrenal axis. Neuropsychopharmacology
34:2733
Hill AJ, Williams CM, Whalley BJ et al (2012) Phytocannabinoids as novel therapeutic agents in CNS
disorders. Pharmacol Ther 133:79–97
Hillig KW, Mahlberg PG (2004) A chemotaxonomic analysis of cannabinoid variation in Cannabis
(Cannabaceae). Am J Bot 91:966–975
Hirota R et al (2012) Limonene inhalation reduces allergic airway inflammation in Dermatophagoides
farinae-treated mice. Inhal Toxicol 24:373–381
Ho B, Uezono Y, Takada S et al (1999) Coupling of the expressed cannabinoid CB1 and CB2 receptors to
phospholipase C and G protein-coupled inwardly rectifying K+ channels. Receptors Channels 6:363–374
Howlett AC (2002) The cannabinoid receptors. Prostaglandins Other Lipid Mediat 68:619–631
Howlett A, Fleming R (1984) Cannabinoid inhibition of adenylate cyclase. Pharmacology of the response in
neuroblastoma cell membranes. Mol Pharmacol 26:532–538
Ito K, Ito M (2011) Sedative effects of vapor inhalation of the essential oil of Microtoena patchoulii and its
related compounds. J Nat Med 65:336–343
Iwata N, Kitanaka S (2011) New cannabinoid-like chromane and chromene derivatives from Rhododendron
anthopogonoides. Chem Pharm Bull 59:1409–1412
Izzo AA, Borrelli F, Capasso R et al (2009) Non-psychotropic plant cannabinoids: new therapeutic
opportunities from an ancient herb. Trends Pharmacol Sci 30:515–527
Jiang W, Zhang Y, Xiao L et al (2005) Cannabinoids promote embryonic and adult hippocampus
neurogenesis and produce anxiolyticand antidepressant-like effects. J Clin Invest 115:3104–3116
Kallendrusch S, Kremzow S, Nowicki M et al (2013) The G proteincoupled receptor 55 ligand l-α-
lysophosphatidylinositol exerts microglia-dependent neuroprotection after excitotoxic lesion. Glia 61:1822–
1831
Kalra EK (2003) Nutraceutical-definition and introduction. AAPS
Pharm Sci 5(3):5. http://www.pharmsci.org
Kapoor R, Huang Y-S (2006) https://www.ingentaconnect.com/content/ben/cpb/2006/00000007/00000006/
art00016?crawler=true

277
 King A, Lodola A, Carmi C et al (2009) A critical cysteine residue in monoacylglycerol lipase is targeted by
a new class of isothiazolinonebased enzyme inhibitors. Br J Pharmacol 157:974–983
Klauke A-L, Racz I, Pradier B et al (2014) The cannabinoid CB2 receptor-selective phytocannabinoid beta-
caryophyllene exerts analgesic effects in mouse models of inflammatory and neuropathic pain. Eur
Neuropsychopharmacol 24:608–620
Klein TW, Lane B, Newton CA, Friedman H (2000) The cannabinoid system and cytokine network. Proc
Soc Exp Biol Med 225:1–8
Koch M, Varela L, Kim JG et al (2015) Hypothalamic POMC neurons promote cannabinoid-induced
feeding. Nature 519:45
Kogan L, Hellyer P, Robinson N (2015) Consumers perceptions of animal hemp products. J Am Holist Vet
Med Assoc 14:34–35
Kogan L, Hellyer P, Schoenfeld-Tacher R (2018) Dog owner’s use and perceptions of cannabis products. J
Am Holist Vet Med Assoc 4:34–35
Komiya M, Takeuchi T, Harada E (2006) Lemon oil vapor causes an anti-stress effect via modulating the 5-
HT and DA activities in mice. Behav Brain Res 172:240–249
Lafourcade M, Larrieu T, Mato S et al (2011) Nutritional omega-3 deficiency abolishes endocannabinoid-
mediated neuronal functions. Nat Neurosci 14:345
Laun AS, Song Z-H (2017) GPR3 and GPR6, novel molecular targets for cannabidiol. Biochem Biophys
Res Commun 490:17–21
Le Foll B, Trigo JM, Sharkey KA et al (2013) Cannabis and Δ9-tetrahydrocannabinol (THC) for weight loss?
Med Hypotheses 80:564–567
Legault J, Pichette A (2007) Potentiating effect of β-caryophyllene on anticancer activity of α-humulene,
isocaryophyllene and paclitaxel. J Pharm Pharmacol 59:1643–1647
Leizer C, Ribnicky D, Poulev A, Dushenkov S, Raskin I (2000) The composition of hemp seed oil and its
potential as an important source of nutrition. J Nutraceut Funct Med Foods 2(4):35–53.
https://www.tandfonline.com/doi/abs/10.1300/J133v02n04_04
Lewis MA, Russo EB, Smith KM (2018) Pharmacological foundations of cannabis chemovars. Planta Med
84:225–233
Ligresti A, Moriello AS, Starowicz K et al (2006) Antitumor activity of plant cannabinoids with emphasis on
the effect of cannabidiol on human breast carcinoma. J Pharmacol Exp Ther 318: 1375–1387
Lima NG et al (2013) Anxiolytic-like activity and GC–MS analysis of (R)-(+)-limonene fragrance, a natural
compound found in foods and plants. Pharmacol Biochem Behav 103:450–454
Lissoni P, Resentini M, Mauri R et al (1986) Effects of tetrahydrocannabinol on melatonin secretion in man.
Horm Metabol Res 18:77–78
Lorenzetti BB, Souza GE, Sarti SJ et al (1991) Myrcene mimics the peripheral analgesic activity of
lemongrass tea. J Ethnopharmacol 34:43–48
MacCallum CA, Russo EB (2018) Practical considerations in medical cannabis administration and dosing.
Eur J Intern Med 49:12–19
Mackie K (2006) Cannabinoid receptors as therapeutic targets. Annu Rev Pharmacol Toxicol 46:101–122
Mackie K (2008) Cannabinoid receptors: where they are and what they do. J Neuroendocrinol 20:10–14
Makriyannis A (2014) 2012 Division of medicinal chemistry award address. Trekking the cannabinoid road:
a personal perspective. J Med Chem 57:3891–3911
Marcu JP, Schechter JB (2016) Molecular pharmacology of CB1 and CB2 cannabinoid receptors. In:
Neuropathology of Drug Addictions and Substance Misuse. Elsevier, London, pp 713–721
McAllister SD, Christian RT, Horowitz MP et al (2007) Cannabidiol as a novel inhibitor of Id-1 gene
expression in aggressive breast cancer cells. Mol Cancer Ther 6:2921–2927
McGrath S (2018) Cannabis clinical trials in dogs—CSU paving the way. In: Proceedings of the AVMA
Annual Conference, Denver, CO, July, 2018
McGrath S, Bartner L, Rao S, et al (2018) A report of adverse effects associated with the administration of
cannabidiol in healthy dogs. J Am Holistic Vet Med Assoc. Fall 2018
McHugh D, Hu SS, Rimmerman N et al (2010) N-arachidonoyl glycine, an abundant endogenous lipid,
potently drives directed cellular migration through GPR18, the putative abnormal cannabidiol receptor. BMC
Neurosci 11:44
McPartland J, Marzo VD, Petrocellis LD et al (2001) Cannabinoid receptors are absent in insects. J Comp
Neurol 436:423–429
McPartland JM, Agraval J, Glesson D et al (2006) Cannabinoid receptors in invertebrates. J Evol Biol
19:366–373

278
 Mechoulam R, Ben-Shabat S, Hanus L et al (1995) Identification of an endogenous 2-monoglyceride,
present in canine gut, that binds to cannabinoid receptors. Biochem Pharmacol 50:83–90
Meola SD, Tearney CC, Haas SA et al (2012) Evaluation of trends in marijuana toxicosis in dogs living in a
state with legalized medical marijuana: 125 dogs (2005–2010). J Vet Emerg Crit Care 22:690–696
Mercati F, Dall’Aglio C, Pascucci L et al (2012) Identification of cannabinoid type 1 receptor in dog hair
follicles. Acta Histochem 114:68–71
Miyazawa M, Yamafuji C (2005) Inhibition of acetylcholinesterase activity by bicyclic monoterpenoids. J
Agric Food Chem 53:1765–1768
Mo X-L, Yang Z, Tao Y-X (2014) Targeting GPR119 for the potential treatment of type 2 diabetes mellitus.
Prog Mol Biol Transl Sci 121:95–131
Moon AM, Buckley SA, Mark NM (2018) Successful treatment of cannabinoid hyperemesis syndrome with
topical capsaicin. ACG Case Rep J 5:e3. https://doi.org/10.14309/crj.2018.3
Morello G, Imperatore R, Palomba L et al (2016) Orexin-A represses satiety-inducing POMC neurons and
contributes to obesity via stimulation of endocannabinoid signaling. Proc Natl Acad Sci USA 113:4759–4764
Morena M, Patel S, Bains JS et al (2016) Neurobiological interactions between stress and the
endocannabinoid system. Neuropsychopharmacology 41:80
Moreno-Sanz G (2016) Can you pass the acid test? Critical review and novel therapeutic perspectives of
Δ9-tetrahydrocannabinolic acid A. Cannabis Cannabinoid Res 1(1):124–130
Muniyappa R, Sable S, Ouwekerk R et al (2013) Metabolic effects of chronic cannabis smoking. Diabetes
Care 36:2415–2422
Nadal X, Del Río C, Casano S et al (2017) Tetrahydrocannabinolic acid is a potent PPARγ agonist with
neuroprotective activity. Br J Pharmacol 174:4263–4276
Ndong C, O'donnell D, Ahmad S et al (2011) Cloning and pharmacological characterization of the dog
cannabinoid CB2 receptor. Eur J Pharmacol 669:24–31
Niederhoffer N, Szabo B (1999) Effect of the cannabinoid receptor agonist WIN55212-2 on sympathetic
cardiovascular regulation. Br J Pharmacol 126(2):457–466
Niederhoffer N, Szabo B (2000) Cannabinoids cause central sympathoexcitation and bradycardia in
rabbits. J Pharmacol Exp Ther 294(2):707–713
Nissen L, Zatta A, Stefanini I et al (2010) Characterization and antimicrobial activity of essential oils of
industrial hemp varieties (Cannabis sativa L.). Fitoterapia 81:413–419
Ottani A, Leone S, Sandrini M et al (2006) The analgesic activity of paracetamol is prevented by the
blockade of cannabinoid CB1 receptors. Eur J Pharmacol 531:280–281
Pacioni G et al (2015) Truffles contain endocannabinoid metabolic enzymes and anandamide.
Phytochemistry 110:104–110
Parray HA, Yun JW (2016) Cannabidiol promotes browning in 3T3-L1 adipocytes. Mol Cell Biochem
416:131–139
Patel S, Kingsley PJ, Mackie K et al (2009) Repeated homotypic stress elevates 2-arachidonoylglycerol
levels and enhances short-term endocannabinoid signaling at inhibitory synapses in basolateral amygdala.
Neuropsychopharmacology 34:2699
Pertwee RG (2000) Cannabinoid receptor ligands: clinical and neuropharmacological considerations,
relevant to future drug discovery and development. Exp Opin Invest Drugs 9:1553–1571
Pertwee RG (2001) Cannabinoid receptors and pain. Prog Neurobiol 63:569–611
Pertwee RG (2005) Pharmacological actions of cannabinoids. In: Cannabinoids. Springer, Cham, pp 1–51
Pertwee RG (2008) The diverse CB1 and CB2 receptor pharmacology of three plant cannabinoids: Δ9-
tetrahydrocannabinol, cannabidiol and Δ9-tetrahydrocannabivarin. Br J Pharmacol 153:199–215
Pertwee Handbook of Cannabis (2014) https://www.biblio.com/book/handbook-cannabis-roger-pertwee-ed/
d/1139894567?aid=frg&utm_source=google&utm_medium=product&utm_campaign=feed-
details&gclid=EAIaIQobChMIsrjyvqy04QIVXSCtBh0gMwygEAYYASABEgIB1fD_BwE
Pirone A, Lenzi C, Coli A et al (2015) Preferential epithelial expression of type-1 cannabinoid receptor
(CB1R) in the developing canine embryo. Springerplus 4:804
Pollan M (2001) The botany of desire: a plant’s-eye view of the world. In: How to change your mind: what
the new science of psychedelics teaches us about consciousness, dying, addiction, depression, and
transcendence. Random house trade paperbacks
Pollastro F, De Petrocellis L, Schiano-MorielloA et al (2017)Amorfrutintype phytocannabinoids from
Helichrysum umbraculigerum. Fitoterapia 123:13–17
Prates Ong T, Testoni Cardozo M, de Conti A et al (2012) Chemoprevention of hepatocarcinogenesis with
dietary isoprenic derivatives: cellular and molecular aspects. Curr Cancer Drug Targets 12:1173–1190

279
 Raduner S et al (2006) Alkylamides from Echinacea are a new class of cannabinomimetics Cannabinoid
type 2 receptor-dependent and-independent immunomodulatory effects. J Biol Chem 281:14192–14206
Radwan MM, ElSohly MA, Slade D et al (2008) Non-cannabinoid constituents from a high potency
Cannabis sativa variety. Phytochemistry 69(14):2627–2633
Rao V, Menezes A, Viana G (1990) Effect of myrcene on nociception in mice. J Pharm Pharmacol 42:877–
878
Rashidi H, Akhtar MT, van der Kooy F et al (2009) Hydroxylation and further oxidation of Δ9-
tetrahydrocannabinol by alkane-degrading bacteria. Appl Environ Microbiol 75(22):7135–7141
Reddy AT, Lakshmi SP, Reddy RC (2012) Murine model of allergen induced asthma. J Visual Exp, JoVE
Ribeiro A et al (2015) Cannabidiol improves lung function and inflammation in mice submitted to LPS-
induced acute lung injury. Immunopharmacol Immunotoxicol 37:35–41
Riedel G, Fadda P, McKillop-Smith S et al (2009) Synthetic and plantderived cannabinoid receptor
antagonists show hypophagic properties in fasted and non-fasted mice. Br J Pharmacol 156:1154–1166
Rock EM, Parker LA (2013) Effect of low doses of cannabidiolic acid and ondansetron on LiCl-induced
conditioned gaping (a model of nausea-induced behaviour) in rats. Br J Pharmacol 169:685–692
Rock E, Kopstick R, Limebeer C et al (2013) Tetrahydrocannabinolic acid reduces nausea-induced
conditioned gaping in rats and vomiting in Suncus murinus. Br J Pharmacol 170:641–648
Rock EM et al (2014) A comparison of cannabidiolic acid with other treatments for anticipatory nausea
using a rat model of contextually elicited conditioned gaping. Psychopharmacology 231:3207–3215
Roehrs T, Roth T (2017) Medication and substance abuse. In: Principles and practice of sleep medicine,
6th edn. Elsevier, Philadelphia, pp 1380–1389.e1384
Rogerio AP, Andrade EL, Leite DF et al (2009) Preventive and therapeutic anti-inflammatory properties of
the sesquiterpene α-humulene in experimental airways allergic inflammation. Br J Pharmacol 158:1074–
1087
Romano B, Borrelli F, Pagano E et al (2014) Inhibition of colon carcinogenesis by a standardized Cannabis
sativa extract with high content of cannabidiol. Phytomedicine 21:631–639
Rufino AT, Ribeiro M, Sousa C et al (2015) Evaluation of the antiinflammatory, anti-catabolic and pro-
anabolic effects of E-caryophyllene, myrcene and limonene in a cell model of osteoarthritis. Eur J Pharmacol
750:141–150
Russo EB (2011) Taming THC: potential cannabis synergy and phytocannabinoid-terpenoid entourage
effects. Br J Pharmacol 163:1344–1364
Russo EB (2016a) Beyond cannabis: plants and the endocannabinoid system. Trends Pharmacol Sci
37:594–605
Russo EB (2016b) Clinical endocannabinoid deficiency reconsidered: Current research supports the theory
in migraine, fibromyalgia, irritable bowel, and other treatment-resistant syndromes. Cannabis Cannabinoid
Res 1:154–165
Russo E, Etges T, Stott C, et al (2011) Sativex safety profile is improving over time. International
Cannabinoid Research Society, St Charles, pp 1122–1131
Saito VM, Rezende RM, Teixeira AL (2012) Cannabinoid modulation of neuroinflammatory disorders. Curr
Neuropharmacol 10:159–166
Saliba SW, Marcotequi AR, Fortwängler E et al (2017) AM404, paracetamol metabolite, prevents
prostaglandin synthesis in activated microglia by inhibiting COX activity. J Neuroinflammation 14:246
Satsu H, Matsuda T, Toshimitsu T et al (2004) Regulation of interleukin-8 secretion in human intestinal
epithelial Caco-2 cells by α-humulene. Biofactors 21:137–139
Schmitt S, Schaefer UF, Doebler L et al (2009) Cooperative interaction of monoterpenes and
phenylpropanoids on the in vitro human skin permeation of complex composed essential oils. Planta Med
75:1381–1385
Scialdone MA (2017) U.S. Patent Application No. 15/613,633
Sellers EM, Schoedel K, Bartlett C et al (2013) A multiple-dose, randomized, double-blind, placebo-
controlled, parallel-group QT/QTc study to evaluate the electrophysiologic effects of THC/CBD spray. Clin
Pharmacol Drug Dev 2(3):285–294
Silvestri C, Paris D, Martella A et al (2015) Two non-psychoactive cannabinoids reduce intracellular lipid
levels and inhibit hepatosteatosis. J Hepatol 62(6):1382–1390
Simopoulos AP (2002) The importance of the ratio of omega-6/omega-3 essential fatty acids. Biomed
Pharmacother 56(8):365–379
Smith TH, Blume LC, Straiker A et al (2015) Cannabinoid receptor–interacting protein 1a modulates CB1
receptor signaling and regulation. Mol Pharmacol 87(4):747–765

280
 Smith DR, Stanley C, Foss T et al (2017) Rare genetic variants in the endocannabinoid system genes
CNR1 and DAGLA are associated with neurological phenotypes in humans. PLoS One 12:e0187926
Solowij N, Walterfang M, Lubman DI et al (2013) Alteration to hippocampal shape in cannabis users with
and without schizophrenia. Schizophrenia Res 143:179–184
Stanley CP, Hind WH, O'sullivan SE (2013) Is the cardiovascular system a therapeutic target for
cannabidiol? Br J Clin Pharmacol 75:313–322
Takeda S, Misawa K, Yamamoto I et al (2008) Cannabidiolic acid as a selective cyclooxygenase-2
inhibitory component in cannabis. Drug Metab Dispos 36:1917–1921
Tashkin DP, Shapiro BJ, Frank IM (1974) Acute effects of smoked marijuana and oral Δ9-
tetrahydrocannabinol on specific airway conductance in asthmatic subjects. Am Rev Respir Dis 109:420–428
Tate G et al (1989)
https://www.researchgate.net/profile/Guillermo_Tate/publication/20604782_Suppression_of_acute_and_chro
nic_inflammation_by_dietary_gamma_linolenic_acid/links/56e9a36a08aec8bc078113e9/Suppression-of-
acute-and-chronicinflammation-by-dietary-gamma-linolenic-acid.pdf
Tishcler J (2018) Microdosing for the medical market: Why who and how. Paper presented at the Institute
for Cannabis Research, Colorado State University, Pueblo, April 27–28 2018
Toyota M, Shimamura T, Ishii H et al (2002) New bibenzyl cannabinoid from the New Zealand liverwort
Radula marginata. Chem Pharm Bull 50:1390–1392
Trumbly B (1990) Double-blind clinical study of cannabidiol as a secondary anticonvulsant. In: Presented at
Marijuana ‘90 international Conference on Cannabis and Cannabinoids, Kolympari (Crete)
Turner CE, Elsohly MA, Boeren EG (1980) Constituents of Cannabis sativa L. XVII. A review of the natural
constituents. J Nat Prod 43:169–234
Ulbricht C (2011) Focus: Diabetes. J Diet Suppl 8:239–256
Upton R, Craker I, ElSohly M, et al. (2014) Cannabis inflorescence Cannabis Spp.: standards of identity,
analysis, and quality control. American Herbal Pharmacopoeia, Scott’s Valley
Vaccani A, Massi P, Colombo A et al (2005) Cannabidiol inhibits human glioma cell migration through a
cannabinoid receptorindependent mechanism. Br J Pharmacol 144:1032–1036
Van der Stelt M, Veldhuis W, Bär P et al (2001) Neuroprotection by Δ9-tetrahydrocannabinol, the main
active compound in marijuana, against ouabain-induced in vivo excitotoxicity. J Neurosci 21:6475–6479
Vemuri VK, Makriyannis A (2015) Medicinal chemistry of cannabinoids. Clin Pharmacol Ther 97:553–558
Veress T, Szanto J, Leisztner L (1990) Determination of cannabinoid acids by high-performance liquid
chromatography of their neutral derivatives formed by thermal decarboxylation: I. Study of the
decarboxylation process in open reactors. J Chromatogr A 520:339–347
Verhoeckx KC, Korthout HA, van Meeteren-Kreikamp AP et al (2006) Unheated Cannabis sativa extracts
and its major compound THC-acid have potential immuno-modulating properties not mediated by CB1 and
CB2 receptor coupled pathways. Int Immunopharmacol 6(4):656–665
Viñals X, Moreno E, Lanfumey L et al (2015) Cognitive impairment induced by delta9-tetrahydrocannabinol
occurs through heteromers between cannabinoid CB1 and serotonin 5-HT2A receptors. PloS Biol
13(7):e1002194
Vogelmann AF, Turner JC, Mahlberg PG (1988) Cannabinoid composition in seedlings compared to adult
plants of Cannabis sativa. J Nat Prod 51:1075–1079
Wagner JA, Varga K, Kunos G (1998) Cardiovascular actions of cannabinoids and their generation during
shock. J Mol Med 76 (12):824–836
Wargent E, Zaibi MS, Silvestri C et al (2013) The cannabinoid Δ9-tetrahydrocannabivarin (THCV)
ameliorates insulin sensitivity in two mouse models of obesity. Nutr Diabetes 3:e68
Weiland BJ, Thayer RE, Depue BE et al (2015) Daily marijuana use is not associated with brain
morphometric measures in adolescents or adults. J Neurosci 35:1505–1512
Whyte LS, Ryberg E, Sims NA et al (2009) The putative cannabinoid receptor GPR55 affects osteoclast
function in vitro and bone mass in vivo. Proc Natl Acad Sci USA 106:16511–16516
Woelkart K, Bauer R (2007) The role of alkamides as an active principle of Echinacea. Planta Med 73:615–
623
Xi Z-X, Peng X-Q, Li X et al (2011) Brain cannabinoid CB2 receptors modulate cocaine's actions in mice.
Nat Neurosci 14:1160–1166. http://www.nature.com/neuro/journal/v14/n9/abs/nn.2874.html#supplementary-
information
Yücel M, Solowij N, Respondek C et al (2008) Regional brain abnormalities associated with long-term
heavy cannabis use. Arch Gen Psychiatry 65:694–701
Yücel M, Lorenzetti V, Suo C et al (2016) Hippocampal harms, protection and recovery following regular
cannabis use. Transl Psychiatry 6:e710
281
 Zuardi AW, Cosme RA, Graeff FG et al (1993) Effects of ipsapirone and cannabidiol on human
experimental anxiety. J Psychopharmacol 7 (1 Suppl):82–88

282
 Óleos Essenciais
Ajay Srivastava, Rajiv Lall, Anita Sinha, and Ramesh C. Gupta

Resumo
Os óleos essenciais (EOs) têm sido usados em humanos e animais há vários milênios,
pois representam uma parte importante da medicina popular por suas propriedades
medicinais. Os EOs são um grupo muito heterogêneo de misturas complexas de
metabólitos secundários de plantas. A natureza de um EO varia de planta para planta, de
espécie para espécie e dentro de famílias botânicas. Até agora, mais de 3.000 variedades
de compostos aromáticos voláteis foram identificados. Centenas de compostos químicos
foram identificados nos óleos essenciais (EOs) de algumas plantas, com propriedades
como antioxidante, antiinflamatória, antibacteriana, antiviral, antifúngica, antisséptica,
antimicótica, antitumoral, antiespasmódica, imunoestimulante, etc. Além da aromaterapia,
eles são ingeridos ou aplicados topicamente para condições como dor, artrite,
hematomas, arranhões, cicatrizes, controle de pulgas e muitos outros. Este capítulo
descreve EOs de origem vegetal e não vegetal, seus constituintes ativos e aplicações
clínicas na saúde e doença animal.

Palavras-chave: Nutracêuticos · Nutracêuticos veterinários · Óleos essenciais · Doenças

animais

A. Srivastava · R. Lall · A. Sinha – Vets Plus Inc., Menomonie, WI, USA

R. C. Gupta (*) Toxicology Department, Breathitt Veterinary Center, Murray State University, Hopkinsville, KY,
USA. e-mail: rgupta@murraystate.edu

1. Introdução
Os óleos essenciais (EOs) são compostos aromáticos voláteis de ocorrência natural,
encontrados na casca, caules, flores, sementes e outras partes de muitas plantas. Os
EOs são um grupo muito heterogêneo de misturas complexas de metabólitos secundários
de plantas. A composição dos EOs pode variar dependendo de vários fatores, como
localização geográfica, cultivo, hora do dia, clima, estação do ano e método e duração da
destilação. Na verdade, cada etapa durante o processo de produção é um determinante
crítico da qualidade dos EOs.

EOs têm sido usados por, pelo menos, vários milênios para curas naturais em humanos e
animais. EOs também oferecem fragrâncias calmantes e revigorantes através da

283
aromaterapia. As propriedades físicas e químicas dos EOs permitem que eles se movam
rapidamente pelo ar e interajam diretamente com os sensores olfativos no nariz, razão
pela qual os EOs são comumente usados para aromaterapia em cães. Há um interesse
crescente em plantas aromáticas e medicinais por causa de suas propriedades
antioxidantes e antiinflamatórias tanto na pesquisa científica quanto na indústria (Singh et
al. 2005; Isbilir e Sagiroglu 2011). EOs pode ser usado para uma ampla gama de bem-
estar emocional de cães e gatos. Dependendo da necessidade, eles podem ser usados
como um único EO ou em combinação com outros EOs. No caso de cães, os EOs são
comumente usados para artrite, hematomas, cicatrizes, cepas, problemas de pele (como
eczema, infecções bacterianas ou fúngicas), controle de pulgas e muitas outras
condições. Além disso, os EOs podem ser usados como biopreservativos, reduzindo ou
eliminando bactérias patogênicas e aumentando a qualidade geral dos produtos
alimentícios de origem animal e vegetal (Solórzano-Santos e Miranda-Novales 2012). Em
vacas leiteiras, EOs como óleo de alho, eugenol, cinamaldeído 33 e capsicum34
(isoladamente ou em combinação) modulam a fermentação ruminal e as respostas
imunológicas e de lactação (Cardozo et al. 2004; Tekippe et al. 2013; Oh et al. 2015;
Oguey e Wall 2016; Stelwagen et al. 2016). Este capítulo oferece um breve relato de
alguns EOs comumente usados, enquanto outros estão listados na Tabela 1.

Tabela 1 Óleos essenciais (EOs), constituintes químicos e suas aplicações clínicas

Óleo
Constituintes químicos Aplicações clínicas Referências
essencial/fonte
Óleo de ajenjo
(Artemisia Antibacteriano, eliminador de
Tujona, cânfora Laciar et al. (2009)
echegarayi radicais livres
Hieron.)
1,8-Cineol, a- erpineol, a-pineno,
Óleo de gengibre
β-pineno, terpineno-4-ol, chavicol,
do Laos (Alpinia Antisséptico, expectorante,
(E)-β-farneseno, β- Raina et al. (2014)
galanga Willd. anestésico
esquifelandrene, β-bisaboleno,
(L.))
acetato de eugenol
Óleo de
1,8-Cineol, α-terpineol, α-pineno,
galangal (Alpinia Antisséptico, expectorante,
β-pineno, terpineno-4-ol, cânfora, Raina et al. (2014)
officinarum anestésico
α-fenquila acetato
Hance.)
Cânfora, α-pineno, β-pineno, β-
Óleo de Alpinia agarofurano, globulol, β-
polyantha D. cubebeno, acetato de fenchil, β- Huong et al. (2015)
Fang maalieno, aristolona, δ-cadineno,
β-cariofileno, α-muuroleno

33 Canela
34 Pimenta
284
 Cânfora, α-pineno, β-pineno, β-
Óleo de Alpinia agarofurano, globulol, β-
polyantha D. cubebeno, acetato de fenchil, β- Huong et al. (2015)
Fang maalieno, aristolona, δ-cadineno,
β-cariofileno, α-muuroleno
Anthemis α-pineno, terpinen-4-ol,
Antimicrobiano Baser et al. (2006)
aciphylla Boiss. isofaurinona
Óleo de
Anti: inflamatório, bacteriano,
arborvitae α-Pineno, α-cedrol, δ-3-careno, Hashemi e Safavi (2012),
fúngico, hipertensivo, câncer, Puškárová et al. (2017)
(Platycladus limoneno, β-cariofileno, mirceno
gota. Hemostático, inseticida
orientalis L.)
Anti: oxidante, inflamatório,
viral, bacteriano, Lemberkovics et al. (1998),
Óleo de Suppakul et al. (2003),
Monoterpenos, hidrocarbonetos espasmódico, verrugas,
manjericão Kuorwel et al. (2011),
sesquiterpênicos, sesquiterpenos fadiga. Diurético, aperitivo, Chenni et al. (2016),
(Ocimum
oxigenados estimulador do sistema Sakkas e Papadopoulou
basilicum L.)
nervoso, relaxante muscular, (2017)
conservante de alimentos
Pineno, metil eugenol, sabineno, Restaura a queda de cabelo,
Óleo de
geraniol, mirceno, felandreno, 1,8- tratamento para a pele, Anti:
cardamomo
cineol, citronelol, linalol, limoneno, oxidante, inflamatório, Al-Zuhair et al. (1996)
(Elettaria
p-cimeno, terpinoleno, espasmódico. Analgésico,
cardamomum)
transnerolidol relaxante muscular, diurético
Óleo de Salmon (1992), McKay e
Terpenóides, flavonóides, α- Anti: inflamatório, séptico.
camomila/óleo Blumberg (2000),
bisabolol, derivados de Carminativo, sedativo, Srivastava et al. (2010),
azul (Matricaria
sesquiterpeno, chamazuleno espasmolítico Singh et al. (2011)
chamomilla L.)
Óleo de
(-) - Cinamaldeído, o-metoxi-
canela/cássia Burt (2004), Oussalah et
cinamaldeído, acetato de Antibacteriano al. (2006)
(Cinnamomum
cinamila, ácido cinâmico
cassia)
Óleo de pomelo
(Citrus maxima DL-Limonene Anti: oxidativo e fúngico Singh et al. (2010)
Burm.)
Óleo de
laranjeira (Citrus DL-Limonene Anti: oxidativo e fúngico Singh et al. (2010)
sinensis L.)
Eugenol, eugenina, eugenitina, Pinto (2017), Nagababu e
Óleo de cravo acetil eugenol, bicornina, β- Lakshmaiah (1992), Viuda-
Anti: oxidante, inflamatório, Martos et al. (2007a, b),
(Syzygium cariofileno, vanilina, ácido Rodrigues et al. (2009),
bacteriano, fúngico, gengivite
aromaticum) cratególico, campesterol, Białoń et al. (2017),
sesquiterpenos, α-humuleno Puškárová et al. (2017)

Anti: oxidante, inflamatório,

bacteriano, helmíntico,
fúngico, depressivo,
Óleo de coentro Taninos, terpenóides, alcalóides,
Alzheimer, convulsivante, Cantore et al. (2004), Al-
(Coriandrum fenólicos, flavonóides, esteróis, Snafi (2016)
câncer, diabetes. A
sativum) glicosídeos
analgésico, ansiolítico,
sedativo, hipnótico, hipnótico,
anti, hepatoprotetor

285
 Óleo
Constituintes químicos Aplicações clínicas Referências
essencial/fonte
Óleo de amora Cudraxantona L,
chinesa cudratricusxantona A, Antibacteriano, Tian et al. (2005), Bajpai et
(Cudrania cudratricusxantona E, hepatoprotetor al. (2013)
tricuspidata) macluraxantona B
Óleo de cominho β-Pineno, γ-pineno, p-cimeno, γ- Viuda-Martos et al.
(Cuminum terpineno, aldeído cumínico, Anti: microbiano, fúngico (2007b), Wanner et al.
cyminum L.) cuminal (2010)

Porter et al. (1983), Brunke

et al. (1991), Vera e
Óleo de semente α-felandreno, β-felandreno, éter Chane-Ming
de endro de endro, p-cimeno, limoneno, Anti: oxidante, bacteriano, (1998), Hosseinzadeh et
(Anethum anetofurano, carvona, carveol, fúngico. Importância sensorial al. (2002), Singh et al.
(2005), Isbilir e Sagiroglu
graveolens L.) isoeugenol, apiole de endro
(2011), Rana e Blazquez
(2015)

Óleo de
eucalipto Anti: bacteriano, gengivite,
Borneol, 1,8-Cineol, globulol, p- Silva et al. (2003), Sebei et
(Eucalyptus sangramento gengival, placa,
cimeno, limoneno, α-pineno, al. (2015), Singh et al.
citriodora, E. inflamatório. Analgésico (2016)
criptona, α-terpineol
tereticornis, E. central e periférico
globulus)
Óleo de erva- Anti: oxidante, inflamatório, Yamini et al. (2002), Choi e
Hwang (2004), Cetin et al.
doce microbiano analgésico.
Trans-anetol, (E) -anetol (2010), Picon et al. (2010),
(Foeniculum Laxante, carminativo, Mohamad et al. (2011),
vulgare) limpador facial Qiu et al. (2012)

Óleo e Incenso
Monoterpenos, sesquiterpenos,
de Perfume, cosmético,
monoterpenóis, sesquiterpenóis, Frank e Unger (2006),
olíbano/levona aromaterapia, antidiabético, Woolley et al. (2012)
felandreno, cetonas, limoneno, α-
(Boswellia inibidor do citocromo P450
tujona, α-pineno, β-pineno
Sacra)
Óleo de alho Trissulfeto de dialil, dissulfeto de
Anti: bacteriano, fúngico, Rao et al. (1999), Kyung
(Allium sativum dialil, trissulfeto de metil alil, (2012), Djiri et al. (2014)
viral, parasitário
L.) tiossulfinatos, alicina
Anti: oxidante, disenteria,
hemorróidas, inflamatório,
Óleo de gerânio Geraniol, citronelol, linalol, α- diabético, úlceras gástricas,
(Pelargonium pineno, mirceno, linalol, γ- diarreico, câncer. Sharopov et al. (2014)
graveolens L.) terpineno, neral Aromaterapia, relaxante
muscular, cuidados com a
pele
Óleo de
Anti: oxidante, bacteriano,
gengibre Zingibereno, e-citral, z-citral, Stoyanova et al. (2006),
fúngico. Eeliminador de
(Zingiber canfeno, ocimeno, ar-curcumeno, Bellik et al. (2013), Raina
radicais livres, eliminador de et al. (2013)
officinale β-bisaboleno, β-sesquifelandrene
peróxido de hidrogênio
Roscoe)
Óleo de
α-cedreno, α-curcumeno, acetato Sala et al. (2002), Nostro
Helichrysum Anti: oxidante, inflamatório,
de geranila, limoneno, nerol, et al. (2003), Djihane et al.
(Helichrysum bacteriano, viral, fúngico (2017)
acetato de nerila, α-pineno
italicum)

286
 Óleo
Constituintes químicos Aplicações clínicas Referências
essencial/fonte
Anti: artrite, dermatite atópica,
Óleo de
diabetes, convulsões
cânhamo/óleo Canabidiol (CBD), THC, β-
epilépticas, Alívio da dor, -
CBD (Cannabis cariofileno, limoneno, β-mirceno
neuroproteção, antioxidante,
sativa L.)
antiinflamatório
α-Pineno, sabineno, β-mirceno, p-
cimeno, geranial, α-cariofileno, β-
Óleo de zimbro
cariofileno, germacreno D, δ- Filipwicz et al. (2003),
(Juniperus
cadineno, trans-calameneno, D- Anti: bacteriano e fúngico Białoń et al. (2017), Glisic
communis L., J. et al. (2007)
limoneno, terpineno-4-ol,
oxycedrus)
terpinoleno, 3-careno, β-
felandreno, β-tujona, α-humuleno
Óleo de Lantana (E) -cariofileno, γ-cadineno, α-
Antimicrobiano Juliani Jr et al. (2002)
xenica Mold. pineno, ocimeno, germacreno D
Óleo de Lantana Carvacrol, 1,8-cineol,
achyranthifolia isocaryophyllene, α-bisabolol, β- Antibacteriano Hernández et al. (2005)
Desf. bisabolene
Anti: séptico, convulsivante,
1,3,7-Octatriene, 3,7-dimetil, α- depressivo, reumático,
Óleo de lavanda pineno, limoneno, 1,8-cineol, cis- oxidante, inflamatório, viral, Shellie et al. (2002), Hui et
al. (2010), Robu et al.
(Lavandula ocimeno, trans-ocimeno, cânfora, bacteriano. Analgésico,
(2011), Adaszynska-
latifolia, L. linalol, cariofileno, terpinen-4-ol, carminativo, colagogo, Skwirzynska e
angustifolia) acetato de lavandulil, eucaliptol , desodorante, diurético, Szczerbinska (2017)
cânfora emenagogo, hipotensor,
sedativo, sudorífico
Limoneno, β-pineno, α-pineno,
Óleo de limão
sabineno, mirceno, limoneno, 1,8- Anti: oxidante, microbiano,
cítrico (Citrus Hsouna et al. (2017)
cineol, linalol, α-terpineol, nerol, fúngico
limon)
neradiol, geranial, farnesol
Óleo de capim- Anti: stress, fadiga mental,
Mirceno, citronelal, acetato de
limão microbiano. Estimulante da Abdulazeez (2016), Lawal
geranila, neral, nerol, geraniol, (2017)
(Cymbopogon secreção glandular, repelente
limoneno, citral
citratus) de insetos
Anti: bacteriano, viral,
Óleo de
α-pineno, β-pineno, limoneno fúngico, diabético, depressão. Białoń et al. (2017)
manjerona
Analgésico
Óleo de
α-Pineno, β-cariofileno, α-tujona,
Metasequoia Bajpai et al. (2007),
bornileno, totarol, δ-3-careno, 2-β- Antifúngico
glyptostroboides Bajpai e Kang (2010)
pineno, α-humuleno
Mikiex
Óleo de aroeira
α-pineno, β-pineno, trans- Rebouças de Araujo et al.
(Miracrodruon Antibacteriano, citotóxico (2017)
cariofileno, limoneno
urundeuva)
Anti: bacteriano, viral,
Óleo de mirra fúngico, espasmódico, Dolara et al. (2000), Zhu et
Furanoeudesma-1, 3-dieno,
(Commiphora inflamatório. Adstringente, al. (2003), Tipton et al.
curzareno, esteróis, esteróides (2006)
myrrha) analgésico, amebicida,
hipoglicêmico
Continua

287
 Óleo
Constituintes químicos Aplicações clínicas Referências
essencial/fonte
Óleo de murta
α-pineno, 1,8-cineol, flavonóides,
(Myrtus
taninos hidrolisáveis Antioxidante Aidi et al. (2010)
communis var.
(galotaninos), catequina
italica L.)
Óleo de cominho
Anti: oxidante, inflamatório, Burits e Bucar (2000),
preto (Nigella Timoquinona Gupta et al. (2016)
câncer, proliferativo
sativa)
Óleo de semente Sabineno, α-pineno, α-tujona, α-
Inibição locomotora,
de noz-moscada mirceno, α-terpineno, α-terpineol, Muchtaridi et al. (2010),
ansiogênica, antidor Zhang et al. (2016)
(Myristica 4-terpineol, miristicina, safrol,
inflamatória crônica
fragrans Houtt.) citronelol
Óleo de oliva Anti: oxidante, inflamatório,
Compostos fenólicos Cicerale et al. (2012)
(extravirgem) microbiano
Óleo de incenso
(Boswellia sacra Limoneno, mirceno, α-pineno Antibacteriano Al-Saidi et al. (2012)
Flueck)
Lambert et al. (2001),
Figiel et al. (2010),
α-tujona, α-pineno, sabineno, β- Bolechowski et al. (2011),
Óleo de orégano pineno, β-mirceno, α-felandreno, Anti: oxidante, bacteriano, Kuorwel et al. (2011),
Sakkas e Papadopoulou
(Origanum α-terpineno, p-cimeno, limoneno, viral, fúngico. Citotóxico, (2017), De Falco et al.
vulgare L.) 1,8-cineol, linalol, γ-terpineno, conservante de alimentos (2013), Siroli et al. (2014),
timol, carvacrol, cariofileno, etc. Stanojević et al. (2016),
Białoń et al. (2017),
Puškárová et al. (2017)

Óleo de
palmarosa (E) -β-ocimeno, linalol, geraniol, Anti: oxidante, inflamatório,
(Cymbopogon acetato de geranila, (E, Z) - bacteriano, viral, fúngico. Puškárová et al. (2017)
martinii var. farnesol, β-cariofileno Febre, artrite
motia Burk.)
Óleo de Palo
Santo (Bursera α-Terpineno Anti: oxidante, microbiano Mendez et al. (2017)
graveolens)
Anti: oxidante, inflamatório,
Óleo de hortelã- Mentol, mentona, acetato de Blumenthal et al. (1998),
gengivite, úlcera. Analgésico,
pimenta (Mentha mentila, 1,8-cineol, limoneno, β- Kumar et al. (2009), Taheri
citoprotetor, et al. (2011)
piperita L.) pineno, flavonóides, β-cariofileno
quimiopreventivo
Estimulação olfatória, inibidor
(-) - perilaldeído, (-) - álcool Solórzano-Santos e
Óleo de Perilla do córtex pré-frontal,
perílico, (+) - limoneno, α-pineno, Miranda-Novales (2012),
(Perilla citostático. Anti: alérgico, Igarashi e Miyazaki (2013),
luteolina, ácido perílico, carvano,
frutescens L.) depressivo, bacteriano, Igarashi et al. (2014)
trans-shisool, perillacetona
fúngico, inflamatório
Óleo de
α-Pineno, β-pineno,
pimenta-de-
biciclogermacreno, β-cariofileno, Antimicrobiano Constantin et al. (2001)
macaco (Piper
espatulenol, germacreno D
cernuum)
Óleo de
Linalol, mirceno,
pariparoba Antimicrobiano Constantin et al. (2001)
biciclogermacreno, β-cariofileno
(Piper regnellii)
Continua …

288
 Óleo
Constituintes químicos Aplicações clínicas Referências
essencial/fonte
Óleo de coração
magoado
[Plectranthus
Maaliol, β-cariofileno, α-pineno, Anti: oxidante, microbiano, Govindarajan et al. (2016),
spp. (P. Mothana et al. (2018)
borneol, espatulenol câncer. Larvicida
cylindraceus, P.
asirensis, P.
barbatus)]
Óleo de
almecegueira α-Pineno, p-mentha-1,4 (8) -
Gastroprotetor, ansiolítico, Aragão et al. (2006),
(Protium dieno, α-felandreno, α- e β- Araujo et al. (2011)
antidepressivo, antioxidante
heptaphyllum amirina
Aubl.)
Óleo de rosa
Citronelol, geraniol, nonadecano, Almasirad et al. (2011),
(Rosa Sabor, fragrância Verma et al. (2011)
nerol, heneicosano, linalol
damascene Mill.)
Óleo de alecrim Bozin et al. (2007), Viuda-
1,8-Cineol, cânfora, α-pineno, β- Anti: oxidante, úlceras Martos et al. (2007b),
(Rosmarinus Zaouali et al. (2010),
pineno gástricas, microbiano
officinalis) Takayama et al. (2016)

Esculetina, cânfora, 1,8-cineol, Anti: bacteriano, fúngico,

Óleo de sálvia canfeno, α-humuleno, α-tujeno, α- oxidante, séptico, Perry et al. (2003),
Delamare et al. (2007),
(Salvia tujona, β-tujona, α-terpineol, α- espasmódico, dermatite,
Viuda-Martos et al.
officinalis, Salvia terpenos, α-pineno, linalol, demência. Colagogo, (2007b), Pierozan et al.
hispanica) limoneno, salviol, tujanol, colerético, febrífugo, (2009), Porte et al. (2013)
terpinoleno emenagogo.
Óleo de sândalo
(Santalum
spicatum, S. Santalóis, α-bergamotol, nuciferol, Antiinflamatório, Howes et al. (2004),
acuminatum, S. γ-elemeno, cis-lanceol, α-cedrol aromaterapia Kusuma e Mahfud (2016)
album, S.
latifolium)
Óleo de
α-tujona, α-pineno, mirceno, p-
segurelha-das-
cimeno, sabineno, α-terpineno, Milos et al. (2001),
montanhas Antibacteriano Oussalah et al. (2006)
cânfora, borneol, carvacrol, timol,
(Satureja
óxido de cariofileno
montana L.)
Óleo de cardo
morto (Senecio α-terpineno, α-felandreno, p-
Antimicrobiano Benites et al. (2011)
atacamensis cimeno
Phil.)
α-felandreno, β-felandreno, α-
Óleo de Sideritis Anti: inflamatório, reumático,
pineno, (Z) -β-guaieno, Sabineno, Palá-Paul et al. (2006)
hirsuta L. bacteriano, microbiano
1,8-cineol
Óleo de Sidris Sesquiterpenos, derivado de Lemberkovics et al. (1998),
Anti: bacteriano, oxidante Basile et al. (2006)
italica Miller. fenilpropano
Óleo de orégano
espanhol
- Antibacteriano Oussalah et al. (2006)
(Coridothymus
capitatus)

289
 Óleo
Constituintes químicos Aplicações clínicas Referências
essencial/fonte
Óleo de hortelã
Carvona, 1,8-cineol, β-pineno, β- Hussain et al. (2011),
(Mentha spicata Anti: oxidante, microbiano Şarer et al. (2011)
cariofileno, trans-dihidrocarvona
L.)
α-Pineno, canfeno, limoneno,
Óleo de abeto mirceno, acetato de bomil, δ-
Antimicrobiano Radulescu et al. (2011)
(Picea abies L.) cadineno, muuroleno, cadinol,
muurolol, manool
Óleo de Satureja Antioxidante, antibacteriano, Sahin et al. (2003),
γ-terpineno, carvacrol, α-tujona
hortensis L. antifúngico, antiespasmódico Khalid (2016)
Óleo da árvore
Terpinen-4-ol, γ-terpineno, 1,8-
do chá
cineol, α-cimeno, δ-cadineno, Antimicrobiano Carson et al. (2006)
(Melaleuca
globulol, linalol, limoneno
alternifolia)
Pierce (1999), Ramsewak
et al. (2003), Burt (2004),
Anti: bacteriano, séptico, Tawfik et al. (2006), Viuda-
Martos et al. (2007a, b),
Óleo de tomilho oxidante, inflamatório, Rota et al. (2006), Sakkas
Timol, carvacrol, terpineno-4-ol, α-
(Thymus espasmódico, fúngico nas e Papadopoulou (2017),
pineno, γ-terpineno, hidrato de
vulgaris, T. unhas dos pés. Curativo, Kuorwel et al. (2011),
cis-sabineno, cariofileno, p- Fachini-Queiroz et al.
zygis, T. enxaguatório bucal,
cimeno, mirceno, borneol, linalol (2012), Cerda et al. (2013),
hyemalis) ansiolítico, carminativo, Borugă et al. (2014),
conservante de alimentos Komaki et al. (2016),
Al-Asmari et al. (2017),
Puškárová et al. (2017)

Óleo Thymus
Limoneno, timol, geraniol, acetato
longicaulis
de geranila, linalol, acetato de α- Antimicrobiano Tzakou et al. (1998)
subsp.
terpinila
Chaubardii
Anti: insônia, epilepsia,
Óleo de
Ácido valerênico, β-sitosterol, reumático, espasmódico,
valeriana Jiang et al. (2007),
ácido ursólico, cariofileno, helmíntico. Ansiolítico, Nandhini et al. (2018)
(Valeriana
valerano afrodisíaco diurético,
officinalis L.)
diaforético, emenagogo
Anti: bacteriano, fúngico,
Khusimol, germacreno D, α- e β-
Óleo de Vetiver oxidante, inflamatório.
vetivona, cedrano, bisabolano, Khesorn et al. (2010),
(Vetiveria Inseticida, herbicida, Chahal et al. (2015)
eudesmane, eremofilano, zizaano,
zizanioides) calmante para cães com
valerenol, β-cariofileno
medo de ruídos altos
Doenças estomacais, asma,
gota, reumatismo, amebicida,
Óleo de Ylang
Monoterpenos, sesquiterpenos, citotóxico, inseticida. Anti:
Ylang (Cananga Tan et al. (2015)
fenilpropanóides bacteriano, fúngico, biofilme,
odorata)
inflamatório, vetor, diabético,
fertilidade,

290
2. Óleos essenciais
2.1 OE de tomilho

Existem mais de 150 espécies de Salvia encontradas na América do Norte, Ásia e África.
Thymus vulgaris é uma planta aromática perene com grande valor medicinal. O óleo de
tomilho contém ingredientes vitais para a saúde humana e animal. O óleo de tomilho
contém 12-61% de timol. A fórmula estrutural do timol e carvacrol é mostrada na Fig. 1.

Fig. 1 Fórmula estrutural do timol (esquerda) e

carvacrol (direita)

O óleo de tomilho também pode conter carvacrol (0,4-20,6%), 1,8-cineol (0,2-14,2%), p-

cimeno (9,1-22,2%), linalol (2,2-4,8%), borneol (0,6-7,5%) , α-pineno (0,9-6,6%) e cânfora
(0,6-7,3%). Timol e carvacrol são os principais componentes que são os principais
responsáveis pela atividade antioxidante do tomilho fenólico (Yanishlieva et al. 1999; Rota
et al., 2006; Komaki et al. 2016; Al-Asmara al. 2017).

O timol possui propriedade antisséptica e, portanto, é utilizado em curativos e diversos

enxaguatórios bucais disponíveis no mercado, incluindo Listerine (Pierce, 1999).
Ramsewak al. (2003) relataram que o óleo de tomilho pode ser usado como um agente
antifúngico para unha infectada. Seu uso também tem sido indicado para tosse e
bronquite. Recentemente, Komaki et al. (2016) demonstraram que o extrato de Thymus
vulgaris exerce um efeito ansiolítico em ratos.

Nos últimos anos, o óleo de tomilho como nutracêutico se tornou mais popular do que
nunca devido às suas propriedades antioxidantes e antiinflamatórias (Amir 2012; Cerda et
al. 2013). Além disso, o tomilho é conhecido por exercer efeitos antiespasmódicos,
antiviróticos, antifúngicos, carminativos, sedativos, diaforéticos, anti-hipertensivos,
anticâncer e antiacne (Leonard-Mart et al. 2007a, b Fachinei-Queiroz et al. 2012; Ahmad
et al. 2014).

2.2 OE de Alecrim

O óleo essencial de alecrim (OE) é obtido das folhas e flores da planta Rosmarinus
officinalis, nativa da região mediterrânea. Os antigos gregos, romanos, egípcios e hebreus
291
consideravam o óleo de alecrim uma substância sagrada, pois melhorava a memória,
acalmava problemas digestivos, estimulava o sistema imunológico e aliviava dores e
dores. A análise fitoquímica do óleo de alecrim revelou a presença de ácido rosmarínico
(Fig. 2), 1,8-cineol, cânfora, carnosol, ácido carnósico, ácido ursólico e ácido caféico
(Zaouali et al. 2010; Takayama et al. 2016). Usando GC/MS, Takayama et al. (2016)
identificaram três monoterpenos principais: cineol (28,5%), cânfora (27,7%) e α-pineno
(21,3%) no óleo essencial de R. officinalis.

Fig. 2 Fórmula estrutural do ácido rosmarínico

Por milhares de anos, o OE de alecrim tem sido usado em muitas condições de saúde,
incluindo alopecia, disfunção cognitiva e como antinocicepção, limpeza do fígado, redução
do cortisol e agente anticâncer. Nas anormalidades GI, o epitélio gástrico é
frequentemente atacado por agentes físicos, químicos ou microbiológicos que atuam no
lúmen gástrico. OE de alecrim protegeu a mucosa gástrica por meio de sua propriedade
antioxidante (Rozza e Pellizzon 2013; Dawidowicz e Olszowy 2014) modulando as
atividades de enzimas (superóxido dismutase e glutationa peroxidase) e aumentando ou
mantendo os níveis de glutationa (Takayama et al. 2016). Em vários outros modelos
experimentais de condições inflamatórias GI, o OE de alecrim foi considerado eficaz (Dias
et al. 2000; Minaiyan et al. 2011).

Zaouali et al. (2010) relataram atividades antioxidantes e antimicrobianas de variedades

de R. officinalis L. (var. typicus e var. troglodytorum). As atividades bactericida e
antioxidante foram maiores com OE da var. troglodytorum do que aqueles de var. Typicus.

2.3 OE de Orégano

Orégano (Origanum vulgare) é nativo dos países mediterrâneos, como Itália e Espanha, e
é usado como uma erva picante. O OE de orégano contém mais de 25 compostos,
incluindo α-tujona, α-pineno, sabineno, β-pineno, β-mirceno, α-felandreno, α-terpineno, p-
cimeno, limoneno, 1,8-cineol, γ-terpineno, linalol, timol, carvacrol, cariofileno, etc. (Figiel et
al. 2010; Bolechowski et al. 2011). OE de orégano é conhecido por exercer fortes
atividades antioxidantes, antimicrobianas, citotóxicas e antifúngicas (Viuda-Martos et al.
2007a, b; Wojdylo et al. 2008; Siroli et al. 2014). Por possuir essas propriedades, o OE do
292
orégano pode ser utilizado em diversas enfermidades de humanos e animais, além de ser
um conservante de alimentos.

2.4 OE de Manjericão

O OE de manjericão (Ocimum basilicum L.) tem sido usado extensivamente por um longo
tempo em produtos alimentícios, odontológicos e orais e perfumaria. Chenni et al. (2016)
identificaram 65 compostos químicos em OE extraídos de folhas de manjericão egípcio.
Os principais componentes foram linalol (43,5–48,4%), metil chavicol (13,3–14,3%) e 1,8-
cineol (6,8–7,3%). Esses autores sugeriram que o método de extração por micro-ondas
sem solvente (SFME) pode ser uma alternativa melhor ao método convencional de
hidrodestilação (HD) para a extração de OE de folhas de manjericão. Isso ocorre porque o
método SFME pode fornecer uma fonte mais rica de antioxidantes naturais, bem como
agentes antimicrobianos fortes para a preservação de alimentos. Foi relatado que os EOs
de manjericão e seus principais constituintes químicos exibem atividade antimicrobiana
contra uma ampla gama de bactérias Gram-negativas e Gram-positivas, fungos e
leveduras (Suppakul et al. 2003).

2.5 OE de camomila

A camomila é uma das ervas medicinais nativas do sul e do leste da Europa. Atualmente,
é cultivado em muitos países europeus, Brasil, Índia e muitas outras partes do mundo. No
mercado internacional, é crescente a demanda pelo óleo de camomila. A camomila alemã
(Matricaria chamomilla), comumente referida como “óleo azul”, e a camomila romana
(Chamaemelum nobile) são mais populares do que outras camomilas. A análise
fitoquímica da camomila revelou mais de 120 metabólitos secundários, 28 terpenóides e
36 flavonóides (McKay e Blumberg 2000; Singh et al. 2011). Os principais componentes
do óleo essencial extraído das flores da camomila alemã são os terpenóides α-bisabolol e
seus óxidos azulenos, incluindo o azuleno e derivados do acetileno. Tanto o azuleno
quanto o bisabolol são muito instáveis e são mais bem preservados em uma tintura
alcoólica. O óleo essencial de camomila romana contém menos azuleno e é constituído
principalmente de ésteres de ácido angélico e ácido tigrico. Ele também contém farneseno
e α-pineno. Na camomila, α-bisabolol, óxidos de bisabolol A e B, azuleno, farneseno,
espiroéter sesquiterpeno lactonas, glicosídeos, hidroxicumarinas, flavonóides (apigenina,
luteolina, patuletina e quercetina), cumarinas (herniarina e umbeliferona) e terpenoides
são considerados os principais ingredientes bioativos (Singh et al. 2011). Dependendo
dos constituintes químicos e da composição qualitativa e quantitativa, existem quatro tipos
básicos de óleos essenciais de camomila (OE):

Tipo A: o componente dominante é o óxido de bisabolol A

293
Tipo B: O componente dominante é óxido de bisabolol B

Tipo C: o componente dominante é (-) - α-bisabolol

Tipo D: (-) - α-bisabolol e óxido de bisabolol A e B presentes na proporção de 1:1

As propriedades biológicas e farmacológicas do óleo de camomila incluem atividades

antioxidantes, antiinflamatórias, antissépticas, carminativas, sedativas e espasmolíticas e,
como resultado, suas preparações têm sido usadas para muitas doenças humanas, como
febre do feno, doenças de pele (eczema, catapora e psoríase), espasmos musculares,
neuralgia, ciática, dor reumática, distúrbios menstruais, insônia, úlceras, feridas, distúrbios
gastrointestinais e hemorróidas (Salmon 1992; Srivastava et al. 2010; Singh et al. 2011).
Na medicina veterinária, o uso da camomila ainda não foi explorado.

Srivastava et al. (2010) relataram um efeito antiinflamatório devido aos constituintes da

camomila, como bisabolol, azuleno, apigenina e luteolina, embora o mecanismo exato
ainda não tenha sido elucidado. Em estudos experimentais, cumarinas, bisabolol e
flavonóides demonstraram exercer efeitos relaxantes do músculo liso e antiespasmódicos
(Gardiner 2007; Srivastava et al. 2010). Em humanos, Merfort et al. (1994) demonstraram
que os flavonóides e os óleos essenciais da camomila penetram abaixo da superfície da
pele nas camadas mais profundas da pele, exercendo assim uma atividade
antiinflamatória. O óleo de camomila produziu um efeito antiinflamatório ao inibir a
liberação de prostaglandina E2 induzida por LPS e o acúmulo da atividade da enzima
ciclo-oxigenase-2 (COX-2) sem afetar o componente constitutivo da COX-1 (Srivastava et
al. 2009).

As aplicações tópicas de camomila demonstraram ser moderadamente eficazes no

tratamento de eczema atópico e outras doenças de pele (Nissen et al. 1988; Graf 2000).
Os resultados revelaram que era cerca de 60% tão eficaz quanto o creme de
hidrocortisona a 0,25% (Albring et al. 1983). Em um estudo randomizado parcialmente
duplo-cego, o creme à base de camomila romana Kamillosan® mostrou uma ligeira
superioridade sobre hidrocortisona a 0,5% (Patzelt-Wenczler e Ponce-Pöschl 2000). Mais
investigações precisam ser feitas nesta área de pesquisa.

A camomila tem sido usada em muitas condições gastrointestinais, incluindo espasmos

gastrointestinais, irritação gastrointestinal, dores de estômago, flatulência e úlceras (Kroll
e Cordes 2006) e condições inflamatórias gastrointestinais, como refluxo esofágico,
doença diverticular, etc. A camomila foi especificamente considerada útil na dissipação de
gases, acalmando o estômago e relaxando os músculos que movem os alimentos através
dos intestinos (revisado em Srivastava et al. 2010). Relatórios sugeriram que a pomada

294
de camomila pode melhorar as hemorróidas, reduzindo a inflamação (Misra e Parshad
2000). Estudos também provaram que a camomila inibe a Helicobacter pylori, a bactéria
que pode contribuir para úlceras estomacais. A camomila reduz os espasmos do músculo
liso associado a vários distúrbios inflamatórios gastrointestinais.

A camomila tem sido indicada no tratamento do transtorno de ansiedade generalizada.

Um dos compostos bioativos da camomila, a apigenina, demonstrou reduzir a latência no
início das convulsões induzidas por picrotoxina e redução na atividade locomotora, mas
não demonstrou nenhuma atividade ansiolítica, miorrelaxante ou anticonvulsivante
(Avallone et al. 2000).

A camomila foi considerada muito eficaz no controle da hiperglicemia e do diabetes. Ele

melhora a hiperglicemia e as complicações diabéticas, independentemente da secreção
de insulina, suprimindo os níveis de açúcar no sangue, aumentando o armazenamento de
glicogênio no fígado, inibindo o sorbitol nos eritrócitos e protegendo as células beta-
pancreáticas do estresse oxidativo (Cemek et al. 2008; Srivastava et al. 2010).

Foi relatado que a camomila é estatisticamente eficaz na produção de secagem de

feridas, epitelização rápida e cicatrização de feridas (Glowania et al. 1987; Nayak et al.
2007). Na aromaterapia, a massagem de camomila também demonstrou exercer efeitos
positivos sobre a ansiedade (Hadfield 2001). Além disso, a camomila pode ser usada em
muitas outras condições, como cardiovascular, mucosite, osteoporose, distúrbio do sono,
dor de garganta, vaginite, imunodeficiência e câncer (Srivastava et al. 2010; Singh et al.
2011).

Embora a camomila esteja listada na lista GRAS (geralmente reconhecida como segura)
do FDA, ela pode produzir reação alérgica provavelmente devido à sua contaminação
com “camomila de cachorro”, uma planta altamente alergênica de aparência semelhante
(Srivastava et al. 2010).

2.6 OE de canela

O óleo essencial de canela (OE) é obtido da casca externa ou das folhas de

Cinnamomum zeylanicum e Cinnamomum vervun (ambos os nomes referem-se à mesma
árvore). Os principais constituintes químicos da casca da canela e dos OE das folhas, em
quantidades variáveis, são: cinamaldeído, acetato de cinamila, eugenol e acetato de
eugenol. O OE da casca de C. altissimum Kosterm consiste em linalol (36,0%), metil
eugenol (12,8%), limoneno (8,3%), α-terpineol (7,8%), terpinen-4-ol (6,4%), γ-terpineno
(3,5%), α-terpineno (2,3%) e 1,8-cineol (2,3%) (Abdelwahab et al. 2017).

295
O cinamaldeído exibe atividades antibacteriana e antifúngica, além de transmitir um
aroma aromático. O acetato de cinamila costuma ser usado para repelir e prevenir a
infestação de insetos, além de seu uso comum como fixador em perfumes
manufaturados. O eugenol exerce propriedades antiinflamatórias, antissépticas e
analgésicas, alivia úlceras e dores gástricas, reduz as chances de desenvolver feridas,
elimina bactérias e previne o crescimento de muitos fungos. O acetato de eugenol é um
antioxidante bem conhecido.

OE de canela é conhecido por diminuir os sentimentos de depressão, desmaios e

exaustão. Estimula a libido e costuma ser considerado um afrodisíaco natural. Também
estimula os sistemas GI e imunológico e alivia dores musculares e articulares associadas
ao reumatismo. OE de canela tem efeitos calmantes e tônicos na mente e pode melhorar
a função cognitiva e a memória. Em essência, OE de canela tem muitas propriedades
medicinais como antioxidante, antiinflamatória, antibacteriana, antifúngica, antiviral,
adstringente, antiespasmódica, imunoestimulante, carminativa, emenagoga,
antirreumática, etc.

2.7 OE de cravo

O óleo essencial de cravo-da-índia ou óleo de cravo-da-índia é obtido a partir dos botões

e caules dos cravos-da-índia (Syzygium aromaticum) que crescem em regiões tropicais.
Xu et al. (2016) identificaram 22 compostos químicos no OE do cravo-da-índia com
76,23% de eugenol. OE de cravo foi considerado muito eficaz contra muitas cepas de
bactérias, incluindo E. coli, Salmonella, Helicobacter pylori, Staphylococcus aureus,
Streptococcus pneumonia e muitos outros. Suas outras propriedades incluem
antioxidante, antiinflamatório, antibacteriano, antiviral, antifúngico, antitumoral,
anticoagulante e anticâncer (citotoxicidade e apoptose para células cancerosas).

2.8 OE de semente de endro

Anethum graveolens L., comumente conhecido como endro, é nativo dos países
mediterrâneos e do sudeste da Europa. Em um estudo anterior, Porter et al. (1983)
encontraram quatro constituintes principais (felandreno, limoneno, anetofurano e carvona)
no óleo de endro. Limoneno e felandreno estavam presentes ao máximo em caules e
folhas. O anetofurano foi o principal componente do óleo de umbelas na floração, mas
diminuiu durante a maturação das sementes. Dentro das umbelas, a carvona estava
presente apenas nas sementes e não nos pedicelos (Porter et al. 1983). Usando GC/MS,
pelo menos 36 produtos químicos (incluindo α-felandreno 56,5%, éter endro 20,8%,
limoneno 10,9%, p-cimeno 3,8%) foram identificados no OE de A. graveolens, totalizando
92% (Vera e Chane-Ming 1998; Singh et al. 2005; Rana e Blazquez 2015). Carvona é
296
comumente considerado como o componente com maior influência no caráter dos óleos
de endro.

Os fitoconstituintes do óleo de endro e seu extrato têm propriedades de eliminação de

radicais livres, eliminação de peróxido de hidrogênio, antioxidantes, antibacterianas e
antifúngicas (Singh et al. 2005; Isbilir e Sagiroglu 2011). É usado como diurético e
também para resolver certos problemas gastrointestinais (GI), como flatulência, espasmos
intestinais e vários problemas digestivos (Hosseinzadeh et al. 2002).

2.9 OE de Eucalipto

O OE de eucalipto é obtido de Eucalyptus citriodora, E. camaldulensis, E. urophylla, E.

lehmani, E. leucoxylon, E. cinerea e muitas outras espécies. O valor do óleo de eucalipto
para fins medicinais pode variar dependendo de vários fatores, como espécies de
eucalipto e seus constituintes químicos (Sebei et al. 2015). Nos OE de folhas de eucalipto
foram encontrados produtos químicos de três classes: (1) monoterpenos oxigenados (1,8-
cineol, transpinocarveol e α-terpineol), (2) sesquiterpenos oxigenados (borneol,
espatulenol, viridiflorol e globulol), e (3) hidrocarbonetos mono terpênicos (α-pineno, p-
cimeno e limoneno). Os principais constituintes do OE da folha de E. camaldulensis são
α-pineno (22,52%), p-cimeno (21,69%), α-felandreno (20,08%), 1,8-cineol (9,48%), c-
terpineno (9,36%) e limoneno (4,56%) (Cheng et al. 2008). Em um estudo recente, Sebei
et al. (2015) relataram que os OE de folhas de eucalipto contêm dois fitoconstituintes
principais, 1,8-cineol (49,07–83,59%) e α-pineno (1,27–26,35%).

Foi relatado que o óleo exerce ação antirradical e antioxidante (Ben Hassine et al. 2012),
antiinflamatória (Silva et al. 2003), antipirético (Silva et al. 2003), antibacteriano (Cimanga
et al. 2006; Sebei et al. . 2015) e propriedades antifúngicas (Su et al. 2006). Em humanos,
o óleo de eucalipto é amplamente usado para muitas condições de saúde, incluindo
asma, bronquite, placas e gengivite, piolhos e fungos nas unhas dos pés.

2.10 OE de limão

As plantas cítricas, incluindo o limão (Citrus limon), constituem uma das principais fontes
valiosas de OE usadas em alimentos e para fins medicinais (Hsouna et al. 2017). A
análise fitoquímica do OE dos citros revelou a presença de muitos produtos químicos com
abundância de limoneno (39,74%) e β-pineno (25,44%). Em uma série de estudos, o OE
cítrico foi investigado para atividades antimicrobianas contra uma ampla gama de
microrganismos associados a alimentos (bactérias, bolores e leveduras) (Hsouna et al.
2017). Hsouna et al. (2017) sugeriram que o OE cítrico tem grande potencial como um

297
agente antioxidante e antimicrobiano natural e pode ser aplicado em sistemas alimentares
e na indústria nutracêutica.

2.11 OE de lavanda/alfazema

O OE de alfazema é obtido das flores de certas espécies de alfazema (Lavandula latifolia,

L. angustifolia, L. intermedia). Os fitoconstituintes presentes no óleo de lavanda podem
ser mais de 100 e variam de espécie para espécie. O OE consiste principalmente de
linalol e acetato de linalil, com quantidades moderadas de acetato de lavandulil, terpineno-
4-ol e lavandulol. Cânfora e 1,8-cineol estão presentes em pequenas quantidades.
Smigielski et al. (2009) relataram 78 constituintes químicos no OE de flores secas de
Lavandula angustifolia (cultivada na Polônia), incluindo linalol (30,6%), acetato de linalila
(14,2%), geraniol (5,3%), β-cariofileno (4,7%), e acetato de lavandulil (4,4%). Em um
estudo semelhante, Robu et al. (2011) encontraram linalol (20,60–35,99%), acetato de
linalil (12,58–19,65%), acetato de lavandulil (3,74–10,48%), t-p3-ocimeno (1,26–9,23%),
α-terpineol (3,67–6,73%), nerol (0,81–3,32%), acetato de nerila (0,95–3,64%) e β-
cariofileno (0,93–2,43%). Recentemente, Adaszynska-Skwirzynska e Szczerbinska (2017)
investigaram a atividade antimicrobiana do OE de lavanda e sua influência no
desempenho produtivo de frangos de corte. Esses pesquisadores encontraram 26
compostos químicos no OE de lavanda com 87,79% de monoterpenos oxigenados, 8,17%
de hidrocarbonetos monoterpênicos e 2,93% de hidrocarbonetos sesquiterpênicos.
Acetato de linalol (46,25%) e linalol (35,17%) foram os principais compostos. Os
resultados revelaram que o OE lavanda exibiu atividade antimicrobiana e melhorou
significativamente o desempenho da produção de frango. Em outro estudo, Hui et al.
(2010) relataram a atividade antioxidante e a atividade inibitória do EO de lavanda contra
bactérias relacionadas à rinite (Staphylococcus aureus, Micrococcus ascoformans,
Proteus vulgaris e Escherichia coli). Outros usos do OE de lavanda incluem antisséptico,
analgésico, anticonvulsivante, antidepressivo, antirreumático, antioxidante,
antiinflamatório, antiviral, antibacteriano, carminativo, colagogo, desodorante, diurético,
emenagogo, hipotensor, sedativo e sudorífico.

2.12 OE de sálvia

OE da sálvia é obtido da Salvia officinalis, um arbusto perene nativo da região

mediterrânea. Porte et al. (2013) identificou 47 produtos químicos no OE da salva,
incluindo α-tujona (40,9%), cânfora (26,12%), α-pineno (5,85%) e β-tujona (5,62%). Por
ter propriedades antimicrobianas e antioxidantes, o OE é comumente usado em carnes,
salsichas, recheios de aves, peixes, sopas, alimentos enlatados e outros produtos
alimentícios (revisado em Porte et al. 2013).
298
2.13 OE de hortelã-pimenta

A hortelã-pimenta (Mentha piperita L.) é um híbrido de hortelã-d'água e hortelã-pimenta e

é nativa da Europa. O OE é extraído das folhas e flores da planta. Seu óleo consiste em
mentol, mentona, acetato de mentila, 1,8-cineol, limoneno, β-pineno, β-cariofileno e
flavonóides. O OE é usado para mais de 35 finalidades, incluindo dor neurológica,
problemas digestivos, saúde oral, doenças infecciosas, deficiência imunológica, dores
musculares e artríticas, cuidados com a pele, queimaduras, alergias e controle de piolhos
e pulgas.

2.14 OE de Cânhamo/CBD/Cannabis

O óleo de cannabis/cânhamo/canabidiol (CBD) tem sido usado na medicina há milênios. A

fitoquímica do óleo de cânhamo é complexa, pois contém CBD, THC, β-cariofileno,
limoneno, β-mirceno, humuleno, α-pineno, linalol, terpinoleno, etc. Devido aos efeitos
colaterais comportamentais do abuso de produtos de cannabis, o uso da maconha
medicinal continua a ser uma questão com carga emocional e política. O óleo CBD
mostrou benefícios notáveis à saúde em muitas condições, incluindo dor, convulsões,
osteoartrite, dermatite atópica, obesidade, diabetes, DPOC, hipertensão, câncer, etc. Os
leitores são encaminhados para um capítulo sobre cannabis neste livro para fitoquímica
detalhada, farmacologia e usos e riscos para a saúde.

2.15 OE de Palmarosa

O OE de Palmarosa é extraído da planta Cymbopogon martinii var. motia. A planta é

originária da Índia. Rao et al. (1999) identificou 17 fitoconstituintes responsáveis por 95,6–
97,1% do óleo. Os principais fitoconstituintes foram (E)-β-ocimeno (1,2–4,3%), linalol
(0,8–2,0%), geraniol (70,1–85,3%), acetato de geranila (4,3–14,8%) e (E,Z)-farnesol (1,6–
3,4%). Descobriu-se que o óleo de erva integral é mais rico em linalol, β-cariofileno e
(E,Z)-farnesol. Enquanto os óleos da lâmina da folha e da bainha da folha eram ricos em
geraniol, o óleo da inflorescência era rico em (E)-β-ocimeno e acetato de geranila. Além
de seu aroma de rosa, o OE tem atividades antioxidante (Puškárová et al. 2017),
antiinflamatória, bactericida, antiviral e antifúngica e é comumente usado para febre,
doenças infecciosas, feridas, artrite e reumatismo, distúrbios digestivos e pele danificada
e seca, bem como estresse e dores nervosas.

2.16 OE de cardamomo

OE de cardamomo é obtido da Elettaria cardamomum. O óleo consiste em muitos

fitoquímicos, incluindo pineno, metil eugenol, sabineno, geraniol, mirceno, felandreno, 1,8-
cineol, citronelol, linalol, limoneno, p-cimeno, terpinoleno e trans-nerolidol. Além da
299
aromaterapia, o OE do cardamomo exibe propriedades antioxidantes, antiinflamatórias,
analgésicas e antiespasmódicas. O óleo é comumente usado para tratamento de pele,
tosse, náusea e azia (Al-Zuhair et al. 1996). Também é usado como relaxante muscular,
diurético e agente antibacteriano.

2.17 OE de Coentro

O OE de coentro é extraído do Coriandrum sativum. A análise fitoquímica revelou a

presença de muitos produtos químicos bioativos, incluindo alcalóides, terpenóides,
taninos, fenólicos, flavonóides, esteróis e glicosídeos (Al-Snafi 2016). Al-Snafi (2016) e
Cantore et al. (2004) relataram que o OE tem muitas propriedades biológicas e
farmacológicas e é, portanto, usado como um antioxidante, antiinflamatório, analgésico,
antibacteriano, antifúngico, anti-helmíntico, ansiolítico, antidepressivo, sedativo, hipnótico,
anticonvulsivante, anti Alzheimer, neuroprotetor, hipolipidêmico, agente antidiabético,
anticâncer e hepatoprotetor.

2.18 OE de Gerânio

OE de gerânio é extraído de Pelargonium graveolens L. O óleo contém muitos compostos

fitoquímicos, incluindo geraniol, citronelol, linalol, α-pineno, mirceno, γ-terpineno e neral.
Farmacologicamente, o óleo de gerânio é muito importante, pois possui atividades
antioxidantes e antiinflamatórias. OE de gerânio tem sido indicado na aromaterapia,
relaxamento muscular, cuidados com a pele, disenteria, hemorróidas, condições
inflamatórias, diabetes, diarreia, úlceras gástricas e câncer.

2.19 OE de capim-limão

O OE de capim-limão é obtido de Cymbopogon citratus, que é nativo de regiões quentes e

tropicais, como Índia, Sudeste Asiático e Oceania. Os fitoquímicos presentes no OE do
capim-limão são heterogêneos por natureza, incluindo limoneno, citronelal, mirceno,
acetato de geranila, neral, nerol, geraniol e citral. Além disso, o óleo é rico em vitaminas
(vitamina A, B1, B2, B3, B5, B6, C e folato) e minerais essenciais (cálcio, cobre, ferro,
manganês, magnésio, fósforo e zinco). O óleo exerce atividades antioxidantes e
antiinflamatórias. O OE de capim-limão tem ampla aplicação em aromaterapia, saúde e
doenças. Ele reduz a febre, o estresse, a fadiga mental e a dor associada aos nervos,
músculos e ao trato gastrointestinal (irritação gasosa e úlceras gástricas). O óleo também
tem propriedades estimulantes da secreção glandular, diurética, imunoestimulante,
antibacteriana, antifúngica, cicatrizante (antisséptica e adstringente) e repelente de
insetos (Abdulazeez 2016; Lawal 2017).

300
2.20 –E de Sideritis hirsuta

O OE de Sideritis hirsuta L. é comumente usado na região do Mediterrâneo. Palá-Paul et

al. (2006) identificaram mais de 70 produtos químicos no OE, predominantemente β-
felandreno (23,8%), α-felandreno (9,2%), α-pineno (8,2%) e (Z)-β-guaieno (8,1%). O óleo
exerce propriedades antiinflamatórias, antirreumáticas, antimicrobianas e antibacterianas.
O OE de Sideritis hirsuta L. parece ter grande potencial como nutracêutico em medicina
veterinária.

2.21 OE da árvore do chá

O OE da árvore do chá é extraído das folhas frescas e da madeira da árvore Melaleuca

alternifolia. Os constituintes químicos presentes no óleo incluem terpinen-4-ol, γ-
terpineno, 1,8-cineol, limoneno, linalol, α-cimeno, δ-cadineno e globulol. As aplicações do
óleo da árvore do chá são diversas, abrangendo desde limpeza, cuidados com a pele,
massagem, prevenção e tratamento de doenças. Na década de 1920, Arthur Penfold, um
químico da Austrália, afirmou que o óleo da árvore do chá tem 11 a 13 vezes mais
atividade antimicrobiana do que o fenol. Devido ao alto teor de terpineno-4-ol, o óleo
exerce atividades antibacteriana e antifúngica. Seu uso na saúde bucal e doenças
periodontais está bem estabelecido (discutido em detalhes no Capítulo sobre
nutracêuticos na saúde periodontal e doenças em cães e gatos). Outros usos do óleo da
árvore do chá incluem no tratamento de acne, cortes, arranhões, feridas, cicatrizes,
eczema, psoríase, coceira, verrugas, fungo nas unhas dos pés, pé de atleta, micose e
câncer. Além disso, pode ser usado como um poderoso inseticida.

2.22 OE de mirra

O OE de mirra é obtido da casca do tronco da árvore e dos ramos da Commiphora

myrrha, que é nativa dos países do Oriente Médio. Seu uso foi descrito ao longo da
história (literatura romana, Bíblia, Alcorão) para vários fins, incluindo rituais, cerimônias,
mumificação e na saúde e doenças (ayurvédica, unani e medicina chinesa). O óleo de
mirra contém muitos produtos químicos, incluindo sesquiterpenos (furanoeudesma-1,3-
dieno e curzareno), esteróis e esteróides (Zhu et al. 2003). Seu uso foi bem documentado
para higiene bucal e doenças periodontais. Os fitoconstituintes do óleo de mirra exercem
propriedades antibacterianas, antivirais, antifúngicas, amebicidas, adstringentes,
antiespasmódicas, hipoglicêmicas e antiinflamatórias (Dolara et al. 2000; Tipton et al.
2006).

2.23 Azeite Ozonado

301
Estudos mostraram que, quando o gás ozônio passa pelo azeite, o ozônio reage com os
ácidos graxos poliinsaturados (PUFA). Este azeite ozonizado contém, portanto, um
ozonídio de agente oxidante e altamente reativo que apresenta um forte efeito
antimicrobiano. A Vets Plus Inc. (Menomonie, WI, EUA) desenvolveu uma formulação de
azeite ozonizado com patente pendente Ozoderm, que é uma mistura proprietária de
ácidos graxos ômega e curcumina em azeite de oliva ozonizado. Em estudos clínicos (não
publicados), o Ozoderm demonstrou ser muito eficaz contra uma variedade de doenças
da pele.

2.24 Óleo de Emu

O óleo de emu35 é obtido na Austrália a partir da gordura de um emu. O óleo é muito rico
em antioxidantes e ácidos graxos poliinsaturados (incluindo ácidos graxos ômega-3). Por
ter propriedades antioxidantes e antiinflamatórias, o óleo de emu é comumente usado
para tratar doenças de pele (como acne, eczema, psoríase, erupções cutâneas e
rosácea), para a saúde do cabelo e cicatrização de feridas. Acredita-se que o óleo de emu
melhora a dor nas costas, dor crônica, dor de cabeça, diabetes, doenças gengivais,
osteoartrite e artrite reumatóide.

3. Óleos essenciais como modificadores da fermentação ruminal,

sistema imunológico e lactação
Busquet et al. (2006) relataram que o aumento da fermentação ruminal é indicado por um
aumento no propionato e uma diminuição no metano, acetato e nitrogênio amoniacal, sem
reduzir os ácidos graxos voláteis totais (AGV). Os AGV são sumidouros naturais de
hidrogênio que ajudam a manter o equilíbrio do hidrogênio e o processo de fermentação
ativo. A retenção de energia da glicose é maior em propionato (109%), intermediária em
butirato (78%) e menor em acetato (62,5%). Recentemente, alguns OE foram relatados
como modificadores da fermentação ruminal (Lillehoj et al. 2018). Em estudos in vitro, o
óleo de alho é relatado para reduzir as proporções de acetato e AGV de cadeia ramificada
e aumentar as proporções de propionato e butirato (Busquet et al. 2005, 2006). Seu perfil
de fermentação é consistente com as mudanças observadas quando inibidores de metano
são fornecidos a ruminantes (Lillehoj et al. 2018). O efeito antimetanogênico do alho e
seus componentes ativos é devido à inibição direta dos microrganismos Archaea no
rúmen através da inibição da hidroximetilglutaril coenzima A (HMG-CoA) redutase, uma
via específica essencial para a estabilidade da membrana de Archaea. O óleo de alho tem

35 Ave terrestre endêmica de Austrália, a segunda maior do mundo

302
forte ação inibitória sobre a produção de AGV com efeito variável, sendo estreita a
margem de segurança nas doses entre níveis adequados e tóxicos.

Em outros estudos, cinamaldeído e eugenol são relatados para reduzir a proporção molar
de acetato e aumentar as proporções molares de propionato e butirato (Cardozo et al.
2004; Busquet et al. 2005). O cinamaldeído causou (1) inibição da metanogênese, (2)
redução do nitrogênio amoniacal e (3) aumento dos aminoácidos livres, sugerindo que a
desaminação de aminoácidos foi inibida no rúmen. Em um sistema de simulação ruminal
in vitro, cinamaldeído foi relatado para reduzir Prevotella spp. (bactérias envolvidas na
desaminação) (Ferme et al. 2004). Busquet et al. (2005) demonstraram que o eugenol
inibe a quebra de grandes peptídeos em pequenos peptídeos e aminoácidos.
Recentemente, Lillehoj et al. (2018) sugeriu que a combinação de cinamaldeído e eugenol
pode funcionar em sinergia para inibir a peptidólise e desaminação e, em seguida,
melhorar o fornecimento geral de aminoácidos e pequenos peptídeos para a flora ruminal
e o hospedeiro.

Tekippe et al. (2013) relataram que a alimentação com cinamaldeído sozinho ou em

combinação com eugenol resulta em aumento na produção de leite (1,7–2,7%). Em
alguns outros estudos, uma combinação de cinamaldeído, eugenol e capsicum, quando
fornecida a gado leiteiro, aumentou a produção de leite com energia corrigida de 3,2%
para 5,2% (Bravo et al. 2009; Wall et al. 2014; Oguey e Wall 2016). Foi demonstrado que
a alimentação com capsicum protegido no rúmen melhora a produção de leite ao modular
a função imunológica (Oh et al. 2015; Stelwagen et al. 2016).

4. Segurança de óleos essenciais

Não adicione OE concentrado à comida de cachorro ou gato e água potável. Além disso,
evite usar OE com filhotes com menos de 10 semanas de idade. Em vez disso, use
hidrossóis. Conforme necessário, dilua os OE e aplique-os topicamente ou administre por
meio de alimentos ou água.

5. Observações finais e direções futuras

Os óleos essenciais (OE) são extraídos de origens vegetais e não vegetais. Eles podem
conter mais de 100 produtos químicos, que podem ser de classes heterogêneas. Um bom
número desses produtos químicos possui propriedades antioxidantes, antiinflamatórias,
imunoestimulantes e antimicrobianas. Alguns dos óleos também têm propriedades

303
analgésicas, antiespasmódicas, antiparasitárias, antifúngicas, cicatrizantes da pele e
muitas outras propriedades medicinais. Em vacas leiteiras, alguns OE (como eugenol,
cinamaldeído e capsicum) podem estimular o sistema imunológico e melhorar a produção
de leite. Esses óleos são de grande valor para promover a saúde humana e animal e
prevenir e tratar doenças. No futuro, novos óleos e novos usos dos óleos existentes serão
descobertos para a prevenção e tratamento de doenças animais.

Agradecimentos Os autores gostariam de agradecer a Sra. Robin B. Doss por sua

assistência técnica na preparação deste capítulo.

Referências

Abdelwahab SI, Mariod AA, Taha MME et al (2017) Chemical composition and antioxidant properties of the essential
oil of Cinnamomum altissimum Kosterm. (Lauraceae). Arab J Chem 10:131–135
Abdulazeez MA (2016) In: Preedy VR (ed) Essential oils in food preservation, flavor and safety. Elsevier, Amsterdam,
pp 509–516
Adaszynska-Skwirzynska M, Szczerbinska D (2017) The antimicrobial activity of lavender essential oil (Lavandula
angustifolia) and its influence on the production performance of broiler chickens. J Anim Physiol Anim Nutr 102:1020–
1025
Ahmad A, van Vuuren S, Viljoen A (2014) Unravelling the complex antimicrobial interactions of essential oils—the case
of Thymus vulgaris (Thyme). Molecules 19:2896–2910
Aidi WW, Mhamdi B, Sriti J et al (2010) Antioxidant activities of the essential oils and methanol extracts from myrtle
(Myrtus communis var. italica L.) leaf, stem and flower. Food Chem Toxicol 48:1362–1370
Al-Asmari AK, Athar MT, Al-Faraidy AA et al (2017) Chemical composition of essential oil of Thymus vulgaris collected
from Saudi Arabian market. Asian Pac J Trop Biomed 7(2):147–150
Albring M, Albrecht H, Alcorn G et al (1983) The measuring of the antiinflammatory effect of a compound on the skin of
volunteers. Methods Find Exp Clin Pharmacol 5:75–77
Almasirad A, Amanzadeh Y, Taheri A et al (2011) Composition of a historical rose oil sample (Rosa damascena Mill.,
Rosaceae). J Essent Oil Res 19(2):110–112
Al-Saidi S, Rameshkumar KB, Hisham A et al (2012) Composition and antibacterial activity of the essential oils of four
commercial grades of Omani luban, the oleo-gum resin of Boswellia sacra FLUECK. Chem Biodivers 9(3):615–624
Al-Snafi AE (2016) A review on chemical constituents and pharmacological activities of Coriandrum sativum. IOSR J
Pharm 6(7):17–42
Al-Zuhair H, Al-Sayed B, Ameen HA et al (1996) Pharmacological studies of cardamom oil in animals. Pharmacol Res
34:79–82
Amiri H (2012) Essential oils composition and antioxidant properties of three Thymus species. Evid Based
Complement Alternat Med 2012:728065
Aragăo GF, Carneiro LMV, Junior APF et al (2006) A possible mechanism for anxiolytic and antidepressant effect of
alpha- and betaamyrin from Protium heptaphyllum (Aubl.) March. Pharmacol Biochem Behav 85:827–834
Araujo DAO, Takayama C, de Faria FM et al (2011) Gastroprotective effects of essential oil from Protium heptaphyllum
on experimental gastric ulcer models in rats. Rev Bras Farm 21:721–729
Avallone R, Zanoli P, Puia G et al (2000) Pharmacological profile of apigenin, a flavonoid isolated from Matricaria
chamomilla. Biochem Pharmacol 59:1387–1394
Bajpai VK, Kang SC (2010) Antifungal activity of leaf essential oil and extracts of Metasequoia glyptostroboides Mikiex
Hu. J Am Oil Chem Soc 87:327–336
Bajpai VK, Rahman A, Kang SC (2007) Chemical composition and anti-fungal properties of the essential oil and crude
extracts of Metasequoia glyptostroboides Mikiex Hu. Ind Crop Prod 26 (1):28–35
Bajpai VK, Sharma A, Back KH (2013) Antibacterial mode of action of Cudrania tricuspidata fruit essential oil, affecting
membrane permeability and surface characteristics of food-borne pathogens. Food Control 32:582–590
Baser KH, Demirci B, Iscan G et al (2006) The essential oil constituents and antimicrobial activity of Anthemis aciphylla
BOISS. Var. discoidea BOISS. Chem Pharm Bull 54:222–225
Basile A, Senatore F, Gargano R et al (2006) Antibacterial and antioxidant activities in Sidris italica (Miller) Greuter et
Burdet essential oils. J Ethnopharmacol 107:240–248
Bellik Y, Benabdesselam F, Ayad A et al (2013) Antioxidant activity of the essential oil and oleoresin of Zingiber
officinale Roscoe as affected by chemical environment. Int J Food Prop 16:1304–1313

304
 Ben Hassine D, Abderrabba M, Yvon Y et al (2012) Chemical composition and in vitro evaluation of the antioxidant and
antimicrobial activities of Eucalyptus gillii essential oil and extracts. Molecules 17 (8):9540–9558
Benites J, Bravo F, Rojas M et al (2011) Composition and microbiological screening of the essential oil from the leaves
and stems of Senecio atacamensis. Phil from Chile. J Chil Chem Soc 56 (2):712–714
Białoń M, Krzyśko-Łupicka T, Pik A et al (2017) Chemical composition of herbal macerates and corresponding
commercial essential oils and their effect on Bacteria Escherichia coli. Molecules 22:1887
Blumenthal M, Busse WR, Goldberg A et al (1998) The complete German commission E monographs: therapeutic
guide to herbal medicines. Austin, American Botanical Council and Boston, Integr Med Commun, pp 180–182
Bolechowski A, Moral R, Bustamante MA et al (2011) Composition of oregano essential oil (Origanum vulgare) as
affected by the use of winery-distillery composts. J Essent Oil Res 23:32–38
Borugă O, Jianu C, Mişcă C et al (2014) Thymus vulgaris essential oil: chemical composition and antimicrobial activity.
J Med Life 7 (3):56–60
Bozin B, Mimica-Dukic N, Samojlik I et al (2007) Antimicrobial and antioxidant properties of rosemary and sage
(Rosmarinus officinalis L. and Salvia officinalis L., Lamiaceae) essential oils. J Agric Food Chem 55:7879–7885
Bravo D, Pyatt N, Doane PH et al (2009) Meta analysis of growing ruminants fed a mixture of eugenol,
cinnamaldehyde and capsicum oleoresin. J Dairy Sci 92:374
Brunke E-J, Hammerschmidt F-J, Koester F-H et al (1991) Constituents of dill (Anethum graveolens L.) with sensory
importance. J Essent Oil Res 3(4):257–267
Burits M, Bucar F (2000) Antioxidant activity of Nigella sativa essential oil. Phytother Res 14:323–328
Burt S (2004) Essential oils: their antibacterial properties and potential applications in foods-a review. Int J Food
Microbiol 94:223–253
Busquet M, Calsamiglia S, Ferret A et al (2005) Effects of cinnamaldehyde and garlic oil on rumen microbial
fermentation in a dual flow continuous culture. J Dairy Sci 88:2508–2516
Busquet M, Calsamiglia S, Ferret A et al (2006) Plant extract affect in vitro rumen microbial fermentation. J Dairy Sci
89:761–771
Cantore LP, Iacobellis SN, Marco DA et al (2004) Antibacterial activity of Coriandrum sativum L. and Foeniculum
vulgare Miller var. (Miller) essential oil. J Agric Food Chem 52(26):7862–7866
Cardozo PW, Calsamiglia S, Ferret A et al (2004) Effects of natural plant extracts on ruminal protein degradation and
fermentation profiles in continuous culture. J Anim Sci 83:3230–3236
Carson CF, Hammer KA, Riley TV (2006) Melaleuca alternifolia (Tea Tree) oil: a review of antimicrobial and other
medicinal properties. Clin Microbiol Rev 19(1):50–62
Cemek M, Kaga S, Simsek N et al (2008) Antihyperglycemic and antioxidative potential of Matricaria chamomilla L. in
streptozotocin-induced diabetic rats. J Nat Med 62:284–293
Cerda A, Martínez ME, Soto C et al (2013) The enhancement of antioxidant compounds extracted from Thymus
vulgaris using enzymes and the effect of extracting solvent. Food Chem 139:138–143
Cetin B, Ozer H, Cakir A et al (2010) Antimicrobial activities of essential oil and hexane extract of Florence fennel
[Foeniculum vulgare var. azoricum (Mill.) Thell.] against foodborne microorganisms. J Med Food 13(1):196–204
Chahal KK, Bhardwaj U, Kaushal S et al (2015) Chemical composition and biological properties of Chrysopogon
zizanioides (L.) Roberty syn. Vetiveria zizanioides (L.) Nash-a review. Indian J Nat Prod Resour 6(4):251–260
Cheng SS, Huang CG, Chen YJ et al (2008) Chemical compositions and larvicidal activities of leaf essential oils from
two Eucalyptus species. Bioresour Technol 99(9):3617–3622
Chenni M, El Abed D, Rakotomanomana N et al (2016) Comparative study of essential oils extracted from Egyptian
basil leaves (Ocimum basilicum L.) using hydro-distillation and solvent-free microwave extraction. Molecules 21(1):E113.
https://doi.org/10.3390/molecules21010113
Choi E-M, Hwang J-K (2004) Antiinflammatory, analgesic and antioxidant activities of the fruit of Foeniculum vulgare.
Fitoterapia 75:557–565
Cicerale S, Lucas LJ, Keast RSJ (2012) Antimicrobial, antioxidant and anti-inflammatory phenolic activities in extra
virgin olive oil. Curr Opin Biotechnol 23(2):129–135
Cimanga K, Kambu K, Tona L et al (2006) Correlation between chemical composition and antibacterial activity of
essential oils of some aromatic medicinal plants growing in the Democratic Republic of Congo. J Ethnopharmacol
79(2):213–220
Constantin M, Sartorelli P, Limburger R et al (2001) Essential oils from Piper cernuum and Piper regnellii: antimicrobial
activities and analysis by GC/MS and 13C-NMR. Planta Med 67:771–773
Dawidowicz AL, Olszowy M (2014) Does antioxidant properties of the main component of essential oil reflect its
antioxidant properties? The comparison of antioxidant properties of essential oils and their main components. Nat Prod
Res 28:1952–1963
De Falco E, Mancini E, Roscigno G et al (2013) Chemical composition and biological activity of essential oils of
Origanum vulgare L. subsp. vulgare L. under different growth conditions. Molecules 18:14948–14960
Delamare APL, Moschen-Pistorello IT, Artico L et al (2007) Antibacterial activity of the essential oil of Salvia officinalis
L. and Salvia triloba L. cultivated in South Brazil. Food Chem 100:603–608
Dias PC, Foglio MA, Possenti A et al (2000) Antiulcerogenic activity of crude hydroalcoholic extract of Rosmarinus
officinalis L. J Ethnopharmacol 69:57–62

305
 Djihane B,Wafa N, Elkhamssa S et al (2017) Chemical constituents of Helichrysum italicum (Roth) G. Don essential oil
and their antimicrobial activity against Gram-positive and Gram-negative bacteria, filamentous fungi and Candida
albicans. Saudi Pharm J 25:780–787
Djiri S, Casabianca H, Hanchi B et al (2014) Composition of garlic essential oil (Allium sativum L.) as influenced by
drying method. J Essent Oil Res 26(2):91–96
Dolara P, Corte B, Ghelardini C et al (2000) Local anesthetic, antibacterial and antifungal properties of sesquiterpenes
from myrrh. Planta Med 66(4):356–358
Fachini-Queiroz FC, Kummer R, Estevao-Silva CF et al (2012) Effects of thymol and carvacrol, constituents of Thymus
vulgaris L. essential oil, on the inflammatory response. Evid Based Complement Alternat Med 2012:657026
Ferme D, Banjac M, Calsamiglia S et al (2004) The effects of plant extracts on microbial community structure in a
rumen-simulating continuous-culture system as revealed by molecular profiling. Folia Microbiol (Praha) 49:151–155
Figiel A, Szumny A, Gutiérrez-Ortíz A et al (2010) Composition of oregano essential oil (Origanum vulgare) as affected
by drying method. J Food Eng 98(2):240–247
Filipwicz N, Kaminski M, Kurlenda J et al (2003) Antibacterial and antifungal activity of juniper berry oil and its selected
components. Phytother Res 17:227–231
Frank A, Unger M (2006) Analysis of frankincense from various Boswellia species with inhibitory activity on human
drug metabolizing cytochrome P450 enzymes using liquid chromatography mass spectrometry after automated on-line
extraction. J Chromatogr A 1112(1–2):255–262
Gardiner P (2007) Complementary, holistic, and integrative medicine: chamomile. Pediatr Rev 28(4):16–18
Glisic SB, Milojevic SZ, Dimimitrijevic SL et al (2007) Antimicrobial activity of the essential oil and different fractions of
Juniperus communis L., and comparison with some commercial antibiotics. J Serb Chem Soc 2:311–320
Glowania HJ, Raulin C, Swoboda M (1987) Effect of chamomile on wound healing-a clinical double-blind study. Z
Hautkr 62:1267–1271
Govindarajan M, Rajeswary M, Hoti SL et al (2016) Eugenol, α-pinene and β-caryophyllene from Plectranthus barbatus
essential oil as eco-friendly larvicides against malaria, dengue and Japanese encephalitis mosquito vectors. Parasitol
Res 15(2):807–815
Graf J (2000) Herbal anti-inflammatory agents for skin diseases. Skin Therapy Lett 5:3–5
Gupta B, Ghosh KK, Gupta RC (2016) Thymoquinone. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity.
Academic Press/Elsevier, Amsterdam, pp 541–550
Hadfield N (2001) The role of aromatherapy massage in reducing anxiety in patients with malignant brain tumors. Int J
Palliat Nurs 7:279–285
Hashemi SM, Safavi SA (2012) Chemical constituents and toxicity of essential oils of oriental arborvitae, Platycladus
orientalis L. Franco, against three stored-product beetles. Chilean J Agric Res 72 (2):188–194
Hernández T, Canales M, Avila JG et al (2005) Comparative and antibacterial activity of essential oil of Lantana
achyranthifolia Desf. (Verbenaceae). J Ethnopharmacol 96(3):551–554
Hosseinzadeh H, Karimi GR, Ameri M (2002) Effects of Anethum graveolens L. seed extracts on experimental gastric
irritation models in mice. BMC Pharmacol 2:21–27
Howes MJR, Simmonds MSJ, Kite GC (2004) Evaluation of the quality of sandalwood essential oils by gas
chromatography-mass spectrometry. J Chromatogr 1028(2):307–312
Hsouna AB, Halima NB, Smaoui S et al (2017) Citrus lemon essential oil: chemical composition, antioxidant and
antimicrobial activities with its preservative effect against Listeria monocytogenes inoculated in minced beef meat. Lipids
Health Dis 16:146
Hui L, He L, Huan L et al (2010) Chemical composition of Lavender essential oil and its antioxidant activity and
inhibition against rhinitis-related bacteria. Afr J Microbiol Res 4(4):309–313
Huong T, Thang TD, Ogunwande IA (2015) Chemical constituents of essential oils from the leaves, stems, roots and
fruits of Alpinia polyantha. Nat Prod Commun 10(2):367–368
Hussain AI, Anwar F, ShahidMet al (2011) Chemical composition, and antioxidant and antimicrobial activities of
essential oil of spearmint (Mentha spicata L.) from Pakistan. J Essent Oil Res 22(1):78–84
Igarashi M, Miyazaki Y (2013) A review on bioactivities of Perilla: progress in research on the functions of Perilla as
medicine and food. Evid Based Complement Alternat Med 2013:925342
Igarashi M, Song C, Ikei H et al (2014) Effects of olfactory stimulation with Perilla essential oil on prefrontal cortex
activity. J Altern Complement Med 20(7). https://doi.org/10.1089/acm.214.0100
Isbilir SS, Sagiroglu A (2011) Antioxidant potential of different dill (Anethum graveolens L.) leaf extract. Int J Food Prop
14:894–902
Jiang X, Zhang JC, Liu YW et al (2007) Studies on chemical constituents of Valeriana officinalis. Zhong Yao Cai 30
(11):1391–1393
Juliani HR Jr, Biurrun F, Koroch AR et al (2002) Chemical constituents and antimicrobial activity of the essential oil of
Lantana xenica. Planta Med 68(8):762–764
Khalid KA (2016) Essential oil constituents of summer savory plants propagated and adapted under Egyptian climate.
J Appl Sci 16 (2):54–57
Khesorn N, Manasnant B, Banyong K et al (2010) Antimicrobial activity of alkaloid from roots of Vetiveria zizanioides
(L.) Nash ex small. Thai Pharm Health Sci J 5(2):99–102

306
 Komaki A, Hoseini F, Shahidi S et al (2016) Study of the effect of extract of Thymus vulgaris on anxiety in male rats. J
Tradit Complement Med 6:257–261
Kroll U, Cordes C (2006) Pharmaceutical prerequisites for a multi-target therapy. Phytomedicine 5:12–19
Kumar P, Ansari SH, Ali J (2009) Herbal remedies for the treatment of periodontal disease-a patent review. Recent Pat
Drug Deliv Formul 3:221–228
Kuorwel KK, Cran MJ, Sonneveld K et al (2011) Essential oils and their principal constituents as antimicrobial agents
for synthetic packaging films. J Food Sci 76(9):R164–R177
Kusuma HS, MahfudM(2016) Chemical composition of essential oil of Indonesia sandalwood extracted by microwave-
assisted hydrodistillation. AIP Conf Proc 1755(1):50001. https://doi.org/10.1063/1.4958484
Kyung KH (2012) Antimicrobial properties of Allium species. Curr Opin Biotechnol 23(2):142–147
Laciar A, Ruiz ML, Flores RC et al (2009) Antibacterial and antioxidant activities of the essential oil of Artemisia
echegarayi Hieron. (Asteraceae). Rev Argent Microbiol 41:226–231
Lambert RJW, Skandamis PN, Coote PJ et al (2001) A study of the minimum inhibitory concentration and mode of
action of oregano essential oil, thymol and carvacrol. J Appl Microbiol 91:453–462
Lawal OA (2017) Medicinal spices and vegetables from Africa. Academic Press, London, pp 397–423
Lemberkovics E, Kéry A, Marczal G et al (1998) Phytochemical evaluation of essential oils, medicinal plants and their
preparations. Acta Pharm Hung 68:141–149
Lillehoj H, Liu Y, Calsamiglia S et al (2018) Phytochemicals as antibiotic alternatives to promote growth and enhance
host health. Vet Res 49:76
McKay DL, Blumberg JB (2000) A review of the bioactivity and health benefits of chamomile tea (Matricaria ricutita L.).
Phytother Res 20:519–530
Mendez AHS, Cornejo CGF, Coral MFC et al (2017) Chemical composition, antimicrobial and antioxidant activities of
the essential oil of Bursera graveolens (Burseraceae) from Peru. Indian J Pharm Educ Res 51(3):S429–S435
Merfort I, Heilmann J, Hagedorn-Leweke U et al (1994) In vivo skin penetration studies of chamomile flavones.
Pharmazie 49:509–511
Milos M, Radonic A, Bezic N et al (2001) Localities and seasonal variations in the chemical compositions of essential
oils of Satureja montana L. and S. cuneifolia Ten. Flavour Fragr J 16:157–160
Minaiyan M, Ghannadi AR, Afsharipour M et al (2011) Effects of extract and essential oil of Rosmarinus officinalis L. on
TNBSinduced colitis in rats. Res Pharm Sci 6:13–21
Misra MC, Parshad R (2000) Randomized clinical trial of micronized flavonoids in the early control of bleeding from
acute internal hemorrhoids. Br J Surg 87:868–872
Mohamad RH, El-Bastawesy AM, Abdel-Monem MG et al (2011) Antioxidant and anticarcinogenic effects of methanolic
extract and volatile oil of fennel seeds (Foeniculum vulgare). J Med Food 14 (9):986–1001
Mothana RA, Khaled JM, Noman OM et al (2018) Phytochemical
analysis and evaluation of the cytotoxic, antimicrobial and antioxidant activities of essential oils from three Plectranthus
species grown in Saudi Arabia. BMC Complement Altern Med 18:237
Muchtaridi, Subarnas A, Apriyantono A et al (2010) Identification of compounds in the essential oil of nutmeg seeds
(Myristica fragrans Houtt.) that inhibit locomotor activity in mice. Int J Mol Sci 11:4771–4781
Nagababu E, Lakshmaiah M (1992) Inhibitory effect of eugenol on non-enzymatic lipid peroxidation in rat liver
mitochondria. Biochem Pharmacol 43:2393–2400
Nandhini S, Narayanan KB, Ilango K (2018) Valeriana officinalis: a review of its traditional uses, phytochemistry and
pharmacology. Asian J Pharm Clin Res 11(1):36–41
Nayak BS, Raju SS, Rao AV (2007) Wound healing activity of Matricaria ricutita L. extract. J Wound Care 16:298–302
Nissen HP, Blitz H, Kreyel HW (1988) Prolifometrie, eine methode zur beurteilung der therapeutischen wirsamkeit kon
Kamillosan®-Salbe. Z Hautkr 63:84–90
Nostro A, Cannatelli MA, Marino A et al (2003) Evaluation of antiherpesvirus-1 and genotoxic activities of Helichrysum
italicum extract. New Microbiol 26:125–128
Oguey C, Wall EH (2016) 1570A blend of cinnamaldehyde, eugenol, and capsicum oleoresin improves milking
performance in lactating daily cows. J Anim Sci 94:763
Oh J, Giallongo F, Frederick T et al (2015) Effects of dietary Capsicum oleoresin on productivity and immune
responses in lactating dairy cows. J Dairy Sci 98:6327–6339
Oussalah M, Caillet S, Lacroix M (2006) Mechanism of action of Spanish oregano, Chinese cinnamon, and savory
essential oils against cell membranes and walls of Escherichia coli 0157:H7 and Listeria monocytogenes. J Food Prot
69(5):1046–1055
Palá-Paul J, Pérez-Alonso J, Velasco-Negueruela A et al (2006) Essential oil composition of Sideritis hirsuta L. from
Guadalajara province, Spain. Flavour Fragr J 21:410–415
Patzelt-Wenczler R, Ponce-Pöschl E (2000) Proof of efficacy Kamillosan® cream in atopic eczema. Eur J Med Res
5:171–175
Perry NS, Bollen C, Perry EK et al (2003) Salvia for dementia therapy: review of pharmacological activity and pilot
tolerability clinical trial. Pharmacol Biochem Behav 75:651–659
Picon PD, Picon RV, Costa AF et al (2010) Randomized clinical trial of a phytotherapic compound containing
Pimpinella anisum, Foeniculum vulgare, Sambucus nigra, and Cassia angustifolia for chronic constipation. BMC
Complement Altern Med 10:17
307
 Pierce A (1999) American pharmaceutical association practical guide to natural medicines. Stonesong Press, New
York, pp 338–340
Pierozan MK, Pauletti GF, Rota L et al (2009) Chemical characterization and antimicrobial activity of essential oils of
Salvia L. species. Cienc Technol Aliment 29:764–770
Pinto P, Santos CN (2017) Worldwide (poly)phenol intake: assessment methods and identified gaps. Eur J Nutr
56:1393–1408
Porte A, Godoy RLO, Maia-Porte LH (2013) Chemical composition of sage (Salvia officinalis L.) essential oil from the
Rio de Janeiro State (Brazil). Rev Bras Plantas Med 15(3):438–441
Porter NG, Shaw ML, Shaw GJ et al (1983) Content and composition of dill herb oil in the whole plant and the different
plant parts during crop development. N Z J Agric Res 26(1):119–127
Puškárová A, Bučková M, Kraková L et al (2017) The antibacterial and antifungal activity of six essential oils and their
cyto/genotoxicity to human HEL 12469 cells. Sci Rep 7:8211
Qiu J, Li H, Su H et al (2012) Chemical composition of fennel essential oil and its impact on Staphylococcus aureus
exotoxin production. World J Microbiol Biotechnol 28(4):1399–1405
Radulescu V, Saviuc C, Chifiriuc C et al (2011) Chemical composition and antimicrobial activity of essential oil from
Shoots Spruce (Picea abies L.). Rev Chim (Bucharest, Rom) 62(1):69–74
Raina VK, Kumar A, Aggarwal KK (2013) Essential oil composition of Ginger (Zingiber officinale Roscoe) rhizomes
from different place in India. J Essent Oil Bear Plants 89(2):187–191
Raina AP, Verma SK, Abraham Z (2014) Volatile constituents of essential oils isolated from Alpinia galanga Willd. (L.)
and A. officinarum Hance rhizomes from North East India. J Essent Oil Res 26(1):24–28
Ramsewak RS, Nair MG, Stommel M et al (2003) In vitro antagonistic activity of monoterpenes and their mixtures
against ‘toe nail fungus’ pathogens. Phytother Res 17(4):376–379
Rana VS, Blazquez MA (2015) Chemical composition of the essential oil of Anethum graveolens aerial parts. J Essent
Oil Bear Plants 17 (6):1219–1223
Rao PGP, Rao LJ, Raghavan B (1999) Chemical composition of essential oils of garlic (Allium sativum L.). J Spices
Aromat Crops 8 (1):41–47
Rebouças de Araujo JD, Coriolano de Aquino N, Véras de Aguiar Guerra AC et al (2017) Chemical composition and
evaluation of the antibacterial and cytotoxic activities of the essential oil from the leaves of Myracrodruon urundeuva.
BMC Complement Alternat Med 17(1):419
Robu S, Aprotosoaie AC, Spac A et al (2011) Studies regarding chemical composition of lavender volatile oils. Rev
Med Chir Soc Med Nat Iasi 115(2):584–589
Rodrigues TG, Fernandes A Jr, Sousa JP et al (2009) In vitro and in vivo effects of clove on pro-inflammatory cytokines
production by macrophages. Nat Prod Res 23(4):319–326
Rota MC, Herrera A, Martinez RM et al (2006) Antimicrobial activity and chemical composition of Thymus vulgaris,
Thymus zygis, and Thymus hyemalis essential oils. Food Control 19:681–687
Rozza AL, Pellizzon CH (2013) Essential oils from medicinal and aromatic plants: a review of the gastroprotective and
ulcer-healing activities. Fundam Clin Pharmacol 27:51–63
Sahin F, Karaman I, Gulluce M et al (2003) Evaluation of antimicrobial activities of Satureja hortensis L. J
Ethnopharmacol 87:61–65
Sakkas H, Papadopoulou C (2017) Antimicrobial activity of basil, oregano, and thyme essential oils. J Microbiol
Biotechnol 27 (3):429–438
Sala A, Recio M, Giner RM et al (2002) Anti-inflammatory and antioxidant properties of Helichrysum italicum. J Pharm
Pharmacol 54:365–371
Salmon I (1992) Chamomile a medicinal plant. J Herbs Spices Med Plants 10:1–4
Şarer E, Toprak Y, Otlu B et al (2011) Composition and antimicrobial activity of the essential oil from Mentha spicata L.
subsp. spicata. J Essent Oil Res 23(1):105–108
Sebei K, Sakouhi F, Herchi W et al (2015) Chemical composition and antibacterial activities of seven Eucalyptus
species essential oils leaves. Biol Res 48(1):7
Sharopov FS, Zhang H, Setzer WN (2014) Composition of geranium (Pelargonium graveolens) essential oil from
Tajikistan. Am J Essent Oils Nat Prod 2(2):13–16
Shellie R, Mondello L, Marriott P et al (2002) Characterization of lavender essential oils by gas chromatography-mass
spectrometry with correlation of linear retention indices and comparison with comprehensive two-dimensional gas
chromatography. J Chromatogr A 970(1–2):225–234
Silva J, Abebe W, Sousa SM et al (2003) Analgesic and antiinflammatory effects of essential oils of Eucalyptus. J
Ethnopharmacol 89(2–3):277–283
Singh G, Maurya S, de Lamposana MP et al (2005) Chemical constituents, antimicrobial investigation, and
antioxidative potential of Anethum graveolens L. essential oil and acetone extract. Part 52. J Food Sci 70(4):208–215
Singh P, Shukla R, Prakash B et al (2010) Chemical profile, antifungal, antiaflatoxigenic and antioxidant activity of
Citrus maxima Burm. and Citrus sinensis (L.) Obseck essential oils and their cyclic monoterpene, DL-limonene. Food
Chem Toxicol 48:1734–1740
Singh O, Khanam Z, Misra N et al (2011) Chamomile (Matricaria chamomilla L.): an overview. Pharmacogn Rev
5(9):82–95

308
 Singh J, Singh R, Gambhir RS et al (2016) Local drug delivery system in treatment of periodontitis: a review. J
Periodontol Med Clin Pract 3 (3):153–160
Siroli L, Patrignani F, Montanari C et al (2014) Characterization of oregano (Origanum vulgare) essential oil and
definition of its antimicrobial activity against Listeria monocytogenes and Escherichia coli in vitro system and on foodstuff
surfaces. Afr J Microbiol Res 8 (29):2746–2753
Smigielski K, Raj A, Krosowiak K et al (2009) Chemical composition of the essential oil of Lavandula angustifolia
cultivated in Poland. J Essent Oil Bear Plants 12(3):338–347
Solórzano-Santos F, Miranda-Novales MG (2012) Essential oils from aromatic herbs as antimicrobial agents. Curr Opin
Biotechnol 23 (2):136–141
Srivastava JK, Pandey M, Gupta S (2009) Chamomile, a novel and selective Cox-2 inhibitor with anti-inflammatory
activity. Life Sci 85:663–669
Srivastava JK, Shankar E, Gupta S (2010) Chamomile: a herbal medicine of the past with bright future. Mol Med Rep
3(6):895–901
Stanojević LP, Stanojević JS, Cvetković DJ et al (2016) Antioxidant activity of oregano essential oil (Origanum vulgare
L.). Biol Nyssana 7(2):131–139
Stelwagen K, Wall EH, Bravo DM (2016) Effect of rumen-protected capsicum on milk production in early lactating cows
in a pasturebased system. J Anim Sci 94:675
Stoyanova A, Konakchiev A, Damyanova S et al (2006) Composition and antimicrobial activity of ginger essential oil
from Vietnam. J Essent Oil Bear Plants 84(4):93–98
Su YC, Ho CL, Wang EI et al (2006) Antifungal activities and chemical compositions of essential oils from leaves of
four eucalyptus. Taiwan J For Sci 21:49–61
Suppakul P, Miltz J, Sonneveld K et al (2003) Antimicrobial properties of basil and its possible application in food
packaging. J Agric Food Chem 51(11):3197–3207
Taheri JB, Azimi S, Rafieian N et al (2011) Herbs in dentistry. Int Dent J 61:287–296
Takayama C, de-Faria FM, de Almeida CA et al (2016) Chemical composition of Rosmarinus officinalis essential oil
and antioxidant action against gastric damage induced by absolute ethanol in the rat. Asian Pac J Trop Biomed
6(8):677–681
Tan LTH, Lee LH, Yin WF et al (2015) Traditional uses, phytochemistry, and bioactivities of Cananga odorata (Ylang
Ylang). Evid Based Complement Alternat Med 2015:896314
Tawfik SS, Abbady MI, Ahmed M et al (2006) Therapeutic efficacy attained with thyme essential oil supplementation
throughout γ-irradiated rats. Egypt J Rad Sci Appl 19(1):1–22
Tekippe JA, Tacoma R, Hristov AN et al (2013) Effect of essential oils on ruminal fermentation and lactation
performance of dairy cows. J Dairy Sci 96:7892–7903
Tian YH, Kim HC et al (2005) Hepatoprotective constituents of Cudrania tricuspidata. Arch Pharm Res 28:44–48
Tipton DA, Hamman NR, Dabbous MKH (2006) Effect of myrrh oil on IL-1beta stimulation of NF-kappaB activation and
PGE2 production in human gingival fibroblasts and epithelial cells. Toxicol In Vitro 20 (2):248–255
Tzakou O, Verykokidou E, Roussis V et al (1998) Chemical composition and antibacterial properties of Thymus
longicaulis subsp. Chaubardii oils: three chemotypes in the same population. J Essent Oil Res 10:97–99
Vera RR, Chane-Ming J (1998) Chemical composition of essential oil of dill (Anethum graveolens L.) growing in
Reunion island. J Essent Oil Res 10(5):539–542
Verma RS, Padalia RC, Chauhan A et al (2011) Volatile constituents of essential oil and rose water of damask rose
(Rosa damascena Mill.) cultivars from North Indian hills. Nat Prod Res 25(17):1577–1584
Viuda-Martos M, Ruíz-Navajas Y, Fernández-López J et al (2007a) Antifungal activities of thyme, clove and oregano
essential oils. J Food Saf 27:91–101
Viuda-Martos M, Ruíz-Navajas Y, Fernández-López J et al (2007b) Chemical composition of the essential oils obtained
from some spices widely used in Mediterranean region. Acta Chim Slov 54:921–926
Wall EH, Doane PH, Donkin SS et al (2014) The effects of supplementation with a blend of cinnamaldehyde and
eugenol on feed intake and milk production of dairy cows. J Dairy Sci 97:5709–5717
Wanner J, Bail S, Jirovetz L et al (2010) Chemical composition and antimicrobial activity of cumin oil (Cuminum
cyminum, Apiaceae). Nat Prod Commun 5(9):1355–1358
Wojdylo A, Figiel A, Oszmianski J (2008) Dehydration techniques effect on polyphenols content, antioxidant activity
and color of oregano herb. J Clin Biochem Nutr 43:1–4
Woolley CL, Suhail MM, Smith BL et al (2012) Chemical differentiation of Boswellia sacra and Boswellia carterii
essential oils by gas chromatography and chiral gas chromatography-mass spectrometry. J Chromatogr A 1261:158–163
Xu J-G, Liu T, Hu Q-P et al (2016) Chemical composition, antibacterial properties and mechanism of action of essential
oil from clove buds against Staphylococcus aureus. Molecules 21:1194
Yamini Y, Sefidkon F, Pourmortazavi SM (2002) Comparison of essential oil composition of Iranian fennel (Foeniculum
vulgare) obtained by supercritical carbon dioxide extraction and hydrodistillation methods. Flavour Fragr J 17(5):345–348
Yanishlieva NV, Marinova EM, Gordon MH et al (1999) Antioxidant activity and mechanism of action of thymol and
carvacrol in two lipid systems. Food Chem 64:59–66
Zaouali Y, Bouzaine T, Boussaid M (2010) Essential oils composition in two Rosmarinus officinalis L. varieties and
incidence for antimicrobial and antioxidant activities. Food Chem Toxicol 48:3144–3152

309
 Zhang WK, Tao SS, Li TT et al (2016) Nutmeg oil alleviates chronic inflammatory pain through inhibition of COX-2
expression and substance P release in vivo. Food Nutr 60:30849
Zhu N, Sheng S, Sang S et al (2003) Isolation and characterization of several aromatic sesquiterpenes from
Commiphora myrrha. Flavour Fragr J 18:282–285

310
 Ácidos graxos ômega
Szabina A. Stice

Resumo
Os nutracêuticos são compostos bioativos que podem ser usados para prevenir e tratar
doenças e promover a saúde. Eles incluem vitaminas, minerais e outros compostos
químicos bioativos, como ácidos graxos ômega. Este capítulo discute os benefícios
potenciais dos ácidos graxos ômega para os animais, incluindo seu uso no tratamento de
osteoartrite, atopia, doença inflamatória intestinal e outras condições inflamatórias,
doenças renais e cardiovasculares, distúrbios lipídicos e metabólicos e câncer. Além
disso, os efeitos dos ácidos graxos ômega no desenvolvimento neurológico,
comportamento e função cognitiva são resumidos junto com os níveis de dosagem
recomendados e potenciais efeitos adversos, como prejuízo da função imunológica,
disfunção plaquetária e glicose alterada e metabolismo lipídico.

Palavras-chave: Ácidos graxos ômega · Ácidos graxos ômega-3 · Ácidos graxos ômega-
6 · Ácidos graxos poliinsaturados

As opiniões expressas neste capítulo são opiniões pessoais do autor e não refletem
necessariamente as do FDA, DHHS ou do Governo Federal.

S. A. Stice (*) Rockville, MD, USA. e-mail: szabina.stice@fda.hhs.gov

1 – Introdução
Os nutracêuticos podem ter efeitos profundamente benéficos no bem-estar e na saúde de
animais e humanos, incluindo a prevenção e o tratamento de doenças. Eles também
podem ajudar a reduzir ou eliminar a necessidade de medicamentos convencionais e
podem conferir alguns efeitos benéficos que não estão disponíveis em produtos
farmacêuticos. Os nutracêuticos incluem vitaminas, minerais e outros compostos químicos
bioativos ou misturas de compostos, como óleo de peixe. Óleos de peixes e de vida
marinha, importantes fontes de ácidos graxos ômega-3, junto com ácidos graxos
poliinsaturados purificados, são exemplos de nutracêuticos amplamente disponíveis.

Os ácidos graxos ômega-3 têm efeitos benéficos em animais com osteoartrite, atopia,
doença inflamatória intestinal ou outras condições inflamatórias. Eles são importantes

311
para o desenvolvimento neurológico e retiniano e podem melhorar a pele e a pelagem.
Uma dieta com baixo teor de gordura combinada com a suplementação de ácido graxo
ômega-3 pode ser eficaz no controle da hipercolesterolemia e hipertrigliceridemia canina.
Em cães, a suplementação com óleo de peixe parece ajudar a preservar a função renal,
bem como prevenir arritmias, tratar contrações ventriculares prematuras, minimizar a
perda de músculo cardíaco na insuficiência cardíaca congestiva e exibir efeitos benéficos
nas doenças valvulares crônicas iniciais. Os ácidos graxos ômega-3 foram investigados
em humanos e animais para prevenção, suporte ou terapia do câncer, tanto como agentes
isolados ou, mais frequentemente, combinados com agentes quimioterápicos, para
potencializar seus efeitos. O tratamento com óleo de peixe reduz a caquexia (síndrome do
desperdício) e melhora a ingestão de alimentos em cães com anorexia.

Embora o uso de ácidos graxos poliinsaturados para o manejo e tratamento de várias

doenças em animais seja considerado seguro, não é totalmente isento de efeitos
adversos. Por exemplo, embora a suplementação com ácidos graxos ômega-3 pareça ser
protetor renal, a suplementação de longo prazo com ácidos graxos ômega-6 aumentou a
lesão renal em cães. Além disso, a administração simultânea do AINE carprofeno ou do
medicamento antiplaquetário clopidogrel e ácidos graxos ômega-3 pode ter um impacto
negativo na hemostasia.

2. Ácidos graxos ômega

Um ácido graxo é um ácido carboxílico com uma longa cadeia alifática que é saturada ou
insaturada. No caso dos ácidos graxos insaturados, a posição da dupla ligação na cadeia
alifática pode ser indicada de duas maneiras. Ao empregar a notação ω-n, a posição da
ligação dupla é contada a partir da extremidade metil (–CH3) do ácido graxo. Por
exemplo, no caso de um ácido graxo de 18 carbonos, uma ligação dupla entre C-15 e C-
16 contada a partir da extremidade do ácido carboxílico (-COOH) pode ser relatada como
ω-3 (ou ômega-3). A nomeação dos ácidos graxos insaturados (ou seja, se eles forem
ácidos graxos ω-3, ácidos graxos ω-6 ou ácidos graxos ω-9) é baseada na localização da
primeira ligação dupla determinada pela notação ω-n. Neste capítulo, o termo “ácidos
graxos ômega-3” refere-se a compostos que são ácidos graxos poliinsaturados contendo
uma ligação dupla na posição ω-3. A denominação de ácidos graxos insaturados da
União Internacional de Química Pura e Aplicada (IUPAC) começa na extremidade –COOH
(Fig. 1).

312
 Fig. 2 Numeração de átomos de carbono em ácidos graxos e nomenclatura de ácidos
graxos ômega

Os ácidos graxos são componentes estruturais importantes das células, precursores de

outros produtos químicos necessários para muitos processos fisiológicos e fornecem
combustível para os animais. Por exemplo, o ácido eicosapentaenóico (EPA) é um
precursor de muitos produtos químicos importantes no corpo, como prostaglandina-3,
tromboxano-3 e leucotrieno-5 eicosanóides; portanto, contribui para a agregação
plaquetária e a regulação das respostas imunológicas, combinado a outras funções. O
ácido docosahexaenóico (DHA) é um componente importante da retina, da pele e do
cérebro e pode reduzir os marcadores de inflamação. O ácido araquidônico (AA) está
presente nos fosfolipídios das membranas celulares e é abundante no fígado, cérebro e
músculos. Além disso, o AA está envolvido na sinalização celular e é um intermediário
inflamatório chave.

Os ácidos graxos essenciais (EFAs) são ácidos graxos que humanos e outros animais
não podem sintetizar. Portanto, eles devem obter EFAs da dieta para uma saúde ideal.
313
Dietas deficientes em EFAs podem causar deficiência de ácidos graxos essenciais
(EFAD), caracterizada por dermatite escamosa, alopecia, trombocitopenia, hiperlipidemia,
agregação plaquetária alterada e má cicatrização de feridas (Morley 2016; Mogensen
2017). O tratamento da deficiência de ácidos graxos requer a administração dietética de,
ou suplementação com, EFAs. Ácidos graxos importantes incluem, mas não estão
limitados a, os ácidos graxos ω-3 ácido α-linolênico (ALA), EPA e DHA e os ácidos graxos
ω-6 ácido linoleico (LA), ácido γ-linolênico (GLA), e AA. Em humanos, LA e ALA são EFAs,
enquanto DHA, EPA, GLA e AA podem ser sintetizados a partir de EFAs ou obtidos da
dieta. Alguns mamíferos têm uma capacidade limitada ou não têm a capacidade de
converter LA em AA e, para esses animais, AA é um ácido graxo essencial. Devido à taxa
ineficiente de conversão de ALA em EPA, as dietas contendo ALA como única fonte de
ácidos graxos ômega-3 podem não ser tão eficazes quanto aquelas contendo EPA e DHA.
Fontes naturais de ácidos graxos incluem sementes (ALA, LA, GLA); nozes (ALA, LA,
GLA); óleos vegetais (ALA, LA, GLA); peixes oleosos, óleo de peixe ou óleo de vida
marinha (EPA, DHA); algas (EPA, DHA); carne (AA); e ovos (AA).

3. Ácidos graxos ômega como nutracêuticos em medicina veterinária

3.1 Desenvolvimento do cérebro e retina

O DHA é um componente importante do cérebro e da retina e pode ser sintetizado a partir

da ALA ou obtido na dieta. Gatinhos e cachorros precisam de altas concentrações de DHA
durante a gestação e como recém-nascidos para apoiar o desenvolvimento saudável de
seu cérebro e retinas (Bauer 2006, 2007). Quantidades insuficientes de DHA materno
durante a gestação e lactação podem levar a um não desenvolvimento neurológico e
retiniano ótimo na prole; portanto, a ingestão materna adequada de ALA e DHA deve ser
garantida. Após o desmame, a suplementação dietética de DHA com óleo de peixe é
recomendada para melhorar o desenvolvimento geral da retina e do sistema nervoso em
cachorros e gatinhos. Isso é preferível a alimentá-los com alimentos que contenham ALA,
pois os cães neonatais parecem sintetizar preferencialmente DHA a partir de ALA apenas
por um curto período de tempo enquanto estão amamentando, e porque a conversão de
precursores pode ser insuficiente para atender às necessidades de DHA dos gatinhos.

3.2. Efeitos antiinflamatórios

3.2.1 – Modificação de respostas inflamatórias e imunológicas

Os ácidos graxos ômega-3 foram mostrados para modificar as respostas inflamatórias e

imunológicas. Uma dieta suplementada com óleo de peixe consistindo em 1,75 g de EPA/
314
kg e 2,2 g de DHA/kg de dieta (proporção ω-6:ω-3 de 3,4: 1) parece suprimir, não
promover, a proliferação de linfócitos em cães saudáveis (LeBlanc et al . 2007). A mesma
dieta foi associada a reduções significativas na prostaglandina E 2 sérica (PGE2, um
potente mediador inflamatório) e nas concentrações e atividades da interleucina-1 e
interleucina-6 (IL-1 e IL-6, reguladores das respostas imunes e inflamatórias) em cães
(LeBlanc et al. 2008).

O efeito dos ácidos graxos ômega-3 na dieta sobre a inflamação e a resposta imune
também foi avaliado em gatos (Park et al. 2011). Durante 12 semanas, os gatos foram
alimentados com dietas suplementadas com óleo de peixe (rico em EPA e DHA) ou óleo
de linhaça (rico em ALA) com proporções de ω-6:ω-3 de 20:1, 5:1 e 5:1, respectivamente.
A resposta inflamatória da pele à histamina diminuiu significativamente nos grupos de
peixe e óleo de linhaça. Nestes grupos, subpopulações B, T e Th totais diminuídas e
resposta proliferativa de leucócitos ao mitógeno daninho foram observadas. Os gatos
alimentados com óleo de peixe apresentaram leucotrieno LTB5 significativamente maior,
mas os gatos alimentados com óleo de linhaça não. Esses resultados indicam que,
embora os óleos de peixe e de linhaça possam reduzir as respostas inflamatórias da pele
do felino, o óleo de linhaça é menos imunossupressor do que o óleo de peixe.

Os efeitos da suplementação de ácido graxo ômega-3 nas respostas imunes selecionadas

também foram avaliados em cavalos normais por um teste cutâneo de hipersensibilidade
de tipo retardado para hemocianina de lapa (KLH) e medindo os títulos de anticorpos para
KLH junto com outras medições (Hall et al. 2004). A suplementação com óleo de peixe
inibiu o aumento induzido por lipopolissacarídeo (endotoxina) na produção de PGE 2 de
células do fluido de lavagem broncoalveolar (BALF). Os autores concluíram que o óleo de
peixe pode ter um papel benéfico no tratamento da obstrução recorrente das vias aéreas
ou outras doenças inflamatórias equinas, visto que o óleo de peixe não aumenta a
produção de PGE2. De fato, em cavalos com obstrução recorrente das vias aéreas ou
doença inflamatória das vias aéreas, a suplementação de ácido graxo ômega-3 foi
posteriormente demonstrada para melhorar os sinais clínicos, a função pulmonar e o
BALF (diminuição dos neutrófilos) em comparação ao placebo (Nogradi et al. 2015).

Os efeitos antiinflamatórios e imunossupressores dos ácidos graxos ômega-3 são

potencialmente benéficos para animais com doenças inflamatórias crônicas. Algumas
dessas doenças inflamatórias e os efeitos benéficos relatados dos tratamentos com
ácidos graxos ômega são discutidos abaixo.

3.2.2 – Uso Terapêutico na Doença Inflamatória Intestinal

315
A doença inflamatória intestinal (IBD) é comum em gatos (Trepanier 2009) e também foi
relatada em cães. A IBD é geralmente tratada primeiro modificando-se a dieta alimentar e,
se isso falhar, administrando terapias imunossupressoras. Infelizmente, esses tratamentos
nem sempre ajudam ou não ajudam o suficiente; portanto, os tratamentos adjuvantes são
frequentemente procurados. Uma dessas terapias adjuvantes potenciais é a
suplementação de ácidos graxos ômega-3, porque os ácidos graxos ômega-3 têm
propriedades antiinflamatórias. Eles demonstraram ser benéficos no tratamento da IBD
em humanos.

Em ratos, o óleo de fígado de bacalhau mostrou efeitos positivos no tratamento da colite

inflamatória; ou seja, a suplementação com óleo de fígado de bacalhau diminuiu
significativamente a gravidade das lesões inflamatórias do intestino e sua progressão para
a cronicidade (Guarner et al. 1992). Em um modelo de colite em camundongo, a
administração dietética de ácidos graxos ômega-3 reduziu a colite clínica e a
imunopatologia colônica por vários mecanismos (Whiting et al. 2005). Um segundo estudo
em camundongos mostrou que os ácidos graxos ômega-3 na dieta reduziram a gravidade
e a manifestação da colite, além de suprimir a produção do fator a de necrose tumoral
que parece desempenhar um papel central na patogênese da IBD crônica (Chapkin et al.
2007).

Em cães com diarreia responsiva a alimentos (FRD) ou IBD, os ácidos graxos ômega-3
diminuíram significativamente o índice de atividade IBD canino em ambos os grupos FRD
e IBD, demonstrando que os ácidos graxos ômega-3 podem ser benéficos para o
tratamento de enteropatias crônicas caninas (Ontsouka et al. 2012). Embora a supressão
marcada da atividade inflamatória intestinal tenha sido relatada em cães com FRD, os
cães com IBD necessitaram de uma combinação de ácidos graxos ômega-3 na dieta e
drogas imunossupressoras para reduzir os índices a níveis semelhantes aos dos cães no
grupo FRD recebendo ácidos graxos ômega-3. Infelizmente, faltam estudos de eficácia
em gatos; assim, a dosagem em gatos é empírica e extrapolada a partir das dosagens
usadas para tratar IBD em humanos. A titulação cuidadosa da dose é recomendada.

3.2.3 – Tratamento de Prurido e Dermatite Atópica

Prurido, ou coceira, é uma sensação na pele que provoca vontade de coçar. Dermatite
atópica (AD), um tipo de inflamação da pele, é caracterizada por coceira crônica, junto
com pele vermelha, inchada e rachada ou lesões na pele. A imunoterapia específica para
alérgenos, corticosteroides, anti-histamínicos e ciclosporina têm sido usados para
controlar ou reduzir o prurido. Esses tratamentos podem ter efeitos colaterais
indesejáveis, levar muito tempo para produzir melhora (imunoterapia) ou não são eficazes
316
em todos os pacientes. Alguns casos requerem uma combinação de medicamentos para
controlar adequadamente os sintomas. Portanto, existe a necessidade de uma alternativa
mais segura ou que possa reduzir o número e/ou a dosagem de medicamentos
administrados a um animal. Os efeitos da suplementação de óleo de peixe foram
examinados em vários estudos para determinar se a suplementação de ácidos graxos
ômega pode ser uma alternativa mais segura para o tratamento de prurido e dermatite
atópica ou para ajudar a reduzir as doses dos medicamentos usados.

Em um estudo simples cego e autocontrolado, cães atópicos foram alimentados com uma
dieta com uma proporção de ácidos graxos ω-6 a ω-3 de 5,5 para 1 (Scott et al. 1997). A
coceira foi controlada satisfatoriamente em 1-3 semanas em quase metade dos animais.
Depois que a suplementação de ácido graxo foi interrompida, a coceira voltou logo
depois, mas foi controlada novamente quando a dieta foi reinstaurada. Em um segundo
ensaio randomizado, simples cego, foram avaliados os efeitos de uma proporção de
ácidos graxos ω-6 a ω-3 na dieta semelhante (ou seja, 5: 1) na dermatite atópica perene
canina (Bensignor et al. 2008). A dieta de teste continha 1,6% ω-6 e 0,32% ω-3 de EFAs.
Enquanto a extensão da dermatite atópica canina e os escores do índice de gravidade e
os escores de prurido diminuíram significativamente com a dieta de teste, provando sua
eficácia, as reduções de escore foram inferiores a 50% e a maioria dos casos exigiu
terapia adjuvante para resolver completamente os sintomas.

Em um estudo duplo-cego, controlado com placebo e randomizado, cães com dermatite

atópica não sazonal foram suplementados com óleo de linhaça (contendo ALA e LA), um
suplemento comercial de ácido graxo (contendo EPA e DHA) ou óleo mineral como
placebo por 10 semanas (Mueller et al. 2004). A ingestão média global (suplementação
mais dieta) de ácidos graxos ômega-3 foi de 84, 327 e 141 mg / kg de peso corporal nos
grupos de placebo, óleo de linhaça e cápsula comercial, respectivamente. A ingestão
global média de ácidos graxos ômega-6 foi de 509, 468 e 426 mg / kg nos grupos de
placebo, óleo de linhaça e cápsula comercial, respectivamente. Em cada grupo de
tratamento, aproximadamente metade dos cães melhorou em mais de 50% e 10–20%
alcançaram remissão completa. Em um estudo duplo-cego e cruzado, cães com prurido
idiopático, atopia confirmada e/ou alergia a pulgas foram suplementados com 1 cápsula
de ácido graxo ômega-3 contendo 180 mg de EPA e 120 mg de DHA ou uma cápsula de
controle contendo 570 mg de LA e 50 mg GLA por 4,55 kg de peso corporal durante 6
semanas (Logas e Kunkle 1994). Isso foi seguido por um período de 3 semanas sem
suplementação. Após o período de descanso, os cães receberam o outro suplemento por
mais 6 semanas. Cães com suplementação de 180 mg de EPA e 120 mg de DHA de óleo

317
marinho exibiram melhorias significativas no prurido, alopecia e caráter da pelagem ao
longo do tempo, fornecendo evidências de que o óleo marinho em altas doses é um
tratamento antiinflamatório eficaz da doença alérgica cutânea canina e pode fornecer uma
alternativa segura aos glicocorticoides para alívio dos sintomas de curto prazo.

O efeito poupador de esteróides da suplementação de ácidos graxos ômega foi

demonstrado em estudos por Bond e Lloyd (1994) e Saevik et al. (2004). Bond e Lloyd
(1994) estudaram cães atópicos perenemente afetados, aos quais deram um suplemento
de ácido graxo concentrado contendo GLA e EPA por 12 semanas para examinar se isso
reduziria suas necessidades de prednisolona (esteróide). Setenta e três por cento dos
cães necessitaram de doses reduzidas de prednisolona para o controle satisfatório de sua
atopia. O efeito poupador de esteróides da suplementação de ácidos graxos essenciais
na dermatite atópica canina também foi indicado no ensaio clínico randomizado, duplo-
cego e controlado por placebo de 12 semanas por Saevik et al. (2004). Neste estudo, os
cães receberam uma combinação de óleo de semente de borragem e óleo de peixe, ou
um placebo, além de comprimidos de prednisolona. Os investigadores observaram um
intervalo de 64 dias antes de encontrar uma diferença estatisticamente significativa entre
os grupos de placebo e controle; no entanto, os resultados indicaram que o tratamento
teve um efeito poupador de esteróides. Infelizmente, com base nos resultados deste
estudo, eles não puderam sugerir uma dose ideal para um efeito poupador de esteróides
da suplementação de ácido graxo para o tratamento da dermatite atópica canina.

Uma revisão da literatura por Saevik et al. (2004) concluíram que diferentes estudos
mostraram diferentes períodos de tempo necessários para que o tratamento com ácidos
graxos apresentasse benefícios. Por exemplo, no estudo de Scott et al. (1997), os
resultados foram vistos logo após 1–3 semanas, enquanto nos estudos de Bond e Lloyd
(1994) e Saevik et al. (2004), o período foi muito mais longo; portanto, o período de tempo
necessário para atingir o benefício máximo ainda está sendo debatido.

O momento de início da suplementação de ácido graxo também pode ser importante para
obter benefícios ideais no tratamento de prurido e dermatite atópica. Em um estudo de
Abba et al. (2005), os efeitos da suplementação de ácidos graxos ômega foram avaliados
em cães atópicos não sazonais durante um ensaio de 2 meses. Enquanto os animais
foram divididos em dois grupos, cães com estágios iniciais de atopia e cães com atopia
crônica (imunoterapia não responsiva), todos os cães receberam 17 mg de EPA/kg, 5 mg
de DHA/kg e 35 mg de GLA/kg de suplementação que forneceu uma razão de ácidos
graxos ω-6 a ω-3 de 5,5 para 1 globalmente. Com base nos resultados, os estágios
iniciais da atopia parecem ser mais responsivos à suplementação de ácidos graxos do
318
que a atopia crônica; portanto, os autores do estudo recomendaram que a administração
de ácidos graxos ômega fosse iniciada no início do tratamento.

Além da administração enteral de ácidos graxos poliinsaturados, uma preparação tópica

de ácidos graxos poliinsaturados e óleos essenciais mostrou-se benéfica na redução dos
sinais clínicos da dermatite atópica canina. Em um ensaio clínico randomizado, duplo-
cego e controlado por placebo, os cães foram tratados uma vez por semana durante 8
semanas com placebo ou uma formulação local contendo 6 mg ALA/mL, 30 mg LA/mL,
óleo de nim, extrato de alecrim, óleo de lavanda, óleo de cravo, óleo da árvore do chá,
extrato de orégano, extrato de hortelã-pimenta, extrato de casca de cedro e vitamina E
(Blaskovic et al. 2014). Semanalmente, cães com peso inferior a 10 kg, entre 10–20 kg ou
entre 20–40 kg foram administrados com 0,6, 1,2 ou 2,4 mL, respectivamente. Embora
uma melhora significativa dos sintomas tenha sido relatada no grupo de tratamento em
comparação com o grupo de placebo, a maioria dos cães não atingiu a remissão
completa. De acordo com Blaskovic et al. (2014), a eficácia deste tratamento tópico com
ácidos graxos poliinsaturados e óleos essenciais parece ser comparável ao tratamento
oral com ácidos graxos poliinsaturados, mas nem o tratamento oral nem dérmico com
ácidos graxos poliinsaturados é tão eficaz quanto o tratamento com glicocorticoides ou
ciclosporina. No entanto, os ácidos graxos ômega são alternativas seguras para outras
terapias antiinflamatórias e podem ter efeitos poupadores de esteroides quando usados
como terapia adjuvante.

3.3 Tratamento da osteoartrite

A osteoartrite (OA) resulta da degeneração da cartilagem articular. Causa dor nas

articulações, inchaço, rigidez e restrição de movimentos da articulação. É uma causa
prevalente de claudicação em espécies equinas e também é comum em cães e gatos
mais velhos (Vandeweerd et al. 2012; Corbee et al. 2013). Em gatos, cães e cavalos, os
antiinflamatórios não esteróides (AINEs) são o tratamento básico para OA. Injeções de
corticosteroides, glicosaminoglicanos polissulfatados ou ácido hialurônico (um
glicosaminoglicano não sulfatado) também são empregados em cavalos e cães
(Vandeweerd et al. 2012). Vários nutracêuticos para o manejo de OA também estão
disponíveis.

Com base em uma revisão da literatura científica, Vandeweerd et al. (2012) concluíram
que os ácidos graxos ômega-3 aliviam significativamente os sinais clínicos da OA em
cães, ao contrário de outros nutracêuticos, cuja evidência de eficácia é pobre. Os cães
alimentados com dietas contendo um total de 0,8% (alimento terapêutico de linha de
base), 2,0% e 2,9% de EPA e DHA com base na matéria seca (DM) foram avaliados para
319
o alívio sintomático de OA (Fritsch et al. 2010a). Os animais na dieta contendo 2,9% de
EPA e DHA, mas não aqueles na dieta de 2,0%, apresentaram melhora significativa nos
sinais clínicos de claudicação e sustentação de peso, condição artrítica geral e
progressão de OA, em comparação com aqueles na dieta de base (0,8 %) no dia 90 do
estudo. Em um segundo estudo dietético, os cães foram alimentados com dietas contendo
aproximadamente 0,11% de ácidos graxos ômega-3 e 2,78% de ácidos graxos ômega-6
(ω-6 muito alto: ω-3, dieta de controle) ou 3,47% de ácidos graxos ômega-3 e 2,46% de
ácidos graxos ômega-6 (baixo ω-6: ω-3, alimento de teste) (Roush et al. 2010a). Os
proprietários de cães que receberam o alimento de teste relataram algumas melhorias nos
sinais clínicos de OA de seus cães, como a capacidade de andar após 12 e 24 semanas
com o alimento de teste. Para avaliar os efeitos do alimento suplementado com ácidos
graxos ômega-3 na sustentação de peso em cães com OA, os investigadores designaram
cães aleatoriamente para consumir alimentos comerciais típicos (controles) ou alimentos
de teste contendo 3,5% de ácidos graxos ômega-3 (Roush et al. 2010b). A suplementação
com ácidos graxos ômega-3 resultou em melhora significativa no suporte de peso e
claudicação. Quando os efeitos de dietas contendo 1,47% de ácidos graxos ômega-3 e
1,86% de ácidos graxos ômega-6 (proporção ω-6:ω-3 de 1:3) ou 0,18% de ômega-3 e
2,43% de ácidos graxos ômega-6 (proporção ω-6:ω-3 de 13:6) foram comparados em
cães com OA ao longo de um período de 13 semanas, cães com dieta rica em ácidos
graxos ômega-3 apresentaram melhora da capacidade locomotora e desempenho das
atividades de vida diária (Moreau et al. 2013). Além disso, os resultados de um estudo
controlado randomizado sugeriram que a suplementação dietética no nível de 3,5% com
ácidos graxos ômega-3 em cães com OA crônica recebendo carprofeno (um AINE) para
controlar a dor pode permitir a redução da dosagem de carprofeno (Fritsch et al . 2010b).
Em resumo, vários estudos demonstraram que os ácidos graxos ômega-3 podem aliviar
significativamente os sinais clínicos de OA em cães.

A eficácia dos ácidos graxos ômega-3 no manejo da OA também foi avaliada em gatos e
cavalos. Em um estudo clínico randomizado, controlado e cego, os gatos com doença
articular degenerativa alimentados com uma dieta rica em EPA e DHA e suplementada
com extrato de mexilhão de concha verde e sulfato de glucosamina/condroitina melhorou
significativamente em medidas objetivas de mobilidade ao longo de um período de 9
semanas (Lascelles et al. 2010). A dieta de teste continha 2,97 g de ácidos graxos ômega-
3 totais / 1000 Kcal e 8,03 g de ácidos graxos ômega-6 totais / 1000 Kcal. Os efeitos da
suplementação de ácido graxo ômega-3 na percepção dos proprietários do
comportamento e locomoção em gatos com OA foram investigados em um estudo
randomizado, duplo-cego e controlado por placebo (Corbee et al. 2013). Óleo de peixe
320
contendo 15 mg de ácido eicosatetraenóico (ETA)/mL, 500 mg de EPA/mL e 100 mg de
DHA/mL (suplemento de teste) ou óleo de milho contendo 0 mg de EPA e DHA/mL
(suplemento de controle) foram fornecidos aos gatos em um dosagem de 1 mL/5 kg de
peso corporal/dia durante um período de 10 semanas. Os gatos do suplemento de teste
apresentaram níveis de atividade mais elevados, andando mais, subindo e descendo
escadas, menos rigidez de marcha, mais interação com seus donos e pulos mais altos em
comparação com os gatos do suplemento de controle.

Cavalos artríticos que consumiram aproximadamente 89,2 g de ácidos graxos ômega-6 e

17,8 g de ácidos graxos ômega-3 (proporção ω-6:ω-3 de 5:1) por 90 dias experimentaram
uma maior diminuição na concentração de leucócitos no líquido sinovial e prostaglandina
E2 plasmática, bem como uma tendência de concentrações plasmáticas de fibrinogênio
normalizadas mais baixas em comparação com cavalos artríticos no grupo de controle,
consumindo aproximadamente 114 g de ácidos graxos ômega-6 e 10,2 g de ácidos
graxos ômega-3 (razão ω-6:ω-3 de 11:1) (Manhart et al. 2009). Embora mais estudos
sejam necessários, os resultados acima indicam que os ácidos graxos ômega-3 podem
ser benéficos no tratamento de OA felina e equina também.

3.4 Efeitos protetores renais

Para examinar a utilidade do EPA como um agente protetor renal, os efeitos da

suplementação de óleo de peixe foram investigados em um modelo isquêmico de
insuficiência renal aguda em cães (Neumayer et al. 1992). Os cães selecionados
aleatoriamente receberam cápsulas de veículo (controles) ou 55 mg de EPA e 40 mg de
DHA /kg/dia (grupo de óleo de peixe) ao longo do estudo. Após 3 semanas de dieta, o rim
direito de cada cão foi removido. Três semanas após a nefrectomia do lado direito, a
artéria renal do rim esquerdo foi ocluída por 2 horas para iniciar a isquemia. Ao contrário
dos animais de controle, nenhum efeito significativo na função renal ou no volume da
urina foi relatado em cães pré-tratados com óleo de peixe. Em cães uni néfricos, o pré-
tratamento com óleo de peixe pareceu proteger os animais da insuficiência renal
isquêmica.

A redução acentuada da massa renal em cães leva à perda progressiva da função renal e,
como tal, este modelo tem sido usado para estudar a lesão renal progressiva (Brown et al.
1998, 2000). As respostas de longo prazo de cães com massa renal reduzida à
manipulação dietética de ácidos graxos poliinsaturados foram estudadas para investigar o
curso crônico da doença renal induzida (Brown et al. 1998). Cães parcialmente
nefrectomizados foram aleatoriamente designados a três grupos de suplemento 2 meses
após a nefrectomia: ácidos graxos ômega-3 (óleo de peixe), ácidos graxos ômega-6 (óleo
321
de cártamo) e ácidos graxos saturados (sebo bovino). Ao longo de um período de 20
meses, a sobrevivência significativamente reduzida no grupo suplementado com óleo de
cártamo foi observada em comparação com o grupo com óleo de peixe. O grupo de óleo
de peixe também teve proteinúria significativamente menor, o que pode indicar danos aos
rins, do que nos grupos de óleo de cártamo e sebo bovino e maior depuração urinária
média de creatinina administrada exogenamente, uma medida para aproximar a taxa de
filtração glomerular e usada para avaliar a função excretora dos rins. A gravidade
histológica da lesão glomerular foi significativamente maior, e o infiltrado celular intersticial
renal foi mais grave nos grupos de óleo de cártamo e sebo bovino em comparação com o
grupo de óleo de peixe. A incidência de glomerulosclerose, o endurecimento dos
glomérulos responsáveis pela filtração, foi significativamente menor no grupo de óleo de
peixe em comparação com os grupos de óleo de cártamo e sebo bovino. A fibrose
tubulointersticial renal, uma deposição progressiva de tecido conjuntivo prejudicial no
parênquima renal, foi significativamente mais grave no grupo do óleo de cártamo do que
no grupo do óleo de peixe. Em resumo, enquanto a suplementação com ácidos graxos
ômega-3 foi sugerida como protetora, a suplementação de longo prazo com ácidos graxos
ômega-6 aumentou a lesão renal em cães.

Ao contrário dos estudos de Neumayer et al. (1992) e Brown et al. (1998), o estudo de
Brown et al. (2000) estudaram o mesmo modelo de doença renal e dietas, mas antes do
início da função renal diminuída (Brown et al. 2000). Ou seja, eles investigaram os efeitos
da suplementação de ácidos graxos ômega-3 e ômega-6 em cães com insuficiência renal
crônica precoce. Os cães parcialmente nefrectomizados foram aleatoriamente designados
a três grupos de suplemento 8 semanas após a nefrectomia: ácidos graxos ômega-3 (óleo
de peixe), ácidos graxos ômega-6 (óleo de cártamo) e ácidos graxos saturados (sebo
bovino) (Brown et al. 2000). Além disso, os animais foram suplementados com 5 UI de
vitamina E/kg/dia. As dietas suplementadas foram administradas por 10–13 semanas,
durante as quais a lesão renal foi mínima e não diferiu entre os grupos. A suplementação
de ácidos graxos ômega-6 resultou no agravamento da hipertensão glomerular e
hipertrofia. Redução significativa da concentração de colesterol sérico e manutenção
concomitante ou redução da proporção de colesterol HDL para colesterol total foi
observada com a suplementação de ácido graxo ômega-3.

Em conclusão, há muitas evidências que apóiam o uso de ácidos graxos ômega-3 para
retardar a progressão da doença renal crônica em cães. A suplementação de ácidos
graxos ômega-3 é recomendada em cães e gatos com doença renal crônica, além do
antagonismo renina-angiotensina, antagonismo dos canais de cálcio e terapia anti-

322
hipertensiva e antiproteinúrica (Brown 2008). A suplementação alimentar com
antioxidantes específicos, como a vitamina E, também é importante para ajudar a retardar
a progressão da doença renal crônica. Infelizmente, a quantidade ideal de ácido graxo
ômega-3 e a proporção de ácido graxo ω-3 para ω-6 para suplementação não foram
estabelecidas de forma conclusiva. No entanto, a inclusão dietética de ácidos graxos
ômega-3 de 0,4–2,5% DM tem sido recomendada para cães com doença renal crônica
(Forrester et al. 2010). Em uma revisão do uso terapêutico de óleos de peixe em animais
de companhia, Bauer (2011) recomenda que uma dieta com 0,4% de DM [equivalente a
uma dose de aproximadamente 130-140 mg de EPA e DHA/(kg) 0,75 ou ~ 790 mg EPA e
DHA para cães de 10 kg] podem ser úteis, e a dose mais alta recomendada por Forrester
et al. (2010) deve ser usadoacom cautela até que mais dados sejam obtidos.

3.5 Efeitos benéficos na hiperlipidemia

Os distúrbios lipídicos são comuns em cães (Johnson 2005). Hiperlipidemia refere-se a

níveis anormalmente elevados de qualquer um ou todos os lipídios ou lipoproteínas no
sangue. Eles podem ser classificados pelos tipos de lipídios que são elevados e como
familiares (primários) ou adquiridos (secundários). Várias dessas condições foram
reconhecidas em raças de cães específicas. Por exemplo, a hipercolesterolemia
(colesterol alto) tem sido associada a sarças, uma raça antiga de grandes cães de
pastoreio originária da França. Hipertrigliceridemia idiopática primária, o tipo mais comum
de hiperlipidemia primária em cães que vivem nos EUA, é reconhecida em Schnauzer
miniatura (Xenoulis e Steiner 2010).

Os distúrbios lipídicos secundários caninos podem ser causados por dietas com alto teor
de gordura, diabetes, hiperadrenocorticismo, hipotireoidismo, pancreatite aguda,
nefropatia com perda de proteína e colestase. Eles são muito mais comuns do que
distúrbios lipídicos primários. Níveis elevados de colesterol no plasma predispõem os
cães ao estreitamento das artérias devido ao acúmulo de placas. Além da aterosclerose,
as complicações da hiperlipidemia em cães podem incluir pancreatite, convulsões e
doenças hepáticas e oculares. Tratar estes distúrbios envolve corrigir ou gerenciar suas
causas.

Um estudo duplo-cego, randomizado e controlado por placebo que investigou o efeito de

uma dieta suplementada com óleo de peixe e doxorrubicina nos hemogramas e perfis
bioquímicos de cães com linfoma e hemangiossarcoma relatou que cães recebendo dieta
suplementada com ômega-3 tinham colesterol sérico significativamente mais baixo níveis
superiores aos dos cães alimentados com a dieta controle (Walton et al. 2000). Nos
estudos de Brown et al. (2000) e Neumayer et al. (1992), a suplementação com ácidos
323
graxos ômega-3 diminuiu a hipercolesterolemia na insuficiência renal canina e reduziu
significativamente os valores de colesterol e triglicerídeos na insuficiência renal isquêmica
canina, respectivamente.

A hipertrigliceridemia também foi relatada como eficazmente controlada com ingestão

reduzida de gordura dietética e suplementação com uma cápsula de óleo de peixe rica em
ácidos graxos ômega-3, 1 g / 4,55 kg/dia (Bauer 1995). Esta dose equivale a
aproximadamente 120 mg de EPA e DHA /kg 0,75 (Bauer 2011). Em um estudo, a
suplementação de óleo de peixe (1,75 g/kg de EPA dietético e 2,2 g/kg de DHA dietético
com uma proporção de ácidos graxos ω-6:ω-3 de 3,4:1) diminuiu com segurança os
triglicerídeos em cães, evidenciando ainda mais o óleo de peixe possível benefício da
suplementação no tratamento da hiperlipidemia canina (LeBlanc et al. 2005). Além de
drogas redutoras de lipídios, a suplementação com ácidos graxos ômega-3, óleo de peixe
ou óleo de vida marinha, em conjunto com uma dieta com baixo teor de gordura, é uma
estratégia viável de redução de lipídios em cães.

3.6 – Efeitos benéficos em doenças cardiovasculares

Os ácidos graxos ômega-3 demonstraram ser benéficos nas doenças cardiovasculares

humanas. A aterosclerose é comumente relatada em aves em cativeiro (Petzinger et al.
2010). Com base na revisão da literatura científica, Petzinger et al. (2010) concluíram que
a suplementação de ácidos graxos ômega-3 em aves em cativeiro pode reduzir a
prevalência de aterosclerose e ajudar a manter sua saúde. Além disso, estudos que
evidenciam os efeitos benéficos dos ácidos graxos ômega-3 nas doenças
cardiovasculares caninas foram revisados por Freeman (2010) e Bauer (2011). Os
resultados dessas revisões apóiam as propriedades antiarrítmicas dos ácidos graxos
ômega-3 e sua potencial utilidade no tratamento de contrações ventriculares prematuras
em cães. A suplementação de óleo de peixe com 780 mg de EPA e 497 mg de DHA /
animal / dia reduziu significativamente o número de contrações ventriculares prematuras
em cães boxer com cardiomiopatia ventricular direita arritmogênica (Smith et al. 2007).
Em um modelo de cão de morte súbita cardíaca, a administração intravenosa de 860 mg
de EPA, DHA ou ALA foi protetora contra arritmias ventriculares fatais, indicando que os
ácidos graxos ômega-3 purificados podem prevenir a fibrilação ventricular induzida por
isquemia (Billman et al. 1999) Os ácidos graxos ômega-3 também foram encontrados
para beneficiar cães com doenças valvulares crônicas iniciais e para reduzir
significativamente o tamanho do infarto do miocárdio em cães com isquemia miocárdica
com oclusão da perfusão. Em cães com insuficiência cardíaca crônica estável secundária
à cardiomiopatia dilatada idiopática, o tratamento com óleo de peixe (fornecendo
324
aproximadamente 27 mg de EPA / kg / dia e 18 mg de DHA / kg de peso corporal / dia)
reduziu a caquexia (síndrome de emaciação) e melhorou a ingestão de alimentos em
cães com anorexia (Freeman et al. 2006). As doses recomendadas de ácidos graxos
ômega-3 para cães com anorexia e caquexia são 40 mg de EPA / kg e 25 mg de DHA / kg
(Freeman e Rush 2006).

Dito isso, as doses ideais de ácidos graxos ômega para diferentes doenças cardíacas,
para diferentes estágios da mesma doença ou para diferentes espécies ainda não são
claramente conhecidas; portanto, mais pesquisas são necessárias. Até que mais
informações estejam disponíveis, Freeman (2010) recomenda 40 mg de EPA / kg e 25 mg
de DHA / kg com uma proporção de EPA e DHA de aproximadamente 1,5:5 para gatos e
cães com doença cardíaca. Essas quantidades podem ser adicionadas diretamente à
dieta ou administradas por via oral em cápsulas de óleo de peixe. O uso de óleo de
linhaça e de linhaça não é recomendado, pois o ácido graxo ômega-3 nesses produtos é
o ALA e a conversão de ALA em EPA e DHA é ineficiente em cães e quase inexistente em
gatos.

3.7 Papel Terapêutico Contra o Câncer

Estudos de cultura de células in vitro, estudos in vivo em roedores com vários tipos de
câncer, ensaios clínicos em humanos com câncer e ensaios clínicos em cães com câncer
indicaram que os ácidos graxos ômega-3 podem prevenir o desenvolvimento de tumores
induzidos por carcinogêneo, alterar o crescimento do tumor e metástase , e sensibilizar
células tumorais a drogas anticâncer (Hardman et al. 1997; Ogilvie et al. 2000;
Roudebush et al. 2004; Gleissman et al. 2010; Nabavi et al. 2015). Em um estudo duplo-
cego randomizado, 12 cães com doenças malignas da cavidade nasal receberam uma
dieta suplementada com óleo de peixe menhaden 36 e arginina (usado para melhorar a
cicatrização de feridas e respostas imunológicas, dieta experimental) ou uma dieta
idêntica suplementada com óleo de milho ao invés de óleo de peixe (dieta de controle)
(Anderson et al. 1997). Os animais receberam 4 semanas de radioterapia. As dietas foram
administradas 1 semana antes da terapia de radiação, durante a terapia e por, pelo
menos, 6 semanas após a terapia. Os ácidos graxos ômega-3 normalizaram os níveis
elevados de ácido láctico no sangue e diminuíram os mediadores inflamatórios. Além
disso, o exame histopatológico da pele e mucosa revelou que os cães com dieta
experimental apresentaram menos afinamento e ulceração.

Em um estudo duplo-cego, randomizado e controlado por placebo, cães com linfoma

receberam uma dieta suplementada com óleo de peixe e arginina ou uma dieta controle

36 Peixe marinho
325
suplementada com óleo de soja (Ogilvie et al. 2000). Essas dietas foram fornecidas antes
e depois que os cães atingiram a remissão, junto com até cinco doses de doxorrubicina
(um agente quimioterápico usado para tratar linfoma e outros tipos de câncer). Os cães
alimentados com óleo de peixe apresentaram níveis séricos médios significativamente
mais elevados de DHA e EPA em comparação com os controles, o que por sua vez
ajudou a normalizar o ácido láctico no sangue de uma maneira dependente da dose. Para
cães com linfoma de estágio III que foram alimentados com óleo de peixe, níveis séricos
mais elevados de DHA foram significativamente associados com maior intervalo livre de
doença e tempo de sobrevivência. Como a dieta era suplementada com arginina e ácidos
graxos ômega-3, não foi possível distinguir os efeitos de cada um.

As principais vias responsáveis pelos efeitos benéficos dos ácidos graxos ômega-3 na
terapia do câncer são (a) alteração da transdução de sinal associada à membrana, (b)
aumento da peroxidação lipídica que resulta em dano celular irreversível, aumentando a
sensibilidade a drogas anticâncer e induzindo apoptose, e (c) modular a expressão gênica
em várias vias de sinalização (Nabavi et al. 2015). Para uma revisão mais completa sobre
os efeitos antineoplásicos dos ácidos graxos ômega-3 e seus modos potenciais de ação
em animais e humanos, consulte Nabavi et al. (2015), Gleissman et al. (2010), Calviello et
al. (2009) e Roudebush et al. (2004). As descobertas dessas revisões indicam que os
ácidos graxos ômega-3 claramente têm um papel terapêutico contra certos tipos de
câncer e podem melhorar a tolerabilidade e eficácia da quimioterapia e da radioterapia.
Gatos com câncer, entretanto, devem receber níveis mais baixos de ácidos graxos
ômega-3 ou óleo de peixe do que os recomendados para cães, já que alguns estudos
com gatos indicaram um potencial para problemas de sangramento (Roudebush et al.
2004).

3.8 Tratamento comportamental

Estudos clínicos em humanos sugerem que a suplementação com ácidos graxos ômega-3
pode reduzir comportamentos agressivos, impulsivos e depressivos (Hibbeln et al. 2006).
Filhotes de ratos machos submetidos a uma dieta deficiente em ácidos graxos ômega-3
por 15 semanas exibiram depressão e agressão significativamente aumentadas em
comparação com filhotes em uma dieta adequada de ácidos graxos ômega-3 (DeMar et
al. 2006). Embora a suplementação com ácidos graxos ômega-3 pareça reduzir o
comportamento agressivo e a depressão, a prole de camundongos expostos a altos níveis
de ácidos graxos ômega-6 durante a gestação por meio da dieta materna (2,3 g LA / dia)
foi mais agressiva do que a prole de ratos com dieta controle (0,8 g LA / dia), indicando

326
que a exposição in útero a uma dieta rica em ácidos graxos ômega-6 aumenta a
agressividade (Raygada et al. 1998).

A agressão é um problema comum em cães. Como a suplementação de ácido graxo

ômega-3 levou à redução da agressão em humanos e roedores, Re et al. (2008)
estudaram a relação entre o nível plasmático de ácidos graxos ômega-3 e o
comportamento agressivo em cães. Cães agressivos apresentaram níveis plasmáticos de
DHA mais baixos e maior proporção de ω-6 a ω-3 em comparação com cães normais,
sugerindo que níveis baixos de ácidos graxos ômega-3 podem afetar negativamente o
comportamento. Se a suplementação de ômega-3 é útil na redução do comportamento
agressivo em cães, é necessário mais investigação.

3.9 Uso potencial para a prevenção do trabalho de parto prematuro

Em humanos, os ácidos graxos ômega-3 marinhos reduzem a taxa de nascimentos

prematuros e aumentam o peso ao nascer quando administrados durante a gravidez
(Salvig e Lamont 2011). Em ratos, a idade gestacional média ao nascer foi positivamente
relacionada a uma alta ingestão alimentar materna de ácidos graxos ômega-3 (Olsen et
al. 1990). Em ovelhas, quando o trabalho de parto prematuro foi induzido por
betametasona, a administração intravenosa de ácidos graxos ômega-3 atrasou o início do
trabalho de parto e o momento do parto (Baguma-Nibasheka et al. 1999). Em dois dos
seis animais do grupo de tratamento, o trabalho de parto foi interrompido. Essas
observações indicam que os ácidos graxos ômega-3 podem ser benéficos para a
prevenção do trabalho de parto prematuro em animais, mas mais investigações são
necessárias antes que se tornem amplamente usados para esse fim.

4. Potenciais efeitos adversos de ácidos graxos ômega em cães e gatos

Com base na revisão da literatura científica, Nabavi et al. (2015) concluíram que altas
doses de ácidos graxos ômega-3 podem estar associadas ao comprometimento da
função imunológica, disfunção plaquetária e alteração do metabolismo de glicose e
lipídios. De acordo com a revisão de Freeman (2010), a maioria dos estudos não
identificou as alterações hemostáticas relatadas devido aos efeitos antiagregantes nas
plaquetas, deficiência de vitamina E, peroxidação lipídica e diarreia leve como sendo de
relevância clínica. A transição lenta do animal para uma dieta rica em ácidos graxos
ômega, diminuindo a dosagem de ácidos graxos ômega e outras modificações dietéticas
podem ajudar no controle da diarreia. Para evitar ou diminuir a peroxidação lipídica e
prevenir a deficiência de vitamina E, as dietas enriquecidas com ácidos graxos ômega
327
podem ser suplementadas com vitamina E, ou a vitamina E pode ser adicionada aos
suplementos de ácidos graxos ômega (Lenox e Bauer 2013). Além dos potenciais efeitos
adversos diretos mencionados acima dos ácidos graxos ômega, há um potencial para
interações ácido graxo ômega/drogas. A administração simultânea do AINE carprofeno ou
do medicamento antiplaquetário clopidogrel e ácidos graxos ômega-3 pode ter um
impacto negativo na hemostasia (Lenox e Bauer 2013). Consequentemente, é importante
considerar o animal individual antes de iniciar o tratamento com ácido graxo ômega-3. Por
exemplo, animais com baixa contagem de plaquetas podem não ser candidatos à
suplementação de ácido graxo ômega-3. Todos os animais suplementados com altas
doses de ácidos graxos ômega-3 devem ser monitorados regularmente para possíveis
efeitos adversos.

5. Observações finais e direções futuras

Os nutracêuticos, quando usados corretamente como suplementos, oferecem benefícios à
saúde e desempenham um papel no manejo seguro de inúmeras doenças humanas e
veterinárias. As evidências sobre os efeitos benéficos dos ácidos graxos ômega em
doenças humanas e veterinárias têm se acumulado. No entanto, mais pesquisas são
necessárias para estabelecer com firmeza a quantidade e o tipo de ácidos graxos ômega,
bem como a proporção de ácidos graxos ω-6: ω-3 necessária para o tratamento de várias
doenças em diferentes espécies. Assim que esses estudos estiverem disponíveis, podem
ser implementados refinamentos nas recomendações atuais ou o estabelecimento de
doses recomendadas para aplicações clínicas veterinárias.

Referências
Abba C, Mussa PP, Vercelli A et al (2005) Essential fatty acids supplementation in different-stage atopic dogs fed on a
controlled diet.
J Anim Physiol Anim Nutr 89(3–6):203–207
Anderson CR, Ogilvie GK, Fettman MJ et al (1997) Effect of fish oil and arginine on acute effects of radiation injury in
dogs with nasal tumors: a double blind randomized study. Proc Vet Cancer Soc Am Coll Vet Radiol, Chicago:33–34
Baguma-Nibasheka MJ, Brenna T, Nathanielsz PW (1999) Delay of preterm delivery in sheep by omega-3 long-chain
polyunsaturates. Biol Reprod 60(3):698–701
Bauer JE (1995) Evaluation and dietary considerations in idiopathic hyperlipidemia in dogs. J Am Vet Med Assoc
206(11):1684–1688
Bauer JE (2006) Metabolic basis for the essential nature of fatty acids and the unique dietary fatty acid requirements of
cats. J Am Vet Med Assoc 229(11):1729–1732
Bauer JE (2007) Responses of dogs to dietary omega-3 fatty acids. J Am Vet Med Assoc 231(11):1657–1661
Bauer JE (2011) Therapeutic use of fish oils in companion animals. J Am Vet Med Assoc 239(11):1441–1451
Bensignor E, Morgan DM, Nuttall T (2008) Efficacy of an essential fatty acid-enriched diet in managing canine atopic
dermatitis: a randomized, single-blinded, cross-over study. Vet Dermatol 19(3):156–162
Billman GE, Kang JX, Leaf A (1999) Prevention of sudden cardiac death by dietary pure ω-3 polyunsaturated fatty
acids in dogs. Circulation 99(18):2452–2457
Blaskovic M, Rosenkrantz W, Neuber A et al (2014) The effect of a spot-on formulation containing polyunsaturated fatty
acids and essential oils on dogs with atopic dermatitis. Vet J 199(1):39–43

328
 Bond R, Lloyd DH (1994) Combined treatment with concentrated essential fatty acids and prednisolone in the
management of canine atopy. Vet Rec 134(2):30–32
Brown SA (2008) Oxidative stress and chronic kidney disease. Vet Clin Small Anim Pract 38(1):157–166
Brown SA, Brown CA, Crowell WA et al (1998) Beneficial effects of chronic administration of dietary ω-3
polyunsaturated fatty acids in dogs with renal insufficiency. J Lab Clin Med 131(5):447–455
Brown SA, Brown CA, Crowell WA et al (2000) Effects of dietary polyunsaturated fatty acid supplementation in early
renal insufficiency in dogs. J Lab Clin Med 135(3):275–286
Calviello G, Serini S, Piccioni E et al (2009) Antineoplastic effects of n-3 polyunsaturated fatty acids in combination
with drugs and radiotherapy: preventive and therapeutic strategies. Nutr Cancer 61 (3):287–301
Chapkin RS, Davidson LA, Ly L et al (2007) Immunomodulatory effects of (n-3) fatty acids: putative link to inflammation
and colon cancer. J Nutr 137(1):200S–204S
Corbee RJ, Barnier MMC, Van De Lest CHA et al (2013) The effect of dietary long-chain omega-3 fatty acid
supplementation on owner’s perception of behaviour and locomotion in cats with naturally occurring osteoarthritis. J Anim
Physiol Anim Nutr 97(5):846–853
DeMar JC, Ma K, Bell JM et al (2006) One generation of n-3 polyunsaturated fatty acid deprivation increases
depression and aggression test scores in rats. J Lipid Res 47(1):172–180
Forrester SD, Adams LG, Allen TA (2010) Chronic kidney disease. In: Small animal clinical nutrition, 5th edn. Mark
Morris Institute, Topeka, KS, pp 765–810
Freeman LM (2010) Beneficial effects of omega-3 fatty acids in cardiovascular disease. J Small Anim Pract 51(9):462–
470
Freeman LM, Rush JE (2006) Cardiovascular diseases: nutritional modulation. In: Encyclopedia of canine clinical
nutrition. Aniwa SAS-Royal Canin, Aimargues, pp 316–341
Freeman LM, Rush JE, Markwell PJ (2006) Effects of dietary modification in dogs with early chronic valvular disease. J
Vet Intern Med 20 (5):1116–1126
Fritsch D, Allen TA, Dodd CE et al (2010a) Dose-titration effects of fish oil in osteoarthritic dogs. J Vet Intern Med
24(5):1020–1026
Fritsch DA, Allen TA, Dodd CE et al (2010b) A multicenter study of the effect of dietary supplementation with fish oil
omega-3 fatty acids on carprofen dosage in dogs with osteoarthritis. J Am Vet Med Assoc 236(5):535–539
Gleissman H, Johnsen JI, Kogner P (2010) Omega-3 fatty acids in cancer, the protectors of good and the killers of
evil? Exp Cell Res 316(8):1365–1373
Guarner F, Vilaseca J, Malagelada JR (1992) Dietary manipulation in experimental inflammatory bowel disease.
Agents Actions 36(1): C10–C14
Hall JA, Saun RJ, Tornquist SJ et al (2004) Effect of type of dietary polyunsaturated fatty acid supplement (corn oil or
fish oil) on immune responses in healthy horses. J Vet Intern Med 18 (6):880–886
Hardman WE, Barnes CJ, Knight CW et al (1997) Effects of iron supplementation and ET-18-OCH3 on MDA-MB 231
breast carcinomas in nude mice consuming a fish oil diet. Br J Cancer 76 (3):347
Hibbeln JR, Ferguson TA, Blasbalg TL (2006) Omega-3 fatty acid deficiencies in neurodevelopment, aggression and
autonomic dysregulation: opportunities for intervention. Int Rev Psychiatry 18 (2):107–118
Johnson MC (2005) Hyperlipidemia disorders in dogs. Compendium 27:361–370
Lascelles BDX, DePuy V, Thomson A, Hansen B, Marcellin‐Little DJ, Biourge V, Bauer JE (2010) Evaluation of aLittle DJ, Biourge V, Bauer JE (2010) Evaluation of a
therapeutic diet for feline degenerative joint disease. J Vet Intern Med 24(3): 487–495
LeBlanc CJ, Bauer JE, Hosgood G, Mauldin GE (2005) Effect of dietary fish oil and vitamin E supplementation on
hematologic and serum biochemical analytes and oxidative status in young dogs. Vet Ther 6(4):325
LeBlanc CJ, Dietrich MA, Horohov DW et al (2007) Effects of dietary fish oil and vitamin E supplementation on canine
lymphocyte proliferation evaluated using a flow cytometric technique. Vet Immunol Immunopathol 119(3–4):180–188
LeBlanc CJ, Horohov DW, Bauer JE et al (2008) Effects of dietary supplementation with fish oil on in vivo production of
inflammatory mediators in clinically normal dogs. Am J Vet Res 69(4):486–493
Lenox CE, Bauer JE (2013) Potential adverse effects of omega-3 fatty acids in dogs and cats. J Vet Intern Med
27(2):217–226
Logas D, Kunkle GA (1994) Double-blinded crossover study with marine oil supplementation containing high-dose
icosapentaenoic acid for the treatment of canine pruritic skin disease. Vet Dermatol 5(3):99–104
Manhart DR, Scott BD, Gibbs PG et al (2009) Markers of inflammation in arthritic horses fed omega-3 fatty acids. Prof
Anim Sci 25 (2):155–160
Mogensen KM (2017) Essential fatty acid deficiency. Pract Gastroenterol:37
Moreau M, Troncy E, Del Castillo JRE et al (2013) Effects of feeding a high omega-3 fatty acids diet in dogs with
naturally occurring osteoarthritis. J Anim Physiol Anim Nutr 97(5):830–837
Morley JE (2016, October) Essential fatty acid deficiency. https://www.merckmanuals.com/professional/nutritional-
disorders/undernutrition/essential-fatty-acid-deficiency. Accessed 8 June 2018
Mueller RS, Fieseler KV, Fettman MJ, Zabel S, Rosychuk RAW, Ogilvie GK, Greenwalt TL (2004) Effect of omega ‐Little DJ, Biourge V, Bauer JE (2010) Evaluation of a3
fatty acids on canine atopic dermatitis. J Small Anim Pract 45(6):293–297
Nabavi SF, Bilotto S, Russo GL, Orhan IE, Habtemariam S, Daglia M, Devi KP, Loizzo MR, Tundis R, Nabavi SM
(2015) Omega-3 polyunsaturated fatty acids and cancer: lessons learned from clinical trials. Cancer Metastasis Rev
34(3):359–380
329
 Neumayer HH, Heinrich M, Schmissas M et al (1992) Amelioration of ischemic acute renal failure by dietary fish oil
administration in conscious dogs. J Am Soc Nephrol 3(6):1312–1320
Nogradi N, Couetil LL, Messick J et al (2015) Omega-3 fatty acid supplementation provides an additional benefit to a
low-dust diet in the management of horses with chronic lower airway inflammatory disease. J Vet Intern Med 29(1):299–
306
Ogilvie GK, Fettman MJ, Mallinckrodt CH et al (2000) Effect of fish oil, arginine, and doxorubicin chemotherapy on
remission and survival time for dogs with lymphoma. Cancer 88(8):1916–1928
Olsen SF, Hansen HS, Jensen B (1990) Fish oil versus Arachis oil food supplementation in relation to pregnancy
duration in rats. Prostaglandins Leukot Essent Fatty Acids 40(4):255–260
Ontsouka EC, Burgener IA, Luckschander-Zeller N et al (2012) Fishmeal diet enriched with omega-3 PUFA and
treatment of canine chronic enteropathies. Eur J Lipid Sci Technol 114(4):412–422
Park HJ, Park JS, Hayek MG, Reinhart GA, Chew BP (2011) Dietary fish oil and flaxseed oil suppress inflammation
and immunity in cats. Vet Immunol Immunopathol 141(3–4):301–306
Petzinger C et al (2010) Dietary modification of omega-3 fatty acids for birds with atherosclerosis. J Am Vet Med Assoc
236(5): 523–528
Raygada M, Cho E, Hilakivi-Clarke L (1998) High maternal intake of polyunsaturated fatty acids during pregnancy in
mice alters offsprings’ aggressive behavior, immobility in the swim test, locomotor activity and brain protein kinase C
activity. J Nutr 128 (12):2505–2511
Re S, Zanoletti M, Emanuele E (2008) Aggressive dogs are characterized by low omega-3 polyunsaturated fatty acid
status. Vet Res Commun 32(3):225–230
Roudebush P, Davenport DJ, Novotny BJ (2004) The use of nutraceuticals in cancer therapy. Vet Clin Small Anim
Pract 34 (1):249–269
Roush JK, Dodd CE, Fritsch DA et al (2010a) Multicenter veterinary practice assessment of the effects of omega-3
fatty acids on osteoarthritis in dogs. J Am Vet Med Assoc 236(1):59–66
Roush JK, Cross AR, Renberg WC et al (2010b) Evaluation of the effects of dietary supplementation with fish oil
omega-3 fatty acids on weight bearing in dogs with osteoarthritis. J Am Vet Med Assoc 236(1):67–73
Saevik BK, Bergvall K, Holm BR et al (2004) A randomized, controlled study to evaluate the steroid sparing effect of
essential fatty acid supplementation in the treatment of canine atopic dermatitis. Vet Dermatol 15(3):137–145
Salvig JD, Lamont RF (2011) Evidence regarding an effect of marine n-3 fatty acids on preterm birth: a systematic
review and metaanalysis. Acta Obstet Gynecol Scand 90(8):825–838
Scott DW, MillerWHJr, Reinhart GA et al (1997) Effect of an omega-3/omega-6 fatty acid-containing commercial lamb
and rice diet on pruritus in atopic dogs: results of a single-blinded study. Can J Vet Res 61(2):145
Smith CE, Freeman LM, Rush JE et al (2007) Omega-3 fatty acids in Boxer dogs with arrhythmogenic right ventricular
cardiomyopathy. J Vet Intern Med 21(2):265–273
Trepanier L (2009) Idiopathic inflammatory bowel disease in cats: Rational treatment selection. J Feline Med Surg
11(1):32–38
Vandeweerd JM, Coisnon C, Clegg P et al (2012) Systematic review of efficacy of nutraceuticals to alleviate clinical
signs of osteoarthritis. J Vet Intern Med 26(3):448–456
Walton JA, Ogilvie GK, Fettman MJ et al (2000) Effect of fish oil supplemented diet and doxorubicin on hemograms
and biochemical profiles from dogs with lymphoma and hemangiosarcoma: a double blind, randomized, placebo
controlled study. Proc Vet Cancer Soc Conf:101
Whiting CV, Bland PW, Tarlton JF (2005) Dietary n-3 polyunsaturated fatty acids reduce disease and colonic
proinflammatory cytokines in a mouse model of colitis. Inflamm Bowel Dis 11(4): 340–349
Xenoulis PG, Steiner JM (2010) Lipid metabolism and hyperlipidemia in dogs. Vet J 183(1):12–21

330
 Polifenóis e flavonóides
Satish Kumar Garg, Amit Shukla, and Soumen Choudhury

Resumo
A maioria das plantas utilizadas no sistema de medicina tradicional são ricas em polifenóis
e flavonóides que não só regulam o crescimento das plantas, mas também são fonte rica
em fitoquímicos empregados na saúde humana e animal. Polifenóis e flavonóides têm
sido defendidos como nutracêuticos na medicina humana para tratar certas doenças do
estilo de vida moderno, incluindo câncer. Esses fitoquímicos parecem possuir grande
potencial para uso na saúde animal e sistema de produção e para substituir certos
produtos químicos sintéticos que são deletérios por seus efeitos residuais na saúde
humana e animal. Alguns dos polifenóis e flavonóides comuns que possuem atividades
farmacológicas desejáveis e o potencial para uso em setores de gado e aves são
caempferol, quercetina, genisteína, rutina, catequina, etc. Da mesma forma, algumas das
plantas ricas em polifenóis e flavonóides podem ser usadas como forragens verdes e
como suplementos alimentares para formular certos alimentos funcionais para aumentar a
produtividade de animais e aves.

Palavras-chave: Polifenóis · Flavonóides · Antocianina · Flavanonas · Isoflavonas ·

Flavonóis · Nutracêuticos · Saúde humana · Produção animal

S. K. Garg · A. Shukla · S. Choudhury – Department of Pharmacology and Toxicology, College of Veterinary

Science and Animal Husbandry, U.P. Pandit Deen Dayal Upadhyaya Veterinary University (DUVASU),
Mathura, Uttar Pradesh, India

1. Introdução
O uso de plantas e vegetais no tratamento de doenças humanas e animais tem sido
defendido desde tempos imemoriais. A famosa citação de Hipócrates “Deixe que o
alimento seja o seu remédio e o remédio seja o seu alimento”, expressa há quase 2.000
anos, também acrescenta crédito ao fato de que antes do advento das drogas alopáticas,
as plantas eram as principais fontes de drogas nos sistemas tradicionais de medicina e
usadas por curandeiros tradicionais em medicina humana e veterinária em todo o mundo,
incluindo a Índia. A literatura antiga de terapêutica em Ayurveda também descreveu o
papel das plantas no tratamento de doenças. Avanços na ciência e compreensão das
atividades farmacológicas, mecanismo (s) de ação em níveis celulares e moleculares,
potencial de toxicidade e possíveis usos terapêuticos dos princípios ativos de plantas e
331
seus metabólitos secundários abriram as perspectivas para a descoberta e síntese de
vários semissintéticos e drogas sintéticas com sua origem em plantas, por ex. aspirina,
quinina, atropina, glicosídeos cardíacos, reserpina, morfina, senna, etc. Portanto, vários
medicamentos modernos têm suas raízes na literatura médica antiga.

A compreensão da saúde humana e das doenças está se tornando cada vez mais
complexa com os avanços da ciência, especialmente em nível molecular, devido às
complexas interações entre diferentes fatores, incluindo poluentes ambientais, hábitos
alimentares e estilo de vida. Durante as últimas duas décadas, a incidência de várias
doenças como hipertensão, diabetes, obesidade, insuficiência renal e até vários tipos de
câncer aumentou várias vezes, e estes estão se tornando cada vez mais desafiadores
tanto em países desenvolvidos quanto em desenvolvimento. O estilo de vida e os hábitos
alimentares foram identificados como os fatores precipitantes para doenças que não eram
muito comuns há algumas décadas. O setor nutracêutico teve um crescimento sem
precedentes durante a última década e agora são considerados complementares e
suplementares à medicina humana moderna, pois se espera que desempenhem um papel
importante na gestão holística da saúde em humanos. No entanto, sua importância na
medicina veterinária no manejo da saúde e no aumento da produtividade animal não pode
ser prejudicada.

O termo “nutracêutico” foi cunhado a partir da combinação “nutrição” e “farmacêutica” por

Stephen DeFelice, fundador e presidente da Fundação para a Inovação em Medicina
(FIM), Cranford, New Jersey em 1989 (Maddi et al. 2007). Segundo De Felice, os
nutracêuticos podem ser definidos como “um alimento (ou parte de um alimento) que
proporciona benefícios médicos ou de saúde, incluindo prevenção e/ou tratamento de
uma doença”. Por outro lado, a Health Canada definiu nutracêutico como “um produto
preparado a partir de alimentos, mas vendido na forma de pílulas, ou pó (poções) ou em
outras formas medicinais, geralmente não associadas a alimentos” (Wildman 2001; Bull
2000). De acordo com o relatório da Business Communications Company Research
(2007), o mercado mundial de nutracêuticos cresceu para US$ 74,7 bilhões, de US$ 46,7
bilhões em 2002. Os EUA, o Reino Unido e o Japão estão entre os países líderes no
mercado de nutracêuticos. Os nutracêuticos fornecem suplementos funcionais e dietéticos
e conferem efeitos medicinais aos indivíduos. Portanto, os alimentos funcionais e
dietéticos têm se mostrado a chave para a saúde humana no estilo de vida moderno.

332
2. Fitoquímicos (PCs)
As plantas sendo muito ricas em vários princípios ativos e constituindo as “frações
farmacóforas37” ativas possuem diversas atividades farmacológicas e potencial
terapêutico. Alcalóides, glicosídeos, taninos, saponinas, gomas e resinas, etc. são os
princípios ativos comuns presentes nas plantas (Fig. 1 e 2). Tem havido um enorme
aumento nos estudos relativos à descoberta de metabólitos secundários em plantas e
suas atividades farmacológicas. Porções químicas presentes nas plantas foram
consideradas de forma otimista por suas propriedades adaptogênicas não apenas para a
planta em si, mas também para melhorar a saúde humana e animal (Valdes et al. 2015).

Fig. 1 Imagens da flora contendo

polifenóis e flavonóides. (a) Fruta de
groselha preta. (b) Noz-pecã. (c) Flor
de cravo. (d) Cacau. (e) Folhas de chá.
(f) Uvas. (Fonte: página da web do
Google)

Fig. 2 Imagens da flora rica em polifenóis e

flavonóides para uso animal. (a) Espinheiro-mar. (b)
Folhas de Azadirachta. (c) Folhas de Moringa oleifera
(Fonte: página da web do Google)

A pesquisa básica e aplicada em química e ciências biológicas revelou o papel de

diferentes metabólitos primários nas funções fisiológicas básicas em plantas, como
respiração, crescimento e desenvolvimento, armazenamento e reprodução (Montero
2016). A descoberta de drogas baseadas em metabólitos vegetais começou com o
37 Em termos de química farmacêutica, é a região da molécula de um ligante que está intimamente ligada ao seu receptor.
333
isolamento da morfina do ópio por Friedrich Wilhelm Sertürner em 1800. Kossel (1891) foi
creditado por definir os metabólitos secundários das plantas em comparação com os
primários pela primeira vez, e Czapek (1925) foi a segunda pessoa que descreveu o novo
papel dos fitoquímicos e cunhou o termo “produtos finais” para esses compostos.

Os fitoquímicos são uma categoria difusa de metabólitos secundários diversos de plantas

e biologicamente ativos, tendo diversas atividades farmacológicas, e formam uma parte
essencial da alimentação e forragem para animais e da dieta de seres humanos. Os
fitoquímicos têm as vantagens de acessibilidade, especificidade de respostas e toxicidade
comparativamente mais baixa. Mas as principais desvantagens são a baixa
biodisponibilidade e a rápida eliminação devido à rápida biotransformação e excreção.
Alimentos e rações para humanos e animais, respectivamente, contêm misturas
complexas de PCs junto com vários fatores antinutricionais que podem afetar as
concentrações desses PCs no corpo.

2.1 Polifenóis

Os polifenóis são metabólitos vegetais secundários que estão presentes em vegetais,

frutas, grãos de café, folhas de chá, chocolates, cereais, legumes, bebidas, etc. Mais de
8.000 polifenóis foram identificados em diferentes plantas e atuam principalmente como
antioxidantes. Os compostos fenólicos também são constituintes importantes e afetam a
qualidade das frutas, incluindo sabor, cor e propriedades nutricionais. Em média, cerca de
300 mg de polifenol estão presentes em 100 mg de frutas frescas como uva, maçã, pêra,
cerejas etc., e o alívio do estresse após o consumo de café e chá é atribuído aos
polifenóis. Vários dados de meta-análise e achados epidemiológicos revelaram os papéis
profiláticos e terapêuticos de polifenóis e flavonóides contra doenças crônicas, como
doenças cardiovasculares, cerebrovasculares e neurodegenerativas, tumor, diabetes
mellitus, etc. na medicina humana.

2.1.1 – Classificação de polifenóis

Com base na configuração química, os polifenóis foram classificados em vários tipos, a

saber, ácidos fenólicos (ácidos hidroxibenzóicos e ácidos hidroxicinâmicos), flavonóides
(flavonóis, flavonas, flavanóis, flavanonas, antocianidinas, chalconas, catequinas,
isoflavonas e proantocianidinas), estilbenos (resveratrol) e lignanos (matairesinol)
(Manach et al. 2004, 2005; Bohn 2014).

Ácidos fenólicos: estão predominantemente presentes em mirtilos, café, chá, canela,

ameixa, maçã e cerejas e subdivididos em dois subgrupos denominados ácidos
hidroxibenzóicos e ácidos hidroxicinâmicos.

334
Flavonóides: são comumente encontrados em frutas, vegetais, legumes, vinho tinto e chá-
verde.

Estilbenos: são derivados do vinho tinto e amendoim, e o resveratrol é a entidade mais

popular desse grupo.

Lignanos: são comumente encontrados em sementes como linhaça, linhaça, legumes,

cereais, grãos e frutas, algas e certos vegetais.

2.1.2 – Ácidos fenólicos

O ácido hidroxibenzóico e o ácido hidroxicinâmico são as duas classes distintas de ácidos

fenólicos. Os ácidos hidroxibenzóicos são compostos por taninos hidrolisáveis, como
galotaninos e elagitaninos, e geralmente estão presentes em frutas vermelhas como
framboesas, amoras e morangos (Clifford e Scalbert 2000). A porcentagem de conteúdo
de ácido hidroxibenzóico em plantas comestíveis é geralmente muito baixa. Existem
certas exceções, por exemplo, rabanete preto e cebola contêm concentração em dezenas
de miligramas por quilograma de peso (Shahidi e Naczk 1995). O ácido gálico é
comumente encontrado nas folhas de chá e sua concentração é de cerca de 4,5 g/kg de
peso fresco (Tomas-Barberan e Clifford 2000). As plantas que contêm ácido
hidroxibenzóico são menos comumente usadas na alimentação humana; portanto, o
aspecto nutracêutico desses compostos não foi bem explorado.

Os ácidos hidroxicinâmicos são a forma mais comum de ácidos fenólicos em comparação

com os ácidos hidroxibenzóicos e consistem principalmente em produtos químicos como
os ácidos p-cumárico, ferúlico, sinápico, caféico, etc. Esses ácidos em plantas são
comumente distribuídos em formas ligadas que são os produtos glicosilados ou ésteres
de ácido chiquímico, ácido quínico e ácido tartárico. O processamento do material
alimentício por congelamento ou por fermentação somente produz a forma livre de ácido
hidroxicinâmico. O ácido clorogênico (CGA) é um polifenol importante e valioso e uma
fonte barata de fenol dietético (Clifford 1999; Garg 2016) e é composto de ácido caféico,
ferúlico, cumárico, quínico e 3,4 dimetoxicinâmico (Belay e Gholap 2009; Tajik et al. 2017)
e encontrados em concentrações muito altas em grãos de café verde (Garg 2016). As
partes externas das frutas maduras são ricas em ácidos hidroxicinâmicos. Cerca de 0,5–2
g de ácidos hidroxicinâmicos/kg de peso fresco estão presentes nos frutos de mirtilos,
kiwis, ameixas, cerejas, maçãs, etc. Os grãos de cereais são ricos em ácido ferúlico e os
de trigo contêm cerca de 0,8–2 g/kg de ácido ferúlico com base no peso seco que
constitui até 90% dos polifenóis totais (Lempereur et al. 1997; Hatcher e Kruger 1997).

335
2.1.3 – Flavonóides

Os flavonóides constituem quimicamente a classe de compostos fenólicos de baixo peso

molecular amplamente distribuídos entre o reino Plantae. Muitos deles servem como
pigmentos de flores comumente encontrados em angiospermas. Os flavonóides são uma
importante classe de fitoquímicos metabólitos secundários com estrutura polifenólica;
estão amplamente presentes em frutas, vegetais, chá, cacau e vinho; e, portanto, são
denominados “flavonóides dietéticos”, pois constituem um componente importante da
dieta humana normal. Os flavonóides são ainda classificados em diferentes subgrupos,
dependendo da estereoquímica e da estrutura química como o local de fixação do anel B
no anel C e o grau de oxidação do anel C e insaturação (Fig. 1). Flavonóides onde o anel
B está ligado na posição 3 do anel C são chamados de isoflavonas. Mas se o anel B
estiver ligado na posição 4 do anel C, são classificados como neoflavonóides (Fig. 3).
Aqueles em que o anel B está ligado na posição 2 do anel C podem ser divididos em
vários subgrupos com base na oxidação e insaturação do anel C. Esses subgrupos são
flavonas, flavonóis, flavonóides, flavanonóis, catequinas, antocianinas e chalconas.
Exemplos dos diferentes subtipos foram ilustrados na Fig. 4.

Fig. 3 Estruturas químicas básicas de flavonóides e

suas classes (Fonte: Panche et al. 2016)

Fig. 4 Classes, subclasses e fontes naturais de

flavonóides (Fonte: Panche et al. 2016)

336
Flavonóis: são os flavonóides mais onipresentes presentes nos alimentos dietéticos, e o
kaempferol e a quercetina são as moléculas representativas principais (Manach et al.
2005). Os flavonóis geralmente estão presentes em concentrações relativamente baixas
de 15-30 mg/kg de peso fresco, mas a cebola (1,2 g/kg de peso fresco), alho-poró,
brócolis e mirtilo são as fontes mais ricas de flavonóis (Manach et al. 2004). Os flavonóis
estão geralmente presentes na forma glicosilada com glicose ou ramnose como açúcar
principal.

Flavanóis: estão geralmente presentes em duas formas, isto é, a forma de polímero

conhecida como proantocianidinas e a forma monomérica conhecida como catequinas. O
damasco é a fonte mais rica em catequinas e contém cerca de 250 mg/kg de catequinas
em peso fresco (Manach et al. 2005). Chá verde, vinho tinto e chocolate também contêm
catequina em grandes quantidades.

Flavonas: são menos comumente encontrados em frutas e plantas em comparação com

os flavonóis e consistem principalmente de glicosídeos de luteolina e apigenina. De
acordo com Manach et al. (2005), salsa e aipo são as únicas fontes comestíveis de
flavonas. Cereais como milho e trigo contêm C-glicosídeos de flavonas (Erlund et al.
2002; Graefe et al. 2001).

Antocianinas: são os pigmentos coloridos presentes nas plantas. Cianidina, malvidina,

pelargonidina, delfinidina e peonidina são as antocianinas mais estudadas. Eles estão
comumente presentes nas camadas celulares externas das frutas, como groselha preta,
uvas vermelhas, framboesas, morangos, mirtilos, etc. Esses compostos são geralmente
estáveis na natureza; portanto, os benefícios para a saúde, associado a estabilidade, os
impulsionam para serem usados na indústria nutracêutica.

Isoflavonas: os produtos derivados da soja são a fonte mais rica de isoflavonas. As

isoflavonas são encontradas em abundância nas leguminosas. A soja contém entre 580 e
3800 mg de isoflavonas por kg com base no peso fresco, e o leite de soja contém entre 30
e 175 mg por litro (Hollman e Katan 1997; Moon et al. 2000). Algumas isoflavonas
também estão presentes em microrganismos (Matthies et al. 2008).

Chalconas: são caracterizados pela ausência de “anel C” na estrutura básica do esqueleto

dos flavonóides e, portanto, são denominados “flavonóides de cadeia aberta”. Exemplos
de chalconas são arbutina, floridzina, chalconaringenina e floretina. Chalconas estão
presentes em quantidades significativas em morangos, peras, tomates, berberies,
produtos de trigo, etc.

337
2.1.4 – Lignanos

Os lignanos são compostos por duas unidades de fenilpropano. A linhaça é a fonte

alimentar mais rica de lignanos e contém secoisolariciresinol e matairesinol. A
concentração de lignanas na linhaça é 1000 vezes mais do que em outros cereais, frutas,
grãos e certos vegetais (Adlercreutz e Mazur 1997). Os lignanos são biotransformados
pela microbiota intestinal em enterolactona e porções de enterodiol. Essas duas partes
são excretadas principalmente na urina, bile e fluidos seminais de humanos e animais
(Wang 2002). Essas metades funcionam como fitoestrogênios e, portanto, produzem
efeitos antioestrogênicos.

2.1.5 Estilbenos

Os estilbenos são melhores exemplificadas com o resveratrol, um agente antioxidante e

antineoplásico, encontrado em pequenas quantidades no vinho tinto (Bhat e Pezzuto
2002). Geralmente são encontrados em concentrações muito baixas; portanto, o efeito
antineoplásico não pode ser associado à ingestão alimentar dessas moléculas.

Teores fenólicos e flavonóides em algumas das plantas comuns

Conteúdo fenólico total {mg equivalente Conteúdo de flavonóides {mg equivalente

Fonte de ácido gálico/grama com base no peso rutina/catequina/grama com base no peso
seco} seco}
Raiz de alcaçuz 23,65 18,51
Cravo 194,47 46,30
Noz-moscada 37,26 51,97
Pimenta preta 17,16 23,57
Folha de amoreira 25,22 21,66
Gengibre 21,24 26,21
Hortelã-pimenta 13,17 27,05
Folhas de bambu 2,75 1,51
Folha de lótus 8,66 12,55
Emblica 26,59 1,35
Ficus 12,36 0,86
Azadirachta indica 12.0 3.14
Terminalia arjuna 12,8 3,49
Acacia nilotica 16,5 4,93
Fonte: Liu et al. (2008), Sultana et al. (2007) e Pinto e Santos (2017)

2.1.6 – Relação de Atividade Estrutural (SAR) de Polifenóis e Flavonóides

A estereoquímica dos flavonóides tem sido intimamente associada às

atividades/propriedades farmacológicas. Com base na química alvo conhecida, as novas
338
moléculas também podem ser geradas seguindo as novas dimensões da biologia
molecular, bem como da bioinformática. O entendimento completo da SAR de flavonóides
pode ajudar na evolução de vários compostos semissintéticos e sintéticos mais novos,
tendo atividades farmacológicas promissoras e melhores aplicações terapêuticas e
clínicas na medicina humana e veterinária.

A atividade antioxidante dos flavonóides é profundamente influenciada não apenas pela

posição e número de grupos hidroxila nos anéis A e B, mas também pelo grau de
conjugação entre os anéis B e C (Sichel et al. 1991; Chen et al. 1996) . O potencial
antioxidante de polifenóis e flavonóides segue os critérios de Bors (Bors et al. 1990),
conforme discutido abaixo:

a. A estrutura o-dihidroxi (30,40-diOH, isto é, catecol) no anel B confere alta estabilidade

aos radicais fenoxil dos flavonóides via ligação de hidrogênio ou por deslocamento de
elétron expandido.

b. A ligação dupla C2-C3 com o grupo 4-oxo determina a coplanaridade do hétero anel e
transmite estabilização radical por meio de deslocalização de elétrons em todos os três
sistemas de anel (A, B e C).

c. Os grupos 3-OH e 5-OH são necessários para a capacidade máxima de eliminação de

radicais e a absorção de radicais mais forte.

d. Na ausência da estrutura o-dihidroxi no anel B, os substituintes hidroxila em uma

estrutura catecol no anel A são capazes de compensar e se tornar um determinante maior
da atividade antirradical dos flavonóides (Amic et al. 2007).

e. A substituição do grupo hidroxila em C-5 no anel A e C-40 no anel B e a substituição do

grupo metoxila em C-3 e C-8 no anel A são essenciais para a ação inibitória da DNA-
girase e para a inibição da multiplicação de Escherichia coli (Wu et al. 2013).

3. Classificação de nutracêuticos
Os nutracêuticos foram classificados como “nutracêuticos estabelecidos e potenciais”
(Pandey et al. 2010). Polifenóis e flavonóides são considerados na categoria de
“nutracêuticos potenciais” em vista de suas promissoras atividades farmacológicas e
potencial para uso na saúde humana e para melhorar a saúde e produtividade animal.
Portanto, há um vasto escopo para explorar os polifenóis e flavonóides “como
nutracêuticos em ‘uma missão de saúde’ também”.

339
4. Significado dos polifenóis na flora e fauna e na saúde humana
Os polifenóis têm papel protetor no mundo floral e também protegem humanos e espécies
de plantas dos efeitos nocivos e perigosos das radiações ultravioleta e infestações
microbiológicas. Devido aos seus atributos antioxidantes, reconhece-se que têm papel
citoprotetor, pois previnem a lesão celular.

O ditado popular “Você é o que você come” prevê a correlação positiva entre a dieta
saudável e o corpo e a mente sãos. O potencial de melhora de diferentes fitoquímicos
contra várias doenças humanas, como obesidade, distúrbios cardiovasculares,
hipertensão, hepatomegalia, carcinomas, doenças infecciosas, etc. (Ganesan e Xu 2017)
foi bem documentado e sua eficácia protetora foi atribuída à modulação/regulação ou
inibição de vias de sinalização celular, agregação plaquetária reduzida, modulação da
síntese de colesterol, diminuição da resistência periférica total e tensão mural nos vasos
sanguíneos ou efeitos antioxidantes (Vita 2005). A presença de diferentes PCs, incluindo
polifenóis em plantas e seu potencial terapêutico promissor, tem sido a base da pesquisa
de “farmacologia reversa”, que resultou na descoberta de várias moléculas de drogas
mais novas durante programas de desenvolvimento de drogas.

4.1 Extração de Polifenóis e Flavonóides

Embora métodos de extração comuns possam ser empregados para extração de

polifenóis e flavonóides, alguns dos principais métodos para melhor extração de polifenóis
e flavonóides são extração por solvente, extração com líquido pressurizado, extração
assistida por ultrassom, extração assistida por micro-ondas e extração supercrítica. Os
procedimentos convencionais de extração líquido/líquido e sólido/líquido também são
frequentemente usados para a extração de polifenóis. Tendo em vista a estereoquímica
dos polifenóis, é melhor usar protocolos de extração específicos para cada polifenol. O
tempo necessário para a extração, a estrutura química dos polifenóis e os solventes
orgânicos usados desempenham um papel muito importante nos procedimentos de
extração e recuperação final dos fitoconstituintes alvo.

Os fitoconstituintes são fixados à matriz da parede celular através da ligação

glicosídica/éster; portanto, sua solubilidade em água é reduzida. Estudos sobre
procedimentos de extração mostraram que um antioxidante como estabilizador básico é
necessário em várias abordagens de extração. Técnicas analíticas avançadas, como
cromatografia líquida de alto desempenho e/ou espectrometria de cromatografia gasosa-

340
MS (GC-MS) também podem ser usadas para a extração de lignanas de alta qualidade
(Brglez 2016).

4.2 Atributos Farmacocinéticos de Polifenóis e Flavonóides

Estudos farmacocinéticos de polifenóis e flavonóides revelaram que após a ingestão de

flavonóides e polifenóis dietéticos, que residem predominantemente nas plantas como
conjugados de glicosídeos, a absorção de alguns dos componentes, não todos, no
sistema circulatório ocorre a partir do intestino delgado (Donovan et al. 2006). Existem
duas vias principais de absorção, nomeadamente, “lactase florizina hidrolase
(LPH)/difusão” e “transporte/β-glucosidase citosólica (CBG)”. Lactase florizina hidrolase
(LPH) está presente na borda em escova das células epiteliais do intestino delgado e
exibe ampla especificidade de substrato para flavonóides, e as porções de aglicona
liberadas são absorvidas passivamente pelas células epiteliais devido à sua alta
lipofilicidade (Day et al. 2000). A hidrólise catalisada por CBG é um processo ativo que
envolve o transportador ativo de glicose dependente de sódio (SGLT1) para transportar os
glicosídeos polares para as células epiteliais (Gee et al. 2000), e esta via fornece um meio
alternativo de clivagem hidrolítica de polifenóis e flavonóides dentro das células epiteliais.

Antes da passagem de flavonóides e polifenóis para a circulação, as agliconas sofrem um

processo de conjugação, isto é, há sulfatação, metilação e glucuronidação. Além disso,
alguns dos produtos metabólicos podem efluir de volta para o lúmen do intestino delgado,
e esse efluxo pode ser atribuído à ação dos transportadores ABC [adenosina trifosfato
(ATP)], incluindo a proteína multirresistente (MRP) e P-glicoproteína (P-gp). Então, esses
metabólitos sofrem metabolismo de fase II. Além disso, existe reciclagem enterohepática
de volta para o intestino delgado por meio da excreção biliar (Donovan et al. 2006). Vários
estudos sugeriram que após a ingestão dos flavonóides da dieta, quantidades
substanciais podem passar do intestino delgado para o grosso (Jaganath et al. 2006;
Marks et al. 2009).

A biodisponibilidade é a proporção do fármaco ou entidade nutriente que atinge a

circulação sistêmica na forma quimicamente inalterada. Não há correlação entre a
concentração de polifenol e sua biodisponibilidade. Antes da absorção, esses compostos
devem sofrer hidrólise por enzimas intestinais ou bactéria do cólon. Os polifenóis sofrem
extensas alterações químicas por meio de reações de conjugação no fígado e no
intestino. Metilação, sulfatação e/ou glucuronidação são os principais contribuintes para
as vias de conjugação dos polifenóis. Os polifenóis chegam aos tecidos, principalmente
aqueles nos quais são metabolizados, mas esses compostos não possuem nenhuma
propriedade de acumulação. A principal via de excreção é a urina ou as fezes.
341
A maioria dos polifenóis sofre degradação enzimática bacteriana com a ajuda da
betaglicuronidase na parte distal do intestino e os metabólitos resultantes são
reabsorvidos na circulação. Assim, a reciclagem entero-hepática pode levar a uma meia-
vida mais longa dos polifenóis no corpo. Este catabolismo microbiano de polifenóis e
flavonóides é melhor exemplificado com proantocianidinas (oligômeros e polímeros de
flavan-3-ols). Resulta na produção sequencial de lactonas e ácidos aromáticos e fenólicos
com derivados hidroxilados dependendo das estruturas precursoras como fenil
valerolactonas, ácidos fenilpropiônicos, ácidos fenilacéticos, ácido fenil valérico, ácidos
hipúrico e benzóico (Saura-Calixto et al. 2007).

A porcentagem de absorção das catequinas varia de 47 a 58% e a das agliconas da

quercetina é relatada como sendo de 4 a 13%. A porção de quercetina glicosilada mostrou
melhor biodisponibilidade por meio de absorção melhorada em comparação com as
moléculas de quercetina intactas (Hollman e Katan 1997).

O modo microbiológico de biotransformação de elagitaninos ou taninos hidrolisáveis,

moléculas poliméricas não flavonóides, também foi estudado durante os últimos quase 10
anos (Larrosa et al. 2010). Morangos, framboesas, nozes, vinhos envelhecidos em
carvalho, romãs, etc. liberam ácido elágico livre após sua hidrólise no lúmen do trato
intestinal. Clostridium e Eubacteria são os principais gêneros bacterianos que estão
envolvidos no metabolismo da maioria dos polifenóis e fenólicos, como isoflavonas
(daidzeína), flavonóis (quercetina e kaempferol), flavonas (naringenina e ixoxantumol) e
flavan-3-ols (catequina e epicatequina) (Selma et al. 2009).

A concentração plasmática de metabólitos polifenólicos totais variou de 0 a 4 μg/ml e 3,77 mol/L com
ingestão alimentar de 50 mg de equivalentes de aglicona, e a excreção urinária foi
encontrada na faixa de 0,3–43% da dose ingerida (Manach et al. 2005). Dentre os 97
polifenóis estudados bem conhecidos, o ácido gálico e as isoflavonas são os polifenóis
mais absorvidos, seguidos pelas catequinas, flavanonas e glicosídeos de quercetina,
enquanto as proantocianidinas, as galoiladas catequinas do chá e a antocianina estão
entre os polifenóis menos absorvidos.

Apesar da baixa biodisponibilidade de polifenóis, polifenóis dietéticos (por exemplo,

resveratrol genisteína, curcumina e vários outros) continuam a chamar a atenção da
comunidade científica devido às suas promissoras atividades farmacológicas como
antioxidante, antiinflamatório, antienvelhecimento, antineoplásico e anti-hiperlipidêmico
(Farzaei et al. 2016). Crofelemer, uma proantocianidina oligomérica, revolucionou o uso
de polifenóis como produtos farmacêuticos para controlar os efeitos colaterais de certos

342
medicamentos para o HIV, por exemplo. Aprovação do FDA do Crofelemer, Polyphenon E,
uma mistura de polifenóis de chá-verde, para o tratamento de verrugas genitais em 2006.

As interações diretas e indiretas de polifenóis, flavonóides, proteínas ou polissacarídeos

ou outros fitoquímicos com a alimentação humana podem alterar os atributos
farmacocinéticos das entidades nutracêuticas e drogas na administração concomitante. O
pH intestinal, a fermentação intestinal, a excreção biliar, etc. afetam a saúde geral do
intestino e, portanto, podem afetar a absorção de polifenóis (Bohn 2014; Faria et al. 2014;
Marin et al. 2015).

O papel dos xenobióticos administrados concomitantemente e dos indutores e inibidores

de enzimas metabólicas não pode ser negligenciado em termos de seu efeito na alteração
da taxa de absorção. Foi relatado que a adição de leite ao chá preto elimina o potencial
antioxidante (Serafini et al. 1996). Mas, ao contrário, Hollman et al. (2001) mostraram que
a adição de leite ao chá-preto ou verde não teve efeito sobre a biodisponibilidade de
certos polifenóis e flavonóides como quercetina, catequinas ou kaempferol em humanos,
enquanto o álcool no vinho tinto pode melhorar a absorção intestinal de polifenóis,
aumentando sua dissolução e desintegração, melhorando assim a solubilidade. Pelo
contrário, Donovan et al. (1999) relataram que as concentrações plasmáticas de
metabólitos de catequina eram semelhantes com ou sem consumo de vinho tinto
alcoolizado em humanos. Os relatórios existentes não sugerem efeito marcante de vários
componentes da dieta sobre a biodisponibilidade de polifenóis em humanos e animais.

4.3 Atributos Farmacológicos de Polifenóis e Flavonóides

Foi relatado que a suplementação da dieta humana com moléculas bioativas importantes
aumenta a biodisponibilidade de vários medicamentos e modifica as funções corporais.
Foi relatado que suplementos dietéticos ricos em polifenóis e flavonóides possuem
atividades antioxidantes, estimulantes da imunidade, antineoplásicos e várias outras.
Algumas das propriedades farmacológicas desejáveis e modo de ação das porções
polifenol e flavonóides são descritas aqui.

4.3.1 – Atividade antioxidante

O dano celular ao sistema corporal ocorre principalmente devido à geração de radicais

livres mediada pela abstração de hidrogênio; as porções químicas hiperativas produzidas
incluem espécies reativas de oxigênio (ROS) e espécies reativas de nitrogênio (RNS).
Esses ROS e RNS ainda produzem uma cascata de reações e danificam a integridade
celular. Os polifenóis protegem contra danos celulares induzidos por insultos oxidativos e
também evitam os efeitos nocivos das radiações ou contaminação microbiológica. A

343
importância dos antioxidantes dietéticos naturais, como polifenóis e flavonóides, como
uma nova entidade terapêutica, foi sugerida no tratamento de várias doenças humanas,
como doenças neurodegenerativas, diabetes, disfunções cardiovasculares, inflamação e
senescência.

Mecanismo de ação antioxidante: Polifenóis e flavonóides produzem ação antioxidante

impedindo a abstração de hidrogênio e geração de ROS e RNS. As catequinas
polifenólicas e a rutina eliminam as ROS geradas devido ao efeito cascata dos radicais
livres após o início e propagação do fenômeno de insulto oxidativo (Yang et al. 2008). A
propriedade quelante de metal das catequinas também reduz seu potencial para combater
o insulto oxidativo (Hider et al. 2001; Kumamoto et al. 2001). Além disso, os polifenóis
também produzem sua ação antioxidante, evitando a oxidação da lipoproteína LDL,
evitando a agregação plaquetária e danos aos glóbulos vermelhos (Cheynier 2005).

4.3.2 – Atividade antiinflamatória

A ciclo-oxigenase (COX) é a enzima endógena que catalisa a conversão do ácido

araquidônico em prostaglandinas e tromboxanos. A COX2 é uma enzima induzível, que é
direcionada principalmente por flavonóides e polifenóis. Dependendo do local de origem e
também das múltiplas etiologias, existem diferentes tipos de inflamação. A artrite
reumatóide e as doenças inflamatórias intestinais são condições graves na medicina
humana e requerem o uso contínuo e prolongado de antiinflamatórios. Rutina, quercetina,
resveratrol, catequina, genisteína, etc. foram testados e considerados muito eficazes
contra essas condições em humanos (Kauss et al. 2008).

Mecanismo de ação: Os polifenóis demonstraram sua eficácia contra a artrite reumatóide

e outras condições inflamatórias, e os mecanismos incluem a inibição da diferenciação de
macrófagos e função osteoclástica (Kauss et al. 2008), modulação de estrogênio (Wang et
al. 2008) e inibição antiproliferativa e generalizada de migração de células inflamatórias.
Na rinite alérgica, bronquite e também em pacientes asmáticos, o papel dos flavonóides
foi estabelecido por Jung et al. (2007). Foi proposto que a quercetina e seu glicosídeo
rutina ajudaram a diminuir a resistência das vias aéreas e também reduziram os níveis de
histamina, fosfolipase A2 e endo peroxidase. Observou-se também que a infiltração
celular é inibida no local da inflamação.

4.3.3 – Atividade Antimicrobiana

Os polifenóis possuem atividade antimicrobiana e também atuam como agentes

clarificadores (Proestos et al. 2005). O ácido clorogênico produz efeito bactericida ao
romper significativamente a membrana celular, aumentando a permeabilidade da

344
membrana plasmática e, finalmente, o vazamento de macromoléculas citoplasmáticas,
incluindo material nuclear (Lou et al. 2011; Garg 2016). A atividade antimicrobiana do mel
foi potencialmente aumentada na presença de ácidos fenólicos (Aziz et al. 1998).
Pesquisadores têm defendido as atividades antibacteriana, antifúngica e antiviral desses
polifenóis e flavonóides. A quercetina produz sua ação antibacteriana por meio da inibição
da DNA-girase. Da mesma forma, a soforaflavona G e o galato de (-) -epigalocatequina
inibem a função da membrana celular e as licocalconas A e C estão envolvidas na inibição
do metabolismo energético (Cushnie e Lamb 2005).

5. Polifenóis e flavonóides na medicina humana

5.1 Tratamento de doenças neurodegenerativas

Doenças neurodegenerativas, como a doença de Parkinson, são atribuídas à

desregulação do metabolismo do ferro e à produção de insulto oxidativo de espécies
reativas de oxigênio (ROS) a partir do peróxido de hidrogênio. Isso, em conjunto com
citocinas inflamatórias e outros mediadores, propaga os eventos em cascata que
terminam em apoptose (morte celular programada) ou necrose.

Mecanismo de neuroproteção: Os polifenóis e flavonóides produzem efeito protetor contra

doenças neurodegenerativas, alterando o metabolismo do ferro. Mandel et al. (2004)
defendeu a propriedade quelante de ferro da epigalocatequina-3-galato (EGCG) como
sendo responsável por sua eficácia terapêutica contra doenças neurodegenerativas. Foi
relatado que EGCG tem papel terapêutico contra a doença de Alzheimer, protegendo
contra a neurotoxicidade induzida por b-amilóide em neurônios do hipocampo em cultura
no sistema nervoso central (Choi et al. 2001). O mecanismo molecular descreve que
EGCG modula a conversão da proteína precursora de amiloide (APP), por meio da
ativação de PKC, em APP solúvel não amiloidogênica (sAPP), evitando assim a formação
de proteína b-amilóide neurotóxica (Levites et al. 2003). Além disso, a enzima b-secretase
(BACE1) é responsável pelo processamento de sAPP em b-amilóide e também está
sendo inibida por EGCG, produzindo assim um efeito inibitório adicional em processos
neurodegenerativos (Jeon et al. 2003).

5.2 Tratamento de neoplasias

Neoplasia ou câncer é definido como descontrole no crescimento e metabolismo celular.

Um agente terapêutico deve possuir a propriedade de inibir o crescimento descontrolado
e a proliferação celular (Guo et al. 2009). Os nutracêuticos têm se mostrado eficazes na
redução do número de casos de neoplasia em consumidores veganos e de frutas.
345
Os metabólitos químicos dos polifenóis gerados após a degradação microbiana possuem
atividade anticâncer. Forester e Waterhouse (2008) observaram que a incubação do
extrato de antocianina de uvas Cabernet Sauvignon com o intestino grosso de porcos por
6 h resultou na geração de três metabólitos identificáveis. Lala e col. (2006) sugeriram
que esses produtos metabólicos tinham o potencial protetor contra o câncer de cólon.
Estudos in vivo e in vitro também revelaram o papel protetor do ácido ferúlico contra o
câncer de mama (Kampa et al. 2004) e hepatocarcinoma (Lee et al. 2004).

Mecanismo de ação: A teoria da mutação somática do câncer afirma que as alterações no

DNA resultam no desenvolvimento de neoplasia (Vogelstein e Kinzler 2004). Foi sugerido
que baixas concentrações de kaempferol protegem contra danos ao DNA induzidos por
diferentes carcinógenos, conferindo assim uma atividade anticâncer (Cemeli et al. 2004).
Os polifenóis exercem efeitos protetores e terapêuticos contra a carcinogênese por vários
mecanismos que incluem a remoção dos agentes carcinogênicos (Owen et al. 2000),
modulação da sinalização celular, progressão do ciclo celular (Corona et al. 2009) e
indução de apoptose (Mantena et al. 2006). Os polifenóis também atuam como quelantes
de metal e alteram as atividades enzimáticas, por exemplo resveratrol atua como um
agente quimiopreventivo, inibindo a ribonucleotídeo redutase e certos outros eventos
celulares envolvidos na carcinogênese, como iniciação, promoção e progressão. A
proteína quinase ativada por mitogênio (MAPK) e as vias de sinalização da PI3-quinase
também foram direcionadas como o local de intervenção terapêutica por alguns dos
flavonóides e polifenóis (Corona et al. 2009). Flavonóides com potencial antioxidante
também inibem a carcinogênese (Stefani et al. 1999). Flavonóides como apigenina,
fisetina e luteolina também produzem atividade antineoplásica ao inibir a proliferação
celular (Fotsis et al. 1997). Os possíveis mecanismos de ação da antocianina contra o
câncer de cólon incluem diminuição na proliferação de células do cólon, diminuição da
formação de cripta aberrante induzida por carcinógeno e insulto oxidativo devido à
propriedade antioxidante (Lala et al. 2006).

5.3 Tratamento de doenças cardiovasculares

As doenças cardiovasculares são uma das principais causas de mortalidade no novo

mundo. A hipertensão é o principal fator de risco para acidente vascular cerebral, doença
cardíaca e insuficiência renal e é um dos problemas mais críticos na saúde humana
(Domanski et al. 2002; Lloyd-Jones et al. 2002; Whelton et al. 2002). A disfunção
endotelial é considerada um estágio inicial da arteriosclerose com o papel central da
endotelina como substância vasoativa (Ross 1999). A programação de dieta individual e o
monitoramento do estilo de vida com suplementação nutracêutica podem proteger contra
346
doenças cardíacas. Evidências substanciais indicam que a dieta balanceada é uma
bênção na prevenção de doenças cardiovasculares, abrindo assim o escopo do uso de
polifenóis e flavonóides em alimentos funcionais, bem como nutracêuticos na medicina
humana.

Mecanismo de ação cardioprotetora: A ingestão de polifenóis de várias fontes, como chá,

vinho tinto, trevo vermelho, etc. resulta na diminuição dos níveis de colesterol total,
lipoproteína de baixa densidade (LDL) e apolipoproteína B e aumento do nível de
colesterol bom, ou seja, lipoproteína de alta densidade (HDL) e apolipoproteína AI. Os
polifenóis, portanto, produzem efeito antilipidêmico e contribuem para a cardioproteção. A
eficácia cardioprotetora também é atribuída à atividade antioxidante dos flavonóides e
polifenóis. As antocianinas exercem propriedades de redução do colesterol e seu
mecanismo inclui a ativação induzida por antocianina da proteína quinase ativada por
AMP (AMPK) que inibe a atividade da enzima 3-hidroxi-3-metilglutaril coenzima A
redutase (HMG CoA) e, assim, reduz biossíntese de colesterol (Guo et al. 2012; Towler e
Hardie 2007). Corder et al. (2001) relataram que o vinho tinto inibe a síntese de
endotelina-1, um peptídeo vasoativo, que tem papel na aterosclerose coronariana.
Consequentemente, ele prova a eficácia benéfica e protetora dos polifenóis e flavonóides
na disfunção cardiovascular.

6. Polifenóis e flavonóides na medicina veterinária

Os nutracêuticos tornaram-se muito populares na medicina humana e seu uso em
programas de saúde humana está aumentando em um ritmo muito rápido e a participação
no mercado de nutracêuticos deve crescer de 4 bilhões de dólares hoje para 10 bilhões
de dólares até 2022. Em Tendo em vista os efeitos promissores dos nutracêuticos na
medicina humana, há um escopo crescente para o uso de nutracêuticos na medicina
veterinária também para tratar das questões de saúde e produção relacionadas ao gado.

O uso de antibióticos como promotores de crescimento foi proibido na Europa e em

alguns outros países, incluindo a Índia; portanto, essas drogas devem ser substituídas por
certas substâncias que têm a propriedade de construir moléculas biológicas dentro do
corpo e desencadear a promoção do crescimento. Resíduos de drogas, suplementos
alimentares e aditivos alimentares em alimentos de origem animal, incluindo aves,
aumentaram mais ainda o escopo para o uso de nutracêuticos na medicina veterinária,
uma vez que os nutracêuticos veterinários foram anotados como substâncias não
medicamentosas que são produzidas na forma purificada ou extraída e são administrados

347
por via oral a fim de fornecer os elementos necessários ao funcionamento normal do
corpo com o objetivo de melhorar a saúde dos animais. Quercetina, rutina, resveratrol etc.
estão entre as metades ativas bem estudadas. As aplicações de nutracêuticos
veterinários abrangem seu amplo uso no sistema de produção de aves, suínos, caninos,
felinos e roedores.

É relatado por Evan et al. (2007) que cerca de 25% dos cães com mais de 7 anos
sofreram de doenças cardíacas. Cerca de 10% dos cães apresentados a clínicas
veterinárias foram associados a um ou outro tipo de doença cardiovascular (Atkins et al.
2009).

A maioria dos nutracêuticos usados comercialmente incluem polifenóis e/ou flavonóides

como um de seus principais princípios ativos. Quercetina, rutina, estilbeno, etc. são os
componentes mais comumente usados de nutracêuticos, e há um escopo mais amplo
para inclusão de vários outros polifenóis e flavonóides nesta classe.

6.1 Setor Avícola

A quercetina possui várias propriedades farmacológicas promissoras. A alimentação com

dietas suplementadas com quercetina neutralizou o estresse oxidativo e melhorou a
qualidade da carne de frangos de corte (Rupasinghe et al. 2010). Também foi relatado
que produz efeito antiinflamatório em pássaros e animais (Huang et al. 2010). O sistema
imunológico modula criticamente a saúde e a produção nos animais. As respostas imunes
humoral e celular regulam o perfil imunológico em animais. Polifenóis e flavonóides
conferem melhor saúde imunológica através de várias vias, como aumento da produção
de imunoglobulina, função multiplex em órgãos linfóides, aumento da atividade das
células assassinas naturais, aumento do peso dos órgãos imunológicos e manutenção do
equilíbrio entre as citocinas pró e antiinflamatórias (Iqbal et al. 2015).

Foi relatado que a quercetina melhora a saúde geral dos frangos e aumenta a eficiência
da conversão alimentar por meio da imunomodulação (Korver 2012). Os flavonóides
também foram documentados como tendo efeitos benéficos em várias características,
como crescimento, peso corporal, taxa de conversão alimentar (FCR), características de
carcaça, qualidade da carne e do ovo, estado imunológico e perfil antioxidante em
animais e pássaros (Goliomytis et al. 2014).

Também foi relatado que flavonóides e polifenóis têm propriedade antídoto. A quercetina
se liga a metais pesados como molibdênio, alumínio e níquel e quela esses metais;
portanto, há espaço para explorar este atributo da quercetina não apenas no tratamento
de animais afetados, mas também para melhorar os prováveis efeitos adversos desses

348
metais e alguns outros metais pesados em animais como uma terapia antidotal e também
para garantir a produção de qualidade e livre de resíduos em ovos e carne de aves
(Maleser e Kuntic 2007).

6.2 Setor de Suínos

Os nutracêuticos melhoram a qualidade da carcaça e modulam o sistema imunológico. Os

porcos são muito propensos a infecções virais. Atributos antimicrobianos e
imunomoduladores de polifenóis e flavonóides fornecem proteção extra contra essas
infecções e, portanto, reduzem a mortalidade neonatal e melhoram a taxa de conversão
alimentar. Wein e Wolffram (2014) defenderam a eficácia da quercetina, um polifenol, em
porcos hiperglicêmicos, reduzindo o nível de glicose pós-prandial e a concentração de
lipídios. O atributo hipolipemiante dos polifenóis, portanto, dá uma visão sobre o escopo
do uso de polifenóis como suplemento dietético em porcos na forma de nutracêuticos para
produzir carne de porco de boa qualidade que é baixa em colesterol e lipídios e pode ser
usado com segurança para humanos consumo. Foi relatado que a genisteína da soja em
concentrações dietéticas de 200-400 ppm modula a resposta imune em porcos infectados
com vírus e melhora o peso corporal em porcos (Greiner et al. 2001).

A catequina (s), um polifenol, também foi considerada um bom antibacteriano e, segundo

relatos, promove o crescimento em porcos. Galato de epigalocatequina (EGCG),
catequina mais abundante das folhas de chá-verde, provou ser seguro e tão potente como
outros antimicrobianos (Caturla et al. 2003). Além disso, a falta de resistência cruzada
com o uso de polifenóis e flavonóides parece uma vantagem adicional desses
fitoconstituintes.

O resveratrol também possui propriedades hipolipemiantes e antioxidantes (Resuleo

2016). Reduz a oxidação de lipoproteínas de baixa densidade e também atua como
quelante de cobre no sangue de porcos (Fremont et al. 1999). O resveratrol também tem
sido usado na indústria cosmética como substância antienvelhecimento com base nos
estudos realizados em porcinos como má absorção da camada de estrato e efeitos
benéficos localizados (Zhang et al. 2007).

6.3 Animais de companhia

Os flavonóides são empregados como antioxidantes e imunomoduladores em caninos. Os

flavonóides melhoram a vascularização em caninos e reduzem a ocorrência de púrpura e
hemorragias após a exposição à radiação (Field e Rekers 1949).

Os flavonóides do chá têm sido associados à redução do processo de aterogênese,

inibição da agregação plaquetária e também prevenção da trombose coronária em cães
349
(Tijburg et al. 1997). Flavonóides e ácidos fenólicos também são relatados para inibir a
replicação viral (Rees et al. 2008; Saha et al. 2009; Kim et al. 2010; Gravina et al. 2011). A
atividade antiviral da quercetina (30,4,3,5,7-pentaidroxil flavonol) foi documentada contra
o adenovírus 3 (AdV-3), o vírus do herpes simplex (HSV) e o vírus da influenza (Choi et al.
2009; Thapa et al. 2011), enquanto o morim (20,40,3,5,7-pentahidroxil flavonol) foi
considerado eficaz contra o herpesvírus equino 1 (EHV-1) (Gravina et al. 2011). Rutina
(quercetina-3-orutinósido), um flavonóide glicosídico, também foi relatado por mostrar
atividade antiviral contra HSV, vírus da dengue 2 (DENV-2) e vírus da imunodeficiência
humana (HIV) (Tao et al. 2007; Zandi et al. 2011), enquanto a hesperidina é eficaz contra
o vírus da gripe (Saha et al. 2009). A atividade antiviral de ácidos fenólicos também foi
relatada contra DENV, EHV-1 e HIV (Ichimura et al. 1999; Rees et al. 2008; Gravina et al.
2011).

Os cães são vulneráveis a infecções virais, especialmente cinomose (DC). A cinomose

canina resulta em distúrbios no trato gastrointestinal (GI), nos sistemas respiratório e
nervoso. Embora as vacinas estejam disponíveis, as taxas de mortalidade não foram
reduzidas e mesmo a forma nervosa da DC é quase incurável. Foi relatado que
flavonóides e polifenóis impedem a replicação do vírus (Kim et al. 2010; Gravina et al.
2011). O efeito antiviral de flavonóides e ácidos fenólicos foi demonstrado por meio de
mecanismos inibitórios, que incluem interação com as glicoproteínas do envelope viral
(Schnitzler et al. 2008) e / ou inibição da polimerase viral e interferência na síntese do
genoma viral (Formica e Regelson 1995; Cushnie e Lamb 2005).

As ações biológicas desses princípios ativos têm sido atribuídas à sua estrutura química,
e com a mudança na estrutura química dos flavonóides, mudanças na atividade biológica
e nos mecanismos têm sido relatadas. Por exemplo, a isoquercetina, uma forma
glicosilada de quercetina, foi relatada para mostrar maior atividade inibitória do que a
quercetina contra o vírus da gripe em modelos experimentais in vitro e in vivo (Kim et al.
2010). A atividade antiviral de vários derivados da quercetina com substituições de
hidroxila em C-3, C-30 e C-5 foi estudada por Thapa et al. (2011), e esses análogos
sintéticos da quercetina mostraram um índice terapêutico mais alto do que a quercetina
contra o vírus da gripe.

Demrow et al. (1995) sugeriram que o vinho tinto e o suco de uva reduzem a atividade
plaquetária e trombose em artérias coronárias estenosadas de caninos. Esse efeito é
atribuído à presença de flavonóides e polifenóis no vinho tinto e nos sucos de uva.

O risco de carcinogênese, especialmente tumores venéreos, é uma das doenças tumorais

mais comumente encontradas em caninos. Foi relatado que os flavonóides estão
350
associados à atividade quimiopreventiva na terapia do câncer em humanos e também em
animais. As chalconas, apigenina, luteolina etc. descobriram ser potentes agentes
citotóxicos contra a linha celular de câncer canino DH82 (Silva et al. 2013), sugerindo
assim seu possível uso em quimioterapia direcionada contra tumores malignos e benignos
em caninos e também em humanos .

O controle da dor é muito desafiador e crítico tanto em animais quanto em humanos e às

vezes até justifica o uso de analgésicos muito fortes, incluindo analgésicos narcóticos. O
uso indiscriminado de analgésicos, tanto narcóticos quanto não narcóticos, representa
grande ameaça à saúde humana e animal devido aos seus efeitos colaterais.
Comprometimento gástrico, constipação e hepatotoxicidade, etc. são os principais efeitos
colaterais dos analgésicos não narcóticos. O uso de flavonóides e polifenóis como
nutracêuticos tem sido sugerido para produzir alívio da dor neuropática degenerativa e
osteoartrite em cães após a suplementação da mistura de baicalina e catequina como
nutracêutico para cães através da inibição dupla de ciclooxigenase e 5-lipoxigenase por
flavonóides (Burnett et al. 2009).

Danos oculares em humanos e caninos resultam em nictalopia que termina em cegueira.

Os flavonóides e polifenóis presentes na toranja foram relatados para neutralizar o dano
induzido pelo insulto oxidativo às células epiteliais do cristalino canino (Barden et al.
2008). Portanto, a suplementação nutricional de toranja ou dos flavonóides e polifenóis
isolados desta na dieta pode ser útil na manutenção da visibilidade da córnea por mais
tempo. Low et al. (2014) também sugeriram a eficácia do ácido ferúlico, um ácido com
atividade antioxidante polifenólica contra halitose em caninos, evitando cárie dentária e
problemas de indigestão em caninos. Portanto, o ácido ferúlico pode ser empregado como
um constituinte em rações/alimentos funcionais para caninos.

6.4 Setor Equino

Equinos, que incluem cavalos, mulas e burros, são usados para fins de corrida e
recreação e transporte de carga na vida cotidiana, bem como em áreas difíceis, não
apenas por pessoas em geral, mas também pelas forças de defesa. Geralmente, os
cavalos recebem feno e forragem verde junto com um pouco de concentrado. Devido às
corridas e à carga de peso, especialmente em terrenos difíceis, esses animais são muito
propensos ao desgaste excessivo, alterações inflamatórias e envelhecimento. Estudos
sobre os efeitos benéficos dos polifenóis na dieta equina revelaram que a inflamação
relacionada com a idade, i.e. inflamação, é reduzida após a suplementação dietética de
curcumina na dieta equina; assim, reduz as chances de pânico e osteoartrite em equinos
(Siard et al. 2016).
351
Também na ciência da reprodução, a quercetina foi identificada como um novo e
promissor antioxidante para melhorar a vitalidade dos espermatozóides no sêmen
armazenado, pois reduz a peroxidação lipídica no esperma e mantém a concentração
interna de trifosfato de adenosina (ATP) e, assim, melhora a taxa de fertilidade geral,
melhorando a capacitação (McNiven e Richardson 2006). Portanto, há um amplo escopo
para o uso de polifenóis e flavonóides como nutracêuticos em equinos.

6.5 Animais de Laboratório

Os flavonóides e polifenóis são considerados como possuidores de potencial promissor

contra várias doenças, incluindo doenças degenerativas das articulações; e o uso de
extrato de chá verde mostrou melhora na artrite devido à inibição de enzimas/fatores que
degradam a matriz no nível de mRNA por meio da inibição da via de NFkB (Haqqi et al.
1999). Os flavonóides obtidos do Ficus foram relatados como sendo tão eficazes quanto a
vitamina E como nutracêuticos e também comprovados como hepatoprotetores contra
lesão hepática induzida por tetracloreto de carbono em ratos (Augusti et al. 2005).

A atividade antiinflamatória dos flavonóides usando o modelo da cobaia foi estabelecida, e

os flavonóides têm potencial inibidor da ciclo-oxigenase (COX) (Kim et al. 1998). Assim,
os flavonóides têm potencial para serem usados como nutracêuticos contra doenças
antiinflamatórias. A uva contém polifenóis como antocianinas, quercetina, miricetina,
kaempferol, resveratrol, etc. Esses polifenóis como nutracêuticos na dieta de porquinho-
da-índia comprovadamente alteram o metabolismo do colesterol hepático e afetam a
“secreção de lipoproteína de densidade muito baixa (VLDL)”. Esse efeito resulta na
redução do acúmulo de triglicerídeos e colesterol nas artérias coronárias, reduzindo assim
as chances de doenças coronárias (Zern et al. 2003). Portanto, eles podem ser usados
como constituintes em rações animais para produzir animais de laboratório saudáveis e
livres de doenças para pesquisas biomédicas.

7. Uso potencial de polifenóis e plantas ricas em flavonóides na

alimentação animal
Moringa oleifera, Espinheiro-mar, Curcuma longa, Trachyspermum ammi e várias outras
plantas têm sido amplamente utilizadas como forragem verde ou como suplementos
alimentares no setor animal e avícola. As propriedades farmacológicas dessas plantas
são atribuídas aos seus diversos princípios ativos, principalmente polifenóis e flavonóides.

O óleo e a fruta do espinheiro-mar têm efeito citoprotetor contra o insulto oxidativo

induzido pelo nitroprussiato de sódio (Geetha et al. 2002). Esta planta também é
352
conhecida por sua potencial ação imunomoduladora. Além disso, melhora o braço celular
da imunidade, aumentando a multiplicação das células imunológicas nos respectivos
órgãos imunológicos, como o baço. As folhas e frutos do espinheiro marítimo contêm
flavonóides e exercem efeito cardioprotetora ao diminuir o consumo de oxigênio do
miocárdio acompanhado de efeito agregador antiplaquetário. Os flavonóides nas plantas
também melhoram as contrações cardíacas por meio da modulação do sinal de cálcio ao
inibir o influxo de cálcio e, assim, prevenir a insuficiência cardíaca congestiva.

Foram relatados efeitos benéficos da alimentação com suplemento alimentar poli herbal
(Herbiotic FS) em frangos, refletidos pelos retornos econômicos dos frangos, e o FCR
melhorado foi atribuído aos três materiais constituintes à base de plantas, ou seja,
Trachyspermum ammi, Rheuma emodi e Cúrcuma longa. Essas plantas são conhecidas
por serem ricas em compostos fenólicos (Bhushan et al. 2008).

Foi relatado que Trachyspermum ammi possui atividades antilipidêmica, antiinflamatória,

antibacteriana e antifúngica, e essas atividades foram atribuídas aos compostos fenólicos
presentes nas sementes desta planta (Pathak et al. 2010). Folhas de bambu também têm
efeito redutor de lipídios no modelo de rato devido à presença de flavonas (Yang et al.
2015). Além disso, as folhas de bambu também possuem atividade antimicrobiana, que é
atribuída a polifenóis e flavonóides (Singh et al. 2012). O extrato aquoso de flores de
Nyctanthes arbor-tristis possui ação imunomoduladora promissora, aumentando a
produção de anticorpos e modificando a produção de citocinas (Bharshiv et al. 2016).
Efeito imunomodulador semelhante do extrato da folha de Moringa oleifera também foi
relatado (Jayanthi et al. 2015), sugerindo o possível uso de folhas e flores dessas plantas
como biomassa na alimentação de aves e animais.

As folhas de Moringa oleifera e Nyctanthes arbor-tristis e algumas outras partes dessas

plantas também são ricas em flavonóides e polifenóis. Swain et al. (2017) também
mostraram que a adição de farelo de folhas de Moringa oleifera a 0,50 kg/100 kg de dieta
como substituto de biomassa em galinhas poedeiras melhorou a produção de ovos e a
taxa de conversão alimentar (FCR) nas poedeiras. Divya et al. (2014) relataram que o pó
de folhas de Moringa oleifera possui atividade antilipidêmica e também melhora a FCR em
frangos de corte quando usado como suplemento alimentar. Alam et al. (2015) relataram
que alimentar com pó de folha de neem para frangos de corte apresentou melhora
significativa no rendimento da carne e no crescimento geral. Assim, comprova o potencial
dessas plantas como suplementos alimentares e substitutos da biomassa em parceria
com o efeito benéfico na saúde dos animais.

353
8. Toxicidade de polifenóis e flavonóides
Possivelmente, o uso terapêutico de polifenóis e flavonóides tem sido amplamente
investigado, mas seus efeitos tóxicos na saúde humana e animal não foram totalmente
investigados. Flavonóides e polifenóis têm sido defendidos como fonte de medicina
alternativa sem determinar seus efeitos adversos, se houver. Essas substâncias têm
atividade pró-oxidante que pode desencadear a peroxidação lipídica precoce, levando ao
aumento dos radicais livres e, portanto, ao aumento da geração de ROS. A catequina do
chá-verde e o (-) -epigalocatequina-3-galato (EGCG) são conhecidos por desencadear a
produção de H2O2 e induzir dano oxidativo ao DNA do citosol na presença de íons de
metal de transição, como o cobre. Este aumento na atividade pró-oxidante de EGCG está
reivindicando significativamente seu papel no câncer de cólon induzido por nitrosamina.

O chá é a bebida mais comumente usada em todo o mundo. Os polifenóis e flavonóides

do chá provam que é uma bebida nutracêutica; no entanto, o conteúdo de xantina no chá
resulta em uma variedade de sinais e sintomas tóxicos. Os efeitos tóxicos comumente
encontrados incluem irritação dos nervos, convulsões tônicas, arritmia, taquicardia e
irritação gastrointestinal. Além disso, certas variedades de chá também provocam reações
alérgicas graves, como asma, náusea, vômito, febre do feno, dor no corpo e no pescoço
em quem sofre (Subiza et al. 1989).

O chá-verde causa hepatotoxicidade, toxicidade mitocondrial, dor de cabeça, náusea e

insulto oxidativo em indivíduos intoxicados em exposição crônica, enquanto o chá preto
causa precipitação dos sucos digestivos e redução na absorção de ferro. O consumo
excessivo de chá oolong pode levar à eliminação do cálcio na urina, levando à
osteoporose (Heaney 2002). Portanto, deve ser limitado a apenas três xícaras de chá por
dia. Uma sobredosagem adicional de chá oolong pode levar à hipocalemia,
prolongamento do intervalo QT, bloqueio atrioventricular e taquicardia ventricular (Toshiya
et al. 1999).

A quercetina também é conhecida por ser mutagênica em células em cultura. Foi relatado
um efeito pró carcinogênico da quercetina em modelo de rato de câncer pancreático
induzido por nitrosometilureia ou câncer de cólon induzido por azoximetano (Barotto et al.
1998). As enzimas de metabolização da fase II são os principais fatores para os efeitos
tóxicos dos polifenóis.

Os fitoestrogênios estimulam a proliferação de células que respondem ao estrogênio e

aumentam os riscos de carcinogênese (Breinholt et al. 2000). Foi relatado que a

354
genisteína estimula a proliferação de células de câncer de mamas implantadas em
camundongos ovariectomizados (Ju et al. 2001).

Com o equilíbrio entre as propriedades pró e antioxidantes dos flavonóides e polifenóis, a

vantagem terapêutica máxima deve ser explorada a partir dessas entidades; portanto,
eles devem ser usados com a devida precaução.

9. Observações Finais e Orientações Futuras

O uso de fito medicamentos na saúde humana e animal na medicina folclórica remonta a
milhares de anos. Com os avanços no conhecimento científico e nos métodos de
validação científica, o papel dos medicamentos populares e dos formulários tradicionais à
base de ervas está aumentando com o passar do tempo. Os polifenóis são um grupo de
vastas entidades terapêuticas que têm potencial para uso como antioxidantes,
antiinflamatórios, cardioprotetores, antineoplásicos, antialérgicos, antibacterianos,
antivirais, etc. A baixa biodisponibilidade de flavonóides e polifenóis é motivo de
preocupação. Os cientistas devem desenvolver métodos para melhorar o perfil
farmacocinético dos polifenóis. Ferramentas de encapsulação e nanotecnologia podem
ser úteis para aumentar a biodisponibilidade desses polifenóis e flavonóides.

Devem ser feitos esforços para desenvolver sistemas direcionados de administração de

drogas e validar percepções moleculares para ações baseadas na estereoquímica e
validar a interação droga/receptor. Polifenóis e flavonóides têm o potencial de servir como
panacéia para doenças do estilo de vida moderno como suplementos dietéticos na dieta
humana, além de seu uso no tratamento de algumas doenças ocupacionais. Esses
fitoconstituintes também devem ser explorados para seu uso em rações de gado e aves,
além de encorajar a inclusão de biomassa dessas plantas na alimentação de animais que
são ricas em polifenóis e flavonóides.

Referências

Adlercreutz H, Mazur W (1997) Phytoestrogens and western diseases. Ann Med 29:95–120
Alam M, Rakib A, Abdullah-Al-Hasan M et al (2015) Effects of neem leave powder as a growth promoter in broilers. Int
J Nat Soc Sci 2:22–26
Amic D, Davidovic A, Beslo D et al (2007) SAR and QSAR of the antioxidant activity of flavonoids. Curr Med Chem
14:827–845
Atkins C, Bonagura J, Ettinger S et al (2009) Guidelines for the diagnosis and treatment of canine chronic valvular
heart disease. J Vet Intern Med 23(6):1142–1150
Augusti KT, Prabha SP, Smitha KB et al (2005) Nutraceutical effects of garlic oil, its nonpolar fraction and a Ficus
flavonoid as compared to vitamin E in CCl4-induced liver damage in rats. Indian J Exp Biol 43 (05):437–444
Aziz NH, Farag SE, Mousa LA et al (1998) Comparative antibacterial and antifungal effects of some phenolic
compounds. Microbios 93 (374):43–54
Barden CA, Chandler HL, Lu P et al (2008) Effect of grape polyphenols on oxidative stress in canine lens epithelial
cells. Am J Vet Res 69 (1):94–100

355
 Barotto NN, Lopez CB, Eynard AR et al (1998) Quercetin enhances pretumorous lesions in NMU model of rat
pancreatic carcinogenesis. Cancer Lett 129:1–6
Belay A, Gholap AV (2009) Characterization and determination of chlorogenic acids (CGA) in coffee beans by UV-VIS
spectroscopy. Afr J Pure Appl Chem 3(11):234–240
Bharshiv CK, Garg SK, Bhatia AK (2016) Immunomodulatory activity of aqueous extract of Nyctanthes arbor-tristis
flowers with particular reference to splenocytes proliferation and cytokines induction. Indian J Pharm 48(4):412–417
Bhat K, Pezzuto JM (2002) Cancer chemopreventive activity of resveratrol. Ann N Y Acad Sci 957:210–229
Bhushan B, Garg SK, Kumar J, Shukla PK (2008) Effect of polyherbal feed supplement on production performance
and nutrient utilization in broiler chicks. Indian J Poult Sci 43(1):67–70
Bohn T (2014) Dietary factors affecting polyphenol bioavailability. Nutr Rev 72(7):429–452
Bors W, Heller W, Michel C et al (1990) In: Packer L, Glazer AN (eds) Methods in enzymology, vol 186. Academic
Press, San Diego, CA, pp 343–355
Breinholt V, Hossaini A, Svendsen GW et al (2000) Estrogenic activity of flavonoids in mice. The importance of
estrogen receptor distribution, metabolism and bioavailability. Food Chem Toxicol 38 (7):555–564
Brglez M (2016) Polyphenols: extraction methods, antioxidative action, bioavailability and anticarcinogenic effects.
Molecules 21(7):901
Bull E (2000) What is nutraceutical? Pharm J 265:57–58
Burnett BP, Stenstrom KK, Baarsch MJ et al (2009) A flavonoid mixture, dual inhibitor of cyclooxygenase and 5-
lipoxygenase enzymes, shows superiority to glucosamine/chondroitin for pain management in moderate osteoarthritic
dogs. Int J Appl Res Vet Med 7(1):1–10
Caturla N, Vera-Samper E, Villalaín J et al (2003) The relationship between the antioxidant and the antibacterial
properties of galloylated catechins and the structure of phospholipid model membranes. Free Radic Biol Med 34(6):648–
662
Cemeli E, Schmid TE, Anderson D (2004) Modulation by flavonoids of DNA damage induced by estrogen-like
compounds. Environ Mol Mutagen 44:420–426
Chen ZY, Chan PT, Ho KY et al (1996) Antioxidant activity of natural flavonoids is governed by number and location of
their aromatic hydroxyl groups. Chem Phys Lipids 79:157–163
Cheynier V (2005) Polyphenols in foods are more complex than often thought. Am J Clin Nutr 81:223S–229S
Choi YT, Jung CH, Lee SR et al (2001) The green tea polyphenol()- epigallocatechin gallate attenuates b-amyloid-
induced neurotoxicity in cultured hippocampal neurons. Life Sci 70:603–614
Choi HJ, Kim JH, Lee CH et al (2009) Antiviral activity of quercetin 7-rhamnoside against porcine epidemic. Antivir Res
81(1):77–80
Clifford MN (1999) Chlorogenic acids and other cinnamates–nature, occurrence and dietary burden. J Sci Food Agric
79:362–372
Clifford MN, Scalbert A (2000) Ellagitannins–nature, occurrence and dietary burden. J Sci Food Agric 80(7):1118–1125
Corder R, Douthwaite JA, Lees DM et al (2001) Health: endothelin-1 synthesis reduced by red wine. Nature
414(6866):863
Corona G, Spencer JP, Dessi MA (2009) Extra virgin olive oil phenolics: absorption, metabolism, and biological
activities in the GI tract. Toxicol Ind Health 25:285–293
Cushnie TT, Lamb AJ (2005) Antimicrobial activity of flavonoids. Int J Antimicrob Agents 26(5):343–356
Czapek F (1925) Biochemie der Pflanzen, vol 2. G. Fischer, Switzerland Day AJ, Canada FJ, Diaz JC et al (2000)
Dietary flavonoid and isoflavones glycosides are hydrolysed by the lactase site of lactase phloridzin hydrolase. FEBS
Lett 468:166–170
Demrow HS, Slane PR, Folts JD (1995) Administration of wine and grape juice inhibits in vivo platelet activity and
thrombosis in stenosed canine coronary arteries. Circulation 91:1182–1188
Divya, Mandal AB, Biswas A et al (2014) Effect of dietary Moringa oleifera leaves powder on growth performance,
blood chemistry, meat quality and gut microflora of broiler chicks. Anim Nutr Feed Technol 14:349–357
Domanski M, Mitchell G, Pfeffer M et al (2002) Pulse pressure and cardiovascular disease-related mortality: follow-up
study of the multiple risk factor intervention trial (MRFIT). JAMA 287:2677–2683
Donovan JL, Bell JR, Kasim KS et al (1999) Catechin is present as metabolites in human plasma after consumption of
red wine. J Nutr 129:1662–1668
Donovan JL, Manach C, Faulks RM et al (2006) Absorption and metabolism of dietary secondary metabolites. In:
Crozier A, Clifford MN, Ashihara H (eds) Plant secondary metabolites: occurrence, structure and role in the human diet.
Blackwell Publishing, Oxford, NY, pp 303–351
Erlund I, Silaste ML, Alfthan G et al (2002) Plasma concentrations of the flavonoids hesperetin, naringenin and
quercetin in human subjects following their habitual diets, and diets high or low in fruit and vegetables. Eur J Clin Nutr
56:891–898
Evan SK, Braunwald E, Wood HF (2007) A study of C-reactive protein in the serum of patients with congestive heart
failure. Am Heart J 51:533–541
Faria A, Fernandes I, Norberto S et al (2014) Interplay between anthocyanins and gut microbiota. J Agric Food Chem
62:6898–6902
Farzaei MH, Bahramsoltani R, Abdollahi M et al (2016) The role of visceral hypersensitivity in irritable bowel syndrome:
pharmacological targets and novel treatments. J Neurogastroenterol Motil 22:558–574
356
 Field J, Rekers PE (1949) Studies of the effects of flavonoids on roentgen irradiation disease. comparison of the
protective influence of some flavonoids and vitamin c in dogs. J Clin Invest 28 (4):746–751
Forester SC, Waterhouse AL (2008) Identification of Cabernet Sauvignon anthocyanin gut microflora metabolites. J
Agric Food Chem 56(19):9299–9304
Formica JV, Regelson W (1995) Review of biology of quercetin and related bioflavonoids. Food Chem Toxicol
33:1061–1080
Fotsis T, Pepper MS, Aktas E et al (1997) Flavonoids, dietary-derived inhibitors of cell proliferation and in vitro
angiogenesis. Cancer Res 57:2916–2921
Fremont L, Belguendouz L, Delpal S (1999) Antioxidant activity of resveratrol and alcohol-free wine polyphenols
related to LDL oxidation and polyunsaturated fatty acids. Life Sci 64:2511–2521
Ganesan K, Xu B (2017) A critical review on polyphenols and health benefits of black soybeans. Nutrients 9:455.
https://doi.org/10.3390/nu9050455
Garg SK (2016) Green coffee bean. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity, 1st edn. Academic
Press/Elsevier, San Diego, CA, pp 653–667
Gee JM, DuPont SM, Day AJ et al (2000) Intestinal transport of quercetin glycosides in rats involves both
deglycosylation and interaction with the hexose transport pathway. J Nutr 130:2765–2771
Geetha S, Singh V, Havazhagan G et al (2002) Antioxidant and immunomodulatory properties of Sea buckthorn—an in
vitro study. J Ethnopharmacol 79:373–378
Goliomytis M, Tsoureki D, Simitzis PE et al (2014) The effects of quercetin dietary supplementation on broiler growth
performance, meat quality, and oxidative stability. Poult Sci 93:1957–1962
Graefe EU, Wittig J, Mueller S et al (2001) Pharmacokinetics and bioavailability of quercetin glycosides in humans. J
Clin Pharmacol 41:492–499
Gravina HD, Tafuri NF, Silva Júnior A et al (2011) In vitro assessment of the antiviral potential of trans cinnamic acid,
quercetin and morin against equid herpesvirus 1. Res Vet Sci 91(3):158–162
Greiner LL, Stahl TS, Stabel TJ (2001) The effect of dietary soy genistein on pig growth and viral replication during a
viral challenge. J Anim Sci 79(5):1272–1279
Guo Z, Yang X, Sun F et al (2009) A novel androgen receptor splice variant is up-regulated during prostate cancer
progression and promotes androgen depletion–resistant growth. Cancer Res 69 (6):2305–2313
Guo H, Xia M, Zou T et al (2012) Cyanidin 3-glucoside attenuates obesity-associated insulin resistance and hepatic
steatosis in high-fat diet-fed and db/db mice via the transcription factor FoxO1. J Nutr Biochem 23:349–360
Haqqi TM, Anthony DD, Gupta S et al (1999) Prevention of collageninduced arthritis in mice by a polyphenolic fraction
from green tea. Proc Natl Acad Sci USA 96(8):4524–4529
Hatcher DW, Kruger JE (1997) Simple phenolic acids in flours prepared from Canadian wheat: relationship to ash
content, color, and polyphenol oxidase activity. Cereal Chem 74:337–343
Heaney R (2002) Effects of caffeine on bone and calcium economy. Food Chem Toxicol 40:1263–1270
Hider RC, Liu ZD, Khodr HH (2001) Metal chelation of polyphenols. Methods Enzymol 335:190–203
Hollman PC, Katan MB (1997) Absorption, metabolism and health effects of dietary flavonoids in man. Biomed
Pharmacother 51:305–310
Hollman PCH, van het Hof KH, Tijburg LBM et al (2001) Addition of milk does not affect the absorption of flavonols
from tea in man. Free Radic Res 34:297–300
Huang RY, Yu YL, Cheng WC et al (2010) Immunosuppressive effect of quercetin on dendritic cell activation and
function. J Immunol 184 (12):6815–6821
Ichimura T, Otake T, Mori H et al (1999) HIV-1 protease inhibition and anti-HIV effect of natural and synthetic water-
soluble lignin-like substances. Biosci Biotechnol Biochem 63(12):2202–2204
Iqbal Z, Kamran Z, Sultan JI et al (2015) Replacement effect of vitamin E with grape polyphenols on antioxidant status,
immune, and organs histopathological responses in broilers from 1- to 35-d age. J Appl Poult Res 24(2):127–134
Jaganath IB, Mullen W, Edwards CA et al (2006) The relative contribution of the small and large intestine to the
absorption and metabolism of rutin in man. Free Radic Res 40:1035–1046
Jayanthi M, Garg SK, Yadav P et al (2015) Some newer marker phytoconstituents in methanolic extract of Moringa
oleifera leaves and evaluation of its immunomodulatory and splenocytes proliferation potential in rats. Indian J Pharm
47(5):518–523
Jeon SY, Bae K, Seong YH et al (2003) Green tea catechins as a BACE1 (beta-secretase) inhibitor. Bioorg Med Chem
Lett 13(22): 3905–3908
Ju YH, Allred CD, Allred KF et al (2001) Physiological concentrations of dietary genistein dose-dependently stimulate
growth of estrogendependent human breast cancer (MCF-7) tumors implanted in athymic nude mice. J Nutr
131(11):2957–2962
Jung CH, Lee JY, Cho CH et al (2007) Anti-asthmatic action of quercetin and rutin in conscious guinea-pigs challenged
with aerosolized ovalbumin. Arch Pharm Res 30(12):1599–1607
Kampa M, Vassilia-Ismini A, George N et al (2004) Antiproliferative and apoptotic effects of selective phenolic acids on
T47D human breast cancer cells: potential mechanisms of action. Breast Cancer Res 6:63–74
Kauss T, Moynet D, Rambert J et al (2008) Rutoside decreases human macrophage-derived inflammatory mediators
and improves clinical signs in adjuvant-induced arthritis. Arthritis Res Ther 10(1):R19

357
 Kim HP, Mani I, Iversen L et al (1998) Effects of naturally-occurring flavonoids and bioflavonoid on epidermal
cyclooxygenase and lipoxygenase from guinea-pigs. Prostaglandins Leukot Essent Fatty Acids 58(1):17–24
Kim Y, Narayanan S, Chang K (2010) Inhibition of influenza virus replication by plant-derived isoquercetin. Antivir Res
88:227–235
Korver D (2012) Implications of changing immune function through nutrition in poultry. Anim Feed Sci Technol 173:54–
64
Kossel A (1891) Uber die Chemische Zusammensetzung der Zelle. Arch Physiol 1891:181–186
Kumamoto M, Sonda T, Nagayama K et al (2001) Effects of pH and metal ions on antioxidative activities of catechins.
Biosci Biotechnol Biochem 65(1):126–132
Lala G, Malik M, Zhao C et al (2006) Anthocyanin-rich extracts inhibits multiple biomarkers of colon cancer in rats. Nutr
Cancer 54:84–93
Larrosa M, Garcia-Conesa MT, Espín JC et al (2010) Ellagitannins, ellagic acid and vascular health. Mol Asp Med
31(6):513–539
Lee J, Koo N, Min DB (2004) Reactive oxygen species, aging, and antioxidative nutraceuticals. Compr Rev Food Sci
Technol 3:21–33
Lempereur I, Rouau X, Abecassis J (1997) Genetic and agronomic variation in arabinoxylan and ferulic acid contents
of durum wheat (Triticum durum L.) grain and its milling fractions. J Cereal Sci 25:103–110
Levites Y, Amit T, Mandel S et al (2003) Neuroprotection and neurorescue against Abeta toxicity and PKC-dependent
release of nonamyloidogenic soluble precursor protein by green tea polyphenol ()-epigallocatechin-3-gallate. FASEB J
17:952–954
Liu H, Qiu N, Ding H et al (2008) Polyphenols contents and antioxidant capacity of 68 Chinese herbals suitable for
medical or food uses. Food Res Int 41(4):363–370
Lloyd-Jones DM, Larson MG, Leip EP et al (2002) Lifetime risk for developing congestive heart failure: the
Framingham Heart Study. Circulation 106:3068–3072
Lou Z, Wang H, Zhu S et al (2011) Antibacterial activity and mechanism of action of chlorogenic acid. J Food Sci
76(6):M398– M403
Low S, Peak RM, Smithson CW et al (2014) Evaluation of a topical gel containing a novel combination of essential oils
and antioxidants for reducing oral malodor in dogs. Am J Vet Res 75(7):653–657
Maddi VS, Aragade PD, Digge VG et al (2007) Importance of nutraceuticals in health management. Pharmacol Rev
1:377–379
Maleser D, Kuntic V (2007) Investigation of metal-flavonoid chelates and the determination of flavonoids via metal-
flavonoid complexing reactions. J Serb Chem Soc 72:921–939
Manach C, Scalbert A, Morand C et al (2004) Polyphenols: food sources and bioavailability. Am J Clin Nutr 79:727–747
Manach C, Williamson G, Morand C et al (2005) Bioavailability and bioefficacy of polyphenols in humans. I. Review of
97 bioavailability studies. Am J Clin Nutr 81:230S–242S
Mandel S, Weinreb O, Amit T et al (2004) Cell signaling pathways in the neuroprotective actions of the green tea
polyphenol ()-epigallocatechin-3-gallate: implications for neurodegenerative diseases. J Neurochem 88:1555–1569
Mantena SK, Baliga MS, Katiyar SK (2006) Grape seed proanthocyanidins induce apoptosis and inhibit metastasis of
highly metastatic breast carcinoma cells. Carcinogenesis 27:1682–1691
Marin L, Miguelez EM, Villar CJ et al (2015) Bioavailability of dietary polyphenols and gut microbiota metabolism:
antimicrobial properties. Biomed Res Int 2015:905215
Marks SC, Mullen W, Borges G et al (2009) Absorption, metabolism, and excretion of cider dihydrochalcones in healthy
humans and subjects with an ileostomy. J Agric Food Chem 57:2009–2015
Matthies A, Clavel T, Gütschow M et al (2008) Conversion of daidzein and genistein by an anaerobic bacterium newly
isolated from the mouse intestine. Appl Envrion Microbiol 74:4847–4852
McNiven MA, Richardson GF (2006) Effect of quercetin on capacitation status and lipid peroxidation of stallion
spermatozoa. Cell Preserv Technol 4:3. https://doi.org/10.1089/cpt.2006.4.169
Montero R (2016) Alterations in primary and secondary metabolism in Vitis vinifera ‘Malvasía de Banyalbufar’ upon
infection with Grapevine leafroll-associated virus 3. Physiol Plant 157(4):442–452
Moon JH, Nakata R, Oshima S et al (2000) Accumulation of quercetin conjugates in blood plasma after the short-term
ingestion of onion by women. Am J Phys 279:R461–R467
Owen RW, Giacosa A, Hull WE et al (2000) The antioxidant/anticancer potential of phenolic compounds isolated from
olive oil. Eur J Cancer 36:1235–1247
Panche AN, Diwan AD, Chandra SR (2016) Flavonoids: an overview. J Nutr Sci 5(47):1–15
Pandey M, Verma RK, Saraf SA (2010) Nutraceuticals: new era of medicine and health. Asian J Pharm Clin Res 3:11–
15
Pathak AK, Nainwal N, Goyal BM et al (2010) Pharmacological activity of Trachyspermum ammi: a review. J Pharm
Res 3(4):895–899
Pinto P, Santos CN (2017) Worldwide polyphenol intake: assessment methods and identified gaps. Eur J Nutr
56:1393–1408
Proestos C, Bakogiannis A, Psarianos C et al (2005) High performance liquid chromatography analysis of phenolic
substances in Greek wines. Food Control 16:319–323

358
 Rees CR, Costin JM, Fink RC et al (2008) In vitro inhibition of dengue virus entry by p-sulfoxy-cinnamic acid and
structurally related combinatorial chemistries. Antivir Res 80:135–142
Resuleo G (2016) Resveratrol: multiple activities on the biological functionality of the cell. In: Gupta RC (ed)
Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity, 1st edn. Academic Press/Elsevier, San Diego, CA, pp 453–464
Ross R (1999) Atherosclerosis – an inflammatory disease. N Engl J Med 340:115–126
Rupasinghe HP, Ronalds CM, Rathgeber B et al (2010) Absorption and tissue distribution of dietary quercetin and
quercetin glycosides of apple skin in broiler chickens. J Sci Food Agric 90:1172–1178
Saha RK, Takahashi T, Suzuki T (2009) Glucosyl hesperidin prevents influenza a virus replication in vitro by inhibition
of viral sialidase. Biol Pharm Bull 32(7):1188–1192
Saura-Calixto F, Serrano J, Goñi I (2007) Intake and bioaccessibility of total polyphenols in a whole diet. Food Chem
101:492–501
Schnitzler P, Nolkemper S, Stintzing FC et al (2008) Comparative in vitro study on the anti-herpetic effect of
phytochemically characterized aqueous and ethanolic extracts of Salvia officinalis grown at two different locations.
Phytomedicine 15(1–2):62–70
Selma MV, Espin JC, Tomas-Barberan FA (2009) Interaction between phenolics and gut microbiota: role in human
health. J Agric Food Chem 57:6485–6501
Serafini M, Ghiselli A, Ferro-Luzzi A (1996) In vivo antioxidant effect of green and black tea in man. Eur J Clin Nutr
50:28–32
Shahidi F, Naczk M (1995) Food phenolics, sources, chemistry, effects, applications. Technomic Publishing, Lancaster,
PA
Siard MH, McMurry KE, Adams AA (2016) Effects of polyphenols including curcuminoids, resveratrol, quercetin,
pterostilbene, and hydroxypterostilbene on lymphocyte pro-inflammatory cytokine production of senior horses in vitro. Vet
Immunol Immunopathol 173:50–59
Sichel G, Corsaro C, Scalia M et al (1991) In vitro scavenger activity of some flavonoids and melanins against O2-(.).
Free Radic Biol Med 11:1–8
Silva G, Fachin AL, Beleboni RO et al (2013) In vitro action of flavonoids in the canine malignant histiocytic cell line
DH82. Molecules 18(12):15448–15463
Singh A, Bora TC, Singh NR (2012) Preliminary photochemical analysis and antimicrobial potential of fermented
Bambusa balcooa shoots. Bioscan 7(3):391–394
Stefani ED, Boffetta P, Deneo-Pellegrini H et al (1999) Dietary antioxidants and lung cancer risk: a case-control study
in Uruguay. Nutr Cancer 34:100–110
Subiza J, Subiza JL, Hinojosa Met al (1989) Anaphylactic reaction after the ingestion of chamomile tea: a study of
cross-reactivity with other composite pollens. J Allergy Clin Immunol 84:353–358
Sultana B, Anwar F, Przybylski R (2007) Antioxidant activity of phenolic components present in barks of Azadirachta
indica, Terminalia arjuna, Acacia nilotica, and Eugenia jambolana Lam. trees. Food Chem 104(3):1106–1114
Swain B, Naik PK, Chakurkar EB et al (2017) Effect of Supplementation of Moringa oleifera leaf meal (MOLM) on the
performance of Vanaraja laying hens. Indian J Anim Sci 87(3):353–355
Tajik N, Tajik M, Mack I et al (2017) The potential effects of chlorogenic acid, the main phenolic components in coffee,
on health: a comprehensive review of the literature. Eur J Nutr 56:2215–2244
Tao J, Hu Q, Yang J et al (2007) In vitro anti-HIV and -HSV activity and safety of sodium rutin sulfate as a microbicide
candidate. Antivir Res 75:227–233
Thapa M, Kim Y, Desper J et al (2011) Synthesis and antiviral activity of substituted quercetins. Bioorg Med Chem Lett
22(1): 353–356
Tijburg LBM, Mattern T, Folts JD et al (1997) Tea flavonoids and cardiovascular diseases: a review. Crit Rev Food Sci
Nutr 37:771–785
Tomas-Barberan FA, Clifford MN (2000) Flavanones, chalcones and dihydrochalcones—nature, occurrence and
dietary burden. J Sci Food Agric 80:1073–1080
Toshiya A, Manabu O, Hideyuki H et al (1999) Hypokalemia with syncope caused by habitual drinking of oolong tea.
Intern Med 38:252–256
Towler MC, Hardie DG (2007) AMP-activated protein kinase in metabolic control and insulin signaling. Circ Res
100(3):328–341
Valdes KI, Salem AZM, Lopez S et al (2015) Influence of exogenous enzymes in presence of Salix babylonica extract
on digestibility, microbial protein synthesis and performance of lambs fed maize silage. J Agric Sci 153:732–742
Vita JA (2005) Polyphenols and cardiovascular disease: effects on endothelial and platelet function. Am J Clin Nutr
81:292–297
Vogelstein B, Kinzler KW (2004) Cancer genes and the pathways they control. Nat Med 10:789–799
Wang LQ (2002) Mammalian phytoestrogens: enterodiol and enterolactone. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed
Life Sci 777 (1–2):289–309
Wang J, Zhang Q, Jin S et al (2008) Genistein modulate immune responses in collagen-induced rheumatoid arthritis
model. Maturitas 59:405–412
Wein S, Wolffram S (2014) Concomitant intake of quercetin with a grain-based diet acutely lowers postprandial plasma
glucose and lipid concentrations in pigs. Biomed Res Int 2014:748742

359
 Whelton PK, He J, Appel LJ et al (2002) Primary prevention of hypertension: clinical and public health advisory from
The National High Blood Pressure Education Program. JAMA 288:1882–1888
Wildman REC (ed) (2001) Handbook of nutraceuticals and functional foods. CRC Press, Boca Raton, pp 13–30
Wu T, Zang X, He M et al (2013) Structure-activity relationship of flavonoids on their anti-Escherichia coli activity and
inhibition of DNA gyrase. J Agric Food Chem 61(34):8185–8190
Yang J, Guo J, Yuan J (2008) In vitro antioxidant properties of rutin. LWT-Food Sci Technol 41(6):1060–1066
Yang C, Yifan L, Dan L et al (2015) Bamboo leaf flavones and tea polyphenols show a lipid-lowering effect in a rat
model of hyperlipidemia. Drug Res (Stuttg) 65(12):668–671
Zandi K, Teoh B, Sam S et al (2011) In vitro antiviral activity of fisetin, rutin and naringenin against dengue virus type-2.
J Med Plant Res 4 (23):5534–5539
Zern TL, West KL, Fernandez ML (2003) Grape polyphenols decrease plasma triglycerides and cholesterol
accumulation in the aorta of ovariectomized guinea pigs. J Nutr 133(7):2268–2272
Zhang G, Flach CR, Mendelsohn R (2007) Tracking the dephosphorylation of resveratrol triphosphate in skin by
confocal Raman microscopy. J Control Release 123(2):141–147

360
 Antioxidantes na prevenção e tratamento de doenças e
toxicidade
Dejan Milatovic and Ramesh C. Gupta

Resumo
O estresse oxidativo reflete um desequilíbrio entre a produção de oxigênio reativo (ROS)
e espécies reativas de nitrogênio (RNS) e a capacidade do corpo de desintoxicar seus
efeitos tóxicos por meio do sistema de defesa antioxidante. Os radicais reativos derivados
do oxigênio molecular ou do nitrogênio são gerados internamente nos sistemas do corpo
humano e animal ou por meio de fontes externas como poluição ambiental, metais tóxicos
e pesticidas. ROS e RNS atacam uma variedade de moléculas biológicas essenciais,
incluindo lipídios, proteínas celulares e DNA, causam alterações na fisiologia normal de
células e órgãos e ativam processos de doenças. Dado o importante papel do estresse
oxidativo na lesão celular e tecidual, vários antioxidantes têm sido explorados por seus
efeitos benéficos na regulação da produção e neutralização de ROS/RNS, bem como na
preservação do equilíbrio. Este capítulo analisa o estresse oxidativo e seus
biomarcadores e discute sistemas antioxidantes essenciais para prevenir e melhorar os
efeitos prejudiciais de ROS e RNS.

Palavras-chave: Estresse oxidativo · Espécies reativas de oxigênio · Biomarcadores ·

Antioxidantes

D. Milatovic. Alexandria, VA, USA

R. C. Gupta Toxicology Department, Breathitt Veterinary Center, Murray State University, Hopkinsville, KY,
USA

1. Introdução
As espécies reativas de oxigênio (ROS) e as espécies reativas de nitrogênio (RNS) são
moléculas altamente reativas com um ou mais elétrons desemparelhados em sua camada
externa. Essas espécies oxidantes podem ser geradas em uma variedade de processos
endógenos (respiração celular, explosões fagocíticas oxidativas, defesa antibacteriana e
outros) ou durante exposições a vários agentes (pesticidas, metais, xenobióticos e
radiação ionizante) (Chakravarti e Chakravarti 2007; Mangialasche et al. 2009; Il'yasova et
al. 2012). O desequilíbrio entre a geração de ROS e RNS e a capacidade da célula de
neutralizá-los por defesa antioxidante é definido como estresse oxidativo.
361
ROS e RNS produzidos sob estresse oxidativo são conhecidos por danificar biomoléculas
celulares, incluindo lipídios, açúcares, proteínas e polinucleotídeos, e por iniciar efeitos
prejudiciais (Negre-Salvayre et al. 2010; Roberts et al. 2010; Marrocco et al. 2017) . Os
radicais livres são gerados principalmente na célula como superóxido por fosforilação
oxidativa mitocondrial (Federico et al. 2012; Trewin et al. 2018; Sas et al. 2018). O
superóxido pode gerar outro ROS, radical hidroxila (HO), pelas reações de Fenton e
Haber-Weiss ou RNS formando peroxinitrito (ONOO) em reação com óxido nítrico (NO)
(Dix e Aikens 1993; Guéraud et al. 2010; Vatassery 2004).

ROS e RNS também são gerados por enzimas rigidamente reguladas ou sistemas
enzimáticos localizados nas membranas celulares ou organelas. Eles são produzidos por
enzimas associadas ao sistema da cadeia respiratória, síntese de prostaglandinas,
fagocitose e sistemas do citocromo P450 (Halliwell e Gutteridge 2007; Bahorun et al.
2006; Kumar e Pandey 2015; Pacher et al. 2007; Pizzino et al. 2017). A enzima óxido
nítrico sintase (NOS) catalisa a produção de NO a partir da larginina com fosfato de
dinucleotídeo de adenina nicotinamida (NADPH) e oxigênio. Existem três isoformas
principais de NOS: (a) NOS neuronal (nNOS), (b) NOS endotelial (eNOS) e (c) NOS
induzível (iNOS) produzida pela micróglia, astrócitos e neurônios. As isoformas de óxido
nítrico sintases e nicotinamida adenina dinucleotídeo fosfato (NADP) oxidase que
produzem ROS/RNS também estão envolvidas na transmissão neuronal, sinalização
celular, reações ao estresse e vários agentes, plasticidade sináptica e a indução de
respostas mitogênicas e apoptóticas (Beal 2000; Valko et al. 2007; Mangialasche et al.
2009). Portanto, ROS/RNS gerados por sistemas enzimáticos não atuam apenas como
subproduto tóxico, mas também têm função de controle na célula (Babior 1999; Valko et
al. 2007). Este capítulo descreve vários biomarcadores de estresse oxidativo, atenuação
de lesão oxidativa e sistemas antioxidantes.

2. Biomarcadores de Estresse Oxidativo

Produtos de modificação induzida por ROS/RNS de lipídios, proteínas, carboidratos e
DNA podem ser usados como marcadores de estresse oxidativo (Salisbury e Bronas
2015; Frijhoff et al. 2015; Liguori et al. 2018). ROS/RNS pode induzir a oxidação de
proteínas, nitrosação e hidrólise da ligação peptídica na presença de prolina, afetar
modificações no DNA, incluindo oxidação de nucleotídeos, quebra de fita, perda de bases
e formação de aduto38 (Berlett e Stadtman 1997; Wiseman e Halliwell 1996; Dizdaroglu et
al. 2002; Marrocco et al. 2017) ou danificar diretamente lipídios contendo ligações duplas
38 Produto da adição direta de duas ou mais moléculas diferentes, resultando em um único produto de reação contendo todos os
átomos de todos os componentes iniciais. O resultado é considerado uma espécie molecular distinta.
362
de carbono com carbono, como colesterol, fosfolipídios e ácidos graxos poliinsaturados
(PUFAs) (Morrow et al. 1990; Montine et al. 2002). Ao longo dos anos, os produtos
lipídicos do dano oxidativo geraram intenso interesse como marcadores in vivo de dano
oxidativo (De Zwart et al. 1999; Milatovic et al. 2011). Estes compostos incluem os F2-
isoprostanos (F2-IsoPs) e F4-neuroprostanos (F4-NeuroPs) (Morrow et al. 1990; Yin et al.
2007; Janicka et al. 2010; Milatovic et al. 2011).

F2-IsoPs são compostos semelhantes à prostaglandina que são produzidos por um

mecanismo catalisado por radicais livres não ciclo-oxigenase envolvendo a peroxidação
do PUFA, ácido araquidônico (AA, C20:4, ω-6). F2-IsoPs são formados principalmente in
situ, esterificados em fosfolipídios e, subsequentemente, liberados por fosfolipases
(Famm e Morrow 2003; Gao et al. 2006). Em contraste com F2-IsoPs, as prostaglandinas
(PGs) são geradas apenas a partir do ácido araquidônico livre (Morrow et al. 1990).

Análogos de F2-IsoPs denominados neuroprostanos (F4-NeuroPs), devido aos altos

níveis de seu precursor no cérebro, são formados por peroxidação de ácido
docosahexaenóico (DHA, C22:6, ω-3) (Roberts et al. 1998). Enquanto o DHA é altamente
concentrado nas membranas neuronais, o AA é distribuído uniformemente em todos os
tipos de células em todos os tecidos (Salem et al. 1986). Portanto, F2-IsoPs fornece um
índice de dano oxidativo global no cérebro e a determinação de F4-NeuroPs permite a
quantificação específica de dano oxidativo às membranas neuronais. Ambos os
compostos semelhantes à prostaglandina podem ser quantificados por métodos baseados
em espectrometria de massa com o limite inferior de detecção de F2-IsoPs na faixa de
picograma baixo (Montine et al. 2004; Milatovic et al. 2005a, b; Milatovic et al. 2011).

O produto malonildialdeído (MDA) também é usado para quantificar o estresse oxidativo.

Este produto é gerado por peroxidação enzimática e de radical livre de PUFAs que
contêm, pelo menos, três ligações duplas. O MDA pode ser gerado pelo tromboxano
sintase, mas também derivado da degradação peroxidativa não enzimática de lipídios
insaturados (Kadiiska et al. 2005). Adutos de MDA/TBA, produzidos na reação de MDA
com ácido tiobarbitúrico (TBA), são usados para medir via espectrofotometra os níveis de
estresse oxidativo e consequente peroxidação lipídica (Spickett et al. 2010; Fang et al.
2017).

ROS e RON podem reagir com a molécula de DNA e induzir nitração e desaminação de
purinas, base de purina ou pirimidina ou lesões de açúcar, DNA/DNA, ou ligações
cruzadas de DNA/proteína (Dizdaroglu et al. 2002). O aduto de DNA mais investigado, 8-
hidroxi-20-desoxiguanosina (8-OHdG), pode ser avaliado por várias técnicas, incluindo

363
GC-MS, HPLC, LC-MS, imunoensaio e eletroforese capilar (Lovell e Markesbery 2007;
Fang et al . 2017).

ROS e RNS também podem atacar qualquer aminoácido e produzir derivados de

carbonila (Stadtman e Levine 2003). Carbonilos de proteína podem ser detectados com
2,4-dinitrofenilhidrazina (DNPH) e usados como biomarcadores de estresse oxidativo
(Dalle-Donne et al. 2003). Produtos de modificação oxidativa/nitrosativa de proteínas são
relativamente estáveis e ensaios sensíveis estão disponíveis para sua detecção
(Chakravarti e Chakravarti 2007).

3. Estresse Oxidativo e Neurodegeneração

O estresse oxidativo desempenha um papel importante nos processos
neurodegenerativos, como excitotoxicidade e neurotoxicidade associada a
anticolinesterases ou metais. O cérebro é muito sensível ao estresse oxidativo por causa
de sua alta atividade metabólica, alta densidade de substratos oxidáveis e deficiência
relativa em sistemas antioxidantes (Garcia-Mesa et al. 2016; Simioni et al. 2018).

Estudos anteriores apoiaram um papel para o estresse oxidativo e geração excessiva de

ROS e RNS em ácido caínico (KA)- e neuro toxicidades induzidas por anticolinesterase
(Dettbarn et al. 2001; Yang e Dettbarn 1998; Gupta et al. 2001a, b, 2007; Milatovic et al.
2000a, b, 2001, 2005a; Zaja-Milatovic et al. 2008). A exposição a anticolinesterases,
diisopropil fosforofluoridato (DFP) e carbofurano (CF), suprimiu significativamente a
atividade da AChE no cérebro de rato, induziu convulsão grave e aumentou
significativamente os biomarcadores de dano global por radicais livres (F2-IsoPs) e dano
oxidativo às membranas neuronais (F4-NeuroPs) (Gupta et al. 2007; Zaja-Milatovic et al.
2009). Após a exposição ao DFP, os níveis de F2-IsoPs e F4-NeuroPs são mais do que
duas e cinco vezes maiores em comparação com os controles, respectivamente (Zaja-
Milatovic et al. 2009). Nossos estudos em camundongos também mostraram que a
excitotoxicidade induzida por KA causou um aumento nos biomarcadores de dano
oxidativo, F2-IsoPs e F4-NeuroPs (Zaja-Milatovic et al. 2008) (Tabela 1).

364
 Tabela 1 Concentrações cerebrais de F2-IsoPs e F4-NeuroPs e degeneração dendrítica de
neurônios piramidais do hipocampo após convulsões induzidas por KA em camundongos

Comprimento Densidade da coluna

F2-IsoPs (ng/g) F4-NeuroPs (ng/g)
dendrítico (μg/ml e 3,77 m) (número/100 μg/ml e 3,77 m de dendrito)
Controle 3.07± 0.05 13.89±0.58 1032.10±61.41 16.45±0.55
KA 30 min 4.81±0.19* 34.27±2.71* 363.44±20.78* 8.81±0.55*
KA 60 min 3.40±0.18 18.55±1.26 425.71±23.04* 7.44±0.56*
Os dados de camundongos expostos a KA foram coletados 30 min ou 60 min após a injeção
* ANOVA de uma via mostrou p <0,0001 para cada ponto final. O teste de comparação múltipla de
Bonferroni mostrou diferença significativa (p <0,001) em comparação com o controle de veículo injetado

Exposição a solução salina Exposição ao ácido caínico

Fig. 1 Fotomicrografias de hipocampos de camundongos com neurônios piramidais da área CA1 do

hipocampo dos cérebros 1 h após as injeções de solução salina (controle) e ácido caínico (KA, 1 nmol/5 μg/ml e 3,77 l,
ICV). Tratamento com degeneração induzida por KA do sistema dendrítico do hipocampo e diminuição do
comprimento total do dendrito e da densidade da coluna dos neurônios piramidais do hipocampo

Além disso, investigamos se o dano oxidativo cerebral induzido por convulsão em ratos e
camundongos adultos é acompanhado por alterações na integridade do sistema
dendrítico CA1 hipocampal. Os resultados de nossos estudos avaliados por impregnação
de Golgi e morfometria assistida por Neurolucida mostraram que tanto a excitotoxicidade
induzida por KA quanto por anticolinesterase direcionada ao sistema dendrítico com
degeneração profunda da coluna e regressão dos dendritos em ambos os modelos
animais (Tabela 1 e Fig. 1) (Zaja-Milatovic et al. 2008, 2009). Juntos, nossos estudos
demonstram que ambos os modelos de excitotoxicidade levam a danos oxidativos
cerebrais profundos e neurodegeneração na região CA1 hipocampal do cérebro.

A exposição a alguns metais, incluindo manganês (Mn), também pode levar a danos
oxidativos e condições patológicas, incluindo neurodegeneração. Os primeiros estudos
demonstraram que as mitocôndrias sequestram ativamente o Mn, causando a inibição da
fosforilação oxidativa (Cotzias e Greenough 1958; Gavin et al. 1990, 1992). Nossos
estudos com astrócitos primários também mostraram que a exposição ao Mn induz dano
oxidativo e um consequente aumento nos biomarcadores de estresse oxidativo (Milatovic
et al. 2007, 2009). As concentrações de Mn conhecidas por provocar efeitos neurotóxicos

365
(100 μg/ml e 3,77 M, 500 μg/ml e 3,77 M ou 1 mM) em astrócitos induziu elevações significativas nos níveis de
F2-IsoPs em todos os tempos de exposição investigados (Milatovic et al. 2007).

O estresse oxidativo induzido por Mn e a neurotoxicidade também são confirmados em

nosso modelo in vivo. Nosso estudo mostrou que um desafio único de camundongos com
Mn (100 mg/kg, s.c.) foi suficiente para produzir aumentos significativos em F2-IsoPs
cerebrais (Milatovic et al. 2009) 24 horas após a injeção. Nosso estudo também
demonstrou que a exposição ao Mn alterou os sistemas dendríticos de camundongos com
regressão dendrítica profunda de neurônios espinhosos do meio estriado (MSNs). Juntos,
esses estudos demonstraram que o estresse oxidativo é o mecanismo subjacente na
vulnerabilidade induzida por Mn dos neurônios do meio estriado.

4. Estresse oxidativo e antioxidantes em doenças não

neurodegenerativas
O papel do estresse oxidativo na fisiopatologia e antioxidantes na prevenção e tratamento
de doenças associadas ao coração (Wolfram et al. 2005; Willcox et al. 2008; Šterba et al.
2013), respiratório (Janssen 2008; Behndig et al. 2009; Kontakiotis et al. 2011; Nyunoya et
al. 2011), hepático (Jaeschke et al. 2012; Bischoff et al. 2016; Gwaltney-Brant 2016), renal
(Tucker et al. 2013; Modaresi et al. 2015), pancreático ( Brownlee 2001), articulações
esqueléticas (Gupta 2016) e músculos esqueléticos (Gupta et al. 2014), e outros foram
bem documentados.

5. Sistemas antioxidantes
A defesa antioxidante protege os sistemas biológicos dos efeitos prejudiciais de ROS e
RNS. Os mecanismos de defesa são amplamente baseados na presença de antioxidantes
(moléculas exógenas e endógenas) e no reparo ou remoção das moléculas/sistemas
lesados. A defesa antioxidante envolve uma variedade de estratégias, tanto enzimáticas,
como redutase, superóxido dismutase ou catalase, quanto não enzimáticas, envolvendo
caroteno, tocoferóis, flavonóides, ascorbato e glutationa (GSH) (Halliwell 2007).

Enzimas antioxidantes, como superóxido dismutase, glutationa peroxidase, catalase e

redutase, exercem ações sinérgicas na eliminação de radicais livres. A superóxido
dismutase é considerada a primeira linha de defesa contra a formação de radicais livres.
Catalisa a dismutação do radical superóxido em oxigênio e peróxido de hidrogênio. A
glutationa peroxidase e a redutase são enzimas dependentes da glutationa localizadas no

366
citoplasma, mitocôndria e núcleo (Gamble et al. 1999). A glutationa peroxidase metaboliza
o peróxido de hidrogênio em água usando glutationa reduzida como doador de hidrogênio
e é reciclada de volta em glutationa redutase pelo cofator NADPH. Ele desempenha um
papel importante no mecanismo de defesa nos eritrócitos contra os danos da peroxidação
lipídica (Sen 2000; Shah et al. 2014). O radical superóxido pode inativar diretamente
enzimas como a glutationa peroxidase e a catalase, que são necessárias para eliminar o
peróxido de hidrogênio do meio intracelular (Johnson e Giulivi 2005). Outra enzima
antioxidante, a catalase, está localizada nos peroxissomos (80%) e no citosol (20%) e
decompõe o peróxido de hidrogênio em água e oxigênio sem a produção de radicais livres
(Jones et al. 1981). A catalase não mostra atividade significativa em condições fisiológicas
devido à sua afinidade mais baixa do que a glutationa peroxidase para o peróxido de
hidrogênio, mas se torna uma enzima importante no estado de doença onde a
concentração de H2O2 é elevada (Chance et al. 1979). O sistema de defesa antioxidante
também envolve a glutationa S-transferase (Birben et al. 2012).

A glutationa (GSH, L-γ-glutamil-L-cisteinilglicina), um elemento importante do sistema

antioxidante não enzimático, é um tripeptídeo que representa o tiol não proteico mais
abundante presente na célula (Wu et al. 2004a; Lu 2009). GSH atua como um sistema de
defesa antioxidante por sua capacidade de eliminar ROS por meio da oxidação reversível
de GSH. A forma oxidada (GSSG) pode ser enzimaticamente reduzida a GSH pela
atividade da glutationa redutase e pelo poder redutor do NADPH. Em células e tecidos
saudáveis, mais de 90% do pool total de glutationa está na forma reduzida (GSH) e
menos de 10% existe na forma oxidada (Schafer e Buettner 2001).

A vitamina E foi identificada como um dos antioxidantes nutricionais mais relevantes. A

vitamina E refere-se a um grupo de compostos solúveis em gordura que incluem
tocoferóis e tocotrienóis. a-Tocoferol é a forma mais biologicamente ativa e tem
demonstrado proteger as células da peroxidação lipídica (Azlina et al. 2018; Simioni et al.
2018), dano oxidativo do DNA e proteínas celulares e degeneração da membrana
(Topinka et al. 1989). A vitamina E atua como um eliminador de radicais e um antioxidante
de quebra de cadeia, protegendo as células da peroxidação de PUFA em fosfolipídios de
membrana (VanAcker et al. 1993). Além disso, a vitamina E mantém a fosforilação
oxidativa na mitocôndria, regula a produção de ROS e acelera a restituição de metabólitos
de alta energia (Chow et al. 1999; Punz et al. 1998). Níveis diminuídos de vitamina E em
resposta à hiperóxia ou tratamento com convulsivos relatados em vários estudos (Mori et
al. 2004; Onodera et al. 2003; Rauca et al. 2004) sugerem que a vitamina E no cérebro é
consumida para prevenir danos oxidativos. A vitamina E também exerceu efeitos

367
anticonvulsivos ao regular positivamente a atividade da catalase em modelos de epilepsia
com pilocarpina (Xavier et al. 2007; Barros et al. 2007; Santos et al. 2008).

A eficácia da vitamina E antioxidante para suprimir um aumento de NO e peroxidação

lipídica e prevenir a neurodegeneração de neurônios do hipocampo também foi testada no
modelo de camundongo de excitotoxicidade induzida por KA (Zaja-Milatovic et al. 2008).
Nosso estudo mostrou que a vitamina E suprimiu aumentos induzidos por KA em citrulina
e marcadores cerebrais e neuronais de dano oxidativo, F2-IsoPs e F4-NeuroPs,
respectivamente (Fig. 2) (Zaja-Milatovic et al. 2008). É importante ressaltar que a vitamina
E suprimiu completamente a redução tanto na densidade da coluna quanto no
comprimento dendrítico dos neurônios piramidais da área do hipocampo CA de
camundongos expostos a KA (Fig. 3). Uma vez que o tratamento com vitamina E não
alterou a gravidade da convulsão induzida por cainita, seu efeito protetor é provavelmente
mediado pela prevenção da peroxidação lipídica e consequente dano neuronal, mas não
por seu efeito nas convulsões per se (Zaja-Milatovic et al. 2008).

Fig. 3 Comprimento dendrítico (a) e densidade da coluna (b) de neurônios piramidais da área CA1 do
hipocampo de camundongos após ICV KA com ou sem vitamina E ou pré-tratamento com PBN. Cérebros
de camundongos expostos a KA foram coletados 30 minutos após a injeção (n≥ 5 para cada grupo). ANOVA
unilateral teve p <0,001 com testes de comparação múltipla de Bonferroni significativos para KA versus
controle, vitamina E + KA ou tratamento com PBN + KA

A vitamina C, ácido ascórbico, é um antioxidante natural solúvel em água e um poderoso

inibidor da peroxidação lipídica. A vitamina C elimina os radicais livres por meio da
formação do radical ascorbil e, assim, evita danos às macromoléculas, como lipídios ou
DNA. Esta molécula também inibe a propagação de radicais livres e reduz os radicais α-
tocoferoxila e inibe a propagação de radicais livres (Huang et al. 2002). Os resultados de
modelos animais também demonstraram que a vitamina C melhora o edema e a
hipotensão e melhora a responsividade das artérias e o fluxo sanguíneo capilar (Tyml et
al. 2005; Wu et al. 2004b; Wilson 2009). A vitamina C inibe a expressão de moléculas de
368
adesão intracelular e, portanto, inibe a entrada de células do sistema imunológico na
microcirculação (Berger e Oudemans-van Straaten 2015). É importante ressaltar que a
vitamina C não apenas atenua o estresse oxidativo, mas também restaura a
responsividade vascular aos vasoconstritores (Tyml 2017), melhora o fluxo sanguíneo
microcirculatório, preserva as barreiras endoteliais, evita a apoptose e aumenta a defesa
bacteriana (Oudemans-van Straaten et al. 2014; Yamamoto et al. 2014; Yamamoto et al.
2010).

A vitamina A pertence a um grupo de hidrocarbonetos insaturados e pode ser encontrada

em duas formas lipossolúveis principais, retinol ou ésteres de retinila e caroteno. Tem
funções de crescimento e desenvolvimento, boa visão e manutenção do sistema
imunológico. O β-caroteno mais conhecido é um potente antioxidante capaz de extinguir o
oxigênio singlete (Di Mascio et al. 1991) e reduzir a peroxidação lipídica (Upritchard et al.
2003). A depleção de α-caroteno, licopeno, β-criptoxantina e luteína/zeaxantina foi
associada a uma variedade de doenças, incluindo doença cardiovascular (Gaziano et al.
1995) e aterosclerose (Prince et al. 1988). Juntos, a vitamina C, a vitamina E e os
carotenóides demonstraram neutralizar sinergicamente a peroxidação lipídica (Niki et al.
1995).

Os antioxidantes derivados de alimentos naturais também receberam grande atenção nas

últimas duas décadas. Flavonóides naturais, presentes em frutas, vegetais e ervas,
mostraram efeito positivo para a saúde em doenças neurodegenerativas, devido às suas
atividades de eliminação de radicais livres, evitando a peroxidação lipídica ou íons
metálicos quelantes (Lee et al. 2010; Rahal et al. 2014). Eles são uma classe de
compostos polifenólicos com uma estrutura benzo-γ-pirona amplamente representada em
plantas, responsável por várias atividades farmacológicas (Mahomoodally et al. 2005;
Pandey 2007). Eles respondem por> 85% dos componentes fenólicos do vinho tinto e
incluem diferentes moléculas, especialmente a quercetina, e os não flavonóides incluem
principalmente o resveratrol. O flavonóide afeta a supressão da síntese de ROS,
eliminando ROS e melhorando as defesas antioxidantes (Halliwell e Gutteridge 1998).

A melatonina, um hormônio de mamíferos sintetizado a partir da serotonina, também

mostrou propriedades antioxidantes (Nishida 2005; Sharman e Bondy 2016). A melatonina
exerce sua capacidade antioxidante estimulando a expressão e a atividade da glutationa
peroxidase e superóxido dismutase e inibindo a da óxido nítrico sintase (Pieri et al. 1995;
Dato et al. 2013). A melatonina tem efeitos antiinflamatórios e antiapoptóticos, mas
também pode atuar como um necrófago antioxidante de espécies radicais de oxigênio e
nitrogênio (Mahomoodally et al. 2005; Pandey 2007). Vários estudos em animais
369
demonstraram propriedades antioxidantes benéficas da melatonina em condições de
choque séptico (Heim et al. 2002; Kumar et al. 2013; Kumar e Pandey 2013). A
melatonina também suprimiu a disfunção mitocondrial, pois sua administração afetou a
atividade mitocondrial de NOS e restaurou a produção mitocondrial de ATP (Escames et
al. 2003; Lopez et al. 2006; Mantzarlis et al. 2017).

A melatonina, um hormônio de mamíferos sintetizado a partir da serotonina, também

mostrou propriedades antioxidantes (Nishida 2005; Sharman e Bondy 2016). A melatonina
exerce sua capacidade antioxidante estimulando a expressão e a atividade da glutationa
peroxidase e superóxido dismutase e inibindo a da óxido nítrico sintase (Pieri et al. 1995;
Dato et al. 2013). A melatonina tem efeitos antiinflamatórios e antiapoptóticos, mas
também pode atuar como um necrófago antioxidante de espécies radicais de oxigênio e
nitrogênio (Mahomoodally et al. 2005; Pandey 2007). Vários estudos em animais
demonstraram propriedades antioxidantes benéficas da melatonina em condições de
choque séptico (Heim et al. 2002; Kumar et al. 2013; Kumar e Pandey 2013). A
melatonina também suprimiu a disfunção mitocondrial, pois sua administração afetou a
atividade mitocondrial de NOS e restaurou a produção mitocondrial de ATP (Escames et
al. 2003; Lopez et al. 2006; Mantzarlis et al. 2017).

Um agente sintético de captura de spin, como fenil-N-terc-butilnitrona (PBN), também é

capaz de eliminar muitos tipos de radicais livres. O PBN reage com ROS e forma adutos
estáveis que podem ser quantificados por espectrometria de ressonância paramagnética
de elétrons. Vários estudos in vitro e in vivo demonstraram efeitos benéficos do PBN na
prevenção da degeneração neuronal, inibição da indução de NOS (Miyajima e Kotake
1995), em diferentes modelos de convulsões (He et al. 1997; Thomas et al. 1997),
proteção efeitos em modelos de isquemia/reperfusão cerebral (Carney e Floyd 1991; Gido
et al. 1997; Fetcher et al. 1997) e excitotoxicidade (Lancelot et al. 1997; Milatovic et al.
2002). Estudos experimentais também demonstraram que o PBN preveniu a
neurodegeneração na doença de Parkinson (Frederiksson et al. 1997; Sack et al. 1996),
neurotoxicidade anticolinesterásica (Gupta et al. 2001a, b) e doença de Alzheimer (Sack
et al. 1996). PBN demonstrou efeito direto na função estriatal, incluindo inibição do
acoplamento excitação – contração (Andersen et al. 1996), bloqueio do canal de Ca 2+ no
músculo vascular causando vasodilatação (Anderson et al. 1993) e indução de hipotermia
(Pazos et al. 1999). Nossos estudos demonstraram que o tratamento com PBN preveniu o
dano oxidativo induzido pelo KA; suprimidos aumentos em citrulina e marcadores
cerebrais e neuronais de dano oxidativo, F2-IsoPs e F4-NeuroPs (Fig. 2); bem como
evitou a degeneração dendrítica de neurônios piramidais da área do hipocampo CA de

370
camundongos expostos a KA (Fig. 3) (Zaja-Milatovic et al. 2008). Uma vez que o
tratamento antioxidante minimiza a peroxidação lipídica, uma redução paralela no dano
neuronal fornece fortes evidências de que o estresse oxidativo e a peroxidação lipídica de
forma causal medeiam a convulsão e a lesão correspondente.

6. Comentários Finais e Orientações Futuras

Evidências crescentes apóiam o papel central desempenhado pelo estresse oxidativo no
desenvolvimento de lesões nos tecidos. A superprodução de espécies reativas de
oxigênio e nitrogênio, em combinação com uma defesa antioxidante reduzida,
eventualmente, leva a funções celulares perturbadas, perda de sinapses, dano neuronal e
morte celular que dá origem aos sintomas clínicos associados a doenças cerebrais. Os
resultados de vários estudos apoiaram uma associação entre estresse oxidativo e
neurotoxicidade e indicaram que a excitotoxicidade leva a danos oxidativos cerebrais
profundos e neurodegeneração na região cerebral do hipocampo. É importante ressaltar
que nossos estudos demonstraram que a terapia antioxidante, como a vitamina E e o
PBN, preveniu o dano oxidativo induzido pela excitotoxicidade e a degeneração dendrítica
dos neurônios piramidais da área cerebral do hipocampo CA. Uma vez que o tratamento
com antioxidantes minimiza a peroxidação lipídica, a redução paralela do dano neuronal
fornece fortes evidências de que o estresse oxidativo e a peroxidação lipídica de uma
forma causal medeiam a convulsão e a lesão correspondente. O papel do estresse
oxidativo e sua melhora por antioxidantes em outros órgãos vitais também foram bem
documentados. Estudos futuros devem ser direcionados a decifrar os mecanismos de
proteção e orientar o desenvolvimento de terapias antioxidantes seletivas e eficazes que
visem as vias em tecidos neuronais e não neuronais. As terapias antioxidantes, incluindo
antioxidantes naturais fornecidos pela nutrição, são uma grande promessa.

Reconhecimento A preparação deste capítulo é apoiada pela JGMS, Inc.

Referências
Andersen KA, Diaz PT, Wright VP et al (1996) N-tert-butyl-alphaphenylnitrone: a free radical trap with unanticipated
effects on diaphragm function. J Appl Physiol 80:862–868
Anderson DE, Yuan XJ, Tseng CM et al (1993) Nitrone spin traps block calcium channels and induce pulmonary artery
relaxation independent of free radicals. Biochem Biophys Res Commun 193:878–885
Azlina MFN, Kamisah Y, Qodriyah MS (2018) Tocopherol and tocotrienol: therapeutic potential in animal models of
stress. Curr Drug Targets 19(12):1456–1462
Babior BM (1999) NADPH oxidase: an update. Blood 93(5):1464–1476
Bahorun T, Soobrattee MA, Luximon-Ramma V et al (2006) Free radicals and antioxidants in cardiovascular health and
disease. Internet J Med Updat 1:1–17
Barros DO, Xavier SML, Barbosa CO et al (2007) Effects of the vitamin E in catalase activities in hippocampus after
status epilepticus induced by pilocarpine in Wistar rats. Neurosci Lett 416(3):227–230
Beal MF (2000) Oxidative metabolism. Ann N Y Acad Sci 924:164–169

371
 Behndig AF, Blomberg A, Helleday R et al (2009) Antioxidant response to acute ozone challenge in the healthy human
airway. Inhal Toxicol 21(11):933–942
Berger MM, Oudemans-van Straaten HM (2015) Vitamin C supplementation in the critically ill patient. Curr Opin Clin
Nutr Metab Care 18:193–201
Berlett BS, Stadtman ER (1997) Protein oxidation in aging, disease, and oxidative stress. J Biol Chem 272(33):20313–
20316
Birben E, Sahiner UM, Sackesen C et al (2012) Oxidative stress and antioxidant defense. World Allergy Organ J
5(1):9–19
Bischoff K, Mukai M, Ramaiah SK (2016) Liver toxicity. In: Gupta RC (ed) Veterinary toxicology basic and clinical
principles, 3rd edn. Academic Press/Elsevier, Amsterdam, pp 239–257
BrownleeM(2001) Biochemistry and molecular cell biology of diabetic complications. Nature 414:813–820
Carney JM, Floyd RA (1991) Protection against oxidative damage to CNS by alpha-phenyl-tert-butylnitrone (PBN) and
other spintrapping agents: a novel series of nonlipid free radical scavengers. J Mol Neurosci 3:47–57
Chakravarti B, Chakravarti SN (2007) Oxidative modification of proteins: age-related changes. Gerontology 53(3):128–
139
Chance B, Sies H, Boveris A (1979) Hydroperoxide metabolism in mammalian organs. Physiol Rev 59:527–605
Chow CK, Ibrahim W, Wei Z et al (1999) Vitamin E regulates mitochondrial hydrogen peroxide generation. Free Radic
Biol Med 27:580–587
Cotzias GC, Greenough JJ (1958) The high specificity of the manganese pathway through the body. J Clin Invest
37:1298–1305
Dalle-Donne I, Rossi R, Giustarini D et al (2003) Protein carbonyl groups as biomarkers of oxidative stress. Clin Chim
Acta 329:23–38
Dato S, Crocco P, D’Aguila P, de Rango F, Bellizzi D, Rose R, Passarino G (2013) Exploring the role of genetic
variability and lifestyle in oxidative stress response for healthy aging and longevity. Int J Mol Sci 14(8):16443–16472
De Zwart LL, Meerman JHN, Commandeur JNM et al (1999) Biomarkers of free radical damage applications in
experimental animals and in humans. Free Radic Biol Med 26:202–226
Dettbarn W-D, Milatovic D, Zivin M, Gupta RC (2001) Oxidative stress, acetylcholine and excitoxicity. In: Marwah J,
Kanthasamy A (eds) International conference on antioxidants. Prominant Press, Scottsdale, AZ, pp 183–211
Di Mascio P, Kaiser SP, Devasagayam TP et al (1991) Biological significance of active oxygen species: in vitro studies
on singlet oxygen-induced DNA damage and on the singlet oxygen quenching ability of carotenoids, tocopherols and
thiols. Adv Exp Med Biol 283:71–77
Dix TA, Aikens J (1993) Mechanisms and biological relevance of lipid peroxidation initiation. Chem Res Toxicol 6:2–18
Dizdaroglu M, Jaruga P, BirinciogluMet al (2002) Free radical-induced damage to DNA: mechanisms and
measurement. Free Radic Biol Med 32(11):1102–1115
Escames G, Leon J, Macias M et al (2003) Acuna-Castroviejo D. Melatonin counteracts lipopolysaccharide-induced
expression and activity of mitochondrial nitric oxide synthase in rats. FASEB J 17(8):932–934
Famm SS, Morrow JD (2003) The isoprostanes: unique products of arachidonic acid oxidation- a review. Curr Med
Chem 10:1723–1740
Fang C, Gu L, Smerin D et al (2017) The interrelation between reactive oxygen species and autophagy in neurological
disorders. Oxidative Med Cell Longev 2017:1–16
Federico A, Cardaioli E, Pozzo PD (2012) Mitochondria, oxidative stress and neurodegeneration. J Neurol Sci
322:254–262
Fetcher LD, Liu Y, Pearce TA (1997) Cochlear protection from carbon monoxide exposure by free radical blockers in
the guinea pig. Toxicol Appl Pharmacol 142:47–55
Frederiksson A, Eriksson P, Archer T (1997) MPTP-induced deficits in motor activity: neuroprotective effects of the spin
trapping agents, alpha-phenyl-tert-butylnitrone (PBN). J Neural Transm 104:579–592
Frijhoff J, Winyard PG, Zarkovic N et al (2015) Clinical relevance of biomarkers of oxidative stress. Antioxid Redox
Signal 23 (14):1144–1170
Gamble SC, Wiseman A, Goldfarb PS (1999) Selenium-dependent glutathione peroxidase and other selenoproteins:
their synthesis and biochemical roles. J Chem Technol Biotech 68:123–134
Gao L, Yin H, Milne GL et al (2006) Formation of F-ring isoprostanelike compounds (F3-isoprostanes) in vivo from
eicosapentaenoic Acid. J Biol Chem 281:14092–14099
Garcia-Mesa Y, Colie S, Corpas R et al (2016) Oxidative stress is a central target for physical exercise neuroprotection
against pathological brain aging. J Gerontol A Biol Sci Med Sci 71:40–49
Gavin CE, Gunter KK, Gunter TE (1990) Manganese and calcium efflux kinetics in brain mitochondria. Relevance to
manganese toxicity. Biochem J 266:329–334
Gavin CE, Gunter KK, Gunter TE (1992) Gunter, Mn2+ sequestration by mitochondria and inhibition of oxidative
phosphorylation. Toxicol Appl Pharmacol 115:1–5
Gaziano JM, Manson JE, Branch LG et al (1995) A prospective study of consumption of carotenoids in fruits and
vegetables and decreased cardiovascular mortality in the elderly. Ann Epidemiol 5:255–260
Gido G, Kristian T, Siesjo BK (1997) Extracellular potassium in a neocortical cone area after transient focal ischemia.
Stroke 28:206–210

372
 Guéraud F, Atalay M, Bresgen N (2010) Advances in methods for the determination of biologically relevant lipid
peroxidation products. Free Radic Res 44:1098–1124
Gupta RC (2016) Nutraceuticals in arthritis. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity. Academic
Press/Elsevier, Amsterdam, pp 161–176
Gupta RC, Milatovic D, Dettbarn W-D (2001a) Depletion of energy metabolites following acetylcholinesterase inhibitor-
induced status epilepticus: protection by antioxidants. Neurotoxicology 22:271–282
Gupta RC, Milatovic D, Dettbarn W-D (2001b) Nitric oxide modulates high-energy phosphates in brain regions of rats
intoxicated with diisopropylphosphorofluoridate or carbofuran: prevention by N-tert- butyl-α- phenylnitrone or vitamin E.
Arch Toxicol 75:346–356
Gupta RC, Milatovic S, Dettbarn W-D, Aschner M, Milatovic D (2007) Neuronal oxidative injury and dendritic damage
induced by carbofuran: protection by memantine. Toxicol Appl Pharmacol 219:97–105
Gupta RC, Lasher MA, Doss RB, Milatovic D (2014) Skeletal muscle toxicity biomarkers. In: Gupta RC (ed) Biomarkers
in toxicology. Academic Press/Elsevier, Amsterdam, pp 291–308
Gwaltney-Brant SM (2016) Nutraceuticals in hepatic diseases. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and
toxicity. Academic Press/Elsevier, Amsterdam, pp 87–99
Halliwell B (2007) Oxidative stress and neurodegeneration: where are we now? J Neurochem 97:1634–1658
Halliwell B, Gutteridge JMC (1998) Free radicals in biology and medicine. Oxford University Press, Oxford
Halliwell B, Gutteridge JMC (2007) Free radicals in biology and medicine, 4th edn. Clarendon Press, Oxford
He QP, Smith ML, Li PA et al (1997) Necrosis of the substantia nigra, pars reticulata, influorothyl-induced status
epilepticus is ameliorated by the spin trap alpha-phenyl-N-tert-butylnitrone. Free Radic Biol Med 22:917–922
Heim KE, Tagliaferro AR, Bobilya DJ (2002) Flavonoid antioxidants: chemistry, metabolism and structure-activity
relationships. J Nutr Biochem 13(10):572–584
Huang HY, Appel LJ, Croft KD et al (2002) Effects of vitamin C and vitamin E on in vivo lipid peroxidation: results of a
randomized controlled trial. Am J Clin Nutr 76:549–555
Il’yasova D, Scarbrough P, Spasojevic I (2012) Urinary biomarkers of oxidative stress. Clin Chim Acta 413:1446–1453
Jaeschke H, McGill MR, Ramachandran A (2012) Oxidant stress, mitochondria, and cell death mechanisms in drug-
induced liver injury: lessons learned from acetaminophen hepatotoxicity. Drug Metab Rev 44:88–106
Janicka M, Kot-Wasik A, Kot J, Namiesnik J (2010) Isoprostanesbiomarkers of lipid peroxidation: their utility in
evaluating oxidative stress and analysis. Int J Mol Sci 11:4631–4659
Janssen LJ (2008) Isoprostanes and lung vascular pathology. Am J Respir Cell Mol Biol 39(4):383–389
Johnson F, Giulivi C (2005) Superoxide dismutases and their impact upon human health. Mol Asp Med 26:340–352
Jones DP, Eklow L, Thor H, Orrenius S (1981) Metabolism of hydrogen peroxide in isolated hepatocytes: relative
contributions of catalase and glutathione peroxidase in decomposition of endogenously generated H2O2. Arch Biochem
Biophys 210:505–516
Kadiiska MB, Gladen BC, Baird DD et al (2005) Biomarkers of oxidative stress study II: are oxidation products of lipids,
proteins, and DNA markers of CCl4 poisoning? Free Radic Biol Med 38:698–710
Kontakiotis T, Katsoulis K, Hagizisi O et al (2011) Bronchoalveolar lavage fluid alteration in antioxidant and
inflammatory status in lung cancer patients. Eur J Intern Med 22(5):522–526
Kumar S, Pandey AK (2013) Phenolic content, reducing power and membrane protective activities of Solanum
xanthocarpum root extracts. Vegetos 26:301–307
Kumar S, Pandey AK (2015) Free radicals: health implications and their mitigation by herbals. Br J Med Med Res
7:438–457
Kumar S, Mishra A, Pandey AK (2013) Antioxidant mediated protective effect of Parthenium hysterophorus against
oxidative damage using in vitro models. BMC Complement Altern Med 13:article 120. https://doi.org/10.1186/1472-6882-
13-120
Lancelot E, Revaud ML, Boulee RG (1997) Alpha-N-tert-butylnitone attenuates excitotoxicity in rat striatum by
preventing hydroxyl radical accumulation. Free Radic Biol Med 23:1031–1034
Lee J, Hahm ER, Singh SV (2010) Withaferin A inhibits activation of signal transducer and activator of transcription 3 in
human breast cancer cells. Carcinogenesis 31(11):1991–1998
Liguori I, Curcio F, Bulli G et al (2018) Oxidative stress, aging, and diseases. Clin Interv Aging 13:757–772
Lopez LC, Escames G, Ortiz F, Ros E (2006) Acuna-Castroviejo D. Melatonin restores the mitochondrial production of
ATP in septic mice. Neuroendocrinol Lett 27(5):623–630
Lovell MA, Markesbery WR (2007) Oxidative DNA damage in mild cognitive impairment and late-stage Alzheimer’s
disease. Nucleic Acids Res 35(22):7497–7504
Lu SC (2009) Regulation of glutathione synthesis. Mol Asp Med 30 (1–2):42–59
Mahomoodally MF, Gurib-Fakim A, Subratty AH (2005) Antimicrobial activities and phytochemical profiles of endemic
medicinal plants of Mauritius. Pharm Biol 43(3):237–242
Mangialasche F, Polidori MC, Monastero R (2009) Biomarkers of oxidative and nitrosative damage in Alzheimer’s
disease and mild cognitive impairment. Ageing Res Rev 8:285–305
Mantzarlis K, Tsolaki V, Zakynthionoc E (2017) Role of oxidative stress and mitochondrial dysfunction in sepsis and
potential therapies. Oxid Med Cell Longev 2017:5985209
Marrocco I, Altieri F, Peluso I (2017) Measurement and clinical significance of biomarkers of oxidative stress in
humans. Oxid Med Cell Longev 2017:6501046
373
 Milatovic D, Radic Z, Zivin M, Dettbarn W-D (2000a) Atypical effect of some spin trapping agents: reversible inhibition
of acetylcholinesterase. Free Radic Biol Med 28:597–603
Milatovic D, Zivin M, Dettbarn W-D (2000b) The spin trapping agent phenyl-N-tert-butyl-nitrone (PBN) prevents
excitotoxicity in skeletal muscle. Neurosci Lett 278:25–28
Milatovic D, Zivin M, Gupta RC, Dettbarn W-D (2001) Alterations in cytochrome-c-oxidase and energy metabolites in
response to kainic acid-induced status epilepticus. Brain Res 912:67–78
Milatovic D, Gupta RC, Dettbarn W-D (2002) Involvement of nitric oxide in kainic acid-induced excitotoxicity in rat
brain. Brain Res 957:330–337
Milatovic D, Gupta RC, Dekundy A et al (2005a) Carbofuran-induced oxidative stress in slow and fast skeletal muscles:
prevention by memantine. Toxicology 208:13–24
Milatovic D, VanRollins M, Li K et al (2005b) Suppression of murine cerebral F2-isoprostanes and F4-neuroprostanes
from excitotoxicity and innate immune response in vivo by alpha- or gamma-tocopherol. J Chromatogr B Anal Technol
Biomed Life Sci 827:88–93
Milatovic D, Yin Z, Gupta RC et al (2007) Manganese induces oxidative impairment in cultured rat astrocytes. Toxicol
Sci 98:198–205
Milatovic D, Zaja-Milatovic S, Gupta RC et al (2009) Oxidative damage and neurodegeneration in manganese-induced
neurotoxicity. Toxicol Appl Pharmacol 240:219–225
Milatovic D, Montine TJ, Aschner M (2011) Measurement of isoprostanes as markers of oxidative stress. Methods Mol
Biol 758:195–204
Miyajima T, Kotake Y (1995) Spin trap phenyl-N-tert-butylnitone (PBN) inhibits induction of nitric oxide synthase in
endotoxininduction in mice. Free Radic Biol Med 22:463–470
Montine TJ, Milatovic D, Gupta RC et al (2002) Neuronal oxidative damage from activated innate immunity is EP2
receptor-dependent. J Neurochem 83:463–470
Modaresi A, Nafar M, Sahraei Z (2015) Oxidative stress in chronic disease. Iran J Kidney Dis 9(3):165–179
Montine KS, Quinn JF, Zhang J et al (2004) Isoprostanes and related products of lipid peroxidation in
neurodegenerative diseases. Chem Phys Lipids 128:117–718
Mori A, Yokoi I, Noda Y et al (2004) Natural antioxidants may prevent posttraumatic epilepsy: a proposal based on
experimental animal studies. Acta Med Okayama 58:111–118
Morrow JD, Hill KE, Burk RF et al (1990) A series of prostaglandin F2-like compounds are produced in vivo in humans
by a non-cyclooxygenase, free radical-catalyzed mechanism. Proc Natl Acad Sci USA 87:9383–9387
Negre-Salvayre A, Auge N, Ayala V et al (2010) Pathological aspects of lipid peroxidation. Free Radic Res
44(10):1125–1171
Niki E, Noguchi N, Tsuchihashi H et al (1995) Interaction among vitamin C, vitamin E, and beta-carotene. Am J Clin
Nutr 62:1322S–1326S
Nishida S (2005) Metabolic effects of melatonin on oxidative stress and diabetes mellitus. Endocrine 27:131–136
Nyunoya T, March TH, Tesfaigzi Y et al (2011) Antioxidant diet protects against emphysema, but increases mortality in
cigarette smoke-exposed mice. COPD 8(5):362–368
Onodera K, Omoi NO, Fukui K et al (2003) Oxidative damage of rat cerebral cortex and hippocampus, and changes in
antioxidative defense systems caused by hyperoxia. Free Radic Res 37:367–372
Oudemans-van Straaten HM, Spoelstra-de Man AM, de Waard MC (2014) Vitamin C revisited. Crit Care 18:460
Pacher P, Beckman JS, Liaudet L (2007) Nitric oxide and peroxynitrite in health and disease. Physiol Rev 87:315–424
Pandey AK (2007) Anti-staphylococcal activity of a pan-tropical aggressive and obnoxious weed Parihenium
histerophorus: an in vitro study. Natl Acad Sci Lett 30(11–12):383–386
Pazos AJ, Green EJ, Busto R et al (1999) Effects of combined postischemic hypothermia and delayed N-tert-butyl-
alpha-phenylnitrone (PBN) administration on histopatological and behavioral deficits associated with transient global
ischemia. Brain Res 846:186–195
Pieri C, Marra M, Moroni F et al (1995) The modulation of intracellular glutathione level modulates the mitochondrial
response in proliferating rat splenocytes. Arch Gerontol Geriatr 21:115–125
Pizzino G, Irrera N, Cucinotta A et al (2017) Oxidative stress: harms and benefits for human health. Oxid Med Cell
Longev 2017:8416763
Prince MR, LaMuraglia GM, MacNichol EF (1988) Increased preferential absorption in human atherosclerotic plaque
with oral beta carotene. Implications for laser endarterectomy. Circulation 78:338–344
Punz A, Nanobashvili N, Feugl A et al (1998) Effect of α-tocopherol pretreatment on high energy metabolites in rabbit
skeletal muscle after ischemia-reperfusion. Clin Nutr 17:85–87
Rahal A, Kumar A, Singh V et al (2014) Oxidative stress, prooxidants, and antioxidants: the interplay. Biomed Res Int
2014:761264
Rauca C, Wiswedel I, Zerbe R et al (2004) The role of superoxide dismutase and alpha-tocopherol in the development
of seizures and kindling induced by pentylenetetrazol—influence of the radical scavenger alpha-phenyl-N-tert-butyl
nitrone. Brain Res 1009:203–212
Roberts LJ, Montine TJ, Markesbery WR et al (1998) Formation of isoprostane-like compounds (neuroprostanes) in
vivo from docosahexaenoic acid. J Biol Chem 273:13605–13612
Roberts RA, Smith RA, Safe S et al (2010) Toxicological and pathophysiological roles of reactive oxygen and nitrogen
species. Toxicology 276(2):85–94
374
 Sack CA, Socci DJ, Crandall BM et al (1996) Antioxidant treatment with phenyl-alpha-tert-butylnitrone (PBN) improves
the cognitive performance and survival of aging rats. Neurosci Lett 205:181–184
Salem N, Kim HY, Lyergey JA (1986) Docosahexaenoic acid: membrane function and metabolism. In: Martin RE (ed)
Health effects of polyunsaturated acids in seafoods. Academic Press, New York, pp 263–317
Salisbury D, Bronas U (2015) Reactive oxygen and nitrogen species: impact on endothelial dysfunction. Nurs Res
64(1):53–66
Santos LFL, Freitas RLM, Xavier SML et al (2008) Neuroprotective actions of vitamin C related to decreased lipid
peroxidation and increased catalase activity in adult rats after pilocarpine-induced seizures. Pharmacol Biochem Behav
89(1):1–5
Sas K, Szabó E, Vécsei L (2018) Mitochondria, oxidative stress and the kynurenine system, with a focus on ageing
and neuroprotection. Molecules 23:191
Schafer FQ, Buettner GR (2001) Redox environment of the cell as viewed through the redox state of the glutathione
disulfide/glutathione couple. Free Radic Biol Med 30(11):1191–1212
Sen CK (2000) Cellular thiols and redox-regulated signal transduction. Curr Top Cell Regul 36:1–30
Shah D, Mahajan N, Paudyal B (2014) Oxidative stress and its biomarkers in systemic lupus erythematosus. J Biomed
Sci 21(1):23
Sharman EH, Bondy SC (2016) Melatonin: a safe nutraceutical and clinical agent. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals:
efficacy, safety and toxicity. Academic Press/Elsevier, Amsterdam, pp 501–509
Simioni C, Zauli G, Meartelli AM et al (2018) Oxidative stress: role of physical exercise and antioxidant nutraceuticals
in adulthood and aging. Oncotarget 9(24):17181–17198
Spickett CM, Wiswedel I, Siems W et al (2010) Advances in methods for the determination of biologically relevant lipid
peroxidation products. Free Radic Res 44:1172–1202
Stadtman ER, Levine RL (2003) Free radical-mediated oxidation of free amino acids and amino acids residue in
proteins. Amino Acids 25 (3–4):207–218
Šterba M, PopelováO VA et al (2013) Oxidative stress, redox signaling, and metal chelation in anthracycline
cardiotoxicity and pharmacological cardioprotection. Antioxid Redox Signal 18(8):899–929
Thomas CE, Ohlweiler DF, Taylor VL et al (1997) Radical trapping and inhibition of iron-dependent CNS damage by
cyclic nitrone spin traps. J Neurochem 68:1173–1182
Topinka J, Bincova B, Sram RJ et al (1989) The influence of a-tocopherol and pyritinol on oxidative DNA damage and
lipid peroxidation in human lymphocytes. Mutat Res 225:131–136
Trewin AJ, Berry BJ, Wojtovich AP (2018) Exercise and mitochondrial dynamics: keeping in shape with ROS and
AMPK. Antioxidants (Basel) 7(1):1–8
Tucker PS, Dalbo VJ, Han T et al (2013) Clinical and research markers of oxidative stress in chronic kidney disease.
Biomarkers 18 (2):103–115
Tyml K (2017) Vitamin C and microvascular dysfunction in systemic inflammation. Antioxidants 6:49
Tyml K, Li F, Wilson JX (2005) Delayed ascorbate bolus protects against maldistribution of microvascular blood flow in
septic rat skeletal muscle. Crit Care Med 33(8):1823–1828
Upritchard JE, Schuurman CR, Wiersma A et al (2003) Spread supplemented with moderate doses of vitamin E and
carotenoids reduces lipid peroxidation in healthy, nonsmoking adults. Am J Clin Nutr 78:985–992
Valko M, Leibfritz D, Moncol J et al (2007) Free radicals and antioxidants in normal physiological functions and human
disease. Int J Biochem Cell Biol 39:44–84
VanAcker S, Koymans LMH, Bast A (1993) Molecular pharmacology of vitamin E: structural aspects of antioxidant
activity. Free Radic Biol Med 15:311–328
Vatassery GT (2004) Impairment of brain mitochondrial oxidative phosphorylation accompanying vitamin E oxidation
induced by iron or reactive nitrogen species: a selective review. Neurochem Res 29:1951–1959
Willcox BJ, Curb JD, Rodriguez BL (2008) Antioxidants in cardiovascular health and disease: key lessons from
epidemiologic studies. Am J Cardiol 101:75D–86D
Wilson JX (2009) Mechanism of action of vitamin C in sepsis: ascorbate modulates redox signaling in endothelium.
Biofactors 35 (1):5–13
Wiseman H, Halliwell B (1996) Damage to DNA by reactive oxygen and nitrogen species: role in inflammatory disease
and progression to cancer. Biochem J 313(Part 1):17–29
Wolfram R, Oguogho A, Palumbo B et al (2005) Enhanced oxidative stress in coronary heart disease and chronic heart
failure as indicated by an increased 8-epi-PGF (2alpha). Eur J Heart Fail 7:167–172
Wu G, Fang YZ, Yang S et al (2004a) Glutathione metabolism and its implications for health. J Nutr 134(3):489–492
Wu F, Wilson JX, Tyml K (2004b) Ascorbate protects against impaired arteriolar constriction in sepsis by inhibiting
inducible nitric oxide synthase expression. Free Radic Biol Med 37(8):1282–1289
Xavier SM, Barbosa CO, Barros DO et al (2007) Vitamin C antioxidant effects in hippocampus of adult Wistar rats after
seizures and status epilepticus induced by pilocarpine. Neurosci Lett 420(1):76–79
Yamamoto T, Kinoshita M, Shinomiya N et al (2010) Pretreatment with ascorbic acid prevents lethal gastrointestinal
syndrome in mice receiving a massive amount of radiation. J Radiat Res 51:145–156
Yang ZP, Dettbarn W-D (1998) Lipid peroxidation and changes of cytochrome c oxidase and xanthine oxidase in
organophosphorous anticholinesterase induced myopathy. Xth International Symposium on Cholinergic Mechanisms. J
Physiol 92:157–162
375
 Yin H, Gao L, Tai HH et al (2007) Urinary prostaglandin F2alpha is generated from the isoprostane pathway and not
the cyclooxygenase in humans. J Biol Chem 282:329–336
Zaja-Milatovic S, Gupta RC, Aschner M, Montine TJ, Milatovic D (2008) Pharmacologic suppression of oxidative
damage and dendritic degeneration following kainic acid-induced excitotoxicity in mouse cerebrum. Neurotoxicology
29:621–627
Zaja-Milatovic S, Gupta RC, Aschner M, Milatovic D (2009) Protection of DFP-induced oxidative damage and
neurodegeneration by antioxidants and NMDA receptor antagonist. Toxicol Appl Pharmacol 240:124–131

376
 Resveratrol: Atividades biológicas e uso potencial na
saúde e na doença
Gianfranco Risuleo e Camillo La Mesa

Resumo
O resveratrol (RV) é um composto polifenol não flavonóide presente em vegetais
fortemente pigmentados e frutas frescas, bem como em nozes secas, como o amendoim.
Altas concentrações desse composto natural foram encontradas, no mundo ocidental
moderno, na casca das bagas da uva vermelha Vitis vinifera, mas o uso desse
medicamento natural na medicina popular foi documentado muito antes. O resveratrol
exibe diversas atividades biológicas, como antitumoral, antioxidante, antiviral e fito
estrogênico. Em particular, conforme o trabalho relatado de nossos laboratórios, o
composto mostra um efeito inibitório na replicação do DNA do poliomavírus murino,
enquanto que em concentrações mais altas, o RV mostra um efeito citotóxico significativo.
Este complexo comportamento dependente da dose não é intrínseco ao medicamento.
Outras substâncias naturais se comportam de maneira semelhante, sendo a curcumina e
uma fração semi-purificada de todo o óleo de nim dois exemplos diferentes. Muito
provavelmente, a administração de RV a células em cultura altera a permeabilidade e a
fluidez da membrana celular. Além disso, dados apresentados na literatura atribuem ao
RV uma ação antiproliferativa, tornando-o um bom candidato para o controle do
crescimento neoplásico. O uso potencial de RV na medicina humana e veterinária
também é examinado nesta revisão.

Palavras-chave: Resveratrol · Nutracêutico · Nutracêutico veterinário · Propriedades

biológicas · Aplicações potenciais · Medicina avançada

G. Risuleo Department of Biology and Biotechnologies “Charles Darwin”, Sapienza University of Rome,
Rome, Italy e-mail: gianfranco.risuleo@uniroma1.it
C. La Mesa Department of Chemistry “Stanislao Cannizzaro”, Sapienza University of Rome, Rome, Italy

1. Prólogo
A expressão “a pesquisa com compostos naturais e nutracêuticos está em contínua e
crescente expansão” pode soar exagerada, se não abusada e trivial. Mas, apenas para
dar ao leitor um exemplo da validade e atualidade desse ditado, relataremos um resultado
facilmente adquirido de uma busca simples e rápida em um banco de dados de literatura.
Quando um de nós (GR) foi convidado a escrever um capítulo para um livro sobre
377
Nutracêuticos: Eficácia, Segurança e Toxicidade, em 2016 (Risuleo 2016), o número de
artigos de revisão publicados, da década de 1960 do século passado até 2014, sobre o
assunto geral “substâncias naturais e suas atividades biológicas”, foi cerca de 1650.
Agora, a mesma pesquisa usando simplesmente resveratrol, como palavra-chave, rendeu
incríveis 1560 entradas (apenas em termos de artigos de revisão) de 2001 até os dias
atuais. É fácil afirmar, portanto, que o interesse geral sobre o assunto não diminuiu em
nada, mas continua sendo um tema central para a pesquisa em produtos alternativos,
alimentos e, por último, mas não menos importante, medicamentos destinados a usos
terapêuticos.

Neste capítulo condensado, vamos nos concentrar no resveratrol como um remédio

medicinal potencial no campo humano e veterinário. Em qualquer caso, é necessária uma
visão geral das propriedades biológicas do resveratrol. Nós deliberadamente mantivemos
a linguagem muito simples e compreensível também para cientistas não necessariamente
ou diretamente envolvidos na pesquisa biomolecular/física de compostos naturais, bem
como para leigos e pessoas interessadas em maneiras alternativas de olhar para nutrição
e saúde. Na verdade, estamos convencidos de que um assunto que tanto desperta
atenção deve ser facilmente acessado por todos.

2. Introdução
2.1 Fitoalexinas em uma casca-de-noz

As fitoalexinas são compostos naturais dotados de ação antimicrobiana e antioxidante;

eles incluem moléculas como terpenóides, glicosteróides e alcalóides. Eles são
sintetizados de novo por plantas sob condições de estresse que podem se originar, por
exemplo, por um ataque patogênico e/ou por condições físicas adversas, por exemplo,
seca. A infecção por patógenos pode causar um rápido acúmulo de substâncias
fitotóxicas, no local da infecção: aqui, as fitoalexinas mostram seu caráter de inibidores de
amplo espectro da progressão infecciosa. A família das fitoalexinas tem múltiplas
características químicas e inclui terpenóides, glicosteróides e alcalóides. Em todo caso, a
definição de fitoalexina se aplica a todos os tipos de moléculas fitoquímicas envolvidas na
defesa da planta: em um sentido muito amplo, sua ação poderia ser comparada ao
sistema imunológico animal. De fato, a suscetibilidade do tecido vegetal à infecção
aumenta quando a biossíntese da fitoalexina é inibida. Com relação a isso, os autores
mostraram que plantas mutantes incapazes de produzir esses “defensores” naturais são
mais vulneráveis à colonização de patógenos em comparação com o tipo selvagem;

378
inversamente, os patógenos específicos do hospedeiro capazes de degradar as
fitoalexinas causam uma maior virulência para a planta (Glazebrook e Ausbel 1994;
Thomma et al. 1999).

Como mencionado acima, polifenóis, flavonóides e substâncias quimicamente

relacionadas desempenham um papel fundamental na defesa contra fungos e outros
patógenos. Mencionaremos aqui alguns exemplos dessas moléculas “protetoras de
plantas”:

Danielone é uma fitoalexina encontrada no fruto da planta do mamão (Carica papaya) que
apresenta uma potente atividade antifúngica contra Colletotrichum gloeosporioides, um
fungo patogênico infeccioso (Echeverri et al. 1997).

Sakuranetin é uma flavanona encontrada no arroz e em outras plantas exóticas como

Polymnia fruticosa, onde inibe a germinação dos esporos de Magnaporthe grisea (Molnár
et al. 2010; Cho e Lee 2015). Finalmente, foi sugerido que no Sorgum, as interações com
o Colletotrichum mencionado acima parecem ser inibidas pela expressão do SbF3'H2
através da síntese das fitoalexinas 3-desoxianocianidina específicas do patógeno (Shih et
al. 2006) cujo gene codifica um flavonóide 30-hidroxilase.

Os estilbenos são produzidos em Eucalyptus sideroxylon no caso de ataques de

patógenos. Esses compostos podem estar implicados na resposta de hipersensibilidade
das plantas. Na verdade, uma das razões pelas quais algumas madeiras apresentam uma
preservação natural contra o apodrecimento pode residir na presença de altos níveis de
polifenóis, conforme relatado por um trabalho “clássico” de Hart e Hillis (1974).

Finalmente, voltando ao assunto principal do nosso trabalho, também o resveratrol

pertence à família química das fitoalexinas. Em particular, o trans resveratrol em uvas
Vitis vinifera é produzido pela planta para combater a infecção e a proliferação de
patógenos fúngicos, como Botrytis cinerea (Favaron et al. 2009). A Figura 1 mostra as
estruturas de algumas fitoalexinas comuns com diferentes características químicas.

Pelo que discutimos brevemente acima, é claro que a importância dessas moléculas vai
além do interesse científico intrínseco e deriva também de seu enorme significado
comercial. Na verdade, as fitoalexinas podem ser consideradas muito importantes para
combater doenças de plantas e, mais em geral, no controle de pragas.

Esta breve visão geral sobre fitoalexinas, no entanto, está longe de ser exaustiva; o leitor
que quiser se aprofundar neste assunto deve consultar as resenhas que tratam
especificamente do assunto. Veja, por exemplo: Harborne 1999; Ahuja et al. 2012;

379
Großkinsky et al. 2012; Sanchez Maldonado et al. 2015; Meyer et al. 2016; Oliveira et al.
2016; Burow e Halkier 2017; Santos Silva et al. 2018.

Fig. 1 Estrutura e função de algumas substâncias

naturais comuns. Painel superior: Os terpenóides,
também conhecidos como isoprenóides, derivam de
terpenos que são hidrocarbonetos com grupos
funcionais adicionais, geralmente contendo um
átomo de oxigênio. Eles formam uma classe grande
e diversa de produtos químicos orgânicos naturais.
Cerca de 60% dos produtos naturais conhecidos
são terpenóides. A figura relata a estrutura química
do terpenóide taxol, um conhecido fármaco
anticâncer obtido da árvore Taxus baccata e agora
produzido também em laboratório em sistemas de
cultura de células vegetais. Painel central: os
esteróides são compostos orgânicos biologicamente
ativos com quatro anéis dispostos em uma
configuração molecular específica. Eles são
componentes importantes das membranas
celulares, desempenhando um papel na fluidez da
membrana. Eles também podem funcionar como
moléculas de sinalização. Um grande número de
esteróides é encontrado em plantas, fungos e
animais. Painel inferior: Alcalóides podem ser
purificados de extratos brutos por extração ácido -
base por bactérias, fungos, plantas e animais. Eles
mostram uma gama muito ampla de atividades
farmacológicas. Ao contrário de outros compostos
naturais, os alcalóides são caracterizados por uma
grande diversidade estrutural e funcional; portanto,
sua classificação unívoca é quase impossível.
Métodos obsoletos classificaram os alcalóides pela
fonte vegetal natural comum. Isso se deveu
principalmente à falta de conhecimento sobre sua
estrutura química. As classificações mais recentes
são baseadas na semelhança do esqueleto de
carbono ou do precursor bioquímico. No entanto,
devido à sua diversidade, a classificação dos
alcalóides às vezes ainda é incerta. A imagem
mostra a estrutura da fórmula da cafeína e suas
modificações metabólicas

2.2 Resveratrol: a molécula e sua síntese

Como mencionado acima, o resveratrol é uma fitoalexina de origem natural produzida

tanto por briófitas quanto por plantas superiores em resposta a estímulos de natureza
diferente. O resveratrol é um estilbenóide de baixo peso molecular (MW = 228,25 dal); é
caracterizado por dois anéis aromáticos ligados por um resíduo de etano ou etileno. Os
anéis aromáticos que o compõem apresentam três grupos hidroxila nas posições 3’, 4’ e
380
5’. Na nomenclatura IUPAC é classificado como 5-[(E)-2-(4-hidroxifenil)-etenil] benzeno-
1,3-diol, mas também é conhecido como 3,4,5 tri-hidroestilbeno ou 3,4,5 estilbeno triol.

Nas plantas, a síntese de RV é mediada pela enzima resveratrol sintase (Schröder et al.
1988). A droga é normalmente encontrada em duas formas isoméricas geométricas: cis-
(Z) e trans-(E) resveratrol; ambos os isômeros podem existir em uma forma livre ou ligada
à glicose. A transição do isômero cis – trans ocorre por fotoisomerização, um processo
mediado por luz ultravioleta (Mattivi et al. 1995; Lamuela-Raventos et al. 1995) (Fig. 2).

Fig. 2 (a) Fórmulas empíricas e estruturais do cis

resveratrol (esquerda e direita, respectivamente). O
número de átomos C, H e O também é fornecido. (b)
Fórmula da estrutura do cis- e trans- resveratrol
(esquerda e direita, respectivamente). (c) Transição do
resveratrol para os dois isômeros conhecidos mediada
pela luz UV

O resveratrol é solúvel em água até uma concentração de 16,9 mg/L a 25 ºC, mas a
solubilidade é maior em etanol. Sua temperatura de fusão é 253 ºC. Além disso, o pó de
trans é estável a 40 ºC na presença de ar e em atmosfera relativamente seca (75% de
umidade). Este isômero também é estabilizado pela presença de proteínas de transporte
(Prokop et al. 2006, ver também abaixo). A preparação comercialmente disponível
consiste em um pó branco com uma tonalidade laranja amarelada.

O resveratrol é sintetizado em Vitis vinifera seguindo a via metabólica dos fenil

propanóides (Dixon e Paiva 1995) onde o composto inicial é a fenilalanina. A enzima
fenilalanina amônio liase medeia a eliminação do grupo NH2 do aminoácido e catalisa a
formação do ácido cinâmico: a série de etapas metabólicas que levam à síntese do RV é
mostrada na Fig. 3 (reproduzida com modificações de: Soleas et al. 1997; Schröder 1999;
Jeandet et al. 2002, Cichewicz e Kouzi 2002).

381
 Fig. 3 Ilustração esquemática da biossíntese química de
Vitis vinifera por RV. Veja o texto para detalhes

2.3 Ocorrência na Natureza

O resveratrol foi originalmente encontrado nas bagas da uva para vinho (Vitis vinifera),
mas também está presente nas raízes, sementes e estoque da planta. A concentração
mais alta é encontrada na casca das frutas, embora o conteúdo possa variar
significativamente dependendo da fonte da fruta da qual o resveratrol é extraído e da
forma como a fruta é processada. O vinho tinto contém uma quantidade relevante de RV,
mas também pode ser obtido de diversas fontes, como ervilha e pinhão, bem como
amoras: na verdade, o composto pode ser isolado de todas as frutas intensamente
pigmentadas (a Tabela 1 mostra a quantidade de RV presente em vários alimentos e
bebidas). De qualquer forma, este produto natural é conhecido há séculos e foi utilizado
na medicina tradicional japonesa e chinesa: na verdade, o RV foi obtido em sua forma
original crua, a partir das raízes dessecadas da knotweed japonesa (Polygonum
cuspidatum) onde está presente em uma concentração 400 vezes maior em comparação
com uvas ou vinho tinto.

382
 Tabela 1 Conteúdo de resveratrol em vários produtos comercialmente disponíveis

Resveratrol Bebidas e Resveratrol (mg/100 mL)

Alimentos
Total (mg/100 g) temperos Faixa Média
Amendoim 0,08 Vinho tinto 0,27 0–2,78
Amendoim torrado 0,06 Vinho Rosé 0,12 5,00 x 10-3 a 0,29
Manteiga de amendoim 0,04 Vinho branco 0,04 0,00–0,17
a -3
Uvas vermelhas 0,24–1,25 Vinho espumante 9,00 x 10 8,00 x 10-3 a 1,00 x 10-2
Cacau em pó 0,14–0,23a Suco de uva verde 5,08 x 10-3 0,00 a 1,00 x 10-2
Cacau – chocolate (escuro) 0,04a Vinagre 6,86 x 10-3 0,02–7,75
Pistache, descascado 0,11
Lingonberry, cru 3,00
Groselha vermelha, em bruto 1,57
Morango, cru 0,35
Reelaborado a partir de estilbenos resveratrol em alimentos e bebidas. Phenol-Explorer 2016. Link:
http://phenol-explorer.eu/contents/polyphenol/592
a
Estes valores podem variar de acordo com a cultivar de uvas vermelhas, a hidratação do pó (cacau), ou
seu percentual (p / p) no produto acabado (chocolate). O mesmo se aplica a vinhos e temperos. Além
disso, o teor de RV no vinho é diferente do das uvas, uma vez que sua extração da fruta depende das
técnicas de vinificação e fermentação (por exemplo, a duração do tempo de contato com as cascas das
uvas). Além disso, o resveratrol em sua forma 3-glucosídica é hidrolisado, produzindo resveratrol trans e
cis. Dados para molho de soja e outros temperos orientais, bem como alimentos tradicionais, como pickles
kosher, não estão disponíveis. Traços de resveratrol e outros licopenos, por outro lado, estão presentes em
cosméticos, mas a adsorção pela pele desses compostos merece mais avaliações

3. Ações biológicas relevantes

3.1 Atividade antitumoral em mamíferos

A principal característica de uma célula tumoral transformada é representada por sua

proliferação desregulada que determina um aumento significativo na velocidade de
duplicação em comparação com as células do tecido normal. Existem várias razões
responsáveis por esta desregulação metabólica, essencialmente perda de controle do
ciclo celular e/ou evasão dos mecanismos de morte apoptótica que representam o
principal modo de controlar a diferenciação e o tamanho da população celular. Nesse
sentido, as ciclinas constituem uma família de fatores proteicos capazes de regular a
correta execução e conclusão do ciclo celular: se ocorrer o bloqueio na fase G1, a via
apoptótica é ativada. Este fenômeno foi observado, por exemplo, no carcinoma
epidérmico humano (Ahmad et al. 2001), e dados um pouco mais recentes demonstraram
o impedimento da progressão para a fase S (Liao et al. 2010). Com relação a isso, RV
demonstrou modular os mecanismos dependentes de cdk-ciclina. Esta droga também tem
estado envolvida no desenvolvimento do cólon retal humano, uma vez que induz o
agrupamento do ligante Fas e sua redistribuição na matriz esfingolipídica das células

383
transformadas que, por sua vez, está associada à formação de DISC (complexo de
sinalização indutor de morte; Delmas et al. 2011). Estudos em um modelo de
camundongo de tumor epidérmico nas glândulas mamárias demonstram que o RV
neutraliza a tumorigênese. O resveratrol também aumenta a atividade antitumoral dos
inibidores de mTOR e, finalmente, reprime a via de ativação de fatores estimuladores de
tumor em linhagens de células de tumor mamário (He et al. 2011). O produto do gene nf-
kb está envolvido na regulação de um grande número de fatores protéicos que modulam
fenômenos biológicos muito complexos, como inflamação, proliferação celular e
carcinogênese: foi sugerido que o RV inibe a ação desse fator (Singh et al. 2011). Uma
consideração interessante, não diretamente associada à propriedade antitumoral do RV, é
que este composto também é um regulador do gene SIRT-1 humano que codifica uma
proteína envolvida no envelhecimento e é considerado um potencial fator de longevidade
(Signorelli e Ghidoni 2005 ; Singh et al. 2011). No entanto, a partir de 2018, a evidência de
que o resveratrol tem propriedades de prolongamento da vida em humanos permanece
uma questão de debate. Além disso, a biodisponibilidade limitada do resveratrol pode
impedir ainda mais seus efeitos potenciais (Pallauf et al. 2016; Wahl et al. 2018. Consulte
também a seção sobre farmacologia de RV neste capítulo).

3.2 Propriedades antioxidantes

O principal agente causador da aterosclerose e inflamação crônica da artéria depende do

estilo de vida individual e das condições ambientais. Portanto, fumar tabaco, poluição,
hipercolesterolemia, hipertensão e outras condições (por exemplo, diabetes e obesidade)
estão na base de problemas cardíacos/coronários. Um dos estágios finais na complexa
gênese da aterosclerose é o dano ao endotélio vascular, o depósito da fração lipídica de
baixa densidade (LDL) e, por fim, a agregação das plaquetas. O resveratrol pode
desempenhar um papel protetor devido ao seu alto caráter antioxidante (Matos et al.
2012): por exemplo, o tratamento de células da aorta bovina com RV retarda a formação
do ateroma. O tratamento paralelo com fatores estimuladores da mitose, como o PDGF,
pode atuar sinergicamente com a RV (Araim et al. 2002).

Os lipídios que contêm ácidos graxos insaturados, ou seus ésteres, são oxidados pelo
oxigênio molecular presente nas células; a peroxidação lipídica é uma consequência
direta da formação de espécies reativas de oxigênio (ROS). O resveratrol pode inibir a
oxidação da fração de lipídios de baixa densidade (LDL) que circula no sangue. Esta
oxidação é um evento primário no desenvolvimento da aterosclerose: o forte caráter
antioxidante do RV atenua a formação de ROS e, consequentemente, a citotoxicidade
induzida pela peroxidação de LDL bem como o acúmulo de cálcio intracelular que
384
também é um efeito induzido pela droga. O resultado final é a inibição da caspase-3, uma
enzima que desempenha um papel crucial na execução da apoptose (Shalini et al. 2015).
Deve-se considerar que níveis elevados de ROS estimulam a agregação plaquetária:
também neste caso, a ação antioxidante do fármaco e sua capacidade de reduzir a
adesão plaquetária ao colágeno tipo I permitem que o trans-resveratrol limite esse
fenômeno. Isso termina em um comprometimento da coagulação do sangue e
estabelecimento do processo aterosclerótico (Zbikowska et al. 1999).

3.3 Morte Celular

A forte atividade antioxidante do RV com consequente proteção contra dano celular, como
repetidamente afirmado acima, é de conhecimento comum; no entanto, a droga também
pode induzir paradoxalmente apoptose e autofagia (Kou e Chen 2017). Esses efeitos,
monitorados em um modo dependente do tempo e da concentração, foram demonstrados
em diferentes modelos de culturas de células (Berardi et al. 2009; Whitlock e Baek 2012;
Aluyen et al. 2012; Hasima e Ozpolat 2014). A análise citofluorimétrica também mostrou
ativação dos fatores marcadores apoptóticos e a ocorrência de alterações morfofuncionais
apoptóticas típicas (Zhang et al. 2011). Em qualquer caso, o alvo preferencial de RV
parece ser representado pelas células transformadas (Berardi et al. 2009; Zhang et al.
2012; Risuleo 2016). No que diz respeito ao ciclo celular, o RV pode induzir uma parada
na fase S em pré adipócitos murinos e um aumento significativo da concentração
intracelular de desidrogenase láctica (LDH): uma marca registrada da apoptose. No
entanto, os efeitos paradoxais do fármaco, que podem proteger a célula ou vice-versa,
induzem sua morte, e seus efeitos sinérgicos com diversos antioxidantes, são um sinal
claro das complexas interações do fármaco com as células-alvo. Vários estudos
demonstraram que este comportamento é compartilhado por outros produtos naturais
(ver, por exemplo: De la Lastra e Villegas 2007; Ricci et al. 2009; Chen et al. 2011; Ullah
et al. 2015; Wang et al. 2012).

3.4 Atividade antiviral

A primeira evidência da ação antiviral do RV remonta a 1999, quando a inibição da

replicação do vírus herpes simplex (HSV) foi publicada (Docherty et al. 1999). Além disso,
seus efeitos de melhoria em um sistema modelo de rato com infecção vaginal também
foram mostrados (Docherty et al. 2005). Posteriormente, os mesmos autores
demonstraram a inibição dependente de RV da replicação do DNA do varicela-zóster em
uma linha de células de fibroblastos humanos. Esta ação é exercida nas fases iniciais da
infecção principalmente no nível da transcrição do mRNA viral (Docherty et al. 2006).
Estudos posteriores, entretanto, atribuíram essa ação antiviral indireta à inibição por RV
385
da formação do complexo dimérico NFkB, um pré-requisito essencial para a síntese de
DNA (Gregory et al. 2004); fenômeno análogo ocorre no caso do vírus influenza A, onde
as proteínas necessárias para a montagem e maturação do capsídeo viral, após a síntese
citoplasmática, não são transportadas de forma eficiente para o núcleo (Palamara et al.
2005). Trabalhos relativamente recentes sugeriram um possível papel do RV no controle
das complicações após a infecção pelo vírus H1N1. Conforme revisado por Uchide e
Toyoda, esse controle negativo seria devido à neutralização mediada por RV do ânion
superóxido produzido por macrófagos que limitaria as consequências da infecção viral. O
resveratrol também foi sugerido por influenciar negativamente a vitalidade das células do
linfoma infectadas com o vírus Epstein-Barr (De Leo et al. 2012), que está envolvido em
diferentes patologias humanas (Tooze 1981).

Tem sido sugerido que o RV também pode ter um papel no controle da infecção pelo HIV
em humanos, pois potencializa a ação dos antivirais usados na terapia anti-HIV;
entretanto, devido ao quadro patológico extremamente complicado da AIDS, na opinião
dos autores deste capítulo, essa observação merece uma avaliação mais aprofundada.
Finalmente, em nosso laboratório, exploramos a ação do RV na replicação do
poliomavírus murino (Py). Também neste caso, o RV tem demonstrado fortes
propriedades antivirais, pois reduz a síntese de DNA viral tanto em fibroblastos murinos
quanto em células de leucemia promielocítica humana. A inibição ocorre em baixas doses
não citotóxicas do fármaco que não parecem impedir a adsorção viral e a entrada na
célula. Esses dados, combinados com outras observações de nosso laboratório em outra
substância natural, sugerem fortemente que a membrana celular é o principal alvo da RV
(Ricci et al. 2009; Aiello et al. 2011). Em particular, o papel da permeabilidade da
membrana em relação à bioatividade de RV será discutido em mais detalhes na seção
seguinte.

3.5 Resveratrol e a membrana celular

O que foi discutido anteriormente abre novas questões sobre o modo de ação da RV em
particular: Como a droga encontra seu(s) alvo(s)? A eficácia “terapêutica” multifacetada
também é mediada pela ligação de transportadores moleculares que melhoram a
penetração através da membrana celular e estabilizam sua “sobrevivência” intracelular?
Finalmente, é possível construir veículos de “carga” capazes de entregar no distrito celular
correto, melhorando assim sua eficácia? Esse aspecto, em particular, será tema de outro
capítulo.

De qualquer forma, a albumina poderia atuar como um bom transportador, uma vez que
essa proteína é capaz de se ligar a moléculas anfifílicas e, além do RV, interage com
386
outras substâncias naturais, como genisteína e curcumina (Bourassa 2010). Estudos
indicam que o RV é capaz de se ligar a uma das principais proteínas plasmáticas
humanas (HAS). No entanto, a quantidade de droga ligada é inversamente proporcional à
sua concentração plasmática, o que torna esse resultado de interpretação muito difícil
(Jiang 2008). Foi sugerido que a entrada do RV ocorre por meio de um processo de
endocitose independente da clatrina39; mas as jangadas lipídicas parecem desempenhar
um papel, já que os agentes que danificam sua funcionalidade também inibem a
penetração da droga dentro da célula (Colin et al. 2011). Investigamos o mecanismo de
entrada do RV na célula por eletro rotação: uma abordagem biofísica que foi amplamente
discutida e revisada (Bonincontro e Risuleo 2015). Por meio dessa estratégia
experimental, pudemos avaliar a função da membrana celular e o papel intrínseco na
mediação da ação do RV. O resultado de nosso laboratório demonstra que a droga é
prontamente absorvida pela população de células que não é bloqueada em G1 em
extensão relevante (Berardi et al. 2009; Bonincontro et al. 2018).

Para uma revisão mais detalhada sobre as várias e diversificadas propriedades biológicas
do resveratrol, o leitor deve abordar um trabalho publicado anteriormente (Risuleo 2016).
A Tabela 2 relata uma sinopse das diferentes bioatividades do medicamento e os dados
de referência relacionados.

Tabela 2 Atividades/propriedades exibidas pelo resveratrol

Ação/função Sistema(s)a Referência(s)
Envelhecimento AMS, HS (Sarubbo et al. 2017; McCubrey et al. 2017)
(Owen et al. 2017; Tsai et al. 2017; Bhat et al. 2018; Cao et al. 2018; Fan et al.
Autofagia/morte celular CCS, AMS 2018)

Cérebro HS, AMS (Castro et al. 2017; Amro et al. 2018; Lange e Li 2018; Lee et al. 2018)
(Crooker et al. 2018; Elshaer et al. 2018; Espinoza et al. 2018; Huminiecki e
Câncer CCS, AMS Horbańczuk 2018; Perez-Vizcaino e Fraga 2018; Zhai et al. 2018)

Cardiovascular AMS, HS/CT (Treviño-Saldaña e García-Rivas 2017; Bird et al. 2015)

Diabetes AMS, HS/CT (Oliveira et al. 2017; Zhu et al. 2017; Popescu et al. 2018)

Pele HS/CT (Farris et al. 2013; Ganesan e Choi 2016; Chedea et al. 2011)

Essas características da droga são adicionais às examinadas in extenso no texto

a
Acrônimos: AMS, sistemas de modelos animais; CCS, sistemas de cultura de células; HS/CT, sistemas
humanos/ensaios clínicos

4. Aspectos Farmacológicos: Farmacodinâmica e Farmacocinética

O resveratrol foi identificado como um composto de interferência do ensaio pan, que
produz resultados positivos em muitos ensaios laboratoriais diferentes. Os compostos
definidos pelo ensaio pan podem produzir falsos positivos, especialmente em rastreios de
39 Proteína que desempenha um importante papel no processo de formação de vesículas membranares no interior das células
eucariontes, as quais são responsáveis pelo transporte de material proveniente da membrana plasmática, entre os compartimentos
endossomais e da face trans do aparato de Golgi.
387
alto rendimento, uma vez que tendem a reagir de uma forma não específica com vários
alvos biológicos dentro da célula, em vez de afetar um específico (Baell e Walters 2014).
Portanto, alguns cuidados são necessários ao analisar o amplo espectro de ações
inibidas pela RV. Uma das formas de racionalizar o efeito multi-alvo desse produto natural
leva em consideração sua capacidade de interagir com a membrana celular o que poderia
causar uma cascata de efeitos em outros distritos da célula não diretamente envolvidos
com as membranas (Ingólfsson et al. 2014; Bonincontro e Risuleo 2015, Vang 2015; ver
também as referências sobre este assunto na seção: “Resveratrol e a membrana celular”).
Na verdade, muitos e diversos alvos biológicos específicos do resveratrol, por exemplo,
receptores de hormônios, fatores apoptóticos e reguladores do ciclo celular, foram
identificados (Vang 2015). A membrana celular permite que a matriz do citoplasma se
comunique com o mundo exterior e atue como um filtro altamente seletivo. As membranas
biológicas participam de vários mecanismos de transporte, como osmose passiva e
difusão. Portanto, sua integridade desempenha papel fundamental em uma série de
funções celulares como metabolismo, manutenção da homeostase basal e, embora de
forma indireta, diferenciação e desenvolvimento celular. Recentemente, tornou-se claro o
papel da membrana celular em “filtrar” os sinais de apoptose parácrinos e/ou intrínsecos
de morte; portanto, qualquer agente que afete a função eficiente da membrana celular
poderia desempenhar um papel binário: ajudar a sobrevivência celular e corrigir a
proliferação ou vice-versa desencadeando mecanismos que levam a danos; para uma
revisão relativamente recente, ver Mattetti e Risuleo (2014) e referências nele. A
complexidade e a multiplicidade de funções da membrana celular são representadas na
Fig. 5.

Fig. 5 O desenho animado mostra a estrutura de uma membrana celular típica. Seu
envolvimento em várias funções e atividades celulares é claramente ilustrado. A
imagem está disponível gratuitamente na rede e não possui direitos autorais.
Informamos aqui o link:
https://en.wikipedia.org/wiki/Cell_membrane#mediaviewer/File:Cell_membrane_detaile
d_diagramen.svg. O trabalho da autora desta imagem, Lady of Hats, é reconhecido

388
Outros estudos realizados in vitro indicam que o resveratrol ativa as sirtuínas. Essas
proteínas influenciam uma ampla variedade de processos celulares, como
envelhecimento, transcrição, apoptose, inflamação e resistência ao estresse, bem como
eficiência energética e alerta durante situações energéticas, como dietas de baixa caloria.
Por fim, o resveratrol parece estimular a produção de superóxido dismutase (SOD-2) e a
atividade GPER. Esta última é uma proteína G que em humanos interage com o receptor
de estrogênio-1 GPER e é ativada pelo hormônio sexual feminino. Foi demonstrado que o
resveratrol atua in vitro, como um agonista do receptor gama ativado pelo proliferador de
peroxissoma, um receptor nuclear em pesquisa farmacológica como um agente potencial
para o tratamento do diabetes tipo 2 (Yang et al. 2015).

Uma forma de administrar o resveratrol em humanos é por via bucal sem engolir, ou seja,
por absorção direta pelos tecidos dentro da boca. Um miligrama de resveratrol em
solução (50% álcool/água) retido na boca por 1 minuto pode ser monitorado 2 minutos
depois no plasma na concentração de 37 ng/mL (resveratrol livre). Essa mesma
concentração de RV nativo não modificado é alcançada após a administração de 250 mg
da droga em forma de comprimido (Asensi et al. 2002). No entanto, a relativa baixa
solubilidade do RV na água limita a quantidade que pode ser absorvida pela mucosa
bucal. Portanto, a viabilidade do método de administração bucal é questionável devido à
relativa baixa solubilidade aquosa da molécula. Portanto, é necessária uma avaliação
mais aprofundada da eficácia do parto bucal de RV para RV (Madhav et al. 2009; Ansari
et al. 2011).

De acordo com avaliações farmacológicas, cerca de 70% do resveratrol é absorvido após

administração oral; entretanto, sua biodisponibilidade oral é de aproximadamente 0,5%
devido a extensas modificações químicas, como a glucuronidação e a sulfatação, sofridas
pelo fármaco: ocorrem em nível hepático (Walle 2011). Finalmente, a produção da
formulação SRT-501 foi descontinuada pela GlaxoSmithKline, uma vez que “a empresa
decidiu encerrar o estudo de Fase 2 de SRT501 no mieloma múltiplo e interromper o
desenvolvimento da droga como um tratamento potencial para mieloma. A formulação
SRT501 de resveratrol pode oferecer apenas uma eficácia mínima, enquanto aumenta as
chances de insuficiência renal.”

Veja a equipe do Myeloma Beacon. 30 de novembro de 2010 (https://myelomabeacon.org/

news/2010/11/30/glaxosmithklinehalts-all-further-development-of-resveratrol-drug-srt501/).

O resveratrol foi detectado no líquido cefalorraquidiano em um estudo humano

envolvendo a administração oral de 500 mg ao longo de 13 semanas (Turner et al. 2015),
o que sugere que a droga é capaz de atravessar a barreira sangue/líquido
389
cefalorraquidiano. O resveratrol também é amplamente metabolizado no fígado e nos
pulmões, os principais locais de suas transformações metabólicas (Sharan e Nagar 2013).

5. Efeitos adversos
Um número limitado de estudos em humanos mostrou que o resveratrol é geralmente
bem tolerado. Os ensaios clínicos mostraram que uma pessoa que tomou uma dose diária
de 1000 mg desenvolveu uma erupção cutânea com coceira que foi resolvida após a
descontinuação; no mesmo estudo, também a pressão arterial parecia ter sido afetada.
Em quatro dos ensaios publicados, as pessoas tiveram aumento da frequência de
evacuações e fezes amolecidas no primeiro mês de tratamento. Em um estudo de Fase 2
de um ano em pessoas com Alzheimer, os efeitos adversos mais frequentes foram
diarreia, perda de peso e náuseas (Hausenblas et al. 2014; Fogacci et al. 2018). Em
suma, esses efeitos parecem ser muito importantes se forem consideradas as vantagens
potenciais decorrentes do tratamento com RV.

6. Observações finais e orientações futuras

O controle da morte e senescência celular parece ser o efeito mais relevante da
administração do resveratrol. Essa ação é essencialmente exercida por meio da interação
do RV com a membrana celular. No entanto, como outros produtos naturais, a RV pode
dar origem a efeitos paradoxais; portanto, seu uso como meio terapêutico de múltiplos
alvos deve ser considerado com algumas ressalvas. Por exemplo, o resveratrol
aparentemente é capaz de atravessar a membrana sem causar graves consequências
para a viabilidade e sobrevivência celular, mas sua limitada solubilidade em água e
biodisponibilidade podem reduzir o uso dessa substância natural para fins terapêuticos.
Isso deve levar à busca de novas maneiras de entregar o medicamento à população
celular ou ao distrito celular, onde ele pode desempenhar seu papel de contrastar e/ou
eliminar fenômenos patológicos. Em todo caso, o uso deste, assim como de outros
medicamentos de origem natural, deve ser feito somente após uma avaliação precisa de
sua biocompatibilidade, embora o resveratrol não pareça apresentar efeitos adversos
significativos. No que diz respeito ao uso farmacológico da RV, as nanotecnologias podem
ser um grande suporte para uma aplicação eficiente e biocompatível na resolução de
problemas de saúde. Na verdade, a entrega mediada por nanopartículas, como
lipossomas, vesículas ou nanotubos, pode representar a nova forma de despacho de
moléculas com capacidade terapêutica segura e eficiente.
390
Referências
Ahmad N, Adhami VM, Afaq F et al (2001) Resveratrol causes WAF-1/p21-mediated G(1)-phase arrest of cell cycle
and induction of apoptosis in human epidermoid carcinoma A431 cells. Clin Cancer Res 7:1466–1473
Ahuja I, Kissen R, Bones AM (2012) Phytoalexins in defense against pathogens. Trends Plant Sci 17:73–90
Aiello C, Berardi V, Ricci F, Risuleo G (2011) Biological properties of a methanolic extract of neem oil, a natural oil from
the seeds of the Neem tree (Azadirachta indica var. A. Juss). In: Preedy VR, Watson RR, Patel VB (eds) Nuts & seeds in
health and disease prevention, 1st edn. Academic Press is an imprint of Elsevier, London,
Burlington, San Diego, pp 813–821. ISBN: 978-0-12-375688-6 Aluyen JK, Ton QN, Tran T et al (2012) Resveratrol:
potential as anticancer agent. J Diet Suppl 9(1):45–56
Amro MS, Teoh SL, Norzana AG et al (2018) The potential role of herbal products in the treatment of Parkinson’s
disease. Clin Ter 169 (1):e23–e33
Ansari KA, Vavia PR, Trotta F et al (2011) Cyclodextrin-based nanosponges for delivery of resveratrol: in vitro
characterisation, stability, cytotoxicity and permeation study. AAPS Pharm Sci Technol 12(1):279–286
Araim O, Ballantyne J, Waterhouse AL et al (2002) Inhibition of vascular smooth muscle cell proliferation with red wine
and red wine polyphenols. J Vasc Surg 35(6):1226–1232
Asensi M, Medina I, Ortega A et al (2002) Inhibition of cancer growth by resveratrol is related to its low bioavailability.
Free Radic Biol Med 33(3):387–398
Baell J, Walters MA (2014) Chemistry: chemical con artists foil drug discovery. Nature 513:481–483
Berardi V, Ricci F, Castelli M, Galati G, Risuleo G (2009) Resveratrol exhibits a strong cytotoxic activity in cultured cells
and has an antiviral action against polyomavirus: potential clinical use. J Exp Clin Cancer Res 28:96–105
Bhat P, Kriel J, Shubha Priya B et al (2018) Modulating autophagy in cancer therapy: advancements and challenges
for cancer cell death sensitization. Biochem Pharmacol 147:170–182
Bird JK, Raederstorff D, Weber P et al (2015) Cardiovascular and antiobesity effects of resveratrol mediated through
the gut microbiota. Adv Nutr 8:839–849
Bonincontro A, Risuleo G (2015) Electrorotation: a spectroscopic imaging approach to study the alterations of the
cytoplasmic membrane. Adv Mol Imaging 5:1–15
Bonincontro A, Domenici F, Milardi GL, Risuleo G (2018) Differential dielectric behavior of the plasma membrane in
mouse fibroblasts and human embryo kidney cells. Intl J Sci Res 7:68–71
Bourassa P (2010) Resveratrol, genistein, and curcumin bind bovine serum albumin. J Phys Chem 114:3348–3354
Burow M, Halkier BA (2017) How does a plant orchestrate defense in time and space? Using glucosinolates in
Arabidopsis as case study. Curr Opin Plant Biol 38:142–147
Cao W, Dou Y, Li A (2018) Resveratrol boosts cognitive function by targeting SIRT1. Neurochem Res 43(9):1705–
1713. https://doi.org/10.1007/s11064-018-2586-8
Castro OW, Upadhya D, Kodali M et al (2017) Resveratrol for easing status epilepticus induced brain injury,
inflammation, epileptogenesis, and cognitive and memory dysfunction-are we there yet? Front Neurol 13(8):603
Chedea VS, Vicaş SI, Sticozzi C et al (2011) Resveratrol: from diet to topical usage. Food Funct 8:3879–3892
Chen S, Xiao X, Feng X et al (2011) Resveratrol induces Sirt1- dependent apoptosis in 3T3-L1 preadipocytes by
activating AMPK and suppressing AKT activity and survivin expression. J Nutr Biochem 23(9):1100–1112
Cho MH, Lee SW (2015) Phenolic phytoalexins in rice: biological functions and biosynthesis. Int J Mol Sci
16(12):29120–29133
Cichewicz RH, Kouzi ESA (2002) Resveratrol oligomers: structure, chemistry, and biological activity. In: Atta-ur-
Rahman (ed) Studies in natural products chemistry, vol 26. Elsevier, Amsterdam, pp 507–579
Colin D, Limagne E, Jeanningros-Arnaud S et al (2011) Endocytosis of resveratrol via lipid rafts and activation of
downstream signaling pathways in cancer cells. Cancer Prev Res (Phila) 4(7):1095–1106. https://doi.org/10.1158/1940-
6207.CAPR-10-0274
Crooker K, Aliani R, Ananth M (2018) A review of promising natural chemopreventive agents for head and neck cancer.
Cancer Prev Res (Phila) 11(8):441–450. https://doi.org/10.1158/1940-6207.CAPR-17-0419
De la Lastra CA, Villegas I (2007) Resveratrol as an antioxidant and pro-oxidant agent: mechanisms and clinical
implications. Biochem Soc Trans 35(5):1156–1160
De Leo A, Arena G, Lacanna E et al (2012) Resveratrol inhibits Epstein Barr Virus lytic cycle in Burkitt’s lymphoma
cells by affecting multiple molecular targets. Antivir Res 96(2):196–202
Delmas D, Solary E, Latruffe N (2011) Resveratrol, a phytochemical inducer of multiple cell death pathways: apoptosis,
autophagy and mitotic catastrophe. Curr Med Chem 18(8):1100–1121
Dixon RA, Paiva NL (1995) Stress-induced phenylpropanoid metabolism. Plant Cell 7:1085–1097
Docherty JJ, Fu MM, Stiffler BS et al (1999) Resveratrol inhibition of herpes simplex virus replication. Antivir Res
43:145–155
Docherty JJ, Fu MM, Hah JM et al (2005) Effect of resveratrol on herpes simplex virus vaginal infection in the mouse.
Antivir Res 67:155–162
Docherty JJ, Sweet TJ, Bailey E et al (2006) Resveratrol inhibition of varicella-zoster virus replication in vitro. Antivir
Res 72:171–177
Echeverri F, Torres F, Quinones W et al (1997) Danielone, a phytoalexin from papaya fruit. Phytochemistry 44(2):255–
256
391
 Elshaer M, Chen Y, Wang XJ et al (2018) Resveratrol: an overview of its anti-cancer mechanisms. Life Sci 207:340–
349
Espinoza JL, Kurokawa Y, Takami A (2018) Rationale for assessing the therapeutic potential of resveratrol in
hematological malignancies. Blood Rev S0268–960X(17):30124–30128
Fan Y, Chiu JF, Liu J (2018) Resveratrol induces autophagy-dependent apoptosis in HL-60 cells. BMC Cancer
18(1):581
Farris P, Krutmann J, Li YH (2013) Resveratrol: a unique antioxidant offering a multi-mechanistic approach for treating
aging skin. J Drugs Dermatol 12(12):1389–1394
Favaron F, Lucchetta M et al (2009) The role of grape polyphenols on trans-resveratrol activity against Botrytis cinerea
and of fungal laccase on the solubility of putative grape PR proteins. J Plant Pathol 91(3):579–588
Fogacci F, Tocci G, Presta V et al (2018) Effect of resveratrol on blood pressure: a systematic review and meta-
analysis of randomized, controlled, clinical trials. Crit Rev Food Sci Nutr 58(2):1–14
Ganesan P, Choi DK (2016) Current application of phytocompoundbased nanocosmeceuticals for beauty and skin
therapy. Int J Nanomedicine 11:1987–2007
Glazebrook J, Ausbel FM (1994) Isolation of phytoalexin-deficient mutants of Arabidopsis thaliana and characterization
of their interactions with bacterial pathogens. PNAS 91:8955–8959
Gregory D, Hargett D, Holmes D et al (2004) Efficient replication by herpes simplex virus type 1 involves activation of
the IfkappaB kinase-IkappaB-p65 pathway. J Virol 78(24):13582–13590
Großkinsky DK, van der Graaff E, Roitsch T (2012) Phytoalexin transgenics in crop protection—fairy tale with a happy
end? Plant Sci 195:54–70
Harborne JB (1999) The comparative biochemistry of phytoalexin induction in plants. Biochem Syst Ecol 27(4):335–
367
Hart JH, Hillis WE (1974) Inhibition of wood-rotting fungi by stilbenes and other polyphenols in Eucalyptus sideroxylon.
Phytopathology 64:939–948
Hasima N, Ozpolat B (2014) Regulation of autophagy by polyphenolic compounds as a potential therapeutic strategy
for cancer. Cell Death Dis 5:e1509. https://doi.org/10.1038/cddis.2014.467
Hausenblas HA, Schoulda JA, Smoliga JM et al (2014) Resveratrol treatment as an adjunct to pharmacological
management in type 2 diabetes mellitus-systematic review and meta-analysis. Mol Nutr Food Res 59(1):147–159
He X, Wang Y, Zhu J et al (2011) Resveratrol enhances the anti-tumor activity of the mTOR inhibitor rapamycin in
multiple breast cancer cell lines mainly by suppressing rapamycin-induced AKT signaling. Cancer Lett 301(2):168–176
Huminiecki L, Horbańczuk J (2018) The functional genomic studies of resveratrol in respect to its anti-cancer effects.
Biotechnol Adv 36 (6):1699–1708
Ingólfsson HI, Thakur P, Herold KF et al (2014) Phytochemicals perturb membranes and promiscuously alter protein
function. ACS Chem Biol 9:1788–1798
Jeandet P, Douillet-Breuil AC, Bessis R et al (2002) Phytoalexins from the Vitaceae: biosynthesis, phytoalexin gene
expression in transgenic plants, antifungal activity, and metabolism. J Agric Food Chem 50:2731–2741
Jiang J (2008) Design, synthesis and spectroscopic studies of resveratrol aliphatic acid ligands of human serum
albumin. Bioorg Med Chem 16:6406–6414
Kou X, Chen N (2017) Resveratrol as a natural autophagy regulator for prevention and treatment of Alzheimer’s
disease. Nutrients 9(9): E927. https://doi.org/10.3390/nu9090927
Lamuela-Raventos RM, Romero-Perez AI, Waterhouse AL et al (1995) Direct HPLC analysis of cis- and trans-
resveratrol and piceid isomers in Spanish red Vitis vinifera wines. J Agric Food Chem 43 (2):281–283
Lange KW, Li S (2018) Resveratrol, pterostilbene, and dementia. Biofactors 44(1):83–90
Lee RHC, Lee MHH, Wu CYC et al (2018) Cerebral ischemia and neuroregeneration. Neural Regen Res 13(3):373–
385
Liao PC, Ng LT, Lin LT et al (2010) Resveratrol arrests cell cycle and induces apoptosis in human hepatocellular
carcinoma Huh-7 cells. J Med Food 13(6):1
Madhav NV, Shakya AK, Shakya P et al (2009) Orotransmucosal drug delivery systems: a review. J Control Release
140(1):2–11
Matos RS, Baroncini LA, Précoma LB et al (2012) Resveratrol causes antiatherogenic effects in an animal model of
atherosclerosis. Arq Bras Cardiol 98(2):136–142
Mattetti A, Risuleo G (2014) Apoptosis: a mode of cell death. Biochem Mol Biol 2:34–39
Mattivi F, Reniero F, Korhammer S (1995) Isolation, characterization, and evolution in red wine vinification of
resveratrol monomers. J Agric Food Chem 43(7):1820–1823
McCubrey JA, Lertpiriyapong K, Steelman LS et al (2017) Effects of resveratrol, curcumin, berberine and other
nutraceuticals on aging, cancer development, cancer stem cells and micro-RNAs. Aging (Albany NY) 9(6):1477–1536
Meyer J, Murray SL, Berger DK (2016) Signals that stop the rot: regulation of secondary metabolite defences in
cereals. Physiol Mol Plant Pathol 94:156–166
Molnár J, Engi H, Hohmann J et al (2010) Reversal of multidrug resistance by natural substances from plants. Curr Top
Med Chem 10(17):1757–1768
Oliveira MDM, Varanda CMR, Félix MRF (2016) Induced resistance during the interaction pathogen x plant and the
use of resistance inducers. Phytochem Lett 15:152–158

392
 Oliveira ALB, Monteiro VVS, Navegantes-Lima KC et al (2017) Resveratrol role in autoimmune disease-AMini-review.
Nutrients 19: E1306
Owen HC, Appiah S, Hasan N et al (2017) Phytochemical modulation of apoptosis and autophagy: strategies to
overcome chemoresistance in leukemic stem cells in the bone marrow microenvironment. Int Rev Neurobiol 135:249–
278
Palamara AT, Nencioni L, Aquilano K et al (2005) Inhibition of influenza A virus replication by resveratrol. J Infect Dis
191:1719–1729
Pallauf K, Rimbach G, Rupp PM et al (2016) Resveratrol and lifespan in model organisms. Curr Med Chem
23(41):4639–4680
Perez-Vizcaino F, Fraga CG (2018) Research trends in flavonoids and health. Arch Biochem Biophys 646:107–112
Popescu M, Bogdan C, Pintea A et al (2018) Drug Des Devel Ther 12:1985–1996
Prokop J, Abrman P, Seligson AL et al (2006) Resveratrol and its glycon piceid are stable polyphenols. J Med Food
9(1):11–14
Ricci F, Berardi V, Risuleo G (2009) Differential cytotoxicity of MEX: a component of Neem oil whose action is exerted
at the cell membrane level. Molecules 14:122–132
Risuleo G (2016) Resveratrol: multiple activities on the biological functionality of the cell. In: Gupta R (ed)
Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity. Elsevier/Academic Press, Amsterdam, pp 453–464
Sanchez Maldonado AF, Schieber A, Gänzle MG (2015) Plant defence mechanisms and enzymatic transformation
products and their potential applications in food preservation: advantages and limitations. Trends Food Sci Technol
46(1):49–59
Santos Silva M, Barbosa Monteiro Arraes F, de Araújo Campos M et al (2018) Potential biotechnological assets related
to plant immunity modulation applicable in engineering disease-resistant crops. Plant Sci 270:72–84
Sarubbo F, Moranta D, Asensio VJ et al (2017) Effects of resveratrol and other polyphenols on the most common brain
age-related diseases. Curr Med Chem 24(38):4245–4266
Schröder J (1999) Probing plant polyketide biosynthesis. Nat Struct Biol 6:714–716
Schröder G, Brown JW, Schröder J et al (1988) Molecular analysis of resveratrol synthase. cDNA, genomic clones and
relationship with chalcone synthase. Eur J Biochem 172(1):161–169
Shalini S, Dorstyn L, Dawar S et al (2015) Old, new and emerging functions of caspases. Cell Death Differ 22:526–539
Sharan S, Nagar S (2013) Pulmonary metabolism of resveratrol: in vitro and in vivo evidence. Drug Metab Dispos
41(5):1163–1169
Shih C-H, Chu IK, Yip WK et al (2006) Differential expression of two flavonoid 30-hydroxylase cDNAs involved in
biosynthesis of anthocyanin pigments and 3-deoxyanthocyanidin phytoalexins in Sorghum. Plant Cell Physiol
47(10):1412–1419
Signorelli P, Ghidoni R (2005) Resveratrol as an anticancer nutrient: molecular basis, open questions and promises. J
Nutr Biochem 16 (8):449–466
Singh NP, Singh UP, Hegde VL et al (2011) Resveratrol (trans-3,5,4-0-trihydroxystilbene) suppresses EL4 tumor
growth by induction of apoptosis involving reciprocal regulation of SIRT1 and NF-κBα e AMPK. Esses dadosB. Mol Nutr Food Res 55(8):1207–
1218
Soleas GJ, Diamandis EP, Goldberg DM (1997) Resveratrol: a molecule whose time has come? And gone? Clin
Biochem 30:91–113
Thomma BP, Nelissen I, Eggermont K et al (1999) Deficiency in phytoalexin production causes enhanced susceptibility
of Arabidopsis thaliana to the fungus Alternaria brassicicola. Plant J 19(2):163–171
Tooze J (ed) (1981) Molecular biology of tumor viruses: DNA tumor viruses part 2. Cold Spring Harbor Laboratory
Press, Cold Spring Harbor, NY
Treviño-Saldaña N, García-Rivas G (2017) Regulation of sirtuinmediated protein deacetylation by cardioprotective
phytochemicals. Oxidative Med Cell Longev:1750306. https://doi.org/10.1155/2017/1750306
Tsai HY, Ho CT, Chen YK (2017) Biological actions and molecular effects of resveratrol, pterostilbene, and 30-
hydroxypterostilbene. J Food Drug Anal 25(1):134–147
Turner RS, Thomas RG, Craft S et al (2015) A randomized, doubleblind, placebo-controlled trial of resveratrol for
Alzheimer disease. Neurology 85(16):1383–1391
Ullah MF, Bhat SH, Hussain E et al (2015) Ascorbic acid in cancer chemoprevention: translational perspectives and
efficacy. Curr Drug Targets 13(14):1757–1771
Vang O (2015) Resveratrol: challenges in analyzing its biological effects. Ann N Y Acad Sci 1348:161–170
Wahl D, Bernier M, Simpson SJ et al (2018) Future directions of resveratrol research. Nutr Health Aging 4(4):287–290
Walle T (2011) Bioavailability of resveratrol. Ann N Y Acad Sci 1215:9–15
Wang Z, Li W, Meng X, Jia B (2012) Resveratrol induces gastric cancer cell apoptosis via reactive oxygen species, but
independent of sirtuin1. Clin Exp Pharmacol Physiol 39(3):227–232
Whitlock NC, Baek SJ (2012) The anticancer effects of resveratrol: modulation of transcription factors. Nutr Cancer
64(4):493–502
Yang T, Li S, Zhang X et al (2015) Resveratrol, sirtuins, and viruses. J Rev Med Virol 25(6):431–445
Zbikowska HM, Olas B, Wachowicz B et al (1999) Response of blood platelets to resveratrol. Platelets 10:247–252
Zhai T, Li S, Hu W et al (2018) Potential micronutrients and phytochemicals against the pathogenesis of chronic
obstructive pulmonary disease and lung cancer. Nutrients 10(7):E813. https://doi.org/10.3390/nu10070813
393
 Zhang YH, Guo JG, Guo ZH et al (2011) Involvement of p38-p53 signal pathway in resveratrol-induced apoptosis in
MCF-7 cells. Yao Xue Xue Bao 46(11):1332–1337
Zhang W, Wang X, Chen T (2012) Resveratrol induces apoptosis via a Bak-mediated intrinsic pathway in human lung
adenocarcinoma cells. Cell Signal 24(5):1037–1046
Zhu X, Wu C, Qiu S et al (2017) Effects of resveratrol on glucose controland insulin sensitivity in subjects with type 2
diabetes: systematic review and meta-analysis. Nutr Metab (Lond) 14:60. https://doi.org/10.1186/s12986-017-0217-z

394
 Membranas de casca de ovo para usos veterinários
Dan DuBourdieu

Resumo
A membrana da casca de ovo (ESM) é um ingrediente relativamente novo na lista de
ingredientes usados para mitigar os efeitos da inflamação das articulações em animais. A
casca do ovo contém uma membrana fina que reveste a superfície interna da casca que é
composta por um grande número de proteínas, aminoácidos, proteínas semelhantes ao
colágeno, enzimas e glicosaminoglicanos. Quando o ESM é consumido por um animal, os
compostos encontrados no ESM desempenham um papel na manutenção da saúde das
articulações. No entanto, ESM também tem efeitos antimicrobianos. Os efeitos
antimicrobianos do ESM podem ser utilizados em rações para animais como uma
alternativa aos antibióticos para promoção do crescimento em animais de produção.
Assim, o ESM representa um novo ingrediente para uso veterinário, não apenas para
combater a inflamação nas articulações, mas também como uma alternativa aos
antibióticos para atividades de promoção de crescimento.

Palavras-chave: Nutracêuticos veterinários · Membrana da casca do ovo

D. DuBourdieu. Vets Plus Inc., Menomonie, WI, USA. e-mail: dand@vets-plus.com

1. Introdução
Os animais enfrentam muitos dos mesmos problemas básicos que os humanos enfrentam
no que diz respeito à saúde. Como tratar esses problemas de saúde é o desafio constante
para pesquisadores e fabricantes. Entre os problemas de saúde estão vários problemas
nas articulações que ocorrem com o envelhecimento do animal. Existem agora vários
produtos nutracêuticos no mercado que surgiram do lado humano para ajudar a tratar ou
prevenir problemas comuns em animais. Outro item desse tipo é o ESM. Os ovos têm
sido usados por humanos desde o início dos tempos, mas, ainda assim, novas maneiras
estão sendo encontradas para explorar o ovo. Entre os novos usos dos ovos está o ESM
encontrado no interior do ovo. Além dos usos para combater a inflamação das
articulações, um novo uso veterinário inclui como alternativa aos antibióticos e para a
promoção do crescimento em animais de produção.

395
2. Ovos e resíduos de casca de ovo
O conteúdo comum dos ovos das aves na gema e na clara tem sido usado pelos
humanos como fonte de alimento há muito tempo. Mas a casca normalmente é
descartada, e isso significa muito desperdício de casca de ovo. A indústria de alimentos
dos Estados Unidos gera mais de 24 bilhões de cascas de ovo todos os anos. Isso gera
mais de 150.000 toneladas de resíduos de conchas por ano (Hecht 1999). No entanto,
muitos aterros não estão dispostos a receber os resíduos porque as conchas e a
membrana anexada atraem os vermes. Portanto, livrar-se das cascas de ovo apresentou
um problema de descarte. Cerca de 25% dos resíduos de cascas de ovos são usados
como fertilizante. Isso ocorre porque as cascas dos ovos contêm cálcio que aumenta, ou
neutraliza, o nível de pH do solo excessivamente ácido. Mas o cálcio da casca também
pode ser usado em suplementos de cálcio, espessantes alimentares e outros usos (Yoo et
al. 2009). Assim, outros 25% são usados em ingredientes de ração animal, mas ainda
25% são descartados em lixões municipais e o restante é usado de outras maneiras
(Daengprok et al. 2002). Mas essa situação cria uma nova oportunidade de pegar um
resíduo e transformá-lo em algo útil.

3. Estrutura de cascas de ovo e membranas

Do ponto de vista biológico, a estrutura da casca do ovo é importante por algumas razões
óbvias (Hunton 2005). A casca forma uma câmara embrionária para o pintinho em
desenvolvimento, fornecendo proteção mecânica e um meio de troca gasosa controlada.
A casca do ovo consiste quase inteiramente (95-97%) de carbonato de cálcio (CaCO 3)
com algum carbonato de magnésio (MgCO3) presente como uma estrutura colunar que
cria até 17.000 poros transversais estreitos entre colunas em paliçada de CaCO 3. Esses
poros permitem que o ar e o vapor d'água entrem e saiam do ovo (Rovenský et al. 2003).
Em segundo lugar, a casca é um recipiente para o ovo comercial, proporcionando
proteção do conteúdo e uma embalagem única para um alimento valioso. Mas de
interesse atual são as membranas da casca do ovo que revestem o interior da casca.

4. Membranas de casca de ovo

Na verdade, existem várias membranas encontradas nos ovos (Fig. 1). A membrana
interna da casca adere à clara do ovo, enquanto a membrana externa da casca adere à
casca. A membrana interna e a externa aderem uma à outra, exceto no espaço aéreo. A
gema também é envolvida por uma membrana. Essas membranas são formadas antes da

396
casca durante o desenvolvimento, uma vez que o cálcio é necessário para se formar na
membrana externa.

Fig. 1 Estrutura da casca do ovo e membranas

5 Métodos de separação de ESM

Separar o ESM das conchas por técnicas manuais obviamente pode ser muito trabalhoso
e demorado. Do ponto de vista comercial, para gerar ESM suficiente para ser útil, existem
várias maneiras pelas quais a membrana de uma casca de ovo é separada da casca. Isso
inclui processos químicos, mecânicos, a vapor e a vácuo (Vlad 2009; Yoo et al. 2009;
MacNeil 2001; Adams 2006; Novo 2013). O objetivo desses métodos é usar o mínimo
possível de força degradativa na membrana. Os métodos que são de natureza mecânica
podem ser os melhores para manter a atividade biológica da membrana. Normalmente, o
invólucro é triturado de alguma maneira adequada, tal como usando um aparelho de rolo
e, em seguida, os invólucros esmagados com membranas ainda fixadas aos fragmentos
de invólucro são colocados em um tanque de água ou outro solvente. A agitação por
vários métodos ocorre para realmente separar as membranas das cascas. As conchas
afundam no fundo do tanque e as membranas flutuam para conseguir a separação e
posterior remoção. Existem muitas variações das técnicas para separar as membranas
das cascas. Mas uma vez que a membrana isolada é seca para produzir um pó, então
podem ser utilizadas em produtos veterinários.

6. Componentes do ESM
As membranas da casca interna e externa são as primeiras camadas da matriz
extracelular que cobrem o ovo (gema e clara) (Creger et al. 1976). As camadas separadas
da casca do ovo foram analisadas e descobriram que contêm vários tipos de colágeno
(tipos X, I, V). A membrana externa é predominantemente feita de colágeno tipo I,

397
enquanto a membrana interna consiste principalmente de colágeno tipo V (Wong et al.
1984). Além disso, foi relatado que o colágeno do tipo X ocorre em ambas as estruturas
de membrana (Arias et al. 1991). Os perfis de aminoácidos do ESM também mostraram
altas concentrações de arginina, ácido glutâmico, histidina, cistina e prolina (Britton e Hale
1977). Além disso, um número de proteínas semelhantes ao colágeno (incluindo
hidroxiprolina, hidroxilisina, desmosina e isodesmosina) são componentes estruturais
primários das membranas (Baker e Balch 1962; Candlish e Scougall 1969; Starcher
1980). Os colágenos e proteínas semelhantes ao colágeno no ESM são interessantes
para produtos de cuidados com a pele. Membranas de casca de ovo também mostraram
conter glicosaminoglicanos, como sulfato de dermatana e sulfato de condroitina, e
glicoproteínas sulfatadas, incluindo hexosaminas, como glucosamina (Picard 1973). ESM
tem um alto teor de proteína e quantidades moderadas de glucosamina (até 1% por peso
seco), sulfato de condroitina (até 2%), ácido hialurônico (até 2%) e colágeno (tipo I, até
25%) Os glicosaminoglicanos (GAGs) são de grande interesse, pois desempenham
papéis importantes no tecido conjuntivo (Kjellen e Lindahl 1991). Glucosamina, ácido
hialurônico e sulfato de condroitina são GAGs importantes em ESM (Nakano 2003; Long
et al. 2004). Outros componentes identificados em membranas de casca de ovo são ácido
hialurônico (Long et al. 2004), ácido siálico (Nakano 2003), desmosina e isodesmosina
(Starcher 1980), ovo transferrina (Gautron et al. 2001) e enzimas como lisil oxidase
(Akagawa 1999), lisozima (Hincke et al. 2000) e β-N-acetil glucosaminidase (Ahlborn
2006). Com o alto conteúdo de proteínas e enzimas e GAGs de ocorrência natural no
ESM, cientistas e empresas de suplementos nutricionais especularam que isso poderia
representar uma alternativa viável aos tratamentos tradicionais para distúrbios articulares
e osteoartrite.

Mais de 300 proteínas são encontradas no ESM. Estes incluem proteínas estruturais
fibrosas constituídas por colágenos e queratinas que geralmente são resistentes às
proteases gástricas convencionais. Também são abundantes a lisozima, ovotransferrina,
ovocleidina, clusterina, ovoceratina, ovodefensina e muitos mais (Makkar 2016). Muitas
dessas proteínas e peptídeos têm propriedades antimicrobianas, antioxidantes e
imunomoduladoras. Entre aqueles incluem lisozima, ovo transferrina, ovalbumina,
globulinas, ovo mucinas e defensinas (Miksík et al. 2007). Muitas dessas proteínas são
funcionalmente semelhantes a algumas proteínas do leite que conferem proteção pós-
natal aos recém-nascidos, ajudam na maturação do intestino e moldam seu microbioma
(Lawrence e Pane 2007; Rose e Hincke 2009). Os peptídeos antimicrobianos não apenas
fornecem proteção contra uma ampla gama de micróbios, incluindo bactérias e fungos,
mas também podem funcionar como adjuvantes, aumentando a imunidade contra
398
antígenos estranhos (Brown e Hancock 2006). Deve-se notar que os componentes da
membrana ainda não foram totalmente caracterizados; há provavelmente vários
compostos que ainda não foram identificados na membrana. Alguns desses elementos
ainda não detectados podem contribuir para benefícios ou melhorias observados na
saúde das articulações ou em outros usos. Além disso, tendo em vista a necessidade de
alternativas aos antibióticos na produção de carne animal (Seal et al. 2013; Thacker
2013), explorar o potencial dos subprodutos do ovo para melhorar a imunidade e a
resistência a doenças em animais de produção também faz sentido. Fatores presentes no
ESM parecem ajudar a modular a imunidade e o desempenho das galinhas quando
fornecidos como suplementos nutricionais pós-nascimento (Makkar 2016).

7. Eficácia (em humanos) para tratar a inflamação das articulações

A descoberta da membrana da casca do ovo como uma fonte natural de colágeno
combinado, glucosamina, condroitina e ácido hialurônico levou à avaliação deste material
como um potencial tratamento para dores nas articulações e no tecido conjuntivo. Há um
interesse crescente na suplementação com ESM como tratamento para dores articulares,
uma vez que não apresenta os efeitos colaterais dos tratamentos convencionais, como os
antiinflamatórios não esteroidais. Relatórios clínicos (Ruff et al. 2009a, b) investigaram o
momento e a eficácia da suplementação de ESM nas articulações e tecido conjuntivo
junto com a osteoartrite em pacientes humanos com dor intensa e amplitude de
movimento limitada. Esses pacientes receberam doses diárias de 500 mg de ESM oral
por 4–8 semanas. Efeitos rápidos (7–10 dias) e contínuos foram observados em termos
de redução da dor e rigidez, bem como melhora da flexibilidade. Nessas investigações,
não houve relatos de efeitos adversos com a suplementação. Outros relatórios (Ruff et al.
2009a, b) mostraram resultados positivos de 500 mg de ESM tomado uma vez ao dia,
reduziram significativamente a dor nas articulações e a rigidez em comparação com o
placebo em 10, 30 e 60 dias. Relatórios adicionais também mostraram que o ESM ajuda
com problemas nas articulações induzidas por exercícios e dor ou osteoartrite (Ruff et al.
2018; Danesch et al. 2014).

8. Eficácia (em animais) para tratar inflamação articular e modos de

ação
O uso de ESM para tratar a inflamação das articulações em humanos levou ao mesmo
uso para animais. Estudos em animais ajudaram a elucidar os modos de ação do ESM.
399
ESM foi investigado para atividade anti-artrite em ratos (Sim et al. 2015). A artrite foi
induzida por iodoacetato monossódico e tratada pela administração de ESM. O óxido
nítrico e citocinas incluindo IL-1β, IL-6, PGE 2, TIMP-1, LTB4 e hs-CRP no soro foram
diminuídos em comparação com os controles. O volume da cartilagem da patela
aumentou significativamente. O tratamento com ESM suprimiu a deformação da
cartilagem e preservou o volume da cartilagem em comparação com os controles não
tratados. Pelo menos parte disso, a condroproteção pode resultar das propriedades
antiinflamatórias do ESM. Os níveis séricos de metaloproteinases da matriz (MMP-2 e
MMP-9) que degradam a cartilagem também foram substancialmente reduzidos. Outros
estudos em animais também observaram uma redução de citocinas pró-inflamatórias
quando ESM foi administrado (Ruff e DeVore 2014).

Estudos adicionais (Ruff et al. 2015) mostraram que o intensificador da cadeia leve kappa
do fator nuclear de células B ativadas (NFkB) desempenha um papel na forma como a
ESM funciona no corpo. O NFkB é uma proteína sinalizadora encontrada no citoplasma
de quase todos os tipos de células humanas e animais e é um regulador primário da
função imunológica. Os hidrolisados de ESM ativaram significativamente o NFkB e o
aumento da atividade do NFkB pode se traduzir na eficácia in vivo observada com o ESM
por meio de um mecanismo de “tolerância oral”. A tolerância oral se refere ao fenômeno
de uma resposta imunológica periférica reduzida (tolerância) que resulta da exposição
repetida do sistema imunológico da mucosa no intestino aos antígenos proteicos
ingeridos. Acredita-se que a tolerância oral a peptídeos imunogênicos que são ingeridos
repetidamente resulte da vigilância imunológica dentro do tecido linfóide associado ao
intestino como uma forma de o corpo prevenir uma resposta imunológica inadequada ou
desnecessária às proteínas normalmente consumidas na dieta. A tolerância imunológica
aos componentes da cartilagem, particularmente colágeno do tipo II, da suplementação
oral com ESM (que contém colágeno dos tipos I, V e X), é uma possível explicação para a
redução observada na formação de colágeno C-telopeptídeo tipo II (CTX-II) observada
com suplementação ESM. Deve-se notar que CTX-II é um marcador de degradação do
colágeno observada na osteoartrite. Pesquisas posteriores também mostraram (Wedekind
et al. 2017) que a suplementação oral com ESM suprimiu substancialmente o inchaço
devido à inflamação e redução acentuada dos danos à cartilagem, formação de pannus e
reabsorção óssea periarticular histologicamente em ratos. Além disso, o ESM pode
promover a regeneração do nervo, que pode ser decorrente da osteoartrite (Farjah 2013).
A eficácia do ESM para uso conjunto foi investigada em outros animais além de ratos.
Esses animais incluem guindastes (Bauer et al. 2014), camelos (Dierenfeld et al. 2014) e

400
cavalos (Wedekind et al. 2015). Da mesma forma, um efeito condroprotetor do tratamento
com ESM em cães também é observado na doença articular de ocorrência natural. Não
houve eventos adversos graves relatados durante o estudo, e os proprietários de cães
relataram que o ESM foi bem tolerado por seu animal de estimação (Ruff et al. 2016). A
suplementação com ESM, ~ 13,5 mg/kg tomada uma vez ao dia, reduziu
significativamente a dor nas articulações e melhorou a função articular rapidamente,
conforme avaliado pelo questionário Canine Brief Pain Inventory. ESM demonstrou uma
melhora duradoura na dor nas articulações, levando a uma melhora na qualidade de vida
em 6 semanas. Além disso, um profundo efeito condroprotetor foi demonstrado após 6
semanas de suplementação com ESM.

9. ESM como alternativa aos antibióticos para promoção do

crescimento em animais de produção
Os estudos em animais mencionados anteriormente mostraram atividade antiartrite
significativa ao usar ESM. No entanto, existem usos adicionais para o ESM que estão
começando a ser reconhecidos. O principal desses novos usos do ESM é uma alternativa
aos antibióticos usados para promoção do crescimento em animais de produção. Há uma
crescente preocupação pública e científica sobre o uso de antibióticos como aditivos para
rações na produção animal. Essa preocupação é alimentada pelo surgimento de
resistência a antibióticos em muitas bactérias patogênicas humanas, a liberação de
resíduos contaminantes no meio ambiente (água, solo, etc.) e o risco de que resíduos de
antibióticos promotores de crescimento possam ocorrer em alimentos de origem animal.
Essa preocupação resultou na proibição do uso de antibióticos como promotores de
crescimento em animais de produção na Europa em 2006. Em 2015, o FDA aprovou uma
nova Diretiva de Alimentos Veterinários, que é uma diretriz atualizada que dá instruções
para empresas farmacêuticas, veterinários e produtores sobre como administrar os
medicamentos necessários através da ração e água do animal. O FDA pediu às empresas
farmacêuticas que editassem voluntariamente seus rótulos para excluir a promoção do
crescimento como uma indicação para o uso de antibióticos. Os regulamentos da FDA
sobre o uso off-label40 proíbem o uso de um medicamento off-label para fins não
terapêuticos, o que tornaria ilegal o uso do medicamento com novo rótulo para aumento
do crescimento. As novas diretrizes entraram em vigor em 1º de janeiro de 2017 (FDA
2017). Isso levou à busca de alternativas aos antibióticos. Produtos como probióticos,
prebióticos, bacteriófagos, extratos fecais, anticorpos de gema e ácidos orgânicos têm
40 Se refere ao uso diferente do aprovado em bula ou ao uso de produto não registrado no órgão regulatório de vigilância sanitária no
País
401
sido usados para satisfazer essa necessidade. No entanto, outro item surpreendente a
adicionar à lista são as membranas de casca de ovo. A pesquisa (Makkar 2016) mostrou
que a alimentação com níveis de 0,5% da membrana da casca do ovo não só melhorou o
peso corporal das galinhas, mas também modulou os parâmetros de imunoglobulina pró e
genes antiinflamatórios e reduziu os níveis de corticosterona sérica sob condições de
desafio de endotoxina. Tendo em vista a necessidade de alternativas aos antibióticos na
produção de carne animal, parece lógico explorar o potencial dos subprodutos do ovo
como modulador nutricional da imunidade durante o período pós-nascimento.

10. Efeitos nutricionais de suplementos de membrana de casca de ovo

no desempenho e imunidade de galinhas
ESM contém uma variedade de proteínas e peptídeos que auxiliam no desenvolvimento
do embrião e fornecem proteção a ele. Muitos dos peptídeos e proteínas associados com
ESM têm propriedades antimicrobianas, imunomoduladoras e adjuvantes. Tendo em vista
a necessidade de alternativas aos antibióticos na produção de carne animal (Seal et al.
2013; Thacker 2013), faz sentido explorar o potencial dos subprodutos do ovo para
melhorar a imunidade e a resistência a doenças em aves ou outros animais de produção.
Foi hipotetizado (Makkar 2016) que os subprodutos da membrana do ovo, fornecidos
como suplementos nutricionais pós-parto para as galinhas, podem melhorar seu
desempenho e imunidade. Para explorar seu efeito, três grupos de pintos de corte foram
alimentados com ração contendo 0%, 0,2% e 0,4% de ESM desde o dia 1 pós-nascimento
até 14 dias e ração regular depois disso. As galinhas nos grupos tratados com ESM
mostraram um aumento estatisticamente significativo no peso corporal, sem impacto nos
pesos relativos dos órgãos. Em comparação com os controles, a porcentagem de
leucócitos e linfócitos aumentou em galinhas alimentadas com ESM de 0,4%, enquanto a
porcentagem de monócitos diminuiu em ambos os níveis de ESM. Exceto para a proteína
sérica que aumentou em aves alimentadas com ESM, nenhuma outra variável química
clínica metabólica mostrou qualquer mudança significativa. Os níveis de IgM e IgG (Y)
estavam elevados e os níveis de corticosterona reduzidos em galinhas alimentadas com
dietas suplementadas com ESM. Esses resultados sugeriram que os suplementos de
ESM durante as fases iniciais do crescimento podem melhorar a imunidade e as variáveis
de estresse e melhorar o seu desempenho de crescimento sem qualquer efeito prejudicial
em outros parâmetros fisiológicos.

Esses estudos também mostraram que os níveis de corticosterona no sangue foram

reduzidos em galinhas alimentadas com dietas ESM, sugerindo níveis mais baixos de
402
estresse nessas aves, embora o mecanismo para sua redução não seja conhecido.
Estresse e inflamação também podem causar perda de peso corporal e apresentar outros
sinais de doença, como letargia, que não foram observados em aves alimentadas com
ESM. Baixos níveis de estresse também podem implicar em um melhor comportamento
alimentar (Bunnett 2005), que contribuiria para o aumento do PN. IgM é um anticorpo que
combate infecções, previne inflamação, reage com uma variedade de antígenos
estranhos, incluindo moléculas associadas a patógenos, ativa o complemento,
precursores e estimula a resposta de IgG. Da mesma forma, um aumento nos níveis de
IgG em galinhas alimentadas com ESM também sugere uma modulação da resposta
imune adaptativa. Esses anticorpos desempenham papéis vitais na proteção contra uma
variedade de patógenos microbianos. É necessário verificar se a resposta do anticorpo ao
ESM é transitória ou se estabelece uma resistência duradoura a certas infecções. O
suplemento ESM parece ter efeito benéfico em galinhas enquanto reduz o estresse e
modula a imunidade sem sacrificar o potencial de crescimento das aves.

Estudos adicionais foram realizados (Makkar 2016) para determinar se ESM poderia
diminuir os efeitos nocivos do lipossacarídeo (LPS) em galinhas mais velhas. Aves de
controle com LPS e aves alimentadas com ESM mais LPS com 5 semanas de idade
foram utilizadas no estudo. O ESM também foi tratado com etanol para inativar fatores
bacterianos. Os efeitos do LPS foram avaliados às 4 e 24 horas de tratamento. O
suplemento de ESM causou um ganho de peso numérico, mas não significativo, e
diminuiu consistentemente os níveis de corticosterona no sangue. O LPS causou uma
perda significativa no peso corporal 24 horas após sua administração, mas as aves
suplementadas com ESM apresentaram perda de peso corporal significativamente menor
em comparação com as aves alimentadas com controle. Os glóbulos brancos, a razão
heterófilos/linfócitos e os níveis de IgG foram baixos em galinhas alimentadas com dieta
de suplemento de ESM em comparação com o grupo controle alimentado. O desafio com
LPS aumentou a expressão do gene da citocina pró-inflamatória IL-6, mas as aves
alimentadas com ESM também mostraram seu efeito reduzido, favorecendo a regulação
positiva de alguns genes antiinflamatórios em comparação com as galinhas alimentadas
com controle. A suplementação pós-nascimento de ESM parece modular a imunidade e
aumentar sua resistência à endotoxina. Os dados sugeriram que a suplementação de
ração com ESM é benéfica para as aves pós-nascimento e reduz os efeitos prejudiciais
do LPS contra infecções comuns. Em conclusão, esses resultados mostram que um
suplemento ESM pode ser um aditivo alimentar sustentável para melhorar a imunidade e
a fisiologia da saúde das aves. O uso futuro de ESM em outros animais de produção
como uma alternativa aos antibióticos será de interesse óbvio.
403
11. Outros usos veterinários do ESM
Embora o ESM tenha demonstrado eficácia na inflamação das articulações e como
agente antimicrobiano, há ainda outros usos. Isso inclui o uso em cosméticos funcionais
humanos como um ingrediente anti-envelhecimento para ajudar a prevenir a formação de
rugas, pois o ESM pode diminuir a atividade da colagenase. Os efeitos cosméticos do
ESM, como clareamento da pele, cicatrização de feridas e proteção UV, parecem ajudar a
função da pele humana (Kimoon et al. 2012). ESM também pode ajudar a reter a umidade
da pele, melhorando assim a capacidade de proteção da pele. Como tal, pode ser
possível que o ESM encontre um novo material para reparo de pele também para fins
veterinários.

12. Comentários de Conclusão e Orientações Futuras

ESM, como muitos nutracêuticos, é um dos ingredientes mais novos no mercado que
pode ter vários usos. O ESM foi inicialmente encontrado para ter eficácia em produtos de
articulação, mas agora descobriu-se que tem eficácia na promoção do crescimento em
animais de produção. Suplementos ESM durante as fases iniciais de crescimento podem
melhorar a imunidade e as variáveis de estresse, melhorando o desempenho do
crescimento sem qualquer efeito prejudicial em outros parâmetros fisiológicos. Quais são
os usos veterinários adicionais que o ESM terá no futuro ainda está para ser visto. Mas
está claro que o ESM desempenhará um papel maior como alternativa aos antibióticos e
como promotor de crescimento, ao mesmo tempo que continuará a ser usado para
combater a inflamação nas articulações.

Referências
Adams RG (2006) Eggshell membrane separation method. US Patent 7,017,277, United States: ESM Technologies,
LLC
Ahlborn GJ (2006) Identification of eggshell membrane proteins and purification of ovotransferrin and β-NAGase from
hen egg white. Protein J 25(1):71–81
Akagawa M (1999) Lysyl oxidase coupled with catalase in egg shell membrane. Biochim Biophys Acta 1434(1):151–
160
Arias JL, Fernandez MS, Dennis JE et al (1991) The fabrication and collagenous substructure of the eggshell
membrane in the isthmus of the hen oviduct. Matrix 11(5):313–320
Baker JR, Balch DA (1962) A study of the organic material of hen’s-egg shell. Biochem J 82:352–361
Bauer KL, Dierenfeld ES, Hartup BK (2014) Evaluation of a nutraceutical joint supplement in cranes. Proc N Am Crane
Workshop 12:27–32
Britton WN, Hale KK (1977) Amino acid analysis of shell membranes of young and old hens varying in shell quality.
Poult Sci 56:865–871
Brown KL, Hancock RE (2006) Cationic host defense (antimicrobial) peptides. Curr Opin Immunol 18:24–30
Bunnett NW (2005) The stressed gut: contributions of intestinal stress peptides to inflammation and motility. Proc Natl
Acad Sci U S A 102:7409–7410
Candlish JK, Scougall RK (1969) L-5-hydroxylysine as a constituent of the shell membranes of the hen’s egg. Int J
Protein Res 1(4):299–302
Creger CR, Phillips H, Scott IJ (1976) Formation of an eggshell. Poult Sci 55:1717–1723
404
 Daengprok W, Garnjanagoonchorn W, Mine Y (2002) Fermented pork sausage fortified with commercial or hen
eggshell calcium lactate. Meat Sci 62:199–204
Danesch U, Seybold M, Rittinghausen R et al (2014) NEM® brand eggshell membrane effective in the treatment of
pain associated with knee and hip osteoarthritis: results from a six-center, open-label German Clinical Study. J Arthritis
3(3):136
Dierenfeld ES, Baum D, Hampe L et al (2014) Evaluation of a nutraceutical joint supplement in camels. Am Holist Vet
Med Assoc J 39:59–66
Farjah G (2013) Using eggshell membrane as nerve guide channels in peripheral nerve regeneration. Iran J Basic Med
Sci 16(8):901–905
FDA (2017) Center for veterinary medicine. FDA’s strategy on antimicrobial resistance – questions and answers.
Guidance for industry. Accessed March 14, 2017
Gautron J, Hincke MT, Panheleux M et al (2001) Ovotransferrin is a matrix protein of the hen eggshell membranes and
basal calcified layer. Connect Tissue Res 42(4):255–267
Hecht J (1999) Eggshells break into collagen market. New Sci 161:6
Hincke MT, Gautron J, Panheleux M et al (2000) Identification and localization of lysozyme as a component of eggshell
membranes and eggshell matrix. Matrix Biol 19(5):443–453
Hunton P (2005) Research on eggshell structure and quality: an historical overview. Rev Bras Cienc Avic 7(2):67–71
Kimoon P, Jinhee Y, Youngjae S (2012) Effects of egg shell membrane hydrolysates on skin whitening, wound healing,
and UV-protection.
Korean J Food Sci Anim Resour 32(3):308–315
Kjellen L, Lindahl U (1991) Proteoglycans: structures and interactions. Annu Rev Biochem 60:443–475
Lawrence RM, Pane CA (2007) Human breast milk: current concepts of immunology and infectious diseases. Curr
Probl Pediatr Adolesc Health Care 37:7–36
Long FD, Adams RG, De Vore DP (2004) Preparation of hyaluronic acid from eggshell membrane. 60/453,891(US
2004/0180851 A1)
MacNeil JH (2001) Method and apparatus for separating a protein membrane and shell material in waste egg shells.
United States Patent (Foundation TPSR ed, vol 6,176,376). United States: The Penn State Research Foundation
Makkar SK (2016) Proteomic characterization of egg shell membranes and their effect on poultry physiology and
immunity. PhD Thesis. Punjabi University, India
Miksík I, Eckhardt A, Sedláková P et al (2007) Proteins of insoluble matrix of avian (Gallus gallus) eggshell. Connect
Tissue Res 48:1–8
Nakano T (2003) Chemical composition of chicken eggshell and shell membranes. Poult Sci 82:510–514
New L (2013) Eggshell membrane separation process. US Patent 8,448,884 B2
Picard J (1973) Sulfated glycoproteins from egg shell membranes and hen oviduct. Isolation and characterization of
sulfated glycopeptides. Biochim Biophys Acta 320:427–441
Rose ML, Hincke MT (2009) Protein constituents of the eggshell: eggshell-specific matrix proteins. Cell Mol Life Sci
66:2707–2719
Rovenský J, Stancíková M, Masaryk P et al (2003) Eggshell calcium in the prevention and treatment of osteoporosis.
Int J Clin Pharmacol Res 23:83–92
Ruff KJ, DeVore DP (2014) Reduction of pro-inflammatory cytokines in rats following 7-day oral supplementation with a
proprietary eggshell membrane-derived product. Mod Res Inflamm 3(1):19–25
Ruff KJ, DeVore DP, Leu MD et al (2009a) Eggshell membrane: a possible new natural therapeutic for joint and
connective tissue disorders. Results from two open-label human clinical studies. Clin Interv Aging 4:235–240
Ruff KJ, Winkler A, Jackson WR et al (2009b) Eggshell membrane in the treatment of pain and stiffness from
osteoarthritis of the knee: a randomized, multicenter, double-blind, placebo-controlled clinical study. Clin Rheumatol
28(8):907–914
Ruff KJ, Durham PL, O’Reilly A et al (2015) Eggshell membrane hydrolyzates activate NF-κBα e AMPK. Esses dadosB in vitro: possible
implications for in vivo efficacy. J Inflamm Res 8:49–57
Ruff KJ, Kopp KJ, Von Behrens P et al (2016) Effectiveness of NEM® brand eggshell membrane in the treatment of
suboptimal joint function in dogs: a multi-center, randomized, double-blind, placebocontrolled study. Vet Med Res Rep
7:113–121
Ruff KJ, Morrison D, Duncan SA et al (2018) Beneficial effects of natural eggshell membrane versus placebo in
exercise-induced joint pain, stiffness, and cartilage turnover in healthy, postmenopausal women. Clin Interv Aging
13:285–295
Seal BS, Lillehoj HS, Donovan DM et al (2013) Alternatives to antibiotics: a symposium on the challenges and
solutions for animal production. Anim Health Res Rev 14:78–87
Sim BY, Bak JW, Lee HL et al (2015) Effects of natural eggshell membrane (NEM) on monosodium iodoacetate-
induced arthritis in rats. J Nutr Health 48(4):310–318
Starcher BC (1980) The presence of desmosine and isodesmosine in eggshell membrane protein. Connect Tissue Res
8(1):53–55
Thacker PA (2013) Alternatives to antibiotics as growth promoters for use in swine production: a review. J Anim Sci
Biotechnol 4:35
Vlad V (2009) Eggshell membrane separation method. US Patent, vol 7534909. United States: Biova, LLC
405
 Wedekind KJ, Coverdale JA, Hampton TR et al (2015) Efficacy of an equine joint supplement, and the synergistic
effect of its active ingredients (chelated trace minerals and natural eggshell membrane), as demonstrated in equine,
swine, and an osteoarthritis rat model. Open Access Anim Physiol 7:13–27
Wedekind KJ, Ruff KJ, Atwell CA et al (2017) Beneficial effects of natural eggshell membrane (NEM) on multiple
indices of arthritis in collagen-induced arthritic rats. Mod Rheumatol 27(5):838–848
Wong M, Hendrix MJ, von der Mark K et al (1984) Collagen in the egg shell membranes of the hen. Dev Biol
104(1):28–36
Yoo S, Kokoszka J, Zou P et al (2009) Utilization of calcium carbonate particles from eggshell waste as coating
pigments for ink-jet printing paper [electronic resource]. Bioresour Technol 100:6416–6421

406
 Ovotransferrinas e lactoferrinas derivadas de ovo
Jamil Talukder

Resumo
Proteínas e minerais são partes integrantes do sistema biológico que harmonizam e
sustentam a vida. Minerais como o ferro se ligam às proteínas e são chamados de
transferrina e desempenham um papel crucial nos animais. Ovotransferrina (OVTF) e
lactoferrina (LF) são glicoproteínas ávidas de ligação ao ferro com peso molecular de 76 e
80 kDa, respectivamente. Eles pertencem à família da transferrina, têm uma ampla gama
de biofunções e são o principal componente do sistema imunológico inato dos mamíferos.
O OVTF está presente na clara do ovo e o LF está abundantemente presente no colostro,
leite de diferentes espécies (humanos, bovinos e camundongos), neutrófilos e outras
secreções corporais. OVTF mostra uma homologia de sequência de cerca de 50% com a
transferrina de soro de mamífero e LF. Os efeitos protetores de OVTF e LF variam de
atividades antimicrobianas diretas contra um grande painel de microorganismos a
atividades antiinflamatórias e anticâncer. Essas atividades extensas são possibilitadas por
mecanismos de ação que utilizam não apenas a capacidade de OVTF e LF de se ligar ao
ferro, mas também as interações com componentes moleculares e celulares do
hospedeiro e do patógeno. Este capítulo tem como objetivo resumir o entendimento atual,
embora incompleto, das muitas maneiras pelas quais LF e OVTF influenciam a complexa
maquinaria imunológica e os mecanismos conhecidos e putativos que podem explicar as
funções biológicas.

Palavras-chave: Proteína ligadora de ferro · Ovalbumina · Proteína do leite ·

Ovotransferrina · Lactoferrina · Metaloproteínas · Peptídeos antimicrobianos

J. Talukder. Vets Plus, Inc., Menomonie, WI, USA. e-mail: Jamilt@vets-plus.com

1. Introdução
Desde a descoberta das proteínas de ligação ao ferro, acredita-se que OVTF e LF sejam
os mais polivalentes encontrados em vertebrados. Os vertebrados têm um sistema
imunológico robusto para se proteger de patógenos infecciosos e outros invasores. O
sistema imunológico é um sistema biológico altamente complexo e potencialmente
prejudicial no qual as proteínas de ligação ao ferro não apenas desempenham papéis
antimicrobianos, mas também parecem atuar alavancas estratégicas para modular a
407
defesa do hospedeiro. A própria LF foi objeto de mais de 3.000 estudos relatando suas
atividades na defesa do hospedeiro, bem como os mecanismos para explicá-las. LF
parece ter a capacidade de estimular o sistema imunológico para neutralizar invasores e
lesões patogênicas, evitando reações exageradas que são prejudiciais ao hospedeiro. LF
é produzida por células epiteliais na maioria das secreções exócrinas, como fluido
seminal, secreções pancreáticas exócrinas, lágrimas, saliva e secreções uterinas e no
leite, onde sua concentração em humanos pode variar entre 1 e 7 g/L (Bennett e
Kokocinski 1978). Os receptores LF (LFR) são expressos em diferentes tecidos, incluindo
células do sistema imunológico inato e podem entregar localmente a molécula a locais
inflamatórios (Legrand 2012). Os neutrófilos [neutrófilos polimorfonucleares (PMNs)], que
representam mais da metade do total de leucócitos, produzem LF e o armazenam em
grânulos secundários. Após a ativação dos PMNs, que começa nas primeiras etapas de
adesão ao endotélio ativado, o LF é liberado no sangue, onde sua concentração pode
aumentar para 200 mg/L (de cerca de 1 mg/mL em condições normais), especialmente
em tecidos inflamados (Maacks e Wood 1989). Talukder e Harada (2007) demonstraram
que o LF bovino protege contra diarreia induzida por lipopolissacarídeos ao modular o
óxido nítrico e a prostaglandina E2 em camundongos. Além disso, Talukder et al. (2002)
descobriram o mecanismo de transporte mediado por receptor de LF nas células
intestinais que são transportadas para o líquido cefalorraquidiano via circulação sistêmica
em recém-nascidos (Talukder et al. 2002) e bezerros jovens (Talukder et al. 2003). Além
disso, as células microgliais, que atuam como macrófagos residentes no cérebro, também
liberam LF durante a inflamação (Fillebeen et al. 2001).

A clara do ovo é a principal fonte de várias proteínas do ovo, incluindo OVTF. Em ordem
de abundância, as principais proteínas da clara do ovo são ovalbumina (54%), OVTF
(12%), ovomucoide (11%) e lisozima (3,5%), cada uma com inúmeras características
funcionais (Abeyrathne et al. 2013) As proteínas menores na clara do ovo incluem avidina
(0,05%), cistatina (0,05%), ovomacroglobulina (0,5%), OVTF (0,8%), ovoglicoproteína
(1,0%) e ovoinibidor (1,5%) (Kovacs-Nolan et al. 2005a, b). O primeiro nome dado ao
OVTF foi conalbumina. No entanto, depois de descobrir que o ferro pode ser ligado à
estrutura da proteína, ela foi renomeada para OVTF (Williams 1968).

2. Características de OVTF e LF
OVTF é uma glicoproteína ácida com ponto isoelétrico de 6,0. A estrutura geral do OVTF
é semelhante à do LF humano e da transferrina do soro de coelho. Ele está sendo
dobrado em dois lobos homólogos, cada um contendo dois domínios diferentes com um
408
Fe3+ e um CO32- ligados a um local específico em cada fenda interdomínio. É composto
por 686 aminoácidos com 15 ligações dissulfeto para formar a estrutura de 76 kDa
(Abeyrathne et al. 2014). OVTF carrega e transporta ferro no corpo do animal e existe em
duas formas distintas, (1) holo- (ferro ligado) e (2) apo- (livre de ferro), cada um com
características físico-químicas significativamente diferentes (Wu e Acero-Lopez 2012).
OVTF é composto por dois lóbulos principais. O lóbulo N-terminal consiste no aminoácido
1-329 e o lobo C-terminal consiste no aminoácido 330-686 (Giansanti et al. 2012; Superti
et al. 2007). Cada lóbulo contém um local para se ligar a um ferro molar e é dividido em
dois domínios: C1 e C2 e N1 e N2 (Superti et al. 2007). OVTF é capaz de se ligar a outros
cátions metálicos, como, em ordem de afinidade, Fe 3+ > Cr2+, Cu2+ > Mn2+, Co2+ e Cd2+ >
Zn2+ > Ni2+ (Tan e Woodworth 1969). Esta proteína se assemelha a 50%, 49% e 51% com
LF, LF humano e transferrina humana, respectivamente. A maioria das semelhanças pode
ser encontrada no lobo C-terminal (Jeltsch et al. 1987). As transferrinas são diferentes em
sua estrutura de N-glicano aderido (altamente manose) e no pI, o que pode influenciar
suas biofunções (Jiang et al. 2014).

O LF possui uma maior afinidade de ligação ao ferro e é a única transferrina com a

capacidade de reter esse metal em uma ampla faixa de valores de pH, incluindo
resistência à proteólise. A característica físico-química mais marcante do LF é sua alta
afinidade com o ferro. Em ambos LF e transferrinas relacionadas, dois íons Fe 3+ estão
ligados muito fortemente (K ~ 1022 M), mas reversivelmente a LF, com dois íons CO 32-
sinergicamente ligados (Aisen e Leibman 1972; Baker 1994). Ele contém ~ 700
aminoácidos, com alta homologia entre as espécies. É composto por uma cadeia
polipeptídica simples dobrada em dois lóbulos simétricos (o lóbulo N e o lóbulo C), que
são bastante homólogos entre si (homologia de 33-41%). Os dois lóbulos são conectados
por meio de uma região de dobradiça contendo partes de uma a-hélice entre os
aminoácidos 333 e 343 no LF humano (Öztaş Yeşim e Özgüneş 2005), o que confere
flexibilidade à molécula (Haridas et al. 1995). A cadeia polipeptídica inclui os aminoácidos
1–332, compreendendo o lóbulo N, e 344-703, compreendendo o lóbulo C. A cadeia
também é composta por estruturas de hélice α e folha pregueada β que criam dois
domínios dentro de cada lóbulo (domínios I e II) (Mazurier e Spik 1995). Cada lóbulo pode
ligar um átomo de metal em sinergia com o íon carbonato (CO 32-). LF é capaz de se ligar a
íons Fe2+ ou Fe3+, mas também foi observado que está ligado a íons Cu 2+, Zn2+ e Mn2+
(Baker et al. 2004). Devido à sua capacidade de se ligar reversivelmente ao Fe 3+, o LF
pode existir livre de Fe3+ (apo LF) ou associado ao Fe3+ (holo LF), e tem uma conformação
tridimensional diferente, dependendo de estar ligado ao Fe 3+ (Wally e Buchanan 2007)
Apo LF tem uma conformação aberta, enquanto o holo LF é uma molécula fechada com
409
maior resistência à proteólise (Öztaş Yeşim e Özgüneş 2005). Por causa da estrutura
estrutural comum entre os LF, é possível modelar suas conformações usando dados
cristalográficos de outras espécies de LF (Fig. 1a). Os aminoácidos diretamente
envolvidos no local de ligação do ferro em cada lóbulo são Asp60, Tyr92, Tyr192 e
His253, enquanto Arg121 está envolvido na ligação do íon CO 32- (Fig. 1b). LF é uma
proteína básica carregada positivamente com um pI de 8,0-8,5. A estrutura primária de LF
mostra o número e a posição dos resíduos Cys que permitem a formação de pontes
dissulfeto intramoleculares. Os resíduos Asn nos lobos N- e C- terminais fornecem vários
locais de N-glicosilação potenciais (Khan et al. 2001; Anderson et al. 1987).

Fig. 1 Estrutura prevista de LF e OVTF: (a) Polipeptídeo de dois

lóbulos, quatro domínios, (b) sítio canônico de ligação de ferro
da lactoferrina. Fe3+ (creme), CO3 (cinza e vermelho), e (c)
polipeptídeo de OVTF de dois lóbulos e quatro domínios

3. Receptores OVTF e LF
Os receptores de OVTF e LF desempenham um papel importante na internalização
dessas metaloproteínas. Eles também facilitam a absorção de íons de ferro. Foi
demonstrado que a expressão gênica aumenta com a idade no duodeno e diminui no
jejuno (Liao et al. 2007; Bharadwaj et al. 2009). Demonstrou-se que a enzima glicolítica
gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase (GAPDH) funciona como um receptor para LF
(Rawat et al. 2012).

410
4. Genes de OVTF e LF
O Chicken Gene Nomenclature Consortium relatou que os genes OVTF de Gallus gallus
estão localizados no cromossomo 9 (nome do conjunto, GRCg6a) com um comprimento
médio de 7398 bp. Contagens e comprimento de recursos anotados são fornecidos para
cada gene de montagem e números de pseudogene 24.373; codificação de proteína,
17.477; não codificador, 6534; pseudogenes transcritos, 22; pseudogenes não transcritos,
240; e genes com variantes, 10.544, acompanhado de 49.661 mRNAs. O número de
transcritos por gene é 2,68, e o número de éxons por transcrito é 12,8.

O polimorfismo do gene LF entre as espécies é muito mais diverso do que o polimorfismo

intraespecífico. Cerca de 60 sequências de genes de LF foram caracterizadas em 11
espécies de mamíferos (Kang et al. 2008). Na maioria das espécies, o códon de parada é
TAA e TGA em Mus musculus. Deleções, inserções e mutações de códons de parada
afetam a codificação e seu comprimento varia entre 2.055 e 2.190 pares de nucleotídeos.
Existem diferenças nas sequências de aminoácidos: 8 em Homo sapiens, 6 em Mus
musculus, 6 em Capra hircus, 10 em Bos taurus e 20 em Sus scrofa. Esta variação pode
indicar diferenças funcionais entre diferentes tipos de FL (Kang et al. 2008). Em humanos,
o gene LF está localizado no terceiro cromossomo no locus 3q21-q23. Em bois, a
sequência de codificação consiste em 17 éxons e tem um comprimento de cerca de
34.500 pares de nucleotídeos. Os éxons do gene LF em bois são de tamanho semelhante
aos éxons de outros genes da família da transferrina, enquanto os tamanhos dos íntrons
diferem dentro dessa família. A similaridade no tamanho dos éxons e sua distribuição nos
domínios da molécula de proteína indica que o desenvolvimento evolutivo do gene LF
ocorreu por meio da duplicação (Seyfert et al. 1994). O estudo de polimorfismos de genes
que codificam LF ajuda a selecionar raças de gado resistentes à mastite (O’Halloran et al.
2009).

5. Biodisponibilidade de OVTF e LF
Para maximizar as funções de OVTF e LF, a absorção no sistema digestivo e o transporte
dessas moléculas para os órgãos ou tecidos-alvo são muito importantes. A quantidade de
literatura disponível sobre a absorção de OVTF no corpo humano é limitada. A maioria
das investigações foi realizada em seus peptídeos derivados. Evenepoel et al. (1999)
relataram que as quantidades de proteínas de ovos cozidos e crus que escaparam da
digestão e absorção no intestino delgado de voluntários saudáveis foram 5,73% e
35,10%, respectivamente. Foi percebido que uma boa quantidade de proteína entra no

411
intestino em várias formas, e a maior parte dela é digerida e reabsorvida junto com a
proteína ingerida (Matthews 1971).

Investigações imuno-histoquímicas e físico-químicas sobre o transporte e absorção de LF

bovino no intestino delgado de porcos em crescimento mostraram que a absorção de LF
foi mediada por fatores mediados por LF na membrana da célula epitelial (Kitagawa et al.
2003). Seus resultados também mostraram que o LF bovino foi absorvido através da trans
citose nas metades apicais das vilosidades do intestino delgado como pequenas
vesículas via células epiteliais colunares das vilosidades. Além disso, foi demonstrado que
o LF é transportado através dos vasos linfáticos e da veia porta para a circulação
sistêmica (Kitagawa et al. 2003). Talukder et al. (artigo em revisão) investigou a absorção
de OVTF usando células epiteliais intestinais de rato. Eles observaram que o OVTF é
captado pelas células IEC-6 na membrana transwell como uma proteína intacta da
superfície apical e transportada para a superfície baso lateral através do mecanismo de
exocitose trans epitelial. Internalização máxima e exocitose foram observadas em 90 min.
Esses processos dependiam do tempo e da concentração. Conclui-se que a absorção e o
transporte trans epitelial de OVTF são realizados por trans citose mediada por receptor
nas células epiteliais intestinais (Shirkhani et al. 2018).

Mazurier et al. (1985) detectaram receptores de LF com peso molecular de 100 kD nas
microvilosidades da membrana de enterócitos do intestino delgado de humanos e
coelhos. As análises imuno-histoquímicas de Kitagawa et al. (2003) demonstraram a
presença de receptores LF nas vilosidades apicais, borda estriada e membrana baso
lateral de enterócitos.

6. Propriedades Funcionais de OVTF e LF

Foi relatado que OVTF e LF podem demonstrar uma ampla gama de biofunções. Os
efeitos protetores dessas proteínas de ligação ao ferro foram demonstrados desde
atividades anticâncer, antiinflamatórias e moduladoras imunológicas até atividades
antimicrobianas contra um grande número de microrganismos. A ampla gama de
atividades é possibilitada pelos mecanismos de ação que envolvem não apenas a
capacidade de ligar o ferro, mas também as interações com componentes moleculares e
celulares de hospedeiros e patógenos (Garcia-Montoya et al. 2012). Portanto, sua
aplicação em alimentos funcionais os torna um composto atraente para melhorar a saúde
humana e animal. A Figura 2 mostra as propriedades fisiológicas compartilhadas de OVTF
e LF com outros tipos de transferrina.

412
 Fig. 2 Propriedades fisiológicas compartilhadas entre os membros das
proteínas da família da transferrina

7. Atividade antibacteriana
O papel principal do LF é sequestrar Fe 2+ livre e remover um substrato essencial
necessário para o crescimento bacteriano (Farnaud e Evans 2003). LF é considerado um
componente chave do sistema de defesa inato do hospedeiro porque pode responder a
uma variedade de mudanças fisiológicas e ambientais (Connely 2001). As características
estruturais do LF fornecem funcionalidades adicionais além da função de homeostase do
Fe3+ comum a todas as transferrinas. Em particular, LF exibe forte atividade
antimicrobiana contra um amplo espectro de bactérias (Gram positivas e Gram negativas),
fungos, leveduras, vírus (Drago 2006) e parasitas (Yamauchi et al. 2006). No entanto,
parece promover o crescimento de bactérias benéficas como Lactobacillus e
Bifidobacteria (Sherman et al. 2004). Ele também exibe atividades antiinflamatórias e
anticarcinogênicas (Connely 2001) e tem várias funções enzimáticas (Leffell e Spitznagel
1972). LF desempenha um papel fundamental na manutenção dos níveis de ferro celular
no corpo. Acredita-se que o sequestro de ferro de patógenos bacterianos seja a única
ação antimicrobiana do LF porque a apo LF possui atividade antibacteriana (Kalmar e
Arnold 1988; Yamauchi et al. 1993). Posteriormente, foi demonstrado que o LF também
pode matar microrganismos por meio de um mecanismo independente de ferro (Valenti e
Antonini 2005) no qual o LF interage diretamente com a superfície da célula bacteriana
(Kalmar e Arnold 1988; Bortner et al. 1989; Farnaud e Evans 2003).

As características bacteriostáticas de OVTF são promovidas pela adição de um íon

carbonato, aumentando o pH de 6 para 8 e imobilizando OVTF em Sepharose 4B por
ligação covalente (Giansanti et al. 2012; Valenti et al. 1982). As espécies bacterianas mais
resistentes contra OVTF são Proteus spp. e Klebsiella spp., enquanto os mais sensíveis
são Pseudomonas spp., Escherichia coli e Streptococcus mutans (Valenti et al. 1982).
Recentemente, os autores atuais observaram que OVTF é uma proteína antimicrobiana
potente com a capacidade de matar diferentes tipos de bactérias em aplicações in vitro e
clínicas (Talukder et al. 2018). A cultura bacteriana de um esfregaço uterino demonstrou a
presença de diferentes tipos de bactérias, incluindo Gram positivas, Gram negativas, α- e
β- hemolíticas, bastonetes e cocos. Estudos de zona de inibição com diferentes
413
concentrações de OVTF demonstraram que 5% seria mais do que suficiente para matar
todos os tipos de bactérias encontrados nesses estudos.

8. Atividade Antifúngica
As superfícies da mucosa podem ser infectadas por Candida, e é considerada análoga a
um organismo comensal que também pode se tornar um patógeno oportunista. Kirkpatrick
et al. (1971) conduziram os estudos com Candida spp. e atribuiu o efeito antifúngico do LF
à sua capacidade de sequestrar Fe 3+ (Kirkpatrick et al. 1971; Viejo-Díaz et al. 2004;
Garcia-Montoya et al. 2012). Tanto o LF humano quanto o bovino, bem como o peptídeo
derivado do LF lactoferricina, têm atividade in vitro bem documentada em relação a
fungos patogênicos humanos, especialmente Candida albicans e várias outras espécies
de Candida. LF também tem atividade antifúngica (Arnold et al. 1980; Bellamy et al.
1993), e foi observado que LF pode matar C. albicans e C. krusei alterando a
permeabilidade da superfície celular, como faz com bactérias (Wakabayashi et al. 1996;
Kuipers et al. 1999). Foi demonstrado que o LF bovino é altamente fungicida para C.
tropicalis e C. krusei e um tanto fungicida para C. albicans e C. guilliermondii, enquanto C.
glabrata é quase resistente ao LF (Xu et al. 1999). LF exibiu atividade contra
Cryptococcus neoformans e C. albicans por meio da permeabilização da membrana
citoplasmática e mitocondrial (Kondori et al. 2011). Embora o mecanismo de ação
antifúngico de LF seja por meio da interação da superfície celular em vez da privação de
ferro (Valenti et al. 1986), vários relatórios demonstram sua capacidade de causar danos
à parede celular (Xu et al. 1999; Nikawa et al. 1993, 1995). Além da interação direta com
o patógeno, o sequestro de Fe 3+ é outro mecanismo importante para a atividade fungicida.
Além disso, Zarember et al. (2007) mostraram que o sequestro de Fe 3+ pelo neutrófilo apo
LF é importante para a defesa do hospedeiro contra Aspergillus fumigatus (Zarember et
al. 2007). Além disso, a atividade antifúngica in vitro de dois peptídeos (LF humano (1–11
aa), domínio LF N1 bovino) derivado de LF humano foi comparada e a atividade
antifúngica dependente da dose foi observada (Lupetti et al. 2008; van der Kraan et al.
2004). O LF mostra um interessante efeito antifúngico na tinha do corpo causada por
Trichophyton mentagrophytes contra o qual atua indiretamente, facilitando a melhora
clínica das lesões cutâneas após o pico dos sintomas. O tratamento de cobaias com LF
bovino reduz a infecção fúngica na pele do dorso e nos membros em Tinea corporis e
Tinea pedis, respectivamente (Wakabayashi et al. 2000). Também foi demonstrado que o
LF pode mediar sua atividade antifúngica por meio da estimulação dos mecanismos
imunológicos da célula hospedeira tanto in vitro quanto in vivo (Viejo-Díaz et al. 2004).
414
9. Atividade Antiparasitária
Os nichos ecológicos dos micróbios geralmente diferem de um organismo para outro e
tornam difícil ter um mecanismo claro e a compreensão das atividades antimicrobianas da
FL. Os mecanismos moleculares da LF como atividade antiparasitária são ainda mais
complexos. As atividades antiparasitárias de LF geralmente envolvem interferência na
aquisição de ferro. Esta atividade também foi demonstrada usando peptídeos derivados
da molécula completa (Weinberg 1994; Cirioni et al. 2000). Também há evidências que
apoiam a ocorrência de um mecanismo semelhante durante a amebíase, que é uma das
principais causas de diarreia em crianças menores de 5 anos e é causada por Entameba
histolytica (León-Sicairos et al. 2006a). Em estudos in vitro, apo Lf demonstrou o maior
efeito amebicida contra E. histolytica porque pode se ligar a lipídios na membrana do
trofozoíta, causando ruptura da membrana e danos ao parasita (León-Sicairos et al.
2006b; López-Soto et al., 2010). LF parece atuar como um doador de ferro específico e
pode-se esperar que aumente a infecção por outros parasitas, como Tritrichomonas fetus
(Tachezy et al. 1996). Foi relatado que LF bovino se ligou a componentes de T. brucei e
que o hidrolisado LF bovino interrompeu os sítios responsáveis pela ligação às proteínas
do parasita, causando privação de Fe 3+ (Tanaka et al. 2004). Outros estudos in vitro
mostram que a transferrina sérica, bem como a LF humana e bovina, podem se ligar ao
parasita intracelular Toxoplasma gondii, responsável pela toxoplasmose em humanos e
animais. No entanto, LF não pode impedir que o parasita entre no hospedeiro. O
mecanismo de ação neste caso é a inibição do crescimento intracelular de T. gondii nas
células hospedeiras (Dzitko et al. 2007). Em modelos animais, a lactoferricina reduziu a
infectividade dos esporozoítos de T. gondii e Eimeria stiedae (Omata et al. 2001). O efeito
do LF nos hemoparasitas Babesia caballi e Babesia equi depende se o LF está ou não
ligado ao Fe3+ (Botteon et al. 2002). B. caballi foi encontrado para ser significativamente
suprimido por apo LF, mas não foi inibido por outros tipos de LF, enquanto nenhum dos
tipos de LF teve um efeito inibitório contra B. equi (Ikada et al. 2005). Em todos estes, LF
demonstra uma atividade aditiva ou sinérgica com compostos antiparasitários usados
clinicamente (Weinberg 1994; León-Sicairos et al. 2006a, b).

10. Atividade antiviral

Rotavírus e norovírus frequentemente causam gastroenterite, uma doença importante que
prevalece nos meses de inverno. O rotavírus causa gastroenterite apenas em crianças. O
norovírus é um patógeno humano emergente extremamente importante que causa a
maioria dos surtos de gastroenterite em todo o mundo. Os efeitos anti rotavírus in vitro de
415
LF foram relatados (Superti et al. 1997, 2001; Wakabayashi et al. 2014). O norovírus
humano continua difícil de estudar devido à falta de culturas de células e modelos
animais. Em vez disso, calicivírus felino e norovírus murino, que podem ser cultivados e
compartilhar uma série de propriedades bioquímicas, organização genômica semelhante
e sequências de RNA primárias com o norovírus humano, têm sido usados como
substituto do vírus para estudar o norovírus humano. Um estudo usando calicivírus felino
mostrou que LF bovino inibe a infecção viral de células renais felinas de Crandell-Reese
ligando-se às células e a lactoferricina B inibe a infecção ligando-se ao vírus (McCann et
al. 2003). O LF bovino também diminuiu a infecção por norovírus murino na linha celular
de macrófagos murinos Raw264.7 por meio da inibição da ligação inicial do norovírus
murino às células e a subsequente interferência com a replicação do norovírus murino
(Ishikawa et al. 2013).

A indução da expressão do interferon de citocina antiviral (IFN) -α/β por LF esteve

envolvida na inibição da replicação viral nas células infectadas. Este é o primeiro relato
que mostra a inibição da replicação viral nas células e o envolvimento do IFN-α/β. Já foi
relatado que a administração oral de LF induz IFN-α/β no intestino delgado de
camundongos (Kuhara et al. 2006; Wakabayashi et al. 2006). A partir dessas descobertas,
IFN-α/β pode ser um mediador chave nos efeitos antivirais de LF administrado por via oral
(Wakabayashi et al. 2014), e o mecanismo antiviral deduzido de LF é ilustrado na Fig. 3.

Fig. 3 Mecanismo deduzido do efeito antiviral da

lactoferrina (LF). LF ou lactoferricina (LFcin) evitam
a fixação do vírus às células-alvo, ligando-se ao
receptor do vírus nas células-alvo ou ligando-se ao
vírus. Além disso, a lactoferrina induz a produção de
IFN α / β e, portanto, inibe a replicação do vírus
após a entrada do vírus nas células

Em um estudo de gastroenterite por rotavirus em crianças, a ingestão diária de produtos

contendo LF bovinos melhorou a gravidade da doença, embora não tenha havido
benefício significativo na redução da incidência de infecção (Egashira et al. 2007). A
adição de LF humano recombinante e lisozima a uma solução de reidratação oral à base
de arroz teve efeitos benéficos em crianças com diarreia aguda nas quais o rotavírus foi
identificado como patógeno em 18–19% das amostras de fezes (Zavaleta et al. 2007). A
administração diária de comprimidos LF a crianças reduziu a incidência de gastroenterite
por norovirus (Moriuchi e Moriuchi 2009). A administração de LF não exibiu diminuição na

416
incidência de diarréia, mas diminuiu a prevalência longitudinal e a gravidade em crianças
onde o norovírus foi isolado como patógeno em 35% das amostras fecais (Moriuchi e
Moriuchi 2009). LF inibe o efeito citopático do adenovírus em células HEp-2 (Arnold et al.
2002; Di Biase et al. 2003; Pietrantoni et al. 2003), onde o efeito do LF bovino demonstrou
ser mais potente do que o humano LF. Por outro lado, outra investigação relatou que o LF
humano promove a ligação do adenovírus às células epiteliais da córnea humana e
também a infecção das células por adenovírus (Johansson et al. 2007).

As atividades antienterovirais de LF são indicadas em poliovírus, enterovírus 71,

coxsackievírus A16, echovírus 5 e echovírus 6 (Marchetti et al. 1999; Lin et al. 2002;
Weng et al. 2005; Furlund et al. 2012; Pietrantoni et al. 2006; Ammendolia et al. 2007).
Notavelmente, LF bovino induziu expressão de IFN-α de células de neuroblastoma
humano (SK-N-SH) e inibiu a produção de interleucina (IL) -6 induzida por enterovírus 71
(Weng et al. 2005). A atividade antiviral de bovinos LF não era óbvio no echovírus 9 (Lin et
al. 2002).

Após a infecção pelo enterovírus 71, os filhotes neonatais que ingeriram leite transgênico
expressaram LF suíno recombinante e apresentaram taxa de sobrevivência
significativamente maior e maior peso corporal em comparação com os camundongos do
tipo selvagem (Chen et al. 2008). No entanto, a suplementação oral de LF bovino na dose
de 70 mg/dia não mostrou efeitos benéficos na prevenção de enterovírus 71 ou infecção
por rotavírus em crianças Yen et al. 2011). Os vírus herpes simplex tipo 1 e 2 (HSV-1 e
HSV-2) estabelecem infecções latentes ao longo da vida no hospedeiro e podem ressurgir
periodicamente ao longo da vida, causando principalmente lesões herpéticas faciais e
genitais, respectivamente. As atividades anti-herpéticas in vitro de LF foram estudadas em
HSV-1 (Hasegawa et al. 1994; Marchetti et al. 1996, 1998; Siciliano et al. 1999; Seganti et
al. 2001; Lampis et al. 2001; Jenssen et al. 2008; Marr et al. 2009) e HSV-2 (Marchetti et
al. 1998; Jenssen et al. 2008; Shestakov et al. 2012). O efeito do LF administrado por via
oral na infecção por HSV foi relatado por Wakabayashi et al. (2004) e demonstraram que
a administração de LF previne a perda de peso corporal e aumenta a produção de
citocinas Th1, incluindo IFN-γ, IL-12 e IL-18, após infecção cutânea por HSV-1 em
camundongos. Essas respostas aumentadas de citocinas Th1 podem ajudar na proteção
do hospedeiro contra a infecção por HSV-1.

LF exibe atividades inibitórias contra uma ampla gama de vírus in vitro. Os efeitos da LF
via administração oral foram estudados em várias infecções virais em animais e humanos
(Wakabayashi et al. 2014). Por ser um componente alimentar, o LF é facilmente
consumido por um indivíduo para prevenir essas infecções. Embora o mecanismo de
417
ação do LF não tenha sido elucidado totalmente, as atividades antivirais diretas exercidas
no trato gastrointestinal e a modulação imunológica sistêmica parecem estar envolvidas
nesses efeitos. Assim, o LF é um candidato promissor para prevenir a infecção viral ou
diarreia, e mais estudos são necessários para estabelecer evidências mais confiáveis.

11. Observações Finais e Orientações Futuras

OVTF e LF têm muitas funções biológicas; os efeitos protetores do hospedeiro variam de

atividades antimicrobianas diretas contra um grande painel de microrganismos, incluindo
bactérias, vírus, fungos e parasitas, até atividades antiinflamatórias, antioxidantes e
anticâncer. Assim, essas metaloproteínas têm importantes implicações terapêuticas para
humanos e animais. Outros estudos básicos e clínicos esclarecerão melhor a utilidade de
OVTF e LF.

Referências
Abeyrathne EDNS, Lee HY, Ahn DU (2013) Egg white proteins and their potential use in food processing or as
nutraceutical and pharmaceutical agents—a review. Poult Sci 92(12):3292–3299. https://doi.org/10.3382/ps.2013-03391
Abeyrathne EDNS, Lee HY, Ahn DU (2014) Separation of ovotransferrin and ovomucoid from chicken egg white. Poult
Sci 93(4):1010–1017
Aisen P, Leibman A (1972) Lactoferrin and transferrin: a comparative study. Biochim Biophys Acta 257:314–323
Ammendolia MG, Pietrantoni A, Tinari P et al (2007) Bovine lactoferrin inhibits echovirus endocytic pathway by
interacting with viral structural polypeptides. Antivir Res 73(2007):151–160
Anderson, B.F., Baker, HM, . Dodson EJ et al (1987). Structure of human lactoferrin at 3.2-A resolution. Proc Natl Acad
Sci USA 84: 1769–1773
Arnold RR, Brewer M, Gauthier JJ (1980) Bactericidal activity of human lactoferrin: sensitivity of a variety of
microorganisms. Infect Immun 28:893–898
Arnold D, Di Biase AM, Marchetti M et al (2002) Antiadenovirus activity of milk proteins: lactoferrin prevents viral
infection. Antivir Res 53:153–158
Baker EN (1994) Structure and reactivity of transferrins. Adv Inorg Chem 41:389–463
Baker HM, Anderson BF, Baker EN (2004) Dealing with iron: common structural principles in proteins that transport
iron and heme. Proc Natl Acad Sci USA 100:3579–3583
Bellamy W, Wakabayashi H, Takase M, Shimamura S et al (1993) Killing of Candida albicans by lactoferricin B, a
potent antimicrobial peptide derived from the N-terminal region of bovine lactoferrin. Med Microbiol Immunol 182:97–105
Bennett RM, Kokocinski T (1978) Lactoferrin content of peripheral blood cells. Br J Hematol 39:509–521
Bharadwaj S, Naidu AG, Betageri GV et al (2009) Milk ribonucleaseenriched lactoferrin induces positive effects on
bone turnover markers in postmenopausal women. Osteoporosis Int 20 (9):1603–1611
Bortner CA, Arnold RR, Miller RD (1989) Bactericidal effect of lactoferrin on Legionella pneumophila: effect of the
physiological state of the organism. Can J Microbiol 35:1048–1051
Botteon P, Massard C, Botteon R (2002) Seroprevalence of Babesia equi in three breeding systems of equines.
Parasitol Latinoam (Bras) 57:141–145
Chen H, Wang L, Chang C et al (2008) Recombinant porcine lactoferrin expressed in the milk of transgenic mice
protects neonatal mice from a lethal challenge with enterovirus type 71. Vaccine 26:891–898
Cirioni O, Giacometti A, Barchiesi F et al (2000) Inhibition of growth of Pneumocystis carinii by lactoferrins alone and in
combination with pyrimethamine, clarithromycin and minocycline. J Antimicrob Chemother 46:577–582
Connely OM (2001) Anti-inflammatory activities of lactoferrin. J Am Coll Nutr 438:389S–395S
Di Biase AM, Pietrantoni A, Tinari A et al (2003) Heparin-interacting sites of bovine lactoferrin are involved in anti-
adenovirus activity. J Med Virol 69:495–502
Drago SME (2006) Actividades antibacterianas de la lactoferrinaEnferm. Infecc Microbiol 26:58–63
Dzitko K, Dziadek B, Dziadek J et al (2007) Toxoplasma gondii: inhibition of the intracellular growth by human
lactoferrin. Pol J Microbiol 56(1):25–32
Egashira M, Takayanagi T, MoriuchiMet al (2007) Does daily intake of bovine lactoferrin-containing products ameliorate
rotaviral gastroenteritis? Acta Paediatr 96:1238–1244

418
 Evenepoel P, Claus D, Geypens B et al (1999) Amount and fate of egg protein escaping assimilation in the small
intestine of humans. Am J Phys 277(5):G935–G943
Farnaud S, Evans RW (2003) Lactoferrin-A multifunctional protein with antimicrobial properties. Mol Immunol 40:395–
405
Fillebeen C, Ruchoux MM, Mitchell V et al (2001) Lactoferrin is synthesized by activated microglia in the human
substantia nigra and its growing pigs. J Vet Med Sci 65(5):567–572
Furlund CB, Kristoffersen AB, Devold TG et al (2012) Bovine lactoferrin digested with human gastrointestinal enzymes
inhibits replication of human echovirus 5 in cell culture. Nutr Res 32:503–513
Garcia-Montoya A, Cendon T, Arevalo-Gallegos S et al (2012) Lactoferrin a multiple bioactive protein: an overview.
Biochim Biophys Acta 1820(3):226–236
Giansanti F, Leboffe L, Pitari G et al (2012) Physiological roles of ovotransferrin. Biochim Biophys Acta 1820(3):218–
225
Haridas M, Anderson BF, Baker EN (1995) Structure of human diferric lactoferrin refined at 2.2 Å resolution. Acta
Crystallogr 51:629–646
Hasegawa K, Motsuchi W, Tanaka S et al (1994) Inhibition with lactoferrin of in vitro infection with human herpes virus.
Jpn J Med Sci Biol 47:73–85
Ikada H, Tanaka T, Shibahara N (2005) Short report: inhibitory effect of lactoferrin on in vitro growth of Babesia caballi.
Am J Trop Med Hyg 73:710–712
Ishikawa H, Awano N, Fukui T et al (2013) The protective effects of lactoferrin against murine norovirus infection
through inhibition of both viral attachment and replication. Biochem Biophys Res Commun 434:791–796
Jeltsch JM, Hen R, Maroteaux L et al (1987) Sequence of the chicken ovotransferrin gene. Nucleic Acids Res
15(18):7643–7645
Jenssen H, Sandvik K, Andersen JH et al (2008) Inhibition of HSV cellto-cell spread by lactoferrin and lactoferricin.
Antivir Res 79:192–198
Jiang K, Wang C, Sun Y et al (2014) Comparison of chicken and pheasant ovotransferrin N-glycoforms via
electrospray ionization mass spectrometry and liquid chromatography coupled with mass spectrometry. J Agric Food
Chem 62(29):7245–7254
Johansson C, Jonsson M, Marttila M et al (2007) Adenoviruses use lactoferrin as a bridge for CAR-independent
binding to and infection of epithelial cells. J Virol 81:954–963
Kalmar JR, Arnold RR (1988) Killing of Actinobacillus actinomycetemcomitans by human lactoferrin. Infect Immun
56:2552–2557
Kang JF, Li XL, Zhou RY et al (2008) Bioinformatics analysis of lactoferrin gene for several species. Biochem Genet 46
(5–6):312–322
Khan JA, Kumar P, Paramasivam M et al (2001) Camel lactoferrin, a transferrin-cum-lactoferrin: crystal structure of
camel apolactoferrin at 2.6 Å resolution and structural basis of its dual role. J Mol Biol 309:751–761
Kirkpatrick CH, Green I, Rich RR et al (1971) Inhibition of growth of Candida albicans by iron-unsaturated lactoferrin:
Relation to hostdefense mechanisms in chronic mucocutaneous candidiasis. J Infect Dis 124:539–544
Kitagawa H, Yoshizawa Y, Yokoyama T et al (2003) Persorption of bovine lactoferrin from the intestinal lumen into the
systemic circulation via the portal vein and the mesenteric lymphatics in growing pigs. J Vet Med 65(5):567–572
Kondori N, Baltzer N, Dolphin GT et al (2011) Fungicidal activity of human lactoferrin-derived peptides based on the
antimicrobial αβ region. Int J Antimicrob Agents 37:51–57
Kovacs-Nolan J, Phillips M, Mine M (2005a) Advances in the value of eggs and egg components for human health. J
Agric Food Chem 53 (22):8421–8431
Kovacs-Nolan J, Phillips M, Mine Y (2005b) Advances in the value synthesis by the human microglial CHME cell line is
upregulated by tumor necrosis factor alpha or 1-methyl-4-phenylpyridinium treatment. Brain Res Mol Brain Res 96:103–
113
Kuhara T, Yamauchi K, Tamura Y et al (2006) Oral administration of lactoferrin increases NK cell activity in mice via
increased production of IL-18 and type I IFN in the small intestine. J Interf Cytokine Res 26:489–499
Kuipers ME, de Vries HG, Eikenboom MC et al (1999) Synergistic fungistatic effects of lactoferrin in combination with
antifungal drugs against clinical Candida isolates. Antimicrob Agents Chemother 43:2635–2641
Lampis G, Deidda D, PinzaMet al (2001) Enhancement of anti-herpetic activity of glycyrrhizic acid by physiological
proteins. Antivir Chem Chemother 12:125–131
Leffell S, Spitznagel JK (1972) Association of lactoferrin with lysozyme in granules of human polymorphonuclear
leukocytes. Infect Immun 6:761–765
Legrand D (2012) Lactoferrin, a key molecule in immune and inflammatory processes. Biochem Cell Biol 90:252–268
León-Sicairos N, Reyes-López M, Ordaz-Pichardo C et al (2006a) Microbicidal action of lactoferrin and lactoferricin and
their synergistic effect with metronidazole in Entameba histolytica. Biochem Cell Biol 84:327–336
León-Sicairos N, López-Soto SF, Reyes-López M et al (2006b) Amoebicidal activity of milk, apo-lactoferrin, sIgA and
lysozyme. Clin Med Res 4:106–113
Liao Y, Lopez V, Shafizadeh TB et al (2007) Cloning of a pig homologue of the human lactoferrin receptor: expression
and localization during intestinal maturation in piglets. Comp Biochem Physiol A Mol Integr Physiol 148(3):584–590
Lin T, Chu C, Chiu C (2002) Lactoferrin inhibits enterovirus 71 infection of human embryonal rhabdomyosarcoma cells
in vitro. J Infect Dis186:1161–1164

419
 López-Soto F, León-Sicairos N, Nazmi K et al (2010) Microbicidal effect of the lactoferrin peptides lactoferricin 17–30,
actoferrampin 265–284, and lactoferrin chimera on the parasite Entameba histolytica. Biometals 23:563–568
Lupetti A, Van Dissel JT, Brouwer CPJM et al (2008) Human antimicrobial peptides antifungal activity against
Aspergillus fumigatus. Eur J Clin Microbiol Infect Dis 27:1125–1129
Maacks SYH, Wood WG (1989) Development and evaluation of luminescence based sandwich assay for plasma
lactoferrin as a marker for sepsis and bacterial infections in pediatric medicine. J Biolumin Chemilumin 3:221–226
Marchetti M, Longhi C, Conte MP et al (1996) Lactoferrin inhibits herpes simplex virus type 1 adsorption to vero cells.
Antivir Res 29:221–231
Marchetti M, Pisani S, Antonini G et al (1998) Metal complexes of bovine lactoferrin inhibit in vitro replication of herpes
simplex virus type 1 and 2. Biometals 11:89–94
Marchetti M, Superti F, Ammendolia MG et al (1999) Inhibition of poliovirus type 1 infection by iron-, manganese- and
zinc-saturated lactoferrin. Med Microbiol Immunol 187:199–204
Marr AK, Jenssen H, Moniri R et al (2009) Bovine lactoferrin and lactoferricin interfere with intracellular trafficking of
Herpes simplex virus-1. Biochimie 91:160–164
Matthews DM (1971) Protein absorption. J Clin Pathol s3-5(1):29–40
Mazurier J, Spik G (1995) Comparative study of the iron-binding properties of human transferrins: I. complete and
sequential iron saturation and desaturation of the lactotransferrin. Biochim Biophys Acta 629:399–408
Mazurier J, Montreuil J, Spik G (1985) Visualization of lactotransferrin brush-border receptors by ligand-blotting.
Biochim Biophys Acta 821(3):453–460
McCann KB, Lee A, Wan J et al (2003) The effect of bovine lactoferrin and lactoferricin B on the ability of feline
calicivirus (a norovirus surrogate) and poliovirus to infect cell cultures. J Appl Microbiol 95:1026–1033
Moriuchi M, Moriuchi H (2009) Prevention of norovirus infection in nursery school children by intake of lactoferrin-
containing products. In: 50th Japanese Society of clinical virology, p S56
Nikawa H, Samarayanake LP, Tenovuo J et al (1993) The fungicidal effect of human lactoferrin on Candida albicans
and Candida krusei. Arch Oral Biol 38:1057–1063
Nikawa H, Samarayanake LP, Hamada T (1995) Modulation of the anti-Candida activity of apo-lactoferrin by dietary
sucrose and tunicamycin in vitro. Arch Oral Biol 40:581–584
O'Halloran F, Bahar B, Buckley F et al (2009) Characterisation of single nucleotide polymorphisms identified in the
bovine lactoferrin gene sequences across a range of dairy cow breeds. Biochimie 91 (1):68–75
Omata Y, Satake M, Maeda R et al (2001) Reduction of the infectivity of Toxoplasma gondii and Eimeria stiedae
sporozoites by treatment with bovine lactoferricin. J Vet Med Sci 63:187–190
Öztaş Yeşim ER, Özgüneş N (2005) Lactoferrin: a multifunctional protein. Adv Mol Med 1:149–154
Pietrantoni A, Di Biase AM, Tinari A et al (2003) Bovine lactoferrin inhibits adenovirus infection by interacting with viral
structural polypeptide. Antimicrob Agents Chemother 47:2688–2691
Pietrantoni A, Ammendolia MG, Tinari A et al (2006) Bovine lactoferrin peptidic fragments involved in inhibition of
echovirus 6 in vitro infection. Antivir Res 69:98–106
Rawat P, Kumar S, Sheokand N et al (2012) The multifunctional glycolytic protein glyceraldehyde-3-phosphate
dehydrogenase (GAPDH) is a novel macrophage lactoferrin receptor. Biochem Cell Biol 90(3):329–338
Seganti L, Di Biase AM, Rega B et al (2001) Involvement of bovine lactoferrin moieties in the inhibition of herpes
simplex virus type 1 infection. Int J Immunopathol Pharmacol 14:71–79
Seyfert HM, Tuckoricz A, Interthal H et al (1994) Structure of the bovine lactoferrin-encoding gene and its promoter.
Gene 143 (2):265–269
Sherman MP, Bennett SH, Hwang FF et al (2004) Neonatal small bowel epithelia: enhancing anti-bacterial defense
with lactoferrin and Lactobacillus GG. Biometals 17:285–289
Shestakov A, Jenssen H, Nordström I et al (2012) Lactoferricin but not lactoferrin inhibit herpes simplex virus type 2
infection in mice. Antivir Res 93:340–345
Shirkhani RM, Joo Lee E, Talukder J (2018) Mechanism of absorption and transportation of ovotransferrin in the
intestine. FASEB J 32 (1 Suppl). (Abstract Number 747.17)
Siciliano R, Rega B, Marchetti M et al (1999) Bovine lactoferrin peptidic fragments involved in inhibition of herpes
simplex virus type 1 infection. Biochem Biophys Res Commun 264:19–23
Superti F, Ammendolia MG, Valenti P et al (1997) Antirotaviral activity of milk protein: lactoferrin prevents rotavirus
infection in the enterocyte-like cell line HT-29. Med Microbiol Immunol 186:83–91
Superti F, Siciliano R, Rega B et al (2001) Involvement of bovine lactoferrin metal saturation, sialic acid and protein
fragments in the inhibition of rotavirus infection. Biochim Biophys Acta 1528:107–115
Superti, F., Ammendolia MG, Berlutti, F., et al (2007). Ovotransferrin. In Bioactive egg compounds (pp. 43–50).
Heidelberg: Springer. https://doi.org/10.1007/978-3-540-37885-3_7
Tachezy J, Kulda J, Bahnikova I et al (1996) Tritrichomonas fetus: Iron acquisition from lactoferrin and transferrin. Exp
Parasitol 83:216–228
Talukder MJR, Harada E (2007) Bovine lactoferrin protects lipopolysaccharide-induced diarrhea modulating nitric oxide
and prostaglandin E2 in mice. Can J Physiol Pharmacol 85(2):200–208
Talukder MJR, Takeuchiand T, Harada E (2002) Transport of colostral macromolecules into the cerebrospinal fluid via
plasma in newborn calves. J Dairy Sci 85:514–524

420
 Talukder MJR, Takeuchiand T, Harada E (2003) Receptor mediated transport of lactoferrin into the cerebrospinal fluid
via plasma in young calves. J Vet Med Sci 65:957–964
Talukder J, Srivastava A, Ray A, Lall R (2018) Treatment of infectious endometritis with a novel protein, VPI-O22, in
cows. FASEB J 32 (1 Suppl). (Abstract Number 882.12)
Tan AT, Woodworth RC (1969) Ultraviolet difference spectral studies of conalbumin complexes with transition metal
ions. Biochemistry 8 (9):3711–3716
Tanaka T, Abe Y, Inoue N et al (2004) The detection of bovine lactoferrin binding protein on Trypanosoma brucei. J Vet
Med Sci 66:619–625
Valenti P, Antonini G (2005) Lactoferrin: an important host defense against microbial and viral attack. Cell Mol Life Sci
62:2576–2587
Valenti P, Antonini G, Fanelli MR et al (1982) Antibacterial activity of matrix-bound ovotransferrin. Antimicrob Agents
Chemother 21 (5):840–841
Valenti P, Visca P, Antonini G et al (1986) Interaction between lactoferrin and ovotransferrin and Candida cells. FEMS
Microbiol Lett 33:271–275
van der Kraan MIA, Groenink J, Nazmi K et al (2004) Lactoferrampin: a novel antimicrobial peptide in the N1-domain of
bovine lactoferrin. Peptides 25:177–183
Viejo-Díaz M, Andres M, Fierro JF (2004) Modulation of in vitro fungicidal activity of human lactoferrin against Candida
albicans by extracellular cation concentration and target cell metabolic activity. Antimicrob Agents Chemother 48:1242–
1248
Wakabayashi H, Abe S, Okutomi T et al (1996) Cooperative anti-Candida effects of lactoferrin or its peptides in
combination with azole antifungal agents. Microbiol Immunol 40:821–825
Wakabayashi H, Uchida K, Yamauchi K et al (2000) Lactoferrin given in food facilitates dermatophytosis cure in guinea
pig models. J Antimicrob Chemother 46:595–601
Wakabayashi H, Kurokawa M, Shin K et al (2004) Oral lactoferrin prevents body weight loss and increases cytokine
responses during herpes simplex virus type 1 infection of mice. Biosci Biotechnol Biochem 68:537–544
Wakabayashi H, Takakura N, Yamauchi K et al (2006) Modulation of immunity-related gene expression in small
intestines of mice by oral administration of lactoferrin. Clin Vaccine Immunol 13:239–245
Wakabayashi H, Oda H, Yamauchi K et al (2014) Lactoferrin for prevention of common viral infections. J Infect
Chemother 20 (11):666–671
Wally J, Buchanan SK (2007) A structural comparison of human serum transferrin and human lactoferrin. Biometals
20:249–262
Weinberg GA (1994) Iron chelators as therapeutic agents against Pneumocystis carinii. Antimicrob Agents Chemother
38:997–1003
Weng T, Chen L, Shyu H et al (2005) Lactoferrin inhibits enterovirus 71 infection by binding to VP1 protein and host
cells. Antivir Res 67:31–37
Williams J (1968) A comparison of glycopeptides from the ovotransferrin and serum transferrin of the hen. Biochem J
108 (1):57–67
Wu J, Acero-Lopez A (2012) Ovotransferrin: Structure, bioactivities, and preparation. Food Res Int 46(2):480–487
Xu YY, Samaranayake YH, Samaranayake LP et al (1999) In vitro susceptibility of Candida species to lactoferrin. Med
Mycol 37:35–41
Yamauchi K, Tomita M, Giehl TJ et al (1993) Antibacterial activity of lactoferrin and a pepsin derived lactoferrin peptide
fragment. Infect Immun 61:719–728
Yamauchi K, Wakabayashi H, Shin K et al (2006) Bovine lactoferrin: benefits and mechanism of action against
infections. Biochem Cell Biol 84:291–296
Yen M, Chiu C, Huang Y et al (2011) Effects of lactoferrin-containing formula in the prevention of enterovirus and
rotavirus infection and impact on serum cytokine levels: a randomized trial. Chang Gung Med J 34:395–402
Zarember KA, Sugui JA, Chang YC et al (2007) Human polymorphonuclear leukocytes inhibit Aspergillus fumigatus
conidial growth by lactoferrin-mediated iron depletion. J Immunol 178:6367–6373
Zavaleta N, Figueroa D, Rivera J et al (2007) Efficacy of rice-based oral rehydration solution containing recombinant
human lactoferrin and lysozyme in Peruvian children with acute diarrhea. J Pediatr Gastroenterol Nutr 44:258–264

421
Anticorpos de colostro, anticorpos de ovo e anticorpos
monoclonais que fornecem imunidade passiva para
animais
Dan DuBourdieu

Resumo
A imunidade passiva pode ser fornecida a animais por várias fontes de anticorpos,
incluindo colostro, ovos de aves e fontes monoclonais. Foi demonstrado que esses
anticorpos protegem os animais de produção e de companhia de uma série de patógenos.
Este capítulo analisa o sistema imunológico para os princípios da resposta imunológica a
antígenos e a síntese de imunoglobulinas das cinco classes de anticorpos no corpo. Os
anticorpos do colostro são descritos para proteção da imunidade passiva em animais
como bezerros. Os anticorpos do ovo de galinha são outra fonte de anticorpos para
imunidade passiva. Os anticorpos monoclonais terapêuticos também são usados para
fornecer imunidade passiva no campo veterinário.

Palavras-chave: Imunidade passiva · Anticorpos de colostro · Anticorpos de ovo ·

Anticorpos monoclonais

D. DuBourdieu. Vets Plus Inc., Menomonie, WI, USA. e-mail: dand@vets-plus.com

1. Introdução
O uso de anticorpos por veterinários para manter a saúde dos animais tem uma longa
história. Fundamentalmente, quando se trata da saúde do sistema imunológico dos
animais de produção e de companhia, existem poucas diferenças absolutas na finalidade
pretendida do sistema imunológico. Os mamíferos têm o mesmo sistema imunológico
básico, com pequenas diferenças entre as espécies. Mesmo as diferenças entre pássaros
e mamíferos não são tão grandes, já que o objetivo do sistema imunológico é manter
micro-organismos infecciosos, como certas bactérias, vírus e fungos, fora do corpo e
destruir quaisquer microrganismos infecciosos que invadam o corpo. Como os
veterinários tiram proveito do sistema imunológico para manter a saúde pode ser definido
aproximadamente como tirar proveito do método inerente do corpo de manter a saúde por
meio da imunidade adaptativa fornecida por vacinações para gerar anticorpos dentro do

422
animal ou pela administração de anticorpos pré-formados a um animal através de um
processo chamado imunidade passiva.

2. A Resposta Imune
A evolução produziu um incrível sistema imunológico em animais que utiliza vários tipos
de células e proteínas para protegê-los de organismos invasores. Esse sistema possui
duas categorias amplas: não adaptativo e adaptativo. O sistema imunológico não
adaptativo é mediado por células que respondem de maneira inespecífica a substâncias
estranhas. Esta resposta inclui fagocitose por macrófagos, secreção de lisozimas por
células lacrimais e lise celular através das células natural killer. A resposta imune
adaptativa é mediada por linfócitos que produzem um conjunto de proteínas chamadas
anticorpos que são secretados ou encontrados na superfície do linfócito. Quando os
próprios anticorpos são criados dentro do animal após a vacinação ou da exposição a
patógenos, o processo é denominado imunidade adaptativa. Quando os anticorpos pré-
formados de um animal hospedeiro são dados a outro animal receptor, como sua prole ou
mesmo uma espécie completamente diferente de animal, o processo é denominado
imunidade passiva.

3. Vacinas veterinárias para imunidade ativa

Os cientistas há muito se aproveitam do sistema imunológico adaptativo com o uso de
vacinas. As vacinas para doenças animais foram as primeiras a resultar de investigação
científica baseada em laboratório. O químico francês Louis Pasteur desenvolveu uma
vacina para o cólera das galinhas em 1879 e uma vacina para o antraz de ovelhas e gado
em 1881.

Os principais objetivos das vacinas veterinárias são melhorar a saúde e o bem-estar dos
animais de companhia, aumentar a produção de gado de maneira econômica e prevenir a
transmissão de animal para humano tanto de animais domésticos quanto de vida
selvagem. Esses diversos objetivos levaram a diferentes abordagens no desenvolvimento
de vacinas veterinárias, desde preparações de patógenos totais rudes, mas eficazes, até
vacinas de subunidades definidas pelas moléculas, organismos geneticamente
modificados ou quimeras, formulações de antígenos vetorizados e injeções de DNA
(Meeusen et al. 2007). Também resultou em várias diretrizes para a vacinação de animais
de companhia, como cães (Ford et al. 2017) e animais de produção, como suínos
(Alabama e Auburn 2018), em aves (Stewart-Brown 2018), vacas/bezerros (Missouri
423
2018), e outros animais de produção. Vacinas veterinárias bem-sucedidas foram
produzidas contra patógenos virais, bacterianos, protozoários e multicelulares, que de
muitas maneiras lideraram o campo na aplicação e adaptação de novas tecnologias.

4. Imunidade Passiva
Enquanto a imunidade ativa se refere ao processo de exposição do indivíduo a um
antígeno para gerar uma resposta imune adaptativa, a imunidade passiva se refere à
transferência de anticorpos de um indivíduo para outro (Marcotte e Hammarström 2015). A
imunidade passiva fornece proteção de curta duração, durando de várias semanas a até
3–4 meses, mas é imediata. A natureza pretendia que a imunidade passiva ocorresse
quando os anticorpos maternos fossem transferidos para o feto através da placenta ou do
leite materno para o intestino do bebê. No entanto, também pode ser produzido
artificialmente quando as preparações de anticorpos são derivadas de soros ou secreções
de doadores imunizados e são entregues por via oral ou sistêmica a indivíduos não
imunes. A imunização passiva é uma nova abordagem para fornecer proteção aos
animais contra patógenos devido ao surgimento de microrganismos novos e resistentes a
medicamentos, doenças que não respondem à terapia medicamentosa e indivíduos com
um sistema imunológico debilitado que são incapazes de responder às vacinas
convencionais.

5. Anticorpos
O sistema imunológico pode responder especificamente a milhões de moléculas
diferentes e é constantemente desafiado por um grande número de antígenos. Uma das
principais características do sistema imunológico é que ele pode sintetizar um grande
número de anticorpos. Cada um desses anticorpos pode se ligar a um antígeno diferente.
Essa ligação é a base para a especificidade molecular da resposta imune.

Os anticorpos são proteínas produzidas por um tipo de linfócitos B diferenciados

terminalmente. As células B recebem o nome B de células da bursa de frango, onde foram
descobertas pela primeira vez (Gitlin e Nussenzweig 2015). Os anticorpos são produzidos
em resposta à presença de moléculas estranhas no corpo. Os anticorpos circulam pelo
sangue e linfa, onde se ligam aos antígenos estranhos. Uma vez ligados, esses
complexos anticorpo-antígeno são removidos da circulação, principalmente por meio de
fagocitose por macrófagos. Essa é a base para os anticorpos que protegem o animal
contra patógenos.
424
Os anticorpos são uma grande família de glicoproteínas que compartilham características
estruturais e funcionais importantes. Do ponto de vista da estrutura, os anticorpos
parecem uma molécula em forma de Y (Fig. 1). Cada Y contém quatro polipeptídeos. Dois
dos polipeptídeos são idênticos e chamados de cadeia pesada. Os outros dois, também
idênticos, são chamados de cadeia leve e são conectados por ligações dissulfeto. Existem
cinco classes de anticorpos, IgG, IgM, IgA, IgE e IgD, que são classificados com base no
número de unidades semelhantes a Y e no tipo de polipeptídeo de cadeia pesada que
contêm (Fig. 2).

Fig. 1 Estrutura do anticorpo conforme desenhada, por modelo de proteína e por microscopia eletrônica

Fig. 2 Estruturas das cinco classes de anticorpos IgG IgM IgA IgE IgD

6. Classes de anticorpos
IgM é o maior anticorpo, e é o primeiro a aparecer em resposta à exposição inicial ao
antígeno. O baço, onde residem as células plasmáticas responsáveis pela produção de
anticorpos, é o principal local de produção de IgM específica (Capolunghi et al. 2013;
Marchalonis et al. 2002). IgG é o principal tipo de anticorpo encontrado no sangue e no
fluido extracelular, permitindo controlar a infecção nos tecidos corporais.
Aproximadamente 80% de todos os anticorpos em humanos e animais de companhia são
da classe IgG. A imunoglobulina A (IgA) desempenha um papel crucial na função
imunológica das membranas mucosas. A quantidade de IgA produzida em associação
com as membranas mucosas é maior do que todos os outros tipos de anticorpos
combinados (Fagarasan e Honjo 2003; Holmgren e Czerkinsky 2005; Snoeck et al. 2006).
A IgD foi inicialmente considerada uma classe de anticorpos desenvolvida recentemente
porque só foi detectada em primatas, camundongos, ratos e cães e não em porquinhos-
da-índia, suínos, bovinos, ovelhas e sapos (Preud’homme et al. 2000). No entanto,
425
descobertas recentes de IgD em vertebrados antigos sugerem que o IgD foi preservado
na evolução de peixes para humanos para funções imunológicas importantes (Chen e
Cerutt, 2011). A imunoglobulina E (IgE) só foi identificada em mamíferos. A principal
função da IgE é a imunidade contra parasitas, como helmintos (Erb 2007) como
Schistosoma mansoni, Trichinella spiralis e Fasciola hepatica (Watanabe et al. 2005;
Pfister et al. 1983). IgE também tem um papel essencial na hipersensibilidade tipo I
(Gould et al. 2003) que se manifesta em várias doenças alérgicas, como asma alérgica, a
maioria dos tipos de sinusite, rinite alérgica, alergias alimentares e tipos específicos de
urticária crônica e dermatite atópica (Mueller et al. 2016).

7. Interações Anticorpo/Antígeno
Os anticorpos ligam-se aos antígenos nas pontas superiores da molécula Y. A região do
antígeno onde ocorre a ligação é chamada de epítopo (Fig. 3).

Fig. 3 Ligação do anticorpo a um antígeno

Os anticorpos podem se ligar a uma ampla gama de estruturas químicas e podem

discriminar entre compostos relacionados. O quão bem o anticorpo se liga a um antígeno
é conhecido como afinidade. Essa afinidade pode variar de baixa a alta.

8. Colostro e imunidade passiva

Os mamíferos nascem sem um sistema imunológico adaptativo totalmente funcional,
embora os elementos básicos estejam presentes. Quando um mamífero nasce, emerge
do útero estéril para um ambiente onde é imediatamente exposto a uma série de micro-
organismos. O trato gastrointestinal (GI) adquire uma complexa flora microbiana em
poucas horas. Para sobreviver, o animal recém-nascido deve ser capaz de controlar essa
invasão microbiana. Na prática, o sistema imune adaptativo leva algum tempo para se
tornar totalmente funcional e os mecanismos inatos são responsáveis pela resistência
inicial à infecção. Em algumas espécies com um curto período de gestação, como

426
camundongos, o sistema imunológico adaptativo pode nem estar desenvolvido totalmente
no nascimento. Em animais com um longo período de gestação, como os mamíferos
domésticos, o sistema imunológico adaptativo está desenvolvido totalmente no
nascimento, mas não pode funcionar em níveis adultos por várias semanas. O
desenvolvimento completo da imunidade ativa depende da estimulação antigênica. O
desenvolvimento adequado das células B e da diversidade do receptor de células B
requer seleção clonal e multiplicação de células conduzida por antígeno. Assim, os
mamíferos recém-nascidos são vulneráveis à infecção nas primeiras semanas de vida.
Eles precisam de ajuda para se defender nesta conjuntura. A ajuda temporária é fornecida
pela mãe na forma de colostro, que contém anticorpos. A transferência passiva de
imunidade da mãe para o recém-nascido é essencial para a sobrevivência. Os bezerros
nascem sem um sistema imunológico ativo e dependem do consumo de anticorpos para
proteção contra doenças como diarréia e pneumonia. A vaca fornece nutrientes ao
bezerro para o crescimento e desenvolvimento durante a gestação, mas a vaca não pode
fornecer diretamente anticorpos para protegê-lo de doenças. Felizmente, as
imunoglobulinas constituem um componente importante da atividade imunológica
encontrada no leite e no colostro. Enquanto os humanos têm uma grande quantidade de
IgA no colostro, o colostro da maioria dos outros animais contém uma alta porcentagem
de IgG (Hurley e Theil 2011) (Fig. 4). As imunoglobulinas encontradas nas secreções
mamárias surgem de fontes sistêmicas e locais. No caso de IgG no leite, a maior parte
vem do soro (Mayer et al. 2005). Embora as células plasmáticas produtoras de IgG
possam ocorrer no tecido mamário, sua contribuição para a IgG no colostro é menor em
comparação com a IgG derivada do soro.

Fig. 4 Distribuição relativa de IgG, IgA e IgM no colostro (círculo

externo) e no leite (círculo interno) de cinco espécies

As outras classes principais de imunoglobulinas transportadas para o colostro e o leite

são IgA e IgM. A imunoglobulina A (IgA) é a principal imunoglobulina no colostro e leite
humanos; no entanto, também está presente no leite da maioria das outras espécies.
Colostro e leite IgA e IgM são encontrados na forma de IgA secretora, ou sIgA, e sIgM.
Muito disso é produzido por células plasmáticas no tecido mamário. As células
427
plasmáticas são parte do tecido linfóide associado ao intestino (GALT), o maior órgão
imunológico de um organismo, que inclui as manchas de Peyer, células linfóides e
mieloides na lâmina própria e linfócitos intraepiteliais (Ishikawa et al. 2005).
Curiosamente, mais de 70% do sistema imunológico está localizado no trato
gastrointestinal, o local onde muitos patógenos orais interagem pela primeira vez com um
animal (Vighi et al. 2008). GALT é uma parte do tecido linfoide associado à mucosa e atua
no sistema imunológico para proteger os animais da invasão de patógenos no intestino.
Uma das funções fisiológicas da mucosa intestinal é a absorção de alimentos. No entanto,
de igual importância do GALT é na defesa do corpo, devido à sua grande população de
células plasmáticas cujo número excede o número de células plasmáticas no baço,
nódulos linfáticos e medula óssea combinados (Nagler-Anderson 2001).

Os linfócitos do sistema GALT irão se mover para a glândula mamária e fornecer uma
ligação direta entre a resposta de exposição ao antígeno no sistema mucoso da mãe e as
imunoglobulinas secretoras da glândula mamária (Brandtzaeg 2010). Como tal, isso
significa que o colostro materno e o leite conterão anticorpos específicos para patógenos
que podem ser encontrados no intestino do recém-nascido e em outros tecidos da
mucosa. Isso fornece uma justificativa para as observações de que o colostro bovino de
vacas não imunizadas também pode fornecer proteção imunológica passiva contra
patógenos humanos em humanos e animais (Li-Chan et al. 1994; Yolken et al. 1985) e
abre a porta para novas tecnologias para fornecem aos veterinários outra maneira de
proteger os animais de patógenos que não envolvem antibióticos.

Os anticorpos devem ser obtidos bebendo colostro nas primeiras horas após o
nascimento como parte do sistema de imunização passiva para maximizar a absorção de
anticorpos (Pakkanen e Aalto 1997). Como outros animais, os anticorpos são gerados por
vacas saudáveis como resultado da exposição diária a agentes infecciosos. Os anticorpos
também podem ser o resultado de programas de vacinação específicos. Os anticorpos
naturais da vaca para esses agentes infecciosos são passados da vaca para o bezerro
através do colostro. O nível de anticorpos transmitidos da vaca através do colostro pode
ser elevado por um programa de vacinação pré parto (Thomas 2017).

Quando o bezerro bebe colostro, os anticorpos derivados da mãe são absorvidos do GI

do bezerro para a corrente sanguínea. Algumas das imunoglobulinas também
permanecem no intestino, onde podem neutralizar bactérias patogênicas e ajudar a
prevenir o desenvolvimento de diarreia. A absorção de anticorpos do GI para a corrente
sanguínea é chamada de transferência passiva. A falha da transferência passiva (FPT)
em bezerros leiteiros é definida por um nível de IgG no sangue de <10 mg / mL 24-48 h
428
após o nascimento (Stilwell e Carvalho 2011). Os bezerros que sofrem FPT têm maior
probabilidade de adoecer ou morrer nos primeiros 2 meses de vida do que os bezerros
com imunidade adequada. Muitos fatores podem contribuir para o FPT, mas o colostro e o
manejo da alimentação com colostro estão frequentemente envolvidos. Para obter a
transferência passiva com sucesso e fornecer proteção ao bezerro contra doenças,
acredita-se que o bezerro precise consumir um mínimo de 150–200 g de imunoglobulinas
(Meganck et al. 2014).

O caminho entre o trato gastrointestinal e a corrente sanguínea fica aberto apenas por um
curto período de tempo. A pesquisa mostra que essa via começa a se fechar logo após o
nascimento e, após 8-12 h, aproximadamente 50% da capacidade do bezerro de absorver
anticorpos do colostro desaparece. Portanto, foi recomendado alimentar os bezerros com
a quantidade de colostro que eles quiserem em mamadeira dentro de 1–4 h após o
nascimento e às 12 h de idade para reduzir substancialmente a probabilidade de FPT
(Chigerwe et al. 2009; Trotz-Williams et al. 2008).

O colostro também fornece ao filhote proteína, energia na forma de gordura e açúcar e

vitaminas (Quigley e Drewry 1998). Algumas vitaminas não atravessam a barreira
placentária e o colostro é a principal fonte desses nutrientes para o bezerro após o
nascimento. A energia é necessária para todas as funções metabólicas, incluindo a
manutenção da temperatura corporal. Uma das principais causas de morte em bezerros
leiteiros é a falha em iniciar os processos respiratórios e metabólicos nas primeiras horas
de vida. O bezerro recém-nascido tem apenas algumas horas de reserva de energia na
gordura armazenada e, portanto, precisa da energia do colostro. A pesquisa também
confirma que quanto mais cedo um bezerro consome colostro, mais anticorpos maternos
ele pode utilizar.

A qualidade do colostro é um grande problema que a indústria de laticínios enfrenta

regularmente. De modo geral, a qualidade do colostro está relacionada à quantidade de
anticorpos que está presente. A concentração de IgG colostral é um fator importante que
afeta se os bezerros recebem imunidade passiva suficiente (Godden et al. 2012).
Infelizmente, a quantidade de IgG no colostro materno varia dramaticamente entre as
vacas (<1–235 g/l) com 29,4–57,8% das amostras que não atingem a quantidade
desejada de 50 g de IgG/l (Gulliksen et al. 2008). A qualidade do colostro é difícil de
estimar pelo agricultor com base no volume produzido ou na aparência do colostro.
Existem muitas variáveis que afetam a qualidade do colostro, incluindo nutrição, o tempo
em que a vaca é ordenhada, estresse por calor e estágio da lactação. Um estudo da Iowa
State University sugere que um mínimo de 30% dos bezerros leiteiros nos EUA estão
429
atualmente sendo alimentados com colostro classificado abaixo dos padrões da indústria
para conteúdo de IgG e estão em maior risco de FPT, mortalidade e morbidade (Morrill et
al. 2011).

Outros mamíferos de produção, como os leitões, enfrentam os mesmos problemas que os

bezerros quanto à qualidade do colostro. Estudos demonstraram que, em média, 25% dos
porcos com ingestão de colostro inferior a 200 g geralmente morrem. Em porcos com
ingestão de colostro abaixo de 100 g, a mortalidade chegou a 65% (Devillers et al. 2011).
Foi demonstrado que dar colostro bovino seco por spray a outros animais como os leitões
(Sty et al. 2006) ajuda a proteger contra a disfunção intestinal e inflamação. É possível
que o uso de colostro bovino para leitões ajude a suplementar o colostro da porca. A
pesquisa também foi feita em potros com uma suplementação aprimorada de colostro
bovino (Fenger et al. 2016).

9. Programas de colostro
Uma vez que até 50% das vacas têm colostro com nível de IgG abaixo de 50 mg/mL, o
que não evita a FPT, uma variedade de programas e protocolos foram implementados por
produtores de leite. O colostro materno de alta qualidade ainda é o padrão ouro para
alimentação de bezerros recém-nascidos. No entanto, suplementos de colostro e produtos
substitutos podem ser ferramentas valiosas para aumentar a imunidade dos bezerros
quando os suprimentos de colostro são limitados ou a erradicação da doença é desejada.
Os produtos de colostro que contêm IgG são regulamentados pelo USDA Center for
Veterinary Biologics e estão disponíveis em bolus, gel e pó. Os produtos de suplemento
são incapazes de elevar a concentração sanguínea de IgG acima do padrão da espécie,
que é de 10 mg/mL para bezerros. Qualquer produto que é capaz de aumentar a
concentração sérica de IgG acima de 10 mg/mL pode ser chamado de substituto do
colostro (Penn State 2017). Os suplementos não contêm quantidades suficientes de
anticorpos para elevar o nível de IgG no sangue em bezerros além do que o colostro de
qualidade médio pode fazer. O substituto do colostro contém níveis maiores de IgG e
outros nutrientes e fornece um método eficaz e conveniente de fornecer imunidade
passiva a bezerros quando o colostro materno não está disponível.

Os suplementos de colostro disponíveis hoje são feitos de colostro bovino seco ou soro e
contêm 40–60 g de IgG por dose (9–13% de proteína globulina). O teor de gordura
desses produtos varia de 0,5 a 15%. O colostro seco por spray com altas concentrações
de imunoglobulina pode ser produzido economicamente e usado como um substituto

430
eficaz e conveniente do colostro em bezerros recém-nascidos (Chelack et al. 1993).
Vários produtos projetados para substituir o colostro já estão no mercado. Esses produtos
são feitos de colostro ou soro bovino e contêm 100-150 g de IgG por dose. Esses
produtos também fornecem gordura, proteína, vitaminas e minerais necessários ao
bezerro recém-nascido, embora a quantidade varie entre os produtos. Um resumo
(Pennsylvania State University 2017) das médias de tratamento de 26 estudos publicados
investigando produtos de colostro indicou que os produtos substitutos forneceram uma
média de 157 g de IgG, com uma eficiência de absorção de 31%, e IgG sérica de 12 mg/
mL. Produtos de suplemento (fornecidos além de colostro) forneceram 136 g de IgG com
19% de eficiência de absorção e resultaram em IgG sérico de 9 mg/mL.

Foi reconhecido que, embora os anticorpos encontrados no colostro possam certamente

reduzir doenças em animais por meio da imunidade passiva quando administrados a um
recém-nascido, eles só funcionarão se o animal doador de colostro tiver sido exposto
naturalmente à doença ou vacinado contra a doença, a fim de produzir anticorpos
específicos. O colostro bovino que é tipicamente seco por spray para suplementos ou
substitutos conterá apenas os anticorpos que a vaca pode ter encontrado naturalmente.
Portanto, o colostro usado pode não ter anticorpos específicos contra doenças específicas
nas quais um produtor possa estar interessado. A indústria animal reconheceu esse
problema e desenvolveu métodos para produzir anticorpos específicos em alto título
contra doenças específicas que podem ser entregues em produtos de colostro. Isso é
conseguido pela hiperimunização de animais, como vacas, contra doenças animais
específicas, coleta de colostro e processamento em pó, como por métodos de liofilização,
e depois dá a um animal recém-nascido em géis ou bolus. Uma série de doenças
incluindo doenças bacterianas como E. coli (Selim et al. 1995) e doenças virais, como
rotavírus e coronavírus (Combs et al. 1993) ou doenças por coccidios, como giardíase ou
criptosporidíase (Graczyk et al. 1999; Fayer et al. 1989; Naciri et al. 1994) foram
pesquisados quanto à eficácia do colostro hiperimunizado. O colostro hiperimunizado é
coletado, processado e administrado a bezerros recém-nascidos. Com vários graus de
sucesso, esses anticorpos do colostro hiperimunizados têm demonstrado sucesso no
fornecimento de imunização passiva.

Além dos bezerros, a pesquisa foi feita em uma variedade de animais de produção
usando colostro bovino ou outras fontes. Por exemplo, os cordeiros foram suplementados
com colostro de ovelha e também com soro hiperimunizado de ovelha contra E. coli
(Pommer 2010). Outra pesquisa examinou a vacinação de vacas com antígenos
clostridiais e a transferência passiva de anticorpos clostridiais do colostro bovino para os

431
cordeiros (Clarkson et al. 1985). Os leitões também receberam proteção passiva contra a
diarreia epidêmica suína pelo colostro bovino hiperimune (Shibata et al. 2001).

Anticorpos específicos em um produto derivado de colostro hiperimunizado podem ser

usados enquanto complementam a alimentação com colostro precoce e podem ser
administrados ao mesmo tempo que o colostro. Existem algumas vantagens nessa
estratégia, pois as imunoglobulinas específicas lutam imediatamente no nível do intestino
para proteger contra doenças que destroem o revestimento intestinal, permitindo também
que os anticorpos sejam absorvidos pela corrente sanguínea. É importante proteger o
revestimento intestinal porque se as células que revestem o trato digestivo forem
danificadas, o leite não poderá ser digerido ou absorvido pelo bezerro.

10. Vacinação de animais recém-nascidos durante o recebimento de

colostro
Além da qualidade do colostro em si, os pesquisadores primeiro acreditaram que bezerros
não podiam ser vacinados de forma eficaz enquanto tivessem anticorpos maternos
circulantes do colostro em seu sistema. Os bezerros em pré-desmame podem responder
ao estímulo da vacinação já com 1 mês de idade. Os anticorpos maternos absorvidos do
colostro, entretanto, não conseguem distinguir entre os antígenos de um desafio natural e
os antígenos de uma vacina. Portanto, os anticorpos do colostro podem interferir na
resposta imune a uma vacinação (Niewiesk 2014). O trabalho continua a ser feito para
desenvolver maneiras de contornar a interferência de anticorpos maternos.

A vacinação de bezerros diante dos anticorpos maternos (IFOMA) frequentemente não

resulta em conversão, pois a imunidade derivada da mãe interfere na ativação de
respostas adequadas de anticorpos à vacinação. No entanto, pode estimular as respostas
de memória das células-T e B que protegem os bezerros contra doenças clínicas quando
a imunidade materna decaiu. A ativação das respostas de memória das células B e T em
bezerros vacinados com IFOMA varia e é afetada por vários fatores, incluindo idade, nível
de imunidade materna, tipo de vacina e via de administração. Esses fatores influenciam a
preparação adequada das respostas imunes humorais e mediadas por células e o
resultado da vacinação. A falha em preparar adequadamente a memória imunológica após
a vacinação IFOMA pode resultar em falta de proteção clínica e um risco aumentado de
viremia e/ou eliminação de vírus (Chamorro et al. 2016).

Obviamente, há alguma controvérsia sobre se bezerros recém-nascidos devem ser

vacinados (Cook et al. 2003). Pensa-se que o processo de formação de uma resposta
432
imunológica do bezerro a uma vacina requer energia que poderia ser melhor usada para
combater doenças e ganhar peso, e a resposta poderia ser prejudicial à saúde precoce
desse bezerro. Por outro lado, embora os anticorpos maternos possam bloquear a
resposta à vacinação, às vezes não (Woolums 2007). O resultado imunológico exato em
bezerros vacinados com IFOMA pode variar, e essa variação provavelmente depende de
muitos fatores. Esses fatores não estão bem caracterizados, mas provavelmente incluem
a natureza da vacina administrada, o número de doses administradas, a idade do bezerro
e o nível de anticorpos maternos presentes no bezerro e os meios pelos quais uma
resposta protetora é definida. As diretrizes para a vacinação de animais recém-nascidos,
como bezerros, requerem pesquisas adicionais para esclarecer as reações de vacinação
IFOMA.

11. Produtos de Anticorpos

Felizmente, os produtores também têm a opção de usar produtos de anticorpos para
gerar proteção imediata em situações de baixa qualidade do colostro. Os produtos com
anticorpos complementam a alimentação com colostro porque podem ser administrados
ao mesmo tempo. Esses produtos estão disponíveis em bolus, gel e pó. Eles também
estão incluídos em alguns substitutos de colostro e fórmulas de suplementos para valor
agregado. Normalmente, os produtos de anticorpos são de vacas hiperimunizadas e o
anticorpo específico é encontrado no colostro. O colostro é processado e tipicamente
fracionado em uma preparação parcialmente purificada de anticorpo que é liofilizado e
colocado em cápsulas ou bolus. Como os bolus de anticorpos podem ser fornecidos em
conjunto com o colostro, eles podem ser uma ferramenta para ajudar o bezerro não
apenas a obter uma transferência passiva adequada, mas também fornecer anticorpos
específicos suficientes para proteger contra as doenças iniciais mais comuns na infância.

Os produtos com anticorpos não exigem que o bezerro reaja a uma vacina para
desenvolver anticorpos. Em vez disso, anticorpos específicos contra várias doenças já
estão presentes, medidos e verificados para estar em um nível alto o suficiente para
proteger o bezerro de doenças relacionadas à diarréia, e eles podem ser alimentados o
mais próximo possível do nascimento. Produtos de anticorpos aprovados pelo
Departamento de Agricultura dos Estados Unidos (USDA) estão disponíveis no mercado e
podem ser fornecidos em conjunto com o colostro e fornecem imunidade imediata ao
bezerro. Esses anticorpos vão para o intestino para se ligar imediatamente e neutralizar
os antígenos da diarreia, ao mesmo tempo que são absorvidos pela corrente sanguínea
para proteção estendida (Combs et al. 1993; Chamorro et al. 2014). Outra vantagem
433
dessa abordagem é que o fornecimento de anticorpos específicos pode potencialmente
evitar o estímulo da vacina.

Evitar o estímulo da vacina pode permitir que o bezerro conserve seu suprimento mínimo
de gordura e nutrientes que são essenciais para mantê-lo nos primeiros dias de vida.

12. Imunidade Passiva por Anticorpos de Ovo

As vacas passam sua imunidade para seus filhos pelo colostro, e vários produtos de
colostro estão no mercado para obter imunidade passiva. Fontes adicionais de produtos
de anticorpos podem ser utilizadas de maneira semelhante para atingir imunidade
passiva. Estes são de fontes aviárias, como galinhas. Em pássaros, a transferência
passiva de imunidade ocorre por meio do ovo. Ao hiperimunizar galinhas durante um
período de tempo com vacinas bacterianas ou virais multivalentes inativadas, este
procedimento resulta na produção de imunoglobulinas policlonais da classe IgY
(específicas para aves) dirigidas contra os organismos estimuladores.

O consumo oral de ovos “imunes” contendo anticorpos IgY específicos protege o animal
contra o (s) organismo (s) específico (s) com o qual a galinha foi estimulada. Infelizmente,
os ovos realmente não podem ser cozidos, pois o calor faz uma prótese nos anticorpos
encontrados nos ovos. Outros parâmetros físicos, como um pH ácido, também destroem
os anticorpos até certo ponto. No entanto, IgY administrado por via oral suficiente pode
sobreviver à passagem através do GI e, após a excreção, ainda reter uma grande parte
de sua capacidade de ligação ao antígeno, indicando que IgY administrado por via oral
são úteis para imunidade passiva.

13. Ovos como fonte natural de fatores imuno regulatórios

Assim como a proteção imunológica é transferida in utero em mamíferos ou passivamente
por uma mãe em lactação via colostro, as galinhas transferem passivamente proteção
para seus filhotes, secretando imunoglobulina e outros fatores imunológicos em seus ovos
para uso pelo pintinho. A transferência de imunoglobulinas de galinha do soro da galinha
para a gema e da gema para o pintinho é análoga à transferência através da placenta de
IgG da mãe mamífero para sua prole. Enquanto IgM e IgA são encontrados em ovos de
galinha, a principal imunoglobulina é IgY, que se encontra na gema do ovo (Hamal et al.
2006). IgY (Y significa gema) é uma classe de imunoglobulina específica para aves e

434
análoga em função às imunoglobulinas de mamíferos. IgY tem uma estrutura semelhante
à IgG de mamífero com algumas pequenas diferenças nas cadeias pesadas (Fig. 5).

Fig. 5 Estrutura de IgG de mamífero em comparação com IgY de ave

Tanto os ovos quanto o leite (incluindo o leite materno) contêm anticorpos de ocorrência
natural, e há relatos de fatores imunomoduladores no leite também (Li et al. 2017). No
entanto, os níveis de imunoglobulina nos ovos podem ser significativamente mais
elevados do que os níveis encontrados no soro ou no leite (Woolley e Landon 1995). Isso
pode não ser surpreendente, uma vez que os mamíferos têm um tempo
consideravelmente mais longo de semanas ou meses durante os quais eles podem
transferir passivamente imunoglobulina e fatores imunológicos, enquanto a galinha tem
uma única oportunidade (o ovo) de transferir todos os componentes de sobrevivência
necessários para sua prole. Todos os aspectos de que o pintinho precisa para sobreviver
devem estar no ovo. Como os produtos do ovo são uma fonte comum de proteína na dieta
humana e os ovos contêm anticorpos e fatores imunológicos, era óbvio utilizar anticorpos
do ovo para fornecer imunidade passiva aos animais. Como tal, isso resultou em uma
série de produtos comerciais de anticorpos de ovo no mercado para animais de produção,
bem como animais de companhia, para prevenir várias doenças. Com poucas exceções,
o consumo oral de anticorpos específicos foi relatado (Diraviyam et al. 2014) para
proteger humanos e animais. Além disso, estudos in vitro com anticorpos IgY específicos
foram encontrados para inibir os processos associados ao crescimento bacteriano,
adesão às células intestinais e produção de toxina (Sugita-Konishi et al. 1996).

A meta-análise demonstrou os efeitos benéficos do IgY (Diraviyam et al. 2014) para uma
variedade de animais. Esta análise apóia a opinião de que IgY é útil para profilaxia e
tratamento. Atualmente, a imunização passiva oral com IgY de frango tem se destacado
como alternativa aos antibióticos para o tratamento e controle da diarreia. IgY demonstrou

435
ser eficaz no controle e prevenção da diarreia em humanos e em animais, incluindo
leitões (Cui et al. 2012; Vega et al. 2012), camundongos (Buragohain et al. 2012), aves
(El-Ghany 2011; Farooq et al. 2012) e bezerros (Cook et al. 2005; Germine et al. 2011;
Vega et al. 2011).

A maioria das galinhas comercialmente disponíveis são imunizadas ao nascer para

protegê-las de doenças aviárias. A única diferença entre esses ovos de supermercado e
os ovos “imunes” é que os últimos são de galinhas que receberam vacinações
proprietárias adicionais com outros patógenos inativados conhecidos como agentes
etiológicos de infecções animais. Uma ampla gama de bactérias, vírus e coccídios têm
sido usados em vacinas para a produção de produtos comerciais de IgY. Uma lista parcial
inclui Shigella dysenteriae, Staphylococcus epidermidis, Escherichia coli, E. coli K99,
Salmonella enteritidis e S. typhimurium, Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella
pneumoniae, Haemophilus influenzae, espécies de Streptococcus, Salmonella Dublin,
Salmonella anatum, Clostridium Perfringens tipo A e tipo C, rotavírus tipos 1 e 2,
coronavírus, reovírus, parvovírus e Cryptosporidium parvum (Schade et al. 2005). Apenas
a galinha (não o ovo) é exposta a patógenos inativados. As imunoglobulinas e outros
fatores imunológicos são transferidos passivamente para o ovo a partir do soro para uso
pelo pintinho e, mais importante, para imunidade passiva para outros animais.

Depois de tempos apropriados após a vacinação, os ovos são coletados dos bandos de
frangos especialmente designados, lavados e quebrados, e a gema e a clara do ovo são
normalmente secas em um pó proteico fino. Vários processos foram desenvolvidos para
ajudar a minimizar os danos causados pelo calor aos anticorpos do ovo e fatores
imunorreguladores durante o procedimento de secagem por spray. No entanto, os ovos de
secagem por spray podem desnaturar o IgY até certo ponto, devido a pelo menos algum
aquecimento durante o processo. Manter o ovo longe do calor é uma forma ideal de
manter os níveis e a eficácia do título de IgY. Embora a secagem por congelamento seja
uma opção cara para manter os níveis de título de anticorpos, simplesmente alimentar
ovos imunizados frescos é outro método que existe. Isso é para manter os ovos
imunizados em um líquido estabilizado (DuBourdieu 2014). Este formato de líquido
estabilizado é um método de entrega prático e barato que permite que o IgY específico
seja entregue em sistemas de água para animais de produção ou incorporação em outros
formatos de entrega, como mastigações macias que podem ser prontamente dadas a
animais de companhia (Fig. 6).

436
 Fig. 6 Vacinação para anticorpos específicos e estratégias
de processamento de gema de ovo

O mecanismo eficaz pelo qual o trabalho da IgY aviária é eficaz é pelo mesmo
mecanismo que os anticorpos IgG de mamíferos atuam no animal para fornecer
imunidade passiva. Por exemplo, a bactéria E. coli cepa K88 normalmente causa
problemas em animais de produção que resultam em diarreia e possível morte. Portanto,
um programa de vacinação é usado em galinhas para criar anticorpos IgY anti E. coli K88
específicos. Esses anticorpos específicos encontrados na gema do ovo são administrados
por via oral aos animais para evitar que a E. coli K88 cause doenças. Isso ocorre quando
anticorpos IgY específicos anti E. coli K88 se ligam à bactéria patogênica. Essa ligação
bloqueia a capacidade do patógeno de se ligar à camada de mucina do trato
gastrointestinal do animal. Os patógenos são eliminados do trato gastrointestinal com as
fezes, uma vez que se tornaram incapazes de se ligar.

O conteúdo total de imunoglobulinas de ovos de galinhas hiperimunizadas é idêntico ao

nível total de imunoglobulinas encontradas em ovos de mesa convencionais. No entanto,
as quantidades de imunoglobulinas para antígenos selecionados são diferentes nas duas
variedades de ovos. Além disso, tanto o ovo de mesa quanto o ovo “imune” contêm
fatores imunorreguladores, mas os ovos de galinhas hiperimunizadas podem conter
concentrações muitas vezes maiores de fatores individuais em comparação com os ovos
normais. Além das imunoglobulinas, os ovos contêm vários componentes bioativos,
incluindo fosfolipídios, colesterol, luteína, zeaxantina e proteínas, que possuem uma
variedade de propriedades pró e/ou antiinflamatórias. Duas categorias principais de
componentes imunes são encontradas no ovo “hiperimune”: (1) as imunoglobulinas com
especificidades neutralizantes contra os patógenos estimulantes e (2) os fatores
imunorreguladores que modulam as funções celulares. As imunoglobulinas fornecem
proteção local contra intoxicação gastrointestinal. Os mediadores imunomoduladores
atuam diretamente nas superfícies gastrointestinais e circulam sistemicamente, afetando
todas as vias imunológicas, físicas, metabólicas e neuroendócrinas do corpo. Isso pode
ter implicações importantes para a fisiopatologia de várias doenças crônicas e respostas
imunológicas a lesões agudas (Andersen 2015). Dada a essencialidade das respostas
437
pró-inflamatórias na defesa imunológica normal contra patógenos, pesquisas adicionais
sobre o papel da ingestão de ovos na imunidade são garantidas e podem levar a novos
usos comerciais de ovos e tecnologia IgY.

14. Anticorpos monoclonais em uso veterinário

A medicina biológica em humanos, uma intervenção pioneira nos últimos 30 anos, está
agora no horizonte para animais de companhia. Essa estratégia inclui o uso de anticorpos
monoclonais (mAbs) para direcionar seletivamente proteínas, como receptores celulares
ou moléculas solúveis envolvidas na patogênese da doença. Esse tratamento tem
potencial para terapias direcionadas de doenças crônicas, como osteoartrite, dermatite
atópica ou linfomas em cães e gatos.

Anticorpos monoclonais são anticorpos produzidos por células imunes idênticas, todas
clones de uma única célula-mãe. Os anticorpos monoclonais têm afinidade monovalente,
uma vez que se ligam ao mesmo epítopo. Em contraste, os anticorpos policlonais se
ligam a múltiplos epítopos e geralmente são produzidos por várias linhagens de células
plasmáticas diferentes (Fig. 7).

Fig. 7 Anticorpo policlonal em comparação com a ligação

do anticorpo monoclonal de antígenos

De quase qualquer substância, é possível produzir anticorpos monoclonais que se ligam

especificamente a essa substância; eles podem servir para detectar ou purificar essa
substância. Isso se tornou uma ferramenta importante em bioquímica, biologia molecular
e medicina. Os mAbs terapêuticos podem ser usados clinicamente para bloquear
proteínas relevantes para a doença (por exemplo, citocinas ou receptores nas células) e
câncer e ganharam uso significativo em humanos. Eles também podem ser usados para
atacar vírus ou bactérias e ajudar na sua destruição e eliminação. A medicina veterinária
só agora está incorporando essa ferramenta.

Apesar do sucesso dos mAbs na medicina humana, existem consideravelmente menos no

pipeline de medicina veterinária. Isso pode ser devido a orientações regulatórias incertas
na Europa e nos EUA. Esses documentos regulamentares são escritos a partir da
perspectiva de avaliação e desenvolvimento de risco com base na medicina humana. É
reconhecido que isso pode representar um desafio para os fabricantes de mAbs
438
veterinários para atingir a extensão dos testes de caracterização/controle de qualidade
normalmente necessários para mAbs humanos. (EMA 2017). Independentemente disso, a
indústria de medicamentos para animais de estimação está fazendo avanços para colocar
mAbs no mercado por meio de pesquisa básica.

Os primeiros mAbs terapêuticos humanos continham uma alta proporção de sequências

derivadas de camundongo (mAbs totalmente camundongos ou camundongos / humanos
quiméricos) que foram reconhecidas pelo sistema imunológico humano como estranhas.
Esta resposta imune desencadeou a produção de anti mAbs, levando a uma redução da
eficácia terapêutica. Subsequentemente, o projeto de mAbs humanizados e totalmente
humanos resultou em uma vasta redução em sua imunogenicidade, embora a maioria dos
mAbs terapêuticos possa ter alguma imunogenicidade remanescente que não é seguida
por manifestações clínicas adversas aparentes. Esses mesmos problemas são
verdadeiros para fazer mAbs veterinários e utilizar mAbs caninos para cães que ajudam
na eficácia. Foi descoberto que mAbs anti IgE caninizados reduzem a hipersensibilidade a
IgE em Beagles sensibilizados com ácaros (Gearing et al. 2013). O mAb do fator de
crescimento antinervoso caninizado (Webster 2014) reduziu significativamente os escores
de dor (Webster et al. 2014) em cães, e os mAbs que neutralizam a citocina pruritogênica
IL-31 em cães reduziram a resposta pruriginosa por 3 semanas após a injeção (Dunham
et al., 2014).

Um dos aspectos relacionados à comercialização de anticorpos terapêuticos envolve a

regulamentação do USDA. Em 2015, foram concedidos dois tratamentos de anticorpos
monoclonais aprovados pelo USDA para linfomas de células B e T em cães. Esses mAbs
lutam contra o linfoma ao direcionar a proteína CD20, que é comumente expressa no
linfoma de células B (Ogilvie et al. 2014; Bulman-Fleming et al. 2014). Embora esses
mAbs específicos não tenham tido sucesso comercial, eles fazem parte de uma nova
abordagem para o uso de anticorpos terapêuticos em medicina veterinária. Outras
empresas estão desenvolvendo mAbs veterinários para câncer, alergias e doenças
inflamatórias crônicas, como dermatite atópica, e para o controle da dor associada à
osteoartrite em cães e gatos (Webster et al. 2014). O primeiro mAb aprovado para uso
veterinário foi na União Europeia (BMJ 2017). Ele trata os sinais clínicos de dermatite
atópica em cães, incluindo coceira e inflamação, por até 1 mês. O tratamento com mAb
funciona imitando a atividade de anticorpos naturais para se ligar e neutralizar
seletivamente a interleucina-31 (IL-31), uma proteína-chave envolvida na comunicação
celular que desencadeia o prurido associado à dermatite atópica em cães. Por neutralizar

439
a IL-31, demonstrou-se que não interfere na resposta imune, o que significa que não
induz imunossupressão ou aumento não intencionais.

A maioria dos mAbs terapêuticos é administrada por injeção intravenosa, intramuscular ou

subcutânea. Isso ocorre porque os anticorpos não podem ser administrados por via oral
devido à degradação no estômago por ácidos ou outros fatores encontrados lá. Várias
metodologias de encapsulamento são necessárias para superar esse problema básico, e
esses métodos devem estar disponíveis. Uma vez injetados, a maioria dos mAbs
terapêuticos, como os anticorpos naturais, têm meia-vida longa (cerca de 21 dias). A
meia-vida absoluta para cada um é única, dependendo de sua concentração, distribuição
de seu alvo e, se o mAb for direcionado a um receptor de superfície celular, depuração e
eliminação do receptor alvo. Os mAbs terapêuticos têm duas vantagens de segurança
principais: (1) eles têm alvos muito específicos e (2) eles não têm atividade intracelular.
Como resultado, existem poucos efeitos colaterais e reações esperados, embora possam
ocorrer (Catapanoab e Papadopoulosc 2013). Os mAbs são eventualmente eliminados
por meio do catabolismo intracelular no lisossoma, onde são decompostos em peptídeos
ou aminoácidos que podem ser reutilizados para a síntese de novas proteínas ou
excretados pela urina.

15. Observações Finais e Orientações Futuras

Os anticorpos para uso veterinário têm grande potencial para o futuro. A terapia passiva
de anticorpos no tratamento de doenças infecciosas é um conceito que remonta a mais de
120 anos, na década de 1890, quando o uso de soro de animais imunizados proporcionou
as primeiras opções de tratamento eficazes contra infecções por Clostridium tetani e
Corynebacterium diphtheriae (Hey 2015). No entanto, devido à descoberta da penicilina
por Fleming em 1928 e à subsequente introdução de antibióticos muito mais baratos e
seguros na década de 1930, a soroterapia foi amplamente abandonada. Mas, em tempos
mais recentes, o uso amplo e geral de antibióticos na medicina humana e veterinária
resultou no desenvolvimento de cepas de bactérias multirresistentes com resposta
limitada ou nenhuma resposta aos tratamentos existentes e, portanto, uma necessidade
de opções alternativas de tratamento. Essa situação pode ser parcialmente atribuída ao
uso excessivo de antibióticos como promotores de crescimento para animais de produção
e outros usos indiscriminados.

A especificidade e flexibilidade, combinadas, de tratamentos baseados em anticorpos no

fornecimento de imunidade passiva os torna ferramentas muito valiosas para o

440
desenvolvimento de tratamentos específicos com anticorpos para agentes infecciosos.
Esses atributos já causaram uma revolução em novos tratamentos baseados em
anticorpos em oncologia e doenças inflamatórias, com muitos produtos aprovados para
uso humano. No entanto, apenas alguns poucos mAbs são aprovados para uso
veterinário. As terapias com mAbs são caras e isso tem sido uma barreira para seu
desenvolvimento na presença de antibióticos baratos. O uso de antibióticos como
promotores de crescimento chegou ao fim em 2017 nos EUA com o resto do mundo já
limitando seu uso para esta finalidade (FDA 2015). Isso abre a porta para novas
tecnologias e anticorpos de fontes monoclonais, ovos de galinha, colostro de vaca ou
outras fontes para estarem entre os principais competidores para limitar doenças de
maneira segura e potencialmente atuar como promotores de crescimento. Para tanto,
anticorpos e tratamentos derivados de anticorpos oferecem ferramentas e atributos muito
atraentes para neutralizar agentes infecciosos ou modular o sistema imunológico para
permitir que células efetoras escapem de condições imunossuprimidas e contribuam para
a eliminação de infecções. A capacidade de criar anticorpos para qualquer alvo e de
modular funções efetoras, meia-vida e tamanho das unidades de tratamento torna os
anticorpos ideais para tratamentos personalizados para agentes infecciosos específicos.
No entanto, serão necessárias mais pesquisas sobre o uso de anticorpos como
promotores de crescimento.

Uma área que os pesquisadores estão procurando fazer melhor uso dos tratamentos de
anticorpos para uso veterinário inclui mais uso de mAbs. Foi previsto que mudanças
mínimas de aminoácidos são necessárias para adaptar um anticorpo de uma espécie
para outra para evitar a rejeição imunológica. O uso de bibliotecas de informações
genéticas e algoritmos para garantir que as principais sequências de aminoácidos sejam
reconhecidas como “próprias” ou “nativas” pelo sistema imunológico da espécie alvo pode
reduzir a chance de reações imunológicas indesejáveis. Isso aumentará as vantagens
típicas dos mAbs para potência, segurança e meia-vida de eliminação prolongada.
Portanto, esses mAbs de segunda e terceira geração estarão na vanguarda da tecnologia
de anticorpos veterinários, combinado a tecnologia IgY.

Os alvos moleculares para mAbs terapêuticos, IgY e colostro IgG em animais devem (1)
estar envolvidos nos sinais clínicos ou no mecanismo da doença e (2) não ter vias
redundantes que compensem o bloqueio do alvo pretendido. A validade de bloquear uma
molécula ou eliminar um tipo de célula também deve ser avaliada em relação à
importância dessa proteína ou célula para as funções normais do corpo desejáveis. É
possível especular sobre o uso desses anticorpos em animais de companhia. Isso pode

441
incluir anemias/trombopenias hemolíticas imunomediadas, miastenia gravis e doenças
bolhosas autoimunes, como pênfigo, entre outras condições. Para o câncer, o uso de
terapia com mAb ou IgY direcionado a linfócitos B será valioso para linfomas de células B
em cães e gatos. Em doenças alérgicas, o uso de mAbs para inibir a produção de IgE por
meio de suas citocinas promotoras, como as interleucinas IL-4 / IL-13, seus receptores de
citocinas ou a própria IgE, pode ser benéfica em cães e gatos com dermatite atópica
mediada por IgE ou alimentos alergias. A sensação de coceira em si pode ser alterada,
pelo menos teoricamente, por anticorpos direcionados a citocinas promotoras de coceira,
como IL-31, fator de crescimento do nervo, linfopoietina estromal tímica ou neuro
mediadores envolvidos na transmissão da coceira. Na artrite, os mAbs terapêuticos que
inibem as citocinas pró-inflamatórias (TNF-alfa, IL1, etc.) ou seus receptores são
provavelmente benéficos no tratamento de cães e gatos com artrite. A utilidade dos mAbs
anti-NGF como analgésico deve ser confirmada. Em doenças autoimunes, o uso de mAbs
específicos para proteínas de superfície de linfócitos B poderia teoricamente levar à
redução da produção de autoanticorpos.

As vacinas veterinárias tiveram, e continuam a ter, um grande impacto não apenas na

saúde e produção animal, mas também na saúde humana, por meio do aumento do
abastecimento de alimentos seguros e da prevenção da transmissão de doenças
infecciosas de animais para humanos. A interação contínua entre animais e
pesquisadores humanos e profissionais de saúde será de grande importância para a
adaptação de novas tecnologias, fornecendo modelos animais de doenças e enfrentando
doenças infecciosas novas e emergentes. Uma área de pesquisa em que mais
informações são necessárias são os fatores que limitam a eficácia da vacinação IFOMA,
particularmente em bezerros <1 mês de idade. Este é um problema complexo. No
entanto, a pesquisa continua a evoluir na área de vacinação de bezerros recém-nascidos.

A imunidade passiva fornecida por anticorpos de ovo de galinha terá cada vez mais uso
em animais de produção. Não há dúvida de que os Abs de frango podem ser produzidos e
usados, com pequenas modificações, de maneira semelhante aos Abs de mamíferos.
Também pode ser dito que, dependendo das circunstâncias, o uso de Abs IgY
frequentemente tem uma vantagem significativa sobre o uso de Abs de mamíferos. No
entanto, de um ponto de vista realista, Abs IgY provavelmente não será capaz de
substituir completamente o uso de Abs IgG em sistemas de diagnóstico no futuro próximo
(Schade et al. 2005). As galinhas têm o potencial de ser usadas para completar o
espectro de animais que foram usados para a produção de Ab. No entanto, um pré-
requisito é tornar a tecnologia IgY mais popular e convencer a comunidade científica de

442
suas vantagens significativas. Uma possibilidade interessante para o futuro é a produção
de mAbs de frango. Estes combinariam as vantagens dos mAbs com as vantagens dos
Abs de frango. É de se esperar que os estudos sobre o uso terapêutico ou profilático de
IgY Abs sejam intensificados no futuro. Em particular, devido à crescente resistência dos
microrganismos aos antibióticos, a pesquisa em todos os aspectos relacionados ao
desenvolvimento de IgY específica contra microrganismos patogênicos terá que ser
intensificada.

Em conclusão, a próxima década verá o desenvolvimento contínuo de mAbs, IgYs e

anticorpos do colostro terapêuticos para animais de produção e de companhia, tanto no
tratamento quanto na prevenção. É provável que essas moléculas altamente específicas
se mostrem benéficas para direcionar exclusivamente os mecanismos da doença, sem os
efeitos colaterais associados à farmacoterapia de amplo espectro. Embora as vacinas
continuem a desempenhar um papel muito importante na manutenção da saúde dos
animais por meio da imunidade ativa, os anticorpos que fornecem imunidade passiva
serão uma parte crescente do arsenal disponível aos veterinários para promover o
crescimento de animais de produção de maneira segura e manter a saúde em animais de
companhia.

Referências
Alabama A&M and Auburn Universities (2018) Vaccinations for the swine herd. http://www.aces.edu/pubs/docs/A/ANR-
0902/ANR-0902.pdf
Andersen CJ (2015) Bioactive egg components and inflammation. Nutrients 7(9):7889–7913
BMJ (2017) First antibody therapy in veterinary medicine launched for dogs in the UK. Vet Rec 181:6–7
Brandtzaeg P (2010) The mucosal immune system and its integration with the mammary glands. J Pediatr 156:S8–
S15
Bulman-Fleming J, Rosenberg M, Hansen G et al (2014) Treatment of canine B-cell lymphoma with doxorubicin with or
without an anti-CD20 monoclonal antibody: an open-label pilot study. In: Proceedings, 34th Annual Veterinary Cancer
Society Conference, St. Louis, MO, USA
Buragohain M, Dhale GS, Ghalsasi GR et al (2012) Evaluation of hyperimmune hen egg yolk derived anti-human
rotavirus antibodies (AntiHRVIgY) against rotavirus infection. World J Vacc 2:73–84
Capolunghi F, Rosado MM, Sinibaldi M et al (2013) Why do we need IgM memory B cells? Immunol Lett 152(2):114–
120
Catapanoab AL, Papadopoulosc N (2013) The safety of therapeutic monoclonal antibodies: implications for
cardiovascular disease and targeting the PCSK9 pathway. Atherosclerosis 228:18–28
Chamorro MF, Walz PH, Haines DM et al (2014) Comparison of levels and duration of detection of antibodies to bovine
viral diarrhea virus 1, bovine viral diarrhea virus 2, bovine respiratory syncytial virus, bovine herpesvirus 1, and bovine
parainfluenza virus 3 in calves fed maternal colostrum or a colostrum-replacement product. Can J Vet Res 78(2):81–88
Chamorro MF, Woolums A, Walz PH (2016) Vaccination of calves against common respiratory viruses in the face of
maternally derived antibodies (IFOMA). Anim Health Res Rev 17(2):79–84
Chelack BJ, Morley PS, Haines DM (1993) Evaluation of methods for dehydration of bovine colostrum for total
replacement of normal colostrum in calves. Can Vet 34(7):407–412
Chen K, Cerutt A (2011) The Function and regulation of immunoglobulin D. Curr Opin Immunol 23(3):345–352
Chigerwe M, Tyler JW, Summers MK et al (2009) Evaluation of factors affecting serum IgG concentrations in bottle-fed
calves. J Am Vet Med Assoc 234:785–789
Clarkson MJ, Faull WB, Kerry JB (1985) Vaccination of cows with clostridial antigens and passive transfer of clostridial
antibodies from bovine colostrum to lambs. Vet Rec 116(17):467–469
Combs DK, Bringe AN, Crabb JH et al (1993) Protection of neonatal calves against K99-E. coli and corona virus using
a colostrumderived immunoglobulin preparation. Agri-Practice 14(5):13–16

443
 Cook ME, Butz D, Li GM et al (2003) Conjugated linoleic acid enhances immune responses but protects against the
collateral damage of immune events. In: Sébédio JL, Christie WW, Adlof R (eds) Advances in conjugated linoleic acid
research, vol 2. AOCS Press, Champaign, IL, pp 283–291
Cook S, Bach S, Stevenson S et al (2005) Orally administered anti-Escherichia coli O157: H7 chicken egg yolk
antibodies reduce fecal shedding of the pathogen by ruminants. Can J Anim Sci 85:291–299
Cui HZ, Zhang JL, Zhang H et al (2012) Study and application of the hyperimmunized yolk antibodies against TGEV
and PEDV in piglets. China Anim Husb Vet Med 39:173–175
Devillers N, Le Dividich J, Prunier A (2011) Influence of colostrum intake on piglet survival and immunity. Animal
5(10):1605–1612
Diraviyam T, Zhao B, Wang Y et al (2014) Effect of chicken egg yolk antibodies (IgY) against diarrhea in domesticated
animals: a systematic review and meta-analysis. PLoS One 9(5):e9771
DuBourdieu D (2014) Stabilized liquid egg material for extended shelf life. United States Patent 8,828,422
Dunham S, Teel J, Bammert G et al (2014) Evaluation of anti-IL-31 monoclonal antibodies in a model of IL-31-induced
pruritus in Beagle dogs. Vet Dermatol 25:403
El-Ghany WA (2011) Comparison between immunoglobulins IgY and the vaccine for prevention of infectious Bursal
disease in chickens. Global Vet 6(1):16–24
EMA (2017) EMA/CVMP/ADVENT/307606/2017 Committee for Medicinal Products for Veterinary Use (CVMP).
Questions and answers on monoclonal antibodies for veterinary use European Medicines Agency. Accessed 7 Dec 2017
Erb KJ (2007) Allergic disorders and IgE-mediated immune responses: where do we stand? Eur J Immunol
37(5):1170–1173
Fagarasan S, Honjo T (2003) Intestinal IgA synthesis: regulation of front-line body defenses. Nature Rev Immunol
3(1):63–72
Farooq A, Rabbani M, Muhammad K et al (2012) Passive immunization in infectious bursal disease virus infected birds
using chemically purified immune yolk immunoglobulins (IgY). Afr J Microbiol Res 6:2993–2998
Fayer R, Andrews C, Ungar BL et al (1989) Efficacy of hyperimmune bovine colostrum for prophylaxis of
cryptosporidiosis in neonatal calves. J Parasitol 75(3):393–397
Fenger CK, Tobin T, Casey PJ et al (2016) Enhanced bovine colostrum supplementation shortens the duration of
respiratory disease in thoroughbred yearlings. J Equine Vet Sci 42:77–81
Food and Drug Administration (2015) Food and drug administration center for veterinary medicine veterinary feed
directive guidance for industry #120
Ford RB, Larson LJ, McClure KD et al (2017) American animal hospital association canine vaccination guidelines.
Trends Magaz 27–35.
Gearing DP, Virtue ER, Gearing RP et al (2013) A fully caninised anti-NGF monoclonal antibody for pain relief in dogs.
BMC Vet Res 9:226
Germine SS, Ebied MH, Ibrahim FK et al (2011) Field evaluation of egg yolk antibodies in prevention and treatment of
enteric colibacillosis in calves. Benha Vet Med J (special issue I):108–114
Gitlin AG, Nussenzweig MC (2015) Immunology: fifty years of B lymphocytes. Nature 517:139–114
Godden SM, Smolenski DJ, Donahue M et al (2012) Heat-treated colostrum and reduced morbidity in preweaned dairy
calves: results of a randomized trial and examination of mechanisms of effectiveness. J Dairy Sci 95:4029–4040
Gould HJ, Sutton BJ, Beavil AJ et al (2003) The biology of IgE and the basis of allergic disease. Ann Rev Immunol
21:579–628
Graczyk TK, Cranfield MR, Bostwick EF (1999) Hyperimmune bovine colostrum treatment of moribund Leopard
geckos (Eublepharis macularius) infected with Cryptosporidium spp. Vet Res 30 (4):377–382
Gulliksen SM, Lie KI, Solverod L et al (2008) Risk factors associated with colostrum quality in Norwegian dairy cows. J
Dairy Sci 91:704–712
Hamal KR, Burgess SC, Pevzner IY et al (2006) Maternal antibody transfer from dams to their egg yolks, egg whites,
and chicks in meat lines of chickens. Poult Sci 85(8):1364–1372
Hey A (2015) History and practice: antibodies in infectious diseases. Microbiol Spectr 3(2):AID-0026-2014
Holmgren J, Czerkinsky C (2005) Mucosal immunity and vaccines. Nat Med 11(4 Suppl):S45–S53
Hurley WL, Theil PK (2011) Perspectives on immunoglobulins in colostrum and milk. Nutrients 3(4):442–474
Ishikawa H, Kanamori Y, Hamada H et al (2005) Development and function of organized gut-associated lymphoid
tissues. In: Mestecky J, Lamm M, Strober W, Bienenstock J, McGhee JR, Mayer L (eds) Mucosal immunology, 3rd edn.
Academic, Burlington, MA
Li C, Liu Y, Jiang Y, Xu N, Lei J (2017) Immunomodulatory constituents of human breast milk and immunity from
bronchiolitis. Ital J Pediatr 43:8
Li-Chan E, Kummer A, Losso JN et al (1994) Survey of immunoglobulin G content and antibody specificity in cow’s
milk from British Columbia. Food Agric Immunol 6:443–451
Marchalonis JJ, Jensen I, Schluter SF (2002) Structural, antigenic and evolutionary analyses of immunoglobulins and
T cell receptors. J Mol Recogn 15(5):260–271
Marcotte H, Hammarström L (2015) Chapter 71 - Passive immunization: toward magic bullets. In: Mucosal
immunology, vol 2, 4th edn. Academic, Amsterdam, pp 1403–1434
Mayer B, Doleschall M, Bender B, Bartyik J et al (2005) Expression of the neonatal Fc receptor (FcRn) in the bovine
mammary gland. J Dairy Res 72:107–112
444
 Meeusen NT, Walker J, Peters A et al (2007) Current status of veterinary vaccines. Clin Microbiol Rev 20(3):489–510
Meganck V, Hoflack G, Opsomer G (2014) Advances in prevention and therapy of neonatal dairy calf diarrhoea: a
systematical review with emphasis on colostrum management and fluid therapy. Acta Vet Scand 56:75
Missouri (2018) Programs for the cow/calf operation. http://extension.missouri.edu/ozark/documents/Vaccination
%20Protocol%20Script.pdfVaccination
Morrill KM, Conrad E, Lago A et al (2011) Nation-wide evaluation of quality and composition of colostrum fed to dairy
calves in the United States. J Dairy Sci 94(E-Suppl) 1):277 10
Mueller RS, Janda J, Jensen-Jarolim E et al (2016) Allergens in veterinary medicine. Allergy 71(1):27–35
Naciri M, Mancassola R, Répérant J et al (1994) Treatment of experimental ovine cryptosporidiosis with ovine or
bovine hyperimmune colostrum. Vet Parasitol 53:173–190
Nagler-Anderson C (2001) Man the barrier! Strategic defences in the intestinal mucosa. Nat Rev Immunol 1:59–67
Niewiesk S (2014) Maternal antibodies: clinical significance, mechanism of interference with immune responses, and
possible vaccination strategies. Front Immunol 5:446
Ogilvie G, Proulx D, Van Horn L et al (2014) Treatment of canine B-cell lymphoma with chemotherapy and a canine
anti-CD20 monoclonal antibody: a prospective double-blind, randomized, placebocontrolled study. In: Proceedings, 34th
Annual Veterinary Cancer Society Conference, St. Louis, MO
Pakkanen R, Aalto J (1997) Growth factors and antimicrobial factors of bovine colostrum. Int Dairy J 7(5):285–297
Pennsylvania State University (2017). Colostrum and replacer. https://extension.psu.edu/colostrum-supplements-and-
replacer
Pfister K, Turner K, Currie A et al (1983) IgE production in rat fascioliasis. Parasit Immunol 5(6):587–593
Pommer JL (2010) Sheep antiserum as an antibody supplement in newborn lambs. Sheep Goat Res J 25:45–48
Preud’homme JL, Petit I, Barra A et al (2000) Structural and functional properties of membrane and secreted IgD. Mol
Immunol 37:871–887
Quigley JD, Drewry JJ (1998) Nutrient and immunity transfer from cow to calf pre- and post-calving. J Dairy Sci
98(10):2779–2790
Schade R, Sarmiento R, Calzado EJ et al (2005) Chicken egg yolk antibodies (IgY-technology): a review of progress in
production and use in research and human and veterinary medicine. Altern Lab Anim 33(2):129–154
Selim SA, Cullor JS, Oelsner IE (1995) Passive immunotherapy in neonatal calves - I. Safety and potency of a J5
Escherichia coli hyperimmune plasma in neonatal calves. Vaccine 13(15):1449–1453
Shibata I, Ono M, Mori M (2001) Passive protection against porcine epidemic diarrhea (PED) virus in piglets by
colostrum from immunized cows. J Vet Med Sci 63(6):655–658
Snoeck V, Peters IR, Cox E (2006) The IgA system: a comparison ofstructure and function in different species. Vet Res
37(3):455–467
Stewart-Brown B (2018) Vaccination programs in poultry. http://www.merckvetmanual.com/poultry/nutrition-and-
management-poultry/vaccination-programs-in-poultry
Stilwell G, Carvalho RC (2011) Clinical outcome of calves with failure of passive transfer as diagnosed by a
commercially available IgG quick test kit. Can Vet J 52(5):524–526
Sty AC, Sangild PT, Skovgaard K et al (2006) Spray dried, pasteurized bovine colostrum protects against gut
dysfunction and inflammation in preterm pigs. J Pediatr Gastroenterol Nutr 63(2):280–287
Sugita-Konishi Y, Shibata K, Yun SS, Hara-Kudo Y et al (1996) Immune functions of immunoglobulin Y isolated from
egg yolk of hens immunized with various infectious bacteria. Biosci Biotechnol Biochem 60(5):886
Thomas HS (2017, January) Precalving vaccination programs for cows. 46 Herefor World pp 46–47
Trotz-Williams LA, Leslie KE, Peregrine AS (2008) Passive immunity in Ontario dairy calves and investigation of its
association with calf management practices. J Dairy Sci 91:3840–3849
Vega C, Bok M, Chacana P, Saif L et al (2011) Egg yolk IgY: protection against rotavirus induced diarrhea and
modulatory effect on the systemic and mucosal antibody responses in newborn calves. Vet Immunol Immunopathol
142:156–169
Vega CG, Bok M, Vlasova AN et al (2012) IgY antibodies protect against human rotavirus induced diarrhea in the
neonatal gnotobiotic piglet disease model. PloS One 7:e42788
Vighi G, Marcucci F, Sensi L et al (2008) Allergy and the gastrointestinal system. Clin Exp Immunol 153(Suppl 1):3–6
Watanabe N, Bruschi F, Korenaga M (2005) IgE: a question of protective immunity in Trichinella spiralis infection.
Trends Parasitol 21 (4):175–178
Webster RP, Anderson GI, Gearing DP (2014) Canine brief pain inventory scores for dogs with osteoarthritis before
and after administration of a monoclonal antibody against nerve growth factor. Am J Vet Res 75:532–535
Woolley JA, Landon J (1995) Comparison of antibody production to human interleukin-6 (IL-6) by sheep and chickens.
J Immunol Methods 178:253–265
Woolums AR (2007) Vaccinating calves: new information on the effects of maternal Iimmunity. The AABP Proc 40:10–
17
Yolken RH, Losonsky GA, Vonderfecht S et al (1985) Antibody to human rotavirus in cow’s milk. N Engl J Med
312(10):605–610

445
 Parte II

Prebióticos, probióticos, simbióticos e

antimicrobianos

446
 Prebióticos e probióticos em alimentação e saúde animal
Arturo Anadón, Irma Ares, Maria Rosa Martínez-Larrañaga e Maria Aŕanzazu
Martínez

Resumo
A proibição de promotores de crescimento antimicrobiano (AGP) tem sido um desafio para
a nutrição animal, aumentando a necessidade de encontrar métodos alternativos para
controlar e prevenir a colonização de bactérias patogênicas. A eliminação de
antibacterianos na nutrição animal teve consequências adversas na produção, saúde e
bem-estar dos animais. Muitas pesquisas têm se concentrado no desenvolvimento de
alternativas de antibióticos para manter ou melhorar a saúde e o desempenho dos
animais. A modulação da microbiota intestinal com aditivos zootécnicos para alimentação,
como prebióticos e probióticos, para proteção do hospedeiro para apoiar a pecuária,
incluindo pecuária, avicultura e piscicultura, é a chave para maximizar a produtividade e
manter a saúde e o bem-estar animal. Este capítulo descreve as classes de alternativas
de prebióticos, probióticos e simbióticos disponíveis para aumentar a produtividade e
ajudar no desempenho de vários animais produtores de alimentos. Para os animais de
fazenda, combinações ótimas de várias alternativas juntamente com boas práticas de
manejo e manejo, melhores condições de alojamento e melhoria das medidas de
biossegurança são essenciais.

Palavras-chave: Prebióticos · Probióticos · Simbióticos · Alimentação · Saúde animal ·

Bem-estar animal

A. Anadón · I. Ares · M. R. Martínez-Larrañaga · M. A. Martínez. Universidad Complutense de Madrid,

Madrid, Spain. e-mail: anadon@vet.ucm.es

1. Introdução
O conceito de melhorar a saúde e o bem-estar animal por meio da melhoria da saúde
intestinal é conhecido na produção de alimentos para animais há décadas; no entanto,
somente agora as ferramentas disponíveis para identificar micróbios no intestino estão
associadas a um melhor desempenho (Ballou et al. 2016). Preservar a integridade da
barreira intestinal também é fundamental para a saúde e o bem-estar animal. Além de
garantir a absorção de nutrientes, a barreira intestinal é importante na proteção do
sistema imunológico animal (ou seja, produção de muco, prevenção contra bactérias e
toxinas que entram na corrente sanguínea). O objetivo mais importante da pecuária agora
447
é fornecer alimentos seguros para consumo humano, levando em consideração o bem-
estar animal e o respeito ao meio ambiente (Gaggìa et al. 2010).

Abordagens prebióticas e probióticas requerem o uso de suplementos alimentares

microbianos que beneficiam o hospedeiro, melhorando o equilíbrio microbiano intestinal
(Gibson e Roberfroid 1995). A administração dietética de bactérias formadoras de esporos
pode restaurar o equilíbrio natural da microflora intestinal do animal e retornar o intestino
ao seu estado nutricional, crescimento e saúde normais (Fuller 1989). Os pesquisadores
usaram o termo simbiótico para descrever o uso de misturas prebióticas e probióticas que
podem beneficiar os sistemas gastrointestinais (GI) de animais ou humanos (Kolida e
Gibson 2011).

2. Microbiota e Microbioma Gastrointestinal

A microbiota é considerada um “superorganismo” e é parte integrante do trato
gastrointestinal (GIT). Esse conceito se refere à estreita relação entre os micróbios que
residem no GIT e o animal hospedeiro desenvolvido durante o longo curso de evolução
(Ley et al. 2008). A microbiota GI é uma população complexa de microrganismos
importantes para a saúde e a doença. Numerosas funções que beneficiam o hospedeiro
são atribuídas à microbiota intestinal de mamíferos, como digestão e fermentação de
carboidratos, produção de vitaminas, manutenção da função normal das vilosidades
intestinais, regulação das respostas imunes e proteção contra bactérias patogênicas. As
funções da microbiota incluem “nutrição” [fermentação de substratos não digeríveis (ou
seja, carboidratos) para gerar ácidos graxos de cadeia curta (SCFA)], absorção de íons,
produção de aminoácidos e vitaminas K, B9, B12, “proteção” (o efeito de barreira que
impede a invasão por micróbios não nativos) e os efeitos tróficos no epitélio intestinal e no
sistema imunológico, ou seja, o desenvolvimento e a homeostase da imunidade local e
sistêmica (Guarner 2007). Além disso, as bactérias intestinais são importantes para a
saúde GI. Organismos comensais residentes (microflora normal, microbiota indígena)
promovem a saúde intestinal por meio da indução da produção de muco e renovação de
enterócitos (Kamada et al. 2013) e também são importantes na imunidade do hospedeiro,
absorção de nutrientes e metabolismo. Os organismos comensais residentes da flora
intestinal protegem tanto contra organismos invasores (por exemplo, cepas de
Escherichia coli enterotoxigênica) dentro do GIT e são responsáveis por (1) a síntese de
vitaminas; (2) a bioconversão de compostos tóxicos em resíduos não tóxicos; (3) a
estimulação do sistema imunológico; (4) a manutenção do peristaltismo intestinal e
integridade da mucosa intestinal e (5) o fornecimento de uma barreira contra a
448
colonização por patógenos. Esses efeitos, conforme produzidos por organismos
comensais residentes, podem ser mediados por competição direta por nutrientes,
estimulação da produção de peptídeo antimicrobiano pelo enterócito e imunomodulação
do hospedeiro (Sancak et al. 2004).

As bactérias também promovem a autotolerância induzindo hiporresponsividade aos

organismos comensais residentes (Seepersadsingh et al. 2004). Essas funções
importantes da saúde podem ser significativamente prejudicadas pela disbiose bacteriana
(ou seja, composição bacteriana intestinal alterada), que ocorre quando as populações de
bactérias dentro do GIT tornam-se desequilibradas. A disbiose é provavelmente causada
por um ambiente alterado dentro do GIT, como mudanças no pH, motilidade, nível de
oxigênio e presença de sangue, e tem sido associada à patogênese de muitas doenças
inflamatórias e infecções.

A microbiota GI dos animais domésticos é uma comunidade bacteriana densa, grande e

complexa, composta por bactérias, protozoários, fungos, arquéias e vírus. A microbiota
coloniza o intestino com atividade metabólica que afeta a fisiologia e a patologia do
sistema imunológico da mucosa do hospedeiro. A microbiota localizada no GIT de
mamíferos pode ser considerada um “órgão metabolicamente ativo”, cuja composição e
funções foram caracterizadas para melhor compreensão da principal contribuição da
microbiota intestinal para a nutrição animal. A microbiota GI é complexa. Espécies
bacterianas dos gêneros Lactobacillus e Bifidobacterium mostraram fornecer efeitos
benéficos ao hospedeiro de sua função metabólica e produtos finais. A regulação da
homeostase pela microbiota aumenta seus componentes benéficos, então pode ser
possível tratar vários distúrbios intestinais e manter o bem-estar do hospedeiro (O’Hara e
Shanahan 2007). O transplante microbiano fecal, portanto, pode ser uma nova terapia
para disbiose em medicina veterinária (Redfern et al. 2017).

A microbiota GI promove o suprimento, a digestão e a fermentação de polímeros vegetais

em animais herbívoros e a absorção de nutrientes, melhora o desempenho do
crescimento e evita a colonização de patógenos e mantém a imunidade normal da
mucosa. A importância da microbiota GI e do cross-talk do micróbio hospedeiro é
destacada pelos resultados de estudos com animais livres de germes.

Em galinhas, a dieta e o ambiente afetam o estado microbiano GIT. A microbiota das

galinhas varia de acordo com fatores como dieta, localização e idade. A riqueza e
diversidade microbiana aumentam com a idade, com mudanças dramáticas na
comunidade microbiana à medida que as galinhas envelhecem. A maioria dos estudos
examinou o efeito do tempo na microbiota do ceco de frango, por ser o órgão com maior
449
diversidade e abundância em todo o trato intestinal. No entanto, a diversidade microbiana
da microbiota das galinhas é relativamente baixa em comparação com a microbiota
intestinal de outros animais, o que é atribuído ao rápido trânsito dos alimentos pelo
sistema digestivo, com curtos tempos de retenção. Por exemplo, um tempo de retenção
típico para um frango de corte de 29 dias é entre 4 e 5 h, em comparação com humanos,
onde a média é de 20 h (Clavijo e Vives Flórez 2018).

A cama suja e outros parâmetros de manejo dos animais afetam a composição

microbiana GIT tanto diretamente ao fornecer uma fonte contínua de bactérias quanto
indiretamente ao influenciar a condição física e a defesa das aves. Animais criados em
condições que evitam a colonização bacteriana apresentam desenvolvimento e função do
sistema imunológico intestinal prejudicados (O’Hara e Shanahan 2007). Esse aspecto
demonstra que existe uma relação simbiótica entre hospedeiro e microbiota. A microbiota
intestinal é um meio altamente complexo de mais de 600 espécies, que podem estar
presentes em níveis de até 10 11 unidades formadoras de colônias de bactérias por grama
de conteúdo intestinal. Os dados mostram que as densidades bacterianas no íleo e ceco
de frangos de corte 1 dia após a eclosão já atingem 10 8 e 1010 por grama de digesta,
respectivamente. O número de micróbios chega a 1.011 por grama de digesta cecal e 109
por grama de digesta ileal durante os primeiros 3 dias após a eclosão e permanecem
relativamente estáveis pelos 30 dias seguintes (Apajalahti et al. 2004). Mais da metade
das 640 espécies encontradas em galinhas representam gêneros bacterianos até então
desconhecidos, compondo uma microbiota saudável, crucial para a saúde do hospedeiro.

O ambiente intestinal consiste na microbiota, no sistema imunológico da mucosa e na

estrutura e função intestinal, que afetam a saúde do hospedeiro e a produtividade animal.
Esses aspectos do ambiente intestinal são todos influenciados pela dieta; assim, uma
melhor compreensão das relações entre nutrição, intestino e saúde do hospedeiro é
importante para otimizar a produção animal. Como o GIT, particularmente o intestino
grosso (ou seja, cólon e ceco), é o local mais importante da atividade fermentativa, a
importância da atividade da microflora (ou seja, fermentação) deve ser esclarecida em
relação à saúde do hospedeiro. Embora o conteúdo intestinal passe pelo intestino
delgado humano em apenas 2–4 h, o tempo de trânsito do intestino grosso é
normalmente de 20–80 h, portanto, há tempo mais do que suficiente para o
desenvolvimento e atividade da microflora (Williams et al. 2001).

Conforme indicado anteriormente, o trato intestinal, além da absorção e digestão, também

é o maior órgão de defesa do hospedeiro do corpo. Este órgão representa a maior área
de superfície em contato com os antígenos do ambiente externo, e a densa parede a
450
parede da microbiota intestinal que recobre a mucosa normalmente é responsável pela
maior proporção dos antígenos apresentados às células imunes residentes e estimulantes
os receptores de reconhecimento de padrão, como o receptor toll-like (TLRs) e os
receptores NOD-like (NLRs). Parte da função de barreira da mucosa intestinal é formada
por um sistema imunológico comum da mucosa, que fornece comunicação entre as
diferentes superfícies da mucosa do corpo (Sekirov et al. 2010). A microbiota intestinal
está intimamente envolvida em vários aspectos da fisiologia normal do hospedeiro, desde
o estado nutricional até o comportamento e a resposta ao estresse, agindo como um
órgão microbiano. A microflora indígena é específica do hospedeiro e do local, muito
complexa em composição e geralmente possui propriedades que são benéficas para o
hospedeiro. Portanto, uma grande preocupação do uso de antibióticos é a alteração a
longo prazo da microbiota intestinal saudável normal e a transferência horizontal de genes
de resistência, o que pode resultar em um reservatório de organismos com um pool de
genes multirresistentes (Da Costa et al. 2013). Muitos fatores ambientais podem afetar a
composição e função da microbiota intestinal em animais de criação. Práticas de
alimentação, dieta animal, manejo da fazenda e restrições de produtividade também
influenciam o equilíbrio microbiano no GIT e, consequentemente, afetam a eficiência
alimentar, a saúde digestiva e o bem-estar animal (Chaucheyras-Durand e Durand 2010).

Nesse sentido, o desmame dos leitões representa um período crítico durante o qual a
microbiota intestinal ainda imatura enfrenta uma mudança radical na dieta, levando ao
aumento da suscetibilidade dos animais jovens à colonização do patógeno. Múltiplos
estressores encontrados no desmame de leitões induzem anorexia transitória, inflamação
intestinal e microbiota intestinal desequilibrada (Gresse et al. 2017). As circunstâncias da
transição do desmame dos leitões frequentemente causam infecções gastrointestinais
(por exemplo, diarreia colibacilose), e o uso potencial de suplementos alimentares para
alcançar uma melhor saúde animal, bem-estar e produtividade através da manipulação do
ecossistema microbiano GIT ganhou atenção considerável.

Dados do ambiente ruminal sugerem que é o lar de uma população diversa de micróbios
que abrange todos os três domínios da vida: Bactéria, Archaea e Eukarya. Dos três
domínios da vida que habitam o rúmen, as bactérias são predominantes (10 10–1011 células
por grama de conteúdo ruminal). Os vírus são as entidades biológicas mais abundantes,
participando do equilíbrio de micróbios dentro de um ecossistema e facilitando a
transferência horizontal de genes.

A maioria dos ingredientes da ração de origem vegetal contém quantidades consideráveis

de fibra redefinida para serem carboidratos não digeríveis solúveis e insolúveis com três
451
ou mais unidades monoméricas, ligninas que são intrínsecas e intactas nas plantas e
certos carboidratos não digeríveis isolados e sintéticos com três ou mais unidades
monoméricas (Gibson et al. 2017). As fibras insolúveis têm sido tradicionalmente
consideradas como um diluente nutriente inerte com pouco ou nenhum valor nutritivo em
dietas de animais monogástricos; entretanto, eles têm outras funções, como (1) melhorar
a saúde intestinal, (2) melhorar a digestão de nutrientes e (3) modular o comportamento
animal. É sugerido que os animais monogástricos precisam de fibra porque seu
desenvolvimento intestinal requer estimulação física por partículas sólidas e duras de
alimento (Hetland et al. 2004). Portanto, Choct et al. (1996) demonstraram que a adição
de polissacarídeos não amiláceos solúveis (NSP) a uma dieta de frango de corte
aumentou drasticamente a produção de ácidos graxos voláteis (AGV) no íleo, o que foi
facilmente revertido quando os NSP foram despolimerizados com uma enzima. Os níveis
de AGV no íleo foram negativamente correlacionados com a energia metabolizável
aparente e a digestão do amido. A microbiota também degrada polissacarídeos que não
são digeríveis pelo hospedeiro, aumentando assim o valor nutritivo da dieta (Choct 2009).
As funções da microbiota na exclusão de patógenos e na síntese de vitaminas, minerais e
outros compostos biologicamente ativos estão bem documentadas (Patterson e
Burkholder 2003).

A ligação entre nutrição e microbiota está bem estabelecida. A dieta é considerada um dos
principais fatores na formação da microbiota intestinal ao longo da vida. A função intestinal
e a microflora intestinal de frangos de corte são influenciadas por grãos de cereais e
suplementação de enzimas microbianas (Shakouri et al. 2009), conteúdo de gordura na
dieta, forma de ração e enzimas degradantes de NSP (Torok et al. 2008). O GIT de
galinhas abriga microbiomas importantes em (1) crescimento e desenvolvimento,
incluindo a produção de SCFA rico em energia; (2) promoção de vilosidades GIT e
morfologia de criptas; (3) utilização de nutrientes, incluindo redução da viscosidade
luminal e desconstrução dos polissacarídeos da dieta; (4) absorção de nutrientes; e (5)
bem-estar de seus hospedeiros galinhas, incluindo desintoxicação. Durante a
desconstrução dos polissacarídeos da dieta, as bactérias GIT produzem SCFA. A
composição e as proporções desses SCFA variam dependendo da composição
microbiana, que é até certo grau adaptável e ajustada pela composição e estrutura do
componente de fibra da dieta do frango. O acetato é o principal SCFA produzido na
maioria dos ambientes GIT, incluindo o frango, seguido pelo propionato e butirato. O GIT
de frango é habitado por várias bactérias, archaea metanogênica, fungos e vírus (Yeoman
et al. 2012). O microbioma GIT de frango produz enzimas que permitem a desconstrução
dos polissacarídeos da dieta (Beckmann et al. 2006). Essas enzimas são essenciais para
452
a nutrição do hospedeiro porque as galinhas, assim como a maioria dos animais, não
possuem os genes para glicosídeo hidrolase, polissacarídeo liase e enzimas de esterase
de carboidrato, que são necessárias para facilitar esse processo (Yeoman et al. 2012).

O “microbioma” intestinal (ou seja, as comunidades microbianas intestinais naturais do

hospedeiro, que se referem aos elementos genéticos ou ao genoma da microbiota
intestinal) contém mais de 100 vezes o número de genes em nosso genoma humano e
nos confere características funcionais que não evoluímos (Turnbaugh et al. 2007; Gibson
et al. 2017). O microbioma GI é um consórcio diversificado de bactérias, archaea, fungos,
protozoários e vírus que habitam o intestino de todos os mamíferos. Os microbiomas
existem em sistemas maiores que são orgânicos por natureza, incluindo humanos,
animais, plantas e invertebrados, ou inorgânicos, como solo, água, produtos
manufaturados e o ambiente construído. Microbiomas disfuncionais estão associados à
redução na produtividade animal, como aumentos na resistência antimicrobiana em
rebanhos e aves. Estudos em humanos e outros mamíferos implicaram o microbioma em
uma variedade de processos fisiológicos que são vitais para a saúde do hospedeiro,
incluindo homeostase energética, metabolismo, saúde epitelial intestinal, atividade
imunológica e desenvolvimento neurocomportamental. O genoma microbiano confere
capacidades metabólicas que excedem aquelas do organismo hospedeiro sozinho,
tornando o microbioma intestinal um participante ativo na fisiologia do hospedeiro (Barko
et al. 2018).

Apoiar um microbioma intestinal ideal também pode ser benéfico na ciência animal como
um meio de gerenciar situações estressantes e aumentar a produtividade dos animais de
fazenda. O microbioma e sua genética são uma influência subestimada na saúde e no
crescimento animal. Embora ainda haja uma escassez de dados sobre o microbioma
intestinal em pequenos animais, estudos recentes ajudaram a caracterizar seu papel na
saúde do animal hospedeiro e estados de doença associados (Barko et al. 2018). A
caracterização do microbioma progrediu rapidamente nos últimos anos, à medida que as
tecnologias de perfis baseados em DNA verificaram e substituíram as técnicas tradicionais
baseadas em cultura. Usando essas técnicas mais recentes, descobriu-se que 90% das
bactérias no GIT de frango representam espécies até então desconhecidas (Apajalahti et
al. 2004).

Tal como acontece com os humanos, os microbiomas de plantas e animais são

necessários para o crescimento e desenvolvimento vegetal e animal. As plantas são
constantemente confrontadas com estresses abióticos e bióticos que reduzem seriamente
sua produtividade. Evidências recentes mostram que uma combinação de estresse
453
abiótico e biótico pode ter um efeito positivo no desempenho da planta, reduzindo a
suscetibilidade ao estresse biótico. Essa interação entre os dois tipos de estresse sugere
diafonia entre suas respectivas vias de sinalização. Esta conversa cruzada sinérgica ou
antagônica pode incluir o envolvimento de fitormônios, fatores de transcrição, cascatas de
quinase e espécies reativas de oxigênio (ROS). Em certos casos, essa conversa cruzada
pode levar à tolerância cruzada e aumento da resistência da planta contra patógenos
(Rejeb et al. 2014).

Microbiomas animais são investigados e manipulados junto com práticas agrícolas

modernas para aumentar a produtividade. O microbioma ruminal supostamente contém
até 28.000 genótipos virais diferentes obtidos de cada ambiente, com as sequências de
prófagos superando os fagos líticos potenciais em aproximadamente 2: 1: os tipos de
bacteriófagos e prófagos mais abundantes estão associados a membros do filo bacteriano
dominante do rúmen Firmicutes e Proteobacteria (Berg et al. 2012). Os vírus
demonstraram ser um fator impulsionador na evolução dos microbiomas em vários
ambientes, com papéis importantes no controle do número de micróbios em um
ecossistema, selecionando naturalmente micróbios resistentes a fagos e facilitando a
transferência horizontal de genes (Rohwer and Thurber 2009; Parsley et al. 2010).

O microbioma de uma porca madura pode conter entre 10 e 100 trilhões de organismos.
Cada órgão contém seu próprio microbioma específico (pulmões, pele, trato intestinal,
etc.) (van Haandel 2016). Existem diferentes espécies de microbiomas e, dentro das
espécies, existem variações genéticas. O microbioma do trato intestinal do porco é
dominado por dois grupos principais, Firmicutes e Bacteroides, com a composição
variando moderadamente do início ao fim do GIT (Jensen 1998; Niu et al. 2015). O
microbioma intestinal em porcos jovens é dramaticamente moldado pela composição dos
glicanos da dieta, refletida pelas diferentes capacidades funcionais do microbioma antes e
depois do desmame. Antes do desmame, a flora microbiana parece estar orientada para o
leite. Durante a fase de desmame, o porco e seu microbioma são submetidos a um
período drástico de transição, mas durante a fase de amamentação a população
microbiana é bastante estável. Após o desmame (dia 28 e além), as populações de
Bacteroides e Enterobacteriaceae diminuem e as populações de Lactobacillaceae,
Ruminococcaceae, Veillonellaceae e Prevotellaceae aumentam (Frese et al. 2015). O
microbioma adapta sua composição bacteriana às mudanças no ambiente de vida ou
substratos na dieta (Lallès et al. 2007). O microbioma está em simbiose contínua com seu
hospedeiro, contendo patógenos e outras bactérias que estão perfeitamente em equilíbrio
em um animal saudável.

454
Pouco se sabe sobre a aquisição e o desenvolvimento do microbioma intestinal em cães e
gatos, limitado a um punhado de estudos em gatinhos e cachorros. Até o momento,
apenas um estudo longitudinal de gatinhos em desenvolvimento foi publicado (Deusch et
al. 2015). Como em humanos, o microbioma fecal inicial é caracterizado por um alto grau
de variação interindividual, e que a diversidade intraindividual e a estabilidade
composicional aumentam com a idade. Além disso, semelhante aos humanos, a
abundância relativa de Lactobacillus e Bifidobacterium diminuiu com a idade, enquanto
Bacteroides e genes bacterianos associados à capacidade de metabolizar fontes de
carbono complexas aumentaram com a idade. No entanto, não houve grande mudança
nos repertórios de genes bacterianos entre as semanas 30 e 42 nesses gatinhos (Barko
et al. 2018).

Em relação ao microbioma avícola e à segurança alimentar, deve-se destacar que a

Salmonella afeta pessoas em muitos países a cada ano, causando hospitalizações e
mortes. Esse aspecto é abordado por pesquisadores que estudaram o desenvolvimento
do microbioma do pintinho desde a eclosão até 28 dias. O microbioma de pintinhos em
crescimento se desenvolve rapidamente dos dias 1 a 3, e o microbioma é principalmente
Enterobacteriaceae, mas Firmicutes aumenta em abundância e diversidade taxonômica
começando por volta do dia 7. O conteúdo metagenômico previsto sugere que,
funcionalmente, o tratamento pode estimular mais diferenças no dia 14, apesar das fortes
diferenças taxonômicas no dia 28. Esses estudos descobriram que a vacinação e o uso
de prebióticos (ou seja, nutrientes microbianos) com a dieta do pintinho ajudam a reduzir
a persistência de Salmonella nas aves desafiadas (Ballou et al. 2016). O microbioma GI
em aves domésticas difere ecologicamente daquele dos mamíferos, pois a colonização
ocorre principalmente no ambiente circundante e os indivíduos da mesma idade são
criados em estreita proximidade, em vez de em contato direto com adultos. A colonização
de aves por micróbios de fontes ambientais pode ter importantes implicações de
biossegurança e manejo se os patógenos humanos forem transferidos de reservatórios
ambientais através da cadeia de abastecimento de aves para os consumidores (Oakley et
al. 2013). As comunidades microbianas associadas aos animais agrícolas são importantes
para a saúde animal, segurança alimentar e saúde pública. O uso de sequenciamento de
alto rendimento (HTS) para caracterizar o microbioma avícola em uma série de amostras
farm-to-fork demonstra a utilidade do HP no monitoramento da cadeia de abastecimento
alimentar e na identificação de fontes de zoonoses potenciais e interações entre táxons
em comunidades complexas (Oakley et al. 2013). Abordagens semelhantes com outras
aves e gado podem ajudar a prevenir outras doenças de origem alimentar.

455
O desempenho de crescimento que pode diferir entre as raças de galinhas pode estar
associado ao microbioma GIT. No entanto, pode sempre haver variação entre os
indivíduos, provavelmente por causa da colonização bacteriana inicial na pós-nascimento.
Foi relatado que a microbiota do jejuno foi dominada por lactobacilos (mais de 99% das
sequências do jejuno) e não mostrou nenhuma diferença entre as aves com altas e baixas
taxas de conversão alimentar (FCR), enquanto a comunidade microbiana cecal
apresentou maior diversidade com 24 espécies bacterianas não classificadas,
significativamente mais abundante diferencialmente entre aves de alto desempenho e de
baixo desempenho (Stanley et al. 2012). Muitos frangos de corte e estudos de microbiota
contêm apenas dados de machos ou o sexo dos frangos era desconhecido. Esse viés
sexual na literatura pode influenciar nossa compreensão do desenvolvimento da
microbiota em frangos e, portanto, o sexo do frango deve ser sempre relatado (Stanley et
al. 2012).

Os códigos genéticos de várias bactérias comensais, incluindo Lactobacillus acidophilus e

L. johnsonii (Pridmore et al. 2004), que produziram SCFA, foram recentemente
sequenciados; isso facilitará estudos futuros sobre a expressão de genes microbianos e
melhorará nossa compreensão das interações entre o hospedeiro e o microbioma.

Um intestino saudável é a chave para um animal saudável. Um intestino infectado (ou

seja, por coccidiose ou por enterite necrótica) não é um intestino saudável e não é
eficiente na digestão e transporte de nutrientes (Choct 2009). Assim, uma composição
microbiana balanceada e diversa é essencial para uma digestão e absorção de nutrientes
ideais. A ferramenta mais importante para uma boa saúde intestinal é fornecer a melhor
alimentação possível que atenda às necessidades nutricionais para a faixa etária e
estágio de produção.

O eixo cérebro/intestino/microbiota compreende uma extensa rede de comunicação entre

o cérebro, o intestino e a microbiota (Wiley et al. 2017). O desenvolvimento de uma
microbiota intestinal diversa é crucial para múltiplas características de comportamento e
fisiologia, bem como para muitos aspectos fundamentais da estrutura e função do
cérebro. Acredita-se que a montagem apropriada da microbiota intestinal no início da vida
também influenciará o desenvolvimento emocional e cognitivo subsequente. Se a
composição, diversidade ou montagem da microbiota intestinal for prejudicada, essa
deficiência pode ter um impacto negativo na saúde do hospedeiro e levar a distúrbios.
Avanços recentes na tecnologia de sequenciamento de DNA mostram que as mudanças
no microbioma gastrointestinal estão associadas a doenças incluindo doenças
inflamatórias, asma, obesidade, diabetes, doenças cardiovasculares, condições
456
imunomediadas e até mesmo doenças potencialmente neuropsiquiátricas, incluindo
ansiedade e depressão (Wiley et al. 2017). Microbiomas representam uma fonte de
diversidade genética e metabólica humana e animal. Por exemplo, o envelhecimento
predispõe humanos e animais a uma degeneração natural na função GI, integridade da
barreira epitelial, composição da microbiota GI e função do sistema imunológico
(adaptativa e inata), elevando o risco de infecções. Bactérias potencialmente patogênicas
(ou seja, enterobactérias e Clostridium) aumentam com o envelhecimento, enquanto as
espécies de Bifidobacterium, que contribuem para a proteção do trato intestinal,
diminuem. Pouco se sabe sobre a aquisição e o desenvolvimento do microbioma intestinal
em cães e gatos. Como em humanos, o microbioma fecal inicial é caracterizado por um
alto grau de variação interindividual e que a diversidade intraindividual e a estabilidade
composicional aumentam com a idade (Yatsunenko et al. 2012). Também semelhante aos
humanos, a abundância relativa de Lactobacillus e Bifidobacterium diminuiu com a idade,
enquanto Bacteroides e genes bacterianos associados à capacidade de metabolizar
fontes de carbono complexas aumentaram com a idade (Barko et al. 2018). Em frangos, a
microbiota varia de acordo com diversos fatores, como dieta, localização e idade.
Mudanças dramáticas foram descritas na comunidade microbiana à medida que as
galinhas envelhecem. A maioria dos estudos examinou o efeito do tempo na microbiota do
ceco de frango (isto é, órgão com maior diversidade e abundância em todo o trato
intestinal). No entanto, a diversidade microbiana da microbiota das galinhas é
relativamente baixa em comparação com a microbiota intestinal de outros animais, o que
é atribuído ao rápido trânsito dos alimentos pelo sistema digestivo, com curtos tempos de
retenção; por exemplo, um tempo de retenção típico para um frango de corte de 29 dias é
entre 4 e 5 h, em comparação com humanos, onde a média é de 20 h.

3. Alternativas para promotores de crescimento antimicrobiano

A proibição de antibióticos promotores de crescimento (AGPs) tem sido um desafio para a
nutrição animal, aumentando a necessidade de encontrar métodos alternativos para
controlar e prevenir a colonização de bactérias patogênicas (Anadón et al. 2006). Embora
a UE tenha proibido os antibióticos que são aplicados como promotores de crescimento,
eles ainda são usados regularmente por razões terapêuticas. Quando são usados
antibióticos, a microbiota intestinal fica desequilibrada e restringe a futura saúde intestinal
do animal. Uma melhor saúde intestinal terá um impacto positivo na FCR e na
uniformidade em todas as espécies. Uma alternativa ideal deve ter os mesmos benefícios
que os AGPs, garantir o desempenho ideal dos animais e aumentar a disponibilidade de
457
nutrientes (Huyghebaert et al. 2011). Considerando o mecanismo de ação proposto dos
AGPs (microbioma e atividades imunomoduladoras), uma alternativa prática deve possuir
ambas as propriedades, além de ter um impacto positivo na FCR e no crescimento
(Huyghebaert et al. 2011; Seal et al. 2013). Aplicações de prebióticos e probióticos são
necessárias não apenas para propriedades e desempenho de promoção da saúde e bem-
estar, mas também para substituir a aplicação de antibióticos na alimentação animal. Os
prebióticos e probióticos são considerados componentes de estratégias para reduzir ou
mesmo eliminar o uso rotineiro de antimicrobianos na produção animal e são vistos como
alternativas potenciais aos antibióticos na alimentação. A modulação da microbiota
intestinal com prebióticos e probióticos como novos aditivos alimentares para funções de
proteção do hospedeiro para apoiar a saúde e o bem-estar animal é uma questão
importante na produção animal.

3.1 Conceito Prebiótico: Efeitos Prebióticos

Os prebióticos são produtos que conferem benefícios à saúde. Encontrados naturalmente

em muitos alimentos, os prebióticos também são isolados de plantas ou sintetizados a
partir de lactose ou sacarose por métodos enzimáticos e promovem o crescimento
seletivo de certas bactérias intestinais nativas. Um prebiótico foi definido por Gibson e
Roberfroid (1995) como “um ingrediente alimentar não digestivo que afeta beneficamente
o hospedeiro ao estimular seletivamente o crescimento e/ou a atividade de uma ou de um
número limitado de bactérias no cólon e, assim, melhora a saúde do hospedeiro.” Esses
autores revisaram esse conceito e propuseram uma nova definição prebiótica “como um
ingrediente fermentado seletivamente que permite mudanças específicas; tanto na
composição e/ou atividade na microbiota GI que confere benefícios sobre o bem-estar e
saúde do hospedeiro” (Gibson et al. 2004; Roberfroid 2007). A definição mais recente
iguala “prebiótico” e “bifidogênico” e inclui na definição o “índice prebiótico” (ou seja, dá o
aumento absoluto do concentrado de bifidobactéria fecal por grama de prebióticos
consumidos diariamente). Como os efeitos prebióticos, ou melhor, “efeitos bifidogênicos”,
dependem do tipo e concentração do prebiótico e da concentração de Bifidobacterium no
intestino do hospedeiro, portanto não existe uma relação simples efeito e dose. Outros
pesquisadores propuseram definições que enfatizavam preferencialmente uma ou mais
características funcionais diferentes. A FAO (2007) descreve os prebióticos como
“componentes alimentares não viáveis que conferem um benefício à saúde do hospedeiro
associado à modulação da microbiota”. A definição surgiu a partir de observações de que
determinadas fibras dietéticas provocam uma modulação específica da microbiota
intestinal, particularmente o aumento do número de Bifidobacterium ou Lactobacillus spp.,

458
E que uma diminuição nas bactérias potencialmente nocivas é um critério suficiente para
a promoção da saúde.

A seletividade para bifidobactérias pode ser promovida pela ingestão de substâncias

como fruto-oligossacarídeos (FOS) e inulina, oligossacarídeos trans-galactosilados e
oligossacarídeos de soja (Mitsuoka et al. 1987). Recentemente, um documento de
consenso de especialistas atualizou a definição de um prebiótico (microbiota associada ao
alvo) como substrato que é utilizado seletivamente por micro-organismos hospedeiros,
conferindo um benefício à saúde (Gibson et al. 2017). Os prebióticos como substrato são
ingredientes alimentares não digeríveis que influenciam a microbiota de maneira favorável
à saúde do hospedeiro, estimulando o crescimento ou a atividade da flora microbiana
potencialmente positiva no intestino grosso (Patterson e Burkholder 2003). Assim, um
prebiótico é um substrato que é utilizado seletivamente pelos microrganismos hospedeiros
que conferem um benefício à saúde (Gibson et al. 2017). Todos os prebióticos são fibras,
mas nem todas as fibras são prebióticos. Os efeitos benéficos para a saúde animal devem
ser documentados para que uma substância seja considerada um prebiótico. Prebióticos
para uso por animais em que estratégias com foco microbiano para manter a saúde e
prevenir doenças são tão relevantes quanto para humanos (Gibson et al. 2017).

Durante as últimas duas décadas, os prebióticos foram reconhecidos por sua capacidade
de manipular a microbiota do hospedeiro para o benefício do hospedeiro. Os prebióticos
incluem uma diversidade de polissacarídeos não amiláceos (NSP) ou oligossacarídeos,
incluindo manan-oligossacarídeo (MOS), frutanos (FOS e inulina), oligo frutose,
galactanos [galacto oligossacarídeo (GOS)], malto oligossacarídeo, lactulose, lactitol,
gluco oligossacarídeo, xilo oligossacarídeo, soja oligossacarídeo, isomalto
oligossacarídeo (IOS) e pirodextrinas.

Não digerível no intestino delgado, o FOS poderia ser utilizado apenas por algumas
espécies bacterianas, notavelmente Bifidobacterium, e incluir tais oligossacarídeos na
comida aumentou a contagem de bifidobactérias no intestino. Deve ser declarado que é
difícil testar a estimulação seletiva de cepas bacterianas individuais entre as mais de 400
cepas bacterianas cultiváveis e não cultiváveis no intestino humano; por esse motivo, o
efeito prebiótico foi definido como “a estimulação seletiva do crescimento e/ou atividade(s)
de um ou de um número limitado de gênero/espécie microbiana na microbiota intestinal
que confere(m) benefícios à saúde para o hospedeiro” (Roberfroid et al. 2010). A
diversidade de espécies bacterianas no intestino é um dos fatores mais importantes para
o estabelecimento de um ecossistema estável no trato intestinal. As aves jovens têm
menos espécies bacterianas no trato intestinal do que as aves adultas, portanto, sua
459
microflora intestinal é mais suscetível a distúrbios do que a dos adultos (Mead 1989). Uma
flora estável é essencial para um animal resistir a infecções, especialmente no intestino.

Embora o conceito de prebióticos tenha sido desenvolvido ao longo do tempo, para ser
considerado um prebiótico eficaz, propõe-se que um prebiótico candidato deve preencher
os seguintes critérios, que devem ser comprovados por estudos in vitro e in vivo: (1) não
digeribilidade (isto é, resistência ao ácido gástrico de baixo pH, digestão enzimática e
absorção intestinal na parte superior do GIT), (2) boa fermentação pela microbiota
intestinal grosso; isso pode ser investigado medindo o hidrogênio respiratório ou a
recuperação fecal do carboidrato administrado após uma única refeição prebiótica e (3)
estimulação seletiva do crescimento e da atividade das bactérias intestinais (ou seja,
medindo contagens bacterianas em amostras fecais, ou conteúdo intestinal, antes e
durante a exposição ao material de teste em sistemas de fermentação em lote ou
multiplas câmaras) que tenham efeitos associados de promoção da saúde (Macfarlane et
al. 2006; De Vrese e Schrezenmeir 2008).

Os prebióticos são carboidratos não absorvíveis, como inulina, galacto oligossacarídeos

(GOS) e FOS que promovem o crescimento e a atividade metabólica de bactérias
intestinais supostamente benéficas, principalmente as espécies de Bifidobacterium e
Lactobacillus. Esses produtos podem conferir benefícios à saúde por meio da produção
de SCFA, incluindo lactato e butirato, que podem reduzir a produção de citocinas na
mucosa intestinal (Sartor 2004).

Os prebióticos sofrem fermentação pela microflora benéfica no intestino grosso,

fornecendo fontes de energia para a microflora. Apenas os carboidratos [isto é, inulina e
oligo frutose (OF), (trans galacto oligossacarídeos (TOS ou GOS) ou lactulose], que não
são digeríveis, mas podem ser fermentados pela flora intestinal (Gibson 1999), cumprem
este critério.

A “abordagem probiótica” adiciona uma ou duas espécies a um espectro de centenas de

espécies na flora intestinal, mas a “abordagem prebiótica” visa a fertilização do
ecossistema intestinal. As imitações funcionais dos prebióticos naturais GOS e FOS
estimulam o crescimento intestinal de bifidobactérias como um marcador de probióticos
de maneira dependente da dose (Patterson e Burkholder 2003; Gaggìa et al. 2010).

Em termos comuns, os prebióticos são “componentes alimentares” para microrganismos

vivos que são considerados benéficos para a saúde e o bem-estar, e é cientificamente
aceito que os prebióticos são adições dietéticas valiosas para modular o crescimento e a
atividade de espécies bacterianas específicas no cólon que são consideradas apoio à
saúde (Gibson et al. 2010). Um exemplo de ingredientes para rações para animais é a
460
lignocelulose eubiótica, que a microflora que não digere, mas atravessa o intestino
grosso, onde as bactérias a fermentam (Metzler e Mosenthin 2008).

Um substrato diferente no intestino grosso contém uma microflora intestinal diversa. Em

amostras de fezes de porco e de excreta de peru, a quantidade de ácidos graxos voláteis
(AGV) (isto é, ácido acético, ácido propiônico, ácido butírico, AGV total) e lactato pode ser
alta quando os animais recebem lignocelulose A e B. A digestibilidade da matéria seca foi
estimada ser cerca de 75%, 28% e <5% para a dieta de suínos/perus e lignocelulose A e
B, respectivamente. A lignocelulose A resultou em uma quantidade maior de gases, AGV e
lactato em comparação com o produto B. A lignocelulose A pode ser usada como uma
fonte alternativa de fibra para manter a saúde e a função do trato digestivo (Youssef e
Kamphues 2018). A inclusão de lignocelulose na dieta de frangos, principalmente na dose
de 0,5%, promove o crescimento de Lactobacillus spp. e Bifidobacterium spp., e reduz o
número de Escherichia coli e Clostridium spp. além de aumentar a concentração de ácido
acético, ácidos propiônicos e ácido láctico, o que sugere o efeito prebiótico da
lignocelulose no GIT de frango de corte, embora a lignocelulose não tenha um efeito
substancial no pH da digesta ileal e cecal (Bogusławska-Tryk et al. 2015; Choct 2009;
Mancabelli et al. 2016).

Embora os prebióticos sejam definidos como “um componente alimentar inviável que
confere um benefício à saúde do hospedeiro associado à modulação da microbiota”
(Pineiro et al. 2008), existem algumas limitações quanto aos componentes alimentares
que realmente contam como prebióticos. Os compostos precisam ser resistentes à
hidrólise e absorção pelo GIT superior para que possam atingir os organismos-alvo no
GIT inferior. É desejável que esses compostos sejam substratos mais ou menos apenas
para os microrganismos que se pretende sustentar. Tem sido argumentado que apenas os
fruto oligossacarídeos e a inulina atendem a esses critérios (Roberfroid 2007); no entanto,
numerosos outros compostos foram incluídos nas listas de prebióticos, como galacto
oligossacarídeos, oligossacarídeos de soja, xilo oligossacarídeos, pirodextrinas, isomalto
oligossacarídeos, lactulose, pectina oligossacarídeos, lacto sacarose, álcoois de açúcar,
gluco oligossacarídeos, amido resistentes oligossacarídeos e xilo sacarídeos.

Os prebióticos são ingredientes alimentares não digeríveis (ou seja, carboidratos) que
promovem seletivamente o desenvolvimento de uma ou mais espécies de micro-
organismos no GIT de humanos ou animais. Os oligossacarídeos são os componentes
principais: a faixa é diversa e pode ser baseada em qualquer um dos monossacarídeos
hexose, incluindo glicose, frutose, galactose e manose (Durst 1996) com um grau de
polimerização entre 2 e 20 monossacarídeos. Leguminosas de grão são as fontes
461
naturais mais comuns de oligossacarídeos (por exemplo, rafinose, estaquiose,
verbascose). Os oligossacarídeos “sintéticos” são derivados da polimerização direta de
dissacarídeos ou do fracionamento de células vegetais e microbianas. Oligossacarídeos
como arabinogalactana, arabinoxilano e ramnogalacturonano, que são derivados de
polissacarídeos de soja (com cerca de 3-5% de galacto oligossacarídeos), trigo e fruta,
respectivamente (Van Craeyveld et al. 2009), são geralmente referidos como não
digeríveis oligossacarídeos.

Alguns dos oligossacarídeos não digeríveis atualmente adicionados à alimentação animal

em diferentes espécies animais são oligossacarídeos de manose (MOS),
oligossacarídeos de frutose (FOS), lactulose e galacto oligossacarídeos (GOS), chito
oligossacarídeos (COS), oligossacarídeos de arabinoxilano (AXOS), xilo oligossacarídeos
(XOS), trans galacto oligossacarídeo (TOS), glucano, parede celular de levedura, inulina,
bactéria de levedura inativada, galactomanana oligossacarídeo complexo de
arabinoxilano (GGMO-AX), levana, poli dextrose, peptídeoglicanogalactomanano, quitina),
oligossacarídeos ácidos (AOS), arabino galactano, manano fosforilado (MAN),
arabinoxilano e manobiose (Anadón et al. 2016a). Essas substâncias influenciam o
ecossistema intestinal, por exemplo, melhorando a fermentação do ácido lático.

Os compostos prebióticos podem reduzir o risco de certas condições e promover uma

saúde melhor; eles têm uma longa história de uso seguro e são conhecidos por seus
benefícios à saúde para humanos, incluindo um aumento na biodisponibilidade de
minerais, modulação do sistema imunológico, prevenção de infecções gastrointestinais,
modificação de condições inflamatórias, regulação de distúrbios metabólicos e redução de
o risco de câncer (Roberfroid et al. 2010). Para que um substrato dietético seja
classificado como prebiótico, são necessários pelo menos três critérios: (1) o substrato
não deve ser hidrolisado ou absorvido no estômago ou intestino delgado; (2) deve ser
seletivo para bactérias comensais benéficas no intestino grosso, como as Bifidobactérias;
e (3) a fermentação do substrato deve introduzir efeitos luminais benéficos (sistêmicos)
dentro do hospedeiro (Manning e Gibson 2004). Acredita-se que os oligossacarídeos β-
glucanos estimulem o desempenho devido aos seus efeitos imunomoduladores. Sua
principal ação é aumentar a fagocitose e a proliferação de monócitos e macrófagos
(Novak e Vetvicka 2008). Como os macrófagos têm um papel crucial na imunomodulação,
a interação dos glucanos com os macrófagos pode ter efeitos muito grandes no
hospedeiro. Revisões recentes elaboraram a ação dos glucanos na estimulação
imunológica (Novak e Vetvicka 2008). Estudos com frangos de corte documentaram
benefícios significativos para a saúde com o uso de β-1,3- ou 1,6-glucanos

462
imunomoduladores (de paredes celulares de levedura obtidas de S. cerevisiae) como
ingrediente alimentar. No entanto, foram observadas mudanças nos pesos relativos do
timo e do fígado e na morfologia das vilosidades de frangos de corte (Morales-López et al.
2009).

Os prebióticos são uma forma especial de fibra dietética, não são afetados pelo calor, frio,
ácido ou tempo, fornecem uma ampla gama de benefícios à saúde e afetam
beneficamente o hospedeiro ao estimular seletivamente o crescimento, a atividade ou
ambos, de um ou de um número de espécies de bactérias já residentes no cólon (Nagpal
e Kaur 2011). Os prebióticos são fibras vegetais especializadas que nutrem de forma
benéfica as bactérias boas localizadas no intestino grosso ou no cólon. Os prebióticos são
usados para aumentar as bifidobactérias ou lactobacilos, tornando-os o gênero
numericamente predominante no cólon, melhorando adequadamente a resistência à
colonização.

Os compostos prebióticos são capazes de modular as atividades e composição

microbiana luminal e mucosa e regular de forma benéfica as interações
micróbio/hospedeiro. Além disso, as mudanças na composição da microbiota intestinal
(especialmente o número de bifidobactérias) contribuem para modular os processos
metabólicos humanos associados à obesidade e diabetes tipo 2 (Roberfroid et al. 2010).
Os prebióticos induzem não apenas alterações na microbiota intestinal e na superfície da
mucosa do cólon, mas também o transporte trans epitelial do SCFA, estimulando
mudanças de fluido de e para o lúmen; além disso, o transporte de minerais catiônicos é
estimulado pelo baixo pH do lúmen. O propionato colônico intraluminal induz a liberação
não neuronal de acetilcolina sintetizada pelas células da cripta epitelial para a superfície
da serosa, especialmente no cólon distal, e isso foi associado a modificações nos
parâmetros elétricos da mucosa e excreção de cloreto (Yajima et al. 2011).

Os mecanismos de ação propostos para os prebióticos incluem o bloqueio dos locais dos
receptores para a adesão do patógeno, imunomodulação, produção de compostos
antimicrobianos na fermentação e modificação da morfologia intestinal (Pourabedin e
Zhao 2015). Acredita-se que a imunomodulação por prebióticos resulte da ativação da
imunidade inata pela interação dos açúcares com certos receptores presentes na
superfície das células dendríticas e macrófagos, que podem então estimular a produção
de citocinas, a proliferação de linfócitos e a atividade do natural killer (Células NK) (Saad
et al. 2013).

A maioria dos prebióticos para o intestino requer uma dose oral de 3 g/dia ou mais para
provocar um efeito (Roberfroid et al. 2010). Produtos que contenham dosagens inferiores
463
a este nível não devem ser chamados de prebióticos, a menos que tal dose baixa tenha
sido comprovada para provocar efeitos seletivos na microbiota com aspectos de saúde
concomitantes (Gibson et al. 2017).

3.1.1 – Aplicações para Benefício Animal

Os prebióticos têm sido estudados e usados para animais de companhia e criação de

animais, incluindo gado, aves e aquicultura. As diferenças inerentes entre as espécies
animais no que diz respeito ao ambiente de vida, anatomia e fisiologia, composição da
dieta e dependência da microbiota intestinal para energia devem ser consideradas ao
avaliar o efeito dos prebióticos na saúde animal (Stevens e Hume 1998, Gibson et al.
2017). A maioria dos prebióticos parece estimular bactérias ácido lácticas e bifidogênicas.
As funções descritas para os prebióticos são que eles se ligam a patógenos, servem
como substratos para a fermentação, aumentam a osmose no lúmen do intestino e
também podem estimular indiretamente a resposta de macrófagos e a produção de SCFA
e modular o sistema imunológico (Patel e Goyal 2012).

Aves: que são usadas principalmente para a produção de carne ou ovos, incluem
espécies de aves terrestres (por exemplo, galinhas, perus, codornizes) e espécies de
aves aquáticas (por exemplo, patos, gansos) que respondem a prebióticos, embora a
maioria tenha um intestino médio bastante curto e intestino grosso que inclui um cólon
curto e reto e um ceco gêmeo. Os prebióticos dietéticos, incluindo inulina, extratos de
parede celular de levedura, lactulose e GOS são geralmente fornecidos em
concentrações de até 0,2% (peso/volume) da dieta (Bednarczyk et al. 2016). Os
prebióticos fornecem substratos para a fermentação microbiana no intestino, resultando
na produção de SCFA, uma fonte de energia para enterócitos. A fermentação das fibras
alimentares por bactérias comensais no intestino leva, em geral, à produção de SCFA no
intestino posterior que podem ser facilmente absorvidos e contribuir com as fontes de
energia para o animal hospedeiro. Muitos prebióticos, incluindo fruto oligossacarídeo e
manano oligossacarídeo, aumentam os níveis de bactérias benéficas, como Lactobacillus
e Bifidobacterium spp. e diminuir os níveis de patógenos, como Escherichia coli (Fukata et
al. 1999; Xu et al. 2003; Baurhoo et al. 2007). Polimorfismo de comprimento de fragmento
de restrição terminal (T-RFLP) e análise de eletroforese em gel de gradiente desnaturante
foram usados para demonstrar que FOS e MOS afetam a composição da população
bacteriana e perfis de espécies de Lactobacillus em frangos de corte. Essas mudanças
microbianas não afetaram o desempenho, indicando que várias composições microbianas
podem facilitar um alto nível de desempenho nessas condições (Geier et al. 2009).

464
Em comparação com os probióticos, os riscos de efeitos colaterais indesejáveis no
hospedeiro são menores. Prebióticos são macromoléculas derivadas de plantas ou
sintetizadas por microrganismos. O MOS, derivado da camada externa da parede celular
de Saccharomyces cerevisiae, foi estudado extensivamente como um suplemento
prebiótico em dietas para aves.

Dois tipos de prebióticos foram descritos para uso na avicultura. A maioria dos usados
atualmente são oligossacarídeos sintéticos não digeríveis que contêm uma ou mais
moléculas de um açúcar, ou uma combinação de açúcares simples, como glicose, frutose,
xilose, galactose e manose. Os MOS encontrados nas paredes celulares das leveduras
provaram ser os mais importantes, pois contêm proteínas compostas e glucana (Rehman
et al. 2009). O outro tipo de prebiótico descrito corresponde à lactose e seus derivados,
como a lactulose e a lacto-sacarose (van Immerseel et al. 2002). A lactulose é um
dissacarídeo sintético não digerível que mostra efeito prebiótico em dietas para frangos de
corte, melhorando o peso corporal e FCR, aumentando a altura das vilosidades, o número
de células caliciformes, as concentrações totais de SCFA e as contagens de Lactobacillus
(Calik e Ergün 2015). Outros prebióticos que têm efeitos benéficos em aves incluem
lignina, inulina e extrato de semente de palmiste.

Vários estudos de prebióticos em galinhas fornecem evidências de efeitos positivos para

oligossacarídeos de manose ou frutose na inibição dos patógenos Salmonella e E. coli
(Chambers e Gong 2011; Stanley et al. 2014). Resultados conflitantes obtidos com ou
sem oligossacarídeos que ocorrem naturalmente nos ingredientes da ração (por exemplo,
os oligossacarídeos da série rafinose) apresentam um cenário pouco claro em relação ao
efeito de sua inclusão em dietas para frangos de corte (Iji e Tivey, 1998); entretanto, seu
impacto nutricional não pode ser separado de outros componentes não nutritivos da dieta.

Prebióticos em aves indicam sua utilidade no controle ou redução do crescimento de

Clostridium perfringens implicado na enterite necrótica. A fucosilactose, um
oligossacarídeo funcional presente no leite humano que protege contra a infecção por
patógenos entéricos, parece favorecer a coaggragação com patógenos em vez de o
contaminante do patógeno ser eliminado pelo revestimento da mucosa do intestino das
aves (Lee et al. 2012). A adição de vários níveis de MOS à dieta de frangos de corte
aumentou significativamente seu peso corporal e melhorou a FCR com o aumento da
altura das vilosidades intestinais, melhorou a imunocompetência no intestino, alterou a
expressão do gene jejunal e influenciou a microbiota intestinal. O FOS, que é derivado de
plantas, também demonstrou possuir efeitos prebióticos significativos e melhorar o
desempenho em frangos de corte. Outra classe de prebióticos inclui IOS mostrando sua
465
eficácia em melhorar o ganho de peso e FCR quando alimentado com frangos de corte
(Mookiah et al. 2014). Em pombos, a administração dietética de MOS induziu mudanças
na morfologia intestinal e baixou o pH das excretas, refletindo uma redução do desafio
bacteriano no intestino; assim, o MOS tem potencial como uma estratégia prebiótica em
pássaros (Abd El-Khalek et al. 2012).

Várias características devem ser levadas em consideração ao selecionar prebióticos para

aves, incluindo resistência ao ambiente ácido gástrico, hidrólise de enzimas
intestinais/pancreáticas e absorção através do epitélio intestinal. A característica mais
importante de um prebiótico padrão é a capacidade de enriquecer seletivamente micro-
organismos benéficos associados à saúde e ao bem-estar. Assim, acredita-se que a
maioria dos efeitos benéficos dos prebióticos seja mediada predominantemente por meio
da alteração da microbiota intestinal (Pourabedin e Zhao 2015). Os prebióticos também
evitam a colonização de patógenos por ligação direta ou por exclusão competitiva,
promovendo o crescimento de micróbios benéficos ou estimulando-os a produzir
bacteriocinas e ácido láctico (Spring et al. 2000). Em particular, o MOS atua ligando-se às
fímbrias do tipo 1 de patógenos entéricos e evita sua adesão às células epiteliais
intestinais (Spring et al. 2000) e atua como adjuvante, ajudando a aumentar as respostas
imunes do hospedeiro (Ferket et al. 2005). Em geral, os prebióticos também agem
alterando beneficamente os aspectos luminais ou sistêmicos do sistema imunológico do
hospedeiro.

A fermentação dos prebióticos pela microflora também leva à produção de SCFAs que
atuam como fontes de energia para as células epiteliais intestinais e, assim, mantêm a
integridade do revestimento do intestino (Ferket et al. 2005). Vários estudos revelaram
que o tratamento simbiótico foi mais eficaz do que um prebiótico individual na redução da
transmissão de patógenos e infecções em aves.

Suínos: diferentes tipos de compostos dietéticos quimicamente definidos ou

indefinidos são adicionados à dieta de suínos para testar sua influência na microbiota
gastrointestinal ou na melhoria do estado de saúde durante o desafio com patógenos.
Quando adicionada à dieta de suínos, a fibra fermentável e não fermentável parece ter um
impacto positivo significativo no crescimento e na saúde intestinal: parece influenciar os
processos totais de digestão e fermentação, contribuindo para um equilíbrio diferente,
particularmente no intestino grosso dos animais monogástricos. Prebióticos, como
oligossacarídeos de frutose, manose e quitina, protegem os leitões contra altos
estressores ambientais (por exemplo, antibióticos) e cargas de patógenos, incluindo a
eliminação de Escherichia coli fecal e respostas reduzidas de infecções associadas à
466
infecção por Salmonella enterica sorovar typhimurium ou vírus da síndrome reprodutiva e
respiratória suína (Liu et al. 2008; Che et al. 2011). As aplicações simbióticas podem ser
benéficas, visto que foi observada uma melhoria significativa dos parâmetros de
desempenho de crescimento em leitões e porcos em crescimento (Modesto et al. 2011).

A alimentação de porcas grávidas com dietas ricas em fibras ao final do período de

lactação mostra um impacto positivo, pois esses aditivos estimulam continuamente o trato
gastrointestinal e têm uma influência positiva na duração do parto (ou seja, uma duração
mais curta do parto aumenta as taxas de sobrevivência dos leitões). Carboidratos
funcionais refinados (RFC) são os componentes colhidos de células de levedura (S.
cerevisiae) usando enzimas específicas durante o processo de fabricação para garantir
um alto nível de biodisponibilidade e uniformidade. Essa hidrólise enzimática patenteada
produz MOS, β-glucanos (1,3/1,6) e D-manose. Esses compostos estão naturalmente
presentes em todas as células de levedura, mas não estão prontamente biodisponíveis. O
método de processamento usado para refinar as células de levedura influencia o tamanho
e a estrutura desses componentes liberados, que por sua vez afetam a biodisponibilidade
e a funcionalidade. A pesquisa mostra que cada RFC tem um modo específico de ação e
resultado quando fornecido a várias espécies de gado, incluindo laticínios, carne bovina e
aves. RFC também mostraram influenciar positivamente a resposta imunológica de
porcos de creche. Os RFC atuam como um prebiótico, alimentando as bactérias benéficas
encontradas no intestino, enquanto bloqueiam os locais de fixação por patógenos.

Ruminantes: os bezerros nascem em um estado pré ruminante e funcionam como

não ruminantes até que o rúmen e outros compartimentos do estômago se desenvolvam
totalmente (Quigley et al. 1997). Durante as primeiras semanas de vida, ou mais no caso
de bezerros mantidos em dietas com baixo teor de volumoso (ou seja, baixo teor de
material fibroso), os prebióticos podem ser usados para aumentar o crescimento,
melhorar a FCR, reduzir a incidência e gravidade da diarreia, ou reduzir a incidência de
doenças respiratórias (Quigley et al. 1997; Ghosh e Mehla 2012; Roodposhti e Dabiri
2012).

O uso de prebióticos em bovinos tem sido limitado pela capacidade dos ruminantes de
degradar a maioria dos prebióticos; no entanto, o aprimoramento das tecnologias de
proteção do rúmen pode permitir que essas substâncias alimentares sejam usadas em
confinamento e gado leiteiro, considerando também que várias classes de
oligossacarídeos não digeríveis são encontrados na parede celular da planta na natureza,
incluindo plantas normalmente usadas para alimentação de gado (Callaway et al . 2008).

467
No entanto, os prebióticos usados em bezerros pré desmamados são celo
oligossacarídeos, galactosil lactose, extratos de parede celular de levedura e MOS.

Equinos: grandes herbívoros não ruminantes que dependem fortemente da

fermentação microbiana para obter energia, com mais da metade de sua necessidade de
energia de manutenção vindo da fermentação microbiana ocorrendo em seu ceco e cólon
aumentados (Stevens e Hume 1998). Como sua dieta típica é rica em volumoso e
alimentos que são consumidos ao longo do dia, as intervenções prebióticas podem
melhorar a eficácia da fermentação (Morgan et al. 2007; Respondek et al. 2011). Os
prebióticos comumente usados têm efeitos estimuladores sobre as bactérias do ácido
láctico (isto é, Lactobacillus, Bifidobacterium, Enterococcus). Muitas dessas cepas
bacterianas têm sido usadas com sucesso como probióticos equinos. Esses prebióticos
indigestíveis servem como substrato para bactérias do ácido láctico, melhorando
potencialmente a microbiota do intestino grosso. Tem havido um número limitado de
estudos de digestibilidade equina usando prebióticos como auxiliares digestivos.
Semelhante aos estudos com probióticos, os resultados são variáveis. Quando os
produtos de fermentação de S. cerevisiae foram suplementados em conjunto com
forragem de baixa qualidade, a digestibilidade aparente da matéria seca, proteína bruta e
fibra em detergente neutro foi maior, indicando que a suplementação de prebióticos é
mais eficaz quando com alto teor de amido, alto teor de fibra ou dietas de forragem de
baixa qualidade são fornecidas.

A ingestão de amido após a suplementação da dieta do cavalo com fruto oligossacarídeos

de cadeia curta (Respondek et al. 2011) ou MOS tem efeitos benéficos na prevenção de
distúrbios digestivos associados a ambos os prebióticos. Além disso, o uso de fruto
oligossacarídeos de cadeia curta em cavalos reduziu as interrupções nas populações
microbianas do cólon após uma mudança abrupta na dieta e concentrações alteradas de
AGV fecal para propionato e butirato (Coverdale 2016).

Cães e Gatos: evoluíram como carnívoros, comendo dietas ricas em proteínas e

gorduras, mas pobres em fibras. Eles são não ruminantes com GIT curto e simples que
têm pouca capacidade de fermentar substâncias não digeríveis, cuja ação ocorre
predominantemente no cólon (Stevens e Hume 1998). No entanto, alguns benefícios
foram alcançados para a saúde com a administração de prebióticos, como infecções
reduzidas, melhora da sensibilidade à insulina e melhor consistência fecal (Respondek et
al. 2008; Verbrugghe et al. 2009). A maioria dos estudos investigou os efeitos da
suplementação dietética com prebióticos na flora bacteriana de cães e gatos saudáveis. O

468
FOS suplementado com 0,75% de matéria seca produziu mudanças qualitativas e
quantitativas na flora fecal de gatos saudáveis (Sparkes et al. 1998a, b).

Em comparação com amostras de gatos alimentados com uma dieta basal, o aumento do
número de espécies de lactobacilos e Bacteroides e a diminuição do número de E. coli
foram associados à dieta de FOS. No entanto, o exame bacteriológico do suco duodenal
nesses mesmos gatos mostrou grande variação na composição da flora duodenal, ao
longo dos períodos de amostragem, que não foi afetada pela suplementação de FOS. Em
um ensaio separado, gatos saudáveis alimentados com uma dieta contendo GOS e FOS
de cadeia curta tiveram maiores populações de espécies de Bifidobacterium fecais e
concentrações de butirato em relação ao controle (Kanakupt et al. 2011). Além disso, cães
Beagle saudáveis alimentados com uma dieta de 1% de FOS ao longo de um ensaio de 3
meses mostraram excreção fecal inconsistente de espécies de Lactobacillus e
Bifidobacterium (Willard et al. 2000). Há um único relatório avaliando os efeitos do GOS
na microbiota fecal em gatos saudáveis e gatos com doença inflamatória intestinal (DII)
(Biagi et al. 2013). Usando um estudo randomizado, duplo-cego, de alimentação cruzada,
as sondas de oligonucleotídeos direcionadas a populações bacterianas específicas não
mostraram diferenças significativas na microbiota fecal de gatos com DII e gatos
saudáveis alimentados com a mesma dieta. No geral, a variação entre animais foi
moderadamente alta, enquanto uma tendência de aumento dos níveis das espécies de
Bifidobacterium foi observada com a suplementação de GOS.

Espécies aquáticas cultivadas: incluem peixes finos e crustáceos. Embora a

anatomia varie entre as espécies carnívoras (por exemplo, turbot), onívoras (por exemplo,
bagre) e herbívoras (por exemplo, esturjão), todos os peixes têm um GIT bastante simples
e curto. O comprimento curto e a estrutura simples (falta de adaptações especiais) do
intestino do peixe resultam no trânsito rápido do material digerido, limitando o tempo
disponível para a atividade microbiana ou prebiótica. Os prebióticos são fibras indigeríveis
que aumentam as bactérias comensais residentes no intestino benéficas, resultando na
melhoria da saúde do hospedeiro. Os prebióticos estimulam o crescimento de espécies de
bactérias intestinais em espécies aquáticas. Doses prebióticas eficazes em espécies
hospedeiras aquáticas estão na faixa de 1% a 3% (peso/volume) da dieta (Li et al. 2007;
Hoseinifar et al. 2013, 2014). Os efeitos benéficos dos prebióticos resultam dos
subprodutos gerados por sua fermentação por bactérias comensais intestinais.
Prebióticos como FOS, MOS, inulina ou β-glucano são chamados de imuno sacarídeos.
Esses aditivos aumentam diretamente as respostas imunes inatas, incluindo ativação
fagocítica, ativação de neutrófilos, ativação do sistema complemento alternativo e

469
aumento da atividade da lisozima, entre outros, em peixes aquáticos de criação (Tabela
1). Os imuno sacarídeos ativam diretamente o sistema imunológico inato ao interagir com
os receptores de reconhecimento de padrões expressos nas células imunológicas inatas
(Kyu Song et al. 2014). Eles também podem se associar a padrões moleculares
associados a micróbios para ativar células imunes inatas. Respostas imunológicas
adequadas são importantes não apenas para combater patógenos, mas também para
ganho de peso adequado. Muitos estudos indicaram que os imunossacarídeos são
benéficos para peixes e crustáceos (ver Tabela 1).

O prebiótico mannan oligossacarídeo melhora o crescimento e aumenta as enzimas

digestivas, como proteases e amilases (Xu et al. 2009).

Tabela 1 – Prebióticos como imunoestimulantes na aquicultura

Oligossacarídeos Polissacarídeos
Fruto oligossacarídeos (FOS) Inulina
Manan oligossacarídeo (MOS) β-Glucano
Manan oligossacarídeo (MOS) + β-glucano Quitina / quitosana
Galacto oligossacarídeo (GOS)
Arabinoxilano oligossacarídeo (AXOS)

4. Probióticos
As abordagens prebiótica e probiótica exigem o uso de suplementos alimentares
microbianos que afetam beneficamente o hospedeiro, melhorando seu equilíbrio
microbiano intestinal (Gibson e Roberfroid 1995). Os probióticos são outro aditivo
alimentar que está ganhando aceitação como uma alternativa potencial aos antibióticos
para melhorar a eficácia da produção em gado, aves e aquicultura. Os probióticos foram
definidos como “culturas mono ou mistas de micro-organismos vivos que afetam
beneficamente o hospedeiro, melhorando as propriedades da microbiota indígena” (Fuller
1992). Os probióticos são definidos como “aditivo microbiano vivo” para ração que afeta
beneficamente o animal hospedeiro, melhorando seu equilíbrio intestinal; probióticos, às
vezes usados de forma intercambiável com o termo microbiano de alimentação direta,
usado nos Estados Unidos para produtos dados a animais. Os microrganismos usados na
alimentação animal na União Europeia são principalmente cepas bacterianas de bactérias
gram-positivas pertencentes aos tipos B. licheniformis, B. subtilis, Enterococcus (E.
faecium), Lactobacillus (L. acidophilus, L. casei, L. farciminis, L. plantarum, L. rhamnosus),
470
Pediococcus (P. acidilactici) e Streptococcus (S. infantarius); alguns outros probióticos são
fungos microscópicos, como cepas de leveduras pertencentes a Saccharomyces
cerevisiae e Kluyveromyces (Anadón et al. 2006). As bactérias Bacillus e Lactobacillus
diferem em muitas características, e Bacillus e as leveduras não são componentes usuais
da microflora intestinal. Embora a maioria das espécies e gêneros sejam aparentemente
seguros, particularmente lactobacilos e bifidobactérias, certos microrganismos podem ser
problemáticos, particularmente os enterococos, que podem abrigar determinantes
resistentes a antibióticos transmissíveis e bacilos, especialmente aqueles pertencentes ao
grupo Bacillus cereus que são conhecidos por produzir enterotoxinas e uma toxina
emética (Anadón et al. 2006). Por exemplo, Bacillus cereus var. toyoi NCIMB
(40112/CNCMI-1012) como aditivo para alimentos para animais foi retirado na UE em
2015 para todas as espécies animais autorizadas anteriormente.

Até o momento, o aumento de desempenho relatado em animais domésticos foi obtido

principalmente por meio da aplicação de uma espécie específica ou uma mistura de
cepas probióticas dentro de uma espécie (Williams et al. 2001). Para humanos, cepas
microbianas específicas podem ter um papel importante na resistência à colonização nos
tratos intestinal, respiratório e urogenital, metabolismo do colesterol, inibição da
carcinogênese por estimulação do sistema imunológico e metabolismo da lactose,
absorção de cálcio e síntese de vitaminas (Anadón et al. 2016). Para animais de fazenda,
as reivindicações mais importantes são promoção de crescimento, melhor FCR, controle
de saúde, como prevenção de distúrbios intestinais (especialmente em animais jovens),
pré-digestão de fatores antinutricionais (por exemplo, inibidores de tripsina, ácido fítico,
glucosinolatos) (Havenaar et al. 1992) e promoção do bem-estar.

Os probióticos para gado comumente apresentam várias cepas de levedura Bacillus,

Lactobacillus, Enterococcus e Saccharomyces. Ainda há muito a aprender sobre suas
interações com patógenos, mas sabe-se que certas cepas de Bacillus diminuem o
crescimento de certas espécies de bactérias patogênicas, incluindo E. coli, Clostridium,
Streptococcus e Salmonella. Os probióticos ajudam a prevenir e controlar os patógenos
GI ou melhorar o desempenho e a produtividade dos animais de criação por meio de
vários mecanismos. A seleção de cepas probióticas adequadas é absolutamente
essencial porque tais cepas não devem conter genes de resistência a antibióticos. Outros
genes que deveriam, é claro, estar ausentes em cepas probióticas são aqueles que
codificam a produção de toxinas ou compostos que podem interferir de alguma forma no
bem-estar e na produtividade de um animal (Anadón et al. 2016; Joerger e Ganguly
2017).

471
Algumas cepas geneticamente modificadas foram testadas com o objetivo de melhorar o
desempenho animal. Por exemplo, Lactococcus lactis foi projetado para expressar o fator
de crescimento epidérmico em um esforço para impulsionar o desempenho de leitões
desmamados precocemente (Bedford et al. 2012), e a levedura Pichia pastoris foi
modificada pela introdução do Clostridium perfringens gene da toxina alfa na tentativa de
induzir imunidade contra C. perfringens em frangos de corte (Gil de los Santos et al.
2012).

Um organismo probiótico adequado deve ser capaz de resistir ao processamento e

armazenamento, sobreviver no ambiente ácido gástrico, aderir ao epitélio ou muco nos
intestinos, produzir compostos antimicrobianos e modular as respostas imunológicas. No
entanto, nem todas as cepas probióticas exibem todas essas propriedades e as cepas
probióticas mais adequadas ou suas combinações que atingirão o efeito benéfico máximo
devem ser selecionadas. A proteção de organismos probióticos durante sua passagem
pelo trato alimentar superior, como uma microencapsulação, deve ser considerada para
garantir a viabilidade e a colonização no intestino (Anadón et al. 2016b).

Probióticos ou microbianos ativos podem ajudar a modular a microflora e os butiratos de

liberação lenta podem ter um efeito positivo na integridade intestinal. O butirato parece ter
uma influência positiva nas células epiteliais, levando a uma melhor proliferação e
diferenciação das células epiteliais. Além de uma melhor absorção de água e nutrientes,
isso leva a uma barreira melhorada e ao controle de patógenos e parece influenciar
positivamente o sistema imunológico (Eeckhaut et al. 2008).

Probióticos são organismos vivos que, quando ingeridos em quantidades suficientes,

transferem um benefício à saúde do hospedeiro. Os probióticos comuns incluem membros
dos gêneros Lactobacillus e Bifidobacterium e organismos como Saccharomyces
cerevisiae. A atividade probiótica pode estar relacionada a gêneros, espécies ou cepas. A
eficácia dos probióticos de cepa única e multistrain para gado foi investigada: as
propriedades benéficas incluem a remoção ou exclusão competitiva de patógenos,
aumento do desenvolvimento e capacidade de resposta do sistema imunológico e
produção de compostos benéficos e subprodutos metabólicos (Patterson e Burkholder
2003).

Para os probióticos, foram sugeridos dois mecanismos principais de ação, resumidos a

seguir: (1) efeito nutricional, caracterizado pela redução das reações metabólicas que
produzem substâncias tóxicas, estimulação de enzimas indígenas e produção de
vitaminas e substâncias antimicrobianas; e (2) efeitos sobre a saúde ou sanitários,
distinguidos pelo aumento na resistência à colonização, competição pela adesão da
472
superfície intestinal e estimulação da resposta imune (Guillot 2003); o último efeito agindo
como “bioreguladores da microflora intestinal” e reforçando as defesas naturais do
hospedeiro. Neste último mecanismo, há um aumento na resposta imune mediada por
células, sinalização de TLR, produção de anticorpos e diminuição da apoptose celular,
entre outros (Khan et al. 2016). Células epiteliais intestinais hospedeiras e células
dendríticas têm certos receptores [por exemplo, TLRs, proteínas de domínio de
oligomerização de ligação de nucleotídeos (NOD)] ativados por MAMP probióticos, como
fímbrias, flagelos, lipopolissacarídeo, ácido lipoteicóico e peptideoglicano. A ativação
desses receptores leva à indução de vias de transdução de sinal na célula hospedeira
para a transcrição de genes que codificam para quimiocinas e citocinas, que podem
posteriormente estimular a imunidade sistêmica e mucosa do hospedeiro (Hardy et al.
2013). A interleucina 12 (IL-12), uma citocina pró-inflamatória, e a interleucina (IL-10), uma
citocina antiinflamatória, são de particular interesse no que diz respeito aos probióticos.
Os probióticos imunoestimuladores induzem a proliferação de IL-12, que por sua vez
aumenta a potência das células NK e induz as vias T auxiliares. Os probióticos
imunorreguladores induzem a proliferação de IL-10, que então induz a via T regulatória
(Yaqoob 2014). Os probióticos também são conhecidos por alterar a arquitetura epitelial
do intestino. A camada de muco, composta por uma classe de glicoproteínas conhecidas
como mucinas, forma a primeira linha de defesa do hospedeiro junto com o epitélio
intestinal. Estudos têm demonstrado que certas espécies probióticas aumentam a
expressão dos genes mucina 2 (MUC-2) e mucina 3 (MUC-3), que codificam a síntese de
mucinas pelas células caliciformes. O aumento da produção de muco no intestino evita a
adesão e subsequente colonização do epitélio intestinal por bactérias patogênicas (Hardy
et al. 2013). Os probióticos também podem manter a integridade das tight junctions
epiteliais por meio da regulação positiva de genes que codificam para proteínas de
junção, que são responsáveis pela sinalização das junções estreitas, bem como pela
restauração da integridade da mucosa (Syngai et al. 2016). Foi relatado que Lactobacillus
rhamnosus GG produziu proteínas solúveis que protegem as junções estreitas epiteliais
intestinais e a função de barreira da ruptura induzida por peróxido de hidrogênio pela
ativação de isoformas de proteína quinase C e o mecanismo dependente de proteína
quinase ativada por mitogênio (MAPK) (Seth et al. 2008).

A distribuição de certos microrganismos vivos durante a produção de alimentos para

animais, com uma variedade de microrganismos usados sendo LAB, várias espécies de
Bacillus e a levedura Saccharomyces cerevisiae, tem sido particularmente usada na
indústria de suínos. O estabelecimento de uma população de LAB benéfica no
nascimento pode levar a animais mais saudáveis: isso pode ser alcançado mais
473
facilmente pelo tratamento de porcas, que fornece uma etapa de amplificação e inunda o
ambiente do porco neonatal com cepas bacterianas desejáveis (Kenny et al. 2011). A
suplementação dietética com DFMs é usada para promover a saúde em rebanhos e aves,
resultando na repartição de energia para o sistema imunológico e um aumento na
produção de anticorpos independente de mudanças no metabolismo de corpo inteiro ou
desempenho de crescimento (Qiu et al. 2012).

A alimentação dietética com ração suplementada com probióticos reduziu a expressão de

citocinas inflamatórias intestinais e melhorou o desempenho de crescimento em aves
(Higgins et al. 2011). Além disso, a cepa PB6 de Bacillus subtilis, fornecida como uma
preparação em pó, pode ter efeitos antiinflamatórios pré-clínicos em um modelo de
camundongo agudo, reduzindo os sintomas de doença inflamatória intestinal que
dependem de respostas imunomoduladoras (Foligné et al. 2012).

Os probióticos teriam, portanto, um papel no equilíbrio da microflora intestinal,

aumentando a resistência aos agentes patogênicos, tanto pelo fortalecimento da barreira
intestinal quanto pelo estímulo direto do sistema imunológico.

Os probióticos operam por “exclusão competitiva”, o que significa que, quando

populações adequadas de bactérias probióticas estão presentes, eles reduzem a
capacidade das bactérias patogênicas de ficar fora de controle e dominar o hospedeiro.
Os probióticos disponíveis podem ser classificados em (1) espécies ‘colonizantes’, como
Lactobacillus e Enterococcus spp., e (2) espécies ‘não colonizantes’ de fluxo livre, como
Bacillus spp. (esporos) e S. cerevisiae. A exclusão competitiva descreve o tratamento de
pintos de um dia com uma microbiota indefinida derivada de animais adultos, resultando
em resistência à colonização contra micro-organismos patogênicos (Huyghebaert et al.
2011).

Os produtos aditivos para rações atuais projetados para a manipulação da microbiota de

animais com microrganismos vivos (ou com produtos diretamente derivados da cultura
desses organismos) se enquadram em duas categorias. O grupo predominante (primeira
categoria) tenta melhorar ou manter o estado de saúde animal nas condições encontradas
nas práticas modernas de criação de animais, sem fazer alegações específicas para os
patógenos que são de interesse para a saúde humana. A segunda categoria (grupo
menor) afirma estabelecer ou modificar a microbiota intestinal que tem um efeito
mensurável direto sobre patógenos de interesse para os humanos, como Salmonella
enterica e Clostridium jejuni. As duas categorias não são mutuamente exclusivas porque
espera-se que animais mais saudáveis sejam menos suscetíveis à colonização por certos
patógenos humanos ou carreguem menos desses patógenos. Da mesma forma, as
474
mudanças na microbiota destinadas a inibir a colonização de patógenos transmitidos por
alimentos também podem melhorar a saúde geral do animal e levar a ganhos de peso
corporal. O número de produtos probióticos colocados no mercado que afirmam ser
direcionados contra patógenos ou são produtos de “exclusão competitiva” é
excessivamente pequeno em comparação com produtos que afirmam melhorar o FCR, o
crescimento, a função do sistema imunológico ou a resistência a eventos estressantes
(Joerger e Ganguly 2017). A definição ecológica de “exclusão competitiva” afirma que
duas espécies competindo pelos mesmos recursos não podem coexistir de forma estável.
Portanto, um dos competidores sempre dominará o outro, levando a uma modificação
evolutiva, uma mudança para outro nicho ou extinção. A microbiota intestinal compete
com as bactérias patogênicas colonizadoras e pode reduzir a adesão e colonização de
patógenos no intestino. Essa redução pode ser consequência de diferentes mecanismos,
talvez a ocupação física do espaço, a competição por recursos em um determinado nicho,
ou o confronto físico ou químico direto com o potencial colonizador (Chaucheyras-Durand
e Durand 2010; Clavijo e Vives Flórez 2018). Em aves, a exclusão competitiva é o
processo pelo qual as bactérias favoráveis excluem bactérias que podem ser prejudiciais
ao animal ou que são de interesse para a saúde pública, como Salmonella spp. A
exclusão de Salmonella implica a prevenção do estabelecimento de bactérias nocivas no
intestino. O objetivo é fornecer, no início da vida de uma ave, bactérias boas com
capacidade ideal de se estabelecer e manter no ambiente intestinal. Assim, a
administração de misturas bacterianas de Salmonella spp. de fontes fecais ou cecais de
frangos de corte foi mais protetor do que a administração de isolados bacterianos únicos
ou uma combinação de apenas alguns isolados (Kerr et al. 2013). Na prática, é usado
principalmente como medida profilática com o objetivo de aumentar a resistência de
pintos e peruzinhos à infecção por Salmonella. Isso implica que as aves jovens sendo
tratadas estão livres de Salmonella, porque as bactérias boas não são capazes de
deslocar a Salmonella se tiverem a oportunidade de se estabelecer primeiro no intestino.
Para isso, é imperativo administrar o tratamento imediatamente após o nascimento, antes
que os pintos ou peruzinhos possam ser expostos a Salmonella spp. O principal modo de
ação da “exclusão competitiva” é o estabelecimento de uma barreira física (boa cultura de
bactérias aderindo à parede intestinal) entre a parede intestinal e o lúmen do intestino. O
estabelecimento de bactérias favoráveis aumenta a produção de AGV e de lactato, que
reduzem o pH intestinal. O pH mais baixo e a alta concentração de VFA produzem um
ambiente hostil para bactérias indesejadas, como Salmonella spp. e E. coli (Lutful Kabir
2010).

475
4.1 Aplicação de probióticos em diferentes espécies animais

A Associação Científica Internacional de Probióticos e Prebióticos definiu os probióticos

“como uma mistura de microrganismos vivos que, quando administrados em quantidades
adequadas, conferem um benefício à saúde do hospedeiro” (Smith 2014). Antes de
explicar os mecanismos e benefícios proporcionados por esses microrganismos, é
importante especificar por que, se um microrganismo deve ser considerado um probiótico,
ele deve atender a uma série de requisitos: (1) não patogênico; (2) pode aderir a células
epiteliais; (3) pode colonizar e se reproduzir no hospedeiro; (4) capaz de sobreviver à
passagem pelo GIT; (5) é resistente à acidez gástrica e ao conteúdo biliar; (6) produz
metabólitos que inibem ou matam bactérias patogênicas; e (7) foi submetido a ensaios in
vitro e in vivo que demonstram seus benefícios. Finalmente, um probiótico deve
permanecer viável nas condições de processamento, produção e armazenamento (Kabir
2009). Os seguintes benefícios são esperados da administração de probióticos (Syngai et
al. 2016): (1) estimulação do desenvolvimento da microbiota benéfica; (2) redução e
prevenção da colonização por patógenos entéricos; (3) modulação da atividade
imunológica; (4) estimulação da saúde epitelial; (5) aumento da capacidade digestiva; e
(6) auxiliar na maturação do tecido intestinal. Os probióticos podem influenciar o sistema
imunológico direta e indiretamente. A influência direta é exercida por diferentes espécies
de Lactobacillus que aumentam os níveis de citocinas e anticorpos (Haghighi et al. 2006;
Brisbin et al. 2011).

Aves

Numerosas cepas probióticas foram testadas para uso em aves para melhorar o
desempenho, prevenir a colonização patogênica e melhorar a imunidade. Probióticos,
como Lactobacillus johnsonii, Bacillus subtilis e um Lactobacillus johnsonii FI9785
multicepa modificaram a microbiota intestinal reduzindo os níveis de bactérias
patogênicas, como Salmonella enteritidis e Clostridium perfringens em pintos recém-
nascidos (La Ragione et al. 2004; Higgins et al. 2004; Higgins et al. 2008). Além disso, um
probiótico de múltiplas cepas aumentou significativamente o número de lactobacilos e
bifidobactérias no ceco de frangos de corte (Mountzouris et al. 2007).

Os probióticos para aves podem conter uma ou mais cepas de microrganismos e podem
ser administrados isoladamente ou em combinação com outros aditivos na ração ou na
água. O uso de probióticos em frangos de corte para o controle de Salmonella spp. foi
eficaz quando pintos nascidos foram alimentados com uma suspensão do conteúdo
intestinal de galinhas adultas (Nurmi e Rantala 1973). No entanto, esta primeira proposta
de uso de “probiótico” provou ter sérias limitações, principalmente a potencial
476
transferência de doenças junto com os microrganismos benéficos. Por esse motivo,
pesquisas subsequentes se concentraram no desenvolvimento de probióticos definidos,
capazes de serem cultivados e administrados como culturas puras (Smith 2014). Foi
desenvolvida uma gama de probióticos, obtidos de várias maneiras e para os quais a
dosagem e o tempo no ciclo em que são administrados também variam. Novas
estratégias de aplicação, como pulverizar o probiótico em pintos ou ovos embrionados,
também são estudadas, e métodos potenciais, como a aplicação in ovo, estão sendo
avaliados (Cox e Dalloul 2015).

Uma variedade de espécies de bactérias (Bacillus, Bifidobacterium, Enterococcus,

Lactobacillus, Streptococcus e Lactococcus spp.) e espécies de leveduras
(Saccharomyces spp.) foram testadas e usadas como probióticos em aves. A maior parte
das pesquisas conduzidas objetivou especificamente investigar os efeitos dos probióticos
na redução do número de microrganismos patogênicos no GIT. No entanto, uma
quantidade considerável de pesquisas também examinou os efeitos dos probióticos na
melhoria do crescimento e do desempenho em aves sem doença aparente.
Suplementação de dietas com uma única cepa de Lactobacillus sp. (L. casei, L.
fermentum, L. bulgaricus, L. reuteri) mostrou melhorar o peso corporal e a eficiência
alimentar em frangos de corte. Resultados semelhantes foram mostrados quando frangos
de corte receberam várias cepas de Lactobacillus sp., probióticos à base de Bacillus sp.
(B. coagulans, B. subtilis, B. licheniformis e B. amyloliquefaciens) também foram
empregados com sucesso em dietas avícolas e mostraram ter efeitos promotores de
crescimento.

Diferentes estudos experimentais mostraram que galinhas tratadas com probióticos

produzem um maior número de anticorpos em resposta a um determinado antígeno
(Brisbin et al. 2010). Os probióticos também podem ter efeitos indiretos, promovendo o
crescimento de outras bactérias. Por exemplo, Lactobacillus agilis e Lactobacillus
salivarus podem estimular a microbiota produtora de butirato e restabelecer o equilíbrio da
microbiota (Meimandipour et al. 2009). Outro benefício dos probióticos é competir com
microorganismos patogênicos como Salmonella, Enterobacter sakasaki e Clostridium
difficile, que têm uma alta capacidade de adesão à mucosa intestinal (Collado et al. 2005).

As cepas de probióticos que ajudam a reduzir esses níveis de adesão incluem bactérias
dos gêneros Bifidobacterium (Collado et al. 2005) e Lactobacillus (Servin e Coconnier
2003). No entanto, essa capacidade é altamente dependente da origem do
microrganismo, visto que bactérias do intestino de galinhas apresentam maior capacidade

477
de aderir à mucosa e, portanto, de deslocar microrganismos patogênicos (Collado et al.
2005).

Os efeitos inibitórios das bactérias probióticas em microrganismos indesejáveis podem

resultar da produção de metabólitos como peróxido de hidrogênio (H 2O2), diacetil,
bacteriocinas e ácidos orgânicos. Uma bacteriocina purificada produzida por Lactobacillus
salivarius NRRL B-30.514 foi usada para tratar galinhas, causando uma clara redução no
número de C. jejuni em seus intestinos (Stern et al. 2006). Outros compostos que auxiliam
na exclusão de microrganismos patogênicos humanos são os ácidos orgânicos, como
ácido láctico, acético ou propiônico, que diminuem os níveis de pH no intestino e reduzem
a velocidade de multiplicação do patógeno (Blajman et al. 2015).

A eficácia dos probióticos depende de vários fatores, como a composição das rações
mistas, o momento em que são administrados e a origem dos microorganismos. Parece
que a eficácia das culturas probióticas é maior quando contêm um maior número de
gêneros (Chambers e Gong 2011). Da mesma forma, a origem afeta a eficácia, já que as
cepas que vêm diretamente do intestino do frango são mais eficazes do que as de outras
fontes. Além disso, a composição probiótica pode ser benéfica para uma raça de frango,
mas não para outras. Outro fator que afeta a eficácia dos probióticos é o momento em
que são administrados. Quando os probióticos são administrados em um estágio inicial do
ciclo, eles terão efeitos positivos apenas até a semana 6, mostrando maior diversidade e
abundância de Lactobacillus e uma redução significativa na presença de patógenos de
frango em comparação com o controle (Nakphaichit et al. 2011). Também foi sugerido que
a administração de probióticos tem um efeito maior sobre os microorganismos
patogênicos após uma mudança na dieta ou após a terapia com antibióticos (Zulkifli et al.
2000).

Lactobacillus é o probiótico mais comumente usado; seus benefícios relatados incluem

aumento do ganho de peso, maior eficácia na utilização da ração e redução da
mortalidade (Zulkifli et al. 2000; Kalavathy et al. 2003; Timmerman et al. 2006). O modelo
probiótico tem sido amplamente utilizado em frangos de corte para o controle de
Salmonella, e foi relatado que o emprego dessas culturas levou a reduções na
colonização por este patógeno, um efeito que também está correlacionado com aumento
de ganho de peso e melhor conversão de alimento em massa corporal (Chambers e Gong
2011).

Suínos

O desmame praticado atualmente é um dos períodos mais críticos para os suínos, sendo
caracterizado pela queda no consumo de alimentos, levando a anorexia severa, aumento
478
da suscetibilidade a distúrbios digestivos, atrasos no crescimento e infecções
microbianas. A mudança no substrato alimentar também leva a mudanças significativas na
funcionalidade do intestino. Leveduras Saccharomyces cerevisiae, suas paredes celulares
ou frações extraídas (mannan oligossacarídeos, β-glucanos), parecem constituir
alternativas positivas. Seu uso em dietas suínas pode contribuir para melhorar o
desempenho do crescimento, estimular o sistema imunológico, manter o equilíbrio da
microflora digestiva e prevenir a adesão bacteriana às células epiteliais intestinais.
Leveduras ou produtos de fermento podem ser alternativas potenciais aos promotores de
crescimento de antibióticos para suínos.

O efeito da inclusão da levedura S. cerevisiae ou sua fração da parede celular em dietas

para leitões desmamados para desempenho de crescimento, utilização de nutrientes e
alguns parâmetros morfológicos e imunológicos foi avaliado. Duas dietas foram
suplementadas com 1 g/kg de levedura viva ou paredes celulares de levedura para um
experimento com duração de 5 semanas. No geral, aumentos no ganho de peso e no
peso corporal final foram observados, e a relação alimentação/ganho tendeu a melhorar
com dietas de fermento. A inclusão de leveduras ou paredes celulares de levedura reduziu
o número de linfócitos intraepiteliais e aumentou a produção de AGV e a porcentagem de
acetato, tendo efeitos benéficos no desempenho produtivo dos leitões após o desmame
(Lizardo et al. 2008).

Os efeitos de S. cerevisiae [cepa CNCM I-4407, 10 (10) ufc/g] foram estudados na

diarreia pós-desmame, resposta imune e desempenho de crescimento em leitões
desmamados desafiados oralmente com Escherichia coli enterotoxigênica cepa O149:
K88. A levedura viva foi fornecida às porcas e seus leitões no final da gestação,
aleitamento e pós-desmame. As porcas foram alimentadas com dieta basal sem ou com
suplementação (ou seja, 1 g/kg de levedura viva) desde o dia 94 de gestação e durante a
lactação até o desmame dos leitões (dia 28). Os leitões lactentes das porcas
suplementadas foram tratados por via oral com 1 g de fermento vivo em mingau três
vezes por semana até o desmame. Os leitões desmamados foram alimentados com uma
dieta inicial basal sem ou com suplementação (ou seja, 5 g de fermento vivo/kg de ração
durante 2 semanas). As pontuações diárias de diarreia, a duração da diarreia e a
eliminação de bactérias patogênicas E. coli nas fezes foram significativamente mais
baixas nos leitões suplementados. A administração de levedura viva aumentou
significativamente os níveis de IgA no soro do leitão. As evidências indicam que a
diminuição do estresse relacionado à infecção e a diminuição da gravidade da diarreia em
leitões desmamados alimentados com levedura afetaram positivamente sua capacidade

479
de crescimento no período pós-desmame. Assim, a suplementação dietética com levedura
viva S. cerevisiae para porcas e leitões no final da gestação, amamentação e períodos
pós-desmame pode ser útil na redução da duração e severidade da diarreia pós-
desmame causada por E. coli. A redução do estresse relacionado à infecção e da
gravidade da diarreia em leitões desmamados alimentados com fermento pode afetar
positivamente o desempenho de crescimento no período pré desmame. Os resultados
deste estudo sugerem que a levedura S. cerevisiae viva (cepa CNCM I-4407) pode ser
uma alternativa para prevenção e tratamento de diarreia pós desmame. Além disso, S.
cerevisiae pode diminuir as respostas inflamatórias induzidas por E. coli enterotoxigênica
F4+ em células epiteliais intestinais de suínos.

As E. coli enterotóxicas são bactérias gram-negativas patogênicas que infectam várias

espécies de animais de fazenda, incluindo porcos. A infecção por E. coli enterotoxigênica
e a secreção enterotóxica podem induzir inflamação intestinal e diarréia, resultando em
redução da taxa de crescimento, aumento da mortalidade e perda econômica (Fairbrother
et al. 2005). Leveduras probióticas podem fornecer proteção contra a inflamação intestinal
induzida por patógenos entéricos. Em leitões, a infecção por E. coli enterotoxigênica F4+
causa inflamação, diarreia e danos intestinais. As cepas de levedura S. cerevisiae (cepa
CNCM I-3856) e S. cerevisiae var. boulardii (cepa CNCM I-3799) foram investigados
quanto à expressão diminuída de citocinas pró-inflamatórias e quimiocinas em células
epiteliais intestinais IPI-2I cultivadas com E. coli enterotoxigênica F4+. Os resultados
mostraram que S. cerevisiae viável inibiu a expressão do gene TNF-a induzida por ETEC,
ao passo que Saccharomyces boulardii não. Em contraste, S. cerevisiae morta falhou em
inibir a expressão de genes pró-inflamatórios: esta inibição era dependente de fatores
solúveis secretados. O sobrenadante da cultura de S. cerevisiae diminuiu o mRNA
induzido por TNF-a, IL-1α, IL-6, IL-8, CXCL2 e CCL20 de E. coli enterotoxigênica. Além
disso, a fração filtrada do sobrenadante da cultura de S. cerevisiae a 10 kDa apresentou
os mesmos efeitos, exceto para TNF-a.

A inclusão de Lactobacillus sobrius em dietas para suínos pode ser significativamente

eficaz na redução da colonização por E. coli F4+ e pode melhorar o ganho de peso de
leitões infectados (Konstantinov et al. 2008). Além disso, um probiótico multicepa
contendo L. acidophilus, L. bulgaricus, B. subtilis e S. cerevisiae aumentou
significativamente os níveis de bifidobactérias ileais e colônicas e diminuiu os níveis de
coliformes colônicos.

480
Ruminantes

A levedura S. cerevisiae tem sido usada como alternativa aos aditivos antimicrobianos
para rações em ruminantes há mais de 15 anos. As respostas de produção mostraram
aumento no ganho de peso vivo em bovinos de corte e aumento na produção de leite e
produção de gordura em vacas leiteiras. No entanto, as respostas foram altamente
variáveis e aparentemente influenciadas pela composição da dieta e pelo estágio
fisiológico do animal. A levedura está geralmente disponível em duas formas diferentes:
produtos de cultura de leveduras e produtos de células de leveduras vivas. Os animais
ruminantes, incluindo bovinos, ovinos e caprinos, dependem principalmente da
degradação microbiana de sua alimentação, e não da degradação direta da enzima, como
na maioria dos não ruminantes. O intestino anterior alargado do gado ruminante permite
que uma grande e diversa população microbiana ganhe acesso aos alimentos antes que
os produtos desta fermentação e as células microbianas entrem nas regiões de absorção
do GIT (Russell 2002).

O rúmen é uma via de simbiose entre o hospedeiro ruminante e os micróbios. Sabe-se

que os microorganismos estão envolvidos no animal hospedeiro no fornecimento de
proteínas, vitaminas e ácidos orgânicos de cadeia curta. No rúmen do gado, por exemplo,
a levedura viva pode melhorar a produção de leite e o ganho de peso por estimulação da
atividade microbiana, embora essa estimulação possa depender de certas espécies
microbianas. A alimentação do gado suplementada com a levedura viva S. cerevisiae
Sc47 (0,5 ou 5 g/dia) modifica a diversidade e população bacteriana e altera o padrão de
fermentação e os parâmetros físico-químicos no rúmen que podem modificar a
composição da microbiota. Neste estudo, a melhoria dos parâmetros zootécnicos
acompanha uma mudança no grupo fibrolítico da manina (ou seja, Fibrobacter e
Ruminococcus) (Pinloche et al. 2013).

Vacas leiteiras de alta produção no início da lactação têm uma estratégia nutricional com
o objetivo de fornecer energia adequada e proteína não degradada no rúmen para
atender às altas necessidades em relação ao aumento da produção de leite; na maioria
das vezes, as vacas estão com balanço energético negativo (Julien et al. 2015). Portanto,
deve ser importante usar levedura viva como aditivo alimentar para o nível de proteína
degradável no rúmen da dieta, aumentando a energia da ração com uma determinada
quantidade de grãos (Julien et al. 2015).

A inclusão de levedura viva estabiliza o ambiente ruminal por meio de valores de pH mais
altos e melhora a digestão das fibras (Campanile et al. 2008). Esses resultados-chave
certamente explicam porque o impacto da suplementação de levedura viva foi estudado
481
principalmente no metabolismo energético, em relação à proporção forragem:
concentrados da dieta (Lascano et al. 2009). O consenso era que os efeitos da levedura
viva eram aumentados quando os animais consumiam uma dieta altamente concentrada
ou durante uma transição alimentar abrupta (Chaucheyras-Durand et al. 2008). No
entanto, alguns estudos têm considerado o efeito potencial da levedura viva no
metabolismo do nitrogênio amoniacal ruminal, mais especificamente na degradação ou
síntese de proteínas microbianas. Ao estudar a interação entre a levedura viva e o nível
de proteína degradável no rúmen da dieta, Julien et al. (2015) concluíram que o teor de
proteína degradável no rúmen de vacas leiteiras em lactação, alimentadas com dieta,
poderia impactar diretamente na capacidade acidogênica da dieta: o farelo de soja curtido
foi menos acidogênico do que o farelo de soja quando usado como principal fonte de
proteína. O efeito positivo da levedura viva no pH ruminal em vacas recebendo uma dieta
altamente acidogênica e, portanto, sofrendo de acidose ruminal subaguda (SARA) já é
conhecido, uma vez que a levedura viva poderia modular a digestão do N dietético em
vacas leiteiras em lactação precoce e um rúmen inadequado cuja dieta tinha conteúdo de
proteína degradável. Na verdade, a levedura viva parecia ter um efeito pós-ruminal sobre
a digestibilidade do N ainda mais pronunciado do que a quantidade de N de bypass, ou
seja, com fontes de proteína dietética protegida. Em ambos os casos, a levedura viva
usada como aditivo alimentar permite uma melhor utilização da dieta em vacas leiteiras
(Julien et al. 2015) e, além disso, aumenta o AGV total ruminal.

O estresse térmico afeta negativamente a produtividade e a longevidade das vacas

leiteiras. O estresse calórico reduziu a ingestão e aumentou a dependência da glicose,
portanto, estratégias de alimentação capazes de melhorar a digestibilidade da dieta são
plausíveis para melhorar o fluxo e o desempenho de nutrientes pós-rúmen. Avanços no
manejo, como sistemas de resfriamento e estratégias de nutrição, podem atenuar os
efeitos negativos do estresse térmico, mas a perda econômica da redução da produção
de leite, eficiência reprodutiva e saúde animal durante as estações quentes é um grande
problema para a indústria de laticínios em todo o mundo (St. Pierre et al. 2003). O efeito
da levedura viva (S. cerevisiae) na digestão e desempenho de vacas em lactação durante
os meses quentes de verão do sudeste do Brasil foi avaliado (Salvati et al. 2015) usando
tratamentos com S. cerevisiae equivalente a 25 x 1010 ufc de células vivas e 5 x 10 10 cfu
de células mortas com cobertura para a dieta pela manhã. Foi observada uma tendência
de aumento da glicose plasmática com levedura (62,9 vs. 57,3 mg/dl), diminuição da
frequência respiratória (48 vs. 56 respirações/min) e aumento do conteúdo de niacina
plasmática (1,31 vs. 1,22 μg/ml e 3,77 g/ml), embora as vacas tivessem temperatura retal
semelhante. Lactato e butirato ruminal como proporções de ácidos orgânicos ruminais
482
foram reduzidos pela levedura. O nitrogênio da uréia plasmática foi aumentado pela
levedura ao longo de 24 h. O tratamento com fermento produziu um pH sanguíneo mais
alto em comparação com o controle, 7,34 e 7,31, respectivamente. A suplementação de
fermento melhorou o desempenho da lactação de vacas leiteiras sob estresse térmico,
embora essa melhoria aparentemente envolvesse a regulação da homeotermia corporal
em vez de melhorar a digestibilidade (Salvati et al. 2015).

Em vacas leiteiras de alta produção, a levedura viva S. cerevisiae difere do bicarbonato

de sódio para estabilizar o pH ruminal (Marden et al. 2008). Vacas Holandesas em início
de lactação foram suplementadas com 150 g/dia de bicarbonato de sódio ou 5 g/dia de
levedura viva durante um período experimental de 21 dias. O total de AGV, acetato e
propionato foram maiores com ambos os aditivos, mas o butirato permaneceu constante;
e as concentrações médias de lactato total diminuíram 67% com S. cerevisiae. A
conclusão foi que S. cerevisiae evitou o acúmulo de lactato e permitiu uma melhor
digestão das fibras, enquanto o bicarbonato de sódio pareceu agir apenas como um
tampão exógeno.

Além disso, uma abordagem bioenergética redox para o efeito de S. cerevisiae no pH

ruminal durante SARA induzida em vacas leiteiras foi descrita por Marden et al. (2013). A
capacidade de S. cerevisiae a 4 g/vaca/dia em otimizar o pH ruminal foi avaliada para
entender seu modo de ação durante a acidose induzida em vacas. Os efeitos benéficos
da levedura viva nas concentrações de AGV e na proporção de propionato no fluido
ruminal foram maiores em comparação com a dieta controle. A proporção de butirato
diminuiu de 15,8% para 14,2% de AGV total, e a concentração de lactato diminuiu 55%
em média. A estabilização do pH ruminal (> 6) é o resultado da capacidade do S.
cerevisiae de eliminar o oxigênio após uma dieta rica em amido. A levedura viva parece
atuar no poder redutor do meio ruminal, diminuindo a pressão parcial de oxigênio e,
portanto, aumentando a atividade das bactérias anaeróbias.

Equinos

As práticas de manejo intensivo na indústria equina apresentam um desafio único para o

microbioma do intestino grosso. Práticas comuns de manejo, como dietas com alto teor de
concentrado, baixa qualidade da forragem, alimentação com refeição e confinamento, têm
impacto na função intestinal, especificamente na fermentação do intestino grosso. O
microbioma do intestino grosso equino é um ecossistema complexo e diverso, e a
interrupção da microbiota e de seu ambiente pode levar ao aumento da incidência de
distúrbios gastrointestinais. Em cavalos, cujo compartimento digestivo alvo é o ceco-
cólon, a distribuição de probióticos parece particularmente relevante em caso de estresse
483
(por exemplo, transporte) ou durante a distribuição de uma dieta rica em concentrado
(Coverdale 2016). A pesquisa sobre o uso de probióticos em cavalos para melhorar a
fermentação intestinal e a digestibilidade da dieta foi limitada. A maioria dos estudos
utilizou cultura de levedura viva (S. cerevisiae) suplementada com uma variedade de
dietas. Apesar da falta de evidências de colonização com a cepa suplementada de S.
cerevisiae, melhorias na digestibilidade da parede celular foram evidentes,
independentemente da dieta. Em particular, quando adicionado a dietas ricas em amido, a
suplementação de S. cerevisiae parece mitigar algumas das interrupções, como a
redução da digestibilidade da fibra, que ocorrem no intestino posterior. A manutenção da
digestão das fibras é de particular interesse quando os cavalos consomem dietas com alto
teor de concentrado com o objetivo de desempenho atlético ou produção máxima
(lactação, crescimento, etc.).

Probióticos, ou micróbios alimentados diretamente, têm sido amplamente usados em

cavalos para o tratamento e prevenção de doenças gastrointestinais. A introdução oral
desses microrganismos benéficos vivos no trato intestinal produziu resultados variáveis.
No entanto, é difícil comparar os dados devido às variações na escolha do organismo,
dosagem e dieta basal. Embora ainda haja muitas perguntas sem resposta sobre o modo
de ação dos probióticos de sucesso, as evidências indicam inibição competitiva e
imunidade aumentada. Uma variedade de espécies microbianas foram testadas em
cavalos como probióticos, tais como Lactobacillus spp., Enterococcus spp.,
Bifidobacterium spp. e Saccharomyces spp. (Coverdale 2016). As dietas contendo
Lactobacillus acidophilus tiveram efeitos limitados na redução do risco de acidose
associada à alimentação de cavalos com concentrados de alto teor de amido ou na
digestibilidade dos nutrientes. Foi demonstrado que leveduras vivas eliciam um aumento
na digestibilidade das fibras no cólon e modulam o equilíbrio das comunidades
bacterianas do intestino posterior, com um risco reduzido de acidose láctica (Jouany et al.
2008). O uso desses produtos resultou em melhor digestibilidade da fibra em equinos com
dietas ricas em amido e fibras.

Coelhos

A criação intensiva de coelhos pode alterar o ambiente, causando estresse fisiológico e

aumentando a frequência de doenças entéricas, consequentemente causando alta
mortalidade e diminuição do desempenho reprodutivo e produtivo das coelhas (Combes et
al. 2013). A aplicação de probióticos como suplementos dietéticos pode controlar doenças
entéricas. Assim, alguns probióticos exercem um efeito de barreira contra
microorganismos patogênicos, impedindo seu desenvolvimento e colonização no trato
484
digestivo (Vanderpool et al. 2008). O microorganismo mais frequentemente examinado,
relacionado aos probióticos, tem sido a levedura S. cerevisiae, conhecida por melhorar o
desempenho de crescimento em coelhos mestiços. O efeito da suplementação de
leveduras vivas na dieta de coelhas sobre sua mortalidade e desempenho reprodutivo e o
desempenho de sua progênie foi estudado em dois grupos com dieta diferente durante
dois ciclos reprodutivos. O acasalamento natural foi realizado 11 dias após o
acasalamento e os kits foram desmamados aos 28 dias de idade. A adição de 1 g/kg de
dieta aumentou a fertilidade e reduziu a mortalidade das coelhas, ao mesmo tempo que
melhorou a taxa de viabilidade dos filhotes ao nascimento; nenhuma diferença foi
observada durante a segunda lactação. No entanto, a dieta suplementada com o
probiótico testado não teve efeito sobre outras características de desempenho reprodutivo
em coelhas (Belhassen et al. 2016).

Caninos e felinos

Lactobacillus spp. e Enterococcus spp. foram estudados como probióticos para cães e
Bifidobacterium spp. para gatos.

Aquicultura

Os probióticos destinados ao uso aquático devem levar em consideração a relação que

um organismo aquático tem com seu ambiente direto. As bactérias anaeróbicas
facultativas Gram-negativas são dominantes no trato digestivo de peixes e crustáceos; no
entanto, a microbiota intestinal pode frequentemente mudar com a intrusão de micróbios
da água e dos alimentos (Chaucheyras-Durand e Durand 2010). Assim, um grande
número de probióticos desenvolvidos na aquicultura provavelmente são bactérias
originadas diretamente do meio aquático. No entanto, a maioria dos probióticos
comumente usados na aquicultura são bactérias procarióticas ou leveduras, como
Lactobacillus spp., Pediococcus spp., Bacillus spp., Vibrio spp. e S. cerevisiae. Espécies
de levedura também têm sido usadas como probióticos e para liberação de enzimas em
rações animais. Vários microrganismos eucarióticos são capazes de sobreviver à
passagem pelas condições ácidas e sais biliares do GIT para o intestino. Como esses
microrganismos podem ser benéficos para a saúde do hospedeiro, utilização da ração e
desempenho de crescimento, eles também podem ser usados como probióticos
alternativos. Os probióticos podem ter como alvo ovas e larvas de peixes, juvenis e
adultos de peixes, crustáceos, moluscos bivalves e também alimentos vivos como
rotíferos, Artemia ou algas unicelulares (Verschuere et al. 2000). Os efeitos de promoção
do crescimento por meio de uma melhor utilização e digestão dos alimentos, bem como o
controle biológico da colonização de patógenos, são os benefícios esperados mais
485
importantes das aplicações de probióticos (Chaucheyras-Durand e Durand 2010). Surtos
de doenças causados por Vibrio spp. ou Aeromonas spp. foram reconhecidas como uma
restrição significativa na produção de aquicultura (Verschuere et al. 2000), particularmente
no subsetor de camarão, onde a vibriose é atualmente uma das principais doenças
identificadas (Castex et al. 2008). Foi demonstrado que alguns probióticos protegem a
truta arco-íris contra infecções de pele causadas por Aeromonas bestiarum e um
patógeno eucariótico, Ichthyophthirius multifiliis (Pieters et al. 2008).

Os efeitos do probiótico dietético S. cerevisiae microencapsulado com goma guar no

bagre listrado (Pangasianodon hypophthalmus) por um período de cultura de 120 dias
demonstrou que as dietas suplementadas com S. cerevisiae melhoraram
significativamente o desempenho de crescimento, incluindo a taxa de crescimento e FCR.
S. cerevisiae não teve efeitos nos parâmetros hematológicos e na química do sangue,
mas aumentou os parâmetros imunes humorais, incluindo imunoglobulina total, lisozima e
atividades alternativas do complemento (Boonanuntanasarn et al. 2018).

No robalo asiático, a mistura de L. casei M15, L. plantarum D8, L. pentosus BD6, L.

fermentum LW2, Enterococcus faecium 10–10, B. subtilis E20 e S. cerevisiae P13
melhorou o desempenho de crescimento ou a doença resistência. Uma dieta contendo
uma mistura de probióticos de 109 ufc (kg de dieta) -1 é recomendada para melhorar o
crescimento e o estado de saúde do robalo asiático (Lin et al. 2017).

Os efeitos da substituição dietética da farinha de peixe por fermento vivo, S. cerevisiae, e

do aumento da temperatura da água sobre a diversidade e composição da microbiota
intestinal de truta arco-íris foram descritos. As trutas foram criadas em temperaturas de
água de 11 ºC (frio) ou 18 ºC (quente) durante 6 semanas. A alimentação com fermento
vivo aumentou principalmente a carga de fermento no intestino da truta, ao passo que o
aumento da temperatura da água alterou significativamente a diversidade bacteriana e a
abundância da microbiota intestinal. A levedura viva pode substituir 40% da farinha de
peixe sem interromper as comunidades de bactérias no intestino da truta arco-íris, embora
o aumento da temperatura da água devido a flutuações sazonais ou mudanças climáticas
possa causar uma disbiose intestinal que prejudica a saúde dos peixes de criação
(Huyben et al. 2018).

Abelhas

As abelhas (Apis millifera), como polinizadores na agricultura, têm um papel crítico na

produção global de alimentos. Em todo o mundo, 75% das safras comercializadas no
mercado global dependem em algum grau dos polinizadores. As abelhas são
frequentemente os polinizadores mais importantes das culturas e as abelhas melíferas
486
são os polinizadores mais amplamente utilizados. Estudos mostram que a diversidade de
polinizadores pode melhorar o rendimento da colheita ou a qualidade dos frutos.
Restaurar e manter a diversidade de polinizadores é, portanto, muito importante para a
agricultura, bem como para a vegetação natural. Recentemente, as populações de
abelhas melíferas nos EUA, Canadá e Europa sofreram perdas anuais inexplicáveis de
um fenômeno conhecido como “desordem do colapso das colônias”. Vários membros da
microbiota Apis mellifera (Acetobacteriaceae, Bifidobacterium, Lactobacillus, Simunsiella)
produzem SCFA, como os ácidos lático e acético, como produtos residuais durante o
metabolismo de carboidratos (Vasquez et al. 2012). As abelhas possuem uma abundante,
diversa e antiga microbiota LAB em sua cultura, com efeitos benéficos para a saúde das
abelhas, defendendo-as contra ameaças microbianas. Esta microbiota se tornará central
para os estudos sobre a saúde das abelhas, incluindo o distúrbio do colapso das colônias,
e atuará como um caso exemplar de simbiose inseto/micróbio. As espécies de abelhas
melíferas mais as abelhas apid relacionadas mostram uma das maiores coleções de
novas espécies dos gêneros Lactobacillus e Bifidobacterium já descobertas em um único
inseto, sugerindo uma longa história de associação (> 80 milhões de anos). A microbiota
associada a abelhas destaca o Lactobacillus kunkeei como o membro dominante do LAB.
As práticas profiláticas que aumentam o LAB, ou alimentação complementar do LAB,
podem servir em abordagens integradas para a prestação de serviços sustentáveis de
polinizadores (Vasquez et al. 2012).

SCFA pode ser absorvido através da parede retal em insetos, e a maioria do pólen e
biomassa bacteriana dentro de um adulto A. mellifera está contido dentro do reto (Bradley
2008). Durante o inverno, a Apis pode obter nutrição adicional dessas bactérias retais,
pois os alimentos consumidos são armazenados por períodos mais longos no reto durante
os meses de inverno (Lindström et al. 2008). Os probióticos Lactobacillus e
Bifidobacterium evoluíram em sinergia com as abelhas e são importantes na defesa de
seu hospedeiro.

5. Simbióticos
Um simbiótico é uma combinação de um ou mais probióticos e prebióticos. Os prebióticos
podem aumentar a sobrevivência de cepas probióticas, bem como estimular a atividade
das bactérias endógenas do hospedeiro. Os simbióticos são aditivos que combinam o uso
de probióticos e prebióticos de modo que atuem sinergicamente (Alloui et al. 2013). O uso
de simbióticos foi baseado no conceito de que uma mistura de probióticos e prebióticos
afetam beneficamente o hospedeiro, melhorando a sobrevivência e implantação de
487
organismos probióticos e promovendo seletivamente o crescimento ou metabolismo de
bactérias benéficas no trato intestinal (Gibson e Roberfroid 1995). Foi sugerido que os
efeitos clínicos variam de modestos a significativos de uma única cepa de probióticos <
probióticos de múltiplas cepas < ou < simbióticos de cepa única < simbióticos de múltiplas
cepas. Acredita-se que uma combinação de um prebiótico e um probiótico, denominado
simbiótico, exerce efeitos sinérgicos para manter a saúde intestinal. Especificamente,
acredita-se que a fração probiótica promova o crescimento de bactérias patogênicas.
Além disso, os simbióticos ajudam a reduzir a concentração de metabólitos indesejáveis,
incluindo as nitrosaminas, a inativar os carcinógenos e a prevenir a constipação e a
diarréia de diversas etiologias em seres humanos (Bengmark e Martindale 2005). Em
comparação com o uso de componentes individuais, os simbióticos parecem modular
beneficamente a composição da microbiota intestinal, aumentando as bactérias benéficas
(ou seja, lactobacilos e bifidobactérias) e reduzindo outras bactérias menos desejáveis (ou
seja, coliformes, enterococos) (Modesto et al. 2011).

Frangos de corte

Poucos ensaios de pesquisa foram conduzidos para demonstrar os efeitos dos

simbióticos no desempenho de frangos de corte. A suplementação de dietas com um
produto simbiótico em comparação com dietas basais suplementadas com probiótico
(homo fermentativo e um hétero fermentativo Lactobacillus sp.) Mostrou melhorar
significativamente o peso corporal, ganho médio diário, eficiência alimentar e
porcentagem de rendimento de carcaça de produtos simbióticos em comparação com
controles ou probióticos frangos de corte alimentados (Awad et al. 2009). Os simbióticos
também mostraram alterar beneficamente a composição da microbiota intestinal e
aumentar a altura das vilosidades e a profundidade das criptas na mucosa intestinal. O
aumento na altura das vilosidades e na relação altura das vilosidades: profundidade da
cripta foi associado à melhoria do desempenho de crescimento para ambos os simbióticos
e probióticos (Awad et al. 2009). Aumento significativo no ganho de peso e uma
diminuição na FCR foram relatados quando as aves foram alimentadas com dietas com
uma combinação de IOS e um probiótico de múltiplas cepas (consistindo de 11 cepas de
Lactobacillus spp.). Uma combinação desses aditivos dietéticos como um simbiótico em
populações bacterianas cecais e concentrações de ácidos graxos voláteis cecais e ácidos
graxos não voláteis de frangos de corte também foram avaliados (Mookiah et al. 2014).

Cães e gatos

Existem poucos dados sobre o uso de simbióticos em cães e gatos. Em um estudo, o

efeito de um simbiótico de múltiplas espécies na microbiota fecal foi investigado em cães
488
e gatos saudáveis (Garcia-Mazcorro et al. 2011). O simbiótico (contendo 5 x 10 9 unidades
formadoras de colônias de uma mistura de sete cepas probióticas e uma mistura de FOS
+ arabinogalactana) foi alimentado diariamente por 21 dias, com mudanças na microbiota
fecal analisadas por análises independentes de cultura visando genes bacterianos 16S
rRNA (por exemplo, 454-pirosequenciamento). A ingestão de simbióticos levou ao
aumento da abundância de algumas espécies probióticas nas fezes; no entanto, nenhuma
mudança significativa na composição das espécies bacterianas foi identificada.

Aquicultura

Um exemplo de simbióticos na aquicultura é a combinação de oligossacarídeos

prebióticos e bactérias probióticas. Uma avaliação da resposta de fase aguda em truta
arco-íris (Oncorhynchus mykiss) alimentada com dietas funcionais suplementadas com
pré e probióticos (ou seja, mannan oligossacarídeos e S. cerevisiae, respectivamente) e
desafiada por Vibrio anguillarum ou estresse crônico via manutenção sob alta densidades
de estocagem sugerem que ambos os suplementos têm alto potencial imunoestimulante
para peixes de criação. Na truta arco-íris juvenil alimentada com dietas funcionais
suplementadas com pré ou probióticos (0,6% de mannan oligossacarídeos e 0,5% de S.
cerevisiae, respectivamente) ou a mistura de ambos mostra uma mudança dinâmica da
composição do microbioma e da dinâmica de modulação do microbioma por dietas
funcionais à base de mannan oligossacarídeos (Gonçalves e Gallardo-Escarate 2017).

Na tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus), S. cerevisiae JCM 7255 encapsulada e

liofilizada melhorou a estrutura intestinal e o desempenho de crescimento. Os linfócitos
intraepiteliais no intestino proximal foram significativamente maiores do que no controle, e
a redução da mortalidade cumulativa após o desafio com estreptococos oral também foi
observada (Pinpimai et al. 2015).

Em jovens pacus (Piaractus mesopotamicus) estressados e experimentalmente infectados

com Aeromonas hydrophila, a eficácia de um produto comercial (Glucan-MOS®) derivado
da levedura S. cerevisiae, contendo dois produtos combinados, β-1,3- ou 1,6 -glucanos e
mannans, alimentados por 30 dias, em períodos anteriores ao manejo intensivo,
aumentaram o crescimento e a imunidade inata. A suplementação de 0,1% Glucan-MOS®
melhorou o ganho de peso, a conversão alimentar e a taxa de eficiência proteica em
comparação com uma dieta controle. As dietas Glucan-MOS® 0,2% e 0,4% foram
suficientes para aumentar a explosão respiratória de leucócitos e atividade da lisozima, o
número de trombócitos, neutrófilos e monócitos no sangue após manipulação estressante
e desafio bacteriano, e resposta minimizada ao estresse, conforme mostrado por
diminuição dos níveis de cortisol e glicose quando comparada ao controle. O período de
489
30 dias foi suficiente para estimular o desempenho do crescimento, melhorar a utilização
de nutrientes, minimizar a resposta ao estresse e modular as respostas da imunidade
inata (Pereira Soares et al. 2018).

6. Comentários Finais e Orientações Futuras

Há grande potencial para o uso de prebióticos e probióticos como alternativas aos
antibióticos para melhorar o desempenho e reduzir a carga patogênica no intestino dos
animais. A microbiota intestinal é complexa e não está claro como as bactérias trazem
benefícios ao hospedeiro. A modulação das bactérias intestinais em direção a uma
comunidade “saudável” por carboidratos especiais que sustentam bactérias benéficas (os
chamados prebióticos) ou pela alimentação de bactérias vivas (os chamados probióticos)
está atualmente em pesquisa ativa. A análise da comunidade microbiana se tornou mais
precisa, fornecendo dados confiáveis de que as bactérias no GIT podem ser moduladas
de várias maneiras. Embora os mecanismos pelos quais os antibióticos melhoram a
saúde e a produtividade não tenham sido totalmente elucidados, novas ferramentas de
pesquisa, por exemplo, metagenômica e outras tecnologias habilitadas para genoma,
podem fornecer novas maneiras de elucidar a ecologia do microbioma intestinal,
interações patógeno-hospedeiro, imunidade desenvolvimento, nutrição e saúde. Uma
consideração cuidadosa deve ser dada ao selecionar combinações de prebióticos e
probióticos a serem usados como simbióticos, e os ensaios de pesquisa devem ser
realizados de acordo com a orientação aprovada pelas autoridades reguladoras para
demonstrar seu efeito sinérgico em comparação com o uso de qualquer um dos produtos
isoladamente e dependendo do uso pretendido e, finalmente, de acordo com os requisitos
de qualidade, eficácia e segurança. A inclusão de prebióticos específicos não terá nenhum
benefício sem a presença dos produtos bacterianos benéficos e direcionados e não terá
sucesso se o ambiente no qual eles são introduzidos for desfavorável. O aumento do
crescimento e a melhoria da saúde de animais domésticos alcançados pela promoção do
crescimento de certos micróbios no GIT com prebióticos ou probióticos é uma estratégia
benéfica e racional, mas seu uso em alguns sistemas de produção, como a aquicultura,
está apenas começando.

A pesquisa limitada sobre o uso de probióticos em cavalos para melhorar a fermentação

intestinal e a digestibilidade da dieta também produziu resultados contrastantes. As
bactérias probióticas têm um efeito positivo sobre a função GI em diferentes espécies. As
espécies de leveduras também têm sido utilizadas como probióticos e para a entrega de
enzimas em rações animais; o desenvolvimento de leveduras geneticamente modificadas
490
e células bacterianas que expressam novas substâncias como antibacterianos pode ter
potencial como probióticos (Biliouris et al. 2012). Em muitos desses estudos, não está
claro o quanto da resposta positiva obtida com probióticos pode ou deve ser considerada
no contexto de seu efeito na prevenção de problemas de saúde de melhoria da saúde e
bem-estar e quanto em seu efeito direto na utilização da dieta. Essas abordagens têm
sido utilizadas em sistemas de produção de animais para alimentação para promover a
saúde, mas é necessário avaliar sua eficácia e mecanismos de ação. O objetivo de tais
produtos nutracêuticos é melhorar a saúde GI, selecionando a microflora benéfica e
suprimindo patógenos intestinais e de origem alimentar. Se as necessidades de
crescimento das bactérias forem diferentes, é possível, em teoria, mudar a comunidade
microbiana de bactérias nocivas para não nocivas, alterando a dieta e,
consequentemente, a dinâmica intestinal. Espécies específicas podem ser selecionadas
para componentes alimentares resistentes, que escapam da digestão pelo hospedeiro,
mas estão prontamente disponíveis para a maquinaria metabólica dos micróbios alvos.
Microbianos de alimentação direta (probióticos) são direcionados para melhorar a saúde
GI, mas provavelmente só serão eficazes se seus requisitos de crescimento forem
atendidos. Na verdade, um produto simbiótico, que contém uma cepa probiótica e um
prebiótico que favorece o crescimento dessa cepa, pode ser uma boa solução em muitos
casos.

Agradecimentos Este trabalho foi apoiado pelo Projeto S2013/ ABI-2728 (Programa ALIBIRD-CM) da
Comunidade de Madrid, e pelo Projeto Ref. RTA2015-00010-C03-03 do Ministerio de Economía, Industria y
Competitividad, Espanha.

Referências
Abd El-Khalek E, Kalmar ID, De Vroey M et al (2012) Indirect evidence for microbiota reduction through dietary
mannanoligosaccharides in the pigeon, an avian species without functional caeca. J Anim Physiol Anim Nutr 96:1084–
1090
Alloui MN, Szczurek W, Świątkiewicz S (2013) The usefulness of prebiotics and probiotics in modern poultry nutrition:
a review. Ann Anim Sci 13:17–32
Anadón A, Martínez-Larrañaga MR, Martínez MA (2006) Probiotics for animal nutrition in the European Union.
Regulation and safety assessment. Regul Toxicol Pharmacol 45:91–95
Anadón A, Martínez-Larrañaga MR, Arés I, Martínez MA (2016) Chapter 1. Prebiotics and probiotics: an assessment of
their safety and health benefits. In: Ross Watson R, Preedy VR (eds) Probiotics, prebiotics, and synbiotics. Bioactive
foods in promoting health: probiotics and prebiotics. Academic, San Diego, CA, pp 3–23
Anadón A, Martínez-Larrañaga MR, Aresi MMA (2016a) Chapter 54. Prebiotics: safety and toxicity considerations. In:
Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity. Academic, Amsterdam, pp 757–775
Anadón A, Martínez-Larrañaga MR, Aresi MMA (2016b) Chapter 55. Probiotics: safety and toxicity considerations. In:
Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity. Academic, Amsterdam, pp 777–853
Apajalahti J, Kettunen A, Graham H (2004) Characteristics of the gastrointestinal microbial communities, with special
reference to the chicken. Worlds Poult Sci J 60:223–232
Awad WA, Ghareeb K, Abdel-Raheem S et al (2009) Effects of dietary inclusion of probiotic and synbiotic on growth
performance, organ weights, and intestinal histomorphology of broiler chickens. Poult Sci 88:49–55
Ballou AL, Rizwana AA, Mendoza MA et al (2016) Development of the chick microbiome: how early exposure
influences future microbial diversity. Front Vet Sci 3:2
Barko PC, McMichael MA, Swanson KS et al (2018) The gastrointestinal microbiome: a review. J Vet Intern Med 32:9–
25

491
 Baurhoo B, Letellier A, Zhao X et al (2007) Cecal populations of lactobacilli and bifidobacteria and Escherichia coli
populations after in vivo Escherichia coli challenge in birds fed diets with purified lignin or mannanoligosaccharides. Poult
Sci 86 (12):2509–2516
Beckmann L, Simon O, Vahjen W (2006) Isolation and identification of mixed linked β-glucan degrading bacteria in the
intestine of broiler chickens and partial characterization of respective 1,3-1,4-β-glucanase activities. J Basic Microbiol
46(3):175–185
Bedford A, Li Z, Li M et al (2012) Epidermal growth factor-expressing Lactococcus lactis enhances growth performance
of early-weaned pigs fed diets devoid of blood plasma. J Anim Sci 90:4–6
Bednarczyk M, Stadnicka K, Kozlowska I et al (2016) Influence of different prebiotics and mode of their administration
on broiler chicken performance. Animal 10:1271–1279
Belhassen T, Simon E, Potel A et al (2016) Effect of diet supplementation with live yeast (Saccharomyces cerevisiae)
on performance of rabbit does and their progenies. World Rabbit Sci 24:77–82
Bengmark S, Martindale R (2005) Prebiotics and synbiotics in clinical medicine. Nutr Clin Pract 20:244–261
Berg ME, Miller ME, Yeoman CJ et al (2012) Phage–bacteria relationships and CRISPR elements revealed by a
metagenomic survey of the rumen microbiome. Environ Microbiol 14(1):207–227
Biagi G, Cipollini I, Bonaldo A et al (2013) Effect of feeding a selected combination of galacto-oligosaccharides and a
strain of Bifidobacterium pseudocatenulatum on the intestinal microbiota of cats. Am J Vet Res 74:90–95
Biliouris K, Babson D, Schmidt-Dannert C et al (2012) Stochastic simulations of a synthetic bacteria-yeast ecosystem.
BMC Syst Biol 6(1):58
Blajman JE, Zbrun MV, Astesana DM et al (2015) Probióticos en pollos parrilleros: una estrategia para los modelos
productivos intensivos? Rev Argent Microbiol 47(4):360–367
Bogusławska-Tryk M, Szymeczko R, Piotrowska A, Burlikowska K, Śliżewska K (2015) Ileal and cecal microbial
population and shortchain fatty acid profile in broiler chickens fed diets supplemented with lignocellulose. Pak Vet J
35(2):212–216
Boonanuntanasarn S, Ditthab K, Jangprai A et al (2018) Effects of microencapsulated Saccharomyces cerevisiae on
growth, hematological indices, blood chemical, and immune parameters and intestinal morphology in striped catfish,
Pangasianodon hypophthalmus. Probiotics Antimicrob Proteins. https://doi.org/10.1007/s12602-018-9404-0
Bradley TJ (2008) Active transport in insect recta. J Exp Biol 211 (Pt 6):835–836
Brisbin JT, Gong J, Parvizi P et al (2010) Effects of lactobacilli on cytokine expression by chicken spleen and cecal
tonsil cells. Clin Vaccine Immunol 17(9):1337–1343
Brisbin JT, Gong J, Orouji S et al (2011) Oral treatment of chickens with lactobacilli influences elicitation of immune
responses. Clin Vaccine Immunol 18(9):1447–1455
Calik A, Ergün A (2015) Effect of lactulose supplementation on growth performance, intestinal histomorphology, cecal
microbial population, and short-chain fatty acid composition of broiler chickens. Poult Sci 94(9):2173–2182
Callaway TR, Edrington TS, Anderson RC et al (2008) Gastrointestinal microbial ecology and the safety of our food
supply as related to Salmonella. J Anim Sci 86:163–178
Campanile KA, Zicarelli F, Vecchio D et al (2008) Effects of Saccharomyces cerevisiae on in vivo organic matter
digestibility and milk yield in buffalo cows. Livest Sci 114:358–361
Castex M, Chim L, Pham D et al (2008) Probiotic P. acidilactici application in shrimp Litopenaeus stylirostris culture
subject to vibriosis in New Caledonia. Aquaculture 275:183–193
Chambers JR, Gong J (2011) The intestinal microbiota and its modulation for Salmonella control in chickens. Food Res
Int 44 (10):3149–3159
Chaucheyras-Durand F, Durand H (2010) Probiotics in animal nutrition and health. Benef Microbes 1(1):3–9
Chaucheyras-Durand F, Walker ND, Bach A (2008) Effects of active dry yeasts on the rumen microbial ecosystem:
past, present and future. Anim Feed Sci Technol 145:5–26
Che TM, Johnson RW, Kelley KW et al (2011) Mannan oligosaccharide improves immune responses and growth
efficiency of nursery pigs experimentally infected with porcine reproductive and respiratory syndrome virus. J Anim Sci
89:2592–2602
Choct M (2009) Managing gut health through nutrition. Br Poult Sci 50 (1):9–15
Choct M, Hughes RJ, Wang J et al (1996) Increased small intestinal fermentation is partly responsible for the
antinutritive activity of non-starch polysaccharides in chickens. Br Poult Sci 37:609–621
Clavijo V, Vives Flórez MJ (2018) The gastrointestinal microbiome and its association with the control of pathogens in
broiler chicken production: a review. Poult Sci 0:1–16
Collado MC, Gueimonde M, Hernandez M et al (2005) Adhesion of selected Bifidobacterium strains to human intestinal
mucus and the role of adhesion in enteropathogen exclusion. J Food Prot 68 (12):2672–2678
Combes S, Fortun-Lamothe L, Cauquil L, Gidenne T (2013) Engineering the rabbit digestive ecosystem to improve
digestive health and efficacy. Animal 7:1429–1439
Coverdale JA (2016) Horse species symposium: can the microbiome of the horse be altered to improve digestion? J
Anim Sci 94:2275–2281
Cox CM, Dalloul RA (2015) Immunomodulatory role of probiotics in poultry and potential in ovo application. Benef
Microbes 6(1):45–52
Da Costa PM, Loureiro L, Matis AJF (2013) Transfer of multidrugresistant bacteria between intermingled ecological
niches: the interface between humans, animals and the environment. Int J Environ Res Public Health 10:278–294

492
 De Vrese M, Schrezenmeir J (2008) Probiotics, prebiotics, and synbiotics. Adv Biochem Eng Biotechnol 111:1–66
Deusch O, O’Flynn C, Colyer A et al (2015) A longitudinal study of the feline faecal microbiome identifies changes into
early adulthood irrespective of sexual development. PLoS One 10:e0144881
Durst L (1996) Inclusion of fructo- and galacto-oligosaccharides in broiler diets. Arch Geflugelkd 60:160–164
Eeckhaut V, Van Immerseel F, Teirlynck E et al (2008) Butyricicoccus pullicaecorum gen. nov., sp. nov., an anaerobic,
butyrate-producing bacterium isolated from the caecal content of a broiler chicken. Int J Syst Evol Microbiol 58(12):2799–
2802
Fairbrother JM, Nadeau É, Gyles CL (2005) Escherichia coli in postweaning diarrhea in pigs: an update on bacterial
types, pathogenesis, and prevention strategies. Anim Health Res Rev 6(1):17–39
FAO (2007) Technical meeting report. FAO Technical Meeting on Prebiotics, Food Quality and Standards Service
(AGNS), 15–16 Sept 2007
Ferket PR, Santos AA Jr, Oviedo-Rondon EO (2005) Dietary factors that affect gut health and pathogen colonization.
In: Proceedings of 32nd annual Carolina poultry nutrition conference, Research Triangle Park, NC, p 22
Foligné B, Peys E, Vandenkerckhove J et al (2012) Spores from two distinct colony types of the strain Bacillus subtilis
PB6 substantiate anti-inflammatory probiotic effects in mice. Clin Nutr 31:987–994
Frese SA, Parker K, Calvert CC, Mills DA (2015) Diet shapes the gut microbiome of pigs during nursing and weaning.
Microbiome 3:28. https://doi.org/10.1186/s40168-015-0091-8
Fukata T, Sasai K, Miyamoto T et al (1999) Inhibitory effects of competitive exclusion and fructooligosaccharide, singly
and in combination, on Salmonella colonization of chicks. J Food Prot 62 (3):229–233
Fuller R (1989) Probiotics in man and animals. J Appl Bacteriol 66:365–378
Fuller R (1992) The effect of probiotics on the gut micro-ecology of farm animals. In: The lactic acid bacteria, vol 1.
Springer, Boston, MA, pp 171–192
Gaggìa F, Mattarelli P, Biavati B (2010) Probiotics and prebiotics in animal feeding for safe food production. Int J Food
Microbiol 141: S15–S28
Garcia-Mazcorro JF, Lanerie DJ, Dowd SE et al (2011) Effect of a multi-species synbiotic formulation on fecal bacterial
microbiota of healthy cats and dogs as evaluated by pyrosequencing. FEMS Microbiol Ecol 78(3):542–554
Geier MS, Torok VA, Allison GE et al (2009) Indigestible carbohydrates alter the intestinal microbiota but do not
influence the performance of broiler chickens. J Appl Microbiol 106 (5):1540–1548
Ghosh S, Mehla RK (2012) Influence of dietary supplementation of prebiotics (mannanoligosaccharide) on the
performance of crossbred calves. Trop Anim Health Prod 44:617–622
Gibson GR (1999) Dietary modulation of the human gut microflora using the prebiotics oligofructose and inulin. J Nutr
129(7):1438S–1441S
Gibson GR, Roberfroid MB (1995) Dietary modulation of the human colonic microbiota: introducing the concept of
prebiotics. J Nutr 125:1401–1412
Gibson GR, Probert HM, Van Loo J et al (2004) Dietary modulation of the human colonic microbiota: updating the
concept of prebiotics. Nutr Res Rev 17:259–275
Gibson GR, Scott KP, Rastall RA et al (2010) Dietary prebiotics: current status and new definition. Food Sci Technol
Bull Funct Foods 7 (1):1–19
Gibson GR, Hutkins R, Sanders ME et al (2017) The International Scientific Association for Probiotics and Prebiotics
(ISAPP) consensus statement on the definition and scope of prebiotics. Nat Rev Gastroenterol Hepatol 14:491–502
Gil de los Santos JR, Storch OB, Fernandes CG et al (2012) Evaluation in broilers of the probiotic properties of Pichia
pastoris and a recombinant P. pastoris containing the Clostridium perfringens alpha toxin gene. Vet Microbiol 156:448–
451
Goncalves AT, Gallardo-Escarate C (2017) Microbiome dynamic modulation through functional diets based on pre- and
probiotics (mannan-oligosaccharides and Saccharomyces cerevisiae) in juvenile rainbow trout (Oncorhynchus mykiss). J
Appl Microbiol 122:1333–1347
Gresse R, Chaucheyras-Durand F, Fleury MA et al (2017) Gut microbiota dysbiosis in postweaning piglets:
understanding the keys to health. Trends Microbiol 25(10):851–873
Guarner F (2007) Prebiotics in inflammatory bowel diseases. Br J Nutr 98(Suppl 1):S85–S89
Guillot JF (2003) Probiotic feed additives. J Vet Pharmacol Ther 26 (Suppl 1):52–55
Haghighi HR, Gong J, Gyles CL et al (2006) Probiotics stimulate production of natural antibodies in chickens. Clin
Vaccine Immunol 13(9):975–980
Hardy GA, Sieg S, Rodriguez B et al (2013) Interferon-α is the primary plasma type-I IFN in HIV-1 infection and
correlates with immune activation and disease markers. PLoS One 8(2):e56527
Havenaar R, Ten Brink B, Huis JH (1992) Selection of strains for probiotic use. In: Probiotics. Springer, Dordrecht, pp
209–224
Hetland H, Svihus B, Choct M (2004) Role of insoluble non-starch polysaccharides in poultry nutrition. Worlds Poult Sci
J 60:415–422
Higgins SE, Higgins JP, Wolfenden AD et al (2008) Evaluation of a Lactobacillus-based probiotic culture for the
reduction of Salmonella enteritidis in neonatal broiler chicks. Poult Sci 87:27–31
Higgins SE, Wolfenden AD, Tellez G et al (2011) Transcriptional profiling of cecal gene expression in probiotic- and
Salmonella challenged neonatal chicks. Poult Sci 90:901–913

493
 Hoseinifar SH, Khalili M, Rostami HK et al (2013) Dietary galactooligosaccharide affects intestinal microbiota, stress
resistance, and performance of Caspian roach (Rutilus rutilus) fry. Fish Shellfish Immunol 35:1416–1420
Hoseinifar SH, Soleimani N, Ringø E (2014) Effects of dietary fructooligosaccharide supplementation on the growth
performance, haemato-immunological parameters, gut microbiota and stress resistance of common carp (Cyprinus
carpio) fry. Br J Nutr 112:1296–1302
Huyben D, Sun L, Moccia R et al (2018) Dietary live yeast and increased water temperature influence the gut
microbiota of rainbow trout. J Appl Microbiol 124:1377–1392
Huyghebaert G, Ducatelle R, Van Immerseel F (2011) An update on alternatives to antimicrobial growth promoters for
broilers. Vet J 187:182–188
Iji PA, Tivey DR (1998) Natural and synthetic oligosaccharides in broiler chicken diets. Worlds Poult Sci J 54(2):129–
143
Jensen BB (1998) The impact of feed additives on the microbial ecology of the gut in young pigs. J Anim Sci 7:45–64
Joerger RD, Ganguly A (2017) Current status of the preharvest application of pro- and prebiotics to farm animals to
enhance the microbial safety of animal products. Microbiol Spectr 5(1). https://doi.org/10.1128/microbiolspec.PFS-0012-
2016
Jouany JP, Gobert J, Medina B et al (2008) Effect of live yeast culture supplementation on apparent digestibility and
rate of passage in horses fed a high-fiber or high-starch diet. J Anim Sci 86(2):339–347
Julien C, Marden JP, Auclair E et al (2015) Interaction between live yeast and dietary rumen degradable protein level:
effects on diet utilization in early-lactating dairy cows. Agric Sci 6:1–13
Kabir SM (2009) The role of probiotics in the poultry industry. Int J Mol Sci 10(8):3351–3546
Kalavathy R, Abdullah N, Jalaludin S et al (2003) Effects of Lactobacillus cultures on growth performance, abdominal
fat deposition, serum lipids and weight of organs of broiler chickens. Br Poult Sci 44(1):139–144
Kamada N, Seo SU, Chen GY, Nuñez G (2013) Role of the gut microbiota in immunity and inflammatory disease. Nat
Rev Immunol 13:321–335
Kanakupt K, Vester Boler BM, Dunsford BR et al (2011) Effects of shortchain fructooligosaccharides and
galactooligosaccharides, individually and in combination, on nutrient digestibility, fecal fermentative metabolite
concentrations, and large bowel microbial ecology of healthy adult cats. J Anim Sci 89:1376–1384
Kenny M, Smidt H, Mengheri E et al (2011) Probiotics – do they have a role in the pig industry? Animal 5:462–470
Kerr AK, Farrar AM, Waddell LA et al (2013) A systematic reviewmeta-analysis and meta-regression on the effect of
selected competitive exclusion products on Salmonella spp. prevalence and concentration in broiler chickens. Prev Vet
Med 111:112–125
Khan N, Vidyarthi A, Pahari S et al (2016) Signaling through NOD-2 and TLR-4 bolsters the T cell priming capability of
dendritic cells by inducing autophagy. Sci Rep 6:19084
Kolida S, Gibson GR (2011) Synbiotics in health and disease. Annu Rev Food Sci Technol 2:373–393
Konstantinov SR, Smidt H, De Vos WM et al (2008) S layer protein A of Lactobacillus acidophilus NCFM regulates
immature dendritic cell and T cell functions. Proc Natl Acad Sci USA 105 (49):19474–19479
Kyu Song S, Ram Beck B, Kim D et al (2014) Prebiotics as immunostimulants in aquaculture: a review. Fish Shellfish
Immunol 40:40–48
La Ragione RM, Narbad A, Gasson MJ et al (2004) In vivo characterization of Lactobacillus johnsonii FI9785 for use
as a defined competitive exclusión agent against bacterial pathogens in poultry. Lett Appl Microbiol 38:197–205
Lallès J-P, Bosi P, Smidt H, Stokes C (2007) Weaning – a challenge to gut physiologists. Livestock Sci 108(1–3):82
Lascano GJ, Zanton GI, Heinrichs AJ (2009) Concentrate levels and Saccharomyces cerevisiae affect rumen fluid-
associated bacteria numbers in dairy heifers. Livest Sci 126:189–194
Lee W-H, Pathanibud P, Quarterman J et al (2012) Whole cell biosynthesis of a functional oligosaccharide, 20-
fucosyllactone, using engineered Escherichia coli. Microb Cell Factories 11:48. https://doi.org/10.1186/1475-2859-11-48
Ley RE, Hamady M, Lozupone C et al (2008) Evolution of mammals and their gut microbes. Science 320:1647–1651
Li P, Burr GS, Gatlin DM et al (2007) Dietary supplementation of shortchain fructooligosaccharides influences
gastrointestinal microbiota composition and immunity characteristics of Pacific white shrimp. Litopenaeus vannamei,
cultured in a recirculating system. J Nutr 137:2763–2768
Lin H-L, Shiu Y-L, Chiu C-S et al (2017) Screening probiotic candidates for a mixture of probiotics to enhance the
growth performance, immunity, and disease resistance of Asian seabass, Lates calcarifer (Bloch), against Aeromonas
hydrophila. Fish Shellfish Immunol 60:474–482
Lindström A, Korpela S, Fries L (2008) Horizontal transmission of Paenibacillus larvae spores between honey bee
(Apis mellifera) colonies through robbing. Apidologie 39:515–522
Liu P, Piao XS, Kim SW et al (2008) Effects of chito-oligosaccharide supplementation on the growth performance,
nutrient digestibility, intestinal morphology, and fecal shedding of Escherichia coli and Lactobacillus in weaning pigs. J
Anim Sci 86:2609–2618
Lizardo R, Nofrarias M, Guinvarch J et al (2008) Influence de l’incorporation de levures Saccharomyces cerevisiae ou
de leur parois dans l’aliment sur la digestión et les performances zootechniques des porcelets en post-sevrage. J Recher
Porc 40:183–190
Lutful Kabir SM (2010) Avian colibacillosis and salmonellosis: a closer look at epidemiology, pathogenesis, diagnosis,
control and public health concerns. Int J Environ Res Public Health 7 (1):89–114

494
 Macfarlane SMGT, Macfarlane GT, Cummings JT (2006) Prebiotics in the gastrointestinal tract. Aliment Pharmacol
Ther 24(5):701–714
Mancabelli L, Ferrario C, Milani C (2016) Insights into the biodiversity of the gut microbiota of broiler chickens. Environ
Microbiol 18 (12):4727–4738
Manning TS, Gibson GR (2004) Microbial-gut interactions in health and diasease. Prebiotics. Best Pract Res Clin
Gastroenterol 18 (2):287–298
Marden JP, Julien C, Monteils V et al (2008) How does live yeast differ from sodium bicarbonate to stabilize ruminal pH
in high-yielding dairy cows? J Dairy Sci 91(9):3528–3535
Marden J-P, Bayourthe C, Auclair E et al (2013) A bioenergetic-redox approach to the effect of live yeast on ruminal pH
during induced acidosis in dairy cow. Am J Anal Chem 4:60–68
Mead GC (1989) Microbes of the avian cecum: types present and substrates utilized. J Exp Zool Suppl 3:48–54
Meimandipour A, Shuhaimi M, Hair-Bejo M et al (2009) In vitro fermentation of broiler cecal content: the role of
lactobacilli and pH value on the composition of microbiota and end products fermentation. J Appl Microbiol 49(4):415–
420
Metzler BU, Mosenthin R (2008) A review of intreractions between dietary fiber and the gastrointestinal microbiota and
their consequences on intestinal phosporous metabolism in growing pigs. Asian Aust J Anim Sci 21(4):603–615
Mitsuoka T, Hidaka H, Eida T (1987) Effect of fructo-oligosaccharides on intestinal microflora. Nahrung 31(5–6):427–
436
Modesto M, Steanini I, D’Aimmo MR et al (2011) Strategies to augment non-immune system based defence
mechanisms against gastrointestinal diseases in pigs. NJAS – Wageningen J Life Sci 58 (3–4):149–156
Mookiah S, Sieo CC, Ramasamy K et al (2014) Effects of dietary prebiotics, probiotic and synbiotics on performance,
caecal bacterial populations and caecal fermentation concentrations of broiler chickens. J Sci Food Agric 94:341–348
Morales-López R, Auclair E, Garcia F et al (2009) Use of yeast cell walls; β-1, 3/1, 6-glucans; and mannoproteins in
broiler chicken diets. Poult Sci 88:601–607
Morgan LM, Coverdale JA, Froetschel MA et al (2007) Effect of yeast culture supplementation on digestibility of varying
forage quality in mature horses. J Equine Vet Sci 27:260–265
Mountzouris KC, Tsistsikos P, Kalamara E et al (2007) Evaluation of the efficacy of a probiotic containing Lactobacillus,
Bifidobacterium, Enterococcus, and Pediococcus strains in promoting broiler performance and modulting cecal microflora
composition and metabolic activities. Poult Sci 86:309–317
Nagpal R, Kaur A (2011) Synbiotic effects of various prebiotics on in vitro activities of probiotic lactobacilli. Ecol Food
Nutr 50 (1):63–68
Nakphaichit M, Thanomwongwattana S, Phraephaisarn C et al (2011) The effect of including Lactobacillus reuteri KUB-
AC5 during posthatch feeding on the growth and ileum microbiota of broiler chickens. Poult Sci 90(12):2753–2765
Niu Q, Li P, Hao S, Zhang Y, Kim SW, Li H, Ma X, Gao S, He L, Wu WJ, Huang X, Hua J, Zhou B, Huang R (2015)
Dynamic distribution of the gut microbiota and the relationship with apparent crude fiber digestibility and growth stages in
pigs. Sci Rep 5:9938. https://doi.org/10.1038/srep09938
Novak M, Vetvicka V (2008) Beta-glucans, history, and the present: immunomodulatory aspects and mechanisms of
action. J Immunotoxicol 5:47–57
Nurmi E, Rantala M (1973) New aspects of Salmonella infection in broiler production. Nature (Lond) 241(5386):210–
211
O’Hara AM, Shanahan F (2007) Gut microbiota: mining for therapeutic potential. Clin Gastroenterol Hepatol 5:274–284
Oakley BB, Morales CA, Line J et al (2013) The poultry-associated microbiome: network analysis and farm-to-fork
characterizations. PLoS One 8(2):e57190
Parsley LC, Consuegra EJ, Thomas SJ et al (2010) Census of the viral metagenome within an activated sludge
microbial assemblage. Appl Environ Microbiol 76:2673–2677
Patel S, Goyal A (2012) The current trends and future perspectives of prebiotics research: a review. 3 Biotech 2(1):1–
15
Patterson JA, Burkholder KM (2003) Applications of prebiotics and probiotics in poultry production. Poult Sci 82:627–
631
Pereira Soares M, Cristina Oliveira F et al (2018) Glucan-MOS® improved growth and innate immunity in pacu
stressed and experimentally infected with Aeromonas hydrophila. Fish Shellfish Immunol 73:133–140
Pieters N, Brunt J, Austin B et al (2008) Efficacy of in-feed probiotics against Aeromonas bestiarum and
Ichthyophthirius multifiliis skin infections in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss, Walbaum). J Appl Microbiol 105(3):723–
732
Pineiro M, Asp N-G, Reid G et al (2008) FAO technical meeting on prebiotics. J Clin Gastroenterol 42(Suppl 3 Pt
2):S156–S159
Pinloche E, McEwan N, Marden J-P et al (2013) The effects of a probiotic yeast on the bacterial diversity and
population structure in the rumen of cattle. PLoS One 8(7):e67824
Pinpimai K, Rodkhum C, Chansue N et al (2015) The study on the candidate probiotic properties of encapsulated
yeast, Saccharomyces cerevisiae JCM7255, in Nile tilapia (Oreochromis niloticus). Res Vet Sci 102:103–111
Pourabedin M, Zhao X (2015) Prebiotics and gut microbiota in chickens. FEMS Microbiol Lett 362:fnv122
Pridmore RD, Berger B, Desiere F et al (2004) The genome sequence of the probiotic intestinal bacaterium
Lactobacillus johnsonni NCC 533. Proc Natl Acad Sci USA 101:2512–2517

495
 Qiu R, Croom J, Ali RA et al (2012) Direct fed microbial supplementation repartitions host energy to the immune
system. J Anim Sci 90:2639–2651
Quigley JD, Drewry JJ, Murray LM et al (1997) Body weight gain, feed efficiency, and fecal scores of dairy calves in
response to galactosyllactose or antibiotics in milk replacers. J Dairy Sci 80:1751–1754
Redfern A, Suchodolski J, Jergens A (2017) Role of the gastrointestinal microbiota in small animal health and disease.
Vet Rec 181(14):370
Rehman H, Vahjen W, Kohl-Parisini A et al (2009) Influence of fermentable carbohydrates on the intestinal bacteria and
enteropathogens in broilers. Worlds Poult Sci J 65(1):75–90
Rejeb KB, Abdelly C, Savouré A (2014) How reactive oxygen species and proline face stress together. Plant Physiol
Biochem 80:278–284
Respondek F, Swanson KS, Belsito KR et al (2008) Short-chain fructooligosaccharides influence insulin sensitivity and
gene expression of fat tissue in obese dogs. J Nutr 138:1712–1718
Respondek F, Myers K, Smith TL et al (2011) Dietary supplementation with short-chain fructooligosaccharides
improves insulin sensitivity in obese horses. J Anim Sci 89:77–83
Roberfroid M (2007) Prebiotics: the concept revisited. J Nutr 137:830–837
Roberfroid M, Gibson GR, Hoyles L et al (2010) Prebiotic effects: metabolic and health benefits. Br J Nutr 104(Suppl
2):S1–S63
Rohwer F, Thurber RV (2009) Viruses manipulate the marine environment. Nature 459:207–212
Roodposhti PM, Dabiri N (2012) Effects of probiotic and prebiotic on average daily gain, fecal shedding of Escherichia
coli, and immune system status in newborn female calves. Asian-Australas J Anim Sci 25:1255–1261
Russell JB (2002) Rumen microbiology and its role in ruminant nutrition. Cornell University, Ithaca, NY
Saad N, Delattre C, Urdaci M et al (2013) An overview of the last advances in probiotic and prebiotic field. LWT – Food
Sci Technol 50:1–16
Salvati GGS, Morais Junior NN, Melo ACS et al (2015) Response of lactating cows to live yeast supplementation
during summer. J Dairy Sci 98(6):4062–4073
Sancak AA, Rutgers HC, Hart CA et al (2004) Prevalence of enteropathic Escherichia coli in dogs with acute and
chronic diarrhoea. Vet Rec 154:101–106
Sartor RB (2004) Therapeutic manipulation of the enteric microflora in inflammatory bowel diseases: antibiotics,
probiotics, and prebiotics. Gastroenterology 126:1620–1633
Seal BS, Lillehoj HS, Donovan DM et al (2013) Alternatives to antibiotics: a symposium on the challenges and
solutions for animal production. Anim Health Res Rev 14(1):78–87
Seepersadsingh N, Adesiyun AA, Seebaransingh R (2004) Prevalence and antimicrobial resistance of Salmonella spp.
in non-diarrhoeic dogs in Trinidad. J Vet Med B Infect Dis Vet Public Health 51:337–342
Sekirov I, Russell SL, Antunes CM, Finlay BB (2010) Gut microbiota in health and disease. Physiol Rev 90:859–904
Servin AL, Coconnier MH (2003) Adhesion of probiotic strains to the intestinal mucosa and interaction with pathogens.
Best Pract Res Clin Gastroenterol 17(5):741–754
Seth A, Yan F, Polk DB et al (2008) Probiotics ameliorate the hydrogen peroxide-induced epithelial barrier disruption by
a PKC-and MAP kinase-dependent mechanism. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol 294:1060–1069
Shakouri MD, Iji PA, Mikkelsen LL et al (2009) Intestinal function and gut microflora of broiler chickens as influenced by
cereal grains and microbial enzyme supplementation. J Anim Physiol Anim Nutr 93:647–658
Smith JM (2014) A review of avian probiotics. J Avian Med Surg 28 (2):87–94
Sparkes AH, Papasouliotis K, Sunvold G et al (1998a) Bacterial flora in the duodenum of healthy cats, and effect of
dietary supplementation with fructo-oligosaccharides. Am J Vet Res 59:431–435
Sparkes AH, Papasouliotis K, Sunvold G et al (1998b) Effect of dietary supplementation with fructo-oligosaccharides
on fecal flora of healthy cats. Am J Vet Res 59:436–440
Spring P, Wenk C, Dawson KA et al (2000) The effect of dietary mannonoligosaccharides on cecal parameters and the
concentrations of enteric bacteria in the ceca of Salmonella-challenged broiler chicks. Poult Sci 79:205–211
St. Pierre NR, Cobanov B, Schnitkey G (2003) Economic losses from heat stress by US livestock industries. J Dairy
Sci 86(E Suppl):E52–E77
Stanley D, Denman SE, Hughes RJ et al (2012) Intestinal microbiota associated with differential feed conversion
efficiency in chickens. Appl Microbiol Biotechnol 96:1361–1369
Stanley D, Hughes RJ, Moore RJ (2014) Microbiota of the chicken gastrointestinal tract: influence on health,
productivity and disease. Appl Microbiol Biotechnol 98(10):4301–4310
Stern NJ, Svetoch EA, Eruslanov BV et al (2006) Isolation of a Lactobacillus salivarius strain and purification of its
bacteriocin, which is inhibitory to Campylobacter jejuni in the chicken gastrointestinal system. Antimicrob Agents
Chemother 50(9):3111–3116
Stevens CE, Hume ID (1998) Contributions of microbes in vertebrate gastrointestinal tract to production and
conservation of nutrients. Physiol Rev 78:393–427
Syngai GG, Gopi R, Bharali R et al (2016) Probiotics: the versatile functional food ingredients. J Food Sci Technol
53:921–933
Timmerman HM, Veldman A, Van den Elsen E et al (2006) Mortality and growth performance of broilers given drinking
water supplemented with chicken-specific probiotics. Poult Sci 85 (8):1383–1388

496
 Torok VA, Ophel-Keller K, Loo M et al (2008) Application of methods for identifying broiler chicken gut bacterial species
linked with increased energy metabolism. Appl Environ Microbiol 74 (3):783–791
Turnbaugh PJ, Ley RE, Hamady M et al (2007) Human microbiome project. Nature 449:804–810
Van Craeyveld V, Holopainen U, Selinheimo E et al (2009) Extensive dry ball milling of wheat and rye bran leads to in
situ production of arabinoxylan oligosaccharides through nanoscale fragmentation. J Agric Food Chem 57:8467–8473
Van Haandel B (2016) Microbiome: its effect on health and growth. All About Feed 24(7):6–7
Van Immerseel F, Cauwerts K, Devriese LA et al (2002) Feed additives to control Salmonella in poultry. Worlds Poult
Sci J 58(4):501–513
Vanderpool C, Yan F, Polk DB (2008) Mechanisms of probiotic action: implications for therapeutic applications in
inflammatory bowel diseases. Inflamm Bowel Dis 14:1585–1596
Vasquez A, Forsgren E, Fries I et al (2012) Symbionts as major modulators of insect health: lactic acid bacteria in
honeybee. PloS One 7:e33188
Verbrugghe A, Hesta M, Gommeren K et al (2009) Oligofructose and inulin modulate glucose and amino acid
metabolism through propionate production in normal-weight and obese cats. J Nutr 102:694–702
Verschuere L, Rombaut G, Sorgeloos P et al (2000) Probiotic bacteria as biological control agents in aquaculture.
Microbiol Mol Biol Rev 64:655–671
Wiley NC, Dinan TG, Ross P et al (2017) The microbiota-gut-brain axis as a key regulator of neural function and the
stress response: implications for human and animal health. J Anim Sci 95:3225–3246
Willard MD, Simpson RB, Cohen ND et al (2000) Effects of dietary fructooligosaccharide on selected bacterial
populations in feces of dogs. Am J Vet Res 61:820–825
Williams BA, Verstegen MWA, Tamminga S (2001) Fermentation in the large intestine of single-stomached animals
and its relationship to animal health. Nutr Res Rev 14:207–228
Xu ZR, Hu CH, Xia MS et al (2003) Effects of dietary fructooligosaccharide on digestive enzyme activities, intestinal
microflora and morphology of male broilers. Poult Sci 82(6):1030–1036
Xu Q, Chao Y, Wan Q (2009) Health benefit application of functional oligosaccharides. Carbohydr Polym 77:435–441
Yajima T, Inoue R, Yajima M et al (2011) The G-protein in colesterolrich membrane microdomains mediates mucosal
sensing of shortchain fatty acids and secretory response in rat colon. Acta Physiol (Oxf) 203:381–389
Yaqoob P (2014) Ageing, immunity and influenza: a role for probiotics? Proc Nutr Soc 73(2):309–317
Yatsunenko T, Rey FE, Manary MJ et al (2012) Human gut microbiome viewed across age and geography. Nature
486:222–228
Yeoman CJ, Chia N, Jeraldo P et al (2012) The microbiome of the chicken gastrointestinal tract. Anim Health Res Rev
13(1):89–99
Youssef IMI, Kamphues J (2018) Fermentation of lignocellulose ingredients in vivo and in vitro via using fecal and
caecal inoculums of monogastric animals (swine/turkeys). BJBAS 7:407–413
Zulkifli I, Abdullah N, Azrin NM et al (2000) Growth performance and immune response of two commercial broiler
strains fed diets containing Lactobacillus cultures and oxytetracycline under heat stress conditions. Br Poult Sci
41(5):593–597

497
 Simbióticos em saúde e produção animal
Jitendra K. Malik, Atul Prakash, Anil K. Srivastava e Ramesh C. Gupta

Resumo
Este capítulo descreve o conhecimento atual sobre os efeitos dos simbióticos na saúde e
no desempenho de animais de fazenda e de companhia. São apresentados o mecanismo
de ação, os efeitos benéficos e os resultados de estudos demonstrados que comprovam a
eficácia dos simbióticos em aves, gado, porcos e animais de companhia. Os simbióticos
agora são considerados ferramentas importantes para ajudar a manter os animais com
boa saúde e melhorar o desempenho de crescimento. A maioria dos estudos que lidam
com simbióticos foi conduzida em aves, mas o aumento da pesquisa tem se concentrado
em outras espécies animais. A administração de simbióticos em animais é favorável para
a microbiota intestinal benéfica que desempenha vários papéis significativos, incluindo a
produção de vários nutrientes para o seu hospedeiro, prevenção de infecções causadas
por patógenos intestinais e modulação da resposta imunológica. Assim, a modificação dos
microrganismos presentes no trato gastrointestinal para atingir, restaurar e manter o
equilíbrio positivo no ecossistema e na atividade da microbiota intestinal é essencial para
a melhoria da saúde e desempenho dos animais. Os simbióticos que compreendem os
microrganismos probióticos mais apropriados e os prebióticos sinérgicos podem ser ainda
mais eficazes e benéficos para a saúde e produção animal.

Palavras-chave: Simbiótico · Animal · Microbiota intestinal · Saúde · Desempenho

J. K. Malik. Division of Pharmacology and Toxicology, Indian Veterinary Research Institute, Dehradun,
Uttarakhand, India
A. Prakash. Department of Pharmacology and Toxicology, College of Veterinary Science and Animal
Husbandry, UP Pandit Deen Dayal Upadhyay Pashu Chikitsa Vigyan Vishwavidyalaya Evam Go-
Anusandhan Sansthan, Mathura, UP, India
A. K. Srivastava. Agricultural Scientists Recruitment Board, Indian Council of Agricultural Research, New
Delhi, India
R. C. Gupta. Department of Toxicology, Breathitt Veterinary Center, Murray State University, Hopkinsville, KY,
USA

1. Introdução
Os simbióticos são geralmente considerados suplementos nutricionais que combinam
probióticos e prebióticos em uma forma de sinergismo. Assim, um produto simbiótico pode
potencializar os efeitos benéficos isolados de probióticos e prebióticos. Probióticos são
definidos como cepas vivas de microrganismos estritamente selecionados que, quando
administrados em quantidades adequadas, conferem um benefício à saúde do hospedeiro
498
(FAO 2002). Os probióticos são microrganismos não patogênicos que favorecem o
crescimento de bactérias intestinais benéficas em relação às prejudiciais. Os prebióticos
são ingredientes alimentares não digeríveis que afetam beneficamente a saúde do
hospedeiro ao estimular seletivamente o crescimento e/ou a atividade de um grupo
selecionado de microrganismos que vivem no cólon. Uma base importante para o uso de
um simbiótico é que um verdadeiro probiótico usa o prebiótico como fonte de alimento que
facilita a extensão da sobrevivência de microrganismos probióticos no sistema digestivo, o
que não seria possível sem o contrário. Sem a fonte alimentar necessária para o
probiótico, terá maior intolerância ao oxigênio, baixo pH e temperatura. Aproveitando
ambas as vantagens dos prebióticos e probióticos em sinergia, o número de
microorganismos bons aumenta muitas dobras no sistema digestivo (Sekhon e Jairath
2010; Malik et al. 2016). Assim, uma combinação adequada de probióticos e prebióticos
em um único produto deve garantir um efeito melhor, em comparação com sua atividade
isolada. Além da sobrevivência melhorada de microrganismos benéficos adicionados à
comida ou ração, os simbióticos também estimulam a proliferação de cepas bacterianas
nativas específicas presentes no trato gastrointestinal (Gourbeyre et al. 2011). Os efeitos
dos simbióticos na saúde podem estar associados à combinação individual de um
probiótico e um prebiótico. Levando em consideração um grande número de combinações
possíveis, a aplicação de simbióticos para a modulação da microbiota intestinal em
humanos e animais parece promissora (Scavuzzi et al. 2014; Kearney e Gibbons 2018;
Markowiak e Śliżewska 2018).

Alguns dos microrganismos probióticos amplamente usados incluem Lactobacillus

rhamnosus, L. reuteri, bifidobactérias e certas cepas de Lactobacillus casei; grupos de L.
acidophilus; Bacillus coagulans; Escherichia coli estirpe Nissle 1917; certos enterococos,
particularmente Enterococcus faecium SF68 e a levedura Saccharomyces boulardii.
Bactérias de ácido láctico (BAL), incluindo espécies de Lactobacillus, servem como
agentes de fermentação de alimentos e potencialmente conferem benefícios à saúde
(Pandey et al. 2015; Malik et al. 2016). Microrganismos probióticos contidos em
suplementos alimentares para uso em animais incluem Lactobacillus sp. (L. brevis, L.
casei, L. crispatus, L. farciminis, L. fermentum, L. murinus, L. gallinarum, L. paracasei, L.
pentosus, L. plantarum, L. reuteri, L. rhamnosus, L. salivarius), Bifidobacterium sp. (B.
animalis, B. longum, B. pseudolongum, B. thermophilum), Enterococcus faecalis,
Enterococcus faecium, Lactococcus lactis, Leuconostoc citreum, Leuconostoc lactis,
Leuconostoc mesenteroides, Pediococcus acidilactici, Pediococcus stroceptilivarius,
Strococeptus stroceptilivarius, Pediococeptus stroceptilivarius, Sporolactobacillus inulinus,
Bacillus cereus, Bacillus licheniformis, Bacillus subtilis, Propionibacterium freudenreichii,
499
Saccharomyces cerevisiae (boulardii), Saccharomyces pastorianus, Kluyveromyces
fragilis, Kluyveromyces marxianus, Aspergillus oryzae e Aspergillus niger (EFSA 2013a, b,
2017; Markowiak e Śliżewska 2018). Com esforços de pesquisa mais avançados e
focados, novos gêneros e cepas de microrganismos probióticos estão surgindo
continuamente.

Algumas das fontes de prebióticos incluem soja, fontes de inulina (como alcachofra de
Jerusalém, raízes de chicória, etc.), aveia crua, trigo não refinado, cevada não refinada,
batata yacon, carboidratos não digeríveis e, em particular, oligossacarídeos não
digeríveis. Os prebióticos comumente conhecidos incluem fruto-oligossacarídeos (FOS),
galacto oligossacarídeos (GOS), galacto oligossacarídeos/oligossacarídeos trans
galactosilados (GOS/TOS), inulina, isomalto oligossacarídeos (IMO), lactulose,
pirodextrinas, oligossacarídeos de soja (SOS). Os prebióticos emergentes são genti
oligossacarídeos, gluco oligossacarídeos, lacto sacarose, levanas, oligossacarídeos
pécticos, amido resistente, álcoois de açúcar e xilo oligossacarídeos (XOS) (Anadon et al.
2010; Pandey et al. 2015). Os prebióticos mais comumente usados na nutrição de animais
são FOS, GOS, inulina, IMO, XOS, oligossacarídeo mannan (MOS), lacticol, lactulose e
fibra de cereais (Malik et al. 2016; Olveira e González-Molero 2016; Markowiak e
Śliżewska 2018). A fermentação de FOS no cólon aumenta o número de bifidobactérias
no cólon, bem como a absorção de cálcio e peso fecal. Além disso, leva à diminuição do
tempo de trânsito gastrointestinal. O aumento das bifidobactérias do cólon produz
compostos para inibir patógenos potenciais, reduzindo os níveis de amônia no sangue e
produzindo vitaminas e enzimas digestivas (Malik et al. 2016).

Em vista do declínio no uso de promotores de crescimento de antibióticos na indústria

animal, há uma conscientização crescente para a busca e exploração do potencial de
alternativas de antibióticos. Entre vários agentes alternativos, os probióticos, prebióticos e
simbióticos devem ter efeitos benéficos para manter ou melhorar a saúde e o
desempenho dos animais. O aumento significativo de ácidos graxos de cadeia curta
(SCFA), cetonas, dissulfeto de carbono e acetato de metila após a ingestão de simbióticos
foi sugerido por seus potenciais efeitos de promoção da saúde (Vitali et al. 2010). Nos
últimos anos, estudos sobre simbióticos começaram a surgir, tendo como principal foco
suas aplicações na melhoria da saúde e prevenção de doenças, melhoria de outros
índices de produção como taxa de crescimento, absorção de nutrientes e qualidade da
carne, leite e ovos. Os simbióticos levam à melhora da sobrevivência da microbiota
probiótica durante a passagem pelo trato intestinal superior. Com uma implantação mais
eficiente no cólon, bem como um efeito estimulante do crescimento de probióticos e

500
bactérias ubíquas, os simbióticos contribuem para manter a homeostase intestinal e
oferecer benefícios específicos à saúde. Comparados com os probióticos e prebióticos, os
simbióticos são as substâncias menos investigadas no que diz respeito à saúde e ao
desempenho animal. Este capítulo descreve o conhecimento atual sobre os efeitos dos
simbióticos na saúde e no desempenho de aves, gado, porcos e animais de companhia.
São apresentados o modo de ação, os efeitos benéficos e os resultados de estudos
demonstrados que comprovam a eficácia dos simbióticos em animais de fazenda e de
companhia.

2. Simbióticos para Animais

Os microrganismos intestinais são conhecidos por desempenhar um papel significativo
nas funções imunológicas, fisiológicas, nutricionais e de proteção do hospedeiro e podem
ser influenciados pelo tipo de alimento. O uso de simbióticos como aditivos alternativos
para ração para gado e aves provavelmente produzirá maiores efeitos na saúde e
oferecerá mais benefícios aditivos no desempenho do crescimento, taxa de conversão
alimentar, parâmetros hematológicos e bioquímicos do que o uso individual de probióticos
e prebióticos desses aditivos. Além disso, os simbióticos podem aumentar a
digestibilidade e a disponibilidade de muitos elementos nutrientes, como vitaminas,
elementos minerais e proteínas (Uyeno et al. 2015; Hamasalim 2016; Malik et al. 2016;
Markowiak e Śliżewska 2018).

O simbiótico é projetado não apenas para apresentar populações de microrganismos

benéficos, mas também para promover a proliferação de cepas autóctones específicas no
trato intestinal. Embora os estudos sobre os efeitos dos simbióticos na saúde e no
desempenho do gado ainda sejam limitados, vale a pena mencionar que os efeitos na
saúde provavelmente dependerão da combinação simbiótica e os simbióticos parecem
promissores para a modulação da composição da microbiota intestinal (Scavuzzi et al.
2014).

2.1 Simbióticos para Aves

Embora poucos ensaios de pesquisa tenham sido conduzidos para demonstrar os efeitos
dos simbióticos, os resultados dos estudos in vivo são promissores, e os
desenvolvimentos e aplicações recentes dos simbióticos têm se concentrado na avaliação
dos efeitos benéficos dos simbióticos na saúde e no desempenho das aves (Gadde et al.
2017). Os efeitos de alguns simbióticos investigados na resposta de crescimento,

501
ecossistema microbiano intestinal, funções imunológicas e outros índices de frangos de
corte são apresentados na Tabela 1.

Tabela 1 Efeitos de alguns simbióticos na saúde e no desempenho de crescimento das avesMelhoria da

imunidade humoral aumentando a concentração de IgG no soro e modulando a resposta imune adaptativa
mediada por anticorpos contra o vírus da bronquite infecciosa
Simbiótico Resultado principal

Lactobacillus (L.) acidophilus, Enterococcus

faecium, L. plantarum, Pediococcus acidilactici
mais MOS
Enterococcus faecium mais FOS
Biomin®IMBOa
L. acidophilus, L. casei, L. plantarum, L.
bulgaricus, Bifidobacterium (B.) bifidum,
Streptococcus thermophilus, Streptococcus
faecium, Torulopsis sp., Aspergillus oryzae mais
inulina
Lactobacillus, Bifidobacterium mais
Melhorou a resposta de anticorpos ao vírus da doença de Newcastle
oligossacarídeos derivado da parede celular de
levedura e outros ingredientes
Saccharomyces cerevisiae mais MOS
B. longum subsp. longum PCB133 mais GOS
a Aumentou o número de lactobacilos e reduziu as populações de Escherichia coli e coliformes totais no intestino
Biomin®IMBO
Probiótico multi-cepas consistindo em 11 cepas
de Lactobacillus mais IMO
Biomin®IMBOa
L. acidophilus, L. casei, Streptococcus faecium,
Exibiu uma resposta T-helper balanceada (Th) -1 / Th-2 localmente e
Bacillus subtilis mais carboidratos derivados de
levedura
Biomin®IMBOa
L. acidophilus, L. casei, Streptococcus faecium,
Bacillus subtilis, Saccharomyces cerevisiae
mais carboidratos derivados de levedura
B. longum PCB133 mais XOS
L. reuteri, Enterococcus faecium, B. animalis,
Pediococcus acidilactici mais FOS
L. casei, L. acidophilus, B. thermophilum,
Enterococcus faecium mais MOS
L. acidophilus, B. thermophilus, B. longum,
Streptococcus faecium mais prebióticos
Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis,
Clostridium butyricum mais parede celular de
levedura e XOS
Reduziu a mortalidade por enterite necrótica causada por
Clostridium perfringens
Enterite necrótica evitada causada por Clostridium perfringens
expressa pela redução dos sinais, mortalidade, lesões e contagem
intestinal e melhores índices de desempenho
Melhor ganho de peso corporal e taxa de conversão alimentar e
efeito protetor contra coccidiose
Aumento do ganho de peso e redução dos efeitos tóxicos das
aflatoxinas
e vacinas contra o vírus da bronquite infecciosa
Aumento do ganho de peso, redução do número de Escherichia coli
no intestino delgado e digesta cecal e maior altura das vilosidades
no duodeno, jejuno e íleo
Concentração reduzida de Campylobacter jejuni nas fezes de aves
Aumentou as populações cecais de lactobacilos e bifidobactérias e
diminuiu a Escherichia coli cecal e melhorou o desempenho e
aumentou os ácidos graxos voláteis cecais
Aumentou as respostas imunes humorais após a vacinação contra a
doença de Newcastle, bronquite infecciosa e doença infecciosa da
bursa
uma resposta mais dependente de Th-2 sistemicamente
Melhor ganho de peso corporal, conversão alimentar, morfologia
intestinal e ecologia microbiana intestinal e a maior resposta de
anticorpos à vacina contra a doença de Newcastle
Melhoria da imunidade humoral aumentando a concentração de IgG
no soro e modulando a resposta imune adaptativa mediada por
anticorpos contra o vírus da bronquite infecciosa
Reduziu o cecal Campylobacter jejuni e Campylobacter sp. após a
administração vitalícia do simbiótico em frangos de corte infectados
com Campylobacter jejuni cepa M1
Aumento do peso corporal, desempenho aprimorado e proteção
contra infecção por Salmonella enterica Enteritidis
Taxa de crescimento específico melhorada, eficiência de
crescimento, índice de eficiência energética, índice de eficiência de
proteína e diminuição da concentração de colesterol sérico
Ashayerizadeh et al. (2011)
Aumento da capacidade antioxidante total sérica total, atividade de
paraoxonase e ceruloplasmina e diminuição do status oxidante total
sérico e concentrações de homocisteína
Aumento do ganho médio diário e da produção de peito, redução da
relação alimentação / ganho e gordura abdominal e redução do teor
de malondialdeído no músculo da coxa, resultando na produção de
carne com qualidade favorável e estabilidade oxidativa
502
 Tabela 1 Efeitos de alguns simbióticos na saúde e no desempenho de crescimento das avesMelhoria da
imunidade humoral aumentando a concentração de IgG no soro e modulando a resposta imune adaptativa
mediada por anticorpos contra o vírus da bronquite infecciosa
Níveis séricos reduzidos de colesterol total às 36 semanas de idade,
L. acidophilus, L. casei, B. bifidum, colesterol de lipoproteína de baixa densidade, alanina
Streptococcus faecium, Aspergillus oryzae mais aminotransferase e fosfatase alcalina, porcentagem de heterófilos e
IMO razão de heterófilos para linfócitos e aumento da porcentagem de
linfócitos às 36 e 52 semanas de idade
Diminuiu o colesterol da gema de ovo e os ácidos graxos saturados
L. acidophilus, L. casei, B. bifidum,
totais e aumentou os ácidos graxos insaturados totais, ômega 6 total
Streptococcus faecium, Aspergillus oryzae mais
e ácidos graxos poliinsaturados, incluindo os níveis de ácido linoléico
IMO
e alfa-linolênico em ovos
Melhor peso do ovo, produção de ovo e massa de ovo; valores mais
a altos de espessura da casca, unidade Haugh e porcentagem da
Biomin®IMBO
casca; aumento da taxa de conversão alimentar; e diminuição do
colesterol sérico
Melhor desempenho do crescimento, morfologia intestinal e
a absorção de nutrientes; aumento da relação altura das vilosidades /
Biomin®IMBO
profundidade da cripta e altura das vilosidades no íleo; e redução na
profundidade da cripta ileal
Aumento do ganho médio diário de peso corporal, porcentagem de
a rendimento de carcaça, taxa de conversão alimentar e relação altura
Biomin®IMBO
de vilosidade / profundidade de cripta e altura de vilosidades no
duodeno e íleo
Melhor ganho de peso e relação alimentação / ganho até 21 dias de
L. acidophilus, Enterococcus ssp mais MOS
idade
Aumento do consumo de energia metabolizável e proteína bruta e
Biomin®IMBOa
maior índice de produção, peso vivo e eficiência alimentar
L. plantarum, L. delbrueckii subsp. bulgaricus,
L. acidophilus, L. rhamnosus, B. bifidum, Aumento da altura das vilosidades ileais, profundidade da cripta e
Streptococcus salivarius subsp. thermophilus, área de superfície das vilosidades
Enterococcus faecium mais MOS
L. plantarum, L. acidophilus, L. bulgaricus, L.
rhamnosus, B. bifidum, Streptococcus Melhorou o ganho médio de peso corporal e a eficiência alimentar e
thermophilus, Enterococcus faecium, melhorou os efeitos do estresse térmico cíclico sobre os pesos
Aspergillus oryzae, Candida pintolopesii mais relativos do baço, bursa, intestino e ceco
MOS
Aumento do ganho de peso diário; eficiência alimentar; altura das
Bacillus subtilis mais XOS e MOS vilosidades; e razão vilo / cripta no duodeno, jejuno e íleo; conteúdo
de IgA secretora da mucosa intestinal; e capacidades antioxidantes
Aumento do peso corporal, redução da taxa de conversão alimentar
Saccharomyces cerevisiae, Enterococcus ajustada para mortalidade e mortalidade associada à enterite
faecium, Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis necrótica sem diminuição na gravidade dos escores de lesão
mais β-glucans, MOS e FOS intestinal em frangos de corte desafiados com Clostridium
perfringens
a
Biomin®IMBO (Enterococcus faecium mais prebiótico derivado de chicória e substâncias imunomoduladoras
derivadas de algas marinhas)

A combinação de probióticos e prebióticos pode melhorar a sobrevivência e persistência

dos microorganismos promotores da saúde no intestino das aves devido à disponibilidade
de seu substrato específico para fermentação (Yang et al. 2009; Adil e Magray 2012). Os
simbióticos podem ter um efeito significativo na absorção e utilização da ração, no ganho
diário de peso corporal e na qualidade da carne e dos ovos. Os benefícios clínicos dos
simbióticos incluem a inibição da proliferação de bactérias patogênicas, proteção da
barreira intestinal, modulação da função imunológica e combate à diarreia em galinhas.
Mohnl et al. (2007) demonstraram que o produto simbiótico aumentou o peso corporal e a
503
taxa de conversão alimentar e reduziu o consumo de ração e a mortalidade em
comparação aos controles. O simbiótico tinha um potencial de estimulação de
crescimento comparável ao promotor de crescimento de antibiótico avilamicina em
frangos de corte e pode ser uma alternativa promissora ao uso de promotores de
crescimento de antibióticos na produção de frangos. Um produto simbiótico contendo
Lactobacillus sp. com adição de lactose mostrou melhorar o ganho de peso corporal e a
taxa de conversão alimentar em perus desafiados com Salmonella (Vicente et al. 2007).
Da mesma forma, a inclusão dietética de Bacillus subtilis mais FOS melhorou o
crescimento diário médio e a taxa de conversão alimentar, bem como reduziu a incidência
de diarreia e mortalidade de frangos de corte em comparação com aves tratadas com um
antibiótico tetraciclina aureomicina. A combinação de Bacillus subtilis e FOS produziu um
melhoramento muito melhor no ecossistema cecal em frangos de corte do que sua
administração isolada. Além disso, a combinação teve melhores efeitos na redução da
taxa de diarreia e na promoção do crescimento do que os administrados individualmente.
O simbiótico teve efeitos seletivos no aumento da concentração cecal de bactérias
benéficas, como Lactobacillus, e diminuição da concentração de bactérias nocivas, como
Escherichia coli e Salmonella, enquanto o tratamento com aureomicina teve efeitos não
seletivos na microflora cecal que inibiu todas as bactérias (Li et al. 2008).

A inclusão dietética de simbióticos contendo uma combinação de bactérias

Bifidobacterium lactis e GOS por 40 dias resultou em um aumento significativo na
contagem de Bifidobacterium e Lactobacillus e na população de bactérias anaeróbias
totais na microbiota fecal dos frangos de corte (Jung et al. 2008). McReynolds et al.
(2009) avaliaram os efeitos do probiótico (Enterococcus faecium, Pediococcus acidilactici,
Bifidobacterium animalis, Lactobacillus reuteri) em associação com um prebiótico
contendo, mas não limitado a, FOS e extratos de óleo essencial em pintinhos que
receberam uma vacina imunossupressora, inoculada com Clostridium perfringens e em
condições dietéticas favoráveis ao desenvolvimento de enterite necrótica. Tanto os
probióticos quanto os prebióticos resultaram na redução da contagem de Clostridium
perfringens, diminuição das lesões intestinais e menor mortalidade. Foi sugerido que o
simbiótico poderia ser usado como alternativas potenciais para ajudar a controlar o
Clostridium perfringens e a enterite necrótica. Erdoğan et al. (2010) mostraram que a
adição de simbióticos à dieta produziu uma diminuição na contagem de organismos
coliformes cecais, o que pode ser devido aos efeitos positivos dos probióticos e
prebióticos na ecologia microbiana intestinal.

504
O impacto positivo da administração de simbióticos no desempenho e na microbiota ileal
de galinhas também foi comprovado em estudos recentes. A aplicação de
Saccharomyces cerevisiae com MOS aumentou significativamente o ganho de peso, bem
como a população de LAB e levedura no conteúdo ileal e cecal de frangos de corte. A
população de Escherichia coli diminuiu significativamente no íleo e ceco. A inclusão
dietética de Saccharomyces cerevisiae sem MOS também produziu esses efeitos, mas os
efeitos foram mais pronunciados após a administração combinada (Koc et al. 2010). Visto
que o MOS não é digerido enzimaticamente no intestino delgado, as bactérias ligadas ao
MOS provavelmente saem do intestino sem se ligar ao epitélio (Spring et al. 2000). O
aumento da morfologia intestinal e da absorção de nutrientes após a administração de
simbióticos parece contribuir para o melhor desempenho de frangos de corte (Awad et al.
2008; Hassanpour et al. 2013). Tayeri et al. (2018) compararam os efeitos de antibióticos,
probióticos, prebióticos e simbióticos no desempenho e nas características de carcaça de
frangos de corte. As aves alimentadas com simbiótico apresentaram maiores pesos
relativos de moela e baço e rins mais leves, além de paredes mais delgadas dos
segmentos intestinais caudais. A suplementação dietética do simbiótico também reduziu a
taxa de conversão alimentar, em comparação com o controle e o tratamento com
antibiótico com flavomicina. Assim, houve benefícios significativos para o desempenho e a
saúde com o uso de probióticos, prebióticos e simbióticos para frangos de corte, em vez
de antibióticos.

A restrição alimentar por longo período pode causar grande estresse nas aves. Foi
demonstrado que os simbióticos amenizam os efeitos negativos da restrição alimentar no
desempenho dos frangos de corte. Consequentemente, os efeitos dos simbióticos com e
sem restrição alimentar foram investigados no desempenho, índices hematológicos e
características de carcaça de frangos de corte. Dietas suplementadas com Bacillus
licheniformis e Bacillus subtilis mais MOS, com e sem restrição alimentar, melhoraram o
desempenho dos frangos, sem afetar os parâmetros sanguíneos e o rendimento de
carcaça. A restrição alimentar e a adição do simbiótico resultaram em uma diminuição da
gordura visível da carcaça. O uso de simbiótico foi recomendado como um fator
antiestresse na restrição alimentar e para aumentar o peso, melhorar a taxa de conversão
alimentar e reduzir o custo de produção da ração (Abdel-Hafeez et al. 2017).

A adição de simbióticos às dietas de frangos não apenas melhorou o desempenho do

crescimento, mas também teve um impacto positivo no perfil lipídico do sangue e na
qualidade da carne (Ghasemi et al. 2016). O simbiótico demonstrou melhorar o ganho de
peso corporal geral ou a taxa de conversão alimentar e diminuir o colesterol sérico, bem

505
como as concentrações de colesterol de lipoproteína de baixa densidade. O conteúdo de
substâncias reativas ao ácido 2-tiobarbitúrico na carne de coxa após 30 dias de
armazenamento a 4 ºC foi linearmente diminuído com o aumento das concentrações de
inclusão simbiótica nas dietas. Os simbióticos dietéticos também diminuíram a proporção
de ácidos graxos monoinsaturados e aumentaram a concentração de ácidos graxos
poliinsaturados n-6 na carne da coxa, enquanto o perfil de ácidos graxos da carne de
peito não foi afetado pela suplementação simbiótica.

Em um estudo interessante, Calik et al. (2017) avaliaram o efeito da administração intra-

amniótica de simbiótico composto de Enterococcus faecium e inulina e sua
suplementação contínua na dieta sobre o desempenho, integridade do epitélio intestinal e
microflora cecal de frangos de corte. A administração de um simbiótico intra-amniótico a
ovos embrionados no dia 17 de incubação não teve efeito sobre a eclosão ou peso de
incubação das aves. No entanto, resultou em um efeito positivo na altura das vilosidades
e na contagem de células positivas para o antígeno nuclear de células em proliferação. A
injeção de simbióticos intra-amnióticos seguida de suplementação dietética com o
simbiótico aumentou significativamente a colonização de Lactobacillus e diminuiu a
população de coliformes no ceco de frangos de corte. Além disso, a concentração de
ácido butírico cecal aumentou proporcionalmente à contagem de Lactobacillus cecal com
a suplementação dietética do simbiótico.

Além do desempenho de crescimento melhorado, a suplementação simbiótica também

mostrou aumentar a função imunológica geral de frangos de corte. Chen et al. (2018)
investigaram os efeitos da suplementação simbiótica dietética como uma alternativa aos
antibióticos no desempenho do crescimento, morfologia intestinal, imunidade e estado
oxidativo de frangos de corte. O simbiótico suplementar aumentou o ganho médio diário e
a relação ganho: ração de frangos de corte, bem como o peso relativo do timo e o nível de
imunoglobulina A secretora no jejuno e íleo. A inclusão de simbióticos na dieta promoveu a
relação entre a altura das vilosidades ileais e a profundidade da cripta e reduziu o
acúmulo de malonildialdeído ileal em frangos de corte. Os efeitos induzidos por
simbióticos foram comparáveis aos da inclusão dietética do antibiótico clortetraciclina. Foi
sugerido que a suplementação simbiótica dietética pode ser usada como uma alternativa
ao antibiótico. Da mesma forma, Naghi Shokri et al. (2017) relataram que galinhas
alimentadas com dieta suplementada com simbiótico exibiram melhores taxas de
conversão alimentar no período de 14-28 dias e maior ganho médio diário e relação altura
de vilosidades duodenais/profundidade de cripta em 42 dias do que aquelas alimentadas
com dieta controle. O simbiótico suplementar produziu um aumento acentuado no título de

506
anticorpos séricos contra a doença infecciosa da bursa e as vacinas contra a bronquite
infecciosa.

Pelo contrário, alguns dos ensaios conduzidos com inclusão de simbióticos na dieta não
mostraram que o desempenho dos frangos de corte foi afetado. A administração oral de
GOS sozinho ou em combinação com um probiótico à base de Bifidobacterium lactis não
teve efeito significativo no crescimento, consumo de ração e taxa de conversão alimentar
em frangos de corte (Jung et al. 2008). A inclusão dietética de uma combinação de
probiótico (Bacillus licheniformis, Bacillus subtilis) e um MOS derivado das paredes
celulares da levedura (Saccharomyces cerevisiae) não teve efeito significativo no ganho
de peso corporal, ingestão de ração, peso de carcaça e rendimento de carcaça, mas
ração a taxa de conversão foi significativamente melhorada (Midilli et al. 2008). Da mesma
forma, a alimentação com dieta suplementada com simbiótico não influenciou o consumo
de ração, a eficiência da conversão alimentar, o ganho de peso corporal e o peso do
intestino delgado dos frangos (Erdoğan et al. 2010). A suplementação dietética com uma
combinação de probiótico comercial (PrimaLac) e prebiótico (TechnoMos) não teve efeito
significativo no consumo diário de ração, ganho de peso corporal diário, taxa de
conversão alimentar, características de carcaça, morfologia intestinal e populações
bacterianas do íleo de frangos de corte (Salehimanesh et al. 2016). Os parâmetros
morfométricos das diferentes camadas da parede intestinal de frangos de corte não foram
influenciados pela alimentação de uma combinação de produto probiótico contendo
bactérias anaeróbias, enterobactérias fermentadoras de lactose, Enterococcus sp. e
Lactobacillus acidophilus e MOS. Além disso, o simbiótico não melhorou a integridade
intestinal e o desempenho dos frangos (Fernandes et al. 2014). Mookiah et al. (2014)
relataram que o simbiótico consistindo em 11 cepas de Lactobacillus mais IMO não
mostrou um efeito sinérgico duplo no desempenho, populações bacterianas cecais e
concentrações de ácidos graxos voláteis cecais (AGV) e não AGV de frangos de corte em
comparação com os probióticos ou pré-biótico sozinho. As diferenças nos efeitos dos
simbióticos sobre o desempenho do crescimento e outros índices podem ser atribuídas a
variações na cepa de probióticos e/ou tipo de prebióticos selecionados, métodos de
preparação, nível de suplementação alimentar e duração do uso, composição da dieta,
idade das aves e condições de higiene. Além disso, em vários casos, o ambiente e o
estado de estresse das aves não são relatados ou considerados, já que os ambientes
experimentais costumam estar muito distantes das condições da fazenda (Gaggia et al.
2010; Wang et al. 2018).

507
O deficit de íons cálcio nos ossos leva à deterioração da estrutura do esqueleto e à
redução da resistência óssea. A necessidade de usar alimentos e ingredientes bioativos
na alimentação, estimulando a assimilabilidade de minerais nas aves, é particularmente
importante quando as aves crescem intensamente e são muito pesadas (Kwiatkowska et
al. 2017). Embora prebióticos, probióticos e simbióticos tenham mostrado modular a
absorção de minerais e o conteúdo mineral ósseo, os simbióticos são as substâncias
menos investigadas com relação ao potencial de promoção da saúde óssea. Estudos
realizados em animais e humanos revelaram resultados positivos dos prebióticos na
absorção e metabolismo de minerais e na composição e arquitetura óssea. Este efeito
dos prebióticos dietéticos é promovido pelo alto teor de cálcio na dieta até um nível limite
e uma quantidade e composição otimizadas de prebióticos suplementados. Os
mecanismos subjacentes incluem o aumento da solubilidade de minerais devido ao
aumento da produção bacteriana de SCFA, um aumento da superfície de absorção pela
promoção da proliferação de enterócitos mediada por produtos de fermentação bacteriana
e aumento da expressão de proteínas de ligação ao cálcio. Com o aumento da expressão
de enterócitos, bem como de proteínas ligantes de cálcio, mais minerais são absorvidos, a
saúde do intestino é melhorada e o corpo pode manter uma estrutura óssea mais forte
com o fornecimento de cálcio (Scholz-Ahrens et al. 2007) Por outro lado, os
microrganismos probióticos produzem a enzima fitase que é usada para liberar mais
minerais da ligação fitato para absorção. Os microrganismos probióticos também são
capazes de hidrolisar ligações de glicosídeos em nutrientes que, de outra forma, não
podem ser decompostos pelos intestinos; como resultado, as bactérias probióticas e o
animal hospedeiro se beneficiam com o aumento da disponibilidade de minerais
(Parvaneh et al. 2014). Os probióticos têm um efeito independente na facilitação da
absorção de minerais, e os simbióticos podem induzir efeitos adicionais. Foi relatado que
o aumento nos níveis de absorção de cálcio coincide com um aumento nos valores de
densidade óssea (Weaver 2015).

A alimentação com dieta contendo Bacillus subtilis e/ou inulina aumentou o teor de cinzas,
cálcio e densidade da tíbia de poedeiras brancas Lohmann. Além disso, a suplementação
também aumentou a produção e o peso do ovo e melhorou a qualidade da casca do ovo,
incluindo espessura e conteúdo de cálcio e diminuição das deformações da casca do ovo.
As melhorias no desempenho e na qualidade da casca do ovo após a inclusão do
simbiótico na dieta estão diretamente relacionadas à colonização da microflora benéfica
associado a um aumento na área de absorção das vilosidades criptas. Os efeitos
positivos do simbiótico nos índices de qualidade da casca do ovo podem provavelmente
ser atribuídos à estimulação da disponibilidade de minerais (Abdelqader et al. 2013). Um
508
efeito favorável do simbiótico no acúmulo de cálcio também foi demonstrado em codornas
japonesas, nas quais o conteúdo de cálcio e fósforo na tíbia após o uso de um simbiótico
comercial (Biomin®IMBO) era dependente do sexo da ave, e os resultados significativos
foram evidentes apenas em homens (Vahdatpour et al. 2014). Os efeitos benéficos do uso
de simbióticos dietéticos na nutrição de poedeiras Hy-Line W-36 sobre as características
da casca do ovo foram relatados por Cesari et al. (2014). Prebiótico (leite em pó
desnatado contendo 54% de lactose) adicionado a uma dieta contendo Lactobacillus
acidophilus D2/CSL resultou em melhorias significativas nas características de qualidade
do ovo, em termos de densidade específica, espessura da casca, unidade Haugh e
porcentagem da casca. Esses efeitos positivos podem ser devidos ao aumento da
produção de SCFA no intestino de galinhas alimentadas com a combinação de bactérias
probióticas e lactose.

Os microrganismos benéficos habitam o trato gastrointestinal das galinhas imediatamente

após a eclosão, e esse desenvolvimento ocorre por meio do contato com as fezes
maternas. Porém, na incubação artificial, apesar do uso de aditivos para rações, a fixação
dos microrganismos benéficos intestinais é retardada. Assim, a administração de
determinada substância diretamente no ovo tem sido usada e os resultados são
promissores (Maiorano et al. 2012; Sławińska et al. 2014a, b). Em comparação com a
administração de prebióticos na dieta, a injeção in ovo aumenta a população de microflora
benéfica no dia da eclosão e leva a um nível alto e estável de bifidobactérias durante o
período de crescimento dos frangos de corte (Villaluenga et al. 2004). Além disso, doses
muito baixas das substâncias são eficazes quando injetadas in ovo.

A administração in ovo de simbióticos selecionados é uma abordagem promissora para

melhorar o sistema imunológico das galinhas, pois combina os méritos dos probióticos e
prebióticos e pela administração precoce no embrião e apoia o desenvolvimento de seus
órgãos imunológicos. A administração in ovo de Lactococcus lactis IBB SL1 mais
oligossacarídeos da família de rafinose, Lactococcus lactis IBB SC1 mais
oligossacarídeos da família de rafinose, ou Lactobacillus acidophilus e Streptococcus
faecium mais lactose no embrião de galinha em desenvolvimento forneceu estímulo para
a estimulação do sistema imunológico das galinhas em crescimento, mas seu a eficiência
dependeu do genótipo da galinha. Os probióticos de Lactococcus lactis sobreviveram no
intestino do frango ao longo de sua vida (Sławińska et al. 2014a). A administração in ovo
de simbióticos também demonstrou ativar o sistema imunológico em galinhas adultas.
Sławińska et al. (2014b) investigaram os efeitos da administração in ovo de Lactococcus
lactis subsp. lactis IBB SL1 mais oligossacarídeos da família de rafinose, Lactococcus

509
lactis subsp. cremoris IBB SC1 mais oligossacarídeos da família de rafinose e
Lactobacillus acidophilus e Streptococcus faecium mais lactose na expressão de genes
relacionados ao sistema imunológico em galinhas adultas. Os tecidos intestinais tiveram
regulação negativa da expressão para as citocinas interleucina (IL) IL-4, IL-6, IL-12p40,
IL-18, interferon (IFN) -β e IFN-γ e 1 quimiocina (IL-8) em as tonsilas cecais de galinhas
tratadas com simbióticos. No baço, que é a parte periférica do sistema imunológico, a
expressão de IL-4 e IL-6 foi regulada positivamente, sugerindo que a administração in ovo
de simbióticos ativa o sistema imunológico em galinhas adultas. A administração in ovo de
Lactococcus lactis subsp. lactis 2955 mais inulina foi associada à regulação negativa da
expressão gênica imune nas tonsilas cecais e baço de frangos de corte. A magnitude
dessa regulação negativa aumentou com a idade e foi provavelmente causada pela
estabilização da microbiota gastrointestinal (Płowiec et al. 2015).

Os simbióticos (Lactococcus lactis subespécie lactis IBB SL1 mais inulina e Lactococcus
lactis subespécie cremoris IBB SC1 mais trans galacto oligossacarídeo [TGOS]) injetados
in ovo na célula de ar no 12º dia de desenvolvimento embrionário demonstraram
aumentar a atividade total do pâncreas enzimas amilase e tripsina, enquanto a atividade
da lipase foi aumentada por Lactococcus lactis subespécie cremoris IBB SC1 mais TGOS
nas galinhas em crescimento. As mudanças mais pronunciadas foram observadas no final
do período de criação investigado no dia 34. Os simbióticos injetados in ovo não
causaram deterioração na condição pós-eclosão do fígado de galinha, conforme
determinado pela medição da atividade das enzimas marcadoras alanina
aminotransferase sérica e sérica aspartato aminotransferase. Embora o tratamento com
os simbióticos não tenha alterado a taxa de conversão alimentar, Lactococcus lactis
subespécie lactis IBB SL1 mais inulina aumentou significativamente o peso corporal final
das galinhas (Pruszynska-Oszmalek et al. 2015).

A administração in ovo de simbióticos também pode ser um método eficaz para aumentar
o peso corporal, melhorar o perfil cecal de SCFA e aumentar a relação comprimento das
vilosidades: profundidade da cripta na mucosa jejunal (Miśta et al. 2017). Estes efeitos
foram mais pronunciados após a administração de Lactococcus lactis subsp. lactis IBB
SL1 mais inulina em comparação com outro simbiótico Lactococcus lactis subsp. cremoris
IBB SC1 mais TGOS. Além disso, a administração in ovo destes dois simbióticos no dia
12 de incubação demonstrou modular o desenvolvimento dos órgãos linfáticos centrais e
periféricos em frangos de corte. Lactococcus lactis subsp. cremoris IBB SC1 mais TGOS
diminuiu a razão córtex/medula no timo e retardou o desenvolvimento do córtex nos
folículos bursais no dia 21 pós-eclosão, com impactos consequentes nos órgãos linfáticos

510
primários. O tratamento simbiótico também estimulou a formação de centros germinativos
no baço de galinhas de 21 e 35 dias de idade, indicando aumento da proliferação de
células B em órgãos linfáticos secundários. Produziu um aumento dependente da idade
na proporção baço/bursa de Fabricius (Madej et al. 2015). Em outro estudo, Lactococcus
lactis subsp. lactis IBB SL1 mais inulina, bem como Lactococcus lactis subsp. cremoris
IBB SC1 mais TGOS administrados in ovo mostraram ter um efeito estimulador no
desenvolvimento do tecido linfóide associado ao intestino após a eclosão (Madej e
Bednarczyk 2016).

Os efeitos biológicos dos simbióticos dependem exclusivamente da seleção cuidadosa de

probióticos e prebióticos bioativos. Dunislawska et al. (2017) apresentou um fluxo de
trabalho associado à seleção in vitro de simbióticos e suas consequências para o estudo
animal a jusante, incluindo abundância de comunidades microbianas intestinais,
parâmetros de desempenho e respostas moleculares do sistema imunológico. Com base
em achados in vitro sobre a eclosão e curva de crescimento, eles desenvolveram dois
simbióticos, a saber, Lactobacillus salivarius IBB3154 mais GOS e Lactobacillus
plantarum IBB3036 mais oligossacarídeos da família da rafinose. Ambos os simbióticos
administrados in ovo tiveram efeitos benéficos sobre o estado geral de frangos de corte
caracterizados por baixa mortalidade e altos parâmetros de produção e populações
microbianas de Lactobacillus sp. e Enterococcus sp. eram mais elevados no íleo. Dos
dois simbióticos, Lactobacillus salivarius IBB3154 mais GOS causou suprarregulação
significativa de IL-6, IL-18, IL-1β, IFN-γ e IFN-β no baço no dia 21 e IL-1β no dia 7,
enquanto IL-12, IL-8 e IL-1β no dia 42 e IFN-β no dia 14 foram regulados para baixo nas
tonsilas cecais e foram mais potentes no estabelecimento de uma mudança benéfica na
composição da microbiota no trato gastrointestinal.

Em um estudo recente, Kolodziejski et al. (2018) demonstraram que as incretinas estão

envolvidas na ação de simbióticos ou que podem até ser seu alvo em aves. A injeção in
ovo de dois simbióticos diferentes Lactobacillus salivarius IBB3154 mais GOS e
Lactobacillus plantarum IBB3036 mais oligossacarídeos da família da rafinose levou a
uma redução do nível de incretinas do peptídeo semelhante ao glucagon 1 (GLP-1) e
polipeptídeo inibitório gástrico ou peptídeo insulinotrópico dependente de glicose (GIP) no
soro sanguíneo de frangos de corte. Ambos os simbióticos regularam negativamente a
expressão de GLP-1 e GIP mRNA no duodeno e os receptores de GLP-1 no pâncreas.
Além disso, Lactobacillus plantarum IBB3036 mais oligossacarídeos da família da rafinose
aumentaram as atividades de tripsina e lipase no conteúdo do duodeno, diminuindo
simultaneamente a atividade de amilase, que provavelmente promove a digestão de

511
proteínas e lipídios. A entrega in ovo desses simbióticos também afetou significativamente
a estrutura intestinal, o que deve contribuir para a melhoria na absorção de nutrientes pelo
intestino (Sobolewska et al. 2017).

2.2 Simbióticos para Ruminantes

O uso atual de probióticos em jovens preruminantes geralmente tem como alvo o intestino
grosso e representa um meio interessante de estabilizar os microrganismos
gastrointestinais e reduzir o risco de colonização de patógenos e, em última análise,
apoiar os efeitos benéficos, incluindo o equilíbrio da microbiota intestinal, bem como na
nutrição e saúde animal. Por outro lado, os prebióticos demonstraram ter efeitos benéficos
específicos em bezerros, incluindo bloqueio da colonização de patógenos no intestino,
redução na incidência e severidade da doença entérica e prevenção da adesão de
Enterobacteriaceae, particularmente Escherichia coli e Salmonella, ao epitélio intestinal e
pode, em última análise, melhorar o desempenho do crescimento. No entanto, os efeitos
benéficos para a saúde com probióticos e prebióticos parecem ser mínimos quando os
bezerros são geralmente saudáveis. Os probióticos em ruminantes adultos melhoram
principalmente a digestão das fibras por microrganismos ruminais e têm efeitos positivos
em vários processos digestivos, particularmente a lise da celulose e a síntese de
proteínas microbianas (Heinrichs et al. 2009; Uyeno et al. 2015). A aplicação de
simbióticos pode auxiliar na redução da acidose e estabilização do pH ruminal,
melhorando a função imunológica, interferindo nas infecções por patógenos e,
consequentemente, melhorando a saúde animal e a eficiência produtiva.

Em comparação com probióticos e prebióticos, os estudos sobre simbióticos sobre a

saúde e o desempenho do gado receberam atenção mínima. A eficácia e a adequação do
uso de simbióticos foram geralmente avaliadas com base no ganho de peso, ingestão de
alimentos e utilização e no estado de saúde (Radzikowski 2017; Markowiak e Śliżewska
2018). Em bezerros pré ruminantes, Enterococcus faecium mais lactulose produziu efeitos
benéficos no desempenho de crescimento. A altura das vilosidades ileais, a profundidade
das criptas no ceco e a área de superfície dos folículos linfáticos das manchas de Peyer
foram diminuídas pelo tratamento simbiótico (Fleige et al. 2007). A adição da combinação
de Streptococcus faecium e MOS às dietas de bezerros leiteiros mostrou melhorar a
consistência fecal e reduzir o escore fecal de bezerros sem reduzir o número de episódios
de diarréia (Morrison et al. 2010). Bezerros pré ruminantes alimentados com leite
contendo simbiótico composto por probiótico (contendo sete cepas de bactérias e duas
cepas de levedura) e prebiótico (polissacarídeos da parede celular de Saccharomyces
cerevisiae) resultaram em um aumento no ganho de peso médio diário e uma diminuição
512
no número de Escherichia coli patogênica nas fezes de bezerros. No entanto, a aplicação
do simbiótico não teve efeito significativo sobre a contagem de leucócitos, o nível de IgG1
no plasma e a resposta imune mediada por células (Roodposhti e Dabiri 2012).
Resultados semelhantes foram demonstrados por Marcondes et al. (2016) em bezerros
Holstein Californianos após suplementação de complexo simbiótico. Os bezerros
alimentados com simbióticos obtiveram maior ganho de peso médio diário e exibiram
maior digestibilidade da matéria seca e fibra em detergente neutro e melhor saúde animal.
Além disso, uma combinação de probióticos e prebióticos comerciais também demonstrou
eliminar a perda de morbidade e mortalidade associada a infecções por Escherichia coli
produtoras de toxina Shiga em bezerros leiteiros (Baines et al. 2013).

Suplementação de alimentos com um produto simbiótico que consiste em Lactobacillus

casei subsp. casei e dextrano aumentaram a resistência de vacas leiteiras Holstein a
condições ambientais adversas, como alta temperatura e umidade. O simbiótico melhorou
a produção de leite e os teores totais de gordura, proteína e desnatado sólido, como
resultado de uma mudança positiva na microbiota intestinal bovina e uma maior
resistência a doenças infecciosas. As vacas avaliadas também apresentaram redução no
número de células somáticas e diminuição na incidência de mastites. (Yasuda et al. 2007).

2.3 Simbióticos para Suínos

Os estudos sobre os efeitos dos simbióticos na saúde e no desempenho dos suínos são
escassos. Os efeitos de alguns simbióticos investigados sobre a saúde e o desempenho
dos suínos são apresentados na Tabela 2. A diarreia pós-desmame é uma das principais
preocupações relacionadas à saúde intestinal dos leitões e costuma ser causada pela
infecção de Escherichia coli enterotoxigênica (Sun e Kim 2017). Alguns estudos foram
realizados para determinar a utilidade potencial dos simbióticos na prevenção da diarreia
pós-desmame em porcos. Nemcová et al. (1999) demonstraram o efeito benéfico
sinérgico de Lactobacillus paracasei mais FOS na microbiota fecal de leitões recém-
desmamados. Animais alimentados com simbiótico exibiram aumento na contagem total
de anaeróbios e aeróbios e aumento no número de Lactobacillus e Bifidobacterium,
enquanto a contagem bacteriana de Enterobacteriaceae e Clostridium diminuiu nas fezes
de leitões. Em um estudo posterior, Nemcová et al. (2007) relataram que a administração
da combinação de Lactobacillus plantarum, maltodextrina e FOS aumentou as
concentrações de ácido acético no íleo e cólon e foi considerada mais eficaz na inibição
das contagens de Escherichia coli O8: K88 aderindo à mucosa intestinal do jejuno e cólon
de leitões convencionais.

513
 Tabela 2 Efeitos de alguns simbióticos na saúde e desempenho de crescimento de porcos
Simbiótico
Lactobacillus (L.) paracasei + FOS
L. salivarius 1B 4/11 + lactitol
Diminuição de triacilglicerol plasmático, colesterol total
L. acidophilus ATCC 4962 + FOS, e colesterol de lipoproteína de baixa densidade e
inulina e manitol
Bacillus subtilis, L. casei, Pichia
anomala + oligossacarídeos
Enterococcus faecium, L.
salivarius, L. reuteri,
Bifidobacterium thermophilum +
inulina
L. plantarum—Biocenol™ LP96
(CCM 7512), L. fermentum—
Biocenol™ LF99 (CCM 7514) +
linhaça
Enterococcus faecium NCIMB
11181 + lactulose
L. plantarum—Biocenol™ LP96
(CCM 7512), L. fermentum—
Biocenol™ LF99 (CCM 7514) +
linhaça
Resultado principal Referências
Contagens fecais aumentadas de Lactobacillus sp.,
Bifidobacterium sp., Anaeróbios totais e aeróbios Bomba et al.
totais e contagens de Clostridium e Enterobacterium (2002)
significativamente diminuídas
Efeito sinérgico positivo da combinação em
comparação com o uso de componentes individuais
Piva et al.
na modulação da microflora cecal in vitro e melhor
(2005)
eficiência alimentar quando fornecida a porcos
desmamados
Liong et al.
deformação reduzida de eritrócitos em porcos (2007)
hipercolesterolêmicos
Melhoria da digestibilidade aparente dos nutrientes,
Fan et al.
diminuição das taxas de diarreia e aumento das
(2015)
contagens fecais de LAB e atividade da lipase fecal
Efeito benéfico na microbiota intestinal; diminuição da
Sattler et al.
abundância relativa de Escherichia no íleo, ceco e
(2015)
cólon; e aumento do número de bifidobactérias no íleo
Diminuição do vazamento de lactato desidrogenase
no soro sanguíneo e extratos de tecidos e provável Andrejčáková
melhora no estado imunológico e na integridade da et al. (2016)
mucosa do jejuno durante a infecção
Abundância de Proteobacteria diminuída, aumento da
população média de Lactobacillaceae e grande Chae et al.
diminuição nas proporções de Enterobacteriaceae nas (2016)
fezes
Efeitos positivos sobre os níveis séricos de lipídios
totais, a proporção de ácidos graxos poliinsaturados Sopková et al.
n-3 (PUFAs) / n-6 PUFAs e saúde intestinal e (2017)
processo de adaptação após o desmame

Leitões alimentados com dieta contendo 0,5% de simbióticos (mistura de 0,2% de oligo
frutose mais 0,3% de probióticos) exibiram maior ganho de peso médio diário e tiveram
um número significativamente reduzido de bactérias coliformes totais no cólon, enquanto
a população de bifidobactérias aumentou significativamente no íleo e cólon (Shim et al.
2005). Lee et al. (2009) em um estudo de 16 dias avaliou o efeito dos simbióticos no
desempenho do crescimento, digestibilidade dos nutrientes, emissão de gases nocivos e
população microbiana fecal em leitões desmamados. A suplementação com o produto
simbiótico contendo uma combinação de um probiótico originado da microflora anaeróbica
e um prebiótico (MOS, lactose, acetato de sódio e citrato de amônio) resultou em melhor
digestão de nutrientes, diminuição da emissão de gases nocivos e bactérias patogênicas
no desmame precoce de porcos. Suínos em crescimento, alimentados com dieta
514
suplementada com prebióticos e probióticos 0,2% de bactérias anaeróbias por 15 dias,
apresentaram maior digestibilidade da matéria seca e proteína bruta, diminuição da
emissão de amônia fecal e gases de amina e aumento da emissão de acetato fecal.
Embora o desempenho do crescimento não tenha sido afetado, a população fecal de
Escherichia coli foi menor em porcos alimentados com o simbiótico (Chu et al. 2011).

Krause et al. (2010) demonstraram a eficácia do simbiótico que consiste em uma mistura
50:50 das cepas de Escherichia coli probiótica UM-2 e UM-7 e amido de batata cru
prebiótico (RPS) em porcos jovens desafiados com Escherichia coli enterotoxigênica
(ETEC) K88. O simbiótico produziu um efeito benéfico no desempenho do crescimento
dos leitões e resultou na redução da diarreia e no aumento da diversidade microbiana no
intestino. Foi sugerido que a microcina produzida pelo probiótico Escherichia coli pode
limitar o crescimento de competidores em um intestino inflamado, incluindo Escherichia
coli comensal e Escherichia coli invasiva aderente (Krause et al. 2010; Sassone-Corsi et
al. 2016; Liao e Nyachoti 2017). O efeito prebiótico do RPS pode ser atribuído aos
grânulos de amido, que são muito maiores que os dos grãos de cereais e,
consequentemente, atingem o intestino delgado distal e o cólon, onde modificam a
fermentação. Em outro estudo, o potencial de Lactobacillus plantarum JC1 (B2028),
lactulose e sua combinação para controlar a colibacilose pós-desmame em porcos foi
avaliado usando um desafio oral ETEC K88 (Guerra-Ordaz et al. 2014). A lactulose, um
dissacarídeo sintético e não digerível, não apenas melhorou o ganho médio diário, mas
também aumentou os lactobacilos, a porcentagem de ácido butírico no cólon e a altura
das vilosidades do íleo e diminuiu a proteína principal de fase aguda do porco no soro.
Por outro lado, o probiótico aumentou o número de bactérias Lactobacillus plantarum no
íleo e cólon e os lactobacilos totais no cólon e apresentou tendência à redução da
diarreia. As concentrações de amônia na digesta ileal e colônica diminuíram, enquanto a
altura das vilosidades e o número de células caliciformes ileais aumentaram. Os efeitos
positivos do Lactobacillus plantarum e da lactulose foram combinados no tratamento
simbiótico, resultando em um simbiótico complementar com potencial para controlar a
colibacilose pós-desmame em leitões.

O miniporco de Göttingen parece ser um modelo adequado para a pesquisa da microbiota

intestinal em porcos. Tanner et al. (2015) investigaram o impacto de Bifidobacterium
thermophilum RBL67 (RBL67) sozinho e combinado com FOS na microbiota intestinal de
miniporcos de Göttingen. Durante os tratamentos e no momento da morte dos animais,
RBL67 foi detectado de forma consistente nas fezes, ceco e cólon após alimentação com
RBL67 e dietas simbióticas. No momento da morte dos animais, números

515
significativamente maiores de Bifidobacterium no ceco e cólon de miniporcos alimentados
com simbióticos foram medidos em comparação com RBL67, sugerindo que a
combinação simbiótica representa uma estratégia valiosa para aumentar os níveis de
bactérias probióticas e a sobrevivência no trato gastrointestinal para alimentação e
aplicações em alimentos.

2.4 Simbióticos para animais de companhia

O componente prebiótico em um produto simbiótico deve apoiar o crescimento do

probiótico e aumentar sua proliferação no trato gastrointestinal. Obviamente, os aditivos
prebióticos devem ser escolhidos dependendo da cepa probiótica. Embora as
combinações de prebióticos com probióticos dietéticos não tenham sido exploradas
adequadamente nas espécies caninas e felinas domésticas, tais informações podem ter
implicações para o projeto e produção de formulações simbióticas para animais de
companhia. Ogué-Bon et al. (2010) conduziram testes in vitro para avaliar o potencial
sinérgico dos prebióticos FOS, GOS e inulina e cepas probióticas Bifidobacterium
bifidum 02450B, Bifidobacterium longum 05, Lactobacillus plantarum 115400B,
Lactobacillus acidophilus 14150B, Lactobacillus acidophilus e Lactobacillus rhamnosus.
Foi demonstrado que a combinação simbiótica GOS mais Bifidobacterium bifidum 02450B
induziu maior modulação da microbiota fecal canina em comparação com GOS sozinho.
Em outro estudo in vitro, a associação entre cepas probióticas disponíveis
comercialmente (Lactobacillus plantarum 115400B, Lactobacillus acidophilus 14150B,
Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus rhamnosus, Bifidobacterium longum 05, e
Bifidobacterium bifidum bifidum, fibra de cítrico 02450B e amido de milho) foi investigado.
O farelo de arroz mostrou ser capaz de aumentar a produção de SCFA e estimular o
crescimento de cepas probióticas. Já o farelo de arroz é comumente utilizado como
suplemento de fibra na indústria de rações e poderia, portanto, agregar um efeito
prebiótico aos conhecidos efeitos dietéticos vinculados ao uso desse tipo de fibra, que
incluem aumento da massa fecal e ação laxante. O farelo de arroz por si só teve o mesmo
efeito nas contagens fecais de bifidobactérias e lactobacilos e nas concentrações de
SCFAs que as várias combinações simbióticas, indicando assim a falta de efeito sinérgico
entre as cepas probióticas e a fonte de fibra usada (Ogue-Bon et al. 2011; Pinna e Biagi
2014).

Em um estudo recente, Salavati Schmitz e Allenspach (2017) testaram as propriedades de

crescimento de Enterococcus faecium NCIMB 10415 E1707, Enterococcus faecium
NCIMB 30183, Bifidobacterium longum NCIMB 30182 e Bifidobacterium infantis NCIMB
30181, com a adição de FOS, MOS, FOS e goma arábica in vitro. O Enterococcus
516
faecium NCIMB 10415 E1707, que é a cepa probiótica mais comumente usada em
pequenos animais, não foi influenciada por nenhum dos prebióticos usados. O
crescimento das bifidobactérias foi aumentado com oligossacarídeos prebióticos
comumente usados, enquanto a adição de goma arábica teve um efeito mais forte na
aceleração do crescimento do que o FOS sozinho, sugerindo que as bifidobactérias
podem ser candidatos probióticos interessantes em pequenos animais.

Além dos estudos in vitro, os efeitos de Lactobacillus acidophilus NCFM, FOS ou sua
combinação foram investigados nas concentrações de populações microbianas
intestinais, produtos finais fermentativos e digestibilidades de nutrientes em cães adultos
saudáveis. Lactobacillus acidophilus mais FOS contendo simbiótico provou ser benéfico
em cães saudáveis. A suplementação de FOS sozinho melhorou a ecologia microbiana
intestinal aumentando as concentrações de populações microbianas benéficas (por
exemplo, bifidobactérias, lactobacilos) e diminuindo as concentrações de patógenos
potenciais (por exemplo, Clostridium perfringens). Ele também aumentou os índices de
saúde intestinal, aumentando as concentrações fecal de butirato e lactato e diminuindo
vários compostos putrefativos presentes nas fezes. Por outro lado, Lactobacillus
acidophilus aumentou algumas populações microbianas benéficas e aumentou a
digestibilidade de nutrientes do trato total. Lactobacillus acidophilus mais FOS resultou em
efeitos de entidade maior na concentração de metabólitos bacterianos. Em particular, o
simbiótico foi eficaz na redução das concentrações fecais de amônia e compostos
putrefativos, incluindo ácidos graxos de cadeia ramificada, aminas biogênicas, fenóis e
indóis em maior extensão, em comparação com a administração de probiótico ou
prebiótico sozinho (Swanson et al. 2002).

Embora os simbióticos suplementares possam ser úteis na introdução de populações

bacterianas benéficas e tenham potencial para encorajar a proliferação de cepas
específicas autóctones no trato intestinal, existem estudos limitados usando simbióticos
como um suplemento na prevenção ou tratamento da diarreia em animais de companhia.
Gagné et al. (2013) avaliaram os efeitos de um simbiótico contendo Enterococcus
faecium SF68, Bacillus coagulans e Lactobacillus acidophilus mais FOS e MOS e outros
ingredientes sobre a qualidade fecal, as concentrações de SCFA e o microbioma e seu
potencial para reduzir os episódios de diarreia em cães em treinamento. A administração
de simbióticos resultou em um aumento significativo de Lactobacillaceae, correlação
positiva entre Lactobacillaceae e concentração geral de butirato e melhora na pontuação
fecal, que foi associada a uma diminuição na prevalência de diarreia em cães. Em
contraste, em um estudo anterior, nenhuma alteração nos principais filos bacterianos foi

517
identificada em cães e gatos saudáveis após a administração de um simbiótico comercial
contendo uma mistura de sete espécies probióticas diferentes (E. faecium NCIMB 30183,
S. salivarius subsp. thermophilus NCIMB 30189, B. longum, NCIMB 30179, NCIMB 30184
de L. acidophilus, L. casei subsp. rhamnosus NCIMB 30188, L. plantarum NCIMB 30187,
L. delbrueckii subsp. bulgaricus NCIMB 30186) e uma mistura de FOS e arabino
galactanos diariamente durante 21 dias. O simbiótico não teve efeitos adversos
gastrointestinais durante o período do estudo. Nenhum dos marcadores séricos avaliados
(cobalamina, folato, IgA, imunorreatividade semelhante à tripsina e imunorreatividade da
lipase pancreática) ou fecal (inibidor de IgA e α1-proteinase) da função gastrointestinal e
imunológica foram influenciados pela administração simbiótica. No entanto, a
administração do simbiótico resultou em um aumento da abundância de bactérias
probióticas nas fezes de cães e gatos saudáveis (Garcia-Mazcorro et al. 2011). A falta de
mudanças nos principais filos bacterianos dos cães e gatos administrados com
simbióticos foi atribuída a uma quantidade significativamente menor de prebióticos
fornecidos na dieta. Foi demonstrado que para causar aumentos significativos no
microbioma fecal de cães como Lactobacillus, é necessário pelo menos 0,5-1% de
aumento na fibra solúvel (Swanson et al. 2002; Gagné et al. 2013).

A diarreia também é a doença mais comum que afeta cães em canis e em abrigos de
animais. Em um estudo recente, Rose et al. (2017) avaliaram a eficácia de um
suplemento simbiótico na incidência de diarreia em um abrigo para cães em um estudo
randomizado, duplo-cego e controlado por placebo. A suplementação de cães saudáveis
que entram em um abrigo para animais com Enterococcus faecium NCIMB 10415 4b1707
mais uma combinação de FOS e acácia demonstrou diminuir significativamente a
incidência de diarreia. Foi sugerido que os abrigos de animais podem usar suplementos
simbióticos para melhorar o bem-estar animal e diminuir os custos envolvidos na limpeza
e alojamento dos animais, bem como potencialmente diminuir a intervenção veterinária.

Os estudos que abordam a eficácia dos simbióticos em gatos domésticos com diarreia
são muito escassos. Hart et al. (2012) examinou o efeito de uma formulação simbiótica
compreendendo probióticos multiespécies (Enterococcus faecium NCIMB 30183,
Streptococcus salivarius subsp. thermophilus NCIMB 30189, Bifidobacterium bifidum
NCIMB 30179, Lactobacillus acidophilus NCIMB 30184, Lactobacillus casei subsp.
rhamnosus NCIMB 30188, Lactobacillus plantarum NCIMB 30187, Lactobacillus
delbrueckii subsp. bulgaricus NCIMB 30186) mais dois prebióticos em gatos adultos de
propriedade de clientes com diarreia crônica de ocorrência natural. O simbiótico melhorou
o caráter das fezes e a pontuação fecal média diminuiu de 6,0 para 4,4, representando

518
um caráter significativamente mais firme das fezes. Após um curso de suplementação
simbiótica de 21 dias, 72% dos proprietários perceberam uma melhora na diarreia de seus
gatos. Este produto simbiótico não teve efeitos adversos e foi considerado seguro e bem
tolerado.

Embora o uso de probióticos seja benéfico na prevenção de sinais gastrointestinais

associados a antibióticos (AAGS) em humanos (Blaabjerg et al. 2017), pouco se sabe
sobre a eficácia dos simbióticos na mitigação de AAGS em gatos. Stokes et al. (2017)
conduziram um estudo randomizado, duplo-cego, controlado por placebo, bidirecional, de
dois períodos, cruzado de prevenção de sinais gastrointestinais induzidos por
clindamicina usando um simbiótico (uma mistura comercial de probióticos e prebióticos)
em gatos saudáveis de pesquisa. A administração do simbiótico 1 hora após a
administração de clindamicina diminuiu a hiporexia e o vômito em gatos. Além disso, os
benefícios clínicos da administração simbiótica persistiram por pelo menos 6 semanas
após a descontinuação, diminuindo a gravidade da AAGS em gatos que
subsequentemente receberam clindamicina com placebo. No entanto, a administração de
simbióticos não diminuiu a diarreia associada a antibióticos.

3. Observações finais e direções futuras

Tendo em vista a crescente conscientização do consumidor e a demanda cada vez maior
por produtos de origem animal de sistemas de produção de gado sem antibióticos,
simbióticos e outros aditivos para rações estão sendo considerados ferramentas
importantes para ajudar na melhoria do desempenho e saúde animal e no combate a
doenças. Embora os dados disponíveis sobre os efeitos dos simbióticos na saúde e na
produção animal sejam inadequados e exijam mais estudos, a maioria dos estudos que
tratam dos simbióticos foi realizada em aves, mas o aumento da pesquisa tem se
concentrado em ruminantes, porcos e animais de estimação. Existem evidências que
sugerem que os simbióticos estão tendo influência favorável sobre a microbiota intestinal
dos animais e desempenham um papel na melhoria do desempenho e manutenção da
saúde ideal de animais de fazenda e de companhia. O alto potencial de produtos
simbióticos é atribuível ao uso concomitante de probióticos e prebióticos com o objetivo
final, além de outros para melhorar a sobrevivência e implantação de microrganismos
probióticos e manter um equilíbrio favorável no ecossistema do trato gastrointestinal, o
que é crucial para a melhoria da saúde e produtividade do animal hospedeiro. Além de
outros efeitos favoráveis, a melhora no número de microrganismos intestinais benéficos e
a redução da carga potencial do patógeno, a estimulação da resposta imunológica e o
519
aumento da capacidade de produção foram demonstrados após a administração de
simbióticos em animais. Eles também são eficazes para melhorar a arquitetura intestinal,
os índices sanguíneos e a absorção de minerais e nutrientes. O uso de simbióticos pode
reduzir a demanda por promotores de crescimento à base de antibióticos. A seleção dos
probióticos e prebióticos mais apropriados em produtos simbióticos e um melhor
entendimento sobre a microbiota intestinal dos animais abrirão o caminho para o
desenvolvimento de simbióticos mais eficazes. Mais pesquisas são necessárias em
relação aos benefícios de saúde preventivos e terapêuticos, mecanismos de ação, doses
ótimas, duração do tratamento, sistemas de entrega melhorados e aumento da eficácia in
vivo dos simbióticos que podem levar ao aumento de seus efeitos benéficos na saúde e
produção animal.

Referências
Abdel-Hafeez HM, Saleh ESE, Tawfeek SS, Youssef IMI, Abdel-Daim ASA (2017) Effects of probiotic, prebiotic, and
synbiotic with and without feed restriction on performance, hematological indices and carcass characteristics of broiler
chickens. Asian-Australas J Anim Sci 30(5):672–682
Abdelqader A, Irshaid R, Al-Fataftah AR (2013) Effects of dietary probiotic inclusion on performance, eggshell quality,
cecal microflora composition, and tibia traits of laying hens in the late phase of production. Trop Anim Health Prod
45(4):1017–1024
Abdel-Raheem SM, Abd-Allah SMS, Hassanein KMA (2012) The effects of prebiotic, probiotic and synbiotic
supplementation on intestinal microbial ecology and histomorphology of broiler chickens. IJAVMS 6(4):277–289
Abdel-Wareth AA (2016) Effect of dietary supplementation of thymol, synbiotic and their combination on performance,
egg quality and serum metabolic profile of Hy-line Brown hens. Br Poult Sci 57 (1):114–122
Adil S, Magray SN (2012) Impact and manipulation of gut microflora in poultry: a review. J Anim Vet Adv 11(6):873–877
Alizadeh M, Munyaka P, Yitbarek A, Echeverry H, Rodriguez- Lecompte JC (2017) Maternal antibody decay and
antibodymediated immune responses in chicken pullets fed prebiotics and synbiotics. Poult Sci 96(1):58–64
Al-Sultan SI, Abdel-Raheem SM, El-Ghareeb WR, Mohamed MHA (2016) Comparative effects of using prebiotic,
probiotic, synbiotic and acidifier on growth performance, intestinal microbiology and histomorphology of broiler chicks.
Jpn J Vet Res 64(Suppl 2):S187– S195
Anadón A, Martínez-Larrañaga MR, Caballero V, Castellano V (2010) Assessment of prebiotics and probiotics: an
overview. In: Watson RR, Preedy VR (eds) Bioactive foods in promoting health: probiotics and prebiotics. Academic,
Oxford, pp 19–41
Andrejčáková Z, Sopková D, Vlčková R, Kulichová L, Gancarčíková S, Almášiová V, Holovská K, Petrilla V, Krešáková
L (2016) Synbiotics suppress the release of lactate dehydrogenase, promote non-specific immunity and integrity of
jejunum mucosa in piglets. Anim Sci J 87(9):1157–1166
Anwar H, Rahman ZU, Javed I, Muhammad F (2012) Effect of protein, probiotic, and synbiotic supplementation on
serum biological health markers of molted layers. Poult Sci 91(10):2606–2613
Ashayerizadeh A, Dabiri N, Mirzadeh Kh, Ghorbani MR (2011) Effects of dietary inclusion of several biological feed
additives on growth response of broiler chickens. J Cell Anim Biol 5(4):61–65
Awad W, Ghareeb K, B§hm J (2008) Intestinal structure and function of broiler chickens on diets supplemented with a
synbiotic containing Enterococcus faecium and oligosaccharides. Int J Mol Sci 9 (11):2205–2216
Awad WA, Ghareeb K, Abdel-Raheem S, B§hm J (2009) Effects of dietary inclusion of probiotic and synbiotic on
growth performance, organ weights, and intestinal histomorphology of broiler chickens. Poult Sci 88(1):49–56
Aziz Mousavi SMA, Seidavi A, Dadashbeiki M, Kilonzo-Nthenge A, Nahashon SN, Laudadio V, Tufarelli V (2015) Effect
of a synbiotic (Biomin®IMBO) on growth performance traits of broiler chickens. Eur Poult Sci 79. https://doi.org/10.1399/
eps.2015.78
Baffoni L, Gaggia F, Di Gioia D, Santini C, Mogna L, Biavati B (2012) A Bifidobacterium-based synbiotic product to
reduce the transmission of C. jejuni along the poultry food chain. Int J Food Microbiol 157(2):156–161
Baffoni L, Gaggìa F, Garofolo G, Di Serafino G, Buglione E, Di Giannatale E, Di Gioia D (2017) Evidence of
Campylobacter jejuni reduction in broilers with early synbiotic administration. Int J Food Microbiol 251:41–47
Baines D, Sumarah M, Kuldau G, Juba J, Mazza A, Masson L (2013) Aflatoxin, fumonisin and Shiga toxin-producing
Escherichia coli infections in calves and the effectiveness of Celmanax®/Dairyman’s choice™ applications to eliminate
morbidity and mortality losses. Toxins (Basel) 5(10):1872–1895
Blaabjerg S, Artzi DM, Aabenhus R (2017) Probiotics for the prevention of antibiotic-associated diarrhea in outpatients-
a systematic review and meta-analysis. Antibiotics (Basel) 6(4):pii: E21
520
 Bomba A, Nemcová R, Gancarcíková S, Herich R, Guba P, Mudronová D (2002) Improvement of the probiotic effect of
micro-organisms by their combination with maltodextrins, fructo-oligosaccharides and polyunsaturated fatty acids. Br J
Nutr 88(Suppl 1):S95–S99
Calik A, Ceylan A, Ekim B, Adabi SG, Dilber F, Bayraktaroglu AG, Tekinay T, Özen D, Sacakli P (2017) The effect of
intra-amniotic and posthatch dietary synbiotic administration on the performance, intestinal histomorphology, cecal
microbial population, and shortchain fatty acid composition of broiler chickens. Poult Sci 96 (1):169–183
Cesari V, Mangiagalli MG, Giardini A, Galimberti P, Carteri S, Gallazzi D, Toschi I (2014) Egg quality and productive
performance of laying hens fed different levels of skimmed milk powder added to a diet containing Lactobacillus
acidophilus. Poult Sci 93 (5):1197–1201
Chae JP, Pajarillo EA, Oh JK, Kim H, Kang DK (2016) Revealing the combined effects of lactulose and probiotic
enterococci on the swine faecal microbiota using 454 pyrosequencing. Microb Biotechnol 9 (4):486–495
Chen Y, Wen C, Zhou Y (2018) Dietary synbiotic incorporation as an alternative to antibiotic improves growth
performance, intestinal morphology, immunity and antioxidant capacity of broilers. J Sci Food Agric 98(9):3343–3350
Cheng Y, Chen Y, Li X, Yang W, Wen C, Kang Y, Wang A, Zhou Y (2017) Effects of synbiotic supplementation on
growth performance, carcass characteristics, meat quality and muscular antioxidant capacity and mineral contents in
broilers. J Sci Food Agric 97 (11):3699–3705
Chu GM, Lee SJ, Jeong HS, Lee SS (2011) Efficacy of probiotics from anaerobic microflora with prebiotics on growth
performance and noxious gas emission in growing pigs. Anim Sci J 82(2):282–290
Dibaji SM, Seidavi A, Asadpour L, da Silva FM (2014) Effect of a synbiotic on the intestinal microflora of chickens. J
Appl Poult Res 23(1):1–6
Dunislawska A, Slawinska A, Stadnicka K, Bednarczyk M, Gulewicz P, Jozefiak D, Siwek M (2017) Synbiotics for
broiler chickens-in vitro design and evaluation of the influence on host and selected microbiota populations following in
ovo delivery. PLoS One 12(1): e0168587. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0168587
EFSA (2013a) The European union summary report on trends and sources of zoonoses, zoonotic agents and food-
borne outbreaks in 2011. EFSA J 3129:1–250
EFSA (2013b) Scientific opinion on the maintenance of the list of QPS biological agents intentionally added to food and
feed (2013 update). EFSA J 3449:1–108
EFSA (2017) Scientific opinion on the update of the list of QPS-recommended biological agents intentionally added to
food or feed as notified to EFSA (2017 update). EFSA J 15(3):1–177. https://doi.org/10.2903/j.efsa.2017.4664
El-Ghany WAA (2010) Comparative evaluation on the effect of coccidiostate and synbiotic preparations on prevention
of Clostridium perfringens in broiler chickens. Global Vet 5(6):324–333
El-Sissi AF, Mohamed SH (2011) Impact of symbiotic on the immune response of broiler chickens against NDV and
IBV vaccines. Global J Biotechnol Biochem 6(4):186–191
Erdoğan Z, Erdoğan S, Aslantaş Ö, Çelik S (2010) Effects of dietary supplementation of synbiotics and phytobiotics on
performance, caecal coliform population and some oxidant/antioxidant parameters of broilers. J Anim Physiol Anim Nutr
(Berl) 94(5):e40–e48
Fan G, Chang J, Yin Q, Wang X, Dang X (2015) Effects of probiotics, oligosaccharides, and berberine combinations on
growth performance of pigs. Turk J Vet Anim Sci 39(6):637–642
Fernandes BCS, Martins MRFB, Mendes AA, Milbradt EL, Sanfelice C, Martins BB, Aguiar EF, Bresne C (2014)
Intestinal integrity and performance of broiler chickens fed a probiotic, a prebiotic, or an organic acid. Rev Bras Cienc
Avic 16(4):417–424
Fleige S, Preißinger W, Meyer HHD, Pfaffl MW (2007) Effect of lactulose on growth performance and intestinal
morphology of pre-ruminant calves using a milk replacer containing Enterococcus faecium. Animal 1(3):367–373
Food and Agriculture Organization (FAO) (2002) Guidelines for the evaluation of probiotics in food. Report of a Joint
FAO/WHO Working Group on Drafting Guidelines for the evaluation of probiotics in food; FAO, London, Ontario, Canada,
30 April–1 May 2002
Gadde U, Kim WH, Oh ST, Lillehoj HS (2017) Alternatives to antibiotics for maximizing growth performance and feed
efficiency in poultry: a review. Anim Health Res Rev 18(1):26–45
Gaggia F, Mattarelli P, Biavati B (2010) Probiotics and prebiotics in animal feeding for safe food production. Int J Food
Microbiol 141 (Suppl 1):S15–S28
Gagné JW, Wakshlag JJ, Simpson KW, Dowd SE, Latchman S, Brown DA, Brown K, Swanson KS, Fahey GC Jr
(2013) Effects of a synbiotic on fecal quality, short-chain fatty acid concentrations, and the microbiome of healthy sled
dogs. BMC Vet Res 9:246. doi:https://doi.org/10.1186/1746-6148-9-246
Garcia-Mazcorro JF, Lanerie DJ, Dowd SE, Paddock CG, Grützner N, Steiner JM, Ivanek R, Suchodolski JS (2011)
Effect of a multispecies synbiotic formulation on fecal bacterial microbiota of healthy cats and dogs as evaluated by
pyrosequencing. FEMS Microbiol Ecol 78(3):542–554
Ghasemi HA, Shivazad M, Esmaeilnia K, Kohram H, Karimi MA (2010) The effects of a synbiotic containing
Enterococcus faecium and inulin on growth performance and resistance to coccidiosis in broiler chickens. J Poult Sci
47(2):149–155
Ghasemi HA, Shivazad M, Mirzapour Rezaei SS, Karimi Torshizi MA (2016) Effect of synbiotic supplementation and
dietary fat sources on broiler performance, serum lipids, muscle fatty acid profile and meat quality. Br Poult Sci 57(1):71–
83
Gourbeyre P, Denery S, Bodinier M (2011) Probiotics, prebiotics, and synbiotics: impact on the gut immune system and
allergic reactions. J Leukoc Biol 89(5):685–695

521
 Guerra-Ordaz AA, González-Ortiz G, La Ragione RM, Woodward MJ, Collins JW, Pérez JF, Martín-Orúe SM (2014)
Lactulose and Lactobacillus plantarum, a potential complementary synbiotic to control postweaning colibacillosis in
piglets. Appl Environ Microbiol 80 (16):4879–4886
Hamasalim HJ (2016) Synbiotic as feed additives relating to animal health and performance. Adv Microbiol 6:288–302.
https://doi.org/10.4236/aim.2016.64028
Hart ML, Suchodolski JS, Steiner JM, Webb CB (2012) Open-label trial of a multi-strain synbiotic in cats with chronic
diarrhea. J Feline Med Surg 14(4):240–245
Hashem MA, Mohamed MH (2009) Haemato-biochemical and pathological studies on aflatoxicosis and treatment of
broiler chicks in Egypt. Vet Ital 45(2):323–337
Hassanpour H, Zamani Moghaddam AK, Khosravi M, Mayahi M (2013) Effects of synbiotic on the intestinal
morphology and humoral immune response in broiler chickens. Livest Sci 153 (1–3):116–122
Heinrichs AJ, Jones CM, Elizondo-Salazar JA, Terrill SJ (2009) Effects of a prebiotic supplement on health of neonatal
dairy calves. Livest Sci 125(2–3):149–154
Hofacre CL, Beacorn T, Collett S, Mathis G (2003) Using competitive exclusion, mannan-oligosaccharide and other
intestinal products to control necrotic enteritis. J Appl Poult Res 12(1):60–64
Jung SJ, Houde R, Baurhoo B, Zhao X, Lee BH (2008) Effects of galacto-oligosaccharides and a Bifidobacteria lactis-
based probiotic strain on the growth performance and fecal microflora of broiler chickens. Poult Sci 87(9):1694–1699
Kearney SM, Gibbons SM (2018) Designing synbiotics for improved human health. Microb Biotechnol 11(1):141–144
Koc F, Samli H, Okur A, Ozduven M, Akyurek H, Senkoylu N (2010) Effects of Saccharomyces cerevisiae and/or
mannanoligosaccharide on performance, blood parameters and intestinal microbiota of broiler chicks. Bulg J Agric Sci
16(5):643–650
Kolodziejski PA, Sassek M, Chalupka D, Leciejewska N, Nogowski L, Mackowiak P, Jozefiak D, Stadnicka K, Siwek M,
Bednarczyk M, Szwaczkowski T, Pruszynska-Oszmalek E (2018) GLP1 and GIP are involved in the action of synbiotics
in broiler chickens. J Anim Sci Biotechnol 9:13. https://doi.org/10.1186/s40104-017-0227-8
Krause DO, Bhandari SK, House JD, Nyachoti CM (2010) Response of nursery pigs to a synbiotic preparation of
starch and an anti- Escherichia coli K88 probiotic. Appl Environ Microbiol 76 (24):8192–8200
Krueger LA, Spangler DA, Vandermyde DR, Sims MD, Ayangbile GA (2017) Avi-Lution® supplemented at 1.0 or 2.0 g/
kg in feed improves the growth performance of broiler chickens during challenge with bacitracin-resistant Clostridium
perfringens. Poult Sci 96(8):2595–2600
Kwiatkowska K, Winiarska-Mieczan A, Kwiecień M (2017) Feed additives regulating calcium homeostasis in the bones
of poultry—a review. Ann Anim Sci 17(2):303–316
Lee DY, Seo YS, Rayamajhi N, Kang ML, Lee SI, Yoo HS (2009) Isolation, characterization, and evaluation of wild
isolates of Lactobacillus reuteri from pig feces. J Microbiol 47(6):663–672
Li X, Qiang L, Liu XC (2008) Effects of supplementation of fructooligosaccharide and/or Bacillus subtilis to diets on
performance and on intestinal microflora in broilers. Arch Anim Breed 51(1):64–70
Liao SF, Nyachoti M (2017) Using probiotics to improve swine gut health and nutrient utilization. Anim Nutr 3(4):331–
343
Liong M-T, Dunshea FR, Shah NP (2007) Effects of a synbiotic containing Lactobacillus acidophilus ATCC 4962 on
plasma lipid profiles and morphology of erythrocytes in hypercholesterolaemic pigs on high- and low-fat diets. Br J Nutr
98(4):736–744
Luoma A, Markazi A, Shanmugasundaram R, Murugesan GR, Mohnl M, Selvaraj R (2017) Effect of synbiotic
supplementation on layer production and cecal Salmonella load during a Salmonella challenge. Poult Sci 96(12):4208–
4216
Madej JP, Bednarczyk M (2016) Effect of in ovo-delivered prebiotics and synbiotics on the morphology and specific
immune cell composition in the gut-associated lymphoid tissue. Poult Sci 95(1):19–29
Madej JP, Stefaniak T, Bednarczyk M (2015) Effect of in ovo-delivered prebiotics and synbiotics on lymphoid-organs’
morphology in chickens. Poult Sci 94(6):1209–1219
Maiorano G, Sobolewska A, Cianciullo D, Walasik K, Elminowska-Wenda G, Slawinska A, Tavaniello S, Zylinska J,
Bardowski J, Bednarczyk M (2012) Influence of in ovo prebiotic and synbiotic administration on meat quality of broiler
chickens. Poult Sci 91 (11):2963–2969
Malik JK, Ahmad AH, Kalpana S, Prakash A, Gupta RC (2016) Synbiotics: safety and toxicity considerations. In: Gupta
RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity. Academic Press/Elsevier, Amsterdam, pp 811–822
Marcondes MI, Pereira TR, Chagas JC, Filgueiras EA, Castro MM, Costa GP, Sguizzato AL, Sainz RD (2016)
Performance and health of Holstein calves fed different levels of milk fortified with symbiotic complex containing pre- and
probiotics. Trop Anim Health Prod 48(8):1555–1560
Markowiak P, Śliżewska K (2018) The role of probiotics, prebiotics and synbiotics in animal nutrition. Gut Pathog 10:21.
https://doi.org/10.1186/s13099-018-0250-0
McReynolds J, Waneck C, Byrd J, Genovese K, Duke S, Nisbet D (2009) Efficacy of multistrain direct-fed microbial
and phytogenetic products in reducing necrotic enteritis in commercial broilers. Poult Sci 88(10):2075–2080
Midilli M, Alp M, Kocabach N, Muglah OH, Turan N, Yilmaz H, Cakir S (2008) Effects of dietary probiotic and prebiotic
supplementation on growth performance and serum IgG concentration of broilers. South Afr J Anim Sci 38(1):21–27
Min YN, Yang HL, Xu YX, Gao YP (2016) Effects of dietary supplementation of synbiotics on growth performance,
intestinal morphology, sIgA content and antioxidant capacities of broilers. J Anim Physiol Anim Nutr (Berl) 100(6):1073–
1080
522
 Miśta D, Króliczewska B, Pecka-Kiełb E, Kapuśniak V, Zawadzki W, Graczyk S, Kowalczyk A, Łukaszewicz E,
Bednarczyk M (2017) Effect of in ovo injected prebiotics and synbiotics on the caecal fermentation and intestinal
morphology of broiler chickens. Anim Prod Sci 57(9):1884–1892
Mohnl M, Acosta Aragón Y, Acosta Ojeda A, Rodríguez Sánchez B, Pasteiner S (2007) Effect of synbiotic feed additive
in comparison to antibiotic growth promoter on performance and health status of broilers. Poult Sci 86(Suppl 1):217
Mookiah S, Sieo CC, Ramasamy K, Abdullah N, Ho YW (2014) Effects of dietary prebiotics, probiotic and synbiotics on
performance, caecal bacterial populations and caecal fermentation concentrations of broiler chickens. J Sci Food Agric
94(2):341–348
Morrison SJ, Dawson S, Carson AF (2010) The effects of mannan oligosaccharide and Streptococcus faecium addition
to milk replacer on calf health and performance. Livest Sci 131(2–3):292–296
Murarolli VDA, Burbarelli MFC, Polycarpo GV, Ribeiro PAP, Moro MEG, Albuquerque R (2014) Prebiotic, probiotic and
symbiotic as alternative to antibiotics on the performance and immune response of broiler chickens. Rev Bras Cienc Avic
16(3):279–284
Naghi Shokri A, Ghasemi HA, Taherpour K (2017) Evaluation of Aloe vera and synbiotic as antibiotic growth promoter
substitutions on performance, gut morphology, immune responses and blood constitutes of broiler chickens. Anim Sci J
88(2):306–313
Nemcová R, Bomba A, Gancarčíková S, Herich R, Guba P (1999) Study of the effect of Lactobacillus paracasei and
fructooligosaccharides on the faecal microflora in weanling piglets. Berl Munch Tierarztl Wochenschr 112(6–7):225–228
Nemcová R, Bomba A, Gancarcíková S, Reiffová K, Guba P, Koscová J, Jonecová Z, Sciranková L, Bugarský A (2007)
Effects of the administration of lactobacilli, maltodextrins and fructooligosaccharides upon the adhesion of E. coli O8:K88
to the intestinal mucosa and organic acid levels in the gut contents of piglets. Vet Res Commun 31(7):791–800
Ogué-Bon E, Khoo C, McCartney AL, Gibson GR, Rastall RA (2010) In vitro effects of synbiotic fermentation on the
canine faecal microbiota. FEMS Microbiol Ecol 73(3):587–600
Ogué-Bon E, Khoo C, Hoyles L, McCartney AL, Gibson GR, Rastall RA (2011) In vitro fermentation of rice bran
combined with Lactobacillus acidophilus 14 150B or Bifidobacterium longum 05 by the canine faecal microbiota. FEMS
Microbiol Ecol 75(3):365–376
Olveira G, González-Molero I (2016) An update on probiotics, prebiotics and synbiotics in clinical nutrition. Endocrinol
Nutr 63 (9):482–494
Pandey KR, Naik SR, Vakil BV (2015) Probiotics, prebiotics and synbiotics—a review. J Food Sci Technol
52(12):7577–7587
Parvaneh K, Jamaluddin R, Karimi G, Erfani R (2014) Effect of probiotics supplementation on bone mineral content
and bone mass density. Sci World J 2014:595962. https://doi.org/10.1155/2014/595962
Pinna C, Biagi G (2014) The utilisation of prebiotics and synbiotics in dogs. Ital J Anim Sci 13(1).
https://doi.org/10.4081/ijas.2014.3107
Piva A, Casadei G, Gatta PP, Luchansky JB, Biagi G (2005) Effect of lactitol, lactic acid bacteria, or their combinations
(synbiotic) on intestinal proteolysis in vitro, and on feed efficiency in weaned pigs. Can J Anim Sci 85(3):345–353
Płowiec A, Sławińska A, Siwek MZ, Bednarczyk MF (2015) Effect of in ovo administration of inulin and Lactococcus
lactis on immunerelated gene expression in broiler chickens. Am J Vet Res 76 (11):975–982
Pruszynska-Oszmalek E, Kolodziejski PA, Stadnicka K, Sassek M, Chalupka D, Kuston B, Nogowski L, Mackowiak P,
Maiorano G, Jankowski J, Bednarczyk M (2015) In ovo injection of prebiotics and synbiotics affects the digestive potency
of the pancreas in growing chickens. Poult Sci 94(8):1909–1916
Radzikowski D (2017) Effect of probiotics, prebiotics and synbiotics on the productivity and health of dairy cows and
calves. World Sci News 78:193–198
Roodposhti PM, Dabiri N (2012) Effects of probiotic and prebiotic on average daily gain, fecal shedding of Escherichia
coli, and immune system status in newborn female calves. Asian-Australas J Anim Sci 25(9):1255–1261
Rose L, Rose J, Gosling S, Holmes M (2017) Efficacy of a probioticprebiotic supplement on incidence of diarrhea in a
dog shelter: a randomized, double-blind, placebo-controlled trial. J Vet Intern Med 31(2):377–382
Salavati Schmitz S, Allenspach K (2017) Effects of different oligosaccharides on growth of selected probiotic bacterial
strains. J Microb Biochem Technol 9:054–058. https://doi.org/10.4172/1948-5948.1000343
Salehimanesh A, Mohammadi M, Roostaei-Ali MehrM(2016) Effect of dietary probiotic, prebiotic and synbiotic
supplementation on performance, immune responses, intestinal morphology and bacterial populations in broilers. J Anim
Physiol Anim Nutr (Berl) 100 (4):694–700
Sassone-Corsi M, Nuccio SP, Liu H, Hernandez D, Vu CT, Takahashi AA, Edwards RA, Raffatellu M (2016) Microcins
mediate competition among Enterobacteriaceae in the inflamed gut. Nature 540 (7632):280–283
Sattler VA, Bayer K, Schatzmayr G, Haslberger AG, Klose V (2015) Impact of a probiotic, inulin, or their combination
on the piglets’microbiota at different intestinal locations. Benef Microbes 6 (4):473–483
Scavuzzi BM, Henrique FC, Miglioranza LHS, Simão ANC, Dichi I (2014) Impact of prebiotics, probiotics and synbiotics
on components of the metabolic syndrome. Ann Nutr Disord Ther 1(2):1009
Scholz-Ahrens KE, Ade P, Marten B, Weber P, Timm W, Açil Y, Glüer CC, Schrezenmeir J (2007) Prebiotics, probiotics,
and synbiotics affect mineral absorption, bone mineral content, and bone structure. J Nutr 137(3 Suppl 2):838S–846S
Sekhon BS, Jairath S (2010) Prebiotics, probiotics and synbiotics: an overview. J Pharm Educ Res 1(2):13–36
Shim SB, Verstegen MWA, Kim IH, Kwon OS, Verdonk JMAJ (2005) Effects of feeding antibiotic-free creep feed
supplemented with oligofructose, probiotics or synbiotics to suckling piglets increases the preweaning weight gain and
composition of intestinal microbiota. Arch Anim Nutr 59(6):419–427
523
 Sławińska A, Siwek M, Zylińska J, Bardowski J, Brzezińska J, Gulewicz KA, Nowak M, Urbanowski M, Płowiec A,
Bednarczyk M (2014a) Influence of synbiotics delivered in ovo on immune organs development and structure. Folia Biol
62(3):277–285
Sławińska A, Siwek MZ, Bednarczyk MF (2014b) Effects of synbiotics injected in ovo on regulation of immune-related
gene expression in adult chickens. Am J Vet Res 75(11):997–1003
Sobolewska A, Bogucka J, Dankowiakowska A, Elminowska-Wenda G, Stadnicka K, Bednarczyk M (2017) The impact
of synbiotic administration through in ovo technology on the microstructure of a broiler chicken small intestine tissue on
the 1st and 42nd day of rearing. J Anim Sci Biotechnol 8:61. https://doi.org/10.1186/s40104-017-0193-1
Sohail MU, Hume ME, Byrd JA, Nisbet DJ, Ijaz A, Sohail A, Shabbir MZ, Rehman H (2012) Effect of supplementation
of prebiotic mannan-oligosaccharides and probiotic mixture on growth performance of broilers subjected to chronic heat
stress. Poult Sci 91 (9):2235–2240
Sohail MU, Ijaz A, Younus M, Shabbir MZ, Kamran Z, Ahmad S, Anwar H, Yousaf MS, Ashraf K, Shahzad AH, Rehman
H (2013) Effect of supplementation of mannan oligosaccharide and probiotic on growth performance, relative weights of
viscera, and population of selected intestinal bacteria in cyclic heat-stressed broilers. J Appl Poult Res 22(3):485–491
Sopková D, Hertelyová Z, Andrejčáková Z, Vlčková R, Gancarčíková S, Petrilla V, Ondrašovičová S, Krešáková L
(2017) The application of probiotics and flaxseed promotes metabolism of n-3 polyunsaturated fatty acids in pigs. J Appl
Anim Res 45 (1):93–98
Spring P, Wenk C, Dawson KA, Newman KE (2000) The effects of dietary mannanoligosaccharides on cecal
parameters and the concentrations of enteric bacteria in the ceca of Salmonellachallenged broiler chicks. Poult Sci
79(2):205–211
Stokes JE, Price JM, Whittemore JC (2017) Randomized, controlled, crossover trial of prevention of clindamycin-
induced gastrointestinal signs using a synbiotic in healthy research cats. J Vet Intern Med 31 (5):1406–1413
Sun Y, Kim SW (2017) Intestinal challenge with enterotoxigenic Escherichia coli in pigs, and nutritional intervention to
prevent postweaning diarrhea. Anim Nutr 3(4):322–330
Swanson KS, Grieshop CM, Flickinger EA, Bauer LL, Chow J, Wolf BW, Garleb KA, Fahey GC Jr (2002)
Fructooligosaccharides and Lactobacillus acidophilus modify gut microbial populations, total tract nutrient digestibilities
and fecal protein catabolite concentrations in healthy adult dogs. J Nutr 132 (12):3721–3731
Talebi A, Amani A, Pourmahmod M, Saghaei P, Rezaie R (2015) Synbiotic enhances immune responses against
infectious bronchitis, infectious bursal disease, Newcastle disease and avian influenza in broiler chickens. Vet Res
Forum 6(3):191–197
Tang SGH, Sieo CC, Kalavathy R, Saad WZ, Yong ST, Wong HK, Ho YW (2015) Chemical compositions of egg yolks
and egg quality of laying hens fed prebiotic, probiotic, and synbiotic diets. J Food Sci 80(8):C1686–C1695
Tang SGH, Sieo CC, Ramasamy K, Saad WZ, Wong HK, Ho YW (2017) Performance, biochemical and
haematological responses, and relative organ weights of laying hens fed diets supplemented with prebiotic, probiotic and
synbiotic. BMC Vet Res 13(1):248
Tanner SA, Lacroix C, Del'Homme C, Jans C, Zihler Berner A, Bernalier-Donadille A, Chassard C (2015) Effect of
Bifidobacterium thermophilum RBL67 and fructo-oligosaccharides on the gut microbiota in Göttingen minipigs. Br J Nutr
114(5):746–755
Tayeri V, Seidavi A, Asadpour L, Phillips CJC (2018) A comparison of the effects of antibiotics, probiotics, synbiotics
and prebiotics on the performance and carcass characteristics of broilers. Vet Res Commun 42(3):195–207
Uyeno Y, Shigemori S, Shimosato T (2015) Effect of probiotics/prebiotics on cattle health and productivity. Microbes
Environ 30 (2):126–132
Vahdatpour T, Ebrahimnezhad Y, Vahdatpour S (2014) Effects of dietary functional additives on characteristics and
minerals of tibia bone and blood parameters of Japanese quails (Coturnix coturnix japonica). Int J Plant Anim Environ Sci
4(2):690–695
Vicente J, Wolfenden A, Torres-Rodriguez A, Higgins S, Tellez G, Hargis B (2007) Effect of a Lactobacillus species-
based probiotic and dietary lactose prebiotic on Turkey poult performance with or without Salmonella enteritidis
challenge. J Appl Poult Res 16 (3):361–364
Villaluenga CM, Wardeńska M, Pilarski R, Bednarczyk M, Gulewicz K (2004) Utilization of the chicken embryo model
for assessment of biological activity of different oligosaccharides. Folia Biol (Krakow) 52(3–4):135–142
Vitali B, Ndagijimana M, Cruciani F, Carnevali P, Candela M, Guerzoni ME, Brigidi P (2010) Impact of a synbiotic food
on the gut microbial ecology and metabolic profiles. BMC Microbiol 10:4. https://doi.org/10.1186/1471-2180-10-4
Wang Y, Dong Z, Song D, Zhou H, Wang W, Miao H, Wang L, Li A (2018) Effects of microencapsulated probiotics and
prebiotics on growth performance, antioxidative abilities, immune functions, and caecal microflora in broiler chickens.
Food Agric Immunol. https://doi.org/10.1080/09540105.2018.1463972
Weaver CM (2015) Diet, gut microbiome, and bone health. Curr Osteoporos Rep 13(2):125–130
Yang Y, Iji PA, ChoctM(2009) Dietary modulation of gut microflora in broiler chickens: a review of the role of six kinds of
alternatives to in-feed antibiotics. Worlds Poult Sci J 65(1):97–114
Yasuda K, Hashikawa S, Sakamoto H, Tomita Y, Shibata S, Fukata T (2007) A new synbiotic consisting of Lactobacillus
casei subsp. casei and dextran improves milk production in Holstein dairy cows. J Vet Med Sci 69(2):205–208
Yitbarek A, Echeverry H, Munyaka P, Rodriguez-Lecompte JC (2015) Innate immune response of pullets fed diets
supplemented with prebiotics and synbiotics. Poult Sci 94(8):1802–1811

524
 Enzimas na alimentação e na saúde animal
Arturo Anadón, Irma Ares, Maria Rosa Martínez-Larrañaga e Maria Aŕanzazu
Martínez

Resumo
Enzimas exógenas são alternativas potencialmente importantes aos antibióticos para
melhorar o desempenho de crescimento, particularmente em aves e suínos, embora
pesquisas em outros animais, como ruminantes, peixes, peleteiros e animais de
estimação tenham sido feitas nos últimos anos. O valor das enzimas alimentares
adicionadas na promoção do crescimento e eficiência da utilização de nutrientes na
produção animal é claramente reconhecido. Este capítulo cobre várias condições de
reação que precisam ser atendidas para a ação da enzima, bem como enzimas
alimentares e microbiota gastrointestinal, modo de ação das enzimas, substratos
dietéticos e tipos de enzimas a serem usados na alimentação animal (por exemplo, fitase,
e classes de enzimas como xilanases, β-glucanases, pectinases, amilases e proteases)
que melhoram a utilização de alimentos de componentes dietéticos, como proteínas,
aminoácidos, amido, lipídios e energia. As enzimas alimentares podem afetar a ecologia
microbiana do trato gastrointestinal (GIT), reduzindo substratos não digeridos e fatores
antinutritivos e produzindo oligossacarídeos in situ a partir de polissacarídeos não
amiláceos (NSP) da dieta com efeitos prebióticos potenciais.
Palavras-chave: Nutracêuticos veterinários · Enzimas em rações · Ração para aves ·
Ração para suínos · Fitase · Glucanases · Amilases · Proteases

A. Anadón · I. Ares · M. R. Martínez-Larrañaga · M. A. Martínez. Universidad Complutense de Madrid,

Madrid, Spain. e-mail: anadon@vet.ucm.es

1. Introdução
Enzimas como aditivos alimentares para animais de produção de alimentos são proteínas
biologicamente ativas que facilitam a decomposição química de nutrientes em compostos
menores para posterior digestão e absorção (Thacker 2013). As enzimas adicionadas à
ração são decompostas no trato digestivo da mesma forma que outras proteínas. As
enzimas são proteínas biologicamente ativas que quebram ligações químicas específicas
para liberar nutrientes para posterior digestão e absorção. As enzimas utilizadas na
alimentação animal são comumente produzidas por bactérias (ou seja, Bacillus subtilis),
fungos (ou seja, Trichoderma reesei, Aspergillus niger) ou levedura (Saccharomyces
525
cerevisiae). Os benefícios potenciais de várias enzimas alimentares exógenas, derivadas
de micróbios (bactérias e fungos) por meio da fermentação líquida submersa tradicional
ou fermentação em estado sólido, têm sido usados em rações para aves e suínos nos
últimos anos, e seu valor para melhorar a digestão de nutrientes e o crescimento e a
eficiência da utilização dos componentes da dieta (ou seja, proteína, aminoácidos, amido,
lipídios, energia) nos alimentos estão bem documentados (Woyengo e Nyachoti 2011). O
potencial de uso de enzimas em rações, como alternativas aos antibióticos, para melhorar
o desempenho em aves e suínos é significativo.

As enzimas extraídas de microrganismos são de grande importância na fabricação de

rações para animais. Atualmente, novas técnicas moleculares são utilizadas para
descobrir enzimas microbianas que são utilizadas em rações animais para melhorar sua
qualidade.
Uma série de ensaios de eficácia indicam que as consequências adversas da interrupção
do uso de promotores de crescimento antimicrobiano (AGPs) podem ser compensadas
em certa medida pela administração de enzimas para facilitar a digestão de
polissacarídeos. Enzimas específicas adicionadas à dieta são capazes de despolimerizar
esses polissacarídeos. Uma variedade de enzimas são obtidas de plantas, bactérias e
fungos, mas também há uma grande variedade de enzimas comercialmente
comercializadas para aditivos de ração para aves, muitas das quais são produzidas como
proteínas recombinantes em levedura comercialmente e vendidas como um lisado. Em
aves, as enzimas alimentares geralmente aumentam sua digestibilidade, o que pode ser
particularmente benéfico para animais jovens; assim, os pássaros jovens podem se
beneficiar de um amplo espectro de enzimas, como lipase, proteases e amilases. Os
benefícios das enzimas geralmente diminuem com a categoria de idade, e as respostas
são geralmente maiores durante a fase inicial do frango de corte em comparação com a
fase final. O objetivo de adicionar enzimas à ração das aves é melhorar o desempenho e
a lucratividade por meio da digestão aprimorada dos componentes da dieta. Na tentativa
de reduzir a pegada ecológica, as enzimas como proteases são uma opção interessante;
as enzimas permitem melhorias mais eficazes no manejo nutricional, mitigando assim os
riscos e particularmente no “ambiente pós-antibiótico”.

As diferentes classes de enzimas alimentares comumente utilizadas incluem fitase,

carboidrases em dietas à base de milho, xilanase (de Trichoderma longibrachiatum),
celulose (de Aspergillus niger e Trichoderma longibrachiatum), a-galactosidase, b-
mananase, a-amilase (de Aspergillus, Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus subtilis) e
pectinase, β-glucanase (de Aspergillus niger), proteases e lipases. Os motivos mais

526
comuns para a suplementação enzimática incluem degradar componentes da alimentação
resistentes a enzimas endógenas (ou seja, β-glucanase, xilanase, mananase, pectinase,
galactosidase), inativar ANF (ou seja, fitase) e suplementar enzimas endógenas que
podem estar presentes em quantidades insuficientes (ou seja, proteases, lipases,
amilases) (Thacker 2013). Acredita-se que as xilanases em dietas à base de trigo podem
melhorar o desempenho das galinhas, iniciando a quebra das pentosanas em compostos
menores e, como resultado, reduzindo suas propriedades de viscosidade.

Muitas outras classes de enzimas podem melhorar significativamente a utilização de

alimentos como xilanases, β-glucanases, pectinases, amilases e proteases. A este
respeito, a endo-1,4-β-xilanase pode melhorar o valor nutritivo de dietas à base de trigo
para aves, degradando arabinoxilanos dietéticos (Beg et al. 2001). Entretanto, nem
sempre é observada uma resposta de frangos de corte à suplementação de dietas à base
de trigo com endo-1,4-β-xilanase exógena. Pensa-se que a endoxilanase melhora o valor
de energia metabolizável aparente e a digestibilidade dos nutrientes de dietas à base de
trigo e reduz a variabilidade do trigo.

Embora inicialmente possa haver preocupações sobre o uso de enzimas produzidas por
DNA recombinante como aditivos alimentares para animais produtores de alimentos, as
enzimas sintetizadas recombinantes, como fitases e carboidrases, são produzidas
comercialmente e vendidas como aditivos alimentares na produção animal monogástrica
(Adeola e Cowieson 2011). As proteases adicionadas à ração para frangos de corte têm
um efeito benéfico ao aumentar a taxa de conversão alimentar (FCR) e reduzir os níveis
de Clostridium perfringens no íleo.

As enzimas são catalisadores biológicos altamente eficazes, capazes de acelerar milhões

de vezes as reações químicas, agindo sobre substratos ou reagentes específicos.
Quimicamente, são proteínas com uma estrutura molecular tridimensional altamente
complexa. A natureza proteica das enzimas tem implicações importantes para sua
estabilidade durante a fabricação de alimentos em alta temperatura e o trânsito pelo trato
gastrointestinal (GIT). Como proteínas, podem ser desnaturadas pelo calor e pelo pH e
também podem ser submetidas a proteólise por enzimas digestivas. As enzimas são
afetadas pelas condições de seus arredores (por exemplo, concentração de água,
temperatura, pH) no que diz respeito à atividade da enzima, bem como estabilidade.

O papel das enzimas alimentares na melhoria do valor produtivo das dietas para animais
de estômago único é baseado em vários modos de ação (Adeola e Cowieson 2011;
Slominski 2011), a saber, (1) hidrólise de ligações químicas específicas em alimentos que
não são suficientemente degradadas ou mesmo não pelas próprias enzimas do animal
527
(por exemplo, sais mistos de ácido fítico); (2) eliminação do efeito de encapsulação de
nutrientes dos polissacarídeos da parede celular e, portanto, maior disponibilidade de
amidos, aminoácidos e minerais; (3) decomposição de fatores antinutricionais (ANF) que
estão presentes em muitos ingredientes da ração [por exemplo, polissacarídeos sem
amido (NSP) e ácido fítico]; (4) solubilização de NSP insolúvel para fermentação intestinal
mais eficaz e, portanto, utilização geral de energia melhorada; e (5) complementação das
enzimas (por exemplo, amilase, lipase, protease) produzidas por animais jovens nos
quais, devido à imaturidade de seu próprio sistema digestivo, a produção de enzima
endógena pode ser inadequada.

1. Umidade. As enzimas requerem um ambiente aquoso para iniciar sua atividade; assim,
a umidade pode ser essencial para a mobilidade da enzima, solubilidade do substrato e
da enzima, ou ambos (Ravindran 2013). Quando o alimento ingerido contém enzima
exógena, a condição de umidade é rapidamente satisfeita e o alimento desce pelo trato
digestivo (Svihus 2011).

2. Temperatura. Em geral, a atividade da enzima aumenta até 40 ºC e, em seguida, decai

acentuadamente devido à perda de estrutura por desnaturação, que torna a enzima
inativa (Ravindran 2013). Por exemplo, no corpo da ave, a maioria das enzimas são ativas
em uma faixa entre 40 ºC e 60 ºC, sem ser um fator limitante.

3. pH. Em geral, as enzimas mais exógenas têm um pH ótimo de 4-6 (Ravindran 2013),
mas pode haver variação entre diferentes fontes de enzima, o que pode resultar em
atividade catalítica em pH mais baixo e mais alto. Nas aves, as enzimas exógenas são
ativas e degradam seus substratos no estômago anterior (ou seja, ingesta, proventrículo
ou estômago glandular e moela ou estômago muscular) antes de serem expostas à
hidrólise por enzimas proteolíticas endógenas no local de secreção de ácido (Selle e
Ravindran 2007). A condição de pH torna-se a primeira limitação fisiológica para a
atividade e estabilidade das enzimas. A segunda limitação é o curto intervalo entre a
ingestão da ração e o tempo para atingir o íleo inferior. O pH da ração é normalmente
próximo do neutro, a ingesta do frango é levemente ácida, o proventrículo e a moela são
ácidos e o intestino é levemente ácido na extremidade proximal, tornando-se levemente
alcalino a neutro em direção à parte distal (ver Tabela 1). A secreção de ácido das
galinhas é alta em relação aos mamíferos, possivelmente devido ao rápido tempo de
trânsito digestivo. Em sistemas de alimentação descontínua, o papel da cultura de aves
assemelha-se a um órgão de armazenamento de alimentos, não sendo essencial para a
digestão, enquanto nos sistemas de alimentação contínua essa função não existe. Uma
moela menos desenvolvida serve como um órgão de trânsito em vez de um órgão de
528
moagem, com implicações para o tempo de retenção reduzido. Há evidências de que a
alimentação por refeição, em vez do acesso ad libitum à ração, pode aumentar
significativamente o tempo de retenção na cultura, acompanhado de uma hidratação
rápida e uma redução do pH (ou seja, pH entre 4 e 5). No porco, o pH do estômago está
geralmente entre 2 e 3,5, de modo que as enzimas foram desenvolvidas para resistir a
uma ampla faixa de pH e apresentar termoestabilidade, ou seja, são resistentes à pepsina
e tripsina endógenas e são viáveis em condições gástricas simuladas (Thacker 2013).

4. Concentração da enzima. Em teoria, a taxa de reação é diretamente proporcional à

concentração da enzima e aumenta quando aumenta a concentração da enzima, porque
existem mais locais ativos disponíveis, e isso continuará até que nenhum complexo
substrato/enzima possa ser formado. Na prática, entretanto, por causa de outras
limitações dentro do trato digestivo dos animais, essa relação linear não ocorre
(Ravindran 2013).

5. Concentração de substrato. Na presença de concentrações adequadas de enzimas, a

taxa de reação aumenta com o aumento da concentração de substrato até que o turnover
máximo seja alcançado. As enzimas variam consideravelmente com as condições de
reação necessárias e dependem de sua fonte (fungo vs. bactéria vs. levedura). Portanto,
a fonte tem uma grande influência sobre o grau de adaptação das enzimas específicas às
condições prevalentes no trato digestivo e sua eficácia (Ravindran 2013).

A eficácia de uma enzima alimentar no trato digestivo de uma ave depende de vários pré-
requisitos (Tabela 2). É necessário um ambiente aquoso para que as enzimas iniciem sua
atividade.

Tabela 1 Tempo médio de trânsito e pH em diferentes segmentos do trato digestivo de frangos de

corte
Segmento pH Tempo de trânsito (min)
Ingesta 5,5 10-50
Proventrículo e moela 2,5–3,5 30–90
Duodeno 5-6 5-10
Jejuno 6,5–7,0 20–30
Íleo 7,0-7,5 50-70
Ceco/cólon 8,0 20-30

529
 Tabela 2 A eficácia de uma enzima alimentar no trato digestivo de uma ave
Pré-requisitos
Fonte, atividade catalítica específica, resistência à ação proteolítica da
Enzimas
pepsina
Características do substrato Concentração e acessibilidade
Conteúdo de umidade, pH, temperatura e o tempo que a digesta
Condições do trato digestivo permanece no trato, especialmente na fase gástrica inicial, onde
ocorre a maior parte da ação enzimática

2. Enzimas da alimentação e da microbiota gastrointestinal

A eficácia em aplicações de ração animal depende muito de um conjunto diferente de
critérios baseados no mecanismo de ação na nutrição animal (Bedford e Schulze 1998). A
interação entre as enzimas alimentares e a microbiota/microbioma do GIT pode ser
melhor compreendida de dois pontos de vista. Por um lado, estão os efeitos dos próprios
substratos nas características bioquímicas da digesta e na fisiologia do GIT (ou seja,
aumento da viscosidade do NSP solúvel, aumento do tempo de trânsito da digesta do
NSP solúvel, aumento da secreção endógena e renovação celular (por exemplo, muco),
aumento da gordura não digerida, proteínas e amidos e, por outro lado, é a modificação
desses efeitos por enzimas alimentares [diminuição da viscosidade, diminuição do tempo
de trânsito (NSPases), diminuição da secreção endógena (NSPases, fitase), diminuição
da gordura não digerida, proteína e amidos (NSPases, fitase, amilase, proteases)] na
medida em que os substratos são degradados ou modificados no GIT (Kiarie et al. 2013),
o que explica as enzimas alimentares agindo em componentes específicos dos
ingredientes da ração, o que na maioria dos casos explica o papel das enzimas da ração
na modulação da microbiota intestinal.

A redução da viscosidade pode ser efetivamente alcançada com uma única enzima,
desde que seja ativa contra a estrutura do polímero e não contra uma cadeia lateral.
Como a viscosidade é, em parte, uma função do comprimento da cadeia, não é
necessário degradar totalmente o polímero; relativamente poucas quebras na cadeia
reduzirão ou destruirão substancialmente a capacidade de formação de gel. Assim,
problemas, como excrementos pegajosos, que se referem apenas à gelificação, são
relativamente simples de aliviar com qualquer preparação enzimática que contenha a
atividade necessária. Por exemplo, os problemas de excrementos úmidos associados a
dietas à base de aveia e centeio para frangos de corte podem ser superados pela
inclusão de preparações enzimáticas ricas em atividade de β-glucanase e endo-β-
xilanase (pentosanase), respectivamente.

530
A última endo-β-xilanase também melhora a qualidade da cama. Em conclusão, existe
uma estreita relação entre os dados de viscosidade obtidos in vitro pela extração do
polissacarídeo solúvel e as propriedades dos ANF que podem ser reduzidas ou
erradicadas por tratamento enzimático (Annison 1991). O aspecto da viscosidade é
importante porque a justificativa para o desenvolvimento e aplicação de enzimas
alimentares é direcionar certos substratos dietéticos (isto é, fitato e NSP) que não são
degradados suficientemente ou de fato não são degradados pelo arranjo de enzimas
digestivas endógenas no GIT. Por exemplo, um paradigma aceito em frangos de corte é
que o aumento da viscosidade intestinal de NSP solúvel, conforme indicado
anteriormente, é a causa mais importante de baixo crescimento e utilização de ração.
Consequentemente, foi sugerido que as enzimas alimentares podem influenciar a
microbiota intestinal por meio de dois mecanismos principais: reduzindo os substratos não
digeridos; e a criação (in situ) de oligossacarídeos de cadeia curta a partir de NSP da
parede celular com efeitos prebióticos potenciais (Kiarie et al. 2013).

Para a digestão da ração por enzimas, há, no entanto, um limite fisiológico na medida em
que as enzimas podem melhorar a digestão, e essas barreiras estão relacionadas ao pH e
ao tempo de retenção no GIT. O uso de enzimas exógenas na alimentação de aves está
se tornando uma norma para superar os efeitos adversos dos fatores antinutricionais
(ANF) que estão presentes em alimentos à base de plantas, como ácido fítico, NSP e
carboidratos complexos da parede celular, e para melhorar a digestão de componentes da
dieta e desempenho das aves. As paredes celulares dos grãos de cereais, leguminosas e
farinhas de sementes oleaginosas são constituídas por carboidratos complexos
comumente referidos como NSP (Choct 2009). NSP são um grupo complexo de
componentes que diferem amplamente na composição química, propriedades físicas e
atividade fisiológica. NSP consiste em uma ampla gama de polímeros, incluindo (hemi)
celulose, pectinas, β-glucanos (consistindo em uma fração mais solúvel ou não solúvel),
α-galactosídeos (rafinose, estaacniose, verbascose) e xilanos (Thacker 2013). Muitos
NSP têm efeitos negativos sobre o crescimento e desempenho e reduzem o valor
nutricional dos ingredientes da ração de várias maneiras: (1) eles são indigestíveis por
enzimas de mamíferos e, portanto, diluem o conteúdo de energia e nutrientes da ração, e
(2) NSP exibem um chamado efeito de gaiola, pelo qual nutrientes normalmente
altamente digestíveis, como amido, gordura e proteína, são aprisionados em um
revestimento de NSP que impede o acesso das enzimas endógenas a esses substratos
(Metzler et al. 2005). Além disso, certos NSP podem aumentar a viscosidade intestinal. Os
efeitos anti nutritivos exercidos pelo NSP são complexos, mas sua natureza viscosa é
considerada a principal causa de seu efeito anti nutritivo em aves. O volume e a
531
viscosidade, aumentados, do conteúdo intestinal diminuem a taxa de difusão de
substratos e enzimas digestivas e impedem sua interação efetiva na superfície da mucosa
(Choct et al. 1996). Além do efeito direto de NSP viscosos na fisiologia e morfologia
intestinal, parece haver alguns efeitos indiretos que têm implicações importantes para o
uso eficiente de nutrientes pelo frango (Dänicke et al. 1999). Um desses efeitos indiretos
pode estar relacionado à estimulação da fermentação de NSP pela microbiota intestinal,
levando à produção de ácidos graxos voláteis (AGV) no intestino delgado. Em uma dieta
rica em NSP, a concentração de AGV aumenta, principalmente no lúmen ileal distal,
devido ao excesso de fermentação combinado com uma proliferação da microflora
fermentativa com um efeito bastante limitado na atividade da microbiota intestinal (Choct
et al. 1999). A fermentação no intestino delgado indica competição com o hospedeiro por
nutrientes digestíveis. As enzimas NSP dietéticas reduzem a viscosidade da digesta no
intestino delgado, de modo que a passagem da digesta e a taxa de digestão dos
nutrientes aumentam, permitindo menos substrato e menos tempo para a proliferação dos
organismos de fermentação.

Essa alteração pode restaurar a digestão enzimática endógena normal e eficiente de

nutrientes no intestino delgado. As enzimas contrabalançam parcialmente os efeitos
adversos do NSP solúvel no desempenho (Bedford e Classen 1992). Além disso, as
enzimas de degradação de NSP também reduzirão a proliferação de bactérias
patogênicas, como Clostridium perfringens (Jackson et al. 2003). Atualmente, todos os
alimentos para frangos de corte contêm enzimas como xilanases e β-glucanases que
quebram os NSPs. Diferentes tipos de cereais contêm níveis variáveis de NSP com
diferenças concomitantes na composição química. Por exemplo, o milho contém NSP
quase exclusivamente insolúveis, enquanto o trigo e a cevada contêm NSP, dos quais a
proporção de solúvel para insolúvel é de cerca de 1:6. Esta proporção é de cerca de 3:4
no centeio, tornando este cereal um cereal com níveis particularmente altos de NSP
solúveis (Choct 2002). A formulação da dieta deve ser ajustada e as condições devem ser
criadas para garantir a resposta máxima às enzimas adicionadas.

3. Modo de ação das enzimas

Deve-se reconhecer que diferentes enzimas alimentares (Tabela 1) têm modos de ação
não idênticos. Apesar de sua crescente aceitação como aditivos alimentares, o (s) modo
(s) exato (s) de ação das enzimas alimentares ainda precisa ser elucidado. Os possíveis
mecanismos de ação das enzimas da alimentação incluem o seguinte: (1) aumento na
digestibilidade de nutrientes que de outra forma não são degradados pelas enzimas do
532
hospedeiro (por exemplo, ácido fítico); (2) eliminação do efeito de encapsulamento de
nutrientes dos polissacarídeos da parede celular e aumento na disponibilidade de amidos,
aminoácidos e minerais; (3) inativação de fatores antinutricionais (por exemplo, ácido
fítico ou NSP solúvel) e viscosidade intestinal reduzida; (4) aumento da solubilidade de
NSP não solúvel e promoção da fermentação cecal; e (5) suplementação de enzimas
endógenas que podem ocorrer em quantidades insuficientes, especialmente em animais
jovens nos quais o sistema digestivo não está desenvolvido totalmente (Choct 2009;
Kiarie et al. 2013). Além das enzimas, foram observados efeitos na digestibilidade dos
nutrientes; eles também influenciam a composição da microbiota intestinal. As alterações
da microbiota induzidas por enzimas são principalmente indiretas e são mediadas por dois
mecanismos principais: (1) redução dos substratos não digeridos e (2) geração de
oligossacarídeos de cadeia curta da parede celular NSP com efeitos prebióticos
potenciais (Bedford 2000; Bedford e Cowieson 2012; Kiarie et al. 2013). Esses
mecanismos influenciam o suprimento de nutrientes e o ambiente intestinal, alterando
assim as pressões de seleção nas espécies bacterianas (Bedford e Cowieson 2012;
Cheng et al. 2014).

O consenso é que um ou mais dos seguintes mecanismos são responsáveis pelos

benefícios observados (Bedford e Partridge 2011): (1) degradação de ligações específicas
em ingredientes que geralmente não são hidrolisados por enzimas digestivas endógenas;
(2) degradação de fatores antinutricionais que limitam a digestão de nutrientes
diretamente, aumentam a viscosidade da digesta intestinal indiretamente, ou ambos; (3)
ruptura da integridade do endosperma e liberação de nutrientes que estão ligados ou
presos pela parede celular; (4) mudança da digestão para locais de digestão mais
eficientes; (5) reduções nas secreções endógenas e perdas de proteína do intestino,
resultando em requisitos de manutenção reduzidos (Cowieson et al. 2009), (6) redução do
peso do trato intestinal e mudanças na morfologia intestinal (Jaroni et al. 1999), e (7)
mudanças no perfil da microflora no intestino delgado. O valor comprovado da adição de
preparações enzimáticas, capazes de hidrolisar o teor de β-glucano misto das paredes do
endosperma da cevada (parte de uma estrutura de armazenamento) para dietas de aves
contendo cevada (classificado como um cereal de baixa energia), estimulou o interesse
em tanto o mecanismo subjacente à resposta produtiva quanto a aplicação de enzimas a
outros cereais como um componente importante das dietas dos animais de fazenda. As
paredes celulares com função estrutural são intrinsecamente mais resistentes à
degradação.

533
A β-Glucanase sozinha é suficiente para romper as paredes do endosperma da cevada:
preparações de multienzimas contendo altos níveis de enzimas ativas contra a celulose e
arabinoxilano são necessárias para maximizar a liberação de proteína da camada de
aleurona (Mulder et al. 1991). As paredes do endosperma de milho, triticale e trigo
também contêm arabinoxilanos e glucanos. O rompimento das paredes intactas e a
liberação de nutrientes aprisionados é o principal fator em qualquer melhoria no valor
nutritivo atribuído às enzimas exógenas. O β-Glucano e os arabinoxilanos, que, em
proporções variáveis, formam a parede do endosperma de todos os cereais, atuam
restringindo o acesso aos nutrientes encontrados no endosperma. Por esse motivo, as
adições de enzimas em suínos jovens e aves sustentam os valores de digestibilidade de
gordura, amido e nitrogênio.

Como as enzimas influenciam as quantidades e a forma do substrato presente no

intestino, seu uso tem um efeito direto nas bactérias que constituem as populações da
microflora (Apajalahti et al. 2004; Vahjen et al. 1998); a alteração da flora intestinal para
espécies bacterianas favoráveis, que melhora a saúde intestinal, proporciona um efeito
protetor na saúde geral do animal que surge, em parte, da influência da flora na função
imunológica. O aumento das enzimas digestivas endógenas, que são insuficientes ou
ausentes na ave, resulta em melhor digestão, especialmente em pintos recém-nascidos
com sistemas digestivos imaturos.

4. Substratos dietéticos e tipos de enzimas

Em aves, os substratos nos ingredientes da ração podem ser classificados principalmente

em três grupos: (1) substratos para os quais as enzimas adequadas são produzidas em
seu próprio trato digestivo (por exemplo, amido, proteínas, lipídios) [algumas dessas
enzimas endógenas incompletas (ou seja, 10 –20%) desses substratos não são digeridos
e são excretados]; (2) substratos para os quais as enzimas não são produzidas pela ave e
não são digeridas (por exemplo, celulose); e (3) substratos para os quais as enzimas não
são produzidas pela ave e, além de não serem digeridas, têm efeitos antinutritivos (por
exemplo, β-glucanos, pentosanos, fitato). Os pentosanos (arabinoxilanos) no trigo têm
uma atividade antinutritiva em frangos de corte. Nos ingredientes da ração, os substratos
(nutrientes e antinutrientes) existem como complexos, limitando a acessibilidade às
enzimas (Ravindran 2013).

Apesar dos avanços, a química e a estrutura da maioria dos substratos-alvo nos

ingredientes da ração ainda estão mal definidas. Sabe-se que a química do NSP em
diferentes ingredientes varia amplamente. Embora as informações quantitativas básicas
534
sobre o tipo de açúcares que constituem o NSP estejam disponíveis para os cereais,
faltam informações correspondentes para outros ingredientes. O alto conteúdo de NSP e
proteínas indigestíveis em coprodutos de cereais pode limitar sua inclusão na alimentação
de suínos; no entanto, enzimas degradantes de NSP suplementares e proteases podem
permitir alta inclusão de tais alimentos. A eficácia das enzimas pode ser muito melhorada
se a química dos substratos alvos forem mais precisamente entendida. A correspondência
de uma enzima, no entanto, não garante a eficácia da enzima na degradação do
substrato, e a afinidade também deve ser considerada. O uso de três xilanases fúngicas
(xilanase A derivada de Thermomyces lanuginosus, xilanase B de Humicola insolens e
xilanase C de Aspergillus aculeatus), de diferentes afinidades de substrato, mostrou que a
especificidade do substrato depende da fonte da enzima. Pode-se concluir que trigos com
valores baixos ou normais de energia metabolizável variam em suas respostas à
suplementação com xilanase (Choct et al. 2004).

Para que uma enzima seja eficaz, uma proporção adequada de enzima para substrato
deve estar presente na dieta. Um fator complicador é que um substrato específico em um
ingrediente não é exatamente o mesmo que o encontrado em outro ingrediente. Os
substratos diferem e o mesmo substrato em ingredientes diferentes pode responder de
maneira diferente à enzima. Essas diferenças surgem da localização do substrato na
matriz do ingrediente, a presença de outros fatores limitantes e diferenças na
acessibilidade ou solubilidade. No caso do fitato, foi demonstrado que os fitatos de
diferentes ingredientes não são igualmente suscetíveis à desfosforilação e que o
conteúdo de fitato reativo, e não total, é crítico para determinar as respostas à fitase
suplementar (Leske e Coon 1999). Verificou-se, por exemplo, que a farinha de canola
continha um nível relativamente alto de fitato total, mas um fitato menos reativo e não
responde bem à fitase adicionada (Ravindran 2013).

As enzimas alimentares são, na verdade, os aditivos alimentares mais pesquisados. O

uso atual de enzimas para rações é muito amplo, dado o número de enzimas para rações
(Tabela 3) e, dentro de cada enzima, um grande número de produtos comerciais está
disponível, variando em sua origem, atividades enzimáticas e características (Ravindran
2013). Não é surpreendente o sucesso da adição de enzimas à dieta de frangos de corte
contendo cevada, o que estimulou o interesse na aplicação de enzimas alimentares em
outras dietas e ingredientes da dieta, notadamente trigo e soja.

535
 Tabela 3 Tipo de enzimas alimentares comerciais e substratos alvos
Enzima Substrato alvo Alimento alvo
Todos os ingredientes derivados
Fitases Ácido fítico
de plantas
β-Glucanases β-Glucan Cevada, Aveia e Centeio
Trigo, centeio, triticale, cevada,
Xilanases (carboidrase) Arabinoxilanos
materiais vegetais fibrosos
Farinha de soja, leguminosas de
Oligossacarídeos α-Galactosidases
grão
Todas as fontes de proteína
Proteases Proteínas
vegetal
Grãos de cereais, leguminosas de
α-Amilase Amido
grão
Lipases Lipídios Lipídios em ingredientes de rações
β-mananases, celulases (carboidrase), Matriz de parede celular Ingredientes derivados de plantas,
hemicelulases, ectinases (componentes de fibra) materiais vegetais fibrosos

Atualmente, quatro categorias distintas de produtos enzimáticos estão disponíveis

comercialmente para uso pela indústria de rações: (1) fitases microbianas; (2) glicanases
ou glicano hidrolases (xilanases, β glucanases) direcionadas a cereais viscosos (por
exemplo, trigo, cevada) (essas enzimas degradam polissacarídeos e mostram pouca ou
nenhuma atividade contra oligossacarídeos); (3) enzimas direcionadas a cereais não
viscosos (por exemplo, milho, sorgo); e (4) enzimas direcionadas a não cereais (por
exemplo, farelo de soja, leguminosas de grão). Com exceção das fitases microbianas, a
maioria dos outros produtos enzimáticos contém uma mistura de enzimas que podem ser
produzidas por um ou mais organismos (Cowieson et al. 2006; Selle e Ravindran 2007).
As enzimas alimentares mais amplamente utilizadas são uma mistura de uma variedade
de glicanases, e a enzima degradante de uso único é a fitase (Ravindran 2013). Também
há evidências que sugerem que as preparações com múltiplas atividades enzimáticas
podem fornecer uma estratégia competitiva para melhorar a utilização de nutrientes em
dietas para aves (Selle e Ravindran 2007). A aplicação combinada de enzimas pode
resultar em efeitos aditivos, subaditivos ou sinérgicos na utilização de nutrientes e no
desempenho animal (Ravindran et al. 1999; Juanpere et al. 2005). Essas combinações de
enzimas, em vez de enzimas simples puras, representam a próxima geração de enzimas
alimentares, porque os ingredientes alimentares são extremamente complexos. No
estágio nativo, os nutrientes nas matérias-primas não são entidades isoladas, mas
existem como complexos com várias ligações a proteínas, gorduras, fibras e outros
carboidratos complexos. Por exemplo, em dietas à base de trigo, apenas direcionar os
arabinoxilanos com xilanases pode não fornecer benefícios completos (Ravindran 2013).

536
Os benefícios das inclusões simultâneas de uma enzima carboidrase com atividade
predominantemente xilanase e uma fitase microbiana em dietas de frangos de corte à
base de trigo, em termos de utilização de proteína e energia e desempenho de
crescimento, foram relatados (Ravindran et al. 1999; Zyla et al. 1999; Selle et al. 2009).
Parece que a atividade de um tipo de enzima alimentar pode ser facilitada pelo outro,
possivelmente de forma recíproca, proporcionando maior acesso ao substrato e também
reduzindo os efeitos antinutritivos dos substratos e fitato) na utilização de nutrientes.
Pensa-se que esses efeitos antinutricionais se manifestam por depressão no desempenho
e excrementos úmidos, associados à alta viscosidade dos NSP. A inclusão simultânea de
fitase com α galactosidases, protease, β glucanases e xilanase em dietas à base de
milho, cevada ou trigo foi investigada: descobriu-se que a fitase em combinação com
carboidrase e protease teve efeitos aditivos em dietas de frangos de corte
nutricionalmente marginais (Cowieson e Adeola 2005; Juanpere et al. 2005).

Neste contexto, várias enzimas, derivadas de micróbios (bactérias e fungos) através da

fermentação, têm sido usadas em rações para suínos e aves nos últimos anos, e seu
valor para aumentar o crescimento e a eficiência alimentar é amplamente conhecido. As
diversas classes de enzimas comumente empregadas incluem fitase, carboidrases e
proteases. As enzimas não atacam diretamente as bactérias, mas apenas reduzem os
substratos para o crescimento das bactérias.

5. Principais Enzimas
5.1 Fitase

O fósforo é o terceiro nutriente mais caro nas dietas para não ruminantes; no entanto, a
maioria (> 65%) do fósforo nos alimentos de origem vegetal está ligada a sais mistos de
ácidos fíticos e não está disponível para o animal sem desfosforilação enzimática (Kiarie e
Nyachoti 2009). O fosfato vegetal, por não estar disponível para os animais, atua como
um ANF formando complexos com minerais como cálcio, zinco e ferro. A fitase, atividade
derivada do Aspergillus ficuum, é capaz de liberar fosfato do ácido fítico. A enzima
necessária para hidrolisar os ácidos fíticos é insuficiente nas secreções pancreáticas e
intestinais de aves e mamíferos, presente em alguns alimentos e onipresente em
sistemas microbianos (Selle e Ravindran 2007, 2008). O ácido fítico é a principal forma de
armazenamento de fósforo em sementes de plantas e é particularmente abundante em
cereais, onde ocorre como cristais associados a corpos proteicos encontrados
principalmente na camada de aleurona (Graf 1986). Aproximadamente dois terços do

537
fósforo em alimentos para porcos e aves estão presentes como ácido fítico, que não está
disponível para não ruminantes. Assim, os animais monogástricos (isto é, suínos e aves
domésticas) utilizam mal o fósforo presente no fitato, visto que têm pouca ou nenhuma
atividade fitase endógena. A aplicação de fitase, seja como pré-tratamento ou suplemento
alimentar, permite que as dietas sejam formuladas com substancialmente menos fósforo
inorgânico suplementar e reduz a descarga de fósforo fecal para o meio ambiente.
Consequentemente, para fornecer fósforo adequado a animais de fazenda não
ruminantes, é necessário incluir alimentos com alta biodisponibilidade de fósforo, como
suplementos inorgânicos (por exemplo, fosfato dicálcico) ou alimentos à base de animais
(por exemplo, farinha de carne e ossos) na dieta. É conhecido que a fitase tem efeitos
significativos na digestibilidade de cálcio, fósforo e minerais, bem como na produção de
mucina intestinal e perdas endógenas, todos os quais influenciam o fornecimento de
nutrientes e o ambiente intestinal, o que alterará a pressão de seleção sobre as espécies
bacterianas (Bedford e Cowieson 2012).

Hoje em dia, a fitase domina o mercado de enzimas alimentares e o rápido crescimento

tem sido associado à aceitação da fitase na substituição de fosfatos inorgânicos (Kiarie et
al. 2013). O uso de fitases para melhorar a disponibilidade de fósforo de ingredientes de
rações vegetais é muito conhecido na nutrição animal. Um exemplo simples é o nível de
fósforo na dieta e as fitases microbianas; se as dietas contiverem quantidades excessivas
de fósforo, a chance de qualquer resposta animal à adição de fitase será baixa. O uso de
fitase microbiana é potencialmente útil e apropriado apenas para dietas com níveis de
fósforo subótimos e contendo níveis significativos de ingredientes derivados de plantas. O
aditivo alimentar de fitase é usado para aumentar a absorção de fósforo, para digerir mais
de 30% mais fosfato em suas proporções, pelos porcos. Portanto, menos do mineral é
necessário na alimentação e menos é desperdiçado, reduzindo assim a emissão de
fosfato mineral na lama e diminuindo a carga nas águas subterrâneas. Ele também
oferece economia substancial para recursos naturais de fosfato mineral. A fitase em
rações para porcos pode quebrar a produção de fosfato no estrume e aumentar a
eficiência da digestão do fósforo e de outros minerais da dieta, incluindo cálcio, magnésio
e zinco.

O potencial de poluição de níveis muito altos de fosfato em estrume de porco e de aves

começa com a forma como o fosfato é apresentado na maioria das matérias-primas
vegetais como fitato-fósforo. Esse fitato-fósforo só pode ser decomposto para digestão
por meio da atividade das enzimas fitase.

538
Essas enzimas podem ser encontradas no estômago de ruminantes, como vacas, onde
são produzidas naturalmente por microorganismos. Mas, em animais monogástricos,
como porcos e aves, as enzimas não estão presentes, ou estão presentes apenas em
quantidades muito pequenas. Um porco alimentado com rações convencionais excreta
mais de 60% do fósforo presente em sua ração e uma porca reprodutora cerca de 85%.
Quando fornecida a suínos para abate em crescimento a uma taxa de cerca de 100 g por
tonelada de mistura de ração, esta fitase oferece apenas cerca de 33% de redução na
excreção de fosfato. Por promover uma digestão mais eficiente do fósforo da dieta,
qualquer suplementação de fósforo mineral na ração pode ser reduzida.

A adição de enzimas fitase à dieta animal tem o potencial de melhorar a utilização do

ácido fítico-fósforo pelo animal. As enzimas fitase catalisam a hidrólise de grãos de ração
e ácido fítico de fibra em mioinositol e fósforo e, assim, permitem a redução na
suplementação e excreção de fosfato mineral. Uma grande variedade de técnicas se
segue antes que o produto fitase esteja pronto: triagem, caracterização, engenharia de
proteínas, modificação genética, genômica, tecnologia de expressão, fermentação e teste.
A próxima geração de produtos é ainda melhor porque são mais estáveis e menos fosfato
em excesso é liberado no meio ambiente.

5.2 Carboidrases

Carboidrases incluem todas as enzimas que catalisam uma redução no peso molecular de
carboidratos poliméricos, mas mais de 80% do mercado global de carboidratos é
representado por xilanase e β glucanase (Adeola e Cowieson 2011). Outras carboidrases
disponíveis comercialmente incluem α amilase, celulose, β mananase, α galactosidase e
pectinase. Essas carboidrases têm ampla aplicação na indústria avícola, mas são menos
comumente usadas em rações para suínos.

O efeito da suplementação de carboidrase no desempenho de suínos é contraditório

(Thacker 2013). Embora efeitos positivos no desempenho sejam observados, eles são
comumente associados a aumentos na digestibilidade dos nutrientes, provavelmente um
resultado do aumento da acessibilidade das enzimas endógenas aos nutrientes como
resultado da inibição do “efeito gaiola”, bem como da hidrólise ou hidrólise parcial do NSP.
A hidrólise de NSP resulta em maior liberação de açúcar no intestino grosso e delgado e,
portanto, estimula o crescimento de lactobacilos, que produzem ácido lático. Proporções
aumentadas de ácido láctico promovem a saúde intestinal, suprimindo o crescimento de
coliformes como a E. coli patogênica.

Sabe-se que a resposta de suínos à suplementação de carboidrase é menos consistente

do que a observada com aves, diferenças decorrentes da fisiologia do porco e da galinha.
539
Uma diferença clara é o pH no intestino. No porco, a duração da exposição do alimento a
um pH baixo é significativamente maior do que no frango (Baas e Thacker 1996). É
possível que a exposição a baixo pH no estômago do porco desnature parcial ou
totalmente a enzima, sendo responsável pela menor magnitude das respostas obtidas
quando as carboidrases são fornecidas aos porcos em comparação com as aves
(Thacker 2013).

5.3 Proteases

As proteases têm a capacidade de quebrar proteínas. O uso de proteases na ração não

foi analisado tão extensivamente quanto outras classes de enzimas e, em muitos casos,
as proteases investigadas estiveram presentes como parte de uma mistura de enzimas
(por exemplo, fermentações de tipo selvagem de Bacillus). Animais monogástricos, como
suínos e aves, produzem proteases digestivas, por exemplo, pepsina, tripsina,
quimiotripsina e carboxipeptidases, que digerem as proteínas dos alimentos em maior
extensão. No entanto, uma fração da proteína alimentar ingerida é excretada nas fezes,
representando uma oportunidade para uma protease exógena melhorar a utilização da
proteína em galinhas para engorda (Glitsoe et al. 2015). A protease reduz a proporção de
aminoácidos não digeríveis nos alimentos, resultando em um aumento correspondente
nos aminoácidos digestíveis. Geralmente, quanto mais indigestível for o nível de
aminoácido presente, maior será o aumento da digestibilidade quando as proteases são
adicionadas. Quanto maior o nível de proteína não digerida, conforme medido pelo nível
de digestibilidade dos aminoácidos, maior a variabilidade de um determinado alimento.

A protease é um aditivo alimentar muito moderno que oferece suporte a melhores

condições nutricionais, de saúde e ambientais na produção de suínos, que estão
intimamente relacionadas pelo modo de ação da protease. O uso de protease pode
contribuir significativamente para reduzir as emissões de nitrogênio durante a produção
animal. A melhora da saúde intestinal, por exemplo, também reduz a necessidade de
aminoácidos e energia. Os benefícios nutricionais baseiam-se firmemente nos
aminoácidos digestíveis, tanto em termos de necessidades dos animais quanto da
disponibilidade dos alimentos. Os benefícios para a saúde estão ligados ao potencial de
reduzir os níveis de proteína na dieta e, portanto, reduzir o nível de proteínas não
digeridas no intestino posterior. O excesso de proteína é um substrato de fermentação
que pode produzir produtos de degradação, como fenóis, aminas, amônia e indóis que,
por sua vez, aumentam o pH, que são todos resultados indesejáveis. Da mesma forma,
fatores antinutricionais (ANF), como inibidores de tripsina, podem criar condições para

540
predispor o crescimento de Clostridium perfringens. Níveis mais altos de amônia em
edifícios de animais podem predispor os animais a riscos de doenças respiratórias.

Foi relatado que a protease adicionada à ração para frangos de corte tem um efeito
benéfico ao aumentar o FCR e reduzir os níveis de Clostridium perfringens no íleo. Há
uma grande variedade de enzimas para aditivos de ração para aves, muitas das quais são
produzidas como proteínas recombinantes em leveduras usadas como lisado. A produção
de enzimas por Pichia pastoris pode servir como uma fonte potencial para estudos
bioquímicos ou de alimentação animal (Johnson et al. 2010), e o uso dietético de lisozima
encapsulada (Zhong e Jin 2009) como aditivo alimentar na dieta de galinhas reduziu
significativamente a concentração de Clostridium perfringens e lesões gastrointestinais
por causa do organismo no íleo (Liu et al. 2012).

O desmame abrupto do leitão por volta da quarta semana de vida causa uma queda
dramática na produção de amilase e um controle significativo na produção de protease,
seja medida como atividade por unidade de peso do pâncreas ou com base no pâncreas
total (Lindemann et al. 1986). O porco desmamado está mal preparado para digerir o
amido e a proteína encontrados em uma dieta de desmame à base de cereais e poderia
se beneficiar do aumento das enzimas imediatamente após o desmame (Owsley et al.
1986). No entanto, a recuperação da produção de enzimas endógenas é rápida e o
benefício da suplementação de enzimas provavelmente terá vida curta.

No desmame, a transição de fontes de proteína altamente digestíveis para menos

digestíveis é agravada por uma diminuição na secreção de protease endógena e
mudanças na morfologia do revestimento intestinal. Essas alterações incluem a redução
da altura das vilosidades e hiperplasia da cripta, o que resulta em absorção prejudicada
de nutrientes e problemas de saúde intestinal. Portanto, a suplementação aditiva de
protease pode ajudar os leitões a digerir proteínas, o que reduz a quantidade de proteína
não digerida que chega ao intestino grosso. A alimentação com aditivo de protease
exógena para leitões pode melhorar a morfologia intestinal em comparação com leitões
não suplementados. Assim, a integridade das junções apertadas pode ser preservada,
levando a uma redução na mortalidade pós-desmame. Ao minimizar os níveis de proteína
não digerida, a enzima protease também estabelece as condições para um intestino mais
saudável, redução da excreção de nitrogênio e dietas de proteína mais baixas, todos os
quais têm o potencial de melhorar o desempenho e reduzir os custos de alimentação e
produção (Aehle 2007). Esta funcionalidade é exclusiva da protease, por isso é chamada
de “próximo aminoácido”. Os efeitos nutricionais indiretos da enzima protease fornecem
alguns benefícios adicionais à saúde. A redução potencial da proteína de putrefação no
541
intestino posterior diminui o risco de geração de uma variedade de metabólitos nocivos,
como 3-metilindol e sulfeto de hidrogênio. A suplementação com protease resultou em um
aumento significativo na espessura da camada de muco aderente no GIT de frangos de
corte e promoveu a capacidade de sobreviver com uma infecção por coccidiose.

Foi observado que a protease suplementar aumentou a resistência à tração do intestino, a

altura das vilosidades e a profundidade da cripta, e reduziu a espessura epitelial e o
número de células caliciformes (Cowieson et al. 2009). Essas alterações morfológicas são
indicativas de maior integridade e resiliência intestinal e são sugestivas de efeitos
benéficos da protease que vão além do aumento da recuperação de aminoácidos. Foi
demonstrado que a presença de protease aumenta o número de lactobacilos e reduz os
níveis de Escherichia coli no cólon em dietas ricas e pobres em proteínas.

Uma análise do ciclo de vida foi realizada para determinar o impacto ambiental da
protease em toda a cadeia de produção de frangos de corte usando a metodologia de
avaliação do ciclo de vida descrita nas ISO 1404017 e 1404418. O estudo mostrou
benefícios significativos para todos os impactos ambientais considerados. O mais
importante era o potencial de redução da poluição da água e do ar com compostos
nitrosos, que podem levar à eutrofização e acidificação. Os maiores efeitos foram
observados quando a protease foi usada em dietas para compensar a redução no teor de
proteína (Oxenboll et al. 2011).

As dietas de baixa proteína reduzem o risco de doenças. O uso de protease permite a

confiança na obtenção de desempenho compatível com dietas com baixo teor de proteína
e, portanto, oferece suporte a um ambiente melhor e reduz o risco de doenças
respiratórias produzidas por Pasteurella multocida; uma dieta pobre em proteínas produz
estrume com muito menor teor de amônia, sulfeto de hidrogênio e odor.

Na suinocultura, foi proposto o uso de “técnicas de alimentação de precisão” como uma

abordagem essencial para melhorar a utilização de nitrogênio, fósforo e outros nutrientes
na dieta, e também para reduzir a excreção de nutrientes. Por exemplo, a adição de
enzimas (por exemplo, fitases) melhora as características ambientais em comparação
com a formulação de ração tradicional. A adição de enzimas na ração pode promover a
sustentabilidade da melhoria da sustentabilidade ambiental da produção de suínos, bem-
estar animal e qualidade dos produtos de carne, reduzindo a excreção de nutrientes em
operações de suínos com pequenos aumentos nos custos de alimentação (Pomar et al.
2009). Usando essas “técnicas de alimentação de precisão”, os porcos são alimentados
individualmente com uma dieta diária ajustada que pode melhorar a eficiência nutricional
da dieta. Os custos estimados de alimentação podem ser reduzidos em uma quantidade
542
superior a 4,6%, e a excreção de nitrogênio e fósforo pode ser reduzida em mais de 38%
(Pomar et al. 2009).

O papel da protease, portanto, torna-se cada vez mais importante na melhoria da

disponibilidade de vários aminoácidos essenciais dos alimentos. Um benefício adicional
da protease é a redução dos efeitos negativos dos ANF, como os inibidores de tripsina, na
eficiência da produção. Um resultado adicional é que a produção de mucina intestinal
pode ser reduzida de modo que os aminoácidos absorvidos sejam usados para a
construção de proteína útil por meio do ganho de massa magra ou produção de leite e
não para a produção desnecessária de proteína mucina intestinal. A produção de mucina
também usa energia que, de outra forma, apoiaria a construção de proteínas.
Consequentemente, a energia é usada com mais eficiência, o que torna esse resultado
duplamente valioso.

Os aditivos de protease reduzem a proporção de aminoácidos não digeríveis nos

alimentos, resultando em um aumento correspondente nos aminoácidos digestíveis.
Geralmente, quanto mais indigestível o nível de aminoácidos presentes, maior o aumento
na digestibilidade quando as proteases são adicionadas. Uma meta-análise revelou que a
melhoria da digestibilidade dos aminoácidos foi de cerca de 10% quando a digestibilidade
geral em uma dieta de controle foi inferior a 70%. Como a digestibilidade geral da dieta
controle melhorou, a oportunidade para o benefício da protease foi reduzida. Com 90% da
digestibilidade da dieta, a resposta média da protease foi de cerca de 2% (Cowieson e
Ross 2014). A energia metabolizável aparente aumentou significativamente em 49 kcal/kg
e a digestibilidade da gordura melhorou em 1%. É importante notar que a digestibilidade
inerente à dieta controle explicou aproximadamente 047% da variância da resposta.

Anteriormente, após a adição in vitro de protease, foi demonstrada maior hidrólise de

proteínas alergênicas, glicinina e β conglicinina do farelo de soja (Wang et al. 2004). É
importante observar que os níveis de nutrientes em uma dieta afetam a resposta à
protease e que as melhores respostas parecem ocorrer quando há níveis mais elevados
de proteína indigestível e soja na dieta. Portanto, a resposta à protease pode ser mais
consistente na presença de fitase e xilanase. Além disso, as interações enzimáticas com
uma fonte de milho indicaram a influência do teor de proteína solúvel em sal extraível do
milho na acessibilidade à proteína e ao amido. A magnitude das respostas à fitase foi
maior durante a primeira semana pós-nascimento em comparação com frangos de corte
com 4 semanas de idade. As respostas às enzimas exógenas não podem ser
consideradas constantes e são influenciadas pela fonte de milho usada, bem como pela
idade dos frangos de corte. Uma advertência com este estudo específico refere-se ao fato
543
de que entre os dias 9 e 21 as aves foram alimentadas com os mesmos tratamentos
enzimáticos, mas com uma fonte constante e diferente de milho (Gehring et al. 2013).

5.4 Xilanase

Curiosamente, a xilanase adicionada a uma dieta à base de trigo aliviou os efeitos

patológicos de Clostridium perfringens em frangos de corte (Liu et al. 2012).

5.5 b Galactomananos

A inclusão dietética de β-galactomananas tem se tornado uma estratégia promissora para

controlar e prevenir infecções intestinais. O efeito de vários produtos ricos em β
galactomanana na morfologia intestinal em galinhas desafiadas com Salmonella
enteritidis foi investigado, indicando que os efeitos benéficos dessas enzimas na
morfologia intestinal dão mais evidências dos efeitos positivos desses suplementos na
nutrição de aves (Brufau et al. 2015).

6. Observações finais e orientações futuras

O potencial do uso de enzimas na dieta de aves para melhorar o valor nutricional dos
alimentos é reconhecido há muitos anos. As limitações da atividade enzimática são
impostas pela natureza do substrato e pelo animal hospedeiro. A base científica para a
adição de enzimas é estabelecida para alguns alimentos, embora não seja para outros. As
β-glucanases e xilanases têm sido usadas como aditivos para rações por mais de 20 anos
e sua capacidade de melhorar o FCR e o ganho de peso de animais monogástricos (aves
e porcos) foi demonstrada em vários relatórios. O uso dessas enzimas alimentares foi
restrito principalmente a aves e porcos, onde a maioria dos alimentos na criação intensiva
contém enzimas alimentares, embora pesquisas com foco em enzimas suplementares
para ruminantes e peixes, bem como peles e animais de estimação, também tenham sido
realizadas nos últimos anos. Durante os últimos anos, as investigações sobre o modo de
ação das enzimas alimentares continuaram rapidamente, particularmente na pesquisa de
fitase, onde está claro que o valioso benefício desta enzima não é simplesmente através
do fornecimento de fosfato, mas também através da destruição do ácido fítico , um
antinutriente potente. Da mesma forma, um melhor entendimento entre a função das
enzimas alimentares e a fisiologia digestiva influenciou positivamente as recomendações
de aplicação de enzimas alimentares. A confirmação de enzimas alimentares reduz os
impactos ambientais da agricultura como uma área complexa que requer consideração e
estudos específicos. Enzimas alimentares são aplicadas para melhorar a utilização da
ração e seus benefícios incluem custo reduzido da ração, melhor desempenho do animal
544
e impacto ambiental reduzido da produção animal. Além disso, os efeitos das enzimas
alimentares na microbiota ou microbioma do GIT precisam de mais pesquisas. As
enzimas alimentares podem causar um impacto na ecologia microbiana do GIT, reduzindo
substratos não digeridos e fatores antinutritivos e produzindo oligossacarídeos in situ a
partir de NSP dietético. Além disso, as investigações usando modelos específicos de
desafio de patógenos entéricos demonstraram a eficácia das enzimas alimentares na
modulação da saúde intestinal. Como as enzimas alimentares provavelmente mudam as
características do substrato ao longo do GIT, as respostas subsequentes da microbiota
variarão de acordo com as populações presentes no momento da administração e sua
reação a tais mudanças. Atualmente, é de grande interesse o papel das principais
enzimas alimentares (por exemplo, carboidrases e fitase) na saúde intestinal de aves e
suínos, com foco específico no impacto sobre a microbiota do GIT. A aplicação da
engenharia genética no processo de produção de enzimas permite o desenvolvimento de
enzimas direcionadas para fins específicos. O estabelecimento de substratos específicos
(e, portanto, a atividade enzimática), os efeitos do substrato, o fator que afeta a
importância do substrato e a estabilidade dos coquetéis de enzimas são necessários para
explorar totalmente esta nova tecnologia de engenharia. No entanto, antes de uma
enzima alimentar ser colocada no mercado, ela deve ser submetida a uma série de
exames toxicológicos e de segurança e cumprir os requisitos dos procedimentos de
registro.

Agradecimentos Este trabalho foi apoiado pelo Projeto S2013/ABI-2728 (Programa ALIBIRD-CM) da
Comunidade de Madrid, e pelo Projeto Ref. RTA2015-00010-C03-03 do Ministerio de Economía, Industria y
Competitividad, Espanha.

Referências
Adeola O, Cowieson AJ (2011) Opportunities and challenges in using exogenous enzymes to improve non-ruminant
animal production. J Anim Sci 89:3189–3218
Aehle W (2007) Enzymes in industry: production and applications, 3rd edn. Wiley VCH, Weinheim. ISBN:978-3-527-
31689-2
Annison G (1991) Relationship between levels of soluble nonstarch polysaccharides and the apparent metabolizable
energy of wheats assayed in broiler chickens. J Agric Food Chem 39:1252–1256
Apajalahti J, Kettunen A, Graham H (2004) Characteristics of the gastrointestinal microbial communities, with special
reference to chickens. World Poult Sci J 60:223–232
Baas TC, Thacker PA (1996) Impact of gastric pH on dietary enzyme activity and survivability in swine fed β-glucanase
supplemented diets. Can J Anim Sci 76:245–252
Beg Q, Kappor M, Mahajan L et al (2001) Microbial xylanases and their industrial applications: a review. Appl Microbiol
Biotechnol 56(3–4):326–338
BedfordM(2000) Removal of antibiotic growth promoters from poultry diets: implications and strategies to minimise
subsequent problems. World Poult Sci J 56:347–365
Bedford MR, Classen HL (1992) Reduction of intestinal viscosity through manipulation of dietary rye and pentosanase
concentration is effected through changes in the carbohydrate composition of the intestinal aqueous phase and results in
improved growth rate and food conversion efficiency of broiler chicks. J Nutr 122:560–569
Bedford MR, Cowieson AJ (2012) Exogenous enzymes and their effects on intestinal microbiology. Anim Feed Sci
Technol 173:76–85
Bedford MR, Partridge GG (2011) Enzymes in farm animal nutrition. CAB International, Wallingford

545
 Bedford MR, Schulze H (1998) Exogenous enzymes for pigs and poultry. Nutr Res Rev 11:91–114
Brufau MT, Martín-Venegas R, Guerrero-Zamora AM et al (2015) Dietary β-galactomannans have beneficial effects on
the intestinal morphology of chickens challenged with Salmonella enterica serovar enteritidis. J Anim Sci 93:238–246
Cheng G, Hao H, Xie S et al (2014) Antibiotic alternatives: the substitution of antibiotics in animal husbandry? Front
Microbiol 5:217
Choct M (2002) Non-starch polysaccharides: effect on nutritive value. In: McNab JM, Boorman KN (eds) Poultry
feedstuffs. CABI Publishing, New York
Choct M (2009) Managing gut health through nutrition. Br Poult Sci 50:9–15
Choct M, Hughes RJ, Wang J et al (1996) Increased small intestinal fermentation responsible for the anti-nutritive
activity of non-starch polysaccharides in chickens. Br Poult Sci 37:609–621
Choct M, Hughes RJ, Bedford MR (1999) Effects of α-xylanase on individual bird variation, starch digestion throughout
the intestine, and ileal and caecal volatile fatty acid production in chickens fed wheat. Br Poult Sci 40:419–422
Choct M, Kocher M, Waters DLE et al (2004) A comparison of three xylanases on the nutritive value of two wheats for
broiler chickens. Br J Nutr 92:53–61
Cowieson AJ, Adeola O (2005) Carbohydrase protease and phytase have an additive beneficial effect in nutritionally
marginal diets for broiler chicks. Br Poult Sci 84:1860–1867
Cowieson AJ, Ross FF (2014) Bioefficacy of a mono-component protease in the diets of pigs and poultry: a meta-
analysis of effect on ileal amino acid digestibility. J Appl Anim Nutr 2:1–8
Cowieson AJ, Singh DN, Adeola O (2006) Prediction of ingredient quality and the effect of a combination of xylanase,
amylase, protease and phytase in the diets of broiler chicks. 1. Growth performance and digestible nutrient intake. Br
Poult Sci 47(4):477–489
Cowieson AJ, Bedford MR, Selle PH et al (2009) Phytate and microbial phytase: implications for endogenous nitrogen
losses and nutrient availability. World Poult Sci J 65:401–418
Dänicke S, Vahjen W, Simon O et al (1999) Effects of dietary fat and xylanase supplementation to rye-based broiler
diets on selected bacteria groups adhering to the intestinal epithelium, on transit time of feed, and on nutrient digestibility.
Poult Sci 78:1292–1299
Gehring CK, Bedford MR, Dozier WA (2013) Interactive effects of phytase and xylanase supplementation with
extractable salt-soluble protein content of corn in diets with adequate calcium and nonphytate phosphorus fed to broilers.
Poult Sci 92(7):1858–1869
Glitsoe V, Ruckwbusch J-P, Knap I (2015) White paper. Innnovation in enzyme development. DSM, Health Nutrition
Materials
Graf E (1986) Chemistry and applications of phytic acid. In: Graf E (ed) Phytic acid: chemistry and applications. Pilatus
Press, Minneapolis, MN, pp 1–21
Jackson ME, Anderson DM, Hsiao HY et al (2003) Beneficial effect of β-mannanase feed enzyme on performance of
chicks challenged with Eimeria sp. and Clostridium perfringens. Avian Dis 47:759–763
Jaroni D, Scheideler SE, Beck MM et al (1999) The effect of dietary wheat middlings and enzyme supplementation. II:
Apparent nutrient digestibility, digestive tract size, guts viscosity, and gut morphology in two strains of Leghorn hens.
Poult Sci 78:1664–1674
Johnson SC, Yang M, Murthy PP (2010) Heterologous expression and functional characterization of a plant alkaline
phytase in Pichia pastoris. Protein Expr Purif 74:196–203
Juanpere J, Pere-Vendrell AM, Angulo E et al (2005) Assessment of potential interaction between phytase and
glycosidase enzyme supplementation on nutrient digestibility in broilers. Poult Sci 84:571–580
Kiarie E, Nyachoti CM (2009) Bioavailability of calcium and phosphorous in feedstuffs for farm animals. In: Vitti DMSS,
Kebreab E (eds) Phosphorus and calcium utilization and requirements in farm animals. CAB International Wallingford, pp
76–83
Kiarie E, Romero LF, Nyachoti CN (2013) The role of added feed enzymes in promoting gut health in swine and
poultry. Nutr Res Rev 26:71–88
Leske KL, Coon CN (1999) A bioassay to determine the effect of phytase on phytate phosphorus hydrolysis and total
phosphorus retention of feed ingredients as determined with broilers and laying hens. Poult Sci 78:1151–1157
Lindemann MD, Cornelius SG, El Kandelgy SM et al (1986) Effect of age, weaning and diet on digestive enzyme levels
in the piglet. J Anim Sci 62:1298–1307
Liu D, Guo Y, Wang Z, Yuan J (2012) Exogenous lysozyme influences Clostridium perfringens colonization and
intestinal barrier function in broiler chickens. Avian Pathol 39:17–24
Metzler B, Bauer B, Mosenthin R (2005) Microflora management in the gastrointestinal tract of piglets. Asian-Aust J
Anim Sci 18:1353–1362
Mulder MM, Lomax JA, Hotten PM et al (1991) Digestion of wheat aleurone by commercial polysaccharidases. Anim
Feed Sci Technol 32:185–192
Owsley WF, Orr DE, Tribble LF (1986) Effect of age and diet on the development of the pancreas and the synthesis
and secretion of pancreatic enzymes in the young pig. J Anim Sci 63:497–504
Oxenboll KM, Pontoppidan K, Fru-Nij F (2011) Use of a protease in poultry feed offers promising environmental
benefits. Int J Poult Sci 10(11):842–848
Pomar C, Hauschild L, Zhang G-H et al (2009) Applying precision feeding techniques in growing-finishing pig
operations. Rev Bras Zootec 38:226–237

546
 Ravindran V (2013) Feed enzymes: the science, practice, and metabolic realities. J Appl Poult Res 22:628–636
Ravindran V, Selle PH, Bryden WL (1999) Effects of phytase supplementation, individually and in combination, with
glycanase on the nutritive value of wheat and barley. Poult Sci 78:1588–1595
Selle PH, Ravindran V (2007) Microbial phytase in poultry nutrition. Anim Feed Sci Technol 135:1–41
Selle PH, Ravindran V (2008) Phytate-degrading enzymes in pig nutrition. Livest Sci 113:99–122
Selle P, Ravindran V, Partridge GG (2009) Beneficial effects of xylanase and/or phytase inclusions on ileal amino acid
digestibility, energy utilization, mineral retention and growth performance in wheat-based broiler diets. Anim Feed Sci
Technol 53:303–313
Slominski BA (2011) Recent advances in research on enzymes for poultry diets. Poult Sci 90:2013–2023
Svihus B (2011) The gizzard: function, influence of diet structure and effects on nutrient availability. World Poult Sci J
67 (2):207–224
Thacker PA (2013) Alternatives to antibiotics as growth promoters for use in swine production: a review. J Anim Sci
Technol 4(1):35
Vahjen W, Gläser K, Schäfer K et al (1998) Influence of xylanasesupplemented feed on the development of selected
bacterial groups in the intestinal tract of broiler chicks. J Agric Sci 130:489–500
Wang Z, Li L, Yuan D et al (2004) Reduction of the allergenic protein in soybean meal by enzymatic hydrolysis. Food
Agric Immunol 25 (3):301–310
Woyengo TA, Nyachoti CM (2011) Supplementation of phytase and carbohydrases to diets for poultry. Can J Anim Sci
91(2):177–192
Zhong Q, Jin M (2009) Nanoscalar structures of spray-dried zein microcapsules and in vitro release kinetics of the
encapsulated lysozyme as affected by formulations. J Agric Food Chem 57:3886–3894
Zyla K, Gogol D, Koreleski J et al (1999) Simultaneous application of phytase and xylanase to broiler feeds based on
wheat: in vitro measurements of phosphorus and pentose release from wheat and wheat-based feeds. J Sci Food Agric
79:1832–1840

547
 Nutracêuticos usados como alternativas
antibacterianas na saúde e doença animal

Arturo Anadón, Irma Ares, Maria Rosa Martínez-Larrañaga e Maria Aŕanzazu

Martínez

Resumo
Nas últimas décadas, uma quantidade cumulativa de pesquisas tem se concentrado no
desenvolvimento de alternativas aos antimicrobianos para manter o bem-estar, a saúde e
o desempenho dos animais. Um alto nível de biossegurança interna e externa para
fazendas, rebanhos ou rebanhos é fundamental porque eles recebem e entregam material
biológico constantemente. Muitos esforços têm sido dedicados a demonstrar como os
vírus ou bactérias são eliminados de aves ou porcos e transmitidos entre fazendas,
rebanhos ou rebanhos. Uma boa biossegurança externa é fundamental para evitar a
introdução de novos agentes biológicos. Para superar o aumento da taxa de mortalidade
e morbidade resultante da proibição de antibióticos in-feed, uma série de alternativas
antibacterianas foram projetadas. As classes de substâncias alternativas descritas neste
capítulo incluem ácidos orgânicos e ácidos graxos de cadeia curta e média, fitobióticos e
óleos essenciais, peptídeos antimicrobianos, bacteriófagos e suas endolisinas e
compostos imunomoduladores (vacinas). Prebióticos, probióticos e enzimas também são
alternativas notáveis aos antibacterianos, mas são descritos em dois outros capítulos.
Esses nutracêuticos são ferramentas valiosas em sistemas de produção sem antibióticos
para apoiar a saúde intestinal do animal. Com base em uma pesquisa bibliográfica, é
evidente que uma longa e crescente lista de compostos tem sido relatada por sua
capacidade de substituir antibacterianos como aditivos alimentares em dietas animais.
Ainda são necessárias pesquisas na área de nutracêuticos usados como alternativas
antibacterianas em saúde animal, pois a alternativa perfeita aos antibacterianos ainda não
existe. O mecanismo de ação desses compostos precisa ser melhor definido. Os
regulamentos relativos aos aditivos para rações na União Europeia para esses
nutracêuticos usados na produção animal também são descritos.

Palavras-chave: Nutracêuticos veterinários · Alternativas antibacterianas

A. Anadón · I. Ares · M. R. Martínez-Larrañaga · M. A. Martínez. Universidad Complutense de Madrid,

Madrid, Spain. e-mail: anadon@vet.ucm.es

548
1. Introdução
Os antimicrobianos têm sido usados em todo o mundo na pecuária, incluindo pecuária,
avicultura e criação de peixes por muitas décadas devido aos seus efeitos econômicos
favoráveis na produção de gado para manter a saúde e a produtividade. Os antibióticos
adicionados em doses baixas (ou seja, doses subterapêuticas) à alimentação dos animais
de fazenda melhoraram o crescimento e o desempenho (taxa de conversão alimentar) e,
portanto, eram conhecidos como “promotores de crescimento antimicrobiano” (AGP). A
promoção do crescimento envolve a modificação da população da microflora intestinal e
mudanças no metabolismo do hospedeiro. Existem preocupações de que essas práticas
de uso de antibióticos como promotores de crescimento na alimentação animal
contribuíram para o desenvolvimento de resistência antimicrobiana, disseminando
patógenos resistentes a medicamentos em animais de fazenda e humanos,
representando uma ameaça potencial significativa à saúde pública.

Os problemas associados ao uso de antimicrobianos em animais para alimentação estão

crescendo em todo o mundo, sem evidências claras da necessidade ou benefício disso,
levando ao reconhecimento crescente de que ações urgentes são necessárias. É aceito
que a prevalência de resistência a antibióticos no setor pecuário é geralmente mais alta
em espécies animais criadas em sistemas de produções intensivas. O uso prudente de
antimicrobianos (também conhecido como “judicioso”, “racional” ou “administração
antimicrobiana”) em animais é muito importante para ajudar a reduzir o desenvolvimento
de resistência antimicrobiana (AMR) porque, como em humanos, o uso inadequado pode
resultar no desenvolvimento de microrganismos resistentes, que podem ser
posteriormente transmitidos de animais para humanos (ou vice-versa) e para o meio
ambiente. Termos “prudentes ou judiciosos” e “racionais” são frequentemente usados para
sugerir uma atitude responsável em relação ao uso de antimicrobianos, visando minimizar
o desenvolvimento e a disseminação da AMR e, ao mesmo tempo, maximizar a eficácia
terapêutica.

O gerenciamento antimicrobiano é um conceito desenvolvido como uma abordagem

interdisciplinar para garantir a eficácia dos antibacterianos e seu uso nas gerações
futuras. Os princípios básicos do conceito são os "5 Rs": Responsabilidade
(responsabilidade compartilhada envolve um veterinário que prescreve medicamentos e
produtores de gado), Redução (evitar o uso profilático e metafilático e usar
antibacterianos apenas para surtos), Refinamento (combinação de diagnósticos confiáveis
seguida do uso correto de antibacterianos), Reposição (uso de alternativas à disposição
do agricultor, pré e probióticos, ácidos orgânicos e butirato, compostos secundários de
549
plantas) e Revisão (verificação regular das medidas aplicadas com o objetivo de,
eventualmente, reduzir o uso de antibióticos a zero). O uso prudente de antimicrobianos
faz parte das boas práticas veterinárias e de boa criação de animais e leva em
consideração as práticas de prevenção de doenças, como o uso de vacinação e
melhorias nas condições de criação. As diferentes aplicações de antibióticos em animais
de alimentação têm sido descritas como uso profilático, uso terapêutico e uso metailático
e subterapêutico. O uso de antimicrobianos para medicamentos em massa, em doses
subterapêuticas ou de outras formas inadequadas, amplifica esse risco. Assim, a
Comissão Europeia publicou em 2015 orientações para o uso prudente de
antimicrobianos em animais que estabelecem muitos fatores potenciais a serem
considerados no estabelecimento de políticas e ações que refletem as questões
multifacetadas e complexas envolvidas no combate à AMR. Eles definem o uso prudente
de antimicrobianos como levando a um uso mais racional e direcionado, maximizando
assim seu efeito terapêutico e minimizando o desenvolvimento de AMR (EC 2015, 2018).
Ainda existem opiniões divergentes sobre a transferência de genes de resistência a
antibióticos de patógenos animais para humanos (Gadde et al. 2017). Vários estudos
mostraram que pode haver uma ligação entre a prática de usar doses subterapêuticas de
antibacterianos e o desenvolvimento de AMR na microflora (Cosby et al. 2015). Devido ao
surgimento de micróbios resistentes a antibióticos (AMR) que são usados para tratar
infecções humanas e animais, a Comissão Europeia (EC) decidiu descontinuar e, em
última instância, banir desde a decisão de 1º de janeiro de 2006 tomada sobre “princípios
de precaução”, comercialização e uso de antibióticos como promotores de crescimento na
alimentação animal (Anadón 2006). Desde então, o uso de antibacterianos só é permitido
mediante receita veterinária para aplicações diretas ou como ração medicamentosa.
Essas restrições são consideradas necessárias, pois os antibacterianos podem levar à
seleção de cepas bacterianas resistentes em animais que podem ser transferidas para
humanos, por contato direto ou via alimentos, e, subsequentemente, levar a um
comprometimento da eficácia dos antibióticos usados na terapia de doenças infecciosas
humanas (Anadón 2006).

O impacto da eliminação dos promotores de crescimento animal pode ser minimizado,

desde que seja dada atenção adequada a estratégias alternativas de prevenção de
doenças e fatores de manejo, tais como práticas alternativas de manejo na produção de
alimentos para animais. O desempenho do gado e a eficiência alimentar estão
intimamente relacionados com a carga microbiana qualitativa e quantitativa do intestino do
animal, a estrutura morfológica da parede intestinal e a atividade do sistema imunológico
(Huyghebaert et al. 2011). Nos EUA, o uso de antibióticos em rações para gado e aves
550
está sob grande escrutínio como resultado da crescente conscientização do consumidor e
da demanda por produtos de origem animal a partir de sistemas de produção sem
antibióticos. Em 2013, a FDA dos EUA convocou os principais fabricantes de
medicamentos animais medicamente importantes para parar voluntariamente de rotulá-los
para promoção de crescimento em animais e revisar os rótulos de forma que a supervisão
veterinária seja necessária para usos terapêuticos (FDA 2013).

O FDA continuou a fortalecer sua agenda na promoção do uso criterioso de

antimicrobianos em animais produtores de alimentos e publicou sua regra final da Diretiva
de Alimentos Veterinários (VFD) no início de 2015, trazendo o uso de antimicrobianos
(CIAs) criticamente importantes (por exemplo, terceira ou quarta geração de
cefalosporinas e/ou fluoro quinolonas) de acordo com o seu grau de risco para o homem
em alimentos para animais sob supervisão veterinária, de modo que sejam utilizadas
apenas quando necessário para garantir a saúde dos animais. Os alimentos
medicamentosos para animais que contenham medicamentos veterinários antibacterianos
não devem ser utilizados para complementar animais produtores de alimentos nem para
melhorar o seu desempenho. Questões específicas devem ser consideradas antes de
usar CIAs. (1) Muitos dos antimicrobianos usados em animais também são usados em
humanos. Alguns desses antimicrobianos são essenciais para prevenir ou tratar infecções
potencialmente fatais em humanos. (2) É necessária consideração especial para garantir
a eficácia contínua de tais antimicrobianos e para minimizar o desenvolvimento de
resistência. (3) Antes de usar esses antimicrobianos em animais, deve-se considerar o
seguinte: esses antimicrobianos só devem ser usados em situações para as quais um
veterinário avaliou, com base em testes de sensibilidade antimicrobiana (AST) e dados
epidemiológicos relevantes, que não há antimicrobiano eficaz não criticamente importante
disponível. (4) Em casos excepcionais em que o uso desses antimicrobianos sob o uso
“off-label” (uso não descrito) (sistema em cascata) é inevitável e legalmente permitido, a
prescrição e o uso final devem ser suficientemente justificados e registrados. Tal uso deve
ser baseado em fundamentos clínicos: isto é, o veterinário que prescreve o medicamento
considera o uso de um determinado CIA necessário para evitar o sofrimento de animais
doentes e, também deve levar em consideração, questões éticas e de saúde pública. O
uso de CIAs deve ser limitado aos casos em que nenhuma outra opção está disponível
(EC 2015).

A resistência antimicrobiana é um efeito indireto bem documentado do uso excessivo de

antibióticos como método preventivo para manter a saúde e o desempenho animal. A
maioria dos antibióticos usados na criação de animais não são usados para tratar animais

551
doentes, mas são usados para tratar sistemas de produção insalubres. Por exemplo, na
produção de leite (por exemplo, os tratamentos para mastite são responsáveis pela
maioria dos antibióticos usados em uma fazenda de gado leiteiro para controlar a
inflamação da glândula mamária e dos tecidos do úbere, geralmente causada por
infecções bacterianas), as vacas leiteiras recebem em média dois tratamentos com
antibióticos por ano, um para prevenir e um para tratar a mastite. Essa prática geralmente
envolve o uso “generalizado” de antibióticos em todas as vacas para prevenir a ocorrência
de mastite durante o período “seco”; quando as vacas leiteiras descansam entre o final de
uma lactação e o início da seguinte (normalmente em torno de 60 dias), com penicilinas,
cefalosporinas (por exemplo, cefquinoma, uma cefalosporina de terceira geração) ou
outras drogas β lactânicas. Os antibióticos mais comumente usados para a terapia da
vaca seca são as cefalosporinas mais antigas, com as cefalosporinas modernas usadas
por cerca de 16% dos agricultores (Rose e Nunan 2016). Outra área onde o uso de
antibacterianos é muito alto é em bezerros leiteiros pré desmamados criados na fazenda;
antibióticos são adicionados ao leite/sucedâneo do leite e para tratar a diarreia de forma
rotineira. Da mesma forma, bezerros de corte que entram em confinamentos recebem
antibióticos para o tratamento de doenças respiratórias clínicas ou para prevenir abcessos
hepáticos que impactam negativamente o crescimento com macrolídio tilosina (Walker et
al. 2012).

Suínos em crescimento recebem antibióticos, comumente tetraciclinas ou tilosina, em sua

ração para fins de prevenção de doenças e promoção do crescimento. Finalmente, o uso
mais comum de antibióticos na produção de aves é para apoiar pintinhos marginais que
foram contaminados no saco vitelino ou no umbigo durante a eclosão. A injeção
sistemática de antimicrobianos (por exemplo, cefalosporinas) em ovos ou pintos de um
dia em incubatórios é frequentemente praticada, mas deve ser totalmente evitada, a
menos que justificada por razões excepcionais. Por exemplo, a utilização de
cefalosporinas de terceira e quarta gerações em aves (incluindo ovos) deve ser proibida,
de acordo com a decisão da Comissão após o procedimento de consulta de 13 de janeiro
de 2012 e de acordo com os critérios científicos da Autoridade Europeia para a Segurança
dos Alimentos (EFSA) parecer sobre os riscos para a saúde pública de cepas bacterianas
produtoras de beta lactamases de espectro estendido (ESBL) e/ou AmpC β lactamases
em alimentos e animais produtores de alimentos e devido ao risco de propagação de AMR
para humanos (EMA 2012). O uso profilático de antimicrobianos neste estágio pode ser
evitado garantindo uma boa higiene do incubatório e por meio do bom gerenciamento da
produção de pintinhos de um dia (por exemplo, controle de temperatura, higiene e
estimulação de beber e comer) (EC 2015). Para o pintinho recém-nascido, o acesso à
552
ração também é muito importante. A nutrição neonatal é um componente crítico no
estabelecimento da função intestinal normal, desde a digestão e absorção até a função de
barreira e desenvolvimento do sistema imunológico. O epitélio intestinal está
constantemente exposto a micróbios patogênicos comensais ou residentes e antígenos
que são importantes para o desenvolvimento da imunidade.

2. Impacto da eliminação progressiva dos promotores de crescimento

animal
Antimicrobianos muitas vezes têm sido usados indiscriminadamente, em detrimento de
animais saudáveis. Se os antimicrobianos forem administrados a um animal com
microflora intestinal saudável, é altamente provável que resulte em distúrbios digestivos e
microbianos. Na alimentação, os antibióticos profiláticos não são usados para tratar
animais doentes individuais, mas para tratar sistemas de produção doentes e subótimos.

É bem-sabido que após o tratamento com antibióticos em humanos resulta em distúrbios

graves da microflora intestinal, levando a diarreia e desconforto abdominal em uma fração
variável de pacientes, dependendo da faixa etária e do antibiótico utilizado;
aproximadamente 15-30% dos pacientes apresentam recorrência sintomática após a
descontinuação dos antibióticos. Um período de tratamento com antibióticos altera
apenas temporariamente a composição da microbiota, causando alterações ambientais.
Na maioria dos casos, a causa da diarreia é desconhecida, mas uma proporção variável
dos casos é causada por Clostridium difficile. As toxinas do C. difficile podem causar
qualquer coisa, desde diarreia leve, que pode ser curada simplesmente interrompendo o
tratamento com antibióticos, até a colite pseudomembranosa, uma doença com risco de
vida (Vanderhoof et al. 1999). Embora esses efeitos geralmente se resolvam com os
probióticos Lactobacillus como uma única espécie ou produtos probióticos combinados,
na pecuária esses distúrbios intestinais certamente têm um custo em termos de perda de
eficiência alimentar. Portanto, o impacto da eliminação gradual do AGP pode ser
minimizado com o uso adequado de estratégias alternativas de prevenção de doenças e
fatores de manejo, como práticas alternativas de manejo na produção de alimentos para
animais (Huyghebaert et al. 2011).

A incidência de certas doenças avícolas, como (subclínica) “enterite necrótica”, também

chamada disbacteriose, afeta galinhas e perus para engorda na idade de 2–16 semanas,
proliferando na idade de 3–6 semanas. A enterite necrótica subclínica leva a uma redução
lenta mas constante da taxa de crescimento. Esta síndrome de doença avícola está

553
claramente emergindo na EU simultaneamente com a proibição da EU de AGP; tanto a
incidência de enterite bacteriana quanto o uso de medicamentos para tratar essa doença
aumentaram. A enterite necrótica é causada por bactérias gram-positivas anaeróbicas
facultativas específicas, Clostridium perfringens (patógeno produtor de toxinas),
principalmente do tipo A. O crescimento excessivo da cepa produtora de toxinas de C.
perfringens danifica a parede intestinal, prejudicando a funcionalidade da parede e a
arquitetura química, o que reduz sua capacidade de absorver nutrientes. A enterite
necrótica clínica aguda em que o nível de infecção é grave pode resultar em alta
mortalidade, mesmo na ausência de outros sintomas. Os fatores predisponentes mais
comumente reconhecidos para enterite necrótica incluem infecção por coccidiose, altos
níveis dietéticos de polissacarídeos não amiláceos (NSP) e proteína indigestível. C.
perfringens é um componente da flora intestinal normal e é encontrado na cama, fezes,
solo, poeira e no intestino de animais saudáveis. Essas bactérias formadoras de esporos
são extremamente resistentes às influências ambientais e podem sobreviver no solo, nos
alimentos e na cama por vários anos e até se reproduzir. Os fatores que criam um
ambiente intestinal favorável para C. perfringens promovendo uma infecção com enterite
necrótica são os seguintes. (1) Alimentação: polissacarídeos não-amiláceos não digeridos
(NSP) servem como substrato, e alguns causam maior produção de muco, servindo
também como substrato e proporcionando condições anaeróbias ideais. Proteínas não
digeridas de alto conteúdo na dieta também servem como substratos. (2) Tensão: tensões
como mudança de alimentação ou alta densidade de estocagem. (3) Doenças
imunossupressoras (como anemia infecciosa de frango e Gumboro ou Marek) diminuem a
resistência contra infecções intestinais e facilitam sua colonização. A disbacteriose é
comumente observada em frangos de corte com doença gastrointestinal (GI) aguda ou
crônica; disbiose primária é definida como alterações na microbiota sem causa
identificável. Diferenças anatômicas e fisiológicas ao longo do trato GI, diferenças entre a
microbiota luminal e aderente à mucosa e as interações bacterianas entre o hospedeiro e
a microbiota (via sistema imune inato e adaptativo) também podem ocorrer em um nível
funcional sem mudanças óbvias na composição real da microbiota (Suchodolski et al.
2005). Alguns patógenos exercem pressão sobre o intestino e preparam o caminho para
Clostridia: Cryptosporidium e Salmonella podem resultar em um desequilíbrio entre
comensais ou residentes e bactérias potencialmente patogênicas (Clostridium perfringens,
entre outras) devido a um excesso de oferta de nutrientes no lúmen, levando a
interferência da microbiota com a mucosa e inflamação (Dibner e Richards 2005).
Consequentemente, o trato gastrointestinal (GIT) torna-se menos funcional, contribuindo
para a má digestão da ração e desempenho do rebanho. Esta condição do intestino pode
554
ser sinônimo de condições como “cama úmida”, “crescimento excessivo de bactérias no
intestino delgado”, “má absorção” e “síndrome de passagem de alimento”. Nesta
síndrome, há aumento do conteúdo de água nas fezes e digestibilidade reduzida com
resíduos não digeridos visíveis nas fezes (Huyghebaert et al. 2011). Pode ser necessário
adicionar cama seca para eliminar a umidade que já está na cama. Alternativas como
probióticos ou butiratos de liberação lenta são administradas via ração antes do
surgimento do problema da cama úmida, trazendo alguns benefícios em termos de taxa
de conversão alimentar (FCR) e uniformidade. Evitar “cama molhada” pode contribuir para
a qualidade do ar no aviário, melhorando as condições para trabalhadores e animais.
Uma boa saúde intestinal pode prevenir problemas respiratórios por meio de cama mais
seca.

O desmame é um evento crítico no ciclo de vida do porco, frequentemente associado a

infecções entéricas graves e uso excessivo de antibióticos, o que levanta sérias
preocupações econômicas e de saúde pública. Durante o período de desmame, os leitões
perdem o benefício da imunidade passiva do leite da porca e experimentam mudanças
gastrointestinais que acompanham a mudança na dieta, o que lhes causa um certo grau
de estresse e os deixa vulneráveis a infecções secundárias. Entre os fatores fisiológicos e
gastrointestinais afetados pela transição do desmame, a perturbação da microbiota
intestinal é provavelmente reconhecida como uma das principais causas da diarreia pós-
desmame. A microbiota do intestino do porco é um ecossistema muito complexo,
apresentando composição dinâmica e diversidade que muda com o tempo e ao longo de
todo o trato gastrointestinal (Isaacson e Kim 2012). A colonização é iniciada no
nascimento e é moldada pelo consumo do leite da porca, que fornece vantagens
nutricionais para a população de bactérias do ácido láctico, construindo um microbioma
orientado para o leite (Frese et al. 2015). Escherichia coli e Streptococcus spp. criam um
ambiente anaeróbio que favorece o estabelecimento de outros colonizadores, como
Bacteroides, Lactobacillus, Bifidobacterium e Clostridium (Petri et al. 2010). Durante o
período de amamentação, a cria e a mãe de criação diferenciam ainda mais a microbiota
fecal dos leitões. Este período de desmame obriga a mudança para novas estratégias,
pois agora nenhuma proteção vem da mãe. Como resultado de todas essas mudanças,
alguns leitões não comerão por algum tempo. Estratégias têm sido desenvolvidas para
neutralizar os problemas desse período porque a ração é menos digerível, pois inclui
matérias-primas vegetais e muitas vezes é apresentada na forma seca. Uma estratégia é
estimular o desenvolvimento do trato GI do recém-nascido por meio da suplementação da
dieta das porcas com certas substâncias e plantas biologicamente ativas. O corpo do
leitão desmamado deve tentar se adaptar a esta nova condição fisiológica, reduzindo o
555
uso de energia e proteína e diminuindo a taxa de reposição das células epiteliais
intestinais, resultando em um encurtamento das microvilosidades intestinais (Skrzypek et
al. 2007): seu estômago entretanto não está preparado para receber grandes quantidades
de alimentos. O tempo que o alimento permanece no estômago será menor e o pH obtido
não será correto para ativar enzimas proteicas para digerir a proteína vegetal e, portanto,
o risco de diarreia aumentará.

O desmame tem um forte impacto no sistema imunológico GI, pois o momento do

desmame resulta em três mudanças principais para o leitão: (1) toda a composição da
dieta é alterada drasticamente de leite facilmente digerível para uma dieta de base sólida
menos digerível; (2) os leitões são movidos para um novo ambiente; e (3) as ninhadas
são misturadas, o que traz estresse social ao animal. Esses fatores têm grande impacto
na saúde e no desempenho do leitão e às vezes resultam em mortalidade. A disbiose da
microbiota intestinal, induzida por mudanças abruptas na composição da dieta e no
ambiente dos leitões, surge como uma das principais causas de “diarreia pós-desmame” e
infecções associadas em leitões, mesmo que os mecanismos subjacentes exatos
permaneçam obscuros (Gresse et al. 2017) A mudança na composição da dieta pode ter
um enorme impacto na ingestão de ração e água, o que resulta em um período de jejum
de 24 horas ou mesmo 48 horas. Quando um leitão está em estado de disbiose, existe um
risco aumentado de diarreia pós-desmame. Além disso, o desmame está associado ao
aumento da permeabilidade do epitélio intestinal, o que aumenta o risco de infecções
patogênicas, uma vez que se torna mais fácil para os patógenos cruzarem o epitélio e
entrarem no corpo (Gresse et al. 2017). Por muitos anos, a solução foi baseada no uso de
antibióticos ou óxido de zinco como pré mistura para rações medicamentosas, na
dosagem de 100 mg/kg/dia por 14 dias consecutivos, ou seja, 2500 mg/kg ração ppm, em
pré dietas iniciais e iniciais, para o tratamento ou prevenção e controle da diarreia pós-
desmame em leitões (EMA 2016a, b). De acordo com dados publicados recentemente, o
zinco usado na criação de animais pode aumentar a prevalência de bactérias resistentes
a antibióticos por causa da co-seleção de genes de resistência antimicrobiana. Vários
estudos publicados demonstraram, durante experimentos in vivo ou investigando isolados
ambientais, uma correlação entre altas doses de suplementação de zinco em alimentos e
a prevalência de bactérias resistentes a antimicrobianos (LA-MRSA) ou de clones
bacterianos multirresistentes (Escherichia coli). O EMA/CVMP considera que (1) os riscos
ambientais identificados pela acumulação anual de zinco no solo a partir da propagação
de estrume em terras agrícolas não podem ser controlados com medidas de mitigação de
risco, e (2) o perfil risco/benefício geral para medicamentos veterinários contendo óxido
de zinco para administração oral a espécies produtoras de alimentos é negativo, uma vez
556
que os benefícios do óxido de zinco para a prevenção da diarreia em suínos não superam
os riscos para o meio ambiente. Em geral, há um risco de co-seleção para resistência
associada ao uso de óxido de zinco, mas, no momento, esse risco não é quantificável
(EMA 2016a, b). Entre as alternativas não antimicrobianas estão os óleos essenciais e os
prebióticos ou probióticos, que atualmente são avaliados para restaurar o equilíbrio
intestinal e permitir um melhor manejo da crucial transição do desmame (Gresse et al.
2017).

3. Biossegurança
Biossegurança é o termo usado na medicina veterinária para descrever medidas para
evitar que patógenos entrem nas instalações da fazenda ou um grupo de animais
(biossegurança externa) ou a propagação de patógenos dentro das instalações da
fazenda ou grupos de animais (biossegurança interna) (Amass e Clark 1999). A
biossegurança geralmente se refere a manter os agentes infecciosos fora de uma
operação animal ou fazenda, enquanto a biocontenção se refere a manter qualquer
agente infeccioso presente em uma fazenda ou dentro de uma região confinada a essa
região (Turner 2018). A biossegurança é um tipo de sistema ou programa de produção
animal de saúde, que é fundamental para prevenir a introdução de organismos
causadores de doenças em uma fazenda/rebanho/manadas e prevenir a propagação
dentro de uma fazenda/rebanhos/manadas, fazendo parte de práticas sustentáveis de
produção animal. Biossegurança significa tomar medidas para garantir que as boas
práticas de higiene sejam implementadas para que o risco de ocorrência ou propagação
de uma doença seja minimizado. Essas medidas devem ser praticadas em todos os
momentos e não apenas durante um surto de doença. A indústria avícola há muito tempo
abraçou a importância da biossegurança, e a produção de suínos avançou muito,
enquanto a importância da biossegurança não foi totalmente adotada na produção de
laticínios e carne bovina. O nível de biossegurança de um determinado rebanho pode ser
avaliado entrevistando o agricultor sobre as práticas de biossegurança e coletando dados
por inspeção visual. Um alto nível de biossegurança é uma demanda, não apenas para
fazendas localizadas em áreas densas de suínos com alta pressão de infecção, mas para
todas as fazendas porque elas recebem e entregam constantemente material biológico
(ou seja, animais e ração). O sistema de pontuação de biossegurança ponderada com
base em risco traduz as questões relacionadas à biossegurança em uma pontuação para
um rebanho para seu status de biossegurança interno, externo e geral. Esta pontuação
visa fornecer uma descrição objetiva, abrangente e quantitativa do nível de biossegurança
557
e pode ser usada para informar o agricultor sobre possíveis áreas para melhorias e para
comparar o nível de biossegurança com o de outras fazendas/rebanhos/manadas. Os
agricultores provavelmente estarão mais motivados para implementar medidas de
biossegurança se tais medidas puderem ser benéficas para o desempenho de sua
fazenda (Laanen et al. 2014), mas há dados quantitativos limitados disponíveis para ligar
os parâmetros de biossegurança e produção (Amass e Clark 1999 ; Laanen et al. 2013).
Especialmente, o estudo dessas relações com base em dados de vários países não foi
feito anteriormente. A biossegurança também tem um papel na manutenção da saúde dos
animais nas fazendas e os desafios dentro das fazendas para gerenciar a implementação
de protocolos de biossegurança.

O uso de antibacterianos, por exemplo, na suinocultura, é influenciado por uma série de

fatores de risco, incluindo características do rebanho, nível de biossegurança,
desempenho da fazenda, ocorrência de sinais clínicos e esquema de vacinação, bem
como atitudes e hábitos dos agricultores em relação ao uso de antimicrobianos. Portanto,
devem ser necessárias iniciativas para preservar a eficácia dos antibióticos e, ao mesmo
tempo, garantir a segurança alimentar em países de baixa e média renda.

O desenvolvimento de resistência antimicrobiana é um processo evolutivo normal para

microrganismos, mas a pressão de seleção criada pelo uso rotineiro de antibióticos
acelera esse desenvolvimento. Esse problema ameaça as conquistas da medicina
moderna, pois o pipeline para o desenvolvimento de novos medicamentos antibacterianos
está quase vazio. Limitar o uso de drogas antimicrobianas na prática humana e veterinária
pode minimizar o desenvolvimento de resistência. Em 2016, E. coli resistente à colistina
foi isolada de uma granja comercial na China. Após a descoberta de um novo mecanismo
de resistência transferível horizontalmente à colistina (mcr-1), e considerando a
importância cada vez maior da colistina para tratar de pacientes humanos gravemente
enfermos, a Agência Europeia de Medicamentos (EMA) recomendou que todos os países
deveriam se esforçar para reduzir o uso de polimixinas tanto quanto possível porque a
colistina é um antibiótico de último recurso (EMA 2016a). Paralelamente, a EMA também
recomendou a recusa de novas e existentes Autorizações de Introdução no Mercado para
medicamentos veterinários contendo óxido de zinco. A recomendação se baseia
principalmente no risco para o meio ambiente, além do possível risco de seleção para
resistência antimicrobiana associada ao uso de óxido de zinco (EMA 2016a, b).

Os esforços globais incluem a Declaração Política das Nações Unidas sobre AMR de
2016 e o Plano de Ação Global da OMS de 2015 sobre AMR, que foi subsequentemente
adotado pela Organização Mundial de Saúde Animal (OIE) e pela Organização para
558
Alimentação e Agricultura (FAO). AMR também foi abordado nos fóruns do G7 e G20.
Além disso, os planos de ação sobre resistência antimicrobiana, como os lançados pela
FAO, OMS e a UE (UE 2017), também permitem e motivam os países a fornecer ações
de apoio para reduzir as infecções e, portanto, a necessidade de antimicrobianos. A
indústria está claramente trabalhando em conjunto para garantir que nossos sistemas
agrícolas sejam sustentáveis e saudáveis. De acordo com este “Plano de Ação Único de
Saúde Europeu sobre RAM”, as ações de apoio das Agências Europeias incluirão
prevenção de infecções, medidas de biossegurança e práticas de controle na saúde
humana e na pecuária, incluindo a aquicultura, para reduzir infecções e, portanto, a
necessidade de antimicrobianos (UE 2017). Em medidas de biossegurança, deve-se
monitorar as seguintes características críticas.

3.1 Bem-estar Animal

As cinco liberdades propostas pelo FAWC (1993) abrangiam (1) Livre de sede, fome e
desnutrição; (2) Livre de desconforto; (3) Livre de dor, lesão e doença; (4) Liberdade para
expressar comportamento normal, e (5) Livre de medo e angústia, elementos combinados
de bem-estar que são uma estrutura muito útil para identificar os principais problemas de
bem-estar em um determinado sistema de produção e também como ponto de partida
para selecionar os principais indicadores de bem-estar. O bem-estar de um indivíduo é o
seu estado no que diz respeito às suas tentativas de lidar com o meio ambiente. Muitas
das mudanças comportamentais e condições médicas associadas ao envelhecimento
podem prejudicar o bem-estar do animal conforme definido pelas cinco liberdades (FAWC
1993). O bem-estar animal tem um grande impacto na eficiência e saúde da produção.
Embora a maioria de nós saiba sobre todos esses fatores de estresse para os animais, é
muito comum vir a fazendas, rebanhos ou rebanhos onde o manejo e os fatores de
estresse que levam à doença não são corrigidos, mas os animais são alimentados com
antibióticos para reduzir doenças e mau desempenho. Por exemplo, várias doenças
podem resultar em dor ou interferir na expressão do comportamento normal. Em leitões,
reduzir o estresse, principalmente no momento do desmame, aumentando a idade de
desmame e uma nutrição ideal também são benéficos, principalmente para reduzir a
necessidade de antimicrobianos para controlar a diarreia pós-desmame. Em aves, a
enterite necrótica subclínica que produz condições como “cama úmida” é um desafio
constante na produção de frangos de corte, fortemente ligada a lesões de “almofada
alimentar” e preocupações com o bem-estar para a qualidade do ar.

559
3.2 Prevenção de doenças

As doenças e infecções animais devem ser evitadas garantindo a biossegurança,

seguindo boas práticas de produção e manejo e implementando programas integrados de
controle de doenças para minimizar a ocorrência de doenças e erradicar doenças
endêmicas (EC 2015). Soluções nutricionais para preparar o intestino para um influxo de
bactérias podem ser cruciais. As medidas de biossegurança que garantam os padrões de
higiene e as situações de alojamento que respeitem o bem-estar e bem-estar do animal
devem ser as mais elevadas possíveis. A prevenção de doenças por meio de medidas de
biossegurança é considerada um fator importante para a melhoria do estado geral de
saúde na pecuária. Animais mais protegidos, por sua vez, diminuem a necessidade de
medicamentos preventivos ou subterapêuticos. As medidas de biossegurança podem
influenciar a saúde animal para melhor e reduzir a necessidade potencial de
antimicrobianos. Portanto, a implementação de medidas de biossegurança, boas práticas
agrícolas e planejamento de saúde do rebanho que previnem infecções reduzem a
necessidade de antimicrobianos (EC 2015).

3.3 Limpeza e Desinfecção

Uma boa biossegurança requer um protocolo de desinfecção. Um protocolo implementado

corretamente pode ser um método econômico de redução de organismos patogênicos e é
uma etapa importante em qualquer programa de gerenciamento de risco biológico. Todo
protocolo de biossegurança deve incluir um agente de higiene e desinfecção corretamente
selecionado, que deve prevenir a proliferação de microrganismos patogênicos. Um
material desinfetante eficaz reduz a formação de amônia, absorve a umidade excessiva,
diminui o valor do pH da cama, contribui para uma qualidade do ar significativamente
melhor por meio da minimização de emissões prejudiciais e melhora o desempenho geral
do animal. Aplicado regularmente, o desinfetante pode melhorar o status de
biossegurança e minimizar a propagação de doenças. As medidas de higiene e
biossegurança, incluindo medidas destinadas a prevenir a introdução de infecções,
incluem manter roupas e botas separadas para cada unidade; controlar ou limitar o
acesso para minimizar a exposição intra e interespécies a animais e a transmissão de
patógenos (por exemplo, por artrópodes e roedores); lavar as mãos (por exemplo, antes
de preparar ou comer comida humana), com instalações de desinfecção das mãos (sabão
líquido, água quente e fria) disponíveis perto do local de trabalho; assegurar a remoção
rápida e a prevenção do acesso aos animais mortos; aplicar o sistema “todos dentro todos
fora” em cada unidade; seguir um cronograma rigoroso de limpeza e desinfecção; e
realização de controles de desinfecção regulares (EC 2015). Uma ação-chave que se
560
destaca acima de tudo em termos de prevenção da resistência aos antibióticos é
estabelecer um ambiente melhor e mais saudável por meio de melhores práticas de
higiene e biossegurança.

3.4 Boas Práticas de Higiene e Meio Ambiente

Em sistemas de produção com alta densidade de animais ou baixa biossegurança, o

desenvolvimento e a disseminação de doenças infecciosas são favorecidos, levando mais
frequentemente ao tratamento antimicrobiano e à prevenção dessas doenças e
fornecendo condições favoráveis para a seleção, disseminação e persistência de
bactérias resistentes a antimicrobianos (Rose e Nunan 2016). O objetivo de reduzir o uso
de antimicrobianos também está alinhado ao bem-estar animal, visando à redução da
densidade populacional dos animais de criação. A densidade (um parâmetro de bem-estar
adequado) e as condições higiênicas do alojamento, material de cama, temperatura,
umidade e qualidade do ar são apenas algumas das condições ambientais com grande
influência na produção, saúde e bem-estar dos animais. O excesso da população é muito
comum, afetando a temperatura e a higiene do ambiente e, muitas vezes, reduz a limpeza
e a desinfecção entre lotes de animais. A superlotação também impõe estresse social aos
animais, pois pode haver espaço insuficiente para comer e descansar. A superlotação e
um grande número de animais facilitam a transmissão de doenças e a mutação do
patógeno para maior virulência. Manter as densidades da população baixas e evitar
tamanho excessivo de rebanho ou manada, e evitar a mistura dentro do rebanho ou
rebanho, ou colocar o estoque em quarentena por um período apropriado antes da
mistura, são medidas de biossegurança importantes (EC 2015). Um período de
quarentena e estabilização pode ajudar a garantir que a nova população esteja saudável
e livre de doenças (Turner 2018).

Uma temperatura ambiente impecável adapta-se perfeitamente à idade e peso dos

animais. Boa qualidade do ar e ventilação são essenciais para manter os animais
saudáveis e vigorosos. A separação física de animais saudáveis e doentes e o manuseio
e atendimento das necessidades de animais saudáveis primeiro, ajudará a reduzir a
transmissão de doenças dentro de um grupo de animais (Turner 2018). Em aves, por
exemplo, a ventilação deve ser administrada de forma adequada para minimizar o
impacto negativo das concentrações de amônia, poeira, umidade da cama, umidade
excessiva ou gases de combustão. Um ambiente quente e úmido também é um ambiente
perfeito para o desenvolvimento e a propagação de bactérias patogênicas.

Em galinhas poedeiras, a operação ideal do equipamento de incubação e o ambiente

ideal de incubação reduzem a necessidade de antibióticos de suporte. O estabelecimento
561
e a manutenção de uma boa função intestinal são de vital importância na redução da
morbidade e mortalidade de pintinhos neonatais. Antimicrobianos não devem ser usados
rotineiramente na chegada de pintinhos de um dia à granja. O uso profilático de
antimicrobianos nesta fase pode ser evitado garantindo uma boa higiene do incubatório e
por meio do bom gerenciamento da produção de pintinhos de um dia (por exemplo,
controle de temperatura, higiene, estimulação de beber e comer) (EC 2015).

Em bovinos e pequenos ruminantes, a medicação em massa ou em grupo de bovinos é

rara, embora bezerros de vitela possam ser submetidos a tratamento em grupo com
antimicrobianos. O tratamento dado às vacas na secagem é de particular importância.
Essas medidas incluem (1) evitar o uso profilático de antimicrobianos em bezerros recém-
nascidos (por exemplo, antimicrobianos adicionados a substitutos do leite) por meio da
implementação de boas práticas agrícolas (por exemplo, garantir altos padrões de
higiene); (2) desenvolver estratégias preventivas (por exemplo, vacinações, alimentação
de bezerros com colostro), especialmente para a distribuição de vitelos e bovinos de
corte; (3) evitar o tratamento sistemático das vacas na secagem, considerando e
implementando medidas alternativas caso a caso; (4) estabelecimento de medidas de
higiene completas e boas práticas agrícolas e estratégias de manejo para minimizar o
desenvolvimento e disseminação da mastite em vacas leiteiras; (5) promoção de testes de
diagnóstico rápido (por exemplo, testes padronizados com meios cromogênicos) para
identificar patógenos causadores de mastite para minimizar antimicrobianos
intramamários e injetáveis em vacas leiteiras; e (6) evitar alimentar bezerros com leite
residual de vacas tratadas com antimicrobianos (EC 2015). Em vacas leiteiras, piso duro,
cama inadequada e condições de superlotação podem aumentar a probabilidade de
desenvolverem mastite ou claudicação. O alojamento deve, portanto, ser projetado em
torno do conforto da vaca, com boa ventilação, umidade adequada, cama de alta
qualidade e boas práticas de higiene (Rose e Nunan 2016).

3.5 Imunidade

As vacinas têm se mostrado muito importantes e econômicas na prevenção do

aparecimento e disseminação de doenças infecciosas e, portanto, têm grande potencial
para reduzir a incidência de RAM; portanto, uma boa imunidade sistêmica é essencial. A
Comissão Europeia declara no “Plano de Ação Único de Saúde” (UE 2017) que as
vacinas devem ser ainda mais reforçadas para diminuir o uso de antimicrobianos nesses
setores. No entanto, as medidas de reforço imunológico não se limitam a vacinações, mas
incluem seleção genética, animais livres de patógenos, nutrição, prevenção de
micotoxinas, redução do estresse, densidade de estocagem e fatores ambientais. A
562
biossegurança e o aumento do uso de vacinação foram percebidos como as alternativas
mais promissoras aos antimicrobianos na produção industrial de suínos e aves, com base
na eficácia combinada, viabilidade e retorno sobre o investimento. Em pintinhos, por
exemplo, o treinamento da equipe do incubatório para monitorar os fatores críticos para a
qualidade dos pintinhos, bem como o treinamento em técnicas de vacinação, permitem
que os produtores avícolas comecem com aves saudáveis. Quando possível, estratégias
alternativas para controlar a doença que se provaram ser igualmente eficientes e seguras
(por exemplo, vacinas) devem ser preferidas ao tratamento antimicrobiano. A gestão da
vacinação também deve incluir medidas para evitar reações ao estresse e melhorias para
a disponibilidade de vacinas autógenas (EC 2015).

3.6 Gestão

O gerenciamento é provavelmente a melhor alternativa, mas não é tão fácil de aplicar,

pois inclui muitas características diferentes. A gestão deve garantir uma boa higiene e
ambiente (por exemplo, quando os porcos são desmamados e colocados em creches). Os
porcos devem encontrar comida e água o mais facilmente possível, e os comedouros
devem permitir que eles comam em grupos, como fazem durante a lactação.
Provavelmente, a melhoria mais importante no manejo é ensinar o porco a comer ração. É
reconhecido que se os porcos sabem comer e beber antes do desmame, o período de
jejum é reduzido e com ele, todos os problemas derivados. O treinamento do leitão para
comer deve começar muito cedo, durante a lactação (Oostindjer et al. 2011). Garantir que
a alimentação animal seja preservada e que a água seja limpa e não contaminada
minimizará a propagação de doenças dentro de um grupo de animais (Turner 2018).
Estimulá-los a comer devagar deve incluir habilidades nutricionais para formular uma dieta
atraente e digerível, mas também permitir que eles tomem ração e água ao mesmo
tempo, como quando amamentam de sua mãe. A apresentação líquida em uma
concentração semelhante ao leite materno pode facilitar o treinamento e aumentar a
ingestão de ração enquanto ainda estão amamentando, permitindo que alcancem seu
potencial genético máximo. Esta apresentação antes do desmame não é simples, pois
deve garantir que a ração permaneça limpa e atraente para os leitões. O manejo do
desmame em casos de diarreia de desmame recorrente deve ser reavaliado,
considerando em particular a higiene, idade dos porcos, uso de sistemas "all-in all-out",
redução do estresse sofrido pelos animais e alternativas ao uso profilático de
antimicrobianos (EC 2015).

563
3.7 Nutrição

Os operadores das empresas de alimentos para animais devem cumprir os requisitos

legais de higiene dos alimentos para animais, implementar as melhores práticas na
produção de alimentos para animais seguros e nutricionalmente balanceados e garantir a
formulação adequada dos alimentos. Devem também garantir que todos os ingredientes
atendam aos padrões exigidos e que o processo de fabricação não permita que a ração
seja contaminada com agentes deletérios, que podem comprometer a segurança da
ração. Os operadores de empresas de alimentos para animais que produzem alimentos
medicamentosos devem ser aprovados para o seu fabrico. Eles devem seguir todos os
requisitos legais para alimentos medicamentosos e só podem produzir alimentos
medicamentosos a partir de medicamentos veterinários autorizados e de acordo com a
prescrição de um veterinário. Eles devem seguir boas práticas de fabricação e garantir a
mistura adequada para garantir a homogeneidade dos antimicrobianos na ração, bem
como evitar a contaminação cruzada e minimizar a transferência de antimicrobianos para
lotes subsequentes de ração (Dorne et al. 2013; EC 2015).

As dietas altamente digestíveis sempre foram consideradas um bom instrumento para

prevenir problemas digestivos. A biodisponibilidade dos aminoácidos sintéticos tornou
possível formular dietas com baixo teor de proteína bruta e consideradas mais seguras,
mas o desempenho dos suínos permanece inalterado. Mesmo as dietas de baixa proteína
não impedirão totalmente a fermentação da proteína no intestino, pois a digestibilidade da
proteína não será de 100%. A inclusão de níveis mais elevados de fibra pode ajudar na
manutenção da estabilidade intestinal. O tipo ou nível de fibra seria mais interessante em
dietas pós-desmame, mas precisa de mais investigação (Gloaguen et al. 2014). Deve-se
destacar que o colostro fornecido ao leitão ou bezerro nas primeiras 24 horas após o
nascimento é a refeição mais importante da vida do animal, pois é vital para o
desenvolvimento do intestino. Um ambiente e alimentação higiênicos são cruciais para
animais jovens com sistema imunológico subdesenvolvido.

Além de uma boa nutrição e um programa anticoccidiano adequado, a engorda de

galinhas requer eubióticos para evitar problemas com cama molhada e limitar o uso de
antibióticos. O efeito sinérgico de certos ácidos orgânicos com óleos essenciais é bem
conhecido e agora são amplamente usados como “intensificadores da saúde intestinal”. A
combinação de compostos específicos de óleo essencial e ácido benzóico é
particularmente eficaz em melhorar a utilização de nutrientes, melhorando assim o
desempenho e reduzindo os tratamentos de rebanho.

564
A abordagem eubiótica deve ser incluída em uma estratégia alimentar completa,
envolvendo com precisão todos os outros componentes nutricionais críticos, incluindo
micronutrientes e enzimas. A nutrição é apenas parte da solução e precisa ser integrada
em uma abordagem holística sustentável, incluindo vacinação adequada, gerenciamento
da fazenda e biossegurança.

3.8 Estresse

O transporte e o comércio de animais vivos impõem alto estresse fisiológico aos animais e
criam um alto risco de propagação de doenças, o que cria a necessidade de
medicamentos antimicrobianos para proteger os animais contra doenças. Os sistemas de
produção atuais têm permitido o transporte e o comércio de animais vivos em detrimento
dos animais. O transporte de animais jovens geralmente inclui medicamentos antibióticos
profiláticos. Os antimicrobianos são mais frequentemente usados em porcos para aliviar a
diarreia do desmame, infecções intestinais associadas a Lawsonia intracellularis e
doenças respiratórias frequentemente associadas ao transporte, além do estresse
causado quando porcos originários de diferentes fazendas são reunidos ou quando os
animais são alojados com ventilação inadequada alimentação, ou medidas de
biossegurança insuficientes (EC 2015). Esses sistemas de produção devem minimizar
todo o transporte desnecessário de animais durante a criação. No entanto, existem
vantagens em sistemas de produção segregados e, portanto, mais foco deve ser colocado
em minimizar o estresse e a propagação de doenças através do comércio e transporte de
animais e minimizar o tempo de transporte. Situações estressantes podem enfraquecer o
sistema imunológico dos animais e torná-los mais suscetíveis a infecções; portanto, para
evitar estresse, o transporte de animais deve ser limitado, minimizando o tempo de
transporte e evitando a superlotação) (EC 2015).

4. Reduzindo o uso de antibióticos

Antibióticos profiláticos têm sido usados para vários desafios do trato digestivo na
produção animal, como enterite necrótica em aves, diarreia pré desmame de bezerros e
diarreia pré e pós desmame em leitões. Assim, o foco na saúde intestinal é fundamental
para alcançar uma produção sustentável e eficiente sem o uso rotineiro de antibióticos.
Por exemplo, o ácido butírico diminui a incidência de enterite necrótica subclínica causada
por C. perfringens (Timbermont et al. 2009). Para reduzir o uso de antibióticos, o sistema
de produção precisa ser saudável, sustentável e respeitar as necessidades dos animais.

565
A redução do risco de contrair uma infecção pode permitir a redução da necessidade de
tratamento antimicrobiano dos animais. Foi demonstrada uma ligação clara entre a
biossegurança e os critérios relacionados à produção e ao tratamento antimicrobiano em
rebanhos suínos, indicando diferenças substanciais na aplicação atual de biossegurança
em rebanhos suínos. Aspectos de biossegurança externa e interna foram positivamente
associados ao ganho de peso diário e negativamente associados à FCR,
respectivamente. As pontuações internas foram negativamente associadas à incidência
do tratamento da doença, sugerindo que a melhoria da biossegurança pode reduzir o uso
profilático de antimicrobianos (Laanen et al. 2013). O uso reduzido e prudente de
antimicrobianos na pecuária é um ponto discutível, principalmente em relação à saúde
pública. Sabe-se que antibióticos antes eficazes estão perdendo força e a saúde se
aproxima de uma situação semelhante à “era pré antibiótica”. Os antibacterianos têm sido
e são as melhores opções de tratamento para doenças bacterianas graves. Campanhas
de administração antibacteriana internacionais, nacionais, regionais e locais foram
desenvolvidas para encorajar o uso prudente e responsável de antibióticos, limitando a
exposição desnecessária, com o objetivo final de preservar sua eficácia para infecções
graves e potencialmente fatais.

Em junho de 2017, a UE adotou o “Plano de ação europeu único para a saúde contra a
resistência antimicrobiana (AMR)” (UE 2017). Esta política foi reforçada com o plano de
ação da Comissão de 2011, notável por sua “abordagem de saúde única”, abordando a
AMR em humanos e animais. “Uma saúde” é um termo usado para descrever um
princípio que reconhece que a saúde humana e animal estão interligadas, que as doenças
são transmitidas de humanos para animais e vice-versa e, portanto, devem ser
combatidas em ambas. A “abordagem de saúde única” também abrange o meio ambiente,
outro elo entre humanos e animais e também uma fonte potencial de novos
microrganismos resistentes. O novo plano de ação único da UE em matéria de saúde
assenta em três pilares: (1) tornar a UE uma região de boas práticas em matéria de
resistência antimicrobiana: melhores dados e sensibilização; melhor coordenação e
implementação das regras da UE; melhor prevenção e controle; abordar melhor o papel
do meio ambiente; uma parceria mais forte contra a resistência antimicrobiana e melhor
disponibilidade de antimicrobianos; (2) impulsionar a pesquisa, o desenvolvimento e a
inovação em AMR: novos modelos e incentivos econômicos, melhores medidas de
detecção e controle; novos antimicrobianos, testes de diagnóstico rápido, vacinas e
terapias alternativas; AMR no meio ambiente; e (3) definição da agenda global sobre a
resistência antimicrobiana: maior presença global da UE, parcerias; parceria bilateral mais
forte para cooperação mais forte; cooperar com os países em desenvolvimento; e
566
desenvolver uma agenda global de pesquisa (UE 2017). Este novo plano de ação
permitirá e motivará os países a fornecer ações de apoio, incluindo prevenção de
infecções, medidas de biossegurança e práticas de controle na saúde humana e na
pecuária para reduzir infecções e, portanto, a necessidade de antimicrobianos.

A maior falha dos sistemas de produção animal é que eles foram projetados e utilizados
de uma forma que requer antibacterianos para manter a produção, a saúde e o bem-estar
dos animais. A maioria dos antibacterianos usados na produção animal não é usada para
tratar animais doentes, mas sim para tratar sistemas de produção insalubres. O objetivo
de reduzir o uso de antibióticos deve ser reformulado para produzir sistemas de produção
saudáveis. O conhecimento e as ferramentas para criar esses sistemas e muitos
produtores podem demonstrar alta produtividade e custo-benefício em sistemas de
produção que eliminaram o uso profilático e metafilático de antibióticos. Na busca por um
nível mais alto de saúde e produtividade, e fornecendo os produtos de qualidade que os
consumidores modernos estão solicitando, é hora de alternativas aos antibióticos antes de
agir. A chave para o sucesso em um programa de redução de antibióticos é reunir uma
equipe incluindo veterinários, nutricionistas, consultores (governamentais, acadêmicos ou
da indústria), engenheiros de construção, proprietários, gerentes e trabalhadores. Este
termo “Uma Saúde” é mundialmente reconhecido, tendo sido amplamente utilizado na UE
e na Declaração Política das Nações Unidas de 2016 da reunião de alto nível da
Assembleia Geral sobre resistência antimicrobiana. O projeto de declaração política
reconhece a “abordagem de saúde única”, enfatizando que isso requer uma ação
multissetorial coerente, abrangente e integrada, porque a saúde humana, animal e
ambiental estão interligadas. Duas mensagens principais foram levantadas pelo Grupo de
Coordenação Interinstitucional sobre AMR: (1) a resistência antimicrobiana é uma questão
global e multissetorial que afeta todos os países e requer ação coerente e abrangente em
humanos, animais, plantas e saúde ambiental no âmbito de uma “abordagem de saúde
única” e (2) uma resposta bem-sucedida à AMR abordará não apenas os antimicrobianos,
mas também diagnósticos, vacinas e alternativas aos antibióticos para a saúde humana e
animal (IACG 2018).

A redução do uso de antibióticos na produção de alimentos para animais tornou-se um

objetivo significativo de todos os produtores de gado. Os veterinários e produtores de
animais domésticos, ao usarem um medicamento veterinário, devem aplicar a forma
farmacêutica, a via de administração ou o regime de dosagem conforme estabelecido; o
intervalo de segurança indicado na rotulagem do produto aplica-se apenas àquela
formulação particular quando administrada pela via recomendada e de acordo com o

567
regime de dosagem para garantir que os produtos de origem animal não sejam
contaminados com resíduos de medicamentos. A alteração de qualquer um desses
fatores afeta o comportamento farmacocinético do medicamento no animal e invalida o
período de carência (Anadón et al. 2018). As preocupações com o desenvolvimento e a
disseminação de genes resistentes, independentemente do uso prudente e responsável
de antibacterianos, criaram um clima em que a redução geral de antibióticos se tornou
uma meta de produtores, varejistas e consumidores de alimentos de origem animal.

O primeiro passo em direção ao objetivo de redução de antibióticos são melhores

estratégias de prevenção de doenças. O uso preventivo de antibióticos ou para melhorar
o desempenho de animais produtores de alimentos não deve, em particular, ser permitido.
O período após o desmame é conhecido pela aplicação regular de antibióticos e é um
alvo perfeito para a redução de antibióticos. A Organização Mundial da Saúde Animal
(OIE) e a Comissão Europeia (EC), bem como a OMS, propuseram estratégias para a
questão da resistência antimicrobiana (UE 2017): (1) boa governação e princípios de
utilização de antibióticos; (2) monitoramento do uso e resistência aos antimicrobianos; (3)
prevenção inespecífica, intervenções no nível de produção para reduzir os riscos de
desenvolvimento de doenças na fazenda (boas moradias e gestão para reduzir os
desafios ambientais e o estresse, nutrição correta, dietas para biossegurança); e (4)
prevenção específica, intervenções específicas de doenças ou patógenos para eliminar
ou reduzir a incidência de doenças e, portanto, evitar a necessidade de antibióticos. Esta
etapa pode ser focada no controle de infecções bacterianas primárias ou controle de
doenças virais que podem desencadear desfechos clínicos mais graves. Veterinários e
agricultores têm um impacto direto na implementação de programas de prevenção para
reduzir a dependência de antibióticos usando quatro etapas principais. (1) Diagnóstico:
Veterinários especializados com um conhecimento profundo da situação da doença em
uma fazenda podem coletar amostras e realizar testes para determinar a causa de uma
infecção ou doença. Frequentemente, essas doenças são multifatoriais e toda a
propriedade deve ser considerada na análise (cadeia de infecção). Se uma causa
bacteriana for encontrada, o laboratório pode testar o tratamento antimicrobiano mais
adequado (ou seja, culturas convencionais e teste de sensibilidade antimicrobiana, ou C &
AST): cada bactéria pode ser relatada como suscetível, intermediária ou resistente. Mais
precisa é a determinação da concentração inibitória mínima (MIC), a concentração mais
baixa de um antimicrobiano que inibe o crescimento da bactéria. (2) Conselhos sobre
controle: Uma vez que a situação seja totalmente compreendida, as intervenções podem
ser implementadas. Intervenções específicas, por exemplo, podem ser o tratamento
curativo com um antibiótico usando princípios de uso prudente para interromper a doença
568
e o sofrimento e mortalidade. O uso de vacinas adequadas pode resultar em menos uso
de antibióticos na fazenda. As intervenções gerais são frequentemente tão importantes,
por exemplo, minimizar a exposição a patógenos (ou seja, biossegurança interna:
ventilação e higiene para reduzir a presença, carga e disseminação de patógenos) e uma
boa biossegurança externa evitará que novos patógenos entrem no sistema de produção.
Um estudo de trabalho recente que mediu os níveis de implementação de medidas de
biossegurança na produção de suínos em quatro países da UE (Postma et al. 2016b)
também examinou associações entre conformidade de biossegurança e características da
fazenda e da produção. Os resultados sugeriram melhorias na biossegurança. Melhores
práticas de biossegurança e manejo com foco na prevenção podem reduzir o uso de
antimicrobianos e permitir um melhor estado de saúde geral e maior produção e bem-
estar animal. A prevenção é melhor do que a cura (Collineau et al. 2017). (3) Monitorar os
resultados do tratamento e os resultados do teste de sensibilidade aos antimicrobianos
(AST) por meio de acompanhamento de rotina e periódico, com revisão dos planos de
controle da doença para otimizar a prevenção, para que um veterinário possa aconselhar
o melhor tratamento com antibióticos. (4) Educação: os produtores de suínos precisam
ser informados sobre as melhores práticas e compreender a legislação e os
desenvolvimentos de saúde pública que afetam seus negócios.

Em um esforço para reduzir o uso de antimicrobianos, existe uma excelente oportunidade

para otimizar a saúde, o bem-estar e a produtividade dos animais de produção. A
biossegurança, a imunidade ao nível do rebanho, os sistemas de alimentação e
alimentação, os níveis de estresse, a saúde individual dos suínos e as condições
ambientais influenciam a saúde e a produtividade animal e todos interagem uns com os
outros. Muitos recursos e fontes de informação podem ajudar um produtor individual a
otimizar e manter altos níveis de saúde e bem-estar em sistemas de produção que não
requerem medicação antimicrobiana. Especialistas europeus em saúde suína
recentemente classificaram soluções alternativas para antimicrobianos em um consórcio.
As cinco principais medidas em termos de eficácia percebida foram (1) biossegurança
interna aprimorada; (2) biossegurança externa aprimorada; (3) melhoria das condições
climáticas/ambientais; (4) alta saúde/livre de patógenos específicos/erradicação de
doenças; e (5) vacinação aumentada (Postma et al. 2015). Esses especialistas indicaram
que a biossegurança é a maior prioridade como uma solução alternativa aos
antimicrobianos (Postma et al. 2016b). Demonstrou-se que níveis mais altos de
biossegurança em fazendas de suínos estão associados a níveis mais altos de produção
e diminuição do uso de antimicrobianos e resistência (Postma et al. 2016a). Uma boa
imunidade desenvolvida a várias doenças é essencial na produção industrial de suínos.
569
As vacinas têm se mostrado muito econômicas na prevenção do aparecimento e
disseminação de doenças infecciosas e, portanto, são cruciais no sistema moderno de
produção de saúde. Por outro lado, o estresse pode ter um impacto negativo no
desenvolvimento da barreira intestinal.

Em sistemas de produção animal com alta densidade de animais ou baixa biossegurança,

o desenvolvimento e a disseminação de doenças infecciosas são favorecidos, levando
mais frequentemente ao tratamento antimicrobiano e à prevenção dessas doenças
(Davies et al. 2009), pois essas condições favorecem a seleção, disseminação e
persistência de bactérias resistentes a antimicrobianos. Algumas dessas bactérias são
capazes de causar infecções em animais e, se zoonóticas, também em humanos.
Bactérias de origem animal também podem ser uma fonte de transmissão de genes de
resistência a patógenos humanos e animais. Em muitos casos, essa doença pode ser
prevenida com bom manejo, um bom ambiente e higiene, em vez do uso profilático de
antibióticos de rotina (Aarestrup 2004). As medidas positivas que podem reduzir a doença
em animais de criação incluem o seguinte. (1) Mudança para sistemas de produção
extensivos: sistemas de alto bem-estar, caipiras e orgânicos podem atingir níveis mais
elevados de saúde animal junto com níveis mais baixos de uso de antibióticos do que os
sistemas de produção intensiva. Estudos recentes no Reino Unido, Noruega e Suécia
descobriram que fazendas de leite orgânico, onde o tratamento preventivo com
antibióticos de vacas secas é menos provável de ser usado, alcançam o mesmo nível de
controle da mastite que fazendas convencionais que normalmente usam antibióticos
profiláticos de rotina (Van Borel e Sorensen 2004; Cogliani et al. 2011; Hovi et al. 2003).
(2) Redução do estresse: o estresse pode causar comprometimento imunológico dos
animais, enquanto a redução do estresse pode melhorar a imunocompetência e a
capacidade dos animais de lutar contra as doenças. (3) Boas práticas de desmame: Se
for muito precoce ou mal administrado, o desmame pode causar estresse e levar a
doenças (Davies et al. 2009). O desmame posterior ajuda a garantir que os animais sejam
mais independentes de sua mãe nutricional, imunológica e fisiologicamente, o que reduz o
estresse e o risco de diarréia. A “Aliança para Salvar nossos Antibióticos” no setor de
laticínios do Reino Unido identificou três medidas potenciais para otimizar o bem-estar
animal e a imunidade, para mitigar o risco de doenças zoonóticas e para reduzir a
necessidade de antibióticos neste setor: (1) os animais devem ser mantido em pastagem;
(2) passar para a terapia de vacas secas seletivas; e (3) maximizar a saúde, o bem-estar
e a higiene do rebanho (Rose e Nunan 2016).

570
Os veterinários são responsáveis pela biossegurança interna, evitando a disseminação de
patógenos em fazendas ou grupos de animais, bem como a implementação de vacinas
contra doenças para reduzir o uso de antibióticos. Medidas alternativas, em particular,
estratégias preventivas, também reduzem o uso de terapia antibacteriana. Intervenções
específicas do rebanho para reduzir substancialmente o uso de antimicrobianos na
produção de suínos foram seguidas sem impacto negativo no desempenho geral da
fazenda. Foi alcançada uma redução média de 47% do tratamento com antibióticos desde
o nascimento até o momento do abate (mais de 30% de redução do gasto médio com
antimicrobianos). Durante o estudo, não houve mudanças significativas na mortalidade,
ganho de peso diário e taxa de conversão alimentar; por outro lado, houve uma ligeira
melhora no número de leitões desmamados por porca por ano. Os produtores de suínos,
veterinários e consultores podem ver a redução da política de uso de antibacterianos
como uma chance de otimizar a produção e as abordagens de prevenção de doenças,
melhorando a sustentabilidade da agricultura e a saúde e bem-estar animal (Collineau et
al. 2017).

Tornou-se comum o desenvolvimento de alternativas aos antibióticos na alimentação,

conforme exigido pelos consumidores e pela legislação. Quando se trata de produção
animal sem antibióticos, veterinários, nutricionistas e produtores de animais usam várias
substâncias como ácidos orgânicos, enzimas, prebióticos e probióticos e aditivos
fitogênicos para rações para apoiar a saúde intestinal dos animais.

5. Microflora gastrointestinal
O intestino é o maior órgão interno e tem a superfície exposta mais extensa dentro do
corpo. É uma barreira seletiva com aspectos físicos, químicos, imunológicos e
microbiológicos onde a ração digerida e a água são absorvidas, mas os agentes
causadores de doenças devem ser mantidos sob controle. O intestino também é o maior
órgão imunológico do corpo e a localização de 70% das células imunológicas, sendo a
primeira linha de defesa ativa do corpo contra patógenos. Um intestino saudável, portanto,
não é apenas um intestino livre de doenças; mas também é um órgão digestivo eficaz que
pode oferecer uma boa proteção contra doenças e lidar com mudanças e tensões. A
microbiota gastrointestinal (GI) é crucial para o sistema imunológico do hospedeiro, seu
desenvolvimento fisiológico, saúde, nutrição e produtividade. Um intestino saudável com
uma composição microbiana equilibrada é fundamental para uma digestão e absorção de
nutrientes ideais. A ferramenta mais importante para um bom intestino saudável é fornecer
a melhor alimentação possível que atenda às necessidades nutricionais para a idade e
571
estágio de produção específicos do animal. Os sistemas de alimentação multifásicos e a
alimentação de precisão são ferramentas valiosas, não apenas para a produtividade, mas
também para a saúde. A alimentação adequada para os vários estágios de
desenvolvimento é muito importante, e os tempos de desmame e sistemas de desmame
em leitões e bezerros leiteiros devem permitir que os animais façam a transição de dietas
com leite para dietas baseadas em grãos.

A presença de microrganismos causadores de doenças (patógenos) no intestino não é

suficiente para causar doenças. Trilhões de microrganismos habitam o trato intestinal
(coletivamente chamados de “microflora intestinal”), formando um ecossistema complexo
que pode influenciar o sistema imunológico tanto dentro quanto fora do intestino e do
animal. Quando esta microflora intestinal é perturbada (disbiose), há um desequilíbrio
microbiano entre a microflora benéfica e os patógenos potenciais, podendo ocorrer
doenças. A disbiose, portanto, torna mais fácil para os patógenos danificarem as
estruturas e funções intestinais. Qualquer mudança na dieta leva a mudanças na
microflora, então as mudanças na dieta devem ser sempre graduais para permitir que a
microflora se adapte. Probióticos e mannan oligossacarídeos têm se mostrado benéficos
para a microflora e as estruturas intestinais, sendo ferramentas valiosas em sistemas de
produção livres de antibióticos.

A dieta animal deve incorporar substâncias eubióticas, como ácidos orgânicos,

probióticos, prebióticos e óleos essenciais para otimizar a funcionalidade GI, seja por
ação na barreira intestinal ou junções apertadas, ou modulando a composição da
microflora. Por exemplo, os ácidos graxos de cadeia curta (SCFA) reduzem a
permeabilidade paracelular na linha celular caco-2, possivelmente devido à promoção de
um fenótipo mais diferenciado; se houver tal efeito in vivo, pode ter consequências para a
biologia e a patobiologia da mucosa do cólon (Mariadason et al. 1997). No geral, a
microbiota GI tem grande influência no sistema imunológico do hospedeiro, seu
desenvolvimento fisiológico, saúde e nutrição e na produtividade animal. O controle da
comunidade microbiana do GIT com a inclusão de aditivos alimentares que abrangem
prebióticos, probióticos, fitobióticos e fagos pode aumentar o crescimento animal e o
controle de patógenos humanos e animais. Na verdade, o intestino do animal jovem é
exposto a bactérias do ambiente por meio da mãe, do cercado e da ração, sendo a
nutrição confiável para a mãe. Uma boa condição intestinal pode ajudar a superar os
estresses ambientais, de manejo e nutricionais, ajudando os animais a se manterem
saudáveis. O desmame cria um ponto de estresse no intestino imaturo e pode afetar a
microflora, portanto, a ingestão inicial é importante. Uma microflora diversa, por exemplo,

572
em galinhas, pode fornecer benefícios como exclusão competitiva de patógenos e
resistência natural a doenças (Patterson e Burkholder 2003). Em suínos, o microbioma
intestinal em animais jovens pode ser modificado pela composição dos glicanos da dieta,
resultando em uma capacidade funcional diferente do microbioma antes e após o
desmame. As vias de degradação do glicano diferem significativamente entre as dietas
(Frese et al. 2015).

As evidências sugerem que os eubióticos podem ser grandes contribuintes para a

funcionalidade gastrointestinal ideal, reduzindo a necessidade de antibióticos. Durante as
últimas décadas, o conceito de saúde intestinal tem despertado interesse crescente para
nutricionistas de animais. No entanto, a falta de uma definição clara redirecionou os
esforços científicos para a funcionalidade GI, definida como um estado estacionário onde
o microbioma e o trato intestinal do hospedeiro existem em equilíbrio simbiótico, o que
significa que o bem-estar e o desempenho do animal não são limitados pela disfunção
intestinal. Ocasionalmente, as bactérias patogênicas têm uma mudança para crescer, as
barreiras imunológicas são rompidas e o animal hospedeiro fica doente. O uso de
antibióticos tem influência nas populações microbianas, pois pode matar bactérias
patogênicas e inofensivas. A funcionalidade GI abrange fatores como digestão eficaz,
ausência de distúrbios intestinais, uma microbiota intestinal equilibrada e barreiras
químicas e físicas gastrointestinais ideais (Kamada et al. 2013).

Um estado geral de bem-estar, um sistema imunológico eficaz e um estado inflamatório e

oxidativo ideal também estão diretamente relacionados a um trato gastrointestinal
saudável. É necessário adotar uma abordagem totalmente integrada, na qual as práticas
de gestão e saúde incluam a nutrição para o sucesso. As alterações na composição das
comunidades bacterianas comensais estão associadas a uma maior suscetibilidade a
múltiplas doenças inflamatórias, alérgicas, metabólicas e infecciosas. Sinais derivados de
bactérias comensais podem influenciar a resposta imune do hospedeiro a patógenos
invasivos, agindo como um adjuvante para aumentar a resposta imune à infecção ou
fornecendo estimulação tônica para induzir a expressão basal de fatores necessários para
a defesa do hospedeiro. Por outro lado, alguns patógenos desenvolveram mecanismos
que podem utilizar bactérias comensais para estabelecer uma vantagem replicativa dentro
do hospedeiro. Assim, examinar a relação dinâmica entre o hospedeiro mamífero,
bactérias comensais e patógenos invasivos pode fornecer informações sobre a etiologia
da patogênese de uma infecção (Abt e Artis 2013).

Os eubióticos estão se tornando cada vez mais populares e usados globalmente. O termo
“eubiótico” foi introduzido há muitos anos para abranger todas as diferentes categorias de
573
produtos. Ácidos orgânicos e óleos essenciais atuam diretamente na modulação da flora
intestinal, levando a uma melhor digestibilidade, enquanto os probióticos são
notavelmente capazes de aumentar a resiliência de animais jovens a doenças entéricas
ou estresse estabelecendo, mantendo ou mesmo restaurando uma flora intestinal
equilibrada. Os prebióticos atuam especificamente no intestino posterior, reduzindo
indiretamente a pressão do patógeno, aumentando a morfologia intestinal e modulando a
resposta imunológica. É essencial entender os desafios que os produtores de aves e
suínos podem enfrentar para propor a combinação de eubióticos mais relevante e
eficiente. Seu uso integrado na alimentação animal tem grande potencial para a nutrição
animal.

Os antibióticos são uma das descobertas médicas mais importantes do século XX e

continuarão sendo uma ferramenta essencial para o tratamento de doenças animais e
humanas no século XXI. No entanto, a resistência antimicrobiana (AMR) entre os
patógenos bacterianos e as preocupações com seu uso extensivo em animais para
alimentação geraram interesse global na limitação do uso de antibióticos na pecuária.

Há uma preocupação mundial com o estado atual da AMR entre as bactérias zoonóticas
que circulam entre os animais produtores de alimentos, incluindo aves, bovinos de corte e
leite, cabras, ovelhas e populações de aquicultura (Gyles 2008; Prescott 2008). Embora
os antibióticos promotores de crescimento (AGP) tenham sido utilizados com sucesso
durante a produção de alimentos para animais, desde que sua eficácia foi descrita pela
primeira vez durante a década de 1940, os modos exatos de ação não são totalmente
compreendidos e são provavelmente multifatoriais. Nos últimos anos, muitas associações
veterinárias nacionais produziram “diretrizes de uso prudente e responsável” para
melhorar o uso de medicamentos antimicrobianos e diminuir a resistência, mas o impacto
dessas diretrizes é desconhecido. Dentro do movimento global em evolução para
“administração de antimicrobianos”, muitos aspectos do uso de antimicrobianos em
animais podem ser melhorados, incluindo o controle de infecção e redução do uso, com
vistas a reduzir a resistência e sua propagação e para preservar os medicamentos
antimicrobianos para o futuro (Prescott 2008). São necessários novos métodos de
intervenção, incluindo antimicrobianos e probióticos de espectro estreito que visam
seletivamente organismos patogênicos, evitando a morte de organismos benéficos.

A necessidade urgente de alternativas eficazes para AGP para manter os níveis atuais de
produção animal sem ameaçar a saúde pública deve estimular novas pesquisas (Millet e
Maertens 2011). Consequentemente, a descoberta de antimicrobianos adicionais da

574
natureza pode levar a novas alternativas veterinárias e médicas ainda mais abrangentes
aos antibióticos comuns.

6. Alternativas antibacterianas em saúde animal

As alternativas aos antibacterianos são amplas, mas provavelmente não existe nenhuma
tão poderosa, consistente nos resultados e fácil de usar quanto os antibióticos. As
seguintes alternativas diferentes a serem exploradas aqui incluem manejo, formulação de
rações, vacinas, ácidos orgânicos, enzimas, prebióticos, probióticos e aditivos fitogênicos
para rações.

6.1 Ácidos Orgânicos

Os ácidos orgânicos e seus sais são distribuídos na natureza e têm sido amplamente
aplicados em todo o mundo por mais de 50 anos como aditivos para rações (acidificantes)
e suplementos de água potável entre uma variedade de candidatos para a substituição e
redução do consumo de antibióticos na produção animal. Esses ácidos ocorrem como
constituintes normais de tecidos animais ou vegetais e alguns, particularmente ácidos
graxos de cadeia curta (SCFA), são produzidos naturalmente pelo corpo como
subprodutos no intestino posterior de animais e humanos através da fermentação
bacteriana intestinal grossa de fibras dietéticas, amidos e açúcar pelas bactérias da
microbiota, vírus e fungos que colonizam o trato gastrointestinal. SCFA e ácidos graxos de
cadeia média (MCFA) são absorvidos principalmente através da veia porta durante a
digestão de lipídios (Huyghebaert et al. 2011). Tem sido uma prática comum adicionar
ácidos orgânicos à ração animal; eles podem ter benefícios significativos na produção de
aves e suínos ao longo dos anos devido ao seu efeito conservante e à influência positiva
na taxa de crescimento e FCR (Panda et al. 2009; Adil et al. 2011; Chowdhury et al.
2009). Ácidos orgânicos têm sido usados em dietas de criação para melhorar a taxa de
crescimento e o FCR (por exemplo, 5% em leitões e 1–5% em porcos) durante o período
inicial de creche de leitões (Tabela 1). A inclusão de ácidos dietéticos pode ser
particularmente benéfica quando há um problema com a enterobactéria Escherichia coli
no período de creche. O mecanismo de ação não é claro, mas pode estar relacionado à
redução do pH no trato intestinal superior e, portanto, diminuir a proliferação potencial de
patógenos de microrganismos indesejáveis no estômago e no intestino delgado. A
acidificação da ração (efeito sanitizante da ração) e do GIT por meio do uso adequado de
acidificantes melhora a digestão e a absorção e auxilia a flora intestinal.

575
 Tabela 1 Ácidos orgânicos usados em animais para alimentação
Leitões Ácido acético, ácido cítrico, ácido fórmico, ácido fumárico, ácido propiônico, ácido tartárico
Aves Ácido cítrico, ácido fórmico, ácido láctico, ácido málico, ácido sórbico, ácido tartárico

Pode-se presumir que a água potável é o fator de risco mais importante para a
propagação da infecção por Campylobacter em bandos de frangos de corte, e a
acidificação na água potável com ácidos orgânicos pode afetar a infecção por
Campylobacter em pintinhos jovens. Os ácidos orgânicos na água potável foram capazes
de manter a água livre de Campylobacter. As preocupações com o bem-estar animal
sobre o consumo de água potável acidificada foram levadas em consideração avaliando-
se as lesões do epitélio do trato gastrointestinal. O consumo de água acidificada não
mostrou diferenças no número de células epiteliais danificadas no trato digestivo. Nos
conteúdos da colheita e cecal de galinhas, nenhuma diferença nos níveis de ácidos
graxos voláteis (AGV) foi observada entre os grupos de tratamento e controle
(Chaveerach et al. 2004).

A pesquisa mostrou que os efeitos benéficos dos ácidos orgânicos podem ser
aumentados usando-os como misturas em vez de um único ácido, por exemplo, para
melhorar o FCR em galinhas para engorda (Samanta et al. 2008). As misturas de ácidos
orgânicos representam uma série de valores de pKa e são usadas devido ao espectro
mais amplo de atividade. Atualmente, não é permitida a utilização de ácido benzóico como
aditivo para rações para animais. No entanto, os resultados sugerem que a
suplementação de ácido benzóico tem um efeito positivo tanto na emissão de amônia
quanto na conversão alimentar. Quimicamente, os ácidos orgânicos usados em animais
produtores de alimentos estão listados na Tabela 2.

Tabela 2 Grupos de ácidos orgânicos usados em animais para alimentação

Ácidos monocarboxílicos Ácido acético, ácido butírico, ácido fórmico, ácido propiônico
Ácidos carboxílicos Ácido cítrico, ácido láctico, ácido málico, ácido tartárico

O mecanismo de ação dos ácidos orgânicos não é claramente compreendido, mas pode
ser atribuído à sua atividade antibacteriana. Vários mecanismos possíveis foram
resumidos: (1) redução do nível de pH do trato gastrointestinal superior (cultura, pró-
ventrículo, moela) e alterações fisiológicas associadas na mucosa intestinal; (2) alterar a
microflora intestinal matando diretamente através da penetração na parede celular ou
modificando indiretamente o pH e reduzindo o número de bactérias patogênicas,
aumentando as espécies benéficas tolerantes a ácidos, como Lactobacillus spp., E
reduzindo a competição por nutrientes pelos micróbios alterados; (3) aumentar a
576
digestibilidade dos nutrientes, elevando a retenção de proteína e matéria seca,
melhorando a absorção de minerais e a utilização de fósforo; e (4) melhorar a saúde
intestinal por meio de efeitos diretos nas células epiteliais (por exemplo, SCFA são uma
fonte de energia direta para o crescimento de células epiteliais) (Gadde et al. 2017). No
geral, as variáveis que influenciam a atividade antibacteriana (Huyghebaert et al. 2011)
estão listadas na Tabela 3.

Tabela 3 Variáveis que influenciam a atividade antibacteriana de ácidos orgânicos

Fórmula química
Valor pKa do ácido orgânico
Forma química (esterificada ou não; sal ácido, revestido ou não)
Peso molecular
O valor MIC relacionado ao microrganismo do ácido
A natureza do microorganismo
Espécies de animais
Capacidade tampão do alimento

SCFA, com um comprimento de cadeia inferior a 6 átomos de carbono, e ácidos graxos

de cadeia média (MCFA), com um comprimento de cadeia entre 8 e 12 átomos de
carbono, são amplamente utilizados na nutrição animal. Os campos de aplicação e o
efeito dos respectivos ácidos variam amplamente; cada ácido orgânico pode ser utilizado
para diferentes fins e possuem diversas propriedades de acordo com suas características
químicas. Suplementos alimentares de misturas de ácidos orgânicos são usados para
tornar seu espectro mais amplo e combinar as boas qualidades dos diferentes ácidos. No
entanto, efeitos sinérgicos podem ser criados por seleção direcionada e combinação de
ácidos (Huyghebaert et al. 2011). Os efeitos benéficos podem ser atribuídos a vários
fatores, como as taxas de inclusão, a fonte dos ácidos orgânicos e a capacidade tampão
de outros ingredientes da dieta. Os SCFA afetam positivamente a microbiota e modulam
as respostas imunológicas no intestino. A ação antimicrobiana dos ácidos orgânicos na
ração ou água potável ocorre por meio da redução do pH, redução da capacidade de
tamponamento da alimentação e um efeito direto na população microbiana. Ainda, mais
importante é a atividade dos ácidos orgânicos dentro do trato GI animal.

A atividade antimicrobiana dos ácidos orgânicos depende do valor de pKa de cada ácido.
A um pH igual ao valor de pKa, metade do ácido presente é dissociado. Ácidos orgânicos
fortes (baixo pKa) em pH intestinal normal estão principalmente em uma forma
dissociada. Assim, são ácidos redutores do pH e têm efeito bacteriostático. Ácidos
orgânicos fracos (pKa alto) em pH intestinal normal estão principalmente na forma não
dissociada. Esta forma de ácido orgânico não dissociado é um requisito para se aproximar
577
da bactéria, pode facilmente penetrar nos lipídios da membrana celular da bactéria, onde
se dissociam e, portanto, têm um efeito bactericida. No interior da célula bacteriana (o pH
é mantido próximo a 7), com pH acima do pKa do ácido, diminuirá o pH citoplasmático,
consequentemente inibindo a atividade enzimática normal e causando vazamento celular
(Ricke 2003). Existe um efeito sinérgico entre ácidos fortes e fracos. Os ácidos redutores
de pH irão garantir uma melhor ação dos ácidos bactericidas, pois promovem que os
ácidos fracos permaneçam na forma não dissociada. Dessa forma, os ácidos orgânicos
podem enfrentar as bactérias enteropatogênicas, atuando como moduladores da
microflora intestinal. As enzimas celulares são suprimidas e a energia esgota-se à medida
que as bactérias tentam manter um citoplasma neutro bombeando prótons. A atividade
antimicrobiana de ácidos orgânicos geralmente melhora com valores de pKa mais altos.
Ácidos orgânicos com valores mais altos de pKa são compostos antibacterianos mais
eficazes e sua eficácia é geralmente melhorada com o aumento do comprimento da
cadeia e do grau de insaturação (Huyghebaert et al. 2011): SCFA são ácidos fracos com
um valor de pKa abaixo de 4,8. No intestino grosso, onde o pH está próximo do neutro,
eles estão presentes como ânions e têm propriedades antimicrobianas menores em
comparação com os MCFA. O valor de MIC relacionado ao microrganismo do ácido é
outro fator que determina sua atividade antimicrobiana. Clostridium perfringens é
suscetível à maioria dos MCFA com o menor valor de MIC para o ácido láurico, enquanto
a resistência ocorre contra os ácidos fumárico, lático, acético e propiônico. A parede
celular bacteriana é menos penetrada por esses AGCC em pH intestinal, em torno de 6,
devido ao seu pKa mais baixo. É muito importante diferenciar a ação antimicrobiana dos
ácidos orgânicos como conservantes na ração ou na água potável, do efeito na complexa
comunidade microbiana ao longo do intestino e na integridade da mucosa intestinal. Em
conclusão, os ácidos orgânicos podem ajudar a mucosa intestinal a manter sua
integridade; eles reduzem a capacidade tampão das dietas ajudando a manter o pH do
estômago baixo, resultando no aumento da atividade da pepsina e na diminuição do
esvaziamento do estômago.

A atividade antibacteriana dos ácidos orgânicos é principalmente contra Campylobacter

spp., Escherichia coli, Salmonella, Clostridium perfringens e Listeria monocytogenes
(Over et al. 2009). SCFA também pode oferecer uma maneira de resistir ou limitar os
efeitos de uma infecção por Salmonella. A suplementação dietética de ácidos orgânicos
aumentou a contagem de células CD4 e linfócitos do receptor II de células-T, o que
corresponde a uma resposta imunológica mais rápida (Khan e Iqbal 2016). Os ácidos
orgânicos também estão sendo estudados por sua parte na melhoria da utilização do
fitato de fósforo em galinhas (Rafacz-Livingston et al. 2005). Foi relatado que os SCFA
578
regulam positivamente os genes envolvidos no crescimento, divisão, diferenciação,
proliferação e apoptose das células epiteliais (Hashemi e Davoodi 2011).

O ácido butírico tem um impacto principalmente no desenvolvimento da fisiologia intestinal

e na recuperação da integridade intestinal, mas também fornece efeitos indiretos no
metabolismo animal além da capacidade digestiva e de absorção comprometida, função
da barreira intestinal e qualidade das junções herméticas, que também se deterioram no
desmame. O ácido butírico induz a produção de peptídeos de defesa do hospedeiro no
muco e o reparo da arquitetura do trato intestinal por meio do aumento da proliferação
celular, montagem de junções estreitas e regulação da célula imunológica. O ácido
butírico estimula a expressão de proteínas de junção apertada (Mariadason et al. 1997).
No desmame dos leitões, a ativação do sistema imunológico intestinal e a regulação
positiva de genes de citocinas pró-inflamatórias geram uma reação inflamatória
significativa, resultando em lesão e disfunção da mucosa intestinal. As necessidades de
energia para um sistema imunológico ativado aumentam em mais de 20%. As
propriedades antiinflamatórias do ácido butírico e dos extratos de plantas ricos em
alcalóides podem moderar amplamente a reação inflamatória, o que contribui para um
efeito de economia de energia e promoção do crescimento. O estresse de desmame
também está relacionado ao aumento de espécies reativas de oxigênio (ROS). A
glutationa, positivamente influenciada pelo ácido butírico, é crítica em muitos processos
biológicos como o principal tampão redox em células de mamíferos. O intenso processo
de renovação das células intestinais (2–7 dias) requer um suprimento de energia
adequado. SCFA e MCFA estimulam a mitose, maturação e diferenciação das células da
mucosa intestinal e inibem sua apoptose (Isaacson e Kim 2012).

Efeitos semelhantes de melhora no desempenho de crescimento foram observados

quando o ácido butírico foi incluído na dieta de frangos de corte (Panda et al. 2009). Para
garantir a presença de ácido butírico no intestino, são utilizadas formas esterificadas de
ácido butírico. As formas esterificadas contornam automaticamente o estômago e as
moléculas de ácido butírico são liberadas enzimaticamente (principalmente das di e
tributirinas) pela lipase no intestino delgado. As mono butirinas polares passam pela
membrana hidrofílica de bactérias patogênicas (E. coli, Salmonella, Clostridium
perfringens), perturbando seu metabolismo e inativando-as.

O butirato é um dos mais importantes SCFA. O butirato é uma molécula muito pequena,
facilmente absorvida no estômago e na parte superior do intestino delgado. No entanto,
para melhorar a saúde e integridade do intestino, deve ser administrado na parte inferior
do trato intestinal. A solução para este problema reside no uso de ácido butírico como um
579
sal revestido (ou seja, sais de sódio, potássio ou cálcio) ou parcialmente esterificado (por
exemplo, glicerídeo de ácido butírico) para atingir a parte inferior do trato intestinal. Os
glicerídeos têm a vantagem sobre os sais de ácido butírico, pois são muito facilmente
absorvidos e muito saborosos devido ao sabor adocicado do glicerol. Esta forma química
não deprime o consumo de ração e não tem odor. Outra vantagem dos ácidos graxos
esterificados é a liberação gradual do ácido correspondente em todo o intestino pela
atividade enzimática da lipase do pâncreas. Para que o butirato suplementar aumente os
níveis alcançados pela produção endógena, ele deve ser protegido dos processos
digestivos (isto é, as formas revestidas de butirato podem fornecer a proteção necessária
para atravessar o estômago ácido). O butirato liberado na primeira parte do trato intestinal
também tem impacto na inflamação do cólon, atribuível à ação do intestino como um
órgão sensorial que se comunica através de sistemas efetores que incluem o sistema de
sinalização hormonal enteroendócrino, inervação intestinal, o sistema imunológico e
defesas de tecidos locais. O butirato é importante para melhorar a integridade intestinal e
para o desenvolvimento e melhoria das funções intestinais em mamíferos e aves. O ácido
butírico é liberado no intestino, nutrindo a mucosa intestinal, diminuindo a proliferação de
patógenos e inativando bactérias negativas, melhorando muito a qualidade do microbioma
intestinal e a integridade da mucosa (Castillo et al. 2006). Entre os SCFA, o ácido butírico
tem recebido atenção especial por seus extraordinários efeitos benéficos no estado geral
de saúde. O butirato está naturalmente presente em altas concentrações no intestino
grosso, como produto da fermentação bacteriana, e no leite. Serve como uma importante
fonte de energia para os enterócitos, especialmente para as células epiteliais do cólon.
Também aumenta substancialmente a proliferação e diferenciação das células epiteliais,
ao mesmo tempo que reduz a apoptose de enterócitos normais. O butirato parece ter uma
influência positiva. Em galinhas, o butirato parece estar envolvido no controle da
saciedade e na manutenção da homeostase colônica. Vários estudos confirmam um efeito
estimulante do ácido butírico e MCFA na microflora benéfica em porcos de desmame
precoce, enquanto diminui o número de coliformes (E. coli).

A imensa superfície da mucosa intestinal está constantemente em contato direto com o

meio ambiente. O intestino é uma barreira seletiva entre o metabolismo animal e o
ambiente luminal, proporcionando proteção adequada contra a invasão de bactérias
patogênicas, mas também garante uma absorção eficiente de nutrientes. Para realizar
ambas as funções, é necessário manter simultaneamente um equilíbrio requintado entre
os componentes microbianos do intestino e um número adequado de bactérias e sua
localização. Qualquer fator que comprometa a integridade da mucosa intestinal afetará a
saúde e a produtividade dos animais (Mariadason et al. 1997). É importante apreciar os
580
detalhes de como o butirato pode apoiar a saúde contra os desafios bacterianos e
restaurar o equilíbrio da microbiota quando ela é perturbada, por exemplo, por
antibacterianos. No entanto, os efeitos do butirato no sistema imunológico estão
potencialmente envolvidos na produção animal. O intestino é o maior órgão
imunologicamente ativo. SCFA é um elo crucial na manutenção de uma microbiota
saudável e sistema imunológico contra invasão patogênica. Dessa forma, o SCFA atua
como um elo vital entre a microbiota e a imunidade do hospedeiro.

A superfície da mucosa intestinal é um componente imunológico que protege o

hospedeiro do desafio de invasão patogênica, é rigidamente regulada quanto à sua
permeabilidade e pode influenciar o balanço energético sistêmico. A ativação ou
supressão dos receptores toll-like (TLRs) por sinais microbianos pode ditar o tom da
resposta imune, e os TLRs estão implicados na regulação da homeostase energética. Os
SCFA são um grupo de moléculas que podem modular a barreira intestinal e escapar do
intestino para influenciar a saúde sistêmica. Como moduladores da resposta imune, os
sinais microbiotaderivados influenciam as funções de órgãos distantes e podem alterar a
suscetibilidade a doenças metabólicas (Spiljar et al. 2017). O sistema imunológico é
constituído por respostas inatas e adaptativas que dependem da ativação do sistema
imunológico inato, incluindo respostas específicas pela formação de anticorpos. A
imunidade inata inclui barreiras epiteliais físicas (isto é, células intestinais e células
sentinelas como macrófagos e mensageiros químicos). A barreira epitelial intestinal,
constituída de células epiteliais, proteínas de junção apertada e secreções intestinais,
pode impedir a entrada de substâncias luminais e antígenos em todo o espaço paracelular
(Kamada et al. 2013). É conhecido que a disfunção da integridade da barreira intestinal
induzida por toxinas e patógenos está associada a uma variedade de distúrbios GI,
incluindo doenças. O butirato modifica a função da barreira intestinal em células IPEC-J2
por meio de uma suprarregulação seletiva de proteínas de junção apertada e ativação das
vias de sinalização de Akt. Além disso, o butirato aumenta a expressão do mRNA e a
junção da proteína, influenciando a concentração de ATP intracelular em uma relação
dependente da dose (Yan e Ajuwon 2017). No trato gastrointestinal, o butirato tem
capacidade regulatória no transporte de fluido transepitelial, melhora a inflamação da
mucosa e o estado de estresse oxidativo, fortalece a barreira de defesa epitelial e ajusta a
sensibilidade visceral e a motilidade intestinal (Canani et al. 2011). Foi descrito como
sinergia fornecida pela aplicação de cetona exógena e beta hidroxi butirato em
combinação com butirato SCFA no contexto de resultados celulares e fisiológicos
(Cavaleri e Bashar 2018). O butirato também exerce um efeito benéfico no sistema
imunológico por meio da atividade antiinflamatória e antioxidante (Hodin 2000). Outra
581
característica importante do SCFA em frangos de corte é sua influência na microflora
intestinal. A suplementação de acetato, butirato e propionato aumenta de níveis
indetectáveis em frangos de corte de 1 dia para alta concentração em frangos de corte de
15 dias, após o que eles se estabilizam. Os resultados indicaram que correlações
negativas significativas podem ser calculadas entre o número de Enterobacteriaceae e as
concentrações de SCFA não dissociado (van Der Wielen et al. 2000). O butirato tem sido
o SCFA mais estudado, sendo o metabólito preferido para os colonócitos. Com base
nisso, o metabolismo do butirato e da glicose pelos colonócitos foi evidenciado na colite
experimental de camundongo e concluiu-se que o metabolismo do butirato, mas não da
glicose, dos colonócitos está deteriorado na colite, o que pode ser importante na
interpretação da fisiopatologia da colite (Ahmad et al. 2000). Evidências pré-clínicas
corroboram os SCFA como substâncias moduladoras da função colônica e em múltiplos
processos inflamatórios e metabólicos. SCFA também está associado a doenças
autoimunes, alérgicas e metabólicas (Gill et al. 2017).

6.2 Fito bióticos e óleos essenciais

A necessidade de reduzir o uso de antibióticos na pecuária, decorrente do aumento das

preocupações com a disseminação da AMR, aumentou o interesse pelos fito bióticos.
Fitogênico também conhecido como “fito bióticos”, “botânicos” ou “extratos de plantas”,
que são constituintes naturais biologicamente ativos derivados de plantas e incorporados
à alimentação animal para aumentar a produtividade (Windisch et al. 2008). Os
medicamentos fitoquímicos são reconhecidos como alternativas úteis e viáveis à
quimioterapia porque são econômicos, eficazes, não formam resistência, são renováveis
e ambientalmente corretos. Os fitoquímicos dietéticos são pequenas moléculas com alta
diversidade estrutural que causam estresse seletivo ou estimulam a microbiota residente.
SCFA são correlacionados com microorganismos específicos do filo de Firmicutes
intestinais. Extratos de plantas potencialmente eficazes podem ser usados em
combinação com antibióticos para reduzir a dose necessária de antibiótico e aumentar
sua eficácia (Shin e Park 2018).

Os fito bióticos constituem um grande número de compostos ou variedade de ervas,

espécies e produtos derivados dos mesmos, como óleos essenciais. Uma característica
comum dos fito bióticos é que eles são uma mistura altamente complexa de componentes
bioativos. Os fito bióticos são descritos como componentes primários ou secundários de
plantas que contêm constituintes bioativos que exercem um efeito positivo na
produtividade e saúde dos animais.

582
Os fito bióticos têm sido explorados na nutrição animal, em particular por suas atividades
antimicrobiana, antiinflamatória, antioxidante e antiparasitária. Os componentes primários
incluem os nutrientes básicos, como proteínas, gorduras e carboidratos; compostos
secundários incluem óleos essenciais (lipofílicos ou voláteis), amargos, corantes e
compostos fenólicos (Grashorn 2010) que podem ser classificados em quatro grupos: (1)
ervas (produtos de plantas com flores, não lenhosas e não perenes); (2) botânicos
(plantas inteiras ou partes processadas); (3) óleos essenciais (extratos hidro destilados de
compostos voláteis de plantas); e (4) oleorresinas (extratos à base de solventes não
aquosos) (Clavijo e Vives Flórez 2017). Os constituintes biologicamente ativos das plantas
são principalmente metabólitos secundários, como terpenóides (mono e sesquiterpenos,
esteróides, etc.), fenólicos (taninos), glicosídeos e alcalóides (presentes como álcoois,
aldeídos, cetonas, ésteres, éteres, lactonas, etc.) (Huyghebaert et al. 2011). Os
fitoquímicos antimicrobianos úteis podem ser divididos em várias categorias, como
fenólicos/polifenóis, terpenóides/óleos essenciais e lectinas/polifenóis (Windisch et al.
2008). Os óleos essenciais têm duas classes principais de compostos, terpenos (por
exemplo, carvacrol e timol) e fenilpropenos (por exemplo, cinamaldeído e eugenol)
(Omonijo et al. 2018). Os flavonóides como resveratrol, galato de epigalocatequina e
fenóis como galangina, puerarina e ácido ursólico são comprovadamente eficazes como
agentes antimicrobianos (Shin e Park 2018).

Muitas plantas têm propriedades multifuncionais benéficas derivadas de seus

componentes bioativos específicos. Grandes variações na composição resultam de (1)
fatores diferentes (ou seja, espécies de plantas, local de cultivo, condições de colheita),
(2) fabricação (ou seja, extração/destilação, estabilização) e (3) condições de
armazenamento (ou seja, luz, temperatura, tensão de oxigênio, tempo). O desafio é
identificar e quantificar a infinidade de ações e reivindicações que melhoram a utilização
da ração, a fisiologia animal e o estado de saúde.

Uma ampla gama de plantas e seus produtos estão nesta categoria benéfica e, com base
em sua origem (parte da planta), podem ser amplamente classificados como ervas (flores,
não lenhosas, plantas não persistentes das quais folhas e flores são usadas ) ou
especiarias (partes não foliares das plantas, incluindo sementes, frutas, cascas ou raízes
com sabor ou cheiro intenso) (Windisch et al. 2008). Eles podem ser usados na forma
sólida, seca e moída ou como extrato (bruto ou concentrado) (Gadde et al. 2017). Uma
característica comum dos fito bióticos é que eles são uma mistura muito complexa de
componentes bioativos. Os constituintes biologicamente ativos são compostos derivados
de plantas ou partes delas (folhas, raízes, flores, etc.) (Huyghebaert et al. 2011). A ampla

583
gama de modos de ação de diferentes atividades fitogênicas pode otimizar a
digestibilidade dos nutrientes e apoiar a saúde intestinal. Os fitogênicos podem promover
o crescimento de bactérias intestinais benéficas para o hospedeiro e promover
concentrações aumentadas de SCFA no íleo e no cólon, ao mesmo tempo que reduz
bactérias potencialmente prejudiciais e a produção de catabólitos derivados de proteínas.

Os fitogênicos, ou compostos à base de plantas, são especificamente óleos essenciais de

ervas e especiarias conhecidos por terem uma estreita faixa de propriedades
biologicamente ativas que podem ser aplicadas na produção animal moderna. Os
fitogênicos são potentes para melhorar a utilização de nutrientes, estimular a atividade
enzimática digestiva (ou seja, a produção de enzimas intestinais e pancreáticas),
aumentar o fluxo biliar e até mesmo apresentar efeitos antioxidantes, antimicrobianos,
antiinflamatórios e imunomoduladores, além de manter o crescimento intestinal (barreira
intestinal funções) e melhoria da palatabilidade dos alimentos e da saúde (Windisch et al.
2008).

Dados experimentais mostram os efeitos antimicrobianos in vitro com os respectivos

valores de concentração inibitória mínima (MIC) e espectro de atividade (Fu et al. 2007;
Barbosa et al. 2009). O MIC de óleos essenciais necessários para matar patógenos
entéricos pode não garantir a ingestão ideal de ração na produção de suínos. A natureza
lipofílica e volátil dos óleos essenciais cria um desafio em sua entrega eficaz no intestino
do porco, e esse desafio pode ser parcialmente resolvido por microencapsulação e
nanotecnologia (Omonijo et al. 2018). De acordo com Adams (1999), a atividade
antimicrobiana é bastante fraca para gengibre (Zingiber officinale Roscoe) e pimenta
(Piper spp.), média para cominho (Cuminum cyminum), coentro (Coriandrum sativum),
orégano (Origanum vulgare), alecrim (Rosmarinus officinalis), sálvia (Salvia officinalis) e
tomilho (Thymus vulgaris), e forte para cravo (Syzygium aromaticum), mostarda (Lyrica),
canela (Cinnamomum cassia, Cinnamomum zeylanicum, Cinnamomum verum) e alho
(Allium sativum) (Tabela 4). Outros extratos vegetais biologicamente ativos incluem
derivados de soja, derivados de Allium, carvacrol, derivados de Curcuma longa, derivados
de Astragalus, derivados de Capsicum, derivados de Achyranthes, Echinacea e derivados
de Origanum.

Os fitogênicos são caracterizados por sua origem vegetal, sendo naturais e

comprovadamente seguros. Os aditivos fitogênicos para rações consistem principalmente
de óleos essenciais, substâncias amargas e pungentes, saponinas, flavonóides,
mucilagens e taninos; é evidente que não servem apenas para estimulação sensorial,
mas também estimulam vários processos fisiológicos. É bem conhecido que os
584
componentes usados em fitogênicos são geralmente aprovados na UE para uso em
rações animais como “aditivos sensoriais” ou “sabores” devido às suas características de
sabor. No entanto, é importante entender quais sabores ou compostos podem ter um
impacto negativo na ingestão de ração pelos animais e saber a dose aceitável, mascarar
seu sabor ou substituí-los totalmente na fórmula. A composição dos produtos fitogenéticos
e os níveis ideais de inclusão de alimentos devem ser baseados em testes de dose-
resposta por espécies animais. Além disso, os componentes bioativos de ervas e
espécies podem ter propriedades funcionais além de suas propriedades aromatizantes.

Tabela 4 Substâncias fitobióticas naturais e composição química

Substâncias naturais Composição química
Monoterpenos (pineno, canfeno, limoneno), sesquiterpenos O principal constituinte
Espécies de canela
do óleo da casca de canela é o cinamaldeído
Coentro Linalol (terpeno insaturado)
Cravo da índia Eugenol e β-cariofileno
Cominho (preto) p-Cimeno (alquilbenzeno relacionado a um monoterpeno)
Alicina: os principais constituintes do óleo de alho são polissulfetos de alila (sulfeto
Alho
de dialila, dissulfeto de dialila, trissulfeto de dialila)
6-Gingerol, 8-gingerol, 10-gingerol, metilgingerol, gingerdiol, desidrogingerdiona,
Gengibre
gingerdionas, diarilheptanoides (curcuminóides), diterpeno lactonas, galanolactona)
Mostarda Allyl Isotiocianato
Orégano Carvacrol, o-cianofenol (fenol monoterpenóide)
Capsaicina, dihidrocapsaicina, nordihidrocapsaicina, homocapsaicina,
Pimenta
homodihidrocapsaicina
Ácido carnósico, carnosol, ácido 12-O-metilcarnósico, ácido rosmarínico,
Alecrim
genkwanin, isoscutellarein-7-Oglucoside
Sálvia Cineol ou eucaliptol (óleo essencial)
Tomilho Timol, derivado de fenol monoterpeno de cimeno

Os óleos essenciais têm demonstrado bom potencial como alternativas de antibióticos em

rações para a produção de suínos. A combinação de diferentes óleos essenciais e outros
compostos (efeito sinérgico) como os ácidos orgânicos parece ser uma abordagem
promissora para melhorar a eficácia e segurança dos óleos essenciais nas aplicações.

Embora os fitogênicos, e principalmente os óleos essenciais, tenham demonstrado efeitos

antibacterianos diretos, altas concentrações são necessárias para garantir tais efeitos e
são menos atrativos por razões econômicas ou sensoriais. No entanto, pequenas
quantidades de vários óleos essenciais derivados de plantas reduzem efetivamente a
produção de fatores de virulência pelas bactérias, o chamado quorum sensing (QS),
resultando na redução da produção de toxinas, fatores de adesão e formação de biofilme.
QS é um processo de comunicação célula a célula que permite às bactérias compartilhar
585
informações sobre a densidade celular e ajustar a expressão do gene de acordo. Esse
processo permite que as bactérias expressem processos energeticamente caros como um
coletivo apenas quando o impacto desses processos no meio ambiente ou em um
hospedeiro for maximizado (Rutherford e Bassler 2012). Em geral, os efeitos dos óleos
essenciais na inflamação, estresse oxidativo, microbioma, quimio sensibilização intestinal
e QS bacteriana levaram a um melhor desempenho de produção de animais alimentados
com óleos essenciais em vários estudos (Omonijo et al. 2018). Os óleos essenciais são
líquidos oleosos aromáticos obtidos de material vegetal e geralmente têm o odor ou sabor
característico da planta da qual são derivados (Stein e Kil 2006). Normalmente misturas
de metabólitos vegetais secundários, eles podem conter compostos fenólicos (ou seja,
timol, carvacrol, eugenol), terpenos (ou seja, extratos cítricos e de abacaxi), alcalóides
(capsaicina), lectinas, aldeídos (ou seja, cinamaldeído), polipeptídeos ou poliacetilenos
(Thacker 2013). Muitas plantas produzem produtos químicos com propriedades
terapêuticas e protetoras, cujo isolamento e concentração podem produzir compostos
potentes que podem melhorar a saúde e o desempenho animal. Esses benefícios
fitogênicos são derivados da melhoria da saúde intestinal, incluindo melhor digestão,
modificação das secreções digestivas e suporte da histologia do intestino (Diaz-Sanchez
et al. 2015). Além de ervas e especiarias, vários óleos essenciais (timol; carvacrol;
cinamaldeído; óleos essenciais de cravo, coentro, anis estrelado, gengibre, alho, alecrim,
cúrcuma, manjericão, cominho, limão e sálvia) foram usados individualmente ou como
misturas para melhorar a saúde e a produtividade animal (Gadde et al. 2017).

O principal uso de fito bióticos em aves e suínos tem sido a administração de óleos
essenciais, que há muito são usados no preparo de rações como sabores e conservantes
artificiais. A maioria dos óleos essenciais foi classificada como Generally Recognized as
Safe (GRAS), pelo FDA dos EUA. Esses óleos são caracterizados por estarem envolvidos
em atividades antimicrobianas e por possuírem propriedades promotoras de crescimento.
Vários óleos, incluindo carvacrol e timol obtidos do orégano e eugenol da planta do cravo,
mostraram inibir uma ampla gama de bactérias patogênicas (Dorman e Deans 2000).
Vários estudos relataram experimentos controlados em que óleos têm sido usados como
aditivos alimentares para reduzir a presença de diferentes patógenos no intestino,
incluindo, por exemplo, Salmonella usando capsaicina (Tellez et al. 1993; Vicente et al.
2007); E. coli (Jamroz et al. 2005); Campylobacter (Ali 2014) e Clostridium perfringens
(Mitsch et al. 2004). Esses resultados sugerem que a eficácia dos óleos essenciais varia,
principalmente porque seus componentes ativos podem diferir dependendo do método de
extração, origem geográfica, genótipo da planta e tempo de armazenamento.

586
Foi relatado que extratos de plantas alteram a composição da microbiota em aves (Guo et
al. 2004) e porcos (Castillo et al. 2006). Cinamaldeído, carvacrol, eugenol e timol têm
recebido o maior interesse para uso na produção de suínos. O modo exato de ação dos
óleos essenciais não foi estabelecido, mas a atividade pode estar relacionada a
alterações na solubilidade lipídica na superfície da bactéria. Os constituintes hidrofóbicos
dos óleos essenciais permitem que eles desintegrem a membrana externa de E. coli e
Salmonella e, assim, inativem esses patógenos (Stein e Kil 2006). Os óleos essenciais
são líquidos aromáticos, voláteis e oleosos extraídos de materiais vegetais, como
sementes, flores, folhas, botões, galhos, ervas, cascas, madeira, frutas e raízes; óleos
essenciais contendo compostos fenólicos tendem a ter maior atividade antimicrobiana do
que óleos contendo outros compostos (Brenes e Roura 2010). Com base no fato de que
os óleos essenciais parecem controlar bactérias patogênicas, vários grupos de pesquisa
tentaram determinar se a inclusão de óleos essenciais na dieta de suínos pode melhorar o
desempenho dos suínos (Ragland et al. 2008). Os resultados foram inconclusivos; alguns
estudos demonstraram resultados positivos, enquanto outros não relataram efeitos
benéficos. Evidências conclusivas para a inclusão de óleos essenciais em dietas para
suínos foram demonstradas por um ensaio que comparou o desempenho de suínos
alimentados com uma dieta controle não suplementada com a de suínos alimentados com
uma dieta suplementada com antibióticos ou uma combinação de timol (Thymus vulgaris)
e cinamaldeído (Cinnamomum zeylanicum, Cinnamomum verum) (Li et al. 2012). O ganho
de peso, FCR e consistência fecal de suínos alimentados com óleos essenciais foram
essencialmente iguais aos de suínos alimentados com antibióticos. Além disso, a
capacidade antioxidante total e os níveis das citocinas interleucina 6 (IL-6) e fator de
necrose tumoral α (TNF α) foram alterados pela inclusão de óleos essenciais. A
variabilidade pode resultar de diferenças no tipo de óleos essenciais e na dose usada (Li
et al. 2012). Parece que os óleos contendo compostos fenólicos têm maior atividade
antimicrobiana do que aqueles baseados em outros compostos. Além disso, se a dose
usada for muito alta, o cheiro forte pode reduzir o consumo de ração e, assim, limitar o
desempenho dos porcos (Stein e Kil 2006). Outra consideração importante é a
estabilidade dos óleos essenciais durante a peletização.

O óleo de eucalipto, um MCFA, é obtido das folhas do eucalipto, uma árvore da família de
plantas Myrtaceae que é cultivada em todo o mundo. O óleo de eucalipto também
demonstrou estimular o sistema imunológico ao afetar a capacidade fagocítica de
macrófagos derivados de monócitos (Serafino et al. 2008). Em aves, a inclusão de
eucalipto na dieta demonstrou melhorar o desempenho da produção e estimular a
imunidade de galinhas poedeiras comerciais (Abd El-Motaal et al. 2008).
587
Os MCFA foram sugeridos como um aditivo alimentar alternativo aos antibióticos para
leitões (Hong et al. 2012). MCFA mostraram atividade antimicrobiana contra Salmonella
(Rossi et al. 2010) e E. coli (Dierick et al. 2002). Foi relatado que a alimentação com uma
mistura de ácidos caprílico e capróico melhora o desempenho e a digestibilidade dos
nutrientes em porcos desmamados de 3 e 4 semanas durante as primeiras 2 semanas
após o desmame (Hong et al. 2012). Um estudo recente de revisão in vitro demonstrou a
influência de vários MCFA no crescimento de germes patogênicos específicos para suínos
(Omonijo et al. 2018). Os efeitos dos óleos essenciais sobre a inflamação, estresse
oxidativo, microbioma, sensor químico intestinal e QS bacteriana levaram a um melhor
desempenho de produção de animais alimentados com óleos essenciais em vários
estudos. Foi demonstrado que os óleos essenciais têm um bom potencial como
alternativas de antibióticos em rações para a produção de suínos.

As bactérias causam muitos problemas nas fazendas de suínos. Streptococcus suis é

uma espécie de cepa bacteriana gram-positiva patogênica que representa um dos
principais problemas de saúde na indústria suína em todo o mundo. S. suis também é um
patógeno zoonótico emergente que causa infecções humanas graves clinicamente,
apresentando doenças ou síndromes variadas, como meningite, septicemia e artrite. As
infecções por estreptococos são consideradas a principal razão para o alto uso de
antibióticos na produção de leitões (Feng et al. 2014). Os leitões são geralmente
infectados durante ou logo após o nascimento, com germes capazes de entrar no animal
mesmo pelas feridas mais pequenas. A característica especial dos estreptococos
perigosos é que eles possuem a capacidade de entrar na corrente sanguínea, onde se
estabelecem em certos lugares do corpo através do sangue e se reproduzem. Depois que
o patógeno se instala no animal, ele pode causar uma ampla variedade de padrões de
doenças. Com pneumonia, inflamação das articulações e meningite, os estreptococos
também podem causar morte súbita. O objetivo deve ser, portanto, minimizar a pressão
dos germes o mais cedo e tanto quanto possível.

MCFA são particularmente importantes na nutrição animal por causa de seus ingredientes
que fornecem energia e efeito antibacteriano. Essas propriedades são altamente
interessantes para uso na suinocultura. A pressão da infecção nos animais,
desencadeada por germes patogênicos específicos do suíno, é um dos principais motivos
para o uso de antibióticos. Muitos estudos in vitro exibiram efeitos antibacterianos
pronunciados após o uso de MCFA contra bactérias gram-negativas e gram-positivas. O
ácido láurico e o mono laurato de glicerol são considerados ingredientes antibacterianos
particularmente ativos (Omonijo et al. 2018).

588
A invasão de Salmonella nas células epiteliais intestinais é diminuída e a colonização de
Campylobacter jejuni é reduzida em frangos de corte quando administrada uma mistura
de MCFA contendo ácido láurico. Em particular, o ácido láurico tem um forte efeito
antibacteriano contra as cepas de Clostridium perfringens, diminuindo significativamente
as lesões necróticas no intestino. A MIC dos diferentes aditivos foi determinada in vitro,
mostrando que o ácido láurico, o timol e o cinamaldeído são muito eficazes na inibição do
crescimento de Clostridium perfringens. A eficácia do ácido butírico liberado no alvo,
MCFA (C6 a C12, mas principalmente ácido láurico) e óleos essenciais (timol,
cinamaldeído, óleo essencial de eucalipto) microencapsulados em uma matriz de poli
açúcares para controlar a enterite necrótica foi investigada. A combinação de butirato e
ácidos graxos de cadeia média, como o ácido láurico, oferece a melhor proteção contra
essas lesões e pode ser usada para controlar a enterite necrótica em frangos de corte.
Esses resultados sugerem que o ácido butírico, os ácidos graxos de cadeia média e os
óleos essenciais podem contribuir para a prevenção da enterite necrótica em frangos de
corte (Timbermont et al. 2010). MCFA têm um efeito antimicrobiano pronunciado em uma
ampla gama de espécies bacterianas, tanto para bactérias gram-positivas quanto para
gram-negativas: este efeito é maior do que para SCFA.

A microencapsulação de MCFA é um processo no qual os ácidos graxos de cadeia média

são micronizados em partículas extremamente pequenas (nano) e, em seguida,
encapsulados. Um produto de extrato de eucalipto misturado com ácidos caprílico e
cárpico e encapsulado com óleo de palma foi testado em comparação com antibióticos ou
óxido de zinco. O desempenho dos suínos alimentados com a mistura de ácido graxo de
cadeia média de eucalipto foi essencialmente igual ao dos que receberam antibióticos ou
óxido de zinco. Os efeitos de melhoria de desempenho da mistura parecem ser mediados
por melhorias na digestibilidade dos nutrientes (Han et al. 2011).

Uma abordagem alternativa para apoiar a saúde intestinal de animais de fazenda pode
ser encontrada combinando os efeitos benéficos de aditivos fitogênicos para rações com
os efeitos antibacterianos de SCFA e MCFA esterificados. Ambos os SCFA e MCFA
possuem propriedades antimicrobianas e influenciam a composição da microbiota
(Chaveerach et al. 2004; Solis de Los Santos et al. 2008). SCFA são produzidos pela
fermentação de oligossacarídeos indigeríveis e podem alterar o pH do ambiente intestinal,
mudando as proporções relativas de bactérias suscetíveis, incluindo Salmonella e C.
perfringens (Chaveerach et al. 2004; Van Immerseel et al. 2006). Os MCFA têm
propriedades antimicrobianas potentes in vitro e in vivo. Por exemplo, o ácido láurico
demonstrou ter como alvo C. perfringens (Skrivanova et al. 2005), enquanto o ácido

589
caprílico é eficaz contra E. coli (Marounek et al. 2003) e Campylobacter jejuni (Solis de
Los Santos et al. 2008).

Uma possível influência dos fitogênicos na eficácia dos antibióticos por meio da
administração combinada exigiria uma mudança nas recomendações de aplicação de
antibióticos e aditivos fitogênicos para rações. Um julgamento avaliou em que medida é
esse o caso.

Muitos antibacterianos usados em animais são aplicados através da linha de água, onde
são dosados em combinação com outros aditivos para rações. Entre eles, encontram-se
misturas de compostos secundários de plantas com eficácia antimicrobiana comprovada
contra bactérias patogênicas veterinárias. No entanto, as informações disponíveis são
escassas se e em que medida os antibióticos e os fitogênicos influenciam uns aos outros.
Existem vários cenários possíveis: (1) nenhuma interação (se a cepa bacteriana é
sensível a ambos, antibióticos e fitogênicos, e eles não influenciam um ao outro em sua
eficácia antimicrobiana, então uma aplicação combinada com suas dosagens
recomendadas é possível sem restrições e limitações); (2) interação negativa (se o uso
combinado de antibióticos com aditivos fitogênicos para rações atenua a eficácia dos
antibióticos, uma aplicação combinada não seria recomendada); (3) interação positiva (se
os fitogênicos aumentarem a eficácia dos antibióticos, uma aplicação combinada de
ambos pode gerar um efeito antimicrobiano sinérgico em certas bactérias patogênicas
veterinárias). Existem relatos sobre as interações adversas de fitogênicos com
preparações enzimáticas (Sarica et al. 2005). Uma abordagem alternativa para apoiar a
saúde intestinal de animais de fazenda pode ser encontrada combinando os efeitos
benéficos de aditivos fitogênicos para rações com os efeitos antibacterianos de SCFA e
MCFA esterificados. Em um ensaio, esta combinação demonstrou melhorar a eficácia do
desempenho das aves, mesmo em condições desafiadoras envolvendo enterite necrótica
(Dahiya et al. 2006). Em termos de desempenho, a alimentação com a combinação do
aditivo fitogênico para rações com SCFA e MCFA esterificados por 28 dias foi eficaz. O
amplo espectro de modos de ação dos aditivos fitogênicos para rações à base de extratos
vegetais mostram os efeitos sinérgicos de muitos bioativos diferentes, que não foram
reduzidos aos efeitos de uma única substância chumbo.

No entanto, embora os mecanismos de ação da maioria dos produtos químicos

fitoterápicos não sejam totalmente compreendidos, sua atividade antimicrobiana sinérgica
é geralmente considerada o resultado da ruptura da membrana bacteriana por compostos
lipofílicos ou seu bloqueio da divisão celular pela inibição da síntese de DNA (Chandar et
al. 2017).
590
6.3 Peptídeos Antimicrobianos

Os peptídeos antimicrobianos (AMP) são amplamente distribuídos e classificados em

duas categorias, AMP não sintetizados ribossomalmente e AMP sintetizados
ribossomicamente, de acordo com o mecanismo de síntese peptídica. O AMP não
ribossomal, produzido principalmente por bactérias, é sintetizado por peptídeos sintetases
e modificações estruturais (ou seja, gramicidina, polimixina, bacitracina, peptídeo de
açúcar) (Cheng et al. 2014).

Relatórios indicaram o efeito protetor dos peptídeos antimicrobianos em animais.

Antibióticos naturais codificados por genes que ganharam atenção recentemente incluem
peptídeos antimicrobianos derivados do hospedeiro, como defensinas e catelicidinas, que
fornecem uma resposta protetora contra a infecção bacteriana e são um componente
principal da imunidade inata em vertebrados (Sang e Blecha 2008). Por exemplo, os
peptídeos de defesa do hospedeiro suíno são um grande grupo de peptídeos
antimicrobianos imunes inatos que possuem atividade antibacteriana (Sang e Blecha
2008). Catelicidinas são peptídeos de defesa do hospedeiro que foram descritos pela
primeira vez em mamíferos, e também são encontrados em pássaros, que exibem
atividades antimicrobiana e imunomoduladora (van Dijk et al. 2009, 2011) que podem ser
usados para controlar patógenos como Campylobacter jejuni (van Dijk et al. 2012). Outros
peptídeos, como a lactoferricina B, um peptídeo de 25 resíduos derivados do domínio N-
terminal da lactoferrina bovina, e derivados sintéticos desse peptídeo causam
despolarização da membrana citoplasmática em bactérias suscetíveis e têm atividade
antimicrobiana (Liu et al. 2011). Peptídeos antimicrobianos, como cecropinas (Boman
1991) e magaininas (Zasloff 1987), um peptídeo quimérico, são derivados de insetos e
anfíbios, respectivamente. O cecropìn A adicionado à dieta alimentar aumentou o ganho
de peso, o consumo de ração, a relação ração: ganho e a altura das vilosidades
intestinais, ao mesmo tempo que diminuiu a contagem de bactérias aeróbias em digestão
jejunal e cecal. Outros peptídeos antibacterianos são as bacteriocinas, que são definidas
como peptídeos sintetizados ribossomicamente e secretados por várias bactérias que têm
atividade antibacteriana contra outras bactérias semelhantes ou intimamente
relacionadas. Bacteriocinas produzidas por bactérias de ácido láctico (BAL) geralmente
funcionam para suprimir espécies concorrentes que são principalmente ativas contra
outras bactérias gram-positivas (Cotter et al. 2005). No passado, as bacteriocinas eram
usadas como conservantes de alimentos. Várias bacteriocinas foram identificadas, como
nisina, lactacina, lactocina, helveticina, fermenticina, sakacina, lacticina, plantacina e
subticina, entre outros em gêneros incluindo bactérias gram-positivas e gram-negativas,

591
bem como Archaea. Testes in vitro mostram que as bacteriocinas têm fortes efeitos
supressores e exterminadores de uma variedade de patógenos, incluindo patógenos
resistentes. O espectro antibacteriano da maioria das bacteriocinas é estreito, apenas
eficaz para as espécies bacterianas relacionadas. Um dos mais relatados como
suplemento dietético em aves foi a divercina AS7 (produzida por Carnobacterium
divergens AS7), uma bactéria produtora de ácido láctico isolada de peixes, que foi
extensivamente estudada em frangos de corte quanto ao efeito de promoção do
crescimento, digestibilidade e modulação efeito na microbiota intestinal (Józefiak et al.
2012).

Além disso, a nisina dietética (produzida por Lactococcus lactis) exerceu um efeito
modulador na ecologia microbiana do GIT com contagens diminuídas de Bacteroides e
Enterobacteriaceae, mas contagens inalteradas de Clostridium perfringens, Lactobacillus
spp., Enterococcus spp. e bactérias totais (Józefiak et al. 2013). Albusina B (produzida por
Ruminococcus albus 7), outra bacteriocina adicionada à ração de aves, também mostrou
desempenho de crescimento melhorado, aumento da absorção intestinal e contagem de
Lactobacillus, metabolismo lipídico modulado e defesa antioxidante sistêmica ativada
(Wang et al. 2013). Em geral, o uso de peptídeos antimicrobianos, incluindo bacteoricinas,
tem potencial para melhorar a saúde e a produtividade animal.

6.4 Bacteriófagos e suas endolisinas

Os bacteriófagos, que são vírus altamente específicos de espécies que matam bactérias,
têm sido considerados agentes para tratar infecções bacterianas por meio da produção de
endolisinas e subsequente lise das células bacterianas. Os bacteriófagos podem ser
considerados alternativas seguras de antibióticos, pois não exibem atividade contra
células animais e vegetais. Bacteriófagos (fagos) têm sido utilizados como tratamento
para doenças bacterianas na Europa (Sulakvelidze 2005), particularmente em aves (ou
seja, para reduzir a mortalidade em aves, causada por Staphylococcus gallinarum e
Pullorum (Atterbury et al. 2007) e em bovinos (Smith et al. 1987). As preparações de
bacteriófagos estão comercialmente disponíveis em muitas partes do mundo. O FDA
aceitou o uso de uma preparação de bacteriófago como aditivo alimentar (Bren, 2007).
Uma extensão importante da terapia com bacteriófagos é o uso de enzimas líticas de fago
que digerem o peptídio glicano bacteriano, especialmente de bactérias gram-positivas,
como uma nova classe de antimicrobianos alternativos (Fischetti 2008; Schmelcher et al.
2012a). As enzimas líticas do fago podem ser aplicadas externamente e têm uma
variedade de atividades bioquímicas que podem ser fundidas em recombinantes
moléculas quiméricas que retêm sinergicamente suas atividades parentais para digerir as
592
paredes das células bacterianas, evitando assim o desenvolvimento de resistência
(Schmelcher et al. 2012b). Os bacteriófagos podem se replicar nas células hospedeiras e
são capazes de produzir novos fagos líticos para acompanhar a mutação dos patógenos.
Muitas dessas enzimas líticas de fago são altamente específicas para espécies (Simmons
et al. 2010), e seus domínios de ligação à parede celular (CWB) também podem ser
usados para sistemas de detecção bacteriana (Schmelcher et al. 2010). Os fagos podem
causar a liberação de toxinas [por exemplo, endotoxinas (lipopolissacarídeos, LPS)], em
grandes quantidades de bactérias, especialmente bactérias gram-negativas, que podem
ser responsáveis por vários efeitos colaterais no hospedeiro, como o desenvolvimento de
uma cascata inflamatória levando a falência de múltiplos órgãos (Chen et al. 2014).

Uma extensão importante da terapia com bacteriófagos é o uso de enzimas líticas de fago
que digerem o peptídio glicano bacteriano, particularmente de bactérias gram-positivas
(Schmelcher et al. 2012a). Os bacteriófagos são definidos como parasitas intracelulares
específicos de bactérias que se multiplicam usando a maquinaria metabólica de seus
hospedeiros. Existem dois grandes tipos de fagos: (1) fagos virulentos, com um ciclo de
vida lítico; e (2) fagos temperados, com um ciclo de vida lisogênico. Em um ciclo de vida
lítico, o fago reconhece bactérias específicas, injeta seu material genético e então usa a
maquinaria metabólica do hospedeiro para se replicar e montar cópias de si mesmo. Um
processo de lise celular mediado pelo fago, então, libera os vírions reunidos no interior da
célula. Uma vez liberados, esses novos vírions podem infectar outra célula, reiniciando o
ciclo. Em contraste, no ciclo de vida lisogênico, o fago reconhece a célula hospedeira, o
DNA injetado é incorporado ao genoma da bactéria e se replica com ele. Sob certas
condições, esse DNA pode se desprender do genoma e iniciar um ciclo de vida lítico. Ao
deixar o genoma bacteriano, o DNA do fago pode levar informações que podem ser
transferidas para seu próximo hospedeiro. Esse processo pode transmitir características
indesejáveis ao novo hospedeiro, como fatores de virulência ou genes de resistência a
antibióticos.

A terapia fágica é definida como o uso de fagos para tratar infecções bacterianas; o termo
é restrito ao emprego de fagos virulentos. Sua aplicação em humanos foi descrita quase
assim que esses vírus foram descobertos, em 1915 (Abedon et al. 2011). No entanto, o
uso de bacteriófagos foi deslocado pela descoberta da penicilina e continuou apenas em
alguns países do antigo Bloco de Leste (Summers 2012). Hoje, o surgimento problemático
de bactérias multirresistentes proporcionou um novo enfoque aos bacteriófagos como
uma alternativa natural e não tóxica de tratamento de infecções bacterianas. As
vantagens da terapia fágica incluem que o tratamento com fagos pode atingir um grupo

593
específico de bactérias, fazendo com que a microbiota normal não seja afetada,
reduzindo, assim, o risco de infecções secundárias associadas às terapias antibióticas
(Loc-Carrillo e Abedon 2011). A terapia fágica é uma das estratégias disponíveis para
manipular o microbioma intestinal; tem resultados promissores e também algumas
vantagens sobre as outras tecnologias. Os fagos são considerados mais eficazes do que
os antibióticos, pois eles só se multiplicam quando seu hospedeiro específico está
presente, o que implica que os fagos têm a capacidade de aumentar sua densidade in
situ. Da mesma forma, após a infecção, uma vez que a concentração do hospedeiro foi
reduzida, a população de fagos também diminui. Outra vantagem importante é que os
fagos podem ser eficazes contra bactérias sensíveis, bem como cepas que são
resistentes a antibióticos (Nilsson 2014). Os fagos são capazes de atingir apenas certos
grupos de bactérias patogênicas sem ter qualquer efeito negativo na microbiota normal de
um determinado nicho (Sulakvelidze 2011), que, como já foi demonstrado, cumpre
funções importantes no hospedeiro.

A aplicação de fagos foi descrita para humanos (Abedon et al. 2011), diferentes modelos
em animais, plantas e alimentos (Cooper 2016). Um coquetel de bacteriófago que visa
contaminantes de Listeria monocytogenes em alimentos prontos para consumo contendo
carne e produtos de aves foi aprovado em 2006 pelo FDA dos EUA (Sulakvelidze 2013).
Apesar disso, vários estudos têm utilizado bacteriófagos em animais para controlar
bactérias transmitidas por alimentos. Esses modelos incluem o uso de fagos para
controlar Salmonella e Campylobacter em frangos de corte (Wernicki et al. 2017). É
amplamente reconhecido que patógenos como Campylobacter e Salmonella podem ser
transmitidos ao longo da cadeia alimentar e podem ser a fonte de doenças humanas. Em
todos os casos, os fagos foram administrados por via oral, seja como suplemento
alimentar, em água ou usando uma sonda após as aves terem sido desafiadas com uma
determinada concentração do patógeno (Grant et al. 2016). Estudos publicados mostram
que a aplicação de fagos em concentrações mais altas do que o microrganismo-alvo tem
mais sucesso na redução da presença deste (Bardina et al. 2012). Também deve ser
considerado que coquetéis de fagos são mais eficazes do que aplicações individuais.
Além disso, foi demonstrado que o tratamento com fagos é mais eficaz quando antecede
a exposição ao patógeno (Wong et al. 2014). Nas vias de administração, embora a
maioria dos estudos tenha sido realizada por gavagem oral, comparando a eficácia dos
tratamentos realizados por gavagem com aqueles em que os fagos foram administrados
como suplemento alimentar, ambas as abordagens obtiveram reduções de 1,7 log10 e 2
log10 UFC/ml, respectivamente (Carvalho et al. 2010). Em uma abordagem diferente, um
estudo extremamente interessante mostrou que a aplicação de fagos junto com
594
probióticos é mais eficaz na redução de Salmonella do que a aplicação de cada
tratamento separadamente (Toro et al. 2005).

Bacteriófagos são vírus parasitas de bactérias e há muito tempo são considerados um

dos tipos de agentes para o tratamento de infecções bacterianas. Um coquetel de
bacteriófago que têm como alvos contaminantes de Listeria monocytogenes em alimentos
prontos para consumo contendo carne e produtos de aves foi aprovado em 2006, que foi
a primeira vez que o FDA dos EUA aceitou o uso de uma preparação de bacteriófago
como aditivo alimentar (Bren 2007). Preparações de bacteriófagos estão disponíveis
comercialmente em muitas partes do mundo para reduzir a mortalidade em aves, causada
por Salmonella gallinarum e S. pullorum. O fago lítico também foi usado para tratar uma
infecção fatal por E. coli com meningite neonatal em ratos (Pouillot et al. 2012). Uma
extensão importante para a terapia com bacteriófagos é o uso de enzimas líticas de fago
(PLEs) que digerem o peptídio glicano bacteriano, especialmente de bactérias gram
positivas, como uma nova classe de antimicrobianos alternativos (Fischetti 2008;
Schmelcher et al. 2012a). PLEs podem ser aplicados externamente e têm uma variedade
de atividades bioquímicas que podem ser fundidas em moléculas quiméricas
recombinantes que retêm sinergicamente suas atividades parentais para digerir as
paredes celulares bacterianas, evitando assim o desenvolvimento de resistência
(Schmelcher et al. 2012b). Muitas dessas enzimas são altamente específicas de espécies
(Simmons et al. 2010), e seus domínios de ligação à parede celular também podem ser
usados para sistemas de detecção de bactérias (Schmelcher et al. 2010). Atualmente, o
principal desafio para a promoção de preparações fágicas é a falta de dados obtidos em
ensaios clínicos em larga escala, dificultando sua aplicação universal. As lacunas
regulatórias continuam sendo outro grande obstáculo. Além da preocupação de
segurança inerente, nem o FDA dos EUA nem a EMA têm um local de processamento de
aprovação que pode acomodar facilmente as combinações em constante mudança de
fagos que acompanham a necessidade de desenvolver continuamente o produto para
ficar um passo à frente das bactérias resistentes em evolução (Miedzybrodzki et al. 2012).

Outra opção ao uso de bacteriófagos é a aplicação de endolisinas (ou lisinas) de

bacteriófagos (glicosidase, amidase, endopeptidase, transglicosilase), que são enzimas
líticas codificadas por bacteriófagos que decompõem o peptídio glicano da parede celular
bacteriana durante a fase tardia da reprodução do fago lítico ciclo, degradando o peptídio
glicano bacteriano para facilitar a liberação de novos fagos da bactéria infectada. As
endolisinas podem tratar sepse e algumas infecções por bactérias gram positivas, mas
são fracas contra bactérias gram negativas (Cheng et al. 2014). As endolisinas podem

595
matar rapidamente as cepas suscetíveis com espectro antibacteriano mais amplo do que
os fagos e as atividades são mais fáceis de detectar. Essas enzimas apresentam algumas
vantagens e desvantagens em relação aos fagos vivos. As vantagens são (1) as lisinas
não são auto replicantes, o que significa que são um controle mais direcionado e definido;
(2) resistência a essas enzimas ainda não foi relatada; (3) podem ser identificados e
usados a partir de fagos temperados e virulentos; e (4) as lisinas têm potencial para
serem usadas em muitos ambientes (humanos, animais, alimentos, biofilmes, etc.)
(O’Flaherty et al. 2009). Entre as desvantagens importantes das lisinas estão (1) falta de
eficácia contra bactérias gram negativas; e (2) as bacteriocinas são proteínas, portanto,
são suscetíveis à inativação. Vários relatos sobre a aplicação de antimicrobianos de
endolisinas ao longo da linha de processamento de alimentos têm sido realizados,
principalmente direcionados a Staphylococcus aureus e Listeria monocytogenes em
laticínios (Oliveira et al. 2012).

Também é importante notar que todas as outras espécies de Clostridium foram resistentes
à atividade lítica, demonstrando especificidade de espécie para C. perfringens. Nenhum
outro relato de lisinas com uso potencial em frangos de corte foi encontrado, talvez
porque a maior parte da contaminação de origem alimentar seja causada por bactérias
gram-negativas (Zimmer et al. 2002).

Deve-se ressaltar que a terapia fágica ainda apresenta limitações, como a variabilidade
nos resultados obtidos, que pode ser explicada por diferentes razões: (1) o
desenvolvimento de resistência a fagos por bactérias alvo, (2) a baixa multiplicidade de
infecção, ( 3) a inacessibilidade do microrganismo alvo e (4) a desativação dos fagos pelo
hospedeiro. As limitações mais importantes para o emprego de bacteriófagos em
fazendas produtoras são a falta de aprovação e regulamentação para seu uso em animais
e a aceitação da terapia pela comunidade de produtores, por se tratar de uma tecnologia
relativamente nova. No entanto, se essa aprovação for alcançada, a pesquisa sobre a
eficácia dos fagos nas condições comerciais da pecuária industrial ainda é necessária
(Grant et al. 2016).

Apenas um estudo usando bacteriófagos em bandos de frangos de corte usando fagos

Campylobacter está disponível (Kittler et al. 2013). Os autores deste estudo com galinhas
realizaram três ensaios de campo, dois na mesma fazenda, mas em galpões diferentes, e
o terceiro foi realizado em outra fazenda. O coquetel de quatro fagos foi fornecido via
água potável a uma concentração final de 105–107 UFC/ml. No primeiro ensaio, foi
alcançada uma redução de até 3,2 UFC/g da carga de Campylobacter no conteúdo cecal,
em comparação com o controle. No entanto, nenhuma redução significativa foi observada
596
nos grupos experimentais dos outros ensaios, indicando que pesquisas adicionais são
necessárias para a aplicação em grande escala dos fagos (Kittler et al. 2013).

De maneira geral, os bacteriófagos representam uma alternativa promissora para o

controle de Salmonella e Campylobacter em animais produtores de alimentos. No entanto,
estudos replicáveis que demonstrem a eficácia da tecnologia em sistemas intensivos de
produção ainda são necessários.

6.5 Compostos Imunomoduladores: Vacinas

Os compostos imunomoduladores, como a lactoferrina, também podem afetar a

microbiota. Foi demonstrado que a lactoferrina afeta a comunidade bacteriana no ceco
das aves (Geier et al. 2011). Em porcos, a lactoferrina aumentou o número de
Lactobacillus e Bifidobacteria e diminuiu o número de E. coli e Salmonella (Wang et al.
2007). Outros compostos, incluindo produtos bacterianos, como bacteriocinas (Shin et al.
2008) e compostos imunomoduladores, também podem ser importantes na modificação
da microbiota intestinal.

Uma técnica que parece ter um potencial considerável como alternativa aos
antibacterianos na presença de organismos causadores de doenças é o uso de anticorpos
de gema de ovo, geralmente chamados de IgY. A injeção dos antígenos induz uma
resposta imune na galinha, resultando na produção de anticorpos. Abordagens que
utilizam anticorpos específicos de patógenos em rações animais são baseadas no fato de
que a transferência de anticorpos maternos aviários do soro para a gema do ovo (os
anticorpos são depositados na gema do ovo) pode conferir imunidade passiva a embriões
e recém-nascidos (Tini et al. 2002). Consequentemente, a imunização passiva por
administração oral de anticorpos específicos é uma possível alternativa ao tratamento
com antibióticos para reduzir os patógenos gastrointestinais em animais. Especificamente,
com base no tratamento com anticorpos específicos que visam proteínas associadas à
adesão de E. coli (Cook et al. 2007), os anticorpos específicos do patógeno administrados
por via oral podem aliviar doenças entéricas.

7. Regulamentos relativos a aditivos para rações na União Européia

O artigo 5º do Regulamento (EC) nº 1831/2003 (EC 2003) afirma que um aditivo para
alimentação animal (1) não deve ter um efeito adverso na saúde animal, humana ou no
ambiente, (2) não deve ser apresentado em forma que pode induzir o usuário em erro, e
(3) não deve prejudicar o consumidor ao prejudicar as características distintivas dos
597
produtos animais, ou induzir o consumidor em erro no que diz respeito às características
distintivas de um produto animal (Anadón et al. 2018).

De acordo com o Regulamento (EC) nº 1831/2003, um aditivo para rações é uma

substância, microrganismos ou preparações, que não sejam matérias-primas e pré-
misturas, que é intencionalmente adicionado à ração ou água para realizar, em particular,
um ou mais funções enumeradas no artigo 5.º, n.º 3, do Regulamento (EC) n.º 1831/2003
(EC 2003): (1) afetam favoravelmente as características dos alimentos para animais; (2)
afetar favoravelmente as características dos produtos de origem animal; (3) afetar
favoravelmente a cor de peixes e pássaros ornamentais; (4) satisfazer as necessidades
nutricionais dos animais; (5) afetar favoravelmente as consequências ambientais da
produção animal; (6) afetar favoravelmente a produção, desempenho ou bem-estar
animal, particularmente afetando a flora gastrointestinal ou a digestibilidade dos
alimentos; ou (7) têm um efeito coccidiostático ou histomonostático; e deve ser alocado a
uma ou mais das seguintes categorias:

Aditivos tecnológicos Os aditivos tecnológicos são definidos como qualquer substância

adicionada à ração para fins tecnológicos, incluindo os seguintes grupos funcionais. (1)
conservantes: substâncias ou, quando aplicável, microrganismos que protegem os
alimentos contra a deterioração causada por microrganismos ou seus metabólitos; (2)
antioxidantes: substâncias que prolongam o tempo de armazenamento de alimentos e
matérias-primas para alimentação animal, protegendo-os contra a deterioração causada
pela oxidação; (3) emulsionantes: substâncias que permitem a formação de uma mistura
homogênea de duas ou mais fases imiscíveis nos alimentos; (4) estabilizantes:
substâncias que permitem manter o estado físico-químico dos alimentos para animais; (5)
espessantes: substâncias que aumentam a viscosidade dos alimentos para animais; (6)
agentes gelificantes: substâncias que conferem textura ao alimento por meio da formação
de um gel; (7) aglutinantes: substâncias que aumentam a tendência de aderência das
partículas dos alimentos para animais; (8) substâncias para o controle da contaminação
por radionuclídeos: substâncias que suprimem a absorção de radionuclídeos ou
promovem sua excreção; (9) agentes antiaglomerantes: substâncias que reduzem a
tendência de aderência de partículas individuais de um alimento; (10) reguladores de
acidez: substâncias que ajustam o pH dos alimentos; (11) aditivos para silagem:
substâncias, incluindo enzimas ou microrganismos, destinadas a serem incorporadas em
alimentos para animais para melhorar a produção de silagem; (12) desnaturantes:
substâncias que, quando utilizadas para o fabrico de alimentos para animais

598
transformados, permitem a identificação da origem de alimentos ou matérias-primas
específicas para alimentação animal.

Aditivos sensoriais Os aditivos sensoriais são definidos como qualquer substância que
melhora ou altera as propriedades organolépticas da ração e/ou as características visuais
de alimentos derivados de um animal, e incluem os seguintes grupos funcionais: (1)
corantes: substâncias que adicionam ou restauram a cor em alimentos para animais;
substâncias que, quando dadas aos animais, dão cor aos alimentos de origem animal; e
substâncias que afetam favoravelmente a cor de peixes ornamentais ou pássaros; e (2)
compostos aromatizantes: as substâncias quando incluídas nos alimentos aumentam o
cheiro ou a palatabilidade dos alimentos (Anadón et al. 2018).

Aditivos nutricionais Os aditivos nutricionais fornecem um nutriente específico exigido pelo

animal para um crescimento ideal. Os seguintes grupos funcionais estão incluídos: (1)
vitaminas, pró-vitaminas e substâncias quimicamente bem definidas com efeito
semelhante; (2) compostos de oligoelementos; (3) aminoácidos, seus sais e análogos; e
(4) uréia e seus derivados (Anadón et al. 2018).

Aditivos zootécnicos Os aditivos zootécnicos são definidos como qualquer aditivo usado
para afetar favoravelmente o desempenho de animais em boa saúde ou para afetar
favoravelmente o meio ambiente, incluindo os seguintes grupos funcionais: (1)
melhoradores de digestibilidade, substâncias que, quando dadas aos animais, aumentam
a digestibilidade da dieta, através da ação sobre as matérias-primas da ração; (2)
estabilizadores da flora intestinal, microrganismos ou outras substâncias quimicamente
definidas que, quando dadas aos animais, têm um efeito positivo na flora intestinal; (3)
substâncias que afetam favoravelmente o meio ambiente; e (4) outros aditivos
zootécnicos. O Regulamento (EC) n.º 429/2008 (EC 2008) da Comissão sobre as regras
de execução do Regulamento (EC) n.º 1831/2003 no que diz respeito à preparação e
apresentação de pedidos e à avaliação e autorização de aditivos para alimentos para
animais está em aplicação.

Este Regulamento (EC) n.º 429/2008 (EC 2008) inclui disposições gerais para estudos de
segurança e eficácia a serem realizados para apoiar a aplicação de aditivos para a
alimentação animal. Diretrizes específicas foram preparadas para o Painel FEEDAP da
EFSA para aditivos para rações que já estão autorizados para uso em alimentos em
espécies menores, como aditivos nutricionais em animais de estimação e para outros
animais não produtores de alimentos, bem como para aditivos sensoriais que não sejam
aromatizantes compostos, aditivos tecnológicos (aditivos para silagem), aditivos
tecnológicos que não sejam aditivos para silagem, aditivos zootécnicos (enzimas,
599
microrganismos), aditivos zootécnicos, exceto enzimas e microrganismos, e
coccidiostáticos e histomonostáticos, entre outros (Anadón et al. 2018). O Regulamento
(EC) n.º 1831/2003 estabelecerá um procedimento comunitário para autorizar a colocação
no mercado e a utilização de aditivos para alimentação animal e estabelecerá regras para
a supervisão e rotulagem de aditivos e pré-misturas para alimentação animal para
fornecer uma base para a garantia de um elevado nível de proteção da saúde humana, da
saúde e do bem-estar animal, do ambiente e dos interesses dos utilizadores e
consumidores em relação aos aditivos para a alimentação animal, garantindo
simultaneamente o funcionamento eficaz do mercado interno. Este regulamento não se
aplica a auxiliares tecnológicos e medicamentos veterinários, conforme definido na
Diretiva 2001/82/EC (EC 2001) Diretiva 2004/28/EC (EC 2004) que altera a Diretiva
2001/82/EC sobre o código comunitário relativo aos medicamentos veterinários produtos,
com exceção dos coccidiostáticos e histomonostáticos utilizados como aditivos para a
alimentação animal Regulamento (UE) 2019/6 do Parlamento Europeu e do Conselho de
11 de dezembro de 2018 sobre medicamentos veterinários e que revoga a Diretiva
2001/82/EC recentemente publicada. No entanto, os prebióticos (inulina, fruto/mannan
oligossacarídeos, paredes celulares de levedura ricas em β-glucanos) ou SCFA e MCFA
são considerados alimentos e não como aditivos alimentares e, portanto, estão no âmbito
do Regulamento (EC) n.º 767/2009 (EC 2009) relativos à comercialização e utilização de
alimentos para animais. No entanto, a classificação de um produto como matéria-prima ou
aditivo alimentar permanece obscura por causa das diferenças no impacto relativo do
processamento tecnológico (Huyghebaert et al. 2011). Extratos botânicos ou de ervas,
aromas e óleos etéricos agora estão dentro do escopo do Regulamento (EC) nº
1831/2003 (EC 2003). Em geral, ervas não processadas são consideradas matérias-
primas para alimentação animal e não precisam de autorização. Os extratos ou
componentes vegetais notificados estão incluídos no “Registro Comunitário de Aditivos
para Alimentos para Animais” estabelecido conforme estabelecido pelo Artigo 17 do
Regulamento (EC) Nº 1831/2003 (EC 2003). A Comissão criou este registo comunitário,
que é regularmente actualizado, e contém referências/ligações à autorização relevante.
Este registo é composto por duas partes: a primeira parte, Anexo I, contém a lista de
alterações ao Registo e as autorizações em vigor, e a segunda parte, Anexo II, contém
uma lista de aditivos que serão retirados a curto prazo. Também estão incluídos aqueles
para os quais uma data é indicada na coluna “Data de validade da autorização”. Esses
aditivos já não podem ser colocados no mercado da UE se essa data tiver expirado. O
Registro Comunitário de Aditivos para Alimentos para Animais tem apenas fins
informativos e não substitui os atos jurídicos da comunidade. Os atos jurídicos
600
comunitários relativos à autorização de cada aditivo inscrito no Registo constituem a base
jurídica para a colocação no mercado e a utilização de cada um dos aditivos em causa.
Assim, antes de novembro de 2010, um dossiê científico completo para cada óleo ou
componente etérico notificado deve ser submetido à Autoridade Europeia para a
Segurança dos Alimentos (EFSA), que fornece orientação sobre os dados científicos
necessários para realizar uma avaliação de segurança para agentes botânicos (EFSA
2009, 2014).

Questões não resolvidas

Uma área significativa de atenção é o aprimoramento da biossegurança empregada na

produção animal, que melhora a eficiência da produção e do bem-estar animal.
Há um forte impulso por parte dos consumidores, agências reguladoras, comitês
científicos e governos para reduzir o uso de antibióticos em animais produtores de
alimentos. As empresas de rações e farmacêuticas fornecem uma variedade de
nutracêuticos para uso como aditivos para rações ou medicamentos veterinários, todos
oferecendo a substituição de antibióticos, mas nem todos podem cumprir essa promessa.
É muito importante avaliar cada aditivo alimentar ou medicamento veterinário em suas
alegações. Uma descrição do mecanismo de ação, eficácia e vantagens e desvantagens
de uso deve estar disponível, e uma prova clara da compatibilidade de diferentes aditivos
na água potável e na ração deve ser mostrada. Os benefícios devem ser visíveis em
fazendas, rebanho ou condições de rebanho na produção animal: somente aqueles que
atuam em bases científicas são verdadeiras alternativas. São necessários estudos
replicáveis que demonstrem a eficácia e segurança dos nutracêuticos como alternativas
aos antibacterianos em sistemas de produção intensiva. Os pesquisadores continuam a
investigar e aperfeiçoar as soluções nutricionais para a criação de animais para influenciar
positivamente a saúde, o bem-estar e a produtividade dos animais e diminuir o uso de
antibióticos em fazendas intensivas. A maioria desses compostos produz resultados
inconsistentes e raramente são iguais aos antibacterianos em sua eficácia. Ainda há muito
a aprender sobre qual tipo ou nível de fibra seria melhor em dietas pós-desmame,
conforme a investigação prossegue: também é necessário evitar disbacteriose, diarreia
pós-desmame, ambiente de incubação pobre e mastite, entre outros achados patológicos.

A terapia fágica tem resultados promissores e também algumas vantagens sobre outras
tecnologias, mas pesquisas são necessárias para o uso de fagos em escala produtiva. A
limitação mais importante ao uso de bacteriófagos em fazendas produtoras é a falta de
aprovação e regulamentação para seu uso em animais e a aceitação da terapia pela
comunidade de produtores, por se tratar de uma tecnologia relativamente nova. No
601
entanto, se essa aprovação for alcançada, a pesquisa sobre a eficácia dos fagos nas
condições comerciais da pecuária industrial ainda é necessária.

O uso de fitogênicos na prática agrícola é limitado. O modo de ação dos extratos vegetais
é pouco investigado, seja porque foram estudados principalmente com relação a misturas,
seja porque poucos estudos estão disponíveis.

Óleos essenciais e ácidos orgânicos têm sido extensivamente usados e estudados em

animais de alimentação para melhorar a segurança alimentar, taxa de crescimento e
conversão alimentar, mas mais pesquisas são necessárias para confirmar a possível
melhoria dos parâmetros produtivos e da saúde e bem-estar animal. Além disso, há uma
necessidade de validar biomarcadores confiáveis para medir a eficácia e segurança dos
fitogênicos.

Os estudos sobre peptídeos antimicrobianos e suas aplicações em aves têm se

concentrado principalmente na proteção potencial contra diversos patógenos que causam
doenças infecciosas, em vez de atividades de promoção de crescimento. No entanto,
alguns ensaios de pesquisa investigaram o efeito dos peptídeos antimicrobianos no
desempenho do crescimento das aves, na morfologia intestinal e na microbiologia
intestinal como alternativas potenciais de AGP.

Deve existir uma base legal para a colocação no mercado e o uso de novos nutracêuticos.
A atividade regulatória para levar em conta o novo desenvolvimento e inovação de
nutracêuticos a serem usados em animais de alimentação deve ser baseada em dados
científicos.

Agradecimentos: Este trabalho foi apoiado pelo Projeto S2013/ABI-2728 (Programa

ALIBIRD-CM) da Comunidade de Madrid, e pelo Projeto Ref. RTA2015-00010-C03-03 do
Ministerio de Economía, Industria y Competitividad, Espanha.

Referências
Aarestrup FM (2004) Monitoring of antimicrobial resistance among food animals: principles and limitations. J Vet Med
B 51(8–9):380–388
Abd El-Motaal AM, Ahmed AMH, Bahakaim ASA et al (2008) Productive performance and immunocompetence of
commercial laying hens given diets supplemented with eucalyptus. Int J Poult Sci 7 (5):445–449
Abedon ST, Kuhl SJ, Blasdel BG et al (2011) Phage treatment of human infections. Bacteriophage 1(2):66–85
Abt MC, Artis D (2013) The dynamic influence of commensal bacteria on the immune response to pathogens. Curr
Opin Microbiol 16 (1):4–9
Adams C (1999) Nutricines: food components in health and nutrition. Nottingham University Press, Nottingham
Adil S, Banday T, Bhat GA et al (2011) Response of broiler chicken to dietary supplementation of organic acids. J Cent
Eur Agric 12:498–508
Ahmad MS, Krishnan S, Ramakrishna BS et al (2000) Butyrate and glucose metabolism by colonocytes in
experimental colitis in mice. Gut 46:493–499
Ali AHH (2014) Productive performance and immune response of broiler chicks as affected by dietary marjoram leaves
powder. Egypt Poult Sci J 34:57–70
Amass SF, Clark LK (1999) Biosecurity considerations for pork production units. J Swine Health Prod 7:217–228

602
 Anadón A (2006) The EU ban of antibiotics as feed additives. Alternatives and consumer safety. J Vet Pharmacol Ther
29(suppl 1):41–44
Anadón A, Martínez-Larrañaga MR, Ares I et al (2018) Regulatory aspects for the drugs and chemicals used in food
producing animals. In: Gupta RC (ed) Veterinary toxicology. Basic and clinical principles, 3rd edn. Elsevier/Academic
Press, Amsterdam, pp 103–131
Atterbury RJ, Van Bergen MA, Ortiz F et al (2007) Bacteriophage therapy to reduce Salmonella colonization of broiler
chickens. Appl Environ Microbiol 73(14):4543–4549
Barbosa LN, Rall VL, Fernandes AA et al (2009) Essential oils against foodborne pathogens and spoilage bacteria in
minced meat. Foodborne Pathog Dis 6:725–728
Bardina C, Spricigo DA, Cortés P et al (2012) Significance of the bacteriophage treatment schedule in reducing
Salmonella colonization of poultry. Appl Environ Microbiol 78:6600–6607
Boman HG (1991) Antibacterial peptides: key components needed in immunity. Cell 65(2):205–207
Bren L (2007) Bacteria-eating virus approved as food additive. FDA Consum 41(1):20–22
Brenes A, Roura E (2010) Essential oils in poultry nutrition: main effects and modes of action. Anim Feed Sci Technol
158(1–2):1–14
Canani RB, Di Costanzo M, Leone L et al (2011) Potential beneficial effects of butyrate in intestinal and extraintestinal
diseases. World J Gastroenterol 17(12):1519–1528
Carvalho CM, Gannon BW, Halfhide DE et al (2010) The in vivo efficacy of two administration routes of a phage
cocktail to reduce numbers of Campylobacter coli and Campylobacter jejuni in chickens. BMC Microbiol 10:232
Castillo M, Martín-Orúe SM, Roca M et al (2006) The response of gastrointestinal microbiota to avilamycin, butyrate,
and plant extracts in early-weaned pigs. J Anim Sci 84(10):2725–2734
Cavaleri F, Bashar E (2018) Potential synergies of β-hydroxybutyrate and butyrate on the modulation of metabolism,
inflammation, cognition, and general health. J Nutr Metab 2018:7195760
Chandar B, Poovitha S, Ilango K et al (2017) Inhibition of New Delhi metallo-β-lactamase 1 (NDM-1) producing
Escherichia coli IR-6 by selected plant extracts and their synergistic actions with antibiotics. Front Microbiol 8:1580
Chaveerach P, Keuzenkamp DA, Lipman LJ et al (2004) Effect of organic acids in drinking water for young broilers on
Campylobacter infection, volatile fatty acid production, gut microflora and histological cell changes. Poult Sci 83(3):330–
334
Chen F, Wu W, Millman A et al (2014) Neutrophils prime a long-lived effector macrophage phenotype that mediates
accelerated helminth expulsion. Nat Immunol 15(10):938–946
Cheng G, Hao H, Xie S et al (2014) Antibiotic alternatives: the substitution of antibiotics in animal husbandry? Front
Microbiol 5:217
Chowdhury R, Islam KMS et al (2009) Effect of citric acid, avilamycin, and their combination on the performance, tibia
ash, and immune status of broilers. Poult Sci 88:1616–1622
Clavijo V, Vives Flórez MJ (2017) The gastrointestinal microbiome and its association with the control of pathogens in
broiler chicken production: a review. Poult Sci 97:1–16
Cogliani C, Goossens H, Greko C (2011) Restricting antimicrobial use in food animals: lessons from Europe. Microbe
6(6):274–279
Collineau L, Rojo-Gimeno C, Léger A et al (2017) Herd-specific interventions to reduce antimicrobial usage in pig
production without jeopardising technical and economic performance. Prev Vet Med 144:167–178
Cook SR, Maiti PK, DeVinney R et al (2007) Avian- and mammalianderived antibodies against adherence-associated
proteins inhibit host cell colonization by Escherichia coli O157:H7. J Appl Microbiol 103(4):1206–1219
Cooper IR (2016) A review of current methods using bacteriophages in live animals, food and animal products
intended for human consumption. J Microbiol Methods 130:38–47
Cosby DE, Cox NA, Harrison MA et al (2015) Salmonella and antimicrobial resistance in broilers: a review. J Appl Poult
Res 24:408–426
Cotter PD, Hill C, Ross RP (2005) Bacteriocins: developing innate immunity for food. Nat Rev Microbiol 3(10):777–788
Dahiya JP, Wilkie DC, Van Kessel AG et al (2006) Potential strategies for controlling necrotic enteritis in broiler
chickens in post-antibioticera. Anim Feed Sci Technol 129(1–2):60–88
Davies G, Genini S, Bishop SC, Giuffra E (2009) An assessment of opportunities to dissect host genetic variation in
resistance to infectious diseases in livestock. Animal 3(3):415–436
Diaz-Sanchez S, D’Souza D, Biswas D et al (2015) Botanical alternatives to antibiotics for use in organic poultry
production. Poult Sci 94(6):1419–1430
Dibner JJ, Richards JD (2005) Antibiotic growth promoters in agriculture: history and mode of action. Poult Sci 84:634–
643
Dierick NA, Decuyperea JA, Molly K et al (2002) The combined use of triacylglycerols (TAGs) containing medium chain
fatty acids (MCFAs) and exogenous lipolytic enzymes as an alternative to nutritional antibiotics in piglet nutrition: II. In
vivo release of MCFAs in gastric cannulated and slaughtered piglets by endogenous and exogenous lipases; effects on
the luminal gut flora and growth performance. Livest Prod Sci 76(1–2):1–16
Dorman HJ, Deans SG (2000) Antimicrobial agents from plants: antibacterial activity of plant volatile oils. J Appl
Microbiol 88 (2):308–316
Dorne JL, Heppner C, Kass GE et al (2013) Special issue: risk assessment of undesirable substances in feed. Toxicol
Appl Pharmacol 270 (3):185–186

603
 EC (2001) Directive 2001/82/EC of the European Parliament and of the Council of 6 November 2001 on the
community code relating to veterinary medicinal products (OJ L 136, 30.4.2004)
EC (2003) Regulation (EC) No. 1831/2003 (EC, 2003) of the European Parliament and of the Council of 22 September
on additives for use in animal nutrition (OJ L 268, 18.10.2003)
EC (2004) Directive 2004/28/EC of the European Parliament and of the Council of 31 March 2004 amending Directive
2001/82/EC on the Community code relating to veterinary medicinal products (OJ L 136, 30/04/2004)
EC (2008) Commission Regulation (EC) No 429/2008 of 25 April 2008 on detailed rules for the implementation of
Regulation (EC) No 1831/2003 of the European Parliament and of the Council as regards the preparation and the
presentation of applications and the assessment and the authorisation of feed additives (OJ No. L 133, 22.5.2008)
EC (2009) Regulation (EC) No 767/2009 of the European Parliament and of the Council of 13 July 2009 on the placing
on the market and use of feed, amending European Parliament and Council Regulation (EC) No 1831/2003 and
repealing Council Directive 79/373/EEC, Commission Directive 80/511/EEC, Council Directives 82/471/EEC,
83/228/EEC, 93/74/EEC, 93/113/EC and 96/25/EC and Commission Decision 2004/217/EC (OJ No. 229, 1.9.2009)
EC (2015) Commission notice. Guidelines for the prudent use of antimicrobials in veterinary medicine (2015/C 299/04)
(OJ No. C 299, 11.09.2015)
EC (2018) DG Health and Food Safety. Overview report non-EU countries’ national policies and measures on
antimicrobial resistance. Publications Office of the European Union, Luxembourg. isbn:978-92-79-43534-8
EFSA (2009) Guidance on safety assessment of botanicals and botanical preparations intended for use as ingredients
in food supplements. EFSA J 7(9):1249
EFSA (2014) Scientific opinion on a qualified presumption of safety (QPS) approach for the safety assessment of
botanicals and botanical preparations. EFSA J 12(3):3593
EMA (2012) CVMP. Opinion following an Article 35 referral for all veterinary medicinal products containing systemically
administered (parenteral and oral) 3rd and 4th generation cephalosporins intended for use in food producing species.
http://www.ema.europa.eu/ema/index.jsp?curl¼pages/medicines/veterinary/referrals/Cephalosporins/
vet_referral_000056.jsp&mid¼WC0b01ac05805c5170
EMA (2016a) Opinion of the committee for medicinal products for veterinary use pursuant to Article 35 of Directive
2001/82/EC for veterinary medicinal products EMEA/V/A/118. Opinion 8 December 2016 EMA/CVMP/746319/2016
EMA (2016b) Updated advice on the use of colistin products in animals within the European Union: development of
resistance and possible impact on human and animal health. 26 May 2016. EMA/231573/2016
EU (2017) A European One Health Action Plan against Antimicrobial Resistance (AMR).
https://ec.europa.eu/health/amr/sites/amr/files/amr_action_plan_2017_en.pdf
EU Regulation 2019/6 of the European Parliament and of the council of 11 December 2018 on veterinary medicinal
products and repealing Directive 2001/82/EC (OJ of EU L4/43, 7.1.2019)
FAWC (1993) Farm Animal Welfare Council: second report on priorities for research and development in farm animal
welfare. Tolworth, MAFF, 1993
FDA (2013) Guidance for Industry #213: New animal drugs and new animal drug combination products administered in
or on medicated feed or drinking water of food-producing animals: recommendations for drug sponsors for voluntarily
aligning product use conditions withGFI#209.
http://www.fda.gov/downloads/AnimalVeterinary/GuidanceComplianceEnforcement/GuidanceforIndustry/UCM299624.pdf
Feng Y, Zhang H, Wu Z et al (2014) Streptococcus suis infection: an emerging/reemerging challenge of bacterial
infectious diseases? Virulence 5(4):477–497
Fischetti VA (2008) Bacteriophage lysins as effective antibacterials. Curr Opin Microbiol 11(5):393–400
Frese SA, Parker K, Calvert CC et al (2015) Diet shapes the gut microbiome of pigs during nursing and weaning.
Microbiome 3:28
Fu Y, Zu Y, Chen L et al (2007) Antimicrobial activity of clove and rosemary oils alone and in combination. Phytother
Res 21:989–994
Gadde U, Kim WH, Oh ST et al (2017) Alternatives to antibiotics for maximizing growth performance and feed
efficiency in poultry: a review. Anim Health Res Rev 18(1):26–45
Geier MS, Torok VA, Guo P et al (2011) The effects of lactoferrin on the intestinal environment of broiler chickens. Br
Poult Sci 52 (5):564–572
Gill PA, van Zelm MC, Muir JG et al (2017) Review article: short chain fatty acids as potential therapeutic agents in
human gastrointestinal and inflammatory disorders. Aliment Pharmacol Ther 48:1–20
Gloaguen M, Le Floc’h N, Primot Y et al (2014) Performance of piglets in response to the standardized ileal digestible
phenylalanine and tyrosine supply in low-protein diets. Animal 8(9):1412–1419
Grant A, Hashem F, Parveen S (2016) Salmonella and Campylobacter: antimicrobial resistance and bacteriophage
control in poultry. Food Microbiol 53:104–109
Grashorn MA (2010) Use of phytobiotics in broiler nutrition—an alternative to infeed antibiotics? J Anim Feed Sci
19:338–347
Gresse R, Chaucheyras-Durand F, Fleury MA et al (2017) Gut microbiota dysbiosis in postweaning piglets:
understanding the keys to health. Trends Microbiol 25(10):851–873
Guo FC, Williams BA, Kwakkel RP et al (2004) Effects of mushroom and herb polysaccharides, as alternatives for an
antibiotic, on the cecal microbial ecosystem in broiler chickens. Poult Sci 83 (2):175–182
Gyles CL (2008) Antimicrobial resistance in selected bacteria from poultry. Anim Health Res Rev 9(2):149–158

604
 Han Y-K, Hwan Hwang IL, Thacker PA (2011) Use of a microencapsulated eucalyptus-medium chain fatty acid product
as an alternative to zinc oxide and antibiotics for weaned pigs. J Swine Health Prod 19(1):34–43
Hashemi SR, Davoodi H (2011) Herbal plants and their derivatives as growth and health promoters in animal nutrition.
Vet Res Commun 35:169–180
Hodin R (2000) Maintaining gut homeostasis: the butyrate-NF-kappaB connection. Gastroenterology 118(4):798–801
Hong SM, Hwang JH, Kim IH (2012) Effect of medium-chain triglyceride (mct) on growth performance, nutrient
digestibility, blood characteristics in weanling pigs. Asian-Aust J Anim Sci 25 (7):1003–1008
Hovi M, Sundrum A, Thamsborg SM (2003) Animal health and welfare in organic livestock production in Europe:
current state and future challenges. Lives Prod Sci 80(1–2):41–53
Huyghebaert G, Ducatelle R, Van Immerseel F (2011) An update on alternatives to antimicrobial growth promoters for
broilers. Vet J 187:182–188
IACG (2018) Antimicrobial resistance: invest in innovation and research, and boost R&D and access. International
Coordination Group on Antimicrobial Resistance (IACG) discussion paper, June 2018
Isaacson R, Kim HB (2012) The intestinal microbiome of the pig. Anim Health Res Rev 13(1):100–109
Jamroz D, Wiliczkiewicz A, Wertelecki T et al (2005) Use of active substances of plant origin in chicken diets based on
maize and locally grown cereals. Br Poult Sci 46(4):485–493
Józefiak D, Sip A, Rutkowski A et al (2012) Lyophilized Carnobacterium divergens AS7 bacteriocin preparation
improves performance of broiler chickens challenged with Clostridium perfringens. Poult Sci 91(8):1899–1907
Józefiak D, Kierończyk B, Juśkiewicz J et al (2013) Dietary nisin modulates the gastrointestinal microbial ecology and
enhances growth performance of the broiler chickens. PLoS One 8 (12):e85347
Kamada N, Seo SU, Chen GY et al (2013) Role of the gut microbiota in immunity and inflammatory disease. Nat Rev
Immunol 13 (5):321–335
Khan SH, Iqbal J (2016) Recent advances in the role of organic acids in poultry nutrition. J Appl Anim Res 44:359–369
Kittler S, Fischer S, Abdulmawjood A et al (2013) Effect of bacteriophage application on Campylobacter jejuni loads in
commercial broiler flocks. Appl Environ Microbiol 79:7525–7533
Laanen M, Persoons D, Ribbens S et al (2013) Relationship between biosecurity and production/antimicrobial
treatment characteristics in pig herds. Vet J 198:508–512
Laanen M, Maes D, Hendriksen C et al (2014) Pig, cattle and poultry farmers with a known interest in research have
comparable perspectives on disease prevention and on-farm biosecurity. Prev Vet Med 115:1–9
Li P, Piao X, Ru Y et al (2012) Effects of adding essential oil to the diet of weaned pigs on performance, nutrient
utilization, immune response and intestinal health. Asian-Aust J Anim Sci 25 (11):1617–1626
Liu Y, Han F, Xie Y et al (2011) Comparative antimicrobial activity and mechanism of action of bovine lactoferricin-
derived synthetic peptides. Biometals 24(6):1069–1078
Loc-Carrillo C, Abedon S (2011) Pros and cons of phage therapy. Bacteriophage 1:111–114
Mariadason JM, Barkla DH, Gibson PR (1997) Effect of short-chain fatty acids on paracellular permeability in Caco-2
intestinal epithelium model. Am J Phys 272:G705–G712
Marounek M, Skřivanová E, Rada V (2003) Susceptibility of Escherichia coli to C 2–C 18 fatty acids. Folia Microbiol 48
(6):731–735
Międzybrodzki R, Borysowski J, Weber-Dąbrowska B et al (2012) Clinical aspects of phage therapy. Adv Virus Res
83:73–121
Millet S, Maertens L (2011) The European ban on antibiotic growth promoters in animal feed: from challenges to
opportunities. Vet J 187(2):143–144
Mitsch P, Zitterl-Eglseer K, Köhler B et al (2004) The effect of two different blends of essential oil components on the
proliferation of Clostridium perfringens in the intestines of broiler chickens. Poult Sci 83(4):669–675
Nilsson AS (2014) Phage therapy constraints and possibilities. Ups J Med Sci 119:192–198
O’Flaherty S, Ross RP, Coffey A (2009) Bacteriophage and their lysins for elimination of infectious bacteria: review
article. FEMS Microbiol Rev 33:801–819
Oliveira H, Azeredo J, Lavigne R et al (2012) Bacteriophage endolysins as a response to emerging foodborne
pathogens. Trends Food Sci Technol 28:103–115
Omonijo FA, Ni L, Gong J et al (2018) Essential oils as alternatives to antibiotics in swine production. Anim Nutr
4(2):126–136
Oostindjer M, Bolhuis JE, Mendl M et al (2011) Learning how to eat like a pig: effectiveness of mechanisms for vertical
social learning in piglets. Anim Behav 82(3):503–511
Over K, Hettiarachchy N, JohnsonMet al (2009) Effect of organic acids and plant extracts on Escherichia coli O157:H7,
Listeria monocytogenes, and Salmonella typhimurium in broth culture model and chicken meat systems. J Food Sci
74:515–521
Panda AK, Rama Rao SV, Raju MVLN et al (2009) Effect of butyric acid on performance, gastrointestinal tract health
and carcass characteristics in broiler chickens. Asian-Aust J Anim Sci 22:1026–1031
Patterson JA, Burkholder KM (2003) Applications of prebiotics and probiotics in poultry production. Poult Sci 82:627–
631
Petri D, Hillb JE, Van Kessel AG (2010) Microbial succession in the gastrointestinal tract (GIT) of the preweaned pig.
Lives Sci 133 (1–3):107–109

605
 Postma M, Stärk KDC, Sjölund M et al (2015) Alternatives to the use of antimicrobial agents in pig production: a multi-
country expert-ranking of perceived effectiveness, feasibility and return on investment. Prev Vet Med 118:457–466
Postma M, Backhans A, Collineau L et al (2016a) Evaluation of the relationship between the biosecurity status,
production parameters, herd characteristics and antimicrobial usage in farrow-to-finish pig production in four EU
countries. Porcine Health Manag 2:9
Postma M, Backhans A, Collineau L et al (2016b) The biosecurity status and its associations with production and
management characteristics in farrow-to-finish pig herds. Animal 10(3):478–489
Pouillot F, Chomton M, Blois H et al (2012) Efficacy of bacteriophage therapy in experimental sepsis and meningitis
caused by O25b:H4-ST131 E. coli strain producing CTX-M-15. Antimicrob Agents Chemother 56(7):3568–3575
Prescott JF (2008) Antimicrobial use in food and companion animals. Anim Health Res Rev 9(2):127–133
Rafacz-Livingston K, Parsons C, Jungk R (2005) The effects of various organic acids on phytate phosphorus utilization
in chicks. Poult Sci 84:1356–1362
Ragland D, Stevenson D, Hill MA (2008) Oregano oil and multicomponent carbohydrases as alternatives to
antimicrobials in nursery diets. J Swine Health Prod 16(5):238–243
Ricke S (2003) Perspectives on the use of organic acids and short chain fatty acids as antimicrobials. Poult Sci
82:632–639
Rose E, Nunan C (2016) Alliance to save our antibiotics. Antibiotic use in the UK dairy sector.
http://www.saveourantibiotics.org/media/1762/antibiotic-use-in-the-uk-dairy-sector.pdf
Rossi R, Pastorelli G, Cannata S et al (2010) Recent advances in the use of fatty acids as supplements in pig diets: a
review. Anim Feed Sci Technol 162(1–2):1–11
Rutherford ST, Bassler BL (2012) Bacterial quorum sensing: its role in virulence and possibilities for its control. Cold
Spring Harb Perspect Med 2(11):1–25
Samanta S, Haldar S, Ghosh TK (2008) Production and carcass traits in broiler chickens given diets supplemented
with inorganic trivalent chromium and an organic acid blend. Br Poult Sci 49:155–163
Sang Y, Blecha F (2008) Antimicrobial peptides and bacteriocins: alternatives to traditional antibiotics. Anim Health Res
Rev 9 (2):227–235
Sarica S, Ciftci A, Demir E et al (2005) Use of an antibiotic growth promoter and two herbal natural feed additives with
and without exogenous enzymes in wheat based broiler diets. S Afr J Anim Sci 35(1):61–72
Schmelcher M, Shabarova T, Eugster MR et al (2010) Rapid multiplex detection and differentiation of Listeria cells by
use of fluorescent phage endolysin cell wall binding domains. Appl Environ Microbiol 76(17):5745–5756
Schmelcher M, Donovan DM, Loessner MJ (2012a) Bacteriophage endolysins as novel antimicrobials. Future
Microbiol 7:1147–1171
Schmelcher M, Powell AM, Becker SC et al (2012b) Chimeric phage lysins act synergistically with lysostaphin to kill
mastitis-causing Staphylococcus aureus in murine mammary glands. Appl Environ Microbiol 78(7):2297–2305
Serafino A, Sinibaldi Vallebona P et al (2008) Stimulatory effect of Eucalyptus essential oil on innate cell-mediated
immune response. BMC Immunol 9:17
Shin B, Park W (2018) Zoonotic diseases and phytochemical medicines for microbial infections in veterinary science:
current state and future perspective. Front Vet Sci 5:166
Shin MS, Han SK, Ji AR, Kim KS, Lee WK (2008) Isolation and characterization of bacteriocin-producing bacteria from
the gastrointestinal tract of broiler chickens for probiotic use. J Appl Microbiol 105(6):2203–2212
Simmons KJ, Chopra I, Fishwick CWG (2010) Structure-based discovery of antibacterial drugs. Nat Rev Microbiol
8:501–510
Skrivanová E, Marounek M, Dlouhá G et al (2005) Susceptibility of Clostridium perfringens to C-C fatty acids. Lett Appl
Microbiol 41 (1):77–81
Skrzypek T, Valverde Piedra JL, Skrzypeka H et al (2007) Intestinal villi structure during the development of pig and
wild boar crossbreed neonates. Livest Sci 109(1–3):38–41
Smith HW, Huggins MB, Shaw KW (1987) The control of experimental Escherichia coli diarrhea in calves by means of
bacteriophages. J Gen Microbiol 133:1111–1126
Solis de los Santos F, Donoghue AM, Venkitanarayanan K et al (2008) Therapeutic supplementation of caprylic acid in
feed reduces Campylobacter jejuni colonization in broiler chicks. Appl Environ Microbiol 74(14):4564–4566
Spiljar M, Merkler D, Trajkovski M (2017) The immune system bridges the gut microbiota with systemic energy
homeostasis: focus on TLRs, mucosal barrier, and SCFAs. Front Immunol 8:1353
Stein HH, Kil DY (2006) Reduced use of antibiotic growth promoters in diets fed to weanling pigs: dietary tools, part 2.
Anim Biotechnol 17 (2):217–231
Suchodolski JS, Ruaux CG, Steiner JM et al (2005) Assessment of the qualitative variation in bacterial microflora
among compartments of the intestinal tract of dogs by use of a molecular fingerprinting technique. Am J Vet Res
66:1556–1562
Sulakvelidze A (2005) Phage therapy: an attractive option for dealing with antibiotic-resistant bacterial infections. Drug
Discov Today 10 (12):807–809
Sulakvelidze A (2011) Safety by nature: potential bacteriophage applications. Microbe 6:122–126
Sulakvelidze A (2013) Using lytic bacteriophages to eliminate or significantly reduce contamination of food by
foodborne bacterial pathogens. J Sci Food Agric 93:3137–3146
Summers WC (2012) The strange history of phage therapy. Bacteriophage 2(2):130–133
606
 Tellez GI, Jaeger L, Dean CE et al (1993) Effect of prolonged administration of dietary capsaicin on Salmonella
enteritidis infection in leghorn chicks. Avian Dis 37(1):143–148
Thacker PA (2013) Alternatives to antibiotics as growth promoters for use in swine production: a review. J Anim Sci
Biotechnol 4(1):35
Timbermont L, Lanckriet A, Gholamiandehkordi AR et al (2009) Origin of Clostridium perfringens isolates determines
the ability to induce necrotic enteritis in broilers. Comp Immunol Microbiol Infect Dis 32 (6):503–512
Timbermont L, Lanckriet A, Dewulf J et al (2010) Control of Clostridium perfringens-induced necrotic enteritis in broilers
by targetreleased butyric acid, fatty acids and essential oils. Avian Pathol 39 (2):117–121
Tini M, Jewell UR, Camenisch G et al (2002) Generation and application of chicken egg-yolk antibodies. Comp
Biochem Physiol A Mol Integr Physiol 131(3):569–574
Toro H, Price SB, McKee AS et al (2005) Use of bacteriophages in combination with competitive exclusion to reduce
Salmonella from infected chickens. Avian Dis 49:118–124
Turner PV (2018) Improving animal production biosecurity to minimise global one health risks. IAHJ 5(4):28–30
Van Der Wielen PW, Biesterveld S, Notermans S et al (2000) Role of volatile fatty acids in development of the cecal
microflora in broiler chickens during growth. Appl Environ Microbiol 66:2536–2540
Van Dijk A, Herrebout M, Tersteeg-Zijderveld MH et al (2012) Campylobacter jejuni is highly susceptible to killing by
chicken host defense peptide cathelicidin-2 and suppresses intestinal cathelicidin-2 expression in young broilers. Vet
Microbiol 160(3–4):347–354
Van Dijk A, Molhoek EM, Veldhuizen EJ, Tjeerdsma-van Bokhoven JL, Wagendorp E, Bikker F, Haagsman HP (2009)
Identification of chicken cathelicidin-2 core elements involved in antibacterial and immunomodulatory activities. Mol
Immunol 46(13):2465–2473
Van Dijk A, Molhoek EM, Bikker FJ, Yu PL, Veldhuizen EJA, Haagsman HP (2011) Avian cathelicidins: paradigms for
the development of anti-infectives. Vet Microbiol 153(1–2):27–36
Van Immerseel F, Russell JB, Flythe MD et al (2006) The use of organic acids to combat Salmonella in poultry: a
mechanistic explanation of the efficacy. Avian Pathol 35(3):182–188
Vanderhoof JA, Whitney DB, Antonson DL et al (1999) Lactobacillus GG in the prevention of antibiotic-associated
diarrhea in children. J Pediatr 135(5):564–568
Vicente JL, Lopez C, Avila E et al (2007) Effect of dietary natural capsaicin on experimental Salmonella enteritidis
infection and yolk pigmentation in laying hens. Int J Poult Sci 6:393–396
Von Borel E, Sørensen JT (2004) Organic livestock production in Europe: aims, rules and trends with special emphasis
on animal health and welfare. Lives Prod Science 90(1):3–9
Walker WL, Epperson WB, Wittum TE et al (2012) Characteristics of dairy calf ranches: morbidity, mortality, antibiotic
use practices, and biosecurity and biocontainment practices. J Dairy Sci 95 (4):2204–2214
Wang YZ, Shan TZ, Xu ZR et al (2007) Effects of the lactoferrin (LF) on the growth performance, intestinal microflora
and morphology of weanling pigs. Anim Feed Sci Technol 135 (3–4):263–272
Wang HT, Li YH, Chou IP et al (2013) Albusin B modulates lipid metabolism and increases antioxidant defense in
broiler chickens by a proteomic approach. J Sci Food Agric 93(2):284–292
Wernicki A, Nowaczek A, Urban-Chmiel R (2017) Bacteriophage therapy to combat bacterial infections in poultry. Virol
J 14:179
Windisch W, Schedle K, Plitzner C et al (2008) Use of phytogenic products as feed additives for swine and poultry. J
Anim Sci 86 (14 suppl):E140–E148
Wong CL, Sieo CC, Tan WS et al (2014) Evaluation of a lytic bacteriophage, Φ st1, for biocontrol of Salmonella
enterica serovar typhimurium in chickens. Int J Food Microbiol 172:92–101
Yan H, Ajuwon KM (2017) Butyrate modifies intestinal barrier function in IPEC-J2 cells through a selective upregulation
of tight junction proteins and activation of the Akt signalling pathways. PLoS One 12 (6):e0179586
Zasloff M (1987) Magainins, a class of antimicrobial peptides from Xenopus skin: isolation, characterization of two
active forms, and partial cDNA sequence of a precursor. Proc Natl Acad Sci USA 84 (15):5449–5453
Zimmer M, Vukov N, Scherer S et al (2002) The murein hydrolase of the bacteriophage ϕ3626 dual lysis system is
active against all tested Clostridium perfringens strains. Appl Environ Microbiol 68:5311–5317

607
 Aditivos para rações em saúde animal
Amit Kumar Pandey, Prafulla Kumar e M. J. Saxena

Resumo
Os aditivos para ração animal são usados em todo o mundo para vários rebanhos,
incluindo aves, por várias razões, como fornecer nutrientes essenciais, aumentar a
palatabilidade da ração, melhorar seu desempenho de crescimento, bem como otimizar a
utilização da ração. Animais com alto desempenho de crescimento precisam manter um
alto estado de saúde, e o uso de aditivos adequados é um argumento predominante
nesses casos. Com o aumento dos padrões da indústria e da conscientização do
consumidor, bem como a demanda por produtos alimentícios saudáveis de origem animal,
há uma pressão crescente sobre a indústria por alternativas mais naturais e não residuais
do que os aditivos convencionais usados até recentemente como produtos de ração
animal. O bem-estar do consumidor e animal são as principais preocupações que ditam
as alternativas valiosas de aditivos para rações animais. Algumas das alternativas
consideradas para uso como aditivos para ração animal são probióticos, prebióticos,
enzimas e ervas. Essa escolha de aditivos para rações é apoiada por pesquisas
científicas e empíricas sobre essas alternativas, já que as ervas e seus extratos
(botânicos) têm uma ampla gama de atividades que não só estimulam a ingestão de
ração, mas também estimulam secreções endógenas ou têm antimicrobianos,
coccidiostáticos, ou atividade anti-helmíntica.

A proibição do uso de antibióticos como promotores de crescimento, rentabilidade e maior

conscientização sobre o efeito residual prejudicial fazem com que o aditivo à base de
ervas para rações ganhe importância na produção animal sustentável. O setor de
pecuária se beneficia com o uso de diversos aditivos para rações, como ácido ascórbico,
prebióticos, probióticos e extratos de ervas. As propriedades medicinais das ervas para
melhorar a atividade antimicrobiana, antiinflamatória, antioxidante, digestibilidade e
imunoestimulante devem ser exploradas na alimentação de animais, bem como em
alimentos seguros para seres humanos. A padronização do regime de dosagem correto
de aditivos fitoterápicos para uma função específica é a demanda da situação, portanto,
mais pesquisas devem ser conduzidas nessa direção.

Palavras-chave: Aditivos para rações · Produto fitogênico · Probióticos · Prebióticos ·

Enzimas · Ervas · Extratos vegetais · Controle de qualidade
A. K. Pandey (*) · P. Kumar · M. J. Saxena. Ayurvet, Ghaziabad, UP, India. e-mail: amit.pandey@ayurvet.com

608
1. Introdução
Um dos maiores desafios enfrentados por administradores de fazendas, criadores de
gado, cientistas animais, bem como nutricionistas envolvidos na indústria de ração animal
ou no domínio da pesquisa é projetar as práticas de ração balanceada de animais de alto
rendimento, associado à manutenção da relação custo-benefício. Além disso, deve ser
levado em consideração o fato de que os custos de carne, laticínios e subprodutos
animais não são estáveis e variam por vários motivos, e um deles é o custo da ração
envolvido (Thornton 2010). Os custos da alimentação representam o maior custo de
insumo nas práticas de criação de animais (estimado em 35–50%). Em geral, há uma
opinião de que os animais comiam plantas, ou grama ou algum outro “alimento” natural
para sua espécie, mas na realidade, nas fazendas de hoje, alimentar gado e aves é um
empreendimento complicado, repleto de controvérsias e opiniões divididas. Os aditivos
para rações têm sido considerados como um grupo ou classe de ingredientes para rações
que, em um papel não nutritivo, podem causar a resposta animal desejada. Essas
respostas podem incluir uma mudança no pH, crescimento ou modificação da resposta
metabólica do animal (Hutjens 1991). De acordo com a Comissão Europeia, os aditivos
para rações são produtos usados na nutrição animal com o objetivo de melhorar a
qualidade da ração e a qualidade dos alimentos de origem animal ou para melhorar o
desempenho e a saúde dos animais, por exemplo, proporcionando melhor digestibilidade
dos materiais para ração. Vários aditivos para rações podem conter vários nutrientes,
como sódio e proteínas, que fazem parte do bicarbonato de sódio ou da cultura de
levedura, respectivamente. Tecnicamente, os aditivos para rações não são considerados
um requisito nem garantem alta produtividade animal ou lucratividade econômica nas
práticas de criação de animais (Animal Feed Additives 2018, fonte da web). Houve um
rápido aumento na demanda a ser atendida da indústria de laticínios e carne devido à
crescente pressão populacional. A segurança alimentar, que é a segunda na lista de
Objetivos de Desenvolvimento Sustentável na forma de “fome zero” e a 12ª meta de
desenvolvimento sustentável que é “consumo e produção responsáveis”, são ambas
muito procuradas na indústria de ração animal.

A importância dos aditivos para rações está ganhando popularidade dia a dia devido aos
benefícios que eles podem determinar, como promoção de crescimento em animais,
controle de doenças infecciosas, bem como aumento da digestibilidade da ração
(Specialty Feed Additives Report 2016). Há um gráfico de crescimento constante do
mercado de aditivos para ração animal que deve crescer no futuro devido ao rápido
aumento na demanda por carne, produtos cárneos e laticínios em todo o mundo (Animal

609
Feed Additives Report 2014). O consenso dos produtores de carne e laticínios aumentou
em relação à qualidade da ração e às certificações associadas a eles devido à ocorrência
frequente de epidemias como a gripe aviária, outras doenças como a febre aftosa e
preocupações ambientais, levando a um aumento da preocupação com os animais saúde
em todo o mundo.

Os maiores consumidores de aditivos para rações no mundo são América do Norte e

Ásia-Pacífico. Eles respondem por mais de 60% do consumo de rações animais no
mundo (Animal Feed Additives Report 2014). Estima-se que a Ásia-Pacífico seja a região
de crescimento mais rápido em termos de receita. O crescimento é particularmente alto
em economias emergentes como Índia, China e Brasil devido ao aumento gradual nos
níveis de renda da população, ao aumento da industrialização e ao boom no setor de
serviços e, no processo, também deu um impulso à indústria de rações devido ao
aumento do consumo de carne per capita (Ruminant Feed Market Report 2018). Em
termos de espécies, a maior cobertura de mercado é de aditivos para rações para aves,
seguidos pela participação no mercado de aditivos para rações para suínos (Animal Feed
Additives Report 2014). Os principais fatores impulsionadores do mercado global de
aditivos para rações animais podem ser classificados como (Kearney 2010; Henchion et
al. 2017):

(a) Aumento no consumo global de carne

(b) Aumentar a conscientização em relação à qualidade e segurança da carne
(c) Aumento da produção em massa de carne
(d) Surtos recentes de doenças na pecuária

As restrições do mercado estão aumentando o custo da matéria-prima e a estrutura

regulatória. No entanto, o aumento do custo dos produtos naturais para rações está
criando uma oportunidade para aditivos para rações como uma alternativa barata. Os
principais fabricantes estão se concentrando na expansão dos negócios em todas as
regiões e na criação de novas fábricas para aumentar sua capacidade de produção.

Embora existam várias definições de aditivos para rações, uma definição abrangente
apresentada pela Comissão Europeia é: “Os aditivos para rações são produtos usados na
nutrição animal com o propósito de melhorar a qualidade dos alimentos e dos alimentos
de origem animal, ou para melhorar o desempenho e saúde dos animais, por exemplo
proporcionando melhor digestibilidade dos materiais de alimentação.”

Com o aperto das autoridades reguladoras e mídias sociais mais fortes, dificilmente há
qualquer espaço para ignorar as normas estabelecidas para as indústrias. Para qualquer
aditivo para alimentação animal a ser comercializado, o processo de avaliação científica e
610
validação para determinar a presença ou ausência de quaisquer efeitos nocivos na saúde
humana e animal ou no ambiente deve ser realizado de forma rigorosa (Comissão
Europeia 2018). Portanto, vários domínios, como saúde, sustentabilidade ambiental,
requisitos regulatórios e até mesmo mudanças climáticas, fazem parte dos efeitos da
produção, comercialização e pós-utilização que são assimilados pela indústria de
produção de rações.

2. Classificação de aditivos para rações animais

Os aditivos para rações são classificados em várias categorias de acordo com diferentes
parâmetros. Os aditivos para rações podem ser de vários tipos: com base nos
regulamentos da Comissão Europeia, com base na abordagem holística e com base em
sua origem e função.

Os aditivos para rações podem ser categorizados como antioxidantes, acidificantes

compostos, enzimas complexas, adsorvente de micotoxinas, prevenção de mofo,
vitaminas e eletrólitos, cloridrato de L-carnitina, nicotinato de cromo diluído, agentes de
engorda, aminoácidos, antibióticos, aglutinantes, minerais, ervas e pré-mistura. Uma
classificação amplamente reconhecida de aditivos para rações animais com base nos
regulamentos e diretrizes da Comissão Europeia é como abaixo. Uma classe adicional de
aditivos para rações, usada para incluir as intervenções tecnológicas empregadas em
aditivos para rações, são os aditivos tecnológicos.

2.1 Com base nos regulamentos da Comissão Europeia

2.1.1 – Aditivos sensoriais

Isso se refere a um grupo de aditivos que melhoram a palatabilidade (ou seja, ingestão
voluntária) de uma dieta, estimulando o apetite, geralmente através do efeito que esses
produtos têm no sabor ou na cor da dieta. Por exemplo, sabores de ração ou adoçantes,
como extrato de baunilha, podem encorajar os leitões a comerem uma ração.

2.1.2 – Aditivos Nutricionais

Os aditivos fornecem nutrientes específicos para um animal para um crescimento ideal.

Um exemplo seria uma vitamina, aminoácido ou mineral traço. Na maioria dos casos,
esses aditivos são simplesmente formas concentradas de nutrientes fornecidos em
ingredientes naturais da dieta.

611
2.1.3 – Aditivos Zootécnicos

Esses aditivos melhoram o estado nutricional e a produção do gado, não apenas por
fornecer nutrientes específicos, mas também por auxiliar no uso mais eficiente dos
nutrientes presentes na dieta. Um exemplo de tal aditivo seria uma enzima ou um produto
microbiano de alimentação direta, os quais melhoram as condições do trato intestinal,
permitindo assim uma extração mais eficaz de nutrientes da dieta. A este respeito, são
frequentemente referidos como pró-nutrientes, ou seja, produtos que melhoram o valor
nutricional de uma dieta sem necessariamente fornecer nutrientes diretamente. Outros
aditivos são usados para benefícios ambientais que proporcionam à pecuária, e outros
são direcionados para funções fisiológicas específicas.

2.1.4 – Coccidiostáticos e histomonostáticos

Esses aditivos controlam a saúde das aves por meio de efeitos diretos. Esses compostos
são usados para controlar a saúde intestinal das aves, atuam diretamente nos organismos
parasitas que habitam o intestino e não são classificados como antibióticos (classificações
de aditivos para rações 2018).

2.1.5 – Aditivos Tecnológicos

Esta classificação refere-se a um grupo de aditivos que influenciam os aspectos

tecnológicos da ração. Esses aditivos não influenciam diretamente o valor nutricional da
ração, mas podem fazê-lo indiretamente, melhorando suas características de manuseio
ou higiene. Um exemplo de tal aditivo seria um ácido orgânico para a preservação de
alimentos para animais (Fig. 1).

Fig. 1 Classificação de aditivos tecnológicos para

rações

612
2.2 Com base na abordagem holística

Além da classificação europeia, uma classificação mais holística fornecida pelo Conselho
Indiano de Pesquisa Agrícola, Ministério da Agricultura, Governo da Índia, é mostrada na
Fig. 2.

Fig. 2 Conselho Indiano de Pesquisa Agrícola (ICAR) - classificação de aditivos

para rações

2.2.1 – Aditivos que influenciam a estabilidade dos alimentos, a fabricação e as

propriedades dos alimentos: Antifúngicos, antioxidantes e aglutinantes

2.2.2 – Aditivos que modificam o crescimento animal, a eficiência alimentar, o

metabolismo e o desempenho:

(a) Sabores da ração

(b) Modificadores de digestão: enzimas; prebióticos; tampões; acidificantes; ionóforos;

composto antientumecimento; isoácidos; indutores de salivação, probióticos e agentes
defaunantes
(c) Modificadores do metabolismo: Hormônios e agentes b adrenérgicos
(d) Promotores de crescimento: antibióticos; quimioterápicos, prebióticos e probióticos
2.2.3 – Aditivos que modificam a saúde animal: drogas e imunomoduladores

2.2.4 – Aditivos que modificam a aceitação do consumidor: xantofilas

Além disso, para ter uma classificação holística para incluir todos os tipos e subtipos de
aditivos para rações animais, incluindo aqueles da classificação acima com base na
atividade primária da função desempenhada por uma classe definida, sugerimos a
seguinte classificação detalhada.

613
2.3 Com base em sua origem e função (Fig. 3)

Fig. 3 Classificação holística de

aditivos para rações

2.3.1 – Aditivos que aumentam a ingestão de alimentos

Antioxidantes: compostos que previnem o ranço oxidativo das gorduras poli-insaturadas.

O ranço, uma vez que se desenvolve, pode causar a destruição das vitaminas A, D e E
assim como várias vitaminas do complexo B. Os produtos da decomposição do ranço
podem reagir com a lisina e, portanto, afetar o valor proteico da ração. A etoxiquina ou
BHT (hidroxitolueno butilado) pode servir como antioxidante na ração.

Agentes aromatizantes: são aditivos alimentares que supostamente aumentam a

palatabilidade e o consumo de ração. Há necessidade de agentes aromatizantes que
ajudem a manter o consumo de ração. Quando medicamentos altamente desagradáveis
são misturados: durante ataques de doenças, quando os animais estão sob estresse e
quando alimentos menos palatáveis estão sendo fornecidos como tal ou sendo
incorporados na ração. Os ruminantes preferem compostos doces. Além disso, bovinos e
caprinos respondem positivamente aos sais de ácidos graxos voláteis. Os cavalos
frequentemente recusam ração com mofo quando há tão pouco mofo que o dono não
consegue detectá-lo.

2.3.2 – Aditivos que aumentam a qualidade e a aceitabilidade da ração: os proprietários

de aves geralmente aumentam a cor amarela incorporando xantofilas na ração dos
frangos. Entre vários aditivos, ácido arsanílico, arsanilato de sódio e roxarsona são
adicionados para esse fim.

Agentes Antiaglomerantes: são as substâncias anidras que podem absorver umidade sem
se molhar. Eles são adicionados a misturas secas para evitar que as partículas se
aglutinem e assim manter o fluxo livre do produto. Eles são sais anidros ou substâncias
que retêm água por adesão de superfície, mas permanecem fluindo livremente: sal ou
ácidos graxos de cadeia longa; fosfato de cálcio; ferrocianeto de potássio e sódio; óxido
614
de magnésio; sais do ácido silícico – Al, Mg, Ca e sal; silicato de sódio e alumínio, silicato
de sódio e cálcio e alumínio e, silicato de cálcio e alumínio.

Umectantes: são as substâncias necessárias para manter o produto

úmido, por exemplo, pães e bolos. Os agentes antiaglomerantes imobilizam a umidade
que foi coletada. Os umectantes não são muito úteis na alimentação de aves.

Agentes Firmadores e Crispantes: são substâncias que preservam a textura dos tecidos
vegetais e, mantendo a pressão da água em seu interior, os mantêm túrgidos. Impede a
perda de água dos tecidos.

Sequestrantes: certos elementos – cobre e ferro – podem atuar como catalíticos pró-
oxidantes e, portanto, precisam ser imobilizados. Sequestrantes são compostos
adicionados para fazer isso. Esses compostos devem ter afinidade com os íons metálicos
e devem evitar que o metal se envolva na ação oxidativa. Os sequestrantes mais
eficazes, o ácido etilenodiaminotetracético (EDTA) é um sal de cálcio de EDTA que
funciona satisfatoriamente como sequestrante sem interferir com o metabolismo dos
minerais residuais.

Adoçantes: são a constituição comum dos alimentos, mas, ainda assim, usados como
aditivos, por exemplo, açúcar. Alguns são mal digeríveis e podem causar problemas
digestivos. A sacarina é amplamente utilizada durante a Primeira Guerra Mundial. É um
composto sem qualquer valor calórico.

Aditivos como umectantes, agentes firmadores e crocantes, adoçantes, emulsificantes,

estabilizantes, ácidos e tampões não são comumente usados em rações para aves.

2.3.3 – Aditivos que Facilitam a Digestão e Absorção

Grãos: as aves não têm dentes para moer grãos duros, a maior parte da moagem ocorre
na moela espessa e musculada. Quanto mais bem moída for a ração, mais área de
superfície é criada para digestão e subsequente absorção. Portanto, quando rações
duras, grossas ou fibrosas são fornecidas às aves, às vezes adiciona-se areia para
fornecer superfície adicional para moagem dentro da moela. Quando rações trituradas ou
finamente moídas são fornecidas, o valor da areia torna-se menor. Conchas de ostra,
conchas de coquina e calcário são usadas como grão.

Tampões e neutralizadores: Durante o estágio máximo de produção, os ruminantes

recebem altas doses de alimentos concentrados para atender às demandas de energia
extra e de proteína do animal. A condição, por outro lado, diminui o pH do rúmen. Uma
vez que muitos dos micróbios do rúmen não podem tolerar um ambiente de baixo pH, a

615
população normalmente heterogênea e equilibrada de micróbios torna-se distorcida,
favorecendo as bactérias acidófilas (amantes do ácido). A condição geralmente leva à
acidose e, portanto, perturba a digestão normal. A adição de tampões de alimentação e
neutralizantes, como carbonatos, bicarbonatos, hidróxidos, óxidos, sais de AGV, sais de
fosfato, cloreto de amônio e sulfato de sódio, demonstrou ter efeitos benéficos.
Recentemente, o uso de bicarbonato de sódio (NaHCO 3) mostrou aumentar o ganho
médio diário em cerca de 10%, a eficiência da alimentação em 5-10% e a produção de
leite em cerca de 0,5 L por pessoa por dia.

Quelatos: a palavra “quelatos” é derivada da palavra grega “chele”

significando “garra”, que é um bom termo descritivo para a maneira pela qual os cátions
polivalentes são retidos pelos agentes de ligação de metal. Antes da união com o metal,
essas substâncias orgânicas são denominadas "ligantes". Ligante + mineral = elemento
quelato. Quelatos orgânicos de elementos minerais, que são compostos cíclicos, são os
fatores mais importantes no controle da absorção de vários elementos minerais. Um
elemento particular na forma quelada pode ser liberado na forma iônica na parede
intestinal ou pode ser prontamente absorvido como o quelato intacto. Os quelatos podem
ser de substâncias de ocorrência natural, como clorofila, citocromos, hemoglobina,
vitamina B12, alguns aminoácidos, etc. ou podem ser de substâncias sintéticas, como
ácido etilenodiaminotetracético (EDTA).

Quelatos como aditivos alimentares

Tipo I: Quelatos que auxiliam no transporte e no armazenamento de íons metálicos – os

quelatos deste grupo se comportam como um transportador para absorção adequada,
transporte no sistema circulatório e passagem através das membranas celulares para
depositar o íon metálico no local onde necessário. Entre os aminoácidos, a cisteína e a
histidina são agentes de ligação a metais particularmente eficazes e podem ser de
importância primária no transporte e armazenamento de elementos minerais por todo o
corpo do animal. O ácido etilenodiaminotetracético (EDTA) e outros ligantes sintéticos
semelhantes também podem melhorar a disponibilidade de zinco e outros minerais.

Tipo II: Quelatos essenciais no metabolismo – muitos quelatos do corpo animal estão
retendo íons metálicos de uma forma cíclica que são absolutamente necessários para
estar nessa forma para desempenhar a função metabólica. Vitamina B12, enzimas do
citocromo e hemoglobina são alguns dos exemplos desse tipo. A molécula de
hemoglobina sem seu conteúdo de ferro ferroso não terá utilidade no transporte de
oxigênio.
Tipo III: Quelatos que interferem na utilização de cátions essenciais – existem alguns
616
quelatos encontrados no corpo que podem ter se formado acidentalmente e não são úteis
para o sujeito. Em vez disso, esses quelatos podem ser prejudiciais para a utilização
adequada do elemento. O quelato de Zn do ácido fítico e o quelato de cálcio do ácido
oxálico são exemplos deste tipo.

2.3.4 – Enzimas

As enzimas são proteínas que têm a propriedade de catalisar reações bioquímicas

específicas. Eles são encontrados em todas as plantas e animais e são responsáveis pelo
crescimento e pela manutenção da saúde. Os microrganismos também produzem
enzimas e, nos últimos anos, tem sido possível produzir enzimas usando microrganismos
em escala industrial e extrair e usar essas enzimas em uma ampla gama de processos
para a produção de rações e produtos naturais.

Os alimentos para aves são amplamente compostos de materiais vegetais e vegetais, e

existem enzimas desenvolvidas para degradar, modificar ou extrair os polímeros vegetais
encontrados em alguns dos cereais e seus subprodutos. As enzimas podem ser usadas
para melhorar a alimentação das aves das seguintes maneiras:

• Melhorando a eficiência da utilização da ração

• Melhorando os subprodutos de cereais ou componentes da ração que são mal digeridos

• Fornecendo enzimas digestivas adicionais para ajudar as aves a resistir a condições de

estresse, por exemplo, climas quentes.

Alguns dos cereais são compostos de polímeros de glicose (beta-glucana) ou arabinose e

xilose (pentosana ou hemicelulose). Esses polímeros não são bem digeridos pelas aves,
e isso pode resultar em perda de energia de duas maneiras.

A energia pode ser perdida porque esses polímeros dificultam a digestão do amido,
revestindo os grânulos de amido e impedindo a ação das enzimas digestivas do amido no
intestino. A energia pode ser perdida porque as próprias enzimas dos animais não são
capazes de degradar os polímeros e, portanto, eles passam pelo sistema digestivo
intactos. Ao adicionar enzimas microbianas à ração, esses polímeros podem ser
degradados e seu valor energético disponibilizado para a ave. O papel duplo das enzimas
foi demonstrado em ensaios com rações à base de cevada, suplementadas com beta-
glucanase, onde o aumento aparente na energia disponível foi muito superior ao
disponível no beta-glucan da cevada. Neste caso, não apenas o problema de
excrementos pegajosos foi eliminado, mas a taxa de crescimento do frango foi
equivalente à observada normalmente com alimentos contendo uma densidade de
energia mais alta (por exemplo, à base de trigo).
617
Escolha da enzima

• Como a ração é normalmente composta de uma única matéria-prima de qualidade

constante, é importante que seja feita a escolha correta do produto enzimático.

• Mesmo no caso de um problema relativamente bem definido como o da cevada, o uso

de produtos com atividade poli enzimática apresenta uma vantagem.

• As enzimas devem cumprir os seguintes critérios para aplicação prática:

– As enzimas devem ser ativas no pH do sistema digestivo dos animais e capazes

de sobreviver ao trânsito pelo estômago.

– Devem estar em uma forma física em que possam ser misturados com
segurança e facilidade em todas as formas de ração animal.

– Os produtos devem ter uma atividade altamente padronizada que permaneça

estável antes e depois da incorporação na ração ou pré mistura.

– As enzimas devem ser capazes de sobreviver às condições normais de

granulação.

2.3.5 – Aditivos que promovem o crescimento e a produção

Antibióticos: são substâncias produzidas por organismos vivos (fungos, bactérias ou

plantas verdes) e que, em pequenas concentrações, apresentam propriedades
bacteriostáticas ou bactericidas. Eles foram originalmente desenvolvidos para fins
médicos e veterinários para controlar organismos patogênicos específicos. Mais tarde, foi
descoberto que certos antibióticos podem aumentar a taxa de crescimento de porcos e
pintinhos quando incluídos em sua dieta em pequenas quantidades. Logo após este
relatório, uma ampla gama de antibióticos foi testada e os seguintes demonstraram ter
propriedades promotoras de crescimento: penicilina, oxitetraciclina (Terramicina),
clortetraciclina, bacitracina, estreptomicina, tirotricina, gramicidina, neomicina, eritromicina
e flavomicina.

O aumento do ganho de peso é mais evidente durante o período de rápido crescimento e

depois diminui. As diferenças entre animais de controle e tratados são maiores quando a
dieta é ligeiramente deficiente ou marginal em proteínas, vitaminas B ou certos elementos
minerais.

Modo de ação dos antibióticos

• Os antibióticos “poupam” proteínas, aminoácidos e vitaminas em dietas contendo 1–3%

menos proteína, mas os experimentos de equilíbrio muitas vezes falharam em mostrar
maior retenção de nitrogênio. A estimulação do crescimento foi maior quando o
618
suplemento antibiótico de penicilina foi adicionado a uma ração que não continha
suplementos de proteína de origem animal ou a uma ração com baixo teor de vitamina
B12. Em condições higiênicas, os aumentos de crescimento são pequenos.

• A parede intestinal de animais alimentados com antibióticos é mais fina do que a de

animais não tratados, o que pode explicar a maior absorção de cálcio demonstrada em
pintos.

• Reduzir ou eliminar a atividade de patógenos que causam “infecção subclínica”.

• Reduz o crescimento de microorganismos que competem com o hospedeiro por

suprimentos de nutrientes.

• Os antibióticos alteram as bactérias intestinais para que menos urease seja produzida e,
portanto, menos amônia seja formada. A amônia é altamente tóxica e suprime o
crescimento em não ruminantes.

• Estimular o crescimento de microorganismos que sintetizam nutrientes conhecidos ou

não identificados.

Os seguintes pontos devem ser mantidos em mente ao usar antibióticos para alimentação
animal:

• Os antibióticos devem ser usados apenas para:

– Porcos em crescimento e engorda para abate como carne de porco ou bacon

– Pintinhos em crescimento e aves de peru para abate como aves de mesa

• Os antibióticos não devem ser usados na alimentação de ruminantes (bovinos, ovinos e

caprinos), suínos reprodutores e aves reprodutoras e poedeiras.

• Ao adicionar antibióticos no nível recomendado, deve-se tomar cuidado para que eles
sejam completa e uniformemente misturados com a ração.

• Para obter melhores resultados, os antibióticos devem ser usados com alimentos
adequadamente balanceados. Além disso, os alimentos contendo antibióticos devem ser
fornecidos apenas para o tipo de estoque para o qual se destinam.

• Os antibióticos não são um substituto para um bom manejo e condições de vida

saudáveis ou para rações adequadamente balanceadas.

Probiótico e Prebiótico

O intestino do animal é composto de quase mil tipos diferentes de microrganismos, alguns

deles benéficos, outros não. A microflora intestinal desempenha um papel muito
importante na condição de saúde e doença do ser vivo. A condição saudável se deve à
619
presença de bactérias benéficas, também denominadas de probióticos, ou à ingestão de
nutrientes que estimulam os micróbios benéficos endógenos (prebióticos).

Um probiótico é definido classicamente como um suplemento alimentar microbiano viável

que afeta beneficamente o hospedeiro por meio de seus efeitos no trato intestinal
(Sanchez e Rivas-Estilla 2006). Probióticos são suplementos alimentares microbianos
vivos que são benéficos para os animais hospedeiros e ajudam a melhorar o equilíbrio
microbiano intestinal.

Um prebiótico é definido como um ingrediente alimentar não digerível que afeta

beneficamente o hospedeiro ao estimular seletivamente o crescimento e/ou a atividade de
uma ou de um número limitado de bactérias no cólon (Gibson e Roberfroid 1995). O uso
de prebióticos causa mudança na composição da microflora colônica com dominância de
algumas das bactérias potencialmente promotoras da saúde, especialmente, mas não
exclusivamente, Lactobacillus e Bifidobacterium (Gibson e Roberfroid 1995). Os
prebióticos têm como alvo a microbiota associada a animais com o objetivo de melhorar a
saúde, enquanto os probióticos usam microorganismos vivos.

Probióticos: Os gêneros de bactérias mais frequentemente usados como probióticos são

Lactobacillus e Bifidobacterium, Enterococcus faecium e Bacillus spp. Formadores de
esporos, enquanto algumas leveduras também são usadas, como Saccharomyces.
Existem vários novos usos de probióticos que antes eram impensáveis. Mas a eficácia
destes não é mal compreendida e considerada para a cura de tudo. Os probióticos são
muito específicos e dependem da cepa e, portanto, cepas diferentes são benéficas em
distúrbios diferentes. Algumas cepas de probióticos podem ser prejudiciais para certos
indivíduos e podem piorar a condição da doença em certos indivíduos. Além disso, a
investigação da relação dose/dependência também é muito rara. Embora inúmeras
pesquisas sobre probióticos tenham sido conduzidas nas últimas duas décadas, ainda há
muito a ser descoberto.

Eles beneficiam o hospedeiro ao:

• Ter efeito antagônico direto contra grupo específico de organismos indesejáveis ou

prejudiciais por meio da produção de compostos antibacterianos, elementares, ou
minimizando sua competição por nutrientes.

• Alterar o padrão de metabolismo microbiano no trato gastrointestinal.

• Estimulação da imunidade.

• Neutralização de enterotoxinas formadas por organismos patogênicos.

620
Prebióticos: Os prebióticos foram reconhecidos por sua capacidade de manipular a
microbiota do hospedeiro em benefício do hospedeiro (Gibson e Roberfroid 1995). Os
prebióticos fornecem nutrientes aos microrganismos favoráveis criados pelo hospedeiro,
incluindo cepas probióticas administradas e microrganismos nativos (residentes).
Portanto, os prebióticos são diferentes da maioria das fibras dietéticas, como celulose,
xilanas e pectinas, que inspiram o crescimento de uma ampla gama de microrganismos
intestinais. Atualmente, dois grupos principais dominam a categoria prebiótica com seus
efeitos atuando através do enriquecimento de Lactobacillus e/ou Bifidobacterium spp.
resultando em aumento da taxa de crescimento e melhoria da eficiência alimentar:

I. Frutanos [fruto oligossacarídeos (FOS) e inulina]

II. Galactanos (galacto oligossacarídeos ou GOS)

2.3.6 – Aditivos que alteram o metabolismo

Hormônios: Estes são produtos químicos liberados por uma área específica do corpo
(glândulas endócrinas) e são transportados para outra região dentro do animal onde
provocam uma resposta fisiológica. O uso extensivo está sendo feito de estrogênios
sintéticos e purificados, androgênios, progestogênios, hormônios de crescimento e
tiroxina (caseína iodada) para estimular o crescimento e a engorda de animais produtores
de carne. Há preocupação, no entanto, sobre os possíveis efeitos prejudiciais de
quaisquer resíduos desses materiais na carne ou no leite para os consumidores.
Toda a questão de saber se os hormônios devem ser usados como promotores de
crescimento ainda é discutível, mas parece lógico que, com qualquer sistema de
alimentação, as vantagens econômicas, por maiores que sejam, nunca devam ter
precedência sobre qualquer risco potencial para a saúde humana. Essas substâncias
podem induzir câncer em seres humanos se ingeridas por um período prolongado através
de produtos dos animais tratados. O uso de tais substâncias na criação de aves foi
proibido por lei nos EUA.

Implantes: são hormônios ou produtos semelhantes aos hormônios que são projetados
para liberar lenta, mas constantemente, os produtos químicos ativos para absorção na
corrente sanguínea. Estes são implantados no subcutâneo do ouvido [por exemplo,
dietilestilbestrol (DES)].

621
2.3.7 – Aditivos que afetam o estado de saúde do gado

Compostos Anti-inchaço: Surfactantes como o poloxaleno são usados como preventivos

para o inchaço de pastagens, e vários outros produtos que se mostraram altamente
eficazes para prevenir o inchaço também estão disponíveis no mercado.

Aditivos antifúngicos: Os inibidores de fungos são adicionados a rações que podem

estar contaminadas com vários tipos de fungos, como Aspergillus flavus, Penicillium
cyclopium, etc. Antes de adicionar inibidores comerciais, todos os alimentos devem ser
secos abaixo de 10% de umidade. Propiônico, ácido acético e propionato de sódio são
adicionados em grãos de alta umidade para inibir o crescimento de fungos. Antifúngicos
como preparações de nistatina e sulfato de cobre também são usados para concentrar
alimentos para prevenir fungos.

Anticoccidianos: Várias marcas de anticoccidianos já estão disponíveis no país para

prevenir o crescimento de coccídios, que são protozoários e vivem dentro das células do
revestimento intestinal dos rebanhos.

Anti-helmínticos: sob algumas condições práticas de alimentação, também têm sido

usados anti-helmínticos. Os compostos atuam reduzindo as infecções parasitárias.

2.3.8 – Aditivo Fitogênico para Alimentação

Os aditivos fitogênicos para rações são os produtos derivados de plantas para uso na
alimentação animal para melhorar a qualidade da alimentação, o desempenho e a saúde
dos rebanhos agrícolas e a qualidade dos alimentos de origem animal. Desde as últimas
duas décadas, esse grupo de aditivos para rações desperta enorme interesse entre os
produtores, principalmente para uso na avicultura e suinocultura. Este aumento na
popularidade deve-se ao aumento do número de publicações científicas neste campo
desde 2000, que também é apoiado pela proibição da maioria dos aditivos de antibióticos
para rações na União Europeia (proibição total aplicada em 2006), retirada voluntária do
uso de antibióticos como promotores de crescimento pelos EUA e crescente discussão
para restringir seu uso fora da União Europeia. Essa proibição e discussão são motivadas
pelo risco especulado de geração de resistência a antibióticos em microrganismos
patogênicos.
A conscientização das pessoas sobre os riscos potenciais causados à saúde e ao meio
ambiente pelo uso excessivo de produtos farmacêuticos sintéticos, incluindo antibióticos
na ração como promotores de crescimento e hormônios de crescimento, e também a
demanda pública por alimentos orgânicos mudaram gradualmente a atitude em relação a
esses antibióticos sintéticos (Greathead 2003; Rochfort et al. 2008).
622
As restrições ao uso de antibióticos como promotores de crescimento aumentaram
significativamente a incidência de infecção por patógenos, tendo, consequentemente, um
efeito adverso no desempenho dos rebanhos. Isso também intensifica a busca por uma
alternativa aos antibióticos como promotores de crescimento e populariza o aditivo
fitogênico para rações. Os fitobióticos como aditivo para rações são um novo membro na
lista dos promotores de crescimento não antibióticos, como os probióticos, prebióticos e
ácidos orgânicos, que já são bem conhecidos no campo da nutrição animal. O
conhecimento sobre seu modo de ação e aspecto do aplicativo ainda é bastante limitado
e tem muito potencial nos próximos tempos.

O aditivo fitogênico para rações é uma ampla gama de produtos derivados de plantas,
como ervas, óleos essenciais/aromáticos e oleorresinas. Eles podem ser adicionados à
dieta de animais comerciais para melhorar sua produtividade através do aprimoramento
das propriedades dos alimentos, promovendo o desempenho da produção dos animais e
melhorando a qualidade dos produtos derivados desses animais (Windisch et al. 2008).

Windisch et al. (2008) também recomendou alguns termos comumente usados para
classificar diferentes compostos fitogênicos com base em sua origem e processamento,
incluindo ervas (flores, plantas não lenhosas e não persistentes), especiarias (ervas com
um cheiro ou sabor intensivo comumente adicionado à alimentação humana), óleos
essenciais (compostos lipofílicos voláteis) e oleorresinas (extratos derivados de solventes
não aquosos). O conteúdo de substâncias ativas e a composição química da substância
fitogênica nos produtos finais podem variar amplamente, dependendo das partes da
planta utilizadas (sementes, folhas, etc.), origens geográficas e época de colheita (Burt
2004; Bakkali et al. 2008; Wendisch et al. 2008). A seleção de uma parte particular de
uma planta ou de uma espécie particular de uma região geográfica muito particular é
muito importante para obter um efeito específico necessário. Os constituintes ativos de
uma mesma espécie de planta podem variar dependendo das diferentes regiões
geográficas e condições climáticas. Essas variações são resultados da interação genética
e ambiental e uma manifestação da biodiversidade dentro da mesma espécie de planta
(Zhang et al. 2011).

Muitos estudos de pesquisa indicaram os múltiplos papéis dos fitobióticos como um

aditivo alimentar, como efeitos de promoção do crescimento, atividade antimicrobiana,
atividade antioxidante, atividade antiinflamatória, etc. Com base nas investigações, parece
que a modulação do ambiente intestinal e morfologia intestinal em suínos e aves são o
modo de ação hipotético de aditivos fitogênicos para rações (Stein e Kil 2006; Li et al.
2012) (Tabela 1).
623
 Tabela 1 Plantas comumente usadas como aditivo alimentar em saúde animal e produção pecuária
Nome Partes Constituintes ativos
Usos comuns Referência
botânico usadas importantes
Ananthanarayan
Asparagus Shatavarin I – IV, Galactagogo, anti-stress, a et al. (2002),
Raiz Dahouda et al.
racemosus asparagamina imunoestimulante
(2009)

Extrato de J.A. Duke

Acacia Catequina, quercetina, Antidiarreico, antiinflamatório, (1992), Rastogi
madeira do and Mehrotra
catechu epicatequina antioxidante
caule, fruta (2005)
Hussain et al.
Allium Alicina, alina, dissulfeto de Hipolipemiante, carminativo, (1992), Sharma
Bulbo et al. (2000–
sativum metil alil antiprotozoário, antiinflamatório
2005)

Fruta, Bilore et al.

Balanites semente, Balanitisinas A-E, Purgativo, espasmolítico, (2004–2005),
roxburghii óleo de marmesina, bergapten anticolico, anti-helmíntico Hussain et al.
(1992)
semente
Cissus Ananthanarayan
Caule, raiz, Quadrangularis, Cicatrização de fratura, útil na a et al. (2002),
quadrangula Rastogi and
folhas piceatannol, pallidal dispepsia
ris Mehrotra (2005)
Blumenthal et
Antiinflamatório, carminativo, al. (1998), J.A.
Curcuma Curcumina, turmerona,
Rizoma espasmolítico, antioxidante, Duke (1992),
longa desmetoxicurcumina Hussain et al.
hepatoprotetor
(1992)
Rastogi and
Mehrotra
Antiinflamatório, carminativo, (2005),
Eucalyptus Cineol, pineno, limoneno,
Folhas, óleos digestivo, expectorante, Blumenthal et
globulus eucaglobulina al. (1998),
antibacteriano
Hussain et al.
(1992)
J.A. Duke
Glycyrrhiza Glicirrizina, liquiritina, Anti-histamínico, expectorante, (1992),
Raiz Blumenthal et
glabra glabraninas antiinflamatório
al. (1998)
F. Mirzaei
Leptadenia Hentriacontanol, Galactogogo, estimulante,
Raiz (2011), Hussain
reticulata estigmasterol, rutina limpador uterino et al. (1992)
Sharma et al.
Eugenol, ácido ursólico, Imunomodulador, (2000–2005), D.
Ocimum Planta inteira,
carvacrol, luteolina, antiinflamatório, antitússico, Brown (1996),
sanctum folhas, óleo Rastogi and
metilchavicol antiprotozoário
Mehrotra (2005)
Ananthanarayan
Phyllanthus Ácido ascórbico, ácido Antioxidante, hepatoprotetor, a et al. (2002),
Frutas, folhas Rastogi and
emblica gálico, emblicaninas A e B imunomodulador
Mehrotra (2005)
J.A. Duke
Solanum Solasodine, solasonine, Hepatoprotetor, antioxidante,
Planta inteira (1992), Hussain
nigrum solanine, solamargine inibidor de micotoxinas, diurético et al. (1992)
Bilore et al.
Swertia Swertiamarin, swerchirin, Hepatoprotetor, antiinflamatório, (2004–2005),
Planta inteira Hussain et al.
chirata genianina anti-helmíntico
(1992)
D. Brown
Withania Withaferin-A, withanina, Imunomodulador, antiestresse,
Raiz (1996), J.A.
somnifera soniferina antioxidante, adaptogênico Duke (1992)

Metabólitos secundários da planta (PSM)

A propriedade biológica e terapêutica de uma planta medicinal está intimamente

relacionada aos fitoquímicos nela contidos. Um extenso resumo é necessário para uma
624
visão abrangente da química, bioquímica e bioatividade dos metabólitos secundários das
plantas, porque eles são um grupo muito grande de compostos. Dos mais de 100.000
diferentes compostos de origem natural descritos, mais de 80.000 são derivados de
plantas (Hashemi e Davoodi 2010). Esses fitoquímicos podem ainda ser classificados em
grupos principais, como alcalóides, taninos, saponinas, esteróides, óleos essenciais,
ácidos, etc.
Diferentes classificações foram propostas para classificar esta ampla gama de
substâncias fitogênicas com base em sua fonte de origem, composição química, uso,
modo de ação, etc. Com relação à classificação das substâncias fitogênicas/fitobióticos
com relação à origem biológica, composição química, formulação, e pureza, as
substâncias fitogênicas compreendem uma gama muito ampla e podem ainda ser
classificadas em quatro grupos como ervas (produtos de flores, plantas não lenhosas e
não persistentes), botânicas (parte inteira ou processada de uma planta, por exemplo,
raiz, folhas e casca), óleos essenciais (extratos hidrodestilados de compostos vegetais
voláteis) e oleorresinas (extratos baseados em solventes não aquosos) (Windish e
Kroismayr 2006) (Fig. 4).

Fig. 4 Principais razões para o uso de aditivos fitogênicos para rações (em%)

Classificação de fitogênicos com base em suas propriedades

Antimicrobianos, antioxidantes e antiinflamatórios, promotores de crescimento,

moduladores de palpabilidade e função intestinal e imunomoduladores.

(I) Atividade antibacteriana de soluções fitogênicas: Ervas e especiarias são bem

conhecidas por exercer ações antimicrobianas in vitro contra patógenos importantes,
incluindo fungos (Windisch et al. 2008). Uma característica comum dos compostos
fitogênicos é que eles são uma mistura multifacetada se um componente bioativo. Os
fitoquímicos em compostos fitogênicos são bem conhecidos por terem atividade
625
antimicrobiana (Cowan 1999). Investigações com fitoquímicos indicaram que os
conteúdos fenólicos como carvacrol, timol, fenilpropano, limoneno, geraniol e citronelal
são os compostos ativos importantes com função antimicrobiana (Gheisar e Kim 2018).
Limoneno e compostos de Sanguinaria canadensis que são não fenólicos também
mostram alta atividade antibacteriana (Newton et al. 2002; Burt 2004). Yang et al. (2015)
sugeriram que a ação antimicrobiana do PFA varia de acordo com a localização de seus
grupos hidroxila ou alquila funcionais. Investigações mostram que a presença de elétrons
deslocalizados e o grupo hidroxila dos terpenóides fenólicos são elementos importantes
para a ação antimicrobiana de fitoquímicos. Os fitoquímicos exercem sua atividade
antimicrobiana por meio de diferentes mecanismos; taninos, por exemplo, agem por
privação de ferro, ligações de hidrogênio ou interações não específicas com proteínas
vitais, como enzimas (Scalbert 1991). O ácido tânico inibe o crescimento de bactérias
intestinais importantes, como Bacteroides fragilis, Clostridium perfringens, E. coli e
Enterobacter cloacae (Chung et al. 1993). Alcalóide é conhecido por ser um intercalador
de DNA e um inibidor da síntese de DNA por meio da inibição da topoisomerase (Karou et
al. 2006). O principal mecanismo pelo qual as saponinas apresentam atividade
antimicrobiana baseia-se na capacidade de formar um complexo com os esteróis
presentes na membrana dos microrganismos.

Os óleos essenciais há muito são reconhecidos por sua atividade antimicrobiana (Lee et
al. 2004) e têm recebido muita atenção por seu potencial como alternativa aos antibióticos
em frangos de corte. Alguns estudos com frangos de corte demonstraram eficácia
antimicrobiana in vitro de óleos essenciais contra E. coli e Clostridium perfringens (Jamroz
et al. 2003; Mistsch et al. 2004). Os óleos essenciais atuam sobre as bactérias
patogênicas, bloqueando a atividade do quorum sensing das bactérias patogênicas.
Extratos de plantas de diferentes espécies como Chamaesyce hypericifolia, Conocarpus
erectus e Quercus virginiana mostram propriedade de inibição de quorum sensing e
protegem o crescimento de bactérias patogênicas (Adonizio et al. 2006). Além disso,
propriedades estruturais como a presença de grupos funcionais (Farag et al. 1989) e
aromaticidade (Bowels e Miller 1993) também são responsáveis pela atividade
antibacteriana dos óleos essenciais. Foi postulado em relação aos terpenóides que os
terpenóides e os fenilpropanóides podem penetrar na membrana da bactéria e atingir o
interior da célula devido à sua lipofilicidade (Helander et al. 1998). Os benefícios
importantes da ação antimicrobiana dos produtos fitogênicos são que eles podem
melhorar a higiene microbiana das carcaças. Aksit et al. (2006) ilustram que a adição de
óleo essencial reduz a carga de bactérias ou patógenos viáveis totais (por exemplo,
Salmonella) em carcaças de frangos.
626
(II) Ação antioxidante e antiinflamatória: A atividade antioxidante é uma das
propriedades importantes dos produtos fitogênicos que contribuem para o uso como
aditivos para rações em humanos e animais. Sua capacidade de eliminar os radicais livres
pode desempenhar um papel importante na prevenção de algumas doenças causadas por
radicais livres, como câncer e doenças cardíacas (Miguel 2010). A investigação anterior
sugeriu que a atividade antioxidante se deve à sua capacidade de doar hidrogênio ou um
elétron aos radicais livres e também deslocar o elétron desemparelhado dentro da
estrutura aromática que são os principais mecanismos de proteção de outras moléculas
biológicas contra a oxidação (Fernandez-Panchon et al. 2008; Giannenas et al. 2013).
Brenes e Roura (2010) relataram que uma ampla gama de ervas e seus extratos têm
funções antioxidantes potenciais, especialmente aqueles produtos derivados da família de
plantas Labiatae, como alecrim, orégano e tomilho. A mistura de produtos fitogênicos
como o tomilho na alimentação dos patos causa uma redução significativa no valor das
substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) da carne de peito (Mohammadi et al.
2015a). Cherian et al. (2013) relataram que alimentar frangos de corte com PFA
(Artemisia annua) resultou em uma redução significativa no valor de TBARS na carne de
peito e coxa. A redução no valor de TBARS pode ser devido a propriedades antioxidantes
individuais ou compartilhadas de compostos polifenólicos ou vitamina E na Artemisia
annua. A atividade antioxidante dos produtos fitogênicos é devida ao conteúdo fenólico e
não fenólico (Cuppett e Hall 1998). Placha et al. (2014) demonstraram que a
suplementação da dieta de frangos de corte com timol pode reduzir a oxidação de ácidos
graxos indicada pelo menor nível de malondialdeído na mucosa duodenal. Franz et al.
(2010) defendem que os fitobióticos podem afetar beneficamente algumas enzimas
antioxidantes, como a glutationa peroxidase e a superóxido dismutase,
consequentemente afetando o metabolismo lipídico em animais. Outras espécies de
plantas como coentro, cúrcuma, gengibre, erva-doce e plantas que são ricas em
flavonóides ou antocianinas também têm atividades antioxidantes (Nakatani 2000; Wei e
Shibamoto 2007). Os compostos ativos dos compostos fitogênicos podem ter papéis
protetores para os lipídios dos alimentos contra o dano oxidativo, semelhantes aos
antioxidantes como acetato de a tocoferila ou hidroxitolueno butilado que geralmente é
adicionado às dietas (Gheisar e Kim 2018).

A inflamação é o fenômeno protetor normal induzido devido a lesão no tecido ou infecção

para combater invasores no corpo (patógenos) e para remover células hospedeiras
mortas ou danificadas (Stevenson e Hurst 2007). Miguel (2010) afirmou que alguns óleos
essenciais têm a capacidade de eliminar os radicais livres. Além disso, também podem

627
atuar como agentes antiinflamatórios, pois uma das respostas inflamatórias é a explosão
oxidativa em diversas células. Óleos essenciais (eucalipto, alecrim, lavanda, millefolia) e
outras plantas (pinheiro, cravo e mirra) também são usados em formulações mistas como
agentes antiinflamatórios.

(III) Propriedade que promove o crescimento: Com relação à atividade promotora de

crescimento dos compostos fitogênicos, muitas investigações foram conduzidas durante
as últimas duas décadas. A atividade promotora de crescimento do aditivo à base de
ervas para rações foi relatada em suínos (Wenk 2003; Kim et al. 2010; Mohammadi et al.
2015b). Li et al. (2012) compararam o desempenho de suínos alimentados com dietas
suplementadas com óleos essenciais e relataram ganho de peso e digestibilidade da
matéria seca e da proteína bruta em 10,3%, 2,9% e 5,9%, respectivamente. Eles
sugeriram que a melhora no desempenho dos suínos era resultado da melhora da
morfologia intestinal e, consequentemente, da melhora da digestibilidade dos nutrientes.
Yan et al. (2011) relataram que a adição de uma mistura de extrato de ervas (contendo
trigo sarraceno, tomilho, cúrcuma, pimenta-do-reino e gengibre) à dieta de porcos em
crescimento resultou em aumentos no consumo médio diário de ração (ADFI) e no peso
corporal final (PC). Alimentar frangos de corte com a dieta contendo 0,075% de uma
mistura fitogênica levou a uma melhoria de 3,9% e 3,4% no BWG e no FCR,
respectivamente (Mohammadi et al. 2015a). De acordo com a proposta do pesquisador,
os compostos fitogênicos atuam de forma diferenciada para desencadear sua atividade
promotora de crescimento. Melhorar a palatabilidade e o sabor da ração, aumentar o
consumo de ração, estimular a secreção de enzimas digestivas e aumentar a atividade
antimicrobiana são alguns dos principais modos de ação que podem ter levado a um
melhor desempenho de crescimento dos animais (Jang et al. 2004; Czech et al. 2009).
Diferentes investigações sugeriram que a remoção dos antibióticos na ração resultou em
um efeito significativamente negativo no desempenho de suínos e aves. Este efeito
negativo pode ser aliviado pela incorporação de produtos fitogênicos como promotores de
crescimento na alimentação de suínos e aves (Yakhkeshi et al. 2011).

(IV) Influência na palatabilidade e função intestinal: Alega-se que os produtos fitogênicos

são positivamente eficazes na palatabilidade e no sabor da ração, promovendo a
utilização da ração e melhorando o desempenho da produção (Windisch et al. 2008).
Alguns investigadores encontraram uma diminuição no consumo de ração devido à
incorporação de produtos fitogênicos como promotores de crescimento na ração (Maass
et al. 2005; Roth-Maier et al. 2005), enquanto alguns afirmam que soluções fitogênicas
causam aumento no consumo de ração e palatabilidade da ração (Kyriakis et al. 1998;

628
Kroismayr et al. 2008). Chrubasik et al. (2005) relataram que uma ampla gama de
fitobióticos (incluindo plantas e seus extratos) são conhecidos por terem impactos
benéficos no trato digestivo (como efeitos laxantes e espasmolíticos). Além disso, eles
podem prevenir a flatulência. Além disso, Patel e Srinivasan (2004) sugeriram que as
substâncias fitogênicas podem estimular as secreções digestivas, como saliva e bile. Eles
relataram que melhorar a atividade enzimática é o principal modo de ação nutricional do
aditivo fitogênico para rações (PFA). Rao et al. (2003) relataram que as atividades in vitro
da lipase e amilase pancreática de rato são significativamente aumentadas quando eles
estavam em contato com várias especiarias e extratos de especiarias. Há aumento nas
atividades enzimáticas no homogenato pancreático e fluxo pronunciado de ácido biliar em
ratos alimentados com aditivo fitogênico para rações (Patel e Srinivasan 2000). Relatórios
semelhantes de aumento das atividades de enzimas digestivas, como amilase
pancreática, tripsina e maltase por óleos essenciais nas dietas de frangos de corte foram
fornecidos por pesquisadores (Lee et al. 2003; Jang et al. 2004, 2007). Jamroz et al.
(2006) sugeriram que alimentar frangos de corte com dieta suplementada com PFA
resultou na estimulação da secreção de muco no intestino dos frangos. Presumiu-se que
esse efeito reduzia a adesão de patógenos, estabilizando assim a eubiose microbiana no
intestino dos animais.

(V) Imunomoduladores: os aditivos fitogênicos têm um efeito potencial no sistema

imunológico dos organismos vivos. Os β-glucanos (oligossacarídeos) são encontrados em
componentes vegetais, principalmente na camada aleurônica da cevada e o farelo de
aveia é um importante imunomodulador. O extrato de folha de bambu parece uma fonte
nova e promissora de β-glucanos. Ohtsuka et al. (2014) avaliaram o efeito de um extrato
de β-glucanos obtido de folhas de bambu (Sasa sensanensis) em bovinos e relataram o
aumento na atividade de linfócitos T CD8 +.

3. Padrões de qualidade para a indústria de aditivos para rações

animais
Diante do problema de aumentar o valor nutritivo da ração com recursos limitados de terra
e capital, logo foi descoberto que produtos químicos indesejados e adulterantes estavam
sendo usados em rações animais e isso ajudou a ter uma alta classificação analítica para
a ração. Assim, entraram em vigor padrões de qualidade que estabeleceram diretrizes
para a fabricação até a comercialização de rações para animais e estabeleceram
regulamentos que tornaram obrigatório para os fabricantes de rações obedecerem aos
padrões estabelecidos.
629
Uma das principais autoridades do mundo no que diz respeito à indústria de ração animal
– a American Feed Industry Association (AFIA) - definiu programas de controle de
qualidade de rações como: “Todas as ações destinadas a garantir que o produto atenda
às especificações estabelecidas pelo fabricante”. AFIA é uma das organizações mais
importantes (Maurya 2017). Qualquer programa de controle de qualidade de alimentação
padrão deve conter quatro componentes necessários (Pal e McSpadden Gardener 2006):

• Qualidade do ingrediente.

• Controle do processo.

• Qualidade de alimentação acabada.

• Controle de substâncias tóxicas, incluindo microorganismos patogênicos.

3.1 A importância da garantia da qualidade

A garantia de qualidade é um dos critérios mais importantes para manter os padrões da

indústria e também para se candidatar a várias certificações relacionadas às práticas e
padrões de fabricação de produtos. Ele cria um valor de mercado para o produto e maior
aceitação pelo consumidor. É preciso entender que a segurança dos alimentos para
animais não é o único elemento que determina a segurança dos alimentos de origem
animal, mas que o uso de outros produtos, como medicamentos e promotores de
crescimento (hormônios e b agonistas), também tem impacto.

3.2 Controle de Qualidade da Alimentação

O processo de conversão de ingredientes de alta qualidade em rações de alta qualidade

envolve três componentes importantes dentro da fábrica de rações: pessoal, maquinário e
procedimentos. No caso de qualquer compromisso em qualquer um desses três
componentes, a produção consistente de rações de alta qualidade é improvável.
No entanto, é igualmente importante garantir a combinação de pessoal, maquinário e
procedimentos para o objetivo comum de produção eficiente de alimentos de alta
qualidade (Jones 2006). O controle de qualidade na fábrica de rações é de extrema
importância para o sucesso geral e a lucratividade das empresas de criação de animais.
Os fatores mais críticos que afetam a nutrição e o alto desempenho dos animais são o
controle de qualidade e a consistência da ração. O grau de qualidade é a consistência
com que a ração é formulada, processada, produzida e entregue em comparação com o
que é esperado.

Qualidade foi definida como “o grau em que um conjunto de características inerentes

atende aos requisitos” (Garg et al. 2013). Isso indica claramente que alcançar a qualidade

630
significa cumprir os requisitos. Os requisitos podem vir de clientes e, em alguns casos, de
autoridades regulatórias. Normalmente, a qualidade é verificada por comparação com um
padrão conhecido. No entanto, um valor relativo de qualidade ao longo do tempo é
extremamente valioso e útil em muitas situações.

O desempenho animal é diretamente afetado pela qualidade da ração, e essa relação é

importante, pois abrange não apenas as quantidades quantitativas de todos os
componentes da ração, mas também a digestibilidade e o metabolismo desses
componentes. Assim, o principal desafio que se coloca aos pesquisadores de zootecnia,
bem como aos nutricionistas e demais atores envolvidos na produção de rações é o
monitoramento consistente de todos os aspectos do sistema de produção de rações e
medição dessas variáveis que são bons indicadores de controle de qualidade.
Em alguns casos, verificações de qualidade pós-marketing são feitas para controlar o
prazo de validade e também a satisfação do cliente, pois isso pode ter um enorme
impacto na qualidade percebida por eles. Em vista disso, o monitoramento do controle de
qualidade em diferentes pontos foi classificado como em:

• Controle de qualidade de matérias-primas e produtos acabados

• Controle de qualidade durante o armazenamento

• Controle de qualidade durante a produção

3.3 Necessidade de Controle de Qualidade

O objetivo do controle de qualidade da ração animal e dos aditivos para rações é garantir
que o consumidor obtenha alimentos não adulterados e fiéis à sua natureza e produzam
os resultados desejados. O controle de qualidade é, portanto, definido como a
manutenção da qualidade em níveis e tolerâncias aceitáveis para o comprador,
minimizando o custo de processamento.

O Bureau of Indian Standards é a organização nodal responsável por estabelecer as

especificações de controle de qualidade de vários ingredientes para rações e alimentos
compostos para garantir a manutenção das especificações mínimas do contrato,
adequadas para inclusão nos alimentos compostos, e indicar as proporções máximas de
inclusão de alimentos para animais (Uppal et al. 2004).

3.4 Avaliação da Qualidade da Alimentação

Os alimentos geralmente estão sujeitos aos três tipos de testes a seguir: físicos, químicos
e biológicos.

3.4.1 – Avaliação Física

631
A avaliação física deve ser realizada por pessoal altamente treinado para identificar as
mudanças na natureza da matéria-prima/alimentos. Os principais atributos verificados em
uma avaliação física são cor, tamanho, homogeneidade, cheiro, sabor, tato e som.

Métodos físicos para detectar adulteração ou contaminação: o contaminante ou

adulterante comum é casca ou areia. O melhor método para detectar a casca na ração é
o joeiramento, enquanto a peneiração é realizada para diferenciar os contaminantes com
base no tamanho da partícula. A areia é detectada na ração usando um método
tradicional, porém eficaz, em que uma quantidade pesada do grão é embebida em água
e, em seguida, peneirada manualmente, os grãos podem ser separados. A água restante
é decantada e a areia assentada é pesada para avaliar o nível de contaminação.

3.4.2 – Avaliação Química

Para a avaliação química da alimentação animal, o primeiro e principal requisito é um

laboratório analítico para a estimativa precisa do conteúdo de nutrientes e contaminantes.
Princípios aproximados de alimentação são analisados usando avaliação química.

3.4.3 – Especificações de Ingredientes

Especificações de ingredientes para rações animais e aditivos para rações são cruciais
em um programa de garantia de qualidade de rações. As especificações dos ingredientes
servem como base para a redação dos acordos, a formulação dos alimentos/rações e a
execução das inspeções dos ingredientes. A descrição dos ingredientes da ração e as
especificações nutricionais gerais podem ser encontradas nas especificações do BIS para
rações e ingredientes de rações na Índia. É feito para especificações e padrões
quantitativos e qualitativos.

3.5 – Legislações de controle de qualidade na indústria indiana de rações

No setor organizado, a produção de ração animal é um domínio competitivo e, portanto,

os produtores de ração tentam produzir ração da mais alta qualidade possível (Dhobi e
Malla 2015). A análise regular dos princípios aproximados é feita para controlar a
qualidade da alimentação. Os alimentos para animais e aditivos alimentares são
analisados para aminoácidos, aflatoxina, ocratoxina, mamona, taninos e atividade da
urease, obrigatoriamente, entre outros. As matérias-primas empregadas na fabricação de
ração animal e produtos acabados são submetidas a exames microbianos, como
contagem microbiana, teste de Salmonella e Escherichia coli e contagem de fungos. A
indústria também emprega tecnologias mais recentes e equipamentos modernos, como
cromatografia líquida de alto desempenho e analisadores de infravermelho próximo para
exame espectroscópico. Técnicas analíticas atuais são utilizadas para estimar vitaminas,
632
minerais e outros aditivos alimentares. A maioria das indústrias está promovendo “Análise
de Perigos e Pontos Críticos de Controle” - medidas para garantir alimentos seguros.
Agora, a Índia também está seguindo os padrões internacionais da indústria de ração
animal para atualizar seus padrões de fabricação e competir com o mercado mundial pela
fabricação local de ração animal e aditivos para rações para reduzir o custo também.

Na Índia, os padrões nacionais de controle de qualidade para as condições de fabricação

e armazenamento de rações e aditivos para rações são regulamentados por um órgão
estatutário, o Bureau of Indian Standards (BIS). Foi estabelecido sob a Lei BIS de 1986.
Antes de 1986, o Instituto de Padrões Indiano regulava o controle de qualidade de vários
produtos alimentícios. Os objetivos do BIS são os seguintes:

I. Desenvolvimento harmonioso das atividades de padronização de várias commodities

II. Caracterizando

III. Certificação de qualidade de produtos

IV. Atendendo aos métodos conectados

O Bureau criou subcomitês para a padronização de diferentes tipos de commodities. Um

subcomitê de rações para animais, denominado Animal Feeds Sectional Committee, foi
criado especificamente para verificar a qualidade dos alimentos para animais e dos
ingredientes dos aditivos para rações. Os membros do Comitê Seccional de Alimentação
Animal são um painel de nutricionistas eminentes e compostos por membros especialistas
dos seguintes órgãos:

I. Institutos do Conselho Indiano de Pesquisa Agrícola (ICAR)

II. Universidades estaduais agrícolas

III. Indústria de ração

IV. Departamentos governamentais com especialização em nutrição animal

V. Tecnólogo preocupado em rações com atividades de pecuária

O Governo da Índia tem o poder de registrar os produtos agrícolas (classificação e

comercialização), conhecidos como padrões ‘AGMARK’ para fixar padrões de qualidade e
prescrever termos e condições para o uso do selo ‘AGMARK’.

O governo também é obrigado a garantir o cumprimento das medidas de controle pela

legislação para garantir alimentos e aditivos alimentares de qualidade e seguros a um
custo controlado. Muitos regulamentos foram apresentados:

633
I. A Lei de Prevenção do Black Marketing e Manutenção de Suprimentos de Commodities
Essenciais, 1980.

II. Os padrões de pesos e medidas (produtos embalados), 1977.

III. A Lei de Proteção ao Consumidor, 1986.

IV. Tabela de valores tarifários dos artigos sujeitos a Cess para 2006–2007.

V. Lei de redução de produção agrícola, 1940.

VI. Ordem de Embalagem de Óleos Comestíveis (Regulamento), 1998.

VII. Regras de prevenção de adulteração de alimentos, 1955.

A legislação mais recente a esse respeito é a Ordem de Alimentação de Gado

(Regulamento de Fabricação e Venda) de 2009. No entanto, apesar de toda a presença
legal dessas medidas e legislações, os controles de qualidade da ração na Índia deixam
muito a desejar. Dito e feito, não é feito o suficiente para manter um limite na qualidade da
ração neste país. Isso é bastante factual para fabricantes de ração em pequena escala,
onde a adulteração é uma barreira.

A organização nodal envolvida na Índia para desenvolver interligações entre a indústria

acadêmica e outros setores para práticas de fabricação de rações e estabelecimento de
normas de qualidade é a Compound Livestock Feed Manufacturers’ Association (CLFMA).

3.6 Últimos Desenvolvimentos no Setor de Garantia de Qualidade de Alimentos no

Mundo
Alimentos seguros para animais só podem ser produzidos com ingredientes seguros. A
fim de combinar a experiência dos programas existentes de garantia de ingredientes para
rações em um programa que pode operar em todo o mundo com um conjunto de padrões,
a International Feed Safety Alliance (IFSA) como um projeto conjunto é iniciado pelos
proprietários dos padrões (IFSA Feed Ingredients Standard 2007).

Para cumprir os padrões da IFSA, os países participantes precisam aplicar os princípios

de Análise de Perigos e Pontos Críticos de Controle (HACCP) e Boas Práticas de
Fabricação (GMP). Os participantes certificados terão que demonstrar que existem
controles em cada etapa da cadeia de abastecimento que garantem a segurança dos
constituintes da ração fornecidos.

3.6.1 – BPF: Boas Práticas de Fabricação/Gerenciamento

Um ponto chave para atenção nos programas de controle de qualidade para a pecuária é
a segurança da alimentação animal. O padrão GMP é um dos principais elementos para
qualquer programa de qualidade de ração animal (Coelho e de Toledo 2017).
634
3.6.2 – Gestão de Risco

A avaliação de riscos é a base para a determinação das medidas de controle. A avaliação

de risco é um componente da gestão de risco, resultando em:

• Determinação de medidas de controle para eliminar ou reduzir esses riscos e controlá-

los em um nível aceitável, incluindo rastreamento e rastreamento de produtos

• Determinação de padrões de produto e valores de ação para contaminantes

indesejáveis em rações

• Implementação de uma estratégia de medição (monitoramento e verificação) para

verificar se as medidas de controle são eficazes ou não

Em uma metodologia HACCP, um equilíbrio bem considerado e sensato deve ser

estabelecido entre os procedimentos preventivos e o monitoramento dos constituintes da
ração quanto à presença de riscos. No entanto, onde houver incertezas sobre a
capacidade de controlar os riscos, medidas de precaução, como evitar o uso de um
produto específico, devem ser tomadas. Várias medidas de controle e padrões de
produtos já foram combinados na legislação, mas estão moderadamente fragmentados
com muitas limitações. Para resolver essa lacuna, o padrão GMP + para alimentação
animal oferece uma estrutura coerente.

O padrão GMP + atualmente compreende os seguintes elementos:

• Requisitos gerais para o sistema de qualidade de uma empresa, comparáveis e

baseados na norma ISO 9002, a fim de tornar a garantia de qualidade demonstrável.

• Critérios para avaliação de risco com base nos princípios HACCP.

• Vários subcódigos adicionais incluindo medidas genéricas de controle nos processos

produtivos aliadas ao uso de aditivos, medicamentos, substâncias indesejáveis e higiene
(Salmonella). Estas medidas de controle adicionais foram especificadas para a produção
e fornecimento de alimentos compostos, pré misturas, alimentos simples e ingredientes
para rações e gorduras para rações (além daquelas para ingredientes para rações), para
armazenamento e transbordo de rações e para transporte.

• Requisitos mínimos para inspeções internas, como garantia de qualidade para análises
laboratoriais, frequência de amostragem, etc.

Um conjunto de padrões de produtos, compreendendo os padrões legais da União

Europeia, padrões legais nacionais adicionais e vários padrões supralegais acordados
com os parceiros da cadeia.

3.6.3 – Sistema de Alerta Rápido

635
Um sistema de alerta precoce (EWS) tem como objetivo ser uma rede de segurança,
como um complemento aos sistemas de gestão da qualidade como GMP, ISO 9002 e
HACCP. O objetivo é identificar, comunicar e eliminar perigos possíveis ou potenciais que
podem ocorrer apesar de todas as medidas preventivas tomadas (Stark e Jones Frank
2009).
Nenhum sistema de qualidade é capaz de evitar totalmente todos os problemas que
podem ser causados por fatores incidentais (erro humano, eventos naturais) ou atos
criminosos. Uma abordagem proativa deve ser adotada para evitar que perigos potenciais
se manifestem. Os elementos-chave em tal sistema incluem velocidade, cuidado,
confidencialidade, prestação de contas e responsabilidade.

3.6.4 – Legislações internacionais associadas à segurança de alimentos para animais

Os perigos alimentares associados aos alimentos para animais constituem uma parte
importante da importância para a saúde pública. Perigo é definido como “Um agente
biológico, químico ou físico em, ou condição de, alimento / ração com potencial para
causar efeito adverso à saúde” (Sareen 2010).

De acordo com a OMC, o Artigo 3 da SPS que trata da harmonização incentiva o uso de
padrões internacionais para segurança alimentar e saúde animal e vegetal, ou seja,
Codex. O trabalho importante do Codex sobre a segurança dos alimentos para animais
inclui:
• Classificação de alimentos e rações animais (CAC/Misc 4-93)

• Codex Padrão Geral para Contaminantes e Toxinas em Alimentos e Rações (CODEX

STAN 193-1995)

• MRLs para pesticidas (CAC/MRL 1-2009), medicamento veterinário (2-2009), MRLs

estranhos (CAC/MRL 3-2001)

• Código de Prática para a Redução da Contaminação de Dioxinas e PCB semelhantes às

Dioxinas em Alimentos e Rações (CAC/RCP 62-2006)

• Código de Prática para a Redução de Aflatoxina B1 em Matérias Primas e Alimentos

Suplementares para Animais Produtores de Leite (CAC/RCP 45-1997)

• Código de Prática de Boa Alimentação Animal (CAC/RCP 54-2004)

Outros padrões do Codex: aplicáveis a alimentos

Rastreabilidade: Princípios para rastreabilidade/rastreamento de produtos como uma

ferramenta dentro de um sistema de inspeção e certificação de alimentos (CAC/GL 60-

636
2006).
Análise de risco:

• Princípios de trabalho para análise de risco para aplicação no quadro do Codex

Alimentarius
• Princípios e GL para a conduta de gestão de risco microbiológico
• GL para a realização de avaliações de segurança alimentar de alimentos derivados de
animais com DNA recombinante

• Princípios para a análise de risco de alimentos derivados da biotecnologia moderna

HACCP: Código de Prática Internacional Recomendado – princípios gerais de higiene

alimentar (4 rev 2003) e Anexo sobre sistemas HACCP e GL para sua aplicação

• Situação de emergência – princípios e diretrizes para troca de informações em situações

de emergência de segurança alimentar (CAC/GL 19-2004)

• Inspeção e certificação – princípios (CAC/GL 20-1995); GL para design, operação,

avaliação e credenciamento de sistemas de certificação e inspeção de importação e
exportação de alimentos (CAC/GL 26-1997).

Referências
Adonizio AL, Downum K, Bennett BC et al (2006) Anti-quorum sensing activity of medicinal plants in Southern Florida.
J Ethnopharmacol 105(3):427–435
Aksit M, Goksoy E, Kok F et al (2006) The impacts of organic acid and essential oil supplementations to diets on the
microbiological quality of chicken car-casses. Archiv Fur Geflugelk 70:168–173
Ananthanarayana DB, Brindavanam NB, Dobriyal RM et al (2002) Major herbs of ayurveda. Elsevier Science
Animal Feed Additives (2014) Market by types (antibiotics, vitamins, antioxidants, amino acids, feed enzymes),
livestock (swine, poultry, cattle, aquaculture, others) and geography – trends & forecasts: 2011–2018. Markets and
Markets Report 1715
Animal Feed Additives (2018.) http://www.primaryinfo.com/industry/animal-feed-additives.htm. Accessed 20 June 2018
Bakkali F, Averbeck S, Averbeck D et al (2008) Biological effects of essential oils—a review. Food Chem Toxicol
46:446–475
Bilore KB, Yelne MB, Dennis TJ et al (2004–2005) Database on medicinal plants used in ayurveda, vols 6–7. CCRAS,
New Delhi
Biomin Phytogenic feed additive survey (2018.)
https://info.biomin.net/acton/attachment/14109/f-09d6/1/-/-/-/-/MAG_SciSol_PFA%202018_EN.pdf?sid¼TV2:AQ3kflqii
Blumenthal M, Busse WR, Goldberg A et al (eds) (1998) Therapeutic guide to herbal medicines, 1st edn (trans: Klein
S, Rister RS). American Botanical Council/Integrative Medicine Communication, Austin, TX/Boston
Bowels BL, Miller AJ (1993) Antibouulinal properties of selected aromatic and aliphatic aldehydes. J Food Prod
56:788–794
Brenes A, Roura E (2010) Essential oils in poultry nutrition: main effects and modes of action. Anim Feed Sci Technol
158:1–14
Brown D (1996) Encyclopedia of herbs and their uses, The Herbal Society of America. Dorling Kindersley, New York
Burt S (2004) Essential oils: their antibacterial properties and potential applications in foods—a review. Int J Food
Microbiol 94:223–253
Cherian G, Orr A, Burke IC, Pan W (2013) Feeding Artemisia annua alters digesta pH and muscle lipid oxidation
products in broiler chickens. Poult Sci 92:1085–1090
Chrubasik S, Pittler MH, Roufogalis BD (2005) Zingiberis rhizoma: a comprehensive review on the ginger effect and
efficacy profiles. Phytomedicine 12:684–701
Chung KT, Stevens SE, Lin WF Jr et al (1993) Growth inhibition of selected food borne bacteria by tannic acid, propyl
gallate and related compounds. Lett Appl Microbial 17:29–32
Coelho RP, de Toledo JC (2017) Safety programs for the feed industry: characterization and perceived benefits of the
implementation. Gest Prod São Carlos 24(4):704–718
637
 Cowan MM (1999) Plant products as antimicrobial agents. Clin Microbiol Rev 12:564–582
Cuppett SL, Hall CA (1998) Antioxidant activity of the Labiatae. Adv Food Nutr Res 42:245–271
Czech A, Kowalczuk E, Grela ER (2009) The effect of an herbal extract used in pig fattening on the animals
performance and blood components. Ann Univ Mariae Curie Sklodowska 27:25–33
Dahouda M, Toleba SS, Youssao AK et al (2009) Int J Poult Sci 8 (9):882–889
Dhobi IA, Malla BA (2015) Indian feed industry: past perspective and future challenges. Think Green Think Feed,
Benison Media, pp 1–3
Duke JA (1992) Handbook of phytochemical constituents of GRAS herbs and other economic plants. CRC Press, Boca
Raton, FL
European Commission (2018.) https://ec.europa.eu/food/safety/animalfeed/feed-additives_en. Accessed 20 June 2018
Farag RS, Dawz ZY, Hewedi FM et al (1989) Antimicrobial activity of some Egyptian Spice essential oils. J Food Prot
52:665–667
Feed additive classifications based on Europe regulation and guideline (2018) Bevenovo Co Limited
Fernandez-Panchon MS, Villano D, Troncoso AM et al (2008) Antioxidant activity of phenolic compounds: from in vitro
results to in vivo evidence. Crit Rev Food Sci Nutr 48:649–667
Franz C, Baser KHC, Windisch W (2010) Essential oils and aromatic plants in animal feeding – a European
perspective. A review. Flavour Frag J 25:327–340
Garg MR, Sherasia PL, Bhanderi BM (2013) Quality control manual for the cattle feed plants, AnimalNutrition
Group.NDDB, Anand, Gujarat
Gheisar MM, Kim IH (2018) Phytobiotics in poultry and swine nutrition – a review. Ital J Anim Sci 17(1):92–99
Giannenas I, Bonos E, Christaki E et al (2013) Essential oils and their applications in animal nutrition. Med Aromatic
Plants 2:1–12
Gibson GR, Roberfroid MB (1995) Dietary modulation of the human colonic microflora: introducing the concept of
prebiotics. J Nutr 125:1401–1412
Greathead H (2003) Plants and plant extracts for improving animal productivity. Proc Nutr Soc 62:279–290
Hashemi HR, Davoodi H (2010) Phytogenics as new class of feed additives in poultry industry. J Anim Vet 9(17):2295–
2304
Helander IM, Alakomi HL, Latva-kala K et al (1998) Characterization of the action of selected essential oil components
on gram-negative bacteria. J Agric Food Chem 46:3590–3595
Henchion M, Hayes M, Mullen AM et al (2017) Future protein supply and demand: strategies and factors influencing a
sustainable equilibrium. Foods 6:53. https://doi.org/10.3390/foods6070053
Hussain A, Virmani OP, Popli SP et al (1992) Dictionary of Indian medicinal plants. CIMAP, Lucknow
Hutjens MF (1991) Feed additives. Vet Clinics North Am Food Anim Pract 7(2):525
IFSA Feed Ingredients Standard, April 2007
Jamroz D, Orda J, Kamel C et al (2003) The influence of phytogenetic extracts on performance, nutrient digestibility,
carcass characteristics and gut microbial status in broiler chickens. J Anim Sci 17:394–400
Jamroz D, Wertelecki T, Houszka M et al (2006) Influence of diet type on the inclusion of plant origin active substances
on morphological and histochemical characteristics of the stomach and jejunum walls in chicken. J Anim Physiol Anim
Nutr 90:255–268
Jang IS, Ko YH, Yang HY et al (2004) Influence of essential oil components on growth performance and the functional
activity of the pancreas and small intestine in broiler chickens. Asian-Australas J Anim Sci 17:394–400
Jang IS, Ko YH, Kang SY, Lee CY (2007) Effect of commercial essential oils on growth performance, digestive enzyme
activity and intestinal microflora population in broiler chickens. Anim Feed Sci Technol 134:304–315
Jones FT (2006) Quality control in feed manufacturing. The poultry site.
http://www.thepoultrysite.com/articles/526/quality-control-in-feedmanufacturing. Accessed 20 June 2018
Karou D, Savadogo A, Canini A et al (2006) Antibacterial activity of alkaloids from Sida acuta. Afr J Biotechnol 5:195–
200
Kearney J (2010) Food consumption trends and drivers. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci 365(1554):2793–2807
Kim JD, Sherwin JA, Shim KS (2010) Effects of feed additive as an alternative for antibiotics on growth performance
and feed cost in growing-finishing pigs. Korean J Org Agric 18:233–244
Kroismayr A, Sehm J, Pfaffl M et al (2008) Effects of essential oils or Avilamycin on gut microbiology and blood
parameters of weaned piglets. J Land Manage Food Environ 59:111–120
Kyriakis SC, Sarris K, Lekkas S, et al (1998) Control of post weaning diarrhea syndrome of piglets by in-feed
application of Origanum essential oils. In: Done S, Thomson J, Varley M, (eds) Proceedings of the 15th IPVS Congress,
July 5–9, Birmingham, UK. Nottingham University Press, Nottingham, 218 p
Lee KW, Everts H, Kappert HJ et al (2003) Effects of dietary essential oil components on growth performance,
digestive enzymes and lipid metabolism in female broiler chickens. Br Poult Sci 44:450–457
Lee KW, Everts H, Kappert HJ et al (2004) Growth performance of broiler chickens fed a carboxymethyl cellulose
containing diet with supplemental carvacrol and/or cinnamaldehyde. Int J Poult Sci 3:619–612
Li PF, Piao XS, Ru YJ et al (2012) Effects of adding essential oil to the diet of weaned pigs on performance, nutrient
utilization, immune response and intestinal health. Asian-Australas J Anim Sci 25:1617–1626

638
 Maass N, Bauer J, Paulicks BR et al (2005) Efficiency of Echinacea purpurea on performance and immune status in
pigs. J Anim Physiol Anim Nutr 89:244–252
Maurya P (2017) Quality standards in animal feed industry. Think Green Think Feed, Benison Media, pp 1–4.
Miguel MG (2010) Antioxidant and anti-inflammatory activities of essential oils: a short review. Molecules 15:9252–
9287
Mirzaei F (2011) Rep opinion 3(10):18–36
Mistsch P, Zitterl-Eglseer K, Kohler B et al (2004) The effect of two different blends of essential oils components on the
proliferation of Clostridium perfringens in the intestines of broiler chickens
Mohammadi Gheisar M, Hosseindoust A et al (2015a) Evaluating the effect of microencapsulated blends of organic
acids and essential oils in broiler chickens diet. J Appl Poult Res 24:511–519
Mohammadi Gheisar M, Im YM, Lee HH et al (2015b) Inclusion of phytogenic blends in different nutrient density diets
of meat-type ducks. Poult Sci 94:2952–2958
Nakatani N (2000) Phenolic antioxidants from herbs and spices. Biofactors 13:141–146
Newton SM, Lau C, Gurcha SS et al (2002) The evaluation of fortythree plant species for in vitro anti-mycobacterial
activities; isolation of active constituents from Psoralea corylifolia and Sanguinaria canadensis. J Ethnopharmacol 79:57–
67
Ohtsuka H, Fujiwara H, Nishio A et al (2014) Effect of oral supplementation of bamboo grass leaves extract on cellular
immune function in dairy cows. Acta Veterinaria Brno 83:213–218
Pal KK, McSpadden Gardener B (2006) Biological control of plant pathogens. The Plant Health Instructor.
https://doi.org/10.1094/PHI-A-2006-1117-02
Patel K, Srinivasan K (2000) Stimulatory influence of select spices on bile secretion in rats. Nutr Res 20:1493–1503
Patel K, Srinivasan K (2004) Digestive stimulant action of spices: a myth or reality? Ind J Med Res 119:167–179
Placha I, Takacova J, RyznerMet al (2014) Effect of thyme essential oil and selenium on intestine integrity and anti-
oxidant status of broilers. Br Poult Sci 55:105–114
Rao RR, Platel K, Srinivasan K (2003) In vitro influence of spices and spice-active principles on digestive enzymes of
rat pancreas and small intestine. Nahrung 47:408–412
Rastogi RP, Mehrotra BN (2005) Compendium of Indian medicinal plants, vol 1–5. CDCRI/NISCAIR, Lucknow/New
Delhi
Rochfort S, Parker AJ, Dunshea FR (2008) Plant bioactives for ruminant health and productivity. Phytochemistry
69:299–322
Roth-Maier DA, Bohmer BM, Maass N et al (2005) Efficiency of Echinacea purpurea on performance of broilers and
layers. Archiv Fur Geflugelkunde 69:123–127
Ruminant Feed Market (2018) Segmented by ingredient, supplement, and geography – growth, trends, and forecast:
2018–2023. Mordor Intelligence, India
Sanchez ARR, Rivas-Estilla AM (2006) Role of probiotics in hepatic ischemia-reperfusion injury. J Gastroenterol
Hepatol 21:647–656
Sareen S (2010) Feed Safety: Importance, Codex Standards & FAO Initiatives for First OIE/FAO APHCA Regional
Workshop on Feed Safety – Feed borne Disease Prevention, Tokyo. FAO Regional Office for the Asia & the Pacific
Scalbert A (1991) Antimicrobial properties of tannins. Phytochemistry 30:3875–3883
Sharma PC, Yelne MB, Dennis TJ (2005) Database on medicinal plants used in ayurveda, vol 1–5. CCRAS, New Delhi
Specialty Feed Additives (2016) Market by type (flavors & sweeteners, minerals, binders, vitamins, acidifiers,
antioxidants), livestock (swine, ruminants, poultry, aquatic animals), function, form, and region global forecast to 2022.
Research and Markets report 173, ID: 3897708
Stark CR, Jones Frank T (2009) Quality assurance program in feed manufacturing. Feedstuffs 16:60–65
Stein HH, Kil DY (2006) Reduced use of antibiotic growth promoters in diets fed to weanling pigs: dietary tools, Part 2.
Anim Biotechnol 17:217–231
Stevenson DE, Hurst RD (2007) Polyphenolic phytochemicals—just antioxidants or much more? A review. Cell Mol Life
Sci 64:2900–2916
Thornton PK (2010) Livestock production: recent trends, future prospects. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci 365
(1554):2853–2867
Uppal DS, Ilyas SM, Sikka SS (2004) Quality and safety of animal feeds in India. Central Institute of Post-Harvest
Engineering & Technology, (ICAR) Ludhiana, Punjab Agricultural University, Ludhiana (India)
Wei A, Shibamoto T (2007) Antioxidant activities and volatile constituents of various essential oils. J Agric Food Chem
55:1737–1742
Wenk C (2003) Herbs and botanicals as feed additives in monogastric animals. Asian-Australas J Anim Sci 16:282–
289
Windisch W, Kroismayr A (2006) The effects of phytobiotics on performance and gut function in monogastrics.
http://en.engormix.com/MA-feed-machinery/articles/the-effect-phytobiotics-performance_285.htm
Windisch W, Schedle K, Plitzner C et al (2008) Use of phytogenic products as feed additives for swine and poultry. J
Anim Sci 86:140–148
Yakhkeshi S, Rahimi S, Gharib Naseri K (2011) The effects of comparison of herbal extracts, antibiotic, probiotic and
organic acid on serum lipids, immune response, GIT microbial population, intestinal morphology and performance of
broilers. J Med Plants 10:80–95
639
 Yan L, Meng QW, Kim IH (2011) The effects of dietary Houttuynia cordata and Taraxacum officinale extract powder on
growth performance, nutrient digestibility, blood characteristics and meat quality in finishing pigs. Livestock Sci 141:188–
193
Yang C, Kabir-Chowdhury MA, Hou Y, Gong J (2015) Phytogenic compounds as alternatives to in-feed antibiotics:
potentials and challenges in application. Pathogens 4:137–156
Zhang XB, Zhou T, Guo LP et al (2011) Volatile oil contents correlate with geographical distribution patterns of the
miaoethnic herb Fructus cinnamomi. Acta Ecol Sinic 31(18):5299–5306

640
 Parte III

Nutracêuticos em doenças de órgãos e

sistemas

641
 Nutracêuticos na artrite
Ramesh C. Gupta, Robin B. Doss, Rajiv Lall, Ajay Srivastava e Anita Sinha

Resumo
Atualmente, nos Estados Unidos, um em cada cinco cães ou cavalos adultos sofre de
artrite. Os dois tipos mais comuns de artrite são a osteoartrite (OA) e a artrite reumatóide
(AR). OA ocorre com maior frequência do que RA. OA é uma doença articular
degenerativa crônica heterogênea (DJD) inflamatória caracterizada por degradação
crônica e progressiva da cartilagem articular, formação de osteófitos, espessamento e
esclerose do osso subcondral, lesões da medula óssea, hipertrofia óssea na margem,
sinovite, derrame líquido sinovial e fibrose. Os sinais e sintomas clínicos comuns
associados à OA em cães e cavalos incluem claudicação, imobilidade, rigidez das
articulações, crepitação, edema periarticular, derrame palpável e dor durante a
manipulação da articulação e do membro. A fisiopatologia da OA é muito complexa porque
existem múltiplas etiologias para esta doença e, como resultado, o tratamento é
complicado. A dor e a inflamação associadas à OA são frequentemente tratadas por
supressão farmacológica ou cirurgia entre algumas outras modalidades. Os AINEs são
conhecidos por terem efeitos colaterais graves e a cirurgia é muito cara, portanto, o uso
de nutracêuticos parece ser uma alternativa viável para a prevenção e o tratamento da
OA. Este capítulo descreve vários nutracêuticos que têm o potencial de exercer efeitos
antioxidantes, antiinflamatórios, antinociceptivos e condroprotetores na osteoartrite.

Palavras-chave: Artrite · Osteoartrite · Nutracêuticos · Glucosamina · Condroitina ·

Mexilhão de lábios verdes · Hialuronano · Colágeno Tipo II · Shilajit · Garra do diabo

O autor contribuiu igualmente com todos os outros contribuidores. Bhupesh Kumar, Anshuman Sharma and
Deeksha Sori
B. Gupta · B. Kumar · A. Sharma · D. Sori – Center for Basic Sciences, Pt. Ravishankar Shukla University,
Raipur, Chhattisgarh, India
R. Sharma – Department of Plant Physiology, Agril. Biochemistry, Medicinal and Aromatic Plants, Indira
Gandhi Agricultural University, Raipur, Chhattisgarh, India
S. Mehta – School of Pharmaceutical Sciences, Jamia Hamdard University, New Delhi, India

1. Introdução
A artrite é uma doença crônica debilitante que comumente atinge um grande número de
humanos e animais em todo o mundo. Atualmente, nos Estados Unidos, um em cada
cinco cães ou cavalos adultos sofre de artrite. Os dois tipos mais comuns de artrite são a
642
osteoartrite (OA) e a artrite reumatóide (AR). OA é uma doença articular degenerativa
crônica heterogênea (DJD) inflamatória caracterizada por degradação crônica e
progressiva da cartilagem articular, formação de osteófitos, espessamento e esclerose do
osso subcondral, lesões da medula óssea, hipertrofia óssea na margem, sinovite, derrame
líquido sinovial e fibrose. Eventualmente, a qualidade de vida de um animal é
comprometida devido à diminuição da estabilidade, diminuição da mobilidade, carga,
rigidez das articulações, claudicação e dor e, em estágios avançados, os animais são
incapazes de andar. RA é uma doença crônica caracterizada por inflamação, dor, inchaço
e rigidez de múltiplas articulações. Entre todas as espécies animais, cães e cavalos
sofrem mais com artrite e a OA ocorre com maior frequência. A etiologia da OA é
multifatorial envolvendo idade, lesão, falta de exercício/exercício excessivo, deficiência
nutricional, metabolismo, obesidade, predisposição genética, infecção, ambiente, etc.
(Van Meurs 2017; Gupta et al. 2019). Embora qualquer raça de cão possa desenvolver
OA, cães de raças grandes (como Pastores Alemães, Labrador Retrievers, Terra Nova,
Rottweilers, Siberian Huskies e outros) são geneticamente predispostos para OA e são >
45% mais propensos a desenvolver esta doença. Devido às múltiplas etiologias da OA,
sua fisiopatologia é muito complexa, envolvendo vários mecanismos celulares e
bioquímicos e vias moleculares na degradação ou perda da cartilagem.

Os sinais e sintomas comuns associados à OA em cães e cavalos incluem claudicação,

imobilidade, rigidez das articulações, crepitação, inchaço periarticular, derrame palpável,
dor durante a manipulação da articulação e claudicação (Gupta et al. 2009, 2012; Lawley
et al. 2013; Fleck et al. 2014; May et al. 2015; Murdock et al. 2016). Os antiinflamatórios
não esteroidais (AINEs), que são potentes inibidores da ciclo-oxigenase-2 (COX-2), há
muito tempo são os medicamentos de escolha para a OA. Outros fármacos, como
grapiprant, diacereína e tramadol, também são usados para minimizar a dor associada à
OA (Permuy et al. 2015; Rausch-Derra et al. 2016; Guedes et al. 2018). Devido aos
efeitos colaterais dos AINEs nos sistemas cardíaco, hepático, renal e gastrointestinal, eles
estão sendo substituídos por nutracêuticos. Este capítulo descreve a fisiopatologia da OA,
biomarcadores de detecção e progressão de doenças e uma série de nutracêuticos que
são usados atualmente ou têm potencial para controlar os sinais e sintomas de OA e
melhorar a qualidade de vida de um animal.

2. Fisiopatologia da OA
OA é uma doença articular degenerativa crônica heterogênea (DJD) de toda a articulação
afetando a cartilagem, osso, tecido adiposo e músculo esquelético, causando
643
remodelação e falha da articulação (Ramírez-Flores et al. 2017; Gupta 2016; Svala et al.
2017; Gupta et al. 2019). A degradação da cartilagem é uma característica patológica
primária da OA, que ocorre em duas fases, anabólica e catabólica. Na fase anabólica, os
condrócitos tentam reparar a matriz extracelular danificada (MEC) e, na fase catabólica,
as enzimas produzidas pelos condrócitos e outras células digerem a MEC. Na última fase,
a inibição da síntese de MEC também ocorre, levando à erosão acelerada da cartilagem
(Castrogiovanni et al. 2016; Svala et al. 2017).

Na OA, a mudança na forma da articulação ocorre como resultado de uma perda de

cartilagem articular, formação de osteófitos, esclerose subcondral, lesões da medula
óssea (BMLs) e proliferação sinovial, e essas alterações subsequentemente levam à
diminuição da estabilidade, mobilidade e carregando. A cartilagem articular normal
consiste em 5% de condrócitos e 95% de MEC. Na cartilagem OA, diminuições no
número de condrócitos e em sua capacidade de regenerar a MEC em resposta ao
estresse foram descritas (Portal-Núñez et al. 2016). Os condrócitos OA mostram um
fenótipo secretor de senescência (SSP) exibindo superprodução de citocinas (IL-1 e IL-6),
metaloproteinases de matriz (por exemplo, MMP-1, MMP-3, MMP-10 e MMP-13) e fatores
de crescimento (por exemplo, fator de crescimento epidérmico). Durante a degeneração
da cartilagem, os processos inflamatórios causam produção excessiva de níveis de ROS,
RNS, oxigênio e PGE2 e, como resultado, seus níveis aumentados são encontrados
dentro da articulação (Bakker et al. 2017; Wan e Zhao 2017; Chin e Ima-Nirwana 2018). A
liberação de mediadores inflamatórios como PGE 2 e NO desencadeia inflamação crônica
e apoptose (Amin et al. 1997; Attur et al. 2008). A modulação dos receptores N-metil-D-
aspartato (NMDA) e ATP-citrato liase também está envolvida na alteração do metabolismo
dos condrócitos e degeneração da cartilagem articular (Chen et al. 2018a; Kalev-Zylinska
et al. 2018).

Nos estágios iniciais da OA, a depleção progressiva do proteoglicano da cartilagem leva a

uma perda líquida da matriz da cartilagem. A OA é caracterizada pela degradação dos
componentes da matriz da cartilagem, incluindo colágeno tipo II específico da cartilagem e
proteoglicano, resultando em última análise na perda da estrutura e função da cartilagem.
A quebra e a deterioração da cartilagem foram correlacionadas com o aumento da
atividade de certas enzimas, incluindo MMPs. Nos estágios iniciais e intermediários da
OA, o atrito ósseo (diminuição ou perda da altura e contorno ósseo) é observado. No
estágio avançado da OA, ocorre espessamento do osso subcondral, que é acompanhado
por mineralização diminuída. O atrito do osso subcondral também está associado à
gravidade e perda de cartilagem em regiões e áreas adjacentes de BMLs, indicando um

644
aumento da carga na unidade biomecânica osso/cartilagem. Os BMLs são indicadores da
progressão da OA e são considerados um importante fator de risco para deterioração
estrutural. Evidências radiográficas de OA podem mostrar degeneração da cartilagem,
presença de seus remanescentes e formação de osteófitos na articulação OA.

A atividade da citocina pró-inflamatória IL-1β pode ser detectada no líquido sinovial das
articulações OA, onde induz a expressão gênica de enzimas que degradam a matriz nos
condrócitos. No fluido sinovial de pacientes com OA, outra molécula pró-inflamatória de
células assassinas naturais é expressa, isto é, a protease Granzima A, que pode
contribuir para a inflamação articular crônica. NFkB parece ser um fator de transcrição
chave que conduz a expressão de genes indutores de OA em resposta à ativação de
receptores toll-like e um receptor de interleucina por fragmentos de MEC e IL-1β.
Citocinas pró-inflamatórias, como IL-1β, são produzidas nas vias de proteína quinase
ativada por mitogênio estimulada por OA (MAPK) através das quinases reguladas por
sinal extracelular (ERK)½, quinase p38 e c-jun N-terminal quinase (JNK). A fosforilação
elevada de MAPK resulta na ativação de fatores de transcrição, que por sua vez regula
positivamente a produção de várias moléculas, como MMPs e agrecanases, que são
responsáveis pela degradação da matriz. Em OA, IL-1β induz a ativação da via de
sinalização NFkB em condrócitos humanos, causando dor de baixo grau (Wan e Zhao
2017). Sluzalska et al. (2017) demonstraram que as vias de sinalização de NFkB, p38
MAPK e JNK estão todas envolvidas na biossíntese de fosfolipídios induzidos por IL-1β
(PLs). Recentemente, McAllister et al. (2018) demonstraram que o inflamassoma
contendo a proteína 3 (NLRP3) do receptor semelhante ao domínio de ligação ao
nucleotídeo está implicado na patogênese da OA ao produzir IL-1β, TNF-a e MMP-3, que
conduzem a degeneração da cartilagem e sinovial inflamação. Durante a progressão da
OA, os sinoviócitos semelhantes a fibroblastos sofrem alterações em sua composição de
PL para se adaptar ao novo ambiente doente (Revisado em Gupta 2016; Gupta et al.
2019). Além disso, vários estudos implicaram PKCδ como o fator limitante da taxa em que
PKCδ está situado no ponto convergente de múltiplas entradas de sinalização, incluindo
PGF-2, substância P, TNF-a, IL-1 e fragmento de fibronectina. A ativação de PKCδ pode
levar à ativação de NFkB, além da ativação de MAPK, e essas vias funcionam em
conjunto para inibir a sinalização anabólica e estimular a degeneração de MEC (Lee et al.
2013).

Existem algumas vias de sinalização adicionais envolvidas na degradação da cartilagem

relacionada à OA (Wang et al. 2017; Chen et al. 2018b; Deshmukh et al. 2018). Wnt/β-
catenina desempenha um papel modulador crítico na manutenção da unidade bioquímica
645
osso/cartilagem. O aumento da expressão da proteína de sinalização induzida por Wnt 1
(WISP-1), Wnt-16 e Wnt-28 foi relatado na cartilagem OA e pode contribuir para a
degradação da cartilagem pela regulação positiva de MMPs e agrecanases (Blom et al.
2009). A sinalização Wnt afeta a patogênese da OA modulando a diferenciação de
osteoblastos e condrócitos e através da produção de proteases catabólicas (Deshmukh et
al. 2018). Uma via modulatória do osso/cartilagem, o fator de crescimento transformador β
(TGFβ), é necessária para a manutenção da homeostase metabólica e integridade
estrutural da cartilagem saudável. Este fator é altamente expresso na cartilagem normal,
mas quase ausente na cartilagem OA. Recentemente, Wang et al. (2017) descreveram
que a sinalização de TGFβ/ALK5 mantém a homeostase da cartilagem articular, em parte,
pela regulação positiva da expressão do proteoglicano 4 (PRG4) através da via de
sinalização PKA-CREB em condrócitos articulares. A perda/interrupção da sinalização de
TGFβ na cartilagem resulta em perda de proteoglicanos e degeneração da cartilagem.
Assim, a inibição do TGFβ endógeno leva a um aumento do dano à cartilagem.

Recentemente, Lu et al. (2014) e Carpio e Westendorf (2016) sugeriram que o início e a

progressão da OA contribuem para os padrões de expressão e ativação aprimorada de
histonas desacetilases (HDACs). Superexpressão de HDAC4 promove enzimas de
degradação da matriz e aumenta a atividade catabólica dos condrócitos na cartilagem OA
(Lu et al. 2014). Tanto HDAC1 quanto HDAC2 suprimem a expressão de genes que
codificam genes MEC, como colágeno tipo II (Cil2a1), agrecan (ACAN) e proteína
oligomérica da cartilagem (COMP). Curiosamente, Pujol et al. (2018) relataram que a
redução na densidade das fibras nervosas na sinóvia ocorre com degeneração avançada
da cartilagem, sugerindo que a neuropatia periférica está associada com OA em equinos.
Se esta ligação está associada à dor neuropática ainda não foi elucidado. A fisiopatologia
da OA foi discutida em detalhes em outro lugar (Gupta 2016; Gupta et al. 2019).

3. Diagnóstico de OA
Em ambientes clínicos veterinários, o diagnóstico de OA é frequentemente baseado em
achados observacionais (Gupta et al. 2009, 2012; Fleck et al. 2014; Lawley et al. 2013;
Murdock et al. 2016) e achados radiográficos (Ramírez-Flores et al. 2017). Cães, gatos e
cavalos apresentam dor associada à OA devido à inflamação na (s) articulação (ões). Os
biomarcadores bioquímicos tornaram-se excepcionalmente úteis no diagnóstico e
tratamento da OA.

646
3.1 Medição da Dor

Mensalmente, cães e cavalos são avaliados quanto à dor geral, dor durante a
manipulação dos membros e claudicação associada ao exercício usando o sistema de
pontuação de Glasgow por um período de estudo de pelo menos 4-5 meses (Gupta et al.
2009, 2012, 2019; May et al. 2015; Murdock et al. 2016). Em cães, a dor geral é graduada
em uma escala de 0 a 10: 0, sem dor; 5, dor moderada; e 10, dor intensa e constante. A
dor na manipulação do membro é avaliada durante a extensão e flexão de todos os quatro
membros por um período de vários minutos. O nível de dor é classificado em uma escala
de 0–4; 0, sem dor; 1, leve; 2, moderado; 3, grave; e 4, grave e constante. Dor e
claudicação são medidas após exercícios físicos e classificadas em uma escala de 0–4: 0,
sem dor; 1, leve; 2, moderado; 3, grave; e 4, grave e constante. Em cavalos, a dor é
medida usando critérios e escalas semelhantes. Além disso, a flexibilidade e a amplitude
de movimento nas articulações afetadas são medidas por meio de um goniômetro (May et
al. 2015).

Em cães, uma plataforma de força no solo (Kistler Instrument, Amherst, NY, EUA) é
utilizada para medir quantitativamente a dor associada à claudicação em cada perna de
cada cão (Gupta et al. 2012). O sistema de placa de força no solo (GFP) de Kistler
consiste em placas, lasers e um computador (Fig. 1). O GFP mede dois parâmetros
principais: (1) força vertical de pico ou força g (Newton/kg de peso corporal) e (2) área de
impulso (Newton*s/kg de peso corporal).

Fig. 1 Avaliação da dor usando a plataforma de força

terrestre

3.2 Observação de Ortolani e Exame da gaveta tibial craniana

O exame ortolani e da gaveta tibial cranial é realizado para avaliar a dor, marcha e
claudicação em cães. A Manobra de Ortolani é um teste comum realizado em caninos
com predisposição à displasia do quadril, como pastores alemães ou caninos de raças
maiores. O Ortolani é realizado na articulação do quadril flexionando o joelho e o quadril a
647
90 graus, colocando o dedo indicador nos trocanteres maiores e abduzindo o quadril
(sinal de Ortolani 2007; Fleck et al. 2014). À medida que o quadril é abduzido ou afastado
do corpo, um Ortolani positivo apresentará um som de “estalo” ou sensação à medida que
a cabeça femoral se desloca anteriormente para o acetábulo ou encaixe do quadril. Na
artrite moderada, os cães podem apresentar um sinal de Ortolani negativo (Fleck et al.
2014; Gupta et al. 2019). A gaveta tibial cranial é outro exame que pode ser realizado no
exame físico para indicar alterações artríticas e diagnosticar a ruptura do ligamento
cruzado cranial (LCC). Uma gaveta tibial positiva é obtida com a capacidade de mover a
tíbia cranialmente ou para frente em relação ao fêmur fixo. Para um procedimento
detalhado, consulte Devine (1993) e Gupta et al. (2019).

3.3 Biomarcadores bioquímicos

Existem vários biomarcadores bioquímicos relacionados à inflamação e dor (citocinas,

PGE2, proteína c reativa, TNF-a, TSG-6, etc.) e danos e perda de cartilagem (COMP,
MMPs, fractalcina, fragmentos de cartilagem tipo II, sialoproteína óssea, c-telopeptídeo de
colágeno tipo I, hialuronano, agrecano, grelina, lubricina, proteína semelhante à folistatina
1, etc.). Alguns desses biomarcadores podem ser medidos no fluido sinovial (Trumble et
al. 2004; Venable et al. 2008; Kamm et al. 2010; de Bakker et al. 2017; Heikkilä et al.
2017; Shahid et al. 2018), enquanto outros são medidos no sangue ou na urina (Bay-
Jensen et al. 2016; Singh et al. 2015; Gupta et al. 2019). A PGE 2 é produzida pela ação
das enzimas COX em várias células, e sua concentração aumentada no líquido sinovial
se correlaciona positivamente com a dor da OA em cães (Trumble 2005) e cavalos (Van
Loon et al. 2010). Também foi relatado que a substância P aumenta a liberação de PGE 2
dos condrócitos, e as concentrações de substância P e PGE 2 se correlacionam no líquido
sinovial de cavalos com OA (Kirker-Head et al. 2000). Recentemente, microRNAs
(mRNAs) que são mais sensíveis e específicos para OA foram identificados na circulação
e auxiliam no diagnóstico precoce e progressão da doença. Alguns deles têm potencial
para terapia. Para obter detalhes sobre biomarcadores de OA, consulte as publicações
recentes (Gupta 2016; Gupta et al. 2019).

4. Nutracêuticos no Tratamento de OA
Existem vários nutracêuticos que são usados atualmente ou têm potencial para controlar
os sinais e sintomas da OA em cães e cavalos (Gupta et al. 2009, 2012; Gupta 2016;
Comblain et al. 2015; Bhathal et al. 2017). Além disso, os nutracêuticos multicomponentes
são populares para tratamento ou terapias adjuvantes em medicina veterinária, apesar da

648
falta de evidências de eficácia para muitos produtos (Martinez et al. 2015). Os objetivos
do tratamento da OA incluem minimizar a dor nas articulações, reduzindo a inflamação e
retardando a progressão do dano à cartilagem, aumentando assim a flexibilidade das
articulações e a qualidade de vida. Alguns dos nutracêuticos são discutidos aqui
resumidamente.

4.1 Glucosamina e condroitina

A glucosamina (sulfato de glucosamina, GS ou cloridrato de glucosamina, GH) e o sulfato

de condroitina (CS) são componentes da MEC da cartilagem articular. As fórmulas
estruturais da glucosamina e da condroitina são mostradas na Fig. 2. A glucosamina (2-
amino-2-desoxi-D-glicose) é um constituinte do glicosaminoglicano, que desempenha um
papel no crescimento normal e no reparo da cartilagem articular. É comumente
considerado um bloco de construção da cartilagem.

Fig. 2 Fórmula estrutural de glucosamina (esquerda) e condroitina

(direita)

A glucosamina é comumente obtida de cascas de caranguejo, lagosta e camarão. Após a

administração oral de glucosamina (GS ou GH), 90% do GS é absorvido pelo intestino
delgado. Devido a um extenso metabolismo de primeira passagem, sua biodisponibilidade
é de apenas 25% (Sentikar e Rovati 2001). Adebowale et al. (2002) relataram a
biodisponibilidade do GH em 12%. A excreção de glucosamina é principalmente através
dos rins, com apenas vestígios de glucosamina não modificada eliminada através
as fezes (Persiani et al. 2005; Block et al. 2010). O CS é um glicosaminoglicano sulfatado
(GAG) composto por uma cadeia de açúcares alternados, N-acetil-D-galactosamina e
ácido D-glucurônico. O SC também é um constituinte normal da cartilagem articular e
geralmente é obtida da cartilagem animal (como a traqueia e a cartilagem de tubarão).

Aproximadamente 30% do CS é absorvido, com uma biodisponibilidade de 12–13% (Deal

e Moskowitz 1999). Adebowale et al. (2002) descobriram que a biodisponibilidade de CS
era de 4,8-5,0%. Para farmacocinética detalhada de CS, os leitores devem consultar
Adebowale et al. (2002), Jackson et al. (2010) e Jerosch (2011). Comblain et al. (2015)

649
relataram que a biodisponibilidade oral e a farmacocinética de GS e CS desempenham
um papel importante na otimização do gerenciamento de OA.

A glucosamina e a condroitina fornecem efeitos antiinflamatórios, antiartríticos e de reparo

da cartilagem por múltiplos mecanismos. Alguns desses mecanismos incluem (1)
expressão reduzida de MMPs (MMP-1, MMP-3 e MMP-13) e inibição da quinase amino-
terminal de c-jun e fosforilação de p38 e, consequentemente, atividade de ligação de c-jun
(D'Abusco et al. 2007), (2) síntese de proteoglicanos aprimorada (Hooper 2001) e (3)
supressão da expressão gênica induzida por IL-1 de iNOS, COX-2, mPGEs e NFkB em
explantes de cartilagem. CS também inibe a translocação nuclear NFkB e a fosforilação
de p38 MAPK, ERK½ e JNK (Jomphe et al. 2008; Stabler et al. 2017). Como resultado,
pode ocorrer redução da produção de NO e PGE 2, dois mediadores responsáveis pela
morte celular dos condrócitos e reações inflamatórias (Chan et al. 2005).

Frech e Clegg (2007) e Hochberg et al. (2008) relataram que o CS exerce seus efeitos
anti-OA ao produzir hidratação que ajuda a criar pressão osmótica dentro da MEC para
manter a resistência à compressão da cartilagem e melhora a função/mobilidade da
articulação. O CS estimula o metabolismo dos condrócitos, levando à síntese de colágeno
e proteoglicano (Jerosch 2011). Também pode proteger a cartilagem existente da
degradação prematura. O SC pode reduzir a inflamação, inibir a síntese de MMPs,
aumentar a síntese de constituintes da MEC e reduzir a apoptose de condrócitos
articulares (Monfort et al. 2008; Vangness et al. 2009). A glucosamina e a condroitina,
quando administradas em combinação, oferecem efeitos sinérgicos, como
antiinflamatórios, antioxidantes e condroprotetores (Dechant et al. 2005; Neil et al. 2005;
Trumble 2005; Valvason et al. 2008; Gupta 2016).

As doses, rota e duração do tratamento com glucosamina e condroitina em cães e

cavalos estão resumidos na Tabela 1. Em um estudo duplo-cego, McCarthy et al. (2007)
avaliaram a eficácia do Synoquin SA, um produto da Vets Plus Inc. (475 mg GH e 350 mg
CS por 1 g), em cães com OA por um período de 70 dias. Os cães receberam Synoquin
SA de acordo com seu peso corporal (1 g para 5–19,9 kg; 1,5 g para 20–40 kg; e 2 g
para> 40 kg) duas vezes ao dia por 42 dias. Após 42 dias, a dose diária de GH / CS foi
reduzida em um terço nos 28 dias subsequentes. O tratamento melhorou
significativamente os sinais e sintomas de OA nos cães do estudo. Em uma série de
estudos, GH e CS não produziram efeitos colaterais e foram considerados bem tolerados
(Gupta et al. 2009, 2012). No entanto, em poucos estudos, a glucosamina foi considerada
insegura em doses mais altas (Giaccari et al. 1995; Breese McCoy e Bryson 2003;
Lafontaine-Lacasse et al. (2011).
650
4.2 Hialuronano

O ácido hialurônico (HA), comumente denominado hialuronato ou hialuronano, é um

glicosaminoglicano não sulfatado (GAG), produzido por condrócitos e fibroblastos
sinoviais. HA é um componente importante da MEC da cartilagem articular que reveste
cada condrócito. Também está presente no líquido sinovial. Sua fórmula química é
mostrada na Fig. 3. Dentro da cavidade articular, as moléculas de HA são
predominantemente sintetizadas por sinoviócitos do tipo B. HA (um polímero de
dissacarídeos) pode ter 25.000 repetições de dissacarídeos de comprimento, com um
peso molecular (Peso Mol) de 5.000-20.000.000 Da. O HA é sintetizado por hialuronan
sintases (HAS), das quais os vertebrados possuem três tipos (HAS1, HAS2 e HAS3).
Essas enzimas aumentam o HA ao adicionar repetidamente ácido glucurônico e N-acetil
glucosamina ao polissacarídeo nascente. HA é catabolizado por hialuronidases, e o MW
de HA na cartilagem diminui com a idade, mas a quantidade aumenta (Holmes et al. 1988;
Gupta 2016).

Fig. 3 Fórmula estrutural do ácido

hialurônico (HA)

O tratamento intra-articular (IA) com HA foi investigado em vários estudos e tem sido
usado por décadas como terapia de OA em cães e cavalos (Armstrong et al. 1994; Kuroki
et al. 2002; Frisbie et al. 2009; Jerosch 2011; Carapeba et al. 2016). Em um estudo
recente, o HA também foi administrado por via intravenosa em cavalos (Frisbie et al.
2016). Há controvérsias sobre a eficácia do AH administrado por via oral. Os dados
farmacocinéticos revelaram que o HA de alto peso molecular administrado por via oral
também atingiu a articulação (Balogh et al. 2008), o que fornece uma justificativa para a
suplementação oral de HA. Além de sua contribuição para as propriedades estruturais da
MEC, o HA pode ter um papel na regulação da síntese de proteoglicanos durante a
maturação da cartilagem articular e nos processos de reparo (Kuroki et al. 2002).

Philip (1989) e Jerosch (2011) relataram que HA de maior MW foram mais eficazes do que
aqueles de menor MW. Ghosh e Guidolin (2002) demonstraram que HA dentro da faixa de
Peso Mol de 0,5 x 106 – 1,0 x 106 Da restauraram parcialmente as propriedades reológicas
do fluido sinovial e o metabolismo do fibroblasto sinovial em modelos animais. Esses
651
autores também descreveram a interação do HA com receptores de dor e efeitos
analgésicos. HA exerce ações farmacológicas ao mitigar as atividades de mediadores pró-
inflamatórios e neuropeptídeos produtores de dor liberados por células sinoviais ativadas
(Kuroki et al. 2002; Gupta 2016). Moreland (2003) relatou que o HA pode reduzir os
impulsos nervosos e a sensibilidade nervosa associada à dor da OA. HA também pode
reduzir a dor associada à OA, diminuindo a síntese de PGE 2 e bradicinina, bem como a
substância P (revisado em Gupta 2016).

Em relação ao reparo da cartilagem, Kuroki et al. (2002) sugeriram que a administração

intra-articular de HA tem um efeito direto nos condrócitos ou sinoviócitos e na produção do
fator de crescimento transformador (TGF) -β, fator de crescimento derivado de
fibroblastos básico (FGF) e fator de crescimento semelhante à insulina (IGF) -1. A
evidência histológica sugere que o HA previne a degradação da cartilagem e pode
promover sua regeneração. Ghosh e Guidolin (2002) também forneceram evidências de
que o tratamento com HA mitigou a hipertrofia sinovial e aumentou o número de células
semelhantes a fibroblastos sinoviais enquanto diminuiu macrófagos, linfócitos, mastócitos
e adipócitos. HA parece fornecer proteção à cartilagem pela regulação negativa de
citocinas; radicais livres, como NO; e atividades proteolíticas no líquido sinovial.

Como a glucosamina e o CS, o HA é um agente anti OA de ação lenta que pode ser
usado profilaticamente ou terapeuticamente como um agente modificador da doença
antiinflamatória em OA (Kuroki et al. 2002; Venable et al. 2008; Aubry-Rozier 2012;
Carapeba et al. 2016). Marshall et al. (2000) relataram que uma série de três injeções
semanais de 0,5 ml (4 mg) de Ha (Mol Wt, 6 x 10 6 Da) melhorou a gravidade da OA em
cães. O uso de HA intra-articular (IA) tem sido prescrito para sinovite ou OA em cavalos
desde 1975. HA é comumente usado no tratamento de distúrbios articulares [articulações
do carpo e boleto (sesamoide)] em cavalos, especialmente aqueles envolvidos em
competições de corrida e trabalhos pesados. HA pode ser injetado diretamente em uma
articulação afetada. Auer et al. (1980) relataram que em OA de ocorrência natural e
experimentalmente induzida em cavalos, a injeção IA de HA (40 mg) reduziu
significativamente a claudicação e aumentou a sustentação de peso no membro tratado,
medido usando a plataforma de força no solo. HA é especialmente indicado para níveis
leves a moderados de sinovite associada à OA equina. No entanto, tem uma limitação no
tratamento de sinovite grave ou OA.

Durante a última década, o uso de AH intravenoso tornou-se comum, principalmente para

doenças menos localizadas. No entanto, existe apenas um produto licenciado feito pela
Bayer (Legend® nos Estados Unidos, Hyonate® em outros lugares). Foi sugerido que,
652
quando usado em combinação, o HA não apenas fornece melhores efeitos benéficos dos
corticosteróides, mas pode aplacar os efeitos colaterais de certos corticosteróides. De
acordo com os regulamentos canadenses, o HA na preparação de HY-5 não deve ser
administrado a cavalos que serão abatidos para carne. No entanto, na Europa, a mesma
preparação não é considerada como tendo esse efeito. O HA é conhecido por produzir
alguns efeitos colaterais, como dores musculares, cãibras, dor no joelho injetado e
inchaço nos braços e pernas que dificultam os movimentos (Rutjes et al. 2012).

4.3 Curcumina

A curcumina é um ingrediente ativo do açafrão-da-índia amarela, obtido a partir das raízes

da Curcuma longa. O valor nutracêutico da curcumina foi reconhecido em uma série de
doenças (Javeri e Chand 2016; Shome et al. 2016; Du et al. 2017: Kurien et al. 2017;
Shen et al. 2017), incluindo OA (Henroitin et al. 2014; Comblain et al. 2015; Zhang et al.
2016) e câncer (Jayakumar et al. 2017). Em estudos in vitro, a curcumina demonstrou
diminuir a síntese de iNOS, NO, PGE 2, IL-6, IL-9, COX-2, MMP-3 e MMP-9 ao inibir a
translocação de NFkB e vias de sinalização nos condrócitos TNF-a, proporcionando
assim um efeito condroprotetor (revisado em Comblain et al. 2015). Em um modelo de
camundongo de OA, Zhang et al. (2016) relataram que tanto a curcumina quanto as
nanopartículas encapsulando a curcumina suprimiram a expressão de mRNA de
mediadores pró-inflamatórios IL-1β e TNF-a; MMPs 1, 3 e 13; e agrecanase ADAMTS5 e
regulou positivamente o regulador transcricional condroprotetor CITED2 em condrócitos
de cultura primária na ausência ou presença de IL-1β. A administração oral de curcumina
reduziu significativamente a progressão da doença de OA, mas não mostrou nenhum
efeito significativo no alívio da dor de OA.

Colitti et al. (2012) trataram cães com curcumina (4 mg/kg, bid) por 20 dias e descobriram
que a curcumina tem como alvo a regulação positiva de I-kB na via de sinalização de
TNRF1 e a regulação negativa de IL-18 no papel das citocinas na mediação da
comunicação entre as células imunes. A curcumina também inibiu a proliferação de
macrófagos, regulando negativamente o TNF-a e ativando a fibrinólise. Em essência, a
curcumina exerce atividades antioxidantes, antiinflamatórias e condroprotetoras. Além
disso, a curcumina aumenta a síntese de colágeno tipo II. Após sua administração oral, a
biodisponibilidade da curcumina é baixa, assim como sua eficácia contra a OA. Por essa
razão, intensos esforços de pesquisa estão em andamento para aumentar sua
biodisponibilidade usando várias formulações (incluindo potencializadores) e sistemas de
entrega. Estudos recentes sugerem que, ao conjugar a curcumina com nanopartículas de
óxido metálico ou encapsulá-la em nanopartículas lipídicas, dendrímeros, nanogéis e
653
nanopartículas poliméricas, a solubilidade em água e a biodisponibilidade da curcumina
podem ser melhoradas e, assim, aumentar sua eficácia farmacológica (Shome et al.
2016).
Em vários estudos, a curcumina foi investigada em combinação com outros nutracêuticos,
como ácido boswélico, colágeno tipo II, chá-verde, resveratrol e outros para alcançar
maiores efeitos anti OA do que a curcumina sozinha (revisado em Comblain et al. 2015;
Haroyan et al. 2018; Zhang et al. 2016) Para obter mais detalhes sobre a curcumina, os
leitores devem consultar o cap. 1 neste livro.

4.4 Metil sulfonilmetano

Metil sulfonil metano (MSM), também conhecido como dimetil sulfona (Fig. 4), é um
composto organosulfurado de ocorrência natural presente em algumas plantas.
Suplementos MSM, disponíveis em comprimidos e líquidos, são comercializados com
uma variedade de reivindicações. O MSM é frequentemente administrado em combinação
com glucosamina e/ou condroitina para prevenir ou tratar OA.

Fig. 4 Fórmula
estrutural de metil
sulfonil metano (MSM)

MSM, por ter alto teor de enxofre, é usado pelo corpo para manter o tecido conjuntivo
normal. Pode fornecer efeitos antiartríticos por meio de suas atividades antioxidantes,
antiinflamatórias e analgésicas (Kim et al. 2006; também revisado em Gupta 2016). Na
OA, o MSM tem a mesma finalidade que os AINEs, mas não apresenta nenhum dos
resultados negativos associados aos AINEs.

Em um ensaio clínico, Kim et al. (2006) descobriram que, em comparação com o placebo,
3 g de MSM duas vezes ao dia (6 g/dia no total) durante 12 semanas produziu reduções
significativas na dor WOMAC e no comprometimento da função física. MSM melhorou os
sintomas de dor e melhorou a função física durante a intervenção, sem grandes eventos
adversos. Em outro ensaio clínico, Debbi et al. (2011) relataram que pacientes com OA de
joelho em uso de MSM 3 x ao dia (1,125 g) por 12 semanas apresentaram diminuição da
dor e melhora da função física. Usha e Naidu (2004) trataram pacientes com OA de joelho
com 1,5 g de MSM (500 mg tid), 1,5 g de sulfato de glucosamina (SG) ou MSM mais SG
654
ou placebo por 12 semanas. Reduções significativas no Índice de Lequesne foram
relatadas com MSM, SG e sua combinação (P <0,05). Os autores relataram uma redução
de 33% na dor no grupo de MSM, mobilidade articular, inchaço e avaliação global, e o
tempo de caminhada também foi melhorado.

A dose recomendada de MSM em cães é 250–500 mg/dia e em cavalos é 10–15 g/dia. Os

cães tratados com MSM devem ser examinados regularmente para verificar as funções
hepáticas e renais, e se o cristalino dos olhos está opaco. Alguns cães podem apresentar
distúrbios gastrointestinais leves com vômitos e diarreia, enquanto outros podem
apresentar reações alérgicas, como erupções na pele, urticária e dificuldade para respirar.
MSM não é recomendado para uso em fêmeas grávidas e que são alérgicas a MSM ou
têm câncer do trato urinário ou bexiga.

4.5 Colágeno

O colágeno tipo II é o principal componente do colágeno da cartilagem hialina, que é

destruído na OA pela MMP 13 (Xu et al. 2007). O colágeno glicosilado não desnaturado
do tipo II (doravante denominado colágeno do tipo II) demonstrou ser eficaz na melhora
da dor associada à artrite em humanos (Trentham et al. 1993; Crowley et al. 2009), cães
(Gupta et al. 2012) e cavalos (Gupta et al. 2009). Em ensaios clínicos conduzidos em
cães moderadamente artríticos, 10 mg do colágeno tipo II por dia por um período de 120-
150 dias reduziu significativamente a dor associada à OA (DeParle et al. 2005; D'Altilio et
al. 2007; Peal et al. 2007; Gupta et al. 2012). Também em cavalos, a administração diária
de colágeno tipo II (160 mg) foi considerada eficaz na redução da dor da OA (Gupta et al.
2009). Esses suplementos foram bem tolerados, pois nenhum efeito colateral foi
observado. Para obter detalhes sobre o mecanismo de ação e segurança do colágeno
tipo II, os leitores devem consultar Marone et al. (2010) e Gupta (2016).
Os peptídeos de colágeno estimulam a biossíntese de moléculas da matriz extracelular no
tecido da cartilagem e diminuem os processos degenerativos por meio da modulação da
expressão de colagenases e proteoglicanases (Schunck et al. 2007a, b, 2017). Em um
ensaio clínico, Dobenecker et al. (2017) suplementaram cavalos OA com 25 g ou 50 g de
peptídeos de colágeno bioativos (BCP, PETAGILE®) por 12 semanas. Um exame
ortopédico revelou que, de uma maneira dependente da dose, o BCP proporcionou
melhora significativa na claudicação e dor associadas à OA em cavalos.

4.6 Insaponificáveis de Abacate/Soja

Os insaponificáveis de abacate e soja (ASU) têm sido usados no tratamento da OA há

décadas. Os ingredientes ativos deste extrato são uma fração lipídica hidrolisada rica em
esteróis (Castrogiovanni et al. 2016) e sinergismo entre os componentes do abacate e da
655
soja. Suas proporções relativas (um terço de óleo de abacate e dois terços de óleo de
soja) também parecem ser importantes (revisado em Gupta 2016). ASU parece estimular
a síntese de MEC. Boumediene et al. (1999) e Altinel et al. (2007) também relataram que
o ASU pode estimular a expressão dos genes TGF-β1 e TGF-β2 em condrócitos bovinos
cultivados e no fluido articular canino. Além disso, Altinel et al. (2011) demonstraram que
cães tratados com ASU (300 mg a cada 3 dias) por 15 semanas mostraram
significativamente mais colágeno e conteúdo de tecido condral pelo aumento de TGF-β
nos tecidos. A síntese do inibidor 1 do ativador do plasminogênio (PAI-1) em ambos os
níveis de mRNA e proteína tem sido um fator contribuinte adicional. Henrotin et al. (1998)
demonstraram que ASU pode inibir a ação de IL-1β na produção de MMP 3, IL-6, IL-8 e
PGE2 e síntese de colagenase estimulada por IL-1-β por condrócitos articulares.

Em outro estudo, Boileau et al. (2009) demonstraram que o tratamento com ASU (10
mg/kg/dia) pode reduzir o desenvolvimento de cartilagem da OA precoce e lesões ósseas
subcondrais no ligamento cruzado anterior de cães. Este efeito parece ser mediado pela
inibição de iNOS e MMP-13, que são mediadores chave das mudanças estruturais que
ocorrem na OA. Em essência, o ASU pode ser útil na prevenção ou bloqueio da erosão do
tecido na OA e desacelerar o estreitamento do espaço articular e o reparo da cartilagem
(Maheu et al. 1995, 1998; Lequesne et al. 2002). O extrato de ASU não diminuiu os sinais
clínicos de dor em cavalos com OA induzida experimentalmente e pareceu haver um
efeito modificador da doença do tratamento em comparação com o placebo.

4.7 O mexilhão de lábios verdes da Nova Zelândia

Perna canaliculus (mexilhão de lábios verdes, GLM) é uma fonte rica em

glicosaminoglicanos (GAGs), ácidos graxos ômega-3 e ácido eicosatetraenóico (ETA). Os
GAGs exercem atividade antiinflamatória e lubrificam as articulações em pacientes com
OA. O ETA parece atuar como um inibidor duplo da oxigenação do ácido araquidônico
pelas vias da ciclo-oxigenase (COX) e da lipo-oxigenase. Ao contrário de muitos AINEs, o
GLM é gastroprotetor e não afeta a agregação plaquetária, sugerindo que o ETA pode
bloquear seletivamente a via COX-2 pró-inflamatória em vez da via COX-1
fisiologicamente importante (Rainsford e Whitehouse 1980; Bierer e Bui 2002).
Bui e Bierer (2003) avaliaram a eficácia do pó de GLM (0,3% de uma dieta seca) para
aliviar os sinais clínicos de OA em cães. As articulações foram avaliadas quanto ao grau
de dor, inchaço, crepitação e redução da amplitude de movimento. Ao final de 6 semanas,
os cães tratados com GLM apresentaram melhora significativa na pontuação artrítica, dor
nas articulações e inchaço, sem melhora significativa na crepitação e amplitude de
movimento articular. Em outro estudo, esses pesquisadores (Bierer e Bui 2002) trataram
656
cães OA com PEDIGREE® JointCareTM Treats contendo GLM (450 mg para < 25 kg, 1
tratamento; 750 mg para 25–34 kg, 1,5 Tratamento; e 1 g para > 34 kg, 2 tratamentos) por
8 semanas. Os resultados revelaram redução da claudicação e dor associada à OA em
cães. Rialland et al. (2013) avaliaram o efeito de uma dieta suplementada com GLM no
comportamento e funcionamento da dor em cães. Esses pesquisadores observaram que
os cães que receberam uma dieta rica em GLM mostraram um aumento nas
concentrações plasmáticas de ácidos graxos ômega-3 (EPA e DHA), melhora do pico de
força vertical usando a plataforma de força no solo e redução dos sinais de OA. Em um
ensaio clínico duplo-cego, Hielm-Björkman et al. (2009) avaliaram a eficácia da
preparação de GLM liofilizada (LYPROFLEX®) em cães com OA por um período de 8
semanas. Os resultados revelaram que o GLM foi mais eficaz do que o placebo e menos
eficaz do que os cães de controle positivo que receberam carprofeno, sem quaisquer
efeitos colaterais. A dose-padrão de GLM é de 77 mg/kg/ dia em cães com OA.

Produtos liofilizados de mexilhão de lábios verdes também são usados para tratar cavalos
com OA (Cayzer et al. 2012). Em um estudo randomizado, duplo-cego e controlado por
placebo, cavalos foram dosados por via oral com 25 mg/kg de peso corporal/dia por 56
dias. Os resultados revelaram que o tratamento aliviou significativamente a gravidade da
claudicação e dor nas articulações e melhorou a resposta à flexão articular em cavalos
com claudicação atribuída a OA no boleto (Cayzer et al. 2012).

4.8 Guloseimas congeladas holísticas naturalmente preferidas para cães

Broderick et al. (2013) conduziram um ensaio clínico em cães com artrite moderada de
propriedade de clientes para avaliar o Naturally Preferred Holistic Frozen Dog Treats (um
produto da Henry Schein Animal Health) quanto à eficácia, segurança e tolerabilidade
antiartríticas. No Grupo I (<50 libras cada), cada cão recebeu meia guloseima, enquanto
os do Grupo II (> 50 libras cada) receberam uma guloseima completa diariamente por um
período de 4 semanas. Em intervalos semanais, os cães foram avaliados quanto à dor
associada à OA (dor geral, dor à manipulação dos membros e dor após esforço físico) e
parâmetros físicos (peso corporal, frequência cardíaca e temperatura corporal), análise
sérica para hepatopatia (bilirrubina, ALT e AST), biomarcadores renais (BUN e creatinina),
coração e músculo esquelético (creatina quinase) e parâmetros hematológicos. A redução
acentuada da dor artrítica foi observada em cães de ambos os grupos dentro de uma
semana, com efeitos significativos e máximos após 4 semanas. O produto forneceu
resultados surpreendentes na redução da dor associada à OA e foi considerado seguro e
bem tolerado. Todos os ingredientes deste produto são naturais e o mecanismo de ação

657
dos efeitos antiartríticos permanece confidencial no momento. Para obter mais detalhes,
consulte Broderick et al. (2013).

Em vários estudos, foi demonstrado que a suplementação dietética com ácidos graxos w-
3 marinhos é benéfica para o tratamento da OA canina (Fritsch et al. 2010; Roush et al.
2010a, b; Moreau et al. 2013; Mehler et al. . 2016). Em cães, gatos e cavalos com OA de
ocorrência natural, dietas suplementadas com ácidos graxos ômega-3 podem melhorar a
mobilidade e a atividade (Moreau et al. 2013; Corbee et al. 2012; Gupta 2016). Em um
estudo clínico de 12 semanas, Fritsch et al. (2010) descobriram que a dose necessária de
carprofeno para melhorar a claudicação diminuiu significativamente mais rápido em cães
suplementados com ácidos graxos ômega-3 em comparação com o controle (3,5% e
0,1%, respectivamente). Achados de Roush et al. (2010 a, b) sugeriram que a ingestão de
ácidos graxos ômega-3 de óleo de peixe (3,5% na comida) por 90 dias aumentou a
concentração de EPA no soro 15 vezes e melhorou os sinais clínicos em cães com OA
com base em avaliações ortopédicas e análise de placa de força. Em um estudo recente,
Mehler et al. (2016) determinaram os efeitos de EPA + DHA (69 mg/kg/dia por 84 dias)
sobre os sinais clínicos e as concentrações de PUFA eritrocitários em cães com OA. Os
resultados revelaram que os cães que receberam EPA + DHA mostraram uma diminuição
significativa no ácido araquidônico (17%) e um aumento no EPA (13,3 vezes) e DHA (3,3
vezes) no sangue, o que se correlacionou bem com a melhora nos sinais de OA, sem
qualquer efeito colateral importante. Cavalos suplementados com ácidos graxos ômega-3
(EPA, 15 g/dia; e DHA, 19,8 g/dia) por 90 dias mostraram diminuições significativas nas
concentrações plasmáticas de PGE2 e contagens de leucócitos no líquido sinovial, mas a
análise da placa de força não indicou significância mudança. Para obter detalhes sobre os
ácidos graxos ômega-3, os leitores devem consultar um capítulo sobre os ácidos graxos
ômega neste livro.

4.10 Extrato de Boswellia serrata

Os efeitos benéficos para a saúde do extrato de B. serrata (frequentemente chamado de

incenso indiano, uma planta nativa da Índia) são atribuídos aos ácidos boswelicos (ácido
alfa-boswélico e beta-boswélico). Os outros constituintes químicos incluem óleo volátil,
terpinois, arabinose, xilose, ácido urônico, β-sitosterol e flobafenos (Goyal et al. 2011;
Patel et al. 2013). Ambos os ácidos boswelicos têm um grupo hidroxila e diferem apenas
em sua estrutura de triterpeno. A estrutura química do ácido alfa-boswélico é mostrada na
Fig. 5. Um dos seis ácidos boswelicos, ácido acetil-ceto-beta-boswélico (AKBA) está
presente em 2–3% do extrato total e é o mais importante para antiefeitos OA. Os ácidos

658
acetil-oswélico exibem propriedades antiinflamatórias e antiartríticas ao inibir a síntese de
leucotrieno (Ammon et al. 1993; Upaganlawar e Ghule 2009).

5-Loxin® (um produto patenteado da PLT Health Solutions, Inc.), com 30% de AKBA,
proporciona melhora na mobilidade e conforto das articulações em uma semana. Inibe 5-
lipo-oxigenase, NFkB e MMP-3. 5-Loxin® impacta positivamente os biomarcadores de
inflamação e artrite, como TNFa, CRP e IL-6. Atualmente, o produto Nutraquin+ também
está no mercado para OA em cães, gatos e cavalos.

Fig. 5 Fórmula estrutural do ácido

alfa boswélico

4.11 Shilajit

Shilajit é um exsudato marrom-escuro das rochas sedimentares das montanhas do

Himalaia, que contém muitos constituintes herbo-minerais, principalmente dibenzo-α-
pironas (DBPs), cromoproteínas DBP e ácidos fúlvicos com núcleo de DBP. O shilajit
purificado é preparado a partir deste exsudado por um processo de extração proprietário
(Natreon Inc., New Brunswick, NJ). Shilajit é conhecido por exercer várias ações
biológicas e farmacológicas, incluindo propriedades antioxidantes, antiinflamatórias,
antiartríticas, imunomoduladoras e energéticas (Lawley et al. 2013; Gupta 2016). Em um
ensaio clínico de 5 meses, a administração (bid) de shilajit purificado sozinho (500 mg) ou
shilajit (7,5 mg) em combinação com cromo trivalente (500 μg/ml e 3,77 g) e extrato de Phyllanthus
emblica (amla) (7,5 mg) reduziu significativamente a dor artrítica em cães (Lawley et al.
2013; Fleck et al. 2014). Parece que o shilajit sozinho ou em combinação com cromo e
extrato de amla atenuou a dor artrítica por mecanismos antioxidantes, antiinflamatórios e
imunomoduladores. Shilajit foi relatado como seguro em estudos de longo prazo (Lawley
et al. 2013; Fleck et al. 2014; Stoh 2014; Gupta 2016; Velmurugan et al. 2012).

659
4.12 Garra do Diabo

A garra do diabo (Harpagophytum procumbens e Harpagophytum zeyheri) é uma pequena

planta do deserto nativa da África Austral. É também conhecida como aranha da madeira
ou planta de garra. O extrato da planta/raiz tem glicosídeos iridóides, como harpagosídeo,
harpagida e β-sitosterol, que são ingredientes ativos (Georgiev et al. 2013). A
harpagogenina também foi sugerida como princípio ativo dessas plantas. A fórmula
estrutural de harpagoside e harpagide é mostrada na Fig. 6. O extrato vegetal ou seu(s)
ingrediente(s) ativo(s) são comumente usados para tratar a dor e a inflamação nas
articulações associadas à OA em humanos, cães e cavalos, melhorando assim sua
flexibilidade e mobilidade. O extrato da planta/raiz está disponível em pó ou líquido. Em
humanos, o extrato de garra do diabo foi considerado tão eficaz quanto AINEs ou
diacereína na redução da dor nas costas ou OA (Leblan et al. 2000; Wegener e Lupke
2003; Oltean et al. 2006). Lim et al. (2014) relataram que harpagides podem reduzir a
produção de citocinas inflamatórias (IL-1β, IL-6 e TNF-a) em células de macrófagos. Em
outro estudo, este extrato de planta foi mostrado para reduzir a inflamação, suprimindo a
via de expressão do gene inflamatório, bloqueando uma proteína de ativação do fator de
transcrição-1 (AP-1) (Fiebich et al. 2012). Além disso, o harpagosídeo inibe as atividades
COX-I, COX-II, iNOS e NFκB (Huang et al. 2006).

Fig. 6 Fórmula estrutural de harpagoside (esquerda) e harpagide (direita)

Em humanos, uma dose de 500 mg duas a quatro vezes ao dia demonstrou exercer
efeitos antiinflamatórios, analgésicos e antiartríticos. A dose recomendada para o extrato
de garra do diabo padrão é cápsula de 250 mg (pequena), 500 mg (média) e 1 g para um
cão grande para o tratamento de OA. O extrato também é recomendado para cavalos e
pôneis (0,5–10 mg/kg peso corporal/dia) que sofrem de OA e outras doenças relacionadas
às articulações. O extrato de garra do diabo pode ser dado por um longo período de
tempo sem produzir efeitos colaterais. Não é recomendado em fêmeas grávidas.

660
4.13 Sauchinone

A sauchinona é uma das lignanas isoladas de Saururus chinensis, que possui

propriedades antioxidantes, antiinflamatórias, hepatoprotetoras e antiosteoartríticas.
Recentemente, Gao et al. (2017) investigaram os efeitos antiinflamatórios da sauchinona
em condrócitos estimulados por IL-1β. Os resultados revelaram que a sauchinona
atenuou significativamente a ativação de NFkB, a produção de NO e PGE 2, bem como
inibiu a liberação de MMP-3 e MMP-13 em condrócitos OA humanos, provavelmente por
inibir a ativação da via de sinalização de NFkB. Gao et al. (2017) sugeriram que a
sauchinona pode ser um agente potencial no tratamento da OA.

Tabela 1 Nutracêuticos em osteoartrite

Nutracêuticos Cão Cavalo Referências

5,4 g de glucosamina HCl + 1,8 g de

D’Altilio et al. (2007),
2 g de glucosamina HCl + 1,6 g de sulfato de condroitina, duas vezes ao dia Gupta et al. (2009,
sulfato de condroitina, diariamente durante o primeiro mês, e uma vez ao 2012)
dia depois disso
Glucosamina + 1 g de Synoquin SA (475 mg GH: 350
condroitina mg CS) para 5–19,9 kg; 1,5 g para
20–40 kg; e 2 g para> 40 kg) bid por McCarthy et al.
- (2007)
42 dias. A dose diária foi reduzida em
um terço nos 28 dias subsequentes.
Para detalhes, veja o texto
Auer et al. (1980),
Ácido hialurônico 5 mg por ≤10 kg; e 10 mg para ≥11 kg,
40 mg, IA Carapeba et al.
(HA) IA (2016)

4 mg/kg, duas vezes ao dia por 20

Curcumina - Colitti et al. (2012)
dias
Ácidos Manhart et al.
gordurosos de 69 mg EPA + DHA / kg/dia por 84 dias 15 g EPA + 19,8 g DHA / dia por 90 dias (2009), Mehler et al.
omega-3 (2016)

Rhouma et al.
Vitamina E 400 UI/cão, uma vez por dia - (2013)

Shilajit 500 mg duas vezes ao dia por 5

- Lawley et al. (2013)
(purificado) meses
DeParle et al.
(2005), D’Altilio et al.
Colágeno tipo II
10 mg por dia 160 mg por dia (2007), Peal et al.
(ativo) (2007), Gupta et al.
(2009, 2012)

Peptídeo de
Dobenecker et al.
colágeno bioativo - 25 g ou 50 g / dia por 12 semanas (2017)
(BCP) (Petagile®)
Insaponificáveis Óleo insaponificável de abacate / soja Kawcak et al.
10 mg/kg/ dia por 8 semanas ou 300 (2007), Boileau et al.
de abacate / soja (proporção de 1: 2) em 6 mL de melaço /
mg a cada 3 dias por 15 semanas (2009), Altinel et al.
(ASU) dia por 70 dias (2011)
Bui and Bierer
(2003), Cayzer et al.
GLM 0,3% de dieta de alimentos 25 mg/kg peso corporal / dia, po por 56 (2012), Rialland et
Mexilhão de secos ou Lyproflex® dias al. (2013), Hielm-
lábios verdes Björkman et al.
(2009)
(GLM) (Perna
canaliculus) 450 mg de GLM para <25 kg; 750 mg
Bierer and Bui
para 25–34 kg; e 1 g GLM para> 34 kg - (2002)
/ dia

661
 Tabela 1 Nutracêuticos em osteoartrite
Nutracêuticos Cão Cavalo Referências

25 mg de Chrominex® -3+ (500 μg/ml e 3,77 g de 500 mg de Chrominex® -3+ (10 mg de

cromo trivalente; 7,5 mg de extrato de cromo trivalente; 150 mg de extrato de Fleck et al. (2014),
Crominex® -3+
amla; e 7,5 mg de shilajit purificado), amla; e 150 mg de shilajit purificado), May et al. (2015)
duas vezes ao dia duas vezes ao dia
Extrato de
Boswellia serrata Nenhuma
(ácido acetil-ceto- 150 mg por dia - publicação
beta-boswélico, disponível
AKBA)
Extrato de
Murdock et al.
Terminalia 500 mg de TCE, duas vezes ao dia - (2016)
chebula (TCE)

5. Novos nutracêuticos
5.1 C-Ficocianina

Em um modelo in vitro de OA canina, Martinez et al. (2015) avaliaram um nutracêutico à

base de c-ficocianina disponível comercialmente (PHYCOX, que contém o ingrediente
ativo, extrato de alga azul-verde, um produto da Dechra Pharmaceuticals, Northwich,
Reino Unido) e alguns outros ingredientes selecionados (cloridrato de glucosamina,
etilsulfonilmetano, açafrão, ácido eicosapentaenóico, ácido docosahexaenóico, vit. C, vit.
E, selênio, etc.) para atividades antioxidantes, antiinflamatórias e condroprotetoras. Os
biomarcadores para inflamação e catabolismo da MEC incluíram PGE 2, TNF-a, IL-6,
MMP-3, NO e glicosaminoglicanos sulfatados. A capacidade antioxidante e as atividades
inibitórias dos nutracêuticos sobre a COX-1, COX-2 e lipo-oxigenase (LOX) também foram
avaliadas. Os resultados revelaram que PHYCOX e ingredientes selecionados medeiam
as atividades antioxidantes, antiinflamatórias e condroprotetoras e podem ser úteis no
manejo da OA em cães e outros animais após investigações in vivo e ensaios clínicos.

5.2 Resveratrol

O resveratrol (trans-3,40,5-triidroxistilbeno) é um composto polifenol natural presente na

casca das uvas vermelhas, cranberries e amendoins. O composto é comprovado por
exercer propriedades antioxidantes, antiinflamatórias, cardioprotetores e antitumorais. Em
uma série de estudos in vitro e em animais, o resveratrol proporcionou efeitos protetores
significativos contra a degradação da cartilagem articular (Elmali et al. 2005; Lee et al.
2013). Em condrócitos humanos, Csaki et al. (2008) e Shakibaei et al. (2008)
demonstraram que tanto os mecanismos reguladores antiapoptóticos quanto os
antiinflamatórios são mediados pelo resveratrol (revisado em Lee et al. 2013).

662
Recentemente, o resveratrol também foi encontrado para aliviar a AR, inibindo ROS,
inflamação, vias de sinalização de MAPK e angiogênese (Yang et al. 2018). Com base
nessas descobertas, o resveratrol parece ser um novo nutracêutico que deve ser avaliado
quanto às propriedades antiartríticas e à segurança em cães, gatos e cavalos.

5.3 Lactoferricina Bovina

A lactoferricina bovina é um peptídeo catiônico de 25 aminoácidos com uma estrutura de

folha β antiparalela anfipática que é obtida por hidrólise ácida de pepsina da região N-
terminal da lactoferrina encontrada no leite de vaca (Lee et al. 2013). Além das
propriedades antivirais, antibacterianas e anticâncer, este peptídeo exerce atividades
antioxidantes, antiinflamatórias e anti dor (Guillen et al. 2000; Hayashida et al. 2004). Lee
et al. (2013) também relataram que a lactoferricina bovina reverte os efeitos catabólicos
de PGE2 e IL-1 na produção de enzimas degradantes da matriz, acúmulo de
proteoglicanos e expressão de fatores associados ao estresse oxidativo e inflamação. Por
exibir essas propriedades, a lactoferricina parece ser um nutracêutico promissor para o
tratamento da OA em animais.

5.4 Toxina Botulínica

Foi demonstrado que a toxina botulínica A (BoNT A, IA) reduz a dor nas articulações em
cães com OA. Em uma investigação recente, Heikkilä et al. (2017) injetaram BoNT A intra-
articular (30 UI, IA) na articulação OA de cães. Os resultados revelaram que o líquido
sinovial PGE2, mas não o PGE 2 sérico, poderia ser um biomarcador para OA crônica e dor
em cães. No entanto, a substância P não no líquido sinovial nem no soro parece ser um
bom biomarcador da dor da OA em cães. Para obter detalhes sobre biologia,
farmacologia, toxicologia e segurança de BoNTs, consulte as publicações recentes em
outros lugares (Pirazzini et al. 2017; Cope 2018).

5.5 Membrana Casca de Ovo

A membrana da casca do ovo, que contém glucosamina, condroitina, colágeno e ácido

hialurônico, tem sido indicada no tratamento da OA (Ruff et al. 2009). O produto NEM®
(membrana natural da casca do ovo; ESM Technologies, LLC, Carthage, MO, EUA)
contém glucosamina, 1%; sulfato de condroitina, 1%; ácido hialurônico, 2%; e colágeno
tipo I, 5% (Ruff e DeVore 2014). Em uma série de estudos in vitro e in vivo em ratos, Ruff
et al. (2009) e Ruff e DeVore (2014) descobriram que o NEM® pode influenciar citocinas
pró-inflamatórias de fase inicial, como IL-1b e TNF-a. Este produto também pode
influenciar citocinas pró-inflamatórias de fase posterior, como proteína quimiotática de
monócitos 1 (MCP-1), proteínas inflamatórias de macrófagos (MIP-1a e MIP-1b),

663
reguladas mediante ativação de células-T normais expressas e secretadas (RANTES) e
fator de crescimento endotelial vascular (VEGF). Outro produto MovoflexTM Soft Chew
(Virbac Corp., Fort Worth, TX, EUA), que contém membrana de casca de ovo, também
está no mercado para OA em cães, embora não haja dados publicados disponíveis.

5.6 mRNAs (miRNAs)

A importância dos miRNAs foi recentemente reconhecida na medicina veterinária (Hollis e

Starkey 2018). A tecnologia “Omics” ajudou na identificação de miRNAs que não só
servem como novos biomarcadores para prever o início precoce da OA e sua progressão,
mas também têm potencial para novas modalidades no tratamento de OA. Em uma série
de investigações, os miRNAs mostraram estar envolvidos na patogênese da OA e
degradação da MEC e da cartilagem (expressão de iNOS, inflamação, autofagia,
apoptose, metabolismo de condrócitos, diferenciação e homeostase) (revisado em Gupta
et al. 2019). Em um modelo de rato OA, Wang et al. (2016) demonstraram que a
expressão do miRNA-98 é reduzida nas células da cartilagem por apoptose, e a
superexpressão do miRNA-98 inibe a apoptose das células da cartilagem. Em uma
investigação semelhante, os níveis de miRNA-140 foram significativamente reduzidos em
condrócitos derivados da cartilagem OA humana e líquido sinovial em comparação com
condrócitos normais e líquido sinovial. A superexpressão de miRNA-140 em condrócitos
humanos primários promoveu a síntese de colágeno II e inibiu a expressão de MMP-13 e
ADAMST-5 (Si et al. 2017). Esses investigadores demonstraram que a injeção intra-
articular (IA) de miRNA-140 pode aliviar a progressão da OA modulando a homeostase da
ECM em ratos e pode ter potencial como uma nova terapia para OA em cães, cavalos e
humanos. Atualmente, um grande número de miRNAs está sob investigação para
identificar seus papéis na patogênese, diagnóstico e tratamento da OA (Gupta et al.
2019).

5.7 Espermidina

A espermidina, uma poliamina natural envolvida em uma ampla gama de processos

celulares, é amplamente reconhecida por induzir autofagia e reduzir o estresse oxidativo.
Silvestri et al. (2018) avaliaram a capacidade da espermidina de proteger condrócitos
articulares cultivados contra o estresse oxidativo induzido por peróxido de hidrogênio
(H2O2) por meio da modulação do processo autofágico. Os resultados revelaram que a
promoção da autofagia participa da proteção conferida pela espermidina contra o estresse
oxidativo. Jeong et al. (2018) demonstraram que a espermidina inibiu significativamente a
produção de mediadores pró-inflamatórios como NO e PGE 2 e citocinas incluindo TNF-a e
IL-1b em macrófagos RAW 264,7 sem qualquer citotoxicidade significativa. A espermidina
664
diminuiu significativamente a elevação dos níveis de NO e ROS em um modelo de peixe-
zebra estimulado por LPS e reduziu a migração associada à inflamação de células
imunes, como neutrófilos e macrófagos. A espermidina, por meio de propriedades
autofágicas, antioxidantes e antiinflamatórias, parece ser um candidato promissor como
um novo tratamento para OA. Além disso, a espermidina surgiu com propriedades
antienvelhecimento, como a redução do dano à proteína oxidativa relacionado à idade,
atividades de eliminação de radicais livres e a superprodução de ROS (revisado em
Jeong et al. 2018).

6. Observações Finais e Orientações Futuras

A osteoartrite (OA) é uma doença articular degenerativa crônica (DJD) que comumente
atinge cães e cavalos devido a muitos fatores predisponentes. A fisiopatologia da OA é
muito complexa por causa de múltiplas etiologias e mecanismos subjacentes. Os
biomarcadores de detecção e progressão precoce da doença e reversão da doença
durante o tratamento são bem definidos, e muitos deles são validados. A inflamação e a
dor associadas à OA são as principais queixas. Os sinais e sintomas são geralmente
controlados com o uso de AINEs, drogas terapêuticas e, às vezes, cirurgia. Atualmente,
os nutracêuticos têm substituído outras modalidades de tratamento devido à sua eficácia
e segurança. Este capítulo descreve as etiologias e patofisiologias da OA e uma série de
nutracêuticos que são comumente usados para prevenir ou melhorar a OA em cães e
cavalos. Também são descritos alguns nutracêuticos que têm potencial para tratar OA em
animais.

Referências
Adebowale A, Du J, Leslie JL et al (2002) The bioavailability and pharmacokinetics of glucosamine hydrochloride and
low molecular weight chondroitin sulfate after single and multiple doses to beagle dogs. Biopharm Drugs Dispos
23(6):217–225
Adler N, Schoeniger A, Fuhrmann H (2018) Polyunsaturated fatty acids influence inflammatory markers in a cellular
model for canine osteoarthritis. J Anim Physiol Anim Nutr 102:e623–e632
Altinel L, Saritas ZK, Kose KC et al (2007) Treatment with unsaponifiables extracts of avocado and soybean increases
TGF-β1 and TGF-β2 levels in canine joint fluid. Tohuku J Exp Med 211:181–186
Altinel L, Şahin Ö, Köse KÇ et al (2011) Healing of osteochondral defects in canine knee with avocado/soybean
unsaponifiables: a morphometric comparative analysis. Eklem Hastalik Cerrhisi 22 (1):48–53
Amin AR, Attur M, Patel RN et al (1997) Superinduction of cyclooxygenase-2 activity in human osteoarthritis-affected
cartilage. Influence of nitric oxide. J Clin Invest 99:1231–1237
Ammon HP, Safayi H, Mack T et al (1993) Mechanism of antiinflammatory actions of curcumin and boswellic acids. J
Ethnopharmacol 38:113–119
Armstrong S, Read R, Ghosh P (1994) The effect of intra-articular hyaluronan on cartilage and subchondral bone
changes in an ovine model of early osteoarthritis. J Rheumatol 21:680–687
Attur M, Al-Mussawir HE, Patel J et al (2008) Prostaglandin E2 exerts catabolic effects in osteoarthritis cartilage:
evidence for signaling via the EP4 receptor. J Immunol 181:5082–5088
Aubry-Rozier B (2012) Role of slow-acting anti-arthritic agents in osteoarthritis (chondroitin sulfate, glucosamine,
hyaluronic acid). Rev Med Suisse 14:571–572

665
 Auer JA, Fackelman GE, Gingerich DA et al (1980) Effect of hyaluronic acid in naturally occurring and experimentally
induced osteoarthritis. Am J Vet Res 41(4):568–574
Bakker B, Eijkel GB, Heeren RMA et al (2017) Oxygen-dependent lipid profiles of three-dimensional cultured human
chondrocytes revealed by MALDI-MSI. Anal Chem 89:9438–9444
Balogh L, Polyak A, Mathe D et al (2008) Absorption, uptake and tissue affinity of high-molecular-weight hyaluronan
after oral administration in rats and dogs. J Agr Food Chem 56:10582–10593
Bay-Jensen AC, Reker D, Kjelgaard-Petersen CF et al (2016) Osteoarthritis year in review 2015: soluble biomarkers
and the BIPED criteria. Osteoarthr Cart 24:9–20
Bhathal S, Spryszak M, Louizos C et al (2017) Glucosamine and chondroitin use in canines for osteoarthritis: a review.
Open Vet J 7(1):36–49
Bierer TL, Bui LM (2002) Improvement of arthritic signs in dogs fed green-lipped mussel (Perna canaliculus). J Nutr
132:1634s–1636s
Block JA, Oegema TR, Sandy JD et al (2010) The effects of oral glucosamine on joint health: is a change in research
approach needed? Osteoarthr Cartil 18:5–11
Blom AB, Brockbank SM, van Lent PL et al (2009) Involvement of the Wnt signaling pathway in experimental and
human osteoarthritis: prominent role of Wnt-induced signaling protein 1. Arthr Rheum 60:501–512
Boileau C, Martel-Pelletier J, Caron J et al (2009) Protective effects of total fraction of avocado/soybean
unsaponifiables on the structural changes in experimental dog osteoarthritis: inhibition of nitric oxide synthase and matrix
mettaloproteinase-13. Arthr Res Ther 11:R41
Boumediene K, Felisaz N, Bogdanowicz P et al (1999) Avocado/soy unsaponifiables enhance the expression of
transforming growth factor β1 and β2 in cultured articular chondrocytes. Arthr Rheumat 42:148–156
Breese McCoy SJ, Bryson JC (2003) High-dose glucosamine associated with polyuria and polydipsia in a dog. J Am
Vet Med Assoc 222:431–432
Broderick BA, Miller J, Goad JT, Gupta RC (2013) Efficacy and safety of naturally preferred holistic frozen dog treats in
moderately arthritic dogs. In: Proc Ann Meet Ohio Valley Chapt Soc Toxicol., Louisville, KY, USA, p 20
Bui LM, Bierer TL (2003) Influence of green lipped mussels (Perna canaliculus) in alleviating signs of arthritis in dogs.
Vet Ther 4 (4):397–407
Carapeba GOL, Cavaleti P, Nicácio GM et al (2016) Intra-articular hyaluronic acid compared to traditional conservative
treatment in dogs with osteoarthritis associated with hip dysplasia. Evid-Based Compl Altern Med 2016:20726921
Carpio LR, Westendorf JJ (2016) Histone deacetylases in cartilage homeostasis and osteoarthritis. Curr Rheumatol
18:52
Castrogiovanni P, Trovato FM, Loreto C et al (2016) Nutraceutical supplements in the management and prevention of
osteoarthritis. Int J Mol Sci 17:2042
Cayzer J, Hedderley D, Gray S (2012) A randomized, double-blinded, placebo-controlled study on the efficacy of a
unique extract of greenlipped mussel (Perna canaliculus) in horses with chronic fetlock lameness attributed to
osteoarthritis. Equine Vet J 44:393–398
Chan PS, Caron JP, Rosa GJ et al (2005) Glucosamine and chondroitin sulfate regulate gene expression and
synthesis of nitric oxide and prostaglandin E2 in articular cartilage explants. Osteoarthr Cartil 13:387–394
Chen L-Y, Lotz M, Terkeltaub R et al (2018a) Modulation of matrix metabolism by ATP-citrate lyase in articular
chondrocytes. J Biol Chem 293(31):12259–12270
Chen L-Y, Wang Y, Terkeltaub R et al (2018b) Activation of AMPKSIRT3 signaling is chondroprotective by preserving
mitochondrial DNA integrity and function. Osteoarthr Cartil 26:1539–1550
Chin K-Y, Ima-Nirwana S (2018) The role of Vitamin E in preventing and treating osteoarthritis – a review of the current
evidence. Front Pharmacol 9:946. https://doi.org/10.3389/phar.2018.00946
Colitti M, Gaspardo B, Della Pria A et al (2012) Transcriptome modification of white blood cells after dietary
administration of curcumin and non-steroidal anti-inflammatory drug in osteoarthritic affected dogs. Vet Immunol
Immunopathol 147:136–146
Comblain F, Serisier S, Barthelemy N et al (2015) Review of dietary supplements for the management of osteoarthritis
in dogs in studies from 2004–2014. J Vet Pharmacol Ther 39(1):1–15
Cope RB (2018) Botulinum neurotoxins. In: Gupta RC (ed) Veterinary toxicology: basic and clinical principles.
Academic, Amsterdam, pp 743–757
Corbee RJ, Barnier MMC, van de Lest CHA et al (2012) The effect of dietary long-chain omega-3 fatty acid
supplementation on owner’s perception of behavior and locomotion in cats with naturally occurring osteoarthritis. J Anim
Physiol Anim Nutr 97:846–853
Crowley DC, Lau FC, Sharma P et al (2009) Safety and efficacy of undenatured type II collagen in the treatment of
osteoarthritis of the knee: a clinical trial. Int J Med Sci 6:312–321
Csaki C, Keshishzadeh N, Fischer K et al (2008) Regulation of inflammation signaling by resveratrol in human
chondrocytes in vitro. Biochem Pharmacol 75(3):677–687
D’Abusco AS, Calamia V, Cicione C et al (2007) Glucosamine affects intracellular signaling through inhibition of
mitogen-activated protein kinase phosphorylation in human chondrocytes. Arthr Res Ther 9:R104
D’Altilio M, Peal A, Alvey M et al (2007) Therapeutic efficacy and safety of undenatured type II collagen singly or in
combination with glucosamine and chondroitin in arthritic dogs. Toxicol Mech Meth 17:189–196
de Bakker E, Stroobants V, VanDael F et al (2017) Canine synovial fluid biomarkers for early detection and monitoring
of osteoarthritis. Vet Rec 180:328–329
666
 Deal CL, Moskowitz RW (1999) Nutraceuticals as therapeutic agents in osteoarthritis. The role of glucosamine,
chondroitin sulfate, and collagen hydrolysate. Rheum Dis Clin North Am 25(2):379–395
Debbi EM, Agar G, Fichman G et al (2011) Efficacy of methylsulfonylmethane supplementation on osteoarthritis of the
knee: a randomized controlled study. BMC Complem Altern Med 11:50
Dechant JE, Baxter GM, Frisble DD et al (2005) Effects of glucosamine hydrochloride and chondroitin sulfate, alone
and in combination, on normal and interleukin-1 conditioned equine cartilage explants metabolism. Equine Vet J 37:227–
231
DeParle LA, Gupta RC, Canerdy TD et al (2005) Efficacy and safety of glycosylated undenatured type-II collagen (UC-
II) in therapy of arthritic dogs. J Vet Pharmacol Ther 28:385–390
Deshmukh V, Hu H, Barroga C et al (2018) A small-molecule inhibitor of the Wnt pathway (SM04690) as a potential
disease modifying agent for the treatment of osteoarthritis of the knee. Ostoarthr Cart 26 (1):18–27
Devine SB (1993) Cranial tibial thrust: a primary force in the canine stifle. J Am Vet Med Ass 183(4):456–459
Dobenecker B, Reese S, Jahn W et al (2017) Specific bioactive collagen peptides (Petagile®) as supplement for
horses with osteoarthritis: a two-centered study. J Anim Physiol Anim Nutr 102(Suppl.1): 16–23
Du T, Shi Y, Xiao S et al (2017) Curcumin is a promising inhibitor of genotype 2 porcine reproductive and respiratory
syndrome virus infection. BMC Vet Res 13:298
Elmali N, Esenkaya I, Harma A et al (2005) Effect of resveratrol in experimental osteoarthritis in rabbits. Infl Res
54(4):158–162
Fiebich BL, Muñoz E, Rose T et al (2012) Molecular targets of the antiinflammatory Harpagophytum procumbens
(devil’s claw): inhibition of TNFα and COX-2 gene expression by preventing activation of AP-1. Phytother Res 26(6):806–
811
Fleck A, Gupta RC, Goad JT et al (2014) Anti-arthritic efficacy and safety of Chrominex 3+ (trivalent chromium,
Phyllanthus emblica extract, and shilajit) in moderately arthritic dogs. J Vet Sci Anim Husb 1(4e):1–6
Frech TM, Clegg DO (2007) The utility of nutraceuticals in the treatment of osteoarthritis. Curr Rheumatol Rep 9:25–30
Frisbie DD, Kawcak CE, Werpy NM et al (2009) Evaluation of polysulfated glycosaminoglycan or sodium hyaluronan
administered intra-articularly for treatment of horses with experimentally induced osteoarthritis. Am J Vet Res 70:203–
209
Frisbie DD, McIlwraith CW, Kawcak CE et al (2016) Efficacy of intravenous administration of hyaluronan, sodium
chondroitin sulfate, and N-acetyl-D-glucosamine for prevention or treatment of osteoarthritis in horses. Am J Vet Res
77(10):1064–1070
Fritsch DA, Allen TA, Dodd CE et al (2010) A multicenter study of the effect of dietary supplementation with fish oil
omega-3 fatty acids on carprofen dosage in dogs with osteoarthritis. J Am Vet Med Assoc 236:535–539
Gao Y, Zhao H, Li Y (2017) Sauchinone prevents IL-1β-induced inflammatory response in human chondrocytes. J
Biochem Mol Toxicol 32:e22033
Georgiev MI, Ivanovska N, Alipieva K et al (2013) Harpagoside: from Kalahari Desert to pharmacy shelf.
Phytochemistry 92:8–16
Ghosh P, Guidolin D (2002) Potential mechanism of action of intraarticular hyaluronan therapy in osteoarthritis; are the
effects molecular weight dependent? Sem Arthr Rheum 32:10–37
Giaccari A, Morviducci L, Zorretta D et al (1995) In vivo effects of glucosamine on insulin secretion and insulin
sensitivity in the rat: possible relevance to the maladaptive responses to chronic hyperglycemia. Diabetologia 38:518–
524
Goyal S, Sharma P, Ramchandani U et al (2011) Novel antiinflammatory topical herbal gels containing Withania
somnifera and Boswellia serrata. Int J Pharm Biol Arch 2(4):1087–1094
Guedes AGP, Meadows JM, Pypendop BH et al (2018) Evaluation of tramadol for treatment of osteoarthritis in geriatric
cats. J Am Vet Med Assoc 252(5):565–571
Guillen C, McInnes IB, Vaighan D et al (2000) The effects of local administration of lactoferrin on inflammation in
murine autoimmune and infectious arthritis. Arthr Rheum 43(9):2073–2080
Gupta RC (2016) Nutraceuticals in arthritis. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity. Academic,
Amsterdam, pp 161–176
Gupta RC, Canerdy TD, Scaggs P et al (2009) Therapeutic efficacy of type-II collagen (UC-II) in comparison of
glucosamine and chondroitin in arthritic horses. J Vet Pharmacol Therap 32:577–584
Gupta RC, Canerdy TD, Lindley J et al (2012) Comparative therapeutic efficacy and safety of type-II collagen (UC-II),
glucosamine and chondroitin in arthritic dogs: pain evaluation by ground force plate. J Anim Physiol Anim Nutr 96:770–
777
Gupta RC, Srivastava A, Lall R, Sinha A (2019) Osteoarthritis biomarkers. In: Gupta RC (ed) Biomarkers in toxicology,
2nd edn. Academic, Amsterdam, pp 929–943
Haroyan A, Mkuchyan V, Mkrtchyan N et al (2018) Efficacy and safety of curcumin and its combination with boswellic
acid in osteoarthritis: a comparative, randomized, double-blind, placebo-controlled study. BMC Compl Altern Med 18:7
Hayashida K-I, Kaneko T, Takeuchi T et al (2004) Oral administration of lactoferrin inhibits inflammation and
nociception in rat adjuvantinduced arthritis. J Vet Med 66(2):149–154
Heikkilä HM, Hielm-Björkman AK, Innes JF et al (2017) The effect of intra-articular botulinum toxin A on substance P,
prostaglandin E2, and tumor necrosis factor alpha in the canine osteoarthritic joint. BMC Vet Res 13:74

667
 Henroitin YE, Gharbi M, Dierckxsens Y et al (2014) Decrease of a specific biomarker of collagen degradation in
osteoarthritis, Coll2-1, by treatment with highly bioavailable curcumin during an exploratory clinical trial. BMC Compl
Altern Med 14:159
Henrotin YE, Labasse AH, Jaspar JM et al (1998) Effects of three avocado/soybean unsaponifiables mixtures on
metalloproteinases, cytokines and prostaglandin E2 production by human articular chondrocytes. Clin Rheumatol 17:31–
39
Hielm-Björkman A, Tulamo R-M, Salonen H et al (2009) Evaluating complementary therapies for canine osteoarthritis
part I: greenlipped mussel (Perna canaliculus). eCAM 6(3):365–373
Hochberg MC, Zhan M, Langenberg P (2008) The rate of decline of joint space width in patients with osteoarthritis of
the knee: a systematic review and meta-analysis of randomized placebo-controlled trials of chondroitin sulfate. Curr Med
Res Opin 4:3029–3035
Hollis AR, Starkey MP (2018) MicroRNAs in equine veterinary medicine. Equine Vet J 50:721–726
Holmes MWA, Bayliss MT, Muir H (1988) Hyaluronic acid in human articular cartilage. Biochem J 250:435–441
Hooper M (2001) Is glucosamine an effective treatment for osteoarthritic pain? Cleveland Clin J Med 68:494–495
Huang THV, Tran VH, Duke RK et al (2006) Harpagoside suppresses lipopolysaccharide-induced iNOS and COX-2
expression through inhibition of NF-κBα e AMPK. Esses dadosB activation. J Ethnopharmacol 104(1–2): 149–155
Jackson CG, Plaas AH, Sandy JD et al (2010) The human pharmacokinetics of oral ingestion of glucosamine and
chondroitin sulfate taken separately or in combination. Osteoarthr Carti 19:297–302
Javeri I, Chand N (2016) Curcumin. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity. Academic,
Amsterdam, pp 435–445
Jayakumar S, Patwardhan RS, Pal D et al (2017) Mitochondrial targeted curcumin exhibits anticancer effects through
disruption of mitochondrial redox and modulation of TrxR2 activity. Free rad Biol Med 113:530–538
Jeong J-W, Cha H-J, Han MH et al (2018) Spermidine protects against oxidative stress in inflammation models using
macrophages and zebrafish. Biomol Ther 26(2):146–156
Jerosch J (2011) Effects of glucosamine and chondroitin sulfate on cartilage metabolism in OA: outlook on other
nutrient partners especially omega-3 fatty acids. Int J Rheumatol 2011:1–17
Jomphe CR, Gabriac M, Hale TM et al (2008) Chondroitin sulfate inhibits the nuclear translocation of nuclear factor-
kappa B in interleukin-1beta-stimulated chondrocytes. Basic Clin Pharmacol Toxicol 102:59–65
Kalev-Zylinska ML, Hearn JI, Rong J et al (2018) Altered N-methyl D-receptor subunit expression causes changes to
the circadian clock and cell phenotype in osteoarthritic chondrocytes. Osteoarthr Cartil 26:1518–1530
Kamm JL, Nixon AJ, Witte TH (2010) Cytokine and catabolic enzyme expression in synovium, synovial fluid and
articular cartilage of naturally osteoarthritic equine carpi. Equine Vet J 42:693–699
Kawcak CE, Frisbie DD, McIllwraith CW et al (2007) Evaluation of avocado and soybean unsaponifiable extracts for
treatment of horses with experimentally induced osteoarthritis. Am J Vet Res. 68 (6):598–604
Kim LS, Axelrod LJ, Howard P et al (2006) Efficacy of methylsulfonylmethane (MSM) in osteoarthritis pain of the knee:
a pilot clinical trial. Osteoarthr Cart 14:286–294
Kirker-Head CA, Chandna V, Agrawal R et al (2000) Concentrations of substance P and prostaglandin E2 in synovial
fluid of normal and abnormal joints of horses. Am J Vet Res 61:714–718
Kremer JM, Jubiz W, Michalek A et al (1987) Fish-oil fatty acid supplementation in active rheumatoid arthritis. A double-
blinded, controlled, crossover study. Ann Intl Med 106:497–503
Kurien BT, Matsumoto H, Scofield RH (2017) Nutraceutical value of pure curcumin. Pharmacogn Mag 13(Suppl
1):S161–S163
Kuroki K, Cook JL, Kreeger JM (2002) Mechanisms of action and potential uses of hyaluronan in dogs with
osteoarthritis. J Am Vet Med Assoc 221(7):944–950
Lafontaine-Lacasse M, Dore M, Picard F et al (2011) Hexosamine stimulate apoptosis by altering Sirt1 action and
levels in pancreatic β-cells. J Endocr 208:41–49
Lawley S, Gupta RC, Goad JT et al (2013) Anti-inflammatory and antiarthritic efficacy and safety of purified shilajit in
moderately arthritic dogs. J Vet Sci Anim Husb 1(3e):1–6
Leblan D, Chantre P, Fournié B (2000) Harpagophytum procumbens in the treatment of knee and hip osteoarthritis.
Four-month results of a prospective, multicenter, double-blind trial versus diacerhein. Joint Bone Spine 67(5):462–467
Lee A, Ellman MB, Yan D et al (2013) A current review of molecular mechanisms regarding osteoarthritis and pain.
Gene 527(2):440–447
Lequesne M, Maheu E, Cadet C et al (2002) Structural effects of avocado/soybean unsaponifiables on joint space loss
in osteoarthritis of the hip. Arthr Rheumatol 47:50–58
Lim DW, Kim JG, Han D et al (2014) Analgesic effect of Harpagophytum procumbens on postoperative and
neuropathic pain in rats. Molecules 19(1):1060–1068
Lu J, Sun Y, Ge Q et al (2014) Histone deacetylase 4 alters cartilage homeostasis in human osteoarthritis. BMC
Musculoskelet Disord 15:438
Maheu E, Le Loet X, Loyau G (1995) 6-Month symptomatic efficacy of avocado/soya unsaponifiables in osteoarthritis
(OA) at the lower limb. Rev Rhumat 60:667–673
Maheu E, Mazières B, Valat J-P et al (1998) Symptomatic efficacy of avocado/soybean unsaponifiables in the
treatment of osteoarthritis of the knee and hip. A prospective, randomized, double-blind, placebocontrolled, multicenter

668
clinical trial with six-month treatment period and two-month follow-up demonstrating a persistent effect. Arthr Rheumat
41:81–91
Manhart DR, Scott BD, Gibbs PG et al (2009) Markers of inflammation in arthritic horses fed omega-3 fatty acids.
Profess Anim Scient 25 (2):155–160
Marone PA, Lau FC, Gupta RC et al (2010) Safety and toxicological evaluation of undenatured type II collagen. Toxicol
Mechan Meth 20:175–189
Marshall KW, Manolopoulos V, Mancer K et al (2000) Amelioration of disease severity by intraarticular hylan therapy in
bilateral canine osteoarthritis. J Orthop Res 18:416–425
Martinez SE, Chen Y, Ho EA et al (2015) Pharmacological effects of a cphycocyanin-based multicomponent
nutraceutical in an in vitro canine chondrocyte model of osteoarthritis. Can J Vet res 79:241–249
May K, Gupta RC, Miller J et al (2015) Therapeutic efficacy and safety evaluation of a novel chromium supplement
(Crominex® +3-) in moderately arthritic horses. Jacobs J Vet Sci Res 2(1):014
McAllister MJ, Chemaly M, Eakin AJ et al (2018) NLRP3 as a potentially novel biomarker for the management of
osteoarthritis. Osteoarthr Cartil 26(5):612–619
McCarthy G, O’Donovan J, Jones B et al (2007) Randomized doubleblind, positive-controlled trial to assess the
efficacy of glucosamine/chondroitin sulfate for the treatment of dogs with osteoarthritis. Vet J 174:54–61
Mehler SJ, May LR, King C et al (2016) A prospective, randomized, double-blind, placebo-controlled evaluation of the
effects of eicosapentaenoic acid and docosahexaenoic acid on the clinical signs and erythrocyte membrane
polyunsaturated fatty acid concentrations in dogs with osteoarthritis. Prostaglandins Leukot Essent Fatty Acids 109:1–7
Monfort J, Pelletier JP, Garcia-Giralt N et al (2008) Biochemical basis of the effect of chondroitin sulfate on
osteoarthritis articular tissues. Ann Rheum Dis 67:735–740
Moreau M, Troncy E, del Castillo JRE et al (2013) Effects of feeding a high omega-3 fatty acids diet in dogs with
naturally occurring osteoarthritis. J Anim Physiol Anim Nutr 97:830–837
Moreland LW (2003) Intra-articular hyaluronan (hyaluronic acid) and hylans for the treatment of osteoarthritis:
mechanisms of action. Arthr Res Ther 5:54–67
Murdock N, Gupta RC, Vega N et al (2016) Evaluation of Terminalia chebula extract for anti-arthritic efficacy and safety
in osteoarthritic dogs. J Vet Sci Technol 7:1
Neil KM, Orth MW, Coussens PM et al (2005) Effects of glucosamine and chondroitin sulfate on mediators of
osteoarthritis in cultured equine chondrocytes stimulated by use of recombinant equine interleukin-1 beta. Am J Vet Res
66:1861–1869
Oltean H, Robbins C, van Tulder MW et al (2006) Herbal medicine for low back pain. Cochrane Database Syst Rev
19(2):CD004504 Ortolani’s Sign (2007) In Saunders comprehensive veterinary dictionary, 3rd edn. Elsevier, St Louis,
MO. Retrieved from http://medical-dictionary.thefreedictionary.com/Ortolani’ssign
Patel D, Kaur G, Sawant MG et al (2013) Herbal medicine—a natural cure to arthritis. Indian J Nat Prod Resour
4(1):27–35
Peal A, D’Altilio M, Simms C et al (2007) Therapeutic efficacy and safety of undenatured type-II collagen (UC-II) alone
or in combination with (-)-hydroxycitric acid and chromemate in arthritic dogs. J Vet Pharmacol Ther 30:275–278
Permuy M, Guede D, López-Peña M et al (2015) Effects of diacerein on cartilage and subchondral bone in early
stages of osteoarthritis in a rabbit model. BMC Vet Res 11:143
Persiani S, Roda E, Rovati LC et al (2005) Glucosamine oral bioavailability and plasma pharmacokinetics after
increasing doses of crystalline glucosamine sulfate in man. Osteoarthr Cart 13:1041–1049
Philip MW (1989) Clinical trial comparison of intra-articular sodium hyaluronan products in horses. J Equine Vet Sci.
9:39–40
Pirazzini M, Rossetto O, Eleophra R et al (2017) Botulinum neurotoxins: biology, pharmacology, and toxicology.
Pharmacol Rev 69:200–235
Portal-Núñez S, Esbrit P, Alcaraz MJ et al (2016) Oxidative stress, autophagy, epigenetic changes and regulation by
miRNA as potential therapeutic targets in osteoarthritis. Biochem Pharmacol 108:1–10
Pujol R, Girard CA, Richard H et al (2018) Synovial nerve fiber density decreases with naturally-occurring osteoarthritis
in horses. Osteoarthr Cartil 26:1379–1388
Rainsford KD, Whitehouse MW (1980) Gastroprotective and antiinflammatory properties of green-lipped mussel (Perna
canaliculus) preparation. Arzneimittel Forschung 30:2128–2132
Ramírez-Flores GI, Angel-Caraza JD, Quijano-Hernández IA et al (2017) Correlation between osteoarthritic changes in
the stifle joint in dogs and the results of orthopedic, radiographic, ultrasonographic and arthroscopic examinations. Vet
Res Commun 41:129–137
Rausch-Derra LC, Rhodes L, Freshwater L et al (2016) Pharmacokinetic comparison of oral tablet and suspension
formulations of grapiprant, a novel therapeutic for the pain and inflammation of osteoarthritis in dogs. J Vet Pharmacol
Ther 39(6):566–571
Rhouma M, de Oliveira El WA, Troncy E et al (2013) Antiinflammatory response of dietary vitamin E and its effects on
pain and joint structures during early stages of surgically induced osteoarthritis in dogs. Can J Vet Res. 77:191–198
Rialland P, Bichot S, Lussier B et al (2013) Effect of a diet enriched with green-lipped mussel on pain behavior and
functioning in dogs with clinical osteoarthritis. Can J Vet Res 77:66–74
Roush JK, Chadwick ED, Fritsch DA et al (2010a) Multicenter veterinary practice assessment of the effects of omega-3
fatty acids on osteoarthritis in dogs. J Am Vet Med Assoc 236 (1):59–66

669
 Roush JK, Cross AR, Renberg WC et al (2010b) Evaluation of the effects of dietary supplementation with fish oil
omega-3 fatty acids on weight bearing in dogs with osteoarthritis. J Am Vet Med Assoc 236(1):67–73
Ruff KJ, DeVore DP (2014) Reduction of pro-inflammatory cytokines in rats following 7-day oral supplementation with a
proprietary eggshell membrane-derived product. Mod Res Inflam 3 (1):19–25
Ruff KJ, Winkler A, Jackson RW et al (2009) Eggshell membrane in the treatment of pain and stiffness from
osteoarthritis of the knee: a randomized, multicenter, double-blind, placebo-controlled clinical study. Clin Rheumatol
28:907–914
Rutjes AW, Jüni P, de Costa BR (2012) Viscosupplementation for osteoarthritis of the knee: a systematic review and
meta-analysis. Ann Int Med 157:180–191
Schunck M, Schulze CH, Oesser S (2007a) Orally administered collagen hydrolysate halts the progression of
osteoarthritis in STR/ort mice. Osteoarthr Cartil 15:94–95
Schunck M, Schulze CH, Oesser S (2007b) Collagen peptide supplementation stimulates proteoglycan biosynthesis
and aggrecan expression of articular chondrocytes. Osteoarthr Caritl 17:261
Schunck M, Louton H, Oesser S (2017) The effectiveness of specific collagen peptides on osteoarthritis in dogs-impact
on metabolic processes in canine chondrocytes. Open J Anim Sci 7:254. https://doi.org/10.4236/ojas.2017.73020
Sentikar J, Rovati LC (2001) Absorption, distribution, metabolism and excretion of glucosamine sulfate. A review.
Arzneimittelforschung 51:699–725
Shahid M, Manchi G, Brunnberg L et al (2018) Use of proteomic analysis to determine the protein constituents of
synovial fluid samples from the stifle joints of dogs with and without osteoarthritis secondary to cranial cruciate ligament
rupture. Am J Vet res 79 (4):397403
Shakibaei M, Csaki C, Nebrich S et al (2008) Resveratrol suppresses interleukin-1beta- induced inflammatory
signaling and apoptosis in human articular chondrocytes: potential for use as a novel nutraceutical for the treatment of
osteoarthritis. Biochem Pharmacol 76 (11):1426–1439
Shen L, Liu L, Ji H-F (2017) Regulative effects of curcumin spice administration on gut microbiota and its
pharmacological implications. Food Nutr Res 61:1–4
Shome S, Talukdar AD, Choudhury MD et al (2016) Curcumin as potential therapeutic natural product: a
nanobiotechnological perspective. J Pharm Pharmacol 68:1481–1500
Si HB, Zeng Y, Liu SY et al (2017) Intra-articular injection of microRNA- 140 (miRNA-140) alleviates osteoarthritis (OA)
progression by modulating extracellular matrix (ECM) homeostasis in rats. Osteoarthr Cart 25(10):1698–1707
Silvestri Y, D’amado S, Cetrullo D et al (2018) Chondroprotective and antioxidant activity of spermidine in human
chondrocytes. Osteoarthr Cartil 26(1):S343. (Abstract)
Singh S, Kumar D, Kumar S et al (2015) Cartilage oligomeric matrix protein (COMP) and hyaluronic acid (HA):
diagnostic biomarkers of knee osteoarthritis. MOJ Orthop Rheumatol 2(2):00044
Sluzalska KD, Liebisch G, Lochnit G et al (2017) Interleukin-1 beta affects the phospholipid biosynthesis of fibroblast-
like synoviocytes from human osteoarthritic knee joints. Osteoarthr Cart 25 (11):1890–1899
Stabler TV, Huang Z, Montell E et al (2017) Chondroitin sulfate inhibits NF-kappa B activity induced by interaction of
pathogenic and damage associated molecules. Osteoarthr Cart 25(1):166–174
Stoh SJ (2014) Safety and efficacy of shilajit (mumie, moomiyo). Phytother Res 28:475–479
Svala E, Jin C, Rüetschi U et al (2017) Characterization of lubricin in synovial fluid from horses with osteoarthritis.
Equine Vet J 49:116–123
Trentham DE, Dynesius-Trentham RA et al (1993) Effects of oral administration of type-II collagen on rheumatoid
arthritis. Science 262:1727–1730
Trumble TN (2005) The use of nutraceuticals for osteoarthritis in horses. Vet Clin North Am Equine Pract 21:575–597
Trumble TN, Billinghurst RC, McIlwraith CW (2004) Correlation of prostaglandin E2 concentrations in synovial fluid with
ground reaction forces and clinical variables for pain or inflammation in dogs with osteoarthritis induced by transection of
the cranial cruciate ligament. Am J Vet Res 65:1269–1275
Upaganlawar A, Ghule B (2009) Pharmacological activities of Boswellia serrata RoxB.-mini review. Ethnobot Leaflets
13:766–774
Usha P, Naidu M (2004) Randomized, double-blind, parallel, placebocontrolled study of oral glucosamine,
methylsulfonylmethane and their combination in osteoarthritis. Clin Drug Invest 24:353–363
Valvason C, Musacchio E, Pozzuoli A et al (2008) Influence of glucosamine sulfate on oxidative stress in human
osteoarthritic chondrocytes: effects of HO-I, p22Phox and iNOS expression. Rheumatology 47:31–35
Van Loon J, De Grauw J, Van Dierendonck M et al (2010) Intraarticular opioid analgesia is effective in reducing pain
and inflammation in an equine LPS induced synovitis model. Equine Vet J 42:412–419
Van Meurs JBJ (2017) Osteoarthritis year in review 2016: genetics, genomics and epigenetics. Osteoarthr Cart
25:181–189
Vangness CT, Spiker W, Erickson J (2009) A review of evidence-based medicine for glucosamine and chondroitin
sulfate use in knee osteoarthritis. Arthroscopy 25:86–94
Velmurugan C, Vivek B, Wilson E et al (2012) Evaluation of safety profile of black shilajit after 91 days repeated
administration in rats. Asia Pac J Trop Biomed 2:210–214
Venable RO, Stoker AM, Cook CR et al (2008) Examination of synovial fluid hyaluronan quantity and quality in stifle
joints of dogs with osteoarthritis. Am J Vet Res 69(12):1569–1573

670
 Villalvilla A, Gómez R, Largo R et al (2013) Lipid transport and metabolism in healthy and osteoarthritic cartilage. Int J
Med Sci 14:20793–20808
Wan Z-H, Zhao Q (2017) Gypenoside inhibits interleukin-1β-induced inflammatory response in human osteoarthritis
chondrocytes. J Biochem Mol Toxicol 2017:e21926
Wang GL, Wu YB, Liu JT et al (2016) Upregulation of miR-98 inhibits apoptosis in cartilage cells in osteoarthritis. Gen
Test Mol Biomark 20(11):645–653
Wang Q, Tan QY, XuWet al (2017) Cartilage-specific deletion of Alk5 gene results in a progressive osteoarthritis-like
phenotype in mice. Osteoarthr Cart 25(11):1868–1879
Wegener T, Lupke NP (2003) Treatment of patients with arthritis of hip or knee with an aqueous extract of devil’s claw
amazon. Phytother Res 17(10):1165–1172
Xu I, Peng H, Glasson S et al (2007) Increased expression of the collagen receptor discoidin domain receptor 2 in
articular cartilage as a key event in the pathogenesis of osteoarthritis. Arthr Rheumat 56:2663–2673
Yang G, Chang C-C, Yang Y et al (2018) Resveratrol alleviates rheumatoid arthritis via reducing ROS and
inflammation, inhibiting MAPK signaling pathways, and suppressing angiogenesis. J Agri Food Chem 66:12953–12960
Zainal Z, Longman AJ, Hurst S et al (2009) Relative efficacies of omega-3 polyunsaturated fatty acids in reducing
expression of key proteins in a model system for studying osteoarthritis. Osteoarthr Cart 17(7):896–905
Zhang Z, Leong DJ, Xu L et al (2016) Curcumin slows osteoarthritis progression and relieves osteoarthritis-associated
pain symptoms in a post-traumatic osteoarthritis mouse model. Arthr Res Ther 18:128

671
 Nutracêuticos para Antienvelhecimento
Bhanushree Gupta, Bhupesh Kumar, Anshuman Sharma, Deeksha Sori, Rahul
Sharma e Saumya Mehta

Resumo
O envelhecimento é um fenômeno biológico complexo no qual mudanças estruturais e
funcionais ocorrem ao longo do tempo em um organismo vivo. A relação entre dieta e
envelhecimento é bastante interessante. Os antioxidantes e a diminuição da ingestão
calórica ajudam a retardar o fenômeno do envelhecimento. O oxigênio desempenha
muitos papéis importantes no corpo. Em primeiro lugar
é necessário para sustentar a vida. No entanto, o oxigênio também produz espécies
reativas de oxigênio (ROS), que são prejudiciais à saúde e um dos principais fatores
responsáveis pelo envelhecimento. Alimentos saudáveis e estilo de vida, além de
antioxidantes dietéticos, são necessários para aumentar a qualidade de vida e retardar o
processo de envelhecimento. Antioxidantes dietéticos (adaptógenos, coenzima Q10,
isoflavonas, antocianinas, probióticos, vitamina A, vitamina C, vitamina D e vitamina E) e
microelementos como manganês, zinco, selênio e ferro ajudam a retardar o processo de
envelhecimento devido à sua capacidade de reduzir a quantidade de ROS nas células, o
que acaba resultando em um aumento na expectativa de vida dos organismos. O
O objetivo deste capítulo é destacar a importância dos nutracêuticos antienvelhecimento e
discutir as teorias modernas do envelhecimento. Além disso, o papel dos nutracêuticos
antienvelhecimento como antioxidantes é descrito junto com os mecanismos para
aumentar a expectativa de vida.

Palavras-chave: Envelhecimento · Antioxidantes · Qualidade de vida · Tempo de vida ·

Nutracêuticos

O autor contribuiu igualmente com todos os outros contribuidores. Bhupesh Kumar, Anshuman Sharma and
Deeksha Sori
B. Gupta · B. Kumar · A. Sharma · D. Sori - Center for Basic Sciences, Pt. Ravishankar Shukla University,
Raipur, Chhattisgarh, India
R. Sharma - Department of Plant Physiology, Agril. Biochemistry, Medicinal and Aromatic Plants, Indira
Gandhi Agricultural University, Raipur, Chhattisgarh, India
S. Mehta - School of Pharmaceutical Sciences, Jamia Hamdard University, New Delhi, India

1. Introdução
O envelhecimento é um fenômeno biológico complexo e inevitável, caracterizado por
alterações fisiológicas nas células e tecidos que resultam em maior risco de doença e
672
morte. Também significa crescer e amadurecer junto com essas mudanças fisiológicas
(Lee et al. 2006). O envelhecimento depende de fatores internos e externos. Fatores
internos são processos normais que ocorrem naturalmente dentro da célula. Os fatores
externos incluem deficiências nutricionais, desequilíbrios hormonais, irradiação
ultravioleta, exposição solar crônica e outros fatores, como tabagismo e poluição. O
envelhecimento da pele pode ser diminuído por medidas preventivas adequadas,
incluindo cuidados com a pele, uma dieta balanceada e suplementos enriquecidos com
antioxidantes. Com esses métodos, os efeitos prejudiciais dos radicais livres podem ser
reduzidos (Schagen et al. 2012).

O efeito da nutrição no processo de envelhecimento tem sido um assunto de interesse

não apenas na pesquisa animal, mas também em humanos. Um elemento de nutrição
pode ser fornecido por meio de nutracêuticos. Como o nome sugere, “nutra” significa
alimento e “ceutico” refere-se às propriedades do medicamento. De acordo com a
definição de 1996 da Fundação para a Inovação em Medicina (FIM), nutracêuticos são
“alimentos ou ingredientes alimentares que proporcionam benefícios médicos e de saúde,
incluindo prevenção e/ou tratamento de doenças (Vranešić-Bender 2010)”. Esses
produtos incluem nutrientes isolados, suplementos dietéticos, alimentos “elaborados” por
engenharia genética, alimentos funcionais e extratos de ervas (Kwak e Jukes 2001). De
acordo com a declaração acima, os nutracêuticos são distintos porque agregam
benefícios à saúde a longo prazo com consumo adicional na forma de suplementos.

Dados científicos sugerem que os antioxidantes apresentam efeitos favoráveis em muitas

doenças crônicas e relacionadas à idade, como câncer e doenças neurodegenerativas.
Um grande número de substâncias, como vitaminas, carotenóides e flavonóides,
apresentam propriedades antioxidantes por apresentarem benefícios significativos para a
prevenção ou tratamento de doenças crônicas, resultando em uma vida mais saudável e
prolongada. As substâncias antioxidantes derivadas de alimentos são atualmente um
grande área de pesquisa, especialmente coenzima Q10, fitoestrogênios, probióticos e
ácidos graxos ômega-3. Essas substâncias antagonizam os processos inflamatórios e
degenerativos do corpo e proporcionam efeitos favoráveis nos sistemas digestivo e
imunológico, aumentando assim a qualidade de vida (Patel e Singh 2014).

2. Sinais de envelhecimento
Rugas ao redor dos olhos, sobrancelhas e regiões do pescoço são sinais claros de
envelhecimento. O cabelo fica grisalho, a frequência cardíaca máxima diminui devido a

673
uma diminuição na capacidade de uso de oxigênio, aproximadamente 10.000 neurônios
do cérebro tornam-se disfuncionais, a visão torna-se menos clara e a capacidade máxima
do rim e do fígado para filtrar os resíduos diminui (Patel e Singh 2014).

2.1 Teorias do Envelhecimento

Com base em suposições comuns, as seguintes teorias foram postuladas para descrever
o fenômeno do envelhecimento:

2.1.1 Teoria do Radical Livre

Os radicais livres são espécies altamente reativas e sem carga, de vida curta, com um
elétron de valência desemparelhado. Esses radicais livres são necessários em vários
processos metabólicos, incluindo a proteção do corpo contra infecções, na síntese de
hormônios e na produção de energia liberada pelos alimentos. Em todas essas condições,
os radicais livres são necessários em quantidades específicas. A produção excessiva de
radicais livres é responsável por danos específicos ao corpo, incluindo DNA, elastina e
colágeno (Agarwal 2013). O dano ocorre quando um radical livre pega ou puxa um elétron
de qualquer molécula, provavelmente de uma molécula vizinha, para emparelhar seu
elétron desemparelhado e converter a molécula em um radical livre.
O dano oxidativo a macromoléculas como DNA e proteínas é acumulado, mas não é
significativo o suficiente para causar envelhecimento. O oxigênio tem muitas funções
importantes no corpo. Não só é necessário para a vida, mas também está envolvido na
produção de muitos compostos potencialmente prejudiciais. Algumas espécies reativas de
oxigênio (ROS) são fornecidas na Tabela 1.

Tabela 1 – Espécies reativas de oxigênio

Radical ânion superóxido (O2)-
Radical hidroperóxido HO2
Peróxido de hidrogênio H2O2
Radical hidroxila OH-
Radical peróxido (R=lipid) ROO-
1
Oxigênio singlete O2

Quando atacada por resultados de radicais livres, a molécula de DNA sofre mutações
genéticas que causam a síntese de proteínas disfuncionais. Esta mutação pode ser
corrigida por enzimas reparadoras de DNA. Os radicais livres são gerados durante a
produção de energia, ou seja, ATP. Durante o processo de envelhecimento, as
mitocôndrias perdem sua eficiência para a produção de ATP. Existem vários estudos
científicos (Agarwal 2013) que provam que o DNA mitocondrial é mais sujeito a mutações
do que o DNA principal.
674
Uma diminuição da ingestão de calorias ajuda a retardar o fenômeno do envelhecimento e
promove a longevidade de ratos, aranhas, moscas, peixes, etc. (Vranešić-Bender 2010).
Roedores mais velhos geralmente estão envolvidos nesses tipos de estudos nos quais
recebem uma dieta especial cheia de vitaminas e minerais (Wickens 2001; Cui et al.
2011).

Mecanismo de ação

O desequilíbrio entre radicais livres e pró-oxidantes é definido como estresse oxidativo. O

estresse oxidativo severo causa disfunção celular. O estresse oxidativo ocorre devido a
uma perturbação na quantidade de pró-oxidantes e antioxidantes. Os seres humanos têm
sistemas antioxidantes integrados que ajudam a apresentar os danos dos radicais livres. A
prevenção só é possível com a ingestão de antioxidantes suficientes incluídos na
alimentação. Em condições de estresse, há um aumento da quantidade de radicais livres.
Os radicais livres retiram um elétron da molécula estável vizinha junto com a geração
concomitante de radicais livres. O aumento da transferência de elétrons pode causar
danos à membrana e reprimir o sistema de defesa da célula. É a estrutura do antioxidante
que lhe permite doar elétrons para um radical livre, resultando na estabilização da
molécula.

Há um encurtamento das sequências teloméricas no DNA com a replicação e

envelhecimento celular. O envelhecimento biológico pode ser indicado pelo comprimento
telomérico. Recentemente, foi demonstrado que o aumento da captação de multivitaminas
tem grande impacto no comprimento telomérico, pois modula o estresse oxidativo e as
proteínas envolvidas na inflamação. Estudos mostraram que mulheres com maior
ingestão de multivitaminas têm telômeros 5,1% mais longos em comparação com
mulheres com menor ingestão de multivitaminas (George e Ritter 1996; Xu et al. 2009).

Existem muitos compostos com propriedades antioxidantes. Os antioxidantes dietéticos

ajudam no aumento da regulação de ROS, o que auxilia na melhoria das funções
fisiológicas do corpo humano (Lueckenotte 2000; Rath e Shinde 2012).

A Figura 1 mostra o potencial dos antioxidantes de forma hierárquica. Catalases e

peroxidases são os antioxidantes mais ativos. A segunda classe consiste em
amortecedores e a terceira é representada por antioxidantes essenciais como vitaminas,
aminoácidos e algumas macromoléculas complexas como a coenzima Q10. A última
classe é a maior composta por compostos naturais como flavonóides e carotenóides
(Lueckenotte 2000). As catalases e peroxidases são os antioxidantes mais ativos que
desempenham um papel vital na defesa antioxidante. As enzimas reduzem o excesso de
radicais livres e são comumente encontradas nas organelas subcelulares (Tabassum e
675
Rasool 2012). Essas enzimas podem desempenhar sua função adequadamente apenas
com o fornecimento adequado de elementos, incluindo zinco, selênio, manganês, cobre e
ferro.

Enzimas (peroxidases e catalases) (Atividade Máxima)

Absorventes de impacto (ácido úrico, transferrina e albumina)

Compostos essenciais (vitaminas C e E), aminoácidos,

coenzima Q10, peptídeos, esqualeno e ácido lipóico, etc.

Outros (flavonóides e carotenóides) (Atividade mínima)

Fig. 1 Hierarquia antioxidante

2.1.2 – Teoria Estocástica

A teoria estocástica também é chamada de teoria do desgaste e foi proposta por August
Weismann (Peng et al. 2014). Segundo Weisman, o excesso de gordura, certas lesões e
infecções e a irradiação excessiva com luz ultravioleta são as principais causas do
envelhecimento. Esta teoria foi posteriormente modificada por Hart e Setlow (1974), que
propuseram que o envelhecimento se deve ao dano ao DNA e à mutação nas proteínas.
De acordo com sua pesquisa, existe uma correlação positiva entre o DNA e o tempo de
vida.

2.1.3 – Teoria do Declínio Mitocondrial

De acordo com esta teoria, o citocromo c oxidase, uma enzima que desempenha um
papel vital na cadeia de transporte de elétrons mitocondrial (ETC), declina continuamente
ao longo do tempo em vertebrados e invertebrados (Benzi et al. 1992; Schwarze et al.
1998). Devido a uma deficiência na atividade da citocromo c oxidase, a atividade da
cadeia de transporte de elétrons é reduzida. Portanto, há conexões estreitas entre MDTA
e FRTA. Melhorar o sistema de defesa antioxidante também aumenta o declínio funcional
das mitocôndrias junto com a diminuição da quantidade de radicais livres.

2.1.4 – Teoria do Declínio do Sistema Protossomal da Ubiquitina

De acordo com essa teoria, o dobramento incorreto e a agregação de proteínas são as

razões por trás do envelhecimento. O protossoma 26S é responsável pela degradação da
proteína mal dobrada. É um complexo que consiste em uma câmara central 20S e duas
tampas 19S conectadas a ela em cada extremidade (Thrower et al. 2000; Verma et al.
2001). É relatado que a atividade do protossoma 26S diminui com o tempo, portanto, sua
capacidade de degradar a proteína diminui com o tempo. Isso causa um acúmulo de
676
proteínas mal dobradas, levando ao desenvolvimento de várias doenças
neurodegenerativas, como Alzheimer e Parkinson.

2.1.5 – Teoria Imunológica

A teoria imunológica afirma que um declínio na atividade do sistema imunológico é a

principal força por trás do envelhecimento. Uma ampla gama de moléculas estranhas é
detectada e destruída pelo sistema imunológico para preservar as células saudáveis. É
relatado que uma característica do sistema imunológico para resistir a doenças
infecciosas diminui com o tempo, aumentando assim o risco de morte em idosos
(Lueckenotte 2000).

Modelo in Vivo de Envelhecimento: A pesquisa científica mostra que o saneamento e a

ingestão de alimentos aumentam a expectativa de vida humana, mas um aumento da
expectativa de vida não significa que um indivíduo permaneça com boa saúde, ou seja,
viver mais tempo não significa aumento da qualidade de vida. Uma dieta e um estilo de
vida, ambos saudáveis, melhoram o estado de saúde e, nesses casos, os nutracêuticos
desempenham um papel vital na redução do envelhecimento. Diante da divergência de
espécies, os vários ortólogos de genes ancestrais fornecem informações sobre as
semelhanças e diferenças nas espécies. Por meio dessas informações, pode-se entender
como uma espécie pode ser útil como modelo. Dois modelos biológicos frequentemente
usados, ratos e camundongos, possuem 85% dos genes humanos e, portanto, são
amplamente usados para vários estudos.

Caenorhabditis elegans como modelo in vivo: Caenorhabditis elegans é um verme

redondo que está distantemente relacionado aos humanos e fornece muitas semelhanças
fisiológicas, como os sistemas nervoso e digestivo (Barnett et al. 2016; Fitsanakis et al.
2019). C. elegans é um invertebrado, e seu modelo in vivo está intimamente relacionado
aos modelos de vertebrados mencionados anteriormente. Entre 40% e 80% dos genes
humanos têm ortólogos em C. elegans (Brenner 1974; Lai et al. 2000; Shaye e Greenwald
2011). Esse modelo foi proposto em 1970 pelo cientista Sydney Brenner (1974) e é
amplamente utilizado em pesquisas. Com a ajuda de ferramentas genéticas como a
proteína fluorescente verde (GFP), o efeito dos nutracêuticos na longevidade do verme
pode ser medido. Essa extensão da vida útil indica os efeitos benéficos dos nutracêuticos.
Devido às semelhanças nos genes de vermes e humanos, espera-se que esses
nutracêuticos tenham efeitos benéficos em humanos ao inibir uma ou mais condições de
envelhecimento.

677
3. Nutracêuticos Antienvelhecimento e Alimentos Funcionais
3.1 Adaptógenos

Os adaptógenos são usados na estabilização de processos fisiológicos e para manter a

homeostase. Eles são usados na medicina fitoterápica. Esses compostos aumentam a
capacidade do corpo de resistir aos danos dos fatores de risco e diminuem a sensibilidade
celular ao estresse. Os adaptógenos levam à proteção do estresse, aumentando a
resistência ao estresse e também promovendo ou restaurando a função fisiológica
normal.
Alguns dos adaptógenos mais populares incluem:

1. Brahmi (Bacopa monnieri)

2. Ginkgo (Ginkgo biloba)

3. Amla (Emblica officinalis)

4. Curcumina (Curcuma longa)

5. Alcaçuz (Glycyrrhiza glabra)

6. Ginseng (Panax ginseng)

3.1.1 – Brahmi (Bacopa monnieri)

Brahmi é uma erva perene. Possui flores roxas e pequenas folhas oblongas. Os
bacosídeos são os fitoquímicos nootrópicos mais valiosos encontrados em Bacopa
monnieri. Sua principal função é proteger o cérebro dos radicais livres e estimular o
aprendizado e o funcionamento cognitivo. Brahmi contém dois fitoquímicos importantes,
herpestina (Fig. 2) e brahmine. O uso regular de óleo Brahmi previne várias doenças,
como amnésia e doença de Alzheimer (Talokar et al. 2017).

Fig. 2 Herpestine

3.1.2 – Ginkgo (Ginkgo biloba)

Ginkgo biloba é o nome científico do Ginkgo. A principal função desta planta é aumentar a
quantidade de oxigênio disponível para os tecidos. As folhas de ginkgo ajudam a manter o
678
nível de glicose no cérebro e também auxiliam no fluxo sanguíneo para o cérebro.
Também melhora o funcionamento mental dos seres humanos. Geralmente, 24% de
glicosídeos de flavona estão presentes no extrato da folha de ginkgo junto com
glicosídeos de flavona, isorhamnetina (Fig. 3) derivados de lactona (ginkgolides), ácido
ascórbico, catequina e ácido chiquímico. Os componentes do ginkgo são eliminadores
ativos de radicais livres que causam a morte de células prematuras (Talokar et al. 2017).
Para obter mais detalhes sobre G. biloba, os leitores devem consultar Dziwenka e
Coppock (2016).

Fig. 3 Isorhamnetin

3.1.3 – Amla (Emblica officinalis)

Emblica officinalis é comumente conhecida como amla (groselha indiana) e pertence à

família Phyllanthaceae. Amla possui atividade de aumento de memória devido às suas
propriedades de redução do colesterol no cérebro, somado ao colesterol total no corpo, o
que tem se mostrado útil no tratamento da doença de Alzheimer (Talokar et al. 2017).
3.1.4 – Curcumina (Curcuma longa)

A curcumina é derivada da cúrcuma, uma especiaria da família do gengibre. Possui

pigmento amarelo e muitas funções biológicas, como antioxidante, anticarcinogênica e
antiinflamatória (Krausz et al. 2014; Pal et al. 2016). Devido a essas propriedades, a
curcumina é conhecida como uma droga potencial para o tratamento do câncer (Perrone
et al. 2015). A curcumina tem a capacidade de suprimir citocinas pró-inflamatórias e
prostaglandina E2 (PGE2), fator de necrose tumoral a (TNF-a) e ciclo-oxigenase-2 (COX-
2). Esta atividade supressora mostra propriedades antiinflamatórias da curcumina (Krausz
et al. 2014; Perrone et al. 2015). Além disso, a curcumina atua como um agente
antioxidante, diminuindo a produção de ROS, impedindo a peroxidação lipídica e
eliminando os radicais livres de oxigênio (Krausz et al. 2014; Perrone et al. 2015). A
ingestão oral de curcumina em roedores mostrou melhora das imperfeições da fibrose

679
cística e impedimento da expansão do tumor, mas faltam estudos em humanos (Egan et
al. 2004; Kunnumakkara et al. 2008; Draelos 2010).

3.1.5 – Alcaçuz (Glycyrrhiza glabra)

A raiz da Glycyrrhiza glabra é o alcaçuz, que pertence à família Fabaceae. As raízes e

rizomas da planta atuam como um tônico cerebral que ajuda a manter os níveis de açúcar
no sangue do corpo. A glicirrizina é o principal constituinte do alcaçuz com propriedades
antioxidantes que ajudam a aumentar a memória, proteger o cérebro de danos e manter a
função neuronal (Talokar et al. 2017).

3.1.6 – Ginseng (Panax ginseng)

As raízes das plantas de Ginseng são usadas para muitos fins médicos. As raízes desta
planta contêm ginsenosídeos. Os ginsenosídeos modulam a função imunológica, o que
aumenta a resistência do corpo contra o estresse, trauma, ansiedade e fadiga. Ajuda a
melhorar a memória e o desempenho de aprendizagem e tem propriedades antiestresse
(Talokar et al. 2017).

3.2 Probióticos e Prebióticos

Probióticos são produtos fermentados que alteram a diversidade e a atividade da flora de

microrganismos presentes no trato gastrointestinal para o benefício do indivíduo. Além
disso, melhora o estado imunológico da pessoa e compensa a desnutrição em pessoas
idosas. Alguns dos microrganismos probióticos são Lactobacillus rhamnosus GG e
Lactobacillus reuteri (Patel e Singh 2014).

Os prebióticos são ingredientes que não podem ser digeridos, mas quando ingeridos em
quantidades significativas podem estimular a atividade da flora amigável do cólon e
melhorar as condições de saúde.

3.3 Coenzima Q10

A coenzima Q10 (CoQ10) ou ubiquinona é um composto de benzoquinona solúvel em

gordura com propriedades antioxidantes. Auxilia na produção de outros antioxidantes
como o a tocoferol. Protege dos danos da radiação ultravioleta, atua como cofator na
produção de ATP e também como estabilizador de membrana. Como a síntese de CoQ10
diminui com o envelhecimento, uma dose regular de 60 mg/dia ajuda a diminuir as rugas
(Vranešić-Bender 2010; Talokar et al. 2017; Uekaji e Terao 2017).

3.4 Polifenóis

Os polifenóis estão presentes nas plantas como metabólitos secundários e são

encontrados principalmente em cereais, vegetais, frutas e bebidas. Os polifenóis estão
680
atraindo a atenção dos pesquisadores do antienvelhecimento devido às suas
propriedades antiinflamatórias, antioxidantes e anticarcinogênicas. Essas propriedades
permitem que os polifenóis sejam capazes de prevenir vários problemas de saúde,
incluindo asma, câncer, diabetes, infecções e doenças cardiovasculares (Manach et al.
2004). Os polifenóis são divididos em vários grupos funcionais como flavonóides,
lignanos, ácido fenólico e estilbenos (Manach et al. 2004). Investigações de laboratório de
vários polifenóis, como proantocianidinas de semente de uva, genisteína, polifenóis do
chá-verde, silimarina e resveratrol, levaram a pequenos modelos de animais de irritação
cutânea induzida por UV, estresse oxidativo e danos ao DNA. É proposto que esses
polifenóis, associados à proteção solar, podem proteger a pele dos impactos adversos da
radiação ultravioleta, incluindo o risco de câncer de pele (Nichols e Katiyar 2010). Alguns
flavonóides, polifenóis e antioxidantes botânicos e suas propriedades são descritos a
seguir.

3.4.1 – Flavonóides (Florizina)

A florizina é um tipo de flavonóide que ocorre naturalmente em algumas plantas. Por mais
de 150 anos, ela tem sido amplamente utilizada na indústria farmacêutica e serve como
uma plataforma para exames fisiológicos. Uma investigação para estudar o efeito da
florizina na expectativa de vida da levedura Saccharomyces cerevisiae demonstrou uma
mudança na razoabilidade da levedura. Vários outros extratos botânicos foram descritos
como tendo propriedades antioxidantes intensas. Por exemplo, apigenina (Sim et al.
2007), genisteína e silimarina demonstraram ter efeitos benéficos nos parâmetros de
envelhecimento da pele (Katiyar 2002; Moore et al. 2006).

3.4.2 – Resveratrol (Estilbenos)

O resveratrol é um polifenol natural encontrado na casca das uvas e do amendoim que

exibe propriedades antioxidantes. Tem sido objeto de estudos extraordinários nas últimas
duas décadas por causa de suas propriedades antienvelhecimento. O resveratrol atua
tanto como agente quelante quanto como eliminador de radicais e, além disso, exerce
atividade antiinflamatória. Também é benéfico para doenças cardiovasculares, Alzheimer
e muitas outras doenças (Di Franco et al. 2012; Risuleo 2016).

3.4.3 – Polifenol de Maçã

A maçã contém muitos fitoquímicos, principalmente polifenóis que possuem propriedades

antioxidantes. Polifenóis, incluindo ácido clorogênico, floretina, proantocianidina B2,
epicatequina, catequina e rutina, são os mais comumente encontrados na maçã. O
consumo de uma maçã é responsável por diminuir o risco de doenças cardiovasculares e

681
hipercolesterolemia. Vários estudos mostram que o consumo de uma maçã reduz o risco
de vários tipos de câncer, especialmente câncer de pulmão, e é mais eficaz em mulheres
do que em homens (Feskanich et al. 2000; Marchand et al. 2000; Arts et al. 2001; Sesso
et al. 2003).

3.4.4 – Extrato de Mirtilo

Os mirtilos são ricos em polifenóis e também possuem propriedades antioxidantes

superiores em comparação com outras frutas e vegetais. Os compostos naturais
presentes nos mirtilos podem reduzir as perdas relacionadas à idade (Joseph et al. 2005).
Foi relatado que o consumo diário de mirtilos pode melhorar a função de memória em
adultos. No entanto, esta pesquisa é restrita devido a um baixo número de amostras e
dados (Krikorian et al. 2010).

3.4.5 – Catequinas e teaflavinas do chá

O chá é uma das bebidas mais populares, consumido pela maioria da população. As
folhas de chá contêm catequinas e teaflavinas, responsáveis por vários benefícios à
saúde. Vários estudos científicos mostraram que a oxidação do DNA reduz pelo consumo
de chá preto ou verde (Meng et al. 2001; Rietveld e Wiseman 2003). Estudos in vivo
mostraram que as catequinas e as theaflavinas aumentaram a expectativa de vida média
de Drosophila (Bauer et al. 2004; Li et al. 2008).

3.4.6 – Antocianinas de arroz preto

O arroz preto é rico em antioxidantes dietéticos e sua suplementação tem vários efeitos
benéficos, como anticâncer, anti Alzheimer e antiinflamatório. O arroz preto tem uma
propriedade antioxidante devido ao seu conteúdo abundante de antocianinas, como
cianidina-3-o-glucosídeo e peonidina-3-glucosídeo (Chiang et al. 2006).

3.5 Vitaminas

3.5.1 – Vitamina C

A vitamina C, uma vitamina altamente solúvel em água (Fig. 4) também conhecida como
ácido ascórbico, é um composto cristalino incolor branco com fortes propriedades
redutoras que a tornam um bom antioxidante em um ambiente hidrofílico. É fotossensível
por natureza (Schagen et al. 2012; Souyoul et al. 2018). Os humanos são incapazes de
sintetizar o ácido ascórbico naturalmente em seus corpos e tentam cumprir suas
necessidades de vitamina C por meio de fontes enriquecidas com ácido ascórbico, como
pimentão verde, kiwi, laranja, toranja, couve de Bruxelas, morango, frutas cítricas e
brócolis (Talokar et al . 2017). A vitamina C é oxidada em ácido desidroxiascórbico, que

682
entra nas células e é então convertido de volta em ácido ascórbico por meio do processo
de redução (Subramani et al. 2014). É importante para o corpo humano na prevenção de
doenças relacionadas ao tecido conjuntivo e para melhorias na função celular imunológica
e cardiovascular (Talokar et al. 2017). A deficiência de vitamina C causa uma doença
conhecida como escorbuto com sinais clínicos de fragilidade, sangramento gengival,
petéquias e cicatrização lenta de feridas (Boyera et al. 1998). A vitamina C é um forte
antioxidante e eliminador de radicais livres que evita danos às membranas celulares,
tecidos e DNA dos radicais livres (oxidação), e também é importante na hidroxilação do
colágeno e benéfica no processo de maturação do colágeno extracelular e intracelular
(Wu et al. 2017).

Fig. 4 Vitamina C

3.5.2 – Vitamina E

A vitamina E (Fig. 5) é um grupo de vitaminas solúveis em gordura chamadas

coletivamente de “tocoferóis”. É um antioxidante ligado à membrana junto com um
eliminador de radicais livres. O tocoferol é semelhante à vitamina C por ser um
antioxidante não enzimático (Lyons e O’Brien 2002; Ristow e Schmeisser 2011). Está
presente em vegetais, óleo de cártamo, óleo de gérmen de trigo, óleo e sementes de
girassol, amêndoas, amendoim, soja, milho e carne (Stahl et al. 2006; Suganuma et al.
2010). A deficiência de vitamina E se manifesta em edema com alterações de seborrhiec
ou eritema papular, ressecamento e despigmentação em bebês prematuros (Passi et al.
1991). A ingestão de vitamina E ajuda contra a interligação do colágeno e a peroxidação
lipídica, ambas ligadas à maturação da pele (Schagen et al. 2012).
A vitamina E e a vitamina C são sinérgicas por natureza. Quando as partículas ativadas
por UV oxidam componentes celulares, uma reação em cadeia de peroxidação lipídica
nas membranas, que é rica em ácidos graxos poliinsaturados, é induzida. Nesta reação, o
agente antioxidante D-a-tocoferol é oxidado e convertido no radical tocoferoxila e então
recuperado pelo ácido ascórbico (Chan et al. 1991; Fryer 1993). Por meio desse

683
processo, a membrana celular é estabilizada, evitando a oxidação dos ácidos graxos
poliinsaturados. Observou-se que a vitamina E inibe o eritema e infindáveis danos à pele
iniciados por UVB e reduz as células queimadas pelo sol e os efeitos fotocarcinogênicos
(McVean e Liebler 1999; Makrantonaki e Zouboulis 2008).

Fig. 5 Vitamina E

3.5.3 – Vitamina D

A vitamina D é uma vitamina solúvel em gordura sintetizada pelo corpo humano durante a
exposição à luz solar. Ele também atua como um pró-hormônio. Pequenas quantidades
de vitaminas D2 e D3 (Fig. 6) se originam da ingestão de alimentos de origem animal,
como gema de ovo ou peixe. Alguns produtos, como cereais, margarina e leite, podem ser
enriquecidos com vitamina D (Schagen et al. 2012). A pele é um local significativo para a
intervenção de vitamina D3 e UVB. A vitamina D é armazenada nas partes lipídicas do
corpo e uma superabundância dessa vitamina pode ter efeitos indesejáveis como
fraqueza, falta de apetite, perda de peso e vômitos. A vitamina D desempenha um papel
importante na integridade óssea e na homeostase do cálcio. Também é importante para
várias funções fisiológicas, incluindo liberação de citocinas inflamatórias, regulação do
crescimento e resposta imunológica (Reichrath et al. 2007). Ele protege as células da pele
humana da passagem de células estimuladas por UV e da apoptose e restringe a
iniciação da proteína quinase ativada pelo estresse (De Haes et al. 2003, 2005). Muitos
estudos mostram que o tratamento oral com vitamina D previne o câncer de pele, que
está relacionado aos efeitos antienvelhecimento (Lehmann 2009). A produção de vitamina
D3 diminui com o avançar da idade. Vários fatores como desnutrição, exposição
infrequente ao sol e efeitos comportamentais podem ser responsáveis pela deficiência de
vitamina D. Portanto, a suplementação de vitamina D e cálcio é essencial para humanos e
animais (Makrantonaki e Zouboulis 2008).

684
 Fig. 6 Vitamina D2 (esquerda) e D3
(direita)

3.6 Carotenóides

Os carotenóides são derivados da vitamina A, como astaxantina, β-caroteno, retinol e

licopeno, que geralmente são antioxidantes extremamente viáveis e foram registrados
como foto protetores. A pele humana é moderadamente melhorada pelo licopeno e β-
caroteno, em contraste com a luteína e a zeaxantina, refletindo concebivelmente uma
função particular dos hidrocarbonetos carotenóides na fotoproteção da pele humana
(Scarmo et al. 2010).

O β-caroteno (Fig. 7) é o membro mais importante dos carotenóides (Britton et al. 2008).
É encontrado na dieta humana em batata-doce, cenoura, abóbora, mamão e manga. Um
papel importante do β-caroteno é exercer a atividade pró-vitamina A. O β-caroteno pode
ser separado em duas moléculas de tansretinol pela enzima BCMO1. O β-caroteno
também pode funcionar como um eliminador de radicais lipídicos e como um único
inibidor de oxigênio (Grune et al. 2010). Com base na disseminação do BCMO1 nos
tecidos, a digestão do β-caroteno ocorre em vários órgãos, incluindo a pele (Lindqvist e
Andersson 2004). O β-caroteno é foto protetor eficiente e previne o eritema induzido por
UV (Sies e Stahl 2004).

Fig. 7 β-caroteno

A astaxantina (Fig. 8) é encontrada em algas, fermento, camarão, salmão, crustáceos,

trutas, lagostins e krill. A astaxantina tem um potencial impressionante e aplicações
promissoras no bem-estar e nutrição humana (Hussein et al. 2006). Tem um potencial
685
excepcional para garantir uma forma de vida protetora contra uma série de doenças
(Higuera-Ciapara et al. 2006). O impacto defensivo UV do extrato de algas é devido a
14% da astaxantina em comparação com a astaxantina projetada.
A pré-incubação com astaxantina projetada ou um extrato de algas pode evitar mudanças
induzidas por UVA na ação do superóxido dismutase celular e declínio no conteúdo de
glutationa celular (Lyons e O’Brien 2002). Suganuma et al. (2010) mostraram que os
resultados da radiação UVA, como o enrugamento da pele, podem ser evitados e
minimizados pelo uso tópico ou oral da astaxantina.

Fig. 8 Astaxantina

O licopeno (Fig. 9) é um caroteno vermelho, carotenóide e fitoquímico presente em frutas

e vegetais vermelhos, tomates e outros produtos vermelhos, como mamão, cenoura
vermelha e melancia (Schagen et al. 2012). Apesar de o licopeno ser sinteticamente um
caroteno, o licopeno não tem atividade da vitamina A. No entanto, ele mostra fortes
tendências como um único inibidor de oxigênio (Evans e Johnson, 2010). Alguns
resultados indicam que o licopeno e o β-caroteno protegem a pele contra queimaduras
solares ao expandir a proteção basal contra os danos causados pela luz ultravioleta e
seus produtos também são conhecidos por serem eficazes contra o câncer e na
diminuição da atividade da MMP-1, uma enzima que é responsável pela degradação do
colágeno (Pohar et al. 2003; Etminan et al. 2004; Stahl et al. 2006; Stahl e Sies 2012).

Fig. 9 Licopeno

686
O retinol (Fig. 10) é uma vitamina solúvel em gordura que consiste em unidades de
isopreno. Como não pode ser sintetizada pelo corpo humano, é necessário atender às
necessidades dessa vitamina por fontes externas (dieta), como peixes gordurosos, queijo,
leite, gemas de ovo, etc. Seus dois derivados, ácido retinóico e retinaldeído, são
importantes para o crescimento, úteis na reprodução e responsáveis pela manutenção
dos tecidos epiteliais (Zouboulis et al. 2008). O retinaldeído também é muito importante
para a visão e é produzido em um processo reversível pela oxidação do retinol.
Demonstrou-se que a vitamina A aplicada topicamente possui várias contra-ações contra
a pigmentação irregular do envelhecimento e do enrugamento da pele. Os efeitos da
vitamina A e derivados do ácido sobre os agentes clareadores e peeling químico foram
avaliados. A degradação do colágeno mediada por MMP e induzida por UV foi reduzida
pelo tratamento de retinoide aplicado topicamente (Fisher et al. 1997, 2000; Lee et al.
2012).

Fig. 10 Retinol

4. Observações finais e orientações futuras

O envelhecimento é um processo que depende de muitos fatores internos e externos. As
teorias do envelhecimento associam o envelhecimento a um excesso de radicais livres,
um desequilíbrio na dieta e mutações biológicas. Os nutracêuticos são considerados uma
parte crítica para aumentar a expectativa de vida e ajudar a estrutura antioxidante
endógena, com itens contendo antioxidantes que estão regularmente presentes na pele.
Uma dieta constante de produtos ricos em antioxidantes (vegetais, frutas e grãos de trigo)
tem certas propriedades para a saúde, que podem retardar o envelhecimento. Os
nutracêuticos levam a poucos sintomas irrelevantes em contraste com seu impacto
significativo na digestão celular. Os nutracêuticos parecem ter uma grande promessa de
retardar ou combater o processo de envelhecimento.

Referências
Agarwal V (2013) An ayurvedic insight to ageing with its preventive measures. Int J Res Ayurveda Pharm 4:31–33
Arts IC, Jacobs DR Jr, Harnack LJ et al (2001) Dietary catechins in relation to coronary heart disease death among
postmenopausal women. Epidemiology 12(6):668–675
Barnett RE, Baily DC, Hatfield DE, Fitsanakis VA (2016) Caenorhabditis elegans: a model organism for nutraceutical
safety and toxicity evaluation. In: Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity. Academic Press/Elsevier, Amsterdam, pp
341–354

687
 Bauer JH, Goupil S, Garber JP et al (2004) An accelerated assay for the identification of lifespan-extending
interventions in Drosophila melanogaster. Proc Natl Acad Sci U S A 101:12980–12985
Benzi G, Pastoris O, Marzatico F et al (1992) The mitochondrial electron transfer alteration as a factor involved in the
brain aging. Neurobiol Aging 13:361–368
Boyera N, Galey I, Bernad BA (1998) Effect of vitamin C and its derivatives on collagen synthesis and crosslinking by
normal human fibroblasts. Int J Cosmet Sci 20:151–158
Brenner S (1974) The genetics of Caenorhabditis elegans. Genetics 77:71–94
Britton G, Liaaen-Jensen S et al (2008) Carotenoids. Birkhäuser, Basel, pp 1–33
Chan AC, Tran K, Raynor T et al (1991) Regeneration of vitamin E in human platelets. J Biol Chem 266:17290–17295
Chiang AN, Wu HL, Yeh HI et al (2006) Antioxidant effects of black rice extract through the induction of superoxide
dismutase and catalase activities. Lipids 41:797–803
Cui H, Kong Y, Zhang H (2011) Oxidative stress, mitochondrial dysfunction, and aging. J Signal Transduct 2012:1–13
De Haes P, Garmyn M, Degreef H et al (2003) 1,25-Dihydroxyvitamin D3 inhibits ultraviolet B-induced apoptosis, Jun
kinase activation, and interleukin-6 production in primary human keratinocytes. J Cell Biochem 89:663–673
De Haes P, Garmyn M, Verstuyf A et al (2005) 1,25-Dihydroxyvitamin D3 and analogues protect primary human
keratinocytes against UVB-induced DNA damage. J Photochem Photobiol B 78:141–148
Di Franco R, Calvanese M, Murino P et al (2012) Skin toxicity from external beam radiation therapy in breast cancer
patients: protective effects of Resveratrol, Lycopene, Vitamin C and anthocyanin. Radiat Oncol 7:1–6
Draelos ZD (2010) Nutrition and enhancing youthful appearing skin. Clin Dermatol 28:400–408
Dziwenka M, Coppock RW (2016) Ginkgo biloba. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity.
Academic Press/Elsevier, Amsterdam, pp 681–691
Egan ME, Pearson M, Weiner SA et al (2004) Curcumin, a major constituent of turmeric, corrects cystic Fibrosis
defects. Science 304:600–602
Etminan M, Takkouche B, Caamaño-Isorna F (2004) The role of tomato products and lycopene in the prevention of
prostate cancer: a metaanalysis of observational studies. Cancer Epidemiol Biomark 13:340–345
Evans JA, Johnson EJ (2010) The role of phytonutrients in skin health. Nutrients 2:903–928
Feskanich D, Ziegler RG, Michaud DS et al (2000) Prospective study of fruit and vegetable consumption and risk of
lung cancer among men and women. J Natl Cancer Inst 92(22):1812–1823
Fisher GJ, Wang ZQ, Datta SC et al (1997) Pathophysiology of premature skin aging induced by ultraviolet light. N
Engl J Med 337:1419–1428
Fisher GJ, Datta S, Wang Z et al (2000) c-Jun-dependent inhibition of cutaneous procollagen Transcription following
ultraviolet irradiation is reversed by all-trans retinoic acid. J Clin Invest 106:663–670
Fitsanakis VA, Negga R, Hatfield H (2019) Mechanistic toxicological biomarkers in Caenorhabditis elegans. In: Gupta
RC (ed) Biomarkers in toxicology, 2nd edn. Academic Press/Elsevier, Amsterdam. (in press)
Fryer MJ (1993) Evidence for the photoprotective effects of vitamin E. Photochem Photobiol Sci 58:304–312
George AJ, Ritter MA (1996) Thymic involution with ageing: obsolescence or good housekeeping? Immunol Today
17(6):267–272
Grune T, Lietz G, Palou A et al (2010) β-Carotene is an important vitamin A source for humans. J Nutr 140(12):2268S–
2285S
Hart RW, Setlow RB (1974) Correlation between deoxyribonucleic acid excision repair and life span in a number of
mammalian species. Proc Natl Acad Sci U S A 71:2169–2173
Higuera-Ciapara I, Félix-Valenzuela L, Goycoolea FM (2006) Astaxanthin: a review of its chemistry and applications.
Crit Rev Food Sci Nutr 46:185–196
Hussein G, Goto H, Oda S et al (2006) Antihypertensive potential and mechanism of action of astaxanthin: III.
Antioxidant and histopathological effects in spontaneously hypertensive rats. Biol Pharm Bull 29:684–688
Joseph JA, Shukitt-Hale B, Casadesus G (2005) Reversing the deleterious effects of aging on neuronal
communication and behavior: beneficial properties of fruit polyphenolic compounds. Am J Clin Nutr 81:313S–316S
Katiyar SK (2002) Treatment of silymarin, a plant flavonoid, prevents ultraviolet light-induced immune suppression and
oxidative stress in mouse skin. Int J Oncol 21:1213–1222
Krausz A, Gunn H, Friedman A (2014) The basic science of natural ingredients. J Drugs Dermatol 13:937–943
Krikorian R, Shidler MD, Nash TA et al (2010) Blueberry supplementation improves memory in older adults. J Agric
Food Chem 58:3996–4000
Kunnumakkara AB, Anand P, Aggarwal BB (2008) Curcumin inhibits proliferation, invasion, angiogenesis and
metastasis of different cancers through interaction with multiple cell signaling proteins. Cancer Lett 269:199–225
Kwak NS, Jukes DJ (2001) Functional foods. Part 2: The impact on current regulatory terminology. Food Control
12:109–117
Lai CH, Chou CY, Chang LY et al (2000) Identification of novel human genes evolutionarily conserved in
Caenorhabditis elegans by comparative proteomics. Genome Res 10:703–713
Lee J, Koo N, Min DB (2006) Reactive oxygen species, aging and antioxidative nutraceuticals. Compr Rev Food Sci
Food Saf 3:21–33
Lee SJ, Cho SA, An SS et al (2012) Significantly inhibits retinoidinduced skin irritation in vitro and in vivo. Evid Based
Complement Alternat Med 2012:1–11
Lehmann B (2009) Role of the vitamin D3 pathway in healthy and diseased skin–facts, contradictions and hypotheses.
Exp Dermatol 18:97–108
Li YM, Chan HY, Yao XQ et al (2008) Green tea catechins and broccoli reduce fat-induced mortality in Drosophila
melanogaster. J Nutr Biochem 19:376–383
Lindqvist A, Andersson S (2004) Cell type-specific expression of betacarotene 15,150-monooxygenase in human
tissues. J Histochem Cytochem 52:491–499
Lueckenotte AG (2000) Theories of ageing. In: Gerontologic nursing, 2nd edn. Holly Evans Madison Publisher, pp 21–
24
Lyons NM, O’Brien N (2002) Modulatory effects of an algal extract containing astaxanthin on UVA irradiated cells in
culture. J Dermatol Sci 30:73–84
688
 Makrantonaki E, Zouboulis C (2008) Skin alterations and diseases in advanced age. Drug Discov Today Dis Mech
5:153–162
Manach C, Scalbert A, Morand C et al (2004) Food sources and bioavailability. Am J Clin Nutr 79:727–747
Marchand LL, Murphy SP, Hankin JH et al (2000) Intake of flavonoids and lung cancer. J Natl Cancer Inst 92(2):154–
160
McVean M, Liebler DC (1999) Prevention of DNA photodamage by vitamin E compounds and sunscreens: roles of
ultraviolet absorbance and cellular uptake. Mol Carcinog 24:169–176
Meng J, Ren B, Xu Y et al (2001) Reduction of oxidative DNA damage (comet assay) in white blood cells by black tea
consumption in smokers and non-smokers. Toxicol Sci 60:411–412
Moore JO, Wang Y, Stebbins WG et al (2006) Photoprotective effect of isoflavone genistein on ultraviolet B-induced
pyrimidine dimer formation and PCNA expression in human reconstituted skin and its implications in dermatology and
prevention of cutaneous carcinogenesis. Carcinogenesis 27:1627–1635
Nichols JA, Katiyar SK (2010) Skin photoprotection by natural polyphenols: anti inflammatory, antioxidant and DNA
repair mechanisms. Arch Dermatol Res 302:71–83
Pal HC, Hunt KM, Diamond A et al (2016) Phytochemicals for the management of melanoma. Mini Rev Med Chem
16:953–979
Passi S, Morrone A, De Luca C et al (1991) Blood levels of vitamin E, polyunsaturated fatty acids of phospholipids,
lipoperoxides and glutathione peroxidase in patients affected with seborrheic dermatitis. J Dermatol Sci 2:171–178
Patel P, Singh SK (2014) The aging gut and the role of prebiotics, probiotics, and synbiotics: a review. J Clin Gerontol
Geriatr 5(1):3–6
Peng C, Wang X, Chen J et al (2014) Biology of ageing and role of dietary antioxidant. Bio Med Res Int 2014:1–13
Perrone D, Ardito F, Giannatempo G et al (2015) Biological and therapeutic activities, and anticancer properties of
curcumin. Exp Ther Med 10(5):1615–1623
Pohar KS, Gong MC, Bahnson R et al (2003) Tomatoes, lycopene and prostate cancer: a clinician’s guide for
counseling those at risk for prostate cancer. World J Urol 21(1):9–14
Rath SK, Shinde A (2012) Review of antioxidant activity of Rasayana herbs ayurveda. Int J Ayurvedic Herb Med
2(1):202–217
Reichrath J, Lehmann B, Carlberg C et al (2007) Vitamins as hormones. Horm Metab Res 39(2):71–84
Rietveld A, Wiseman S (2003) Antioxidant effects of tea: evidence from human clinical trials. J Nutr 133(10):3285S–
3292S
Ristow M, Schmeisser S (2011) Extending life span by increasing oxidative stress. Free Radic Biol Med 51:327–336
Risuleo G (2016) Resveratrol: multiple activities on the biological functionality of the cell. In: Gupta RC (ed)
Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity. Academic Press/Elsevier, Amsterdam, pp 453–464
Scarmo S, Cartmel B, Lin H et al (2010) Significant correlations of dermal total carotenoids and dermal lycopene with
their respective plasma levels in healthy adults. Arch Biochem Biophys 504:34–39
Schagen SK, Zampeli VA, Makrantonaki E et al (2012) Discovering the link between nutrition and skin aging. Dermato-
Endocrinology 4 (3):298–307
Schwarze SR, Weindruch R, Aiken JM (1998) Oxidative stress and aging reduce cox I RNA and cytochrome oxidase
activity in Drosophila. Free Radic Biol Med 25:740–747
Sesso HD, Gaziano JM, Liu S et al (2003) Flavonoid intake and the risk of cardiovascular disease in women. Am J Clin
Nutr 77 (6):1400–1408
Shaye DD, Greenwald I (2011) OrthoList: a compendium of C. Elegans genes with human orthologs. PLoS One 6:1–
12
Sies H, Stahl W (2004) Nutritional protection against skin damage from sunlight. Annu Rev Nutr 24:173–200
Sim GS, Lee BC, Cho HS et al (2007) Structure activity relationship of antioxidative property of flavonoids and
inhibitory effect on matrix metalloproteinase activity in UVA-irradiated human dermal fibroblast. Arch Pharm Res
30(3):290–298
Souyoul SA, Saussy KP, Lupo MP (2018) Nutraceuticals: a review. Dermatol Ther (Heidelb) 8(1):5–16
Stahl W, Sies H (2012) b-Carotene and other carotenoids in protection from sunlight. Am J Clin Nutr 96(5):1179S–
1184S
Stahl W, Heinrich U, Aust O et al (2006) Lycopene-rich products and dietary photoprotection. Photochem Photobiol Sci
5:238–242
Subramani T, Yeap SK, Ho WY et al (2014) Vitamin C suppresses cell death in MCF-7 human breast cancer cells
induced by tamoxifen. J Cell Mol Med 18:305–313
Suganuma K, Nakajima H, Ohtsuki M et al (2010) Astaxanthin attenuates the UVA-induced up-regulation of matrix
metalloproteinase-1 and skin fibroblast elastase in human dermal fibroblasts. J Dermatol Sci 58:136–142
Tabassum N, Rasool S (2012) Natural cognitive enhancers. J Pharm Res 5(1):155
Talokar SS, Rajnikant VR, Salunkhe V et al (2017) A review on nootropics and nutraceuticals: the missile for ageing. Int
Res J Pharmaceut Appl Sci 8:1–4
Thrower JS, Hoffman L, Rechsteiner M et al (2000) Recognition of the poly ubiquitin proteolytic signal. EMBO J 19:94–
102
Uekaji Y, Terao K (2017) Coenzyme Q10 – gamma cyclodextrin complex is a Powerful nutraceutical for anti-aging and
health improvements. Biomed Res Clin Pract 2:1–5
Verma R, McDonald H, Yates JR III et al (2001) Selective degradation of ubiquitinated Sic1 by purified 26S
proteasome yields active S phase cyclin-Cdk. Mol Cell 8:439–448
Vranešić-Bender D (2010) The role of nutraceuticals in anti-aging medicine. Acta Clin Croat 49:537–544
Wickens AP (2001) Ageing and the free radical theory. Respir Physiol 128:380–381
Wu X, Cheng J, Wang X (2017) Dietary antioxidants: potential anticancer agents. Nutr Cancer 69:521–533
Xu Q, Parks CG et al (2009) Multivitamin use and telomere length in women. Am J Clin Nutr 89:1857–1863
Zouboulis CC, Schagen S, Alestas T (2008) The sebocyte culture: a model to study the pathophysiology of the
sebaceous gland in sebostasis, seborrhea and acne. Arch Dermatol 300:397–413

689
 Nutracêuticos para disfunção cognitiva
Ramesh C. Gupta, Robin B. Doss, Ajay Srivastava, Rajiv Lall e Anita Sinha

Resumo
Com o aumento da idade, humanos e animais sofrem perda parcial ou completa de
cognição e memória. Como resultado, a qualidade de vida diminui significativamente.
Entre muitos mecanismos subjacentes, um declínio significativo no neurotransmissor
acetilcolina (ACh), um aumento no N-metil-D-aspartato (NMDA) e estresse oxidativo são
os eventos mais reconhecidos envolvidos no comprometimento da cognição,
especialmente memória e aprendizagem. Como a doença de Alzheimer (AD)
neurodegenerativa crônica em humanos, caninos e felinos sofrem com a perda de
memória à medida que envelhecem. Atualmente, para o tratamento da AD em humanos,
um antagonista do receptor NMDA memantina em combinação com o inibidor da
acetilcolinesterase (AChE) donepezil, rivastigmina ou galantamina parece ser a melhor
opção. Uma série de drogas terapêuticas (selegilina, gabapentina, buspirona, memantina,
etc.) também estão disponíveis para o tratamento da disfunção cognitiva canina
(CCD)/síndrome da disfunção cognitiva (CDS). Um grande número de extratos vegetais,
seus ingredientes e compostos bioativos de origem animal foram investigados para
atividades anticolinesterásicas (anti-ChE), antioxidantes, antiinflamatórias e
imunomoduladoras, bem como agregação e deposição de anti-Aβ no cérebro. Algumas
dessas substâncias também demonstraram normalizar a permeabilidade e integridade da
barreira hematoencefálica, enquanto outras demonstraram restaurar a função
mitocondrial. Um pequeno número de extratos de plantas também mostrou propriedade
inibitória da MAO-B. Atualmente, cães e gatos com demência recebem nutracêuticos e/ou
dieta terapêutica para melhorar a cognição e a memória. Este capítulo descreve vários
nutracêuticos e substâncias que têm potencial para melhorar a cognição e a memória em
cães e gatos idosos.

Palavras-chave: Disfunção cognitiva canina · Perda de memória · Acetilcolina ·

Acetilcolinesterase · Butirilcolinesterase · Anticolinesterase · Alcalóides vegetais ·
Antagonista do receptor NMDA · Estresse oxidativo

R. C. Gupta · R. B. Doss – Toxicology Department, Breathitt Veterinary Center, Murray State University,
Hopkinsville, KY, USA e-mail: rgupta@murraystate.edu
A. Srivastava · R. Lall · A. Sinha – Vets Plus Inc., Menomonie, WI, USA

690
1. Introdução
Atualmente, como os humanos, os cães também vivem mais por causa de uma melhor
nutrição, meio ambiente e cuidados veterinários. Como resultado, uma grande população
de cães, muitas vezes considerados cães idosos, sofre de disfunção cognitiva e perda de
memória (Bain et al. 2001). A prevalência da síndrome da disfunção cognitiva (CDS) é
extremamente alta. De acordo com um estudo da University of California Davis, 28% dos
cães com idades entre 11–12 anos e 68% dos cães com 15–16 anos mostraram um ou
mais sinais de deficiência cognitiva (Neilsen et al. 2001). A prevalência de CDS em gatos
foi encontrada em 36% em uma população de gatos de 11 a 21 anos (Moffat e Landsberg
2003). O CDS é subdiagnosticado porque os cuidadores podem presumir que as
mudanças de comportamento são resultados do envelhecimento normal, e os veterinários
podem não reconhecer os sinais (Salvin et al. 2010). O cérebro é o órgão mais complexo
do corpo e, à medida que envelhece, ocorrem certas mudanças, como (1) estresse
oxidativo/nitrosativo, (2) neuroinflamação, (3) declínio no nível de acetilcolina (ACh), (4)
diminuição na atividade da acetilcolinesterase (AChE) e aumento na atividade da
butirilcolinesterase (BuChE), (5) diminuição na colina acetiltransferase (ChAT), (6)
aumento nos receptores N-metil-D-aspartato (NMDA) e (7) alterações microvasculares
(revisado em Gupta e Dekundy 2005; Sadhukhan et al. 2018; Sen e Hongpaisan 2018;
Seo et al. 2018). Embora as alterações neurodegenerativas ocorram em muitas regiões
do cérebro, no contexto da memória, o córtex cerebral e o hipocampo são de particular
importância. O acúmulo de um peptídeo neurotóxico Aβ1–42 e a hiperfosforilação de tau,
levando à formação de placas senis e emaranhados neurofibrilares no córtex e no
hipocampo, são as duas marcas patológicas da AD em humanos e CDS em caninos e
felinos.

Extratos de plantas são conhecidos há muito tempo por conter uma propriedade inibidora
da colinesterase (ChE). A fisostigmina de Physostigma venenosum (feijão Calabar) e a
galantamina de Galanthus nivalis (floco de neve/campânula branca) são os dois exemplos
mais comuns dessas plantas. Plantas ricas em óleo essencial, que também são
conhecidas por possuírem uma propriedade anti-ChE, têm sido tradicionalmente usadas
para melhorar a memória em humanos e também podem ser usadas para CDS em
caninos e felinos (Orhan et al. 2009). Além das propriedades anti-AChE, antioxidantes,
antiinflamatórias e neuroprotetoras (Tabela 1), algumas plantas têm propriedade inibitória
da monoamina oxidase (MAO) (Mazzio et al. 2013). Nutracêuticos, como canela,
curcumina e berberina, também podem atenuar os níveis de b amilóide e tau nas regiões
do cérebro. Recentemente, Marcelli et al. (2018) propôs um interessante mecanismo

691
molecular intracelular implicado na fisiopatologia da AD, denominado SUMOilação. Uma
vez que não existem tratamentos farmacológicos conhecidos para normalizar o equilíbrio
da SUMOilação/desUMOilação, alguns compostos naturais são sugeridos para futuras
terapias convincentes. Extratos de muitas plantas ou seus ingredientes oferecem
esperança para a prevenção e/ou tratamento do declínio da cognição (Cicero et al. 2018;
Momtaz et al. 2018).

Tabela 1 Extratos de plantas/nutracêuticos com potencial para melhorar direta ou indiretamente a

cognição e a memória
Extrato vegetal / Constituintes farmacológicos / Atividades biológicas /
Referências
nutracêutico biológicos farmacológicas
Angelica Sigurdsson and
Imperatorina e xantotoxina Inibidor de AChE Gudbjarnason (2007)
archangelica
Inibidor da AChE, anti: oxidante,
Anisomeles indica
Polifenóis inflamatório, Alzheimer, nociceptivo. Uddin et al. (2016, 2018)
L.
Ansiolítico e sedativo
Aristotelia chilensis F5 Inibidor de AChE, BuChE e tirosinase Cespedes et al. (2017)

Artemisia
Estragole Inibidor de AChE Dohi et al. (2009)
dracunculus (OE)
Anti: oxidante, proteolítico e
Ácido ascórbico Ácido ascórbico Olajide et al. (2017)
apoptótico
Antioxidante, aumento da liberação
de fator de crescimento do nervo,
Asparagus Flavonóides, fenóis, saponinas
inibidor de AChE e diminuição da Lee et al. (2018)
cochinchinenses e protodioscina
produção e deposição do peptídeo
Aβ1-42
Bacopa Monnieri Inibidor de AChE, antioxidante, Das et al. (2002), Zhang
Bacopasides et al. (2009)
(Brahmi) neuroprotetor
Berberis vulgaris,
Berberina e metabólitos de
B. Aristata, B. Inibidor de AChE, antioxidante, Ingkaninan et al. (2006),
berberina (talifendina, Zhu and Qian (2006),
aquifolium, Coptis antiinflamatório, imunomodulador,
berberrubina e jatrorrizina), Kulkarni and Dhir (2008,
chinensis, neuroprotetor, analgésico, inibidor de 2010), Asai et al. (2007),
protoberberinas (esteparanina, Kumar et al. (2015), Cai
Hydrastis Aβ42 e melhora da cognição e et al. (2016), Hussein et
ciclanolina e N-metil al. (2018)
canadensis memória
estefolidina)
Stephania venosa
Cannabis sativa Lignanamidas (cannabisina M,
Yan et al. (2015) and
(semente de cannabisina N, cannabisina O Inibidor e antioxidante de AChE Hartsel et al. (2016)
cânhamo) e 3,3-dimetilheliotropamida)
Líquido de casca
de castanha de
Ácidos anacárdicos Anti Alzheimer Filho et al. (2018)
caju (Anacardium
occidentale)
Cinnamomum Proteína anti-tau e agregação Aβ,
Polifenóis, cinamaldeído Momtaz et al. (2018)
verum, C. tamale anti-Alzheimer e antidiabetes
Anti: inflamatório, oxidante Maheshwari et al. (2006),
Curcumina/ Curcumina, Chen (2006), Javeri and
neuroinflamatório. Citoprotetor, Chand (2016), Risuleo
cúrcuma (Curcuma demetoxicurcumina e (2016), Sadhukhan et al.
previne a agregação de Aβ e o
longa) bisdemetoxicurcumina (2018), Sorrenti et al.
comprometimento da memória (2018)

Cyclotrichium
Isomentona e pulegona Inibidor e antioxidante de AChE Orhan et al. (2009)
niveum (OE)

692
 Tabela 1 Extratos de plantas/nutracêuticos com potencial para melhorar direta ou indiretamente a
cognição e a memória
Extrato vegetal / Constituintes farmacológicos / Atividades biológicas /
Referências
nutracêutico biológicos farmacológicas
Inibidor de AChE e BuChE,
Elatostema
Fenólicos e flavonóides eliminação de radicais livres e Reza et al. (2018)
papillosum
antioxidante
Eugenia
dysenterica Ainda não identificado Inibidor de AChE Gasca et al. (2017)

(cagaita)
Moreloflavona, Deposição de peptídeos Aβ reduzida
Garcinia madruno volkensiflavona, fukugiside e no cérebro e aprendizagem
amentoflavona aprimorada
Inibe a apoptose induzida por Aβ no
hipocampo via suprarregulação de
BDNF, neuroprotetor, inibidor de
Ginkgolida A, B e C, bilobalida,
AChE, aumenta o metabolismo
Ginkgo biloba ácido ginkgólico e flavonóides
mitocondrial e a produção de ATP,
(quercetina)
fator de ativação antiplaquetária e
aprimoramento da cognição e
Sabogal-Guaqueta et al.
(2018)
Das et al. (2002),
Dugoua et al. (2006),
Reichling et al. (2006),
Nagahara et al. (2009),
Xiao et al. (2010), Ihl et
al. (2011), Islam et al.
(2013), Mohanta et al.
(2014), Dziwenka, e
Coppock (2016)

memória
Diminuição do estresse oxidativo,
regulação positiva de proteínas
relacionadas à plasticidade no Zhao et al. (2009), Li et
Ginseng Ginsenósidos al. (2015), Peng et al.
hipocampo, antiinflamatório, (2018)
imunomodulador, neuroprotetor e
melhora a cognição e a memória
Previne o aprendizado espacial e o
comprometimento da memória,
Chá verde diminuindo os oligômeros Aβ1-42 e Li et al. (2009), Coppock
(-) - epigalocatequina-3-galato and Dziwenka (2016)
(Camellia sinensis) regulando positivamente as proteínas
de plasticidade sináptica no
hipocampo
Mirtilo alto
Ativação de sinalização
(Vaccinium Flavonóides Hong et al. (2017)
BDNF/CREB/AKT
corymbosum L.)
Inula graveolens
Acetato de bornila e borneol Inibidor de AChE Dohi et al. (2009)
(OE)
Monsonia Diminuição da formação de Aβ, Gu et al. (2016), Chun et
Justicidin A al. (2017)
angustifolia neuroprotetor e anti-autofagia
Mutellina purpurea Pteryxin Inibidor de BuChE Orhan et al. (2017)

Inibidor e antioxidante de AChE e

Norea micrantha Ainda não identificado Imran et al. (2017)
BuChE
Polygonum Óxido de cariofileno e Inibidor e antioxidante de AChE e Ayaz et al. (2015)
hydropiper L. (OE) decahidronaftaleno BuChE
Piper
Asaricina Inibidor de AChE Xiang et al. (2017)
hispidinervum (OE)
N-3 PUFA N-3 PUFA Previne a depressão induzida por Aβ Morgese et al. (2018)

Antioxidante, antiinflamatório, inibidor Ay et al. (2016),

Dziwenka and Coppock
de AChE, neuroprotetor, mitoprotetor, (2016), Islam et al.
Quercetina Quercetina (2013), Sabogal-
peptídeo Aβ reduzido no cérebro e Guaqueta et al. (2015),
melhora a cognição e a memória Teodoro et al. (2016)

693
 Tabela 1 Extratos de plantas/nutracêuticos com potencial para melhorar direta ou indiretamente a
cognição e a memória
Extrato vegetal / Constituintes farmacológicos / Atividades biológicas /
Referências
nutracêutico biológicos farmacológicas
Antioxidante, antiinflamatório, Marambaud et al. (2005),
aumenta a função mitocondrial, Porquet et al. (2014),
Resveratrol Resveratrol Risuleo (2016), Teodoro
neuroprotetora e evita a perda de et al. (2016), and
Sadhukhan et al. (2018)
memória
Antioxidante, anti-β-amilóide, Zhang et al. (2016) and
Ácido rosmarínico Ácido rosmarínico Rong et al. (2018)
neuroprotetora e anti-Alzheimer
Bolo de óleo de
semente de
(+/-) - cartatinas A-F (1-6,
cártamo Inibidor de AChE Peng et al. (2017)
respectivamente)
(Carthamus
tinctorius L.)
Inibidor da AChE, antinociceptivo,
antidepressivo, ansiolítico, Ghadrdoost et al. (2011),
Picrocrocina, crocina,
Açafrão (Crocus antiinflamatório, antioxidante, Geromichalos et al.
crocetina, dimetil crocetina e (2012), Ghaffari et al.
sativus) antiamiloidogênico e prevenção do (2015) and Adalier, and
safranal Parker (2016)
comprometimento da cognição e da
memória
Salvia
1,8-cineol e α-pineno Inibidor de AChE Perry et al. (2000, 2003)
lavandulaefolia
70-Multijuguinona e 120-
Senna multijuga Inibidor de AChE Serrano et al. (2010)
hidroxi-70-multijuguinona
Fatores neurotróficos aumentados
(BDNF), normetanefrina e
noradrenalina e impedimento do Ding et al. (2013),
Soja (Glycine max Di e tripeptídeos, isoflavona, Maebuchi et al. (2013),
comprometimento cognitivo. A Katayama et al. (2014),
L.) genisteína Ma et al. (2015), Imai et
genisteína alivia a inflamação al. (2017)
induzida por Aβ através do receptor
toll-like 4/NFkB
Melhora a aprendizagem e a
Taurina Taurina El Idrissi (2008)
retenção
Sitoindosídeos VII-X, Bhattacharya et al.
Antioxidante, antiinflamatório, (1995, 1997), Schliebs et
Withania witanolidas, glicowitanolidas, al. (1997), Choudhary et
imunomodulador, al. (2004), Kuboyama et
somnifera witanosídeo I, sulfóxido de
antienvelhecimento, inibidor de AChE al. (2006), Bharti et al.
witanolida (2016)

Zephyranthes
3-epimacronina e licoramina Inibidor de AChE Cortes et al. (2015)
carinata
Abreviaturas: AChE acetilcolinesterase, BuChE butirilcolinesterase, BDNF fator neurotrófico derivado do
cérebro, OE óleo essencial

O comprometimento da cognição também foi melhorado por nutracêuticos de fontes não

vegetais. Por exemplo, a anchova (Coilia mystus) demonstrou conter um peptídeo,
hidrolisado de proteína de anchova (AHP), que pode regular a atividade da AChE e
também pode exercer propriedades antioxidantes e neuroprotetoras (Zhao et al. 2017b).
Relata-se que a principal proteína da geléia real 1 previne o comprometimento da
cognição (Chen et al. 2017; Lin et al. 2018). A melatonina da glândula pineal parece
oferecer efeito positivo no declínio cognitivo e ansiedade relacionada e distúrbios do ciclo
do sono em cães idosos.
694
Este capítulo descreve várias opções, como extratos de plantas, compostos bioativos de
invertebrados e vertebrados e muitos outros nutracêuticos para prevenção e tratamento
de CDS em caninos e felinos idosos.

2. Disfunção Cognitiva Canina

Cães idosos, com mais de 8 anos, podem desenvolver espontaneamente alterações
cerebrais neurodegenerativas e comprometimento associado da função cognitiva (Schütt
et al. 2015). Disfunção cognitiva canina (CCD) ou síndrome de disfunção cognitiva (CDS)
em cães e gatos (Landsberg et al. 2012; Vite e Head 2014) parece ser a contraparte
canina/felina da demência senil do tipo Alzheimer (Rofina et al. 2006). Schütt et al. (2015)
afirmou que a prevalência de CCD varia de 14 a 35% em cães de companhia com mais
de 8 anos de idade, e o risco de desenvolver CDS aumenta exponencialmente com o
aumento da idade (Azkona et al. 2009; Osella et al. 2007; Neilsen et al. 2001: Salvin et al.
2010, 2011). Mudanças no comportamento e nas rotinas diárias são consideradas os
marcadores clínicos mais importantes de disfunção cognitiva em cães e gatos idosos.

3. Fisiopatologia
A biologia celular e molecular da memória é muito complexa (Kandel 2012). Os cérebros
de cães e gatos mais velhos podem apresentar várias alterações anatômicas e
fisiológicas (Vite e Head 2014; Seibert 2017). Essas alterações podem incluir uma
redução na massa cerebral geral (incluindo atrofia do córtex cerebral e gânglios basais),
uma redução no número de neurônios, gliose generalizada, degeneração da substância
branca, desmielinização, degeneração neuro axonal, aumento do tamanho ventricular,
fibrose meníngea calcificação e presença de placas β-amilóide (Aβ). Ocorrem alterações
funcionais, como depleção de neurotransmissores (norepinefrina, serotonina e dopamina),
declínio no sistema colinérgico, aumento da atividade da monoamina oxidase B e redução
dos antioxidantes endógenos (Landsberg e Araujo 2005; D'Amilio et al. 2018). Sechi et al.
(2015) também observaram uma diminuição do fator neurotrófico derivado do cérebro
(BDNF) em correlações séricas com declínio cognitivo e déficits de LTP e memória. Outro
fator etiopatológico no declínio cognitivo é relatado como a neuroinflamação por meio da
hiperativação da microglia (Balducci e Forloni 2018).

695
3.1 Sistema colinérgico e cognição

Neurotransmissão colinérgica no sistema nervoso central (SNC) desempenha um papel

importante na modulação dos processos cognitivos, como aprendizagem, memória,
despertar e sono profundo, bem como na modulação da atividade locomotora (Terry e
Buccafusco 2006; Wevers 2011). Em doenças neurodegenerativas, como CDS ou DA, um
deficit de ACh e um aumento nos receptores NMDA e radicais livres (estresse oxidativo)
são as principais modulações subjacentes (Zhao e Zhao 2013).

3.2 Estresse oxidativo, neuroinflamação e neurodegeneração

O cérebro é muito vulnerável ao estresse oxidativo por causa de (1) alto consumo de
oxigênio (> 20% do oxigênio total do corpo), (2) alta porcentagem de PUFAs e (3) baixa
capacidade antioxidante. No cérebro envelhecido, a geração excessiva de radicais livres
ativa a glia/astrócitos e leva à neuroinflamação (Seo et al. 2018). O estresse oxidativo
também foi implicado na neurotoxicidade induzida por Aβ ou tau. Além disso, as
evidências sugerem que o estresse oxidativo pode aumentar a produção e agregação de
Aβ e facilitar a fosforilação e polimerização de tau, formando assim um ciclo vicioso que
promove a iniciação e progressão da neurodegeneração e DA (Zhao e Zhao 2013).

3.3 Mudanças Patológicas

Recentemente, Schmidt et al. (2015) descreveram que o cérebro envelhecido desenvolve

uma deposição anormal de Aβ no parênquima cerebral e nas paredes dos vasos
sanguíneos cerebrais. O córtex pré-frontal é a primeira área afetada, seguido pelo córtex
temporal, o hipocampo e o córtex occipital. Esses investigadores enfatizaram ainda que,
independentemente da posição, a quantidade e a extensão dos depósitos de Aβ se
correlacionam com a gravidade do comprometimento cognitivo.

4. Diagnóstico de disfunção cognitiva

Mudanças no comportamento e nas rotinas diárias são consideradas os marcadores
clínicos mais importantes de disfunção cognitiva em cães idosos (Schütt et al. 2015).
Esses pesquisadores mediram a concentração plasmática de Aβ 1-40 e Aβ1-42 e observaram
os níveis mais altos de Aβ 1-42 no declínio da cognição canina (CCD). As concentrações de
plasma Aβ1–40 e Aβ1–42 e a razão Aβ1–42/Aβ1–40 podem ser usadas como biomarcadores de
CCD. Curiosamente, Schütt et al. (2015) afirmaram que cães com CCD não são tão
prejudicados cognitivamente quanto pessoas com doença de Alzheimer (AD) e, portanto,
podem corresponder à fase de AD precoce ou de comprometimento cognitivo leve (MCI).
Cães com CCD geralmente apresentam sinais clínicos específicos, como vaguear sem
696
rumo, olhar fixamente para o espaço, evitar ser acariciado e dificuldade em encontrar
comida caída.

Os veterinários costumam fazer um diagnóstico de CCD / CDS com base na sigla DISHA
(desorientação, mudanças de interação, ciclo sono / vigília, sujeira na casa, mudanças no
nível de atividade) (Landsberg et al. 2003; Landsberg 2005). Em resumo, DISHA pode ser
descrito como:

• Desorientação – mudanças na consciência espacial, perda da capacidade de contornar

obstáculos familiares e comportamento errante

• Mudanças de interação – diminuição do interesse em interações sociais, carinho,

cumprimentos, comportamentos dependentes ou “pegajosos”

• Mudanças no ciclo sono/vigília – inquietação ou caminhadas frequentes durante a noite,

aumento do sono durante o dia

• Sujeira da casa – não permite mais que o proprietário saiba quando precisa sair,
eliminação interna, incontinência

• Mudanças no nível de atividade – diminuição da exploração e resposta a coisas,

pessoas e sons ao redor da casa, diminuição da arrumação, diminuição do apetite,
aumento da ansiedade, incluindo inquietação, agitação e/ou angústia de separação

Além dos sinais clínicos, os veterinários devem examinar os cães usando a Escala de
Demência Canina (CADES). CADES é uma escala de classificação altamente sensível e
validada estatisticamente para CDS canino. A escala contém 17 itens não redundantes,
distribuídos em 4 domínios relevantes: (1) orientação espacial, (2) interações sociais, (3)
ciclos de sono/vigília e (4) sujeira da casa. Recentemente, Madaria et al. (2015) relataram
que cães com comprometimento cognitivo leve freqüentemente tinham interações sociais
prejudicadas, enquanto cães com disfunção cognitiva moderada tinham interações sociais
e ciclos de sono/vigília anormais. Cães com disfunção cognitiva severa exibiram
comprometimento em todos os quatro domínios. Vale ressaltar que nenhum cão com CCD
pode apresentar todos esses sinais. Para obter mais detalhes, os leitores devem consultar
Landsberg et al. (2012).

Recentemente, Hampel et al. (2018) descreveu que um biomarcador baseado em

“ômicas” abrangente pode guiar a exploração de mudanças morfofuncionais em todo o
sistema espaço-temporal ao longo do continuum da fisiopatologia da AD ou CDS, da
adaptação à falha irreversível. Biomarcadores de AD em humanos e CCD em cães foram
descritos em detalhes em outro lugar (Galasko 2006; Schütt et al. 2015; Pitt e Leung
2018).
697
5. Prevenção e tratamento da disfunção cognitiva
5.1 Extratos de plantas e seus ingredientes

Foi descoberto que um grande número de plantas e seus ingredientes possuem

propriedades inibidoras de AChE e/ou BuChE para tratar DA em humanos (Trevisan et al.
2003) e CDS em animais (não publicado). Muitas plantas, além da propriedade inibidora
de ChE, têm deposição antioxidante, antiinflamatória, imunomoduladora, anti-β amiloide e
muitas outras propriedades, normalizando assim os níveis de neurotransmissores e
melhorando a cognição e a memória de aprendizagem em caninos e felinos. Algumas
plantas importantes são discutidas aqui resumidamente e, junto com elas, as demais
estão listadas na Tabela 1.

5.1.1 – Polygonum hydropiper L.

Ayaz et al. (2015) analisaram os óleos essenciais de flores e folhas de Polygonum

hydropiper L. e encontraram cariofileno como o principal componente em flores e
decahidronaftaleno em folhas. Em um estudo in vitro, esses compostos exibiram
atividades inibitórias e antioxidantes de ChE dependente da dose, sendo essas atividades
maiores nas folhas do que nas flores (Ayaz et al. 2015). Os valores de IC50 para a
inibição da AChE por óleos essenciais de folhas e flores foram relatados como 120 e 220
μg/ml e 3,77 g/mL, respectivamente; e para a inibição de BuChE foram 130 e 225 μg/ml e 3,77 g/mL,
respectivamente.

5.1.2 – Espécies de Pimenta

Os óleos essenciais derivados de certas espécies de pimenta (Piper austrosinense, P.

puberulum, P. flaviflorum, P. betle e P. hispidinervum) mostraram forte atividade inibitória
da AChE com valores de IC50 na faixa de 1,51–13,9 mg/mL. O óleo essencial mais ativo
de P. hispidinervum continha um potente composto bioativo, asaricina, com um valor de
IC50 de 0,44 ± 0,02 mg/mL contra AChE, comparável à galantamina com um IC50 de 0,15
± 0,01 mg/mL (Xiang et al. 2017). O estudo sugeriu que os óleos essenciais de pimenta
podem ser uma boa fonte de produto natural para compostos com potencial terapêutico
para DA ou outras doenças do SNC. Também existe a possibilidade de que o óleo possa
ser usado contra CCD/CDS.

5.1.3 – Angelica archangelica e Geranium sylvaticum

Sigurdsson e Gudbjarnason (2007) pesquisaram várias plantas medicinais islandesas

quanto à propriedade de inibição da AChE. Os extratos etanólicos das sementes de
Angelica archangelica e da parte aérea de Geranium sylvaticum mostraram-se eficazes
com valores de IC50 de 2,2 mg/mL e 3,56 mg/mL, respectivamente. A análise do extrato
698
de A. archangelica revelou a presença de dois princípios ativos principais (imperatorina e
xantotoxina), com a xantotoxina sendo mais potente do que a imperatorina, com valor de
IC50 de 155 μg/ml e 3,77 g/mL (0,72 mM) e 274 μg/ml e 3,77 g/mL (1,01 mM), respectivamente. Curiosamente,
Sigurdsson e Gudbjarnason (2007) encontraram uma interação sinérgica entre o extrato
de A. archangelica e G. sylvaticum para a atividade anticolinesterásica.

5.1.4 – Bacopa monnieri

Bacopa monnieri, frequentemente chamado de “Brahmi” que significa Criador, é uma

pequena erva rasteira comumente encontrada em áreas pantanosas em toda a Índia. Os
principais ingredientes ativos em Brahmi são saponinas esteróides chamadas
bacopasides. Em humanos, eles são usados para muitos distúrbios do SNC, como
disfunção cognitiva, epilepsia, convulsões, ansiedade e depressão. Em humanos,
descobriu-se que o Brahmi melhora a velocidade do processamento da informação visual
e a precisão da memória operacional espacial, bem como reduz os níveis de ansiedade
subjetiva (Stough et al. 2001; Morgan e Stevens 2010). Foi mencionado que os
bacopasides atravessam a BBB via difusão livre mediada por lipídios devido à sua
natureza hidrofóbica e efeitos na saúde e função do cérebro; no entanto, não há
evidências definitivas para apoiar esse fato (Pitt e Leung 2016). Em estudos in vitro e
experimentais, Brahmi foi relatado para melhorar a cognição por vários mecanismos,
como suas propriedades antioxidantes, antiperoxidação lipídica e neuroprotetoras, e pela
prevenção da morte celular (Limpeanchob et al. 2008; Hosmani 2009; Saini et al. 2012;
Velaga et al. 2014; Le et al. 2015). Além disso, foi relatado que Brahmi fornece efeitos
neuroprotetores e de restauração da memória devido à capacidade dos bacopasides de
alterar a dinâmica do Ca2+ em células musculares lisas induzindo vasodilatação
(Kamkaew et al. 2011), fornecendo assim mais oxigênio e glicose (revisado em Pitt e
Leung 2016). Além disso, os níveis de neurotransmissores (serotonina, ACh, GABA e
glutamato) são relatados como elevados no hipocampo de ratos alimentados com Brahmi,
o que parece facilitar a atividade neuronal e a sinalização sináptica (Ranjan et al. 2011).
Em um estudo in vitro, Das et al. (2002) também demonstraram que o extrato de B.
monnieri exerceu atividade anti-ChE em camundongos.

Em um estudo experimental, Piyabhan et al. (2016) demonstraram que o tratamento com

Brahmi antes da fenciclidina (PCP, 2 mg/kg, ip, duas vezes ao dia) evitou o
comprometimento cognitivo ao elevar o transportador de glutamato vesicular 3 (VGLUT3)
no córtex pré-frontal (PFC), estriado e hipocampo (Setores CA1-3) de ratos. Os ratos que
receberam Brahmi após o tratamento com PCP restauraram o déficit cognitivo,
aumentando VGLUT3 no PFC e estriado. As descobertas deste estudo e de outros
699
sugerem que Brahmi pode ser uma nova fronteira de prevenção e restauração do deficit
cognitivo associado à DA, DP ou esquizofrenia.

A dose recomendada de extrato de B. monnieri em cães e gatos é de 250 mg e 100

mg/dia, respectivamente.

5.1.5 – Curcuma longa (cúrcuma/curcumina)

A raiz da Curcuma longa contém açafrão, que é composto por uma série de compostos
chamados curcuminóides. Os principais curcuminóides são a curcumina, a
desmetoxicurcumina e a bisdemetoxicurcumina. A cúrcuma tem sido usada há milhares
de anos para curar humanos e animais de uma série de doenças. Atualmente, a
curcumina é comumente usada para prevenir ou tratar doenças, como dor, câncer,
acidente vascular cerebral, DA, epilepsia, depressão, obesidade, diabetes e distúrbios
metabólicos (Javeri e Chand 2016). Muitos estudos evidenciaram a ação antiinflamatória
da curcumina exercida por meio da ativação de fatores de transcrição, como NF kB e AP-
1, e suas propriedades antioxidantes e citoprotetoras (Chen et al. 2006; Maheshwari et al.
2006; Risuleo 2016).

Está documentado que o uso de curcumina em baixas doses (~ 50 mg/dia) em longo

prazo pode atrasar ou interromper o início do comprometimento cognitivo nos estágios
iniciais da AD (Chandra et al. 2001; Hamaguchi et al. 2010). Lim et al. (2001) relataram
que a alimentação com curcumina em baixa dose (160 ppm na ração) por 6 meses em
camundongos transgênicos idosos com AD reduziu o marcador astrocítico da proteína
glial fibrilar ácida (GAFP), Aβ insolúvel e Aβ solúvel, com um 43-50 % de redução no nível
de placa. A curcumina também demonstrou se ligar a Aβ e aumentar a depuração cerebral
de Aβ em modelos de camundongo de AD e Aβ40 fibrilar desagregada em estudos in vitro
(Lim et al. 2001; Garcia-Alloza et al. 2007). Em estudos in vivo, camundongos
transgênicos 2576 com acúmulo avançado de amilóide alimentados com curcumina (500
ppm na ração) por 5 meses reduziram os níveis de amilóide e placas. Os achados desses
estudos e outros demonstraram que a curcumina cruza a BBB apesar da baixa dose e
baixa biodisponibilidade (revisado em Javeri e Chand 2016; Sorrenti et al. 2018).

Em estudos experimentais, altas doses de lipopolissacarídeo injetado sistemicamente (5–

10 mg/kg) têm sido amplamente utilizadas para estudar a interação entre a inflamação
periférica e distúrbios neurodegenerativos. O LPS periférico induz a síntese de
mediadores pró-inflamatórios no cérebro, resultando em uma variedade de efeitos
centrais, incluindo disfunção sináptica, degeneração de células neuronais e
comprometimento cognitivo (Qin et al. 2007, 2013). Recentemente, Sorrenti et al. (2018)
demonstrou que a curcumina (50 mg/kg) administrada por via oral por dois dias
700
consecutivos antes de uma única injeção ip de uma alta dose de LPS (5 mg/kg) em
camundongos adultos jovens preveniu a resposta imune, neuroinflamação e
comprometimento da memória. Além disso, o tratamento de curto prazo com curcumina,
administrado no momento do desafio com LPS, antecipou a recuperação das deficiências
de memória observadas 1 mês após o estímulo inflamatório, quando os camundongos se
recuperaram completamente da neuroinflamação aguda. Os resultados desta
investigação sugeriram que o efeito preventivo da curcumina na inibição dos efeitos
agudos da neuroinflamação pode ser valioso na redução das consequências a longo
prazo da inflamação do cérebro, déficits cognitivos e disfunção da memória.

A curcumina parece ser um nutracêutico altamente promissor para a prevenção e

tratamento da deficiência cognitiva em caninos e felinos.

5.1.6 – Ginseng

Ginseng é a raiz das plantas (gênero Panax), incluindo ginseng chinês (P. notoginseng),
ginseng japonês (P. japonica), ginseng coreano (P. ginseng), ginseng vietnamita (P.
vietnamenses) e ginseng americano (P. quinquefolius). O ginseng é cultivado ou cresce
em regiões montanhosas (selvagem) e produzido principalmente na China, Coréia do Sul,
Estados Unidos e Canadá. O extrato da raiz contém muitos ingredientes ativos, chamados
ginsenosídeos (saponinas do ginseng). O conteúdo de ginsenosídeos difere nas
diferentes espécies de ginseng, bem como nas diferentes partes da planta. A quantidade
total de saponinas do tipo dammarano em P. notoginseng é relatada como sendo maior do
que em P. ginseng ou P. quinquefolius (Peng et al. 2018). As saponinas do tipo
dammarane podem ser divididas em dois grupos: protopanaxadiol e protopanaxatriol. Um
grande número de ginsenósidos foi identificado em P. ginseng (Choi 2008; Yang e Wu
2016) e em P. notoginseng (Peng et al. 2018). A eficácia do P. ginseng no cérebro e no
sistema nervoso foi investigada em vários estudos (revisados em Yang e Wu 2016). Os
ginsenósidos não cruzam facilmente a BBB e apenas pequenas quantidades podem ser
detectadas no cérebro após a administração oral. No entanto, metabólitos de
ginsenosídeos cruzam a BBB e produzem efeitos diretos nas células neuronais (revisado
em Pitt e Leung 2016).

Em geral, o P. ginseng é considerado um estimulante da cognição. Xing et al. (2008)

revisaram dados de estudos com animais e relataram que os ginsenosídeos Rb1, Rc,
Rg1, Rg2 e Rg3 tiveram efeitos no SNC. Ambos os ginsenosídeos Rg1 e Rb1
aumentaram as atividades do SNC, ao passo que os ginsenosídeos Rb1 tinham uma
potência muito mais fraca. A melhora da cognição foi atribuída à maior proporção de
ginsenosídeo Rg1/Rb1 (Chen et al. 2008). Liu et al. (2011) descobriram que o
701
ginsenosídeo Rb1 melhorou a função cognitiva e a sobrevivência de neurônios do
hipocampo recém-nascidos em ratos adultos devido aos seus efeitos antiestresse. Os
ginsenosídeos Rg1 e Rb1 também ajudaram a facilitar a aquisição e recuperação de
memória (Wee et al. 2011). Além disso, ginsenosídeo Rg1, Rg3 e Re foram encontrados
para reduzir o peptídeo β amilóide em cérebros de animais após uma dose única (Chen et
al. 2006).

Foi relatado que o ginsenosídeo-Rh1 ativa a expressão do gene dependente do receptor

de estrogênio (ER) (Lee et al. 2003), e a atividade do ER está correlacionada com a
função de memória. No nível celular, a atividade ER promove muitas mudanças
associadas à memória, incluindo aumentos na densidade da coluna dendrítica, expressão
do receptor NMDA e magnitude da potenciação de longo prazo (LTP) (Smith e McMahon
2005). Muitos ensaios clínicos foram conduzidos em pacientes saudáveis, bem como em
pacientes com deficiência cognitiva. Em alguns estudos, o ginseng foi encontrado para
fornecer melhorias na cognição e memória, enquanto em outros estudos, muito pouco ou
nenhum efeito (Attele et al. 1999; Kennedy et al. 2001; Scholey e Kennedy 2002; Xing et
al. 2008; Kim et al. 2015; Asian ginseng 2016). O ginseng tem sido usado em animais de
estimação por vários anos para tratar várias doenças (doença de Addison, insuficiência
cardíaca congestiva, diabetes mellitus, hepatite crônica de baixo grau) e melhorar a
cognição e a memória, mas nenhum ensaio clínico controlado foi relatado em caninos ou
felinos.

5.1.7 – Ginkgo biloba

Acredita-se que o Ginkgo biloba seja a árvore viva mais antiga do mundo, datando de
mais de 250 milhões de anos atrás. Ela cresce em muitos países, incluindo Ásia, América
do Norte, Europa, Nova Zelândia e Argentina. G. biloba é um dos nutracêuticos mais
populares usados nos Estados Unidos e na Europa. Seu extrato ou ingrediente(s) ativo(s)
têm sido usado por milhares de anos em uma série de doenças. O extrato da folha de G.
biloba consiste em trilactonas de terpeno (ginkgolídeos A, B e C e bilobalida), ácido
ginkgólico e glicosídeos de flavonóides (quercetina, caempferol e isorhamnetina) (Wang et
al. 2014).

Gurley et al. (2012) descreveu seu uso terapêutico para fluxo sanguíneo insuficiente,
déficits de memória, distúrbios cognitivos, AD, depressão, vertigem, zumbido e
claudicação intermitente. Em humanos, G. biloba foi indicado para aumentar a memória
(Dugoua et al. 2006). A OMS aceitou os extratos padronizados como EGb 761 e Li 1370
como medicamentos antidemência com base nos estudos farmacológicos in vitro e in vivo

702
e nos numerosos estudos clínicos que apoiam a eficácia do EGb 761 no SNC ao tomar
um 240 mg por dia dose.

Estudos farmacológicos e farmacocinéticos sugerem que o alvo de EGb 761 é o SNC

(Ude et al. 2013). Pode melhorar o fluxo sanguíneo cerebral em 50-100%, aumentar a
captação e utilização de glicose, reduzir a produção de corticosteroides e melhorar o
metabolismo mitocondrial e a produção de ATP, bem como afetar gradientes iônicos
intracelulares e extracelulares (revisado em Dziwenka e Coppock 2016). EGb 761
também demonstrou reduzir a disfunção cognitiva em um modelo de disfunção vascular
em gerbils. O estudo mostrou uma recuperação significativa da memória espacial com
tratamento pós-isquêmico regular (Mohanta et al. 2014).

Em uma série de ensaios clínicos, o EGb provou melhorar a cognição e a memória

(Lebars et al. 1997; Ihl et al. 2011; Garvilova et al. 2014). Em um estudo clínico duplo-
cego, pacientes com DA leve a moderada receberam EGb 761 (240 mg) ou placebo
diariamente por 24 semanas. Os pacientes tratados com EGb 761 melhoraram
significativamente quando avaliados no Short Cognitive Performance Test (Syndrome
Kurz Test, SKT) e no Neuropsychiatric Inventory (NPI) (Ihl et al. 2011). Em um estudo
semelhante, Garvilova et al. (2014) relataram que EGb 761 melhorou os sintomas
neuropsiquiátricos e o desempenho cognitivo com comprometimento cognitivo leve (MCI).
No entanto, em alguns ensaios clínicos, nenhuma diferença foi encontrada entre G. biloba
e os grupos de placebo.

G. biloba pode proteger o dano neuronal por sua ação direta nos neurônios ou
indiretamente, aumentando o fluxo sanguíneo e a ação antioxidante (Chan et al. 2007).
DeFeudis e Drieu (2000) demonstraram que as altas concentrações de EG 761
aumentaram a captação de norepinefrina radiomarcada, dopamina e 5-HT nos
sinaptossomas do cérebro de rato. EGb 761 influencia a neuromodulação da transmissão
adrenérgica, e isso poderia explicar o efeito positivo na cognição observado em
camundongos e humanos. Estudos in vivo em camundongos revelaram que no extrato de
EGb 761, os terpenóides atuam diminuindo a geração de radicais livres, e os flavonóides
atuam eliminando os radicais livres (DeFeudis e Drieu 2000). Além do efeito
antiapoptótico, ginkgolídeos e bilobalida em EGb 761 protegem as mitocôndrias de danos
relacionados à idade e para melhorar a função mitocondrial e o metabolismo energético
(revisado em Dziwenka e Coppock 2016). Os dois mecanismos propostos para proteção
mitocondrial são (1) inibição do fator ativador de plaquetas (PAF) no receptor PAF e (2)
bloqueio dos canais de cloreto ativados por glicina em receptores de glicina em neurônios
do hipocampo (Ude et al. 2013). Ginkgolide B é comprovadamente o protetor mitocondrial
703
mais potente. Em um estudo in vitro, o extrato de G. biloba também exerceu atividade
anticolinesterásica em camundongos (Das et al. 2002).

Em caninos, os produtos de G. biloba são indicados em condições de saúde, como

comprometimento da cognição/memória, depressão, ansiedade e zumbido. Em um ensaio
clínico aberto, o extrato de folha de Ginkgo foi administrado a 42 cães idosos em uma
dose diária de 40 mg/10 kg de peso corporal por 8 semanas (Reichling et al. 2006). Os
resultados revelaram que o extrato de folha de Ginkgo parece ser um agente eficaz que
fornece um suplemento dietético seguro para cães idosos com distúrbios
comportamentais relacionados à idade. G. biloba foi incluído no Senilife®, que é indicado
para caninos com disfunção cognitiva, mas devido a evidências limitadas, oferece fraco
efeito antidemência. Senilife® também contém resveratrol, que carece de evidências
científicas para apoiar que melhora a cognição ou a memória.

5.1.8 – Crocus sativus L. (açafrão)

O açafrão, comumente referido como “ouro vermelho”, tempero frequentemente usado, foi
identificado como um agente de aprimoramento de memória (Adalier e Parker 2016). O
açafrão possui compostos bioativos (crocina, crocetina, dimetilcrocetina e safranal), que
podem exercer atividades antioxidantes, antiinflamatórias, antinociceptivas, anti-ChE e
anti-amiloidogênicas. Geromichalos et al. (2012) relataram as atividades inibitórias da
AChE da crocetina, dimetilcrocetina e safranal com valores de IC50 de 96,33, 107,1 e
21,09 μg/ml e 3,77 M, respectivamente. A análise cinética mostrou que o safranal interage apenas
com o sítio de ligação da AChE, mas a crocetina e a dimetilcrocetina se ligam
simultaneamente aos sítios catalíticos e aniônicos periféricos. Papandreou et al. (2006)
desvendou o mecanismo subjacente do açafrão na DA como antioxidante e a atividade
inibitória na agregação de Aβ. Trans-crocin-4 (o éster digentibiosil da crocetina) foi
considerado o mais potente em comparação com outros constituintes do açafrão. Devido
a essas propriedades, o açafrão foi considerado muito eficaz no comprometimento
cognitivo e na AD (Ghadrdoost et al. 2011; Geromichalos et al. 2012; Ghaffari et al. 2015).
Em um estudo clínico, os pacientes que receberam 15 mg de extrato de açafrão duas
vezes ao dia por 22 semanas tiveram um resultado melhor nas funções cognitivas do que
o grupo placebo (Akhondzadeh et al. 2010). Em outro ensaio clínico, o açafrão foi
considerado tão eficaz quanto o donepezila no tratamento de pacientes com DA leve a
moderada (revisado em Adalier e Parker 2016). Nenhum ensaio clínico foi relatado sobre
o açafrão em CCD/CDS.

5.1.9 – Monsonia angustifolia

704
Monsonia angustifolia é um vegetal nativo da Tanzânia e possui vários compostos
bioativos, como a justicidina A, 5-metoxijusticidina A, chinensinaftol, éter metílico de
retrochinensinaftol e talilactona. Entre esses compostos, descobriu-se que a justicidina A
possui uma propriedade neuroprotetora. Gu et al. (2016) relataram que a justicidina A
protege as células SH-SY5Y da morte celular neuronal induzida por Aβ25-35 por meio da
inibição da hiperfosforilação de tau e indução da autofagia por meio da regulação da
atividade de GSK-3β e AMPK e também forneceu alguns insights sobre a relação entre
hiperfosforilação da proteína tau e autofagia. Chun et al. (2017) investigaram o efeito do
extrato etanólico de M. angustifolia na produção de Aβ e na capacidade de aprendizagem
espacial como proteção contra AD. Em um estudo in vitro, a formação de peptídeos Aβ foi
significativamente reduzida em células HeLa. Em um estudo in vivo, camundongos
Tg2576 foram tratados com extrato de M. angustifolia por 6 meses e, em seguida,
submetidos a um labirinto aquático de Morris e a um novo teste de reconhecimento de
objetos. As descobertas revelaram que os camundongos tratados mostraram déficits
comportamentais melhorados dos camundongos transgênicos AD e níveis reduzidos de
Aβ42 insolúvel no córtex cerebral e hipocampo. A justicidina A diminuiu significativamente
a formação de Aβ em células transfectadas com APPsw. Esses estudos sugerem que o
extrato de M. angustifolia ou justicidina A tem potencial para ser desenvolvido como um
tratamento para AD em humanos e CDS em caninos e felinos.

5.1.10 – Plantas Contendo Berberina

A berberina (BBR), um alcalóide quaternário de benzilisoquinolina não básico, pode ser

obtida de várias plantas (Berberis vulgaris, B. aristata, B. aquifolium, Hydrastis
canadensis, Coptis chinensis, Argemone mexicana e outras). Atualmente, o BBR também
está disponível na forma sintetizada (cloreto de BBR e sulfato de BBR). O BBR derivado
de plantas é considerado de alta potência e mais seguro do que a forma sintetizada. Por
milhares de anos, extratos de plantas contendo BBR foram usados em muitas condições
de saúde, incluindo diabetes, hiperlipidemia, hipertensão, acidente vascular cerebral
isquêmico, diarreia microbiana, câncer, etc. Em uma série de relatórios, o alcalóide BBR
foi indicado em doenças neurológicas, como DA, PD, ansiedade, depressão e epilepsia
(Peng et al. 2004; Yoo et al. 2006; Zhu e Qian 2006; Peng et al. 2007; Kulkarni e Dhir
2008, 2010; Ye et al. 2009; Kumar et al. 2015).

Tan et al. (2013) investigaram a distribuição nos tecidos e a farmacocinética do BBR e

seus metabólitos em ratos após a administração oral de BBR (200 mg/kg). Os resultados
revelaram que a berberina foi rapidamente distribuída no fígado, rins, músculos, pulmões,
cérebro, coração, pâncreas e gordura em ordem decrescente de sua quantidade. As
705
concentrações de berberina foram maiores nos tecidos do que no plasma. Metabólitos do
BBR, como talifendina, berberrubina e jatrorrizina, foram detectados no fígado e nos rins.
Estudos farmacocinéticos de Wang et al. (2004, 2005) confirmaram ainda que a berberina
atravessa a BBB e se acumula no hipocampo, onde fornece efeitos antiapoptóticos e
neuroprotetores.

A berberina exerce múltiplas ações farmacológicas, como antioxidantes, antiinflamatórios,

neuroprotetores, analgésicos, ansiolíticos e imunomoduladores, proporcionando efeitos
preventivos e terapêuticos em condições neurológicas (Kulkarni e Dhir 2008, 2010; Kumar
et al. 2015; Hussein et al. 2015; Hussein et al. . 2018). Em uma investigação conduzida
em ratos sobrecarregados de alumínio, a berberina melhorou o aprendizado e a memória
e protegeu os neurônios do hipocampo da morte normalizando as atividades de AChE,
ChAT, SOD e MAO-B e o conteúdo de MDA (Zhang et al. 2009). Kulkarni e Dhir (2008,
2010) e Kumar et al. (2015) relataram que a administração aguda ou crônica de BBR (5
mg/kg, ip) por 15 dias aumentou os níveis de neurotransmissores (norepinefrina,
dopamina e 5-HT) em regiões discretas do cérebro. Seu papel neuroprotetor também é
atribuído à sua capacidade de bloquear os canais de potássio nos neurônios CA1 do
hipocampo, levando à supressão da apoptose (Wang et al. 2004). A taxa de morte celular
de neurônios tratados com BBR (5 μg/ml e 3,77 mol/L) foi significativamente menor do que a de
neurônios não tratados. Além disso, foi relatado que o BBR protege a região CA1 do
hipocampo de lesão isquêmica ao inibir a imunorreatividade do receptor NMDA em
cérebros de gerbilos isquêmicos (revisado em Ye et al. 2009). Hussein et al. (2018)
demonstraram que ratos pré expostos a uma mistura de metais pesados (Al, 50 mg/kg;
Cd, 5 mg/kg; e Fl, 20 mg/kg) diariamente por 90 dias, quando tratados com BBR (50
mg/kg/dia, po) por um mês, diminuiu a expressão de AChE e inibiu sua atividade no tecido
cerebral e normalizou a produção de TNF-a, IL-1β, IL-6 e IL-12. Além disso, o BBR inibiu
a formação de Aβ42 e melhorou a cognição e a memória. Em alguns outros estudos, foi
relatado que o BBR previne ou atrasa o processo de AD (Abd El-Wahab et al. 2013; Cai et
al. 2016). Assim, o BBR parece ser uma nova modalidade preventiva e terapêutica para
CDS em caninos e felinos.

Alcalóides de protoberberina quaternários, como a estefaranina, a ciclanolina e a N-metil-

estefolidina, foram isolados de uma planta medicinal tailandesa Stephania venosa Spreng
(Ingkaninan et al. 2006). Esses alcalóides expressaram atividade inibitória da AChE com
valores de IC50 de 14,1±0,81, 9,23±3,47 e 31,30±3,67 μg/ml e 3,77 M, respectivamente, e têm
grande potencial para anti CDS em caninos e felinos.

706
5.1.11 – Huperzia serrata (musgo dentado Chinês)

Huperzine A, derivada de Huperzia serrata, é comumente usada para o tratamento de DA

na China. Ele exerce propriedades anti AChE, antagonista do receptor NMDA e
propriedades neuroprotetoras (Landsberg et al. 2012). Pacientes com AD que receberam
huperzine A mostraram melhora na função cognitiva geral, estado clínico global,
desempenho funcional e redução do distúrbio comportamental em comparação com
pacientes que tomaram placebos. Assim, a huperzine A tem potencial como nutracêutico
para o tratamento de CDS em cães idosos.

5.1.12 – Peptídeos de Soja e Isoflavonas

Atualmente, as proteínas da soja estão sendo utilizadas como fonte de nutrientes em todo
o mundo. Essas proteínas são bem conhecidas por diferentes propriedades funcionais e
são amplamente reconhecidas como uma fonte potencial de peptídeos bioativos
(Katayama et al. 2014; Imai et al. 2017). Foi relatado que os peptídeos de soja exibem
uma série de propriedades funcionais, como hipocolesterolêmica, anti-hipertensiva,
antiviral, antiinflamatória e imunoestimulante. Katayama et al. (2014) relataram que a
administração de peptídeos de soja via dieta (7% p/p diariamente por 26 semanas)
suprimiu o declínio cognitivo (Morris-Water Maze for Cognitive Testing) por indução de
fatores neurotróficos derivados do cérebro (BDNF) em camundongos SAMP8. Esses
pesquisadores demonstraram que camundongos alimentados com peptídeos de soja
melhoraram o aprendizado especial e a memória quando comparados com controles.
Curiosamente, os peptídeos de soja aumentaram significativamente os fatores
neurotróficos (NGF, BDNF e NT-3), que promovem a neurogênese, diferenciação
neuronal, neuroproteção e neuroplasticidade. Foi sugerido que o aumento do NT-3 no
cérebro é uma estratégia terapêutica potencial para prevenir o declínio cognitivo
relacionado à idade.

Ding et al. (2013) relataram que 80 mg/kg/ dia de isoflavona de soja por gavagem como
pré-tratamento poderia aliviar o dano estrutural sináptico e antagonizar a regulação
negativa da expressão de proteínas [(1) mRNA e proteína da sinaptofisina e proteína de
densidade pós-sináptica 95 (PDS-95); (2) proteína de calmodulina (CaM), proteína
quinase II dependente de Ca 2+/calmodulina (CaMK II) e proteína de ligação ao elemento
de resposta de cAMP (CREB); e (3) níveis de fosforilação de CaMK II e CREB (pCAM II,
pCREB) induzidos por Aβ1–42 em ratos]. Essas descobertas sugeriram que o pré-
tratamento com isoflavona de soja poderia melhorar o comprometimento da capacidade
de aprendizagem e memória em ratos induzida por Aβ 1–42. A genisteína, uma das
principais isoflavonas da soja, proporcionou um efeito neuroprotetor por meio da atividade
707
antiinflamatória nas células C6 da glia causada pelo Aβ 25–35. Os resultados revelaram que
a genisteína pode (1) aliviar a apoptose celular induzida por Aβ 25-35, (2) prevenir a
liberação de TNF-a e IL-1β, (3) regular positivamente a expressão gênica e protéica de
TLR4, e (4) regular positivamente expressão de 1κBα e AMPK. Esses dadosB-α em células C6. O estudo sugeriu
que a genisteína pode fornecer um efeito neuroprotetor por meio do alívio do estresse
inflamatório induzido por Aβ 25–35, regulando a via de sinalização TLR4/NFkB. A genisteína
pode ser uma terapia adjuvante para o tratamento da síndrome de disfunção cognitiva em
caninos ou felinos.

5.2 Inibidores da monoamina oxidase B (MAO-B)

O aumento relacionado à idade na monoamina oxidase B (MAO-B) é conhecido por

contribuir para doenças neurodegenerativas do SNC (Mazzio et al. 2013). Os inibidores
da MAO-B são indicados para pacientes com AD e DP, pois podem aumentar a neuro
atividade das catecolaminas e aumentar os níveis de dopamina em cães. Atualmente, o
Anipryl® (cloridrato de selegilina, cloridrato de L-deprenil) aprovado pela FDA está
disponível no mercado para o controle de sinais clínicos associados com CDS em cães. A
dose recomendada em cães com CDS é de 0,5-1,0 mg/kg de peso corporal po, uma vez
ao dia, de preferência pela manhã. Os extratos de várias plantas (como Phellodendron
amurense, Cyamopsis psoralioides, Glycyrrhiza glabra, Glycyrrhiza uralensis e Psoralea
corylifolia) foram relatados para forte potência inibidora de MAO-B (Mazzio et al. 2013). A
berberina de Coptis chinensis é conhecida por inibir a atividade da MAO-B. Os extratos de
algumas plantas (como açafrão, confrei, falsa margarida, calota craniana, kava kava,
índigo selvagem, genciana e chá-verde) são identificados com menor potência inibidora
de MAO-B. Extratos de plantas com uma forte atividade inibidora da MAO-B podem ser
usados como nutracêuticos para controlar os sintomas de demência e ansiedade
relacionada e distúrbios do ciclo do sono em cães idosos.

5.3 Proteínas Tampão de Cálcio

As proteínas de ligação ao cálcio estão envolvidas nas atividades e funções celulares. As

células possuem numerosas proteínas de ligação de cálcio que regulam a concentração
de cálcio no citosol ao tamponar o íon de cálcio livre (Moran et al. 2014). A desregulação
do cálcio intracelular foi associada ao envelhecimento e pode estar associada a CDS em
cães (Milgram et al. 2015). Esses pesquisadores avaliaram os efeitos de uma fotoproteína
de tamponamento de cálcio apoaequorin (placebo, 2,5 ou 5 mg) na aprendizagem de
discriminação, atenção e tarefas de memória visual espacial em cães Beagle. Os
resultados revelaram que os cães tratados com apoaequorina apresentaram melhor
desempenho nas tarefas de aprendizagem de discriminação e atenção, mas não nas
708
tarefas de memória espacial. Em outro estudo, esses autores descobriram que cães que
receberam uma dose diária de 10 mg de apoaequorina apresentaram melhora da
cognição igual àqueles que receberam 1 mg de selegilina (Anipryl®). Atualmente, a
apoaequorina é um dos ingredientes do Neutricks®. Moran et al. (2013) determinaram o
nível de efeito adverso não observado (NOAEL) para apoaequorina como 666,7 mg/kg
peso corporal/dia em ratos, e parece não haver preocupação com a segurança devido à
estabilidade incomum da proteína por ingestão (Moran et al. 2013).

5.4 Nutracêuticos com propriedades antioxidantes, antiinflamatórias e

neuroprotetoras

A literatura é abundante mostrando que o estresse oxidativo devido à geração excessiva

de radicais livres é uma das principais causas de CCD/CDS em cães (Skoumalova et al.
2003). Isso se deve ao fato de que o cérebro (1) consome uma alta taxa de oxigênio, (2)
tem uma alta porcentagem de PUFAs e (3) tem baixos níveis de atividade antioxidante
endógena. Estudos também apóiam que alimentos e nutracêuticos enriquecidos com
antioxidantes podem ajudar a reduzir os efeitos do envelhecimento na cognição canina
(Cotman et al. 2002; Sechi et al. 2015). Exemplos de tais dietas incluem semente de
linhaça, espinafre, polpa cítrica, bagaço de tomate, bagaço de uva,
Ácido a lipóico, vitamina C, vitamina E, colina, L-carnitina, etc. Melhoria adicional na
cognição e capacidade de aprendizagem foi observada quando os cães receberam
estímulo/enriquecimento comportamental, além de uma dieta rica em antioxidantes
(Milgram et al. 2005; Opii et al. 2008).

Alguns dos antioxidantes comuns que melhoram a cognição e a memória são discutidos
resumidamente a seguir.

5.4.1 – Ácido Ascórbico

Recentemente, em um modelo de rato de AD, Olajide et al. (2017) investigaram a eficácia

do ácido ascórbico na reversão dos déficits comportamentais induzidos pelo cloreto de
alumínio (AlCl3) e alterações neuropatológicas no córtex pré-frontal e hipocampo. A
administração de ácido ascórbico (100 mg/kg por dia por 15 dias) atenuou
significativamente os déficits comportamentais em ratos por meio da inibição de proteínas
estressoras moleculares e celulares ativadas por AlCl 3. Os resultados revelaram que os
mecanismos primários subjacentes à terapia com ácido ascórbico se relacionam com sua
capacidade de eliminar os radicais livres, prevenir a peroxidação lipídica da membrana,
modular bioenergética neuronal e suas propriedades antiproteolíticas. Parece que a
suplementação de ácido ascórbico pode inibir a progressão de processos
neurodegenerativos e alterações comportamentais em cães e gatos.
709
5.4.2 – Licopeno

O licopeno, um pigmento carotenoide, possui potentes propriedades antioxidantes,

antiinflamatórias e neuroprotetoras. Em um estudo experimental, Zhao et al. (2017a)
determinaram os efeitos do licopeno sobre os defeitos cognitivos induzidos pelo estresse
oxidativo e os mecanismos subjacentes. Os testes comportamentais (teste do labirinto Y,
atividade locomotora e teste do labirinto aquático de Morris) revelaram que a
suplementação crônica de licopeno (50 mg/kg peso corporal/dia) aliviou o
comprometimento cognitivo induzido pela ᴅ-galactose em camundongos CD-1. O licopeno
restaurou os níveis de BDNF e melhorou as alterações histopatológicas no hipocampo de
camundongos. O tratamento com licopeno ativou as expressões de mRNA e elevou
significativamente as atividades das enzimas antioxidantes (HO-1 e NQO-1) e reduziu os
níveis de citocinas inflamatórias (IL-1β e TNF-a) no hipocampo. Além disso, o licopeno
atenuou o dano oxidativo neuronal por meio da ativação da sinalização de Nrf2 e da
inativação da translocação de NFkB em um modelo de célula SH-SY5Y induzida por
H2O2. Zhao et al. (2018) também demonstrou que a suplementação de licopeno reduziu
significativamente a neuroinflamação associada à idade e diminuiu o acúmulo de Aβ1–42
nos cérebros de camundongos CD-1 idosos. Hwang et al. (2017) revelaram que o
licopeno inibiu a apoptose reduzindo ROS e inibindo a disfunção mitocondrial e a
expressão do gene NFkB em células neuronais. Parece que o licopeno tem potencial para
melhorar o comprometimento cognitivo e a memória ao melhorar o estresse oxidativo,
neuroinflamação, ativação da via de transcrição Nrf2 / NFkB e acúmulo de Aβ1–42.

5.4.3 – Vitamina E

A vitamina E (vit. E) é um antioxidante potente que pode ter efeitos benéficos para a
saúde na AD ao melhorar o estresse oxidativo e os radicais livres associados ao Aβ (Yatin
et al. 2000; Morris et al. 2005; Geraldo et al. 2014; Adalier e Parker 2016). Das oito formas
diferentes de vit. E, a tocoferol e g tocoferol são as duas formas mais associadas à
desaceleração do declínio cognitivo (Morris et al. 2005). O a tocoferol é a forma mais
biodisponível de vit. E, e a mais útil na AD (Joshi e Pratico 2012), enquanto o g tocoferol
foi considerado importante para seu efeito neuroprotetor (Morris et al. 2015). Vit E atua
principalmente como um antioxidante de quebra de cadeia e eliminador de radicais,
protegendo as membranas celulares contra os danos oxidativos. Além disso, a vitamina E
regula a produção de ROS, mantém a fosforilação oxidativa na mitocôndria e acelera a
restituição de metabólitos de alta energia.

710
Em uma série de estudos clínicos, a vitamina E (2.000 UI/dia) demonstrou atrasar a
progressão da AD leve a moderada devido aos seus potentes efeitos antioxidantes e
neuroprotetores (revisado em Adalier e Parker 2016). Quando a vit. E foi administrada em
combinação com um inibidor de ChE (donepezil, rivastigmina ou galantamina),
proporcionou maior melhora na cognição do que o inibidor de ChE sozinho (Bittner 2009).
No entanto, quando a vit. E foi administrada em combinação com a memantina (um
antagonista do receptor NMDA), não ofereceu nenhum benefício adicional (Dysken et al.
2014).
Nenhum estudo clínico foi realizado em caninos e felinos com declínio cognitivo. Claro,
vita E está incluída na dieta terapêutica Senilife®.

5.4.4 – Ácidos graxos ômega

Os ácidos graxos poliinsaturados (PUFA) são importantes para a formação de

membranas celulares e funções fisiológicas no cérebro (Layé et al. 2018). Existem duas
famílias principais de PUFA, n-3 e n-6 (comumente referidos como ácidos graxos ômega-
3 e ômega-6, respectivamente). O ácido α-linolênico (ALA) é o precursor do ácido
eicosapentaenóico (EPA) e do ácido docosahexaenóico (DHA), e o ácido linolênico (LA) é
o precursor do ácido araquidônico (AA). AA, DHA e EPA são consumidos na dieta, uma
vez que não são produzidos no cérebro. As principais fontes dietéticas de ALA são plantas
verdes, nozes, linhaça e óleo de colza, enquanto o óleo de peixe é a principal fonte de
EPA e DHA (Layé et al. 2018).

O cérebro é altamente enriquecido em AA e DHA, e ambos os PUFAs ômega-3 e ômega-

6 são esterificados em fosfolipídios, que são bem conhecidos por desempenhar um papel
crítico nas estruturas e funções das membranas das células cerebrais. A distribuição
regional do cérebro e o acúmulo de LC-PUFAs variam. Por exemplo, em camundongos
C57BL6/J adultos, o nível mais alto de AA é encontrado no hipocampo (10,2%), seguido
pelo córtex pré-frontal (9,7%), o hipotálamo (8,5%), o córtex (7,7%), o cerebelo (6,5%) e
tronco cerebral (5,5%) O maior nível de DHA é encontrado no córtex pré-frontal (14,3%) e
no hipocampo (13,7%), seguido pelo cerebelo (12,2%), córtex (11,9%), hipotálamo
(10,1%) e tronco cerebral (8,2%) (Joffre et al. 2016). Vale ressaltar que o hipocampo e o
córtex são regiões importantes do cérebro no contexto da memória, embora outras
regiões do cérebro também estejam envolvidas.

Em humanos, o maior consumo de n-3 LC-PUFA está associado a um menor risco de

distúrbios neurológicos associados à inflamação (Bazinet e Layé 2014). A suplementação
de pacientes com diagnóstico de AD com uma dieta de risco de DHA levou a uma
liberação reduzida de citocinas pró-inflamatórias de leucócitos mononucleares do sangue
711
(Vedin et al. 2008). Altos níveis de DHA cerebral estão ligados à expressão reduzida de
citocinas pró-inflamatórias em vários modelos de roedores de neuroinflamação aguda
(LPS) ou crônica (envelhecimento) (Orr et al. 2013). Os PUFAs cerebrais contribuem para
a homeostase microglial e regulam seu papel nas cascatas neuro inflamatórias (Layé et
al. 2018). Em um ensaio clínico randomizado, duplo-cego e controlado por placebo, os
resultados não apoiaram a suplementação de adultos mais velhos com óleo de peixe rico
em DHA para prevenir o declínio cognitivo (Danthiir et al. 2018). Em ratos, Morgese et al.
(2018) demonstraram que uma dieta enriquecida com n-3 PUFA preveniu o
comportamento do tipo depressivo associado à DA induzido por Aβ e também reverteu os
níveis de serotonina e neurotrofina que foram reduzidos no córtex pré-frontal. O
metabolismo dos PUFAs cerebrais é alterado em condições neurológicas, como a
demência, de modo que os nutracêuticos parecem intervir e restaurar o metabolismo dos
lipídios cerebrais. Esses estudos sugerem que os ácidos graxos ômega-3 têm um grande
potencial e podem ser usados como nutracêuticos em caninos e felinos com disfunção
cognitiva.

5.4.5 – Triglicerídeos de cadeia média

A glicose é a principal fonte de energia dos neurônios e seu metabolismo é reduzido com
o envelhecimento (Seibert 2017). Foi sugerido que os triglicerídeos de cadeia média
(MCT) podem aumentar os níveis de cetonas no sangue, que podem ser usados como
uma fonte alternativa de energia para os neurônios e o funcionamento cerebral. Pan
(2011) relatou que os ácidos graxos derivados de MCT podem fornecer até 20% das
necessidades de energia do cérebro, e a suplementação de longo prazo com MCT
demonstrou melhorar a função cognitiva em cães idosos. MCT foram relatados para
elevar a função mitocondrial para aumentar o nível de produção de ATP e reduzir os
níveis de depósitos de Aβ (Taha et al. 2009; Pan et al. 2010).

O óleo de coco tem MCT, que são convertidos em cetonas que podem fornecer energia
ao cérebro. Estudos científicos e ensaios clínicos ainda precisam ser feitos para apoiar os
fatos e seu uso no CCD.

5.4.6 – Fosfatidilserina

A fosfatidilserina é um fosfolipídio que ocorre nas membranas celulares. Facilita a função

normal das membranas das células nervosas e influencia os níveis de vários
neurotransmissores. Baumeister et al. (2008) investigou a influência da fosfatidilserina no
desempenho cognitivo e na atividade cortical antes e depois do estresse induzido. Os
resultados revelaram que a suplementação crônica de fosfatidilserina diminuiu
significativamente a potência beta-1 nas regiões frontais do cérebro do hemisfério direito
712
antes e depois do estresse induzido. Pedata et al. (1985) descobriram que a liberação de
acetilcolina em ratos de 24 meses que receberam uma única administração de
fosfatidilserina (15 mg/kg, ip) ou fosfatidilcolina (15 mg/kg, ip) por 30 dias foi tão baixa
quanto na de 24 meses – ratos velhos recebendo apenas o tampão Tris. Esses
pesquisadores sugeriram que o tratamento crônico com fosfatidilserina pode reduzir a
diminuição relacionada à idade na liberação de ACh, agindo no mecanismo de
acoplamento estímulo/secreção.

Crook et al. (1991) avaliaram pacientes com deficiência de memória associada à idade
recebendo fosfatidilserina (100 mg tid) por 12 semanas. Os pacientes tratados mostraram
melhora nos testes de desempenho neuropsicológicos padronizados e computadorizados
e também nas avaliações clínicas globais de melhora. Com base na literatura clínica em
humanos, o FDA concluiu que as evidências não apóiam as afirmações de que a
fosfatidilserina tem benefício preventivo ou terapêutico para disfunção cognitiva e
demência em pessoas. No entanto, a agência aprovou a alegação para o produto como
“O consumo de fosfatidilserina pode reduzir o risco de disfunção cognitiva ou demência
em idosos”. A fosfatidilserina é um dos ingredientes do Senilife® e do Aktivait®, mas
nenhum ensaio clínico foi encontrado com a fosfatidilserina sozinha em cães idosos.

5.4.7 – S-Adenosilmetionina

A S-adenosilmetionina (SAMe) é uma molécula endógena com propriedade antioxidante.

SAMe está envolvida na síntese de alguns neurotransmissores e é conhecida por
desempenhar um papel na regulação da estrutura e função da membrana das células
nervosas. Com base em dados científicos limitados, o SAMe mostrou evidências de uma
melhora na atividade diurna e possivelmente alguma melhora nos problemas de sono,
mas não ofereceu nenhuma melhora para confusão ou desorientação.

5.4.8 – Melatonina

A melatonina (N-acetil-5-metoxitriptamina) é um hormônio natural produzido pela glândula

pineal. Foi demonstrado que exerce efeitos antioxidantes, antiinflamatórios e
imunomoduladores (Sharman e Bondy 2016). Foi sugerido que a variação efetiva da
melatonina na função cognitiva e no humor pode existir dentro de níveis fisiológicos. Em
vários estudos, descobriu-se que os níveis fisiológicos de melatonina estavam reduzidos
em pacientes com AD ou transtorno depressivo maior (Mishima et al. 1999; Wu et al.
2003). Níveis mais elevados de melatonina dentro da faixa fisiológica foram associados a
menor prevalência de comprometimento cognitivo e humor deprimido (Obayashi et al.
2015). A associação entre os níveis fisiológicos de melatonina e a função cognitiva foi
independente dos sintomas depressivos. Em uma meta-análise de dez ensaios clínicos
713
randomizados, Hansen et al. (2014) concluíram que não houve efeito significativo da
melatonina contra a depressão. Na maioria desses estudos, a dose diária de melatonina
foi de 2,5–10 mg, níveis de melatonina aproximadamente 10 a 40 vezes maiores do que
os níveis fisiológicos, quando os comprimidos de liberação prolongada foram usados. Os
comprimidos de liberação rápida tendem a encurtar o período de eficácia da melatonina.

Leuner et al. (2007) relataram que a diminuição da neurogênese precede a velhice, e

esse declínio pode ser retardado pela suplementação com melatonina (Ramirez-
Rodriguez et al. 2012). Além disso, a manutenção da complexidade dendrítica é
aumentada pela melatonina (Ramirez-Rodriguez et al. 2012).

A melatonina é usada para tratar a ansiedade ou padrão de sono/vigília perturbado em

cães com demência. De acordo com o site do American Kennel Club, a dose
recomendada de melatonina para cães é 1 mg para menos de 4,5 kg, 1,5 mg para 4,5 –
11 kg, 3 mg para 11 a 45 kg e 3–6 mg para mais de 45 kg. A melatonina atua poucos
minutos após ser ingerida e o efeito pode durar cerca de 8 horas.

5.4.9 – Ácido Rosmarínico

O ácido rosmarínico (RosA) é um polifenol solúvel em água derivado de várias ervas

medicinais, como Salvia miltiorrhiza Bunge e Rosmarinus officinalis, que tem sido usado
na medicina popular para tratar várias formas de demências (Zhang et al. 2016). Foi
demonstrado que RosA exerce propriedades antioxidantes, antiinflamatórias,
antiproliferativas, citoprotetoras, neuroprotetoras e antidepressivas em uma variedade de
sistemas modelo, incluindo DA (Taguchi et al. 2017). O fator 2 relacionado ao fator nuclear
E2 (Nrf2) parece ser o regulador mestre para proteger as células neuronais do estresse
oxidativo por meio da ativação da expressão dos genes portadores do elemento de
resposta antioxidante (ARE). Em um estudo in vitro, Rong et al. (2018) relataram que
RosA atenuou a geração de ROS celular induzida por Aβ e a peroxidação lipídica em
células PC12. RosA também mediou a neuroproteção em células PC12 desafiadas com
Aβ. Os efeitos antioxidantes da RosA são mediados predominantemente pela via
Akt/GSK-3β/Fyn por meio do aumento da atividade de Nrf2. Zhang et al. (2017)
apresentou evidências convincentes de que a inibição da atividade de GSK-3β por
suplementos dietéticos previne o comprometimento cognitivo em camundongos
transgênicos com AD. Pode-se sugerir que RosA parece ser um candidato promissor para
o tratamento neuroprotetor de CDS em caninos e felinos.

714
5.4.10 – Arroz Integral

O arroz integral (Oryza sativus L.) é comumente consumido em todo o mundo.

Geralmente é processado para remover a camada germinativa e o farelo porque são
muito duros, difíceis de cozinhar e mal digeridos. No entanto, essas partes contêm
ingredientes, como ácido ferúlico, ácido gama aminobutírico (GABA), vitamina B6,
vitamina B12 e ácido fólico (Okuda et al. 2018). O ácido ferúlico é um antioxidante (Kanski
et al. 2002), inibidor da produção e agregação de Aβ (Ono et al. 2005) e um modulador de
β-secretase (Mori et al. 2013). Além disso, ele desestabiliza fibrilas β-amiloides pré-
formadas (Ono et al. 2005) e fornece neuroproteção (Yan et al. 2001).
O tratamento de arroz integral altamente pressurizado com água (HPBR) aumenta a
absorção de água do arroz integral sem perder nutrientes e melhora sua digestibilidade.
Okuda et al. (2018) administraram HPBR em camundongos 8 (SAMP8) machos de 3
meses de idade por 2 meses propensos a senescência. Os resultados revelaram que o
HPBR reduziu significativamente os níveis de Aβ1-42 no cérebro, melhorou a função
motora e melhorou a disfunção cognitiva em um modelo de camundongo com AD.
Recentemente, o arroz integral também é relatado por uma taxa de esvaziamento gástrico
mais lenta, em comparação com o arroz branco, o que em parte pode explicar por sua
baixa resposta glicêmica Pletsch e Hamaker (2018).

HPBR pode ser usado como nutracêutico para prevenir a síndrome de disfunção cognitiva
em caninos e felinos. Por ser rico em fibras dietéticas, pode bloquear a absorção de
açúcar e gordura do trato gastrointestinal e contribui para seus efeitos benéficos no
diabetes ou obesidade (Okuda et al. 2018).

5.5 Substâncias Bioativas de Invertebrados para Disfunção Cognitiva

5.5.1 – Proteínas de Geléia Real

A Geléia Real (RJ), principal alimento das primeiras larvas das abelhas-operárias (Apis
mellifera L.) e da rainha das abelhas, é secretada pelas abelhas nutrizes de suas
glândulas hipofaríngea e mandibular. A composição do RJ é complexa, pois contém
proteínas, peptídeos, aminoácidos livres, açúcares, lipídios, vitaminas e água (Lin et al.
2018; Mureşan et al. 2018). As principais proteínas da geléia real (MRJPs) são proteínas
solúveis em água, compostas por nove membros com peso molecular de 49-87 kDa.
Recentemente, Lin et al. (2018) desenvolveu um método UPLC-MS para quantificar
MRJP1, MRJP2, MRJP3 e outros peptídeos de assinatura que podem ter aplicações
potenciais em muitas condições de saúde. O método proposto também poderia ser usado
para avaliar a qualidade dos MRJP para evitar adulteração, o que é bastante comum no
caso das proteínas RJ.
715
A MRJP1, denominada apalbumina 1, constitui 45% das proteínas solúveis em água e é a
proteína mais abundante no RJ. As proteínas RJ têm sido usadas como alimentos e
suplementos funcionais há décadas. Ele exerce atividades anti-hipertensivas,
antidiabéticas, antiobesidade e aumento da proliferação celular, além da regulação do
macrófago de camundongo para liberar TNF-a (Yoshida et al. 2017; Lin et al. 2018).
Estudos relatados também sugerem que essas proteínas podem melhorar a cognição e a
memória (Drapeau et al. 2006; Zamani et al. 2012; Pyrzanowska et al. 2014; Chen et al.
2017). Chen et al. (2017) relataram que ratos machos idosos alimentados com MRJP por
14 semanas apresentaram melhora na memória espacial em até 48,5% quando
comparados aos controles. A análise metabolômica usando espectrometria de massa de
tempo de voo revelou que os compostos alterados foram nicotinato e nicotinamida,
cisteína taurina e vias do metabolismo de energia (Tabela 2).

Tabela 2 Nutracêuticos de origem não vegetal para melhoria da cognição e memória

Atividade
Nutracêutico Ingrediente bioativo Referências
biológica/farmacológica
Proteínas da geléia real Principal proteína da Prevenção do Chen et al. (2017), Lin et al.
de Apis mellifera L. geléia real 1 comprometimento cognitivo (2018), Mureşan et al. (2018)

Inibição da AChE,
Hidrolisado de antioxidante, neuroprotetora
Anchova (Coilia mystus) Zhao et al. (2017b)
proteína de anchova e melhora da memória e
cognição
Extrato de macroalgas
vermelhas do Brasil Monoterpeno
Inibidor de AChE Machado et al. (2015)
(Ochtodes halogenado
secundiramea)
Antioxidante,
antiinflamatório, Mishima et al. (1999), Wu et al.
Melatonina Melatonina imunomodulador, (2003), Obayashi et al. (2015) e
antidepressivo, Sharman, e Bondy (2016)
antienvelhecimento, anti-AD

Em vários estudos, descobriu-se que os peptídeos bioativos do RJ possuem propriedade

anti-hipertensiva (Matsui et al. 2002, Tokunaga et al. 2004; Sultana et al. 2008). Sultana et
al. (2008) investigaram o efeito inibidor da renina de um peptídeo derivado de RJ
(dipeptídeo YY). Verificou-se que o dipeptídeo YY inibia a atividade da renina humana. A
constante de inibição (K1) de YY foi estimada em 10 μg/ml e 3,77 M quando o Km foi de 0,16 μg/ml e 3,77 M
usando angiotensinogênio de ovelha como substrato. O peptídeo foi observado para
reduzir a pressão arterial em ratos espontaneamente hipertensos.

Yoshida et al. (2017) investigou se o RJ poderia prevenir a obesidade e melhorar a

hiperglicemia no diabetes tipo 2. Os resultados indicaram que a administração de RJ (10

716
mg/kg, po) em camundongos KK-Ay por 4 semanas melhorou a hiperglicemia, o que pode
ser devido à supressão da expressão de G6Pase através da regulação positiva de AdipoQ
e AdipoR1 mRNA e expressões da proteína pAMPK. RJ não influenciou a resistência à
insulina ou o peso corporal.

A dose de RJ como suplemento em dietas humanas é normalmente de 1 g vo (Khoshpey

et al. 2016). Esta dose contém em média 120 mg de proteínas, compreendendo 31%
MRJP1 (~ 37 mg), 16% MRJP2 (~ 19 mg) e 26% MRJP3 (~ 31 mg). Aproximadamente
87% do MRJP1 estão na forma oligomérica (~ 32 mg) e 13% do MRJP1 estão presentes
como monômero (~ 5 mg). Demonstrou-se que as proteínas da geléia real exercem
efeitos antioxidantes, antiinflamatórios e imunomoduladores (Šver et al. 1996; Kohno et al.
2004; Jamnik et al. 2007: Pode-se sugerir que as proteínas RJ podem ser usadas para
melhorar a cognição e memória em caninos e felinos.

5.6 Substâncias bioativas de vertebrados para disfunção cognitiva

Durante as últimas décadas, venenos de várias espécies estão sob investigação para o
tratamento de uma variedade de patologias, incluindo distúrbios cardiovasculares, dor,
câncer e várias doenças neurodegenerativas (revisado em DeSouza et al. 2018). Foi
demonstrado que várias toxinas/substâncias melhoram a cognição e a memória em
humanos e em modelos experimentais.

Fasciculinas de Dendroaspis angusticeps (cobra mamba verde), RVV-V de Daboia russelii

russelii (víbora indiana), peptídeo K-49-P1-20 de Bothrops asper (víbora), SVHRP de
Buthus martensii Karsch (escorpião), PhTx3-1 e PhTx4-5-5 de Phoneutria nigriventer
(aranha) e BVPLA2 de Apis mellifera (abelha melífera) são apenas alguns exemplos.
Essas toxinas melhoram a cognição e a memória por meio de diferentes mecanismos de
ação. Por exemplo, as fasciculinas inibem a atividade da AChE, o RVV-V reduz a
deposição da placa Aβ, o SVHRP aumenta os níveis de BDNF e a neurogênese e reduz
as placas Aβ, e o BVPLA2 reduz a deposição da placa Aβ e exerce uma atividade anti-
inflamatória. Essas toxinas têm um grande potencial e precisam ser testadas na disfunção
cognitiva canina e felina (DeSouza et al. 2018).

5.7 Nutracêuticos para proteção da barreira hematoencefálica

Em doenças neurodegenerativas, como a AD, a ruptura da barreira hematoencefálica

(BBB) foi relatada como uma das fisiopatias (revisado em Gupta e Gupta 2018). A entrega
através da BBB para um nutracêutico ou um composto farmacêutico é necessária para
prevenir ou melhorar as doenças neurodegenerativas. Vários modelos in vitro e in vivo
estão disponíveis para rastrear esses compostos para cruzar a BBB e influenciar negativa

717
ou positivamente sua estrutura e função (Gupta et al. 2015). Recentemente, Li et al.
(2017) sugeriu um modelo de peixe-zebra para avaliar a entrega de produtos naturais e
medicamentos no BBB. A geração excessiva de ROS foi sugerida como um dos principais
mecanismos responsáveis pela disfunção BBB (revisado em Li et al. 2018). Li et al. (2018)
demonstraram que o pré-tratamento com astragalosídeo IV (obtido de Astragalus
membranaceus) protegeu a integridade das células endoteliais BBB contra a interrupção
da BBB induzida por LPS, ativando a via de sinalização Nrf2. Os resultados deste estudo
sugeriram que o astragalósido IV pode ser um potencial antioxidante e
nutracêutico/fármaco neuroprotetor que visa BBB. Em outro estudo, Zhang et al. (2013)
demonstraram que em um modelo de isquemia, a berberina regula positivamente pAkt,
pGSK, pCREB e claudina-5 e diminui a expressão de NFkB, melhorando assim a
permeabilidade BBB e proporcionando neuroproteção.

5.8 Nutracêuticos para Proteção e Ativação Mitocondrial

O papel das mitocôndrias na saúde, doenças e toxicidade é reconhecido há muito tempo.

Além de sua função primária de produção de ATP (por meio da fosforilação oxidativa), as
mitocôndrias desempenham um papel vital na modulação da apoptose, autofagia,
envelhecimento e vias de sinalização que controlam a neurogênese e a neuroplasticidade
(Morán et al. 2012; Go et al. 2018, Meyer et al. 2018; Wu et al. 2018; Yu et al. 2018). A
disfunção mitocondrial tem sido implicada em uma série de doenças neurodegenerativas,
como doença de Alzheimer (AD), doença de Parkinson (PD) e doença de Huntington
(HD). Disfunção da cadeia respiratória (Maurer et al. 2000; Lin e Beal 2006; Morán et al.
2012), aumento na produção de ROS e estresse oxidativo (Nunomura et al. 2006;
Federico et al. 2012; Go et al. 2018), mitocondrial hiperfosforilação induzida por estresse
oxidativo de tau (Melov et al. 2007), aumento das membranas do retículo endoplasmático
(Schon e Area-Gomez 2013), superexpressão da proteína do canal 1 do ânion
dependente de voltagem (Shoshan-Barmatz et al. 2018) e dinâmica mitocondrial anormal
(Wang et al. 2009) foi relatada na patogênese da AD. Reddy e Beal (2008) também
relataram que o acúmulo de alterações no DNA mitocondrial pode aumentar a produção
de ROS e reduzir o ATP mitocondrial de maneira dependente da idade, e isso pode
contribuir para o desenvolvimento de AD.

Foi demonstrado que uma série de compostos naturais e sintéticos protegem as

mitocôndrias por meio de vários mecanismos, reduzindo assim o comprometimento da
cognição e da memória (Porquet et al. 2014; Risuleo 2016; Pitt e Leung 2016; Teodoro et
al. 2016).

718
5.8.1 – Resveratrol

O resveratrol, comumente referido como “Paradoxo Francês”, é um polifenol encontrado

naturalmente nas uvas e no vinho tinto. Ele existe nas conformações cis e trans. É
relatado que o resveratrol aumenta a taxa metabólica pela biogênese mitocondrial e foi
postulado como uma opção para prevenir a AD (Jayasena et al. 2013; Porquet et al.
2014). Porquet et al. (2014) elucidaram a interação entre a via amiloidogênica, a
sinalização da sirtuína 1 (SIRT1) e da proteína quinase ativada por monofosfato de 5-
adenosina (AMPK). Os resultados desta investigação apoiaram a alegação de
neuroproteção induzida por resveratrol, mantendo o equilíbrio entre a sinalização SIRT1 e
AMPK, o estado mitocondrial e as alterações inflamatórias. O início da AD pode ser
retardado ou mitigado com o uso de resveratrol na dieta, que é capaz de prevenir a
formação de placas Aβ e perda cognitiva. Marambaud et al. (2005) demonstraram uma
atividade antiamiloidogênica dependente de proteassoma do resveratrol, mas afirmaram
que o resveratrol não inibe a produção de Aβ porque não tem efeito sobre
as enzimas produtoras de Aβ β- e γ- secretetases. Em vez disso, promove a degradação
intracelular de Aβ por meio de um mecanismo que envolve o protossoma. No contexto da
AD, Teodoro et al. (2016) e Jardim (2018) resumiram os efeitos neuroprotetores do
resveratrol como (1) reduzir os níveis intracelulares e secretados de Aβ; (2) para reduzir a
formação de fibrilas Aβ por ligação direta a Aβ; (3) para ativar a proteína quinase C, que
protege contra a apoptose induzida por Aβ; (4) aumentar a produção de glutationa,
contribuindo assim para a defesa antioxidante; e (5) para reduzir a atividade da via do
NFkB, causando uma diminuição na inflamação e perda de células neuronais. Pode-se
sugerir que o resveratrol tem um forte potencial terapêutico na AD em humanos e CDS
em animais de estimação. Atualmente, o resveratrol está incluído no Senilife® para
caninos.

5.8.2 – Quercetina

A quercetina é um dos flavonóides mais amplamente distribuídos, que possui fortes

propriedades antioxidantes, eliminadoras de radicais livres e antiinflamatórias. Em uma
série de estudos in vitro, in silico e in vivo, a quercetina demonstrou exercer vários
mecanismos de ações e melhorar o aprendizado e a memória (Phachonpai et al. 2010;
Islam et al. 2013; Sabogal-Guaqueta et al. 2015; Ay et al. 2016). Ghobeh et al. (2014)
usaram quercetina e resveratrol para proteger as mitocôndrias da fibrilogênese do
fragmento amilóide. A quercetina desestabiliza os agregados amiloides, inibindo assim o
processo de fibrilação e resgatando a função mitocondrial, fornecendo alguns insights
otimistas sobre a prevenção da AD.
719
Curcumina, vitamina E, G. biloba, B. monnieri e triglicerídeos de cadeia média (MCT)
também podem proteger as mitocôndrias ou elevar sua função para prevenir/melhorar a
cognição e o comprometimento da memória por diferentes mecanismos (Ahmed 2012;
Javeri e Chand 2016; Pitt e Leung 2016; Teodoro et al. 2016).

5.8.3 – Tiamina e seus derivados

Os processos dependentes de tiamina são críticos no metabolismo da glicose e diminuem

no cérebro com AD. Em um modelo de camundongo, também foi demonstrado que a
deficiência de tiamina causa a neurogênese hipocampal prejudicada, que está muito
envolvida na disfunção cognitiva no estágio inicial da legião pré patológica (Zhao et al.
2008). Em modelos animais, a deficiência de tiamina é conhecida por exacerbar a
formação de placas, promover a fosforilação de tau e prejudicar a memória (Gibson et al.
2013). Em contraste, o tratamento de modelos de camundongo de AD com o derivado de
tiamina benfotiamina diminui as placas, diminui a fosforilação de tau e reverte os déficits
de memória. Outro derivado da tiamina é a sulbutiamina (dissulfeto de isobutiril tiamina),
que é frequentemente usado para melhorar a fadiga mental e a memória. A sulbutiamina
exerce seus efeitos agindo sobre a dopamina e nenhuma outra catecolamina. Os
benefícios nootrópicos da sulbutiamina são devidos aos seus efeitos nos sistemas
dopaminérgico, glutamatérgico e colinérgico. Devido à sua maior taxa de absorção do que
a tiamina, atua no aumento da eficiência do BBB. Pode-se propor que o uso de
benfotiamina ou sulbutiamina pode fornecer uma intervenção segura para reverter os
processos biológicos e clínicos da progressão da CDS em caninos e felinos.

5.9 Dietas Terapêuticas

Atualmente, dietas terapêuticas/de prescrição, como Canine b/d® (dieta para o cérebro:
ácidos graxos, antioxidantes e ácido dl-α-lipóico e L-carnitina), Purina Pro Plan Bright
Mind® (triglicerídeos de cadeia média), Senilife® (G. biloba, resveratrol, fosfatidilserina,
vitamina B6 e vitamina E), Aktivait® (DHA, EPA, ácido α-lipóico, glutationa, N-
acetilcisteína, vitamina C, vitamina E, L-carnitina, CoQ10, fosfatidilserina e selênio),
Novifit® (S-adenosilmetionina) e Neutricks® (apoaequorina), Nutramind® (ácidos graxos
ômega-3, extrato de G. biloba, vitamina B1, vitamina B3, vitamina B6, vitamina B8,
vitamina B12, vitamina E, e fosfatidilserina) estão disponíveis para cães idosos com CCD/
CDS. Nutramind® também é recomendado para gatos. Essas dietas são frequentemente
fortificadas com uma combinação de ácidos graxos, vitaminas, antioxidantes, substâncias
antiinflamatórias, cofatores mitocondriais, etc. Em uma série de estudos, dietas
fortificadas e terapêuticas demonstraram melhorar a cognição e a memória em cães e

720
gatos idosos (Cotman et al. 2002; Head 2007; Dodd et al. 2003; Ikeda-Douglas et al.
2004; Orlando 2018).

6. Observações Finais e Orientações Futuras

Uma alta porcentagem de cães e gatos idosos sofre de síndrome de disfunção cognitiva
(CDS), e muitas vezes eles são subdiagnosticados. O diagnóstico de CDS é baseado em
sinais clínicos (sigla DISHA) e escala de demência cognitiva. A fisiopatologia da CDS é
muito complexa devido a vários mecanismos subjacentes, como déficit de
neurotransmissores colinérgicos (ACh), estresse oxidativo, neuroinflamação e agregação
e deposição de peptídeos Aβ. Atualmente, vários nutracêuticos estão no mercado para
prevenção e intervenção terapêutica para melhorar ou restaurar a cognição e a memória.
Este capítulo descreve a fisiopatologia da CDS em caninos e felinos e oferece várias
modalidades preventivas e de tratamento, incluindo nutracêuticos que têm propriedades
anti-AChE, antioxidantes, antiinflamatórias, anti-amiloidogênicas, imunomoduladoras,
antidepressivas e ansiolíticas. O capítulo também fornece uma breve cobertura de dietas
terapêuticas disponíveis para prevenção e tratamento de CDS em caninos e felinos. Os
ensaios clínicos são necessários para validar as alegações para a maioria dos
nutracêuticos disponíveis para caninos e felinos.

Referências
Abd El-Wahab AE, Ghareeb DA, Sarhan EEM et al (2013) In vitro biological assessment of Berberis vulgaris and its
active constituent, berberine: antioxidant, anti-acetylcholinesterase, anti-diabetic and anticancer effects. BMC
Compliment Altern Med 13:218–244
Adalier N, Parker H (2016) Vitamin E, turmeric and saffron in treatment of Alzheimer’s disease. Antioxidants 5:40
Ahmed H (2012) Modulatory effects of vitamin E, acetyl-L-carnitine and α-lipoic acid on new potential biomarkers for
Alzheimer’s disease in rat model. Exp Toxicol Pathol 64(6):549–556
Akhondzadeh S, Shafiee SM, Harirchian MH et al (2010) A 22-week, multicenter, randomized, double-blind controlled
trial of Crocus sativus in the treatment of mild-to-moderate Alzheimer’s disease. Psychopharmacology 207:637–643
Asai M, Iwata N, Yoshikawa A et al (2007) Berberine alters the processing of Alzheimer’s amyloid precursor protein to
decrease Abeta secretion. Biochem Biophys Res Commun 352(2):498–502
Asian Ginseng (2016) National center for complementary and integrative health. US National Institutes of Health,
Bethesda
Attele AS, Wu JA, Yuan CS (1999) Ginseng pharmacology: multiple constituents and multiple actions. Biochem
Pharmacol 58 (11):1685–1693
Ay M, Charli A, Jin H et al (2016) Quercetin. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity. Academic
Press/Elsevier, Amsterdam, pp 447–452
Ayaz M, Junaid M, Ullah F et al (2015) Comparative chemical profiling, cholinesterase inhibitions and anti-radicals
properties of essential oils from Polygonum hydropiper L: a preliminary anti-Alzheimer’s study. Lipids Health Dis 14:141
Azkona G, Garcia-Belenguer S, Chacon G et al (2009) Prevalence and risk factors of behavioral changes associated
with age-related cognitive impairment in geriatric dogs. J Small Anim Pract 50:87–91
Bain MJ, Cliff KD, Ruehl WW (2001) Predicting behavioral changes associated with age-related cognitive impairment
in dogs. J Am Vet Med Assoc 218:1792–1795
Balducci C, Forloni G (2018) Novel targets in Alzheimer’s disease: a special focus on microglia. Pharmacol Res
130:402–413
Baumeister J, Barthel T, Geis KR et al (2008) Influence of phosphatidylserine on cognitive performance and cortical
activity after induced stress. Nutr Neurosci 11:103–110

721
 Bazinet RP, Layé S (2014) Polyunsaturated fatty acids and their metabolites in brain function and disease. Nat Rev
Neurosci 15:771–785
Bharti VK, Malik JK, Gupta RC (2016) Ashwagandha: multiple health effects. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals:
efficacy, safety and toxicity. Academic Press/Elsevier, Amsterdam, pp 717–733
Bhattacharya SK, Kumar A, Ghosal S (1995) Effects of glycowithanolides from Withania somnifera on an animal model
of Alzheimer’s disease and perturbed central cholinergic markers of cognition in rats. Phytother Res 9:110–113
Bhattacharya SK, Satyan KS, Ghosal S (1997) Antioxidant activity of glycowithanolides from Withania somnifera.
Indian J Exp Biol 35 (3):236–239
Bittner DM (2009) Combination therapy of acetylcholinesterase inhibitor and vitamin E in Alzheimer disease. J Clin
Psychopharmacol 29:511–513
Cai Z, Wang C, Yang W (2016) Role of berberine in Alzheimer’s. Neuropsychiatr Dis Treat 12:2509–2520
Cespedes CL, Balbontin C, Avila JG et al (2017) Inhibition on cholinesterase and tyrosinase by alkaloids and phenolics
from Aristotelia chilensis leaves. Food Chem Toxicol 109:984–995
Chan P, Xia Q, Fu P (2007) Ginkgo biloba leaves extract: biological, medicinal and toxicological effects. J Environ Sci
Health C Environ Carcinog Ecotoxicol Rev 25:211–244
Chandra V, Pandav R, Dodge HH et al (2001) Incidence of Alzheimer’s disease in a rural community in India. The
Indo-US study. Neurology 57:985–989
Chen WF (2006) Curcumin and its analogues as potent inhibitors of low density lipoprotein oxidation. Free Radic Biol
Med 40 (3):526–535
Chen F, Eckman EA, Eckman CB (2006) Reduction in levels of the Alzheimer’s amyloid beta peptide after oral
administration of ginsenosides. FASEB J 20:1269–1271
Chen CF, Chiou WF, Zhang JT (2008) Comparison of the pharmacological effects of Panax ginseng and Panax
quinquefolium. Acta Pharmacol Sin 29:1103–1108
Chen D, Liu F, Wan J-B et al (2017) Effect of Royal jelly proteins on spatial memory in aged rats: metabolomics
analysis in urine. J Agric Food Chem 65(15):3151–3159
Choi KT (2008) Botanical characteristics, pharmacological effects and medicinal components of Korean Panax ginseng
C.A. Meyer. Acta Pharmacol Sin 29:1109–1118
Choudhary MI, Yousuf S, Nawaz SA et al (2004) Cholinesterase inhibiting withanolides from Withania somnifera. Chem
Pharm Bull 52(11):1358–1361
Chun YS, Kim J, Chung S et al (2017) Protective roles of Monsonia angustifolia and its active compounds in
experimental models of Alzheimer’s disease. J Agric Food Chem 65:3133–3140
Cicero AFG, Fogacci F, Banach M (2018) Botanicals and phytochemicals active on cognitive decline: the clinical
evidence. Pharmacol Res 130:204–212
Coppock RW, Dziwenka M (2016) Green tea extract. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity.
Academic Press/Elsevier, Amsterdam, pp 633–652
Cortes N, Alvarez R, Osorio EH (2015) Alkaloid metabolite profiles by GC/MS and acetylcholinesterase inhibitory
activities with bindingmode predictions of five Amaryllidaceae plants. J Pharm Biomed Anal 102:222–228
Cotman CW, Head E, Muggenburg BA et al (2002) Brain aging in the canine: a diet enriched in antioxidants reduces
cognitive dysfunction. Neurobiol Aging 23(5):809–818
Crook TH, Tinklenberg J, Yesavage J et al (1991) Effects of phosphatidylserine in age-associated memory impairment.
Neurology 41:644–649
D’Amilio M, Puglisi-Allegra S, Mercuri N (2018) The role of dopaminergic midbrain in Alzheimer’s disease: translating
basic science into clinical practice. Pharmacol Res 130:414–419
Danthiir V, Hosking DE, Nettelbeck T et al (2018) An 18-month randomized, double-blind, placebo-controlled trial of
DHA-rich fish oil to prevent age-related cognitive decline in cognitively normal older adults. Am J Clin Nutr 107:754–762
Das A, Shanker G, Nath C et al (2002) A comparative study in rodents of standardized extracts of Bacopa monnieri
and Ginkgo biloba: anticholinesterase and cognitive enhancing activities. Pharmacol Biochem Behav 73:893–900
DeFeudis F, Drieu K (2000) Ginkgo biloba extract (EGb 761) and CNS functions: basic studies and clinical
applications. Curr Drug Targets 1:25–58
DeSouza JM, Goncalves BDC, Gomez MV et al (2018) Animal toxins as therapeutic tools to treat neurodegenerative
diseases. Front Pharmacol 9:145
Ding J, Xi YD, Zhang DD et al (2013) Soybean isoflavones ameliorates β-amyloid 1-42-induced learning and memory
deficit in rats by protecting synaptic structure and function. Synapse 67(12):856–864
Dodd CE, Zicker SC, Jewell DE et al (2003) Can a fortified food affect the behavioral manifestations of age-related
cognitive decline in dogs. Vet Med 98:396–408
Dohi S, Terasaki M, Makino M (2009) Acetylcholinesterase inhibitory activity and chemical composition of commercial
essential oil. J Agric Food Chem 57:4313–4318
Drapeau MD, Albert S, Kucharski R et al (2006) Evaluation of the yellow/major royal jelly protein family and the
emergence of social behavior in honey bees. Genome Res 16:1385–1394
Dugoua JJ, Mills E, Perri D et al (2006) Safety and efficacy of ginkgo (Ginkgo biloba) during pregnancy and lactation.
Can J Clin Pharmacol 13:e277–e284
Dysken MW, Sano M, Asthana S et al (2014) Effect of vitamin E and memantine on functional decline in Alzheimer
disease. The TEAMAD VA Cooperative Randomized Trial. JAMA 311:33–44
722
 Dziwenka M, Coppock RW (2016) Ginkgo biloba. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity.
Academic Press/Elsevier, Amsterdam, pp 681–691
El Idrissi A (2008) Taurine improves learning and retention in aged mice. Neurosci Lett 436:19–22
Federico A, Cardaioloi E, Da Pozzo P et al (2012) Mitochondria, oxidative stress and neurodegeneration. J Neurol Sci
322:254–262
Filho FO, Alcântra DB, Rodrigues THS et al (2018) Development and validation of a reversed phase HPLC method for
determination of anacardic acids in cashew (Anacardium occidentale) nut shell liquid. J Chromatogr Sci 56(4):300–306
Galasko D (2006) Biological markers. In: Gauthier S (ed) Clinical diagnosis and management of Alzheimer’s disease,
3rd edn. Informa Healthcare, Boca Raton, pp 125–133
Garcia-Alloza M, Borrelli LA, Rozkalne A et al (2007) Curcumin labels amyloid pathology in vivo, disrupts existing
plaques, and partially restores distorted neurites in an Alzheimer mouse model. J Neurochem 102:1095–1104
Garvilova SI, Preuss UW, Wong JWM et al (2014) Efficacy and safety of Ginkgo biloba extract EGb 761 in mild
cognitive impairment with neuropsychiatric symptoms: a randomized, placebo-controlled, double-blind, multi-center trial.
In J Geriatr Psychiatry 29: 1087–1095
Gasca CA, Castillo WO, Takahashi CS et al (2017) Assessment of anticholinesterase activity and cytotoxicity of
cagaita (Eugenia dysenterica) leaves. Food Chem Toxicol 109:996–1002
Geraldo E, Lloret A, Fuchsberger T et al (2014) Aβ and tau toxicities in Alzheimer’s are linked via oxidative stress-
induced P38 activation: protective role of vitamin E. Redox Biol 2:873–877
Geromichalos GD, Lamari FN, Papandreou MA et al (2012) Saffron as a source of novel acetylcholinesterase
inhibitors: molecular docking and in vitro enzymatic studies. J Agric Food Chem 60:6131–6138
Ghadrdoost B, Vafaei AA, Rashidy-Pour A et al (2011) Protective effects of saffron extract and its active constituent
crocin against oxidative stress and spatial learning and memory deficits induced by chronic stress in rats. Eur J
Pharmacol 667:222–229
Ghaffari SH, Hatami H, Dehghan G (2015) Saffron ethanolic extract attenuates oxidative stress, spatial learning, and
memory impairments induced by local injection of ethidium bromide. Res Pharm Sci 10:222–232
Ghobeh M, Ahmadian S, Meratan AA et al (2014) Interaction of Aβ25-35 fibrillation products with mitochondria: effects
of small molecule natural products. Biopolymers 102(6):473–486
Gibson GE, Hirsch JA, Cirio RT et al (2013) Abnormal thiaminedependent processes in Alzheimer’s disease: lessons
from diabetes. Mol Cell Neurosci 55:17–25
Go Y-M, Fernandes J, Hu X et al (2018) Mitochondrial network responses in oxidative physiology and disease. Free
Radic Biol Med 116:31–40
Gu MY, Kim J, Yang YO (2016) The neuroprotective effects Justicidin A on amyloid beta25-35-induced neuronal cell
death through inhibition of tau hyperphosphorylation and induction of autophagy in SH-SY5Y cells. Neurochem Res
41:1458–1467
Gupta RC, Dekundy A (2005) memantine does not influence AChE inhibition in rat brain by donepezil or rivastigmine
but does with DFP. Drug Develop Res 64:71–81
Gupta RK, Gupta RC (2018) Biomarkers of blood-brain barrier dysfunction. In: Gupta RC (ed) Biomarkers in toxicology,
2nd edn. Academic Press/Elsevier, Amsterdam
Gupta RC, Pitt J, Zaja-Milatovic S (2015) Blood-brain barrier damage and dysfunction by chemical toxicity. In: Gupta
RC (ed) Handbook of toxicology of chemical warfare agents. Academic Press/Elsevier, Amsterdam, pp 725–739
Gurley BJ, Fifer EK, Gardner Z (2012) Pharmacokinetic herb-drug interactions (Part 2): drug interactions involving
popular botanical supplements and their clinical relevance. Planta Med 78:1490–1514
Hamaguchi T, Ono K, Yamada M (2010) Curcumin and Alzheimer’s disease. CNS Neurosci Ther 16:285–297
Hampel H, Vergallo A, Aguilar LF et al (2018) Precision pharmacology for Alzheimer’s disease. Pharmacol Res
130:331–365
Hansen MV, Danielsen AK, Hageman I et al (2014) The therapeutic or prophylactic effect of exogenous melatonin
against depression and depressive symptoms: a systematic review and meta-analysis. Eur Neuropsychopharmacol
24:1719–1728
Hartsel JA, Eades J, Hickory B et al (2016) Cannabis sativa and Hemp. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy,
safety and toxicity. Academic Press/Elsevier, Amsterdam, pp 735–754
Head E (2007) Combining an antioxidant-fortified diet with behavioral enrichment leads to cognitive improvement and
reduced brain pathology in aging canines: strategies for healthy aging. Ann N Y Acad Sci 1114:398–406
Hong SM, Soe KH, Lee TH et al (2017) Cognitive improving effects by highbush blueberry (Vaccinium corymbosum L.)
vinegar on Scopolamine-induced amnesia mice model. J Agric Food Chem 66 (1):99–107
Hosmani R (2009) Neuroprotective efficacy of Bacopa Monnieri against rotenone induced oxidative stress and
neurotoxicity in Drosophila melanogaster. Neurotoxicology 30:977–985
Hussein HM, Abd-Elmegied A, Ghareeb DA et al (2018) Neuroprotective effect of berberine against environmental
heavy metals-induced neurotoxicity and Alzheimer’s-like disease in rats. Food Chem Toxicol 111:432–444
Hwang S, Lim JW, Kim H (2017) Inhibitory effect of lycopene on amyloid-β-induced apoptosis in neuronal cells.
Nutrients 9:883
Ihl R, Bachinskaya N, Korczyn AD et al (2011) Efficacy and safety of a once-daily formulation of Ginkgo biloba extract
EGb 761 in dementia with neuropsychiatric features: a randomized controlled trial. Int J Geriatr Psychiatry 26:1186–1194

723
 Ikeda-Douglas CJ, Zicker SC, Estrada J et al (2004) Prior experience, antioxidants, and mitochondrial cofactors
improve cognitive dysfunction in aged beagles. Vet Ther 5:5–16
Imai H, Moriyasu K, Nakahata A et al (2017) Soy peptide ingestion augments the synthesis and metabolism of
noradrenaline in the mouse brain. Biosci Biotechnol Biochem 81(5):1007–1013
Imran M, Ullah F, Ayaz M et al (2017) Anticholinesterase and antioxidant potentials of Nonea micrantha Bioss. And
Reut along with GC-MS analysis. BMC Compliment Altern Med 17:499
Ingkaninan K, Phengpa P, Yuenyongsawad S et al (2006) Acetylcholinesterase inhibitors from Stephania venosa tuber.
J Pharm Pharmacol 58(5):695–700
Islam MR, Zaman A, Jahan I et al (2013) In silico QSAR analysis of quercetin reveals its potential as therapeutic drug
for Alzheimer’s disease. J Young Pharm 5:173–179
Jamnik P, Goranovič D, Raspor P (2007) Antioxidative action of royal jelly in the yeast cell. Exp Gerontol 42:494–600
Jardim FR (2018) Resveratrol and brain mitochondria: a review. Mol Neurobiol 55(3):2085–2101
Javeri I, Chand N (2016) Curcumin. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity. Academic
Press/Elsevier, Amsterdam, pp 435–445
Jayasena T, Poljak A, Smythe G et al (2013) The role of polyphenols in the modulation of sirtuins and other pathways
involved in Alzheimer’s disease. Ageing Res Rev 12:867–883
Joffre C, Grégoire S, De Smelt V et al (2016) Modulation of brain PUFA content in different experimental models of
mice. Prostaglandins Leukot Essent Fatty Acids 114:1–10
Joshi YB, Pratico D (2012) Vitamin E in aging, dementia, and Alzheimer’s disease. Biofactors 38:90–97
Kamkaew N, Scholfield CN, Ingkaninan K et al (2011) Bacopa monnieri and its constituents is hypotensive in
anesthetized rats and vasodilator in various artery types. J Ethnopharmacol 137:790–795
Kandel ER (2012) The molecular biology of memory: cAMP, PKA. CRE, CREB-1, CREB-2, and CPEB. Mol Brain 5:14
Kanski J, Aksenova M, Stoyanova A et al (2002) Ferulic acid antioxidant protection against hydroxyl and peroxyl
radical oxidation in synaptosomal and neuronal cell culture systems in vitro: structureactivity studies. J Nutr Biochem
13(5):273–281
Katayama S, Imai R, Sugiyama H et al (2014) Oral administration of soy peptides suppresses cognitive decline by
induction of neurotrophic factors in SAMP8 mice. J Agric Food Chem 62:3563–3569
Kennedy DO, Scholey AB, Wesnes KA (2001) Dose dependent changes in cognitive performance and mood following
acute administration of ginseng to healthy young volunteers. Nutr Neurosci 4:295–310
Khoshpey B, Djazayeri S, Amiri F et al (2016) Effect of royal jelly intake on serum glucose, apolipoprotein A-1 (ApoA-
1), apolipoprotein B (ApoB) and ApoB/ApoA-1 ratios in patients with type 2 diabetes: a randomized, double-blind clinical
trial study. Can J Diabetes 40:324–328
Kim Y-S, Woo Y-Y, Han C-K et al (2015) Safety analysis of Panax Ginseng in randomized clinical trials: a systematic
review. Medicines 2(2):106–126
Kohno K, Okamoto I, Sano O et al (2004) Royal jelly inhibits the production of proinflammatory cytokines by activated
macrophages. Biosci Biotechnol Biochem 68:138–145
Kuboyama T, Tohda C, Komatsu K (2006) Withanoside IV and its active metabolite, sominone, attenuate Aβ25-35-
induced neurodegeneration. Eur J Neurosci 23(6):1417–1426
Kulkarni SK, Dhir A (2008) On the mechanism of antidepressant-like action of berberine chloride. Eur J Pharmacol
589(1–3):163–172
Kulkarni SK, Dhir A (2010) Berberine: a plant alkaloid with therapeutic potential for central nervous system disorders.
Phytother Res 24 (3):317–324
Kumar A, Chopra EK, Mukherjee M et al (2015) Current knowledge and pharmacological profile of berberine: an
update. Eur J Pharmacol 761:288–297
Landsberg G (2005) Therapeutic agents for the treatment of cognitive dysfunction syndrome in senior dogs. Progr
Neropsychopharmacol Biol Psychiatry 29:471–479
Landsberg GM, Araujo JA (2005) Behavior problems in geriatric pets. Vet Clin North Am Small Anim Pract 35(3):675–
698
Landsberg GM, Hunthausen W, Ackerman L (2003) The effect of aging on the behavior of senior pets. In: Landsberg
GM, Hunthausen W, Ackerman W (eds) Handbook of behavior problems of the dog and cat. Saunders, Edinburgh, pp
269–304
Landsberg GM, Nichol J, Araujo JA (2012) Cognitive dysfunction syndrome: a disease of canine and feline brain aging.
Vet Clin North Am Small Anim Pract 42:749–768
Layé S, Nadjar A, Joffre C et al (2018) Anti-inflammatory effects of omega-3 fatty acids in the brain: physiological
mechanisms and relevance to pharmacology. Pharmacol Rev 70:12–38
Le XT, Pham HTN, Van Nguyen T et al (2015) Protective effects of Bacopa monnieri on ischemia-induced cognitive
deficits in mice: the possible contribution of bacopaside I and underlying mechanism. J Ethnopharmacol 164:37–45
Lebars PL, Katz MM, Berman N et al (1997) A placebo-controlled, double blinded, randomized trial of an extract of
Ginkgo biloba for dementia. North American EGb Study Group. JAMA 278:1327–1332
Lee Y, Jin Y, Lim W et al (2003) A ginsenoside-Rh1, a component of ginseng saponin, activates estrogen receptor in
human breast carcinoma MCF-7 cells. J Steroid Biochem Mol Biol 84:463–468
Lee HA, Kim JE, Sung JE et al (2018) Asparagus cochinchinensis stimulates release of nerve growth factor and
abrogates oxidative stress in the Tg2576 model for Alzheimer’s disease. BMC Compliment Altern Med 18:125
724
 Leuner B, Kozorovitskiy Y, Gross CG et al (2007) Diminished adult neurogenesis in the marmoset brain precedes old
age. Proc Natl Acad Sci USA 104:17169–17173
Li Q, Zhao HF, Zhang ZF et al (2009) Long-term green tea catechin administration prevents spatial learning and
memory impairment in senescence-accelerated mouse prone-8 mice by decreasing a beta (1-42) oligomers and up-
regulating synaptic plasticity-related proteins in the hippocampus. Neuroscience 163:741–749
Li NJ, Zhou L, Li W et al (2015) Protective effects of ginsenosides Rg1 and Rb1 on an Alzheimer’s disease mouse
model: a metabolomic study. J Chromatogr B Anal Technol Biomed Life Sci 985:54–61
Li Y, Chen T, Miao X et al (2017) Zebrafish: a promising in vivo model for assessing the delivery of natural products,
fluorescence dyes and drugs across the blood-brain barrier. Pharmacol Res 125:246–257
Li H, Wang P, Huang F et al (2018) Astragaloside IV protects bloodbrain barrier integrity from LPS-induced disruption
via activating Nrf2 antioxidant signaling pathway in mice. Toxicol Appl Pharmacol 340:58–66
Lim GP, Chu T, Yang F et al (2001) The curry spice curcumin reduces oxidative damage and amyloid pathology in an
Alzheimer transgenic mouse. J Neurosci 21:8370–8477
Limpeanchob N, Jaipan S, Rattanakaruna S et al (2008) Neuroprotective effect of Bacopa monnieri on beta-amyloid-
induced cell death in primary cortical culture. J Ethnopharmacol 120:112–117
Lin MT, Beal MF (2006) Mitochondrial dysfunction and oxidative stress in neurodegenerative diseases. Nature
443:787–795
Lin N, Chen S, Zhang H et al (2018) Quantification of major royal jelly protein 1 in fresh royal jelly by ultraperformance
liquid chromatography-Tandem mass spectrometry. J Agric Food Chem 66:1270–1278
Liu L, Hoang-Gia T, Wu H et al (2011) Ginsenoside Rb1 improves spatial learning and memory by regulation of cell
genesis in the hippocampal subregions of rats. Brain Res 1382:147–154
Ma W, Ding B, Yu H et al (2015) Genistein alleviates β-amyloidinduced inflammatory damage through regulating toll-
like receptor 4/nuclear factor κBα e AMPK. Esses dadosB. J Med Food 18(3):273–279
Machado LP, Caralho LR, Young MCM et al (2015) Evaluation of acetylcholinesterase inhibitory activity of Brazilian red
macroalgae organic extract. Rev Bras Farmacogn 25:657–662
Madaria A, Farbakova J, Katina S et al (2015) Assessment of severity and progression of canine cognitive dysfunction
using the Canine Dementia Scale (CADES). Appl Anim Behav Sci 171:138–145
Maebuchi M, Kishi Y, Koikeda T et al (2013) Soy peptide dietary supplementation increases serum dopamine level and
improves cognitive dysfunction in subjects with mild cognitive impairment. Jpn Pharmacol Ther 41:67–73
Maheshwari RK, Singh AK, Gaddipati J et al (2006) Multiple biological activities of curcumin: a short review. Life Sci
78:2081–2087
Marambaud P, Zhao H, Davies P (2005) Resveratrol promotes clearance of Alzheimer’s disease amyloid-beta
peptides. J Biol Chem 280:37377–37382
Marcelli S, Ficulle E, Oiccolo L et al (2018) An overview of the possible therapeutic role of SUMOylation in the
treatment of Alzheimer’s disease. Pharmacol Res 130:420–437
Matsui T, Yukiyoshi A, Doi S et al (2002) Gastrointestinal enzyme production of bioactive peptides from royal jelly
protein and their antihypertensive ability in SHR. J Nutr Biochem 13:80–86
Maurer I, Zierz S, Möller HJ (2000) A selective defect of cytochrome c oxidase is present in brain of Alzheimer disease
patients. Neurobiol Aging 21:455–462
Mazzio E, Deiab S, Park K et al (2013) High throughput screening to identify natural human monoamine oxidase B
inhibitors. Phytother Res 27(6):818–828
Melov S, Adlard PA, Morten K et al (2007) Mitochondrial oxidative stress causes hyperphosphorylation of tau. PLoS
One 2:536
Meyer JN, Hartman JH, Mello DF (2018) Mitochondrial toxicity. Toxicol Sci 162(1):15–23
Milgram NW, Head E, Zicker SC et al (2005) Learning ability in aged beagle dogs is preserved by behavioral
enrichment and dietary fortification: a two-year longitudinal study. Neurobiol Aging 26 (1):77–90
Milgram NW, Landsberg G, Merrick D et al (2015) A novel mechanism for cognitive enhancement in aged dogs with the
use of a calciumbuffering protein. J Vet Behav Clin Appl Res 10(3):217–222
Mishima K, Tozawa T, Satoh K et al (1999) Melatonin secretion rhythm disorders in patients with senile dementia of
Alzheimer’s type with disturbed sleep-waking. Biol Psychiatry 45(4):417–421
Moffat KS, Landsberg GM (2003) An investigation of the prevalence of clinical signs of cognitive dysfunction syndrome
(CDS) in cats. JAAHA 39(5):512
Mohanta T, Tamboli Y, Zubaidha P (2014) Phytochemical and medicinal importance of Ginkgo biloba L. Nat Prod Res
28:746–752
Momtaz S, Hassani S, Khan F et al (2018) Cinnamon, a promising prospect towards Alzheimer’s disease. Pharmacol
Res 130:241–258
Morán M, Moreno-Lastres D, Marín-Buera L et al (2012) Mitochondrial respiratory chain dysfunction: implications in
neurodegeneration. Free Radic Biol Med 53:595–609
Moran DL, Marone PA, Bauter MR et al (2013) Safety assessment of apoaequorin, a protein preparation: subchronic
toxicity study in rats. Food Chem Toxicol 57:1–10
Moran DL, Tetteh AO, Goodman RE et al (2014) Safety assessment of the calcium-binding protein, apoaequorin,
expressed by Escherichia coli. Regul Toxicol Pharmacol 69(2):243–249

725
 Morgan A, Stevens J (2010) Bacopa monnieri improve memory performance in older persons? Results of a
randomized, placebocontrolled, double-blind trial. J Altern Complement Med 16:753–759
Morgese MG, Schiavone S, Mhillaj E et al (2018) N-3 PUFA diet enrichment prevents amyloid beta-induced
depressive-like phenotype. Pharmacol Res 129:526–534
Mori T, Koyama N, Guillot-Sestier MV et al (2013) Ferulic acid is a nutraceutical β-secretase modulator that improves
behavioral impairment and Alzheimer-like pathology in transgenic mice. PLoS One 8(2):e55774
Morris MC, Evans DA, Tangney CC et al (2005) Relation of the tocopherol forms to incident Alzheimer disease and to
cognitive change. Am J Clin Nutr 81:508–514
Morris MC, Schneider JA, Li H et al (2015) Tocopherols relation to Alzheimer disease neuropathology in humans.
Alzheimers Dement 11:32–39
Mureşan CI, Schierhorn A, Buttstedt A (2018) The fate of major royal jelly proteins during proteolytic digestion in the
human gastrointestinal tract. J Food Agric Chem 66:4164–4170
Nagahara AH, Merrill DA, Coppola G et al (2009) Neuroprotective effects of brain-derived neurotrophic factor in rodent
and primate models for Alzheimer’s disease. Nat Med 15:331–337
Neilsen JC, Hart BL, Cliff KD et al (2001) Prevalence of behavioral changes associated with age-related cognitive
impairment in dogs. J Am Vet Med Assoc 218:1787–1791
Nunomura A, Castellani RJ, Zhu X et al (2006) Involvement of oxidative stress in Alzheimer disease. J Neuropathol
Exp Neurol 65:631–641
Obayashi K, Saeki K, Iwamoto J et al (2015) Physiological levels of melatonin relate to cognitive function and
depressive symptoms: the HEIJO-KYO cohort. J Clin Endocrinol Metab 100(8):3090–3096
Okuda M, Fijita Y, Katsube T et al (2018) Highly water pressurized brown rice improves cognitive dysfunction in
senescenceaccelerated mouse prone 8 and reduces amyloid beta in the brain. BMC Compliment Altern Med 18:110
Olajide OJ, Yawson EO, Gbadamosi IT et al (2017) Ascorbic acid ameliorates behavioral deficits and
neuropathological alterations in rat model of Alzheimer’s disease. Environ Toxicol Pharmacol 50:200–211
Ono K, Hirohata M, Yamada M et al (2005) Ferulic acid destabilizes preformed β-amyloid fibrils in vitro. Biochem
Biophys Res Commun 336:444–449
Opii WO, Joshi G, Head E et al (2008) Proteomic identification of brain proteins in the canine model of human aging
following a long-term treatment with antioxidants and a program of behavioral enrichment: relevance to Alzheimer’s
disease. Neurobiol Aging 29(1):51–70
Orhan I, Şenol FS, Gülpinar AR et al (2009) Acetylcholinesterase inhibitory and antioxidant properties of Cyclotrichium
niveum, Thymus praecox subsp, caucasicus var. caucasicus, Echinacea purpurea and E. pallida. Food Chem Toxicol
47:1304–1310
Orhan IE, Senol FS, Shekfeh S et al (2017) Pteryxin-A promising butyrylcholinesterase-inhibiting coumarin derivative
from Muttelina purpurea. Food Chem Toxicol 109:970–974
Orlando JM (2018) Behavioral nutraceuticals and diets. Vet Clin North Am Small Anim Pract 48(3):473
Orr SK, Trépanier MO, Bazinet RP (2013) n-3 Polyunsaturated fatty acids in animal models with neuroinflammation.
Prostaglandins Leukot Essent Fatty Acids 88:97–103
Osella MC, Re G, Odore R et al (2007) Canine cognitive dysfunction syndrome: prevalence, clinical signs and
treatment with a neuroprotective nutraceutical. Appl Anim Behav Sci 105:297–310
Pan Y (2011) Enhancing brain function in senior dogs: a new nutritional approach. Top Companion Anim Med
26(1):10–16
Pan Y, Larson B, Araujo JA et al (2010) Dietary supplementation with medium-chain TAG has long-lasting cognition-
enhancing effects in aged dogs. Br J Nutr 103:1746–1754
Papandreou MA, Kanakis CD, Polissiou MG et al (2006) Inhibitory activity on amyloid-β-aggregation and antioxidant
properties of Crocus sativus stigmas extract and its crocin constituents. J Agric Food Chem 54:8762–8768
Pedata F, Giovannelli L, Spignoli G et al (1985) Phosphatidylserine increases acetylcholine release from cortical slices
in aged rats. Neurobiol Aging 6:337–339
Peng WH, Wu CR, Chen CS et al (2004) Anxiolytic effect of berberine on exploratory activity of the mouse in two
experimental anxiety models, interaction with drugs acting at 5-HT receptors. Life Sci 75:2451–2462
Peng WH, Lo KL, Lee YH et al (2007) Berberine produces antidepressant-like effects in the forced swim test and in the
tail suspension test in mice. Life Sci 81(11):933–938
Peng XR, Wang X, Dong JR et al (2017) Rare hybrid dimers with antiacetylcholinesterase activities from a Safflower
(Carthamus tinctorius L.) seed oil cake. J Agric Food Chem 65(43):9453–9459
Peng M, Yi YX, Zhang T et al (2018) Stereoisomers of saponins in Panax notoginseng (Sanqi): a review. Front
Pharmacol 9:188
Perry NSL, Houghton P, Theobald A et al (2000) In vitro inhibition of human erythrocyte acetylcholinesterase by Sativa
lavandulaefolia essential oil and constituent terpenes. J Pharm Pharmacol 52:895–902
Perry NSL, Bollen C, Perry EK et al (2003) Salvia for dementia therapy: review of pharmacological activity and pilot
tolerability clinical trial. Pharmacol Biochem Behav 75:651–659
Phachonpai W, Wattanathorn J, Muchimapura S et al (2010) Neuroprotective effect of quercetin encapsulated
liposomes: a novel therapeutic strategy against Alzheimer’s disease. Am J Appl Sci 7(4):480–485
Pitt J, Leung Y (2016) Cognitive effects of nutraceuticals. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity.
Academic Press/Elsevier, Amsterdam, pp 29–48

726
 Pitt J, Leung Y (2018) Biomarkers of Alzheimer’s disease. In: Gupta RC (ed) Biomarkers in toxicology. Academic
Press/Elsevier, Amsterdam. In press
Piyabhan P, Wannasiri S, Naowaboot J (2016) Bacopa Monnieri (Brahmi) improved novel object recognition task and
increased cerebral vesicular glutamate transporter type 3 in sub-chronic phencyclidine rat model of schizophrenia. Clin
Exp Pharmacol Physiol 43 (12):1234–1242
Pletsch EA, Hamaker BR (2018) Brown rice compared to white rice slows gastric emptying in humans. Eur J Clin Nutr
72(3):367–373
Porquet D, Griñán-FerréC FI et al (2014) Neuroprotcive role of transresveratrol in murine model of familial Alzheimer’s
disease. J Alzheimers Dis 42:1209–1220
Pyrzanowska J, Piechal A, Blecharz-Klin K et al (2014) Long-term administration of Greek royal jelly improves spatial
memory and influences the concentration of brain neurotransmitters in naturally aged Wistar male rats. J
Ethnopharmacol 155:343–351
Qin L, Wu X, Block ML et al (2007) Systemic LPS causes chronic neuroinflammation and progressive
neurodegeneration. Glia 55:453–462
Qin L, Liu Y, Hong JS et al (2013) NADPH oxidase and aging drive microglial activation, oxidative stress, and
dopaminergic neurodegeneration following systemic LPS administration. Glia 61:855–868
Ramirez-Rodriguez G, Ortiz-Lopez L, Dominguez-Alonso A et al (2012) Chronic treatment with melatonin stimulates
dendritic maturation and complexity in adult hippocampal neurogenesis of mice. J Pineal Res 50:29–37
Ranjan KE, Singh HK, Parkavi A et al (2011) Attenuation of 1-(m-chlorophenyl)-biguanide induced hippocampus-
dependent memory impairment by a standardized extract of Bacopa monnieri (BESEB CDRI-08). Neurochem Res
36:2136–2144
Reddy PH, Beal MF (2008) Amyloid beta, mitochondrial dysfunction and synaptic damage: implications for cognitive
decline in aging and Alzheimer’s disease. Trends Mol Med 14:45–53
Reichling J, Frater-Schröder M, Herzog K et al (2006) Reduction of behavioral disturbances in elderly dogs
supplemented with a standardized Ginkgo leaf extract. Schweiz Arch Tierheilkd 148 (5):257–263
Reza ASM, Hossain MS, Akhter S et al (2018) In vitro antioxidant and cholinesterase inhibitory activities of
Elatostemma papillosum leaves and correlation with their phytochemical profiles: a study relevant to the treatment of
Alzheimer’s disease. BMC Complement Altern Med 18:123
Risuleo G (2016) Resveratrol: multiple activities on the biological functionality of the cell. In: Gupta RC (ed)
Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity. Academic Press/Elsevier, Amsterdam, pp 453–464
Rofina JE, Van Ederen AM, Toussaint MJM et al (2006) Cognitive disturbances in old dogs suffering from the canine
counterpart of Alzheimer’s disease. Brain Res 1069:216–226
Rong H, Liang Y, Niu Y (2018) Rosmarinic acid attenuates β-amyloidinduced oxidative stress via Akt/GSK-3β/Fyn-
mediated Nrf2 activation in PC2 cells. Free Radic Biol Med 120:114–123
Rosello A, Warnes G, Meier UC (2012) Cell death pathways and autophagy in the central nervous system and its
involvement in neurodegeneration, immunity and central nervous system infection: to die or not to die-that is the
question. Clin Exp Immunol 168:52–57
Sabogal-Guaqueta AM, Carrillo-Hormaza L, Osorio E et al (2015) Effects of bioflavonoids from Garcinia madruno on a
triple transgenic mouse model of Alzheimer’s disease. Pharmacol Res 129:128–138
Sabogal-Guaqueta AM, Munoz-Manco JI, Ramirez-Pineda JR et al (2018) The flavonoid quercetin ameliorates
Alzheimer’s disease pathology and protects cognitive and emotional function in aged triple transgenic Alzheimer’s
disease model mice. Neuropharmacology 93C:134–145
Sadhukhan P, Saha S, Dutta S et al (2018) Nutraceuticals: an emerging therapeutic approach against the
pathogenesis of Alzheimer’s disease. Pharmacol Res 129:100–114
Saini N, Singh D, Sandhir R (2012) Neuroprotective effects of Bacopa monnieri in experimental model of dementia.
Neurochem Res 37:1928–1937
Salvin HE, McGreevy PD, Sachdev PS et al (2010) Under diagnosis of canine cognitive dysfunction: a cross-sectional
survey of older companion dogs. Vet J 184(3):277–281
Salvin HE, McGreevy PD, Sachdev PS et al (2011) The canine cognitive dysfunction rating scale (CCDR): a data-
driven and ecologically relevant assessment tool. Vet J 188:331–336
Schliebs R, Liebmann A, Bhattacharya SK et al (1997) Systemic administration of defined extracts from Withania
somnifera (Indian ginseng) and Shilajit differentially affects cholinergic but not glutamatergic and GABAergic markers in
rat brain. Neurochem Int 30(2):181–190
Schmidt F, Boltze J, Jager C et al (2015) Detection and quantification of β-amyloid, pyroglutamil Aβ, and tau in aged
canines. J Neuropathol Exp Neurol 74(9):912–923
Scholey AB, Kennedy DO (2002) Acute, dose-dependent cognitive effects of Ginkgo biloba, Panax ginseng and their
combination in healthy young volunteers: differential interactions with cognitive demand. Hum Psychopharmacol 17:35–
44
Schon EA, Area-Gomez E (2013) Mitochondria-associated ER membranes in Alzheimer’s disease. Mol Cell Neurosci
55:26–36
Schütt T, Toft N, Berendt M (2015) Cognitive function, progression of age-related behavioral changes, biomarkers, and
survival in dogs more than 8 years old. J Vet Intern Med 29(6):1569–1577
Sechi S, Chiavolelli F, Spissu N et al (2015) An antioxidant dietary supplement improves brain-derived neurotrophic
factor levels in serum of aged dogs: preliminary results. J Vet Med 2015:412501. https://doi.org/10.1155/2015/412501
727
 Seibert L (2017) Management of dogs and cats with cognitive dysfunction. Today’s. Vet Pract 7(5):1–8
Sen A, Hongpaisan J (2018) Hippocampal microvasculature changes in association with oxidative stress in Alzheimer’s
disease. Free Radic Biol Med 120:192–203
Seo EJ, Fischer N, Efferth T (2018) Phytochemicals as inhibitors of NF-kappa B for treatment of Alzheimer’s disease.
Pharmacol Res 129:262–273
Serrano MAR, Pivatto M, FranciscoWet al (2010) Acetylcholinesterase inhibitory pyridine alkaloids of the leaves of
Senna multijuga. J Nat Prod 73:482–484
Sharman EH, Bondy SC (2016) Melatonin: a safe nutraceutical and clinical agent. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals:
efficacy, safety and toxicity. Academic Press/Elsevier, Amsterdam, pp 501–509
Shoshan-Barmatz V, Nahon-Crystal E, Shteinfer-Kuzmine A, Gupta R (2018) VDAC1, mitochondrial dysfunction, and
Alzheimer’s disease. Pharmacol Res 131:87–101
Sigurdsson S, Gudbjarnason S (2007) Inhibition of acetylcholinesterase by extracts and constituents from Angelica
archangelica and Geranium sylvaticum. Z Naturforsch C 62(9–10):689–693
Skoumalova A, Rofina J, Schwippelova Z et al (2003) The role of free radicals in canine counterpart of senile dementia
of the Alzheimer type. Exp Gerontol 38(6):711–719
Smith CC, McMahon LL (2005) Estrogen-induced increase in the magnitude of long-term potentiation occurs only
when the ratio of NMDA transmission to AMPA transmission is increased. J Neurosci 25:7780–7791
Sorrenti V, Contarini G, Sut S et al (2018) Curcumin prevents acute neuroinflammation and long-term memory
impairment induced by systemic lipopolysaccharide in mice. Front Pharmacol 9:183
Stough C, Lloyd J, Clarke J et al (2001) The chronic effects of an extract of Bacopa monnieri (Brahmi) on cognitive
function in healthy human subjects. Psychopharmacology (Berlin) 156:481–484
Sultana A, Nurun Nabi AHM, Nasir UM et al (2008) A dipeptide YY derived from royal jelly proteins inhibits renin
activity. Int J Mol Med 21:677–681
Šver L, Oršolić N, Tadić Z et al (1996) A royal jelly as a new potential immunomodulator in rats and mice. Comp
Immunol Microbiol Infect Dis 19:31–38
Taguchi R, Hatayama K, Takahashi T et al (2017) Structure-activity relations of rosmarinic acid derivatives for the
amyloid β aggregation inhibition and antioxidant properties. Eur J Med Chem 138:1066–1075
Taha AY, Henderson ST, Burnham MW (2009) Dietary enrichment with medium chain triglycerides (AC-1203) elevates
polyunsaturated fatty acids in the parietal cortex of aged dogs: implications for treating age-related cognitive decline.
Neurochem Res 34 (9):1619–1625
Tan X-S, Ma J-Y, Feng R et al (2013) Tissue distribution of berberine and its metabolites after oral administration in
rats. PLoS One 8(10): e77969
Teodoro JS, Duarte FV, Rolo AP, Palmeira CM (2016) Mitochondria as a target for safety and toxicity evaluation of
nutraceuticals. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity. Academic Press/Elsevier, Amsterdam, pp
387–400
Terry AV, Buccafusco JJ (2006) The cholinergic hypothesis of age and Alzheimer’s disease related cognitive deficits:
recent challenges and their implications for novel drug development. J Pharmacol Exp Ther 306:821–827
Tokunaga K, Yoshida C, Suzuki K et al (2004) Antihypertensive effect of peptide from royal jelly in spontaneously
hypertensive rats. Biol Pharm Bull 27:189–192
Trevisan MTS, Macedo FW, Meent M et al (2003) Screening for acetylcholinesterase inhibitors from plants to treat
Alzheimer’s disease. Quím Nova 26(3):301–304
Uddin MJ, Abdullah-Al-Mamun M, Biswas K et al (2016) Assessment of anticholinesterase activities and antioxidant
potentials of Anisomeles indica relevant to the treatment of Alzheimer’s disease. Orient Pharm Exp Med 16:113–121
Uddin MJ, Ali Reza ASM, Abdullah-Al-Mamun M et al (2018) Antinociceptive and anxiolytic and sedative effects of
methanol extract of Anisomeles indica: an experimental assessment in mice and computer aided models. Front
Pharmacol 9:246
Ude C, Schubert-Zsilavecz M, Wurglics M (2013) Ginkgo biloba extracts: a review of the pharmacokinetics of the
active ingredients. Clin Pharmacokinet 52:727–749
Vedin I, Cederholm T, Freund Levi Y et al (2008) Effects of docosahexaenoic acid-rich n-3 fatty acid supplementation
on cytokine release from blood mononuclear leukocytes: the Omega AD study. Am J Clin Nutr 87:1616–1622
Velaga MK, Basuri CKR, Taylor KS et al (2014) Ameliorative effects of Bacopa monnieri on lead-induced oxidative
stress in different regions of rat brain. Drug Chem Toxicol 37:357–364
Vite CH, Head E (2014) Aging in the canine and feline brain. Vet Clin North Am Small Anim Pract 44:1113–1129
Wang F, Zhao G, Cheng L et al (2004) Effects of berberine on potassium currents in acutely isolated CA1 pyramidal
neurons of rat hippocampus. Brain Res 999:91–97
Wang X, Wang R, Xing D et al (2005) Kinetic difference of berberine between hippocampus and plasma in rat after
intravenous administration of Coptidis rhizoma extract. Life Sci 77(24):3058–3067
Wang X, Su B, Zheng L et al (2009) The role of abnormal mitochondrial dynamics in the pathogenesis of Alzheimer’s
disease. J Neurochem 109:153–159
Wang M, Zhao J, Avula B et al (2014) High-resolution gas chromatography/mass spectrometry method for
characterization and quantitative analysis of ginkgolic acids in Ginkgo biloba plants, extracts, and dietary supplements. J
Agric Food Chem 62: 12103–12111

728
 Wee JJ, Mee PK, Chung AS (2011) Biological activities of ginseng and its application to human health. In: Benzie IFF,
Wachtel-Galor S (eds) Herbal medicine: biomolecular and clinical aspects. CRC Press, Boca Raton
Wevers A (2011) Localization of pre- and postsynaptic cholinergic markers in the human brain. Behav Brain Res
221:341–355
Wu YH, Feenstra MG, Zhou JN et al (2003) Molecular changes underlying reduced pineal melatonin levels in
Alzheimer’s disease: alterations in preclinical and clinical stages. J Clin Endocrinol Metab 88(12):5898–5906
Wu D, Wang X, Sun H (2018) The role of mitochondria in cellular toxicity as a potential drug target. Cell Biol Toxicol
34:87–91
Xiang C-P, Han J-X, Li X-C et al (2017) Chemical composition and acetylcholinesterase inhibitory activity of essential
oils from Piper species. J Agric Food Chem 65:3702–3710
Xiao Q, Wang C, Li J et al (2010) Ginkgolide B protects hippocampal neurons from apoptosis induced by beta-amyloid
25-35 partly via up-regulation of brain derived neurotrophic factor. Eur J Pharmacol 647:48–54
Xing YZ, Shang HC, Gao XM et al (2008) A comparison of the ancient use of ginseng in traditional Chinese medicine
with modern pharmacological experiments and clinical trials. Phytother Res 22:851–858
Yan JJ, Cho JY, Kim HS et al (2001) Protection against beta-amyloid peptide toxicity in vivo with long-term
administration of ferulic acid. Br J Pharmacol 133(1):89–96
Yan X, Tang J, dos Santos Passos C et al (2015) Characterization of lignanamides from hemp (Cannabis sativa L.)
seed and their antioxidant and acetylcholinesterase inhibitory activities. J Agric Food Chem 63:10611–10619
Yang MS, Wu MY (2016) Chinese ginseng. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity. Academic
Press/Elsevier, Amsterdam, pp 693–705
Yatin SM, Varadarajan S, Butterfield DA (2000) Vitamin E prevents Alzheimer’s amyloid β-peptide (1-42)-induced
neuronal protein oxidation and reactive oxygen species production. J Alzheimers Dis 2:123–131
Ye M, Fu S, Pi R et al (2009) Neuropharmacological and pharmacokinetic properties of berberine: a review of recent
research. J Pharm Pharmacol 61:831–837
Yoo KY, Hwang IK, Lim BO et al (2006) Berberry extract reduces neuronal damage and N-methyl-D-aspartate receptor
1 immunoreactivity in the gerbil hippocampus after transient forebrain ischemia. Biol Pharm Bull 29:623–628
Yoshida M, Hayashi K, Watadani R et al (2017) Royal jelly improves hyperglycemia in obese/diabetic KK-Ay mice. J
Vet Med Sci 79 (2):299–307
Yu H, Wang D, Zou L et al (2018) Proteomic alterations of brain subcellular organelles caused by low-dose copper
exposure: implication for Alzheimer’s disease. Arch Toxicol 92:1363–1382
Zamani Z, Reisi P, Alaei H et al (2012) Effect of royal jelly on special learning and memory in rat model of
streptozotocin-induced sporadic Alzheimer’s disease. Adv Biomed Res 1:26
Zhang J, Yang JQ, He BC et al (2009) Berberine and total base from rhizoma Coptis chinensis attenuate brain injury in
an aluminuminduced rat model of neurodegenerative disease. Saudi Med J 30 (6):760–766
Zhang X, Zhang X, Wang C et al (2013) Neuroprotection of early and short-time applying berberine in the acute phase
of cerebral ischemia: up-regulated pAkt, pGSK and pCREB, down-regulated NF-κBα e AMPK. Esses dadosB expression, ameliorated BBB
permeability. Brain Res 1459 (6):61–70
Zhang XZ, Qian SS, Zhang YJ et al (2016) Salvia miltiorrhiza: a source for anti-Alzheimer’s disease drugs. Pharm Biol
54:18–24
Zhang ZH, Wen L, Yu QY et al (2017) Long-term dietary supplementation with selenium-enriched yeast improves
cognitive impairment, reserves synaptic deficits, and mitigates tau pathology in a triple transgenic mouse model of
Alzheimer’s disease. J Agric Food Chem 65:4970–4979
Zhao Y, Zhao B (2013) Oxidative stress and the pathogenesis of Alzheimer’s disease. Oxid Med Cell Longev
2013:316523
Zhao N, Zhong C, Wang Y et al (2008) Impaired hippocampal neurogenesis is involved in cognitive dysfunction
induced by thiamine deficiency at early pre-pathological legion stage. Neurobiol Dis 29(2):176–185
Zhao HF, Li Q, Zhang ZF et al (2009) Long-term ginsenoside consumption prevents memory loss in aged SAMP8 mice
by decreasing oxidative stress and up-regulating the plasticity-related proteins in hippocampus. Brain Res 1256:111–122
Zhao B, Ren B, Guo R et al (2017a) Supplementation of lycopene attenuates oxidative stress induced
neuroinflammation and cognitive impairment via Nrf2/NF-κBα e AMPK. Esses dadosB transcriptional pathway. Food Chem Toxicol 109:505–516
Zhao T, Su G, Wang S et al (2017b) Neuroprotective effects of acetylcholinesterase inhibitory peptides from anchovy
(Coilia mystus) against glutamate-induced toxicity in PC12 cells. J Agric Food Chem 65:11192–11201
Zhao B, Liu H, Wang J et al (2018) Lycopene supplementation attenuates oxidative stress, neuroinflammation, and
cognitive impairment in aged CD-1 mice. J Agric Food Chem 66:3127–3136
Zhu F, Qian C (2006) Berberine chloride can ameliorate the spatial memory impairment and increase the expression of
interleukin-1beta and inducible nitric oxide synthase in the rat model of Alzheimer’s disease. BMC Neurosci 7:78

729
 Nutracêuticos para calmante e estresse
Anitha Alex e Ajay Srivastava

Resumo
O estresse em animais é evidente através dos comportamentos perturbadores exibidos,
incluindo latidos excessivos, inquietação, comportamento repetitivo, vigilância extrema,
etc. A sociabilidade é um fator chave para determinar o sucesso da adaptação dos
animais de estimação ao seu ambiente. Cães sociáveis sentem-se mais confortáveis com
estranhos e situações desconhecidas. Assim, reduzir o estresse e a ansiedade nos
animais de estimação é essencial para proporcionar interações sociais positivas e
melhorar a qualidade de vida deles e dos proprietários. O ácido g-aminobutírico (GABA) é
o principal neurotransmissor inibitório no cérebro de mamíferos, e muitos ansiolíticos
exercem sua ação por meio de interações com os receptores GABA. Além do sistema
gabaérgico, os sistemas serotonérgico, dopaminérgico e noradrenérgico também estão
implicados no desenvolvimento de ansiedade e estresse em vários modelos animais e em
humanos. Além disso, o envolvimento do eixo hipotálamo-pituitária-adrenal (HPA) e a
desregulação do sistema imunológico também podem mediar o estresse social em
animais que produz agressão e/ou depressão. Embora várias drogas ansiolíticas estejam
disponíveis no mercado, os suplementos dietéticos e extratos de ervas demonstraram
exercer efeitos calmantes equivalentes, com nenhum ou mínimos efeitos colaterais
viciantes ou aversivos. Este capítulo descreve os mecanismos subjacentes envolvidos no
desenvolvimento de estresse e ansiedade e vários nutracêuticos e substâncias que têm
potencial para reduzir o comportamento de estresse e melhorar as interações sociais em
caninos.

Palavras-chave: Estresse canino · Ansiedade · Calmante · GABA · Comportamento

A. Alex. Salt Lake City, UT, USA

A. Srivastava. Vets Plus Inc., Menomonie, WI, USA e-mail: drajay@vets-plus.com

1. Introdução
Os transtornos de estresse e ansiedade em cães como em humanos são devidos a um
desequilíbrio nos neurotransmissores no cérebro. Os principais atores na patogênese dos
transtornos de ansiedade são o ácido γ-aminobutírico (GABA), a serotonina, a dopamina
e a norepinefrina. Além disso, neuropeptídeos como colecistocinina (CCK), oxitocina,
vasopressina, peptídeo natriurético atrial (ANP) e substância P também estão implicados
730
na modulação de comportamentos relacionados ao estresse e ansiedade (Bandelow et al.
2017; MacLean et al. 2017). O papel do eixo hipotálamo-pituitária-adrenal (HPA) na
fisiopatologia dos transtornos de ansiedade também foi amplamente estudado. Estudos
indicam que a hiperativação do eixo HPA leva à estimulação da glândula adrenal para
liberar cortisol, deidroepiandrosterona (DHEA), adrenalina e noradrenalina. O cortisol, o
hormônio do estresse em humanos e cães (corticosteroides em roedores), medeia uma
variedade de efeitos por todo o corpo e cérebro e exerce um feedback negativo no eixo
HPA, inibindo assim sua própria produção (Herman e Cullinan 1997).

O estresse em cães pode ser reconhecido por sua resposta comportamental, como
vigilância ativa e movimentos repetitivos, como pular, andar e latir excessivamente. Os
cães domésticos são animais altamente sociais e a sociabilidade é uma característica
essencial para uma interação bem-sucedida com os humanos (Grigg et al. 2017). Os cães
enfrentam uma variedade de estressores em suas vidas, incluindo novidades, restrições
espaciais, aumento dos níveis de ruído, etc. O isolamento social também atua como um
estressor que resulta em alterações na reatividade ao estresse, comportamento social,
função dos sistemas neuroquímico e neuroendócrino, e mudanças fisiológicas,
anatômicas e comportamentais em animais e humanos (Mumtaz et al. 2018). Outro fator
de estresse são as visitas ao hospital veterinário. Reduzir os níveis de estresse em
animais de estimação deve ser uma prioridade durante suas visitas ao hospital e isso é
frequentemente esquecido. Há evidências crescentes que sugerem que os cuidados
veterinários de rotina podem estar contribuindo para a ansiedade do paciente ao longo da
vida, começando com o primeiro exame físico do cachorro ou gatinho (Global 2013). Os
relatórios sugerem que, embora um ambiente “sem estresse” não seja possível,
compreender como criar um ambiente de “baixo estresse” e como lidar com os animais de
uma maneira menos estressante beneficia muito os pacientes, funcionários e o hospital
(Lloyd 2017).

Evidências crescentes sugerem que extratos de ervas e nutrientes dietéticos podem

efetivamente reduzir a ansiedade, alterando os níveis de neurotransmissores e o eixo
HPA. Por exemplo, as vitaminas C, D e E, os ácidos graxos ômega-3 e o aminoácido L-
teanina do chá-verde são suplementos dietéticos que aumentam a produção de
dopamina. Além disso, a suplementação com o aminoácido L-triptofano e seu precursor,
5-HTP, as vitaminas B, vitamina D, selênio e ácidos graxos ômega-3 aumentam a
produção de serotonina. Esses suplementos de aminoácidos são blocos de construção de
neurotransmissores, e as vitaminas atuam como cofatores nas vias de biossíntese de
neurotransmissores. Esta abordagem dietética pode corrigir a neuroquímica subjacente

731
sem os efeitos colaterais associados aos medicamentos ansiolíticos que podem
simplesmente mascarar o problema (Alramadhan et al. 2012).

Este capítulo descreve os principais neurotransmissores envolvidos nos transtornos de

ansiedade e estresse, biomarcadores de estresse, vários suplementos dietéticos e
produtos à base de ervas que podem ajudar a acalmar os cães e reduzir seus níveis de
estresse.

2. Neurotransmissores, neuropeptídeos e eixo HPA em estresse e

ansiedade

2.1 Ácido g-aminobutírico (GABA)

O GABA é o principal neurotransmissor inibitório no cérebro dos mamíferos e

desempenha um papel central na manutenção do equilíbrio inibitório e excitatório. A
rápida ação inibitória do GABA é mediada pelos receptores GABA A, um canal iônico
cloridrato. Os estudos pré-clínicos e clínicos sugerem fortemente que as deficiências na
neurotransmissão Gabaérgica sustentam o estresse humano e os transtornos de
ansiedade (Goddard 2016). A hiperexcitabilidade da amígdala, em particular, está
fortemente associada à ansiedade, hipervigilância e incapacidade de regular as emoções.
Vários modelos de roedores destacaram o papel das isoenzimas sintéticas GABA ácido
glutâmico descarboxilase 65 (GAD65) e GAD67 na expressão do medo normal dos
mamíferos. A destruição da proteína GAD67 na amígdala do camundongo prejudicou a
extinção do medo normal e diminuiu a sensibilidade ao diazepam (Heldt et al. 2012).
Baixos níveis corticais de GABA foram observados em transtornos de pânico e podem
servir como um biomarcador potencial para pânico e outros transtornos de estresse
relacionados (Goddard et al. 2004). Experimentos em vários modelos animais implicaram
o papel do GABA na ansiedade de separação e na ansiedade traço (Tasan et al. 2011;
Feng et al. 2014). Além disso, o estresse de contenção crônico também pode levar à
diminuição da expressão das subunidades do receptor GABA A no córtex e no hipocampo,
sugerindo um papel na disfunção do eixo HPA e na sintomatologia do estresse
(Wisłowska-Stanek et al. 2013). Vários agentes ansiolíticos disponíveis no mercado hoje
medeiam seus efeitos calmantes, visando os receptores GABA. A benzodiazepina (BZD) é
um agonista completo no local BZD dos receptores GABA A e aumenta alostericamente as
respostas fisiológicas do GABA. O trabalho pré-clínico definiu ainda mais o papel das
subunidades do receptor GABA A discretas nos efeitos clínicos separados dos BZDs, como
ansiólise, sedação, relaxamento muscular e efeitos anticonvulsivantes (Rudolph e
Knoflach 2011).

732
O interesse recente em suplementos dietéticos aumentou o uso de GABA como
suplemento alimentar. Na Europa e nos Estados Unidos, o GABA é considerado um
“constituinte alimentar” e um “suplemento dietético”, respectivamente (Boonstra et al.
2015). Os efeitos calmantes do GABA por administração oral foram investigados em cães
adultos Shih Tzu e foram encontrados para diminuir o tempo gasto em pé e andando em
comparação com cães não tratados. Da mesma forma, uma depressão significativa no
nível de cortisol urinário também foi observada 7 h após a administração. Esses
resultados indicam que o GABA administrado por via oral exerce efeitos calmantes em
cães, assim como em humanos (Uetake et al. 2012). No entanto, deve-se notar que a
capacidade do GABA de cruzar a barreira hematoencefálica (BBB) em humanos não está
clara até agora e os relatórios disponíveis são, no mínimo, contraditórios (Boonstra et al.
2015).

Pode haver, no entanto, outros mecanismos pelos quais o GABA exerce seus efeitos,
como por meio do sistema nervoso entérico (SNE). Na verdade, foi demonstrado que a
microbiota intestinal melhora o humor e reduz a ansiedade em pacientes com fadiga
crônica (Logan e Katzman 2005; Rao et al. 2009; Pisanu e Squassina 2017). Da mesma
forma, estudos indicam que a ingestão oral de probióticos resultou em redução do cortisol
urinário e percepção de estresse psicológico (Messaoudi et al. 2011). Certas cepas
bacterianas, como Lactobacillus e Bifidobacterium podem produzir GABA in vivo e foram
consideradas eficazes no aumento das concentrações de GABA no SNE (Barrett et al.
2012). Isso pode explicar o efeito calmante relatado do GABA dietético; no entanto,
pesquisas adicionais são necessárias para apoiar os efeitos benéficos do GABA por meio
do SNE.

2.2 Serotonina (5-HT)

A serotonina ou 5-HT é uma monoamina encontrada no SNC, nas plaquetas sanguíneas e

no trato gastrointestinal. A principal fonte de liberação de serotonina no cérebro são os
núcleos da rafe no tronco cerebral. A serotonina pode inibir as respostas de luta/fuga
medicamentosa de substância cinzenta periaquedutal de ameaças, enquanto também
pode facilitar as respostas de ansiedade, mediadas pela amígdala (Deakin 2013). Dados
de animais e estudos genéticos e de neuroimagem em humanos apontam para um papel
do receptor 5HT1A no processamento neural da ansiedade (Akimova et al. 2009).
Recentemente, uma revisão do receptor 5HT2C sugeriu que esse receptor pode
desempenhar um papel crucial na ansiedade (Chagraoui et al. 2016). A classe de
antidepressivos inibidores seletivos da recaptação da serotonina (SSRIs) age inibindo a
recaptação da serotonina como o nome sugere e inclui citalopram, escitalopram
733
(enantiômero ativo de citalopram), fluoxetina, fluvoxamina, paroxetina e sertralina. A
fluoxetina é aprovada para uso veterinário no tratamento da ansiedade de separação
canina. Atenção especial deve ser dada ao tratar caninos com SSRIs, pois uma overdose
pode resultar em síndrome da serotonina, que pode se manifestar clinicamente como
náusea, vômito, midríase, hipersalivação, hipertermia, ataxia, tremores, rigidez muscular,
diarreia e convulsões. Os objetivos do tratamento nesta intoxicação são apoiar o animal,
prevenir a absorção futura da droga, apoiar o sistema nervoso central, controlar a
hipertermia e interromper qualquer atividade convulsiva. A segurança relativa dos SSRIs
em uma overdose, apesar da ocorrência da síndrome da serotonina, os torna mais
desejáveis do que outros antidepressivos (Fitzgerald e Bronstein 2013).

2.3 Dopamina

A dopamina está envolvida no comportamento motivado por recompensa e no controle

motor. Os cães ponteiros nervosos têm sido sugeridos como um modelo animal para
ansiedade patológica. Houve uma tendência para níveis mais baixos de [HVA] e [DOPAC]
e uma proporção [DOPAC]/[DA] significativamente mais baixa em cães nervosos,
sugerindo função dopaminérgica diminuída (Gurguis et al. 1990). O estresse de
isolamento social pode alterar os níveis de neurotransmissores, como dopamina,
serotonina, GABA, glutamato, o sistema nitrérgico e adrenalina, bem como levar a uma
alteração na sensibilidade do receptor de N-metil-D-aspartato (NMDA) e o sistema opioide
(Mumtaz et al. 2018).

2.4 Norepinefrina

NE é um neurotransmissor catecolaminérgico que desempenha um papel fundamental na

regulação do sistema nervoso autônomo. O metabolismo e as funções da norepinefrina
foram estudados extensivamente. Embora a hipofunção seja postulada para a depressão,
a hiperfunção é sugerida como a razão para os transtornos de ansiedade. A estimulação
do locus coeruleus, uma área que contém a maioria dos corpos celulares noradrenérgicos
do cérebro, mostrou induzir ansiedade e aumentar a concentração do principal metabólito
central de NE, 3-metoxi-4-hidroxifenil glicol (MHPG) em pacientes com ataques de pânico.
Também produz sintomas somáticos, aumento da pressão arterial e elevação dos níveis
de cortisol (Bandelow et al. 2017).

2.5 Colecistoquinina (CCK)

A CCK é um neuropeptídeo amplamente distribuído no cérebro e demonstrou induzir a

excitação de neurônios centrais, bem como efeitos pós-sinápticos inibitórios (Bourin e
Dailly 2004). Relatórios indicam que CCK pode ser um modulador importante das redes

734
neuronais que estão envolvidas na ansiedade (Bandelow et al. 2017). A CCK interage
com os sistemas serotonérgico, gabaérgico e noradrenérgico, bem como com
endocanabinóides e neuropeptídeos Y e S (Zwanzger et al. 2012). A expressão e a
ligação do receptor CCK-B estão aumentadas em modelos animais ansiosos. Em
humanos, a ansiedade induzida por CCK pode ser mediada por meio de receptores CCK-
B, enquanto em camundongos ela é mediada por receptores CCK-B e CCK-A (Li et al.
2013).

2.6 Oxitocina (OT)

Em humanos, a OT induz uma resposta reduzida a estímulos aversivos na amígdala.

Também é relatado que promove confiança e reduz o nível de ansiedade (Kirsch et al.
2005; Kosfeld et al. 2005; Heinrichs et al. 2009). Estudos recentes em cães sugerem que
OT facilita e responde a formas afiliativas de interação humano-animal (HAI). Foi
demonstrado que em um grupo de Labrador retrievers e cruzamentos de Labrador
retriever/Golden retriever, os cães participantes de HAI exibiram um aumento significativo
tanto na OT salivar (+ 39%) quanto na OT plasmática (+ 5,7%), enquanto os cães no
controle o grupo sem interação humana não. Esses resultados sugerem que em cães
expostos a HAI, as mudanças na OT salivar podem refletir a extensão do comportamento
afiliativo entre o cão e o humano, indicando o potencial da OT salivar para ser um
biomarcador útil em estudos de HAI (MacLean et al. 2017). Curiosamente, os efeitos da
oxitocina no comportamento social dos cães podem não ser universais, mas podem ser
limitados por situações e outros fatores individuais. Mais pesquisas neste campo são
necessárias, e a compreensão de como a OT medeia o comportamento social pode ser
útil para melhorar sua aplicação em farmacoterapia (Turcsán et al. 2017).

2.7 Vasopressina (AVP)

A vasopressina, junto com OT, tem sido associada a comportamento afiliado e agressivo
em cães domésticos (MacLean et al. 2017). Os relatórios indicam que enquanto a OT
pode desempenhar um papel maior no comportamento social afiliativo, ansiólise e inibição
da agressão, AVP pode desempenhar um papel maior na ansiogênese e agressão
(Coccaro et al. 1998; Thompson et al. 2006). O comportamento agressivo em cães é uma
preocupação séria e, apenas nos Estados Unidos, o número estimado de mordidas de
cães é de 4,5 milhões anualmente, com aproximadamente metade dessas mordidas
direcionadas a crianças (Centros para Controle e Prevenção de Doenças 2003; Gilchrist
et al. 2008). Em um experimento em cães de estimação com agressão crônica, cães com
histórico de agressão exibiram comportamento mais agressivo durante encontros
simulados com co-específicos e tiveram menor AVP plasmático livre, mas maior do que os
735
controles correspondentes. Além disso, na população de cães de assistência, os cães que
se comportaram de forma mais agressiva com um estranho ameaçador tiveram AVP total
mais alto do que os cães que não o fizeram, sugerindo o papel do AVP na formação do
comportamento social dos cães (MacLean et al. 2017).

2.8 Eixo HPA

O eixo HPA é o principal sistema fisiológico que medeia a resposta do corpo ao estresse.
Ele desempenha um papel fundamental na regulação da síntese e liberação de hormônios
endócrinos associados ao sistema nervoso central, incluindo o cortisol, um dos principais
hormônios do estresse. O cortisol tem efeitos generalizados por todo o corpo e cérebro e
passa através do BBB para diminuir a atividade do eixo HPA, disparando mecanismos de
feedback negativo, inibindo assim sua própria produção (Herman e Cullinan 1997). O
cortisol exerce seus efeitos por meio de interações com receptores de glicocorticoides e
mineralocorticoides e regula a expressão de vários genes, incluindo citocinas (Lee e Rhee
2017). Vários relatórios indicam que o estresse psicológico pode desencadear a liberação
de citocinas (Black 2003; Zalcman e Siegel 2006), e evidências crescentes têm mostrado
um papel importante do sistema imunológico na regulação de estados emocionais
negativos, bem como de personalidade (Maes et al. 2009; Réus et al. al. 2015; Takahashi
et al. 2018). A ativação do eixo HPA está implicada em muitos distúrbios
comportamentais, incluindo restrição social e espacial (Beerda et al. 1999). Estudos
indicam que, quando colocados em um ambiente de canil, os cães experimentam um
aumento nos níveis de cortisol seguido por uma diminuição dos níveis originais em casa
(Protopopova 2016).

3. Suplementos dietéticos para acalmar

O bem-estar dos cães pode ser afetado por mudanças no estilo de vida humano, hábitos
alimentares e aumento de estressores ambientais e sociais, levando a mudanças
comportamentais e ansiedade, seguidas por humores afetivos negativos e mal-estar
(Sechi et al. 2016). Demonstrou-se que um estado de ansiedade crônica e nutrição
afetam significativamente o comportamento (Bosch et al. 2007). Uma dieta suplementada
com aminoácidos, ácidos graxos poliinsaturados n-3 e n-6 (PUFAs) e uma quantidade
bem balanceada de proteínas e fibras foi considerada benéfica em cães com distúrbios
comportamentais evidentes (Bosch et al. 2007). Da mesma forma, a suplementação
dietética com minerais como cálcio, magnésio e selênio e vitaminas como C, D e E

736
também são relatados para reduzir a ansiedade e melhorar o humor em humanos e
animais (Carroll et al. 2000; Benton e Cook 1990; Hughes et al. 2011).

Relatórios indicam que a deficiência de ômega-3 também pode estar associada a

transtornos de humor e comportamentais (Owen et al. 2008) e os ácidos graxos ômega-3
da dieta têm se mostrado eficazes na melhoria do humor e na redução do risco de
ansiedade (Appleton et al. 2008; Kiecolt-Glaser et al. 2011). Além disso, estudos mostram
que uma dieta rica em triptofano pode diminuir a pontuação de agressão territorial,
enquanto uma dieta rica em proteínas sem suplementação de triptofano pode induzir uma
alta pontuação de agressão de dominância em cães (DeNapoli et al. 2000). Em caninos,
todas essas patologias têm sido consistentemente relatadas como associadas ao
estresse oxidativo. A vitamina C, um cofator para muitas enzimas, reduz a ansiedade ao
limitar o estresse oxidativo dos metabólitos e também ao limitar o cortisol (Hughes et al.
2011).

O estresse oxidativo resulta da geração excessiva de radicais livres, como íon peróxido,
monóxido de nitrogênio e radical hidroxila (Pasquini et al. 2010). Uma melhora na
estabilidade geral do tecido e na proteção contra o estresse oxidativo é observada quando
a dieta é enriquecida com antioxidantes (Sechi et al. 2015). Esses relatórios indicam que
as mudanças nos fatores relacionados ao estresse oxidativo, como derivados de
metabólitos reativos de oxigênio (dROMs) e potencial antioxidante biológico (BAP), devem
ser avaliados para monitorar o bem-estar e a saúde de cães sob condições estressantes
(Passantino et al. 2014; Sechi et al. 2015). Em uma avaliação clínica randomizada e
controlada, 69 cães de diferentes raças com ansiedade e estresse crônico foram
alimentados com dieta controle ou dieta nutracêutica por 45 dias. Os resultados deste
estudo mostraram um aumento significativo na concentração plasmática de serotonina,
dopamina e β-endorfinas no grupo de dieta nutracêutica, enquanto uma diminuição
significativa nos níveis de noradrenalina, cortisol e dROMs foi observada, sugerindo
benefícios do uso de dieta e nutracêuticos no tratamento de distúrbios comportamentais
(Sechi et al. 2016).

Em outro estudo do mesmo grupo, 24 cães de diferentes idades e raças com ansiedade
generalizada e transtornos comportamentais receberam terapia comportamental de contra
condicionamento e dessensibilização combinada com dieta nutracêutica por 10 dias. A
dieta consistia em uma fórmula mista de proteínas de peixe, carboidratos de arroz, Punica
granatum (romã), Valeriana officinalis, Rosmarinus officinalis, Tilia spp., extrato de chá e
L-triptofano, com uma relação ômega-3/ômega-6 de 1 : 0,8. Os resultados indicaram que
cães tratados com dietas específicas apresentaram melhora significativa nos tempos de
737
atividade e de descanso após 10 dias e melhora significativa nos sintomas clínicos e
comportamentais (Di Cerbo et al. 2017). Em geral, esses estudos demonstram os efeitos
positivos das dietas nutracêuticas sobre os parâmetros neuroendócrinos,
comportamentais e sociais associados ao estresse, ansiedade, agressão e distúrbios
comportamentais.

Hidrolisados de proteína

Estudos demonstraram que o hidrolisado de peixe, um suplemento natural derivado da

proteína do peixe, ajuda a reduzir o medo e a ansiedade em Beagles. Em um modelo de
tempestade, o hidrolisado de peixe demonstrou redução em uma resposta de
hiperatividade ao trovão (Landsberg et al. 2015). Outros hidrolisados derivados da
proteína do leite também mostraram eficácia na melhora dos sintomas de ansiedade em
ratos e cães. Um estudo comparativo realizado em 38 cães demonstrou que a alfa-
casozepina (um hidrolisado de proteína do leite) e a selegilina (Anipryl) foram igualmente
eficazes no alívio dos sintomas de ansiedade (Beata et al. 2007a, b). Além disso, em um
estudo controlado com placebo, a alfa-casozepina apresentou melhora no comportamento
de medo e ansiedade em gatos devido a situações socialmente estressantes. Embora não
elucidado claramente, alguns estudos mostraram que o efeito ansiolítico da alfa-
casozepina pode ser devido à sua semelhança estrutural com o GABA e sua ligação aos
receptores GABA no cérebro.

Feromônios
Feromônios são substâncias químicas que afetam o comportamento social dos
mamíferos. Em um estudo triplo-cego, randomizado e controlado por placebo em
cachorros recém-adotados de uma loja de animais, o feromônio apaziguador de cães
(DAP) mostrou reduções nos comportamentos associados ao medo de pessoas
desconhecidas e novos ambientes (Mills et al. 2006). Em outro estudo clínico aberto, o
DAP foi capaz de reduzir os sintomas de ansiedade em cães com medo que mostravam
sinais de medo em resposta a fogos de artifício (Sheppard e Mills 2003). Esses
feromônios também mostraram alguma eficácia na redução da ansiedade e do medo em
filhotes durante as aulas de filhotes e resultaram em uma melhor socialização (Denenberg
et al. 2005). No entanto, 11 dos 14 relatórios revisados e publicados no Journal of
American Veterinary Medical Association sugeriram que não há evidências suficientes
para apoiar a eficácia dos feromônios no tratamento de comportamento indesejável em
cães e gatos.

738
4. Extratos de ervas em ansiedade
Além de nutrientes como aminoácidos, minerais e vitaminas, ervas e produtos vegetais
também se mostraram eficazes no tratamento da ansiedade (Head e Kelly 2009; Saeed et
al. 2007). Os extratos vegetais fornecem uma alternativa e melhor ferramenta na
farmacoterapia de distúrbios psicológicos sem os efeitos adversos associados aos
ansiolíticos. Os medicamentos usados para tratar a ansiedade têm muitos efeitos
colaterais negativos, incluindo dependência, depressão, suicídio, convulsões, disfunção
sexual, dores de cabeça e muito mais (Alramadhan et al. 2012). Os medicamentos
ansiolíticos não restauram os níveis normais de neurotransmissores, mas, em vez disso,
manipulam a química do cérebro.

4.1 Ginkgo biloba

Ginkgo biloba, a árvore mais antiga existente no mundo por mais de 200 milhões de anos,
há muito está implicada no tratamento da ansiedade como parte da medicina tradicional
(Liu et al. 2015). Os suplementos nutricionais de Ginkgo biloba demonstraram ser
eficazes na redução da ansiedade em vários modelos animais. O extrato de Ginkgo
biloba (EGB 761) evitou prejuízos da memória espacial induzidos pelo estresse e pela
corticosterona em um modelo de restrição de estresse crônico em ratos (Walesiuk e
Braszko 2009). Da mesma forma, a administração diária de ginkgolide-A (1 ou 2 mg/kg,
po) resultou em um efeito do tipo ansiolítico em camundongos (Kuribara et al. 2003). Além
disso, foi demonstrado que os extratos de Ginkgo biloba ativam as vias do GABA e agem
como um benzodiazepínico para reduzir a ansiedade em pacientes com transtorno de
ansiedade generalizada. Em cães idosos (idade média de 11,4 anos), a administração de
extrato de folha de Ginkgo em uma dose diária de 40 mg/10 kg de peso corporal por 8
semanas melhorou a “gravidade da condição geriátrica”. A ocorrência de distúrbios
comportamentais típicos relacionados à idade é bem relatada em cães idosos. Uma
diminuição significativa em cinco dos seis escores de sinais clínicos (desorientação, sono/
mudanças de atividade, mudanças comportamentais, comportamento geral e condição
física geral/vitalidade) foi observada durante o período de tratamento, sugerindo a
utilidade de Ginkgo biloba em cães idosos com idade distúrbios comportamentais
relacionados (Reichling et al. 2006). No geral, esses resultados apóiam o uso do extrato
de Ginkgo biloba como um suplemento nutricional fundamental para melhorar o humor e o
comportamento em cães, aumentando assim a qualidade de vida dos cães e seus donos.

739
4.2 Erva de São João (Hypericum perforatum)

A erva de São João é uma planta perene aromática nativa da Europa e partes da Ásia,
América do Norte e América do Sul e tem sido usada tradicionalmente para o tratamento
de ansiedade e depressão e como um tônico nervoso. Uma grande quantidade de dados
clínicos e experimentais em animais demonstram que ela exerce sua ação por meio de
mecanismos semelhantes aos antidepressivos tricíclicos ou inibidores da recaptação da
serotonina (Bukhari e Dar 2013). Na verdade, a maioria dos estudos clínicos que o
comparam com medicamentos antidepressivos o consideraram superior ao placebo
(Sarris e Kavanagh 2009; Linde et al. 2008). A erva de São João aumenta os níveis
cerebrais de serotonina e também normaliza o eixo HPA, reduzindo o estresse
inflamatório e oxidativo (Tadros et al. 2009; Head e Kelly 2009). Relatórios indicam que a
erva de São João alivia a deterioração da memória induzida pelo estresse em ratos
(Trofimiuk et al. 2006). Em um experimento de teste de natação de força, o extrato de H.
perforatum (30-90 mg/kg ip) causou uma redução dependente da dose no tempo de
imobilidade em ratos com efeito máximo observado a 90 mg/kg, semelhante ao observado
com fluoxetina e imipramina (30–70 mg/kg ip) (Bukhari e Dar 2013). Esses estudos
sugerem que a erva de São João demonstra propriedades antidepressivas semelhantes
aos antidepressivos padrão e que o perfil antidepressivo de H. perforatum está mais
intimamente relacionado à classe de inibidores seletivos da recaptação da serotonina de
antidepressivos.

4.3 Ginseng

O ginseng é a raiz das plantas do gênero Panax e é tradicionalmente usado como erva
medicinal na Coreia, Japão e China. Apresenta atividade antioxidante potente atribuída
aos ginsenosídeos, que são extraídos das raízes, folhas, caules e frutos, e tem múltiplos
efeitos farmacológicos (Lee e Rhee 2017). Foi demonstrado que o ginseng regula o eixo
HPA e está implicado no tratamento da depressão, asma, hipertensão e transtornos de
estresse pós-traumático (Park et al. 2005; Choi et al. 2011). O ginseng também
demonstrou atenuar o aumento na concentração de corticosterona no plasma induzido
por estresse restritivo por meio da supressão da atividade da ACTH na glândula adrenal,
sugerindo seu uso como terapia potencial para transtornos mentais associados ao
estresse (Kim et al. 2003). Além de suprimir a ocorrência de doenças psicológicas, o
ginseng também previne doenças fisiológicas associadas ao estresse e regula a resposta
imunológica e as alterações hormonais devido ao estresse, mantendo assim a
homeostase (Lee e Rhee 2017).

740
4.4 Ashwagandha (Withania somnifera) – Ginseng indiano

Withania somnifera, pertencente à família Solanaceae, é usada há séculos na medicina

tradicional indiana, chinesa e árabe. Foi relatado que extratos de Withania somnifera (raiz,
folha ou fruta) possuem propriedades antiinflamatórias, antitumorais, antiestresse,
antioxidantes, imunomoduladoras, hematopoéticas e rejuvenescedoras (Mishra et al.
2000).
Os relatórios indicam que os roedores tratados com Ashwagandha mostraram ansiedade
reduzida em comparação com o tratamento de controle. Essa redução correspondeu à
redução da ansiedade nesses roedores quando tratados com vários medicamentos
benzodiazepínicos (Ramanathan et al. 2011; Mohan et al. 2011). Ashwagandha também
demonstrou, em estudos clínicos, reduzir a ansiedade em pacientes e foi superior em
ação em comparação com o grupo de controle recebendo psicoterapia (Cooley et al.
2009).

4.5 Valeriana (Valeriana officinalis)

A valeriana é uma raiz temperada comumente usada no tratamento de insônia e

ansiedade. Extratos de valeriana têm demonstrado aumentar a síntese de GABA e
diminuir a recaptação sináptica de GABA (Ortiz et al. 1999), por meio da ativação da
descarboxilase do ácido glutâmico, uma enzima envolvida na síntese de GABA (Awad et
al. 2007). O ácido valeriano, um composto ativo da raiz da valeriana, exerce sua ação por
meio da modulação alostérica dos receptores GABA A (Benke et al. 2009). As propriedades
ansiolíticas dos extratos de raiz de valeriana são bem relatadas em modelos animais e em
humanos, sugerindo seu uso como alternativa às drogas ansiolíticas (Benke et al. 2009;
Hattesohl et al. 2008).

Além dos extratos de ervas mencionados acima, há relatos sobre o uso benéfico de
rosenroot (raiz rosen), erva-cidreira, camomila e óleo de lavanda na redução da
ansiedade e do estresse em animais e humanos (Weeks 2009; Bystritsky et al. 2008;
Kennedy et al. 2006; Komiya et al. 2009). Os fitoquímicos contidos nos extratos de ervas
pertencem a diferentes classes, como alcalóides, flavonóides, ácidos fenólicos, lignanos,
cinamatos, terpenos e saponinas. Os resultados apresentados aqui mostraram que todos
eles possuem efeitos ansiolíticos em uma ampla gama de modelos animais de ansiedade.
Os mecanismos envolvidos podem incluir interações com receptores GABAA, sistemas
serotonérgicos, noradrenérgicos e dopaminérgicos. Os fitoquímicos também modulam o
eixo HPA, regulando assim os níveis de cortisol e a liberação de citocinas pró-
inflamatórias (Farzaei et al. 2016). Tomados em conjunto, esses estudos demonstram o

741
uso potencial de fitoquímicos como suplementos às terapias ansiolíticas convencionais, a
fim de melhorar a eficácia e reduzir os efeitos adversos.

5. Observações finais e orientações futuras

A ansiedade e o estresse podem ser estimulados por fatores ambientais, sociais ou
relacionados à idade em cães. A fisiopatologia subjacente da ansiedade é diversa e pode
envolver vários neurotransmissores e sistemas neuroendócrinos, incluindo o eixo HPA,
neuropeptídeos e deficiências em certos nutrientes dietéticos. Embora ansiolíticos mais
novos com menos efeitos colaterais e potenciais viciantes estejam disponíveis no
mercado, evidências crescentes mostram que os nutracêuticos são igualmente potentes
e, em alguns casos, mais eficazes do que a psicoterapia. Além disso, enquanto os
ansiolíticos exercem sua ação manipulando os sistemas de neurotransmissores no
cérebro, os suplementos de ervas exercem sua ação elevando os níveis de
neurotransmissores a níveis fisiológicos para manter a homeostase. Este capítulo
descreve os principais sistemas de neurotransmissores envolvidos no desenvolvimento da
ansiedade e do estresse, bem como os vários suplementos de ervas e dietéticos que são
benéficos para reduzir o estresse e acalmar os animais, proporcionando assim uma
interação mais significativa e agradável com seus donos. Deve-se notar que estudos
padronizados em cães nesta área ainda estão em sua infância, e mais estudos com
protocolos mais padronizados são necessários para investigar e validar os resultados
apresentados neste capítulo.

Referências
Akimova E, Lanzenberger R, Kasper S (2009) The serotonin-1A receptor in anxiety disorders. Biol Psychiatry 66:627–
635
Alramadhan E, Hanna MS, Hanna MS et al (2012) Dietary and botanical anxiolytics. Med Sci Monit 18(4):RA40–RA48
Appleton KM, Rogers PJ, Ness AR (2008) Is there a role for n-3 longchain polyunsaturated fatty acids in the regulation
of mood and behavior? A review of the evidence to date from epidemiological studies, clinical studies and intervention
trials. Nutr Res Rev 21 (1):13–41
Awad R, Levac D, Cybulska P et al (2007) Effects of traditionally used anxiolytic botanicals on enzymes of the gamma-
aminobutyric acid (GABA) system. Can J Physiol Pharmacol 85(9):933–942
Bandelow B, Baldwin D, Abelli M et al (2017) Biological markers for anxiety disorders, OCD and PTSD: a consensus
statement. Part II: neurochemistry, neurophysiology and neurocognition. World J Biol Psychiatry 18(3):162–214
Barrett E, Ross RP, O’Toole PW et al (2012) γ-Aminobutyric acid production by culturable bacteria from the human
intestine. J Appl Microbiol 113:411–417
Beata C, Beaumont-Graff E, Coll V et al (2007a) Effect of alphacasozepine (Zylkene) on anxiety in cats. J Vet Behav
2:40–46
Beata C, Beaumont-Graff E, Diaz C et al (2007b) Comparison of the effect of alpha-casozepine (Zylkene) versus
selegiline hydrochloride on anxiety disorders in dogs. J Vet Behav 2:175–183
Beerda B, Schilder MB, BernadinaWet al (1999) Chronic stress in dogs subjected to social and spatial restriction. II
Hormonal and immunological responses. Physiol Behav 66(2):243–254
Benke D, Barberis A, Kopp S et al (2009) GABA A receptors as in vivo substrate for the anxiolytic action of valerenic
acid, a major constituent of valerian root extracts. Neuropharmacology 56(1):174–181
Benton D, Cook R (1990) Selenium supplementation improves mood in a double-blind crossover trial.
Psychopharmacology 102 (4):549–550
742
 Black PH (2003) The inflammatory response is an integral part of the stress response: implications for atherosclerosis,
insulin resistance, type II diabetes and metabolic syndrome X. Brain Behav Immun 17:350–364
Boonstra E, de Kleijn R, Colzato LS et al (2015) Neurotransmitters as food supplements: the effects of GABA on brain
and behavior. Front Psychol 6:1520
Bosch G, Beerda B, Hendriks WH et al (2007) Impact of nutrition on canine behavior: current status and possible
mechanisms. Nutr Res Rev 20:180–194
Bourin M, Dailly E (2004) Cholecystokinin and panic disorder. Acta Neuropsychiatr 16:85–93
Bukhari IA, Dar A (2013) Behavioral profile of Hypericum perforatum (St. John’s Wort) extract. A comparison with
standard antidepressants in animal models of depression. Eur Rev Med Pharmacol Sci 17(8):1082–1089
Bystritsky A, Kerwin L, Feusner JD (2008) A pilot study of Rhodiola rosea (Rhodax) for generalized anxiety disorder
(GAD). J Altern Complement Med 14(2):175–180
Carroll D, Ring C, Suter M et al (2000) The effects of an oral multivitamin combination with calcium, magnesium, and
zinc on psychological well-being in healthy young male volunteers: a double-blind placebo-controlled trial.
Psychopharmacology 150(2):220–225
Centers for Disease Control and Prevention (2003) Nonfatal dog biterelated injuries treated in hospital emergency
departments–United States, 2001. MMWR Morb Mortal Wkly Rep 52:605–610
Chagraoui A, Thibaut F, Skiba M et al (2016) 5-HT2C receptors in psychiatric disorders: a review. Prog
Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry 66:120–135
Choi JY, Woo TS, Yoon SY et al (2011) Red ginseng supplementation more effectively alleviates psychological than
physical fatigue. J Ginseng Res 35:331e8
Coccaro EF, Kavoussi RJ, Hauger RL et al (1998) Cerebrospinal fluid vasopressin levels correlates with aggression
and serotonin function in personality-disordered subjects. Arch Gen Psychiatry 55:708–714
Cooley K, Szczurko O, Perri D et al (2009) Naturopathic care for anxiety: a randomized controlled trial
ISRCTN78958974. PloS One 4(8):e6628
Deakin J (2013) The origins of ‘5-HT and mechanisms of defense’ by Deakin and Graeff: a personal perspective. J
Psychopharmacol 27:1084–1089
DeNapoli JS, Dodman NH, Shuster L et al (2000) Effect of dietary protein content and tryptophan supplementation on
dominance aggression, territorial aggression, and hyperactivity in dogs. J Am Vet Med Assoc 217:504–508
Denenberg S, Landsberg G, Gaultier E (2005) Evaluation of DAP’s effect on reduction of anxiety in puppies (Canis
familiaris) as well as its usefulness in improving learning and socialization. In: Mills D, Levine E, Landsberg G (eds)
Current issues and research in veterinary behavioral medicine. Purdue University Press, West Lafayette, pp 225–228
Di Cerbo A, Sechi S, Canello S et al (2017) Behavioral disturbances: an innovative approach to monitor the modulatory
effects of a nutraceutical diet. J Vis Exp (119):e54878. https://doi.org/10.3791/54878
Farzaei MH, Bahramsoltani R, Rahimi R et al (2016) A systematic review of plant-derived natural compounds for
anxiety disorders. Curr Top Med Chem 6(17):1924–1942
Feng M, Sheng G, Li Z et al (2014) Postnatal maternal separation enhances tonic GABA current of cortical layer 5
pyramidal neurons in juvenile rats and promotes genesis of GABAergic neurons in neocortical molecular layer and
subventricular zone in adult rats. Behav Brain Res 260:74–82
Fitzgerald KT, Bronstein AC (2013) Selective serotonin reuptake inhibitor exposure. Top Companion Anim Med
28(1):13–17
Gilchrist J, Sacks J, White D et al (2008) Dog bites: still a problem? Inj Prev 14:296–301
Goddard AW(2016) Cortical and subcortical gamma amino acid butyric acid deficits in anxiety and stress disorders:
clinical implications. World J Psychiatry 6(1):43–53
Goddard AW, Mason GF, Rothman DL et al (2004) Family psychopathology and magnitude of reductions in occipital
cortex GABA levels in panic disorder. Neuropsychopharmacology 29:639–640
Grigg EK, Nibblett BM, Robinson JQ et al (2017) Evaluating pair versus solitary housing in kenneled domestic dogs
(Canis familiaris) using behavior and hair cortisol: a pilot study. Vet Rec Open 4(1): e000193.
https://doi.org/10.1136/vetreco-2016-000193
Gurguis GN, Klein E, Mefford IN et al (1990) Biogenic amines distribution in the brain of nervous and normal pointer
dogs. A genetic animal model of anxiety. Neuropsychopharmacology 3(4):297–303
Hattesohl M, Feistel B, Sievers H et al (2008) Extracts of Valeriana officinalis L.s.l. show anxiolytic and antidepressant
effects but neither sedative nor myorelaxant properties. Phytomedicine 15(1–2):2–15
Head KA, Kelly GS (2009) Nutrients and botanicals for treatment of stress: adrenal fatigue, neurotransmitter
imbalance, anxiety, and restless sleep. Altern Med Rev 14(2):114–140
Heinrichs M, von Dawans B, Domes G (2009) Oxytocin, vasopressin, and human social behavior. Front
Neuroendocrinol 30:548–557
Heldt SA, Mou L, Ressler KJ (2012) In vivo knockdown of GAD67 in the amygdala disrupts fear extinction and the
anxiolytic-like effect of diazepam in mice. Transl Psychiatry 2:e181
Herman JP, Cullinan WE (1997) Neurocircuitry of stress: central control of the hypothalamo-pituitary-adrenocortical
axis. Trends Neurosci 20(2):78–84
Hughes RN, Lowther CL, van Nobelen M (2011) Prolonged treatment with vitamins C and E separately and together
decreases anxietyrelated open-field behavior and acoustic startle in hooded rats. Pharmacol Biochem Behav 97(3):494–
499

743
 Kennedy DO, Little W, Haskell CF et al (2006) Anxiolytic effects of a combination of Melissa officinalis and Valeriana
officinalis during laboratory induced stress. Phytother Res 20(2):96–102
Kiecolt-Glaser JK, Belury MA, Andridge R et al (2011) Omega-3 supplementation lowers inflammation and anxiety in
medical students: a randomized controlled trial. Brain Behav Immun 25 (8):1725–1734
Kim DH, Moon YS, Jung JS et al (2003) Effects of ginseng saponin administered intraperitoneally on the hypothalamo-
pituitary-adrenal axis in mice. Neurosci Lett 343(1):62–66
Kirsch P, Esslinger C, Chen Q et al (2005) Oxytocin modulates neural circuitry for social cognition and fear in humans.
J Neurosci 25:11489–11493
Komiya M, Sugiyama A, Tanabe K et al (2009) Evaluation of the effect of topical application of lavender oil on
autonomic nerve activity in dogs. Am J Vet Res 70(6):764–769
Kosfeld M, Heinrichs M, Zak PJ et al (2005) Oxytocin increases trust in humans. Nature 435:673–676
Kuribara H, Weintraub ST, Yoshihama T et al (2003) An anxiolytic-like effect of Ginkgo biloba extract and its
constituent, ginkgolide-A, in mice. J Nat Prod 66(10):1333–1337
Landsberg GM, Mougeot L, Kelly S et al (2015) Assessment of noiseinduced fear and anxiety in dogs: modification by
a novel fish hydrolysate supplemented diet. J Vet Behav 10:391e398
Lee S, Rhee DK (2017) Effects of ginseng on stress-related depression, anxiety, and the hypothalamic-pituitary-
adrenal axis. J Ginseng Res 41(4):589–594
Li H, Ohta H, Izumi H et al (2013) Behavioral and cortical EEG evaluations confirm the roles of both CCKA and CCKB
receptors in mouse CCK-induced anxiety. Behav Brain Res 237:325–332
Linde K, Berner MM, Kriston L (2008) St John’s wort for major depression. Cochrane Database Syst Rev 4:CD000448
Liu L, Liu C, Wan Y et al (2015) Herbal medicine for anxiety, depression and insomnia. Curr Neuropharmacol
2015(13):481–493
Lloyd JKF (2017) Minimizing stress for patients in the veterinary hospital: why it is important and what can be done
about it. Vet Sci 4(2):E22. https://doi.org/10.3390/vetsci4020022
Logan AC, Katzman M (2005) Major depressive disorder: probiotics may be an adjuvant therapy. Med Hypotheses
64:533–538
MacLean EL, Gesquiere LR, Gee NR et al (2017) Effects of affiliative human-animal interaction on dog salivary and
plasma oxytocin and vasopressin. Front Psychol 8:1606. https://doi.org/10.3389/fpsyg.2017.01606. eCollection 2017
Maes M, Yirmyia R, Noraberg J et al (2009) The inflammatory and neurodegenerative (I&ND) hypothesis of
depression: leads for future research and new drug developments in depression. Metab Brain Dis 24:27–53
Messaoudi M, Lalonde R, Violle N et al (2011) Assessment of psychotropic-like properties of a probiotic formulation
(Lactobacillus helveticus R0052 and Bifidobacterium longum R0175) in rats and human subjects. Br J Nutr 105:755–764
Mills DS, Ramos D, Gandia Estelles M et al (2006) A triple blind placebo-controlled investigation into the assessment
of the effect of dog appeasing pheromone (DAP) on anxiety related behavior of problem dogs in the veterinary clinic.
Appl Anim Behav Sci 98:114–126
Mishra LC, Singh BB, Dagenais s. (2000) Scientific basis for the therapeutic use of Withania somnifera
(ashwagandha): a review Altern. Med Rev 5:334–346
Mohan L, Rao US, Gopalakrishna HN et al (2011) Evaluation of the anxiolytic activity of NR-ANX-C (a polyherbal
formulation) in ethanol withdrawal-induced anxiety behavior in rats. Evid Based Complement Alternat Med 2011:327160
Mumtaz F, Khan MI, Zubair M et al (2018) Neurobiology and consequences of social isolation stress in animal model—
a comprehensive review. Biomed Pharmacother 105:1205–1222
Ortiz JG, Nieves-Natal J, Chavez P (1999) Effects of Valeriana officinalis extracts on [3H]fl unitrazepam binding,
synaptosomal [3H]GABA uptake, and hippoc mpal [3H]GABA release. Neurochem Res 24(11):1373–1378
Overall KL (2013) Fear factor: is routine veterinary care contributing to lifelong patient anxiety? Available online:
http://veterinarynews.dvm360.com/fear-factor-routine-veterinary-carecontributinglifelong-patient-anxiety. Accessed on 21
Dec 2016
Owen C, Rees AM, Parker G (2008) The role of fatty acids in the development and treatment of mood disorders. Curr
Opin Psychiatry 21:19–24
Park JH, Cha HY, Seo JJ et al (2005) Anxiolytic-like effects of ginseng in the elevated plus-maze model: comparison of
red ginseng and sun ginseng. Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry 29:895e900
Pasquini A, Luchetti E, Cardini G (2010) Evaluation of oxidative stress in hunting dogs during exercise. Res Vet Sci
89:120–123
Passantino A, Quartarone V, Pediliggeri M et al (2014) Possible application of oxidative stress parameters for the
evaluation of animal welfare in sheltered dogs subjected to different environmental and health conditions. J Vet Behav
9:290–294
Pisanu C, Squassina A (2017) We are not alone in our body: insights into the involvement of microbiota in the
etiopathogenesis and pharmacology of mental illness. Curr Drug Metab 19:688–694
Protopopova A (2016) Effects of sheltering on physiology, immune function, behavior, and the welfare of dogs. Physiol
Behav 159:95–103
Ramanathan M, Balaji B, Justin A (2011) Behavioral and neurochemical evaluation of Perment® an herbal formulation
in chronic unpredictable mild stress induced depressive model. Indian J Exp Biol 49 (4):269–275
Rao AV, Bested AC, Beaulne TM et al (2009) A randomized, doubleblind, placebo-controlled pilot study of a Probiotic in
emotional symptoms of chronic fatigue syndrome. Gut Pathog 1:6. https://doi.org/10.1186/1757-4749-1-6

744
 Reichling J, Frater-Schröder M, Herzog K et al (2006) Reduction of behavioral disturbances in elderly dogs
supplemented with a standardized Ginkgo leaf extract. Schweiz Arch Tierheilkd 148 (5):257–263
Réus GZ, Fries GR, Stertz L et al (2015) The role of inflammation and microglial activation in the pathophysiology of
psychiatric disorders. Neuroscience 300:141–154
Rudolph U, Knoflach F (2011) Beyond classical benzodiazepines: novel therapeutic potential of GABAA receptor
subtypes. Nat Rev Drug Discov 10:685–697
Saeed SA, Bloch RM, Antonacci DJ (2007) Herbal and dietary supplements for treatment of anxiety disorders. Am Fam
Physician 76(4):549–556
Sarris J, Kavanagh DJ (2009) Kava and St. John’s Wort: current evidence for use in mood and anxiety disorders. J
Altern Complement Med 15(8):827–836
Sechi S, Chiavolelli F, Spissu N et al (2015) An antioxidant dietary supplement improves brain-derived neurotrophic
factor levels in serum of aged dogs: preliminary results. J Vet Med 2015:412501
Sechi S, Di Cerbo A, Canello S et al (2016) Effects in dogs with behavioral disorders of a commercial nutraceutical diet
on stress and neuroendocrine parameters. Vet Rec 180(1):18. https://doi.org/10.1136/vr.103865
Sheppard G, Mills DS (2003) Evaluation of dog-appeasing pheromone s a potential treatment for dogs fearful of
fireworks. Vet Rec 152:432–436
Tadros MG, Mohamed MR, Youssef AM et al (2009) Involvement of serotoninergic 5-HT1A/2A, alpha-adrenergic and
dopaminergic D1 receptors in St. John’s wort-induced prepulse inhibition deficit: a possible role of hyperforin. Behav
Brain Res 199(2):334–339
Takahashi A, Flanigan ME, McEwen BS et al (2018) Aggression, social stress, and the immune system in humans and
animal models. Front Behav Neurosci 12:56
Tasan RO, Bukovac A, Peterschmitt YN et al (2011) Altered GABA transmission in a mouse model of increased trait
anxiety. Neuroscience 183:71–80
Thompson R, George K, Walton J et al (2006) Sex-specific influences of vasopressin on human social communication.
Proc Natl Acad Sci USA 103:7889–7894
Trofimiuk E, Walesiuk A, Braszko JJ (2006) St John’s wort (Hypericum perforatum) counteracts deleterious effects of
the chronic restraint stress on recall in rats. Acta Neurobiol Exp (Wars) 66(2):129–138
Turcsán B, Range F, Rónai Z et al (2017) Context and individual characteristics modulate the association between
oxytocin receptor gene polymorphism and social behavior in border Collies. Front Psychol 8:2232
Uetake K, Okumoto A, Tani N et al (2012) Calming effect of orally administered γ-aminobutyric acid in Shih Tzu dogs.
Anim Sci J 83 (12):796–798
Walesiuk A, Braszko JJ (2009) Preventive action of Ginkgo biloba in stress- and corticosterone-induced impairment of
spatial memory in rats. Phytomedicine 16(1):40–46
Weeks BS (2009) Formulations of dietary supplements and herbal extracts for relaxation and anxiolytic action: relarian.
Med Sci Monit 15(11):RA256–RA262
Wisłowska-Stanek A, Lehner M, Skórzewska A et al (2013) Changes in the brain expression of alpha-2 subunits of the
GABA-A receptor after chronic restraint stress in low- and high-anxiety rats. Behav Brain Res 253:337–345
Zalcman SS, Siegel A (2006) The neurobiology of aggression and rage: role of cytokines. Brain Behav Immun 20:507–
514
Zwanzger P, Domschke K, Bradwejn J (2012) Neuronal network of panic disorder: the role of the neuropeptide
cholecystokinin. Depress Anxiety 29:762–774

745
 Nutracêuticos em doenças cardiovasculares
Csaba K. Zoltani

Resumo
A disfunção cardíaca em animais, sob certas condições, pode ser aliviada ou prevenida
pelo consumo de nutracêuticos. Os nutracêuticos, que são componentes naturais não
farmacêuticos das plantas, são capazes de afetar o sistema genético e os sistemas
fisiológicos dos animais após sua absorção. Este capítulo aborda o modo de ação de
componentes fitoterápicos específicos em doenças cardíacas comuns em animais.

Palavras-chave: Disfunção cardíaca animal · Doenças cardíacas · Nutracêuticos · Modo

de ação dos nutracêuticos

C. K. Zoltani. Emeritus US Army Research Lab, Aberdeen Proving Ground, Aberdeen, MD, USA

1. Introdução
As doenças cardiovasculares em animais emulam seus homólogos em humanos. A
insuficiência cardíaca (IC), a incapacidade do coração de fornecer oxigênio e nutrientes
às células, é um dos principais diagnósticos. Há um grande número de disfunções
cardíacas possíveis, incluindo inflamação, bloqueio do fluxo sanguíneo devido à isquemia,
aterosclerose e distúrbio da atividade elétrica (Francis et al. 1990). Na IC, um dos
sintomas dominantes, a fração de ejeção reduzida, geralmente é acompanhada por várias
disfunções relacionadas.

O estresse oxidativo e o desequilíbrio entre a geração e a destruição de espécies reativas

de oxigênio (ROS) nos tecidos marcam muitas dessas condições. A lipidemia resultante
impede o fluxo sanguíneo, causa disfunção vascular e altera o nível de óxido nítrico (NO).

O potencial valor medicinal de algumas plantas para modificar essas condições é

reconhecido desde os tempos antigos. Os nutracêuticos, por meio de vários processos
diferentes, fornecem um meio de combater o aparecimento de doenças. Essas ações
incluem aspectos antioxidantes, antiinflamatórios, anticâncer e de controle de lipídios.
Atualmente, algumas matérias-primas são suplementadas com ingredientes adicionais
com propriedades desejáveis para ajudar os animais a superar possíveis condições
adversas de saúde. Nutracêuticos (Wildman 2001; Lockwood 2007; Zoltani 2016) têm
ingredientes vegetais que ajudam a combater doenças cardíacas.

746
Recentemente, foi reconhecido que os nutracêuticos podem desempenhar um papel
importante, induzindo vias de sinalização desejáveis que controlam a função celular e,
assim, corrigindo disfunções cardíacas (Cicero e Colletti 2018; Ferguson et al. 2016). A
atividade trombolítica dependente de radicais livres e plaquetas e a hipertensão podem
ser particularmente influenciadas. Nutracêuticos como ácidos graxos n-3 41, quercetina
(Larson et al. 2012; Choi et al. 2008), flavonóides e polifenóis são importantes para as
defesas antioxidantes. Além de ser um componente regular da matéria-prima, os
nutracêuticos também estão disponíveis como resíduos de alimentos vegetais (Varzakas
et al. 2016) e resíduos de frutas (Babbar et al. 2015) e em sistemas de entrega de
nutrientes em nanoescala (McClements 2015).

A introdução de nutracêuticos para conferir benefícios cardiovasculares às vezes requer

transformações preliminares do componente. Um envolve a fermentação de microalgas
para a produção de ácidos graxos ômega e subsequente conversão em prostaglandinas,
que regulam a atividade celular e a função cardiovascular.

A eletroforese capilar (CE) é usada para a seleção do conteúdo cardíaco útil de

resveratrol, chá-verde e fitoestrógenos de soja e linho. Agora existe uma grande indústria
que fornece suplementos alimentares contendo esses e outros itens relacionados.

2. Nutracêuticos modulam a expressão genética

Os componentes nutracêuticos das plantas são compostos bioativos que envolvem a
ativação da antioxidação, transdução de sinal, integridade mitocondrial e genes (Mishra et
al. 2009). Os efeitos antiinflamatórios por meio da inibição de fatores de transcrição e
citocinas citotóxicas são notáveis. Primeiramente, esses componentes produzem efeitos
endoteliais e podem evitar resultados cardíacos indesejados, reduzindo a adesão de
lipídios às paredes dos vasos sanguíneos e afrouxando depósitos e reduzindo o estresse
oxidativo.

Quando ingeridos, os nutracêuticos induzem várias vias de sinalização que incluem os

fatores de transcrição NFkB e Nrf2. Eles exercem seu controle antiinflamatório e
antioxidante por meio da inibição. O primeiro, fator nuclear kappa, é um intensificador da
cadeia leve de células B ativadas. São linfócitos que não são processados pela glândula
timo e são responsáveis pela produção de anticorpos. Além disso, funciona como um
complexo proteico que controla a transcrição de DNA, produção de citocinas e aspectos
da sobrevivência celular e é cárdioprotetor durante hipóxia e lesão de reperfusão (Brasier

41 Na literatura, n-3, ômega-3, bem como Ω-3 são usados de maneira intercambiável.
747
2006). A superprodução desse ativador promove a insuficiência cardíaca ao promover a
inflamação por meio de citocinas que produzem uma resposta ao estresse do retículo
endoplasmático.

2.1 Rede Regulatória NFkB

No estado inativado, o NFkB está localizado no citosol complexado com a proteína

inibitória 1kBa. Este último bloqueia a capacidade do fator de transcrição NFkB de se ligar
ao DNA. No coração doente, o NFkB está aumentado. Também regula uma série de
programas genéticos, incluindo hipertrofia, e fornece proteção contra hipóxia e inflamação
(Gordon et al. 2011; Hayden e Ghosh 2012). Pode ser induzido por vias canônicas ou não
canônicas (Valen et al. 2001). Como um fator de transcrição indutível, o NF kB medeia
mudanças transitórias na expressão gênica. Quando desregulado, contribui para a
fisiopatologia da inflamação como uma molécula reguladora. A atividade anormal do NFkB
e um nível anormal de miRNAs frequentemente andam juntos, junto com a regulação
mútua.

2.2 Nrf2 regula genes antioxidantes e de desintoxicação

Nrf2 é um ativador transcricional potente. É um regulador mestre da resposta antioxidante

para neutralizar o estresse oxidativo. Em resposta ao estresse oxidativo, atua nos genes
citoprotetores. Ao se ligar a elementos de resposta antioxidante (ARE), induz enzimas
antioxidantes que protegem contra danos de oxidação (Chen et al. 2015; Satta et al.
2017). Expressões elevadas de Nrf2, marcador de estresse oxidativo, genes-alvo
envolvidos com resistência ao estresse. Um grande número de moléculas são indutores
de Nrf2 que interrompem a ubiquitinação mediada por Keap1, permitindo que a proteína
Nrf2 se acumule e se ligue no promotor de genes (Chen e Maltagliati 2018).

3. Nutracêuticos que evitam o desenvolvimento da disfunção cardíaca

Foram identificados vários ingredientes nutracêuticos que combatem o desenvolvimento
da disfunção cardíaca. Isso inclui antioxidantes, polifenóis para controle de doenças
arteriais e flavonóides que bloqueiam a ECA (enzima conversora de angiotensina),
regulando assim a pressão arterial e fortalecendo minúsculos capilares que transportam
oxigênio para todas as células. Além disso, ácidos graxos poliinsaturados ômega-3,
vitaminas de vários tipos, minerais para prevenção e tratamento de DCV (doenças
cardiovasculares) e curcumina que, entre outros suplementos, melhora o estado da
parede arterial (Tabela 1).

748
 Tabela 1 Nutracêuticos selecionados com potencial terapêutico para a melhoria da disfunção
cardiovascular
Nutracêutico Ingrediente ativo Afeta Efeito Referências
Aggarwal e
Níveis de lipídios Antioxidante Harikumar (2009)

Atenuar a cardiotoxicidade
Anti-inflamatório
induzida por adriamicina
Curcumina/
Cúrcuma Sinalização celular
piperina Inibidor de p300-HAT
mutante Alwi et al. (2008)

Efeito na hipertrofia cardíaca Diminui o LDL

Corrige a homeostase de Ca2+ Bloqueia NFkB, VCAM-1
Estresse oxidativo, pressão
Inibe o NADPH vascular Larson et al. (2012)
arterial
Polifenol
Quercetina
Flavonóides Função vascular Antioxidante
Choi et al. (2008)
Inibidor de NFkB
Reduz os lipídios do Cardoso et al.
Dislipidemia (2015)
sangue
Algas Melhora a função
Macroalgas Estresse oxidativo endotelial, pressão
marinhas
arterial Dousip et al. (2014)

Inflamação vascular
Mantém a homeostase
Efeitos vasculares
de NO
Polifenóis Ativa o NO endotelial Reduz a pressão arterial
Chá verde Grassi et al. (2013)
Catequina Suprime a adesão plaquetária Limita a inflamação
Inibe o fator de transcrição
NFkB
Fator nuclear NFkB, ativa
Regula a inflamação Matos et al. (2012)
Fitoalexina, SIRT1
estilbeno Diminui o LDL Histonas desacetiladas Araim et al. (2002)
Resveratrol fornecem
resistência à Diminuição da célula endotelial
Fatores de transcrição Berman et al.
infecção ICAM
(2017)
Antioxidante
Células endoteliais, afetam o
Antioxidante
Carotenóides Licopeno metabolismo lipídico Wang et al. (2014)
Estresse oxidativo Limita os radicais livres

3.1 Antioxidantes

Os antioxidantes impedem a oxidação de moléculas e a produção de radicais livres,

prevenindo assim o início de processos de doenças. O oxigênio altamente reativo, como o
peróxido de hidrogênio (H 2O2) ou o radical hidroxila, por sua instabilidade, reage com
moléculas biológicas oxidando o DNA e proteínas causando mutações. Podem ocorrer
inibições enzimáticas e degradação de proteínas.

749
A produção de ROS faz parte do processo de geração de energia metabólica na cadeia
de transporte de elétrons. As mitocôndrias são os principais produtores de ROS. Os
defeitos que resultam na diminuição da transferência de elétrons aumentam a produção
de ROS e as condições patológicas subsequentes.

O estresse oxidativo, por meio da oxidação da lipoproteína de baixa densidade (LDL),

contribui para a aterosclerose culminando em doença cardiovascular (Lee et al. 2017). Em
animais, o ácido úrico com alta concentração de antioxidantes é catalisado para a
alantoína, que é benéfica na estimulação do crescimento do tecido saudável e na
reparação de feridas e também atua como um agente anti-hipertensivo por meio da
ativação do receptor da imidazolina. Isso inibe o sistema nervoso simpático, diminuindo
também a contratilidade cardíaca.

Nutracêuticos que contêm glutationa, um importante antioxidante, também é um novo

biomarcador para a detecção de estresse oxidativo (Irino et al. 2016). O nível de ácido 2-
aminobutírico (2-AB) na circulação indica o metabolismo da glutationa. Mudanças nos
níveis de 2-AB refletem o estado de estresse oxidativo. Outros indicadores incluem os
níveis de vitamina C, vitamina E, e melatonina.

3.2 Polifenóis

Micronutrientes polifenólicos contidos em plantas, frutas e vegetais análogos à fitoalexina

desempenham um papel na prevenção de disfunções cardiovasculares. Eles são muito
benéficos devido à sua função antioxidante e sua capacidade de gerar enzimas
desintoxicantes. Seu efeito depende da biodisponibilidade na taxa de absorção intestinal,
que varia com a classe de polifenóis. As doenças cardiovasculares estão associadas ao
estresse oxidativo. Os polifenóis têm propriedades antioxidantes abundantes (Galanakis
2017) e, além disso, regulam genes e participam da sinalização celular (Scalbert et al.
2005). A ação antioxidante direta dos polifenóis é improvável. A bioatividade multifacetada
é mais provável (Hollman et al. 2011). Além disso, os polifenóis são metabolizados ao
longo das vias usadas pelos xenobióticos.

O dano endotelial é fortemente dependente de ROS (Khurana et al. 2013) gerados

durante processos fisiológicos, mas sob estresse excessivo, o sistema antioxidante é
incapaz de manter o equilíbrio e a ligação de ROS ao DNA e criar condições patológicas.
Ao modular as vias de sinalização, os polifenóis fortalecem as defesas antioxidantes e
antiinflamatórias.

750
3.3 Flavonóides

Com base no número de anéis fenólicos e elementos estruturais, os fenóis são

subdivididos em várias classes. Os flavonóides inibem a atividade da enzima conversora
de angiotensina (ECA) que regula a pressão arterial e o equilíbrio eletrolítico. A atividade
da ECA depende da estrutura do flavonóide (Guerrero et al. 2012; Li et al. 2010). Wang et
al. (2018) avaliaram a relação estrutura atividade (SAR) de flavonóides com sistemas
enzimáticos para atividade cardioprotetora. Os flavonóides modulam a atividade de
enzimas que reduzem a produção de prostaglandinas e leucotrienos, que são mediadores
da inflamação (Dabbou et al. 2018).

As propriedades antioxidantes e quelantes dos flavonóides são significativas (Heim et al.

2002; Prochazkova et al. 2011). Ao inibir a peroxidação e os processos atenuantes de
ROS, a atividade de eliminação de radicais e quelante é reduzida. A quelação (ligação a
um metal e, portanto, remoção do sangue) de cobre ou ferro ajuda na prevenção da
formação de radicais livres.

De acordo com a evidência pré-clínica, os fitoestrógenos de soja (isoflavonas) podem ser

benéficos na redução dos níveis de colesterol sérico (Sacks et al. 2006).

3.4 Ácidos graxos poliinsaturados

Os ácidos graxos essenciais (EFA) Ω-3 (ácido alfa linoléico) e Ω-6 (ácido linoléico) são
necessários para a geração de hormônios, substâncias antiinflamatórias e membranas
celulares (Mozaffarian e Wu 2011). Os ácidos graxos, parte das prostaglandinas,
controlam a inflamação. Eles são derivados principalmente de plantas, uma vez que não
podem ser sintetizados. O Ω-3 e seus derivados, EPA (ácido eicosapentaenóico) e DHA
(ácido docosahexaenóico), também são derivados de peixes oleosos. A deficiência de
EFA é rara e indesejável.

A proporção adequada de ácidos graxos relacionados ao ômega é importante. Se a

proporção de Ω-6/Ω-3 for muito alta, a produção de radicais livres é aumentada. Os EFAs
atuam no DNA ativando ou inibindo fatores de transcrição que podem estar ligados à
produção de citocinas pró-inflamatórias (Calder 2004: Rudra et al. 2001).

Animais alimentados com grama acumulam mais ômega-3 do que animais alimentados
com grãos, cujo ômega-6 aumenta. Uma vez que os metabólitos do ômega-6 são mais
inflamatórios, o equilíbrio precisa ser acomodado (Simopoulos 2002). Os ácidos graxos
ômega-3 reduzem a pressão arterial e também foi observada uma redução nos níveis de
triglicerídeos no sangue.

751
3.5 Vitaminas

O calciferol (vitamina D) atua como um hormônio e regula mais de 200 genes. Uma
associação entre deficiência de vitamina D e disfunção endotelial e peroxidação lipídica
(Tarcin et al. 2009) foi observada. Os baixos níveis de vitamina D estão associados a uma
maior incidência de casos cardiovasculares. Na doença coronariana, o aminoácido
homocisteína é importante. A hipertensão e o aumento do risco de disfunção cardíaca
podem ser amenizados pela redução dos níveis de homocisteína (HCys) e aumento dos
níveis de vitamina B6 por meio do uso de nutracêuticos.

A forragem pode ser deficiente nos minerais ou vitamina A. Os nutracêuticos podem

fornecer o suplemento necessário (Gadberry 2012) para a dieta diária.

3.6 Minerais

A associação de anatomia cardiovascular anormal por deficiência de cobre e “doença em

recaída” é conhecida há algum tempo (Klevay 2000). A deficiência de cobre também
aumenta o colesterol e contribui para eletrocardiogramas anormais. Alguma forragem é
sazonalmente deficiente em cobre. Os níveis de minerais na forragem do gado são
frequentemente deficientes devido ao uso de pesticidas e herbicidas. Uma lista de
minerais necessários para animais saudáveis e suas funções é detalhada em (Greenpet
2015).

A hipertensão, assim como a hiperlipidemia, tem sido associada a baixos níveis de zinco
(Zn2+) em medições séricas. A inibição da expressão gênica de Zn 2+ foi associada ao
NFkB (Houston 2010).

O manganês (Mn) é conhecido por se ligar ao músculo liso vascular e aumentar a

vasodilatação, reduzindo assim a pressão arterial. Além disso, afeta o conteúdo
intracelular de sódio, potássio e cálcio.

A digestão do feno no intestino bovino distribui o Mn a vários órgãos. Ele se acumula na

mitocôndria, interrompe a fosforilação oxidativa e cria ROS. O Mn é um tóxico celular que
prejudica a atividade enzimática e as funções do receptor. O Mn afeta o sistema nervoso
autônomo com efeito na função vascular e na contração do miocárdio, levando à
hipotensão (Jiang e Zheng 2005).

A alta absorção de selênio do solo pelas plantas pode levar a doenças inesperadas em
animais que consomem essa matéria-prima. O selênio em excesso produz radicais livres,
causando danos oxidativos aos tecidos, quando a incorporação de selênio em vez de
enxofre nas proteínas interrompe a função celular (Raisbeck 2000). A deficiência de
selênio na matéria-prima causa doença do músculo branco em bezerros e cordeiros. A
752
adição de selênio na dieta previne cardiomiopatia, bem como doenças cardiovasculares
(Duthie et al. 1989). O selênio, em conjunto com a glutationa peroxidase, remove os
peróxidos lipídicos formados durante o estresse oxidativo, com um importante efeito na
síntese e reparo do DNA (Souyoul et al. 2018).

3.7 Curcumina

Embora caracterizada por apresentar baixa biodisponibilidade, a curcumina melhora o

desenvolvimento de insuficiência cardíaca e o desenvolvimento de hipertrofia cardíaca e é
benéfica na prevenção da arritmia atrial (Aggarwal e Harikumar 2009; Alwi et al. 2008).
Além disso, melhora a saúde arterial e aumenta a produção de óxido nítrico (NO) ao ativar
a óxido nítrico sintase endotelial. Isso aumenta o relaxamento do músculo liso vascular e
a dilatação dos vasos. A curcumina é benéfica para o funcionamento do endotélio (Gupta
et al. 2013). Sua poderosa ação antioxidante é complementada por efeitos
antiinflamatórios, e os efeitos colaterais em animais são poucos (Shankar et al. 1980).

O óxido nítrico (NO) é sintetizado a partir do aminoácido L-arginina nas células endoteliais
(Tousoulis 2012). A homeostase vascular depende da disponibilidade de NO suficiente. A
insuficiência cardíaca é marcada por uma liberação diminuída de NO devido ao equilíbrio
endotelial alterado. O NO tem várias funções importantes na manutenção da função
vascular. Estes incluem (a) eliminação de radicais livres, (b) diminuição da permeabilidade
endotelial e (c) ação como um agente antiinflamatório. Isso é realizado através da inibição
da síntese de citocinas e moléculas de adesão celular. O NO diminui a agregação e
aderência das plaquetas e minimiza os efeitos vasoconstritores do Ca 2+ livre nas células
musculares lisas.

3.8 Colostro

O colostro é secretado pelas glândulas mamárias femininas dos animais. Os

componentes do efluxo aumentam a função do sistema imunológico e sua eficácia contra
uma variedade de patógenos comuns. O colostro bovino é um nutracêutico eficaz para a
função imunológica de um grande número de animais, incluindo bovinos, ovinos, cavalos,
gatos e camundongos (Taillon e Andreasen 2000; Pandey et al. 2011).

Devido à associação da bactéria Chlamydia com a formação de placa arterial, foi proposto
que, em certos casos, a doença cardíaca se assemelha a uma resposta autoimune. O
polipeptídeo rico em prolina do colostro (PRP) modera os efetores adversos do sistema
imunológico (IGF-1, IGF-2). Além disso, o fator de crescimento do colostro atua na
regeneração do tecido cardíaco.

753
3.9 Resveratrol

O composto fito polifenol resveratrol (3,5,4-0-trihidroxi-trans-estilbeno), um nutracêutico

encontrado em uvas, frutas vermelhas e amendoim, exerce atividade antiinflamatória e
antioxidante. Também aumenta a produção de NO endotelial e melhora o
desenvolvimento de aterosclerose (Matos et al. 2012) ao diminuir a molécula de adesão
intercelular (ICAM), moléculas de adesão de células vasculares (VCAM) e interleucina
(Berman et al. 2017; Araim et al. 2002). Animais que ingerem resveratrol se beneficiam do
efeito da dilatação mediada por fluxo aprimorada (FMD) (Magyar et al. 2012), que também
é fundamental para superar o início da disfunção endotelial associada a defeitos de
perfusão miocárdica.

3.10 EGCG (galato de epigalocatequina)

Os países onde o chá é uma bebida comum relatam uma incidência menor de doenças
cardiovasculares. O chá-verde contém polifenóis bioativos, incluindo galato de
epigalocatequina (EGCG), que tem uma potente capacidade antioxidante (Potenza et al.
2007; Grassi et al. 2013). Nas células endoteliais vasculares, ativa a óxido nítrico sintase
(eNOS) endotelial com ações vasodilatadoras NO dependentes. A disfunção endotelial
contribui para a insuficiência cardíaca isquêmica. O EGCG também se liga e decompõe a
apolipoproteína A-1, uma proteína que se comporta de forma semelhante às placas
amilóides. Também atenua a cardiotoxicidade da nicotina (Nacera et al. 2017).

Mais importante, EGCG regula negativamente GRK2 (Cannavo et al. 2018). Níveis
elevados e atividade desta quinase levam à disfunção das vias cardíacas e adrenais. A
inibição de GRK2 protege o coração de remodelações e disfunções associadas.

3.11 Coenzima Q10

Um antioxidante produzido naturalmente, CoQ10 (ubiquinona), desempenha um papel

vital como um transportador de elétrons na fosforilação oxidativa mitocondrial. É
significativamente diminuído na insuficiência cardíaca congestiva. CoQ10 melhora a
função das células endoteliais dos vasos sanguíneos e desempenha um papel vital na
produção de ATP, a fonte de energia para os processos metabólicos (Ubbink 2001). Em
cães isquêmicos, a CoQ10 protege contra a necrose no músculo cardíaco. Cavalos mais
velhos que produzem ácido lático aumentado também se beneficiam da CoQ10. Em linha
com sua alta necessidade de energia, CoQ10 está concentrada em células de órgãos que
requerem energia considerável para o músculo cardíaco.

754
3.12 Carotenóides

Pigmentos vegetais não podem ser sintetizados por animais, mas são potentes
necrófagos de espécies reativas, pois inibem os radicais livres e os lipídios singletos. Os
carotenóides são encontrados em vegetais folhosos e frutas amarelas/laranja. Por
exemplo, o β-caroteno é um precursor da vitamina A (Cheng et al. 2017), além de ser um
eliminador de radicais livres.

O licopeno é um carotenoide natural com propriedades antioxidantes e também é um

inibidor de fatores pró-trombóticos e pró-inflamatórios com características de prevenção
de DCV (Wang et al. 2014). Foram observadas reduções significativas no LDL, bem como
uma redução na pressão arterial sistólica.

3.13 Algas Marinhas

As algas marinhas, também conhecidas como macroalgas, são algas multicelulares

pertencentes a três grupos taxonômicos diferentes. Seu consumo modifica as expressões
de doenças cardiovasculares, incluindo dislipidemia, inflamação vascular, hipertensão e
estresse oxidativo, bem como a ativação do sistema simpático. Em experiências com
animais, os ratos tratados com Himanthalia alongada mostraram uma redução notável dos
triglicéridos totais no plasma. Da mesma forma, o pó de Gracilaria changii reduziu
significativamente o colesterol total, LDL e triglicerídeos totais em ratos Sprague-Dawley
(Cardoso et al. 2015; Dousip et al. 2014).

Os lipídios das algas marinhas contêm ácidos graxos poliinsaturados ômega-3 e ômega-6
em abundância. Os peptídeos de macroalgas incorporam resíduos de aminoácidos que,
como constituintes bioativos, aliviam os sintomas cardiovasculares.

4. Soja
A proteína de soja rica em isoflavona diminui marginalmente o perfil lipídico plasmático. O
efeito é causado pela ligação aos receptores de estrogênio presentes na vasculatura. Um
aumento da genisteína, uma isoflavona da soja, no plasma dilata os vasos contraídos. A
função vascular melhorada (Lockwood 2007) ajuda na normalização da pressão arterial.
O desenvolvimento da placa aterosclerótica também é retardado pelo consumo de
isoflavonas de soja via inibição da oxidação do LDL, ligação aos receptores de estrogênio
e inibição da tirosina quinase. A proteína de soja é rica em ácidos graxos poliinsaturados
(PUFAs), fibras, vitaminas e minerais, o que a torna benéfica para a saúde cardiovascular.

755
O USFDA está propondo revogar a alegação de saúde de que a proteína de soja reduz o
risco de doenças cardíacas (FDA 2018), mas pretende permitir o uso de uma alegação de
saúde qualificada. Isso requer um padrão de evidência mais baixo do que uma alegação
de saúde autorizada.

5. Biomarcadores cardíacos em animais

O uso de biomarcadores para determinação do estado de saúde animal, incluindo
doenças respiratórias, peroxidação lipídica e doenças articulares além do estado
cardíaco, está agora amplamente difundido (Oyama 2013; Ferreira et al. 2016). Várias
disfunções cardíacas provocam ativação neuroendócrina. Ocorrem aumentos na
norepinefrina plasmática (PNE) e fator natriurético atrial e ativação dos sistemas
renina/angiotensina/aldosterona com aumento da liberação de citocinas pró-inflamatórias
(Sisson 2004). Um grande número de marcadores, além do pró-hormônio N-terminal
convencional e amplamente utilizado de peptídeo natriurético cerebral (NT-proBNP),
troponina (hs-cTnI) e proteína C reativa (CRP), como o peptídeo natriurético atrial (ANP) e
enzima conversora de angiotensina (ECA), também são medidos.

A presença de nutracêuticos pode modular as vias de sinalização. A atividade pleiotrópica

da curcumina (Gupta et al. 2013) é benéfica na melhoria dos perfis lipídicos em casos de
sintomas coronários agudos. O nível elevado de creatina fosfoquinase (CPK) pode indicar
lesão muscular ou cardíaca. Quando o coração é danificado, a enzima CPK-MB (creatina
quinase músculo/cérebro) aumenta. Os nutracêuticos podem diminuí-lo.

Marcadores mais novos, mais imediatos e específicos para órgãos, passaram a ser
usados. Com potencial notável, miRNAs, RNAs endógenos não codificadores que podem
modular a expressão gênica pós-transcricional, estão sendo amplamente promulgados
(Ono et al. 2011; Phuah e Nagoor 2014). Ao se ligar a sequências complementares na
região de codificação do RNA mensageiro alvo (mRNA), eles têm a capacidade de regular
a atividade celular (Small et al. 2010; Vickers et al. 2014). Isso resulta da degradação do
mRNA ou, alternadamente, pela atenuação da tradução da proteína. Na fibrilação atrial
(FA), miRNA-29 e miRNA-26 são regulados negativamente com remodelação atrial
fibrótico patológico. A corrente de K + retificadora para dentro aumenta (Luo et al. 2013). A
redução do miRNA-26 promoveu fibrilação atrial (FA) em camundongos.

Secretados de tecido, os miRNAs carregam marcadores de sua origem; portanto, eles

têm os atributos de um biomarcador convencional (Zoltani 2014; Maegdefessel 2014). O
nível sérico de miRNA muda notavelmente após eventos cardíacos, em paralelo à
756
troponina, por exemplo, no infarto do miocárdio (MI). Na insuficiência cardíaca, miRNA-
122 e miRNA-499 estão notavelmente aumentados.

Mudanças epigenéticas do DNA, produzidas por modificações nas histonas, constituem

mudanças que regulam a expressão gênica (Tokunaga et al. 2013). Nutracêuticos podem
reverter a metilação de miRNAs (Ahmad et al. 2014; Li e Sarkar 2015). A reversão das
alterações epigenéticas pode facilitar processos cardíacos favoráveis.

6. Problemas cardíacos em animais

Algumas disfunções cardíacas em animais podem ser aliviadas com mudanças na dieta
envolvendo nutracêuticos. A escolha e extensão do uso para adquirir as mudanças
necessárias variam com as espécies.

6.1 Cavalos e Bovinos

Um cavalo maduro e competitivo requer até 30.000 calorias por dia para funcionar em alto
nível. A forragem usual é complementada por grãos. A gordura adicional na dieta contém
consideravelmente mais calorias do que os grãos. Os PUFAs, ácido linoleico (LA) e ácido
alfa linoleico (ALA), precisam estar em equilíbrio. Os cavalos não são rotineiramente
afetados pela doença arterial coronariana. O ataque cardíaco em cavalos geralmente
ocorre por ruptura da aorta ou arritmia desencadeada pela adrenalina que interrompe
repentinamente o coração (Loynachan 2010). A insuficiência miocárdica sistólica, ou seja,
a redução na capacidade do coração de se contrair, causa redução no fluxo sanguíneo
normal. Os puro-sangue experimentam contração prematura supraventricular, mas isso
não aumenta o risco de morte súbita (Marr e Bowen 2010). Cavalos com problemas
cardíacos apresentam concentração elevada de aldosterona, culminando em função
ventricular comprometida (Van Der Vekens et al. 2012).

Para a forragem equina, sabe-se que na miopatia hereditária de armazenamento de

polissacarídeos (PSSM) a modificação da dieta pode remover o glicogênio extra,
armazenado em seus músculos. O espinheiro nutracêutico (um perene), quando digerido,
dilata os vasos sanguíneos periféricos melhorando a circulação. Ele contém um grande
número de flavonóides que são potentes agentes antiinflamatórios. Também afeta a
pressão arterial e os lipídios em circulação. A pimenta caiena (Capsicum annuum) é um
excelente vasodilatador e os cutelos digeridos reduzem a pressão arterial. Os ácidos
graxos ômega-3, contidos em nutracêuticos como sementes de linhaça, contêm ácido alfa
linolênico (ALA) que é convertido em EPA e DHA, ambos importantes para a saúde
cardiovascular (Pomeroy 2011; Jones 1997; National Research Council 2007).
757
Além das disfunções cardíacas congênitas e relacionadas à altitude (hipertensão
pulmonar bovina (HPB)), existem várias outras doenças que podem ser preocupantes
(Peek and Divers 2018) em bovinos. As principais doenças cardíacas em bovinos incluem
pericardite, doença do peito e insuficiência cardíaca congestiva do lado direito (RHF)
(Buczinski et al. 2010; Neary et al. 2016). A doença cardíaca mais comumente adquirida
em bovinos é a endocardite bacteriana que causa arritmia e cardiomiopatia, mas em geral
as doenças cardíacas não são frequentes. A doença do músculo branco em bovinos,
causada pela falta de vitamina E, danifica o músculo cardíaco e as fibras de Purkinje.
Pode ser aliviado com nutracêuticos e selenito de sódio que ativam enzimas antioxidantes
(Bhattacharyya e Roy 2015).

6.2 Cães e Gatos

Mais de 10% dos cães têm doenças cardíacas. A doença cardíaca valvular crônica
(CVHD), afetando cerca de 85% dos cães mais velhos, constitui cerca de 75% das
doenças cardíacas caninas (Atkins et al. 2009; Harker-Murray et al. 2000). Afeta a válvula
atrioventricular esquerda ou mitral. Os machos são mais afetados do que as fêmeas e é
mais prevalente em raças menores. Alterações nas células endoteliais também são
observadas. O prolapso da válvula mitral é uma característica do CVHD.

A doença coronariana é incomum em cães e gatos (Devi e Jani 2009). A arritmia

ventricular é frequente em cães com cardiomiopatia. O Boxer é propenso a cardiomiopatia
ventricular direita (Smith et al. 2007), mas quando alimentado com um suplemento
dietético de ácido graxo Ω, a arritmia é minimizada.

Algumas das doenças cardíacas adversas em animais são devidas à deposição de LDL. A
pró-proteína convertase subtilisina/kexina tipo 9 (PCSK9), uma enzima que regula os
níveis de colesterol LDL, está presente nos nutracêuticos (curcumina e berberina) e alivia
essa condição.

A cardiomiopatia, na qual os músculos cardíacos são incapazes de manter o fluxo

sanguíneo necessário, é a principal doença cardíaca dos gatos. Os folhetos da válvula
mitral geralmente são afetados. A cardiomiopatia hipertrófica (HCM) afeta de 10 a 15%
dos gatos. As paredes cardíacas engrossam e tornam-se menos flexíveis com a redução
da quantidade de sangue bombeado. O acúmulo do lado esquerdo envolve os pulmões,
mas pode ser afetado pela dieta. Embora a insuficiência cardíaca congestiva e o
tromboembolismo arterial (ATE) sejam comuns, a arritmia é incomum.

Vários suplementos nutricionais que podem estar faltando nos alimentos disponíveis para
animais são essenciais para a saúde cardíaca. Os cães que sofrem de insuficiência

758
cardíaca são deficientes em EPA e DHA, que os ácidos graxos ômega-3 podem fornecer.
Boxers e Doberman Pinschers com cardiomiopatia dilatada (DCM) têm deficiência de
carnitina. A L-carnitina é um aminoácido usado para a produção de energia no coração.
Casos de concentrações deficientes de L-carnitina andam de mãos dadas com níveis
elevados de triglicerídeos, um marcador de doença miocárdica. Labradores com
cardiomiopatia apresentam melhora clínica quando suplementados com L-carnitina. A
função cardíaca normal também requer taurina, um aminoácido geralmente em alta
concentração no coração. A deficiência de taurina causa DCM. Os Cocker Spaniels
também sofrem de DCM, que pode ser remediado tanto pela L-carnitina quanto pela
taurina.

Os gatos também precisam de taurina, mas sua capacidade de fabricá-la é restrita e o

DCM, com dieta adequada, pode ser evitado. A taurina, um aminoácido essencial obtido a
partir de proteínas de origem animal, é fundamental para a visão normal e a função do
músculo cardíaco. A designação “essencial” para aminoácidos significa que deve fazer
parte da dieta, uma vez que os gatos têm apenas uma capacidade limitada de fabricar
taurina.

CoQ10, o antioxidante e auxiliar de produção de energia para alguns animais, é apenas

marginalmente usado em cães e gatos mais velhos. As nanoemulsões nutracêuticas que
usam um ácido graxo de cadeia longa (coenzima Q10) demonstraram em um estudo de
alimentação de ratos as possibilidades para o uso de técnicas não padronizadas (Cho et
al. 2014).

7. Observações finais e orientações futuras

Os nutracêuticos não são drogas, mas componentes de plantas que, ao serem ingeridos,
reduzem e, em alguns casos, impedem o desenvolvimento de disfunção cardíaca. Nessa
função, eles atraíram um grande número de adeptos. Os problemas cardíacos foram
aliviados por alimentos que contêm componentes que retardam o desenvolvimento de
processos que levam ao desenvolvimento de doenças cardíacas. Existem dissidentes
desta avaliação (Aronson 2017). No entanto, argumentos contrários enfatizam o uso de
suplementos dietéticos, não seu valor como componentes desejáveis da matéria-prima.
Provas clínicas da hipótese "não funciona" não estão disponíveis. Surpreendentemente,
acredita-se que a escolha de nutrientes e componentes específicos pode desempenhar
um papel importante na prevenção do desenvolvimento de problemas cardíacos. A coleta

759
de dados está em andamento. A biologia sintética (Nielsen e Keasling 2016) aumentará
nossa compreensão do problema e fornecerá respostas adicionais no futuro.

Referências
Aggarwal BB, Harikumar KB (2009) Potential therapeutic effects of curcumin, the anti-inflammatory agent, against
neurodegenerative, cardiovascular, pulmonary, metabolic, autoimmune and neoplastic diseases. Int J Biochem Cell Biol
41(1):40–59
Ahmad A, Li Y, Bao B et al (2014) Epigenetic regulation of miRNAcancer stem cell nexus by nutraceuticals. Mol Nutr
Food Res 58 (1):79–86
Alwi I, Santoso T, Suyomo S et al (2008) The effect of curcumin on lipid level in patients with acute coronary syndrome.
Acta Med Indones 40(4):201–210
Araim O, Ballantyne J, Waterhouse AL et al (2002) Inhibition of vascular smooth muscle cell proliferation with red wine
and red wine polyphenols. J Vasc Surg 35(6):1226–1231
Aronson JK (2017) Defining ‘nutraceuticals’: neither nutritious nor pharmaceutical. Br J Clin Pharmacol 83:8–19
Atkins C, Bonagura J, Ettinger P et al (2009) Guidelines for the diagnosis and treatment of canine chronic valvular
heart disease. J Vet Intern Med 23:1142–1150
Babbar N, Oberoi HS, Sandhu SK (2015) Therapeutic and nutraceutic potential of bioactive compounds extracted from
fruit residues. Crit Rev Food Sci Nutr 55:319–337
Berman AY, Motechin RA, Wiesenfeld MY et al (2017) The therapeutic potential of resveratrol: a review of clinical trials.
NPJ Precis Oncol 1 (1):35
Bhattacharyya A, Roy D (2015) Nutraceuticals in livestock and poultry. New India Publishing Agency, New Delhi
Brasier AR (2006) The NF-kappaB regulatory network. Cardiovasc Toxicol 6(2):111–130
Buczinski S, Rezakhani A, Boerboom D (2010) Heart disease in cattle: diagnosis, therapeutic approaches and
prognosis. Vet J 184:258–263
Calder PC (2004) n-3 fatty acids and cardiovascular disease: evidence explained and mechanisms explored. Clin Sci
(Lond) 107(1):1–11
Cannavo A, Komici K, Bencivenga L et al (2018) GRK2 as a therapeutic target for heart failure. Expert Opin Ther
Targets 22(1):75–83
Cardoso SM, Pereira OR, Seca AML et al (2015) Seaweeds as preventive agents for cardiovascular diseases: from
nutrients to functional foods. Mar Drugs 13:6838–6865
Chen QM, Maltagliati AJ (2018) Nrf2 at the heart of oxidative stress and cardiac protection. Physiol Genomics
50(2):77–97
Chen B, Lu Y, Chen Y et al (2015) The role of Nrf2 in oxidative stressinduced endothelial injuries. J Endocrinol
225(3):R83–R99
Cheng HM, Koutsidis G, Lodge JK et al (2017) Tomato and lycopene supplementation and cardiovascular risk factors:
a systematic review and meta-analysis. Atherosclerosis 257:100–108
Cho HT, Salvia-Trujillo L, Kim J et al (2014) Droplet size and composition of nutraceutical nanoemulsions influences
bioavailability of long chain fatty acids and Coenzyme Q10. Food Chem 156:117–122
Choi EJ, Bae SM, Ahn WS (2008) Antiploriferative effects of quercetin through cell cycle arrest and apoptosis in human
breast cancer MDA-MB-453 cells. Arch Pharm Res 31:1281–1285
Cicero AFG, Colletti A (2018) Handbook of nutraceuticals for clinical use. Springer, Cham
Dabbou S, Gasco L, Rotolo L et al (2018) Effects of dietary alfalfa flavonoids on the performance, meat quality and
lipid oxidation of growing rabbits. Asian-Australas J Anim Sci 31(2):270–277
Devi S, Jani RG (2009) Review on nutritional management of cardiac disorders in canines. Vet World 2(12):482–485
Dousip A, Matanjun P, Sulaiman MR et al (2014) Effect of seaweed mixture intake on plasma lipid and antioxidant
profile of hypercholeserolaemic rats. J Appl Physicol 26:999–1008
Duthie GG, Wahle KW, James WP (1989) Oxidants, antioxidants and cardiovascular disease. Nutr Res Rev 2(1):51–
62
FDA (2018.) https://www.fda.gov/NewsEvents/Newsroom/PressAnnouncements/ucm582744.htm
Ferguson JF, Hooman A, Gerszten RE et al (2016) Nutrigenomics, the microbiome, and gene-environment
interactions: new directions in cardiovascular disease research, prevention and treatment. Circ Cardiovasc Genet 9:291–
313
Ferreira FS, Barretto FL, Fabres A et al (2016) Cardiac markers in five different breeds of rabbits (Oryctolagus
cuniculus Linnaeus, 1758) used for cardiovascular research. Pesq Vet Bras 36(8):737–742
Francis GS, Benedict C, Johnstone DE et al (1990) Comparison of neuroendocrine activation in patients with left
ventricular dysfunction with and without congestive heart failure. Circulation 82:1724–1729
Gadberry S (2012) Mineral and vitamin supplementation of beef cows in Arkansas. https://www.uaex.edu/publications/
pdf/FSA-3035.pdf
Galanakis C (ed) (2017) Nutraceutical and functional food components. Academic Press, New York

760
 Gordon JW, Shaw JA, Kirshenbaum LA (2011) Multiple facets of NF-kB in the heart: to be or not to NF-kB. Circ Res
108:1122–1132
Grassi D, Desideri G, Di Giosia F et al (2013) Tea, flavonoids, and cardiovascular health: endothelial protection. Am J
Clin Nutr 98 (Suppl 6):1660S–1666S
Greenpet (2015) Minerals for healthy animals. https://www.greenpet.com.au/minerals-for-healthy-animals/
Guerrero L, Castillo J, Quinones M et al (2012) Inhibition of angiotensin-converting enzyme activity by flavonoids:
structureactivity relationship studies. PLoS One 7(11):1–11
Gupta C, Patchva S, Aggarwal BG (2013) Therapeutic roles of curcumin: lessons learned from clinical trials. AAPS J
15(1):195–218
Harker-Murray AK, Tajik AJ, Ishikura F et al (2000) The role of coenzyme Q10 in the pathophysiology and therapy of
experimental congestive heart failure in the dog. J Card Fail 6(3):233–242
Hayden MS, Ghosh S (2012) NF-κBα e AMPK. Esses dadosB, the first quarter-century: remarkable progress and outstanding questions. Genes
Dev 26:203–234
Heim KE, Tagliaferro AR, Bobilya DJ (2002) Flavonoid antioxidants: chemistry, metabolism and structure-activity
relationships. J Nutr Biochem 13(10):572–584
Hollman PCH, Cassidy A, Comte B et al (2011) The biological relevance of direct antioxidant effects of polyphenols for
cardiovascular health in humans is not established. J Nutr 141:989S–1009S
Houston MC (2010) The role of cellular micronutrient analysis, nutraceuticals, vitamins, antioxidants and minerals in
the prevention and treatment of hypertension and cardiovascular disease. Ther Adv Cardiovasc Dis 4(3):165–183
Irino Y, Toh R, Nagao M et al (2016) 2-Aminobutyric acid modulates glutathione homeostasis in the myocardium. Sci
Rep 6:36749
Jiang Y, Zheng W (2005) Cardiovascular toxicities upon manganese exposure. Cardiovasc Toxicol 5(4):345–354
Jones WE (1997) Nutraceuticals for equine practice. J Equine Vet Sci 17 (11):562–572
Khurana S, Venkataraman K, Hollingsworth A et al (2013) Polyphenols: benefits to the cardiovascular system in health
and in aging. Nutrients 5:3779–3827
Klevay LM (2000) Cardiovascular disease from copper deficiency-a history. J Nutr 130:489S–492S
Larson AJ, Symons JD, Jalili T (2012) Therapeutic potential of quercetin to decrease blood pressure: review of efficacy
and mechanisms. Adv Nutr 3:39–46
Lee MT, Lin WC, Yu B et al (2017) Antioxidant capacity of phytochemicals and their potential effects on oxidative status
in animals. Asian-Australas J Anim Sci 30:299–308
Li Y, Sarkar FH (2015) Targeting epigenetically deregulated miRNA by nutraceuticals: focusing on cancer prevention
and treatment. Curr Pharm Rep 1:1–10
Li SH, Liu XX, Bai YY et al (2010) Effect of oral isoflavone supplementation on vascular endothelial function in
postmenopausal women: a meta-analysis of randomized placebo-controlled trials. Am J Clin Nutr 91:480–486
Lockwood B (2007) Nutraceuticals, 2nd edn. Pharmaceutical Press, London
Loynachan A (2010) ‘Heart attacks’ and heart disease in horses. Equine Dis Q 19(4):5–6
Luo X, Pan Z, Shan H et al (2013) MicroRNA-26 governs profibrillatory inward-rectifier potassium current changes in
atrial fibrillation. J Clin Invest 123:1939–1951
Maegdefessel L (2014) The emerging role of microRNAs in cardiovascular disease. J Intern Med 275:633–644
Magyar K, Halmosi R, Palfi A et al (2012) Cardioprotection by resveratrol: a human clinical trial in patients with stable
coronary artery disease. Clin Hemorheol Microcirc 50(3):179–187
Marr CM, Bowen M (2010) Cardiology of the horse, 2nd edn. Saunders Elsevier, Philadelphia
Matos RS, Baroncini LAV, Precoma LB et al (2012) Resveratrol causes antiatherogenic effects in an animal model of
atherosclerosis. Arq Bras Cardiol 98(2):136–142
McClements DJ (2015) Nanoscale nutrient delivery systems for food applications: improving bioactive dispersibility,
stability, and bioavailability. J Food Sci 80(7):1602–1611
Mishra S, Singh RB, Dwivedi SP et al (2009) Effects of nutraceuticals on genetic expressions. Open Nutraceuticals J
2:70–80
Mozaffarian D, Wu JHY (2011) Omega-3 fatty acids and cardiovascular disease. J Am Coll Cardiol 58(3):2047–2067
Nacera H, Gregory T, Sihem B et al (2017) Green tea beverage and epigallocatecihin gallate attenuate nicotine
cardiotocytotoxicity in rat. Acta Pol Pharm 74(1):277–287
National Research Council (2007) Nutrient requirements of horses, 6th revised edn. National Academic Press,
Washington, DC
Neary JM, Booker CW, Wildman BK (2016) Right-sided congestive heart failure in North American feedlot cattle. J Vet
Intern Med 30:326–334
Nielsen J, Keasling JD (2016) Engineering cellular metabolism. Cell 164:1185–1197
Ono K, Kuwabara Y, Han J (2011) MicroRNAs and cardiovascular diseases. FEBS J 276(10):1619–1633
Oyama MA (2013) Using cardiac biomarkers in veterinary practice. Vet Clin North Am Small Anim Pract 43(6):1261–
1272
Pandey NN, Dar AA, Mondal DB et al (2011) Bovine colostrum: a veterinary nutraceutical. J Vet Med Anim Health
3(3):31–35
Peek SF, Divers TJ (2018) Rebhun’s diseases of dairy cattle, 3rd edn. Elsevier, St Louis
761
 Phuah NH, Nagoor NH (2014) Regulation of microRNAs by natural agents: new strategies in cancer therapies. Biomed
Res Int
2014:804510
Pomeroy LA (2011) The equine heart: beyond the x-factor. Holistic Horse. https://holistichorse.com/health-care/the-
equine-heartbeyond-the-x-factor/
Potenza MA, Marasciulo FL, Tarquinio M et al (2007) EGCG, a green tea polyphenol, improves endothelial function
and insulin sensitivity, reduces blood pressure, and protects against myocardial I/R injury in SHR. Am J Physiol
Endocrinol Metab 292:E1378–E1387
Prochazkova D, Bousova L, Wilhelmmova N (2011) Antioxidant and prooxidant properties of flavonoids. Fitoterapia
82:513–523
Raisbeck MF (2000) Selenosis. Vet Clin North Am Food Anim Pract 16 (3):465–480
Rudra PK, Nair SSD, Leitch JW et al (2001) Omega-3 polyunsaturated fatty acids and cardiac arrhythmias. In:
Wildman REC (ed) Handbook of nutraceuticals and functional foods. CRC Press, Boca Raton, p 331
Sacks FM, Lichtenstein A, Van Horn L et al (2006) Soy protein, isoflavones, and cardiovascular health: an American
Heart Association science advisory for professionals from the nutrition committee. Circulation 113:1034–1044
Satta S, Mahmoud AM, Wilkinson FI et al (2017) The role of Nrf2 in cardiovascular function and disease. Oxid Med
Cell Long 2017:9237263
Scalbert A, Manach C, Morand C et al (2005) Dietary polyphenols and the prevention of diseases. Crit Rev Food Sci
Nutr 45(4):287–306
Shankar TNB, Shantha NV, Ramesh HP (1980) Toxicity studies on tumeric (Curcuma longa): acute toxicity studies in
rats, guinea pigs & monkeys. Indian J Exp Biol 18:73–75
Simopoulos AP (2002) The importance of the ratio of omega-6/omega-3 essential fatty acids. Biomed Pharmacother
56(8):365–379
Sisson DD (2004) Neuroendocrine evaluation of cardiac disease. Vet Clin North Am Small Anim Pract 34:1105–1126
Small EM, Frost RJA, Olson EN (2010) MicroRNAs add a new dimension to cardiovascular disease. Circulation
121(8):1022–1032
Smith CE, Freeman LM, Rush JE et al (2007) Omega-3 fatty acids in boxer dogs with arrhythmogenic right ventricular
cardiomyopathy. J Vet Intern Med 21:265–273
Souyoul SA, Saussy KP, Lupo MP (2018) Nutraceuticals: a review. Dermatol Ther (Heidelb) 8(1):5–16
Taillon C, Andreasen A (2000) Veterinary nutraceutical medicine. Can Vet J 41:231–234
Tarcin O, Yavuz DG, Ozben B et al (2009) Effect of vitamin D deficiency and replacement on endothelial function in
asymptomatic subjects. J Clin Endocrinol Metab 94(10):4023–4030
Tokunaga M, Takahashi T, Singh RB (2013) Nutrition and epigenetics. Med Epigenet 1:70–77
Tousoulis D, Kampoli AM, Tentolouris C et al (2012) The role of nitric oxide on endothelial function. Curr Vasc
Pharmacol 10(1):4–18
Ubbink JB (2001) Coenzyme Q as a marker of oxidative stress in coronary artery disease. In: Kagan V, Quinn PJ (eds)
Coenzyme Q: molecular mechanisms in health and disease (modern nutrition). CRC Press, Boca Raton
Valen G, Yan Z, Hansson GK (2001) Nuclear factor kappa-B and the heart. J Am Coll Cardiol 38(2):307–314
Van Der Vekens N, Decloedt A, De Clercq D et al (2012) The use of cardiac biomarkers in veterinary medicine: the
equine perspective. Vlaams Diergeneeskundig Tijdschrift 2012(81):319–327
Varzakas V, Zakynthinos G, Verpoort F (2016) Plant food residues as a source of nutraceuticals and functional foods.
Foods 5:88
Vickers KC, Rye KA, Tabet F (2014) MicroRNA in the onset and development of cardiovascular disease. Clin Sci
(Lond) 126:183–194
Wang X, Lv H, Gu Y (2014) Protective effect of lycopene on cardiac function and myocardial fibrosis after acute
myocardial infarction in rats via the modulation of p38 and MMP-9. J Mol Histol 45:113–120
Wang T, Li Q, Bi K (2018) Bioactive flavonoids in medicinal plants: structure, activity and biological fate. Asian J Pharm
Sci 13:12–23
Wildman REC (ed) (2001) Handbook of nutraceuticals and functional foods. CRC Press, Boca Raton
Zoltani CK (2014) Cardiovascular toxicity biomarkers. In: Gupta RC (ed) Biomarkers in toxicology. Elsevier-Academic
Press, Amsterdam
Zoltani CK (2016) Nutraceuticals in cardiovascular diseases. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals, efficacy, safety and
toxicity. Elsevier-Academic Press, Amsterdam

762
 Nutracêuticos em doenças hepáticas e pancreáticas
Sharon M. Gwaltney-Brant

Resumo
A anatomia e fisiologia únicas do fígado o tornam especialmente suscetível a insultos de
uma variedade de fontes metabólicas, infecciosas, imunomediadas, tóxicas e
carcinogênicas. Muitos compostos nutracêuticos têm sido utilizados na tentativa de
auxiliar no suporte ou na melhoria da saúde do fígado por meio de mecanismos
antioxidantes, antiinflamatórios, antifibróticos, antiproliferativos ou antineoplásicos. Da
mesma forma, muitos nutracêuticos foram investigados por sua utilidade no tratamento de
distúrbios pancreáticos, especialmente diabetes mellitus. Este capítulo descreve a
fisiopatologia e os efeitos de alguns nutracêuticos no fígado e no pâncreas.
Palavras-chave: Antioxidante · Suplemento dietético · Hepatoprotetor · Hepatotoxicidade
· Hepatotrópico · Fitoterápico · Fígado · Nutracêutico

S. M. Gwaltney-Brant – Veterinary Information Network, Mahomet, IL, USA e-mail: Sharon@vin.com

1. Introdução
Como o maior órgão interno do corpo, o fígado tem papéis essenciais na homeostase de
nutrientes, filtração de partículas, síntese de proteínas, bioativação e desintoxicação,
formação de bile e secreção e excreção biliar (Jaeschke 2008). Por meio de seu extenso
suprimento de sangue portal, o fígado é exposto a virtualmente todos os compostos
ingeridos que são absorvidos pelo trato gastrointestinal, tornando-o suscetível aos tóxicos
ingeridos. Além disso, o papel do fígado no processamento, biotransformação e
desintoxicação pode resultar na exposição a intermediários ou metabólitos de
xenobióticos potencialmente tóxicos. Em humanos, a causa mais comum de insuficiência
hepática aguda que leva ao transplante de fígado nos Estados Unidos é a lesão hepática
secundária à exposição a drogas ou produtos químicos, e a lesão hepática é a principal
causa de ação regulatória contra drogas (Watkins e Seef 2006).

2. Fígado
2.1 Lesão hepática e reparo

2.1.1 – Mecanismos de Lesão

763
Uma variedade de mecanismos estão envolvidos na lesão hepática, incluindo dano,
desencadeamento de apoptose (morte celular programada), formação de intermediários
reativos, interrupção do metabolismo celular, dano citoesquelético e estimulação de
respostas autoimunes (Gwaltney-Brant 2016). Danos diretos às membranas
hepatocelulares podem ocorrer por meio de lesão mecânica, como lise causada por
agentes infecciosos (por exemplo, vírus, parasitas), peroxidação lipídica ou
rompimento/disfunção de proteínas de membrana e transportadores. As espécies reativas
de oxigênio (ROS) e outros eletrófilos produzidos durante a inflamação ou em reações de
biotransformação podem desencadear a peroxidação lipídica que, na ausência de
antioxidantes, pode se propagar e expandir a membrana muito além do local da lesão
original. A ruptura das membranas celulares resulta em derramamento de componentes
do citosol na matriz extracelular, que então desencadeia respostas inflamatórias que
podem agravar a lesão hepatocelular. A causa da lesão hepatocelular freqüentemente
determina a distribuição da lesão no fígado. Por exemplo, a hepatite bacteriana é
frequentemente de natureza multifocal sem nenhum padrão particular, enquanto a lesão
hepática de metabólitos reativos formados durante a biotransformação de xenobióticos
tende a ocorrer em áreas centrolobulares, onde as enzimas de biotransformação são mais
abundantes (Stalker e Hayes 2007).

O fígado é altamente vascularizado com extenso suprimento sanguíneo, mas a hipóxia

ainda pode causar lesão hepatocelular significativa, morte e fibrose. Sua proximidade com
a veia cava inferior torna a veia hepática sujeita a um fluxo reduzido quando ocorre função
cardiovascular anormal, como insuficiência cardíaca direita. A estase de sangue resultante
em torno das veias centrais hepáticas pode, com o tempo, resultar no desenvolvimento de
fibrose centrolobular. Como os hepatócitos centrolobulares já são relativamente privados
de oxigênio, eles são mais propensos a lesões por hipóxia durante situações em que a
capacidade de transporte de oxigênio do sangue está comprometida (por exemplo,
anemia).

A apoptose (morte celular programada) é um componente normal da renovação celular,

mas também pode ser desencadeada por uma variedade de situações patológicas,
incluindo hepatotoxicidade, exposição à radiação ionizante, neoplasia e infecção por vírus
hepato trópicos (Elmore 2007; Wang 2014). Ao contrário da necrose celular, a apoptose é
um processo que exige energia e elimina células não essenciais ou com lesões
patológicas. A apoptose é um “desligamento” ordenado e sistemático da função celular,
culminando na condensação e fragmentação do componente citoplasmático e nuclear,
sem perda da integridade da membrana celular. Os fragmentos celulares são rapidamente

764
fagocitados por macrófagos locais, mas as respostas inflamatórias geralmente não são
desencadeadas. Em comparação com a necrose celular, que geralmente envolve várias
células adjacentes e é acompanhada por uma resposta inflamatória, a apoptose resulta
em perda de células pontilhadas com mínima ou nenhuma inflamação associada.

A geração de radicais livres dentro dos hepatócitos pode ocorrer durante a

biotransformação xenobiótica, processos metabólicos normais envolvendo reação redox,
estados inflamatórios mediados por óxido nítrico e exposição à radiação ionizante
(Bischoff e Ramaiah 2007). Os radicais livres têm elétrons desemparelhados que os
tornam altamente suscetíveis à ligação de macromoléculas, incluindo lipoproteínas de
membranas celulares, proteínas enzimáticas e ácidos nucléicos. O processo de ligação
dos radicais livres às macromoléculas gera radicais livres adicionais, resultando em um
efeito bola de neve das gerações de radicais livres. As células possuem moléculas
eliminadoras de antioxidantes, principalmente a glutationa (GSH), que reagem e
desintoxicam os radicais livres, interrompendo sua propagação; entretanto, a formação
excessiva de radicais livres pode esgotar os antioxidantes celulares, resultando na ligação
dos radicais livres às estruturas celulares vitais. Os danos dos radicais livres podem
alterar a permeabilidade celular, inativar proteínas associadas à membrana e alterar a
polaridade das membranas das organelas. O dano ao DNA induzido por radicais livres
pode interferir na transcrição ou tradução do gene, resultando na diminuição da síntese de
proteínas. A inativação de proteínas enzimáticas pode interferir no metabolismo celular
normal, levando à degeneração celular, necrose ou apoptose. A ruptura das proteínas que
compõem o citoesqueleto dos hepatócitos pode resultar na perda de adesão célula a
célula, arredondamento dos hepatócitos e liberação de hepatócitos livres na circulação
sistêmica (Stalker e Hayes 2007).

As espécies reativas de oxigênio (ROS) são normalmente formadas no processo de

respiração celular mitocondrial, e existem sistemas antioxidantes endógenos para
interceptar essas ROS antes que possam causar dano oxidativo à mitocôndria. Aumento
do risco de lesão oxidativa mitocondrial pode ocorrer a partir do aumento da produção de
ROS, transporte de elétrons prejudicado com intermediários reduzidos aumentados,
permeabilidade da membrana mitocondrial aumentada e estoques de antioxidantes
reduzidos ou esgotados. Dependendo da natureza e gravidade da lesão mitocondrial,
pode ocorrer morte celular devido à apoptose ou necrose.

2.1.2 – Resposta à Lesão

A resposta do fígado à lesão depende do tipo de insulto, extensão do insulto, duração do

insulto, populações de células afetadas, resposta sistêmica ao insulto e danos colaterais.
765
Apesar de uma grande lista de causas potenciais de lesão hepática (por exemplo,
processos infecciosos, inflamatórios, neoplásicos, tóxicos, metabólicos), os tipos de
respostas do fígado a lesões são bastante limitados. As manifestações clínicas dessas
respostas variam com base na gravidade e extensão da lesão hepática que ocorre. A
resposta mais geral dos hepatócitos ao insulto não letal é a degeneração hepatocelular,
caracterizada por edema celular (Crawford 2005). Os hepatócitos degenerados podem
acumular uma variedade de substâncias, incluindo gordura, pigmento, glicogênio e cobre.
Frequentemente, a degeneração hepatocelular é um evento reversível e transitório; no
entanto, com lesões mais graves, a degeneração pode progredir para morte celular por
meio de necrose ou apoptose. Com insultos infecciosos ou inflamatórios, o influxo de
células inflamatórias pode contribuir para a lesão hepatocelular devido a ROS ou outros
mediadores produzidos por células inflamatórias. A doença hepática colestática pode
ocorrer com lesão hepática que interfere na capacidade dos hepatócitos de excretar bile
para os canalículos ou que posteriormente transportam a bile através da árvore biliar. A
colestase pode ser causada por distúrbios metabólicos nos hepatócitos, edema
hepatocelular, impedimentos ao transporte canalicular ou obstrução mecânica da árvore
biliar ou da vesícula biliar. A doença colestática pode resultar no acúmulo sistêmico de
solutos biliares no sangue e em outros tecidos, levando à formação de icterícia ou icterícia
amarelo-laranja. A esteatose (esteatose hepática, lipidose hepática) é um marcador
comum de lesão hepatocelular moderada a grave. Os hepatócitos se distendem com os
lipídios, uma condição que, no início, é geralmente benigna e reversível; no entanto, com
o tempo, a esteatose pode progredir para esteato-hepatite, que pode resultar em lesão
hepática crônica progressiva, fibrose e possivelmente neoplasia.

O fígado tem ampla capacidade de reparo e regeneração após insultos agudos ou

crônicos. A extensão da regeneração que pode ocorrer depende do equilíbrio entre uma
variedade de fatores hepatocelulares, incluindo regulação do ciclo celular, metabolismo,
angiogênese, adesão celular e componentes da matriz extracelular (Duarte et al. 2015). A
deposição de proteínas da matriz extracelular excessiva começa mais comumente nas
áreas periportais, áreas centrolobulares ou dentro do espaço de Disse (o espaço entre a
membrana do hepatócito apical e as células endoteliais adjacentes) e interfere na troca de
nutrientes e oxigênio entre os hepatócitos e o sangue sinusoidal, promovendo o estresse
hepatocelular e interferindo na função hepatocelular normal (Jaeschke 2008). As células
estreladas hepáticas produzem a maioria das proteínas da matriz extracelular hepática,
cuja ativação é a etapa inicial da fibrose hepática. A ativação das células estreladas
hepáticas ocorre na presença de produtos formados durante a lesão hepatocelular, como
ROS e produtos de peroxidação lipídica, ou por citocinas liberadas por células endoteliais
766
sinusoidais danificadas, células de Kupffer, plaquetas ativadas ou células inflamatórias. A
ativação das células estreladas hepáticas leva à alteração da matriz extracelular por meio
da substituição da matriz da membrana basal não fibrilar por colágenos fibrilo formadores.
À medida que a deposição de colágeno progride, a ruptura da arquitetura hepática por
cicatrizes fibrosas resulta em ilhas de hepatócitos, em regeneração, cercadas por faixas
de tecido conjuntivo fibroso denso, uma condição conhecida como cirrose. As áreas
cirróticas são pouco funcionais e a insuficiência hepática ocorre quando o tecido hepático
suficiente é afetado. A cirrose hepática não é tão comumente identificada em espécies
veterinárias como em humanos, onde hepatite viral, álcool e esteatose não-alcoólica são
causas comuns (Jaeschke 2008).

Lesão hepática crônica com inflamação e/ou cirrose pode progredir para carcinoma
hepatocelular (Jaeschke 2008). Em humanos, o carcinoma hepatocelular foi fortemente
associado à hepatite viral, distúrbios metabólicos como hemocromatose, esteatose não
alcoólica e tóxicos como aflatoxina, álcool e andrógenos exógenos, embora a prova
absoluta de causa e efeito ainda não tenha sido descoberta.

2.2 Nutracêuticos e o Fígado

2.2.1 – S-Adenosilmetionina

A S-Adenosilmetionina (SAMe) é um composto endógeno criado por meio da conversão

enzimática da metionina dietética (Center 2004). Na saúde, SAMe suficiente é gerado por
meio da síntese por meio da ingestão dietética de metionina, catabolismo de proteínas e
vias de resgate envolvendo trimetilglicina ou metiltetraidrofolato e vitamina B12 (Bottiglieri
2002). SAMe funciona como um doador de grupo metil nas vias de transmetilação, como
um precursor de compostos contendo enxofre nas vias de transulfuração e na produção
de poliaminas via vias de poliamina (Friedel et al. 1989). SAMe está envolvida em mais de
100 reações catalisadas por metil transferases, incluindo biossíntese de fosfolipídios,
biossíntese de L-carnitina, biossíntese de creatina, formação de neurotransmissores e
receptores neurais e reações envolvendo RNA, DNA, proteínas e outros metabólitos
endógenos (por exemplo, esteróides hormônios) (Bottiglieri 2002; Friedel et al. 1989). As
vias de transulfuração no fígado fornecem compostos de enxofre endógenos, incluindo
sulfatos, taurina e GSH, e o SAMe hepático serve como a principal fonte de GSH hepático
(Center 2004). SAMe, portanto, é um dos principais contribuintes para o estado redox
hepático e sistêmico, influenciando a resistência à lesão oxidativa e a proteção contra
eletrófilos ou adutos tóxicos produzidos durante o metabolismo xenobiótico. As vias da
poliamina afetam a replicação celular, a regeneração e o crescimento de tecidos, a
síntese de DNA e a resposta celular a sinais apoptóticos. As vias da poliamina geram
767
metiltioadenosina (MTA) por meio da descarboxilação de SAMe; o MTA é uma importante
molécula de sinalização de hepatócitos e pode ser usado para regenerar a metionina
(Mato et al. 2002). A administração de SAMe está associada à alteração da progressão da
doença hepática, aumento dos estoques hepáticos de GSH, melhora da função
mitocondrial hepática e redução dos efeitos prejudiciais citocinemediados (Center 2004;
Center et al. 2005a, b). A restauração dos estoques hepáticos e mitocondriais de GSH em
pacientes com doença hepática melhora a tolerância à lesão de radicais livres, colestase
e isquemia-reperfusão. SAMe mostrou aumentar os níveis de GSH e melhorar o potencial
redox em hepatócitos de gatos normais (Center et al. 2005a). Os cães que receberam
SAMe em conjunto com a terapia com lomustina para doenças malignas melhoraram os
valores hepáticos e eram menos propensos a ter a terapia interrompida devido à
hepatopatia induzida por lomustina do que os cães que receberam apenas lomustina
(Skorupski et al. 2011). SAMe melhorou o estado oxidativo em cães com prednisolona de
longo prazo, mas não evitou o desenvolvimento de hepatopatia vacuolar (Center et al.
2005b). Vários relatos de caso foram publicados sobre o uso de SAMe em cães com
hepatopatia induzida por tóxicos com a sugestão de que SAMe melhorou o resultado,
embora sem um grupo de controle, o papel do SAMe nesses casos não é certo (Schmid e
Hovda 2016; Wallace et al. 2002).

SAMe é usado em medicina veterinária como terapia adjuvante no manejo de

hepatopatias necro inflamatórias, metabólicas e colestáticas, principalmente em cães e
gatos (Vandeweerd et al. 2013). Foi demonstrado que SAMe ajuda a restaurar a função
hepatocelular, atenua a produção de radicais livres, mitiga a lesão induzida por citocinas,
reduz a inflamação, aumenta os mecanismos de desintoxicação e eliminação de tóxicos,
melhora a função da membrana e estimula o reparo hepatocelular (Center 2004). As
dosagens orais de 20 mg/kg de sal estabilizado ou 53 mg/kg de comprimidos com
revestimento entérico resultaram em aumentos significativos nas concentrações
plasmáticas de SAMe em cães e gatos. SAMe é absorvido através do intestino delgado e
deve ser administrado como formulações com revestimento entérico para ser absorvido
em doses orais farmacologicamente relevantes (Center 2004). Os níveis plasmáticos
máximos ocorrem com 1–4 h em cães e 2–8 h em gatos. SAMe parece ser geralmente
bem tolerado, com ocasionais anorexia, náusea ou recusa alimentar ocorrendo poucas
horas após a administração. Raramente, pode ocorrer ansiedade, o que pode exigir a
descontinuação da administração de SAMe. Em humanos, a co-administração de SAMe
com um inibidor da monoamino oxidase foi associada ao desenvolvimento da síndrome
da serotonina. Os estudos de toxicidade em roedores revelaram um DL 50 oral superior a
4650 mg/kg; e ratos que receberam 200 mg/kg de peso corporal por dia durante 104
768
semanas não mostraram efeitos adversos (Center 2004). Da mesma forma, nenhum
efeito tóxico foi observado em gatos que receberam 40-65 mg/kg por dia por mais de 100
dias ou em cães que receberam 20 mg/kg por dia por 6 meses.

2.2.2 – N-acetilcisteína

A N-acetilcisteína (NAC) é a forma acetilada do aminoácido cisteína que atua como

doador de tiol nas reações metabólicas; apenas o isômero L do NAC é usado
terapeuticamente. NAC pode servir como uma fonte rápida de grupos sulfidrila
administrados por via intravenosa ou oral. A biodisponibilidade oral é baixa devido ao
extenso metabolismo de primeira passagem no intestino e no fígado. NAC é desacetilado
em cisteína em enterócitos e hepatócitos, onde estimula a síntese de GSH por meio da
atividade aprimorada de glutationa-S-transferase, aumenta a desintoxicação de muitos
agentes hepatotóxicos e tem atividade antioxidante direta contra radicais livres, como
HOCl, superóxido, OH˙ e H2O2 (Centro 2004). NAC aumenta a GSH dos glóbulos
vermelhos, mantém a fluidez dos hepatócitos, mantém a atividade da enzima antioxidante
dentro das células, promove a síntese de GSH, mitiga a formação de adutos tóxicos,
promove indiretamente a atividade da oxidase do citocromo P450 ao aumentar a redução
de NADP e GSH, apóia a produção de energia pela recuperação acelerada de GSH
mitocondrial e protege contra lesão de isquemia-reperfusão hepática ao inibir a ativação
das células de Kupffer e melhorar a microcirculação sinusoidal (Saito et al. 2010;
Vandeweerd et al. 2013). NAC também atenua os efeitos neurológicos associados à
insuficiência hepática, incluindo encefalopatia, edema cerebral e coma (Bémeur et al.
2010).

O NAC é geralmente recomendado para situações em que hepato toxicose grave é

iminente ou presente, como na intoxicação por paracetamol, e em situações que
envolvem dano oxidativo aos glóbulos vermelhos, como anemia corporal de Heinz (Center
2004). Na medicina veterinária, o NAC foi recomendado para hepato toxicoses
associadas a paracetamol, diazepam (gatos), AINEs (cães), cogumelos e síndrome de
lipidose hepática com anemia corporal de Heinz associada e/ou hemólise (cães) (Avizeh
et al. 2010; Centro 2004; DeClementi 2018; Puschner 2018; Taboada 2017). As dosagens
usadas na medicina veterinária foram derivadas de dosagens humanas para a intoxicação
por paracetamol: 140 mg/kg de solução de NAC a 5% como dose inicial seguida de 70
mg/kg a cada 6–8 h para 5–7 tratamentos (DeClementi 2018; Sellon 2013; Webster e
Cooper 2009). Historicamente, a avaliação da função hepática no final do intervalo de
dosagem de NAC foi recomendada, com continuação de NAC de 6-8 h por até 17
tratamentos se houver evidência de lesão hepática significativa (DeClementi 2018). No
769
entanto, evidências recentes de que o tratamento prolongado com NAC pode realmente
prejudicar a regeneração hepática após lesão induzida por paracetamol fez com que
muitos questionassem o benefício da terapia com NAC além de 24 horas após o insulto
tóxico (Athuraliya et al. 2009; Yang et al. 2009). As vias oral e intravenosa têm sido
utilizadas na medicina veterinária. Embora uma formulação intravenosa aprovada de NAC
esteja disponível, seu custo muitas vezes a torna impraticável para pacientes veterinários,
portanto, soluções de nebulização de paracetamol são frequentemente utilizadas; no
entanto, essas soluções não são estéreis, portanto, a administração por meio de um filtro
milipore é necessária para a administração intravenosa (DeClementi 2018). Os efeitos
adversos da administração de NAC incluem náuseas, vômitos e reações anafiláticas;
distúrbios gastrointestinais podem ser amplamente mitigados por meio da diluição
cuidadosa da solução de NAC (Bateman et al. 2014).

2.2.3 – Silimarina

A silimarina é um extrato do cardo de leite da planta (Silybum marianum), uma planta que
tem sido usada medicinalmente há séculos na Europa. A silimarina compreende 65% -
80% do extrato de cardo de leite e é composta por flavonóide taxifolina e uma mistura de,
pelo menos, sete flavolignanos, incluindo silibinina, isosilbinina, silicristina, isossilicristina
e silidianina (DerMarderosian e Beutler 2014). Silibina A e B, estereoisômeros da
silibinina, são os compostos mais biologicamente ativos da silimarina. A silimarina tem
efeitos antioxidantes contra ROS e peroxidação lipídica, mitigando o dano oxidativo às
membranas hepatocelulares e mitocondriais e reduzindo a depleção de GSH. A silimarina
aumenta a regeneração hepatocelular pela aceleração da síntese de DNA e da
transcrição/tradução do gene (Center 2004). A silimarina exibe atividade antifibrótica no
fígado, inibindo a formação de colágeno reativo em modelos animais de lesão hepática
hepatotóxica e colestática. A estimulação da síntese do ácido biliar pela silimarina resulta
em aumento do fluxo biliar, bem como aumento dos níveis do ácido biliar hepatoprotetor
UDCA. A silimarina mostrou atividades hepatoprotetora e hepatotrófica em uma variedade
de hepatotoxicoses experimentais induzidas por xenobióticos, incluindo aquelas causadas
por cogumelos hepatotóxicos (α-amanitina), acetominofeno, faloidina, cianobactérias
(microcistina), ferro, cisplatina e metotrexato. Os resultados dos ensaios clínicos de
silimarina em humanos têm sido ambíguos e confundidos por falhas metodológicas que
tornam difícil comparar os estudos, embora os estudos individuais geralmente mostrem
alguma melhora no resultado (Center 2004). A avaliação de poucos relatos de casos
clínicos é confundida pelo fato de que os produtos comerciais variam amplamente no
conteúdo de silimarina, sem garantia de pureza.

770
A silimarina é insolúvel em água com baixa biodisponibilidade oral, embora a
biodisponibilidade seja melhorada pela complexação da silimarina com fosfatidilcolina
(Center 2004). A silimarina é eliminada principalmente pela bile como conjugados de
glucuronídeo ou sulfato e sofre recirculação entero-hepática. As recomendações de
dosagem terapêutica são complicadas pela falta de padronização de vários produtos de
cardo leiteiro. As dosagens publicadas para espécies veterinárias incluem 50-150 mg/kg
de silimarina IV em cães para o tratamento da intoxicação por amanitina e 15-100 mg/kg
de silibinina IV em cães, coelhos e roedores que receberam α-amanitina 10 minutos antes
da administração de silimarina (Centro 2004; Vogel et al. 1984). No entanto, a dificuldade
em extrapolar essas dosagens intravenosas para as doses orais e a falta de produtos
padronizados de cardo de leite complicam as recomendações de dosagem. A dosagem
comparável às recomendações de dosagem oral em humanos para hepatite crônica seria
de ~ 7–15 mg/kg por dia; a dosagem de até 40–50 mg/kg por dia seria comparável às
doses usadas para controlar a fibrose em ratos com doença biliar obstrutiva. Em
humanos, as reações adversas notificadas com o tratamento com silimarina incluíram
diarreia ligeira e reações de hipersensibilidade (urticária, prurido).

2.2.4 – Vitamina E

A vitamina E é uma vitamina essencial que atua como o antioxidante lipossolúvel mais
importante (Center 2004). Existem oito enantiômeros da vitamina E na natureza, mas é o
a-tocoferol o mais biodisponível e no qual as recomendações nutricionais devem ser
baseadas. A vitamina E é absorvida pelo intestino proximal com a extensão da absorção
sendo dependente da quantidade de lipídio ingerido, quantidade de bile secretada e
presença de esterases digestivas. A vitamina E absorvida é transportada para o fígado
como micelas mistas, após o que é extraída e transportada para os lisossomos. Uma
proteína de transferência de a-tocoferol específica então classifica as várias formas de
vitamina E acelerando sua transferência para lipoproteínas.

A vitamina E funciona como um componente de uma rede antioxidante que inclui GSH,
ubiquinol, vitamina C, cisteína e SAMe. Um papel importante da vitamina E é mitigar a
propagação dos danos da peroxidação da membrana por meio da terminação catalítica
das reações de peroxidação da membrana. É produzido um radical tocoferil oxidado que é
então reduzido de volta ao seu estado funcional por meio de reações com antioxidantes
solúveis em água e lipídios, como vitamina C e ubiquinol (Center 2004). As funções não
antioxidantes da vitamina E são realizadas por meio da inibição da proteína quinase C,
que modula a inflamação, tem efeitos antiproliferativos no músculo liso vascular, inibe a
agregação e adesão plaquetária, suprime células inflamatórias, suprime as respostas
771
imunológicas prejudiciais e reduz a produção e inibição de radicais livres de ciclo-
oxigenase e 5-lipo-oxigenase (Azzi et al. 2002).

As concentrações hepáticas de a-tocoferol diminuem na doença hepática; os níveis

plasmáticos de a-tocoferol não refletem de forma confiável as concentrações hepáticas,
portanto, não devem ser usados para determinar o status da vitamina E (Center 2004). A
vitamina E deve ser considerada em combinação com outros antioxidantes, como SAMe,
para o manejo de doenças hepatobiliares que provavelmente envolvem lesão da
membrana oxidativa, como doenças necro inflamatórias e colestáticas. Em cães com
doença inflamatória hepática crônica, dosagens de 7 UI/kg por dia por 3 meses resultaram
em melhores valores de enzimas hepáticas e status de glutationa hepática (Cantürk et al.
1998). A recomendação de dosagem atual para cães e gatos é de 10-15 UI/kg PO
diariamente, com altas doses (50-100 UI/kg) reservadas para pacientes com doença
hepática colestática crônica grave; os últimos casos podem se beneficiar da
administração parenteral de vitamina K1 (Center 2004; Vandeweerd et al. 2013). Os
efeitos adversos são incomuns, embora interferência na agregação plaquetária tenha sido
relatada. A vitamina E tem um nível relativamente baixo de toxicidade, com LD50s orais
agudos de > 2 g/kg. Em humanos, a exposição crônica a > 5.000 UI por dia foi associada
à alteração em outras vitaminas solúveis em gordura, resultando em mineralização óssea
prejudicada (vitamina A) e/ou coagulopatia (vitamina K). A dosagem excessiva também
pode promover o acúmulo de radicais toxoferox se outros cofatores protetores estiverem
desequilibrados ou deficientes. Drogas que induzem as enzimas do citocromo p450
também podem potencializar a formação do radical tocoferil.

2.2.5 – Vitamina C

A vitamina C (ácido ascórbico) é uma vitamina hidrofílica com atividades antioxidantes e

pró-oxidantes. Em condições fisiológicas normais, a vitamina C está presente como ácido
ascórbico reduzido, interagindo com oxidantes para ser convertido em sua forma oxidada,
ácido deidroascórbico, que é prontamente convertido de volta em ácido ascórbico pela
glutationa (Jacob e Sotoudeh 2002). Em excesso, a vitamina C pode ter atividade pró-
oxidante, especialmente na presença de metais prontamente oxidados, como ferro e
cobre, por meio da geração de radicais livres derivados do oxigênio produzidos por
peroxidação lipídica (Center 2004). A vitamina C é um cofator importante para, pelo
menos, oito enzimas associadas à síntese e/ou metabolismo de colágeno, aminoácido,
hormônio e carnitina. A vitamina C também está envolvida no metabolismo xenobiótico
microssomal, síntese de corticosteróides e catecolaminas, conversão de colesterol em
ácidos biliares, síntese e modulação de componentes do sistema nervoso e metabolismo
772
de triptofano, tirosina e histamina. A vitamina C reduz uma variedade de ROS, regenera a
vitamina E, protege contra a depleção de GSH e facilita a regeneração de GSH. Devido
ao seu potencial para potencializar certas lesões teciduais mediadas por metal, a
suplementação de vitamina C deve ser evitada em pacientes com altas concentrações
hepáticas de metal, particularmente ferro ou cobre. Da mesma forma, devido à sua
capacidade de induzir a formação de colágeno, a suplementação de vitamina C não é
recomendada em pacientes com distúrbios hepáticos associados à fibrose hepática. A
administração de altas doses de vitamina C deve ser evitada para minimizar qualquer
atividade pró-oxidante associada ao seu uso. Grandes overdoses de vitamina C foram
associadas a estomatite e distúrbios gastrointestinais em porcos e cães e anemia e
diminuição do desempenho reprodutivo em visons (Leveque 1969; National Research
Council 1987).

2.2.6 – Ácido a-lipóico

O ácido a-lipóico foi originalmente classificado como uma vitamina até que foi
determinado que as plantas e animais são capazes de sintetizar endogenamente a
molécula (Zicker et al. 2002). Em tecidos vegetais e animais, o ácido a-lipóico está
covalentemente ligado aos resíduos de lisina. Tem um papel fundamental na produção de
energia, servindo como cofator de enzimas mitocondriais, catalisando a descarboxilação
de piruvato, a-cetoácidos de cadeia ramificada e a-cetoglutarato. Sua estrutura tiol torna o
ácido a-lipóico atraente para tóxicos tiofílicos, como metais pesados.

O ácido a-lipóico é prontamente absorvido pelo trato gastrointestinal, com uma

biodisponibilidade de ~ 30% (Center 2004). Uma vez internalizado nas células, o ácido a-
lipóico é reduzido a di-hidrolipoato (DHLA) por várias enzimas; O DHLA intracelular e o
ácido a-lipóico extracelular formam um par redox, funcionando como antioxidantes à
medida que são trocados através das membranas celulares. A lipoamida, outro metabólito
do ácido a-lipóico, atua como um cofator essencial para vários sistemas enzimáticos,
principalmente nas mitocôndrias. O ácido a-lipóico livre interage com várias vias
bioquímicas diferentes como substrato, inibidor ou efetor (Bustamante et al. 1998).

O uso de ácido a-lipóico como antioxidante no tratamento de doenças do fígado foi

extensivamente investigado em humanos e animais (Bustamante et al. 1998). Acredita-se
que o ácido a-lipóico funcione sinergicamente com as vitaminas A e C e GSH em uma
“rede antioxidante” que aumenta a reciclagem desses compostos, e o ácido a-lipóico
pode desempenhar um papel como um nutriente condicionalmente essencial em
mamíferos idosos (Ames 1998; Podda et al. 1994). Além disso, o ácido a-lipóico foi
773
estudado por sua capacidade de aumentar a captação de glicose pelos músculos
esqueléticos, o que o torna do interesse de atletas e diabéticos. Estudos de ácido a-
lipóico em cães idosos mostraram resultados conflitantes em relação aos efeitos sobre a
cognição, com alguns estudos mostrando um efeito positivo e outros mostrando nenhum
efeito (Christie et al. 2009; Milgram et al. 2007).

O ácido a-lipóico foi incluído como ingrediente em alguns alimentos comerciais

extrusados para cães (Zicker et al. 2002). Nos níveis que ocorrem nesses alimentos, o
ácido a-lipóico parece ter um baixo nível de toxicidade, com uma dosagem oral máxima
tolerada em Beagles de laboratório de 126 mg/kg e DL 50 de 400–500 mg/kg (Hill et al.
2004; Loftin e Herold 2009). No entanto, foi relatado que cães que ingeriram
acidentalmente grandes quantidades de suplementos de ácido a-lipóico experimentaram
hipoglicemia, lesão hepática, insuficiência renal e morte (Loftin e Herold 2009). Os gatos
parecem ser aproximadamente dez vezes mais sensíveis do que outras espécies, com
danos hepatocelulares ocorrendo com 30 mg/kg (Hill et al. 2004). Certos estados de
doença, como deficiência de tiamina, podem resultar em aumento da toxicidade do ácido
a-lipóico, reduzindo significativamente as dosagens tóxicas (Gal 1965). A Sociedade
Americana para a Prevenção da Crueldade para com os Animais Animal Poison Control
Center considera dosagens de ácido a-lipóico de > 5 mg/kg (gatos) e > 50 mg/kg (cães)
como motivo de preocupação para intoxicação (Loftin e Herold 2009).

2.2.7 – Lecitina

A lecitina é uma mistura de fosfatidilcolinas, ácidos graxos, carboidratos e outros

compostos (DerMarderosian e Beutler 2014). Polienilfosfatidilcolina (PPC) é a substância
considerada responsável pelos efeitos hepatoprotetores da lecitina, principalmente por
meio de sua porção dilinoleoilfatidilcolina (DLPC) (Center 2004; Lee et al. 2015). Foi
demonstrado que tanto o PPC quanto o DLPC inibem a fibrogênese hepática, atenuam a
lesão oxidativa da membrana hepatocelular e mitocondrial, reduzem o acúmulo de
espécies reativas de oxigênio e conservam os níveis de GSH hepatocelular e
mitocondrial. As atividades antiinflamatórias de PPC e DLPC ocorrem por meio da inibição
da ativação das células de Kupffer, enquanto a redução da ativação das células
estreladas hepáticas é responsável por algumas de suas atividades anti fibróticas. Foi
demonstrado que a DLPC atenua o dano oxidativo de uma variedade de insultos
hepáticos tóxicos, com exceção da intoxicação por ferro em que a DLPC auxilia na
restauração dos níveis de GSH, mas não controla a lesão oxidativa causada pelo ferro
(Aleynik et al. 2000).

774
Em humanos, o PPC foi usado principalmente na hepatotoxicose do álcool, mas também
demonstrou ser benéfico em doenças hepáticas necroinflamatórias crônicas, bem como
na hepatopatia aguda (Center 2004). Embora nenhum estudo clínico controlado em
espécies veterinárias tenha sido realizado, as recomendações gerais de dosagem para
pacientes veterinários são 25–50 mg/kg PPC por dia. PPC parece ter uma ampla margem
de segurança, sem efeitos adversos relatados em humanos recebendo dosagens
terapêuticas. Ingestão muito grande em humanos (> 25 g/dia) resultou em desconforto
gastrointestinal, sudorese, hipersalivação e anorexia; um estudo em humanos recebendo
tacrina e lecitina teve problemas gastrointestinais e hepatite relatados como efeitos
adversos (DerMarderosian e Beutler 2014).

2.2.8 – Ubiquinol

Ubiquinonas são antioxidantes benzoquinonas solúveis em lipídios endógenos,

sintetizados em todos os tecidos animais; ubiquinol (coenzima Q10) é a forma reduzida de
ubiquinona (DerMarderosian e Beutler 2014). Ubiquinonas atuam em reações de redução
de oxidação na cadeia respiratória mitocondrial e protegem contra a peroxidação lipídica.
Ubiquinol atua como um antioxidante que reduz a vitamina C e a vitamina E após suas
interações com oxidantes. Na doença hepática, a disfunção mitocondrial resulta na
diminuição da disponibilidade de ubiquinol, aumentando o risco de lesão oxidativa (Center
2004). O suporte mediado por ubiquinol da função das células endoteliais pode ser
benéfico na lesão de isquemia-reperfusão hepática. Existem poucos estudos clínicos de
ubiquinol em pacientes veterinários e as recomendações de dosagem são extrapoladas
de estudos em humanos. Em geral, uma dosagem de 1–2 mg/kg PO por dia pode ser
considerada (Center 2004).

2.2.9 – Ácido ursodeoxicólico

Por séculos, a medicina chinesa utilizou Yutan, um composto derivado da bile seca de
ursos negros chineses, para ajudar no tratamento de doenças hepatobiliares
(Vandeweerd et al. 2013). A investigação sobre o Yutan identificou o principal princípio
ativo na bile como o ácido ursodeoxicólico (UDCA), um ácido biliar hidrofílico;
subsequentemente, as formas sintéticas de UDCA estão disponíveis como drogas
humanas aprovadas pela FDA. Os efeitos benéficos do UDCA decorrem de uma
variedade de atividades, incluindo a substituição de ácidos biliares endógenos mais
tóxicos, citoproteção de hepatócitos e epitélio biliar, atividade antioxidante,
imunomodulação, supressão de focos anômalos de histocompatibilidade principal,
aumento da excreção biliar de compostos tóxicos, estimulação da secreção biliar ,
mitigação de lesão mitocondrial induzida por ácido biliar e redução da apoptose
775
hepatocelular induzida por ácido biliar (Center 2004). Os efeitos hepatoprotetores do
UDCA são específicos para lesão induzida por ácido biliar e não se estendem a lesão de
exposição tóxica direta ou indireta ou de lesão de isquemia-reperfusão. Estudos em
humanos e animais de laboratório não conseguiram demonstrar um benefício do uso de
UDCA em casos de hepato esteatose; por essa razão, o UDCA deve ser usado com
cautela, se for o caso, em pacientes, especialmente gatos, com lipidose hepática grave
(Center 2004).

O UDCA administrado por via oral é absorvido nos intestinos grosso e delgado e> 60% de
uma dose absorvida é absorvida pelo fígado. Tal como acontece com outros ácidos
biliares, o UDCA é conjugado com glicina ou taurina de uma forma dependente da
espécie e é excretado na bile. Em pacientes com colestase, o UDCA se torna o ácido
biliar predominante no fígado e na circulação sistêmica. Em geral, o UDCA pode ser
benéfico em pacientes com distúrbios hepáticos necro inflamatórios ou colestáticos em
que a colestase é uma preocupação, embora faltem estudos publicados mostrando
eficácia em pacientes veterinários. Doses de 10–15 mg/kg PO com alimentos em uma ou
duas doses divididas têm sido recomendadas para pacientes veterinários (Center 2004).

3. Pâncreas
3.1 Disfunção pancreática

O pâncreas tem funções endócrinas e exócrinas. A principal função das células acinares
do pâncreas exócrino é a síntese e secreção de enzimas digestivas, incluindo as
proenzimas inativas de quimiotripsina, tripsina, colagenase, fosfolipases, elastases e
carboxipeptidases, bem como lipase e amilase ativas (Jubb e Stent 2016).

As células endócrinas das ilhotas do pâncreas secretam os hormônios insulina, glucagon,

somatostatina, polipeptídeo pancreático, adrenomedulina e grelina. Em termos gerais, o
pâncreas exócrino medeia a digestão, enquanto o pâncreas endócrino regula as
concentrações de glicose no sangue. A disfunção pancreática exócrina resulta em uma
síndrome de má digestão denominada insuficiência pancreática exócrina (IPE), resultando
em diarreia, perda de peso e proliferação da microflora do intestino delgado. A disfunção
das ilhotas pancreáticas mais comumente causa diminuição ou ausência da secreção de
insulina, resultando em diabetes mellitus, caracterizada por hiperglicemia, glicosúria,
polidipsia, poliúria e perda de peso. A pancreatite, uma inflamação do pâncreas, pode
resultar em danos às células acinares e das ilhotas, predispondo ao diabetes ou à
insuficiência pancreática exócrina ou, em casos graves, a ambas.
776
3.2 Nutracêuticos e o Pâncreas

3.2.1 – Enzimas

Para a maioria dos pacientes veterinários com EPI, o uso de extratos de enzimas
pancreáticas comerciais derivados de pâncreas bovino ou suíno proporcionará o grau de
digestão dos alimentos necessário para resolver a maioria dos sinais clínicos (Steiner
2010). As enzimas digestivas derivadas de plantas que foram recomendadas como
substitutas das enzimas pancreáticas incluem papaína, bromelaína e ficina; no entanto,
não há estudos que demonstrem eficácia comparável às enzimas derivadas do pâncreas
para EPI (Silver 2012). A suplementação com vitaminas lipossolúveis (A, D, E, K) também
é recomendada em pacientes com EPI (Steiner 2010).

3.2.2 – Nutracêuticos e Diabetes

Um grande número de nutracêuticos foi investigado por sua capacidade de alterar os

níveis de glicose no sangue em humanos, mas a extrapolação para espécies veterinárias
é complicada pelo fato de que as respostas da insulina e da glicose no sangue podem
variar entre as espécies. Por exemplo, o xilitol é um álcool de açúcar de 5 carbonos
derivado da casca de salgueiro que é usado como adoçante por diabéticos humanos
porque não tem impacto sobre os níveis de insulina ou glicose no sangue; em contraste, a
administração de xilitol a cães pode causar um aumento intenso e prolongado na
secreção de insulina do pâncreas, levando à hipoglicemia que pode ser potencialmente
fatal (Dunayer 2006). Extrapolar entre as espécies veterinárias também é difícil no que diz
respeito ao diabetes mellitus, uma vez que o tipo de diabetes tende a ser diferente: os
cães diabéticos geralmente têm uma falta absoluta de insulina devido à destruição das
células das ilhotas (diabetes tipo 1 humano), enquanto o diabetes mellitus em gatos é
mais semelhante ao diabetes tipo 2 humano, ou seja, disfunção das células β e resposta
deficiente do tecido à insulina (Reusch 2010). A Tabela 1 destaca alguns compostos
nutracêuticos que foram investigados para diabetes mellitus humano; não existem
estudos em espécies veterinárias, e a extrapolação dos resultados para pacientes
veterinários deve ser feita com extrema cautela. Para obter detalhes sobre
nutracêuticos/extratos de plantas em caninos e felinos, os leitores devem consultar o
capítulo “Nutracêuticos em condições gastrointestinais” neste livro.

777
 Tabela 1 Efeitos nutracêuticos em diabetes
Mecanismo de ação
Nutracêutico Constituinte ativo Efeitos adversos Referência
proposto
Hill et al.
(2001), Jacob
Hipoglicemia, et al.
Ácido a-lipóico Ácido a-lipóico ↓ resistência a insulina (1995), Loftin
hepatotoxicidade
and Herold
(2009)
↑ligação à insulina,
↑números do receptor de Lesão renal em altas Anderson
Cromo Cromo (2000)
insulina, ↑sensibilidade à doses
insulina das células
Pode causar anemia Sheela and
Sulfóxido de S-alil Augusti (1992),
Alho ↓ glicose em jejum corporal de Heinz em cães Tang et al.
cisteína
e gatos (2008)
A cafeína pode ter efeitos
adversos; vitamina K pode
↑sensibilidade das Potenza et al.
Chá verde Polifenóis interferir com (2007)
células à insulina
anticoagulantes
terapêuticos
Ubiquinol melhora
o controle Afolayan and
Ubiquinol
glicêmico de longo Nenhum encontrado Olubunmi
(coenzima Q10) (2014)
prazo no diabetes
tipo 2

4. Observações Finais e Orientações Futuras

Centenas de nutracêuticos foram investigados quanto ao seu benefício ou dano potencial
na doença hepática ou pancreática, mas mais estudos são necessários para determinar a
eficácia clínica dos agentes individuais. Embora a pesquisa tenha mostrado que muitos
nutracêuticos possuem atividades medicinais potenciais que são mensuráveis no nível
celular e/ou molecular, demonstrar a eficácia clínica pode ser muito mais problemático.
Relatos de resposta clínica positiva de pacientes veterinários a nutracêuticos não passam
de evidências anedóticas ou relatos de casos individuais onde fatores de confusão, como
compostos coadministrados (por exemplo, medicamentos, ervas, outros nutracêuticos),
pureza nutracêutica questionável ou falta de populações de controle efetivo fazem é difícil
determinar qualquer efeito real dos nutracêuticos. Os nutracêuticos comercialmente
disponíveis variam consideravelmente entre as marcas (e frequentemente entre os lotes
de uma marca) em qualidade e conteúdo de componentes ativos; muitos fabricantes
consideram suas formulações “proprietárias” e se recusam a divulgar o conteúdo, e os
pesquisadores frequentemente usam purificados e/ou extratos de constituintes individuais
de nutracêuticos em vez dos produtos disponíveis para uso, tornando difícil fazer
comparações entre os estudos. Produtos à base de ervas, suplementos e nutracêuticos

778
são mal regulamentados em muitos países, deixando o consumidor à mercê do fabricante
em termos de qualidade e segurança do produto (Seeff et al. 2015).

Os compostos nutracêuticos que funcionam bem in vitro podem ter baixa

biodisponibilidade ou eliminação rápida, o que interfere em sua capacidade de atingir as
concentrações plasmáticas necessárias para que tenham qualquer efeito terapêutico. Os
compostos que atingem bons níveis plasmáticos podem ser incapazes de se distribuir aos
tecidos-alvo devido à incapacidade de atravessar barreiras fisiológicas devido às
propriedades físico-químicas (por exemplo, lipofilicidade, pH) ou devido à presença ou
ausência de moléculas transportadoras apropriadas (por exemplo, glicoproteína-p
transportadores). Outros nutracêuticos podem ter efeitos benéficos em alguns tecidos,
mas podem ser prejudiciais a outros tecidos do corpo. Por exemplo, o composto
hepatoprotetor silimarina demonstrou aumentar o crescimento de tumores mamários
(Malewicz et al. 2006); da mesma forma, a silibinina tem propriedades hepatoprotetoras,
mas pode promover a progressão do carcinoma hepatocelular dependente de etanol
quando coadministrada com etanol (Brandon-Warner et al. 2012).

Nutracêuticos que demonstram atividades antioxidantes, antiinflamatórias e/ou

antifibróticas no fígado podem inibir ou minimizar a lesão aguda induzida por agentes
hepatotóxicos endógenos e exógenos ou podem prevenir ou retardar a progressão de
doenças hepáticas crônicas, como lipidose hepática, hepatite crônica ativa, doenças de
armazenamento hepático, e carcinogênese hepática. No entanto, como a alteração das
enzimas metabólicas hepáticas, respostas inflamatórias/imunes diminuídas e estimulação
da proliferação hepatocelular podem causar consequências desfavoráveis, como
interferência com agentes terapêuticos, vigilância imunológica hepática diminuída ou risco
aumentado de neoplasia hepática, potenciais efeitos adversos dos nutracêuticos devem
ser pesquisado e documentado. A maioria dos nutracêuticos carece de dados de
segurança e carcinogenicidade de longo prazo e carece do requisito regulatório para
rastrear efeitos adversos. Foi relatado que doença e morte em humanos e animais estão
associadas à contaminação ou adulteração intencional de nutracêuticos com biotoxinas,
metais pesados, micotoxinas, resíduos de pesticidas, produtos farmacêuticos, plantas
tóxicas e outras substâncias potencialmente perigosas (Seeff et al. 2015; Mittelman et al.
2016; Brown 2017; Gupta et al. 2018). Essas questões precisarão ser abordadas por meio
de pesquisas adicionais antes que a segurança e a eficácia dos produtos nutracêuticos
possam ser determinadas.

Referências
Afolayan AJ, Olubunmi AW (2014) Dietary supplements in the management of hypertension and diabetes – a review.
Afr J Tradit Complement Altern Med 11(3):248–258
779
 Aleynik SI, Leo SM, Aleynik MK et al (2000) Polyenylphosphatidylcholine protects against alcohol but not iron-induced
oxidative stress in the liver. Alcohol Clin Exp Res 24(2):196–206
Ames BN (1998) Micronutrients prevent cancer and delay aging. Toxicol Lett 102–103:5–18
Anderson RA (2000) Chromium in the prevention and control of diabetes.Diabetes Metab 26(1):22–27
Athuraliya T, Nimmi C, Jones AL (2009) Prolonged N-acetylcysteine therapy in late acetaminophen poisoning
associated with acute liver failure--a need to be more cautious? Crit Care 13(3):144
Avizeh R, Najafzadeh H, Razi Jalali M et al (2010) Evaluation of prophylactic and therapeutic effects of silymarin and
N-acetylcysteine in acetaminophen-induced hepatotoxicity in cats. J Vet Pharmacol Ther 33(1):95–99
Azzi A, Ricciarelli R, Zingg M (2002) Non-antioxidant molecular functions of alpha-tocopherol (Vitamin E). FEBS Lett
519 (1–3):8–10
Bateman D, Dear JW, Thanacoody HK et al (2014) Reduction of adverse effects from intravenous acetylcysteine
treatment for paracetamol poisoning: a randomised controlled trial. Lancet 383 (9918):697–704
Bémeur C, Vaquero J, Desjardins P et al (2010) N-acetylcysteine attenuates cerebral complications of non-
acetaminophen-induced acute liver failure in mice: antioxidant and anti-inflammatory mechanisms. Metab Brain Dis
25(2):241–249
Bischoff K, Ramaiah SA (2007) Liver toxicity. In: Gupta R (ed) Veterinary toxicology: basic and clinical principles.
Academic Press, Amsterdam, pp 145–160
Bottiglieri T (2002) S-Adenosyl-L-Methionine (SAMe): from the bench to the bedside--molecular basis of a pleiotropic
molecule. Am J Clin Nutr 76(5):1151S–1157S
Brandon-Warner EE, Ashley L et al (2012) Silibinin (Milk Thistle) potentiates ethanol-dependent hepatocellular
carcinoma progression in male mice. Cancer Lett 326(1):88–95
Brown AC (2017) Liver toxicity related to herbs and dietary supplements: online table of case reports. Part 2 of 5
series. Food Chem Toxicol 107:472–501
Bustamante J, Lodge J, Marcocci L et al (1998) Alpha-lipoic acid in liver metabolism and disease. Free Radic Biol Med
24 (6):1023–1039
Cantürk NZ, Cantürk Z, Utan N et al (1998) Cytoprotective effects of alpha tocopherol against liver injury induced by
extrahepatic biliary obstruction. East Afr Med J 75(2):77–80
Center SA (2004) Metabolic, antioxidant, nutraceutical, probiotic, and herbal therapies relating to the management of
hepatobiliary disorders. Vet Clin North Am Small Anim Pract 34(1):67–172
Center SA, Randolph J, Warner K et al (2005a) The effects of S-adenosylmethionine on clinical pathology and redox
potential in the red blood cell, liver, and bile of clinically normal cats. J Vet Int Med 19(3):303–314
Center SA, Warner K, McCabe J et al (2005b) Evaluation of the influence of S-adenosylmethionine on systemic and
hepatic effects of prednisolone in dogs. Am J Vet Res 66(2):330–341
Christie L, Opii W, Head E et al (2009) Short-term supplementation with acetyl-L-carnitine and lipoic acid alters plasma
protein carbonyl levels but does not improve cognition in aged beagles. Exp Gerontol 44(12):752–759
Crawford JM (2005) Liver and biliary tract. In: Kumar VA, Abbas V, Fausto N (eds) Robbins and Cotran’s pathologic
basis of disease. Saunders, St. Louis, MO, pp 877–937
DeClementi C (2018) Prevention and treatment of poisoning. In: Gupta R (ed) Veterinary toxicology: basic and clinical
principles. Academic Press, Amsterdam, pp 1141–1159
DerMarderosian A, Beutler JA (2014) The review of natural products, 8th edn. Clinical Drug Information, LLC, St. Louis,
MO
Duarte S, Baber J, Fujii T, Coito AJ (2015) Matrix metalloproteinases in liver injury, repair and fibrosis. Matrix Biol 44–
46:147–156
Dunayer EK (2006) New findings on the effects of xylitol ingestion in dogs. Vet Med 101(12):791–796
Elmore S (2007) Apoptosis: a review of programmed cell death. Toxicol Pathol 35(4):495–516
Friedel HA, Goa KL, Benfield P (1989) S-adenosyl-L-methionine. A review of its pharmacological properties and
therapeutic potential in liver dysfunction and affective disorders in relation to its physiological role in cell metabolism.
Drugs 38(3):389–416
Gal EM (1965) Reversal of selective toxicity of (-)-alpha-lipoic acid by thiamine in thiamine-deficient rats. Nature
207(996):535
Gupta RC, Srivastava A, Lall R (2018) Toxicity potential of nutraceuticals. In: Nicolotti O (ed) Computational toxicology:
methods and protocol. Springer, New York, NY, pp 367–394
Gwaltney-Brant SM (2016) Nutraceuticals in hepatic diseases. In: Gupta R (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and
toxicity. Academic Press, Amsterdam, pp 87–99
Hill AS, O’Neill S, Rogers QR et al (2001) Antioxidant prevention of Heinz body formation and oxidative injury in cats.
Am J Vet Res 62 (3):370–374
Hill AS, Werner JA, Rogers QR et al (2004) Lipoic acid is 10 times more toxic in cats than reported in humans, dogs or
rats. J Anim Physiol Anim Nutr 88(3–4):150–156
Jacob RA, Sotoudeh G (2002) Vitamin C function and status in chronic disease. Nutr Clin Care 5(2):66–74
Jacob S, Henriksen JE, Schiemann A et al (1995) Enhancement of glucose disposal in patients with Type 2 diabetes
by alpha-lipoic acid. Arzneimittelforschung 45(8):872–874
Jaeschke H (2008) Toxic responses of the liver. In: Klaasen CD (ed) Casarett and Doul’s toxicology, the basic science
of poisons. McGraw-Hill, New York, pp 557–582
780
 Jubb KV, Stent AW (2016) Pancreas. In: Maxie MG (ed) Jubb, Kennedy, and Palmer’s pathology of domestic animals.
Elsevier, St. Louis, MO, pp 353–375
Lee W, Weng SH, Su N (2015) Individual phosphatidylcholine species analysis by RP-HPLC-ELSD for determination of
polyenylphosphatidylcholine in lecithins. J Agric Food Chem 63(15):3851–3858
Leveque JI (1969) Ascorbic acid in treatment of the canine distemper complex. Vet Med Small Anim Clin 64(11):997–
999
Loftin EG, Herold LV (2009) Therapy and outcome of suspected alpha lipoic acid toxicity in two dogs. J Vet Emerg Crit
Care 19 (5):501–506
Malewicz B, Wang Z, Jiang C et al (2006) Enhancement of mammary carcinogenesis in two rodent models by
silymarin dietary supplements. Carcinogenesis 27(9):1739–1747
Mato JM, Corrales FJ, Lu SC et al (2002) S-adenosylmethionine: a control switch that regulates liver function. FASEB
J 16(1):15–26
Milgram NW, Araujo JA, Hagen TM et al (2007) Acetyl-L-carnitine and alpha-lipoic acid supplementation of aged
beagle dogs improves learning in two landmark discrimination tests. FASEB J 21 (13):3756–3762
Mittelman NS, Engiles JB, Murphy L et al (2016) Presumptive iatrogenic microcystin-associated liver failure and
encephalopathy in a Holsteiner gelding. J Vet Intern Med 30(5):1747–1751
National Research Council (1987) Vitamin tolerance of animals. National Academy Press, Washington, DC
Podda M, Tritschler HJ, Ulrich H et al (1994) Alpha-lipoic acid supplementation prevents symptoms of Vitamin E
deficiency. Biochem Biophys Res Commun 204(1):98–104
Potenza MA, Marasciulo M, Tarquinio M et al (2007) EGCG, a green tea polyphenol, improves endothelial function and
insulin sensitivity, reduces blood pressure, and protects against myocardial I/R injury in SHR. Am J Physiol Endocrinol
Metab 292(5):E1378–E1387
Puschner B (2018) Mushroom toxins. In: Gupta R (ed) Veterinary toxicology: basic and clinical principles. Academic
Press, Amsterdam, pp 955–966
Reusch C (2010) Feline diabetes mellitus. In: Ettinger SJ, Feldman EC (eds) Textbook of veterinary internal medicine.
St. Louis, MO, Saunders, pp 1796–1816
Saito C, Zwingmann C, Jaeschke H (2010) Novel mechanisms of protection against acetaminophen hepatotoxicity in
mice by glutathione and N-acetylcysteine. Hepatology 51(1):246–254
Schmid RD, Hovda LR (2016) Acute hepatic failure in a dog after xylitol ingestion. J Med Toxicol 12(2):201–205
Seeff LB, Bonkovsky HL, Navarro VJ et al (2015) Herbal products and the liver: a review of adverse effects and
mechanisms. Gastroenterology 148(3):517–532.e3
Sellon RK (2013) Acetaminophen. In: Peterson ME, Talcott PA (eds) Small animal toxicology. Saunders, St. Louis, MO,
pp 423–429
Sheela CG, Augusti KT (1992) Antidiabetic effects of S-allyl cysteine sulphoxide isolated from garlic Allium sativum
Linn. Indian J Exp Biol 30(6):523–526
Silver RJ (2012) Clinical applications of nutraceutical and botanical compounds in companion animals. Proceedings of
the Wild West Veterinary Conference. Reno, NV
Skorupski KA, Hammond GM, Irish AM et al (2011) Prospective randomized clinical trial assessing the efficacy of
denamarin for prevention of CCNU-induced hepatopathy in tumor-bearing dogs. J Vet Int Med 25(4):838–845
Stalker MJ, Hayes MA (2007) Liver and biliary system. In: Maxie MG (ed) Jubb, Kennedy, and Palmer’s pathology of
domestic animals. Elsevier, St. Louis, MO, pp 297–388
Steiner JM (2010) Canine pancreatic disease. In: Ettinger SJ, Feldman EC (eds) Textbook of veterinary internal
medicine. Saunders, St. Louis, MO, pp 1695–1704
Taboada J (2017) Clinical update on the use of nutraceuticals in the management of canine and feline liver disease.
Proceedings of the Southwest Veterinary Symposium
Tang X, Xia Z, Yu J (2008) An experimental study of hemolysis induced by onion (Allium Cepa) poisoning in dogs. J
Vet Pharmacol Ther 31(2):143–149
Vandeweerd JM, Cambier C, Gustin P (2013) Nutraceuticals for canine liver disease: assessing the evidence. Vet Clin
North Am Small Anim Pract 43(5):1171–1179
Vogel GB, Tuchweber T, Trost W, Mengs U (1984) Protection by silibinin against amanita phalloides intoxication in
beagles. Toxicol Appl Pharmacol 73(3):355–362
Wallace KP, Center SA, Hickford SF et al (2002) S-adenosyl-L-methionine (SAMe) for the treatment of acetaminophen
toxicity in a dog. J Am Anim Hosp Assoc 38(3):246–254
Wang K (2014) Molecular mechanisms of hepatic apoptosis. Cell Death Dis 5(1):e996–e910
Watkins PB, Seef LB (2006) Drug-induced liver injury: summary of a single topic clinical research conference.
Hepatology 43:618–631
Webster CRL, Cooper J (2009) Therapeutic use of cytoprotective agents in canine and feline hepatobiliary disease.
Vet Clin North Am Small Anim Pract 39(3):631–652
Yang R, Miki K, He S, Kileen ME et al (2009) Prolonged treatment with N-acetylcysteine delays liver recovery from
acetaminophen hepatotoxicity. Crit Care 13(2):R55
Zicker SC, Hagen TM, Golder C et al (2002) Safety of long-term feeding of Dl- α -lipoic acid and its effect on reduced
glutathione: oxidized glutathione ratios in beagles. Vet Ther 3(2):167–176

781
 Nutracêuticos na saúde e doenças periodontais em
cães e gatos
Ramesh C. Gupta, Denise M. Gupta, Rajiv Lall, Ajay Srivastava e Anita Sinha

Resumo
As doenças periodontais são as doenças mais comuns em cães e gatos domésticos. O
tratamento convencional das doenças periodontais baseia-se em antibióticos e anti-
sépticos de amplo espectro. Devido ao aumento dos custos de saúde, efeitos colaterais
graves e resistência aos medicamentos, os medicamentos complementares e alternativos
são uma escolha preferível para pacientes com doenças periodontais. Este capítulo
descreve vários nutracêuticos e medicamentos fitoterápicos complementares que podem
ser usados isoladamente ou em combinação para a prevenção e o tratamento da
periodontite em cães e gatos.

Palavras-chave: Nutracêuticos · Nutracêuticos veterinários · Saúde bucal · Doenças

periodontais

R. C. Gupta - Toxicology Department, Breathitt Veterinary Center, Murray State University, Hopkinsville, KY,
USA e-mail: rgupta@murraystate.edu
D. M. Gupta Hopkinsville, KY, USA
R. Lall · A. Srivastava · A. Sinha Vets Plus Inc., Menomonie, WI, USA

1. Introdução
Atualmente, cerca de 3,9 bilhões de pessoas sofrem de doenças periodontais associadas
às cáries gengivais e dentais. As doenças periodontais são mais freqüentemente
encontradas em cães e gatos do que em humanos devido à falta de higiene bucal. De
acordo com o American Veterinary Dental College (AVDC), 80% dos cães e 70% dos
gatos sofrem de doenças periodontais. A doença periodontal afeta cães e gatos de todas
as idades, embora seja mais comum em animais mais velhos.

Pode incluir gengivas doloridas, inchadas e com sangramento, dentes infectados, cáries,
formação de placa bacteriana e tártaro. Em animais, a doença periodontal é um problema
de saúde frequentemente esquecido que pode estar direta ou indiretamente ligado a um
risco aumentado de doença cardiovascular, artrite, diabetes e até mesmo doença
neurodegenerativa (síndrome de disfunção cognitiva crônica em cães e gatos).

782
Em vários estudos, foi relatada a influência da dieta na saúde bucal em cães e gatos
(Gawor et al. 2006; Logan 2006; Chandler 2014; Oba et al. 2018). Produtos vegetais têm
sido usados para melhorar a saúde bucal e promover a higiene bucal há muito tempo
(revisado em Kumar et al. 2015). Ganesan (2008) forneceu uma lista de 114 espécies de
plantas pertencentes a 51 famílias com potencial para uso em doenças periodontais.
Ganesan (2008) relatou que as folhas eram a parte dominante da planta usada em
higiene bucal (25,44%), seguida por raiz (20,17%), semente/noz/ frutos (18,42%), casca
(14,03%), caule (12,28%), planta inteira (9,65%) e goma/látex (8,77%). A maioria dos
extratos e produtos vegetais são usados, em várias formas, como enxaguatório bucal,
pasta ou pó, para aliviar dores de dente, gengivite, estomatite, úlceras, sangramento
gengival e outros distúrbios.

No tratamento convencional de doenças periodontais, vários agentes antimicrobianos ou

antissépticos são aplicados localmente na forma de fibras, filmes, géis, sistemas
microparticulados ou sistemas nanoparticulados (Puri e Puri 2013). Com base na duração
de ação necessária, o fármaco ou os agentes fitoquímicos podem ser aplicados
localmente usando dispositivos de liberação sustentada [(a) administração do fármaco por
menos de 24 h, (b) exigir múltiplas aplicações e (c) seguir a cinética de primeira ordem] ou
dispositivos de entrega controlada [(a) a duração da liberação do fármaco excede 24 h,
(b) administrado uma vez e (c) segue uma cinética de ordem zero]. Devido ao aumento
dos custos de saúde, efeitos colaterais e resistência aos medicamentos, os
medicamentos complementares e alternativos são preferidos aos medicamentos
modernos. Este capítulo descreve alguns nutracêuticos e extratos de plantas que podem
ser usados para várias doenças periodontais em cães e gatos.

2. Fisiopatologia das Doenças Periodontais

A fisiopatologia das doenças periodontais é complexa devido às etiologias multifatoriais. A
cavidade oral consiste em dentes, gengivas, palato duro e tecidos moles. O periodonto
consiste em quatro tecidos (gengiva livre e aderida, ligamento periodontal, osso alveolar e
cemento radicular) e protege os dentes. Os problemas dentários podem incluir placa
bacteriana, tártaro, cárie dentária, gengivite e doenças periodontais (Muhammad e Lawal
2010). A deterioração da gengiva, frequentemente caracterizada por inchaço,
sangramento e dor, é a principal causa da perda dentária. A periodontite é considerada a
segunda causa mais importante de perda dentária em humanos e animais. As
características clínicas que podem ser úteis na detecção precoce do início da periodontite

783
incluem inflamação gengival evidente, cálculo dentário e uma alta taxa de cárie,
restaurações e perda dentária (Albandar et al. 1997).

A periodontite pode ser definida como um processo inflamatório, iniciado pela formação
de biofilme de placa, que leva à perda de fixação periodontal na superfície da raiz e osso
alveolar adjacente e pode, em última instância, resultar na perda do dente. Tanto na
gengivite quanto na periodontite, a inflamação é o resultado de microrganismos presentes
na placa dentária (Newman et al. 2006). Inicialmente, as bactérias na placa são
predominantemente aeróbios Gram-positivos, não móveis, incluindo Staphylococcus spp.
e Streptococcus spp., mas muitos outros também estão presentes. À medida que o
biofilme da placa engrossa e amadurece, os anaeróbios Gram-negativos tornam-se
predominantes. As bactérias da placa subgengival secretam toxinas e subprodutos
metabólicos, iniciando a gengivite e o processo inflamatório. Os organismos mais
frequentemente associados à doença periodontal incluem Bacteroides fragilis,
Peptostreptococcus, Porphyromonas gulae, Porphyromonas salivosa, Porphyromonas
denticanis, Prevotella intermedia, Treponema spp., Bacteroides splanchnicus e muitos
outros. Recentemente Singh et al. (2016) enfatizou o papel dos periopatógenos ( P.
gingivalis, A. actinomycetemcomitans, P. intermedia, F. nucleatum, etc.) em doenças
periodontais.

Os patógenos periodontais podem induzir a superprodução de espécies reativas de

oxigênio (ROS) e, portanto, podem causar a degradação do colágeno e das células
periodontais (Soni et al. 2012). Na verdade, a periodontite está associada à redução da
capacidade antioxidante e aumento do dano oxidativo (Lima et al. 2017). O estresse
oxidativo induz inflamação e perda óssea, contribuindo para a progressão patológica das
doenças periodontais. Durante a periodontite, o processo inflamatório é marcado por
neutrófilos que invadem o periodonto e induz a liberação de enzimas proteolíticas e
produção de ROS (D’Aiuto et al. 2010). Um desequilíbrio entre a resposta pró-inflamatória
e anti-inflamatória resulta em colapso periodontal (Preshaw 2008). A exacerbação
contínua da inflamação culmina com a destruição das fibras de colágeno e reabsorção
óssea (Zheng et al. 2015).

No campo da saúde e doenças periodontais, vários marcadores diagnósticos são usados,

como acúmulo de placa (PLA), índice de placa (PI), índice gengival (GI), sangramento à
sondagem (BOP), índice de sangramento do sulco (SBI), sondagem periodontal
profundidade (PD), nível de fixação clínica (CAL) e índice de higiene oral simplificado
(OHI-S) (Pannuti et al. 2003; Nagata et al. 2008; Khairnar et al. 2013). Recentemente,
Kajiura et al. (2016) relataram que a forma solúvel do repórter IL-6 (sIL-6R) e as
784
concentrações de calprotectina no fluido das fendas gengivais são biomarcadores úteis na
avaliação da periodontite. A Figura 1 mostra o tártaro dentário no cão.

Fig. 1 Tártaro em dentes de cachorro

De acordo com o Dr. Alexander M. Reiter (Escola de Medicina Veterinária da Universidade

da Pensilvânia), a periodontite em cães e gatos é classificada em quatro estágios:

Estágio 1: há apenas gengivite, sem perda de inserção; a altura e a arquitetura da

margem alveolar são normais.

Estágio 2: há periodontite inicial com <25% de perda de inserção ou, no máximo, há

envolvimento de furca no estágio 1 em dentes multirradiculares. Existem sinais
radiográficos precoces de periodontite. A perda de inserção periodontal é <25%, medida
por sondagem do nível de inserção clínica ou por determinação radiográfica da distância
da margem alveolar da junção cemento/esmalte em relação ao comprimento da raiz.

Estágio 3: Há periodontite moderada, com 25-50% de perda de inserção, medida pela

sondagem do nível de inserção clínica ou por determinação radiográfica da distância da
margem alveolar da junção cemento/esmalte em relação ao comprimento da raiz, ou lá é
um envolvimento de bifurcação de estágio 2 em dentes com múltiplas raízes.

Estágio 4: Há periodontite avançada, com> 50% de perda de inserção, medida pela

sondagem do nível de inserção clínica ou por determinação radiográfica da distância da
margem alveolar da junção cemento/esmalte em relação ao comprimento da raiz, ou há
um envolvimento de bifurcação de estágio 3 em dentes com raízes múltiplas.

Na periodontite avançada, os dentes podem cair e às vezes são engolidos por cães e
gatos (Fig. 2).

785
 Fig. 2 Quatro estágios da doença periodontal em caninos

3. Nutracêuticos em doenças periodontais

Como em humanos, as doenças periodontais em cães e gatos podem ser tratadas com
quatro objetivos: (1) remover a placa acumulada e o tártaro, (2) combater as bactérias que
causam infecção, (3) reduzir a inflamação e (4) parar o sangramento.
Alguns nutracêuticos comumente usados são discutidos aqui resumidamente, e o restante
está listado na Tabela 1.

Tabela 1 Nutracêuticos/extratos vegetais com potencial para prevenção/tratamento de doenças

periodontais
Nutracêuticos/
Ingredientes ativos Efeitos farmacológicos Referências
extratos vegetais
Abrusogenina, estigmasterol, β- Fortalecimento da gengiva e
Abrus precatorius Ganesan (2008),
sitosterol, monoglicerídeos, dos dentes, dentifrício, Ragasa et al. (2013)
Linn.
triglicerídeos antibacteriano, antifúngico
Polifenólicos, ácido gálico, Antioxidante, antiviral, Ganesan (2008),
Acasia arabica
catequina, ácido clorogênico, antimicrobiano, antifúngico, Pradeep et al.
Wild. (2010)
robidandiol antiplaca, antigengivite

786
 Tabela 1 Nutracêuticos/extratos vegetais com potencial para prevenção/tratamento de doenças
periodontais
Nutracêuticos/
Ingredientes ativos Efeitos farmacológicos Referências
extratos vegetais
Acacia farnesiana Compostos fenólicos, glicosídeo Antioxidante, antibacteriano, Ganesan (2008),
Linn. de galoil dentifrício, anti-gengivite Ramli et al. (2011)

Amos et al. (1999),

Gilani et al. (1999),
Antioxidante, antibacteriano, Shekhawat e Batra
Acacia nilotica L. Androstene, D-pinitol, catequinas,
antifúngico, anti-gengivite, (2006), Bushra et al.
(babool) ácido gálico, rutina (2007), Bachayaa et
antiplaca
al. (2009), Umaru et
al. (2016)

Acalypha indica L. Siddamallayya et al.

Ácido hexanodioico, éster bis (2- (2010) e
(Indian copper Anti-dor de dente Chaichoowong et al.
etilhexil)
leaf) (2017)

Achyranthes
Saponinas triterpenóides, Mahmood et al.
aspera L. (chicote Anti-dor de dente (2005)
ecdisterona, aquirantina
do diabo)
Alicina (sulfóxido de dialil
Allium sativum L. dissulfeto), alina (sulfóxido de S- Anti-dor de dente Gupta (2006)
alilcisteína), ajoene
3,6 octatrieno, 3-ciclohexano-1-
heptanol, bornileno, 1,3- Gupta (2006) e
Aloe ferox Mill. Anti-dor de dente Magwa et al. (2010)
ciclopentadieno, 1,3-
ciclopentadieno
Scherer et al.
(1998), Wynn
(2005), De Oliveira
et al. (2008), Bhat et
Ácido salicílico, enzimas, Dentifrício, anti-placa, anti-
Aloe vera L. al. (2011), Sajjad
vitaminas, minerais, ácidos graxos gengivite and Subhani Sajjad
(2014), Subhash et
al. (2014), e Petrovic
et al. (2015)

Althea officinalis L. Polissacarídeos, flavonóides, Antimicrobiano, antiinflamatório, Iauk et al. (2003)

(marshmallow) cumarinas, ácido fenólico, esteróis anti-periodontite
Β-felandreno, limoneno, metil
Anacardium Kayode e
chavicol, germacreno, linalol, β- Gengiva dolorida, dor de dente Omotoynibo (2009)
occidentale L.
cadinol, bisaboleno
Arecolina, guvacolina,
Areca catechu Ganesan (2008) e
procianidinas, catequina, Dentifrício Patil et al. (2009)
Linn.
epicatequina
Timol, pseudoguaianolida,
Koo e Jeon (2009) e
Arnica montana L. lactonas sesquiterpênicas, Antimicrobiano, anti-periodontal Iauk et al. (2003)
glicosídeos de flavanona
Makarem et al.
Berberis vulgaris Berberina, berbamina, jatrorrizina, Antioxidante, antiinflamatório, (2007), Palombo
(bérberis) palmatina, oxicontin antibacteriano, antigengivite (2011), e Tu et al.
(2013)
Wolinsky et al.
(1996), Pai et al.
Azadirachta indica Inibidor da glicosil transferase,
Galotaninas (2004), Bhambal et
(neem) antibacteriano, anti-placa al. (2011), e Singh et
al. (2016)

Sanguinaria Alcalóides Bacteriostáticos,

canadensis (Raiz Alcalóides antiinflamatórios, anti perda Pai et al. (2004)
de sangue) óssea e perda dentária
Cajanus cajan
Ácido cajanestilbeno, pinostrobina, Ganesan (2008) e
(Linn.) (Feijão Antioxidante, anti-gengivite Wu et al. (2009)
vitexina, orientina
bóer)
787
 Tabela 1 Nutracêuticos/extratos vegetais com potencial para prevenção/tratamento de doenças
periodontais
Nutracêuticos/
Ingredientes ativos
extratos vegetais
Triterpina, oligoglicosídeos,
saponinas, quercetina, glicosídeo
Calendula
sesquiterpeno, luteína,
officinalis L.
flavoxantina, rutina, auroxantina,
zeaxantina, carotenóides, licopeno
Efeitos farmacológicos
Antioxidante, antiinflamatório,
imunoestimulante, antiplaca,
antigengivite, cicatrizante,
antimicrobiano, antifúngico
Referências
Iauk et al. (2003),
Chakraborthy
(2008), Preethi et al.
(2009), Machado
(2010), Parente et
al. (2012), Khairnar
et al. (2013), Li et al.
(2016), e Lima et al.
(2017)

Origanum vulgare
L.; Cinnamomum
Gertsch et al. (2008)
spp.; Piper nigrum β-cariofileno Antibacteriano, anti-placa e Pieri et al. (2016)
L.; Cannabis
sativa L.
Ikinci et al. (2002),
Uraz et al. (2012),
Antibacteriano, antifúngico,
Chitosan Quitosana Costa et al. (2014),
antiplaca, antigengivite e Husain et al.
(2017)

Eugenol, eugenina, eugenitina, Pinto e Santos

Antioxidante, antiinflamatório, (2017), Nagababu e
Syzygium acetil eugenol, β-cariofileno,
antibacteriano, antiviral, Lakshmaiah (1992),
aromaticum vanilina, ácido cratególico, Kumaravelu et al.
imunoestimulador, anti-
(Cravo) bicornina, caempesterol, (1996), Rodrigues et
gengivite, anti-dor de dente
sesquiterpenos al. (2009)

Creme dental à Carbonato de cálcio, camomila,

base de ervas salva, mirra, eucalipto, Anti-placa, anti-gengivite George et al. (2009)
Colgate monofluorofosfato de sódio
Antibacteriano, antinflamatório,
Dolara et al. (2000),
Commiphora Sesquiterpenos (furanoeudesma- antipiorréia, adstringente, Zhu et al. (2003), e
myrrha (mirra) 1,3-dieno, curzareno) analgésico, doenças gengivais e Tipton et al. (2006)
úlceras bucais, antiespasmódico
Ceylon cinnamon
Cinamaldeído, acetato de cinamila,
Powder (Pó de Antimicrobiano, antiinflamatório
álcool cinamílico
canela do Ceilão)
Citrus sinensis Alcalóides, antraquinonas, taninos,
(extrato de casca fenólicos, triterpenóides, Antimicrobiano, Anti-cárie Shetty et al. (2016)
de laranja) saponinas, flavonóides
Nakamura et al.
(1974), Hanioka et
Antioxidante, antiinflamatório, al. (1994), Pradeep
Coenzyme Q10 Coenzima Q10 et al. (2010), Soni et
anti-periodontite, anti-gengivite
al. (2012), Singh et
al. (2016)

Echinacea Ácido chicórico, alquilamidas, Antimicrobiano, antiinflamatório, Kumar et al. (2009)

purpurea (flores de ácido cafeico, glicoproteínas, imunomodulador, analgésico, e Modarai et al.
cone roxo) polissacarídeos anti-gengivite, anti-periodontite (2011)

Extrato de Borneol, 1,8-Cineol, globulol, Antibacteriano, anti-gengivite, Nagata et al. (2008),

Sebei et al. (2015),
eucalipto / óleo de pcimeno, limoneno, α-pineno, anti-sangramento gengival, anti- and Singh et al.
eucaliptol criptona, α-terpineol placa (2016)
Vogel et al. (1978)
Folate Folato Anti-gengivite and Pack (1984)

Fragaria vesca Mirtenol, nonal, linalol, geraniol Anti-placa, anti-tártaro -

788
 Tabela 1 Nutracêuticos/extratos vegetais com potencial para prevenção/tratamento de doenças
periodontais
Nutracêuticos/
Ingredientes ativos Efeitos farmacológicos Referências
extratos vegetais
Garlet et al. (2004),
Vitis vinifera Houde et al. (2006),
Antibacteriano, antioxidante, Baydar et al. (2006),
[Extrato de
Proantocianidinas antiinflamatório, La et al. (2009),
semente de Govindaraj et al.
imunoestimulador, antifúngico
toranja (GSE)] (2010), e Özden et
al. (2017)
Yu et al. (1992),
Hirasawa et al.
Antioxidante, antiinflamatório, (2002), Yun et al.
Epicatequina, galato de
antibacteriano, prevenindo a (2004), Coimbra et
Chá verde epicatequina, epigalocatequina, (-) al. (2006),
reabsorção óssea,
-epigalocatequina-3-galato Kushiyama et al.
anticariogênico (2009) e Chatterjee
et al. (2012)

Taninos Hamamelis, catequinas, Erdelmeier et al.

Hamamelis Antiinflamatório, adstringente,
pró-antocianinas, quercetina, (1996) e Iauk et al.
virginiana L. antimicrobiano, anti-periodontite (2003)
saponinas
Pirnazar et al.
Regeneração periodontal,
Ácido hialurônico Ácido hialurônico (1999) e Bansal et
bacteriostático al. (2010)

Alcalóides de isoquinolona
Hydrastis
(hidrastina, hidrastinina, berberina, Antibacteriano, antiinflamatório,
canadensis (selo Baghele (2017)
berberastina, canadina, canalidina, imunoestimulante
dourado)
tetrahidroberberastina
Α-pineno, farnesol, α-terpineol,
Illicium verum Antioxidante, antimicrobiano, Iauk et al. (2003),
safrol, anisaldeído, β-felandreno,
Hook (anis- antibacteriano, antifúngico, anti- Chouksey et al.
p-cumicaldeído, limoneno, ácido (2010)
estrelado chinês) periodontite
chiquímico
Antioxidante, antiinflamatório,
Terpenóides, flavonóides,
Matricaria anti-séptico, fungistático, anti-
chamazuleno, α-bisabolol, Singh et al. (2011)
chamomilla L. periodontite, anti-feridas na
umbeliferona
gengiva e nos dentes
Iauk et al. (2003),
Mellissa officinalis
Citronelal, geraniol Antimicrobiano, anti-periodontite Abdellatif et al.
L. (2014)

Antioxidante, antiinflamatório, Blumenthal et al.

Mentol, mentona, acetato de
Mentha piperita L. analgésico, antiúlcera, (1998), Kumar et al.
mentila, 1,8-cineol, limoneno, β- (2009), Taheri et al.
(hortelã-pimenta) citoprotetor, quimiopreventivo,
pineno, β-cariofileno, flavonóides (2011)
antigengivite
Origanum vulgare
Polifenóis, flavonas Antioxidantes Petrovic et al. (2015)
(óleo de orégano)
Bicarbonato de sódio, fluoreto de
Pannuti et al.
sódio, camomila, equinácea, Anti-gengivite, anti-placa,
Parodontax® (2003), Ozaki et al.
sálvia, mirra, rhatany, óleo de antiperiodontite (2006)
hortelã-pimenta
Quinods, quercetina,
Quinods, quercetina, benzenoides,
benzenoides, flavonóides,
Tabebuia flavonóides, lapachol, lapachenol, Morrison et al.
lapachol, lapachenol,
impetiginosa (Pau desoxilapachol, α-lapachone, β- (1970), Giuraud et
desoxilapachol, α-lapachone, β- al. (1994)
D’Arco) lapachone, tabebuin, ácido
lapachone, tabebuin, ácido
anísico, antraquinonas, etc.
anísico, antraquinonas, etc.

789
 Tabela 1 Nutracêuticos/extratos vegetais com potencial para prevenção/tratamento de doenças
periodontais
Nutracêuticos/
Ingredientes ativos Efeitos farmacológicos Referências
extratos vegetais
Koo e Jeon (2009),
Gebaraa et al.
(2003), Coutinho
Antioxidante, antimicrobiano, (2012), Campos et
Apis mellifera L. Flavonóides, ácidos fenólicos,
limpeza de cavidades, anti- al. (2014),
(Extrato de terpenos, ácidos aromáticos, Srivastava et al.
tártaro, antiplaca, cicatrização
própolis) chalconas (2016), de Moraes
de feridas Porto et al. (2018),
Kubiliene et al.
(2017)
Liang et al. (2011),
Antioxidante, antiinflamatório, Napimoga et al.
Quercetin Quercetina (2013), Li et al.
imunomodulador
(2016)

Trifolium pratense
Formononetina, biochanina A, Antioxidante, antiinflamatório, Ramos et al. (2012),
L. (Trevo Petrovic et al. (2015)
daidzeína, genisteína antibacteriano, anticâncer
vermelho)
Thymus vulgaris
(Óleo de tomilho Terpineno, timol Antibacteriano, antifúngico Borugă et al. (2014)
vermelho)
Bozin et al. (2007),
Borneol, 1,8-cineol, α-pineno, Antioxidante, antiinflamatório, Santoyo et al.
Rosmarinus
limoneno, ácido rosmarínico, antibacteriano, antifúngico, (2005), Hussain et
officinalis L. al. (2010), Lee et al.
linalol, cânfora, canfeno, antimutagênico,
(Alecrim) (2015), Petrovic et
verbenona, linalol quimiopreventivo al. (2015)
Shiga et al. (2010),
Geléia real Ácido 10-hidroxi-δ2-decenóico, Eick et al. (2014),
Antibacteriano, antifúngico,
(Rojelexin ™, Vets apismina, royalactina, royalisina, Pasupuleti et al.
antiplaca (2017), Lin et al.
Plus, Inc.) jelleines, apolipoforina III
(2018)

N-benzilbenzamida, estigmasterol, Almas (2001), Almas

Salvadora persica Antimicrobiano, antiplaca,
β-sitosterol, ácido espiculespórico, e Almas (2014), El-
(miswak) antigengivite, anticarcinogênico Hefny et al. (2017)
hexadecanoato de metila
Delamare et al.
(2007), Pierozan et
al. (2009), George
Antibacteriano, antifúngico, et al. (2009), Porte
α-tujona, β-tujona, cânfora, α-
antiviral, anticandida, et al. (2013),
Salvia officinalis L. pineno, β-pineno, borneol, ácido
antistomatite, anticárie, Ghorbani e
(sálvia) tânico, cornsole, ácido cornsólico, Esmaeilizadeh
antiplaca, antigengivite,
ácido clorogênico (2014), Narayanan
adstringente and Thangavelu
(2015), Petrovic et
al. (2015)
Stookey et al. (1995,
Hexametafosfato 1996), White e
Hexametafosfato Anti-cálculo Gerlach (2000), Oba
de sódio (SHMP)
et al. (2018)

Melaleuca Terpina-4-ol, γ-terpineno, 1,8-

alternifolia (Óleo cineol, α-cimeno, δ-cadineno, Antimicrobiano Carson et al. (2006)
da árvore do chá) globulol
Taninos hidrolisáveis (ácido gálico,
ácido chebulico, punicalagina, Muhammad et al.
Terminalia chebula chebulanina, corilagina, ácido Antibacteriano (2012), Nayak et al.
chebulínico), triterpenóides, (2014)
compostos fenólicos
Turmeric/curcumin Curcuminóides Antioxidante, antiinflamatório Chaturvedi (2009)

Vitamina C Vitamina C Antioxidante Turesky et al. (1970)

790
3.1 Calendula Officinalis

Calendula officinalis (C. officinalis), comumente conhecida como calêndula, é uma erva
medicinal anual. Mais de 100 fitoconstituintes foram identificados em diferentes partes
desta planta. As flores de Calendula officinalis contêm glicosídeos de flavonóis, oligo
glicosídeos triterpênicos, glicosídeos triterpênicos do tipo oleanan, saponinas e um
glicosídeo sesquiterpênico. As pétalas e o pólen contêm ésteres triterpenóides e os
carotenóides flavoxantina e auroxantina (antioxidante). As folhas e caules contêm outros
carotenóides, principalmente luteína (80%), zeaxantina (5%) e beta-caroteno. Em
essência, a planta é muito rica em quercetina, carotenóides, luteína, licopeno, rutina,
ubiquinona, xantofilas e outros antioxidantes. O flavonóide quercetina é considerado de
grande importância no tratamento da periodontite devido às suas propriedades
antioxidantes e antiinflamatórias (Napimoga et al. 2013; Li et al. 2016).

Por ter esses muitos fitoconstituintes, o extrato de C. officinalis exerce atividades

antioxidantes, antiinflamatórias, antibacterianas, antivirais, antifúngicas e hemostáticas
(Preethi et al. 2009; Preethi e Utta 2006; Parente et al. 2012). Em uma periodontite
induzida experimentalmente em ratos, Lima et al. (2017) demonstraram que 11 dias de
ligadura causaram perda óssea, quebra de fibras de colágeno e aumento da
imunocoloração para DKK-1, reduzindo as expressões de WNT 10b e β-catequina. A
periodontite reduziu a glutationa (GSH), superóxido dismutase (SOD) e catalase (CAT) e
aumentou o malondialdeído (MDA). Todos os achados foram revertidos por 90 mg/kg de
C. officinalis. Lima et al. (2017) sugeriram que C. officinalis reduziu o estresse oxidativo e
a perda óssea e preservou as fibras de colágeno em ratos com periodontite experimental
envolvendo a via de sinalização WNT. Em um ensaio clínico, Khairnar et al. (2013)
relataram que pacientes com gengivite recebendo C. officinalis (tintura de 2 ml com 6 ml
de água destilada) apresentaram redução da placa dentária e gengivite. Em uma série de
outros estudos experimentais e clínicos, C. officinalis (em gel, tintura ou enxaguatório
bucal) mostrou efeitos positivos contra gengivite e periodontite (Lauten et al. 2005; Yusoffs
e Kamin 2006; Preethi e Utta 2006; Machado 2010; Saini et al. 2012; Khairnar et al. 2013;
Tanideh et al. 2013).

O extrato de C. officinalis parece ser um nutracêutico promissor para o tratamento da

periodontite em cães e gatos após obter efeitos positivos em ensaios clínicos
multicêntricos de longo prazo.

791
3.2 Pau d'Arco

Pau d'Arco (Tabebuia impetiginosa), também chamado de “ipê-roxo” ou “lapacho roxo”, é

uma enorme árvore nativa da floresta amazônica e de outras partes tropicais da América
do Sul e América Latina. Há indícios de que seu uso pode realmente ser anterior aos
Incas. Os índios Guarani e Tupi chamam a árvore de “Tajy”, que significa “ter força e
vigor”. Em medicamentos fitoterápicos da América do Sul, Pau d'Arco tem sido indicado
para muitos problemas de saúde, incluindo malária, anemia, febre, colite, artrite,
problemas respiratórios, resfriados, tosse, gripe, infecções fúngicas, reumatismo, picada
de cobra, má circulação, furúnculos, sífilis e câncer.

A casca de Pau d'Arco contém muitos fitoquímicos, incluindo quinóides (antraquinonas,

furanoaftoquinonas, lapachonas e naftoquinonas), benzenóides e flavonóides. Os efeitos
benéficos de Pau d'Arco à saúde derivam de seu conteúdo de lapachol e β-lapachona
(Lagrota et al. 1983; Giuraud et al. 1994). A fórmula estrutural do lapachol e da β-
lapachona é mostrada na Fig. 3. Normalmente, a casca do Pau d'Arco contém 2–7% de
lapachol. Uma casca de Pau d'Arco de boa qualidade contém aproximadamente 4% de
lapachol. Esses fitoconstituintes exercem atividades antimicrobiana, antifúngica, antiviral,
antitumoral, antileucêmica e antiinflamatória.

Fig. 3 Fórmula estrutural de lapachol (esquerda) e β-

lapachona (direita)

Pau d'Arco aumenta o fluxo sanguíneo para os tecidos, ajudando a desintoxicá-los,

enquanto fornece benefícios antibacterianos, antiinflamatórios, antifúngicos, antioxidantes
e antivirais. Devido às suas muitas propriedades biológicas/farmacológicas, Pau d'Arco
atualmente ocupa o centro do palco em medicamentos fitoterápicos comumente usados
na América do Sul e Central para o tratamento de ulcerações e outras condições
inflamatórias. Pau d'Arco parece ser um excelente nutracêutico para higiene oral e
periodontite em cães e gatos após estabelecer a dosagem adequada e ensaios clínicos.
Estudos revelaram que Pau d'Arco é seguro para prevenção e tratamento periodontal,
uma vez que seu LD 50 relatado para lapachol é de 1,2–2,4 g/kg de peso corporal em ratos
e 487–621 mg/kg em camundongos.

792
3.3 Echinacea purpurea (flores em cone)

A planta Echinacea purpurea contém vários compostos químicos, incluindo

polissacarídeos, derivados do ácido cafeico (incluindo ácido chicórico), alquilamidas e
glicoproteínas. Os fitoconstituintes de E. purpurea exercem efeitos antiinflamatórios,
antimicrobianos e analgésicos. Kumar et al. (2009) relataram efeitos antiinflamatórios e
antibacterianos de E. purpurea. O extrato de E. purpurea luta contra a gengivite e a
doença periodontal, estimulando o sistema imunológico contra infecções bacterianas
(Modarai et al. 2011). Sua propriedade analgésica acalma gengivas e dentes doloridos.
Em humanos, um enxágue bucal com Echinacea, sálvia, óleo de menta e camomila é
usado no tratamento de gengivite e periodontal (Modarai et al. 2011). Ao contrário de
muitos outros produtos vegetais, o extrato de E. purpurea é seguro para uso em cadelas e
gatas grávidas.

3.4 Berberina

Berberina (Berberis vulgaris) contém duas classes de alcalóides: protoberberinas

(berberina, berbamina, jateorrizina e palmatina) e bisbenzilisoquinolinas (oxicantina). A
berberina é o principal composto ativo e o alcalóide mais estudado por suas múltiplas
ações farmacológicas, incluindo antiinflamatória, anti ciclo-oxigenase e anti óxido nítrico
sintase induzível (para detalhes, consulte o capítulo “Glucosinolatos e Compostos
Organossulfurados”). Extrato de bérberis e alcalóides berberina são usados para muitos
problemas de saúde em todo o mundo. Foi sugerido que a berberina pode diminuir a
degradação do tecido periodontal através da regulação das metaloproteinases da matriz
(MMPs) durante a progressão das doenças periodontais (Tu et al. 2013). Descobriu-se
que o gel de berberina reduz o biofilme oral em 56% e o índice gengival em 33%.
(Makarem et al. 2007). Esses autores também avaliaram o efeito do gel de berberina na
inflamação periodontal. O único achado significativo foi a redução do número de células
inflamatórias que infiltram a mucosa oral. Palombo (2011) demonstrou que a berberina foi
considerada mais eficaz contra bactérias (Aggregatibacter actinomycetemcomitans e
Porphyromonas gingivalis) ao inibir sua atividade de colagenase. A berberina parece ser
um nutracêutico promissor para doenças periodontais em caninos e felinos. Para obter
detalhes sobre a berberina, consulte o capítulo “Glucosinolatos e compostos
organossulfurados”.

3.5 Alecrim

Alecrim (Rosmarinus officinalis L.) é uma planta perene perene que possui folhas em
forma de agulha. Seus fitoconstituintes incluem borneol, 1,8-cineol, α-pineno, limoneno,
cânfora, canfeno, verbenona, ácido rosmarínico e linalol (Santoyo et al. 2005; Hussain et
793
al. 2010). Esses fitoquímicos exercem poderosas propriedades antioxidantes,
antiinflamatórias, antibacterianas, antifúngicas, antimutagênicas e quimiopreventivas
(Huhtanen 1980; Bozin et al. 2007; Hussain et al. 2010; Petrovic et al. 2015). Santoyo et
al. (2005) relataram que a atividade antimicrobiana no óleo de alecrim se deve
principalmente ao borneol, seguido pela cânfora e verbenona. A ativação significativa da
fosfatase alcalina pelo ácido rosmarínico pode induzir a mineralização nos osteoblastos, o
que pode prevenir doenças metabólicas ósseas (Lee et al. 2015). Pode-se sugerir que o
óleo de alecrim tem potencial nutracêutico para prevenção e tratamento da periodontite.

3.6 Babool

Babool (Acacia nilotica) é uma árvore tropical nativa dos subcontinentes indiano e
africano. Outros nomes para a árvore babool são babul, booni, espinho egípcio, mimosa
espinhosa, acácia espinhosa e goma arábica. As folhas, raízes, cascas, frutas e extratos
de goma de babool têm sido usados em várias preparações de ervas ayurvédicas há
séculos. O extrato de Babool possui um composto antiinflamatório, o esteróide
androsteno. O extrato também possui outros compostos químicos, como D-pinitol,
caempferol, ácido gálico, ácido elágico, (+/-) catequina, (-) - epigalocatequina e rutina.
Além disso, o extrato contém ciclitóis, ácidos graxos, óleos de sementes, aminoácidos
não proteicos, terpenos, saponinas, taninos hidrolisáveis, flavonóides e niloticane (Malviya
et al. 2011). Seu extrato contém um conteúdo fenólico total variando de 9,2 a 16,5%
(Bushra et al. 2007) e taninos e ácido gálico de 24 a 42% (Rahaman 2010).

Por ter esses fitoquímicos, o extrato de babool é conhecido por exercer atividades
hemostáticas, antioxidantes, antiinflamatórias, antiespasmódicas, analgésicas,
imunoestimulantes, antibacterianas, antifúngicas, antiplaquetárias, antiparasitárias e
galactagogos (Amos et al. 1999; Gilani et al. 1999; Bushra et al. 2007; Bachayaa et al.
2009; Umaru et al. 2016). Além de seu uso como anti-hipertensivo, antidiabético,
antimicrobiano, antiinflamatório e antiprotozoário (Entamoeba histolytica em
cães e gatos), bastão de babool e pasta de dente têm sido usados para a saúde bucal.
Em um estudo in vitro, Sharma et al. (2014) demonstraram que um extrato aquoso de
babol, de forma dependente da dose (5%, 10% e 50%), exibiu atividade antimicrobiana
contra Streptococcus mutans. Em outro estudo in vitro, Sunitha et al. (2015) relataram que
o creme dental com extrato de babool proporcionou maior efeito inibitório contra S.
mutans do que outros dentifrícios comumente usados. Foi sugerido que o extrato de
babool tem efeito inibitório contra S. mutans igual ao da clorexidina. Esses achados
sugerem que o creme dental à base de babool pode ser indicado em cães e gatos para
saúde bucal e doenças periodontais.
794
Com base na toxicidade aguda em camundongos, o extrato aquoso do extrato da raiz de
babool é seguro até uma dose de 2.000 mg/kg; e seu NOEL em ratos é relatado como
<250 mg/kg/dia.

3.7 Quitosana

A quitosana é uma fibra anti abrasiva obtida do exoesqueleto de crustáceos (camarão,

lagosta e caranguejo). Sua fórmula estrutural é mostrada na Fig. 4. A quitosana com peso
molecular > 100 kDa é pouco solúvel em água e sua biodisponibilidade é de cerca de 1–
3%.

Fig. 4 Fórmula estrutural da quitosana

A quitosana surgiu como um material potencial para aplicações biodentais devido às suas
propriedades únicas, como bioatividade, atividade antimicrobiana e biocompatibilidade
(Husain et al. 2017). Para obter detalhes sobre suas aplicações em odontologia, consulte
a Fig. 5.

Fig. 5 Aplicações potenciais de materiais de

quitosana em odontologia (Cortesia do Dr.
Shehryar Hussain e seus co-investigadores
2017)

A quitosana também é aplicada diretamente nas gengivas para tratar a inflamação e

prevenir a cárie dentária. Ikinci et al. (2002) relataram que a quitosana em combinação
com gluconato de clorexidina mostrou uma atividade maior em comparação com a
clorexidina sozinha. Em combinação, a clorexidina é necessária em uma concentração
795
mais baixa, evitando assim seus efeitos colaterais indesejados. A quitosana é conhecida
por exercer atividade antimicrobiana contra P. gingivalis, especialmente com quitosana de
alto peso molecular. Em outros estudos, a quitosana provou ser um agente antibacteriano
e antifúngico eficaz (Uraz et al. 2012; Costa et al. 2014). Costa et al. (2014) relataram que
enxaguatório bucal contendo quitosana foi capaz de interferir na aderência de todos os
microrganismos e biofilmes com atividade superior a outros enxaguatórios bucais
disponíveis comercialmente. Por ter propriedades antimicrobianas, antifúngicas e
adesivas, a quitosana em um enxaguatório bucal, filme ou gel parece ser ideal para
sistemas de distribuição local para prevenção ou terapia de doenças periodontais.

3.8 Geléia Real

A geleia real (RJ) é secretada pelas abelhas pelas glândulas hipofaríngea e mandibular.
RJ consiste em água (50-60%), proteínas (18%), carboidratos (15%), lipídios (3-6%), sais
minerais (1,5%) e vitaminas (Pasupuleti et al. 2017). As proteínas RJ contêm as principais
proteínas de geléia real (MRJPs), apismina, royalactina, royalisina, jelleines e
apolipoforina III, aminoácidos livres, glicose oxidase, açúcares, lipídios, vitaminas, etc.
(Lin et al. 2018). As MRJPs podem conter nove tipos de proteínas solúveis em água com
um peso molecular de 49-87 kDa. Além disso, existem alguns peptídeos que podem ter
aplicações potenciais em muitas condições de saúde, incluindo doenças periodontais.

O mel, tendo proteínas RJ, tem sido usado para o tratamento de muitas doenças bucais,
incluindo periodontite, estomatite e halitose. Além disso, tem sido aplicado na prevenção
de placa dentária, gengivite e úlceras bucais. As propriedades antibacterianas e
antiinflamatórias do mel podem estimular o crescimento do tecido de granulação, levando
à reparação das células do tecido danificado. A atividade antibacteriana contra P.
gingivalis foi bem documentada (Eick et al. 2014; Pasupuleti et al. 2017). Shiga et al.
(2010) relataram que o consumo de mel melhora a halitose devido à sua forte atividade
antibacteriana resultante de seu componente metilglioxal.

O produto à base de geléia real Rojelexin ™ (Vets Plus, Inc., Menomonie, WI), por conter
royalisin, ácido 10-hidroxi-δ2-decenóico e jelleines, exerce um efeito antimicrobiano. O
ácido 10-hidroxi-δ2-decenóico, que é o principal componente da fração lipídica de
Rojelexin ™, exibe atividades antibacteriana e antifúngica. A fórmula estrutural do ácido
10-hidroxi-δ2-decenóico é mostrada na Fig. 6.

796
 Fig. 6 Fórmula estrutural do ácido 10-hidroxi-δ2-decenóico

Este componente bioativo da RJ foi encontrado menos de um quarto tão ativo quanto a
penicilina contra Micrococcus pyogenes e menos de um quinto tão ativo quanto a
clortetraciclina contra E. coli. Uma pasta dentária composta por Rojelexin™ e mel
apresentou efeitos sinérgicos potentes contra bactérias patogênicas orais, como S.
mutans e P. gingivalis.

3.9 Própolis

As abelhas (Apis mellifera L.) coletam um exsudato resinoso denominado própolis ou cola
de abelha de diferentes fontes vegetais para protegê-las dos patógenos das abelhas. A
análise da própolis revelou mais de 600 produtos químicos, incluindo flavonóides, ácidos
fenólicos, terpenos e ácidos aromáticos. A maioria desses compostos são lipofílicos e,
portanto, são facilmente dissolvidos em etanol ou metanol (Dantas Silva et al. 2017;
Kubiliene et al. 2017). Relatórios recentes sugerem que a própolis vermelha brasileira
com a seiva de Dalbergia ecastophyllum tem componentes únicos (como isoflavonas,
propolonas/gutiferonas, terpenos, chalconas e compostos fenólicos) (Machado et al. 2016;
Rufatto et al. 2017), que diferem de outras própolis produzidas no Brasil e no mundo. A
composição química da própolis varia significativamente dependendo da flora de um
determinado local (revisado em detalhes por de Moraes Porto et al. 2018). A própolis é
utilizada na medicina popular e em terapias complementares desde a antiguidade.
Durante a última década, a própolis demonstrou exercer múltiplos efeitos biológicos e
farmacológicos, como propriedades antioxidantes, antiinflamatórias, imunomoduladoras,
antissépticas, antibacterianas, antifúngicas, antineoplásicas, cardioprotetores e
hepatoprotetoras (Cornara et al. 2017; Dantas Silva et al. 2017).

Produtos de própolis, contendo microemulsões ou lipídios nanoestruturados, têm sido

usados para cicatrização de feridas (Zilius et al. 2016; Rosseto et al. 2017).
Recentemente, Cao et al. (2017) explicou o mecanismo subjacente da própolis na
cicatrização de feridas. Um extrato etanólico de própolis chinesa (EECP) induziu a
expressão de genes relacionados a antioxidantes, como HO-1, GCLM e GCLC, o que tem
grandes implicações no potencial da própolis em aliviar o estresse oxidativo em tecidos de
feridas e, portanto, pode ser um nutracêutico promissor para a cicatrização de feridas.
797
Em vários estudos clínicos, a própolis tem sido indicada para o tratamento de doenças
periodontais. Gebaraa et al. (2003) avaliaram o efeito da irrigação subgengival com
extrato de própolis com base em parâmetros clínicos e microbiológicos. Os achados
revelaram que o tratamento com própolis (irrigação com solução hidroalcoólica de extrato
de própolis duas vezes/semana) por 2 semanas causou uma diminuição nas contagens
viáveis totais de bactérias anaeróbias, um aumento na proporção de sítios com baixos
níveis de Porphyromonas gingivalis e uma diminuição na o número de locais com
presença detectável de leveduras. Em estudo clínico semelhante, Coutinho (2012)
também relatou que a irrigação subgengival, com extrato de própolis como adjuvante ao
tratamento periodontal, foi mais eficaz do que raspagem e alisamento radicular avaliados
por parâmetros clínicos e microbiológicos.

A cárie dentária é considerada uma doença crônica e multifatorial que ocorre como
resultado da dissolução do mineral do dente por ácidos derivados da fermentação
bacteriana dos carboidratos da dieta, principalmente por Streptococcus e Lactobacillus
ssp., Que estão envolvidos na iniciação e progressão das lesões, respectivamente
(Karpinski e Szkaradkiewicz 2013). Recentemente, de Moraes Porto et al. (2018)
relataram que o extrato de acetato de etila da própolis vermelha brasileira (EARP) e
nanocompósitos micelares carregados com EARP (MNRP) mostraram atividade
antimicrobiana para os principais agentes causadores de cárie dentária (Streptococcus
mutans e Lactobacillus acidophilus) e para Candida albicans. O MNRP em concentrações
de 0,3 e 0,6% usado como limpador de cavidade não compromete a estética ou a
resistência à microtração da interface dentina/resina. O extrato de própolis pode ser
aplicado topicamente como gel ou creme dental.

Srivastava et al. (2016) relataram que Proclean (Vets Plus Inc., Menomonie, WI, USA),
que contém o composto bioativo própolis, exibiu atividade antibacteriana em estudo in
vitro e antiinflamatório, antitártaro, antiplaca e efeitos da halitose em cães.

Com base em todos esses achados, pode-se sugerir que o extrato de própolis pode ser
utilizado como nutracêutico na prevenção e tratamento de doenças periodontais em cães
e gatos.

3.10 Canela em Pó

As propriedades curativas da canela do Ceilão vêm principalmente de três óleos

essenciais (cinamaldeído, acetato de cinamila e álcool cinamílico). Os fitoconstituintes da
canela exercem propriedades antimicrobianas (antissépticas), antiinflamatórias,
carminativas, redutoras do colesterol e anestésicas leves. Além disso, a canela é uma
fonte de cálcio, manganês e fibra.
798
Em doenças periodontais, a dose diária recomendada de canela é: cães pequenos e
gatos-1/8 colher de chá por dia, cães médios-1/4 colher de chá por dia e cães grandes-1/2
colher de chá por dia.

3.11 Hydrastis canadensis (Raiz de ouro)

Hydrastis canadensis, também conhecida como goldenseal, raiz de laranja ou puccoon

amarelo, consiste em alcalóides de isoquinolina (hidrastina, berberina, berberastina,
hidrastinina, tetraidroberberastina, canadina e canalidina). Os efeitos farmacológicos vêm
da berberina e da hidrastina. A atividade antibacteriana é da berberina (Baghele 2017).
Outras propriedades incluem atividades antiinflamatórias e estimulantes do sistema
imunológico. É preciso mencionar que esta erva pode não ser tão segura quanto outras e
é contra indicada em cães e gatas grávidas.

3.12 Orégano

O óleo de Origanum vulgare contém polifenóis, incluindo várias flavonas, que são
antioxidantes. Ele exerce atividades antibacteriana, antiviral e antifúngica. Em 2005, a
Comissão Federal de Comércio dos EUA moveu uma ação legal contra uma empresa que
alegava que o óleo de orégano tratava resfriados e gripes ou aliviou infecções bacterianas
e virais. Descobriu-se que os produtos fitoterápicos contendo óleo essencial de orégano
tinham vários efeitos contra doenças e, portanto, estavam sendo vendidos como
medicamentos não autorizados e com marca incorreta, sujeitos a apreensão e
penalidades federais. O óleo de orégano é seguro para cães, mas não para gatos.

3.13 Sálvia

Salvia (Salvia officinalis L.) é um arbusto baixo perene nativo do Oriente Médio e regiões
mediterrâneas. Atualmente, é cultivado em todo o mundo. Os óleos essenciais de folhas
de salva contêm α-tujona, β-tujona, α-pineno, β-pineno e cânfora. Na medicina popular, o
extrato de S. officinalis tem sido usado para o tratamento de muitas doenças e condições,
incluindo convulsão, tremor, úlceras, gota, reumatismo, inflamação, tontura, paralisia,
diarreia e hiperglicemia. Nos últimos anos, verificou-se que os fitoquímicos em S.
officinalis exercem ação antioxidante, antiinflamatória, antibacteriana, antiviral,
antifúngica, anticárie, antiplaca, antinociceptiva, espasmolítica, carminativa, antisséptica,
adstringente, hipoglicêmica, antiidrótica e antidemênica propriedades (Bozin et al. 2007;
Delamare et al. 2007; Pierozan et al. 2009; Sookto et al. 2013; Ghorbani e Esmaeilizadeh
2014; Petrovic et al. 2015). S. officinalis é usado em práticas odontológicas para o
tratamento de doenças periodontais e para prevenir a halitose (Smullen et al. 2012;
Narayanan e Thangavelu 2015). As tujonas e os ácidos fenólicos exercem ação

799
antisséptica e antibiótica, e os taninos, ação adstringente. Em um estudo in vitro, Smullen
et al. (2012) descobriram que os extratos de S. officinalis e Rosmarinus officinalis inibiram
a atividade da glucosiltransferase, a produção de glucon e a formação da placa e
sugeriram que o extrato dessas plantas pode ser usado como um agente antiplaca.
Sookto et al. (2013) relataram a atividade de S. officinalis contra Candida albicans e
indicaram que ele pode ser usado como um agente antifúngico em doenças periodontais.
O extrato de sálvia é frequentemente usado em pastas de dente. Também pode ser
indicado para tratamento de doenças periodontais em cães e gatos após estudos clínicos.

3.14 Aloe vera

A. vera contém ácido salicílico, enzimas, vitaminas, minerais, ácidos graxos e açúcares.
A. vera tem fortes propriedades antioxidantes, antiinflamatórias, analgésicas,
imunoestimulantes, antibacterianas, antivirais e antifúngicas (Scherer et al. 1998; Bhat et
al. 2011; Sajjad e Subhani Sajjad 2014). Sajjad e Subhani Sajjad (2014) relataram a
atividade antiinflamatória de A. vera, fornecendo evidências de sua ação inibitória na via
da ciclo-oxigenase, reduzindo assim a produção de prostaglandina E2.

Scherer et al. (1998) descobriram que um enxágue bucal contendo A. vera reduziu a
inflamação gengival, as lesões e o sangramento. Em outro estudo, Bhatt et al. (2011)
demonstraram que o gel de A. vera, quando aplicado por via sublingual, diminuiu
significativamente a profundidade da bolsa e mostrou uma diminuição relativa no índice
gengival e índice de placa (revisado em Petrovic et al. 2015). Em uma série de estudos,
A. vera (gel, pasta de dente ou enxaguatório bucal) é relatado para prevenir doenças
periodontais e cáries (Wynn 2005; Subhash et al. 2014).

3.15 Hortelã-pimenta

A hortelã-pimenta (Mentha piperita L.) é um cruzamento entre dois tipos de hortelã

(hortelã da água e hortelã) que cresce em toda a Europa e América do Norte. A hortelã
tem sido usada para uma variedade de finalidades de saúde (síndrome do intestino
irritável, dor de cabeça, resfriado comum, dores musculares, etc.) por milhares de anos
(McKay e Blumberg 2006; Ford et al. 2008). O óleo de hortelã-pimenta contém vários
fitoconstituintes de importância medicinal, incluindo mentol (40,7%), mentona (23,4%),
acetato de mentila, 1,8-cineol, limoneno, β-pineno, β-cariofileno e flavonóides. Os
fitoconstituintes da hortelã-pimenta exercem atividades antioxidante, antiinflamatória,
analgésica, antiúlcera, citoprotetora e quimiopreventiva. O óleo de hortelã-pimenta,
quando aplicado localmente, ou o extrato de folha administrado por via oral, produz um
efeito analgésico (Blumenthal et al. 1998) e reduz a dor de dente e a inflamação gengival

800
(Taheri et al. 2011). O óleo essencial e o extrato da folha de hortelã-pimenta reduzem as
bactérias periodontais (Kumar et al. 2009).

3.16 Extrato de Semente de Uva

O extrato de semente de uva (GSE), obtido de Vitis vinifera ou outras Vitis spp., éÉ muito
rico em proantocianidinas. A proantocianidina A (polihidroxiflavan-3-ol) é um antioxidante
20–50 vezes mais potente do que a vitamina C ou a vitamina E. A fórmula estrutural da
proantocianidina A é mostrada na Fig. 7.

Fig. 7 Fórmula estrutural da

proantocianidina A

GSE exerce atividades antioxidantes, antiinflamatórias, antibacterianas, antifúngicas e

antiparasitárias. Govindaraj et al. (2010) demonstraram o efeito antioxidante da
proantocianidina (40 mg/kg peso corporal) em um modelo experimental de rato com
periodontite que foi induzida pela injeção de endotoxina de E. coli. Recentemente, Özden
et al. (2017) relataram que ratos com periodontite induzida por ligadura recebendo GSE
(200 mg/kg de peso corporal, por via oral) mostraram um efeito antiinflamatório (menor
número de células inflamatórias), maior nível de fixação do tecido conjuntivo e menor
densidade de osteoclastos. Uma vez que o acúmulo de biofilme dental microbiano é o
principal fator etiológico para doença periodontal e os biofilmes são altamente resistentes
a antibióticos, GSE parece ser útil devido à sua ação antibacteriana. Além disso, em
vários outros estudos, GSE foi encontrado para melhorar a periodontite suprimindo o
estresse oxidativo e inflamação, matriz metaloproteinases, fatores de osteoclastos,
imunoestimulantes e efeitos antibacterianos (Nuttall et al. 1998; Li et al. 2001; Garlet et al.
2004; Baydar et al. 2006; Houde et al. 2006; Furiga et al. 2009; La et al. 2009). Todas
essas descobertas sugerem que o GSE pode ser usado como nutracêutico para a
prevenção e tratamento da periodontite em caninos e felinos.

801
3.17 Mirra (Commiphora mirra)

Commiphora myrrha ou Mirra (latim) recebe o nome da filha de Thesis, rei da Síria. A
árvore é nativa da Arábia Saudita, Omã, Iêmen, Somália, Eritreia e Etiópia. Seu uso foi
descrito na literatura romana, na Bíblia, na Bíblia hebraica, no Alcorão e na medicina
ayurvédica, unani e chinesa. A mirra é usada como fragrância em cosméticos e como
agente aromatizante em alimentos e bebidas. A mirra contém constituintes químicos como
sesquiterpenos (furanoeudesma-1,3-dieno e curzareno), esteróis e esteróides (Zhu et al.
2003). O óleo de mirra é extraído do tronco, caule e galhos da árvore por destilação a
vapor. A resina de goma de mirra e seu principal constituinte químico (furanoeudesma-1,3-
dieno) são mostrados na Fig. 8.

Fig. 8 Resina de goma de mirra e princípios ativos

(furanoeudesma-1,3-dieno)

Resina e óleo de mirra têm sido usados por muitos séculos para tratar gengivas inchadas,
úlceras bucais, etc. Os fitoconstituintes da mirra exercem propriedades antibacterianas,
antivirais, antifúngicas, antissépticas, adstringentes, antiespasmódicas, amebocidas,
antiinflamatórias, analgésicas e hipoglicêmicas (Dolara et al. 2000; Tipton et al. 2006). Na
cultura grega, quando os soldados iam para a batalha, a mirra era uma parte essencial de
seu equipamento de combate por causa de suas propriedades antissépticas e
antiinflamatórias extremamente altas. Era usado para limpar feridas e prevenir infecções e
gangrena. A mirra é um excelente anti-séptico na boca para dor de garganta, feridas nas
gengivas, dor de dente e piorreia. Atualmente, a mirra é usada em cremes dentais, pós
dentais, gargarejos e enxaguatórios bucais. Vale ressaltar que a mirra é considerada
segura em cadelas grávidas quando usada em pequenas quantidades. Não é
recomendado para gatos.

3.18 Chá Verde

O chá verde (Camellia sinensis) é um arbusto nativo do Tibete, China Ocidental e norte da
Índia. Os compostos ativos presentes no chá verde são polifenóis chamados catequinas
(epicatequina, galato de epicatequina, epigalocatequina e (-)- epigalocatequina-3-galato).

802
Entre todas as catequinas, (-) - epigalocatequina-3-galato (EGCG) é a principal catequina
com atividade biológica máxima. Sua fórmula estrutural é mostrada na Fig. 9.

Fig. 9 Fórmula estrutural de (-) -

epigalocatequina-3-galato (EGCG)

As folhas de chá-verde podem conter flavonóides, incluindo catequinas e seus derivados,

até 30% com base no peso seco. Claro, o chá-verde também contém muitos outros
compostos, como carotenóides, tocoferóis, ácido ascórbico, cafeína, L-teanina, etc. O
chá-verde tem sido usado para enxaguar e escovar os dentes. Streptococcus mutans
pode ser inibido completamente após contato com o extrato de chá-verde por 5 min. Não
há resistência aos medicamentos após a repetição das culturas. Os efeitos clínicos
mostraram que o índice de placa e o índice gengival diminuíram significativamente depois
que o extrato de chá verde foi usado. Em uma série de estudos, a aplicação local de chá
verde demonstrou promover a saúde periodontal por meio de efeitos antioxidantes e
antiinflamatórios, prevenindo a reabsorção óssea e cáries dentárias e limitando o
crescimento de certas bactérias (Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermedia,
Prevotella nigrescens, Streptococcus mutans) associado a doenças periodontais
(Sakanaka et al. 1996; Hirasawa et al. 2002; Coimbra et al. 2006; Kushiyama et al. 2009;
Chatterjee et al. 2012). Foi relatado que P. gingivalis estimula a atividade e expressão de
vários grupos de metaloproteinases de matriz (MMPs), e EGCG tem efeitos inibitórios
sobre a atividade e expressão de MMPs (Chatterjee et al. (2012). EGCG impede a
reabsorção óssea que ocorre em doenças periodontais pela inibição da expressão de
MMP-9 em osteoblastos e formação de osteoclastos (Yun et al. 2004). O efeito
anticariogênico do chá verde também está bem estabelecido (Yu et al. 1992).

3.19 Cravo

O cravo (Syzygium aromaticum) é uma árvore tropical perene nativa da Índia e das ilhas
das especiarias da Indonésia (Aka e Maluku). Botões de flores secos são comumente
usados como tempero na culinária da Índia, África, Oriente Médio e outras partes do
803
mundo. Seu uso remonta ao século IV aC. Na China (200 aC), o cravo era usado como
“perfume na boca”. Tanto na medicina ayurvédica quanto na chinesa, o cravo-da-índia tem
sido usado para muitas doenças humanas. No século X, o dentista árabe Al-Gazzar usava
cravo para controlar os odores e a dor na boca. O cravo e a fórmula estrutural de seu
princípio ativo eugenol são mostrados na Fig. 10.

Fig. 10 Cravo (à esquerda) e seu princípio ativo eugenol

(à direita)

O óleo essencial de cravo-da-índia, que consiste em 80–95% de eugenol, exerce

atividades antibacteriana, antiviral e imuno estimuladora. O eugenol também possui
propriedades analgésicas e antissépticas. O óleo essencial de cravo também contém
outros constituintes químicos, como eugenina, eugenitina, acetil eugenol, β-cariofileno,
vanilina, ácido cratególico, bicornina, caempesterol e sesquiterpenos (Tabela 1). O óleo de
cravo é conhecido por reduzir as bactérias que causam doenças gengivais e promove o
crescimento de bactérias boas, criando assim um bioma oral equilibrado. Além disso, as
bactérias patogênicas não desenvolvem resistência ao óleo de cravo, como o fazem
contra os antibióticos. O óleo de cravo provou ser eficaz contra P. gingivalis. Eugenol
também combate o crescimento de muitos fungos, incluindo Candida albicans e C.
tropicalis.

O cravo é relatado como tendo o maior valor antioxidante (15.188,2 mg (poli) fenóis/100 g
de peso fresco) em comparação com qualquer outro produto vegetal natural (Pinto e
Santos 2017), exercendo assim um forte efeito antiinflamatório. Rodrigues et al. (2009)
relataram que camundongos tratados com extrato aquoso de cravo-da-índia
apresentaram inibição de macrófagos produtores de citocinas pró-inflamatórias (IL-1β e
IL-6). Em um estudo in vitro, esses pesquisadores demonstraram que o eugenol no óleo
essencial de cravo também inibiu a produção dessas citocinas. Os achados deste estudo
e de outros confirmaram que o eugenol exerce efeitos antioxidantes e antiinflamatórios
(Nagababu e Lakshmaiah 1992; Kumaravelu et al. 1996) e pode ser útil para prevenir ou
tratar doenças periodontais em cães e gatos. O cravo pode ser aplicado topicamente na
forma de gel, pasta de dente ou óleo.

804
3.20 Eucalipto

Existem mais de 700 espécies de eucalipto, e a maioria é nativa da Austrália. Atualmente,

os eucaliptos são amplamente cultivados no mundo tropical e temperado, incluindo as
Américas, Europa, África, Bacia do Mediterrâneo, Oriente Médio, China e subcontinente
indiano. Folhas de eucalipto contêm muitos fitoconstituintes, incluindo borneol, 1,8-cineol,
globulol, p-cimeno, limoneno, α-pineno, criptona, α-terpineol e muitos outros (Sebei et al.
2015). Nagata et al. (2008) relataram que goma de mascar de extrato de eucalipto (60–90
mg/dia) teve efeitos significativos no acúmulo de placa, índice gengival, sangramento na
sondagem e profundidade de sondagem periodontal. Os achados revelaram que o uso de
goma de mascar com extrato de eucalipto pode promover a saúde periodontal. Além
disso, o extrato/óleo de eucalipto possui atividade antibacteriana contra bactérias
cariogênicas e periodontais e, portanto, é usado em dentifrícios.

3.21 Camomila

A camomila (Matricaria chamomilla L.), também conhecida como “estrela entre as

espécies medicinais”, é nativa do sul e do leste da Europa. Atualmente, a planta é
cultivada na Alemanha, França, Hungria, Brasil, Rússia, Índia, América do Norte e do Sul,
Austrália, Nova Zelândia e muitos outros países. Os fitoconstituintes presentes em M.
chamomilla L. incluem 28 terpenóides, 36 flavonóides e 52 compostos adicionais com
potencial atividade farmacológica. O óleo de camomila (óleo azul) também consiste em
derivados de sesquiterpenos e vestígios de monoterpenos. Componentes como α-
bisabolol e éteres cíclicos são antimicrobianos, a umbeliferona é fungistática e o
chamazuleno e o α-bisabolol são antissépticos (Singh et al. 2011). Alguns desses
fitoconstituintes exercem atividades antioxidantes, antiinflamatórias, antissépticas,
antiespasmódicas, antiperiodontite e antidor na gengiva. A camomila é um nutracêutico
que pode ser usado para muitas doenças periodontais.

3.22 β-cariofileno

O sesquiterpeno β-cariofileno (BCP) é encontrado em grandes quantidades nos óleos

essenciais de muitas especiarias e plantas alimentícias, como orégano (Origanum vulgare
L.), canela (Cinnamomum spp.) e pimenta preta (Piper nigrum L.) O BCP também está
presente em grandes quantidades no óleo essencial (até 35%) de Cannabis sativa L.
(Gertsch et al. 2008). A fórmula estrutural do β-cariofileno é mostrada na Fig. 11.

805
 Fig. 11 Fórmula estrutural
do cariofileno

Em ambos os modelos de inflamação de lipopolissacarídeo (LPS) e carragenina, o BCP

induziu o efeito antiinflamatório (Gertsch et al. 2008). Após a ligação ao receptor
canabinoide 2 (CB2), o BCP inibe a adenilato ciclase, leva a transientes de cálcio
intracelular e ativa fracamente as quinases ativadas por mitogênio, Erk ½ e p38 em
monócitos humanos primários, exercendo assim efeito anti-inflamatório.

Recentemente, Pieri et al. (2016) avaliaram a atividade antimicrobiana do BCP contra

bactérias da placa dentária canina in vitro e in vivo. A aderência bacteriana de três
Enterococcus sp., um Streptococcus sp., um Haemophilus sp., um Aerococcus sp., um
Bacillus sp. e um Lactococcus sp. foi inibido pela concentração sub-inibitória. Um ensaio
in vivo mostrou redução na formação de placa dentária pelo BCP, com cobertura final da
placa de 23,3 ± 2,6% da área total dos dentes, diferença significativa em relação à
clorexidina (37,5 ± 3,7%).

O estudo concluiu que o BCP possui atividade antimicrobiana contra a proliferação de

bactérias formadoras de placa dentária em cães, representando uma alternativa
adequada ao uso de clorexidina na profilaxia e tratamento de doenças periodontais em
cães.

3.23 Tomilho

O óleo de tomilho é obtido da Thymus vulgaris. Por via oral, o tomilho tem sido indicado
em muitas condições de saúde, como bronquite, coqueluche, dor de garganta, cólica,
artrite, dispepsia, gastrite, diarreia, enurese, flatulência, doenças de pele, desinfetante
urinário e como estimulante do apetite. Topicamente, o óleo de tomilho é usado como
contra irritação, um antisséptico em enxaguatórios bucais e linimentos. O timol
demonstrou ser eficaz na redução da formação de placa, gengivite e cáries devido às
suas propriedades antimicrobianas e antioxidantes. Também tem sido usado em
combinação com clorexidina como verniz dental para prevenir cáries. Por ter atividades
antibacteriana e antifúngica, o óleo de tomilho é usado em cremes dentais (Meeker e
Linke 1998; Borugă et al. 2014).

806
3.24 Ácido Fólico

O ácido fólico foi clinicamente testado em soluções para bochechos para tratar a gengivite
e manter o tecido gengival normal. Em vários estudos clínicos, o ácido fólico demonstrou
ser eficaz na gengivite por meio de vários mecanismos, incluindo efeitos antiinflamatórios
(Pack 1984). O ácido fólico se liga às endotoxinas bacterianas e as torna neutras. No
entanto, quando tomado como suplemento dietético, o ácido fólico não produz resultados
positivos. Portanto, recomenda-se a aplicação tópica de ácido fólico na goma.

3.25 Coenzima Q

A coenzima Q10 (CoQ10) é um composto de ocorrência natural presente na mitocôndria.

As deficiências de CoQ10 foram reconhecidas em muitas condições de saúde, incluindo
doenças periodontais. Ele atua como um antioxidante endógeno e, inicialmente, sua
concentração é aumentada como um mecanismo compensatório na gengiva doente para
suprimir a inflamação periodontal. CoQ10 pode melhorar a degradação do colágeno (Soni
et al. 2012). Investigadores clínicos e dentistas recomendam a suplementação de CoQ10,
particularmente em pacientes diabéticos e outros que estão em risco de doenças
periodontais (Hanioka et al. 1994; Pradeep et al. 2010; também revisado em Soni et al.
2012). A administração tópica de CoQ10 (Perio-Q®) na gengiva como um único
tratamento demonstrou diminuir o fluxo do fluido gengival (GCF) e as profundidades de
sondagem e melhorar a fixação gengival clínica (Hanioka et al. 1994; Singh et al. 2016).

3.26 Ácido Hialurônico

O ácido hialurônico (HA) é um mucopolissacarídeo presente em todos os organismos

vivos. Estudos têm demonstrado que o HA exerce atividades antioxidantes,
antiinflamatórias, antiedematosas e antibacterianas e, portanto, pode prevenir ou melhorar
doenças periodontais em humanos e animais (Cristina et al. 2013). Bansal et al. (2010)
enfatizou que o HA pode (1) atuar como um agente antimicrobiano auxiliar para raspagem
e alisamento radicular, (2) acelerar a regeneração óssea em defeitos ósseos periodontais,
(3) atuar como um enxerto autólogo de células HA em cirurgias mucogengivais, e (4)
atuam como um transportador para o fator de crescimento derivado de plaquetas (PDGF)
e a proteína morfogenética óssea (BMP-2) em terapias regenerativas. O HA demonstrou
ter um efeito bacteriostático contra Prevotella oris, Staphylococcus aureus e
Aggregatibacter actinomycetemcomitans, que são comumente encontrados em feridas
periodontais (Pirnazar et al. 1999). Atualmente, o HA está disponível na forma de gel
(Gingigel®), esponja ou membrana.

807
3.27 Hexametafosfato de sódio (SHMP)

Um dos suplementos mais utilizados para o controle de doenças periodontais na indústria

de rações são os sais de fosfato, entre eles o polifosfato de sódio ou hexametafosfato
(Oba et al. 2018). SHMP é um sequestrante mineral aprovado pela AAFCO para o
controle do tártaro. SHMP se liga ao cálcio salivar, tornando-o menos disponível para
precipitação como cálculo dentário (Stookey et al. 1996; White Gerlach 2000). A
segurança nutricional do SHMP reside no fato de que este composto é conhecido por ser
convertido em ortofosfato na presença de ácidos fortes, como ácido clorídrico no
estômago, e o ortofosfato pode ser utilizado pelo hospedeiro. Stookey et al. (1995)
relataram que alimentar um único lanche diário de dois biscoitos simples revestidos com
HMP (0,6% de HMP) diminuiu a formação de cálculos em quase 80%. Sugere-se que o
revestimento de ração seca para cães ou biscoitos simples para cães com HMP seja um
meio eficaz de reduzir a formação de cálculos em cães.

3.28 Parodontax®

Parodontax® é um creme dental à base de ervas (Glaxo Smith Kline, Middlesex, UK) que
consiste em bicarbonato de sódio, fluoreto de sódio, camomila, equinácea, sálvia, mirra,
rhatany e óleo de hortelã-pimenta. Embora Parodontax® tenha proporcionado uma
melhora significativa na saúde bucal e possa ser usado como uma alternativa aos cremes
dentais convencionais usados regularmente, não apresentou nenhuma vantagem clínica
significativa sobre os cremes dentais convencionais com flúor (Pannuti et al. 2003). Em
outro estudo, Ozaki et al. (2006) comparou a eficácia de Parodontax® com Colgate Total
(Colgate-Palmolive Co, New York, NY, EUA) contendo 0,3% de triclosan, 2,0% de
copolímero e 0,243% de fluoreto de sódio. Embora ambos os tipos de pasta de dente
reduzam a placa e a gengivite, nenhum benefício adicional do Parodontax® pode ser
observado em relação ao Colgate Total.

3.29 Pasta de dente à base de ervas Colgate

George et al. (2009) avaliaram os efeitos do creme dental à base de ervas Colgate
(Colgate-Palmolive India, Mumbai, India) contendo carbonato de cálcio, camomila, sálvia,
mirra, eucalipto e monofluorofosfato de sódio e comparou os efeitos com um creme dental
Colgate convencional contendo carbonato de cálcio, monofluorofosfato de sódio, triclosan
e silicato. Com base nos parâmetros usados neste estudo (índice de placa, índice
gengival, etc.), os resultados não revelaram nenhuma diferença significativa na eficácia
desses dois tipos de creme dental.

808
3.30 Probióticos

Os probióticos são bactérias vivas não patogênicas (incluindo Lactobacillus acidophilus,

Lactobacillus casei, Bifidobacterium infantis e Streptococcus thermophilus) que são
administrados por via oral para ativar o sistema imunológico. A aplicação dessas bactérias
como um complemento para raspagem e alisamento radicular parece inibir a
recolonização periopatogênica da bolsa periodontal, alcançando e mantendo a saúde
periodontal (Lagdive e Lagdive 2014). O uso de probióticos na prevenção e tratamento de
doenças periodontais tem sido indicado há décadas (Meurman 2005; Wim et al. 2008;
Yanine et al. 2013; Lagdive e Lagdive 2014). Yanine et al. (2013) relataram que para o
desfecho primário, sondagem da profundidade do bolso, não houve efeito clínico benéfico
dos probióticos. Para resultados secundários, os probióticos mostraram pequenos
benefícios no índice de placa e inflamação gengival. Vanderpool (2009) usou terapia de
reposição para regeneração de defeitos ósseos periodontais em Beagles pela aplicação
local de Streptococcus sanguinis, Streptococcus salivarius e Streptococcus mitis.
Atualmente, não há evidências suficientes que demonstrem os benefícios do uso
preventivo sistemático de probióticos em pacientes com doenças periodontais (Yanine et
al. 2013). Portanto, mais estudos precisam ser feitos antes que seu uso possa ser
justificado nas doenças periodontais. Nenhum efeito negativo do uso de probióticos na
saúde bucal foi relatado até o momento.

4. Observações Finais e Orientações Futuras

Fitoquímicos como alcalóides, taninos, óleos essenciais e flavonóides exercem atividades
antimicrobiana, anti-séptica, antiviral, antifúngica, antioxidante, antiinflamatória e
imunomoduladora, melhorando assim a higiene oral e prevenindo doenças gengivais,
cáries dentárias e periodontite. Este capítulo descreve a fisiopatologia das doenças
periodontais em breve e nutracêuticos comuns que podem ser usados para prevenir ou
tratar doenças periodontais em caninos e felinos. Futuras investigações precisam ser
conduzidas em estudos clínicos em caninos e felinos para o uso criterioso de
nutracêuticos em doenças periodontais.

Referências
Abdellatif F, Boudjella H, Zitouni A et al (2014) Chemical composition and antimicrobial activity of the essential oil from
leaves of Algerian Melissa officinalis L. EXCLI J 13:772–781
Albandar JM, Brown LJ, Loe H (1997) Clinical features of early-onset periodontitis. J Am Dent Assoc 128(10):1393–
1399
Almas K (2001) The effects of extracts of chewing sticks (Salvadora persica) on healthy and periodontally involved
human dentine: a SEM study. Indian J Dent Res 12(3):127–132

809
 Almas AK, Almas K (2014) Miswak (Salvadora persica chewing stick): the natural toothbrush revisited. Odontostomatol
Trop 37 (145):27–39
Amos S, Akah CJ, Odukwe KS et al (1999) The pharmacological effects of an aqueous extract from Acacia nilotica
seeds. Phytother Res 13:683–685
Bachayaa HA, Iqbala Z, Khana MN et al (2009) Anthelmintic activity of Ziziphus nummularia (bark) and Acacia nilotica
(fruit) against Trichostrongylid nematodes of sheep. J Ethnopharmacol 123:325–329
Baghele ON (2017) Antibacterial activity of Hydrastis canadensis extract on selected periodontal pathogens: an in vitro
study. Bhavnagar Univ J Dent 7(1):12–15
Bansal J, Keige SD, Anand S et al (2010) Hyaluronic acid: a promising mediator for periodontal regeneration. Indian J
Dent Res 21 (4):575–578
Baydar NG, Sagdic O, Ozkan G et al (2006) Determination of antibacterial effects and total phenolic contents of grape
(Vitis vinifera L.) seed extracts. Int J Food Sci Technol 41:799–804
Bhambal A, Kothari S, Saxena S et al (2011) Comparative effect of neemstick and toothbrush on plaque removal and
gingival health—a clinical trial. J Adv Oral Res 2(3):51–55
Bhat G, Kudva P, Dodwad V (2011) Aloe vera: nature’s soothing healer to periodontal disease. J Indian Soc
Periodontol 15:205–209
Blumenthal M, Busse WR, Goldberg A et al (1998) The complete German Commission E monographs: therapeutic
guide to herbal medicines. American Botanical Council and, Integrative Medicine Communications, Austin, Boston, pp
180–182
Borugă O, Jianu C, Mişcă C et al (2014) Thymus vulgaris essential oil: chemical composition and antimicrobial activity.
J Med Life 7 (3):56–60
Bozin B, Mimica-Dukic N, Samojlik I et al (2007) Antimicrobial and antioxidant properties of rosemary and sage
(Rosemarinus officinalis L. and Salvia officinalis L., Lamiaceae) essential oils. J Agric Food Chem 5:7879–7885
Bushra S, Farooq A, Roman P (2007) Antioxidant activity of phenolic components present in barks of Azarichta indica,
Terminalia arjuna, and Acacia nilotica, and Eugenia jambolana Lam trees. Food Chem 104(3):148–161
Campos JF, dos Santos UP, Macorini LF et al (2014) Antimicrobial, antioxidant and cytotoxic activities of propolis from
Melipona orbignyi (Hymenoptera, Apidae). Food Chem Toxicol 65:374–380
Cao XP, Chen YF, Zhang JL et al (2017) Mechanisms underlying the wound healing potential of propolis based on its in
vitro antioxidant activity. Phytomedicine 34:76–84
Carson CF, Hammer KA, Riley TV (2006) Melaleuca alternifolia (tea tree) oil: a review of antimicrobial and other
medicinal properties. Clin Microbiol Rev 19(1):50–62
Chaichoowong S, Bol JB, Bol P et al (2017) Chemical profiling of Acalypha indica obtained from supercritical carbon
dioxide extraction and Soxhlet extraction methods. Orient J Chem 33(1):66–73
Chakraborthy GS (2008) Antimicrobial activity of leaf extract of Calendula officinalis Linn. J Herb Med Toxicol 2:65–66
Chandler M (2014) Impact of nutrition on dental issues in companion animals. Vet Times:1–8
Chatterjee A, Saluja M, Agarwal G et al (2012) Green tea: a boon for periodontal and general health. J Indian Soc
Periodontol 16 (2):161–167
Chaturvedi TP (2009) Use of turmeric in dentistry: an update. Indian J Dental Res 20:107–109
Chouksey D, Sharma P, Pawar RS (2010) Biological activities and chemical constituents of Illicium verum hook fruits
(Chinese star anise). Der Pharmac Sinica 1(3):1–10
Coimbra S, Castro E, Rocha-Pereira P et al (2006) The effect of green tea in oxidative stress. Clin Nutr 25:790–796
Cornara L, Biagi M, Xiao J et al (2017) Therapeutic properties of bioactive compounds from different honeybee
products. Front Pharmacol 8:412
Costa EM, Silva S, Madureira AR et al (2014) A comprehensive study into the impact of a chitosan mouthwash upon
microorganism’s biofilm formation in vitro. Carbohydr Polym 101:1081–1086
Coutinho A (2012) Honeybee propolis extract in periodontal treatment: a clinical and microbiological study of propolis in
periodontal treatment. Indian J Dent Res 23:294
Cristina GM, Stana P, Maniu G et al (2013) Biotechnological value of the hyaluronic acid in periodontal treatment. Rom
Biotechnol Lett 18 (4):8551–8558
D’Aiuto F, Nibali L, Parkar M et al (2010) Oxidative stress, systemic inflammation, and severe periodontitis. J Dent Res
89:1241–1246
Dantas Silva RP, Machado BA, Barreto GA et al (2017) Antioxidant, antimicrobial, antiparasitic, and cytotoxic
properties of various Brazilian propolis extracts. PLoS One 12(3):e172585
de Moraes Porto ICC, de Almeida DCC, de Oliveira Costa GVC et al (2018) Mechanical and aesthetic compatibility of
Brazilian red propolis micellar nanocomposite as a cavity cleansing agent. BMC Complement Altern Med 18:219
De Oliveira SM, Torres TC, Pereira SL et al (2008) Effects of a dentifrice containing Aloe vera on plaque and gingivitis
control: a double-blind clinical study in humans. J Appl Oral Sci 16 (4):293–296
Delamare APL, Moschen-Pistorello IT, Artico L et al (2007) Antibacterial activity of the essential oil of Salvia officinalis
L. and Salvia triloba L. cultivated in South Brazil. Food Chem 100:603–608
Dolara P, Corte B, Ghelardini C et al (2000) Local anesthetic, antibacterial and antifungal properties of sesquiterpenes
from myrrh. Planta Med 66(4):356–358
Eick S, Schäfer G, Kwiecinski J et al (2014) Honey-a potential agent against Porphyromonas gingivalis: an in vitro
study. BMC Oral Health 14(1):14
810
 El-Hefny M, Ali HM, Ashmawy NA et al (2017) Chemical composition and bioactivity of Salvadora persica extracts
against some potato bacterial pathogens. Bioresources 12(1):1835–1849
Erdelmeier CAJ, Cinati J, Rabenau H et al (1996) Antiviral and antiparasitic activity of Hamamelis virginiana bark.
Planta Med 62:241–245
Ford AC, Talley NJ, Spiegel BM et al (2008) Effect of fiber, antispasmodics, and peppermint oil in the treatment of
irritable bowel syndrome: systematic review and meta-analysis. Br Med J 337:a2313
Furiga A, Lonvaud-Funel A, Badet C (2009) In vitro study of antioxidant capacity and antibacterial activity on oral
anaerobes of a grape seed extract. Food Chem 113:1037–1040
Ganesan S (2008) Traditional oral care medicinal plants survey of Tamil Nadu. Nat Prod Radiance 7(2):166–172
Garlet GP, Martins W Jr, Fonseca BA et al (2004) Matrix metalloproteinases, their physiological inhibitors and
osteoclast factors are differently regulated by the cytokine profile in human periodontal disease. J Clin Periodontol
31:671–679
Gawor JP, Reiter AM, Jodkowska K et al (2006) Influence of diet on oral health in cats and dogs. J Nutr 136(7
Suppl):2021S–2023S
Gebaraa EC, Pustiglioni AN, de Lima LA et al (2003) Propolis extract as an adjuvant to periodontal treatment. Oral
Health Prev Dent 1 (1):29–35
George J, Hegde S, Rajesh KS et al (2009) The efficacy of a herbalbased toothpaste in the control of plaque and
gingivitis: a clinicobiochemical study. Indian J Dent Res 20:480–482
Gertsch J, Leonti M, Raduner S et al (2008) Beta-caryophyllene is a dietary cannabinoid. Proc Natl Acad Sci USA
105(26):9099–9104
Ghorbani A, Esmaeilizadeh M (2014) Pharmacological properties of salvia officinalis and its components. J Tradit
Complement Med 7 (4):433–440
Gilani AH, Shaheen F, Zaman M et al (1999) Studies on antihypertensive and antispasmodic activities of methanol
extract of Acacia nilotica pods. Phytother Res 13:665–669
Giuraud P, Steiman R, Campos-Takaki GM et al (1994) Comparison of antibacterial and antifungal activities of lapachol
and β-lapachone. Planta Med 60:373–374
Govindaraj J, Emmedi P, Lakshmi D et al (2010) Protective effect proanthocyanidins on endotoxin induced
experimental periodontitis in rats. Indian J Exp Biol 48:133–142
Gupta MP (2006) The future of products of the Andean high plateau and central valleys: report on medicinal plants
originating in the Andean high plateau and central valleys region of Bolivia, Acuador and Peru. United Nations Industrial
Development Organization Investment and Technology Promotion Branch
Hanioka T, Tanaka M, OjimaMet al (1994) Effect of topical application of coenzyme Q10 on adult periodontitis. Mol Asp
Med 15:241–248
Hirasawa M, Takada K, Makimura M et al (2002) Improvement of periodontal status by green tea catechin using a local
delivery system: a clinical pilot study. J Periodontal Res 37:433–438
Houde V, Grenier D, Chandad F (2006) Protective effects of grape seed proanthocyanidins against oxidative stress
induced by lipopolysaccharides of periodontopathogens. J Periodontol 77:1371–1379
Huhtanen C (1980) Inhibition of Clostridium botulinum by spice extract and aliphatic alcohols. J Food Prot 43:195–196
Husain S, Al-Samadani KH, Najeeb S et al (2017) Chitosan biomaterials for current and potential dental applications.
Materials 10:602. https://doi.org/10.3390/ma10060602
Hussain AI, Anwar F, Chatha SAS et al (2010) Rosmarinus officinalis essential oil: antiproliferative, antioxidant and
antibacterial activities. Braz J Microbiol 41:1070–1078
Iauk L, Lo Bue AM, Milazzo I et al (2003) Antibacterial activity of medicinal plant extracts against periodontopathic
bacteria. Phytother Res 17:599–604
Ikinci G, Şenel S, Akincibay H et al (2002) Effect of chitosan on a periodontal pathogen Porphyromonas gingivalis. Int J
Pharm 235 (1–2):121–127
Kajiura Y, Lew J-H, Ikuta T et al (2016) Clinical significance of GCF sIL-6R and calprotectin to evaluate the periodontal
inflammation. Ann Clin Biochem 54(6):664–670
Karpinski TM, Szkaradkiewicz AK (2013) Microbiology of dental caries. J Biol Earth Sci 3:M21–M24
Kayode J, Omotoynibo MA (2009) Ethnobotanical utilization and conservation of chewing sticks plants in Ekiti state,
Nigeria. Res J Bot 4 (1):1–9
Khairnar MS, Pawar B, Marawar PP et al (2013) Evaluation of Calendula officinalis as an anti-plaque and atigingivitis
agent. J Indian Soc Periodontol 17(6):741–747
Koo H, Jeon JG (2009) Naturally occurring molecules as alternative therapeutic agents against cariogenic biofilms. Adv
Dent Res 21:63–68
Kubiliene L, Jekabsone A, Zilius M et al (2017) Comparison of aqueous, polyethylene glycol-aqueous and ethanolic
propolis extracts: antioxidant and mitochondria modulating properties. BMC Complement Altern Med 18:165
Kumar P, Ansari SH, Ali J (2009) Herbal remedies for the treatment of periodontal disease—a patent review. Recent
Pat Drug Deliv Formul 3:221–228
Kumar A, Lather A, Kumar V et al (2015) Pharmacological potential of plant used in dental care: a review. J Herb Drug
5(4):179–186
Kumaravelu P, Subramaniyam S, Dakshinamoorthy DP et al (1996) The antioxidant effect of eugenol on CCl4-induced
erythrocyte damage in rats. J Nutr Biochem 7:23–28
811
 Kushiyama M, Shimazaki Y, Murakami M et al (2009) Relationship between intake of green tea and periodontal
disease. J Periodontol 80:372–377
La VD, Bergeron C, Gafner S et al (2009) Grape seed extract suppresses lipopolysaccharide-induced matrix
metalloproteinase (MMP) secretion by macrophages and inhibits human MMP-1 and MMP-9 activities. J Periodontol
80:1875–1882
Lagdive SS, Lagdive SB (2014) Role of probiotics in periodontal health and diseases. Asian J Biosci (1):01, 20–23
Lagrota MHC, Wigg MD, Pereira LOB et al (1983) Antiviral activity of lapachol. Rev Microbiol 14:21–26
Lauten JD, Boyd L, Hanson MB et al (2005) A clinical study: Melaleuca, Manuka, Calendula and green tea mouth
rinse. Phytother Res 19:951–957
Lee JW, Asai M, Jeon SK et al (2015) Rosmarinic acid exerts an antiosteoporotic effect in the RANKL-induced mouse
model of bone loss by promotion of osteoblastic differentiation and inhibition of osteoclastic differentiation. Mol Nutr Food
Res 59:386–400
Li WG, Zhang XY, Wu YJ et al (2001) Anti-inflammatory effect and mechanism of proanthocyanidins from grape seeds.
Acta Pharmacol Sin 22:1117–1120
Li Y, Yao J, Han C et al (2016) Quercetin, inflammation and immunity. Nutrients 8:167
Liang W, Luo Z, Ge S et al (2011) Oral administration of quercetin inhibits bone loss in rat model of diabetic
osteopenia. Eur J Pharmacol 670:317–324
Lima MDR, Lopes AP, Martins C et al (2017) The effect of Calendula officinalis on oxidative stress and bone loss in
experimental periodontitis. Front Physiol 8:440
Lin N, Chen S, Zhang H et al (2018) Quantification of major royal jelly protein 1 in fresh royal jelly by ultraperformance
liquid chromatography-Tandem mass spectrometry. J Agric Food Chem 66:1270–1278
Logan EI (2006) Dietary influences on periodontal health in dogs and cats. Vet Clin North Am Small Anim Pract
36(6):1385–1401
Machado MA (2010) Management of two cases of desquamative gingivitis with clobetasol and Calendula officinalis gel.
Biomed Pap Med Fac Univ Palacky Olomouc Czech Repub 154:335–338
Machado CS, Mokochinski JB, Lira TOD et al (2016) Comparative study of chemical composition and biological activity
of yellow, green, brown, and red Brazilian propolis. Evid Based Complement Alternat Med 2016:6057650. https://doi.org/
10.1155/2016/6157650
Magwa ML, Gundidza M, Coopoosamy R et al (2010) Chemical composition of volatile constituents from the leave of
Aloe ferox. Afr J Biotechnol 5(18):1652–1654
Mahmood A, Ahmad M, Jabeen A et al (2005) Pharmacognostic studies of some indigenous medicinal plants of
Pakistan. Ethnobot Leaflets 9:1
Makarem A, Khalili N, Asodeh R (2007) Efficacy of barberry aqueous extracts dental gel on control of plaque and
gingivitis. Acta Med Iran 45:91–94
Malviya S, Rawat S, Kharia A et al (2011) Medicinal attributes of Acacia nilotica Linn. A comprehensive review on
ethnopharmacological claims. Int J Pharm Life Sci 2(6):830–837
McKay DL, Blumberg JB (2006) A review of the bioactivity and potential benefits of peppermint tea (Mentha piperita
L.). Phytother Res 20(8):619–633
Meeker HG, Linke HAB (1998) The antibacterial action of eugenol, thyme oil, and related essential oils used in
dentistry. Compendium 9:32–40
Meurman JH (2005) Probiotics: do they have a role in oral medicine and dentistry. Eur J Oral Sci 113:188–196
Modarai M, Silva E, Suter A et al (2011) Safety of herbal medicinal products: Echinacea and selected alkylamides do
not induce CYP3A4 mRNA expression. Evid Based Complement Alternat Med 2011:213021
Morrison RK, Brown D et al (1970) Oral toxicology studies with lapachol. Toxicol Appl Pharmacol 17(1):1–11
Muhammad S, Lawal MT (2010) Oral hygiene and the use of plants. Sci Res Essays 5(14):1788–1795
Muhammad S, Khan BA, Akhtar N et al (2012) The morphology, extractions, chemical constituents and uses of
Terminalia chebula: a review. J Med Plant Res 6(33):4772–4775
Nagababu E, Lakshmaiah M (1992) Inhibitory effect of eugenol on non-enzymatic lipid peroxidation in rat liver
mitochondria. Biochem Pharmacol 43:2393–2400
Nagata H, Inagaki Y, Tanaka M (2008) Effect of Eucalyptus extracts chewing gum on periodontal health: a double-
masked, randomized trial. J Periodontol 79:1378–1385
Nakamura R, Littarru GP, Folkers K et al (1974) Study of CoQ10 in gingiva from a patient with periodontal disease and
evidence for deficiency of coenzyme Q10. Proc Natl Acad Sci USA 71:1456–1460
Napimoga MH, Clemente-Napimoga JT, Macedo CG et al (2013) Quercetin inhibits inflammatory bone resorption in a
mouse periodontitis model. J Nat Prod 76:2316–2321
Narayanan N, Thangavelu L (2015) Salvia officinalis in dentistry. Dent Hypotheses 6:27–30
Nayak SS, Ankola AV, Metgud SC et al (2014) An in vitro study to determine the effect of Terminalia chebula extract
and its formulation on Streptococcus mutans. J Contemp Dent Pract 15:278–282
Newman MG, Takai HH, Carranza FA (2006) Carranza’s clinical periodontology, 10th edn. WB Saunders Co,
Philadelphia, PA
Nuttall SL, Kendall MJ, Bombardelli E et al (1998) An evaluation of the antioxidant activity of a standardized grape
seed extract, Leucoselect. J Clin Pharm Ther 23:385–389

812
 Oba PM, Rentas MF, Vendramini TH et al (2018) Nutrition as a tool to control periodontal diseases in dogs and cats.
Nutr Food Sci Int J 4 (4):1–3
Ozaki F, Pannuti CM, Imbronito AV et al (2006) Efficacy of a herbal toothpaste on patients with established gingivitis-a
randomized controlled trial. Braz Oral Res 20:172–177
Özden FO, Sakkalioğlu EE, Sakallioğlu U et al (2017) Effects of grape seed extract on periodontal disease: an
experimental study in rats. J Appl Oral Sci 25(2):121–129
Pack ARC (1984) Folate mouth wash: effects on established gingivitis in periodontal patients. J Clin Periodontol
11:619–628
Pai MR, Acharya LD, Udupa N (2004) Evaluation of antiplaque activity of Azadirachta indica leaf extract gel- a 6-week
clinical study. J Ethnopharmacol 90(1):99–103
Palombo EA (2011) Traditional medicinal plant extracts and natural products with activity against oral bacteria:
potential application in the prevention and treatment of oral diseases. Evid Based Complement Alternat Med
2011:680354
Pannuti CM, de Mattos JP, Ranoya PN et al (2003) Clinical effect of herbal dentifrice on the control of plaque and
gingivitis: a doubleblind study. Pesqui Odontol Bras 17(4):314–318
Parente LM, Lino Junior R, Trevenzol LM et al (2012) Wound healing and anti-inflammatory effect in animal models of
Calendula officinalis L. growing in Brazil. Evid Based Complement Alternat Med 2012:357671
Pasupuleti VR, Sammugam L, Ramesh N et al (2017) Honey, propolis, and Royal Jelly: a comprehensive review of
their biological actions and health benefits. Oxidat Med Cell Longev 2017:1259510
Patil PR, Rakesh SU, Dhabale PN et al (2009) Pharmacological activities of Areca catechu Linn.—a review. J Pharm
Res 2 (4):683–687
Petrovic MS, Kesic LG, Kitic DV et al (2015) Periodontal disease and phytotherapy. J Oral Hyg Health 3:172
Pieri FA, de Castro Souza MC et al (2016) Use of β-caryophyllene to combat bacterial dental plaque formation in dogs.
BMC Vet Res 12:216
Pierozan MK, Pauletti GF, Rota L et al (2009) Chemical characterization and antimicrobial activity of essential oils of
Salvia L. species. Cienc Technol Aliment 29:764–770
Pinto P, Santos CN (2017) Worldwide (poly)phenol intake: assessment methods and identified gaps. Eur J Nutr
56:1393–1408
Pirnazar P, Wolinski L, Nachnani S et al (1999) Bacteriostatic effects of hyaluronic acid. J Periodontol 70:370–374
Porte A, Godoy RLO, Maia-Porte LH (2013) Chemical composition of sage (Salvia officinalis L.) essential oil from the
Rio de Janeiro State (Brazil). Rev Bras Plantas Med 15(3):438–441
Pradeep AR, Happy D, Garg G (2010) Short-term clinical effects of commercially available gel containing Acacia
arabica: a randomized controlled clinical trial. Aust Dent J 55:65–69
Preethi KC, Utta GK (2006) Antioxidant potential of an extract of Calendula officinalis in vivo and in vitro. Pharm Biol
44:691–697
Preethi KC, Kuttan G, Kuttan R (2009) Anti-inflammatory activity of flower extract of Calendula officinalis Linn. and its
possible mechanism of action. Indian J Exp Biol 47:113–120
Preshaw PM (2008) Host response modulation in periodontics. Periodontol 2000 48:92–110
Puri K, Puri N (2013) Local drug delivery agents as adjuncts to endodontic and periodontal therapy. J Med Life
6(4):414–419
Ragasa C, Lorena GS, Mandia E et al (2013) Chemical constituents of Abrus precatorius. Am J Essent Oils Nat Prod
1(2):1–10
Rahaman O (2010) A review of uses Acacia nilotica (Booni) in alternative medicine. SearchWarp.com
Ramli S, Harada K-I, Ruangrungsi N (2011) Antioxidant, antimicrobial and cytotoxicity activities of Acacia farnesiana
(L.) Wild. Leaves ethanolic extract. Pharmacogn J 3(23):50–58
Ramos GP, Apel MA, Morais CBD et al (2012) In vivo and in vitro antiinflammatory activity of red clover Trifolium
pratense dry extract. Rev Bras Farmacogn 22:176–180
Rodrigues TG, Fernandes A Jr, Sousa JP et al (2009) In vitro and in vivo effects of clove on pro-inflammatory cytokines
production by macrophages. Nat Prod Res 23(4):319–326
Rosseto HC, Toledo LAS, Francisco LMB et al (2017) Nanostructured lipid systems modified with waste material of
propolis for wound healing: design, in vitro and in vivo evaluation. Colloids Surf B Biointerfaces 158:441–452
Rufatto LC, dos Santos DA, Marinho F et al (2017) Red propolis: chemical composition and pharmacological activity.
Asian Pac J Trop Med 7:591–598
Saini P, Al-Shibani N, Sun J et al (2012) Effects of Calendula officinalis on human gingival fibroblasts. Homeopathy
101:92–98
Sajjad A, Subhani Sajjad S (2014) Aloe vera: an ancient herb for modern dentistry—a literature review. J Dent Surg
2014:210463
Sakanaka S, Aizawa M, Kim M et al (1996) Inhibitory effects of green tea polyphenols on growth and cellular
adherence of an oral bacterium, Porphyromonas gingivalis. Biosci Biotechnol Biochem 60:745–749
Santoyo S, Cavero S, Jaime L et al (2005) Chemical composition and antimicrobial activity of Rosmarinus officinalis L.
essential oil obtained via supercritical fluid extraction. J Food Prot 68:790–795
Scherer W, Gultz J, Lee SS et al (1998) The ability of an herbal mouth rinse to reduce gingival bleeding. J Clin Dent
9:97–100
813
 Sebei K, Sakouhi F, Herchi W et al (2015) Chemical composition and antibacterial activities of seven Eucalyptus
species essential oils leaves. Biol Res 48(1):7
Sharma A, Sankhla B, Parkar S et al (2014) Effect of traditionally used neem and babool chewing stick (Datum) on
Streptococcus mutans: an in vitro study. J Clin Diagn Res 8(7):ZC15–ZC17
Shekhawat D, Batra A (2006) Household remedies of Keshavraipatan tehsil in Bundi district Rajasthan. Indian J Tradit
Knowl 5 (3):362–367
Shetty SB, Mahin-Syed-Ismail P, Varghese S et al (2016) Antimicrobial effects of Citrus sinensis peel extracts against
dental caries bacteria: an in vitro study. J Clin Exp Dent 8(1):e70–e77
Shiga H, Jo A, Terao K et al (2010) Decrease of halitosis by intake of Manuka honey, vol 14. IADR General Session,
Barcelona
Siddamallayya N, Yasmeen A, Gopakumar K (2010) Hundred common medicinal plants of Karnataka in primary health
care. Indian J Tradit Knowl 9(1):90–95
Singh O, Khanam Z, Misra N et al (2011) Chamomile (Matricaria chamomilla L.): an overview. Pharmacogn Rev
5(9):82–95
Singh J, Singh R, Gambhir RS et al (2016) Local drug delivery system in treatment of periodontitis: a review. J
Periodontal Med Clin Pract 3 (3):153–160
Smullen J, Finney M, Storey DM et al (2012) Prevention of artificial dental plaque formation in vitro by plant extracts. J
Appl Microbiol 113:964–973
Soni S, Aggarwal PK, Sharma N et al (2012) Coenzyme Q10 and periodontal health: a review. Int J Oral Maxillofac
Pathol 3(2):21–26
Sookto T, Srithavaj T, Thaweboon B et al (2013) In vitro effects of Salvia officinalis L. essential oil on Candida albicans.
Asian Pac J Trop Biomed 3:376–380
Srivastava A, DuBourdieu D, Deshpande M, Lall R (2016) Effect of novel natural substitute of chlorhexidine on halitosis
in canine: a preliminary report. Proceedings of the 19th American Dental Congress. Phoenix
Stookey GK, Warrick JM, Miller LL (1995) Effect of sodium hexametaphosphate on dental calculus in dogs. Am J Vet
Res 56 (7):913–918
Stookey GK, Warrick JM, Miller LL et al (1996) Hexametaphosphatecoated snack biscuits significantly reduce calculus
formation in dogs. J Vet Dent 13(1):27–30
Subhash AV, Suneela S, Anuradha C et al (2014) The role of Aloe vera in various fields of medicine and dentistry. J
Orafac Sci 6:5–9
Sunitha J, Ananthalakshmi R, Sathiya Jeeva J et al (2015) Antimicrobial effect of herbal dentifrice: an in vitro study. J
Pharm Bioallied Sci 7 (2):S628–S631
Taheri JB, Azimi S, Rafieian N et al (2011) Herbs in dentistry. Int Dent J 61:287–296
Tanideh N, Tavakoli P, Saghiri MA et al (2013) Healing acceleration in hamsters of oral mucositis induced by 5-uracil
with topical Calendula officinalis. Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol 115:332–338
Tipton DA, Hamman NR, Dabbous MKH (2006) Effect of myrrh oil on IL-1beta stimulation of NF-kappaB activation and
PGE2 production in human gingival fibroblasts and epithelial cells. Toxicol in Vitro 20 (2):248–255
Tu HP, Fu MM, Kuo PJ et al (2013) Berberine’s effect on periodontal tissue degradation by matrix metalloproteinases:
an in vitro and in vivo experiment. Phytomedicine 20:1203–1210
Turesky S, Gilmore ND, Glickman I (1970) Reduced plaque formation by chloromethyl analogue of vitamin C. J
Periodontol 41:41–43
Umaru B, Mahre S, Dogo HM et al (2016) Effects of aqueous pod extract of Acacia nilotica on white blood cells,
platelets and clotting time in albino rats. Am J Pharmacol Pharmacother 3(3):1–6
Uraz A, Boynueğri D, Özcan G et al (2012) Two percent chitosan mouthwash: a microbiological and clinical
comparative study. J Dent Sci 7(4):342–349
Vanderpool C (2009) Mechanisms of probiotics action: implication for therapeutic application in inflammatory bowel
disease. Inflamm Bowel Dis 15:300–310
Vogel RI, Fink RA, Frank O et al (1978) The effect of topical application of folic acid on gingival health. J Oral Med
33(1):20–22
White DJ, Gerlach RW (2000) Anticalculus effects of a novel, dualphase polypyrophosphate dentifrice: chemical basis,
mechanism, and clinical response. J Contemp Dent Pract 1(4):1–12
Wim W, Teughel S, Van Esche M (2008) Probiotics in oral health care. Periodontology 48:111–147
Wolinsky LE, Mania S, Nachnani S et al (1996) The inhibiting effect of aqueous Azadirachta indica (Neem) extract
upon bacterial properties influencing in vitro plaque formation. J Dent Res 75 (2):816–822
Wu N, Fu K, Fu Y-J et al (2009) Antioxidant activities of extracts and main components of Pigeon pea [Cajanus cajan
(L.) Millsp.] leaves. Molecules 14:1032–1043
Wynn RL (2005) Aloe vera gel: update for dentistry. Gen Dent 53:6–9 Yanine N, Araya I, Brignardello-Petersen R et al
(2013) Effects of probiotics in periodontal diseases: a systematic review. Clin Oral Investig 17:1627–1634
Yu H, Oho T, Tagomori S et al (1992) Anticariogenic effects of green tea. Fukuoka Igaku Zasshi 83:174–178
Yun JH, Pang EK, Kim CS et al (2004) Inhibitory effects of green tea polyphenol (-)-epigallocatechin gallate on the
expression of matrix metalloproteinase-9 and on the formation of osteoclasts. J Periodontal Res 39:300–307
Yusoffs S, Kamin S (2006) The effect of a mouthwash containing extracts of Calendula officinalis on plaque and
gingivitis. J Clin Periodontol 33:118
814
 Zheng W, Wang S, Wang J et al (2015) Periodontitis promotes the proliferation and suppresses the differentiation
potential of human periodontal ligament stem cells. Int J Mol Med 36:915–922
Zhu N, Sheng S, Sang S et al (2003) Isolation and characterization of several aromatic sesquiterpenes from
Commiphora myrrha. Flavour Fragr J 18:282–285
Zilius M, Ramanauskiene K, Juskaite V et al (2016) Formulation of propolis phenolic acids containing microemulsions
and their biopharmaceutical characterization. Evid Based Complement Alternat Med 2016:1–7.
https://doi.org/10.1155/2016/8175265

815
 Nutracêuticos em doenças gastrointestinais
Jamil Talukder

Resumo
A saúde do sistema digestivo é importante para que ele execute suas funções fisiológicas
de maneira adequada. Os parâmetros fisiológicos do sistema digestivo dependem dos
tipos de alimentos ingeridos e da presença de compostos bioativos nos mesmos.
Compostos bioativos de origem alimentar, ou fitoquímicos, ingeridos podem desempenhar
um papel importante na mediação da fisiopatologia do sistema digestivo. As condições
patológicas são geralmente tratadas com medicamentos diferentes e quase todos os
medicamentos têm efeitos indesejáveis. Portanto, os efeitos adversos e a toxicidade das
drogas levaram os cientistas a considerar alternativas, alimentos funcionais, compostos
bioativos mais seguros ou abordagens baseadas em nutracêuticos para o manejo das
condições gastrointestinais (GI). Nas últimas décadas, foram descobertos muitos
nutracêuticos com propriedades antioxidantes, antiinflamatórias, de ácidos graxos,
probióticos e prebióticos que melhoram os sinais de doença gastrointestinal. Mais estudos
pré-clínicos e clínicos nos levarão a uma nova era de nutracêuticos para o manejo da
saúde e das condições intestinais em animais.

Palavras-chave: Nutracêuticos · Nutracêuticos veterinários · Doenças gastrointestinais

J. Talukder - Vets Plus, Inc., Menomonie, WI, USA e-mail: Jamilt@vets-plus.com

1. Introdução
O sistema digestivo é o principal responsável pela digestão dos alimentos, absorção de
nutrientes e água e eliminação de resíduos do corpo. A alimentação com alimentos
comerciais aumentou o número de doenças causadas devido à nutrição inadequada. A
adequação e a segurança do abastecimento alimentar são de grande interesse para os
consumidores (Buchanan et al. 2011). Geralmente, os donos de animais de estimação
não se recusam a fornecer alimentos que possam apoiar a saúde e o bem-estar de seus
animais, mas, ao mesmo tempo, eles duvidam de sua segurança. Por exemplo, a
incorporação de milho e trigo que documentaram atividades antioxidantes e anticâncer
(Wood et al. 1994) em alimentos para animais de estimação foi percebida como negativa
por um subgrupo de proprietários de animais de estimação. Esses proprietários acreditam
que são de qualidade inferior ou de baixo valor nutricional para cães e gatos, apesar de
816
corresponderem aos padrões da Associação Americana de Controle de Alimentos
(AAFCO) (Carter et al. 2014). Os donos de animais de estimação têm demonstrado um
interesse crescente em dietas naturais holísticas.

A obesidade é reconhecida como um dos mais importantes problemas de saúde. As

doenças cardíacas continuam a ser a principal causa de morte na maioria dos países em
desenvolvimento em todo o mundo, seguidas por câncer, osteoporose, artrite e muitos
outros. Assim, a alimentação adequada é parte integrante das funções normais do corpo,
bem como do sistema digestivo que ajuda na absorção de nutrientes, prevenção de
deficiências nutricionais e desnutrição, reparo de epitélio intestinal danificado, restauração
de populações bacterianas luminais normais, promoção de motilidade gastrointestinal (GI)
e manutenção das funções imunológicas normais (Zoran 2003). Além disso, o trato
gastrointestinal contém alguns microrganismos multifacetados, incluindo bactérias
patogênicas e não patogênicas. Foi relatado que mais de 400 espécies bacterianas
habitam o trato GI (Eckburg et al. 2005). As espécies bacterianas normais e suas
populações são alteradas pela ingestão de diferentes tipos de alimentos, incluindo
medicamentos como antibióticos. Apesar dos efeitos indesejáveis, os veterinários têm que
prescrever antibióticos para o tratamento de doenças bacterianas em animais. Além disso,
os donos de animais que estão frustrados com a abordagem cara e de alta tecnologia do
tratamento de doenças nos medicamentos modernos estão procurando produtos
benéficos complementares ou alternativos. Os alimentos funcionais proporcionam
benefícios à saúde se forem consumidos regularmente como parte de uma dieta variada.
Eles fornecem benefícios à saúde além do fornecimento de nutrientes essenciais, como
vitaminas, minerais, água, proteínas, carboidratos e gorduras (Hasler 2000). Plantas
medicinais e ingredientes disponíveis naturalmente são usados há séculos para a
prevenção, controle e tratamento de várias doenças. Recentemente, há um interesse
crescente no exame do potencial de novos compostos que podem prevenir ou tratar
diferentes doenças, incluindo crescimento aumentado, imunomodulador ou ações
antimicrobianas. As plantas contêm vários compostos bioativos, incluindo fitoesteróis,
fitoestrogênios, polifenóis e ácidos graxos poliinsaturados (PUFAs), que são usados como
nutracêuticos ou alimentos funcionais e são opções atraentes para diferentes doenças
(Foster et al. 2005). Portanto, os cientistas estão agora se concentrando mais no exame
de nutracêuticos quanto ao seu potencial protetor e de prevenção de doenças com pouco
ou nenhum efeito colateral (Nicoli et al. 1999; Kaur e Kapoor 2001; Adelaja e Schilling
1999). Este capítulo descreve os benefícios e a justificativa para o uso de nutracêuticos
nos distúrbios gastrointestinais.

817
2. Fitoquímicos para doenças gastrointestinais
As plantas que contêm muitos fitoquímicos são bioativas por natureza e fornecem muitos
benefícios à saúde. São conhecidos como nutracêuticos. Eles induzem respostas anti-
inflamatórias, eliminam os radicais livres, mantêm uma regulação homeostática da
microbiota intestinal e ativam as células T reguladoras intestinais (Saxena et al. 2014). Os
fitoquímicos contêm fitoestrogênios, compostos fenólicos e metabólitos secundários e
exibem seus efeitos na inflamação intestinal (Mosele et al. 2015; Jarosová et al. 2015).
Esses compostos são classificados como flavonóides, isoflavonóides, lignanos,
elagitaninos, coumestanos e estilbenos (Bilal et al. 2014; Gaya et al. 2016). Uma única
planta pode conter muitos tipos de fitoestrogênios, e diferentes partes da planta podem
conter diferentes quantidades de fitoestrogênios (Jarosová et al. 2015). As principais
fontes desses fitoestrogênios são frutas, vegetais e grãos inteiros (Sirotkin e Harrath
2014). Os flavonóides são transformados por espécies bacterianas no intestino, mas
também podem representar um substrato para a microbiota intestinal humana. Isso pode
influenciar a absorção intestinal (Fig. 1).

Fig. 1 Categorias de nutracêuticos e

compostos representativos. Adotado de
Larussa et al. (2017)

Os flavonóides influenciam e regulam a barreira intestinal e sua permeabilidade. Foi

demonstrado que os flavonóides têm uma influência trófica direta na Akkermansia, mas
não na produção de mucina (Cassidy e Minihane 2017). Os flavonóides fornecem um
efeito antimicrobiano, oferecendo proteção contra bactérias, fungos e vírus patogênicos.
Nesta era de resistência antimicrobiana, os flavonóides podem ser considerados
alternativas adequadas aos antibióticos, especialmente em infecções leves/moderadas ou
em sua prevenção (Iranshahi et al. 2015).

Aloe vera é um dos remédios fitoterápicos comuns que tem sido usado em doenças
gastrointestinais, como diarreia, incluindo doença inflamatória intestinal (DII), por séculos
818
em várias culturas ao redor do mundo. Ele contém vários compostos (antraquinonas,
carboidratos, vitaminas, minerais, enzimas e aminoácidos) com muitos efeitos benéficos.
Além disso, é considerada uma fonte importante e natural de prebióticos. Observou-se
que o gel foliar, devido à oxidação, leva à fermentação e regula o crescimento bacteriano.
Vários grupos de pesquisa relataram a presença de bactérias do ácido láctico após a
fermentação da polpa de Aloe vera, lançando as bases para o estudo de seus efeitos
probióticos. Além disso, Langmead et al. (2004) também usou Aloe vera no tratamento da
colite ulcerosa (UC).

A cúrcuma (Curcuma longa) é comumente usada como tempero, conservante de

alimentos e corante em alimentos. Ele contém uma classe de fenóis, conhecidos como
curcuminóides. Em um estudo clínico, a administração oral de curcumina provou ser um
agente terapêutico na manutenção da UC (Hanai et al. 2006; Lang et al. 2015). A
curcumina também pode ser usada como enema (Singla et al. 2014) e demonstrou ser
muito eficaz em enterites crônicas como a DII, sem levantar preocupações quanto à sua
segurança (Suskind et al. 2013). IBS é o distúrbio GI funcional mais comum, e o
tratamento se concentra principalmente no alívio dos sintomas (Lacy e Lee 2005). Esses
sintomas classicamente incluem desconforto ou dor abdominal, distensão abdominal,
flatulência e urgência fecal. Fitoquímicos como óleo de hortelã-pimenta, extrato de folha
de alcachofra e cúrcuma têm sido usados em pequenos ensaios não controlados e têm
mostrado benefício clínico (Bundy et al. 2004). Os curcuminóides atuam como agentes
antiinflamatórios. Ele suprime o intensificador da cadeia kappalight do fator nuclear das
células B ativadas (NFkB) da via inflamatória relacionada. Posteriormente, inibe TNF-a,
IL-12 e IL-2 (Fig. 2, adotada de Larussa et al. 2017). Assim, a curcumina modula a
resposta imunológica como um agente seguro e promissor para o tratamento da diarreia
crônica (Vecchi Brumatti et al. 2014) sem produzir efeitos adversos (Holt et al. 2005; Hsu
e Cheng 2007; Langhorst et al. 2013).

A capsaicina está presente na pimenta malagueta e requer cálcio para inibir o transporte
de metionina mediado por SNAT2 e causa apoptose e danos ao DNA em enterócitos
(Talukder et al. 2018).

O gengibre (rizoma de Zingiber officinale) tem sido amplamente utilizado há séculos em

distúrbios gastrointestinais, como dispepsia. Tem uma função protetora em doenças e
irritações gástricas, como úlceras, vômitos, náuseas, dores de estômago, espasmos e
câncer gastrointestinal. Aumenta a motilidade GI (Micklefield et al. 1989) e também reduz
a pressão arterial (Ghayur e Gilani 2005).

819
 Fig. 2 (a – d) Fitoquímicos e suas interações
com as vias inflamatórias. IL interleucina, fator
de necrose tumoral alfa - fator nuclear NFkB,
potenciador da cadeia leve de células B
ativadas, fator de necrose tumoral alfa - TNF-a

Gengibre contém gingerols, zingerone, shogaols, paradols e compostos relacionados

(Connell e McLachlan 1972). A atividade pró-cinética do extrato de gengibre revelou que
ele aumenta a viagem intestinal da farinha de carvão em camundongos. Este efeito
propulsor do extrato, semelhante ao do carbacol, foi bloqueado em camundongos pré-
tratados com atropina, um antagonista colinérgico padrão. Além disso, a atividade
procinética mostrou um efeito espasmogênico dependente da dose sensível à atropina in
vitro, bem como em tecidos de fundo de estômago de rato e camundongo isolados. Em
tecido atropinizado, mostrou atividade espasmolítica por meio da inibição das contrações
induzidas por 5-HT- e K+. Um efeito espasmolítico também foi observado em outras
preparações intestinais, seja como inibição não competitiva das curvas de resposta à
dose do agonista, inibição de contrações induzidas por K + alto (80 mM) ou deslocamento
820
das curvas de resposta à dose de Ca 2+ para a direita, indicando um efeito antagonista do
cálcio. A análise fitoquímica revelou a presença de saponinas, flavonóides e alcalóides no
extrato bruto. Além disso, a presença de constituintes espasmolíticos do tipo antagonista
do cálcio pode explicar seu uso em estados hiperativos do intestino, como cólica e
diarreia (Muhammad e Anwarul et al. 2005). Portanto, o gengibre possui uma combinação
única de atividades espasmogênicas e espasmolíticas mediadas por mecanismos
colinérgicos e antagonistas de cálcio, respectivamente.

Frutas e vegetais contêm muitos flavonóides, que pertencem à classe dos polifenóis, e
apresentam benefícios promissores para a saúde. Os usos terapêuticos dos flavonóides
foram investigados junto com seu modo de ação em diferentes condições de doença
gastrointestinal (Hoensch e Oertel 2015). Flavonóides de mirra e camomila demonstram
propriedades nutricionais, antiinflamatórias e imunomoduladoras na enterite crônica
(Langhorst et al. 2013) com diarreia. Além disso, Boswellia serrata é uma erva conhecida
por seus benefícios na enterite. Estudos recentes demonstram melhora significativa na
preservação da barreira epitelial intestinal e atenuação de danos oxidativos e
inflamatórios na colite ulcerosa (Holtmeier et al. 2011; Gupta et al. 1997).

A antocianina, também um flavonóide, é responsável pelas cores azul, roxa e vermelha

das flores e frutas. Além disso, as antocianinas atuam como antioxidantes que restringem
diretamente a expressão gênica e as vias de sinalização inflamatória mediada por
receptor (Biedermann et al. 2013). A suplementação da dieta de camundongos com
mirtilos ou groselhas proporcionou uma mudança significativa na microbiota intestinal ao
promover as bactérias anaeróbias Bacteroidetes e Actinobacteria, provavelmente por
meio de seu efeito antioxidante (Overall et al. 2017). Além disso, mirtilo contém
antocianina e, muito recentemente, foi revelado que reduz as citocinas pró-inflamatórias
IFN-γ e TNF-a, somado a níveis aumentados da citocina imunorreguladora IL-10 em UC
(Roth et al. 2016).

Uma subclasse de flavonóides é chamada de “isoflavonóides”, dos quais uma quantidade

substancial é encontrada na soja, proteína de soja e missô. As isoflavonas são
conjugadas à glicose e não são ativas em sua forma primária. As isoflavonas são
convertidas em diferentes compostos pela microbiota intestinal, bem como enterócitos, e
são bem absorvidas pelos micróbios e pelo intestino e passam pela circulação
enterohepática (Vitale et al. 2013; Catinean et al. 2018). Além disso, esses metabólitos
têm uma atividade semelhante ao estrogênio (Laparra e Sanz 2010). Os isoflavonóides
contêm muitos glicosídeos, como genisteína, daidzeína e gliciteína. A daidzeína é
metabolizada pelas bactérias intestinais em equol (Franke et al. 2014; Catinean et al.
821
2018), que desempenha um papel importante nos benefícios da soja para a saúde. Ele
também tem forte atividade estrogênica e capacidade antioxidante. As principais bactérias
que contribuem para a conversão dos isoflavonóides em equol habitam a porção distal do
intestino e pertencem à família Coriobacteriaceae (Guadamuro et al. 2017; Catinean et al.
2018). As isoflavonas também inibem as tirosina quinases, têm atividade antioxidante,
ligam-se e ativam os reguladores de proliferação de peroxissoma a e g, inibem enzimas
na biossíntese de esteróides, influenciam fortemente a função de células assassinas
naturais e a ativação de subconjuntos específicos de células-T e inibem metástases
(Stephen 2010 ) Junto com os isoflavonóides, elagitaninos e lignanos são metabolizados
pelas bactérias intestinais em equol, urolitinas e enterolignanos, que têm alta
biodisponibilidade e efeitos estrogênicos/antiestrogênicos, antioxidantes, antiinflamatórios
e antiproliferativos (Gaya et al. 2016; Catinean et al. 2018).

Um grupo de polifenóis é conhecido como lignanas, seus precursores são encontrados

em uma ampla variedade de alimentos vegetais, incluindo sementes como linhaça, soja,
morango, cenoura, repolho, cebola, alho e pepino (Blanck et al. 2003; Peterson et al.
2011). Eles são ricos em ácido graxo ômega-3, ácido alfa-linolênico, ácido
aminolevulínico, etc. Todos os quais demonstraram ter muitos benefícios potenciais à
saúde. Eles podem ser usados para melhorar a saúde digestiva, reduzir a pressão arterial
e o colesterol ruim, reduzir o risco de câncer e beneficiar pessoas com diabetes. Os
polifenóis também são abundantes no cacau em pó, chocolate amargo, frutas, feijão,
nozes, vegetais (cebola vermelha, espinafre), soja, chá (preto e verde) e vinho tinto
(Manach et al. 2004; Catinean et al. 2018). Existe uma relação bidirecional entre os
polifenóis e a microbiota intestinal. A biodisponibilidade dos polifenóis é aumentada pela
microbiota, enquanto os polifenóis não absorvidos estão envolvidos na manutenção do
equilíbrio da microbiota no intestino. Os mecanismos sugeridos implicam em proteção
contra distúrbios GI e patógenos, fortalecendo as junções celulares epiteliais intestinais,
aumentando a secreção de muco, estimulando citocinas e modulando a resposta
imunológica (Ozdal et al. 2016; Catinean et al. 2018).

A quercetina, um polifenól específico, é um dos compostos mais estudados em relação à

microbiota intestinal. A quercetina é derivada de plantas que pertencem aos flavonóis,
uma subclasse de compostos flavonóides. Pode ser encontrado em maçãs, frutas
vermelhas, uvas, cebolas, chá, tomates, sementes e nozes, mas também em plantas
medicinais como Hypericum perforatum, Ginkgo biloba e Sambucus canadensis (Li et al.
2016; Catinean et al. 2018). Foi demonstrado que a quercetina tem um papel modulador
na microbiota intestinal quando animais com sobrepeso foram alimentados com uma dieta

822
rica em sacarose. Além disso, a quercetina melhora a proporção Firmicutes/Bacteroidetes
em ratos alimentados com dieta rica em sacarose, aumentando o título de Bacteroides
vulgatus e Akkermansia muciniphila, que foram inversamente correlacionados à
obesidade. Além disso, pode diminuir o título de Eubacterium cylindroides e Bilophila
wadsworthia, bactérias associadas à obesidade induzida por dieta (Etxeberria et al. 2015;
Catinean et al. 2018).

Pistacia lentiscus é um arbusto perene encontrado na região do Mediterrâneo. Ele contém

goma-resina que atua como um agente imunomodulador nas células mononucleares do
sangue periférico. Inibe o TNF-a e estimula o fator de inibição da migração de macrófagos
(MIF). Foi observado que a resina óleo/goma reduz a secreção de TNF-a e aumenta a
MIF na doença de Crohn (DC). Posteriormente, também inibe a migração de monócitos e
a quimiotaxia em doenças gastrointestinais crônicas em DC (Kaliora et al. 2007).

O extrato de Andrographis paniculata é usado para tratar doenças inflamatórias crônicas.

Foi relatado que o extrato de ervas HMPL-004 reduz significativamente a atividade
transcricional de NFkB e diminui as secreções de citocinas pró-inflamatórias, como TNF-a
e IL-6. Seus benefícios na UC ativa foram abordados por dois estudos randomizados,
duplos-cegos, de 8 semanas, mostrando uma diminuição no escore total de Mayo de 3
pontos, bem como uma redução de 30% no sangramento retal (Tang et al. 2011;
Sandborn et al. 2013).

Uma das bebidas mais consumidas é o chá (Camellia sinensis) verde ou preto. Estes
contêm altas concentrações de flavonóides (epicatequina e catequina) e seus ésteres.
Altos níveis de compostos não absorvidos do chá permanecem no intestino e
desempenham um papel importante na saúde do intestino. O ácido cafeico, por exemplo,
inibe o crescimento de muitas bactérias patogênicas intestinais, como E. coli, Salmonella,
Pseudomonas, Clostridium e Bacteroides (Lee et al. 2006). Os principais compostos
ativos do chá-verde são os polifenóis. Eles têm importantes efeitos antioxidantes e
antiinflamatórios e influenciam a atividade de NFkB, COX-2 (ciclo-oxigenase-2) e o nível
de IL-2 (interleucina-2) (Oz et al. 2013). O chá-preto também contém vários metabólitos,
como os ácidos benzóico, fenilacético e fenilpropiônico com propriedades antimicrobianas
(Van Duynhoven et al. 2013).

A planta aromática Oregano vulgare está sendo usada para fins fitoterápicos. Carvacrol e
timol são dois fenóis principais de orégano, e eles têm atividade antimicrobiana em
particular em E. coli (Fournomiti et al. 2015; Lopez-Romero et al. 2015). Em um estudo
experimental em porcos, foi demonstrado que o óleo de orégano tem efeitos protetores

823
contra a atrofia de vilosidades e necrose de células epiteliais e, ao mesmo tempo, diminui
os níveis de endotoxinas séricas (Zou et al. 2016).

Alcalóides com estrutura de amônio quaternário, como a berberina, modulam a microbiota

intestinal e mostram atividade antimicrobiana em Firmicutes e Bacteroidetes. A berberina
exerce propriedades citostáticas, antiproliferativas e antioxidantes. Portanto, a berberina
pode contribuir para o aumento da expressão gênica intestinal do fator adiposo induzido
pelo jejum (Fiaf) em camundongos, que atua como um inibidor da lipase da lipoproteína
(Zhang et al. 2015a, b; Xu et al. 2017). O alcalóide é considerado um antibiótico de amplo
espectro que pode aumentar Bacteroides e diminuir Ruminococcus no íleo terminal e
cólon (Guo et al. 2016).

Algas verdes azuladas, um tipo de cianobactéria, por exemplo, espirulina (Arthrospira

platensis), usada principalmente como suplemento alimentar, tem a capacidade de inibir o
crescimento de bactérias Gram-positivas e Gram-negativas (Staphylococcus aureus,
Bacillus subtilis, E. coli, Pseudomonas aeruginosa, etc.). Este efeito antibacteriano é
devido a um metabólito extracelular produzido pela espirulina. Além disso, o efeito
modulador da microbiota da espirulina foi atribuído aos compostos ativos encontrados
nesta planta (glutamato, aspartato, carboidratos ou compostos fenólicos). Essas
substâncias têm efeitos antimicrobianos e bacteriostáticos bem conhecidos, além da
capacidade de estimular o crescimento de probióticos (Beheshtipour et al. 2013; Finamore
et al. 2017). Devido a esse efeito, a biomassa da espirulina pode se tornar um produto
natural que pode ser adicionado ao leite fermentado para aumentar a produção de
Lactobacillus e também o número de células viáveis que chegam ao intestino (Bhowmik et
al. 2009).

A L-Glutamina (GLN) é um conhecido aminoácido que desempenha um papel importante

no intestino e tem uma importante contribuição para a geração de energia. Talukder et al.
(2008a, b) descobriram a presença de dois tipos diferentes de co-transportadores de GLN
no intestino. O GLN é degradado por enterócitos e bactérias luminais intestinais e oxidado
pelo ciclo de Krebs, formando ATP (Wang et al. 2014). O GLN causa uma mudança na
comunidade de bactérias intestinais e aumenta a imunidade intestinal ao afetar as vias de
sinalização de NFkB, MAPK (proteína quinase ativada por mitogênio) e PI3K-Akt
(fosfatidilinositol-3-quinases-proteína quinase B) (Ren et al. 2014). A Figura 2 resume as
interações entre alguns agentes fitoquímicos e a rede inflamatória (adotada de Larussa et
al. 2017).

824
3. Lipídios dietéticos e vitaminas solúveis em gordura para doenças
gastrointestinais
Os lipídios, também conhecidos como gorduras, desempenham muitos papéis
importantes no corpo animal, desde o fornecimento de energia à produção de hormônios.
Os lipídios da dieta são um dos substratos nutricionais mais ativos na modulação da
resposta imune, em particular, o sistema imune da mucosa intestinal. Os ácidos graxos
poliinsaturados (PUFA) também são chamados de “ácidos graxos essenciais”, pois são
cruciais para o funcionamento do corpo. Estes são introduzidos externamente através da
dieta (Escott-Stump e Mahan 2000). Os PUFAs foram classificados em duas categorias:
ácidos graxos ômega-3 (n-3) e ácidos graxos ômega-6 (n-6). Os principais ácidos graxos
ômega-3 são o ácido α-linolênico (ALA), o ácido eicosapentaenóico (EPA) e o ácido
docosahexaenóico (DHA). ALA é o precursor do EPA e DHA. EPA e DHA são encontrados
principalmente em peixes gordurosos, como cavala, salmão, arenque, truta e atum de
barbatana azul e em óleos de peixe. As principais fontes de ALA são principalmente
sementes de linhaça, soja, canola, algumas nozes e sementes de groselha (Trumbo et al.
2002). Os PUFAs ômega-6 consistem principalmente de ácido linoleico (LA), ácido γ-
linolênico (GLA) e ácido araquidônico (ARA). LA ocorre principalmente em óleos vegetais,
por exemplo, milho, cártamo, soja e girassol. ARA é encontrada em produtos de origem
animal, como carnes, aves e ovos. Os papéis dos PUFAs foram amplamente investigados
durante os processos inflamatórios na enterite crônica (Larussa et al. 2017). Os ácidos
graxos mais interessantes são o n-6 PUFA AA, que é o precursor de eicosanóides
inflamatórios como prostaglandina E2 (PGE2) e leucotrieno B4, e os n-3 PUFAs EPA e
DHA, que são abundantes em óleos de peixe.

A ação modificadora do perfil do mediador lipídico é exercida pelos PUFAs n-3 atuando
principalmente como substrato competitivo, o que diminui a produção dos eicosanóides do
AA, mas também reduz a quimiotaxia leucocitária e a produção de citocinas inflamatórias
(Calder 2008). Um aumento na incidência de enterite foi relatado nos últimos anos,
particularmente com mudanças na dieta, incluindo uma maior ingestão de PUFAs n-6 e
um consumo reduzido de PUFAs n-3 (Marion-Letellier et al. 2013). Foi relatada uma
correlação entre uma maior ingestão de LA, um PUFA n-6 e um risco aumentado de UC
(Tjonneland et al. 2009; Larussa et al. 2017), sugerindo um possível papel do ácido
linoleico dietético na etiologia de a doença. Por outro lado, o ácido oleico, que é o
ingrediente predominante do azeite, mostrou estar inversamente associado ao
desenvolvimento de UC (Silva et al. 2014). De acordo com este achado, um grande
estudo prospectivo mostrou uma associação inversa entre maior ingestão de longo prazo
825
de PUFAs n-3 de cadeia longa e o risco de UC, confirmando o efeito protetor da ingestão
de PUFA n-3, enquanto nenhum ácido graxo específico parecia estar associado ao risco
de DC (Uchiyama et al. 2010). Outro estudo mostrou que uma intervenção dietética com
foco na redução da proporção de PUFA n-6 / n-3 foi eficaz na manutenção da remissão da
doença na DII, possivelmente por meio do aumento da ingestão de PUFA n-3
(Ananthakrishnan et al. 2014; Larussa et al. 2017) A suplementação de óleo de peixe em
IBD resultou na incorporação de n-3 PUFA no tecido da mucosa intestinal e modificação
dos perfis de mediadores inflamatórios, mostrando como prontamente os lipídios do cólon,
prostaglandinas e síntese de tromboxano podem ser alterados por mudanças na dieta
(Hillier et al. 1991; Larussa et al. 2017).

Um ensaio de suplementação dietética com óleo de peixe em UC mostrou uma

diminuição de 56% do índice médio de atividade da doença e uma diminuição de 4% no
placebo. Além disso, a ingestão de óleo de peixe revelou um perfil bem tolerado em todos
os grupos, sem qualquer alteração nos exames de sangue de rotina (Aslan e
Triadafilopoulos 1992; Larussa et al. 2017). Um estudo recente identificou um mediador
lipídico endógeno, resolvina E1, que é gerado a partir do ácido eicosapentaenóico in vivo
e demonstra atividade antiinflamatória potente, sugerindo um mecanismo pelo qual os
ácidos graxos ômega-3 podem modular as vias inflamatórias (Arita et al. 2005).

Um papel interessante no cenário nutracêutico usado na enterite crônica tem sido

proposto para as vitaminas lipossolúveis, como A, D, E e K. A deficiência de vitamina D,
cuja principal fonte é a produção endógena na pele após a exposição a luz solar, foi
considerada significativamente associada com IBD (Del Pinto et al. 2015; Larussa et al.
2017). Cães com enteropatia crônica (CE) têm um status de vitamina D mais baixo do que
cães saudáveis. O status da vitamina D foi associado a um resultado clínico negativo com
DII em humanos. Gow et al. (2011) compararam os metabólitos da vitamina D sérica e as
concentrações plasmáticas do hormônio da paratireóide em cães com IBD e concentração
normal de albumina, cães com IBD e hipoalbuminemia, cães saudáveis e cães doentes
hospitalizados com doenças não gastrointestinais. Eles observaram que as concentrações
séricas de 25-hidroxivitamina D foram menores em cães hipoalbuminêmicos com IBD do
que em cães saudáveis, cães doentes hospitalizados e cães normoalbuminêmicos com
IBS. Cães com IBD e hipoalbuminemia tiveram uma concentração plasmática mais alta de
hormônio da paratireóide e uma concentração plasmática mais baixa de cálcio ionizado
do que cães doentes hospitalizados. Os cães com IBD tiveram uma correlação positiva
entre as concentrações séricas de 25-hidroxi-vitamina D e albumina sérica, cálcio sérico e
concentrações plasmáticas de cálcio ionizado. Além disso, as evidências apoiam um

826
papel imunológico da vitamina D na enterite crônica, promovendo a formação de barreira
de tecido através da expressão de proteínas de adesão celular e estabilização de junções
estreitas entre as células epiteliais e inibindo a produção de citocinas pró-inflamatórias
através da ativação do receptor de vitamina D (Mouli e Ananthakrishnan 2014). Os
resultados de um ensaio clínico randomizado e controlado apoiam os benefícios da
suplementação de vitamina D em pacientes com colite ulcerativa, uma vez que uma
diminuição na taxa de sedimentação de eritrócitos (ESR) e nos níveis de proteína c
reativa (CRP) foi encontrada no grupo de tratamento (Jørgensen et al. 2010). Foi sugerido
que a vitamina K pode estar envolvida na modulação da atividade da doença e na
manutenção da saúde óssea em pacientes com IBD. Nakajima et al. (2011) avaliaram os
níveis de vitamina K de pacientes com IBD medindo a osteocalcina subcarboxilada sérica
e encontraram uma correlação significativa com o índice de atividade clínica da DC. A
complexidade dessas interações foi destacada por Kuwabara et al. (2009), que
descobriram que uma baixa concentração plasmática de vitamina K foi um fator de risco
independente para baixa densidade mineral óssea em pacientes com IBD, mas esses
níveis baixos foram associados com a ingestão de gordura dos pacientes, e não com a
ingestão de vitamina K. Isso sugeriu uma má absorção, em vez de uma ingestão
alimentar pobre.

4. Peptídeos e aminoácidos dietéticos para doenças gastrointestinais

Aminoácidos (AA) são os blocos de construção da proteína que incluem AA essencial e
não essencial. Foi demonstrado que os peptídeos e aminoácidos dietéticos modulam as
funções imunológicas intestinais e influenciam as respostas inflamatórias, estando
envolvidos na redução da inflamação, estresse oxidativo e apoptose no intestino (Zhang
et al. 2015a, b; Larussa et al. 2017). Os processos que levam à liberação do peptídeo
bioativo incluem a digestão enzimática in vivo no trato GI, tanto por enzimas humanas e
da microbiota, quanto pelo processamento de alimentos in vitro. Qualquer fonte de
proteína pode produzir peptídeos bioativos, sendo o leite o mais estudado. No entanto,
peptídeos bioativos de ovo, peixe, carne, algas ou soja também foram relatados
(Martínez-Augustin et al. 2014). Produtos derivados do leite já estão em uso clínico para o
tratamento de enterite crônica, como alimentos enterais à base de caseína que são
usados para o tratamento de CD e cuja eficácia pode ser devida, em parte, à presença do
fator de crescimento transformador de citocinas antiinflamatórias β (Richman e Rhodes
2013; Larussa et al. 2017).

827
O colostro é uma forma de leite produzida pelas glândulas mamárias dos mamíferos
imediatamente antes do parto. O colostro bovino é uma fonte rica em nutrientes,
anticorpos, peptídeos antimicrobianos (por exemplo, lactoferrina, lactoperoxidase) e
fatores de crescimento. Talukder et al. (2002, 2003) descobriram o transporte de
macromoléculas colostrais para o líquido cefalorraquidiano (LCR) via plasma em recém-
nascidos e bezerros jovens. Eles também encontraram as características do receptor de
lactoferrina no intestino bovino: maior atividade de ligação ao epitélio que recobre as
manchas de Peyer (Talukder et al. 2003). Talukder e Harada (2007) também observaram
que a lactoferrina bovina protege a diarreia induzida por lipopolissacarídeo (LPS)
modulando o óxido nítrico (NO) e PE 2 em camundongos. Além disso, a lactoferrina
melhora a inibição mediada por PE 2 do co-transporte de Na+-glicose em enterócitos
(Talukder et al. 2014). Além disso, as propriedades benéficas do colostro foram
demonstradas durante um estudo inicial com pacientes UC tratados por administração de
enema (Khan et al. 2002). Uma melhora na composição corporal, com uma diminuição no
percentual de gordura, foi obtida em pacientes com CD após a suplementação dietética
de soro de leite e proteína de soja (Machado et al. 2015). Considerando que a redução da
gordura corporal contribui para o controle da inflamação, essas estratégias nutricionais
podem ser úteis como tratamentos alternativos ou auxiliares na IBD. As informações
atualmente disponíveis indicam um potencial para peptídeos derivados de alimentos para
neutralizar a inflamação intestinal aguda e crônica. Estudos experimentais em modelos
animais avaliando AA isolados, como triptofano, glutamina, cisteína e arginina, oferecem
uma oferta promissora em CD (Coëffier et al. 2010).

5. Probióticos, prebióticos e simbióticos

Probióticos são “microrganismos vivos” que beneficiam o hospedeiro modulando a
imunidade mucosa e sistêmica e proporcionam equilíbrio nutricional e microbiano no trato
intestinal. Na verdade, a coevolução levou a uma relação simbiótica entre o hospedeiro e
os microrganismos e, assim, desenvolveu um sistema de sinalização bidirecional através
do revestimento intestinal que contém células imunológicas, como linfócitos e células
dendríticas. Mais de 400 espécies de bactérias foram identificadas do trato GI, incluindo
benéficas (por exemplo, Bifidobacterium e Lactobacillus) e patogênicas (por exemplo,
Enterobacteriaceae e Clostridium spp.) As bactérias benéficas usam fibras (prebióticos)
para fermentação e fornecem nutrientes indispensáveis para as células intestinais e o
anfitrião também. Esses nutrientes incluem aminoácidos como Arg, Cys e Gln e ácidos
graxos de cadeia curta (SCFA), como acetato, propionato e butirato (O’Sullivan et al.
828
2005). Esses SCFA estão sendo usados como fonte de energia metabólica basal (10-
30%) por diferentes células do hospedeiro, incluindo colonócitos e hepatócitos; 5% dos
SCFA são excretados nas fezes (O’Sullivan et al. 2005). Os SCFA são importantes para o
fígado regular a homeostase da glicose e a lipogênese. Colonócitos requerem butirato, a
parte mais importante e integral do metabolismo energético, enquanto acetato e
propionato são usados como substratos para lipogênese, gliconeogênese e síntese de
proteínas (Catinean et al. 2018). Além disso, as bactérias benéficas produzem vitaminas
do complexo K e B, ácidos biliares e neutralizam os carcinógenos dietéticos, como as
nitrosaminas. Eles também convertem pró-drogas em metabólitos ativos. A microbiota
intestinal indígena é conhecida como autóctone. Eles competem com bactérias
patogênicas (alóctones) por nutrientes e aderência ao revestimento da mucosa e
produzem diferentes tipos de antígenos, conhecidos como bacteriocinas. As bacteriocinas
têm o potencial de inibir o crescimento e a replicação de alóctones ou matá-los. Em
contraste, alóctone pode ser prejudicial ao produzir toxinas ou outros metabólitos
prejudiciais. Consequentemente, tanto autóctones quanto alóctones podem afetar a
homeostase gastrointestinal, bem como a fisiologia sistêmica do hospedeiro. No entanto,
os autóctones são essenciais para o hospedeiro proteger a mucosa GI e seu sistema
imunológico. Diferentes fatores como dieta, medicamentos e toxinas podem afetar a
abundância e a diversidade usuais da microbiota intestinal (microbioma), conhecida como
disbiose. A dieta inclui "prebiótico". Este último é um carboidrato alimentar não digerível,
metabolizado por microrganismos intestinais para seu crescimento e desenvolvimento.
Assim, a disbiose altera diretamente a produção de SCFA. O desenvolvimento adequado
e a manutenção da homeostase GI, incluindo a secreção de anticorpos no lúmen contra
antígenos nocivos ou alóctones, requerem certos tipos e cargas de microflora para
interação com o sistema imunológico da mucosa (Catinean et al. 2018). Por isso são
conhecidos como o órgão metabólico mais adaptável e renovável do corpo e seus efeitos
biológicos estão resumidos na Tabela 1.

Hoje em dia, uma variedade de probióticos, incluindo suas cepas, estão sendo usados
para apoiar a saúde gastrointestinal, como “comprimidos probióticos para mastigar”
produzidos e comercializados pela Chr. Hansen A/S, Dinamarca, contendo
Bifidobacterium animalis subsp. lactis. Além disso, bactérias probióticas, por exemplo,
Enterococcus faecium SF68, e leveduras, por exemplo, Saccharomyces boulardii,
também são usadas diretamente em alimentos, particularmente produtos lácteos
fermentados. As investigações sobre probióticos em relação ao seu uso medicinal levam à
determinação de novos gêneros e cepas com muitos benefícios à saúde, como isolado de
Lactobacillus plantarum (PCS20, PCS22, PCS25 e PCS26) de queijo esloveno com alto
829
antimicrobiano (Maragkoudakis et al. 2010) e imunomodulador (Bengmark 1998)
competências. A utilização de microrganismos benéficos foi considerada benéfica para a
saúde por meio de alterações na microbiota intestinal e, portanto, considera-se que
preparações de cultura microbiana simples ou misturadas são comumente utilizadas.
Assim, tem sido afirmado que os benefícios dos probióticos dependem dos tipos de cepas
probióticas (de Vrese e Schrezenmeir 2008; Bengmark 1998; Nissen et al. 2009). Embora
os benefícios dos probióticos na saúde intestinal e na diarreia sejam documentados, é
improvável que a dose de probióticos ou a duração de tais tratamentos não estejam
claramente definidas (Minelli e Benini 2008), enquanto a dose para o tratamento de uma
doença aguda por um probiótico específico pode ser inferior ou superior na ordem de dez
ou cem vezes ou mais em termos de unidades formadoras de colônias (UFC). Além disso,
os estudos clínicos não mostraram resultados conclusivos da relação entre cepas de
probióticos e tipos de infecções, como infecções gastrointestinais agudas ou crônicas e
doenças imunológicas ou inflamatórias (Minelli e Benini 2008). A concentração de
probióticos necessária para obter um efeito clínico é frequentemente cotada como 106
unidades formadoras de colônias (UFC) por mL no intestino delgado e ≥ 108 UFC por mL
no cólon. Na diarreia infecciosa aguda, postula-se que doses mais altas de probióticos
para ciclos curtos são mais eficazes do que doses mais baixas. Também foi sugerido que
as vantagens dos probióticos para a saúde só podem ser alcançadas se a cepa adequada
ou a seleção do produto e as diretrizes de dosagem forem seguidas em alimentos ou
medicamentos (Kalliomaki et al. 2010; Douglas e Sanders 2008). Além da importância e
da aplicação de probióticos para GI, foram demonstrados os benefícios no alívio dos
sintomas de alergias (Yao et al. 2010; Kalliomaki et al. 2010), infecções do trato
respiratório e urinário (Kaur et al. 2009), AIDS (Trois et al. 2008) e câncer (Kumar et al.
2010). Foi demonstrado que os efeitos dos probióticos dependem também das interações
entre os respectivos microrganismos e o sistema imunológico intestinal e da duração do
tratamento em doenças crônicas, como doenças alérgicas, inflamatórias e/ou
imunológicas. Além disso, foi revelado que os probióticos melhoram no alívio dos
sintomas associados à osteoporose, obesidade, fadiga, autismo e envelhecimento e na
redução dos riscos de diabetes tipo 2 (Douglas e Sanders 2008).

Tabela 1 Efeitos biológicos de bactérias probióticas

Modulação da resposta imune do hospedeiro
Produção aprimorada de anticorpos
Aumento da atividade celular natural killer

830
 Tabela 1 Efeitos biológicos de bactérias probióticas
Modulação do fenótipo e função das células dendríticas
Modulação da via NFkB e AP-1
Liberação alterada de citocinas
Indução de células-T regulatórias
Indução de PPAR-g
Modulação da apoptose
Inibição da atividade do proteassoma
Função de barreira epitelial aprimorada
Fosforilação aprimorada de proteínas impermeáveis
Regulação positiva da produção de muco
Glicosilação aprimorada de células epiteliais
Aumento da produção sIgA
Efeitos antimicrobianos
PH luminal diminuído
Estimulação da secreção de defensina
Secreção de peptídeos antimicrobianos
Inibição da invasão bacteriana patogênica
Bloqueio da adesão bacteriana às células epiteliais
Liberação de óxido nítrico

Para avaliar a utilidade dos probióticos, é essencial identificar os grupos-alvo específicos

de indivíduos com maior suscetibilidade específica aos efeitos potenciais dos probióticos.
Além disso, dependendo da evidência funcional de diferentes probióticos, o International
Life Sciences Institute (ILSI) categorizou os probióticos em quatro áreas de aplicação. As
áreas incluem (1) metabolismo, (2) distúrbios inflamatórios intestinais crônicos e
funcionais, (3) infecções e (4) alergia (Rijkers et al. 2010). Os principais objetivos do ILSI
eram substanciar o corpo atual de informações sobre os benefícios dos probióticos. O
ILSI também forneceu os prós e os contras, incluindo recomendações para projetar a
próxima geração de pesquisas probióticas.

As principais preparações probióticas atualmente no mercado pertencem a um grande

grupo de bactérias designadas como bactérias do ácido láctico (por exemplo,
Lactobacillus, Streptococcus, Bifidobacterium), que são constituintes importantes e
normais da microflora GI. Estes são apresentados na Tabela 2. No entanto, os estudos
também estão investigando os papéis probióticos potenciais de outros micróbios, como
levedura (Saccharomyces boulardii), que normalmente não são encontrados no trato
gastrointestinal. As cepas probióticas exercem seus efeitos benéficos por meio de uma
variedade de mecanismos (Cong et al. 2003) que são únicos para cada cepa (Tabela 2).
Se microorganismos vivos são necessários, ou mesmo se a administração oral é
831
necessária para benefício clínico, ainda é incerto e pode depender da cepa bacteriana em
particular. Por exemplo, vários estudos recentes em modelos animais demonstraram que
componentes bacterianos inviáveis podem ter efeitos benéficos.

Tabela 2 Probióticos usados em estudos experimentais

Lactobacilos Bifidobactérias Outros Fungos
Saccharomyces
L. acidophilus B. Bifidum Streptococcus thermophilus
cerevisiae
L. casei B. Infantis Enterococcus faecium Saccharomyces boulardii
L. delbrueckii subsp.
B. Longum Lactococcus lactis
Bulgaricus
Propionibacterium
L. reuteri B. Thermophilum
freudenreichii
L. brevis B. Adolescents Escherichia coli Nissle 1917
L. cellobiosus B. Lactis Bacillus clausii
L. curvatus B. Animalis Bacillus oligonitrophilis
L. fermentum B. Breve
L. plantarum
L. rhamnosus (GG)
L. salivarius
L. gasseri
L. johnsonii
L. helveticus
L. farciminis

Os mecanismos de ação probiótica são mal compreendidos (Oelschlaeger 2010). Os

probióticos podem atuar modulando o sistema imunológico do hospedeiro, afetando
outros microorganismos diretamente ou agindo sobre produtos microbianos, produtos do
hospedeiro ou componentes alimentares (Oelschlaeger 2010). A eficácia de um probiótico
depende de suas propriedades metabólicas, do conjunto de moléculas apresentadas em
sua superfície, dos componentes que secreta e das partes integrantes do microrganismo,
como seu DNA ou peptideoglicano (Oelschlaeger 2010). O DNA isolado do composto
probiótico VSL3 atenuou a colite, um efeito que dependia do receptor Toll-like (TLR) -9
(Rachmilewitz et al. 2004). Os TLRs compreendem uma família de receptores de
reconhecimento de padrões que funcionam na manutenção da homeostase intestinal,
reconhecendo e respondendo a produtos moleculares conservados de microrganismos
(Abreu et al. 2005). Outro estudo demonstrou que o DNA isolado de VSL3, mas não de E.
coli, inibiu a ativação do fator nuclear kB e a secreção de citocinas pró-inflamatórias (Jijon
et al. 2004). Além disso, os compostos probióticos podem nem mesmo ter que ser
tomados por via oral para ter benefício. Sheil et al. (2004) mostraram que a administração
832
subcutânea de Lactobacillus salivarius atenuou a colite e a produção de citocinas pró-
inflamatórias em um modelo de camundongo. Isso sugere que, no futuro, pode ser
possível usar componentes bacterianos probióticos purificados e não viáveis para o
tratamento de doenças gastrointestinais.

O termo prebiótico refere-se a carboidratos dietéticos que estimulam o crescimento de

bactérias intestinais ou probióticos quando administrados externamente. Um prebiótico é
um composto não digerível que, por meio de sua metabolização por microrganismos no
intestino, modula a composição e/ou atividade da microbiota intestinal, conferindo assim
um efeito fisiológico benéfico ao hospedeiro. Prebiótico é definido como “um ingrediente
fermentado seletivamente, ou uma fibra que permite alterações específicas, tanto na
composição e/ou atividade da microflora gastrointestinal, resultando em benefícios para o
bem-estar e saúde do hospedeiro” (de Vrese e Schrezenmeir 2008; Douglas e Sanders
2008).

Um agente prebiótico deve cumprir certos critérios, como não ser hidrolisado e absorvido
na primeira parte do trato gastrointestinal e é fermentado por um número limitado de
bactérias benéficas no cólon (por exemplo, Lactobacillus). Além disso, o prebiótico deve
ser capaz de estimular ou ativar metabolicamente o crescimento dessas bactérias
benéficas, a fim de transformar a microflora naquelas mais saudáveis. Os principais
efeitos dos prebióticos incluem a modulação da composição da microbiota intestinal,
produção do metabolismo energético, aumento da absorção de minerais, regulação da
função imunológica e melhora das funções de barreira intestinal. Outros efeitos mais
específicos dos prebióticos na saúde são indiretos, a saber, prevenção da diarreia ou
obstipação, modulação do metabolismo da flora intestinal, prevenção do câncer, efeitos
no metabolismo lipídico, estimulação da adsorção de minerais e propriedades
imunomoduladoras.

Os prebióticos formam um grupo de diversos ingredientes de carboidratos que são mal

compreendidos quanto à sua origem, perfis de fermentação e dosagens necessárias para
efeitos na saúde, embora forneçam valor nutracêutico e nutricional (Douglas e Sanders
2008). Fruto-oligossacarídeos (FOS), galacto oligossacarídeos (GOS), xilo-oligo
sacarídeos (XOS), lactulose, o carboidrato não digerível inulina, celulose, amidos
resistentes, hemiceluloses e pectinas são atualmente os prebióticos mais usados. Hoje,
apenas oligossacarídeos bifidogênicos não digeríveis (particularmente inulina, seu
produto de hidrólise oligo frutose e (trans) galacto oligossacarídeos) preenchem todos os
critérios para classificação prebiótica (de Vrese e Schrezenmeir 2008). Nos últimos anos,

833
foram relatadas tentativas bem-sucedidas de tornar a fórmula infantil mais semelhante ao
leite materno pela adição de fruto e (principalmente) galacto oligossacarídeos.

A soja e a lactose do leite de vaca são as principais fontes de GOS. Estes são incluídos
especialmente em alimentos diferentes. Probióticos e prebióticos compartilham papéis
únicos na nutrição humana, amplamente centrados na manipulação de populações ou
atividades da microbiota que colonizam o trato gastrointestinal humano (Douglas e
Sanders 2008).

O consumo regular de probióticos ou prebióticos tem implicações para a saúde que

incluem melhora da função imunológica, melhora da integridade do cólon, diminuição da
incidência e duração das infecções intestinais, resposta alérgica regulada para baixo e
melhora da digestão e eliminação (Douglas e Sanders 2008). Vale ressaltar que os seres
humanos e sua microbiota entérica evoluíram juntos para atingir um estado de tolerância
mútua. Há evidências crescentes de modelos animais e estudos humanos que sugerem
que a DII é o resultado de um mau funcionamento dessa relação mútua (Hedin et al.
2007). Probióticos e prebióticos, no entanto, foram investigados em ensaios clínicos como
tratamentos para IBD, com resultados conflitantes (Hedin et al. 2007). Embora haja
consenso sobre o valor dos probióticos e prebióticos, sua influência na saúde intestinal
em termos da doença de Crohn é menos convincente (Hedin et al. 2007). Isso pode ser
atribuído a variações nas metodologias; diferenças na gama de tratamentos probióticos,
prebióticos e de combinação (simbióticos) testados; e a variabilidade nos assuntos de
teste usados, como diferentes grupos de pacientes (Hedin et al. 2007). Os “simbióticos”
são combinações sinérgicas de pró e prebióticos (de Vrese e Schrezenmeir 2008). A
Figura 3 representa as interações entre nutracêuticos e microbioma intestinal e outras
doenças associadas (adotado de Larussa et al. 2017).

834
 Fig. 3 (a, b) O papel dos nutracêuticos na microbiota intestinal.
Microbiota intestinal e outras doenças associadas

6. Observações Finais e Orientações Futuras

A fisiologia do sistema digestivo e de seu microbioma depende muito dos tipos de
alimentos ingeridos. Drogas farmacêuticas, especialmente antibióticos, alteram
significativamente o microbioma intestinal, que é muito crítico para as funções GI normais
e podem ser restauradas com o uso de nutracêuticos, incluindo probióticos, prebióticos e
fitoquímicos (fitoestrógenos e polifenóis). Desenvolvimentos recentes na pesquisa
nutracêutica, incluindo a elucidação do mecanismo de ação, são muito promissores, o que
ajudará muito na compreensão de novos nutracêuticos para controlar diferentes
condições GI. A futura pesquisa nutricional básica e aplicada abrirá o caminho. Nesse
sentido, os ensaios in vitro e clínicos são muito importantes para elucidar o modo de ação
em parceria com as doses adequadas para diferentes animais, incluindo humanos.
Portanto, cientistas e profissionais de saúde devem trabalhar juntos para melhorar a
compreensão científica dos nutracêuticos para diferentes condições gastrointestinais para
melhorar a qualidade de vida. A revolução nutracêutica nos levará a uma nova era de
medicina e saúde para animais e humanos.

835
Referências
Abreu MT, Fukata M, Arditi M (2005) TLR signaling in the gut in health and disease. J Immunol 174:4453–4460
Adelaja AO, Schilling BJ (1999) Nutraceutical: blurring the line between food and drugs in the twenty-first century. Mag
Food Farm Resour Issues 14:35–40
Ananthakrishnan AN, Khalili H, Konijeti GG et al (2014) Long-term intake of dietary fat and risk of ulcerative colitis and
Crohn’s disease. Gut 63:776–784
Arita M, Yoshida M, Hong S et al (2005) Resolvin E1, an endogenous lipid mediator derived from omega-3
eicosapentaenoic acid, protects against 2, 4,6-trinitrobenzene sulfonic acid-induced colitis. Proc Natl Acad Sci USA
102:7671–7676
Aslan A, Triadafilopoulos G (1992) Fish oil fatty acid supplementation in active ulcerative colitis: a double-blind,
placebo-controlled, crossover study. Am J Gastroenterol 87:432–437
Beheshtipour H, Mortazavian AM, Mohammadi R et al (2013) Supplementationof Spirulina platensis and Chlorella
vulgaris algae into probiotic fermented milks. Compr Rev Food Sci Food Saf 12:144–154
Bengmark S (1998) Ecological control of the gastrointestinal tract. The role of probiotic flora. Gut 42:2–7
Bhowmik D, Dubey J, Mehra S (2009) Probiotic efficiency of spirulina platensis – stimulating growth of lactic acid
bacteria. World J Dairy Food Sci 4:160163
Biedermann L, Mwinyi J, Scharl M et al (2013) Bilberry ingestion improves disease activity in mild to moderate
ulcerative colitis – an open pilot study. J Crohns Colitis 7:271–279
Blanck HM, Bowman BA, Cooper GR et al (2003) Biomarkers of nutritional exposure and nutritional status laboratory
issues: use of nutritional biomarkers 1. Environ Health 133:888S–894S
Bilal I, Chowdhury A, Davidson J, Whitehead S (2014) Phytoestrogens and prevention of breast cancer: the
contentious debate. World J Clin Oncol 5:705–712. https://doi.org/10.5306/wjco.v5.i4.705
Buchanan RL, Baker RC, Charlton AJ et al (2011) Pet food safety: a shared concern. Br J Nutr 106(Suppl. 1):S78–S84
Bundy R, Walker AF, Middleton RW et al (2004) Turmeric extract may improve irritable bowel syndrome symptomology
in otherwise healthy adults: a pilot study. J Altern Complement 10:1015–1018
Calder PC (2008) Polyunsaturated fatty acids, inflammatory processes and inflammatory bowel diseases. Mol Nutr
Food Res 52:885–897
Carter RA, Bauer JE, Kersey JH et al (2014) Awareness and evaluation of natural pet food products in the United
States. J Am Vet Med Assoc 245:1241–1248
Cassidy A, Minihane AM (2017) The role of metabolism (and the microbiome) in defining the clinical efficacy of dietary
flavonoids. Am J Clin Nutr 05:10–22. https://doi.org/10.3945/ajcn.116.136051
Catinean A, Neag MA, Muntean DM, Bocsan IC, Buzoianu AD (2018) An overview on the interplay between
nutraceuticals and gut microbiota. PeerJ 6:e4465. https://doi.org/10.7717/peerj.4465
Coëffier M, Marion-Letellier R, Déchelotte P (2010) Potential for amino acids supplementation during inflammatory
bowel diseases. Inflamm Bowel Dis 16:518–524
Cong Y, Konrad A, Iqbal N et al (2003) Probiotics and immune regulation of inflammatory bowel diseases. Curr Drug
Targets Inflamm Allergy 2:145–154
Connell DW, McLachlan R (1972) Natural pungent compounds: examination of gingerols, shogaols, paradols and
related compounds by thin-layer and gas chromatography. J Chromatogr 67:29–35
de Silva PS, Luben R, Shrestha SS et al (2014) Dietary arachidonic and oleic acid intake in ulcerative colitis etiology: a
prospective cohort study using 7-day food diaries. Eur J Gastroenterol Hepatol 26:11–18
de Vrese M, Schrezenmeir J (2008) Probiotics, prebiotics, and synbiotics. Adv Biochem Eng Biotechnol 111:1–66
Del Pinto R, Pietropaoli D, Chandar AK et al (2015) Association between inflammatory bowel disease and vitamin D
deficiency: a systematic review and meta-analysis. Inflamm Bowel Dis 21:2708–2717
Douglas LC, Sanders ME (2008) Probiotics and prebiotics in dietetics practice. J Am Diet Assoc 108:510–521
Eckburg PB, Bik EM, Bernstein CN et al (2005) Diversity of the human intestinal microbial flora. Science 308:1635–
1638
Escott-Stump E, Mahan LK (2000) Krause’s food, nutrition and diet therapy, 10th edn. WB Saunders Company,
Philadelphia, pp 553–559
Etxeberria U, Arias N, Boqué N et al (2015) Reshaping faecal gut microbiota composition by the intake of trans-
resveratrol and quercetin in high-fat sucrose diet-fed rats. J Nutr Biochem 26:651–660
Finamore A, Palmery M, Bensehaila S et al (2017) Antioxidant, immunomodulating, and microbial-modulating activities
of the sustainable and ecofriendly spirulina. Oxidative Med Cell Longev 2017:3247528.
https://doi.org/10.1155/2017/3247528
Foster BC, Arnason JT, Briggs CJ (2005) Natural health products and drug disposition. Annu Rev Pharmacol Toxicol
45:203–226
Fournomiti M, Kimbaris A, Mantzourani I et al (2015) Antimicrobial activity of essential oils of cultivated oregano
(Origanum vulgare), sage (Salvia officinalis), and thyme (Thymus vulgaris) against clinical isolates of Escherichia coli,
Klebsiella oxytoca, and Klebsiella pneumoniae. Microb Ecol Health Dis 1:1–7
Franke AA, Lai JF, Halm BM et al (2014) Absorption, distribution, metabolism, and excretion of isoflavonoids after soy
intake. Arch Biochem Biophys 559:24–28

836
 Gaya P, Medina M, Sánchez-Jiménez A, Landete J (2016) Phytoestrogen metabolism by adult human gut microbiota.
Molecules 21:1034. https://doi.org/10.3390/molecules21081034
Ghayur MN, Gilani AH (2005) Ginger lowers blood pressure through blockade of voltage-dependent calcium channels.
J Cardiovasc Pharmacol 45:74–80
Gow AG, Else R, Evans H et al (2011) Hypovitaminosis D in dogs with inflammatory bowel disease and
hypoalbuminaemia. J Small Anim Pract 52(8):411–418
Guadamuro L, Dohrmann AB, Tebbe CC et al (2017) Bacterial com-munities and metabolic activity of faecal cultures
from equol producer and non- producer menopausal women under treatment with soy isoflavones. BMC Microbiol 17:93.
https://doi.org/10.1186/s12866-017-1001-y
Guo Y, Zhang Y, Huang W, Selwyn FP, Klaassen CD (2016) Dose response effect of berberine on bile acid profile and
gut microbiota in mice. BMC Complement Altern Med 16:394. https://doi.org/10.1186/s12906-016-1367-7
Gupta I, Parihar A, Malhotra P et al (1997) Effects of Boswellia serrata gum resin in patients with ulcerative colitis. Eur
J Med Res 2:37–43
Hanai H, Iida T, Takeuchi K et al (2006) Curcumin maintenance therapy for ulcerative colitis: randomized, multicenter,
double-blind, placebo-controlled trial. Clin Gastroenterol Hepatol 4(12):1502–1506
Hasler CM (2000) The changing face of functional foods. J Am Coll Nutr 19:499S–506S
Hedin C, Whelan K, Lindsay JO (2007) Evidence for the use of probiotics and prebiotics in inflammatory bowel
disease: a review of clinical trials. Proc Nutr Soc 66:307–315
Hillier K, Jewell R, Dorrell L et al (1991) Incorporation of fatty acids from fish oil and olive oil into colonic mucosal lipids
and effects upon eicosanoid synthesis in inflammatory bowel disease. Gut 32:1151–1155
Hoensch HP, Oertel R (2015) The value of flavonoids for the human nutrition: short review and perspectives. Clin Nutr
Exp 3:8–14
Holt PR, Katz S, Kirshoff R (2005) Curcumin therapy in inflammatory bowel disease: a pilot study. Dig Dis Sci
50:2191–2193
Holtmeier W, Zeuzem S, Preiss J et al (2011) Randomized, placebocontrolled, double-blind trial of Boswellia serrata in
maintaining remission of Crohn’s disease: good safety profile but lack of efficacy. Inflamm Bowel Dis 17:573–582
Hsu CH, Cheng AL (2007) Clinical studies with curcumin. Adv Exp Med Biol 595:471–480
Iranshahi M, Rezaee R, Parhiz H, Roohbakhsh A, Soltani F (2015) Protective effects of flavonoids against microbes
and toxins: the cases of hesperidin and hesperetin. Life Sci 137:125–132. https://doi.org/10.1016/j.lfs.2015.07.014
Jarosová B, Javrek J, Adamovský O, Hilscherová K (2015) Phytoestrogens and mycoestrogens in surface waters—
their sources, occurrence, and potential contribution to estrogenic activity. Environ Int 81:26–44.
https://doi.org/10.1016/j.envint.2015.03.019
Jijon H, Backer J, Diaz H et al (2004) DNA from probiotic bacteria modulates murine and human epithelial and immune
function. Gastroenterology 126:1358–1373
Jørgensen SP, Agnholt J, Glerup H, Lyhne S, Villadsen GE, Hvas CL, Bartels LE, Kelsen J, Christensen LA, Dahlerup
JF (2010) Clinical trial: vitamin D3 treatment in Crohn’s disease – a randomized double-blind placebo-controlled study.
Aliment Pharmacol Ther 32:377–383. https://doi.org/10.1111/j.1365-2036.2010.04355.x
Kaliora AC, Stathopoulou MG, Triantafillidis JK et al (2007) Alterations in the function of circulating mononuclear cells
derived from patients with Crohn’s disease treated with mastic. World J Gastroenterol 13:6031–6036
Kalliomaki M, Antoine JM, Herz U et al (2010) Guidance for substantiating the evidence for beneficial effects of
probiotics: prevention and management of allergic diseases by probiotics. J Nutr 140:713S–721S
Kaur C, Kapoor HC (2001) Antioxidants in fruits and vegetables-the millennium’s health. Int J Food Sci Technol
36:703–725
Kaur IP, Kuhad A, Garg A et al (2009) Probiotics: delineation of prophylactic and therapeutic benefits. J Med Food
12:219–235
Khan Z, Macdonald C, Wicks AC et al (2002) Use of the ‘nutriceutical’, bovine colostrum, for the treatment of distal
colitis: results from an initial study. Aliment Pharmacol Ther 16:1917–1922
Kumar M, Kumar A, Nagpal R et al (2010) Cancer-preventing attributes of probiotics: an update. Int J Food Sci Nutr
61(5):473–496
Kuwabara A, Tanaka K, Tsugawa N et al (2009) High prevalence of vitamin K and D deficiency and decreased BMD in
inflammatory bowel disease. Osteoporos Int 20:935–942
Lacy BE, Lee RD (2005) Irritable bowel syndrome: a syndrome in evolution. J Clin Gastroenterol 39:S230–S242
Lang A, Salomon N, Wu JC et al (2015) Curcumin in combination with mesalamine induces remission in patients with
mild-to- moderate ulcerative colitis in a randomized controlled trial. Clin Gastroenterol Hepatol 13:1444–9.e1. PMID:
25724700. https://doi.org/10.1016/j.cgh.2015.02.019
Langhorst J, Varnhagen I, Schneider SB et al (2013) Randomised clinical trial: a herbal preparation of myrrh,
chamomile and coffee charcoal compared with mesalazine in maintaining remission in ulcerative colitis--a double-blind,
double-dummy study. Aliment Pharmacol Ther 38:490–500
Langmead L, Feakins RM, Goldthorpe S et al (2004) Randomized, double-blind, placebo-controlled trial of oral aloe
vera gel for active ulcerative colitis. Aliment Pharmacol Ther 19:739–747
Laparra JM, Sanz Y (2010) Interactions of gut microbiota with functional food components and nutraceuticals.
Pharmacol Res 61:219–225

837
 Larussa T, Imeneo M, Luzza F (2017) Potential role of nutraceutical compounds in inflammatory bowel disease. World
J Gastroenterol 23(14):2483–2492. https://doi.org/10.3748/wjg.v23.i14.2483
Lee HC, Jenner AM, Low CS et al (2006) Effect of tea phenolics and their aromatic fecal bacterial metabolites on
intestinal microbiota. Res Microbiol 157:876–884
Li Y, Yao J, Han C et al (2016) Quercetin, inflammation and immunity. Nutrients 8:1–14
Lopez-Romero JC, González-Ríos H, Borges A et al (2015) Antibacterial effects and mode of action of selected
essential oils components against Escherichia coli and Staphylococcus aureus. Evid-Based Complement Alternat Med
2015:795435. https://doi.org/10.1155/2015/795435
Machado JF, Oya V, Coy CS et al (2015) Whey and soy protein supplements changes body composition in patients
with Crohn’s disease undergoing azathioprine and anti-TNF-alpha therapy. Nutr Hosp 31:1603–1610
Manach C, Scalbert A, Morand C et al (2004) Polyphenols: food sources and bioavailability. Am J Clin Nutr 79:727–747
Maragkoudakis PA, Chingwaru W, Gradisnik L et al (2010) Lactic acid bacteria efficiently protect human and animal
intestinal epithelial and immune cells from enteric virus infection. Int J Food Microbiol 141 (1):S91–S97
Marion-Letellier R, Savoye G, Beck PL et al (2013) Polyunsaturated fatty acids in inflammatory bowel diseases: a
reappraisal of effects and therapeutic approaches. Inflamm Bowel Dis 19:650–661
Martínez-Augustin O, Rivero-Gutiérrez B, Mascaraque C et al (2014) Food derived bioactive peptides and intestinal
barrier function. Int J Mol Sci 15:22857–22873
Micklefield GH, Redeker Y, Meister V et al (1989) Effects of ginger on gastroduodenal motility. Int J Clin Pharmacol
Ther 37:341–346
Minelli EB, Benini A (2008) Relationship between number of bacteria and their probiotic effects. Microb Ecol Health Dis
20:1651–2235
Mosele JI, Macià A, Motilva MJ (2015) Metabolic and microbial modulation of the large intestine ecosystem by non-
absorbed diet phenolic compounds: a review. Molecules 20:17429–17468
Mouli VP, Ananthakrishnan AN (2014) Review article: vitamin D and inflammatory bowel diseases. Aliment Pharmacol
Ther 39:125–136
Muhammad NG, Anwarul HG (2005) Pharmacological basis for the medicinal use of ginger in gastrointestinal
disorders. Dig Dis Sci 50 (10):1889–1897
Nakajima S, Iijima H, Egawa S et al (2011) Association of vitamin K deficiency with bone metabolism and clinical
disease activity in inflammatory bowel disease. Nutrition 27:1023–1028
Nicoli MC, Anese M, Parpinel M (1999) Influence of processing on the antioxidant properties of fruits and vegetables.
Trends Food Sci Technol 10:94–100
Nissen L, Chingwaru W, Sgorbati B et al (2009) Gut health promoting activity of new putative probiotic/protective
Lactobacillus spp. strains: a functional study in the small intestinal cell model. Int J Food Microbiol 135:288–294
O’Sullivan GC, Kelly P, O’Halloran S et al (2005) An emerging therapy. Curr Pharm Design 11:3–10
Oelschlaeger TA (2010) Mechanisms of probiotic actions – a review. Int J Med Microbiol 300:57–62
Overall J, Bonney SA, Wilson M et al (2017) Metabolic effects of berries with structurally diverse anthocyanins. Int J
Mol Sci 18:422. https://doi.org/10.3390/ijms18020422
Oz HS, Chen T, De Villiers WJS (2013) Green tea polyphenols and sulfasalazine have parallel anti-inflammatory
properties in colitis models. Front Immunol 4:132. https://doi.org/10.3389/fimmu.2013.00132
Ozdal T, Sela DA, Xiao J et al (2016) The reciprocal interactions between polyphenols and gut microbiota and effects
on bioaccessibility. Nutrients 8:78. https://doi.org/10.3390/nu8020078
Peterson J, Dwyer J, Adlercreutz H et al (2011) Dietary lignans: physiology and potential for cardiovascular disease
risk reduction. Nutr Rev 68:571–603
Rachmilewitz D, Katakura K, Karmeli F et al (2004) Toll-like receptor 9 signaling mediates the anti-inflammatory effects
of probiotics in murine experimental colitis. Gastroenterology 126:520–528
Ren W, Duan J, Yin J et al (2014) Dietary l-glutamine supplementation modulates microbial community and activates
innate immunity in the mouse intestine. Amino Acids 46:2403–2413
Richman E, Rhodes JM (2013) Review article: evidence-based dietary advice for patients with inflammatory bowel
disease. Aliment Pharmacol Ther 38:1156–1171
Rijkers GT, Bengmark S, Enck P et al (2010) Guidance for substantiating the evidence for beneficial effects of
probiotics: current status and recommendations for future research. J Nutr 140:671S–676S
Roth S, Spalinger MR, Gottier C et al (2016) Bilberry-derived anthocyanins modulate cytokine expression in the
intestine of patients with ulcerative colitis. PLoS One 11:e0154817
Sandborn WJ, Targan SR, Byers VS et al (2013) Andrographis paniculata extract (HMPL-004) for active ulcerative
colitis. Am J Gastroenterol 108:90–98
Saxena A, Kaur K, Hegde S et al (2014) Dietary agents and phytochemicals in the prevention and treatment of
experimental ulcerative colitis. J Tradit Complement Med 4:203–217
Sheil B, McCarthy J, O’Mahony L et al (2004) Is the mucosal route of administration essential for probiotic function?
Subcutaneous administration is associated with attenuation of murine colitis and arthritis. Gut 53:694–700
Singla V, Pratap Mouli V et al (2014) Induction with NCB-02 (curcumin) enema for mild-to-moderate distal ulcerative
colitis – a randomized, placebo-controlled, pilot study. J Crohns Colitis 8:208–214
Sirotkin AV, Harrath AH (2014) Phytoestrogens and their effects. Eur J Pharmacol 741:230–236

838
 Stephen B (2010) The biochemistry, chemistry and physiology of the isoflavones in soybeans and their food products.
Lymphat Res Biol 8 (1):89–98. https://doi.org/10.1089/lrb.2009.0030
Suskind DL, Wahbeh G, Burpee T et al (2013) Tolerability of curcumin in pediatric inflammatory bowel disease: a
forced-dose titration study. J Pediatr Gastroenterol Nutr 56:277–279
Talukder MJR, Harada E (2007) Bovine lactoferrin protects lipopolysaccharide-induced diarrhea modulating nitric oxide
and prostaglandin E2 in mice. Can J Physiol Pharmacol 85(2):200–208
Talukder MJ, Takeuchi T, Harada E (2002) Transport of colostral macromolecules into the cerebrospinal fluid via
plasma in newborn calves. J Dairy Sci 85(3):514–524
Talukder MJ, Takeuchi T, Harada E (2003) Characteristics of lactoferrin receptor in bovine intestine: higher binding
activity to the epithelium overlying Peyer’s patches. J Vet Med A 50(3):123–131
Talukder JR, Kekuda R, Saha P et al (2008a) Functional characterization, localization and molecular identification of
rabbit intestinal N-amino acid transporter. Am J Phys 294(6):G1301–G1310
Talukder JR, Kekuda R, Saha P et al (2008b) Identification and characterization of rabbit small intestinal villus cell
brush-border membrane Na-glutamine co-transporter. Am J Phys 295(1):G7–G15
Talukder JR, Griffin A, Jaima A et al (2014) Lactoferrin ameliorates prostaglandin E2-mediated inhibition of Na+
glucose cotransport in enterocytes. Can J Physiol Pharmacol 92(1):9–20
Talukder JR, Antara Jaima, Cameron Hill, et al. (2018) Capsaicin requires calcium to inhibit SNAT2 mediated
methionine transport, causes apoptosis and DNA damage in enterocytes. J Funct Foods. Under Review. MS# JFF-D-17-
01076
Tang T, Targan SR, Li ZS et al (2011) Randomised clinical trial: herbal extract HMPL-004 in active ulcerative colitis – a
double-blind comparison with sustained release mesalazine. Aliment Pharmacol Ther 33:194–202
Tjonneland A, Overvad K, Bergmann MM et al (2009) Linoleic acid, a dietary n-6 polyunsaturated fatty acid, and the
etiology of ulcerative colitis: a nested case-control study within a European prospective cohort study. Gut 58:1606–1611
Trois L, Cardoso EM, Miura E (2008) Use of probiotics in HIV-infected children: a randomized double-blind controlled
study. J Trop Pediatr 54:19–24
Trumbo P, Schlicker S, Yates AA et al (2002) Dietary reference intakes for energy, carbohydrate, fiber, fat, fatty acids,
cholesterol, protein and amino acids. J Am Diet Assoc 102(11):1621–1630
Uchiyama K, Nakamura M, Odahara S et al (2010) N-3 polyunsaturated fatty acid diet therapy for patients with
inflammatory bowel disease. Inflamm Bowel Dis 16:1696–1707
Van Duynhoven J, Vaughan EE, Van Dorsten F et al (2013) Interactions of black tea polyphenols with human gut
microbiota: implications for gut and cardiovascular health. Am J Clin Nutr 98(6):1631S–1641S
Vecchi Brumatti L, Marcuzzi A, Tricarico PM et al (2014) Curcumin and inflammatory bowel disease: potential and
limits of innovative treatments. Molecules 19:21127–21153
Vitale DC, Piazza C, Melilli B et al (2013) Isoflavones: estrogenic activity, biological effect and bioavailability. Eur J
Drug Metab Pharmacokinet 38:15–25
Wang B, Wu G, Zhou Z et al (2014) Glutamine and intestinal barrier function. Amino Acids 47:2143–2154
Wood PJ, Braaten JT, Scott FW et al (1994) Effect of dose and modification of viscous properties of oat gum on
plasma glucose and insulin following an oral glucose load. Br J Nutr 72:731–743
Xu J, Liu X, Pan W et al (2017) Berberine protects against diet-induced obesity through regulating metabolic
endotoxemia and gut hormone levels. Mol Med Rep 15:2765–2787
Yao TC, Chang CJ, Hsu YH et al (2010) Probiotics for allergic diseases: realities and myths. Pediatr. Allerg Immunol
21(6):900–919
Zhang H, Hu CA, Kovacs-Nolan J et al (2015a) Bioactive dietary peptides and amino acids in inflammatory bowel
disease. Amino Acids 47:2127–2141
Zhang X, Zhao Y, Xu J et al (2015b) Modulation of gut microbiota by berberine and metformin during the treatment of
high-fat dietinduced obesity in rats. Sci Rep 5:14405. https://doi.org/10.1038/srep14405
Zoran D (2003) Nutritional management of gastrointestinal disease. Clin Tech Small Anim Pract 18(4):211–217
Zou Y, Xiang Q, Wang J et al (2016) Oregano essential oil improves intestinal morphology and expression of tight
junction proteins associated with modulation of selected intestinal bacteria and immune status in a pig model. Bio Med
Res Int:5436738. https://doi.org/10.1155/2016/5436738

839
 Nutracêuticos em distúrbios reprodutivos
Moges Woldemeskel

Resumo
Os distúrbios reprodutivos ou anormalidades que ocorrem nos tratos reprodutivos
masculinos e femininos são induzidos por agentes infecciosos e não infecciosos e várias
outras condições. No mundo contemporâneo, o uso comum de produtos químicos
sintéticos em cosméticos e outros itens de uso doméstico cotidiano, sem dúvida, contribui
para as causas não infecciosas de anomalias reprodutivas. Tanto em animais quanto em
humanos, os medicamentos modernos são usados para tratar distúrbios reprodutivos. No
entanto, os efeitos colaterais indesejados que se seguem muitas vezes representam
problemas e preocupações graves, consequentemente, aumentando o uso global de
produtos naturais, incluindo nutracêuticos para tratar anormalidades reprodutivas. Neste
capítulo, o uso de nutracêuticos no tratamento e manejo de anormalidades do aparelho
reprodutor feminino e masculino é brevemente destacado.

Palavras-chave: Nutracêuticos · Nutracêuticos veterinários · Distúrbios reprodutivos

M. Woldemeskel. Tifton Veterinary Diagnostic and Investigational Laboratory, Department of Pathology,

College of Veterinary Medicine, University of Georgia, Tifton, GA, USA e-mail: mwoldem@uga.edu

1. Introdução
Desde a antiguidade, os produtos vegetais e seus extratos brutos são usados na medicina
tradicional para o tratamento de várias doenças até o desenvolvimento de drogas
sintéticas (Patel e Patel 2017). Apesar do desenvolvimento de drogas sintéticas
modernas, as plantas medicinais ainda servem como terapêuticas convencionais e são
centrais na medicina tradicional (Akhtar et al. 2017) em muitas partes do mundo. Mais de
40% dos medicamentos prescritos no mundo eram derivados principalmente de fontes
vegetais (Patel e Patel 2017). Embora a medicina moderna esteja na vanguarda no
tratamento de doenças, os remédios à base de plantas na medicina alternativa ainda são
muito usados em todo o mundo, principalmente nos países em desenvolvimento (Fadus et
al. 2017). Hoje em dia, as plantas medicinais desempenham um papel fundamental nos
cuidados de saúde, pois mais de 80% da população mundial depende da medicina
tradicional para os seus cuidados de saúde primários (Patel e Patel 2017). Isso ocorre
principalmente porque os produtos naturais são eficazes e relativamente não tóxicos e
têm doses corretivas muito abaixo de seus níveis tóxicos (Fadus et al. 2017).
840
Nutracêuticos são produtos naturais derivados de várias fontes alimentares que fornecem
benefícios para a saúde, além de valores nutricionais (Kalra 2003; Larussa et al. 2017).
Nutracêuticos podem ser substâncias como vitaminas, minerais, aminoácidos, ácidos
graxos, ervas e produtos botânicos ou substâncias derivadas de outras fontes tomadas
como suplementos dietéticos, incluindo piruvato, sulfato de condroitina, precursores de
hormônios esteróides, etc. (Chauhan et al. 2013).

Os produtos naturais ou nutracêuticos demonstraram provocar efeitos

antienvelhecimento, anticancerígenos e outros efeitos benéficos para a saúde. Um alvo
importante dos efeitos dos produtos naturais pode ser a regulação da expressão de micro
RNA que resulta na morte celular ou previne o envelhecimento, diabetes e doenças
cardiovasculares e outras. Os nutracêuticos também têm sido propostos para exercer
seus efeitos sobre as células-tronco cancerosas, interagindo com a expressão de micro
RNA (McCubrey et al. 2017).

Vários nutracêuticos têm sido usados há séculos para curar diferentes tipos de doenças
em humanos e animais, incluindo doenças que afetam o sistema reprodutor masculino e
feminino. Este capítulo apresenta um breve relato de alguns nutracêuticos usados no
tratamento de doenças reprodutivas em homens e mulheres.

2. Nutracêuticos em anormalidades reprodutivas femininas

Distúrbios causados por microrganismos, agentes físicos e outras etiologias são
conhecidos por afetar o sistema reprodutor feminino. Porém, devido à poluição ambiental,
ao uso de produtos químicos sintéticos em cosméticos e outros itens de uso doméstico no
dia a dia, e outros fatores de risco, atualmente a neoplasia (câncer) é a principal doença
que afeta o trato reprodutivo em mulheres e também em animais de companhia. Várias
formas de terapêutica do câncer estão disponíveis hoje em dia. No entanto, todas as
opções terapêuticas para o câncer atualmente disponíveis são caras e nenhuma delas é
segura. Pelo contrário, os medicamentos tradicionais derivados de plantas ou
nutracêuticos são relativamente seguros e são usados no tratamento de doenças do
aparelho reprodutor feminino. Alguns nutracêuticos eficazes no tratamento e gestão de
doenças reprodutivas femininas, principalmente doenças cancerígenas, são brevemente
destacados a seguir.

2.1 Efeitos dos nutracêuticos no câncer de mama

O câncer de mama é a segunda principal causa de morte em mulheres em todo o mundo,

e mais de um milhão de mulheres são diagnosticadas com tumor de mama (Sayeed e
841
Ameen 2015; Mandal et al. 2017) com aproximadamente 458.000 mortes a cada ano
(Sayeed e Ameen 2015). É também o segundo câncer mais frequente em mulheres nos
EUA com cerca de 246.660 novos casos de câncer de mama e 40.450 mortes
relacionadas ao câncer de mama estimada em 2016 (Siegel et al. 2016). Citando vários
autores, Mandal et al. (2017) relataram que a inflamação crônica é sugerida para
contribuir para o desenvolvimento e progressão dos cânceres de mama. Portanto, os
agentes que inibem a inflamação crônica podem ser eficazes na prevenção e no
tratamento do câncer de mama. Vários produtos naturais, fitoquímicos e agentes
dietéticos com propriedades antiinflamatórias têm se mostrado promissores na prevenção
e tratamento do câncer de mama (Mandal et al. 2017).

Subtipos distintos de tumor de mama respondem de maneira diferente ao tratamento, o

que tornava o câncer de mama extremamente intratável. Atualmente, a ressecção
cirúrgica, quimioterapia adjuvante, radioterapia e terapia hormonal representam as
principais opções de tratamento para o câncer de mama em estágio inicial. No entanto, o
desenvolvimento de resistência aos medicamentos e efeitos colaterais importantes
enfraqueceram a eficácia dessas terapias. Além disso, o câncer de mama triplo negativo
não responde à terapia hormonal. Devido à pouca eficácia das terapias modernas, a
prevenção da ocorrência de câncer de mama parece ser a melhor estratégia para a qual a
abordagem baseada na dieta e nutrição tem sido considerada um método eficaz. Um
grupo de produtos naturais dietéticos mostrou um papel potencial na prevenção e
tratamento de cânceres (Li et al. 2017).

Uma revisão recente resumiu o papel potencial dos produtos naturais da dieta e seus
principais componentes bioativos na prevenção e tratamento do câncer de mama. Vários
estudos epidemiológicos e experimentais sugeriram a correlação inversa entre o consumo
de vegetais e frutas e a incidência de câncer de mama. Muitos produtos naturais da dieta,
como soja, romã, mangostão, frutas cítricas, maçã, uva, manga, vegetais crucíferos,
gengibre, alho, cominho preto, macrofungos comestíveis e cereais podem afetar o
desenvolvimento e progressão do câncer de mama. Estudos experimentais indicaram que
seus efeitos anticâncer de mama envolvem vários mecanismos de ação, como a
regulação negativa da expressão e atividade do receptor de estrogênio α; inibir a
proliferação, migração, metástase e angiogênese de células de tumor de mama; induzir
apoptose e parada do ciclo celular; e sensibilização de células tumorais de mama para
radioterapia e quimioterapia. Estudos epidemiológicos sugeriram que o alto consumo de
alguns produtos naturais da dieta pode reduzir a recorrência e aumentar a taxa de
sobrevivência de pacientes com câncer de mama. Portanto, o uso de substâncias

842
dietéticas naturais pode ser uma abordagem prática para a prevenção e o tratamento do
câncer de mama (Li et al. 2017). Um desses compostos amplamente conhecido é o beta
sitosterol, um nutriente derivado de planta com propriedades anticâncer contra câncer de
mama, câncer de próstata, câncer de cólon, câncer de pulmão, câncer de estômago,
câncer de ovário e leucemia (Sayeed e Ameen 2015). Outros produtos naturais e extratos
de plantas com efeitos semelhantes no câncer de mama são fornecidos abaixo.

A berberina é um alcalóide isoquinolina natural extraído de plantas como Berberis (B)

aquifolium, B. vulgaris, B. aristata e Tinospora cordifolia (Imanshahidi e Hosseinzadeh
2008). Os efeitos antitumorais da berberina em várias células cancerosas humanas foram
relatados. Seu efeito foi avaliado no câncer de mama triplo negativo (TNBC), um câncer
definido pela expressão negativa do receptor de estrogênio, receptor de progesterona e
receptor de fator de crescimento epidérmico humano 2. Devido à falta de alvos
moleculares padrão, as terapias direcionadas viáveis atuais não são útil para pacientes
com TNBC. O TNBC é insensível ao receptor anti-hormônio (HR) e às drogas
direcionadas ao HER2 e tem maior incidência do que os pacientes HR e HER2-positivos.
A berberina inibiu a proliferação e migração de células tumorais e induziu a apoptose
celular. Ativa a apoptose mediada por caspase-9 / citocromo c para inibir o crescimento de
células de câncer de mama TNBC in vitro e in vivo. Portanto, a berberina é um agente de
tratamento potencial para TNBC (Zhao et al. 2017). Além disso, foi relatado que a
berberina pode se ligar à proteína estimulada por vasodilatador superexpressada em
células de câncer de mama e suprimir a proliferação e o crescimento do tumor (McCubrey
et al. 2017).

O resveratrol, um polifenol encontrado em várias plantas, também é relatado como um

dos agentes eficazes contra o câncer de mama. Experimentalmente, inibiu a proliferação
de células-tronco cancerosas isoladas de linhagens celulares de câncer de mama. O
resveratrol reduziu a presença de mamoesferas em linhagens de células de câncer de
mama, inibiu a formação de tumor nas mamoesferas em camundongos e também induziu
a autofagia nas mamoesferas (Fu et al. 2014).

Muitos estudos também relataram que as isoflavonas de soja têm um papel protetor
contra o câncer de mama, embora alguns efeitos adversos também tenham sido
relatados. Se as isoflavonas de soja promovem ou inibem o crescimento do câncer de
mama parece ser dependente da dose (Xie et al. 2013); assim, a dosagem e a segurança
a longo prazo das isoflavonas de soja precisam ser investigadas antes de serem
recomendadas como suplemento para pacientes com câncer de mama (Li et al. 2017).

843
Foi relatado que a curcumina, uma substância do açafrão, exerce efeitos antitumorais no
desenvolvimento do câncer de mama. É demonstrado que tem efeitos na expressão do
transportador de drogas em células de câncer de mama com propriedades de células-
tronco cancerígenas. A curcumina pode aumentar os efeitos tumoricidas da mitomicina-C
e também pode aumentar a sensibilidade das linhas de células de câncer de mama a
vários medicamentos quimioterápicos, como cisplatina, doxorrubicina e paclitaxel. A
combinação de curcumina e mitomicina-C em conjunto preveniu a capacidade de
formação de esferas de linhas de células de câncer de mama (Zhou et al. 2015).

Li et al. (2017) citando vários estudos indicaram que frutas que normalmente contêm alto
teor de polifenóis têm grande atividade antioxidante e podem ajudar a reduzir o risco de
câncer. Frutas, como romã, mangostão e frutas cítricas, têm mostrado atividades
inibitórias nas células do câncer de mama. Por exemplo, a romã inibiu o crescimento e a
metástase do câncer de mama por meio de vários mecanismos, como a inibição do
crescimento das células do câncer de mama induzindo a parada do ciclo celular,
induzindo a apoptose, exercendo efeitos antiproliferativos na tumorigênese mamária de
rato e diminuindo significativamente a viabilidade celular de linhas celulares de câncer de
mama. O suco de romã e seus componentes bloquearam os processos metastáticos das
células do câncer de mama e a proliferação de linhagens de células do câncer de mama
in vitro, indicando um papel potencial da romã na prevenção de câncer de mama
responsivo ao estrogênio. O óleo de semente de romã inteiro e polifenóis de suco de
romã fermentado inibiram a formação de lesões tumorais em uma cultura de órgãos da
glândula mamária murina, sugerindo uma propriedade quimiopreventiva e potencial
terapêutico adjuvante da romã. Óleo de semente de romã e concentrado de suco
fermentado suprimiram lesões pré-neoplásicas da glândula mamária ex vivo em um
modelo de cultura de órgãos mamários de camundongo, e a administração oral de
concentrado de suco de romã reduziu o volume e peso de tumores xenoenxertados em
camundongos nus atímicos fêmeas. A emulsão de romã contendo a maioria dos
fitoquímicos bioativos presentes na fruta inteira exerceu uma atividade quimiopreventiva
significativa contra a tumorigênese mamária iniciada por DMBA em ratas. Reduziu a
incidência, carga total e peso médio de tumores mamários com uma inibição
concomitante da proliferação de células intratumorais e indução de apoptose (Mehta e
Lansky 2004; Banerjee et al. 2012; Li et al. 2017; Mandal et al. 2017).

Vários estudos in vitro e in vivo relataram atividades anticâncer de mama do mangostão

(Garcinia mangostana). O extrato metanólico bruto do pericarpo do mangostão inibe a
proliferação e induz a apoptose na linhagem de células de câncer de mama; os fenólicos

844
do pericarpo da fruta produziram citotoxicidades contra linhas de células de câncer de
mama humano; e o tratamento com alfa-mangostina aumentou significativamente a taxa
de sobrevivência de camundongos com tumores mamários e suprimiu muito o volume do
tumor e as metástases dos linfonodos. Além disso, estudos relatam que frutas cítricas
como laranja, limão, toranja, pomelo e lima têm um impacto na saúde geral de um
paciente, incluindo a redução do risco de desenvolver vários tipos de câncer. Uma série
de estudos apontou uma associação inversa entre a ingestão de frutas cítricas e o risco
de câncer de mama. Por exemplo, polissacarídeos de cascas de hallabong cítricas
coreanas inibiram a angiogênese e extratos de frutas cítricas Citrus hassaku Hort. ex
Tanaka, também conhecido como phalsak, e extrato de limão cítrico induziram apoptose
em linhas de células-tronco de câncer de mama. Além disso, extratos de maçã, uva,
manga, morango, pêssego e outras frutas cítricas são relatados como tendo efeito sobre
as células do câncer de mama in vivo e in vitro através da indução da apoptose, inibição
da proliferação celular, prevenção do crescimento de células do câncer de mama,
diminuição do volume do tumor e ativação do estresse oxidativo nas células cancerosas.
Geralmente, a ingestão de frutas é benéfica para a prevenção e tratamento do câncer de
mama. Romã, mangostão, maçã, frutas cítricas, uva e manga apresentando os efeitos
mais promissores. A ação anticâncer de mama dessas frutas pode ser atribuída à
presença de componentes bioativos, como elagitaninos na romã e mangostina no
mangostão (Li et al. 2017).

Os vegetais também têm efeito sobre o câncer de mama. Em estudos experimentais,

vários vegetais, especialmente vegetais crucíferos, mostraram efeito inibitório nas células
do câncer de mama. Por exemplo, a ingestão de brócolis, couve-flor, agrião e couve de
Bruxelas foi inversamente associada ao risco de câncer de mama (Bradlow 2008;
Thomson et al. 2016). Indol-3-carbinol encontrado em vegetais de Brassica mostrou ação
anticâncer de mama, pois poderia interagir diretamente com o receptor de estrogênio e
inibir sua atividade ou por meio de ações independentes de estrogênio, como bloqueio da
progressão do ciclo celular, metástase e indução de apoptose (Li et al. 2017). A ingestão
diária de suco de cenoura fresco também pode beneficiar pacientes com câncer de mama
(Butalla et al. 2012). Geralmente, isotiocianatos e indol-3-carbinol e seu metabólito 3,30-
diindolilmetano encontrados em vegetais crucíferos têm mostrado um papel potencial na
prevenção e tratamento do câncer de mama. Os mecanismos subjacentes incluem
principalmente a regulação negativa do receptor de estrogênio alfa e a repressão da
sinalização do receptor de estrogênio, induzindo apoptose e parada do ciclo celular e
inibindo a metástase de células de câncer de mama (Li et al. 2017).

845
O consumo de certas especiarias também é conhecido por ter efeito anticâncer de mama.
Vários estudos sugeriram que gengibre, alho e cominho preto mostraram efeitos
promissores contra o câncer de mama entre várias especiarias. Componentes bioativos
em especiarias, como gingeróis e shogaols no gengibre, e substâncias
organossulfuradas, incluindo dialil dissulfeto, dialil trissulfeto, S-alil mercaptocisteína e
alicina no alho têm atividades anticâncer de mama e ajudam a reduzir os riscos de
desenvolver câncer de mama. O extrato metanólico de gengibre (Zingiber officinale) exibiu
efeito inibitório na proliferação de células cancerosas em linhagens de células de câncer
de mama. A propriedade anticâncer de mama do gengibre pode ser atribuída aos seus
constituintes bioativos, como gingeróis e shogaols (Lee et al. 2008; Joo et al. 2016). Um
extrato de CO2 supercrítico de cominho preto (Nigella sativa) exibiu efeito pró-apoptótico e
antimetastático em linhagens de células de câncer de mama in vitro. A timoquinona, um
importante componente bioativo isolado das sementes de Nigella sativa, mostrou potentes
atividades quimiopreventivas e quimioterápicas e efeito antiproliferativo no câncer de
mama (Schneider-Stock et al. 2014; Li et al. 2017).

Outras especiarias, como capsaicina, piperina isolada de pimenta preta (Piper nigrum),
açafrão (Crocus sativus), cravo (Syzygium aromaticum), wasabi (Wasabia japonica),
alecrim (Rosmarinus officinalis) e coentro são relatados como tendo atividades em câncer
de mama em modelos experimentais in vitro e in vivo. No entanto, deve-se notar que o
papel da capsaicina no câncer é controverso. Alguns estudos indicaram que a capsaicina
em si era mutagênica e promove a formação de tumor e pode aumentar o risco de câncer
em humanos (Li et al. 2017), garantindo estudos mais detalhados para determinar seu
real impacto e benefício no câncer de mama.

Vários tipos de macrofungos comestíveis têm mostrado efeito inibitório no câncer de

mama. A ingestão de cogumelos pode estar inversamente associada ao risco de câncer
de mama. Uma associação inversa significativa entre o consumo de cogumelos e a
incidência de câncer de mama foi encontrada em mulheres pós-menopáusicas na Coreia.
Vários mecanismos, como inibir a proliferação, induzir apoptose e suprimir a angiogênese,
foram encontrados para explicar os efeitos anticâncer de mama de macrofungos
comestíveis. Os efeitos anticâncer de mama dos macrofungos comestíveis são atribuídos
principalmente aos polissacarídeos com diferentes pesos moleculares presentes nos
fungos. Vários estudos também indicaram uma associação inversa entre a ingestão de
fibra de cereais e o risco de câncer de mama. Por exemplo, o sorgo suprimiu o
crescimento do tumor, induziu a parada do ciclo celular e inibiu a metástase em
camundongos nus com xenoenxertos de câncer de mama, a cevada jovem (a grama da

846
planta de cevada) exibiu atividades antiproliferativas e pró-apoptóticas significativas em
modelo de tumor de mama de rato e em humanos células de câncer de mama in vitro e
farinha de trigo (Triticum aestivum) inibiram o crescimento de células de câncer de mama
e induziu apoptose in vitro. Sorgo, cevada e trigo mostraram o potencial de inibir o
crescimento de células de câncer de mama, principalmente por meio da indução da
apoptose e da parada do ciclo celular e da inibição da metástase (Hong et al. 2008; Li et
al. 2014, 2017).

Além de seu efeito direto sobre o câncer, os produtos naturais dietéticos têm efeito
sinérgico com as terapias anticâncer. Isso é muito importante porque a quimioterapia e a
radioterapia frequentemente usadas hoje em dia na terapia do câncer exibem certos
efeitos adversos tóxicos, e a resistência aos medicamentos é uma causa comum de falha
da quimioterapia e recorrência da doença. Alguns produtos dietéticos e seus
componentes bioativos mostraram efeitos sinérgicos com a quimioterapia ou radioterapia,
aumentando seu efeito terapêutico ou reduzindo os efeitos colaterais adversos (Li et al.
2017).

Certas vitaminas e minerais também são benéficos na redução do risco de desenvolver

vários tipos de câncer, incluindo o câncer de mama. Por exemplo, estudos experimentais
sugerem um efeito protetor das vitaminas B no risco de câncer de mama. Um grande
estudo prospectivo também sugeriu que a ingestão de piridoxina e tiamina dietética,
suplementar e total estava associada à diminuição do risco de câncer de mama e tinha
um potencial efeito protetor contra o câncer de mama em mulheres de meia-idade (Egnell
et al. 2017). Além disso, Tsuji et al. (2015) citando vários estudos experimentais em
modelos animais indicaram que a deficiência de selênio prejudica a resposta imune à
infecção, câncer e outros estímulos. Estes incluíram a redução na resposta das células-T
CD4+ em camundongos deficientes em selênio desafiados com um peptídeo/adjuvante e
aumento do crescimento e disseminação do tumor em um modelo de camundongo de
câncer de mama, indicando que o selênio pode desempenhar um papel importante na
prevenção do desenvolvimento do câncer de mama.

2.2 – Efeitos dos nutracêuticos no câncer cervical

Uma série de doenças pode afetar o colo do útero nas mulheres. No entanto, o câncer é a
principal doença que afeta o colo do útero e está entre as principais causas de
mortalidade em mulheres em todo o mundo. Vários produtos naturais (nutracêuticos) são
considerados eficazes no tratamento e / ou redução do risco de câncer cervical em
mulheres. Por exemplo, McCubrey et al. (2017) citando vários estudos indicaram que a
berberina e a curcumina podem ser agentes promissores para o tratamento do câncer
847
cervical. Em um estudo sobre linhagens de células cancerosas, foi relatado que o Aloe
vera sozinho ou seu uso simultâneo com cisplatina exibiu efeitos antineoplásicos nos
cânceres de mama e cervical, induzindo apoptose e modulação da expressão de
moléculas efetoras. Estes resultados significam que o Aloe vera pode ser um agente
antineoplásico eficaz para inibir o crescimento de células cancerosas e aumentar a
eficácia terapêutica de drogas convencionais como a cisplatina, promovendo o
desenvolvimento de agentes terapêuticos derivados de plantas para novas estratégias de
tratamento do câncer (Hussain et al. 2015). Devido ao efeito de vários nutracêuticos na
inibição do crescimento tumoral e na redução do risco de desenvolvimento de câncer em
geral, o consumo de produtos vegetais naturais e outros nutracêuticos, sem dúvida,
ajudará a minimizar o risco de desenvolver câncer cervical.

2.3 Efeito dos nutracêuticos nas doenças do útero

Diferentes tipos de doenças, incluindo doenças infecciosas e neoplasias, podem afetar o

útero nas mulheres. Uma série de terapias medicamentosas modernas têm sido usadas
para tratar doenças uterinas. No entanto, os nutracêuticos, conforme descrito
anteriormente, estão ganhando cada vez mais preferência devido aos efeitos colaterais
que se seguem ao tratamento com medicamentos modernos e à eficácia bem
documentada dos nutracêuticos no combate a várias infecções e doenças. Os
nutracêuticos que promovem a saúde geral de indivíduos com efeitos antiinflamatórios e
anticâncer descritos anteriormente certamente têm impacto no tratamento e prevenção de
doenças uterinas. Por exemplo, foi relatado que a berberina inibe a proliferação de células
de leiomioma uterino humano (Wu et al. 2015). Alguns nutracêuticos têm um efeito
sinérgico, funcionam em conjunto com vários medicamentos modernos e podem
aumentar o efeito dos medicamentos modernos nas células cancerosas. A berberina e a
metformina induziram o receptor de lipoproteína estimulado pela lipólise, que é um
componente das junções estreitas tricelulares nas células cancerosas do endométrio e
suprimiu a migração e invasão celular (McCubrey et al. 2017).

A endometriose é uma doença ginecológica comum que afeta mulheres e outras fêmeas
primatas. As opções de tratamento para a endometriose incluem cirurgia e medicamentos,
principalmente analgésicos, como agentes antiinflamatórios não esteroidais ou terapia
hormonal, incluindo agonistas do hormônio liberador de gonadotrofina e andrógenos.
Embora esses tratamentos possam melhorar alguns sintomas, não há cura para a
endometriose. Testes foram conduzidos para determinar os efeitos de alguns produtos
naturais na endometriose. Foi relatado que o extrato de flor de Pueraria suprimiu a
adesão de células endometrióticas humanas às células mesoteliais humanas e inibiu
848
significativamente a migração de células endometrióticas. Também suprimiu
significativamente a formação de lesão endometriótica em um modelo de camundongo,
sugerindo que a flor de Pueraria é um agente anti endometriótico para a inibição da
adesão de células endometrióticas e migração de células endometrióticas e
estabelecimento de lesões semelhantes à endometriose e tem um uso potencial no
tratamento e prevenção da endometriose (Kim et al. 2017).

2.4 Efeito dos nutracêuticos no câncer de ovário

O câncer de ovário é a doença maligna ginecológica mais letal nos países desenvolvidos.
Isso se deve à falta de sintomas específicos que dificultam o diagnóstico precoce e à alta
taxa de recidiva após o tratamento com cirurgia radical e quimioterapia (Áyen et al. 2018).
Vários estudos relataram efeitos de diferentes nutracêuticos no câncer de ovário. A
berberina suprimiu a proliferação de células de câncer de ovário e, em conjunto com a
cisplatina, induziu a morte de células de câncer de ovário e aumentou os efeitos da
cisplatina na indução da parada do ciclo celular em células de carcinoma de ovário
(McCubrey et al. 2017). Resveratrol também foi encontrado para matar as células-tronco
do câncer de ovário. Outros estudos relataram que os extratos de melão amargo 42 contêm
compostos que inibem o crescimento de muitos tipos de câncer, incluindo o crescimento
do câncer de ovário e melhoram a resistência a compostos quimioterápicos comuns (Yung
et al. 2016). Extratos de melão amargo inibiram o crescimento do câncer de ovário por
meio da ativação de várias cascatas de sinalização. Alphamomorcharin, uma proteína
inativadora de ribossomo presente em extratos de melão amargo, pode ser em parte
responsável pelos efeitos anticâncer (McCubrey et al. 2017). O cálcio dietético foi
significativamente associado a um risco reduzido de câncer de ovário, e o aumento da
ingestão de cálcio na dieta pode estar inversamente correlacionado com o risco de câncer
de ovário (Song et al. 2017). Resumidamente, um grande número de produtos naturais
que têm efeito significativo na saúde geral de animais e humanos são benéficos para
minimizar o risco de desenvolver câncer de ovário e no manejo de doenças clínicas.

2.5 Efeitos dos nutracêuticos em outras doenças do sistema reprodutor feminino

Em diferentes partes do mundo, produtos naturais, principalmente de origem vegetal, são

usados no tratamento e gerenciamento de várias condições e sintomas associados ao
sistema reprodutor feminino. Por exemplo, na Índia, a casca de Adenium obesum43 é
usada como agente abortivo e, na comunidade étnica de Omã, é usada para o tratamento
de doenças venéreas, entre muitas outras (Akhtar et al. 2017).

42 Melão de São Caetano

43 Rosa do deserto
849
Alguns nutracêuticos também são usados no tratamento de várias doenças associadas ao
trato reprodutivo em mulheres. Por exemplo, Agnus castus também foi usado no
tratamento de muitas doenças femininas, incluindo distúrbios menstruais, como
amenorreia e dismenorreia, distúrbio disfórico pré-menstrual, insuficiência do corpo lúteo,
hiperprolactinemia, infertilidade, acne, lactação interrompida, dor mamária cíclica,
mastalgia cíclica e condições inflamatórias. Foi ainda indicado que Agnus castus e
magnólia, combinados com isoflavonas de soja mais lactobacilos, foram usados de forma
eficaz e segura no tratamento de sintomas vasomotores em mulheres na pós-menopausa,
principalmente com sono de má qualidade. Esses tratamentos alternativos são preferidos
à terapia de reposição hormonal devido aos efeitos colaterais adversos, baixa adesão e
medo de aumentar o risco de câncer ou ganho de peso associado à terapia hormonal (De
Franciscis et al. 2017).

Muitos estudos indicaram que a suplementação combinada com selênio e vitamina E

administrada, algumas semanas antes do parto, por injeção ou por via oral, pode reduzir
significativamente a incidência de retenção de placenta em bovinos. Também foi indicado
que o selênio como selenito de sódio injetado 3 semanas antes do parto, com ou sem
vitamina E oral, reduziu a incidência de metrite de 83 para 57%. Além disso, uma injeção
de 50 mg de selênio (selenito de sódio) 3 semanas antes do parto reduziu a incidência de
ovários císticos de 47 para 19% (Hemingway 2003).

Nutracêuticos, como alho, que são eficazes contra bactérias (Zardast et al. 2016) e outros
produtos vegetais, incluindo Balanites aegyptiaca e Capparis erythrocarpos conhecidos
por serem eficazes contra fungos (Anywar et al. 2014) podem ajudar no manejo e
tratamento de infecções bacterianas e micóticas do trato reprodutivo.

3. Nutracêuticos em Anormalidades/Doenças Reprodutivas Masculinas

Anormalidades no sistema reprodutor masculino podem ser induzidas por organismos
infecciosos, exposição a toxinas ambientais e estilo de vida do indivíduo, entre outros. Os
distúrbios reprodutivos masculinos, como disfunção sexual, infertilidade, criptorquidia,
hipospadia44 e câncer testicular são doenças de grande preocupação atualmente (Bonde
2010). Entre muitas anormalidades e doenças do sistema reprodutor masculino, o câncer
de próstata é o principal problema. A hiperplasia benigna da próstata também afeta um
grande número de homens com mais de 50 anos de idade. Foi relatado que o padrão
alimentar não saudável foi associado ao aumento do risco de câncer de próstata,
enquanto um padrão alimentar saudável foi associado à diminuição do risco de câncer de
44 Condição em que a abertura do pênis fica na parte de baixo, não na ponta.
850
próstata (Bagheri et al. 2018). Esta seção destacará o uso de alguns nutracêuticos em
distúrbios e doenças da próstata.

3.1 Efeitos dos nutracêuticos nas doenças da glândula prostática

A dieta saudável baseada em vegetais e estilos de vida são relatados como

desempenhando um papel importante na redução dos riscos de desenvolvimento de
doenças da próstata e câncer em homens. Uma série de testes foram feitos para
examinar o efeito de plantas nutritivas e derivados de plantas no câncer de próstata. De
acordo com a Organização Mundial de Saúde, um terço de todas as mortes por câncer
são evitáveis por meio de um aumento do consumo de compostos naturais capazes de
modular as principais cascatas de sinalização molecular que, em última instância, inibem
a proliferação de células cancerosas e induzem a apoptose. Vários fitoquímicos dietéticos,
incluindo curcumina, ácido ursólico, epigalocatequina-3-galato, resveratrol, sulforafano e
6-shogaol, mostraram efeitos quimiopreventivos potenciais in vitro e in vivo em modelos
animais ou em estudos clínicos sobre vários cânceres, incluindo câncer de próstata. A
combinação de ácido ursólico, curcumina e resveratrol administrados a camundongos
modelo de aloenxerto de câncer de próstata por meio da dieta, isoladamente ou em
combinação, produziu efeitos sinérgicos no tamanho e peso do tumor, indicando que
combinações sinérgicas de compostos naturais podem ser importantes para intervenções
terapêuticas contra o câncer (Lodi et al. 2017). A curcumina demonstrou ter alguns efeitos
nas vias de sinalização implicadas no câncer de próstata. Tem efeito sobre os fibroblastos
associados ao câncer, que são importantes na regulação da transição epitelial para
mesenquimal em células tumorais e na indução de características de células-tronco
(McCubrey et al. 2017).

Outros compostos derivados de plantas, como o beta sitosterol, são relatados como tendo
propriedades anticâncer para o câncer de próstata, entre muitos outros (Sayeed e Ameen
2015). A berberina também diminuiu o crescimento do câncer de próstata e a formação de
testosterona celular. Ele suprimiu a migração e invasão de células de câncer de próstata e
diminuiu a expressão de certos genes mesenquimais, como proteína morfogenética
óssea-7, fator de diferenciação de crescimento nodal e SNAIL, normalmente associados a
menor sobrevida de pacientes com câncer de próstata. Além disso, a berberina inibiu a
expressão do fator-1 alfa indutível por hipóxia e do fator de crescimento endotelial
vascular em células de câncer de próstata e aumentou sua radiossensibilidade in vitro e
in vivo. A berberina também tem como alvo a sinalização do receptor do fator de
crescimento epidérmico para suprimir a proliferação de células de câncer de próstata in
vitro e mostrou aumentar a indução de apoptose (McCubrey et al. 2017).
851
Outras plantas, como a fruta da romã, vêm ganhando ampla reputação como suplemento
dietético, bem como alimento funcional, devido às evidências científicas emergentes
sobre os benefícios potenciais à saúde, incluindo prevenção e tratamento da disfunção
erétil em homens, entre muitos outros efeitos. Romã contém fitoquímicos, incluindo
flavonóides (antocianinas e catequinas), flavonóis (caempferol e quercetina), flavonas
(apigenina e luteolina), ácidos graxos conjugados, taninos hidrolisáveis e compostos
relacionados, que são considerados responsáveis por várias atividades biológicas e
farmacológicas, incluindo efeitos preventivos e terapêuticos do câncer contra muitos tipos
de câncer, incluindo câncer de próstata (Mandal et al. 2017).

Além do câncer de próstata, a hiperplasia benigna da próstata costuma afetar a maioria

dos homens com mais de 50 anos. Vários medicamentos modernos são prescritos para a
hiperplasia benigna da próstata. A cura para a hiperplasia benigna da próstata sem efeitos
colaterais ainda não está disponível. Devido aos efeitos adversos dos medicamentos, é
desejável desenvolver medicamentos fitoterápicos eficazes e de segurança de longo
prazo para inibir o progresso da hiperplasia benigna da próstata (Chung et al. 2016). A
semente de abóbora é usada há muito tempo para tratar distúrbios de micção e melhora
substancialmente os sintomas do trato urinário inferior, associados à hiperplasia benigna
da próstata. O alívio dos sintomas observados é acompanhado por uma melhora
clinicamente significativa na qualidade de vida relacionada ao Índice Internacional de
Sintomas da Próstata (IPSS) (Vahlensieck et al. 2015). Outro estudo mostrou que o alho
pode ter efeitos supressores na hiperplasia benigna da próstata. Sua administração
diminuiu a proporção relativa do peso da próstata e suprimiu o nível de expressão de
mRNA do receptor de andrógeno, os níveis séricos de diidro testosterona e o crescimento
do tecido prostático em ratos induzidos por hiperplasia prostática benigna. A
administração de alho evitou o progresso da hiperplasia benigna da próstata regulando as
respostas inflamatórias através da diminuição dos níveis de proteínas inflamatórias e
apoptose, que estarão relacionadas às propriedades antioxidantes do alho e seus
componentes, sugerindo que o alho tem um grande potencial como um tratamento para
hiperplasia benigna da próstata (Chung et al. 2016).

Geralmente, muitos nutracêuticos com propriedades antibacterianas e antifúngicas

conhecidas, como alho (Zardast et al. 2016) e espécies de plantas nutracêuticas
antifúngicas e antibacterianas potentes, como Balanites aegyptiaca e Capparis
erythrocarpos (Anywar et al. 2014) terão potencial para tratar bactérias e fungos de
doenças reprodutivas induzidas em humanos e animais.

852
4. Observações finais e orientações futuras
Distúrbios reprodutivos em homens e mulheres, incluindo infertilidade, inflamação
associada a infecções, câncer e muitas outras anormalidades estão entre os problemas
comuns em humanos e animais. A poluição ambiental devido a imensos
desenvolvimentos industriais, uso de pesticidas na agricultura moderna com fins lucrativos
e produtos químicos em vários usos domésticos em humanos e animais têm contribuído
imensamente para distúrbios reprodutivos, principalmente em países industrializados e
em desenvolvimento. Atualmente, os medicamentos modernos são rotineiramente
prescritos para controlar e tratar anomalias reprodutivas e outras doenças. No entanto, a
ocorrência comum de efeitos colaterais dos tratamentos médicos modernos tem levado os
pacientes a recorrerem ao uso de medicina tradicional e alternativa, principalmente
nutracêuticos, para prevenir ou minimizar a incidência de anomalias reprodutivas e para
tratar doenças clínicas. Como resultado, o uso de produtos naturais, incluindo
nutracêuticos, para combater distúrbios reprodutivos aumentou. Resultados
encorajadores apoiados por empreendimentos de pesquisa e ensaios clínicos estão
inspirando mais esperança no uso futuro de nutracêuticos para o tratamento de várias
doenças reprodutivas em animais e humanos.

Referências
Akhtar MS, Hossain MA, Said SA (2017) Isolation and characterization of antimicrobial compound from the stem-bark
of the traditionally used medicinal plant, Adenium obesum. J Tradit Complement Med 7 (2017):296e300
Anywar G, Oryem-Origa H, Kamatenesi-Mugisha M (2014) Antibacterial and antifungal properties of some wild
nutraceutical plant species from Nebbi District, Uganda. Br J Pharm Res 4 (14):1753–1761
Áyen Á, Jiménez Martínez Y, Marchal JA et al (2018) Recent progress in gene therapy for ovarian cancer. Int J Mol Sci
19(7):E1930. https://doi.org/10.3390/ijms19071930
Bagheri A, Nachvak SM, RezaeiMet al (2018) Dietary patterns and risk of prostate cancer: a factor analysis study in a
sample of Iranian men. Health Promot Perspect 8(2):133–138
Banerjee N, Talcott S, Safe S et al (2012) Cytotoxicity of pomegranate polyphenolics in breast cancer cells in vitro and
vivo: potential role of miRNA-27a and miRNA-155 in cell survival and inflammation. Breast Cancer Res Treat 136:21–34
Bonde JP (2010) Male reproductive organs are at risk from environmental Hazards. A review. Asian J Androl 12:152–
156
Bradlow HL (2008) Indole-3-carbinol as a chemoprotective agent in breast and prostate cancer. In Vivo 22:441–445
Butalla AC, Crane TE, Patil B et al (2012) Effects of a carrot juice intervention on plasma carotenoids, oxidative stress,
and inflammation in overweight breast cancer survivors. Nutr Cancer 64:331–341
Chauhan B, Kumar G, Kalam N et al (2013) Current concepts and prospects of herbal nutraceutical: a review. J Adv
Pharm Technol Res 4:4–8
Chung KS, Shin SJ, Lee NY et al (2016) Anti-proliferation effects of garlic (Allium sativum L.) on the progression of
benign prostatic hyperplasia. Phytother Res 30(7):1197–1203
De Franciscis P, Grauso F, Luisi A et al (2017) Adding Agnus Castus and Magnolia to soy isoflavones relieves sleep
disturbances besides postmenopausal vasomotor symptoms long-term safety and effectiveness. Nutrients 9:129. https://
doi.org/10.3390/nu9020129
Egnell M, Fassier P, Lécuyer L et al (2017) B-Vitamin intake from diet and supplements and breast cancer risk in
middle-aged women: results from the prospective NutriNet-Santé cohort. Nutrients 9:488.
https://doi.org/10.3390/nu9050488
Fadus MC, Lau C, Bikhchandani J et al (2017) Curcumin: an age-old anti-inflammatory and anti-neoplastic agent. J
Tradit Complement Med 7(2017):339e346
Fu Y, Chang H, Peng X et al (2014) Resveratrol inhibits breast cancer stem-like cells and induces autophagy via
suppressing Wnt/β-catenin signaling pathway. PLoS One 9:e102535. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0102535

853
 Hemingway RG (2003) The influences of dietary intakes and supplementation with selenium and vitamin-E on
reproduction diseases and reproductive efficiency in cattle and sheep. Vet Res Commun 27 (2):159–174
Hong SA, Kim K, Nam SJ et al (2008) A case-control study on the dietary intake of mushrooms and breast cancer risk
among Korean women. Int J Cancer 122:919–923
Hussain A, Sharma C, Khan S et al (2015) Aloe vera inhibits proliferation of human breast and cervical cancer cells
and acts synergistically with cisplatin. Asian Pac J Cancer Prev 16(7):2939–2946
Imanshahidi M, Hosseinzadeh H (2008) Pharmacological and therapeutic effects of Berberis vulgaris and its active
constituent, berberine. Phytother Res 22(8):999–1012
Joo JH, Hong SS, Cho YR et al (2016) 10-Gingerol inhibits proliferation and invasion of MDA-MB-231 breast cancer
cells through suppression of Akt and p38(MAPK) activity. Oncol Rep 35:779–784
Kalra EK (2003) Nutraceutical-definition and introduction. AAPS PharmSci 5:E25. https://doi.org/10.1208/ps050325
Kim JH, Woo J-H, Kim HM et al (2017) Anti-endometriotic effects of Pueraria flower extract in human endometriotic
cells and mice. Nutrients 9:212. https://doi.org/10.3390/nu9030212
Larussa T, Imeneo M, Luzza F (2017) Potential role of nutraceutical compounds in inflammatory bowel disease. World
J Gastroenterol 23(14):2483–2492
Lee HS, Seo EY, Kang NE et al (2008) (6)-Gingerol inhibits metastasis of MDA-MB-231 human breast cancer cells. J
Nutr Biochem 19:313–319
Li JY, Zou L, ChenWet al (2014) Dietary mushroom intake may reduce the risk of breast cancer: Evidence from a
meta-analysis of observational studies. PLoS One 9:e93437
Li Y, Li S, Meng X et al (2017) Dietary natural products for prevention and treatment of breast cancer. Nutrients 9:728.
https://doi.org/10.3390/nu9070728
Lodi A, Saha A, Lu X et al (2017) Combinatorial treatment with natural compounds in prostate cancer inhibits prostate
tumor growth and leads to key modulations of cancer cell metabolism. NPJ Precis Oncol 1:18.
https://doi.org/10.1038/s41698-017-0024-z
Mandal A, Bhatia D, Bishayee A (2017) Anti-inflammatory mechanism involved in pomegranate-mediated prevention of
breast cancer: the role of NF-кB and Nrf2 signaling pathways. Nutrients 9:436. B and Nrf2 signaling pathways. Nutrients 9:436. https://doi.org/10.3390/nu9050436
McCubrey JA, Lertpiriyapong K, Steelman LS et al (2017) Effects of resveratrol, curcumin, berberine and other
nutraceuticals on aging, cancer development, cancer stem cells and microRNAs. Aging 9 (6):1477–1536
Mehta R, Lansky EP (2004) Breast cancer chemopreventive properties of pomegranate (Punica granatum) fruit
extracts in a mouse mammary organ culture. Eur J Cancer Prev 13:345–348
Patel K, Patel DK (2017) Medicinal importance, pharmacological activities, and analytical aspects of hispidulin: a
concise report. J Trad Complem Med 7(2017):360e366
Sayeed B, Ameen SS (2015) Beta-sitosterol: a promising but orphan nutraceutical to fight against cancer. Nutr Cancer
67(8):1214–1220
Schneider-Stock R, Fakhoury IH, Zaki AM et al (2014) Thymoquinone: fifty years of success in the battle against
cancer models. Drug Discov Today 19:18–30
Siegel RL, Miller KD, Jemal A (2016) Cancer statistics, 2016. CA Cancer J Clin 66:7–30
Song X, Li Z, Ji X et al (2017) Review: calcium intake and the risk of ovarian cancer: a meta-analysis. Nutrients 9:679.
https://doi.org/10.3390/nu9070679
Thomson CA, Ho E, Strom MB (2016) Chemopreventive properties of 3,30-diindolylmethane in breast cancer:
evidence from experimental and human studies. Nutr Rev 74:432–443
Tsuji PA, Carlson BA, Anderson CB et al (2015) Dietary selenium levels affect selenoprotein expression and support
the interferonand IL-6 immune response pathways in mice. Nutrients 7:6529–6549. https://doi.org/10.3390/nu7085297
Vahlensieck W, Theurer C, Pfitzer E et al (2015) Effects of pumpkin seed in men with lower urinary tract symptoms due
to benign prostatic hyperplasia in the one-year, randomized, placebocontrolled GRANU study. Urol Int 94(3):286–295
Wu HL, Chuang TY, Al-Hendy A et al (2015) Berberine inhibits the proliferation of human uterine leiomyoma cells. Fertil
Steril 103:1098–1106
Xie Q, Chen ML, Qin Y et al (2013) Isoflavone consumption and risk of breast cancer: a dose-response meta-analysis
of observational studies. Asia Pac J Clin Nutr 22:118–127
Yung MM, Ross FA, Hardie DG et al (2016) Bitter melon (Momordica charantia) extract inhibits tumorigenicity and
overcomes cisplatinresistance in ovarian cancer cells through targeting AMPK signaling cascade. Integr Cancer Ther
15:376–389
Zardast M, Namakin K, KahoJ E et al (2016) Assessment of antibacterial effect of garlic in patients infected with
Helicobacter pylori: assessment of garlic’s effect using urease breath test. Avicenna J Phytomed 6(5):495–501
Zhao Y, Jing Z, Lv J et al (2017) Berberine activates caspase-9/cytochrome c-mediated apoptosis to suppress triple-
negative breast cancer cells in vitro and in vivo. Biomed Pharmacother 95:18–24
Zhou Q, Ye M, Lu Y et al (2015) Curcumin improves the tumoricidal effect of mitomycin C by suppressing ABCG2
expression in stem cell-like breast cancer cells. PLoS One 10:e0136694. https://doi.org/ 10.1371/journal.pone.0136694

854
 Nutracêuticos em doenças geniturinárias
Robert W. Coppock

Resumo
Nutracêuticos são usados como profiláticos e remédios para doenças geniturinárias em
animais domésticos e têm sido usados ao longo da história registrada. Eles também são
usados para controlar e melhorar o desempenho reprodutivo, melhorar a capacidade de
armazenamento do sêmen e aumentar a maturação do óvulo e melhorar a fertilização in
vitro. Na última década, os efeitos e mecanismos do estresse oxidativo sobre o
desempenho reprodutivo e a disfunção imunológica foram elucidados. Os efeitos
antioxidantes de certos nutracêuticos durante períodos do ciclo reprodutivo com alto
estresse oxidativo melhoram o desempenho reprodutivo e reduzem infecções e outras
doenças gentiurinárias. Este capítulo também analisa o uso atual de nutracêuticos para
prevenir e tratar doenças geniturinárias.

Palavras-chave: Nutracêutico · Reprodução · Geniturinário · Bexiga · Útero · Óvulo ·

Ovário · Testículo · Sêmen · Óleo de peixe · Óleo vegetal · Maca · Lepidium · Linhaça ·
Linum · Cohosh · Touros · Garanhões · Carneiros · Cabras · Vacas · Galos · Galinhas ·
Cães · Gatos · Tomilho · Ácidos graxos · Carnitina · Coco · Quercetina · Selênio ·
Vitamina E · Persea · Abacate · Pirus · Pêras · Goldenseal · Poria · Ácido lipóico ·
Manose · Metionina · Probióticos · Etnoveterinário · Furões · Bagaço de uva · Algas ·
Espirulina · Vitis · Vitamina A · Caroteno · Carotenóides · Vison · Haematococcus ·
YiShenJianPi · Rúcula · Eruca · Cranberries · Vaccinium · Proantocianidinas · Berberina ·
Rubus · Centaurium · Lovage · Levisticum · Rosmarino

R. W. Coppock. DVM, Toxicologist and Assoc. Ltd, Vegreville, AB, Canada e-mail: r.coppock@toxicologist.ca

1. Introdução
Os nutracêuticos podem ser definidos como produtos isolados ou purificados de plantas e
produtos animais em formulações geralmente não associadas a ingredientes de rações. A
definição também pode incluir alimentos funcionais e probióticos que são fornecidos como
parte de uma dieta incomum. Considera-se que o ingrediente funcional vai além das
necessidades e funções nutricionais básicas para reduzir o risco de doenças e ter
benefícios fisiológicos. Probióticos são microrganismos vivos administrados por via oral e
parenteral para melhorar a saúde. Há uma suposição incorreta de que os nutracêuticos
855
não podem ser prejudiciais porque são um produto natural produzido em uma planta ou
animal ou têm uma atividade antioxidante (Vrolijk et al. 2015). Os antioxidantes em níveis
farmacológicos podem causar interferências fisiopatológicas com a formação de espécies
reativas de oxigênio (ROS) necessárias para as funções fisiológicas. Há uma suposição
comum de que vários nutracêuticos reduzem a toxicidade dos radicais livres in vivo. ROS
são produzidos no corpo como subprodutos do metabolismo e para funções fisiológicas.
Os ROS são buscadores de elétrons reativos e, em excesso, podem causar reações em
cadeia, descontroladas, levando a lesões celulares e morte. ROS bioquimicamente
importantes incluem ânion superóxido (O2 –•), peroxil (ROO•), alcoxil (RO•) e radical
hidroxila (OH•) que é produzido pela reação de Fenton (reação de peróxido com Fe 2+). O
ácido hipocloroso lipossolúvel (HOCl) é outro ROS formado. Espécies reativas de
nitrogênio podem ser formadas incluindo dióxido de nitrogênio ( •NO2) e peroxinitrito não
radical (ONOO–). ROS pode ter importantes funções fisiológicas. Por exemplo,
imunócitos produzem ROS in vivo (oxigênio singlete, ácido hipocloroso, etc.) para
direcionar e inativar patógenos microbianos. Os mecanismos homeostáticos permitem a
destruição de ROS. Quando a produção de ROS supera a capacidade de neutralização
de ROS, a condição é conhecida como estresse oxidativo. O estresse oxidativo e o
estresse do retículo endoplasmático associado ativam a via do fator nuclear kappa B
(NFkB). Por exemplo, há evidências genéticas moleculares de que o estresse do retículo
endoplasmático ocorre durante um balanço energético negativo em vacas leiteiras pós-
parto (Gessner et al. 2014). O estresse no retículo endoplasmático está relacionado ao
desequilíbrio entre a carga proteica recebida e a capacidade de dobramento da proteína.
O desequilíbrio resulta no acúmulo de proteínas desdobradas ou mal dobradas no lúmen
do retículo endoplasmático. A resposta das proteínas não dobradas desencadeia a
regulação positiva das chaperonas do retículo endoplasmático. Estes incluem proteína de
ligação de cadeia pesada de imunoglobulina que auxilia no redobramento de proteínas,
atenuação da tradução de proteínas e regulação positiva na degradação de proteínas mal
dobradas. Se o estresse no retículo endoplasmático não puder ser corrigido, pode ocorrer
morte celular por apoptose. Os transdutores de estresse do retículo endoplasmático são
ativados causando uma cascata de reações macromoleculares que resultam em
observações fisiopatológicas e patológicas, a saber, estresse oxidativo, tolerância à
insulina, esteatose hepática e inflamação. O estresse oxidativo associado ao metabolismo
dos oxilipídios foi revisado recentemente (Mavangira e Sordillo 2018). Os oxilipídios
podem contribuir para o estresse oxidativo ou regular locais específicos de produção de
ROS e podem ser biomarcadores do estresse oxidativo. O manejo dietético detalhado é
importante para o sucesso reprodutivo e controle do estresse oxidativo que está
856
associado a doenças e disfunções reprodutivas. Por exemplo, éguas mais velhas com
problemas de ovulação alimentadas com ração própria que continha gorduras,
carboidratos, proteínas, fibras, vitaminas e minerais balanceados ovularam
significativamente mais cedo do que éguas alimentadas com aveia (25 dias vs. 39 dias)
(Jones 1997). Hidrobiontes de animais terrestres expostos a poluentes antropogênicos
aumentaram o estresse oxidativo. Há um interesse substancial no uso de nutracêuticos
para melhorar a saúde geniturinária de animais domésticos.

2. Estresse oxidativo em vacas leiteiras

Há um interesse substancial no uso de nutracêuticos no manejo dietético de vacas
leiteiras durante os intervalos entre parturiente e pós-parto. O período crítico no ciclo
reprodutivo do gado leiteiro, especialmente em vacas leiteiras de alta produção, são as
últimas 3 semanas de gestação (período de gestação de 9 meses) e as primeiras 3
semanas de lactação. Vacas leiteiras geneticamente selecionadas para alta produção de
leite não podem consumir alimentos suficientes para atender às necessidades de energia
para o pico de produção de leite. Na hora do parto, o sistema imunológico do gado
também diminui a funcionalidade. Vacas leiteiras dentro de uma raça apresentam uma
grande variação na capacidade fisiológica de se adaptar ao estresse metabólico da
lactação. O estresse oxidativo está ligado a uma diminuição da função imunológica que
aumenta a suscetibilidade do gado, especialmente gado leiteiro, à metrite e mastite. Uma
vaca leiteira tem um período de seca (interrupção da ordenha 50-70 dias antes do parto)
que é considerado um intervalo de descanso metabólico. A omissão do período de seca
aumenta os níveis séricos ou plasmáticos de ceruloplasmina, colesterol e ROS e diminui
os níveis de bilirrubina e paraoxonase (Mayasari et al. 2017). Nas últimas 2 semanas
antes do parto e nas primeiras 3 semanas após o parto, há maior mobilização de ácidos
graxos não esterificados dos tecidos adiposos devido ao balanço energético negativo.
Isso está relacionado ao aumento do risco de esteatose hepática e cetose. Na semana
antes do parto, a chance de retenção de placenta aumenta em 5% com cada aumento de
0,1 mMol no colesterol sérico ou ácidos graxos (Quiroz-Rocha et al. 2009). Há sugestões
científicas de que vacas com maior atividade antioxidante apresentam menor ocorrência
de retenção de placenta. O gado leiteiro também tem um período de resistência fisiológica
à insulina antes do parto e imediatamente após o parto (De Koster e Opsomer 2013). A
resistência prolongada à insulina é uma condição fisiopatológica que apresenta
semelhanças com a resistência à insulina em humanos. O estresse oxidativo é
considerado um fator causal para a resistência à insulina em bovinos (Abuelo et al. 2015).
857
Os antioxidantes mais comuns usados em vacas leiteiras são a vitamina E (a-tocoferol) e
o selênio (Se). Vacas leiteiras secas em uma dieta que atendeu ou excedeu as
recomendações de nutrientes do NRC-EUA receberam injeções intramusculares diárias
do produto patenteado de selenato de sódio 45 e de vitamina E por aproximadamente 15
dias antes do parto (Abuelo et al. 2016). A administração desses antioxidantes aumentou
a sensibilidade à insulina. A suplementação da ração para vacas leiteiras com extratos 46
de semente de uva e farinha de bagaço de uva (1% da ingestão de matéria seca) reduziu
a abundância de mRNA hepático do fator de crescimento de fibroblasto de hepatocina 21
(Gessner et al. 2014). O fator de crescimento do fibroblasto da hepatocina 21 está
associado à redução da esteatose hepática e melhora da sensibilidade à insulina. A
lipólise diminuiu e a captação de glicose independente de insulina aumentou. O extrato
das miudezas da uva não alterou o sistema antioxidante e o estresse do retículo
endoplasmático e aumentou a produção de leite. O gado leiteiro foi suplementado com
175 mg de extratos47 de chá-verde (95%) e cúrcuma (5%) / kg de matéria seca da dieta de
3 semanas periparto até a semana 9 pós-parto (Winkler et al. 2015). As vacas
suplementadas com os extratos aumentaram a produção de leite com energia corrigida e
diminuíram o colesterol hepático e os triacilgliceróis nas semanas 1 e 3 pós-parto. Houve
uma tendência de diminuição do mRNA hepático para haptoglobina e fator de crescimento
de fibroblastos 21.

3. Melatonina e reprodutores sazonais

A melatonina (N-acetil-5-metoxitriptamina) tem aplicações para manipulação da
reprodução e uso como antioxidante. A fitomelatonina foi identificada em plantas, por
exemplo, Thymus vulgaris L., Glycyrrhiza uralensis Fisch., Salvia officinalis L. e Hypericum
perforatum L. (Arnao e Hernandez-Ruiz 2018). A melatonina tem um papel fundamental
na modulação da atividade sexual em criadores sazonais (Saxena 2017). A melatonina
modula as funções neuroendócrinas, a endocrinologia da gravidez, a circulação fetal e o
momento do parto. A melatonina também tem um papel modulador nas funções
imunológicas. Os quatro principais interesses na melatonina são seu uso para melhorar a
fertilização in vitro e alterar a sazonalidade da reprodução em animais domésticos,
programação fetal e seu uso como antioxidante (Kutzler 2015; Brockus et al. 2016; Mura
et al. 2017; Saxena 2017; El Allali et al. 2018). A melatonina na dieta em níveis
farmacológicos aumenta o fluxo sanguíneo umbilical e fetal em ovelhas (Lemley e

45 Selevit adultos, Laboratorios SYVA (Leon, Spain)

46 AntaOx, Dr. Eckel (Niederzissen, Germany)
47 Loxidan Dairy Cow B, Lohmann Animal Nutrition GmbH (Cuxhaven, Germany)
858
Vonnahme 2017). Ovelhas e carneiros no norte da Sardenha receberam implantes
subcutâneos contendo 18 mg de melatonina de fevereiro a maio, e os parâmetros de
fertilidade foram monitorados (Mura et al. 2017). As ovelhas e carneiros tratados em abril
e maio melhoraram significativamente a taxa de fertilidade, e as ovelhas tiveram um
tempo de gestação reduzido. O tratamento de coelhos cervos (New Zealand White) com 3
mg de melatonina por via oral / coelho / dia por 60 dias foi comparável a 14 ou 16 h de luz
para melhorar os parâmetros reprodutivos (Mousa-Balabel 2011). Aos 170 dias de
gestação, novilhas prenhes criadas com sêmen classificado por sexo receberam 20 mg
de melatonina por via oral/cabeça/dia durante a gravidez (Brockus et al. 2016). O
tratamento com melatonina durante a gravidez aumentou o crescimento pós-natal nas
novilhas F1 e provavelmente é evidência de programação fetal. Aos 220 dias de gestação,
vacas Holandesas de alta ordenha receberam implantes de melatonina 48 (18 mg de
melatonina/implante, por via subcutânea) para dar uma dose total de 216 mg de
melatonina, e novilhas criadas (220 dias de gestação) receberam 162 mg de melatonina
por implantes via subcutânea (Garcia-Ispierto et al. 2013). O índice de temperatura e
umidade durante o estudo foi de 80 unidades. Não foram observadas diferenças entre o
animal tratado e o animal de controle para retenção de placenta e metrite. A razão de
chances descobriu que a probabilidade de reprodutores repetidos e subsequente perda
de gravidez foi menor nos animais tratados. O tratamento com melatonina reduziu
significativamente os níveis de prolactina, mas não alterou a produção total de leite e as
contagens de células somáticas do leite. Os camelos são reprodutores sazonais durante
fotoperíodos curtos e a ovulação é induzida pelo acasalamento. Camelos dromedários
fêmeas foram condicionados à luz artificial de 16 horas de luz do dia e 8 horas de
escuridão por 41 dias e, em seguida, movidos para fora (maio em Marrocos) e
implantados com 18 mg de implantes subcutâneos de melatonina 49 para dar uma dose de
0,64 mg de melatonina/kg de peso corporal (El Allali et al. 2018). O tratamento com
melatonina antecipou o início do crescimento folicular em 3,5 meses e suprimiu a
prolactina plasmática. Os parâmetros de fertilidade não foram incluídos no estudo. O uso
de melatonina para suprimir o estro em rainhas (gatas), uma criadora de longa data, tem
sucesso variado (Kutzler 2015; Schafer-Somi 2017). A supressão do estro pode durar 4
meses. Em gatos machos, o implante subcutâneo de melatonina (18 mg) reduziu os
parâmetros de qualidade do sêmen.

48 Melovine®, CEVA Salud Animal (Barcelona, Spain)

49 Melovin®, Ceva, Ceva Santé Animale (Libourne, France)
859
4. Ervas
4.1 Framboesa (Rubus idaeus L.)

A framboesa é usada na medicina veterinária e humana como nutracêutico. Em humanos,

as preparações de folhas de framboesa são usadas para prevenir náuseas associadas à
gravidez, para aumentar a eficiência uterina durante o trabalho de parto e parto e para
diminuir o risco de hemorragia pós-parto (Holst et al. 2009). Simpson et al. (2001)
relataram que a administração oral de comprimidos de folha de framboesa para mulheres
grávidas tende a encurtar o segundo estágio do parto. As mulheres receberam uma dose
de folha de framboesa de 2,4 g duas vezes ao dia ou placebo a partir da 32ª semana de
gravidez, continuando até o parto. Não foram observadas diferenças significativas para o
manejo médico do parto, modo de parto, controle da dor do parto, perda de sangue
associada ao parto, pressão arterial (tendência de aumento no grupo de tratamento), peso
ao nascer, índice de Apgar, líquido amniótico manchado de mecônio, especial para bebês
necessidades de cuidados e intervalo de gestação. A força das contrações uterinas
diminuiu em mulheres no pós-parto após a administração oral de extratos de folhas de
framboesa e a subsequente medição da pressão intrauterina (Holst et al. 2009). Um
estudo de toxicidade foi realizado em ratos sobre a segurança da folha de framboesa
vermelha,50 kaempferol,51 e quercetina52 (Johnson et al. 2009). As doses de folha de
framboesa vermelha, caempferol e quercetina foram de 10 mg/dia/rata, administradas
desde o dia zero de gestação até o parto. A dose foi baseada em estudos que mostram a
farmacologia do caempferol e da quercetina. Os parâmetros de fertilidade foram medidos
e as crias do sexo feminino foram monitoradas até a puberdade (abertura vaginal). Não
houve diferenças entre o tratamento e os controles para tamanho da ninhada, peso ao
nascer, peso total da ninhada, proporção sexual e sobrevivência ao desmame. O
tratamento com folha de framboesa vermelha aumentou significativamente o período de
gestação (22,4 ± 0,37 vs. 20,8 ± 0,63 dias para controles), e 78% das fêmeas tratadas
com folha de framboesa vermelha pariram. O tempo de abertura vaginal das fêmeas F 1
nascidas de mães que receberam folhas de framboesa vermelha foi significativamente
reduzido. As fêmeas F1 nascidas de mães recebendo folha de framboesa vermelha foram
reproduzidas e parâmetros de fertilidade foram observados. Não há diferenças entre o
tratado e o controle para o tempo até o acasalamento, sucesso do acasalamento, sucesso
da gravidez, período de gestação, índice de nascidos vivos, tamanho da ninhada, peso ao
nascer, peso total da ninhada, proporção sexual ou sobrevivência pós-natal até o dia 21
pós-nascimento. Para kaempferol e quercetina, o único efeito foi que as fêmeas F 0 que
50 Nature’s Way, Canmore, Alberta, Canada
51 Melovine®, CEVA Salud Animal (Barcelona, Spain)
52 Sigma Aldrich, Oakville, Ontario, Canada
860
receberam quercetina aumentaram significativamente os ganhos de peso durante a
gravidez. Um estudo etnoveterinário em British Columbia descobriu que a infusão de
Rubus idaeus (feita com 250 mL de água fervente e 150 mg de folhas/kg de peso
corporal) é administrada por via oral uma vez ao dia para cães para aumentar o tônus
uterino e facilitar o parto (Lans et al. 2009). Ele também é usado para apoiar a produção
de leite.

4.2 Cohosh Preta (Actaea racemosa L.) e Cohosh Azul (Caulophyllum thalictroides)

Cohosh preta (raiz de squaw ou raiz de papoose) é uma erva popular para problemas de
saúde feminina e tem uso histórico por povos aborígenes (Dietz et al. 2016). O uso
principal dos rizomas e raízes é para melhorar os sinais da menopausa. Na medicina
homeopática, as formulações de cohosh azul e preto são usadas para estabelecer o parto
(Smith 2010). Existem relatos conflitantes na literatura sobre a eficácia do cohosh azul e
preto. Há relatos de cohosh preto sendo usado como tratamento nutracêutico de
infecções uterinas caninas (Lans et al. 2009).

4.3 Linhaça (Linum usitatissimum L.)

A linhaça é usada como nutracêutico em medicina veterinária para melhorar a resistência

do sêmen ao congelamento e descongelamento e para promover a lactação em animais
de estimação e gado (Lans et al. 2009; Kumar e Bharati 2013; Kargar et al. 2017).
Também é usado para melhorar os sinais da menopausa em mulheres (Dietz et al. 2016).
A semente de linhaça é resistente à ação digestiva e, portanto, é recomendado que a
semente seja fraturada antes da administração oral. Eles contêm as lignanas diglucosídeo
secoisolariciresinol que são metabolizadas em moléculas semelhantes ao estrogênio. Os
diglucosídeos secoisolariciresinol, os lignanos primários da linhaça, são mal absorvidos e
metabolizados por microrganismos do cólon. Os produtos da fermentação microbiana do
farelo de linhaça são absorvidos. Existem preocupações de que a ingestão elevada de
linhaça pode resultar em hiperestrogenismo do feto. Um estudo multigeracional em ratos
usando 20 ou 40% da dieta como linhaça ou 13 ou 26% da dieta como farinha de linhaça
foi feito para investigar os efeitos da linhaça na geração F 1 (Sprando et al. 2000a, b). As
fêmeas foram expostas às dietas de linhaça desde o dia 0 de gestação até o desmame
dos filhotes. Aos 21 dias de idade, machos selecionados aleatoriamente foram
alimentados com a mesma dieta das fêmeas por 70 dias. Para os machos F 1, não foram
observados efeitos significativos entre os grupos de tratamento nos pesos testiculares,
pesos do epidídimo, pesos da vesícula seminal e morfologia testicular. Além disso, para
os machos F1, não foram observadas diferenças significativas para contagens de
espermátides resistentes à homogeneização, taxas de produção de espermatozoides
861
diários, porcentagem de anormalidades espermáticas, níveis de testosterona no fluido
tubular seminífero e histopatologia testicular. Diferenças significativas nos parâmetros
endócrinos foram observadas nos machos F 1 quando ratos tratados com linhaça foram
comparados com ratos controles (sem linhaça). O hormônio luteinizante sérico foi
aumentado nos ratos F1 machos que receberam as dietas de linhaça de 20 e 40%, e a
testosterona sérica e o hormônio luteinizante foram aumentados em ratos do grupo de
farinha de linhaça 26%. Além disso, houve aumentos significativos nos pesos
ependimários caudais e aumento no número de espermatozoides epididimários caudais/g
epidídimo nos grupos de linhaça de 20 e 40%. Nos grupos de tratamento com farinha de
linhaça de 13% e 26%, houve aumento do número de espermatozoides epididimários/g
epidídimo. O peso da próstata diminuiu significativamente nos grupos de tratamento com
20% de linhaça e 13 e 26% com farinha de linhaça. Coelhos brancos da Nova Zelândia (8
meses de idade) receberam uma dieta suplementada com 5% de linhaça extrusada por 5
semanas e os parâmetros de sêmen estudados (Mourvaki et al. 2010). O ácido linolênico
elevado aumentou a proporção de ácidos graxos ômega-3 (ω-3) / ômega-6 (ω-6) (ω-3 / ω-
6) da dieta, aumentando os ácidos graxos ω-3 nos espermatozóides e diminuindo o
ácidos graxos ω-6. Os espermatozóides dos machos tratados aumentaram a integridade
da membrana e a velocidade de rastreamento. Houve um aumento dos fosfolipídios nos
grânulos da próstata. O farelo de linhaça e a semente de linhaça moída são considerados
eficazes em Uttar Pradesh, Índia, como galactagogo em gado (Kumar e Bharati 2013). O
bolo de sementes ou sementes trituradas são misturadas com açúcar mascavo ou goma
de Sterculia urens. Um estudo em touros búfalos Nili-Ravi mostrou que a suplementação
da dieta com óleo de linhaça aumentou significativamente a libido, o volume do sêmen, a
porcentagem de espermatozoides vivos, número de espermatozóides/ml de sêmen,
atividade de massa, motilidade percentual e a integridade da membrana dos
espermatozóides (Shah et al. 2016). Os touros receberam 0, 125 e 250 mL de óleo de
linhaça por via oral por 12 semanas. O comportamento de acasalamento foi avaliado
quando o sêmen foi avaliado no dia 0 e semanalmente a partir da semana 5. O óleo de
linhaça e o suplemento dietético de vitamina E melhoraram os parâmetros de avaliação
do sêmen de congelamento e descongelamento de cabras Bakhtiari clonadas (Kargar et
al. 2017). Os óleos de linhaça demonstraram melhorar a fertilidade masculina e feminina.
O óleo de linhaça demonstrou ser um suplemento dietético de substituição para o óleo de
peixe para melhorar o sucesso da fertilização in vitro do óvulo de vacas leiteiras e para
modificar as características de lipídios e sêmen do sêmen de galo (Bongalhardo et al.
2009; Moallem et al. 2013). O óleo de linhaça não contém os poluentes orgânicos

862
persistentes bioconcentrados associados ao óleo de peixe, uma questão importante na
segurança alimentar e na medicina.

4.4 Maca (Lepidium meyenii Walpers)

4.4.1 – Antecedentes

Lepidium meyenii, também conhecido como maca, é da família Brassicaceae (Cruciferae,

contém glucosinolatos) e é cultivado nas terras altas do Peru. O hipocótilo é uma raiz
carnuda que é usada internacionalmente como nutracêutico e consumida localmente
como nutracêutico e como raiz vegetal. A maca tem sido tradicionalmente usada para
melhorar a função sexual e a fertilidade em animais domésticos e humanos (Clement et
al. 2010, 2012; Lee et al. 2016; Beharry e Heinrich 2018). Maca é creditada por
compensar os efeitos adversos da altitude elevada e clima severo e, assim, melhorar o
desempenho reprodutivo de animais domésticos e humanos (Leon 1964). Um estudo em
humanos fornece evidências de que a maca preta e vermelha diminui os sinais da doença
crônica da montanha e melhora o humor e o desejo sexual (Gonzales-Arimborgo et al.
2016). Um estudo em ratos usando uma decocção de Lepidium meyenii mostrou que a
decocção equivalente a 0,6 g de raiz/dia administrada por 21 dias compensou os efeitos
da altitude elevada (4349 m) no número de espermatozóides epididimários (Gonzales et
al. 2004). Usando um processo proprietário, as raízes de Lepidium meyenii foram
extraídas com metanol, etanol ou água, e as frações foram purificadas por processos
cromatográficos para concentrar macaene e macamida e outros produtos químicos
vegetais, incluindo campesterol, estigmasterol e beta sitosterol (Zheng et al. 2000) Os
extratos foram padronizados em macaena e macamida e novos ácidos graxos
poliinsaturados e suas amidas. Camundongos machos foram administrados por via oral
com preparações de extrato de maca a 40 mg/g de peso corporal por 22 dias. Foi
registrado o número de intromissões sexuais que os camundongos machos realizaram em
3 h com fêmeas receptivas. Para os ratos tratados com extrato de maca, as intromissões
aumentaram 2,39 e 2,55 vezes, mais do que os ratos machos de controle. Em ratos
castrados que receberam doses orais de 45, 180 e 1800 mg de extrato / kg de peso
corporal diminuiu o período latente entre a estimulação elétrica e a ereção peniana
observada em 71 ± 12, 73 ± 12 e 41 ± 13 segundos, respectivamente, em comparação
para ratos castrados não tratados. Alimentar ratos com extrato etanólico hidratado 53 de
maca (Lepidium meyenii, diferentes ecótipos de maca vermelha, amarela e preta) com 2%
da dieta aumentou a produção de testosterona de células de Leydig cultivadas e diminuiu
o declínio com o envelhecimento (Yoshida et al. 2018). A alimentação deste produto

53 MACAXS, Towa Corporation KK (Tokyo, Japan)

863
também causou um aumento transitório da testosterona sérica. Existem dados limitados
de estudos controlados em humanos (Lee et al. 2016). Em homens saudáveis, a maca
melhorou os parâmetros laboratoriais para avaliação do sêmen (motilidade, contagens de
esperma e morfologia). Em homens classificados com infertilidade, houve melhora
consistente na motilidade espermática, e um estudo mostrou melhora no número,
motilidade e vitalidade dos espermatozoides. A fertilidade não foi relatada. Existem relatos
de maca sendo usada para melhorar os parâmetros reprodutivos em animais domésticos.

4.4.2 – Touros

Um estudo suíço sobre raízes de Lepidium meyenii em touros reprodutores peripubertais,

usando um desenho experimental cruzado, mostrou que uma suplementação de 10
semanas aumentou o número de espermatozóides (Clement et al. 2010). Um lote de 1000
kg de hipocótilos (aproximadamente 50% de cor amarela, 25% de cor avermelhada e 25%
de cor preta) foi moído em pó (tamanho de partícula de 0,8 mm) e o pó foi misturado em
uma concentração basal. Setenta e oito touros, 55-84 semanas de idade, de cinco raças
diferentes, mantidos em um haras comercial, foram, em intervalos semanais, ejaculados
por procedimentos estabelecidos de coleta de sêmen. Os touros não foram alimentados
com maca durante 10 semanas, 233 mg de pó / kg de peso corporal / dia com maca
durante 10 semanas ou com maca nas últimas 10 semanas do estudo. A suplementação
de maca não afetou a circunferência dos testículos, o comportamento de acasalamento e
o volume do sêmen. Suplementar a dieta por 10 semanas aumentou o número de
espermatozóides nas 10 semanas seguintes, quando nenhum suplemento adicional de
maca foi fornecido. Outros parâmetros melhorados em touros originalmente marginais
foram o índice de fragmentação de DNA e a motilidade.

4.4.3 – Garanhões

A maca amarela, cultivada nas terras altas do Peru, foi estudada em garanhões usados
em uma fazenda comercial (Del Prete et al. 2018). A cepa amarela de hipocótilo de
Lepidium meyenii foi tradicionalmente seca e moída (0,8 mm) em farinha. Os garanhões
tratados receberam 3 g de farinha de maca / kg de peso corporal por 60 dias (o ciclo
espermatogênico é de 57 dias). O tratamento com maca não alterou os níveis de
testosterona sérica e o volume de ejaculação. Do dia 60 (final do tratamento com maca)
até 120 (final do estudo), a concentração de espermatozóides e a contagem total de
espermatozoides aumentaram significativamente (dobraram) no sêmen dos cavalos
tratados com maca. O tratamento com maca melhorou significativamente a integridade do
acrossomo nos dias 60, 90 e 120 do estudo. No dia 120 do estudo, a fragmentação do
DNA foi significativamente reduzida no sêmen dos garanhões tratados. O sêmen foi
864
avaliado após a ejaculação e processamento para remessa refrigerada às 24, 48 e 72
horas de armazenamento. Durante o resfriamento e armazenamento, a motilidade total, a
motilidade progressiva e a integridade acrossomal declinaram mais lentamente no sêmen
de cavalos tratados com maca.

5. Lipídios dietéticos
5.1 Antecedentes

Os lipídios são usados como nutracêuticos para melhorar o desempenho reprodutivo. Os

lipídios nas membranas celulares têm um ponto de transição de temperatura em que
mudam de propriedades do tipo líquido para cristalino com propriedades rígidas. Ter um
ponto de transição a uma temperatura mais baixa é um fator na capacidade de
sobrevivência dos espermatozóides na reconstituição. O aumento das duplas ligações cis,
os hidrocarbonetos mais curtos e o aumento do colesterol nos lipídios da membrana
diminuem a temperatura em que ocorre o ponto de transição. Os ácidos poliinsaturados
são divididos em ácidos graxos ω-3, ω-6 e ω-9. Esses ácidos graxos têm a primeira
ligação dupla localizada a 3, 6 ou 9 carbonos, respectivamente, da extremidade metil da
molécula de ácido graxo. Os mamíferos não podem sintetizar os ácidos graxos ω-3 e ω-6,
tornando-os ácidos graxos essenciais na dieta. O ácido linoleico ω-6 e o ácido α-linolênico
(um ácido graxo ω-3) devem ser fornecidos na dieta, e o ácido eicosapentaenóico, ácido
docosahexaenóico e ácido araquidônico são sintetizados a partir desses precursores
essenciais (Gulliver et al. 2012). O ácido linoleico ω-6 é mais abundante em óleos
vegetais. As vias enzimáticas para os ácidos graxos poliinsaturados em eicosanóides para
reprodução foram revisadas (Wathes et al. 2007). Os ácidos graxos poliinsaturados são
precursores dos eicosanóides, que incluem as prostaglandinas. Em fêmeas mamíferas
acasaladas, o período crítico para a gravidez é o intervalo entre a inseminação e a
implantação do embrião. O catabolismo lipídico pelo embrião antes da implantação é uma
importante fonte de energia. Os ácidos graxos poliinsaturados também são importantes
na fluidez da membrana dos espermatozóides. A suplementação excessiva com ácidos
graxos poliinsaturados têm o risco de ser prejudicial. Os testículos contêm ácido
araquidônico, ácido docosapentaenóico e ácido docosahexaenóico com proporções
variando entre as espécies. Os ácidos graxos poliinsaturados na dieta adequada são
importantes para a fertilidade (Gulliver et al. 2012). A resistência dos espermatozóides à
preservação ao frio é considerada ligada aos níveis de ácidos graxos poliinsaturados ω-3
(por exemplo, ácidos linolênico, eicosapentaenóico e docosahexaenóico) em suas
membranas celulares. Um estudo austríaco em garanhões pôneis Shetland mostrou que o
865
ácido ω-6-docosapentaenóico era o ácido poli-insaturado predominante em
espermatozóides equinos (Aurich et al. 2018). Este estudo também mostrou um aumento
de janeiro a junho no conteúdo relativo de ácido docosapentaenóico e um aumento no
ácido ω-6-araquidônico. A proporção de ácidos graxos poliinsaturados ω-3 / ω-6 em
espermatozoides de garanhões diminuiu de janeiro a junho.

5.2 Farinha de Peixe e Óleos

Os machos foram colocados em uma dieta suplementada com 75 ml de óleo de fígado de

bacalhau / dia / macho durante 12 semanas (Paulenz et al. 1995). O óleo de fígado de
bacalhau é rico em ácidos poliinsaturados ω-3. Os espermatozóides foram analisados
quanto à composição de ácidos graxos. A suplementação com óleo de fígado de bacalhau
aumentou os níveis de ácido docosahexaenóico ω-3 e diminuiu os níveis de ácido
docosapentaenóico ω-6 em comparação com os níveis de espermatozóides no sêmen do
grupo de controle. Não foram observadas diferenças entre os grupos nos efeitos
negativos do congelamento sobre os parâmetros de avaliação do sêmen. Um estudo
mostrou que dietas suplementadas com óleo de peixe em javalis alteram a produção de
esteróides testiculares (Castellano et al. 2011). Os varrascos Duroc receberam uma dieta
suplementada com 62 g de ácidos graxos hidrogenados/varrasco/dia, 60 g de óleo de
peixe menhaden (continha 10,8 g de ácido docosahexaenóico e 9,0 g de ácido
eicosapentaenóico)/javali/dia, ou 60 g de óleo de atum (contendo 19,8 g de ácido
docosahexaenóico e 3,9 g de ácido eicosapentaenóico)/cachaço/dia por 7 meses. A
condição corporal e o conteúdo de lipídios e proteínas testiculares não foram diferentes
entre os grupos. As classes de lipídeos de fosfatidilcolina, fosfatidiletanolamina e
esfingomielina foram significativamente diferentes entre os grupos. A suplementação com
óleos de peixe diminuiu a proporção de ácidos graxos ω-6/ω-3 na fosfatidilcolina, sendo
os ácidos graxos ω-6 os mais afetados. As dietas com óleo de peixe aumentaram os
ácidos graxos ω-3 em comparação com os ácidos graxos ω-6 da fosfatidiletanolamina. As
dietas com óleo de peixe diminuíram a proporção de ácidos graxos ω-6/ω-3 na
esfingomielina. Os níveis de testosterona testicular, di-hidrotestosterona e estradiol foram
medidos. A testosterona foi 46% menor nos machos que receberam a dieta suplementada
com óleo de atum, e o estradiol também foi menor em comparação com os machos que
receberam a dieta suplementada com óleo de peixe menhaden. Três raças diferentes de
porcos javalis (Duroc, Large White e Pietrain) foram suplementadas com óleo de peixe 0,3
kg/javali/dia por 26 semanas para determinar o efeito dos ácidos graxos ω-3
suplementares nos parâmetros do sêmen por raça (Yeste et al. 2010). O sêmen foi
coletado uma vez por semana e avaliado quanto ao volume ejaculado, concentração de

866
espermatozóides, viabilidade, acrossoma e integridade da bainha mitocondrial, motilidade,
morfologia e resistência osmótica. Destes parâmetros, a dieta suplementada afetou
positivamente a morfologia dos espermatozoides nas raças Large White e Pietrain e a
resistência osmótica dos espermatozóides de Pietrain. Este estudo mostra que diferentes
raças de porcos respondem de maneira diferente aos ácidos graxos ω-3. A adição de óleo
de peixe mais tomilho (Thymus vulgaris) foi estudada em garanhões para determinar seu
potencial para melhorar a capacidade de armazenamento do sêmen (resfriado a 5 ºC)
(Garmsir et al. 2014). Os garanhões receberam dieta basal, dieta suplementada com óleo
de peixe a 2,5% da ingestão de matéria seca, dieta suplementada com tomilho a 0,02%
da ingestão de matéria seca e dieta suplementada com óleo de peixe mais tomilho. Os
parâmetros do sêmen para os garanhões alimentados com óleo de peixe e tomilho foram
melhorados com 24 e 48 h de armazenamento. Em um projeto de estudo cruzado 2 x 2
usando oito garanhões, a adição de 250 g/dia/garanhão por 14 semanas de um
nutracêutico54 rico em ácido docosahexaenóico (DHA), um ácido graxo ω-3, demonstrou
melhorar a capacidade de armazenamento do sêmen de garanhão (Brinsko et al. 2005).
O nutracêutico proprietário consistia em trigo, óleo de peixe, farinha de soja, acetato de
DL-tocoferol, fermento seco e palmitato de ascorbila. O nutracêutico continha 25% de
gordura bruta e 30% de ácidos graxos ω-3. O óleo de peixe consistia em
aproximadamente 25% de DHA, ~ 5% de ácido eicosapentaenóico e ~ 34% de ácidos
graxos ω-3.

Os ejaculados da vagina artificial foram divididos e avaliados como sêmen fresco,

resfriado e descongelado. O volume testicular não foi alterado pelo tratamento. A
concentração média de esperma dos garanhões foi 1,8 vezes maior (p = 0,03) nos
cavalos tratados. O nível de DHA/bilhão de espermatozóides foi três vezes maior (p =
0,002) nos garanhões tratados. A proporção de DHA para ácido docosapentaenóico (um
ácido graxo ω-6) aumentou significativamente. A motilidade total, a motilidade progressiva
e a velocidade média do trajeto no sêmen fresco não foram alteradas pelo tratamento.
Após 48 h de armazenamento refrigerado, houve tendência de os espermatozóides dos
garanhões tratados apresentarem maior mobilidade (p = 0,03). A porcentagem de
espermatozoides vivos com acrossomas intactos e a porcentagem de espermatozoides
com cromatina danificada não foram reduzidos pelo tratamento com nutracêutico. O
número de garanhões neste estudo foi pequeno, os efeitos do acetato de DL-tocoferol são
desconhecidos e a fertilidade não foi um parâmetro no estudo. Um estudo em carneiros
mostrou que o suplemento de óleo de peixe foi superior ao óleo de palma e óleo de
girassol para melhorar os parâmetros do sêmen antes e depois do congelamento e

54 ProSperm, Minitube of America (Verona, WI)

867
descongelamento (Esmaeili et al. 2014). O óleo de peixe também aumentou a
testosterona sérica. Outro estudo em carneiros mostrou que a suplementação da dieta
com óleo de peixe teve efeitos positivos sobre os parâmetros do sêmen e alterou a
composição dos perfis de ácidos graxos dos espermatozóides e os efeitos continuaram
por 2 meses após a interrupção da suplementação (Alizadeh et al. 2014). Um estudo em
carneiros Zandi mostrou que a suplementação da dieta com ácidos graxos ω-3 melhorou
a fertilidade do sêmen congelado (Masoudi et al. 2016). Os carneiros foram alimentados
com dieta suplementada com óleo de peixe ou óleo de palma a 3% da matéria seca por
60 dias. O sêmen foi coletado e congelado em diluidor de lecitina de soja ou gema de ovo.
Os parâmetros de sêmen e espermatozóides não foram significativamente diferentes
entre as dietas. Para fertilidade, a dieta de óleo de peixe melhorou significativamente a
taxa de fertilidade, taxa de parto e taxa de parto. O extensor usado não foi significativo
nos resultados de fertilidade. Touros holandeses foram alimentados com óleo de peixe a
1,2% da matéria seca por 13 semanas, e seu sêmen foi avaliado (Khoshvaght et al.
2016). Após 7 semanas, a dieta com óleo de peixe aumentou significativamente o volume
do sêmen, a motilidade progressiva e a viabilidade dos espermatozoides do sêmen
fresco. Para o sêmen descongelado e congelado, a motilidade progressiva foi
significativamente aumentada e os espermatozóides anormais diminuíram
significativamente. Um estudo dietético em cães mostrou que óleo de peixe e óleo de
peixe mais vitamina E diminuíram a sensibilidade dos espermatozóides caninos à
peroxidação lipídica (Risso et al. 2017). Os efeitos da suplementação de ovelhas com
óleo de salmão e fonte de óleo de linhaça (ácidos graxos ω-3) ou com óleo de girassol
(fonte de ácidos graxos ω-6) por 6 semanas foram estudados na função ovariana, oócitos
e qualidade do embrião (Wonnacott et al. 2010). O tamanho e o número do folículo
ovariano não foram diferentes entre os grupos de tratamento. A dieta rica em ácidos
graxos ω-3 aumentou a progesterona no fluido folicular. Houve captação seletiva de
ácidos graxos saturados pelos oócitos, predominando o ácido esteárico. Os blastocistos
de ambos os grupos apresentaram altos níveis de ácidos graxos poliinsaturados,
predominantemente ácido linoleico.

5.3 Óleos Vegetais

O uso de nutracêuticos para melhorar a portabilidade in vitro do sêmen de garanhão para

inseminação artificial está chamando a atenção. Nutracêuticos também são empregados
para melhorar a capacidade de armazenamento do sêmen de garanhões. Muitos
garanhões, férteis por acasalamento natural, produzem sêmen que não atende aos
padrões aceitos após esfriar ou crio preservar (Arruda et al. 2010). Consequentemente,

868
há uma perda de fertilidade inerente. O aumento das fontes dietéticas de ácidos graxos
poliinsaturados pode aumentar a fertilidade em garanhões. Um estudo cruzado em oito
garanhões conduzidos ao longo de 60 dias mostrou que um nutracêutico reprodutivo
proprietário5510 melhorou os parâmetros laboratoriais para sêmen fresco, resfriado e
congelado (Freitas et al. 2016). O nutracêutico, administrado por solução oral por 9
semanas, continha vitaminas A, B12, B6 e E, ácido fólico, β-caroteno, L-carnitina,
aminoácidos, ácidos graxos ω-3 e ω-6, selênio, zinco, cobre e cromo. Os garanhões,
previamente avaliados para atender a um padrão nacional de sêmen (Brasil CBRA 56),
eram ejaculados uma vez por semana e na décima semana eram ejaculados em dias
alternados durante quatro ejaculações. O sêmen foi avaliado na coleta, o sêmen resfriado
foi avaliado às 24, 36 e 48 h e o sêmen congelado foi avaliado no descongelamento. O
sêmen foi avaliado de acordo com o padrão CBRA. Para o sêmen fresco, o tratamento
nutracêutico não alterou o volume ejaculado, a concentração espermática, o número de
espermatozóides anormais, a cor e a densidade aparente. No sêmen fresco, a
suplementação com o nutracêutico proprietário aumentou (p <0,05) a motilidade total, a
velocidade de trajetória, bem como a integridade do plasma e da membrana acrossomal.
No sêmen resfriado, o tratamento nutracêutico preservou a integridade da membrana
acrossomal (p<0,05), a motilidade total (36 h) e a velocidade (36 h). No sêmen congelado,
a suplementação aumentou (p<0,05) a motilidade progressiva dos espermatozóides e a
integridade da membrana plasmática. A adição de 100 mL de óleo de
linhaça/dia/garanhão e 30 mL de um antioxidante proprietário 57/dia/garanhão por 84 dias
(novembro a fevereiro na Áustria) atenuou um declínio sazonal na motilidade e
integridade da membrana do sêmen armazenado resfriado (Schmid -Lausigk e Aurich
2014). Óleos vegetais, administrados intra uterinos, têm sido usados para suprimir o estro
em éguas. As éguas que receberam infusões de óleo de coco estéril ou óleo de
amendoim estéril no dia 10 do ciclo estral tiveram diestro prolongado (Wilsher e Allen
2011). Não foram observados aumento de fluido uterino e secreções vaginais. O uso de
óleo de amendoim para suprimir o estro foi estudado em éguas usando um estudo
cruzado (Campbell et al. 2017). Dez dias após a ovulação, cada égua recebeu 1 mL de
óleo de amendoim esterilizado filtrado (0,22 μg/ml e 3,77 m) 58 intrauterino usando a mesma técnica
estéril usada para transferência de embriões ou um tratamento simulado sem nenhuma
substância injetada. A infusão de óleo de amendoim não aumentou significativamente a
duração da fase lútea, mas aumentou a erosão do epitélio endometrial e aumentou a
infiltração eosinofílica. O óleo de coco fracionado foi considerado ineficaz no

55 Reproductive Garanhões, JCR Nutraceuticals, Vetnil (Louveira, Brazil)

56 Brazilian College of Animal Reproduction (http://www.cbra.org.br/portal/index-ar.htm)
57 Myostem Protect, Audevard (Clichy, France)
58 Peanut oil BP20089, Augustus Oils Ltd (Alton, UK)
869
prolongamento do diestro em éguas (Diel de Amorim et al. 2016). Os machos Landrace
foram alimentados com 75 e 150 mg de suplemento de algas 59/macho/dia durante 19
semanas (Murphy et al. 2017). A preparação de algas também continha etoxiquina (6-
etoxi-2,2,4-trimetil-1,2-di-hidroquinolina). O suplemento de algas aumentou a ingestão oral
de ácido docosahexaenóico. Parâmetros de sêmen e índices de fertilidade foram
avaliados. O suplemento de algas aumentou o volume do sêmen e o número de
espermatozóides. Não houve diferenças significativas entre os machos controle e tratados
para os parâmetros de fertilidade. O suplemento aumentou a produção de sêmen em
mais 3-4 pacotes de doses de inseminação de sêmen. Os espermatozóides caninos são
muito sensíveis ao congelamento e descongelamento.

Melhorias consideráveis foram feitas por meio de procedimentos laboratoriais

aprimorados, incluindo extensores de sêmen. Estudos têm demonstrado que os
suplementos dietéticos podem melhorar a “robustez” dos espermatozóides caninos. A
suplementação da dieta canina com um nutracêutico 60 contendo alto teor de ácidos
graxos ω-3 e ω-6 melhorou os parâmetros do sêmen (Rodrigues et al. 2017). Em um
estudo cruzado, sete reprodutores sem raça definida estavam em uma dieta comercial de
ração e foram condicionados por 8 semanas para a coleta de sêmen (manipulação digital
para ejaculação). Após o período de condicionamento, o sêmen foi coletado por 5
semanas e avaliado como sêmen fresco e descongelado quanto ao volume, motilidade,
vigor, número de espermatozóides e morfologia. Durante 8 semanas, os cães receberam
o suplemento dietético nutracêutico [contendo 39,97 mg de ácidos graxos ω-3
(eicosapentaenóico, docosahexaenóico) e 283,40 mg de ácido graxo ω-6 (ácidos
linoleico)] /10 kg de peso corporal. O regime de suplementação aumentou a motilidade e
concentração dos espermatozoides, mas não melhorou a capacidade de congelamento.
Em outro estudo, os reprodutores estavam em uma ração comercial para cães ou na
ração comercial para cães suplementada com 7,2 mg de ácido ω-3-linoleico/kg de peso
corporal/dia, 25 mg de ácido ω-6-linolênico/kg de peso corporal/dia,
10,1 mg de ácido ω-9-oleico/kg de peso corporal/dia e 1 UI de vitamina E/kg de peso
corporal/dia (da Rocha et al. 2009). O suplemento foi fornecido por 60 dias. O suplemento
de ácidos graxos aumentou o volume do sêmen, a concentração de espermatozóides e a
motilidade, e houve melhora no armazenamento a 38 ºC por 4 h.

59 All-G-Rich, Alltech, Dunboyne, Co (Meath, Ireland)

60 Vetnil Industry and Trade of Veterinary Products Ltda. (Louveira, Brazil)
870
6. Carnitina
6.1 Antecedentes

L-carnitina [(-)-(R)-3-hidroxi-4-(trimetilamônio) butirato] é um composto de amônio

quaternário encontrado em produtos animais e vegetais. É essencial no metabolismo
intermediário, e sua função primária é transferir a porção acetil e ácidos graxos de cadeia
longa, ativados, de um compartimento celular para outro, incluindo as membranas
mitocondriais (Rebouche 2004; Adeva-Andany et al. 2018; Ringseis et al. 2018) Esse
processo garante a disponibilidade da coenzima A. A β-oxidação mitocondrial de ácidos
graxos de cadeia linear saturada é uma via bioquímica catabólica que, em última
instância, gera acetil-CoA, NADH+ e FADH2 a partir de ésteres de acil-CoA graxos. A L-
carnitina é importante na regulação da razão acetil-CoA/CoA, e CoA livre tem atividade
reguladora de feedback no complexo piruvato desidrogenase e influencia o metabolismo
da glicose. Em porcas grávidas, a L-carnitina aumenta o fator de crescimento semelhante
à insulina no sangue (Eder 2009). Os leitões nascidos de porcas suplementadas com L-
carnitina têm um número aumentado de fibras musculares primárias. Todos os mamíferos
podem sintetizar carnitina a partir de lisina e metionina em um processo que requer
metilação da lisina ligada à proteína em uma etapa de velocidade limitada pela N ε-
trimetilisina hidroxilase. O fígado é o tecido primário que contém a enzima γ-butirobetaína
dioxigenase necessária para a reação final para formar carnitina a partir de γ-
butirobetaína. A carnitina no sangue é captada pelos tecidos usando o transportador
orgânico de cátions/carnitina 2 (OCTN2), e esse mecanismo também é usado para
conservar a carnitina por captação do filtrado glomerular. O transportador OCTN2 é o
principal mecanismo de captação de carnitina do intestino delgado. Algumas xantinas
competem pelo transportador OCTN2. Plantas, especialmente leguminosas e Gramineae
(Poaceae) e suas sementes, são consideradas uma importante fonte de N ε-trimetilisina.
As maiores fontes dietéticas de carnitina são os produtos de origem animal. Os
ruminantes podem obter carnitina e seu precursor de seu microbioma nativo. Estudos de
infusão intravenosa demonstraram que a recaptação da carnitina pelos túbulos renais é
saturável. A carnitina é excretada no leite. A ingestão de carnitina na dieta em humanos é
estimada em 0,05–0,25 da dose, e há algumas evidências que apóiam que a taxa de
absorção pode ser limitada. Há evidências de que a ingestão dietética de L-carnitina em
leitões jovens é 90-95% em porcos jovens recebendo dietas contendo 25-100 ppm com
absorção diminuindo com o aumento acima desses níveis dietéticos (Fischer et al. 2009).
Neste estudo, os níveis de L-carnitina no fígado, rim, coração e músculo esquelético
também aumentaram.

871
Alimentar as galinhas com uma dieta com adição de L-carnitina aumenta os níveis de L-
carnitina e L-acetilcarnitina nos ovos (Peebles et al. 2007). A inflamação crônica
provavelmente regula positivamente a absorção in vivo da carnitina total e acetilcarnitina
(solúvel em ácido), e a absorção é aumentada pela regulação positiva ligada à inflamação
da expressão do gene OCTN2. Esta é a evidência de que o OCTN2 é importante na
transferência de carnitina do sangue materno para o feto. As porcas prenhes alimentadas
com uma dieta suplementada com 50 ppm de L-carnitina tiveram níveis aumentados de L-
carnitina em corações e fígados fetais (Xi et al. 2008). A atividade do complexo piruvato
desidrogenase foi aumentada no coração e a atividade da carnitina palmitoiltransferase no
fígado, mas não alterou sua constante de Michaelis (Km). Nas mulheres, os níveis
sanguíneos de carnitina total, acetilcarnitina (solúvel em ácido) e carnitina não esterificada
diminuem durante a gravidez, especialmente no segundo e terceiro trimestres (Cho e Cha
2005). Durante o primeiro e segundo trimestres, a excreção urinária de carnitina total,
carnitina não esterificada e acilcarnitina (solúvel em ácido) foi significativamente maior, e a
excreção urinária diminuiu com o avanço da gravidez. Em porcas, a carnitina plasmática
não diminui durante a gravidez (Eder 2009). A L-carnitina é importante para o transporte
de ácidos graxos de cadeia longa dentro da mitocôndria e síntese de fosfatos ricos em
energia que melhoram a motilidade e a sobrevivência dos espermatozoides, incluindo a
preparação do sêmen para inseminação artificial. A capacidade da mitocôndria de
metabolizar lipídios e equilibrar o suprimento de ATP é crítica para a fertilização do oócito
e atividades de desenvolvimento subsequentes (Van Blerkom 2011). A L-carnitina é
essencial para o metabolismo dos lipídios mitocondriais no oócito. Existem altas
concentrações de L-carnitina no epidídimo e espermatozóides, onde serve como um
veículo para os grupos acila para a oxidação (Ng et al. 2004). Um estudo sobre
epidídimos de javalis de Pietrain com 10 meses de idade mostrou que os níveis de L-
carnitina no fluido luminal aumentaram distalmente com os níveis mais altos ocorrendo na
cauda do epidídimo, e o nível de L-carnitina nos espermatozóides não foi alterado
(Pruneda et al. 2007). Outros estudos em várias espécies mostraram que os níveis de L-
carnitina aumentam nos epidídimos caudais. Em muitas espécies, existe uma correlação
positiva entre a L-carnitina no fluido seminal e o número de espermatozóides. A L-
carnitina tem funções semelhantes em outros tecidos que demandam energia, incluindo o
coração. Por processos ativos, a L-carnitina é transportada para o plasma epididimal. A L-
carnitina livre no fluido seminal está diretamente relacionada à contagem de
espermatozoides e motilidade (Brooks 1979; Sheikh et al. (2007). L-carnitina mostrou
proteger o testículo. Um estudo em ratos mostrou que a suplementação dietética com L-
carnitina é protetora contra a oligospermia induzida por busulfan, um medicamento
872
anticâncer alquilante (Abd-Elrazek e Ahmed-Farid 2018). Estudos duplos-cegos com
placebo em 60 homens com astenozoospermia mostraram que a L-carnitina e a L-
acetilcarnitina, administradas por via oral, melhoraram a motilidade do esperma e sêmen
capacidade de eliminação de radicais hidroxila e peroxila (Balercia et al. 2005). Doze
homens engravidaram espontaneamente sua parceira. Destes, 9/12 dos homens estavam
recebendo L-carnitina mais L-acetilcarnitina (três homens por 3 meses e dois homens por
5 meses) e duas impregnações ocorreram em homens recebendo tratamento com acetil-
L-carnitina (um por 2 meses e um por 5 meses) e uma gravidez ocorreu após 2 meses de
washout (tratamento com carnitina não especificado). foram relatados para outro estudo
em homens (Lenzi, et al. 2003). Uma recente revisão da literatura não forneceu
evidências claras de que a L-carnitina melhora a fertilidade das mulheres (Showell et al.
2017). Outra revisão considera a Lcarnitina e a L-acetilcarnitina para melhorar a fertilidade
feminina, e mais pesquisas são necessárias para entender seu uso em regimes
terapêuticos (Agarwal et al. 2018).

6.2 Bovinos

Um estudo avaliou o uso terapêutico de L-carnitina e acetil-metionina em uma formulação

patenteada61 como uma adição ao regime de tratamento com propilenoglicol padrão para
cetose bovina diagnosticada por níveis sanguíneos> 1,2 mMol de β-hidroxibutirato (Jeong
et al. 2018). O estudo também incluiu acompanhamento para determinar se o tratamento
com L-carnitina diminuiu as probabilidades de doenças reprodutivas pós-parto. O
tratamento com o produto patenteado aumentou as chances de recuperação. A produção
de leite foi melhorada nos dias 30 e 40 após o parto pela adição da formulação
patenteada ao regime de propilenoglicol. As complicações pós-parto dos órgãos
reprodutivos e o intervalo para a primeira inseminação não foram diferentes entre os
grupos.

6.3 Equinos

Um estudo em 25 garanhões jovens Maremmano mostrou que a L-carnitina e a L-acetil-

carnitina estão presentes no plasma seminal (Stradaioli et al. 2000). Tanto a L-carnitina
quanto a L-acetil-carnitina são mais elevadas na primeira ejaculação em comparação com
a segunda ejaculação coletada 1 hora depois. A L-acetil-carnitina seminal foi
positivamente correlacionada com espermatozóides móveis morfologicamente normais, e
tanto a L-carnitina quanto a L-acetil-carnitina no sêmen e plasma seminal foram
positivamente correlacionadas com a concentração de espermatozóides. A L-carnitina tem
uma história de uso para melhorar a fertilidade de garanhões (Zeyner e Harmeyer 1999).

61 Metabolase®, Fatro (Bologna, Italy)

873
A suplementação da dieta com 20 g de L-carnitina/dia por 60 dias melhorou a
oligoastenospermia em garanhões (Stradaioli et al. 2004). A suplementação aumentou os
espermatozóides progressivamente móveis aos 30 e 60 dias nos garanhões
oligoastenospérmicos e aumentou a carnitina livre no plasma seminal. L-acetil-carnitina no
sêmen foi positivamente correlacionada com espermatozóides móveis totais que tinham
morfologia normal. Garanhões com sêmen normal não apresentaram melhorias em seus
parâmetros de sêmen. Arruda e col. (2010) citaram um estudo que mostrou que a
suplementação de garanhões com sêmen bom, intermediário e ruim com 10 g de L-
carnitina/cavalo/dia por 90 dias foi um tratamento eficaz para melhorar os parâmetros do
sêmen. Os garanhões pôneis Shetland foram, por 7 semanas, alimentados com uma
mistura patenteada62 que fornecia tocoferol 300 mg/dia, ácido ascórbico 300 mg/dia, L-
carnitina 4000 mg dia e ácido fólico 12 mg/dia (Deichsel et al. 2008). Nenhuma melhora
geral nos parâmetros do sêmen foi observada no sêmen após ter sido resfriado a 5 ºC por
24 h. Houve uma pequena diminuição nas observações gerais de defeitos morfológicos.
Morris e Gibb (2016) relataram que 6 semanas de suplemento oral com 60 g de L-
carnitina/dia/garanhão foram necessárias para melhorar a fertilidade usando sêmen fresco
para inseminação artificial.

6.4 Suínos

6.4.1 – Porcas

Estudos de pesquisa mostram que as porcas suplementadas com L-carnitina durante a

gestação fornecem resultados variáveis na melhoria do desempenho reprodutivo (Eder
2009). No entanto, a descoberta geral é que a suplementação de porcas com L-carnitina
melhorou seu desempenho reprodutivo. A alimentação com 100 mg de
L-carnitina/porca/dia durante a gestação aumentou significativamente o peso total da
ninhada e do leitão ao nascer e o número de nascidos vivos (Musser et al. 1999). Os
efeitos da suplementação com 150 mg de L-carnitina/porca/dia durante a gestação e 250
mg/porca/dia durante a lactação ao longo de três ciclos reprodutivos mostraram que o
peso da ninhada e dos leitões ao nascer e os ganhos de peso dos leitões e do desmame
aumentaram, mas tamanho da ninhada, leitões natimortos e leitões aptos para a criação
não foram alterados pela suplementação de L-carnitina (Ramanau et al. 2002). As porcas
que receberam 125 mg de L-carnitina/dia tiveram um tamanho de ninhada aumentado de
2,8 leitões/ninhada, e as porcas que receberam 25 e 50 ppm de L-carnitina/dia tiveram um
tamanho de ninhada aumentado de 0,5 e 0,6 leitões/ninhada, respectivamente (Eder
2009). A suplementação da dieta das porcas com L-carnitina aumentou o tempo total de

62 Stallion®, Pavo Pferdenahrung GmbH (Goch, Germany)

874
sucção (1–4 dias de idade) e aumentou o ganho de peso (Birkenfeld et al. 2006). Este
estudo teve dois módulos. O primeiro módulo utilizou 26 porcas (German Landrace
cruzadas com Large White) criadas artificialmente com javalis Pietrain. Durante a
gravidez, as porcas tratadas receberam 125 mg de L-carnitina/dia e 250 mg de L-
carnitina/dia durante a lactação. Ao nascer, o número de leitões na ninhada foi
padronizado, e os leitões foram amamentados por suas mães por 28 dias. No segundo
módulo, as ninhadas foram padronizadas no nascimento, e os leitões das porcas tratadas
com L-carnitina foram colocados em porcas controle, e os leitões das porcas controle
(sem suplemento de L-carnitina) foram colocados nas porcas tratadas. No módulo um, as
comparações de porcas tratadas e de controle mostraram que os pesos corporais das
porcas e os números e peso de nascimento dos leitões nascidos não eram
significativamente diferentes. Nos dias de estudo 3, 6 e 9, a duração da sucção/dia foi
significativamente maior, assim como os ganhos de peso corporal para leitões nascidos
de porcas administradas com L-carnitina. No módulo 2, as comparações dos pesos
corporais e do número de leitões nascidos vivos não diferiram significativamente das
porcas de tratamento e controle. Os leitões das porcas tratadas com L-carnitina
aumentaram significativamente o tempo de sucção no dia 3 e maiores ganhos de peso
nos primeiros 14 dias. Esses resultados mostram os efeitos da exposição no útero de
leitões à L-carnitina e também sugerem que a síntese de L-carnitina pode não atender às
demandas da gravidez. Os efeitos da suplementação de L-carnitina durante a gestação
(125 mg L-carnitina/dia) e lactação (250 mg/dia) foram estudados em porcas que estavam
em dieta baixa em proteínas e energia durante a lactação (Ramanau et al. 2005). O
consumo de ração para porcas tratadas e controle e o número de leitões nascidos vivos e
peso ao nascer não foram diferentes entre as porcas L-carnitina e controle. O ganho de
ninhada para porcas tratadas foi significativamente maior (20%) do que para porcas
controle. As porcas tratadas com L-carnitina produziram 18% mais leite do que as porcas
controle, e a composição do leite não foi diferente entre os grupos. As porcas em ambos
os grupos diminuíram o peso corporal; no entanto, as porcas tratadas com L-carnitina
retiveram mais gordura no toucinho.

6.4.2 – Javalis

Um estudo em javalis de Pietrain mostrou que a suplementação oral com L-carnitina

melhorou a qualidade do sêmen (Jacyno et al. 2007). Os varrascos, com 1,5–2,0 anos de
idade, receberam 500 mg de L-carnitina por via oral durante 5 semanas. Os varrascos
eram ejaculados uma vez por semana e o sêmen avaliado. Os ejaculados de cada
varrasco coletados antes da administração de L-carnitina foram usados como valores de

875
controle. A administração de L-carnitina aumentou significativamente o volume total do
sêmen (11%), o volume da fração rica em esperma (10%) e a contagem total de
espermatozoides ejaculados (11,5%) e reduziu a atividade da asparagina
aminotransferase (medida da integridade da membrana dos espermatozóides, aumento
da atividade à medida que a qualidade da membrana diminui). O efeito foi observado 1
semana após a administração de L-carnitina. Os efeitos da L-carnitina na dieta foram
estudados no sêmen de machos cruzados Hampshire x Pietrain maduros (~ 2 anos)
(Cerovsky et al. 2009). Os varrascos receberam 2 g de L-carnitina/dia em sua dieta por 8
semanas. Nenhum dos índices de qualidade do sêmen melhorou significativamente. Em
um estudo, machos da linha terminal com 285 dias e 504 dias foram alimentados com
dietas suplementadas com 500 mg de L-carnitina por 16 semanas (Kozink et al. 2004). A
suplementação da dieta com L-carnitina não melhorou a capacidade de armazenamento
do sêmen resfriado. Um estudo sobre a suplementação de L-carnitina foi feito em javalis
Pietrain, Duroc e Large White para determinar seus efeitos nos parâmetros de sêmen
(Yeste et al. 2010). Os machos foram suplementados com 0 ou 625 mg de L-carnitina/dia
por 20 semanas e os parâmetros do sêmen avaliados. O fotoperíodo e a temperatura
aumentaram ao longo do período de estudo. A suplementação de javalis Duroc e Large
White não melhorou o volume de ejaculação, a concentração de espermatozoides, a
motilidade espermática, a viabilidade espermática, a resistência osmótica dos
espermatozóides e a morfologia dos espermatozoides. Os autores consideraram o
aumento da temperatura e do fotoperíodo prejudiciais para a morfologia dos
espermatozoides (aumento do número de espermatozóides imaturos), e a morfologia do
esperma foi melhorada em javalis de Pietrain com suplementação com L-carnitina.

6.5 Aves

6.5.1 – Galos

Os espermatozóides aviários têm concentrações mais altas de ácidos graxos insaturados

do que os espermatozóides mamíferos. Produtos de peroxidação lipídica podem ser
usados para indexar a qualidade do sêmen aviário. Os efeitos da L-carnitina dietética no
sêmen de galo foram estudados. Com 58 semanas de idade, galos Leghorn (maduros)
foram alimentados com uma dieta suplementada com 500 ppm de L-carnitina por 5
semanas (Neuman et al. 2002). Em comparação com os controles, a L-carnitina não
alterou o consumo de ração ou o peso corporal. Os níveis circulantes de ácidos graxos
esterificados e L-carnitina aumentaram. O número de espermatozóides no sêmen de aves
alimentadas com L-carnitina aumentou significativamente nas semanas experimentais 3 e
4, e a peroxidação lipídica/bilhão de espermatozóides diminuiu. O volume do sêmen, o
876
peso testicular relativo (correto para a massa corporal) e a viabilidade não foram
alterados. Este estudo foi repetido começando com galos de 32 semanas (imaturos) e
alimentando as aves tratadas com uma dieta contendo 500 ppm de L-carnitina por 5
semanas. Ganhos de peso significativamente maiores foram observados nas aves
controle, e o consumo de ração não foi significativamente diferente entre os grupos
tratados e controle. Na quarta semana do estudo, as aves tratadas tiveram um aumento
significativo no número de espermatozóides. Galos jovens tratados com L-carnitina
tiveram peroxidação lipídica/bilhão de espermatozóides significativamente menor, um
declínio na porcentagem de espermatozóides mortos e um número significativamente
menor de células gigantes no testículo. Esses achados sugerem que a L-carnitina reduz a
peroxidação lipídica dos espermatozóides e aumenta a eficiência testicular para a
produção de espermatozóides viáveis. Outro estudo sobre L-carnitina, usando três grupos
de idades diferentes, foi feito em uma linhagem universitária de galos White Leghorn (Zhai
et al. 2007). O primeiro estudo forneceu uma dieta contendo 0, 125, 250 e 500 ppm de L-
carnitina por 8 semanas para galos a partir de 46 semanas de idade. O segundo estudo
alimentou os mesmos níveis por 17 semanas, e o terceiro estudo alimentou 0 ou 125 ppm
de L-carnitina desde o nascimento até 37 semanas de idade. No primeiro estudo, o
consumo de ração e a viabilidade do esperma não foram alterados pela L-carnitina
dietética. Os galos que consumiram a dieta contendo 125 ppm de L-carnitina aumentaram
significativamente a concentração de esperma. O volume de sêmen entre as dietas nos
tempos de amostragem não foi alterado. No segundo estudo, a alimentação com L-
carnitina por 8 semanas não afetou o consumo de ração, o peso corporal, o volume do
sêmen e a vitalidade do esperma. Houve uma tendência de galos que consumiram a dieta
de 125 ppm L-carnitina apresentarem aumento da concentração seminal de
espermatozóides. No terceiro estudo, embriões de 18 dias foram injetados in ovo no
líquido amniótico com 0, 1 ou 2 μg/ml e 3,77 Mol de L-carnitina, e a porcentagem de incubação não
foi afetada pelo tratamento (Zhai et al. 2008a). Na eclosão, galos de cada um dos
tratamentos com embriões foram colocados em uma dieta contendo 0 ou 125 ppm de L-
carnitina por 37 semanas. Às 17 semanas de idade, não houve efeito da exposição in ovo
à L-carnitina no volume do sêmen e na concentração de espermatozoides. A L-carnitina
dietética aumentou a concentração de espermatozoides (109/mL) de 22 a 37 semanas de
idade e diminuiu o peso corporal. Não houve diferenças no volume do sêmen.

6.5.2 – Galinhas

Zhai et al. (2008a) mostraram que galinhas, expostas a 2 μg/ml e 3,77 Mol de L-carnitina in ovo,
colocaram ovos mais pesados com maior albúmen e massa de casca. Outro estudo

877
usando ovos férteis de Ross x Ross, o líquido amniótico foi injetado com 0,0, 2,0 ou 8,0
mg de L-carnitina e este tratamento produziu uma tendência de aumento da eclodibilidade
e aumento do tempo de incubação (Keralapurath et al. 2010). Não houve diferenças nos
rendimentos de abate. Outro estudo mostrou que galinhas com dieta contendo 25 ppm de
L-carnitina por 16 semanas produziram progênie com características de carcaça
melhoradas (Kidd et al. 2005). Outro estudo foi feito em ovos férteis de galinhas Ross 308
alimentadas com dietas contendo 0 ou 25 ppm de L-carnitina, começando quando as
galinhas tinham 21 semanas de idade (Peebles et al. 2007). Os ovos foram coletados nas
semanas 25, 30, 32 e 38 e incubados. A administração de L-carnitina não diminuiu a
mortalidade de incubação ou eclodibilidade do total de ovos fertilizados, e não houve
diferenças entre os pesos da gema, albumina ou casca dos ovos das galinhas tratadas e
controle. A suplementação da dieta das galinhas com 125 ppm de L-carnitina não
melhorou a eclodibilidade dos ovos (Zhai et al. 2008b).

7. Nutracêuticos na Reprodução Assistida

7.1 Carnitina

7.1.1 – Sêmen

Os espermatozóides do búfalo (Bubalus spp.), em comparação com o gado bovino, são

mais suscetíveis aos efeitos negativos do congelamento e descongelamento. A adição de
L-carnitina ao extensor usado na criopreservação do sêmen de búfalo melhorou
significativamente a motilidade e diminuiu o dano semelhante à capacitação dos
espermatozóides (Longobardi et al. 2017). Lisboa et al. (2012) descobriram que a adição
de L-carnitina e L-acetil-carnitina a extensores à base de leite desnatado aumentou a
motilidade do sêmen e a integridade da membrana plasmática do sêmen equino resfriado
após 48 h de resfriamento (5 ºC). Não houve diferenças entre as preparações de sêmen
contendo L-carnitina, L-acetilcarnitina ou ambas L-carnitina e L-acetil-carnitina. Os
benefícios da adição de carnitina, metionina e inositol ao diluente de sêmen bovino foram
estudados em um modelo de congelamento/descongelamento (Bucak et al. 2010). A
adição de carnitina e inositol nos níveis de 7,5 mMol melhorou a motilidade subjetiva pós-
abatimento. Metionina e carnitina em 2,5 e 7,5 mMol e inositol em 7,5 mMol diminuíram a
porcentagem de anormalidades espermatozóides totais. A análise de motilidade
espermática assistida por computador (CASA) mostrou que a motilidade total foi
melhorada pela carnitina e inositol, e todos os aditivos diminuíram os danos ao DNA. Um
estudo foi feito em L-carnitina e piruvato para melhorar os parâmetros de

878
espermatozóides adversamente afetados pelo resfriamento do sêmen de garanhão (Gibb
et al. 2015). O sêmen foi coletado de garanhões Welch ou pôneis mestiços e preparado
para armazenamento (temperatura ambiente) com a adição de 10 mMol cada de L-
carnitina, piruvato, ou L-carnitina + piruvato ou sem L-carnitina e piruvato. O sêmen que
recebeu a adição de L-carnitina e piruvato manteve a motilidade aceitável (> 34%) por 72
h. A suplementação de sêmen com L-carnitina melhorou significativamente os parâmetros
de motilidade e reduziu o estresse oxidativo. Piruvato + L-carnitina melhorou ainda mais
os parâmetros de motilidade. Espermatozóides de aves são suscetíveis à peroxidação
lipídica quando crio preservados. Em um estudo de congelamento/descongelamento
usando sêmen de galinhas perdizes de patas verdes (raça polonesa de galinha
doméstica), L-carnitina a 1 mMol e taurina a 1 e 10 mMol aumentou significativamente o
potencial mitocondrial de espermatozóides descongelados (Partyka et al. 2017). A L-
carnitina e a taurina a 1 mMol também reduziram significativamente a apoptose e a
reorganização da membrana.

7.1.2 – Oócitos

A maturação in vitro de oócitos tem muitos incentivos, incluindo economia de custos. No

entanto, ROS reduz a produtividade da maturação in vitro de oócitos. Os oócitos
metafásicos II presos podem mudar seu metabolismo em direção ao uso de substratos
lipídicos. Oócitos suínos maturados in vitro foram co-incubados com espermatozóides
usando meio de fertilização in vitro mais a adição de L-carnitina a 0, 3, 6, 12 ou 24 mMol
(Lowe et al. 2017). A formação de blastocisto não diminuiu com a adição de 3 mMol L-
carnitina. Oócitos ou espermatozóides foram incubados por 1 h com 3 mMol L-carnitina
para pré fertilização para óvulos ou espermatozoides, respectivamente, ou durante os
primeiros 30 min de fertilização in vitro ou as primeiras 5,5 h de fertilização in vitro. A taxa
de clivagem foi significativamente maior para 1 h de incubação pré fertilização de oócitos
e espermatozóides. Os blastocistos foram vitrificados e descongelados. A sobrevivência
pós-aquecimento dos blastocistos foi aumentada para os oócitos pré-incubados com 3
mMol L-carnitina. Incubações de uma hora de oócitos com L-carnitina adicionada ao meio
não alteraram significativamente as porcentagens de oócitos fertilizados e esperma
penetrados e a formação de pró-núcleos, mas aumentaram significativamente a taxa de
clivagem dos oócitos. Adicionar 0,5 mg de L-carnitina/mL aos fluidos usados para
amadurecer oócitos de camelo aumentou a taxa de maturação e fertilização (Fathi e El-
Shahat 2017). A taxa de desenvolvimento embrionário (mórula e blastocisto) aumentou. A
adição de L-carnitina ao meio de cultura a 0, 0,3, 0,6 e 1,2 mg/mL foi investigada em
oócitos bovinos (Phongnimitr et al. 2013). A suplementação do meio com 0,6 mg/mL de L-

879
carnitina melhorou significativamente a sobrevivência dos blastocistos. A adição de 0,3 e
0,6 mg de L-carnitina ao meio de cultura melhorou significativamente a taxa de
maturação, e a adição de 1,2 mg de L-carnitina diminuiu significativamente a taxa de
maturação. A suplementação do fluido de maturação in vitro para oócitos bovinos
melhorou a maturação nuclear e o desenvolvimento embrionário após a fertilização in
vitro. No entanto, a adição de L-carnitina não melhorou o desenvolvimento embrionário
após a vitrificação. Um estudo sobre os efeitos da L-carnitina na maturação in vitro de
oócitos bovinos mostrou que o efeito geral da adição de L-carnitina ao meio de incubação
foi benéfico (Knitlova et al. 2017). A adição de L-carnitina ao meio de incubação para os
oócitos meioticamente menos competentes mostrou taxas de fertilização
significativamente maiores do que os oócitos controle meioticamente menos competentes.
A adição de L-carnitina ao fluido de incubação melhorou o rendimento de blastocistos nos
dias 7 e 8 em oócitos classificados como meioticamente mais competentes. Um estudo
sobre L-acetil-carnitina em oócitos ovinos maturados em laboratório para determinar os
efeitos na taxa de blastocisto e os efeitos em organelas intracelulares e gotículas de
lipídios (Reader et al. 2015). Os oócitos foram maturados em meio contendo 0,0 ou 2,0
mMol de L-acetil-carnitina e então fertilizados com sêmen de carneiro descongelado em
meio FIV. A adição de L-acetil-carnitina dobrou significativamente a taxa de blastocisto.
Nos oócitos maturados in vitro, não houve diferença no volume mitocondrial, número de
mitocôndrias e número de cópias mitocondriais. A L-acetil-carnitina aumentou o volume
citoplasmático, causando uma tendência de aumento do volume das vesículas e
distribuição alterada das gotículas lipídicas. Um estudo em embriões ovinos investigou os
efeitos da L-carnitina a 3,72 mMol em soluções de vitrificação e aquecimento (Saraiva et
al. 2018). Os parâmetros do estudo foram: mortalidade; números de células; células
autóticas e índice apoptótico; expressão gênica para carnitina palmitoil transferase I e II,
carnitina O-acetil-transferase e peroxiredoxina-1; e níveis de ROS. Nenhum desses
parâmetros foi alterado pela adição de L-carnitina.

8. Coco (Cocos nucifera L.)

Água de coco é usada como diluente de sêmen e como meio para o congelamento de
embriões. Um incentivo importante para o uso de extensores de sêmen de origem vegetal
é a probabilidade de os reguladores removerem algumas restrições de importação de
sêmen relacionadas a doenças. Os meios à base de água de coco em comparação com
os meios sem água de coco mostraram ser uma solução de retenção adequada para
complexos de células cúmulos-oócitos bovinos imaturos (Cordeiro et al. 2006). A água de
880
coco foi investigada como meio e como aditivo ao meio essencial mínimo para folículos
primordiais caprinos e não foi encontrada para melhorar a sobrevivência ou diâmetros
foliculares (Martins et al. 2005). O efeito de um diluente de água de coco 63 patenteado
(vendido como pó) sobre a fertilidade do sêmen congelado-descongelado para cães foi
determinado (Uchoa et al. 2012a). Após a inseminação artificial, foi relatada uma taxa de
concepção de 60%, taxa de parto de 50% e uma taxa média de natalidade de 3,4 0,6
filhotes. Um extensor de água de coco proprietário foi usado para diluir sêmen de
cachorro armazenado fresco (resfriado) (Uchoa et al. 2012b). O sêmen foi coletado,
estendido com Tris-gema de ovo ou diluente de água de coco, resfriado a 5 ºC por 6 h,
aquecido a 37 ºC por 30 se as cadelas foram inseminadas. Para os parâmetros do
sêmen, não houve diferença significativa entre os extensores. Todas as cadelas
inseminadas por um padreador conceberam (20/20) versos 18/20 gestações para cadelas
criadas por inseminação artificial. Não houve diferenças significativas para o tamanho do
litro, e as cadelas inseminadas com sêmen diluído com diluente de água de coco
exclusivo deram à luz uma porcentagem significativamente maior de filhotes do sexo
feminino. Em outro estudo, diluente de sêmen à base de água de coco foi examinado para
sêmen canino (Cardoso et al. 2006). A água de coco dos cocos verdes foi filtrada. A
fórmula do extensor de coco era 50% de água de coco, 25% de água ultrapura e 25% de
citrato de sódio, e o extensor de controle era um extensor de gema de ovo. O sêmen
diluído foi congelado e armazenado a –196 ºC por 1 semana e descongelado a 37 ºC e
parâmetros de sêmen avaliados. Não houve diferença entre o diluente de água de coco e
o diluente de gema de ovo para os parâmetros de sêmen avaliados. Os efeitos da água
de coco na melhoria dos parâmetros pós-descongelamento foram estudados no sêmen de
suínos (Bottini-Luzardo et al. 2013). Os grupos de tratamento usaram diferentes receitas
de diluente: Grupo 1, água bidestilada, lactose e gema de ovo; Grupo 2, água bidestilada,
lactose e glicerol de gema de ovo e pasta Orvus ET (um surfactante); Grupo 3, água
desionizada de coco, lactose e gema de ovo; e Grupo 4, água de coco in natura, lactose e
gema de ovo. A água de coco adicionada às receitas foi a água de coco filtrada sem
modificações (in natura) e a água de coco filtrada deionizada para remover o excesso de
íons cálcio. Os parâmetros para avaliar os espermatozóides foram: motilidade, integridade
acrossomal, integridade de membrana e atividade mitocondrial. O sêmen foi avaliado no
descongelamento e 30 e 60 min após o descongelamento. A adição de água de coco
deionizada melhorou significativamente os parâmetros pós-descongelamento do sêmen
suíno, e a adição de água de coco in natura filtrada reduziu significativamente os
parâmetros pós-descongelamento do sêmen suíno. Água de coco reconstituída a partir de

63 ACP-106c; ACP Servicos Tecnologicos Ltda, ACP Biotecnologia (Fortaleza, Ceara, Brazil)
881
água de coco em pó64 foi estudada como uma solução de congelamento para sêmen crio
preservado de javali (Silva et al. 2015). Este estudo de congelamento e descongelamento
mostrou que água de coco reconstituída mais solução de congelamento de
dimetilformamida produziu os espermatozóides de mais alta qualidade. O estudo utilizou
uma curva de controle de resfriamento automatizado para resfriar e congelar o sêmen. A
água de coco foi estudada como um extensor para o sêmen equino (London et al. 2017).
Os extensores de sêmen usados foram água de coco, água de coco com um antioxidante
patenteado, extensor de gema de ovo 65 e extensor de gema de ovo com antioxidante
patenteado. O sêmen diluído foi congelado e armazenado em nitrogênio líquido (–196 ºC).
Nenhuma diferença significativa nos parâmetros do sêmen pós-degola foi mostrada entre
os extensores de sêmen. O óleo de coco virgem 66 (VCO) foi estudado como um aditivo
para sêmen resfriado e congelado/descongelado de touros Brangus-Simental (Tarig et al.
2017). O sêmen foi diluído com 8% de VCO em diluente Tris que continha diferentes
concentrações de 0% (controle), 4%, 8%, 12%, 16% e 20% de gema de ovo. O sêmen
resfriado a 4 ºC foi avaliado às 24, 72 e 144 h. O sêmen congelado foi descongelado e
avaliado aos 7 e 14 dias. Para ambos os métodos de preservação, os parâmetros do
sêmen foram significativamente melhorados para 8% de VCO e 20% de gema de ovo.

9. Quercetina
A quercetina [2-(3,4-dihidroxifenil)-3,5,7-trihidroxicromen-4-ona] foi estudada como aditivo
a extensores de sêmen e como protetor testicular. Um estudo em sêmen de touros da
raça Holandesa mostrou que a adição de quercetina (25, 50, 100 e 200 μg/ml e 3,77 g/mL) ao sêmen
de touro estendido melhorou significativamente o comprimento, o DNA e o movimento da
cauda (Avdatek et al. 2018). A adição de quercetina e dimetilacetamida ao sêmen de
caprino Mahabadi melhorou a cinética de movimento pós-descongelamento e suprimiu a
peroxidação lipídica (Seifi-Jamadi et al. 2017). A quercetina (0,15 mMol) adicionada ao
sêmen de garanhão crio preservado classificado por sexo e não classificado melhorou a
motilidade pós-descongelamento e a capacidade de ligação por zona e reduziu a
fragmentação de DNA (Gibb et al. 2013). Não houve efeitos sobre a motilidade,
integridade acrossômica ou viabilidade de espermatozóides classificados por sexo. Os
ratos administrados com 50 mg de quercetina/kg de peso corporal/dia por 70 dias
concomitantemente com 20 mg de fenitrotião (pesticida)/kg de peso corporal melhoraram
a toxicidade testicular do fenitrotião (Saber et al. 2016).

64 ACP-103, coconut water from the fruit, sterilized and lyophilized (University of Ceará State, UECE, Brazil)
65 Oxyrase Corp. (Mansfield, OH)
66 Nano Xan Sdn. Bhd and Malaysia Agriculture Research and Development Institute (Malaysia)
882
10. Vitaminas e selênio (Se)
10.1 Química de Fundo

A vitamina E é um antioxidante e é referida como um desagregador da cadeia de

formação de radicais porque interrompe a propagação em cascata da formação de
radicais livres (Burton e Ingold 1981). A vitamina E existe em oito análogos (α-, β-, γ- e δ-
tocoferol e α-, β-, γ- e δ- tocotrienol), e todos eles têm atividade antioxidante (Zingg 2015).
A molécula de vitamina E é irreversivelmente quimicamente alterada quando reage como
antioxidante, e o local reativo é o hidroxila na porção cromano. As diferenças entre os
análogos da vitamina E em sua atividade in vivo podem ser atividades antioxidantes
específicas de análogos, suas interações específicas com enzimas, proteínas estruturais,
alterações das propriedades físicas e estruturais de lipídios de membrana, cinética de
enriquecimento e diferenças em produtos de biotransformação. A forma do a-tocoferol (α-
T) possui diferentes cinéticas que incluem o enriquecimento seletivo em mamíferos por
proteínas específicas que apresentam polimorfismo de expressão entre os indivíduos. A
vitamina E é absorvida pelos enterócitos do intestino delgado de micelas pelos receptores
necrófagos da classe BI e CD36 e exportada por agregação em quilomícrons. α-T é 50
vezes maior no plasma do que os outros sete análogos. Importante nesse processo de
enriquecimento é a proteína α-T-transportadora, e esse transportador também enriquece
os níveis de α-T hepático. A vitamina E modula a transdução de sinal de enzimas
(revisado por Zingg 2015). Esses mecanismos incluem a modulação de enzimas de
transdução de sinal por ligação direta ou alteração de sua regulação redox. A vitamina E,
nas membranas, pode alterar a transdução de sinal ao neutralizar a oxidação lipídica e,
na modulação, ao empregar diferentes mecanismos e alterar os domínios do lipid raft. A
vitamina E pode competir por locais de ligação do mediador lipídico nas proteínas de
transporte de lipídeos e, assim, modular o tráfego de transporte, a atividade enzimática e
as funções de sinalização. Um tema comum para a atividade da vitamina E é a interação
enzima/membrana que modula ou de outra forma afeta a transdução de sinal e a
expressão gênica.

10.2 Vitamina E na reprodução

Estudos mostraram que a suplementação com vitamina E melhora os parâmetros

reprodutivos e o excesso de vitamina E pode ser prejudicial. Em um estudo japonês,
vacas com natimortos apresentaram níveis significativamente mais elevados de vitamina
E, e níveis significativamente mais baixos de vitamina A e Se (Uematsu et al. 2016).
Nenhuma evidência de doenças virais (Akabane, Aino, Chuzan, Peaton, D’Aguilar,
Shamonda, BVDV, vírus Parainfluenza 3 e Herpesvírus Bovino-1) foi encontrada. Um
883
estudo em vacas leiteiras mostrou que a administração de vitamina E (DL-α-tocoferol)
diminuiu as membranas fetais retidas e natimortos (Pontes et al. 2015).

As vacas tratadas receberam 1000 UI de DL-α-tocoferol nos dias 19,2 ± 4,3, 12,9 ± 3,3 e
6,2 ± 2,9 dias antes do parto. As vacas que receberam vitamina E também melhoraram no
primeiro serviço sem retorno e subsequentemente diminuíram a perda de gestação. A
dieta de carneiros de lã fina Aohan foi suplementada com 0, 20, 200, 1000 ou 2400 UI de
vitamina E/ovelha/dia por 12 meses, e comportamento, sêmen e parâmetros testiculares
foram medidos (Yue et al. 2010). A suplementação da dieta com 200 UI de vitamina E
aumentou significativamente a libido e a produção total de espermatozoides e aumentou a
atividade de superóxido dismutase e da glutationa peroxidase na membrana celular
testicular. A suplementação com 20 e 200 UI de vitamina E aumentou a motilidade do
esperma. Todos os carneiros suplementados com vitamina E tinham, em comparação
com carneiros de controle, diminuição do malondialdeído mitocondrial testicular, e o
malondialdeído mitocondrial no grupo suplementado com 200 UI de vitamina E foi
significativamente menor do que nos outros grupos tratados. A vitamina E em 2.400 UI
aumentou os espermatozóides anormais. Um estudo em furões machos (Mustela
nigripes) mostrou, para parâmetros de sêmen, interações dietéticas entre a fonte de carne
(carne bovina, carne de cavalo e presa inteira) e vitamina E (Santymire et al. 2015). As
dietas diárias foram dieta de carne de cavalo de controle, carne de cavalo suplementada
com vitamina E a 400 UI/kg de matéria seca, carne de cavalo + presa inteira, dieta de
carne de cavalo + vitamina E diária + presa inteira, ou dieta de carne. Dietas e sangue
foram testados para vitaminas A e E assim como Se. Os eletro ejaculados foram
coletados mensalmente e avaliados quanto à concentração de espermatozóides,
morfologia e índice de motilidade espermática. A vitamina A na dieta de carne de cavalo
foi 150% maior do que a especificação do rótulo, e a dieta da carne continha 20% da
especificação do rótulo para vitamina A. A suplementação com vitamina E aumentou os
níveis de vitamina E no sangue. Furões alimentados com carne, em comparação com
furões alimentados com carne de cavalo, tinham concentração de espermatozóides
significativamente mais alta. Os furões alimentados com carne bovina ou de cavalo +
presa + vitamina E tinham os testículos maiores, e a alimentação das presas tendia a
aumentar o índice de motilidade espermática, o tamanho testicular e as porcentagens de
acrossomas normais. No geral, as dietas não afetaram o volume do sêmen e a
porcentagem de acrossomas normais. A suplementação com vitamina E tendeu a reduzir
o número de espermatozóides normais. O sucesso de acasalamento e o número de kits
nascidos não foram influenciados pela dieta. Este estudo mostra que a dieta e as
interações com os suplementos podem ter um efeito nos parâmetros do sêmen. Este
884
estudo também fornece evidências de que carnívoros selvagens em habitats com
escolhas alimentares limitadas podem ter impactos dietéticos na reprodução. O sêmen de
cães não apresenta boas pontuações pós-armazenamento. Isso geralmente é atribuído à
formação de radicais livres devido à oxidação de ácidos graxos nos espermatozóides e
subsequente rompimento da membrana celular. Cães reprodutores, em um estudo duplo-
cego randomizado com cada cão servindo como seu próprio controle, foram
suplementados com selênio e vitamina E (Kirchhoff et al. 2017). Machos férteis com
normospermia conhecida foram selecionados para o estudo. Eles foram alimentados com
uma dieta basal (controle) ou uma dieta basal e aleatoriamente designados a um grupo
que recebeu 0,1 mg/Se/cão/dia, 100 mg de vitamina E/cão/dia, ou 0,1 mg Se/cão/dia e
100 mg de vitamina E. O volume da fração rica em esperma não diferiu entre os grupos.
Os tratamentos com selênio e vitamina E reduziram o número de defeitos na cabeça do
esperma. Nenhum outro parâmetro de sêmen foi melhorado.

11. Nutracêuticos auxiliares

Várias culturas de algas e extratos foram relatados para melhorar a reprodução em
animais domésticos. Os machos receberam 1,5 mL de extrato de Spirulina platensis/dia
por 5 ou 10 dias (Granaci 2007). O autor concluiu que o extrato de espirulina aumentou o
volume da ejaculação, a motilidade, a taxa de partos e o número de leitões nascidos.
Nenhum outro relato sobre o extrato de espirulina em porcos foi encontrado. Cordeiros
presos em cercados foram alimentados com uma dieta suplementada com bagaço de uva
seco (da vinificação, Vitis spp.) a 0, 5 e 10% da matéria seca da dieta por 74 dias e
parâmetros testiculares medidos (Zhao et al. 2017). Este estudo investigou os efeitos
compensatórios do bagaço de semente de uva sobre os efeitos negativos de restrição
sobre o tamanho dos testículos de carneiros cercados. Após alimentação com bagaço de
uva, os carneiros foram sacrificados e os testículos removidos. Alimentar bagaço de uva
reduz as ROS testiculares e o malondialdeído e aumenta o peso testicular e o
comprimento testicular. A avaliação de espermatozóides isolados do epidídimo mostrou
que alimentar bagaço de uva com 10% de matéria seca aumentou significativamente o
número de espermatozóides em 10% e diminuiu as deformidades dos espermatozoides.
O bagaço da uva no nível de 10% aumentou significativamente a motilidade e a
expressão do gene testicular de superóxido dismutase. A suplementação da dieta das
éguas com 100 g L-arginina/égua/dia por 17 dias não aumentou a recuperação dos
embriões (Kelley et al. 2014). As éguas tiveram ovulações espontâneas e inseminações
artificiais. Os terpenóides carotenóides são encontrados em alimentos e adicionados a
885
rações animais para melhorar a reprodução, reduzir o estresse oxidativo e prevenir
deficiências. As deficiências de vitamina A são conhecidas por causar disfunções
reprodutivas e outros problemas de saúde. O β-caroteno é um precursor para a síntese
da vitamina A. Os níveis de β-caroteno natural nos alimentos são difíceis de prever e o
nutricionista recomenda que as necessidades diárias de vitamina A sejam adicionadas à
ração. Um estudo de 2 anos em vacas holandesas suecas mostrou que vacas leiteiras em
lactação mantidas sob métodos de agricultura orgânica sem suplementação de vitaminas
A e E não relataram um aumento nas ocorrências de infertilidade (Johansson et al. 2014).
Éguas trotadoras italianas em feno de grama e suplemento de grãos foram estudadas
periparto para os efeitos de um suplemento de β-caroteno 67 nos parâmetros de
reprodução (Trombetta et al. 2010). Imediatamente após o parto, as éguas foram
suplementadas com 1g de β-caroteno/égua por 15 dias. Em éguas controle, o β-caroteno
foi diminuído por 5 dias e então estabilizado, enquanto o β-caroteno junto com a vitamina
A foi aumentado nas éguas tratadas. O estradiol aumentou significativamente com o
tratamento com β-caroteno. Houve uma sugestão de que o intervalo entre o parto e a
ovulação foi encurtado. Em outro estudo, as éguas foram suplementadas com 1 g de β-
caroteno68/dia por 56 dias, começando 2 semanas antes do parto (Kuhl et al. 2012). O β-
caroteno foi excretado no leite, principalmente no colostro. As éguas foram criadas no
primeiro cio pós-parto (cio do potro), e 7/7 das éguas controle foram concebidas e 5/12
das éguas suplementadas com β-caroteno, concebidas. Os efeitos dos carotenóides da
microalga Haematococcus pluvialis sobre os parâmetros de desempenho foram
estudados em visons (Korhonen e Huuki 2015). O peso corporal das mães foi
significativamente maior nas fêmeas alimentadas com os carotenóides de H. pluvialis,
mas o número de filhotes/fêmeas não aumentou. O número de fêmeas estéreis foi maior
no grupo de controle (16 vs. 13), assim como as perdas dos filhotes de 46 dias (40 vs.
26).

A receita YiShenJianPi para a medicina tradicional chinesa demonstrou melhorar a

oligoastenozoospermia induzida por glicosídeo de tripterígio em camundongos BALB/c
(Sheng et al. 2017). A decocção foi feita a partir da receita YiShenJianPi que contém 30 g
de sementes de Cuscuta chinensis, 30 g de Lycium spp. fruto, 30 g de Schisandra spp.
fruto, 10 g de raiz de Codonopsis pilosula, 10 g de raiz de Astragalus membranaceus (não
processada), 10 g de casca de Citrus reticulata (seca), 6 g de Bupleurum spp., 6 g de
rizomas de Cimicifuga foetida, 6 g de Ligum chuanxiongustics e 6 g de rizomas de
Carthamus tinctorius. Os camundongos receberam glucosídeo de tripterígio por via oral

67 Rovimix® contendo 10% β-carotene 10%, Istituto delle Vitamine SpA (Milano, Italy)
68 Blattiviko beta 8000, Blattin Mineralfutterwerk (Seitschen, Germany)
886
na dose de 40 mg/kg de peso corporal por 4 semanas para induzir
oligoastenozoospermia. Os glicosídeos de tripterígio, de Tripterygium wilfordii Hook F.
(videira do deus do trovão), mostraram induzir infertilidade em homens e ratos (Qian
1987) e são prescritos para artrite. As doses de decocção da receita YiShenJianPi foram
de 1,35 mg/kg/dia e 2,70 mg/kg/ dia por 4 semanas. Os ratos que receberam a dose baixa
da receita YiShenJianPi mais o glicosídeo de Tripterygium melhoraram a
espermatogênese e a função mitocondrial nos espermatozóides.

12 Doenças urinárias
12.1 Antecedentes

As infecções do trato urinário ocorrem quando organismos virulentos se multiplicam e

persistem no trato urinário e causam problemas patológicos e fisiopatológicos. A infecção
do trato urinário está associada a violações nos componentes inatos e adaptativos do
sistema imunológico e também é uma complicação associada a patologias anatômicas e
neurológicas. As infecções urinárias, especialmente em animais mais velhos,
desenvolvem uma história de recorrência (Raditic 2015). Embora os mecanismos
moleculares que levam a infecções urinárias crônicas não sejam completamente
compreendidos, o estresse oxidativo está sendo identificado como um dos “pilares” para a
causalidade (Ratliff et al. 2016). À medida que a importância do estresse oxidativo na
doença renal se torna mais bem compreendida, o interesse e o uso de alimentos
funcionais e nutracêuticos estão aumentando. A recorrência de infecções do trato urinário
e urólitos, e a resistência de microrganismos a quimioterápicos antimicrobianos, está
aumentando o uso de nutracêuticos na medicina veterinária e humana. As infecções
podem ser ascendentes ou localizadas em um local específico, como a bexiga urinária ou
a pelve renal. Os medicamentos antimicrobianos geralmente são eficazes no tratamento,
mas as recorrências após o regime terapêutico são comuns. Os antibióticos também
perturbam o microbioma do corpo. Escherichia coli é responsável por cerca de 50% das
infecções urinárias em cães e gatos. As fímbrias tipo 1 de E. coli e outras
Enterobacteriaceae que causam infecções do trato urinário aderem ao resíduo de açúcar
manose nas mucosas e nas membranas celulares. A adesão está permitindo que a
infecção se estabeleça e se espalhe. Os urólitos são uma doença urinária comum na
medicina de animais de companhia. Infecções, especialmente organismos positivos para
urease, podem aumentar a ocorrência de cristais de estruvita (Gomes et al. 2018). A
formação de urólitos geralmente consiste em estágios distintos. Estes são
supersaturação, nucleação, crescimento, agregação e retenção. Os urólitos de oxalato de
887
cálcio são oxalato de cálcio precipitado, sendo o oxalato de fontes dietéticas e
metabólicas. Há evidências crescentes de que o microbioma pode afetar a incidência de
urólitos (Mehta et al. 2016). A descoberta na medicina humana sugere que os urólitos de
oxalato estão associados a um microbioma que possui microrganismos degradadores de
oxalato diminuídos. Os nutracêuticos estão sendo estudados por seus efeitos profiláticos
na prevenção de danos renais associados ao estresse oxidativo. Extratos de etanol e éter
de petróleo de abacate (Persea americana), noz (Persea americana), linhaça (Linum
usitatissimum) e rúcula (Eruca sativa; syns. E. vesicaria subsp. Sativa) mostraram
proteger ratos dos efeitos tóxicos da cisplatina (Al-Okbi et al. 2014). A cada grupo de ratos
foi administrado oralmente os extratos de sementes de plantas a 250 mg/kg de peso
corporal por 20 dias e, em seguida, administrados 7,5 mg de cisplatina/kg de peso
corporal. A administração de extratos nutracêuticos reduziu os níveis plasmáticos de
malondialdeído (medida da peroxidação lipídica) nos ratos tratados com cisplatina. O pré-
tratamento com os extratos diminuiu significativamente as aberrações cromossômicas em
comparação com o grupo administrado apenas com cisplatina. A comparação
histopatológica dos ratos controles (sem nutracêutico ou cisplatina), cisplatina isolada e
nutracêutico mais cisplatina mostrou que os extratos de rúcula (E. sativa) proporcionaram
70% de proteção e os extratos de linhaça 50% de proteção contra os efeitos nefrotóxicos
da cisplatina. Na medicina veterinária e humana, uma dieta rica em frutas e vegetais
demonstrou ser protetora contra doenças renais (Hall et al. 2016; Manfredini et al. 2016).

12.2 Frutas

Foi demonstrado que uma dieta rica em frutas e vegetais na medicina veterinária e
humana é protetora contra doenças renais (Hall et al. 2016; Manfredini et al. 2016). O
aumento da excreção de citratos e malatos é benéfico na redução da ocorrência e
recorrência de urólitos.

12.2.1 – Cranberry (Vaccinium spp.) e Peras (Pyrus spp.)

Cranberries inteiras (Vaccinium macrocarpon Aiton, V. oxycoccos e V. vitis-idaea) e suco

de cranberry têm sido usados por centenas de anos como remédios para problemas de
saúde urinária (Davidson et al. 2014, Anon 2016; Zhao et al. 2018). Os níveis e o perfil
químico das proantocianidinas do tipo A e a eficácia dos produtos derivados do oxicoco
variam com o Vaccinium spp. e condições de cultivo. Os extratos de cranberry são
produzidos por vários métodos. Há evidências que mostram que o grupo proantocianidina
de fitoquímicos em cranberries bloqueia a adesão das fímbrias bacterianas dos tipos 1 e 2
à porção manose nas células e mucosas do trato urinário (Abascal e Yarnell 2008). O
suco de cranberry também reduz a formação de biofilmes urinários. Um estudo, usando
888
um pequeno número de animais em cães de clientes com uma história de mais de três
infecções recorrentes do trato urinário, mostrou que a administração oral de extrato de
cranberry69 evitou o desenvolvimento de infecções do trato urinário. A parte in vitro deste
estudo também mostrou que a urina de cães que receberam extrato de cranberry impediu
a aderência de Escherichia coli às células renais caninas Madin-Darby (Chou et al. 2016).
A urina dos cães tratados com extrato de cranberry não apresentou atividade
bacteriostática. As concentrações de fitoquímicos proantocianidinas (flavonóides
polifenóis) no extrato de cranberry não foram relatadas. As peras estão sendo
recomendadas na medicina humana como profilático para urólitos (Manfredini et al. 2016).
Os ácidos orgânicos em peras são provavelmente importantes na prevenção de urólitos.
As peras contêm compostos antioxidantes e antiinflamatórios (Li et al. 2012). Os
compostos antioxidantes são os polifenóis, a saber, arbutina, catequina, ácido
clorogênico, quercetina e rutina. Os níveis de antocianinas foram correlacionados com a
atividade antioxidante, e os triterpenóides estão fortemente correlacionados com a
atividade antiinflamatória. Não foram encontrados relatos na literatura veterinária do uso
da pêra ou de seus extratos como profilático ou para tratamento de urólitos.

12.3 Remédios fitoterápicos

O selo dourado (Hydrastis canadensis L.) contém berberina, que tem propriedades
antibacterianas e é usada para cistite na medicina humana (Abascal e Yarnell 2008). Tem
eficácia no tratamento de infecções por E. coli. O selo dourado também é usado como
etnoterapêutico para tratar infecções uterinas caninas e felinas na medicina tradicional na
Colúmbia Britânica, Canadá (Lans et al. 2009). A berberina em selo dourado bloqueia a
expressão de fímbrias de E. coli e a adesão de Streptococcus pyogenes às células
epiteliais. Buchu Berg. (sin. Barosma betulina Bartl.) tem uso histórico para infecções
urinárias e cálculos, e os extratos têm atividade antibiótica (Abascal e Yarnell 2008; Moolla
e Viljoen 2008). Doses altas causam hepatotoxicidade em ratos. Parece não haver relatos
de seu uso em medicina veterinária. Extrato em etanol de Poria cocos Wolf. (sin.
Wolfiporia extensa Peck.) foi estudado em ratos usando um modelo de insuficiência renal
induzida por adenina (Zhao et al. 2013). Simultaneamente ao tratamento com adenina,
um grupo de camundongos recebeu 60 mg do extrato seco de Poria cocos (reconstituído
em 1 mL). Os autores concluíram que dez dos biomarcadores estudados em um perfil
metabonômico mostraram que o extrato de Poria cocos era protetor para o rim. Extratos
da epiderme de Poria cocos sclerotia foram testados em ratos quanto à atividade diurética
(Feng et al. 2013). O extrato de acetato de etila apresentou maior atividade diurética e
aumentou a excreção de íons sódio e cloro. Os extratos de acetato de etila (epiderme de
69 Cranimals (West Vancouver, BC, Canada)
889
Poria cocos sclerotia) foram posteriormente caracterizados quimicamente e estudados in
vitro em culturas de HK-2 para inibição de fibrose (Wang et al. 2018). Os triterpenos,
identificados como PZG e PZH, inibiram a suprarregulação da expressão do colágeno I e
lesão podocitária. O extrato etanólico de Poria cocos tem atividade antifúngica (A.
fumigatus, C. albicans) e antibacteriana (Acinetobacter baumannii, S. aureus) (Zhang et
al. 2013). Um extrato contendo triterpenos, polissacarídeos e esteróides de Poria cocos
foi testado in vivo quanto à sua atividade antioxidante e prevenção de lesão de células
renais ligada à urolitíase (Schulman et al. 2016). Os autores concluíram que este extrato é
um candidato a profilático para urolitíase. Foi relatado que a framboesa (Rubus idaeus L.)
é eficaz na medicina humana como tratamento e profilático para urólitos.

Na medicina tradicional chinesa, a framboesa é considerada uma cura para doenças

renais e a folha da framboesa é considerada um diurético leve. Usando uma nefrolitíase
de oxalato de cálcio induzida por glioxilato em modelo de camundongos, a eficácia do
extrato de raiz de framboesa foi investigada (Ghalayini et al. 2011). Os camundongos
receberam 100 ou 200 mg/kg/dia de extrato de raiz de framboesa por 12 dias. Os rins
foram examinados por histopatologia e os rins analisados para cálcio. O tratamento com
extrato de raiz de framboesa reduziu os depósitos de oxalato de cálcio nos rins de
camundongos que receberam glioxilato. Os pesos renais dos rins dos camundongos que
receberam glioxilato foram significativamente maiores dos que receberam glioxilato mais
extrato de raiz de framboesa. Os níveis de cálcio nos rins dos ratos que receberam
glioxilato mais extrato de raiz de framboesa não foram significativamente diferentes dos
ratos controles (sem tratamento com glioxilato ou extrato de raiz de framboesa). Um
estudo em ratos usando água quente e extratos de metanol quentes de frutas de
framboesa selvagem secas ao ar teve um efeito diurético conservador de potássio (Zhang
et al. 2011). As decocções foram secas, e os ratos receberam os extratos na proporção de
3 g/kg de peso corporal, hidroclorotiazida foi administrada como padrão de referência e os
ratos controles receberam 10 mL de água/kg de peso corporal. Os ratos administrados
com hidroclorotiazida tiveram a maior produção urinária, seguidos pelos ratos que
receberam o extrato de metanol da fruta Rubus idaeus selvagem. Os extratos da fruta
framboesa cultivada não apresentaram propriedades diuréticas. Extratos de água e
solvente de Rubus rosaefolius Sm. as folhas têm propriedades diuréticas em ratos (de
Souza et al. 2017). Seu uso médico popular é para tratar a hipotensão. O Rubus idaeus
não parece ter uso na medicina veterinária para doenças urinárias, exceto na medicina
tradicional chinesa aplicada à medicina veterinária. A quercetina é bioflavonóide e é o
polifenol mais abundante em frutas e vegetais. Está presente como um glicosídeo em
material vegetal comido e como aglicona em suplementos e é importante na
890
farmacocinética de absorção. Frutas comuns que contêm quercetina são maçãs,
cranberries, cerejas e uvas, e vegetais que contêm quercetina são cebola, pimentão e
aspargos. Doses altas de quercetina (acima de 1 g/dia) podem ser prejudiciais a danos
renais preexistentes. A quercetina pode ser um promotor de células neoplásicas
dependentes de estrogênio. A farmacocinética e a toxicologia da quercetina foram
revisadas recentemente (Andres et al. 2018). É considerado um candidato a medicamento
para doença renal em animais de companhia e medicina humana (Pollen 2001; Nirumand
et al. 2018). A administração concomitante de quercetina demonstrou reduzir a toxicidade
renal da ciprofloxacina em ratos (Elbe et al. 2016).

12.4 Ácido lipóico

O ácido lipóico de ocorrência natural existe como lipoilisina e é sintetizado nas células de
mamíferos. O ácido a-lipóico [(R) -5- (1,2-ditiolan-3-il) ácido pentaenóico] é um
nutracêutico usado como um nutriente mitocondrial, como um antioxidante e como um
equalizador para diminuição da atividade ligada à geriatria de piruvato desidrogenase. A
molécula de ácido a-lipóico é um derivado do ácido octanóico e, na forma oxidada, possui
uma ligação dissulfeto intermolecular. O anel 1,2-ditiolato é reativo com moléculas
sensíveis a redox. As células reduzem o ácido a-lipóico a ácido di-hidro lipóico e ambas
as formas estão presentes extracelularmente. Molécula por molécula, o ácido a-lipóico é
mais reativo do que a glutationa e a N-acetilcisteína (Zhang e McCullough 2016). O ácido
a-lipóico é anfipático e é solúvel em ambientes aquosos e lipídicos. A dimetilarginina
simétrica está sendo reconhecida na medicina veterinária como um biomarcador da
função renal e um marcador químico endógeno para o cálculo da taxa de filtração
glomerular. Ter biomarcadores mais sensíveis disponíveis fornece parâmetros sensíveis
para avaliação da eficácia de nutracêuticos prescritos como protetores renais. A dose de
ácido DL-a-lipóico varia de 2,5 a 25 mg/kg/dia em alimentos para cães. Alimentos para
cães extrudados têm menor biodisponibilidade do ácido (Zicker et al. 2010). Existem
relatos de intoxicações por ácido DL-a-lipóico em cães e gatos (Hill et al. 2004; Loftin e
Herold 2009). As doses tóxicas observadas em cães são de 191–210 mg do ácido/kg de
peso corporal para cães. Os níveis de dosagem de 30–60 mg do ácido/kg de peso
corporal são tóxicos para gatos com uma dose de 60 mg/kg de peso corporal, causando
mortes em gatos. Um cão ingeriu uma dose estimada de 210 mg do ácido/kg de peso
corporal e foi encaminhado ao veterinário 60 horas depois. As observações clínicas foram
hiperestesia, hipoglicemia, lesão hepática aguda e insuficiência renal oligúrica. O cão foi
sacrificado 76 horas após a ingestão. O tratamento em cães é sintomático, incluindo o
tratamento agressivo da hipoglicemia. Embora usado, a eficácia de S-adenosil metionina,
891
N-acetilcisteína e silimarina para o tratamento da intoxicação pelo ácido em cães não foi
relatada. Um cão, após ingerir 191 mg do ácido/kg de peso corporal, foi hospitalizado e
tratado sintomaticamente. Recebeu alta 4 dias depois com medicamentos e 4 meses
depois foi relatado pelo proprietário como assintomático. A toxicologia do ácido foi
estudada detalhadamente em gatos com gatos e mostrou ser dez vezes mais sensível do
que humanos, cães ou ratos. Uma dose de 30 mg do ácido/kg de peso corporal é tóxica
para gatos e uma dose de 60 mg/kg pode ser fatal. A dose oral única máxima tolerada
calculada para gatos é de 13 mg do ácido/kg de peso corporal. Em gatos, os sinais
clínicos de intoxicação incluem ptialismo, hiperestesia e algum grau de anorexia. Não
parece haver nenhuma lesão macroscópica distinta para intoxicação pelo ácido. A
histopatologia hepática observada em gatos é edemaciada, citoplasma granular a
vesicular, perda de revestimentos sinusoidais distintos e falta de estoques de lipídios ou
glicogênio nas regiões centrolobulares do fígado. A histopatologia observada por
microscopia ultraestrutural é o espaço expandido de Disse, perda e rompimento de
microvilosidades sinusoidais de hepatócitos, rompimento de complexos juncionais e
canalículos biliares e perda de estoques de glicogênio. Na célula, o ácido é transformado
enzimaticamente em ácido di-hidrolipóico pela glutationa redutase, lipoamida
desidrogenase e tioredoxina redutase. O ácido diidrolipóico é excretado das células e
então reoxidado ou metabolizado. A pesquisa em cultura de células mostrou que o ácido
dihidrolipóico é um gatilho que causa a cascata da caspase 3 na mitocôndria, levando à
apoptose.

12.5 Manose e Metionina

As bactérias, para infectar as células epiteliais, precisam aderir antes de se infiltrarem nas
células. Algumas bactérias possuem fatores de virulência específicos para adesão ao
epitélio. A E. coli uropatogênica possui fator de virulência H das fímbrias de lectina
adesina, que permite que a bactéria adira aos oligomanosídeos da glicoproteína
uroplacina Ia no uroepitélio. A D-manose demonstrou ser eficaz na redução da recorrência
de infecções do trato urinário em mulheres. Um estudo in vitro mostrou que a D-manose
reduziu a aderência dos patógenos equinos E. coli, Pseudomonas aeruginosa e
Streptococcus zooepidemicus às células endometriais equinas (King et al. 2000). Há
relatos de uso bem-sucedido de D-manose para tratar infecções primárias e recorrentes
do trato urinário em cavalos, cães e gatos. O efeito colateral relatado é diarreia. D,L-
metionina foi relatada como um tratamento para urólitos de estruvita ligados a infecções
em cães (Raditic 2015). A dose utilizada foi de 100 mg de D,L-metionina/kg de peso
corporal a cada 12 horas por até 4 meses.

892
13. Receitas Nutracêuticas e Nutracêuticos Candidatos
Remédios fitoterápicos e probióticos são usados no tratamento da urolitíase. Uma eficácia
desejada dos suplementos de ervas é dissolver e prevenir a recorrência dos urólitos e ser
eficaz como tratamento e profilático para cistite urinária. CrystalClair 70, um novo produto
baseado na fórmula Pai Shi Tang da medicina tradicional chinesa, foi desenvolvido para
tratar a urolitíase em cães e gatos (Wen e Johnston 2012). Quatro a 60 semanas de
tratamento com 33,3 mg de CrystalClair/kg de peso corporal foi eficaz na dissolução de
urólitos em 19/33 cães e 7/13 gatos. O tratamento foi eficaz em 2/8 cães com urólitos de
oxalato de cálcio. Esta preparação é recomendada como profilático em cães e gatos com
história conhecida de urolitíase. Não foram relatados efeitos colaterais. O cogumelo Poria
cocos (Fu-Ling) tem sido usado na medicina tradicional chinesa como ingrediente em
remédios para doenças renais. Este cogumelo, considerado um nutracêutico candidato à
medicina veterinária, cresce em torno de pinheiros e contém triterpenóides (poriatina),
polissacarídeos e esteróides. Canephron N 71 é um nutracêutico produzido na Alemanha
usado para a inflamação do trato urinário e urolitíase e como antiespasmódico e
antibacteriano (Naber 2013). Os ingredientes são centáurea-menor (Centaurium
erythraea Rafn.), levístico (Levisticum officinale Koch.) e alecrim (Rosmarinus officinalis
L.). Essas plantas contêm flavonóides, glicosídeos fenólicos, ftalídeos, secoiridoides,
ácidos fenol carboxílicos e óleos essenciais. Há um relato de disfunção hepática
associada ao Canephron N (Sychev et al. 2011). Nessa ocorrência, os medicamentos
concomitantes ao Canephron N foram risperidona e clomipramina, sendo a escala de
Naranjo72 definida como provável. A conclusão é que o Canephron N tem benefícios e é
seguro. Não foram encontrados relatos sobre seu uso em medicina veterinária. Foi feito
um estudo da toxicologia de C. erythraea em camundongos e ratos (Tahraoui et al. 2010).
As plantas de C. erythraea foram colhidas no norte do Marrocos durante maio e junho. As
plantas foram secas ao ar, moídas e extraídas com água. Os camundongos receberam 1–
15 g de extrato/kg de peso corporal e nenhum efeito adverso foi observado. Os ratos
foram administrados por via oral com 0, 100, 600 e 1200 mg de extrato/kg de peso
corporal por 90 dias. Todos os parâmetros hematológicos, exceto o volume corpuscular
médio, não foram significativamente diferentes dos controles. Os parâmetros hepáticos e
urinários não foram alterados significativamente, e nos grupos de 600 e 1200 mg/dia, a
glicemia e os triglicerídeos diminuíram significativamente. C. erythraea pode ser um
nutracêutico candidato para uso em medicina veterinária. Um estudo cruzado sobre as
receitas de ervas Alisma, San Ren Tang e Wei Ling Tang em gatas esterilizadas saudáveis

70 CrystalClair, Natural Solutions, (Speonk, NY). http://www.naturalsolutionsvet.com/product.html?pid=81

71 Bionorica SE (Neumarkt, Germany)
72 https://livertox.nih.gov/Narajo.html
893
em tratamento e fora do tratamento não mostrou nenhuma diferença nos parâmetros
urinários (Daniels et al. 2017). Os parâmetros medidos foram excreções urinárias de 24
horas, volume de urina de 24 horas, pH da urina e saturação urinária de 24 horas para
oxalato de cálcio ou estruvita. Uma dieta canina 73 contendo óleo de peixe, ácido lipóico,
vitaminas C e E, L-carnitina, frutas, vegetais e proteínas de ovo e frango, formulada para
controlar a ingestão de sódio e fornecer proteína com alto valor biológico, demonstrou
melhorar a função renal em cães idosos (Hall et al. 2016). A função renal foi indexada em
dimetilarginina e creatinina simétricas séricas.

14. Probióticos
Os probióticos estão sendo explorados na medicina humana e veterinária como
profiláticos para reduzir o risco e a recorrência de doenças geniturinárias. Há um interesse
substancial no microbioma do corpo total e suas interações em doenças urogenitais
crônicas. Os urólitos contendo oxalato são difíceis de dissolver com várias terapias e
geralmente precisam ser removidos por procedimentos mecânicos e cirúrgicos. O oxalato
é absorvido em todos os segmentos do intestino delgado e há evidências de que uma
grande quantidade de oxalato é absorvida no intestino grosso (Peck et al. 2016). Com
foco no microbioma intestinal, o Oxalobacter formigenes no intestino grosso pode induzir
a secreção de oxalato pelos enterócitos no lúmen, onde é metabolizado por micróbios
intestinais (Miller e Dearing 2013). Bactérias degradadoras de oxalato, como O.
formigenes, Bifidobacterium spp., Porphyromonas gingivalis e Bacillus spp., degradam
oxalato no intestino (Peck et al. 2016). O cólon tem a capacidade de regular a absorção e
a secreção de oxalato e tem uma grande influência na homeostase do oxalato no corpo.
O. formigenes, um Gram-negativo e anaeróbio obrigatório, é considerado importante na
manutenção da homeostase do oxalato. Há evidências de que as terapias com
antimicrobianos provavelmente alteram a homeostase do oxalato, alterando o microbioma
intestinal. O. formigenes pode ser um candidato a probiótico em medicina veterinária.
Bactérias de dois probióticos 74 foram estudadas in vitro para metabolizar oxalato (Cho et
al. 2015). As bactérias presentes nos probióticos foram Lactobacillus spp.,
Bifidobacterium spp. e Enterococcus spp. Dois isolados de L. acidophilus diminuíram o
oxalato na cultura; L. plantarum aumentou o oxalato no meio de cultura. A conclusão geral
é que Lactobacillus spp. e suas cepas são provavelmente variáveis em sua capacidade
de degradar o oxalato. As bactérias do ácido láctico no intestino canino têm capacidade in

73 Hill’ s Pet Nutrition, Inc. (Topeka, USA)

74 Vetri-Mega Probiotic, Vetri-Science Laboratories (Essex Junction, USA) e Proviable-DC, Nutramax Laboratories Inc. (Lancaster,
USA)
894
vitro de degradar o oxalato (Ren et al. 2011). Esses isolados são Leuconostoc
mesenteroides (RL75), Lactococcus garvieae (CD2), Lactococcus lactis subsp. lactis
(CS21), Enterococcus faecium (CL71 e CL72) e Enterococcus faecalis (CD14, CS62 e
CD12). Muitos deles são usados em probióticos, mas não há relatos de seu uso em
probióticos para urolitíase. No manejo da cistite, há um interesse crescente no uso de
infusões de probióticos para alterar a microbiologia da bexiga urinária para controlar a
cistite crônica.

15. Medicina Etnoveterinária

O uso de extratos de plantas, decocções, infusões, tinturas e outras formulações para o
tratamento de doenças animais é registrado ao longo da história escrita. Há um interesse
crescente na investigação do uso histórico e atual de botânicos e outros nutracêuticos na
medicina veterinária, especialmente na documentação de eficácia e segurança. A Tabela
1 mostra que muitas áreas rurais usam preparações de plantas e nutracêuticos. O custo
dos medicamentos modernos está aumentando o interesse em pesquisar a eficácia dos
etno-nutracêuticos.

Tabela 1 Exemplos de etno-nutracêuticos usados como remédios geniturinários para animais

domésticos
Nome científico da
Condição (espécie) Partes da planta Adm. Referência
planta
Prevenir placenta retida
Adiantum capillus- Fronde transformada em
e hemorragia (bovina, Oral
veneris L. decocção
ovina)
Laurus nobilis L. Decocção feita de folhas Oral
Decocção das sementes;
Prevenir problemas pós- Linum usitatissimum L. sementes fervidas, podem ser Oral
parto (bovinos, ovinos) misturadas com outras plantas
Uncini
Misturado com outras
Malus sylvestris L. Oral Manganelli et
sementes e decocções al. (2001)
Prevenir problemas pós-
parto (bovinos, Rubia peregrina L. Planta inteira sem raízes Oral
lagomorfos)
Infusão feita a partir de toda a
Apium nodiflorum L. Oral
Prevenir problemas pós- planta
parto (bovinos) Parietaria diffusa Mert. Decocção misturada com flor
Oral
e Koch. de trigo

895
 Tabela 1 Exemplos de etno-nutracêuticos usados como remédios geniturinários para animais
domésticos
Nome científico da
Condição (espécie) Partes da planta Adm. Referência
planta
Acacia sinuata Lour.,
Chá do caule, casca e raízes
Merr.
50 g triturados com 3-4 folhas
Acacia catechu L.
de Cassia occidentalis L. Oral
Pó de cúrcuma com óleo de
Curcuma longa L.
jiggery
Cynodon dactylon L.
Ficus carica L., Ficus Frutas trituradas fervidas e
racemosa L. jiggery em água
Butea monosperma Chá de raiz triturada; pode ser
Lam. misturado com outras plantas
Chá de folhas com soro de Oral
Flacourtia indica Burm. Upadhyay et
leite al. (2011),
Kumar and
Hordeum vulgare L. Grãos com forragem Bharati (2013)
Placenta retida
Pennisetum Folhas misturadas com chá de
(ruminantes)
americanum L. cevada
Folhas frescas ou fervidas em
Saccharum officinarum
água com forragem; outras
L.
variantes usadas
Folhas (25 g) misturadas com
Tridax procumbens L. cinzas de esterco de vaca
dadas com água
Triticum aestivum L. Dado com açúcar mascavo
Oral ou
Ziziphus nummularia
Raízes esmagadas na água tópico no
Burm., Wight & Arn.
útero
0,25 kg de folhas misturadas
Narcissus tazetta L.
com palha e farinha e fervidas Aziz et al.
Oral (2018)
Visnaga daucoides
Infusão de frutas por 3 dias
Gaertn.
Placenta retida e 90 mL de tintura de partes
Alchemilla vulgaris L. Lans et al.
infecção uterina aéreas Oral (2007)
(ruminantes) Hedera helix L. Punhado de partes aéreas
Deslocamento uterino Raiz moída misturada com
Anisomeles indica Linn.
(ruminantes) leitelho
Butea monosperma Chá de raiz triturada; pode ser
Lam., Taub. misturado com outras plantas
Prolapso de útero Flacourtia indica Burm. Chá de folhas com soro de
(rumninantes) f., Merr. leite
Upadhyay et
Ichnocarpus frutescens Pasta de folha misturada com Oral al. (2011)
L. gengibre e fervida
Bauhinia racemosa, Suco de planta misturado com
Leucorréia (ruminantes)
Lamk. óleo vegetal
Corchorus depressus Pasta de folhas misturada com
Prevenir o aborto L., Hordeum vulgare L. farinha Hordeum vulgare
(ruminantes)
Pedalium murex L. Suco

896
 Tabela 1 Exemplos de etno-nutracêuticos usados como remédios geniturinários para animais
domésticos
Nome científico da
Condição (espécie) Partes da planta Adm. Referência
planta
Uncini
Diurético (bovino, ovino, Petroselinum sativum Planta fresca, dose aumentada
Oral Manganelli et
suíno) Hoffm. pode causar aborto al. (2001)

Problemas urinários Dichrostachys cinerea Upadhyay et

Pó de casca de caule Oral al. (2011)
(ruminantes) Wight & Arn.
Costus spiralis Jacq.
Echinodorus
grandiflorus Cham & Antonio et al.
Pedra nos rins (canino) (2015)
Schltdl., Infusão de folhas Oral
Phyllanthus tenellus
Roxb.
Abutilon indicum L. 200 g triturado
250 g triturados com 4-5 folhas
Acacia nilotica subsp. de Syzygium cumini (L.),
Kumar and
Hematúria (ruminantes) Indica Benth. Mangifera indica (L.) e Aegle Oral Bharati (2013)
marmelos (L.)
100 g triturados com 3-4 folhas
Aegle marmelos L.
de Abutilon indicum (L.)
Infecção urinária Potentilla reptans L. Uncini
Infusão Oral Manganelli et
(bovinos, ovinos) Costus spiralis Jacq. al. (2001)

Hemorragia pós-parto Euphorbia microphylla Upadhyay et

Planta inteira com chapati Oral al. (2011)
(ruminantes) Lam.
Bulbo amassado e misturado Aziz et al.
Allium sativum L. (2018)
com soro de leite por 6–8 dias
Aumentar a fertilidade Cerca de 100 g esmagado Oral
(bovina) Alocasia macrorrhizos com uma pitada de cânfora, Kumar and
L. com pão de Triticum aestivum Bharati (2013)
3 x /dia por 2 semanas
200 g de raiz fresca misturada
Aumentar a fertilidade Kumar and
Heracleum candicans com farinha de trigo e Oral Bharati (2013)
(Bovino, ovino, caprino)
administrada por 3 dias
Allium cepa L. Bulbos frescos com manteiga
Aloe vera L., Burm. Folhas frescas com forragem
Citrullus vulgaris
Thunb., Matsum & Fruta
Estro anormal Nakai.
(Elephantidae)
Curcuma longa L. Rizoma fresco com cânfora
Lycopersicum
Fruto fresco
esculantum L. Jayakumar et
Oral al. (2017)
Musa paradisiaca L. Líquido do caule fresco
Allium cepa L. Bulbos frescos com coalhada
Líquido de caule e frutas
Musa paradisiaca L.
frescas
Mosto (Elephantidae) Myristica fragrans Pó de frutas fornecido com
Houtt. forragem
Sementes em pó com sal-
Piper nigrum L.
gema

897
 Tabela 1 Exemplos de etno-nutracêuticos usados como remédios geniturinários para animais
domésticos
Nome científico da
Condição (espécie) Partes da planta Adm. Referência
planta
Melhorar a fertilidade Avena sativa L. Cariopses germinadas
(bovina, ovina) Prunus avium L. Folha (antes da reprodução)
Aumentar a produção de Uncini
Stellaria media L., Vill. Folhas adicionadas à ração
ovos (gallus) Oral Manganelli et
al. (2001)
Urtica dioica L. Sementes
Aumentar a produção de
ovos (Aves) Sementes, usadas com outras
Urtica urens L.
plantas
Tese citada em
Sintomas de cio Lepidium meyenii
Tubérculo Oral Hermann e
melhorados e outros Walpers. Bernet (2009)
parâmetros de
Maior número de espermatozoides ejaculados com
reprodução (ovinos)
motilidade aumentada (bovino)

16. Observações Finais e Orientações Futuras

A eficácia dos nutracêuticos costuma ser uma controvérsia. Importantes no debate sobre
a eficácia são as alegações não comprovadas de nutracêuticos proprietários. Existem
estudos que mostram que os nutracêuticos são eficazes. Este também é o racional de
que veterinários e médicos, para usar sabiamente os nutracêuticos, devem ser
especificamente treinados na matéria médica de nutracêuticos e etnofarmacologia. Os
nutracêuticos estão sendo cada vez mais considerados no manejo médico quando a
terapêutica médica convencional não é eficaz. Isso inclui o uso de receitas médicas
étnicas e homeopáticas na medicina veterinária. Também há uma mistura de terapias
convencionais e nutracêuticas. Os nutracêuticos são uma mistura de fitoquímicos e
geralmente são polivalentes em suas ações. As interações de múltiplos receptores
estimulantes/inibidores com fitoquímicos são essencialmente desconhecidas, mas
geralmente são consideradas essenciais para sua eficácia. Pesquisas futuras
provavelmente refinarão as ações e interações dos fitoquímicos e aumentar o refinamento
dos fitoquímicos considerados os mais potentes e eficazes. O estresse oxidativo está
sendo investigado e sua contribuição para doenças e métodos de prevenção estão sendo
elucidados. Há evidências crescentes de que exposições in ovo e in utero a fitoquímicos
em nutracêuticos têm efeitos epigenéticos na prole. O avanço mais provável é a
prescrição de nutracêuticos para prevenção e remissão de doenças crônicas debilitantes
e na compreensão dos mecanismos de ação dos fitoquímicos em nível molecular.
Referências
Abascal K, Yarnell E (2008) Botanical medicine for cystitis. Altern Complement Ther 14(2):69–77

898
 Abd-Elrazek AM, Ahmed-Farid OAH (2018) Protective effect of L-carnitine and L-arginine against busulfan-induced
oligospermia in adult rat. Andrologia 50(1):e12806
Abuelo A, Hernandez J, Benedito JL et al (2015) The importance of the oxidative status of dairy cattle in the
periparturient period: revisiting antioxidant supplementation. J Anim Physiol Anim Nutr (Berl) 99 (6):1003–1016
Abuelo A, Alves-Nores V, Hernandez J et al (2016) Effect of parenteral antioxidant supplementation during the dry
period on postpartum glucose tolerance in dairy cows. J Vet Intern Med 30(3):892–898
Adeva-Andany MM, Carneiro-Freire N, Seco-Filgueira M et al (2018) Mitochondrial beta-oxidation of saturated fatty
acids in humans. Mitochondrion. https://doi.org/10.1016/j.mito.2018.02.009
Agarwal A, Sengupta P, Durairajanayagam D (2018) Role of L-carnitine in female infertility. Reprod Biol Endocrinol
16(1):5
Alizadeh A, Esmaeili V, Shahverdi A et al (2014) Dietary fish oil can change sperm parameters and fatty acid profiles of
ram sperm during oil consumption period and after removal of oil source. Cell J 16 (3):289–298
Al-Okbi SY, Mohamed DA, Hamed TE et al (2014) Prevention of renal dysfunction by nutraceuticals prepared from oil
rich plant foods. Asian Pac J Trop Biomed 4(8):618–627
Andres S, Pevny S, Ziegenhagen R et al (2018) Safety aspects of the use of quercetin as a dietary supplement. Mol
Nutr Food Res 62 (1):1700447
Anon (2016) Cranberry products or topical estrogen-based therapy for the prevention of urinary tract infections: a
review of clinical effectiveness and guidelines. Canadian Agency for Drugs and Technologies in Health, Ottawa, ON.
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK401598/
Antonio RL, Souza RM, Furlan MR et al (2015) Investigation of urban ethnoveterinary in three veterinary clinics at east
zone of Sao Paulo City, Brazil. J Ethnopharmacol 173:183–190
Arnao MB, Hernandez-Ruiz J (2018) The potential of phytomelatonin as a nutraceutical. Molecules 23(1):238
Arruda RP, Silva DF, Alonso MA et al (2010) Nutraceuticals in reproduction of bulls and stallions. Revista Bras Zootec
39 (Suppl):339–400
Aurich C, Ortega Ferrusola C, Pena Vega FJ et al (2018) Seasonal changes in the sperm fatty acid composition of
Shetland pony stallions. Theriogenology 107:149–153
Avdatek F, Yeni D, Inanc ME et al (2018) Supplementation of quercetin for advanced DNA integrity in bull semen
cryopreservation. Andrologia. https://doi.org/10.1111/and.12975
Aziz MA, Khan AH, AdnanMet al (2018) Traditional uses of medicinal plants used by indigenous communities for
veterinary practices at Bajaur Agency, Pakistan. J Ethnobiol Ethnomed 14(1):11
Balercia G, Regoli F, Armeni T et al (2005) Placebo-controlled doubleblind randomized trial on the use of L-carnitine, L-
acetylcarnitine, or combined L-carnitine and L-acetylcarnitine in men with idiopathic asthenozoospermia. Fertil Steril
84(3):662–671
Beharry S, Heinrich M (2018) Is the hype around the reproductive health claims of maca (Lepidium meyenii Walp.)
justified? J Ethnopharmacol 211:126–170
Birkenfeld C, Kluge H, Eder K (2006) L-carnitine supplementation of sows during pregnancy improves the suckling
behaviour of their offspring. Br J Nutr 96(2):334–342
Bongalhardo DC, Leeson S, Buhr MM (2009) Dietary lipids differentially affect membranes from different areas of
rooster sperm. Poult Sci 88(5):1060–1069
Bottini-Luzardo M, Centurion-Castro F, Alfaro-Gamboa M et al (2013) Effect of addition of coconut water (Cocos
nucifera) to the freezing media on post-thaw viability of boar sperm. Trop Anim Health Prod 45(1):101–106
Brinsko SP, Varner DD, Love CC et al (2005) Effect of feeding a DHA-enriched nutriceutical on the quality of fresh,
cooled and frozen stallion semen. Theriogenology 63(5):1519–1527
Brockus KE, Hart CG, Fleming BO et al (2016) Effects of supplementing Holstein heifers with dietary melatonin during
late gestation on growth and cardiovascular measurements of their offspring. Reprod Domest Anim 51(2):240–247
Brooks DE (1979) Carnitine, acetylcarnitine and the activity of carnitine acyltransferases in seminal plasma and
spermatozoa of men, rams and rats. J Reprod Fertil 56(2):667–673
Bucak MN, Tuncer PB, Sariozkan S et al (2010) Effects of antioxidants on post-thawed bovine sperm and oxidative
stress parameters: antioxidants protect DNA integrity against cryodamage. Cryobiology 61(3):248–253
Burton G, Ingold KU (1981) Autoxidation of biological molecules. 1. The antioxidant activity of vitamin E and related
chain-breaking phenolic antioxidants in vitro. J Am Chem Soc 103(21):6472–6647
Campbell MLH, Hampshire D, Hamstead LE et al (2017) The effects of intrauterine infusion of peanut oil on
endometrial health, salivary cortisol and interovulatory period in mares. Theriogenology 102:116–125
Cardoso RDS, Silva AR, da Silva LDM (2006) Comparison of two dilution rates on canine semen quality after
cryopreservation in a coconut water extender. Anim Reprod 92(3–4):384–391
Castellano CA, Audet I, Laforest JP et al (2011) Fish oil diets alter the phospholipid balance, fatty acid composition,
and steroid hormone concentrations in testes of adult pigs. Theriogenology 76 (6):1134–1145
Cerovsky J, Frydrychova S, Lustkova A et al (2009) Semen characteristics of boars receiving control diet and control
diet supplemented with L-carnitine. Czeh J Anim Sci 54(9):417–425
Cho SW, Cha YS (2005) Pregnancy increases urinary loss of carnitine and reduces plasma carnitine in Korean
women. Br J Nutr 93 (5):685–691
Cho JG, Gebhart CJ, Furrow E et al (2015) Assessment of in vitro oxalate degradation by Lactobacillus species
cultured from veterinary probiotics. Am J Vet Res 76(9):801–806

899
 Chou HI, Chen KS, Wang HC et al (2016) Effects of cranberry extract on prevention of urinary tract infection in dogs
and on adhesion of Escherichia coli to Madin-Darby canine kidney cells. Am J Vet Res 77(4):421–427
Clement C, Kneubuhler J, Urwyler A et al (2010) Effect of maca supplementation on bovine sperm quantity and quality
followed over two spermatogenic cycles. Theriogenology 74(2):173–183
Clement C, Witschi U, Kreuzer M (2012) The potential influence of plant-based feed supplements on sperm quantity
and quality in livestock: a review. Anim Reprod Sci 132(1–2):1–10
Cordeiro MS, Silva EHS, Miranda MS et al (2006) The use of coconut water solution (Cocos nucifera) as a holding
medium for immature bovine oocytes for in vitro embryo production. Anim Reprod 3 (3):376–379
Daniels M, Bartges JW, Raditic DM et al (2017) Evaluation of three herbal compounds used for the management of
lower urinary tract disease in healthy cats: a pilot study. J Feline Med Surg. https://doi.org/10.1177/1098612X17748241
da Rocha AA, da Cunha IC, Ederli BB et al (2009) Effect of daily food supplementation with essential fatty acids on
canine semen quality. Reprod Domest Anim 44(Suppl 2):313–315
Davidson E, Zimmermann BF, Jungfer E, Chrubasik-Hausmann S (2014) Prevention of urinary tract infections with
vaccinium products. Phytother Res 28(3):465–470
Deichsel K, Palm F, Koblischke P et al (2008) Effect of a dietary antioxidant supplementation on semen quality in pony
stallions. Theriogenology 69(8):940–945
De Koster JD, Opsomer G (2013) Insulin resistance in dairy cows. Vet Clin North Am Food Anim Pract 29(2):299–322
Del Prete C, Tafuri S, Ciani F et al (2018) Influences of dietary supplementation with Lepidium meyenii (Maca) on
stallion sperm production and on preservation of sperm quality during storage at 5 degrees C. Andrology 6(2):351–361
de Souza P, Boeing T, Somensi LB et al (2017) Diuretic effect of extracts, fractions and two compounds
2alpha,3beta,19alpha-trihydroxy-urs-12-en-28-oic acid and 5-hydroxy-3,6,7,8,4-0-pentamethoxyflavone from Rubus
rosaefolius Sm. (Rosaceae) leaves in rats. Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol 390 (4):351–360
Diel de Amorim M, Nielsen K, Cruz RK et al (2016) Progesterone levels and days to luteolysis in mares treated with
intrauterine fractionated coconut oil. Theriogenology 86(2):545–550
Dietz BM, Hajirahimkhan A, Dunlap TL et al (2016) Botanicals and their bioactive phytochemicals for women’s health.
Pharmacol Rev 68(4):1026–1073
Eder K (2009) Influence of l-carnitine on metabolism and performance of sows. Br J Nutr 102(5):645–654
El Allali K, Sghiri A, Bouaouda H et al (2018) Effect of melatonin implants during the non-breeding season on the onset
of ovarian activity and the plasma prolactin in dromedary camel. Front Vet Sci 5:44
Elbe H, Dogan Z, Taslidere E et al (2016) Beneficial effects of quercetin on renal injury and oxidative stress caused by
ciprofloxacin in rats: a histological and biochemical study. Hum Exp Toxicol 35 (3):276–281
Esmaeili V, Shahverdi AH, Alizadeh AR et al (2014) Saturated, omega-6 and omega-3 dietary fatty acid effects on the
characteristics of fresh, frozen-thawed semen and blood parameters in rams. Andrologia 46(1):42–49
Fathi M, El-Shahat KH (2017) L-carnitine enhances oocyte maturation and improves in vitro development of embryos
in dromedary camels (Camelus dromedaries). Theriogenology 104:18–22
Feng YL, Lei P, Tian T et al (2013) Diuretic activity of some fractions of the epidermis of Poria cocos. J
Ethnopharmacol 150(3):1114–1118
Fischer M, Varady J, Hirche F et al (2009) Supplementation of L-carnitine in pigs: absorption of carnitine and effect on
plasma and tissue carnitine concentrations. Arch Anim Nutr 63(1):1–15
Freitas ML, Bouéres CS, Pignataro TA et al (2016) Quality of fresh, cooled, and frozen semen from stallions
supplemented with antioxidants and fatty acids. J Equine Vet Sci 46:1–6
Garcia-Ispierto I, Abdelfatah A, Lopez-Gatius F (2013) Melatonin treatment at dry-off improves reproductive
performance postpartum in high-producing dairy cows under heat stress conditions. Reprod Domest Anim 48(4):577–583
Garmsir AK, Shahneh AZ, Jalali SMA et al (2014) Effects of dietary thyme (Thymus vulgaris) and fish oil on semen
quality of miniature Caspian horse. J Equine Vet Sci 34:1069–1075
Gessner DK, Schlegel G, Ringseis R et al (2014) Up-regulation of endoplasmic reticulum stress induced genes of the
unfolded protein response in the liver of periparturient dairy cows. BMC Vet Res 10:46
Ghalayini IF, Al-Ghazo MA, Harfeil MN (2011) Prophylaxis and therapeutic effects of raspberry (Rubus idaeus) on renal
stone formation in Balb/c mice. Int Braz J Urol 37(2):259–266
Gibb Z, Butler TJ, Morris LH et al (2013) Quercetin improves the postthaw characteristics of cryopreserved sex-sorted
and nonsorted stallion sperm. Theriogenology 79(6):1001–1009
Gibb Z, Lambourne SR, Quadrelli J et al (2015) L-carnitine and pyruvate are prosurvival factors during the storage of
stallion spermatozoa at room temperature. Biol Reprod 93(4):104
Gomes VDR, Ariza PC, Borges NC et al (2018) Risk factors associated with feline urolithiasis. Vet Res Commun
42(1):87–94
Gonzales GF, Gasco M, Cordova A et al (2004) Effect of Lepidium meyenii (Maca) on spermatogenesis in male rats
acutely exposed to high altitude (4340 m). J Endocrinol 180(1):87–95
Gonzales-Arimborgo C, Yupanqui I, Montero E et al (2016) Acceptability, safety, and efficacy of oral administration of
extracts of black or red maca (Lepidium meyenii) in adult human subjects: a randomized, double-blind, placebo-
controlled study. Pharmaceuticals (Basel) 9 (3):49
Granaci V (2007) Achievements in the artificial insemination of swine. Bulletin of University of Agricultural Sciences and
Veterinary Medicine Cluj-Napoca. Anim Sci Biotechnol (Bull USAMV-CN) 63–64:382–386

900
 Gulliver CE, Friend MA, King BJ et al (2012) The role of omega-3 polyunsaturated fatty acids in reproduction of sheep
and cattle. Anim Reprod Sci 131(1–2):9–22
Hall JA, MacLeay J, Yerramilli M et al (2016) Positive impact of nutritional interventions on serum symmetric
dimethylarginine and creatinine concentrations in client-owned geriatric dogs. PLoS One 11(4):e0153653
Hermann M, Bernet T (2009) The transition of maca from neglect to market prominence. Agricultural Biodiversity and
Livelihood Papers 1. Biodiversity International, Rome, Italy
Hill AS, Werner JA, Rogers QR et al (2004) Lipoic acid is 10 times more toxic in cats than reported in humans, dogs or
rats. J Anim Physiol Anim Nutr (Berl) 88(3–4):150–156
Holst L, Haavik S, Nordeng H (2009) Raspberry leaf—should it be recommended to pregnant women? Complement
Ther Clin Pract 15 (4):204–208
Jacyno E, Kolodziej A, Kamyczek M et al (2007) Effect of L-carnitine supplementation on boar semen quality. Acta Vet
Brno 75:595–600
Jayakumar S, Sathiskumar S, Baskaran N et al (2017) Ethnoveterinary practices in Southern India for captive Asian
elephant ailments. J Ethnopharmacol 200:182–204
Jeong JK, Choi IS, Moon SH et al (2018) Effect of two treatment protocols for ketosis on the resolution, postpartum
health, milk yield, and reproductive outcomes of dairy cows. Theriogenology 106:53–59
Johansson B, Persson Waller K, Jensen SK et al (2014) Status of vitamins E and A and beta-carotene and health in
organic dairy cows fed a diet without synthetic vitamins. J Dairy Sci 97 (3):1682–1692
Johnson JR, Makaji E, Ho S et al (2009) Effect of maternal raspberry leaf consumption in rats on pregnancy outcome
and the fertility of the female offspring. Reprod Sci 16(6):605–609
Jones WE (1997) Nutraceuticals for equine practice. Equine Pract 17 (11):562–572
Kargar R, Forouzanfar M, Ghalamkari G et al (2017) Dietary flax seed oil and/or vitamin E improve sperm parameters
of cloned goats following freezing-thawing. Cryobiology 74:110–114
Kelley D, LeBlanc MM, Warren LK et al (2014) Influence of L-arginine supplementation on reproductive blood flow and
embryo recovery rates in mares. Theriogenology 81(5):752–757
Keralapurath MM, Corzo A, Pulikanti R et al (2010) Effects of in ovo injection of L-carnitine on hatchability and
subsequent broiler performance and slaughter yield. Poult Sci 89(7):1497–1501
Khoshvaght A, Towhidi A, Zare-Shahneh A et al (2016) Dietary n-3 PUFAs improve fresh and post-thaw semen quality
in Holstein bulls via alteration of sperm fatty acid composition. Theriogenology 85 (5):807–812
Kidd MT, McDaniel CD, Peebles ED et al (2005) Breeder hen dietary L-carnitine affects progeny carcass traits. Br
Poult Sci 46(1):97–103
King SS, Young DA, Nequin LG et al (2000) Use of specific sugars to inhibit bacterial adherence to equine
endometrium in vitro. Am J Vet Res 61(4):446–449
Kirchhoff KT, Failing K, Goericke-Pesch S (2017) Effect of dietary vitamin E and selenium supplementation on semen
quality in Cairn Terriers with normospermia. Reprod Domest Anim 52(6):945–952
Knitlova D, Hulinska P, Jeseta M et al (2017) Supplementation of l-carnitine during in vitro maturation improves embryo
development from less competent bovine oocytes. Theriogenology 102:16–22
Korhonen HT, Huuki H (2015) Effect of carotenoid supplement on production performance in mink (Neovison vison).
Open J Vet Med 5(4):73–79
Kozink DM, Estienne MJ, Harper AF et al (2004) Effects of dietary L-carnitine supplementation on semen
characteristics in boars. Theriogenology 61(7–8):1247–1258
Kuhl J, Aurich JE, Wulf M et al (2012) Effects of oral supplementation with beta-carotene on concentrations of beta-
carotene, vitamin A and alpha-tocopherol in plasma, colostrum and milk of mares and plasma of their foals and on fertility
in mares. J Anim Physiol Anim Nutr (Berl) 96(3):376–384
Kumar R, Bharati KA (2013) New claims in folk veterinary medicines from Uttar Pradesh, India. J Ethnopharmacol
146(2):581–593
Kutzler MA (2015) Alternative methods for feline fertility control: use of melatonin to suppress reproduction. J Feline
Med Surg 17 (9):753–757
Lans C, Turner N, Khan T et al (2007) Ethnoveterinary medicines used for ruminants in British Columbia, Canada. J
Ethnobiol Ethnomed 3:11
Lans C, Turner N, Brauer G et al (2009) Medicinal plants used in British Columbia, Canada for reproductive health in
pets. Prev Vet Med 90 (3–4):268–273
Lee MS, Lee HW, You S et al (2016) The use of maca (Lepidium meyenii) to improve semen quality: a systematic
review. Maturitas 92:64–69
Lemley CO, Vonnahme KA (2017) Physiology and endocrinology symposium: alterations in uteroplacental
hemodynamics during melatonin supplementation in sheep and cattle. J Anim Sci 95 (5):2211–2221
Lenzi A, Lombardo F, Sgro P et al (2003) Use of carnitine therapy in selected cases of male factor infertility: a double-
blind crossover trial. Fertil Steril 79(2):292–300
Leon J (1964) The “Maca” (Lepidium meyenii), a little known food plant of Peru. Econ Bot 18(2):122–127
Li X, Zhang JY, Gao WY et al (2012) Chemical composition and antiinflammatory and antioxidant activities of eight
pear cultivars. J Agric Food Chem 60(35):8738–8744
Lisboa FL, Hartwig FP, Maziero RRD et al (2012) Use of L-carnitine and acetyl-L-carnitine in cooled-stored stallion
semen. J Equine Vet Sci 32(8):493–494
901
 Loftin EG, Herold LV (2009) Therapy and outcome of suspected alpha lipoic acid toxicity in two dogs. J Vet Emerg Crit
Care (San Antonio) 19(5):501–506
London KT, Christensen BW, Scott CJ et al (2017) The effects of an oxygen scavenger and coconut water on equine
sperm cryopreservation. J Equine Vet Sci 58:51–57
Longobardi V, Salzano A, Campanile G et al (2017) Carnitine supplementation decreases capacitation-like changes of
frozen-thawed buffalo spermatozoa. Theriogenology 88:236–243
Lowe JL, Bartolac LK, Bathgate R et al (2017) Cryotolerance of porcine blastocysts is improved by treating in vitro
matured oocytes with L-carnitine prior to fertilization. J Reprod Dev 63(3):263–270
Manfredini R, De Giorgi A, Storari A et al (2016) Pears and renal stones: possible weapon for prevention? A
comprehensive narrative review. Eur Rev Med Pharmacol Sci 20(3):414–425
Martins FS, Van den Hurk R, Santos RR et al (2005) Development of goat primordial follicles after in vitro culture of
ovarian tissue in minimal essential medium supplemented with coconut water. Anim Repord 2(2):106–113
Masoudi R, Sharafi M, Zare Shahneh A et al (2016) Effect of dietary fish oil supplementation on ram semen freeze
ability and fertility using soybean lecithin- and egg yolk-based extenders. Theriogenology 86 (6):1583–1588
Mavangira V, Sordillo LM (2018) Role of lipid mediators in the regulation of oxidative stress and inflammatory
responses in dairy cattle. Res Vet Sci 116:4–14
Mayasari N, Chen J, Ferrari A et al (2017) Effects of dry period length and dietary energy source on inflammatory
biomarkers and oxidative stress in dairy cows. J Dairy Sci 100(6):4961–4975
Mehta M, Goldfarb DS, Nazzal L (2016) The role of the microbiome in kidney stone formation. Int J Surg 36(Pt D):607–
612
Miller AW, Dearing D (2013) The metabolic and ecological interactions of oxalate-degrading bacteria in the mammalian
gut. Pathogens 2 (4):636–652
Moallem U, Shafran A, Zachut M et al (2013) Dietary alpha-linolenic acid from flaxseed oil improved folliculogenesis
and IVF performance in dairy cows, similar to eicosapentaenoic and docosahexaenoic acids from fish oil. Reproduction
146(6):603–614
Moolla A, Viljoen AM (2008) ‘Buchu’—Agathosma betulina and Agathosma crenulata (Rutaceae): a review. J
Ethnopharmacol 119 (3):413–419
Morris L, Gibb Z (2016) Oral supplementation with L-carnitine improves stallion fertility. J Equine Vet Sci 43:S81
Mourvaki E, Cardinali R, Dal Bosco A et al (2010) Effects of flaxseed dietary supplementation on sperm quality and on
lipid composition of sperm subfractions and prostatic granules in rabbit. Theriogenology 73(5):629–637
Mousa-Balabel TM (2011) Using light and melatonin in the management of New Zealand White rabbits. Open Vet J
1(1):1–6
Mura MC, Luridiana S, Farci F et al (2017) Melatonin treatment in winter and spring and reproductive recovery in
Sarda breed sheep. Anim Reprod Sci 185:104–108
Murphy EM, Stanton C, Brien CO et al (2017) The effect of dietary supplementation of algae rich in docosahexaenoic
acid on boar fertility. Theriogenology 90:78–87
Musser RE, Goodband RD, Tokach MD et al (1999) Effects of L-carnitine fed during gestation and lactation on sow and
litter performance. J Anim Sci 77(12):3289–3295
Naber KG (2013) Efficacy and safety of the phytotherapeutic drug Canephron(R) N in prevention and treatment of
urogenital and gestational disease: review of clinical experience in Eastern Europe and Central Asia. Res Rep Urol 5:39–
46
Neuman SL, Lin TL, Heste PY (2002) The effect of dietary carnitine on semen traits of White Leghorn roosters. Poult
Sci 81(4):495–503
Ng CM, Blackman MR, Wang C et al (2004) The role of carnitine in the male reproductive system. Ann N Y Acad Sci
1033:177–188
Nirumand MC, Hajialyani M, Rahimi R et al (2018) Dietary plants for the prevention and management of kidney stones:
preclinical and clinical evidence and molecular mechanisms. Int J Mol Sci 19 (3):765
Partyka A, Rodak O, Bajzert J et al (2017) The effect of L-carnitine, hypotaurine, and taurine supplementation on the
quality of cryopreserved chicken semen. Biomed Res Int 2017:7279341
Paulenz H, Taugbol O, Hofmo PO et al (1995) A preliminary study on the effect of dietary supplementation with cod
liver oil on the polyunsaturated fatty acid composition of boar semen. Vet Res Commun 19(4):273–284
Peck AB, Canales BK, Nguyen CQ (2016) Oxalate-degrading microorganisms or oxalate-degrading enzymes: which is
the future therapy for enzymatic dissolution of calcium-oxalate uroliths in recurrent stone disease? Urolithiasis 44(1):45–
50
Peebles ED, Kidd MT, McDaniel CD et al (2007) Effects of breeder hen age and dietary L-carnitine on progeny
embryogenesis. Br Poult Sci 48(3):299–307
Phongnimitr T, Liang Y, Srirattana K et al (2013) Effect of L-carnitine on maturation, cryo-tolerance and embryo
developmental competence of bovine oocytes. Anim Sci J 84(11):719–725
Pollen SM (2001) Renal disease in small animals: a review of conditions and potential nutrient and botanical
interventions. Altern Med Rev 6 (Suppl):S46–S61
Pontes GC, Monteiro PL Jr, Prata AB et al (2015) Effect of injectable vitamin E on incidence of retained fetal
membranes and reproductive performance of dairy cows. J Dairy Sci 98(4):2437–2449

902
 Pruneda A, Yeung CH, Bonet S et al (2007) Concentrations of carnitine, glutamate and myo-inositol in epididymal fluid
and spermatozoa from boars. Anim Reprod Sci 97(3–4):344–355
Qian SZ (1987) Tripterygium wilfordii, a Chinese herb effective in male fertility regulation. Contraception 36(3):335–345
Quiroz-Rocha GF, LeBlanc S, Duffield T et al (2009) Evaluation of prepartum serum cholesterol and fatty acids
concentrations as predictors of postpartum retention of the placenta in dairy cows. J Am Vet Med Assoc 234(6):790–793
Raditic DM (2015) Complementary and integrative therapies for lower urinary tract diseases. Vet Clin North Am Small
Anim Pract 45 (4):857–878
Ramanau A, Kluge H, Spilke J et al (2002) Reproductive performance of sows supplemented with dietary L-carnitine
over three reproductive cycles. Arch Tierernahr 56(4):287–296
Ramanau A, Kluge H, Eder K (2005) Effects of L-carnitine supplementation on milk production, litter gains and back-fat
thickness in sows with a low energy and protein intake during lactation. Br J Nutr 93 (5):717–721
Ratliff BB, Abdulmahdi W, Pawar R et al (2016) Oxidant mechanisms in renal injury and disease. Antioxid Redox
Signal 25(3):119–146
Reader KL, Cox NR, Stanton JA et al (2015) Effects of acetyl-Lcarnitine on lamb oocyte blastocyst rate, ultrastructure,
and mitochondrial DNA copy number. Theriogenology 83(9):1484–1492
Rebouche CJ (2004) Kinetics, pharmacokinetics, and regulation of L-carnitine and acetyl-L-carnitine metabolism. Ann
N Y Acad Sci 1033:30–41
Ren Z, Pan C, Jiang L et al (2011) Oxalate-degrading capacities of lactic acid bacteria in canine feces. Vet Microbiol
152(3–4):368–373
Ringseis R, Keller J, Eder K (2018) Regulation of carnitine status in ruminants and efficacy of carnitine
supplementation on performance and health aspects of ruminant livestock: a review. Arch Anim Nutr 72(1):1–30
Risso AL, Pellegrino FJ, Corrada Y et al (2017) Effect of fish oil and vitamin E on sperm lipid peroxidation in dogs. J
Nutr Sci 6:e48
Rodrigues AC, Ruiz CM, De Nardo CD et al (2017) Effect of dietary supplementation with omega-3 and -6 on fresh and
frozen/thawed sperm quality of dogs. Semina Ciênc Agrár 38(5):3069–3076
Saber TM, Abd El-Aziz RM, Ali HA (2016) Quercetin mitigates fenitrothion-induced testicular toxicity in rats. Andrologia
48 (5):491–500
Santymire RM, Lavin SR, Branvold-Faber H et al (2015) Effect of dietary vitamin E and prey supplementation on
semen quality in male black-footed ferrets (Mustela nigripes). Theriogenology 84 (2):217–225
Saraiva H, Batista R, Alfradique VAP et al (2018) L-carnitine supplementation during vitrification or warming of in vivo-
produced ovine embryos does not affect embryonic survival rates, but alters CrAT and PRDX1 expression.
Theriogenology 105:150–157
Saxena VK (2017) Physiology of melatonin, melatonin receptors, and their role in the regulation of reproductive
behavior in animals. In: Ravishankara GA, Ravishankara AR (eds) Serotonin and melatonin their functional role in plants,
food, phytomedicine, and human health. CRC, Boca Raton, FL
Schafer-Somi S (2017) Effect of melatonin on the reproductive cycle in female cats: a review of clinical experiences
and previous studies. J Feline Med Surg 19(1):5–12
Schmid-Lausigk Y, Aurich C (2014) Influences of a diet supplemented with linseed oil and antioxidants on quality of
equine semen after cooling and cryopreservation during winter. Theriogenology 81 (7):966–973
Schulman A, Chaimowitz M, Choudhury M et al (2016) Antioxidant and renoprotective effects of mushroom extract:
implication in prevention of nephrolithiasis. J Clin Med Res 8(12):908–915
Seifi-Jamadi A, Ahmad E, Ansari M et al (2017) Antioxidant effect of quercetin in an extender containing DMA or
glycerol on freezing capacity of goat semen. Cryobiology 75:15–20
Shah SM, Ali S, ZubairMet al (2016) Effect of supplementation of feed with flaxseed (Linum usitatissimum) oil on libido
and semen quality of Nilli-Ravi buffalo bulls. J Anim Sci Technol 58:25
Sheikh N, Goodarzi M, Bab Al-Havaejee H et al (2007) L-carnitine level in seminal plasma of fertile and infertile men. J
Res Health Sci 7 (1):43–48
Sheng W, Zhang YS, Li YQ et al (2017) Effect of Yishenjianpi recipe on semen quality and sperm mitochondria in mice
with oligoasthenozoospermia induced by tripterygium glycosides. Afr J Tradit Complement Altern Med 14(4):87–95
Showell MG, Mackenzie-Proctor R, Jordan V et al (2017) Antioxidants for female subfertility. Cochrane Database Syst
Rev 7:CD007807
Silva CG, Cunha ER, Blume GR et al (2015) Cryopreservation of boar sperm comparing different cryoprotectants
associated in media based on powdered coconut water, lactose and trehalose. Cryobiology 70(2):90–94
Simpson M, Parsons M, Greenwood J et al (2001) Raspberry leaf in pregnancy: its safety and efficacy in labor. J
Midwifery Womens Health 46(2):51–59
Smith CA (2010) Homoeopathy for induction of labour (review). Cochrane database of systematic reviews, vol 2003.
Cochrane Collaboration, Hoboken, NJ. http://www.cochranelibrary.com/
Sprando RL, Collins TF, Black TN et al (2000a) The effect of maternal exposure to flaxseed on spermatogenesis in
F(1) generation rats. Food Chem Toxicol 38(4):325–334
Sprando RL, Collins TF, Wiesenfeld P et al (2000b) Testing the potential of flaxseed to affect spermatogenesis:
morphometry. Food Chem Toxicol 38(10):887–892
Stradaioli G, Sylla L, Zelli R et al (2000) Seminal carnitine and acetylcarnitine content and carnitine acetyltransferase
activity in young Maremmano stallions. Anim Reprod Sci 64 (3–4):233–245

903
 Stradaioli G, Sylla L, Zelli R et al (2004) Effect of L-carnitine administration on the seminal characteristics of
oligoasthenospermic stallions. Theriogenology 62(3–4):761–777
Sychev DA, Semenov AV, Polyakova IP (2011) A case of hepatic injury suspected to be caused by Canephron N, a
Centaurium Hill containing phytotherapeutics. Int J Risk Saf Med 23(1):5–6
Tahraoui A, Israil ZH, Lyoussi B (2010) Acute and sub-chronic toxicity of a lyophilised aqueous extract of Centaurium
erythraea in rodents. J Ethnopharmacol 132(1):48–55
Tarig AA, Wahid H, Rosnina Y et al (2017) Effect of different concentrations of egg yolk and virgin coconut oil in tris-
based extenders on chilled and frozen-thawed bull semen. Anim Reprod Sci 182:21–27
Trombetta MF, Accorsi PA, Falaschini A (2010) Effect of beta-carotene supplementation on Italian Trotter mare
peripartum. J Equine Sci 21 (1):1–6
Uchoa DC, Silva TF, Mota Filho AC et al (2012a) Intravaginal artificial insemination in bitches using frozen/thawed
semen after dilution in powdered coconut water (ACP-106c). Reprod Domest Anim 47 (Suppl 6):289–292
Uchoa DC, da Silva TF, Cardoso Jde F et al (2012b) Favoring the birth of female puppies after artificial insemination
using chilled sêmen diluted with powdered coconut water (ACP-106c). Theriogenology 77(9):1959–1963
Uematsu M, Kitahara G, Sameshima H et al (2016) Serum selenium and liposoluble vitamins in Japanese Black cows
that had stillborn calves. J Vet Med Sci 78(9):1501–1504
Uncini Manganelli RE, Camangi F, Tomei PE (2001) Curing animals with plants: traditional usage in Tuscany (Italy). J
Ethnopharmacol 78(2–3):171–191
Upadhyay B, Singh KP, Kumar A (2011) Ethnoveterinary uses and informants consensus factor of medicinal plants of
Sariska Region, Rajasthan, India. J Ethnopharmacol 133(1):14–25
Van Blerkom J (2011) Mitochondrial function in the human oocyte and embryo and their role in developmental
competence. Mitochondrion 11(5):797–813
Vrolijk MF, Opperhuizen A, Jansen EH et al (2015) The shifting perception on antioxidants: the case of vitamin E and
beta-carotene. Redox Biol 4:272–278
Wang M, Chen DQ, Chen L et al (2018) Novel RAS inhibitors poricoic acid ZG and poricoic acid ZH attenuate renal
fibrosis via a Wnt/beta-Catenin pathway and targeted phosphorylation of smad3 signaling. J Agric Food Chem
66(8):1828–1842
Wathes DC, Abayasekara DR, Aitken RJ (2007) Polyunsaturated fatty acids in male and female reproduction. Biol
Reprod 77 (2):190–201
Wen JJ, Johnston K (2012) Treatment of urolithiasis in 33 dogs and 13 cats with a novel Chinese herbal medicine. Am
J Tradit Chin Vet Med 7(2):39–45
Wilsher S, Allen WR (2011) Intrauterine administration of plant oils inhibits luteolysis in the mare. Equine Vet J
43(1):99–105
Winkler A, Gessner DK, Koch C et al (2015) Effects of a plant product consisting of green tea and curcuma extract on
milk production and the expression of hepatic genes involved in endoplasmic stress response and inflammation in dairy
cows. Arch Anim Nutr 69 (6):425–441
Wonnacott KE, Kwong WY Hughes J et al (2010) Dietary omega-3 and -6 polyunsaturated fatty acids affect the
composition and development of sheep granulosa cells, oocytes and embryos. Reproduction 139(1):57–69
Xi L, Brown K, Woodworth J et al (2008) Maternal dietary L-carnitine supplementation influences fetal carnitine status
and stimulates carnitine palmitoyltransferase and pyruvate dehydrogenase complex activities in swine. J Nutr
138(12):2356–2362
Yeste M, Sancho S, Briz M et al (2010) A diet supplemented with L-carnitine improves the sperm quality of Pietrain but
not of Duroc and Large White boars when photoperiod and temperature increase. Theriogenology 73(5):577–586
Yoshida K, Ohta Y, Kawate N et al (2018) Long-term feeding of hydroalcoholic extract powder of Lepidium meyenii
(maca) enhances the steroidogenic ability of Leydig cells to alleviate its decline with ageing in male rats. Andrologia
50(1):e12803
Yue D, Yan L, Luo H et al (2010) Effect of vitamin E supplementation on semen quality and the testicular cell
membranal and mitochondrial antioxidant abilities in Aohan fine-wool sheep. Anim Reprod Sci 118(2–4):217–222
Zeyner A, Harmeyer J (1999) Metabolic functions of L-carnitine and its effects as feed additive in horses. A review.
Arch Tierernahr 52 (2):115–138
Zhai W, Neuman SL, Latour MA et al (2007) The effect of dietary L-carnitine on semen traits of White Leghorns. Poult
Sci 86 (10):2228–2235
Zhai W, Neuman S, Latour MA et al (2008a) The effect of in ovo injection of L-carnitine on hatchability of white
leghorns. Poult Sci 87(3):569–572
Zhai W, Neuman SL, Latour MA et al (2008b) The effect of male and female supplementation of L-carnitine on
reproductive traits of white leghorns. Poult Sci 87(6):1171–1181
Zhang J, McCullough PA (2016) Lipoic acid in the prevention of acute kidney injury. Nephron 134(3):133–140
Zhang Y, Zhang Z, Yang Y et al (2011) Diuretic activity of Rubus idaeus L (Rosaceae) in rats. Trop J Pharm Res
10(3):243–248
Zhang L, Ravipati AS, Koyyalamudi SR et al (2013) Antifungal and antibacterial activities of ethanol extracts of
selected traditional Chinese medicinal herbs. Asian Pac J Trop Med 6(9):673–681
Zhao YY, Li HT, Feng YL et al (2013) Urinary metabonomic study of the surface layer of Poria cocos as an effective
treatment for chronic renal injury in rats. J Ethnopharmacol 148(2):403–410

904
 Zhao J, Jin Y, Du M et al (2017) The effect of dietary grape pomace supplementation on epididymal sperm quality and
testicular antioxidant ability in ram lambs. Theriogenology 97:50–56
Zhao S, Liu H, Gu L (2018) American cranberries and health benefits—an evolving story of 25 years. J Sci Food Agric.
https://doi.org/10.1002/jsfa.8882
Zheng BL, He K, Kim CH et al (2000) Effect of a lipidic extract from Lepidium meyenii on sexual behavior in mice and
rats. Urology 55 (4):598–602
Zicker SC, Avila A, Joshi DK et al (2010) Pharmacokinetics of orally administered DL-alpha-lipoic acid in dogs. Am J
Vet Res 71 (11):1377–1383
Zingg JM (2015) Vitamin E: a role in signal transduction. Annu Rev Nutr 35:135–173

905
 Nutracêuticos na obesidade e distúrbios metabólicos
Rhian B. Cope

Resumo
Este capítulo examina uma série de nutracêuticos propostos. Os alimentos funcionais não
são especificamente tratados. Cada seção do capítulo é dividida em uma avaliação dos
estudos de “prova de conceito” que pretendem demonstrar eficácia, um exame dos modos
reivindicados e mecanismos de ação de cada nutracêutico e, quando disponível, uma
breve discussão de quaisquer efeitos adversos importantes identificados.. Os agentes
nutracêuticos abrangidos incluem curcumina, Lagenaria siceraria (abóbora d’água),
Trigonella foenum-graecum (feno-grego), Emblica officinalis (groselha indiana), Murraya
koenigii (árvore de curry), Vigna sp. (grama preta), Camellia sinensis (chá), Hibiscus
sabdariffa (caruru azedo), Hypericum perforatum (erva de São João), abacate, capsicum e
alecrim. Embora produtos e ingredientes nutracêuticos em potencial continuem a ser uma
fonte frequente de publicações científicas de “prova de conceito”, geralmente faltam
dados de ensaios clínicos em humanos de alta qualidade. Trabalho científico translacional
substancial ainda é necessário para muitos nutracêuticos em termos de avaliação de sua
segurança e demonstração de sua eficácia em humanos e animais.
Palavras-chave: Nutracêuticos veterinários · Obesidade · Desordens metabólicas

R. B. Cope. Australian Pesticides and Veterinary Medicines Authority, Armidale, NSW, Australia.e-mail:
rhian.Cope@health.gov.au

1. Introdução
Neste capítulo, o termo nutracêuticos será considerado separadamente do conceito de
alimentos funcionais. Um nutracêutico é definido como um nutriente de qualidade
farmacêutica e padronizado (ou suplemento dietético ou aditivo alimentar), enquanto um
alimento funcional é um alimento que recebe uma função adicional pela existência ou
adição de um componente alimentar específico. Os alimentos podem, é claro, ser
fortificados com um nutracêutico específico, e tais produtos seriam então considerados
um alimento funcional; no entanto, por razões de conveniência e simplicidade, este
capítulo se concentrará em espécies de plantas específicas das quais vários extratos
nutracêuticos antiobesidade foram derivados. Alimentos comuns que alegam ter efeitos
contra a obesidade, como amendoim, frutas cítricas e romãs, não são abordados neste
capítulo. Este capítulo não pretende ser uma revisão da fisiopatologia da obesidade e
906
da(s) síndrome(s) metabólica(s); no entanto, é fornecida uma breve introdução a alguns
conceitos-chave na patogênese dessas doenças que são relevantes para os
nutracêuticos. Os nutracêuticos propostos atualmente são particularmente aqueles com
alegados efeitos na biodisponibilidade da gordura dietética, efeitos antioxidantes e
antiinflamatórios, modificação da lipogênese e maturação pré-adipócita, aumento do
metabolismo lipídico e saciedade. No entanto, muitos modos de ação críticos
permanecem compreendidos de forma incompleta.

2. Curcumina
A curcumina é o principal curcuminóide (diarilheptanóide linear) encontrado no açafrão.
Ensaios clínicos de fase I e fase II em humanos demonstraram que esse corante e agente
aromatizante de alimentos são relativamente bem tolerados (Soleimani et al. 2018).
Alguns participantes do estudo desenvolveram diarreia, dor de cabeça, erupções
cutâneas e fezes amarelas. No geral, a dosagem de curcumina oral de 6 g/dia por 4 a 7
semanas foi razoavelmente bem tolerada em humanos. As formulações de curcumina
com biodisponibilidade oral foram razoavelmente bem toleradas após uma dosagem de
500 mg BID por 30 dias. No entanto, há informações mais limitadas sobre nanofórmulas
de curcumina. A curcumina não foi genotóxica em ensaios clássicos, não foi uma toxina
reprodutiva em animais após estudos de dosagem oral, não mostrou efeitos tóxicos em
humanos e foi segura na dose de 6 g/dia por via oral por 4-7 semanas. Embora a
curcumina tenha múltiplas ações farmacológicas, ela tem baixa biodisponibilidade oral e é
rapidamente excretada (Purpura et al. 2018). A fosfolipidação e as formas de dosagem de
nanopartículas associadas com piperina têm sido utilizadas para aumentar a
biodisponibilidade oral. A curcumina inibe várias enzimas CYP450, glutationa-S-
transferase e UDP glucuronosiltransferase. Assim, seu uso pode estar associado a efeitos
de interação medicamentosa.

Devido às suas ações antiinflamatórias, o tratamento com curcumina tem sido aplicado a
uma ampla gama de condições inflamatórias, incluindo obesidade e distúrbios
metabólicos. Dentro da inflamação, a curcumina no meio de sinalização interage
diretamente com a ciclo-oxigenase 2, DNA polimerase, lipo-oxigenase, glicogênio sintase
quinase 3b e fator de necrose tumoral alfa. Ele também modula as ações de vários
transdutores de sinal (AP-1, beta-catenina, STAT e PPARc).

Os efeitos antioxidantes e antiinflamatórios da curcumina foram avaliados em vários

pequenos ensaios clínicos em humanos. Em um ensaio clínico duplo-cego controlado por

907
placebo em humanos, o efeito da curcumina e da curcumina fosfolipidada nos títulos de
anticorpos para a proteína de choque térmico 27 (um biomarcador de inflamação e
estresse oxidativo) foi avaliado em pacientes com síndrome metabólica (Mohammadi et
al. 2018). A dosagem de 1 g/dia por 6 semanas com curcumina ou curcumina
fosfolipidada não teve efeito significativo (p > 0,6) nos títulos de proteína de choque
térmico 27. No entanto, a dosagem oral de pacientes com síndrome metabólica com
curcumina (1 g/dia, com ou sem 10 mg/dia de piperina) por 6–8 semanas resultou em um
aumento significativo (p < 0,05) no equilíbrio pró-oxidante/antioxidante sérico
(Ghazimoradi et al. 2017; Panahi et al. 2015); no entanto, a dosagem de curcumina não
teve efeitos benéficos sobre os níveis circulantes de vitamina E (Mohammadi et al. 2017).
Um ensaio clínico duplo-cego controlado por placebo em humanos que avaliou o efeito da
curcumina ou da curcumina fosfolipidada no cobre sérico, zinco e relação zinco/cobre
demonstrou que, em comparação com o placebo, tanto a curcumina quanto o complexo
de curcumina fosfolipidado, administrados na dose de 1 g por dia durante 6 semanas,
foram associados a um aumento significativo (p < 0,05) no zinco sérico e na razão
zinco/cobre sérico em pacientes com síndrome metabólica (Safarian et al. 2018). Neste
ensaio, a curcumina fosfolipidada (1 g = 200 mg de curcumina) foi significativamente (p <
0,05) mais eficaz neste efeito da curcumina. Isto é provavelmente devido à maior
biodisponibilidade da forma de dosagem fosfolipidada. Com base nos resultados de um
ensaio de controle randomizado duplo-cego, os efeitos da curcumina (1 g/dia)
combinados com piperina (10 mg/dia) resultaram em aumento da adiponectina sérica,
diminuição da leptina sérica e diminuição da razão leptina/adiponectina (a biomarcador de
aterosclerose) (Panahi et al. 2016, 2017). Alegou-se que essas mudanças refletiam uma
diminuição no nível de inflamação sistêmica, medida pelos níveis circulantes de TNF-a.

Um número limitado de ensaios clínicos em humanos também examinou os efeitos da

curcumina na obesidade e dislipidemias. Um pequeno ensaio clínico randomizado
preliminar em humanos demonstrou que os pacientes que não perderam peso corporal (<
2% de redução) após 30 dias de dieta e intervenção no estilo de vida aumentaram a
perda de peso (cerca de 2–5%) e aumentaram as reduções no IMC (cerca de 2 –6%) cf.
controles após dosagem oral diária com 800 mg/dia de curcumina complexada com
fosfolipídios de girassol e 8 mg de piperina. Os efeitos modificadores dos lipídios
plasmáticos de um complexo de curcumina biodisponível (1 g/dia com 10 mg de
piperidina, dosagem por 8 semanas) foram avaliados em pacientes com diagnóstico de
síndrome metabólica (Panahi et al. 2014). Neste ensaio, a curcumina foi mais eficaz do
que o placebo na redução do LDL-C sérico, não-HDL-C, colesterol total, triglicerídeos e Lp

908
(a) e na elevação das concentrações de HDL-C. Efeitos semelhantes foram observados
em um segundo ensaio que utilizou dosagem TID de 630 mg/dia (Yang et al. 2014).

No geral, embora haja evidência de ensaio clínico humano de qualidade preliminar e de

pequena escala razoável de que as formas biodisponíveis de curcumina podem ter efeitos
benéficos na síndrome metabólica, obesidade e dislipidemias, faltam evidências de
desfechos benéficos gerais de longo prazo em pacientes com síndrome metabólica e
obesidade (Hariri e Haghighatdoost 2018).

3. Lagenaria siceraria (cabaça de garrafa, abóbora d’água)

A cabaça de garrafa, uma planta nativa da Índia, tem uma longa história de uso
etnofarmacológico. Os usos médicos tradicionais da planta incluem (1) como um diurético,
purgante e laxante; (2) como diurético para ascite cardiogênica; (3) para o alívio da dor de
cabeça e de dente; (4) como anticonvulsivante; (5) como tratamento para furúnculos,
tétano, febre, feridas e reumatismo; (6) como tratamento para asma e tosse; (7) como um
agente anticâncer; (8) como um tratamento para alopecia; e (9) como um antídoto para
envenenamento. A planta é conhecida por ter efeitos cardioprotetores, anti-
hiperlipidêmicos, antioxidantes, antihiperglicêmicos, analgésicos, antiinflamatórios,
imunomoduladores e hepatoprotetores em humanos. O suco de abóbora fresco é
considerado um tratamento eficaz para a obesidade na Índia.

Pequenos estudos controlados afirmaram que consumir extrato de fruta de cabaça de

garrafa recém-preparado uma vez/dia por 90 dias reduziu o colesterol total plasmático
(marginal), triglicerídeos plasmáticos, lipoproteínas de baixa densidade plasmática e IMC,
além de ter propriedades antioxidantes em humanos (Kaur et al. 2015; Katare et al. 2014).
Estas descobertas são apoiadas por estudos em ratos onde a dosagem oral de extratos
de metanol de cabaça de garrafa a 100-400 mg/kg peso corporal/dia resultou em
reduções dependentes da dose no colesterol total plasmático, triglicerídeos, níveis de
lipoproteínas de baixa densidade e aumento no plasma de lipoproteínas de alta densidade
(Ghule et al. 2006, 2009). Com base nos resultados deste pequeno estudo, o suco fresco
de cabaça pode ter alguns efeitos benéficos limitados sobre as dislipidemias em
humanos.

No geral, embora haja dados exploratórios preliminares razoáveis sobre os possíveis

efeitos benéficos dos produtos de cabaça de garrafa na dislipidemia em humanos, faltam
evidências de resultados benéficos em longo prazo em pacientes.

909
4. Trigonella foenum-graecum (feno-grego)
Uma das plantas medicinais mais antigas do mundo, o feno-grego, se originou na Índia e
no Norte da África (Kaur et al. 2015). Existem três grupos de compostos medicinais
encontrados na planta: saponinas esteróides, galactomanana e isoleucina. O feno-grego é
uma fonte importante do precursor da droga diosgenina, que é usado na síntese de
drogas esteróides.

Embora o feno-grego seja geralmente considerado um produto seguro, os pacientes com

alergia à planta ou alergia ao grão-de-bico (reação cruzada com o feno-grego) devem
evitá-lo (Kaur et al. 2015). O consumo de feno-grego é conhecido por causar tonturas,
diarréia transitória e flatulência. Hipoglicemia e níveis reduzidos de T3 foram relatados em
alguns pacientes. O feno-grego contém cumarina e o consumo pode resultar em tempos
de protrombina aumentados e tendência a sangramento. O feno-grego deve ser evitado
durante a gravidez porque estimula as contrações uterinas em estudos com animais.
Como o feno-grego é rico em fibra alimentar, pode diminuir a biodisponibilidade oral dos
medicamentos. Uma vez que o feno-grego induz hipoglicemia, o uso concomitante com
outros agentes hipoglicemiantes pode exacerbar seus efeitos farmacológicos.

A capacidade das preparações de feno-grego de atenuar a glicemia pós-prandial e a

insulinemia é considerada devido aos seus efeitos na fibra alimentar solúvel (Repin et al.
2017). Afirma-se que esses efeitos são devidos à modificação da viscosidade da ingesta e
ao retardo do esvaziamento gástrico. Os efeitos da fibra alimentar solúvel de feno-grego
nesses tipos de parâmetros são quase os mesmos que com outras fontes de fibra
alimentar solúvel.

As saponinas esteróides de feno-grego são reivindicadas por terem efeitos anti-

hipercolesterolemia e anti-hiperlipidemia em humanos (Kassaian et al. 2009). O
mecanismo desses efeitos não é compreendido completamente, mas pode ser uma
manifestação de aumento da ingestão de fibra alimentar solúvel.

Galactomananos são polímeros de galactose e manose presentes nas sementes de feno-

grego. Eles são hidrofílicos e formam soluções aquosas viscosas em baixas
concentrações (Kaur et al. 2015) e têm sido usados como “enchimentos” gástricos na
tentativa de estimular a saciedade e diminuir a ingestão calórica. A isoleucina é um
precursor de aminoácido que regula a secreção de insulina.

910
5. Emblica officinalis (sin. Phyllanthus emblica; Groselha indiana)
A groselha indiana é uma importante fonte dietética de vitamina C e minerais em muitas
áreas da Índia e tem uma longa história de uso como medicamento tradicional (tratamento
de febre, antiinflamatório, diurético, tônico para cabelo e fígado e auxílio digestivo) (Kaur
et al. 2015). A fruta também tem significado religioso e tem sido usada para fazer tintas
devido ao seu alto teor de tanino.

Foi demonstrado que as preparações de groselha indiana diminuem o colesterol sérico, a

lipoproteína de baixa densidade e os triglicerídeos em humanos e são agonistas de
PPARalfa (Kaur et al. 2015; Akhtar et al. 2011). Eles também exercem alguns de seus
efeitos devido às suas propriedades antioxidantes e de eliminação de radicais livres
(D'souza et al. 2014).

6. Murraya koenigii (árvore de curry)

As folhas desta planta são comumente usadas na culinária indiana (normalmente em
curries). A planta também tem um longo histórico de uso como medicamento tradicional e
é conhecida por ter efeitos antioxidantes, antitumorais, antiinflamatórios, anti-
hiperglicêmicos, hipoglicêmicos e hipolipemiantes (Kaur et al. 2015). Os produtos da
árvore de curry atuam como hipoglicêmicos, aumentando o armazenamento de glicogênio
hepático e diminuindo a gliconeogênese. Parte dos efeitos nutracêuticos da árvore do
curry pode ser devido às ações do alcalóide carbazol mahanimbina. Em camundongos, a
mahanimbina inibe os efeitos obesogênicos de uma dieta rica em gordura, incluindo a
redução do ganho de peso corporal; prevenir hiperlipidemia, acúmulo de gordura no
tecido adiposo e esteatose hepática; melhorando a depuração de glicose; e melhorando a
responsividade à insulina (Jagtap et al. 2017).

7. Vigna sp. (grama preta, lentilha preta, feijão-de-corda, feijão-frade,

feijão adzuki, feijão-mungo)
A lentilha preta (Vigna mungo) tem sido usada como fonte de alimento tradicional segura
e de alta proteína no Nepal e na Índia há milênios. Os benefícios alegados de consumir
lentilhas pretas são (Kaur et al. 2015):

• As propriedades deste alimento com alto teor de fibras e baixo índice glicêmico são
supostamente capazes de modular a homeostase dos lipídios em pessoas com uma dieta
rica em gorduras saturadas.
911
• As propriedades deste alimento com alto teor de fibras e baixo índice glicêmico ajudam a
manter o controle da glicose no sangue em pessoas com diabetes mellitus.

• Dietas supostamente ricas em lentilhas pretas têm algum benefício no controle do peso
corporal, uma vez que alegam ter efeitos de saciedade, limitando assim o consumo geral
de alimentos.

• As lentilhas pretas inibem a alfa amilase. A inibição da alfa amilase é conhecida por
atrasar a absorção de carboidratos e reduzir o pico de concentração plasmática pós-
prandial de glicose.

Outros membros do gênero Vigna têm a reputação de ter efeitos semelhantes. Em um

estudo cruzado duplo-cego randomizado humano, o consumo da proteína V. unguiculata
reduziu o colesterol total (12%), o colesterol LDL (18,9%), o colesterol não HDL (16%) e o
apoB (14%) e aumentou o colesterol HDL (+2,7%); no entanto, nenhum efeito no
inflamassoma sérico foi observado (Frota Kde et al. 2015). O consumo de feijão adzuki
por camundongos com doença hepática não alcoólica induzida por dieta rica em gordura
resultou na redução do sangue em jejum e dos níveis de triglicerídeos e colesterol
hepáticos com evidências de efeitos na lipogênese hepática e diminuição da inflamação
(Kim et al. 2015).

8. Camellia sinensis (Chás)

As alegações sobre os benefícios para a saúde dos três principais tipos de chá, preto,
oolong e verde, remontam à história há milhares de anos. Mais esforços de pesquisa
foram dedicados à Camellia sinensis do que a qualquer outro nutracêutico potencial. No
entanto, apesar desse esforço de pesquisa substancial, um consenso definitivo sobre os
benefícios para a saúde e os usos apropriados do chá como nutracêuticos e
medicamentos complementares ainda não foi alcançado (Jurgens et al. 2012).

Existem três categorias principais de compostos nutracêuticos benéficos alegados no chá:

• Bases xantinas e metilxantinas (cafeína, teofilina e teobromina)

• Óleos essenciais

• Compostos polifenólicos (principalmente epigalocatequina, galato de epigalocatequina,

galato de epicatequina e galato de galocatequina)

Vários estudos demonstraram que os fitoquímicos do chá parecem ter efeitos benéficos
sobre a obesidade e a síndrome metabólica em modelos animais de dieta rica em
gordura. Os estudos a seguir são representativos dos achados em roedores. Os
912
fitoquímicos do chá-verde administrados na água potável a ratos Wistar em
concentrações de até 3,2 g/L durante um período de 26 semanas reduziram o acúmulo de
tecido adiposo visceral em cerca de 40% em relação ao controle (sem resposta à dose)
(Tian et al. 2013). O efeito foi alegado ser devido à modulação da via erk1 / 2-PPARγ-
adiponectina. A dosagem oral de camundongos alimentados com uma dieta rica em
gordura contendo 400 mg/kg de peso corporal/dia de extrato de chá-verde (contendo 15
μg/ml e 3,77 g/mg de epigalocatequina, 95 μg/ml e 3,77 g/mg de galato de epigalocatequina, 20,8 μg/ml e 3,77 g/mg de
galato de epicatequina e 4,9 μg/ml e 3,77 g/mg galato de galocatequina) por 8 semanas foi associado
a um aumento na lipase sensível ao hormônio e perilipina no tecido adiposo mesentérico,
supostamente aumentando a lipólise e reduzindo a inflamação de baixo grau (conforme
medido pelos níveis de TNF-a e reduções em TLR4, MYD88 e TRAF6 sinalização pró-
inflamatória) e redução do peso corporal em cerca de 16% versus controle (Cunha et al.
2013). Os efeitos antiobesidade do chá não estão associados apenas a produtos de folha
e extrato de folha. Demonstrou-se que os extratos etanólicos da casca da fruta da planta
do chá, normalmente considerados resíduos agrícolas, têm efeitos antiobesidade em
ratos (Chaudhary et al. 2014). Neste estudo, a administração de 100 mg/kg de peso
corporal/dia de um extrato etanólico de casca de fruta de chá-verde como parte de uma
dieta rica em gordura fornecida a ratos por 50 dias resultou em uma redução de cerca de
25% no peso corporal e de 74% redução no peso da almofada de gordura do tecido
adiposo versus controle.

Os modos de ação sugeridos dos extratos de chá na obesidade e nas síndromes

metabólicas incluem a inibição da lipase pancreática, atividade de repressão do apetite,
regulação negativa da adipogênese, termogênese, alterações no metabolismo lipídico,
incluindo aumento da lipólise e diminuição da lipogênese, aumento das defesas
antioxidantes, alterações na microflora intestinal, aumento da utilização de gordura
corporal total, aumento da oxidação de gordura e efeitos antiinflamatórios (Grove et al.
2012; Yuda et al. 2012; Moon et al. 2007; Wolfram et al. 2006; Lu et al. 2012; Axling et al.
2012; Basu et al. 2010; Park et al. 2011).

O presumível principal fitoquímico do chá é (–)-epigalocatequina 3-galato dentro da fração

de polifenol, responsável pelo efeito antiobesidade.

As propriedades de segurança do chá foram melhor estudadas para preparações de chá-

verde. O consumo de quantidades moderadas de chá verde como bebida é atualmente
considerado seguro. Extratos concentrados de grandes chás têm sido relatados como
associados à hepatotoxicidade em um pequeno número de pessoas. No entanto, o Centro
Nacional de Saúde Complementar e Integrativa dos Estados Unidos concluiu que, no
913
caso do chá verde, “ainda não é possível chegar a conclusões definitivas sobre se o chá
verde é útil para a maioria dos fins para os quais é usado” (Centro Nacional de Saúde
Integrativa 2016).

9. Hibiscus sabdariffa
Esta planta bem estudada é comumente preparada como um refrigerante e é usada para
reduzir a inflamação, hipertensão e distúrbios hepáticos. No modelo de camundongo
obeso induzido por glutamato monossódico, extrato aquoso de cálices de Hibiscus
sabdariffa administrado a 120 mg/kg peso corporal/dia por 60 dias resultou em uma
redução de aproximadamente 22% no ganho de peso corporal versus controle e redução
da esteatose hepática (Alarcon-Aguilar et al. 2007). Reduções no peso corporal e no peso
do tecido adiposo versus controle também foram demonstradas em ratos obesos tratados
com extratos desta planta (Gamboa-Gómez et al. 2015). Resultados semelhantes foram
alcançados em outros modelos animais. Resultados promissores também foram
observados em ensaios clínicos humanos, onde o consumo de extrato de H. sabdariffa
por 12 semanas resultou em perda de peso, redução do IMC, redução da gordura
corporal, redução da proporção cintura/quadril e redução da esteatose hepática em
indivíduos com IMC 27 e aqueles com idades entre 16 e 65 anos (Chang et al. 2014).

Os fitoquímicos críticos identificados nesta planta são compostos fenólicos e flavonóides

(Peng et al. 2011). Múltiplos modos de ação putativas relacionados à antiobesidade,
distúrbio anti metabólico e efeitos hepatoprotetores da planta foram propostos, incluindo a
regulação negativa dos genes que codificam para a sintase de ácido graxo livre e
proteínas de ligação do elemento regulador de esterol, inibição do acúmulo de gotículas
de lipídeos em adipócitos e hipertrofia de adipócitos, efeitos antioxidantes, efeitos
antiinflamatórios e regulação negativa das lipases pancreáticas (Gamboa-Gómez et al.
2015; Kim et al. 2003).

10. Hypericum perforatum (Erva de São João)

Um banco de dados limitado de estudos sugere que a erva de São João pode ter efeitos
antiobesidade, além de seus usos bem conhecidos como sedativo, ansiolítico e
antidepressivo. A dosagem oral de ratos obesos induzidos por dieta rica em gordura com
extrato de erva de São João a 100 e 200 mg/kg peso corporal/dia por 15 dias resultou em
12% e 15% de redução no peso corporal (respectivamente) versus controle também como
redutor do colesterol total no sangue e do colesterol de baixa densidade em ratos normais
914
(Husain et al. 2011). O mesmo extrato normalizou a dislipidemia e melhorou a
sensibilidade à insulina em ratos alimentados com frutose. Resultados semelhantes com
extratos de outros Hypericum sp. foram relatados por outros investigadores (García-de la
Cruz et al. 2013).

Possíveis modos de ação relevantes para Hypericum sp. extratos incluíram a modulação
do sistema da serotonina que, por sua vez, pode reduzir a ingestão de alimentos, suprimir
o apetite e reduzir a ansiedade (Ganji et al. 2017). Estresse oxidativo reduzido, inibição da
inflamação, inibição da adipogênese, atenuação da captação de glicose sensível à
insulina pelo adipócito e limitação da diferenciação de pré adipócitos também foram
associados aos efeitos antiobesidade (Richard et al. 2012).

Os compostos antiobesidade específicos na erva de São João não foram totalmente

descritos, mas podem incluir hiperforina, hipericina, flavonóides e taninos condensados.

A segurança e as propriedades de interação medicamentosa dos extratos de erva de São

João são bem conhecidas, sendo as mais importantes os efeitos semelhantes à síndrome
da serotonina e os efeitos de interação medicamento/medicamento devido à indução de
CYP3A4 e CYP1A2 (revisado em Coppock e Dziwenka 2016; Gupta et al. 2018)

11. Persea americana (abacate)

Os efeitos anti-obesidade associados aos abacates foram relatados para frutas, folhas e
produtos de extrato de óleo (Brai et al. 2007). Oito semanas de dosagem de ratos com
hipercolesterolemia induzida por dieta rica em gordura saturada com 10 mg/kg de peso
corporal/dia de extratos aquosos e metanólicos de folhas de abacate resultaram em uma
redução de 25% no ganho de peso corporal em relação aos controles. Da mesma forma,
ratos alimentados com polpa de abacate desengordurada (100 g/kg de dieta) por 28 dias
tiveram um ganho de peso corporal 26% reduzido e níveis reduzidos de gordura hepática
total versus controles; no entanto, quando esta dieta e o colesterol foram administrados,
ocorreu um aumento do colesterol sérico (Naveh et al. 2002). No caso da polpa do
abacate, os efeitos antiobesidade foram atribuídos à redução do consumo de alimentos.
Efeitos semelhantes foram relatados para extratos de frutas alcoólicas (100 mg/kg peso
corporal/dia por 14 semanas) e extratos hidroalcoólicos (Padmanabhan e Arumugam
2014; Monika e Geetha 2016). Esses efeitos foram associados a efeitos antioxidantes,
alterações na adiponectina e PPARγ, alterações nas principais enzimas metabólicas
lipídicas e diminuição do LDL e dos peróxidos lipídicos no sangue. Os principais
compostos antiobesidade nos produtos de abacate ainda não foram definidos. O abacate
915
é um alimento seguro para humanos (Mahmassani et al. 2018); no entanto, eles são
tóxicos para uma variedade de animais domésticos e pássaros (Hargis et al. 1994; Stadler
et al. 1991; Burger et al. 1994).

12. Capsicum annuum (Pimenta)

Extratos de pimentaas foram relatados como antiadipogênicos em modelos animais. Uma
fração G de capsicosídeo de 13,35% da dieta (dosada a 10 e 100 mg/kg de peso corporal/
dia) isolada de sementes de capsicum modulou os efeitos da obesidade de uma dieta rica
em gordura em camundongos C57BL/6J (Sung et al. 2016). Os principais efeitos incluíram
redução do peso do tecido adiposo do epididimo, redução da hipertrofia de adipócitos,
redução da esteatose hepática e redução da expressão de reguladores de diferenciação
de adipócitos (PPARγ, CCATα e proteína de ligação ao elemento regulador de esterol 1c).
Da mesma forma, camundongos C57BL/6 alimentados com uma dieta rica em gordura
com um suplemento de suco de pimenta verde (10 mL/kg de peso corporal/dia) tiveram
menor ganho de peso, diminuição dos triglicerídeos séricos, redução do colesterol sérico
e LDL e gordura abdominal inferior (subcutânea e visceral) de volume versus controles
(Kim e Park 2015).

Efeitos antiobesidade dos capsaicinoides de Capsicum sp., também foram demonstrados

em um ensaio clínico limitado em humanos. Uma dose de 6 mg/dia por 12 semanas
resultou em uma pequena redução na adiposidade abdominal em comparação ao
placebo.

Vários modos de ação foram descritos para os efeitos antiobesidade do capsicum,

incluindo a inibição da adipogênese, mudanças na microflora intestinal com uma redução
resultante na inflamação crônica de baixo grau, efeitos antioxidantes, modulação da
inflamação e alteração no metabolismo das lipoproteínas (Kim et al. 2018; Kang et al.
2017; Marrelli et al. 2016; Yu et al. 2012).

13. Rosmarinus officinalis (Alecrim)

O alecrim é uma especiaria medicinal bem conhecida com uma longa história de uso
como abortivo à base de ervas; no entanto, há agora um corpo em expansão de dados de
animais demonstrando eficácia potencial na obesidade e distúrbios metabólicos. A
dosagem de camundongos obesos induzidos por dieta rica em gordura com 200 mg/kg
peso corporal/dia de um extrato de folha de alecrim resultou em ganho de peso reduzido

916
em cerca de 64% acompanhado por uma redução de aproximadamente 57% no ganho de
massa gorda (Harach et al. 2010). Isso foi acompanhado por aumento da excreção de
lipídios fecais e uma redução de aproximadamente 39% nos níveis de triglicerídeos
hepáticos. Resultados semelhantes foram obtidos quando o extrato de folha de alecrim foi
padronizado para um teor de ácido carnósico de 20% e dosado a 500 mg/kg de peso
corporal/dia do extrato (Ibarra et al. 2011). Vários investigadores já replicaram essas
descobertas (Zhao et al. 2015).

O composto antiobesidade ativo mais bem investigado no alecrim é o ácido carnósico,

que tem uma série de modos de ação potencialmente relevantes, incluindo inibição da
lipase gástrica, modulação de genes envolvidos no metabolismo (SIRT1, coativador
PPARγ 1α, glicose-6-fosfatase, ACC e baixo - receptor de lipoproteína de densidade),
modulação de PPARγ, ativação das vias AMPK e PPAR, aumento da glicólise hepática e
oxidação de ácidos graxos, diminuição da inflamação, diminuição da leptina, aumento da
adiponectina, modificação do microbioma cecal, inibição da b-glucosidase cecal, aumento
fecal da cadeia curta de ácido graxo e excreção de fibra, estimulação da captação de
glicose muscular via modulação do eixo de sinalização PME-1/PP2A/PKB, modulação da
sinalização TLR4-MyD88 em adipócitos e redução da lipogênese hepática enquanto
aumenta a lipólise hepática (Romo-Vaquero et al. 2012, 2014a, b; Tu et al. 2013; Park e
Mun 2014). O ácido carnósico inibe a via de sinalização TLR4-MyD88 em adipócitos 3T3-
L1 estimulados por LPS (Park e Sung 2015).

O ácido rosmarínico, outro composto bioativo do alecrim, também demonstrou suprimir a

adipogênese, a lipólise e a inflamação nos adipócitos. Portanto, parece ser um produto
natural promissor para melhorar a mobilização adiposa na obesidade (Rui et al. 2017).

As propriedades de segurança do alecrim e do extrato de alecrim foram bem

documentadas. Os principais efeitos são na fertilidade masculina,
estabelecimento/manutenção da gravidez e alterações no metabolismo do estrogênio.

14. Observações finais e orientações futuras

Embora a obesidade e os distúrbios metabólicos continuem a ser um problema crescente
de saúde pública em todo o mundo, em breve existirá um mercado para produtos
nutracêuticos que tenham como alvo essas doenças. Consequentemente, a mineração de
moléculas na área de nutracêuticos provavelmente continuará em um futuro previsível.
Embora haja um corpo crescente de literatura do tipo prova de conceito em vários
modelos animais, permanecem relativamente poucos ensaios clínicos grandes e de alta
917
qualidade. Os dados mecanísticos também costumam ser de natureza preliminar e
exploratória. Dado o status quo atual, substancialmente mais pesquisas translacionais são
necessárias para estabelecer totalmente a credibilidade terapêutica de muitos desses
materiais.

Referências
Akhtar M, Ramzan A, Ali A et al (2011) Effect of Amla fruit (Emblica officinalis Gaertn.) on blood glucose and lipid profile
of normal subjects and type 2 diabetic patients. Int J Food Sci Nutr 62 (6):609–616
Alarcon-Aguilar F, Zamilpa A, Perez-Garcia M et al (2007) Effect of Hibiscus sabdariffa on obesity in MSG mice. J
Ethnopharmacol 114 (1):66–71
Axling U, Olsson C, Xu J et al (2012) Green tea powder and Lactobacillus plantarum affect gut microbiota, lipid
metabolism and inflammation in high-fat fed C57BL/6J mice. Nutr Metab (Lond) 9(1):105
Basu A, Sanchez K, Leyva M et al (2010) Green tea supplementation affects body weight, lipids, and lipid peroxidation
in obese subjects with metabolic syndrome. J Am Coll Nutr 29(1):31–40
Brai B, Odetla A, Agomo P (2007) Effects of Persea americana leaf extracts on body weight and liver lipids in rats fed
hyperlipidaemic diet. Afr J Biotechnol 6:1007–1011
Burger WP, Naudé TW, van Rensburg IB et al (1994) Cardiomyopathy in ostriches (Struthio camelus) due to avocado
(Persea americana var. guatemalensis) intoxication. J South Afr Vet Assoc 65 (3):113–118
Chang H, Peng C, Yeh D et al (2014) Hibiscus sabdariffa extract inhibits obesity and fat accumulation, and improves
liver steatosis in humans. Food Funct 5(4):734–739
Chaudhary N, Bhardwaj J, Seo H et al (2014) Camellia sinensis fruit peel extract inhibits angiogenesis and ameliorates
obesity induced by high-fat diet in rats. J. Funct Foods 7:479–486
Coppock RW, Dziwenka M (2016) St. John’s Wort. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity.
Academic/Elsevier, Amsterdam, pp 619–631
Cunha C, Lira F, Rosa Neto J et al (2013) Green tea extract supplementation induces the lipolytic pathway, attenuates
obesity, and reduces low-grade inflammation in mice fed a high-fat diet. Mediators Inflamm 2013:635470
D’souza J, D’souza P, Fazal F et al (2014) Anti-diabetic effects of the Indian indigenous fruit Emblica officinalis Gaertn:
active constituents and modes of action. Food Funct 5(4):635–644
Frota Kde M, dos Santos Filho R, Ribeiro V et al (2015) Cowpea protein reduces LDL-cholesterol and apolipoprotein B
concentrations, but does not improve biomarkers of inflammation or endothelial dysfunction in adults with moderate
hypercholesterolemia. Nutr Hosp 31(4):1611–1619
Gamboa-Gómez C, Rocha-Guzmán N, Gallegos-Infante J et al (2015) Plants with potential use on obesity and its
complications. EXCLI J 14:809–831
Ganji A, Salehi I, Sarihi A et al (2017) Effects of Hypericum Scabrum extract on anxiety and oxidative stress
biomarkers in rats fed a longterm high-fat diet. Metab Brain Dis 32(2):503–511
García-de la Cruz L, Galvan-Goiz Y, Caballero-Caballero S et al (2013) Hypericum silenoides Juss. and Hypericum
philonotis Cham. & Schlecht. extracts: in-vivo hypolipidaemic and weight-reducing effects in obese rats. J Pharm
Pharmacol 65(4):591–603
Ghazimoradi M, Saberi-Karimian M, Mohammadi F et al (2017) The effects of curcumin and curcumin-phospholipid
complex on the serum pro-oxidant-antioxidant balance in subjects with metabolic syndrome. Phytother Res 31(11):1715–
1721
Ghule B, Ghante M, Saoji A et al (2006) Hypolipidemic and antihyperlipidemic effects of Lagenaria siceraria (Mol.) fruit
extracts. Indian J Exp Biol 44(11):905–909
Ghule B, Ghante M, Saoji A et al (2009) Antihyperlipidemic effect of the methanolic extract from Lagenaria siceraria
Stand. fruit in hyperlipidemic rats. J Ethnopharmacol 124(2):333–337
Grove K, Sae-Tan S, Kennett M et al (2012) Epigallocatechin-3-gallate inhibits pancreatic lipase and reduces body
weight gain in high fat-fed obese mice. Obesity 20:2311–2313
Gupta RC, Srivastava A, Lall R (2018) Toxicity potential of nutraceuticals. In: Nicolotti O (ed) Computational toxicology:
methods and protocols. Springer, New York, pp 367–394
Harach T, Aprikian O, Monnard I et al (2010) Rosemary (Rosmarinus officinalis L.) leaf extract limits weight gain and
liver steatosis in mice fed a high-fat diet. Planta Med 76(6):566–571
Hargis AM, Stauber E, Casteel S et al (1994) Avocado (Persea americana) intoxication in caged birds. J Am Vet Med
Assoc 194 (1):64–66
Hariri M, Haghighatdoost F (2018) Effect of curcumin on anthropometric measures: a systematic review on randomized
clinical trial. J Am College Nutr. https://doi.org/10.1080/07315724.2017.1392263
Husain G, Chatterjee S, Singh P et al (2011) Hypolipidemic and antiobesity-like activity of standardised extract of
Hypericum perforatum L. in rats. Pharmacology 2011:505247
Ibarra A, Cases J, Roller M et al (2011) Carnosic acid-rich rosemary (Rosmarinus officinalis L.) leaf extract limits
weight gain and improves cholesterol levels and glycaemia in mice on a high-fat diet. Br J Nutr 106(8):1182–1189

918
 Jagtap S, Khare P, Mangal P et al (2017) Effect of mahanimbine, an alkaloid from curry leaves, on high-fat diet-
induced adiposity, insulin resistance, and inflammatory alterations. Biofactors 43 (2):220–231
Jurgens T, Whelan A, Killian L et al (2012) Green tea for weight loss and weight maintenance in overweight or obese
adults. Cochrane Database Syst Rev 1465–1858. https://doi.org/10.1002/14651858.CD008650.pub2
Kang C, Wang B, Kaliannan K et al (2017) Gut microbiota mediates the protective effects of dietary capsaicin against
chronic low-grade inflammation and associated obesity induced by high-fat diet. MBIO 8(4)
Kassaian N, Azadbakht L, Forghani B et al (2009) Effect of fenugreek seeds on blood glucose and lipid profiles in type
2 diabetic patients. Int J Vitam Nutr Res 79(1):34–39
Katare C, Saxena S, Agrawal S et al (2014) Lipid-lowering and antioxidant functions of bottle gourd (Lagenaria
siceraria) extract in human dyslipidemia. J Evid Based Complement Alternat Med 19 (2):112–118
Kaur G, Mukundan S, Wani V et al (2015) Nutraceuticals in the management and prevention of metabolic syndrome.
Austin J Pharmacol Ther 3(1):1–6
Kim N, Park S (2015) Evaluation of green pepper (Capsicum annuum L.) juice on the weight gain and changes in lipid
profile in C57BL/6 mice fed a high-fat diet. J Sci Food Agric 95(1):79–87
Kim M, Kim J, Kim H et al (2003) Hibiscus extract inhibits the lipid droplet accumulation and adipogenic transcription
factors expression of 3T3-L1 preadipocytes. J Altern Complement Med 9(4):499–504
Kim S, Hong J, Jeon R et al (2015) Adzuki bean ameliorates hepatic lipogenesis and proinflammatory mediator
expression in mice fed a high-cholesterol and high-fat diet to induce nonalcoholic fatty liver disease. Nutr Res 36(1):90–
100
Kim H, You M, Wang Z et al (2018) Red pepper seed inhibits differentiation of 3T3-L1 cells during the early phase of
adipogenesis via the activation of AMPK. Am J Chin Med 46(1):107–118
Lu C, Zhu W, Shen C et al (2012) Green tea polyphenols reduce body weight in rats by modulating obesity-related
genes. PLoS One 7: e38332
Mahmassani HA, Avendano EE, Raman G et al (2018) Avocado consumption and risk factors for heart disease: a
systematic review and meta-analysis. Am J Clin Nutr 107:523–536
Marrelli M, Menichini F, Conforti F (2016) Hypolipidemic and antioxidant properties of hot pepper flower (Capsicum
annuum L.). Plant Foods Hum Nutr 71(3):301–306
Mohammadi A, Sadeghnia H, Saberi-Karimian Met al (2017) Effects of curcumin on serum vitamin E concentrations in
individuals with metabolic syndrome. Phytother Res 31(4):657–662
Mohammadi F, Ghazi-Moradi M, Ghayour-Mobarhan M et al (2018) The effects of curcumin on serum heat shock
protein 27 antibody titers in patients with metabolic syndrome. J Diet Suppl 29:1–10
Monika P, Geetha A (2016) Effect of hydroalcoholic fruit extract of Persea americana Mill. on high fat diet induced
obesity: a dose response study in rats. Indian J Exp Biol 54(6):370–378
Moon H, Chung C, Lee H et al (2007) Inhibitory effect of (-)epigallocatechin-3-gallate on lipid accumulation of 3T3-L1
cells. Obeisty 15:2571–2582
National Center for Complementary and Integrative Health (2016) Green tea. Retrieved from Health Topics.
https://nccih.nih.gov/health/greentea
Naveh E, Werman M, Sabo E et al (2002) Defatted avocado pulp reduces body weight and total hepatic fat but
increases plasma cholesterol in male rats fed diets with cholesterol. J Nutr 132 (7):2015–2018
Padmanabhan M, Arumugam G (2014) Effect of Persea americana (avocado) fruit extract on the level of expression of
adiponectin and PPAR-γ in rats subjected to experimental hyperlipidemia and obesity. J Complement Integr Med
11(2):107–119
Panahi Y, Khalili N, Hosseini M et al (2014) Lipid-modifying effects of adjunctive therapy with curcuminoids-piperine
combination in patients with metabolic syndrome: results of a randomized controlled trial. Complement Ther Med
22(5):851–857
Panahi Y, Hosseini M, Khalili N et al (2015) Antioxidant and antiinflammatory effects of curcuminoid-piperine
combination in subjects with metabolic syndrome: a randomized controlled trial and an updated meta-analysis. Clin Nutr
34(6):1101–1108
Panahi Y, Hosseini M, Khalili N et al (2016) Effects of supplementation with curcumin on serum adipokine
concentrations: a randomized controlled trial. Nutrition 32(10):1116–1122
Panahi Y, Khalili N, Sahebi E et al (2017) Curcuminoids plus piperine modulate adipokines in type 2 diabetes mellitus.
Curr Clin Pharmacol 12(4):253–258
Park M, Mun S (2014) Carnosic acid inhibits TLR4-MyD88 signaling pathway in LPS-stimulated 3T3-L1 adipocytes.
Nutr Res Pract 8 (5):516–520
Park M, Sung M (2015) Carnosic acid attenuates obesity-induced glucose intolerance and hepatic fat accumulation by
modulating genes of lipid metabolism in C57BL/6J-ob/ob mice. J Sci Food Agric 95 (4):828–835
Park H, DiNatale D, Chung M et al (2011) Green tea extract attenuates hepatic steatosis by decreasing adipose
lipogenesis and enhancing hepatic antioxidant defenses in ob/ob mice. J Nutr Biochem 22 (4):393–400
Peng C, Chyau C, Chan K et al (2011) Hibiscus sabdariffa polyphenolic extract inhibits hyperglycemia, hyperlipidemia,
and glycationoxidative stress while improving insulin resistance. J Agric Food Chem 59(18):9901–9909
Purpura M, Lowery RP, Wilson JM et al (2018) Analysis of different innovative formulations of curcumin for improved
relative oral bioavailability in human subjects. Eur J Nutr 57:929–938
Repin N, Kay B, Cui SW et al (2017) Investigation of mechanisms involved in postprandial glycemia and insulinemia
attenuation with dietary fibre consumption. Food Funct 8(6):2142–2154
919
 Richard A, Amini Z, Ribnicky D et al (2012) St. John’s Wort inhibits insulin signaling in murine and human adipocytes.
Biochim Biophys Acta 1822(4):557–563
Romo-Vaquero M, Yáñez-Gascón M, García Villalba R et al (2012) Inhibition of gastric lipase as a mechanism for body
weight and plasma lipids reduction in Zucker rats fed a rosemary extract rich in carnosic acid. PLoS One 7(6):e39773
Romo-Vaquero M, Larrosa M, Yáñez-Gascón M et al (2014a) A rosemary extract enriched in carnosic acid improves
circulating adipocytokines and modulates key metabolic sensors in lean Zucker rats: critical and contrasting differences
in the obese genotype. Mol Nutr Food Res 58(5):942–953
Romo-Vaquero M, Selma M, Larrosa M et al (2014b) A rosemary extract rich in carnosic acid selectively modulates
caecum microbiota and inhibits β-glucosidase activity, altering fiber and short chain fatty acids fecal excretion in lean and
obese female rats. PLoS One 9(4):e94687
Rui Y, Tong L, Cheng J et al (2017) Rosmarinic acid suppresses adipogenesis, lipolysis in 3T3-L1 adipocytes,
lipopolysaccharidestimulated tumor necrosis factor-α secretion in macrophages, and inflammatory mediators in 3T3-L1
adipocytes. Food Nutr Res 61:1330096
Safarian H, Parizadeh S, Saberi-Karimain M et al (2018) The effect of curcumin on serum copper and zinc and Zn/Cu
ratio in individuals with metabolic syndrome: a double-blind clinical trial. J Diet Suppl 18
Soleimani V, Sahebkar A, Hosseinzadeh H (2018) Turmeric (Curcuma longa) and its major constituent (curcumin) as
nontoxic and safe substances: Review. Phytother Res 32(6):985–995
Stadler P, van Rensberg IB, Naudé TE et al (1991) Suspected avocado (Persea americana) poisoning in goats. J
South Afr Vet Assoc 62 (4):186–188
Sung J, Jeong H, Lee J (2016) Effect of the capsicoside G-rich fraction from pepper (Capsicum annuum L.) seeds on
high-fat diet-induced obesity in mice. Phytother Res 30(11):1848–1855
Tian C, Ye X, Zhang R et al (2013) Green tea polyphenols reduced fat deposits in high fat-fed rats via erk1/2-PPARγ-
adiponectin pathway. PLos One 8(1):e53796
Tu Z, Moss-Pierce T, Ford P et al (2013) Rosemary (Rosmarinus officinalis L.) extract regulates glucose and lipid
metabolism by activating AMPK and PPAR pathways in HepG2 cells. J Agric Food Chem 61(11):2803–2810
Wolfram S, Wang Y, Thielecke F (2006) Anti-obesity effects of green tea: from bedside to bench. Mol Nutr Food Res
50:176–187
Yang Y, Su Y, Yang H et al (2014) Lipid-lowering effects of curcumin in patients with metabolic syndrome: a
randomized, double-blind, placebo-controlled trial. Phytother Res 28(12):1770–1777
Yu Q, Wang Y, Yu Y et al (2012) Expression of TRPV1 in rabbits and consuming hot pepper affects its body weight.
Mol Biol Rep 39 (7):7583–7589
Yuda N, Tanaka M, Suzuki M et al (2012) Polyphenols extracted from black tea (Camellia sinensis) residue by hot-
compressed water and their inhibitory effect on pancreatic lipase in vitro. J Food Sci 77: H254–H261
Zhao Y, Sedighi R, Wang P et al (2015) Carnosic acid as a major bioactive component in rosemary extract ameliorates
high-fat-dietinduced obesity and metabolic syndrome in mice. J Agric Food Chem 63(19):4843–4852

920
 Nutracêuticos para diabetes em cães e gatos
Ramesh C. Gupta, Rajiv Lall, Anita Sinha e Ajay Srivastava

Resumo
O diabetes é um sério problema de saúde em cães e gatos que geralmente é tratado com
o uso de insulina injetável. Existem mais de 90 milhões de cães de estimação nos
Estados Unidos, e 1 em cada 400–500 cães sofre de diabetes. O diabetes geralmente
ocorre mais tarde na vida, geralmente em torno de 7 a 10 anos de idade, com certas
raças com maior risco de desenvolver esta doença. O tratamento tradicional do diabetes
em cães e gatos inclui monitoramento de alimentos, monitoramento de glicose (que é feito
com o uso de um glicosímetro específico para cães), exercícios moderados,
medicamentos e terapia com insulina. Frequentemente, os donos de cães e gatos
recusam o tratamento para diabéticos porque não se sentem confiantes em dar injeções
de insulina ou porque simplesmente não podem pagar pelo tratamento, já que a terapia
com insulina e os medicamentos tradicionais são caros. Portanto, é benéfico determinar a
eficácia e a segurança de uma potencial formulação oral para o controle do diabetes. Uma
formulação oral de nutracêutico (s) pode fornecer um método de administração mais fácil
(não invasivo) e fornecer custos mais baixos para cães e gatos
proprietários, não exigindo suprimentos adicionais, como agulhas e seringas. Este
capítulo descreve vários extratos de plantas e nutracêuticos que têm potencial para
efeitos antidiabéticos e anti-hiperglicêmicos em cães e gatos diabéticos.
Palavras-chave: Nutracêuticos · Diabetes · Hiperglicemia · Medicina veterinária ·
Resistência à insulina · Sensibilidade à insulina

R. C. Gupta - Toxicology Department, Breathitt Veterinary Center, Murray State University, Hopkinsville, KY,
USA e-mail: rgupta@murraystate.edu
R. Lall · A. Sinha · A. Srivastava Vets Plus Inc., Menomonie, WI, USA

1. Introdução
Em humanos, o diabetes mellitus tipo 2 (DM2) é um distúrbio metabólico crônico que se
tornou a quarta causa de morte em países desenvolvidos (Lee 2016). Mais de 415
milhões de indivíduos com diabetes foram notificados em 2015, com cinco milhões de
mortes em 2015 (OMS 2016). Clinicamente, cerca de 90% dos pacientes diabéticos são
relatados como DMT2, que é caracterizado por resistência à insulina e disfunção das
células β. Entre as espécies animais, os cães sofrem de diabetes com mais frequência do
que outras espécies. Atualmente, a população canina global é de aproximadamente 900
921
milhões. Existem mais de 90 milhões de cães de estimação nos Estados Unidos. As
estatísticas mostram que aproximadamente um em cada 200 gatos e um em cada 400–
500 cães são diagnosticados com diabetes. O diabetes geralmente ocorre mais tarde na
vida, geralmente em torno de 7 a 10 anos de idade em cães, com certas raças (bassês,
schnauzers, poodles, cairn e terriers australianos, springer spaniels, keeshonds,
samoiedos e golden retrievers) correndo um risco maior de desenvolver esta doença. É
interessante notar que em keeshonds, o diabetes é herdado como um traço autossômico
recessivo. Setenta por cento dos cães com diabetes são fêmeas e 30% são machos. Ao
contrário dos cães, os gatos machos são mais propensos a diabetes. Foi relatado que os
gatos birmaneses apresentam um risco maior de diabetes do que outras raças de gatos.
O DM2 é caracterizado por disfunção das células β pancreáticas, que causa hiperglicemia
e pode levar a várias complicações secundárias, como neuropatia, nefropatia e
insuficiência cardíaca.

O manejo tradicional do diabetes em cães e gatos pode incluir monitoramento da dieta,

exercícios moderados e terapia com insulina e outras drogas redutoras de glicose para
controlar as concentrações de glicose no sangue. No entanto, os medicamentos
terapêuticos podem produzir efeitos colaterais, incluindo ganho de peso, distúrbios
gastrointestinais e insuficiência cardíaca. Frequentemente, os donos de cães recusam o
tratamento para diabéticos porque não se sentem confiantes em dar injeções de insulina
ou porque simplesmente não podem pagar pelo tratamento. Recentemente, foi relatado
que o peptídeo-1 semelhante ao glucagon (GLP1) é eficaz contra o DM2 após a
administração oral ou parenteral (Lee 2016).

É benéfico determinar a eficácia e a segurança de uma potencial formulação oral de

medicamentos alternativos naturais para o controle do diabetes. Uma formulação oral de
nutracêutico(s) pode fornecer um método de administração mais fácil (não invasivo) e
reduzir os custos para donos de cães e gatos por não exigir suprimentos adicionais, como
agulhas e seringas.

Extratos de plantas comumente usados que têm potencial antidiabético podem incluir
Berberis vulgaris, Trigonella foenumgraecum, Momordica charantia, Curcuma longa,
Moringa oleifera, Gymnema sylvestre, Azadirachta indica, Aloe vera, Panax ginseng e
muitos outros. Extratos dessas e de outras plantas podem exercer efeitos antidiabéticos
por múltiplos mecanismos (Patel et al. 2012; Nair et al. 2013; Gupta et al. 2017). Os
nutracêuticos também têm sido implicados em complicações secundárias associadas ao
diabetes, como nefropatia, cardiopatia, retinopatia, pancreatite e feridas. Além disso, os
nutracêuticos podem prevenir ou reverter alterações induzidas por DM2 na microbiota,
922
marcadas pelo desempenho de enterobactérias e uma diminuição no número de bactérias
benéficas (Villarruel-López et al. 2018).

Este capítulo descreve vários extratos de plantas e nutracêuticos com potencial para
efeitos antidiabéticos e anti-hiperglicêmicos em cães e gatos.

2. Fisiopatologia do Diabetes Mellitus

A fisiopatologia do diabetes mellitus (DM) é muito complexa e o mecanismo de ação exato
ainda não foi estabelecido. O diabetes mellitus tipo 2 (DM2) é a forma mais comum de
diabetes. A resistência à insulina em tecidos-alvo é uma característica e um fator
importante que contribui para o DM2 (Araki e Miyazaki 2007; DeFronzo e Tripathy 2009;
Kang et al. 2016). Disfunção mitocondrial e estresse oxidativo (devido ao aumento da
produção de ROS) têm sido associados ao desenvolvimento de resistência à insulina no
diabetes (Kaneto et al. 2007; Kim et al. 2008; Matsuzawa-Nagata et al. 2008; Kangralkar
et al. 2010; Raza et al. 2011). Além disso, a via da fosfatidilinositol 3-quinase (PI3K) / AKT
prejudicada no diabetes é um dos principais mecanismos de resistência à insulina
induzida pelo aumento do nível de ROS (Wang et al. 2011; Naveen e Baskaran 2018). Um
aumento na resistência à insulina leva à gliconeogênese elevada e síntese reduzida de
glicogênio no fígado, causando, portanto, diminuição da secreção de insulina das células
β pancreáticas e hiperglicemia (revisado em Yan et al. 2018). A via PI3K / AKT
desempenha um papel importante na via de sinalização da insulina, que é considerada o
regulador chave relevante para a gliconeogênese e síntese de glicogênio (Whiteman et al.
2002). Alvos críticos em DM incluem α-amilase, α-glucosidase, dipeptidil peptidase-IV
(DPP-IV), aldolase redutase, receptor gama ativado por proliferador de peroxissoma
(PPAR-γ), proteína quinase 50 ativada por monofosfato de adenosina (AMP quinase) e
glicose transportador tipo 4 (GLUT4) (Naveen e Baskaran 2018). Naveen e Baskaran
(2018) classificaram as complicações associadas ao DM em duas categorias: (1)
microvascular (nefropatia, neuropatia e retinopatia) e (2) macrovascular (ataque cardíaco,
acidente vascular cerebral e doença vascular periférica).

Alterações da homeostase endotelial, devido principalmente a citocinas pró-inflamatórias

e redução da secreção de adiponectina, parecem ser dois eventos principais na
resistência à insulina e hiperglicemia. Essas condições estão associadas à expressão
gênica alterada e à sinalização celular no endotélio vascular, afetando assim a liberação
de fatores derivados do endotélio, a ativação da NADPH oxidase, o desacoplamento da
NOS endotelial (eNOS) e a expressão da endotelina-1. Essa cascata de eventos

923
frequentemente resulta em um desequilíbrio entre a produção de vasodilatadores e
mediadores vasoconstritores e a indução de moléculas de adesão.

3. Modelos Experimentais de Diabetes

Vários modelos animais são usados para induzir experimentalmente o DM por meio da
injeção de produtos químicos diabetogênicos (Reed et al. 2000; Etuk 2010; King 2012). A
estreptozotocina (STZ) é a droga mais comumente usada para indução de diabetes em
ratos e camundongos (Balamurugan et al. 2003). Uma dose única de estreptozotocina (80
mg/kg em ratos e 150 mg/kg em camundongos) é administrada por via intraperitoneal ao
DM. O diabetes se desenvolve gradualmente e pode ser avaliado após alguns dias,
aproximadamente 4 dias para camundongos e 7 dias para ratos (Etuk 2010).
Normalmente, um nível de glicose sérica de cerca de 180–500 mg/dL indica a indução de
DM. Em ratos, o DM também pode ser induzido por injeção intraperitoneal (IP) de aloxana
(100 mg/kg de peso corporal). Lenzen (2008) induziu hiperglicemia (> 200 mg/dL) em
ratos após 72 h por injeção de monohidrato de aloxano (150 mg/kg, IP). Aloxana foi usada
para produzir diabetes experimental em ratos, camundongos, coelhos e cães (Etuk 2010).
Com a seleção de dose adequada, qualquer medicamento pode induzir DM tipo 1 ou 2.

Qualquer um desses dois medicamentos, com meia dose quando administrado sozinho,
também pode ser administrado em combinação com uma dieta rica em gordura (Reed et
al. 2000; Parveen et al. 2011). Em um modelo de rato de diabetes, uma dieta rica em
gordura (40% das calorias como gordura) é freqüentemente administrada por 2 semanas
antes da injeção de estreptozotocina ou aloxana (Reed et al. 2000).

STZ causa citotoxicidade seletiva de células β das ilhotas pancreáticas mediada pela
liberação de óxido nítrico (NO) e estresse oxidativo / nitrosativo (Raza et al. 2011). A
superexpressão de NADPH oxidase tipo 4 (NOX4) foi relatada em fígados de ratos
induzidos por STZ. Isso resulta em rápida redução na concentração de nucleotídeos de
piridina das ilhotas pancreáticas e subsequente necrose de células β. A ação do STZ nas
mitocôndrias gera ânions superóxido dismutase (SOD), o que leva a complicações
diabéticas. STZ destrói parcialmente as células β, causando descarga inadequada de
insulina e criando diabetes tipo 2 (revisado em Jayaprasad et al. 2015). Aloxano é um
derivativo de ureia que causa necrose seletiva das células β das ilhotas pancreáticas.
Szkudelski (2001) e Lenzen (2008) descreveram em detalhes o mecanismo de STZ e
aloxana no pâncreas e nas células β.

4. Monitoramento de diabéticos
924
A medição da glicose no sangue é geralmente realizada com um glicosímetro de sangue
específico para cães ou felinos e um kit de teste. Cães e gatos clinicamente normais têm
valores de glicose no sangue variando de 79–103 mg/dL e 74–216 mg/dL,
respectivamente. Recentemente, Corradini et al. (2016) sugeriram o uso de um sistema
de monitoramento flash de glicose (FGMS) para medir as concentrações de glicose
intersticial (IG) continuamente por dias ou semanas. O método é indolor, mas eritema leve
no local da aplicação foi encontrado em cinco entre dez cães no final do período de uso,
ou seja, 14 dias. O FGMS é fácil de usar e preciso para a medição da glicose IG em cães
diabéticos. Usando um kit comercialmente disponível, a hemoglobina glicosilada A1 foi
medida no sangue de cães e gatos para monitorar o estado de diabetes, mas o teste não
foi considerado de qualquer valor (Delack e Stogdale 1983). Em humanos, a HbA1c
glicosilada é um índice rotineiro de DM2, pois é um biomarcador para identificar a
hiperglicemia de estresse e a hiperglicemia diabética. Uma série de fatores pode afetar o
monitoramento dos níveis de glicose no sangue (Ginsberg 2009). Em cães e gatos, no
entanto, HbA1c não se correlaciona bem com diabetes, então o ensaio de proteína sérica
glicada (GSP; albumina glicada; Diazyme Laboratories, Poway, CA, EUA) é recomendado
(Kouzuma et al. 2002). Os níveis de glicose no sangue em jejum de animais acima de 200
mg/dL são considerados diabéticos.

5. Prevenção e tratamento do diabetes em animais

Como os humanos (Brouns 2018), exercícios moderados, dieta rica em gorduras com
baixo teor de carboidratos e medicamentos terapêuticos podem ser recomendados para
prevenir e controlar o diabetes em cães e gatos. Feinman et al. (2015) relataram que a
restrição de carboidratos na dieta é a melhor abordagem no controle do diabetes,
melhorando a sensibilidade à insulina e perda significativa de peso. Wyk et al. (2016) e
Brouns (2018) enfatizaram ainda que a qualidade, mas não a quantidade de carboidratos
parece ser um aspecto chave a ser considerado. Quando a disponibilidade de glicose está
em declínio devido à dieta pobre em carboidratos, dois processos metabólicos
(gliconeogênese e cetogênese) entram em jogo (Wyk et al. 2016; Hall 2017). Mudar de
uma dieta rica em carboidratos para uma dieta rica em gordura (LCHF) pode levar à perda
de peso, redução do apetite, melhora da sensibilidade à insulina, menos flutuações nos
níveis de glicose no sangue e níveis mais baixos de glicose no sangue em jejum (Brouns
2018). Além disso, os efeitos metabólicos das dietas LCHF podem levar a melhorias de
vários fatores de risco de doenças, incluindo doenças cardiovasculares (Westman et al.
2007; Accurso et al. 2008; Volek et al. 2008; Feinman et al. 2015).
925
5.1 Plantas Comuns/Nutracêuticos com Potencial Antidiabético e
Antihiperglicêmico

Extratos de plantas comumente usados que têm potencial antidiabetico podem incluir
Berberis vulgaris, Trigonella foenumgraecum, Momordica charantia, Curcuma longa,
Moringa oleifera, Gymnema sylvestre, Azadirachta indica, Aloe vera, Panax ginseng e
muitos outros. Os extratos dessas plantas podem exercer efeitos antidiabéticos por
múltiplos mecanismos: (1) aumentar a secreção de insulina, (2) ativação da glicogenólise,
(3) aumentar a glicólise hepática, (4) mimeticismo adrenal, (5) bloqueador da atividade do
canal de potássio das células β pancreáticas, (6) ativação de cAMP e (7) modulação da
absorção de glicose do intestino (Patel et al. 2012; Gupta et al. 2017). Algumas plantas
importantes e seus princípios ativos com potencial antidiabético são discutidos aqui
resumidamente, enquanto outros são listados na Tabela 1.

Tabela 1 Nutracêuticos e extratos vegetais com potencial de efeitos hipoglicêmicos e antidiabéticos

Nutracêuticos /
Ingrediente ativo Efeito Referência
plantas
Acacia arabica,
Flavonóides, saponinas Hipoglicêmico Rather et al. (2015)
A. nilotica
Fenóis, flavonóides, Hipoglicêmico, antidiabético, inibidor de a-
Acacia karroo
taninos, saponinas e amilase, suprimido Njanje et al. (2017)
Hayne
glicosídeos cardíacos fosforilação de Akt1, antioxidante
Aconitum
Aconitan A Hipoglicêmico Hikino et al. (1989)
carmichaelii
Achyranthes
- Antidiabético Geetha et al. (2011)
rubrofusca
Adansonia
- Hipoglicêmico, antidiabético Tanko et al. (2008)
digitata
β-sitosterol, campesterol, Antidiabético, antioxidante,
Aloe barbadensis Can et al. (2004)
antraquinonas, saponinas antiinflamatório, imunomodulador
Argemone Chen and Xie
mexicana, (1986), Kong et al.
Berberis aristata, (2009), Dong et al.
(2011, 2012), Xia
B. aquifolium, B.
Berberine Antidiabético, hipoglicêmico et al. (2011),
vulgaris, Coptis Kumar et al.
chinensis, C. (2015), Lan et al.
trifolia, Hydrastis (2015), Pang
canadensis et al. (2015)

Artanema
Alcalóides, flavonóides, Antidiabético, antihiperglicêmico,
sesamoides Selvan et al. (2008)
saponinas antioxidante, citoprotetor
Benth

Nutracêuticos /
Ingrediente ativo Efeito Referência
plantas
Artocarpus Artocarpina, artocarpecina, Antidiabético, antiinflamatório, Prakash et al.
heterophyllus morina, di-hidromorina, antioxidante, imunomodulador (2009), Nair et al.
(2013)
(jaca) cicloartinona,
926
 Nutracêuticos /
Ingrediente ativo
plantas
cynomacurina
β-sitosterol, polifenol,
Artocarpus altilis
luteína
Balanites
aegyptiaca Del. Furostanol, balanitinas (1–
(tâmara do 7)
deserto)
Barleria prionitis
Berlerinoside
Linn.
Pectina, saponinas,
Beta vulgaris L. flavonóides,
var cicla (acelga) polissacarídeos, ácido
ascórbico
Onze caseínas de
Hidrolisado de
tamanho médio, peptídeos,
caseína bovina
aminoácido leucina
Butea Butrin, isobutrin, butin,
monosperma palasitrin, butein
Caralluma edulis - (1989)
Terpenóides, cumarinas,
Cassia kleinii
saponina
Catarantina, ácido ursólico,
Catharanthus daucosterol, β-sitosterol,
roseus lochnericina, quercetina,
caempferol
Cloroxylon
Glucosídeo iridoide
swietenia
Cromo trivalente Cromo trivalente
Cinnamomum
zeylanicum (E)-cinamaldeído
Canela
Taninos, alcalóides,
triterpenos esteróides,
aminoácidos, kaempferol,
Cissus sicyoides
quercetina, saponinas,
quinonas, fenólicos,
sabadina
Citrus sinensis L.
Fenólicos, flavonóides
e outras cascas
diosmina
de frutas cítricas
Clitoria ternatea Polifenóis
Efeito Referência
Nair et al. (2013),
Antidiabético Ragasa et al.
(2014)
Prakash et al.
Antidiabético, antioxidante (2009), Nair et al.
(2013)
Dheer and
Antidiabético, antihiperglicêmico Bhatnagar (2010)
Dheer and
Hipoglicêmico, antidiabético
Bhatnagar (2010)
Dheer and
Insulinotrópico, antihiperglicêmico
Bhatnagar (2010)
Hipoglicêmico, antidiabético Deore et al. (2008)
Antioxidante, anti-hiperglicêmico, Wadood et al.
antidiabético
Babu et al. (2002,
Antidiabético, anti-hiperglicêmico
2003a, b)
Singh et al. (2001),
Antidiabético Wu et al. (2017)
Jayaprasad et al.
Antidiabético
(2015)
Ryan et al. (2003),
Biswas et al.
(2010), Rains and
Anti-hiperglicêmico, antidiabético Jain (2011), Hua
et al. (2012), Fleck
et al. (2014)
SubashBabu et al.
(2007), Anand
et al. (2010), Nair
et al. (2013),
Antidiabético, antiobesidade Soliman et al.
(2012, 2013),
Muhammad and
Dewettinck
(2017)
Antidiabético, hipoglicêmico,
Viana et al. (2004)
antiinflamatório
Antidiabético, antihiperglicêmico, Cova et al.(1992),
Jain et al.(2014),
antioxidante, antiinflamatório,
Hsu et al. (2017),
insulinotrópico, citoprotetor, expressão Sathiyabama et al.
aumentada de PPARγ (2018)
Supressão antioxidante de glicose pós- Chusak et al.
(2018)
prandial
927
 Nutracêuticos /
Ingrediente ativo Efeito Referência
plantas
Coscinium Shirwaikar et al.
Ainda não identificado Antidiabético (2005)
fenestratum
Costus pictus D.
Don, Costus Ergastanol, estigmasterol, Jayasri et al.
igneus Nak lupeol, quercetina, Antidiabético, antioxidante (2008), Hegde et al.
(planta de diosgenina (2014)
insulina)
Javeri and Chand
Antidiabético, antioxidante, (2016), Rao and
Curcuma longa Curcumina e antiinflamatório, antiapoptose, Najam (2016), de
(cúrcuma) curcuminóides antidiabético, cardiomiopatia, anti- Melo et al.
hiperlipidêmico (2018), Zheng et al.
(2018)
Ferocactus Perez-Gutierrez
latispinus e F. – Antihiperglicêmico, anti-hiperlipidêmico and Mota Flores
histrix (2010)

Ácido eicosapentaenóico, Sensibilidade à insulina melhorada, Menchetti et al.

Óleo de peixe (2018)
ácido docosahexaenóico antihiperglicêmico
Fructus arctii Ligninas Antidiabético Xu et al. (2008)

Antidiabéticos, hipoglicêmicos,
Galega officinalis Diterpenos, triterpenos, Nagalievska et al.
imunomoduladores e inibidores da
L. fitoesteróis e flavonóides (2018)
apoptose de linfócitos
Hippophae
Zhang et al.
rhamnoides L. Proantocianidinas,
Hipoglicêmica, propriedades sensoriais (2010c), Ma et al.
(espinheiro isorhamnetina, quercetina (2017)
marítimo)
Zhang et al.
Hypoxis Antidiabético, anti-nociceptivo,
Fitoesteróis, esterolina (2010c), Ma et al.
hemerocallidea antiinflamatório (2017)
Ácido corosólico,
Lagerstroemia Mishra et al.
elagitaninos, Hipoglicêmico, antihiperglicêmico,
speciosa (L) Pers (1990), Tanquilut
lagerstroemina, flosina B e antidiabético et al. (2009)
(banaba)
reginina A
Momordica Glicosídeos (momordinas I Ahmed et al.
charantia (melão e II), saponinas, alcalóides, Antihiperglicêmico, antidiabético (2004), Miura et al.
amargo) triterpenos, esteróides (2004)

Bhowmik et al.
(2009), Etuk and
Antidiabéticos, antioxidantes,
Mangifera indica Antioxidantes Muhammed (2010),
antiinflamatórios, imunomoduladores Irondi et al.
(2016)
Shieh et al. (2009),
Melatonina Melatonina Antidiabético, antioxidante Sharman and
Bondy (2016)
Jain et al.(2010),
Gupta et al.(2012),
Moringa oleifera Yassa and
Lam (árvore de Polifenóis (quercetina-3- Tohamy(2014),
Anti-hiperglicêmico, antidiabético, inibidor
baqueta ou glicosídeo, rutina e Stohs and
de α-amilase e α-glucosidase Hartman(2015),
árvore do kaempferol)
cavaleiro) Khan et al.(2017),
Villarruel-López et
al.(2018)

Nutracêuticos /
Ingrediente ativo Efeito Referência
plantas
Mucuna pruriens Monoterpenos e alcalóides Antidiabético Tanko et al. (2012)

928
 Nutracêuticos /
Ingrediente ativo Efeito Referência
plantas
Extrato da folha
Origanum
vulgare L. - Antioxidante, antiobesidade, antidiabético Sabino et al. (2018)
(orégano)
Panax ginseng, Ginsenosídeos Rb2 e Rh2,
P. japonica, P. protopanaxatriol, (20R) - Tomoda et al.
(1985), Cho et al.
notoginseng, P. protopanaxadiol, Rg1, Rc,
Antihiperglicêmico, hipoglicêmico (2006), Lee et al.
quinquefolius, Rd, Re, Rf, Rg2, Rh1, Rb1, (2006), Yang and
P. vietnamensis ácido piroglutâmico, Wu (2016)
(ginseng) peptidoglicano panaxan B
Saponinas, taninos,
Persea
flobataninos, flavonóides, Hipoglicêmicos Antia et al. (2005)
americana Mill
alcalóides, polissacarídeos
Phyllanthus niruri - Antidiabético Okoli et al. (2011)

Piper betle - Antidiabético Nair et al. (2013)

Homoisoflavonóides
(apigenina, luteolina,
quercetina, maringenina,
Polygonatum Inibidor do transportador de glicose 2, Liu et al. (2018),
hesperitina, genisteína),
odoratum antihiperglicêmico Wang et al. (2018)
floretina,
poligonatumosídeo F,
poligonatumosídeo G
Quercus robur L. Worawalai et al.
Quercitol, ciclitóis Hipoglicêmico, antidiabético
Quercus ilex (2018)

Antidiabético, antihiperglicêmico, Shieh et al. (2011),

Rehmannia antioxidante, antiapoptótico, resistência à Zhou et al.
Catalpol
glutinosa antiinsulina, antigluconeogênese, aumento (2015), Yan et al.
da síntese de glicogênio (2018)

Bhatt et al. (2012),

Antioxidante, antihiperglicêmico,
Resveratrol Resveratrol Rouse et al.
antidiabético (2014)
Geléia real Proteínas da geléia real Antihiperglicêmico Fujii et al. (1990)

Ruta graveolens Rutina
Sarcopoterium
Triterpenos, taninos
spinosum
Dibenzo-α-pironas,
Shilajit cromoproteínas dibenzo-α-
pironas, ácido fúlvico
Alcaloides, flavonóides,
Sida cordifolia lignina, glicosídeos,
saponinas, fitoesteróis
Antihiperglicêmico, antihiperlipidêmico,
Fujii et al. (1990)
antioxidante
Hipoglicêmicos Reher et al. (1991)
Antidiabético, antioxidante, Bhavsar et al.
antiinflamatório, imunomodulador (2016)
Antidiabéticos, antihipercolesteromia, Kaur et al. (2011),
antiinflamatórios, hipoglicêmicos, Sivapalan
hepatoprotetores (2015)

Sophora
Flavonóides Antidiabéticos Huang et al. (2016)
tonkinensis
Sphaeranthus
β-sitosterol Antidiabético Prabhu et al. (2008)
indicus
Geuns et al. (2007),
Glicosídeos diterpênicos Stoyanova et al.
(esteviosídeo,
Stevia Antidiabético, antioxidante, hepatoprotetor, (2011), Shivanna et
esteviolbiosídeo, al. (2013),
rebaudiana renoprotetor, imunomodulador, anti- Saleh et al. (2016),
rebaudiosídeos (A, B, C,
Bertoni (stevia) hipertensivo Ahmad and
D, E) e dulcosídeo A) e
Ahmad (2018),
polifenóis Nichol et al. (2018)
Strychnos Isomotiol, sitosterol, Antidiabético, antioxidante Dhasarathan and
929
 Nutracêuticos /
Ingrediente ativo Efeito Referência
plantas
compesterol, Theriappan
potatorum L.f. (2011)
galactomanana, galactana
Fitosterol, lactonas,
Parveen et al.
Terminalia arjuna flavonóides, fenólicos, Antidiabético (2011)
taninos, glicosídeos
Trigonella
Diosgenina, trigonelina, Zia et al. (2001),
foenum-graecum Antihiperglicêmico
galactomanana Garg (2016)
(Feno-grego)
Vernonia Alcalóides, saponinas, Etuk and
Antidiabéticos, anti-hiperglicêmicos
amygdalina taninos, flavonóides Muhammed (2010)

Viburnum Antihiperglicêmico, inibidor de α-

Polifenóis Iwai et al. (2006)
dilatatum glucosidase
Antiresistência à insulina, antidisfunção Lama et al. (2017),
Azeite de oliva Polifenóis, tirosol,
mitocondrial, antidiabético, antioxidante, Celano et al.
virgem hidroxitirosol, secoiridoides (2018)
antiinflamatório
Tostas à base de
Amilose Antihiperglicêmico, antidiabético Vetrani et al. (2018)
trigo
Rafieian-Kopaei
Gingerol, gingerenona A, Antioxidante, antiinflamatório, and Nasri (2014),
Zingiber officinale
shogaols, paradol, 1- antihiperglicêmico, antidiabético, Rahmani et al.
(gengibre) (2014), Roufogalis
desidro-10-gingerdione antinefropatia diabética
(2014)

5.1.1 – Berberina

A berberina (BBR) é um alcalóide isoquinolina comumente obtido de plantas dos gêneros

Berberis, Coptis, Hydrastis e Argemone. BBR tem um peso molecular de 336,361 e sua
fórmula estrutural é mostrada na Fig. 1.

Fig. 1 Fórmula estrutural da

berberina

A farmacocinética e o aspecto PBPK da berberina foram descritos em detalhes no

capítulo “Glucosinolatos e compostos organossulfurados” deste livro. Em vários estudos,
o BBR demonstrou exercer efeitos anti-hiperglicêmicos e antidiabéticos (Chen e Xie 1986;
Dong et al. 2012). Os mecanismos envolvidos no efeito anti-hiperglicêmico do BBR
podem incluir:

1. Diminuição da absorção de glicose pela inibição da α-glucosidase

930
2. Transporte de glicose reduzido através do epitélio intestinal

3. Ativação da proteína quinase ativada por adenosina 50-monofosfato (AMPK)

4. Aumento da atividade da glucoquinase

5. Indução do transporte de glicose aumentando a expressão do gene GLUT1

6. Aumento da captação de glicose do sangue para os órgãos-alvo, como músculo

esquelético e tecido adiposo

7. Melhoria do metabolismo da glicose por estimulação da glicólise

8. Inibição da gliconeogênese no fígado

9. Aumento da expressão do receptor de insulina (InsR) e melhora da secreção e

sensibilidade de insulina

10. Inibição do acúmulo intracelular de ROS / RNS, apoptose celular e inflamação que
caracterizam a lesão vascular

Em ensaios clínicos, o BBR demonstrou reduzir significativamente a glicose no sangue

em jejum, hemoglobina A1c, triglicerídeo, colesterol total e LDL-C e aumentar a expressão
do receptor de insulina em pacientes com diabetes tipo 2 recebendo BBR (1 g por dia ou
500 mg três vezes a dia) (Li 2007; Yin et al. 2008; Zhang et al. 2010a, b). É interessante
notar que o BBR tem efeitos positivos no tratamento de complicações associadas ao
diabetes, como nefropatia, neuropatia e cardiomiopatia (Pang et al. 2015; Imenshahidi e
Hosseinzadeh 2015; Zhang e Chen 2012; Lan et al. 2015). Os ensaios clínicos ainda
precisam ser realizados em cães e gatos para estabelecer a dose certa e a eficácia do
BBR contra o diabetes e complicações associadas.

5.1.2 – Curcumina

A raiz da Curcuma longa é a fonte da cúrcuma (pó amarelo), que consiste em um grupo
de fitoconstituintes comumente chamados de curcuminóides. Os curcuminóides incluem
curcumina (diferuloilmetano), desmetoxicurcumina e bisdemetoxicurcumina (BMC). A
cúrcuma em pó e a fórmula estrutural da curcumina (forma enol e ceto) são mostrados na
Fig. 2.

Quimicamente, a curcumina é um diarilheptanoide, um fenol natural responsável pela cor

amarela da cúrcuma. O tautomerismo da curcumina existe na forma enólica em solventes
orgânicos e na forma ceto em água (Manolova et al. 2014).

Até o momento, a curcumina não levou ao desenvolvimento de nenhum medicamento

devido a vários fatores, como instabilidade química, insolubilidade em água, falta de

931
atividade alvo seletiva, baixa biodisponibilidade, distribuição limitada nos tecidos e
metabolismo extenso (Anand et al. 2013; Metzler et al. 2013; Nelson et al. 2017). No
entanto, é um ingrediente muito popular em muitos suplementos nutracêuticos/dietéticos
em todo o mundo. Atualmente, seu maior mercado está na América do Norte.

Fig. 2 Fórmula estrutural da curcumina

(superior, forma enol; inferior, forma
ceto)

A curcumina parece prevenir e melhorar o diabetes e suas complicações (nefropatia,

retinopatia e cardiopatia) por vários mecanismos (Abo-Salem et al. 2014; Wu et al. 2014;
Javeri e Chand 2016). A inflamação dos micro e macro vasos sanguíneos e dos nervos
periféricos do corpo desempenha um papel importante na fisiopatologia do diabetes. A
alimentação em doses baixas de curcumina a longo prazo pode prevenir e melhorar a
progressão e prevalência de diabetes em humanos e animais. Castro et al. (2014)
racionalizou a eficácia terapêutica da curcumina no diabetes modulando as células
imunológicas responsáveis pela morte das células β em um modelo de camundongo com
diabetes tipo 1.

Foi demonstrado que a curcumina aumenta significativamente a expressão de AMPK e

PPARγ e reduz a expressão de Il-6 e NF-κBα e AMPK. Esses dadosB, melhorando assim a inflamação crônica em
camundongos diabéticos (Abo-Salem et al. 2014; Jiménez-Flores et al. 2014 ) Os
benefícios adicionais da curcumina no diabetes podem ser devido à sua propriedade
antioxidante (Menon e Sudheer 2007; Javeri e Chand 2016).

Recentemente, Hariri e Haghighatdoost (2017) sugeriram que a curcumina em uma forma

mais solúvel e biodisponível pode reduzir o peso corporal e a obesidade, mas ensaios
clínicos de longo prazo precisam ser realizados. Em uma série de outros estudos, várias
formulações de curcumina foram desenvolvidas para melhorar a biodisponibilidade (Liu et
al. 2006; Antony et al. 2008; Cuomo et al. 2011; Sasaki et al. 2011; Jager et al. 2014;
Yallapu et al. 2015). Purpura et al. (2018) demonstraram que a formulação de g-

932
ciclodextrina curcumina (CW8) melhorou significativamente a absorção de curcuminóides
em humanos saudáveis.

Ainda não foram realizados estudos clínicos em cães e gatos para estabelecer a dose
terapêutica, eficácia e segurança em cães e gatos diabéticos. Em estudos clínicos
preliminares, os pacientes que receberam curcumina até 8 g/dia por 3-4 meses não
mostraram toxicidade, embora alguns indivíduos reclamassem de náusea leve e diarreia
(Hsu e Cheng 2007). Detalhes sobre vários aspectos da curcumina, incluindo seus efeitos
benéficos à saúde em outras doenças, podem ser encontrados no capítulo “Cúrcuma e
curcumina padronizados” deste livro.

5.1.3 – Feno-grego

As sementes de feno-grego são obtidas da planta Trigonella foenumgraecum L., que é

comumente cultivada na Índia, China e as regiões do Mediterrâneo e do Norte da África.
As sementes são conhecidas por conter muitos fitoconstituintes, incluindo flavonóides,
saponinas esteróides diosgenina, fibra de galactomanana, aminoácido 4-hidroxiisoleucina,
vitaminas e o alcalóide trigonelina. Ribes et al. (1986) relataram que a parte
desengordurada da semente de feno-grego, chamada subfração “a”, que contém as
partes da semente como testa (tegumento) e endosperma (fonte de alimento
armazenado), foi associada ao efeito antihiperglicêmico em cães diabéticos. A fórmula
estrutural de trigonelina e diosgenina é mostrada nas Figuras 3 e 4, respectivamente.

Fig. 3 Fórmula
estrutural da Fig. 4 Fórmula estrutural da diosgenina
trigonelina

Além da trigonelina, as sementes do feno-grego contêm outros alcalóides, como a

gentianina e a carpaina. Foi demonstrado que a 4-hidroxiisoleucina causa um aumento na
secreção de insulina dependente de glicose (Sauvaire et al. 1998) e reduz os
triglicerídeos plasmáticos elevados e o colesterol total. Haeri et al. (2012) observaram
efeitos anti-hiperglicêmicos e antihiperlipidêmicos (triglicerídeos e colesterol total) em
ratos tratados com STZ. O efeito antihiperglicêmico das sementes de feno-grego também
pode ser devido à galactomanana e à diosgenina (revisado em Garg 2016). Todos os
resultados obtidos em conjunto com vários estudos mostram que os fitoconstituintes em
sementes de feno-grego podem exercer efeito anti-hiperglicêmico por vários mecanismos
933
(como antioxidante, diminuição da peroxidação lipídica, antiinflamatório, aumento da
secreção de insulina, diminuição da resistência à insulina, diminuição da gliconeogênese,
aumento do conteúdo de glicogênio hepático e outros) e, portanto, apresentam sementes
de feno-grego como nutracêutico para cães e gatos diabéticos. Uma desvantagem do
feno-grego para efeito antidiabético é que uma dose relativamente alta para o efeito
antihiperglicêmico é necessária. Para obter mais detalhes sobre a eficácia terapêutica e
segurança do feno-grego, os leitores podem consultar Garg (2016) e o capítulo “Feno-
grego para animais, pássaros e saúde dos peixes” de Kumar e coautores neste livro.

5.1.4 – Canela

A canela é uma especiaria aromática em pó ou em bastão (Fig. 5) obtida da casca seca

de várias espécies da árvore Cinnamomum (Cinnamomum zeylanicum Blume). Nos
Estados Unidos, duas variedades de canela (Ceilão e Cássia) estão disponíveis. A canela
do Ceilão é considerada uma verdadeira canela e é bastante cara. Embora o pó da casca
de canela contenha muitos fitoconstituintes, o (E)-cinamaldeído é o componente principal.
Pó de casca de canela e a fórmula estrutural de (E)-cinamaldeído são mostrados na Fig.
5.

A canela em pó contém a segunda maior quantidade de antioxidantes, depois do cravo.

Em pré-diabéticos, o consumo de 500 mg de canela/dia por 12 semanas pode reduzir o
estresse oxidativo em 14%. Além disso, a canela pode aumentar a secreção de insulina,
aumentar a sensibilidade à insulina e reduzir a glicose no sangue ao mover a glicose para
as células. No entanto, os efeitos da canela na hemoglobina A1C são conflitantes. Shen et
al. (2010) demonstraram que ratos diabéticos induzidos por estreptozotocina recebendo
extrato aquoso de C. zeylanicum (30 mg/kg/dia por 22 dias) foram resgatados de
hiperglicemia e nefropatia. Descobriu-se que esses ratos tinham regulação positiva da
proteína desacopladora-1 (UCP-1) e do transportador de glicose 4 (GLUT4) em seus
tecidos adiposos marrons, bem como em seus músculos. Em adipócitos 3T3-L1, o extrato
de canela regulou positivamente a translocação de GLUT4 e aumentou a captação de
glicose. O extrato de canela exibiu seu efeito antidiabético independentemente da insulina
por, pelo menos, dois mecanismos: (1) regulação positiva da UCP-1 mitocondrial e (2)
translocação aumentada de GLUT4 nos tecidos muscular e adiposo.

934
 Fig. 5 Esquerda: Casca seca de canela e pó obtido
da árvore Cinnamomum. Direita: Fórmula estrutural
de (A) -cinnamaldeído

Em humanos, a dose diária de canela é de 1 a 4 g. Ainda não foram realizados ensaios

clínicos em cães e gatos.

5.1.5 – Stevia rebaudiana

Stevia rebaudiana (comumente chamada de estévia) é nativa do Paraguai. As folhas

desta planta contêm vários princípios ativos, incluindo glicosídeos diterpênicos
(esteviosídeo; esteviolbiosídeo; rebaudiosídeos A, B, C, D e E) e dulcosídeo A. Um sabor
doce é atribuído ao esteviosídeo e aos rebaudiosídeos. O efeito antihiperglicêmico ocorre
devido ao esteviosídeo. A fórmula estrutural do esteviosídeo é mostrada na Fig. 6.

Fig. 6 Fórmula estrutural do esteviosídeo

Recentemente, Ahmad e Ahmad (2018) relataram que ratos diabéticos que receberam um
extrato aquoso de folha de Stevia rebaudiana (200, 300, 400 e 500 mg/kg de peso
corporal) por 8 semanas mostraram (de uma forma dependente da dose) uma diminuição
na glicose no sangue (-73,24%), glicose no sangue em jejum (-66,09%) e hemoglobina
HbA1c (5,32%), enquanto os níveis de insulina (17,82 μg/ml e 3,77 UI/mL) e glicogênio hepático
(45,02 mg/g) melhoraram significativamente. Em outro estudo, Saleh et al. (2016)
demonstraram que a administração de esteviosídeo em ratos diabéticos exibiu um efeito
insulinomimético. O esteviosídeo aumentou a secreção de insulina e leptina, normalizou
os biomarcadores hepáticos e renais e restaurou as alterações na atividade antioxidante e
no perfil lipídico. Esses autores também relataram que para a expressão de mRNA, o
esteviosídeo regulou positivamente a expressão dos genes PK e IRS-1, que são
935
regulados negativamente em ratos diabéticos, e foi muito eficaz na regulação negativa da
expressão de RNAm de CPT-1. Ao nível celular, o esteviosídeo normalizou as alterações
histopatológicas induzidas no pâncreas.

A estévia é conhecida por exercer efeitos antioxidantes, anti-hiperglicêmicos, anti-

hiperlipidêmicos, imunomoduladores, hepatoprotetores, renoprotetores e anti-
hipertensivos (Jeppesen et al. 2003; Gregersen et al. 2004; Lailerd et al. 2004; Chen et al.
2005; Hossain et al. 2011 ; Stoyanova et al. 2011; Lemus-Mondaca et al. 2012; Shivanna
et al. 2013). Recentemente, em uma meta-análise, Nichol et al. (2018) comparou o
impacto glicêmico do adoçante não nutritivo (NNS) esteviosídeo com outro NNS
(aspartame, sacarina e sucralose) e concluiu que o impacto glicêmico desses adoçantes
não diferia por tipo de NNS. Em conclusão, a estévia exerce efeitos semelhantes aos da
insulina e parece ser um nutracêutico promissor para o controle do diabetes e suas
complicações associadas.

5.1.6 – Catalpol

Catalpol é um produto natural (um glucosídeo iridóide) isolado da raiz de Rehmannia

glutinosa. A fórmula estrutural de catalpol é mostrada na Fig. 7.

Fig. 7 Fórmula estrutural de catalpol

Catalpol exerce propriedades antioxidantes, antiinflamatórias, antiapoptose e antidiabetes

(Shieh et al. 2011; Zhou et al. 2015). Catalpol demonstrou ter efeitos benéficos contra
distúrbios metabólicos de glicose/lipídios e resistência à insulina no diabetes (Yan et al.
2018). Zhou et al. (2015) relataram que o catalpol melhorou a resistência à insulina em
diabetes induzida por dieta rica em gordura (HFD) em camundongos. Shieh et al. (2011) e
Bao et al. (2016) demonstraram que o catalpol pode melhorar a resistência à insulina,
diminuir os níveis de glicose no sangue e promover a captação de glicose por meio do
aumento da expressão da proteína do transportador de glicose-4 (GLUT4) no músculo
esquelético e tecidos adiposos em camundongos db/db e ratos induzidos por STZ.
Catalpol reduziu a resistência à insulina induzida por dieta rica em gordura e a inflamação
do tecido adiposo suprimindo as vias JNK e NF-kappaB. Recentemente, Yan et al. (2018)
descobriram que camundongos T2DM tratados com catalpol (100–200 mg/kg/dia) via

936
gavagem melhorou a resistência à insulina hepática ao atuar na proteína quinase ativada
por AMP (AMPK)/NADPH oxidase tipo 4 (NOX4)/fosfatidilinositol 3 – via da quinase
(PI3K)/AKT. O efeito supressor do catalpol na super expressão de NOX4 induzida por
glucosamina foi enfraquecido por um knockdown de AMPK com curto RNA de
interferência (siRNA). Catalpol exibiu os efeitos de diminuição da gliconeogênese hepática
e aumento da síntese de glicogênio hepático tanto in vivo quanto in vitro (Yan et al. 2018).
Essas descobertas sugerem que o catalpol pode ser um novo nutracêutico para controlar
a hiperglicemia e o DM2 em animais e humanos.

5.1.7 – Moringa oleifera Lam

Moringa oleifera é uma árvore indiana que foi cultivada em muitos outros países, incluindo
o México. Esta árvore é comumente referida como “árvore de baqueta” ou “árvore do
cavalo”. As flores, folhas e sementes de M. oleifera têm valor medicinal. O uso terapêutico
das folhas de M. oleifera foi avaliado no diabetes porque as folhas diminuem as
concentrações de glicose no sangue após a ingestão, pois contêm polifenóis como
quercetina-3-glicosídeo, rutina, kaempferol e glicosídeo (Jaiswal et al. 2009; Arora et al. .
2013; Edoga et al. 2013; Al-Malki e El Rabey 2015). Divi et al. (2012) relataram uma
diminuição na glicose no sangue em jejum, teste de tolerância à glicose oral e glicose
pós-prandial em ratos diabéticos após terapia com M. oleifera. Além disso, o efeito
antidiabético do pó de semente de M. oleifera foi observado em modelos de ratos com a
diminuição da glicose no sangue, a melhora do nível de peróxido de lipídio e a diminuição
dos níveis de IL-6 e imunoglobulinas A em comparação com o controle positivo para
diabéticos em ambas as insulinas – bioensaios resistentes e com deficiência de insulina
(Anudeep et al. 2016; Gopalakrishnan et al. 2016). Recentemente, Villarruel-López et al.
(2018) relataram que o consumo das folhas de M. oleifera (50 mg/dia) por aloxana mono-
hidratada (150 mg/kg, IP) induzida por ratos hiperglicêmicos/diabéticos mostrou
hipoglicemia. Esses autores descobriram que o pó da folha de M. oleifera não revelou
nenhum efeito adverso. Os efeitos benéficos de M. oleifera também podem ser devido aos
seus antioxidantes, vitaminas e uma glicoproteína resistente à protease que funciona
como fibra dietética (Georgewill et al. 2010; Gupta et al. 2012; Vongsak et al. 2013; Khan
et al. 2017). O extrato de M. oleifera foi considerado eficaz contra complicações
relacionadas ao diabetes, como retinopatia (Kumar Gupta et al. 2013). Recentemente,
Khan et al. (2017) sugeriram que os extratos aquosos da folha de M. oleifera podem ser
usados como fitofármacos para o controle do diabetes, utilizando-os como adjuvantes ou
isoladamente. Em uma série de estudos, M. oleifera foi avaliada quanto à sua segurança
e toxicidade (Asare et al. 2012; Awodele et al. 2012; Stohs e Hartman 2015).

937
M. oleifera tem um grande potencial para seu uso como nutracêutico antidiabético, desde
que seja utilizado nas doses recomendadas, que ainda não foram estabelecidas por meio
de ensaios clínicos em cães e gatos.

5.1.8 – Momordica charantia

Momordica charantia (melão amargo) é um vegetal comumente usado na Índia, China e

muitos outros países. Os fitoconstituintes presentes nos frutos desta planta incluem
alcalóides, glicosídeos, saponinas, triterpenos, esteróides e óleos fixos. Joseph e Jini
(2013) relataram que o consumo de melão amargo reduziu as concentrações de glicose
no sangue, aumentando a utilização hepática de glicose e diminuindo a produção de
glicose hepática. Em vários estudos, o melão amargo mostrou atividade anti hipoglicêmica
e, em ratos normoglicêmicos, produziu atividade hipoglicêmica (Ojewole et al. 2006).
Portanto, o melão amargo deve ser usado com muito cuidado em pacientes diabéticos,
especialmente se administrado como adjuvante de medicamentos para redução da
glicose (Chan et al. 2016). Além da hipoglicemia, o melão amargo pode produzir outros
efeitos colaterais, como diarreia, dor abdominal, dor de cabeça, febre, fibrilação atrial e
incontinência urinária. Em mulheres grávidas, o melão amargo demonstrou causar
sangramento, contrações, estimulação da menstruação e aborto espontâneo (revisado em
Gupta et al. 2018).

5.1.9 – Diosmina

A diosmina (diosmetina 7-rutinosídeo) é um dos glicosídeos de flavona naturais presentes

em frutas cítricas, hissopo e alecrim. A fórmula estrutural da diosmina é mostrada na Fig.
8. A diosmina demonstrou melhorar o metabolismo da glicose no diabetes (Hsu et al.
2017). Seu perfil farmacocinético indica que a diosmina é transformada pela microbiota
intestinal em diosmetina, que é absorvida e rapidamente distribuída por todo o corpo com
uma meia-vida longa (26–43 h) em voluntários saudáveis (Cova et al. 1992). Em
pacientes com DM tipo 1 (DM1), uma mistura de flavonóides contendo diosmina mostrou
uma diminuição na hemoglobina glicosilada e um aumento na glutationa peroxidase. Pari
e Srinivasan (2010) demonstraram que em ratos DM2, a diosmina afetou as enzimas
limitadoras da taxa do metabolismo de carboidratos e foi encontrado para reverter as
anormalidades nos componentes da glicoproteína. Em uma série de estudos, β-endorfina
endógena e exógena demonstrou aumentar a insulina circulante em humanos e animais
com DM (Curry et al. 1987; Cheng et al. 2002; Liu e Cheng 2011; Hsu et al. 2017). Em
essência, a diosmina exerce antioxidante, antiinflamatório, secreção aumentada de
insulina por aumento da β-endorfina, diminuição da hemoglobina glicosilada e atividades

938
anti hiperglicêmicas. Portanto, tem o potencial de ser um nutracêutico promissor para
humanos e animais diabéticos após ensaios clínicos adequados em cães e gatos.

Fig. 8 Fórmula estrutural da diosmina

5.1.10 – Ginseng

Ginseng é a raiz das plantas (gênero Panax), incluindo ginseng chinês (P. notoginseng),
ginseng japonês (P. japonica), ginseng coreano (P. ginseng), ginseng vietnamita (P.
vietnamensis) e ginseng americano (P. quinquefolius). O ginseng contém muitos
ingredientes ativos, chamados ginsenosídeos (saponinas do ginseng). Foi relatado que o
ginseng exerce efeito hipoglicêmico desde o início dos anos 1970. Descobriu-se que o
ginseng vermelho é superior ao ginseng branco por seu efeito hipoglicêmico. Os
ginsenosídeos Rb2 e Rh2, protopanaxatriol, (20R)-protopanaxadiol, Rg1, Rc, Rd, Re, Rf,
Rg2, Rh1 e Rb1, peptídeo ácido, adenosina, ácido piroglutâmico e peptideoglicano
panaxan B podem ser responsáveis pela glicose efeito redutor no diabetes (revisado em
Yang e Wu 2016). Ginsenosídeo Rh2 exibiu sua eficácia na melhoria do DM através da
redução do nível de glicose no sangue e aumento da sensibilidade à insulina em ratos
diabéticos induzidos por STZ (Lai et al. 2006; Lee et al. 2007). Em outro estudo, Xiang et
al. (2008) mostrou que o ginsenoside Re teve um efeito antidiabético em camundongos.
Em muitos estudos clínicos, os pacientes com DM2 recebendo ginseng mostraram um
efeito anti-hiperglicêmico (Kim et al. 2011). Atualmente, a dose antidiabética recomendada
de ginseng é de 200 mg/dia (Natural Medicines Comprehensive Database 2014). O
ginseng pode ser indicado como uma terapia natural alternativa para cães e gatos
diabéticos após ensaios clínicos adequados de longo prazo. Para obter mais detalhes
sobre o ginseng, os leitores devem consultar Yang e Wu (2016).

5.1.11 – Costus pictus e Costus igneus

Costus pictus D. Don e Costus igneus Nak (comumente chamadas de plantas de insulina)
são nativas da América do Sul e Central. Atualmente, essas plantas também são usadas
como uma cura à base de plantas para diabetes na América e na Índia. A análise
fitoquímica dessas plantas revelou a presença de vários antioxidantes (ácido ascórbico, a-
tocoferol, β-caroteno, terpenóides e flavonóides), triterpenóides, alcalóides, taninos,

939
saponinas, esteróides, etc. Devi e Urooj (2008a, b) relataram que as pessoas com
diabetes na Índia consomem uma folha por dia para manter a glicose no sangue sob
controle. Em uma série de estudos experimentais e clínicos, os extratos dessas plantas
mostraram efeitos antioxidantes e antidiabéticos (Devi e Urooj 2008a, b; Elavarasi e
Saravanan 2012; Hegde et al. 2014). Em um estudo transversal, os pacientes que
consumiram uma folha fresca ou uma colher de sopa de pó seco à sombra/dia de C.
igneus, em conjunto com outras modalidades de tratamento, produziram efetivamente o
controle glicêmico do diabetes (Shetty et al. 2010). Esses ensaios clínicos precisam ser
conduzidos em cães e gatos diabéticos antes que esses extratos de plantas ou seus
constituintes possam ser indicados como nutracêuticos.

5.1.12 – Extrato Touchi

O extrato de Touchi é um produto fermentado de soja usado por milhares de anos na

China e no Japão. Ele reduz o nível de glicose no sangue ao inibir a atividade da a-
glucosidase intestinal. Atualmente, a dose recomendada de extrato Touchi é de 300 mg
antes de cada refeição.

5.1.13 – Produtos fitoterápicos usados em combinação contra o diabetes

Na medicina complementar e alternativa, é uma prática comum usar

nutracêuticos/extratos de plantas em combinação para atingir os efeitos terapêuticos
ideais. Para um efeito antihiperglicêmico no diabetes, os extratos de Curcuma longa e
Eugenia jambolana (Rao e Najam 2016), ou Cinnamomum tamala e Aloe vera (Singh et
al. 2015), ou Balanites aegyptiaca (tâmara do deserto) e Petroselinum sativum (salsa)
fornecem resultados superiores quando usados isoladamente (Abou Khalil et al. 2016).
Em uma investigação recente, Rouse et al. (2014) descobriram que o resveratrol (0,1–10
μg/ml e 3,77 mol/L) e a curcumina (1–100 pmol/L) regulavam a secreção de insulina sob condições
estimuladas por glicose. Além disso, o tratamento de linhas de células β e ilhotas
humanas com esses polifenóis levou a níveis aumentados de cAMP intracelular de
maneira semelhante a 3-isobutil-1-metilxantina, um inibidor clássico da fosfodiesterase
(PDE). O tratamento com resveratrol e curcumina diminuiu significativamente a expressão
de mRNA da maioria das 11 isoenzimas PDE, incluindo PDE3B, PDE8A e PDE10A, que
foram marcadas para a regulação da secreção de insulina em ilhotas. Tanto o resveratrol
quanto a curcumina, além das atividades antioxidante e antiinflamatória, inibiram a
atividade PDE de maneira dose dependente e aumentaram a função das células β
pancreáticas. Atualmente, muitos outros nutracêuticos/alcalóides vegetais são usados em
combinação para melhorar os efeitos anti-hiperglicêmicos e antidiabéticos em humanos e
animais.
940
5.2 Nutracêuticos Herbomineral/Metal

5.2.1 – Shilajit

Shilajit é um exsudato herbomineral marrom-claro a marrom-escuro das rochas

sedimentares das montanhas do Himalaia a uma altitude de cerca de 10.000 pés. Shilajit
tem sido usado por mais de 3.000 anos para a saúde preventiva e para o tratamento de
muitas doenças em humanos, incluindo diabetes, artrite, hipertensão, disfunção
imunológica, prejuízo cognitivo e artrite (Agarwal et al. 2007; Lawley et al. 2013). Consiste
em húmus e materiais vegetais orgânicos (Styrax officinalis, Trifolium repens e outros).
Em vários estudos, descobriu-se que o shilajit é eficaz contra o diabetes. Bhattacharya
(1995) relatou que a administração oral de 50–100 mg/kg de um shilajit processado e
padronizado atenuou o diabetes induzido por estreptozotocina em ratos. Shilajit também
aumentou a atividade de superóxido dismutase das ilhotas pancreáticas, levando a uma
diminuição na produção de radicais livres. Kanikkannan et al. (1994) descobriram que
shilajit processado (1,0 mg/kg, sc) preveniu o diabetes induzido por estreptozotocina em
ratos. Shilajit (100 mg/kg) produziu uma redução significativa nos níveis de glicose no
sangue e também produziu efeitos benéficos no perfil lipídico. O efeito antidiabético do
shilajit pode ser devido aos seus principais constituintes (dibenzo-α-pironas (DBP), DBP-
cromoproteínas e ácidos fúlvicos com núcleo DBP) exercendo ação antioxidante,
antiinflamatória e inibição da a-glucosidase e a-amilase atividade (Aparna et al. 2014;
Bhavsar et al. 2016). Para obter mais detalhes sobre shilajit, os leitores devem consultar o
capítulo “Extrato de Neem” neste livro.

5.2.2 – Cromo

O uso de cromo trivalente em humanos com DM2 (especialmente resistentes à insulina)

tornou-se mais comum porque seu mecanismo de ação para efeito anti-hiperglicêmico é
bem explicado no nível molecular (Biswas et al. 2010; Hua et al. 2012), e tem sido
encontrado com sucesso em ensaios clínicos (Ryan et al. 2003). Além de aliviar a
resistência à insulina, o efeito potencial do cromo na regulação do estresse oxidativo e
inflamação foi relatado (Rains e Jain 2011). Uma dose diária de 120 μg/ml e 3,77 g de cromo
trivalente é recomendada para humanos. O FDA permite até 1000 μg/ml e 3,77 g de cromo/dia. Acima
dessa dose, pode ocorrer toxicidade renal. Em um estudo duplo-cego randomizado, cães
com osteoartrite moderada que receberam 500 μg/ml e 3,77 g de cromo trivalente duas vezes ao dia
por um período de 150 dias não apresentaram efeito adverso (Fleck et al. 2014). O cromo
trivalente pode ser um bom complemento à terapia nutracêutica em cães e gatos
diabéticos após ensaios clínicos válidos.

941
6. Observações Finais e Orientações Futuras
O diabetes em caninos e felinos é um sério problema de saúde em todo o mundo.
Etiopatologias e mecanismos de ação subjacentes no diabetes são muito complexos.
Atualmente, o controle do diabetes, hiperglicemia, hiperlipidemia e complicações
associadas ao diabetes (danos cardíacos, renais e nervosos) depende do monitoramento
da dieta, exercícios moderados e medicamentos fármaco terapêuticos, incluindo injeções
de insulina. Devido ao alto custo e aos efeitos colaterais dos medicamentos sintéticos, os
medicamentos complementares alternativos/nutracêuticos estão recebendo enorme
interesse da comunidade científica e também dos proprietários de animais de estimação.
Para um grande número de nutracêuticos, estudos in vitro e in vivo têm sido conduzidos
para avaliação de eficácia e segurança, enquanto os ensaios clínicos em grande escala
estão completamente ausentes em cães e gatos. Alguns dos nutracêuticos têm
demonstrado forte potencial para um efeito antidiabético e merecem avaliação adicional
em ensaios clínicos. Além disso, quando nutracêuticos são administrados em conjunto
com medicamentos terapêuticos convencionais, eles precisam ser avaliados para
quaisquer possíveis interações tóxicas.

Referências
Abo-Salem OM, Harisa GI, Ali TM (2014) Curcumin ameliorates streptozotocin-induced heart injury in rats. J Biochem
Mol Toxicol 28:263–270
Abou Khalil NS, Abou-Elhamd Alaa S, Wasfy Salwa IA et al (2016) Antidiabetic and antioxidant impacts of desert date
(Balanites aegyptiaca) and parsley (Petroselinum sativum) aqueous extracts: lessons from experimental rats. J Diab Res
2016:ID 8408326
Accurso A, Bernstein RK, Dahlqvist A et al (2008) Dietary carbohydrate restriction in type 2 diabetes mellitus and
metabolic syndrome: time for a critical appraisal. Nutr Metab 5(1):9
Agarwal SP, Khanna R, Karmarkar R et al (2007) Shilajit: a review. Phytother Res 21:401–405
Ahmad U, Ahmad RS (2018) Anti-diabetic property of aqueous extract of Stevia rebaudiana leaves in streptozotocin-
induced diabetes in albino rats. BMC Complement Altern Med 18:179
Ahmed I, Adehgate E, Cummings E et al (2004) Beneficial effects and mechanisms of action of Momordica charantia
juice in the treatment of streptozotocin-induced diabetes mellitus in rat. Mol Cell Biochem 261:63–70
Ahmed OM, Abdel-Moneim A, Abulyazid I et al (2010) Antihyperglycemic, anti-hyperlipidemic and antioxidant effects
and the probable mechanisms of action of Ruta graveolens and rutin in nicotinamide/streptozotocin diabetic albino rats.
Diabetol Croat 39:15–32
Al-Malki AL, El Rabey HA (2015) The antidiabetic effect of low doses of Moringa oleifera Lam. Seeds on streptozotocin
induced diabetes and diabetic nephropathy in male rats. BioMed Res Int. https://doi.org/10.1155/2015/381040
Anand P, Murali KY, Tandon V et al (2010) Insulinotropic effect of cinnamaldehyde on transcriptional regulation of
pyruvate kinase, phosphoenolpyruvate carboxykinase and GLUT4 translocation in experimental diabetic rats. Chem Biol
Interact 186:72–81
Anand P, Kunnumakkara AB, Newman RA et al (2013) Bioavailability of curcumin: problems and promises. Mol Pharm
4(6):807–818
Antia BS, Okokon JE, Okon PA (2005) Hypoglycemic effect of aqueous leaf extract of Persea americana Mill on
alloxan-induced diabetic rats. Indian J Pharmacol 37:325–326
Antony B, Marina B, Iyer VS et al (2008) A pilot cross-over study to evaluate human oral bioavailability of BCM-95CG
(Biocurcumax), a novel bioenhanced preparation of curcumin. Indian J Pharm Sci 70 (4):445–449
Anudeep S, Prasana VK, Adya SM et al (2016) Characterization of soluble dietary fiber from Moringa oleifera seeds
and its immunomodulatory effects. Int J Biol Macromol 91:656–662
Aparna A, Rege A, Chowdhary AS (2014) Evaluation of alpha-amylase and alpha-glucosidase inhibitory activity of
Shilajit. Int J Adv Res 2:735–740
Araki E, Miyazaki J (2007) Metabolic disorders in diabetes mellitus: impact of mitochondrial function and oxidative
stress on diabetes and its complications. Antioxid Redox Signal 9(3):289–291
942
 Arora DS, Onsare JG, Kaur H (2013) Bioprospecting of Moringa (Moringaceae): microbiological perspective. J
Pharmacogn Phytochem 1(6):193–215
Asare GA, Gyan B, Bugyei K et al (2012) Toxicity potentials of the nutraceutical Moringa oleifera at supra-
supplementation levels. J Ethnopharmacol 139:265–272
Awodele O, Oreagba IA, Odoma S et al (2012) Toxicological evaluation of the aqueous leaf extract of Moringa oleifera
Lam. (Moringaceae). J Ethnopharmacol 139:330–336
Babu V, Gangadevi T, Subramonium A (2002) Anti-hyperglycemic activity of cassia kleinii leaf extract in glucose fed
normal rats and alloxan-induced diabetic rats. Indian J Pharmacol 34:409–415
Babu V, Gangadevi T, Subramonium A (2003a) Anti-hyperglycemic activity of Cassia kleinii leaf extract in glucose fed
normal and alloxan-induced diabetic rats. Indian J Pharmacol 34:409–415
Babu V, Gangadevi T, Subramonium A (2003b) Antidiabetic activity of ethanol extract of Cassia kleinii leaf in
streptozotocin-induced diabetic rats and isolation of an active fraction and toxicity evaluation of the extract. Indian J
Pharmacol 35(5):290–296
Balamurugan AN, Miyamoto M, Wang W et al (2003) Streptozotocin (STZ) used to induce diabetes in animal models. J
Ethnopharmacol 26:102–103
Bao X, Shen L, Qian C et al (2016) Anti-diabetic activities of catalpol in db/db mice. Korean J Physiol Pharmacol
20(2):153–160
Bhatt JK, Thomas S, Nanjan MJ (2012) Resveratrol supplementation improves glycemic control in type 2 diabetes
mellitus. Nutr Res 32:534–541
Bhattacharya SK (1995) Shilajit attenuates streptozotocin induced diabetes mellitus and decreases pancreatic islet
superoxide dismutase activity in rats. Phytother Res 9:41–44
Bhavsar SK, Thaker AM, Malik JK (2016) Shilajit. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity.
Academic/Elsevier, Amsterdam, pp 707–716
Bhowmik A, Khan LA, Akhter M et al (2009) Studies on the antidiabetic effects of Mangifera indica stem-barks and
leaves on nondiabetic, type 1 and type 2 diabetic model rats. Bangladesh J Pharmacol 4:110–114
Biswas TK, Polley G, Pandit S et al (2010) Effects of adjunct therapy of proprietary herbo-chromium supplement in
type 2 diabetes: a randomized clinical trial. Int J Diab Develop Countr 30:153–161
Brouns F (2018) Overweight and diabetes prevention: is a low-carbohydrate-high-fat diet recommendable? Eur J Nutr
57:1301–1312
Can A, Akev N, Ozsoy N et al (2004) Effect of Aloe vera leaf gel and pulp extracts on the liver in type-II diabetic rat
models. Biol Pharm Bull 27:694–698
Castro CN, Barcala Tabarrozzi AE, Winnewisser J et al (2014) Curcumin ameliorates autoimmune diabetes. Evidence
in accelerated murine models of type 1 diabetes. Clin Exp Immunol 177:149–160
Celano R, Piccinelli AL, Pugliese A et al (2018) Insights into the analysis of phenolic secoiridoids in extra virgin olive oil.
J Agric Food Chem 66:6053–6063
Chan N, Li S, Perez E (2016) Interactions between Chinese nutraceuticals and Western medicines. In: Gupta RC (ed)
Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity. Academic/Elsevier, Amsterdam, pp 875–882
Chen QM, Xie MZ (1986) Studies on the hypoglycemic effect of Coptis chinensis and berberine. Acta Pharm Sin
21:401–406
Chen TH, Chen SC, Chan P et al (2005) Mechanism of the hypoglycemic effect of stevioside, a glycoside of Stevia
rebaudiana. Plant Med 71:108–113
Cheng JT, Liu IM, Tzeng TF et al (2002) Plasma glucose-lowering effect of beta-endorphin in streptozotocin-induced
diabetic rats. Horm Metab Res 34:570–576
Cho WC, Chung WS, Lee SK et al (2006) Ginsenoside Re of Panax ginseng possesses significant antioxidant and
antihyperlipidemic efficacies in streptozotocin-induced diabetic rats. Eur J Pharmacol 550(1–3):173–179
Chothani DL, Vaghasiya HU (2011) A review on Balanites aegyptiaca Del (desert date): phytochemical constituents,
traditional uses, and pharmacological activity. Pharmacogn Rev 5(9):55–62
Chusak C, Thilavech T, Henry CJ et al (2018) Acute effect of Clitoria ternatea flower beverage on glycemic response
and antioxidant capacity in healthy subjects: a randomized crossover trial. BMC Complement Altern Med 18:6
Corradini S, Pilosio B, Dondi F et al (2016) Accuracy of a flash glucose monitoring system in diabetic dogs. J Vet Int
Med 30 (4):983–988
Cova D, De Angelis L, Giavarini F et al (1992) Pharmacokinetics and metabolism of oral diosmin in healthy volunteers.
Int J Clin Pharmacol Ther Toxicol 30:29–33
Cuomo J, Appendino G, Dern AS et al (2011) Comparative absorption of a standardized curcuminoid mixture and its
lecithin formulation. J Nat Prod 74(4):664–669
Curry DL, Bennett LL, Li CH (1987) Stimulation of insulin secretion by beta-endorphins (1-27 and 1-31). Life Sci
40:2053–2058
DeFronzo RA, Tripathy D (2009) Skeletal muscle insulin resistance is the primary defect in type 2 diabetes. Diab Care
32(Suppl 2):S157–S163
Delack JB, Stogdale L (1983) Glycosylated hemoglobin measurement in dogs and cats: implications for its utility in
diabetic monitoring. Can Vet J 24:308–311

943
 De Melo IS, dos Santos AF, Bueno NB (2018) Curcumin or combined curcuminoids are effective in lowering the fasting
blood glucose concentrations of individuals with dysglycemia: systematic review and meta-analysis of randomized
controlled trials. Pharmacol Res 128:137–144
Deore SL, Khadabadi SS, Daulatkar VD et al (2008) Evaluation of hypoglycemic and antidiabetic activity of Butea
monosperma. Pharmacogn Mag 4(13):134–138
Devi VD, Urooj A (2008a) Hypoglycemic potential of Morus indica L and Costus igneus Nak: a preliminary study. Indian
J Exp Biol 46:614–616
Devi VD, Urooj A (2008b) Nutrient profile and antioxidant components of Costus specious Sm. and Costus igneus Nak.
Indian J Nat Prod 1:116–118
Dhasarathan P, Theriappan P (2011) Evaluation of anti-diabetic activity of Strychnos potatorum in alloxan induced
diabetic rats. J Med Sci 2 (2):670–674
Dheer R, Bhatnagar P (2010) A study of the antidiabetic activity of Barleria prionitis Linn. Indian J Pharmacol 42:70–73
Divi SM, Bellamkonda R, Dasireddy SK (2012) Evaluation of antidiabetic and antihyperlipidemic potential of aqueous
extract of Moringa oleifera in fructose feed insulin resistant and STZ induced diabetic Wistar rats: a comparative study.
Asian J Pharm Clin Res 5 (1):67–72
Dong SF, Hong Y, Liu M et al (2011) Berberine attenuates cardiac dysfunction in hyperglycemic and
hypercholesterolemic rats. Eur J Pharmacol 660:368–374
Dong H, Wang N, Zgao L, Lu F (2012) Berberine in the treatment of type 2 diabetes mellitus: a systemic review and
meta-analysis. Evid Based Complement Altern Med 2012:591654
Drummond E, Flynn S, Whelan H et al (2018) Casein hydrolysate with glycemic control properties: evidence from cells,
animal models, and humans. J Agric Food Chem 66:4352–4363
Edoga CO, Njoku OO, Amadi EN et al (2013) Blood sugar lowering effect of Moringa oleifera Lam. in albino rats. Int J
Sci Technol 3:88–90
Elavarasi S, Saravanan K (2012) Ethnobotanical study of plants used to treat diabetes by tribal people of Kolli Hills,
Namakkal District, Tamilnadu, Southern India. Int J Pharm Tech Res 4:404–411
Etuk EU (2010) Animals models for studying diabetes mellitus. Agric Biol J North Am 1(2):130–134
Etuk EU, Muhammed BJ (2010) Evidence based analysis of chemical method of induction of diabetes mellitus in
experimental rats. Int J Pharm Sci 1(2):139–142
Feinman RD, Pogozelski WK, Astrup A et al (2015) Dietary carbohydrate restriction as the first approach in diabetes
management: critical review and evidence base. Nutrition 31(1):1–13
Fleck A, Gupta RC, Goad JT et al (2014) Anti-arthritic efficacy and safety of chrminex®3þ (trivalent chromium,
Phyllanthus emblica extract, and shilajit) in moderately arthritic dogs. J Vet Sci Anim Husb 1(4):401
Fujii A, Kobayashi S, Kuboyama N et al (1990) Augmentation of wound healing by Royal jelly (RJ) in streptozotocin-
diabetic rats. Jpn J Pharmacol 53:331–337
Garg RC (2016) Fenugreek: multiple health benefits. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity.
Academic/Elsevier, Amsterdam, pp 599–617
Geetha G, Kalavalarasariel GP, Sankar V (2011) Anti-diabetic effect of Achyranthes rubrofusca leaf extracts on alloxan
induced diabetic rats. Pak J Pharm Sci 24:193–199
Georgewill OA, Georgewill UO, Nwankwoala RNP (2010) Antiinflammatory effects of Moringa oleifera Lam. extract in
rats. Asian Pac J Trop Med 3(2):133–135
Geuns JMC, Buyse J, Vankeirsbilck A et al (2007) Metabolism of stevioside by healthy subjects. Exp Biol Med
232:164–173
Ginsberg BH (2009) Factors affecting blood glucose monitoring: sources of errors in measurement. J Diab Sci Technol
3(4):903–913
Gopalakrishnan L, Doriya K, Kumar DS (2016) Moringa oleifera: a review on nutritive importance and its medicinal
application. Food Sci Hum Welln 5:49–56
Gregersen S, Jeppesen PB, Holst JJ et al (2004) Anti-hyperglycemic effects of stevioside in type 2 diabetic subjects.
Metabolism 53:73–76
Gupta R, Mathur M, Bajaj VK et al (2012) Evaluation of antidiabetic and antioxidant activity of Moringa oleifera in
experimental diabetes. J Diabetes 4(2):164–171
Gupta RC, Chang D, Nammi S et al (2017) Interactions between antidiabetic drugs and herbs: an overview of
mechanisms of action and clinical implications. Diabetol Metab Syndr 9:59
Gupta RC, Srivastava A, Lall R (2018) Toxicity potential of nutraceuticals. In: Nicolotti O (ed) Computational toxicology
methods and protocols. Humana/Springer, New York, pp 367–394
Haeri MR, Limaki HM, White CJB et al (2012) Non-insulin dependent anti-diabetic activity of (2S, 3R, 4S) 4-
hydroxyisoleucine of fenugreek (Trigonella foenum graecum) in streptozotocin-induced type I diabetic rats.
Phytomedicine 19:571–574
Hall K (2017) A review of the carbohydrate-insulin model of obesity. Eur J Clin Nutr 71(5):679.
https://doi.org/10.1038/ejcn.2017.21
Hariri M, Haghighatdoost F (2017) Effect of curcumin on anthropometric measures: a systematic review on randomized
clinical trials. J Am Coll Nutr. https://doi.org/10.1080/07315724.2017.1392263
Hegde PK, Rao HA, Rao PN (2014) A review on insulin plant (Costus igneus Nak). Pharmacogn Rev 8(15):67–72

944
 Hikino H, Kobayashi M, Suzuki Y et al (1989) Mechanisms of hypoglycemic activity of aconitan A, a glycan from
Aconitum carmichaelii roots. J Ethnopharmacol 27:295–304
Hossain MS, Alam MB, Asadujjaman M et al (2011) Antihyperglycemic and anti-hyperlipidemic effects of different
fractions of Stevia rebaudiana leaves in alloxan induced diabetic rats. IJPSR 2:1722–1729
Hsu CH, Cheng AL (2007) Clinical studies with curcumin. Adv Exp Med Biol 595:471–480
Hsu CC, Lin MH, Cheng JT et al (2017) Antihyperglycemic action of diosmin, a citrus flavonoid, is induced through
endogenous β-endorphin in type I-like diabetes rats. Clin Exp Pharmacol Physiol 44(5):549–555
Hua Y, Clark S, Ren J et al (2012) Molecular mechanisms of chromium in alleviating insulin resistance. J Nutr Biochem
23:313–319
Huang M, Deng S, Han Q et al (2016) Hypoglycemic activity and the potential mechanism of the flavonoid rich extract
from Sophora tonkinensis Gagnep in KK-Ay mice. Front Pharmacol 7:288
Imenshahidi M, Hosseinzadeh H (2015) Berberis vulgaris and berberine: an update review. Phytother Res 30:1745–
1764
Irondi EA, Oboh G, Akindahunsi AA (2016) Antidiabetic effects of Mangifera indica kernel flour-supplemented diet in
streptozotocin-induced type 2 diabetes in rats. J Food Sci Nutr 4 (6):828–839
Iwai K, Kim MY, Onodera A et al (2006) Alpha-glucosidase inhibitory and antihyperglycemic effects of polyphenols in
the fruit of Viburnum dilatatum Thunb. J Agric Food Chem 54:4588–4592
Jager R, Lowery RP, Calvanese AV et al (2014) Comparative absorption of curcumin formulations. Nutr J 13:1
Jain PG, Patil SD, Haswani NG et al (2010) Hypolipidemic activity of Moringa oleifera Lam., Moringaceae, on high fat
diet induced hyperlipidemia in albino rats. Rev Bras Farmacogn 20:969–973
Jain D, Bansal MK, Dalvi R et al (2014) Protective effect of diosmin against diabetic neuropathy in experimental rats. J
Integr Med 12:35–41
Jaiswal D, Rai PS, Kumar A et al (2009) Effect of Moringa oleifera Lam. Leaves aqueous extract therapy on
hypoglycemic rats. J Ethnopharmacol 123:392–396
Javeri I, Chand N (2016) Curcumin. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity. Academic/Elsevier,
Amsterdam, pp 435–445
Jayaprasad B, Sharavanan PS, Sivaraj R (2015) Effect of Chloroxylon swietenia Dc bark extracts on STZ induced
diabetic rats with special attention to its glycoprotein levels. Der Pharmac Lett 7(12):414–418
Jayasri MA, Gunasekaran S, Radha A et al (2008) Antidiabetic effect of Costus pictus leaves in normal and
streptozotocin-induced diabetic rats. Int J Diabetes Metab 16:117–122
Jeppesen PB, Gregersen S, Rolfsen SE et al (2003) Antihyperglycemic and blood pressure-reducing effects of
stevioside in the diabetic Goto-Kakizaki rat. Metabolism 52:372–378
Jiménez-Flores LM, López-Briones S, Macías-Cervantes MH et al (2014) A PPARγ, NF-κBα e AMPK. Esses dadosB, and AMPK-dependent
mechanism may be involved in the beneficial effects of curcumin in the diabetic db/db mice liver. Molecules 19:8289–
8302
Joseph B, Jini D (2013) Antidiabetic effects of Momordica charantia (bitter melon) and its medicinal potency. Asian Pac
J Trop Dis 3 (2):93–102
Kaneto H, Katakami N, Kawamori D et al (2007) Involvement of oxidative stress in the pathogenesis of diabetes.
Antioxid Redox Sign 9(3):355–366
Kang S, Tsai LT, Rosen ED et al (2016) Nuclear mechanisms of insulin resistance. Trends Cell Biol 26(5):341–351
Kangralkar V, Shivraj A, Patil D (2010) Oxidative stress and diabetes: a review. Int J Pharm Appl 1:38–45
Kanikkannan N, Ramarao P, Ghosal S (1994) Shilajit-induced potentiation of the hypoglycemic action of insulin and
inhibition of streptozotocin induced diabetes in rats. Phytother Res 9:478–481
Kaur G, Kamboj P, Kalia AN et al (2011) Antidiabetic and antihypercholesterolemic effects of aerial parts of Sida
cordifolia Linn on streptozotocin-induced diabetic rats. Indian J Nat Prod Resour 2:428–434
Khan W, Parveen R, Chester K et al (2017) Hypoglycemic potential of aqueous extract of Moringa oleifera leaf and in
vivo GC-MS metabolomics. Front Pharmacol 8:577
Kim JA, Wei Y, Sowers JR et al (2008) Role of mitochondrial dysfunction in insulin resistance. Circ Res 102(4):401–
414
Kim S, Shin BC, Lee MS et al (2011) Red ginseng for type 2 diabetes mellitus: a systematic review of randomized
controlled trials. Chin J Integr Med 17:937–944
King AJF (2012) The use of animal models in diabetes research. Br J Pharmacol 166:877–894
Kong WJ, Zhang H, Song DQ et al (2009) Berberine reduces insulin resistance through protein kinase C-dependent
up-regulation of insulin receptor expression. Metabolism 58:109–119
Kouzuma T, Usami T, Yamakoshi M et al (2002) An enzymatic method for the measurement of glycated albumin in
biological samples. Clin Chim Acta 324:61–71
Kumar A, Chopra EK, Mukherjee M et al (2015) Current knowledge and pharmacological profile of berberine: an
update. Eur J Pharmacol 761:288–297
Kumar Gupta S, Kumar B, Srinivasan BP et al (2013) Retinoprotective effects of Moringa oleifera via antioxidant, anti-
inflammatory, and anti-angiogenic mechanisms in streptozotocin-induced diabetic rats. J Ocul Pharmacol Ther 29:419–
426
Lai DM, Tu YK, Liu IM et al (2006) Mediation of beta-endorphin by ginsenoside Rh2 to lower plasma glucose in
streptozotocin-induced diabetic rats. Planta Med 72:9–13
945
 Lailerd N, Saengsirisuwan V, Slonigar JA (2004) Effect of stevioside on glucose transport activity in rat muscle.
Metabolism 53:101–107
Lama A, Pirozzi C, Mollica MP et al (2017) Polyphenol-rich virgin olive oil reduces insulin resistance and liver
inflammation and improves mitochondrial dysfunction in high-fat diet fed rats. Mol Nutr Food Res 61(3)
Lan J, Zhao Y, Dong F et al (2015) Meta-analysis of the effect and safety of berberine in the treatment of type 2
diabetes mellitus, hyperlipidemia and hypertension. J Ethnopharmacol 161:69–81
Lawley S, Gupta RC, Goad JT et al (2013) Anti-inflammatory and antiarthritic efficacy and safety of purified shilajit in
moderately arthritic dogs. J Vet Sci Anim Husb 1(3):302
Lee CY (2016) Glucagon-like peptide-1 formulation—the present and future development in diabetic treatment. Basic
Clin Pharmacol Toxicol 118:173–180
Lee WK, Kao ST, Liu IM et al (2006) Increase of insulin secretion by ginsenoside Rh2 to lower plasma glucose in
Wistar rats. Clin Exp Pharmacol Physiol 33(1–2):27–32
Lee WK, Kao ST, Liu IM et al (2007) Ginsenoside Rh2 is one of the active principles of Panax ginseng root to improve
insulin sensitivity in fructose-rich chow-fed rats. Horm Met Res 39:347–354
Lemus-Mondaca R, Vega-Galvez A, Zura-Bravo L et al (2012) Stevia rebaudiana Bertoni, source of a high-potency
natural sweetener: a comprehensive review on the biochemical, nutritional and functional aspects. J Food Chem
132:1121–1132
Lenzen S (2008) The mechanisms of alloxan- and streptozotocininduced diabetes. Diabetology 51:216–226
Li X-Y (2007) Efficacy and safety of berberine in the treatment of diabetes with dyslipidemia. US ClinicalTrials.gov
Liu IM, Cheng JT (2011) Mediation of endogenous beta-endorphin in the plasma glucose-lowering actin of herbal
products observed in type 1-like diabetic rats. Evid Based Complement Alternat Med 2011:987876
Liu A, Lou H, Zhao L et al (2006) Validated LC/MS/MS assay for curcumin and tetrahydrocurcumin in rats plasma and
application to pharmacokinetic study of phospholipid complex of curcumin. J Pharm Biomed Anal 40(3):720–727
Liu Q, Li W, Nagata K et al (2018) Isolation, structural elucidation, and liquid chromatography-mass spectrometry
analysis of steroidal glycosides from Polygonatum odoratum. J Agric Food Chem 66 (2):521–531
Ma X, Yang W, Laaksonen O et al (2017) Role of flavonols and proanthocyanidins in the sensory quality of Sea
buckthorn (Hippophae rhamnoides L.) berries. J Agric Food Chem 65:9871–9879
Mahomed IM, Ojewole JA (2003) Hypoglycemic effect of Hypoxis hemerocallidea corm (African potato) aqueous
extract in rats. Methods Find 25(8):617
Manolova Y, Deneva V, Antonov L et al (2014) The effect of the water on the curcumin tautomerism: a quantitative
approach. Spectroch Acta Part A Mol Biomol Spectrosc 132:815–820
Matsuzawa-Nagata N, Takamura T, Ando H et al (2008) Increased oxidative stress precedes the onset of high-fat diet-
induced insulin resistance and obesity. Metabolism 57(8):1071–1077
Menchetti L, Canali C, Castellini C et al (2018) The different effects of linseed and fish oil supplemented diets on
insulin sensitivity of rabbit does during pregnancy. Res Vet Sci 118:126–133
Menon VP, Sudheer AR (2007) Antioxidant and anti-inflammatory properties of curcumin. Adv Exp Med Biol 595:105–
125
Metzler M, Pfeiffer E, Schulz SI et al (2013) Curcumin uptake and metabolism. BioFactors (Oxford, England) 39(1):14–
20
Mishra Y, Khan MSY, Zafar R et al (1990) Hypoglycemic activity of leaves of Lagerstroemia speciosa (L) Pers. Indian J
Pharmacol 22:174–176
Miura T, Itoh Y, Iwamoto N et al (2004) Suppressive activity of the fruit of Momordica charantia with exercise on blood
glucose in type 2 diabetes mice. Biol Pharm Bull 27:248–250
Muhammad DRA, Dewettinck K (2017) Cinnamon and its derivatives as potential ingredient in functional food—a
review. Int J Food Prop 20(D2):S2237–S2263
Nagalievska M, Sabadashka M, Hachkova H et al (2018) Galega officinalis extract regulate the diabetes mellitus
related violations of proliferation, functions and apoptosis of leukocytes. BMC Complement Altern Med 18:4
Nair SS, Kavrekar V, Mishra A (2013) Evaluation of in vitro antidiabetic activity of selected plant extracts. Int J Pharm
Sci Invent 2:12–19
Natural Medicines Comprehensive Database (2014) Ginseng. Panax. Retrieved January 25, 2015 from
http://www.nlm.nih.gov/medilineplus/druginfo/natural/1000.html
Naveen J, Baskaran V (2018) Antidiabetic plant-derived nutraceuticals: a critical review. Eur J Nutr 57:1275–1299
Nelson KM, Dahlin JL, Bisson J et al (2017) The essential medicinal chemistry of curcumin: miniperspective. J Med
Chem 60 (5):1620–1637
Nichol AD, Holle MJ, An R (2018) Glycemic impact of non-nutritive sweeteners: a systematic review and meta-analysis
of randomized controlled trials. Eur J Clin Nutr 72:796–804
Njanje I, Bagla VP, Beseni BK et al (2017) Defatting of acetone leaf extract of Acacia karroo (Hayne) enhances its
hypoglycemic potential. BMC Complement Altern Med 17:482
Ojewole JA (2006) Antinociceptive, antiinflammatory and antidiabetic properties of Hypoxis hemerocallidea
(Hypoxidaceae) corn (African potato) aqueous extract in mice and rats. J Ethnopharmacol 103:126–134
Ojewole JA, Adewole SO, Olayiwola G (2006) Hypoglycemic and hypotensive effects of Momordica charantia Linn
(Cucurbitaceae) whole-plant aqueous extract in rats. Cardiovasc J South Afr 17:227–232

946
 Okoli CO, Obidike IC, Ezike AC et al (2011) Studies on the possible mechanisms of antidiabetic activity of extract of
aerial parts of Phyllanthus niruri. Pharm Biol 49(3):248–255
Pang B, Zhao LH, Zhou Q et al (2015) Application of berberine on treating type 2 diabetes mellitus. Int J Endocrinol
2015:905749
Pari L, Srinivasan S (2010) Antihyperglycemic effect of diosmin on hepatic key enzymes of carbohydrate metabolism in
streptozotocin-nicotinamide-induced diabetic rats. Biomed Pharmacother 64:477–481
Parveen K, Khan R, Siddiqui WA (2011) Antidiabetic effects afforded by Terminalia arjuna in high fat-fed and
streptozotocin-induced type 2 diabetic rats. Int J Diab Metab 19:23–33
Patel DK, Prasad SK, Kumar R et al (2012) An overview on antidiabetic medicinal plants having insulin mimetic
property. Asian Pac J Trop Biomed 2(4):320–330
Perez-Gutierrez RM, Mota Flores JM (2010) Attenuation of hyperglycemia and hyperlipidemia in streptozotocin diabetic
rats by chloroform extract of fruits of Ferocactus latispinus and Ferocactus histrix. BOL Latinoam Caribe Plant Med
Aromat 9:475–484
Prabhu KS, Lobo R, Shirwaikar A (2008) Antidiabetic properties of the alcoholic extract of Sphaeranthus indicus in
streptozotocinnicotinamide diabetic rats. J Pharmac Pharmacol 60:909–916
Prakash O, Kumar R, Mishra A et al (2009) Artocarpus heterophyllus (Jackfruit): an overview. Pharmacogn Rev
3(6):353–358
Purpura M, Lowery RP, Wilson JM et al (2018) Analysis of different innovative formulations of curcumin for improved
relative oral bioavailability in human subjects. Eur J Nutr 57:929–938
Rafieian-Kopaei M, Nasri H (2014) The ameliorative effect of Zingiber officinale in diabetic nephropathy. Iran Red
Crescent Med J 16:1–2
Ragasa C, Ng VAS, Park JH et al (2014) Chemical constituents of Artocarpus altilis and Artocarpus odoratissimus. Res
J Pharm Biol Chem Sci 5(4):1081–1087
Rahmani AH, Al Shabrmi FM, Aly SM (2014) Active ingredients of ginger as potential candidates in the prevention and
treatment of diseases via modulation of biological activities. Int J Pathophysiol Pharmacol 6(2):125–136
Rains JL, Jain SK (2011) Oxidative stress, insulin signaling, and diabetes. Free Radic Biol Med 50:567–575
Rao SS, Najam R (2016) Efficacy of combination herbal product (Curcuma longa and Eugenia jambolana) used for
diabetes mellitus. Pak J Pharm Sci 29(1):201–204
Rather LJ, Ul-Islam S, Mohammad F (2015) Acacia nilotica (L.): a review of its traditional uses, phytochemistry, and
pharmacology. Sustain Chem Pharm 2:12–30
Raza H, Prabu SK, John A et al (2011) Impaired mitochondrial respiratory functions and oxidative stress in
streptozotocin-induced diabetic rats. Int J Mol Sci 12(5):3133–3147
Reed MJ, Meszaros K, Entes LJ et al (2000) A new rat model of type 2 diabetes: the fat-fed, streptozotocin-treated rat.
Metabolism 49:1390–1394
Reher G, Slijepcevic M, Kraus L (1991) Hypoglycemic activity of triterpenes and tannins from Sarcopoterium spinosum
and two Sanguisorba species. Planta Med 57:A57–A58
Ribes G, Sauvaire Y, Da Costa C et al (1986) Antidiabetic effects of subfractions from fenugreek seeds in diabetic
dogs. Proc Soc Exp Biol Med 182:159–166
Roufogalis BD (2014) Zingiber officinale (Ginger): a future outlook on it’s potential in prevention and treatment of
diabetes and prediabetic states. New J Sci 2014:1–5
Rouse M, Younes A, Egan JM (2014) Resveratrol and curcumin enhance pancreatic β-cell function by inhibiting
phosphodiesterase activity. J Endocrinol 223:107–117
Ryan GJ, Wanko NS, Redman AR et al (2003) Chromium as adjunctive treatment for type 2 diabetes. Ann
Pharmacother 37:876–885
Sabino M, Capomaccio S, Cappelli K et al (2018) Oregano dietary supplementation modifies the liver transcriptome
profile in broilers: RNASeq analysis. Res Vet Sci 117:85–91
Saleh OM, Awad NS, SolimanMMet al (2016) Insulin-mimetic activity of stevioside on diabetic rats: biochemical,
molecular and histopathological study. Afr J Tradit Complement Altern Med 13 (2):156–163
Sasaki H, Sunagawa Y, Takahashi K et al (2011) Innovative preparation of curcumin for improved oral bioavailability.
Biol Pharm Bull 34 (5):660–665
Sathiyabama RG, Gandhi GR, Denadai M et al (2018) Evidence of insulin-dependent signaling mechanisms produced
by Citrus sinensis (L.) osbeck fruit peal in an insulin resistant diabetic animal model. Food Chem Toxicol Part B 116:86–
99
Sauvaire Y, Petit P, Broca C et al (1998) 4-Hydroxyisoleucine: a novel amino acid potentiator of insulin secretion.
Diabetes 47:206–2010
Selvan VT, Manikandan L, Senthil KGP et al (2008) Antidiabetic and antioxidant effect of methanol extract of Artanema
sesamoides in streptozotocin-induced diabetic rats. Int J Appl Res Nat Prod 1:25–33
Sharman EH, Bondy SC (2016) Melatonin: a safe nutraceutical and clinical agent. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals:
efficacy, safety and toxicity. Academic/Elsevier, Amsterdam, pp 501–509
Shen Y, Fukushima M, Ito Y et al (2010) Verification of the antidiabetic effects of Cinnamon (Cinnamomum zeylanicum)
using insulinuncontrolled type 1 diabetic rats and cultured adipocytes. Biosci Biotechnol Biochem 74(12):2418–2425
Shetty AJ, Parampalli SM, Bhandarkar R et al (2010) Effect of insulin plant (Costus igneus) leaves on blood glucose
levels in diabetic patients: a cross sectional study. J Clin Diagn Res 4:2617–2621

947
 Shieh JM, Wu HT, Chung KC et al (2009) Melatonin ameliorates highfat diet-induced diabetes and stimulates glycogen
synthesis via a PKzeta-Akt-GSK3beta pathway in hepatic cells. Pineal Res 47 (4):339–344
Shieh J, Cheng KC, Chung HH et al (2011) Plasma glucose lowering mechanisms of catalpol, an active principle from
roots of Rehmannia glutinosa, in streptozotocin-induced diabetic rats. J Agric Food Chem 59(8):3747–3753
Shirwaikar A, Rajendran K, Punitha ISR (2005) Antidiabetic activity of alcoholic stem extract of Coscinium fenestratum
in streptozotocinnicotinamide induced type 2 diabetic rats. J Ethnopharmacol 97 (2):369–374
Shivanna N, Naika M, Khanum F et al (2013) Antioxidant, anti-diabetic and renal protective properties of Stevia
rebaudiana. J Diabet Complications 27:103–113
Singh NS, Vats P, Suri S et al (2001) Effect of an antidiabetic extract of Catharanthus roseus on enzymic activities in
streptozotocin induced diabetic rats. J Ethnopharmacol 76:269–271
Singh V, Singh SP, Singh SM et al (2015) Combined potentiating action of phytochemical(s) from Cinnamomum tamala
and Aloe vera for their anti-diabetic and insulinomimetic effect using in vivo rat and in vitro NIH/3T3 cell culture system.
Appl Biochem Biotechnol 175:2542–2563
Sivapalan SR (2015) Phytochemical study on medicinal plant-Sida cordifolia Linn. Int J Multidiscipl Res Dev 2(1):200–
204
Soliman MM, Attia HF, El-Shazly SA et al (2012) Biomedical effects of cinnamon extract on obesity and diabetes
relevance in Wistar rats. Am J Biochem Mol Biol 2:133–145
Soliman MM, Ahmed MM, El-Shazly SA (2013) Cinnamon extract regulates gene expression of lipid and carbohydrate
metabolism in streptozotocin induced diabetic Wistar rats. Am J Biochem Mol Biol 9:172–182
Stohs SJ, Hartman MJ (2015) Review of the safety and efficacy of Moringa oleifera. Phytother Res 29:796–804
Stoyanova S, Genus J, Heideg E et al (2011) The food additives insulin and stevioside counteract oxidative stress. Int
J Food Sci Nutr 62:207–214
SubashBabu P, Prabuseenivasan S, Ignacimuthu S (2007) Cinnamaldehyde: a potential antidiabetic agent.
Phytomedicine 14:15–22
Szkudelski T (2001) The mechanism of alloxan and streptozotocin action in β cells of the rat pancreas. Physiol Res
50:180–185
Tanko Y, Yerima M, Mahdi MA et al (2008) Hypoglycemic activity of methanolic stem bark of Adansonnia digitata
extract on blood glucose levels of streptozotocin-induced diabetic Wistar rats. Int J Appl Res Nat Prod 1(2):32–36
Tanko Y, Mohammed A, Musa KY et al (2012) Evaluation of ethanolic leaf extract of Mucuna pruriens on blood glucose
levels in alloxaninduced diabetic rats. Asian J Med Sci 4(1):23–28
Tanquilut NC, Tanquilut MRC, Estacio MAC et al (2009) Hypoglycemic effect of Lagerstroemia speciosa (L.) Pers. on
alloxan-induced diabetic mice. J Med Plants Res 3(12):1066–1071
Tomoda M, Shimada K, Konno C et al (1985) Structure of panaxan B. A hypoglycemic glycan of Panax ginseng roots.
Phytochemistry 24:2431–2433
Vetrani C, Sestilli F, Vitale M et al (2018) Metabolic response to amylose-rich wheat-based rusks in overweight
individuals. Eur J Clin Nutr 72:904–912
Viana GS, Medeiros AC, Lacerda AM et al (2004) Hypoglycemic and antilipidemic effects of the aqueous extract of
Cissus sicyoides. BMC Pharmacol 4:9
Villarruel-López A, López-de la Mora DA, Vásquez-Paulino OD et al (2018) Effect of Moringa oleifera consumption on
diabetic rats. BMC Complement Altern Med 18:127
Volek JS, Fernandez ML, Feinman RD et al (2008) Dietary carbohydrate restriction induces a unique metabolic state
positively affecting atherogenic dyslipidemia, fatty acid portioning, and metabolic syndrome. Progr Lipid Res 47(5):307–
318
Vongsak B, Sithisarn P, Mangmool S et al (2013) Maximizing total phenolics, total flavonoids contents and antioxidant
activity of Moringa oleifera leaf extract by the appropriate extraction method. Indian Crop Prod 44:566–571
Wadood A, Wadood N, Shah SA (1989) Effects of Acacia arabica and Caralluma edulis on blood sugar levels of normal
and alloxan diabetic rabbits. J Pak Med Assoc 39(8):208–212
Wang RH, Kim HS, Xiao C et al (2011) Hepatic Sirt1 deficiency in mice impairs mTorc2/Akt signaling and results in
hyperglycemia, oxidative damage, and insulin resistance. J Clin Invest 121 (11):4477–4490
Wang H, Fowler MI, Messenger DJ et al (2018) Homoisoflavonoids are potent glucose transporter 2 (GLUT2)
inhibitors: a potential mechanism for the glucose-lowering properties of Polygonatum odoratum. J Agric Food Chem
66:3137–3145
Westman EC, Feinman RD, Mavropoulos JC et al (2007) Low-carbohydrate nutrition and metabolism. Am J Clin Nutr
86 (2):276–284
Whiteman EL, Cho H, Birnbaum MJ (2002) Role of Akt/protein kinase B in metabolism. ABBV Trends Endocrinol Metab
13(10):444–451
WHO (2016) Global report on diabetes. http://www.who.int/iris/bitstream/10665
Worawalai W, Sompornpisut P, Wacharasindhu S et al (2018) Quercitol: from a taxonomic marker of the genus
Quercus to a versatile chiral building block of antidiabetic agents. J Agric Food Chem 66:5741–5745
Wu W, Geng H, Liu Z et al (2014) Effect of curcumin on rats/mice with diabetic nephropathy: a systematic review and
meta-analysis of randomized controlled trials. J Tradit Chin Med 34:419–429
Wu X-Z, Xie HQ, Long XH et al (2017) Chemical constituents of Catharanthus roseus. J Chin Pharm Sci 52(8):631–
636

948
 Wyk H, Davis R, Davies J (2016) A critical review of low-carbohydrate diets in people with type 2 diabetes. Diabet Med
33(2):148–157
Xia X, Yan J, Shen Y et al (2011) Berberine improves glucose metabolism in diabetic rats by inhibition of hepatic
gluconeogenesis. PloS One 6:e16556
Xiang YZ, Shang HC, Gao XM et al (2008) A comparison of the ancient use of ginseng in traditional Chinese medicine
with modern pharmacological experiments and clinical trials. Phytother Res 22:851–858
Xu Z, Wang X, Zhou M et al (2008) The antidiabetic activity of total lignan from Fructus arctii against alloxan-induced
diabetes in mice and rats. Phytother Res 22:97–101
Yallapu MM, Nagesh PK, Jaggi M et al (2015) Therapeutic applications of curcumin nanoformulations. AAPS J
17(6):1341–1356
Yan J, Wang C, Jin Y et al (2018) Catalpol ameliorates hepatic insulin resistance in type 2 diabetes through acting on
AMPK/NOX4/P13K/AKT pathway. Pharmacol Res 130:466–480
Yanarday R, Colak H (1998) Effect of chard (Beta vulgaris L. var cicla) on blood glucose levels in normal and alloxan-
induced diabetic rabbits. Pharm Pharmacol Commun 4:309–311
Yang MS, Wu MY (2016) Chinese ginseng. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity.
Academic/Elsevier, Amsterdam, pp 693–705
Yassa HD, Tohamy AD (2014) Extract of Moringa oleifera leaves ameliorates streptozotocin-induced diabetes mellitus
in adult rats. Acta Histochem 116:844–854
Yin J, Xing H, Ye J (2008) Efficacy of berberine in patients with type 2 diabetes mellitus. Metabolism 57:712–717
Zhang M, Chen L (2012) Berberine in type 2 diabetes therapy: a new perspective for an old antidiarrheal drug? Acta
Pharm Sin B 2 (4):379–386
Zhang H, Kong WJ, Shan YQ et al (2010a) Protein kinase D activation stimulates the transcription of the insulin
receptor gene. Mol Cell Endocrinol 330:25–32
Zhang H, Wei J, Xue R et al (2010b) Berberine lowers blood glucose in type 2 diabetes mellitus patients through
increasing insulin receptor expression. Metabolism 59:285–292
Zhang W, Zhao J, Wang J et al (2010c) Hypoglycemic effect of aqueous extract of sea buckthorn (Hippophae
rhamnoides L.) seed residues in streptozotocin-induced diabetic rats. Phytother Res 24:228–232
Zheng J, Cheng J, Zheng S et al (2018) Curcumin, a polyphenolic curcuminoid with its protective effects and molecular
mechanisms in diabetes and diabetic cardiomyopathy. Front Pharmacol 9:472
Zhou J, Xu G, Ma S et al (2015) Catalpol ameliorates high-fat dietinduced insulin resistance and adipose tissue
inflammation by suppressing the JNK and NF-kappaB pathways. Biochem Biophys Res Commun 467(4):853–858
Zia T, Hasnain SN, Hasan SK et al (2001) Evaluation of the oral hypoglycemic effect of Trigonella foenum-graecum in
normal mice. J Ethnopharmacol 75:191–195

949
 Nutracêuticos para cicatrização de feridas: um enfoque
especial em Chromolaena odorata como guardiã da
saúde com amplo espectro de atividades biológicas
Mohamed Ali-Seyed e Kavitha Vijayaraghavan

Resumo
Nutracêuticos são qualquer material, total ou parcial, que pode ser considerado um
híbrido de nutrição e produtos farmacêuticos. Essa característica especial, além de
proporcionar boa saúde, leva ao tratamento de feridas e à prevenção de certas doenças.
Os nutracêuticos têm recebido atenção significativa devido à sua segurança presumida e
aos resultados nutricionais e terapêuticos promissores. Um aspecto importante do uso de
remédios tradicionais no tratamento de queimaduras e feridas é o potencial para melhorar
a cura e reduzir o tempo de inatividade, a fim de aliviar o fardo financeiro para os
pacientes afetados e suas famílias. Embora várias plantas medicinais e suas
preparações/formulações farmacêuticas estejam disponíveis para o tratamento e manejo
de feridas, permanece a necessidade de se buscar tratamentos eficazes, pois certas
formulações atuais causam efeitos adversos ou apresentam falta de eficácia. Vários
medicamentos fitoterápicos exibiram atividade marcante no tratamento de feridas, e vários
compostos/extratos naturais verificaram o potencial de cura de feridas in vivo; portanto,
são considerados drogas potenciais de origem natural. C. odorata é considerada uma
erva daninha tropical. Ele exibe inúmeras propriedades medicinais relevantes em uma
escala apreciável e é conhecido em algumas partes do mundo como um medicamento
tradicional usado para tratar várias doenças. Além do exposto, os óleos voláteis da planta
são considerados uma possível fonte de um nutracêutico para uso clínico. Para entender
seu papel preciso como um presente da natureza para a cura de feridas e sua
contribuição para cuidados de saúde acessíveis, esta planta deve ser avaliada
cientificamente com base na literatura disponível. Isso é crucial para seu potencial futuro
design, desenvolvimento e aplicação de medicamentos para o tratamento de feridas em
medicina animal e humana e cuidados de saúde com boa relação custo-benefício.

Palavras-chave: C. odorata · Princípios bioativos · Erva invasora · Produtos Naturais ·

Nutracêuticos para cicatrização de feridas
M. Ali-Seyed - Faculty of Medicine, Department of Clinical Biochemistry, University of Tabuk, Tabuk, Saudi Arabia
K. Vijayaraghavan - Department of Chemical Engineering, Agni College of Technology, Chennai, Tamil Nadu, India

950
1. Introdução
As feridas são lesões físicas que podem ser classificadas como abertas ou fechadas com
base na causa subjacente (Eming et al. 2002) e com base na fisiologia da cicatrização de
feridas. As feridas são popularmente classificadas por seu nível de cronicidade como
agudas ou crônicas (Strodtbeck 2001). Uma ferida aguda é uma lesão do tecido que
normalmente prossegue por meio de um processo reparativo ordenado e oportuno,
resultando na restauração sustentada da integridade anatômica e funcional. As feridas
agudas seguem um trauma ou inflamação, são causadas por danos externos à pele
intacta e geralmente cicatrizam em 6 semanas. Feridas cirúrgicas, mordidas,
queimaduras, pequenos cortes e escoriações e feridas traumáticas mais graves, como
lacerações, esmagamentos ou ferimentos por arma de fogo são exemplos de feridas
agudas. As feridas agudas geralmente são causadas por cortes ou incisões cirúrgicas e
completam o processo de cicatrização da ferida dentro do prazo esperado (Menke et al.
2008).

As feridas que não progridem nos estágios normais de cicatrização levam a um estado de
inflamação patológica. Essas feridas requerem um tempo prolongado para cicatrizar ou
recorrem com frequência. As causas mais comuns de feridas crônicas são infecção local,
hipóxia, trauma, corpos estranhos e problemas sistêmicos como diabetes mellitus,
desnutrição, imunodeficiência ou medicamentos (Menke et al. 2008). As feridas crônicas,
além de não cicatrizarem após 6 semanas, têm associações patológicas características
devido a mecanismos endógenos subjacentes associados a uma condição predisponente
que, em última análise, compromete a integridade do tecido dérmico e epidérmico,
inibindo ou retardando a cicatrização (Krishnan 2006). Úlceras de pressão, úlceras
venosas de perna e úlceras de pé diabético são exemplos de feridas crônicas (de la Torre
e Chambers 2008). Essas feridas são evidências visíveis de uma condição subjacente,
como pressão estendida nos tecidos, perfusão tecidual comprometida como
consequência de suprimento arterial prejudicado (doença vascular periférica) ou
drenagem venosa prejudicada (hipertensão venosa) e doenças metabólicas, como
diabetes mellitus (DM), ou mesmo má nutrição.

2. Fisiopatologia da cicatrização de feridas

É sabido que não existe um método definido de classificação de feridas. No entanto,
existem muitos tipos diferentes de feridas que variam de leves a graves e potencialmente
fatais, e algumas delas são classificadas da seguinte forma:

951
(a) As feridas podem ser referidas pelo seu sítio anatômico, por exemplo, ferida abdominal
ou axilar.

(b) Com base na causa subjacente da ferida, esse tipo de ferida é chamada de aberta ou
fechada. Nesta classe, o sangramento é claramente visível à medida que o sangue
escapa do corpo. É ainda classificado como incisão, laceração, abrasão ou ferimento
superficial, punção, arma de fogo ou penetração (Schultz 1999).

(c) Feridas com ou sem perda de tecido (por exemplo, cirurgia) ou queimaduras (Poul
Holm et al. 1974).

O processo de cicatrização de feridas é estudado há décadas. A cura adequada de feridas

é essencial para a restauração da integridade anatômica prejudicada e função perturbada
da área afetada (Edlich et al. 2005). A cura é um processo complexo e intrincado iniciado
em resposta a uma lesão que serve para restaurar a função e integridade dos tecidos
danificados (Wietecha e DiPietro 2013). Em países em desenvolvimento, como África e
Ásia, lesões na pele são comuns e a falta geral de recursos médicos geralmente resulta
em um estado crônico de cura (Starley et al. 1999). As feridas crônicas, em particular, são
uma grande preocupação tanto para pacientes quanto para médicos, e afetam um grande
número de pacientes, levando a uma grave redução em sua qualidade de vida. A
cicatrização de feridas prejudicada e aberrante impõe um enorme fardo financeiro no
mundo desenvolvido e é um problema intransponível para o não desenvolvido (Previsão
de Feridas para 2021).

As estimativas atuais indicam que quase seis milhões de pessoas sofrem de feridas
crônicas em todo o mundo (Wound Forecast to 2021; WHO 2014). Só nos EUA, feridas
relacionadas com o combate e outras feridas traumáticas levam a mais de 300.000
hospitalizações anualmente. A restauração da área afetada em sobreviventes de feridas é
o principal objetivo da reabilitação de qualidade. As feridas cirúrgicas são responsáveis
pela grande maioria das lesões cutâneas. Aproximadamente 80% dessas feridas usam
algum tipo de produto de fechamento, como suturas, grampos e fitas, enquanto outras
estratégias de tratamento de feridas usam produtos hemostáticos, bandagens de tecido e
curativos cirúrgicos (Belmont et al. 2010).

A cicatrização de feridas é um processo biológico normal no corpo humano e também nos

animais e é realizada por meio de quatro fases precisamente e altamente programadas:
(1) hemostasia, (2) inflamação, (3) proliferação e (4) remodelação (Burford et al. 2007).
Cada fase é caracterizada pela infiltração de tipos específicos de células no local da ferida
(Redd et al. 2004), todos os quais interagem e se comunicam por meio de sinais químicos
para otimizar o reparo. Os processos de cicatrização de feridas são eventos bioquímicos
952
e celulares bem organizados que levam ao crescimento e regeneração do tecido ferido.
Envolve a atividade de uma intrincada rede de células sanguíneas, citocinas e fatores de
crescimento que, em última análise, leva à restauração das condições normais na pele ou
tecido lesionado (Clark 1991). Após o início da resposta inflamatória, os fibroblastos
começam a proliferar e migrar para a área da ferida. O colágeno e a fibronectina são
subsequentemente depositados no leito da ferida, servindo como uma matriz temporária
na qual as células epiteliais podem migrar (Rørth 2007). Ao longo do processo, as células
geralmente migram em grupos.

Embora a compreensão de como as células se movem juntas no reparo do tecido seja

importante, esse processo também é fundamentalmente relevante para outros eventos
complexos, como morfogênese e metástase tumoral (Friedl 2004). Existem dois
mecanismos de migração coletiva que foram identificados (Martin 1997). Primeiro, o
rastreamento lamelipodial envolve a migração ativa de células na borda da ferida,
mediada principalmente por interações da matriz extracelular (ECM) na área da ferida
(Trepat et al. 2009). Este processo é comumente observado na cicatrização de feridas em
adultos e é bem estudado em modelos de cicatrização de feridas in vitro (Bindschadler e
McGrath 2007). O segundo mecanismo é conhecido como modelo em bolsa e é o
principal modo de movimento celular na cicatrização de feridas fetais (Bullard et al. 2003).
Após a lesão, um cabo de actomiosina é montado em torno da periferia da ferida e se
contrai para fechar a ferida, transmitindo tensão através das junções intercelulares
(Tamada et al. 2007). Enquanto o mecanismo de rastreamento lamelipodial resulta no
rápido fechamento da ferida, o mecanismo do cordão em bolsa leva à cicatrização da
ferida sem cicatrizes.

O objetivo do cuidado com a ferida é promover a cicatrização no menor tempo possível,

com o mínimo de dor, desconforto e cicatrizes para o paciente, e isso deve ocorrer em um
ambiente fisiológico que favoreça a reparação e regeneração dos tecidos (Bowler et al.
2001). Sabe-se que os processos de cicatrização de feridas são influenciados por muitos
fatores, incluindo infecções, estado nutricional, medicamentos e hormônios, tipo e locais
da ferida e doenças debilitantes, como diabetes. O processo de cicatrização também
pode ser dificultado pela presença de radicais livres de oxigênio ou infecção microbiana.
Devido a esse mau estado de higiene, a infecção da ferida ainda é uma das doenças mais
comuns nos países em desenvolvimento (Hussein et al. 2011). Além do acima, vários
distúrbios locais e doenças sistêmicas podem resultar na cicatrização de feridas
prejudicada (Eming et al. 2002). A inflamação prolongada e o microambiente tóxico

953
resultantes são as principais razões para a transição do estado agudo para o crônico
(Amadeu et al. 2004).

3. Cura de feridas: uma nova perspectiva multi espectral do século XXI

Apesar dos enormes avanços na indústria farmacêutica, a busca por abordagens
terapêuticas mais eficazes e de menor custo para a cicatrização de feridas permanece um
desafio para a medicina moderna devido à natureza crônica da terapia e efeitos colaterais
relacionados (Ghosh e Gaba 2013). Muitas novas abordagens, como a terapia genética
(Petrie et al. 2003) e a engenharia de tecidos da pele, tiveram sucesso limitado. Na busca
por novas opções terapêuticas, as plantas e seus metabólitos são uma grande fonte de
novas biomoléculas. A aplicação de medicamentos à base de plantas fornece, em
princípio, uma terapia econômica. Uma grande crítica aos medicamentos fitoterápicos, no
entanto, é que eles não estão sujeitos aos rigores de seus equivalentes farmacêuticos
(Barreto et al. 2014). No entanto, nos últimos 20 anos, testes in vitro desenvolvidos para
investigar a cicatrização de feridas têm explorado todos esses processos como alvos para
aprimorar seu manejo. As diferentes fases do processo de cicatrização de feridas se
sobrepõem, e um remédio vegetal ideal deve afetar pelo menos dois dos diferentes
processos antes que possa ser considerado como tendo algum suporte científico para seu
uso tradicional (Burford et al. 2007).

As plantas servem como recursos potenciais para os sistemas tradicionais e modernos de

medicamentos, nutracêuticos, suplementos alimentares, remédios populares,
intermediários farmacêuticos e entidades químicas (Soni e Singhai 2013). Eles também
servem como recursos possíveis para o tratamento de várias doenças humanas devido à
sua eficácia potencial e segurança comprovada para uso animal e humano (Hashemi e
Davoodi 2011). Na medicina popular, as plantas herbáceas têm sido amplamente
utilizadas para facilitar a cicatrização de feridas, com alto grau de sucesso (Kumar et al.
2007). Algumas dessas plantas possuem atividades pró-cicatrização de feridas ou exibem
propriedades antimicrobianas e outras propriedades relacionadas que são benéficas no
tratamento geral de feridas (Dawn et al. 2008). Isso inspirou muitas pesquisas destinadas
a validar afirmações e descobrir mecanismos que possivelmente explicam o potencial
dessas ervas nos processos de reparo de feridas. Alguns exemplos de plantas que curam
feridas (Tabela 1) incluem a babosa, Aloe vera (Maenthaisong et al. 2007); Vinhas da
Madeira, Anredera diffusa (Moura-Letts et al. 2006); gerânio da selva, Ixora coccinea
(Upadhyay et al. 2014); Amora indiana, Morinda pubescens (Mathivanan et al. 2006);

954
árvore casta de folha simples, Vitex trifolia; e a árvore casta do pavão, Vitex altissima
(Manjunatha et al. 2007).

Tabela 1 Nutracêuticos/extratos vegetais com potencial para cicatrização de feridas

Extrato
Ingrediente ativo Efeito Referências
nutracêutico/vegetal
Flavonóides, saponinas, esteróis, Reddy et al.
Acalypha indica Cicatrização de feridas (2002)
polifenóis, triterpenóides
Aloe vera β-Sitosterol Angiogênese Moon et al. (1999)

Flavonóides, taninos, saponinas, Murti and Kumar

Butea monosperma glicosídeos, esteróides e Cicatrização de feridas (2012), Bopage et
triterpenóides al. (2018)

Camellia sinensis (chá-

Epigalocatequina-3-galato Antiinflamatório Li et al. (2016)
verde)
Centaurea sadleriana Csupor et al.
Flavonóides Cicatrização de feridas (2010)
Janka
Shukla et al.
Centella asiatica Asiaticosídeo Cicatrização de feridas (1999)
Farahpour and
Ceylon cinnamon (E) -Cinnamaldeído Cicatrização de feridas Habibi (2012)

Antioxidante, inibidor de
Alcalóides, flavonóides, saponinas, Oludare et al.
peroxidação lipídica,
fenólicos, antraquinonas, taninos, (2000), Phan et
antiinflamatório,
Chromolaena odorata glicosídeos, estigmasterol, al. (2001a, b),
aumento da síntese de Vijayraghavan et
escutelarina, éter tetrametílico (scu),
colágeno, cicatrização de al. (2017a, b)
ácido cromomórico C-1
feridas
Antioxidante,
Oleorresina, diterpenos, antiinflamatório,
Copaifera langsdorffii Paiva et al. (2002)
sesquiterpenos, ácido copaívico antimicrobiano,
cicatrizante de feridas
Antioxidante,
Chereddy et al.
antiinflamatório,
Curcuma longa Curcumina/curcuminóides (2013), Mohanty
antimicrobiano, and Sahoo (2017)
cicatrizante de feridas
Alcalóides, flavonóides, glicosídeos,
Euphorbia hirta Linn. Anti-inflamatório Tuhin et al. (2017)
saponinas, taninos
Antibacteriano,
Murti and Kumar
antifúngico, migração
Ficus racemosa L. Acetato de lupeol, β-sitosterol (2012), Bopage et
celular aprimorada, al. (2018)
cicatrização de feridas
Alcalóides de pirrolizidina, N-óxido de Reddy et al.
Heliotropium indicum Cicatrização de feridas (2002)
indicina, taninos, saponinas, heliotrina
Antimicrobiano,
Plagiochasma Saponinas, flavonóides e Singh et al.
antioxidante, cicatrizante (2006)
appendiculatum Lehm. sesquiterpenos
de feridas
Reddy et al.
Plumbago zeylanica Terpenóides e alcalóides Cicatrização de feridas (2002)

Geléia real Proteínas de geléia real Cicatrização de feridas Fujii et al. (1990)

Flavonóides, taninos e outros Omale and Isaac

Saba florida Benth Cicatrização de feridas (2010)
metabólitos secundários
Triterpenóides, esteróides e Veerapur et al.
Wrightia tinctoria Cicatrização de feridas (2004)
saponinas
Yadav et al.
Phyllanthus Filantina, hipofilantina Cicatrização de feridas (2017)

955
 Tabela 1 Nutracêuticos/extratos vegetais com potencial para cicatrização de feridas
Triterpenóides (lupeol), óleos
aromáticos acre, taninos, saponinas, Upadhyay et al.
Jungle geranium Cicatrização de feridas (2014)
flavonóides (rutina, formononetina, β-
sitosterol)
Amora indiana, Morinda Fenóis, alcalóides, triterpenóides, Mathivanan et al.
Cicatrização de feridas (2006)
pubescens esteróides, ácidos carboxílicos
Alcalóides, glicosídeos, esteróides,
Ixora coccinea óleos fixos, terpenos, taninos e Cicatrização de feridas
flavonóides Upadhyay et al.
(2014)
Vitex trifolia; Vitex Óleo volátil, resina, terpenos, Cicatrização de feridas
altissima flavonóides, glicosídeos, alcalóides

4. Modelos de feridas e de cicatrização de feridas

Nos últimos anos, tem sido bem justificado que a incorporação de modelos in vivo e in
vitro é iminente para pesquisadores em todas as disciplinas científicas, especialmente na
pesquisa de tratamento de feridas. Isso não é surpreendente porque qualquer princípio
bioativo ou novo produto desenvolvido por pesquisadores ou indústrias farmacológicas
precisa de pesquisa básica e translacional para verificar, reproduzir e adquirir dados, pois
o resultado desta experimentação de modelo pode levar a resultados de ensaios pré-
clínicos e clínicos para melhorar a cura da ferida. Em geral, esses modelos são adotados
em uma ordem gradual que começa com ensaios in silicone e in vitro e modelos animais
in vivo seguidos por avaliações clínicas avançadas. Os modelos mais comumente usados
são resumidos abaixo por Wilhelm et al. (2017).

4.1 Ensaios In Vitro

Os ensaios in vitro são testes baseados em laboratório, que fornecem oportunidades

abundantes para observar o resultado dos materiais de teste/agentes de cura/extratos de
plantas/drogas em determinados ou vários tipos de células (por exemplo, fibroblastos e
queratinócitos) e ajudam a determinar quais concentrações do agente podem ser eficaz in
vivo. Ensaios in vitro trazem resultados rapidamente que ajudam o investigador não
apenas em custos, mas também em tempo. Além de fornecer resultados valiosos em um
curto espaço de tempo, eles possuem um apelo humanitário razoável, uma vez que
geralmente não envolvem o uso de animais ou humanos (Perez e Davis 2008). Outra
característica digna de nota dos testes in vitro é a capacidade de rastrear vários agentes
ou amostras simultaneamente. Além do acima, esses testes ajudarão na triagem da
resistência antimicrobiana de organismos patogênicos, mas também ajudarão a encontrar
concentrações inibitórias.

956
4.2 Modelos In Vitro de cicatrização de feridas

Os ensaios in vitro estão desempenhando um papel importante na descoberta da

eficiência de eliminação de vários agentes de cura contra muitos microorganismos
patogênicos e seus papéis no aumento do processo de cicatrização de feridas (Perez e
Davis 2008). Isso ajudará na investigação do efeito dos agentes de cicatrização de feridas
usados em um(ns) modelo(s) animal(is). Esses testes permitem encontrar a presença de
agentes de teste no sangue, fluido da ferida e outros, como células do sistema
imunológico e proteases enzimáticas, que podem ser influenciadas pela atividade dos
agentes de teste. No entanto, os ensaios in vitro não são capazes de imitar ou reproduzir
condições como fases naturais de cicatrização de feridas, respostas imunológicas ou
doenças como diabetes.

Os ensaios in vitro foram reconhecidos por seu papel na integração de uma variedade de
células e tecidos. Uma técnica in vitro mais usada para estudar a cicatrização de feridas é
o ensaio de raspagem, no qual uma monocamada confluente de células é riscada para
formar uma lacuna artificial e as células são observadas enquanto migram e proliferam
para fechar a lacuna (Ling et al. 2007). É um ensaio comparativamente simples para
avaliar o efeito de compostos terapêuticos, alterações bioquímicas endógenas e
alterações genéticas no comportamento da monocamada (Stamm et al. 2016). No
entanto, esses experimentos consomem tempo igual aos equivalentes in vivo e são
frequentemente considerados não representativos dos processos de cura em humanos e
podem ter níveis complexos de variação experimental baseada em experimentos (Ansell
et al. 2012; Johnston et al. 2016; Pampaloni et al. 2007).

Por outro lado, a microscopia de lapso de tempo de ensaios de raspagem representa um

teste apropriado para examinar os resultados do processo celular, que pode ser usado
como base para estudos posteriores (Pampaloni et al. 2007). No entanto, na realidade, as
células in vivo existem em um ambiente fisiológico tridimensional que não é imitado por
monocamadas, porque o ambiente in vivo é totalmente diferente do plástico no qual são
rotineiramente cultivadas (Stamm et al. 2016). No entanto, essa lacuna pode ser superada
usando técnicas avançadas de cultura 3D. Substitutos de pele disponíveis
comercialmente recentes permitem e imitam a estrutura da pele humana (Groeber et al.
2011), a maioria da qual consiste em camadas separadas compreendendo componentes
dérmicos e epidérmicos. A derme é simulada usando um hidrogel, por exemplo, colágeno,
povoado com fibroblastos dérmicos, sobre os quais camadas de queratinócitos são
cultivadas (Stamm et al. 2016).

957
Como os substitutos da pele 3D são mais complexos na natureza do que as células em
monocamada, os efeitos das células do sistema imunológico e dos vasos sanguíneos
ainda estão excluídos. Após o ferimento com bisturi ou biópsia por punção, microscopia
de lapso de tempo, análise histológica ou PCR podem ser realizados para investigar as
taxas de fechamento, morfologia celular e do tecido e expressão gênica. Esses
substitutos de pele também podem ser usados para avaliar a toxicologia ou o modo de
ação de uma variedade de tratamentos tópicos; no entanto, eles são limitados em sua
capacidade de avaliar as respostas a novos curativos ou outros modos de aplicação
(Groeber et al. 2011). Processos celulares básicos, como a secreção de produtos
bioquímicos que regulam a cicatrização de feridas, também podem ser elucidados usando
esta abordagem experimental (Maarof et al. 2016); no entanto, a capacidade de cultivar
substitutos da pele por um longo período de tempo pode dificultar seu uso no estudo das
fases avançadas posteriores da cicatrização cutânea (Ansell et al. 2012). Entretanto,
existem algumas novas técnicas que foram desenvolvidas para superar essa limitação: a
cultura ex vivo de amostras de pele humana demonstrou permitir que os experimentos
sejam conduzidos por períodos mais longos de tempo, por exemplo, no estudo da doença
queloide (Bagabir et al. 2012).

4.3 Modelos In Vivo

Nos últimos anos, a sujeição de modelos animais em investigações de cicatrização de

feridas aumentou tremendamente, pois coincide com o número de novos produtos
introduzidos anualmente. Curiosamente, o número de modelos de cicatrização de feridas
em animais quase dobrou a cada 10 anos. No entanto, vários tipos de modelos in vivo
estão disponíveis e cada um tem alguns benefícios e desvantagens exclusivos.

4.4 Pequenos animais como modelos de cicatrização de feridas

Numerosos estudos anteriores estabeleceram extensivamente modelos animais

apropriados para investigações de tratamento de feridas em mamíferos, e a maioria deles
tem sucesso em superar algumas das dificuldades logísticas associadas aos ensaios
clínicos. O sistema de modelo animal inclui não apenas animais superiores, mas também
envolve Drosophila melanogaster e peixes-zebra para investigar o reparo de barreira em
superfícies epiteliais, fornecendo informações importantes sobre os processos envolvidos
(Razzell et al. 2011; Richardson et al. 2013).

Apesar das opções variadas e de muitas espécies animais disponíveis para estudar o
processo de cicatrização de feridas em humanos, os roedores estão sendo os animais
mais aceitos e geralmente empregados, com a maioria dos experimentos realizados em
camundongos (Galiano et al. 2004; Ansell et al. 2012; Dunn et al. 2013). De muitas
958
maneiras, eles são benéficos para a investigação do cuidado de feridas por várias razões,
pois esses pequenos modelos de animais são menos caros, fáceis de obter e manusear e
requerem menos espaço. Além do acima exposto, esses animais geralmente têm vários
descendentes, que se desenvolvem rapidamente, permitindo que as investigações
prossigam por várias gerações. Não apenas esses animais geralmente têm modos
acelerados de cura em comparação com os humanos; assim, a duração do experimento
leva dias, em comparação com semanas ou meses necessários para experimentos em
humanos (Nunan et al. 2014). Além disso, poucas espécies de pequenos mamíferos
podem ser alteradas geneticamente facilmente e fornecem um modelo de ferida mais
próximo das doenças humanas. Além disso, outras vantagens de envolver esses
pequenos animais em experimentos usando micróbios como bactérias ou infecção por
vírus para o desenvolvimento de modelos de doenças infecciosas (Grose e Werner 2004;
Scheid et al. 2000).

4.5 Animais Superiores como Modelos de Cicatrização de Feridas

Embora modelos de feridas de rato, camundongo, coelho e cobaia existam e na prática, a

pele de suíno é estrutural e bioquimicamente mais semelhante aos humanos (Sullivan et
al. 2001; Seaton et al. 2015) do que outros mamíferos usados para estimar terapias de
cura de feridas (Watson e Moore, 1990; Summereld e Ricklin 2015). Porém, suínos são
empregados com menos frequência do que roedores em estudos de cicatrização cutânea,
por motivos como alto custo, falta de ferramentas genéticas e dificuldade de manuseio.
Além do acima, outros sistemas de modelo estão disponíveis para estudar os aspectos
mecanísticos do processo de cicatrização, por exemplo, a câmara do ouvido de coelho e
o estudo da câmara de Algire usados para visualizar a vascularização e determinar a
angiogênese (Nunan et al. 2014).

4.6 Modelos humanos de cicatrização de feridas

Apesar de haver a disponibilidade de vários modelos animais para vários experimentos,

suas diferenças anatômicas e fisiológicas afetam distintamente o resultado dos
mecanismos de cura. A fim de evitar a desinformação específica da espécie, o
envolvimento humano direto ou a exigência de amostra humana é necessária para
dissecar os mecanismos reais de cicatrização em detalhes. Para apoiar isso, muitos
novos avanços moleculares e tecnológicos inovadores (Ho et al. 2017) estão disponíveis
em nossas mãos, o que nos permite investigar pequenas quantidades de amostras de
tecido de pele humana, tornando possível decifrar os mecanismos de cicatrização de
feridas in situ em humanos.

959
É óbvio esperar que sistemas de modelos baseados em humanos aprimorados
definitivamente sirvam como uma escolha melhor para revelar o processo real de
cicatrização de feridas agudas, visto que a patologia e a fisiologia da cura que ocorrem
entre o paciente são mais bem correlacionadas e idênticas; no entanto, este estudo
requer mais voluntários humanos para gerar vários tipos de modelos de feridas. Para
apoiar essa afirmação, uma revisão de tais modelos foi recentemente apresentada por
Wilhelm et al. (2017) que são destacados abaixo.

De acordo com Gao et al. (2013), feridas de espessura parcial ou total podem ser usadas
para recriar uma situação clínica mais precisa, onde o dano ao tecido ocorre em conjunto
com a perda de tecido. Isso pode ser feito excisando o tecido ou obtendo uma biópsia por
punção para gerar esses tipos de feridas. As feridas dessa natureza normalmente
cicatrizam por nova epitelização, reconstituição dérmica e contração da ferida, permitindo-
nos analisar as diferentes fases da cicatrização ou de todo o processo de cicatrização.

Espessura parcial: De acordo com Xu et al. (2012), uma lesão de espessura parcial é
limitada à epiderme e derme superficial, sem danos aos vasos sanguíneos dérmicos. A
cura ocorre pela regeneração de outros tecidos. Para demonstrar isso, alguns métodos
padrão estão disponíveis, incluindo a remoção da fita. Um relatório de Lademann et al.
(2009) descreveram o termo “remoção de fita adesiva” como a lesão de espessura parcial
mais simples da pele que envolve a remoção do estrato córneo com fita adesiva. Nesse
modelo de ferimento, o compartimento epidérmico geralmente fica intacto. No entanto, o
relatório alertou que, devido à remoção das camadas do estrato córneo, a permeabilidade
da pele fica temporariamente comprometida, mas isso pode ser medido usando a análise
de perda de água trans epidérmica.

Modelo de ferida abrasiva: Um modelo de ferida ligeiramente mais invasivo foi

estabelecido por Wilhelm et al. (2017). Neste relatório, os autores afirmaram que induzem
abrasões uniformes e podem ser usados para avaliar as propriedades de cicatrização de
uma variedade de produtos para o cuidado de feridas (Wigger-Alberti et al. 2009). Este
modelo consiste em infligir abrasões superficiais padronizadas por lixamento repetido da
pele com uma escova cirúrgica até que os primeiros sinais de brilho uniforme e
sangramento pontuado também sejam observados.

Modelo de bolha: Este modelo foi originalmente projetado para medir as concentrações de
drogas em várias partes da pele (Kiistala 1968), mas posteriormente também foi usado
para investigações de cicatrização de feridas. A bolha é formada a partir da separação da
epiderme e derme, na membrana basal entre a lâmina lúcida e a lâmina densa (Chávez et
al. 2011).
960
Modelos de feridas de espessura total: estudos anteriores (Brown et al. 2002; Sørensen et
al. 2010) sugeriram com base em seus resultados que este modelo requer a remoção
completa da epiderme e derme até a profundidade dos planos fasciais ou gordura
subcutânea e rompimentos vasos sanguíneos dérmicos. Isso pode ser feito usando uma
série de dispositivos para infligir uma lesão de uma forma padronizada (por exemplo,
biópsia por punção, bisturi, dermátomo e laser). É importante ressaltar que as feridas de
biópsia por punção são amplamente utilizadas na pesquisa de cicatrização de feridas,
tanto em modelos animais quanto em estudos de voluntários humanos. Portanto, tanto os
estudos animais quanto os clínicos foram usados com sucesso para elucidar os
mecanismos gerais e os resultados da cicatrização de feridas, ao passo que pode ser
difícil analisar mecanismos individuais e processos celulares usando ensaios in vitro.

5. Formulações de nutracêuticos e seus sistemas de aplicação para

cicatrização de feridas
Os nutracêuticos têm ganhado mais atenção nos últimos anos devido à sua segurança
reconhecida e resultados nutricionais e terapêuticos promissores. Embora possa ser fácil
para um inovador ou fabricante desenvolver um produto farmacêutico (comprimidos, pós,
cápsulas, supositórios, etc.) que contenha um alimento bioativo, no entanto, é
relativamente desafiador obter uma biodisponibilidade satisfatória para tais nutracêuticos
(Gaurav et al. 2012; Johnson e Wang 2015). A biodisponibilidade é frequentemente
prejudicada pelos seguintes fatores, como baixa solubilidade, estabilidade e/ou
permeabilidade do componente bioativo. O desenvolvimento avançado de entrega
direcionada usando nanotecnologia para aplicações farmacêuticas abriu um novo
caminho para o aumento da estabilidade, solubilidade e/ou permeabilidade de alguns dos
nutracêuticos desafiadores (Yallapu et al. 2011, 2013).

Ao mesmo tempo, os nutracêuticos também estão recebendo uma aceitação crescente do

consumidor, gerando demanda por inovações de novos produtos com base em sistemas
de entrega superiores. A maioria dos sistemas de entrega atuais para produtos
nutracêuticos são baseados na aplicação ou ingestão direta (Gaurav et al. 2012). Esses
sistemas de administração oral apresentam problemas relativos ao seu odor e sabor
inaceitáveis, bem como à degradação do nutracêutico em si durante seu transporte do
sistema digestivo para o local de ação desejada. O sistema de entrega direta, como a
aplicação tópica, contorna alguns desses problemas devido à sua aplicação perto ou no
local da aflição (Hassan 2012).

961
Nos últimos anos, houve avanços significativos com sistemas de entrega de biomateriais
para satisfazer a necessidade clínica, especialmente na cicatrização de feridas. No
entanto, ainda existem algumas limitações em relação às terapias que envolvem
proteínas, genes e drogas de pequenas moléculas. Uma vez que esses problemas sejam
resolvidos, esses sistemas de entrega podem efetivamente permitir seu benefício
terapêutico completo (Boateng et al. 2008; Koria 2012). No contexto da cicatrização de
feridas, um sistema de entrega deve cumprir o seguinte para sua carga: (a) manter a
bioatividade por meio da proteção da proteólise no leito da ferida, (b) localizar a
biodisponibilidade, evitando a rápida diluição no fluido da ferida e absorção e distribuição
sistêmica, e (c) facilitar a liberação ou apresentação dentro da ferida a uma taxa e
duração fisiologicamente relevantes. Se esses objetivos forem alcançados, um sistema de
administração bem-sucedido também minimizará a dosagem e a frequência de aplicação
necessárias para a eficácia. Uma revisão detalhada por Johnson e Wang (2015) resumiu
e destacou os avanços recentes em sistemas de entrega de drogas para aplicações de
cicatrização de feridas e também identificou cinco tipos de veículos recentemente
desenvolvidos, como (1) hidrogéis, (2) scaffolds 75, (3) partículas, (4) complexos e (5)
coacerva e enfatizou suas vantagens e eficácia na cicatrização de feridas sem quaisquer
efeitos colaterais.

Hidrogéis são um dos veículos de entrega mais utilizados. Eles são versáteis, capazes de
se formar a partir de quase qualquer polímero solúvel em água. Eles também apresentam
uma série de parâmetros ajustáveis, como porosidade, taxa de expansão e densidade de
reticulação para oferecer algum controle sobre a taxa de liberação. Uma vantagem final é
que, até certo ponto, eles podem imitar as propriedades mecânicas do tecido de
granulação e manter um ambiente de ferida úmido (Boateng et al. 2008; Drury e Mooney
2003).

Scaffold é um termo geral, mas nesta seção discutiremos especificamente scaffolds

porosos que são implantados em vez de injetados ou polimerizados in situ, como é
possível com os hidrogéis. Isso geralmente não é uma desvantagem para aplicações de
cicatrização de feridas, pois a maioria das feridas é superficial e relativamente fácil de
acessar para manipulação. Na verdade, um andaime pode ser a melhor escolha quando
são desejadas boas propriedades mecânicas ou um longo tempo de degradação. Sua
estrutura 3D também incentiva a infiltração celular e permite a padronização estratégica
de estímulos para direcionar com precisão a regeneração do tecido (Drury e Mooney
2003). Os materiais naturais são frequentemente utilizados em andaimes semelhantes
aos hidrogéis, embora não precisem ser necessariamente hidrofílicos.
75 Estruturas porosas tridimensionais
962
Partículas. As nanopartículas e micropartículas são outro tipo altamente estudado de
sistema de distribuição de drogas que possui certas vantagens sobre os hidrogéis e
estruturas. Com relação às aplicações de cicatrização de feridas, as partículas podem ser
injetadas por uma agulha de calibre fino no tecido saudável ao redor da ferida de modo a
não complicar a cicatrização dentro do leito da ferida. Eles também podem ser ajustados
através de vários parâmetros para ter perfis de liberação complexos não obtidos com géis
e scaffolds (Soppimath et al. 2001; Kumari et al. 2010).

Complexos e conjugados. Um quarto tipo de sistema de entrega compreende complexos

e conjugados. Os conjugados são normalmente formados por ligações químicas,
enquanto os complexos são normalmente formados por interações físicas. Ambas as
abordagens buscam sequestrar drogas solúveis para estabilizar e estender sua meia-vida
ou para fornecer direcionamento e facilitar suas interações com os receptores celulares. O
polietilenoglicol (PEG) foi anexado ao fator de crescimento de fibroblastos-1 (FGF-1) para
melhorar sua estabilidade térmica e estrutural in vivo (Huang et al. 2011). Outra
abordagem muito interessante envolve a engenharia de miméticos de ECM, considerando
sua importância na orquestração do processo regenerativo (Lutolf e Hubbell 2005;
Uebersax et al. 2009; Schultz e Wysocki 2009).

Coacervatos são uma nova classe interessante de veículos de entrega de drogas,

desenvolvida apenas recentemente para a liberação controlada de proteínas e drogas de
moléculas pequenas. Coacervados são gotículas líquidas de tamanho nanométrico,
mantidas juntas e separadas de seu ambiente por forças hidrofóbicas (Overbeek e Voorn
1957).

6. Extratos nutracêuticos/fitoquímicos de C. odorata para cicatrização

de feridas
Embora muitas plantas que curam feridas sejam relatadas e sirvam como fontes
importantes para uma variedade de nutracêuticos/extratos/fitoquímicos (listados na Tabela
1), é muito difícil discutir todos eles em uma revisão ou capítulo de livro. Portanto, o
objetivo do presente capítulo é fornecer informações atualizadas sobre as propriedades
de C. odorata (Fig. 1a-c), uma das plantas potencialmente cicatrizantes de feridas que
pertence à família Compositae ou Asteraceae de plantas com flores que está sendo
investigada por sua atividade farmacológica diversa. A família Compositae também é rica
em terpenóides (óleo essencial), que podem ser usados para dar sabor a alimentos ou
licores. Os óleos voláteis da planta são considerados uma possível fonte de nutracêuticos

963
para fins clínicos. As substâncias fenólicas também são importantes na preparação de
medicamentos modernos (Heywood et al. 1977). C. odorata tem vários vernáculos
comuns, que estão listados na Tabela 376.

Fig. 1 (a – c) Imagens de C. odorata

C. odorata (L.) King e Robinson (anteriormente conhecido como Eupatorium odoratum L.)
pertence ao reino Plantae (Tabela 2). O gênero Chromolaena inclui 1200 espécies de
pequenas ervas, arbustos ou sob arbustos distribuídos principalmente nos EUA, com
alguns na Europa, Ásia e África tropical (GISD 2006). É uma planta ornamental
considerada uma das 100 ervas daninhas ambientais mais invasivas de terrenos baldios,
margens de estradas e outras áreas expostas em muitas partes do mundo (Chakraborty
et al. 2011).

Embora C. odorata seja conhecido por seu impacto negativo como uma erva daninha
invasora, os usos medicinais potenciais são enormes (Vaisakh e Pandey 2013). Muitas
partes da planta C. odorata são usadas no sistema de medicina indígena. Na verdade, os
curandeiros tradicionais em algumas partes da África exploram a planta como uma fonte
de remédio na cura de diferentes doenças, que estão listadas na Tabela 4. A planta
também é conhecida por suas propriedades medicinais, especialmente no tratamento de
feridas (Phan et al. 2001a, b).

Os fitoquímicos ou princípios bioativos são substâncias/produtos químicos naturais

sintetizados durante o metabolismo secundário e são chamados de metabólitos primários
e secundários (Brielmann et al. 2006). Fitoquímicos específicos foram identificados como
sendo responsáveis por determinadas ações farmacológicas e propriedades medicinais
dessas plantas. Embora os metabólitos primários desempenhem papéis essenciais na
vida das plantas, os metabólitos secundários são frequentemente referidos como
fitoquímicos e geralmente são usados em mecanismos de defesa contra inimigos como
animais herbívoros, vírus, parasitas e bactérias, dos quais 12.000 foram isolados e são
76 Suprimida. Querendo saber veja original, pág. 549
964
preferidos como opções terapêuticas alternativas às drogas sintéticas (Lai 2004). Com o
tempo, as plantas contendo esses fitoquímicos mostraram servir como fontes de remédios
para humanos e animais (Omokhua et al. 2016) porque podem possuir atividades
biológicas, incluindo antioxidante, antibacteriana, antifúngica, antipirética, anti-helmíntica,
antiespasmódica, antiinflamatória, e efeitos de cicatrização de feridas. Os fitoquímicos
também podem ser usados como antisépticos, fragrâncias, corantes, inseticidas,
estimulantes e venenos (Zulak et al. 2006).

Tabela 2 Descrição geral, distribuição e usos farmacológicos de C. odorata

Descrição geral (Chakraborty et Usos

C. odorata sinônimos Distribuição
al. 2011) farmacológicos
Reino Plantae – plantas
Tracheobionta –
Sub-reino plantas Para o tratamento
vasculares de cortes, feridas,
amenorréia,
Spermatophyta – amigdalite, mordida
Superdivisão plantas com (sanguessuga) em
sementes humanos;
Eupatorium affine Hook & Arn.
Magnoliophyta – cataplasma; catarro;
Divisão Eupatorium brachiatum Wikstrom
plantas com flores resfriado;
Eupatorium clematitis DC
descongestionante;
Magnoliopsida – Eupatorium conyzoides M. Vahl América do
Classe diabetes; diarréia;
dicotiledôneas Eupatorium divergens Less. Norte, da
febre; gargarejo;
Eupatorium floribundum Kunth Flórida e
Subclasse Asteridae hemostática;
Eupatorium graciliflorum DC. Texas ao
rouquidão;
Ordem Asterales Eupatorium odoratum L. México e
inflamação;
Eupatorium sabeanum Buckley Caribe, Ásia
Asteraceae – laringite; brutus;
Eupatorium stigmatosum Meyen & tropical,
família Aster leptospirose;
Família Walp. África
(família do coqueluche;
Osmia conyzoides (Vahl) Sch.-Bip. Ocidental e
girassol) reumatismo;
Osmia divergens (Less.) Schultz-Bip. partes da
vermífugo;
Chromolaena DC. Osmia floribunda (Kunth) Schultz- Austrália
Gênero analgésico;
— completa Bip.
antipirético;
Osmia graciliflora (DC) Sch. Bip.
Chromolaena antimicrobiano;
Osmia odorata (L.) Schultz-Bip.
odorata (L.) King antimalárico
& H. Rob. — Jack (Vijayaraghavan et
in the bush al. 2013) Produção
Espécie Nomes comuns: de biogás
erva daninha de (Jagadeesh et al.
Sião, arbusto de 1990)
Natal e flor de fio
dental comum
Forma povoamentos densos impedindo o estabelecimento de outras espécies, tanto por
C. odorata competição quanto por efeitos alelopáticos. Quando seco, torna-se um combustível, o que
Impactos pode provocar incêndios florestais (PIER 2001). Causa problemas de pele e asma em
gerais pessoas com alergia. É uma erva daninha importante em plantações e áreas de cultivo,
incluindo plantações de borracha, dendê, silvicultura e cafeeiros

A extração fitoquímica envolve a separação da fração medicinalmente ativa da planta

usando solventes seletivos. Isso inclui classes de preparações conhecidas como
decocções, infusões, extratos fluidos, tinturas, extratos pilulares ou extratos em pó. Os

965
fitoquímicos encontrados na maioria das plantas medicinais incluem alcalóides, terpenos
e glicosídeos (taninos, saponinas, antraquinonas, flavonóides, etc.) (Trease e Evans
2002). O extrato de ervas assim obtido pode estar pronto para uso como um agente
medicinal como tal, ou pode ser posteriormente processado para ser incorporado em
qualquer forma de dosagem. Um extrato pode ser posteriormente processado por meio de
várias técnicas de fracionamento para isolar entidades químicas individuais para serem
usadas como drogas modernas (Handa 2008). Existem muitos processos patenteados em
todo o mundo para a extração de ingredientes vegetais.

C. odorata possui muitos metabólitos secundários, como terpenos, alcalóides e

glicosídeos. Polifenóis como flavonóides e taninos são abundantes na família Asteraceae.
Muitos desses fitoquímicos possuem várias atividades farmacológicas que são muito úteis
para o bem-estar humano (Panda et al. 2010). Estudos fitoquímicos nos extratos de C.
odorata de várias partes da planta (Fig. 2) indicaram a presença de taninos, terpenóides,
glicosídeos cardíacos, saponinas, antraquinonas, fenóis e alcalóides (Anyasor et al. 2011;
Vijayaraghavan et al. 2013). Cerca de 44 compostos diferentes foram isolados de extratos
de C. odorata usando GC-MS (Raman et al. 2012). Devido à presença desses
fitoquímicos, a planta é considerada anti-helmíntica (Panda et al. 2010), antioxidante
(Raman et al. 2012; Vijayaraghavan et al. 2013), analgésica, antiinflamatória, antipirética,
antiespasmódica (Owoyele e Soladoye 2006; Chakraborty et al. 2011), propriedades
antimicrobianas (Chomnawang 2005), antimaláricas e antioxidantes, bem como potencial
de cicatrização de feridas (Anyasor et al. 2011). Eupolin, um produto de folhas de C.
odorata para queimaduras e feridas de tecidos moles, foi licenciado para uso no Vietnã
(Raina et al. 2008).

Fig. 2 Nutracêuticos/extratos vegetais de C. odorata com potencial para

cicatrização de feridas

966
Investigação anterior das folhas e caules de C. odorata revelou a presença de óleos
essenciais, esteróides, triterpenos e flavonóides (Suksamran et al. 2004). As flores desta
espécie de planta foram submetidas à investigação de óleos essenciais, gorduras,
alcalóides e flavonóides (Odunbaku et al. 2008). Os constituintes químicos isolados
relatados de vários extratos de C. odorata são mostrados na Tabela 5.

Tabela 5 Extratos fitoquímicos e seus constituintes químicos de várias partes da planta C. odorata
Partes da planta Constituintes químicos Referências
3,5,4’-Trihidroxi-7-metoxiflavanona
Flor (extrato aquoso) 5,7,3’’’’’-Trihidroxi-5’-metoxiflavanona Odunbaku et al. (2008)
3,5,7-Trihidroxi-4’-metoxiflavanona
Akuranetin
Persicogenina
5,6,7,4’-Tetrametoxiflavona
4’-hidroxi-5,6,7-trimetoxiflavona Suksamran et al. (2004),
Flor Pisutthanan et al. (2005)
2’-hidroxi-4,4’,5’,6’-tetrametoxicalcona
4,2’-Diidroxi-4’,5’,6’-trimetoxiflavona
Acacetina
Luteolina
5,7-Diidroxi-6-4’-dimetoxiflavona (mais recente)
2'-Hidroxi-3,4,4’,5’,6’-pentametoxi-chalcona
Planta inteira – partes 2',4-Dihidroxi-4',5',6'-trimetoxialcona
acima do solo (extrato Éter tetrametílico de Scutellarein Ling et al. (2007)
de diclorometano) Sinensetina
2'-Hidroxi-4,4',5',6'-tetrametoxicalcona
Éter 4’-metílico de aromadendrina
Eriodictiol 7,4’-éter dimetílico
Éter 4’-metílico de naringenina
Éter 4’-metílico da taxifolina; éter 7-metílico de taxifolina
Planta inteira (etanol e Suksamran et al. (2004),
Quercetina 7,4’-éter dimetílico Ling et al. (2007)
extrato de metanol)
Kaempferol 4’-dimetiléter
Quercetina 3-O-rutinósido
Quercetina 4’-éter metílico
Éter de quercetina 7-metílico
Tamarixetina
Triidroximometoxiflavanona
Pentaetoxiflavanona
Diidroxitrimetoxicalcona
Eupatilin
5,6,7,4’-Tetrametoxiflavona
5-Hdroxy6,7,3’,4’-tetrametoxiflavona
Folhas (extrato de Kaempferide Phan et al. (2001b)
etanol) Ácido protocatecuico
Ácido p-cumarico
Ácido p-hidroxibenzoico
Ácido ferúlico
Ácido vanílico
Sinensetina
Rhamsetin
Tetrahidroximometoxiflavanona

967
6.1 Constituintes Químicos de C. Odorata

C. odorata foi objeto de análises químicas em vários estudos de pesquisa (Zhang et al.
2012; Heiss et al. 2014). Os grupos químicos que foram identificados nesta planta são
monoterpenos, hidrocarbonetos sesquiterpenos, triterpenos/esteróides, alcalóides e
flavonóides. As folhas desta planta são uma fonte rica de flavonóides, incluindo
quercetina, sinensetina, sakuranetina, padmatina, caempferol e salvigenina, que foram
isolados e identificados. As folhas de C. odorata apresentam a maior quantidade de
aleloquímicos (Afolabi et al. 2007) isolados de uma planta. Um estudo no Vietnã mostrou
que o extrato aquoso da folha continha flavonóides (salvigenina, sakuranetina,
isosacuranetina, caempferida, betulenol, 2-5-7-3 tetra-ometil quercetagetina, tamarixetina,
duas chalconas e odoratina e seu composto alcoólico), óleos essenciais (geyren, acetato
de bornil e beta eubeden), triterpenóides saponina, taninos, ácidos orgânicos e
numerosas substâncias residuais (Zhang et al. 2012). Outro estudo de Heiss et al. (2014)
mostraram que o extrato de etanol bruto de C. odorata contém ácidos fenólicos (ácidos
protocatecuico, p-hidroxibenzóico, p-cumárico, ferúlico e vanílico) e misturas complexas
de agliconas flavonóides lipofílicos (flavanonas, flavonóis, flavonas e chalconas). Até o
momento, estudos sobre C. odorata resultaram no isolamento de 17 compostos, como
5aα, 6,9,9aβ,10-pentahydro-10β-hydroxy-7-methylanthra [1,2-d][1,3]dioxol-5-ona, 1,2-
metilenodioxi-6-metilantraquinona, 3-hidroxi-1,2,4-trimetoxi-6-metilantraquinona, 3-hidroxi-
1,2-dimetoxi-6-metilantraquinona e 7-metoxi-7-epimedioresinol, bem como 12 compostos
conhecidos, incluindo odoratina, ácido 3β-acetiloleanólico, ácido ursólico, ombuin, 4,2’-
dihidroxi-40,50,60-trimetoxichalcona, (–)-pinoresinol, austrocortinina, ácido tiansico,
cleomiscosin D, (–)-medioresinol, (–)-iringaresinol e cleomiscosina A (Zhang et al. 2012). A
Figura 3 mostra a estrutura e a composição de alguns dos princípios bioativos importantes
em C. odorata, como estigmasterol (1), escutelarina, éter tetrametílico (scu, 2),
flavonóides (3a – 3l) (Pandith et al. 2013a, b), e o composto de fitoprostano ácido
cromomórico C-1 (Heiss et al. 2014).

6.2 Atividades farmacológicas de extratos de folhas de C. Odorata

Na África, Tailândia e Vietnã, o suco da folha é usado como hemostático em feridas (Phan
et al. 2001a) e como antiinflamatório, e também a decocção das flores é usada como
tônico, antipirético e tônico cardíaco (Bunyapraphatsara e Chokechajiaroenprom 2000).
Os extratos de folhas têm sido usados para o tratamento de picada de sanguessuga,
feridas em tecidos moles, feridas queimadas, infecção de pele e dento-alveolite (Phan et
al. 2001b; Owoyele et al. 2008). A Figura 4 listou várias atividades farmacológicas de
extratos de folhas de C. odorata. Outros usos dos extratos de folhas incluem o tratamento
968
de diabetes (infusão de folhas) e erupções cutâneas (folhas esmagadas) (Obute e Adubor
2007). Uma formulação preparada a partir do extrato aquoso das folhas foi licenciada para
uso clínico no Vietnã para tratar irritações da pele (Ling et al. 2007). Mais suporte para o
uso medicinal das folhas inclui um estudo que mostrou que o extrato de metanol das
folhas tinha propriedades antiinflamatórias, antipiréticas e antiespasmódicas em
camundongos (Taiwo et al. 2000). O extrato aquoso da folha apresentou atividade
antiinflamatória em rato (Vijayaraghavan et al. 2017a, b). Além do acima, extratos de
folhas foram encontrados para estimular a proliferação de fibroblastos e retardar os sinais
visíveis de envelhecimento da pele, como rugas e hiperpigmentação. Esse conhecimento
foi usado para formular uma composição cosmética contendo extratos de C. odorata para
a prevenção de doenças normais da pele devido ao crono ou foto envelhecimento
(Donovan 2007).

969
 Fig. 4 Várias atividades farmacológicas de extratos de folhas de C. odorata

6.3 Agentes derivados de plantas e seu mecanismo na cicatrização de feridas

O uso de plantas medicinais na área da saúde é uma prática comum. Foi relatado que
várias plantas medicinais possuem atividade de cicatrização de feridas e são úteis no
tratamento de feridas (Soni e Singhai 2013). Para apoiar esta afirmação, um estudo
(Manju et al. 2013) descobriu que quase 31% dessas plantas foram usadas para tratar
feridas, 29% foram usadas para cortes e 10% para queimaduras, enquanto 22% foram
usadas para cortes e feridas. Algumas dessas plantas foram testadas cientificamente para
avaliação de sua atividade de cicatrização de feridas em diferentes modelos
farmacológicos e pacientes, mas o potencial da maioria permanece inexplorado. Em
alguns casos, os constituintes químicos ativos foram identificados (Biswas e Mukherjee
2003). Além disso, as plantas aromáticas têm uma longa história de uso no tratamento de
feridas. Os óleos essenciais obtidos de várias partes das plantas são muito eficazes no
tratamento de feridas de pequeno a médio porte, abrasões da pele, escoriações,
970
infecções da pele e outros problemas de saúde tópicos, desde que uma concentração
apropriada do óleo essencial seja usada (Kerr 2002).

Muitos experimentos biológicos, bem como estudos de validação farmacêutica

(Sirinthipaporn e Jiraungkoorskul 2017; Stanley et al. 2017), revelaram que vários extratos
de ervas promovem a cicatrização mais rápida de feridas do que grupos de controle de
referência padrão e não medicamentosos. Vários metabólitos secundários, nutracêuticos
e compostos ativos isolados de plantas foram demonstrados como princípios ativos
responsáveis por facilitar a cicatrização de feridas em modelos animais (Chaudhari e
Mengi 2006). Além disso, alguns dos exemplos mais importantes incluem taninos de
Terminalia arjuna (Chaudhari e Mengi 2006); ácido oleanólico de Anredera diffusa (Moura-
Letts et al. 2006); polissacarídeos de Opuntia ficus-indica (Trombetta et al. 2005);
gentiopicroside, sweroside e swertiamarin de Gentiana lutea (Ozturk et al. 2006);
derivados de shikonina (desoxissiconina, acetil shikonina, 3-hidroxi-isovaleril shikonina e
5,8-odimetil acetil shikonina) de Onosma argentatum (Ozgen et al. 2006); asiaticoside,
ácido asiático e ácido madecassic de Centella asiatica (Hong et al. 2005); quercetina,
isorhamnetina e kaempferol de Hippophae rhamnoides (Fu et al. 2005); curcumina de
Curcuma longa (Jagetia e Rajanikant 2004); oleorresina de Copaifera langsdorffii (Paiva et
al. 2002); proantocianidinas e resveratrol de uvas (Khanna et al. 2002); glicosídeos
iridóides acilados de Scrophularia nodosa (Stevenson et al. 2002); ácidos fenólicos
(ácidos protocatecuico, p-hidroxibenzóico, p-cumárico, ferúlico e vanílico) de C. odorata
(Phan et al. 2001a, b); fração de glicoproteína de Aloe vera (Choi et al. 2001); (+) - epi-
alfabisabolol de Peperomia galioides (Villegas et al. 2001); ácidos fucinólico e cimicifugico
de Cimicifuga spp. (Kusano et al. 2001); e xiloglucano de Tamarindus indica (Burgalassi et
al. 2000).

É importante observar que a cicatrização de feridas é complicada e envolve vários

processos, incluindo inflamação, epitelização, defesa antioxidante, alterações bioquímicas
(hidroxiprolina), granulação, neovascularização e contração da ferida (Joshi et al. 2013).
As plantas medicinais curam feridas por meio de vários mecanismos, como a regulação
positiva do fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) e o fator de crescimento
transformador beta 1 (TGF-β1), ativação do fator nuclear κBα e AMPK. Esses dadosappa B (NFkB), ativação da
interleucina-8 (IL-8), aumento da expressão de iNOS e colágeno alfa-1 tipo 1 e atividade
antioxidante (Mirmalek et al. 2016; Shen et al. 2017). É bem conhecido que o VEGF é
responsável pela angiogênese. Esses fatores de crescimento atuam sobre seus
respectivos receptores presentes nos queratinócitos e macrófagos e desempenham suas
funções importantes durante a cicatrização de feridas. A vascularização insuficiente é a

971
característica comum da ferida crônica e que não cicatriza. Em modelos animais
diabéticos, a cicatrização tardia de feridas foi demonstrada em que a vascularização
pobre é o fator responsável pelo fechamento tardio da ferida, epitelização e formação de
tecido de granuloma (Stallmeyer et al. 2001). O TGF-b é um fator importante nas
pesquisas recentes sobre cicatrização de feridas. Ele atua por meio de receptores
intracelulares de serina/treonina quinase para a via de mediadores intracelulares (SMAD)
que regula a proliferação celular (Klass et al. 2009). O TGF-b causa a migração de
leucócitos para o tecido lesado. Como resultado, os monócitos se transformam em
macrófagos e limpam a área de detritos e a si próprios para liberar TGF-b e outros fatores
de crescimento, que por sua vez ajudam na formação do tecido de granulação (Behm et
al. 2012).

A via da fosfatidilinositol 3-quinase (PI3K) desempenha um papel crucial na cicatrização

de feridas, tornando a proliferação de células. A ativação da via de PI3K causa
fosforilação de Akt (serina/treonina proteína quinase específica) em resíduos de serina
473. Esta via de sinalização revelou ser essencial para a migração direcional de células
epiteliais da córnea e da pele em resposta a feridas ou lesões (Zhao et al. 2006). As
plantas medicinais induzem a cicatrização de feridas por meio da via do fosfatidilinositol-
4,5-bifosfato 3-quinase (PI3K). Por exemplo, a tintura de C. officinalis estimula a
cicatrização de feridas por meio da ativação da via PI3K (Dinda et al. 2015). O extrato
aquoso de ginseng vermelho coreano também acende a angiogênese in vivo e in vitro por
meio da ativação das vias PI3K/Akt (Kim et al. 2007).

A ativação do NFkB é observada em células imunes e não imunes afetadas por

inflamação crônica. A ativação do NFkB aumenta a expressão de mediadores pró-
inflamatórios que organizam e sustentam os processos inflamatórios que causam danos
aos tecidos. No entanto, há muitos relatos de que a inibição de NFkB pode causar efeitos
prejudiciais aos organismos e às vezes pode causar doenças inflamatórias. O efeito
benéfico do NFkB nas células epiteliais foi relatado. A sinalização de NFkB tem um papel
importante na manutenção da homeostase imune em células epiteliais (Wullaert et al.
2011). Foi demonstrado que o extrato da planta pode promover a cicatrização de feridas
pela ativação de NFkB. Foi relatado que o extrato de n-hexano de C. officinalis aumenta a
atividade do fator de transcrição NFkB em queratinócitos humanos imortalizados e células
de fibroblastos dérmicos (Nicolaus et al. 2017).

A interleucina-8 (IL-8) é uma citocina pró-inflamatória. Os queratinócitos são ricos em

interleucina-8. O efeito da interleucina-8 recombinante na migração e adesão de
queratinócitos HaCaT foi demonstrado. Verificou-se que a IL-8 aumentou a migração e
972
adesão dos queratinócitos HaCaT. Curiosamente, também foi observado que a inibição da
fosfolipase C-g (PLC-g) erradicou completamente a migração de queratinócitos HaCaT.
Assim, a IL-8 direciona a migração pela via PLC-g. Extratos de plantas medicinais também
endossam a cicatrização de feridas pela ativação de IL-8. O extrato de n-hexano de C.
officinalis foi encontrado para aumentar a atividade de IL-8 em queratinócitos humanos
imortalizados (Nicolaus et al. 2017).

O óxido nítrico (NO) é um pequeno radical gasoso (Pang et al. 2018). A síntese de NO foi
relatada durante a fase proliferativa após a formação da ferida (Vijayaraghavan et al.
2017a, b). O aumento da expressão de óxido nítrico sintase induzível (iNOS), liberação de
NO regula a formação de colágeno, proliferação celular e contração de feridas (Witte e
Barbul 2002). Além disso, iNOS regula a proliferação de queratinócitos (Frank et al. 1998).
O extrato rico em polissacarídeos de C. ferrea tem aumentado a expressão de iNOS
(Pereira et al. 2016).

O colágeno alfa-1 (a-1) tipo 1 é codificado pelo gene Col 1a (I). Este gene contribui para a
cicatrização de feridas pela produção da cadeia pró-alfa-1 (I), que é um componente do
colágeno tipo 1. Esta cadeia pró-alfa-1 (I) se combina com outra cadeia pró-alfa-1 (I) e
também com uma cadeia pró-alfa-2 (I) para produzir uma molécula de pró-colágeno tipo
1, que passa por processamento e rearranjo para produzir fibras de colágeno tipo 1. Foi
demonstrado que a aplicação tópica de pomada de D. elata mostrou a regulação positiva
do colágeno alfa-1 tipo 1 codificado pelo gene Col 1a (I) que contribui para a cicatrização
de feridas.

A família Rho GTPase como Rac-1, Rho-A e Cdc-42 desempenha um papel fundamental
na proliferação e migração de células de fibroblastos (D’Souza et al. 2011). Reguladores
do ciclo celular, como ciclinas e quinase dependente de ciclina 1 e 2, estão envolvidos na
formação do citoesqueleto em fibroblastos (Yoshizaki et al. 2004). Foi relatado que C.
tamurana aumenta a migração de células de mamíferos em direção à área ferida por meio
da ativação dos genes Rac-1, Rho-A e Cdc-42 m-RNA e Cdk 1 e 2.

Muitas evidências sugerem que as feridas sofrem estresse oxidativo devido ao aumento
da atividade dos neutrófilos e oxidantes resultantes e atividade da mieloperoxidase (MPO;
uma enzima peroxidase). O aumento da atividade dos oxidantes resultantes dos
neutrófilos e da atividade da MPO causa dano ao tecido na ferida crônica (Song et al.
2008). A geração de espécies reativas de oxigênio (ROS) resulta em toxicidade celular por
meio do estresse oxidativo em feridas crônicas e retarda a cicatrização de feridas
(Mikhal’chik et al. 2006). A atividade antioxidante das plantas medicinais se deve à
presença de vários fitoquímicos (Pawar et al. 2007). Para apoiar esta reivindicação, foi
973
relatado que a aplicação tópica de gel bioadesivo de extrato etanólico de L. macrophylla
(5% p/v) aumentou a atividade da catalase, superóxido dismutase e glutationa e diminuiu
a atividade de MPO (Joshi et al. 2016) Assim, as plantas medicinais potencializam a
cicatrização de feridas por múltiplos mecanismos.

6.4 C. odorata como curador de feridas da natureza

Nos últimos anos, a pesquisa química aumentou o interesse nos efeitos medicinais de C.
odorata, uma vez que esta planta é usada como antibacteriano, antiespasmódico,
antiprotozoário, antitripanossoma, antifúngico, anti-hipertensivo, antiinflamatório,
adstringente, diurético, hepato trópico (Hanh et al. 2011), imunomodulador (Taleb-Contini
et al. 2006) e agente anticâncer (Harun et al. 2012; Kouamé et al. 2013).
Tradicionalmente, folhas frescas ou uma decocção de C. odorata têm sido usadas em
todo o Vietnã e em outras partes do mundo por muitos anos, bem como em outros países
tropicais para o tratamento de picadas de sanguessugas, feridas em tecidos moles,
queimaduras, infecções de pele, erupções diabetes e dentoalveolite e como repelente de
insetos (Vaisakh e Pandey 2013). Um cataplasma das folhas é tradicionalmente aplicado
em cortes ou feridas para parar o sangramento e promover a cura (Wang et al. 2014). Um
produto feito de Chromolaena spp. denominado eupolin já foi licenciado para uso no
Vietnã para o tratamento de queimaduras e feridas de tecidos moles (Ayyanar e
Ignacimuthu 2005; Raina et al. 2008). As folhas frescas e o extrato de C. odorata são um
tratamento tradicional à base de plantas em alguns países em desenvolvimento para
queimaduras, feridas de tecidos moles e infecções de pele (Sirinthipaporn e
Jiraungkoorskul 2017; Stanley et al. 2017).

C. odorata foi objeto de análises químicas em vários estudos de pesquisa (Zhang et al.
2012; Heiss et al. 2014). A determinação do perfil fitoquímico das plantas ajuda a
compreender a classe de compostos presentes que são responsáveis pelo processo de
cicatrização de feridas (Karodi et al. 2009; Sirinthipaporn e Jiraungkoorskul 2017; Stanley
et al. 2017). Os grupos químicos que foram identificados nesta planta são monoterpenos,
hidrocarbonetos sesquiterpenos, triterpenos/esteróides, alcalóides e flavonóides. As
folhas desta planta são uma fonte rica de flavonóides, incluindo quercetina, sinensetina,
sakuranetina, padmatina, caempferol e salvigenina, que foram isolados e identificados. As
folhas de C. odorata apresentam a maior quantidade de aleloquímicos (Afolabi et al. 2007)
isolados de uma planta. Um estudo no Vietnã mostrou que o extrato aquoso da folha
continha flavonóides (salvigenina, sakuranetina, isosacuranetina, caempferida, betulenol,
2-5-7-3 tetra-ometil quercetagetina, tamarixetina, duas chalconas e odoratina e seu
composto alcoólico), óleos essenciais (geyren, acetato de bornil e beta eubeden),
974
triterpenóides saponina, taninos, ácidos orgânicos e numerosas substâncias residuais
(Zhang et al. 2012). Outro estudo de Heiss et al. (2014) mostraram que o extrato de etanol
bruto de C. odorata contém ácidos fenólicos (ácidos protocatecuico, p-hidroxibenzóico, p-
cumárico, ferúlico e vanílico) e misturas complexas de agliconas flavonóides lipofílicos
(flavanonas, flavonóis, flavonas e chalconas). Até o momento, estudos sobre C. odorata
resultaram no isolamento de 17 compostos, como 5aα,6,9,9aβ,10-pentahydro-10β-
hydroxy-7-methylanthra [1,2-d] [1,3] dioxol-5-ona, 1,2-metilenodioxi-6-metilantraquinona,
3-hidroxi-1,2,4-trimetoxi-6-metilantraquinona, 3-hidroxi-1,2-dimetoxi-6-metilantraquinona e
7-metoxi-7-epi-medioresinol, bem como 12 compostos conhecidos, incluindo odoratina,
ácido 3β-acetiloleanólico, ácido ursólico, ombuin, 4,2'-dihidroxi-4',5',6'-trimetoxicalcona, (–)
-pinoresinol, austrocortinina, ácido tianshico, cleomiscosin D, (–) -medioresinol, (–) -
siringaresinol e cleomiscosin A (Zhang et al. 2012).

Uma das principais aplicações de C. odorata na medicina tradicional é no tratamento de

feridas. É essencial que, qualquer tratamento de uma ferida, deve incluir o seguinte
(Badoe et al. 2000): (a) parar a perda excessiva de sangue sem danificar o suprimento de
sangue para o local da ferida, (b) prevenir ou limpar a infecção bacteriana residual, e ( c)
incentivo à formação de fibroblastos no local da ferida. Iwu (1993) mostrou que, com suas
propriedades adstringentes, a folha de C. odorata é capaz de conter o sangramento nos
locais das feridas. Além disso, um estudo anterior mostrou que os extratos das folhas de
C. odorata são capazes de impedir o crescimento e até causar a morte de bactérias que
podem infectar feridas. Além disso, Donovan (2007) mostrou que os extratos das folhas
de C. odorata estimulam a proliferação de fibroblastos. Isso atende a terceira condição
indicada para o tratamento de feridas (Badoe et al. 2000). Consequentemente, a folha de
C. odorata possui todas as propriedades necessárias para o tratamento eficaz de uma
ferida. Seu uso na medicina tradicional para tratar feridas é, portanto, cientificamente
justificado.

Além disso, foi demonstrado que os flavonóides exibem suas ações por meio de seus
efeitos na permeabilidade da membrana e pela inibição de enzimas ligadas à membrana,
como ATPase e fosfolipase A2 (Li et al. 1983). Os flavonóides atuam como compostos
promotores da saúde devido à presença de radicais aniônicos (Hausteen 1983). Os
flavonóides inibem significativamente a secreção de enzimas lisossomiais e a liberação de
ácido araquidônico das membranas ao inibir a lipo-oxigenase, a ciclo-oxigenase e a
fosfolipase A2 (Kuponiy e Ibibia 2013). A inibição da liberação de ácido araquidônico nas
células inflamadas forneceria menos substrato araquidônico para as vias da lipo-
oxigenase e da ciclo-oxigenase. Isso, no entanto, leva a uma quantidade menor de

975
endoperóxidos, prostaglandinas, prostacilina e tromboxano, bem como hidroperoxi, ácidos
hidroxil eicosatrienóicos e leucotrienos (Garbor 1986). Tal efeito confirma a diminuição da
histamina, que se sabe atuar no primeiro estágio do processo inflamatório (Farquar 1996).
No entanto, alguns flavonóides se comportam como um poderoso agente protetor contra
doenças inflamatórias. Eles reduzem a formação de edema e inibem a síntese de
prostaglandina E2, prostaglandina F2 e tromboxano B2 (Kuponiy e Ibibia 2013). Portanto,
a ação antiinflamatória do medicamento vegetal selecionado pode ser atribuída à
presença de flavonóides, conforme relatado em trabalhos anteriores.

O fenol também estava presente em quantidade moderada em C. odorata. Descobriu-se

que os fenóis são de grande importância, pois protegem o corpo humano do estresse
oxidativo (Robards et al. 1999). A presença desses compostos fenólicos nesta planta pode
ter contribuído para as propriedades antioxidantes e antimicrobianas relatadas por
Baravkar et al. (2008). Os fenóis são responsáveis pelo bloqueio de enzimas específicas
que causam distúrbios inflamatórios. Eles também modificam as vias da prostaglandina e,
assim, protegem as plaquetas da agregação (Duke 1992). Os taninos também estavam
presentes em extratos aquosos e alcoólicos. Os taninos são úteis como suplemento
alimentar para a manutenção da saúde devido às suas propriedades antioxidantes,
antimicrobianas e antiinflamatórias (Santos-Buelga e Scalbert 2000). Os taninos são
conhecidos por serem úteis no tratamento de tecidos inflamados ou ulcerados (Motar et
al. 1985).

Além do acima, tanto o ensaio de feridas in vitro quanto os estudos in vivo demonstraram
que os extratos das folhas de C. odorata possivelmente aumentam a proliferação de
fibroblastos, células endoteliais e queratinócitos; estimular a migração de queratinócitos;
regular positivamente a produção induzida por queratinócitos de proteínas da matriz
extracelular e componentes da membrana basal, incluindo colágeno VII, fibrilas de
ancoragem e microfibrilas de fibrilina; e inibir a contração da rede de colágeno pelos
fibroblastos (Kusano et al. 2001; Subramoniam et al. 2012).

Apesar das cascatas naturais do processo de cicatrização, a progressão da cicatrização

pode ser retardada por uma infecção mediada por vários mecanismos, como a diminuição
do suprimento sanguíneo, que pode promover a função leucocitária prejudicada,
prolongar as fases inflamatória e de desbridamento e produzir enzimas proteolíticas.
Portanto, a infecção é o principal impedimento para o processo de cicatrização de feridas,
e os compostos antibacterianos desempenham um papel importante (Annan e Houghton
2008; Kahkeshani et al. 2013; Kumari et al. 2013). As plantas medicinais com suas
atividades antioxidantes, antiinflamatórias e antimicrobianas têm um amplo potencial para
976
o manejo e tratamento de feridas (Trabucchi et al. 1986; Trombetta et al. 2006;
Akinmoladun et al. 2010).

A inflamação é uma resposta a qualquer lesão de tecido no corpo causada por infecção,
trauma, produtos químicos, calor ou partículas não reconhecidas (Kim et al. 2007). A
inflamação, que constitui uma parte da resposta aguda, resulta em um influxo coordenado
de neutrófilos para o local da ferida que, por meio de sua atividade de “explosão
respiratória” característica, produz radicais livres (Pan et al. 2008). As aplicações tópicas
de compostos com propriedades de eliminação de radicais livres em pacientes mostraram
melhorar consideravelmente a cicatrização de feridas e proteger os tecidos do dano
oxidativo (Pisutthanan et al. 2005).

Citocinas pró-inflamatórias como ciclo-oxigenase-2 (COX-2) e óxido nítrico sintase

induzível (iNOS) desempenham um papel crítico na inflamação (Hanh et al. 2011). Além
disso, mediadores pró-inflamatórios como prostaglandina E2 (PGE2) e óxido nítrico (NO)
aumentam a expressão de citocinas pró-inflamatórias, incluindo fator de necrose tumoral
(TNF) -a e interleucina (IL) -1b. Estudos anteriores demonstraram que C. odorata tem
atividade antiinflamatória in vitro e in vivo (Karodi et al. 2009; Park et al. 2012). Também
foi relatado que o éter tetrametílico de scutellarein (Scu) (4',5,6,7-tetrametoxiflavona), a
isosacuranetina e o tigmasterol possuem atividade antiinflamatória (Csupor et al. 2010).

Com base na literatura disponível, C. odorata seria um ingrediente farmacêutico útil para o
tratamento de várias feridas, incluindo as crônicas. No entanto, mais estudos devem ser
conduzidos em vários modelos de feridas, e pesquisas em nível celular e molecular são
necessárias para identificar o mecanismo específico que pode induzir a cicatrização
nessas feridas. A cicatrização de feridas é uma sequência multifatorial de eventos muito
complexa que envolve vários processos celulares e bioquímicos. Os vários processos de
cicatrização de feridas ajudarão a regenerar e reconstruir a continuidade anatômica
interrompida e o estado funcional da pele. Inicialmente, a cicatrização da ferida envolve
uma fase inflamatória aguda seguida pela síntese de colágeno e outras macromoléculas
extracelulares, que são posteriormente removidas para formar uma cicatriz (Mukherjee
2002). O uso de um único modelo para um estudo de cicatrização de feridas é
inadequado e não existe um padrão de referência que possa representar coletivamente as
várias fases da cicatrização de feridas. Por exemplo, drogas, que influenciam uma fase,
podem não necessariamente influenciar outra.

Os relatórios disponíveis destacam o fato de que a inclusão de extrato microbiano

antioxidante e antipatogênico rico ou frações de C. odorata como um agente de cura
potencial também beneficiaria a saúde humana e animal. Os dados obtidos de vários
977
estudos são úteis para pesquisas futuras com o objetivo de identificar ainda mais os
princípios bioativos específicos além de Scu e estigmasterol (Pandith et al. 2013a;
Vijayaraghavan et al. 2017a, b) que são de fato responsáveis pela eficácia de cura de C.
odorata. A Figura 5 mostra o possível mecanismo de ação e outros papéis farmacológicos
dos compostos bioativos dos extratos vegetais.

Fig. 5 Possível mecanismo de ação de compostos bioativos de várias partes dos extratos vegetais de C.
odorata

De maneira geral, vários medicamentos fitoterápicos têm demonstrado atividade marcante

no manejo de feridas e, portanto, C. odorata pode ser considerada uma fonte alternativa
de tratamento. Além disso, vários compostos naturais com potencial de cicatrização de
feridas verificado in vivo podem ser considerados drogas naturais em potencial. A
novidade com essa planta inclui a nova abertura no campo do potencial antimicrobiano,
antioxidante e, principalmente, de cicatrização de feridas de C. odorata, com base na
literatura disponível, que são cruciais para seu potencial futuro desenho, desenvolvimento
e aplicação de fármacos para o tratamento de feridas em sistemas biológicos. Em
resumo, a presente revisão conclui que C. odorata é um agente de cicatrização de feridas
promissor no tratamento de várias doenças como medicina veterinária ou alternativa em
animais e humanos, respectivamente, no futuro após mais testes pré-clínicos e clínicos.

978
7. Observações Finais e Orientações Futuras
Muitos indivíduos e pacientes saudáveis estão tomando produtos potencialmente
bioativos para a prevenção e tratamento de várias doenças, incluindo feridas e infecções.
Isso forma a base de uma grande indústria comercial multimilionária em todo o mundo.
Embora a validade científica do uso de vários desses produtos seja insuficiente, nos
últimos anos, muitos esforços foram feitos para fornecer um conhecimento sólido dos
mecanismos subjacentes aos efeitos benéficos dos nutracêuticos. Pesquisas
cientificamente rigorosas são garantidas para identificar novos compostos a serem
usados sozinhos ou em combinação com drogas padrão na cicatrização de feridas. Além
disso, pesquisas futuras devem ter como objetivo aumentar, ainda mais, a eficácia de um
nutracêutico promissor, tentando usá-lo como um modelo químico para síntese
combinatória. Por fim, os pesquisadores desta área devem se concentrar na
compreensão da ação molecular de cada nutracêutico e testar os possíveis efeitos
sinérgicos com outros nutracêuticos e/ou derivados, componentes de alimentos ou drogas
convencionais. No entanto, é preciso ter em mente que, apenas porque compostos
isolados partem de um alimento natural, eles não são necessariamente seguros e naturais
e, portanto, um controle de qualidade rigoroso e questões regulatórias são obrigatórios. A
aplicação criteriosa de nutracêuticos é baseada na avaliação objetiva das evidências
clínicas e na caracterização subjetiva do risco, mérito, preços econômicos e prováveis
interações medicamentosas. Futuros estudos clínicos são necessários para determinar se
esses compostos serão tão interessantes como agentes preventivos ou terapêuticos
quanto são em estudos pré-clínicos.

Concorrência de interesses: Os autores declararam que não existe concorrência de

interesses.
Referências
Afolabi C, Akinmoladun EO, Dan-Ologe IA (2007) Phytochemical constituents and antioxidant properties of extracts
from the leaves of Chromolaena odorata. Sci Res Essays 2(6):191–194
Akinmoladun AC, Obuotor EM, Farombi EO (2010) Evaluation of antioxidant and free radical scavenging capacities of
some Nigerian indigenous medicinal plants. J Med Food 13:444–451
Amadeu TP, Braune AS, Porto LC et al (2004) Fibrillin I and elastin are differentially expressed in hypertrophic scars
and keloids. Wound Repair Regen 12(2):169–174
Amatya S, Tuladhar SM (2011) In vitro antioxidant activity of extracts from Eupatorium odoratum L. Res J Med Plant
5:79–84
Annan K, Houghton PJ (2008) Antibacterial, antioxidant and fibroblast growth stimulation of aqueous extracts of Ficus
asperifolia Miq. And Gossypium arboreum L., wound-healing plants of Ghana. J Ethnopharmacol 119:141–144
Ansell DM, Holden KA, Hardman MJ (2012) Animal models of wound repair: are they cutting it? Exp Dermatol
21(8):581–585
Anyasor GN, Aina DA, Olushola M et al (2011) Phytochemical constituents, proximate analysis, antioxidants, anti-
bacterial and wound healing properties of leaf extracts of Chromolaena odorata. Ann Biol Res 2:441–451
Ayyanar M, Ignacimuthu S (2005) Ethnomedicinal plants used by the tribals of Tirunelveli hills to treat poisonous bites
and skin diseases of Indian. Ind J Tradit Knowl 4(3):229–236
Badoe EA, Archampong EO, da Rocha-Afodu JT (2000) Principles and practice of surgery: including pathology in the
tropics, 3rd edn. Ghana Publishing, Accra, Ghana, pp 53–64
979
 Bagabir R, Byers RJ, Chaudhry IH, Müller W, Paus R, Bayat A (2012) Site-specific immunophenotyping of keloid
disease demonstrates immune upregulation and the presence of lymphoid aggregates. Br J Dermatol 167(5):1053–1066
Baravkar AA, Kale RN, Patil RN et al (2008) Pharmaceutical and biological evaluation of formulated cream of
methanolic extract of Acacia nilotica leaves. Res J Pharm Technol 1(4):481–483
Barreto RS, Albuquerque-Júnior RL, Araújo AA et al (2014) A systematic review of the wound-healing effects of
monoterpenes and iridoid derivatives. Molecules 19:846–862
Behm B, Babilas P, Landthaler M et al (2012) Cytokines, chemokines and growth factors in wound healing. J Eur Acad
Dermatol Venereol 26:812–820
Belmont P, Schoenfeld AJ, Goodman G (2010) Epidemiology of combat wounds in operation iraqi freedom and
operation enduring freedom, Orthopaedic burden of disease. J Surg Orthop Adv 19:2–7
Bhargava D, Sanjay K, Jagadish NS et al (2011) Screening of antigonorrhoeal activity of some medicinal plants in
Nepal. Int J Pharmacol Biosci 2:203–212
Bindschadler M, McGrath JL (2007) Sheet migration by wounded monolayers as an emergent property of single-cell
dynamics. J Cell Sci 120(Pt 5):876–884
Biswas TK, Mukherjee B (2003) Plant medicines of Indian origin for wound healing activity, a review. Int J Lower
Extrem Wounds 2:25–39
Boateng JS, Matthews KH, Stevens HN et al (2008) Wound healing dressings and drug delivery systems: a review. J
Pharm Sci 97 (8):2892–2923
Bopage NS, Kamal Bandara Gunaherath GM, Jayawardena KH et al (2018) Dual function of active constituents from
bark of Ficus racemosa L in wound healing. BMC Complement Altern Med 18 (1):29. https://doi.org/10.1186/s12906-018-
2089-9
Bowler PG, Duerden BI, Armstrong DG (2001) Wound microbiology and associated approaches to wound
management. Clin Microbiol Rev 14:244–269
Brielmann HL, Setzer WN, Kaufman PB et al (2006) Phytochemicals: the chemical components of plants. In: Cseke LJ,
Kirakosyan A, Kaufman PB, Warber SL, Duke JA, Brielmann HL (eds) Natural products from plants. Taylor and Francis,
Boca Raton, FL
Brown NJ, Smyth EA, Cross SS, Reed MW (2002) Angiogenesis induction and regression in human surgical wounds.
Wound Repair Regen 10:245–251
Bullard KM, Longaker MT, Lorenz HP (2003) Fetal wound healing: current biology. World J Surg 27(1):54–61
Bunyapraphatsara N, Chokechajiaroenprom O (2000) Thai medicinal plants, vol 4. Faculty of Pharmacy, Mahidol
University and National Center for Genetic Engineering and Biotechnology, Bangkok, pp 622–626
Burford G, Bodeker G, Ryan TJ (2007) Skin and wound care: traditional, complementary and alternative medicine in
public health dermatology. In: Bodeker G, Burford G (eds) Traditional, complementary and alternative medicine: policy
and public health perspectives. Imperial College Press, London
Burgalassi S, Raimondi L, Pirisino R et al (2000) Effect of xyloglucan (tamarind seed polysaccharide) on conjuctival
cell adhesion to laminin and corneal epithelium wound healing. Eur J Ophthalmol 10:71–76
Chakraborty AK, Sujit R, Umesh KP (2011) Chromolaena odorata, an overview. J Pharm Res 43:573–576
Chaudhari M, Mengi S (2006) Evaluation of phytoconstituents of Terminalia arjuna for wound healing activity in rats.
Phytother Res 20(9):799–805
Chávez EJJ, Martínez BD, González VMA, Trinidad ME, Alancaster CN, Vázquez RAL (2011) Microneedles: a valuable
physical enhancer to increase transdermal drug delivery. J Clin Pharmacol 51:964–977
Chereddy KK, Coco R, Memvanga PB et al (2013) Combined effect of PLGA and curcumin on wound healing activity. J
Controlled Releas 171(2):208–215
Choi SW, Son BW, Son YS et al (2001) The wound-healing effect of a glycoprotein fraction isolated from aloe vera. Br
J Dermatol 145 (4):535–545
Chomnawang MT (2005) Antimicrobial effects of Thai medicinal plants against acne-inducing bacteria. J
Ethnopharmacol 101:330–333
Clark RAF (1991) Cutaneous wound repair. In: Goldsmith LA (ed) Biochemistry and physiology of the skin. Oxford
University Press, London, pp 576–601
Csupor D, Blazso G, Balogh A, Hohmann J (2010) The traditional Hungarian medicinal plant Centaurea sadleriana
Janka accelerates wound healing in rats. J Ethnopharmacol 127:193–195
D’Souza KM, Malhotra R, Philip JL et al (2011) G protein-coupled receptor kinase-2 is a novel regulator of collagen
synthesis in adult human cardiac fibroblasts. J Biol Chem 286:15507–15516
Dawn TA, Jialin W, Zhihong J, Hubiao C, Guanghua L, Zhongzhen Z (2008) Ethnobotanical study of medicinal plants
used by Hakka in Guangdong, China. J Ethnopharmacol 117:41–50
de la Torre JI, Chambers JA (2008) Wound healing, chronic wounds. Emedicine
Dinda M, Dasgupta U, Singh N et al (2015) PI3K-mediated proliferation of fibroblasts by Calendula officinalis tincture:
implication in wound healing. Phytother Res 29:607–616
Donovan RM (2007) Skin treatment based on the use of Chromolaena odorata.
http://www.freepatentsonline.com/EP1367988.html
Drury JL, Mooney DJ (2003) Hydrogels for tissue engineering: scaffold design variables and applications. Biomaterials
24(24):4337–4351
Duke J (1992) Handook of biological active phytochemical and their activities. CRC Press, Boca Raton, FL, pp 99–131
980
 Dunn L, Prosser HC, Tan JT et al (2013) Murine model of wound healing. J Vis Exp 28:e50265
Edlich RF, Winters KL, Britt LD et al (2005) Difficult wounds: an update. J Long Term Eff Med Implants 15:289–302
Eming SA, Smoler H, Krieg T (2002) Treatment of chronic wounds wound: state of the art and future concepts. Cells
Tissues Organs 172 (2):105–117
Farahpour MR, Habibi M (2012) Evaluation of the wound healing activity of an ethanolic extract of Ceylon cinnamon in
mice. Vet Med Czech 57(1):53–57
Farquar JN (1996) Plant sterols: their biological effects in human, handbook of lipids in human nutrition. CRC Press,
Boca Rotan, FL, pp 101–105
Frank S, Madlener M, Pfeilschifter J et al (1998) Induction of inducible nitric oxide synthase and its corresponding
tetrahydrobiopterincofactor-synthesizing enzyme GTPcyclohydrolase I during cutaneous wound repair. J Invest Dermatol
111:1058–1064
Friedl P (2004) Prespecification and plasticity: shifting mechanisms of cell migration. Curr Opin Cell Biol 16:14–23
Fu SC, Hui CW, Li LC et al (2005) Total flavones of Hippophae rhamnoides promotes early restoration of ultimate
stress of healing patellar tendon in a rat model. Med Eng Phys 27(4):313–321
Fujii A, Kobayashi S, Kuboyama N et al (1990) Augmentation of wound healing by Royal jelly (RJ) in streptozotocin-
diabetic rats. Jpn J Pharmacol 53:331–337
Galiano RD, Michaels J, Dobryansky M et al (2004) Quantitative and reproducible murine model of excisional wound
healing. Wound Repair Regen 12:485–492
Gao Y, Wang X, Chen S et al (2013) Acute skin barrier disruption with repeated tape stripping: an in vivo model for
damage skin barrier. Skin Res Technol 19:162–168
Garbor M (1986) Anti-inflammatory and anti-allergic properties of flavonoids in biology and medicine, biochemical,
pharmacological and structural activity relationship. In: Harborne JB, Bertz A (eds)
Progress in clinical and biological research. Alan R. Liss, New York, pp 471–480
Gaurav T, Ruchi T, Birendra S, Bhati L, Pandey S, Pandey P, Saurabh KB (2012) Drug delivery systems: an updated
review. Int J Pharm Investig 2(1):2–11
Ghosh PK, Gaba A (2013) Phyto-extracts in wound healing. J Pharm Pharm Sci 16:760–820
Gill LS (1992) Ethnomedical uses of plants in Nigeria. University of Benin Press, Benin City, Nigeria
GISD (2006) Global invasive species database. Online data sheet. Chromolaena odorata (herb).
http://www.iucngisd.org/gisd/species.php?sc¼47
Groeber F, Holeiter M, Hampel M, Hinderer S, Schenke-Layland K (2011) Skin tissue engineering in vivo and in vitro
applications. Adv Drug Deliv Rev 63(4):352–366
Grose R, Werner S (2004) Wound-healing studies in transgenic and knockout mice. Mol Biotechnol 28(2):147–166
Handa SS (2008) An overview of extraction techniques for medicinal and aromatic plants, in extraction technologies for
medicinal and aromatic plants. In: Handa SS, SPS K, Longo G, Rakesh DD (eds) Extraction technologies for medicinal
and aromatic plants. ICS-UNIDO, Trieste, Italy, pp 21–52
Hanh TT, Hang DT, Van Minh C et al (2011) Anti-inflammatory effects of fatty acids isolated from Chromolaena odorata.
Asian Pac J Trop Med 4(10):760–763
Harun FB, Syed Sahil Jamalullail SM, Yin KB et al (2012) Autophagic cell death is induced by acetone and ethyl
acetate extracts from Eupatorium odoratum in vitro: effects on MCF-7 and vero cell lines. Sci World J 2:439–479
Hashemi SR, Davoodi H (2011) Herbal plants and their derivatives as growth and health promoters in animal nutrition.
Vet Res Commun 35:169–180
Hassan R (2012) Overview on drug delivery system. Pharm Anal Acta 3:10
Hausteen B (1983) Flavonoids, a class of natural products of high pharmacological potency. Biochem Pharmacol
32:1141–1148
Heiss EH, Tran TV, Zimmermann K et al (2014) Identification of chromomoric acid C-I as an Nrf2 activator in
Chromolaena odorata. J Nat Prod 77:503–508
Heywood VH, Harborne JB, Turner BL (1977) Biology and chemistry of the compositae, vol 1. Academic Press,
London
Ho J, Walsh C, Yue D, Dardik A, Umber C (2017) Current advancements and strategies in tissue engineering for
wound healing: a comprehensive review. Adv Wound Care 6(6):2017. https://doi.org/10.1089/wound.2016.0723
Hong SS, Kim JH, Li H et al (2005) Advanced formulation and pharmacological activity of hydrogel of the titrated
extract of C. Asiatics. Arch Pharm Res 28(4):502–508
Huang Z, Lu M, Zhu G et al (2011) Acceleration of diabetic-wound healing with PEGylated rhaFGF in healing-impaired
streptozocin diabetic rats. Wound Repair Regen 19(5):633–644
Hussein J, Mavalankar DV, Sharma S et al (2011) A review of health system infection control measures in developing
countries, What can be learned to reduce maternal mortality. Glob Health 7:14
Idu M, Onyibe HI (2007) Medicinal plants of Edo state, Nigeria. Res J Med Plants 1:32–41
Inya-Agha SI, Oguntimein BO, Sofowora A et al (1987) Phytochemical and antibacterial studies on the essential oil of
Eupatorium odoratum. Int J Crude Drug Res 25:49–52
Iwu MM (1993) Handbook of African medicinal plants, 1st edn. CRC Press, Boca Raton, FL, p 464. ISBN-10:
084934266X

981
 Jagadeesh KS, Geeta GS, Reddy TKR (1990) Biogas production by anaerobic digestion of Eupatorium odoratum L.
Biol Wastes 33:67
Jagetia GC, Rajanikant GK (2004) Role of curcumin, a naturally occurring phenolic compound of turmeric in
accelerating the repair of excision wound, in mice whole-body exposed to various doses of γ-radiation. J Surg Res
120(1):127–138
Johnson NR, Wang Y (2015) Drug delivery systems for wound healing. Curr Pharm Biotechnol 16(7):621–629
Johnston ST, Ross JV, Binder BJ, Sean McElwain D, Haridas P, Simpson MJ (2016) Quantifying the effect of
experimental design choices for in vitro scratch assays. J Theor Biol 400:19–31
Joshi A, Sengar N, Prasad SK et al (2013) Wound-healing potential of the root extract of Albizzia lebbeck. Planta Med
79(9):737–743
Joshi A, Joshi VK, Pandey D et al (2016) Systematic investigation of ethanolic extract from Leea macrophylla:
implications in wound healing. J Ethnopharmacol 191:95–106
Kahkeshani N, Farahanikia B, Mahdaviani P et al (2013) Antioxidant and burn healing potential of Galium odoratum
extracts. Res Pharm Sci 8:197–203
Karodi R, Jadhav M, Rub R et al (2009) Evaluation of the wound healing activity of a crude extract of Rubia cordifolia
L. (Indian madder) in mice. Int J Appl Res Nat Prod 2(2):12–18
Kerr J (2002) The use of essential oils in healing wounds. Int J Aroma Ther 12:202–206
Khanna S, Venojarvi M, Roy S et al (2002) Dermal wound healing properties of redox-active grape seed
proanthocyanidins. Free Radic Biol Med 33(8):1089–1096
Kiistala U (1968) Suction blister device for separation of viable epidermis from dermis. J Invest Dermatol 50:129–137
Kim YM, Namkoong S, Yun YG et al (2007) Water extract of Korean red ginseng stimulates angiogenesis by activating
the PI3K/Akt dependent ERK1/2 and eNOS pathways in human umbilical vein endothelial cells. Biol Pharm Bull
30:1674–1679
Klass BR, Grobbelaar AO, Rolfe KJ (2009) Transforming growth factor beta 1 signaling, wound healing and repair: a
multifunctional cytokine with clinical implications for wound repair, a delicate balance. Postgrad Med J 85:9–14
Koria P (2012) Delivery of growth factors for tissue regeneration and wound healing. BioDrugs 26(3):163–175
Kouamé PB, Jacques C, Bedi G et al (2013) Phytochemicals isolated from leaves of Chromolaena odorata: impact on
viability and clonogenicity of cancer cell lines. Phytother Res 27(6):835–840
Krishnan P (2006) The scientific study of herbal wound healing therapies: current state of play. Curr Anaesth Crit Care
17(1):21–27
Kumar B, Vijayakumar M, Govindarajan R et al (2007) Ethnopharmacological approaches to wound healing – exploring
medicinal plants of India. J Ethnopharmacol 114(2):103–113
Kumari A, Yadav SK, Yadav SC (2010) Biodegradable polymeric nanoparticles based drug delivery systems. Colloid
Surg B 75 (1):1–18
Kumari P, Yadav P, Verma PR et al (2013) A review on wound healing properties of Indian medicinal plants. Indian J
Fundam Appl Life Sci 3:220–232
Kuponiy E, Ibibia T (2013) A review on antimicrobial and other beneficial effects of flavonoids. Int J Pharm Sci Rev Res
21(1):20–33
Kusano A, Seyama Y, NagaiMet al (2001) Effects of fukinolic acid and cimicifugic acids from Cimicifuga species on
collagenolytic activity. Biol Pharm Bull 24(10):1198–1201
Lademann J, Jacobi U, Surber C, Weigmann HY, Fluhr JW (2009) The tape stripping procedure – evaluation of some
critical parameters. Eur J Pharm Biopharm 72:317–323
Lai PK (2004) Antimicrobial and chemopreventive properties of herbs and spices. Curr Med Chem 1(11):1451–1460
Li H, Wang Z, Liu Y (1983) Review in the studies on tannins activity of cancer prevention and anticancer. Zhong Yao
Cai 26(6):444–448
Li M, Xu J, Shi T (2016) Epigallocatechin-3-gallate augments therapeutic effects of mesenchymal stem cells in skin
wound healing. Clin Exp Pharmacol Physiol 43:1115–1124
Ling SK, Abdul Rashih A, Salbiah M et al (2007) Extraction and simultaneous detection of flavonoids in the leaves of
Chromolaena odorata by RP-HPLC with DAD. In: Nik Zanariah NM, Sarifah KA, Nor Azman H (eds) Highlights of FRIM’s
IRPA projects 2006: identifying potential commercial collaborations project evaluation meeting. 14–15 Dec 2006. Forest
Research Institute Malaysia, pp 32–37
Lutolf MP, Hubbell JA (2005) Synthetic biomaterials as instructive extracellular microenvironments for morphogenesis
in tissue engineering. Nat Biotechnol 23(1):47–55
Maarof M, Law JX, Chowdhury SR, Khairoji KA, Saim AB, Idrus RBH (2016) Secretion of wound healing mediators by
single and bi-layer skin substitutes. Cytotechnology 68(5):1873–1884
Maenthaisong R, Chaiyakunapruk N, Niruntraporn S et al (2007) The efficacy of Aloe vera used for burn wound
healing: a systematic review. Burns 33:713–718
Manju RS, Shailendra S, Vyas A et al (2013) Innovative approaches in wound healing: trajectory and advances. Artific
Cells Nanomed Biotechnol 41:202–212
Manjunatha BK, Vidya SM, Krishna V et al (2007) Comparative evaluation of wound healing potency of Vitex trifolia L
and Vitex altissima L. Phytother Res 21:457–461
Martin P (1997) Wound healing-aiming for perfect skin regeneration. Science 276(5309):122–126

982
 Mathivanan N, Surendiran G, Srinivasan K et al (2006) Morinda pubescens JE Smith (Morinda tinctoria Roxb) fruit
extract accelerates wound healing in rats. J Med Food 9:591–593
Menke MN, Menke NB, Boardman CH et al (2008) Biologic therapeutics and molecular profiling to optimize wound
healing. Gynecol Oncol 111(2):S87–S91
Mikhal’chik EV, Anurov MV, Titkova SM (2006) Activity of antioxidant enzymes in the skin during surgical wounds. Bull
Exp Biol Med 142:667–669
Mirmalek S, Parsa T, Parsa Y et al (2016) The wound healing effect of Iris forentina on full thickness excisional skin
wounds: a histomorphometrical study. Bangla J Pharmacol 11:86–90
Mohanty C, Sahoo SK (2017) Curcumin and its topical formulations for wound healing applications. Drug Discov Today
22(10):1582–1592
Moon EJ, Lee YM, Lee H et al (1999) A novel angiogenic factor derived from Aloe vera gel: β-sitosterol, a plant sterol.
Angiogenesis 3:117–123
Morton JF (1981) Atlas of medicinal plants of Middle America, vol 2. Charles C. Thomas, Springfield, IL
Motar ML, Thomas RB, Fillo JM (1985) Effect of Anarcardium occidental stem bark extracts on in vitro inflammatory
models. J Ethnopharmacol 95(2-3):139–142
Moura-Letts G, Villegas LF, Marçalo A et al (2006) In vivo woundhealing activity of oleanolic acid derived from the acid
hydrolysis of Anredera diffusa. J Nat Prod 69:978–979
Mukherjee PW (2002) Quality control of herbal drugs: an approach to evaluation of botanicals. Business Horizons,
New Delhi Murti K, Kumar U (2012) Enhancement of wound healing with roots of Ficus racemosa L in albino rats. Asian
Pac J Trop Biomed 2:276–280
Nicolaus C, Junghanns S, Hartmann A et al (2017) In vitro studies to evaluate the wound healing properties of
Calendula officinalis extracts. J Ethnopharmacol 196:94–103
Nunan R, Harding KG, Martin P (2014) Clinical challenges of chronic wounds: searching for an optimal animal model
to recapitulate their complexity. Dis Model Mech 7(11):1205–1213
Obute GC, Adubor GO (2007) Chemicals detected in plants used for folk medicine in South Eastern Nigeria.
Ethnobotan Leaflets 11:173–194
Odunbaku OA, Ilusanya OA, Akasoro KS (2008) Antibacterial activity of ethanolic leaf extract of Ficus exasperata on
Escherichia coli and Staphylococcus albus. Sci Res Essay 3:562–564
Oludare TB, Olumayokun OA, Olufunmilola SO et al (2000) Antiinflammatory, antipyretic and antispasmodic properties
of Chromolaena odorata. Pharm Biol 38:367–370
Omale J, Isaac AV (2010) Excision and incision wound healing potential of Saba florida (Benth) leaf extract in Rattus
norvegicus. Int J Pharma Biomed Res 1:101
Omokhua AG, McGaw LJ, Finnie JF, Van Staden J (2016) Chromolaena odorata (L.) R.M. King & H. Rob. (Asteraceae)
in sub-Saharan Africa: a synthesis and review of its medicinal potential. J Ethnopharmacol 183:112–122
Overbeek JTG, Voorn MJ (1957) Phase separation in polyelectrolyte solutions. Theory of complex coacervation. J Cell
Comp Physiol 49 (S1):7–26
Owoyele BV, Soladoye AO (2006) Anti-inflammatory and analgesic activities of ethanolic extract of Chromolaena
odorata leaves. Chronic Comm Disease 18:397–406
Owoyele BV, Oguntoye SO, Dare K, Ogunbiyi BA, Aruboula EA, Soladoye AO (2008) Analgesic, anti-inflammatory and
antipyretic activities from flavonoid fractions of Chromolaena odorata. J Med Plant Res 2:219–225
Ozgen U, Ikbal M, Hacimuftuoglu A et al (2006) Fibroblast growth stimulation by extracts and compounds of Onosma
argentatum roots. J Ethnopharmacol 104(1–2):100–103
Ozturk N, Korkmaz S, Ozturk Y et al (2006) Effects of gentiopicroside, sweroside and swertiamarine, secoiridoids from
Gentian (Gentiana lutea sp. symphyandra), on cultured chicken embryonic fibroblasts. Planta Med 72(4):289–294
Pacific Island Ecosystems at Risk (PIER) (2001) Invasive plant species: Chromolaena odorata Sw. Asteraceae.
http://www.hear.org/pier/sotor.htm. p 2
Paiva LA, de Alencar Cunha KM, Santos FA et al (2002) Investigation on the wound healing activity of oleo-resin from
Copaifera langsdorffi in rats. Phytother Res 16:737–739
Pampaloni F, Reynaud EG, Stelzer EHK (2007) The third dimension bridges the gap between cell culture and live
tissue. Nat Rev Mol Cell Biol 8(10):839–845
Pan CH, Kim ES, Jung SH et al (2008) Tectorigenin inhibits IFN-γ/LPSinduced inflammatory responses in murine
macrophage RAW 264.7 cells. Arch Pharm Res 31:1447–1456
Panda D, Dash KS, Dash KG (2010) Qualitative phytochemical analysis and investigation of anthelmintic and wound
healing potentials of various extracts of Chromolaena odorata (L.) collected from the locality of Mohuda Village,
Berhampur (South Orissa). Int J Pharm Sci Rev Res 1:122–126
Pandith H, Zhang X, Thongpraditchote S et al (2013a) Effect of Siam weed extract and its bioactive component
scutellarein tetramethyl ether on anti-inflammatory activity through NF-κBα e AMPK. Esses dadosB pathway. J Ethnopharmacol 147:434–441
Pandith H, Zhang X, Liggett J et al (2013b) Hemostatic and wound healing properties of Chromolaena odorata leaf
extract. ISRN Dermatol 2013:168269. https://doi.org/10.1155/2013/168269
Pang KL, Vijayaraghavan K, Al Sayed B, Seyed MA (2018) Betulinic acid-induced expression of nicotinamide adenine
dinucleotide phosphate-diaphorase in the immune organs of mice: a possible role of nitric oxide in immunomodulation.
Mol Med Rep 17 (2):3035–3041

983
 Park JW, Kwon OK, Jang H et al (2012) A leaf methanolic extract of Wercklea insignis attenuates the
lipopolysaccharide-induced inflammatory response by blocking the NF-κBα e AMPK. Esses dadosB signaling pathway in RAW 264.7
macrophages. Inflammation 35:321–331
Pawar RS, Khan SI, Khan IA (2007) Glycosides of 20-deoxy derivatives of jujubogenin and pseudojujubogenin from
Bacopa monniera. Planta Med 73:380–383
Pereira LDP, Mario RLM, Brizeno LAC et al (2016) Modulator effect of a polysaccharide-rich extract from Caesalpinia
ferrea stem barks in rat cutaneous wound healing: role of TNF-α, IL-1β, NO, TGF-β. J Ethnopharmacol 187:213–223
Perez R, Davis SC (2008) Relevance of animal models for wound healing. Wounds 20(1):3–8
Petrie NC, Yao F, Eriksson E (2003) Gene therapy in wound healing. Surg Clin N Am 83:597–616
Phan TT, Wang L, See P et al (2001a) Phenolic compounds of Chromolaena odorata protect cultured skin cells from
oxidative damage: implication for cutaneous wound healing. Biol Pharm Bull 24:1373–1379
Phan TT, Hughes MA, Cherry GW (2001b) Effects of an aqueous extract from the leaves of Chromolaena odorata
(Eupolin) on the proliferation of human keratinocytes and on their migration in an in vitro model of reepithelialization.
Wound Repair Regen 9:305–313
Pisutthanan N, Liawruangrath S, Bremner J et al (2005) Chemical constituents and biological activities of
Chromolaena odorata. J Sci Fac Chiang Mai Univ 32:139–148
Poul Holm P, Fenstad AM, Lars Folke EA (1974) DNA, RNA and protein synthesis in healing wounds in young and old
mice. Mech Ageing Dev 3:173–185
Raina R, Prawez S, Verma PK et al (2008) Medicinal plants and their role in wound healing. Outline Vet J 3:1–7
Raman VB, Samuel LA, Saradhi PM et al (2012) Antibacterial, antioxidant activity and GC-MS analysis of Eupatorium
odoratum. Asian J Pharm Clin Res 5:99–106
Razzell W, Wood W, Martin P (2011) Swatting flies: modelling wound healing and inammation in Drosophila. Dis Model
Mech 4(5):2011
Redd MJ, Cooper L, Wood W et al (2004) Wound healing and inflammation: embryos reveal the way to perfect repair.
Philos Trans R Soc B 359:777–784
Reddy S, Rao P, Reddy MS (2002) Wound healing effects of Heliohopium indicum, Plumbgo zeylanicum and Acalypha
indica in rats. J Ethnopharmacol 79:249–251
Richardson R, Slanchev K, Kraus C, Knyphausen P, Eming S, Hammerschmidt M (2013) Adult zebrafish as a model
system for cutaneous wound-healing research. J Invest Dermatol 133 (6):1655–1665
Robards K, Prenzler PD, Tucke G et al (1999) Phenolic compounds and their role in oxidative processes in fruits. Food
Chem 66:401–436
Rørth P (2007) Collective guidance of collective cell migration. Trends Cell Biol 17:575–579
Santos-Buelga C, Scalbert A (2000) Proanthocyanidins and tannin-like compounds: nature, occurrence dietary intake
and effects on nutrition and health. J Sci Food Agr 80(7):1094–1117
Scheid A, Meuli M, Gassmann M, Wenger RH (2000) Genetically modified mouse models in studies on cutaneous
wound healing. Exp Physiol 85(6):687–704
Schultz GS (1999) Molecular regulation of wound healing. In: Bryant RA (ed) Acute and chronic wounds nursing
management, 2nd edn. WB Saunders, St. Louis, MO, pp 413–429
Schultz GS, Wysocki A (2009) Interactions between extracellular matrix and growth factors in wound healing. Wound
Repair Regen 17 (2):153–162
Seaton M, Hocking A, Gibran NS (2015) Porcine models of cutaneous wound healing. ILAR J 56:127–138
Shen HM, Chen C, Jiang JY et al (2017) The N-butyl alcohol extract from Hibiscus rosasinensis L. flowers enhances
healing potential on rat excisional wounds. J Ethnopharmacol 198:291–301
Shukla A, Rasik M, Jain GK et al (1999) In vitro and in vivo wound healing activity of asiaticoside isolated from Centella
asiatica. J Ethnopharmacol 65:1–11
Singh M, Govindarajan R, Nath V et al (2006) Antimicrobial, wound healing and antioxidant activity of Plagiochasma
appendiculatum Lehm. et Lind. J Ethnopharmacol 107(1):67–72
Sirinthipaporn A, Jiraungkoorskul W (2017) Wound healing property review of Siam Weed, Chromolaena odorata.
Pharmacogn Rev 11 (21):35–38
Song HS, Park TW, Sohn UD et al (2008) The effect of caffeic acid on wound healing in skinincised mice. Korean J
Physiol Pharmacol 12:343–347
Soni H, Singhai AK (2013) A recent update of botanicals for wound healing activity. Int Res J Pharm 3(7):1–7
Soppimath KS, Aminabhavi TM, Kulkarni AR et al (2001) Biodegradable polymeric nanoparticles as drug delivery
devices. J Control Release 70(1–2):1–20
Sørensen LT, Toft BG, Rygaard J, Ladelund S, Paddon M, James T, Taylor R, Gottrup F (2010) Effect of smoking,
smoking cessation, and nicotine patch on wound dimension, vitamin C, and systemic markers of collagen metabolism.
Surgery 148:982–990
Stallmeyer B, Pfeilschifter J, Frank S (2001) Systemically and topically supplemented leptin fails to reconstitute a
normal angiogenic response during skin repair in diabetic ob/ob mice. Diabetologia 44:471–479
Stamm A, Reimers K, Strauß S, Vogt P, Scheper T, Pepelanova I (2016) In vitro wound healing assays state of the art.
BioNanoMaterials 17 (1–2):79–87
Stanley A, Imeobong JI, Enosakhare AA et al (2017) Effect of ethanolic extract of Chromolaena odorata on the kidneys
and intestines of healthy albino rats. Integr Med Res 6(3):292–299
984
 Starley IF, Mohammed P, Schneider G et al (1999) The treatment of paediatric bums using topical paoava. Burns
25(7):636–639
Stevenson PC, Simmonds MS, Sampson J et al (2002) Wound healing activity of acylated iridoid glycosides from
Scrophularia nodosa. Phytother Res 16(1):33–35
Strodtbeck F (2001) Physiology of wound healing. Newborn Infant Nurs Rev 11:43–52
Subramoniam A, Asha VV, Nair SA et al (2012) Chlorophyll revisited: anti-inflammatory activities of chlorophyll a and
inhibition of expression of TNF-α gene by the same. Inflammation 35(3):959–966
Suksamran A, Chotipong A, Suavansri T et al (2004) Antimycobacterial activity and cytotoxicity of flavanoids from the
leaves of Chromolaena odorata. Arch Pharm Res 5:507–511
Sullivan TP, Eaglstein WH, Davis SC et al (2001) The pig as a model for human wound healing. Wound Repair Regen
9:66–76
Summereld A, Ricklin ME (2015) The immunology of the porcine skin and its value as a model for human skin. Mol
Immunol 66(1):14–21
Taiwo OB, Olajide OA, Soyanwo OO et al (2000) Antiinflammatory, antipyretic and antispasmodic properties of
Chromolaena odorata. Pharm Biol 38(5):367–370
Taleb-Contini SH, Kanashiro A, Kabeya LM et al (2006) Immunomodulatory effects of methoxylated flavonoids from
two Chromolaena species: structure-activity relationships. Phytother Res 20 (7):573–575
Tamada M, Perez TD, Nelson WJ et al (2007) Two distinct modes of myosin assembly and dynamics during epithelial
wound closure. J Cell Biol 176:27–33
Timbilla JA, Zachariades C, Braimah H (2003) Biological control and management of the alien invasive shrub
Chromolaena odorata in Africa. In: Neuenschwander P, Borgemeister C, Langewald J (eds) Biological control in IPM
Systems in Africa. CABI Publishing, Wallingford, UK
Trabucchi E, Preis-Baruffaldi F, Baratti C et al (1986) Topical treatment of experimental skin lesions in rats:
macroscopic, microscopic and scanning electron-microscopic evaluation of the healing process. Int J Tissue React
8:533–544
Trease GE, Evans WC (2002) Pharmacognosy, 15th edn. Saunders, London
Trepat X, Michael RW, Thomas EA et al (2009) Physical forces during collective cell migration. Nat Phys 5:426–430
Trombetta D, Castelli F, Sarpietro MG et al (2005) Mechanisms of antibacterial action of three monoterpenes.
Antimicrob Agents Chemother 49:2474–2478
Trombetta D, Puglia C, Perri D et al (2006) Effect of polysaccharides from Opunta ficus-indica (L.) cladodes on the
healing of dermal wounds in the rat. Phytomedicine 13:289–294
Tuhin RH, Begum M, Rahman S et al (2017) Wound healing effect of Euphorbia hirta Linn. (Euphorbiaceae) in alloxan
induced diabetic rats. BMC Complement Altern Med 17:423
Uebersax L, Merkle HP, Meinel L (2009) Biopolymer-based growth factor delivery for tissue repair: from natural
concepts to engineered systems. Tissue Eng Part B Rev 15(3):263–289
Upadhyay A, Chattopadhyay P, Goyary D et al (2014) Ixora coccinea enhances cutaneous wound healing by
upregulating the expression of collagen and basic fibroblast growth factor. ISRN Pharmacol 2014:751824., 9 pages.
https://doi.org/10.1155/2014/751824
Vaisakh MN, Pandey A (2013) The invasive weed with healing properties: a review on Chromolaena odorata. Int J
Pharmaceut Sci Res 3:80–83
Veerapur VP, Palkar MB, Srinivasa H et al (2004) Effect of ethanol extract of Wrightia tinctoria bark on wound healing
in rats. J Nat Remedies 4(2):155–156
Vijayaraghavan K, Ali MS, Maruthi R (2013) Studies on phytochemical screening and antioxidant activity of
Chromolaena odorata and Annona squamosa. Int J Innov Res Sci Engg Tech 2:7315–7321
Vijayaraghavan K, Rajkumar J, Bukhari SN et al (2017a) Chromolaena odorata: a neglected weed with a wide
spectrum of pharmacological activities (Review). Mol Med Rep 15(3):1007–1016
Vijayaraghavan K, Rajkumar J, Seyed MA (2017b) Efficacy of Chromolaena odorata leaf extracts for the healing of rat
excision wounds. Vet Med 62:565–578
Villegas LF, Marçalo A, Martin J et al (2001) (+)-epi-Alpha-bisabolol [correction of bisbolol] is the wound-healing
principle of Peperomia galioides: investigation of the in vivo wound-healing activity of related terpenoids. J Nat Prod
64(10):1357–1359
Wang L, Waltenberger B, Pferschy-Wenzig EM et al (2014) Natural product agonists of peroxisome proliferator-
activated receptor gamma (PPARγ): a review. Biochem Pharmacol 92(1):73–89
Watson SAJ, Moore GPM (1990) Postnatal development of the hair cycle in the domestic pig. J Anat 170:1–9
WHO Report (2014). http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs365/en/
Wietecha MS, Dipietro LA (2013) Therapeutic approaches to the regulation of wound angiogenesis. Adv Wound Care
2:81–86
Wigger-Alberti W, Kuhlmann M, Ekanayake S, Wilhelm D (2009) Using anovel wound model to investigate the healing
properties of products for superficial wounds. J Wound Care 18:123–131
Wilhelm KP, Wilhelm D, Bielfeldt S (2017) Models of wound healing: an emphasis on clinical studies. Skin Res Technol
23(1):3–12
Witte MB, Barbul A (2002) Role of nitric oxide in wound repair. Am J Surg 183:406–412

985
 Wound Management, Forecast to 2021 (2013, March) Established and emerging products, technologies and markets
in the Americas, Europe, Asia/Pacific and rest of world. http://woundcare-today.com/news/world-at-glance/projected-
global-wound-prevalence-bywound-types
Wullaert A, Bonnet MC, Pasparakis M (2011) NF-κBα e AMPK. Esses dadosB in the regulation of epithelial homeostasis and inflammation. Cell
Res 21:146–158
Xu W, Jong Hong S, Jia S, Zhao Y, Galiano RD, Mustoe TA (2012) Application of a partial-thickness human ex vivo
skin culture model in cutaneous wound healing study. Lab Investig 92(4):584–599
Yadav SS, Singh MK, Singh PK et al (2017) Traditional knowledge to clinical trials: a review on therapeutic actions of
Emblica officinalis. Biomed Pharmacother 93:1292–1302
Yallapu MM, Jaggi M, Chauhan SC (2011) Design and engineering of nanogels for cancer treatment. Drug Discov
Today 16 (9–10):457–463
Yallapu MM, Jaggi M, Chauhan SC (2013) Curcumin nanomedicine: a road to cancer therapeutics. Curr Pharm Des
19(11):1994–2010
Yoshizaki H, Ohba Y, Parrini MC et al (2004) Cell type-specific regulation of RhoA activity during cytokinesis. J Biol
Chem 279:44756–44762
Zhang M-L, Irwin D, Li X-N et al (2012) PPARγ agonist from Chromolaena odorata. J Nat Prod 75:2076–2081
Zhao M, Song B, Pu J et al (2006) Electrical signals control wound healing through phosphatidylinositol-3-OH kinase-
gamma and PTEN. Nature 442:457–460
Zulak KG, Liscombe DK, Ashihara H et al (2006) Alkaloids. In: Crozier A, Clifford MN, Ashihara H (eds) Plant
secondary metabolites – occurrence, structure and role in human diet. Blackwell, Oxford

986
 Nutracêuticos em doenças dermatológicas
Moges Woldemeskel

Resumo
Os distúrbios dermatológicos referem-se a anormalidades da pele que podem ser
induzidas por vários agentes, incluindo organismos infecciosos, agentes físicos não
infecciosos e reações imunológicas. Vários medicamentos modernos estão sendo usados
para tratar diferentes tipos de doenças de pele. Embora alguns deles sejam eficazes,
efeitos colaterais indesejados são frequentemente observados. Atualmente, há uma
tendência crescente para o uso da medicina tradicional, incluindo o uso de nutracêuticos
que são usados desde os tempos antigos, são eficazes no tratamento e controle de
doenças de pele e não causam efeitos colaterais aparentes. Este capítulo destaca
brevemente o uso de alguns nutracêuticos no tratamento de doenças de pele.
Palavras-chave: Nutracêuticos veterinários · Distúrbios dermatológicos

M. Woldemeskel. Tifton Veterinary Diagnostic and Investigational Laboratory, Department of Pathology,

College of Veterinary Medicine, University of Georgia, Tifton, GA, USA e-mail: mwoldem@uga.edu

1. Introdução
A pele é um dos maiores órgãos imunológicos do corpo e é afetada por fatores externos e
internos, bem como por respostas imunes inatas e adaptativas. Os distúrbios
dermatológicos referem-se a anormalidades cutâneas causadas por vários agentes,
incluindo organismos infecciosos, agentes não infecciosos ou físicos e reações
imunológicas. Os distúrbios da pele, como dermatite atópica, dermatite de contato,
urticária, angioedema, psoríase e distúrbios bolhosos autoimunes, são condições
imunomediadas. Muitas dessas doenças são crônicas, inflamatórias e proliferativas, nas
quais fatores genéticos e ambientais desempenham papéis importantes em seu
desenvolvimento (Fonacier et al. 2010).

Os distúrbios da pele costumam ser vistos tanto em humanos quanto em animais, uma
vez que a pele é o órgão mais externo exposto a vários agentes físicos, biológicos e
químicos. Devido às diversas causas subjacentes aos distúrbios cutâneos
(dermatológicos), os métodos usados para tratar anormalidades dermatológicas também
são diversos. Estes variam desde o uso de métodos tradicionais que abrangem diferentes

987
agentes naturais, medicina fitoterápica, incluindo produtos nutracêuticos, até a aplicação
da medicina moderna.

Os medicamentos fitoterápicos estão ganhando popularidade em países em

desenvolvimento e desenvolvidos devido ao seu baixo custo e menos efeitos colaterais.
As plantas contêm diferentes tipos de fitoconstituintes na forma de metabólito primário ou
metabólito secundário, e muitos medicamentos usados na medicina moderna são
derivados principalmente de plantas medicinais (Patel e Patel 2017). Diferentes tipos de
compostos bioativos naturais ou alimentos que fornecem benefícios extras para a saúde
além dos valores nutricionais básicos (nutracêuticos) têm sido usados por várias gerações
para tratar doenças de pele em humanos e animais como parte da medicina tradicional.
Por exemplo, Adenium obesum (Lav, Apocynaceae) é geralmente usado para o
tratamento de feridas e outras doenças de pele na comunidade étnica de Omã (Akhtar et
al. 2017). Neste capítulo, será fornecida uma breve visão geral sobre o papel dos
nutracêuticos em doenças de pele alérgicas, dermatite atópica, doenças infecciosas de
pele e tumores de pele.

2. Nutracêuticos em Dermatite
Diferentes tipos de agentes são incriminados como fatores subjacentes a doenças de
pele. Algumas doenças de pele estão associadas a infecções microbianas, outras estão
associadas à exposição a irritantes, como produtos químicos em cosméticos, enquanto
muitas outras são de origem imunológica e resultam de respostas de hipersensibilidade a
alérgenos ambientais (Fonacier et al. 2010).

Uma vez que a pele está constantemente exposta ao ambiente externo, qualquer insulto à
pele pode induzir uma resposta reativa, incluindo vários tipos de dermatite. A dermatite é
uma inflamação da pele causada por agentes infecciosos e não infecciosos que podem
entrar em contato com a pele. Por exemplo, a dermatite atópica é uma doença
inflamatória crônica recorrente comum caracterizada por prurido e eczema e está
comumente associada à hipersensibilidade a alérgenos, mais frequentemente com
doenças alérgicas, como rinite alérgica e asma (Kim et al. 2016).

Diferentes tipos de dermatite provocada por agentes infecciosos e não infecciosos são
tratados com a medicina moderna, bem como a medicina tradicional, incluindo
nutracêuticos. Esta seção descreverá resumidamente os efeitos de alguns nutracêuticos
usados no tratamento de diferentes tipos de dermatite. Aloe vera, uma planta com uma
longa história de uso popular e tradicional, é um exemplo. É usado na medicina tradicional
988
indiana para várias doenças e infecções de pele. O primeiro relato de caso dos efeitos
benéficos da Aloe vera no tratamento da pele e na cicatrização de feridas foi publicado
em 1935, com extrato de folha inteira fresco relatado para fornecer alívio rápido da
coceira e queimação associada a dermatite severa induzida por radiação e regeneração
da pele. Mais tarde, vários estudos relataram o papel da aplicação tópica de Aloe vera
sozinha ou em combinação com outros para o tratamento de diferentes condições da
pele, incluindo cicatrização de feridas, psoríase, dermatite, queimaduras e feridas
cirúrgicas. Foster et al. (2011), citando vários autores, resumiram os resultados de uma
série de ensaios clínicos em que o Aloe vera é indicado positivamente no tratamento de
doenças de pele. Por exemplo, um ensaio de tratamento de cicatrização de feridas após a
esfoliação facial total de pacientes com acne vulgaris demonstrou que a saturação de um
curativo de gel de polietileno padrão com Aloe vera reduziu significativamente o tempo de
nova epitelização em comparação ao uso do curativo padrão sozinho. Foi relatado que
polissacarídeos, particularmente polissacarídeos contendo manos, celulose e
polissacarídeos pécticos, compreendem a maior parte do gel de Aloe vera. O
glucomanano acetilado é o principal responsável pelas propriedades mucilaginosas do gel
e foi encontrado in vitro e em estudos com animais para modular a função imunológica
por meio da ativação de macrófagos e produção de citocinas e acelerar a cicatrização de
feridas. Em um ensaio randomizado, duplo-cego e controlado de Aloe vera ou creme
placebo em 60 pacientes com psoríase crônica, a taxa de cura de Aloe vera foi de 83%,
sem recidivas em 1 ano de acompanhamento, em comparação com apenas 7% em o
grupo placebo (Foster et al. 2011).

Além disso, outros vários nutracêuticos de plantas são usados para tratar doenças de
pele em geral. Para dar alguns exemplos, estudos etnobotânicos indicam que Rasaut,
decocção de Berberis aristata, era comumente usado para tratar doenças de pele.
Comunidades tribais Malani de Himachal Pradesh, Índia, também usam Berberis aristata
para curar várias doenças de pele (Nimisha et al. 2017). Em outro relatório (Patel e Patel
2017), foi demonstrado que a atividade antiinflamatória tópica do fracionamento guiado
por bioatividade do extrato metanólico das folhas de Santolina insularis, principalmente a
luteolina, que está entre os constituintes ativos do extrato, evitou o edema de orelha em
dermatite induzida por óleo de cróton na orelha de camundongo de forma mais eficaz em
comparação com o medicamento padrão indometacina. O efeito de outros nutracêuticos
em categorias específicas de anormalidades cutâneas é destacado em várias seções
abaixo.

989
3. Nutracêuticos em Otite Externa
A otite externa é uma inflamação ou infecção da pele do canal auditivo externo e pavilhão
auricular. A otite externa pode ser causada por bactérias, vírus, parasitas e agentes não
infecciosos em animais. Entre as doenças de pele que afetam os cães, a otite externa
crônica recorrente representa uma das patologias mais frustrantes da prática clínica
veterinária diária (Rosser 2004; Pietschmann et al. 2013).

Muitos estudos, em cães e humanos, afirmam os benefícios da administração de

nutracêuticos no tratamento da otite externa. Por exemplo, o efeito de uma dieta
nutracêutica comercial composta de proteínas hidrolisadas de peixe, carboidratos de
arroz, Melaleuca alternifolia, Tilia cordata, Allium sativum L., Rosa canina L., zinco e
ômega-3/ômega-6 (proporção 1: 0,8), com atividades antiinflamatórias e antioxidantes
como adjuvante, foi avaliada clinicamente no tratamento de diferentes idades e raças de
cães com otite externa crônica. Os cães também foram tratados farmacologicamente com
um produto tópico (OTOMAX, Schering-Plough, Kenilworth, NJ, EUA) oito gotas por dia
durante 7 dias. A dieta nutracêutica comercial tem se mostrado eficaz, em combinação
com medicamentos, no alívio dos sintomas relacionados à otite externa e na redução dos
principais sintomas da otite externa, como oclusão do canal auditivo externo, eritema,
odor e muco, quando comparada àquelas que receberam a dieta padrão (Di Cerbo et al.
2016). Em outro estudo, o uso de mel de grau médico demonstrou eficácia geral no
tratamento da otite externa em uma população de cães. Os resultados obtidos, como
início rápido de melhora clínica e citológica, avaliações positivas do proprietário,
resultados biocidas in vitro e durabilidade da resolução clínica durante o
acompanhamento foram encorajadores (Maruhashi et al. 2016). Também existem vários
nutracêuticos que afirmam ter efeito em várias lesões de pele, mas precisam de avaliação
científica para confirmar seu efeito específico na otite externa.

4. Nutracêuticos na dermatite associada a infecções

As doenças de pele costumam estar associadas a agentes infecciosos, como bactérias e
parasitas. Diferentes tipos de tratamentos com vários antibióticos e agentes físicos, como
irradiações, são usados para tratar doenças de pele. Os tratamentos atuais para algumas
doenças crônicas da pele não são eficazes; por exemplo, a resistência microbiana aos
medicamentos prejudicou a eficácia dos antibióticos no tratamento de feridas crônicas, e a
radioterapia ultravioleta usada para tratar psoríase e dermatite atópica pode induzir o
desenvolvimento de câncer de pele (Gasparro 2000). Esta seção destacará o uso de

990
nutracêuticos no alívio e tratamento de algumas doenças/doenças de pele associadas a
infecções. Por exemplo, foi feito um estudo sobre o efeito de uma dieta imunomoduladora
no tratamento da leishmaniose canina em cães que não receberam nenhum tratamento
prévio específico para a doença. A leishmaniose canina é uma doença zoonótica que
afeta humanos e cães e é causada pelo protozoário parasita Leishmania infantum. Várias
manifestações clínicas foram descritas na leishmaniose em cães, e a aparência clínica e a
evolução da doença parecem ser influenciadas por interações complexas entre o parasita
e o perfil genético e imunológico do paciente.

Suplemento dietético que continha Ascophyllum nodosum, Cucumis melo, Carica papaya,
Aloe vera, astaxantina de Haematococcusialis, Curcuma longa, Camellia sinensis, Punica
granatum, Piper nigrum, Poligonum spp., Echinacea purpurea, Grifola frondosa, Glycega
frondosa, Glycega max e ácidos graxos insaturados ômega 3 e 6 do óleo de peixe
induziram uma modulação imune intrigante em cães afetados por leishmaniose
submetidos a 12 meses de tratamento com terapia farmacológica padrão. A dieta
imunomoduladora parece regular a resposta imunológica nos cães afetados durante o
tratamento farmacológico padrão. A presença de nutracêuticos na dieta está
correlacionada com a diminuição das células Th1 e com o aumento das células-T
regulatórias em cães doentes. Foi demonstrado que o tratamento farmacológico por si só
foi incapaz de induzir mudanças de longa duração na resposta pró-inflamatória e modular
as células-T reguladoras em cães doentes, enquanto a combinação com dieta
moduladora do sistema imunológico foi associada a uma restauração significativa de
células-T regulatórias nível e com a diminuição da resposta inflamatória Th1. Portanto, a
administração do suplemento dietético específico melhorou a resposta clínica ao
tratamento padrão em um modelo de leishmaniose canina (Cortese et al. 2015),
significando a importância do suplemento nutracêutico no tratamento de doenças de pele
associadas a infecções.

Outros estudos também indicam que vários nutracêuticos à base de plantas também
foram eficazes contra doenças de pele induzidas por micróbios. Nerium oleander
(Apocynaceae) e Aloe vera estão entre os remédios fitoterápicos amplamente usados que
possuem inúmeras atividades, como antibacteriana, antiviral, antifúngica e antioxidante, e
são usados no tratamento de doenças de pele. O efeito de cicatrização de feridas do
extrato à base de Aloe vera da folha de Nerium oleander com base em sua capacidade
antioxidante, antiinflamatória e de reparo de DNA foi investigado e comparado com o
tratamento tradicional com sulfadiazina de prata em ratos Wistar albinos com queimadura
de pele que receberam aplicação tópica duas vezes ao dia por 2 semanas. As alterações

991
induzidas por lesão térmica foram revertidas significativamente com o tratamento. O efeito
curativo do extrato também foi apoiado por achados histológicos, sugerindo que o extrato
à base de Aloe vera da folha de oleandro Nerium é um remédio promissor para o
tratamento de queimaduras na pele (Akgun et al. 2016).

Além disso, os relatórios indicam que, entre outros produtos naturais, o mel também tem
um efeito curativo em doenças de pele associadas a infecções. O mel é usado desde a
antiguidade como medicina tradicional e recentemente tem recebido atenção como um
tratamento complementar e alternativo na medicina moderna. É composto principalmente
de vários açúcares, ácidos fenólicos, flavonóides, enzimas, aminoácidos, proteínas,
fitoquímicos e outros compostos diversos (Ahmed e Othman 2017). Tradicionalmente, tem
sido usado em todo o mundo para tratar doenças de pele associadas a infecções
microbianas e reações imunológicas. Na medicina tradicional do sistema hindu
(ayurvédica), por exemplo, o mel é usado para tratar cortes e feridas, eczema, dermatite,
queimaduras e gangrena de Fournier. McLoonea et al. (2016), citando vários autores,
indicou que as propriedades de cicatrização da pele do mel foram amplamente atribuídas
às suas propriedades antimicrobianas; uma infinidade de estudos in vitro demonstrou
atividade antimicrobiana de mel de todo o mundo contra micróbios dermatologicamente
importantes. Pesquisas in vitro mais recentes sugeriram que méis de origens florais
diversas podem modular o sistema imunológico da pele por meio de efeitos
imunoestimuladores e antiinflamatórios (McLoonea et al. 2016).

Também há evidências biológicas para apoiar o uso de mel no tratamento moderno de

feridas. O mel demonstrou ter efeito contra várias espécies de bactérias, incluindo
Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Acinetobacter e
Stenotrophomonas. Foi demonstrado que sua atividade antimicrobiana é direcionada até
mesmo contra cepas resistentes a antibacterianos, como Staphylococcus aureus
resistente à meticilina e enterococos resistentes à vancomicina (Lee et al. 2011).
Maruhashi et al. (2016) também relataram que o sucesso foi alcançado usando mel contra
bactérias multirresistente.

Os produtos vegetais também são usados contra doenças de pele induzidas por parasitas
ou dermatites. Em Omã, várias preparações de material vegetal (casca e folhas) de
Adenium obesum são usadas para tratar doenças de pele em humanos. No Quênia, os
caules e o pó das cascas de Adenium obesum são usados contra parasitas de pele em
camelos e gado. Os extratos brutos da raiz e da casca também são usados para preparar
uma loção para o tratamento de diferentes doenças de pele e para eliminar piolhos
(Akhtar et al. 2017). Os efeitos de tais produtos à base de plantas em lesões cutâneas
992
específicas associadas a infecções devem ser confirmados por meio de experimentos
científicos e estudos clínicos bem planejados.

5. Nutracêuticos em Dermatite Alérgica/Atópica

A dermatite alérgica é um tipo de dermatite que se desenvolve devido a uma reação
cutânea a alérgenos que entram em contato com a pele. Frequentemente se desenvolve
em animais com tendência hereditária de desenvolver reação alérgica mediada por Ig-E a
agentes ambientais, como proteínas de poeira de ácaros domésticos, pólen de plantas,
esporos de fungos e vários outros alérgenos. Geralmente ocorre em animais de
estimação, como cães e gatos, e em humanos (Gross et al. 2005).

Normalmente, antiinflamatórios e esteróides são usados para tratar a dermatite associada

à alergia. No entanto, devido a questões de segurança decorrentes dos efeitos colaterais
das drogas, o uso de nutracêuticos e certos suplementos alimentares para aliviar os sinais
clínicos e ajudar no tratamento da dermatite alérgica está aumentando. Como resultado,
os estudos científicos sobre nutracêuticos também estão sendo realizados em taxas
crescentes. Por exemplo, a suplementação de linhaça (Linum usitatissimum) foi avaliada
na resposta ao teste cutâneo em cavalos atópicos que apresentaram resposta alérgica a
extratos de Culicoides spp. Observou-se que a suplementação com linhaça por 42 dias
reduziu a resposta média do teste cutâneo aos extratos de Culicoides spp. com uma
diminuição significativa na área de reação alérgica. Neste estudo, foi observado que a
linhaça foi capaz de reduzir a resposta do teste cutâneo de cavalos atópicos, alterar o
perfil de ácidos graxos do pêlo, reduzir a inflamação e não provocar nenhum efeito
colateral negativo, sugerindo um benefício promissor da linhaça para mitigar a pele a
resposta ao extrato de Culicoides provocou dermatite atópica em cavalos (O'Neill et al.
2002).

É importante notar que a resposta alérgica cutânea pode ocasionalmente ocorrer

associada à alergia alimentar, uma síndrome clínica causada por uma reação imunológica
aguda ou crônica após a ingestão de alimentos. A intolerância alimentar, uma resposta
fisiológica anormal não imunológica a alguns alimentos ou aditivos alimentares
específicos, também pode ser observada associada à ingestão de certos alimentos.
Devido à sua diferenciação muitas vezes difícil, esses fenômenos são geralmente
incluídos na síndrome de reação alimentar adversa não específica genérica, que também
pode envolver o sistema cutâneo e são mais frequentemente referidos como reações
alimentares adversas cutâneas.

993
O efeito da dieta nutracêutica em gatos domésticos em ambientes fechados com reações
cutâneas adversas aos alimentos, que entre outras incluíram salivação, lesões de pele
como coceira intensa nas costas e pescoço e eczema no pescoço e tinham alta
quantidade de oxitetraciclina, conforme determinado pelo ensaio imunoenzimático de
oxitetraciclina (ELISA), foi estudado. Os gatos foram agrupados em aqueles que
receberam uma ração padrão e aqueles que receberam uma dieta nutracêutica composta
por uma fórmula mista de proteínas hidrolisadas de peixe, carboidratos de arroz, Aloe
vera, Arctium lappa, Malva sylvestris, Ribes nigrum, Allium sativum e ômega-3 e ômega-6
na proporção de 1:3 por 60 dias. A dieta nutracêutica reduziu significativamente a
intensidade do prurido e a gravidade da lesão cutânea, com uma melhora significativa no
quadro clínico dos gatos afetados (Mazzeranghi et al. 2017).

A suplementação com alguns nutracêuticos é conhecida por aumentar e apoiar os efeitos

do tratamento de outros métodos químicos de tratamento de doenças da pele em
humanos e animais. Por exemplo, em humanos, a suplementação de vitamina D diminuiu
a gravidade da dermatite atópica e melhorou os sintomas e sinais clínicos associados em
pacientes com dermatite atópica, particularmente em pacientes pediátricos (Kim et al.
2016).

Da mesma forma, a suplementação de cães que sofrem de dermatite atópica com

metionina de zinco foi documentada para fornecer benefícios em conjunto com o
tratamento com dois medicamentos antiinflamatórios eficazes: glicocorticoides e
ciclosporina, que são conhecidos por terem certos efeitos colaterais adversos. O estudo
forneceu evidências que sustentam um benefício potencial da suplementação adjuvante
de metionina de zinco em cães com dermatite atópica canina leve a moderada, crônica e
não sazonal. Os cães que recebem glicocorticoides podem ter maior probabilidade de se
beneficiar da suplementação de metionina de zinco. O papel exato do zinco e os
benefícios potenciais da suplementação na dermatite atópica em humanos são
amplamente desconhecidos. Curiosamente, os níveis séricos de zinco foram encontrados
para ser mais baixos em crianças atópicas em comparação com crianças saudáveis
(McFadden et al. 2017). Além disso, Tsuji et al. (2015), citando vários estudos em modelos
animais, indicou que a deficiência de selênio aumentou a resposta alérgica do tipo I em
um modelo de camundongo de anafilaxia cutânea ativa, indicando a importância e o
significado potencial do selênio no controle da resposta alérgica cutânea.

994
6. Nutracêuticos em tumores cutâneos (neoplasias)
As neoplasias cutâneas são tumores que se desenvolvem na pele devido ao crescimento
descontrolado de vários componentes da pele e tecidos conjuntivos associados. Um
grande número de tumores de pele é reconhecido em várias espécies animais. Na
medicina veterinária, os caninos estão entre as espécies animais que frequentemente
desenvolvem câncer de pele. Por exemplo, Raditic e Bartges (2014) indicaram que o
câncer é uma doença importante em cães e é responsável por 27% de todas as mortes
em cães de raça pura no Reino Unido.

A incidência de câncer está aumentando continuamente (Ranzato et al. 2014), e drogas

químicas são frequentemente prescritas para o tratamento de câncer em humanos e
animais. No entanto, as drogas químicas possuem capacidade terapêutica limitada para o
tratamento de pacientes com câncer decorrente da ocorrência de resistência (Mao et al.
2018). Além disso, as opções terapêuticas do câncer atualmente disponíveis são caras e
nenhuma delas é segura (Sayeed e Ameen 2015) devido a efeitos colaterais graves que
costumam aparecer em pacientes tratados com drogas químicas (Mao et al. 2018). No
entanto, medicamentos ou compostos derivados de plantas tradicionais são relativamente
seguros (Sayeed e Ameen 2015). A partir de então, os fito medicamentos estão cada vez
mais ganhando importância, uma vez que são usados mais prontamente e são
relativamente seguros. Nutracêuticos ricos em fitoquímicos fornecem uma fonte
promissora de compostos com efeitos quimiopreventivos porque são baratos e a maioria
deles não apresenta evidências de toxicidade (Ranzato et al. 2014).

Além de fatores hereditários, as fontes de dieta também estão intimamente envolvidas na

patogênese de diversos distúrbios neuropsiquiátricos e cânceres. Os antioxidantes
nutracêuticos, que têm ampla distribuição em diversos tipos de alimentos, frutas, vegetais
e minerais, apresentam potente neuroproteção e propriedades anticâncer in vivo e in vitro.
Atualmente, produtos naturais ou nutracêuticos, também comumente chamados de
alimentos medicinais, são empregados cada vez mais na terapia adjuvante de pacientes
com distúrbios neuropsiquiátricos e câncer. Os nutracêuticos exercem neuroproteção e
suprimem o crescimento do tumor, possivelmente por meio das modulações diferenciais
da homeostase redox (Mao et al. 2018).

Em cães, os nutracêuticos, incluindo algumas vitaminas, têm um efeito na redução dos

riscos de certos tipos de câncer. Há evidências de que o crescimento de mastócitos
caninos é inibido pela vitamina D, e cães Labrador retriever com baixos níveis de vitamina
D têm um risco aumentado de desenvolver mastócitos (Pucheu-Haston et al. 2015). Além
disso, em cães terrier escoceses, foi relatada uma relação inversa entre o consumo de
995
vegetais e o risco de desenvolver carcinoma de células transicionais da bexiga urinária
(Raghavan et al. 2005). Um estudo também mostrou que uma combinação de extratos de
açafrão e alecrim diminuiu o crescimento de células cancerosas in vitro. Embora as
moléculas bioativas que induzem esses efeitos não sejam definitivamente identificadas,
foi sugerido que as altas concentrações de curcuminóides e ácido carnósico estão
provavelmente envolvidas (Levine et al. 2016). Ensaios experimentais e farmacológicos
também demonstraram que a curcumina como um agente anti-inflamatório é eficaz no
controle e tratamento de câncer de pele, entre outros (Fadus et al. 2017).

Os retinoides são derivados naturais ou sintéticos da vitamina A (retinol) que exercem

efeitos profundos no crescimento e na diferenciação de muitos tipos de células in vivo e in
vitro. Retinóide é um termo usado para descrever todo o conjunto de compostos
derivados da vitamina A, incluindo a vitamina A de ocorrência natural, seus metabólitos e
análogos sintéticos (Zhang e Duvic 2003; de Mello Souza et al. 2010). Retinóides
suprimem lesões pré-malignas, como leucoplasia oral, displasia cervical e xeroderma
pigmentoso em pessoas e ceratose actínica em cães (de Mello Souza et al. 2010). Os
retinoides têm sido usados, há muito tempo, sozinhos ou em combinação com outros
agentes em linfomas cutâneos de células-T, um grupo heterogêneo de distúrbios linfo
proliferativos caracterizados pela localização de linfócitos T malignos na pele (Zhang e
Duvic 2003). Em cães, os retinoides têm sido usados na dermatologia como agente de
diferenciação de casos afetados por ceratose actínica, adenite sebácea e pilomatricomas
benignos. Poucos estudos demonstraram os efeitos dos retinoides no câncer canino.
Vários retinoides derivados do ácido retinoico têm sido usados por muito tempo, sozinhos
ou em combinação com outros agentes em linfomas de células-T cutâneos. Foi observada
uma taxa de resposta de 42% ao tratamento com retinóide em cães com linfoma cutâneo,
indicando que os retinóides e os fármacos de ligação ao recetor de rexinóide podem ter
um impacto no tratamento de cães com linfoma cutâneo. Além disso, resultados positivos
também foram registrados com mastócitos caninos e linhagens celulares de
osteossarcoma canino (de Mello Souza et al. 2010). A vantagem de usar retinoides, bem
como os outros modificadores de resposta biológica, é que eles podem ser administrados
por via oral, não são imunossupressores, podem aumentar a função imunológica
induzindo uma resposta antitumoral e podem induzir a apoptose das células-T malignas
(Zhang e Duvic 2003). Em outro estudo, foi indicado que flavonóides hidrofóbicos de
Scutellaria baicalensis e magnolol isolado de Magnolia officinalis também foram relatados
como tendo atividades antitumorais em vários tumores (Chen et al. 2013; Raditic e
Bartges 2014).

996
7. Observações Finais e Orientações Futuras
Como parte do sistema corporal constantemente exposta a agentes externos, a pele é
afetada por uma série de anormalidades induzidas por agentes infecciosos e não
infecciosos e distúrbios imunológicos. Hoje em dia, o uso generalizado de produtos
cosméticos sintéticos de origem química, aplicados na pele, sem dúvida aumentou a
incidência de doenças de pele, incluindo dermatites alérgicas e neoplasias cutâneas.
Várias aplicações da medicina moderna, muitas das quais deixam efeitos colaterais
indesejados, são frequentemente prescritas para controlar e tratar doenças de pele.
Devido aos efeitos colaterais indesejáveis dos tratamentos médicos modernos, há uma
tendência crescente para o uso de medicina tradicional e alternativa, principalmente
nutracêuticos para prevenir ou minimizar a taxa de ocorrência e também para tratar
doenças clínicas da pele. Consequentemente, muitos estudos e empreendimentos de
pesquisa sobre nutracêuticos estão progredindo com resultados encorajadores, indicando
os efeitos e potenciais promissores que os nutracêuticos terão no futuro para o tratamento
de várias dermatopatias em humanos e animais.

Referências
Ahmed S, Othman NH (2017) The anti-cancer effects of Tualang honey in modulating breast carcinogenesis: an
experimental animal study. BMC Complement Altern Med 17:208. https://doi.org/10.1186/s12906-017-1721-4
Akgun SG, Aydemir S, Ozkan N et al (2016) Evaluation of the wound healing potential of Aloe vera-based extract of
Nerium oleander. North Clin Istanb 4(3):205–212
Akhtar MS, Hossain MA, Said SA (2017) Isolation and characterization of antimicrobial compound from the stem-bark
of the traditionally used medicinal plant, Adenium obesum. J Tradit Complement Med 7:296–300
Chen MC, Lee CF, Huang WH et al (2013) Magnolol suppresses hypoxia-induced angiogenesis via inhibition of HIF-
1alpha/VEGF signaling pathway in human bladder cancer cells. Biochem Pharmacol 85:1278–1287
Cortese L, Annunziatella M, Palatucci AT et al (2015) An immunemodulating diet increases the regulatory T-cells and
reduces T-helper-1 inflammatory response in Leishmaniosis affected dogs treated with standard therapy. BMC Vet Res
11:295
de Mello Souza CH, Valli VE, Selting KA et al (2010) Immunohistochemical detection of retinoid receptors in tumors
from 30 dogs diagnose with cutaneous lymphoma. J Vet Intern Med 24 (5):1112–1117
Di Cerbo A, Centenaro S, Beribè F et al (2016) Clinical evaluation of an anti-inflammatory and antioxidant diet effect in
30 dogs affected by chronic otitis externa: preliminary results. Vet Res Commun 40 (1):29–38
Fadus MC, Lau C, Bikhchandani J, Lynch HT (2017) Curcumin: an age-old anti-inflammatory and anti-neoplastic
agent. J Tradit Complement Med 7:339–346
Fonacier LS, Dreskin SC, Leung DYM (2010) Allergic skin diseases. J Allergy Clin Immunol 125(Suppl. 2):S138–S149
Foster M, Hunter D, Samman S (2011) Evaluation of the nutritional and metabolic effects of Aloe vera. In: Benzie IFF,
Wachtel-Galor S (eds) Herbal medicine: biomolecular and clinical aspects, 2nd edn. CRC Press/Taylor & Francis, Boca
Raton, pp 1–41
Gasparro FP (2000) The role of PUVA in the treatment of psoriasis: photobiology issues related to skin cancer
incidence. Am J Clin Dermatol 1(6):337–348
Gross TL, Ihrke PJ, Walder EJ et al (2005) Diseases of the dermis. In: Skin diseases of the dog and cat: clinical and
histopathologic diagnosis, 2nd edn. Blackwell Science, Ames, pp 200–206
Kim MJ, Kim S-N, Lee YW et al (2016) Vitamin-D status and efficacy of Vitamin-D supplementation in atopic dermatitis:
a systematic review and meta-analysis. Nutrients 8:789. https://doi.org/10.3390/nu8120789
Lee DS, Sinno S, Khachemoune A (2011) Honey and wound healing: an overview. Am J Clin Dermatol 12(3):181–190
Levine CB, Bayle J, Biourge V et al (2016) Effects and synergy of feed ingredients on canine neoplastic cell
proliferation. BMC Vet Res 12:159
Mao XY, Jin MZ, Chen JF et al (2018) Live or let die: neuroprotective and anti-cancer effects of nutraceutical
antioxidants. Pharmacol Ther 183:137–151

997
 Maruhashi E, Braz BS, Nunes T et al (2016) Efficacy of medical grade honey in the management of canine otitis
externa-a pilot study. Vet Dermatol 27:93–e27
Mazzeranghi F, Zanotti C, Di Cerbo A et al (2017) Clinical efficacy of nutraceutical diet for cats with clinical signs of
cutaneous adverse food reaction (CAFR). Pol J Vet Sci 20(2):269–276
McFadden RA, Heinrich NA, Haarstad AC et al (2017) A doubleblinded, randomized, controlled, crossover evaluation
of a zinc methionine supplement as an adjunctive treatment for canine atopic dermatitis. Vet Dermatol 28:569–e138
McLoonea P, Warnockb M, Fyfeb L (2016) Honey: an immunomodulatory agent for disorders of the skin. Food Agric
Immunol 27 (3):338–349
Nimisha DAR, Fatima Z et al (2017) Antipsoriatic and antiinflammatory studies of Berberis aristata extract loaded
nanovesicular gels. Pharmacogn Mag 13(Suppl 3):S587–S594
O'Neill W, McKee S, Clarke AF (2002) Flaxseed (Linum usitatissimum) supplementation associated with reduced skin
test lesional area in horses with Culicoides hypersensitivity. Can J Vet Res 66 (4):272–277
Patel K, Patel DK (2017) Medicinal importance, pharmacological activities, and analytical aspects of hispidulin: a
concise report. J Tradit Complement Med 7:360–366
Pietschmann S, Meyer M, Voget M et al (2013) The joint in vitro action of polymyxin B and miconazole against
pathogens associated with canine otitis externa from three European countries. Vet Dermatol 24:439–445
Pucheu-Haston CM, Santoro D, Bizikova P et al (2015) A review: innate immunity, lipid metabolism and nutrition in
canine atopic dermatitis. Vet Dermatol 26(2):104–e28
Raditic DM, Bartges JW (2014) Evidence-based integrative medicine in clinical veterinary oncology. Vet Clin Small
Anim 44:831–853
Raghavan M, Knapp DW, Bonney PL et al (2005) Evaluation of the effect of dietary vegetable consumption on
reducing risk of transitional cell carcinoma of the urinary bladder in Scottish Terriers. J Am Vet Med Assoc 227:94–100
Ranzato E, Martinotti S, Calabrese CM et al (2014) Role of nutraceuticals in cancer therapy. J Food Res 3(4).
https://doi.org/10.5539/jfr.v3n4p18
Rosser EJ Jr (2004) Causes of otitis externa. The veterinary clinics of North America. Vet Clin Small Anim Pract
34:459–468
Sayeed B, Ameen SS (2015) Beta-Sitosterol: a promising but orphan nutraceutical to fight against cancer. Nutr Cancer
67(8):1214–1220
Tsuji PA, Carlson BA, Anderson CB et al (2015) Dietary selenium levels affect selenoprotein expression and support
the interferon-γ and IL-6 immune response pathways in mice. Nutrients 7:6529–6549
Zhang C, Duvic M (2003) Retinoids: therapeutic applications and mechanisms of action in cutaneous T-cell lymphoma.
Dermatol Ther 16:322–330

998
 Nutracêuticos em Mastite
Robert W. Coppock

Resumo
As formas agudas e crônicas de mastite são as doenças mais caras na indústria de
laticínios. A resistência de patógenos microbianos a antimicrobianos aprovados para uso
clínico é uma ameaça significativa ao controle de patógenos mastíticos e é um problema
de saúde pública. Em alguns países, o custo dos medicamentos antimicrobianos reduz
seu uso e remédios étnicos estão sendo usados. Os laticínios orgânicos priorizam a
manutenção da saúde mamária e o uso de nutracêuticos para prevenir e tratar a mastite.
Em algumas jurisdições, os animais leiteiros em fazendas orgânicas que recebem
antibióticos são desqualificados para a vida como animais leiteiros. Há evidências
conflitantes sobre a eficácia dos nutracêuticos, homeopatia e medicina tradicional no
tratamento da mastite e uma falta de padrões para avaliação desses remédios. Estudos
mostram que os nutracêuticos podem ser eficazes. Os fitoterápicos geralmente são
misturas químicas complexas e podem ser multifacetados em mecanismos de ação. As
infusões intramamárias de probióticos e bacteriocinas têm se mostrado eficazes e seus
mecanismos de ação incluem ser um estimulante imunológico. A imunoterapia com
anticorpos e componentes do sistema imunológico pode ser eficaz. Os tratamentos
misturados com nutracêuticos e farmacêuticos podem ser mais eficazes do que qualquer
um dos tratamentos isoladamente.

Palavras-chave: Nutracêutico · Mastite · Bovinos · Vaca · Cabras · Ovelhas ·

Antimicrobiano · Leite · Úbere · Glândula mamária · Mama · Ruminantes · Contagem de
células somáticas · Antibióticos · Terapias alternativas · Veterinária · Fitoterapia ·
Probiótico · Medicina holística · Homeopatia · Fitoterapia · Óleo de orégano · Carvacrol ·
a-pineno · Ginsenosídeo · Ginseng · Cominho · Cebola · Manuka · Óleo de linhaça ·
Azeite de oliva · Óleo de tea tree · Terminalia · Allium · Bunium · Oryza · Timo · Triticum ·
Origanum · Menta · Salvia · Atractylodis · Origanum · Escherichia coli · Klebsiella ·
Staphylococcus · Streptococcus · E. coli · Lactococcus · Lactobacillus · Serratia ·
Corynebacterium · Enterococci · Prototeca · Linum · Candida · Medicina chinesa · Erva
daninha · Cártamo · Serratia · Corynebacterium · Enterococci · Prototeca · Linum ·
Candida · Cártamo · Sálvia vermelha · Sálvia vermelha · Cera de abelha · Óleo de
calêndula · Óleo de eucalipto · Eugenol · Canela · Timol · Eucalipto · Glycyrrhiza ·
Curcuma · Cedrus · Paedaria · Leptospermum · Ziziphus · Panax · Angelica · Tinospora ·
999
Gaultheria · Glycyrrhiza · Pulsatilla · Imersão para tetas · Selante de tetas · Suplemento
mineral · Vitamina E · Bacteriófagos · Bacteriocinas · Nisina · Lisostafina · Tratamentos
secos para vacas · Óleos essenciais · Fitofármacos · Suínos · Porcos

R. W. Coppock. Toxicologist and Assoc Ltd, Vegreville, AB, Canada e-mail: r.coppock@toxicologist.ca

1. Introdução
Mastite, inflamação da glândula mamária, é uma das doenças mais significativas e caras
que afetam ruminantes em lactação (Arsenault et al. 2008; Cooper et al. 2016;
Aghamohammadi et al. 2018). As glândulas mamárias, também chamadas de úbere em
algumas espécies, são suscetíveis à infecção por uma ampla variedade de
microrganismos. O leite na glândula mamária também é um excelente meio de cultura
para muitos microrganismos (Rainard 2017). A mastite infecciosa existe nas formas
subclínica e clínica. O tratamento de infecções clínicas com antibióticos e outras
terapêuticas aumenta o risco de recorrência, especialmente quando a cura bacteriológica
não é alcançada (Gomes e Henriques 2016; Jamali et al. 2018). O custo mundial para a
indústria de laticínios é estimado em 35 bilhões de dólares americanos em perdas diretas,
e essa perda não inclui a perda de genética valiosa devido ao abate e mortes. Vacas com
mastite também podem ter fertilidade reduzida e disfunções metabólicas (Ribeiro et al.
2016). A patogênese da mastite foi revisada (Akers e Nickerson 2011; Lainesse et al.
2012; Bhattarai et al. 2018). Em resumo, o sistema imunológico inato é o primeiro
mecanismo de defesa.

A patogênese da infecção é devida principalmente à infecção ascendente, inflamação que

pode bloquear o sistema de drenagem do ducto de leite, inflamação dos alvéolos com
descamação e apoptose de células secretoras com aparecimento de fibroblastos e
epitélio cubóide pouco diferenciado. As infecções agudas e crônicas geralmente causam
alguma perda da função secretora. Há uma redução na produção de leite, e isso está
associado a um aumento na contagem de células somáticas do leite (SCC, principalmente
leucócitos). Os biomarcadores de mastite incluem aumento de SCC do leite, bactérias
isoladas em secreções da glândula mamária, bactérias identificadas no leite por
contagens de placa de colônia, sinais cardinais de inflamação na glândula mamária e
alterações proteômicas nas secreções mamárias. Há um uso generalizado de antibióticos
como profiláticos para vacas secas e terapêuticas para mastite. Para o tratamento da
mastite em pequenos ruminantes, o quimioterápico antimicrobiano preferido pode não ter
aprovação regulatória. Existem questões de bem-estar animal e saúde públicas
associadas aos animais mastíticos na indústria de laticínios. A resistência antimicrobiana
1000
é uma preocupação crescente em espécies produtoras de leite e na propagação animal a
animal e zoonótica desses organismos (Holmes e Zadoks 2011; Tavakol et al. 2012; Saini
et al. 2013).

A via de administração de antibióticos é importante no desenvolvimento de resistência a

penicilinas, cefalosporinas de terceira geração e macrolídeos, com risco baixo para
administração estratégica intramamária e intrauterina (Nobrega et al. 2018a). Um estudo
canadense recente mostrou que há resistência a antibióticos em estafilococos não aureus
isolados do leite coletado da glândula mamária (Nobrega et al. 2018b). O padrão de
resistência aos antibióticos foi encontrado para ser dependente da espécie com
Staphylococcus gallinarum sendo resistente à combinação quinupristina/dalfopristina em
uma prevalência de 98%. S. cohnii e S. arlettae foram resistentes à eritromicina com
prevalência de 63 e 100%, respectivamente. A resistência das bactérias do leite à
vancomicina, fluoroquinolonas, linezolida e daptomicina foi prevalente em <1%. A
formação de biofilmes intramamários também pode ser um fator na resistência
antimicrobiana (Gomes et al. 2016). Uma preocupação de saúde pública é que o leite
pode ser uma fonte importante de quimioterápicos antimicrobianos e microrganismos
resistentes a antibióticos que entram na cadeia alimentar humana (Kromker e Leimbach
2017). Esses são fatores importantes para identificar e usar alternativas aos antibióticos
para prevenir e tratar a mastite em espécies produtoras de alimentos. A agricultura
orgânica e a economia também podem ser um fator importante no uso regional de
nutracêuticos para prevenir e tratar a mastite (Mushtaq et al. 2018).

Há um debate considerável sobre as bactérias que constituem a flora normal da glândula

mamária de ruminantes (Rainard 2017). Bactérias isoladas da glândula mamária
demonstram atividade antibacteriana in vitro contra patógenos mastíticos (Al-Qumber e
Tagg 2006). Uma recente revisão da literatura sobre a análise qualitativa de tratamentos
para mastite infecciosa que não sejam antimicrobianos concluiu que os tratamentos
alternativos são essencialmente ineficazes (Francoz et al. 2017). As regulamentações
governamentais para a agricultura orgânica variam entre as jurisdições governamentais.
Nos Estados Unidos, um produtor de leite de origem leiteira certificado como orgânico que
recebe um tratamento com antibióticos está proibido para sempre como produtor de leite
orgânico. Recomendar uma dieta balanceada usando ingredientes de menor custo para
maximizar a produção tem sido a marca registrada das recomendações nutricionais. O
uso de antioxidantes no período periparto vem ganhando atenção na prevenção da
mastite associada ao estresse oxidativo (Abuelo et al. 2015). O papel da dieta na
prevenção da mastite e outras doenças em animais leiteiros está ganhando mais atenção,

1001
especialmente na agricultura orgânica. Foi relatado que fazendas orgânicas apresentam
menor ocorrência de mastite, e o crédito é dado ao manejo proativo, redução dos
estressores dos animais, melhor foco na saúde da glândula mamária e alimentação de
mais forragens (Hamilton et al. 2006; Ruegg 2009). O cumprimento dos padrões da
agricultura orgânica resulta em melhor saúde do úbere (Honorato et al. 2014).

2. Terapias Alternativas
Os remédios fitoterápicos são praticados na medicina veterinária e humana há mais de
60.000 anos (Boothe 2004). A terapêutica clássica de origem vegetal inclui salicilatos,
glicosídeos cardíacos, quinina, ópio e morfina. As terapias alternativas incluem fitoterapia
(fitoterapia, fitoterapia), acupuntura, homeopatia e medicina étnica (Tabela 1) (Hektoen
2004; Mushtaq et al. 2018). A medicina holística enfatiza a capacidade do corpo de curar
a si mesmo e a influência do ambiente externo e da dieta tanto na causa da doença
(proteção à saúde) quanto em seu importante papel na cura (restauração). A medicina
holística busca uma terapia natural com o mínimo de efeitos colaterais indesejados. A
homeopatia veterinária é comumente usada em fazendas que produzem produtos
orgânicos de origem animal (Loken 2001). Os remédios fitoterápicos contêm uma mistura
de fitoquímicos, e geralmente se presume que esse coquetel de substâncias químicas
têm vários receptores alvos e interações complexas importantes para os processos de
cura (Spinella 2002). O conceito atual em farmacologia é baseado em receptores-alvo
específicos e minimizando o número de medicamentos usados simplesmente para
farmacodinâmica. Isso contrasta com os medicamentos fitoterápicos que têm vários
lignanos que têm vários receptores como alvo, uma abordagem para impactar vários
alvos (Spelman et al. 2006).

Tabela 1 Exemplos de fitoterápicos étnicos para mastite

Condição
Nome científico Partes da planta Via de administração Referência
(espécie)
Mastite Gloriosa superba L. Chá de raiz triturada Oral Upadhyay et
al. 2011
(Bovino) Vitex negundo Linn. Suco de raiz Oral
a
Chá feito de partes Um pano de algodão é
Achillea millefolium L.; aéreas, raiz de bardana e mergulhado em
Arctium spp.; Salix spp. casca de salgueiro com infusão quente e
adição de mel e sal colocado no úbere
Lans et al.
(Ruminantes) Teucrium scorodonia L. Tintura infundida no úbere (2007)
Infusão (maceração) feita
a partir de 15 mL de
Galium aparine L. Oral
cutelos em 80 mL de
água

1002
 Tabela 1 Exemplos de fitoterápicos étnicos para mastite
Condição
Nome científico Partes da planta Via de administração Referência
(espécie)
(Bovino,
Avena sativa L. Cariopses germinadas Cataplasma
ovino)
Úberes – usado como
(Bovino) Sambucus nigra L. Tópico
fumigante tópico
Pode ser misturado com
(Bovino,
Malus sylvestris L. outras sementes e Oral
ovino, suíno)
decocções
Uncini
(Bovino, Frutas, brotos misturados Manganelli et
Vitis vinifera L. Tópico al. (2001)
ovino) com vinagre
Frutas adicionadas ao
(Bovino) Foeniculum vulgare Miller. feno, decocção de flores Oral
cozidas no vinho
(Bovino, Adicionado a decocções
Salix alba Oral
ovino) de outras plantas
(Ovino) Urtica dioica L. Adicionado ao úbere Tópico
200 g esmagado com 2–4
botões de flores de
Kumar e
(Bovino) Allium cepa L. Syzygium aromaticum L. Oral Bharati (2013)
e óleo de Brassica napus
L.
Oral. Moído e
Amber et al.
Bunium persicum Boiss. Sementes (80 g) misturado com farinha (2018)
de trigo
Oral. Decocção (1-2
(Ruminantes) Oryza sativa L. Sementes (1–2 g)
copos)
Oral. Fundido e
Allium sativum L. Bulbos (100 g) misturado com
manteiga
Profilático
Buxus sempervirens L. Folhas Usadas como cama
(bovino) Uncini
Manganelli et
Galactagogo Folhas adicionadas à al. (2001)
Ficus carica L. Oral
(bovino) forragem
a
0,33 xícara (cerca de 80 mL) de cada erva; cerca de 700 mL de água

2.1 Atividade Antimicrobiana de Extratos Vegetais

O extrato de acetato de etila da fruta Terminalia chebula Retz foi testado in vitro como um
antimicrobiano contra patógenos mastíticos isolados de vacas leiteiras (Kher et al. 2018).
A 500 μg/ml e 3,77 g/mL, o extrato de T. chebula foi tão eficaz quanto a amoxicilina. Extratos de T.
chebula também são usados como uma droga étnica para infecções urinárias. Plantas,
crescendo na região nordeste do Paquistão e usadas em práticas etnoveterinárias para
tratar mastite clínica em bovinos e búfalos, foram testadas in vitro para atividade
antimicrobiana contra patógenos mastíticos (Amber et al. 2018). As plantas estudadas
foram Allium sativum L., Bunium persicum Boiss., Oryza sativa L. e Triticum aestivum L.
1003
(Tabela 1). O extrato bruto, alcalóides, flavonóides e saponinas foram dissolvidos em
dimetilsulfóxido e padronizados a 50 mg/mL e utilizados para determinação da atividade
antibacteriana. Diluições foram usadas para determinar a concentração inibitória mínima.
Cepas multirresistentes de Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae e Staphylococcus
aureus foram utilizadas como bactérias de teste.

Os alcalóides de Allium sativum apresentaram as maiores zonas de inibição de bactérias

(cepas de K. pneumoniae e S. aureus) quando comparados ao extrato bruto, flavonóides
e saponinas. Os alcalóides e o extrato bruto de Bunium persicum apresentaram atividade
inibitória significativamente maior. Os alcalóides de Allium sativum e Bunium persicum
apresentaram inibições antimicrobianas semelhantes a antibióticos sensíveis. Para os
alcalóides, flavonóides e saponinas de Allium sativum, a faixa de concentração inibitória
mínima para todos os estudos de bactérias multirresistentes foi de 25–50 mg/mL. Para
Bunium persicum, esse intervalo foi de 12,5–50 mg/mL, e para Oryza sativa e Triticum
aestivum, o intervalo foi de 25–50 mg/mL. Nas plantas estudadas, os alcalóides estavam
em maior concentração, seguidos pelos flavonóides, e o menor nível eram as saponinas.
As atividades anti-algas in vitro contra cepas mastíticas foram realizadas nos óleos
essenciais de Thymus vulgaris L., Origanum vulgare L., Origanum majorana L., Mentha x
piperita L. (híbrido) e Allium ursinum L. contra Prototheca zopfii. (Grzesiak et al. 2018a).

O óleo de manjerona de Origanum majorana teve a maior atividade antialgal, seguido pelo
óleo de orégano (Origanum vulgare). O óleo essencial de orégano contém carvacrol, timol
e hidrocarbonetos monoterpênicos e tem atividade antibacteriana. Um produto
intramamário proprietário77 contendo 0,9 mL de óleo de orégano em 9,1 mL de um
diluente foi comparado a um produto intramamário 78 contendo 10 g de gentamicina e
solução salina controle para o tratamento de mastite clínica (Cho et al. 2015). O
tratamento foi duas vezes ao dia durante 3 dias, e o orégano foi administrado em doses
únicas e duplas a dois grupos diferentes. Os critérios de inclusão no estudo foram mastite
clínica que não respondeu em 1 semana à terapia anterior, CCS do leite> 200.000
células/mL e detecção de S. aureus e/ou E. coli no leite. O tratamento com gentamicina e
orégano diminuiu os sinais clínicos de mastite e SCC do leite, e S. aureus e/ou E. coli não
foram detectados no leite. Nos trimestres79 que receberam solução salina, os sinais
clínicos e laboratoriais de mastite aumentaram. A farmacocinética do carvacrol, timol e
dissulfeto de dialila foi estudada em gado leiteiro (Mason et al. 2017). A meia-vida
plasmática aproximada (t½) do timol é de 1,6 h e do carvacrol é de 1,5 h, e nenhum nível
de dissulfeto de dialila pode ser medido no plasma. O t½ tecidual do timol foi de 13,9–31,5
77 Eco-Mast, 10 mL/tube, Daehan New Pharm (Seoul, South Korea)
78 Daesung Gentamicin Cream, Daesung Microbiological Labs (Seoul, South Korea)
79 O úbere bovino tem quatro glândulas mamárias distintas com cada glândula drenando em uma teta.
1004
horas e de 16,9–25 horas para o carvacrol, sendo a depleção mais lenta para o fígado. A
administração tópica e intramamária resultou em níveis mensuráveis no plasma, rim e
fígado por até 72 h. A eficácia do óleo de Linum usitatissimum (linhaça) foi estudada in
vitro e in vivo contra organismos mastíticos (Kaithwas et al. 2011). O óleo de linhaça foi
extraído de sementes de linho maceradas usando éter de petróleo e tinha uma gravidade
específica de 0,952 g/mL, 5,5% de ácido palmítico, 4,7% de ácido esteárico, 19,1% de
ácido oleico, 13,7% de ácido linoleico e 57,4% de ácido linolênico. A atividade
antimicrobiana do óleo de linhaça contra S. aureus e Streptococcus agalactiae foi
comparável à cefoperazona e excedeu a cefoperazona contra Candida albicans. Bovinos
selecionados para infusões intramamárias de óleo de linhaça apresentaram sinais clínicos
localizados de mastite mais SCC de leite positivo. Os grupos de tratamento foram infusão
de óleo de linhaça, infusão de óleo de linhaça mais uma formulação intramamária
proprietária de cefoperazona80 ou uma formulação intramamária proprietária de
cefoperazona. Todos os tratamentos foram administrados durante 7 dias. O SCC do leite
não aumentou com os tratamentos, e o SCC foi reduzido no dia 7 do estudo, com o SCC
sendo menor no leite de vacas tratadas com cefoperazona. As contagens microbianas
totais foram reduzidas 87,7% pelo tratamento com óleo de linhaça e 93% por óleo de
linhaça mais cefoperazona e cefoperazona sozinha.

2.2 Medicina Tradicional Chinesa

O tratamento da mastite, na medicina tradicional chinesa, está focado no aumento do

fluxo sanguíneo, redução do calor, remoção de material tóxico e alívio da tumefação e da
dor (Lu et al. 2008). As fórmulas usadas nas receitas tradicionais chinesas para mastite
em vacas leiteiras geralmente incluem ingredientes que aumentam o fluxo sanguíneo.

Para investigar drogas fitoterápicas, a hemorreologia foi estudada em coelhos usando o

modelo de dextrana de alto peso molecular. As decocções foram feitas de rizoma
knotweed (erva daninha) gigante (Rhizoma Polygoni Cuspidati), cártamo (Flos Carthami),
raiz de sálvia vermelha (Radix Salviae Miltiorrhizae) e rizoma chuanxiong (Rhizoma
Chuanxiong). Esses materiais à base de plantas foram adquiridos de uma empresa
comercial81 e são amplamente usados na China para curar a “estase de sangue”.
Os coelhos em cada grupo receberam por via oral 1,0 mL da decocção/kg de peso
corporal uma vez por dia durante 7 dias. A raiz de sálvia vermelha foi a mais potente na
redução da estase de sangue induzida por dextrana no modelo de estase de sangue
induzida por dextran de alto peso molecular e é considerada a primeira escolha em uma
receita para mastite bovina. Atractylodis macrocephalae Koidz. (atractylodes brancos) tem

80 25 mg cefoperazone/mL, Mastiwock, Wockhardt Laboratories (Mumbai, India)

81 Dahua Traditional Chinese Medicine Company (Nanjing, Jiangsu Province)
1005
uma história de seu rizoma sendo usado na medicina tradicional chinesa. Possui fenólicos
com propriedades antioxidantes e polissacarídeos com atividades imunoestimulantes (Li
et al. 2012; Xu et al. 2015). Os polissacarídeos atractylodes concentrados e purificados
foram estudados como um estimulante imunológico em vacas leiteiras com mastite
infecciosa ou vacas com SCC > 500.000 células/mL (Xu et al. 2015). Resumidamente, o
polissacarídeo purificado (89,63%) (RAMP) foi suspenso em óleo de colza contendo
monooleato de sorbitano (Span 82 80) e monooleato de polietilenoglicol sorbitano (Tween 83-
80) e o produto final continha 8% de Tween-80 e 12, 24, e 36 mg de RAMP/mL. A irritação
do produto final foi testada em uma vaca com contagem de células somáticas < 500.000
células/mL e culturas de leite negativas. O linfonodo mamário desta vaca foi injetado com
36 mg de RAMP.

Não foram observados sinais clínicos ou evidências laboratoriais de inflamação. As vacas

selecionadas para o Experimento 1 tinham SCC do leite > 500.000 células/mL, e as vacas
do Experimento 2 tinham, pelo menos, um quarto mamário positivo para bactérias
mastíticas e SCC do leite > 500.000 células/mL. Todas as vacas nos experimentos 1 e 2
receberam injeções de 0, 12, 24 ou 36 mg de RAMP na área do linfonodo supramamário.
Para o Experimento 1, 3 semanas após o tratamento, houve declínios temporais no SCC
do leite e na N-acetil-β-D-glucosaminidase do leite, mas não houve diferenças
significativas entre os grupos de tratamento e controle. No Experimento 2, o grupo de 32
mg RAMP/mL, houve diminuições significativas no SCC do leite e na N-acetil-β-D-
glucosaminidase do leite. A amostra composta de leite, quando comparada ao grupo
controle, apresentou redução significativa no SCC do leite. Houve redução significativa
das infecções bacterianas na maioria dos quartos mamários infectados. As bactérias
isoladas foram S. aureus, Streptococcus agalactiae, Streptococcus dysgalactiae,
Streptococcus uberis, estafilococos coagulase negativos (-) e outras bactérias não
identificadas.

A química da RAMP é ramnose, arabinose, xilose, manose, glicose e galactose com

razões molares de 1,00 : 2,49 : 2,07 : 4,94 : 11,33 : 1,35. A berberina é usada na medicina
tradicional chinesa e tem atividades antibacteriana e antiinflamatória. O cloridrato de
berberina (berberina) é um alcalóide dilema de amônia do tipo isoquinolina. É isolada das
famílias Berberidaceae (bérberis), Rutaceae (cítricos) e Ranunculaceae. A atividade
antiinflamatória da berberina84 foi estudada em um modelo de mastite em camundongo
(Wang et al. 2018). Resumidamente, 50 μg/ml e 3,77 L de solução de lipopolissacarídeo (LPS) de E.
coli (0,2 mg LPS/mL) foram injetados nos dutos de leite de camundongos lactantes
82 Sigma-Aldrich
83 Sigma-Aldrich
84 Controle de Produtos Farmacêuticos e Biológicos (Pequim, China)
1006
usando as duas maiores glândulas mamárias dos cinco pares ventrais. Os grupos de
tratamento eram controle (apenas LPS); três grupos que receberam injeções
intraperitoneais de LPS mais 5, 10 e 20 mg de berberina/kg de peso corporal,
respectivamente; e um grupo que recebeu LPS mais 5 mg de dexametasona
(intraperitoneal)/kg de peso corporal. A berberina e a dexametasona foram injetadas 1
hora antes do LPS e 12 horas após a administração do LPS. Os efeitos da berberina
foram significativos para diminuir a infiltração de neutrófilos e diminuir a expressão de
mRNA e secreção de fator de necrose tecidual (TNF) -a, IL-1β e IL-6 de forma
dose/dependente. O tratamento com berberina suprimiu o receptor 4 toll-like ligado a LPS
(TLR4) e a ativação de NFkB p65 e a fosforilação de I-kB. A histopatologia da infusão de
LPS foi exsudato inflamatório e esfoliação celular, e estes foram diminuídos pelos
tratamentos com berberina e dexametasona.

2.3 Tratamento com óleos essenciais

Os óleos essenciais de sálvia (Salvia officinalis) foram avaliados em ovelhas como

tratamento por infusão para mastite crônica (Alekish et al. 2017). A concentração inibitória
mínima de óleo essencial de sálvia para S. aureus foi de 120 mg/mL, e a concentração
bactericida mínima foi de 6,1 mg/mL. O SCC do leite diminuiu em 24 e 48 h. O óleo de
orégano de Origanum vulgare L. foi avaliado como um tratamento para mastite bovina
associada a E. coli e S. aureus sendo eliminados no leite (Byung-Wook et al. 2015).
Mastite clínica neste estudo foi definida como SCC do leite > 200.000 células/mL e E. coli
ou S. aureus sendo eliminado no leite. Os tratamentos foram controles, que receberam
infusões intramamárias de soro fisiológico estéril, tratamento antibiótico com 10 g de
gentamicina85 ou uma preparação comercial de óleo de orégano 8610 administrada em
dose única ou dupla; todos os tratamentos foram administrados duas vezes ao dia
durante 3 dias. O tratamento com solução salina e óleo de orégano resultou no inchaço
de alguns quartos.

SCC no leite diminuiu nos quartos tratados com gentamicina e óleo de orégano. Nos
grupos gentamicina e óleo de orégano, E. coli ou S. aureus não foram detectados no leite
na cessação do tratamento (dia de estudo 4). O tratamento com gentamicina e óleo de
orégano também diminuiu o número de glóbulos brancos no sangue. Outros óleos
essenciais foram avaliados in vitro por suas atividades antibacterianas contra patógenos
mastíticos (Ananda Baskaran et al. 2009). Os compostos 87 estudados foram carvacrol e
timol de óleo de orégano, eugenol de óleo de cravo e trans-cinamaldeído de extrato de

85 Gentamicin Cream, Daesung Microbiological Labs (Korea)

86 Eco-Mast 10 mL/tube containing 0.9 mL oregano oil, Daehan New Pharm (Korea)
87 Sigma-Aldrich Chemical Co. (St Louis, MO)
1007
casca de canela. Os organismos de teste foram Streptococcus agalactiae, Streptococcus
dysgalactiae, Streptococcus uberis, S. aureus e E. coli. Destes, o trans-cinamaldeído foi o
mais eficaz em matar bactérias e sua atividade de matar persistiu por 14 dias. Carvacrol,
timol e eugenol também foram eficazes em matar os cinco patógenos, mas menos
eficazes do que o trans-cinamaldeído. Um gel herbáceo proprietário 88 foi estudado como
tratamento para mastite subclínica (Bhatt et al. 2014). Dez gramas do gel de ervas
continham 200 mg de Eucalyptus globulus, 200 mg de Glycyrrhiza glabra, 40 mg de
Curcuma longa, 1,0 g de Cedrus deodara, 40 mg de Paederia foetida e 1 g de enxofre. O
gel de ervas foi aplicado no úbere após as ordenha da manhã e da noite por 5 dias. Os
parâmetros estudados foram citocinas e SCC do leite e unidades formadoras de colônias
de bactérias no leite. A atividade transcricional de citocinas no leite (IL-6, IL-8, IL-12, GM-
CSF, IFN-γ e TNF-a) foi significativamente aumentada no dia 5 do estudo e reduzida
significativamente no dia 21 do estudo. de bactérias no leite diminuiu significativamente
nos dias 5 e 21 do estudo, mas não houve reduções no SCC do leite.

2.4 Mel

O mel, um armazém de alimentos de origem vegetal feito por abelhas, é um dos

medicamentos tradicionais mais antigos relatados (Mandal e Mandal 2011). A atividade
antibacteriana do mel é variável e está ligada à composição de sua espécie floral (Stagos
et al. 2018). O mel é um nutracêutico preparado por abelhas a partir de materiais vegetais
selecionados que contêm açúcar. A abelha melífera (Apis mellifera) é a produtora
predominante de mel utilizado na medicina tradicional e alopática. No entanto, o mel feito
por outras abelhas também é usado e é creditado por substâncias não encontradas no
mel feito por Apis mellifera (Cortopassi-Laurino et al. 2006). Um ramo da medicina
alternativa conhecido como apiterapia concentra-se no uso do mel como remédio. A
química do mel é em parte determinada pela fonte vegetal do néctar. Por exemplo, o mel
de Leptospermum scoparium (mel de manuka) demonstrou atividade antibacteriana
contra bactérias Gram-positivas, Gram-negativas, aeróbias e anaeróbias. Infecções e
feridas sem resposta reacenderam o interesse pelo uso do mel como medicamento. A
atividade antibacteriana do mel egípcio e dos óleos essenciais de cominho preto e cebola
foi estudada em patógenos mastíticos isolados de ovelhas e cabras (Abdalhamed et al.
2018). Os autores concluíram que o mel egípcio e os óleos essenciais de cebola e
cominho preto têm uma forte atividade antibacteriana contra bactérias mastíticas isoladas
de ovelhas e cabras. Os óleos essenciais apresentaram maior atividade antibacteriana
contra bactérias Gram-positivas e Gram-negativas quando comparados ao mel. O mel de
abelhas sem ferrão na Austrália tem atividade antibacteriana contra bactérias Gram-
88 Mastilep, Dabur Ayurvet Ltd. (Ghaziabad, India)
1008
positivas e Gram-negativas e é usado na medicina tradicional (Boorn et al. 2010). O pH é
3,85, 25% de água e redução da atividade do açúcar de 54,2/100 g. A fonte vegetal dos
precursores do mel é importante em sua atividade antibacteriana (Almasaudi et al. 2017).
As atividades antibacterianas do mel de flores de manuka, Nigella sativa L. e Sidr
(Ziziphus spina-christi L.) contra S. aureus foram estudadas in vitro. O mel da flor de
manuka mostrou um efeito bactericida tanto em S. aureus resistente à meticilina quanto
insensível à meticilina. O mel das flores de Sidr e N. sativa teve efeito bacteriostático. A
atividade antibacteriana do mel é creditada ao peróxido de hidrogênio, conteúdo
polifenólico e compostos proteicos indefinidos.

2.5 Raiz de Ginseng

Raiz de ginseng de Panax ginseng Meyer., tem sido usada como fitofarmacêutico na
medicina tradicional oriental tradicional por mais de 2.000 anos. É considerada uma das
ervas mais valiosas na Coreia, Japão e China. Ginseng é conhecido por conter
poliacetileno, ginsenosídeo, polissacarídeo ácido, peptídeo ácido semelhante à insulina e
composto aromático antioxidante (Choi 2008). A modificação da resposta biológica do
extrato de ginseng Rg1 foi estudada em um modelo de camundongo de mastite induzida
por S. aureus (Silvestrini et al. 2017). O extrato tinha 27% de ginsenosídeo Rg 189 e não
continha endotoxinas (limite de detecção < 0,05 ng/mL). Os testes de irritação foram feitos
para determinar a tolerância de Rg 1 intramamária pela infusão de 100 μg/ml e 3,77 L de 3 mg/mL, 10
mg/mL ou 50 mg/mL de Rg1 nos ductos do teto de camundongos em lactação. Não havia
patologia macroscópica observável, mas havia histopatologia. Para as glândulas
mamárias que receberam infusões de 3 e 10 mg Rg 1/mL, alguns exsudatos de neutrófilos
e mononucleares foram observados no estroma interlobular e no lúmen dos alvéolos 6,
24, 48 e 72 horas após a infusão. A infusão da solução de 50 mg RG 1/mL causou, em 24
horas, exsudato moderado de neutrófilos, macrófagos e linfócitos. Às 48 h, havia
neutrófilos, eosinófilos e mastócitos circundando os alvéolos e dutos de leite. Setenta e
duas horas depois, havia um grande número de neutrófilos, eosinófilos e mastócitos no
interstício e no lúmen dos dutos de leite e alvéolos. Os camundongos do Grupo 1
recebem infusões no ducto de leite de 100 μg/ml e 3,77 L de solução salina estéril seguida 72 h mais
tarde com 100 μg/ml e 3,77 L de inoculação intraductal de 106 unidades formadoras de colônias de
solução de S. aureus. Os camundongos do Grupo 2 receberam 100 μg/ml e 3,77 L de 50 mg de RG 1/
mL seguido 72 h mais tarde com uma infusão intraductal de 100 μg/ml e 3,77 L de solução de S.
aureus. Os camundongos do Grupo 3 receberam uma infusão intraductal de 100 μg/ml e 3,77 L de
solução de S. aureus. O pré-tratamento com Rg1 aumentou significativamente a
depuração de S. aureus. A infusão de RG1 aumentou significativamente a expressão da
89 Indena®, SpA (Milan, Italy)
1009
glândula mamária da expressão de mRNA para IL-1α, TNF-a, TLR2 e TLR4 e a secreção
de NFkB-p65. Este estudo demonstrou o potencial do extrato de ginseng para atuar como
um modificador da resposta biológica, aumentando a resposta imune à infecção por S.
aureus na glândula mamária. Um estudo de eficácia foi realizado em RG 1 em vacas
leiteiras para a eliminação da mastite subclínica por S. aureus (Hu et al. 2001).

Um estudo de eficácia foi realizado em Rg 1 em vacas leiteiras para a eliminação da

mastite subclínica por S. aureus (Hu et al. 2001). Vacas com mastite clínica receberam
injeção subcutânea de 8 mg de Rg 1 por 6 dias. As vacas de controle receberam injeções
de solução salina estéril. O tratamento com Rg 1 tendeu a diminuir SCC/mL de leite e o
número de quartos infectados por S. aureus. A fagocitose in vitro e o estresse oxidativo
aumentaram significativamente 1 semana após o regime de tratamento com RG 1. Outro
estudo sobre o extrato de ginseng em bovinos leiteiros no final da lactação mostrou que
as reações inflamatórias induzidas pelo ginseng (Indena SPA 90) provavelmente
favoreceriam a remoção de organismos que causam mastite crônica (Baravalle et al.
2011). O extrato de ginseng de 23,9% consistia em ginsenosídeos de rotopanaxatriol RG 1,
Rf e Re, calculados como RG1, e ginsenosídeos de protopanaxadiol R c, Rd, Rb2 e Rb1
calculados como Rb1. A solução final continha 3 mg de extrato de ginseng / mL em
solução salina a 0,89%. A unidade experimental foi um quarto mamário, que foi agrupado
como controle (sem injeções), injeção de solução salina e 10 mL de extrato de ginseng 3
mg / mL. Houve interrupção da ordenha após as infusões intramamárias. O leite foi
coletado 24, 48 e 72 horas após o tratamento, e as vacas foram abatidas 7 dias após o
tratamento e os tecidos mamários examinados por histopatologia, histoquímica e
procedimento de Western blot. Em 24 h, um inchaço moderado foi observado nos quartos
tratados com extrato de ginseng. O TNF-a pró-inflamatório da glândula mamária
aumentou significativamente nos quartos que receberam o tratamento com extrato de
ginseng, assim como o número de monócitos/macrófagos (determinado com anticorpo
CD14). Um estudo de acompanhamento sobre o extrato de ginseng (Indena SPA forneceu
insights sobre os mecanismos de ação (Baravalle et al. 2015). Vacas com sinais
laboratoriais e clínicos de mastite no final da ordenha foram utilizadas no estudo. A
unidade experimental foi um quarto da glândula mamária. Os quartos foram infundidos
com 10 mL de extrato de ginseng 3 mg/mL de extrato, solução salina ou nenhum
tratamento. As vacas não foram ordenhadas após a infusão. Este estudo mostrou que o
extrato de ginseng estimula a expressão de TRL2 e TRL4 no tecido mamário.

90 Indena SpA (Milan, Italy)

1010
2.6 Candidatos e Remédios Herbais Proprietários

Tinospora cordifolia tem história tradicional como fitorremédio na medicina humana e

veterinária e tem efeitos antibacterianos, imunomoduladores e antioxidantes. Extrato
hidrometanólico (50:50) de Tinospora cordifolia Wild. foi estudado como um remédio em
vacas mastíticas (Mukherjee et al. 2010). As vacas dos grupos 1 e 2 não tinham evidência
laboratorial ou clínica de mastite, e as vacas dos grupos 3 e 4 tinham evidência de mastite
clínica e estavam liberando bactérias patogênicas em seu leite. Para os grupos 2 e 3, uma
solução de 100 mg de extrato de Tinospora cordifolia em pó diluído para 7,5 mL em
tampão fosfato estéril foi administrada intramamária por 5 dias, e o grupo 4 recebeu
tampão fosfato sem extrato de T. cordifolia. A infusão do extrato aumentou inicialmente o
SCC do leite e, em seguida, o SCC do leite foi significativamente reduzido no dia do
estudo 15. As contagens bacterianas totais no leite foram reduzidas no dia do estudo 3. A
infusão do extrato de T. cordifolia aumentou a atividade fagocítica das células
polimorfonucleares e aumentou suas enzimas lisossomais no leite. Em vacas tratadas
com extrato de T. cordifolia, o nível de interleucina-8 aumentou. Este estudo mostra que o
extrato hidrometanólico de T. cordifolia é um fitofármaco candidato para o tratamento da
mastite bovina.

Um produto patenteado (Phyto-Mast91) contendo extratos de Angelica sinensis, Gaultheria

procumbens, Thymus vulgaris, Glycyrrhiza uralensis, vitamina E, timol extraído, salicilato
de metila, glicirrizina e a-pineno foi avaliado como um tratamento para mastite bovina
(Pinedo et al. 2013). No Colorado (EUA), de fevereiro a setembro, vacas leiteiras em uma
fazenda orgânica com mastite clínica foram incluídas no estudo, e vacas com sinais
sistêmicos (hiperpirexia) foram excluídas. A mastite foi pontuada em uma escala de 1–3,
com o número 3 sendo o mais grave. Vacas de tratamento, após ordenha e esvaziadas,
receberam infusão intramamária de 15 mL do produto patenteado a cada 12 h por 3 dias.
As vacas de controle foram ordenhadas e despojadas e não receberam nenhuma infusão.
Amostras de leite para microbiologia foram coletadas antes do tratamento e nos dias 14 e
48 do estudo. Não houve diferenças significativas entre os grupos quanto à paridade, dias
no leite e escores de gravidade da mastite ocorridos antes do tratamento. Os patógenos
identificados no leite foram 10,3% S. aureus, 20,1% E. coli e 40,3% coagulase (-)
estreptococos, e não houve diferenças entre os grupos para ocorrências de pré-
tratamento de S. aureus e E. coli. Duas vacas em cada grupo foram retiradas do estudo
devido a sinais sistêmicos de mastite. Não houve diferenças entre os grupos para curas
bacteriológicas e clínicas. Houve um efeito significativo no grupo tratado para redução do
SCC do leite após mastite clínica. Um estudo farmacocinético sobre este fitocêutico (Fito-
91 Phyto-Mast®, Penn Dutch Cow Care (Narvon, PA)
1011
Mast) em cabras lactantes (genética alpina) mostrou que o timol foi absorvido
sistemicamente após um tratamento intramamário de 5 mL (McPhee et al. 2011). Após o
tratamento intramamário, o timol foi detectado no plasma em 15 minutos e no leite 12
horas depois e não foi detectado no plasma 4 horas depois. Salicilato de metila não foi
detectado no leite. Os produtos fitofarmacêuticos da mástique foram testados quanto às
suas ações antibacterianas no leite (Mullen et al. 2017). Esses produtos foram
intramamário Fito-Mast, Uddersol tópico92 e intravulvar Dr. Paul'sCEGtincture. 93 Os
métodos usados foram Delvotest®-P 94 e Charm® SL Beta-lactam. 95 Nenhum desses
fitofármacos deu um teste positivo em leite em concentrações esperadas para ocorrem no
leite cru.

3. Tratamentos para vacas secas

A terapia da vaca seca consiste no tratamento de animais leiteiros com medicamentos e
selantes de teto no final da lactação (secagem). Mullen et al. (2014) relataram um estudo
de vários anos, comparando o tratamento patenteado com antibiótico para vacas secas
com tratamentos para vacas secas com produtos fitoterápicos patenteados. O primeiro
grupo de tratamento foi antibiótico intramamário (penicilina-diidroestreptomicina 96) e um
selante do canal do teto à base de subnitrato de bismuto 97. Um segundo grupo foi tratado
com um fitofármaco patenteado (Phyto-Mast), o terceiro grupo recebeu Phyto-Mast e um
selante de canal de teto à base de fito (Cinnatube), 98 e o quarto grupo não recebeu
nenhum tratamento. O tratamento com antibióticos foi limitado à fazenda experimental
devido à inclusão de fazendas leiteiras orgânicas. Os dados de produção foram
padronizados para lactação equivalente a 305 anos. Os indicadores de efeito foram a
mudança na pontuação das células somáticas do leite da amostra de desidratação para a
purificação dos dados de vacas e quartos, mudanças na microbiologia do leite da
desidratação para a lactação subsequente e taxa de descarte. Comparando as lactações
pré e pós-tratamento, não foram observadas diferenças significativas na produção de
leite, leite SCC e taxas de cura (19% quartos infectados na secagem). A taxa de novas
infecções não foi significativamente diferente, exceto o Cinnatube diminuiu
significativamente as reinfecções (15 ± 7%) em comparação com os controles (35 ± 11%).
No geral, os tratamentos com ervas para vacas secas foram semelhantes à terapia com
antibióticos e nenhum efeito colateral foi observado com os produtos à base de ervas. Os
92 Ralco Animal Health (Marshall, MN, USA)
93 Cayenne, echinacea, and garlic (Arcadia, WI, USA)
94 https://www.dsm.com
95 https://www.charm.com
96 Quartermaster, Zoetis (Florham Park, NJ)
97 Orbeseal, Zoetis (Florham Park, NJ)
98 New AgriTech Enterprises (Locke, NY)
1012
ingredientes ativos do Cinnatube são azeite de oliva, óleo da árvore do chá, cera de
abelha, óleo de calêndula e óleo de eucalipto. 99 Um selante de teta patenteado (canal
intra-tetina) foi comparado a tratamentos homeopáticos de secagem (por via oral) para
prevenir a recorrência de mastite (Klocke et al. 2010). Oito remédios homeopáticos foram
selecionados como mais adequados do Veterinary Materia Medica. 100 Os remédios
homeopáticos representados foram mercurius solubilis, lachesis mutus, enxofre, cálcio
carbonicum, cálcio fosfórico, Pulsatilla pratensis, sépia e sílica. Os remédios
homeopáticos foram administrados por via oral nos últimos 5 dias de lactação. Os grupos
de tratamento foram vacas não tratadas, selador de teto e remédios homeopáticos.
Nenhuma mastite clínica foi observada durante o período seco. Durante os 100 dias após
o parto, foram observados oito casos clínicos de mastite, e as ocorrências não foram
significativamente diferentes entre os grupos de tratamento. As ocorrências foram de 3%
para o grupo controle não tratado, 9% para o grupo homeopático e 11% para o grupo do
selador de teto. Oitenta por cento dos quartos eram cultura negativa e não houve
diferenças entre os grupos.

4. Homeopatia
A homeopatia, um sistema médico baseado em curas semelhantes, é encorajado pelos
regulamentos da União Europeia para a agricultura biológica e é comumente utilizado em
fazendas de leite orgânicas. Estima-se que em partes da Europa, 34-51% das ocorrências
de mastite clínica são tratadas por remédios homeopáticos (Keller e Sundrum 2018). A
agricultura orgânica na Europa incentiva o uso de produtos homeopáticos antes do uso de
medicamentos convencionais. Para a mastite, os agricultores de leite se misturam
terapias veterinárias convencionais com homeopatia. Sua escolha de terapias está ligada
à experiência, eficácia clínica, gravidade da doença, custos e desejo de usar menos
produtos químicos sintéticos na produção agrícola. Estudos sobre a eficácia dos
tratamentos de homeopatia são difíceis, porque os profissionais da homeopatia variam em
suas escolhas de remédios. Há diferenças nas descobertas de pesquisa sobre a eficácia
da homeopatia no tratamento da mastite ruminante (Mathie e Clausen 2014). Um estudo
randomizado de duplo-cego na Alemanha não encontrou diferença entre tratamentos de
homeopatia e placebo (Ebert et al. 2017).

Em um estudo norueguês, os rebanhos utilizando terapias de homeopatia não foram

significativamente diferentes no rendimento do leite, taxas de abate, patógenos
mastíticos, SCC de leite a granel e trimestres mamários secos (agalactia devido à
99 http://newagritech.com/
100 Steingassner HM (1998) Homoopathische Materia Medica fur Veterinarmediziner (Wien: Wilhelm Maudrich, Vienna)
1013
doença) (Hektoen 2004). Um estudo em vacas leiteiras norueguesas, utilizando um um
estudo cruzado estratificado, descobriu que não havia diferenças entre o tratamento
homeopático e antibiótico nos dias de estudo 7 e 28 (Hektoen et al. 2004). Grupos de
tratamento foram placebo, remédio homeopático e um regime antibiótico padronizado. A
comparação foi feita na pontuação 1 e pontuação 2 com pontuação 1 sendo contados de
sinais agudos de mastite e pontuação 2 sendo contados de sinais crônicos de mastite.
Mudanças observáveis no leite sem outros sinais de inflamação intramamária foram
definidas como mastite suave. A presença de inflamação aguda da glândula mamária sem
sinais clínicos sistêmicos foi definida como mastite moderada, enquanto a mastite grave
foi definida como mastite moderada, além de sinais sistêmicos de doença, por exemplo,
temperatura corporal elevada, etc. Para todos os grupos, o escore 1 foi significativamente
reduzido no dia de estudo 7. Para percentuais reduções na pontuação 1 por dias 0-7, não
houve diferenças significativas entre homeopatia e placebo.

Houve uma redução significativamente maior na pontuação percentual 1 para vacas no

regime de antibióticos. Para a pontuação 1, comparações da área sob a curva (AUC) para
o intervalo de dias 0-28 mostrou que a homeopatia não era significativamente diferente do
grupo antibiótico e do grupo placebo. A AUC para o grupo antibiótico foi significativamente
diferente do grupo placebo. Para todos os grupos, a pontuação percentual 2 foi
significativamente reduzida do dia 0 a 28. No dia 0 a 28, o grupo homeopático mostrou as
maiores reduções percentuais na pontuação 2 seguida do grupo antibiótico e do grupo
placebo, mas os grupos não foram significativamente diferentes de um para o outro. A
AUC para os grupos não foi significativamente diferente um do outro. O tratamento da
homeopatia tinha mais desfechos negativos microbiológicos. A resistência de organismos
gram-positivos aos antibióticos não foi considerada um fator neste estudo. Um estudo
usando 180 vacas leiteiras lactantes (rendimento de leite de 6500-10.000 kg de leite/vaca/
ano) com mastite clínica10125 constatou que os remédios antimicrobianos ou alternativos
devem ser baseados em patógenos de leite identificados (Keller e Sundrum 2018). As
vacas que atendem aos critérios de mastite para tratamento homeopático serem
repertificados individualmente de acordo com a teoria de Hahnemann e padronizados
usando um repertório de software de remédios mastíticos e escolhas feitas por um
homeopata veterinário. Os antibióticos eram produtos mastíticos comerciais utilizados de
acordo com o rótulo e as diretrizes alemãs para uso veterinário prudente de farmacêuticos
antimicrobianos. As amostras de leite foram coletadas antes do tratamento e nos dias de
estudo 7, 14 e 28 e testados para os patógenos e o SCC do leite determinado. Os
patógenos isolados foram S. aureus, Streptococcus uberis, Streptococcus dysgalactiae,

101 Critérios de Federação Internacional Dairy (Bruxelas, Bélgica)

1014
E. Coli, Klebsiella spp, espécies de Enterococcus, Serratia spp, outras bactérias
coliformes, outros estreptococos positivos, coagulase (-) Staphylococci, Corynebacterium
bovis e leveduras. No dia 7, as vacas tratadas com antibióticos tiveram 81%, remédios
homeopáticos 43%, e controle 45%, respectivamente, eliminação de patógenos
mastíticos. Resultados semelhantes foram observados no dia do estudo 14. No dia 28, as
vacas tratadas com antibióticos tiveram as curas bacteriológicas mais altas e a menor
taxa não responsiva. Nas vacas com mastite clínica e culturas negativas de leite de pré-
tratamento, não houve diferenças entre as vacas de tratamento e controle. A redução no
SCC do leite foi de 39%, 34% e 27%, respectivamente, para grupos antibióticos,
homeopáticos e de controle. Taxa total de cura não diferiu entre os métodos de
tratamento. Vacas que atingiram uma contagem de células somáticas de 100.000 células
após o tratamento foram independentes da estratégia de tratamento. Houve um aumento
no número de vacas no grupo de tratamento antibiótico que se tornaram não responder
ao tratamento. Havia evidências de que o tratamento antibiótico de infecções causados
por E. coli é contraindicado. Para as outras infecções, antibióticos foram o melhor
tratamento para a recuperação do úbere.

5. Probióticos, bacteriocinas e bacteriófagos

5.1 Histórico

Há evidências de que a glândula lactante pode ter seu próprio microbioma único. O
conceito emergente é aquele leite como deixa o mamilo não é estéril e é uma importante
fonte de bactérias para “construir” o microbioma intestinal do neonato (Fernandez et al.
2013; Gomez-Gallego et al. 2016). Alguns autores visam leite materno como fonte de
probióticos para o bebê. O conceito emergente para mastite infecciosa em humanos é
que a causa pode ser uma perturbação no microbioma da glândula mamária. Os fatores
que influenciam o microbioma da glândula mamária de mulheres em lactação incluem o
modo do parto (vaginal vs. cesariana), quimioterapia antimicrobiana anterior, etapa de
lactação, idade gestacional, índice de massa corporal, fisiopatologia concorrente, a
amostra de leite coletada, e localização geográfica (Gomez-Gallego et al. 2016; Kumar et
al. 2016). Há evidências de que a glândula mamária de ruminantes não tem um
microbioma único (Rainard 2017). O microbioma mamário associado aos ruminantes pode
existir no orifício do teto e no canal da teta. Por exemplo, a amamentação das ovelhas por
cordeiros muda dinamicamente a microbiota do ducto de teto e pode transferir organismos
infecciosos (Gougoulis et al. 2008). Os múltiplos pequenos ductos de leite que saem do
mamilo podem ser reservatórios para o microbioma mamário humano. Estudos do
1015
microbioma associados a cada espécie de animal estão influenciando recomendações
médicas e alterando os critérios para prescrever antibióticos na gestão de infecções
microbianas.

A formação intramamária de biofilmes por coagulase (-) staphylococci, S. aureus, E. coli, e

Enterococcus faecalis é provavelmente importante na mastite crônica e subclínica (Olson
et al. 2002; Gomes e Henriques 2016; Gomes et al. 2016). Há evidências de que quando
um biofilme é formado, há menos expressão de fatores de virulência que excitam as
respostas imunes intramamárias clinicamente evidentes (Le e Otto 2015). As bactérias
sésseis em biofilmes podem ter 10-1000 vezes menos sensibilidade aos antibióticos que
as bactérias planctônicas que vivem fora do biofilme. A expressão gênica bacteriana da
virulência pode ser regulada no biofilme versus a expressão gênica de virulência em
formas planctônicas fora do biofilme. Esta é a evidência de que as estirpes de S. aureus
isoladas de animais no mesmo rebanho podem produzir biofilmes com composições
excepcionalmente diferentes (Ceotto-Vigroder et al. 2016). Lactobacillus spp. pode inibir a
formação de biofilmes por espécies de Streptococcus, e epigalocatequina galato no chá-
verde é eficaz contra a formação de biofilmes por alguns organismos (Yang et al. 2012). A
adesina intercelular polissacarídica/poli-n-acetil lucosamina é importante na formação de
biofilmes, em parceria com proteínas. Os biofilmes fornecem aos patógenos com um
mecanismo que perturba as defesas imunológicas e diminui a suscetibilidade dos
patógenos aos antibióticos. Algumas bacteriocinas são eficazes contra biofilmes. Dezoito
estirpes de S. aureus isolados a partir de gado foram encontrados para produzir biofilmes
(Ceotto-Vigoder et al. 2016). Oito dessas cepas produziram biofilmes distintos e foram
selecionados para determinar sua sensibilidade à nisina e lisostafina. Para S. aureus
planctônicas, a concentração mínima de inibidor de nisina variou de 15,6 a 500 μg/ml e 3,77 g/ml e
3,9 a 50 μg/ml e 3,77 g/ml para lisostafina. Destacamento do biofilme e morte de células séssis foram
observados em 0,4 μg/ml e 3,77 g lisostafina/ml, e 100 μg/ml e 3,77 g nisina/ml causado redução notável na
viabilidade de S. aureus. Este estudo sugere que a lisostafina sozinha ou em combinação
com a nisina é candidata para o controle da mastite bovina de S. aureus. O uso de
extratos de plantas na inibição da formação de biofilme é uma área promissora para
terapêutica combinada. S. Aureus se esconde intracelularmente do sistema imunológico,
e isso é considerado um dos mecanismos para a existência de mastite infecciosa crônica.

5.2 Lactococcus lactis e bacteriocinas

A resistência antibiótica aumentou o interesse em bacteriocinas e bactérias produzindo

bacteriocinas. As bacteriocinas são péptidos naturais que são ribossomicamente
sintetizados e pós translacionalmente modificados para aumentar a funcionalidade (Allen
1016
et al. 2014). Este grupo de péptidos é produzido por bactérias de ácido láctico Gram-
positivas (Bedard e Biron 2018). Algumas bacteriocinas, por exemplo, nisina, têm
aprovação governamental para uso pela indústria alimentícia. O Staphylococcus não-
aureus é um grupo heterogêneo de aproximadamente 50 espécies que são comumente
isoladas de amostras de leite recolhidas assepticamente. Isso é evidência de que as
bacteriocinas produzidas pelo residente Staphylococcus não-aureus protegem a glândula
mamária de patógenos mastíticos pela produção de bacteriocinas.

A resistência antibiótica de S. Auras isoladas de vacas leiteiras com mastite subclínica foi
estudada na Polônia Oriental (Szweda et al. 2014). A sensibilidade de S. Auras foi testada
contra 20 antibióticos e a lisostafina de bacteriocinas e nisina. A ordem decrescente de
resistência antibiótica foi estreptomicina > β-lactama > amoxicilina > ampicilina. Todos os
isolados resistentes à amoxicilina e da ampicilina também foram resistentes à penicilina. A
concentração inibitória mínima para lisostafina foi de 0,008-0,5 μg/ml e 3,77 g/ml, e todos os isolados
de S. auras foram considerados sensíveis. Para nisina, os isolados de 18/39 de S. Auras
foram considerados acima de 32 μg/ml e 3,77 g/ml e considerados resistentes. Um estudo em
Flandres, Região da Bélgica, descobriu que os rebanhos participantes de um programa de
gestão de saúde veterinário haviam diminuído o uso geral de antibióticos para controle de
mastite (Stevens et al. 2016). Seletivamente secando vacas e tratar vacas com
substâncias homeopáticas também diminuíram o uso de antibióticos. O uso de
antibióticos criticamente importantes (fluoro quinolonas e terceira e quarta geração
cefalosporinas) foi associado à forma como a mastite subclínica foi gerida. Estudos
fornecem evidências de que os genomas de Staphylococcus não-aureus da glândula
mamária fornecem evidências de que > 21% desses isolados são possíveis produtores de
bacteriocinas (Carson et al. 2017).

Lactococcus lactis cepa V7, uma bactéria ácida láctica isolada de vacas saudáveis no
Brasil, foi estudada em cultura de células epiteliais mamárias bovinas como modificadores
de patogenicidade de S. aureus e E. coli (Assis et al. 2015). V7 L. lactis inibiu a
internalização de S. aureus e E. coli nas células epiteliais, mas tinha atividade limitada
contra a adesão de S. aureus para superfícies celulares. Além disso, não inibiu a adesão
de E. coli às células epiteliais. O próprio V7 L. Lactis induziu a produção de citocina
CXCL8 que aumentou a resposta CXCL8 a E. coli. Lactobacillus spp. foram isolados de
gado leiteiro e estudados como probióticos candidatos para prevenção e tratamento da
mastite bovina (Espeche et al. 2012; Frola et al. 2012). Um estudo sobre a atividade
antagônica de Lactobacillus perolens CRL 1724 e Lactobacillus plantarum CRL 1716
mostrou que L. perolens CRL 1724 foi superior no crescimento do antagonizante de

1017
antagonização de patógenos mastíticos (Frola et al. 2012). O CRL 1716 também tinha
maior índice de adesão às células epiteliais mamárias. Os canais de tetos de duas vacas
lactantes foram infundidos com 103 e 106 unidades de formação de colônias de L.
perolens. Às 24 horas após a inoculação, nenhum sinal clínico de mastite foi observado e
um aumento duas vezes no SCC de leite foi observado. Como as 10 6 unidades
formadoras de colônia eram bem toleradas, nove canais de tetos em três vacas foram
inoculadas. Houve um aumento significativo no SCC do leite em 24 h e 48 h e depois
retornou aos valores de pré-inoculação. No dia de estudo 15, 22% dos tetos continuaram
a verter L. perolens CRL 1724. Um estudo em um modelo de mastite do rato mostrou que
a infusão Lactobacillus lactis lactis LMG102 7930 na glândula mamária foi imprevisível na
gravidade da mastite resultante (Camperio et al. 2017). A histopatologia da inoculação
intramamária de Lactobacillus perolens CRL 1724 foi estudada em gado leiteiro (Frola et
al. 2013). Vacas em lactação tardia (média de 14 kg de leite/dia), sem evidência clínica e
laboratorial de mastite, foram inoculadas intramamário após a noite de ordenha com um
milhão de unidades de formação de colônia de L. perolens CRL 1724 em 1 ml. A unidade
de estudo foi um quarto mamário com três tetos sendo infundidos e um teto usado como
controle. Após a infusão, não havia sinais físicos de mastite ou mudanças nas aparições
do leite despojado do úbere. O SCC do leite aumentou para 4,5 x 10 6 células/ml e
retornou a 106 células/ml em 7 dias. A histopatologia foi aumentada como o exsudato de
neutrófilos no epitélio da cisterna e do congestionamento da teta. Havia colônias de
bactérias gram-positivas aderidas ao epitélio da cisterna. A resposta imune após a infusão
intramamária de Lactococcus lactis DPC 3147, um organismo de qualidade alimentar, foi
estudado em gado leiteiro (Beecher et al. 2009). Esta cepa de L. lactis também produz a
bacteriocina lacticina 3147. Após a infusão intramamária, L. lactis foi recuperada em leite
até 72 h, e nenhum L. lactis foi recuperado dos tetos que não foram infundidos com
bactérias vivas. Sete h pós-infusão com L. lactis, foram observados sinais de inflamação,
incluindo glândula mamária inchada, temperatura corporal elevada e SCC de leite
elevado, e coágulos foram observados no leite. Todas as vacas infundidas continuaram a
ter sinais de inflamação do úbere em 7 dias após a infusão. Um aumento notável foi
observado na expressão gene imune, e estes foram para interleucina (IL) -1b e IL-8, com
maior expressão correspondente a picos no estudo SCC. O leite em gado leiteiro com
mastite crônica ou aguda compararam infusões mamárias de L. lactis DPC3147 (grau
alimentar) a infusões de antibiótico aprovado para uso intramamário (Klostermann et al.
2008). A infusão antibiótica 103 continha amoxicilina (200 mg), ácido clavulânico (50 mg) e
prednisolona (10 mg). No tratamento da mastite crônica, culturas vivas de L. lactis
102 BCCM/LMG Bacteria Collection (Belgium)
103 Synulox, Pfizer Animal Health (New York, USA)
1018
DPC3147 foram eficazes no tratamento de mastite infecciosa (Staphylococcus aureus)
com 7 quartos infectados tornando-se livre de patógenos em comparação com 5 dos 11
quartos tratados com antibiótico. No tratamento da mastite aguda, 15/25 casos de L. lactis
DPC3147 e 18/25 casos tratados com antibiótico não mostravam sinais clínicos após o
tratamento. Um estudo simultâneo investigou a resposta imune da glândula mamária a L.
lactis DPC3147 (Crispie et al. 2008). Em comparação com os quartos mamários, os
quartos infundidos com L. lactis DPC3147 tiveram um grande aumento nos leucócitos do
leite. O recrutamento de leucócitos nos quartos tratados com tratamento antibiótico
(formulação continha prednisolona) foi significativamente menor. A infusão produziu uma
resposta imune semelhante à cultura in vivo. O leite amilóide A e haptoglobina foram
aumentados por infusão de 26BCCM/LMG, tanto as bactérias vivas e as bactérias secas
congeladas com a mais alta resposta que ocorrem com a infusão das células liofilas.

Lactococcus lactis LMG 7930 foi estudado in vitro como um probiótico candidato para o
controle de mastite (Armas et al. 2017). A cepa L. lactis LMG 7930 é um produtor de
nisina conhecido e é usado na produção de queijo suíço. Esta cepa mostrou ser sensível
aos antibióticos, ter hidrofobicidade de superfície média, não aceitar elétrons, ter baixa
auto agregação e não ter capacidade de co agregação com patógenos. A tensão tem
antagonismo contra muitos patógenos microbianos isolados das glândulas mamárias de
ovelhas e vacas. Na linha de célula epitelial mamária bovina BME-UV1D, L. lactis LMG
7930 foi adesivo com células epiteliais e tinha baixa taxa de internalização. Em um estudo
sobre a eficácia das culturas vivas de Lactococcus lactis em ovelhas italianas, as infusões
mamárias de L. lactis causaram a depuração transitória de patógenos mastíticos e L.
lactis causando a mastite leve a moderada (Mignaca et al. 2017). A cultura in vivo foi
escolhida porque aumentou as atividades imunomoduladoras em comparação com as
células mortas por calor e extratos sem células. Nas glândulas mamárias infectadas com
estafilococos de coagulase-negativos e tratados com L. lactis, 92% foram negativos para
a coagulase (-) estafilococos 3 dias após o tratamento e coagulase (-) estafilococos
reapareceram em culturas de leite após o tratamento for interrompido (dia 7). Esta é uma
evidência de que L. lactis não conseguiu colonizar a glândula mamária. O leite SCC
aumentou com a infusão de L. lactis. As infusões de L. lactis eram ineficazes contra o
Staphylococcus aureus. No entanto, a expressão CXCR1 de IL-1β, IL-8 e receptor de
quimioquina foi aumentada na média de 7000 vezes, 4400 vezes e 2700 vezes, e os
aumentos corresponderam a picos no SCC do leite.

1019
5.2.1 – Nisina

A bacteriocina nisina, produzida por L. lactis, foi estudada como um tratamento para
mastite clinicamente evidente em vacas leiteiras (Cao et al. 2007). As amostras de leite
foram coletadas imediatamente antes do tratamento e 1 e 2 semanas após o tratamento
para bacteriologia e leite SCC. As infusões intramamárias foram 2,5 milhões de unidades
internacionais (UI) de nisina (Nisin Z 10428) ou 800 mg de gentamicina.105 A taxa de cura
clínica foi de 90,2% e 91,1% para a nisina e gentamicina, respectivamente. A taxa de cura
de S. Aureus em 2 semanas foi de 6/11 para nisina e 2/6 para gentamicina, e para o
Streptococcus agalactiae a taxa de cura da bacteriologia foi (15/18) para nisina e 11/22
para a gentamicina. O leite SCC às 2 semanas não foi estaticamente diferente entre os
grupos de tratamento, mas tinha uma tendência aparente para ser maior para os quartos
tratados com nisina. Para S. aureus, a taxa de resistência à gentamicina foi de 35,3% e à
penicilina 82,5%, e não houve resistência observada a nisina. A inibição da fermentação
do leite por estreptococos lácticos foi de 36 h para a nisina e 72 h para gentamicina. A
irritação de nisina Z foi estudada em uma vaca que não tinha evidência clínica e
laboratorial de mastite (Wu et al. 2007). Três quartos foram injetados com 1,25 milhão, 2,5
milhões ou 5,0 milhões de UI de nisina em volume de 20 ml, e um quarto foi injetado com
20 ml de solução salina estéril. O leite SCC e N-acetil-Beta-D-Glucosaminidase (NAGase,
uma medida indireta de leite SCC e uma possível medida de dano epitelial) tendiam a
aumentar com o UI de nisina infundido na glândula mamária. Cinco milhões de unidades
de nisina Z causaram sinais clínicos de inflamação mamária. A eficácia de nisina Z (2,5
milhões de UI) como tratamento para a mastite infecciosa subclínica também foi estudada
em 90 vacas. As bactérias isoladas das glândulas mamárias foram S. aureus, coagulase
(-) Staphylococci, e Streptococcus agalactiae a 27,8%, 31,1% e 33,0% das vacas,
respectivamente.
As bactérias não especificadas foram isoladas de 7,8% das vacas. As vacas tratadas
receberam infusões intramamária de 2,5 milhões de UI de nisina Z/dia (manhã) por 3 dias,
e as vacas de controle não foram tratadas. O SCC de leite e a NAGase foram reduzidos
com o tratamento. O tratamento com nisina Z reduziu as infecções intramamárias em
43,5% e 65,2% na semana 1 e 2, respectivamente. O tratamento com nisina Z resultou
em curas bacteriológicas para S. Aureus e Streptococcus agalactiae a 50% e 90,9%,
respectivamente. Quinze por cento das vacas de controle tinham recuperações
bacteriológicas, e nenhuma diminuição foi observada no SCC do leite. Havia 20 isolados
de S. aureus, e a resistência à penicilina, gentamicina, cefazolina, norfloxacina e

104 Zhejiang Silver-Elephant Bioengineering Co., Ltd. (Tiantai, Zhejiang, China)

105 Zhejiang Silver-Elephant Bioengineering Co., Ltd. (Tiantai, Zhejiang, China)
1020
combinação sulfa metoxazole-trimetoprim foi de 80%, 45%, 5%, 75% e 90%,
respectivamente. Nisina Z foi detectada no leite em 75,8 ± 36,5 UI/ml e 5,7 ± 7,3 UI/ ml às
24 e 48 horas, respectivamente, após a rescisão da terapia. A concentração inibitória
mínima de nisina Z para S. aureus foi de 75,5 ± 70,8 UI/ml. A eficácia de nisina Z 106 foi
estudada em combinação com uma bacterina feita a partir de S. Aureus cepa CQ399RP
(Guan et al. 2017). Os critérios para mastite crônica foram ≥ 5 105 glóbulos brancos/ml de
leite e um quarto infectado com S. aureus. Vacas (75) que atendiam aos critérios do
estudo foram randomizadas em grupos de tratamento. O Grupo 1 recebeu uma injeção de
bacterina no linfonodo supramamário 1 semana antes do início das infusões de Nisin Z e
um impulsionador 1 semana após as infusões de Nisina. Nisin Z (2,5 milhões de UI) foi
infundido na glândula mamária uma vez por dia por três dias consecutivos. O grupo 2
recebeu três infusões de Nisin Z e o Grupo 3 consistiu em vacas de controle não tratadas.
Para o Grupo 1, as curas bacteriológicas foram de 68,0%, 72,0% e 72,0%,
respectivamente, às 2, 4 e 6 semanas após o tratamento e 44,0%, 40,0% e 40,0%,
respectivamente, para o Grupo 2. A combinação de Nisin A 107 e Cefazolin108 foi estudada
in vitro como um possível tratamento para a mastite (Kitazaki et al. 2017). Esta
combinação mostrou interações sinérgicas contra S. Aureus e Enterococcus Faecalis e
interações aditivas contra Staphylococcus intermedius, Streptococcus agalactiae,
Streptococcus dysgalactiae e E. coli. Os organismos foram isolados de casos de mastite
clínica e subclínica na Prefeitura de Fukuoka, no Japão, e as interações antimicrobianas
foram determinadas em um ensaio quadriculado.

5.3 Experiência em Medicina Humana

Mulheres que já tiveram mastite têm risco aumentado de a desenvolver em lactações

subsequentes. Lactobacillus salivarius PS2 foi estudado como um probiótico administrado
por via oral em mulheres que sofreram mastite em uma lactação anterior (Fernandez et al.
2016). As mulheres no grupo de tratamento receberam log 109 unidades formadoras de
colônias de L. salivarius/dia da semana 30 de gravidez até o parto. O número de mulheres
que desenvolveram mastite foi significativamente menor no grupo de tratamento.
Mulheres voluntárias com mastite estafilocócica sem abscesso refratária à cloxacilina,
clindamicina, clindamicina, amoxicilina/ácido clavulânico e eritromicina foram
selecionadas para um estudo duplo-cego usando nisina isolada de Lactococcus lactis ESI
515 (Fernandez et al. 2008). Os critérios foram dor durante a amamentação, fissuras no
mamilo e área adjacente, contagem de leite estafilocócica > log 104/mL, contagem de
leucócitos no leite > log106/mL e nenhum tratamento antibiótico nas 2 semanas anteriores.
106 Zhejiang Silver-Elephant Bio-Engineering Co., Ltd. (Tiantai, China)
107 Omu Milk Products Co., Ltd. (Fukuoka, Japan)
108 Meiji Seika Pharma Co., Ltd. (Tokyo, Japan)
1021
O tratamento durou 2 semanas com a aplicação de ~ 1,0 de solução de nisina (6 μg/ml e 3,77 g/mL)
no mamilo e área circundante após cada episódio de amamentação. O tratamento com
nisina reduziu significativamente as unidades formadoras de colônias de bactérias do
leite.

Um estudo foi feito em mulheres usando Lactobacillus fermentum CECT5716 e L.

salivarius CECT5713 isolado de leite materno não mastítico como um tratamento oral
para mastite (Arroyo et al. 2010). Os tratamentos probióticos administrados por via oral
foram comparados aos regimes de antibióticos prescritos pelo médico. Os tratamentos
com antibióticos foram amoxicilina-ácido clavulânico, amoxicilina, cotrimoxazol, cloxacilina
e eritromicina. Antes do tratamento, as espécies bacterianas dominantes isoladas do leite
materno foram S. epidermidis (73% das mulheres), S. aureus (43%) e S. mitis (30%),
outras espécies bacterianas (<5%) e Lactobacilos spp. (0%). A dor nas mamas foi
pontuada de 0 (muito dolorosa) a 10 (sem dor). No dia 21 de tratamento, as contagens
bacterianas nas mulheres que receberam tratamentos orais com L. fermentum CECT5716
e L. salivarius CECT5713 foram significativamente menores do que as mulheres que
receberam tratamentos com antibióticos. A dor na mama foi correlacionada com a
contagem da placa bacteriana, e os grupos de probióticos não foram significativamente
diferentes, mas tiveram escores de dor significativamente mais baixos em comparação
com os grupos de antibióticos. L. fermentum CECT5716 e L. salivarius CECT5713 foram
isolados do leite de mulheres que receberam esses probióticos. As mulheres nos grupos
de probióticos tiveram menor recorrência de mastite.

6. Bacteriófagos e seus produtos

Bacteriófagos são vírus que atacam e matam bactérias (Gomes e Henriques 2016). Um
problema com o uso de bacteriófagos é que eles podem não infectar bactérias dentro da
glândula mamária por causa das ações inativadoras de interferência do leite e outras
secreções mamárias.

Os bacteriófagos podem ser específicos no ataque a uma espécie de Staphylococcus que

causa mastite, ou o bacteriófago pode ser polivalente, incluindo atividades contra
biofilmes. Proteínas específicas isoladas de bacteriófagos estão sendo testadas in vivo
quanto à sua atividade antibacteriana. Duas proteínas de bacteriófago são expressas
dentro da bactéria; a proteína holing cria um poro na membrana celular permitindo que a
endolisina atravesse o poro e faça a hidrólise do peptideoglicano na parede celular,
liberando os bacteriófagos recém-formados.

1022
A endolisina produzida por procedimentos recombinantes em E. coli foi testada como
terapêutica para mastite por S. aureus em bovinos leiteiros com sinais clínicos de mastite
leve (Fan et al. 2016). A sequência do gene da endolisina (Trx-SA1) foi isolada de um
bacteriófago identificado como IME-SAG1 na família Myoviridae. Cinco quartos do úbere
com mastite por S. aureus foram tratados com a endolisina recombinante Trx-SA1 por
infusão intramamária. Vinte miligramas de endolisina foram dissolvidos em solução salina
fisiológica e infundidos uma vez por dia durante 3 dias. O leite SCC e a eliminação de
patógenos diminuíram com a remissão dos sinais clínicos. O tratamento com endolisina
não foi eficaz em quartos mamários infectados com E. coli e Streptococcus agalactiae.

7. Suplementação de vitaminas e minerais

A vitamina E foi estudada como nutracêutico para prevenir a mastite em gado leiteiro. O
gado leiteiro no período peri parto e pós parto imediato está em risco de estresse
oxidativo, cetose, resistência à insulina e esteatose hepática. A diminuição das funções
imunológicas pode estar associada ao estresse oxidativo. Os efeitos da suplementação
de vitamina E durante o período seco (intervalo entre as lactações) foram investigados em
um estudo duplo-cego para seus efeitos na redução de ocorrências de mastite clínica e
subclínica (Bouwstra et al. 2010a, b).

Este estudo foi realizado em novilhas Holstein e vacas produzindo de 8.000 a 10.000 kg
de leite/ano e com um período médio de seca de 6 semanas. O estudo foi controlado
quanto ao alojamento, método de ordenha, estação do ano e dieta alimentar. Os animais
do grupo de baixo suplemento receberam 100 g de uma mistura de minerais/dia/vaca
fornecendo 135 UI de DL-α-tocoferil-acetato/dia/ vaca e as vacas e novilhas do grupo alto
receberam 3000 UI de DL-α-tocoferil- acetato/dia/vaca. A suplementação foi iniciada na
secagem e continuada até o parto (média de 8 semanas). O sangue foi coletado na
secagem, 4 e 2 semanas antes do parto calculado e 24 horas após o parto. Mastite
subclínica foi definida como CCS > 100.000 células/mL de leite.

As vacas do grupo que recebeu 3.000 UI de vitamina E/dia tiveram maior ocorrência de
mastite clínica e subclínica do que as vacas que receberam 135 UI de vitamina E/dia. Os
níveis sanguíneos de vitamina E aumentaram com a suplementação de vitamina E, assim
como a relação vitamina E/colesterol. Além disso, este estudo mostrou que o nível de
vitamina E no sangue acima de 14,5 μg/ml e 3,77 mol/L é um fator de risco para aumento da mastite
clínica. Este risco foi 3 vezes maior no grupo não suplementado e 1,5 vezes maior nos
grupos suplementados. Os níveis sanguíneos das novilhas no início do estudo eram

1023
9.10 ? μg/ml e 3,77 mol/L. O mecanismo de ação pode ser o excesso de vitamina E interferindo nas
reações oxidativas que ocorrem normalmente nas respostas do sistema imunológico. Um
produto patenteado administrado por via parenteral 109 foi estudado quanto ao seu efeito
na redução da mastite subclínica (Ganda et al. 2016). O estudo foi conduzido de janeiro a
abril no interior do estado de Nova York, EUA, e envolveu 620 vacas. As vacas receberam
uma ração mista total que atendeu ou excedeu as necessidades de nutrientes, conforme
recomendado pelo Conselho Nacional de Pesquisa dos Estados Unidos. Os requisitos de
inscrição eram CCS > 200.000 células/mL de leite, < 150 dias de gravidez e nenhum
tratamento com antibióticos na lactação atual. As vacas tratadas receberam 5 mL do
produto patenteado administrado uma vez por via parenteral, e as vacas controle
receberam 5 mL de solução salina. Cada mL do produto de teste continha 60 mg de zinco,
10 mg de manganês, 5 mg de selênio e 15 mg de cobre.

Uma seleção aleatória de vacas teve sangue coletado no dia 0 do estudo e novamente no
dia 30 do estudo e o soro analisado para cálcio, magnésio, fósforo, cobre, ferro, potássio,
manganês, molibdênio, selênio e zinco. Escores de condição corporal, número de
lactação, produção de leite, dias no leite e escores lineares de números de células
somáticas no momento da inscrição também foram parâmetros no estudo, e esses
parâmetros não foram significativamente diferentes. Houve um período de
acompanhamento de 10 meses. O cálcio e o magnésio séricos foram significativamente
maiores nas vacas controle, e também houve uma tendência para o molibdênio também
ser maior nas vacas controle. Não houve diferença entre os grupos para os outros
elementos medidos no soro. Não houve diferenças significativas entre os grupos para
curas de mastite subclínica e SCC do leite e nenhuma interação significativa entre o
tratamento e a lactação no SCC do leite. Houve tendência na lactação para o tratamento
curar mastite subclínica em vacas com três ou mais lactações. Houve uma tendência
geral para o tratamento reduzir a mastite clínica crônica, especialmente em vacas
primíparas. Independentemente do tratamento, vacas com níveis séricos de zinco mais
baixos no diagnóstico de mastite e níveis séricos mais elevados de selênio e fósforo 30
dias depois tiveram mais curas. Um estudo sueco sobre a suplementação de vitamina E
(RRR-α-tocoferil-acetato110) em gado leiteiro não reduziu a ocorrência de mastite (Persson
Waller et al. 2007). As vacas estavam em rebanhos com alta ocorrência de mastite e
foram suplementadas com 1,61 g de RRR-α-tocoferil-acetato como cobertura durante 4
semanas antes do parto calculado e 2 semanas após o parto real.

109 Multimin 90, Multimin North America Inc. (Fort Collins, CO)
110 Natur-E granulat 40%, Pharmalett A/S (Kolding, Denmark)
1024
8. Banhos de teta
O ducto do teto é um portal de entrada para patógenos, e o primeiro a responder é o
sistema imunológico inato (Mavrogianni et al. 2007). Manter a saúde do teto é importante
na prevenção de infecções mamárias. Os banhos de teta são usados para diminuir o
número de bactérias, especialmente no orifício da mesma. As cepas IMAU 80065 e IMAU
10155 de Lactobacillus plantarum foram estudadas como um banho de teta para bovinos
(Yu et al. 2017). Vacas com leite SCC > 200.000 células/mL foram selecionadas para o
estudo.

Após a ordenha, os tetos foram imersos em uma preparação de L. plantarum (5*1010

unidades formadoras de colônia/mL) ou um banho comercial de tetos 111. A imersão das
tetas com bactérias probióticas de ácido láctico foi considerada eficaz na redução de
bactérias associadas à mastite. O CCS do leite das vacas com tetas mergulhadas nessas
bactérias diminuiu e foi significativamente menor do que vacas com tetas mergulhadas na
tetina comercial. Um banho de tetina feito de uma receita usando 2-3 gotas de sabonete
líquido, óleo da árvore do chá, óleo de hortelã-pimenta, óleo de lavanda e extrato de
semente de uva, uma gota de cada um adicionado a 350 mL de água potável, foi
considerada a fonte mais provável de Pseudomonas aeruginosa causando mastite em
cabras leiteiras (Kelly e Wilson 2016). O mergulho do teto em si também apoiou o
crescimento de P. aeruginosa. As microalgas Prototheca podem ser uma causa de mastite
e são difíceis de tratar devido à sua resistência aos quimioterápicos antimicrobianos.

Uma formulação patenteada de enxágue de vegetais 112 foi estudada quanto à sua
atividade antisséptica contra Prototheca zopfi (Grzesiak et al. 2018b). As cepas de P. zopfi
testadas foram isoladas de vacas com mastite subclínica. As concentrações microbicidas
mínimas de foram 0,002–0,019%. Os ingredientes deste produto são decil poliglucose,
amido de milho e óleo de coco. O ingrediente ativo é decil poliglucose, um composto
amplamente utilizado em cosméticos. A descoberta sugere que este produto tem potencial
para lavagem e imersão de tetas.

9. Imunoterapia
Imunoglobulina IgY de gema de ovo de galinhas vacinadas contra cepas mastíticas de S.
aureus foram avaliadas em vacas com mastite de S. aureus induzida experimentalmente
e naturalmente infectada (Zhen et al. 2009). Os critérios para vacas com infecções
naturais foram sinais clínicos de mastite, CCS do leite > 500.000 células/mL e contagens
111 Dipal Concentrate 1C4 (Delaval, Tianjin, China)
112 SunSmile® Fruit & Vegetable Rinse (Sunrider International, http://www.sunrider.com/eng/worldwide/offices#)
1025
de placa bacteriana de 100–200 unidades formadoras de colônias de S. aureus/mL de
leite e nenhum tratamento com antibióticos nos últimos 90 dias. Para mastite induzida por
S. aureus, as vacas antes da inoculação eram clinicamente normais, CCS do leite <
100.000 células/mL de leite, <10 unidades formadoras de colônias de S. aureus/mL de
leite e nenhum tratamento com antibióticos nos últimos 90 dias. A inoculação para induzir
mastite foi de 107 unidades formadoras de colônias/mL. Os tratamentos foram infusões
intramamárias de 10 mL de 20 mg de IgY/mL ou 10 mL de 100 mg de penicilina/mL
imediatamente após ordenhas matinais e noturnas ou sem infusões. As taxas de cura
para IgY foram 83,3% para mastite induzida experimentalmente e 50% para mastite
clínica. A taxa de cura para o tratamento com penicilina foi de 66,7% e 33,3%,
respectivamente, para mastite experimental e clínica. As vacas tratadas foram
significativamente diferentes das vacas controle não tratadas para SCC do leite e
contagens bacterianas.

O concentrado de plaquetas bovinas foi investigado como um medicamento para mastite

(Lange-Consiglio et al. 2014). Uma vaca saudável em cada uma das três fazendas foi
usada para doar plaquetas. Os quartos das vacas com mastite foram divididos em três
grupos de tratamento: antibióticos, antibióticos mais plaquetas e plaquetas sem
antibióticos. Vacas com mastite aguda e crônica foram incluídas no estudo. O
concentrado de plaquetas foi padronizado em 10 9 plaquetas/mL. As vacas dos grupos que
receberam plaquetas receberam 5 mL do concentrado de plaquetas para
3 dias. Para mastite aguda, o grupo de concentrado de plaquetas não foi estatisticamente
diferente do grupo de antibiótico sozinho, e para mastite crônica, o concentrado de
plaquetas sozinho foi significativamente melhor do que o antibiótico sozinho. Para mastite
aguda e crônica, o antibiótico mais concentrado de plaquetas foi significativamente melhor
do que o antibiótico sozinho, e essa combinação também reduziu significativamente a
taxa de recidivas.

10. Observações Finais e Orientações Futuras

Os nutracêuticos têm aumentado o uso para prevenção e tratamento da mastite. Razões
médicas incluem aumento da resistência antimicrobiana a quimioterápicos
antimicrobianos aprovados, preocupações de saúde pública em relação à exposição
humana a microrganismos resistentes a antibióticos em alimentos de origem animal,
restrições ao uso de antibióticos na agricultura orgânica e aumento do interesse no uso de
medicina alternativa. As interações entre o sistema imunológico e a nutrição e o estado
antioxidante do corpo no que diz respeito à saúde da glândula mamária são importantes
1026
na prevenção da mastite. Os avanços na metabolômica provavelmente fornecerão perfis
estratégicos para a saúde da glândula mamária. O aumento da compreensão do
microbioma e das interações das populações microbianas na manutenção da saúde
mamária e da modulação imunológica aumentará.

Referências
Abdalhamed AM, Zeedan GSG, Zeina H (2018) Isolation and identification of bacteria causing mastitis in small
ruminants and their susceptibility to antibiotics, honey, essential oils, and plant extracts. Vet World 11(3):355–362
Abuelo A, Hernandez J, Benedito JL et al (2015) The importance of the oxidative status of dairy cattle in the
periparturient period: revisiting antioxidant supplementation. J Anim Physiol Anim Nutr (Berl) 99 (6):1003–1016
Aghamohammadi M, Haine D, Kelton DF et al (2018) Herd-level mastitis-associated costs on Canadian dairy farms.
Front Vet Sci 5:100
Akers RM, Nickerson SC (2011) Mastitis and its impact on structure and function in the ruminant mammary gland. J
Mammary Gland Biol Neoplasia 16(4):275–289
Alekish MO, Ismail ZB, Awawdeh MS et al (2017) Effects of intramammary infusion of sage (Salvia officinalis) essential
oil on milk somatic cell count, milk composition parameters and selected hematology and serum biochemical parameters
in Awassi sheep with subclinical mastitis. Vet World 10(8):895–900
Allen HK, Trachsel J, Looft T et al (2014) Finding alternatives to antibiotics. Ann N Y Acad Sci 1323:91–100
Almasaudi SB, Al-Nahari AAM, Abd El-Ghany ESM et al (2017) Antimicrobial effect of different types of honey on
Staphylococcus aureus. Saudi J Biol Sci 24(6):1255–1261
Al-Qumber M, Tagg JR (2006) Commensal bacilli inhibitory to mastitis pathogens isolated from the udder microbiota of
healthy cows. J Appl Microbiol 101(5):1152–1160
Amber R, Adnan M, Tariq A et al (2018) Antibacterial activity of selected medicinal plants of northwest Pakistan
traditionally used against mastitis in livestock. Saudi J Biol Sci 25(1):154–161
Ananda Baskaran S, Kazmer GW, Hinckley L et al (2009) Antibacterial effect of plant-derived antimicrobials on major
bacterial mastitis pathogens in vitro. J Dairy Sci 92(4):1423–1429
Armas F, Camperio C, Marianelli C (2017) In vitro assessment of the probiotic potential of Lactococcus lactis LMG
7930 against ruminant mastitis-causing pathogens. PLoS One 12(1):e0169543
Arroyo R, Martin V, Maldonado A et al (2010) Treatment of infectious mastitis during lactation: antibiotics versus oral
administration of Lactobacilli isolated from breast milk. Clin Infect Dis 50 (12):1551–1558
Arsenault J, Dubreuil P, Higgins R et al (2008) Risk factors and impacts of clinical and subclinical mastitis in
commercial meat-producing sheep flocks in Quebec, Canada. Prev Vet Med 87(3–4):373–393
Assis BS, Germon P, Silva AM et al (2015) Lactococcus lactis V7 inhibits the cell invasion of bovine mammary
epithelial cells by Escherichia coli and Staphylococcus aureus. Benef Microbes 6 (6):879–886
Baravalle C, Dallard BE, Cadoche MC et al (2011) Proinflammatory cytokines and CD14 expression in mammary
tissue of cows following intramammary inoculation of Panax ginseng at drying off. Vet Immunol Immunopathol 144(1–
2):52–60
Baravalle C, Silvestrini P, Cadoche MC et al (2015) Intramammary infusion of Panax ginseng extract in bovine
mammary gland at cessation of milking induces changes in the expression of toll-like receptors, MyD88 and NF-kB
during early involution. Res Vet Sci 100:52–60
Bedard F, Biron E (2018) Recent progress in the chemical synthesis of class ii and s-glycosylated bacteriocins. Front
Microbiol 9:1048
Beecher C, Daly M, Berry DP et al (2009) Administration of a live culture of Lactococcus lactis DPC 3147 into the
bovine mammary gland stimulates the local host immune response, particularly IL-1beta and IL-8 gene expression. J
Dairy Res 76(3):340–348
Bhatt VD, Shah TM, Nauriyal DS et al (2014) Evaluation of a topical herbal drug for its in-vivo immunomodulatory
effect on cytokines production and antibacterial activity in bovine subclinical mastitis. Ayu 35(2):198–205
Bhattarai D, Worku T, Dad R et al (2018) Mechanism of pattern recognition receptors (PRRs) and host pathogen
interplay in bovine mastitis. Microb Pathog 120:64–70
Boorn KL, Khor YY, Sweetman E et al (2010) Antimicrobial activity of honey from the stingless bee Trigona carbonaria
determined by agar diffusion, agar dilution, broth microdilution and time-kill methodology. J Appl Microbiol 108(5):1534–
1543
Boothe DM (2004) Balancing fact and fiction of novel ingredients: definitions, regulations and evaluation. Vet Clin North
Am Small Anim Pract 34(1):7–38
Bouwstra RJ, Nielen M, Stegeman JA et al (2010a) Vitamin E supplementation during the dry period in dairy cattle.
Part I: Adverse effect on incidence of mastitis postpartum in a double-blind randomized field trial. J Dairy Sci
93(12):5684–5695
Bouwstra RJ, Nielen M, Newbold JR et al (2010b) Vitamin E supplementation during the dry period in dairy cattle. Part
II: Oxidative stress following vitamin E supplementation may increase clinical mastitis incidence postpartum. J Dairy Sci
93(12):5696–5706
1027
 Byung-Wook C, Chun-Nam C, Soo-Mi L et al (2015) Therapeutic effect of oregano essential oil on subclinical bovine
mastitis caused by Staphylococcus aureus and Escherichia coli. Korean J Vet Res 55 (4):253–257
Camperio C, Armas F, Biasibetti E et al (2017) A mouse mastitis model to study the effects of the intramammary
infusion of a food-grade Lactococcus lactis strain. PLoS One 12(9):e0184218
Cao LT, Wu JQ, Xie F et al (2007) Efficacy of nisin in treatment of clinical mastitis in lactating dairy cows. J Dairy Sci 90
(8):3980–3985
Carson DA, Barkema HW, Naushad S et al (2017) Bacteriocins of non-aureus Staphylococci isolated from bovine milk.
Appl Environ Microbiol 83(17):e01015-17
Ceotto-Vigoder H, Marques SL, Santos IN et al (2016) Nisin and lysostaphin activity against preformed biofilm of
Staphylococcus aureus involved in bovine mastitis. J Appl Microbiol 121 (1):101–114
Cho B-W, Cha C-N, Lee S-M et al (2015) Therapeutic effect of oregano essential oil on subclinical bovine mastitis
caused by Staphylococcus aureus and Escherichia coli. Korean J Vet Res 55 (4):253–257
Choi KT (2008) Botanical characteristics, pharmacological effects and medicinal components of Korean Panax ginseng
CA Meyer. Acta Pharmacol Sin 29(9):1109–1118
Cooper S, Huntley SJ, Crump R et al (2016) A cross-sectional study of 329 farms in England to identify risk factors for
ovine clinical mastitis. Prev Vet Med 125:89–98
Cortopassi-Laurino M, Imperatriz-Fonseca VL, Roubik DW et al (2006) Global meliponiculture: challenges and
opportunities. Apidologie 37:275–292
Crispie F, Alonso-Gomez M, O'Loughlin C et al (2008) Intramammary infusion of a live culture for treatment of bovine
mastitis: effect of live lactococci on the mammary immune response. J Dairy Res 75 (3):374–384
Ebert F, Staufenbiel R, Simons J et al (2017) Randomized, blinded, controlled clinical trial shows no benefit of
homeopathic mastitis treatment in dairy cows. J Dairy Sci 100(6):4857–4867
Espeche MC, Pellegrino M, Frola I et al (2012) Lactic acid bacteria from raw milk as potentially beneficial strains to
prevent bovine mastitis. Anaerobe 18(1):103–109
Fan J, Zeng Z, Mai K et al (2016) Preliminary treatment of bovine mastitis caused by Staphylococcus aureus, with Trx-
SA1, recombinant endolysin of S. aureus bacteriophage IME-SA1. Vet Microbiol 191:65–71
Fernandez L, Delgado S, Herrero H et al (2008) The bacteriocin nisin, an effective agent for the treatment of
staphylococcal mastitis during lactation. J Hum Lact 24(3):311–316
Fernandez L, Langa S, Martin V et al (2013) The human milk microbiota: origin and potential roles in health and
disease. Pharmacol Res 69(1):1–10
Fernandez L, Cardenas N, Arroyo R et al (2016) Prevention of infectious mastitis by oral administration of Lactobacillus
salivarius PS2 during late pregnancy. Clin Infect Dis 62(5):568–573
Francoz D, Wellemans V, Dupre JP et al (2017) Invited review: a systematic review and qualitative analysis of
treatments other than conventional antimicrobials for clinical mastitis in dairy cows. J Dairy Sci 100(10):7751–7770
Frola ID, Pellegrino MS, Espeche MC et al (2012) Effects of intramammary inoculation of Lactobacillus perolens
CRL1724 in lactating cows’ udders. J Dairy Res 79(1):84–92
Frola ID, Pellegrino MS, Magnano G et al (2013) Histological examination of non-lactating bovine udders inoculated
with Lactobacillus perolens CRL 1724. J Dairy Res 80(1):28–35
Ganda EK, Bisinotto RS, Vasquez AK et al (2016) Effects of injectable trace mineral supplementation in lactating dairy
cows with elevated somatic cell counts. J Dairy Sci 99(9):7319–7329
Gomes F, HenriquesM(2016) Control of bovine mastitis: old and recent therapeutic approaches. Curr Microbiol
72(4):377–382
Gomes F, Saavedra MJ, Henriques M (2016) Bovine mastitis disease/pathogenicity: evidence of the potential role of
microbial biofilms. Pathog Dis 74(3):ftw006
Gomez-Gallego C, Garcia-Mantrana I, Salminen S et al (2016) The human milk microbiome and factors influencing its
composition and activity. Semin Fetal Neonatal Med 21(6):400–405
Gougoulis DA, Kyriazakis I, Tzora A et al (2008) Effects of lamb sucking on the bacterial flora of teat duct and
mammary gland of ewes. Reprod Domest Anim 43(1):22–26
Grzesiak B, Kolodziej B, Glowacka A et al (2018a) The effect of some natural essential oils against bovine mastitis
caused by Prototheca zopfii isolates in vitro. Mycopathologia 183(3):541–550
Grzesiak B, Krukowski H, Glowacka A (2018b) The in vitro efficacy of SunSmile® Fruit & Vegetable Rinse against
pathogenic strains of Prototheca algae that cause mastitis in cows. J Mycol Med 28 (2):300–304
Guan R, Wu JQ, Xu W et al (2017) Efficacy of vaccination and nisin Z treatments to eliminate intramammary
Staphylococcus aureus infection in lactating cows. J Zhejiang Univ Sci B 18(4):360–364
Hamilton C, Emanuelson U, Forslund K et al (2006) Mastitis and related management factors in certified organic dairy
herds in Sweden. Acta Vet Scand 48:11
Hektoen L (2004) Investigations of the motivation underlying Norwegian dairy farmers’ use of homoeopathy. Vet Rec
155(22):701–707
Hektoen L, Larsen S, Odegaard SA et al (2004) Comparison of homeopathy, placebo and antibiotic treatment of
clinical mastitis in dairy cows – methodological issues and results from a randomized-clinical trial. J Vet Med A Physiol
Pathol Clin Med 51(9–10):439–446
Holmes MA, Zadoks RN (2011) Methicillin resistant S. aureus in human and bovine mastitis. J Mammary Gland Biol
Neoplasia 16 (4):373–382

1028
 Honorato LA, Machado Filho LC, Barbosa Silveira ID et al (2014) Strategies used by dairy family farmers in the south
of Brazil to comply with organic regulations. J Dairy Sci 97(3):1319–1327
Hu S, Concha C, Johannisson A et al (2001) Effect of subcutaneous injection of ginseng on cows with subclinical
Staphylococcus aureus mastitis. J Vet Med B Infect Dis Vet Public Health 48(7):519–528
Jamali H, Barkema HW, Jacques M et al (2018) Invited review: incidence, risk factors, and effects of clinical mastitis
recurrence in dairy cows. J Dairy Sci 101(6):4729–4746
Kaithwas G, Mukerjee A, Kumar P et al (2011) Linum usitatissimum (linseed/flaxseed) fixed oil: antimicrobial activity
and efficacy in bovine mastitis. Inflammopharmacology 19(1):45–52
Keller D, Sundrum A (2018) Comparative effectiveness of individualised homeopathy and antibiotics in the treatment of
bovine clinical mastitis: randomised controlled trial. Vet Rec 182(14):407
Kelly EJ, Wilson DJ (2016) Pseudomonas aeruginosa mastitis in two goats associated with an essential oil-based teat
dip. J Vet Diagn Investig 28(6):760–762
Kher MN, Sheth NR, Bhatt VD (2018) In vitro antibacterial evaluation of Terminalia chebula as an alternative of
antibiotics against bovine subclinical mastitis. Anim Biotechnol:1–8. https://doi.org/10.1080/10495398.2018.1451752
Kitazaki K, Koga S, Nagatoshi K et al (2017) In vitro synergistic activities of cefazolin and nisin A against mastitis
pathogens. J Vet Med Sci 79(9):1472–1479
Klocke P, Ivemeyer S, Butler G et al (2010) A randomized controlled trial to compare the use of homeopathy and
internal teat sealers for the prevention of mastitis in organically farmed dairy cows during the dry period and 100 days
post-calving. Homeopathy 99(2):90–98
Klostermann K, Crispie F, Flynn J et al (2008) Intramammary infusion of a live culture of Lactococcus lactis for
treatment of bovine mastitis: comparison with antibiotic treatment in field trials. J Dairy Res 75(3):365–373
Kromker V, Leimbach S (2017) Mastitis treatment-reduction in antibiotic usage in dairy cows. Reprod Domest Anim
52(Suppl 3):21–29
Kumar R, Bharati KA (2013) New claims in folk veterinary medicines from Uttar Pradesh, India. J Ethnopharmacol
146(2):581–593
Kumar H, du Toit E, Kulkarni A et al (2016) Distinct patterns in human milk microbiota and fatty acid profiles across
specific geographic locations. Front Microbiol 7:1619
Lainesse C, Gehring R, Pasloske K et al (2012) Challenges associated with the demonstration of bioequivalence of
intramammary products in ruminants. J Vet Pharmacol Ther 35(Suppl 1):65–79
Lange-Consiglio A, Spelta C, Garlappi R et al (2014) Intramammary administration of platelet concentrate as an
unconventional therapy in bovine mastitis: first clinical application. J Dairy Sci 97 (10):6223–6230
Lans C, Turner N, Khan T et al (2007) Ethnoveterinary medicines used for ruminants in British Columbia, Canada. J
Ethnobiol Ethnomed 3:11
Le KY, OttoM(2015) Quorum-sensing regulation in staphylococci – an overview. Front Microbiol 6:1174
Li X, Lin J, Han W et al (2012) Antioxidant ability and mechanism of rhizoma Atractylodes macrocephala. Molecules 17
(11):13457–13472
Loken T (2001) Alternative therapy of animals-homeopathy and other alternative methods of therapy. Acta Vet Scand
Suppl 95:47–50
Lu Y, Hu YL, Kong XF et al (2008) Selection of component drug in activating blood flow and removing blood stasis of
Chinese herbal medicinal formula for dairy cow mastitis by hemorheological method. J Ethnopharmacol 116(2):313–317
Mandal MD, Mandal S (2011) Honey: its medicinal property and antibacterial activity. Asian Pac J Trop Biomed
1(2):154–160
Mason SE, Mullen KAE, Anderson KL et al (2017) Pharmacokinetic analysis of thymol, carvacrol and diallyl disulfide
after intramammary and topical applications in healthy organic dairy cattle. Food Addit Contam Part A 34(5):740–749
Mathie RT, Clausen J (2014) Veterinary homeopathy: systematic review of medical conditions studied by randomised
placebo-controlled trials. Vet Rec 175(15):373–381
Mavrogianni VS, Cripps PJ, Fthenakis GC (2007) Bacterial flora and risk of infection of the ovine teat duct and
mammary gland throughout lactation. Prev Vet Med 79(2–4):163–173
McPhee CS, Anderson KL, Yeatts JL et al (2011) Milk and plasma disposition of thymol following intramammary
administration of a phytoceutical mastitis treatment. J Dairy Sci 94(4):1738–1743
Mignacca SA, Dore S, Spuria L et al (2017) Intramammary infusion of a live culture of Lactococcus lactis in ewes to
treat staphylococcal mastitis. J Med Microbiol 66(12):1798–1810
Mukherjee R, De UK, Ram GC (2010) Evaluation of mammary gland immunity and therapeutic potential of Tinospora
cordifolia against bovine subclinical mastitis. Trop Anim Health Prod 42(4):645–651
Mullen KA, Anderson KL, Washburn SP (2014) Effect of 2 herbal intramammary products on milk quantity and quality
compared with conventional and no dry cow therapy. J Dairy Sci 97 (6):3509–3522
Mullen KA, Beasley E, Rizzo JQ et al (2017) Potential of phytoceuticals to affect antibiotic residue detection tests in
cow milk in a randomised trial. Vet Rec Open 4(1):e000214
Mushtaq S, Shah AM, Shah A et al (2018) Bovine mastitis: an appraisal of its alternative herbal cure. Microb Pathog
114:357–361
Nobrega DB, De Buck J, Barkema HW (2018a) Antimicrobial resistance in non-aureus staphylococci isolated from milk
is associated with systemic but not intramammary administration of antimicrobials in dairy cattle. J Dairy Sci 101:7425–
7436

1029
 Nobrega DB, Naushad S, Naqvi SA et al (2018b) Prevalence and genetic basis of antimicrobial resistance in non-
aureus staphylococci isolated from Canadian dairy herds. Front Microbiol 9:256
Olson ME, Ceri H, Morck DW et al (2002) Biofilm bacteria: formation and comparative susceptibility to antibiotics. Can
J Vet Res 66 (2):86–92
Persson Waller K, Hallen Sandgren C, Emanuelson U et al (2007) Supplementation of RRR-alpha-tocopheryl acetate
to periparturient dairy cows in commercial herds with high mastitis incidence. J Dairy Sci 90(8):3640–3646
Pinedo P, Karreman H, Bothe H et al (2013) Efficacy of a botanical preparation for the intramammary treatment of
clinical mastitis on an organic dairy farm. Can Vet J 54(5):479–484
Rainard P (2017) Mammary microbiota of dairy ruminants: fact or fiction? Vet Res 48(1):25
Ribeiro ES, Gomes G, Greco LF et al (2016) Carryover effect of postpartum inflammatory diseases on developmental
biology and fertility in lactating dairy cows. J Dairy Sci 99(3):2201–2220
Ruegg PL (2009) Management of mastitis on organic and conventional dairy farms. J Anim Sci 87(13 Suppl):43–55
Saini V, McClure JT, Scholl DT et al (2013) Herd-level relationship between antimicrobial use and presence or absence
of antimicrobial resistance in gram-negative bovine mastitis pathogens on Canadian dairy farms. J Dairy Sci 96(8):4965–
4976
Silvestrini P, Beccaria C, Pereyra EAL et al (2017) Intramammary inoculation of Panax ginseng plays an
immunoprotective role in Staphylococcus aureus infection in a murine model. Res Vet Sci 115:211–220
Spelman K, Duke JA, Bogenschutz-Godwin MJ (2006) The synergy principle at work with plants, pathogens, insects,
herbivores, and humans. In: Cseke LJ, Kirakosyan A, Kaufman PB et al (eds) Natural products from plants. CRC, Boca
Raton, FL, pp 475–501
Spinella M (2002) The importance of pharmacological synergy in psychoactive herbal medicines. Altern Med Rev
7(2):130–137
Stagos D, Soulitsiotis N, Tsadila C et al (2018) Antibacterial and antioxidant activity of different types of honey derived
from Mount Olympus in Greece. Int J Mol Med 42(2):726–734
Stevens M, Piepers S, De Vliegher S (2016) Mastitis prevention and control practices and mastitis treatment strategies
associated with the consumption of (critically important) antimicrobials on dairy herds in Flanders, Belgium. J Dairy Sci
99(4):2896–2903
Szweda P, Schielmann M, Frankowska A et al (2014) Antibiotic resistance in Staphylococcus aureus strains isolated
from cows with mastitis in eastern Poland and analysis of susceptibility of resistant strains to alternative nonantibiotic
agents: lysostaphin, nisin and polymyxin B. J Vet Med Sci 76(3):355–362
Tavakol M, Riekerink RG, Sampimon OC et al (2012) Bovineassociated MRSA ST398 in the Netherlands. Acta Vet
Scand 54:28
Uncini Manganelli RE, Camangi F, Tomei PE (2001) Curing animals with plants: traditional usage in Tuscany (Italy). J
Ethnopharmacol 78(2–3):171–191
Upadhyay B, Singh KP, Kumar A (2011) Ethno-veterinary uses and informants consensus factor of medicinal plants of
Sariska region, Rajasthan, India. J Ethnopharmacol 133(1):14–25
Wang X, Feng S, Ding N et al (2018) Anti-inflammatory effects of berberine hydrochloride in an LPS-induced murine
model of mastitis. Evid Based Complement Alternat Med 2018:5164314
Wu J, Hu S, Cao L (2007) Therapeutic effect of nisin Z on subclinical mastitis in lactating cows. Antimicrob Agents
Chemother 51 (9):3131–3135
Xu W, Guan R, Lu Y et al (2015) Therapeutic effect of polysaccharide fraction of Atractylodis macrocephalae Koidz in
bovine subclinical mastitis. BMC Vet Res 11:165
Yang L, Liu Y, Wu H et al (2012) Combating biofilms. FEMS Immunol Med Microbiol 65(2):146–157
Yu J, Ren Y, Xi X et al (2017) A novel lactobacilli-based teat disinfectant for improving bacterial communities in the
milks of cow teats with subclinical mastitis. Front Microbiol 8:1782
Zhen YH, Jin LJ, Li XY et al (2009) Efficacy of specific egg yolk immunoglobulin (IgY) to bovine mastitis caused by
Staphylococcus aureus. Vet Microbiol 133(4):317–322

1030
 Nutracêuticos em doenças imunológicas
Moges Woldemeskel

Resumo
Os distúrbios imunológicos em animais e humanos podem ocorrer devido a distúrbios no
sistema imunológico do corpo em respostas a várias substâncias, como alérgenos,
infecções, doenças de imunodeficiência crônica, doenças autoimunes e perturbação do
sistema imunológico devido a várias outras condições. A medicina moderna é usada há
muito tempo para tratar diferentes tipos de distúrbios imunológicos. Muitos deles, de fato,
têm efeitos colaterais indesejados, embora possam ser eficazes no tratamento de
doenças ou no alívio dos sintomas associados. Os nutracêuticos são usados na medicina
tradicional em todo o mundo há séculos, apesar do surgimento da medicina moderna.
Hoje em dia, existe uma tendência crescente de se recorrer aos nutracêuticos para o
tratamento de várias doenças e condições em humanos e animais, devido à sua eficácia
no tratamento de doenças e ao fato de não causarem efeitos colaterais indesejados. Este
capítulo destaca brevemente o uso de nutracêuticos em distúrbios imunológicos.
Palavras-chave: Nutracêuticos · Doenças imunológicas · Medicina veterinária
M. Woldemeskel.Tifton Veterinary Diagnostic and Investigational Laboratory, Department of Pathology, College of
Veterinary Medicine, University of Georgia, Tifton, GA, USA. e-mail: mwoldem@uga.edu

1. Introdução
O termo “nutracêutico” foi cunhado em 1989 por Stephen DeFelice e combina duas
palavras: “nutriente” e “farmacêutico” (Kalra 2003). Nutracêutico é um termo amplo usado
para descrever qualquer produto derivado de fontes alimentares que proporcionam
benefícios à saúde, incluindo prevenção e tratamento de doenças além de seu valor
nutricional intrínseco (Kalra 2003; Larussa et al. 2017). Foi proposto que os nutracêuticos
podem ser agrupados em três grandes categorias: (1) substâncias com funções
nutricionais estabelecidas, como vitaminas, minerais, aminoácidos e ácidos graxos,
também definidos como nutrientes; (2) ervas ou produtos botânicos como concentrados e
extratos, frequentemente chamados de ervas; e (3) reagentes como piruvato, sulfato de
condroitina e precursores de hormônio esteróide que são derivados de outras fontes e
servem a funções específicas, como nutrição esportiva, suplementos para perda de peso
e substitutos de refeição, também indicados como suplementos dietéticos (Chauhan et al .

1031
2013). As plantas medicinais constituem um reservatório natural de medicamentos em
todo o mundo e são parte integrante dos nutracêuticos. Eles servem à terapêutica
convencional e são centrais na medicina folclórica (Akhtar et al. 2017).

Produtos naturais de plantas têm sido usados como base para vários tratamentos
médicos. Embora a medicina ocidental moderna tenha se tornado a vanguarda da prática
clínica hoje, produtos vegetais naturais continuam a ser usados como remédios na
medicina alternativa em todo o mundo. Estima-se que 80% dos indivíduos nos países em
desenvolvimento dependem principalmente de produtos naturais para atender às suas
necessidades de saúde. Nos Estados Unidos, descobriu-se que cerca de um em cada
três americanos usa medicamentos naturais diariamente. Produtos naturais não são
apenas eficazes, mas são relativamente não tóxicos e têm doses terapêuticas bem abaixo
de seus níveis tóxicos (Fadus et al. 2017). Em geral, os nutracêuticos são compostos
bioativos naturais ou alimentos que fornecem benefícios extras à saúde, além dos valores
nutricionais básicos. Os nutracêuticos costumam se referir a ingredientes ativos
encontrados em alimentos funcionais e envolvem a extração, purificação, concentração e
análise de tais ingredientes (Alkhatib et al. 2017). Vários nutracêuticos estiveram em
uso durante séculos para curar doenças em humanos e animais como parte da medicina
tradicional. Este capítulo fornece um breve relato do uso de nutracêuticos em doenças e
condições com distúrbios ou disfunções imunológicas subjacentes, incluindo doenças
degenerativas e metabólicas, e doenças associadas ao sistema imunológico hipersensível
ou hiperativo.

2. Nutracêuticos na regulação do sistema imunológico

O sistema imunológico é composto por várias células, proteínas, moléculas, tecidos e
órgãos que protegem o corpo de agentes nocivos. Nutrientes apropriados são
necessários para que as várias células do sistema imunológico funcionem de maneira
ideal e respondam a lesões e vírus e bactérias invasores. Extremos dietéticos,
especialmente a desnutrição proteico/energética, têm efeitos profundos na redução da
função imunológica e no aumento do risco de infecções oportunistas (Nieman e
Mitmesser 2017). Foi indicado no Relatório Global de Nutrição de 2016 que uma em cada
três pessoas em todo o mundo está desnutrida de uma forma ou de outra (Global
Nutritional Report 2016, 3).

As deficiências nutricionais têm um efeito negativo na defesa do corpo contra várias

infecções, diminuindo o sistema imunológico. Por exemplo, Tsuji et al. (2015) citando

1032
vários relatórios em modelos animais indicaram que a deficiência de selênio (Se)
prejudica a resposta imune à infecção, câncer e outros estímulos, indicando a importância
do papel do selênio na resposta imune. Os exemplos incluem uma redução na resposta
de células-T CD4+ em camundongos deficientes em selênio desafiados com um peptídeo/
adjuvante, aumento do crescimento tumoral e disseminação em um modelo de
camundongo de câncer de mama, resposta alérgica tipo I aumentada em um modelo de
camundongo de anafilaxia cutânea ativa, e aumento da imunotoxicidade resultante da
exposição ao arsênio (Tsuji et al. 2015).

Mais recentemente, substâncias naturais, principalmente suplementos alimentares

derivados de plantas que foram dadas a animais de fazenda, chamaram a atenção como
um substituto para promotores de crescimento de antibióticos (Zhang et al. 2017). Eles
são considerados benéficos para melhorar o desempenho do crescimento, a função
digestiva e a absorção de nutrientes. Eles também são úteis para melhorar a capacidade
de lutar contra as infecções e reduzir a incidência de diarreia. Estudos recentes
demonstraram que os alcalóides de isoquinolina podem regular os processos
metabólicos, sistema imunológico inato e funcionamento digestivo em animais. A
suplementação com alcalóides isoquinolina do extrato de Macleaya cordata aumenta a
ingestão de ração e o ganho de peso. Verificou-se que a ingestão do extrato de Macleaya
cordata aumenta a expressão de ZO-1 e claudina-1 e, portanto, ajuda na prevenção de
substâncias com propriedades alergênicas e toxigênicas que entram no intestino
(Montagne et al. 2007). Isso indica e apóia o entendimento de que o uso de extrato de
Macleaya cordata como aditivo alimentar pode promover o crescimento da mucosa
intestinal e melhorar os sistemas de defesa (Liu et al. 2016). Também foi demonstrado
que a suplementação dietética com alcalóides reduziu o nível sérico de amiloide A (SAA),
um grupo de apolipoproteínas produzidas em reação a citocinas estimuladas por
monócitos ou macrófagos. As apolipoproteínas amiloides A séricas estão intimamente
associadas à imunidade inerente e estão envolvidas na patogênese de doenças
inflamatórias crônicas (Eklund et al. 2012). Assim, a suplementação dietética com
alcalóides isoquinolínicos extraídos de Macleaya cordata estimula o sistema imunológico
e regula o processo metabólico e, finalmente, promove o crescimento e o
desenvolvimento. É relatado que é benéfico para suínos e aves, aumentando o consumo
de ração, massa corporal e ganho de peso, bem como a concentração de aminoácidos
séricos. Ele estimula o sistema imunológico inato ao regular os fagócitos, a haptoglobina e
a amiloide A (Ni et al. 2016).

1033
Além disso, estudos in vitro e estudos em modelos animais de doença inflamatória
intestinal demonstraram que os nutracêuticos, como produtos à base de ervas ou
vitaminas, são geralmente aceitos como alternativa mais segura ou suplementação à
terapia convencional. Eles estão envolvidos em vários processos biológicos, incluindo
defesas antioxidantes, proliferação celular e expressão gênica, o que pode ser
responsável por seu papel na manutenção da integridade da barreira mucosa, no controle
das vias inflamatórias e na modulação da resposta imune (Larussa et al. 2017). Por
exemplo, foi demonstrado em modelo animal experimental que os níveis de interferon-γ e
outras citocinas foram reduzidos em camundongos com deficiência de selênio. Estudos
adicionais em nocautes em camundongos demonstraram que o selenoproteoma, bem
como selenoproteínas individuais como Selk e Sep15, parecem desempenhar papéis
diretos no suporte da função imunológica. Os papéis importantes que as selenoproteínas
desempenham na regulação dos estados de oxidação celular, catalisando reações redox
com proteínas e substratos químicos, sinalização de Ca 2+, dobramento de proteínas e os
efeitos a jusante dessas funções serão provavelmente identificados como os mecanismos
moleculares para explicar a importância do selênio na dieta em apoiar o sistema
imunológico (Tsuji et al. 2015). Os polissacarídeos do cogumelo também demonstraram
ter efeitos positivos na função do sistema imunológico. Alfa (α) - e β-glucanos derivados
de fungos e outras fontes alimentares demonstraram possuir atividade imunoestimulante
eficaz (Zhang et al. 2017).

3. Efeitos Antiinflamatórios dos Nutracêuticos

A inflamação e as reações inflamatórias estão na base de muitas doenças humanas e
animais. Vários medicamentos antiinflamatórios são prescritos para controlar reações
inflamatórias e dores e doenças associadas à inflamação. No entanto, os efeitos
colaterais dos medicamentos usados para tratar condições inflamatórias, principalmente
durante doenças inflamatórias crônicas, como a artrite reumatóide, com vários
medicamentos, como esteróides, não esteróides e imunossupressores, podem ser mais
difíceis de controlar do que a própria doença. Nutracêuticos antiinflamatórios seguros que
podem ser usados como complementares aos antiinflamatórios podem levar à redução do
nível de dose desses medicamentos, reduzindo assim seus efeitos colaterais (Al-Okbi
2014).

Vários nutracêuticos são conhecidos por exercerem efeito antiinflamatório e ajudar no

tratamento e controle de muitas doenças e condições em humanos e animais. Alimentos
ricos em antioxidantes e constituintes bioativos antiinflamatórios, por exemplo, compostos
1034
fenólicos, ácidos graxos poliinsaturados, fitoesteróis, tocoferóis e carotenóides, podem ser
uma boa fonte de nutracêuticos de efeito benéfico para doenças inflamatórias crônicas.
Entre muitos outros, óleo de peixe, óleo de prímula, cominho preto, feno-grego, alcaçuz,
coentro, tomate, cenoura, batata-doce, brócolis, chá-verde, alecrim, avelã, noz, gérmen
de trigo e extratos de tâmara são exemplos de tais fontes (Al -Okbi 2014). Por exemplo, a
administração oral de metanol e extratos aquosos da porção comestível de frutas tâmaras
é relatada para suprimir a inflamação significativamente em 67,8% e 61,3%,
respectivamente (Al-Okbi 2014). A erva ayurvédica que pertence à família Berberidaceae
também é usada desde os tempos antigos como um agente antiinflamatório para
osteoporose, dores nas articulações, febre, olhos e infecções de pele. Além disso, a
instilação tópica de extrato aquoso de Berberis aristata mostrou potente atividade
antiinflamatória contra uveíte induzida por endotoxina, bem como contra inflamação ocular
induzida por linimento de terebintina em coelhos (Nimisha et al. 2017).

Entre muitos outros produtos naturais, a curcumina é um agente antiinflamatório que tem
sido usado para tratar condições médicas por muitos anos (Fadus et al. 2017). A
curcumina pertence à família de compostos naturais chamados coletivamente de
curcuminóides. É o principal curcuminóide natural, que é uma classe de fenóis
encontrados na planta Curcuma longa, uma planta herbácea perene rizomatosa
comumente usada como condimento, conservante de alimentos e corante em alimentos
(Vecchi Brumatti et al. 2014; Larussa et al. 2017). A curcumina possui propriedades
benéficas notáveis como um agente antioxidante, antiinflamatório, anticâncer e
neuroprotetor (Vecchi Brumatti et al. 2014). Vários ensaios experimentais e
farmacológicos demonstraram a eficácia da curcumina como agente antiinflamatório. Tem
se mostrado eficaz no tratamento e gerenciamento de condições crônicas, como artrite
reumatóide, doença inflamatória intestinal, doença de Alzheimer e outras doenças
malignas comuns (Fadus et al. 2017).

O mecanismo de ação antiinflamatório exercido por vários nutracêuticos é diferente e

depende de sua natureza e estrutura, seja esteroidal ou não (Al-Okbi 2014). Por exemplo,
o mecanismo antiinflamatório da curcumina atua principalmente por meio da supressão do
potencializador da cadeia leve kappa do fator nuclear da via inflamatória relacionada às
células B ativadas (NFkB), com subsequente inibição do fator de necrose tumoral (TNF) -
α, interleucina (IL)-12 e IL-2, afetando assim a modulação da resposta imune e
representando um agente seguro e promissor (Vecchi Brumatti et al. 2014; Larussa et al.
2017) como é relatado na supressão da inflamação na doença no intestino inflamatório
(Vecchi Brumatti et al. 2014).

1035
Polifenóis de várias plantas também têm efeitos antiinflamatórios potentes. Eles são
compostos naturais encontrados principalmente em frutas como uvas, maçã, pêra, cerejas
e frutas vermelhas, em vegetais, cereais e bebidas (Pandey e Rizvi 2009). Eles são
metabólitos vegetais secundários que também demonstraram exercer efeitos
antioxidantes e antiinflamatórios em estudos de cultura de células, roedores e humanos
(Gessner et al. 2016).

Devido ao fato de que o estresse oxidativo e a inflamação são altamente prevalentes em

animais de fazenda, os polifenóis são considerados aditivos alimentares promissores na
nutrição de animais de fazenda. Um grande número de estudos com culturas de células,
como células intestinais, células imunes, células endoteliais e musculares lisas, adipócitos
ou modelos animais experimentais de inflamação, incluindo inflamação intestinal,
inflamação sistêmica associada à obesidade, síndrome metabólica e aterosclerose,
demonstraram que compostos polifenólicos isolados ou extratos de plantas ricas em
polifenóis, como chá verde, lúpulo, cacau e uva, suprimem os processos inflamatórios
induzidos experimentalmente (Gessner et al. 2016). Os efeitos dos polifenóis contra a
inflamação são mediados por complexos mecanismos celulares, a maioria dos quais está
ligada a uma inibição do fator nuclear NFkB, o principal regulador da inflamação. Os
polifenóis são capazes de bloquear a ativação de NFкB ao inibir a fosforilação e a
degradação proteassomal do kappa B inibitório (IkB), um efeito que é em parte devido às
propriedades antioxidantes dos polifenóis (Vendrame e Klimis-Zacas 2015). Em geral,
evidências crescentes de estudos com porcos, aves e gado indicam que os polifenóis
vegetais são úteis para aliviar as condições inflamatórias locais e sistêmicas, que são de
particular relevância durante a fase de desmame em espécies monogástricas e durante o
período periparturiente em gado leiteiro, e assim melhorar o desempenho do animal. A
principal razão para melhorias no desempenho do animal, como aumento na proporção
de ganho para alimentação e produção de leite, em resposta aos polifenóis vegetais é que
os fenóis reduzem o efeito da condição inflamatória que diminui o consumo de ração,
aumenta a necessidade de energia para a produção de febre, e induz várias alterações
hormonais, deslocando o metabolismo para um estado mais catabólico em animais de
fazenda (Gessner et al. 2016).

4. Nutracêuticos em doenças degenerativas e metabólicas

Doenças degenerativas e metabólicas se desenvolvem devido a doenças crônicas
ou insultos contínuos a células, tecidos e órgãos em humanos
e animais resultando em aumento da perturbação da morfologia e funções (metabolismo)
1036
de tecidos e órgãos ao longo do tempo. Desgaste corporal normal associado à idade ou
escolhas de estilo de vida, como exercícios ou hábitos nutricionais, podem estar na base
do desenvolvimento de doenças degenerativas e metabólicas. Suplementos alimentares
naturais são conhecidos por prevenir ou retardar o desenvolvimento de doenças
degenerativas e aliviar os sinais de doença, sintomas e dor associados a doenças
clínicas. Por exemplo, o suplemento dietético natural, consistindo de extrato de cinco
fontes vegetais que continham Cynara scolymus, Silybum marianum, Taraxacum
officinale, Curcuma longa (curcumina) e Commiphora mukul, é relatado para prevenir
doença hepática gordurosa não alcoólica e aterogênese modulando a expressão de
diferentes genes envolvidos e evitando o desequilíbrio do sistema renina-angiotensina. O
suplemento dietético natural previne o acúmulo de gordura no fígado e o desenvolvimento
de lesões ateroscleróticas e melhora a hiperlipidemia (Amato et al. 2017).

Um ensaio clínico randomizado (Williams et al. 2017) em obesos e idosos também

mostrou que a suplementação com concentrado de frutas e vegetais tem o potencial de
melhorar o perfil metabólico de indivíduos com sobrepeso e obesos, reduzindo os níveis
de lipídios no sangue e a inflamação sistêmica, além de melhorar composição do corpo. O
grau das melhorias é considerado clinicamente significativo, uma vez que a redução no
colesterol total observada na coorte completa é estimada como equivalente a uma perda
de peso de 4 kg e uma redução de 8–9% no risco de doença cardiovascular. Todos os
indivíduos obesos têm probabilidade de obter algum benefício com a suplementação com
concentrado de frutas e vegetais; no entanto, parece provável que as maiores melhorias
ocorram naqueles com inflamação sistêmica ou lipídios no sangue de base elevada. Em
suma, foi indicado que em indivíduos obesos, que normalmente têm um baixo consumo
de frutas e vegetais, a suplementação com concentrado de frutas e vegetais pode ser
benéfica para melhorar o perfil metabólico e, consequentemente, reduzir o risco de
desenvolver doença inflamatória crônica (Williams et al. 2017) e, assim, diminuir o
desenvolvimento de várias doenças metabólicas.

A inflamação crônica está associada a um amplo espectro de doenças

neurodegenerativas do envelhecimento em humanos, incluindo doença de Alzheimer,
doença de Parkinson, esclerose lateral amiotrófica, complexo Parkinson/demência de
Guam, todas as tauopatias e degeneração macular relacionada à idade, bem como várias
doenças degenerativas como osteoartrite, artrite reumatóide, aterosclerose e enfarte do
miocárdio (McGeer e McGeer 2004). Portanto, nutracêuticos, como concentrados de
frutas e vegetais, que reduzem a inflamação crônica, ajudariam a aliviar a doença clínica
ou o desenvolvimento de tais doenças degenerativas. Por exemplo, polissacarídeos e

1037
outros constituintes dos cogumelos demonstraram reparar o dano oxidativo e suprimir a
neuroinflamação, exibindo um grande potencial para desenvolver terapias para condições
neurodegenerativas (Zhang et al. 2017).

Uma revisão sistemática (Zhai et al. 2017) forneceu algumas evidências de que a
suplementação com coenzima Q10 (CoQ10) pode melhorar parcialmente o processo de
estado inflamatório em pacientes com doenças metabólicas, embora mais estudos bem
planejados, com tamanho de amostra maior, sejam necessários para confirmar sua
eficácia na inflamação associada a doenças metabólicas.

5. Nutracêuticos em distúrbios de hipersensibilidade (alérgicos) e

outras doenças inflamatórias
Hipersensibilidade ou reações alérgicas e doenças ocorrem em humanos e animais
quando o sistema imunológico do corpo reage de forma exagerada após a exposição a
vários agentes estranhos, frequentemente conhecidos como alérgenos, que ilicitam tal
reação. Isso se manifestará de várias formas, dependendo dos tecidos, órgãos ou
sistemas afetados do corpo. Pode ser visto como dermatite alérgica na pele ou doença
inflamatória intestinal no trato gastrointestinal. Vários nutracêuticos, incluindo aqueles de
origem vegetal, são usados no tratamento e/ou redução dos efeitos clínicos de doenças
associadas a reações alérgicas. Por exemplo, o gel de aloe vera, um extrato vegetal
conhecido para fins medicinais em várias culturas há séculos, é uma das terapias
fitoterápicas comuns usadas para doenças inflamatórias intestinais, apesar da falta de
grandes estudos que confirmem sua eficácia (Hilsden et al. 2003). Langmead et al. (2004)
demonstraram a indução de resposta clínica em pacientes com colite ulcerosa após um
tratamento de 4 semanas com administração oral de gel de aloe vera, embora nenhum
efeito significativo tenha sido observado nos resultados endoscópicos e histológicos.

Em outro estudo (Del Pinto et al. 2015), constatou-se que a doença inflamatória intestinal
está significativamente associada à deficiência de vitamina D. As evidências apoiam um
papel imunológico da vitamina D na doença inflamatória intestinal, ambos promovendo a
formação de barreira tecidual por meio da expressão celular, proteínas de adesão e
estabilização de junções estreitas entre células epiteliais e inibição da produção de
citocinas pró-inflamatórias por meio da ativação do receptor de vitamina D (Mouli e
Ananthakrishnan 2014). Além disso, Larussa et al. (2017), citando vários autores, indicou
que a suplementação com vitamina D é relatada como resultando em taxas de recidiva
mais baixas e melhora no índice de atividade da doença de Crohn e demonstrou ter um

1038
efeito benéfico em pacientes com colite ulcerosa. Peptídeos e aminoácidos dietéticos
(AAs) também demonstraram modular as funções imunológicas intestinais e influenciar as
respostas inflamatórias, estando envolvidos na redução da inflamação, estresse oxidativo
e apoptose no intestino e podem ser úteis como tratamentos alternativos ou auxiliares na
doença inflamatória intestinal ( Zhang et al. 2015).

6. Observações Finais e Orientações Futuras

Nutracêuticos em diferentes formas, incluindo ervas e outros produtos vegetais, são
usados há séculos. Apesar do desenvolvimento da medicina moderna, a medicina
tradicional que usa ervas e nutracêuticos ainda é usada com uma tendência crescente em
todo o mundo. Com a exposição de humanos e animais a ambientes poluídos, produtos
sintéticos para uso diário e alimentos contaminados com produtos químicos e poluentes,
várias doenças, incluindo reações alérgicas e doenças imunomediadas, estão afetando
humanos e animais em taxas crescentes. Devido aos efeitos colaterais indesejados, os
medicamentos modernos usados para tratar várias doenças e à eficácia dos produtos
naturais no tratamento e gerenciamento de várias doenças em animais e humanos sem
muitos efeitos colaterais, os nutracêuticos têm muito em estoque no futuro como parte da
alternativa medicamento.

Referências
Akhtar MS, Hossain MA, Said SA (2017) Isolation and characterization of antimicrobial compound from the stem-bark
of the traditionally used medicinal plant, Adenium obesum. J Tradit Complement Med 7 (2017):296–300
Alkhatib A, Tsang C, Tiss A et al (2017) Functional foods and lifestyle approaches for diabetes prevention and
management. Nutrients 2017 (9):1310. https://doi.org/10.3390/nu9121310
Al-Okbi SY (2014) Nutraceuticals of anti-inflammatory activity as complementary therapy for rheumatoid arthritis.
Toxicol Ind Health 30(8):738–749
Amato A, Caldara G-F, Nuzzo D et al (2017) NAFLD (Non-alcoholic fatty liver disease) and atherosclerosis are
prevented by a natural dietary supplement containing curcumin, silymarin, guggul, chlorogenic acid and inulin in mice fed
a high-fat diet. Nutrients 9:492. https://doi.org/10.3390/nu9050492
Chauhan B, Kumar G, Kalam N et al (2013) Current concepts and prospects of herbal nutraceutical: a review. J Adv
Pharm Technol Res 4:4–8
Del Pinto R, Pietropaoli D, Chandar AK et al (2015) Association between inflammatory bowel disease and vitamin D
deficiency: a systematic review and meta-analysis. Inflamm Bowel Dis 21:2708–2717
Eklund KK, Niemi K, Kovanen PT (2012) Immune functions of serum amyloid A. Crit Rev Immunol 32(4):335–348
Fadus MC, Lau C, Bikhchandani J, Lynch HT (2017) Curcumin: an age-old anti-inflammatory and anti-neoplastic
agent. J Tradit Complement Med 7:339–346
Gessner DK, Ringseis R, Eder K (2016) Potential of plant polyphenols to combat oxidative stress and inflammatory
processes in farm animals. J Anim Physiol Anim Nutri 101:605–628
Global Nutrition Report (2016) From promise to impact: ending malnutrition by 2030. International Food Policy
Research Institute (IFPRI), Washington, DC, USA. http://www.ifpri.org/publication/global-nutrition-report-2016-promise-
impact-ending-malnutrition-2030
Hilsden RJ, Verhoef MJ, Best A et al (2003) Complementary and alternative medicine use by Canadian patients with
inflammatory bowel disease: results from a national survey. Am J Gastroenterol 98:1563–1568
Kalra EK (2003) Nutraceutical-definition and introduction. AAPS PharmSci 5:E25
Langmead L, Feakins RM, Goldthorpe S et al (2004) Randomized, double-blind, placebo-controlled trial of oral aloe
vera gel for active ulcerative colitis. Aliment Pharmacol Ther 19:739–747

1039
 Larussa T, Imeneo M, Luzza F (2017) Potential role of nutraceutical compounds in inflammatory bowel disease. World
J Gastroenterol 23(14):2483–2492
Liu G, Guan G, Fang J, et al (2016) Macleaya cordata extract decreased diarrhea score and enhanced intestinal
barrier function in growing piglets. BioMed Res Int, 2016, 1069585, 7 pages
McGeer PL, McGeer EG (2004) Inflammation and the degenerative diseases of aging. Ann N Y Acad Sci 1035:104–
116
Montagne L, Boundry G, Favier C et al (2007) Main intestinal markers associated with the changes in gut architecture
and function in piglets after weaning. Br J Nutr 97:45–57
Mouli VP, Ananthakrishnan AN (2014) Review article: vitamin D and inflammatory bowel diseases. Aliment Pharmacol
Ther 39: 125–136
Ni H, Martínez Y, Guan G et al (2016) Analysis of the impact of isoquinoline alkaloids, derived from Macleaya cordata
extract, on the development and innate immune response in swine and poultry. BioMed Res Int 2016, 1352146, 7 pages
https://doi.org/10.1155/2016/1352146
Nieman DC, Mitmesser SH (2017) Potential impact of nutrition on immune system recovery from heavy exertion: a
metabolomics perspective. Nutrients 2017(9):513. https://doi.org/10.3390/nu9050513
Nimisha RDA, Fatima Z, Neema KCD (2017) Antipsoriatic and antiinflammatory studies of Berberis aristata extract
loaded nanovesicular gels. Pharmacogn Mag 13(Suppl 3):S587–S594
Pandey KB, Rizvi SI (2009) Plant polyphenols as dietary antioxidants in human health and disease. Oxid Med Cell
Longev 2(5):270–278
Tsuji PA, Carlson BA, Anderson CB et al (2015) Dietary selenium levels affect selenoprotein expression and support
the interferonand IL-6 immune response pathways in mice. Nutrients 7:6529–6549
Vecchi Brumatti L, Marcuzzi A, Tricarico PM et al (2014) Curcumin and inflammatory bowel disease: potential and
limits of innovative treatments. Molecules 19:21127–21153
Vendrame S, Klimis-Zacas D (2015) Anti-inflammatory effect of anthocyanins via modulation of nuclear factor- jB and
mitogenactivated protein kinase signaling cascades. Nutr Rev 73:348–358
Williams EJ, Baines KJ, Berthon BS et al (2017) Effects of an encapsulated fruit and vegetable juice concentrate on
obesityinduced systemic inflammation: a randomised controlled trial. Nutrients 2017(9):116.
https://doi.org/10.3390/nu9020116
Zhai J, Bo Y, Lu Y et al (2017) Effects of coenzyme Q10 on markers of inflammation: a systematic review and meta-
analysis. PLoS One 12 (1):e0170172. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0170172
Zhang H, Hu CA, Kovacs-Nolan J et al (2015) Bioactive dietary peptides and amino acids in inflammatory bowel
disease. Amino Acids 47:2127–2141
Zhang L, Li CG, Liang H et al (2017) Bioactive mushroom polysaccharides: immunoceuticals to anticancer agents. J
Nutr Food Sci 2(2):6

1040
 Imunomoduladores derivados de plantas e alimentos
como nutracêuticos para atividades de melhoria de
desempenho
Bhanushree Gupta, Vidya Rani Singh, Surabhi Verma, Neha Meshram, Leena Dhruw,
Rahul Sharma, Kallol K. Ghosh e Ramesh C. Gupta

Resumo
O progresso na pesquisa gerou uma nova era para alimentos e produtos derivados de
plantas que são de incrível benefício e são amplamente utilizados como
imunomoduladores e defensores da vitalidade na forma de nutracêuticos. Eles estão até
mesmo sendo considerados como agentes com potencial para curar inúmeras doenças.
Esses produtos funcionais são processados de plantas na forma de fitoquímicos, bem
como de fontes alimentares, como produtos de soja, cogumelos e leite. Um número
considerável desses nutracêuticos possui funções fisiológicas relevantes e atividades
biológicas importantes. As informações agregadas presentes sobre nutracêuticos, sem
dúvida, fornecem oportunidades extraordinárias para uso por nutricionistas, médicos,
tecnólogos de alimentos e químicos.

Palavras-chave: Imunomoduladores · Peptídeos bioativos · Nutracêuticos · Alimentos

nutricionais · Nutracêuticos para melhorar o desempenho
Authores Vidya Rani Singh, Surabhi Verma, Neha Meshram, and Leena Dhruw have contributed equally.
B. Gupta · V. R. Singh · S. Verma · N. Meshram · L. Dhruw
Department of Chemistry, Center for Basic Sciences, Pandit Ravishankar Shukla University, Raipur (C.G.), India R.
Sharma. Department of Plant Physiology, Agricultural Biochemistry, Medicinal and Aromatic Plants, Indira Gandhi
Agricultural University, Raipur (C.G.), India
K. K. Ghosh. School of Studies in Chemistry, Pandit Ravishankar Shukla University, Raipur (C.G.), India
R. C. Gupta. Toxicology Department, Breathitt Veterinary Center, Murray State University, Hopkinsville, KY, USA

1. Introdução
No campo de rápido crescimento da pesquisa biomédica, a demanda por alimentos
funcionais (ou seja, nutracêuticos) tem sido altamente comercializada em resposta à
crescente conscientização sobre os efeitos da dieta na saúde (Orlando 2018). Como
esses alimentos fornecem nutrientes adicionais ao corpo, eles são amplamente utilizados
como fonte adicional de energia para o corpo. Nutracêuticos são substâncias presentes
nos alimentos ou isoladas dos alimentos que proporcionam benefícios médicos ou de
saúde, incluindo benefícios no tratamento e prevenção de doenças (DeFelice 1992). Eles

1041
também são conhecidos como alimentos de marca e incluem nutrientes isolados,
suplementos dietéticos e produtos à base de ervas da natureza, bem como produtos
alimentícios processados, como cereais, sopas e bebidas. Este capítulo enfoca os
nutracêuticos derivados de plantas e animais.

A partir de uma vasta pesquisa ao longo dos anos, fitoquímicos derivados de plantas,
como flavonóides e polissacarídeos, foram distinguidos por seus atributos
imunomoduladores (Jantan et al. 2015). As drogas imunológicas incorporam operadores
orgânicos naturais e sintéticos; por exemplo, citocinas e anticorpos para alvos únicos ou
vias têm sido utilizados para tratar doenças relacionadas ao sistema imunológico, mas
com sucesso apenas limitado. Várias doenças podem ser tratadas com imunomodulação
utilizando plantas, em vez de outros meios. A descoberta e o isolamento de determinados
operadores imunomoduladores e impulsionadores de energia de origem vegetal têm o
potencial de eliminar os efeitos colaterais e reduzir os altos custos de fabricação de
drogas sintéticas (Baxter 2007). Este capítulo apresenta a importância das plantas como
criadoras de moléculas funcionais ativas de vários tipos com usos concebíveis em
animais e seu bem-estar.

O capítulo também enfoca o setor de alimentos, que tem mostrado crescimento

ininterrupto em proteínas alimentares, oferecendo benefícios à saúde além de atender às
necessidades nutricionais do corpo. Essas intervenções nutricionais podem ser de imenso
benefício para melhorar a saúde de indivíduos saudáveis e com comprometimento
imunológico. Numerosos estudos de pesquisa em andamento descrevem o potencial do
uso de óleos de peixe no tratamento de dermatite atópica e psoríase. O tratamento com
suplementos dietéticos de ácido graxo n-3 oferece possibilidades novas e estimulantes
em doenças malignas (Fürst e Kuhn 2000). Os papéis dos alimentos tradicionais à base
de soja na prevenção e tratamento de doenças ganharam reconhecimento mundial por
causa de seus efeitos antidiarreicos, hipolipemiantes, anticarcinogênicos e
antiosteoporóticos. Peptídeos bioativos também se estabeleceram como protetores contra
patógenos nocivos presentes no meio ambiente, bem como nas funções imunológicas
humorais e mediadas por células. Assim, têm perspectivas de serem incorporados como
ingredientes em alimentos funcionais, nutracêuticos e farmacêuticos, onde suas
atividades biológicas possam auxiliar no controle e prevenção de doenças. Eles podem
ser produzidos a partir de uma ampla variedade de materiais alimentares, incluindo
aqueles de origem animal (por exemplo, leite), pois fornecem uma capacidade imensa de
aumento de potência e têm amplas características imunorregulatórias (Gill et al. 2000).

1042
Portanto, podemos concluir que os nutracêuticos têm uma vantagem sobre os
medicamentos devido à sua imensa capacidade como imunomoduladores e
amplificadores de energia. Eles também são uma grande vantagem, pois não têm efeitos
colaterais e complementam naturalmente a dieta (Chauhan et al. 2013). Uma grande
vantagem dos nutracêuticos é sua segurança, enquanto sua grande desvantagem é sua
eficácia relativamente baixa. No entanto, essa aparente desvantagem às vezes pode ser
enganosa.

2. Imunomoduladores Derivados de Plantas

O sistema imunológico é responsável pelos mecanismos de defesa do hospedeiro. A
assistência do corpo para se defender contra substâncias estranhas, patógenos, toxinas e
células vivas não compatíveis é fornecida pelo sistema imunológico (Licciardi e
Underwood 2011). O sistema imunológico foi classificado em duas categorias amplas: o
sistema imunológico adaptativo (que fornece imunidade específica ou adquirida) e o
sistema imunológico inato (que fornece imunidade não específica).

Os compostos derivados de plantas têm características imunomoduladoras apreciáveis.

Alcalóides, flavonóides, diterpenóides e glicosídeos são os principais tipos de agentes
imunomoduladores derivados de plantas. Além disso, curcumina, resveratrol, quercetina,
capsaicina, etc., são de importância terapêutica (Jantan et al. 2015).

O uso de plantas medicinais para imunomodulação é uma alternativa à quimioterapia

comum para o tratamento de várias doenças – por exemplo, imunossupressão. Os
nutracêuticos podem ser úteis em circunstâncias como o funcionamento impróprio do
sistema imunológico. Os produtos de Emblica officinalis – também conhecidos como amla
ou groselha indiana – têm propriedades antifúngicas, antibacterianas e antidiabéticas
significativas (Dhir et al. 1991). Além dessas propriedades, essa fruta também demonstrou
propriedades citoprotetoras na toxicidade aguda do cádmio (Khandelwal et al. 2002).
Descobriu-se que o suco de shankhpushpi (Evolvulus alsinoides) melhora a cicatrização
de úlceras, e o extrato da folha tem sido usado como remédio para unheiro nos dedos das
mãos e pés (Sethiya et al. 2011).

2.1 Alcalóides

Os alcalóides são geralmente usados na forma de sais. Dois exemplos são a cafeína e a
codeína, que têm atividades estimulantes e analgésicas, respectivamente. Alguns
alcalóides, como os sais de nicotina e anabasina, são usados como inseticidas. Os
alcalóides modificados são as principais fontes de muitas drogas sintéticas e
1043
semissintéticas, concebidas de forma a aumentar ou alterar o efeito primário da droga e
reduzir os efeitos colaterais indesejados. A piperina, um agente imunomodulador, é um
tipo de alcalóide que possui as seguintes atividades: reduz os níveis das citocinas pró-
inflamatórias interleucina (IL) -1β, IL-6 e fator de necrose tumoral (TNF) a; regula
negativamente a expressão de ciclooxigenase (COX) -2, óxido nítrico sintase (NOS) 2 e
fator nuclear (NF) kB; e inibe a geração de eicosanóides ao inibir a atividade da
fosfolipase A2 (PLA2) e do tromboxano A2 (TXA2) sintase (Vaibhav et al. 2012).

2.2 Flavonóides

Os flavonóides são uma grande classe de pigmentos vegetais, que têm uma estrutura
baseada ou semelhante à das flavonas. Várias formas de flavonóides são flavonóis,
floroglucinóis, isoflavonas, quinonas, etc.

Por exemplo, a buteína é uma chalcona que suprime a produção de óxido nítrico (NO)
atenuando a expressão induzível de óxido nítrico sintase (iNOS) e inibe a translocação de
NFkB (Wang et al. 2014). A quercetina - um flavanol envolvido na diminuição da
expressão de citocinas pró-inflamatórias, NFkB e iNOS - também reduz a expressão da
molécula de adesão de células vasculares (VCAM) 1 e E-selectina. Epigalocatequina-3-
galato, um membro da classe flavanol, inibe a geração de espécies reativas de oxigênio
(ROS), fosforilação de proteína quinase ativada por mitogênio (MAPK), expressão de
molécula de adesão e transdutor de sinal e ativador da transcrição (STAT) 3 e ativação da
transcrição translocação do fator (ATF) 2 através da indução de heme oxigenase (HO) 1 e
supressor de expressão de sinalização de citocinas (SOCS) 3. A isoflavona daidzeína
diminui a expressão de TNF-a, IL-1β, proteína quimioatraente de monócitos (MCP) 1, NO
e iNOS no nível do RNA mensageiro (mRNA) (Rabinovitch et al. 1996). O floroglucinol
mirtucomulona inibe a produção de prostaglandina E2 (PGE2) ao inibir a atividade da
prostaglandina E sintase microssomal (mPGES) 1 sem inibir significativamente a atividade
da enzima COX. A timoquinona, um princípio ativo em Nigella sativa L., pertence às
quininas e realiza os mecanismos de proliferação de fibroblastos induzida por
lipopolissacarídeo (LPS) e geração de 4-hidroxinonenal induzida por H2O2 (Wang et al.
2014).

2.3 Terpenóides

Os terpenóides são as substâncias responsáveis pelo odor das plantas e flores. Eles são
encontrados amplamente nas folhas e produtos de plantas superiores, como coníferas,
frutas cítricas e eucaliptos. 1,4-Deoxyandrographolide (de Andrographis paniculata) é um

1044
terpenóide que tem uma ação imunomoduladora e aumenta a multiplicação de linfócitos
(Kumar et al. 2004) (Fig. 1).

Fig. 1 Estruturas químicas de imunomoduladores derivados de

algumas plantas

2.4 Curcumina

A curcumina é um composto diarilheptanóide característico encontrado no rizoma de

Curcuma longa e espécies relacionadas. As vantagens terapêuticas da curcumina são
conhecidas há centenas de anos. Foi descrita uma variedade de propriedades naturais e
farmacológicas da curcumina, incluindo a inibição do crescimento de células cancerosas,
angiogênese e proliferação celular; e indução de apoptose (Bhaumik et al. 2000; Surh et
al. 2001).

2.5 Resveratrol

O resveratrol (que é sinteticamente (5 - [(E) -2- (4-hidroxifenil) etenil benzeno-1,3-diol) é

uma subsidiária da estilbeno e da fitoalexina. É encontrado em diferentes itens
alimentares e plantas, incluindo uvas, vinho tinto e amendoim. Como a curcumina,
descobriu-se que o resveratrol exerce uma série de efeitos farmacológicos, como
propriedades antimicrobianas, quimiopreventivas, anticâncer / pró-apoptóticas, atenuantes
e de reforço celular. Os átomos provocantes são enfaticamente impedidos pelo
resveratrol.

Os resveratróis são encontrados principalmente em uvas, diminuem o movimento da

mieloperoxidase (MPO) e mPGES-1 para níveis basais; inibe a articulação iNOS e COX-2
(Youn et al. 2009); reduz as citocinas incendiárias especializadas IL-8, TNF-a, IFN-γ e IL-
1α; e aumenta os níveis da citocina mitigadora IL-10 (Vang et al. 2011).

1045
2.6 Quercetina

A quercetina flavanol (que quimicamente é 2- (3,4-di-hidroxifenil) -3,5,7-tri-hidroxicromeno-

4-ona) pertence à família dos polifenóis, representando metabólitos secundários de
plantas amplamente difundidas. A quercetina é encontrada em uma variedade de
alimentos, como chá, alcaparras, cebolas vermelhas, brócolis, frutas vermelhas, uvas e
maçãs. Foi descoberto que a quercetina exerce efeitos antimutagênicos, antioxidantes,
antiinflamatórios, anticâncer / quimiopreventivos, neuroprotetores, anti-hipertensivos e de
redução da glicose no sangue (Middleton et al. 2000). A quercetina ativa quinases, que
fosforilam o fator de iniciação eucariótica (eIF) 2, inibindo assim a tradução celular (Ito et
al. 1999). O mecanismo por trás dessas ações é a diminuição da expressão de citocinas
pró-inflamatórias, NFkB, iNOS, VCAM-1 e seleção-E.

2.7 Capsaicina

A capsaicina (que é sinteticamente (E) -N - [(4-hidroxi-3-metoxifenil) metil] -8-metilnon-6-

enamida) é um alcalóide hidrofóbico encontrado em pimentas (espécies de Capsicum da
família Solanaceae) e é responsável pelo sabor / nitidez da marca registrada dos produtos
naturais desse tipo. Tem sido utilizado em medicamentos habituais contra o agravamento
e como um rubefaciente tópico para acalmar dores nas articulações e nos músculos. Um
adesivo cutâneo de capsaicina a 8% foi recentemente aprovado para tratar a dor
neuropática em adultos não diabéticos na União Europeia (UE) e para tratar a dor
neuropática associada à neuralgia pós-herpética nos EUA (Caterina et al. 1997). Foi
descoberto que a capsaicina inibe a via NFkB, a expressão de iNOS e a atividade da
COX-2 em macrófagos de uma maneira independente do receptor potencial transitório do
vaniloide (TRPV) 1 (Kim et al. 2004).

3. Imunomoduladores derivados de alimentos

Os agentes imunomoduladores derivados na forma de alimentos de animais e plantas têm
várias funções regulatórias no sistema imunológico (Hartmann et al. 2000). Através do uso
desses agentes imunomoduladores, imunidade de longa duração e outros efeitos
benéficos podem ser alcançados em animais. A eficiência na produção de alimentos pode
ser aumentada com o auxílio desses agentes, pois estimulam o sistema imunológico e
seu funcionamento nos animais, regulando certos fatores imunológicos (por meio de
supressão ou estimulação). Os peptídeos bioativos são amplamente conhecidos no
campo da ciência por causa de sua funcionalidade biológica benéfica, induzida por
hidrolisados de proteínas alimentares. Eles podem ser produzidos a partir de subprodutos
1046
do bioprocessamento de proteínas alimentares e também de uma ampla variedade de
materiais alimentares de animais (ovo, queijo, leite, carne bovina e pele de frango e peixe)
e plantas (soja, produtos de soja, trigo, e culturas biofortificadas).

3.1 Bioprocessamento de Peptídeos Bioativos de Proteínas

Os peptídeos bioativos atuam como agentes imunomoduladores devido à presença de

diferentes grupos funcionais que possuem várias atividades dependentes da estrutura.
Essas propriedades funcionais dos compostos bioativos podem ser determinadas com
base em suas estruturas tridimensionais únicas. Esta determinação pode ser feita de
acordo com o tipo e a natureza dos aminoácidos presentes nas sequências primárias dos
hidrolisados de proteínas alimentares. As proteínas podem ser produzidas a partir de
peptídeos bioativos por vários métodos relatados, tais como:

1. Hidrólise enzimática com enzimas digestivas

2. Fermentação de proteínas de alimentos com culturas iniciais de proteólise

3. Proteólise por enzimas derivadas de microorganismos ou plantas

3.1.1 – Hidrólise Enzimática com Enzimas Digestivas

O método mais comumente usado para obter peptídeos bioativos é a hidrólise enzimática
de moléculas inteiras. As enzimas utilizadas são de plantas, bactérias ou fungos, ou
podem ser de origem gastrointestinal. A produção de fontes de proteína por enzimas
proteolíticas e seus precursores, pelo uso de tecnologia de DNA recombinante, foi
relatada (Korhonen e Pihlanto 2006). As enzimas normalmente usadas são quimotripsina,
pepsina, alcalase, tripsina, papaína e pancreatina, que são utilizadas sozinhas ou
misturadas com outras enzimas. Por hidrólise enzimática, a produção de peptídeos
bioativos é realizada utilizando a condição otimizada da(s) enzima(s), e o tipo de peptídeo
gerado é submetido à especificidade hidrolítica da(s) enzima(s). Além disso, com esse
método, combinações de enzimas específicas podem ser usadas para determinar o
destino de uma molécula de proteína quando ela passa pelo sistema digestivo. Por
exemplo, a proteína Brassica carinata digerida sequencialmente – isolada in vitro com
tripsina, quimiotripsina e carboxipeptidase A – tem sido usada para produzir peptídeos
com propriedades de prevenção do câncer e atividades inibidoras da enzima de
conversão da angiotensina (Pedroche et al. 2007). Acredita-se que os peptídeos bioativos
gerados com esse tipo de combinação de enzimas estimulam os produzidos pelo sistema
digestivo (Pedroche et al. 2007). Além disso, a produção de vários novos peptídeos é
liderada pela combinação de vários tratamentos enzimáticos. O uso de catalisadores
imobilizados sobre as enzimas solúveis convencionais para a produção de peptídeos
1047
bioativos está ganhando impulso. Em um estudo de Pedroche et al. (2007), peptídeos
bioativos foram produzidos a partir de B. carinata hidrolisada por enzimas imobilizadas em
suporte de agarose glioxal.

3.1.2 – Fermentação de proteínas alimentares com culturas iniciais de proteólise

Outra técnica amplamente conhecida para a produção de peptídeos bioativos é a

fermentação de proteínas de alimentos com culturas iniciadoras proteolíticas. O sistema
proteolítico das bactérias do ácido láctico (LAB) oferece especificidades enzimáticas
alteradas. Na produção de peptídeos bioativos, o LAB oferece proteinases associadas ao
envelope celular (CEP) e também peptidases intracelulares – por exemplo,
endopeptidases, aminopeptidases, tripeptidases e dipeptidases – para possível aplicação.
Para a produção de probióticos e peptídeos bioativos, os micróbios probióticos dos
gêneros Lactobacillus e Bifidobacterium têm sido amplamente estudados (Alhaj et al.
2010). As atividades das peptidases são influenciadas pelos estados de desenvolvimento
dos microrganismos produtores; assim, o desenvolvimento de peptídeos por este método
pode ser controlado até certo ponto (Korhonen e Pihlanto 2006).

3.1.3 – Proteólise por enzimas derivadas de microorganismos ou plantas

A pesquisa sobre a produção comercial de peptídeos bioativos está progredindo e é

possibilitada pelo desenvolvimento de técnicas de produção otimizadas. Os avanços nas
tecnologias de biosseparação (utilizadas na higienização e isolamento de biomoléculas)
combinados com os princípios de troca de massa convectiva da engenharia química
podem oferecer um estágio de produção prático e versátil para peptídeos
imunomoduladores. Até o momento, as estratégias que têm sido utilizadas para o
fracionamento e o avanço de peptídeos são aquelas que permitem recuperar os
peptídeos bioativos com destruição mínima. Resumidamente, eles incluem tecnologias de
troca iônica, ultrafiltração e filtração em gel. Técnicas acopladas – por exemplo,
ultrafiltração em um reator de membrana seguida por hidrólise enzimática e, da mesma
forma, cromatografia de membrana de troca iônica – têm sido utilizadas (Chabeaud et al.
2009; Pedroche et al. 2007). A utilização de uma combinação de técnicas também está se
tornando popular para filtração, produção, separação e identificação de peptídeos
bioativos. Esses métodos levam a produtos de alto rendimento, bem como de alta pureza.
Para isolamento e enriquecimento de peptídeos bioativos, a técnica de filtração por
eletromembrana é utilizada (Bargeman et al. 2002). Esta técnica combina filtração por
membrana e eletroforese e, portanto, é muito eficaz para uso em biomoléculas fortemente
carregadas. Além disso, os principais parâmetros operacionais – por exemplo, a
intensidade do campo elétrico, o tipo de membrana, a salinização dos hidrolisados e a
1048
concentração do hidrolisado – podem ser controlados para aumentar as taxas de
transferência e separação do produto (Bargeman et al. 2002).

3.2 Atividades Biológicas de Peptídeos Bioativos

Várias atividades biológicas, como anti-hipertensiva, antioxidante, imunomoduladora,

anticâncer, antimicrobiana e hipolipemiante, foram exibidas por hidrolisados de proteínas
alimentares.

3.2.1 – Atividade anti-hipertensiva

Entre o vasto número de peptídeos bioativos, a maioria dos peptídeos de fontes exógenas
são peptídeos anti-hipertensivos – por exemplo, ovalbumina, que está presente na
proteína da clara do ovo. Esses peptídeos anti-hipertensivos derivados de alimentos não
apenas têm sido bem pesquisados, mas também têm amplas aplicações, como em
alimentos funcionais e de design. Hoje em dia, a hipertensão tornou-se um problema
médico importante e genuíno em animais, principalmente em países desenvolvidos, e é
considerada um fator de risco para o desenvolvimento de doenças cardiovasculares. Os
peptídeos anti-hipertensivos têm atraído interesse devido à sua ampla eficácia na redução
da pressão arterial. Eles têm se mostrado eficazes na prevenção ou tratamento da
hipertensão, principalmente por inibir as enzimas conversoras da angiotensina, que
desempenham um papel fundamental na regulação da pressão arterial e homeostase
eletrolítica. Os peptídeos Ile-Pro-Pro (IPP) e Val-Pro-Pro (VPP) foram, em sua maioria,
descritos e analisados como inibidores das enzimas de conversão da angiotensina I. A
enzima de conversão da angiotensina I (ECA; peptidil dipeptídeo hidrolase; EC 3.4.15.1) é
uma enzima chave no sistema renina-angiotensina. Essa enzima controla o volume do
fluido extracelular e a vasoconstrição arterial, convertendo a angiotensina I em
vasoconstritor angiotensina II ou inativando a bradicinina (um peptídeo vasodilatador) e a
encefalina. A inibição da ECA dessa maneira resulta em uma diminuição da pressão
arterial, ajudando a controlar a hipertensão (Petrillo e Ondetti 1982).

3.2.2 – Atividade antioxidante

A oxidação desempenha um papel crítico no corpo para a sobrevivência das células e

também na alimentação. Um efeito colateral da digestão oxidativa, sendo fundamental
para a sobrevivência das células, é a geração de radicais livres e outras ROS, resultando
em alterações oxidativas. No ponto em que um excesso de radicais livres é formado, eles
podem sobrepujar enzimas protetoras, como superóxido dismutase, catalase e
peroxidase, causando impactos perigosos e mortais nas células, semelhantes à apoptose,
pela oxidação de proteínas celulares, lipídios de membrana, DNA e enzimas e, assim,

1049
interrompendo os processos celulares (Sharma et al. 2011). Proteínas, hidrolisados de
proteínas, peptídeos singulares e aminoácidos parecem exibir atividade antioxidante
significativa. Os peptídeos antioxidantes bioativos foram derivados de muitas proteínas
hidrolisadas de alimentos, como caseínas, proteínas do soro de leite, proteína da gema
do ovo, proteínas miofibrilares suínas e proteínas subprodutos aquáticos (Pihlanto 2006).
Eles são eficazes contra a peroxidação enzimática e não enzimática de lipídios e ácidos
graxos fundamentais, como eliminadores de radicais livres e quelantes de partículas
metálicas. Durante a hidrólise por enzimas proteolíticas, as caseínas podem liberar
peptídeos antioxidantes (Korhonen e Pihlanto 2006).

Os peptídeos derivados de a-s-caseína demonstraram atividade sequestradora de

radicais livres e inibiram a peroxidação lipídica enzimática e não enzimática (Sharma et al.
2011). Além de ser crítica para a sobrevivência das células em um organismo, a inibição
das formas oxidativas é de grande importância para a qualidade dos alimentos. O
desenvolvimento de radicais livres resulta em efeitos detectáveis na qualidade dos
alimentos, como sabor rançoso, sabor inaceitável e redução do prazo de validade,
enquanto a ingestão de alimentos contendo produtos de oxidação lipídica foi associada a
diferentes doenças, incluindo câncer, diabetes e doenças cardiovasculares (Ryan et al.
2011).

3.2.3 – Atividades Cito moduladoras e Anticâncer

Proteínas, peptídeos e aminoácidos têm sido implicados na prevenção do

desenvolvimento de diferentes tipos de câncer. As proteínas do leite e seus derivados
peptídicos desempenham papéis na prevenção do câncer. Os fosfopeptídeos de caseína
(CPP) demonstraram atividade anticarcinogênica (Bouhallab e Bouglé 2011). As
atividades anticâncer dessas proteínas podem ser pelo menos parcialmente atribuíveis a
peptídeos bioativos criptografados. Numerosos peptídeos em diferentes tamanhos de
várias fontes demonstraram efeitos anticâncer em estudos in vivo (Yu et al. 2014). Há
evidências crescentes de que, agindo como sinais específicos que podem afetar a
viabilidade das células cancerosas, os peptídeos derivados do leite podem ter atividades
moduladoras celulares (Gobbetti et al. 2007). Peptídeos bioativos com essas atividades
foram encontrados durante a hidrólise bacteriana de caseína em culturas iniciais de
iogurte comerciais, que afetou a cinética de células do cólon Caco-2 in vitro (Macdonald et
al. 1994). Peptídeos bioativos com atividade antiproliferativa para células de leucemia
foram encontrados durante a digestão de leite desnatado bovino com um extrato livre de
células da levedura Saccharomyces cerevisiae (Roy et al. 1999). A modulação da
viabilidade celular, por exemplo, através da proliferação e apoptose, em diferentes
1050
modelos de cultura de células humanas foi demonstrada por muitos peptídeos purificados
equivalentes a sequências de caseína. Hartmann et al. (2000) relataram que peptídeos
citomoduladores derivados de frações de caseína inibem o crescimento de células
cancerosas ou estimulam a atividade de células imunocompetentes e células intestinais
neonatais. Os fragmentos 1-18 e 105-117 da b-caseína mostraram influenciar a
viabilidade – bem como a proliferação, diferenciação e apoptose – de diferentes tipos de
células (Phelan et al. 2009).

3.3 Efeitos imunomoduladores

A associação entre nutrição e imunidade é reconhecida há muito tempo. Peptídeos

bioativos derivados de diferentes fontes de proteína demonstraram exercer efeitos
imunomoduladores em estudos in vitro e in vivo. No entanto, esses estudos geralmente se
concentram na avaliação dos impactos de peptídeos e hidrolisados de proteínas em
sistemas imunológicos específicos, e apenas um número limitado de investigações
analisou seus efeitos em sistemas imunológicos não específicos (intrínsecos) (Shahidi e
Zhong 2008). Peptídeos bioativos de caseínas e proteínas de soro são conhecidos por
terem impactos imunomoduladores.

3.4 Ingredientes funcionais de peptídeos bioativos como imunomoduladores

Os grupos funcionais presentes em vários peptídeos biologicamente ativos servem como

uma imensa fonte de energia e também atuam como imunomoduladores quando tomados
na forma de nutracêuticos. As principais fontes de peptídeos bioativos que atuam como
imunomoduladores são leite, cogumelos, ovos, queijo, carne bovina, frutos do mar, arroz,
milho, soja e trigo (Dominic e Danquah 2012).

3.4.1 – Componentes do leite como imunomoduladores

O leite é possivelmente a fonte de nutrientes mais conhecida. Além disso, alguns

componentes do leite, como caseína, lactoferrina, prolactina e citocinas, são fatores de
crescimento do leite. A imunoglobulina do leite facilita a imunidade passiva e contribui
para a proteção contra patógenos ambientais prejudiciais. Proteínas e peptídeos
derivados do leite têm amplas características imunorregulatórias, tornando o leite o
alimento mais importante consumido em todo o mundo. A Tabela 1 lista os componentes
do leite responsáveis pelas propriedades imunomoduladoras.

1051
 Tabela 1 Leite bovino e seus
componentes imunomoduladores com
suas bioatividades (Park 2009)

1. Caseína: esta é a principal proteína do leite e é uma fonte de aminoácidos para animais
jovens. A ação das proteinases intestinais de mamíferos resulta na produção de alguns
peptídeos, derivados de caseínas, que foram encontrados para reter propriedades inumo-
intensificadoras in vitro. Os resíduos de fosfopeptídeo 59-75 da caseína bovina (gerada
pela digestão com tripsina bovina) e os resíduos 1-25 da b-caseína demonstram atividade
mitogênica em células de baço de camundongo, timócitos de camundongo ou células de
patch de Peyer de coelho; e um efeito estimulador na produção de imunoglobulina em
células do baço de camundongos (Otani et al. 2010).

2. Proteínas do soro: são imunorreguladores importantes para animais. As proteínas de

soro de leite bovino têm efeitos imuno-estimulantes em camundongos. Eles incluem
várias proteínas, como g-globulina, b-lactoglobulina, a-lactalbumina (aLA), albumina
sérica bovina (BSA), lactoferrina (LF), lactoperoxidase (LP) e alguns fatores de
crescimento, como interleucinas, fator de crescimento epidérmico, fator de crescimento
semelhante à insulina e fator de crescimento transformador. Essas proteínas têm
atividades biológicas importantes. Algumas proteínas principais e secundárias do soro
estão agora disponíveis comercialmente como resultado dos avanços na tecnologia de
fracionamento de proteína do leite (Wong et al. 1997).

3. Lactoferrina: Esta é uma glicoproteína de 80 KDa, que está envolvida na ligação do

ferro e ocorre no leite de todos os mamíferos. Ele mostra diversos efeitos no sistema de
defesa do hospedeiro. Além de sua função como fator de crescimento e sua ação
antimicrobiana, a lactoferrina demonstrou exibir vários efeitos imunomoduladores. Em
experimentos de cultura de células, foi demonstrado que a lactoferrina e os peptídeos

1052
derivados dela influenciam a produção de citocinas envolvidas em ações imunológicas e
inflamatórias no corpo (Yada et al. 2002).

4. Prolactina: Este é um polipeptídeo de cadeia única de 23 KDa secretado por células

lactotróficas da glândula pituitária anterior em vertebrados. Aumenta a função imunológica
em peixes. A prolactina estimula a atividade fagocítica dos leucócitos de peixes. A
prolactina é necessária para manter os níveis circulantes de imunoglobulina na truta arco-
íris (Yada et al. 2002).

5. Citocinas: estão presentes nas glândulas mamárias e desempenham papéis

importantes no desenvolvimento do sistema imunológico em neonatos. Os fatores
imunológicos são transferidos das mães para os recém-nascidos através da placenta ou
através da amamentação e protegem a prole de patógenos até a maturação do sistema
imunológico (Nguyen et al. 2007).

3.4.2 – Cogumelos

Os cogumelos têm grande importância em medicamentos e nutracêuticos usados para

melhorar a saúde. Algumas espécies de cogumelos – como Lentinula edodes,
Schizophyllum commune, Ganoderma lucidum e Coriolus versicolor – têm sido usadas
como imunomoduladores e agentes anticâncer.

O polissacarídeo K (PSK; Krestin) e o polissacaropeptídeo (PSP) são ambos isolados de

C. versicolor e são usados como agentes imunes e quimioterápicos para o tratamento do
câncer. PSP inibe a proliferação de células tumorais por meio da atividade
imunomoduladora. Schizophyllan (SPG) é um polissacarídeo derivado de cogumelo,
isolado de S. commune, que estimula o sistema imunológico e ativa as células NK, células
do baço, células linfóides e células da medula óssea; e aumenta a produção de citocinas
imunomoduladoras. Dois β-glucanos imunomoduladores derivados de G. lucidum são
polissacarídeos com uma estrutura β-D- (1-3) -glucana e ramificação caracterizada por
ligação β-D- (1-6) e têm propriedades imunomoduladoras e antioxidantes.

Fatores que influenciam a bioatividade de imunomoduladores derivados de cogumelos

Os principais fatores que influenciam a atividade e confirmação de polissacarídeos

(ligação glicosídica e estrutura helicoidal) são os seguintes:

1. A presença da ligação (1-3)-β na cadeia principal de glucanas é uma característica

estrutural importante para a atividade imunoestimuladora e anticâncer.

2. A estrutura helicoidal tripla de (1-3)-β-glucana pode ser reconhecida pelos receptores

de glucana, correlacionando-se com a atividade imunomoduladora.

1053
Outro fator que influencia as atividades imunomoduladoras dos polissacarídeos é o grau
de ramificação. Polissacarídeos com maior grau de ramificação demonstram atividades
modulatórias imunes e anticâncer mais altas.

Potencial imunológico de polissacarídeos de cogumelo

Glucanos, mananos, galactanos e frutanos são os mais importantes polissacarídeos

imunoestimuladores e anticâncer. Entre todos eles, os glucanos são os polissacarídeos
imunoestimuladores e anticâncer mais auspiciosos. Glucanos são polímeros baseados
em D-glicose, principalmente unidos por ligações β-glicosídicas e, em alguns casos, por
ligações α. Enquanto os imunoestimuladores mais ativos são β-glucanos, α-glucanos são
inativos, mas α-glucanos com ligações glicosídicas (1-4) e (1-6) mostram atividade
imunoestimulante (Zhang et al. 2017).

3.4.3 – Ovos

Foi demonstrado que o derivado de clara de ovo de galinha, produto de clara de ovo ativo
e peptídeo imunoativo derivado de clara de ovo de galinha aumentam a imunidade
inespecífica em camundongos, leitões, gado e truta arco-íris (Hirota e Yang 1995).

4. Aplicações clínicas de nutracêuticos derivados de alimentos

Os nutracêuticos têm sido usados na prevenção e tratamento de várias doenças comuns
em animais, como doença cardiovascular, disfunção cognitiva, câncer, osteoartrite e
doença periodontal, fornecendo evidências de seu potencial farmacológico em uma ampla
gama de doenças animais em vários ensaios clínicos. Os nutracêuticos têm sido
administrados em suplementos animais em muitas formas, como cápsulas, comprimidos e
pós, com ou sem prescrição de veterinários (Lerman e Lockwood 2007).

5. Observações Finais e Orientações Futuras

Várias doenças podem ser tratadas por imunomodulação através da utilização de plantas
terapêuticas em vez de farmacoterapia. Peptídeos imunomoduladores podem ser
incluídos nas categorias de alimentação e medicação, e seu uso pode ser expandido na
forma de suplementos. Demonstrou-se que as proteínas dos alimentos oferecem
benefícios à saúde além da necessidade de nutrição corporal. Houve um avanço crítico
em nossa compreensão das estruturas e bioatividade dos polissacarídeos, obtidos de
organismos e outras fontes de nutrição, que parecem ter ações viáveis de fortalecimento
imunológico. Estudos estabeleceram os efeitos de certas práticas relacionadas ao estilo
1054
de vida sobre alguns parâmetros do sistema imunológico. Por implicação, os peptídeos
com propriedades anti-hipertensivas, antimicrobianas e imunomoduladoras podem ser
utilizados para ajudar a prevenir ou controlar doenças relacionadas ao estilo de vida,
como hipertensão, proliferação e doenças cardiovasculares. Espera-se que novas
pesquisas sobre a bioatividade de polissacarídeos levem ao desenvolvimento de novos
agentes terapêuticos e nutracêuticos para aplicações curativas e preventivas contra
doenças, incluindo o câncer.

Referências
Alhaj OA, Kanekanian AD, Peters AC et al (2010) Hypocholesterolaemic effect of Bifidobacterium animalis subsp.
lactis (Bb12) and trypsin casein hydrolysate. Food Chem 123(2):430–435
Bargeman G, Koops GK, Houwing J et al (2002) The development of electromembrane filtration for the isolation of
bioactive peptides: the effect of membrane selection and operating parameters on the transport rate. Desalination
149(1e3):369–374
Baxter D (2007) Active and passive immunity, vaccine types, excipients and licensing. Occup Med 57:552–556
Bhaumik S, Jyothi MD, Khar A (2000) Differential modulation of nitric oxide production by curcumin in host
macrophages and NK cells. FEBS Lett 483:78–82
Bouhallab S, Bouglé D (2011) Mineral-binding peptides from food. In: Hettiarachchy NS, Sato K, Marshall MR, Kannan
A (eds) Bioactive food proteins and peptides: applications in human health. CRC Press, Boca Raton, FL, pp 117–130
Caterina MJ, Schumacher MA, Tominaga M et al (1997) The capsaicin receptor: a heat-activated ion channel in the
pain pathway. Nature 389:816–824
Chabeaud A, Vandanjon L, Bourseau P et al (2009) Performances of ultrafiltration membranes for fractionating a fish
protein hydrolysate: application to the refining of bioactive peptide fractions. Sep Purif Technol 66(3):463–471
Chauhan B, Kumar G, Kalam N et al (2013) Current concepts and prospects of herbal nutraceutical: a review. J Adv
Pharm Technol Res 4(1):4–8
DeFelice SL (1992) The nutraceutical initiative: a recommendation for US economic and regulatory reforms. Genet
Eng News 12:13–15
Dhir H, Roy AK, Sharma A et al (1991) Modification of clastogenicity of lead and aluminium in mouse bone marrow
cells by Phyllanthus emblica fruit extract. Mutation Res 24:305–312
Dominic A, Danquah MK (2012) Rethinking food-derived bioactive peptides for antimicrobial and immunomodulatory
activities. Trends Food Sci Technol 23(2):62–69
Fürst P, Kuhn KS (2000) Fish oil emulsions: what benefits can they bring? Clin Nutr 19:7–14
Gill HS, Doull F, Rutherfurd KJ et al (2000) Immunoregulatory peptides in bovine milk. Br J Nutr 84(Suppl. 1):S111–
S117
Gobbetti M, Minervini F, Rizzello CG (2007) Bioactive peptides in dairy products. In: Hui YH (ed) Handbook of food
products manufacturing. Wiley, Hoboken
Hartmann R, Gunther S, Martin D et al (2000) Cytochemical model systems for the detection and characterization of
potentially bioactive milk components. Kiel Milchwirtschaftliche Forschungsberichte 52:61–85
Hirota Y, Yang MP (1995) Enhancing effect of chicken egg white derivatives on the phagocytic response in the dog. J
Vet Med Sci 57(5):825–829
Ito T, Warnken SP, May SW (1999) Protein synthesis inhibition by flavonoids: roles of eukaryotic initiation factor 2 alpha
kinases. Biochem Biophys Res Commun 265:589–594
Jantan I, Ahmad W, Nasir S, Bukhari NS (2015) Plant-derived immunomodulators: an insight on their preclinical
evaluation and clinical trials. Front Plant Sci 6:655. https://doi.org/10.3389/fpls.2015.00655
Khandelwal S, Shukla LJ, Shanker R (2002) Modulation of acute cadmium toxicity by Emblica off{cinalis fruit in rat. Ind
J Exp Biol 40:564–570
Kim S, Shin HJ, Kim SY et al (2004) Genistein enhances expression of genes involved in fatty acid catabolism through
activation of PPAR alpha. Mol Cell Endocrinol 220:51–58
Korhonen H, Pihlanto A (2006) Bioactive peptides: production and functionality. Int Dairy J 16(9):945–960
Kumar RA, Sridevi K, Kumar NV et al (2004) Anticancer and immunostimulatory compounds from Andrographis
paniculata. J Ethnopharmacol 92:291–295
Lerman A, Lockwood B (2007) Nutraceuticals in veterinary medicine. Pharm J 278:51–55
Licciardi PV, Underwood JR (2011) Plant-derived medicines: a novel class of immunological adjuvants. Int
Immunopharmacol 11 (3):391–398
Macdonald RS, Thornton WH, Marshall RT (1994) A cell culture model to identify biologically active peptides generated
by bacterial hydrolysis of casein. J Dairy Sci 77:1167–1175

1055
 Middleton E, Kandaswami C, Theoharides TC (2000) The effects of plant flavonoids on mammalian cells: implications
for inflammation, heart disease, and cancer. Pharmacol Rev 52:673–751
Nguyen TV, Yuvan L, Saif LJ et al (2007) Transfer of maternal cytokines to suckling piglets: in vivo and in vitro models
with implications for immunomodulation of neonatal immunity. Vet Immunol Immunopathol 117:236–248
Orlando JM (2018) Behavioral nutraceuticals and diets. Vet Clin N Am Small Anim Pract 48:473–495
Otani H, Kihara Y, Park M (2010) The immunoenhancing property of dietary casein phosphopeptide preparation in
mice. Food Agr Immunol 12:165–173
Park YW (ed) (2009) Bioactive components in milk and dairy products. Wiley, Hoboken
Pedroche J, Yust MM, Lqari H et al (2007) Obtaining of Brassica carinata protein hydrolysates enriched in bioactive
peptides using immobilized digestive proteases. Food Res Int 40(7):931–938
Petrillo EW Jr, Ondetti MA (1982) Angiotensin converting enzyme inhibitors: medicinal chemistry and biological actions.
Med Res Rev 2:1–41
Phelan M, Aherene A, Fitz Gerald RJ et al (2009) Casein-derived bioactive peptides: biological effects, industrial uses,
safety aspects and regulatory status. Int Dairy J 19:643–654
Pihlanto A (2006) Antioxidative peptides derived from milk proteins. Int Dairy J 16:1306–1314
Rabinovitch A, Suarez-Pinzon WL, Sorensen O et al (1996) Inducible nitric oxide synthase (iNOS) in pancreatic islets
of nonobese diabetic mice: identification of iNOS expressing cells and relationships to cytokines expressed in the islets.
Endocrinology 137(5):2093–2099
Roy MK, Watanabe Y, Tami Y (1999) Induction of apoptosis in HL-60 cells by skimmed milk digested with a proteolytic
enzyme from the yeast Saccharomyces cerevisiae. J Biosci Bioeng 88:426–432
Ryan JT, Ross RP, Bolton D et al (2011) Bioactive peptides from muscle sources: meat and fish. Nutrients 3:765–791
Sethiya NK, Alok N, Dixit VK et al (2011) Cognition boosting effect of Canscoradecussata (a South Indian
Shankhpushpi). Eur J Integr Med 4:113–121. ELSEVIER
Shahidi F, Zhong Y (2008) Bioactive peptides. J AOAC Int 91 (4):914–931
Sharma S, Singh R, Rana S (2011) Bioactive peptides: a review. Int J Bioautomation 15(4):223–250
Surh YJ, Chun KS, Cha HH et al (2001) Molecular mechanisms underlying chemopreventive activities of
antiinflammatory phytochemicals: down-regulation of COX-2 and iNOS through suppression of NF-activation. Mutat Res
481:243–268
Vaibhav K, Shrivastava P, Javed H et al (2012) Piperine suppresses cerebral ischemia-reperfusion-induced
inflammation through the repression of COX-2, NOS-2, and NF-κBα e AMPK. Esses dadosB in middle cerebral artery occlusion rat model. Mol Cell
Biochem 367:73–84
Vang O, Ahmad N, Baile CA et al (2011) What is new for an old molecule? Systematic review and recommendations on
the use of resveratrol. PLos One 6(6):e19981
Wang Z, Lee Y, Eun JS et al (2014) Inhibition of adipocyte inflammation and macrophage chemotaxis by butein. Eur J
Pharmacol 738:40–48
Wong CW, Seow HF, Husband AJ et al (1997) Effects of purified bovine whey factors on cellular immune functions in
ruminants. Vet Immunol Immunopathol 56:85–96
Yada T, Uchida K, Kajimura S et al (2002) Immunomodulatory effects of prolactin and growth hormone in the tilapia,
Oreochromis mossambicus. J Endocrinol 173:483–492
Youn J, Lee JS, Na HK et al (2009) Resveratrol and piceatannol inhibit iNOS expression and NF-κBα e AMPK. Esses dadosB activation in
dextran sulfate sodium-- induced mouse colitis. Nutr Cancer 61:847–854
Yu L, Yang L, AnWet al (2014) Anticancer bioactive peptide-3 inhibits human gastric cancer growth by suppressing
gastric cancer stem cells. J Cell Biochem 115(4):697–711
Zhang L, Guang Li C, Liang H et al (2017) Bioactive mushroom polysaccharides: immunoceuticals to anticancer
agents. J Nutr Food Sci 2:1–5

1056
 Nutracêuticos para a prevenção e cura do câncer
Subash Chandra Gupta, Anurag Sharma, Shruti Mishra e Nikee Awasthee

Resumo
Apesar de um melhor sistema de saúde e tecnologia avançada, a morbidade e
mortalidade devido ao câncer são altas nos países ocidentais em comparação com o
mundo oriental. Por outro lado, um aumento na incidência de câncer foi relatado no
mundo oriental durante os últimos anos, provavelmente devido às mudanças no estilo de
vida e nos hábitos alimentares. Os medicamentos contra o câncer disponíveis oferecem
poucos benefícios aos pacientes. O acúmulo de evidências sugere que a Mãe Natureza
tem sido uma grande fonte de remédios, pois quase 70% dos medicamentos atuais se
originam da Natureza. Nutracêuticos que se referem ao alimento ou produtos alimentícios
com valores nutricionais têm surgido como novos agentes para a prevenção e cura do
câncer. Ao contrário dos medicamentos concebidos de forma racional, os nutracêuticos
são polivalentes, baratos e supostamente seguros. Quimicamente, os nutracêuticos são
diversos e podem atingir várias etapas do desenvolvimento do tumor. O potencial
anticâncer dos nutracêuticos foi demonstrado em nível molecular, celular, animal e
humano. Os alvos moleculares relacionados ao câncer de nutracêuticos incluem
moléculas pró-inflamatórias, proteínas quinases, receptores, fatores de transcrição, etc.
Alguns dos nutracêuticos comuns com atividades anticâncer incluem ácido caféico,
capsaicina, curcumina, galato de epigalocatequina, flavopiridol, genisteína, resveratrol,
sanguinarino e tocotrienol. Os nutracêuticos também foram modificados estruturalmente
para melhor biodisponibilidade e eficácia. Esses agentes também são usados em
combinação para aumentar a eficácia dos medicamentos existentes. Neste capítulo,
discutimos o potencial terapêutico dos nutracêuticos contra o câncer. As vantagens e
desvantagens associadas ao uso de nutracêuticos são discutidas.
Palavras-chave: Câncer · Eficácia · Nutracêutico · Prevenção · Segurança · Tratamento

Abreviações
5-LOX 5-lipoxigenase
8-OHdG 8-hidroxi-20-desoxiguanosina
AKBA ácido acetil-11-ceto-beta-boswélico
AMPK 50 proteína quinase ativada por monofosfato de adenosina
AP-1 proteína 1 ativadora
APC polipose adenomatosa coli
Bax proteína X associada a bcl-2
Bcl-2 linfoma de células B-2
Bcr-abl região de cluster de ponto de interrupção - oncogene viral de leucemia murina de Abelson
CAPE éster fenetílico de ácido cafeico
1057
COX-2 ciclooxigenase-2
CRC câncer colorretal
DNA ácido desoxirribonucleico
EGCG galato de epigalocatequina
EGFR receptor do fator de crescimento epidérmico
ERK1/2 quinase 1/2 regulada por sinal extracelular
GAS-5 parada de crescimento específico-5
GSH glutationa
GST glutationa S-transferase
HIF-1 fator-1 induzível por hipóxia
ICAM molécula de adesão intercelular
IGF-1 fator de crescimento semelhante à insulina-1
IGF1-R receptor do fator de crescimento semelhante à insulina 1
IGFBP-3 proteína 3 de ligação ao fator de crescimento semelhante à insulina
IKK quinase IκBα e AMPK. Esses dadosB
IL interleucina
Keap-1 proteína-1 associada a ECH semelhante a cálice
lncRNA ácido ribonucleico não codificador longo
M1G pirimido [1,2-a] -purin-10 (3H) -ona
MDA malondialdeído
MEG-3 expresso maternalmente-3
MMP metaloproteinase de matriz
mTOR alvo mamífero da rapamicina
NF-κBα e AMPK. Esses dadosB potenciador da cadeia leve kappa do fator nuclear de células B ativadas
NIK quinase indutora de NF-κBα e AMPK. Esses dadosB
NO óxido nítrico
NOS óxido nítrico sintase
Nrf2 fator 2 relacionado ao fator nuclear eritróide 2 (NFE2)
PAI-1 inibidor-1 do ativador do plasminogênio
PAK quinase-1 ativada por p21
PGC-1α coativador gama 1-alfa do receptor ativado por proliferador de peroxissoma
PGE2 prostaglandina E2
PI3K fosfoinositídeo 3-quinase
PMA acetato de forbol miristato
PPAR-γ receptor gama ativado por proliferador de peroxissoma
PSA antígeno específico da próstata
RASSF-1α domínio de associação Ras contendo família 1 alfa
SIRT-1 sirtuína 1
STAT3 transdutor de sinal e ativador de transcrição 3
TIMP-2 inibidor de tecido de metaloproteinase-2
TNF-α fator de necrose tumoral alfa
VCAM molécula de adesão de células vasculares
VEGFR receptor do fator de crescimento endotelial vascular
Wnt wingless

1. Introdução
Em 1971, uma extensa campanha foi lançada por Richard Nixon, o então presidente dos
EUA para a cura do câncer. Desde esta campanha, a patogênese da doença é
relativamente bem compreendida. No entanto, a doença continua a ser uma das principais
causas de morte em todo o mundo. A incidência e a morte por câncer provavelmente
dobrarão até 2030 em comparação com 2002. A menos que repensemos as abordagens

1058
para a cura, é improvável que a mortalidade e morbidade devido ao câncer sejam
significativamente reduzidas.

A carcinogênese é um processo de várias etapas durante o qual uma série de eventos

determina o destino de uma célula do estado normal ao maligno. A maioria das mortes
relacionadas ao câncer se deve à metástase do tumor. No entanto, a maioria dos
medicamentos é projetada para matar as células cancerosas e não para prevenir a
propagação. Estima-se que mais de 500 genes são desregulados em qualquer tipo de
câncer. No entanto, a maioria das terapêuticas atuais do câncer é baseada na modulação
de apenas alguns alvos, o que é improvável que seja eficaz. O foco atual da terapia do
câncer é desenvolver um medicamento que possa atingir vários alvos ou combinar vários
agentes mono direcionados. O acúmulo de evidências sugere que uma abordagem
múltipla direcionada tem uma maior possibilidade de sucesso em comparação com a
terapia mono direcionada. Alguns dos medicamentos múltiplos direcionados concebidos
de forma racional e produzidos por empresas farmacêuticas são lapatinibe, sunitinibe e
sorafenibe. Essas drogas aumentaram um pouco a sobrevida geral dos pacientes. No
entanto, eles produzem vários efeitos colaterais quando tomados por um longo período de
tempo. Além disso, esses medicamentos são muito caros e não podem ser comprados
por mais de 80% da população mundial. Por exemplo, uma combinação de Erbitux e
Avastin para o tratamento do câncer de cólon é conhecida por tornar a terapia pior do que
melhor (Mayer 2009).

Estima-se que até 90% das mortes relacionadas ao câncer estão relacionadas a estilo de
vida e dieta inadequados. Por exemplo, o uso do tabaco e os hábitos alimentares
contribuem significativamente para o desenvolvimento do câncer gástrico (Pavithra et al.
2018). A associação de fatores de estilo de vida com a incidência de câncer é relatada
para o câncer de bexiga (Fankhauser e Mostafid 2018), mama (Bougnoux et al. 2010),
trato gastrointestinal (Bjelakovic et al. 2008), rim (Tahbaz et al. 2018), pulmão (Cranganu e
Camporeale 2009; Goralczyk 2009) e próstata (Er et al. 2017). A implicação dessas
declarações sugere que muito do câncer pode ser evitado mudando o estilo de vida e os
hábitos alimentares. Por exemplo, o consumo de alimentos ricos em vegetais e frutas está
negativamente relacionado com o risco de câncer (Block et al. 1992; Steinmetz e Potter
1996; Reddy et al. 2003; Benetou et al. 2008; Freedman et al. 2008). Aproximadamente
35% das mortes por câncer podem ser evitadas com o uso de nutrição apropriada (Doll e
Peto 1981; Hardy et al. 2003). Além disso, uma dieta adequada pode ajudar a reduzir em
até 90% de certos tipos de câncer (Doll e Peto 1981; Hardy et al. 2003). A ingestão de

1059
vegetais, frutas e grãos na dieta reduz a incidência de câncer de ovário em mulheres
(Plagens-Rotman et al. 2018).

Nos últimos anos, tem sido dada ênfase ao uso de agentes nutricionais denominados
nutracêuticos para prevenção e tratamento do câncer. Até onde sabemos, a palavra
nutracêutico (nutrição + farmacêutica) foi cunhada pela primeira vez em 1989 por Stephen
L. DeFelice (Brower 1998; Kalra 2003). O alimento ou componente alimentar que pode
fornecer benefícios à saúde é conhecido como nutracêuticos (Brower 1998; Zeisel 1999).
A Mãe Natureza é uma grande fonte de nutracêuticos. Os nutracêuticos têm demonstrado
potencial contra o câncer de mama, câncer colorretal, câncer pancreático, câncer de
próstata, carcinoma de células escamosas e muitos outros (Gupta et al. 2010). Os
nutracêuticos podem ter como alvos várias etapas do desenvolvimento do tumor. Os
nutracêuticos são diversos quanto às suas estruturas químicas. Vários estudos
epidemiológicos apóiam os benefícios dos nutracêuticos na prevenção e cura do câncer.

2 – Atividades anticâncer de nutracêuticos

2.1 Nível molecular e celular

A base molecular para as atividades anticâncer dos nutracêuticos é relativamente bem

explorada. Agora sabemos que os nutracêuticos podem atingir as células cancerosas nos
níveis molecular, celular, animal e humano. Os alvos moleculares comuns relacionados ao
câncer modulados por nutracêuticos incluem receptores do fator de crescimento [receptor
do fator de crescimento epidérmico (EGFR), receptor do fator de crescimento semelhante
à insulina 1 (IGF1-R), receptor do fator de crescimento endotelial vascular (VEGFR)],
mediadores pró-inflamatórios [5-lipo-oxigenase (5-LOX), ciclo-oxigenase-2 (COX-2),
interleucinas, fator de necrose tumoral alfa (TNFa)], proteínas quinases [50 adenosina
monofosfato proteína quinase ativada (AMPK), região de cluster de ponto de interrupção -
Abelson oncogênese viral de leucemia murina (Bcr-abl), alvo de rapamicina de mamífero
(mTOR), fosfoinositídeo 3-quinase (PI3K), Ras/Raf] e fatores de transcrição [proteína
ativadora 1 (AP-1), β-catenina/Wnt, fator nuclear potenciador de cadeia leve kappa de
células B ativadas (NF-kB), fator nuclear eritroide 2 (NFE2) relacionado a fator 2 (Nrf2),
receptor gama ativado por proliferador de peroxissoma (PPAR-γ), transdutor de sinal e
ativador de transcrição 3 (STAT3)].

Além disso, os nutracêuticos são conhecidos por desencadear alterações no proteassoma

e epigenética que levam à prevenção e ao tratamento do câncer (Pandey et al. 2017).
Sendo um regulador crucial de proteínas tumorigênicas, os fatores de transcrição
1060
representam um importante alvo dos nutracêuticos (Shishodia et al. 2007b). Entre todos
os nutracêuticos, muito se sabe sobre a curcumina.

Quimicamente, a curcumina é um polifenol derivado do tempero indiano açafrão (Gupta et

al. 2012). Este polifenol pode suprimir a ativação de NFkB induzida por TNF-a em células
de leucemia, inibindo a fosforilação e degradação de IkBa (Singh e Aggarwal 1995). A
curcumina também suprime a expressão de COX-2 induzida por TNF-a e a ativação de
NFkB em células epiteliais do cólon humano (Plummer et al. 1999). O polifenol também
suprimiu a degradação de IkB e as atividades da quinase indutora de NFkB (NIK) e da
quinase IkB (IKK) que podem contribuir para seus efeitos inibitórios na ativação de NFkB.

O potencial da curcumina em suprimir a proliferação e metástase e induzir apoptose é

mediado por seus efeitos negativos na ativação do NFkB (Bharti et al. 2003, Philip e
Kundu 2003). A curcumina também pode sensibilizar as células cancerosas aos agentes
quimioterápicos por meio de seus efeitos inibitórios na ativação do NFkB (Kunnumakkara
et al. 2009). Além dos fatores de transcrição, a curcumina também pode modular as
atividades das proteínas quinases. Por exemplo, a curcumina regulou negativamente o
EGFR e a atividade da quinase 1/2 regulada por sinal extracelular (ERK1/2) em células de
câncer pancreático e de pulmão (Lev-Ari et al. 2006). Em células de glioma maligno, a
curcumina suprime a via PI3K/AKT (Aoki et al. 2007). Outras proteínas quinases
reguladas negativamente pela curcumina incluem a fosforilase quinase, pp60c-src tirosina
quinase, proteína quinase C e protamina quinase (Shishodia et al. 2007b).

Bharangin é um methide diterpenóide quinona pouco estudado que é derivado de

Pygmacopremna herbacea. Nosso grupo demonstrou recentemente as atividades
anticâncer desse diterpenóide contra o câncer de mama (Awasthee et al. 2018). Além
disso, a ativação de NFkB induzida por ácido okadaico também foi suprimida por este
diterpenóide. Pela primeira vez, também demonstramos que o diterpenóide modula a
expressão de ácidos ribonucleicos longos não codificadores (lncRNAs). Enquanto a
expressão de lncRNAs supressores de tumor, como o de parada de crescimento
específico-5 (GAS-5) e maternalmente expresso-3 (MEG-3) foi induzida, a expressão de
H19 (lncRNA oncogênico) foi suprimida pelo diterpenóide. É provável que bharangin exiba
atividades anticâncer modulando a expressão de lncRNA e anulando a ativação de NFkB.
Estamos explorando ainda mais o mecanismo em profundidade para as atividades de
bharangin contra o câncer de mama.

O resveratrol é um polifenol e fitoalexina, cuja principal fonte são as uvas (Gupta et al.
2011). Esta fitoalexina suprime a ativação constitutiva do NFkB e induz atividades pró-

1061
apoptóticas na mama (Banerjee et al. 2002) e nas células do câncer pancreático (Mouria
et al. 2002).

A sanguinarina é um alcalóide que suprime a ativação do NFkB em resposta a indutores

como a interleucina (IL) -1, ácido okadaico, éster de forbol e TNF (Chaturvedi et al. 1997).
O éster fenetílico do ácido caféico (CAPE) suprime a atividade do NFkB de maneira
direta. Mais especificamente, este agente inibe a ligação entre o complexo p65-p50 e o
DNA e leva à supressão da transcrição do gene alvo dependente de NFkB (Natarajan et
al. 1996).

O galato de epigalocatequina (EGCG) é um antioxidante presente principalmente no chá-

verde. Este antioxidante suprime a ativação de NFkB e a transformação maligna da linha
de células JB6 de camundongo (Nomura et al. 2000). EGCG também suprime a
acetilação de p65 e a expressão gênica associada a NFkB induzida por uma gama de
estímulos (Choi et al. 2009b). O ácido gálico obtido de nozes, chá-verde, casca-de-
carvalho e sumagre também pode anular a atividade do NFkB (Choi et al. 2009c).

Os nutracêuticos também podem induzir a parada do ciclo celular em células cancerosas.

A casca de Boswellia serrata é uma fonte rica em ácido acetil-11-ceto-beta-boswélico
(AKBA), que é um triterpeno pentacíclico. Este polifenol exibe atividades anticâncer contra
as células do câncer de cólon, induzindo a parada do ciclo celular na fase G1 (Liu et al.
2006). Da mesma forma, uma diminuição nas atividades da ciclina-D1 e da quinase
ativada por p21 (PAK) -1 pela curcumina foi associada à sua capacidade de suprimir a
transição de fase G1/S (Cai et al. 2009). β-Escina também induz a parada do ciclo celular
da fase G1/S em células de câncer de cólon HT-29 (Patlolla et al. 2006). Da mesma
forma, a timoquinona induz a parada do ciclo celular da fase G1/S nas células do câncer
de próstata (Kaseb et al. 2007).

Concomitante com essas observações, foi observada uma regulação positiva na

expressão de p21 e p27, enquanto a regulação negativa na expressão do receptor de
andrógeno e E2F-1 foi observada (Kaseb et al. 2007). Outros nutracêuticos conhecidos
por exibirem efeitos antiproliferativos pela indução da parada do ciclo celular incluem
berberina (Liu et al. 2009), deguelin (Murillo et al. 2009), emodin (Kuo et al. 2002), fisetina
(Khan et al. 2008), guggulsterona (Shishodia et al. 2007a), piceatanol (Lee et al. 2009),
silibinina (Mateen et al. 2010), silimarina (Ramakrishnan et al. 2009), sulforafano (Bryant
et al. 2010) e quercetina (Hung 2007). Em células de câncer de cólon humano, a fisetina
diminuiu a expressão de COX-2 e inibiu a secreção de prostaglandina E2 (Suh et al.
2009). Isso foi acompanhado por atividades diminuídas de sinalização wint (Wnt), EGFR e

1062
NFkB e uma supressão concomitante na expressão de ciclina-D1 (Suh et al. 2009).
Alguns nutracêuticos também demonstraram suprimir a proliferação de células
cancerosas, suprimindo a ativação de NFkB e os produtos gênicos regulados por esse
fator de transcrição. Exemplos de tais nutracêuticos são ácido anacárdico (Sung et al.
2008), diosgenina (Shishodia e Aggarwal 2006), isoeoxyelephantopin (Ichikawa et al.
2006), noscapina (Sung et al. 2010), pinitol (Sethi et al. 2008), e ácido ursólico (Shishodia
et al. 2003).

A invasão e metástase, que são as principais causas de mortes relacionadas ao câncer,

também podem ser suprimidas por nutracêuticos. A base molecular para os efeitos
negativos dos nutracêuticos na invasão das células cancerosas é mais provavelmente
através da modulação das metaloproteinases da matriz (MMPs) e da inibição da ativação
do NFkB. Por exemplo, o resveratrol pode suprimir a migração e invasão das células
cancerosas do pulmão (Liu et al. 2010). A supressão da atividade de invasão pelo
resveratrol foi acompanhada pela atividade suprimida de NFkB e redução da expressão
de MMPs (Liu et al. 2010). Da mesma forma, a silibinina inibiu a invasão do câncer de
língua SCC-4 e células de câncer de pulmão A459 (Chu et al. 2004, Chen et al. 2006).
Isso foi acompanhado por supressão na expressão de MMP-2 e u-PA e aumento da
expressão do inibidor tecidual da metaloproteinase (TIMP) -2 e inibidor do ativador do
plasminogênio-1 (PAI-1) (Chu et al. 2004, Chen et al. 2006). A capacidade de invasão das
células de câncer de mama MCF-7 induzida pelo acetato de forbol miristato (PMA) foi
suprimida pela silibinina, possivelmente por meio de seus efeitos inibitórios na expressão
de MMP-9 (Lee et al. 2007). Outros nutracêuticos conhecidos por suprimir a invasão de
células cancerosas incluem licopeno (Huang et al. 2005), miricetina (Ko et al. 2005),
piperina (Pradeep e Kuttan 2004), quercetina (Vijayababu et al. 2006) e sanguinarina
(Choi et al. 2009a).

2.2 Nível Animal

O potencial anticâncer dos nutracêuticos é demonstrado em modelos de roedores com

câncer. Por exemplo, a curcumina inibiu o crescimento do tumor ovariano em modelos de
camundongos ortotópicos, provavelmente por regular negativamente as atividades da via
NFkB e STAT3 (Lin et al. 2007). Em camundongos implantados com células de carcinoma
renal Caki-I, o ácido caféico suprimiu o fator 1 indutível por hipóxia (HIF-1) e a expressão
de VEGF, angiogênese e vascularização (Jung et al. 2007). A capsaicina anula a
formação de tumor de pele e a ativação de NFkB induzida por PMA em camundongos
(Han et al. 2001). A silibinina suprime o crescimento do tumor em modelos de
camundongos implantados com carcinoma colorretal humano (Singh et al. 2008). A
1063
silibinina também induziu atividades antiangiogênicas e regulou negativamente a
expressão de COX, HIF-1a, óxido nítrico sintase (NOS) e VEGF em camundongos nus
(Singh et al. 2008). O sulfeto de dialila pode reduzir o nível de VEGF no soro de
camundongos implantados com células de melanoma B16F-10 (Thejass e Kuttan 2007).
O ácido ursólico também suprime a formação capilar em camundongos C57BL/6
implantados com células de melanoma (Kanjoormana e Kuttan 2010). O ácido ursólico
também pode suprimir os níveis de citocinas pró-inflamatórias de óxido nítrico (NO) e
VEGF no soro de animais com tumor (Kanjoormana e Kuttan 2010). O sulforafano pode
inibir a metástase pulmonar e a ativação de MMPs no modelo de melanoma em
camundongos (Thejass e Kuttan 2006). A vanilina suprime a angiogênese das células
tumorais induzida pelo fator de crescimento dos hepatócitos em um modelo de
camundongo (Lirdprapamongkol et al. 2009). A supressão na angiogênese pela vanilina
foi mediada por seus efeitos inibitórios na sinalização de PI3K/AKT e na expressão de
VEGF (Lirdprapamongkol et al. 2009).

2.3 Potencial clínico de nutracêuticos

As atividades pleiotrópicas dos nutracêuticos forneceram uma base para o exame de seu
potencial clínico para a prevenção e o tratamento do câncer. A farmacocinética, segurança
e eficácia dos nutracêuticos foram demonstradas em pacientes com câncer. Os
nutracêuticos são conhecidos por modular os alvos moleculares, como 8-hidroxi-20-
desoxiguanosina (8-OHdG), AMPK, proteína X associada a BCL-2 (Bax), linfoma de
células B 2 (Bcl-2), caspases, COX-2, glutationa (GSH), glutationa S-transferase (GST),
molécula de adesão intercelular (ICAM), IGF-1, proteína-3 de ligação ao fator de
crescimento semelhante à insulina (IGFBP-3), IKKβ, interleucinas, ECH semelhante a
kelch- proteína associada 1 (Keap-1), pirimido [1,2-a] -purin-10 (3H) -ona (M1G), MMPs,
malondialdeído (MDA), NF-κBα e AMPK. Esses dadosB, Notch, Nrf-2, p53, fosforilado proteína quinase cepa Ak
timoma (pAkt), coativador gama 1-alfa do receptor ativado por proliferador de
peroxissoma (PGC-1α), prostaglandina E2 (PGE2), antígeno específico da próstata
(PSA), STAT3, família alfa contendo domínio de associação Ras (Rassf-1α), sirtuin 1
(SIRT-1), TNF, molécula de adesão celular vascular 1 (VCAM-1), VEGF e
wingless/integrado (Wnt) em pacientes com câncer (Gupta et al. 2013; Pandey et al.
2017) No ensaio clínico, os nutracêuticos foram usados tanto individualmente quanto em
combinação.

A curcumina é provavelmente um dos nutracêuticos extensivamente estudados em seres

humanos. Os efeitos promissores deste nutracêutico foram relatados em pacientes com
câncer de bexiga, mama, colo do útero, colorretal, fígado, boca, pele e pâncreas (Hsu e
1064
Cheng 2007, Gupta et al. 2013). O potencial anticâncer da curcumina em pacientes com
câncer foi provavelmente demonstrado pela primeira vez em 1987, em um ensaio clínico
com 62 pacientes (Kuttan et al. 1987). A ingestão diária de 3,6 g de curcumina por 29 dias
reduz a produção de prostaglandina E2 induzível (PGE2) em amostras de sangue de
pacientes com câncer colorretal (CRC) (Sharma et al. 2004). No ensaio clínico de fase II,
o potencial da curcumina em 25 pacientes com câncer pancreático avançado foi avaliado.
A curcumina foi administrada por via oral em 8 g por dia (Dhillon et al. 2008). Embora a
absorção limitada tenha sido observada, a curcumina foi bem tolerada e produziu efeitos
benéficos em alguns pacientes (Dhillon et al. 2008).

O resveratrol demonstrou potencial terapêutico em pacientes com câncer de mama,

mieloma múltiplo e câncer de cólon. Em um estudo, os efeitos do resveratrol na
expressão da prostaglandina PGE2 e na metilação do DNA foram avaliados em 39
mulheres com câncer de mama (Rasyid e Lelo 1999). Resveratrol foi administrado aos
pacientes nas doses de 5 mg e 50 mg/dia por 12 semanas. A metilação do DNA de genes
relacionados ao câncer [polipose adenomatosa coli (APC), CCND-2, p16, RASSF-1α] foi
avaliada após a administração de resveratrol. Resveratrol foi encontrado para suprimir
significativamente a metilação de RASSF-1α. Além disso, o nível de PGE2 também
diminuiu no líquido aspirado do mamilo dos pacientes. Essas observações fornecem
evidências dos benefícios à saúde do resveratrol contra o câncer de mama (Rasyid e
Lelo, 1999). Mais estudos envolvendo uma coorte maior de pacientes confirmarão ainda
mais o potencial do resveratrol contra o câncer de mama (Rasyid e Lelo, 1999). Quando
administrado em combinação com ácido elágico e quercetina, o resveratrol foi
considerado seguro e bem tolerado em pacientes com câncer de próstata (Zuccotti et al.
2009).

A capsaicina é conhecida por fornecer alívio temporário em pacientes com câncer com
dor na mucosite oral (Pyun et al. 2008). A aplicação tópica de capsaicina também reduz a
dor neuropática em pacientes com câncer após a cirurgia (Ellison et al. 1997). Foi relatado
que o gengibre, o tempero comumente usado na cozinha indiana, reduz a náusea e o
vômito associados à quimioterapia em pacientes com câncer (Levine et al. 2008, Pillai et
al. 2011). O flavopiridol é um alcalóide obtido da casca de Dysoxylum binectariferum. Este
alcalóide pode aumentar a eficácia do imatinibe em doenças hematológicas malignas
(Bose et al. 2012). Em combinação com o bortezomibe, o flavopiridol é bem tolerado e
eficaz em pacientes com linfoma não Hodgkin indolente de mieloma múltiplo
recidivante/refratário (Holkova et al. 2014). O flavopiridol também aumenta a potência da
doxorrubicina em pacientes com sarcoma avançado (Luke et al. 2012).

1065
3. Observações finais e orientações futuras
Os nutracêuticos demonstraram o potencial de prevenção e cura do câncer tanto por
estudos pré-clínicos quanto clínicos. O potencial terapêutico dos nutracêuticos contra
doenças crônicas é baseado em sua capacidade de interromper várias vias de sinalização
celular relacionadas aos cânceres. Os nutracêuticos são consumidos desde a antiguidade
e, portanto, a segurança não é uma preocupação. No entanto, o número total de estudos
clínicos sobre nutracêuticos é muito menor em comparação com os estudos pré-clínicos.
Além disso, a maioria dos estudos se concentra em matar as células cancerosas. Mais de
90% das mortes relacionadas ao câncer são causadas pela disseminação do tumor para
órgãos secundários. Mais estudos são necessários para examinar se os nutracêuticos
podem suprimir a metástase das células tumorais. A forma como os nutracêuticos
discriminam entre células normais e cancerosas também deve ser cuidadosamente
examinada. Estratégias também são necessárias para aumentar a biodisponibilidade de
nutracêuticos. Em nossa opinião, é necessária maior ênfase na pesquisa clínica para que
os nutracêuticos possam ser indicados para enfermidades humanas e animais.

Agradecimento: O apoio nos laboratórios de Gupta (ECR / 2016/000034) e Sharma

(ECR / 2016/001863) vem do Science and Engineering Research Board. O laboratório de
Gupta também é apoiado pela University Grants Commission [No. F.30-112 / 2015 (BSR)].
SM é um ICMR-JRF (3/1/3 / JRF-2016 / LS / HRD-65-80388).

Referências
Aoki H, Takada Y, Kondo S et al (2007) Evidence that curcumin suppresses the growth of malignant gliomas in vitro
and in vivo through induction of autophagy: role of Akt and extracellular signal-regulated kinase signaling pathways. Mol
Pharmacol 72 (1):29–39
Awasthee N, Rai V, Verma SS et al (2018) Anti-cancer activities of Bharangin against Breast Cancer: evidence for the
role of NF-kB and lncRNAs. Biochim Biophys Acta 1862(12):2738–2749
Banerjee S, Bueso-Ramos C, Aggarwal BB (2002) Suppression of 7,12-dimethylbenz(a)anthracene-induced mammary
carcinogenesis in rats by resveratrol: role of nuclear factor-kappaB, cyclooxygenase 2, and matrix metalloprotease 9.
Cancer Res 62(17):4945–4954
Benetou V, Orfanos P, Lagiou P et al (2008) Vegetables and fruits in relation to cancer risk: evidence from the Greek
EPIC cohort study. Cancer Epidemiol Biomark Prev 17(2):387–392
Bharti AC, Donato N, Singh S et al (2003) Curcumin (diferuloylmethane) down-regulates the constitutive activation of
nuclear factor-kappa B and IkappaBalpha kinase in human multiple myeloma cells, leading to suppression of proliferation
and induction of apoptosis. Blood 101(3):1053–1062
Bjelakovic G, Nikolova D, Simonetti RG et al (2008) Antioxidant supplements for preventing gastrointestinal cancers.
Cochrane Database Syst Rev 3:CD004183
Block G, Patterson B, Subar A (1992) Fruit, vegetables, and cancer prevention: a review of the epidemiological
evidence. Nutr Cancer 18(1):1–29
Bose P, Perkins EB, Honeycut C et al (2012) Phase I trial of the combination of flavopiridol and imatinib mesylate in
patients with Bcr-Abl+ hematological malignancies. Cancer Chemother Pharmacol 69(6):1657–1667
Bougnoux P, Hajjaji N, Maheo K et al (2010) Fatty acids and breast cancer: sensitization to treatments and prevention
of metastatic re-growth. Prog Lipid Res 49(1):76–86
Brower V (1998) Nutraceuticals: poised for a healthy slice of the healthcare market? Nat Biotechnol 16(8):728–731
Bryant CS, Kumar S, Chamala S et al (2010) Sulforaphane induces cell cycle arrest by protecting RB-E2F-1 complex
in epithelial ovarian cancer cells. Mol Cancer 9:47
Cai XZ, Wang J, Li XD et al (2009) Curcumin suppresses proliferation and invasion in human gastric cancer cells by
downregulation of PAK1 activity and cyclin D1 expression. Cancer Biol Ther 8 (14):1360–1368
1066
 Chaturvedi MM, Kumar A, Darnay BG et al (1997) Sanguinarine (pseudochelerythrine) is a potent inhibitor of NF-
kappaB activation, IkappaBalpha phosphorylation, and degradation. J Biol Chem 272 (48):30129–30134
Chen PN, Hsieh YS, Chiang CL et al (2006) Silibinin inhibits invasion of oral cancer cells by suppressing the MAPK
pathway. J Dent Res 85(3):220–225
Choi YH, Choi WY, Hong SH et al (2009a) Anti-invasive activity of sanguinarine through modulation of tight junctions
and matrix metalloproteinase activities in MDA-MB-231 human breast carcinoma cells. Chem Biol Interact 179(2–3):185–
191
Choi KC, Jung MG, Lee YH et al (2009b) Epigallocatechin-3-gallate, a histone acetyltransferase inhibitor, inhibits EBV-
induced B lymphocyte transformation via suppression of RelA acetylation. Cancer Res 69(2):583–592
Choi KC, Lee YH, Jung MG et al (2009c) Gallic acid suppresses lipopolysaccharide-induced nuclear factor-kappaB
signaling by preventing RelA acetylation in A549 lung cancer cells. Mol Cancer Res 7(12):2011–2021
Chu SC, Chiou HL, Chen PN et al (2004) Silibinin inhibits the invasion of human lung cancer cells via decreased
productions of urokinaseplasminogen activator and matrix metalloproteinase-2. Mol Carcinog 40(3):143–149
Cranganu A, Camporeale J (2009) Nutrition aspects of lung cancer. Nutr Clin Pract 24(6):688–700
Dhillon N, Aggarwal BB, Newman RA et al (2008) Phase II trial of curcumin in patients with advanced pancreatic
cancer. Clin Cancer Res 14(14):4491–4499
Doll R, Peto R (1981) The causes of cancer: quantitative estimates of avoidable risks of cancer in the United States
today. J Natl Cancer Inst 66(6):1191–1308
Ellison N, Loprinzi CL, Kugler J et al (1997) Phase III placebocontrolled trial of capsaicin cream in the management of
surgical neuropathic pain in cancer patients. J Clin Oncol 15(8):2974–2980
Er V, Lane JA, Martin RM et al (2017) Barriers and facilitators to healthy lifestyle and acceptability of a dietary and
physical activity intervention among African Caribbean prostate cancer survivors in the UK: a qualitative study. BMJ
Open 7(10):e017217
Fankhauser CD, Mostafid H (2018) Prevention of bladder cancer incidence and recurrence: nutrition and lifestyle. Curr
Opin Urol 28 (1):88–92
Freedman ND, Park Y, Subar AF et al (2008) Fruit and vegetable intake and head and neck cancer risk in a large
United States prospective cohort study. Int J Cancer 122(10):2330–2336
Goralczyk R (2009) Beta-carotene and lung cancer in smokers: review of hypotheses and status of research. Nutr
Cancer 61(6):767–774
Gupta SC, Kim JH, Prasad S et al (2010) Regulation of survival, proliferation, invasion, angiogenesis, and metastasis
of tumor cells through modulation of inflammatory pathways by nutraceuticals. Cancer Metastasis Rev 29(3):405–434
Gupta SC, Kannappan R, Reuter S et al (2011) Chemosensitization of tumors by resveratrol. Ann N Y Acad Sci
1215:150–160
Gupta SC, Patchva S, Koh W et al (2012) Discovery of curcumin, a component of golden spice, and its miraculous
biological activities. Clin Exp Pharmacol Physiol 39(3):283–299
Gupta SC, Patchva S, Aggarwal BB (2013) Therapeutic roles of curcumin: lessons learned from clinical trials. AAPS J
15(1):195–218
Han SS, Keum YS, Seo HJ et al (2001) Capsaicin suppresses phorbol ester-induced activation of NF-kappaB/Rel and
AP-1 transcription factors in mouse epidermis. Cancer Lett 164(2):119–126
Hardy G, Hardy I, Ball PA (2003) Nutraceuticals--a pharmaceutical viewpoint: part II. Curr Opin Clin Nutr Metab Care
6(6):661–671
Holkova B, Kmieciak M, Perkins EB et al (2014) Phase I trial of bortezomib (PS-341; NSC 681239) and “nonhybrid”
(bolus) infusion schedule of alvocidib (flavopiridol; NSC 649890) in patients with recurrent or refractory indolent B-cell
neoplasms. Clin Cancer Res 20(22):5652–5662
Hsu CH, Cheng AL (2007) Clinical studies with curcumin. Adv Exp Med Biol 595:471–480
Huang CS, Shih MK, Chuang CH et al (2005) Lycopene inhibits cell migration and invasion and upregulates Nm23-H1
in a highly invasive hepatocarcinoma, SK-Hep-1 cells. J Nutr 135(9):2119–2123
Hung H (2007) Dietary quercetin inhibits proliferation of lung carcinoma cells. Forum Nutr 60:146–157
Ichikawa H, Nair MS, Takada Y et al (2006) Isodeoxyelephantopin, a novel sesquiterpene lactone, potentiates
apoptosis, inhibits invasion, and abolishes osteoclastogenesis through suppression of nuclear factor-kappaB (nf-kappaB)
activation and nf-kappaB-regulated gene expression. Clin Cancer Res 12(19):5910–5918
Jung JE, Kim HS, Lee CS et al (2007) Caffeic acid and its synthetic derivative CADPE suppress tumor angiogenesis
by blocking STAT3-mediated VEGF expression in human renal carcinoma cells. Carcinogenesis 28(8):1780–1787
Kalra EK (2003) Nutraceutical-definition and introduction. AAPS PharmSci 5(3):E25
Kanjoormana M, Kuttan G (2010) Antiangiogenic activity of ursolic acid. Integr Cancer Ther 9(2):224–235
Kaseb AO, Chinnakannu K, Chen D et al (2007) Androgen receptor and E2F-1 targeted thymoquinone therapy for
hormone-refractory prostate cancer. Cancer Res 67(16):7782–7788
Khan N, Afaq F, Syed DN et al (2008) Fisetin, a novel dietary flavonoid, causes apoptosis and cell cycle arrest in
human prostate cancer LNCaP cells. Carcinogenesis 29(5):1049–1056
Ko CH, Shen SC, Lee TJ et al (2005) Myricetin inhibits matrix metalloproteinase 2 protein expression and enzyme
activity in colorectal carcinoma cells. Mol Cancer Ther 4(2):281–290

1067
 Kunnumakkara AB, Diagaradjane P, Anand P et al (2009) Curcumin sensitizes human colorectal cancer to
capecitabine by modulation of cyclin D1, COX-2, MMP-9, VEGF and CXCR4 expression in an orthotopic mouse model.
Int J Cancer 125(9):2187–2197
Kuo PL, Lin TC, Lin CC (2002) The antiproliferative activity of aloeemodin is through p53-dependent and p21-
dependent apoptotic pathway in human hepatoma cell lines. Life Sci 71(16):1879–1892
Kuttan R, Sudheeran PC, Josph CD (1987) Turmeric and curcumin as topical agents in cancer therapy. Tumori
73(1):29–31
Lee SO, Jeong YJ, Im HG et al (2007) Silibinin suppresses PMA-induced MMP-9 expression by blocking the AP-1
activation via MAPK signaling pathways in MCF-7 human breast carcinoma cells. Biochem Biophys Res Commun
354(1):165–171
Lee YM, Lim DY, Cho HJ et al (2009) Piceatannol, a natural stilbene from grapes, induces G1 cell cycle arrest in
androgen-insensitive DU145 human prostate cancer cells via the inhibition of CDK activity. Cancer Lett 285(2):166–173
Lev-Ari S, Starr A, Vexler A et al (2006) Inhibition of pancreatic and lung adenocarcinoma cell survival by curcumin is
associated with increased apoptosis, down-regulation of COX-2 and EGFR and inhibition of Erk1/2 activity. Anticancer
Res 26(6B):4423–4430
Levine ME, Gillis MG, Koch SY et al (2008) Protein and ginger for the treatment of chemotherapy-induced delayed
nausea. J Altern Complement Med 14(5):545–551
Lin YG, Kunnumakkara AB, Nair A et al (2007) Curcumin inhibits tumor growth and angiogenesis in ovarian carcinoma
by targeting the nuclear factor-kappaB pathway. Clin Cancer Res 13 (11):3423–3430
Lirdprapamongkol K, Kramb JP, Suthiphongchai T et al (2009) Vanillin suppresses metastatic potential of human
cancer cells through PI3K inhibition and decreases angiogenesis in vivo. J Agric Food Chem 57(8):3055–3063
Liu JJ, Huang B, Hooi SC (2006) Acetyl-keto-beta-boswellic acid inhibits cellular proliferation through a p21-dependent
pathway in colon cancer cells. Br J Pharmacol 148(8):1099–1107
Liu Z, Liu Q, Xu B et al (2009) Berberine induces p53-dependent cell cycle arrest and apoptosis of human
osteosarcoma cells by inflicting DNA damage. Mutat Res 662(1–2):75–83
Liu PL, Tsai JR, Charles AL et al (2010) Resveratrol inhibits human lung adenocarcinoma cell metastasis by
suppressing heme oxygenase 1-mediated nuclear factor-kappaB pathway and subsequently downregulating expression
of matrix metalloproteinases. Mol Nutr Food Res 54(2):S196–S204
Luke JJ, D’Adamo DR, Dickson MA et al (2012) The cyclin-dependent kinase inhibitor flavopiridol potentiates
doxorubicin efficacy in advanced sarcomas: preclinical investigations and results of a phase I dose-escalation clinical
trial. Clin Cancer Res 18(9):2638–2647
Mateen S, Tyagi A, Agarwal C et al (2010) Silibinin inhibits human nonsmall cell lung cancer cell growth through cell-
cycle arrest by modulating expression and function of key cell-cycle regulators. Mol Carcinog 49(3):247–258
Mayer RJ (2009) Targeted therapy for advanced colorectal cancer-more is not always better. N Engl J Med
360(6):623–625
Mouria M, Gukovskaya AS, Jung Y et al (2002) Food-derived polyphenols inhibit pancreatic cancer growth through
mitochondrial cytochrome C release and apoptosis. Int J Cancer 98(5):761–769
Murillo G, Peng X, Torres KE et al (2009) Deguelin inhibits growth of breast cancer cells by modulating the expression
of key members of the Wnt signaling pathway. Cancer Prev Res (Phila Pa) 2 (11):942–950
Natarajan K, Singh S, Burke TR Jr et al (1996) Caffeic acid phenethyl ester is a potent and specific inhibitor of
activation of nuclear transcription factor NF-kappa B. Proc Natl Acad Sci USA 93 (17):9090–9095
Nomura M, Ma W, Chen N et al (2000) Inhibition of 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate-induced NF-kappaB
activation by tea polyphenols, (-)-epigallocatechin gallate and theaflavins. Carcinogenesis 21(10):1885–1890
Pandey MK, Gupta SC, Nabavizadeh A et al (2017) Regulation of cell signaling pathways by dietary agents for cancer
prevention and treatment. Semin Cancer Biol 46:158–181
Patlolla JM, Raju J, Swamy MV et al (2006) Beta-escin inhibits colonic aberrant crypt foci formation in rats and
regulates the cell cycle growth by inducing p21(waf1/cip1) in colon cancer cells. Mol Cancer Ther 5(6):1459–1466
Pavithra D, Gautam M, Rama R et al (2018) TGFbeta C-509T, TGFbeta T869C, XRCC1 Arg194Trp, IKBalpha C642T,
IL4 C-590T Genetic polymorphisms combined with socio-economic, lifestyle, diet factors and gastric cancer risk: a case
control study in South Indian population. Cancer Epidemiol 53:21–26
Philip S, Kundu GC (2003) Osteopontin induces nuclear factor kappa B-mediated promatrix metalloproteinase-2
activation through I kappa B alpha/IKK signaling pathways, and curcumin (diferulolylmethane) down-regulates these
pathways. J Biol Chem 278 (16):14487–14497
Pillai AK, Sharma KK, Gupta YK et al (2011) Anti-emetic effect of ginger powder versus placebo as an add-on therapy
in children and young adults receiving high emetogenic chemotherapy. Pediatr Blood Cancer 56(2):234–238
Plagens-Rotman K, Chmaj-Wierzchowska K, Pieta B et al (2018) Modifiable lifestyle factors and ovarian cancer
incidence in women. Ann Agric Environ Med 25(1):36–40
Plummer SM, Holloway KA, Manson MM et al (1999) Inhibition of cyclo-oxygenase 2 expression in colon cells by the
chemopreventive agent curcumin involves inhibition of NF-kappaB activation via the NIK/IKK signalling complex.
Oncogene 18(44):6013–6020
Pradeep CR, Kuttan G (2004) Piperine is a potent inhibitor of nuclear factor-kappaB (NF-kappaB), c-Fos, CREB, ATF-2
and proinflammatory cytokine gene expression in B16F-10 melanoma cells. Int Immunopharmacol 4(14):1795–1803
Pyun BJ, Choi S, Lee Y et al (2008) Capsiate, a nonpungent capsaicinlike compound, inhibits angiogenesis and
vascular permeability via a direct inhibition of Src kinase activity. Cancer Res 68(1):227–235
1068
 Ramakrishnan G, Lo Muzio L, Elinos-Baez CM et al (2009) Silymarin inhibited proliferation and induced apoptosis in
hepatic cancer cells. Cell Prolif 42(2):229–240
Rasyid A, Lelo A (1999) The effect of curcumin and placebo on human gall-bladder function: an ultrasound study.
Aliment Pharmacol Ther 13(2):245–249
Reddy L, Odhav B, Bhoola KD (2003) Natural products for cancer prevention: a global perspective. Pharmacol Ther
99(1):1–13
Sethi G, Ahn KS, Sung B et al (2008) Pinitol targets nuclear factorkappaB activation pathway leading to inhibition of
gene products associated with proliferation, apoptosis, invasion, and angiogenesis. Mol Cancer Ther 7(6):1604–1614
Sharma RA, Euden SA, Platton SL et al (2004) Phase I clinical trial of oral curcumin: biomarkers of systemic activity
and compliance. Clin Cancer Res 10(20):6847–6854
Shishodia S, Aggarwal BB (2006) Diosgenin inhibits osteoclastogenesis, invasion, and proliferation through the
downregulation of Akt, I kappa B kinase activation and NF-kappa B-regulated gene expression. Oncogene 25(10):1463–
1473
Shishodia S, Majumdar S, Banerjee S et al (2003) Ursolic acid inhibits nuclear factor-kappaB activation induced by
carcinogenic agents through suppression of IkappaBalpha kinase and p65 phosphorylation: correlation with down-
regulation of cyclooxygenase 2, matrix metalloproteinase 9, and cyclin D1. Cancer Res 63(15):4375–4383
Shishodia S, Sethi G, Ahn KS et al (2007a) Guggulsterone inhibits tumor cell proliferation, induces S-phase arrest, and
promotes apoptosis through activation of c-Jun N-terminal kinase, suppression of Akt pathway, and downregulation of
antiapoptotic gene products. Biochem Pharmacol 74(1):118–130
Shishodia S, Singh T, Chaturvedi MM (2007b) Modulation of transcription factors by curcumin. Adv Exp Med Biol
595:127–148
Singh S, Aggarwal BB (1995) Activation of transcription factor NF-kappa B is suppressed by curcumin
(diferuloylmethane) [corrected]. J Biol Chem 270(42):24995–25000
Singh RP, Raina K, Sharma G et al (2008) Silibinin inhibits established prostate tumor growth, progression, invasion,
and metastasis and suppresses tumor angiogenesis and epithelial-mesenchymal transition in transgenic
adenocarcinoma of the mouse prostate model mice. Clin Cancer Res 14(23):7773–7780
Steinmetz KA, Potter JD (1996) Vegetables, fruit, and cancer prevention: a review. J Am Diet Assoc 96(10):1027–1039
Suh Y, Afaq F, Johnson JJ et al (2009) A plant flavonoid fisetin induces apoptosis in colon cancer cells by inhibition of
COX2 and Wnt/EGFR/NF-kappaB-signaling pathways. Carcinogenesis 30 (2):300–307
Sung B, Pandey MK, Ahn KS et al (2008) Anacardic acid (6-nonadecyl salicylic acid), an inhibitor of histone
acetyltransferase, suppresses expression of nuclear factor-kappaB-regulated gene products involved in cell survival,
proliferation, invasion, and inflammation through inhibition of the inhibitory subunit of nuclear factorkappaBalpha kinase,
leading to potentiation of apoptosis. Blood 111(10):4880–4891
Sung B, Ahn KS, Aggarwal BB (2010) Noscapine, a benzylisoquinoline alkaloid, sensitizes leukemic cells to
chemotherapeutic agents and cytokines by modulating the NF-kappaB signaling pathway. Cancer Res 70(8):3259–3268
Tahbaz R, Schmid M, Merseburger AS (2018) Prevention of kidney cancer incidence and recurrence: lifestyle,
medication and nutrition. Curr Opin Urol 28(1):62–79
Thejass P, Kuttan G (2006) Antimetastatic activity of Sulforaphane. Life Sci 78(26):3043–3050
Thejass P, Kuttan G (2007) Antiangiogenic activity of Diallyl Sulfide (DAS). Int Immunopharmacol 7(3):295–305
Vijayababu MR, Arunkumar A, Kanagaraj P et al (2006) Quercetin downregulates matrix metalloproteinases 2 and 9
proteins expression in prostate cancer cells (PC-3). Mol Cell Biochem 287(1–2):109–116
Zeisel SH (1999) Regulation of “nutraceuticals”. Science 285 (5435):1853–1855
Zuccotti GV, Trabattoni D, Morelli M et al (2009) Immune modulation by lactoferrin and curcumin in children with
recurrent respiratory infections. J Biol Regul Homeost Agents 23(2):119–123

1069
Expansão dos alvos metabólicos no câncer por meio de
combinações selecionadas de vitamina C e EGCG com
diferentes compostos naturais
Aleksandra Niedzwiecki, Bilwa Bhanap, M. Waheed Roomi e Matthias Rath

Resumo
Em todo o mundo, o câncer é a segunda causa de morte. Atualmente, cerca de noventa
por cento das mortes por câncer são atribuídas à metástase, sem opções de tratamento
eficazes para controlá-la. Os atuais tratamentos padrão de câncer, como cirurgia,
quimioterapia e radiação, estão associados a vários efeitos colaterais. Nutracêuticos
incluindo vitaminas, minerais, aminoácidos e vários fitoquímicos derivados da dieta são
conhecidos por terem propriedades antioxidantes e anticâncer. No entanto, os compostos
individuais têm eficácia anticâncer limitada em comparação com seu uso em
combinações. Neste capítulo, descrevemos a eficácia de diferentes combinações de
vitamina C e polifenol (-) epigalocatequina-3-galato (EGCG) do chá-verde com outros
componentes naturais e seus mecanismos de prevenção do câncer. Combinações de
micronutrientes adequadamente escolhidas podem superar as limitações metabólicas de
componentes individuais e aumentar o escopo de sua eficácia terapêutica. Neste aspecto,
nossos estudos in vitro e in vivo mostraram que a interação baseada em sinergia de
micronutrientes selecionados é eficaz no controle dos principais mecanismos do câncer,
como a inibição da proliferação de células cancerosas, invasão, metástase,
desencadeamento de apoptose e redução da angiogênese, entre outros mecanismos.
Esta combinação de sinergia de nutrientes é segura e eficaz no direcionamento de vários
mecanismos de câncer e deve ser investigada em um ambiente clínico.

Palavras-chave: Nutracêuticos · Alvos metabólicos no câncer · Vitamina C · EGCG ·

Tratamento do câncer

1. Introdução
Câncer é um termo genérico que descreve mais de 125 tipos diferentes de doenças que
compartilham certas características comuns, como crescimento descontrolado de células
anormais, invasão e metástase. É a segunda principal causa de morte no mundo e

1070
estima-se que, até 2030, mais de 11 milhões de mortes por ano serão atribuídas somente
ao câncer em todo o mundo. https://www.cancer.gov/about-cancer/understanding/statistics

Os tratamentos convencionais de câncer, como cirurgia, quimioterapia e radiação, têm

eficácia limitada e estão associados a vários efeitos colaterais devastadores (Jemal et al.
2010). Uma avaliação abrangente dos benefícios da quimioterapia em mais de 22 tipos de
câncer mostrou que ela pode aumentar a chance de sobrevida em 5 anos em apenas
2,1% nos EUA e 2,6% na Austrália (Morgan et al. 2004). Mesmo os novos regimes de
drogas contra o câncer aprovados pela Food and Drug Administration dos EUA entre 2002
e 2014 melhoraram a sobrevida geral em apenas 2,1 meses (Fojo et al. 2014; Mayor
2018).

Uma vez que muitos estudos mostram que o alto consumo de frutas e vegetais tem sido
associado à prevenção, inibição e até mesmo reversão do câncer, tem havido uma
tendência de rápido crescimento na pesquisa do câncer para investigar compostos
naturais (Adlercreutz 1990; Miller 1990; Amin et al. 2009).

Uma vez que 90% das mortes por câncer ocorrem secundariamente à metástase,
qualquer tratamento anticâncer bem-sucedido deve ter como alvo esse estágio de
desenvolvimento do câncer (Mehlen e Puisieux 2006; Taketo 2011). Rath e Pauling
propuseram uma abordagem universal para controlar o câncer, garantindo a síntese e
integridade ideais do tecido conjuntivo ao redor das células cancerosas e, como tal,
reforçando a barreira natural que impede sua propagação e invasão. Este processo é
amplamente dependente de nutrientes não produzidos no corpo humano, como vitamina
C e lisina (Rath e Pauling 1990; Rath e Pauling 1992). Estudos seguindo essa direção
confirmaram a eficácia dessa abordagem. Entre outros, um estudo com um modelo de
camundongo que imita o metabolismo humano em relação à falta de síntese de ascorbato
endógeno (GULO -/-) demonstrou que a vitamina C na dieta pode inibir o crescimento
tumoral e metástase, facilitando a formação da barreira de colágeno ao redor dos tumores
(Cha et al. 2011). Essa direção também levou ao desenvolvimento de uma nova
estratégia destinada ao controle simultâneo dos principais mecanismos do câncer, usando
combinações específicas de compostos naturais e aumentando sua eficácia por meio de
sinergia mútua (Niedzwiecki et al. 2010).

A maioria das pesquisas científicas publicadas sobre os efeitos anticâncer dos

micronutrientes foi conduzida usando compostos únicos, e a vitamina C foi amplamente
estudada em vários aspectos do câncer (Yun et al. 2015; Gonzalez e Miranda-Massari
2014; Cha et al. 2013). Como tal, muitos estudos clínicos investigaram intervalos de
dosagem eficazes de vitamina C, métodos de sua administração (via intravenosa ou via
1071
oral) e outros aspectos (Gonzalez e Miranda-Massari 2014). No entanto, não existem
muitos estudos com foco no aumento dos efeitos anticâncer da vitamina C, combinando-a
com outros compostos naturais. Além da vitamina C, tem havido um interesse cada vez
maior em fitoquímicos dietéticos na prevenção e tratamento de cânceres (Donaldson
2004). Embora alguns dos fitoquímicos, como EGCG, curcumina, resveratrol e quercetina
tenham mostrado propriedades anticâncer in vitro, eles não foram muito potentes como
compostos individuais em estudos anticâncer in vivo. Isso pode estar relacionado ao seu
metabolismo e biodisponibilidade limitada após o consumo.

Em nossa abordagem de “sinergia de nutrientes” para o câncer, estudamos diferentes

combinações de vitamina C e EGCG com vários micronutrientes. Esta pesquisa pioneira
conduzida por mais de uma década resultou no desenvolvimento de combinações de
nutrientes com efeitos mecanísticos pleiotrópicos contra o câncer (ou seja, crescimento
celular, invasão, metástase, angiogênese e apoptose). Isso poderia ser alcançado com
doses mais baixas de compostos individuais e, como tal, mantendo o equilíbrio metabólico
celular sob controle.

Este capítulo avalia a eficácia anticâncer da vitamina C e (-) epigalocatequina-3-galato

(EGCG) do chá-verde usado em combinações com outros nutrientes individuais, misturas
de nutrientes e em sinergia com compostos naturais selecionados. Todos esses estudos
fornecem evidências adicionais de suporte de que a proteção baseada na dieta contra o
câncer pode derivar parcialmente da sinergia entre fitoquímicos dietéticos direcionados
contra alvos moleculares específicos em células cancerosas responsivas e fornecem a
base para explorar este princípio no projeto de combinações seguras e eficazes de
nutrientes contra o câncer.

2. Vitamina C em combinação com compostos naturais individuais

A maioria dos micronutrientes estudados em combinação com
a vitamina C, por seus efeitos anticâncer, eram antioxidantes e, como tal, mecanismos
celulares relacionados ao redox, conhecidos por afetar as vias metabólicas das células
cancerosas envolvidas no crescimento celular e nos ciclos de morte. Estudos
experimentais e humanos com combinações de antioxidantes no tratamento do câncer,
revisados por Prasad (2004), destacaram a necessidade de protocolos nutricionais,
incluindo altas doses de múltiplos antioxidantes dietéticos e seus derivados, a fim de
melhorar os resultados oncológicos e diminuir a toxicidade dos tratamentos
convencionais. Além disso, estudos clínicos envolvendo 8521 pacientes em uso de

1072
betacaroteno; vitaminas A, B, C, D3, E, e K3; e selênio, cisteína e glutationa como
agentes únicos ou como adjuvantes à radiação ou quimioterapia demonstraram que esses
antioxidantes e nutrientes não interferiram nas modalidades terapêuticas para o câncer,
mas aumentaram a atividade anticâncer e diminuíram seus efeitos colaterais (Simone et
al. 2007).

2.1 Vitamina C com Selênio

Zheng et al. (2002) investigaram os efeitos e mecanismos da combinação de ácido

ascórbico e selenito de sódio no crescimento e outra diferenciação de células cancerosas
gástricas humanas. Eles descobriram que a combinação induziu a outra diferenciação de
células cancerosas gástricas humanas e inibiu o crescimento celular, aumentando as
enzimas antioxidantes, induzindo a formação de H 2O2 e alterando o status redox da
célula.

2.2 Vitamina C com Cobre

Uma mistura de vitamina C e sulfato cúprico administrado por via oral inibiu
significativamente o crescimento do tumor mamário humano em camundongos (Chen et
al. 2015). Satoh et al. relataram que a citotoxicidade induzida por ascorbato de sódio ou
5,6-benzilideno-Lascorbato de sódio e clivagem do DNA internucleossômico em células
HL-60 de leucemia promielocítica humana foram significativamente aumentadas pela
adição de CuCl ou CuCl2. Em contraste, a adição de FeCl 2 ou FeCl3 inibiu a atividade
citotóxica do ascorbato. O cobre também estimulou a morte celular apoptótica induzida
por galato ou cafeato, enquanto o ferro foi inibitório (Satoh e Sakagami 1997a). Os efeitos
apoptóticos do ascorbato de sódio, além de outros antioxidantes (ácido gálico, n-
propilgalato e ácido cafeico) nas células de leucemia promielocítica humana HL-60 foram
aumentados por CuCl2 ou mesilato de deferoxamina, um quelante de ferro, mas foram
reduzidos por FeCl3. A espectroscopia ESR mostrou que tanto CuCl 2 quanto FeCl3
aumentaram a intensidade do radical ascorbil, mas reduziram a intensidade dos radicais
galato e cafeato. Eles concluíram que os íons de cobre e ferro modificaram a atividade
citotóxica desses antioxidantes de forma diferente, e sua intensidade de radical não foi o
único determinante da atividade citotóxica (Satoh et al. 1997).

2.3 Vitamina C com Glutationa

Para abordar a eficácia do ácido ascórbico intravenoso em altas doses (AA) e da

glutationa intravenosa (GSH), que são frequentemente administrados conjuntamente a
pacientes com câncer com eficácia e interação medicamentosa incerta, Chen et al. (2011)
testaram os efeitos de AA, GSH e sua combinação na citotoxicidade de dez linhagens de

1073
células cancerígenas. Embora todos os tratamentos (AA, GSH e AA + GSH) tenham
melhorado a taxa de sobrevivência, AA + GSH inibiu o efeito citotóxico do AA sozinho e
falhou em fornecer mais benefícios de sobrevivência. Assim, o mecanismo anticâncer pró-
oxidativo do AA farmacológico foi confirmado, e a administração de GSH com AA não
mostrou nenhum benefício adicional em comparação com o AA sozinho. O antagonismo
entre ascorbato e glutationa sugere que AA intravenoso e altas doses de GSH não devem
ser administrados conjuntamente a pacientes com câncer no mesmo dia. No entanto, o
estudo foi repreendido por outros por usar um modelo animal inadequado (ratos atímicos
que produzem sua própria vitamina C) e usar níveis inadequados de glutationa e,
portanto, ter pouca relevância para pacientes com câncer humano (Dettman et al. 2012).

2.4 Vitamina C com Metil sulfonil metano (MSM)

Além de fornecer alívio da dor para pacientes com câncer, um composto orgânico de
enxofre, metil sulfonil metano (MSM), é considerado potenciador dos efeitos anticâncer da
maioria das vitaminas e outros nutrientes, como a vitamina C; coenzima Q10; todas as
vitaminas B; vitaminas A, D e E; aminoácidos; selênio; cálcio; magnésio; e muitos outros.
Foi demonstrado que o MSM melhora a absorção celular desses nutrientes e pode
prolongar vidas (Mindell 1997; Ley 1998; Jacob 1983).

2.5 Vitamina C com ácido retinóico

O ácido retinóico, o ácido ascórbico e as vitaminas D e E têm sido implicados na

prevenção do desenvolvimento e progressão do câncer de mama. O ácido ascórbico
combinado com o ácido retinóico demonstrou uma inibição significativamente maior da
proliferação de células MCF-7 do câncer de mama humano do que a vitamina C ou o
ácido retinóico independentemente (75,7% em comparação com 20,7% e 23,3%,
respectivamente) (Kim et al. 2006). Além disso, a avaliação dos perfis de expressão
gênica das células tratadas e não tratadas por análise de microarray de cDNA radioativo
revelou que 29 genes foram regulados positivamente e 38 genes regulados
negativamente após o tratamento de combinação (Kim et al. 2006). A natureza desses
genes sugere que o mecanismo pelo qual o ácido retinóico e o ácido ascórbico agem
sinergicamente na inibição da proliferação de células do câncer de mama humano pode
envolver a expressão de genes que induzem a diferenciação e bloqueiam o crescimento
celular, além da regulação positiva de enzimas antioxidantes e proteínas envolvidas na
apoptose, regulação do ciclo celular e reparo de DNA, alterando sua expressão gênica.

1074
2.6 Vitamina C com Quercetina

Quercetina como um inibidor de sinalização de células múltiplas e vitamina C como um

antioxidante com potente atividade anticâncer foram combinados para investigar seus
efeitos sobre os níveis de estresse oxidativo em células de câncer de mama. O estudo
investigou a indução do fator nuclear 2 relacionado ao eritroide 2 (Nrf2) nos níveis de
gene e proteína como um mediador do estresse oxidativo celular. Os resultados
mostraram que a combinação desses dois compostos tem efeito significativo sobre os
genes Nrf2, principalmente nas células MDA-MB231 que apresentam maior expressão
desse fator do que a linha celular MCF7 e podem modular níveis endógenos de estresse
oxidativo (ROS). Esses aspectos são importantes para diminuir os efeitos colaterais da
quimioterapia e superar a resistência aos medicamentos quimio (Mostafafavi-Pour et al.
2017).

2.7 Vitamina C com Aminoácidos selecionados e Extratos Vegetais

Satoh e Sakagami (1997b) investigaram o efeito de 20 aminoácidos na intensidade do

radical de quatro antioxidantes, L-ascorbato de sódio, 5,6-benzilideno-L-ascorbato de
sódio, ácido gálico e ácido caféico, usando espectroscopia ESR. Os resultados
demonstraram que a metionina e o metional não afetaram significativamente a
intensidade do radical desses antioxidantes, enquanto o sulfóxido de metionina aumentou
ligeiramente a intensidade do radical do ascorbato de sódio e 5,6-benzilideno-L-ascorbato
de sódio, mas não do ácido gálico e do ácido caféico. Cisteína, N-acetilcisteína e
glutationa reduziram significativamente a intensidade do radical e a atividade citotóxica
desses antioxidantes, exceto para 5,6-benzilideno-L-ascorbato de sódio. Os outros
aminoácidos estavam inativos. Além disso, o estudo indica que esses antioxidantes
induzem citotoxicidade por meio de sua ação pró-oxidante (Satoh e Sakagami 1997c).

Konno (2007) testou oito produtos naturais comercialmente disponíveis para possíveis
efeitos no crescimento de células T24 de câncer de bexiga humana. Ele descobriu que,
desses produtos, apenas dois extratos de cogumelos, frações GD ou PL, induziam morte
celular significativa. Além disso, quando as concentrações não tóxicas das frações GD ou
PL foram combinadas com uma concentração não tóxica de vitamina C, a combinação
tornou-se altamente citotóxica, resultando em> 90% de morte celular. O cogumelo
Maitake (fração GD) também induziu apoptose em células PC-3 de câncer de próstata
humano, com> 95% de morte celular a 480 μg/ml e 3,77 g / ml (Fullerton et al. 2000). O mesmo
resultado foi obtido com uma concentração muito menor de GD (30–60 μg/ml e 3,77 g / ml)
combinado com ácido ascórbico 200 μg/ml e 3,77 M (Fullerton et al. 2000). Li et al. (2010)
investigaram os efeitos de theaflavin-3-30-digallate, um importante monômero de
1075
theaflavin no chá-preto, em combinação com ácido ascórbico, e ECGC, o principal
polifenol no chá-verde, na viabilidade celular do adenocarcinoma de pulmão humano
SPC-A-1 e ciclo celular. O ensaio de MTT mostrou que as concentrações inibitórias de
50% de theaflavin-3-30-digalato, EGCG e ácido ascórbico nas células SPC-A-1 foram
4,78 μg/ml e 3,77 mol/L, 4,90 μg/ml e 3,77 mol/L e 30,62 μg/ml e 3,77 mol/L, respectivamente. Os polifenóis do chá-preto e
do chá-verde em combinação com ácido ascórbico em uma razão molar de 1:6
demonstraram inibição sinérgica da proliferação de células SPC-A-1 (54,4% e 45,5%,
respectivamente) e continham células SPC-A-1 significativamente na fase G0/G1,
sugerindo que a combinação com ácido ascórbico aumenta sua atividade anticâncer (Li et
al. 2010).

2.8 Vitamina C com Calcitriol

O calcitriol, a forma hormonal da vitamina D3, sensibiliza as células do câncer de mama

para a citotoxicidade dependente de espécies reativas de oxigênio (ROS) induzida por
várias modalidades anticâncer. O calcitriol combinado com H 2O2, que é liberado durante o
tratamento IV com vitamina C, aumentou a taxa de morte de células MCF-7 do câncer de
mama em 78% em comparação com H 2O2 sozinho (Weitsman et al. 2005). Alguns
aditivos, no entanto, na verdade inibiram a eficácia da vitamina C. Por exemplo, a
vitamina C perdeu 95% de seu poder de matar o câncer quando a glutationa foi
conjuntamente injetada, e a redução do tumor normalmente observada com a vitamina C
sozinha foi inibida (Chen et al. 2011).

2.9 Vitamina C com Vitamina K3 (Menadiona)

As combinações de vitamina C com vitamina K3 foram pesquisadas como uma estratégia

multifacetada contra uma variedade de células tumorais. As vias precisas pelas quais a
interação desses nutrientes exibe atividades anticâncer não estão bem estabelecidas. No
entanto, foi demonstrado que envolve a produção de espécies reativas de oxigênio (ROS)
pela ciclagem redox da vitamina C em associação com K3, que pode ultrapassar o
sistema de defesa celular do câncer e induzir a morte celular. Estudos também
demonstraram que a administração conjunta de vitamina C e vitamina K3 em uma
proporção de 100: 1, respectivamente, resulta em um tipo necrótico de morte celular por
autoscopia (Verrax et al. 2003). Além disso, a administração conjunta dessas vitaminas
reativou o ácido e os DNA alcalinos inibidos nas células cancerosas, o que foi associado à
inibição do crescimento tumoral e metástase tanto in vitro quanto in vivo (Taper 2008).

1076
2.10 Vitamina C com Vitamina E

Uma combinação de vitamina E (acetato de alfa-tocoferol) e vitamina C mostrou efeitos

radioprotetores e pró-apoptóticos quando administrada a ratos antes e após a exposição à
irradiação g (Vasileva et al. 2016). Um pequeno ensaio clínico do complexo de vitaminas
C e E mostrou que a suplementação de curto prazo com esses nutrientes tem efeito
protetor contra a xerostomia induzida por radiação em pacientes com câncer de cabeça e
pescoço. O acompanhamento final mostrou que a ingestão de vitaminas não afetou a
sobrevida geral e livre de doença (Chung et al. 2016).

A evidência clínica geral da eficácia anticâncer da vitamina C tomada junto com a vitamina
E trouxe resultados mistos, com alguns estudos mostrando efeitos benéficos e outros não
(Coulter et al. 2006; Gaziano et al. 2009). As diferenças relacionadas às doses e fontes
desses nutrientes usados nos estudos, populações testadas, métodos de recodificação de
dados, duração dos estudos, tipos de câncer, etc. podem levar a conclusões definitivas.

3. Vitamina C em combinação com vários nutrientes

3.1 Vitamina C com Lisina, Prolina e Chá Verde (EGCG)

Netke et al. investigou o efeito de uma combinação específica de ácido ascórbico (100
μg/ml e 3,77 M), prolina (140 μg/ml e 3,77 M) e lisina (400 μg/ml e 3,77 M) na proliferação e propriedades invasivas de várias
linhas de células de câncer humano: mama (MDA-MB-231), cólon ( HCT116) e pele
(melanoma, A2058) (Netke et al. 2003). A combinação de nutrientes mostrou efeitos
antiproliferativos e anti-invasivos significativos contra essas linhas celulares. A adição de
20 μg/ml e 3,77 g/ml de EGCG a esta combinação de nutrientes aumentou os efeitos antiproliferativos
e a inibição da invasão da matriz nessas linhas celulares. Por exemplo, o ataque com
MatrigelTM nas células de câncer de mama e células de melanoma humano na presença
de ácido ascórbico, prolina, lisina e 20 μg/ml e 3,77 g/ml de EGCG foi interrompida completamente
(Netke et al. 2003).

3.2 Vitamina C com carotenóides, vitamina E e ácido retinóico

Um estudo de Prasad et al. indicou que, embora os compostos naturais usados

individualmente em doses de 50 μg/ml e 3,77 g/ml de vitamina C, 10 μg/ml e 3,77 g/ml de carotenóides, 10 μg/ml e 3,77 g/ml
de succinato de alfa-tocoferol e 7,5 μg/ml e 3,77 g / ml de ácido retinóico não afetaram o crescimento
de células de melanoma, sua combinação reduziu o número de células em 56%. O
aumento do nível de ascorbato nesta mistura para 100 μg/ml e 3,77 g/ml resultou em maior redução
do crescimento do melanoma em 87% (Prasad et al. 1994).

1077
4. Polifenol de chá-verde (EGCG) em combinação com outros
compostos naturais
O chá e, em particular, os polifenóis contidos no chá-verde têm propriedades
antioxidantes e antiinflamatórias potentes, contribuindo para o seu anticancerígeno e
outros benefícios para a saúde. O chá-verde contém entre 30 e 40% de polifenóis
extraíveis com água, entre os quais o EGCG foi o mais estudado e demonstrou o maior
potencial por suas propriedades anticarcinogênicas. No entanto, os outros componentes
como epicatequina, epigalocatequina e galato de epicatequina também ajudam a
aumentar as ações de EGCG como parte do extrato de chá-verde.

EGCG é importante para estimular a produção da enzima glutationa S-transferase (GST),

que desempenha um papel importante na defesa do corpo contra o câncer. No entanto, o
EGCG tem ação multifacetada na prevenção do câncer e na carcinogênese. Quando
usado sozinho, o EGCG tende a atingir concentrações mais altas apenas no sistema
digestivo e sua biodisponibilidade geral diminui gradualmente devido à oxidação e ao
metabolismo. Como tal, muito menos EGCG atinge o sangue e outros tecidos, indicando
que a potência do EGCG é perdida durante a sua absorção pelo trato digestivo. Por
exemplo, em um modelo de camundongo especializado em carcinogênese humana,
Shimizu et al. mostraram que a administração de EGCG a camundongos em seu líquido
de beber diminuiu significativamente a formação de tumor no intestino delgado (Shimizu
et al. 2008). Portanto, os pesquisadores passaram a usar combinações com outros
fitoquímicos para aumentar a potência anticâncer de EGCG.

4.1 EGCG com Resveratrol

O resveratrol é um polifenol presente nas uvas, vinho tinto, suco de uva roxa, amendoim,
mirtilo e cranberries. Acredita-se que as plantas produzam resveratrol para protegê-las de
infecções bacterianas e fúngicas. Foi demonstrado que o EGCG e o resveratrol são
importantes na quimioprevenção do câncer devido aos seus efeitos pró-apoptóticos
(Aggarwal et al. 2004; Manson 2005). Assim, os estudos in vitro de Ahmad et al. (2007)
em células de câncer de próstata (PC-3) mostraram que os efeitos pró-apoptóticos do
resveratrol e EGCG podem ser devido à modulação da caseína quinase 2 (CK2). CK2 é
uma proteína quinase multifuncional envolvida no crescimento celular, proliferação,
sobrevivência de células cancerosas (Litchfield 2003) e inibição da apoptose (Guo et al.
2001). Em um dos estudos in vivo avaliando a combinação de EGCG com resveratrol,
George et al. (2011) concluíram que o resveratrol e os polifenóis do chá atuam
sinergicamente na inibição do crescimento de tumores cutâneos já estabelecidos quando

1078
comparados a qualquer um desses antioxidantes usados isoladamente. Como tal, eles
observaram menor número de tumores e também reduziram o volume do tumor.

4.2 EGCG com Curcumina

A curcumina é o fenol natural mais abundante (curcuminóide) presente no tempero curry

indiano, a cúrcuma, que é obtido dos rizomas da planta Curcuma longa e é amplamente
utilizado na culinária do sul da Ásia e na preservação de alimentos. Nas últimas décadas,
a curcumina foi estudada por suas propriedades antioxidantes, antiinflamatórias e de
modulação imunológica. Ao agir como um eliminador de radicais livres, a curcumina pode
prevenir o dano oxidativo ao DNA, que está associado ao desencadeamento do processo
do câncer. As propriedades anticâncer da curcumina incluem vários mecanismos
celulares, como redução do crescimento das células cancerosas, início da apoptose,
inibição das enzimas MMP que digerem o colágeno e prevenção da angiogênese (Anand
et al. 2008). Acredita-se que as ações anticâncer da curcumina estejam relacionadas à
sua ação inibitória característica observada em modelos animais durante as etapas de
iniciação do câncer ou na supressão da promoção e progressão de vários estágios da
carcinogênese (Ferreira et al. 2015; Rao et al. 1995).

Estudos demonstraram que a curcumina pode atuar em sinergia com outros polifenóis.
Por exemplo, Khafif et al. (1998) e sua equipe demonstraram que uma combinação de
EGCG e curcumina inibiu o crescimento de células epiteliais orais pré-malignas e
malignas por diferentes mecanismos, e uma combinação desses dois fitoquímicos
permitiu a dose reduzida de cada composto individual sem comprometer a eficácia
anticâncer. Uma vez que a baixa biodisponibilidade de polifenóis individuais do chá tem
sido um fator limitante em sua ação anticâncer, a administração concomitante de
curcumina demonstrou ter um efeito sinérgico na inibição do crescimento de células de
câncer de mama (Somers-Edgar et al. 2008). Além disso, o efeito apoptótico aprimorado
desta combinação foi demonstrado na leucemia linfocítica crônica (Angelo e Kurzrock
2009).

Dados experimentais de Saha et al., mostraram que a epicatequina atua em sinergia com
EGCG e curcumina na inibição do crescimento de células cancerígenas e na indução de
apoptose em células de câncer de pulmão PC-9 (Saha et al. 2010). Além disso, estudos in
vivo conduzidos por Zhou et al. (2013) mostraram que a combinação de EGCG e
curcumina reduziu o crescimento tumoral e a carga tumoral em um xenoenxerto de câncer
de pulmão em modelo de camundongo pelado. Eles também notaram que protegia ratos
da perda de peso induzida pelo câncer, sem quaisquer efeitos colaterais adversos.

1079
Ao explorar o modelo de células-tronco cancerígenas na quimioprevenção nutracêutica,
Chung e Vadgama (2015) mostraram que EGCG combinado com curcumina suprime um
modelo de células-tronco de câncer de mama, o que sugere que esta abordagem poderia
ser usada como uma terapia direcionada para o câncer de mama.

4.3 EGCG com Quercetina

A quercetina é um importante fitoquímico presente em frutas e vegetais, como cebolas,

maçãs, frutas vermelhas e complexo de bioflavonóides cítricos. Possui fortes
propriedades antioxidantes e antiinflamatórias. A quercetina também é essencial para
facilitar a absorção da vitamina C e prevenir sua destruição no corpo. Como um agente
anticâncer, a quercetina inibiu seletivamente a proliferação de células cancerosas e se
mostrou eficaz na indução da apoptose de células cancerosas sem prejudicar as células
normais (Hirpara et al. 2009; Jagtap et al. 2009). Acredita-se que a inibição da proliferação
de células de linfoma pela quercetina seja devido à parada na fase G1 do ciclo celular
(Lee et al. 2006).

Quando usado sozinho, o chá-verde tem ação anticâncer limitada devido à extensa
metilação do EGCG no corpo. Wang e sua equipe demonstraram que a quercetina pode
aumentar a captação celular de EGCG e inibir sua metilação (Wang et al. 2013). Esses
pesquisadores usaram dois tipos de células de câncer de próstata – PC-3 e LNCaP –
para estudar os efeitos de uma combinação de EGCG e quercetina. Eles descobriram
que, embora a administração simultânea de EGCG e quercetina resultou na diminuição da
absorção de quercetina pelas células, ainda levou ao aumento da apoptose e inibiu a
proliferação dessas células cancerosas (Wang et al. 2012). Outros estudos desta
combinação em xenoenxertos de câncer de próstata em camundongos mostraram que ela
pode inibir o crescimento do tumor em 45%, o que foi mais do que alcançado com
qualquer um desses nutrientes isoladamente (Wang et al. 2014b).

Concentrando-se nas células-tronco do câncer de próstata, Tang e a equipe mostraram

que o EGCG usado com a quercetina era mais potente do que o usado sozinho. Essa
combinação diminuiu a capacidade de auto-renovação das células-tronco do câncer de
próstata, inibiu a migração e a capacidade de invasão e também induziu a apoptose das
células cancerosas (Tang et al. 2010). Pesquisas in vivo e evidências clínicas mostram
que a quercetina pode ajudar a aumentar os níveis de fenóis do chá-verde disponíveis no
sangue (Kale et al. 2010a; Gawande et al. 2008). Portanto, a adição de quercetina pode
aumentar significativamente a atividade anticâncer do extrato de chá-verde.

1080
4.4 EGCG com Sulforafano

As propriedades antioxidantes, incluindo a capacidade de inibir o crescimento do tumor,

induzir a apoptose e facilitar a desintoxicação de pró-carcinógenos, são alguns dos
mecanismos pelos quais os extratos vegetais crucíferos de Brassica atuam como agentes
quimiopreventivos. A alta ingestão de vegetais de Brassica foi associada a menor risco de
câncer, incluindo câncer de cólon, pulmão, pâncreas, bem como câncer de mama
dependente de hormônio e próstata. O fitoquímico ativo nesses vegetais é um composto
de enxofre chamado sulforafano, que é derivado de glucosinolatos. O sulforafano tem
uma potente atividade antioxidante e anticâncer. Estudos relataram que, quando usado
sozinho, o sulforafano inibe a proliferação celular e induz a apoptose em células de
leucemia (Suppipat et al. 2012).

Estudos in vitro usando a combinação de EGCG e sulforafano em células de câncer de

cólon (HT-29 AP-1) mostraram seus efeitos sinérgicos resultando em diminuição da
viabilidade celular e diminuição da atividade das células cancerígenas (Nair et al. 2008).
Da mesma forma, a combinação de EGCG e sulforafano foi testada em células de câncer
de ovário que eram sensíveis ao paclitaxel (SKOV3-ip1) e resistentes ao paclitaxel
(SKOV3TR-ip2) por Chen et al. Eles relataram que o sulforafano inibiu a viabilidade
celular em ambos os tipos de células de câncer de ovário e que o EGCG aumentou esse
efeito. Essa combinação também aumentou a apoptose, regulando negativamente hTERT
e Bcl-2 e induzindo danos ao DNA em células de câncer de ovário resistente ao paclitaxel
(Chen et al. 2013).

5 EGCG em combinações com vários nutrientes

5.1 EGCG com Genisteína e Quercetina

EGCG, genisteína e quercetina são fitoestrógenos predominantes na dieta asiática.

Individualmente, eles reduzem o risco de vários tipos de câncer, incluindo câncer de
mama, próstata e endometrial. Hsieh e Wu testaram a combinação desses três
compostos em células de câncer de próstata (CaP) e observaram um efeito sinérgico
significativo na inibição da proliferação celular. Ação sinérgica semelhante também foi
observada com esta combinação no aumento da expressão do gene supressor de tumor
p53 e da enzima quinona redutase tipo 1 que impede a desmetilação de p53 (Hsieh e Wu
2009).

1081
5.2 EGCG com ácido fítico e inositol

O ácido fítico e o inositol estão presentes em grãos, feijões e leguminosas e têm atividade
antioxidante. Devido à sua capacidade de aglutinar o ferro, uma dieta rica em ácido fítico
pode levar à deficiência de ferro. Por outro lado, Jariwalla et al., relataram que esta
propriedade do ácido fítico é vantajosa na redução do câncer de cólon mediado por ferro
em animais e que o ácido fítico inibe a proliferação celular mesmo após estimulação por
carcinógenos (Jariwalla et al. 1977). Também Khatiwada et al. usaram uma combinação
de EGCG, ácido fítico e inositol para estudar tumores de câncer de cólon induzidos por
azoximetano em ratos machos. De acordo com seus resultados, a administração oral dos
três componentes apresentou maior redução nos tumores formados. Como tal, os ratos
do grupo de controle desenvolveram 36 tumores que eram significativamente maiores em
comparação com 3 tumores desenvolvidos no grupo que recebeu chá verde, ácido fítico e
inositol (Khatiwada et al. 2011).

5.3 EGCG com Resveratrol e Vitamina E

Hsieh e Wu (2008) mostraram que o extrato de chá-verde combinado com resveratrol e

isoforma de vitamina E (gamatocotrienol — GT3) é eficaz e atua sinergicamente na
supressão da proliferação de células de câncer de mama MCF-7 positivas para receptor
de estrogênio, modulando a expressão gênica e aumentando o antioxidante atividade, em
comparação com cada um desses três fitoquímicos usados isoladamente. Os resultados
mostraram que houve aproximadamente 33%, 50% e 58% de inibição da proliferação
celular por > ou = 50 mM EGCG, > ou = 25 mM M de resveratrol e > ou = 10 mM M GT3,
respectivamente, adicionados como agentes únicos. Quando uma dose subótima (10 mM
M) de cada fitoquímico foi usada, um efeito aditivo significativo na supressão da
proliferação celular foi observado com a combinação de resveratrol e GT3, enquanto os
três fitoquímicos somados não produziram inibição mais pronunciada da proliferação
celular. No entanto, um efeito aditivo significativo na redução da expressão de ciclina D1 e
Bcl-2 foi encontrado quando GT3 foi adicionado com EGCG ou resveratrol. O sinergismo
funcional entre os três fitoquímicos foi observado apenas na indução da quinona redutase
NQO1.

5.4 EGCG com Curcumina e Arctigenina

Wang et al. (2014a) mostraram que uma combinação de EGCG com curcumina e
arctigenina (lignana antiinflamatória de sementes de Arctium lappa) aumentou
significativamente os efeitos antiproliferativos contra células de câncer de mama e
próstata em comparação com os obtidos com compostos individuais. Além disso, o uso

1082
desses nutrientes em uma combinação teve benefícios adicionais, como um aumento da
proporção de proteínas Bax para Bcl-2 e diminuição da ativação de NFkB e outras vias
envolvidas na migração de células cancerosas.

5.5 EGCG e outras catequinas com quercetina e sulforafano

Uma combinação de catequinas de chá-verde (EGCG, ECG e CG), sulforafano e

quercetina demonstrou ser superior na inibição da viabilidade celular, migração e
expressão de MMP-2 e MMP-9 do que qualquer um dos compostos usados isoladamente.
Além disso, esses nutrientes complementaram-se na inibição da progressão das células-
tronco do câncer de pâncreas, controlando sua proliferação excessiva e indução de
microRNA (miR-let-7), cujo baixo nível foi associado a resultados ruins para pacientes
com câncer e à inibição do gene K-ras (Appari et al. 2014).

5.6 EGCG com Curcumina, Resveratrol, Quercetina e Cruciferex™

Com base nas propriedades antioxidantes anticâncer de vários fitoquímicos, uma

combinação única baseada em sinergia foi testada por Roomi et al. em várias linhas de
células cancerosas. Esta mistura fitobiológica (PB) inclui 400 mg de quercetina, 400 mg
de Cruciferex™ (repolho, couve-flor, brócolis e extrato de cenoura), 300 mg de curcumina,
50 mg de resveratrol e 300 mg de extrato de chá-verde padronizado.

O teste in vitro de PB em células de carcinoma de células escamosas de cabeça e

pescoço (HNSCC) exibiu uma toxicidade dependente da dose significativa (52%), inibição
completa das enzimas MMP-2 e MMP-9 e inibição da invasão celular por Matrigel™. Os
estudos in vivo testando o crescimento de xenoenxertos tumorais em camundongos nus
mostraram que a ingestão dietética de PB (0,5% p/p) inibiu o crescimento do tumor
HNSCC em 67,6% (Roomi et al. 2015a).

A eficácia desta combinação de nutrientes na redução da proliferação celular, inibição de

MMP-2 e MMP-9 e alcançando virtualmente 100% de inibição da invasão celular através
de Matrigel™ também foi confirmada em condrossarcoma (SW-1353), fibrossarcoma (HT-
1080) e células de melanoma (A-2058) (Roomi et al. 2017a, b). Outro estudo preliminar
mostrou que o PB pode inibir a proliferação celular e induzir a apoptose em linhas
celulares de câncer de mama MDA-MB-231 e MCF-7 (Alqarni et al. 2017).

6. Nova abordagem ao câncer por meio da combinação sinérgica de

vitamina C com EGCG e outros nutrientes

1083
Nossa pesquisa baseada em uma estratégia multifacetada em relação ao câncer levou ao
desenvolvimento de uma combinação de nutrientes específicos (NM), visando
simultaneamente os principais mecanismos do câncer. Esta combinação particular (Tabela
1) inclui vitamina C, EGCG e vários compostos naturais destinados a proteger a
integridade da matriz extracelular como uma barreira biológica contra a invasão do câncer
e metástase (Rath e Pauling 1992).

Tabela 1 Composição de nutrientes de NM

Componentes do NM Concentrações em solução de 1000 μg/ml e 3,77 g/ml
Ascorbato 900 μg/ml e 3,77 M
Lisina 1100 μg/ml e 3,77 M
Prolina 1100 μg/ml e 3,77 M
N-acetil-cisteína 250 μg/ml e 3,77 M
EGCG (de chá-verde) 150 μg/ml e 3,77 M
Selênio 85 μg/ml e 3,77 M
Cobre 7 μg/ml e 3,77 M
Manganês 4 μg/ml e 3,77 M

Os micronutrientes neste complexo de ação sinérgica exibiram eficácia anticâncer em

mais de 50 tipos de células cancerosas humanas in vitro e in vivo. Seus efeitos
pleiotrópicos incluem, entre outros, a inibição do crescimento de células cancerosas,
invasão e metástase, redução da angiogênese e estimulação da apoptose. Os
componentes individuais do NM mostraram menor eficácia anticâncer do que toda a sua
composição (Netke et al. 2003; Roomi et al. 2012c).

6.1 Inibição do crescimento do tumor (xenoenxertos)

A avaliação dos efeitos do NM em xenoenxertos em modelos murinos demonstrou

redução significativa no tamanho do tumor e na carga do tumor em várias linhas de
células cancerosas humanas e murinas. Os exemplos são apresentados na Tabela 2.

6.2 Inibição de metástase e invasão

A eficácia do NM no controle de metástases e parâmetros invasivos foi confirmada em

vários estudos.

1084
Tabela 2 Efeito da dieta enriquecida com NM no peso do tumor e na carga em estudos selecionados
de xenoenxertos [Roomi et al.]
Inibição do
Inibição da carga do
Linha de células cancerosas crescimento do
tumor
tumor
SK-Hep-1 42% (p = 0,09) 36% (p = 0,005)
Colon HCT-116 63% (p = 0,0002) 46% (p = 0,0005)
Próstata PC-3 47% (p < 0,0001) 53% (p = 0,0002)
Lung A-549 44% (p = 0,001) 47% (p < 0,0001)
Melanoma A2058 57% (p < 0,0001) 31%
HeLa cervical 59% (p = 0,001) N/A
Carcinoma de células escamosas, cabeça e pescoço OHSU-
47% (p = 0,0009) N/A
974
Glioblastoma U-87MG 53% (p = 0,015) 48% (p = 0,010)
Mama 4T1 50% (p = 0,02) 53,4% (p = <0,000)
Osteossarcoma MNNG-HOS 53% (p = 0,0001) 53% (p = 0,0001)
ES-2 ovariano 59,3% (p ≤ 0,0001) 58,7% (p < 0,0001)

6.2.1 Metástase

A eficácia contra a metastasea de NM foi testada em vários modelos de camundongos

usando várias vias de administração de nutrientes (ou seja, dieta, IP e IV) e introdução de
células, como por injeção intravenosa, subcutânea e direta em órgãos. Os resultados
resumidos na Tabela 3 mostram um forte efeito contra a metástase desta combinação.

Tabela 3 Efeitos do NM na metástase de órgãos testados em diferentes projetos experimentais

Célula Via de administração Entrega NM Inibição de metástases em órgãos
Dieta 0,5% 63% para os pulmões
Melanoma
Intravenoso IV 86% para os pulmões
B16FO
IP 86% para pulmões
Melanoma
Intra-baço Dieta 0,5% 55% para fígado
B16FO
Sem metástase peritoneal em 50% dos animais,
Melanoma
Intratesticular Dieta 1% em outros apenas leve em comparação com o
B16FO
controle
87% para os pulmões (nº de colônias)
Câncer de
Subcutâneo Dieta 0,5% 60% (por peso do pulmão)
mama 4T1
Metástase reduzida para fígado e baço
Câncer de Inoculação ortotópica Reduziu metástases para os pulmões e baço em
Dieta 0,5%
mama 4T1 no rim comparação com o controle
Câncer de ovário Injeção
Dieta 0,5% Metástase pulmonar reduzida em 100%
A2780 intraperitoneal

1085
6.2.2 – Inibição de MMPs e invasão de células cancerosas através do Matrigel™

A inibição da invasão das células cancerígenas pelo NM pode ser atribuída ao seu efeito
inibitório sobre a secreção e atividade de MMPs e uPA, as enzimas responsáveis pela
digestão da matriz extracelular que circunda as células. Foi demonstrado que o uPA e
várias MMPs, principalmente a MMP-2 e a MMP-9, são elevados em vários tipos de
cânceres humanos que têm sido associados a um prognóstico ruim (Fingleton 2006;
Mannello et al. 2005). Usando zimografia de gelatinase, avaliamos a secreção de MMP-2
e MMP-9 em muitas linhas de células cancerosas humanas e não humanas, algumas das
quais expressam apenas MMP-2 ou apenas MMP-9 e algumas expressam ambas (Roomi
et al. 2010a, 2015b). Também avaliamos os efeitos do NM no uPA e nos inibidores
naturais da proteólise de ECM, TIMP1 e TIMP2 (Roomi et al. 2013, 2014b). Nosso estudo
mostrou uma correlação entre as atividades de MMPs e as propriedades invasivas das
células cancerosas (Roomi et al. 2010b). Assim, ao inibir a atividade proteolítica da ECM
em várias linhagens celulares de câncer diferentes, o NM inibe não apenas a
multiplicação, mas também a propagação do câncer. Os resultados mostraram que o NM
teve um forte efeito inibitório na secreção de MMP em todos os tipos de células
cancerosas testados sem e sob estimulação de PMA. Resumo do potencial anti-invasão
de NM em linhas de células cancerosas selecionadas resumido na Tabela 4 mostra que
NM pode bloquear completamente a invasão de vários tipos de células cancerosas, mas
suas concentrações eficazes diferem.

Tabela 4 Doses eficazes de NM resultando na inibição completa da invasão de células cancerosas

Concentração de NM resultando em 100% de inibição da invasão celular
100 mg
Mama (MDA-MB-231)
Mama (MCF-7 sensível ao
estrogênio) + estradiol
Testicular (NT2/DT)
Anemia de Fanconi (FAA:P220)
Anemia de Fanconi (GM13022; FA-A:
através do Matrigel™
500 mcg
Câncer cervical (HeLa)
Colon (HCT 116)
Pâncreas (MIA PACA-2)
Próstata (LNCaP e DU-145) Carcinoma hepatocelular (SK-
Rabdomiossarcoma
Tiróide (SW 579)
PD20;)
1000 mcg
Câncer de bexiga (T-24)
Câncer cervical (DoTc2451)
Glioma (A-172)
Hep-1)
Lipossarcoma (SW-872)
Melanoma (A2058)
Ovariana (SK-OV-3)
Próstata (PC-3)
Carcinoma renal (786-0)
Carcinoma sinovial
Condrossarcoma (SW1353)
Cabeça e pescoço (HNSCC)
Língua (SC-255)
1086
6.3 Inibição da angiogênese

Uma vez que o crescimento e a metástase de todos os tumores malignos requerem um

suprimento sanguíneo adequado, a inibição da angiogênese induzida por tumor
representa uma abordagem promissora na terapia do câncer (Yang et al. 2017). A
angiogênese tumoral envolve a interação de vários fatores diferentes, incluindo
degradação e reconstrução de ECM, que tem sido associada à atividade de MMPs e
outras enzimas proteolíticas. Com base em modelos de angiogênese in vivo e in vitro,
demonstramos que a eficácia anti-MMP e uPA do NM foi associada às suas propriedades
antiangiogênicas (Roomi et al. 2005c, 2007). Além de seu efeito na inibição de MMPs, o
NM mostrou seus efeitos inibitórios na secreção de fatores pró-angiogênicos, como VEGF,
IL-6, IL-8, FGF, TGF-β e angiopoietina-2 (Roomi et al. 2007). Esses fatores afetam o
endotélio direta ou indiretamente pela ativação das células circundantes para produzir
outros fatores pró-angiogênicos ou modulação dos receptores/atividades do receptor
(Yoshida et al. 1997).

6.4 Efeitos Pró-apoptóticos de NM

Efeitos pró-apoptóticos de NM foram demonstrados em linhas de células cancerosas de

leucemia mostrando seu efeito estimulador na parada do ciclo celular do câncer,
fragmentação de DNA e expressão aumentada de genes pró-apoptóticos (p53, Bax, P21)
e inibição de Bcl2a (Harakeh et al . 2006) (Fig. 1).

619
Fig. 1 Efeito do NM na apoptose de células HepG2 - Poli Caspases verdes. Análise
quantitativa (a) e fotomicrografias de células HepG2 expostas a concentrações de NM de 0
(b), 100 (c), 500 (d) e 1000 (e) μg/ml e 3,77 g / ml (Roomi et al. 2012c)

1087
Além disso, os efeitos pró-apoptóticos do NM foram documentados in vivo, como em
xenoenxertos de células HeLa cervicais em camundongos fêmeas nus alimentados com
NM (Roomi et al. 2014c). A coloração imuno-histoquímica para marcação terminal de
desoxinucleotidil transferase dUTP a marcação da extremidade de corte (TUNEL) mostrou
apoptose abundante em ambos os tumores de controle e tratados com NM; no entanto,
mais apoptose ocorreu em tumores do grupo tratado com NM, que exibiu áreas uniformes
de células apoptóticas homogêneas com áreas periféricas de células não apoptóticas, e
alguma apoptose foi detectada nas células da cápsula fibrosa de tumores tratados com
NM. Os tumores de controle mostraram alta coloração para Bcl-2, uma proteína anti-
apoptótica pró-sobrevivência, enquanto um nível reduzido de Bcl-2 foi detectado nos
tumores tratados com NM. Os tumores tratados com NM tinham vastas regiões de células
livres de Bcl-2, que estavam nitidamente nucleadas com consideravelmente menos
expressão de Bcl-2.

6.5 Efeitos antiinflamatórios de NM

Proteínas inflamatórias como a Cox-2 contribuem para a carcinogênese e promovem o

crescimento de tumores humanos e foram encontradas elevadas em pacientes com
câncer (Greenhough et al. 2009; Colotta et al. 2009). Observamos que a expressão de
Cox-2 em células T-24 de câncer de bexiga expostas a NM foi reduzida de forma dose-
dependente (Roomi et al. 2010d). Além disso, o estudo in vivo do efeito da suplementação
de NM dietético em xenoenxertos de células HeLa em camundongos fêmeas nus mostrou
forte inibição do crescimento do tumor com peso médio do tumor reduzido para 59% (P =
0,001). Isso foi acompanhado por uma menor intensidade de coloração para Cox-2 e
iNOS em tumores desenvolvidos no grupo NM em comparação com o grupo controle
(Roomi et al. 2015c).

6.6 Efeitos Terapêuticos de NM

O potencial terapêutico de uma combinação de nutrientes em NM em comparação com o

extrato de chá-verde é exemplificado no estudo de Kale et al. no tratamento de tumores
mamários induzidos por MNU em ratos Wistar (Kale et al. 2010b). Diferentes regimes de
tratamento com micronutrientes foram fornecidos depois que os ratos desenvolveram
tumores palpáveis para simular abordagens de tratamento de intervenção em ambientes
clínicos. A administração de NM resultou em inibição acentuadamente maior (85%) do
crescimento do tumor, em comparação com o extrato de chá-verde sozinho (50%). Além
disso, entre os tumores que se desenvolveram em camundongos tratados com NM, a
maioria (90%) era não maligna.

1088
7. Observações Finais e Orientações Futuras
Nutrientes e fitoquímicos têm propriedades anticâncer comprovadas. No entanto, os
compostos individuais têm eficácia limitada em comparação com combinações
selecionadas de nutrientes específicos. Essas combinações podem superar algumas
inadequações metabólicas de componentes individuais e, por meio de suas interações
mútuas, aumentar sua eficácia terapêutica. Pesquisas futuras sobre vitamina C e EGCG
no câncer devem incluir seu uso em combinação com outros nutrientes para direcionar os
mecanismos seletivos do câncer. Nossos resultados mostram que uma combinação de
vitamina C e EGCG com micronutrientes e fitoquímicos selecionados permite a expansão
e simultaneamente direcionar vários mecanismos específicos para o câncer (Tabela 5).
Além disso, ao contrário da quimioterapia tóxica e dos tratamentos de radiação, a
combinação de sinergia de nutrientes não é tóxica. Estudos usando as doses clinicamente
relevantes de NM mostraram uma ausência de efeitos adversos em órgãos vitais, como
coração, fígado e rins.

Tabela 5 Efeitos anticâncer confirmados experimentalmente de compostos naturais combinados

sinergicamente na mistura de nutrientes (NM)
Processo no câncer Efeitos/mecanismos benéficos
Eliminando radicais livres
Estresse oxidativo
Estresse oxidativo reduzido
Crescimento e sobrevivência de Inibição da proliferação celular Parada do ciclo celular
células cancerosas Indução de apoptose
Inibição da angiogênese
Inibição da adesão e invasão das células cancerosas
Inibição da destruição proteolítica do tecido conjuntivo (MMPs, uPA)
Crescimento do tumor e Síntese aumentada de inibidores de proteólise TIMP 1 e 2, PAI1
metástase Prevenção da formação de dímeros de MMP
Encapsulamento de tumor
Inibição do crescimento tumoral e carga
Efeitos anti metastáticos
Inibição da expressão do oncogene
Genética
Indução de genes supressores de tumor
Suporte para sistema imunológico
Sistemas de suporte Efeitos antiinflamatórios (inibição de COX2, iNOS induzível)
Prevenção de cânceres quimicamente induzidos
Modulação da expressão de genes de transição mesenquimal
Efeitos metabólicos
glicolítica e epitelial (EMT)

1089
Estudos futuros em compostos naturais devem se concentrar na utilização expandida de
suas propriedades preventivas do câncer por meio da sinergia de nutrientes.
Combinações sinérgicas de nutrientes e fitoquímicos podem oferecer uma alternativa
terapêutica segura e eficaz para os atuais tratamentos de câncer extremamente tóxicos.

Agradecimentos: Agradecemos à Sra. Cathy Flowers por seus valiosos comentários e

edições.

Referências
Adlercreutz H (1990) Western diet and Western diseases: some hormonal and biochemical mechanisms and
associations. Scand J Clin Lab Invest Suppl 20:3–23
Aggarwal BB, Bhardwaj A, Aggarwal RS (2004) Role of resveratrol in prevention and therapy of cancer: preclinical and
clinical studies. Anticancer Res 5:2783–2840
Ahmad KA, Harris NH, Johnson AD et al (2007) Protein kinase CK2 modulates apoptosis induced by resveratrol and
epigallocatechin-3- gallate in prostate cancer cells. Mol Cancer Ther 6(3):1006–1012
Alqarni AA, Alamoudi AA, Ajabnoor GM et al (2017) Inhibition of proliferation and induction of apoptosis by a novel
phytobiological mixture against breast cancer cell lines. Cancer Res 77 (13 Suppl):4208. https://doi.org/10.1158/1538-
7445.AM2017-4208
Amin ARMR, Kucuk O, Khuri FR et al (2009) Perspectives for cancer prevention with natural compounds. J Clin Oncol
27 (16):2712–2725
Anand P, Sundaram C, Jhurani S et al (2008) Curcumin and cancer: an “old-age” disease with an “age-old” solution.
Cancer Lett 267 (1):133–164
Angelo LS, Kurzrock R (2009) Turmeric and green tea: a recipe for the treatment of B-chronic lymphocytic leukemia.
Clin Cancer Res 15 (4):1123–1125
Appari M, Babu KR, Kaczorowski A et al (2014) Sulforaphane, quercetin and catechins complement each other in
elimination of advanced pancreatic cancer by miR-let-7 induction and K-ras inhibition. Int J Oncol 45(4):1391–1400
Cha J, Roomi MW, Ivanov V et al (2011) Ascorbate depletion increases growth and metastasis of melanoma cells in
vitamin C deficient mice. Exp Oncol 33(4):226–230
Cha J, Roomi W, Ivanov V et al (2013) Ascorbate supplementation inhibits growth and metastasis of B16FO melanoma
and 4T1 breast cancer cells in vitamin C-deficient mice. Int J Oncol 42:55–64
Chen P, Stone J, Sullivan G et al (2011) Anti-cancer effect of pharmacologic ascorbate and its interaction with
supplementary parenteral glutathione in preclinical cancer models. Free Radic Biol 51 (3):681–687
Chen H, Landen CN, Li Y et al (2013) Epigallocatechin gallate and sulforaphane combination treatment induce
apoptosis in paclitaxelresistant ovarian cancer cells through hTERT and Bcl-2 down-regulation. Exp Cell Res
319(5):697–706
Chen Q, Polireddy K, Chen P et al (2015) The unpaved journey of vitamin C in cancer treatment. Can J Physiol
Pharmacol 93 (12):1055–1063
Chung SS, Vadgama JV (2015) Curcumin and epigallocatechin gallate inhibit the cancer stem cell phenotype via
down-regulation of STAT3–NFκBα e AMPK. Esses dadosB signaling. Anticancer Res 35(1):39–46
Chung MK, Kim Do H, Ahn YC et al (2016) Randomized trial of vitamin C/E complex for prevention of radiation-induced
xerostomia in patients with head and neck cancer. Otolaryngol Head Neck Surg 155(3):423–430
Colotta F, Allavena P, Sica A et al (2009) Cancer-related inflammation, the seventh hallmark of cancer: links to genetic
instability. Carcinogenesis 30(7):1073–1081
Coulter ID, Hardy ML, Morton SC et al (2006) Antioxidants vitamin C and vitamin e for the prevention and treatment of
cancer. J Gen Intern Med 21(7):735–744
Dettman I, Meakin C, Allen R (2012) Co-infusing glutathione and vitamin C during cancer treatment: a reply. J
Australasian Coll Nutr Environm Med 31(1):8–11
Donaldson MS (2004) Nutrition and cancer: a review of the evidence for an anti-cancer diet. Nutr J 3:19–40
Ferreira LC, Arbab AS, Jardim-Perassi BV et al (2015) Effect of curcumin on pro-angiogenic factors in the xenograft
model of breast cancer. Anticancer Agents Med Chem 15(10):1285–1296
Fingleton B (2006) Matrix metalloproteinases: roles in cancer and metastasis. Front Biosci 11:479–491
Fojo T, Mailankody S, Lo A (2014) Unintended consequences of expensive cancer therapeutics—the pursuit of
marginal indications and a me-too mentality that stifles innovation and creativity: the John
Conley Lecture. JAMA Otolaryngol Head Neck Surg 140 (12):1225–1236
Fullerton SA, Samadi AA, Tortorellis DG et al (2000) Induction of apoptosis in human prostate cancer cells with beta-
glucan (Maitake mushroom polysaccharide). Mol Urol 4(1):7–13
Gawande S, Kale A, Kotwal S (2008) Effect of nutrient mixture and black grapes on the pharmacokinetics of orally
administered (-)epigallocatechin-3-gallate from green tea extract: a human study. Phytother Res 22(6):802–808

1090
 Gaziano JM, Glynn RJ, Christen WG et al (2009) Vitamins E and C in the prevention of prostate and total cancer in
men: the Physicians’Health Study II randomized controlled trial. JAMA 301(1):52–62
George J, Singh M, Srivastava AK et al (2011) Resveratrol and black tea polyphenol combination synergistically
suppress mouse skin tumors growth by inhibition of activated MAPKs and p53. PLoS One 6(8): e23395
Gonzalez MJ, Miranda-Massari JR (2014) New insights on Vitamin C and cancer. Springer, New York, p 2014
Greenhough A, Smartt HJ, Moore AE et al (2009) The COX-2/PGE2 pathway: key roles in the hallmarks of cancer and
adaptation to the tumour microenvironment. Carcinogenesis 30(3):377–386
Guo C, Yu S, Davis AT et al (2001) A potential role of nuclear matrixassociated protein kinase CK2 in protection
against drug-induced apoptosis in cancer cells. J Biol Chem 276:5992–5999
Harakeh S, Diab-Assaf M, Niedzwiecki A et al (2006) Apoptosis induction by Epican Forte in HTLV-1 positive and
negative malignant T-cells. Leuk Res 30(7):869–881
Hirpara KV, Aggarwal P, Mukherjee AJ et al (2009) Quercetin and its derivatives: synthesis, pharmacological uses with
special emphasis on anti-tumor properties and prodrug with enhanced bio-availability. Anticancer Agents Med Chem
9(2):138–1361
Hsieh TC, Wu JM (2008) Suppression of cell proliferation and gene expression by combinatorial synergy of EGCG,
resveratrol and gamma-tocotrienol in estrogen receptor-positive MCF-7 breast cancer cells. Int J Oncol 33(4):851–859
Hsieh TC, Wu JM (2009) Targeting CWR22Rv1 prostate cancer cell proliferation and gene expression by combinations
of the phytochemicals EGCG, genistein and quercetin. Anticancer Res 29 (10):4025–4032
Jacob SW (1983) The current status of MSM in medicine. Am Acad Prev Med
Jagtap S, Meganathan K, Wagh V et al (2009) Chemoprotective mechanism of the natural compounds,
epigallocatechin-3-O-gallate, quercetin and curcumin against cancer and cardiovascular diseases. Curr Med Chem
16:1451–1462
Jariwalla RJ, Sabin R, Lawson S et al (1977) Effects of dietary phytic acid on the incidence and growth rate of tumors
promoted in Fisher rats by a magnesium supplement. Nutr Res 8:813
Jemal A, Siegel R, Xu J, Ward E (2010) Cancer statistics. CA Cancer J Clin 60(5):277–300
Kale A, Gawande S, Kotwal S et al (2010a) Studies on the effects of oral administration of nutrient mixture, quercetin
and red onions on the bioavailability of epigallocatechin gallate from green tea extract. Phytother Res Suppl 1:S48–S55
Kale A, Gawande S, Kotwal S et al (2010b) A combination of green tea extract, specific nutrient mixture and quercetin:
an effective intervention treatment for the regression of N-methyl-N-nitrosourea (MNU)-induced mammary tumors in
Wistar rats. Onc Letters 1:313–317
Khafif A, Schantz SP, Chou TC et al (1998) Quantitation of chemopreventive synergism between (-)-epigallocatechin-3-
gallate and curcumin in normal, premalignant and malignant human oral epithelial cells. Carcinogenesis 19(3):419–424
Khatiwada J, Verghese M, Davis S et al (2011) Green tea, phytic acid, and inositol in combination reduced the
incidence of azoxymethaneinduced colon tumors in Fisher 344 male rats. J Med Food 14 (11):1313–1320
Kim KN, Pie JE, Park JH et al (2006) Retinoic acid and ascorbic acid act synergistically in inhibiting human breast
cancer cell proliferation. J Nutr Biochem 17(7):454–462
Konno S (2007) Effect of various natural products on growth of bladder cancer cells: two promising mushroom
extracts. Altern Med Rev 12 (1):63–68
Lee TJ, Kim OH, Kim YH et al (2006) Quercetin arrests G2/M phase and induces caspase-dependent cell death in
U937 cells. Cancer Lett 240(2):234–242
Ley BM (1998) The forgotten nutrient MSM: on our way back to health with sulfur in health learning handbooks. BL
Publications, California
Li W, Wu J, Tu YJ (2010) Synergistic effects of tea polyphenols and ascorbic acid on human lung adenocarcinoma
SPC-A-1 cells. Zhejiang Univ Sci B 11:458–464
Litchfield DW (2003) Protein kinase CK2: structure, regulation and role in cellular decisions of life and death. Biochem
J 369:1–15
Mannello F, Tonti G, Papa S (2005) Matrix metalloproteinase inhibitors as anticancer therapeutics. Curr Cancer Drug
Targets 5(4):285–298
Manson MM (2005) Inhibition of survival signaling by dietary polyphenols and indole-3-carbinol. Eur J Cancer
41(13):1842–1853
Mayor S (2018) Seven in 10 women with early breast cancer do not need chemotherapy, study finds. BMJ 361:k2473.
https://doi.org/10.1136/bmj.k2473
Mehlen P, Puisieux A (2006) Metastasis: a question of life or death. Nat Rev Cancer 6:449–458
Miller A (1990) Diet and cancer: a review. Acta Oncol 29(1):87–95
Mindell EL (1997) The MSM miracle. Enhance your health with organic sulfur. Good Health Guides Keats Publishing,
Connecticut
Morgan G, Ward R, Barton M (2004) The contribution of cytotoxic chemotherapy to 5-year survival in adult
malignancies. Clin Oncol (R Coll Radiol) 16(8):549–560
Mostafafavi-Pour Z, Ramezani F, Keshavarzi F et al (2017) The role of quercetin and vitamin C in Nrf2-dependent
oxidative stress production in breast cancer cells. Oncol Lett 13:1965–1973
Nair S, Hebbar V, Gouxiang S et al (2008) Synergistic effects of a combination of dietary factors sulforaphane and ()
epigallocatechin-3-gallate in HT-29 AP-1 human colon carcinoma cells. Pharm Res 25(2):387–399

1091
 Netke SP, Roomi MW, Ivanov V et al (2003) A specific combination of ascorbic acid, lysine, proline and
epigallocatechin gallate inhibits proliferation and extracellular matrix invasion of various human cancer cell lines. Res
Comm Pharmacol Toxicol 8(1/2):IV37–IV49
Niedzwiecki A, Roomi MW, Kalinovsky T, Rath M (2010) Micronutrient synergy-a new tool in effective control of
metastasis and other key mechanisms of cancer. Cancer Metastasis Rev 29(3):529–542
Prasad KN (2004) Multiple dietary antioxidants enhance the efficacy of standard and experimental cancer therapies
and decrease their toxicity. Integr Cancer Ther 3(4):310–322
Prasad KN, Hernandez C, Edwards PJ et al (1994) Modification of the effect of tamoxifen, cisplatin, DTIC and
interferon alpha 2b on human melanoma cells in culture by mixture of vitamins. Nutr Cancer 22:223–245
Rao CV, Rivenson A, Simi B et al (1995) Chemoprevention of colon carcinogenesis by dietary curcumin, a naturally
occurring plant phenolic compound. Cancer Res 55(2):259–266
Rath M, Pauling L (1990) Hypothesis: lipoprotein(a) is a surrogate for ascorbate. Proc Natl Acad Sci U S A
87(16):6204–6207
Rath M, Pauling L (1992) Plasmin-induced proteolysis and the role of apoliporotein (a), lysine and synthetic lysine
analogues. J Orthomol Med 7:17–23
Roomi MW, Ivanov V, Kalinovsky T et al (2005a) In vivo antitumor effect of ascorbic acid, lysine, proline and green tea
extract on human colon cancer cell HCT 116 xenografts in nude mice: evaluation of tumor growth and
immunohistochemistry. Oncol Rep 12 (3):421–425
Roomi MW, Ivanov V, Kalinovsky T et al (2005b) In vivo antitumor effect of ascorbic acid, lysine, proline and green tea
extract on human prostate PC-3 xenografts in nude mice: evaluation of tumor growth and immunohistochemistry. In Vivo
19(1):179–184
Roomi MW, Roomi NW, Ivanov V et al (2005c) Inhibitory effect of a mixture containing ascorbic acid, lysine, proline,
and green tea extract on critical parameters in angiogenesis. Oncol Rep 14 (4):807–815
Roomi MW, Ivanov V, Kalinovsky T, Niedzwiecki A, Rath M (2006 a) In vivo and in vitro anti-tumor effect of a unique
nutrient mixture on lung cancer cell line A-549. Exp Lung Res 32:441–453
Roomi MW, Ivanov V, Kalinovsky T, Niedzwiecki A, Rath M (2006b) In vitro and in vivo antitumor effect of ascorbic acid,
lysine, proline and green tea extract on human melanoma cell line A2058. In Vivo 20(1):25–32
Roomi MW, Roomi NW, Ivanov V et al (2006c) Inhibition of pulmonary metastasis of melanoma B16FO cells in C57BL/
6 mice by a nutrient mixture consisting of ascorbic acid, lysine, proline, arginine, and green tea extract. Exp Lung Res
32:517–530
Roomi MW, Ivanov V, Kalinovsky T et al (2006d) Effect of ascorbic acid, lysine, proline and green tea extract on human
osteosarcoma cell line MNNG-HOS xenographs in nude mice: evaluation of tumor growth and immunohistochemistry.
Med Oncol 23:411–417
Roomi MW, Ivanov V, Kalinovsky T et al (2007) A novel nutrient mixture containing ascorbic Acid, lysine, proline, and
green tea extract inhibits critical parameters in angiogenesis. In: Losso JN, Shahidi F, Bagchi D (eds) Anti-angiogenic
functional and medicinal foods. CRC Press, Taylor & Francis Group, New York, pp 561–580
Roomi MW, Kalinovsky T, Roomi NW et al (2009) A nutrient mixture suppresses hepatic metastasis in athymic nude
mice injected with murine B16FO melanoma cells. Biofactors 33:181–189
Roomi MW, Monterrey JC, Kalinovsky T et al (2010a) Comparative effects of EGCG, green tea, and a nutrient mixture
on the patterns of MMP-2 and MMP-9 expression in cancer cell lines. Oncol Rep 24:747–757
Roomi MW, Monterrey JC, Kalinovsky T et al (2010b) Inhibition of invasion and MMPs by a nutrient mixture in human
cancer cells: a correlation study. Oncol Rep 32:243–248
Roomi MW, Roomi NM, Kalinovsky T et al (2010c) In vivo and in vitro effect of a nutrient mixture on human
hepatocarcinoma cell line SK-Hep-1. Exp Oncol 32:84–91
Roomi MW, Kalinovsky T, Niedzwiecki A, Rath M (2010d) Pleiotropic effects of a micronutrient mixture on critical
parameters of bladder cancer. In: Nilsson WE (ed) Bladder cancer etymology, diagnosis and treatments. Nova Science
Publishers, New York, pp 229–243
Roomi MW, Kalinovsky T, RoomiNW et al (2012a) In vitro and in vivo inhibition of human Fanconi anemia head and
neck squamous carcinoma by a novel nutrient mixture. Int J Oncol 41(6):1996–2004
Roomi MW, Kalinovsky T, Roomi NW et al (2012b) Suppression of metastasis of intratesticular inoculation of B16FO
melanoma cells by a novel nutrient mixture in male athymic nude mice. Exp Ther Med 4:775–780
Roomi MW, Roomi NW, Kalinovsky T et al (2012c) Micronutrient synergy in the fight against hepatocellular carcinoma.
Cancers 4 (2):323–339
Roomi MW, Kalinovsky T, Niedzwiecki A, Rath M (2013) Modulation of u-PA, MMPs and their inhibitors by a novel
nutrient mixture in adult human sarcoma cell lines. Int J Oncol 43(1):39–49
Roomi MW, Kalinovsky T, RoomiNW et al (2014a) In vivo and in vitro effects of a nutrient mixture on breast 4T1 cancer
progression. Int J Oncol 44(6):1933–1944
Roomi MW, Kalinovsky T, Niedzwiecki A, Rath M (2014b) Modulation of uPA, MMPs and their inhibitors by a novel
nutrient mixture in human glioblastoma cell line. Int J Oncol 45:887–894
Roomi MW, Kalinovsky T, Cha J, Roomi NW et al (2014c) Effects of a nutrient mixture on immunohistochemical
localization of cancer markers in human cervical cancer HeLa cell tumor xenografts in female nude mice. Exp Ther Med
9(2):294–302
Roomi MW, Kalinovsky T, Roomi NW et al (2015a) In vitro and in vivo inhibition of human Fanconi anemia head and
neck squamous carcinoma by a phytonutrient combination. Int J Oncol 46 (5):2261–2266
1092
 Roomi MW, Bhanap B, Niedzwiecki A, RathM(2015b) Suppression of matrix metalloproteinases -2 and -9 in various
human cancer cell lines by a nutrient mixture. J Oncobiomark 2(2):17
Roomi MW, Cha J, Kalinovsky T et al (2015c) Effect of nutrient mixture on the localization of extracellular matrix
proteins in HeLa human cervical cancer xenograft in female nude mice. J Exp Ther Med 9:294–302
Roomi MW, Kalinovsky T, Rath M, Niedzwiecki A (2016a) A nutrient mixture inhibits glioblastoma xenograft U-87 MG
growth in male nude mice. Exp Oncol 38(1):54–56
Roomi MW, Kalinovsky T, Rath M, Niedzwiecki A (2016b) A nutrient mixture modulates ovarian ES-2 cancer
progression by inhibiting xenograft tumor growth and Cellular MMP secretion, migration and invasion. Int J Clin Exp Med
9(2):814–822
Roomi MW, Bhanap B, Niedzwiecki A, Rath M (2017a) Anti-cancer potential of a specific mixture of phytonutrients in
chondrosarcoma SW-1358 cells. J Cell Med Nat Health, October
Roomi MW, Kalinovsky T, Jariwalla N, et al (2017b) A specific mixture of phytonytrients inhibits cel proliferation,
secretion of MMPs and invasion through Matrigel in fibrosarcoma HT-1080 and melanoma A-2058 cells. J Cell Med Nat
Health, March
Roomi MW, Kalinovsky T, Niedzwiecki A, Rath M (2017c) A specific mixture of nutrients suppresses ovarian cancer A-
2780 tumor incidence, growth and metastasis to the lungs. Nutrients 9:303–314
Roomi MW, Bhanap B, Niedzwiecki A, Rath M (2018) Inhibition of tumor growth and metastasis by a novel nutrient
mixture of inoculation of mouse mammary 4T1 carcinoma in kidney of female Balb/c mice. J Cell Med Nat Health, July
Saha A, Kuzuhara T, Echigo N et al (2010) New role of (-)-epicatechin in enhancing the induction of growth inhibition
and apoptosis in human lung cancer cells by curcumin. Cancer Prev Res (Phila) 3 (8):953–962
Satoh K, Sakagami H (1997a) Effect of copper and iron ions on cytotoxicity induced by ascorbate, gallate and caffeate.
Anticancer Res 17(3C):2181–2184
Satoh K, Sakagami H (1997b) Effect of cysteine N-acetyl-L-cysteine and glutathione on cytotoxic activity of
antioxidants. Anticancer Res 17(3C):2175–2179
Satoh K, Kadofuku T, Sakagami H (1997) Copper, but not iron, enhances apoptosis-inducing activity of antioxidants.
Anticancer Res 17(4A):2487–2490
Shimizu M, Shirakami Y, Sakai H et al (2008) (-)-Epigallocatechin gallate suppresses azoxymethane-induced colonic
premalignant lesions in male C57BL/KsJdb/db mice. Cancer Prev Res (Phila) 1:298–304
Simone CB, Simone NL, Simone V et al (2007) Antioxidants and other nutrients do not interfere with chemotherapy or
radiation therapy and can increase kill and increase survival, Part 2. Altern Ther Health Med 13(2):40–47
Somers-Edgar TJ, Scandlyn MJ, Stuart EC et al (2008) The combination of epigallocatechin gallate and curcumin
suppresses ER alpha-breast cancer cell growth in vitro and in vivo. Int J Cancer 122 (9):1966–1971
Suppipat K, Park CS, Shen Y et al (2012) Sulforaphane induces cell cycle arrest and apoptosis in acute lymphoblastic
leukemia cells. PLoS One 7(12):e51251. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0051251
Taketo MM (2011) Reflections on the spread of metastasis to cancer prevention. Cancer Prev Res (Phila) 4(3):324–
328
Tang S, Singh C, Nall D et al (2010) The dietary bioflavonoid quercetin synergizes with epigallocathechin gallate
(EGCG) to inhibit prostate cancer stem cell characteristics, invasion, migration and epithelialmesenchymal transition. J
Mol Sign 5:14. https://doi.org/10.1186/1750-2187-5-14
Taper H (2008) Altered deoxyribonuclease activity in cancer cells and its role in non toxic adjuvant cancer therapy with
mixed vitamins C and K3. Anticancer Res 28(5A):2727–2732
Vasileva IN, Bespalov VG, Baranenko DA (2016) Radioprotective and apoptotic properties of a combination of a-
tocopheryl acetate and ascorbic acid. Bull Exp Biol Med 161(2):248–251
Verrax J, Cadrobbi J, Delvaux M et al (2003) The association of vitamins C and K3 kills cancer cells mainly by
autoschizis, a novel form of cell death. Basis for their potential use as coadjuvants in anticancer therapy. Eur J Med
Chem 38(5):451–457
Wang P, Heber D, Henning SM (2012) Quercetin increased the antiproliferative activity of green tea polyphenol (-)-
epigallocatechin gallate in prostate cancer cells. Nutr Cancer 64(4):580–587
Wang P, Heber D, Henning SM (2013) Quercetin increased bioavailability and decreased methylation of green tea
polyphenols in vitro and in vivo. Food Funct 3(6):635–642
Wang P, Wang B, Chung S et al (2014a) Increased chemopreventive effect by combining arctigenin, grean tae
polyphenol and curcumin in prostate and breast cancer cells. RSC Adv 4(66):35242–35250
Wang P, Vadgama JV, Said JW et al (2014b) Enhanced inhibition of prostate cancer xenograft tumor growth by
combining quercetin and green tea. J Nutr Biochem 25(1):73–80
Weitsman GE, Koren R, Zuck E et al (2005) Vitamin D sensitizes breast cancer cells to the action of H2O2:
mitochondria as a convergence point in the death pathway. Free Radic Biol Med 39 (2):266–278
Yang W-H, Xu J, Mu J-B, Xie J (2017) Revision of the concept of antiangiogenesis and its applications in tumor
treatment. Chronic Dis Transl Med 3(1):33–40
Yoshida S, Ono M, Shono T et al (1997) Involvement of interleukin-8, vascular endothelial growth factor and basic
fibroblast growth factor in tumor necrosis factor α-dependent angiogenesis. Mol Cell Biol 17:4015–4023
Yun J, Mullarky E, Changyuan L et al (2015) Vitamin C selectively kills KRAS and BRAF mutant colorectal cancer cells
by targeting GAPDH. Science 350(6266):1391–1396
Zheng QS, Sun XL, Wand CH (2002) Redifferentiation of human gastric cancer cells induced by ascorbic acid and
sodium selenite. Biomed Environ Sci 15:223–232
1093
 Zhou DH, Wang X, Yang M et al (2013) Combination of low concentration of (-)-epigallocatechin gallate (EGCG) and
curcumin strongly suppresses the growth of non-small cell lung cancer in vitro and in vivo through causing cell cycle
arrest. Int J Mol Sci 14 (6):12023–12036

1094
 Nutracêuticos para controle de carrapatos, pulgas e
outros ectoparasitas
Ramesh C. Gupta, Robin B. Doss, Ajay Srivastava, Rajiv Lall e Anita Sinha

Resumo
Os carrapatos, pulgas, mosquitos e outros ectoparasitas, além de incômodos, transmitem
doenças infecciosas em animais de companhia, gado e na fauna. O uso de
ectoparasiticidas em animais de companhia e de fazenda parece ser inevitável.
Atualmente, inseticidas sintéticos de várias classes são usados para combater
ectoparasitas em animais. Alguns dos inseticidas sintéticos são usados como ovicidas ou
larvicidas, enquanto outros são usados como adulticidas. Mas devido à sua maior
toxicidade, falta de toxicidade seletiva e resistência a pesticidas em insetos, seu uso está
em declínio. Nas últimas duas décadas, a busca por produtos naturais como alternativa
aos pesticidas sintéticos foi reconhecida. Este capítulo descreve, alguns, biopesticidas
que podem ser usados para controlar ectoparasitas em animais de estimação e de
fazenda.
Palavras-chave: Nutracêuticos · Biopesticidas · Ectoparasitas · Ectoparasiticidas ·
Ovicidas · Larvicidas · Adulticidas

R. C. Gupta · R. B. Doss Toxicology Department, Breathitt Veterinary Center, Murray State University,
Hopkinsville, KY, USA e-mail: rgupta@murraystate.edu
A. Srivastava · R. Lall · A. Sinha Vets Plus Inc., Menomonie, WI, USA

1. Introdução
Os carrapatos sugadores de sangue, pulgas, mosquitos, moscas picadoras e outros
ectoparasitas comumente infestam animais de estimação, gado e vida selvagem. Esses
ectoparasitas representam um sério problema de saúde global, pois transmitem doenças
infecciosas e, em alguns casos, causam dermatite atópica. Portanto, o uso de
ectoparasiticidas em animais de companhia e de fazenda parece ser inevitável.
Atualmente, inseticidas sintéticos de várias classes são usados para combater
ectoparasitas em animais (Gupta 2006; Marrs, 2012; Marrs e Dewhurst 2012). Alguns dos
inseticidas sintéticos são usados como ovicidas ou larvicidas, enquanto outros são usados
como adulticidas. Atualmente, os produtos ectoparasitários comumente usados em
animais de estimação incluem Frontline, Advantage, Revolution, Certifect, Activyl, Parastar
Plus, Bio Spot Defense, VetGuard, Vectra-3D e Seresto. Esses produtos podem ter um
1095
inseticida individual ou múltiplo (fipronil, imidaclopride, selamectina, amitraz, etofenprox,
indoxacarbe, dinotefurano, permetrina, cifenotrina ou espinosade). Alguns desses
produtos também possuem butóxido de piperonila para sinergizar o efeito da
piretrina/piretróide e do s-metopreno como larvicida.

Atualmente, os repelentes de insetos químicos sintéticos mais amplamente usados são

dimetil ftalato (DMP), N, N-dietil-mtoluamida (DEET) e picaridina. O DEET é recomendado
pela American Academy of Pediatrics (AAP), a EPA e o CDC por suas propriedades
repelentes de insetos. Esses produtos químicos são eficazes contra mosquitos e outros
insetos que picam, mas são conhecidos por produzir efeitos adversos, como dermatite de
contato, encefalopatia tóxica em crianças e erupções cutâneas (revisado em Kim et al.
2005; Kitchen et al. 2009).

Devido à maior toxicidade, falta de toxicidade seletiva, desenvolvimento de resistência de

insetos a inseticidas sintéticos e custos crescentes (OMS 1992; Gupta 2006; Bissinger e
Roe 2010; Nicoletti et al. 2016a, b; Lin 2015; Mougabure-Cueto e Picollo 2015), seu uso
está diminuindo. Durante as últimas duas décadas, a busca por produtos naturais como
uma alternativa ecológica que substitua os pesticidas sintéticos foi reconhecida como uma
necessidade (Berenbaum 1989; Castillo et al. 1998; Purohit et al. 2011; Wink 2012). Os
pesticidas botânicos têm sido usados por pelo menos 2.000 anos na Ásia e no Oriente
Médio (Thacker 2002; Isman e Machial 2006). Até agora, milhares de plantas foram
testadas para repelência de insetos e efeitos inseticidas. Intensos esforços de pesquisa
estão em andamento para encontrar extratos de plantas e fitotóxicos que tenham efeitos
repelentes, larvicidas e adulticidas contra carrapatos, pulgas, piolhos, moscas, mosquitos
e outros ectoparasitas. A inibição de enzimas, como acetilcolinesterase (AChE),
butirilcolinesterase (BuChE), tirosinase, α-amilase, endonucleases, celulase e outras, é
usada para controle de insetos, alterando o sistema nervoso central (SNC) e crescimento
(Sami 2014; Sami et al. 2016; Pulido et al. 2017). Alguns extratos de plantas ou
fitoquímicos também podem apresentar supressão do apetite, redução da atividade
reprodutiva ou toxicidade direta em insetos predadores (D'Incao et al. 2013).
Curiosamente, Weldon et al. (2011) também relataram que alguns compostos naturais
aplicados topicamente (presentes na casca de cítricos) e monoterpenos, incluindo
geraniol, citronelol, citral, carveol, acetato de geranila, α-terpineol, acetato de citronelila e
carvona, são convertidos em impedimentos de artrópodes mais potentes quando oxidado
no tegumento de animais ungidos.

Nos países em desenvolvimento, os extratos de plantas são comumente usados para

repelir ou matar carrapatos, moscas e outros ectoparasitas. Por exemplo, 28 plantas da
1096
Etiópia mostraram atividades de repelência promissoras contra carrapatos Rhipicephalus
pulchellus adultos, com Calpurnia aurea exibindo a maior toxicidade para os carrapatos
(Zoroloni 2007). Atualmente, nos EUA e também na Europa, o uso de biopesticidas está
se tornando popular (Jaenson et al. 2006; Garboui 2008). Este capítulo descreve alguns
biopesticidas que podem ser usados para controlar ectoparasitas em animais de
estimação e de fazenda. Uma lista parcial de biopesticidas é fornecida na Tabela 1.

Tabela 1 Lista de plantas com propriedade repelente de insetos e/ou inseticida

Fonte Biopesticida Bioatividade Referências
Efeito repelente de insetos, Nchu (2004), Weiner et
Allium sativum, A. al. (2009), McGaw e Eloff
inseticida, carrapato, inibidor
Ursinum, A. porrum, Compostos organossulfurados, (2010), Singh e Singh
de tripanotiona redutase, (2010), Goncharov et al.
A. cepa (alho e alicina e ajoene
tripanocida, leishmanicida e (2016), Krstin et al.
cebola)
antioxidante (2018a, b).

Aristeguietia
Dois diterpenóides labdane
glutinosa
Azadiractina A, di-n-
propildissulfeto, meliacina,
Azadirachta indica
meliacinol, meliatetraolenol,
(árvore de nim)
sesquiterpeno, salannin, nimbin
e nimbolid
2-undecanona derivada de
BioUD®
tomateiros selvagens
Calpurnia aurea - Repelente de carrapatos
Anti-Trypanosoma cruzi
Ovicida, larvicida,
mosquitocida, antioxidante,
antiinflamatório,
imunoestimulante,
espermicida, antibacteriano,
antiviral, antifúngico e
repelente de insetos
Repelente de insetos
Varela et al. (2012, 2014)
Mulla e Tianyun (1999),
Okumu et al. (2007),
Kumar e Navaratnam
(2013), Benelli et al.
(2015, 2016), Kumar et
al. (2016), Nicoletti et al.
(2016a, b)
Bissinger et al. (2009)
Zoroloni (2007)

Folha de mamona Inibidores de tripsina Larvicida e inseticida Rossi et al. (2012)

Ansari e Razdan (1995),
Cymbopogon Kim et al. (2005),
Sakulku et al. (2009),
nardus, C. Citronela, citronelal, 1,8-cineol,
Repelente de insetos Goodyer et al. (2010),
winterianus Z-citral, α-citral e α-pineno Miro Specos et al.
(citronela) (2010), Maia e Moore
(2011)

Eucalyptus
Globoidnan A Repelente de carrapatos Mkolo (2008)
globoidea
Eucalyptus
citriodora, E. Trigg (1996), Barasa et
Repele mosquitos, moscas al. (2002), Carroll e Loye
globulus (óleo de P-metano-3,8-diol (2006) e Maia e Moore
que picam e mosquitos
eucalipto com (2011)
limão)
Repelente de mosquitos,
insetos, acaricida, ovicida, El-Hag et al. (1999), Kim
Eugenia et al. (2003), Yang et al.
Sesquiterpenos, eugenol, timol, larvicida, antimicrobiano,
caryophyllata (óleo (2003), Jirovetz et al.
carvacrol, cinamaldeído antiviral, antifúngico, (2006), Chaieb et al.
de cravo)
antioxidante e (2007), Shapiro (2012)
antiinflamatório
(-) - 10-Epi-γ-eudesmol,
Pelargonium
citronelol, linalol, geraniol, Repelente de insetos,
graveolens (óleo de Tabanca et al. (2013)
isomentona, formato de geranil, repelente de carrapatos
gerânio)
β-cariofileno, germacreno D, etc.
Lavandula Linalol, acetato de linalil, 1,8- Repelente de carrapatos,
Mkolo (2008), Attia et al.
angustifolia cineol, cânfora, β-pineno e repelente de mosquitos, (2016)
(lavanda) terpineno-4-ol inseticida

1097
 Tabela 1 Lista de plantas com propriedade repelente de insetos e/ou inseticida
Lippia javanica - Anti-carrapato Nchu (2004)

Inseticida, antioxidante,
Sun (2007), Kim et al.
antiinflamatório,
D-Limonene D-Limonene (2013), D-Limonene
antibacteriano e (2017)
antifúngico
Melia azedarach L. Triterpenos, limonóides, Anti-Triatoma infestans, Han et al. (1991),
Carpinella et al. (2003),
(árvore de melianol, melianona, vanilina e inseticida, repelente e Szewczuk et al. (2003),
cinamomo) ácido vanílico antialimentador Dadé et al. (2018)

Larvicida, inseticida,
Mentha piperita Ansari et al. (1999),
repelente, crescimento e Kumar et al (2011)
(hortelã-pimenta)
inibição da reprodução
Eugenol, isoeugenol, acetato de
Repelente de mosquitos e
Pinus longifolia eugenil, K-terpineol, K-pineno, B-
larvicida (somente em alta Ansari et al. (2005)
(óleo de pinho) pineno, cineol, cânfora e
concentração)
cariofileno
Sargachromenol, ácido
Roldana barba- Inibidor do crescimento de
sargaidroquinóico e ácido Céspedes et al. (2004)
johannis insetos
sargaquinóico
Senna italica ssp. Efeito acaricida, carrapato,
- Thembo (2006)
arachoides anti alimentador
Tagetes minuta Anti-carrapato, mosquito-
Terpeno (ocimenona) Green et al. (1991)
(óleo de calêndula) larvicida
α-Pineno, β-pineno,
Tanacetum vulgare pinocamfona, 1,8-cineol, α-
Repelente de carrapatos Pålsson et al. (2008)
L. tujona, β-tujona, verbenol e
verbenona
Thymus vulgaris α-terpineno, carvacrol, timol, p- Repelente de insetos e Avaliado em Maia e
Timol cimeno, linalol e geraniol inseticida Moore (2011)

Tithonia diversifolia Lactonas sesquiterpênicas e Inibidor de tirosina, repelente Pulido et al. (2017)
(girassol mexicano) compostos fenólicos e inseticida

2. Nutracêuticos para o controle de carrapatos, pulgas e outros

ectoparasitas
2.1 Extrato de Neem

A árvore do Neem é nativa do subcontinente indiano, Austrália, África e América Central e

do Sul. O extrato da árvore de nim exerce atividades antidiabética, antioxidante,
antiinflamatória, imunoestimulante, antitumoral, antimicrobiana (antibacteriana, antiviral e
antifúngica), antiparasitária (inseticida e anti-helmíntica), doenças de pele, febre,
hepatoprotetora, veneno de cobra e espermicida (Kumar e Navaratnam 2013; Kumar et al.
2016). Antigos textos indianos o chamam de “o curador de todas as doenças”. A Academia
Nacional de Ciências publicou um relatório em 1992 intitulado “Neem: Uma árvore para
resolver problemas globais” (NAS 1992). Em 2012, as Nações Unidas declararam a
árvore do neem como a “Árvore do Século XXI”.

1098
A importância dos produtos do neem para controlar artrópodes, especialmente de
importância médica e veterinária, é reconhecida há mais de meio século (OMS 1981;
Vietmeyer 1992; Kumar e Navaratnam 2013: Nicoletti et al. 2016a, b; Benelli et al . 2015,
2016). Os produtos de Neem exibem uma ampla gama de efeitos, incluindo
antialimentação (Tianyun e Mulla 1998; Lucantoni et al. 2006), ovicida (Tianyun e Mulla
1998; Abdel-Ghaffar et al. 2012), larvicida (Sinniah et al. 1994; Ziba 1995; Howard et al.
2011; Nicoletti et al. 2012), supressão de fecundidade (Tianyun e Mulla 1998), regulação
do crescimento de insetos (Mordue e Blackwell 1993; Mordue e Nisbet 2000) e repelência
(Sharma e Dhiman 1993; Sharma et al. 1993; Singh et al. 1996). Simmonds et al. (2004)
comparou a atividade antialimentação e inseticida dos produtos de fotooxidação de
nimbina e salanino com limonóides de nim. A estrutura química da azadiractina A é
mostrada na Fig. 1.

Fig. 1 Estrutura química da azadiractina

A

Em uma série de publicações (Sami e Akhtar 1993; Sami e Shakoori 2007; Sami 2014;
Sami et al. 2016) mostraram que os fitoconstituintes do nim podem produzir efeito
inseticida ao atingir várias moléculas, como alfa-amilase, acetilcolinesterase,
endonucleases, celulase e outros. Os extratos de neem têm hormônios que imitam e
interferem no ciclo de vida dos parasitas, inibem sua capacidade de alimentação e
previnem a eclosão dos ovos. Abdel-Ghaffar et al. (2012) encontraram um único
tratamento de piolhos com extrato de semente de neem altamente eficaz.

Partes diferentes (raízes, cascas, folhas, frutos e sementes) da árvore de neem podem
conter até 300 fitoquímicos. Recentemente, Benelli et al. (2016) relataram que as
formulações de óleo de neem geralmente mostram uma gama de diferentes quantidades
de azadiractinas, variando de 1000 a 4000 mg/kg. A atividade inseticida do extrato de
neem e seus fitoconstituintes é relatada em cerca de 100 artigos publicados. A atividade

1099
reguladora do crescimento de insetos de moléculas transmitidas pelo neem enfraquece o
sistema de defesa da cutícula dos instares jovens, causando fácil penetração de
organismos patogênicos. As formulações emulsificadas de óleo de neem mostraram um
excelente potencial larvicida contra diferentes gêneros de mosquitos, incluindo Aedes,
Anopheles e Culex (revisado em Benelli et al. 2016). A atividade mosquicida foi
demonstrada para compostos organossulfurados voláteis de sementes de neem (di-n-
propil-dissulfeto, LC50 = 66 ppm contra larvas de terceiro instar de Aedes aegypti)
(Balandrin et al. 1988).

O uso de óleo de neem como inseticida, repelente de insetos e em atividades

antialimentantes foi aprovado pela US EPA (2012). Os dois inseticidas mais comumente
usados são NeemAzal e Fortune AZA, e ambos são extratos de grãos de nim. O efeito
mosquicida do óleo de semente de neem parece ser devido à azadiractina A, salannin,
nimbin e nimbolida (Nicoletti et al. 2012, 2016a, b). Benelli et al. (2013, 2015, 2016)
enfatizou ainda que vários constituintes menores do neem são capazes de sinergizar o
efeito inseticida dos constituintes principais. Atualmente, nos EUA e em outros países,
dezenas de biopesticidas à base de óleo de neem estão disponíveis no mercado. Mas na
comunidade da UE, há apenas um produto que é o extrato de margosa, que é derivado da
extração com CO2 supercrítico de grãos de neem. A casca e as raízes de uma árvore de
neem parecem ser excelentes fontes de bioinseticidas para o controle de ectoparasitas
como pulgas e carrapatos.

Foi sugerido que, ao contrário dos inseticidas sintéticos, os produtos do neem são menos
propensos a induzir resistência a insetos devido aos seus múltiplos modos de ação (Mulla
e Tianyun 1999).

2.2 Melia azedarach L.

Melia azedarach L. (também chamada de árvore chinaberry ou cinamomo) é originária da

região do Himalaia na Índia. Seus constituintes fitoquímicos incluem limonóides
triterpênicos, melianol, melianona, meliandiol, vanilina e ácido vanílico (Han et al. 1991). O
extrato acetônico de M. azedarach demonstrou exercer atividades inseticida e repelente
contra Triatoma infestans (barbeiro) (Dadé et al. 2018), um vetor do Trypanosoma cruzi,
um parasita monoprotozoário responsável pela transmissão da doença de Chagas em
humanos e cães. Além de antiparasitários (Valladares et al. 1999), os extratos preparados
a partir de Melia azedarach L. possuem propriedades antibacterianas, antivirais,
antifúngicas e antioxidantes.

1100
2.3 Senna italica ssp. arachoides

Thembo (2006) demonstrou que Senna italica ssp. arachoides, extratos de acetato de
etila tiveram um efeito acaricida dependente da concentração em carrapatos Hyalomma
marginatum. Quando extratos aquosos de S. italica ssp. arachoides foram fornecidos a
porquinhos-da-índia e coelhos, o desempenho alimentar de H. m adulto pareciam estar
prejudicados.

2.4 Alho e Cebola

Os benefícios dos bulbos de alho (Allium sativum) e cebola (Allium cepa) na saúde e nas
doenças (incluindo doenças parasitárias) são reconhecidos desde os tempos antigos. A
análise química dos extratos dessas duas plantas revelou a presença de vários
metabólitos secundários de enxofre (alicina, ajoene e outros) e um (zwiebelane) na cebola
(Singh e Singh 2010; Goncharov et al. 2016; Krstin et al. 2018a, b).

O extrato de alho foi considerado eficaz contra um hospedeiro de protozoários, incluindo

Opalina ranarum, Balantidium entozoon, Entamoeba histolytica, Trypanosoma,
Leishmania, Leptomonas e Crithidia (Greenstock e Larrea 1972: Saleheen et al. 2004;
Wabwoba et al. 2010; Sadeghi-Nejad e Saki 2014; Goncharov et al. 2016). Nchu (2004)
analisou os efeitos repelentes de extratos de espécies de Allium, bem como a toxicidade
direta, contra carrapatos adultos de Hyalomma marginatum. Os resultados revelaram que
os extratos de acetona de A. porrum exibiram alto índice de repelência (65-79,48%) e o
extrato de diclorometano de A. sativum foi tóxico para 100% dos carrapatos dentro de
uma hora de exposição.

Recentemente, Krstin et al. (2018a) avaliaram as atividades antiparasitárias do alho e da

cebola contra Trypanosoma brucei brucei e Leishmania tarentolae. Os extratos de alho e
cebola inibiram o crescimento de tripanossomas e leishmanias e mataram parasitas de
maneira eficiente. Os extratos inibiram a atividade da tripanotiona redutase
irreversivelmente em Trypanosoma brucei através da formação de ligações dissulfeto
entre grupos SH de compostos redox vitais e metabólitos secundários contendo enxofre.
Krstin et al. (2018b) relataram que os extratos de diclorometano de Allium ursinum e
Tulbaghia violacea são capazes de inibir a tripanotiona redutase e, consequentemente,
mediar a inibição do crescimento dos parasitas. O mecanismo de atividade antiparasitária
do alho e da cebola parece estar relacionado à quantidade e ao perfil dos compostos
contendo enxofre. O extrato de alho foi considerado cinco vezes mais potente do que o
extrato de cebola para o efeito tripanocida devido à abundância de compostos
organossulfurados (especialmente ajoene) e inibição da atividade da tripanotiona
redutase. Esses autores e outros confirmaram a hipótese de que os compostos contendo
1101
enxofre produzidos na via da alinase, como no alho e na cebola, são responsáveis pela
atividade antiparasitária (Weiner et al. 2009: Krstin et al. 2018a, b). Deve ser apontado
que o extrato de alho também diminuiu o potencial da membrana mitocondrial
significativamente de uma maneira dependente da dose em tripanossomos (Krstin et al.
2018a) e pode levar à apoptose em protozoários (Ly et al. 2003). Foi relatado que a
combinação de alho e cebola com drogas tripanocidas e leishmanicidas comuns resultou
em um efeito sinérgico ou aditivo para aumentar a atividade antiparasitária (Krstin et al.
2018a).

2.5 Citronela e Citronelal

O óleo de citronela é obtido a partir de uma erva perene Cymbopogon nardus ou

Citronella winterianus. Tem sido usado como repelente de insetos desde 1948. O óleo de
citronela tem muitos fitoconstituintes (como 1,8-cineol, citronelal, Z- e α-citral e α-pineno),
mas citronelal ou rodinal (3,7-dimetiloct -6-en-1-al), que é um monoterpenóide, é o
principal composto que dá um aroma distinto para repelência de insetos. A estrutura
química do citronelal é mostrada na Fig. 2.

Kim et al. (2005) avaliaram a real eficácia repelente de dois compostos naturais (citronela
e citronelal) in vitro e em campo contra Culex pipiens pallens. A porcentagem de
repelência das três bandas controladas (impregnada com 30% de extrato de citronela,
15% de extrato de citronela e 30% de extrato de citronela) foi calculada em 86%, 73% e
78%, respectivamente, in vitro e 80% na banda impregnado com extrato de citronela 30%
em campo. Parece que esses dois produtos químicos de aroma natural têm alta eficácia
repelente contra mosquitos, pulgas, carrapatos e outros vetores de insetos. Atualmente, a
citronela é um dos repelentes naturais mais usados no mercado, com uma concentração
de 5–10% (Maia e Moore 2011). Foi relatado que o efeito repelente da citronela é
prolongado pela taxa de liberação retardada usando nanoformulação (Sakulku et al. 2009)
ou microencapsulação (Miro Specos et al. 2010).

Como repelente de insetos, o citronelal está disponível comercialmente em erva-cidreira,

e a citronela está disponível em sprays, velas, loções, géis e toalhetes. Nem a citronela
nem o citronelal no óleo de citronela têm atividade inseticida. Quando usados de acordo
com o rótulo, não se espera que os produtos de citronela causem danos a animais de
estimação, humanos ou ao meio ambiente. Com base em estudos com animais de
laboratório, o óleo de citronela apresenta riscos mínimos ou nenhum risco para a vida
selvagem.

1102
 Fig. 2
Estrutura Fig. 3 Fórmula estrutural do
química do Limoneno
citronelal
(principal
componente
do óleo de
citronela)

2.6 D-Limoneno

O D-Limoneno (1-metil-4- (1-metiletenil) cclohexano) é um monoterpeno monocíclico,

obtido a partir de cascas de frutas cítricas (limão e laranja). A fórmula estrutural do D-
limoneno é mostrada na Fig. 3.

D-Limonene é comumente usado como fragrância em perfumaria, loções pós-barba,

produtos de banho, produtos de higiene pessoal, suplementos dietéticos,
quimioprevenção e inseticidas botânicos (D-Limonene 2017). Possui propriedades
antioxidantes, antiinflamatórias, antibacterianas e antifúngicas. Além disso, o D-limoneno
aumenta o peristaltismo. O D-Limonene está listado no Código de Regulamentações
Federais como geralmente reconhecido como seguro (GRAS) para um agente
aromatizante. Atualmente, vários produtos com D-limoneno, como xampus, sabonetes,
etc., estão disponíveis como ectoparasiticidas para cães e gatos.

O D-Limoneno é considerado como tendo uma toxicidade bastante baixa. O LD 50 oral para
D-limoneno em camundongos machos e fêmeas é relatado como 5,6 e 6,6 g/kg de peso
corporal, respectivamente, enquanto o LD 50 em ratos machos e fêmeas é relatado como
4,4 e 5,1 g/kg de peso corporal, respectivamente (Sun 2007). Em 1990, o National
Toxicology Program (NTP) investigou a toxicidade do D-limoneno (> 99% puro) em doses
variando de 413 a 6600 mg/kg diariamente administradas a ratos e camundongos 5
dias/semana por 3 semanas. Nenhum sinal de toxicidade relacionada ao composto foi
observado em doses < 1650 mg/kg por dia. O D-Limoneno não apresenta risco
mutagênico, carcinogênico ou nefrotóxico para humanos. O D-Limonene aplicado na pele
pode causar irritação, mas parece ser seguro para uso (Kim et al. 2013).

1103
2.7 Óleo de Lavanda

O óleo de lavanda é um óleo essencial obtido da Lavandula angustifolia. A análise

fitoquímica de Lavandula angustifolia por GC/MS revelou a presença de linalol (38,57%),
seguido de acetato de linalila (29,95%), 1,8-cineol (13,66%), cânfora (13,13%), β-pineno
(3,14%) e terpineno-4-ol (1,54%) (Attia et al. 2016). Ele tem sido usado na aromaterapia e
como repelente de insetos (mosquitos, pulgas, moscas e outros insetos que picam) por
muitos séculos. O óleo de lavanda exerce propriedades analgésicas, inseticidas,
antissépticas e calmantes. Essas propriedades da lavanda são adequadas tanto para
prevenir picadas de insetos quanto para acalmar mordidas e picadas de insetos. O óleo
de lavanda é usado para prevenir a propagação de infecções causadas por picadas de
insetos e controlar a coceira e a inflamação frequentemente associadas às picadas de
insetos. Os produtos que contêm lavanda costumam ser encontrados na forma de loção
para a pele, sabonete e xampu. O óleo de lavanda (5%) tem sido usado para tratar a
irritação da pele causada por ácaros que põem ovos sob a pele e sarna. Em caso de
inflamação causada por picada de mosquito, aplique uma compressa fria e a mistura de
óleo de lavanda e melaleuca, 1–2 gotas a cada hora ou até que a inflamação desapareça.

Se o óleo de lavanda causar irritação na pele no local da aplicação, considere misturá-lo

com azeite de oliva (50:50). Em altas doses, a ingestão de óleo de lavanda pode causar
desregulação endócrina ao inibir os efeitos do androgênio e imitar as ações do estrogênio,
produzindo assim a ginecomastia.

2.8 Óleo de hortelã-pimenta

O óleo de hortelã-pimenta é obtido da Mentha piperita. A hortelã-pimenta tem repelente

natural de insetos e propriedades larvicidas (Ansari et al. 1999). Em caso de coceira de
picada de mosquito, a mistura de óleo de hortelã-pimenta (10 gotas) e óleo de melaleuca
(10 gotas) em um óleo carreador pode aliviar o desconforto por efeito calmante e
cicatrizante.

2.9 Óleo de pinho

O óleo de pinho é obtido da Pinus longifolia. O pinho tem vários fitoquímicos, incluindo
eugenol, isoeugenol, acetato de eugenila, K-terpineol, cariofileno, K-pineno, B-pineno, B
cineol e cânfora (Ansari et al. 2005). Ansari et al. (2005) descobriram que o óleo de pinho
apresentou forte ação repelente contra o An. culicifacies (vetor da malária) e Cx.
quinquefasciatus (mosquito-praga), mas o efeito larvicida foi observado apenas em doses
muito mais altas.

1104
2.10 Óleo de limão eucalipto (Eucalyptus citriodora)

Eucalyptus citriodora é uma árvore de goma com aroma de limão. O óleo de eucalipto (um
óleo essencial) é extraído das folhas e consiste em vários fitoconstituintes, incluindo p-
metano-3,8-diol e eucamol (Barasa et al. 2002; Maia e Moore 2011). O óleo protege a
pele de mosquitos, carrapatos e outros insetos que picam, e o efeito dura várias horas.
Como a citronela, o óleo de eucalipto precisa ser aplicado regularmente para manter a
proteção da pele. Trigg (1996) avaliou repelente de insetos derivado de eucalipto (PMD),
tendo p-metano-3,8-diol como ingrediente ativo, e comparou seu efeito repelente com o
DEET. Os produtos à base de eucalipto forneceram proteção completa contra picadas de
insetos por 6–7,75 h e foram considerados tão eficazes quanto o DEET. Outro produto,
Mosi-guard Natural (MASTA, Londres, Reino Unido), compreendendo p-metano-3,8-diol e
isopulegol e citronela, está disponível no mercado como repelente de insetos (Carroll e
Loye 2006). Produtos repelentes de insetos derivados do eucalipto estão disponíveis na
forma de spray ou loção.

Em animais de laboratório, o p-mentano-3,8-diol não apresentou efeitos adversos, exceto

irritação ocular. Esses produtos apresentam riscos mínimos ou nenhum risco à vida
selvagem ou ao meio ambiente.

2.11 Óleo de Soja

O óleo de soja é um ingrediente ativo em um repelente de insetos comercial

BiteBlocker™, que está no mercado desde 2001. Em um estudo experimental, Campbell e
Gries (2012) relataram que o óleo de soja não apresentou efeito repelente contra Aedes
aegypti L.

2.12 Óleo de Cedro

O óleo de cedro é comumente pulverizado (nebulização) na pele de animais de estimação

para protegê-los de ectoparasitas. O óleo de cedro mata carrapatos, pulgas, moscas,
ácaros, mosquitos, mosquitos, larvas e outros insetos que picam. Também funciona como
repelente de insetos. O óleo de cedro tem efeito parasiticida e repelente duradouro e
deixa a cura anticoceira e um cheiro de cedro na pele do animal. É seguro usar em
cachorros e gatinhos também. O spray de óleo de cedro pode ser usado em carpetes
contra pulgas e carrapatos. O óleo dissolve ovos e larvas e prejudica a respiração dos
insetos, bloqueando os poros respiratórios.

2.13 Óleo de Gerânio

O óleo de gerânio é obtido das folhas e caules do Pelargonium capitatum ou P.

graveolens. Ele contém muitos fitoconstituintes, incluindo (-)-10-epi-γ-eudesmol, citronelol,
1105
linalol, geraniol, isomentona, formato de geranil, β-cariofileno, germacreno D, etc.
(Tabanca et al. 2013). A repelência ao carrapato deve-se principalmente ao (-)-10-epi-γ-
eudesmol. É recomendado que, para proteger a pele do cão, misture 20 gotas de óleo de
gerânio em 3 colheres de sopa de óleo de amêndoa e aplique de 3 a 4 gotas nas seções
do pelo do cão, especialmente na área da coleira. Usar óleo de amêndoa como carreador
aumenta a eficácia da solução, pois os carrapatos odeiam o odor de enxofre. O óleo de
gerânio pode não ser seguro para gatos.

2.14 Óleo de cravo

O óleo de cravo é extraído de Eugenia caryophyllata e consiste em vários fitoconstituintes,

incluindo sesquiterpenos, eugenol, timol, carvacrol e cinamaldeído (Zheng et al. 1992;
Jirovetz et al. 2006; Chaieb et al. 2007). O óleo de cravo repele mosquitos, carrapatos,
ácaros e outros insetos que picam (Kim et al. 2003; Shapiro 2012). Além disso, o óleo de
cravo exerce um efeito ovicida e larvicida contra Culex pipiens e Pediculus capitis (Yang
et al. 2003) e carrapatos e ácaros (El-Hag et al. 1999). O composto eugenol parece ser
responsável pela repelência de insetos, bem como pela atividade acaricida contra
Dermatophagoides farinae e D. pteronyssinus (Perrucci et al. 1995; Kim et al. 2003), além
de antioxidante, antiinflamatório, analgésico e antibacteriano atividades (Jirovetz et al.
2006; Chaieb et al. 2007). Os óleos de cravo devem ser usados em animais de estimação
com cautela, pois uma overdose pode resultar em toxicidade. Os sinais clínicos podem
incluir salivação, vômito, convulsão, tremores musculares e até morte. Como os humanos,
os animais que tomam AINEs, anticoagulantes ou medicamentos para diabetes ou
problemas cardíacos não devem ser tratados com óleo de cravo. Vale ressaltar que cães
e gatos podem ter uma reação muito mais intensa ao óleo de cravo do que humanos.

2.15 Óleo de tomilho

O óleo de tomilho é extraído do Thymus vulgaris. Ele contém muitos fitoconstituintes,

incluindo α-terpineno, carvacrol, timol, p-cimeno, linalol e geraniol (Maia e Moore 2011). A
fórmula estrutural do timol é mostrada na Fig. 4.

Fig. 4 Fórmula
estrutural do timol

O timol exibe efeitos repelentes de insetos e inseticidas. O mecanismo de ação do timol

em insetos não é bem compreendido. Sugere-se que o timol atue sobre as sinapses
neuronais bloqueando a produção de um neurotransmissor acetilcolina. Em Drosophila
1106
melanogaster, o timol exerce efeito inseticida ligando-se aos receptores GABA e inibindo a
atividade enzimática do citocromo P450 e da glutationa-S-transferase. O uso frequente de
timol em animais de estimação pode ser necessário, pois ele se decompõe por foto-
oxidação. Em animais de fazenda, o uso de timol parece ser impraticável, pois eles ficam
de frente para o sol a maior parte do dia. Devido à sua vida curta, o timol não deixa
resíduos nos alimentos, leite ou carne. O timol em animais de estimação deve ser usado
com cautela, pois pode ser irritante para a pele e os olhos e causar sensibilização da pele.
Em geral, o timol é considerado seguro, pois seu DL 50 oral é relatado como sendo 980
mg/kg e DL50 dérmico > 2.000 mg/kg de peso corporal em ratos.

3 Observações Finais e Orientações Futuras

Muitos ectoparasitas sugadores de sangue mordem ou picam a pele humana e animal;
causam inflamação, alergias e dermatite; e transmitemr doenças mortais. Vários produtos
vegetais estão disponíveis que exercem efeitos ovicidas, larvicidas, adulticidas e
repelentes contra carrapatos, pulgas, mosquitos e outros ectoparasitas picadores por
meio de múltiplos mecanismos. Esses são (1) facilmente disponíveis, (2) são baratos, (3)
são rapidamente biodegradáveis, (4) não deixam nenhum resíduo de inseticida na
comida/ração e (5) oferecem maior segurança para espécies não-alvo. Além disso, não há
desenvolvimento de resistência dos insetos. Alguns extratos de plantas importantes que
são comumente usados ou têm potencial para efeitos ectoparasiticidas ou repelentes de
insetos são discutidos neste capítulo. A busca por novos biopesticidas e repelentes com
maior eficácia e segurança continuará.

Agradecimentos Os autores gostariam de agradecer a Sra. Robin B. Doss por sua

assistência técnica na preparação deste capítulo.

Referências
Abdel-Ghaffar F, Al-Quraishy S, Al-Rasheid KA et al (2012) Efficacy of a single treatment of head lice with a neem seed
extract: an in vivo and in vitro study on nits and motile stages. Parasitol Res 110 (1):277–280
Ansari MA, Razdan RK (1995) Relative efficacy of various oils in repelling mosquitoes. Indian J Malariol 32:104–111
Ansari MA, Vasudevan P, Tandon M et al (1999) Larvicidal and mosquito repellent action of peppermint (Mentha
piperita) oil. Bioresour Technol 71:267–271
Ansari MA, Mittal PK, Razdan RK et al (2005) Larvicidal and mosquito repellent activities of pine (Pinus longifolia,
Family: Pinaceae) oil. J Vect Borne Dis 42:95–99
Attia S, Lognay G, Heuskin S et al (2016) Insecticidal activity of Lavandula angustifolia Mill against the pea aphid
Acyrthosiphon pisum. J Entomol Zool Stud 4(1):118–122
Balandrin MFS, Lee SM, Klocke JA (1988) Biologically active volatile organosulfur compounds from seeds of the neem
tree, Azadirachta indica (Meliaceae). J Agric Food Chem 36:1048–1054
Barasa SS, Ndiege IO, Lwande W et al (2002) Repellent activities of stereoisomers of p-methane-3,8-diols against
Anopheles gambiae (Diptera: Culicidae). J Med Entomol 39:736–741
Benelli G, Canale A, Conti B (2013) Eco-friendly control strategies against the Asian tiger mosquito, Aedes albopictus
(Diptera: Culicidae): repellency and toxic activity of plant essential oils and extracts. Pharmacol Online 47:44–51

1107
 Benelli G, Murugan K, Panneerselvam C et al (2015) Old ingredients for a few new recipe? Neem cake, a low-cost
botanical by-product in the fight against mosquito-borne diseases. Parasitol Res 114: 391–397
Benelli G, Canale A, Toniolo C et al (2016) Neem (Azadirachta indica): towards the ideal insecticide? Nat Prod Res.
https://doi.org/10.1080/14786419..2016.1214834
Berenbaum MR (1989) North American ethnobotanicals as source of novel plant-based insecticides. In: Arnason J,
Philogene B, Morand P (eds) Insecticides of plant origin. American Chemical Society, Washington, pp 11–24.
https://doi.org/10.1021/bk-1989-0387.ch002
Bissinger BW, Roe RM (2010) Tick repellents: past, present, and future. Pest Biochem Physiol 96:63–79
Bissinger BW, Apperson CS, Sonenshine DE et al (2009) Efficacy of the new repellent BioUD® against three species
of ixodid ticks. Exp Appl Acarol 48(3):239–250
Campbell C, Gries G (2012) Is soybean oil an effective repellent against Aedes aegypti? Canad Entomol 142(4):405–
415
Carpinella C, Defagó T, Valladares G et al (2003) Antifeedant and insecticide properties of a limonoids from Melia
azedarach (Meliaceae) with potential use for pest management. J Agr Food Chem 51:369–374
Carroll SP, Loye J (2006) PMD, a registered botanical mosquito repellent with DEET-like efficacy. J Am Mosq Control
Assoc 22:507–514
Castillo M, Martinez-Pardo R, Garcera MD et al (1998) Biological activities of natural sesquiterpene lactones and the
effect of synthetic sesquiterpene derivatives on insect juvenile hormone biosynthesis. J Agric Food Chem 46:2030–2035
Céspedes CL, Torres P, Marín JC et al (2004) Insect growth inhibition by tocotrienols and hydroquinones from Roldana
barba-johannis. Phytochemistry 65:1963–1975
Chaieb K, Hajlaoui H, Zmontar T et al (2007) The chemical composition and biological activity of clove essential oil,
Eugenia caryophyllata (Syzigium aromaticum L. Myrtaceae): a short review. Phytother Res 21:501–506
D’Incao MP, Kanak N, Fiuza LM (2013) Phytochemicals taken from plants with potential in management of Spodoptera
frugiperda (Lepidoptera: Noctuidae). J Biopest 6(2):182–192
Dadé M, Zeinsteger P, Bozzolo F et al (2018) Repellent and lethal activities of extracts from fruits of Melia azedarach
L. (Chinaberry, Meliaceae) against Triatoma infestans. Font Vet Sci 5:158. https://doi.org/10.3389/fvets.2018.00158
D-Limonene (2017) National Center for Biotechnology Information. US National Library of Medicine
El-Hag EA, El Nadi AH, Zaiton AA (1999) Toxic and growth retarding effects of three plant extracts on Culex pipiens
larvae (Diptera: Culicidae). Phytother Res 13:388–392
Garboui SS (2008) Plant-derived chemicals as tick repellents. Doctoral Dissertation, Uppsala University, Uppsala,
Sweden
Goncharov N, Orekhov AN, Voitenko N et al (2016) Organosulfur compounds as nutraceuticals. In: Gupta RC (ed)
Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity. Academic Press, Amsterdam, pp 555–568
Goodyer LI, Croft AM, Frances SP et al (2010) Expert review of the evidence base for arthropod bite avoidance. J
Travel Med 17:182–192
Green M, Singer JM, Sutherland DJ et al (1991) Larvicidal activity of Tagetus minuta (Marigold) towards Aedes aegypti.
J Am Mosq Control Assoc 7:282–286
Greenstock DL, Larrea Q (1972) Garlic as an insecticide. Doubleday Research Association, Braintree, England, p 12
Gupta RC (2006) In: Gupta RC (ed) Toxicology of organophosphate and carbamate compounds. Academic
Press/Elsevier, Amsterdam, pp 1–763
Han J, Lin WH, Xu RS et al (1991) Studies on the chemical constituents of Melia azedarach Linn. Yao Xue Xue Bao
26(6):426–429
Howard AFV, Adongo EA, Githure JVJ (2011) Effects of a botanical larvicide derived from Azadirachta indica (the neem
tree) on oviposition behavior in Anopheles gambiae s.s. mosquitoes. J Med Plant Res 5:1948–1954
Isman MB, Machial CM (2006) Chapter 2: Pesticides based on plant essential oils: from traditional practice to
commercialization. In: Rai M, Carpinella MC (eds) Naturally occurring bioactive compounds. Elsevier, Amsterdam, pp
29–44
Jaenson TGT, Garboui SS, Palsson K (2006) Repellency of oils of lemon eucalyptus, geranium, and lavender and the
mosquito repellent MyggA natural to Ixodes ricinus (Acari: Ixodidae) in the laboratory and field. J Med Entomol 43:731–
736
Jirovetz L, Buchbauer G, Stoilova I et al (2006) Chemical composition and antioxidant properties of clove leaf essential
oil. J Agr Food Chem 54:6303–6307
Kim EH, Kim HK, Choi DH et al (2003) Acaricidal activity of clove bud oil compounds against Tyrophagus putrescentiae
(Acari: Acaridae). Appl Entomol Zool 38:261–266
Kim JK, Kang CS, Lee JK et al (2005) Evaluation of repellency effect of two natural aroma mosquito repellent
compounds, citronella and citronellal. Entomol Res 35(2):117–120
Kim YW, Kim MJ, Chung BY et al (2013) Safety evaluation and risk assessment of d-limonene. J Toxicol Environ
Health Part B 16 (1):17–38
Kitchen LW, Lawrence KL, Coleman RE (2009) The role of the United States military in the development of vector
control products, including insect repellents, insecticides, and bed nets. J Vector Ecol 34:50–61
Krstin S, Sobeh M, Braun MS et al (2018a) Anti-parasitic activities of Allium sativum and Allium cepa against
Trypanosoma b. brucei and Leishmania tarentolae. Medicine 5:37

1108
 Krstin S, Sobeh M, Braun MS et al (2018b) Tulbaghia violacea and Allium ursinum extracts exhibit anti-parasitic and
antimicrobial activities. Molecules 23:313
Kumar VS, Navaratnam V (2013) Neem (Azadirachta indica): prehistory to contemporary medicinal uses to
humankind. Asian Pac J Trop Biomed 3:505–314
Kumar P, Mishra S, Malik A et al (2011) Insecticidal properties of Mentha species: a review. Ind Crop Prod 34(1):802–
817
Kumar D, Rahal A, Malik JK (2016) Neem extract. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity.
Academic Press, Amsterdam, pp 585–597
Lin N (2015) Insecticide resistance in mosquitos: impact, mechanisms, and research directions. Annu Rev Entomol
60:34–41
Lucantoni L, Giusti F, Cristofaro M et al (2006) Effects of neem extract on blood feeding, oviposition and oocyte
ultrastructure in Anopheles stephensi Liston (Diptera: Culicidae). Tissue Cell 38:361–371
Ly JD, Grubb DR, Lawen A (2003) The mitochondrial membrane potential (deltapsi(m)) in apoptosis: an update.
Apoptosis 8:115–128
Maia MF, Moore SJ (2011) Plant-based insect repellents: a review of their efficacy, development and testing. Malaria J
10(Suppl):S11
Marrs TC (2012) Insecticides that interfere with insect growth and development. In: Marrs TC (ed) Mammalian
toxicology of insecticides. RSC Publ, Cambridge, pp 221–253
Marrs TC, Dewhurst IC (2012) Toxicology of some insecticides not discussed elsewhere. In: Marrs TC (ed) Mammalian
toxicology of insecticides. RSC Publ, Cambridge, pp 288–301
McGaw LJ, Eloff JN (2010) Methods for evaluating efficacy of ethnoveterinary medicinal plants. In: Katerere DR,
Luseba D (eds) Ethnoveterinary botanical medicine. Herbal medicines for animal health. CRC Press, Boca Raton, FL, pp
1–24
Miro Specos MM, Garcia JJ, Tornesello J et al (2010) Microencapsulated citronella oil for mosquito repellent finishing
of cotton textiles. Trans R Soc Trop Med Hyg 104:653–658
Mkolo NM (2008) Anti-tick properties of some of the traditionally used plant-based products in South Africa. MSc
Thesis, University of Limpopo, South Africa.
Mordue (L)AJ, Blackwell A (1993) Azadirachtin; an update. Insect Physiol 39:903–924
Mordue (L)AJ, Nisbet AJ (2000) Azadirachtin from the neem tree Azadirachta indica: its actions against insects. Ann
Enomol Soc Brasil 29:615–632
Mougabure-Cueto G, Picollo MI (2015) Insecticide resistance in vector Chagas disease; Evolution, mechanisms and
management. Acta Trop 149:70–85
Mulla MS, Tianyun S (1999) Activity and biological effects of neem products against arthropods of medical and
veterinary importance. J Am Mosq Control Assoc 15(2):133–152
National Academies of Science (1992) Neem, a tree for solving global problems. National Academies Press,
Washington, DC
Nchu F (2004) Developing methods for the screening of ethnoveterinary plants for tick control. MSc Thesis, Medical
University of South Africa
Nicoletti M, Mariani S, Maccioni O et al (2012) Neem cake: chemical composition and larvicidal activity on Asian tiger
mosquito. Parasitol Res 111:205–213
Nicoletti M, Murugan K, Benelli G (2016a) Chapter 11: emerging insect-borne diseases of agricultural, medical and
veterinary importance. In: Trdan S (ed) Emerging insect-borne diseases of agriculture, medical and veterinary
importance. Intech, Rijeka, pp 219–241
Nicoletti M, Murugan K, Canale A et al (2016b) Neem-borne molecules as eco-friendly control tools against mosquito
vectors of economic importance. Curr Org Chem 20(25):2681–2689. https://doi.org/10.2174/138527282-
0666160218233923
Okumu FO, Knols BGJ, Fillinger U (2007) Larvicidal effects of a neem (Azadirachta indica) oil formulation on the
malaria vector Anopheles gambiae. Malaria J 6:63
Pålsson K, Jaenson TG, Baeckström P et al (2008) Tick repellent substances in the essential oil of Tencetum vulgare.
J Med Entomol 45(1):88–93
Perrucci S, Macchioni G, Cioni PL et al (1995) Structure/activity relationship of some natural monoterpenes as
acaricides against Psoroptes cuniculi. J Nat Prod 8:1261–1264
Pulido KDP, Dulcey AJC, Martínez JHI (2017) New caffeic acid derivative from Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray
butanolic extract and its antioxidant activity. Food Chem Toxicol 109:1079–1085
Purohit AM, Rezende AR, Lopez Baldin EL et al (2011) Plant extracts, isolated phytochemicals, and plant-derived
agents which are lethal to arthropod vectors of human tropical diseases: a review. Planta Med 77:618–630
Rossi GD, Santos CD, Carvalho GA et al (2012) Biochemical analysis of a castor bean extract and its insecticidal
effects against Spodoptera frugiperda (smith) (Lepidoptera: noctuidae). Neotrop Entomol 41:503–509
Sadeghi-Nejad B, Saki J (2014) Effect of aqueous Allium cepa and Ixora brachiata root extract on Leishmania major
promastigotes. Jundishapur J Nat Pharm Prod 9:e15442
Sakulku U, Nuchuchua O, Uawongyart N et al (2009) Characterization and mosquito repellent activity of citronella oil
nanoemulsion. Int J Pharm 372:105–111
Saleheen D, Ali SA, Yasinzai MM (2004) Antileishmanial activity of aqueous onion extract in vitro. Fitoterapia 75:9–13

1109
 Sami AJ (2014) Azadirachta indica derived compounds as inhibitors of digestive alpha-amylase in insect pests:
potential biopesticides in insect pest management. Eur J Exp Biol 4:259–264
Sami AJ, Akhtar MW (1993) Purification and characterization of two low-molecular weight endonucleases of
Cellulomonas flavigena. Enzyme Microb Technol 15:586–592
Sami AJ, Shakoori AR (2007) Extracts of plant leaves have inhibitory effect on the cellulase activity of whole body
extracts of insects: a possible recipe for bioinsecticides. Proc Pakistan Congr Zool 27:105–118
Sami AJ, Bilal S, Khalid M et al (2016) Effect of crude neem (Azadirachta indica) powder and azadirachtin on the
growth and acetylcholinesterase activity of Tribolium castaneum (Herbst) (Coleoptera; Tenebrionidae). Pakistan J Zool
48:881–886
Shapiro R (2012) Prevention of vector transmitted diseases with clove oil insect repellent. J Pediatr Nurs 27:346–349
Sharma VP, Dhiman RC (1993) Neem oil as a sand fly (Diptera: Psychodidae) repellent. J Am Mosq Control Assoc
9:364–366
Sharma VP, Ansari MA, Razdan RK (1993) Mosquito repellent action of neem (Azadirachta indica) oil. J Am Mosq
Control Assoc 9:359–360
Simmonds MS, Jarvis AP, Johnson S et al (2004) Comparison of antifeedant and insecticidal activity of nimbin and
salannin photooxidation products with neem (Azadirachta indica) limonoids. Pest Manag Sci 60:459–464
Singh YP, Singh RA (2010) In silico studies of organosulfur-functional active compounds in garlic. Biofactors
36(4):297–311
Singh N, Mishra AK, Saxena A (1996) Use of neem cream as a mosquito repellent in tribal areas of central India.
Indian J Malaria 33:99–102
Sinniah B, Sinniah D, Ibrahim J (1994) Effect of neem oil on mosquito larvae. Mosq Borne Dis Bull 1:90–93
Sun J (2007) D-Limonene: safety and clinical applications. Altern Med Rev 12(3):259–264
Szewczuk VD, Mongelli ER, Pomilio AB (2003) Antiparasitic activity of Melia azedarach growing in Argentina. Mol Med
Chem 1:54–57
Tabanca N, Wang M, Avonto C et al (2013) Bioactivity-guided investigation of geranium essential oils as natural tick
repellents. J Agric Food Chem 61:4101–4107
Thacker JRM (2002) An introduction to arthropods pest control. Cambridge University Press, Cambridge, UK, p 343
Thembo MK (2006) The anti-tick effects of Senna italica ssp. arachoides extracts on adults Hyalomma marginatum
rufipes. Msc Thesis, University of Limpopo, South Africa
Tianyun S, Mulla MS (1998) Ovicidal activity of neem products (Azadirachtin) against Culex tarsalis and Culex
quinquefasciatus (Diptera: Culicidae). J Am Mosq Control Assoc 14:204–209
Trigg JK (1996) Evaluation of a Eucalyptus-based repellent against Anopheles Spp. in Tanzania. J Am Mosq Control
Ass 12 (2):243–246
US EPA (2012) Biopesticide registration document. Cold pressed neem oil. PC Code 025006. Office of Pesticide
Programs, Washington, DC
Valladares GR, Ferreyra D, Defago MT et al (1999) Effects of Melia azedarach on Triatoma infestans. Fitoterapia
70(4):421–424
Varela L, Lavaggi ML, Cabrera M et al (2012) Bioactive-guided identification of labdane diterpenoids from aerial parts
of Aristeguietia glutinosa Lam. as anti-Trypanosoma cruzi agents. Nat Prod Commun 7:1139–1142
Varela J, Serna E, Torres S et al (2014) In vivo anti-Trypanosoma cruzi activity of hydro-ethanolic extract and isolated
active principles from Aristeguietia glutinosa and mechanism of action studies. Molecules 19:8488–8502
Vietmeyer N (ed) (1992) Neem: a tree for solving global problems. National Academy Press, Washington, DC
Wabwoba BW, Anjili CO, Ngeiywa MM et al (2010) Experimental chemotherapy with Allium sativum (Liliaceae)
methanolic extract in rodents infected with Leishmania major and Leishmania donovani. J Vector Borne Dis 47:160–167
Weiner L, Shin I, Shimon LJ et al (2009) Thiol-disulfide organization in alliin lyase (alliinase) from garlic (Allium
sativum). Protein Sci 18:196–205
Weldon PJ, Carroll JF, Kramer M et al (2011) Anointing chemicals and hematophagous arthropods: responses by ticks
and mosquitoes to citrus (Rutaceae) peel exudates and monoterpene components. J Chem Ecol 37(4):348–359
Wink M (2012) Medicinal plants: a source of anti-parasitic secondary metabolites. Molecules 17:12771–12791
World Health Organization (1981) Instructions for determining the susceptibility or resistance of mosquito larvae to
insecticides. WHO, Geneva
World Health Organization (1992) Expert Committee on Vector Biology and Control. Vector resistance to pesticides:
fifteenth report of the Expert Committee on Vector Biology and Control. WHO Technical Report Series 818, pp 1–62
Yang YC, Lee SH, Lee WJ et al (2003) Ovicidal, and adulticidal effects of Eugenia caryophyllata bud and leaf oil
compounds on Pediculus capitis. J Agric Food Chem 51:4884–4888
Zheng GQ, Kenney PM, Lam LKT (1992) Sesquiterpenes from clove (Eugenia caryophyllata). J Nat Prod 55:999–1003
Ziba MM (1995) Preliminary laboratory trial of neem on Anopheles and culex larvae in Zambia. Cent Afr J Med 41:137–
138
Zoroloni A (2007) Evaluation of plants used for the control of animal ectoparasitoses in Southern Ethiopia (Oromiya
and Somali regions). MSc Thesis, University of Pretoria, South Africa

1110
 Parte IV

Nutracêuticos em espécies animais específicas

1111
 Nutracêuticos na Saúde e Doenças do Gado
Begüm Yurdakok-Dikmen e Ayhan Filazi

Resumo
Como resultado da crescente demanda dos consumidores por produtos “limpos, verdes e
éticos” relacionados à conscientização pública dos riscos ambientais e de saúde dos
medicamentos veterinários – e ao aumento da resistência antimicrobiana, levando à perda
de eficácia – os produtores de carne e laticínios estão se esforçando para encontrar
alternativas eficazes. Os nutracêuticos fornecem uma ferramenta valiosa para a
prevenção e controle de doenças em ruminantes por meio de seus efeitos antioxidantes,
antiinflamatórios e antimicrobianos. Nutracêuticos com efeitos benéficos na microbiota
ruminal contribuem para o aumento da produtividade e da lucratividade, uma vez que o
rúmen desempenha um importante papel no sistema imunológico e na nutrição. Os efeitos
benéficos não se restringem à saúde do gado, mas também impactam o meio ambiente
como resultado de seus impactos positivos nas emissões de metano. Esses compostos
também têm o potencial de aumentar as “gorduras saudáveis” nos produtos finais, que
são favoráveis à saúde humana. Portanto, nutracêuticos (incluindo probióticos, prebióticos
e simbióticos), lipídios dietéticos, proteínas e peptídeos (incluindo peptídeos
antimicrobianos), algas (macroalgas e microalgas) e fitonutracêuticos (taninos, saponinas
e óleos essenciais) são ferramentas valiosas na saúde do gado e doença. Enquanto isso,
muitos fatores afetam a eficácia dos nutracêuticos, incluindo a fonte, técnica de produção
e concentração do composto, associado a condição física, dieta, espécie e pH ruminal do
animal. Para alcançar o máximo de benefícios dos nutracêuticos, mais estudos devem ser
realizados para avaliar sua eficácia e toxicidade em diferentes espécies de ruminantes
com diferentes condições fisiológicas.

Palavras-chave: Bovinos · Nutracêuticos · Probióticos · Prebióticos · Simbióticos ·

Proteínas e peptídeos de lipídios dietéticos · Algas · Fitonutracêuticos
B. Yurdakok-Dikmen · A. Filazi. Department of Pharmacology and Toxicology, Faculty of Veterinary Medicine, Ankara
University, Ankara, Turkey

1. Introdução
O uso de nutracêuticos tem recebido atenção crescente para a melhoria da saúde, bem-
estar e produtividade animal no manejo da saúde do rebanho. Tanto no manejo do
1112
rebanho bovino quanto no leiteiro, a medicina preventiva é o marco no controle dos riscos
relacionados às doenças. A medicina preventiva requer uma abordagem bem planejada e
abrangente. A avaliação de risco dentro da localidade, planos de gestão de doenças,
vacinação e biossegurança aumentam os custos diretos, mas são essenciais para a
produção e eficácia. A prevenção de doenças por meio do diagnóstico preciso imediato e
do tratamento precoce está diretamente ligada à saúde do sistema imunológico, onde a
nutrição desempenha um papel central (Ingvartsen e Moyes 2013). Uma ênfase em
nutracêuticos revelou seu potencial para apoiar o sistema imunológico.

Nutracêuticos – compreendendo nutrientes, suplementos dietéticos, produtos à base de

plantas e alimentos processados (incluindo fibra dietética, probióticos e prebióticos, ácidos
graxos poliinsaturados, vitaminas antioxidantes e compostos fito ativos) - induzem uma
ampla gama de processos biológicos em organismos (Das et al. 2012). Devido ao
desenvolvimento de resistência aos medicamentos convencionais e à demanda do
consumidor (influenciada por mudanças sociais e culturais) por produtos de origem animal
mais naturais/orgânicos, os criadores buscam alternativas e terapias complementares na
medicina de rebanho. Esses motivos têm promovido o valor dos nutracêuticos, onde
complexos mecanismos polifarmacológicos de múltiplos alvos, como ativação de defesa
antioxidante e vias antiinflamatórias – junto com efeitos benéficos nas células por meio da
integridade, sobrevivência, proliferação e diferenciação – são exibidos (Dormán et al.
2016; Mandel et al. 2005). Os nutracêuticos influenciam a manutenção da saúde intestinal
e metabólica, ao mesmo tempo que estimulam a função imunológica, o que pode
eventualmente prevenir doenças inflamatórias complexas, como mastite, metrite ou
doença respiratória bovina.

A conservação da grande diversidade de microrganismos no rúmen está no cerne da

produtividade e das emissões de gás metano e amônia em ruminantes. Enquanto isso,
para atender às demandas crescentes da população humana, os sistemas de produção
intensiva que comprometem a saúde e o bem-estar do gado aumentaram as doenças
metabólicas e infecciosas em todo o mundo. Por isso, a indústria busca continuamente
estratégias alternativas de criação para atender às demandas dos consumidores, levando
também em consideração o bem-estar animal. O uso prudente de nutracêuticos tem o
potencial de ajudar a garantir uma produção limpa, ecológica e ética. Os nutracêuticos
têm o potencial de melhorar a retenção e utilização de nutrientes no rúmen, onde
melhorias significativas de produtividade, juntamente com a redução das emissões de
gases de efeito estufa, são possíveis (McGrath et al. 2018). Os nutracêuticos derivados
de várias fontes (animais, microrganismos, plantas, minerais e algas) exercem seus

1113
efeitos por meio de vários mecanismos, como efeitos antimicrobianos, antiinflamatórios e
antioxidantes em ruminantes. Enquanto isso, há uma falta de estudos específicos da
espécie, correlacionados com a dose e específicos do produto (detalhando fontes,
técnicas de produção e armazenamento) e estudos fisiologicamente normalizados
(detalhando as diferenças na doença e outras condições fisiológicas), tornando difícil
ajustar o uso de nutracêuticos de forma adequada para cada criadouro. Este capítulo faz
uma breve revisão dos principais compostos nutracêuticos e seus efeitos nos ruminantes.

2. Classes principais de nutracêuticos usados em gado

2.1 Probióticos

Probióticos são definidos como microrganismos vivos não patogênicos, encontrados na

natureza e/ou no trato gastrointestinal (GI) de ruminantes, que conferem efeitos benéficos
à saúde do hospedeiro mediante ingestão de quantidades adequadas, principalmente por
melhorar o equilíbrio da microflora saudável (bactérias benéficas). A estimulação da
microflora saudável melhora a imunidade da mucosa, aumenta a capacidade digestiva e
evita a colonização por bactérias prejudiciais (Uyeno et al. 2015). Os mecanismos de
ação dos probióticos são a produção de substâncias antimicrobianas e metabólitos
inibitórios (bacteriocinas, diacetil, ácidos orgânicos), competição com patógenos por sítios
de adesão intestinal e fontes nutricionais, produção de nutrientes benéficos às bactérias
benéficas, metabolismo/desintoxicação de compostos indesejáveis e xenobióticos
(afetando a capacidade de ligação de toxinas secretadas por patógenos),
imunomodulação e produção/estimulação de enzimas (Auclair 2001; Retta 2016). As
características microbianas GI diferem dependendo da região (rúmen, intestino grosso) e
idade do hospedeiro (pré desmamado/desmamado), incluindo as funções microbianas
envolvidas na nutrição do hospedeiro em termos de síntese de proteína microbiana,
respostas imunológicas, digestão de polímeros e patogênese de bactérias nocivas.
Portanto, ao contrário da crença comum, os probióticos têm maiores benefícios potenciais
em ruminantes do que em animais monogástricos (Wallace e Newbold 1992).

Os probióticos são usados principalmente em animais jovens para promover a maturação

ideal da microbiota ruminal. Em animais adultos, seu principal uso é para reduzir o risco
de colonização de patógenos. Na produção de laticínios, eles são usados principalmente
para aumentar a produção e a qualidade do leite, enquanto na produção de carne bovina
seu principal uso é para promover o ganho de peso. No entanto, tanto na produção de
laticínios quanto na de carne bovina, eles também são usados para promover a saúde,

1114
limitando a acidose e aumentando a eficácia da ração (Chaucheyras-Durand e Durand
2010). Seus efeitos positivos na produção de leite também estão relacionados à
estabilização do pH no rúmen, aumentos no consumo de matéria seca e produção de
energia/proteína microbiana e redução da contagem de células somáticas no leite
(Maamouri et al. 2014; Suarez e Guevara 2018).

Em mamíferos, Bacteroidetes e Firmicutes são as principais comunidades bacterianas do

trato GI. Fibrobacter, Archaea e outras espécies de protozoários também são comumente
encontradas no rúmen, e Atopobium, bifidobactérias e Fibrobacter também são comuns
no intestino grosso (Uyeno et al. 2015). No geral, a composição do microrganismo no
rúmen inclui bactérias (1010–1011/ml); arqueões como Methanobacterium spp. e
Methanobrevibacter spp. (108-109/ml); protozoários compreendendo entodiniomorfos,
Holothrix e espécies flageladas (10 5-106/ml); e fungos ruminais, tais como Neocallimastix,
Piromyces, Caecomyces, Orpinomyces e Anaeromyces spp. (103-104/ml) (Vohra et al.
2016).

Probióticos para ruminantes são selecionados principalmente para atingir o rúmen, uma
vez que este complexo ecossistema formado por bactérias, fungos anaeróbios e
protozoários ciliados é responsável pela degradação e fermentação de compostos
dietéticos (Chaucheyras-Durand e Durand 2010). Assim, os probióticos usados em
ruminantes são comumente baseados em leveduras (Saccharomyces cerevisiae) e em
fungos (Aspergillus oryzae). Enquanto isso, outras bactérias Gram-positivas, como
Lactobacillus (L. acidophilus, L. brevis, L. bulgaricus, L. casei, L. cellobiosus, L. curvatus,
L. delbrueckii, L. fermentum, L. lactis, L. plantarum), Streptococcus (S. cremoris, S. lactis,
S. thermophilus, S. faecium), Leuconostoc mesenteroides, Propriobacterium,
Pediococcus, Bifidobacterium (B. adolescentis, B. infantis, B. longum), Bacillus (B. cereus,
B. lentus, B. natto), bactérias Gram-negativas como Bacteriodes (B. amylophilus, B.
capillosus, B. ruminicola), leveduras (Saccharomyces boulardii, Torulopsis candida) e
fungos (Aspergillus niger) também são usadas (Chaucheyras- Durand e Durand 2010).

Vários modos de ação foram descritos para os efeitos das leveduras, incluindo aumentos
no número total de bactérias cultiváveis (através do fornecimento de vitaminas e ácidos
dicarboxílicos, remoção da anaerobiose que favorece o oxigênio e uma redução na
concentração de amônio) e o fluxo de proteína microbiana, aumentando o suprimento de
aminoácidos para o intestino delgado e estabilizando o pH por meio de vários processos,
como a competição de bactérias produtoras de ácido láctico e/ou utilizadoras de manitol
(Megasphaera elsdenii e Selenomonas ruminantium). Além disso, glucanas e outras
macromoléculas na parte interna da parede celular da levedura estimulam a amplificação
1115
das defesas do hospedeiro, especialmente a resposta inflamatória e o sistema
reticuloendotelial (Auclair 2001; Suarez e Guevara 2018).

As cepas probióticas podem ser administradas separadamente ou em combinação; as

misturas são favorecidas devido à sua ampla gama de efeitos sinérgicos, que estão
principalmente relacionados aos seus diferentes mecanismos de ação (Chapman et al.
2011; Hatoum et al. 2012). Por outro lado, os probióticos de múltiplas cepas podem inibir-
se mutuamente e possivelmente produzir efeitos antagônicos. Por exemplo, Lactobacillus
dentro de uma mistura induziu maior eficácia do que Bifidobacterium; portanto, a maioria
das misturas contém Lactobacillus. Maior eficácia de conversão alimentar e melhor
desempenho de crescimento também foram mostrados em cabras alimentadas com
misturas de L. acidophilus e S. cerevisiae (Jinturkar et al. 2009) e em cordeiros
alimentados com Pediococcus acidilactici e P. pentosaceus (Saleem et al. 2017). Estão
disponíveis coquetéis comerciais que incluem extrato de fermentação de Lactobacillus,
Bacillus, A. oryzae e culturas de levedura Saccharomyces, associados com enzimas
como α-amilase, β-glucanases, hemicelulases e celulases para ruminantes (Chapman et
al. 2011). Para resultados eficazes, estudos preliminares específicos com as leveduras
probióticas ou suas misturas são recomendados, uma vez que o mecanismo de ação e a
taxa de sucesso dependem da cepa de levedura, viabilidade e composição da ração
(Chiquette 2009).

2.2 Prebióticos

Os prebióticos são definidos como ingredientes não digeríveis e não viáveis – geralmente
compostos dietéticos fermentados seletivamente – que conferem benefícios à saúde do
hospedeiro por meio do crescimento e/ou atividade da microbiota gastrointestinal
(Callaway et al. 2012; Roberfroid et al. 2010). Os prebióticos que comprovadamente
proporcionam efeitos benéficos à saúde são principalmente carboidratos não digeríveis e
oligossacarídeos com diferentes estruturas moleculares. Os oligossacarídeos incluem
fruto-oligossacarídeos (FOS; oligofrutose e inulina), galacto-oligossacarídeos (GOS),
transgalacto-oligossacarídeos (TOS) e lactulose. Descobriu-se que eles estimulam o
crescimento de bifidobactérias e lactobacilos, levando a mudanças significativas na
microbiota intestinal (Gaggìa et al. 2010).

A lactulose – um dissacarídeo sintético que consiste em galactose e frutose – demonstrou

afetar a morfologia do intestino por meio da diminuição da profundidade das vilosidades
ileais e da área de superfície dos folículos linfáticos das placas de Peyer, com um
aumento no desempenho de crescimento em bezerros preruminantes recebendo leite
substituto contendo Enterococcus faecium (Fleige et al. 2007). Em outro estudo, uma
1116
mistura de óleos essenciais (EO; carvacrol, cariofileno, p-cimeno, cineol, terpineno e
timol) e prebióticos (arabinogalactanos) foi testada em bezerros recém-nascidos para
promoção da imunidade e estimulação do apetite; pequenas quantidades (1,25 g por
bezerro por dia em um substituto do leite 24:20) foram confirmadas para induzir os efeitos
benéficos acima mencionados (Froehlich et al. 2017).

A fibra é definida como a fração de carboidrato na ração que é resistente à digestão por
enzimas produzidas pelo gado. Fibras como celulose, hemicelulose, lignina e fibras
solúveis (frutanos, pectinas, galactanas e beta-glucanas) são encontradas principalmente
como componentes estruturais das paredes celulares. As ações digestivas dos
microrganismos ruminais permitem o acesso ao potencial nutritivo das fibras necessárias
para o funcionamento adequado do rúmen e uma fonte de energia (Moreira et al. 2013).
Como uma aproximação, é recomendado que 25% da matéria seca da ração seja fibra
dietética neutra, com os outros 75% sendo uma fonte de fibra forrageira. As propriedades
físicas da fibra são importantes para a estimulação da atividade mastigatória
(granulometria) e estabelecimento da estratificação bifásica do conteúdo ruminal. A
forragem longa forma uma esteira de fibra, que flutua no rúmen e tem uma função na
seleção de partículas, prendendo as partículas finas e diminuindo sua taxa de
degradação, reduzindo a exposição microbiana ruminal. À medida que a atividade de
mastigação aumenta, a salivação também aumenta, favorecendo o crescimento de
micróbios celulolíticos e a produção de ácido acético, onde uma proporção maior de
acetato para propionato favorece a síntese de gordura do leite (Mirzaei-Aghsaghali e
Maheri-Sis 2011; Tackett et al. 1996).

Para gado de corte que recebe uma dieta rica em forragem, onde os animais pastam ou
feno de escolha livre é suplementado, a fibra dietética é suficiente. Fibras inadequadas
podem danificar a parede ruminal, enquanto quantidades maiores não garantem eficácia,
já que em partículas de tamanho menor (se forem moídas ou picadas muito finamente), a
saúde ruminal pode não ser promovida. A promoção de uma suplementação de fibra
eficaz melhora o desempenho geral. Fibras de detergente neutros eficazes (caroço de
algodão, capim Bahia, capim Bermuda, milho, soja, trigo, grãos de destilaria) em rações
para bovinos de corte podem ser fornecidas como grãos secos, cascas, farelo, milho
quebrado, costeleta normal ou costeleta fina (Paróquia 2007).

Mesmo que a produção de leite diminua com a ingestão de matéria seca, com uma
ingestão de fibra em detergente neutro fisicamente eficaz de 30-33%, a produção de
gordura do leite é aumentada (3,5%), com maior eficácia energética do leite e o risco de
acidose ruminal subaguda é diminuída (Zebeli et al. 2008). A prevenção de uma queda no
1117
percentual de gordura do leite pelo uso de fibra também depende da forma física da fibra
(o comprimento médio de partícula de forragem preferido é 0,64 cm) (Woodford et al.
1986) e da umidade (o aumento da fibra resulta em um aumento da temperatura retal e
aumento do estresse) (Tsai et al. 1967).

2.3 Simbióticos

Os efeitos sinérgicos de uma combinação de prebióticos e probióticos, no aumento da

sobrevivência e deposição de organismos microbiológicos benéficos viáveis para reter um
ambiente microbiano natural saudável no rúmen, são muito maiores do que aqueles
observados com o uso de probióticos ou prebióticos isoladamente (Hamasalim 2016;
Radzikowski 2017). Uma maior melhora no ganho médio diário e uma maior diminuição
na Escherichia coli fecal foram observadas em bezerras lactentes alimentadas com uma
combinação de probióticos (1 g de sete bactérias e duas cepas de levedura) e prebióticos
(4 g de polissacarídeos da parede da célula de S. cerevisiae) (Roodposhti e Dabiri 2012).
Cordeiros Moghani amamentados suplementados com 3 g de um simbiótico (contendo E.
faecium, um prebiótico derivado da chicória e algas marinhas como uma substância
imunomoduladora) em sua dieta tinham maior peso corporal, maior ganho de peso
corporal, maior ingestão de alimento e uma melhor taxa de conversão alimentar. As
bactérias coliformes foram reduzidas (assim como os níveis de colesterol sérico) e as
bactérias de ácido láctico aumentaram, indicando o potencial deste suplemento como
promotor de crescimento (Moarrab et al. 2016). Os efeitos do leite fermentado simbiótico
(contendo S. thermophilus, L. acidophilus e Bifidobacterium bifidum) - em sinergia com
alguns ingredientes ativos de hidrossóis de ervas e mel (ácido de maçã) - na atividade
sexual, características do sêmen e níveis de testosterona em machos Aradhi e de
Damasco foram avaliados e a libido aumentada e as características físicas do sêmen
foram observadas (Al-Sobayil et al. 2008).

2.4 Lipídios da dieta

Os lipídios dietéticos desempenham papéis importantes na nutrição e nas funções

biológicas, fornecendo fontes de ácidos graxos essenciais e energia e aumentando a
absorção de nutrientes solúveis em gordura. Os principais constituintes lipídicos na
nutrição de vacas leiteiras são triglicerídeos, glicolipídeos, fosfolipídeos e ácidos graxos
livres (Drackley 2004). A proporção usual na alimentação é de 2–4% de lipídios, uma vez
que contribuem diretamente com 50% da gordura do leite. Os microrganismos ruminais
são capazes de hidrogenar ácidos graxos insaturados, incluindo os ácidos linoleico e
linolênico, entre outros; cerca de 90% são hidrogenados em ácidos graxos saturados
(Tiven et al. 2016). Como os ácidos graxos livres se ligam à ração, junto com as partículas
1118
microbianas, eles tendem a afetar negativamente a fermentação, especialmente a
fermentação de carboidratos fibrosos e, como resultado, a produção de leite e o
percentual de gordura no leite diminuem (> 8%) Seu uso é apoiado para aumentar a
densidade energética da dieta e para aumentar a proporção de forragem para
concentrado para um percentual ideal de gordura do leite (Palmquist e Conrad 1978;
Zhang et al. 2011).

Entre os lipídios da dieta, os ácidos graxos poliinsaturados (PUFAs) contêm duas ou mais
ligações duplas entre os átomos de carbono e, dependendo da posição do grupo metil na
cadeia de carbono, são categorizados como n-3 (peixe, óleo de peixe, nozes) e n-6 (óleos
vegetais). Eles podem ser produzidos endogenamente a partir do ácido linoléico (n-6),
como o precursor do ácido araquidônico e do ácido linolênico (n-3), e o precursor do ácido
eicosapentaenóico (EPA) e do ácido docosahexaenóico (DHA) (Kadegowda e Yu 2016;
Palou e Bonet 2007). Como os PUFAs n-3 não podem ser sintetizados por ruminantes,
esses animais têm necessidade absoluta de alguns ácidos graxos das famílias n-3 e n-6,
que são considerados essenciais e devem ser fornecidos em proporção adequada. As
vacas leiteiras consomem uma dieta contendo predominantemente PUFAs, onde os
microrganismos ruminais separam os ácidos graxos da estrutura do glicerol para serem
posteriormente fermentados em ácidos graxos voláteis. Os PUFAs fornecem precursores
para a síntese de prostaglandinas, modulando as principais enzimas relacionadas à
prostaglandina e ao metabolismo de esteroides e melhorando o desempenho reprodutivo
masculino, pois os PUFAs são importantes na integridade da membrana do esperma.
Estudos revelaram efeitos benéficos, como melhorias na motilidade do esperma,
viabilidade e desenvolvimento do testículo, levando a melhores parâmetros de fertilidade
em ruminantes (Van Tran et al. 2016). A inclusão de PUFAs também demonstrou modular
a resposta imune por meio de vários mecanismos, incluindo reduções nos níveis teciduais
de agentes imunossupressores, como ácido araquidônico e prostaglandina E2, que são
especialmente importantes na redução do estresse de transporte e estresse de entrada
no pátio de ruminantes. Os PUFAs também têm o potencial de modificar a composição
dos ácidos graxos do leite, além de melhorar o desempenho produtivo e a saúde
metabólica (Bragaglio et al. 2015; Savoini et al. 2010). A seleção de fontes de PUFAs é
importante para a proteção relativa da biodegradação ruminal. A redução das emissões de
metano, como gás de efeito estufa produzido no rúmen, é considerada uma prioridade
socioambiental. Dietas enriquecidas com PUFA, como dietas ricas em linhaça ou
suplementadas com óleo de peixe, têm o potencial de ajudar a mitigar a produção de
metano entérico (Savoini et al. 2010). Outro aspecto importante está relacionado ao
aumento da compreensão pública das relações entre dieta e saúde no que diz respeito ao
1119
consumo de carne vermelha e ingestão de n-3 na dieta em humanos, uma vez que a
manipulação de dietas para bovinos de corte com ácidos graxos enriquecidos altera a
composição de ácidos graxos na carne (Vahmani et al. 2015).

Os ácidos linoleicos conjugados (CLA) são isômeros do ácido linoléico com ligações
duplas isoladas; cis-9, trans-11-CLA (CLA1) e trans-10, cis-12-CLA (CLA2) são os
isômeros mais ativos. Cis-9 e trans-11 CLA são os intermediários na bio hidrogenação do
ácido linoleico em ácido esteárico no rúmen pelas bactérias ruminais; que são os
principais isômeros do CLA na gordura do leite. Também pode ser sintetizado na glândula
mamária pela conversão endógena de ácido transvaccênico ou ácido linolênico pela
enzima dessaturase. O CLA exibe efeitos anticâncer, antioxidantes, antiateroscleróticos e
antiobesidade em humanos e animais (Kelly 2001). Portanto, um aumento no CLA na
carne bovina e no leite tem efeitos benéficos na saúde humana; por isso, os criadores
estão se concentrando em aumentar a quantidade desse composto por meio da dieta.
Verificou-se que o fornecimento de CLA a gado de corte por longos períodos de tempo,
especialmente em dietas ricas em grãos, aumenta o teor de CLA da carne (Mir et al.
2004).

2.5 Proteínas e peptídeos nutracêuticos

Peptídeos biologicamente ativos são fragmentos específicos de proteínas derivados por

digestão enzimática natural ou por fermentação de produtos alimentícios, promovendo a
função ou condição corporal e permitindo a prevenção e/ou tratamento de doenças ou
distúrbios. Dependendo do tipo e da concentração, os peptídeos biológicos exercem
diferentes efeitos na saúde, melhorando o sistema de absorção de nutrientes, o sistema
de defesa, o sistema regulatório e o sistema nervoso (de Mejia e Dia 2010; Mine e Shahidi
2005). Tanto para gado de corte como de leite, proteínas dietéticas de qualidade “bypass”
ou “não degradável” (que escapam da fermentação ruminal), junto com outras proteínas
microbianas produzidas através da fermentação ruminal, são fontes importantes de
aminoácidos. Portanto, além de seus efeitos nutracêuticos, essas proteínas têm grande
importância na nutrição de ruminantes. Enquanto isso, a fonte de proteínas e os
procedimentos de processamento são importantes para os efeitos farmacológicos, junto
com a integridade de certas subunidades de proteínas bioativas. Alguns exemplos de
proteínas e peptídeos nutracêuticos [fosfopeptídeos de caseína (CPP), proteína de soro
de leite, proteínas de clara de ovo, proteínas de soja e peptídeos antimicrobianos] usados
em ruminantes são brevemente revisados aqui.

CPP são peptídeos derivados de caseína fosforilados. Esses compostos são capazes de
se ligar e solubilizar macroelementos (cálcio, magnésio, ferro), junto com oligoelementos
1120
(zinco, bário, cromo, níquel, cobalto e selênio). As aplicações potenciais de CPP incluem
prevenção de osteoporose, hipertensão, anemia e cárie dentária; e humanização do leite
bovino (com aumento dos níveis de fósforo) (FitzGerald 1998).

Soro de leite ácido, doce (soro líquido) e caseína são coprodutos altamente nutritivos das
fábricas de queijo e iogurte. Foi descoberto que o soro de leite doce, administrado em
uma concentração de 12–20 L por vaca por dia, aumenta a produção de leite, o conteúdo
de cálcio e o conteúdo de magnésio, assim como as propriedades tecnológicas do leite,
em bovinos em lactação (El-Shewy 2016). Como uma substituição parcial para a ração
concentrada (controle), 40 L por vaca por dia de soro de leite líquido melhorou a produção
de gordura e proteína do leite sem afetar a composição do leite (Salem e Fraj 2007).
Verificou-se que o soro melhorou a qualidade e a digestibilidade da silagem de gramíneas
e leguminosas, reduziu as concentrações de nitrogênio amoniacal e teve um efeito
favorável nas taxas de crescimento em bezerros que foram alimentados com substitutos
do leite contendo até 89% de soro seco (Schingoethe 1976). Foi descoberto que um gel
de emulsão de proteína de soro de leite protege os ácidos graxos insaturados da
biohidrogenação ruminal, levando a uma melhor absorção desses compostos no intestino
delgado para eventual incorporação na gordura do leite (Carroll et al. 2006).

Entre as proteínas da clara do ovo, ovalbumina, ovotransferrina, ovomucóide, ovomucina

e lisozima são os principais grupos com grande potencial para uso nas indústrias
alimentícia e farmacêutica. Eles têm efeitos antimicrobianos, anticâncer, antioxidantes, de
ligação/transporte de metais e de suplementação de nutrientes nos organismos
(Abeyrathne et al. 2013). Os efeitos da ovalbumina, como fonte de nitrogênio na dieta, nas
concentrações de peptídeos no rúmen de ovinos foram avaliados. Em comparação com a
caseína, a ovalbumina se degradou lentamente e, portanto, não deu origem a níveis
significativos de peptídeo (Broderick e Wallace 1988); isso poderia ser atribuído ao seu
potencial para estimular o crescimento de bactérias proteolíticas e outras espécies
proteolíticas predominantes (Tsuda et al. 1991). Outro estudo sobre os efeitos do ovo em
pó não comercializável como suplemento proteico em substituto do leite de cordeiro pré
ruminante relatou efeitos indesejáveis no sistema digestivo, indicando que isso não é
adequado para ração de cordeiro (Wereme et al. 2016).

Os peptídeos de soja têm uma grande capacidade de se ligar ao ácido biliar, reduzindo o
colesterol ao restringir a reabsorção do ácido biliar no íleo (Ahmad et al. 2014). Foi
relatada uma ligeira diminuição no colesterol de lipoproteína de baixa densidade (LDL),
mas não houve efeitos associados no colesterol de lipoproteína de alta densidade (HDL),
triglicerídeos, lipoproteína (a) ou pressão arterial (Xiao 2008). Peptídeos de soja preta
1121
também foram relatados como tendo efeitos antidiabéticos por meio da supressão do
estresse do retículo endoplasmático hepático e manutenção da resistência à insulina
(Ahmad et al. 2014). No entanto, as preocupações de segurança em relação aos impactos
negativos sobre a função tireoidiana (indução de hipotireoidismo) e funções reprodutivas
(efeitos estrogênicos), juntamente com um aumento na carcinogênese relacionada ao
estrogênio, restringem seu uso potencial como nutracêuticos em humanos (Xiao 2008;
Xiao et al. 2004) . Tanto nas dietas de carne quanto de laticínios, o farelo de soja está
entre as proteínas mais comumente usadas; como seu conteúdo de desvio ruminal é mais
alto, soja tratada ou farinhas de soja são preferidas. A soja devidamente tratada é capaz
de aumentar a produção de leite e melhorar o crescimento (Radivojević et al. 2011; Ure et
al. 2005). Por outro lado, em um estudo, nenhuma melhoria na produção de leite foi
observada com alimentação de proteína não degradada no rúmen do farelo de soja
expelida ou maiores quantidades de proteína degradada no rúmen do farelo de soja
extraído com solvente (Colmenero e Broderick 2006).

A resistência bacteriana a muitas classes de antibióticos é uma grande preocupação,

devido às suas implicações para a saúde pública. O uso de alternativas como peptídeos
antimicrobianos (AMP) para ajuste da fermentação ruminal, promoção do consumo de
ração e secreção de enzimas endógenas com propriedades imunológicas são
favorecidos, enquanto resistência a esses compostos também é esperada em um futuro
próximo. AMP são geralmente peptídeos sequenciados hidrofóbicos catiônicos curtos
(<100 aminoácidos) dentro de uma estrutura linear ou cíclica, que constituem um sistema
de defesa imunológico inato e existem em quase todas as classes de organismos como
uma arma biológica (Ageitos et al. 2017). Por causa de sua afinidade antiprotozoária e de
ligação de nitrogênio, e seus efeitos na promoção da flora ruminal ideal, as proteínas são
impedidas de sofrer desaminação ruminal, para serem posteriormente utilizadas na
alimentação do próprio animal. Isso é importante especialmente em sistemas de produção
de leite, onde altos níveis de fornecimento de energia e proteína são necessários
(Cheema et al. 2011).

Peptídeos aniônicos de gado (BNBD-1-3, 6-11, 13; BNBD-4, 5, 12; peptídeo

antimicrobiano traqueal (TAP), peptídeo antimicrobiano lingual (LAP), β-defensina entérica
(EBD), indolicidina, dodecapeptídeo) , peptídeos aniônicos de ovelha (ovelha BD-1, 2;
SMAP 28, 29, 34; OaBac5a, b, 6), peptídeos antimicrobianos de cabra (BD-1, 2; ChBac5)
e vários outros AMP inatos foram identificados em vários tecidos de ruminantes,
proporcionando efeitos antibacterianos em bactérias Gram-positivas e Gram-negativas. O

1122
colostro em ruminantes contém várias citocinas e AMP, incluindo lactoferrina, defensina e
catelicidinas (Cheema et al. 2011; Wang et al. 2016).

A lactoferrina, como uma glicoproteína de ligação ao ferro com propriedades

antimicrobianas e antioxidantes, é aprovada para descontaminação de carcaças de
bovinos. A lactoferrina interfere na adesão/colonização, separa microorganismos de
superfícies biológicas, inibe a multiplicação, neutraliza endotoxinas e estimula o sistema
imunológico, implicando em potencial para ser usado contra patógenos de origem
alimentar (Acuff 2005). A administração retal de lactoferrina bovina mostrou induzir
atividades antimicrobianas e imunomodulatórias contra infecções por E. coli O157: H7 em
bovinos (Kieckens et al. 2018). Identidade antigênica parcial foi observada entre
lactoferrina bovina, caprina e ovina e, em termos de propriedades imunoquímicas, os
espectros de dicroísmo circular (CD) foram semelhantes (Shimazaki et al. 1991). A
lactoferrina também exibe atividades antivirais, antifúngicas e antiparasitárias (Jenssen e
Hancock 2009). Kappacin, um fragmento C-terminal heterogêneo de leite bovino kappa-
caseína casinomacropeptídeo (CMP), tem efeitos antibacterianos, tem efeitos biológicos,
como supressão da secreção gástrica, depressão da agregação plaquetária, efeitos
antivirais (gripe), inibição da ligação da toxina do cólera e efeitos imunomoduladores
(Malkoski et al. 2001). Não apenas o leite, mas também o microbioma ruminal tem sido
investigado como um recurso pouco explorado para novos antimicrobianos. Lynronne-1,
Lynronne-2 e Lynronne-3, isoladas do rúmen bovino, foram consideradas eficazes contra
muitos patógenos multirresistentes clinicamente importantes, incluindo Staphylococcus
aureus resistente à meticilina (Oyama et al. 2017). Um grande número de AMP está
presente em ruminantes, os quais ainda não foram explorados por seus efeitos úteis.
Enquanto isso, não apenas AMP originado de tecidos do próprio animal, mas também
outro AMP derivado de vários organismos diferentes, pode ser potencialmente usado
contra doenças microbianas infecciosas em ruminantes (Cheema et al. 2011). AMP
derivado de insetos (cecropinas e defensinas), de anfíbios (magainina, limnochariína,
hilaranina) e de mamíferos (defensinas e catelicidinas) têm potenciais efeitos
antibacterianos, enquanto a subtilosina e catelicidina têm potenciais efeitos antivirais
(Wang et al. 2016).

2.6 Algas

Microalgas (diatomáceas – Bacillariophyceae, algas verdes – Chlorophyceae, algas

douradas – Chrysophyceae e algas verdes – Cyanophyceae) e macroalgas (Chlorophyta,
Phaeophyta, Chrysophyta e Rhodophyta) têm sido estudados em saúde e nutrição
humana e animal desde os tempos antigos.. Dependendo da estrutura química e das
1123
condições ambientais, eles têm uma ampla gama de aplicações, incluindo a produção de
biodiesel a partir de seu óleo biolipídeo, fertilizantes, aditivos para rações, agentes
terapêuticos e cosméticos. Por meio da produção sustentável (com otimização de água,
CO2, nutrientes, calor, luz, sistemas de colheita e sistemas de secagem), vários tipos de
algas se tornaram disponíveis para alimentação animal. Numerosas moléculas bioativas
(PUFA, ácidos graxos ômega-3, como EPA e DHA, clorofila, carotenóides, esteróis, etc.),
junto com alto teor de vitaminas e minerais, são responsáveis pelas propriedades de
melhoria da saúde das algas. Foi relatado que a suplementação da ração para gado
leiteiro com algas ou óleo de algas rico em ácido graxo n-3 afeta positivamente o
conteúdo de ácidos graxos do leite (Stamey et al. 2012). Extratos de clorelina isolados da
microalga verde Chlorella vulgaris mostraram induzir atividade antibacteriana contra
bactérias Gram-positivas e Gram-negativas (Alwathnani e Perveen 2017; Pratt et al.
1944). Da mesma forma, Chroococcus dispersus, com um alto conteúdo de clorelina, foi
relatado por ter um amplo espectro de atividades antimicrobianas, incluindo atividades
antifúngicas e antibacterianas (Ghasemi et al. 2007). A espirulina seca (com um teor de
60% de aminoácidos essenciais ricos, embora com quantidades reduzidas de metionina,
cisteína e lisina) é altamente nutritiva e tem potencial como substituto em dietas de
confinamento (Nicoletti 2016). A espirulana de cálcio (Ca-SP) - que é isolada de uma alga
azul-esverdeada marinha, Arthrospira platensis (anteriormente chamada de Spirulina
platensis) - foi encontrada para ser ativa contra muitos tipos de vírus, incluindo sarampo,
gripe, vírus do herpes simplex (HSV) 1, vírus Coxsackie, caxumba e vírus da
imunodeficiência humana (HIV) (Hayashi et al. 1996). As frações de carboidratos de A.
platensis foram digeridas de forma eficiente (até 20%) em comparação com Chlorella ou
Scenedesmus obliquus, com um aumento na condição corporal em vacas leiteiras,
aumento no peso corporal e espessura de gordura nas costas em cordeiros desmamados,
e um aumento no peso corporal em cordeiros sendo observado. O uso de Schizochytrium
spp., por outro lado, não teve um efeito significativo no peso da carcaça (Madeira et al.
2017).

Algas marinhas – como subespécies de algas marinhas macroscópicas, multicelulares

encontradas em Chlorophyceae (algas verdes), Rhodophyceae (algas vermelhas) e
Phaeophyceae (algas marrons) - são boas fontes de algumas vitaminas solúveis em água
(B1, B2, B12, C) e vitaminas lipossolúveis (β-caroteno com atividade de vitamina A,
vitamina E) com capacidade antioxidante e têm benefícios para a saúde, como diminuição
da pressão arterial, prevenção de doenças cardiovasculares e redução do risco de câncer
(Škrovánková 2011). Polissacarídeos em algas marinhas – como galactanas e xilanas (em
algas verdes); alginato, laminarina e polímeros contendo fucose sulfatada (em algas
1124
marrons); ágares; carrageninas; xilanos; galactanos sulfatados; e porfiranos e
polissacarídeos menores, como ascofilano e álcoois de açúcar – induzem ações
prebióticas, levando a um aumento na produtividade e melhoria da saúde em animais
(Evans e Critchley 2014).

Algas marinhas (Ulva spp., Laminaria ochroleuca, Saccharina latissima, Gigartina spp. e
Gracilaria vermiculophylla) também mostraram ter efeitos benéficos na produção de gás e
metano e nos parâmetros de fermentação ruminal em bovinos; a Gigartina apresentou o
menor valor para a produção de gás (Maia et al. 2016). Entre as algas marinhas, a alga
marrom Ascophyllum nodosum (algas da rocha) é mais conhecida para uso em
aplicações de alimentação animal. Verificou-se que produtos comercialmente disponíveis
de algas marrons induzem efeitos benéficos na resistência a estressores, como mistura,
transporte de gado, exposição a toxinas de origem alimentar e calor ou temperatura
excessiva, estimulando o sistema imunológico, aumentando a produtividade e reduzindo o
número de microorganismos patogênicos (E. coli O157: cepa H7, Salmonella spp.,
Campylobacter spp. e Clostridium) (Allen et al. 2001; Evans e Critchley 2014). Foram
avaliados os efeitos da suplementação com subprodutos de algas marrons (BSB) em
vacas Holandesas; BSB não comprometeu a fermentação ruminal e o desempenho
animal em níveis mais baixos. Os níveis de estrogênio, triiodotironina e tiroxina foram
encontrados para ser mais elevados após 3 meses de gravidez, e a suplementação de
BSB não afetou a produção e composição diária do leite (Hong et al. 2015).

Pesquisas sobre os efeitos dos florotaninos isolados de A. nodosum na digestão ruminal

in vitro de forragem mista ou grão de cevada mostraram que eles reduziram a produção
de metano e gás total e reduziram a fermentação ruminal e a degradação de proteínas de
maneira dependente da dose (Wang et al. 2008 ) Em cordeiros wether estressados pelo
calor, descobriu-se que a forragem conservada tratada com algas marinhas aumenta o
status antioxidante e a função imunológica (Saker et al. 2004). Os níveis de minerais em
algas marrons são geralmente mais baixos do que em algas verdes e vermelhas,
enquanto os níveis de proteína são mais elevados (Makkar et al. 2016). Misturas de algas
marrons, vermelhas e verdes também estão disponíveis como suplementos alimentares.
Como as algas marinhas são pobres em celulose e ricas em polissacarídeos específicos
(alginato, laminarina e fucoidano) e em manitol, elas têm a capacidade de alterar a
microflora ruminal substancialmente, para um alto grau de adaptação da flora ruminal
(Makkar et al. 2016 ) No entanto, as algas marinhas acumulam metais pesados (arsênio),
iodo e outros minerais (Bouga e Combet 2015), o que requer consideração cuidadosa,
uma vez que isso tem o potencial de ser prejudicial à saúde humana e animal.

1125
2.7 Fito nutracêuticos

Metabólitos secundários de extratos vegetais, com várias estruturas químicas e atividades

biológicas, são recursos exclusivos para produtos farmacêuticos, aditivos alimentares e
produtos químicos finos. Há muito que são estudados em ruminantes como alternativas
aos tratamentos convencionais com drogas e por seu potencial para aumentar a
produtividade. A demanda e o interesse por compostos secundários em plantas têm
aumentado, com o objetivo de melhorar a qualidade da carne e do leite e aumentar a
imunidade a doenças patogênicas. Os principais compostos secundários (metabólitos em
plantas) usados em sistemas agrícolas incluem compostos fenólicos (fenólicos simples,
taninos condensados), saponinas e OE ricos em terpenos (Vasta e Luciano 2011).

Os taninos têm sido considerados compostos antinutritivos/tóxicos por causa de seus

efeitos negativos na digestão e absorção de proteínas, polissacarídeos e minerais,
resultando em desempenho animal reduzido, assim como efeitos ulcerativos, irritativos,
hepatotóxicos e nefrotóxicos. Os taninos utilizados foram os taninos majoritariamente
hidrolisáveis, que foram posteriormente despolimerizados no rúmen em ácido gálico, com
o pirogalol e o resorcinol, como produtos metabolizados do ácido gálico, sendo
responsáveis por danos celulares. Por outro lado, os taninos condensados não são
degradados e, portanto, não causam esses efeitos tóxicos (Jerónimo et al. 2016). Os
taninos têm diversos efeitos na saúde ruminal, dependendo da espécie animal, do pH
ruminal e do tipo e concentração do tanino utilizado. Os taninos formam complexos
indigestos e diminuem a taxa de renovação ruminal, o que impede sua degradação no
rúmen e os torna eventualmente disponíveis no intestino. Isso aumenta a eficácia da
digestão de proteínas e melhora a saúde animal
(Mueller-Harvey 2006; Naumann et al. 2017).

Outros efeitos importantes dos taninos hidrolisáveis e condensados em ruminantes são

atribuídos ao seu efeito anti-helmíntico na motilidade larval e sua inibição da eclosão dos
ovos (Naumann et al. 2017; Williams et al. 2014). Monômeros de taninos condensados
(prodelfinidina, galoílo, procianidina) foram encontrados para afetar o escoamento larval
de nematóides parasitas em pequenos ruminantes (Brunet e Hoste 2006). Os taninos
também afetam o metabolismo dos lipídios. Dependendo das etapas de biohidrogenação,
as espécies microbianas e a fisiologia do animal, aumentos nos ácidos graxos benéficos
(como ácido linolênico, ácido vacênico e ácido rumênico) na carne e no leite podem ser
alcançados (Morales e Ungerfeld 2015). Além disso, taninos condensados formam
complexos com proteínas e polissacarídeos nas rações para reduzir a digestibilidade da

1126
matéria seca e orgânica para a produção de H 2 metabólico a ser posteriormente utilizado
por metanógenos para reduzir CO2 a CH4 (Piñeiro-Vázquez et al. 2015).

As saponinas são glicosídeos anfipáticos com propriedades ativas de superfície,

amplamente distribuídos na natureza em fontes marinhas e vegetais. As saponinas
produzem uma variedade de efeitos biológicos, incluindo hipocolesterolêmico,
hipolipidêmico, potencializador imunológico, antiinflamatório, antioxidante, neuro-
hepatoprotetor, anticarcinogênico e efeitos antifúngicos (incluindo efeitos antibacterianos,
antifúngicos, antiprotozoários, antivirais e antimoluscos), inibição de cáries dentárias
inibição da agregação plaquetária. Devido às suas propriedades detergentes e
propriedade de inibição pronunciada da motilidade pré estomacal, as saponinas formam
uma espuma estável no rúmen e alguns tipos levam à fotossensibilização, seguida por
degeneração hepática e renal, junto a outros problemas intestinais (Addisu e Assefa 2016;
Westendarp 2005). Assim como os taninos, as saponinas são capazes de suprimir a
produção intestinal e ruminal de amônia por meio da inibição de microrganismos
proteolíticos.

Além disso, a diminuição na produção de metano está relacionada à defaunação, junto

com a inibição da metanogênese ou uma diminuição na expressão de genes produtores
de metano (Patra e Saxena 2009). Verificou-se que a saponina do chá aumenta a
produção de metano em vacas leiteiras em lactação, apresentando uma contradição com
os efeitos de redução do metano das saponinas (Guyader et al. 2017). Uma meta-análise
sobre as propriedades de mitigação de metano de fontes ricas em saponina mostrou que
os efeitos eram dependentes da fonte e dependentes da concentração (Jayanegara et al.
2014). Entre as saponinas disponíveis comercialmente, o extrato de Yucca schidigera
atraiu grande interesse por sua desodorização de esterco e propriedades de redução de
metano/mitigação de gás perigoso (Sun et al. 2017). Extratos de mandioca foram
considerados mais eficazes na mitigação de metano do que chá e Quillaja saponaria
(Jayanegara et al. 2014). As saponinas também aumentam a eficácia das vacinas orais,
alterando a permeabilidade da mucosa oral, com propriedades de reforço imunológico. Há
uma série de adjuvantes químicos purificados ou semi-purificados disponíveis que são
derivados de Q. saponaria, como Quil A, Spikoside e as frações definidas QS-21 e
Iscoprep 703. Quil A é amplamente utilizado como um medicamento veterinário adjuvante
nas vacinas de vírus da gripe equina, parvovírus canino e vírus da leucemia felina (FeLV)
(Kirk et al. 2004; Spickler e Roth 2003).

Os OE são compostos aromáticos voláteis produzidos pelas plantas. Eles são

combinações químicas multicomponentes com terpenos e terpenóides (20–70%) como
1127
seus constituintes principais (Kumari et al. 2014). Os OE têm atividades anti-sépticas,
antimicrobianas, antioxidantes e de triagem de radicais livres (Ballester-Costa et al. 2017;
Patra 2011). Os OE mais estudados são tomilho, orégano, cravo, canela, alecrim, endro,
eucalipto, alho e anis. A inibição da formação de metano (principalmente por meio da
redução da degradação alimentar) e os efeitos moduladores da fermentação ruminal
foram observados de forma consistente com tomilho (timol), orégano (carvacrol), canela
(cinamaldeído) e alho (alicina) (Cobellis et al. 2016). As concentrações totais de ácidos
graxos voláteis foram apenas ligeiramente afetadas ou diminuídas pelo OE; os efeitos
foram dependentes do pH ruminal. Apenas informações limitadas sobre os efeitos dos OE
no desempenho dos ruminantes estão disponíveis; pequenas mudanças foram
observadas ocorrendo de uma maneira dependente da dieta (Patra 2011). Uma dieta de
terminação em confinamento contendo OE de tomilho e canela teve efeitos benéficos no
desempenho e na fermentação ruminal em bezerros holandeses que consomem uma
dieta rica em concentrado, e esses OE poderiam ser posteriormente adotados como
modificadores da fermentação ruminal em sistemas de produção de carne (Vakili et al.
2013). Embora os OEs tenham se mostrado aditivos alimentares promissores para a
mitigação da emissão de metano e amônia, e tenham efeitos antioxidantes,
antimicrobianos e de reforço imunológico, sua eficácia varia como resultado de fatores
ambientais como luz, temperatura (perda considerável de atividade foi registrado com
uma temperatura de peletização de 58 ºC na ração), estresse hídrico, dosagem (conforme
ocorre a adaptação, a necessidade de aumento da dose é inevitável) e a dieta do animal
(Cobellis et al. 2016).

3. Observações Finais e Orientações Futuras

A proibição dos antibióticos como promotores de crescimento, junto com a resistência
antimicrobiana e a demanda dos consumidores por animais livres de drogas e com
produtos alimentícios de alta qualidade, criam desafios para os criadores buscarem
métodos alternativos de controle e prevenção de patógenos. Os nutracêuticos fornecem
uma ferramenta valiosa em termos de aditivos para rações, principalmente com foco nas
funções de proteção do hospedeiro (efeitos antioxidantes, antiinflamatórios,
antimicrobianos e de sobrevivência celular) para aumentar a produtividade. Em
ruminantes, a microbiota ruminal desempenha papel fundamental no funcionamento do
sistema imunológico, bem como na nutrição; portanto, espera-se que os nutracêuticos
tenham principalmente efeitos moduladores do rúmen. A produção de ruminantes também
tem influência no meio ambiente por meio da emissão de metano e da excreção de
1128
nitrogênio em grandes quantidades, contribuindo para as emissões globais de metano.
Portanto, os nutracêuticos não são apenas importantes para a saúde dos ruminantes,
mas também podem influenciar a saúde pública por meio da inibição das emissões de
metano, bem como da redução de bactérias patogênicas em produtos alimentícios de
origem animal. Os principais compostos nutracêuticos com potencial em ruminantes
incluem fibra dietética, probióticos, prebióticos, lipídios dietéticos, proteínas e peptídeos
(incluindo peptídeos antimicrobianos), algas (macroalgas e microalgas) e fito
nutracêuticos (taninos, saponinas e óleos essenciais) (Fig. 1).

Fig. 1 Efeitos dos nutracêuticos na saúde do gado

Uma vez que muitos fatores afetam a eficácia dos nutracêuticos – incluindo a fonte, a
técnica usada para a produção e a concentração do composto, junto com a condição
física, dieta, espécie e pH ruminal do animal – mais estudos sobre estes naturais e
potentes os compostos devem ser realizados para avaliar sua eficácia e toxicidade, a fim
de obter custos/benefícios efetivos.

Referências
Abeyrathne EDNS, Lee HY, Ahn DU (2013) Egg white proteins and their potential use in food processing or as
nutraceutical and pharmaceutical agents—a review. Poult Sci 92(12):3292–3299
Acuff GR (2005) Chemical decontamination strategies for meat. In: Sofos NJ (ed) Improving the safety of fresh meat.
Woodhead Publishing, Cambridge, pp 350–363
Addisu S, Assefa A (2016) Role of plant containing saponin on livestock production; a review. Adv Biol Res 10(5):309–
314
Ageitos JM, Sánchez-Pérez A, Calo-Mata P et al (2017) Antimicrobial peptides (AMPs): ancient compounds that
represent novel weapons in the fight against bacteria. Biochem Pharmacol 133:117–138
Ahmad A, Hayat I, Arif S et al (2014) Mechanisms involved in the therapeutic effects of soybean (Glycine max). Int J
Food Prop 17 (6):1332–1354
1129
 Allen VG, Pond KR, Saker KE et al (2001) Tasco-forage: III influence of a seaweed extract on performance, monocyte
immune cell response, and carcass characteristics in feedlot-finished steers. J Anim Sci 79(4):1032–1040
Al-Sobayil KA, Zeitoun MM, Khalil MH et al (2008) Effect of oral administration of a functional synbiotic syrup on libido,
sêmen characteristics, serum testosterone and liver and kidney function of goat’s bucks. Asian J Biol Sci 1(1):11–18
Alwathnani H, Perveen K (2017) Antibacterial activity and morphological changes in human pathogenic bacteria
caused by Chlorella vulgaris extracts. Biomed Res 28(4):1610–1614
Auclair E (2001) Yeast as an example of the mode of action of probiotics in monogastric and ruminant species. In:
Brufau J (ed) Feed manufacturing in the Mediterranean region improving safety: from feed to food. CIHEAM, Zaragoza,
pp 45–53
Ballester-Costa C, Sendra E, Fernández-López J et al (2017) Assessment of antioxidant and antibacterial properties
on meat homogenates of essential oils obtained from four thymus species achieved from organic growth. Foods 6(8):59
Bouga M, Combet E (2015) Emergence of seaweed and seaweedcontaining foods in the UK: focus on labeling, iodine
content, toxicity and nutrition. Foods 4(2):240–253. https://doi.org/10.3390/foods4020240
Bragaglio A, Braghieri A, Napolitano F et al (2015) Omega-3 supplementation, milk quality and cow immune-
competence. Ital J Agron 10(1):9–14
Broderick GA, Wallace RJ (1988) Effects of dietary nitrogen source on concentrations of ammonia, free amino acids
and fluorescaminereactive peptides in the sheep rumen. J Anim Sci 66:2233–2238
Brunet S, Hoste H (2006) Monomers of condensed tannins affect the larval exsheathment of parasitic nematodes of
ruminants. J Agric Food Chem 54(20):7481–7487
Callaway TR, Edrington TS, Harvey RB et al (2012) Prebiotics in food animals, a potential to reduce foodborne
pathogens and disease. Roman Biotechnol Let 17(6):7808–7816
Carroll SM, DePeters EJ, Rosenberg M (2006) Efficacy of a novel whey protein gel complex to increase the
unsaturated fatty acid composition of bovine milk fat. J Dairy Sci 89(2):640–650
Chapman CMC, Gibson GR, Rowland I (2011) Health benefits of probiotics: are mixtures more effective than single
strains? Eur J Nutr 50(1):1–17
Chaucheyras-Durand F, Durand H (2010) Probiotics in animal nutrition and health. Benef Microbes 1(1):3–9
Cheema U, Younas M, Sultan J et al (2011) Antimicrobial peptides: an alternative of antibiotics in ruminants. Adv Agric
Biotechnol 2:15–21
Chiquette J (2009) Evaluation of the protective effect of probiotics fed to dairy cows during a subacute ruminal acidosis
challenge. Anim Feed Sci Technol 153(3–4):278–291
Cobellis G, Trabalza-Marinucci M, Yu Z (2016) Critical evaluation of essential oils as rumen modifiers in ruminant
nutrition: a review. Sci Total Environ 545–546:556–568
Colmenero JJO, Broderick GA (2006) Effect of amount and ruminal degradability of soybean meal protein on
performance of lactating dairy cows. J Dairy Sci 89(5):1635–1643
Das L, Bhaumik E, Raychaudhuri U et al (2012) Role of nutraceuticals in human health. J Food Sci Technol 49(2):173–
183
de Mejia EG, Dia VP (2010) The role of nutraceutical proteins and peptides in apoptosis, angiogenesis, and metastasis
of cancer cells. Cancer Metastasis Rev 29(3):511–528
Dormán G, Flachner B, Hajdú I et al (2016) Target identification and polypharmacology of nutraceuticals. In: Gupta RC
(e) (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity. Academic, Amsterdam, pp 263–286
Drackley JK (2004) Overview of fat digestion and metabolism in dairy cows. Illinois Livestock Trail, University of Illinois.
http://livestocktrail.illinois.edu/uploads/dairynet/papers/Overview%20of%20Fats%2004.pdf
El-Shewy AA (2016) Whey as a feed ingredient for lactating cattle. Sci Int 4(3):80–85
Evans FD, Critchley AT (2014) Seaweeds for animal production use. J Appl Phycol 26(2):891–899
FitzGerald RJ (1998) Potential uses of caseinophosphopeptides. Int Dairy J 8(5–6):451–457
Fleige S, Preißinger W, Meyer HHD et al (2007) Effect of lactulose on growth performance and intestinal morphology
of pre-ruminant calves using a milk replacer containing Enterococcus faecium. Animal 1(03):367–373
Froehlich KA, Abdelsalam KW, Chase C et al (2017) Evaluation of essential oils and prebiotics for newborn dairy
calves. J Anim Sci 95 (8):3772–3782
Gaggìa F, Mattarelli P, Biavati B (2010) Probiotics and prebiotics in animal feeding for safe food production. Int J Food
Microbiol 141: S15–S28
Ghasemi Y, Moradian A, Mohagheghzadeh A et al (2007) Antifungal and antibacterial activity of the microalgae
collected from paddy fields of Iran: characterization of antimicrobial activity of Chroococcus dispersus. J Biol Sci
7(6):904–910
Guyader J, Eugène M, Doreau M et al (2017) Tea saponin reduced methanogenesis in vitro but increased methane
yield in lactating dairy cows. J Dairy Sci 100(3):1845–1855
Hamasalim HJ (2016) Synbiotic as feed additives relating to animal health and performance. Adv Microbiol 6:288–302
Hatoum R, Labrie S, Fliss I (2012) Antimicrobial and probiotic properties of yeasts: from fundamental to novel
applications. Front Microbiol 19(3):421
Hayashi T, Hayashi K, Maeda M et al (1996) Calcium spirulan, an inhibitor of enveloped virus replication, from a blue-
green alga Spirulina platensis. J Nat Prod 59(1):83–87

1130
 Hong ZS, Kim EJ, Jin YC et al (2015) Effects of supplementing brown seaweed by-products in the diet of Holstein
cows during transition on ruminal fermentation, growth performance and endocrine responses. Asian-Australas J Anim
Sci 28(9):1296–1302
Ingvartsen KL, Moyes K (2013) Nutrition, immune function and health of dairy cattle. Animal 7(S1):112–122
Jayanegara A, Wina E, Takahashi J (2014) Meta-analysis on methane mitigating properties of saponin-rich sources in
the rumen: influence of addition levels and plant sources. Asian-Australas J Anim Sci 27 (10):1426–1435
Jenssen H, Hancock R (2009) Antimicrobial properties of lactoferrin. Biochimie 91(1):19–29
Jerónimo E, Pinheiro C, Lamy E et al (2016) Tannins in ruminant nutrition—impact on animal performance and quality
of edible products. In: Combs CA (ed) Tannins: biochemistry, food sources and nutritional properties. Nova Science, New
York, pp 121–168
Jinturkar AS, Gujar BV, Chauhan DS, et al (2009) Effect of feeding probiotics on the growth performance and feed
conversion efficiency in goat. Indian Journal of Animal Research 43(1): 49–52
Kadegowda AKG, Yu L (2016) Effects of dietary lipid intake on diabetes functional dietary lipids. In: Sanders TAB (ed.)
Functional dietary lipids food formulation, consumer issues and innovation for health (pp 151–176) Amsterdam
Woodhead
Kelly GS (2001) Conjugated linoleic acid: a review. Alt Med Rev 6 (4):367–382
Kieckens E, Rybarczyk J, Cox E et al (2018) Antibacterial and immunomodulatory activities of bovine lactoferrin
against Escherichia coli O157:H7 infections in cattle. Biometals 31 (3):321–330
Kirk DD, Rempel R, Pinkhasov J et al (2004) Application of Quillaja saponaria extracts as oral adjuvants for plant-made
vaccines. Expert Opin Biol Ther 4(6):947–958
Kumari S, Pundhir S, Priya P, et al (2014) EssOilDB: a database of essential oils reflecting terpene composition and
variability in the plant kingdom. Database 2014:bau120
Maamouri O, Selmi H, M’hamdi N (2014) Effects of yeast (Saccharomyces cerevisiae) feed supplement on milk
production and its composition in Tunisian Holstein Friesian cows. Sci Agric Bohem 45 (3):170–174
Madeira MS, Cardoso C, Lopes PA et al (2017) Microalgae as feed ingredients for livestock production and meat
quality: a review. Livest Sci 205:111–121
Maia MRG, Fonseca AJM, Oliveira HM et al (2016) The potential role of seaweeds in the natural manipulation of
rumen fermentation and methane production. Sci Rep 6(1):323–321
Makkar HPS, Tran G, Heuzé V et al (2016) Seaweeds for livestock diets: a review. Anim Feed Sci Technol 212:1–17
Malkoski M, Dashper SG, O’Brien-Simpson NM et al (2001) Kappacin, a novel antibacterial peptide from bovine milk.
Antimicrob Agents Chemother 45(8):2309–2315
Mandel S, Packer L, Youdim MBH et al (2005) Proceedings from the “Third International Conference on Mechanism of
Action of Nutraceuticals”. J Nutr Biochem 16(9):513–520
McGrath J, Duval SM, Tamassia LFM et al (2018) Nutritional strategies in ruminants: a lifetime approach. Res Vet Sci
116:28–39
Mine Y, Shahidi F (2005) Nutraceutical proteins and peptides in health and disease: an overview. In: Mine Y, Shahidi F
(e) (eds) Nutraceutical proteins and peptides in health and disease. CRC, Boca Raton, pp 3–9
Mir PS, McAllister TA, Scott S et al (2004) Conjugated linoleic acid–enriched beef production. Am J Clin Nutr
79(6S):1207S–1211S
Mirzaei-Aghsaghali A, Maheri-Sis N (2011) Importance of “physically effective fibre” in ruminant nutrition: a review. Ann
Biol Res 2 (3):262–270
Moarrab A, Ghoorchi T, Ramezanpour S et al (2016) Effect of synbiotic on performance, intestinal morphology, fecal
microbial population and blood metabolites of suckling lambs. Iran J Appl Anim Sci 6 (3):621–628
Morales R, Ungerfeld EM (2015) Use of tannins to improve fatty acids profile of meat and milk quality in ruminants: a
review. Chil J Agric Res 75(2):239–248
Moreira LM, Leonel FP, Vieira RAM et al (2013) A new approach about the digestion of fibers by ruminants. R Brasil
Saúde Prod Anim 14 (2):382–395
Mueller-Harvey I (2006) Unravelling the conundrum of tannins in animal nutrition and health. J Sci Food Agric
86(13):2010–2037
Naumann HD, Tedeschi LO, Zeller WE et al (2017) The role of condensed tannins in ruminant animal production:
advances, limitations and future directions. R Bras Zootec 46(12):929–949
Nicoletti M (2016) Microalgae nutraceuticals. Foods 5(3):54
Oyama LB, Girdwood SE, Cookson AR et al (2017) The rumen microbiome: an underexplored resource for novel
antimicrobial discovery. NPJ Biofilms Microbiomes 3(1):33
Palmquist DL, Conrad HR (1978) High fat rations for dairy cows effects on feed intake, milk and fat production, and
plasma metabolites. J Dairy Sci 61(7):890–901
Palou A, Bonet ML (2007) Controlling lipogenesis and thermogenesis and the use of ergogenic aids for weight control.
In: Henry CJK (ed) Novel food ingredients for weight control. Woodhead Publishing, Cambridge, pp 58–103
Parish J (2007) Effective fiber in beef cattle diets. Cattle Business in Mississippi.
https://extension.msstate.edu/sites/default/files/topicfiles/cattle-business-mississippi-articles/cattle-business-
mississippiarticles-landing-page/mca_mar2007.pdf
Patra AK (2011) Effects of essential oils on rumen fermentation, microbial ecology and ruminant production. Asian J
Anim Vet Adv 6 (5):416–428
1131
 Patra AK, Saxena J (2009) The effect and mode of action of saponins on the microbial populations and fermentation in
the rumen and ruminant production. Nutr Res Rev 22(02):204–219
Piñeiro-Vázquez AT, Canul-Solís JR, Alayón-Gamboa JA et al (2015) Potential of condensed tannins for the reduction
of emissions of enteric methane and their effect on ruminant productivity. Arch Med Vet 47:263–272
Pratt R, Daniels TC, Eiler JJ et al (1944) Chlorellin, an antibacterial substance from Chlorella. Science 99(1944):351–
352
Radivojević M, Grubić G, Šamanc H et al (2011) Heat treated soybeans in the nutrition of high producing dairy cows.
Afr J Biotechnol 10 (19):3929–3937
Radzikowski D (2017) Effect of probiotics, prebiotics and synbiotics on the productivity and health of dairy cows and
calves. World Sci News 78:193–198
Retta KS (2016) Role of probiotics in rumen fermentation and animal performance: a review. Int J Livest Prod 7(5):24–
32
Roberfroid M, Gibson GR, Hoyles L et al (2010) Prebiotic effects: metabolic and health benefits. Br J Nutr 104(S2):S1–
S63
Roodposhti P, Dabiri N (2012) Effects of probiotic and prebiotic on average daily gain, fecal shedding of Escherichia
coli, and immune system status in newborn female calves. Asian-Australas J Anim Sci 25(9):1255–1261
Saker KE, Fike JH, Veit H et al (2004) Brown seaweed (Tasco™) treated conserved forage enhances antioxidant
status and immune function in heat-stressed wether lambs. J Anim Physiol Anim Nutr 88(3–4):122–130
Saleem AM, Zanouny AI, Singer AM (2017) Growth performance, nutrients digestibility, and blood metabolites of lambs
fed diets supplemented with probiotics during pre- and post-weaning period. Asian-Australas J Anim Sci 30(4):523–530
Salem MB, Fraj M (2007) The effects of feeding liquid acid whey in the diet of lactating dairy cows on milk production
and composition. J Cell Anim Biol 1(1):7–10
Savoini G, Agazzi A, Invernizzi G et al (2010) Polyunsaturated fatty acids and choline in dairy goats nutrition:
production and health benefits. Small Rumin Res 88(2–3):135–144
Schingoethe DJ (1976) Whey utilization in animal feeding: a summary and evaluation. J Dairy Sci 59(3):556–570
Shimazaki K, Kawano N, Yoo YC (1991) Comparison of bovine, sheep and goat milk lactoferrins in their electrophoretic
behavior, conformation, immunochemical properties and lectin reactivity. Comp Biochem Physiol B 98(2–3):417–422
Škrovánková S (2011) Seaweed vitamins as nutraceuticals. Adv Food Nutr Res 64:357–369
Spickler AR, Roth JA (2003) Adjuvants in veterinary vaccines: modes of action and adverse effects. J Vet Int Med
17:273–281
Stamey JA, Shepherd DM, de Veth MJ et al (2012) Use of algae or algal oil rich in n-3 fatty acids as a feed supplement
for dairy cattle. J Dairy Sci 95(9):5269–5275
Suarez C, Guevara CA (2018) Probiotic use of yeast Saccharomyces cerevisiae in animal feed. Res J Zool 1:1
Sun DS, Jin X, Shi B et al (2017) Effects of Yucca schidigera on gas mitigation in livestock production: a review. Braz
Arch Biol Technol 60(0):e17160359
Tackett VL, Bertrand JA, Jenkins TC et al (1996) Interaction of dietary fat and acid detergent fiber diets of lactating
dairy cows. J Dairy Sci 79(2):270–275
Tiven NC, Siwa IP, Joris L (2016) Effects of Citrus hystryx as fat protector on unsaturated fatty acids, cholesterol and
chemical composition of lamb meat. J Indones Trop Anim Agric (1):45–49
Tsai YC, Castillo LS, Hardison WA et al (1967) Effect of dietary fiber level on lactating dairy cows in the humid tropics.
J Dairy Sci 50 (7):1126–1129
Tsuda T, Sasaki Y, Kawashima R (1991) Physiological aspects of digestion and metabolism in ruminants. In: Tsuda T,
Sasaki Y, Kawashima R (eds) Proceedings of the Seventh International Symposium on Ruminant Physiology, San Diego
Academic
Ure AL, Dhiman TR, Stern MD et al (2005) Treated extruded soybean meal as a source of fat and protein for dairy
cows. Asian-Australas J Anim Sci 18(7):980–989
Uyeno Y, Shigemori S, Shimosato T (2015) Effect of probiotics/prebiotics on cattle health and productivity microbes
and environments. Microbes Environ 30(2):126–132
Vahmani P, Mapiye C, Prieto N et al (2015) The scope for manipulating the polyunsaturated fatty acid content of beef:
a review. J Anim Sci Biotechnol 6(1):29
Vakili AR, Khorrami B, Mesgaran MD et al (2013) The effects of thyme and cinnamon essential oils on performance,
rumen fermentation and blood metabolites in Holstein calves consuming high concentrate diet. Asian-Australas J Anim
Sci 26(7):935–944
Van Tran L, Malla BA, Kumar S et al (2016) Polyunsaturated fatty acids in male ruminant reproduction—a review.
Asian-Australas J Anim Sci 30(5):622–637
Vasta V, Luciano G (2011) The effects of dietary consumption of plants secondary compounds on small ruminants’
products quality. Small Rumin Res 101(1–3):150–159
Vohra A, Syal P, Madan A (2016) Probiotic yeasts in livestock sector. Anim Feed Sci Technol 219:31–47
Wallace RJ, Newbold CJ (1992) Probiotics for ruminants. In: Fuller R (ed) Probiotics. Springer, Dordrecht, pp 317–353
Wang Y, Xu Z, Bach SJ et al (2008) Effects of phlorotannins from Ascophyllum nodosum (brown seaweed) on in vitro
ruminal digestion of mixed forage or barley grain. Anim Feed Sci Technol 145 (1–4):375–395
Wang S, Zeng X, Yang Q et al (2016) Antimicrobial peptides as potential alternatives to antibiotics in food animal
industry. Int J Mol Sci 17(5):603
1132
 Wereme D, Grongnet JF, Gelbcke D (2016) Using unmarketable egg powder as protein supplement in pre-ruminant
lamb milk replacer. Direct Res J Agric Food Sci 4(9):271–279
Westendarp H (2005) Saponins in nutrition of swine, poultry and ruminants. Dtsch Tierarztl Wochenschr 112(2):65–70
Williams AR, Fryganas C, Ramsay A et al (2014) Direct anthelmintic effects of condensed tannins from diverse plant
sources against Ascaris suum. PLoS One 9(5):e97053
Woodford JA, Jorgensen NA, Barrington GP (1986) Impact of dietary fiber and physical form on performance of
lactating dairy cows. J Dairy Sci 69(4):1035–1047
Xiao CW (2008) Health effects of soy protein and isoflavones in humans. J Nutr 138(6):1244S–1249S
Xiao CW, L’Abbé MR, Gilani GS et al (2004) Dietary soy protein isolate and isoflavones modulate hepatic thyroid
hormone receptors in rats. J Nutr 134(4):743–749
Zebeli Q, Dijkstra J, Tafaj M et al (2008) Modeling the adequacy of dietary fiber in dairy cows based on the responses
of ruminal pH and milk fat production to composition of the diet. J Dairy Sci 91 (5):2046–2066
Zhang H, Wang Z, Liu G et al (2011) Effect of dietary fat supplementation on milk components and blood parameters of
early-lactating cows under heat stress. Slovak J Anim Sci 44(2):52–58

1133
 Nutracêuticos em Medicina Equina
A. Sankaranarayanan

Resumo
O uso de nutracêuticos na medicina equina está crescendo rapidamente e se tornando
uma indústria multibilionária global. Com a introdução da legislação de Saúde e Educação
de Suplementos Alimentares (DSHEA) em 1994, a regulamentação de nutracêuticos para
animais tornou-se um tanto vaga, mas foi parcialmente resgatada pela formação do
Conselho Nacional de Suplementos Animais (NASC) em 2002. Na prática equina,
nutracêuticos são comumente usados como intensificadores de desempenho, bem como
suplementos para as articulações. Em ambos os casos, a pesquisa em humanos e
cavalos foi de importância crítica. A claudicação em equinos é uma das condições mais
importantes que afetam sua utilidade, e nutracêuticos são comumente usados em seu
tratamento. Produtos que contêm glucosamina e sulfato de condroitina demonstraram ser
eficazes com algum nível de suporte científico. Existem muitos outros, como o colágeno
tipo II não desnaturado, o manganês, os antioxidantes e a vitamina C, que também têm
sido empregados com vários níveis de sucesso. Como intensificadores de desempenho,
L-carnitina, creatina, aminoácidos de cadeia ramificada e HMB têm sido usados, com
HMB se mostrando promissor. Apesar da euforia inicial, é um momento desafiador para a
indústria nutracêutica gerar dados clínicos de qualidade para apoiar as alegações de
eficácia e segurança de seus produtos para garantir um crescimento sustentado.
Palavras-chave: Nutracêuticos veterinários · Saúde equina · Medicina equina

1. Introdução
Desde o final da década de 1990, houve um crescimento explosivo na indústria
nutracêutica, tanto na nutrição humana quanto animal, transformando-a em uma indústria
multibilionária global. Portanto, não é surpresa que também na medicina equina os
nutracêuticos estejam crescendo rapidamente em demanda tanto por proprietários de
cavalos quanto por veterinários, como evidenciado pela variedade e volume de produtos
introduzidos no mercado. Apesar dessa tendência, é irônico que a própria definição de
nutracêuticos seja vaga e não haja uma definição regulamentar. O termo “nutriente” é
definido pela Associação Americana de Oficiais de Controle de Alimentos (AAFCO) como
“um constituinte do alimento em uma forma e em um nível que ajudará a manter a vida de

1134
um animal”. As principais classes de nutrientes dos alimentos são proteínas, gorduras,
carboidratos, minerais e vitaminas. A AAFCO define “droga” como “uma substância
destinada ao uso no diagnóstico, cura, mitigação, tratamento ou prevenção de doenças
no homem ou em outros animais”. O termo nutracêutico foi cunhado por DeFelice (1995)
como uma combinação das palavras, “nutriente” e “farmacêutico” e é definido como
“alimento ou parte de um alimento que fornece benefícios médicos ou de saúde, incluindo
prevenção e/ou tratamento de uma doença.” O North American Veterinary Nutraceutical
Council (NAVNC) define nutracêutico como uma substância que é produzida ou extraída
na forma purificada e administrada por via oral aos pacientes para fornecer os agentes
necessários para a estrutura e função normal do corpo e administrados com a intenção de
melhorar a saúde e o bem-estar de animais (Crandell e Duren 2001).

DeFelice (1995) estava otimista de que a revolução nutracêutica mudaria drasticamente a

indústria de alimentos, mas também dependeria da capacidade da indústria de
demonstrar os benefícios clínicos desses produtos e de sua capacidade de patenteá-los.
Para o crescimento sustentado da indústria nutracêutica, esse seria um fator importante.

2. Cenário Regulatório
Os regulamentos sobre nutracêuticos para uso em animais são bastante vagos e
confusos. Isso se deve em parte à própria natureza dos nutracêuticos e à sua posição
entre os produtos nutricionais (alimentos/rações para animais) e as drogas/produtos
farmacêuticos de origem animal. Em 1994, o Congresso dos Estados Unidos aprovou a
Lei de Educação para a Saúde de Suplementos Dietéticos (DSHEA), que foi sancionada
em outubro daquele ano pelo presidente Bill Clinton. Isso levou à criação de suplementos
dietéticos, um subconjunto de alimentos, sob a Lei Federal de Alimentos, Medicamentos e
Cosméticos que permitia a produção e comercialização de suplementos dietéticos para
uso humano. Enquanto os suplementos dietéticos para consumo humano foram
discutidos no Congresso, o caso dos suplementos dietéticos para animais não foi
mencionado nem considerado. Talvez naquela época a indústria de suplementos
dietéticos para animais não estivesse bem desenvolvida ou, possivelmente, o propósito
do DSHEA era especificamente atender à crescente demanda por suplementos dietéticos
para uso humano.

O Centro de Medicina Veterinária (FDA-CVM) da Administração de Alimentos e

Medicamentos dos EUA é responsável pela regulamentação de alimentos e
medicamentos para animais. Ela trabalha em estreita associação com agências como a

1135
AAFCO e outras autoridades estaduais no cumprimento das leis federais e estaduais para
garantir que os fabricantes de ração animal e medicamentos cumpram os regulamentos.
Vitaminas, minerais e aditivos para rações geralmente reconhecidos como seguros
(GRAS) estão no mercado há vários anos na categoria de suplementos dietéticos para
animais e estão listados na publicação oficial da AAFCO.

Com a introdução do DSHEA, ingredientes semelhantes aos usados em suplementos

dietéticos humanos foram comercializados como componentes de suplementos dietéticos
para animais. Muitos deles contêm ingredientes que podem ser aditivos alimentares não
seguros ou novos medicamentos para animais não aprovados. Isso levou à publicação de
um aviso pelo FDA dos EUA no Federal Register de 1996 esclarecendo que o DSHEA não
se aplica a animais. A preocupação do FDA-CVM era que esses suplementos dietéticos
para animais não têm dados científicos para mostrar que são seguros para os animais. O
resultado de tal raciocínio é que os produtos comercializados para animais que são
semelhantes aos suplementos alimentares humanos só podem ser legalmente
classificados em uma de duas categorias – alimentos para animais ou medicamentos para
animais.

Um alimento animal não requer nenhuma aprovação para comercialização pelo FDA-
CVM, mas, de acordo com o DSHEA, ele deve ser puro e saudável e não contém
ingredientes prejudiciais ou deletérios e deve ser rotulado como tal. Tem apenas valor
nutritivo. Por outro lado, um medicamento animal é um artigo destinado ao uso no
diagnóstico, cura, tratamento ou prevenção de doenças. De acordo com o DSHEA, um
novo medicamento para animais deve ter dados científicos que demonstrem que é eficaz
e seguro como parte de sua nova aplicação de medicamento para animais (NADA).
Simplesmente, se um produto no mercado não for aprovado para o uso em uma condição,
ele será considerado ilegal e sujeito a ação regulatória.

Isso levou a uma situação legal complexa, conforme elegantemente resumido pelo
National Animal Supplements Council (NASC), uma organização sem fins lucrativos
501(c)6 estabelecida como uma corporação em Utah com escritórios principais no sul da
Califórnia (https://nasc.cc). Com o aumento da demanda por suplementos dietéticos para
animais, isso criou uma situação incomum para a indústria. Há um número crescente de
ingredientes comumente usados em suplementos dietéticos humanos que não são
aprovados para uso em animais. Essa falta de status legal para suplementos dietéticos
para animais levou a propostas iminentes por órgãos reguladores para retirar muitos
desses produtos do mercado. Em resposta a isso, o NASC foi formado em abril de 2002.

1136
As pesquisas da NASC revelaram que existem mais de 400 ingredientes comercializados
atualmente por membros da NASC que não são aprovados para uso em produtos para
alimentação animal. Para resolver esse problema, o NASC apresentou pedidos de
definição de ingredientes em 2002 e 2003, solicitando ao FDA-CVM que permitisse o uso
de glucosamina e MSM na alimentação animal, visto que suas necessidades nutricionais
não haviam sido estabelecidas em animais até então. Esses produtos são reconhecidos
pelos consumidores como sendo usados para outros fins que não nutricionais, como no
tratamento de doenças como a osteoartrite. Essas considerações obrigam a indústria a
cumprir a lei e a comercializar produtos como medicamentos de origem animal. O
marketing de produtos como medicamentos de origem animal requer o preenchimento de
um novo pedido de medicamento para animais (NADA) junto ao FDA-CVM com dados de
apoio sobre sua segurança e eficácia. Embora pareça simples, na realidade isso pode ser
problemático. Em primeiro lugar, a indústria precisaria proteger seus direitos de
propriedade intelectual, uma vez que investimentos consideráveis terão de ser feitos no
desenvolvimento do produto. No entanto, os tribunais sustentaram que as substâncias
naturais não podem ser protegidas por meio de direitos de propriedade intelectual. Em
segundo lugar, os consumidores podem acessar suplementos dietéticos humanos para
uso animal e podem evitar produtos animais caros desenvolvidos e comercializados
através do processo NADA. Obviamente, tudo isso torna a posição regulatória dos
nutracêuticos para animais bastante complexa.

3. Nutracêuticos
A Lei Federal de Alimentos, Medicamentos e Cosméticos dos EUA define um ingrediente
dietético como uma vitamina, mineral, erva ou outro botânico, aminoácido ou substância
dietética para uso pelo homem para complementar a dieta, aumentando a ingestão
alimentar total ou um concentrado, metabólito, constituinte, extrato ou combinação das
substâncias anteriores. O termo usado cobre uma ampla lista de produtos que são usados
na nutrição humana e se tornaram populares na indústria nutracêutica equina. Os
nutracêuticos fornecem benefícios funcionais, aumentando o fornecimento de blocos de
construção estruturais no corpo e, assim, mitigando os sinais de doenças e/ou
melhorando o desempenho dos animais. A maioria dos dados científicos gerados sobre
nutracêuticos vêm de pesquisas em humanos, enquanto apenas um número limitado de
nutracêuticos usados em equinos foi avaliado clinicamente. Observa-se também que, na
prática equina, os nutracêuticos têm sido usados mais comumente como intensificadores
de desempenho do que no tratamento de doenças. Este capítulo se concentrará em
1137
nutracêuticos na medicina equina que são apoiados por pesquisas clínicas em equinos e
humanos.

4. Nutracêuticos como suplementos articulares

A osteoartrite é uma das causas mais comuns de claudicação em cavalos. Um
desequilíbrio na síntese e degradação da matriz da cartilagem articular é responsável por
essa patologia articular. A degradação da cartilagem articular leva, em última análise, à
deterioração da rigidez à compressão e à tração. Níveis aumentados de interleucina-1β
(IL-1β) nas estruturas da cartilagem medeiam a deterioração da cartilagem por meio do
aumento dos níveis de óxido nítrico (NO) e ativação de metaloproteinases de matriz
(MMPs). Convencionalmente, antiinflamatórios não esteroidais (AINEs), injeções
articulares e fisioterapia são empregados nessas condições. No entanto, os suplementos
orais para as articulações também são comumente usados por proprietários de cavalos
como um simples suplemento ou substituto para as terapias convencionais. Portanto, não
é surpreendente que a artrite e as doenças das articulações sejam duas das condições
mais comuns em cavalos onde são usados nutracêuticos. Uma ampla gama de produtos
nutracêuticos está disponível para tratar essas condições. Os nutracêuticos são
considerados para fornecer blocos de construção estruturais e, portanto, fornecer
benefícios funcionais em tais condições. Fornecer blocos de construção pode atenuar os
sinais de doenças e melhorar o desempenho do cavalo. Normalmente, os suplementos
para articulações contêm glucosamina, sulfato de condroitina, uma combinação de
glucosamina e sulfato de condroitina, insaponificáveis de abacate/soja, metil sulfonil
metano (MSM), gel de hialuronano oral, extrato de mexilhão de lábios verdes, Epiitalis,
etc. com dados científicos disponíveis para apoiar a sua atividade.

4.1 Sulfato de glucosamina e condroitina

A glucosamina é um composto natural encontrado nas cartilagens. É colhido da casca do

marisco ou preparado em laboratório. Existem várias formas de glucosamina, como
sulfato de glucosamina, cloridrato de glucosamina, N-acetil glucosamina, etc. O sulfato de
condroitina (CS) é um componente importante da matriz extracelular (ECM) dos tecidos
conjuntivos como a cartilagem, osso, pele, ligamentos, etc. É um glicosaminoglicano
sulfatado (GAG) e é composto por uma longa cadeia polissacarídica não ramificada com
uma estrutura de dissacarídeo repetida de N-acetil galactosamina e ácido glucurônico. A
SC é responsável pela resistência, elasticidade e outras propriedades biomecânicas da
cartilagem. O sulfato de condroitina e a glucosamina têm sido usados clinicamente para

1138
doenças articulares há quase 50 anos. Uma vez que foram investigados juntos em muitos
estudos clínicos e em animais, eles são considerados aqui juntos para seu uso como
suplementos para as articulações.

Vários estudos em humanos mostraram que a glucosamina diminui a dor e melhora a

mobilidade em pessoas que sofrem de osteoartrite. Em um ensaio clínico duplo-cego
(Lopez Vaz 1982), a glucosamina (1,5 g) foi comparada com o ibuprofeno (1,2 g)
diariamente durante um período de 8 semanas. Embora a pontuação da dor tenha
diminuído com o ibuprofeno nas primeiras 2 semanas, a glucosamina se saiu melhor ao
final das 8 semanas. Ambas as drogas foram bem toleradas.

A glucosamina demonstrou prevenir a degradação da cartilagem induzida

experimentalmente em explantes de cartilagem articular equina. Discos de cartilagem
colhidos da região de suporte de peso da superfície articular foram cultivados.
Demonstrou-se que essas cartilagens aumentam a produção de NO, liberam
peptideoglicano e aumentam as MMPs em resposta ao LPS ou IL-1 adicionado ao meio.
Fenton et al. (2000) demonstraram que todas essas respostas foram evitadas pela
glucosamina que foi adicionada à mídia. Os autores postularam que a glucosamina pode
prevenir a degradação da matriz da cartilagem pela inibição da produção de NO. Sabe-se
que os níveis de NO estão aumentados no líquido sinovial das articulações doentes e
induzem apoptose de condrócitos, inibição da proliferação celular e ativação de MMPs.
Alternativamente, a glucosamina pode simplesmente extinguir diretamente o NO
aumentado ou atuar como um antioxidante e prevenir a degradação mediada por MMP da
matriz da cartilagem. O segundo mecanismo proposto foi a inibição direta das MMPs pela
glucosamina.

Em um estudo em cavalos com doença articular degenerativa, tratados com um composto

de sulfato de glucosamina+condroitina para determinar sua eficácia na diminuição da
claudicação, verificou-se que dentro de 2 semanas de tratamento, o grau de claudicação,
teste de flexão e comprimento da passada foram todos significativamente melhorados
(Hanson et al. 1997). Uma outra melhora significativa ocorreu em 4 semanas de
tratamento.

É essencial que qualquer agente terapêutico seja absorvido o suficiente para que alcance
seu local de ação e exerça seu efeito farmacológico. Nesse contexto, a biodisponibilidade
de qualquer medicamento é fundamental para sua ação. Du et al. (2004) mostraram que o
cloridrato de glucosamina e o sulfato de condroitina são biodisponíveis por via oral em
cavalos, determinando o Cmax e o Tmax. No entanto, a biodisponibilidade oral do CS tem
sido debatida há algum tempo devido à sua grande estrutura molecular. Ao mesmo tempo,
1139
no entanto, também se sabe que a administração oral de CS proporciona alívio da dor e
uma desaceleração da progressão da osteoartrite em animais. O CS também pode ser
metabolizado em dissacarídeos insaturados. Estudos in vitro em cultura de células Caco-2
também sugeriram maior permeabilidade para CS de baixo peso molecular. Para resolver
esse problema, Eddington et al. (2001) realizaram um estudo em cavalos para determinar
a biodisponibilidade oral de CS por meio da determinação dos dissacarídeos formados
após a administração oral e para determinar a influência de seu peso molecular. O estudo
descobriu que os dissacarídeos se formaram especificamente após a quebra do sulfato de
condroitina em amostras de plasma de cavalo após a dosagem oral de CS de peso
molecular de 8,0 e 16,9 kDa. Foi interpretado que o CS ou fragmentos da molécula do CS
são absorvidos após sua administração oral. A biodisponibilidade associada a CS de 8,0
kDa foi maior do que a CS de 16,9 kDa.

Laverty et al. (2005) examinaram a concentração de glucosamina no líquido sinovial e sua

farmacocinética no soro de cavalos após níveis de dose oral e iv clinicamente relevantes.
A concentração máxima de glucosamina no soro foi de ~ 300 μg/ml e 3,77 M após a dosagem iv e ~ 6
μg/ml e 3,77 M após a dosagem oral. As concentrações sinoviais correspondentes foram 9 μg/ml e 3,77 M – 15
μg/ml e 3,77 M e 0,3 μg/ml e 3,77 M – 0,7 μg/ml e 3,77 M, respectivamente. Com base nessas concentrações, os
pesquisadores concluíram que o benefício terapêutico da glucosamina dietética pode ser
secundário aos seus efeitos nos tecidos não articulares, como o revestimento intestinal,
fígado ou rim. A biodisponibilidade média da glucosamina foi de 5,9%, e sua meia-vida de
eliminação média foi de 2,82 h. Portanto, mesmo o mecanismo de ação da glucosamina
precisa de mais elucidação.

Como a glucosamina e o sulfato de condroitina atuam na inflamação e na dor das

articulações? A osteoartrite está associada à degeneração da cartilagem articular e à
produção excessiva de citocinas pró-inflamatórias. É reconhecido que a IL-1β é uma
citocina pró-inflamatória que pode induzir a cascata catabólica. Em concentrações
fisiologicamente relevantes, foi demonstrado que glucosamina e sulfato de condroitina
regulam a expressão gênica e a síntese de óxido nítrico (NO) e prostaglandina E 2 e
podem exercer propriedades antiinflamatórias (Chan et al. 2005). Além disso, a
glucosamina pode estimular a síntese de glicosaminoglicanos (GAG) e de proteoglicanos
e diminuir a degradação de proteoglicanos, preservando assim a cartilagem.

4.2 Suplementos Conjuntos Diversos

Suplementos para articulações contendo glucosamina e sulfato de condroitina também

são comercializados com manganês, vários antioxidantes, incluindo vitamina C, ou
compostos antiinflamatórios à base de ervas.
1140
O colágeno tipo II não desnaturado (UC-II), um ingrediente natural contendo colágeno tipo
II não desnaturado glicosilado (Bagchi et al. 2002), demonstrou modular a saúde das
articulações na osteoartrite (OA) e na artrite reumatóide (AR). A ingestão oral de
pequenas quantidades de UC-II glicosilado (10 mg/dia) ao longo de 42 dias em cinco
mulheres que sofrem de dor significativa nas articulações reduziu muito a dor, incluindo
rigidez matinal, rigidez após períodos de descanso, etc. estudo clínico, Gupta et al. (2009)
avaliaram o colágeno tipo II não desnaturado (UC-II) contra glucosamina e condroitina na
dor artrítica em cavalos. Os cavalos foram avaliados quanto à dor geral, dor durante a
manipulação dos membros, dor após esforço físico e funções hepáticas e renais. Embora
o grupo tratado com glucosamina e condroitina tenha mostrado redução significativa na
dor, sua eficácia foi menor em comparação com UC-II. Clinicamente, os animais tratados
com UC-II toleraram bem o tratamento sem quaisquer sinais de toxicidade. Todos os
parâmetros monitorados, ou seja, peso corporal, temperatura corporal, frequência
respiratória, pulso, funções hepáticas (bilirrubina, GGT e ALP) e funções renais (BUN e
creatinina) permaneceram inalterados.

Em um modelo de sinovite aguda equina induzida experimentalmente, dois suplementos

nutracêuticos AT (Cavalor ArtiTec, Nutriquine NV, Bélgica) e HP (Hydro-P, Sonac,
Holanda) foram investigados em relação à inflamação e biomarcadores do metabolismo
da cartilagem (Van de Water et al. 2016). A sinovite foi induzida na articulação intercarpal
direita por injeção de 0,5 ng de lipopolissacarídeo (LPS) de E. coli. As amostras de líquido
sinovial foram analisadas para contagens de células nucleadas totais (TNCC), proteína
total (TP) e um conjunto abrangente de biomarcadores de inflamação (PGE 2, IL-6, MMPs,
CP-11 e CAG). Ambos os nutracêuticos reduziram significativamente TP, TNCC e PGE 2.
Não houve efeitos adversos graves.

O mercado de suplementos para articulações tem vários outros produtos como mexilhão
de lábios verdes da Nova Zelândia, cartilagem de tubarão, um extrato lipídico da erva
Biota orientalis, etc. (May et al. 2015; Gupta 2016; Cap. 26).

5. Nutracêuticos como impulsionadores de desempenho

O mercado nutracêutico está repleto de produtos nutracêuticos para cavalos, alegando
retardar a fadiga, aumentar a resistência, construir músculos, reduzir o tempo de
recuperação, etc. Esses chamados ergogênicos supostamente aumentam a capacidade
de desempenho dos cavalos no exercício. O termo “ergogênico” é derivado da palavra
grega “ergo” que significa “trabalho”. Infelizmente, muitos desses suplementos não são

1141
suportados por evidências científicas. Existem vários mecanismos pelos quais vários
alimentos ou suplementos nutricionais atuam para melhorar o desempenho físico. No
entanto, é essencial considerar as informações disponíveis sobre um determinado
suplemento e determinar a fundamentação científica e a validade de tais alegações.
Alguns dos nutracêuticos mais comumente usados para tais fins são discutidos aqui.

5.1 Carnitina

A L-carnitina é um nutriente condicionalmente essencial que desempenha um papel

importante na β-oxidação mitocondrial. Por estar envolvido na utilização de ácidos graxos
para energia na célula muscular, acredita-se que a suplementação de carnitina
economizaria glicogênio muscular e reduziria a produção de ácido lático, melhorando
assim a função muscular e a resistência. Como um suplemento dietético para atletas, a L-
carnitina foi investigada por seu potencial para aumentar a β-oxidação durante o exercício
(Huang e Owen 2012). Enquanto alguns estudos mostraram um impacto positivo no VO (2
máx.) E outras medidas de desempenho, outros encontraram resultados contraditórios.
Como a L-carnitina é conhecida por aumentar a função endotelial vascular, ela também
pode melhorar o fluxo sanguíneo para os tecidos musculares e diminuir o estresse
hipóxico e suas sequelas resultantes. Os autores concluíram que a L-carnitina é
considerada um suplemento seguro para atletas e demonstrou ter um impacto positivo no
processo de recuperação após o exercício. Em cavalos, foi demonstrado (Zeyner e
Harmeyer 1999) que a suplementação oral de 5–50 g de L-carnitina/dia elevou a
concentração de carnitina no plasma sanguíneo para cerca de duas vezes sua
concentração basal. No entanto, não existia uma relação clara entre uma dose
administrada por via oral de carnitina e o aumento de L-carnitina. É essencial demonstrar
inequivocamente um aumento nos níveis de carnitina muscular após
suplementação de carnitina.

5.2 Creatina

A creatina está intrinsecamente envolvida no metabolismo energético dos músculos. A

creatina é convertida em fosfocreatina, que anaerobicamente doa fosfato em adenosina
fosfato, criando ATP. Aumentar o ATP disponível pode facilitar a contração muscular e,
portanto, pode contribuir para o aumento da resistência. A fosfocreatina inadequada é
considerada uma das principais causas de fadiga muscular durante exercícios intensos.
Com base nisso, é comum suplementar a dieta do cavalo com creatina para melhorar o
desempenho. Existem vários estudos em voluntários humanos sobre o efeito da
suplementação de creatina no desempenho e na resistência ao exercício. Em um desses
estudos, Becque et al. (2000) investigaram os efeitos de 6 semanas de suplementação
1142
oral de creatina durante um programa periodizado de treinamento de força dos flexores do
braço em 1RM dos flexores do braço, área muscular do braço e composição corporal. Foi
descoberto que a suplementação de creatina durante o treinamento de força dos flexores
do braço leva a maiores aumentos na força muscular dos flexores, área muscular do
braço e massa livre de gordura do que o treinamento de força sozinho. No entanto, em
cavalos, a suplementação de creatina não pareceu fornecerem benefícios. Em um estudo
sobre a suplementação oral de creatina no desempenho do cavalo quarto de milha,
usados em corridas de barril, Teixeira et al. (2016) descobriram que a suplementação com
28 g de creatina/100kg de peso corporal, por via oral por 45 dias, alterou
significativamente a atividade de LDH, glicose plasmática e PCV. No entanto, não houve
mudança nos escores de tempo, freqüência cardíaca e lactato plasmático; as variáveis
são consideradas indicadores de desempenho. Os autores concluíram que não houve
melhora no desempenho atlético equino devido à suplementação oral de creatina. A falta
de efeito da suplementação de creatina no desempenho equino pode ser devido à baixa
biodisponibilidade da creatina em cavalos. Em um estudo realizado para examinar a
absorção oral de creatinina em cavalos por Sewell e Harris (1995), uma única dose de
mono hidrato de creatina aumentou apenas modestamente os níveis de creatina. Mesmo
após 13 dias de alimentação com 0,15 g/kg de peso corporal de creatina, não houve
efeito no conteúdo muscular de creatina. Ao contrário dos humanos, os cavalos têm
capacidade limitada de absorver creatina quando administrada por via oral. Isso é
compreensível, pois o cavalo está normalmente exposto a níveis muito baixos de creatina
em sua dieta herbívora e como uma espécie não tem capacidade de absorver creatina por
via oral. Isso é diferente de humanos, onde a dieta contém carne animal e peixes que
contêm altos níveis de creatina. Portanto, é improvável que os suplementos dietéticos
contendo creatina melhorem o desempenho em cavalos.

5.3 Aminoácidos

Os aminoácidos e os suplementos de proteína são considerados como tendo a

capacidade de construir massa muscular, influenciando assim o desempenho do cavalo.
Além disso, os aminoácidos de cadeia ramificada (BCAA) têm a capacidade de impactar
positivamente o conteúdo de glicogênio muscular, o que pode ter alguma influência na
fadiga. Em ciclistas treinados em endurance do sexo masculino, o tratamento com BCAA
mostrou um interessante efeito poupador de glicogênio muscular em comparação com o
placebo. Acredita-se que este efeito poupador de glicogênio pode se traduzir em uma
fadiga muscular retardada durante o exercício exaustivo sustentado (Blomstrand et al.
1996). Além disso, o tratamento com BCAA pode fornecer intermediários de carbono para

1143
o ciclo do ácido cítrico quando as reservas de carboidratos endógenos estão esgotadas.
Isso poderia aumentar mais ainda o atraso no início da fadiga (Wagenmakers, 1999).

Os mecanismos centrais da fadiga desempenham um papel importante no desempenho

do exercício. O aumento da 5-hidroxitriptamina (5-HT) cerebral é conhecido por causar
uma deterioração no desempenho esportivo e de exercício. Atualmente, há evidências de
que o exercício aumenta os níveis plasmáticos de triptofano livre (fTRP) levando a um
aumento na razão fTRP/BCCA, que está associado ao aumento de 5-HT cerebral e
consequentemente aumento da fadiga. Foi demonstrado que os níveis cerebrais de 5-HT
podem ser manipulados com drogas e têm um efeito previsto na fadiga de exercícios
mediada pelo cérebro. No entanto, a influência das manipulações nutricionais da razão
fTRP/BCAA no desempenho não está bem estabelecida, em parte devido a problemas
metodológicos. A alimentação com carboidratos durante exercícios prolongados,
entretanto, levou a reduções dramáticas em fTRP/BCCA e melhorou o desempenho. No
entanto, tem sido difícil distinguir entre os efeitos da alimentação com carboidratos sobre
o efeito direto dos músculos e os efeitos centrais (Davis 1995).

Como o BCAA e o triptofano competem entre si para entrar no sistema nervoso central
(SNC), a suplementação de BCAA pode reduzir a entrada de triptofano e, assim, atrasar o
início da fadiga. Farris et al. (1998) infundiu cavalos por via intravenosa com triptofano
para aumentar sua entrada no SNC e previsivelmente diminuiu o tempo de fadiga em
cerca de 15%. Isso foi tomado como evidência de que um aumento no triptofano
circulante pode diminuir o desempenho de resistência em cavalos. No entanto, isso não
pode ser replicado com a administração oral de triptofano. Novamente, a suplementação
de BCAA em grandes quantidades não teve influência esperada no desempenho de
resistência.

Mikulski et al. (2015) investigaram a eficácia da suplementação oral de BCAA e L-ornitina

L-aspartato (BCAA + OA) em homens saudáveis para reduzir a concentração plasmática
de amônia e melhorar o desempenho psicomotor durante exercícios exaustivos. No final
do exercício prolongado, a concentração plasmática de amônia foi maior no grupo BCAA
+ OA do que no grupo placebo. As reduções na amônia plasmática durante a recuperação
foram significativamente maiores no grupo BCAA + OA do que no grupo placebo.
Concluiu-se que o BCAA + OA é uma forma útil de melhorar o tempo de reação de
múltipla escolha durante o exercício de alta intensidade e acelerar a eliminação da
amônia na fase de recuperação após o exercício em homens jovens saudáveis.

Infelizmente, os efeitos benéficos da suplementação de BCAA no desempenho do

exercício não puderam ser demonstrados de forma consistente. Em um estudo em
1144
cavalos trotadores (Stefanon et al. 2000), os cavalos foram tratados por 4 semanas de
suplementação com uma mistura de BCAA (9,0 g L-leucina, 4,5 g isoleucina e 4,5 g L-
valina) 1 hora antes do treinamento. A suplementação com BCAA resultou em maior alfa-
cetoisocaproato em cavalos suplementados. No entanto, o tratamento com BCAA por 4
semanas não afetou nenhum marcador do metabolismo energético, como lactato
plasmático, glicose, alantoína ou concentração de piruvato. Da mesma forma, em um
estudo (Casini et al. 2000) sobre o efeito da suplementação de BCAA na resposta
metabólica a uma corrida de 1.600 m em uma esteira em trotadores normais, lactato,
amônia, proteína total, ureia, ácido úrico, creatinina, FFA, creatinina quinase, LDH e AST
foram monitorados. No entanto, nenhum desses parâmetros apresentou diferença
estatística entre os grupos. Os resultados sugeriram que a suplementação com BCAA não
foi eficaz em melhorar o desempenho em cavalos saudáveis e bem alimentados.

5.4 HMB (b-hidroxi b-metil butirato)

Tanto em cavalos quanto em humanos, ajudas ergogênicas nutricionais têm sido usadas
junto com um programa de treinamento apropriado para melhorar a capacidade física. O
HMB é um metabólito do aminoácido essencial leucina e é produzido endogenamente em
animais e no homem. É um suplemento dietético comum em entusiastas de exercícios. O
HMB está envolvido na biossíntese do colesterol e acredita-se que durante o treinamento
pesado e exercícios, a suplementação com HMB pode ajudar na síntese do colesterol no
tecido muscular, mitigar os danos musculares e promover o crescimento e função
máximos. Em uma dieta normal de equinos, como a alfafa, o HMB está presente apenas
em pequenas quantidades.

Em um estudo, cavalos que receberam suplemento de HMB tiveram menor degradação

do tecido muscular em comparação com os controles (Nissen et al. 1997). Em outro
estudo conduzido para determinar o efeito da suplementação oral de HMB e γ-Oryzanol
(GO) nos índices de dano muscular induzido por exercício em cavalos de corrida puro-
sangue (Ostaszewski et al. 2012), verificou-se que os níveis de creatina quinase e lactato
foram menores no grupo tratado em comparação com os controles. Concluiu-se que a
suplementação de HMB e GO fornecem prevenção de dano muscular induzido por
exercício. Novamente, em uma meta-análise de ensaios clínicos randomizados
controlados, foi descoberto que a suplementação de HMB reduziu os níveis séricos de
LDH e CK em adultos após lesão muscular induzida por exercício, mostrando sua eficácia
como agente de recuperação de lesão muscular (Rahimi et al. 2018). A alimentação de
HMB melhora a resistência e reduz os danos musculares em cavalos.

1145
6. O Uso de Suplementos Nutricionais em Cavalos de Adestramento e
CCE
Uma pesquisa realizada sobre o uso de suplementos nutricionais em cavalos de
adestramento e eventos esportivos (Agar et al. 2016) mostrou que uma ampla gama de
suplementos foi usada e a maioria dos proprietários e cavaleiros percebeu que eles eram
importantes para a saúde e o desempenho de seus cavalos. Os principais problemas de
saúde e desempenho identificados para cavalos de adestramento foram
energia/comportamento, claudicação e problemas nas costas e músculos. Para cavalos
de equitação, foram os níveis de resistência e condicionamento físico, claudicação e
energia/comportamento. Em ambas as disciplinas, claudicação e/ou problemas nas
articulações foram identificados como questões importantes, além dos problemas
comportamentais. Os autores concluíram que, apesar dos baixos níveis de evidência para
a maioria dos suplementos, este estudo mostrou que eles eram amplamente usados em
ambas as disciplinas. A maioria dos proprietários afirmou sentir que os suplementos
fizeram uma diferença marcante para seus cavalos. Uma vez que tais suplementos
alimentares são amplamente utilizados e seu valor percebido é ótimo para a saúde e
desempenho do cavalo, a profissão veterinária deve ter uma compreensão das opiniões e
preocupações dos proprietários/cavaleiros.

7. Observações Finais e Orientações Futuras

Suplementos nutricionais e de saúde são frequentemente usados para melhorar a saúde
e/ou desempenho, além de prevenir deficiências de vitaminas, minerais, eletrólitos etc., no
homem e nos animais. O mercado de nutracêuticos equinos cresceu muito nos últimos 25
anos, mas há preocupações com seu crescimento sustentado. Desde que o termo
nutracêuticos foi cunhado, não foi apreciado totalmente e não tem nenhum significado
regulamentar. Infelizmente, isso encorajou apenas uma atenção limitada à avaliação da
segurança e eficácia dos produtos e à qualidade de fabricação. Até que a indústria
desenvolva capacidades e a capacidade de demonstrar os benefícios clínicos de seus
produtos e a capacidade de fabricar com aderência à qualidade de seus processos,
continuará sendo um momento desafiador para a indústria nutracêutica.

Referências
Agar C, Gemmill R, Hollands T et al (2016) The use of nutritional supplements in dressage and eventing horses. Vet
Rec Open 3:e000154
Bagchi D, Misner B, Bagchi M et al (2002) Effects of orally administered undenatured type II collagen against arthritic
inflammatory disease: a mechanistic exploration. Int J Clin Pharmacol Res 22:101–110

1146
 Becque MD, Lochmann JD, Melrose DR (2000) Effects of oral creatine supplementation on muscular strength and
body composition. Med Sci Sports Exer 32:654–658
Blomstrand E, Ek S, Newsholme EA (1996) Influence of ingesting a solution of branched-chain amino acids on plasma
and muscle concentrations of amino acids during prolonged submaximal exercise. Nutrition 12:485–490
Casini L, Gatta D, Magni L et al (2000) Effect of prolonged branchedchain amino acid supplementation on metabolic
response to anaerobic exercise in Standardbreds. J Equine Vet Sci 20:120–123
Chan PS, Caron JP, Rosa GJM et al (2005) Glucosamine and chondroitin sulphate regulate gene expression and
synthesis of nitric oxide and prostaglandin E2 in articular cartilage explants. Osteoarthr Cartil 13:387–394
Crandell K, Duren S (2001) Nutraceuticals: what are they and do they work? In: Pagan JD (ed) Advances in equine
nutrition, vol II. Nottingham University Press, Nottingham, pp 29–36
Davis JM (1995) Carbohydrates, branched-chain amino acids, and endurance: the central fatigue hypothesis. Int J
Sport Nutr 5:S29–S38
DeFelice SL (1995) The nutraceutical revolution: Its impact on food industry R&D. Trends Food Sci Technol 6:59–61
Du J, White N, Eddington ND (2004) The bioavailability and pharmacokinetics of glucosamine hydrochloride and
chondroitin sulphate after oral and intravenous single dose administration in the horse. Biopharm Drug Dispos 25:109–
116
Eddington ND, Du J, White N (2001) Evidence of the oral absorption of chondroitin sulphate as determined by total
disaccharide content after oral and intravenous administration to horses. Proc Annu Convention AAEP 47:326–328
Farris JW, Hinchcliff KW, McKeever KH et al (1998) Effect of tryptophan and of glucose on exercise capacity of horses.
J Appl Physiol 85:807–816
Fenton JL, Chlebek-Brown KA, Peters TL et al (2000) Glucosamine HCl reduces equine articular cartilage degradation
in explant culture. Osteoarthr Cartil 8:258–265
Gupta RC (2016) Nutraceuticals in arthritis. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity.
Academic/Elsevier, Amsterdam, pp 161–176
Gupta RC, Canerdy TD, Skaggs P et al (2009) Therapeutic efficacy of undenatured type-II collagen (UC-II) in
comparison to glucosamine and chondroitin in arthritic horses. J Vet Pharmacol Ther 32:577–584
Hanson RR, Smalley LR, Huff GK et al (1997) Oral treatment with a glucosamine-chondroitin sulfate compound for
degenerative joint disease in horses: 25 cases. Equine Pract 19:16–21
Huang A, Owen K (2012) Role of supplementary L-carnitine in exercise and exercise recovery. Med Sport Sci 59:135–
142
Laverty S, Sandy JD, Celeste C et al (2005) Synovial fluid levels and serum pharmacokinetics in a large animal model
following treatment with oral glucosamine at clinically relevant doses. Arthritis Rheum 52:181–191
Lopez Vaz A (1982) Double-blind clinical evaluation of the relative efficacy of ibuprofen and glucosamine sulphate in
the management of osteoarthrosis of the knee in out-patients. Curr Med Res Opin 8:145–149
May K, Gupta RC, Miller J et al (2015) Therapeutic efficacy and safety evaluation of a novel chromium supplement
(Crominex® +3-) in moderately arthritic horses. Jacobs J Vet Sci Res 2(1):014
Mikulski T, Dabrowski J, Hilgier W et al (2015) Effects of supplementation with branched chain amino acids and
ornithine aspartate on plasma ammonia and central fatigue during exercise in healthy men. Folia Neuropathol 53:377–
386
Nissen S, Fuller J, Rathmacher J (1997) β-hydroxy β-methylbutyrate (HMB) supplementation in training horses.
Metabolic Technologies Bulletin, Ames (Cited by Crandell and Duren 2001)
Ostaszewski P, Kowalska A, Szarska E et al (2012) Effect of β-hydroxy-β-methylbutyrate and γ-oryzanol on blood
biochemical markers in exercising Thoroughbred race horses. J Equine Vet Sci 32:542–551
Rahimi MH, Mohammadi H, Eshaghi H et al (2018) The effects of betahydroxy- methylbutyrate supplementation on
recovery following exercise-induced muscle damage: a systemic review and metaanalysis. J Am Coll Nutr 20:1–10
Sewell DA, Harris RC (1995) Effect of creatine supplementation in the Thoroughbred horse. Equine Vet J 18:239–242
Stefanon B, Bettini C, Guggia P (2000) Administration of branchedchain amino acids to standardbred horses in
training. J Equine Vet Sci 20:115–119
Teixeira FA, Araujo AL, Ramalho LO et al (2016) Oral creatine supplementation on performance of Quarter Horses
used in barrel racing. J Anim Physiol Anim Nutr 100:513–519
Van de Water E, Oosterlinck M, van Weeren PR et al (2016) The effect of two nutraceuticals on inflammation and
biomarkers of cartilage metabolism in equine synovial fluid after experimentally induced acute synovitis. Equine Vet J
48(Suppl 49):7 (Abstract)
Wagenmakers A (1999) Nutritional supplements: effects on exercise performance and metabolism. In: Lamb D, Murray
R (eds) Perspectives in exercise science and sports medicine. The metabolic basis of performance in exercise and sport.
Indiana Cooper Publishing, Carmel, pp 207–260
Zeyner A, Harmeyer J (1999) Metabolic functions of L-carnitine and its effects as feed additive in horses. A review.
Arch Tieremahr 52:115–138

1147
 Nutracêuticos para camelídeos
Tarun K. Gahlot

Resumo
Os nutracêuticos estão se tornando cada vez mais populares na profissão veterinária e
são usados popularmente em camelídeos como suplementos dietéticos para melhorar a
saúde, prevenir doenças e fornecer suplementação nutricional. O leite de camelo está
entre os suplementos dietéticos com profundos valores nutracêuticos. Cerca de 16
nutracêuticos ativos foram identificados e discutidos. Esses são emulsificantes naturais de
galactolipídios; antioxidantes naturais de tocotrienol; beta glucanos derivados de aveia;
fosfolipídios; traços biodisponíveis e macrominerais; componentes da nanotecnologia e
“oligossacarídeos” de açúcares simples; tamponamento natural e culturas de levedura;
Ácidos gordurosos de ômega-3; prebióticos; vitamina D3, fósforo, cálcio e culturas de
levedura; proteínas digestíveis do leite; ácido glutâmico; metil sulfonil metano (MSM);
aglutinante de toxina microscópica; nucleotídeos; e vitamina C. A suplementação
nutracêutica melhora a saúde cartilaginosa dentro da articulação, além de manter a
qualidade da pele e da pelagem. Eles têm um impacto profundamente benéfico na saúde
do corpo e os compostos antioxidantes podem ajudar na prevenção do câncer.

Palavras-chave: Camelídeos · Nutracêuticos · Emulsionantes naturais de galactolipídios ·

Antioxidantes de tocotrienol · Beta glucanos derivados da aveia · Fosfolipídios · Traços e
macrominerais biodisponíveis · Oligossacarídeos · Ácidos graxos ômega-3 · Prebióticos ·
Vit. D3 · Fósforo · Culturas de cálcio e levedura · Proteínas do leite digerível · Ácido
glutâmico · MSM (metilsulfonilmetano) · Aglutinante de toxina microscópica · Nucleotídeos
e vitamina C

T. K. Gahlot. Rajasthan University of Veterinary and Animal Sciences, Bikaner, Rajasthan, India

1. Introdução
Os nutracêuticos estão se tornando cada vez mais populares na profissão veterinária. O
bem-estar de um animal pode ser melhorado por uma dieta contendo nutracêuticos. Eles
foram descritos pelo Conselho Nutracêutico Veterinário da América do Norte como uma
“substância não medicamentosa produzida em uma forma purificada ou extraída e
administrada por via oral para fornecer os agentes necessários para a estrutura e função
normal do corpo com a intenção de melhorar a saúde e o bem-estar. sendo de animais.”
1148
Os nutracêuticos são comumente usados no cuidado de saúde de um grande animal.
Suplementos vitamínicos e minerais para gado e cavalos são usados em ambientes
estáveis, pastagens e equinos. A suplementação nutracêutica melhora a saúde
cartilaginosa dentro da articulação, além de manter a qualidade da pele e da pelagem.
Eles têm um impacto profundamente benéfico na saúde do corpo e os compostos
antioxidantes podem ajudar na prevenção do câncer.

Os camelídeos são ruminantes modificados ou “pseudo ruminantes”. Como os

ruminantes, eles usam a fermentação do intestino anterior para quebrar a celulose em
espécies de plantas fibrosas. Mas, em contraste com os ruminantes, seus pré-estômagos
são compostos de três compartimentos, em vez dos verdadeiros ruminantes (ovelhas,
cabras, gado, veados) quatro. As três seções de um estômago de camelídeo são
chamadas C-1, C-2 e C-3; cada compartimento tem uma função especializada a
desempenhar. Os ruminantes e camelídeos dedicam a maior parte de sua capacidade
digestiva à fermentação da fibra vegetal. É importante que os camelídeos comam
bastante material fibroso para manter a saúde normal e, como tal, o consumo de
alimentos duros concentrados deve ser sempre reduzido ao mínimo. A digestão natural do
intestino anterior deve ser mantida porque é crucial para a saúde e vitalidade dos
camelídeos do Novo Mundo.

A natureza da ração pode ter efeitos dramáticos no bem-estar, já que todos os alimentos
vão direto para o tanque de fermentação do estômago anterior, onde fatores como
motilidade, eructação de gás, regurgitação, remasticação e re-engolir fazem parte do
processo normal de alimentação.

O leite de camelo está entre os suplementos dietéticos com profundos valores

nutracêuticos. Do ponto de vista medicinal, possui um rico conteúdo de proteínas e
minerais protetores que podem ter um papel vital para aumentar o mecanismo de defesa
imunológica (Yagil 1982). Ele contém uma quantidade maior de zinco que oferece um
papel significativo no desenvolvimento e manutenção de um sistema imunológico
funcionando normalmente (Hansen et al. 1982). O leite de camelo tem atividade
semelhante à insulina e funções regulatórias e imunomoduladoras nas células β. Ele
contém uma boa quantidade de proteínas protetoras, incluindo lisozima, lactoferrina,
lactoperoxidase, enzima da proteína de reconhecimento de peptidoglicano (PGRP),
imunoglobulina G e imunoglobulina secretora A. Esses fatores imunológicos estão
presentes em maiores concentrações no leite de camelo (El Agamy et al. 1992).

Os nutracêuticos parecem ser benéficos tanto no tratamento quanto na prevenção de

doenças porque muitas vezes possuem ações químicas únicas que não estão disponíveis
1149
em produtos farmacêuticos, por exemplo, a capacidade da silimarina no cardo leiteiro de
proteger as células do fígado de danos e quercetina (encontrada em uma variedade de
plantas) para estabilizar certas células do sistema imunológico (mastócitos) para evitar
reações alérgicas.

A eficácia e dosagem dos nutracêuticos devem ser bem examinadas, pois não há agência
reguladora encarregada de determinar as diretrizes para os nutracêuticos. Alguns animais
podem ser potencialmente alérgicos à planta ou fonte de alimento do produto
nutracêutico; portanto, os testes desses produtos devem ser realizados exaustivamente.
Existem muitos nutracêuticos ativos cuja composição e modo de ação são discutidos
resumidamente a seguir.

2. Nutracêuticos Ativos
2.1 Emulsificantes naturais de galactolipídios

Galactolipídios são glicoglicerolipídios livres de fósforo em plantas e são, na verdade, uma

combinação de moléculas de açúcar e gordura que criam o meio adequado para a
absorção de ingredientes ativos através da parede intestinal. Galactolipídios constituem a
maior parte das membranas fotossintéticas. A fotossíntese oxigenada em cianobactérias e
plantas depende da presença de galactolipídios. Recentemente, foi demonstrado que o
galactolipídeo, 1,2-di-o-alfa-linolenoil-3-o-beta-D-galactopiranosilsn-glicerol (1), pode ser
importante para a atividade antiinflamatória da rosa canina (Rosa canina), uma planta
medicinal com efeito antiinflamatório documentado em doenças como a artrite. Este
galactolipídeo também ocorre em concentrações relativamente altas em certas
leguminosas (por exemplo, feijão-comum, ervilha), vegetais folhosos (por exemplo, couve,
alho-poró, salsa, perilla e espinafre), vegetais de caule (por exemplo, aspargos, brócolis e
couve de Bruxelas) e frutas e vegetais (por exemplo, pimenta, pimentão e abóbora). Além
disso, o composto 1 foi isolado do espinafre e de várias plantas medicinais por
fracionamento guiado por bioensaios como um galactolipídeo com possíveis efeitos
preventivos do câncer (Christensen 2009).

2.2 Antioxidantes naturais de tocotrienol

Os antioxidantes do tocotrienol são uma forma natural de vitamina E. Eles são 40-60
vezes mais biodisponíveis do que outras formas de vitamina E ajudando a manter a
integridade das células que formam o revestimento do intestino para auxiliar na absorção.
Estudos mecanísticos recentes indicam que outras formas de vitamina E, como γ-
tocoferol (γT), δ-tocoferol (δT) e γ-tocotrienol (γTE) têm propriedades antioxidantes e anti-
1150
inflamatórias únicas que são superiores a αT na prevenção e terapia contra doenças
crônicas. Estas formas de vitamina E eliminam as espécies reativas de nitrogênio (ROS),
inibem a ciclo-oxigenase (COX) - e os eicosanóides catalisados pela 5-lipoxigenase (5-
LOX) e suprimem a sinalização pró-inflamatória, como NFκBα e AMPK. Esses dadosB e STAT3/STAT6. Ao contrário
da αT, outras formas de vitamina E são significativamente metabolizadas em
carboxicromanóis por meio da oxidação ω da cadeia lateral iniciada pelo citocromo P-450
(CYP4F2). Carboxicromanóis de cadeia longa, esp. 13’-carboxicromanóis demonstraram
ter efeitos antiinflamatórios mais fortes do que as vitaminas não metabolizadas e,
portanto, podem contribuir para os efeitos benéficos das formas de vitamina E in vivo
(Jiang 2014).

2.3 Beta glucanos derivados da aveia

Beta glucanos têm propriedades prebióticas que apoiam as bactérias benéficas no

intestino para promover uma absorção saudável. Seis gramas de β-glucano de aveia
adicionados à dieta AHA Etapa II e atividade física moderada melhoraram o perfil lipídico
e causaram uma diminuição no peso e, portanto, reduziram o risco de eventos
cardiovasculares em indivíduos do sexo masculino com excesso de peso com
hipercolesterolemia leve a moderada (Reyna- Villasmil et al. 2007).

2.4 Fosfolipídios

Os fosfolipídios têm propriedades emulsificantes e mostraram influenciar ativamente a

digestibilidade e a absorção dos nutrientes.

2.5 Minerais biodisponíveis e macrominerais

Os oligoelementos biodisponíveis são minerais essenciais, fornecidos em uma forma

digestível para suprir as necessidades dos camelídeos produtivos. A suplementação com
altos níveis de zinco disponível tem mostrado resultados muito positivos, e o fermento de
selênio é comprovadamente 20 vezes menos tóxico que o selênio inorgânico, o que é
muito benéfico para a saúde.

Spears (2003) descobriu que a absorção de selênio e cobre é muito menor em ruminantes
do que em não ruminantes. A baixa absorção desses minerais em ruminantes se deve às
modificações que ocorrem no ambiente ruminal. A biodisponibilidade do selênio é
reduzida pelo alto teor de enxofre da dieta e pela presença de glicosídeos cianogenéticos
em certas leguminosas. A alimentação com selênio orgânico a partir de selenometionina
ou levedura seleniada resulta em concentrações muito mais altas de selênio no tecido e
no leite do que as obtidas com selenito. O alto teor de molibdênio na dieta em
combinação com o teor de enxofre moderado a alto resulta na formação de tiomolibdatos
1151
no rúmen. Os tiomolibdatos reduzem muito a absorção de cobre, e certas espécies de
tiomolibdato podem ser absorvidas e interferir sistemicamente no metabolismo do cobre.
Independentemente do molibdênio, o alto teor de enxofre na dieta reduz a absorção de
cobre, talvez por meio da formação de sulfeto de cobre. O alto teor de ferro na dieta
também reduz a biodisponibilidade do cobre. Os fatores dietéticos que afetam a
biodisponibilidade do zinco em ruminantes não estão bem definidos. O fitato não afeta a
absorção de zinco em ruminantes porque a fitase microbiana no rúmen degrada o fitato. O
manganês é muito pouco absorvido em ruminantes, e pesquisas limitadas sugerem que
altos níveis de cálcio e fósforo na dieta podem reduzir a absorção de manganês. Minerais
quelados fornecem formas biodisponíveis de vitaminas essenciais, cobre, manganês e
zinco, que são requeridos por importantes processos metabólicos em um jovem cria em
desenvolvimento.

2.6 Componentes de nanotecnologia e oligossacarídeos de açúcares simples

Os oligossacarídeos são usados para apoiar o sistema imunológico. Os organismos

prejudiciais absorvidos pela corrente sanguínea são bloqueados por altos níveis de
atividade macrofágica. Em conjunto com uma dieta de forragem natural de alta qualidade,
a exposição a bolores/fungos patogênicos será reduzida e, se houver um problema, o
mecanismo de autodefesa ativo tratará deles.

2.7 Tampão Natural e Culturas de Levedura

O material de tamponamento natural e as culturas de levedura ajudam a estabilizar o pH

no intestino anterior e estimulam o desenvolvimento de bactérias benéficas para a
digestão de fibras. Isso é importante ao fornecer alimentos à base de cereais, pois o
amido é convertido em ácido lático, o que pode aumentar a acidez e criar um ambiente
desfavorável para as bactérias que digerem as fibras.

2.8 Ácidos graxos ômega-3

Os ácidos graxos ômega-3 fornecem uma fonte diária de componentes de gordura

essenciais. Os ácidos graxos ômega-3 são amplamente reconhecidos como compostos
antiinflamatórios e equilibram os ácidos graxos ômega-6 pró-inflamatórios na proporção
correta. Os ômega 3 também são encontrados em grandes concentrações nos
espermatozóides e são essenciais para manter a integridade da parede celular e prevenir
a perda de umidade/óleo da pele. Uma pele saudável significa uma produção de fibras de
alta qualidade.

Gulliver et al. (2012) descobriram que os efeitos específicos dos ácidos graxos
poliinsaturados ômega-3 (n-3) sobre o sucesso reprodutivo em ruminantes não foram
1152
examinados em detalhes. Há fortes evidências ligando o consumo de dietas ricas em n-3
com marcadores inflamatórios periféricos circulantes reduzidos, como PGF (2α). Os
eicosanóides inflamatórios, incluindo PGF (2α), em particular, podem afetar
significativamente os resultados da reprodução, como o início do estro, a sobrevivência do
embrião e o parto. Parece haver uma evidência ligando a suplementação de n-3 com
maior tempo de estro e parto associado com PGF reduzido (2α), os efeitos do n-3 em
outros resultados mensuráveis de sucesso reprodutivo, como taxa de gravidez,
sobrevivência embrionária e intergeracional os efeitos na saúde e na produção de
descendentes são amplamente desconhecidos.

Demonstrou-se que o aumento dos ácidos graxos ômega nos tecidos da vaca proporciona
benefícios no desempenho reprodutivo, imunidade e resistência a doenças, e mudanças
hormonais positivas (Jenkins 2004).

2.9 Prebióticos

Os prebióticos fornecem nutrição específica para bactérias amigáveis que digerem fibras
para manter uma boa digestão e liberar nutrientes para o crescimento, reprodução e
desempenho.

2.10 Vitamina D3, Fósforo, Cálcio e Culturas de Levedura

As culturas de vitamina D3, fósforo, cálcio e levedura contêm altos níveis de vitamina D3,
fósforo disponível e cálcio em uma forma muito palatável. Todos os três são cruciais para
o desenvolvimento saudável do esqueleto, e culturas de fermento adicionais são
adicionadas para melhorar significativamente a digestibilidade do fósforo da alimentação
normal.

2.11 Proteínas Digestíveis Do Leite

As proteínas do leite, particularmente as caseínas, são altamente digeríveis no intestino e

são uma fonte de aminoácidos de alta qualidade. As proteínas do leite prontamente
digeríveis fornecem aminoácidos essenciais para apoiar o crescimento de todos os
tecidos com alto teor de proteína, a saber, músculos, ligamentos, tendões, cabelo e
cascos.

2.12 Ácido glutâmico

O ácido glutâmico é um intensificador de sabor natural e um importante suporte nutricional

para a cura natural e a saúde intestinal em momentos de estresse.

2.13 Metil sulfonil metano (MSM)

1153
MSM é uma fonte de enxofre, que ajuda a formar ligações cruzadas com outras moléculas
que mantêm a força e a integridade dos tecidos conjuntivos. Também é essencial para a
fabricação de colágeno.

2.14 Aglutinante de Toxina Microscópica

Uma mistura de compostos adsorventes microscópicos que auxiliam na expulsão natural

de biotoxinas, incluindo micotoxinas, encontradas na ração e no meio ambiente.

2.15 Nucleotídeos

A divisão celular é a base do crescimento e do desenvolvimento e envolve a divisão do

RNA e do DNA. Os nucleotídeos fornecem unidades estruturadas essenciais para a
produção de RNA e DNA nas células e são muito importantes para manter o
desenvolvimento normal e saudável.

2.16 Vitamina C

A vitamina C é necessária para a formação de colágeno no corpo que forma a matriz dos
tecidos conjuntivos nos mamíferos. A suplementação de vitamina C, portanto, pode ajudar
no crescimento do tecido, na cura do tecido após trauma e no sistema imunológico dos
camelídeos.

3. Observações finais e orientações futuras

Produtos nutracêuticos são frequentemente incluídos em rações para animais, mas estão
amplamente disponíveis em muitas formas, incluindo cápsulas, comprimidos, pós, etc.
Nutracêuticos são usados para a prevenção e tratamento de doenças comuns em
animais, incluindo doenças cardiovasculares, osteoartrite, doença periodontal, disfunção
cognitiva, e câncer, com sua validação por meio de ensaios clínicos. Os camelídeos são
usados atualmente como indústria de carne, lã/cabelo e leite, além da criação e da prática
de esportes. Os nutracêuticos podem desempenhar um papel fundamental na
manutenção da saúde de vários sistemas corporais desses camelídeos. Os nutracêuticos
veterinários podem ser obtidos em lojas de veterinários, consultórios veterinários,
farmácias e na Internet.

Leituras Sugeridas
Allen JD, Gawthorne JW (1987) Involvement of the solid phase of rumen digesta in the interaction between copper,
molybdenum and sulphur in sheep. Br J Nutr 58:265–276
Bremner I, Humphries WR, Phillippo M et al (1987) Iron induced copper deficiency in calves: dose response
relationships and interactions with molybdenum and sulphur. Anim Prod 45:403–414
Brower V (1998) Nutraceuticals: poised for a healthy slice of the healthcare market? Nat Biotechnol 16:728–731
Cao J, Henry PR, Guo R et al (2000) Chemical characteristics and relative bioavailability of supplemental organic zinc
sources for poultry and ruminants. J Anim Sci 78:2039–2054
1154
 Christensen LP (2009) Galactolipids as potential health promoting compounds in vegetable foods. Recent Pat Food
Nutr Agric 1 (1):50–58
Cousins RJ, Liuzzi JP, Lichten LA (2006) Mammalian zinc transport, trafficking, and signals. J Biol Chem 281:24085–
24089
De Domenico I, Ward DM, Kaplan J (2008) Regulation of iron acquisition and storage: consequences for iron-linked
disorders. Nat Rev Mol Cell Biol 9:7281
De Felice SL (2002) FIM rationale and proposed guidelines for the Nutraceutical Research & Education Act-NREA,
November 10, 2002. Foundation for Innovation in Medicine. Available at:
http://www.fimdefelice.org/archives/arc.researchact.html
El Agamy EI, Ruppanner R, Ismail A et al (1992) Antibacterial and antiviral activity of camel milk protective proteins. J
Dairy Res 59:169–175
Elizabeth AC (2002) Over-the-counter products: nonprescription medications, nutraceuticals, and herbal agents. Clin
Obstet Gynecol 45(1):89–98
FDA/CFSAN resources page (1994) Food and Drug Administration Web site. Dietary Supplement Health and
Education Act of 1994. Available at: http://vm.cfsan.fda.gov/~dms/dietsupp.html
Gulliver CE, Friend MA, King BJ et al (2012) The role of omega-3 polyunsaturated fatty acids in reproduction of sheep
and cattle. Anim Reprod Sci 131(1–2):9–22
Hansen M, Fernandes G, Good R (1982) Nutrition and immunity: the influence of diet on autoimmunity and the role of
zinc in the immune response. Annu Rev Nutr 2:151–157
Heyland DK (2001) In search of the magic nutraceuticals: problems with current approaches. J Nutr 131(9):2591S–
2595S
Hunt JR (2003) Bioavailability of iron, zinc, and other trace minerals from vegetarian diets. Am J Clin Nutr 78(3):633S–
639S. https://doi.org/10.1093/ajcn/78.3.633S
Jenkins T (2004) Challenges of meeting cow demands for omega fatty acids. In: Florida ruminant nutrition symposium,
pp 52–66
Jiang Q (2014) Natural forms of vitamin E: metabolism, antioxidant and anti-inflammatory activities and the role in
disease prevention and therapy. Free Radic Biol Med 72:76–90
Nelson NJ (1999) Purple carrots, margarine laced with wood pulp? Nutraceuticals move into the supermarket. J Natl
Cancer Inst 91:755–757
Reyna-Villasmil N, Bermúdez-Pirela VMD et al (2007) Oat-derived β-glucan significantly improves HDLC and
diminishes LDLC and Non-HDL cholesterol in overweight individuals with mild hypercholesterolemia. Am J Ther
14(2):203–212
Spears JW (2003) Trace mineral bioavailability in ruminants. J Nutr 133 (Suppl 5):1506S–1509S
Voulgaris D (2011) Alternative therapies in camelids. Faculty publications and other works – large animal clinical
sciences. http://trace.tennessee.edu/utk_largpubs/26
Whitman M (2001) Understanding the perceived need for complementary and alternative nutraceuticals: lifestyle
issues. Clin J Oncol Nurs 5:190–194
Yagil R (1982) Camels and camel milk. Food and Agriculture Organization, Animal Production. Health Paper 26
Zeisel SH (1999) Regulation of nutraceuticals. Science 285:185–186

1155
 Nutracêuticos na saúde e doença avícola
Ayhan Filazi e Begüm Yurdakok-Dikmen

Resumo
O uso de antibióticos em doses subterapêuticas com o objetivo de acelerar o crescimento
em aves de criatório foi proibido ou restrito em muitos países, pois causa o
desenvolvimento de microrganismos resistentes a antibióticos e é um perigo para a saúde
dos consumidores. A exclusão de antibióticos das dietas de aves de criatório causou
vários problemas de desempenho e de saúde; portanto, há uma necessidade crescente
de substâncias naturais alternativas que possam criar efeitos semelhantes. Para este
propósito, vários aditivos para rações foram desenvolvidos para melhorar o crescimento e
influenciar a saúde de forma positiva. Essas substâncias desempenham um papel
importante no desenvolvimento e continuidade das funções fisiológicas normais dos
animais e na saúde e na proteção contra doenças infecciosas. Algumas dessas
substâncias são conhecidas como “nutracêuticos”. Nesta seção, nutracêuticos como
probióticos, simbióticos, enzimas, ácidos orgânicos e fitobióticos e seu mecanismo de
ação e possível uso na melhoria do crescimento, sistema imunológico e bem-estar são
discutidos.

Palavras-chave: Nutracêuticos · Aves · Probióticos · Prebióticos · Simbióticos · Ácidos

orgânicos · Enzimas · Fitobióticos

1. Introdução
Na avicultura, os alvos mais importantes são acelerar o crescimento e aumentar a
eficiência da alimentação. A fim de obter um desempenho ideal no gado, muitos fatores,
incluindo a genética dos animais, qualidade da alimentação, condições ambientais e
doenças, devem ser considerados (Rinttila e Apajalahti 2013). Como é o caso entre todos
os animais, os tratos digestivos dos animais domésticos são o sistema mais importante
para mediar a ingestão e o uso de alimentos. Também é significativo no que diz respeito à
exposição a patógenos ambientais (Yegani e Korver 2008). Quando as funções do
sistema digestivo são interrompidas, a digestão e a absorção dos alimentos são
interrompidas, o que põe em risco a saúde e o desempenho dos animais. A mucosa
intestinal funciona tanto como auxiliar na absorção de nutrientes quanto como barreira
contra o conteúdo intestinal negativo e tecidos internos do hospedeiro (Rinttila e Apajalahti
1156
2013). O equilíbrio dinâmico entre a camada de mucosa do intestino, células epiteliais,
microbiota e células imunológicas permite suas funções mucosas (Schenk e Mueller
2008). A perturbação deste equilíbrio dinâmico devido a uma composição negativa da
alimentação e/ou doenças infecciosas influencia a saúde e o desempenho dos animais de
criação de forma negativa.

Antimicrobianos têm sido usados em doses subterapêuticas na avicultura há muitos anos,

com o objetivo de manter esse equilíbrio e melhorar o desenvolvimento dos animais
(Filazi et al. 2017). No entanto, uma vez que o uso a longo prazo de antibióticos causa o
desenvolvimento de microrganismos resistentes, para evitar ameaças à saúde do
consumidor e reduzir os efeitos ambientais negativos, os antibióticos foram proibidos ou
significativamente limitados em muitos países desenvolvidos e em desenvolvimento (Filazi
et al. 2015). A exclusão de antibióticos da dieta de aves domésticas causou problemas de
desempenho nesses animais e um aumento na incidência de certas doenças de aves
domésticas, como enterite necrótica e disbacteriose (Huyghebaert et al. 2011). Com isso
em mente, há uma necessidade crescente de substâncias naturais alternativas que
possam criar efeitos semelhantes. Em resposta, várias substâncias para rações e aditivos
para rações foram desenvolvidas para ajudar os animais a crescer e ter um impacto
positivo em sua saúde. Essas substâncias desempenham um papel importante na
mudança e manutenção das funções fisiológicas normais e da saúde animal e na ajuda
na proteção contra doenças infecciosas. Alguns deles são conhecidos como
“nutracêuticos” (Das et al. 2012).

Enquanto os nutracêuticos são usados em humanos como um tratamento alternativo para

câncer, diabetes, osteoporose e depressão, em animais domésticos, eles são usados
para regular a população de bactérias intestinais e o sistema imunológico e para proteger
e tratar infecções entéricas, para corrigir a morfologia intestinal, e para aumentar o
desempenho de crescimento (Sugiharto 2016).

Geralmente, é aceito que o equilíbrio entre o número de bactérias úteis e bactérias

patogênicas (pelo menos 85% do total de bactérias são compostas de bactérias úteis) tem
importância vital para o hospedeiro e que uma interrupção neste equilíbrio prejudica a
saúde intestinal dos animais aviários. (a morfologia da parede intestinal é interrompida e
as respostas imunes são induzidas) (Choct 2009). Nesse caso, as galinhas precisam de
mais energia e seu desenvolvimento fica mais lento. Para superar infecções microbianas
em galinhas, a resposta inflamatória é importante (Kogut 2013). Por outro lado, se a
inflamação não pode ser controlada, pode causar danos intestinais e interromper a função
digestiva (Brisbin et al. 2008). Além disso, a inflamação extrema pode interromper o
1157
metabolismo hospedeiro (Kogut 2013). Em suma, a microbiota intestinal é importante para
manter o equilíbrio imunológico e evitar a inflamação (Lan et al. 2005). Bactérias
comensais mostram atividades antiinflamatórias com ácidos graxos de cadeia curta
(SCFAs), que sintetizam para evitar danos intestinais (Brestoff e Artis 2013). Com a
adição de nutracêuticos à dieta, é possível alterar a população de microrganismos nos
intestinos dos animais aviários e facilitar o crescimento de bactérias úteis (Adil e Magray
2012).

Outro efeito dos nutracêuticos está relacionado à sua capacidade de reduzir os efeitos
indesejáveis/adversos dos antimicrobianos. As aplicações orais ou parenterais de
antibióticos causam uma redução da população da microbiota intestinal,
independentemente do local da infecção (Sullivan et al. 2001). Assim, uma vez que as
variedades de bactérias intestinais mudam, a síndrome do intestino irritável e infecções
por Clostridium difficile podem ser observadas (Rashid et al. 2012). Além disso,
considerando os resultados indesejáveis do uso sistemático de antimicrobianos, um
reservatório da microbiota intestinal de genes resistentes a antibióticos pode se formar e a
transferência horizontal de genes das cepas de bactérias pode aumentar na forma de
alterações na composição de carboidratos. Então, a população de certas bactérias
intestinais aumenta e as atividades metabólicas que contribuem para a alteração da
digestão podem ocorrer nas respostas imunológicas dos órgãos distais. A única maneira
de reduzir ou eliminar esse tipo de provável efeito negativo entre a microbiota intestinal é
usar mais produtos especiais para um fator de infecção específico (Frei et al. 2015).
Dentro deste contexto, aplicações como nutracêuticos são frequentemente aplicadas.

O objetivo desta seção é discutir as substâncias nutracêuticas usadas em aves de

criatório para melhorar seu desenvolvimento, regular seu sistema imunológico e manter
sua saúde. Esta seção também apresenta uma discussão sobre os prováveis
mecanismos de efeito dos nutracêuticos.

2. Probióticos
O uso de bactérias exógenas (probióticos) para manter a saúde e evitar doenças é
comum há anos, apesar de seus resultados bastante complexos (Huyghebaert et al.
2011). É bem conhecido que os tipos de microrganismos usados nas preparações
probióticas modernas são bastante variáveis, embora sejam usados principalmente
Lactobacillus (LAB) e Bifidobacteria. Entre eles estão microorganismos como
Lactobacillus bulgaricus, L. acidophilus, L. casei, L. helveticus, L. lactis, L. salivarius, L.

1158
plantarum, Streptococcus thermophilus, Enterococcus faecium, E. faecalis e
Bifidobacterium spp. (Khaksefidi e Rahimi 2005; Kabir 2009). Algumas amostras de
probióticos comerciais usadas em aves são apresentadas na Tabela 1.

Tabela 1 Algumas amostras de probióticos comerciais usados em aves

Bacillus amyloliquefaciens
Bacillus subtilis
Bacillus subtilis + B. licheniformis
Bacillus subtilis + Clostridium butyricum + Lactobacillus acidophilus
Bacillus subtilis + Saccharomyces cerevisiae
Bacillus subtilis + Bifidobacterium: animalis, bifidum, longum + Lactobacillus: acidophilus, casei, delbrueckii
subsp. bulgaricus, fermentum, plantarum + Lactococcus lactis subsp. lactis + Saccharomyces cerevisiae +
Streptococcus thermophilus
Bacillus: licheniformis, megaterium, mesentericus, polymyxa, subtilis + Saccharomyces boulardii +
Bifidobacterium bifidum + Lactobacillus: acidophilus, bulgaricus, plantarum + Streptococcus faecium
Bifidobacterium: bifidum, thermophilus + Enterococcus faecium + Lactobacillus: acidophilus, casei
Bifidobacterium bifidum + Lactobacillus amylovorus + Enterococcus faecium
Enterococcus faecium
Enterococcus faecium + Lactobacillus acidophilus
Enterococcus faecium + Lactobacillus: acidophilus, casei, plantarum
Lactobacillus acidophilus + Streptococcus faecium
Lactobacillus acidophilus + Bifidobacterium bifidum + Pediococcus faecium
Lactobacillus: acidophilus, casei, plantarum
Lactobacillus: paracasei, plantarum + Lactococcus lactis + Saccharomyces cerevisiae
Lactobacillus: rhamnosus, farciminis
Lactobacillus salivarius + Pediococcus parvulus
Lactobacillus: plantarum, casei + Lactococcus lactis + Carnobacterium divergens + Saccharomyces
cerevisiae
Lactobacillus: acidophilus, casei, plantarum, lactis + Enterococcus faecium + Bacillus subtilis
Lactobacillus fermentum
Lactobacillus: plantarum, delbrueckii subsp. bulgaricus, acidophilus, rhamnosus + Bifidobacterium bifidum
+ Streptococcus salivarius subsp.
thermophilus + Enterococcus faecium + Aspergillus oryzae + Candida pintolepesii
Nenhum nome comercial fornecido

Devido aos seus efeitos benéficos, os probióticos são comumente usados para evitar a
infecção por microrganismos patógenos em vários ambientes, incluindo aves de criatório,
e para fornecer um meio protetor e eficaz de aumentar o peso corporal, regular a ingestão
de ração/alimentos e a digestibilidade, melhorando as respostas imunológicas, e
reduzindo as taxas de mortalidade (Armut e Filazi 2012).

Não se espera que o probiótico ideal seja influenciado negativamente pelas atividades
normais da microflora no sistema digestivo. Os efeitos benéficos no ambiente do
hospedeiro dependem do crescimento rápido e fácil do probiótico no ambiente, ser
resistente a vários valores de pH e ácidos orgânicos, regular as células do sistema
1159
imunológico intestinal, aderir às células intestinais e não interromper os tecidos intestinais
e a permeabilidade (Kum e Sekkin 2012; Musa et al. 2009). A esse respeito, é importante
que os probióticos apresentem um impacto inibidor direto sobre os patógenos e/ou
tenham alta resistência à colonização intestinal. Nesses casos, os probióticos inibem a
eficácia das bactérias patógenas por meio da mediação de diferentes mecanismos e
reduzem a frequência e a duração das doenças. Eles podem mostrar seus efeitos
benéficos na saúde por meio do sistema digestivo, sistema imunológico, metabolismo
e/ou saúde mental do hospedeiro. Geralmente, eles revelam seus efeitos benéficos à
saúde como sendo especiais para cepas e, mesmo que sejam do mesmo tipo, podem não
mostrar seus efeitos em uma cepa, mas se manifestarão em outra. Por esse motivo,
devido às semelhanças nos metabolismos, algumas de suas características podem ser
comuns (Fijan 2014).

Os efeitos dos probióticos em aves podem ser resumidos da seguinte forma:

1. Com seus efeitos competitivos e antagônicos, eles mantêm a microflora intestinal

normal contra bactérias patógenas.

2. Ao aumentar as atividades do sistema digestivo ou atividades de enzimas bacterianas e

ao reduzir a produção de amoníaco, eles causam mudanças no metabolismo das aves.

3. Ao regular a ingestão de alimentos, eles regulam a digestão.

4. Ao permitir a dissolução de substâncias orgânicas mediadas pelas bactérias, elas

contribuem para a sua absorção.

5. Ao aumentar os níveis de anticorpos ou atividades de macrófagos contra

microrganismos patógenos ou ao promover a secreção de citocinas, eles estimulam o
sistema imunológico e permitem a imunomodulação.

7. Ao influenciar positivamente a qualidade da água nos intestinos, eles controlam certos

microrganismos, como protozoários e coccidiose (Khaksefidi e Rahimi 2005; Lan et al.
2005; Kabir 2009; Brisbin et al. 2010).

Foi afirmado que, em nosso tempo, para aumentar a eficácia dos probióticos e fornecer
uma combinação de características eficazes, podem ser usados produtos comerciais com
diferentes mecanismos de efeito compostos por uma variedade de combinações de
probióticos. No entanto, devemos observar que as cepas bacterianas usadas para fins
probióticos podem exibir diferenças que são exclusivas para hospedeiros ou diferentes
tipos (Musa et al. 2009). O principal ponto a se ter em mente com esses produtos é que
os microrganismos com características de probióticos não são eficazes contra todos os
tipos de doenças, portanto, para obter os benefícios esperados de uma cepa especial
1160
para a doença, deve-se saber a dosagem adequada (geralmente 10 9 ufc/kg de ração para
aves) e período de uso. Além disso, um adjuvante que contém um microrganismo
probiótico pode ter riscos de efeitos colaterais e ser prejudicial a algumas atividades
metabólicas (Mikelsaar 2011).

Nossa informação ainda é limitada quanto ao motivo pelo qual as populações bacterianas
se tornam instáveis quando um único probiótico é adicionado. Por esta razão, e para
fortalecer a população natural de bactérias e eliminar patógenos competitivos, geralmente
são aplicadas misturas microbianas complexas. Sabemos que essa abordagem é
especialmente bem-sucedida em aves de criatório. Naqueles animais tratados com uma
mistura de bactérias anaeróbias comensais, os estudos mostraram reduções significativas
na população de Salmonella intestinal (Markowiak e Śliżewska 2018). A preocupação
mais importante relacionada aos probióticos é a resistência aos antibióticos neles e o
transporte dessa propriedade para as bactérias intestinais. As autoridades competentes e
instituições industriais começaram a publicar relatórios avaliando o risco de transferência
de resistência a antibióticos para probióticos, expondo suas preocupações (Nawaz et al.
2011).

3. Prebióticos
Os prebióticos, também conhecidos como “fibras dietéticas”, causam alterações especiais
na composição e/ou eficácia da flora do trato digestivo e induzem impactos fisiológicos
benéficos não apenas no cólon, mas também em todo o corpo. Eles também podem
reduzir os riscos associados a vários patógenos (Fernandez et al. 2016). Uma substância
prebiótica deve estimular a atividade das bactérias intestinais e/ou seu desenvolvimento
de forma seletiva e não deve ser influenciada pelas atividades gástricas, hidrolisada por
enzimas do sistema digestivo, digerida nos intestinos ou digerida a uma taxa
significativamente baixa (Kolida e Gibson 2011).

Ao contrário dos probióticos, os prebióticos são componentes inanimados; as células

hospedeiras não os utilizam. Enquanto os probióticos são mais eficazes no intestino
delgado, os prebióticos são mais eficazes no cólon (Kum e Sekkin 2012). Os prebióticos
com essas características que são amplamente usados em aves modernas incluem
inulina, fruto-oligossacarídeos (FOS), lactulose, oligo frutose, galacto oligossacarídeos
(GOS), trans galacto-oligossacarídeos (TOS), manam oligossacarídeos (MOS),
oligossacarídeos de soja (SOS), xilo oligossacarídeos (XOS), lactitol, pirodextrinas e
isomalto oligossacarídeos (IMO) (Gibson e Barret 2010; Huyghebaert et al. 2011; Kim et

1161
al. 2011; Alloui et al. 2013). Legumes, frutas e cereais são fontes naturais de prebióticos.
No entanto, a maioria das substâncias usadas hoje foi sintetizada industrialmente por
meio de métodos químicos e enzimáticos (Markowiak e Śliżewska 2018).

Em aves, os prebióticos reduzem a mortalidade causada por patógenos intestinais e

fortalecem os sistemas de defesa do hospedeiro. Não se sabe exatamente como os
prebióticos conseguem esse efeito. É provável que isso ocorra quando os números de
LAB nos intestinos estão aumentados e essas bactérias se ligam aos locais onde os
patógenos estarão se ligando (antagonismo competitivo) (Alloui et al. 2013). A produção
de SCFA causada por prebióticos aumenta os níveis de acidez do intestino, o que
comprime os patógenos neles. Além disso, como os prebióticos permitem que os
patógenos no intestino sejam removidos rapidamente, eles também melhoram a resposta
imunológica do animal (Kim et al. 2011). Os prebióticos têm uma interação direta com as
células do sistema imunológico nos intestinos e permitem que os microrganismos
benéficos sejam colonizados com mais sucesso nesses locais. Dessa forma, eles
fortalecem o sistema imunológico de forma indireta (Janardhana et al. 2009).

Um estudo realizado com frangos de corte (Kim et al. 2011) constatou que a adição de
prebióticos à dieta (FOS e MOS usados separadamente) não alterou o consumo de ração,
a eficiência alimentar ou as taxas de mortalidade, quando comparados aos grupos de
controle. No entanto, causou um aumento nos pesos vivos. Por outro lado, alguns autores
(Biggs et al. 2007; Janardhana et al. 2009) afirmaram que a adição de prebióticos à dieta
não revelou aumento no peso vivo de frangos de corte. Essas diferenças podem ser
explicadas em relação aos tipos de prebióticos usados em cada estudo e às
características exclusivas de cada prebiótico. Por exemplo, inulina e FOS são prebióticos
preferidos para bifidobactérias; por isso, evitam o estabelecimento de bactérias patógenas
nos intestinos hospedeiros, o que favorece o crescimento das bifidobactérias. MOS (para
patógenos como E. coli e Salmonella spp.) Tem um efeito como um análogo do receptor;
no entanto, pode se ligar a patógenos e causar sua eliminação junto com o conteúdo do
intestino (Huyghebaert et al. 2011).

Além disso, alguns estudos descobriram que os prebióticos regulam as características de

barreira do epitélio do intestino, que fornecem energia para as células do intestino grosso
e que previnem a diarreia relacionada aos antibióticos. Eles também reduzem a carga
renal, aumentando a extração de nitrogênio do intestino e reduzem as taxas de
lipoproteína de baixa densidade e triglicerídeos séricos no fígado, enquanto aumentam a
produção de imunoglobulina A no sistema imunológico. Devido a esses diferentes efeitos,
os prebióticos podem ser empregados em diferentes áreas entre as aves, principalmente
1162
para aumentar sua taxa de conversão alimentar, para criar um efeito imunomodulador,
para melhorar a qualidade do produto (como reduzir os níveis de colesterol em ovos),
para regular a microbiota intestinal, e para reduzir a eficácia dos microrganismos
patogênicos (Roberfroid et al. 2010).

4. Simbióticos
Os simbióticos são definidos como uma mistura de probióticos e prebióticos que permitem
que alimentos microbianos vivos/aditivos para rações permaneçam vivos no trato
digestivo e que possibilitam sua implantação, causando influências positivas no
hospedeiro, que estimulam o crescimento de forma seletiva e/ou que estimular o
metabolismo de um ou um número limitado de metabolismo de bactérias (Kolida e Gibson
2011). Enquanto os prebióticos são selecionados independentemente por seu efeito
complementar, os probióticos são selecionados para fornecer os efeitos benéficos
desejados no hospedeiro. Em um simbiótico, um probiótico é escolhido para fornecer
efeitos benéficos no hospedeiro, e um prebiótico deve ser um componente específico que
estimula o crescimento e/ou metabolismo de um microrganismo probiótico selecionado.
Nesse efeito sinérgico, o efeito de um prebiótico, quando tomado abaixo da dosagem
necessária, é limitado, portanto, uma pequena quantidade do probiótico é necessária.
Além disso, o prebiótico selecionado deve estar mais interessado no probiótico com o
qual será usado e deve ser seletivo em sua capacidade de promover o crescimento e o
desenvolvimento do hospedeiro. Em outras palavras, é necessário que o prebiótico apoie
o desenvolvimento dos microrganismos probióticos que são seletivamente preferidos
(Kum e Sekkin 2012).

Alguns autores argumentaram que os probióticos não são ativados pelos prebióticos, mas
que a área de impacto dos probióticos está no intestino delgado, enquanto a área de
impacto dos prebióticos está no intestino grosso. Se isso for verdade, não podemos
descrever um impacto simbiótico entre os dois componentes, mas, em vez disso,
devemos considerar isso como uma relação simbiótica com seus mecanismos individuais,
melhor descritos como sinergismo (Cerezuela et al. 2011). No entanto, não importa que
tipo de relação existe entre eles, vários estudos realizados com animais mostraram que
combinações de prebióticos e probióticos têm efeitos benéficos na regulação da flora
intestinal, na prevenção de septicemia e no tratamento de doenças intestinais
inflamatórias e irritáveis, câncer de cólon, doença óssea e certas doenças cirúrgicas
(Kolida e Gibson 2011). Algumas amostras simbióticas comerciais usadas em aves hoje
são fornecidas na Tabela 2.
1163
 Tabela 2 Algumas amostras simbióticas comerciais usadas em aves
Probióticos Prebióticos
Enterococcus faecium Fruto oligossacarídeos
Bifidobacterium animalis, Pediococcus acidilactici, Enterococcus faecium,
Inulina
Lactobacillus reuteri, Lactobacillus salivarius
Lactobacillus: acidophilus, casei, salivarius, plantarum, rhamnosus, brevis;
Inulina
Bifidobacterium: bifidum, lactis; Streptococcus thermophilus
Nenhum nome comercial fornecido

Os dados atuais relacionados aos efeitos dos simbióticos na saúde animal são bastante
limitados. Pesquisa metagenômica mais avançada precisa ser conduzida a esse respeito.
No entanto, foi comprovado que eles reduzem os patógenos nos intestinos, então os
probióticos e prebióticos têm um efeito sinérgico (Markowiak e Slizewska 2018).

Em um estudo realizado com um probiótico e FOS, os pesquisadores descobriram que,

quando estes foram usados separadamente, a colonização de S. enteritidis nos intestinos
dos frangos foi reduzida e, quando combinados, eles foram mais eficazes (Fukata et al.
1999) Além disso, foi demonstrado que uma combinação de Enterococcus faecium e FOS
aumenta o crescimento em frangos de corte semelhante à avilamicina, o que desencadeia
um crescimento significativo nas vilosidades do intestino delgado (Awad et al. 2009). De
forma semelhante, quando uma combinação de FOS e Bacillus subtilis foi aplicada a 720
pintos de corte, causou aumento no peso corporal médio diário e melhora na eficiência
alimentar. Uma redução nas taxas de diarreia e mortalidade também foi observada nos
animais (Li et al. 2008). Foi afirmado que, quando um prebiótico composto de Bacillus
subtilis, B. licheniformis e bactérias Clostridium butyricum e parede celular de levedura e
oligossacarídeos de xilose foi dado aos frangos durante o período de criação, aumentou
seus pesos corporais, melhorou a eficiência alimentar, aumentou tamanho do peito,
redução da gordura abdominal, aumento do pH muscular, redução das perdas durante o
cozimento, redução da formação de malondialdeído e redução do teor de cromo dos
músculos das pernas. Em contrapartida, este simbiótico melhorou o desempenho dos
frangos e teve um efeito positivo na qualidade da carne e nas características oxidativas
relevantes (Cheng et al. 2017). Os simbióticos mostraram induzir efeitos mais positivos
nos parâmetros de desempenho do que os antibióticos; incluindo a redução da gordura
abdominal. Como os parâmetros de desempenho são a principal influência da indústria,
os simbióticos como substitutos dos antibióticos devem representar uma vantagem
competitiva (Toghyani et al. 2011).

1164
5. Enzimas exógenas
As enzimas exógenas são obtidas principalmente das bactérias Bacillus subtilis,
Lactobacillus acidophilus e Streptococcus faecium; fungos Trichoderma longibrachiatum e
Aspergillus oryzae; e levedura Saccharomyces cerevisiae (Slominski 2011). Várias
enzimas exógenas, incluindo beta-glucanase, xilanase, amilase, alfa-galactosidase,
protease, lipase e fitase, foram adicionadas à ração de aves por muitos anos (Adeola e
Cowieson 2011). Enzimas exógenas são significativamente importantes, especialmente
para frangos alimentados com matérias-primas para ração, como milho e soja, que
incluem componentes antinutritivos que dificultam a digestão e a absorção da ração no
trato digestivo (como polissacarídeos e inibidores de protease) (Yegani e Korver 2008).
Além disso, quando essas substâncias aditivas são inseridas na ração de uma maneira
extraordinária para reduzir os custos da ração, elas não podem ser completamente
digeridas ou usadas pelas galinhas; por esse motivo, enzimas exógenas podem ser
necessárias (Costa et al. 2008). Nesses casos, as enzimas exógenas tratam das
deficiências em enzimas endógenas específicas que são necessárias para hidrolisar
fatores antinutricionais na ração e para digerir aquelas matérias-primas que não podem
ser digeridas por galinhas (Sugiharto 2016).

Quando a adição de enzimas à ração é comparada com a de outros animais, fica claro
que os aditivos enzimáticos são preferidos principalmente entre os animais de criação.
Isso porque, em aves, a velocidade de passagem do alimento pelo sistema digestivo é
curta; eles não desenvolvem uma flora microbiana nem produzem outras enzimas para
quebrar essas enzimas exógenas para quebrar as paredes das células vegetais. Da
mesma forma, foi observado que o uso de glucanase em rações contendo cevada e
centeio e o uso de celulase em rações ásperas contendo grandes quantidades de
celulose são úteis (Slominski 2011).

Quando a xilanase foi adicionada à ração, podemos observar um aumento nas

proporções dos ácidos lático e orgânico, uma redução na produção de amoníaco e um
aumento nas concentrações de SCFA (Adeola e Cowieson 2011). Da mesma forma, os
intestinos de aves alimentadas com uma dieta contendo xilanase exibem um aumento no
número de LAB, coliformes e Salmonella (Nian et al. 2011). Por outro lado, outros estudos
revelaram que a adição de xilanase não altera o número de LAB e coliformes no jejuno de
animais domésticos (Yang et al. 2008). Essas diferenças podem ser atribuídas à atividade
enzimática que é influenciada por vários fatores, como temperatura, umidade, composição
da ração, idade e raça do animal e, principalmente, o nível de pH do canal intestinal (Yang
et al. 2008; Adeola e Cowieson 2011).
1165
O uso combinado de probióticos com enzimas permite que os polissacarídeos dos grãos
de cereais da parede celular que não estão sendo digeridos se fragmentem
(principalmente trigo e cevada), de modo que a viscosidade intestinal é aumentada pela
redução dos polissacarídeos como a digestibilidade dos nutrientes e seus os valores de
energia metabólica são melhorados. Além disso, verificou-se que as enzimas exógenas
reduzem o desenvolvimento e a fermentação de microrganismos prejudiciais no intestino
e desencorajam a colonização. A este respeito, as enzimas podem ser consideradas uma
substância aditiva de ração alternativa aos antibióticos, que são comumente usados para
regular o crescimento e o desenvolvimento na criação de aves (Kum e Sekkin 2012).

Para que as enzimas exógenas mostrem seus efeitos, os frangos não devem ser
influenciados por enzimas de digestão endógena no trato digestivo ou em níveis de pH
baixos (<4) (Sugiharto 2016). Para obter o máximo benefício das enzimas, é
recomendado que mais de uma enzima seja usada como uma combinação, uma vez que
pode haver a presença de diferentes tipos e variedades de componentes antinutritivos na
ração. Em suma, os efeitos benéficos das combinações de enzimas dependem da
composição da ração (Adeola e Cowieson 2011).

6. Ácidos orgânicos
Os ácidos orgânicos são encontrados amplamente na natureza como componentes
normais dos tecidos vegetais e animais. Eles também se formam comumente no ceco de
animais domésticos como resultado da fermentação microbiana de carboidratos
(Huyghebaert et al. 2011). Vários ácidos orgânicos têm diferentes características físicas e
químicas que podem ser usados adicionando-os à ração ou à água potável. Isso pode ser
feito sozinho ou em combinação. O uso combinado de ácidos orgânicos demonstrou ser
mais eficaz do que o uso sozinho (Menconi et al. 2014).

Certos ácidos orgânicos (como o ácido fórmico e propiônico) têm sido usados por muitos
anos para proteger os alimentos para animais; eles e seus sais são referidos como
“conservantes para alimentos” nos países da União Europeia. Aqueles com cadeias curtas
(C1 – C7) têm efeitos antimicrobianos. Estes incluem ácidos monocarboxílicos simples,
como ácidos fórmico, acético, propiônico e butírico; ácidos carboxílicos com hidroxilo, tais
como ácidos láctico, málico, tartárico e cítrico; e ácidos carboxílicos com ligações duplas,
como os ácidos fumárico e sórbico (Shahidi et al. 2014).

Os ácidos orgânicos têm características ácidas fracas e podem se dissociar parcialmente.

Alguns deles podem existir como sais de sódio, potássio ou cálcio. As vantagens dos sais
1166
são que eles geralmente são inodoros e menos corrosivos, podem se dissolver mais na
água e são sólidos e menos voláteis do que os ácidos durante a preparação da ração, de
modo que podem ser facilmente processados (Huyghebaert et al. 2011). Os ácidos
orgânicos são amplamente utilizados em aves de criatório devido às suas características
antimicrobianas, sua capacidade de regular os intestinos e seus efeitos positivos na
saúde intestinal, uso nutricional, desempenho, eficiência do ovo e qualidade (Khan e Iqbal
2016).

Alguns estudos observaram um aumento significativo na profundidade da cripta e na

altura, largura e área das vilosidades no intestino delgado de frangos de corte cujas
rações receberam aditivos de ácido orgânico, isoladamente ou em combinação (Adil et al.
2010; Kum et al. 2010; Rodríguez-Lecompte et al. 2012). Resultados semelhantes
também foram obtidos em relação aos sais de ácidos orgânicos (Paul et al. 2007). O
aumento da altura das vilosidades causa o epitélio intestinal, que funciona como uma
barreira natural contra o fortalecimento de substâncias tóxicas e bactérias patogênicas no
intestino. Dessa forma, os ácidos orgânicos ou seus sais reduzem a colonização de
patógenos intestinais, devido aos seus efeitos antimicrobianos e sua capacidade de
aumentar a altura das vilosidades. Além disso, aumentam a digestão e a absorção de
nutrientes (Iji e Tivey, 1998). Em alguns estudos (Adil et al. 2010), quando ácidos
orgânicos foram adicionados à dieta de frangos de corte, houve aumento nos números de
LAB no íleo e ceco, uma redução no número de Enterobacteriaceae e Salmonella spp., E
um aumento no peso corporal e eficiência alimentar. A aplicação de ácidos orgânicos em
aves leva a melhorias no desempenho e na saúde quando usados em altas e baixas
dosagens, e podem causar uma redução na altura das vilosidades intestinais e na
profundidade das criptas (Smulikowska et al. 2009).

Com a adição de ácidos orgânicos à água potável, os pesquisadores observaram uma

redução nos patógenos no estômago/proventrículo e na água, uma melhora na microflora
intestinal, um aumento na digestão da ração e uma aceleração no crescimento (Hamed e
Hassan 2013). Da mesma forma, foi demonstrado que as misturas de ácidos orgânicos
(ácido fumárico, formato de cálcio, propionato de cálcio, sorbato de potássio, butirato de
cálcio, lactato de cálcio e óleo vegetal hidrogenado) são mais eficazes do que antibióticos
estruturados com polipeptídeo como fator de crescimento para reduzir E. coli e
Salmonella spp. nos intestinos (Hassan et al. 2010).

As características antimicrobianas dos ácidos orgânicos dependem de sua transformação

para não serem dissociadas em uma forma dissociada, de seus valores de pKa e de suas
características hidrofóbicas. Os ácidos orgânicos passam da membrana semipermeável
1167
da bactéria para o citoplasma da célula na forma dissociada em uma rodovia (Van
Immerseel et al. 2006). Assim, na célula onde o pH é quase 7, eles deprimem as enzimas
bacterianas (como descarboxilases e catalases) e os sistemas de transporte de nutrição
são dissociados. Como a parede celular bacteriana normalmente possui uma estrutura
lipídica, a hidrofobicidade do ácido permite que ele mostre sua atividade antimicrobiana.
Dessa forma, os ácidos orgânicos hidrofóbicos se ligam aos materiais lipídicos e
interrompem as atividades das bactérias (Huyghebaert et al. 2011).

Nem todos os ácidos orgânicos são eficazes na microflora. Cada ácido tem um espectro
de atividade antimicrobiana exclusivo. Os valores de pKa da maioria dos ácidos orgânicos
com atividade antimicrobiana variam entre 3 e 5. Entre esses, enquanto o ácido lático é
mais eficaz em bactérias, os ácidos acético, fórmico e propiônico têm uma atividade
antimicrobiana mais ampla, incluindo leveduras e fungos. Substâncias como o ácido
sórbico e fumárico têm principalmente efeitos antifúngicos (Kum et al. 2010). Foi
demonstrado que os sais de ácidos orgânicos (como formato de amônio e propionato de
cálcio) reduziram o número de coliformes em frangos de corte, mas não afetaram os
clostrídios (Paul et al. 2007). Além disso, o propionato de cálcio deprimiu os fungos na
alimentação melhor do que o formato de amônio, devido ao impacto antifúngico do ácido
propiônico ou propionato (Zha e Cohen 2014). Outro estudo mostrou que a adição de
diformato de potássio à dieta com uma proporção de 0,45% reduziu significativamente a
mortalidade causada por enterite necrótica (Mikkelsen et al. 2009).

O butirato de sódio (em duas formas diferentes, revestido com óleo vegetal e não sendo
coberto com ele) pode impedir a colonização de Salmonella no trato digestivo de frangos
de corte, mas somente sua forma coberta com óleo vegetal pode reduzir a colonização de
Salmonella no fígado; assim, em relação à Salmonella, a forma que é coberta com óleo
de ervas é mais eficaz do que a forma não revestida (Fernández-Rubio et al. 2009). Com
isso em mente, podemos prever que os óleos fitoterápicos que protegem o butirato de
sódio são mais duráveis contra o pH ácido, pois permitem que parte do butirato penetre
mais no intestino. Alguns autores (Hamed e Hassan 2013) afirmaram que a maioria dos
ácidos graxos com cadeias curtas, como o ácido propiônico e fórmico, são metabolizados
e absorvidos no trato digestivo superior de animais aviários, de modo que alteram a
microflora dos hospedeiros na parte inferior do trato digestivo de uma forma limitada. Por
esse motivo, alguns pesquisadores (Fernández-Rubio et al. 2009; Van Immerseel et al.
2006) propuseram que os ácidos graxos com cadeias curtas deveriam ser administrados
na forma de microencapsulação, para que fossem eficazes nas partes inferiores de trato
digestivo também. Uma matriz lipídica protetora usada para microencapsulação permite

1168
que os ácidos orgânicos sejam eficazes ao longo de todo o trato digestivo. Por exemplo, a
adição de um ácido orgânico, preparado em uma forma de encapsulamento, à dieta com
uma proporção de 0,2% causou o aumento da microflora útil (LAB) no intestino de animais
domésticos e a redução dos níveis de microflora prejudicial (Gheisari et al. 2007).

Entre os SCFA, o butirato tem o maior efeito bactericida contra bactérias sensíveis a
ácidos, como E. coli e Salmonella (Kwon e Ricke 1998). Em estudos in vitro, dependendo
do comprimento da cadeia de carbono e valores de pH dos ácidos orgânicos e da
condição de que haja uma quantidade suficiente de moléculas de ácido no ambiente não
sendo dissociadas e que permaneçam com as bactérias por muito tempo, tem sido
sugerido que as bactérias passam facilmente da membrana celular; reduzir os níveis de
pH intracelular; interromper o metabolismo intracelular de aminoácidos, estrutura da
membrana citoplasmática, proteínas e sistema de transporte de elétrons; e reduzir a
produção de ATP intracelular e revelar efeitos bactericidas/estáticos em troca. Como esse
efeito dos ácidos orgânicos se origina do acúmulo de ânions, que ocorre durante sua
dissolução, ele não tem impacto sobre as bactérias resistentes aos ácidos (Patten e
Waldroup 1988).

7. Ácidos graxos poliinsaturados

Os dois tipos principais de ácidos graxos poliinsaturados (PUFAs) mais importantes são
os ácidos graxos ômega-3 e ômega-6. Nenhum deles pode ser produzido pelo corpo; eles
devem ser adquiridos com a dieta. Por esse motivo, são classificados, para as pessoas,
como “ácidos graxos essenciais”. Exemplos de ácidos graxos ômega-3 são ácido α-
linolênico (ALA), ácido eicosapentaenóico (EPA) e ácido docosahexaenóico (DHA).
Exemplos de ácidos ômega-6 incluem ácido linolênico (LA) e ácido araquidônico (AA). De
acordo com um estudo (Sioen et al. 2006), adicionar PUFAs como o ômega-3 causa
regularmente efeitos benéficos relacionados às funções fisiológicas. Além disso, o
conteúdo de PUFA nas dietas modernas é baixo, em relação aos íons de ácidos graxos
ômega-3. Assim, a proporção de ácidos graxos ômega-6: ômega-3 é alta. Esse
desequilíbrio entre ômega-3 e ômega-6 é um fator importante na patogênese de várias
doenças, como câncer e doenças inflamatórias e autoimunes. Ao adicionar proativamente
ácidos graxos ômega-3 à dieta, a proporção de ômega-6: ômega-3 pode ser reduzida
(Simopoulos 2004). A carne de aves é conhecida por ser a principal fonte de PUFA na
alimentação humana (Sioen et al. 2006) e a adição de subprodutos de peixe (López-
Ferrer et al. 2001a) e óleo de semente de linho (López-Ferrer et al. 2001b) para a
alimentação de animais domésticos aumentou os ácidos graxos ômega-3 na carne de
1169
aves (especialmente ALA). No entanto, como esses produtos aumentam a oxidação
lipídica da carne, eles podem levar à redução do sabor (Bou et al. 2001). Em um estudo
(Ponte et al. 2008), os pesquisadores demonstraram que alimentar galinhas criadas soltas
com plantas verdes pode causar um aumento no peso vivo.

Verificou-se que, em aves, o óleo de peixe e o óleo de milho são amplamente usados
como fontes de ômega 3 e 6. O óleo de peixe aumenta as respostas imunológicas e o
óleo de milho reduz a resposta imunológica (Yang e Guo 2006). Além disso, em frangos
cuja ração recebeu aditivos ômega-3 (óleo de atum, óleo de girassol e óleo de palma),
aumentos foram observados no peso do baço, bronquite infecciosa, doenças de
Newcastle, títulos de anticorpos, interleucina-2 e interferon-γ concentrações. Em troca, as
respostas imunológicas em aves de criatório foram aumentadas (Maroufyan et al. 2012).
No entanto, em outro estudo (Al-Khalifa et al. 2012), o oposto foi encontrado: a adição de
ômega-3 na dieta (via óleo de peixe) reduziu as respostas imunológicas em frangos de
corte (fagocitose e proliferação de linfócitos).

O ácido linoleico conjugado (CLA) é outro tipo de PUFA usado para apoiar a alimentação
de aves e aumentar as respostas imunológicas em galinhas (Zhang et al. 2005). Quando
o CLA é adicionado à dieta, ele promove o crescimento de tecidos imunológicos como o
timo e a bursa em galinhas e estimula a proliferação de linfócitos T, enquanto aumenta a
produção de anticorpos. Esses estudos sugerem que resultados inesperados podem
ocorrer, devido às diferenças biológicas (gênero, idade e raça), tipo de ácido graxo
essencial introduzido, composição da dieta e diferença de equilíbrio entre os ácidos
graxos ômega-3 e ômega-6 na dieta com em relação aos fatores que influenciam a
resposta imune dos animais de criação (He et al. 2007).

Finalmente, o ômega-3 mostrou um efeito antimicrobiano em um ambiente in vitro

(Kankaanpaa et al. 2001). Ainda assim, alguns pesquisadores argumentam que o ômega-
3 e o CLA não têm muito efeito na microbiota geral do intestino do frango (Chanuwat et al.
2011).

Informações sobre aumentos no desempenho de animais de criação devido aos PUFAs

também são discutíveis. Embora alguns autores (Roy et al. 2008; Chanuwat et al. 2011)
tenham afirmado que a adição de ômega-3 (eicosapentaenóico e docosahexaenóico) ou
CLA à dieta apóia o crescimento de aves domésticas, outros (Zhang et al. 2005; Cho et al.
2013) afirmaram que estes não influenciam o desempenho do crescimento. Da mesma
forma, diferentes tipos e fontes de PUFAs, a composição alimentar dos animais e suas
variações biológicas podem explicar esses resultados discutíveis.

1170
8. Fitobióticos
Os fitobióticos são componentes bioativos naturais que podem ser extraídos de várias
fontes de ervas, como plantas e especiarias (Windisch et al. 2008). Os componentes
ativos dos fitobióticos são geralmente terpenóides, fenóis, glicosídeos, alcalóides e
componentes secundários semelhantes (Huyghebaert et al. 2011). Os fitobióticos são
divididos em quatro classes relacionadas à sua origem e características de
processamento: (1) plantas (florescendo, não lenhosas e não permanentes), (2)
especiarias (plantas com odor ou sabor denso que geralmente são adicionadas à
alimentação humana), (3) óleos essenciais (componentes lipofílicos voláteis) e (4)
oleorresinas (extratos obtidos de soluções não aquosas) (Windisch et al. 2008; Yang et al.
2009).

Em fitobióticos, o conteúdo e a composição química da substância ativa variam de acordo

com a parte da planta utilizada (semente, folha, etc.), fontes geográficas e época de
colheita (Windisch et al. 2008). Vários estudos têm mostrado que os fitobióticos
promovem o crescimento e têm propriedades antimicrobianas, antioxidantes e
antiinflamatórias. No entanto, quando avaliamos esses estudos de perto, podemos notar
que alguns resultados são contraditórios (Mohammadi Gheisar e Kim 2018).

Alguns estudos descobriram que a adição de uma mistura fitogênica a frangos de corte e
ração de pato tipo carne a uma proporção de 0,075% levou a aumentos no peso corporal
e na eficiência alimentar (Mohammadi Gheisar et al. 2015a, b). Segundo os autores, os
fitobióticos apresentam atividade antimicrobiana, estimulam a secreção de enzimas da
digestão e aumentam o sabor da ração, o que por sua vez aumenta seu consumo. Desta
forma, um aumento é visto no desempenho de crescimento dos animais de criação. No
entanto, outros estudos afirmaram que a adição de fitobióticos à ração de frangos de corte
e poedeiras causou uma redução significativa no consumo de ração (Maass et al. 2005;
Roth-Maier et al. 2005). Houve aumento nas atividades de tripsina, maltase e amilase
pancreática de frangos de corte (Jang et al. 2007) e na secreção da mucosa intestinal
(Jamroz et al. 2006), com a adição de óleos essenciais à dieta. Isso reduziu a adesão de
patógenos e proporcionou equilíbrio microbiano nos intestinos dos animais (Brenes e
Roura 2010).

Os efeitos antimicrobianos dos fitobióticos foram objeto de muitos estudos (Burt 2004; Si
et al. 2006; Panghal et al. 2011; Giannenas et al. 2013). A maioria deles demonstrou que
componentes fenólicos, como timol, carvacrol, fenilpropano, limoneno, geraniol e
citronelal, são os antimicrobianos mais eficazes. O impacto antimicrobiano dos fitobióticos
foi considerado dependente do local de fixação dos grupos funcionais hidroxila e alquila
1171
em suas estruturas (Yang et al. 2015). Por exemplo, certos terpenos (como carvacrol e
timol) têm efeitos antimicrobianos semelhantes, mas sua influência contra bactérias
Gram-negativas ou Grampositivas diferiu em relação ao local de fixação de um ou mais
grupos funcionais em suas moléculas (Salehi et al. 2018). A família de plantas Labiatae,
que inclui plantas como tomilho, orégano e sálvia, os fitobióticos mais conhecidos, tem
despertado o maior interesse nesse sentido. Os óleos essenciais hidrofóbicos aderem às
membranas celulares dos patógenos e rompem as estruturas da membrana, levando à
perda de íons nas bactérias (Burt 2004).

Várias substâncias que não são fenólicas, mas que são obtidas do limoneno e da
Sanguinaria canadensis, também têm efeitos antimicrobianos (Newton et al. 2002; Burt
2004). Em alguns estudos com frangos de corte, a eficácia dos óleos essenciais contra E.
coli e Clostridium perfringens foi revelada (Jamroz et al. 2006; Mitsch et al. 2004), e certos
fitobióticos também se mostraram eficazes contra fatores de Eimeria (Oviedo-Rondon et
al. 2006). Os fitobióticos também aumentaram a higiene microbiana da carcaça. Por
exemplo, a adição de óleo essencial de orégano à dieta na proporção de 0,1% teve um
impacto benéfico na carga microbiana de patógenos específicos ou bactérias vivas totais
em carcaças de frangos (Aksit et al. 2006). No entanto, os dados atuais são
significativamente limitados em revelar os fitobióticos como confiáveis para aumentar a
higiene da carcaça.

As características antioxidantes dos fitobióticos são outra característica que atrai muita
atenção. Plantas como alecrim, orégano e tomilho, que fazem parte da família de plantas
Labiatae, e seus extratos têm altos efeitos antioxidantes (Brenes e Roura 2010). Esse
impacto foi revelado em carne de patos cujas dietas receberam aditivos de tomilho
(Mohammadi Gheisar et al. 2015b) e em frangos de corte a cujas dietas foi adicionado
Artemisia annua (Cherian et al. 2013). Esses fitobióticos podem ter um efeito positivo
sobre certas enzimas antioxidantes, como a glutationa peroxidase e a superóxido
dismutase, que ajudam a regular o metabolismo lipídico em animais (Franz et al. 2010).
Outros estudos mostraram que variedades de plantas como gengibre, curcuma, erva-doce
e coentro; especiarias, tais como pimenta preta (Piper nigrum), pimenta vermelha
(Capsicum annuum L.) e pimenta (Capsicum frutescens); e as plantas ricas em
flavonóides (como o chá-verde) e antocianinas (como várias frutas) têm atividades
antioxidantes (Nakatani 2000; Wei e Shibamoto 2007; Yatao et al. 2018). O uso da maioria
dessas plantas é limitado na alimentação animal, devido ao seu odor e sabor acentuados,
atribuídos às suas substâncias ativas.

1172
Enquanto alguns autores (Abd El-Ghany e Ismail 2014; Diaz-Sanchez et al. 2015) afirmam
que os fitobióticos aceleram o desenvolvimento em frangos de corte de forma semelhante
aos antibióticos, outros (Karimi et al. 2010; Al-Mufarrej 2014) afirmam que eles (tomilho e
cominho preto (Nigella sativa L.)) não influenciam o crescimento dos frangos. O tipo e a
dose de fitobióticos usados nesses estudos podem explicar as diferenças nessas dietas.

Em relação aos efeitos dos fitobióticos usados como aditivos para rações na saúde
intestinal e no desempenho de crescimento de aves, essas substâncias e seus conteúdos
variam de acordo com fatores biológicos (tipos de plantas, locais onde são criadas e
condições de colheita), métodos de produção (extração/destilação, estabilização) e
condições de armazenamento (luz, temperatura, pressão de oxigênio e período).

9. Observações finais e orientações futuras

Seguindo a proibição de antibióticos em aves como fator de crescimento, a necessidade
de aditivos alimentares alternativos aumentou. Substâncias aditivas para rações, ou
nutracêuticos, agora estão sendo usadas com o objetivo de acelerar o crescimento no
setor avícola, evitando doenças e regulando o sistema imunológico dos animais. Os
nutracêuticos fornecem uma esperança significativa nesses aspectos. No entanto, seu
uso no tratamento de doenças e seus mecanismos de impacto permanecem discutíveis.
Para alimentar a população mundial, que está em constante crescimento, e para produzir
ração animal de melhor qualidade e menos cara, devemos aumentar as variedades e
fontes de nutracêuticos. Mais estudos sobre nutracêuticos são necessários entre grandes
bandos de aves antes que eles possam ser usados na indústria avícola comercial.

Referências
Abd El-Ghany WA, Ismail M (2014) Tackling of experimental colisepticaemia in broiler chickens using phytobiotic
essential oils and antibiotic alone or in combination. Iran J Vet Res 15(2): 110–115
Adeola O, Cowieson AJ (2011) Board-invited review: opportunities and challenges in using exogenous enzymes to
improve nonruminant animal production. J Anim Sci 89:3189–3218
Adil S, Magray SN (2012) Impact and manipulation of gut microflora in poultry: a review. J Anim Vet Adv 11:873–877
Adil S, Banday T, Bhat GA et al (2010) Effect of dietary supplementation of organic acids on performance, intestinal
histomorphology, and serum biochemistry of broiler chicken. Vet Med Int 2010: 479485
Aksit M, Goksoy E, Kok F et al (2006) The impacts of organic acid and essential oil supplementations to diets on the
microbiological quality of chicken carcasses. Arch Geflügelk 70(4):168–173
Al-Khalifa H, Givens DI, Rymer C et al (2012) Effect of n-3 fatty acids on immune function in broiler chickens. Poult Sci
91(1):74–88
Alloui MN, Szczurek W, Swiatkiewicz S (2013) The usefulness of prebiotics and probiotics in modern poultry nutrition:
review. Ann Anim Sci 13(1):17–32
Al-Mufarrej SI (2014) Immune-responsiveness and performance of broiler chickens fed black cumin (Nigella sativa L.)
powder. J Saudi Soc Agric Sci 13(1):75–80
Armut M, Filazi A (2012) Evaluation of the effects produced by the addition of growth-promoting products to broiler
feed. Turk J Vet Anim Sci 36(4):330–337
Awad WA, Ghareeb K, Abdel-Raheem S et al (2009) Effects of dietary inclusion of probiotic and synbiotic on growth
performance, organ weights, and intestinal histomorphology of broiler chickens. Poult Sci 88(1):49–56

1173
 Biggs P, Parsons CM, Fahey GC (2007) The effects of several oligosaccharides on growth performance, nutrient
digestibilities, and caecal microbial populations in young chicks. Poult Sci 86(1): 2327–2336
Bou R, Guardiola F, Grau A et al (2001) Influence of dietary fat source, α-tocopherol, and ascorbic acid
supplementation on sensory quality of dark chicken meat. Poult Sci 80(6):800–807
Brenes A, Roura E (2010) Essential oils in poultry nutrition: main effects and modes of action. Anim Feed Sci Technol
158(1–2):1–14
Brestoff JR, Artis D (2013) Commensal bacteria at the interface of host metabolism and the immune system. Nat
Immunol 14(7):676–684
Brisbin JT, Gong J, Sharif S (2008) Interactions between commensal bacteria and the gut-associated immune system
of the chicken. Anim Health Res Rev 9:101–110
Brisbin JT, Gong J, Parvizi P et al (2010) Effects of lactobacilli on cytokine expression by chicken spleen and caecal
tonsil cells. Clin Vaccine Immunol 17(9):1337–1343
Burt S (2004) Essential oils: their antibacterial properties and potential applications in foods—a review. Int J Food
Microbiol 94(3): 223–253
Cerezuela R, Meseguer J, Esteban MA (2011) Current knowledge in synbiotic use for fish aquaculture: a review. J
Aquac Res Dev S1:008
Chanuwat T, Wongsuthavas S, Smerjai B et al (2011) Effect of supplementation of conjugated linoleic acid in diets on
growth performance and total lactic bacteria in small intestine of broiler. J Agric Sci Technol A 1:1141–1143
Cheng Y, Chen Y, Li X et al (2017) Effects of synbiotic supplementation on growth performance, carcass
characteristics, meat quality and muscular antioxidant capacity and mineral contents in broilers. J Sci Food Agric
97(11):3699–3705
Cherian G, Orr A, Burke IC et al (2013) Feeding Artemisia annua alters digesta pH and muscle lipid oxidation products
in broiler chickens. Poult Sci 92(4):1085–1090
Cho S, Ryu C, Yang J et al (2013) Effect of conjugated linoleic acid feeding on the growth performance and meat fatty
acid profiles in broiler: meta-analysis. Asian Australas J Anim Sci 26(7):995–1002
Choct M (2009) Managing gut health through nutrition. Br Poult Sci 50 (1):9–15
Costa FGP, Goulart CC, Figueiredo DF et al (2008) Economic and environmental impact of using exogenous enzymes
on poultry feeding. Int J Poult Sci 7(4):311–314
Das L, Bhaumik E, Raychauduri U et al (2012) Role of nutraceuticals in human health. J Food Sci Technol 49(2):173–
183
Diaz-Sanchez S, D’Souza D, Biswas D et al (2015) Botanical alternatives to antibiotics for use in organic poultry
production. Poult Sci 94(6):1419–1430
Fernández J, Redondo-Blanco S, Gutiérrez-del-Río I et al (2016) Colon microbiota fermentation of dietary prebiotics
towards short-chain fatty acids and their roles as anti-inflammatory and antitumour agents: a review. J Funct Foods
25:511–522
Fernández-Rubio C, Ordóñez C, Abad-González J et al (2009) Butyric acid-based feed additives help protect broiler
chickens from Salmonella enteritidis infection. Poult Sci 88(5):943–948
Fijan S (2014) Microorganisms with claimed probiotic properties: an overview of recent literature. Int J Environ Res
Public Health 11(5):4745–4767
Filazi A, Yurdakok-Dikmen B, Kuzukiran O (2015) Antibiotic resistance in poultry. Turkiye Klinikleri J Vet Sci Pharmacol
Toxicol- Special Topics 1(2):42–51
Filazi A, Yurdakok-Dikmen B, Kuzukiran O (2017) The usage of antibacterial agents in poultry. Turkiye Klinikleri J Vet
Sci Pharmacol Toxicol-Special Topics 3(3):181–187
Franz C, Baser KHC, Windisch W (2010) Essential oils and aromatic plants in animal feeding – a European
perspective. A review. Flavour Frag J 25(5):327–340
Frei R, Akdis M, O’Mahony L (2015) Prebiotics, probiotics, synbiotics, and the immune system: experimental data and
clinical evidence. Curr Opin Gastroenterol 31(2):153–158
Fukata T, Sasai K, Miyamoto T et al (1999) Inhibitory effects of competitive exclusion and fructooligosaccharide, singly
and in combination, on Salmonella colonization of chicks. J Food Prot 62(3): 229–233
Gheisari AA, Heidari M, Kermanshahi RK, et al (2007) Effect of dietary supplementation of protected organic acids on
ileal microflora and protein digestibility in broiler chickens. Proceedings of the 16th European symposium on poultry
nutrition, Strasbourg, France, pp 519–522
Giannenas I, Bonos E, Christaki E et al (2013) Essential oils and their applications in animal nutrition. Med Aromatic
Plants 2:1–12
Gibson PR, Barrett JS (2010) The concept of small intestinal bacterial overgrowth in relation to functional
gastrointestinal disorders. Nutrition 26(11–12):1038–1043
Hamed DM, Hassan AMA (2013) Acids supplementation to drinking water and their effects on Japanese quails
experimentally challenged with Salmonella enteritidis. Res Zool 3(1):15–22
Hassan HMA, Mohamed MA, Youssef AW et al (2010) Effect of using organic acids to substitute antibiotic growth
promoters on performance and intestinal microflora of broilers. Asian-Australas J Anim Sci 23(10):1348–1353
He XE, Zhang H, Yang X et al (2007) Modulation of immune function by conjugated linoleic acid in chickens. Food
Agric Immunol 18 (3–4):169–178

1174
 Huyghebaert G, Ducatelle R, Van Immerseel F (2011) An update on alternatives to antimicrobial growth promoters for
broilers. Vet J 187(2):182–188
Iji PA, Tivey DR (1998) Natural and synthetic oligosaccharide in broiler chicken diet. Worlds Poult Sci J 54(2):129–143
Jamroz D, Wertelecki T, Houszka M et al (2006) Influence of diet type on the inclusion of plant origin active substances
on morphological and histochemical characteristics of the stomach and jejunum walls in chicken. J Anim Physiol Anim
Nutr 90(5-6):255–268
Janardhana V, Broadway MM, Bruce MP et al (2009) Prebiotics modulate immune responses in gut-associated
lymphoid tissue of chickens. J Nutr 139(7):1404–1409
Jang IS, Ko YH, Kang SY et al (2007) Effect of commercial essential oils on growth performance, digestive enzyme
activity and intestinal microflora population in broiler chickens. Anim Feed Sci Technol 134(3-4):304–315
Kabir SML (2009) The role of probiotics in the poultry industry. Int J Mol Sci 10(8):3531–3546
Kankaanpaa PE, Salminen SJ, Isolauri E et al (2001) The influence of polyunsaturated fatty acids on probiotic growth
and adhesion. FEMS Microbiol Lett 194(2):149–153
Karimi A, Yan F, Coto C et al (2010) Effect of level and source of oregano leaf in starter diets for broiler chicks. J Appl
Poult Res 19(2):137–145
Khaksefidi A, Rahimi S (2005) Effect of probiotic inclusion in the diet of broiler chickens on performance, feed
efficiency and carcass quality. Asian-Australas J Anim Sci 18(8):1153–1156
Khan SH, Iqbal J (2016) Recent advances in the role of organic acids in poultry nutrition. J Appl Anim Res 44(1):359–
369
Kim G-B, Seo YM, Kim CH et al (2011) Effect of dietary prebiotic supplementation on the performance, intestinal
microflora, and immune response of broilers. Poult Sci 90(1):75–82
Kogut MH (2013) The gut microbiota and host innate immunity: regulators of host metabolism and metabolic diseases
in poultry? J Appl Poult Res 22(3):637–646
Kolida S, Gibson GR (2011) Synbiotics in health and disease. Annu Rev Food Sci Technol 2:373–393
Kum C, Sekkin S (2012) Alternative approaches to antibiotics. Turkiye Klinikleri J Vet Sci 3(3):84–116
Kum S, Eren U, Onol A et al (2010) Effects of dietary organic acid supplementation on the intestinal mucosa in broilers.
Rev Med Vet 161(10):463–468
Kwon YM, Ricke SC (1998) Induction of acid resistance of Salmonella typhimurium by exposure to short chain fatty
acids. Appl Environ Microbiol 64(9):3458–3463
Lan Y, Verstegen MWA, Tamminga S et al (2005) The role of the commensal gut microbial community in broiler
chickens. Worlds Poult Sci J 61(1):95–104
Li X, Qiang L, Liu, Xu C (2008) Effects of supplementation of fructooligosaccharide and/or Bacillus subtilis to diets on
performance and on intestinal microflora in broilers. Arch Anim Breed 51:64–70
López-Ferrer S, Baucells MD, Barroeta AC et al (2001a) n-3 enrichment of chicken meat. 1. Use of very long-chain
fatty acids in chicken diets and their influence on meat quality: fish oil. Poult Sci 80(6): 741–752
López-Ferrer S, Baucells MD, Barroeta AC et al (2001b) n-3 enrichment of chicken meat. 2. Use of precursors of long-
chain polyunsaturated fatty acids: linseed oil. Poult Sci 80(6):753–761
Maass N, Bauer J, Paulicks BR et al (2005) Efficiency of Echinacea purpurea on performance and immune status in
pigs. J Anim Physiol Anim Nutr 89(7–8):244–252
Markowiak P, Śliżewska K (2018) The role of probiotics, prebiotics and synbiotics in animal nutrition. Gut Pathog 10:21
Maroufyan E, Kasim A, Ebrahimi M et al (2012) Omega-3 polyunsaturated fatty acids enrichment alters performance
and immune response in infectious bursal disease challenged broilers. Lipids Health Dis 11:15
Menconi A, Kuttappan VA, Hernandez-Velasco X et al (2014) Evaluation of a commercially available organic acid
product on body weight loss, carcass yield, and meat quality during preslaughter feed withdrawal in broiler chickens: a
poultry welfare and economic perspective. Poult Sci 93(2):448–455
Mikelsaar M (2011) Human microbial ecology: lactobacilli, probiotics, selective decontamination. Anaerobe 17(6):463–
467
Mikkelsen LL, Vidanarachchi JK, Olnood CG et al (2009) Effect of potassium diformate on growth performance and gut
microbiota in broiler chickens challenged with necrotic enteritis. Br Poult Sci 50(1):66–75
Mitsch P, Zitterl-Eglseer K, Köhler B et al (2004) The effect of two different blends of essential oil components on the
proliferation of Clostridium perfringens in the intestines of broiler chickens. Poult Sci 83(4):669–675
Mohammadi Gheisar M, Kim IH (2018) Phytobiotics in poultry and swine nutrition – a review. Ital J Anim Sci 17(1):92–
99
Mohammadi Gheisar M, Hosseindoust A, Kim IH (2015a) Evaluating the effect of microencapsulated blends of organic
acids and essential oils in broiler chickens diet. J Appl Poult Res 24(1): 511–519
Mohammadi Gheisar M, Im YW, Lee HH et al (2015b) Inclusion of phytogenic blends in different nutrient density diets
of meat-type ducks. Poult Sci 94(12):2952–2958
Musa HH, Wu SL, Zhu CH et al (2009) The potential benefits of probiotics in animal production and health. J Anim Vet
Adv 8(2): 313–321
Nakatani N (2000) Phenolic antioxidants from herbs and spices. Biofactors 13(1–4):141–146
Nawaz M, Wang J, Zhou A et al (2011) Characterization and transfer of antibiotic resistance in lactic acid bacteria from
fermented food products. Curr Microbiol 62(3):1081–1089

1175
 Newton SM, Lau C, Gurcha SS et al (2002) The evaluation of fortythree plant species for in vitro antimycobacterial
activities; isolation of active constituents from Psoralea corylifolia and Sanguinaria canadensis. J Ethnopharmacol
79(1):57–67
Nian F, Guo YM, Ru YJ et al (2011) Effect of exogenous xylanase supplementation on the performance, net energy
and gut microflora of broiler chickens fed wheat-based diets. Asian-Australas J Anim Sci 24(3):400–406
Oviedo-Rondon EO, Hume ME, Hernandez C et al (2006) Intestinal microbial ecology of broilers vaccinated and
challenged with mixed Eimeria species, and supplemented with essential oil blends. Poult Sci 85(5):854–860
Panghal M, Kaushal V, Yadav JP (2011) In vitro antimicrobial activity of ten medicinal plants against clinical isolates of
oral cancer cases. Ann Clin Microbiol Antimicrob 10:21
Patten JD, Waldroup PW (1988) Use of organic acids in broiler diets. Poult Sci 67(8):1178–1182
Paul SK, Halder G, Mondal MK et al (2007) Effect of organic acid salt on the performance and gut health of broiler
chicken. J Poult Sci 44(4):389–395
Ponte PI, Rosado CM, Crespo JP et al (2008) Pasture intake improves the performance and meat sensory attributes of
free-range broilers. Poult Sci 87(1):71–79
Rashid MU, Weintraub A, Nord CE (2012) Effect of new antimicrobial agents on the ecological balance of human
microflora. Anaerobe 18(2):249–253
Rinttila T, Apajalahti J (2013) Intestinal microbiota and metabolites – implications for broiler chicken health and
performance. J Appl Poult Res 22(3):647–658
Roberfroid M, Gibson GR, Hoyles L et al (2010) Prebiotic effects: metabolic and health benefits. Br J Nutr 104(Suppl
2):S1–S63
Rodríguez-Lecompte JC, Yitbarek A, Brady J et al (2012) The effect of microbial nutrient interaction on the immune
system of young chicks after early probiotic and organic acid administration. J Anim Sci 90(7):2246–2254
Roth-Maier DA, Böhmer BM, Maass N et al (2005) Efficiency of Echinacea purpurea on performance of broilers and
layers. Arch Geflügelk 69(3):123–127
Roy R, Singh S, Pujari S (2008) Dietary role of omega-3 polyunsaturated fatty acid (PUFA): a study with growing
chicks, Gallus domesticus. Int J Poult Sci 7(4):360–367
Salehi B, Mishra AP, Shukla I et al (2018) Thymol, thyme, and other plant sources: health and potential uses. Phytother
Res. https://doi.org/10.1002/ptr.6109
Schenk M, Mueller C (2008) The mucosal immune system at the gastrointestinal barrier. Best Pract Res Clin
Gastroenterol 22(3):391–409
Shahidi S, Maziar Y, Delaram NZ (2014) Influence of dietary organic acids supplementation on reproductive
performance of freshwater Angelfish (Pterophyllum scalare). Glob Vet 13:373–377
Si W, Gong J, Tsao R et al (2006) Antimicrobial activity of essential oils and structurally related synthetic food additives
towards selected pathogenic and beneficial gut bacteria. J Appl Microbiol 100: 296–305
Simopoulos AP (2004) Omega-6/omega-3 essential fatty acid ratio and chronic diseases. Food Rev Int 20:77–90
Sioen IA, Pynaert I, Matthys C et al (2006) Dietary intakes and food sources of fatty acids for Belgian women, focused
on n-6 and n-3 polyunsaturated fatty acids. Lipids 41:415–422
Slominski BA (2011) Recent advances in enzymes for poultry diets. Poult Sci 90(9):2013–2023
Smulikowska S, Czerwiński J, Mieczkowska A et al (2009) The effect of fat-coated organic acid salts and a feed
enzyme on growth performance, nutrient utilization, microflora activity, and morphology of the small intestine in broiler
chickens. J Anim Feed Sci 18:478–489
Sugiharto S (2016) Role of nutraceuticals in gut health and growth performance of poultry. J Saudi Soc Agric Sci
15(2):99–111
Sullivan A, Edlund C, Nord CE (2001) Effect of antimicrobial agents on the ecological balance of human microflora.
Lancet Infect Dis 1 (2):101–114
Toghyani M, Toghyani M, Tabeidian SA (2011) Effect of probiotic and prebiotic as antibiotic growth promoter
substitutions on productive and carcass traits of broiler chicks. International Conference on Food Engineering and
Biotechnology, IPCBEE 9:82–86
Van Immerseel F, Russell JB, Flythe MD et al (2006) The use of organic acids to combat Salmonella in poultry: a
mechanistic explanation of the efficacy. Avian Pathol 35(3):182–188
Wei A, Shibamoto T (2007) Antioxidant activities and volatile constituents of various essential oils. J Agric Food Chem
55(5): 1737–1742
Windisch W, Schedle K, Plitzner C et al (2008) Use of phytogenic products as feed additives for swine and poultry. J
Anim Sci 86(14 Suppl):E140–E148
Yang X, Guo Y (2006) Modulation of intestinal mucosal immunity by dietary polyunsaturated fatty acids in chickens.
Food Agric Immunol 17(2):129–137
Yang Y, Iji PA, Kocher A et al (2008) Effects of xylanase on growth and gut development of broiler chickens given a
wheat-based diet. Asian-Australas J Anim Sci 21(11):1659–1664
Yang Y, Iji PA, ChoctM(2009) Dietary modulation of gut microflora in broiler chickens: a review of the role of six kinds of
alternatives to in-feed antibiotics. Worlds Poult Sci J 65(1):97–114
Yang C, Kabir-Chowdhury MA, Hou Y et al (2015) Phytogenic compounds as alternatives to in-feed antibiotics:
potentials and challenges in application. Pathogens 4(1):137–156

1176
 Yatao X, Saeed M, Kamboh AA et al (2018) The potentially beneficial effects of supplementation with hesperidin in
poultry diets. Worlds Poult Sci J 74(2):265–276
Yegani M, Korver DR (2008) Factors affecting intestinal health in poultry. Poult Sci 87(10):2052–2063
Zha C, Cohen AC (2014) Effects of anti-fungal compounds on feeding behavior and nutritional ecology of tobacco
budworm and painted lady butterfly larvae. Entomol Ornithol Herpetol 3:120
Zhang H, Guo Y, Yuan J (2005) Conjugated linoleic acid enhanced the immune function in broiler chicks. Br J Nutr
94(5):746–752

1177
 Parte V

Avaliação de Segurança e Toxicidade de

Nutracêuticos e Alimentos Funcionais

1178
 Avaliação de segurança e toxicidade de nutracêuticos
em modelos animais
Nikolay Goncharov, Vladislav Sobolev, Maxim Terpilowski, Ekaterina Korf e Richard
Jenkins

Resumo
Os nutracêuticos são derivados de várias fontes naturais, como plantas medicinais,
organismos marinhos, vegetais e frutas. A maioria deles possui propriedades
antioxidantes ou antiinflamatórias e afirmam fornecer proteção contra muitas doenças, se
tomados regularmente. Ao mesmo tempo, os estudos toxicológicos dos nutracêuticos
foram limitados, de modo que a segurança de muitos deles não pode ser garantida. Os
animais compartilham muitas semelhanças genéticas, anatômicas e fisiológicas com os
humanos, e continuam a ser amplamente utilizados em estudos pré-clínicos de drogas,
apesar da falta de validade devido às grandes diferenças fenotípicas. A ausência de
toxicidade em animais fornece pouca probabilidade de que as reações adversas também
estejam ausentes em humanos. Atualmente, existem milhares de pesquisadores
envolvidos no desenvolvimento de alternativas ao uso de animais nas ciências da vida. As
ferramentas estatísticas de aprendizado de máquina, uma vez desenvolvidas, podem se
tornar um meio poderoso para explicar os complexos efeitos fisiológicos dos
nutracêuticos. O uso de diferentes modelos e algoritmos pode fornecer uma base mais
científica para a avaliação de risco de nutracêuticos para humanos.

Palavras-chave: Estudos pré-clínicos · Biomarcadores · Análise de sistema · Modelos

alternativos · Poder citotóxico

N. Goncharov. Research Institute of Hygiene, Occupational Pathology and Human Ecology, Leningrad
Region, Russia
Sechenov Institute of Evolutionary Physiology and Biochemistry, St. Petersburg, Russia
V. Sobolev Research Institute of Hygiene, Occupational Pathology and Human Ecology, Leningrad Region,
Russia
M. Terpilowski · E. Korf. Sechenov Institute of Evolutionary Physiology and Biochemistry, St. Petersburg,
Russia
R. Jenkins. School of Allied Health Sciences, De Montfort University, Leicester, UK

Abreviações

ADI Ingestão diária aceitável

ADRs Reações adversas a medicamentos
ALA Ácido α-linolênico
ARRIVE Animais em pesquisa: relatando experiências in vivo

1179
BMD Dose de referência
BMDL Limite inferior da dose de referência
CDDs Dibenzo-p-dioxinas cloradas
DHA Ácido docosahexaenóico
DNEL Nível sem efeito derivado
DSHEA Lei de Saúde e Educação de Suplementos Dietéticos
EDI Ingestão diária estimada
EGCG (-) -epigalocatequina-3-galato
EPA Ácido eicosapentaenóico
ETs Elagitaninos
GRAS Geralmente reconhecido como seguro
GTE Extrato de chá-verde
HBA Análise de dano/benefício
LOAEL Nível mais baixo de efeito adverso observado
LRs Índices de verossimilhança
MOA Modo de ação
MOE Margem de exposição
NHPs Primatas não humanos
NOAEL Nível de efeito adverso não observado
OSC Compostos organossulfurados
PARNUTS Usos nutricionais particulares
PAs Alcalóides pirrolizidínicos
PFS Suplemento alimentar vegetal
PODs Pontos de partida
RfC Concentração de referência
RfD Dose de referência
ROS Espécies que reagem ao oxigênio
RPF Fatores de potência relativa
RYR Arroz com levedura vermelha
TEFs Fatores de equivalência tóxica
TTC Limiar de preocupação toxicológica

1. Introdução
Os produtos alimentícios usados como nutracêuticos podem ser categorizados como fibra
alimentar, prebióticos, probióticos, ácidos graxos poliinsaturados, antioxidantes e outros
diferentes tipos e constituintes de alimentos naturais. Eles ajudam na prevenção e até no
combate a alguns problemas de saúde como obesidade, doenças cardiovasculares,
câncer, osteoporose, artrite, diabetes, excesso de colesterol, etc. (Das et al. 2012; Gupta
2016). Muitos indivíduos bebem chás de ervas para fins profiláticos ou como alternativa
às bebidas com cafeína. Existe também uma grande indústria de produção de
suplementos alimentares para a prática de esportes. A vantagem percebida dos
nutracêuticos sobre os medicamentos é que eles geralmente são considerados como não
tendo efeitos colaterais, ao passo que sua desvantagem percebida é a eficácia
relativamente baixa, que é considerada superada pelo aumento da dosagem ou pelo
consumo por longos períodos de tempo. No entanto, tais percepções podem ser um tanto

1180
enganosas por causa de nossa pouca compreensão das propriedades mecanicistas dos
nutracêuticos e sua administração incompetente. Muito frequentemente, a decisão de
consumir nutracêuticos é baseada em alegações de marketing, em vez de pesquisas
baseadas em evidências disponíveis. Em atividades esportivas, foi demonstrado que com
uma ingestão calórica suficiente, nutracêuticos ou outra suplementação não são
necessários para ajudar os atletas de elite a ter um melhor desempenho, e muitos
estudos controlados falharam em confirmar os efeitos ergogênicos anunciados dos
suplementos nutricionais (Mason e Lavallee 2012; Desbrow et al. 2014).

Hoje em dia, os americanos gastam mais de US $ 28 bilhões em nutracêuticos e

suplementos dietéticos (Ronis et al. 2018). Nos EUA, os suplementos dietéticos são
definidos e regulamentados de acordo com o Dietary Supplement Health and Education
Act (DSHEA) de 1994 (Mueller 1999). De acordo com o DSHEA, um suplemento dietético
é um produto que contém ingredientes dietéticos como vitaminas, minerais, aminoácidos,
ervas e vegetais. O termo nutracêutico não é definido pela lei dos Estados Unidos, mas
geralmente é entendido como se referindo a um produto purificado derivado de uma fonte
alimentar humana, que pode fornecer benefícios à saúde além do valor nutricional básico
dos alimentos usuais. A legislação europeia também não menciona o termo
“nutracêuticos”, e estes poderiam ser tratados dentro do quadro regulamentar de
Alimentos para Usos Nutricionais Específicos (PARNUTs) (Diretiva 89/398 / CEE 1989).
PARNUTs inclui alimentos para fins médicos especiais ou para necessidades nutricionais
específicas, uma vez que sua segurança e eficácia tenham sido devidamente avaliadas
por estudos in vitro e in vivo. No entanto, ao contrário da fabricação de fármacos, que
requer evidências documentadas da eficácia e segurança dos medicamentos, não há
necessidade de demonstração da eficácia de suplementos alimentares ou nutracêuticos.
Consequentemente, via de regra, são trazidos ao mercado sem o apoio de ensaios
clínicos, faltando estudos de efeitos adversos. Alguns relatos de casos de sintomas que
aparecem após a ingestão de nutracêuticos não revelam relações de causa-efeito.
Apenas o acúmulo de muitos casos ao longo do tempo pode, em última análise,
estabelecer que a ingestão de um nutracêutico pode resultar em efeitos adversos, e
descobriu-se que o risco de efeitos adversos é bastante significativo (Ronis et al. 2018).

As plantas sintetizam muitos metabólitos secundários cujo papel pode ser nos
mecanismos de defesa contra herbívoros e parasitas, portanto, o consumo de
nutracêuticos por um longo e mesmo curto período de tempo deve ser uma grande
preocupação. Os estimuladores mais populares de adaptação física ou mental são
essencialmente nutracêuticos – cafeína, nicotina, etanol e tetrahidrocanabinol – que ao

1181
mesmo tempo podem ser tóxicos e não apenas para viciados. Além disso, numerosas
intoxicações humanas e animais foram associadas a componentes naturais de ervas,
incluindo alcalóides de pirrolizidina (PAs), taninos e safrol (Manteiga et al. 1997). Algumas
impurezas tóxicas também são componentes de alimentos consumidos como fonte de
nutracêuticos (Shimshoni et al. 2015; Hassanin et al. 2017). As impurezas também podem
ser fornecidas com aditivos artificiais ou não inteiramente naturais: muitos dos
nutracêuticos contendo resveratrol são enriquecidos neste composto pela adição de
resveratrol purificado que foi extraído da raiz da erva daninha do Polygonum cuspidatum
(Espín et al. 2007).

A evidência mais convincente para os potenciais efeitos benéficos para a saúde dos
nutracêuticos parece derivar de dados epidemiológicos descritivos e correlativos (Sauer e
Plauth 2017). Por outro lado, o problema dos relatórios escassos e inconsistentes sobre
os efeitos dos nutracêuticos muitas vezes reside na esfera de modelos de teste
inadequados ou na explicação quase científica dos dados experimentais obtidos
(Goncharov et al. 2016a). O contexto fisiológico é de grande importância para avaliar os
efeitos dos suplementos dietéticos, alguns dos quais foram observados em experimentos
in vitro e devem ser extrapolados com muito cuidado para o contexto in vivo. Os efeitos in
vitro dos nutracêuticos podem ser irrelevantes em termos de suas propriedades in vivo. A
biodisponibilidade, o metabolismo e a distribuição nos tecidos são fatores muito
importantes que precisam ser estabelecidos para uma compreensão clara dos efeitos
biológicos dos nutracêuticos. Uma vez distribuídos no corpo, os nutracêuticos ou seus
derivados interagem com muitas proteínas-alvo diferentes com especificidades muito
diferentes (Sauer e Plauth 2017). A microbiota intestinal é um dos alvos principais e, às
vezes, um verdadeiro quebra-cabeça quanto aos verdadeiros compostos bioativos
responsáveis pela atividade biológica sistêmica.

Os animais têm desempenhado um papel principal na pesquisa experimental biomédica

ao longo da história (Franco 2013). Para reduzir ou evitar procedimentos antiéticos, uma
estratégia de 3Rs (redução, refinamento e substituição) está sendo aplicada para testes
em animais, e alternativas para o uso de animais em laboratório foram introduzidas (Doke
e Dhawale 2015). No entanto, é imperativo obter mais informações sobre segurança e
eficácia com base em estudos pré-clínicos e clínicos in vivo, e é muito importante alcançar
um melhor entendimento do mecanismo de ação e biodisponibilidade desses produtos
(Santini et al. 2018).

1182
2. Ações tóxicas de nutracêuticos
Os fitoquímicos dietéticos mais importantes são isotiocianatos, glucosinolatos, compostos
organossulfurados (OSC), terpenóides (carotenóides, monoterpenos e fitoesteróis) e
vários grupos de polifenóis [antocianinas, flavonas, flavan-3-els, isoflavonas,
estilbenóides, ácidos), elagitaninos (ETs), etc.] (Ismail et al. 2016). Alguns deles têm um
efeito protetor contra compostos tóxicos, como o tetracloreto de carbono, como foi
demonstrado com o extrato de chá-verde (GTE) em hamsters machos (Elgawish et al.
2015). Além disso, foram demonstrados efeitos positivos da lecitina e/ou ácido gálico na
neurotoxicidade induzida por óxido de alumínio em ratos experimentais (Hassanin et al.
2017).

As propriedades tóxicas dos nutracêuticos não são estudadas tão extensivamente quanto
as dos produtos farmacêuticos. Na verdade, existem poucos dados que sugiram que os
nutracêuticos e suplementos dietéticos sejam tóxicos. Uma variável interessante que vale
a pena mencionar neste contexto é a questão do financiamento para pesquisas sobre sua
eficácia e segurança. Vários artigos divulgam que o financiamento é fornecido pelas
empresas que comercializam o produto para fins de varejo (Vaughan et al. 2014). No
entanto, eles não são necessariamente seguros para todos. Suplementos com
ingredientes ativos que proporcionam um efeito fisiológico também podem causar efeitos
adversos. Por exemplo, suspeita-se que alguns metabólitos de (-) - epigalocatequina-3-
galato (EGCG) não diminuem, mas aumentam o estresse oxidativo e causam lesão
hepática, sendo a mitocôndria um possível alvo (Mazzanti et al. 2009, 2015; James et al.
2018). Além de GTE e EGCG, vários medicamentos fitoterápicos estão associados a um
espectro de eventos de hepatotoxicidade, como ervas ayurvédicas e chinesas, cohosh 113
preto, chaparral, germander, celandine maior, Herbalife, Hydroxycut, kava, poejo, calota
craniana, ácido úsnico, e PAs (Bunchorntavakul e Reddy 2013). As isoflavonas derivadas
de soja genisteína e daidzeína com seu metabólito equol demonstraram possuir
propriedades estrogênicas, incluindo a capacidade de produzir hipertrofia uterina, reduzir
o tamanho dos testículos, inibir a produção de andrógenos, etc. (Tan et al. 2006;
Akingbemi et al. 2007; Ronis et al. 2014, 2016). Houve relatos de casos de endometriose
em mulheres que consumiram suplementos de isoflavona, portanto, há um risco de
cânceres sensíveis ao estrogênio em consumidores desses produtos (Mahady et al.
2003).

O ácido α-linolênico (ALA) é o precursor dos ácidos graxos ômega-3 de cadeia mais
longa, do ácido eicosapentaenóico (EPA) e do ácido docosahexaenóico (DHA). Embora
113 Cimicífuga também conhecida por Black Cohosh é muito indicada para as mulheres, devido sua eficácia em tratar os sintomas
decorrentes dos distúrbios da menopausa e da TPM, como as cólicas.
1183
existam dados toxicológicos limitados, o ALA é considerado seguro como ingrediente
alimentar. No entanto, deve-se observar que o ALA, como outros ácidos graxos, pode
produzir produtos de peroxidação lipídica sob exposição ao ar ou à radiação ultravioleta,
que podem produzir efeitos adversos se não controlados de forma adequada. Além disso,
os riscos de câncer de próstata e degeneração macular também devem ser considerados
em relação à ingestão alimentar de ALA, embora a evidência geral sobre a associação de
ALA com esses riscos permaneça mista e inconclusiva (Kim et al. 2014). Em alguns
experimentos, a administração de ETs a ratos inibiu a iniciação e progressão de cânceres
de cólon e esôfago induzidos quimicamente (Stoner et al. 2006). Em outros experimentos,
nenhum efeito foi mostrado no número ou tamanho dos adenomas no intestino delgado
de camundongos após a administração de EA pura ou dietas com ETs (Päivärinta et al.
2006). Esses resultados contraditórios podem ser devido a diferentes tipos de tumores,
mas também devido aos diferentes modelos animais usados. Mais importante e menos
anunciado são os relatórios nos quais os ETs mostraram causar necrose hepática e
nefrotoxicidade em bovinos (Filippich et al. 1991; Oelrichs et al. 1994).

Existem muitas plantas que contêm OSC, cuja toxicidade varia em diferentes espécies e
diferentes células dentro de um corpo (Munday 2012; Goncharov et al. 2016b). No
entanto, se a toxicidade elevada estiver dentro das células cancerosas, sem dúvida seria
um evento positivo para o organismo. Há muitas evidências indicando que eles modulam
a atividade de várias enzimas metabolizadoras que ativam (enzimas de fase 1: CYP2E1,
CYP1A1 e CYP1A2) ou desintoxicam (enzimas de fase 2: NAD (P) H: quinona oxido
redutase 1, glutationa S-transferases, UDP-glucuronosiltransferases, etc.) carcinógenos,
por meio da inibição da atividade da histona desacetilase e da inibição da formação de
adutos de DNA em vários tecidos-alvo (Navarro et al. 2011; Zhang et al. 2013).
Ironicamente, a ativação persistente de sistemas antioxidantes por meio de alterações
genéticas em Nrf2 e Keap1 também contribui para a carcinogênese. Alguns cânceres
sequestram o sistema Nrf2/Keap1 com mutação nesses genes, que ativam
persistentemente os sistemas antioxidantes peroxiredoxina/sulfiredoxina nas células
cancerosas (Toyokuni 2014). Os efeitos positivos do OSC em mamíferos geralmente vêm
de seus efeitos tóxicos seletivos sobre os microrganismos. Assim, o alho provou ser tóxico
para uma infinidade de bactérias Gram-positivas, Gram-negativas e ácido-resistentes,
incluindo Salmonella, Escherichia coli, Pseudomonas, Proteus, Staphylococcus aureus,
Klebsiella, Micrococcus, Bacillus subtilis, Clostridium, Mycobacterium e Helicobacter
(Bayan et al. 2014).

1184
O arroz com levedura vermelha (RYR) é um tipo de alimento funcional obtido da
fermentação com a levedura vermelha Monascus purpureus, contendo um componente
bioativo monacolina K (quimicamente idêntico à lovastatina), que tem sido reconhecido
como um componente chave na redução do colesterol. Em um estudo sobre a segurança
do RYR, foram observados casos de mialgia e/ou aumento da creatina fosfoquinase, bem
como lesão hepática e reações gastrointestinais e, em alguns casos, hospitalização
(Mazzanti et al. 2017). Além disso, há outro fator de risco no RYR – o metabólito tóxico
micotoxina citrinina – que é um sério obstáculo ao uso de RYR como suplemento
dietético, uma vez que a exposição à citrinina pode causar nefrotoxicidade (Vanacloig-
Pedros et al. 2016; Patel 2016).

Alguns chás verdes e/ou infusões de ervas podem ser contaminados por PAs que são
produzidos por várias plantas daninhas e possuem toxicidade aguda e crônica,
propriedades genotóxicas, mutagênicas e carcinogênicas (Habs et al. 2017). Os PAs 1,2-
insaturados devem ser uma preocupação especial porque são carcinógenos genotóxicos
(Chen et al. 2017). Os metabólitos reativos dos PAs são formados in vivo após a ativação
metabólica via enzimas CYP3A4 no fígado e podem causar síndrome de obstrução
sinusoidal hepática e envenenamento em animais (Wiedenfeld e Edgar 2011; Jurgens et
al. 2012). Outra fonte de PAs é o mel coletado de plantas produtoras de PAs (Merz e
Schrenk 2016).

O consumo selecionado de preparações botânicas chinesas aumenta a preocupação com

a exposição a alquenilbenzenos (Ning et al. 2018). Além disso, metileugenol e
alquenilbenzenos relacionados foram encontrados em uma série de suplementos
alimentares vegetais à base de noz-moscada (PFS) e molhos pesto, embora suas
toxicidades baseadas na ingestão diária estimada (EDI) e na abordagem da margem de
exposição (MOE) sejam insignificantes e o consumo de molhos pesto só seriam
preocupantes se consumidos diariamente por longos períodos de tempo (Al-Malahmeh et
al. 2016, 2017). A próxima seção é dedicada a esses e outros índices relevantes para a
estimativa de segurança e toxicidade de nutracêuticos.

3. Estudos de segurança e toxicidade com modelos animais:

fundamentos, problemas e alternativas
A atividade biológica de um fitoquímico é geralmente realizada por meio de testes in vitro
e/ou in vivo. O teste in vitro é frequentemente realizado com concentrações muito mais
altas de compostos investigados em comparação com aqueles testados in vivo. Outro

1185
problema significativo para a pesquisa in vitro é se o teste é necessário, ou mesmo
possível, para os metabólitos relevantes que podem ser encontrados in vivo em
concentrações variáveis em diferentes órgãos e tecidos. Por outro lado, a extrapolação
dos resultados obtidos em um modelo animal para humanos não é totalmente adequada
devido às diferenças em sua fisiologia, e também existem diferenças entre as espécies
animais que podem resultar em interpretações contraditórias de dados experimentais
(Espín et al. 2007).

Idealmente, uma combinação de vários modelos in vitro com, pelo menos, dois modelos
animais deve ser adotada para dar uma compreensão clara das propriedades
mecanísticas e tóxicas de compostos, incluindo nutracêuticos. As pessoas podem evitar o
consumo de nutracêuticos como aditivos alimentares ao curar uma doença aguda, mas a
questão é se eles podem ser usados como adjuvantes terapêuticos ou de forma profilática
para evitar doenças. Em caso afirmativo, é necessário testá-los quanto à segurança e
toxicidade? Se sim, é necessário usar modelos animais? Modelos animais são usados
para determinar os órgãos-alvo afetados por componentes ativos, supondo que eles
sejam bem caracterizados, suas impurezas (se houver) também sejam bem
caracterizadas e o processo de fabricação seja padronizado (Kruger e Mann 2003). Várias
espécies animais – como peixes, anfíbios, pássaros, camundongos, ratos, hamsters,
coelhos, porquinhos-da-índia, cães, gatos e primatas – foram e continuam a ser usados
na ciência há muito tempo. Os roedores são os animais de laboratório mais utilizados,
constituindo quase 80% do total de animais utilizados na UE, seguidos por animais de
sangue frio (9,6%) e aves (6,3%) (Comissão Europeia 2010; Franco 2013).

3.1 Fundamentos

Os estudos de toxicidade incluem (1) estudos de toxicidade geral de dose repetida, (2)
estudos farmacocinéticos/toxicocinéticos, (3) toxicologia reprodutiva, (4) estudos de
genotoxicidade, (5) estudos de carcinogenicidade e (6) estudos especiais de
farmacologia, que podem incluir estudos in vitro e in silico e, portanto, fornecem
explicações para descobertas tóxicas em estudos com animais (Kruger e Mann 2003).
Para avaliar o potencial tóxico de um produto químico, os toxicologistas devem avaliar a
toxicidade aguda, subaguda, subcrônica e crônica. Para estudos de toxicidade aguda,
uma dose é administrada aos animais e os sintomas são observados ao longo de 14 dias.
Nos estudos subcrônicos, os mais populares entre os toxicologistas e adequados para
nutracêuticos, os animais recebem várias doses de um produto químico durante 90 dias.
Ao final, os animais são sacrificados e amostras são retiradas para análises
hematológicas e bioquímicas, pesos dos órgãos e exame histopatológico. A forma usual
1186
de avaliação do potencial de genotoxicidade é por meio do teste de micronúcleo, devendo
ser incorporado um controle negativo. Os pontos de partida (PODs) em estudos
toxicológicos são definidos como os pontos em uma curva dose/resposta estabelecida a
partir de dados experimentais correspondentes a um nível de efeito adverso observado
mais baixo estimado (LOAEL), nível de efeito adverso não observado (NOAEL), ou dose
de referência estatística (BMD) (Augustin et al. 2013). Eles marcam o início da
extrapolação para a dose toxicológica de referência (RfD) ou concentração de referência
(RfC). Na UE, o RfD pode ser denominado nível derivado sem efeitos (DNEL). A US EPA
define RfD ou RfC da seguinte forma (ChemSafetyPRO 2018):

• A dose de referência (RfD) é uma estimativa (com a incerteza abrangendo talvez uma
ordem de magnitude) de uma exposição oral ou cutânea diária à população humana
(incluindo subgrupos sensíveis) que provavelmente não terá um risco apreciável de
efeitos deletérios durante a vida. Sua unidade geralmente é mg/kg pc/dia ou mg/kg.

• A concentração de referência (RfC) é uma estimativa (com incerteza abrangendo talvez

uma ordem de magnitude) de uma exposição de inalação contínua para a população
humana (incluindo subgrupos sensíveis) que provavelmente não apresentará um risco
apreciável de efeitos deletérios durante a vida. Sua unidade é geralmente mg/L ou ppm.

Nos EUA, muitos nutracêuticos foram classificados como geralmente reconhecidos como
seguros ”(GRAS), com NOAEL aceitável (Augustin et al. 2013). No desenho de estudos
com animais, um parâmetro importante que deve ser considerado é a margem de
exposição (MOE) entre o NOAEL e o nível previsto ou estimado de ingestão diária (EDI)
por humanos. Para um aditivo alimentar, uma ingestão diária aceitável (ADI) é geralmente
derivada da aplicação de um fator de segurança de 100 vezes ao NOAEL determinado
em estudos com animais. Se o EDI cair abaixo do ADI, a exposição é considerada segura.
Este conceito é aplicável para nutracêuticos consumidos por humanos em quantidades
não superiores a 1,5 g / dia (igual a cerca de 25 mg / kg / dia), uma vez que este nível de
ingestão pode ser apoiado pela aplicação de um fator de segurança de 100 vezes a um
NOAEL em um modelo de teste de rato (cerca de 5% da dieta do rato) (Kruger e Mann
2003). O conceito do fator de segurança 100 vezes maior não deve ser aplicado para
drogas ou nutrientes, uma vez que os efeitos encontrados em estudos com animais não
seriam uma resposta toxicológica aos ingredientes ativos, mas podem ser devido às suas
atividades fisiológicas ou farmacológicas.

Nesse contexto, deve-se citar um exemplo de estudos inadequados em animais, nos

quais foi registrado o potencial hepatotóxico de GTE e EGCG. Uma dose única muito alta
de EGCG (500-750 mg/kg) por via intragástrica para camundongos C57BL/6J diariamente
1187
com o estômago vazio por 3 dias causou inflamação hepática, necrose e hemorragia. A
hepatotoxicidade foi associada ao aumento do estresse oxidativo e diminuição dos níveis
de superóxido dismutase e glutationa peroxidase (James et al. 2018). Para comparação,
em nossos estudos dos possíveis efeitos do GTE na resistência e fadiga em um modelo
de rato de natação forçada, o GTE foi administrado em quantidade igual a uma dosagem
de EGCG de 6 mg/kg (duas ordens de magnitude menor do que a usada por James et al.
2018) por 2–3 semanas duas vezes ao dia após a ingestão de alimentos, e nenhuma
hepatotoxicidade foi encontrada; além disso, foi demonstrado que o GTE aumenta a
duração da natação, em comparação com os animais de controle que consumiram água
(Novozhilov et al. 2015). Estudos posteriores confirmaram esses resultados e,
adicionalmente, verificou-se que a administração de GTE aumentou a resistência devido
ao envolvimento dos músculos de contração lenta, cuja adaptação está associada à
expressão aumentada de genes responsáveis pela regulação sutil do equilíbrio do cálcio
nos músculos (Korf et al. 2017). Infelizmente, existem muitos exemplos de como os
experimentos com animais servem para justificar a posição obviamente preconceituosa
dos pesquisadores, independentemente de essa posição se resumir a elogiar ou zombar
dos nutracêuticos. Alguns outros problemas são discutidos na próxima seção.

3.2 Problemas e alternativas para estudos baseados em animais

Uma lista de problemas metodológicos relativos à pesquisa com base em animais foi
elaborada em 2004 (Pound et al. 2004): (1) variações nos esquemas e esquemas de
dosagem da droga, (2) variabilidade na forma como os animais são selecionados para o
estudo, (3) escolha de terapia de comparação (nenhum, placebo, veículo), (4) pequenos
grupos experimentais e análise estatística simplista, (5) nuances na técnica de laboratório
que podem influenciar os resultados, (6) seleção de uma variedade de medidas de
resultado e sua relevância para o ser humano condição clínica e (7) duração do
acompanhamento antes da determinação do desfecho da doença e sua relevância para a
latência da doença em humanos. Vários anos depois, as diretrizes ARRIVE (Animais em
pesquisa: relatando experiências in vivo) foram elaboradas para melhorar o padrão de
relatórios de pesquisas com animais (Kilkenny et al. 2010). Eles consistem em 20 itens
sobre as informações mínimas que todas as publicações científicas que relatam
pesquisas com animais devem incluir. Se isso for feito, há um bom motivo para combinar
muitos estudos que aderem a critérios específicos em revisões sistemáticas e/ou
metanálises, a fim de se chegar a conclusões mais confiáveis em relação à pesquisa
experimental com animais. Ao mesmo tempo, há alegações de que qualquer modelo
animal falha como modalidade preditiva para a resposta humana a drogas e doenças.

1188
O problema não é a ausência de efeitos colaterais, já que muitos efeitos colaterais de
drogas foram observados em modelos animais, mas não havia valor preditivo para
humanos. Portanto, revisões sistemáticas e meta-análises de pesquisas baseadas em
animais, por qualquer meio, não podem ser boas ferramentas para tentar chegar a
conclusões sobre intervenções humanas (Greek e Menache 2013). De acordo com alguns
estudos analíticos, a correlação de efeitos adversos encontrados em modelos animais
para aqueles observados em humanos foi estimada em 63% em experimentos com não
roedores e 43% em experimentos com roedores (Olson et al. 2000). A base de muitas
publicações desse tipo é que os animais não ajudam em nada na medicina experimental,
porque, independentemente da forma como um problema é abordado, os animais e os
humanos sempre serão diferentes nos complexos (Greek e Menache 2013). No entanto,
nesta e em publicações semelhantes, o real potencial e a perspectiva de desenvolvimento
da ciência não são totalmente levados em consideração.

Não podemos abandonar completamente os modelos animais agora; a visão afirmativa é

uma afirmação populista, muitas vezes de pessoas com pouca ou nenhuma competência
e responsabilidade. Ainda assim, devemos pensar na elaboração de algoritmos para
análise de sistemas e abordagens integrativas, a fim de minimizar o uso de animais e
maximizar o benefício científico que eles podem trazer para a sociedade humana. É
particularmente importante no que diz respeito à busca de novos biomarcadores
integrativos de vários estados patológicos e mudanças funcionais invariantes –
irrelevantes da associação de espécies, em diferentes animais e humanos – induzidas por
diferentes produtos químicos ou suas misturas complexas (Goncharov et al. 2017b). Os
biomarcadores são usados não apenas como indicadores de diagnóstico ou prognóstico,
mas também para formular teorias de patogênese (Ghezzi et al. 2018). Dois problemas
foram identificados no uso de biomarcadores em estudos mecanísticos: o primeiro surge
no caso de doenças multifatoriais, onde diferentes combinações de múltiplas causas
resultam na heterogeneidade do paciente; a segunda surge quando um(ns) mediador(es)
patogênico(s) é(são) difíceis de medir. O último se aplica no caso da teoria da doença do
estresse oxidativo, em que os componentes causais são ROS que têm meias-vidas muito
curtas; é comum medir os traços deixados pela reação de ROS com moléculas biológicas,
ao invés das próprias ROS. Diferentes facetas de biomarcadores e seus diferentes
valores e significados em doenças multifatoriais e medicina sistêmica foram recentemente
discutidos (Ghezzi et al. 2018; Goncharov et al. 2017b). Isso parece ser especialmente útil
e promissor para estudos pré-clínicos e clínicos de nutracêuticos, muitos dos quais estão
envolvidos em regulamentações redox e usados em quantidades relativamente baixas.
Estudos toxicológicos subcrônicos de concentrações muito baixas de hidrocarbonetos
1189
alifáticos com técnicas metabolômicas e quimiométricas revelaram novos marcadores
metabólicos do efeito tóxico: uma proporção de concentrações de pirofosfato e oxalato no
plasma sanguíneo de ratos foi considerada o marcador mais sensível, denominado “índice
de pirofosfato”. Esse achado nos ajudou a formular uma hipótese sobre a violação do
equilíbrio redox como o principal mecanismo patogênico de neuropatias associadas à
intoxicação crônica por hidrocarbonetos, independentemente da espécie animal; a
hipótese precisa ser testada com várias outras espécies de animais (Ukolov et al. 2017).

Biomarcadores combinatórios são considerados mais específicos e sensíveis do que

marcadores únicos em diagnósticos e previsões médicas, mas mesmo a detecção desses
biomarcadores combinatórios requer uma análise computacional profunda. Os princípios
da análise combinatória, combinado a regressão linear do cume do kernel, ajudaram a
identificar vários biomarcadores combinatórios fortemente correlacionados de danos
musculares com altos escores de precisão de predição, que também poderiam ser uma
plataforma comum para estudos em animais e humanos (Terpilowski et al. 2018). Estudos
metabolômicos com aplicação de quimiometria e outras metodologias computacionais
frequentemente revelam que parâmetros bioquímicos não menores e exóticos, mas muito
simples, e seus derivados podem ser biomarcadores muito sensíveis com alto valor
prognóstico. Por exemplo, a albumina está entre os poucos biomarcadores selecionados
que fornecem informações sobre o risco de morte por todas as causas (Fischer et al.
2014; Hui et al. 2014). A albumina é a principal proteína plasmática e contribui muito para
o pool de proteína plasmática SH. A homocisteinilação da albumina em Cys34 a torna
cada vez mais suscetível à degradação oxidativa (Prakash et al. 2008). A futura busca por
novas propriedades da albumina de diferentes espécies sob a influência de nutracêuticos
é considerada muito importante, via estudos in vivo, in vitro e in silico (Goncharov et al.
2017a, c).

Fatores de equivalência tóxica (TEFs) e abordagens MOE são usados para suplementos
alimentares vegetais (PFS) contendo diferentes substâncias tóxicas, como
alquenilbenzenos (Al-Malahmeh et al. 2017). Inicialmente, um conceito provisório de TEFs
foi proposto para dibenzo-p-dioxinas cloradas (CDDs) e, em experimentos agudos com
ratos, foi provado que as interações de quatro CDDs homólogos eram estritamente
aditivas (Stahl et al. 1992). Para nutracêuticos ou seus ingredientes tóxicos, como PAs, a
avaliação de risco é geralmente estimada após a aplicação (sub) crônica em animais, e a
concepção de fatores de potência relativa provisórios (RPF) foi proposta como a métrica
de dose com maior potencial para avaliação de risco toxicológico, como em comparação
com TEFs (Merz e Schrenk 2016). Esta nova abordagem foi construída com base nas

1190
exposições humanas previstas a metabólitos em vários compartimentos (como alimentos
e água), o limite de preocupação toxicológica (TTC) e o conceito de toxicidade
comparativa (Terry et al. 2015). O objetivo final era abordar a segurança humana dos
metabólitos com o número mínimo de estudos in vivo e, ao mesmo tempo, garantir que a
segurança humana seria considerada abordada em uma escala regulatória global. O
terceiro componente, a toxicidade comparativa, foi projetado principalmente para
determinar se os metabólitos tinham perfis de toxicidade iguais ou semelhantes para sua
molécula original e também entre si. O objetivo final era estabelecer se os metabólitos
tinham o potencial de causar efeitos-chave - como câncer e toxicidade no
desenvolvimento, com base em estudos de modo de ação (MOA) - e desenvolver um RPF
em comparação com a molécula original. O MOA para os efeitos primários da molécula
parental foi elucidado em detalhes, e uma série de experimentos in silico, in vitro e/ou in
vivo foram conduzidos nos metabólitos ambientais para avaliar a potência relativa de seus
perfis de toxicidade quando comparados. Esta estratégia de avaliação comparativa -
utilizando dados de MOA, potência relativa, caracterização de perigo, leitura cruzada,
exposição prevista e TTC - forneceu um banco de dados robusto, que minimizou o uso de
animais, mas avaliou de forma abrangente o perigo e o risco humano apresentados por
esses metabólitos (Terry et al. 2015).

Os modelos animais e de cultura de células bidimensionais tiveram um impacto profundo

na pesquisa médica, apesar das falhas e diferenças inerentes quando comparados com
observações in vivo e clínicas. Modelos de tecido tridimensionais (3D) são uma
progressão natural e extensão de técnicas existentes que buscam preencher as lacunas e
mitigar as desvantagens das tecnologias bidimensionais e animais (Konar et al. 2016). A
maioria dos compostos exógenos, mais nutracêuticos, possuem múltiplos alvos celulares
e moleculares com baixos níveis de especificidade e diferentes níveis de toxicidade para
muitos deles. Por exemplo, alguns tióis e dissulfetos são usados como nutracêuticos em
terapia cardiovascular ou de câncer complexa (Cerella et al. 2011; Ried e Fakler 2014) e,
em certas concentrações, podem ser tóxicos para as células endoteliais (Prokofieva e
Goncharov 2014) e células vermelhas do sangue (Munday 2012; Alzoubi et al. 2015;
Mindukshev et al. 2016), com ROS sendo mediadores de seus efeitos tóxicos. O
desenvolvimento de uma metodologia de triagem citofisiológica de várias substâncias,
incluindo fármacos e nutracêuticos, é uma necessidade urgente dos nossos dias.
Intuitivamente, deve haver uma forte correlação entre as respostas celulares in vitro e a
eficácia final da terapia, embora essa correlação ainda não tenha sido comprovada.

1191
3.3 Poder Citotóxico

O desenvolvimento de ferramentas para intervenções destinadas a melhorar a saúde

humana requer um conhecimento abrangente das reações celulares a estímulos positivos
ou negativos, correlacionando esses dados obtidos in vitro e ex vivo com efeitos
terapêuticos ou tóxicos finais in vivo (Mindukshev et al. 2016). Uma dessas ferramentas
poderia ser a concepção de “poder citotóxico”, cuja versão inicial foi publicada
recentemente (Goncharov et al. 2018). Os termos atualmente existentes “índice
apoptótico” e “potencial apoptótico” são insuficientes para uma avaliação qualitativa
adequada e análise da atividade pró-apoptótica de agentes químicos dentro da ampla
gama de doses terapêuticas ou tóxicas, então um novo conceito de poder citotóxico foi
introduzido como uma alternativa a esses termos relacionados à apoptose e outros tipos
de morte celular. Este conceito está sendo desenvolvido nos dias de hoje, e sua essência
é a seguinte: Em experimentos in vitro, o cálculo final dos valores efetivos é feito com
base em proporções quantitativas de uma substância e células estudadas. O poder
citotóxico (º) da substância pode ser representado quantitativamente como o produto da
quantidade de substância (S) em moles que atua sobre um determinado número de
células (n) e a intensidade de desenvolvimento de processos citotóxicos (I) no mesmo
número de células por unidade de tempo (t):

I⋅S
P=
n 2⋅t

O conceito e o algoritmo correspondente para calcular a potência torna possível realizar

uma transformação válida da dependência quântica em gradativa, com base na estratégia
de busca de multimarcadores e, combinado a indicadores de citotoxicidade relativamente
universais e não específicos para um determinado tecido, para identificar e usar
indicadores específicos de tecido (marcadores) - componentes do assim chamado
fenômeno. Com cada tipo de morte celular, podem ser identificados marcadores, cujas
concentrações aumentam ou diminuem gradualmente antes da morte da célula. O nível
de expressão de cada marcador depende da dose (quantidade) da substância citotóxica.
É importante observar que observamos a expressão de células vivas, independentemente
da porcentagem de células mortas registradas; além disso, podemos observar
adicionalmente a expressão por células em estágio inicial de apoptose ou autofagia, uma
vez que também são tipos de células vivas. Assim, a intensidade do desenvolvimento do
sinal reflete um aumento no número de estruturas intracelulares discretas, funcionalmente
acopladas e relativamente estáveis, embora transitórias, que são constituintes do
fenômeno da célula; nós os chamamos de “phens”, F, então I=F/t. A unidade convencional

1192
para medição do poder citotóxico de uma substância é “molphen” - a quantidade de
nanomoles que altera a intensidade de expressão de marcadores fenotípicos
(constituintes de phens) em 100 unidades arbitrárias por hora a partir do momento de
exposição a 1000 células. Essa definição, não alegando completude, enfatiza o número
fracionário de phens em relação ao número de células, bem como o diferente estado
inicial das células, o que explica as diferentes taxas de morte celular na população. O
conceito de poder citotóxico pode ajudar a integrar os dados obtidos com várias células
em estudos in vitro com aqueles obtidos in vivo.

4. Problemas não resolvidos

Animais são usados em pesquisas quando há a necessidade de descobrir o que acontece
em todo o corpo vivo, que é muito mais complexo do que a soma de suas partes. É difícil,
e na maioria dos casos simplesmente ainda não possível, substituir o uso de animais
vivos em pesquisas por métodos alternativos. Existem quatro razões principais pelas
quais os animais são usados em pesquisas (Anon 2018a): (1) para promover a
compreensão científica; (2) como modelos para estudar doenças; (3) desenvolver e testar
possíveis formas de tratamento; e (4) para proteger a segurança de pessoas, animais e
meio ambiente. Ao mesmo tempo, os modelos animais mostraram um potencial muito
baixo para contribuir significativamente para o desenvolvimento de intervenções clínicas
em humanos (Knight 2008). Embora a presença de toxicidade possa adicionar um peso
de evidência considerável para o risco humano, as razões de probabilidade são
extremamente inconsistentes, variando em mais de duas ordens de magnitude para
diferentes classes de compostos e seus efeitos (Bailey et al. 2014). Ainda restam dúvidas
sobre a adequação das diretrizes existentes e se os pesquisadores, conselhos de revisão
e financiadores implementaram totalmente os “3Rs” (Ferdowsian e Beck 2011). Os
pesquisadores reconheceram o papel central dos 3Rs e a necessidade de mais
transparência em relação ao uso de animais em estudos biomédicos por meio da
Declaração de Basileia (Anon 2018b). A análise de dano/benefício (HBA) é a pedra
angular da regulamentação da pesquisa animal e é considerada uma salvaguarda ética
fundamental para os animais (Pound e Nicol 2018). Por outro lado, a ênfase nos
benefícios práticos têm a desvantagem de levar os pesquisadores à especulação sobre o
benefício social de suas pesquisas e, portanto, a prometer muito, levando assim a uma
perda de confiança e credibilidade (Grimm et al. 2017; Eggel e Grimm 2018). Assim, os
conceitos de benefício e avaliação de benefício requerem uma reavaliação em um espírito
que abarca o valor do conhecimento em si. A geração de conhecimento científico tem sido
1193
utilizada com grande benefício para humanos, animais e meio ambiente. O HBA, como
está atualmente, tende a virar essa ideia de cabeça para baixo e implica que a pesquisa
só tem valor se os resultados resultantes trouxerem benefícios sociais imediatos (Grimm
et al. 2017).

Na busca por propriedades mecanísticas dos nutracêuticos, muitas vezes parece inútil
quebrar artificialmente os efeitos da interação única molécula/proteína apenas para
satisfazer o “paradigma da pesquisa mecanicista” (Weinberg 2010). Além disso, pode
acontecer que as propriedades emergentes das interações moleculares aditivas,
sinérgicas ou inibitórias e os efeitos resultantes dos nutracêuticos levem a um resultado
fisiológico benéfico geral que não pode ser rastreado até um único evento molecular. Hoje
em dia, metodologias baseadas em ômicas e análises de dados adequadas permitem a
determinação eficiente de efeitos sistêmicos (Sauer e Luge 2015; Goncharov et al. 2015).
A análise de “big data”, ou seja, ferramentas estatísticas de aprendizado de máquina, se
tornará cada vez mais importante para fenômenos biológicos complexos e estruturas de
causalidade para desenvolver modelos computacionais apropriados para predição (Sauer
e Plauth 2017). Por exemplo, novas abordagens baseadas na reconstrução de espaço de
estado não linear foram desenvolvidas para diferenciar causalidade de correlação e para
analisar com eficiência sistemas biológicos dinâmicos fracamente conectados (Sugihara
et al. 2012). A biologia baseada em Omics deve ser consultada com mais frequência para
resolver problemas biológicos complexos. Um deles são os mecanismos epigenéticos e
sua modulação por nutracêuticos, que foram mostrados como alvo de enzimas envolvidas
na regulação do gene epigenético (Gerhauser 2018). Outro problema complexo é que a
microbiota intestinal e os metabólitos microbianos podem ser mediadores importantes da
interação dieta/epigenoma. Apenas alguns metabólitos microbianos, incluindo folato,
ácidos fenólicos, S - (-) equol, urolitinas, isotiocianatos e ácidos graxos de cadeia curta e
longa, foram testados com relação ao seu potencial para influenciar os mecanismos
epigenéticos (Gerhauser 2018).

Os conceitos descritos neste capítulo podem ajudar a aumentar muito o valor prognóstico
da pesquisa in vitro para finalmente rejeitar – quem sabe? – os estudos in vivo. A
metodologia dos estudos de segurança e toxicidade deve ser enviesada para modelos in
vitro e in silico, ainda mais quando os nutracêuticos são objeto de pesquisa.
Considerações éticas e financeiras favorecem esses empreendimentos científicos. Os
animais não devem ser sacrificados por causa de pessoas saudáveis que procuram ser
ainda mais saudáveis. As direções futuras dos testes nutracêuticos estão certamente
ligadas ao desenvolvimento de uma metodologia de triagem citofisiológica in vitro, assim

1194
como com simulações in silico de interações moleculares e algoritmos computacionais
para aumentar o valor prognóstico da pesquisa. Devem ser suplementos indispensáveis à
metodologia de investigação de suplementos naturais, ou seja, nutracêuticos. Esses
suplementos, tomados em conjunto, acrescentariam muito à saúde humana e ao nosso
conhecimento associado.

Referências
Akingbemi BT, Braden TD, Kemppainen BW et al (2007) Exposure to phytoestrogens in the perinatal period affects
androgen secretion by testicular Leydig cells in the adult rat. Endocrinology 148:4475–4488
Al-Malahmeh AJ, Al-Ajlouni AM, Wesseling S et al (2016) Determination and risk assessment of naturally occurring
genotoxic and carcinogenic alkenylbenzenes in basil-containing sauce of pesto. Toxicol Rep 4:1–8
Al-Malahmeh AJ, Alajlouni AM, Ning J et al (2017) Determination and risk assessment of naturally occurring genotoxic
and carcinogenic alkenylbenzenes in nutmeg-based plant food supplements. J Appl Toxicol 37(10):1254–1264
Alzoubi K, Calabrò S, Faggio C et al (2015) Stimulation of suicidal erythrocyte death by sulforaphane. Basic Clin
Pharmacol Toxicol 116(3):229–235
Anon (2018a.) http://www.animalresearch.info/en/designing-research/why-animals-are-used/. Accessed Jun 2018
Anon (2018b) 5th international conference of the Basel Declaration Society openness and transparency: building trust
in animal research, 14th–15th Feb 2018. http://www.basel-declaration.org/
Augustin MA, Sanguansri L, Lockett T (2013) Nano- and microencapsulated systems for enhancing the delivery of
resveratrol. Ann N YAcad Sci 1290:107–112
Bailey J, Thew M, Balls M (2014) An analysis of the use of animal models in predicting human toxicology and drug
safety. Altern Lab Anim 42(3):181–199
Bayan L, Koulivand PH, Gorji A (2014) Garlic: a review of potential therapeutic effects. Avicenna J Phytomed 4(1):1–14
Bunchorntavakul C, Reddy KR (2013) Review article: herbal and dietary supplement hepatotoxicity. Aliment Pharmacol
Ther 37(1):3–17
Cerella C, Dicato M, Jacob C et al (2011) Chemical properties and mechanisms determining the anti-cancer action of
garlic-derived organic sulfur compounds. Anti Cancer Agents Med Chem 11 (3):267–271
ChemSafetyPRO (2018.)
http://www.chemsafetypro.com/Topics/CRA/What_is_Point_of_Departure_(POD)_in_Toxicology_and_How_to_Use_It_to
_Calculate_Reference_Dose_RfD.html. Accessed Jun 2018
Chen L, Mulder PPJ, Louisse J et al (2017) Risk assessment for pyrrolizidine alkaloids detected in (herbal) teas and
plant food supplements. Regul Toxicol Pharmacol 86:292–302
Das L, Bhaumik E, Raychaudhuri U et al (2012) Role of nutraceuticals in human health. J Food Sci Technol 49(2):173–
183
Desbrow B, McCormack J, Burke LM (2014) Sports dietitians Australia position statement: sports nutrition for the
adolescent athlete. Int J Sport Nutr Exerc Metab 24(5):570–584
Directive 89/398/EEC (1989.) https://eur-lex.europa.eu/legal-content/EN/TXT/?uri=celex%3A31989L0398. Accessed
Jun 2018
Doke SK, Dhawale SC (2015) Alternatives to animal testing: a review. Saudi Pharm J 23(3):223–229
Eggel M, Grimm H (2018) Necessary, but not sufficient. The benefit concept in the project evaluation of animal
research in the context of directive 2010/63/EU. Animals (Basel) 8(3):E34
Elgawish RAR, Rahman HGA, Abdelrazek HMA (2015) Green tea extract attenuates CCl4-induced hepatic injury in
male hamsters via inhibition of lipid peroxidation and p53-mediated apoptosis. Toxicol Rep 2:1149–1156
Espín JC, García-ConesaMT, Tomás-Barberán FA (2007) Nutraceuticals: facts and fiction. Phytochemistry 68(22–
24):2986–3008
European Commission (2010) Sixth report on the statistics on the number of animals used for experimental and other
scientific purposes in the member states of the European Union, Brussels
Ferdowsian HR, Beck N (2011) Ethical and scientific considerations regarding animal testing and research. PLoS One
6(9):e24059
Filippich LJ, Zhu J, Oelrichs P et al (1991) Hepatotoxic and nephrotoxic principles in Terminalia oblongata. Res Vet Sci
50(2):170–177
Fischer K, Kettunen J, Würtz P et al (2014) Biomarker profiling by nuclear magnetic resonance spectroscopy for the
prediction of all-cause mortality: an observational study of 17,345 persons. PLoS Med 11(2):e1001606
Franco NH (2013) Animal experiments in biomedical research: a historical perspective. Animals (Basel) 3(1):238–273
Gerhauser C (2018) Impact of dietary gut microbial metabolites on the epigenome. Philos Trans R Soc Lond Ser B Biol
Sci 373 (1748):20170359
Ghezzi P, Davies K, Delaney A et al (2018) Theory of signs and statistical approach to big data in assessing the
relevance of clinical biomarkers of inflammation and oxidative stress. Proc Natl Acad Sci USA 115(10):2473–2477

1195
 Goncharov NV, Ukolov AI, Orlova TI et al (2015) Metabolomics: on the way to an integration of biochemistry, analytical
chemistry, and informatics. Biol Bull Rev 5(4):296–307
Goncharov N, Maevsky E, Voitenko N et al (2016a) Nutraceuticals in sports activities and fatigue. In: Gupta RC (ed)
Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity. Academic Press/Elsevier, Amsterdam, pp 177–188
Goncharov N, Orekhov A, Voitenko N et al (2016b) Organosulfur compounds as nutraceuticals. In: Gupta RC (ed)
Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity. Academic Press/Elsevier, Amsterdam, pp 555–568
Goncharov NV, Belinskaia DA, Shmurak VI et al (2017a) Serum albumin binding and esterase activity: mechanistic
interactions with organophosphates. Molecules 22(7):E1201
Goncharov NV, Nadeev AD, Jenkins RO, Avdonin PV (2017b) Markers and biomarkers of endothelium: when
something is rotten in the state. Oxidative Med Cell Longev 2017:9759735, 27 pp
Goncharov NV, Terpilovskii MA, Shmurak VI et al (2017c) Comparative analysis of esterase and paraoxonase activities
of different serum albumin species. J Evol Biochem Physiol 53(4):271–281
Goncharov NV, Terpilowski MA, Nadeev AD et al (2018) Cytotoxic power of hydrogen peroxide effect on endothelial
cells in vitro. Biochemistry (Moscow), Supplement Series A: Membr Cell Biol 12(2):180–188
Greek R, Menache A (2013) Systematic reviews of animal models: methodology versus epistemology. Int J Med Sci 10
(3):206–221
Grimm H, Eggel M, Deplazes-Zemp A et al (2017) The road to hell is paved with good intentions: why harm-benefit
analysis and its emphasis on practical benefit jeopardizes the credibility of research. Animals (Basel) 7(9):E34
Gupta RC (2016) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity. Academic Press/Elsevier, Amsterdam, 1040 pp
Habs M, Binder K, Krauss S et al (2017) A balanced risk-benefit analysis to determine human risks associated with
pyrrolizidine alkaloids (PA)—the case of tea and herbal infusions. Nutrients 9 (7):E717
Hassanin LA, Salama AM, Essa EA et al (2017) Potential role of some nutraceuticals in neurotoxicity induced by
aluminum oxide in experimental animal model. Int J Adv Res Biol Sci 4(11):72–89
Hui L, Qigui L, Sashuang R et al (2014) Nonspecific changes in clinical laboratory indicators in unselected terminally ill
patients and a model to predict survival time based on a prospective observational study. J Transl Med 12:78
Ismail T, Calcabrini C, Diaz AR et al (2016) Ellagitannins in cancer chemoprevention and therapy. Toxins (Basel)
8(5):E151
James KD, Kennett MJ, Lambert JD (2018) Potential role of the mitochondria as a target for the hepatotoxic effects of
(-)-epigallocatechin-3-gallate in mice. Food Chem Toxicol 111:302–309
Jurgens TM, Whelan AM, Killian L et al (2012) Green tea for weight loss and weight maintenance in overweight or
obese adults. Cochrane Database Syst Rev 12:CD008650
Kilkenny C, Browne WJ, Cuthill IC et al (2010) Improving bioscience research reporting: the ARRIVE guidelines for
reporting animal research. PLoS Biol 8:e1000412
Kim KB, Nam YA, Kim HS et al (2014) α-Linolenic acid: nutraceutical, pharmacological and toxicological evaluation.
Food Chem Toxicol 70:163–178
Knight A (2008) Systematic reviews of animal experiments demonstrate poor contributions toward human healthcare.
Rev Recent Clin Trials 3(2):89–96
Konar D, Devarasetty M, Yildiz DV et al (2016) Lung-on-a-chip technologies for disease modeling and drug
development. Biomed Eng Comput Biol 7(Suppl 1):17–27
Korf EA, Kubasov IV, Vonsky MS et al (2017) Green tea extract increases the expression of genes responsible for
regulation of calcium balance in rat slow-twitch muscles under conditions of exhausting exercise. Bull Exp Biol Med
164(1):6–9
Kruger CL, Mann SW (2003) Safety evaluation of functional ingredients. Food Chem Toxicol 41(6):793–805
Mahady G, Parrot J, Lee C et al (2003) Botanical dietary supplement use in peri- and postmenopausal women.
Menopause 10(1):65–72
Manteiga R, Park DL, Ali SS (1997) Risks associated with consumption of herbal teas. Rev Environ Contam Toxicol
150:1–30
Mason BC, Lavallee ME (2012) Emerging supplements in sports. Sports Health 4(2):142–146
Mazzanti G, Menniti-Ippolito F, Moro PA et al (2009) Hepatotoxicity from green tea: a review of the literature and two
unpublished cases. Eur J Clin Pharmacol 65(4):331–341
Mazzanti G, Di Sotto A, Vitalone A (2015) Hepatotoxicity of green tea: an update. Arch Toxicol 89(8):1175–1191
Mazzanti G, Moro PA, Raschi E et al (2017) Adverse reactions to dietary supplements containing red yeast rice:
assessment of cases from the Italian surveillance system. Br J Clin Pharmacol 83:894–908
Merz KH, Schrenk D (2016) Interim relative potency factors for the toxicological risk assessment of pyrrolizidine
alkaloids in food and herbal medicines. Toxicol Lett 263:44–57
Mindukshev I, Kudryavtsev I, Serebriakova M et al (2016) Flow cytometry and light scattering technique in evaluation
of nutraceuticals. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity. Academic Press/Elsevier, Amsterdam, pp
319–332
Mueller C (1999) The regulatory status of medical foods and dietary supplements in the United States. Nutrition
15:249–251
Munday R (2012) Harmful and beneficial effects of organic monosulfides, disulfides, and polysulfides in animals and
humans. Chem Res Toxicol 25(1):47–60

1196
 Navarro SL, Li F, Lampe JW (2011) Mechanisms of action of isothiocyanates in cancer chemoprevention: an update.
Food Funct 2(10):579–587
Ning J, Cui X, Kong X et al (2018) Risk assessment of genotoxic and carcinogenic alkenylbenzenes in botanical
containing products present on the Chinese market. Food Chem Toxicol 115:344–357
Novozhilov AV, Tavrovskaya TV, Voitenko NG et al (2015) Efficacy of green tea extract in two exercise models. Bull
Exp Biol Med 158 (3):342–345
Oelrichs PB, Pearce CM, Zhu J et al (1994) Isolation and structure determination of terminalin A toxic condensed
tannin from Terminalia oblongata. Nat Toxins 2(3):144–150
Olson H, Betton G, Robinson D et al (2000) Concordance of the toxicity of pharmaceuticals in humans and in animals.
Regul Toxicol Pharmacol 32:56–67
Päivärinta E, Pajari AM, Törrönen R et al (2006) Ellagic acid and natural sources of ellagitannins as possible
chemopreventive agents against intestinal tumorigenesis in the Min mouse. Nutr Cancer 54(1):79–83
Patel S (2016) Functional food red yeast rice (RYR) for metabolic syndrome amelioration: a review on pros and cons.
World J Microbiol Biotechnol 32:32–87
Pound P, Nicol CJ (2018) Retrospective harm benefit analysis of pre-clinical animal research for six treatment
interventions. PloS One 13(3):e0193758
Pound P, Ebrahim S, Sandercock P et al (2004) Where is the evidence that animal research benefits humans? BMJ
328:514–517
Prakash M, Shetty JK, Rao L et al (2008) Serum paraoxonase activity and protein thiols in chronic renal failure
patients. Indian J Nephrol 18(1):13–16
Prokofieva DS, Goncharov NV (2014) Effects of biogenic and abiogenic disulphides upon endothelial cells in culture:
comparison of three methods of viability assessment. Tsitologiya 56(6):410–418
Ried K, Fakler P (2014) Potential of garlic (Allium sativum) in lowering high blood pressure: mechanisms of action and
clinical relevance. Integr Blood Press Control 7:71–82
Ronis M, Hennings L, Gomez-Acevedo H et al (2014) Different responses to soy and estradiol in the reproductive
system of prepubertal male rats and neonatal male pigs. FASEB J 28:373.5
Ronis MJ, Gomez-Acevedo H, Blackburn ML et al (2016) Uterine responses to feeding soy protein isolate and
treatment with 17-β-estradiol differ in ovariectomized female rats. Toxicol Appl Pharmacol 297:68–80
Ronis MJJ, Pedersen KB, Watt J (2018) Adverse effects of nutraceuticals and dietary supplements. Annu Rev
Pharmacol Toxicol 58:583–601
Santini A, Cammarata SM, Capone G et al (2018) Nutraceuticals: opening the debate for a regulatory framework. Br J
Clin Pharmacol 84(4):659–672
Sauer S, Luge T (2015) Nutriproteomics: facts, concepts, and perspectives. Proteomics 15(5–6):997–1013
Sauer S, Plauth A (2017) Health-beneficial nutraceuticals-myth or reality? Appl Microbiol Biotechnol 101(3):951–961
Shimshoni JA, Duebecke A, Mulder PP et al (2015) Pyrrolizidine and tropane alkaloids in teas and the herbal teas
peppermint, rooibos and chamomile in the Israeli market. Food Addit Contam Part A Chem Anal Control Expo Risk
Assess 32(12):2058–2067
Stahl BU, Kettrup A, Rozman K (1992) Comparative toxicity of four chlorinated dibenzo-p-dioxins (CDDs) and their
mixture. Part I: acute toxicity and toxic equivalency factors (TEFs). Arch Toxicol 66(7):471–477
Stoner GD, Chen T, Kresty LA et al (2006) Protection against esophageal cancer in rodents with lyophilized berries:
potential mechanisms. Nutr Cancer 54(1):33–46
Sugihara G, May R, Ye H et al (2012) Detecting causality in complex ecosystems. Science 338(6106):496–500
Tan KAL, Walker M, Morris K et al (2006) Infant feeding with soy formula milk: effects on puberty progression,
reproductive function and testicular cell numbers in marmoset monkeys in adulthood. Hum Reprod 21:896–904
Terpilowski MA, Korf EA, Jenkins RO, Goncharov NV (2018) An algorithm for deriving combinatorial biomarkers based
on ridge regression. J Bioinform Genom 1(6). https://doi.org/10.18454/jbg.2018.1.6.2
Terry C, Rasoulpour RJ, Knowles S et al (2015) Utilizing relative potency factors (RPF) and threshold of toxicological
concern (TTC) concepts to assess hazard and human risk assessment profiles of environmental metabolites: a case
study. Regul Toxicol Pharmacol 71(2):301–317
Toyokuni S (2014) Iron and thiols as two major players in carcinogenesis: friends or foes? Front Pharmacol 5:200
Ukolov AI, Kessenikh ED, Radilov AS, Goncharov NV (2017) Toxicometabolomics: identification of markers of chronic
exposure to low doses of aliphatic hydrocarbons. J Evol Biochem Physiol 53 (1):25–36
Vanacloig-Pedros E, Proft M, Pascual-Ahuir A (2016) Different toxicity mechanisms for citrinin and ochratoxin A
revealed by transcriptomic analysis in yeast. Toxins 8:273
Vaughan RA, Conn CA, Mermier CM (2014) Effects of commercially available dietary supplements on resting energy
expenditure: a brief report. ISRN Nutr 2014:650264
Weinberg R (2010) Point: hypotheses first. Nature 464(7289):678
Wiedenfeld H, Edgar J (2011) Toxicity of pyrrolizidine alkaloids to humans and ruminants. Phytochem Rev 10:137–151
Zhang CL, Zeng T, Zhao XL, Xie KQ (2013) Garlic oil attenuated nitrosodiethylamine-induced hepatocarcinogenesis by
modulating the metabolic activation and detoxification enzymes. Int J Biol Sci 9(3):237–245

1197
 Avaliação da segurança e eficácia de nutracêuticos
usando Drosophila como uma ferramenta in vivo
Anurag Sharma, Clinton D’Souza, Vipin Rai e Subash Chandra Gupta

Resumo
A palavra nutracêutica se refere aos compostos bioativos naturais, incluindo alimentos
funcionais, alimentos medicinais e fitoquímicos. As fontes de nutracêuticos, como frutas,
legumes, nozes, especiarias e vegetais, são consumidas desde a antiguidade. A
segurança e eficácia dos nutracêuticos foram examinadas usando modelos
experimentais, como linhagens celulares e roedores. Durante os últimos anos, uma
ênfase tem sido dada ao uso de modelos experimentais alternativos de organização pelos
direitos dos animais. Nesse sentido, a mosca da fruta, Drosophila, surgiu como um
modelo animal alternativo ideal para estudar a patogênese da doença. Mais
especificamente, a alta conservação das sequências do genoma, reduzida redundância
genética, ciclo de vida curto e facilidade nas manipulações genéticas são algumas das
vantagens associadas à Drosophila. A eficácia dos nutracêuticos para uso humano contra
o câncer, envelhecimento e doenças neurodegenerativas também foi examinada usando
Drosophila. Drosophila também foi usada para examinar a segurança de nutracêuticos. O
metabolismo, a dose/resposta e o perfil farmacológico e toxicológico dos nutracêuticos
foram examinados. Os nutracêuticos comuns avaliados com Drosophila incluem
curcumina, celastrol e genisteína. A segurança e eficácia da terapia combinada também
foram examinadas usando Drosophila. Neste capítulo, discutimos a utilidade da
Drosophila no exame da segurança e eficácia dos nutracêuticos contra doenças crônicas.
As vantagens e desvantagens associadas a este modelo experimental são discutidas.
Palavras-chave: Modelo animal alternativo · Drosophila melanogaster · Eficácia ·
Nutracêutico · Teste de toxicidade · Avaliação de segurança

A versão original deste capítulo foi revisada. Uma correção para este capítulo está
disponível em https://doi.org/10.1007/978-3-030-04624-8_65.

1. Introdução
A medicina moderna está altamente avançada na sociedade humana hoje. No entanto, o
conceito de usar nossos alimentos locais e produtos naturais como remédio para a cura

1198
de doenças e melhorar a qualidade de vida foi reconhecido pela primeira vez no século V
por Hipócrates. Agora sabemos que a Mãe Natureza é uma rica fonte de medicamentos e
que até 70% dos medicamentos atuais têm sua origem na Natureza. O termo nutracêutico
(nutrição + farmacêutico) que se refere a um alimento ou parte de um alimento com
valores nutricionais foi cunhado pela primeira vez em 1989. Nutracêuticos são os
compostos bioativos naturais, que incluem alimentos funcionais suplementares dietéticos,
alimentos medicinais e fitoquímicos. O uso de nutracêuticos para doenças crônicas, tem
recebido considerável atenção nas últimas duas décadas. Os nutracêuticos são
consumidos como suplementos dietéticos desde a antiguidade. Estima-se que, em média,
70% dos americanos e 20% dos europeus estão usando nutracêuticos de alguma forma
todos os dias (Ronis et al. 2018; The Lancet Gastroenterology Hepatology 2018).
Evidências científicas crescentes indicam os efeitos benéficos dos nutracêuticos para a
saúde geral ou para o gerenciamento de algumas condições de saúde (Cencic e
Chingwaru 2010; Gupta et al. 2010a; Das et al. 2012; Abdelhamid et al. 2018). Embora os
nutracêuticos sejam geralmente considerados seguros, alguns pesquisadores relataram
que essas moléculas produzem efeitos colaterais inesperados e toxicidade (Hudson et al.
2018; Ronis et al. 2018). Portanto, é fundamental avaliar a segurança e eficácia dos
nutracêuticos antes que possam ser prescritos pelos médicos.

Os nutracêuticos exercem seus efeitos benéficos e prejudiciais pela interação com várias
moléculas de sinalização celular. No entanto, a base molecular para a eficácia dos
nutracêuticos continua a crescer. Nesse contexto, o desenvolvimento de ensaios in vitro e
in vivo, baratos, rápidos, confiáveis e de alto rendimento ajudará a examinar o
metabolismo, a dose/resposta e o perfil farmacológico e toxicológico dessas moléculas.
Drosophila melanogaster, uma alternativa ao sistema mamífero, tem sido usada como um
modelo versátil na pesquisa biomédica básica e aplicada. Este capítulo fornece uma
breve visão geral da utilidade da Drosophila como um sistema modelo alternativo para
examinar a eficácia e a segurança dos nutracêuticos.

2. Drosophila melanogaster como organismo modelo

A escolha de um organismo modelo sempre esteve no centro da pesquisa biológica por
muitas décadas. Procariontes, protistas, fungos, plantas e animais têm sido usados como
organismos modelo por muito tempo. Camundongos, ratos, hamsters, coelhos, galinhas,
porquinhos-da-índia, Xenopus, primatas, cães e gatos estão sendo usados como
substitutos de humanos. No entanto, devido a preocupações regulamentares, científicas e
éticas, a redução ou proibição do uso de organismos de mamíferos superiores em
1199
pesquisas e testes tem sido recomendada. Nesse contexto, Russell e Burch (1959)
propuseram “se os animais fossem usados em experimentos, todos os esforços deveriam
ser feitos para substituí-los por alternativas não sencientes”. Além disso, foi desenvolvida
uma estratégia “3R” que se refere ao Refinamento, refinando os protocolos experimentais
para minimizar o sofrimento desnecessário aos animais; Redução, reduzindo o número de
animais por experimento; e Substituição, desenvolvendo métodos alternativos que evitam
ou substituem o uso de animais (Tannenbaum e Bennett 2015). D. melanogaster,
comumente conhecido como “mosca da fruta”, atende aos critérios de “3R” e tem sido
amplamente utilizado em pesquisas biomédicas. Em 1901, William Castle (1867–1962)
lançou as bases da genética das moscas. No entanto, o poder da genética da mosca foi
verdadeiramente explorado por TH Morgan (1866-1945) e HJ Muller por duas grandes
descobertas: (1) o conceito de herança ligada ao sexo (1926) e (2) mutação em genes por
radiação ionizante (1945), respectivamente. No momento, a versatilidade desse modelo
foi comprovada em várias disciplinas da pesquisa biomédica e básica, como modelagem
de doenças, farmacologia, toxicologia, genética, desenvolvimento e comportamento
(Pandey e Nichols 2011; Jansen et al. 2014; Rand et al. 2014). Embriões, larvas e adultos
de Drosophila têm sido usados para avaliar a eficácia e segurança de vários
nutracêuticos. As seguintes características tornam a Drosophila um modelo alternativo na
pesquisa nutracêutica:

1. Organismo modelo de invertebrado mais próximo do humano; moscas e humanos

compartilham homologia funcional com dois terços dos genes de doenças humanas.

2. Menos genes nas moscas reduzem a redundância em comparação com os

vertebrados.

3. Ciclo de vida curto (~ 10–12 dias) e expectativa de vida (60–70 dias); alta
potencialidade reprodutiva oferece para estudar o efeito de nutracêuticos em várias
gerações.

4. O modelo de Drosophila produziu percepções substanciais na compreensão da

patogênese das doenças humanas.

5. A drosófila pode ser facilmente alimentada com nutracêuticos por meio de alimentos e o
impacto dos agentes pode ser avaliado em nível celular e orgânico. Da mesma forma, a
eficácia dos nutracêuticos pode ser examinada usando o modelo de doença da mosca.

6. A conservação das vias de sinalização e seus reguladores entre moscas e mamíferos

pode ser pertinente para decifrar os insights mecanicistas sobre a eficácia e segurança
dos nutracêuticos.

1200
7. O máximo de informações associadas à Drosophila, como sequência gênica,
disponibilidade de linhagens transgênicas, mutantes e estoques de RNAi, está disponível
no banco de dados online “FlyBase” (http://flybase.org/).

8. O uso de Drosophila como modelo animal alternativo está em conformidade com os

regulamentos da organização de direitos dos animais e é recomendado pelo Centro
Europeu para a Validação de Métodos Alternativos (ECVAM).

3. Utilidade da drosófila no exame do potencial anticâncer dos

nutracêuticos
Nos últimos anos, os nutracêuticos surgiram como agentes potentes para a prevenção e o
tratamento do câncer (Gupta et al. 2010 a; Salami et al. 2013). Drogas mono
direcionadas, antes chamadas de drogas inteligentes ou balas mágicas, acrescentaram
pouco à sobrevida geral de pacientes com câncer. Além disso, essas drogas produzem
inúmeros efeitos colaterais e não podem ser oferecidas por mais de 80% da população
humana. O acúmulo de evidências de estudos pré-clínicos e clínicos sugere que os
nutracêuticos podem ter várias vias relacionadas ao câncer como alvo. Além disso, esses
agentes são consumidos desde a antiguidade e, portanto, têm segurança bem testada.
Drosophila tem sido usada como um modelo animal alternativo para examinar a eficácia
de nutracêuticos. Numerosas linhas de evidência apoiam a contribuição vital da
Drosophila não apenas na decifração do mecanismo molecular fundamental, mas também
na facilitação do desenvolvimento de drogas para o câncer (Rudrapatna et al. 2012;
Yadav et al. 2016). Além disso, a Drosophila foi bem estabelecida para fornecer
informações valiosas sobre o modo de ação de vários nutracêuticos em modelos de
câncer.

Os benefícios para a saúde de vegetais crucíferos, como brócolis e repolho, foram bem
documentados (Armah et al. 2015). Lozano-Baena et al. (2015) relataram propriedade
antimutagênica da mostarda etíope Brassica carinata e seu glucosinolato sinigrina usando
o ensaio de mutação somática e recombinação (SMART) em Drosophila. O efeito
anticâncer da artemisinina e curcumina foi estudado por Das et al. (2014). Gigante letal
(2) é um gene supressor de tumor e sua deleção leva a um tumor cerebral em mosca
(Froldi et al. 2008). A administração de artemisinina e curcumina ao organismo gigante
letal (2) aumentou a produção de ROS (além do limite) e foi benéfica em vários aspectos
da patogênese do câncer. A mutação UBIAD1/heix (gene supressor de tumor) em
Drosophila exibe fortes fenótipos de linfoma, incluindo hipotrofia no cérebro, hiperplasia

1201
da glândula linfática (órgão hematopoiético de Drosophila) e proliferação excessiva de
hemócitos. A vitamina K2 é uma vitamina solúvel em gordura que tem vários benefícios à
saúde, incluindo atividades anticâncer. Recentemente, Dragh et al. (2017) demonstraram
que a exposição à vitamina K2 a larvas de Drosophila previne a progressão do linfoma
restaurando a função mitocondrial. Muitos estudos estabeleceram que estressores
químicos e físicos podem produzir instabilidade do DNA, o que pode levar à
transformação maligna (Wakeford et al. 2010; Rodgers et al. 2018). Nagpal e Abraham
(2017) avaliaram o efeito antígeno tóxico do β-caroteno e polifenóis do chá em Drosophila
exposta à radiação γ. O grupo demonstrou que a co-exposição de β-caroteno e polifenóis
do chá foi capaz de diminuir a mutação letal recessiva ligada ao sexo induzida pela
radiação γ (SLRL). Da mesma forma, Kaya (2003) sugeriu o efeito antígeno tóxico do
ácido ascórbico contra a exposição ao metanossulfonato de etila (EMS),
metanossulfonato de metila (MMS) e N-nitroso-Netilureia (ENU) à Drosophila.

4. Utilidade da drosófila no exame da eficácia dos nutracêuticos contra

o envelhecimento
O envelhecimento é um processo biológico multifatorial que leva a um declínio
progressivo da função fisiológica e cognitiva (Khan et al. 2017). Embora o envelhecimento
em si seja um processo biológico complexo, fatores genéticos e ambientais o tornam
ainda mais complexo. Portanto, o desenvolvimento de intervenções eficazes para a
promoção do envelhecimento saudável é uma das principais e desafiadoras
preocupações biomédicas. Entre as diferentes teorias do envelhecimento, a teoria dos
radicais livres do envelhecimento está diretamente ligada aos nutracêuticos devido às
suas atividades de eliminação de radicais livres. Em comparação com outros modelos
biológicos convencionais na pesquisa do envelhecimento, a Drosophila é um organismo
valioso para avaliar a eficácia e identificar o modo de ação dos nutracêuticos devido ao
seu curto tempo de vida e genética bem definida. O superóxido dismutase 1 (SOD1) e a
caixa Forkhead O (dfoxo), os atores críticos do sistema de defesa antioxidante, estão
associados ao envelhecimento. Laslo et al. (2013) e Wang et al. (2014 a) demonstraram
que a suplementação de polpa de açaí (Euterpe oleracea) liofilizada e cranberry promove
o envelhecimento saudável em moscas mutantes SOD1 e dfoxo. Da mesma forma, a
administração de riboflavina à Drosophila promoveu a sobrevivência com aumento da
capacidade reprodutiva por meio da modulação na via do estresse antioxidante (Zou et al.
2017). Além disso, Chandrashekara et al. (2014) mostraram que a suplementação de
curcumina leva ao aumento da sobrevivência de Drosophila por meio da modulação do
1202
metabolismo energético, como aumento dos níveis de glicogênio e atividade pAkt e
aconitase. Recentemente, dados do transcriptoma de larvas de Drosophila expostas ao
suco de palma (PFJ) e corpos de gordura larvais revelaram a modulação de genes
responsivos ao estresse (proteínas de choque térmico 70 e 26, SOD2, TOR) que podem
estar associados ao aumento do fenótipo de longevidade após a suplementação de PFJ
para Drosophila (Leow et al. 2018). A nectarina (Prunus persica var. Nectarine;
subespécie de pêssego) contém fibras dietéticas, ampla quantidade de vitamina C, β-
carotenóides e polifenóis que podem promover uma vida saudável. Estudo sobre
Drosophila mostrou que a suplementação de nectarina (4%) modula o metabolismo da
glicose e controla o dano oxidativo, levando ao aumento da expectativa de vida do
organismo (Boyd et al. 2011). Em outro estudo, a inibição farmacológica da quinurenina
do triptofano por suplementação de berberina (componente bioativo da medicina chinesa
natural Rhizoma coptidis) leva ao aumento da expectativa de vida da Drosophila
(Navrotskaya et al. 2012). A dieta rica em gordura está associada ao aumento do peso
corporal e à diminuição da expectativa de vida (Muller et al. 2013; Lamont et al. 2016). Da
mesma forma, Drosophila alimentada com dieta rica em gordura apresentou aumento do
peso corporal e redução do tempo de vida. Os efeitos do extrato de alecrim (erva perene)
na longevidade da Drosófila sob condição de dieta rica em gordura foram avaliados por
Wang et al. (2017). O grupo observou que a suplementação de alecrim resgatou o peso
corporal induzido pela dieta de gordura e aumentou a expectativa de vida de Drosophila
por meio do aumento da atividade das enzimas antioxidantes (SOD e CAT) e diminuição
da expressão de Matusalém. Da mesma forma, a suplementação de proteínas de Geléia
Real para Drosophila prolongou o tempo de vida por meio do aumento da atividade da
enzima antioxidante e da via de sinalização mediada por EGFR (Xin et al. 2016).

5. Utilidade da drosófila no exame da eficácia dos nutracêuticos contra

doenças neurodegenerativas
A natureza progressiva e complexa das doenças neurodegenerativas representa uma
séria ameaça ao ser humano em todo o mundo. De acordo com o Relatório Mundial de
Alzheimer em 2015, cerca de 46,8 milhões de pessoas são afetadas com a doença de
Alzheimer (DA). Além disso, espera-se que esse número chegue a 75 milhões em 2030.
Da mesma forma, mais de dez milhões de pessoas sofrem com a doença de Parkinson
(DP) em todo o mundo. Desde a última década, a Drosophila tem sido amplamente usada
para estudar várias doenças neurodegenerativas (Lu e Vogel 2009). Além disso, o uso
deste modelo para examinar os valores terapêuticos de vários agentes aumentou
1203
significativamente. Galato de epicatequina (EC), um conhecido antioxidante extraído do
chá-verde, demonstrou potencial terapêutico múltiplo (Chu et al. 2017). Siddique et al.
(2014b) avaliaram a eficácia da EC no modelo transgênico de Drosophila PD (expressão
da alfa-sinucleína humana no cérebro da mosca usando o sistema UAS-Gal4) nos
neurônios. Os resultados mostraram melhora na habilidade de escalar e redução no
estresse oxidativo e apoptose no cérebro de Drosophila doente após a suplementação de
CE. O mesmo grupo examinou a aplicação terapêutica de uma erva indiana Ocimum
sanctum L. (conhecida como tulsi) contra o modelo PD Drosophila. A suplementação de
Ocimum sanctum foi encontrada para aumentar a capacidade locomotora no modelo
Drosophila PD. Isso pode ser devido a uma redução no estresse oxidativo no cérebro da
mosca (Siddique et al. 2014a). Faust et al. (2009) usaram o modelo Drosophila DJ-1A de
DP para avaliar o potencial terapêutico da erva chinesa celastrol e do antibiótico
minociclina. Os resultados revelaram que a administração de celastrol e minociclina inibe
a perda de neurônio dopaminérgico e restaura os níveis de dopamina no cérebro do
modelo Drosophila DP. Da mesma forma, a espirulina (Arthrospira platensis), uma
biomassa de cianobactérias, é geralmente considerada um superalimento (Karkos et al.
2011). A administração desta espirulina a Drosophila PD sensível ao paraquat (DJ-1βΔ93)
aumenta a expectativa de vida e a atividade locomotora e diminui o estresse celular no
organismo (Kumar et al. 2017). A cepa mutante de Drosophila para o gene da quinase 1
putativa induzida por PTEN (PINK1B9) é outra ferramenta predominante para estudar a
DP (Song et al. 2013).

Poddighe et al. (2014) examinaram os efeitos neuroprotetores de Mucuna pruriens

(contém genisteína e ácidos graxos poliinsaturados) no mutante Drosophila PINK1B9. Os
autores observaram que a suplementação de 0,1% de Mucuna pruriens no alimento do
mutante PINK1B9 melhorou a sobrevivência, resgatou o comportamento de escalada
prejudicado e restaurou a expressão do piloto de dano cerebral e da tirosina hidroxilase.
Em outro estudo, o efeito neuroprotetor do ácido α-lipóico foi estudado contra a esclerose
lateral amiotrófica (ALS) usando Drosophila transgênica (com mutações G85R e G93A
hSOD1) (Wang et al. 2018). O autor observou que a suplementação de ácido α-lipóico
exibe uma neuroproteção contra ALS, regulando positivamente a atividade antioxidante
por meio da ativação da via ERK/Akt. Além disso, a perda de parkin no cérebro de
Drosophila está associada à DP por meio de estresse oxidativo avaliado e disfunção
mitocondrial (Julienne et al. 2017). A administração de ácido fólico para derrubar parkin no
cérebro de Drosophila foi associada à melhora da capacidade locomotora, redução da
mortalidade, estresse oxidativo e restauração do metabolismo energético no organismo
(Srivastav et al. 2015). Mohandas et al. (2017) mostraram que a exposição ao manganês
1204
à Drosophila induz disfunção locomotora que pode ser melhorada pela suplementação de
proteína isolada de soro de leite. Da mesma forma, a exposição do paraquat 114 à
Drosophila leva à degeneração neurológica grave por meio do conteúdo mitocondrial
alterado, aumento da produção de ROS e envelhecimento acelerado. Os autores
mostraram que a administração de ácido eicosapentaenóico e docosahexaenóico (ácido
graxo ômega-3) em combinação com PQ protege o organismo contra a
neurodegeneração, inibindo a produção de H 2O2 e reduzindo os níveis de glutationa e
proteínas oxidadas (de Oliveira Souza et al. 2017). A formação de placas amilóides devido
à agregação de peptídeos β-amilóides é uma das marcas registradas da AD (Murphy e
LeVine 2010). O efeito do derivado de flavonóides contra o modelo de Drosophila AD
(expressão de Aβ42 em tecido cerebral de Drosophila usando driver cerebral; elav-Gal4)
foi avaliado por Singh et al. (2014). Os autores observaram que a administração oral de
flavonóides a moscas com AD exibiu atividade anti-Aβ, melhorando a função motora e
aumentando a longevidade. Os autores também observaram resgate de 70% no fenótipo
da degeneração ocular (expressão de Aβ42 usando driver específico para o olho; ey-gal4)
por administração oral de flavonóides a 100 μg/ml e 3,77 M. Em outro estudo, um efeito neuroprotetor
de Curcuma longa foi observado em outro modelo transgênico de Drosophila (expressão
de BACE-1 usando driver específico para o cérebro e o olho) (Wang et al. 2014b).

6. Utilidade da Drosophila na Avaliação da Toxicidade de Nutracêuticos

Durante as últimas duas décadas, vários ensaios celulares e orgânicos simples e
confiáveis foram desenvolvidos no modelo de Drosophila para avaliação de toxicidade
(Sharma et al. 2012; Chandra et al. 2015; Pandey et al. 2015). Esses ensaios podem ser
usados para avaliar a segurança de nutracêuticos (Fig. 1). A genisteína é um estrogênio
derivado de planta com potencial terapêutico contra doenças humanas, como câncer,
osteoporose e doenças cardiovasculares (Miao et al. 2012; Spagnuolo et al. 2015; De
Gregorio et al. 2017). Altun et al. (2011) observaram uma redução de 45% no tempo
médio de vida da população de Drosophila após a exposição à genisteína. No entanto,
Siddique et al. (2018) demonstraram a redução dos sintomas de DP em Drosophila
transgênica exposta à genisteína. O consumo excessivo de polifenóis do chá-verde (GTP)
produz efeitos negativos em Drosophila (Lopez et al. 2016). A exposição de larvas de
Drosophila ao GTP (10 mg/mL) atrasou o desenvolvimento de um organismo. Além disso,
foi observada redução na produção reprodutiva, defeitos morfológicos nos órgãos
reprodutivos e redução na sobrevivência de organismos femininos. A exposição de

114 Inseticida
1205
Drosophila a Croton campestris e Duguetia furfuracea (plantas medicinais originárias do
Brasil; usadas para tratar vários problemas de saúde) foi encontrada para aumentar a
mortalidade e comportamento locomotor prejudicado devido ao estresse oxidativo (Valeria
Soares de Araujo Pinho et al. 2014; Junior et al. 2016). Boulahbel (2015) examinou o
efeito de desenvolvimento e reprodução do óleo de neem em Drosophila. A exposição ao
óleo de neem à Drosophila resultou em redução do peso das pupas, fecundidade e
fertilidade.

A Drosófila transgênica também tem sido usada para a avaliação da toxicidade

nutracêutica. Usando a tecnologia transgênica, os genes associados à segurança e à
toxicidade são facilmente avaliados. Por exemplo, a expressão de proteínas de choque
térmico (HSPs) é considerada um bioindicador de primeira camada de estresse celular.
Amplas evidências mostraram que a atividade do promotor HSPs (hsp70, hsp83, hsp26)
pode ser avaliada marcando-o com um gene repórter, como β-galactosidase ou GFP para
a avaliação da toxicidade (Gupta et al. 2010b). Da mesma forma, a atividade da glutationa
S-transferase (GST) é diretamente proporcional ao aumento dos níveis de ROS.
Drosophila transgênica carregando o promotor GST marcado com β-galactosidase ou
GFP (GST-lacZ ou GST-GFP) pode ser usada para a avaliação fácil dos níveis de ROS

1206
após a administração de nutracêuticos (Veal et al. 2002; Sykiotis e Bohmann 2008;
Louradour et al. 2017). A expressão da ceifeira e do esconderijo é considerada como os
iniciadores da morte celular (Xu et al. 2009). A avaliação de β-galactosidase em lacZ ou
hid-lacZ pode ser usada como avaliação de morte celular após administração nutracêutica
(Fan et al. 2010; Wu et al. 2015). O sistema Gal4/UAS é uma das ferramentas mais
poderosas para a expressão de genes alvo in vivo. O ativador de transcrição de levedura
Gal4 se liga à sequência de ativação a montante (UAS) e ativa a transcrição. A atividade
de Gal4 estimula a transcrição de um gene repórter sob o controle de UAS em Drosophila
(Duffy 2002). Este sistema pode ser usado para decifrar os insights moleculares dos
nutracêuticos.

7. Comentários finais e orientações futuras

Devido à crescente popularidade do uso de nutracêuticos em nossa vida diária, a
avaliação da segurança e eficácia desses agentes é crucial. Este capítulo descreve a
Drosophila como um excelente sistema modelo in vivo para avaliações de eficácia e
segurança de nutracêuticos (Tabela 1). Devido à semelhança significativa com o genoma
humano, curta vida útil e alta capacidade reprodutiva, a Drosophila pode ser usada para a
avaliação da segurança e eficácia de nutracêuticos. Vários ensaios em nível celular e
organizacional foram desenvolvidos neste modelo para dar uma visão abrangente da
segurança/eficácia dos compostos nutracêuticos. Além disso, o ensaio do gene repórter e
o sistema UAS-Gal4 também podem ser utilizados para a avaliação rápida e para
decodificar a compreensão mecanicista desses agentes, respectivamente.

Tabela 1 Avaliação da segurança e eficácia de nutracêuticos e extratos de plantas usando

o sistema modelo Drosophila

Tabela 1 Avaliação da segurança e eficácia de nutracêuticos e extratos de plantas usando o sistema

modelo Drosophila
Nº Nome do agente Fonte do agente Efeito do agente Referência
Lozano-Baena et
1 Glucosinolato sinigrina Brassica carinata Anticâncer al. (2015)

2 Artemisinina Artemisia annua Anticâncer Das et al. (2014)

3 Curcumina Curcuma longa Anticâncer Das et al. (2014)

Dragh et al.
4 Vitamina K2 Alimentos fermentados Anticâncer (2017)
Nagpal e
5 β-caroteno Frutas amarelas e laranja Anticâncer Abraham (2017)
Nagpal e
6 Polifenóis do chá Camellia sinensis Anticâncer Abraham (2017)

7 Ácido ascórbico Frutas e vegetais Anticâncer Kaya (2003)

Laslo et al.
8 Açaí liofilizado Euterpe oleracea Antienvelhecimento (2013)
1207
Tabela 1 Avaliação da segurança e eficácia de nutracêuticos e extratos de plantas usando o sistema
modelo Drosophila
Wang et al.
9 Cranberry Vaccinium macrocarpon Antienvelhecimento (2014a)

10 Riboflavina Vegetais folhosos Aliviador de estresse Zou et al. (2017)

Chandrashekara
11 Curcumina Curcuma longa Anti-envelhecimento et al. (2014)
Leow et al.
12 Suco de palma Borassus flabellifer Longevidade aumentada (2018)
Boyd et al.
13 Nectarine Prunus persica Longevidade aumentada (2011)
Navrotskaya et
14 Berberine Berberis aristata Longevidade aumentada al. (2012)
Wang et al.
15 Extrato de alecrim Rosmarinus officinalis Longevidade aumentada (2017)

16 Proteínas da geléia real Mel Maior longevidade Xin et al. (2016)

Siddique et al.
17 Galato de epicatequina Camellia sinensis Neuroprotetor e antioxidante (2014b)
Siddique et al.
18 Extrato de Tulsi Ocimum sanctum L. Neuroprotetor (2014a)
Faust et al.
19 Celastrol Celastrus regelii Neuroprotetor (2009)

Tetraciclina natural, Faust et al.

20 Minociclina Neuroprotetor (2009)
antibióticos
Kumar et al.
21 Spirulina Arthrospira platensis Neuroprotetor (2017)
Poddighe et al.
22 Extrato de genisteína Mucuna pruriens Neuroprotetor (2014)
Wang et al.
23 Ácido α-lipóico Suplementos dietéticos Neuroprotetor (2018)
Mohandas et al.
24 Isolado proteico de soro Suplementos dietéticos Neuroprotetor (2017)
Wang et al.
25 Ácido graxo ômega-3 Suplementos dietéticos Neuroprotetor (2014b)
de Oliveira
26 Extrato de cúrcuma Curcuma longa Neuroprotetor Souza et al.
(2017)
Altun et al.
27 Genisteína Fitoestrogênica Redução do tempo de vida (2011)
Lopez et al.
28 Chá verde polifenol Camellia sinensis Atraso de desenvolvimento (2016)

Dano oxidativo e redução do Junior et al.

29 Extrato Croton campestris (2016)
tempo de vida
Valeria Soares
Dano oxidativo e redução do
30 Extrato Duguetia furfuracea de Araujo Pinho
tempo de vida et al. (2014)

31 Óleo de Neem Azadirachta indica Defeitos de desenvolvimento Boulahbel (2015)

Agradecimentos: os laboratórios de Gupta e Sharma são apoiados pelo Conselho de

Pesquisa em Ciência e Engenharia (ECR / 2016/000034 para SCG e ECR / 2016/001863
para AS). Além disso, o laboratório de Gupta é apoiado pela University Grants
Commission [No. F.30-12 / 2015 (BSR)]. O CD deseja agradecer à Diretoria de Minorias
(DOM / FELLOWSH I P / CR-33 / 2018-19) pelo apoio financeiro.

Referências
1208
 Abdelhamid AS, Brown TJ, Brainard JS et al (2018) Omega-3 fatty acids for the primary and secondary prevention of
cardiovascular disease. Cochrane Database Syst Rev 7:CD003177
Altun D, Uysal H, Askin H et al (2011) Determination of the effects of genistein on the longevity of Drosophila
melanogaster meigen (Diptera; Drosophilidae). Bull Environ Contam Toxicol 86:120–123
Armah CN, Derdemezis C, Traka MH et al (2015) Diet rich in high glucoraphanin broccoli reduces plasma LDL
cholesterol: evidence from randomised controlled trials. Mol Nutr Food Res 59:918–926
Boulahbel B (2015) Activity of neem oil in Drosophila melanogaster: toxicity and delayed effect on the progeny. J
Entomol Zool Stud 3:306–310
Boyd O, Weng P, Sun X et al (2011) Nectarine promotes longevity in Drosophila melanogaster. Free Radic Biol Med
50:1669–1678
Cencic A, Chingwaru W (2010) The role of functional foods, nutraceuticals, and food supplements in intestinal health.
Nutrients 2:611–625
Chandra S, Pandey A, Chowdhuri DK (2015) MiRNA profiling provides insights on adverse effects of Cr(VI) in the
midgut tissues of Drosophila melanogaster. J Hazard Mater 283:558–567
Chandrashekara KT, Popli S, Shakarad MN (2014) Curcumin enhances parental reproductive lifespan and progeny
viability in Drosophila melanogaster. Age 36:9702
Chu C, Deng J, Man Y et al (2017) Green tea extracts epigallocatechin-3-gallate for different treatments. Biomed Res
Int 2017:5615647
Das L, Bhaumik E, Raychaudhuri U et al (2012) Role of nutraceuticals in human health. J Food Sci Technol 49:173–
183
Das SS, Nanda GG, Alone DP (2014) Artemisinin and curcumin inhibit Drosophila brain tumor, prolong life span, and
restore locomotor activity. IUBMB Life 66:496–506
De Gregorio C, Marini H, Alibrandi A et al (2017) Genistein supplementation and cardiac function in postmenopausal
women with metabolic syndrome: results from a pilot strain-echo study. Nutrients 9:584
de Oliveira Souza A, Couto-Lima CA, Rosa Machado MC et al (2017) Protective action of Omega-3 on paraquat
intoxication in Drosophila melanogaster. J Toxicol Environ Health A 80:1050–1063
Dragh MA, Xu Z, Al-Allak ZS et al (2017) Vitamin K2 prevents lymphoma in Drosophila. Sci Rep 7:17047
Duffy JB (2002) GAL4 system in Drosophila: a fly geneticist’s Swiss army knife. Genesis 34:1–15
Fan Y, Lee TV, Xu D et al (2010) Dual roles of Drosophila p53 in cell death and cell differentiation. Cell Death Differ
17:912–921
Faust K, Gehrke S, Yang Y et al (2009) Neuroprotective effects of compounds with antioxidant and anti-inflammatory
properties in a Drosophila model of Parkinson’s disease. BMC Neurosci 10:109
Froldi F, Ziosi M, Tomba G et al (2008) Drosophila lethal giant larvae neoplastic mutant as a genetic tool for cancer
modeling. Curr Genomics 9:147–154
Gupta SC, Kim JH, Prasad S et al (2010a) Regulation of survival, proliferation, invasion, angiogenesis, and metastasis
of tumor cells through modulation of inflammatory pathways by nutraceuticals. Cancer Metastatis Rev 29:405–434
Gupta SC, Sharma A, Mishra M et al (2010b) Heat shock proteins in toxicology: how close and how far? Life Sci
86:377–384
Hudson A, Lopez E, Almalki AJ et al (2018) A review of the toxicity of compounds found in herbal dietary supplements.
Planta Med 84:613–626
Jansen RL, Brogan B, Whitworth AJ et al (2014) Effects of five Ayurvedic herbs on locomotor behaviour in a Drosophila
melanogaster Parkinson’s disease model. Phytother Res 28:1789–1795
Julienne H, Buhl E, Leslie DS et al (2017) Drosophila PINK1 and parkin loss-of-function mutants display a range of
non-motor Parkinson’s disease phenotypes. Neurobiol Dis 104:15–23
Junior FE, Macedo GE, Zemolin AP et al (2016) Oxidant effects and toxicity of Croton campestris in Drosophila
melanogaster. Pharm Biol 54:3068–3077
Karkos PD, Leong SC, Karkos CD et al (2011) Spirulina in clinical practice: evidence-based human applications. Evid-
Based Complement Alternat Med 2011:531053
Kaya B (2003) Anti-genotoxic effect of ascorbic acid on mutagenic dose of three alkylating agents. Turk J Biol 27:241–
246
Khan SS, Singer BD, Vaughan DE (2017) Molecular and physiological manifestations and measurement of aging in
humans. Aging Cell 16:624–633
Kumar A, Christian PK, Panchal K et al (2017) Supplementation of spirulina (Arthrospira platensis) improves lifespan
and locomotor activity in paraquat-sensitive DJ-1beta(Delta93) flies, a Parkinson’s disease model in drosophila
melanogaster. J Diet Suppl 14:573–588
Lamont BJ, Waters MF, Andrikopoulos S (2016) A low-carbohydrate high-fat diet increases weight gain and does not
improve glucose tolerance, insulin secretion or beta-cell mass in NZO mice. Nutr Diabetes 6:e194
Laslo M, Sun X, Hsiao CT et al (2013) A botanical containing freeze dried acai pulp promotes healthy aging and
reduces oxidative damage in sod1 knockdown flies. Age 35:1117–1132
Leow SS, Luu A, Shrestha S et al (2018) Drosophila larvae fed palm fruit juice (PFJ) delay pupation via expression
regulation of hormetic stress response genes linked to ageing and longevity. Exp Gerontol 106:198–221
Lopez TE, Pham HM, Barbour J et al (2016) The impact of green tea polyphenols on development and reproduction in
Drosophila melanogaster. J Funct Foods 20:556–566
1209
 Louradour I, Sharma A, Morin-Poulard I et al (2017) Reactive oxygen species-dependent Toll/NF-kappaB activation in
the Drosophila hematopoietic niche confers resistance to wasp parasitism. Elife 6: e25496
Lozano-Baena MD, Tasset I, Obregon-Cano S et al (2015) Antigenotoxicity and tumor growing inhibition by leafy
Brassica carinata and Sinigrin. Molecules 20:15748–15765
Lu B, Vogel H (2009) Drosophila models of neurodegenerative diseases. Annu Rev Pathol 4:315–342
Miao Q, Li JG, Miao S et al (2012) The bone-protective effect of genistein in the animal model of bilateral ovariectomy:
roles of phytoestrogens and PTH/PTHR1 against post-menopausal osteoporosis. Int J Mol Sci 13:56–70
Mohandas G, Rao SV, Muralidhara R (2017) Whey protein isolate enrichment attenuates manganese-induced
oxidative stress and neurotoxicity in Drosophila melanogaster: relevance to Parkinson’s disease. Biomed Pharmacother
95:1596–1606
Muller AP, Dietrich Mde O, Martimbianco de Assis A et al (2013) High saturated fat and low carbohydrate diet
decreases lifespan independent of body weight in mice. Longev Healthspan 2:10
Murphy MP, LeVine H 3rd (2010) Alzheimer’s disease and the amyloid-beta peptide. J Alzheimers Dis 19:311–323
Nagpal I, Abraham SK (2017) Protective effects of tea polyphenols and beta-carotene against gamma-radiation
induced mutation and oxidative stress in Drosophila melanogaster. Genes Environ 39:24
Navrotskaya VV, Oxenkrug G, Vorobyova LI et al (2012) Berberine prolongs life span and stimulates locomotor activity
of Drosophila melanogaster. Am J Plant Sci 3:1037–1040
Pandey UB, Nichols CD (2011) Human disease models in Drosophila melanogaster and the role of the fly in
therapeutic drug discovery. Pharmacol Rev 63:411–436
Pandey A, Khatoon R, Saini S et al (2015) Efficacy of methuselah gene mutation toward tolerance of dichlorvos
exposure in Drosophila melanogaster. Free Radic Biol Med 83:54–65
Poddighe S, De Rose F, Marotta R et al (2014) Mucuna pruriens (Velvet bean) rescues motor, olfactory, mitochondrial
and synaptic impairment in PINK1B9 Drosophila melanogaster genetic model of Parkinson’s disease. PLoS One
9:e110802
Rand MD, Montgomery SL, Prince L et al (2014) Developmental toxicity assays using the Drosophila model. Curr
Protoc Toxicol 59(1):12 11–12 20
Rodgers KM, Udesky JO, Rudel RA et al (2018) Environmental chemicals and breast cancer: an updated review of
epidemiological literature informed by biological mechanisms. Environ Res 160:152–182
Ronis MJJ, Pedersen KB, Watt J (2018) Adverse effects of nutraceuticals and dietary supplements. Annu Rev
Pharmacol Toxicol 58:583–601
Rudrapatna VA, Cagan RL, Das TK (2012) Drosophila cancer models. Dev Dyn 241:107–118
Russell WMS, Burch RL (1959) The principles of humane experimental technique. Methuen, London
Salami A, Seydi E, Pourahmad J (2013) Use of nutraceuticals for prevention and treatment of cancer. Iran J Pharm
Res 12:219–220
Sharma A, Mishra M, Shukla AK et al (2012) Organochlorine pesticide, endosulfan induced cellular and organismal
response in Drosophila melanogaster. J Hazard Mater 221–222:275–287
Siddique YH, Faisal M, Naz F et al (2014a) Role of Ocimum sanctum leaf extract on dietary supplementation in the
transgenic Drosophila model of Parkinson’s disease. Chin J Nat Med 12:777–781
Siddique YH, Jyoti S, Naz F (2014b) Effect of epicatechin gallate dietary supplementation on transgenic Drosophila
model of Parkinson’s disease. J Diet Suppl 11:121–130
Siddique YH, Naz F, Jyoti S et al (2018) Effect of genistein on the transgenic Drosophila model of Parkinson’s disease.
J Diet Suppl:1–14
Singh SK, Gaur R, Kumar A et al (2014) The flavonoid derivative 2-(40 Benzyloxyphenyl)-3-hydroxy-chromen-4-one
protects against Abeta42-induced neurodegeneration in transgenic Drosophila: insights from in silico and in vivo studies.
Neurotox Res 26:331–350
Song S, Jang S, Park J et al (2013) Characterization of PINK1 (PTENinduced putative kinase 1) mutations associated
with Parkinson disease in mammalian cells and Drosophila. J Biol Chem 288:5660–5672
Spagnuolo C, Russo GL, Orhan IE et al (2015) Genistein and cancer: current status, challenges, and future directions.
Adv Nutr 6:408–419
Srivastav S, Singh SK, Yadav AK et al (2015) Folic acid supplementation rescues anomalies associated with
knockdown of parkin in dopaminergic and serotonergic neurons in Drosophila model of Parkinson’s disease. Biochem
Biophys Res Commun 460:780–785
Sykiotis GP, Bohmann D (2008) Keap1/Nrf2 signaling regulates oxidative stress tolerance and lifespan in Drosophila.
Dev Cell 14:76–85
Tannenbaum J, Bennett BT (2015) Russell and Burch’s 3Rs then and now: the need for clarity in definition and
purpose. J Am Assoc Lab Anim Sci 54:120–132
The Lancet Gastroenterology Hapatology (2018) Herbal assault: liver toxicity of herbal and dietary supplements.
Lancet Gastroenterol Hapatol 3:141
Valeria Soares de Araujo Pinho F, Felipe da Silva G, Echeverria Macedo G et al (2014) Phytochemical constituents
and toxicity of Duguetia furfuracea hydroalcoholic extract in Drosophila melanogaster. Evid Based Complement Alternat
Med 2014:838101
Veal EA, Toone WM, Jones N et al (2002) Distinct roles for glutathione S-transferases in the oxidative stress response
in Schizosaccharomyces pombe. J Biol Chem 277:35523–35531

1210
 Wakeford R, Little MP, Kendall GM (2010) Risk of childhood leukemia after low-level exposure to ionizing radiation.
Expert Rev Hematol 3:251–254
Wang C, Yolitz J, Alberico T et al (2014a) Cranberry interacts with dietary macronutrients to promote healthy aging in
Drosophila. J Gerontol A Biol Sci Med Sci 69:945–954
Wang X, Kim JR, Lee SB et al (2014b) Effects of curcuminoids identified in rhizomes of Curcuma longa on BACE-1
inhibitory and behavioral activity and lifespan of Alzheimer’s disease Drosophila models. BMC Complement Altern Med
14:88
Wang HL, Sun ZO, Rehman RU et al (2017) Rosemary extractmediated lifespan extension and attenuated oxidative
damage in Drosophila melanogaster fed on high-fat diet. J Food Sci 82:1006–1011
Wang T, Cheng J, Wang S et al (2018) Alpha-lipoic acid attenuates oxidative stress and neurotoxicity via the ERK/Akt-
dependent pathway in the mutant hSOD1 related Drosophila model and the NSC34 cell line of amyotrophic lateral
sclerosis. Brain Res Bull 140:299–310
Wu C, Chen Y, Wang F et al (2015) Pelle modulates dFoxO-mediated cell death in Drosophila. PLoS Genet
11:e1005589
Xin XX, Chen Y, Chen D et al (2016) Supplementation with major Royal-Jelly Proteins increases lifespan, feeding, and
fecundity in Drosophila. J Agric Food Chem 64:5803–5812
Xu D, Woodfield SE, Lee TV et al (2009) Genetic control of programmed cell death (apoptosis) in Drosophila. Fly 3:78–
90
Yadav AK, Srikrishna S, Gupta SC (2016) Cancer drug development using Drosophila as an in vivo tool: from bedside
to bench and back. Trends Pharmacol Sci 37:789–806
Zou YX, Ruan MH, Luan J et al (2017) Anti-aging effect of riboflavin via endogenous antioxidant in fruit fly Drosophila
Melanogaster. J Nutr Health Aging 21:314–319

1211
 Biomarcadores de alimentos e nutracêuticos:
aplicações em eficácia, segurança e toxicidade
Ramesh C. Gupta, Ajay Srivastava, Anita Sinha e Rajiv Lall

Resumo

Atualmente, os nutracêuticos, principalmente extratos vegetais ou seus constituintes, são

usados para prevenção e tratamento de doenças em humanos e animais. O uso de
nutracêuticos (comumente chamados de suplementos fitoterápicos), em comparação com
os medicamentos modernos, tornou-se mais popular porque (1) oferecem benefícios à
saúde, (2) são eficazes na prevenção e no tratamento de doenças, (3) têm uma ampla
margem de segurança, (4) são mais compatíveis com outros nutracêuticos e/ou
medicamentos modernos em polifarmácia, (5) são baratos, e (6) são facilmente
disponíveis e não requerem prescrição médica. Incontáveis extratos de plantas foram
investigados por sua fitoquímica detalhada, fitofarmacologia e fitoterapia/fitomedicina.
Uma única planta pode ter mais de cem fitoconstituintes, muitos deles com potencial
biológico e farmacológico. Isso torna a avaliação da eficácia e segurança dos
fitoconstituintes muito complicada e desafiadora. Outra questão desafiadora com
nutracêuticos é a contaminação com metais, pesticidas e micotoxinas e a adulteração
com drogas ilegais. Comparados aos medicamentos modernos, os nutracêuticos carecem
de informações sobre farmacocinética/toxicocinética e interação com outros nutracêuticos
e drogas terapêuticas e biomarcadores. A presença de compostos alimentares,
fitoquímicos e/ou seus metabólitos nos fluidos e tecidos corporais servem como
biomarcadores. Este capítulo descreve os biomarcadores de alimentos comuns de valor
nutricional e extratos vegetais de potencial nutracêutico.

Palavras-chave: Biomarcadores · Nutracêuticos · Nutracêuticos veterinários ·

Fitoquímicos · Polifenóis · Alimentos funcionais · Fitoterapia

1. Introdução
A necessidade e a importância dos biomarcadores no campo dos alimentos
dietéticos/funcionais e nutracêuticos foram bem reconhecidas em todo o mundo (Davis e
Milner 2007; Caligiani et al. 2010; Gupta 2016; Savolainen et al. 2017). Os biomarcadores
são frequentemente usados para identificar a exposição de animais e humanos a um tipo
e composição de alimentos, extratos de plantas ou seus ingredientes e para a avaliação
1212
de eficácia e segurança. Os ingredientes da dieta não apenas fornecem os nutrientes
necessários, mas também ajudam no controle de certas doenças crônicas, como
diabetes, doenças cardiovasculares, gastrointestinais, cognição, câncer e outras
condições de saúde. A fitoquímica de extratos vegetais provou ser muito complexa porque
uma única planta pode ter mais de cem constituintes químicos, por exemplo, Perilla
frutescens L. (Yu et al. 2017a). Como resultado, um extrato de planta pode exercer vários
efeitos biológicos e farmacológicos. Alvos moleculares e mecanismos foram identificados
para muitos componentes bioativos presentes em alimentos e nutracêuticos (Gupta 2016).
Diferentes extratos de plantas podem ser usados em combinação com o objetivo de
serem mais eficazes do que um único extrato de planta contra uma doença, e
biomarcadores podem ajudar a explicar as relações dosagem/toxicidade/eficácia (Shen et
al. 2017). Um grande número de extratos vegetais exerce efeitos antioxidantes e
antiinflamatórios e, portanto, são usados na prevenção e tratamento de muitas doenças
em animais e humanos (Gessner et al. 2016; Gupta 2016). Atualmente, as consequências
do estresse oxidativo e da inflamação na saúde animal e seu impacto na indústria animal
são bem conhecidas. Muitos fitoquímicos têm efeitos antiinflamatórios e analgésicos e,
portanto, podem ser indicados no tratamento da dor (Alonso-Castro et al. 2017; Tamrat et
al. 2017). Esses nutracêuticos que exercem atividade imunomoduladora e apoptótica
contra células tumorais ou neoplásicas podem ser empregados como agentes
antitumorais e/ou anticâncer (Ayeka et al. 2017; Davis e Milner 2007; Yu et al. 2017a, b).
Em animais de produção, os nutracêuticos são utilizados para potencializar seu
crescimento e desempenho, além de prevenir e tratar doenças. Hoje, o uso de
prebióticos, probióticos e simbióticos é maior do que nunca em monogástricos e
ruminantes. Alguns nutracêuticos, como o resveratrol, são usados para prolongar a vida,
além de suas atividades antioxidantes e cardioprotetora (Gessner et al. 2016). Muitos
nutracêuticos são usados para amenizar intoxicações causadas por metais, pesticidas,
micotoxinas e venenos. Este capítulo foi preparado para abordar alguns dos
biomarcadores de exposição, efeitos e suscetibilidade a alimentos, nutracêuticos e
extratos de plantas com potencial para uso nutracêutico.

2. Complexidades em biomarcadores alimentares e nutracêuticos

Nas indústrias de alimentos e nutracêuticos, os biomarcadores desempenham papéis
essenciais na identificação e quantificação de ingredientes químicos, farmacocinética e
toxicocinética, interações medicamentosas e medicamentos, avaliações de segurança e
toxicidade e políticas de tomada de decisão. Os biomarcadores também são importantes
1213
para a identificação e quantificação de drogas ilegais que estão envolvidas na adulteração
de nutracêuticos (Gupta 2016; Cheng et al. 2017). No entanto, é preciso mencionar que a
pesquisa de biomarcadores é muito cara, pois requer químicos, bioquímicos,
farmacologistas e toxicologistas altamente qualificados, além de equipamentos de última
geração.

Matrizes de alimentos e fitoextratos são complexas e requerem equipamentos altamente

sofisticados e sensíveis, como HPLC-MS, HPLC-DAD-MS, UPLC-PDA, UHPLC-MSMS,
UHPLC-Q-TOF-MS, GC-MS, GC- MS-MS, MALDITOF-MS, NMR / MRI, cromatografia
eletrocinética micelar e muitos outros. Atualmente, uma abordagem ômica (nutrigenômica,
proteômica, metabolômica e nutrifenômica) também se tornou muito útil na identificação
de biomarcadores no campo da pesquisa alimentar e nutracêutica. Em ciência de
alimentos, separação, isolamento, identificação, confirmação e quantificação de
compostos bioativos são necessários antes que eles possam ser qualificados e validados
como biomarcadores.

A complexidade vem de vários compostos presentes em um único ingrediente alimentar.

Por exemplo, as antocianinas no fruto do maqui chileno são caracterizadas pelo uso de
HPLCDAD-ESI / MSn e espectroscopia de RMN (Brauch et al. 2017). Os extratos de soja
contêm genisteína, daidzeína, genistina, daidzina, gliciteína, malonilgenistina,
acetilgenistina, malonildaidzina e muitos outros compostos bioativos; e sua identificação,
confirmação e quantificação são realizadas por espectrometria de RMN de 1H (Caligiani
et al. 2010). Os cientistas exploraram extensivamente o uso de RMN e RM para
desenvolver uma ampla gama de aplicações para pesquisa e fabricação de alimentos. A
ressonância magnética oferece não apenas informações sobre a composição química e
estrutura interna de certos alimentos, mas também permite o monitoramento da
composição interna e modificação estrutural dos alimentos quando eles experimentam
diferentes práticas agrícolas e processos industriais (Marcone et al. 2013). Recentemente,
Rossi et al. (2017) identificou 32 proteínas (incluindo novas proteínas de armazenamento:
faseolinas, leguminas e lectinas) no feijão-comum brasileiro (Phaseolus vulgaris L.)
usando eletroforese em gel 2-D e espectrometria de massa em tandem (MS/MS). O
processo de fermentação complica ainda mais a identificação e quantificação de
compostos, pois modifica as estruturas químicas de seus metabólitos.

A matriz de um extrato vegetal é ainda mais complexa do que a matriz alimentar. Por
exemplo, o pólen de abelha de plantas de néctar (Brassica campestris L., Camellia
sinensis L., Nelumbo nucifera Gaertn.) É caracterizado pela identificação e quantificação
de compostos bioativos (fosfatidilcolina, fosfatidiletanolamina, fosfatidilglicerol,
1214
fosfatidilserina, lisofosfatidilcolina, lisofosfatidilcolina, ácidos graxos, fenóis, flavonóides,
carboidratos, vitaminas e minerais) usando lipidômica baseada em orbitrap/MS exativa
UPLC-Q (Li et al. 2017a). Muito recentemente, Sima et al. (2018) usaram cromatografia
eletrocinética micelar (avaliação quimiométrica) e HPLC para impressão digital e
autenticação de medicamentos fitoterápicos. A medição de um fitoquímico individual e/ou
seu(s) metabólito(s) precisa ser quantificada no fluido corporal e/ou tecidos para servir
como biomarcadores de exposição. Biomarcadores de efeitos também são medidos nos
fluidos corporais. Por exemplo, ABTS para estado antioxidante e citocinas e
prostaglandinas para atividade antiinflamatória servem como biomarcadores. Da mesma
forma, para efeitos anticâncer, imunomoduladores, antidiabéticos e outros efeitos à saúde,
foram identificados biomarcadores que são medidos em fluidos corporais.

3. Análise da atividade antioxidante

O estresse oxidativo desempenha um papel importante nas etiologias de várias doenças
em humanos e animais, e o índice de tiiolação de proteínas (PTI) é comumente usado
como um biomarcador (Giustarini et al. 2012). Para neutralizar o estresse oxidativo, são
usados antioxidantes. Os antioxidantes são uma família extremamente heterogênea de
compostos, e uma distinção entre antioxidantes diretos (como vitamina E, curcumina,
ácido ascórbico, fenóis, polifenóis) e antioxidantes indiretos (catalase, superóxido
dismutase, glutationa peroxidase) foi feita (Amorati e Valgimigli 2015a, b). A atividade
antioxidante de fitoquímicos e extratos vegetais pode ser medida usando ABTS (2, 2-
azinobis (ácido 3-etilbenzotiazolina-6-sulfônico), DPPH (2, 2-difenil-1-picrilhidrazil), FRAP
(poder antioxidante redutor férrico), ensaios ORAC (capacidade de absorção de radical de
oxigênio) e outros (Ou et al. 2002; Cheng et al. 2006; Thaipong et al. 2006; Amorati e
Valgimigli 2015a, b). Os resultados nesses ensaios são expressos em μg/ml e 3,77 mol Trolox [( ±) -6
hidroxi-2,5,7,8 ácido tetra-metilcromano-2-carboxílico] equivalentes (TE)/amostra de 100 g
ou 100 mL. Entre os alimentos sólidos e líquidos comuns, foi encontrada a capacidade
antioxidante total (TAC) ser máximo no vinho tinto (seco) (247.800) e mínimo na pimenta
vermelha (40) (Kusano e Ferrari 2008).

Em humanos, animais, pássaros e peixes, a medição separada de diferentes moléculas

antioxidantes não é prática e seus efeitos antioxidantes são aditivos, portanto, a medição
do TAC é recomendada (Erel 2004). Os outros nomes para TAC são: atividade
antioxidante total (TAA), poder antioxidante total (TAOP), status antioxidante total (TAS) e
resposta antioxidante total (TAR). Vários métodos foram desenvolvidos para medir o TAC,
mas o método baseado em ABTS é o mais amplamente utilizado, e os resultados do TAC
1215
são expressos em mmol TE/L. O TAC, medido pelo ABTS ou qualquer outro teste, é
atualmente usado como um biomarcador do estado antioxidante. Em alguns estudos, os
níveis plasmáticos e urinários dos flavonóis antioxidantes (quercetina e kaempferol) são
usados como biomarcadores para a ingestão alimentar (De Vries et al. 1998).

4. Análise da atividade antiinflamatória

Um grande número de nutracêuticos, incluindo fitoquímicos, exerce atividade
antiinflamatória. Em modelos animais experimentais (principalmente ratos e
camundongos), a inflamação é induzida pela injeção de carragenina ou formalina nas
patas, e o volume do edema cru da pata ou o volume dos exsudatos na bolsa de ar é
medido (Omote et al. 1998; Ajayi et al. 2017; Fahmy et al. 2017; Tamrat et al. 2017). O
efeito antiinflamatório de um nutracêutico pode ser determinado medindo a redução no
volume do edema da pata e/ou exsudato da bolsa de ar e redução no mediador
inflamatório (histamina, bradicinina, substância P, óxido nítrico, IL-1β, IL-6, TNF -α, PGE2,
glutamato, aspartato, mieloperoxidase e outros) em rato, camundongo ou qualquer outro
animal de laboratório. Esses mediadores inflamatórios podem ser medidos nos fluidos
corporais (principalmente no soro) e ser usados como biomarcadores de atividades
inflamatórias e antiinflamatórias.

5. Atividade analgésica
O teste de calor radiante de movimento da cauda, conforme descrito originalmente por
D’Amour e Smith (1941) com ligeiras modificações (Milind e Monu 2013), é realizado para
medir a atividade analgésica.

6. Biomarcadores de alimentos e nutracêuticos

No caso de alimentos e alimentos funcionais, os biomarcadores são compostos bioativos
que estão presentes. Esses compostos podem ser identificados e quantificados no
ingrediente alimentar e nos fluidos corporais (principalmente plasma e urina) e tecidos, e
frequentemente servem como biomarcadores da ingestão de alimentos. Alguns dos
biomarcadores de alimentos comuns estão listados na Tabela 1. Os níveis plasmáticos de
alquilresorcinol C17 e alquilresorcinol C19 servem como bons biomarcadores da ingestão
de trigo integral e centeio; β-alanina para carne; ácido eicosapentaenóico (EPA) e ácido 3-

1216
carboxi-4-metil-5-propil-2-furanpropanóico (CMPF) para peixes; ácido linoléico para
sementes, nozes e óleo vegetal; etc.

Tabela 1 Biomarcadores de alguns alimentos comuns/alimentos funcionais e seus contaminantes

Dieta Biomarcador (es) Referências
N-óxido de trimetilamina na urina, padrão de proteína específica
Cheung et al. (2017), Stahl e
da espécie (massas), código de barras de DNA, ácido
Peixe Schröder (2017) e Savolainen
eicosapentaenóico (EPA), ácido 3-carboxi-4-metil-5-propil-2- et al. (2017)
furanpropanóico (CMPF) e ácido graxo n-3
Savolainen et al. (2017) e
Carne (bife) β-alanina e aminas heterocíclicas Hsiao et al. (2017)

Carnosina, acilcarnitinas (acetilcarnitina, propionilcarnitina, 2- Marcone et al. (2013) e

Peixe e carne Cheung et al. (2017)
metilbutirilcarnitina), ácidos graxos poliinsaturados, aminoácidos
Camarão Peptídeo de arginina quinase Ortea et al. (2009)

Aminoácidos, peptídeos e proteínas, coloides alimentares,

Comida diária Mariette (2009)
ácidos graxos essenciais
Mariette (2009) e Savolainen
Ovos Alfa-tocoferol, colesterol e ácido gama linolênico et al. (2017)

Feijão comum Faseolinas, leguminas, lectinas Rossi et al. (2017)

Isoflavonas (genisteína, genistina, daidzeína, biochanina,

Soja malonilgenistina, malonildaidzina, acetil genistina), saponinas, Caligiani et al. (2010)
aminoácidos, ácidos orgânicos, etc.
Ross et al. (2003), Woo et al.
Grãos β-Glucano, alquilresorcinóis C17 e C19 e octacosanol (2011) e Savolainen et al.
(2017)

Abacate Ácido oleico Savolainen et al. (2017)

Cogumelo Monossacarídeos, polissacarídeos e β-glucano Khatua e Acharya (2017)

Vegetais de
Glucosinolatos Bischoff (2016)
Brassica
Alimentos Aminoácidos, ácidos orgânicos, antocianinas, compostos van Gorsel et al. (1992) e
líquidos fenólicos Belton et al. (1996)

Margarina e
Ácido oleico, ácido linoléico e α-tocoferol Savolainen et al. (2017)
óleo vegetal
Contaminantes
Acrilamida, ésteres 3-MCPD, ésteres glicidílicos, furano e
no processo Rietjens et al. (2018)
acroleína, seus metabólitos e adutos na urina, sangue e tecidos
alimentar

Durante o processamento de alimentos, os alimentos podem ser contaminados com uma

série de produtos químicos, como acrilamida, 3-monocloropropano-1, 2-diol (3-MCPD)
ésteres, glicidil ésteres, furano, acroleína, etc. Recentemente, Rietjens et al. (2018)
relatou que a detecção de resíduos desses contaminantes ou seus metabólitos e adutos
na urina, sangue ou tecido pode servir como biomarcadores
de exposição e ajuda na farmacocinética de base fisiológica, biomonitoramento e
avaliação de risco.

A presença de compostos químicos e/ou seus metabólitos em fluidos/tecidos corporais de

animais e humanos servem como biomarcadores de fitoquímicos/organismos marinhos e
outros consumos nutracêuticos. Os nutracêuticos e seus biomarcadores estão listados na
1217
Tabela 2. Alguns biomarcadores são específicos, enquanto outros não são específicos
nem validados. Esses biomarcadores não apenas indicam a exposição a um nutracêutico
específico, mas também como um guia adicional para intervenções farmacológicas e
terapêuticas. A maioria dos fitoconstituintes exerce atividades antioxidantes e
antiinflamatórias, enquanto outros exercem imunomoduladores, antiapoptóticos,
antiagregantes plaquetários, anticâncer, antiosteoartríticos, antiacetilcolinesterase, anti-
butirilcolinesterase e muitas outras propriedades. Além disso, alguns biomarcadores são
úteis na prática da polifarmácia, onde a erva/erva ou a erva nutracêutica podem não ser
compatíveis.

Tabela 2 Potenciais biomarcadores de extratos de plantas selecionadas, organismos marinhos e

nutracêuticos
Extrato vegetal
Potencial biomarcador(es)
/nutracêutico
Lignanos (di-hidrobenzofurano, tetra-
Açaí hidrofurano, etc.), (+)-lariciresinol, (+)-
pinoresinol, (+)-siringaresinol
Taninos, flavonóides, alcalóides, ácidos
Babul
graxos e polissacarídeos
1,8-cineol, β-bisaboleno, β-selineno, α-
selineno, farneseno, Ácido 1,2-
Gengibre benzenodicarboxílico, germacreno B,
acetato de 10S0-10-acetoxicavicol e α-
fenchil acetato
Amaranto Alb, amaranto Glob,
tetrapeptídeos de globulina 11S e polifenóis
inibidor da ECA, anti-hipertensivo,
Amaranto
antioxidante, hipocolesterolemia,
imunomodulador, antitumoral,
hipoglicêmico, anti-anemia
Anaferina, anahigrina, withanina,
Ashwagandha somniferina, withaferina-A, witanolida,
witanol, diosgenina, sitoindosídeos, etc.
Astaxantina Astaxantina
Astragalosídeo IV, calicosina e
Raiz astragali
formononetina
Ácido cafeico, ácido trans-cinâmico, ácido
Alecrim
p-cumárico e ácido ferúlico
Alcalóides, saponinas, taninos, flavonóides
Barleria
e proteínas
Efeito(s) biológico(s)/farmacológico(s)
Antioxidante, citoprotetor
Antioxidante, antiinflamatório,
antidiarreico, anti-hipertensivo,
antiespasmódico, antibacteriano, anti-
helmíntico, antiplaquetário, anticâncer e
inibidor da acetilcolinesterase
Antiinflamatório, antioxidante,
analgésico,
psicoestimulante,hipoglicêmico,
antialérgico, antimicrobiano,
gastroprotetor, antiplaquetário,
anticâncer, imunoestimulador, redutor de
colesterol
Rastogi e Shukla (2013), Soriano-Santos
e Escalona-Buendia (2015) e Quiroga et
al. (2017)
Antidepressivo, antifúngico,
antimicrobiano, antimalárico,
condroprotetor, inibidor da colinesterase
e promoção do aprendizado e da
memória na doença de Alzheimer,
antioxidante, antiinflamatório,
antienvelhecimento, ansiolítico e
antitumoral
Antioxidante
Alívio da dor, antioxidante,
antiinflamatório e anti-artrítico
Antioxidante, anti-antiinflamatório e
imunomodulador
Antioxidante, antibacteriano e
imunomodulador

1218
 Tabela 2 Potenciais biomarcadores de extratos de plantas selecionadas, organismos marinhos e
nutracêuticos
Propriedades antioxidantes,
Fosfatidilcolina, fosfatidiletanolamina,
antiinflamatórias, anticarcinogênicas,
fosfatidilglicerol, fosfatidilserina, ceramida,
Pólen de abelha antibacterianas, fungicidas,
fenóis, flavonóides, ácidos graxos,
hepatoprotetoras, antiateroscleróticas e
carboidratos, vitaminas e minerais
imunorreguladoras
Doenças antidiabéticas, cardiovasculares
Berberina, talifendina, berberrubina e
Berberine e metabólicas, gastroenterite e doenças
jatrorrizina
neurodegenerativas
Antioxidante, antiinflamatório,
Extrato de folhas Catequina, kaempferol, ácido ferúlico, analgésico, antimicrobiano,
de picão preto ácido gálico e paclitaxel imunossupressor, antiproliferativo,
antitumoral e anticâncer
Antocianinas / antocianidinas (delfinidina,
Mirtilo cianidina, petunidina, peonidina e Anticâncer
malvidina)
Antioxidante, antiinflamatório, anti-
Algas verde-
C-ficocianina hiperalgésico, inibidor seletivo da COX-2
azuladas
e reparo da cartilagem na osteoartrite
Mostarda Ácido sinápico Atividade de eliminação de peroxinitrito
Aurones, butin, butein, butrin, isobutrin, Antidiarreia, antidiabético, adstringente e
Flor do fogo
chalconas, palasitrin, coreopsina e outros diurético
Calafate Polifenóis Antioxidante
Antioxidante, antiinflamatório, anti-
hipertensivo, antifertilidade,
Chaksine, iso-chaksine, crisofanol e
Chuva de ouro antibacteriano, antifúngico, anti-
emodina de aloe
hiperglicêmico, anti-glicação, alfa-
amilase
Antibacteriano, antitumoral, anticâncer e
Jacareúba Jacareubin
gastroprotetor
Líquido de casca
Doença anti-Alzheimer, antiapoptótica,
de castanha de Ácidos anacárdicos
antioxidante e antibacteriano
caju
Alcalóide indol, taninos, rutina, ácido
Antioxidante, antiinflamatório e
Unha de gato elágico, ácido gálico, flavonóides, esterol,
cicatrizante de feridas
proantocianidina, etc.
Videira do deus do Antioxidante, antiinflamatório, anticâncer,
Celastrol
trovão anti-osteoartrítico e inseticida
Eliminador de radicais livres e
Amora-preta Ácido gálico, luteolina, miricetina e
antioxidante, antiinflamatório,
chilena quercetina
hipoglicêmico e anti-hemolítico
Antioxidante, inibidor de peróxido de
Extrato foliar da Estigmasterol e scutellarein éter
lipídio, inibidor de peróxido de hidrogênio
Erva-do-Sião tetrametílico
e cicatrizante
Bactericida, bacteriostático, fungicida,
Ácido cinâmico, acetato de cinamila,
Óleo e extrato de fungistático, antidiabético, antiparasitário,
cinamaldeído, eugenol, ácido benzóico e
canela antioxidante, anti-hiperlipidemia, anti-
benzaldeído
hipertensivo e cardioprotetor
Oleorresina, β-cariofileno, β-bisaboleno, α-
Óleo de copaíba bergamoteno, éster metílico de ácido Antiinflamatório, antibacteriano e lavicida
copálico
α-Citronelal, acetato de citronelol,
Eucalipto-limão Antifúngico e antioxidante
isopulegol e eucaliptol

1219
 Tabela 2 Potenciais biomarcadores de extratos de plantas selecionadas, organismos marinhos e
nutracêuticos
Terpinen-4-ol, α-felandrene, α-citronelol e
Tuia Antibacteriano e antifúngico
α-citronelal
Neuroprotetor, antioxidante,
antiinflamatório, antiosteoartrite, anti-
Curcumina/ Parkinson, anti-Alzheimer, antidiabético,
Curcumina, mitocurcumina
cúrcuma anti-doenças cardiovasculares,
anticonvulsivante, anti-obesidade,
anticâncer e cicatrização de feridas
Pólen de Cardiopreventivo, inibidor da ECA e
Fenóis e flavonóides
tamareira antioxidante
Phlomuroside, lariciresinol, adenosina, Inibidor da peroxidação lipídica,
Lírio de um dia quercetina, isorhamnetins, e pinnatanine, antioxidante, antiinflamatório, e anti-
roseoside icterícia
Orvalinha de folha 20-o-galoilhiperosídeo, miricetina-3-o-β-
Doenças anti-respiratórias
redonda115 glucopiranosídeo, Kaempferol e outros
OE de pimenta Asaricina Anticolinesterase
Pinoresinol, vomifoliol, methyl gallate,
rhamnazin, rhamnetin, eucalyptone,
Eucalipto eriodictyol, quercetin, taxifolin, engelitin, Lipid peroxidation inhibitory, antibacterial
catechin, eupatriol, macrocarpals, and
several terpenoids
Anti-hiperglicêmico, hipolipidêmico,
síndrome antimetabólico,
Diosgenina, trigonelina, cumarina,
Feno grego antiinflamatório, anticâncer, galactagogo,
galactomanana, 4-hidroxiisoleucina
hepatoprotetor e intensificador da libido
masculina
Figo do rio Antibacteriano, antifúngico e cicatrizante
Lupeol e β-sitosterol
vermelho de feridas
Antioxidante, antidiabético,
Flavonóides, saponinas, taninos, antidepressivo e intensificador da
Figueira Doida
triterpinas, fenóis e glicosídeos cardíacos memória espacial, antiepiléptico,
anticonvulsivante
Lignanas (secoisolariciresinol, enterodiol, Antiinflamatório, antidiabético, anti-
Linhaça enterolactona, enterolignana), ácidoα- hiperlipidêmico, anti-hipertensivo,
linolênico síndrome antimetabólico, anti-obesidade
Antiinflamatório, anticâncer,
antiobesidade, anticâncer, aumento do
Boldo Forskolin
cAMP e aumento da biossíntese de
proteínas
Alina, alicina, sulfóxidos de S-alquil-L-
cisteína, tiossulfinato de dialila, tiossulfato Antimicrobiano, antioxidante,
Alho
de sódio-2-propenila, sulfeto de dialila, antiinflamatório, antimutagênico,
peptídeo C plasmático e muitos outros
Alcaçus Ácido 18 β-glicirretínico Antiinflamatório, anti-asmático
Compostos de alcaçuz (glicirrizina,
Imunomodulador, antiinflamatório,
Alcaçus chinês glabridina, liquiritina, isoliquiritina,
anticâncer e antitumoral
isoliquiritigenina)
Fitoflueno, β-caroteno, β-criptoxantina,
Goiaba Antioxidante
licopeno, criptoflavina, luteína, neocromo
Semente de uva Proantocianidina Antioxidante, anti-osteoartrítico

115 Carnívora
1220
 Tabela 2 Potenciais biomarcadores de extratos de plantas selecionadas, organismos marinhos e
nutracêuticos
Antioxidante, antiinflamatório,
Epigalocatequina-3-galato, epicatequina,
antiapoptótico, verrugas genitais,
epigalocatequina, catequina,
imunomodulador, antiobesidade,
Chá verde galocatequina, teaflavina, apigenina,
antidiabético, antimicrobiano, anticâncer,
luteolina, quercetina, miricetina e
cicatrizante de feridas e doenças
ciclodextrina
cardiovasculares
Antinociceptivo, antiinflamatório,
Bromélia Ácido dihidrotucumanóico
antimicrobiano, antidiarreico
Óleo de sementes
Ácidos graxos poliinsaturados Dermatite atópica
de cânhamo
Mel de Abelha Própolis Antisséptico
Jatobá Engeletin Antidiabético
Antocianinas, ácido elágico / elagitaninos e
Amora indiana Antioxidante, antiproliferativo
polifenólicos
Ácidos boswélicos: ácido β-boswélico, Inibidor de 5-lipoxigenase,
ácido acetil-β-boswélico, ácido 11-ceto-β- antiinflamatório, anti-artrítico, inibidor de
Olíbano indiano
boswélico e ácido acetil-11-ceto-β- tumor de próstata, neuroprotetor na
boswélico doença de Parkinson
Tanóides hidrolisáveis (emblicanina A,
emblicanina B, punigluconina,
Groselha indiana Antioxidante, antiinflamatório, anti-artrite
pedunculagina), punicafolina, filanemblinina
e outros polifenóis
Antioxidante, antiinflamatório,
α-Pineno, ácido clorogênico, rutina,
Zimbro rasteiro genoprotetor, imunoestimulador e
apigenina e quercetina
antifúngico
Resveratrol, polidatina, rutina, reinoutrina, Antioxidante, antiinflamatório,
Falópia Nipônica emodina, fisção, citroroseína, lapathosídeo neuroprotetor, antibacteriano, antifúngico
A, quercetina e kaempferol e antitumoral
Limnophila
Fenóis e flavonóides Antioxidante
aromatica
Limoneno (óleo de Doenças gástricas e efeito
Limoneno (p-Mentha-1,8-dieno)
plantas cítricas) antiproliferativo em células cancerosas
Eliminador de radicais livres e
Licopeno Licopeno antioxidante, antiinflamatório,
neuroprotetor, antidemência, anticâncer
Polifenóis (ácido gálico, catequina,
Lótus peltatosídeo, rutina, isoquercitrina, Antioxidante, hepatoprotetor e anticâncer
miquelianina e astragalina)
Indução antioxidante, antiinflamatória,
antiproliferativa, neuroprotetora,
Mangostão Xantonas, mangostanina e α-mangostina
hipoglicêmica, anti-obesidade e quinona
redutase
Gastroprotetor, antiúlcera, inibidor da
Ácido gálico, ácido elágico, quercetina,
Azaléia de secreção gástrica, antinociceptivo,
vitexina, isovitexina, miricetina, caempferol,
Cingapura e citoprotetor, antioxidante, eliminador de
naringenina, luteolina, diosmetina,
Calabura radicais livres, peroxidação anti-lipídica,
apigenina e muitos outros polifenóis
antiinflamatório e antipirético
Antioxidante, antiinflamatório, anti-
Pó de casca de Flavonóides, polissacarídeos, resveratrol,
apoptótico para as células do pâncreas e
amoreira ácidos fenólicos
antidiabético
Antioxidante, antibacteriano,
Baga maqui Antocianinas, polifenóis
antidiabético

1221
 Tabela 2 Potenciais biomarcadores de extratos de plantas selecionadas, organismos marinhos e
nutracêuticos
Diterpenos: krempfielins, hirsutalins,
klymollins, klysimplexin, sulfóxido de
Corais Antiinflamatório, anti-artrítico
klysimplexin, simplexin, cladieunicelina e
outros
Naringina Antioxidante, antiinflamatório,
Naringin
(espécies cítricas) antimicrobiano e anticâncer
Nutritivo, ansiolítico, antimicrobiano,
antiparasitário, imunomodulador,
Azadiractinas, nimbina, nimbidina, antioxidante, antidiabético, antitumoral,
nimbolida, margolona, gedunina, catequina, quimiopreventivo, controle de pragas,
Extrato de Neem
epicatequina, galocatequina, cicatrização de feridas
epigalocatequina e vários outros Tandan et al. (1995), Tepsuwan et al.
(2002), Aruwayo e Maigandi (2013) e
Kumar et al. (2016)
Antioxidante, antiinflamatório, anticâncer,
Cominho negro Timoquinona efeito pró-apoptótico, doenças anti-
autoimunes, antiasma, antidiabético
Crodacid, neofitadieno, vanicol, crisarobina, IInibição da colinesterase e promoção da
Hibisco
clionasterol e muitos outros aprendizagem e memória e antioxidante
Rutina, ácido rosmarínico, ácido chicórico,
Antiinflamatório e antioxidante, anti-
kaempferol, ácido cafeico, ácido
Alfavaca (óleo) reumatismo, anti-bronquite,
transferúlico, quercetina, vicetina,
antimicrobiano
salvigenina, nevadensina e cirsimaritina
Derivados do ácido gálico, flavonóides, Antioxidante, eliminador de radicais
Olax nana rutina, taninos, esteróis, saponinas e livres, anticolinesterase e inibição de
terpenóides alfa-glucosidase
Tirosol, hidroxitirosol, (álcoois feniletílicos,
Azeite de oliva Antioxidante
lignanos e secoiridoides)
Ginsenosídeo Rgl, ginsenosídeo Rbl e Antioxidante, antipancreatite,
Ginseng
ginsenosídeo Rd antiapoptótico, antiautofagia e anticâncer
Bambú 2,6-Dimetoxi-p-benzoquinona Antibacteriano
Pinheiro silvestre Compostos fenólicos Anti-inflamatório
Anti-hipertensivo, antigenotóxico e contra
Kuduzu Puerarin
febre, diarreia e distúrbios oculares
Antioxidante, antiinflamatório,
Don gling cao Oridonin
imunomodulador e anticâncer
Cogumelo
Ácido protocatecuico, ácido vanílico,
selvagem Antioxidante e antigenotóxico
esteróis, compostos fenólicos e triterpenos
comestível
Trans-resveratrol, cis-resveratrol, trans-
Antioxidante, antitumoral, antiviral, anti-
Resveratrol resveratrol-glucuronosídeo ácido cinâmico,
ateroma
ácido p-cumárico
Antioxidante, antiinflamatório,
Raiz de ouro Salidroside, rosarina, rosavin e resina
antidiabético, anticâncer e antiviral
Lesão antioxidante, antiinflamatória,
Salsaparrilha Astilbin imunomoduladora e anti-hepática, anti-
artrítica e anti-renal

1222
 Tabela 2 Potenciais biomarcadores de extratos de plantas selecionadas, organismos marinhos e
nutracêuticos
Quimiopreventivo, antiangiogênese,
antiproliferativo, antitumoral, promotor de
Ácido rosmarínico, apigenina, ácido crescimento, antioxidante,
Alecrim e Perila cafeico, catequina, ácido ferúlico, luteolina, antiinflamatório, antidepressivo,
ácido m-cumárico e ácido carnósico imunomodulador, antimicrobiano,
antidiabético, antialérgico, hepatoprotetor
e renal e anti-doença de Alzheimer
Samambaia real Taninos, glicosídeos, esteróides, saponinas
Anticâncer
(raiz) e ácido ferúlico
Inibição de renina, inibição de ACE, anti-
Geléia real Dipeptídeo YY
hipertensivo, cicatrização de feridas
Bolo de óleo de
Atividade de inibição da
semente de Carthatins
acetilcolinesterase
cártamo
Antiapoptótico, antioxidante,
Crocin-1, crocetina, trans-crocetina, antiinflamatório, anticâncer, antitumoral,
Açafrão
safranal neuroprotetor, cardioprotetor,
hepatoprotetor
Sesquiterpenos, ácido fenólico, Antioxidante, antiinflamatório,
Sarcandra flavonóides, chalconas, polissacarídeos, imunomodulador, anticâncer,
cumarinas, triterpenóides antidiarreico e antirreumatismo
Cauda de lagarto Antioxidante, antiinflamatório,
Sauchinone
asiático condroprotetor e antiosteoartrítico
Extrato/óleo de Ácido quinico, catequina, galato de Antienvelhecimento, anti-elastase e
Marula epigalocatequina e galato de epicatequina anticolagenase
Antioxidante, antiinflamatório, anticâncer,
Calota chinesa Baicalin e baicalein antidemência, antimicrobiano, antipirético
e anti-inflamatório
Antioxidante, imunomodulador,
antiinflamatório, analgésico, de aumento
Dibenzo-α-pironas, dibenzo-α-pirona-
Shilajit de aprendizagem, antidiabético,
cromoproteínas, ácidos fúlvicos
antiulcerogênico, anti-osteoartrítico,
cardioprotetor e antimicrobiano
Nutritivo, antianemia, antioxidante,
antimicrobiano, antiinflamatório,
Cianobactérias C-ficocianina antialérgico, antidiabético,
quimiopreventivo, anticâncer e
neuroprotetor
Stenoloma Ácido filicínico, ácido clorogênico,
chusanum (L.) piracrimicina, teofilina, chaplacina, Antioxidante, antitirosinase e antitumoral
ching bisabolenona e escadenona
2-Hidroxi-3,4-dihidroxiacetofenona, metil
Tamarindo
3,4-dihidroxibenzoato, 3,4-dihidroxifenil Eliminador de radicais livres, antioxidante
(semente e
acetato, (+) - catequina, () -epicatequina, e antidiabético
pericarpo)
proantocianidinas e procianidinas
Antifúngico, antibacteriano,
Óleo da árvore do
Terpinen-4-ol, terpinolene e 1,8-cineol antipneumônico, anti-piolhos,
chá
antiinflamatório
Ácido chebulágico, ácido chebulínico, ácido Antioxidante, antiinflamatório,
chebulínico, ácido gálico, ácido elágico, analgésico, anti-artrítico, antiproliferativo,
Mirobalano preto
ácido tânico, corilagina, triterpenóides, adaptogênico, imunomodulador e
compostos polifenólicos e ascorbato citoprotetor
Amêndoa Isoorientina, vitexina, ácido elágico,
Antiinflamatório e analgésico
australiana elagitanino

1223
 Tabela 2 Potenciais biomarcadores de extratos de plantas selecionadas, organismos marinhos e
nutracêuticos
Óleo de tomilho e Antioxidante, antibacteriano, antimicótico
Carvacrol e γ-terpineno
orégano e antiplaquetário
Quaresmeira Proantocianidinas, glicosídeos flavonóides Anti-inflamatório
Antiinflamatório, antioxidante,
anticoagulante, fibrinolítico,
Cogumelo de leite Α- e β-glucano, compostos fenólicos, antimicrobiano, anti-obesidade,
de tigre polissacarídeo anticâncer, hepatoprotetor,
antitumoral, antiviral, neuroprotetor e
imunomodulador
Turbinaria ornata Polissacarídeos sulfatados Antiinflamatório, artrite anti-reumatóide
Macieira,
Anti-artrite, antiúlcera, anticâncer,
Manjericão e Ácido ursólico
antidiabetes
outros
Óleo de farelo de Esteróis, compostos semelhantes ao Eliminador de radicais livres, antioxidante
trigo orizanol, tocoferóis e carotenóides e hipolipemiante
Mirtilos selvagens Antocianinas Antioxidante
Isorinato de metila, aliínas (metilalliína, Antioxidante, antimicrobiano, inibição dos
metiína e alilaliína), compostos canais de cálcio, espasmolítico,
Alho selvagem
organossulfurados (dissulfeto de alil metila antiplaquetário e outros distúrbios
e alicina), e compostos fenólicos gastrointestinais

Esses biomarcadores podem auxiliar na identificação do alimento ou nutracêutico

consumido e também na farmacocinética e toxicocinética de fitoquímicos, interação em
polifarmácia e fitoterapia.

7. Biomarcadores de polifenóis e compostos relacionados: uma

perspectiva farmacocinética
7.1 Justificativa

As plantas produzem uma variedade de metabólitos secundários, incluindo compostos

fenólicos, comumente chamados de polifenóis. Existem mais de 500 polifenóis dietéticos
pertencentes às classes de ácidos fenólicos, flavonóides, lignanas e estilbenos e, como
resultado, sua química é muito complexa. Alguns dos grupos de polifenóis são
mencionados aqui resumidamente com exemplo(s) adequado(s) entre parênteses. Os
ácidos hidroxibenzóicos (um ácido gálico monômero e um ácido elágico dímero,
coletivamente referidos como elagitaninos) são ingredientes comuns usados em
nutracêuticos. Flavonóides que são comumente encontrados em extratos vegetais
incluem flavonóis (quercetina), flavonas (apigenina), flavonóides [(-)-epicatequina e
proantocianidina B2)], flavanonas (naringenina), antocianinas (antocianidinas: cianidina,
delfinidina, malvidina, pelonidinina, peonidinina e petunidina) e isoflavonas (genisteína)
(Pinto e Santos 2017). É preciso mencionar que há cerca de 700 antocianinas relatadas
1224
como isoladas de plantas (Faria et al. 2014). Em humanos, as principais classes de
polifenóis consumidos são biflavonas (45%), antocianinas (17%) e flavonóis, flavonas e
flavanonas (16%). Existem variações, é claro, durante as diferentes estações do ano e em
diferentes países.

Os polifenóis podem atuar como antioxidantes extinguindo espécies reativas de oxigênio

(ROS) ou indiretamente alterando a expressão gênica por meio de cascatas de
sinalização intracelular, reduzindo NFkB ou aumentando o fator nuclear 2 (Nrf2),
estimulando assim o mecanismo antioxidante e de desintoxicação do próprio corpo (Bohn
2014). Os polifenóis exercem múltiplos mecanismos e efeitos fitofarmacológicos e,
portanto, previnem doenças crônicas, como diabetes, doenças cardiovasculares,
neurodegenerativas, câncer e muitas outras doenças.

7.2 Análise do conteúdo fenólico total

O conteúdo fenólico total (TPC) pode ser medido espectrofotometricamente em um leitor

de microplaca (EPOCH 2 BioTek, BioTek Instruments Inc., Highland Park, Winooski, EUA)
de acordo com o método de Folin-Ciocalteu (Bailon-Moscoso et al. 2017). A quantidade de
TPC é expressa em mg equivalente de ácido gálico (GAE) / g de amostra. O teor de
polifenóis foi relatado como máximo no cravo (15.188,2 mg/100 g) e mínimo na massa de
grãos inteiros e couve-flor (21,9 mg/100 g e 22,3 mg/100 g, respectivamente) (Pinto e
Santos 2017).

7.3 Interação nutracêutico/microbiota intestinal e biomarcadores de

biodisponibilidade

Após a ingestão, os alimentos/nutracêuticos encontram primeiro a microbiota intestinal,

que é considerada um órgão metabólico. As bactérias parecem participar do metabolismo
dos polifenóis das reações da fase I e da fase II. As reações comuns incluem
desglicosilação, desidroxilação, desmetilação ou conjugação. Alguns exemplos de
metabólitos formados a partir de isoflavonas pela microbiota são (1) diidrodaidzeína, equol
e O-desmetilangolensina (O-DMA) de daidzeína, (2) diidrogenisteína de genisteína, (3)
urolitina B de elagitaninos, (4) enterodiol e enterolactona de secoisolariciresinol di-O-
glucosídeo e (5) flavanona 8-prenilnaringenina de prenilchalcona isoxanto-humol. Os
biomarcadores frequentemente explicam como os nutracêuticos afetam o nível e a
composição da microbiota intestinal e como a microbiota intestinal afeta os níveis
nutracêuticos, sua biodisponibilidade e o metabolismo.

1225
A partir da interação entre nutracêuticos e microbiota, um ou mais dos seguintes
resultados podem ser esperados (Faria et al. 2014; Most et al. 2017; Williams e Clifford
2017; Tomas-Barberan et al. 2018):

1. O nível e a composição da microbiota podem ser alterados por nutracêuticos (por

exemplo, polifenóis e resveratrol).
2. Os nutracêuticos podem ser metabolizados e sua bioatividade pode ser alterada.
3. A microbiota pode alterar a biodisponibilidade e outros aspectos da farmacocinética dos
nutracêuticos.
4. A interação de nutracêuticos com a microbiota pode influenciar o perfil metabolômico.
5. Os polifenóis podem oferecer atividade prebiótica modulando a composição da
microbiota.
6. As variabilidades de gênero e interindividuais desempenham um papel significativo.
Em alguns casos, o resultado fitofarmacológico e fitoterápico desses fatores mostra-se
conflitante. Por exemplo, alguns relatórios indicam que os polifenóis dietéticos promovem
o crescimento da microbiota intestinal (Roopchand et al. 2015), enquanto outros sugerem
que eles são antimicrobianos (Marin et al. 2015). Com base nessas interações,
biomarcadores qualitativos e quantitativos podem ser identificados e validados. Por
exemplo, enterolactona e hidroxitirosol são considerados bons biomarcadores da ingestão
de lignana e álcool fenólico de oliva, respectivamente.

Em geral, a fermentação microbiológica diminui a biodisponibilidade dos polifenóis

nativos, mas em alguns casos, pode dar origem a metabólitos que são mais bioativos do
que os polifenóis nativos, por exemplo, equol da daidzeína e dihidroresveratrol do
resveratrol.

Curiosamente, em um estudo muito recente, a microbiota do intestino anterior de camelos

e bovinos demonstrou degradar (99%) um composto não polifenólico indospicina (uma
hepatotoxina bem conhecida) de Indigofera spicata em ácido 2-aminopimelâmico e ácido
2-aminopimélico (Tan et al. 2017).

Além de fatores indígenas, como microbiota e enzimas digestivas, a matriz alimentar (fibra
alimentar, lipídios, proteínas e carboidratos digestíveis) pode afetar significativamente a
biodisponibilidade e bioacessibilidade, absorção e metabolismo adicional de polifenóis
(Bohn 2014).

Em geral, os polifenóis podem ter maior biodisponibilidade quando são ingeridos em

combinação com outros polifenóis do que quando tomados isoladamente, como em
suplemento. Cerca de 48% dos polifenóis dietéticos são bioacessíveis no intestino

1226
delgado, enquanto 42% se tornam bioacessíveis no intestino grosso (Saura-Calixto et al.
2007). Faria et al. (2014) observaram que a maioria das antocianinas dietéticas não são
absorvidas no nível GI superior, atingindo assim a microbiota intestinal onde são
biotransformadas em seus metabólitos, que são então absorvidos.

7.4 Absorção

Os polifenóis podem ser transportados no sangue na forma livre, ligados a proteínas ou

ligados a lipoproteínas (Bohn 2014). Verificou-se que a quercetina se liga à albumina em
mais de 99%. A absorção de monômeros, como epicatequina, geralmente é alta (45%) em
comparação com dímeros de procianidinas (<1%) (Bohn 2014). Os polifenóis podem ser
absorvidos por difusão passiva (por exemplo, ácido clorogênico) ou o sistema de
transporte facilitado (por exemplo, ácido caféico). Polifenóis, como ácido caféico e ácido
ferúlico, são absorvidos por transporte facilitado por transportadores de ácido
monocarboxílico (MCTs). Outros transportadores também podem estar envolvidos, como
a glicoproteína-P, proteínas de resistência a múltiplas drogas (MRPs) e transportadores
de fita de ligação de ATP.

7.5 Sangue/Metabólitos urinários como biomarcadores de ingestão de polifenol

A presença de polifenóis e outros nutracêuticos e/ou seus metabólitos nos fluidos

corporais (principalmente no soro e na urina) servem como biomarcadores de exposição.
A relação entre a ingestão de polifenóis e biomarcadores específicos medidos no sangue
e na urina é altamente complexa (Pinto e Santos 2017). Isso pode ser devido a vários
fatores: (1) má liberação de polifenóis da matriz alimentar; (2) interação com outros
compostos alimentares e com a microbiota; (3) polifenóis individuais que não são
digeridos no trato digestivo, resultando em má absorção do intestino; (4) biotransformação
extensa por reações de fase I e fase II; e (5) excreção rápida. O método de análise, a
sensibilidade da instrumentação, a concentração do metabólito polifenol no sangue/urina
e a disponibilidade de padrões são outros fatores que podem influenciar a precisão da
análise e identificação do metabólito.

Estudos em humanos sugerem que um biomarcador na coleta de urina de 24 horas

(polifenol urinário total) e um biomarcador substituto no plasma (carotenóides) podem
fornecer uma estimativa adequada para avaliar a ingestão de polifenol (Burkholder-Cooley
et al. 2017; Pinto e Santos 2017). Obviamente, a estimativa baseada na excreção urinária
de polifenóis é limitada pela variação genética, metabolismo e biodisponibilidade.

Pérez-Jiménez et al. (2010) investigaram metabólitos urinários como biomarcadores de

ingestão de polifenol em humanos e descobriram que polifenóis como daidzeína,

1227
genisteína, gliciteína, enterolactona e hidroxitirosol são bons biomarcadores de ingestão
de polifenol, enquanto hesperidina, naringenina, (-)-epicatequina, (-)-epigalocatequina,
quercetina e três metabólitos microbianos de isoflavonas (diidrodaidzeína, equol e O-
desmetilangolensina) são biomarcadores de ingestão menos adequados. Os metabólitos
urinários adicionais estão na forma de conjugados (sulfato e glicuronídeo). Até agora,
cerca de 160 metabólitos polifenóis foram identificados na urina, e apenas alguns deles
poderiam ser atribuídos com certeza a precursores conhecidos (Pérez-Jiménez et al.
2010). Da mesma forma, a quantificação da origem e/ou metabólitos na urina pode ser
usada para determinar a ingestão de outros nutracêuticos. É necessário salientar que o
valor dos metabólitos urinários de polifenóis ou outras classes de fitoquímicos como
biomarcadores de ingestão depende de sua especificidade, sensibilidade e variabilidade.

7.6 Biomarcadores de exposição ao tecido de polifenol

Após a absorção, os polifenóis podem ser distribuídos na maioria dos tecidos e

atravessam a barreira hematoencefálica. Os níveis teciduais de polifenóis e seus
metabólitos são melhores biomarcadores do que as concentrações plasmáticas e servem
como melhores biomarcadores dos efeitos à saúde do que sua ingestão devido a uma
grande variabilidade individual na absorção e no metabolismo.

7.7 Excreção

Os compostos polares, como o ácido gálico e as isoflavonas, excretam pelo rim, enquanto
os compostos apolares, como a curcumina, são excretados pela bile.

8. Biomarcadores de Toxicidade e Avaliação de Segurança de Alimentos

e Nutracêuticos
Para a avaliação de toxicidade e segurança de alimentos e nutracêuticos, as amostras de
soro são analisadas para biomarcadores de fígado (alanina aminotransferase, ALT;
aspartato aminotransferase, AST; gama-glutamil transferase, GGT; fosfatase alcalina,
ALP; e bilirrubina), rim (ureia e nitrogênio no sangue (BUN) e creatinina), e funções do
coração (creatina quinase (CK) e troponina). Outros biomarcadores séricos específicos
para lesão hepática incluem microRNA-122 (miR-122), glutamato desidrogenase (GLDH),
citoqueratina-18 clivada por caspase (cc-K18) e queratina-18 completa (FL-K18) (Longo et
al. 2017). FL-K18 é liberado passivamente das células necróticas, enquanto cc-K18 é
liberado das células apoptóticas após a perda da integridade da membrana, e a proporção
de cc-K18 para FL-K18 é considerada como o “índice apoptótico”. Na hepatotoxicidade, o
fator estimulador de colônias de macrófagos (CSF-1) também é usado como biomarcador.
1228
O “índice apoptótico” foi proposto para estimar as contribuições relativas da necrose e
apoptose para a morte celular. Alguns desses biomarcadores podem não satisfazer os
critérios da lei de Hy. A cinética de todos esses biomarcadores de hepatotoxicidade pode
ser interpretada usando o software DILIsym®, que é um modelo matemático mecanístico
para lesão hepática induzida por drogas (Shoda et al. 2014). Em caso de lesão renal
aguda, biomarcadores, como lipocalina associada a neutrófilos gelatinase (NGAL),
molécula de lesão renal-1 (KIM-1) e proteína 1 de caixa de grupo de alta mobilidade
(HMGB1), também podem ser levados em consideração enquanto avaliação dos efeitos
dos medicamentos fitoterápicos (Oh et al. 2017). Atualmente, pesquisas intensas estão
em andamento para biomarcadores mais específicos para tecidos e sensíveis a tecidos,
como microRNAs, que ainda são considerados biomarcadores mecanísticos para
modelagem mecanística (Penman et al. 2014; Gupta 2014).

9. Biomarcadores de nutracêuticos com potencial tóxico

Durante as últimas décadas, o uso global de nutracêuticos aumentou tremendamente
para humanos e animais e, portanto, tem riscos para a saúde decorrentes de
componentes ativos, bem como de contaminantes tóxicos de suplementos (Gupta 2016;
Gupta et al. 2018). Alguns extratos vegetais são inerentemente tóxicos em virtude de
terem fitoconstituintes tóxicos, enquanto outros podem estar contaminados com outros
alcalóides vegetais (por exemplo, alcalóides pirrolizidina), metais (arsênico, cádmio,
chumbo e mercúrio), pesticidas (inseticidas, herbicidas, fungicidas, PCBs, PAHs, etc.) e
micotoxinas (aflatoxinas, ocratoxina A, citrinina, T-2 e HT2) (Gupta et al. 2018). Às vezes,
os nutracêuticos também são adulterados com drogas de abuso. Alguns extratos vegetais
comuns usados como nutracêuticos são mencionados aqui com seu princípio tóxico entre
parênteses: erva de São João (hipericina), raiz dourada (hidrastina), ginkgo biloba
(ginkgotoxinas), kava (flavokawain B), efedra (efedrina), poejo óleo (cetona pulegona),
Aristolochia (ácido aristolóquico), melão amargo (momordinas e vicino), lichia (hipoglicina
A), confrei (alcalóide pirrolizidina), chá-verde (epigalocatequina-3-galato) e muitos outros
(Gupta et al. 2018). Além disso, algumas plantas, como Indigofera spicata, que são
comestíveis, ricas em proteínas e facilmente digeríveis pelo gado são tóxicas por terem
uma fitotoxina indospicina (Tan et al. 2017).

A detecção de um princípio fitotóxico e/ou seu(s) metabólito(s) no sangue, urina ou tecido

geralmente serve como um biomarcador de exposição, e o nível de exposição pode servir
como um biomarcador de efeito. Os efeitos adversos associados aos extratos tóxicos de
plantas podem incluir desde pequenas náuseas, vômitos ou distúrbios gastrointestinais
1229
até graves como insuficiência hepática, renal ou cardíaca, convulsões ou morte (Gupta et
al. 2018). A maioria dos nutracêuticos são pequenas moléculas multi-direcionadas e
afetam várias vias de sinalização para exercer seus efeitos. Existem até alguns
nutracêuticos que exercem efeitos adversos específicos aos tecidos. Por exemplo, os
órgãos alvo para toxicidade de Aristolochia, confrei e ephedra são os sistemas renal,
hepático e cardíaco, respectivamente. Além da detecção de resíduos, o dano tecidual
induzido por nutracêuticos/contaminantes pode ser avaliado usando biomarcadores
convencionais, conforme descrito na seção anterior (Gupta et al. 2018).

A detecção de resíduos de metal, pesticida, micotoxina ou droga de abuso em fluidos

corporais confirma a exposição a contaminantes. Muitas vezes, o resultado da toxicidade
surge da interação tóxica erva/droga na polifarmácia. Para mais detalhes, os leitores
podem consultar Gupta (2016) e Gupta et al. (2018).

10. Observações finais e orientações futuras

Os biomarcadores são de extrema importância, pois oferecem uma infinidade de
informações sobre vários aspectos dos alimentos e nutracêuticos, incluindo a identificação
de ingredientes alimentares e fitoquímicos, farmacocinética e toxicocinética de
fitoquímicos, interação com outros nutracêuticos e medicamentos modernos no caso de
polifarmácia, toxicidade e avaliação de segurança de nutracêuticos, ensaios clínicos e
seus regulamentos. A escolha dos biomarcadores mais promissores que são validados
desempenha um papel vital no campo da nutrição e nutracêuticos e na avaliação de
associações com resultados de saúde e doenças. Com um rápido avanço em
equipamentos e biotecnologias, novos biomarcadores surgem continuamente com maior
sensibilidade e reprodutibilidade, e a busca continuará. Assim, com o auxílio de
biomarcadores validados, as indústrias de alimentos e nutracêuticos terão maior
confiança em alimentos e nutracêuticos de alta qualidade.

Agradecimento: Os autores gostariam de agradecer a Sra. Robin B. Doss por sua

assistência técnica na preparação deste capítulo.

Referências
Aggarwal SP, Khanna R, Karmarkar R et al (2007) Shilajit: a review. Phytother Res 21:401–405
Aggarwal BB, Gupta SC, Sung B (2013) Curcumin: an orally bioavailable blocker of TNF and other pro-inflammatory
biomarkers. Br J Pharmacol 169:1672–1692
Ahmad S, Hassan A, Abbasi WM et al (2018) Phytochemistry and pharmacological potential of Cassia absus—a review. J
Pharm Pharmacol 70:27–41
Ajayi AM, Umukoro S, Ben-Azu B et al (2017) Toxicity and protective effect of phenolic- enriched ethylacetate fraction of
Ocimum gratissimum (Linn.) leaf against acute inflammation and oxidative stress in rats. Drug Dev Res 78:135–145
Alagawany M, Abd El-Hack ME, Farag MR et al (2017) Rosmarinic acid: modes of action, medicinal values and health
benefits. Anim Health Res Rev 7:1–10
1230
 Alonso-Castro AJ, González-Chávez MM, Zapata-Morales JR et al (2017) Antinociceptive activity of ent-dihydrotucumanoic
acid isolated from Gymnosperma glutinosum Spreng Less. Drug Dev Res 78:340–348
Ameen AM, Elkazaz AY, Mohammad HMF (2017) Anti-inflammatory and neuroprotective activity of boswellic acids in rotenone
parkinsonian rats. Can J Physiol Pharmacol 95(7):819–829
Amorati R, Valgimigli L (2015a) Advantages and limitations of common testing methods for antioxidants. Free Radic Res
49:633–649
Amorati R, Valgimigli L (2015b) Methods to measure the antioxidant activity of phytochemicals and plant extracts. J Agric
Food Chem 66:3324–3329
Ananthi S, Gayathri V, Malarvizhi R et al (2017) Anti-arthritic potential of marine macroalgae Turbinaria ornata in complete
Freund’s adjuvant induced rats. Exp Toxicol Pathol 69(8):672–680
Aprotosoaie AC, Zavastin DE, Mihai C-T et al (2017) Antioxidant and antigenotoxic potential of Ramaria largentii Marr and D.
E. Stuntz, a wild edible mushroom collected from Northeast Romania. Food Chem Toxicol 108:429–437
Aqil F, Gupta A, Munagala R et al (2012) Antioxidant and antiproliferative activities of anthocyanin/ellagitannins-enriched
extracts from Syzygium cumini L. (Jamun, the Indian blackberry). Nutr Cancer 64(3):428–438
Aqil F, Vadhanam MV, Jeyabalan J et al (2014) Detection of anthocyanins/anthocyanidins in animal tissues. J Agric Food
Chem 62:3912–3918
Aruwayo A, Maigandi SA (2013) Neem (Azadirachta indica) seed cake/kernel as protein source in ruminants feed. Am J Exp
Agric 3 (3):482–494
Ayeka PA, Bian YH, Githaiga PM et al (2017) The immunomodulatory activities of licorice polysaccharides (Glycyrrhiza
uralensis Fisch.) in CT 26 tumor-bearing mice. BMC Complement Altern Med 17:536
Baba S, Osakabe M, Natsume J et al (2004) Orally administered rosmarinic acid is present as the conjugated and/or
methylated forms in plasma, and is degraded and metabolized to conjugated forms of caffeic acid, ferulic acid and m-coumaric
acid. Life Sci 75 (2):165–178
Bacanli M, Aydin S, Başaran AA et al (2017) Are all phytochemicals useful in the preventing of DNA damage? Food Chem
Toxicol 109:210–217
Bailon-Moscoso N, Tinitana F, Martínez-Espinosa R et al (2017) Cytotoxic, antioxidative, genotoxic and antigenotoxic effects
of Horchata, beverage of South Ecuador. BMC Complement Altern Med 17:539
Belton PS, Delgadillo I, Holmes E et al (1996) Use of high-field 1H NMR spectroscopy for the analysis of liquid foods. J Agric
Food Chem 44:1483–1487
Bharti VK, Malik JK, Gupta RC (2016) Ashwagandha: multiple health benefits. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy,
safety and toxicity. Academic Press/Elsevier, Amsterdam, pp 717–733
Bhavsar SK, Thaker AM, Malik JK (2016) Shilajit. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity. Academic
Press/Elsevier, Amsterdam, pp 707–716
Bischoff KL (2016) Glucosinolates. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity. Academic Press/Elsevier,
Amsterdam, pp 551–554
Bohn T (2014) Dietary factors affecting polyphenol bioavailability. Nutr Rev 72(7):429–452
Bopage NS, Gunaherath KB, Jayawardena KH et al (2018) Dual function of active constituents from bark of Ficus racemosa L
in wound healing. BMC Complement Altern Med 18:29
Brauch JE, Reuter L, Conrad J et al (2017) Characterization of anthocyanins in novel Chilean maqui berry clones by HPLC-
DADESI/MSn and NMR-spectroscopy. J Food Compos Anal 58:16–22
Burkholder-Cooley NM, Rajaram SS, Haddad EH et al (2017) Validating polyphenol intake estimates from a food-frequency
questionnaire by using repeated 24-h dietary recalls and a unique method of triads approach with 2 biomarkers. Am J Clin Nutr
105 (3):685–694
Caligiani A, Palla G, Maietti A et al (2010) 1H NMR fingerprinting of soybean extracts, with emphasis on identification and
quantification of isoflavones. Nutrients 2:280–289
Callaway J, Schwab U, Harvima I et al (2005) Efficacy of dietary hempseed oil in patients with atopic dermatitis. J Dermatol
Treat 16(2):87–94
Carrasco-Pancorbo A, Cerretani L, Bendini A et al (2005) Evaluation of the antioxidant capacity of individual phenolic
compounds in virgin olive oil. J Agric Food Chem 53:8918–8925
Carson CF, Hammer KA, Riley TV (2006) Melaleuca alternifolia (Tea tree) oil: a review of antimicrobial and other medicinal
properties. Clin Microbiol Rev 19(1):50–62
Cespedes CL, Pavon N, Dominguez M et al (2017) The Chilean Maquiberry Aristotelia chilensis (Elaeocarpaceae), Maqui as
mediator in inflammation-associated disorders. Food Chem Toxicol 108: 438–450
Cheng Z, Moore J, Yu L (2006) High-throughput relative DPPH radical scavenging capacity assay. J Agric Food Chem
54:7429–7436
Cheng Q, Shou L, Chen C et al (2017) Application of ultra-highperformance liquid chromatography coupled with LTQ-orbitrap
mass spectrometry for identification, confirmation and quantitation of illegal adulterated weight-loss drugs in plant dietary
supplements. J Chromatogr B 1064:92–99
Cheung W, Keski-Rakhonen P, Assi N et al (2017) A metabolomic study of biomarkers of meat and fish intake. Am J Clin Nutr
105 (3):600–608
Chin Y-W, Chai H-B, Keller WJ et al (2008a) Lignans and other constituents of the fruits of Euterpe oleracea (Açai) with
antioxidant and cytoprotective activities. J Agric Food Chem 56:7759–7764
Chin Y-W, Jung H-A, Chai H et al (2008b) Xanthones with quinone reductase-inducing activity from the fruits of Garcinia
mangostana (Mangosteen). Phytochemistry 69:754–758
Comblain F, Serisier S, Barthelemy N et al (2015) Review of dietary supplements for the management of osteoarthritis in dogs
in studies from 2004–2014. J Vet Pharmacol Ther 39(1):1–15

1231
 Chorfa N, Savard S, Belkacemi K et al (2016) An efficient method for high-purity anthocyanin isomers isolation from wild
blueberries and their radical scavenging activity. Food Chem 197:1226–1234
Choudhary MI, Yousuf S, Nawaz SA et al (2004) Cholinesterase inhibiting withanolides from Withania somnifera. Chem
Pharm Bull (Tokyo) 52(11):1358–1361
Choudhary I, Ullah F, Ayaz M et al (2017) Anticholinesterase and antioxidant potentials of Nonea micrantha Bios. and Reut
along with GC-MS analysis. BMC Complement Altern Med 17:499
Chudiwal AK, Jain DP, Somani RS (2010) Alpinia galanga Willd.—an overview on phyto-pharmacological properties. Indian J
Nat Prod Resour 1(2):143–149
Clark KL (2007) Nutritional considerations in joint health. Clin Sports Med 26:101–118
Clarke KA, Dew TP, Watson REB et al (2014) High performance liquid chromatography tandem mass spectrometry dual
extraction method for identification of green tea catechin metabolites excreted in human urine. J Chromatogr B 972:29–37
Coppock RW, Dziwenka M (2016) Green tea extract. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity. Academic
Press/Elsevier, Amsterdam, pp 633–652
D’Amour F, Smith DA (1941) A method for determining loss of pain sensation. J Pharmacol Exp Ther 72(1):74–79
Daoud A, Mefteh FB, Mnafgui K et al (2017) Cardiopreventive effect of ethanolic extract of Date Palm Pollen against
isoproterenol induced myocardial infarction in rats through the inhibition of the angiotensin-converting enzyme. Exp Toxicol
Pathol 69(8): 656–665
Davis CD, Milner JA (2007) Biomarkers for diet and cancer prevention research: potentials and challenges. Acta Pharmacol
Sin 28(9): 1262–1273
De Vries JH, Hollman PC, Meyboom S et al (1998) Plasma concentrations and urinary excretion of the antioxidant flavonols
quercetin and kaempferol as biomarkers for dietary intake. Am J Clin Nutr 68:60–65
Denisow B, Denisow-Pietrzyk M (2016) Biological and therapeutic properties of bee pollen: a review. J Sci Food Agric
96:4303–4309
Di Y, Jones J, Mansell K et al (2017) Influence of flaxseed lignan supplementation to older adults on biochemical and
functional outcome measures of inflammation. J Am Coll Nutr 36(8):646–653
Do QD, Angkawijaya AE, Tran-Nguyen PL et al (2014) Effect of extraction solvent on total phenol content, total flavonoid
content, and antioxidant activity of Limnophila aromatica. J Food Drug Anal 22:296–302
Erel O (2004) A novel automated direct measurement method for total antioxidant capacity using a new generation, more
stable ABTS radical cation. Clin Biochem 37:277–285
Fahmy NM, El-Sayed E, Abdel-Daim MA et al (2017) Antiinflammatory and analgesic activities of Terminalia muelleri Benth.
(Combretaceae). Drug Dev Res 78:146–154
Faria A, Fernandes I, Norberto S et al (2014) Interplay between anthocyanins and gut microbiota. J Agric Food Chem
62:6898–6902
Fierascu I, Ungureanu C, Avramescu SM et al (2018) Genoprotective, antioxidant, antifungal, and anti-inflammatory
evaluation of hydroalcoholic extract of wild-growing Juniperus communis L. (Cupresseae) native to Romanian southern sub-
Carpathian hills. BMC Complement Altern Med 18:1–14
Figueiredo-Rinchel ASG, de Melo LL, Bortot LO et al (2017) Baccharis dracunculifolia DC (Asteraceae) selectively modulates
the effector functions of human neutrophils. J Pharm Pharmacol 69:1829–1845
Filho FO, Alcântra DB, Rodrigues THS et al (2018) Development and validation of a reversed phase HPLC method for
determination of anacardic acids in cashew (Anacardium occidentale) nut shell liquid. J Chromatogr Sci 56(4):300–306
Fleck A, Gupta RC, Goad JT et al (2013) Anti-arthritic efficacy and safety of Crominex®+ (trivalent chromium, Pyllanthus
emblica extract, and Shilajit) in moderately arthritic dogs. J Vet Sci Anim Hus 1(4):1–8
Fotso AF, Longo F, Djomeni PD et al (2014) Analgesic and antiinflammatory activities of the ethyl acetate fraction of Bidens
pilosa (Asteraceae). Inflammopharmacology 22:105–114
Foyet HS, Deffo ST, Yewo PK et al (2017) Ficus sycomorus extract reversed behavioral impairment and brain oxidative stress
induced by unpredictable chronic mild stress in rats. BMC Complement Altern Med 17:502
Fujii A, Kobayashi S, Kuboyama N et al (1990) Augmentation of wound healing by royal jelly (RJ) in streptozotocin-diabetic
rats. Jpn J Pharmacol 53:331–337
Gao Y, Li C, Wang Y et al (2017) Nonclinical safety of astilbin: a 4-week oral toxicity study in rats with genotoxicity,
chromosomal aberration, and mammalian micronucleus tests. Food Chem Toxicol 107:1–9
Garcia-Nino WR, Estrada-Muniz E, Valverde M et al (2017) Cytogenetic effects of Jacareubin from Calophyllum brasiliense on
human peripheral blood mononucleated cells in vitro and on mouse polychromatic erythrocytes in vivo. Toxicol Appl Pharmacol
335:6–15
Garg RC (2016) Fenugreek: multiple health benefits. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity. Academic
Press/Elsevier, Amsterdam, pp 599–617
Genskowsky E, Puente LA, Pérez-Álvarez JA et al (2016) Determination of polyphenolic profile, antioxidant activity and
antibacterial properties of maqui [Aristotelia chilensis (Molina) Stunts] a Chilean blackberry. J Sci Food Agric 96:4235–4242
Gessner DK, Ringseis R, Eder K (2016) Potential of plant polyphenols to combat oxidative stress and inflammatory processes
in farm animals. J Anim Physiol Anim Nutr 101:605–628
Giustarini D, Dalle-Donne I, Lorenzini S et al (2012) Protein thiolation index (PTI) as a biomarker of oxidative stress. Free
Radic Biol Med 53:907–915
Goncharov N, Orekhov AN, Voitenko N et al (2016) Organosulfur compounds as nutraceuticals. In: Gupta RC (ed)
Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity. Academic Press/Elsevier, Amsterdam, pp 555–568
González Y, Torres-Mendoza D, Jones GE et al (2015) Marine diterpenoids as potential anti-inflammatory agents. Mediators
Inflamm 2015:1–14
Gupta RC (2014) In: Gupta RC (ed) Biomarkers in toxicology. Academic Press/Elsevier, Amsterdam, pp 1–1128

1232
 Gupta RC (2016) In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity, Academic Press/Elsevier, Amsterdam. pp 1–
1022
Gupta C, Garg AP, Uniyal RC et al (2008) Comparative analysis of the antimicrobial activity of cinnamon oil and cinnamon
extract on some food-borne microbes. Afr J Microbiol Res 2(9):247–251
Gupta B, Ghosh KK, Gupta RC (2016) Thymoquinone. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity.
Academic Press/Elsevier, Amsterdam, pp 541–550
Gupta RC, Srivastava A, Lall R (2018) Toxicity potential of nutraceuticals. In: Nicolotti O (ed) Computational toxicology—
methods and protocols. Springer Nature, New York
Halim SZ, Zakaria ZA, Omar MH et al (2007) Synergistic gastroprotective activity of methanolic extract of a mixture of
Melastoma malabathricum and Muntingia calabura leaves in rats. BMC Complement Altern Med 17:488
Henroitin Y, Clutterbuck AL, Allaway D et al (2010) Biological actions of curcumin on articular chondrocytes. Osteoarthr Cart
18:141–149
Hiyasat B, Sabha D, Grötzinger K et al (2009) Antiplatelet activity of Allium ursinum and Allium sativum. Pharmacology
83:197–2004
Horng C-T, Huang C-W, Yang M-Y et al (2017) Nelumbo nucifera leaf extract treatment attenuated preneoplastic lesions and
oxidative stress in the livers of diethylnitrosamine-treated rats. Environ Toxicol 32:2327–2340
Hoshyar R, Mollaei H (2017) A comprehensive review on anticancer mechanisms of the main carotenoid of saffron, crocin. J
Pharm Pharmacol 69(11):1419–1427
Hsiao HY, Chen BH, Kao TH (2017) Analysis of heterocyclic amines in meat by the quick, easy, cheap, effective, rugged, and
safe method couples with LC-DAD-MS-MS. J Agric Food Chem 65 (51):11329–11329
Javeri I, Chand N (2016) Curcumin. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity. Academic Press/Elsevier,
Amsterdam, pp 435–445
Jayakumar S, Patwardhan RS, Pal D et al (2017) Mitochondrial targeted curcumin exhibits anticancer effects through
disruption of mitochondrial redox and modulation of TrxR2 activity. Free Radic Biol Med 113:530–538
Jayaprakasha GK, Singh RP, Sakariah KK (2001) Antioxidant activity of grape seed (Vitis vinefera) extracts on peroxidation
models in vitro. Food Chem 73:285–290
Jeong K, Shin Y-C, Park S et al (2011) Ethanol extract of Scutellaria baicalensis Georgi prevents oxidative damage and
neuroinflammation and memorial impairments in artificial senescense mice. J Biomed Sci 18:14
Karonen M, Hamalainen M, Nieminen R et al (2004) Phenolic extractives from the bark of Pinus sylvestris L. and their effects
on inflammatory mediators nitric oxide and prostaglandin E2. J Agric Food Chem 52:7532–7540
Khan W, Gupta S, Ahmad S (2017) Toxicology of the aqueous extract from the flowers of Butea monosperma Lam. and it’s
metabolomics in yeast cells. Food Chem Toxicol 108:486–497
Khatua S, Acharya K (2017) Alkaline extractive crude polysaccharide from Russula senecis possesses antioxidant potential
and stimulates innate immunity response. J Pharm Pharmacol 69:1817–1828
Kim SH, Hong JH, Lee JE et al (2017) 18 beta-Glycyrrhetinic acid, the major bioactive component of Glycyrrhizae radix,
attenuates airway inflammation by modulating Th2 cytokines, GATA-3, STAT6, and Foxp3 transcription factors in an asthmatic
mouse model. Environ Toxicol Pharmacol 52:99–113
Krajčovičová Z, Melus V (2013) Bioactivity and potential health benefits of Rosmarinic acid. Univ Rev 7(2):8–14
Kumar A, Chopra EK, Mukherjee M et al (2015) Current knowledge and pharmacological profile of berberine: an update. Eur J
Pharmacol 761:288–297
Kumar D, Rahal A, Malik JK (2016) Neem extract. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity. Academic
Press/Elsevier, Amsterdam, pp 585–597
Kumari R, Kumar S, Kumar A et al (2017) Antibacterial, antioxidant and immunomodulatory properties in extracts of Barleria
lupulina Lindl. BMC Complement Altern Med 17:484
Kusano C, Ferrari B (2008) Total antioxidant capacity: a biomarker in biomedical and nutritional studies. J Cell Mol Biol
7(1):1–15
Lautenschläger M, Lechtenberg M, Sendker K et al (2014) Effective isolation protocol for secondary metabolites from saffron:
semipreparative scale preparation of crocetin-1 and trans-crocetin. Fitoterapia 92:290–295
Lawley S, Gupta RC, Goad JT et al (2013) Anti-inflammatory and antiarthritic efficacy and safety of purified shilajit in
moderately arthritic dogs. J Vet Sci Anim Hus 1(3):302
Levine CB, Bayle J, Biourge V et al (2017) Cellular effects of a turmeric root and rosemary leaf extract on canine neoplastic
cell lines. BMC Vet Res 13:388
Li M, Xu J, Shi T et al (2016) Epigallocatechin-3-gallate augments therapeutic effects of mesenchymal stem cells in skin
wound healing. Clin Exp Pharmacol 43:1115–1124
Li Q, Liang X, Zhao L et al (2017a) UPLC-Q-exactive orbitrap/Msbased lipidomics approach to characterize lipid extracts from
bee pollen and their in vitro anti-inflammatory properties. J Agric Food Chem 65:6848–6860
Li M, Zhu LF, Zhang TT et al (2017b) Pulmonary delivery of tea tree oil-beta-cyclodextrin inclusion complexes for the
treatment of fungal and bacterial pneumonia. J Pharm Pharmacol 69(11):1458–1467
Li J, Yuan C, Pan P et al (2017c) Bioassay-guided isolation of antioxidant and cytoprotective constituents from a Maqui berry
(Aristotelia chilensis) dietary supplement ingredient as markers for qualitative and quantitative analysis. J Agric Food Chem
65:8634–8642
Liu M-W, Wei R, Su M-X et al (2018) Effects of Panax notoginseng saponins on severe acute pancreatitis through the
regulation of mTOR/Akt and caspase-3 signaling pathway by upregulating miR-181b expression in rats. BMC Complement
Altern Med 18:51
Longo DM, Generaux GT, Howell BA et al (2017) Refining liver safety risk assessment: application of mechanistic modeling
and serum biomarkers to cimaglermin alpha (GGF2) clinical trials. Clin Pharmacol Ther 102(6):961–969

1233
 Lucca LG, de Matos SP, Borille BT et al (2015) Determination of β-caryophyllene skin permeation/retention from crude
copaiba oil (Copaifera multijuga Hayne) and respective oil-based nanoemulsion using a novel HS-GC/MS method. J Pharm
Biomed Anal 104:144–148
Machado AM, de Paula H, Cardoso LD et al (2015) Effects of brown and golden flaxseed on the lipid profile, glycemia,
inflammatory biomarkers, blood pressure and body composition in overweight adolescents. Nutrition 31:90–96
Maiti R, Jane D, Das UK et al (2004) Antidiabetic effect of aqueous extract of seed of Tamarindus indica L. in streptozotocin-
induced diabetic rats. J Ethnopharmacol 92(1):85–91
Marchev AS, Dimitrova P, Koycheva IK et al (2017) Altered expression of TRAIL on mouse T cells via ERK phosphorylation by
Rhodiola rosea L. and its marker compounds. Food Chem Toxicol 108: 419–428
Marcone MF, Wang S, Albabish W et al (2013) Diverse food-based applications of nuclear magnetic resonance (NMR)
technology. Food Res Int 51:729–747
Maresca M, Micheli L, Cinci L et al (2017) Pain relieving and protective effects of Astragalus hydroalcoholic extract in rat
arthritis models. J Pharm Pharmacol 69:1858–1870
Mariette F (2009) Investigations of food colloids by NMR and MRI. Curr Opin Colloid Interface Sci 14(3):203–211
Marin L, Miguelez EM, Villar CJ et al (2015) Bioavailability of dietary polyphenols and gut microbiota metabolism: antimicrobial
properties. Biomed Res Int 2015:905215
Martinez SE, Chen Y, Ho EA et al (2015) Pharmacological effects of a c-phycocyanin-based multicomponent nutraceutical in
an in-vitro canine chondrocyte model of osteoarthritis. Can J Vet Res 79: 241–249
May K, Gupta RC, Miller J et al (2015) Therapeutic efficacy and safety evaluation of a novel chromium supplement
(Crominex®+3-) in moderately arthritic horses. J J Vet Sci Res 2(1):014
Milind P, Monu Y (2013) Laboratory models for screening analgesics. Int Res J Pharm 4:15–19
Mohanty C, Sahoo SK (2017) Curcumin and its topical formulations for wound healing applications. Drug Discov Today
22(10):1582–1592
Most J, Penders J, Lucchesi M et al (2017) Gut microbiota composition in relation to the metabolic response to 12-week
combined polyphenol supplementation in overweight men and women. Eur J Clin Nutr 71:1040–1045
Murdock N, Gupta RC, Vega N et al (2016) Evaluation of Terminalia chebula extract for anti-arthritic efficacy and safety in
osteoarthritic dogs. J Vet Sci Technol 7(1):1–8
Nallathamby N, Phan C-W, Seow SLS et al (2018) A status review of the bioactive activities of tiger milk mushroom Lignosus
rhinocerotis (Cooke) Ryvarden. Front Pharmacol 8:998
Nishina A, Hasegawa K-I, Uchibori T et al (1991) 2, 6-Dimethoxy-pbenzoqiuinone as an antibacterial substance in the bark of
Phyllostachys heterocycla var. pubescens, a species of thick stemmed bamboo. J Agric Food Chem 39:266–269
Oda K, Murakami T (2017) Pharmacokinetic interaction of green tea beverage containing cyclodextrins and high
concentration catechins with p-glycoprotein substrates in LLC-GA5-COL150 cells in vitro and in the small intestine of rats in
vivo. J Pharm Pharmacol 69:1736–1744
Oh S-M, Park G, Lee SH et al (2017) Assessing the recovery from prerenal and renal acute kidney injury after treatment with
single herbal medicine via activity of the biomarkers HMGB1, NGAL, and KIM-1 in kidney proximal tubular cells treated by
cisplatin with different doses and exposure. BMC Complement Altern Med 17:544
Omote K, Kawamata T, Kawamata M et al (1998) Formalin-induced release of excitatory amino acids in the skin of the
hindpaw. Brain Res 787(1):161–164
Ortea I, Canas B, Calo-Mata P et al (2009) Arginine kinase peptide mass fingerprinting as a proteomic approach for species
identification and taxonomic analysis of commercially relevant shrimp species. J Agric Food Chem 57:5665–5672
Ou B, Huang D, Hampsch-Woodill M et al (2002) Analysis of antioxidant activities of common vegetables employing oxygen
radical absorbance capacity (ORAC) and ferric reducing antioxidant power (FRAP) assays: a comparative study. J Agric Food
Chem 50:3122–3128
Ovais M, Ayaz M, Khalil AT et al (2018) HPLC-DAD finger printing, antioxidant, cholinesterase, and α-glucosidase inhibitory
potentials of a novel plant Olax nana. BMC Complement Altern Med 18:1–13
Ovalle-Magallanes B, Eugenio-Perez D, PedrazaCharerri J (2017) Medicinal properties of Mangosteen (Garcinia mangostana
L.): a comprehensive update. Food Chem Toxicol 109:102–122
Pang X, Yi Z, Zhang X et al (2009) Acetyl-11-keto-β-boswellic acid inhibits prostate tumor growth by suppressing vascular
endothelial growth factor receptor 2-mediated angiogenesis. Cancer Res 69: 5893–9000
Patocka J, Navratilova Z, Ovando M (2017) Biologically active compounds of Knotweed (Reynoutria Spp.). Mil Med Sci Lett
86 (1):17–31
Pavlovic DR, Veljkovic M, Stojanovic NM et al (2017) Influence of different wild-garlic (Allium ursinum) extracts on the
gastrointestinal system: spasmolytic, antimicrobial and antioxidant properties. J Pharm Pharmacol 69:1208–1218
Peng XR, Wang X, Dong JR et al (2017) Rare hybrid dimers with anti-acetylcholinesterase activities from a Safflower
(Carthamus tinctorius L.) seed oil cake. J Agric Food Chem 65(43):9453–9459
Penman AD, Kaufman GE, Daniels KK (2014) MicroRNA expression as an indicator of tissue toxicity. In: Gupta RC (ed)
Biomarkers in toxicology. Academic Press/Elsevier, Amsterdam, pp 1003–1018
Pérez-Jiménez J, Hubert J, Hooper L et al (2010) Urinary metabolites as biomarkers of polyphenol intake in humans: a
systematic review. Am J Clin Nutr 92(4):801–809. https://doi.org/10.3945/ajcn.2010.29924
Pieloch MJ (2006) Method of use and dosage composition of bluegreen algae extract for inflammation in animals. United
States Patent; US 7, 025, 965 B1, pp 1–10
Pinto P, Santos CN (2017) Worldwide (poly)phenol intake: assessment methods and identified gaps. Eur J Nutr 56:1393–
1408
Poeckel D, Werz O (2006) Biological actions and molecular targets. Curr Med Chem 13:3359–3369

1234
 Quiroga AV, Aphalo P, Nardo AE et al (2017) In vitro modulation of renin-angiotensin system enzymes by Amaranth
(Amaranthus hypochondriacus) protein-derived peptides: alternative mechanisms different from ACE inhibition. J Agric Food
Chem 65:7415–7423
Ranasinghe P, Jayawardena R, Pigera S et al (2017) Evaluation of pharmacodynamic properties and safety of Cinnamomum
zeylanicum (Ceylon cinnamon) in healthy adults: a phase I clinical trial. BMC Complement Altern Med 17:550
Rastogi A, Shukla S (2013) Amaranth: a new millennium crop of nutraceutical values. Crit Rev Food Sci Nutr 53(2):109–125
Rather LJ, Islam S-U, Mohammad F (2015) Acacia nilotica (L): a review of its traditional uses, phytochemistry, and
pharmacology. Sustain Chem Pharm 2:12–30
Rietjens IMCM, Dussort P, Günther H et al (2018) Exposure assessment of process-related contaminants in food by
biomarker monitoring. Arch Toxicol 92:15–40
Risuleo G (2016) Resveratrol: multiple activities on the biological functionality of the cell. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals:
efficacy, safety and toxicity. Academic Press/Elsevier, Amsterdam, pp 453–464
Rodrigues EDCR, Ferreira AM, Vilhena JCE et al (2014) Development of a larvicidal nanoemulsion with Copaiba (Copaifera
duckei) oleoresin. Rev Bras Farm 24:699–707
Rojo LE, Ribnicky D, Logendra S et al (2012) In vitro and in vivo antidiabetic effects of anthocyanins from Maqui berry
(Aristotelia chilensis). Food Chem 131:387–396
Rong H, Liang Y, Niu Y (2018) Rosmarinic acid attenuates β-amyloidinduced oxidative stress via Akt/GSK-3β/Fyn-mediated
Nrf2 activation in PC2 cells. Free Radic Biol Med 120:114–123
Roopchand DE, Carmody RN, Kuhn P et al (2015) Dietary polyphenols promote growth of the gut bacterium Akkermansia
muciniphila and attenuate high fat diet-induced metabolic syndrome. Diabetes 64:2847–2858
Ross AB, Shepherd MJ, Schüpphaus M et al (2003) Alkylresorcinols in cereals and cereal products. J Agric Food Chem
51:4111–4118
Rossi GB, Valentim-Neto PA, Blank M et al (2017) Comparison of grain proteome profiles of four Brazilian common bean
(Phaseolus vulgaris L.) cultivars. J Agric Food Chem 65:7588–7597
Ruiz A, Hermosín-Gutiérrez I, Mardones C et al (2010) Polyphenols and antioxidant activity of calafate (Berberis microphylla)
fruits and other native berries from Southern Chile. J Agric Food Chem 58:6081–6089
Salem MZM, Elansary HO, Ali HM et al (2018) Bioactivity of essential oils extracted from Cupressus macrocarpa branchlets
and Corymbia citriodora leaves grown in Egypt. BMC Complement Altern Med 18:23
Sandesh P, Velu V, Singh RP (2014) Antioxidant activities of tamarind (Tamarindus indica) seed coat extracts using in vitro
and in vivo models. J Food Sci Technol 51(9):1965–1973
Sarada DVL, Kumar CS, Rengasamy R (2011) Purified c-phycocyanin from Spirulina platensis (Nordstedt) Geitler: a novel
and potent agent against drug resistant bacteria. World J Microbol Biotechnol 27:779–783
Satoh T (2016) Astaxanthin: health benefits and toxicity. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity.
Academic Press/Elsevier, Amsterdam, pp 531–539
Saura-Calixto F, Serrano J, Goñi I (2007) Intake and bioaccessibility of total polyphenols in a whole diet. Food Chem
101(2):492–501
Savolainen O, Lind MV, Bergstrom G et al (2017) Biomarkers of food intake and nutrient status are associated with glucose
tolerance status and development of type 2 diabetes in older Swedish women. Am J Clin Nutr 106(5):1302–1310
Schmidt M, Skaf J, Gavril G et al (2017) The influence of Osmunda regalis root extract on head and neck cancer cell
proliferation, invasion and gene expression. BMC Complement Altern Med 17:518
Servili M, Baldioli M, Selvaggini R et al (1999) High-performance liquid chromatography evaluation of phenols in olive fruit,
virgin olive oil, vegetation waters, and pomace and 1D- and 2D-nuclear magnetic resonance characterization. J Am Oil Chem
Soc 76: 873–882
Shen J, Pu ZJ, Kai J et al (2017) Comparative metabolomics analysis for the compatibility and incompatibility of kansui and
kansui and licorice with different ratios by UHPLC-QTOF/MS and multivariate data analysis. J Chromatogr B 1057:40–45
Shih CM, Cheng SN, Wong CS et al (2009) Antiinflammatory and antihyperalgesic activity of c-phycocyanin. Anesth Analg
108:1302–1310
Shoda LKM, Woodhead JL, Siler SQ et al (2014) Linking physiology to toxicity using DILIsym®, a mechanistic mathematical
model of drug-induced liver injury. Biopharm Drug Dispos 35:33–49
Shoko T, Maharaj VJ, Naidoo D et al (2018) Anti-aging potential of extracts from Sclerocarya birrea (A. Rich.) Hochst and its
chemical profiling by UPLC-Q-TOF-MS. BMC Complement Altern Med 18:54
Siddiqui MZ (2011) Boswellia serrata, a potential antiinflammatory agent: an overview. Indian J Pharm Sci 73(3):255–261
Sima IA, Andrasi M, Sarbu C (2018) Chemometric assessment of chromatographic methods for herbal medicines
authentication and fingerprinting. J Chromatogr Sci 56(1):49–55
Singh G, Passari AK, Singh P et al (2017) Pharmacological potential of Bidens pilosa L. and determination of bioactive
compounds using UHPLC-QqQLIT-MS/MS and GC/MS. BMC Complement Altern Med 17:492
Sobrinho AP, Minho AS, Ferreira LC et al (2017) Characterization of anti-inflammatory effect and possible mechanism of
action of Tibouchina granulosa. J Pharm Pharmacol 69:706–713
Soriano-Santos J, Escalona-Buendía H (2015) Angiotensin I-converting enzyme inhibitory and antioxidant activities and
surfactant properties of protein hydrolysates as obtained of Amaranthus hypochondriacus L. grain. J Agric Food Chem
52(4):2073–2082
Srivastava S, Mennemeier M, Pimple S (2017) Effect of Alpinia galanga on mental-alertness and sustained attention with or
without caffeine: a randomized placebo-controlled study. J Am Coll Nutr 36 (8):631–639
Stahl A, Schröder U (2017) Development of a MALDI-TOF MS-based protein fingerprint database of common food fish
allowing fast and reliable identification of fraud and substitution. J Agric Food Chem 65:7519–7527

1235
 Sudjaroen Y, Haubner R, Würtele G et al (2005) Isolation and structure elucidation of phenolic antioxidants from tamarind
(Tamarindus indica L.) seeds and pericarp. Food Chem Toxicol 43(11): 1673–1682
Sultana A, Nurun Nabi AHM, Nasir UM et al (2008) A dipeptide YY derived from royal jelly proteins inhibits renin activity. Int J
Mol Med 21:677–681
Svoboda P, Vičková H, Nováková L (2015) Development and validation of UHPLC-MS/MS method for determination of eight
naturally occurring catechin derivatives in various tea samples and the role of matrix effects. J Pharm Biomed Anal 114:62–70
Talawar ST, Harohally NV, Ramakrishna C et al (2017) Development of wheat bran oil concentrates rich in bioactives with
antioxidant and hypolipidemic properties. J Agric Food Chem 65(45):9838–9848
Tamrat Y, Nedi T, Assefa S et al (2017) Anti-inflammatory and analgesic activities of solvent fractions of the leaves of Moringa
stenopetala Bak. (Moringaceae) in mice models. BMC Complement Altern Med 17:473
Tan ETT, Jassim RA, D’Arcy BR et al (2017) In vitro biodegradation of hepatotoxic indospicine in Indigofera spicata and its
degradation derivatives by camel foregut and cattle rumen fluids. J Agric Food Chem 65:7528–7534
Tandan SK, Gupta S, Chandra S et al (1995) Safety evaluation of Azadirachta indica seed oil, a herbal wound dressing agent.
Fitoterapia 66:69–72
Tarachiwin L, Ute K, Kobayashi E et al (2007) 1H NMR based metabolic profiling in the evaluation of Japanese green teat
quality. J Agric Food Chem 55(23):9330–9336
Tepsuwan A, Kupradinum P, Kusamran WR (2002) Chemopreventive potential of neem flowers on carcinogen-induced rat
mammary and liver carcinogenesis. Asia Pac J Cancer Prev 3(3):231–238
Thaipong K, Boonprakob U, Crosby K et al (2006) Comparison of ABTS, DPPH, FRAP, and ORAC assays for estimating
antioxidant activity from guava fruit extracts. J Food Compos Anal 19:669–675
Tomas-Barberan FA, Selma MV, Espín JC (2018) Polyphenols’ gut microbiota metabolites: bioactives or biomarkers? J Agric
Food Chem 66:3593–3594
Tsai Y-C, Chen S-H, Lin L-C et al (2017) Anti-inflammatory principles from Sarcandra glabra. J Agric Food Chem 65:6497–
6505
Tsuda T, Watanabe M, Ohshima K et al (1994) Antioxidative components isolated from the seed of tamarind (Tamarindus
indica L.). J Agric Food Chem 42:2671–2674
Upadhyay A, Agrahari P, Singh DK (2014) A review on the pharmacological aspects of Terminalia chebula. Int J Pharmacol
10:289–298
van Gorsel H, Li C, Kerbel EL et al (1992) Compositional characterization of prune juice. J Agric Food Chem 40:784–789
Vijayaraghavan K, Rajkumar J, Seyed MA (2017) Efficacy of Chromolaena odorata leaf extracts for the healing of rat excision
wounds. Vet Med 62(10):565–578
Wan D, Wu Q, Kuča K (2016) Spirulina. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity. Academic
Press/Elsevier, Amsterdam, pp 569–583
Wang J, Zhang X, Lan H et al (2017) Effect of garlic supplement in the management of type 2 diabetes mellitus (T2DM): a
meta-analysis of randomized controlled trials. Food Nutr Res 61:1377571
Wang WF, Ha CZ, Lin T et al (2018) Celastrol attenuates pain and cartilage damage via SDF-1/CXCR4 signaling pathway in
osteoarthritis rats. J Pharm Pharmacol 70(1):81–88
Williams G, Clifford MN (2017) Role of the small intestine, colon and microbiota in determining the metabolic fate of
polyphenols. Biochem Pharmacol 139:24–39
Wilson E, Rajamanickam GV, Dubey GP et al (2011) Review on shilajit used in traditional Indian medicine. J Ethnopharmacol
136:1–9
Woo YJ, Joo YB, Jung YO et al (2011) Grape seed proanthocyanidin extract ameliorates monosodium iodoacetate-induced
osteoarthritis. Exp Mol Med 43:561–570
Wu S, Li J, Wang Q et al (2017) Seasonal dynamics of the phytochemical constituents and bioactivities of extracts from
Stenoloma chusanum (L.) ching. Food Chem Toxicol 108:458–466
Wu QJ, Zheng XC, Wang T et al (2018) Effects of dietary supplementation with oridonin on the growth performance, relative
organ weight, lymphocyte proliferation, and cytokine concentration in broiler chickens. BMC Vet Res 14:34
Xavier FH, Maciuk A, Morais ARD et al (2017) Development of a gas chromatography method for the analysis of copaiba oil. J
Chromatogr Sci 55(10):969–978
Xiang C-P, Han J-X, Li X-C et al (2017) Chemical composition and acetylcholinesterase inhibitory activity of essential oils from
Piper species. J Agric Food Chem 65:3702–3710
Yamakoshi Y, Murata M, Shimizu A et al (1992) Isolation and characterization of macrocarpals B-G antibacterial compounds
from Eucalyptus macrocarpa. Biosci Biotechnol Biochem 56: 1570–1576
Ye W, Chen R, SunWet al (2017) Determination and pharmacokinetics of engeletin in rat plasma by ultra-high performance
liquid chromatography with tandem mass spectrometry. J Chromatogr B 1060: 144–149
Yin X-L, Liu H-Y, Zhang Y-Q (2017) Mulberry branch bark powder significantly improves hyperglycemia and regulates insulin
secretion in type II diabetic mice. Food Nutr Res 61:1368847
Yu H, Qiu J-F, Ma L-J et al (2017a) Phytochemical and phytopharmacological review of Perilla frutescens L. (Labiatae), a
traditional edible-medicinal herb in China. Food Chem Toxicol 108:375–391
Yu X, Tang YH, Liu PY (2017b) Flaxseed oil alleviates chronic HFD-induced insulin resistance through remodeling lipid
homeostasis in obese adipose tissue. J Agric Food Chem 65(44):9635–9645
Yun B-S, Lee I-K, Kim J-P et al (2000) Lipid peroxidation inhibitory activity of some constituents isolated from the stem bark of
Eucalyptus globulus. Arch Pharm Res 23:147–150
Zakaria ZA, Hazalin NM, Zaid SM et al (2007) Antinociceptive, antiinflammatory and antipyretic effects of Muntingia calabura
aqueous extract in animal models. J Nat Med 61(4):443–448

1236
 Zehl M, Braunberger C, Conrad J et al (2011) Identification and quantification of flavonoids and ellagic acid derivatives in
therapeutically important Drosera species by LC-DAD, LC-NMR, NMR, and LC-MS. Anal Bioanal Chem 400(8):2565–2576
Zhang Y, Cicchewicz RH, Nair MG (2004) Lipid peroxidation inhibitory compounds from daylily (Hemerocallis fulva) leaves.
Life Sci 75:753–763
Zhao B, Ren B, Guo R et al (2017) Supplementation of lycopene attenuates oxidative stress induced neuroinflammation and
cognitive impairment via Nrf2/NF-κBα e AMPK. Esses dadosB transcriptional pathway. Food Chem Toxicol 109(1):505–516
Zou Y, Kim AR, Kim JE et al (2002) Peroxynitrite scavenging activity of sinapic acid (3, 5-dimethoxy-4-hydroxycinnamic acid)
isolated from Brassica juncea. J Agric Food Chem 50:5884–5890

1237
 Toxicologia e interações medicamentosas de
nutracêuticos
Rhian B. Cope

Resumo
Este capítulo tenta resumir e tabular muitos dos efeitos toxicológicos adversos e de
interação medicamentosa mais conhecidos dos nutracêuticos e suplementos botânicos.
Devido ao grande escopo desses assuntos, uma extensa lista de literatura é fornecida na
seção “Referências” deste capítulo. As propriedades de segurança dos nutracêuticos são,
em geral, pouco estudadas e não há absolutamente nenhuma razão para assumir que
esses produtos são “seguros” para uso em humanos ou animais, apesar das alegações
de uso cultural ou dietético de longa data. Dado este contexto, é possível que muitos
problemas atualmente não sejam reconhecidos e a carga dos efeitos adversos possa ser
substancialmente subestimada. Esta situação provavelmente continuará até que uma
mudança em direção a um regime de aprovação regulatória pré-comercialização com
farmacovigilância pós-comercialização obrigatória seja aplicada em substâncias de alto
risco e / ou com poucos dados.

Palavras-chave: Nutracêuticos veterinários · Interações tóxicas

1. Introdução
Os efeitos adversos mais conhecidos dos nutracêuticos e suplementos fitoterápicos
envolvem hepatotoxicidade e interações medicamentosas. Devido ao escopo monumental
dessas questões, este capítulo adotou a abordagem de resumir os efeitos adversos bem
conhecidos dos suplementos nutracêuticos e botânicos. Uma vez que a maioria das
jurisdições regulatórias geralmente exigem o mínimo ou nenhuma informação ou estudos
sobre os efeitos adversos dos nutracêuticos e suplementos fitoterápicos, os dados
disponíveis geralmente são de qualidade inferior e são exploratórios por natureza.
Frequentemente, as propriedades críticas de segurança dos nutracêuticos são mal
estudadas e muitas das informações são baseadas em estudos in vitro, estudos
exploratórios de pequena escala em espécies de laboratório, séries de casos limitados e
relatos de casos únicos.

1238
Atualmente, não há razão para suspeitar que os órgãos e sistemas clássicos de alto risco
associados a produtos farmacêuticos bem caracterizados (SNC, fígado, rim e sistema de
condução cardíaca) também não corram risco devido a produtos nutracêuticos e extratos
de ervas mal caracterizados. Em muitas jurisdições, a avaliação de segurança pós-
mercado pode ser, na melhor das hipóteses, descrita como mínima e, na pior, aleatória ou
ausente. Embora a abordagem regulatória relativamente frouxa que é aplicada atualmente
aos produtos nutracêuticos permaneça, muitas vezes uma enorme falta de dados de
segurança avaliados sistematicamente sobre muitos desses produtos também
permanecerá. Além disso, grande parte do banco de dados atual é simplesmente
observacional e, frequentemente, há uma falta substancial de dados mecanísticos e de
modo de ação.

Talvez a graça salvadora nesta situação seja que, com base em grande parte nos dados
do Centro de Informações sobre Venenos, a maioria dos eventos adversos associados a
nutracêuticos/suplementos são menores, embora os efeitos adversos aparentes sejam
relativamente comuns. No entanto, eventos adversos graves e fatalidades certamente
foram detectados. Dada a incidência conhecida de eventos adversos entre as populações
de estudo que agora está disponível na literatura de ensaios clínicos farmacêuticos
humanos, é provável que os efeitos adversos dos nutracêuticos sejam frequentemente
subestimados.

2. Hepatotoxicidade
Conforme observado na introdução, a hepatotoxicidade inesperada é a causa principal
mais bem estudada de eventos adversos associados ao uso de nutracêuticos e
suplementos. Dois tipos principais de hepatotoxicidade foram identificados:

Hepatotoxicidade clássica do Tipo A induzida por produtos químicos devido ao dano

hepatocelular inerente induzido pelo ingrediente ativo e/ou seu(s) metabólito(s) e/ou suas
impurezas. Este tipo de hepatotoxicidade tem respostas de dose individual e populacional
previsíveis e temporalidade que frequentemente tem um modo de ação bem
caracterizado, e a maioria de uma população apropriadamente exposta desenvolverá
dano hepático. Os exemplos clássicos incluem muitos produtos farmacêuticos humanos,
várias micotoxinas como as aflatoxinas e toxinas vegetais como os alcalóides
pirrolizidínicos.

Hepatotoxicidade clássica idiossincrática do Tipo B que ocorre sem aviso é muitas vezes
imprevisível usando técnicas toxicológicas clássicas, geralmente não tem uma resposta à
1239
dose clara ou previsível, muitas vezes não tem temporalidade previsível pós-exposição,
pode ocorrer raramente ou esporadicamente entre as populações e pode estar associada
a uma subpopulação hipersusceptível particular e/ou pode ter um componente mediado
imunologicamente. Exemplos clássicos são os medicamentos troglitazona e
trovafloxacina.

A hepatotoxicidade do Tipo A importante e bem descrita devido a fontes de nutracêuticos

está resumida na Tabela 1. Criticamente, muitas vezes apenas informações limitadas
estão disponíveis para muitos nutracêuticos; portanto, este resumo não pode ser
considerado abrangente. Além disso, como a hepatotoxicidade do Tipo B pode ser difícil
de identificar em grandes populações, esse tipo de hepatotoxicidade pode ser seriamente
subestimado com produtos nutracêuticos (especialmente porque esses produtos
geralmente não são submetidos a uma avaliação sistemática de segurança pós-
comercialização).

Tabela 1 Hepatotoxicidade potencial do Tipo A devido a nutracêuticos

Composto-chave ou
Suplemento de ervas Efeitos ou circunstâncias Referências
forma do produto
Ginseng Panax ginseng, Possivelmente devido à interação com Bilgi et al.
Extrato (2010)
P. quinquefolius imatinibe
Hardeman et al.
(2008), Stickel
et al. (2003),
Grande celidônia Relatos de lesão hepatocelular e Teschke et al.
Extrato (2011) e
Chelidonium majus colestase em humanos
Teschke et al.
(2012a, b)

De Souza
Grinevicius et
Pimenta preta Evidência experimental de dano redox
Piperidina al. (2016) e
Piper nigrum em roedores Piyachaturawat
et al. (1995)
Agollo et al.
Possivelmente devido à interação com (2014),
Domínguez
Erva de São João a copaíba e/ou devido a uma interação
Extrato Jiménez et al.
Hypericum perforatum química medicamento/medicamento ou (2007) e
de medicamento Valentao et al.
(2004)

Epigalocatequina- 3- Wang et al.

galato (2015)

Emoto et al.
(2014),
Federico et al.
Hepatotóxico em roedores e humanos. (2007), Galati et
Os casos em humanos são al. (2006), Gloro
Chá verde
supostamente devidos a N- et al. (2005),
Camellia sinensis Mazzanti et al.
Extrato nitrosofenfluramina e/ou
(2009),
pigalocatequina-3-galato Mazzanti et al.
(2015), Pillukat
et al. (2014),
Teschke et al.
(2014) e Vial et
al. (2003)

1240
 Tabela 1 Hepatotoxicidade potencial do Tipo A devido a nutracêuticos
Goksu et al.
(2012), Kouzi et
al. (1994),
Tomilho Extratos, teucrina A,
Hepatóxico em roedores e humanos Lekehal et al.
Teucrium sp. teuchamaedryn A (1996) e Sezer
e Bozaykut
(2012)

Canfora Desde relato de caso de

Creme tópico Uc et al. (2000)
Cinnamomum camphora hepatotoxicidade em criança humana
Kava Teschke
Extrato Hepatotóxico em humanos (2010a, b)
Piper methysticum
Anderson et al.
(1996),
Bakerink et al.
Óleo de poejo Óleo, (R) - (+) - (1996), Gordon
Hepatotóxico em roedores e em et al. (1982),
Mentha pulegium, pulegone, pulegone, Gordon e
humanos
Hedeoma pulegioides mentol, mentona Khojasteh
(2015) e
Sztajnkrycer et
al. (2003)
Yamano et al.
Extrato (1988) e Yang
Gardênia et al. (2006)
Hepatotóxico em roedores
Fructus gardenia
Wei et al.
Geniposide (2014)
Oboh (2006) e
Alho
Homogenado Hepatotóxico em roedores Rana et al.
Allium sativum (2006)

Encontrado em muitas
Monocrotalina, Hepatotóxicos e vasculotóxicos
espécies de plantas, Mingatto et al.
desidromonocrotalina, pulmonares clássicos pelos alcalóides (2007)
classicamente
desidrorectronecina pirrolizidina
Crotalaria sp.
Citrino Corey et al.
Extrato Hepatotóxico em humanos (2016)
Garcinia cambogia
Visco Kim et al.
Extrato Hepatotóxico em humanos (2015)
Viscum coloratum
Laranja amarga Teschke e
Não declarado Hepatotóxico em humanos Andrade (2016)
Citrus aurantium
Árvore casta Daniele et al.
Não declarado Hepatotóxico em humanos (2005)
Vitex agnus-castus
Valeriana Cohen e Del
Não declarado Hepatotóxico em humanos Toro (2008)
Valeriana officinalis

Maiores detalhes sobre os agentes específicos listados na Tabela 1 podem ser

encontrados consultando os documentos da seção “Referências” deste capítulo.

A hepatotoxicidade clássica do Tipo B em humanos foi registrada com cohosh preto

(Actaea racemosa, Franco et al. 2017). A hepatite imunomediada clássica secundária à
formação de adutos de proteína foi identificada. A hepatite autoimune também foi
associada ao uso de produtos contendo Echinacea purpurea (Enbom et al. 2014; Franco
et al. 2017; Kocaman et al. 2008; Lim et al. 2013; Lynch et al. 2006; Teschke 2010a, b ;
Whiting et al. 2002).

1241
3. Interações medicamentosas conhecidas de nutracêuticos
Uma descrição detalhada e abrangente do grande número de interações fármaco/fármaco
e xenosensores de nutracêuticos seria o assunto de um livro didático inteiro por conta
própria! Devido às restrições de comprimento deste capítulo, essas informações foram
resumidas na Tabela 2. Mais detalhes podem ser encontrados nas referências relevantes.
É importante lembrar que esses efeitos não são necessariamente adversos no sentido
biológico: muitos são exemplos clássicos dos mecanismos adaptativos que entram em
ação quando o corpo encontra um xenobiótico e executa uma série de respostas
bioquímicas estereotipadas na tentativa de desintoxicar e/ou aumentar a excreção da
substância indesejada. Infelizmente, essas respostas também podem ser adversas e/ou
podem afetar o comportamento farmacocinético de muitas outras substâncias. Ao
consultar a Tabela 1, é importante lembrar que os membros CYP1A2, CYP2C9,
CYP2C19, CYP2D6, CYP3A4 e CYP3A5 da família de enzimas do citocromo P450
metabolizam aproximadamente 90% dos medicamentos humanos atuais.

Tabela 2 Potenciais interações medicamentosas conhecidas de nutracêuticos

Composto-chave ou forma do
Suplemento de ervas Citocromo inibido Referências
produto
Inibição de enzimas da família do citocromo P450
Mangostão (Garcinia
Extrato aquoso CYP 2C8, 2C9, 2C19 Foti et al. (2009)
mangostana)
Cohosh preto (Actaea
Gurley et al.
racemosa L./ Ácido fucinólico e ácidos
CYP1A2, 2D6, 2C9, 3A4 (2008) e Huang et
Cimicifuga racemosa cimicifugicos A e B al. (2010)
L.
Chá verde (Camellia (-)-Epigalocatequina-3-galato CYP2B6, 2C8, 2C19, 2D6, 3A Misaka et al.
sinensis) (2013a, b, c)
Extrato CYP3A
Kramlinger et al.
Menthofuran CYP2A6, 2A13 (2012), Miyazawa
Mentol et al. (2011) e
Yamaguchi et al.
(-)-mentol CYP2A6, 2A13 (2013)

Geniposídeo, extrato CYP3A4 Kang et al. (1997)

Garcinia jasminoides Genipin CYP2C19, A4 Gao et al. (2014)

e Kang et al.
Geniposide CYP3A4 (1997)

Óleo de alho CYP2E1 Gurley et al.

Alho (Allium sativum) (2005) e Zhang et
Não definido CYP1A2 al. (2006)

Retrorsine Vários extratos de plantas CYP3A4 Dai et al. (2010)

Cingi et al. (2013),
CYP3A4 Holmberg et al.
Diidroxibergamotina, bergamotina
(2014), Lee et al.
Toranja (Citrus (1999), Messer et
paradisi) al. (2012) e
Sumo CYP3A4 Tanaka et al.
(2013)

1242
 Tabela 2 Potenciais interações medicamentosas conhecidas de nutracêuticos
Extrato de raiz (comprimido) CYP3A4, 1A2 Barrett (2003),
Gorski et al.
Echinacea purpurea Ácido maslínico, ácido corosólico, (2004) e Gurley et
CYP3A4
ácido ursólico al. (2004)

Cranberry (Vaccinium
Extrato CYP1A2, 2D6 Kim et al. (2011)
macrocarpon)
Cardo mariano CYP3A4, inibição de regulação Mooiman et al.
Silybin, isosilybin (2013)
(Silybum marianum) positiva de PXR
Tomate (Lycopersicon Sunaga et al.
Extrato de suco CYP3A4 (2012)
esculentum)
Pimenta (Capsicum
Sunaga et al.
annuum L. var. Seco CYP3A4 (2012)
Grossum.)
Batata (Solanum Sunaga et al.
Seco CYP1A2, 2D6, 3A4 (2012)
tuberosum L.)
Berinjela (Solanum Sunaga et al.
Seco CYP1A2, 2D6, 3A4 (2012)
melongena L.)
Pimenta doce Sunaga et al.
Seco CYP1A2, 2D6, 3A4 (2012)
(Capsicum annuum)
Sabugueiro preto Langhammer e
Extrato CYP1A2, 2D6, 3A4 Nilsen (2014)
(Sambucus nigra)
Funcho (Foeniculum Langhammer e
Chá CYP1A2, 2D6, 3A4 Nilsen (2014)
vulgare)
Cavalinha (família Langhammer e
Chá CYP1A2, 2D6, 3A4 Nilsen (2014)
Equisetaceae)
Folha de framboesa Langhammer e
Extrato CYP1A2, 2D6, 3A4 Nilsen (2014)
(Rubus idaeus)
Canela
Hasegawa et al.
(Cinnamomum O-metoxi cinamaldeído CYP 1A2, 2E1 (2002)
verum)
Gengibre (Zingiber
Extrato CYP2C9, 2C19, 3A4 Li et al. (2013a, b)
officinale)
Moscadeira (Myristica Kimura et al.
Extrato CYP2C9, 3A4 (2010)
fragrans)
Noz-moscada Kimura et al.
Extrato CYP2C9, 3A4 (2010)
(Myristica genus)
Valeriana (Valeriana Carrasco et al.
Extrato CYP2C8 (2009)
officinalis)
Ajmalicine CYP2D6
Madagascar
(Catharanthus Vindolene CYP2D6, 3A4 Usia et al. (2005)
roseus)
Serpentina CYP2D6, 3A4
África Sulista Bye e Dutton
(Sutherlandia Extrato CYP3A4 (1991) e Mills et
frutescens) al. (2005)

África Sulista Monera et al.

Extrato CYP3A4 (2008)
(Moringa oleifera)

1243
 Tabela 2 Potenciais interações medicamentosas conhecidas de nutracêuticos
Composto-chave ou forma do
Suplemento de ervas Citocromo inibido Referências
produto
África Ocidental
Aframomum
cuspidatum,
Aframomum
melegueta, Harrisonia
abyssinica, Extrato CYP3A4, 3A5, 3A7
Phyllanthus amarus,
Piper guineense),
Lonchocarpus Agbonon et al.
(2010)
sericeus), Lippia
multiflora
África Ocidental
Jatropha curcas
Persea americana
Extrato Inibição de CYP3A4, 3A7
Oxytenanthera
abyssinica Talinum
triangulare
Tanzânia
Cyphostemma Extrato CYP3A4, 3A7
ildebrandtii
Tanzânia Acacia Van den Bout-van
robusta Agauria Extrato CYP2C9, 2C19, 3A4 den Beukel et al.
salicifolia (2008)

Tanzânia
Elaeodendron
Extrato CYP2C9, 3A4
buchananii
Sclerocarya birrea
Hortelã-pimenta Óleo, Mentol, Acetato de mentila, Dresser et al.
Inibição de CYP3A4 (2002)
(Mentha piperita) Palmitato de ascorbil
Gergelim (Sesamum Inibição de CYP1A2, 2C9, Yasuda e Sakaki
Não declarado (2012)
indicum) 2C19, 2D6, 3A4
Cúrcuma (Curcuma Bahramsoltani et
Não declarado Inibição de CYP1A2, 2C9, 3A4 al. (2017)
longa)
Erva de São João
(Hypericum Não declarado Inibição de CYP1A2, 2C9, 3A4 Roby et al. (2000)
perforatum)
Lau e Chang
Ginkgo biloba Extrato Inibição de CYP2B6 (2009) e Zhou et
al. (2014)

Composto-chave ou forma do
Suplemento de ervas Efeito Referências
produto
Alcaçuz (Raiz e Rizoma) Extrato *
Astragalus mebranaceus Extrato *
Centella asiatica Extrato *
Isatis Indigotica Extrato *
Li et al. (2015) e Xu et al.
Lonicera japonica Extrato * (2016)
Rhodiola crenulata Extrato *
Extrato *
Rhubarb (Raiz e Rizoma)
Trans-resveratrol *
Poria cocos Extrato *

1244
 Composto-chave ou forma do
Suplemento de ervas Efeito Referências
produto
Paeonia lactiflora Extrato *
Panax notoginseng Extrato *
Ligusticum chuanxiong Extrato *
Extrato *
Angelicae sinensis
Ligustilida *
Radix rehmanniae Extrato *
Epimedium brevicornum Extrato *
Lycium chinense Extrato *
Radix rehmanniae Extrato *
Epimedium brevicornum Extrato *
Lycium chinense Extrato *
Atractylodes Li et al. (2015) e Xu et al.
Extrato * (2016)
macrocephala
Extrato *
Schisandra chinensis
Schisantherin A *
Paeonia lactiflora Extrato *
Ophiopogon japonicus Extrato *
Polygonum multiflorum Extrato *
Coptis chinensis Extrato *
Berberine hydrochloride *
Artemisia scoparia Extrato *
Trichosanthes kirilowii Extrato *
Silybum marianum Extrato *
Fructus gardeniae Extrato *
Ginsenoside F2,
*
protopanaxadiol
Gurley et al. (2005), Janetzky e
Raiz e Rizoma de Panaxatriol, Rg2, Morreale (1997), Jones e
ginseng pseudoginsenoside F11, Rg1, * Runikis (1987), Li et al.
ginsenodide, Rb3
Extrato *
Piper nigrum Piperidine * Wang et al. (2013a, b)

Também aumentou
Hypericum perforatum Hyperforin Godtel-Armbrust et al. (2007)
CYP2C9, C19, 2E1
Extrato *
Ginkgolida A, Ginkgolida B Gurley et al. (2005) e Zhou et
Ginkgo biloba al. (2014)
Também aumentou CYP2B6, *
3A4
* Também
Piper methysticum Não declarado aumentou Gurley et al. (2008)
CYP2C19
Awortwe et al. (2015), Gorski et
Echinacea purpurea Extrato * Também CYP1A2 al. (2004), Gurley et al. (2005) e
Gurley et al. (2008)

1245
 Composto-chave ou forma do
Suplemento de ervas Efeito Referências
produto
Thymus vulgaris Extrato *
Syzygium aromaticum Extrato *
Kluth et al. (2007)
Curcuma longa Curcumina *
Vitis vinifera Resveratrol *
Extrato *
Hypoxis hemerocallidea Rooperol *
Monera et al. (2008)
Stimasherol *
Sutherlandia frutescens Extrato *
Cyphostemma
Extrato *
hildebrandtii
Agauria salicifolia Extrato *
Elaeodendron Van den Bout-van den Beukel
Extrato *
buchananii et al. (2008)

Sclerocarya birrea Extrato *

Sterculia africana Extrato *
Turraea holstii Extrato *
Pimenta dioica Extrato *
Kluth et al. (2007)
Vitis vinifera Extrato *
Allium sativum Sulfeto Diário * Zhou et al. (2014)

* Ativação do promotor 3A4 do citocromo P450 por mecanismos dependentes de PXR

4. Efeitos cardiovasculares
Atualmente, há uma séria falta de avaliação sistemática dos possíveis efeitos
cardiovasculares dos nutracêuticos e suplementos nutricionais. A toxicidade
simpaticomimética associada à cafeína e/ou Ephedra sp. - (agora proibida em muitos
países) e/ou produtos contendo Yohimbe sp. é agora bem conhecida (Gurley et al. 2015).
Efeitos adversos psiquiátricos também foram associados a esses produtos.

O uso de Citrus aurantium L. (laranja amarga) foi associado a efeitos adversos no sistema
cardiovascular, incluindo angina, hipertensão, taquicardia, extrassístoles ventriculares e
colite isquêmica (Gange et al. 2006; Stohs 2017; Sultan et al. 2006). Os supostos
princípios tóxicos são as aminas estimulantes simpatomiméticas, sinefrina e octopamina
(Stohs 2017). O uso em combinação com outros simpaticomiméticos pode exacerbar
esses efeitos e supostamente resultou em angina, infarto agudo do miocárdio, acidente
vascular cerebral isquêmico e síncope induzida por exercício. As comorbidades estão
frequentemente presentes nos relatos de experiências adversas em humanos, tornando
as conclusões definitivas sobre a causalidade menos absoluta (Stohs 2017). Tal como

1246
acontece com outras substâncias simpaticomiméticas, a psicose da laranja amarga
também foi descrita (Retamero et al. 2011).

Os produtos à base de Ginkgo biloba têm ocasionado arritmias ventriculares (Cianfrocca

et al. 2002). O uso de Cimicifuga racemosa (cohosh preto) foi associado a bloqueio
cardíaco reversível com bradicardia e vasculite cutânea em humanos (McKenzie e
Rahman 2010).

Hipertensão e efeitos hipocalêmicos no coração e no músculo esquelético são efeitos

clássicos bem conhecidos do ácido glicirrético derivado de Glycyrrhiza glabra (alcaçuz).
Produtos da árvore casta (Vitex agnus castus) são conhecidos por causar espasmo
arterial (Daniele et al. 2005).

5. Efeitos alérgicos e cutâneos não associados à hepatotoxicidade

O uso de Citrus aurantium L. (laranja amarga) foi associado ao broncoespasmo alérgico
(Felix et al. 2013). A hipersensibilidade mediada por IgE e outros tipos de
hipersensibilidade estão supostamente associados à imunoestimulação por produtos
contendo Echinacea sp. (Mullins e Heddle 2002). As reações alérgicas à geleia real de
abelha-doméstica e à própolis são bem conhecidas. O pseudolinfoma cutâneo foi
associado ao uso de Cimicifuga racemosa (cohosh preto) (Meyer et al. 2007).

Os produtos que contêm canela são causas bem conhecidas de efeitos adversos na pele
e na mucosa da cavidade oral, incluindo sensibilização por contato; estomatite com
inchaço e queimação dos lábios, língua e bochechas; exacerbação da rosácea; e placas
hiperceratóticas cobrindo a maior parte da língua dorsal e lateral e envolvendo a mucosa
bucal, leucoplasia alérgica da mucosa oral e carcinoma de células escamosas da língua
(Campbell et al. 2008; Cohen e Bhattacharyya 2000; Mihail 1992; Pilapil 1989; Siqueira et
al . 2009; Tremblay e Avon 2008; Westra et al. 1998).

Produtos de soja (Glycine max) são uma causa bem conhecida de reações alérgicas
graves em humanos, assim como os produtos que contêm ginseng.

Os produtos da árvore casta (Vitex agnus castus) têm sido associados a reações
alérgicas com prurido, eritema, sintomas gastrointestinais e inflamação facial em forma de
acne (Daniele et al. 2005). Dor de cabeça, ganho de peso e gastroenterite persistente
também ocorreram em humanos.

Uvas (Vitis vinifera) são uma causa suspeita de reações alérgicas, incluindo síndrome
oral, urticária, angioedema, hipotensão e dificuldade respiratória, anafilaxia e anafilaxia

1247
induzida por exercícios. Os principais alérgenos nas uvas são as endocitinases A e B,
uma proteína de transferência de lipídios e uma proteína semelhante à taumatina.

6. Efeitos adversos no sistema de coagulação

O consumo de folhas e extratos de Ginkgo biloba foi associado a eventos hemorrágicos,
incluindo hematoma subdural (Bebbington et al. 2005; Castellote Varona e Atienza
Morales 2005; Meisel et al. 2003; Miller e Freeman 2002; Pedroso et al. 2011). Os efeitos
são supostamente associados à atividade antiplaquetária dos ginkgosídeos, sendo o
ginkgolídeo B o principal terpenóide responsável por esses efeitos. A ingestão de produtos
Ginkgo biloba com fármacos que atuam na coagulação (aspirina, ibuprofeno e varfarina)
parece exacerbar esses efeitos anticoagulantes dessa planta. Alimentos contendo soja e
suas isoflavonas eram responsáveis pelo sangramento quando combinados com o
estradiol.

7. Efeitos adversos no sistema nervoso central

A indução associada ao Ginkgo biloba do catabolismo CYP2C19 da fenitoína e do ácido
valpróico foi associada a crises convulsivas fatais em humanos (Kupiec e Raj 2005). A
encefalopatia hipocalêmica é um efeito clássico da toxicidade do alcaçuz. Harpagophytum
procumbens (garra do diabo) é reivindicado como um inibidor da ciclo-oxigenase 2
(Grahame e Robinson 1981). Além dos previsíveis efeitos adversos no intestino, os
produtos que contêm este material têm sido associados a latejantes cefaleias frontais,
zumbido, anorexia e perda do paladar dos alimentos. Os produtos com Panax ginseng
(ginseng) foram associados a efeitos estimulantes, como nervosismo e tremor e episódios
maníacos (Gonzalvez-Seijo et al. 1995; Vasquez e Aguera-Ortiz 2002).

8. Efeitos no sistema musculoesquelético

A miopatia com astenia grave e rabdomiólise em humanos foi associada ao uso de
Cimicifuga racemosa (black cohosh) (Minciullo et al. 2006). A rabdomiólise secundária
também é um efeito observado das substâncias simpaticomiméticas, e o risco desse
efeito deve ser sempre reconhecido em casos de sobredosagem com essas substâncias.
Rabdomiólise e paralisia hipocalêmica são efeitos clássicos que ocorrem com a toxicidade
do alcaçuz (Sundaram e Swaminathan 1981).

1248
9. Efeitos do sistema endócrino e reprodutivo
Os efeitos estrogênicos das isoflavonas da soja são bem conhecidos. Os efeitos
colaterais associados foram detectados em ambos os sexos biológicos e incluem telarca
precoce relacionada à atividade pseudo-hormonal; miomas uterinos; carcinossarcoma
mülleriano ureteral associado a endometriose, ginecomastia, hipogonadismo e disfunção
erétil; câncer de intestino; câncer de testículo; e distúrbios reprodutivos (Balk et al. 2005;
Dinsdale e Ward 2010; Kwack et al. 2009; Martinez e Lewis 2008; Nagata et al. 2009; Nan
et al. 2005; Noel et al. 2006). O hipotireoidismo associado à ingestão excessiva de iodo foi
associado ao consumo de leite de soja (Bell e Ovalle 2001; Crawford et al. 2010). A
hipernatremia fatal também foi associada ao consumo excessivo de leite de soja
(Furukawa et al. 2011). A alcalose hipoclorêmica ocorreu em bebês alimentados com
substitutos do leite à base de soja (Linshaw et al. 1980).

O ácido glicirrético no alcaçuz é um inibidor da 11-β-hidroxiesteróide desidrogenase tipo 2,

a enzima necessária para inativar o cortisol antes de se ligar ao receptor de aldosterona
dentro das células principais (Francini-Pesenti et al. 2008; Hukkanen et al. 2009; Russo et
al. 2000; Sundaram e Swaminathan 1981). O efeito líquido é um efeito semelhante à
aldosterona que resulta na supressão eixo renina/angiotensina/aldosterona, expansão do
volume sanguíneo, hipertensão, encefalopatia hipertensiva, hipocalemia e alcalose
metabólica. Os produtos da árvore casta (Vitex agnus castus) têm sido associados a
distúrbios ou sangramento intermenstrual (Daniele et al. 2005; Loch et al. 2000;
Prilepskaya et al. 2006; Propping et al. 1991).

10. Observações finais e orientações futuras

Os produtos e suplementos nutracêuticos botânicos não devem ser considerados
clinicamente e toxicologicamente inertes, independentemente de a substância ter ou não
uma longa história de uso alimentar ou cultural. Embora, felizmente, as reações graves
pareçam ser um tanto incomuns, fatalidades e eventos adversos importantes foram
registrados. No entanto, o que é extremamente claro é que geralmente há um corpo muito
limitado de dados de farmacovigilância pré e pós-comercialização sobre muitos produtos
botânicos comuns. Dado este contexto, é possível que muitos problemas atualmente não
sejam reconhecidos e a carga dos efeitos adversos possa ser substancialmente
subestimada. Esta situação provavelmente continuará até que uma mudança em direção
a um regime de aprovação regulatória pré-comercialização com vigilância farmacêutica

1249
pós-comercialização obrigatória seja aplicada em substâncias de alto risco e/ou com
poucos dados.

Referências
Aaronov D, Tasher D, Levine A et al (2008) Natural history of food allergy in infants and children in Israel. Ann Allergy
Asthma Immunol 101:637–640
Abdel-Zaher AO, Farghaly HSM, El-Refaiy AEM et al (2017) Protective effect of the standardized extract of ginkgo
biloba (EGB761) against hypertension with hypercholesterolemia-induced renal injury in rats: insights in the underlying
mechanisms. Biomed Pharmacother 95:944–955
Agbonon A, Eklu-Gadegbeku K, Aklikokou K et al (2010) In vitro inhibitory effect of west african medicinal and food
plants on human cytochrome P450 3A subfamily. J Ethnopharmacol 128:390–394
Agollo MC, Miszputen SJ, Diament J (2014) Hypericum perforatuminduced hepatotoxicity with possible association
with copaiba (Copaifera langsdorffii Desf): case report. Einstein 12:355–357
Albassam AA, Mohamed ME, Frye RF (2015) Inhibitory effect of six herbal extracts on CYP2C8 enzyme activity in
human liver microsomes. Xenobiotica 45:406–412
Aleksunes LM, Klaassen CD (2012) Coordinated regulation of hepatic phase i and ii drug-metabolizing genes and
transporters using AhR-, CAR--, PPARα-, and Nrf2-null mice. Drug Metab Dispos 40:1366–1379
Ali N, Auerbach HE (2017) New-onset acute thrombocytopenia in hospitalized patients: pathophysiology and
diagnostic approach. J Community Hosp Intern Med Perspect 7:157–167
Anderson IB, Mullen WH, Meeker JE et al (1996) Pennyroyal toxicity: measurement of toxic metabolite levels in two
cases and review of the literature. Ann Intern Med 124:726–734
Appiah S, Revitt M, Jones H et al (2017) Antiinflammatory and hepatoprotective medicinal herbs as potential
substitutes for bear bile. Int Rev Neurobiol 135:149–180
Armanini D, Lewicka S, Pratesi C et al (1996) Further studies on the mechanism of the mineralocorticoid action of
licorice in humans. J Endocrinol Investig 19:624–629
Avorn J, Monane M, Gurwitz JH et al (1994) Reduction of bacteriuria and pyuria after ingestion of cranberry juice.
JAMA 271:751–754
Awortwe C, Manda VK, Avonto C et al (2015) Echinacea purpurea up-regulates CYP1A2, CYP3A4 and MDR1 gene
expression by activation of pregnane X receptor pathway. Xenobiotica 45:218–229
Baes M, Gulick T, Choi HS et al (1994) A new orphan member of the nuclear hormone receptor superfamily that
interacts with a subset of retinoic acid response elements. Mol Cell Biol 14:1544–1552
Bagheri H, Broué P, Lacroix I et al (1998) Fulminant hepatic failure after herbal medicine ingestion in children. Therapie
53:77–83
Bahramsoltani R, Rahimi R, Farzaei MH (2017) Pharmacokinetic interactions of curcuminoids with conventional drugs:
a review. J Ethnopharmacol 209:1–12
Bajad S, Bedi KL, Singla AK et al (2001) Antidiarrhoeal activity of piperine in mice. Planta Med 67:284–287
Bakerink JA, Gospe SM Jr, Dimand RJ et al (1996) Multiple organ failure after ingestion of pennyroyal oil from herbal
tea in two infants. Pediatrics 98:944–947
Balk E, Chung M, Chew P et al (2005) Effects of soy on health outcomes. Evid Rep Technol Assess (Summ) 126:1–8
Barrett B (2003) Echinacea: a safety review. HerbalGram 57:36–39 Bebbington A, Kulkarni R, Roberts P (2005)
Ginkgo biloba: persistent bleeding after total hip arthroplasty caused by herbal selfmedication. J Arthroplast 20:125–126
Bell DSH, Ovalle F (2001) Use of soy protein supplement and resultant need for increased dose of levothyroxine.
Endocr Pract 7:193–194
Benichou C (1990) Standardization of definitions and criteria of causality assessment of adverse drug reactions. Drug-
induced liver disorders: report of an international consensus meeting. Int J Clin Pharmacol Ther Toxicol 28:317–322
Benichou C, Danan G, Flahault A (1993) Causality assessment of adverse reactions to drugs—II. An original model for
validation of drug causality assessment methods: case reports with positive rechallenge. J Clin Epidemiol 46:1331–1336
Bessone F, Hernandez N, Lucena MI et al (2016) The latin american DILI registry experience: a successful ongoing
collaborative strategic initiative. Int J Mol Sci 17:313
Bhopal JS (2001) St John’s wort-induced sexual dysfunction. Can J Psychiatr 46:456–457
Bilgi N, Bell K, Ananthakrishnan AN et al (2010) Imatinib and Panax ginseng: a potential interaction resulting in liver
toxicity. Ann Pharmacother 44:926–928
Borrelli F, Izzo AA (2009) Herb-drug interactions with St John’s wort (Hypericum perforatum): an update on clinical
observations. AAPS J 11:710–727
Bosisio E, Giavarini F, Dell’Agli M et al (2004) Analysis by highperformance liquid chromatography of teucrin A in
beverages flavoured with an extract of Teucrium chamaedrys L. Food Addit Contam 21:407–414
Brewer CT, Chen T (2016) PXR variants: the impact on drug metabolism and therapeutic responses. Acta Pharm Sin B
6:441–449
Brown TM (2000) Acute St. John’s wort toxicity. Am J Emerg Med 18:231–232
Bruno JJ, Ellis JJ (2005) Herbal use among us elderly: 2002 national health interview survey. Ann Pharmacother
39:643–648
1250
 Bye SN, Dutton MF (1991) The inappropriate use of traditional medicines in south africa. J Ethnopharmacol 34:253–
259
Campbell TM, Neems R, Moore J (2008) Case report: severe exacerbation of rosacea induced by cinnamon
supplements. J Drugs Dermatol 7:586–587
Canter PH, Ernst E (2004) Herbal supplement use by persons aged over 50 years in britain: frequently used herbs,
concomitant use of herbs, nutritional supplements and prescription drugs, rate of informing doctors and potential for
negative interactions. Drugs Aging 21:597–605
Carrasco MS, Vallejo JR, Pardo-de-Santayana M et al (2009) Interactions of Valeriana officinalis L. and Passiflora
incarnata L. in a patient treated with Lorazepam. Phytother Res 23:1795–1796
Castellote Varona FJ, Atienza Morales MP (2005) Ginkgo biloba and cerebral hemorrhage. An Med Interna 22:199
Chaabane M, Bidat E, Chevallier B (2010) A new case of food proteininduced enterocolitis syndrome. Arch Pediatr
17:502–506
Chalasani N, Fontana RJ, Bonkovsky HL et al (2008) Drug induced liver injury network. Causes, clinical features, and
outcomes from a prospective study of drug-induced liver injury in the united states. Gastroenterology 135:1924–1934
Chan TY, Tam HP, Lai CK et al (2005) A multidisciplinary approach to the toxicologic problems associated with the use
of herbal medicines. Ther Drug Monit 27:53–57
Chanet A, Milenkovic D, Deval C et al (2012) Naringin, the major grapefruit flavonoid, specifically affects
atherosclerosis development in diet-induced hypercholesterolemia in mice. J Nutr Biochem 23:469–477
Chen T (2008) Nuclear receptor drug discovery. Curr Opin Chem Biol 12:418–426
Chen D, Klesmer J, Giovanniello A et al (2002) Mental status changes in an alcohol abuser taking valerian and Gingko
biloba. Am J Addict 11:75–77
Chen Y, Ferguson SS, Negishi M et al (2004) Induction of human CYP2C9 by rifampicin, hyperforin, and phenobarbital
is mediated by the pregnane x receptor. J Pharmacol Exp Ther 308:495–501
Chen M, Suzuki A, Borlak J et al (2015) Drug-induced liver injury: interactions between drug properties and host
factors. J Hepatol 63:503–514
Chen M, Li L, Zhong D et al (2016) 9-glutathionyl-6,7-dihydro-1-hydroxymethyl-5hpyrrolizine is the major pyrrolic
glutathione conjugate of retronecine-type pyrrolizidine alkaloids in liver microsomes and in rats. Chem Res Toxicol
29:180–189
Cherian MT, Chai SC, Chen T (2015) Small-molecule modulators of the constitutive androstane receptor. Expert Opin
Drug Metab Toxicol 11:1099–1114
Chiu NT, Tomlinson Guns ES, Adomat H et al (2014) Identification of human cytochrome P450 enzymes involved in the
hepatic and intestinal biotransformation of 20(S)-protopanaxadiol. Biopharm Drug Dispos 35:104–118
Cianfrocca C, Pelliccia F, Auruti A et al (2002) Ginkgo biloba-induced frequent ventricular arrhythmia. Ital Heart J
3:689–691
Ciganda C, Laborde A (2003) Herbal infusions used for induced abortion. J Toxicol Clin Toxicol 41:235–239
Cingi C, Toros SZ, Gurbuz MK et al (2013) Effect of grapefruit juice on bioavailability of montelukast. Laryngoscope
123:816–819
Cirmi S, Maugeri A, Ferlazzo N et al (2017) Anticancer potential of citrus juices and their extracts: a systematic review
of both preclinical and clinical studies. Front Pharmacol 8:420
Clare KE, Miller MH, Dillon JF (2017) Genetic factors influencing drug-induced liver injury: do they have a role in
prevention and diagnosis? Curr Hepatol Rep 16:258–264
Coelho C, Tyler R, Ji H et al (2016) Survey on the effectiveness of dietary supplements to treat tinnitus. Am J Audiol
25:184–205
Cohen DM, Bhattacharyya I (2000) Cinnamon-induced oral erythema multiformelike sensitivity reaction. J Am Dent
Assoc 131:929–934
Cohen DL, Del Toro Y (2008) A case of valerian-associated hepatotoxicity. J Clin Gastroenterol 42:961–962
Corey R, Werner KT, Singer A et al (2016) Acute liver failure associated with garcinia cambogia use. Ann Hepatol
15:123–126
Crawford BA, Cowell CT, Emder PJ et al (2010) Iodine toxicity from soy milk and seaweed ingestion is associated with
serious thyroid dysfunction. Med J Aust 193:413–415
Crean AM, Abdel-Rahman SE, Greenwood JP (2009) A sweet tooth as the root cause of cardiac arrest. Can J Cardiol
25:e357–e358
Cuzzolin L, Benoni G (2009) Attitudes and knowledge toward natural products safety in the pharmacy setting: an
Italian study. Phytother Res 23:1018–1023
Dag M, Ozturk Z, Aydnl M et al (2014) Postpartum hepatotoxicity due to herbal medicine teucrium polium. Ann Saudi
Med 34:541–543
Dai J, Zhang F, Zheng J (2010) Retrorsine, but not monocrotaline, is a mechanism-based inactivator of P450 3A4.
Chem Biol Interact 183:49–56
Danan G, Benichou C (1993) Causality assessment of adverse reactions to drugs—I. A novel method based on the
conclusions of international consensus meetings: application to drug-induced liver injuries. J Clin Epidemiol 46:1323–
1330
Danan G, Teschke R (2015) Rucam in drug and herb induced liver injury: the update. Int J Mol Sci 17:14

1251
 Daniele C, Thompson Coon J et al (2005) Vitex agnus castus: a systematic review of adverse events. Drug Saf
28:319–332
De la Garza AL, Etxeberria U, Haslberger A et al (2015) Helichrysum and grapefruit extracts boost weight loss in
overweight rats reducing inflammation. J Med Food 18:890–898
De Maat MM, Hoetelmans RM, Math RA, van Gorp EC et al (2001) Drug interaction between St John’s wort and
nevirapine. AIDS 15:420–421
De Souza Grinevicius VM, Kviecinski MR, Santos Mota NS et al (2016) Piper nigrum ethanolic extract rich in
piperamides causes ROS overproduction, oxidative damage in DNA leading to cell cycle arrest and apoptosis in cancer
cells. J Ethnopharmacol 189:139–147
Deferme S, Kamuhabwa A, Nshimo C et al (2003) Screening of tanzanian plant extracts for their potential inhibitory
effect on P-glycoprotein mediated efflux. Phytother Res 17:459–464
Den Braver MW, den Braver-Sewradj SP, Vermeulen NP et al (2016) Characterization of cytochrome P450 isoforms
involved in sequential two-step bioactivation of diclofenac to reactive P-benzoquinone imines. Toxicol Lett 253:46–54
Dergal JM, Gold JL, Laxer DA et al (2002) Potential interactions between herbal medicines and conventional drug
therapies used by older adults attending a memory clinic. Drugs Aging 19:879–886
Dinsdale EC, Ward WE (2010) Early exposure to soy isoflavones and effects on reproductive health: a review of
human and animal studies. Nutrients 2:1156–1187
Dittmar FW, Bohnert KJ, Peeters M et al (1992) Syndrom, Behandlung mit einem Phytopharmakon. TW Gynakol 5:60–
68
Domínguez Jiménez JL, Pleguezuelo Navarro M et al (2007) Hepatotoxicity associated with Hypericum (St. John’s
wort). Gastroenterol Hepatol 30:54–55
Dona M, Dell’Aica I, Calabrese F et al (2003) Neutrophil restraint by green tea: inhibition of inflammation, associated
angiogenesis, and pulmonary fibrosis. J Immunol 170:4335–4341
Dresser GK, Wacher V, Wong S et al (2002) Evaluation of peppermint oil and ascorbyl palmitate as inhibitors of
cytochrome P450 3A4 activity in vitro and in vivo. Clin Pharmacol Ther 72:247–255
Druckova A, Mernaugh RL, Ham AJ et al (2007) Identification of the protein targets of the reactive metabolite of teucrin
a in vivo in the rat. Chem Res Toxicol 20:1393–1408
Emoto Y, Yoshizawa K, Kinoshita Y et al (2014) Green tea extractinduced acute hepatotoxicity in rats. J Toxicol Pathol
27:163–174
Enbom ET, Le MD, Oesterich L et al (2014) Mechanism of hepatotoxicity due to black cohosh (Cimicifuga racemosa):
histological, immunohistochemical and electron microscopy analysis of two liver biopsies with clinical correlation. Exp
Mol Pathol 96:279–283
Evans JR (2013) Ginkgo biloba extract for age-related macular degeneration. Cochrane Database Syst Rev
31:CD001775
Fau D, Lekehal M, Farrell G et al (1997) Diterpenoids from germander, an herbal medicine, induce apoptosis in
isolated rat hepatocytes. Gastroenterology 113:1334–1346
Federico A, Tiso A, Loguercio C (2007) A case of hepatotoxicity caused by green tea. Free Radic Biol Med 43:474
Felix R, Martorell C, Martorell A et al (2013) Induced bronchospasm after handling of orange flavedo (zest). J Allergy
Clin Immunol 131:1423–1425
Fisher CD, Augustine LM, Maher JM et al (2007) Induction of drugmetabolizing enzymes by garlic and allyl sulfide
compounds via activation of constitutive androstane receptor and nuclear factor E2-related factor 2. Drug Metab Dispos
35:995–1000
Fisher K, Vuppalanchi R, Saxena R (2015) Drug-induced liver injury. Arch Pathol Lab Med 139:876–887
Fong TL, Klontz KC, Canas-Coto A et al (2010) Hepatotoxicity due to hydroxycut: a case series. Am J Gastroenterol
105:1561–1566
Foti RS, Pearson JT, Rock DA et al (2009) In vitro inhibition of multiple cytochrome P450 isoforms by xanthone
derivatives from mangosteen extract. Drug Metab Dispos 37:1848–1855
Francini-Pesenti F, Puato M, Piccoli A et al (2008) Liquorice-induced hypokalaemia and water retention in the absence
of hypertension. Phytother Res 22:563–565
Franco DL, Kale S, Lam-Himlin DM et al (2017) Black cohosh hepatotoxicity with autoimmune hepatitis presentation.
Case Rep Gastroenterol 11:23–28
Furukawa S, Takaya A, Nakagawa T et al (2011) Fatal hypernatremia due to drinking a large quantity of shoyu
(Japanese soy sauce). J Forensic Leg Med 18:91–92
Gagnier JJ, van Tulder MW, Berman B et al (2007) Herbal medicine for low back pain: a Cochrane review. Spine
32:82–92
Galati G, Lin A, Sultan AM et al (2006) Cellular and in vivo hepatoxicity caused by green tea phenolic acids and
catechins. Free Radic Biol Med 40:570–580
Ganey PE, Luyendyk JP, Maddox JF et al (2004) Adverse hepatic drug reactions: inflammatory episodes as
consequence and contributor. Chem Biol Interact 150:35–51
Ganey PE, Luyendyk JP, Newport SW et al (2007) Role of the coagulation system in acetaminophen-induced
hepatotoxicity in mice. Hepatology 46:1177–1186
Gange CA, Madias C, Felix-Getzik EM et al (2006) Variant angina associated with bitter orange in a dietary
supplement. Mayo Clin Proc 81:545–548

1252
 Gao LN, Zhang Y, Cui YL et al (2014) Evaluation of genipin on human cytochrome P450 isoenzymes and P-
glycoprotein in vitro. Fitoterapia 98:130–136
Gardner-Stephen D, Heydel JM, Goyal A et al (2004) Human PXR variants and their differential effects on the
regulation of human UDP-glucuronosyltransferase gene expression. Drug Metab Dispos 32:340–347
Gentry-Maharaj A, Karpinskyj C, Glazer C et al (2015) Use and perceived efficacy of complementary and alternative
medicines after discontinuation of hormone therapy: a nested United Kingdom collaborative trial of ovarian cancer
screening cohort study. Menopause 22:384–390
Ghannam M, Mansour S, Nabulsi A et al (2017) Anticonvulsant hypersensitivity syndrome after phenytoin
administration in an adolescent patient: a case report and review of literature. Clin Mol Allergy 15:14
Glintborg B, Andersen SE, Dalhoff K (2005) Drug-drug interactions among recently hospitalised patients—frequent but
mostly clinically insignificant. Eur J Clin Pharmacol 61:675–681
Gloro R, Hourmand-Ollivier I, Mosquet B et al (2005) Fulminant hepatitis during self-medication with hydroalcoholic
extract of green tea. Eur J Gastroenterol Hepatol 17:1135–1137
Godtel-Armbrust U, Metzger A, Kroll U et al (2007) Variability in PXR-mediated induction of CYP3A4 by commercial
preparations and dry extracts of St. John’s wort. Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol 375:377–382
Goksu E, Kilic T, Yilmaz D (2012) Hepatitis: a herbal remedy germander. Clin Toxicol 50:158
Gong H, Singh SV, Singh SP et al (2006) Orphan nuclear receptor pregnane X receptor sensitizes oxidative stress
responses in transgenic mice and cancerous cells. Mol Endocrinol 20:279–290
Gonzalvez-Seijo JC, Ramos YM, Lastra I (1995) Manic episode and ginseng: report of a possible case. J Clin
Psychopharmacol 15:447–448
Gordon P, Khojasteh SC (2015) A decades-long investigation of acute metabolism-based hepatotoxicity by herbal
constituents: a case study of pennyroyal oil. Drug Metab Rev 47:12–20
Gordon WP, Forte AJ, McMurtry RJ et al (1982) Hepatotoxicity and pulmonary toxicity of pennyroyal oil and its
constituent terpenes in the mouse. Toxicol Appl Pharmacol 65:413–424
Gordon WP, Huitric AC, Seth CL et al (1987) The metabolism of the abortifacient terpene, (R)-(+)-pulegone, to a
proximate toxin, menthofuran. Drug Metab Dispos 15:589–594
Gorski JC, Huang S, Pinto A et al (2004) The effect of echinacea (Echinacea purpurea root) on cytochrome P450
activity in vivo. Clin Pharmacol Ther 75:89–100
Grahame R, Robinson BV (1981) Devils’s claw (Harpagophytum procumbens): pharmacological and clinical studies.
Ann Rheum Dis 40:632
Guesmi F, Prasad S, Tyagi AK et al (2017) Antinflammatory and anticancer effects of terpenes from oily fractions of
teucruim alopecurus, blocker of IκBα e AMPK. Esses dadosBα kinase, through downregulation of nf-kappab activation, potentiation of apoptosis
and suppression of NF-κBα e AMPK. Esses dadosB-regulated gene expression. Biomed Pharmacother 95:1876–1885
Gum SI, Jo SJ, Ahn SH et al (2007) The potent protective effect of wild ginseng (Panax ginseng C.A. Meyer) against
benzo[α]pyreneinduced toxicity through metabolic regulation of CYP1A1 and GSTs. J Ethnopharmacol 112:568–576
Gurley BJ, Gardner SF, Hubbard MA et al (2002) Cytochrome P450 phenotypic ratios for predicting herb-drug
interactions in humans. Clin Pharmacol Ther 72:276–287
Gurley BJ, Gardner SF, Hubbard MA et al (2004) In vivo assessment of botanical supplementation on human
cytochrome P450 phenotypes: Citrus aurantium, Echinacea purpurea, milk thistle, and saw palmetto. Clin Pharmacol
Ther 76:428–440
Gurley BJ, Gardner SF, Hubbard MA et al (2005) Clinical assessment of effects of botanical supplementation on
cytochrome P450 phenotypes in the elderly: St John’s wort, garlic oil, panax ginseng and ginkgo biloba. Drugs Aging
22:525–539
Gurley BJ, Swain A, Hubbard MA et al (2008) Clinical assessment of CYP2D6-mediated herb–drug interactions in
humans: effects of milk thistle, black cohosh, goldenseal, kava kava, St. John’s wort, and Echinacea. Mol Nutr Food Res
52:755–763
Gurley BJ, Steelman SC, Thomas SL (2015) Multi-ingredient, caffeine containing dietary supplements: history, safety,
and efficacy. Clin Ther 37(2):275–301
Haller CA, Benowitz NL, Jacob P 3rd (2005) Hemodynamic effects of ephedra-free weight-loss supplements in
humans. Am J Med 118:998–1003
Haller CA, Kearney T, Bent S et al (2008) Dietary supplement adverse effects: report of a one-year poison center
surveillance project. J Med Toxicol 4:84–92
Haqqi TM, Anthony DD, Gupta S et al (1999) Prevention of collageninduced arthritis in mice by a polyphenolic fraction
from green tea. Proc Natl Acad Sci USA 96:4524–4529
Hardeman E, Van Overbeke L, Ilegems S, Ferrante M (2008) Acute hepatitis induced by greater celandine
(Chelidonium majus). Acta Gastroenterol Belg 71:281–282
Hasegawa A, Yoshino M, Nakamura H et al (2002) Identification of inhibitory component in cinnamon—O-
methoxycinnamaldehyde inhibits CYP1A2 and CYP2E1. Drug Metab Pharmacokinet 17:229–236
Hayashi PH (2016) Drug-induced liver injury network causality assessment: criteria and experience in the United
States. Int J Mol Sci 17:201
He YQ, Yang L, Liu HX et al (2010) Glucuronidation, a new metabolic pathway for pyrrolizidine alkaloids. Chem Res
Toxicol 23:591–599
He X, Xia Q, Ma L et al (2016) 7-cysteine-pyrrole conjugate: a new potential DNA reactive metabolite of pyrrolizidine
alkaloids. J Environ Sci Health C Environ Carcinog Ecotoxicol Rev 34:57–76
1253
 Herrera S, Bruguera M (2008) Hepatotoxicity induced by herbs and medicines used to induce weight loss.
Gastroenterol Hepatol 31:447–453
Higashino S, Sasaki Y, Giddings JC et al (2014) Crocetin, a carotenoid from gardenia jasminoides ellis, protects
against hypertension and cerebral thrombogenesis in stroke-prone spontaneously hypertensive rats. Phytother Res
28:1315–1319
Holmberg MT, Tornio A, Neuvonen M et al (2014) Grapefruit juice inhibits the metabolic activation of clopidogrel. Clin
Pharmacol Ther 95:307–313
Holmes RO, Tavee J (2008) Vasospasm and stroke attributable to ephedra-free Xenadrine: case report. Mil Med
173:708–710
Honkakoski P, Zelko I, Sueyoshi T et al (1998) The nuclear orphan receptor CAR-retinoid X receptor heterodimer
activates the phenobarbital-responsive enhancer module of the CYP2B gene. Mol Cell Biol 18:5652–5658
Hoshino M, Ikarashi N, Tsukui M et al (2014) Menthol reduces the anticoagulant effect of warfarin by inducing
cytochrome P450 2C expression. Eur J Pharm Sci 56:92–101
Hoskyn J, Guin JD (2005) Contact allergy to cinnamal in a patient with oral lichen planus. Contact Dermatitis 52:160–
161
Hu Z, Yang X, Ho PC et al (2005) Herb-drug interactions: a literature review. Drugs 65:1239–1282
Huang W, Zhang J, Chua SS et al (2003) Induction of bilirubin clearance by the constitutive androstane receptor
(CAR). Proc Natl Acad Sci USA 100:4156–4161
Huang Y, Jiang B, Nuntanakorn P et al (2010) Fukinolic acid derivatives and triterpene glycosides from black cohosh
inhibit CYP isozymes, but are not cytotoxic to HEP-G2 cells in vitro. Curr Drug Saf 5:118–124
Hukkanen J, Ukkola O, Savolainen MJ (2009) Effects of low-dose liquorice alone or in combination with
hydrochlorothiazide on the plasma potassium in healthy volunteers. Blood Press 18:192–195
Ingraffea A, Donohue K, Wilkel C et al (2007) Cutaneous vasculitis in two patients taking an herbal supplement
containing black cohosh. J Am Acad Dermatol 56:S124–S126
Ioannides C, Lewis DF (2004) Cytochromes P450 in the bioactivation of chemicals. Curr Top Med Chem 4:1767–1788
Irefin S, Sprung J (2000) A possible cause of cardiovascular collapse during anesthesia: long-term use of St John’s
Wort. J Clin Anesth 12:498–499
Jacobsson I, Jönsson AK, Gerdén B et al (2009) Spontaneously reported adverse reactions in association with
complementary and alternative medicine substances in Sweden. Pharmacoepidemiol Drug Saf 18:1039–1047
Janetzky K, Morreale A (1997) Probably interaction between warfarin and ginseng. Am J Health Syst Pharm 54:692–
693
Jaradat NA, Ayesh OI, Anderson C (2016) Ethnopharmacological survey about medicinal plants utilized by herbalists
and traditional practitioner healers for treatments of diarrhea in the west bank/palestine. J Ethnopharmacol 182:57–66
Jerome SV, Hughes TF, Friesner RA (2016) Successful application of the DBLOC method to the hydroxylation of
camphor by cytochrome P450. Protein Sci 25:277–285
Jones BD, Runikis AM (1987) Interactions of Ginseng with phenelzine. J Clin Psychopharmacol 7:201–202
Kalogeromitros DC, Makris MP, Gregoriou SG et al (2005) Grape anaphylaxis: a study of 11 adult onset cases. Allergy
Asthma Proc 26:53–58
Kanda T, Yokosuka O, Okada O et al (2003) Severe hepatotoxicity associated with Chinese diet product ‘Onshidou-
Genbi-Kounou’. J Gastroenterol Hepatol 18:354–355
Kang JJ, Wang HW, Liu TY et al (1997) Modulation of cytochrome P-450-dependent monooxygenases, glutathione
and glutathione s-transferase in rat liver by geniposide from gardenia jasminoides. Food Chem Toxicol 35:957–965
Karalapillai DC, Bellomo R (2007) Convulsions associated with an overdose of St John’s wort. Med J Aust 186:213–
214
Kawamoto T, Sueyoshi T, Zelko I et al (1999) Phenobarbital-responsive nuclear translocation of the receptor CAR in
induction of the CYP2b gene. Mol Cell Biol 19:6318–6322
Khawaja IS, Marotta RF, Lippmann S (1999) Herbal medicines as a factor in delirium. Psychiatr Serv 50:969–970
Khojasteh SC, Hartley DP, Ford KA et al (2012) Characterization of rat liver proteins adducted by reactive metabolites
of menthofuran. Chem Res Toxicol 25:2301–2309
Khojasteh-Bakht SC, Chen W, Koenigs LL et al (1999) Metabolism of (R)-(+)-pulegone and (R)-(+)-menthofuran by
human liver cytochrome P-450s: evidence for formation of a furan epoxide. Drug Metab Dispos 27:574–580
Kim E, Sy-Cordero A, Graf TN et al (2011) Isolation and identification of intestinal CYP3A inhibitors from cranberry
(Vaccinium macrocarpon) using human intestinal microsomes. Planta Med 77:265–270
Kim HJ, Kim H, Ahn JH et al (2015) Liver injury induced by herbal extracts containing mistletoe and kudzu. J Altern
Complement Med 21:180–185
Kimura Y, Ito H, Hatano T (2010) Effects of mace and nutmeg on human cytochrome P450 3A4 and 2C9 activity. Biol
Pharm Bull 33:1977–1982
Kinoshita H, Okabayashi M, Kaneko M et al (2009) Shakuyaku-kanzoto induces pseudoaldosteronism characterized
by hypokalemia, rhabdomyolysis, metabolic alkalosis with respiratory compensation, and increased urinary cortisol
levels. J Altern Complement Med 15:439–443
Kishida T, Onozato T, Kanazawa T et al (2012) Increase in covalent binding of 5-hydroxydiclofenac to hepatic tissues in
rats co-treated with lipopolysaccharide and diclofenac: involvement in the onset of diclofenac-induced idiosyncratic
hepatotoxicity. J Toxicol Sci 37:1143–1156
1254
 Kliewer SA, Moore JT, Wade L et al (1998) An orphan nuclear receptor activated by pregnanes defines a novel steroid
signaling pathway. Cell 92:73–82
Kluth D, Banning A, Paur I et al (2007) Modulation of pregnane X receptor- and electrophile responsive element-
mediated gene expression by dietary polyphenolic compounds. Free Radic Biol Med 42:315–325
Kocaman O, Hulagu S, Senturk O (2008) Echinacea-induced severe acute hepatitis with features of cholestatic
autoimmune hepatitis. Eur J Intern Med 19:148–152
Kouzi SA, McMurtry RJ, Nelson SD (1994) Hepatotoxicity of germander (Teucrium chamaedrys L.) and one of its
constituent neoclerodane diterpenes teucrin a in the mouse. Chem Res Toxicol 7:850–856
Kramlinger VM, von Weymarn LB, Murphy SE (2012) Inhibition and inactivation of cytochrome P450 2A6 and
cytochrome P450 2A13 by menthofuran, beta-nicotyrine and menthol. Chem Biol Interact 197:87–92
Kumar BS, Chung BC, Kwon OS et al (2012a) Discovery of common urinary biomarkers for hepatotoxicity induced by
carbon tetrachloride, acetaminophen and methotrexate by mass spectrometry-based metabolomics. J Appl Toxicol
32:505–520
Kumar S, Jin M, Ande A et al (2012b) Alcohol consumption effect on antiretroviral therapy and HIV-1 pathogenesis: role
of cytochrome P450 isozymes. Expert Opin Drug Metab Toxicol 8:1363–1375
Kupiec T, Raj V (2005) Fatal seizure due to potential herb-drug interactions with Ginkgo biloba. J Anal Toxicol 29:755–
758
Kwack SJ, Kim KB, Kim HS et al (2009) Risk assessment of soybeanbased phytoestrogens. J Toxicol Environ Health A
72:1254–1261
Lamba V, Yasuda K, Lamba JK et al (2004) PXR (NR1I2): splice variants in human tissues, including brain, and
identification of neurosteroids and nicotine as PXR activators. Toxicol Appl Pharmacol 199:251–265
Langhammer AJ, Nilsen OG (2014) In vitro inhibition of human CYP1A2, CYP2D6, and CYP3A4 by six herbs
commonly used in pregnancy. Phytother Res 28:603–610
Lassila T, Mattila S, Turpeinen M et al (2016) Tandem mass spectrometric analysis of S- and N-linked glutathione
conjugates of pulegone and menthofuran and identification of P450 enzymes mediating their formation. Rapid Commun
Mass Spectrom 30:917–926
Lau AJ, Chang TK (2009 Sep) Inhibition of human CYP2B6-catalyzed bupropion hydroxylation by Ginkgo biloba
extract: effect of terpene trilactones and flavonols. Drug Metab Dispos 37 (9):1931–1937
Lau G, Lo DS, Yao YJ et al (2004) A fatal case of hepatic failure possibly induced by nitrosofenfluramine: a case report.
Med Sci Law 44:252–263
Lee Soon S, Crawford RI (2001) Recurrent erythema nodosum associated with Echinacea herbal therapy. J Am Acad
Dermatol 44:298–299
Lee AJ, Chan WK, Harralson AF et al (1999) The effects of grapefruit juice on sertraline metabolism: an in vitro and in
vivo study. Clin Ther 21:1890–1899
Lee JI, Cho BK, Ock SM, Park HJ (2010) Pigmented contact cheilitis: from green tea? Contact Dermatitis 62:60–61
Lee GH, Bhandary B, Lee EM et al (2011) The roles of ER stress and P450 2E1 in CCL(4)-induced steatosis. Int J
Biochem Cell Biol 43:1469–1482
Lee WJ, Kim HW, Lee HY et al (2015) Systematic review on herbinduced liver injury in korea. Food Chem Toxicol
84:47–54
Lehmann JM, McKee DD, Watson MA et al (1998) The human orphan nuclear receptor PXR is activated by
compounds that regulate CYP3A4 gene expression and cause drug interactions. J Clin Investig 102:1016–1023
Leitolf H, Dixit KCS, Higham CE et al (2010) Licorice—or more? Exp Clin Endocrinol Diabetes 118:250–253
Lekehal M, Pessayre D, Lereau JM et al (1996) Hepatotoxicity of the herbal medicine germander: metabolic activation
of its furano diterpenoids by cytochrome P450 3A depletes cytoskeleton associated protein thiols and forms plasma
membrane blebs in rat hepatocytes. Hepatology 24:212–218
Letsyo E, Jerz G, Winterhalter P et al (2017) Incidence of pyrrolizidine alkaloids in herbal medicines from german retail
markets: risk assessments and implications to consumers. Phytother Res 31 (12):1903–1909
Li L, Stanton JD, Tolson AH et al (2009) Bioactive terpenoids and flavonoids from ginkgo biloba extract induce the
expression of hepatic drug-metabolizing enzymes through pregnane X receptor, constitutive androstane receptor, and
aryl hydrocarbon receptormediated pathways. Pharm Res 26:872–882
Li M, Chen PZ, Yue QX et al (2013a) Pungent ginger components modulates human cytochrome P450 enzymes in
vitro. Acta Pharmacol Sin 34(9):1237–1242
Li F, Lu J, Cheng J et al (2013b) Human PXR modulates hepatotoxicity associated with rifampicin and isoniazid co-
therapy. Nat Med 19:418–420
Li L, Bonneton F, Chen XY, Laudet V (2015) Botanical compounds and their regulation of nuclear receptor action: the
case of traditional Chinese medicine. Mol Cell Endocrinol 401:221–237
Lim TY, Considine A, Quaglia A et al (2013) Subacute liver failure secondary to black cohosh leading to liver
transplantation. BMJ Case Rep 2013:bcr2013009325
Lin YP, Zhang MP, Wang KY et al (2016) Research achievements on ginsenosides biosynthesis from panax ginseng.
Zhongguo Zhong Yao Za Zhi 41:4292–4302
Linshaw MA, Harrison HL, Gruskin AB et al (1980) Hypochloremic alkalosis in infants associated with soy protein
formula. J Pediatr 96:635–640

1255
 Loch EG, Selle H, Boblitz N (2000) Treatment of premenstrual syndrome with a phytopharmaceutical formulation
containing Vitex agnus castus. J Womens Health Gend Based Med 9:315–320
Lundgren H, Martinsson K, Cederbrant K et al (2017) HLA-DR7 and HLA-DQ2: transgenic mouse strains tested as a
model system for ximelagatran hepatotoxicity. PLoS One 12:e0184744
Lunow M, Adam B, Seidel G (2011) Pseudo-Conn’s syndrome with hypokalemic paralysis due to diuretics and licorice
abuse. Fortschr Neurol Psychiatr 79:46–50
Lynch CR, Folkers ME, Hutson WR (2006) Fulminant hepatic failure associated with the use of black cohosh: a case
report. Liver Transpl 12:989–992
Ma Y, Sachdeva K, Liu J et al (2004) Desmethoxyyangonin and dihydromethysticin are two major pharmacological
kavalactones with marked activity on the induction of CYP3A23. Drug Metab Dispos 32:1317–1324
Ma X, Shah Y, Cheung C et al (2007) The pregnane X receptor genehumanized mouse: a model for investigating drug-
drug interactions mediated by cytochromes P450 3A. Drug Metab Dispos 35:194–200
MacVie OP, Harney BA (2005) Vitreous haemorrhage associated with Gingko biloba use in a patient with age related
macular disease. Br J Ophthalmol 89:1378–1379
Madsen C, Wurtzen G, Carstensen J (1986) Short-term toxicity study in rats dosed with menthone. Toxicol Lett
32:147–152
Maeda J, Inoue K, Ichimura R et al (2015) Essential role of constitutive androstane receptor in ginkgo biloba extract
induced liver hypertrophy and hepatocarcinogenesis. Food Chem Toxicol 83:201–209
Maglich JM, Parks DJ, Moore LB et al (2003) Identification of a novel human constitutive androstane receptor (CAR)
agonist and its use in the identification of CAR target genes. J Biol Chem 278:17277–17283
Martinez J, Lewi JE (2008) An unusual case of gynecomastia associated with soy product consumption. Endocr Pract
14:415–418
Matthews HB, Lucier GW et al (1999) Medicinal herbs in the United States: research needs. Environ Health Perspect
107:773–778
Mazzanti G, Menniti-Ippolito F, Moro PA et al (2009) Hepatotoxicity from green tea: a review of the literature and two
unpublished cases. Eur J Clin Pharmacol 65:331–341
Mazzanti G, Di Sotto A, Vitalone A (2015) Hepatotoxicity of green tea: an update. Arch Toxicol 89:1175–1191
McKenzie SC, Rahman A (2010) Bradycardia in a patient taking black cohosh. Med J Aust 193:479–481
Meier Y, Pauli-Magnus C, Zanger UM et al (2006) Interindividual variability of canalicular ATP-binding-cassette (ABC)-
transporter expression in human liver. Hepatology 44:62–74
Meisel C, Johne A, Roots I (2003) Fatal intracerebral mass bleeding associated with Ginkgo biloba and ibuprofen.
Atherosclerosis 167:367
Messer A, Raquet N, Lohr C et al (2012) Major furocoumarins in grapefruit juice ii: phototoxicity, photogenotoxicity, and
inhibitory potency vs. Cytochrome P450 3A4 activity. Food Chem Toxicol 50:756–760
Meyer S, Vogt T, Obermann EC et al (2007) Cutaneous pseudolymphoma induced by Cimicifuga racemosa.
Dermatology 214:94–96
Mihail RC (1992) Oral leukoplakia caused by cinnamon food allergy. J Otolaryngol 21:366–367
Miller LG, Freeman B (2002) Possible subdural hematoma associated with Ginkgo biloba. J Herb Pharmacother 2:57–
63
Mills E, Foster BC, van Heeswijk R et al (2005) Impact of African herbal medicines on antiretroviral metabolism. AIDS
19:95–97
Minciullo PL, Saija A, Patafi M et al (2006) Muscle damage induced by black cohosh (Cimicifuga racemosa).
Phytomedicine 13:115–118
Mingatto FE, Dorta DJ, dos Santos AB et al (2007) Dehydromonocrotaline inhibits mitochondrial complex I. A potential
mechanism accounting for hepatotoxicity of monocrotaline. Toxicon 50 (5):724–730
Misaka S, Kawabe K, Onoue S et al (2013a) Effects of green tea catechins on cytochrome P450 2B6, 2C8, 2C19, 2D6
and 3A activities in human liver and intestinal microsomes. Drug Metab Pharmacokinet 28:244–249
Misaka S, Kawabe K, Onoue S et al (2013b) Green tea extract affects the cytochrome P450 3A activity and
pharmacokinetics of simvastatin in rats. Drug Metab Pharmacokinet 28:514–518
Misaka S, Miyazaki N, Fukushima T et al (2013c) Effects of green tea extract and ()-epigallocatechin-3-gallate on
pharmacokinetics of nadolol in rats. Phytomedicine 20:1247–1250
Miwa H, Iijima M, Tanaka S et al (2001) Generalized convulsion after consuming a large amount of Gingko nuts.
Epilepsia 42:280–281
Miyazawa M, Marumoto S, Takahashi T et al (2011) Metabolism of (+)- and ()-menthols by CYP2A6 in human liver
microsomes. J Oleo Sci 60:127–132
Mizutani T, Nomura H, Nakanishi K et al (1987) Effects of drug metabolism modifiers on pulegone-induced
hepatotoxicity in mice. Res Commun Chem Pathol Pharmacol 58:75–83
Monera TG, Wolfe AR, Maponga CC et al (2008) Moringa oleifera leaf extracts inhibit 6beta-hydroxylation of
testosterone by CYP3A4. J Infect Dev Ctries 2:379–383
Mooiman KD, Maas-Bakker RF, Moret EE et al (2013) Milk thistle’s active components silybin and isosilybin: novel
inhibitors of PXR-mediated CYP3A4 induction. Drug Metab Dispos 41:1494–1504
Moore GA (2001) Oranges and lemons: clues to the taxonomy of citrus from molecular markers. Trends Genet
17:536–540
1256
 Moore LB, Parks DJ, Jones SA et al (2000) Orphan nuclear receptors constitutive androstane receptor and pregnane
X receptor share xenobiotic and steroid ligands. J Biol Chem 275:15122–15127
Mousa HA (2017) Prevention and treatment of influenza, influenza-like illness, and common cold by herbal,
complementary, and natural therapies. J Evid Based Complementary Altern Med 22:166–174
Mukherjee T, Bhatt K, Sirsat R (2006) A young female with quadriparesis. J Assoc Physicians India 54:400–402
Mullins RJ, Heddle R (2002) Adverse reactions associated with echinacea: the Australian experience. Ann Allergy
Asthma Immunol 88:42–51
Murray KF, Christie DL (1993) Dietary protein intolerance in infants with transient methemoglobinemia and diarrhea. J
Pediatr 122:90–92
Nagata C, Nakamura K, Oba S et al (2009) Association of intakes of fat, dietary fibre, soya isoflavones and alcohol
with uterine fibroids in Japanese women. Br J Nutr 101:1427–1431
Nakahashi H, Miyazawa M (2011) Biotransformation of ()-camphor by salmonella typhimurium OY1002/2A6 expressing
human CYP2A6 and NADPH-P450 reductase. J Oleo Sci 60:545–548
Nan HM, Park JW, Song YJ et al (2005) Kimchi and soybean pastes are risk factors of gastric cancer. World J
Gastroenterol 11:3175–3181
Nasir JM, Durning SJ, Ferguson M et al (2004) Exercise-induced syncope associated with QT prolongation and
ephedra-free Xenadrine. Mayo Clin Proc 79:1059–1062
Navarro VJ, Senior JR (2006) Drug-related hepatotoxicity. N Engl J Med 354:731–739
Nelson HD, Vesco KK, Haney E et al (2006) Nonhormonal therapies for menopausal hot flashes: systematic review
and meta-analysis. JAMA 295:2057–2071
Nencini C, Galluzzi P, Pippi F et al (2014) Hepatotoxicity of Teucrium chamaedrys L. Decoction: role of difference in the
harvesting area and preparation method. Indian J Pharmacol 46:181–184
Nierenberg AA, Burt T, Matthews J et al (1999) Mania associated with St. John’s wort. Biol Psychiatry 46:1707–1708
Noel JC, Anaf V, Fayt I et al (2006) Ureteral mullerian carcinosarcoma (mixed mullerian tumor) associated with
endometriosis occurring in a patient with a concentrated soy isoflavones supplementation. Arch Gynecol Obstet
274:389–392
O’Connell R, Parkin L, Manning P et al (2005) A cluster of thyrotoxicosis associated with consumption of a soy milk
product. Aust N Z J Public Health 29:511–512
Oboh G (2006) Tropical green leafy vegetables prevent garlic-induced hepatotoxicity in the rat. J Med Food 9:545–551
Oladimeji PO, Lin W, Brewer CT et al (2017) Glucose-dependent regulation of pregnane x receptor is modulated by
AMP-activated protein kinase. Sci Rep 7:46751
Pal D, Kwatra D, Minocha M et al (2011) Efflux transporters- and cytochrome P-450-mediated interactions between
drugs of abuse and antiretrovirals. Life Sci 88:959–971
Palop-Larrea V, Gonzalvez-Perales JL, Catalan-Oliver C et al (2000) Metrorrhagia and ginseng. Ann Pharmacother
34:1347–1348
Pant P, Nadimpalli L, Singh M et al (2010) A case of severe hypokalemic paralysis and hypertension. Licorice-induced
hypokalemic paralysis. Am J Kidney Dis 55:A35–A37
Patel S, Robinson R, Burk M(2002) Hypertensive crisis associated with St. John’s Wort. Am J Med 112:507–508
Pedroso JL, Henriques Aquino CC, Escorcio Bezerra ML et al (2011) Ginkgo biloba and cerebral bleeding: a case
report and critical review. Neurologist 17:89–90
Pennisi RS (2006) Acute generalized exanthematous pustulosis induced by the herbal remedy Ginkgo biloba. Med J
Aust 184:583–584
Pilapil VR (1989) Toxic manifestations of cinnamon oil ingestion in a child. Clin Pediatr 28:276
Pillukat MH, Bester C, Hensel A et al (2014) Concentrated green tea extract induces severe acute hepatitis in a 63-
year-old woman—a case report with pharmaceutical analysis. J Ethnopharmacol 155:165–170
Pitter MH, Schmidt K, Ernst E (2005) Adverse events of herbal food supplements for body weight reduction: systematic
review. Obes Rev 6:93–111
Piyachaturawat P, Kingkaeohoi S, Toskulkao C (1995) Potentiation of carbon tetrachloride hepatotoxicity by piperine.
Drug Chem Toxicol 18:333–344
Prasad S, Tyagi AK (2016) Historical spice as a future drug: therapeutic potential of piperlongumine. Curr Pharm Des
22:4151–4159
Prilepskaya VN, Ledina AV, Tagiyeva AV et al (2006) Vitex agnus castus: successful treatment of moderate to severe
premenstrual syndrome. Maturitas 55:S55–S63
Propping D, Bohnert KJ, Peeters M et al (1991) Vitex agnus castus. Behandlung gynakologischer Krankheitsbilder.
Therapeutikon 5:581–585
Radha Krishna Y, Mittal V, Grewal P et al (2011) Acute liver failure caused by ‘fat burners’ and dietary supplements: a
case report and literature review. Can J Gastroenterol 25:157–160
Raederstorff DG, Schlachter MF, Elste V et al (2003) Effect of EGCG on lipid absorption and plasma lipid levels in rats.
J Nutr Biochem 14:326–332
Raji MA, Kuo YF, Snih SA et al (2005) Ethnic differences in herb and vitamin/mineral use in the elderly. Ann
Pharmacother 39:1019–1023
Rana SV, Pal R, Vaiphei K et al (2006) Garlic hepatotoxicity: safe dose of garlic. Trop Gastroenterol 27:26–30

1257
 Rashid NN, Grant J (2010) Hydroxicut hepatotoxicity. Med J Aust 192:173–174
Ratnatilaka A, Yakandawala D, Ratnayake J et al (2003) Poisoning with ‘hondala’ leaves due to misidentification as
‘passion fruit’ leaves. Ceylon Med J 48:23
Raucy JL (2003) Regulation of CYP3A4 expression in human hepatocytes by pharmaceuticals and natural products.
Drug Metab Dispos 31:533–539
Reay JL, Scholey AB, Kennedy DO (2010) Panax ginseng (G115) improves aspects of working memory performance
and subjective ratings of calmness in healthy young adults. Hum Psychopharmacol 25:462–471
Retamero C, Rivera T, Murphy K (2011) Ephedra-Free Diet pillinduced psychosis. Psychosomatics 52:579–582
Ricketts ML, Moore DD, Banz WJ et al (2005) Molecular mechanisms of action of the soy isoflavones includes
activation of promiscuous nuclear receptors. A review. J Nutr Biochem 16:321–330
Ridker PM, Ohkuma S, McDermott WV et al (1985) Hepatic venocclusive disease associated with the consumption of
pyrrolizidine-containing dietary supplements. Gastroenterology 88:1050–1054
Rietjens IMCM, Martena MJ, Boersma MG et al (2005) Molecular mechanisms of toxicity of important food-borne
phytotoxins. Mol Nutr Food Res 49:131–158
Roby CA, Anderson GD, Kantor E et al (2000) Pharmacokinetics and drug disposition. St John’s Wort: effect on
CYP3A4 activity. Clin Pharmacol Ther 67:451–457
Romano C, Ferrara A (1998) Food allergy induced by grapes. Allergy 53:93
Rozenfeld P, Docena GH, Anon MC et al (2002) Detection and identification of a soy protein component that cross-
reacts with caseins from cow’s milk. Clin Exp Immunol 130:49–58
Russo S, Mastropasqua M, Mosetti MA et al (2000) Low doses of liquorice can induce hypertension encephalopathy.
Am J Nephrol 20:145–148
Ryan CK, Reamy B, Rochester JA (2002) Ischemic colitis associated with herbal product use in a young woman. J Am
Board Fam Pract 15:309–312
Sanfelix Genoves J, Palop Larrea V, Rubio Gomis E et al (2001) Consumption of medicinal herbs and medicines. Aten
Primaria 28:311–314
Sarges P, Steinberg JM, Lewis JH (2016) Drug-induced liver injury: highlights from a review of the 2015 literature. Drug
Saf 39:801–821
Sartippour MR, Shao ZM, Heber D et al (2002) Green tea inhibits vascular endothelial growth factor (VEGF) induction
in human breast cancer cells. J Nutr 132:2307–2311
Sasaki T, Sato Y, Kumagai T et al (2017) Effect of health foods on cytochrome P450-mediated drug metabolism. J
Pharm Health Care Sci 3:14
Schell J, Betts NM, Foster Met al (2017) Cranberries improve postprandial glucose excursions in type 2 diabetes. Food
Funct 8:3083–3090
Scholey A, Ossoukhova A, Owen L et al (2010) Effects of american ginseng (Panax quinquefolius) on neurocognitive
function: an acute, randomised, double-blind, placebo-controlled, crossover study. Psychopharmacology 212:345–356
Schwarz UI, Hanso H, Oertel R et al (2007) Induction of intestinal P-glycoprotein by St John’s wort reduces the oral
bioavailability of talinolol. Clin Pharmacol Ther 81:669–678
Schyschka L, Sanchez JJ, Wang Z et al (2013) Hepatic 3D cultures but not 2D cultures preserve specific transporter
activity for acetaminophen-induced hepatotoxicity. Arch Toxicol 87:1581–1593
Seddik M, Lucidarme D, Creusy C et al (2001) Is exolise hepatotoxic? Gastroenterol Clin Biol 25:834–835
Senna G, Mistrello G, Roncarolo D et al (2001) Exercise-induced anaphylaxis to grape. Allergy 56:1235–1236
Sezer RG, Bozaykut A (2012) Pediatric hepatotoxicity associated with polygermander (Teucrium polium). Clin Toxicol
50:153
Shahbaz O, Mahajan S, Lewis JH (2017) Highlights of drug—and herbinduced liver injury in the literature from 2016:
how best to translate new information into clinical practice? Expert Opin Drug Metab Toxicol 13:935–951
Sharma T, Wong L, Tsai N et al (2010) Hydroxycut® (herbal weight loss supplement) induced hepatotoxicity: a case
report and review of literature. Hawaii Med J 69:188–190
Shaw D, Leon C, Kolev S, Murray V (1997) Traditional remedies and food supplements. A 5-year toxicological study
(1991–1995). Drug Saf 17:342–356
Shenai JP, Jhaveri BM, Reynolds JW et al (1981) Nutritional balance studies in very low-birth-weight infants: role of
soy formula. Pediatrics 67:631–637
Shim M, Saab S (2009) Severe hepatotoxicity due to Hydroxycut: a case report. Dig Dis Sci 54:406–408
Siegel MA (2006) Perioral dermatitis. J Am Dent Assoc 137:1121–1122
Siepmann T, Roofeh J, Kiefer FW et al (2011) Hypogonadism and erectile dysfunction associated with soy product
consumption. Nutrition 27:859–862
Silano V, Coppens P, Larrañaga-Guetaria A et al (2011) Regulations applicable to plant food supplements and relative
products in the European Union. Food Funct 2:710–719
Siqueira AS, Santos CCO, Cristino MR et al (2009) Intraoral contact mucositis induced by cinnamon-falvored chewing
gum—a case report. Quintessence Int 40:719–721
Smejkal K, Rjaskova V (2016) Use of plant extracts as an efficient alternative therapy of respiratory tract infections.
Ceska Slov Farm 65:139–160
Smith LW, Culvenor CC (1981) Plant sources of hepatotoxic pyrrolizidine alkaloids. J Nat Prod 44:129–152

1258
 Stephensen TA, Sarlay RJ (2009) Ventricular fibrilation associated with use of synephrine containing dietary
supplement. Mil Med 174:1313–1319
Stickel F, Poschl G, Seitz HK et al (2003) Acute hepatitis induced by greater celandine (Chelidonium majus). Scand J
Gastroenterol 38:565–568
Stjernberg L, Berglund J (2000) Garlic as an insect repellent. JAMA 284:831
Stjernberg L, Berglund J, Halling A (2006) Age and gender effect on the use of herbal medicine products and food
supplements among the elderly. Scand J Prim Health Care 24:50–55
Stohs SJ (2017) Safety, efficacy, and mechanistic studies regarding citrus aurantium (bitter orange) extract and p-
synephrine. Phytother Res 31(10):1463–1474
Stojanovic NM, Samardzic L, Randjelovic PJ et al (2017) Prevalence of self-medication practice with herbal products
among non-psychotic psychiatric patients from southeastern serbia: a cross-sectional study. Saudi Pharm J 25:884–890
Su Y, Wu L, Wang Q et al (2014) New 9,19-cycloartenol glycosides isolated from the roots of cimicifuga simplex and
their antiinflammatory effects. Bioorg Med Chem Lett 24:5688–5691
Sueoka N, Suganuma M, Sueoka E et al (2001) A new function of green tea: prevention of lifestyle-related diseases.
Ann N Y Acad Sci 928:274–280
Sueyoshi T, Green WD, Vinal K et al (2011) Garlic extract diallyl sulfide (DAS) activates nuclear receptor CAR to
induce the sult1e1gene in mouse liver. PLoS One 6:e21229
Sugatani J, Kojima H, Ueda A et al (2001) The phenobarbital response enhancer module in the human bilirubin UDP-
glucuronosyltransferase UGT1A1 gene and regulation by the nuclear receptor CAR. Hepatology 33:1232–1238
Suk KT, Kim DJ, Kim CH et al (2012) A prospective nationwide study of drug-induced liver injury in Korea. Am J
Gastroenterol 107:1380–1387
Sultan S, Spector J, Michell RM (2006) Ischemic colitis associated with use of a bitter orange-containing dietary
weight-loss supplement. Mayo Clin Proc 81:1630–1631
Sun CL, Yuan JM, Arakawa K et al (2002) Dietary soy and increased risk of bladder cancer: the Singapore Chinese
Health Study. Cancer Epidemiol Biomark Prev 11:1674–1677
Sunaga K, Ohkawa K, Nakamura K et al (2012) Mechanism-based inhibition of recombinant human cytochrome P450
3A4 by tomato juice extract. Biol Pharm Bull 35:329–334
Sundaram MB, Swaminathan R (1981) Total body potassium depletion and severe myopathy due to chronic liquorice
ingestion. Postgrad Med J 57:48–49
Suzuki N, Irie M, Iwata K et al (2006) Altered expression of alkaline phosphatase (ALP) in the liver of primary biliary
cirrhosis (PBC) patients. Hepatol Res 35:37–44
Sztajnkrycer MD, Otten EJ, Bond GR et al (2003) Mitigation of pennyroyal oil hepatotoxicity in the mouse. Acad Emerg
Med 10:1024–1028
Tanaka S, Uchida S, Miyakawa S et al (2013) Comparison of inhibitory duration of grapefruit juice on organic anion-
transporting polypeptide and cytochrome P450 3A4. Biol Pharm Bull 36:1936–1941
Tannergren C, Engman H, Knutson L et al (2004) St John’s wort decreases the bioavailability of R- and S-verapamil
through induction of the first-pass metabolism. Clin Pharmacol Ther 75:298–309
Taylor JR, Wilt VM (1999) Probable antagonism of warfarin by green tea. Ann Pharmacother 33:426–428
Taylor JA, Weber W, Standish L et al (2003) Efficacy and safety of Echinacea in treating upper respiratory tract
infections in children. JAMA 290:2824–2830
Teschke R (2010a) Black cohosh and suspected hepatotoxicity: inconsistencies, confounding variables, and
prospective use of a diagnostic causality algorithm. A critical review. Menopause 17:426–440
Teschke R (2010b) Kava hepatotoxicity—a clinical review. Ann Hepatol 9:251–265
Teschke R, Andrade RJ (2016) Drug, herb, and dietary supplement Hepatotoxicity. Int J Mol Sci 17(9):E1488
Teschke R, Glass X, Schulze J (2011) Herbal hepatotoxicity by greater celandine (Chelidonium majus): causality
assessment of 22 spontaneous reports. Regul Toxicol Pharmacol 61:282–291
Teschke R, Frenzel C, Glass X et al (2012a) Greater celandine hepatotoxicity: a clinical review. Ann Hepatol 11:838–
848
Teschke R, Wolff A, Frenzel C et al (2012b) Herbal hepatotoxicity: a tabular compilation of reported cases. Liver Int
32:1543–1556
Teschke R, Zhang L, Melzer L et al (2014) Green tea extract and the risk of drug-induced liver injury. Expert Opin Drug
Metab Toxicol 10:1663–1676
Teschke R, Larrey D, Melchart D et al (2016) Traditional Chinese Medicine (TCM) and herbal hepatotoxicity: rucam
and the role of novel diagnostic biomarkers such as microRNAs. Medicines 3:18
Thiolet C, Mennecier D, Bredin C et al (2002) Acute cytolysis induced by Chinese tea. Gastroenterol Clin Biol 26:939–
940
Thomas JE, Munir JA, McLntyre PZ et al (2009) STEMI in a 24-yearold man after use of a synephrine-containing
dietary supplement. Tex Heart Inst J 36:586–590
Thorup I, Wurtzen G, Carstensen J et al (1983a) Short term toxicity study in rats dosed with pulegone and menthol.
Toxicol Lett 19:207–210
Thorup I, Wurtzen G, Carstensen J et al (1983b) Short term toxicity study in rats dosed with peppermint oil. Toxicol Lett
19:211–215
Tremblay S, Avon SL (2008) Contact allergy to cinnamon: case report. J Can Dent Assoc 74:445–461
1259
 Tsintis P, La Mache E (2004) Cioms and ich initiatives in pharmacovigilance and risk management: overview and
implications. Drug Saf 27:509–517
Tucker GT, Houston JB, Huang SM (2001) Optimizing drug development: strategies to assess drug
metabolism/transporter interaction potential-toward a consensus. Clin Pharmacol Ther 70:103–114
Tujios S, Fontana RJ (2011) Mechanisms of drug-induced liver injury: from bedside to bench. Nat Rev Gastroenterol
Hepatol 8:202–211
Uc A, Bishop WP, Sanders KD (2000) Camphor hepatotoxicity. South Med J 93(6):596–598
Usia T, Watabe T, Kadota S et al (2005) Cytochrome P450 2D6 (CYP2D6) inhibitory constituents of catharanthus
roseus. Biol Pharm Bull 28:1021–1024
Valentao P, Carvalho M, Carvalho F et al (2004) Hypericum androsaemum infusion increases tert-butyl hydroperoxide-
induced mice hepatotoxicity in vivo. J Ethnopharmacol 94:345–351
Valla D, Benhamou JP (1988) Drug-induced vascular and sinusoidal lesions of the liver. Baillieres Clin Gastroenterol
2:481–500
Valli G, Giardina E-GV (2002) Benefits, adverse effects and drug interactions of herbal therapies with cardiovascular
effects. J Am Coll Cardiol 39:1083–1095
Van den Bout-van den Beukel CJ, Hamza OJ, Moshi MJ et al (2008) Evaluation of cytotoxic, genotoxic and CYP450
enzymatic competition effects of tanzanian plant extracts traditionally used for treatment of fungal infections. Basic Clin
Pharmacol Toxicol 102:515–526
Vannacci A, Lapi F, Gallo E et al (2009) A case of hepatitis associated with long-term use of Cimicifuga racemosa.
Altern Ther Health Med 15:62–63
Vasquez I, Aguera-Ortiz LF (2002) Herbal products and serious side effects: a case of ginseng-induced manic episode.
Acta Psychiatr Scand 105:76–77
Verma S, Thuluvath PJ (2007) Complementary and alternative medicine in hepatology: review of the evidence of
efficacy. Clin Gastroenterol Hepatol 5:408–416
Vial T, Bernard G, Lewden B et al (2003) Acute hepatitis due to Exolise, a Camellia sinensis-derived drug.
Gastroenterol Clin Biol 27:1166–1167
Vitalone A, Menniti-Ippolito F, Moro PA et al (2011) Suspected adverse reactions associated with herbal products used
for weight loss: a case series reported to the Italian National Institute of Health. Eur J Clin Pharmacol 67:215–224
Walton EW (2014) Topical phytochemicals: applications for wound healing. Adv Skin Wound Care 27:328–332
Wang LS, Zhou G, Zhu B et al (2004a) St John’s wort induces both cytochrome P450 3A4-catalyzed sulfoxidation and
2C19-dependent hydroxylation of omeprazole. Clin Pharmacol Ther 75:191–197
Wang LS, Zhu B, Abd El-Aty AM et al (2004b) The influence of St John’s wort on CYP2C19 activity with respect to
genotype. J Clin Pharmacol 44:577–581
Wang YM, Ong SS, Chai SC et al (2012) Role of CAR and PXR in xenobiotic sensing and metabolism. Expert Opin
Drug Metab Toxicol 8:803–817
Wang YG, Liu HS, Zhang XX et al (2013a) Screening of pregnane X receptor activation from ginsenosides. Yao Xue
Xue Bao 48:144–148
Wang YM, Lin W, Chai SC et al (2013b) Piperine activates human pregnane x receptor to induce the expression of
cytochrome P450 3A4 and multidrug resistance protein 1. Toxicol Appl Pharmacol 272:96–107
Wang YM, Chai SC, Brewer CT et al (2014) Pregnane X receptor and drug-induced liver injury. Expert Opin Drug
Metab Toxicol 10:1521–1532
Wang D, Wang Y, Wan X et al (2015) Green tea polyphenol ()-epigallocatechin-3-gallate triggered hepatotoxicity in
mice: responses of major antioxidant enzymes and the NRF2 rescue pathway. Toxicol Appl Pharmacol 283:65–74
Watkins RE, Maglich JM, Moore LB et al (2003) 2.1 a crystal structure of human PXR in complex with the St. John’s
wort compound hyperforin. Biochemistry 42:1430–1438
Wei J, Zhang F, Zhang Y et al (2014) Proteomic investigation of signatures for geniposide-induced hepatotoxicity. J
Proteome Res 13:5724–5733
Werba JP, Giroli M, Cavalca V et al (2008) The effect of green tea on simvastatin tolerability. Ann Intern Med 149:286–
287
Westra WH, McMurray JS, Califano J et al (1998) Squamous cell carcinoma of the tongue associated with cinnamon
gum use: a case report. Head Neck 20:430–433
Whiting PW, Clouston A, Kerlin P (2002) Black cohosh and other herbal remedies associated with acute hepatitis. Med
J Aust 177:440–443
WHO (2004) Guidelines on safety monitoring of herbal medicines in pharmacovigilance systems. World Health
Organization, Geneva
Wiwanitkit V (2012) Excessive consumption of soybean milk and unexplained hepatitis. J Postgrad Med 58:226–227
Wiwanitkit V, Taungjaruwinai W (2004) A case report of suspected ginseng allergy. Med Gen Med 6:9
Woolbright BL, Jaeschke H (2012) Novel insight into mechanisms of cholestatic liver injury. World J Gastroenterol
18:4985–4993
Wu R, Tao W, Zhang H et al (2016) Instant and persistent antidepressant response of gardenia yellow pigment is
associated with acute protein synthesis and delayed upregulation of BDNF expression in the hippocampus. ACS Chem
Neurosci 7:1068–1076
Xia S-H, Fang DC (2007) Pharmacological action and mechanisms of ginkgolide B. Chin Med J 120:922–928
1260
 Xie Y, McGill MR, Dorko K et al (2014) Mechanisms of acetaminophen-induced cell death in primary human
hepatocytes. Toxicol Appl Pharmacol 279:266–274
Xu C, Huang M, Bi H (2016) PXR- and CAR-mediated herbal effect on human diseases. Biochim Biophys Acta
1859(9):1121–1129
Yagmur E, Piatkowski A, Gröger A et al (2005) Bleeding complication under Gingko biloba medication. Am J Hematol
79:343–344
Yamaguchi Y, Akimoto I, Motegi K et al (2013) Synthetic models related to methoxalen and menthofuran-cytochrome
P450 (CYP) 2A6 interactions. Benzofuran and coumarin derivatives as potent and selective inhibitors of CYP2A6. Chem
Pharm Bull 61:997–1001
Yamano T, Tsujimoto Y, Noda T et al (1988) Hepatotoxicity of gardenia yellow color in rats. Toxicol Lett 44:177–182
Yamazaki F, Sone R (2017) Desensitization of menthol-activated cold receptors in lower extremities during local
cooling in young women with a cold constitution. J Physiol Sci 67:331–337
Yang HJ, Fu MH, Wu ZL et al (2006) Experimental studies on hepatotoxicity of rats induced by Fructus gardeniae.
Zhongguo Zhong Yao Za Zhi 31:1091–1093
Yang M, Ruan J, Fu PP et al (2016) Cytotoxicity of pyrrolizidine alkaloid in human hepatic parenchymal and sinusoidal
endothelial cells: firm evidence for the reactive metabolites mediated pyrrolizidine alkaloid-induced hepatotoxicity. Chem
Biol Interact 243:119–126
Yao HT, Hsu YR, Lii CK et al (2014a) Effect of commercially available green and black tea beverages on drug-
metabolizing enzymes and oxidative stress in wistar rats. Food Chem Toxicol 70:120–127
Yao J, Li CG, Gong LK et al (2014b) Hepatic cytochrome P450s play a major role in monocrotaline-induced renal
toxicity in mice. Acta Pharmacol Sin 35:292–300
Yasuda K, Sakaki T (2012 Jan) How is sesamin metabolised in the human liver to show its biological effects? Expert
Opin Drug Metab Toxicol 8(1):93–102
Yeung EY, Sueyoshi T, Negishi M et al (2008) Identification of ginkgo biloba as a novel activator of pregnane x
receptor. Drug Metab Dispos 36:2270–2276
Yin OQ, Tomlinson B, Waye MM et al (2004) Pharmacogenetics and herb-drug interactions: experience with ginkgo
biloba and omeprazole. Pharmacogenetics 14:841–850
Yokotani K, Chiba T, Sato Y et al (2013) Effect of three herbal extracts on cytochrome P450 and possibility of
interaction with drugs. Shokuhin Eiseigaku Zasshi 54:56–64
Yotsawimonwat S, Rattanadechsakul J, Rattanadechsakul P et al (2010) Skin improvement and stability of echinacea
purpurea dermatological formulations. Int J Cosmet Sci 32:340–346
Yu C, Chai X, Yu L et al (2011) Identification of novel pregnane X receptor activators from traditional chinese
medicines. J Ethnopharmacol 136:137–143
Yuste M, Sánchez-Estella J, Santos JC et al (2005) Síndrome de Stevens-Johnson/necrolisis epidérmica tóxica tratado
com inmunoglobulinas intravenosas. Actas Dermosifiliogr 96:589–592
Zhang P, Noordine ML, Cherbuy C et al (2006) Different activation patterns of rat xenobiotic metabolism genes by two
constituents of garlic. Carcinogenesis 27:2090–2095
Zhang HF, Huang LB, Zhong YB et al (2016) An overview of systematic reviews of ginkgo biloba extracts for mild
cognitive impairment and dementia. Front Aging Neurosci 8:276
Zhou XW, Ma Z, Geng T et al (2014) Evaluation of in vitro inhibition and induction of cytochrome P450 activities by
hydrolyzed ginkgolides. J Ethnopharmacol 158(Pt A):132–139
Ziment I (1991) History of the treatment of chronic bronchitis. Respiration 58:37–42
Zimmermann R, Witte A, Voll RE et al (2010) Coagulation activation and fluid retention associated with the use of black
cohosh: a case study. Climacteric 13:187–191
Zollner G, Wagner M, Trauner M (2010) Nuclear receptors as drug targets in cholestasis and drug-induced
hepatotoxicity. Pharmacol Ther 126:228–243
Zullino D, Borgeat F (2003) Hypertension induced by St. John’s Wort—a case report. Pharmacopsychiatry 36:32

1261
 Parte VI

Tendências mais recentes em pesquisa

nutracêutica e desenvolvimento de produtos

1262
 Proteômica na avaliação de nutracêuticos e alimentos
funcionais
Christina Wilson-Frank

Resumo
Nutracêuticos e alimentos funcionais são usados na medicina veterinária como
tratamentos preventivos ou de suporte para doenças e para melhorar a saúde animal.
Embora os supostos benefícios à saúde dos nutracêuticos e alimentos funcionais em
animais sejam bem documentados, é necessário compreender os mecanismos
moleculares envolvidos nos benefícios nutritivos à saúde e no desfecho da doença em
nível celular. Técnicas baseadas em proteômica estão evoluindo como uma ferramenta
promissora que pode fornecer o conhecimento científico para vincular dieta e doença na
pesquisa nutricional. O uso da proteômica na pesquisa em nutrição se transformou nas
disciplinas de nutri proteômica e alimentos ômicos. Embora mais estudos sejam
necessários para obter uma compreensão mais profunda dos mecanismos responsáveis
pelos benefícios para a saúde dessas substâncias nutritivas em animais, as aplicações da
nutri proteômica e de alimentos ômicos têm oferecido novos insights sobre os
mecanismos moleculares de ação e mudanças na expressão de proteínas de uma
variedade de substâncias nutritivas.

Palavras-chave: Foodmics116 · Nutracêutico · Nutriproteômica · Probiótico · Proteômica

C. Wilson-Frank. Department of Comparative Pathobiology, Animal Disease Diagnostic. Laboratory, College

of Veterinary Medicine, Purdue University, West Lafayette, IN, USA e-mail: wilsonc@purdue.edu

1. Introdução
Os estudos proteômicos abrangem a análise qualitativa e quantitativa global e a
caracterização de todo o complemento proteico em uma célula, organismo ou tecido que
muda em resposta a um estímulo externo ou devido a um estado de doença específico.
As mudanças mensuráveis no proteoma têm sido usadas para identificar biomarcadores
potenciais para estados de doença específicos e para elucidar o mecanismo de ação de
xenobióticos ou outras substâncias. Na pesquisa baseada em proteômica, a primeira
etapa na caracterização das mudanças no proteoma requer a separação de proteínas ou

116 A Foodomics foi definida em 2009 como “uma disciplina que estuda os domínios da Alimentação e Nutrição através da aplicação e
integração de tecnologias avançadas de ômica para melhorar o bem-estar, a saúde e o conhecimento do consumidor”
1263
peptídeos intactos. Separar adequadamente esse complexo, os componentes
heterogêneos têm se mostrado um desafio analítico, em grande parte devido à grande
faixa dinâmica das proteínas e à micro-heterogeneidade da expressão da proteína nas
amostras. Por exemplo, um proteoma sérico típico pode conter aproximadamente 20.000
proteínas, criando um desafio analítico ao tentar isolá-las ou separá-las adequadamente
para identificação (Anderson e Anderson 2002; Issaq et al. 2005). Tecnologias
emergentes de separação de proteínas, que incluem eletroforese em gel bidimensional (2-
DGE), eletroforese em gel bidimensional (2-DIGE) e cromatografia líquida de alto
desempenho multidimensional (HPLC), oferecem níveis multidimensionais de separação
que aumentam a resolução e isolamento de proteínas de misturas complexas (Görg et al.
2000; Hamdan e Righetti 2002; Issaq et al. 2005; Zhang et al. 2010). Portanto, a
capacidade de melhor isolar proteínas e peptídeos que mudam em amostras biológicas
complexas com doença ou em resposta a estímulos melhorou e continua a evoluir. Além
do desafio de separar misturas de proteínas, o uso de instrumentação baseada em
espectrometria de massa para identificar e quantificar mudanças em proteínas impôs
avanços significativos nessa tecnologia. Avanços recentes em espectrômetros de massa
híbridos forneceram automação significativa de alto rendimento com sensibilidade
excepcional e poder de resolução aprimorado de proteínas. Especificamente, os avanços
nas tecnologias de dessorção a laser assistida por matriz/espectrometria de massa em
tandem de tempo de voo (MALDI/MS/MS) e ionização por electrospray/espectrometria de
massa em tandem (ESI/MS/MS) melhoraram a quantificação e o isolamento de proteínas
e peptídeos significativamente e são os dois espectrômetros de massa mais comuns
usados em investigações proteômicas (Li et al. 2017).

A proteômica tem sido utilizada em uma ampla variedade de estudos na pesquisa

biomédica. No entanto, muitas novas disciplinas estão explorando a utilidade das
investigações proteômicas. Por exemplo, a interação de alimentos funcionais e
nutracêuticos com a medicina e a farmacologia apresentou um novo desafio para a
indústria nutracêutica. Portanto, novas disciplinas como “nutriproteômica” e “foodomics”
visam explorar avanços em tecnologias baseadas em proteômica para entender como
nutracêuticos, alimentos funcionais ou outros nutrientes dietéticos influenciam a
expressão de proteínas. Faltam estudos científicos que avaliem a eficácia e segurança
desses nutracêuticos e alimentos funcionais, além de identificar possíveis interações
medicamentosas. À medida que o uso de nutracêuticos e alimentos funcionais em
humanos e animais continua a evoluir, será importante ter um entendimento completo de
como esses componentes nutritivos afetam a saúde e o resultado das doenças. Portanto,
a nutriproteômica e a foodomics visam atender a essa necessidade por meio da
1264
caracterização de proteínas bioativas nutritivas, identificando biomarcadores importantes
para a regulação de doenças, avaliando a segurança de nutracêuticos atuais e novos e
identificando mecanismos pelos quais nutracêuticos e alimentos funcionais afetam os
resultados de saúde. Na medicina veterinária, existem diversos nutracêuticos e alimentos
funcionais sendo utilizados em animais com o objetivo de prevenir doenças e promover
saúde ou qualidade de vida. Este capítulo descreve as investigações proteômicas que
têm sido conduzidas a fim de elucidar o mecanismo de ação de nutracêuticos e alimentos
funcionais usados em medicina veterinária.

2. Nutriproteômica
2.1 S-Adenosilmetionina (SAM-e)

SAM-e é um doador de metila de ocorrência natural envolvido em reações de metil

transferase, e a suplementação demonstrou restaurar os níveis de glutationa hepática e
reduzir a lesão hepática em animais e humanos (Guo et al. 2015). As concentrações de
glutationa hepática diminuem em cães e gatos com doença hepática (Center et al. 2002).
Portanto, a suplementação de SAM-e tem sido recomendada como tratamento de suporte
em caninos e felinos com doença hepática ou hepatotoxicidade. SAM-e tem sido usado
como tratamento de suporte em animais com hepatotoxicidade originada de intoxicação
por paracetamol (Wallace et al. 2002; Webb et al. 2003), intoxicação por algas azuis
(Bautista et al. 2015; Sebbag et al. 2013), e intoxicação por xilitol (Schmid e Hovda 2016).
Embora o SAM-e tenha sido usado como hepatoprotetor, o mecanismo exato pelo qual
ele protege o fígado não foi definido explicitamente. No entanto, pesquisas recentes
baseadas em proteômica dos efeitos do SAM-e no fígado após a exposição ao etanol
lançaram alguma luz sobre os alvos moleculares potenciais envolvidos nos efeitos
hepatoprotetores do SAM-e. Em dois estudos conduzidos em ratos Sprague-Dawley, as
alterações no proteoma mitocondrial do fígado foram avaliadas após a exposição dos
ratos ao etanol, com e sem suplementação de SAM-e (Andringa et al. 2010; Bailey et al.
2006). Em um estudo, os ratos foram alimentados com dietas de controle ou etanol,
suplementados ou não com SAM-e, por 5 semanas (Bailey et al. 2006). Usando SDS-
PAGE e análise de imunotransferência, os pesquisadores foram capazes de mostrar que
SAM-e evitou diminuições mediadas por álcool na respiração mitocondrial hepática e
citocromo c oxidase. O estresse metabólico tem sido associado à inibição da síntese de
proteínas mitocondriais, causando a regulação positiva da proteína proibitina (Bailey et al.
2006). A exposição ao etanol causou um aumento significativo nesta proteína; enquanto o
grupo controle e o grupo alimentado com etanol e SAM-e não apresentaram aumento
1265
dessa proteína. Isso sugeriu que o SAM-e protegeu as mitocôndrias hepáticas da inibição
da síntese de proteínas pelo etanol. Em outro estudo, ratos foram alimentados com dieta
controle ou etanol, também suplementada ou não com SAM-e, por 31 dias. Usando 2-
DGE e MALDI/MS, 30 proteínas mudaram significativamente com a exposição ao etanol
ou SAM-e ou exposição a ambos. Os tipos de proteínas incluem chaperonas, proteínas de
beta-oxidação, proteínas do metabolismo do enxofre e enzimas desidrogenase. O etanol
demonstrou diminuir as proteínas mitocondriais essenciais GRP78, Hspd1 e PDI/T3BP.
SAM-e evitou diminuições dependentes de etanol nessas proteínas chaperonas,
preservando assim a função mitocondrial. Portanto, esses estudos proteômicos sugerem
que o efeito hepatoprotetor de SAM-e contra a toxicidade do etanol pode ser mediado por
proteínas protetoras que são fundamentais para as vias biossintéticas mitocondriais e de
energia. Estudos proteômicos usando células de hepatoma humano para avaliar os
efeitos hepatoprotetores de SAM-e no carcinoma hepatocelular revelaram um potencial
alvo molecular para SAM-e no fígado (Schroder et al. 2012). Usando 2D-DIGE e
HPLC/MS/MS, 128 proteínas foram identificadas que estavam envolvidas na apoptose,
proliferação celular e sobrevivência celular. No entanto, a proteína da caixa DEAD
humana 3 (DDX3X) foi regulada negativamente quando a enzima que sintetiza SAM-e foi
regulada negativamente. Os pesquisadores concluíram que o DDX3X pode ser um alvo
primário de SAM-e e um intermediário principal de seu efeito antitumoral. Portanto, a
redução de SAM-e no fígado pode causar regulação positiva de DDX3X e contribuir para
o processo patogênico (Schroder et al. 2012). Nesses estudos, as avaliações proteômicas
sugerem que a suplementação de SAM-e pode prevenir o dano oxidativo à mitocôndria
hepática e diminuir a regulação de proteínas essenciais para a patogênese do carcinoma
hepatocelular.

2.2 Glucosamina e condroitina

Existem vários nutracêuticos sendo usados para tratar a osteoartrite em animais que
podem incluir, mas não estão limitados a, glucosamina, ácidos graxos ômega-3, sulfato de
condroitina e pó de mexilhão de lábios verdes (Gupta 2016). Esses nutracêuticos são
usados como um tratamento alternativo para a osteoartrite devido aos seus supostos
benefícios antiinflamatórios. Em animais, os nutracêuticos mais comumente usados são a
glucosamina e a condroitina. A glucosamina é um aminossacarídeo que é um componente
natural da cartilagem e é comumente vendido como sulfato de glucosamina ou cloridrato
de glucosamina como suplemento (Blum et al. 2006). O sulfato de condroitina é um
glicosaminoglicano e é um componente funcional dos proteoglicanos do tecido
1266
cartilaginoso (Pomin 2015). É um nutracêutico comum usado em humanos e animais com
artrite e osteoartrite. Embora a administração desses nutracêuticos possa ser benéfica
para o animal, a eficácia desses suplementos e como eles afetam os processos biológicos
não foram totalmente definidos. Um grupo de pesquisadores conduziu uma revisão de 22
estudos e a eficácia de nutracêuticos para aliviar os sinais clínicos de osteoartrite em
cavalos, cães e gatos (Vandeweerd et al. 2012). Os nutracêuticos considerados nesta
revisão incluíram o uso de cloridrato de glucosamina, sulfato de condroitina, ácidos graxos
ômega-3, mexilhão em pó verde e uma variedade de outros tipos de tratamentos. Após a
conclusão da revisão da literatura, este grupo concluiu que a evidência de eficácia era
baixa para todos os nutracêuticos, exceto para os ácidos graxos ômega-3. No entanto,
desde esta revisão, a pesquisa em proteômica foi capaz de elucidar os alvos potenciais
de alguns desses nutracêuticos, o que acabou destacando seu potencial antiinflamatório.
Por exemplo, em um estudo usando 2-DIGE, microarrays de proteína e HPLC / MS, as
alterações no proteoma sérico de nove homens e nove mulheres tomando glucosamina e
condroitina para osteoartrite foram avaliadas (Navarro et al. 2015). Neste estudo, os
indivíduos tomaram três cápsulas de 500 mg de cloridrato de glucosamina e 400 mg de
sulfato de condroitina; enquanto o grupo controle recebeu cápsulas contendo celulose
cristalina por 28 dias. A análise proteômica revelou que as concentrações de proteína C
reativa foram significativamente reduzidas em pacientes que tomaram glucosamina e
condroitina quando comparados ao grupo de placebo. Os resultados do microarray de
proteínas também revelaram que os efeitos da glucosamina e da condroitina reduziram as
proteínas envolvidas na via de atividade das citocinas. Com base em seus resultados,
eles concluíram que a suplementação de glucosamina e condroitina pode reduzir a
inflamação sistêmica. Curiosamente, algumas das proteínas e vias impactadas por esses
nutracêuticos também foram sugeridas como associadas à redução do risco de câncer
colorretal e de pulmão.

2.3 Ácidos graxos ômega-3

Os ácidos graxos ômega-3, como o ácido docosahexaenóico (DHA) e o ácido

eicosapentaenóico (EPA), têm sido usados como suplemento nutracêutico no tratamento
de uma variedade de doenças caninas, incluindo o câncer (Bauer 2011). A suplementação
de DHA em cães com linfoma de estágio III foi associada à produção de tempos de
sobrevivência e períodos de remissão mais longos quando usada em combinação com a
doxorrubicina (Bauer 2011; Ogilvie et al. 2000). A suplementação de DHA e EPA em cães
dada para carcinomas nasais malignos demonstrou diminuir os eicosanóides inflamatórios
prejudiciais, bem como suprimir alguns dos efeitos prejudiciais da radioterapia (Hansen et

1267
al. 2011). A fim de compreender melhor o mecanismo pelo qual os ácidos graxos ômega-3
exercem suas propriedades anticâncer, uma avaliação proteômica das linhagens de
células cancerosas de glioma C6 e SH-Y5Y foi comparada aos astrócitos primários
normais após o tratamento com 100 μg/ml e 3,77 M de DHA (Das e Das 2016). A eletroforese
bidimensional em gel e as análises de MALDI/MS/MS identificaram seis proteínas que
foram alteradas com o tratamento com DHA. As proteínas anexina A2, piruvato quinase
M2 e anexina A2 foram reguladas negativamente com o tratamento com DHA, enquanto a
aldo-ceto redutase 1B8 e a glutationa S-transferase P1 foram reguladas positivamente
nas células cancerosas. Estes resultados sugerem que o DHA induz apoptose em células
cancerosas, regulando a expressão das proteínas identificadas neste estudo, a fim de
ativar as vias apoptóticas que promovem a morte de células cancerígenas.

3. Foodomics
3.1 Probióticos

Probióticos são microrganismos que conferem benefícios à saúde para humanos e

animais, promovendo a digestão, fortalecendo o epitélio gastrointestinal e modulando a
microbiota intestinal e a resposta imune (Wang et al. 2018a, b). O uso de probióticos na
medicina veterinária está se tornando mais prevalente, particularmente no que diz
respeito ao tratamento preventivo e de suporte para distúrbios gastrointestinais e doenças
infecciosas (Bybee et al. 2011; Mudronova et al. 2018; Wang et al. 2018a, b). Os
probióticos mais amplamente usados incluem Bifidobacterium e Lactobacillus spp. (Cho et
al. 2015; Solano-Aguilar et al. 2018). Embora os probióticos sejam bem reconhecidos por
seus benefícios à saúde em animais, a identificação de marcadores moleculares de sua
atividade promotora de saúde e a elucidação dos processos pelos quais as bactérias
probióticas podem exercer benefícios à saúde em animais ainda são garantidos. No
entanto, pesquisas recentes baseadas em proteômica têm sido recompensadoras e
oferecem alguns insights sobre os mecanismos moleculares da ação probiótica e o papel
das proteínas bacterianas.

Nos últimos anos, os genomas de algumas espécies probióticas foram sequenciados. Ter
essas sequências genômicas disponíveis tornou a identificação de proteínas possível por
meio do uso de tecnologias baseadas em proteômica. Por exemplo, 2-DGE com
MALDI/TOF MS e HPLC/MS/MS têm sido usados para elucidar os mecanismos
moleculares dos probióticos em relação a como eles se adaptam ao ambiente do trato
gastrointestinal e para identificar proteínas que podem ajudar a explicar os benefícios de

1268
saúde de uso de probióticos. Um dos maiores desafios dos probióticos é sobreviver às
condições ambientais adversas do trato gastrointestinal, como pH ácido e exposição à
bile. A proteômica foi capaz de oferecer algumas informações sobre como Bifidobacterium
spp. e Lactobacillus spp. neutralizar e superar esses desafios.

Bifidobacteria e Lactobacillus são comumente adicionados a produtos lácteos

fermentados, que são de natureza ácida. Essas bactérias precisam lidar com o estresse
ácido durante a produção do alimento funcional e também durante a ingestão, quando
expostas às condições ácidas do estômago. Investigações proteômicas foram capazes de
lançar alguma luz sobre como essas bactérias se adaptam a essas condições ácidas. Por
exemplo, estudos de proteômica revelaram que Bifidobacterium longum superexpressa as
proteínas AtpA e AtpD e induz a H+-F1F0-ATPase quando em condições ácidas
(Matsumoto et al. 2004; Cotter e Hill 2003). Sabe-se que essas proteínas, particularmente
H+-F1F0-ATPase, desempenham um papel importante na resistência a ácidos de bactérias
gram-positivas. Esta enzima é uma bomba de prótons que pode expulsar prótons do
citoplasma da célula, tornando a bactéria tolerante aos ácidos. O efeito do pH ácido na
expressão de proteínas em Lactobacillus reuteri também foi investigado usando
proteômica. Aproximadamente 40 proteínas foram identificadas que mudaram com a
exposição a um ambiente ácido e englobavam proteínas envolvidas no transporte e
ligação, homeostase do pH e estresse, metabolismo da energia do carbono e biossíntese
de aminoácidos (Lee et al. 2007). As proteínas superexpressas por L. reuteri em resposta
ao baixo pH incluíram gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase, fosfoglicerato mutase e
piruvato quinase. Isso provavelmente se deve ao fato de que as células modificam seu
metabolismo energético e o transporte de carboidratos em ambientes ácidos. Semelhante
ao Bifidobacterium, L. reuteri também demonstrou superexpressão da F1-ATPase para
aumentar a tolerância ao ácido.

Essas bactérias probióticas também adaptaram mecanismos de resistência à bile para

sobreviver à exposição aos sais biliares no trato gastrointestinal. Os sais biliares
desconjugados são tóxicos para as bactérias e podem danificar as membranas celulares,
causar desnaturação de proteínas ou induzir danos ao DNA e RNA (Begley et al. 2005). A
compreensão de alguns dos mecanismos subjacentes pelos quais essas bactérias
probióticas se tornaram tolerantes às condições de estresse biliar foi realizada por meio
da proteômica. O efeito dos sais biliares na tolerância ao estresse de Bifidobacterium
longum foi examinado usando 2-DGE e MALDI/TOF MS (Sanchez et al. 2005). Este
estudo proteômico se concentrou na identificação de mudanças na expressão dos
padrões de proteínas citosólicas sob estresse de sais biliares. Trinta e quatro proteínas

1269
alteradas com estresse de sais biliares com xilulose 5-fosfato/frutose 6-fosfato
fosfocetolase significativamente regulada positivamente. Esta proteína é uma enzima
chave no desvio bifidobacteriano. As outras proteínas que mudaram foram principalmente
associadas à exposição à bile e estão envolvidas na resposta ao estresse, metabolismo,
síntese de proteínas e glicólise e catabolismo do piruvato. Isso sugere que a ativação de
proteínas nessas vias tinha como objetivo proteger as bactérias do estresse oxidativo,
danos aos ácidos nucléicos e acidificação do pH. Este estudo também destacou que
várias proteínas envolvidas em muitas vias fisiopatológicas são responsáveis pela
tolerância aos sais biliares em Bifidobacterium longum. A fim de proteger a membrana
celular dos danos dos sais biliares, evidências proteômicas mostraram que o
Bifidobacterium também aumenta a produção de exopolissacarídeos (Ruas-Madiedo et al.
2009). Os exopolissacarídeos são polissacarídeos associados à superfície que cobrem as
células bacterianas e formam a “cápsula” (Nwodo et al. 2012). Evidências proteômicas
revelaram que cepas de Bifidobacterium tolerantes à bile aumentam a produção de
exopolissacarídeos para torná-la mais tolerante ao estresse biliar e ao ambiente ácido no
trato gastrointestinal. Os níveis de proteoma também foram investigados em Lactobacillus
rhamnosus GG em resposta ao estresse de sais biliares (Koskenniemi et al. 2011).
Quarenta e duas proteínas foram expressas diferencialmente, das quais 14 proteínas
aumentaram sob estresse biliar e também se correlacionaram com alterações no
transcriptoma. As proteínas identificadas incluem aquelas envolvidas nas vias associadas
às propriedades do envelope celular, remoção ativa de compostos biliares da célula
bacteriana, respostas ao estresse e processos metabólicos. Curiosamente, embora as
proteínas envolvidas no espessamento da camada de exopolissacarídeo tenham sido
identificadas, os autores notaram que uma proteína dedicada à remoção ativa de
compostos biliares das paredes celulares foi significativamente regulada positivamente,
fornecendo um meio pelo qual essa bactéria é tolerante à bile. Embora mais pesquisas
devam ser feitas com relação aos mecanismos moleculares dos efeitos dos probióticos na
saúde, a proteômica tem sido fundamental para aumentar nossa compreensão de alguns
dos mecanismos moleculares subjacentes das bactérias probióticas e como eles superam
os desafios quando usados para tratar distúrbios gastrointestinais.

4. Comentários finais e orientações futuras

Nutracêuticos e alimentos funcionais são uma promessa significativa na melhoria da
saúde animal e na prevenção de doenças. Embora as aplicações clínicas e os benefícios
para a saúde dessas disciplinas nutricionais sejam bem avaliados, ainda há uma
1270
necessidade de obter uma compreensão mais profunda dos mecanismos moleculares
responsáveis por seus supostos benefícios para a saúde. A proteômica está evoluindo
como uma ferramenta promissora que pode fornecer esse conhecimento científico para
vincular dieta e doença na pesquisa nutricional. Além disso, mais estudos de longo prazo
podem ser necessários para entender melhor seu papel e benefícios para as condições
médicas e a saúde animal em geral.

Referências
Anderson NL, Anderson NG (2002) The human plasma proteome. Mol Cell Proteomics 1:311–326
Andringa NK, King AL, Eccleston HB et al (2010) Analysis of the liver mitochondrial proteome in response to ethanol
and S-adenosylmethionine treatments: novel molecular targets of disease and hepatoprotection. Am J Physiol
Gastrointest Liver Physiol 298: G732–G745
Bailey SM, Robinson G, Pinner A et al (2006) S-adenosylmethionine prevents chronic alcohol-induced mitochondrial
dysfunction in the rat liver. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol 291: G857–G867
Bauer JE (2011) Therapeutic use of fish oils in companion animals. J Am Med Assoc 239:1441–11451
Bautista AC, Moore CE, Lin Y et al (2015) Hepatopathy following consumption of a commercially available blue-green
algae supplement in a dog. BMC Vet Res 11:136. https://doi.org/10.1186/s12917-015-0453-2
Begley M, Gahan CG, Hill C (2005) The interaction between bacteria and bile. FEMS Microbiol Rev 15(8):625–651
Blum K, Meshkin B, Downs BW (2006) DNA based customized nutraceutical “gene therapy” utilizing a genoscore: a
hypothesized paradigm shift of a novel approach to the diagnosis, stratification, prognosis and treatment of inflammatory
processes in the human. Med Hypotheses 66(5):1008–1018
Bybee SN, Scorza AV, Lappin MR (2011) Effect of the probiotic E. Faecium SF68 on the presence of diarrhea in cats
and dogs housed in an animal shelter. J Vet Intern Med 25(4):856–860
Center SA, Warner KL, Erb HN (2002) Liver glutathione concentrations in dogs and cats with naturally-occurring liver
disease. Am J Vet Res 63:1187–1197
Cho JG, Geghart CJ, Furrow E et al (2015) Assessment of in vitro oxalate degradation by Lactobacillus species
cultured from veterinary probiotics. Am J Vet Res 76(9):801–806
Cotter PD, Hill C (2003) Surviving the acid test: responses of gram-positive bacteria to low pH. Microbiol Mol Biol Rev
67:429–453
Das M, Das S (2016) Identification of cytotoxic mediators and their putative role in the signaling pathways during
docosahexaenoic acid (DHA)-induced apoptosis of cancer cells. Apoptosis 21(12): 1408–1421
Görg A, Obermaier C, Boguth G et al (2000) The current state of two-dimensional electrophoresis with immobilized pH
gradients. Electrophoresis 21:1037–1053
Guo T, Chang L, Xiao Y et al (2015) S-adenosyl-L-methionine for the treatment of chronic liver disease: a systematic
review and metaanalysis. PLoS One 10(3):e0122124
Gupta RC (2016) Nutraceuticals in arthritis. In: Gupta RC (ed) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity. Academic
Press/Elsevier, Amsterdam, pp 161–176
Hamdan M, Righetti PG (2002) Modern strategies for protein quantification in proteome analysis: advantages and
limitations. Mass Spectrom Rev 21:287–302
Hansen RA, Anderson C, Fettman MJ et al (2011) Menhaden oil administration to dogs treated with radiation for nasal
tumors demonstrates lower levels of tissue eicosanoids. Nutr Res 31:929–936
Issaq HJ, Chan KC, Janini GM et al (2005) Multidimensional separation of peptides for effective proteomic analysis. J
Chromatogr B 817:35–47
Koskenniemi K, Laakso K, Koponen J et al (2011) Proteomics and transcriptomics characterization of bile stress
response in probiotic Lactobacillus rhamnosus GG. Mol Cell Proteomics 10(2).
https://doi.org/10.1074/mcp.M110.002741–2
Lee K, Lee H, Pi K et al (2007) The effect of low pH on protein expression by the probiotic bacterium Lactobacillus
reuteri. Proteomics 8:1624–1630
Li X, Wang W, Chen J (2017) Recent progress in mass spectrometry proteomics for biomedical research. Sci China
Life Sci 60:1093–1114
Matsumoto M, Ohishi H, Benno Y (2004) H+-ATPase activity in Bifidobacterium with special reference to acid
tolerance. Int J Food Microbiol 93:109–113
Mudronova D, Karaffova V, Csank T et al (2018) Systemic immune response of gnotobiotic mice infected with porcine
circovirus type 2 after administration of Lactobacillus reuteri L26 Biocenol™. Benef Microbes 20:1–12
Navarro SL, White E, Kantor ED et al (2015) Randomized trial of glucosamine and chondroitin supplementation on
inflammation and oxidative stress biomarkers and plasma proteomics profiles in healthy humans. PLoS One
10(2):e0117534. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0117534

1271
 Nwodo UU, Green E, Okoh AI (2012) Bacterial exopolysaccharides: functionality and prospects. Int J Mol Sci
13(11):14002–14015
Ogilvie GK, Fettman MJ, Mallinckrodt CH et al (2000) Effect of fish oil, arginine, and doxorubicin chemotherapy on
remission and survival time for dogs with lymphoma: a double-blind, randomized placebocontrolled study. Cancer
88:1916–1928
Pomin VH (2015) Medical gains of chondroitin sulfate upon fucosylation. Curr Med Chem 22(35):4166–4176
Ruas-Madiedo P, Gueimonde M, Arigoni F et al (2009) Bile affects the synthesis of exopolysaccharides by
Bifidobacterium animalis. Appl Environ Microbiol 75:1204–1207
Sanchez B, Champonier-Verges MC, Anglade P et al (2005) Proteomic analysis of global changes in protein
expression during bile salt exposure of Bifidobacterium longum NCIMB 8809. J Bacteriol 187(16):5799–5808
Schmid RD, Hovda LR (2016) Acute hepatic failure in a dog after xylitol ingestion. J Med Toxicol 12(2):201–205
Schroder PC, Fernandez-Irigoyen J, Bigaud E et al (2012) Proteomic analysis of human hepatoma cells expressing
methionine adenosyltransferase I/III, characterization of DDX3X as a target of S-adenosylmethionine. J Proteomics
75:2855–2868
Sebbag L, Smee N, van der Merwe D et al (2013) Liver failure in a dog following suspected ingestion of blue-green
algae (Microcystis spp.): a case report and review of the toxin. J Am Anim Hosp Assoc 49(5):342–346
Solano-Aguilar G, Shea-Donahue T, Madden KB et al (2018) Bifidobacterium animalis subspecies lactis modulates the
local immune response and glucose uptake in the small intestine of juvenile pigs infected with the parasitic nematode
Ascaris suum. Gut Microbes 9(5):422–436. https://doi.org/10.1080/19490976.2018.1460014
Vandeweerd JM, Coisnon C, Clegg P et al (2012) Systematic review of efficacy of nutraceuticals to alleviate clinical
signs of osteoarthritis. J Vet Intern Med 26:448–456
Wallace KP, Center SA, Hickford FH et al (2002) S-adenosyl-L-methionine (SAMe) for the treatment of acetaminophen
toxicity in a dog. J Am Anim Hosp Assoc 38:246–254
Wang J, Ji H, Wang S et al (2018a) Probiotic Lactobacillus plantarum promotes intestinal barrier function by
strengthening the epithelium and modulating gut microbiota. Front Microbiol 9:1953.
https://doi.org/10.3389/fmicb.2018.01953
Wang J, Zeng Y, Liu H et al (2018b) Swine-derived probiotic Lactobacillus plantarum inhibits growth and adhesion of
entertoxicgenic escherichia coli and mediates host defense. Front Microbiol 9:1364.
https://doi.org/10.3389/fmicb.2018.01364
Webb CB, Twedt DC, Fettman MJ et al (2003) S-adenosylmethionine (SAMe) in a feline acetaminophen model of
oxidative injury. J Feline Med Surg 5:69–75
Zhang X, Fang A, Riley CP et al (2010) Multi-dimensional liquid chromatography in proteomics—a review. Anal Chem
Acta 664 (2):101–113

1272
 Nanopartículas e sistema de entrega molecular para
biodisponibilidade de nutracêuticos
Gianfranco Risuleo e Camillo La Mesa

Resumo
Esta contribuição discute métodos de transferência de materiais exógenos e drogas,
particularmente, em tecidos biológicos. O foco está em matrizes como micelas, vesículas
e dispersões à base de óleo, bem como nanotubos de carbono. Um conjunto de forças
físicas desempenha um papel fundamental na dispersão da droga e inclui van der Waals
(vdW), estérica (ST), camada dupla, (DL), osmótica (OS), etc. A combinação dessas
forças é responsável pela absorção da droga em matrizes e para sua liberação nos
tecidos. A absorção de moléculas exógenas macro ou pequenas em partículas de carga e
sua transferência para as células receptoras é o resultado de processos complexos,
concomitantes à partição do fármaco entre os agregados supramoleculares e o volume.
Conclusões semelhantes se aplicam à liberação de drogas, principalmente quanto às
características cinéticas em questão; portanto, a adsorção de nutracêuticos e a liberação
nos órgãos-alvo são particularmente relevantes. Essas características complexas podem
ser explicadas com base na termodinâmica e expressas como a combinação de
diferentes forças. A seguir, alguns detalhes sobre as energias a serem consideradas são
delineados. Isso inclui termos que controlam o destino dos transfectantes.
Consideraremos primeiro as forças responsáveis pela formação de tais entidades
supramoleculares em bases físico-químicas e a absorção da droga; finalmente,
revisaremos a possibilidade real de transfecção de agregados mediados por carga de
complexos de nanopartículas/drogas para células ou tecidos de interesse e sua
bioatividade após a liberação na matriz celular.

Palavras-chave: Nanopartículas · Adsorção/partição/liberação · Termodinâmica · Ação

biológica · Citotoxicidade · Genotoxicidade · Células cultivadas · Organismos vivos

G. Risuleo. Department of Biology and Biotechnologies “Charles Darwin”, Sapienza University of Rome,
Rome, Italy e-mail: gianfranco.risuleo@uniroma1.it

1273
1. Introdução
Devido à complexidade dos tópicos tratados neste capítulo, os autores decidiram não
introduzir figuras e/ou tabelas no texto. Duas são as razões que estão na base desta
escolha: primeiro, os números referentes especificamente à parte físico-química teriam
sido, possivelmente, não prontamente inteligíveis para o leitor em geral, que na visão dos
autores está bastante interessado em mais características gerais das nanopartículas e na
sua fabricação. A segunda razão é que as figuras que ilustram aspectos muito específicos
e resultados experimentais obtidos em células de cultura ou em sistemas de modelos de
animais vivos não teriam adicionado informações mais gerais sobre seu uso potencial na
medicina humana e veterinária. Aliás, também neste capítulo, os autores tentaram
intencionalmente adotar uma linguagem muito simples, destinada a atingir um público o
mais amplo possível. Em outras palavras, objetivamos compor um texto compreensível
tanto para cientistas ativos na pesquisa biomolecular de compostos naturais, onde a parte
bioquímica/física é fundamental, quanto para o leigo interessado em formas alternativas
de olhar para nutrição e cuidados com a saúde em humanos e outros animais. Os autores
sentem, na verdade, o interesse explosivo nos hábitos emergentes de nutrição e saúde
deve ser patrimônio de todos.

Uma palavra final de advertência: a revisão pode parecer um tanto repetitiva, mas isso foi
feito de propósito. O leitor pode pular algumas partes consideradas muito especializadas
ou fora do campo de interesse. A mesma informação será reiterada em diferentes pontos
do capítulo. Em todo caso, as abundantes referências feitas ao final do texto principal
permitirão ao leitor aprofundar-se nos assuntos de interesse.

2. Matrizes Avançadas para Veículos de Drogas: Aspectos Físico-

Químicos dos Nanomateriais para Entrega Molecular
A absorção de drogas pelas células e tecidos biológicos é o resultado de um equilíbrio
complexo entre muitas forças físicas que contribuem conjuntamente para esses
processos; seu papel é hierarquicamente controlado pelas contribuições de energia
relacionadas. Do ponto de vista termodinâmico, deve-se considerar a absorção de drogas
em um determinado tecido em analogia com a partição de uma espécie entre fluidos
imiscíveis, como água e óleo, por exemplo (Leo et al. 1971; Bolhassani e Rafati 2011;
Florence e Attwood 1988). Essa visão simplificada do que efetivamente ocorre nos
sistemas reais é extremamente útil nas estratégias de formulação atuais.

1274
Além disso, a absorção da droga em um órgão é o resultado de um comportamento
complexo, ditado pelo fato de que o primeiro nunca se dispersa exclusivamente naquele
tecido. A partição depende da semelhança (em termos de polaridade, por exemplo) da
espécie com o tecido. Isso implica que, para que um medicamento seja eficaz em relação
a um órgão específico, são necessárias uma estrutura química, uma dispersão específica
e estratégias de transferência. Dado o complexo equilíbrio hidrofílico/lipofílico inerente a
todos os tecidos biológicos (Porter 1993; Barkat et al. 2011), devemos contar com
estratégias capazes de dispersar substancialmente o fármaco a ser transferido no órgão
alvo, minimizando assim sua partição em tecidos indesejáveis e aumentando sua
eficiência tópica. Essas estratégias aumentarão a dose no órgão, ainda diminuindo a
quantidade total do medicamento na formulação (ou seja, os produtos resultam menos
tóxicos para o corpo humano).

Qualquer que seja a transportadora, seus recursos são otimizados quando ela se
comporta de forma análoga a uma bala atingindo um órgão. Em outras palavras, a
formulação contendo o medicamento deve ser seletiva em relação a um determinado
tecido, denominado alvo. Essa hipótese nunca se concretiza na prática,
independentemente dos cuidados com a otimização da formulação e também da
qualidade do medicamento. Pense em dispersões à base de óleo, por exemplo; estes
dissolvem drogas lipofílicas em quantidades mais ou menos substanciais. As dispersões à
base de óleo disponíveis não se dispersam facilmente nas matrizes biológicas, quando
sua viscosidade, parcialmente responsável pela mobilidade do fármaco, é alta. Não é
surpreendente, portanto, que as dispersões à base de óleo sejam destinadas a
procedimentos de transferência de longo a médio prazo. Além disso, deve-se considerar
se tais dispersões devem ser usadas para injeção ou tratamento de pele.

Nesta linha, devemos estar atentos às estratégias preferidas a serem cumpridas na

prática. A seguir, relatamos alguns aspectos relacionados à partição de medicamentos em
portadores selecionados (Cammasab et al. 1997) e explicamos quais contribuições devem
ser otimizadas para tornar a absorção efetiva. Em uma primeira aproximação, lembramos
que um fármaco é particionado entre dois fluidos imiscíveis de acordo com o que é ditado
pela energia de Gibbs de transferência entre duas fases. Essa relação quantifica o
coeficiente de partição do fármaco ao equalizar o potencial químico do produto químico
dissolvido em líquidos imiscíveis. As propriedades físicas dos líquidos (isto é, momento
dipolar, permissividade dielétrica, viscosidade, tensão interfacial, capacidade de ligação
de hidrogênio e assim por diante) são relevantes. Água e octan-1-ol não tóxico são, em
conjunto, solventes de referência; eles representam mídia altamente polar e fortemente

1275
apolar, respectivamente (Andersson e Schräder 1999; Moriguchi et al. 1992). É bem
conhecido, de fato, que o coeficiente de partição de um fármaco entre dois meios
depende do gradiente de permissividade dielétrica entre dois fluidos e é racionalizado
pela equação de Born (Monk 1961). Originalmente desenvolvida para partição de íons
entre dois fluidos, a equação relaciona a energia de Gibbs de transferência da fase
aquosa para o óleo ao gradiente de permissividade dielétrica entre eles, eWa e eO,
respectivamente, de acordo com

A relação acima se refere às propriedades físicas básicas da mídia acima e não explica
explicitamente os efeitos da temperatura, T, força iônica, I e pH (embora estes, ou os
respectivos gradientes, possam ser inseridos de alguma forma na teoria original). O
modelo funciona bem para líquidos imiscíveis, como água e octan-1-ol, se a temperatura
das duas fases for a mesma. Embora o octan-1-ol seja considerado um solvente de
referência, raramente é usado na formulação.

Que métodos estranhos são possíveis na distribuição de drogas? Tudo isso deve garantir
a captação de uma quantidade significativa do fármaco no tecido-alvo; o último pode ser
polar ou não. Esse fato tem consequências sobre a melhor forma necessária para
dissolver o medicamento nele. Em alguns casos, as drogas são transformadas em sais de
ácido (na forma de cloridratos, geralmente) quando os tecidos-alvo são fortemente
polares. Alternativamente, eles podem formar complexos com éteres de coroa (Muzzalupo
et al. 2007; Vintiloiu e Leroux 2008) ou espécies semelhantes e também com
ciclodextrinas (Loftsson et al. 2005). Os últimos são unidades de sacarídeo unidas para
formar um orifício, cuja largura depende do número de unidades de açúcar na molécula.
Quando os éteres de coroa são destinados ao transporte de íons, as ciclodextrinas
encontram uso preferencial com pequenas espécies hidrofóbicas. Métodos mais refinados
dependem do transporte de drogas por géis (Qiu e Park 2012), dendrímeros, nanotubos
de carbono (Patri et al. 2005; Bianco et al. 2005) e muitas outras entidades
supramoleculares, algumas das quais são discutidas abaixo.

Nós nos concentramos em dois dispersantes selecionados, representativos do

comportamento do tipo líquido e do tipo sólido, respectivamente. Vesículas catiônicas
(Pucci et al. 2014a-c) e nanotubos de carbono, CNTs, são representantes de entidades
quase esféricas e fortemente anisométricas, por sua vez. As vesículas retêm espécies
hidrofílicas na superfície interna e externa, mas hidrofóbicas na bicamada, enquanto os
CNTs adsorvem espécies polares na superfície externa apenas quando estão
1276
adequadamente funcionalizados. A quantidade de produtos químicos de pequeno porte
que podem ser absorvidos pelo interior dos nanotubos é moderada. Assim, os CNTs retêm
quantidades muito pequenas de moléculas na região polar interna. Além disso, as
vesículas têm elasticidade de curvatura significativa, quando os CNTs são relativamente
rígidos. Em certo sentido, portanto, vesículas e CNTs estão nos limites extremos da
classe de dispersantes de drogas.

A estabilidade das formulações à base de drogas depende das matrizes de dispersão. Em

particular, os termos de energia superficial tornam-se cada vez mais significativos à
medida que o tamanho dos adutos de droga/transportador diminui. Na verdade, a tensão
superficial de tais sistemas, g, é expressa como

A equação (2) explica como a área de superfície pode ser controlada, e um

aumento/diminuição dela é a base de uma estratégia de trabalho ótima.

Esses fatos oferecem a oportunidade de estender a aplicação a portadores semelhantes a

colóides; entre eles, nanotubos de carbono, micelas, sistemas de polímero-surfactante,
vesículas ou lipossomas são os mais atraentes (Weinstein e Leserman 1984; La Mesa
2005; Fadel e Fahmy 2014; Grumezescu 2018).

3. Vesículas e agregados relacionados

Essas entidades são caracterizadas conjuntamente por termos de energia de superfície
peculiares. No entanto, os portadores baseados nas espécies acima diferem amplamente
uns dos outros na capacidade de solventes em relação às drogas. Em tais sistemas, os
termos de energia hidrofóbica e de superfície se sobrepõem e se combinam com os
eletrostáticos. Micelas, sistemas surfactantes poliméricos, lipossomas e vesículas são
caracterizados pela presença de cargas nas respectivas superfícies. Este fato implica
muitos efeitos marcantes, que em conjunto contribuem para:

(i) Estabilização de micelas/vesículas

(ii) A formação de uma dupla camada elétrica em torno de tais entidades

(iii) Modulação de tamanho

(iv) Conformação da cadeia de polímero no caso de sistemas surfactantes de polímero e

assim por diante

1277
Macromoléculas como aquelas indicadas em (iv) são adjuvantes surfactantes em
procedimentos modernos de transferência de drogas. Por exemplo, os comprimidos
contêm dodecil sulfato de sódio, SDS ou carboxilatos de potássio, com óxido de
polietileno, PEO e/ou polivinil pirrolidona, PVP (para mencionar apenas alguns) (Karthik
2016). Os dois produtos químicos em cada uma dessas formulações operam em forma
associada (como complexo polímero/surfactante) como dispersantes e moduladores de
viscosidade (La Mesa 2005). Nós, deliberadamente, não consideramos aqui o uso de
sistemas surfactantes de polímero em fraldas para bebês, embora o uso putativo desses
sistemas seja às vezes anunciado em comerciais. Na verdade, a literatura científica que
apóia ou desencoraja essas ajudas não é corroborada por evidências (Degouy et al.
2014).

Voltando aos modos de associação supramolecular, vamos apontar que cabeças polares
com carga semelhante, localizadas em interfaces, se repelem. Esse processo neutraliza o
efeito hidrofóbico; é de alguma forma modulado a partir de contra-íons que absorvem
parcialmente na interface e reduzem a carga líquida nos agregados. Desta forma, um
empacotamento da cabeça polar mais denso/mais solto é favorecido e a área de
superfície otimizada. Indiretamente, as contribuições de volume para a energia do sistema
(que são opostas em sinal às de superfície) também são moduladas. O modo de
automontagem do surfactante obtido desta forma é definido como “restrição de
empacotamento” (teoria PC, ver abaixo, conforme discutido em Tanford 1980; Safran et al.
1990; Nagarajan 2002). Definido originalmente por Israelachvili et al. (1976), tem alguns
pontos em comum com a nucleação de uma partícula, seja ela um sólido ou um fluido. A
associação de surfactantes é determinada pelo equilíbrio dos termos de energia de
superfície e volume, de sinal oposto. O potencial químico da espécie em questão depende
de tais contribuições e define o tamanho do agregado mais compatível com a energia
mínima de Gibbs. Esse fato encontra analogia com a nucleação de gotículas de óleo
dispersas em um determinado meio (Morris et al. 1997); eles começam a se formar e
crescer em tamanho somente quando um raio crítico é atingido. A agregação do
surfactante, por outro lado, é determinada pelo equilíbrio da transferência (atrativa) de
cadeias de hidrocarbonetos no interior da micela e é contrariada pela combinação dos
termos de tensão superficial e densidade de carga superficial.

A teoria de PC tem vantagens significativas em comparação com a teoria de nucleação

clássica. Em particular, ele determina o tamanho ideal que uma molécula/íon de
surfactante deve ter para compactar em entidades de uma dada curvatura, seja ela
positiva ou negativa. Ao fazer isso, combinamos termos de energia de superfície e efeitos

1278
de volume (contribuindo conjuntamente para o potencial químico de uma dada espécie)
com a geometria preferida dos agregados que obteríamos. As vantagens devido às
considerações acima são terríveis nas estratégias de formulação modernas e podem ser
obtidas por ações experimentais adequadas, adicionando sais ou co-tensoativos, por
exemplo. Entre muitas outras vantagens, a teoria do PC explica porque o sal adicionado
favorece a formação de micelas semelhantes a bastonetes em relação às esféricas
(Hayashi e Ikeda 1980; Alargova et al. 1997; Zoeller e Blankschtein 1998). Também é
responsável pela densidade de carga superficial residual que controla a formação de
vesículas cataniônicas termodinamicamente estáveis (Bonincontro et al. 2007, 2008). A
sigla indica que tais misturas contêm espécies catiônicas e aniônicas em quantidades
variáveis. As últimas vesículas são transfectantes atraentes por uma série de razões
(Jung et al. 2001; Lo et al. 2010; Barbetta et al. 2011; Coey et al. 2011; Louzao e van der
Hest 2013; Pucci et al. 2014a – c), a saber:

(i) A modulação da densidade de carga superficial favorece um tamanho de vesícula ideal.

(ii) Um empacotamento ideal das cadeias alquil em bicamadas é possível.

(iii) A absorção do fármaco no interior da vesícula, ou na superfície externa, é favorecida.

(iv) Uma bicamada ótima e elasticidade de curvatura podem ser obtidas.

Quanto às consequências biológicas do uso de vesículas do tipo catiônico, uma relevante

encontra origem na baixa citotoxicidade de tais vesículas (ordens de magnitude inferior
aos agentes tensoativos de que são feitas) (Moroi e Matuura 1988; Muzzalupo et al.
2006). Considere que quando o SDS é fortemente citotóxico e o brometo de
cetiltrimetilamônio, CTAB ou brometo de didodecildimetilamônio, DDAB, ainda mais, as
vesículas formadas por misturas de tais substâncias são pouco tóxicas, senão de todo
(Kuo et al. 2005; Aiello et al. 2010). Esse ponto é bastante contra intuitivo para o senso
comum, a menos que se esteja ciente do fato de que a toxicidade do surfactante para os
tecidos biológicos depende de sua solubilidade na forma molecular. Não é surpreendente,
portanto. Na verdade, a concentração de surfactante (s) na forma molecular coexistindo
com vesículas catiônicas é ordens de magnitude menor do que a pertinente a agregados
feitos por um único surfactante. Esse comportamento é racionalizado pelo chamado
parâmetro de interação surfactante-surfactante (Muzzalupo et al. 2006), determinado por
comparação com o comportamento esperado da mistura ideal das espécies em questão.
A cooperatividade é concomitante a uma diminuição na concentração de surfactante
molecular na massa e é proporcional a b. Em outras palavras, o processo mencionado
encontra analogia com a metátese. Refinamentos adicionais são possíveis se alcanóis ou
esteróis ou então forem adicionados a formulações catiônicas; em particular, os últimos
1279
produtos químicos favorecem um empacotamento de cadeia alquílica mais densa e um
caráter mais robusto para as bicamadas. Em casos selecionados, os polímeros se
adsorvem na superfície da vesícula e se ancoram nela graças à ação combinada de
interações iônicas e captação de cadeia alquila, se polímeros modificados
hidrofóbicamente, HMPs, forem usados (Sallustio et al. 2004). A última possibilidade tem
sido usada para modular o tamanho da vesícula (Pucci et al. 2014a – c) e, eventualmente,
para favorecer sua facetação. Mais vantagens estão na possibilidade de acondicionar
diferentes vesículas em superestruturas.

As drogas podem ser seletivamente particionadas na superfície externa/interna da

vesícula, em seu interior e na piscina aquosa interna. Portanto, diferentes possibilidades
de formulação (como adsorção superficial, captação seletiva em matrizes hidrofóbicas ou,
inversamente, matrizes polares) estão em nossas mãos, dependendo da natureza
química do fármaco a ser transferido. Esta é a razão para o uso amplamente difundido de
formulações catiônicas em muitos campos biomédicos diferentes. Implicações biológicas
e sugestões para um uso otimizado e seletivo das misturas catiônicas mais comuns (e
também mais promissoras) são descritas abaixo. O que foi considerado no caso das
espécies catiônicas mencionadas acima pode ser estendido a muitas outras espécies.
Com certeza é válido para misturas de fosfolipídios (Lozano et al. 2009). Mais
recentemente, esforços têm sido feitos por grupos de pesquisa em colaboração ativos no
campo. A ideia básica subjacente à hipótese de trabalho é que os surfactantes com
aminoácidos como grupo de cabeça polar são caracterizados por uma citotoxicidade
muito baixa (Pinazo et al. 2011; Colomer et al. 2012; Mezei et al. 2012). Se
considerarmos, além disso, que a quantidade de surfactante na forma molecular que
coexiste com as vesículas é, como regra, extremamente baixa (na faixa dos micromoles),
é razoavelmente assumido que as vesículas catatônicas construídas em conformidade
têm muito baixo, se houver, citotoxicidade (Muzzalupo et al. 2017; Tavano et al. 2017).
Além disso, tal hipótese foi substancialmente demonstrada, principalmente quando o pH
controla o estado de carga da vesícula. No melhor de nosso conhecimento, esses estão
entre os resultados mais promissores na área.

4. Nanotubos de carbono
Muitos sistemas feitos de porções de carbono estendidos são candidatos potenciais para
tecnologias de transfecção. No entanto, quando quase nada se sabe realmente sobre as
potencialidades oferecidas pelos derivados do grafeno, aqueles baseados em fulerenos
funcionalizados (Nakamura e Isobe 2003) tiveram algum sucesso. Ainda mais bem
1280
sucedidos são aqueles baseados em nanotubos de carbono, CNT. Essas espécies têm
potencialidades de interesse substancial em aplicações biomédicas. Primeiro, eles têm
cavidades internas; segundo, suas superfícies externas podem ser devidamente
funcionalizadas, quando necessário (como veremos a seguir, esse procedimento é quase
obrigatório). Além disso, apresentam excelentes propriedades físico-mecânicas, como
elasticidade e comportamento condutor/semicondutor. Em termos do que é declarado em
muitos livros e resenhas, suas propriedades são principalmente destinadas à engenharia
(Hone et al. 1999; Arroyo e Belytschko 2004); incluímos na categoria a preparação de
novos materiais duros para a engenharia de tecidos. No entanto, esforços substanciais
foram feitos recentemente por diversos cientistas para torná-los adequados para
aplicações biológicas refinadas (Popov et al. 2007; Heister et al. 2013; Amenta e
Aschberger 2015). Para proceder ao longo desta linha, deve-se estar ciente do fato de
que as altas relações de aspecto (ou seja, a relação tubo/diâmetro) pertinentes aos CNT
e, principalmente, o caráter fortemente hidrofóbico de suas superfícies externas dificultam
substancialmente a preparação de produtos/materiais biomedicamente avançados
relevantes. Em particular, altas razões axiais implicam que filamentos longos de CNT
(vários nm de comprimento) facilmente formam andaimes simplesmente pressionando ou
de outras maneiras. Como regra, os procedimentos de reticulação não são estritamente
necessários, uma vez que o forte caráter hidrofóbico dos CNT garante uma energia de
interação substancial e agregação significativa.

Os nanotubos são obtidos porque as relações muito específicas dos anéis de cinco/seis
carbonos garantem-lhes uma curvatura de superfície adequada. A laminação de
monocamada de carbono pode parar para dar nanotubos de carbono de parede única,
SWCNT, ou, posteriormente, de paredes múltiplas, MWCNT. Quanto às propriedades da
superfície, não há diferença substancial entre essas duas classes, que, no entanto,
diferem amplamente em elasticidade, rigidez e assim por diante. Sua reatividade química
é principalmente ativa nas superfícies externas, devidamente funcionalizadas por
procedimentos drásticos de oxidação, usando misturas de HNO 3/H2SO4 ou H2O2 ou outros
agentes (Ajayan et al. 1993; Tsang et al. 1993). Nos casos acima, o carboxilato ou o grupo
OH se fixam na superfície, enquanto o comprimento total do CNT é drasticamente
reduzido. Desta forma, as propriedades elásticas do CNT são minimizadas, enquanto a
reatividade química aumenta amplamente. Essa dualidade dá a oportunidade de distinguir
entre o CNT destinado à engenharia, o primeiro e o bioinspirado. A funcionalização da
superfície, de fato, é a estratégia-chave que leva à biocompatibilidade.

1281
Os CNT primitivos são pouco estabilizados em meio aquoso e se associam por interações
vdW para formar feixes. Este fato reduz fortemente as aplicações possíveis e deve ser
severamente minimizado. Esta é a razão pela qual a cobertura de superfície é relevante.
Esse processo pode ser obtido por procedimentos de funcionalização covalente, conforme
descrito acima, ou por procedimentos não covalentes. Entre os mais usados, citaremos a
adsorção de surfactante (Bandyopadhyaya et al. 2002; Islam et al. 2003; Wang 2009;
Vaisman et al. 2006) ou polímero (Liu 2005; Spitalsky et al. 2010; Huang e Terentjev
2012). A primeira categoria implica a adsorção de tensoativos de cadeia média/longa,
iônicos ou não. É bem conhecido, entretanto, que a eficiência na adsorção do surfactante
é limitada inferior e superiormente. A justificativa para esse comportamento inesperado
surge por fenômenos de esgotamento (Tardani et al. 2012). O surfactante, para simplificar,
divide-se entre o estado da superfície e o volume, onde também pode formar agregados
micelares, ou seja, íons, micelas e estados ligados à superfície. O potencial químico das
espécies de superfície ativa depende do equilíbrio entre todos esses estados. Como
resultado de efeitos osmóticos desequilibrados na massa, as espécies adsorvidas na
superfície tendem a se desprender dos nanotubos e formar mais micelas. Assim, os CNT
não mais cobertos pela superfície interagem diretamente para formar feixes e se
separarão facilmente da solução. Observe que o último efeito não é peculiar aos CNT e
foi brilhantemente explicado alguns anos atrás por De Gennes (1981).

Uma alternativa aos surfactantes depende de polímeros. A maioria deles sofre das
mesmas desvantagens descritas acima; em muitos casos, a adsorção é moderada e
limitada superiormente, principalmente no caso de pequenas proteínas (Bomboi et al.
2013). Existem exceções a essas regras gerais; o mais proeminente é aquele observado
quando o DNA de fita simples se adsorve aos CNT. Para aqueles que não estão
explicitamente cientes desse método, lembramos que a forma estável do DNA de fita
dupla pode ser transformada em dois filamentos pela ação do calor. A 95 ºC, em média, a
dupla hélice se funde em dois filamentos, que podem permanecer por muito tempo nesse
estado se a solução for resfriada termicamente. A adição de CNT permite uma cobertura
eficiente da superfície. A diferença entre nanotubos de impressão, estabilizados com
surfactante e cobertos de fita simples é surpreendente. A solubilidade dos dois primeiros
estados está na faixa de mg*kg –1, quando o último pode ser tão alto quanto algumas
porcentagens em peso. Este fato permitiu determinar com algum detalhe o diagrama de
fases dos sistemas ss-DNA/CNT e visualizar a formação da ordem nemática nos mesmos
(Tardani et al. 2012, 2013; Tardani e Sennato 2014). A única possibilidade de utilizar tais
formulações para fins biomédicos é devido à possível adsorção de fármacos em

1282
nanotubos funcionalizados. Em outras palavras, os CNT atuariam como superfícies nas
quais os adutos de polímero/droga são adsorvidos!

As únicas vantagens significativas das formulações baseadas em biopolímeros e CNTs

são devido à sua alta biocompatibilidade, conforme demonstrado por alguns de nós em
casos selecionados (Muzi et al. 2016a, b; Risuleo e La Mesa 2016). Assim, mesmo que a
quantidade de droga veiculada seja moderada, toda a estratégia é eficaz.
Alternativamente, podemos usar formulações baseadas em CNT levando em
consideração a presença de uma cavidade nas mesmas; o último pode ser preenchido
com pequenas drogas, como foi demonstrado no caso da terapia anticâncer à base de cis
platina (Muzi et al. 2015a, b). A última espécie entra nas cavidades dos nanotubos, sendo
todo o processo controlado pelos tamanhos das respectivas espécies. Uma vez que os
complexos internos com cis platina são liberados no tecido infectado, ocorre uma
liberação lenta do medicamento. A força motriz para isso é o resultado de uma
combinação de difusão, gradientes de concentração e concentração de íons no órgão
alvo.

5. Nanomateriais como cargas de moléculas biológicas: uso potencial

em estratégias terapêuticas avançadas
O número, a natureza e a sofisticação dos transportadores moleculares para a entrega de
material exógeno dentro de uma célula viva são diversificados e, em muitos casos, têm
finalidades diferentes. Portanto, por uma questão de concisão, vamos nos concentrar
principalmente em três nanopartículas diferentes, ou seja: lipossomas catiônicos,
vesículas catiônicas e nanotubos de carbono de parede simples.

A maior parte ou os resultados aqui discutidos foram obtidos em nossos laboratórios ou

em laboratórios de estreita colaboração: aliás, a nanociência, embora em um estágio de
desenvolvimento ainda rápido, requer um esforço multidisciplinar onde participam
cientistas com expertises diversas, mas complementares. No entanto, as realizações de
outros grupos de pesquisa também serão levadas em consideração.

6. Lipossomas
Devido à sua biocompatibilidade, os lipossomas estão entre os sistemas de liberação de
fármacos mais estudados. Além disso, a possibilidade de direcioná-los de forma seletiva
para diferentes tecidos e o custo/facilidade de produção favorável desempenha um papel

1283
importante na sua aplicação como agentes terapêuticos em medicina avançada. Vários
parâmetros físico-químicos determinam a validade dos lipossomas como partículas de
carga para o transporte de moléculas específicas, sejam elas: macromoléculas como
DNA, RNA e proteínas ou pequenas moléculas como hormônios, compostos naturais e/ou
fármacos em geral. O tipo e a quantidade de lipídios em sua formulação são cruciais. Por
exemplo, os lipossomas baseados em lípidos catiônicos não são encontrados na
natureza, mas são sintetizados no laboratório de química. Uma vez que são dotados de
uma carga líquida positiva, eles podem interagir prontamente com a membrana celular
carregada negativamente e os ácidos nucleicos (Simberg et al. 2004). Relativamente,
trabalhos recentes têm evidenciado sua capacidade como carreadores de ácidos
nucléicos e carreadores/adjuvantes de vacinas (Joseph et al. 2006; Lonez et al. 2008). A
possibilidade de usar esse tipo de lipossoma como carreador de drogas para doenças
neoplásicas e outras doenças também foi examinada; em particular, os lipossomas
catiônicos são capazes de entregar especificamente sua carga útil a tecidos
embriologicamente diferentes, como tumores de origem endotelial, para os pulmões,
fígado e trato gastrointestinal. Portanto, eles se tornaram uma ferramenta muito atraente
para a administração oral de agentes terapêuticos na terapia do câncer. Uma outra
observação importante é que a interação deste tipo de lipossoma não interfere com as
características morfológicas e funcionais das células-alvo, conforme observado por
imagens ópticas e SFM, bem como estudos de RMN-metabolômica (Piccioni et al. 2007).

Finalmente, a ação antibacteriana dos lipossomas catiônicos também foi examinada em

microrganismos patogênicos Gram-negativos ou resistentes a antibióticos: na verdade, os
lipossomas podem aumentar a permeabilidade da membrana bacteriana, o que,
consequentemente, causa uma maior suscetibilidade à absorção de drogas (Hamblin e
Hasan 2004; Bombelli et al. 2008; Cosimati et al. 2013; Stefanutti et al. 2014). Para uma
visão sobre o papel desempenhado pela permeabilidade da membrana celular na
absorção de moléculas exógenas, as rotas de internalização e o tráfego intracelular, o
leitor também deve abordar um capítulo anterior deste livro escrito pelos mesmos autores
e referências nele. Para o uso potencial de lipossomas em terapia antiproliferativa
(anticâncer), o leitor é aconselhado a consultar as seguintes revisões recentes: Heidarli et
al. 2017; Olusanya et al. 2018; Deshantri et al. 2018.

7. Vesículas Catiônicas
As vesículas catiônicas são agregados supramoleculares formados pela mistura em
proporções não estequiométricas de espécies de surfactantes catiônicos e aniônicos
1284
(Letizia et al. 2007). Os surfactantes de carga oposta tendem a se agregar em solventes
polares aquosos. As interações eletrostáticas entre as cabeças polares e as caudas
hidrofóbicas favorecem a formação de estruturas supramoleculares automontadas e
organizadas. Uma extensa análise dos parâmetros que regem a formação e morfologia
pode ser encontrada no trabalho clássico de Israelachvili e colaboradores (Israelachvili et
al. 1977). As vesículas podem interagir facilmente com DNA, RNA ou outros biopolímeros,
assemelhando-se, neste caso, aos lipossomas discutidos acima. Também neste caso, os
complexos vesícula/macromolécula, comumente definidos como lipoplexos, assumem
uma importância fundamental nas aplicações biotecnológicas e biomédicas: de fato, suas
propriedades estruturais e funcionais intrínsecas atribuem-lhes a capacidade de entregar
material genético através da membrana celular via fusão da membrana plasmática e/ou
endocitose. O trabalho do nosso laboratório mostrou que é possível formar complexos
entre o DNA e as vesículas com um excesso de carga positiva na superfície, que podem
ser potencialmente entregues dentro da célula (Bonincontro et al. 2008). Porém, quanto à
sua biocompatibilidade, algumas ressalvas devem ser consideradas: as vesículas podem
apresentar um efeito citotóxico, que está diretamente relacionado ao tempo de exposição
e à dose de administração, bem como à natureza das frações catiônicas que as
compõem. Existe literatura sobre este aspecto específico (Kuo et al. 2005; Vlachy et al.
2009; Lozano et al. 2011), e o trabalho de nosso laboratório mostrou que SDS-DDAB são
muito mais citotóxicos do que aqueles formados com SDS e CTAB como contra-íon
hidrofóbico (Russo et al. 2013); além disso, estes últimos (SDS-CTAB) são capazes de
“atingir” as células tumorais de forma mais eficiente do que os fibroblastos normais de
camundongo, que apresentam uma taxa de sobrevivência/proliferação mais alta em
comparação com a população de células anterior (Aiello et al. 2010). No entanto, apesar
de sua citotoxicidade, é possível ajustar as condições experimentais, como tempo e dose
de tratamento, para permitir uma transfecção bem-sucedida mediada por vesículas com
subsequente expressão de material genético exógeno (Loftsson et al. 2005; Muzzalupo et
al. 2007).

Com relação a esse aspecto crucial, um dos principais interesses no uso de

nanopartículas como carreadores moleculares de material genético consiste em averiguar
o destino desse material, seja DNA ou RNA, ao entrar na célula receptora: ou seja, a
macromolécula transfectada é estável? Ele mantém seus recursos funcionais? As
características genéticas codificadas dentro da macromolécula podem ser transformadas
no produto funcional maduro? Abordamos essa questão transfectando RNA mensageiro
em células receptoras e medindo o nível do produto do gene codificado por ensaios CAT
padrão. O resultado nítido e claro é que o lipoplex catiônico/RNA transfectado é
1285
eficientemente traduzido metabolicamente em proteína que exibe epítopos funcionais
prontamente reconhecidos pelo anticorpo cognato, como mostrado por ensaios ELISA
(para um estudo dos efeitos do gene mediado por nanopartículas transferência no
metabolismo celular geral, ver Aiello et al. 2010; Russo et al. 2013; Cosimati et al. 2013;
Stefanutti et al. 2014). Finalmente, estudos-piloto indicam que as vesículas podem ser
utilizadas na terapia anticâncer (para revisões recentes, ver Wright 2008; Freire et al.
2015; Han et al. 2017).

8. Nanotubos
Para recapitular rapidamente, os nanotubos de carbono (CNTs) são folhas enroladas de
grafeno formando cilindros ou estruturas quase-cilíndricas; estes são encontrados em
formas de CNT concêntricas simples (SWCNT) ou de paredes múltiplas (MWCNT). Os
nanotubos têm inúmeras aplicações potenciais em bioquímica, nanomedicina,
farmacologia e indústria, como aviônica, bem como engenharia espacial (ver, por
exemplo, Prato et al. 2008; Ménard-Moyon et al. 2010; Venkatesan et al. 2014; Shtansky
et al. 2018, Krishna et al. 2018; Mohajeri et al. 2018).

Curiosamente, o grafeno foi recentemente implicado no desenvolvimento de preservativos

ultrafinos de alta resistência: a pesquisa foi financiada patrocinada por um chefe muito
conhecido de uma empresa de informática, mas não expandiremos este aspecto, embora
forneceremos um link útil para o leitor interessado nesta pesquisa de ponta
(https://www.extremetech.com/extreme/171417-bill-gates-funds-creation-of-thin-light-
impenetrablegraphene-condoms).

Em vez disso, restringiremos nossa discussão à administração de medicamentos e à

terapia potencial, incluindo o diagnóstico quando apropriado. O desenvolvimento de
biotecnologias baseadas em nanotubos requer a avaliação de alguns aspectos
preliminares, mas essenciais. Na verdade, como com outras nanopartículas, a
biocompatibilidade do CNT deve ser avaliada cuidadosamente tanto em sistemas de
cultura de células quanto em modelos animais: neste último caso, por exemplo, a
verificação de que eles não são tóxicos e não induzem respostas imunes é principalmente
importante. Além disso, uma vez que a membrana celular é a primeira barreira encontrada
pelo nanotubo na entrada da célula, um outro problema deve ser considerado. Os CNT
são pouco dispersíveis em solução aquosa; assim, eles estabelecem interações de van
der Waals (ver também acima, neste capítulo) que causam sua agregação em grandes
feixes que podem ser prejudiciais à integridade da membrana e/ou podem impedir sua

1286
passagem através dela (Holt et al. 2010). Inicialmente, SWCNT agrupados, não
purificados e longos foram associados a toxicidade e efeitos celulares negativos. Várias
moléculas dispersantes melhoram a dispersibilidade, principalmente as albuminas.
Investigações recentes conduzidas em nossos laboratórios demonstraram que nanotubos
de carbono não covalentes/complexos BSA não alteraram a viabilidade celular. Esses
nanocompósitos foram administrados a diferentes linhagens celulares de fibroblastos
murinos (NH3T6), células renais embrionárias humanas (HEK-293) ou macrófagos
murinos (RAW-294). Nenhuma mudança significativa na viabilidade celular foi monitorada
em células 3T6 e HEK 293 após exposição a diferentes concentrações de pristine ou
BSA-CNT. Um efeito citotóxico, pelo contrário, foi observado no caso de macrófagos
murinos tratados com CNT puro e estabilizado com BSA. A toxicidade diminuiu quando o
CNT foi revestido com BSA; isso evidencia que essa proteína aumenta a
biocompatibilidade. Em qualquer caso, a boa qualidade de dispersão destes complexos
BSA-CNT causou uma boa internalização de tipos celulares fagocíticos (macrófagos) e
não fagocíticos (fibroblastos). As observações realizadas por microscopia eletrônica de
transmissão mostraram que os complexos penetram nas células por uma difusão passiva
ou endocitose, que é um mecanismo ativo de suposição dependente de energia. No
entanto, o cruzamento da membrana plasmática não causou alterações dos parâmetros
dielétricos da membrana celular medidos por uma abordagem biofísica: eletro rotação
(Bonincontro e Risuleo 2015; Muzi et al. 2015a, b, 2016a, b).

Como uma segunda recapitulação, discutiremos nesta seção o papel do grafeno. O

grafeno está na base da tecnologia de nanotubos e consiste em uma folha plana de
átomos de carbono com a espessura de um átomo densamente compactada em uma
estrutura de cristal em favo de mel. O grafeno pode exibir diferentes formas que são
convencionalmente combinadas nos chamados materiais da família do grafeno e incluem
o grafeno de poucas camadas (FLG), óxido de grafeno, óxido de grafeno reduzido,
nanofolhas de grafeno, grafite ultrafino, fitas de grafeno e pontos de grafeno. Em qualquer
caso, FLG é constituído por 2–10 camadas de grafeno (Bianco et al. 2013) e compartilha
o elemento estrutural básico de outros alótropos de carbono, incluindo nanotubos de
carbono e fulerenos, mas sua história é bastante recente. No entanto, desde sua
descoberta, o grafeno tem sido objeto de grande interesse em muitos campos da ciência
básica e da indústria: isso se deve principalmente às características extraordinárias do
grafeno. Na verdade, a nanotecnologia baseada no grafeno representa hoje em dia uma
área de pesquisa científica e aplicações industriais em plena expansão (Liang e Chen
2010). O grafeno foi explorado inicialmente nas ciências dos materiais, mas recentemente
se tornou uma ferramenta muito boa em eletrônica, fotônica, materiais compostos,
1287
geração de energia, armazenamento de energia e sensores, bem como em aplicações
biológicas (veja também o link da web citado acima).

Por último, mas não menos importante, FLG é facilmente produzido com alto rendimento
e a um custo relativamente baixo (Novoselov et al. 2012). Uma nova ressalva é que o
rápido aumento na produção e aplicações de FLG implica em sua liberação potencial no
meio ambiente, especialmente no compartimento aquático geralmente considerado como
uma macro esfera frágil e sensível. Com relação a isso, a liberação de FLG poderia
ocorrer mais ou menos acidentalmente a partir do descarte inadequado ou não controlado
de tais produtos comerciais e da modificação química e degradação após os resíduos:
possíveis riscos do ecossistema induzidos por FLG foram examinados e são encontrados
na literatura (Hu e Zhou 2013); também, uma revisão recente discute a toxicidade dos
GFMs para o ambiente aquático, incluindo bactérias, crustáceos, nematóides e peixes
(Zhao et al. 2014). A ideia é que a toxicidade de diferentes organismos aquáticos e o
impacto do FLG contra organismos aquáticos podem não ser tão altos quanto
nanomateriais de carbono, como fulerenos e nanotubos de carbono. No entanto, os
resultados são controversos. Na verdade, a resposta biológica muitas vezes depende da
natureza estrutural intrínseca do grafeno, como número de camadas, rigidez,
hidrofobicidade, dose e pureza do material sob escrutínio e, finalmente, o uso de diversos
modelos de células/organismos (Bianco 2013) Com base nos resultados de nosso
laboratório em larvas de Xenopus laevis, FLG é substancialmente não tóxico (Muzi et al.
2016a, b). Esses dados são consistentes com a literatura disponível sobre a
ecotoxicidade do FLG em diferentes organismos como Pseudomonas aeruginosa,
Caenorhabditis elegans e Vibrio fischeri (Gollavelli e Ling 2012; Zanni et al. 2012; Guo et
al. 2013; Pretti et al. 2014). Estudos análogos em crustáceos como Artemia salina
produziram resultados semelhantes em relação ao estresse oxidativo e expectativa de
vida e mostraram que FLG não induziu estresse oxidativo nas bactérias, mas 70% da
viabilidade bacteriana foi perdida após 5 h de exposição a 250 mg* L –1 do material. Eles
também não mostraram nenhum efeito na expectativa de vida. Em nosso caso, apenas a
taxa de crescimento das larvas de Xenopus pareceu ser afetada pelo material em alguma
extensão. Na verdade, o tamanho da larva foi diminuído em cerca de 40% apenas após a
exposição às concentrações mais altas de FLG. Esta resposta de perfil é geralmente
observada em larvas de Xenopus expostas nas mesmas condições aos nanotubos de
carbono (Muzi et al. 2016a, b). Várias hipóteses têm sido propostas para explicar esse
fenômeno. Por exemplo, a absorção de nanomaterial à base de carbono pode levar a
obstruções digestivas e respiratórias, causando disfunções de troca gasosa (Mouchet et
al. 2011).
1288
9. Observações finais e orientações futuras
Nesta visão geral multifacetada do grande e diversificado grupo de nanopartículas de
carbono, discutimos a fabricação e os efeitos dos lipossomas, vesículas e nanotubos. Os
efeitos da administração desses nanocompósitos foram examinados tanto em células
cultivadas quanto, no caso de folhas de grafeno de poucas camadas, também em animais
vivos: larvas de Xenopus laevis. Os resultados foram, quando apropriado, comparados
aos dados da literatura publicada, e nenhuma discrepância relevante pôde ser detectada
entre os dados de nossos estudos e o trabalho realizado em outros laboratórios. A
conclusão é que, em geral, as nanopartículas podem ser consideradas uma ferramenta
segura, embora muito eficiente, para uso em diversos campos biomédicos. Estes variam
de diagnósticos a terapia potencial de doenças proliferativas e/ou imunossupressoras em
humanos e outros animais. As nanopartículas são internalizadas nas células-alvo, onde
entregam sua carga molecular. De acordo com os dados apresentados discutidos neste
trabalho, muito pouco, ou nenhum, dano permanente é infligido ao animal assumindo o
material exógeno: portanto, pode-se concluir com segurança que nem a membrana
celular, primeira barreira encontrada pelo nano-complexo na entrada da célula , nem o
metabolismo celular geral sofre um dano significativo. Isso torna as nanopartículas muito
atraentes em biomedicina avançada, que é o campo de nosso principal interesse. Além
disso, a toxicidade não parece ser a principal preocupação no uso de tais partículas.
Como sempre se repetiu, o campo nanotecnológico está passando por um processo de
expansão sempre crescente: não é tarefa fácil prever quais serão os desenvolvimentos
em um médio a longo prazo. Quem teria imaginado apenas algumas décadas atrás o
desenvolvimento de técnicas de imagem avançadas, de microcirurgia não invasiva,
telemedicina: ficção científica? A resposta é negativa! A ciência prossegue por inspiração,
mas, como T.A. Edison117 colocou, também através de muita transpiração. Portanto,
nossos auspícios e ambição são que esta revisão sirva principalmente a jovens cientistas
para encontrar um impulso para seu trabalho.

Em qualquer caso, uma consideração final é necessária: um lado muito importante dos
trabalhos discutidos nesta revisão diz respeito ao caráter interdisciplinar da abordagem
nanotecnológica. São necessárias várias especializações diversificadas, que vão desde
ciências básicas, biologia molecular, físico-química e biofísica até economia e marketing.
Com relação a isso, entretanto, alguns aspectos socioeconômicos não podem ser
desconsiderados. Algumas palavras devem ser gastas, a saber, no que diz respeito ao
seu uso no campo; isto é, apesar das técnicas laboratoriais relativamente simples

117 “Genius é um por cento de inspiração, noventa e nove por cento de transpiração.” Declaração oral relatada por Harper’s Monthly,
setembro de 1932.
1289
exigidas para sua fabricação e do custo relativamente baixo, será possível, como as
coisas estão agora, aplicar essas tecnologias também em situações de desvantagem?
Haverá pessoal disponível para realizar esses procedimentos nessas condições
desfavoráveis? Essas perguntas merecem uma resposta imediata e, quando necessário,
um remédio.

Referências
Aiello C, Andreozzi P, La Mesa C et al (2010) Biological activity of SDS-CTAB cat-anionic vesicles in cultured cells and
assessment of their cytotoxicity ending in apoptosis. Colloids Surf B Biointerfaces 78:149–154
Ajayan PM, Ebbesen TW, Ichihashi T et al (1993) Opening carbon nanotubes with oxygen and implications for filling.
Nature 362:522–525
Alargova RG, Danov KD, Petkov JT et al (1997) Sphere-to-rod transition in the shape of anionic surfactant micelles
determined by surface tension measurements. Langmuir 13:5544–5551
Amenta V, Aschberger K (2015) Carbon nanotubes: potential medical applications and safety concerns. Interdiscip Rev
Nanomed Nanobiotechnol 7:371–386
Andersson JT, Schräder W (1999) A method for measuring 1-octanol/water partition coefficients. Anal Chem 71:3610–
3614
Arroyo M, Belytschko T (2004) Finite crystal elasticity of carbon nanotubes based on the exponential Cauchy-Born
rule. Phys Rev B 69:115415–115420
Bandyopadhyaya R, Nativ-Roth E, Regev O (2002) Stabilization of individual carbon nanotubes in aqueous solutions.
Nano Lett 2:25–28
Barbetta A, Pucci C, Tardani F et al (2011) Size and charge modulation of surfactant-based vesicles. J Phys Chem B
115:12751–12758
Barkat A, Barkat AK, Naveed A et al (2011) Basics of pharmaceutical emulsions: a review. Afr J Pharm Pharmacol
525:2715–2725
Bianco A (2013) Graphene: safe or toxic? The two faces of the medal. Angew Chem Int Ed Engl 52:4986–4997
Bianco A, Kostarelos K, Prato M (2005) Applications of carbon nanotubes in drug delivery. Curr Opin Chem Biol 9:674–
679
Bianco A, Cheng H-M, Enoki T et al (2013) All in the graphene family—A recommended nomenclature for two-
dimensional carbon materials. Carbon 65:1–6
Bolhassani A, Rafati S (2011) Non-viral delivery systems in gene therapy and vaccine developments. In: Xu-bo Y (ed)
Non-viral gene therapy. Intech, Rijeka, Croatia, pp 27–50
Bombelli C, Bordi F, Ferro S, Giansanti L et al (2008) New cationic liposomes as vehicles of m-
tetrahydroxyphenylchlorin in photodynamic therapy of infectious diseases. Mol Pharm 5:672–679
Bomboi F, Tardani F, Gazzoli D et al (2013) Lysozyme binds onto functionalized carbon nanotubes. Colloids Surf B
Biointerfaces 108:16–22
Bonincontro A, Risuleo G (2015) Electrorotation: a spectroscopic imaging approach to study the alterations of the
cytoplasmic membrane. Adv J Mol Imaging 5:1–15
Bonincontro A, La Mesa C, Proietti C, Risuleo G (2007) A biophysical investigation on the binding and controlled DNA
release in a cetyltrimethylammonium bromide-sodium octyl sulfate cat-anionic vesicle system. Biomacromolecules
8:1824–1829
Bonincontro A, Falivene M, La Mesa C, Risuleo G (2008) Dynamics of DNA adsorption on and release from SDS-
DDAB cat-anionic vesicles: a multitechnique study. Langmuir 24:1973–1978
Cammasab S, Suzuki K, Sone C et al (1997) Thermo-responsive polymer nanoparticles with a core-shell micelle
structure as site-specific drug carriers. J Control Release 48:157–164
Coey AT, Sahu ID, Gunasekera TS et al (2011) Reconstitution of KCNE1 into lipid bilayers: comparing the structural,
dynamic, and activity differences in micelle and vesicle environments. Biochemistry 50:10851–10859
Colomer A, Pinazo A, García MT et al (2012) pH-sensitive surfactants from lysine: assessment of their cytotoxicity and
environmental behavior. Langmuir 28:5900–5912
Cosimati R, Milardi GL, Bombelli C, Bonincontro A et al (2013) Interactions of DMPC and DMPC/gemini liposomes with
the cell membrane investigated by electrorotation. Biochim Biophys Acta 1828:352–356
De Gennes PG (1981) Polymer solutions near an interface. Adsorption and depletion layers. Macromolecules
14:1637–1642
Degouy A, Gomez-Berrada MP, Ferret PJ (2014) Baby care product development: artificial urine in vitro assay is useful
for cosmetic product assessment. Toxicol In Vitro 28:3–7
Deshantri AK, Varela Moreira A, Ecker V et al (2018) Nanomedicines for the treatment of hematological malignancies.
J Control Release 287:194–215
Fadel TR, Fahmy TM (2014) Immunotherapy applications of carbon nanotubes: from design to safe applications.
Trends Biotechnol 32:198–209
1290
 Florence AT, Attwood D (1988) Physicochemical principles of pharmacy, II edn. MacMillan, London
Freire JM, Gaspar D, Veiga AS et al (2015) Shifting gear in antimicrobial and anticancer peptides biophysical studies:
from vesicles to cells. J Pept Sci 21:178–185
Gollavelli G, Ling YC (2012) Multi-functional graphene as an in vitro and in vivo imaging probe. Biomaterials 33:2532–
2545
Grumezescu AM (2018) Vesicle-based drug carriers: liposomes, polymersomes, and niosomes. In: Dan N (ed) Design
and development of new nanocarriers. Elsevier, Oxford,. Chapt. 1, pp 1–55
Guo X, Dong S, Petersen EJ et al (2013) Biological uptake and depuration of radio-labeled graphene by Daphnia
magna. Environ Sci Technol 47:12524–12531
Hamblin MR, Hasan T (2004) Photodynamic therapy: a new antimicrobial approach to infectious disease? Photochem
Photobiol Sci 3:436–450
Han L, Xu J, Xu Q et al (2017) Extracellular vesicles in the tumor microenvironment: therapeutic resistance, clinical
biomarkers, and targeting strategies. Med Res Rev 37(6):1318–1349
Hayashi S, Ikeda SJ (1980) Micelle size and shape of sodium dodecyl sulfate in concentrated sodium chloride
solutions. J Phys Chem 84:744–751
Heidarli E, Dadashzadeh S, Haeri A (2017) State of the art of stimuliresponsive liposomes for cancer therapy. Iran J
Pharm Res. 16:1273–1304
Heister E, Brunner EW et al (2013) Are carbon nanotubes a natural solution? Applications in biology and medicine.
ACS Appl Mater Interfaces 5:1870–1891
Holt BD, Short PA, Rape AD et al (2010) Carbon nanotubes reorganize actin structures in cells and ex vivo. ACS Nano
4:4872–4878
Hone J, Whitney M, Piskoti C et al (1999) Thermal conductivity of single-walled carbon nanotubes. Phys Rev B
59:R2514–R2516
Hu X, Zhou Q (2013) Health and ecosystem risks of graphene. Chem Rev 113:3815–3835
Huang YY, Terentjev EM (2012) Dispersion of carbon nanotubes: mixing, sonication, stabilization, and composite
properties. Polymers 4:275–295
Islam MF, Rojas E, Bergey DM et al (2003) High weight fraction surfactant solubilization of single-wall carbon
nanotubes in water. Nano Lett 3:269–273
Israelachvili J, Mitchell DJ, Ninham BWJ (1976) Theory of selfassembly of hydrocarbon amphiphiles into micelles and
bilayers. J Chem Soc Faraday Trans 72:1525–1568
Israelachvili JN, Mitchell DJ, Ninham BW (1977) Theory of selfassembly of lipid bilayers and vesicles. Biochim Biophys
Acta 470:185–201
Joseph A, Itskovitz-Copper N, Samira S et al (2006) A new intranasal influenza vaccine based on a novel polycationic
lipid—ceramide carbamoyl-spermine (CCS): I. Immunogenicity and efficacy studies in mice. Vaccine 24:3990–4006
Jung HT, Coldren B, Zasadzinski JA et al (2001) The origins of stability of spontaneous vesicles. Proc Natl Acad Sci
USA 98:1353–1357
Karthik VV (2016) Excipients used in the formulation of tablets. Res Rev J Chem 5:143–154
Krishna VD, Wu K, Su D et al (2018) Nanotechnology: of concepts and potential application of sensing platforms in
food safety. Food Microbiol 75:47–54
Kuo JH, Jan MS, Chang CH et al (2005) Cytotoxicity characterization of catanionic vesicles in RAW 264.7 murine
macrophage-like cells. Colloids Surf B Biointerfaces 41:189–196
La Mesa C (2005) Polymer-surfactant and protein-surfactant interactions. J Colloid Interface Sci 286:148–157
Leo A, Hansch C, Elkins D (1971) Partition coefficients and their uses. Chem Rev 71:525–616
Letizia C, Andreozzi P, Scipioni A et al (2007) Protein binding onto surfactant-based synthetic vesicles. J Phys Chem B
111:898–908
Liang F, Chen B (2010) A review on biomedical applications of singlewalled carbon nanotubes. Curr Med Chem 17:10–
24
Liu P (2005) Modifications of carbon nanotubes with polymers. Eur Polym J 41:2693–2703
Lo CT, Jahn A, Locascio LE et al (2010) Controlled self-assembly of monodisperse niosomes by microfluidic
hydrodynamic focusing. Langmuir 26:8559–8566
Loftsson T, Jarho P, Másson M et al (2005) Cyclodextrins in drug delivery. Expert Opin Drug Deliv 2:335–351
Lonez C, Vandenbranden M, Ruysschaert J-M (2008) Cationic liposomal lipids: from gene carriers to cell signaling.
Progr Lipid Res 47:340–347
Louzao I, van der Hest JCM(2013) Permeability effects on the efficiency of antioxidant nanoreactors.
Biomacromolecules 14:2364–2372
Lozano N, Pinazo A, La Mesa C et al (2009) Catanionic vesicles formed with arginine-based surfactants and 1,2-
dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphate monosodium salt. Phys Chem B 113:6321–6327
Lozano N, Perez L, Pons R, Pinazo A (2011) Diacyl glycerol argininebased surfactants: biological and physicochemical
properties of catanionic formulations. Amino Acids 40:721–729
Ménard-Moyon C, Kostarelos K, Prato M et al (2010) Functionalized carbon nanotubes for probing and modulating
molecular functions. Chem Biol 17:107–115

1291
 Mezei A, Pérez L, Pinazo A et al (2012) Self-assembly of pH-sensitive cationic lysine based surfactants. Langmuir
28:16761–16771
Mohajeri M, Behnam B, Sahebkar A (2018) Biomedical applications of carbon nanomaterials: drug and gene delivery
potentials. J Cell Physiol. https://doi.org/10.1002/jcp.26899
Monk CB (1961) Electrolytic dissociation. Academic, New York
Moriguchi I, Shuichi Hirono S, Qian Liu Q et al (1992) Simple method of calculating octanol/water partition coefficient.
Chem Pharm Bull 40:127–130
Moroi Y, Matuura RJ (1988) Thermodynamics of solubilization into surfactant micelles: effect of hydrophobicity of both
solubilizate and surfactant molecules. J Colloid Interface Sci 125:456–462
Morris J, Olsson U, Wennerström H (1997) Homogeneous nucleation in a mono-disperse oil-in-water emulsion.
Langmuir 13:606–608
Mouchet F, Landois P, Datsyuk V et al (2011) International amphibian micronucleus standardized procedure (ISO
21427-1) for in vivo evaluation of double-walled carbon nanotubes toxicity and genotoxicity in water. Environ Toxicol
26:136–145
Muzi L, Ménard-Moyon C, Russier J et al (2015a) Diameter-dependent release of a cisplatin pro-drug from small and
large functionalized carbon nanotubes. Nanoscale 7:5383–5394
Muzi L, Ménard-Moyon C, Russier J et al (2015b) A comparative study on the anticancer efficacy of two types of
functionalized multiwalled carbon nanotubes filled with a cisplatin prodrug. Nanoscale 7:5383–5394
Muzi L, Tardani F, La Mesa C et al (2016a) Interactions and effects of BSA-functionalized single-walled carbon
nanotubes on different cell lines. Nanotechnology 15:155704
Muzi L, Mouchet F, Cadarsi S et al (2016b) Examining the impact of multi-layer graphene using cellular and amphibian
models. 2D Mater 3:1–10
Muzzalupo R, Gente G, La Mesa C et al (2006) Micelles in mixtures of sodium dodecyl sulfate and a bolaform
surfactant. Langmuir 22:6001–6009
Muzzalupo R, Nicoletta FP, Trombino S et al (2007) A new crown ether as vesicular carrier for 5-fluorouracil: synthesis,
characterization and drug delivery evaluation. Colloids Surf B Biointerfaces 58:197–202
Muzzalupo R, Pérez L, Pinazo A et al (2017) Pharmaceutical versatility of cationic noises derived from amino acid-
based surfactants: skin penetration behavior and controlled drug release. Int J Pharm 29:245–252
Nagarajan R (2002) Molecular packing parameter and surfactant selfassembly: the neglected role of the surfactant tail.
Langmuir 18:31–38
Nakamura F, Isobe H (2003) Functionalized fullerenes in water. The First 10 Years of their chemistry, biology, and
nanoscience. Acc Chem Res 36:807–815
Novoselov KS, Fal’ko VI, Colombo L et al (2012) A roadmap for graphene. Nature 490:192–200
Olusanya TOB, Haj Ahmad RR, Ibegbu DM et al (2018) Liposomal drug delivery systems and anticancer drugs.
Molecules 23:907–911
Patri AK, Kukowska-Latallo JF, Baker JR Jr (2005) Targeted drug delivery with dendrimers: comparison of the release
kinetics of covalently conjugated drug and non-covalent drug inclusion complex. Adv Drug Deliv Rev 57:2203–2214
Piccioni F, Borioni A, Delfini M, Del Giudice MR et al (2007) Metabolic alterations in cultured mouse fibroblasts induced
by an inhibitor of the tyrosine kinase receptors fibroblast growth factor receptor 1. Anal Biochem 367(1):111–121
Pinazo A, Lozano N, Perez L et al (2011) Arginine diacyl-glycerolipid conjugates as multifunctional biocompatible
surfactants. Compt Rend Chim 14:726–735
Popov AM, Lozovik YE, Fiorito S et al (2007) Biocompatibility and applications of carbon nanotubes in medical
nanorobots. Int J Nanomed 2:361–372
Porter WL (1993) Paradoxical behavior of antioxidants in food and biological systems. Toxicol Ind Health 9:93–122
Prato M, Kostarelos K, Bianco A (2008) Functionalized carbon nanotubes in drug design and discovery. Acc Chem Res
41:60–68
Pretti C, Oliva M, Di Pietro R et al (2014) Ecotoxicity of pristine graphene to marine organisms. Ecotoxicol Environ Saf
101:138–145
Pucci C, Barbetta A, Sciscione F et al (2014a) Ion distribution around synthetic vesicles of the cat-anionic Type. J Phys
Chem B 118:557–566
Pucci C, Pérez L, La Mesa C et al (2014b) Characterization and stability of catanionic vesicles formed by pseudo-
tetraalkyl surfactant mixtures. Soft Matter 10:9657–9667
Pucci C, Scipioni A, La Mesa C (2014c) Albumin binding onto synthetic vesicles. Soft Matter 10:9669–9675
Qiu Y, Park K (2012) Environment-sensitive hydrogels for drug delivery. Adv Drug Deliv Rev 64:49–60
Risuleo G, La Mesa C (2016) Dispersibility of carbon nanotubes in biopolymer-based fluids and their potential
biotechnological applications. Trends Nanotechnol Mater Sci 1:1–7
Russo L, Berardi V, Tardani F, Risuleo G (2013) Delivery of RNA and its intracellular translation into protein mediated
by SDS-CTAB vesicles: potential use in nanobiotechnology. Biomed Res Int 734596:1–6
Safran SA, Pincus P, Andelman D (1990) Theory of spontaneous vesicle formation in surfactant mixtures. Science
248:354–356
Sallustio S, Galantini L, Gente G et al (2004) Hydrophobically modified pullulans: characterization and
physicochemical properties. J Phys Chem B 108:18876–18883

1292
 Shtansky DV, Firestein KL, Golberg DV (2018) Fabrication and application of BN nanoparticles, nanosheets and their
nanohybrids. Nanoscale 10:17477–17493
Simberg D, Weisman S, Talmon Y et al (2004) DOTAP (and other cationic lipids): chemistry, biophysics, and
transfection. Crit Rev Ther Drug Carrier Syst 21:257–319
Spitalsky Z, Tasis D, Papagelis K et al (2010) Carbon nanotube–polymer composites: chemistry, processing,
mechanical and electrical properties. Prog Polym Sci 35:357–401
Stefanutti E, Papacci F, Sennato S et al (2014) Cationic liposomes formulated with DMPC and a gemini surfactant
traverse the cell membrane without causing a significant bio-damage. Biochim Biophys Acta 1838:2646–2655
Tanford C (1980) The hydrophobic effect; formation of micelles, vesicles and biological membranes. Wiley-
Interscience, New York
Tardani F, Sennato S (2014) Phase behavior of DNA-stabilized carbon nanotubes dispersions: association with
oppositely-charged additives. J Phys Chem 118:9268–9274
Tardani F, La Mesa C, Poulin P et al (2012) Phase behavior of DNA-based dispersions containing carbon nanotubes:
effects of added polymers and ionic strength on excluded volume. J Phys Chem C 2012(116):9888–9894
Tardani F, Strobbia P, Scipioni A (2013) Encapsulating carbon nanotubes in aqueous ds-DNA anisotropic phases:
shear orientation and rheological properties. RSC Adv 3:25917–25923
Tavano L, Mazzotta E, Muzzalupo R (2017) Nanovesicular formulations for cancer gene therapy. Curr Pharm Des
23:5327–5335
Tsang SC, Harris PJF, Green MLH (1993) Thinning and opening of carbon nanotubes by oxidation using carbon
dioxide. Nature 362:520–522
Vaisman L, Wagner HD, Marom G (2006) The role of surfactants in dispersion of carbon nanotubes. Adv Colloid
Interface Sci 128–130:37–46
Venkatesan J, Pallela R, Kim SK (2014) Applications of carbon nanomaterials in bone tissue engineering. J Biomed
Nanotechnol 10:3105–3123
Vintiloiu A, Leroux J-CJ (2008) Organogels and their use in drug delivery—a review. J Control Release 125:179–192
Vlachy N, Touraud D, Heilmann J et al (2009) Determining the cytotoxicity of catanionic surfactant mixtures on HeLa
cells. Colloids Surf B Biointerfaces 70:278–280
Wang H (2009) Dispersing carbon nanotubes using surfactants. Curr Opin Colloid Interface Sci 14:364–371
Weinstein JN, Leserman LD (1984) Liposomes as drug carriers in cancer chemotherapy. Pharmacol Ther 24:207–233
Wright PK (2008) Targeting vesicle trafficking: an important approach to cancer chemotherapy. Recent Pat Anticancer
Drug Discov 3 (2):137–147
Zanni E, De Bellis G, Bracciale MP et al (2012) Graphite nanoplatelets and Caenorhabditis elegans: insights from an in
vivo model. Nano Lett 12:2740–2744
Zhao J, Wang Z, White JC, Xing B (2014) Graphene in the aquatic environment: adsorption, dispersion, toxicity and
transformation. Environ Sci Technol 48:9995–10009
Zoeller N, Blankschtein D (1998) Experimental determination of micelle shape and size in aqueous solutions of
dodecyl ethoxy sulfates. Langmuir 14:7155–7165

1293
 Nanossuplementos e saúde animal
Alessia Bertero, Leon J. Spicer, Teresa Coccini e Francesca Caloni

Resumo
Os nanossuplementos têm despertado grande atenção nos últimos anos, principalmente
na indústria de produção animal e veterinária, onde estão em constante desenvolvimento
e expansão devido às suas características peculiares, em grande parte devido às suas
dimensões que vão de aproximadamente 1 a 100 nm. Curiosamente, nessa faixa de
tamanho nano dimensional, as substâncias adquirem novas características, diferentes
daquelas do material a granel de onde se originam, levando, em alguns casos, a uma
maior adequação desses materiais para usos específicos. Nesse cenário, a inclusão
regular de nanossuplementos na ração animal ou na água para beneficiar a qualidade e a
quantidade do produto obtido, bem como o ciclo de produção, é provável em um futuro
próximo. Esses compostos têm muitas aplicações potenciais: como promotores de
crescimento, potencializadores da flora ruminal, antiinflamatórios, estimulantes do sistema
imunológico, etc. As pesquisas neste campo têm feito avanços consideráveis, mas ainda
existem muitas lacunas a serem preenchidas, visto que, para Por exemplo, os
mecanismos de ação das nanopartículas permanecem desconhecidos, bem como as
implicações para a saúde e ambientais de um uso generalizado deste tipo particular de
suplemento dietético, especialmente, mas não apenas em termos de toxicidade
reprodutiva/desenvolvimento e poluição ambiental.

Palavras-chave: Nanossuplementos · Nutracêuticos veterinários

1. Introdução
1.1 Nanopartículas

Nanopartículas (NP) são partículas com uma faixa de tamanho que vai de
aproximadamente 1 a 100 nm e derivam de fontes naturais e antropogênicas (Klaine et al.
2008). Vapores provenientes de vulcões, a fração fina de areia do deserto e coloides
aquáticos (Ostiguy et al. 2006) são alguns exemplos de NP produzidos naturalmente,
enquanto os antropogênicos podem ser produzidos intencionalmente ou não, como NP
gerado a partir de vapores de soldagem (Nowack e Bucheli 2007; Ostiguy et al. 2006). Os
NP produzidos intencionalmente também são designados como NP projetados (Maurer-
Jones et al. 2013), e a tecnologia que lida com a produção e uso de NP é conhecida como
1294
nanotecnologia. As propriedades NP (Ostiguy et al. 2006; Batley e McLaughlin 2010;
Schodek et al. 2009) permitem seu uso em uma ampla gama de aplicações em diferentes
áreas da indústria química para aplicações médicas (Farré et al. 2009; De Berardis et al.
2010).

1.1.1 Classificação de nanopartículas

NP pode ser classificado em relação à sua composição, dimensionalidade, morfologia,

uniformidade e estado de aglomeração (Buzea et al. 2007). NP pode ser sintetizado a
partir de diferentes materiais e caracterizado em função de sua composição: NP de
carbono, NP metálico, NP óxido metálico, NP não metálico e outros (Burda et al. 2005;
Berube et al. 2011). Dimensionalidade e morfologia desempenham um papel importante
em relação à toxicidade de NP (Buzea et al. 2007), e as propriedades químicas e
eletromagnéticas de NP podem influenciar seu estado de aglomeração (Corbierre et al.
2005; Han et al. 2009; Shen et al. 2009), perdendo algumas de suas características
típicas e se comportando como partículas maiores (Buzea et al. 2007).

2. Entrega de nanossuplemento
NP e NP nutracêuticos como sistemas de entrega são áreas de crescente interesse na
medicina veterinária e na indústria de rações (Hill e Li 2017). O uso de sistemas de
entrega de nanossuplemento nutricional adiciona várias vantagens em comparação com
as formas tradicionais de suplementos nutricionais. Os sistemas de entrega de
nanocarreadores, bem como as nanomoléculas, são mais eficientes para alcançar o local
de ação; assim, a influência nos locais de destino pode ser otimizada, minimizando
também os efeitos colaterais indesejáveis. Muitas nanoestruturas, incluindo lipossomas,
polímeros, etc., têm sido estudadas como sistemas de nanoentrega. Os dois grupos
principais são os nanodispositivos e nanomateriais. Dispositivos em nanoescala incluem
biossensores e vários detectores, os últimos dos quais são caracterizados por
modificação de superfície, devido à nanodimensão, ou revestimentos, que aumentam sua
biocompatibilidade.

Os nanomateriais também podem ser divididos em materiais nanocristalinos e

nanoestruturados. Os nanocristalinos são obtidos diretamente de materiais a granel e são
caracterizados por um maior desempenho em termos de absorção e ações biológicas.
Eles são empregados, por exemplo, na encapsulação de drogas para distribuição de
drogas. Materiais nanoestruturados podem ser feitos de nanomateriais brutos para obter
certas formas com uma finalidade específica, como nanotubos quânticos (Bhatia 2016).
1295
Outra categorização identifica quatro grupos: metais, polímeros, compostos naturais e
materiais nanoestruturados (Hill e Li 2017).

Independentemente da forma em que os NP são administrados, existem os seguintes

mecanismos de ação: NP pode atuar como a unidade funcional, como um veículo de
entrega para materiais que podem ser conjugados em sua superfície ou encapsulados em
sua superfície (Hill e Li 2017).

Para entrega de suplemento nutricional, os NP mais usados são:

2.1 NP metálico

Este tipo de NP é caracterizado por um tamanho muito pequeno (<100 nm), resultando
em uma área de superfície maior e, portanto, em uma área funcional elevada. Esta forma
de entrega nanométrica está emergindo como um bom portador de entrega e biossensor.
Além disso, alguns NP metálicos provaram ter propriedades antimicrobianas e ser uma
ferramenta útil na nutrição mineral, uma vez que as partículas nanominerais apresentam
maior potencial do que sua contraparte convencional e, portanto, a quantidade necessária
é reduzida (Sri Sindhura et al. 2014).

Outra vantagem da administração de NP é que muitos nanominerais podem ser

sintetizados de forma eficiente e fácil com métodos físicos, químicos e biológicos (Swain
et al. 2015) que não são caros. Além disso, eles são estáveis e podem ser modificados
por meio de conjugação com diferentes grupos funcionais (Jain et al. 2007). Apesar de
seu grande potencial e vantagens, os NP metálicos apresentam uma ampla gama de
efeitos tóxicos que não podem ser ignorados. Vários metais têm sido usados para
preparar NPs. Cobre, prata, ouro e zinco são os mais comumente usados (Ghosh et al.
2008; Mishra et al. 2010). Dentre eles, um dos NP metálicos mais utilizados na zootecnia
é o óxido de zinco. É uma boa alternativa ao zinco convencional como suplemento
alimentar animal, devido à sua maior biodisponibilidade, mas os estudos também
apontaram muitos outros efeitos do óxido de zinco, como promoção de crescimento,
ações antibacterianas e efeitos imunomoduladores (Partha et al. 2016). Outros
nanometais usados são selênio, cromo e cálcio, que mostraram efeitos positivos em
vários aparelhos e atividades fisiológicas (Hosnedlova et al. 2018; Hill e Li 2017).

2.2 NP natural

Alguns NP podem ser definidos como NP de ocorrência natural. Por exemplo, algumas
isoformas de caseína são capazes de se reunir em torno de cálcio, proteínas e outras
substâncias hidrofóbicas (Haham et al. 2012). Essas micelas podem ser usadas para
incorporar nutrientes hidrofóbicos (Semo et al. 2006), como a vitamina D, aumentando a
1296
biodisponibilidade da vitamina in vivo após a clivagem proteolítica da caseína no
estômago, levando à liberação de vitaminas encapsuladas.

Outra molécula potencialmente útil na entrega de nutrientes é a cruciferina, um

nanocarreador promissor para a entrega de compostos nutracêuticos. Estudos foram
realizados usando este NP feito da proteína cruciferina da canola, que poderia encapsular
substâncias hidrofóbicas e hidrofílicas, protegendo-as de um ambiente ácido simulado in
vitro como o do estômago e liberando-as em um ambiente intestinal simulado in vitro
(Akbari e Wu 2016).

2.3 Micelas Poliméricas

Micelas poliméricas são nanoagregados geralmente caracterizados por uma forma

esferoidal em que as moléculas hidrofóbicas constituem o núcleo da estrutura,
circundadas por uma camada hidrofílica. A fase hidrofílica pode ser feita de micelas de
fosfolipídios, micelas plurônicas (que consistem em óxido de polietileno hidrofílico e óxido
de polipropileno hidrofóbico), micelas de poliaminoácido e micelas de poliéster rodeadas
por polímeros biocompatíveis (Koo et al. 2005).

Este sistema de nano-entrega é produzido através da automontagem de polímeros

anfifílicos em meio aquoso, de forma que são fáceis de preparar. Além disso, as micelas
são caracterizadas por uma baixa toxicidade e grande versatilidade devido às
combinações disponíveis. As micelas poliméricas são utilizadas principalmente para a
administração de agentes terapêuticos, principalmente drogas anticâncer.

2.4 NP polimérico

Os NP poliméricos são produzidos combinando um polímero biodegradável (que deve ser

biocompatível e não tóxico) com a substância ativa. Este último pode ser adsorvido na
superfície do polímero, encapsulado no NP polimérico ou mesmo dissolvido nele. O
polímero pode ser natural ou sintético. Entre os polímeros naturais, o mais amplamente
utilizado é a quitosana (um polissacarídeo linear), mas também a gelatina, a albumina e o
alginato de sódio. Esses compostos naturais foram introduzidos para superar alguns
problemas toxicológicos apresentados por polímeros sintéticos (Vyas e Khar 2002).

Os NP poliméricos são um grupo enorme que inclui uma variedade de NP, como
nanocápsulas (que são caracterizadas por uma estrutura vesicular) e nanoesferas (que
são um sistema de matriz e a matriz é uniformemente dispersa). Mais especificamente, as
nanocápsulas são estruturas com uma cavidade interna na qual a substância ativa é
confinada, e essa cavidade central é circundada por uma única membrana polimérica,
enquanto na nanosfera a substância ativa se dissemina por toda a matriz polimérica. As
1297
características deste tipo de sistema de nano-entrega podem ser variadas e otimizadas a
fim de se obter as propriedades cinéticas e dinâmicas desejadas. Esses sistemas de
entrega e, em particular, o NP baseado em polímero natural, são usados principalmente
na terapia do câncer, entrega de vacinas, medicamentos e antibióticos direcionados, onde
levam a um aumento significativo da eficiência de entrega.

2.5 Nanocápsulas

Micelas minúsculas (nanocápsulas) podem ser utilizadas como carreadores de óleos

essenciais, polifenóis, antioxidantes, coenzima Q10, vitaminas, minerais e
micronutrientes, alcançando uma melhor biodisponibilidade desses compostos (El Amin
2006). O encapsulamento os protege da oxidação sem quaisquer sabores indesejáveis.

2.6 Lipossomas

Os lipossomas são vesículas lipídicas sintetizadas por hidratação de fosfolipídeos secos,

que podem consistir em uma ou mais bicamadas lipídicas (cinco ou mais) dispostas
concentricamente em torno de um núcleo aquoso. Essa estrutura se assemelha às das
membranas celulares, permitindo uma fusão imediata com elas. A alta biocompatibilidade
dos lipossomas e sua capacidade de preservar, dissolver e entregar moléculas solúveis
em água ou gordura os tornam uma ferramenta poderosa e flexível, especialmente como
um sistema de entrega de drogas. O tipo de composição lipídica e o número de
bicamadas de fosfolipídios podem ser modificados mudando sua carga e suas
propriedades físico-químicas, a fim de otimizar a adequação desse sistema para um uso
específico. Apesar da flexibilidade dos lipossomas, eles são principalmente adequados
para administração tópica, intravenosa e intramuscular e têm uma biodisponibilidade oral
limitada devido à sua susceptibilidade à degradação gastrointestinal. Até agora, os
lipossomas foram estudados para entrega de drogas, vacinas e genes, e como agentes
de imagem, com resultados encorajadores.

No entanto, sua aplicação na ciência animal é limitada por sua curta vida útil, as
complexas técnicas de produção e seus altos custos (Underwood e van Eps 2012).
Recentemente, em um estudo realizado por Colom et al. (2015), a eficácia de
bacteriófagos encapsulados em lipossomas na redução de Salmonella em aves foi
investigada. Em frangos de corte infectados experimentalmente com Salmonella, a
mistura contendo bacteriófagos encapsulados em lipossomas foi administrada por via oral
todos os dias durante 6 dias após a infecção. Esta formulação evita a sedimentação na
água potável e simplifica a adição à ração; além disso, os resultados mostraram um
tempo de residência intestinal prolongado para os bacteriófagos encapsulados e uma boa

1298
liberação do fago no intestino com uma proteção forte e duradoura contra a colonização
de Salmonella.

2.7 Nanoemulsões

As nanoemulsões são uma dispersão coloidal multifásica de dois líquidos imiscíveis,

normalmente óleo e água, usando um filme de superfície feito de surfactante. Neste
sistema, a substância ativa é normalmente transportada pela fase dispersa. As técnicas
de fabricação são baratas e simples; além disso, são geralmente caracterizadas por uma
grande estabilidade. Variando a solução aquosa, o tipo de óleos e surfactantes, uma
grande variedade de nanoemulsões com propriedades peculiares pode ser preparada,
adaptando a formulação à molécula a ser encapsulada, otimizando assim o sistema de
entrega (Vandamme e Anton 2010). El-Sherbiny et al. (2016) realizaram um estudo sobre
um novo tipo de suplemento feito de óleos nanoemulsificados (óleos de soja, peixe e
colza). Os óleos foram usados na forma bruta ou na forma nanoemulsificada e foram
testados em culturas de batelada no rúmen. Os resultados comprovaram que a mistura de
óleo nanoemulsificado foi mais eficaz do que os óleos crus na preservação de ácidos
graxos poliinsaturados no ambiente de biohidrogenação da cultura, mostrando que as
nanoemulsões óleo em água podem representar uma abordagem eficiente e gerenciável
para a suplementação de lipídeos insaturados que pode ser facilmente administrado com
a água potável.

2.7.1 – NP lipídico (LNP)

Esses sistemas de entrega são sistemas de transporte caracterizados por uma matriz
lipídica sólida (que pode ser feita de triglicerídeos altamente purificados, misturas
complexas de glicerídeos e ceras) (Müller e Lucks 1996), geralmente preparada com uma
técnica de emulsão de óleo em água. Esta estrutura de lipídios fisiológicos, geralmente
estabilizada por surfactantes, permite obter uma ação protetora em relação aos materiais
do núcleo e aumentar a bio acessibilidade oral de materiais lipofílicos como os flavonóides
(Ban et al. 2015). Isso é obtido graças a um maior tempo de residência devido à sua
capacidade de aderir à parede gastrointestinal e entrar nos espaços intervilares. Além
disso, esse sistema protege o material do núcleo dos danos físicos e bioquímicos que
podem ocorrer durante sua passagem no trato gastrointestinal (Li et al. 2015). Quando o
LNP entra no intestino delgado, os sucos duodenal e biliar, junto com as enzimas
digestivas, separam o LNP em monoglicerídeos e ácidos graxos que são absorvidos pelas
micelas, contendo os nutracêuticos, que entram em contato com a superfície dos
enterócitos onde ocorre a absorção (McClements e Xiao 2012) Outra aplicação inovadora
do LNP está ligada à sua capacidade de ser entregue no sistema nervoso central, levando
1299
a uma atividade melhorada do fármaco encapsulado devido à ação protetora dos
nanolipídeos e ao aumento da superfície de absorção. Em um estudo realizado por
Valdes et al. (2018), dois antibióticos, minociclina e ciprofloxacina, foram incorporados em
LNPs de fase sólida e injetados por via intratecal em ratos. Os antibióticos encapsulados
mostraram-se pelo menos 50% mais eficientes do que o antibiótico isoladamente,
comprovando a eficiência desse sistema de nano-entrega (Valdes et al. 2018).

O LNP também foi investigado como um sistema de entrega de mRNA. Uma vez que a
principal preocupação relacionada à tecnologia de mRNA são suas propriedades
imunogênicas e sua pouca estabilidade, o uso de LNP parece ser adequado para evitar
esses pontos críticos. Em um estudo recente realizado por Sedic et al. (2018), o mRNA
modificado, que codifica a eritropoietina humana, foi formulado em LNP e administrado
por via intravenosa em ratos e macacos. Sucessivamente, foi registrado um aumento
significativo nos parâmetros eritrocitários, demonstrando a possibilidade de induzir, via
LNP, níveis terapêuticos de proteínas com mRNA modificado (Sedic et al. 2018).

2.8 Nanocristais

Os nanocristais são agregados de muitas partículas da substância ativa na forma

cristalina que são revestidos com um ou uma combinação de tensoativos para atingir a
estabilização da estrutura. Este tipo de nanossistema é usado para superar os problemas
relacionados de absorção e biodisponibilidade à administração de certos medicamentos.
Em um estudo realizado por Pensel et al. (2018), nanocristais de albendazol (ABZ-NC)
foram usados para tratar camundongos experimentalmente infectados com E.
multilocularis, e esta nanoforma da droga tinha maior eficácia química profilática e clínica
do que o albendazol clássico, provavelmente devido a uma maior disponibilidade
sistêmica de sulfóxido de albendazol (Pensel et al. 2018).

3. Produção Animal
3.1 Crescimento

Hoje em dia, os nanossuplementos estão atraindo cada vez mais atenção e interesse,
particularmente na indústria de produção animal, onde estão constantemente sendo
desenvolvidos e expandidos (Thornton 2010; Hill e Li 2017; Pinar et al. 2018). A inclusão
regular de nanossuplementos na ração animal ou água para beneficiar a qualidade (e a
quantidade) do produto obtido, bem como o ciclo de produção, é provavelmente possível
em um futuro próximo. De fato, muitos estudos têm sido realizados, em diversas espécies,

1300
para investigar a ação do NP na produção animal e verificar seu papel potencial no
aumento do crescimento animal e, consequentemente, na produção de carne.

3.1.1 – Suínos

O cobre é um microelemento adicionado rotineiramente a todas as dietas de suínos para

aumentar o crescimento. De fato, o cobre alimentado com 125–250 ppm teve um efeito
positivo no crescimento, particularmente dos porcos desmamados (Holden et al. 2002). O
mecanismo de ação pelo qual o cobre exerce seu efeito está em suas propriedades
antibacterianas (Cromwell 2001) e em sua capacidade de estimular a capacidade
imunológica. Apesar de todos esses efeitos positivos, a suplementação com cobre teve
algumas desvantagens, como um aumento da contaminação ambiental, porque quando
alimentado em alto nível, a digestibilidade e a absorção do cobre diminuem. Como
consequência, há uma alta excreção de cobre nas fezes, aumentando a poluição
ambiental. Nesse contexto, a suplementação com nanocobre tem sido estudada com o
objetivo de melhorar a digestibilidade e, portanto, aumentar a absorção e diminuir a
excreção fecal deste importante promotor de crescimento.

O efeito da suplementação de nanocobre na digestibilidade e biodisponibilidade deste

elemento em porcos e os efeitos do nanocobre nos parâmetros de crescimento e soro
foram investigados. Os resultados mostraram que o nanocobre (administrado a 50 mg/kg)
melhorou o desempenho de crescimento, bem como a digestibilidade e a
biodisponibilidade em porcos suplementados com nanocobre em comparação com porcos
alimentados com sulfato de cobre (na mesma dose). Além disso, a excreção de cobre foi
reduzida. Em relação aos parâmetros séricos, os níveis de IgG, γ-globulina, proteína de
globulina total e atividade da superóxido dismutase (a atividade desta enzima é reduzida
em porcos com deficiência de cobre) foram aumentados pela suplementação de
nanocobre (Eguia et al. 2009).

Prata é outro elemento investigado para avaliar seu potencial como aditivo NP em dietas
para leitões recém-desmamados. Quando os leitões desmamados foram alimentados com
dieta suplementada com 0, 20 ou 40 mg de nano-prata/kg, na segunda semana após o
desmame, o crescimento diário foi aumentado linearmente com a dose de prata NP. Além
disso, a concentração ileal de bactérias totais diminuiu com o aumento da concentração
de nanoprata na dieta, também apresentando uma relação linear (Fondevila et al. 2009).

Em relação ao desempenho produtivo, o consumo de ração foi maior em animais

alimentados com dieta suplementada com 20 mg de nanoprata/kg sem retenção de prata
detectada nos rins ou músculos esqueléticos, embora traços tenham sido encontrados no
fígado (1,354 e 2,445 μg/ml e 3,77 g prata/g fígado seco por 20 e dietas de 40 mg de prata/kg,
1301
respectivamente). Tomados em conjunto, esses resultados indicam que o efeito da
nanoprata no consumo de ração e no desempenho do crescimento pode estar
relacionado também, como para o cobre, às suas propriedades antimicrobianas.

Outro NP estudado como suplemento dietético em suínos é o cromo, e seus efeitos sobre
o crescimento, características de carcaça, qualidade da carne suína e presença de tecido
foram investigados em suínos em terminação. Este elemento aumenta a atividade da
insulina, sendo fundamental na manutenção da tolerância normal à glicose, bem como na
síntese de proteínas e no metabolismo de ácidos nucleicos e lipídeos (Anderson 1987).

Em suínos, a alimentação com picolinato de cromo aumenta a porcentagem de carne

magra e diminui a deposição de gordura no músculo longíssimo (Xi et al. 2001). Nesse
cenário, o cromo NP pode trazer vantagens no uso desse elemento como suplemento
alimentar devido às suas propriedades únicas.

A adição de nano-cromo (200 μg/ml e 3,77 g/kg) à dieta por 35 dias (Wang e Xu 2004) diminuiu a
relação alimentação/ganho em 3,56% em comparação com animais alimentados com
dieta controle sem integração de cromo, sugerindo um efeito positivo sobre desempenho
de crescimento. Os suínos que ingeriram a dieta suplementada apresentaram aumento da
porcentagem de massa magra da carcaça (14,06%), área do músculo longíssimo
(19,96%), músculo longíssimo (16,33%) e peso do semimembranoso (14,87%), enquanto
o percentual de gordura da carcaça (25,53%) e a espessura do toucinho (18,22%)
diminuiu. Simultaneamente, um incremento do conteúdo de cromo foi encontrado em
vários órgãos (fígado, rim e coração) e no músculo longuíssimo. Esses achados sugerem
que a suplementação dietética de 200 μg/ml e 3,77 g/kg de cromo NP poderia ser conveniente devido
ao efeito comprovado no desempenho de crescimento e nas características de carcaça.
No entanto, o aumento nas concentrações de cromo no músculo longíssimo e outros
órgãos deve ser levado em consideração para as potenciais implicações para a saúde
humana (Wang e Xu 2004).

3.1.2 – Ruminantes

O selênio desempenha papéis importantes como antioxidante e nos sistemas reprodutivo,

endócrino e imunológico. Foi relatado que a deficiência de selênio causa doença do
músculo branco e muitos outros sintomas patológicos (Rock et al. 2001). Uma vez que as
dietas para ruminantes são quase exclusivamente baseadas em plantas e as
concentrações de selênio nas plantas podem ser extremamente variáveis (Juniper et al.
2009), uma suplementação deste elemento pode ser necessária, especialmente em áreas
geográficas particulares caracterizadas por solos deficientes em selênio, como China.

1302
A biodisponibilidade do selênio está relacionada à sua forma. O selenito de sódio é a fonte
usual de selênio usada como suplemento na alimentação animal, enquanto a levedura
enriquecida com selênio é a forma orgânica mais comumente usada. Recentemente, o
nanosselênio ganhou atenção crescente devido à sua alta biodisponibilidade e baixa
toxicidade (Zhang et al. 2008). Estudos avaliaram os efeitos do nano-selênio elementar na
retenção de selênio, desempenho de crescimento, concentrações de selênio no sangue e
tecidos e estado de oxidação sérica de cabras. O efeito da alimentação de nano-selênio
inorgânico (0,3 mg/kg de selênio como selenito de sódio), orgânico (fermento de selênio)
e nano-selênio elementar em caprinos machos em crescimento (do desmame à
maturidade) foi investigado (Shi et al. 2011b). Neste estudo, o peso corporal foi
aumentado em machos suplementados com selênio, com valores mais elevados
detectados para as suplementações de nano-selênio e levedura de selênio. A retenção
sérica de GSH-Px, SOD e CAT e de selênio de sangue total, soro e órgãos foi maior nos
animais alimentados com a suplementação de nano-selênio em comparação com os
animais que receberam levedura de selênio e selenito de sódio como suplementação,
demonstrando que o a suplementação dietética de nano-selênio elementar pode ser mais
eficiente quando comparada ao selênio inorgânico ou orgânico (Shi et al. 2011b).

3.1.3 – Frangos de corte

Frangos criados para carne são frequentemente mantidos em grandes grupos

caracterizados por alta densidade animal e criados rapidamente para o abate. Nesta difícil
condição de cultivo, os antibióticos têm sido usados como promotores de
crescimento/aditivos para rações por causa de sua capacidade de estimular a imunidade,
favorecendo um melhor desempenho de crescimento, mas isso tem fomentado a
resistência aos antibióticos (Wegener 2003). No contexto de novas pesquisas de
promotores de crescimento, o polímero biodegradável NP tem recebido atenção
crescente.

A quitosana, um polímero de carboidrato não tóxico e biodegradável, tem muitas ações,

como reforço imunológico e atividades antibacterianas. NP de quitosana carregados com
cobre melhoram o desempenho do crescimento e têm ação na microbiota da digesta
cecal (Han et al. 2010). Especificamente, os efeitos da suplementação dietética de NP
com quitosana carregada de cobre no desempenho do crescimento, valores
hematológicos e imunológicos e microbiota cecal em frangos de corte foram avaliados,
demonstrando que a administração de quitosana NP carregada com cobre pode melhorar
o desempenho de crescimento, sistema imunológico e síntese de proteínas, além de ter
ação benéfica sobre a microbiota cecal, principalmente quando administrado na dose de
1303
100 mg/kg. Nesta concentração, o ganho médio diário, os conteúdos de IgA, IgG, IgM e
complemento C3-C4, e proteína sérica e albumina foram aumentados, assim como as
populações de Lactobacillus e Bifidobacterium na digesta cecal e, mais importante, a
população de coliformes foi diminuído. A concentração de nitrogênio ureico no soro
também diminuiu. Esses resultados promissores parecem indicar a quitosana carregada
de cobre como um possível substituto para a clortetraciclina na suplementação dietética
(Wang et al. 2011a).

Outro elemento estudado em frangos em sua nanoforma é o cromo. Seus estados

trivalente (mais estável) e hexavalente são biologicamente ativos. O cromo trivalente
parece estar envolvido na atividade do fator de tolerância à glicose (GTF), que facilita a
ligação celular e aumenta a ação da insulina. A suplementação dietética de cromo
trivalente diminuiu o impacto negativo de altas temperaturas ambientais no desempenho
de frangos de corte (Sahin et al. 2002b). Se as galinhas recebem suplementação
adequada de cromo ou não, depende de seu estado de estresse, uma vez que foi
demonstrado que o estresse é responsável pelo esgotamento das reservas corporais de
cromo (Ahmed et al. 2005). Além disso, deve-se considerar que a maior parte das dietas
das aves são quase inteiramente compostas por ingredientes de origem vegetal, que
geralmente são caracterizados por baixos teores de cromo (Giri et al. 1990). Já se sabe
que o cromo de complexos orgânicos (ou seja, picolinato de cromo) e a levedura com alto
teor de cromo são melhor absorvidos em comparação com o cromo de compostos
inorgânicos como o cloreto de cromo, mas recentemente o nano-cromo apresentou maior
absorção e biodisponibilidade em comparação com picolinato de cromo e cloreto de
cromo (Zha et al. 2007, 2008).

Uma investigação comparativa sobre os efeitos de uma suplementação de 6 semanas

com três formas diferentes de cromo (nano-cromo, picolinato de cromo e cloreto de cromo
na dosagem de 500 μg/ml e 3,77 g/kg) foi realizada em frangos de corte machos de 1 dia de idade. A
suplementação de nano-cromo e picolinato de cromo foi encontrada para aumentar
significativamente o ganho médio diário, eficiência alimentar, rendimento de carcaça e
músculos magros enquanto diminui a gordura abdominal. Em particular, o nano-cromo
aumentou significativamente o conteúdo de proteína dos músculos da mama e da coxa e
diminuiu os níveis de gordura e colesterol nos músculos da coxa. Além disso, toda a
suplementação de cromo (nano-cromo, picolinato de cromo e cloreto de cromo) resultou
em aumentos significativos do conteúdo de cromo no soro, fígado e rim, com nano-cromo
induzindo também aumentos significativos de cromo nos músculos da mama e da coxa.
Com base nesses resultados, pode-se afirmar que a suplementação de cromo,

1304
principalmente se utilizada na nanoforma, pode ajudar a melhorar o desempenho de
crescimento e as características de carcaça de frangos de corte (Zha et al. 2009), mas
mais pesquisas são necessárias.

3.2 Função gastrointestinal

3.2.1 – Ruminantes

O selênio, na forma de selênio cisteína, desempenha um papel importante na nutrição

animal como componente de mais de 30 selênio enzimas e atua também como
antioxidante. Vários tipos de fontes de selênio têm sido usados como suplementos em
ruminantes. Apesar disso, pouco se sabe sobre a influência do nano-selênio como
suplemento nutricional de ruminantes no metabolismo e desempenho de ruminantes.

A avaliação dos efeitos do nano-selênio (nas doses de 0,3, 3 e 6 g de nano-selênio/kg de

matéria seca, por um período de 20 dias) na digestibilidade da ração, fermentação ruminal
e excreção de purina foi realizada em ovelhas canuladas no rúmen (Shi et al. 2011a). O
pH ruminal médio e o conteúdo de nitrogênio amoniacal diminuíram quadraticamente com
o aumento da suplementação de nano-selênio, enquanto a concentração total de ácidos
graxos voláteis no rúmen aumentou linear e quadraticamente com o aumento da
suplementação de nano-selênio. O pH ruminal médio permaneceu na faixa fisiológica
para atividade bacteriana celulolítica com todas as dosagens de administração de selênio.
Em relação à cinética da digestão ruminal in situ de Leymus chinensis e farelo de soja,
com o aumento da suplementação de nanosselênio, a fração solúvel, a taxa de
degradação fracionada e a degradabilidade efetiva de Leymus chinensis aumentaram
linear e quadraticamente. Por outro lado, a fração lentamente degradável diminuiu
quadraticamente. Da mesma forma, a digestibilidade dos nutrientes no trato total e a
excreção urinária de derivados de purina aumentaram quadraticamente com o aumento
da suplementação de nano-selênio. Todos esses parâmetros digestivos considerados em
conjunto indicam que a suplementação com nano-selênio melhora a fermentação ruminal
e, portanto, a utilização da ração. Também aumentou a atividade microbiana ruminal e os
microrganismos digestivos e a atividade enzimática. De acordo com esses dados, a dose
ideal em ovelhas parecia ser de cerca de 3,0 g/kg de matéria seca da dieta (Shi et al.
2011a).

Outro nanoelemento estudado por sua ação no padrão de fermentação ruminal foi o
zinco. O efeito in vitro de cinco níveis de suplementação com óxido de zinco nano, a
saber, 0 (controle), 50, 100, 200 e 400 mg/kg de matéria seca na fermentação ruminal, foi
investigado (Chen et al. 2011). Esses pesquisadores descobriram que a suplementação
de óxido de nano-zinco não afetou o pH ruminal, mas aumentou o crescimento de
1305
microrganismos ruminais e aumentou a síntese de proteína microbiana ruminal e a
eficiência de utilização de energia na fase inicial (6-12 h) de incubação (Chen et al. 2011).
Além disso, constatou-se um aumento nas concentrações de ácidos graxos voláteis, na
produção de proteína bruta microbiana e na fermentação da matéria orgânica. Por outro
lado, a concentração de nitrogênio amoniacal e a proporção de acetato para propionato
foram significativamente reduzidas com a suplementação de 100 e 200 mg/kg de óxido de
zinco NP na 6ª e 12ª horas de cultivo in vitro. Assim, a suplementação de óxido de nano-
zinco pode potencializar o crescimento de microrganismos ruminais e aumentar a síntese
de proteína microbiana ruminal e a eficiência de utilização de energia in vitro, mas
estudos adicionais são necessários.

3.2.2 – Frangos

Os nano-minerais têm demonstrado ação na microbiota cecal de frangos, com efeitos

promissores. A administração de quitosana carregada de cobre na dieta para frangos de
corte nas dosagens de 0 (grupo de controle negativo), 50, 100 e 150 mg/kg e, no controle
positivo, 50 mg/kg de clortetraciclina foi comparada. A adição de nano-cobre aumentou as
populações de Lactobacillus e Bifidobacterium, enquanto diminuiu a população de
coliformes na digesta cecal, e esses efeitos foram mais fortes na dose de 100 mg/kg. Em
comparação com o controle positivo, as populações de Lactobacillus e Bifidobacterium
aumentaram 3,31 e 3,85%, respectivamente, e a população de coliformes diminuiu 5,71%.
O mecanismo por trás do crescimento de Lactobacillus e Bifidobacterium não é claro, mas
supõe-se que o nano-cobre inibe parte da microbiota, estabelecendo um ambiente melhor
para a proliferação de Lactobacillus e Bifidobacterium (Wang et al. 2011a). O impacto no
sistema imunológico dos frangos de corte neste estudo é resumido na Seção 5.1.

Outra NP potencialmente útil por sua ação gastrointestinal em aves é a prata. Os efeitos
de baixas doses de NP de prata foram investigados como um substituto potencial para
antibióticos occidiostáticos. A coccidiose é um grande problema nas explorações avícolas,
uma vez que há muitos anos é responsável pelo fraco desempenho da produção. Além
disso, sinais de desenvolvimento de resistência têm sido evidentes recentemente,
levantando a necessidade de pesquisas de novas formas de controle desse parasita.

O efeito da suplementação de baixa dose (15 mg/l) de NP de prata na água de beber de

frangos de corte foi avaliado como um substituto para coccidiostáticos. Os resultados
mostraram que o grupo de tratamento com coccidiostático teve um ganho de peso
significativamente menor em comparação com os controles não medicados, mas teve a
pontuação de lesão mais baixa das lesões cecais. O grupo NP prata teve,
numericamente, uma pontuação ligeiramente melhor do que o grupo não tratado, e tanto
1306
o grupo NP prata quanto o grupo coccidiostático tiveram 50% menos oocistos nas
amostras fecais em comparação ao grupo controle. Esses resultados demonstram que a
administração de NP de prata não alterou o desempenho do crescimento, mas pode ser
adequada para controlar coccídios em intestinos de frangos em termos de excreção de
oocistos (Chauke e Siebrits 2012).

3.3 Reprodução

Foi comprovado que alguns NP aumentam a fertilidade e protegem os espermatozóides.

Os mecanismos de ação não são totalmente compreendidos, mas parecem estar
relacionados aos grupos funcionais que eles carregam e que os caracterizam.

3.3.1 – Ruminantes

Os efeitos da administração oral de nano-selênio (ração suplementada com 0,3 mg/kg de

selênio por 12 semanas, ou seja, a duração necessária para atingir a maturidade sexual)
sobre os parâmetros reprodutivos, como ultraestrutura testicular, qualidade do sêmen e
atividade da glutationa peroxidase do sêmen de cabras machos foram avaliados (Shi et al.
2011b). Os resultados mostraram um aumento significativo nos níveis de selênio
testicular, glutationa peroxidase no sêmen e atividade ATPase em animais suplementados
com nano-selênio em comparação com os animais de controle (alimentados com uma
ração não suplementada que continha 0,06 mg/kg de selênio). Por outro lado, a nano-
suplementação não influenciou os parâmetros de qualidade do sêmen (volume,
densidade, motilidade e pH), embora a taxa de anormalidade espermática do grupo
controle tenha sido significativamente maior do que a do grupo suplementado. O exame
de microscopia eletrônica de transmissão também foi realizado, e enquanto os
espermatozóides de cabras no grupo de controle exibiam anormalidade marcante da peça
intermediária, o grupo suplementado não, apontando que a deficiência de selênio afetou a
peça intermediária da cauda do esperma. Além disso, nas amostras do grupo de controle,
o padrão mitocondrial era menos apertado do que o normal, com lacunas entre as
organelas que também apresentavam uma forma anormal e extensa vacuolização (Shi et
al. 2010).

Os nano-antioxidantes representam um campo com grande potencial na reprodução

animal e podem ser usados para prevenir e tratar problemas de infertilidade (Partha et al.
2016). Dentre os nano-antioxidantes, o nano-zinco pode ser uma ferramenta adequada,
pois possui um alto poder antioxidante. Estudos mostram que a deficiência de zinco pode
ser responsável pela má qualidade dos espermatozóides e que esse elemento está
envolvido nos mecanismos que controlam a motilidade espermática por meio de sua ação
no sistema ATP envolvido na contração e pela regulação das reservas energéticas de
1307
fosfolipídios. Em cabras, o zinco também tem influência no desenvolvimento da cauda do
esperma. Nesse contexto, o fornecimento insuficiente de zinco nas dietas pode ser um
fator de risco discriminatório para sêmen de baixa qualidade e infertilidade masculina
(Croxford et al. 2011; Colagar et al. 2009). Em fêmeas, a deficiência de zinco foi relatada
como responsável pela alta incidência de abortos e natimortos (Campbell e Mills, 1979),
portanto, a nano-suplementação de antioxidantes deve ser investigada para prevenir
problemas reprodutivos antes e durante a gravidez e após o parto, como placentas
retidas.

O efeito de diferentes concentrações (1, 10 e 100 μg/ml e 3,77 g/ml) de NP de óxido de titânio
(tamanho <100 nm) em espermatozóides de búfalo em termos de viabilidade, integridade
da membrana, capacidade de capacitação e integridade do DNA foi examinado. Os
resultados mostraram uma diminuição significativa na viabilidade celular e integridade da
membrana após 6 h de exposição ao óxido de titânio NP e um aumento dependente da
dose na fragmentação do DNA. Esses achados, junto à demonstração da presença de NP
de óxido de titânio dentro da cabeça e da membrana plasmática dos espermatozóides,
sugerem que esses NP podem prejudicar a funcionalidade dos espermatozóides (Pawar e
Kaul 2014).

3.3.2 – Aves

Nas aves, o picolinato de cromo suplementar aumenta a produção em baixas

temperaturas, e doses mais altas de picolinato de cromo podem aumentar a produção de
ovos (Yildiz et al. 2004). Além disso, a suplementação de cromo orgânico, particularmente
em 1200 ppb, aumentou os critérios de desempenho e a qualidade do ovo (Sahin et al.
2002a). Os efeitos de diferentes níveis de NP de picolinato de cromo (0 ppb, 500 ppb e
3000 ppb de integração de nano-cromo por 60 dias) no desempenho, qualidade do ovo e
retenção mineral de poedeiras também foram avaliados. Esses pesquisadores
descobriram que o nano-cromo suplementar melhorou significativamente a qualidade do
ovo e a retenção de cromo e zinco, mas diminuiu a proporção de casca em ovos de 60
dias (Sirirat et al. 2013). Assim, a alimentação com picolinato de cromo melhorou a
qualidade do ovo em todos os três estudos, mas se o picolinato de nano-cromo pode ser
mais eficaz em doses mais baixas exigirá mais estudos.

3.3.3 – Outros Animais

Vários estudos mostraram que o selênio em nano-compatibilidade tem melhor

biocompatibilidade e eficácia em comparação com compostos inorgânicos e orgânicos de
selênio (Wang et al. 2007). Por essas razões, aliadas com as propriedades antioxidantes

1308
e a menor toxicidade exercida por esse composto, o selênio nanométrico é considerado
uma boa escolha para substituir outras formas de selênio em suplementos nutricionais.

O selênio é um importante regulador do sistema reprodutor masculino em ratos (Behne et

al. 1982), e a deficiência desse elemento tem sido associada à diminuição da fertilidade,
baixa motilidade dos espermatozoides e alteração da parte intermediária dos
espermatozóides. Essas alterações respondem à suplementação de selênio, mas,
curiosamente, não respondem à suplementação de vitamina E, destacando a importância
desse elemento na reprodução masculina em ratos (Wu et al. 1979). No entanto, fornecer
fontes adicionais de selênio para animais que já têm níveis de selênio adequados e
atividade de fosfolipídeo hidroperóxido glutationa peroxidase do testículo, poderia expô-
los potencialmente a um risco de toxicose.

Foram avaliados os efeitos da administração oral de selênio NP (0,08, 0,2, 0,4, 0,8, 2,0,
4,0 e 8,0 mg de selênio/kg de peso corporal, por 2 semanas) no desempenho reprodutivo
masculino de ratos. Os resultados mostraram que o selênio NP administrado em dose
maiores teve um efeito positivo na função reprodutiva dos ratos. A suplementação
promoveu parâmetros de concentração, vitalidade e motilidade dos espermatozóides. A
concentração de testosterona sérica foi significativamente maior nos ratos que receberam
selênio (0,8 mg de selênio/kg de peso corporal) em comparação com os do grupo
controle. Além disso, as dosagens de 4,0 e 8,0 mg de selênio/kg de peso corporal
melhoraram significativamente o fosfolipídio hidroperóxido glutationa peroxidase no
testículo. Efeitos prejudiciais foram observados apenas com 8,0 mg de selênio/kg de peso
corporal (Liu et al. 2017).

3.4 Consequências reprodutivas e de desenvolvimento das formulações NP

As consequências reprodutivas e de desenvolvimento das formulações NP devem ser

levadas em consideração, especialmente em animais reprodutores. Considerando a
toxicidade reprodutiva potencial dos NP, deve-se sublinhar que a biocompatibilidade (e,
portanto, o potencial tóxico) é influenciada não apenas pelo tipo de material e as
dosagens, mas também pelos resultados das interações de uma série de fatores
complexos. Além da composição química, superfície, forma e polaridade, outras
características devem ser consideradas, como o meio de suspensão influenciando
fortemente o potencial de superfície (SP) das nano-partículas (Taylor et al. 2012). O efeito
do SP foi bem ilustrado em um trabalho de Ding et al. (2010). O SP é frequentemente
referido como potencial zeta, e sabe-se que NP com SP mais alto mostrou uma captação
celular mais rápida e um melhor direcionamento nuclear celular. Por outro lado, NP com
SP muito alto podem exercer efeitos citotóxicos desestabilizando a membrana celular e,
1309
portanto, levando a danos celulares. Especificamente, uma perda aumentada de
viabilidade celular foi descrita após a cultura de células de exposição (linha de células de
carcinoma gástrico humano BGC 823) a NP ouro com um potencial zeta de 40 mV, em
comparação com 20 e 30 mV (Ding et al. 2010). Um outro efeito é adicionado pelas
modificações da superfície. Massich et al. (2010) observaram um efeito citotóxico da NP
ouro na presença de citrato (um agente estabilizador usado durante a produção de NP),
mas nenhum efeito citotóxico foi detectado quando outras substâncias foram usadas
durante o processo de produção (por exemplo, albumina de soro bovino).

3.4.1 – Transporte de NP para os tecidos reprodutivos

Gâmetas e embriões de mamíferos, apesar de protegidos por barreiras biológicas, são

altamente sensíveis ao efeito de NP. Na verdade, vários estudos relataram que a maioria
das NP tem a capacidade de cruzar efetivamente as barreiras biológicas, incluindo
aquelas do trato reprodutivo. A ruptura da barreira hemato-testicular induzida por NP foi
relatada e pode levar a consequências reprodutivas significativas. Kim et al. (2006)
sintetizaram um NP magnético revestido externamente com sílica biocompatível com
espessura de 50 nm para uso como modelo de nano-material. Em seguida, este
composto foi administrado por via intraperitoneal durante 4 semanas a camundongos nas
dosagens de 100, 50 e 25 mg/kg. Após este período, as NP foram detectadas nos
testículos e útero, bem como em muitos outros órgãos, demonstrando que as NP de 50
nm de diâmetro, embora neste estudo não apresentassem toxicidade aparente, podem
penetrar na barreira hemato-testicular (Kim et al. 2006). Além disso, NP de polimetil (2-
14C) metacrilato (Araujo et al. 1999) e NP de ouro (Balasubramanian et al. 2010) foram
encontrados em testículos de ratos após administração oral e intravenosa,
respectivamente. Além disso, a toxicidade de NP de prata (tamanho de 60 nm) foi
estudada, usando ratos e alimentando-os por 28 dias com 30, 300 e 1000 mg/kg de NP
de prata. Em seguida, a distribuição de prata foi investigada demonstrando que após a
exposição a NP de prata, um claro acúmulo foi detectado em vários órgãos, incluindo o
cérebro e testículos (Kim et al. 2008).

Em relação às gônadas femininas, até o momento, não foram realizados estudos para
investigar se as NP têm capacidade de penetração nos ovários, mas considerando os
dados acima, essa possibilidade deve ser considerada. Por outro lado, vários estudos têm
sido realizados, utilizando modelos de roedores, para verificar a capacidade das NP de
atravessar a barreira placentária, mas os resultados relatados estão longe de ser
conclusivos. Foi constatado que NP cruza a barreira da placenta em alguns estudos
(Semmler-Behnke et al. 2007; Takahashi e Matsuoka 1981), mas em outros estudos essa
1310
capacidade não foi observada (Challier et al. 1973; Sadauskas et al. 2007). Por exemplo,
em camundongos, NP de prata de 10 nm não apareceram na placenta em camundongos
grávidas (Austin et al. 2016). Outros estudos in vivo (Takeda et al. 2009; Yamashita et al.
2011) foram realizados em camundongos grávidas, comprovando a capacidade da NP de
dióxido de titânio de cruzar a barreira placentária após injeção intravenosa com efeitos
embrionários tóxicos.

Tomados em conjunto, esses resultados parecem indicar que a barreira placentária pode
ser atravessada por alguma NP, mas apenas em certas condições ainda desconhecidas,
portanto, mais estudos devem ser realizados para esclarecer os mecanismos que regulam
esse fenômeno, principalmente em animais de criação.

3.4.2 – Efeitos embrionários e de desenvolvimento pelas NP

Foram descritos defeitos de desenvolvimento em associação com NP metálica. A maioria

dos estudos sobre toxicologia embrionária concentrou-se no uso de embriões de
camundongos e peixes-zebra (Danio rerio) como um modelo para avaliar a toxicidade de
NP em vertebrados, uma vez que é um sistema estabelecido para ensaio de toxicidade de
NP (Chakraborty et al. 2016). Heiden et al. (2007) usando embriões de peixe-zebra
avaliaram a toxicidade do desenvolvimento de G3,5-G4 de baixa geração (dendrímeros
de geração completa são terminados em amina, enquanto dendrímeros de meia geração
terminam com grupos de ácido carboxílico) Dendrímeros de poliamido amina StarburstTM
(um dendrímero de peptídeo altamente ramificado), e dendrímeros conjugados com Arg-
Gly-Asp (dendrímeros bioconjugados com ligantes seletivos – Arg-Gly-Asp – que são
produzidos para células-alvo que expressam receptores de integrina e mostram uso
potencial como sistema de entrega de drogas). Seus resultados mostraram que os
dendrímeros G4, caracterizados por grupos funcionais amino, eram tóxicos e causavam
diminuição no desenvolvimento e crescimento em embriões de peixe-zebra em
concentrações subletais. Por outro lado, os dendrímeros G3,5, caracterizados por grupos
funcionais terminais de ácido carboxílico, não mostraram qualquer efeito tóxico em
embriões de peixe-zebra.

Os efeitos e o padrão de distribuição em embriões de peixe-zebra de NP de prata também

foram avaliados (Asharani et al. 2008), com resultados que mostram um aumento
dependente da concentração na mortalidade e no atraso da eclosão nos embriões
expostos a NP de prata. Além disso, eixos corporais anormais, notocórdio torcido,
diminuição do fluxo sanguíneo, edema pericárdico e arritmia cardíaca foram descritos em
embriões tratados com NP de prata assim como um aumento da apoptose, demonstrando
uma toxicidade dependente da concentração para este NP. Por outro lado, íons de prata e
1311
agentes estabilizadores não mostraram efeitos significativos nos embriões. NP de prata
foi encontrada em vários órgãos embrionários, como cérebro, coração, gema e sangue
(Asharani et al. 2008).

Outro alvo da toxicidade da NP na prole é o sistema respiratório, conforme observado por

Fedulov et al. (2008). Fedulov e colaboradores demonstraram que os recém-nascidos de
camundongos expostos intranasalmente à NP de dióxido de titânio no dia 14 de gravidez
tinham um risco maior de desenvolver hiporresponsividade das vias aéreas e inflamação
alérgica, demonstrando assim que a suscetibilidade alérgica foi aumentada em
camundongos expostos no pré-natal (ver Seção 4).

Efeitos da exposição embrionária a NP em galinhas

Pesquisas na área de reprodução em nano-toxicologia também foram conduzidas em

embriões de galinha. Nesta espécie, a injeção de NP feita de ouro (Zielinska et al. 2009),
prata (Sikorska et al. 2010), liga de prata-paládio (Studnicka et al. 2009) e liga de prata-
cobre (Sawosz et al. 2009) não causou nenhum desenvolvimento anormal; apenas NP de
liga prata-cobre causou sinais limitados de inflamação no fígado. Uma investigação
realizada por Hao et al. (2017) em galinhas avaliaram a disfunção hepática em nível
molecular (expressão de genes e proteínas) na prole, após exposição oral materna ao NP
de óxido de zinco. Dois grupos foram analisados: um grupo alimentado com dieta basal
adicionada de ZnSO4 (considerado como o grupo controle, pois ZnSO 4 é um aditivo
alimentar comum para galinhas) e um grupo alimentado com dieta basal adicionada de
NP de óxido de zinco. A concentração dada de zinco foi de 200 mg/kg de alimento para
todos os grupos. Foi descoberto que as NP de óxido de zinco podem ser tóxicos no
desenvolvimento do fígado da prole, influenciando principalmente a síntese de lipídios, o
crescimento e causando lesões ou apoptose. Assim, essa NP deve ser considerada um
possível agente de toxicidade reprodutiva, embrionária e de desenvolvimento.

Efeitos das NP no sistema nervoso

Os estudos que exploram a toxicologia embrionária de NP em mamíferos são menos

numerosos do que aqueles relativos a peixes e galinhas (Taylor et al. 2012). No entanto,
considerando a NP de dióxido de titânio, há indícios que apontam para uma toxicidade do
sistema nervoso após a concepção. Takeda et al. (2009) estudaram os efeitos de NP de
dióxido de titânio administrados por via subcutânea a camundongos prenhes. Eles
observaram que as NP de dióxido de titânio foram transferidos para a prole, causando
alterações no aparelho genital e nos sistemas de nervos cranianos. A presença de NP na
prole foi confirmada nos órgãos danificados (ou seja, cérebro e testículos) por meio de
microscopia eletrônica. Além disso, Shimizu et al. (2009) mostraram em camundongos
1312
que a exposição materna a NP de dióxido de titânio anatase causa mudanças na
expressão de genes associados ao desenvolvimento do cérebro, morte celular, resposta
ao estresse oxidativo e mitocôndrias no cérebro durante o período perinatal. Genes
associados à inflamação e neurotransmissores também são afetados, mas em um estágio
posterior. Além disso, os efeitos da exposição pré-natal à NP de dióxido de titânio no
sistema nervoso central em camundongos foram investigados medindo os níveis de
dopamina e seus metabólitos em várias regiões do cérebro (Takahashi et al. 2010).
Verificou-se que as concentrações de dopamina, bem como as concentrações de seus
metabólitos, aumentaram no córtex pré-frontal e neostriato dos fetos no grupo tratado com
óxido de titânio, demonstrando assim que esta NP pode afetar o desenvolvimento do
sistema dopaminérgico central em fetos expostos.

Os efeitos de desenvolvimento e neurocomportamentais do dióxido de titânio nanométrico

revestido de superfície em fetos de camundongos, após a exposição materna por inalação
durante a gravidez, também foram investigados. Quando adultos, os fetos expostos no
pré-natal exibiram alterações neurocomportamentais, tendendo a evitar a zona central do
campo aberto, e as crias expostas apresentaram inibição aumentada do pré-pulso. Por
outro lado, a função cognitiva não foi afetada. Os efeitos da exposição a NP de óxido de
titânio, após a administração oral na gestação, no desenvolvimento, foi na plasticidade
sináptica na área do giro dentado hipocampal (DG) de ratos (Gao et al. 2011). Pensa-se
que a plasticidade sináptica nesta área do cérebro está associada a determinadas
funções complexas do sistema nervoso central, como processos de aprendizagem e
memória. Gao et al. (2011) também descobriram que a prole exposta apresentou uma
alteração significativa dos parâmetros nervosos da região hipocampal, sugerindo que o
cérebro em desenvolvimento é suscetível a NP de óxido de titânio e que esta NP pode
afetar a plasticidade sináptica nesta área.

Outro NP, a saber, NP de sílica, também demonstrou exercer efeitos neuronais. Os efeitos
metabólicos da exposição durante a diferenciação neuronal in vitro foram investigados. As
células SH-SY5Y foram expostas a NP de sílica antes e durante a diferenciação. A
exposição prejudicou a função mitocondrial dependendo do tempo de exposição (antes e
durante a diferenciação neuronal). A exposição durante a diferenciação afetou a atividade
mitocondrial, o que pode ter consequências na diferenciação das células neuronais
(Ducray et al. 2017a), pois as mitocôndrias desempenham um papel fundamental durante
este processo (Almeida e Vieira 2017). Especificamente, a diferenciação neuronal resulta
em uma diminuição da taxa de respiração celular, uma vez que as células diferenciadas
são caracterizadas por uma atividade glicolítica mais baixa em comparação com as

1313
células indiferenciadas. Além disso, foi descoberto que estas NP foram absorvidas
principalmente por células microgliais nas culturas do hipocampo, mas as NP também
foram encontradas em células SH-SY5Y diferenciadas. A captação era dependente do
tempo e da concentração. Agregados de NP e partículas únicas foram encontradas no
citoplasma e no retículo endoplasmático, mas não em outras organelas. Embora a
exposição a NP não tenha prejudicado a viabilidade celular, os marcadores de
diferenciação neuronal indicaram novamente uma redução na indução de diferenciação
neuronal após a exposição (Ducray et al. 2017b). Com base nesses estudos, a exposição
às NP embrionicamente claramente tem efeitos neurológicos na prole, mas como a
exposição embrionária a várias NP afetam o comportamento em mamíferos de fazenda
exigirá um estudo mais aprofundado.

3.4.3 – Efeitos de NP na função do esperma

Como mencionado anteriormente (Seção 3.3.1), algumas NP, como o óxido de titânio, são
espermotóxicos, exercendo um efeito citotóxico e causando grande quantidade de
fragmentação de DNA nos espermatozóides de búfalo, prejudicando a funcionalidade dos
espermatozoides (Pawar e Kaul 2014). Outros estudos sobre a toxicidade do esperma
foram realizados em NP obtidos de titânio (camundongos; Miura et al. 2017; ratos;
Morgan et al. 2017), níquel (invertebrados marinhos; Gallo et al. 2016), ouro
(camundongos; Zakhidov et al. 2010), óxido de ferro revestido com álcool polivinílico
(bovino; Makhluf et al. 2006), dióxido de európio e hidróxido de európio em conjunto com
polivinil pirrolidona e álcool polivinílico (bovino; Makhluf et al. 2008) e óxido de zinco e
dióxido de titânio (humano; Gopalan et al. 2009). O óxido de ferro revestido com álcool
polivinílico não mostrou qualquer efeito prejudicial sobre os espermatozóides, enquanto
as NP de óxido de zinco e as NP de óxido de titânio causaram danos aos
espermatozoides. NP de níquel induziram estresse oxidativo causando peroxidação
lipídica e fragmentação de DNA e potencial de membrana mitocondrial alterado e
morfologia espermática. Além disso, a exposição dos espermatozoides a NP de níquel
prejudicou a capacidade de fertilização e causou anomalias de desenvolvimento na prole.
NP de ouro muito pequenas (2,5 nm de diâmetro) causaram falha no processo de
descondensação da cromatina, provavelmente devido a uma interação com moléculas de
DNA de dupla hélice. No entanto, nenhum desses estudos investigou os mecanismos de
ação dos vários NP para a toxicidade no esperma e, portanto, mais investigações são
necessárias.

Estudos de toxicidade usando prata, trióxido de molibdênio e alumina foram realizados em

células-tronco dos espermas de camundongo (Braydich-Stolle et al. 2005, 2010). Foi
1314
encontrada uma citotoxicidade dependente da concentração para todos as NP, sendo a
NP de prata a mais tóxica. Nesse caso, a toxicidade provavelmente se deve às interações
de NP com uma quinase intracelular associada à proliferação celular. Usando culturas de
células testiculares inteiras de camundongos, Asare et al. (2012) relataram diminuição da
atividade metabólica celular e da viabilidade celular após 24-48 h de exposição a 100 μg/ml e 3,77 g/
ml de NP de prata de 20 nm. Se esses efeitos ocorrerão em animais de fazenda, será
necessário um estudo mais aprofundado.

3.4.4 – Efeitos das NP na função do oócito

A toxicidade na maturação do oócito foi investigada apenas em alguns estudos. Em uma

pesquisa de Hou et al. (2009), folículos pré antrais de ratos foram cultivados na presença
de NP de dióxido de titânio, e o efeito sobre o desenvolvimento folicular e a maturação do
oócito foi observado. A taxa de sobrevivência do folículo, a taxa de formação de folículos
antrais e a taxa de liberação de complexos cumulus oócito diminuíram com o aumento da
concentração de NP de dióxido de titânio no meio de cultura (12,5, 25 e 50 μg/ml e 3,77 g/ml),
enquanto o mesmo meio foi adicionado com micropartícula de dióxido não apresentou
efeitos prejudiciais aos folículos, demonstrando que a toxicidade está relacionada às
dimensões.

Outro estudo in vivo e in vitro combinado (Hsieh et al. 2009) avaliou o efeito dos pontos
quânticos centrais de CdSe na maturação de oócitos de camundongos, fertilização e o
desenvolvimento embrionário subsequente (pré e pós-implantação). Os pontos quânticos
centrais de CdSe causaram uma redução significativa na maturação do oócito, fertilização
e taxas de desenvolvimento embrionário in vitro, mas isso não ocorreu quando os pontos
quânticos centrais de CdSe foram revestidos com ZnS; assim, essa modificação de
superfície foi capaz de prevenir o efeito citotóxico. Além disso, quando os oócitos foram
maturados in vitro com uma concentração de 500 nM de pontos quânticos do núcleo de
CdSe no meio de maturação, a reabsorção pós-implantação aumentou, enquanto os
pesos da placenta e do feto diminuíram. Além da ação decorrente da administração direta
de NP aos animais, o acúmulo de NP no meio ambiente, causado pelo último aumento do
uso desses produtos em muitos campos, deve ser considerado e considerado como um
possível problema futuro, que poderia ter um grande impacto veterinário. Espécies.

4. Atividade antiinflamatória
O potencial de prevenção de doenças de suplementos dietéticos (isto é, polifenóis) tem
despertado grande atenção nos últimos anos, e muitos estudos in vitro e in vivo foram
1315
realizados em animais e humanos. Nesse contexto, uma ampla gama de atividades
biológicas tem sido relatada para os polifenóis, desde efeitos anticâncer e antioxidantes
até atividades relacionadas à prevenção de doenças crônicas.

Existem desafios relacionados ao uso de polifenóis e, em particular, a curcumina, uma

molécula insolúvel em água extraída da planta Curcuma longa, como suplemento
dietético. Essas questões estão principalmente relacionadas à escassa solubilidade dessa
molécula que prejudica sua biodisponibilidade oral. Assim, diferentes tamanhos de
nanoemulsões de óleo homogeneizado de alta velocidade e alta pressão (triacilgliceróis
de cadeia média) em água foram usados para encapsular a curcumina para melhorar sua
atividade antiinflamatória, e os efeitos foram avaliados usando um modelo de inflamação
da orelha de camundongo. Os resultados provaram que, em comparação com a
curcumina a 1% em solução aquosa 10% de Tween 20 , as emulsões de curcumina a 1%
tiveram um maior efeito antiinflamatório, mostrando uma inibição mais forte do edema de
ouvido. Além disso, esse efeito foi aumentado quando o tamanho da gota da emulsão foi
menor que 100 nm (Wang et al. 2008).

A biodisponibilidade oral em camundongos de três polímeros de quitosana diferentes

usados para produzir nanocápsulas de curcumina também foi investigada (Marin et al.
2017). Os polímeros de quitosana, caracterizados por alta capacidade adesiva na mucosa
e segurança (Wang et al. 2011b), diferiram em termos de peso molecular e grau de
desacetilação (Marin et al. 2017).

As nanocápsulas carregadas com curcumina foram administradas por via oral na dose de
25 mg/kg. Curiosamente, a biodisponibilidade da curcumina nanoformulada foi nove vezes
maior em comparação com a da curcumina não formulada (suspensões de curcumina).
Além disso, as nanocápsulas podem atravessar a barreira hematoencefálica (BBB). Em
relação à distribuição de uma formação nanométrica de curcumina, foi observado que NP
poli (ácido lático-co-glicólico) carregados com curcumina, administrados por via
intravenosa a ratos, são distribuídos para o fígado, coração, baço, pulmão, rim e cérebro.
Além disso, esta última formação provou aumentar significativamente a área sob
concentração – curva de tempo, a meia-vida e o tempo médio de residência da curcumina
em todos esses órgãos, mas não no coração (Tsai et al. 2011).

5. Imunidade
A alimentação com nanozinco para gado e aves produziu respostas de imunidade
encorajadoras, uma vez que foi observado que aumenta a imunidade dos animais.
1316
5.1 Frangos de corte

A suplementação de zinco nanométrico (em uma dose de 0,06 ppm) é eficaz para
melhorar o estado de imunidade dos frangos (Sahoo et al. 2014). Os efeitos de diferentes
tipos de suplementação de zinco em frangos de corte (15 ppm de zinco inorgânico, 15
ppm e 7,5 ppm de zinco orgânico e 0,3, 0,06 e 0,03 ppm de zinco nanométrico) foram
investigados. A resposta imune celular foi avaliada pelo teste de hipersensibilidade
basofílica cutânea (CBH) usando PHA-P (fosfato de fitohemaglutinina), enquanto a
resposta imune humoral foi testada pela produção de anticorpos em resposta à injeção de
glóbulos vermelhos de ovelha (SRBC).

Níveis de título significativamente mais elevados foram observados nos grupos

alimentados com 15 ppm de zinco orgânico e 0,06 ppm de nanozinco quando
comparados ao grupo alimentado apenas com dieta basal sem zinco e ao grupo que
recebeu a suplementação de zinco inorgânico, enquanto a resposta CBH foi encontrada
maior em o grupo suplementou com 15 ppm de zinco orgânico. A resposta do título de
anticorpos ao SRBC foi significativamente maior nos grupos que receberam a integração
de zinco orgânico na dose de 15 ppm e naqueles que receberam a integração do nano-
zinco na dose de 0,06 ppm. O peso percentual da bursa foi significativamente maior no
grupo que recebeu o nanozinco (dose de 0,06 ppm). Em resumo, as dosagens de 0,06
ppm de nanozinco adicionadas à dieta basal melhoraram a imunidade e o estado de
saúde das aves de corte.

Outro nanomineral testado em aves quanto ao efeito de imunidade é o cobre. Em vários

estudos in vitro (Małaczewska 2014), NP de cobre mostraram ter um efeito imunotrópico.
Nesse sentido, um estudo in vivo foi realizado por Ognik et al. (2018). Eles impregaram
308 frangos machos criados até a idade de 42 dias e foram divididos em grupos que
receberam dieta basal sem integração de cobre e suplementação de nanocobre na dose
de 0,5 mg/kg de peso corporal/dia e 1,5 mg/kg de peso corporal/dia. A correção da dieta
basal deficiente de galinhas com uma quantidade de nanocobre excedendo a
recomendação do National Research Council (NRC 1994) em 54%, levou a um aumento
do potencial antioxidante do corpo e inibiu a peroxidação lipídica, e quando a
suplementação excedeu a recomendação em 96%, sinais de deterioração do sistema
antioxidante começaram a surgir com uma diminuição do nível de glutationa mais
dissulfeto de glutationa e aumento dos níveis de SOD, CAT, atividade da ceruloplasmina e
teor de hidroperóxido de lípido. Por outro lado, um aumento de apenas 7% em relação às
recomendações foi seguido por uma deterioração nos parâmetros dos glóbulos vermelhos
e estimulação do sistema imunológico com um aumento de IL-6, IgA, IgM e IgY. Esses
1317
resultados, tomados em conjunto, indicam um aprimoramento simultâneo do sistema
antioxidante e a defesa imunológica das galinhas é alcançado com a suplementação de
sua dieta com nanocobre até 12 mg/frango em um período de 6 semanas.

Outro NP avaliado em aves na tentativa de aumentar a imunidade foram NP carregadas

de cobre. Suplementações dietéticas foram administradas a frangos de corte nas
dosagens de 0, 50, 100 e 150 mg/kg de NP de quitosana carregados com cobre, e os
resultados foram comparados com aqueles obtidos alimentando os animais com dietas
suplementadas com clortetraciclina como controle positivo. Índices de órgãos
imunológicos (o timo, baço e bolsa de Fabricius) em frangos de corte que receberam
suplementação dietética de 100 mg/kg de NP de quitosana carregados com cobre
aumentaram 31,27, 22,64 e 19,61%, respectivamente (todos estatisticamente
significativos), em comparação com o grupo de controle. Além disso, a administração de
nanocobre aumentou as concentrações de imunoglobulinas, complementos e lisozima no
soro e, em comparação com o grupo controle, a suplementação de 100 mg/kg aumentou
significativamente as concentrações séricas de IgA, IgG, IgM, C3, C4 e lisozima.
Notavelmente, as concentrações de IgA e C3 em frangos que receberam 100 mg/kg de
NP de quitosana carregados com cobre foram significativamente maiores do que aquelas
nos frangos que receberam 50 mg/kg de clortetraciclina na dieta (Wang et al. 2011a).

5.2 Outros Animais

Os efeitos do nanocompósito de magnésio e óxido de silício (MgO-SiO 2) na imunidade e

nas alterações teciduais de ratos machos adultos expostos à aflatoxina B1 (AFB1) foram
avaliados (Essa et al. 2017). A exposição a alimentos contaminados com flatoxina pode
causar a supressão das respostas imunes mediadas por células, afetar a função e a
contagem de linfócitos T, suprimir a atividade fagocítica e prejudicar a atividade do
complemento em muitas espécies, como aves, porcos e ratos (Marin et al. 2002; Ottinger
e Kaattari 2000; Cusumano et al. 1990). A este respeito, a eficácia do óxido de magnésio
nanocompósito e óxido de silício (MgO-SiO2) na redução dos efeitos tóxicos de AFB1 na
imunidade e alterações histológicas foi testada em ratos (Essa et al. 2017). Os animais
foram divididos em quatro grupos: grupo 1 (grupo controle; não alimentado com AFB1 ou
nanocompósito), o grupo 2 foi alimentado com ração contaminada (200 ppb AFB1), o
grupo 3 foi alimentado com 200 ppb AFB1 e 0,5 g/kg de nanocompósito de MgO-SiO 2 e o
grupo 4 receberam apenas 0,5 g/kg de nanocompósito de MgO-SiO 2. O experimento
durou 8 semanas.

Ratos alimentados com suplemento de nanocompósito de MgO-SiO 2 exibiram conteúdo

de AFB1 significativamente reduzido no soro e no fígado. Por outro lado, o conteúdo de
1318
fezes aumentou significativamente, indicando que as NP de MgO-SiO 2 afetaram a
absorção de AFB1, causando um aumento da excreção fecal. A última observação sugere
que essa suplementação dietética pode oferecer uma boa proteção contra os efeitos
tóxicos de AFB1, evitando sua absorção por causa de sua capacidade absorvente e a
maior reatividade de superfície em comparação com produtos comerciais tradicionais (não
nanométricos). Além disso, a resposta imune celular, as contagens leucocíticas totais e
diferenciais, as atividades fagocíticas de neutrófilos e macrófagos, a transformação de
linfócitos e a atividade da lisozima foram severamente reduzidas no grupo 2 alimentado
com dieta adicionada com 200 ppb AFB1 em comparação com o grupo 3 alimentado com
o AFB1-contaminado, mas suplementado com o nanocompósito MgO-SiO 2. Estes
sugerem ainda que essa suplementação pode mitigar indiretamente os efeitos de AFB1,
impedindo que AFB1 atue no sistema imunológico.

Em resumo, o nanocompósito de MgO-SiO 2 na dose de 0,5 g/kg de ração pode ser

considerado um agente adsorvente eficaz para AFB1, devido à sua capacidade de
prevenir o desenvolvimento de graves efeitos tóxicos na imunidade e órgãos de ratos.
Também deve ser considerado que é um aditivo alimentar barato e acessível que pode
ser uma ferramenta útil, especialmente em climas quentes e úmidos tropicais e
subtropicais, para a prevenção da aflatoxicose em animais.

6. Riscos e desafios
Devido ao grande e rápido aumento do interesse em NP tanto em atividades humanas
quanto na medicina veterinária e humana, os testes de ecotoxicidade regulatórios desses
tipos de produtos químicos estão se tornando uma questão de importância fundamental
para nossa sociedade contemporânea, e grandes esforços têm sido feitos na OCDE para
garantir que as diretrizes de teste da OCDE (TG) sejam adequadas aos nanomateriais.
Neste contexto, o projeto MARINA (http: //www.marina-fp7. Eu /) nasceu para desenvolver
e validar os Métodos de Gestão de Risco de Nanomateriais. Oito TG da OCDE foram
adaptados para cobrir as duas variantes principais de NP, como as NP de liberação de
íons e os inertes. Assim, foram desenvolvidas diretrizes para testar no mínimo uma NP de
liberação de íons (Ag) e duas NP inertes (TiO 2) (Hund-Rinke et al. 2016). Como os testes
de toxicidade padronizados podem subestimar a ecotoxicidade, outros fatores, como
exposição e disponibilidade de recursos, podem ser necessários para serem
considerados para estimar corretamente o efeito tóxico (Stevenson et al. 2017).

1319
7. Comentários finais e orientações futuras
A nanotecnologia tem um grande potencial para aplicações generalizadas na ciência
veterinária, incluindo entrega de drogas e vacinas e diagnóstico por imagem. No entanto,
um equilíbrio entre segurança e eficácia e risco e benefício será obrigatório, incluindo
considerações sobre o acúmulo de NP no meio ambiente. Futuros estudos de pesquisas
in vitro e in vivo terão papel fundamental no desenvolvimento do uso desta tecnologia na
medicina veterinária, bem como no direcionamento de seu uso correto e consciente, o
que implica, em uma perspectiva de saúde, a proteção de animais, humanos e o
ambiente.

Adsorção, distribuição, mecanismo de ação, via de toxicidade e possíveis efeitos

adversos em uma base espécie específica precisam ser esclarecidos para nanomateriais
e NP. Informações sobre os efeitos das NP no metabolismo dos animais de fazenda e na
função reprodutiva são escassas e precisam ser mais conduzidas. Além disso, estudos
usando a tecnologia de microarray ajudarão na descoberta de novos genes envolvidos no
processo de funções celulares (Türkez et al. 2017). Além disso, o verdadeiro objetivo da
nanotecnologia veterinária é ter um impacto positivo na profissão veterinária e ser útil para
os profissionais, além de influenciar positivamente a saúde animal.

Referências
Ahmed N, Haldar S, Pakhira MC et al (2005) Growth performances, nutrient utilization and carcass traits in broiler
chickens fed with a normal and a low energy diet supplemented with inorganic chromium (as chromium chloride
hexahydrate) and a combination of inorganic chromium and ascorbic acid. J Agric Sci 143:427–439
Akbari A, Wu J (2016) Cruciferin nanoparticles: preparation, characterization and their potential application in delivery
of bioactive compounds. Food Hydrocoll 54:107–118
Almeida AS, Vieira HL (2017) Role of cell metabolism and mitochondrial function during adult neurogenesis.
Neurochem Res 42(6):1787–1794
Anderson RA (1987) Chromium. In: Mertz W (ed) Trace elements in human and animal nutrition, 5th edn. Academic,
San Diego, CA
Araujo L, Sheppard M, Lobenberg R et al (1999) Uptake of PMMA nanoparticles from the gastrointestinal tract after
oral administration to rats: modification of the body distribution after suspension in surfactant solutions and in oil vehicles.
Int J Pharm 176:209–224
Asare N, Instanes C, Sandberg WJ et al (2012) Cytotoxic and genotoxic effects of silver nanoparticles in testicular
cells. Toxicology 291 (1–3):65–72
Asharani PV, Lian Wu Y, Gong Z et al (2008) Toxicity of silver nanoparticles in zebrafish models. Nanotechnology
19:255102
Austin CA, Hinkley GK, Mishra AR et al (2016) Distribution and accumulation of 10 nm silver nanoparticles in maternal
tissues and visceral yolk sac of pregnant mice, and a potential effect on embryo growth. Nanotoxicology 10(6):654–661
Balasubramanian SK, Jittiwat J, Manikandan J et al (2010) Biodistribution of gold nanoparticles and gene expression
changes in the liver and spleen after intravenous administration in rats. Biomaterials 31:2034–2042
Ban C, Park SJ, Lim S et al (2015) Improving flavonoid bioaccessibility using an edible oil-based lipid nanoparticle for
oral delivery. J Agric Food Chem 63:5266–5272
Batley GE, McLaughlin MJ (2010) Fate of manufactured nanomaterials in the Australian environment. Department of
the Environment, Water, Heritage and the Arts, New South Wales
Behne D, Höfer T, von Berswordt-Wallrabe R et al (1982) Selenium in the testis of the rat: studies on its regulation and
its importance for the organism. J Nutr 112(9):1682–1687
Berube D, Cummings C, Cacciatore M et al (2011) Characteristics and classification of nanoparticles: expert Delphi
survey. Nanotoxicology 5:236–243
Bhatia S (2016) Nanoparticles types, classification, characterization, fabrication methods and drug delivery
applications. In: Bhatia S (ed) Natural polymer drug delivery systems. Springer, Cham
1320
 Braydich-Stolle L, Hussain S, Schlager JJ et al (2005) In vitro cytotoxicity of nanoparticles in mammalian germline
stem cells. Toxicol Sci 88:412–419
Braydich-Stolle LK, Lucas B, Schrand A et al (2010) Silver nanoparticles disrupt GDNF/Fyn kinase signaling in
spermatogonial stem cells. Toxicol Sci 116:577–589
Burda C, Chen X, Narayanan R et al (2005) Chemistry and properties of nanocrystals of different shapes. Chem Rev
105:1025–1102
Buzea C, Pacheco II, Robbie K (2007) Nanomaterials and nanoparticles: sources and toxicity. Biointerphases 2:17–71
Campbell JK, Mills CF (1979) The toxicity of zinc to pregnant sheep. Environ Res 20:1–13
Chakraborty C, Sharma AR, Sharma G et al (2016) Zebrafish: a complete animal model to enumerate the nanoparticle
toxicity. J Nanobiotechnol 14(1):65
Challier JC, Panigel M, Meyer E (1973) Uptake of colloidal 198Au by fetal liver in rat, after direct intrafetal
administration. Int J Nucl Med Biol 1:103–106
Chauke N, Siebrits FK (2012) Evaluation of silver nanoparticles as a possible coccidiostat in broiler production. S Afr J
Anim Sci 42(5):493–497
Chen J, Wang W, Wang Z (2011) Effect of nano-zinc oxide supplementation on rumen fermentation in vitro. Chin J
Anim Nutr 8:023
Colagar AH, Marzony ET, Chaichi MJ (2009) Zinc levels in seminal plasma are associated with sperm quality in fertile
and infertile men. Nutr Res 29(2):82–88
Colom J, Cano-Sarabia M, Otero J et al (2015) Liposome-encapsulated bacteriophages for enhanced oral phage
therapy against Salmonella spp. Appl Environ Microbiol 81(14):4841–4849
Corbierre MK, Cameron NS, Sutton M et al (2005) Gold nanoparticle/polymer nanocomposites: dispersion of
nanoparticles as a function of capping agent molecular weight and grafting density. Langmuir 21:6063–6072
Cromwell GL (2001) Antimicrobial and promicrobial agent. In: Lewis AJ, Southern LL (eds) Swine nutrition, 2nd edn.
CRC, Boca Raton, FL. ISBN: 9780849306969
Croxford TP, McCormick NH, Kelleher SL (2011) Moderate zinc deficiency reduces testicular Zip6 and Zip10
abundance and impairs spermatogenesis in mice. J Nutr 141(3):359–365
Cusumano V, Costa GB, Seminara S (1990) Effect of aflatoxins on rat peritoneal macrophages. Appl Environ Microb
56:3482–3484
De Berardis B, Civitelli G, Condello M et al (2010) Exposure to ZnO nanoparticles induces oxidative stress and
cytotoxicity in human colon carcinoma cells. Toxicol Appl Pharmacol 246:116–127
Ding Y, Bian XC, Yao W et al (2010) Surface potential-regulated transmembrane and cytotoxicity of chitosan/gold
hybrid nanospheres. ACS Appl Mater Interfaces 2:1456–1465
Ducray AD, Felser A, Zielinski J et al (2017a) Effects of silica nanoparticle exposure on mitochondrial function during
neuronal differentiation. J Nanobiotechnol 15(1):49
Ducray AD, Stojiljkovic A, Möller A et al (2017b) Uptake of silica nanoparticles in the brain and effects on neuronal
differentiation using different in vitro models. Nanomedicine 13(3):1195–1204
Eguia AG, Fu CM, Lu FY et al (2009) Effects of nanocopper on copper availability and nutrients digestibility, growth
performance and serum traits of piglets. Livest Sci 126:122–129
El Amin A (2006) Nanotech database compiles consumer items on the market. Available from:
http://www.foodproductiondailyusa.com/news/ng.asp?id¼66516
El-Sherbiny M, Cieslak A, Pers-Kamczyc E et al (2016) Short communication: a nanoemulsified form of oil blends
positively affects the fatty acid proportion in ruminal batch cultures. J Dairy Sci 99(1):399–407
Essa SS, El-Saied EM, El-Tawil OS et al (2017) Modulating effect of MgO-SiO(2) nanoparticles on immunological and
histopathological alterations induced by aflatoxicosis in rats. Toxicon 140:94–104
Farré M, Gajda-Schrantz K, Kantiani L et al (2009) Ecotoxicity and analysis of nanomaterials in the aquatic
environment. Anal Bioanal Chem 393:81–95
Fedulov AV, Leme A, Yang Z et al (2008) Pulmonary exposure to particles during pregnancy causes increased
neonatal asthma susceptibility. Am J Respir Cell Mol Biol 38:57–67
Fondevila M, Herrer R, Casallas MC et al (2009) Silver nanoparticles as a potential antimicrobial additive for weaned
pigs. Anim Feed Sci Technol 150:259–269
Gallo A, Boni R, Buttino I et al (2016) Spermiotoxicity of nickel nanoparticles in the marine invertebrate Ciona
intestinalis (ascidians). Nanotoxicology 10(8):1096–1104
Gao X, Yin S, TangMet al (2011) Effects of developmental exposure to TiO2 nano-particles on synaptic plasticity in
hippocampal dentate gyrus area: an in vivo study in anesthetized rats. Biol Trace Elem Res 143:1616–1628
Ghosh P, Han G, De M et al (2008) Gold nanoparticles in delivery applications. Adv Drug Deliver Rev 60:1307–1315
Giri J, Usha K, Sunita T (1990) Evaluation of the selenium and chromium content of plants foods. Plant Foods Hum
Nutr 40:49–59
Gopalan R, Osman I, de Matas M et al (2009) The effect of zinc oxide and titanium dioxide nanoparticles in the comet
assay with UVA photoactivation of human sperm and lymphocytes. Environ Mol Mutagen 50:541–541
Haham M, Ish-Shalom S, Nodelman M et al (2012) Stability and bioavailability of vitamin D nanoencapsulated in
casein micelles. Food Funct 3(7):737–744
Han XY, Wang X, Li S (2009) A simple route to prepare stable hydroxyapatite nanoparticles suspension. J Nanopart
Res 11:1235–1240
1321
 Han XY, Du WL, Fan CL et al (2010) Changes in composition a metabolism of caecal microbiota in rats fed diets
supplemented with copper-loaded chitosan nanoparticles. J Anim Physiol Anim Nutr Berl 94:e138–e144
Hao Y, Liu J, Feng Y et al (2017) Molecular evidence of offspring liver dysfunction after maternal exposure to zinc
oxide nanoparticles. Toxicol Appl Pharmacol 329:318–325
Heiden TC, Dengler E, Kao WJ et al (2007) Developmental toxicity of low generation PAMAM dendrimers in zebrafish.
Toxicol Appl Pharmacol 225:70–79
Hill EK, Li J (2017) Current and future prospects for nanotechnology in animal production. J Anim Sci Biotechnol 8:26.
https://doi.org/10.1186/s40104-017-0157-5
Holden P, Carr J, Honeyman M et al (2002) Minimizing the use of antibiotics in pig production. Iowa State University
Extension, Iowa
Hosnedlova B, Kepinska M, Skalickova S et al (2018) Nano-selenium and its nanomedicine applications: a critical
review. Int J Nanomed 13:2107–2128
Hou J, Wan XY, Wang F et al (2009) Effects of titanium dioxide nanoparticles on development and maturation of rat
preantral follicle in vitro. Acad J Second Mil Med Univ 30(8):869–873
Hsieh MS, Shiao NH, Chan WH (2009) Cytotoxic effects of CdSe quantum dots on maturation of mouse oocytes,
fertilization, and fetal development. Int J Mol Sci 10:2122–2135
Hund-Rinke K, Baun A, Cupi D et al (2016) Regulatory ecotoxicity testing of nanomaterials—proposed modifications of
OECD test guidelines based on laboratory experience with silver and titanium dioxide nanoparticles. Nanotoxicology
10(10):1442–1447
Jain PK, El-Sayad IH, El-Sayed MH (2007) Au nanoparticles target cancer. Nano Today 2:18–29
Juniper DT, Phipps RH, Ramos-Morales E et al (2009) Effects of dietary supplementation with selenium enriched yeast
or sodium selenite on selenium tissue distribution and meat quality in lambs. Anim Feed Sci Technol 149:228–239
Kim JS, Yoon TJ, Yu KN et al (2006) Toxicity and tissue distribution of magnetic nanoparticles in mice. Toxicol Sci
89:338–347
Kim YS, Kim JS, Cho HS et al (2008) Twenty-eight-day oral toxicity, genotoxicity, and gender-related tissue distribution
of silver nanoparticles in Sprague-Dawley rats. Inhal Toxicol 20(6):575–583
Klaine SJ, Alvarez PJJ, Batley GE et al (2008) Nanomaterials in the environment: behavior, fate, bioavailability, and
effects. Environ Toxicol Chem 27:1825–1851
Koo OM, Rubinstein I, Onyuksel H (2005) Role of nanotechnology in targeted drug delivery and imaging: a concise
review. Nanomedicine 1(3):193–212
Li Z, Jiang H, Xu C, Gu L (2015) A review: using nanoparticles to enhance absorption and bioavailability of phenolic
phytochemicals. Food Hydrocoll 43:153–164
Liu L, He Y, Xiao Z et al (2017) Effects of selenium nanoparticles on reproductive performance of male Sprague-
Dawley rats at supranutritional and nonlethal levels. Biol Trace Elem Res 180(1):81–89
Makhluf SBD, Qasem R, Rubinstein S et al (2006) Loading magnetic nanoparticles into sperm cells does not affect
their functionality. Langmuir 22:9480–9482
Makhluf SBD, Arnon R, Patra C et al (2008) Labeling of sperm cells via the spontaneous penetration of Eu3+ ions as
nanoparticles complexed with PVA or PVP. J Phys Chem C 112(33):12801–12807
Małaczewska J (2014) Impact of noble metal nanoparticles on immune system of animals. Med Weter 70:204–208
Marin DE, Taranu I, Bunaciu PR et al (2002) Changes in performance, blood parameters, humoral and cellular immune
response in weanling piglets exposed to low doses of aflatoxin. J Anim Sci 80:1250–1257
Marin E, Briceño MI, Torres A et al (2017) New curcumin-loaded chitosan nanocapsules: in vivo evaluation. Planta Med
83(10):877–883
Massich MD, Giljohann DA, Schmucker AL et al (2010) Cellular response of polyvalent oligonucleotide-gold
nanoparticle conjugates. ACS Nano 4:5641–5646
Maurer-Jones MA, Gunsolus IL, Murphy CJ et al (2013) Toxicity of engineered nanoparticles in the environment. Anal
Chem 85:3036–3049
McClements DJ, Xiao H (2012) Potential biological fate of ingested nanoemulsions: influence of particle
characteristics. Food Funct 3:202–220
Mishra B, Patel BB, Tiwari S (2010) Colloidal nanocarriers: a review on formulation technology, types and applications
toward targeted drug delivery. Nanomedicine 6(1):9–24
Miura N, Ohtani K, Hasegawa T et al (2017) High sensitivity of testicular function to titanium nanoparticles. J Toxicol
Sci 42(3):359–366
Morgan AM, Ibrahim MA, Noshy PA (2017) Reproductive toxicity provoked by titanium dioxide nanoparticles and the
ameliorative role of Tiron in adult male rats. Biochem Biophys Res Commun 486(2):595–600
Müller RH, Lucks JS (1996) Arzneistofftraüger aus festen Lipidteilchen, Feste Lipidnanosphaüren (SLN). European
Patent No. EP 0605497
National Research Council (1994) Nutrient requirements of poultry: ninth revised edition. The National Academies
Press, Washington, DC. https://doi.org/10.17226/2114
Nowack B, Bucheli TD (2007) Occurrence, behavior and effects of nanoparticles in the environment. Environ Pollut
150:5–22
Ognik K, Sembratowicz I, Cholewińska E et al (2018) The effect of administration of copper nanoparticles to chickens
in their drinking water on the immune and antioxidant status of the blood. Anim Sci J 89(3):579–588
1322
 Ostiguy C, Lapointe G, Ménard L et al (2006) Nanoparticles: actual knowledge about occupational health and safety
risks and prevention measures. IRSST, Montréal, QC. ISBN: 2-89631-062-2
Ottinger CA, Kaattari SL (2000) Long-term immune dysfunction in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) exposed as
embryos to aflatoxin B1. Fish Shellfish Immunopathol 10(1):101–106
Partha SS, Somu BNR, Somu BNR, Rajendran D et al (2016) Nano zinc, an alternative to conventional zinc as animal
feed supplement: a review. Anim Nutr 2(3):134–141
Pawar K, Kaul G (2014) Toxicity of titanium oxide nanoparticles causes functionality and DNA damage in buffalo
(Bubalus bubalis) sperm in vitro. Toxicol Ind Health 30(6):520–533
Pensel P, Paredes A, Albani CM et al (2018) Albendazole nanocrystals in experimental alveolar echinococcosis:
enhanced chemoprophylactic and clinical efficacy in infected mice. Vet Parasitol 251:78–84
Pinar TS, Ismail S, Burcu GB et al (2018) Nanotechnology and nanopropolis in animal production and health: an
overview. Ital J Anim Sci. https://doi.org/10.1080/1828051X.2018.1448726
Rock MJ, Kincaid RL, Carstens GE (2001) Effects of prenatal source and level of dietary selenium on passive
immunity and thermometabolism of newborn lambs. Small Rumin Res 40(2):129–138
Sadauskas E, Wallin H, Stoltenberg M et al (2007) Kupffer cells are central in the removal of nanoparticles from the
organism. Part Fibre Toxicol 4:10
Sahin K, Sahin N, Kucuk O (2002a) Effects of dietary chromium picolinate supplementation on serum and tissue
mineral contents of laying Japanese quails. J Trace Elem Exp Med 15:163–169
Sahin K, Sahin N, Onderci M et al (2002b) Optimal dietary concentration of chromium for alleviating the effect of heat
stress on growth, carcass qualities and some serum metabolites of broiler chickens. Biol Trace Elem Res 89:53–64
Sahoo A, Swain RK, Mishra SK (2014) Effect of inorganic, organic and nano zinc supplemented diets on bioavailability
and immunity status of broilers. Int J Adv Res 2(11):828–837
Sawosz E, Grodzik M, Zielinska M et al (2009) Nanoparticles of silver do not affect growth, development and DNA
oxidative damage in chicken embryos. Arch Geflugelkd 73:208–213
Schodek DL, Ferreira P, Ashby MF (2009) Nanomaterials: classes and fundamentals. In: Nanomaterials,
nanotechnologies and design: an introduction for engineers and architects. Butterworth-Heinemann, Burlington. ISBN:
9780750681490
Sedic M, Senn JJ, Lynn A et al (2018) Safety evaluation of lipid nanoparticle-formulated modified mRNA in the
Sprague-Dawley rat and cynomolgus monkey. Vet Pathol 55(2):341–354
Semmler-Behnke M, Fertsch S, Schmid G, et al (2007) Uptake of 1.4 nm versus 18 nm gold nanoparticles by
secondary target organs is size dependent in control and pregnant rats after intratracheal or intravenous application.
EuroNanoForum 102–104
Semo E, Kesselman E, Danino D et al (2006) Casein micelle as a natural nano-capsular vehicle for nutraceuticals.
Food Hydrocoll 21:936–942
Shen XS, Wang GZ, Hong X et al (2009) Nanospheres of silver nanoparticles: agglomeration, surface morphology
control and application as SERS substrates. Phys Chem Chem Phys 11:7450–7454
Shi LG, Yang RJ, Yue WB et al (2010) Effect of elemental nanoselenium on semen quality, glutathione peroxidase
activity, and testis ultrastructure in male Boer goats. Anim Reprod Sci 118:248–254
Shi L, Xun W, Yue W et al (2011a) Effect of elemental nano-selenium on feed digestibility, rumen fermentation and
purine derivatives in sheep. Anim Feed Sci Technol 163:136–142
Shi LG, Xuna W, Yue W et al (2011b) Effect of sodium selenite, Se-yeast and nano-elemental selenium on growth
performance, Se concentration and antioxidant status in growing male goats. Small Ruminant Res 96:49–52
Shimizu M, Tainaka H, Oba T et al (2009) Maternal exposure to nanoparticulate titanium dioxide during the prenatal
period alters gene expression related to brain development in the mouse. Part Fibre Toxicol 6:20
Sikorska J, Szmidt M, Sawosz E et al (2010) Can silver nanoparticles affect the mineral content, structure and
mechanical properties of chicken embryo bones? J Anim Feed Sci 2:286–291
Sirirat N, Lu JJ, Hung ATY et al (2013) Effect of different levels of nanoparticles chromium picolinate supplementation
on performance, egg quality, mineral retention, and tissues minerals accumulation in layer chickens. J Agric Sci
5(2):150–159
Sri Sindhura K, Prasad TNVKV, Panner Selvam P et al (2014) Synthesis, characterization and evaluation of effect of
phytogenic zinc nanoparticles on soil exo-enzymes. Appl Nanosci 4:819
Stevenson M, Katherine E, Krattenmaker EJ et al (2017) Standardized toxicity testing may underestimate ecotoxicity:
environmentally relevant food rations increase the toxicity of silver nanoparticles to daphnia. Environ Toxicol Chem
36(11):3008–3018
Studnicka A, Sawosz E, Grodzik M et al (2009) Influence of nanoparticles of silver/palladium alloy on chicken embryos’
development. In: Kaleta T (ed) Annals of Warsaw University of Life Sciences – SGGW, Animal Science. Warsaw
University of Life Science Press, Warsaw, pp 237–242
Swain PS, Rajendran D, Rao SBN, Dominic G (2015) Preparation and effects of nano mineral particle feeding in
livestock: a review. Vet World 8(7):888–891
Takahashi S, Matsuoka O (1981) Cross placental-transfer of Au-198-colloid in near term rats. J Radiat Res 22:242–
249
Takahashi Y, Mizuo K, Shinkai Y et al (2010) Prenatal exposure to titanium dioxide nanoparticles increases dopamine
levels in the prefrontal cortex and neostriatum of mice. J Toxicol Sci 35:749–756

1323
 Takeda K, Suzuki KI, Ishihara A et al (2009) Nanoparticles transferred from pregnant mice to their offspring can
damage the genital and cranial nerve systems. J Health Sci 55:95–102
Taylor U, Barchanski A, Kues W et al (2012) Impact of metal nanoparticles on germ cell viability and functionality.
Reprod Domest Anim 47(4):359–368
Thornton PK (2010) Livestock production: recent trends, future prospects. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci
365(1554):2853–2867
Tsai YM, Chien CF, Lin LC et al (2011) Curcumin and its nanoformulation: the kinetics of tissue distribution and blood-
brain barrier penetration. Int J Pharm 416(1):331–338
Türkez H, Arslan ME, Sönmez E et al (2017) Toxicogenomic responses of human alveolar epithelial cells to tungsten
boride nanoparticles. Chem Biol Interact 273:257–265
Underwood C, van Eps AW (2012) Nanomedicine and veterinary science: the reality and the practicality. Vet J
193(1):12–23
Valdes C, Bustos G, Martinez JL et al (2018) Antinociceptive antibiotics-loaded into solid lipid nanoparticles of
prolonged release: measuring pharmacological efficiency and time span on chronic monoarthritis rats. PLoS One
13(4):e0187473
Vandamme TF, Anton N (2010) Low-energy nanoemulsification to design veterinary controlled drug delivery devices.
Int J Nanomed 21(5):867–873
Vyas SP, Khar RK (2002) Targeted and controlled drug delivery: novel carrier systems, 1st edn. CBS, New Delhi.
ISBN: 978-8123907994
Wang MQ, Xu ZR (2004) Effect of chromium nanoparticle on growth performance, carcass characteristics, pork quality
and tissue chromium in finishing pigs. Asian Aust J Anim Sci 17(8):1118–1122
Wang H, Zhang J, Yu H (2007) Elemental selenium at nano size possesses lower toxicity without compromising the
fundamental effect on selenoenzymes: comparison with selenomethionine in mice. Free Radic Biol Med 42:1524–1533
Wang X, Jiang Y, Wang YW et al (2008) Enhancing anti-inflammation activity of curcumin through O/W nanoemulsions.
Food Chem 108(2):419–424
Wang C, Wang MQ, Ye SS et al (2011a) Effects of copper-loaded chitosan nanoparticles on growth and immunity in
broilers. Poult Sci 90(10):2223–2228
Wang JJ, Zeng ZW, Xiao RZ, Xie T, Zhou GL, Zhan XR et al (2011b) Recent advances of chitosan nanoparticles as
drug carriers. Int J Nanomed 6:765–774
Wegener HC (2003) Antibiotics in animal feed and their role in resistance development. Curr Opin Microbiol 6:439–445
Wu ASH, Oldfield JE, Shull LR et al (1979) Specific effect of selenium deficiency on rat sperm. Biol Reprod 20:793–
798
Xi G, Xu ZR, Wu SH et al (2001) Effect of chromium picolinate on growth performance, carcass, characteristics, serum
metabolites and metabolism of lipid in pigs. Asian-Aust J Anim Sci 14(2):258–262. https://doi.org/10.5713/ajas.2001.258
Yamashita K, Yoshioka Y, Higashisaka K, Mimura K, Morishita Y, Nozaki M et al (2011) Silica and titanium dioxide
nanoparticles cause pregnancy complications in mice. Nat Nanotechnol 6:321–328
Yildiz A, Parlat S, Yazgan O (2004) The effects of organic chromium supplementation on production traits and some
serum parameters of laying hens. Rev Med Vet 12:642–646
Zakhidov ST, Marshak TL, Malolina EA, Kulibin AY, Zelenina IA, Pavluchenkova SM et al (2010) Gold nanoparticles
disturb nuclear chromatin decondensation in mouse sperm in vitro. Biol Membr 4:349–353
Zha LY, Wang MQ, Xu ZR, Gu LY (2007) Efficacy of chromium(III) supplementation on growth, body composition,
serum parameters, and tissue chromium in rats. Biol Trace Elem Res 119:42–50. https://doi.org/10.1007/s12011-007-
0042-8
Zha LY, Xu ZR, Wang MQ, Gu LY (2008) Chromium nanoparticle exhibits higher absorption efficiency than chromium
picolinate and chromium chloride in caco-2 cell monolayers. J Anim Physiol Anim Nutr 92:131–140.
https://doi.org/10.1111/j.1439-0396.2007.00718.x
Zha LY, Zeng JW, Chu XW, Mao LM, Luo HJ (2009) Efficacy of trivalent chromium on growth performance, carcass
characteristics and tissue chromium in heat-stressed broiler chicks. J Sci Food Agric 89:1782–1786.
https://doi.org/10.1002/jsfa.3656
Zhang JS, Wang XF, Xu TW (2008) Elemental selenium at nano size (Nano-Se) as a potential chemopreventive agent
with reduced risk of selenium toxicity: comparison with Se-methylselenocysteine in mice. Toxicol Sci 101:22–31.
https://doi.org/10.1093/toxsci/kfm221
Zielinska AK, Sawosz E, Grodzik M, Chwalibog A, Kamaszewski M (2009) Influence of nanoparticles of gold on
chicken embryos’ development. In: Kaleta T (ed) Annals of Warsaw University of Life Sciences – SGGW, Animal Science.
Warsaw University of Life Science Press, Warsaw, pp 249–253

1324
 Teste de estabilidade de nutracêuticos veterinários
Dan DuBourdieu

Resumo
Os nutracêuticos têm ganhado importância cada vez maior no uso veterinário nos últimos
30 anos. No entanto, a estabilidade de muitos desses nutracêuticos é um desafio para os
fabricantes manterem uma vida útil de 2 anos. Os fatores que afetam a estabilidade
nutracêutica incluem condições ambientais, instabilidade química, interações de matriz,
embalagem e outros problemas. Certos nutracêuticos, como o sulfato de glucosamina,
têm estabilidade muito curta em produtos acabados, enquanto outros, como o sulfato de
condroitina, são muito estáveis. O teste de nutracêuticos envolve monitorá-los em tempo
real e condições aceleradas para determinar o quanto eles se degradarão. As estratégias
que as empresas usam para aumentar a estabilidade dos nutracêuticos envolvem
qualidade desde o projeto, métodos de encapsulamento e avanços nas técnicas de
embalagem.
Palavras-chave: Nutracêuticos veterinários · Estabilidade nutracêutica · Testes
nutracêuticos

D. DuBourdieu. Vets Plus Inc., Menomonie, WI, USA. e-mail: dand@vets-plus.com

1. Introdução
Os nutracêuticos ganharam cada vez mais destaque para uso veterinário nos últimos 30
anos e se transformaram em uma indústria de bilhões de dólares. Essa tendência reflete
uma mudança na mentalidade de fabricantes, veterinários e proprietários de animais. Em
vez de depender exclusivamente de medicamentos ou medicamentos para a prevenção e
tratamento de doenças, alternativas nutricionais para o gerenciamento de doenças e
promoção da saúde estão prontamente disponíveis em alimentos convencionais para
animais de estimação, bem como em suplementos individuais. Essa tendência vem de um
ambiente altamente regulamentado de medicamentos, onde a fabricação é rigidamente
controlada e onde a estabilidade dos ingredientes ativos é totalmente conhecida nos
produtos acabados. No entanto, o ambiente de fabricação de nutracêuticos não é
atualmente tão controlado quanto o ambiente de fabricação de medicamentos. As datas
de expiração não são exigidas nos rótulos nutracêuticos do ponto de vista regulamentar
nos EUA. Isso levou a preocupações justificáveis sobre a estabilidade da vida de
1325
prateleira dos nutracêuticos usados tanto na área humana quanto na veterinária e a
preocupação se o nutracêutico ainda é eficaz. O principal motivo dos testes de
estabilidade é a preocupação com o bem-estar do animal que sofre da doença para a qual
o produto foi desenvolvido. Uma segunda preocupação importante é proteger a reputação
do fabricante, garantindo que o produto manterá a adequação para uso com relação a
todos os atributos funcionalmente relevantes enquanto estiverem no mercado. Assim,
fabricantes, veterinários e donos de animais desejam saber se os nutracêuticos que estão
sendo usados são estáveis e ainda serão eficazes, mesmo 2 anos ou mais após a data de
fabricação.

Nos EUA, aproximadamente 90% dos veterinários vendem algum tipo de ingrediente
novo, como nutracêuticos. Quase 30% dos donos de animais de estimação usaram ou
consideraram o uso de novos ingredientes, como nutracêuticos e ervas/vegetais em seus
animais. Os consumidores geralmente procuram datas de validade para os produtos, mas
as regulamentações federais dos Estados Unidos atualmente não exigem datas de
validade para suplementos nutricionais. Os fabricantes desejam uma estabilidade de pelo
menos 2 anos em seus produtos nutracêuticos, se possível, o que significa que os
ingredientes “ativos” listados no rótulo ainda serão capazes de atender à declaração do
rótulo se testados novamente 2 anos após a fabricação. O melhor que o consumidor pode
fazer é examinar o rótulo para verificar a data de fabricação e torcer para que o produto
permaneça estável por pelo menos 2 anos, após o armazenamento adequado. No
entanto, fabricantes, veterinários e consumidores devem estar cientes de que nem todos
os nutracêuticos podem atender a esta declaração do rótulo.

2. Fatores que afetam a estabilidade dos nutracêuticos

Há uma série de problemas que podem afetar a concentração e a estabilidade dos
nutracêuticos em seus formatos bruto e acabado. Isso inclui condições ambientais,
instabilidade química, interações de matriz, embalagem e outras questões intangíveis. Um
produto nutracêutico pode sofrer alterações na aparência, consistência, uniformidade de
conteúdo, clareza (solução), teor de umidade, tamanho e forma da partícula, pH e
integridade da embalagem, afetando assim sua estabilidade. Essas mudanças físicas
podem ser devido ao impacto, vibração, abrasão e flutuações de temperatura, como
congelamento, descongelamento ou cisalhamento, etc. As reações químicas como
solvólise, oxidação, redução, racemização, etc. que ocorrem nos produtos nutracêuticos
podem levar à formação de produtos de degradação, perda de potência do ingrediente
nutracêutico ativo e perda da atividade do excipiente, como ação conservante
1326
antimicrobiana e atividade antioxidante. A estabilidade de um produto nutracêutico
também pode ser afetada por causa de mudanças microbiológicas, como crescimento de
microorganismos em produtos não estéreis e mudanças na eficácia do preservativo.

Uma fonte de problemas para a estabilidade nutracêutica é a própria matéria-prima inicial,

como os ativos de plantas. As plantas que contêm ativos nutracêuticos são coletadas ou
colhidas de fontes cultivadas ou silvestres em certas épocas do ano e, em seguida, são
normalmente secas. O material vegetal então passa por uma etapa de distorção para
remover matéria estranha, como sujeira ou partes indesejadas da planta ou outros
adulterantes. Isso deve ser feito antes de ser enfardado ou embalado. Estas matérias-
primas podem então ser processadas adicionalmente para purificar parcialmente ou mais
completamente um composto ativo particular (isto é, o nutracêutico específico) de
interesse. Para muitos nutracêuticos botânicos e fitoterápicos, condições ambientais como
precipitação, altitude, temperatura, solo e condições de armazenamento, bem como
diferentes procedimentos de colheita; tempo e método de coleta; processos de fabricação,
como seleção, secagem, purificação e extração; e a variabilidade genética pode criar uma
variabilidade substancial na qualidade e estabilidade do produto e na concentração de
produtos químicos vegetais em diferentes produtos. Os nutracêuticos derivados de
animais ou de outras fontes correspondem às mesmas questões básicas da coleta de
nutracêuticos à base de plantas.

As fito-formulações freqüentemente sofrem degradação durante o armazenamento por

meio de oxidação, hidrólise, cristalização, quebra da emulsão, deterioração enzimática e
reações químicas com os aditivos e excipientes. Cada ingrediente, seja terapeuticamente
ativo ou inativo, em uma forma de dosagem pode afetar a estabilidade. A temperatura e a
umidade são os dois principais fatores que afetam a qualidade e a estabilidade da maioria
dos produtos à base de plantas. Uma reação química aumenta 2–3 vezes para cada
aumento de 10 ºC na temperatura. A umidade absorvida na superfície de um nutracêutico
sólido freqüentemente aumenta a taxa de decomposição se for suscetível à hidrólise. A
presença de enzimas no produto também aumenta a taxa de degradação química. A luz
também é um fator importante que afeta as fito-formulações por geração de radicais
livres. Os fatores ambientais de oxigênio e dióxido de carbono podem afetar a
estabilidade. Da mesma forma, fatores como tamanho de partícula, pH, as propriedades
da água e outros solventes empregados, a natureza do recipiente e a presença de outros
produtos químicos resultantes da contaminação ou da mistura intencional de diferentes
produtos podem influenciar a estabilidade. Nutracêuticos derivados de fontes animais
também são afetados por essas reações químicas e físicas. A Tabela 1 demonstra a

1327
suscetibilidade dessas vitaminas tipicamente encontradas em várias preparações
nutracêuticas a diversos fatores externos.

Tabela 1 Fatores externos que afetam a estabilidade da vitamina

Vitamina Temperatura Oxigênio Umidade Luz PH ácido PH alcalino
A xx xx x xx x 0
D3 x xx x x x 0
E x 0 x x x x
K3 x x xx x xx 0
B1 x x xx x 0 xx
B2 0 0 x x 0 0
B6 xx 0 x x x 0
B12 x x x 0 0 0
Pantotenato de cálcio x 0 x 0 0 0
Ácido nicotinico 0 0 0 0 0 0
Biotina 0 0 x x xx 0
Ácido folico xx 0 x xx 0 0
C 0 xx xx 0 0 0
0, estável; x, sensível; xx, muito sensível Fonte: Gadient (1986)

Muitas formulações de ervas são misturas complexas de diferentes componentes obtidos

durante um processo de extração. Isso não é surpreendente, uma vez que a eficácia de
muitos nutracêuticos à base de plantas não é baseada em um único composto puro, como
a droga poderia ser, mas sim a eficácia de grupos de compostos na planta. Cada
componente tem vida útil, atividade, concentração e consistência variáveis. Isso cria um
problema durante a determinação das condições de armazenamento, pois não é fácil
determinar a estabilidade da preparação final à base de plantas com base na atividade e
no perfil de estabilidade de um único componente. No entanto, a maioria dos fabricantes
baseará qualquer alegação de rótulo de estabilidade de um único composto devido à
natureza complicada e cara do trabalho analítico necessário para obter pelo menos algum
tipo de medição de estabilidade.

O teor de umidade acima de um valor crítico e o crescimento de fungos em produtos

naturais podem causar uma interação dos componentes ativos com o material de
embalagem. Medicamentos naturais e nutracêuticos costumam sofrer instabilidade física
devido à presença de impurezas e reação com o recipiente. Condições como o
crescimento de microrganismos e alimentação de insetos afetam os metabólitos
secundários e a composição química das plantas. Os componentes ativos voláteis de
medicamentos naturais e nutracêuticos apresentam um problema de volatilidade e
diminuição da atividade após armazenamento a longo prazo. As interações dos
1328
componentes ativos com outros ingredientes das formulações, como os aditivos, causam
alteração na atividade do novo fármaco. As formulações à base de ervas possuem muitos
constituintes ativos, como alcalóides, glicosídeos, taninos, flavonóides, etc., e cada
componente terá diferentes condições de estabilidade. Portanto, as condições reais de
estabilidade para a formulação à base de plantas são diferentes das de seus
componentes individuais.

A embalagem do produto final também tem grande influência na estabilidade do

nutracêutico. Se a embalagem não permite que a umidade, a luz ou o ar cheguem ao
nutracêutico e se a embalagem tem qualquer tipo de capacidade para moderar a
temperatura afetará muito a estabilidade geral do produto final.

3. Categorias de nutracêuticos e sua estabilidade

Existem muitos tipos de nutracêuticos. Cada um deles tem sua própria estabilidade
inerente, e os fabricantes devem estar cientes de que alguns serão mais estáveis do que
outros para a matriz específica na qual o nutracêutico é fornecido. As principais categorias
de suplementos usados em situações veterinárias incluem protetores articulares e
antioxidantes, ácidos graxos com capacidade antiinflamatória e probióticos.

Os protetores de articulação comumente usados incluem glucosamina, sulfato de

condroitina e metil sulfonilmetano. Alguns desses ingredientes não são muito estáveis.
Por exemplo, a glucosamina não é um composto estável em sua forma de base livre. É
conhecido por se degradar rapidamente em soluções aquosas (Hrynets et al. 2015).
Existem inúmeras formas mais estáveis de glucosamina disponíveis para os
consumidores. Essas diferentes formas incluem sulfato de glucosamina, cloridrato de
glucosamina e N-acetil-glucosamina. Esses diferentes produtos químicos têm algumas
semelhanças. No entanto, eles podem não ter os mesmos efeitos quando tomados como
suplemento dietético, nem a mesma estabilidade. A partir dos resultados apresentados na
Tabela 2, é claro que o sulfato de glucosamina é uma substância particularmente instável,
uma vez que é facilmente oxidado e fortemente higroscópico. As condições em que é
mantido são claramente muito importantes (particularmente a umidade relativa do
ambiente) e devem ser rigorosamente controladas. Somente em temperaturas inferiores a
15 ºC, com umidade relativa não superior a 30%, pode-se obter uma estabilidade de
cerca de 4-5 meses, enquanto a 25 ºC, nas mesmas condições de umidade relativa,
sinais de degradação são mostrados mesmo após cerca de 60 dias. Além disso, se as
condições de temperatura e umidade forem consideradas normais (25 ºC e 60% de

1329
umidade relativa), os primeiros sinais de degradação aparecem mesmo após 4 h, e o
sulfato de glucosamina é completamente decomposto após apenas 36 h (Senin 1987). É
conhecido que os sais de glucosamina se destroem em soluções para 5-
hidroximetilfurfural (Shu 1998; Kompantsev 2012).

Tabela 2 Estabilidade do sulfato de glucosamina em diferentes temperaturas e umidade

relativa

Tabela 2 Estabilidade do sulfato de glucosamina em diferentes temperaturas e umidade relativa

25 ºC / 30% UR 15 ºC / 30% UR 25 ºC / 45% UR
Dia
% Valor % Valor % Valor
0 99.6 99.7 100.5
6 99.8
7 99.1 99.3 –
12 – 90.3
15 98.3 98.4 –
24 – 74.5
30 99.5 99.5 –
36 – 29.6
60 87.8 98.1 –
120 75.2 97.2 –
360 40.4 84.1 –
Tabela adaptada de Senin (1987)

Por outro lado, o cloridrato de glucosamina é mais estável do que a forma sulfato em pH
ácido, e a degradação começa quando a temperatura atinge 190 ºC. Consequentemente,
é mais estável em condições de pasteurização e em pH ácido. A sua estabilidade em
alimentos foi estudada (EFSA 2009). Por exemplo, na limonada e no suco 100% mantido
a 100 ºC por 5 min, ocorre uma recuperação de 100% da glucosamina. Da mesma forma,
há 100% de recuperação em bebidas isotônicas em pH 3,0, suco em pH 3,0 e “água de
fitness” em pH 2,9, todas mantidas em temperatura ambiente por 9, 24 e 17 meses,
respectivamente. No entanto, a estabilidade da glucosamina HCl em produtos acabados
de matrizes sólidas, como comprimidos, ainda dependerá da quantidade de umidade, pH
e temperatura a que o produto acabado foi submetido. Espera-se que a degradação tenha
ocorrido desde a data de fabricação na maioria dos produtos até certo ponto. Embora a
quantidade ainda possa atender às reivindicações do rótulo após 2 anos, dependerá do
produto específico. Infelizmente, não há uma maneira simples de saber pelo rótulo, a
menos que o teste tenha ocorrido no produto acabado 2 anos após a data de fabricação e
essa informação esteja declarada em algum lugar. Felizmente, os grupos de manufatura

1330
continuarão a pesquisar maneiras de estabilizar ainda mais a glucosamina em produtos
acabados.

A estabilidade do sulfato de condroitina (CS) usado em produtos para juntas tem um

histórico muito melhor de estabilidade do que a glucosamina. A matéria-prima CS mantida
em temperatura ambiente sofre pouca degradação ao longo de um ano. O CS foi
estudado em condições ácidas, neutras e básicas a 30 e 60 ºC, e o CS é notavelmente
estável em condições neutras a baixa temperatura. No entanto, ele se degrada a 60 ºC,
produzindo fragmentos de baixa massa molecular e produtos dessulfatados (Volpi et al.
1999).

Metil sulfonilmetano (MSM) é um composto organossulfurado com um grupo funcional

sulfonil que é frequentemente usado em produtos de junta. Ocorre naturalmente em
algumas plantas e é usado em doenças relacionadas à dor crônica, inflamação e artrite.
MSM parece ser bastante estável devido à sua capacidade de resistir a altas
temperaturas (Trivedi et al. 2015). A vida útil do MSM pode ser de 5 anos em preparações
puras, de acordo com os fabricantes.

Os antioxidantes referem-se a um grupo heterogêneo de compostos que evitam os danos

dos radicais livres às membranas celulares, proteínas e DNA. Eles são benéficos em
doenças inflamatórias, envelhecimento e certos tipos de câncer. Antioxidantes comuns
usados como suplementos em alimentos ou ingestão oral direta incluem vitaminas C
(ácido ascórbico) e E, vários bioflavonóides encontrados em plantas e carotenóides como
a astaxantina encontrada na vida marinha. Muitos desses antioxidantes têm baixa
estabilidade a longo prazo e, portanto, uma vida útil reduzida dos produtos acabados. O
trabalho analítico mostrou (Oyetade et al. 2012) que os materiais de embalagem, a
exposição ao ar, as condições de temperatura de armazenamento e o tipo de matriz
podem afetar significativamente a estabilidade das vitaminas que foram usadas como
antioxidantes. Existe uma correlação negativa significativa entre o declínio do ácido
ascórbico, que depende das temperaturas de armazenamento, e o tipo de matriz
conforme visto na Tabela 3 (tabela adaptada de Oyetade et al. 2012). O teor de ácido
ascórbico foi mais estável quando armazenado sob refrigeração.

1331
 Tabela 3 Mudanças nos conteúdos de ácido ascórbico em matrizes armazenadas em diferentes
temperaturas
Comprimidos Temperatura
Tempo de retenção (min) 4 ºC 35 ºC 55 ºC 75 ºC 95 ºC
0 84.5 84.5 84.5 84.5 84.5
60 84.5 77.5 72.9 69.9 61.6
120 84.5 75.8 63.3 59.3 48.9
180 84.5 69.8 60 48.6 36.8
240 84.5 62.9 52.3 38.6 30.9
Suco de uva
0 58,2 58.2 58.2 58.2 58.2
60 46.0 42.5 40.5 31.9 29.3
120 46.0 40.3 39.8 30.2 26.9
180 46.0 37.8 37.8 28.9 24.3
240 45.8 37 33.9 26.3 19.3

A estabilidade de outras vitaminas individuais em pré-misturas e alimentos acabados varia

de acordo com uma série de fatores (Tabela 4).

Tabela 4 Porcentagem de retenção de vitaminas em rações peletizadas armazenadas 6 meses em

temperatura ambiente
Vitamina Só vitaminas Vitaminas misturadas com minerais e cloreto de colina
A 89–95 70–100
D3 90–100 80–100
E 90–100 90–100
K3 50–70 30–50
Tiamina 85–100 70–80
Riboflavina 90–100 90–100
B6 70–90 60–80
B12 60–90 50–80
Ácido pantotênico 90–100 80–100
Niacina 90–100 90–100
Ácido fólico 70–100 50–70
Biotina 90–100 70–90

Os minerais são mais resistentes aos processos de fabricação do que as vitaminas. Os

minerais são substâncias fundamentais de ocorrência natural que mantêm a saúde óssea
adequada e os sistemas nervoso e muscular e têm a capacidade de assimilar nutrientes.
No entanto, eles sofrem alterações quando expostos ao calor, ar ou luz. Minerais como
cobre, ferro e zinco também são afetados pela umidade e podem reagir com outros
componentes da matriz, como proteínas e carboidratos. Várias formas de ferro são
usadas na fortificação. Entre os mais populares estão o sulfato ferroso e os pós de ferro
1332
elementar devido à sua biodisponibilidade relativamente alta. Outras fontes potenciais de
ferro incluem ortofosfato férrico, fosfato de sódio e ferro, fumarato ferroso e ferro-EDTA. A
estabilidade das diferentes formas de ferro depende de vários fatores, incluindo a
natureza do produto nutracêutico final ao qual é adicionado, o tamanho da partícula e a
exposição ao calor e ao ar (Tabela 4).

As proteínas, como as enzimas, possuem maior complexidade bioquímica e estrutural em

comparação com a maioria dos ingredientes ativos usados em produtos nutracêuticos.
Assim, a formulação e entrega de proteínas e enzimas em produtos nutracêuticos
estáveis, bem caracterizados e eficazes representam desafios significativos para o
formulador. Os comprimidos são uma forma de dosagem adequada para a aplicação
desses materiais, pois fornecem facilidade de administração, precisão de dosagem,
robustez, boa estabilidade e produção eficiente. No entanto, a compressão simples de um
material a granel, em pó ou granular, em um comprimido robusto depende de um grande
número de influências, principalmente a força de compressão, deformação de partícula e
formação de forças adesivas. Portanto, as propriedades físicas e químicas das proteínas
e enzimas podem ser influenciadas pela formulação e por fatores tecnológicos, como
excipientes, temperatura, condições de armazenamento, compressão ou forças de
cisalhamento (Manning et al. 1989).

Houve um aumento na evidência clínica sobre os benefícios terapêuticos das bactérias

probióticas, incluindo espécies de Lactobacillus, Bifidobacteria e Enterococcus para a
saúde intestinal e um crescente interesse comercial em alimentos e/ou aplicações
nutracêuticas dessas bactérias (Park et al. 2016). Um efeito benéfico dos probióticos na
flora intestinal humana e animal é a restauração da função de barreira intestinal
prejudicada. A ingestão regular de cepas probióticas estimula o crescimento de
microrganismos preferidos, elimina cepas potencialmente prejudiciais e reforça os
mecanismos naturais de defesa. No entanto, a formulação de bactérias probióticas junto
com outros ingredientes, ou mesmo isoladamente, em uma forma de dosagem estável é
dificultada por sua viabilidade extremamente pobre durante o processo de preparação e /
ou período de armazenamento. A maioria dos microrganismos geralmente exibe extrema
vulnerabilidade ao oxigênio, temperaturas, baixo pH e aditivos (Kailasapathy e Chin
2000). Além disso, a viabilidade de bactérias vivas no fluido gástrico é bastante pobre.
Poucos deles apresentam resistência a condições ambientais adversas para colonizar a
membrana mucosa do intestino delgado e/ou grosso. Para ajudar a superar esses
problemas de estabilidade, técnicas de revestimento entérico foram exploradas a fim de
proteger as bactérias vivas da interação desfavorável dentro da forma de dosagem e

1333
ambientes gastrointestinais adversos (pH, enzimas, sais biliares, etc.) e para entregar
bactérias ao intestino de animais. Por exemplo, L. acidophilus e Enterococcus faecalis
foram revestidos (encapsulados) e embutidos em comprimidos e comparados com as
bactérias nuas correspondentes, as bactérias não revestidas, em comprimidos sob
condições ambientais de armazenamento (25 ºC / 60% de umidade relativa) por 6 meses.
Os procedimentos de revestimento específicos claramente ajudaram a manter a
estabilidade e a viabilidade das bactérias (Park et al. 2016).

Os ácidos graxos poli-insaturados de cadeia longa ômega-3, incluindo EPA e DHA, são
substâncias com uma série de importantes funções estruturais e regulatórias na fisiologia
animal. As deficiências na ingestão alimentar e nos níveis teciduais estão relacionadas à
suscetibilidade a doenças crônicas. Demonstrou-se que os ácidos graxos ômega-3 são
benéficos em cães com dermatite atópica, prurido, linfoma, artrite e doença valvar crônica.
O National Research Council reconheceu os ácidos graxos ômega-3 como um nutriente
essencial para cães e gatos. Como tal, um número substancial de produtos acabados é
produzido com óleos contendo EPA/DHA derivados de fontes marinhas, nomeadamente
de anchova e fígado de bacalhau. Outras fontes, como microalgas cultivadas
propositadamente, são de importância crescente. Preparar formulações sólidas, como pó
e comprimidos, que contêm ômega-3, pode ser desafiador, pois os processos de
produção necessários expõem os ácidos graxos ômega-3 insaturados a altas
temperaturas, luz e estresse mecânico na presença de ar. Quando adicionados a
formulações de roedores de laboratório, esses ácidos graxos estão sujeitos a oxidação
rápida e/ou extensa e outras mudanças químicas por exposição ao ar, luz ou calor
durante o processamento de pelotas ou quando armazenados por vários períodos de
tempo (Lytle et al. 1992) Em condições ambientais e de vida real, a estabilidade oxidativa
absoluta dos óleos contendo EPA/DHA não pode ser alcançada, mas pode ser
desacelerada consideravelmente, limitando a exposição ao ar e reduzindo as taxas de
peroxidação e reações adicionais secundárias ao primário oxidação, por exemplo,
mantendo concentrações suficientemente altas de antioxidantes reduzidos e limitando a
exposição a fatores predisponentes, como calor e luz (Bannenberg et al. 2017). O uso de
tecnologia de encapsulamento para ácidos graxos pode ajudar a retardar a degradação,
bem como aumentar a estabilidade.

4. Métodos de teste de estabilidade

O teste de estabilidade é um procedimento de rotina realizado em substâncias e produtos
nutracêuticos e é empregado em vários estágios de desenvolvimento do produto (Mehta
1334
2009). Nos estágios iniciais, o teste de estabilidade acelerado (em temperaturas e/ou
umidade relativamente altas) é usado para determinar o tipo de produtos de degradação
que podem ser encontrados após o armazenamento de longo prazo. O teste sob
condições menos rigorosas (ou seja, aquelas recomendadas para armazenamento de
longo prazo) em temperaturas ligeiramente elevadas é usado para determinar a vida útil
de um produto e a data de validade O principal objetivo dos testes de estabilidade
nutracêutica é fornecer uma garantia razoável de que os produtos permanecerão em um
nível aceitável de adequação/qualidade ao longo do período durante o qual estão
disponíveis para fornecimento ao animal e estarão adequados para seu consumo até que
o paciente use a última unidade do produto.

O teste de estabilidade em tempo real é a melhor maneira de estabelecer valores

precisos. Em testes de estabilidade em tempo real, um produto é armazenado nas
condições recomendadas e testado/monitorado pelo período de tempo na embalagem em
que o produto nutracêutico se destina a ser comercializado. No entanto, o teste em tempo
real é muito demorado e pode levar anos para ser concluído. O teste de estabilidade em
tempo real é normalmente executado por um período mais longo do período de teste para
permitir a degradação significativa do produto nas condições de armazenamento
recomendadas. As condições de armazenamento de teste de longo prazo geralmente são
25 ± 2 ºC / 60 ± 5% de umidade relativa (UR) em câmaras de estabilidade. São câmaras
ambientais especializadas que podem simular as condições de armazenamento e permitir
a avaliação da estabilidade do produto com base em protocolos em tempo real,
acelerados e de longo prazo. As amostras também devem ser mantidas sob refrigeração
por longo prazo a 5 ºC e congeladas por longo prazo a –20 ºC para ver o que acontece
com o produto quando resfriado ou congelado e então descongelado.

É sempre recomendado seguir os procedimentos dados nos compêndios oficiais, se

possível, para qualquer nutracêutico em particular, uma vez que os resultados obtidos
usando os testes oficiais em geral encontram melhor aceitação. Se métodos alternativos
forem usados, eles devem ser devidamente validados. No entanto, o ensaio do
nutracêutico deve ser realizado usando um método indicador de estabilidade,
estabelecido pela realização de testes de estresse no nutracêutico em condições de
decomposição forçada. Este método deve ser validado quanto à especificidade, exatidão,
precisão e linearidade, na faixa dentro da qual se espera que o nutracêutico caia durante
os estudos de estabilidade. Para o ensaio de produtos de degradação, o método validado
também deve incluir os limites de detecção/quantificação. Os métodos relatados na
literatura devem ser usados após a confirmação da reprodutibilidade e realização de

1335
validação mínima de linearidade, intervalo, etc. Todos os métodos analíticos devem ser
validados antes de iniciar os estudos de estabilidade. Da mesma forma, os critérios de
aceitação dos resultados analíticos, bem como da presença de produtos de degradação,
também devem ser fixados antes da realização dos ensaios. Esses critérios de aceitação
também devem incluir limites superiores individuais e totais para produtos de degradação.

O período de teste depende da estabilidade do produto. Este período deve ser longo o
suficiente para indicar claramente que nenhuma degradação mensurável ocorre e deve
distinguir a degradação da variação entre os ensaios. Durante a análise, os dados são
coletados em uma frequência apropriada, de modo que uma análise de tendência seja
capaz de distinguir a instabilidade da ambiguidade do dia a dia. A frequência dos testes
deve ser suficiente para estabelecer o perfil de estabilidade da nova substância
nutracêutica. Para produtos com uma vida útil proposta de pelo menos 24 meses, a
frequência de teste em condições de armazenamento de longo prazo deve ser a cada 3
meses durante o primeiro ano, a cada 6 meses durante o segundo ano e anualmente a
partir de então até a data de validade proposta, se essa data for colocada no rótulo. Os
estudos de estabilidade nas fases de desenvolvimento são geralmente realizados em um
único lote, enquanto os estudos destinados ao registro de novo produto ou produto
estabelecido instável são realizados nos três primeiros lotes de produção. Em geral, a
seleção de lotes deve constituir uma amostra aleatória da população de lotes piloto ou de
produção. A confiabilidade da interpretação dos dados pode ser aumentada incluindo um
único lote de material de referência para o qual as características de estabilidade já foram
estabelecidas. A estabilidade do material de referência também inclui a estabilidade dos
reagentes, bem como a consistência do desempenho do instrumento a ser usado durante
o período de teste de estabilidade. No entanto, o desempenho do sistema e o controle de
desvio e descontinuidade resultantes de alterações nos reagentes e na instrumentação
devem ser monitorados.

Como os fabricantes normalmente não esperam de 2 a 3 anos antes de lançar um

produto nutracêutico, um programa de teste de estabilidade acelerado é usado
simultaneamente com estudos em tempo real. No teste de estabilidade acelerada, um
produto é submetido a tensões em várias temperaturas altas (mais quentes do que a
ambiente), e a quantidade de entrada de calor necessária para causar a falha do produto
é determinada. Condições aceleradas de 40 ± 2 ºC / 75 ± 5% UR são comumente usadas,
bem como um mínimo de três pontos de tempo, incluindo os pontos inicial e final [0, 3 e 6
meses é recomendado (Magari 2003)].

1336
O teste de estabilidade acelerado é feito para sujeitar o produto a uma condição que
acelera a degradação. Essa informação é então projetada para prever a vida útil ou usada
para comparar a estabilidade relativa de formulações alternativas usando a equação de
Arrhenius. A equação de Arrhenius fornece a dependência da constante de velocidade de
uma reação química com a temperatura absoluta, um fator pré-exponencial e outras
constantes da reação:

onde k é a constante de velocidade, T é a temperatura absoluta (em kelvins) e A é o fator

pré-exponencial, uma constante para cada reação química. De acordo com a teoria das
colisões, A é a frequência das colisões na orientação correta, Ea é a energia de ativação
para a reação (nas mesmas unidades que R * T) e R é a constante universal do gás. Esta
equação descreve a relação entre as temperaturas de armazenamento e a taxa de
degradação. Usando a equação de Arrhenius, a projeção de estabilidade (uma estimativa)
das taxas de degradação observadas em altas temperaturas para alguns processos de
degradação pode ser determinada. Quando a energia de ativação é conhecida, a taxa de
degradação em baixas temperaturas pode ser estimada a partir daquelas observadas em
temperaturas de “estresse” em qualquer momento específico. Os resultados em tempo
real podem ser representados graficamente e comparados à curva de degradação
estimada gerada a partir dos dados de teste de estabilidade acelerada e os cálculos de
Arrhenius (Fig. 1).

Fig. 1 Exemplo de estabilidade em tempo real

em comparação com a estabilidade estimada

Os resultados produzidos a partir da equação de Arrhenius geralmente fornecem uma

indicação antecipada da vida útil do produto, encurtando assim o cronograma de
desenvolvimento. Além da temperatura, as condições de estresse aplicadas durante o
teste de estabilidade acelerada são umidade, luz, agitação, gravidade, pH e embalagem.
Em testes de estabilidade acelerada, as amostras são submetidas a estresse,
refrigeração após estresse e, em seguida, ensaio simultâneo. Como a duração da análise

1337
é curta, a probabilidade de instabilidade no sistema de medição é reduzida em
comparação com o teste de estabilidade em tempo real. Além disso, no teste de
estabilidade acelerado, a comparação do produto sem estresse com o material sob
estresse é feita no mesmo ensaio, e a recuperação da amostra sob estresse é expressa
como porcentagem da recuperação da amostra sem estresse. Por razões estatísticas, o
tratamento em projeções de estabilidade acelerada é recomendado para ser conduzido
em quatro temperaturas de tensão diferentes. No entanto, para componentes termolábeis
e proteicos, projeções de estabilidade relativamente precisas são obtidas quando as
temperaturas de estresse desnaturante são evitadas. Embora a degradação estimada dos
cálculos de Arrhenius possa dar alguma ideia sobre o que pode ocorrer na vida real, os
dados acelerados não devem ser usados apenas pelos fabricantes para o que realmente
acontece nas condições da vida real. Os dados em tempo real devem ocorrer
simultaneamente com estudos acelerados para determinar completamente o que ocorre
para a estabilidade de qualquer nutracêutico.

5. Aspectos das Diretrizes Regulatórias Relacionados à Estabilidade

Nutracêutica
O Dietary Supplement Health and Education Act de 1994 é um estatuto da legislação
federal dos Estados Unidos que define e regula os suplementos dietéticos e como os
nutracêuticos são pelo menos parcialmente regulamentados. Segundo a lei, os
suplementos são efetivamente regulamentados pelo FDA para boas práticas de
fabricação (GMP). A lei foi criticada porque os fabricantes de suplementos não são
obrigados a demonstrar a segurança dos suplementos antes de comercializá-los. Para
ajudar as empresas de suplementos nutricionais a garantir que tenham os dados
necessários para apoiar a data de validade nos rótulos dos produtos, a NSF International,
desenvolvedora do padrão nacional dos EUA para suplementos dietéticos, ajudou a criar
uma Diretriz de Teste de Estabilidade voluntária (NSF 2011). Esta diretriz descreve os
critérios de base científica necessários para apoiar a data de validade, a fim de cumprir as
GMP atuais para suplementos nutracêuticos. A diretriz sugere que as empresas de
suplementos nutricionais identifiquem as características físicas, químicas e
microbiológicas de seus produtos em armazenamento de longo prazo. Ele especifica que
as empresas entendem o impacto dos processos de fabricação, embalagem, rotulagem,
distribuição e retenção/armazenamento que podem ter na estabilidade de um produto. Os
fatores envolvidos no teste de estabilidade incluem a força do ingrediente alimentar,
impressões digitais químicas, crescimento microbiano, conteúdo de conservante, teor de
1338
umidade, pH, viscosidade e oxidação, entre outros parâmetros, como o sistema de
fechamento do recipiente do produto.

Para garantir que moléculas e produtos perfeitamente estáveis sejam fabricados,

distribuídos e dados aos pacientes, as autoridades regulatórias em vários países
estabeleceram disposições nos regulamentos de medicamentos para o envio de dados de
estabilidade pelo fabricante. Esses mesmos princípios básicos de medicamentos são
válidos para os nutracêuticos. O objetivo básico dessas diretrizes regulatórias era trazer
uniformidade aos testes de fabricante para fabricante. Essas diretrizes incluem questões
básicas relacionadas à estabilidade, requisitos de dados para o dossiê de aplicação e
etapas para sua execução. Essas diretrizes foram inicialmente emitidas na década de
1980. Posteriormente, estes foram uniformizados pela Conferência Internacional sobre
Harmonização (ICH 2003), a fim de superar o gargalo para comercializar e registrar
produtos em outros países. O ICH foi um consórcio formado com contribuições de
agências regulatórias e da indústria da Comissão Europeia, Japão e EUA.

6. Comentários finais e orientações futuras

O teste de estabilidade é um componente processual fundamental no programa de
desenvolvimento farmacêutico para um novo medicamento, e os mesmos princípios estão
começando a ser aplicados à indústria nutracêutica. Os testes de estabilidade são
realizados para que as condições de armazenamento recomendadas e o prazo de
validade podem ser incluídos no rótulo para garantir que o medicamento ou nutracêutico
seja seguro e eficaz durante todo o seu prazo de validade. Ao longo de um período de
tempo e com cada vez mais experiência e atenção, os requisitos regulamentares
tornaram-se cada vez mais rigorosos para atingir o objetivo acima em todas as condições
possíveis às quais o produto possa ser submetido durante sua vida útil. Embora as datas
de vencimento não sejam exigidas para os nutracêuticos nos EUA a partir de 2018, a
tendência é que os nutracêuticos se tornem cada vez mais regulamentados e rigidamente
controlados para a fabricação, como é feito atualmente na indústria farmacêutica. Uma
abordagem para isso é a qualidade por design (QbD). QbD é uma abordagem sistemática
para o desenvolvimento de produtos farmacêuticos que começa com objetivos
predefinidos e enfatiza a compreensão do produto e do processo e o controle do
processo, com base em ciência sólida e gerenciamento de risco de qualidade. A mesma
abordagem está começando a ser usada pela indústria nutracêutica. Significa projetar e
desenvolver formulações e processos de fabricação para garantir uma qualidade
predefinida. Assim, QbD requer uma compreensão de como as variáveis de formulação e
1339
processo influenciam a qualidade do produto (Lionberger et al. 2008). QbD é uma
abordagem científica, baseada em risco, holística e proativa para o desenvolvimento
farmacêutico que funcionará para a indústria nutracêutica. É um esforço de design
deliberado desde a concepção do produto até a comercialização.

O teste de estabilidade é um componente processual fundamental no programa de

desenvolvimento farmacêutico para um novo medicamento, e os mesmos princípios estão
começando a ser aplicados à indústria nutracêutica. Os testes de estabilidade são
realizados para que as condições de armazenamento recomendadas e o prazo de
validade possam ser incluídos no rótulo para garantir que o medicamento ou nutracêutico
é seguro e eficaz durante todo o seu prazo de validade. Ao longo de um período de tempo
e com cada vez mais experiência e atenção, os requisitos regulamentares tornaram-se
cada vez mais rigorosos para atingir o objetivo acima em todas as condições possíveis às
quais o produto possa ser submetido durante sua vida útil. Embora as datas de
vencimento não sejam exigidas para os nutracêuticos nos EUA a partir de 2018, a
tendência é que os nutracêuticos se tornem cada vez mais regulamentados e rigidamente
controlados para a fabricação, como é feito atualmente na indústria farmacêutica. Uma
abordagem para isso é a qualidade por design (QbD). QbD é uma abordagem sistemática
para o desenvolvimento de produtos farmacêuticos que começa com objetivos
predefinidos e enfatiza a compreensão do produto e do processo e o controle do
processo, com base em ciência sólida e gerenciamento de risco de qualidade. A mesma
abordagem está começando a ser usada pela indústria nutracêutica. Significa projetar e
desenvolver formulações e processos de fabricação para garantir uma qualidade
predefinida. Assim, QbD requer uma compreensão de como as variáveis de formulação e
processo influenciam a qualidade do produto (Lionberger et al. 2008). QbD é uma
abordagem científica, baseada em risco, holística e proativa para o desenvolvimento
farmacêutico que funcionará para a indústria nutracêutica. É um esforço de design
deliberado desde a concepção do produto até a comercialização.

Uma maneira pela qual a indústria de nutracêuticos está lidando atualmente com as
questões de estabilidade é simplesmente adicionar mais nutracêuticos a qualquer
formulação específica do que seria declarado no rótulo no momento da fabricação.
Levando em consideração que ocorrerá a deterioração do nutracêutico, espera-se que o
excesso do nutracêutico ativo específico seja suficiente para que, quando ocorrer a
deterioração, haja o suficiente para atender a quaisquer reivindicações do rótulo. Embora
essa abordagem possa ser simples em teoria, pode ser cara de fazer ou impraticável em
certas formulações ou simplesmente indesejável por outras razões como palatabilidade.

1340
Outra estratégia é usar formas químicas de sal do nutracêutico que tornam a molécula
inerentemente mais estável. Estratégias de encapsulamento de nutracêuticos é uma área
em que muitos esforços de pesquisa estão sendo realizados (Thakur et al. 2011; Ruiz e
Campos 2017). O desenvolvimento de sistemas de encapsulamento com base na
capacidade de ligação dos nutracêuticos lipofílicos com algumas proteínas globulares é
uma área promissora. Novas estratégias de embalagem para limitar a umidade, luz e ar
são outra forma de ajudar a manter a estabilidade nutracêutica. Além de simplesmente
manter os produtos nutracêuticos refrigerados para manter a estabilidade, a embalagem
que ajuda a evitar que a temperatura afete os ingredientes ativos será um avanço no uso
de várias soluções de embalagem com temperatura controlada. Estruturalmente, os
pacotes nutracêuticos podem ser mais experimentais e exclusivos do que os recipientes
farmacêuticos, a fim de intrigar a geração baby-boomer voltada para novidades.
Independentemente das estratégias utilizadas, o objetivo dos fabricantes ainda será
alcançar a maior vida útil do agente ativo e garantir ao veterinário e ao dono do animal
que o animal está recebendo um nutracêutico eficaz.

Referências
Bajaj S, Singla D, Sakhuja N (2012) Stability testing of pharmaceutical products. J Appl Pharm Sci 02(3):129–138
Bannenberg G, Craig Mallon C, Edwards H et al (2017) Omega-3 longchain polyunsaturated fatty acid content and
oxidation state of fish oil supplements in New Zealand. Sci Rep 7:1488
EFSA (2009) Opinion of the safety of glucosamine hydrochloride from Aspergillus niger as food ingredient. EFSA J
1099:1–19
FDA for Good Manufacturing Practices under 21 CFR Part 111.
http://www.accessdata.fda.gov/scripts/cdrh/cfcfr/cfrsearch.cfm?cfrpart=111
Gadient M (1986) Effect of pelleting on nutritional quality of feed. In: Proceedings of the 1986 Maryland nutrition
conference feed manufacturers, College Park, MD
Hrynets Y, Ndagijimana M, Betti M (2015) Studies on the formation of Maillard and caramelization products from
glucosamine incubated at 37 C. J Agric Food Chem 63(27):6249–6261
ICH (2003) International conference on harmonization. Stability testing of new drug substances and products Q1A(R2)
Kailasapathy K, Chin J (2000) Survival and therapeutic potential of probiotic organisms with reference to Lactobacillus
acidophilus and Bifidobacterium spp. Immunol Cell Biol 78:80–88
Kompantsev DV (2012) Stability of glucosamine dosage forms. Russ J Gen Chem 82(3):579–585
Lionberger RA, Lee SL, Lee ML et al (2008) Quality by design: concepts for ANDAs. AAPS J 10(2):268–276
Lytle JS, Lytle TF, Newmark HL et al (1992) Stability of a commercially prepared fish oil (omega-3 fatty acid) laboratory
rodent diet. Nutr Cancer 17(2):187–194
Magari RT (2003) Assessing shelf life using real-time and accelerated stability tests. BioPharm Int 16(11):36–48
Manning MC, Patel K, Borchardt RT (1989) Stability of protein pharmaceuticals. Pharm Res 6(11):903–918
Mehta J (2009) Practical challenges of stability testing of nutraceutical formulations. In: Huynh-Ba K (ed)
Pharmaceutical stability testing to support global markets. Springer, New York, pp 85–91. 20 Oct 2009,
www.iosrjournals.org
NSF (2011) www.nsfstability.org
Oyetade OA, Oyeleke GO, Adegoke BM et al (2012) Stability studies on ascorbic acid (vitamin C) from different
sources. IOSR J Appl Chem 2(4):20–24
Park HK, Lee GH, Jun J et al (2016) Multiple-unit tablet of probiotic bacteria for improved storage stability, acid
tolerability, and in vivo intestinal protective effect. Drug Des Dev Ther 10:1355–1364
Ruiz JCR, Campos PS (2017) New polymers for encapsulation of nutraceutical compounds. Wiley, Chichester
Senin (1987) Stable compounds of glucosamine sulfate. US Patent 4,642,340
Shu CK (1998) Degradation products formed from glucosamine in water. J Agric Food Chem 46(3):1129–1131
Thakur L, Ghodasra U, Patel N et al (2011) Novel approaches for stability improvement in natural medicines.
Pharmacogn Rev 5(9):48–54
1341
 Trivedi MK, Branton A, Trivedi D, Nayak G et al (2015) Evaluation of physical, thermal and spectral parameters of
biofield energy treated methylsulfonylmethane. J Mol Pharm Org Process Res 3:129
Volpi N, Mucci A, Schenetti L (1999) Stability studies of chondroitin sulfate. Carbohydr Res 315(3–4):345–349

1342
 Parte VII

Aspectos regulatórios e requisitos específicos do

país para nutracêuticos

1343
 Diretrizes regulatórias básicas para nutracêuticos
veterinários
Dan DuBourdieu, Anita Sinha e Rajiv Lall

Resumo
Quase 30% dos donos de animais de estimação usam nutracêuticos em seus animais.
Nutracêuticos veterinários enfrentam regulamentações de autoridades regulatórias,
incluindo a Food and Drug Administration, a American Federation of Feed Control
Officials, estados e países. Esses regulamentos podem ser confusos sobre como os
nutracêuticos para uso veterinário podem ser comercializados legalmente. Organizações
comerciais, como o National Animal Supplement Council, recomendam diretrizes aos
fabricantes em coordenação com as agências reguladoras, tanto em nível estadual
quanto federal, para ajudar a estabelecer um sistema de supervisão regulatória. Essa
abordagem ajuda a esclarecer o ambiente regulatório para que os fabricantes de
nutracêuticos veterinários continuem fabricando e comercializando seus produtos.

Palavras-chave: Nutracêuticos veterinários · Regulamentos

1. Introdução
Cerca de 30% dos proprietários de animais de estimação usaram nutracêuticos de um
tipo ou outro em seus animais, enquanto nos EUA, aproximadamente 90% dos
veterinários recomendam algum tipo de ingrediente nutracêutico (Boothe 2017). Assim,
estima-se que o mercado global de alimentos nutracêuticos para animais de estimação
alcance um valor de US $ 8,25 bilhões até 2023 (Mordor Intelligence 2018). Claramente,
este é um grande mercado. Portanto, a forma como os nutracêuticos são regulamentados
é de óbvio interesse para fabricantes e veterinários e para os proprietários dos animais
que os utilizam. A American Veterinary Medical Association reconhece a importância
desses medicamentos por meio de suas diretrizes sobre medicina complementar ou
alternativa, que inclui a terapia nutracêutica veterinária (AVMA 2018). Embora os
nutracêuticos para uso humano tenham alguma estrutura regulatória que os cerca, o uso
de nutracêuticos para uso veterinário é um pouco mais obscuro e confuso do ponto de
vista regulatório. A fabricação e o uso de nutracêuticos veterinários são regulamentados
por uma série de entidades, incluindo agências governamentais, grupos comerciais e
indiretamente pelos requisitos do cliente. Como essas várias entidades trabalham juntas
1344
para regulamentar os nutracêuticos veterinários é o que as empresas de manufatura
devem ter um entendimento para comercializar seus produtos nutracêuticos para uso
veterinário.

2. DSHEA
O Dr. Stephen DeFelice cunhou o termo “nutracêutico” de “nutrição” e “farmacêutico” em
1989 (Kalra 2003). O termo nutracêutico é comumente usado em peças de marketing,
mas não tem uma definição regulamentar real. As tentativas de colocar algum tipo de
aspecto regulatório em torno dos nutracêuticos começaram no início dos anos 1990. Em
1994, o Dietary Supplement Health Education Act (DSHEA) foi aprovado pelo Congresso
dos Estados Unidos e sancionado pelo presidente Clinton em outubro. Essa legislação
criou uma categoria específica de produtos, suplementos dietéticos, como um
subconjunto de alimentos sob a Lei Federal de Alimentos, Medicamentos e Cosméticos
que permitia a comercialização de suplementos dietéticos para uso humano. Infelizmente,
quando o assunto foi debatido no Congresso, os animais não foram considerados e a
linguagem não foi incluída na legislação para permitir que produtos semelhantes para
animais fossem regulamentados como “suplementos dietéticos”, conforme previsto para
as pessoas. O DSHEA estabeleceu os suplementos destinados ao consumo humano
como uma nova classe de alimentos para fins de regulamentação federal. Mas, o mais
importante, o DSHEA não permite que fabricantes de suplementos dietéticos façam
alegações de saúde não aprovadas, como curar, prevenir, mitigar, tratar ou diagnosticar
uma doença. É aí que ocorrem problemas na comercialização de nutracêuticos
veterinários, uma vez que os fabricantes desejam fazer essas alegações de saúde não
aprovadas com nutracêuticos, mas não têm permissão e se metem em problemas quando
fazem essas alegações.

DSHEA define um suplemento dietético como um produto destinado a suplementar a dieta

que contém pelo menos um ou mais dos seguintes ingredientes: uma vitamina, um
mineral, uma erva ou outro botânico, um aminoácido, uma substância dietética para uso
para complementar a dieta aumentando a ingestão alimentar total, ou um concentrado,
metabólito, constituinte, extrato ou combinação de qualquer um dos ingredientes
mencionados anteriormente. O principal efeito do DSHEA foi remover certos ingredientes
dietéticos da regulamentação como aditivos alimentares, o que requer aprovação pré-
comercialização. Vários produtos de suplementos animais estão sendo vendidos como
resultado do DSHEA, e esses produtos geralmente contêm ingredientes semelhantes aos
dos suplementos alimentares humanos. O exame da ata do Congresso, quando o projeto
1345
foi finalizado, mostra que o Congresso não incluiu nem excluiu especificamente a
aplicação a animais. Embora possa ter sido razoável incluir pelo menos animais que não
se destinam ao consumo humano, como cães, gatos e cavalos, o tópico dos animais foi
esquecido, provavelmente pela razão principal de que a indústria de suplementos animais
realmente não existia para qualquer grau significativo em 1994. Além disso, o objetivo
principal da legislação era atender à crescente demanda dos consumidores por
suplementos dietéticos para pessoas. No entanto, a Food and Drug Administration (FDA)
publicou um aviso no Federal Register em 1996 explicando porque o FDA acredita que o
DSHEA não se aplica a animais (Schultz 1996). O FDA acreditava que muitos dos tipos de
produtos comercializados para animais continham ingredientes que podem ser aditivos
alimentares inseguros ou novas drogas animais não aprovadas, tornando os produtos
inseguros para os animais. O Centro de Medicina Veterinária (CVM) se preocupou com
esses produtos, pois a CVM não possuía dados científicos que mostrassem que eles
eram seguros ou mesmo continham os ingredientes listados no rótulo. Assim, muitas
substâncias permitidas em suplementos dietéticos humanos podem não ser legalmente
vendidas em suplementos animais. Ao anunciar que o DSHEA não se aplica a produtos
de origem animal, a CVM argumentou que muitas substâncias que se qualificam como
suplementos dietéticos para consumo humano, como botânicos, têm um histórico de uso
em humanos que pode ser usado para estabelecer níveis razoavelmente seguros. No
entanto, o mesmo não é verdade para muitos dos mesmos ingredientes em animais, pois
o suporte probatório sobre o uso de tais substâncias está incompleto ou indisponível. Os
animais podem reagir de maneira muito diferente às substâncias que os humanos, e
mesmo pequenas doses podem causar efeitos adversos. Além disso, cada espécie animal
requer diferentes nutrientes, absorve e metaboliza os nutrientes de maneira diferente e
pode apresentar diferentes reações tóxicas aos alimentos e seus componentes. Como a
CVM determinou que o DSHEA não se aplica a suplementos para animais, muitas
reivindicações que são permitidas para suplementos dietéticos humanos não são
permitidas para suplementos nutricionais para animais. Os tribunais interpretaram
“alimento” como uma substância que fornece nutrição, sabor ou aroma. Assim, as
reivindicações sobre alimentos para animais e produtos de suplemento que estabelecem
que o uso pretendido do produto afeta a estrutura ou função do corpo dos animais de uma
maneira diferente da nutrição, aroma ou sabor, fazem com que o produto seja um
medicamento.

1346
3. FDA/CVM
A principal agência responsável pela regulamentação de alimentos e medicamentos para
animais é o Centro de Medicina Veterinária da Food and Drug Administration. A FDA/CVM
trabalha em estreita colaboração com os estados por meio de associações regulatórias
como a Associação Americana de Funcionários de Controle de Alimentos (AAFCO) para
garantir que as leis federais e estaduais sejam seguidas e as empresas permaneçam em
conformidade. O CVM geralmente assume a posição de que animais com rações
balanceadas, como animais de companhia (ou seja, cães, gatos e cavalos), não requerem
suplementação nutricional extra, além de sua alimentação típica. Isso ocorre porque a
CVM acredita que os alimentos para cães e gatos são ricos em nutrientes e que a maioria
dos animais recebe quantidades adequadas de vitaminas, minerais, proteínas
(aminoácidos essenciais), gordura (ácidos graxos) e carboidratos de sua dieta ou são
capazes de sintetizar a partir de uma ração balanceada para observar os requisitos de
nutrientes do National Research Council (FDA 2015a). Não há exigência de que os
alimentos de origem animal tenham aprovação pré-comercialização pela CVM. A Lei
Federal de Alimentos, Medicamentos e Cosméticos exige que os alimentos de origem
animal, como os humanos, sejam puros e saudáveis, não contenham substâncias
prejudiciais ou deletérias e sejam rotulados de maneira confiável. Quando uma
substância, incluindo uma considerada alimento, se destina a ser usada para o tratamento
ou prevenção de doenças ou para um efeito de estrutura/função “não alimentar”, a FDA a
considera um medicamento. Drogas são um artigo destinado ao uso no diagnóstico, cura,
mitigação, tratamento ou prevenção de doenças ou um artigo destinado a afetar a
estrutura ou função do corpo além da comida. Na definição de droga, os tribunais
interpretaram “comida” como algo que fornece nutrição, sabor ou aroma. Se um alimento
afeta a estrutura ou função do corpo, ele o faz por meio dessas propriedades (por
exemplo, um alimento pode fornecer nutrientes como o cálcio para suportar a estrutura
óssea adequada). No entanto, se uma substância afeta a estrutura ou função do corpo
além de seu valor nutritivo, como melhora na função articular, pode ser considerada uma
droga. Os efeitos de estrutura/função que vão além do guarda-chuva “alimento” também
incluem reivindicações de produção e desempenho melhorados ou aumentados e
alteração ou melhoria na função. Um novo medicamento animal deve ser comprovado
como seguro e eficaz para seu uso pretendido por dados adequados de estudos
científicos controlados como parte de um Novo Aplicativo de Medicamento Animal
(NADA). Se um produto no mercado não for aprovado, pode ser considerado um
medicamento adulterado e sujeito a ações regulatórias.

1347
A maioria dos suplementos de saúde animal foram considerados “medicamentos de baixa
prioridade regulatória” pelo FDA, mas uma mudança sutil ocorreu, e o FDA/CVM agora vê
esses suplementos como “medicamentos não aprovados para os quais a discrição de
aplicação pode ser exercida” com base em conteúdo, rotulagem, uso pretendido e
conduta geral da empresa. Se o produto se destina a ser uma fonte de minerais e
vitaminas para um animal da cadeia alimentar não humana (cães, gatos e cavalos), é
classificado como um suplemento nutricional ou alimentar e regulado pela FDA e oficiais
de controle de alimentos do estado individual através da AAFCO Model Bill. A maioria dos
estados segue as recomendações da AAFCO. No entanto, a CVM geralmente não se
opõe à comercialização de suplementos dietéticos em comprimidos, cápsulas, pó ou
líquidos para animais de companhia semelhantes aos suplementos dietéticos
comercializados para humanos. No entanto, a CVM assume a posição de que tais
produtos devem fornecer quantidades significativas de cada um dos nutrientes que eles
representam e que os nutrientes devem ser de valor conhecido para o animal pretendido
ou alvo. O FDA usa as Exigências Nutricionais de Cães e Gatos (National Research
Council 2006) para chegar a um nível de suplementação que representa a melhor
informação atualmente disponível para essas espécies. O FDA normalmente aceita como
adequados aqueles produtos que fornecem um nível significativo de nutrição quando
comparados com as recomendações do NRC.

Geralmente, a CVM não se oporá à comercialização de suplementos nutricionais para

administração oral a animais de companhia, desde que respeitem as seguintes restrições:
há uma necessidade conhecida de cada ingrediente nutriente representado no produto
para cada animal para o qual o produto é pretendido; o rótulo representa o produto para
uso apenas na suplementação de, e não como um substituto para, boas rações diárias; o
produto fornece uma quantidade significativa, mas não excessiva, de cada um dos
nutrientes que parece conter; o produto não é nem superpotente, nem subpotente, nem
formulado de outra forma de forma a representar um perigo para a saúde do animal alvo;
a rotulagem não deve conter prevenção de doenças ou representações terapêuticas,
incluindo promoção de crescimento; e a rotulagem não deve ser falsa ou enganosa.

O FDA envia cartas de advertência aos fabricantes em certos casos. Mas, normalmente, a
justificativa não é porque o suplemento não é eficaz, mas sim por causa da linguagem
usada na descrição do suplemento. Quando a linguagem é aceita pelo FDA, o produto
pode ser vendido novamente. Por exemplo, um fabricante de suplemento foi acusado pelo
FDA de vender um produto que o FDA chamou de medicamento não aprovado para
doenças renais para animais de estimação, mas foi autorizado a continuar vendendo o

1348
mesmo produto como suplemento em vez de com um novo nome de produto e marketing
diferente (JAVMA 2015).

4. AFFCO
Em geral, o FDA exige que os alimentos para animais sejam puros e saudáveis, não
contenham substâncias prejudiciais ou deletérias e sejam rotulados de maneira confiável.
Atualmente, apenas aquelas substâncias que são (1) listadas como geralmente
reconhecidas como seguras (GRAS) nos regulamentos da FDA em 21 C.F.R. Parte 582,
(2) listado como um aditivo alimentar aprovado nos regulamentos da FDA em 21 C.F.R.
Parte 573, ou (3) listado como um ingrediente definido na Publicação Oficial da
Associação de Funcionários de Controle de Alimentos Americanos (o livro da AAFCO) são
permitidos na alimentação animal, incluindo suplementos para animais/animais de
estimação que estão sendo vendidos como ração. AAFCO é uma associação voluntária
de agências locais, estaduais e federais encarregadas por lei de regulamentar a venda e
distribuição de rações e medicamentos para animais. Embora a AAFCO não tenha
autoridade regulatória, a maioria dos estados adaptou as diretrizes da AAFCO ao
regulamentar alimentos para animais/animais de estimação. A AAFCO fornece um fórum
para os membros e a representação da indústria atingirem três objetivos principais
declarados: salvaguardar a saúde dos animais e humanos, garantir a proteção do
consumidor e fornecer condições equitativas de comércio ordenado para a indústria de
ração animal (AFFCO 2018). Esses objetivos são alcançados através do desenvolvimento
e implementação de leis, regulamentos, padrões, definições e políticas de fiscalização
uniformes e equitativos para regulamentar a fabricação, rotulagem, distribuição e venda
de alimentos para animais – resultando em alimentos seguros, eficazes e úteis,
promovendo a uniformidade entre agências membros.

O CVM categoriza ingredientes em suplementos animais como um de dois tipos: (1) um

ingrediente nutricional (destinado a fornecer nutrição) ou (2) um ingrediente não nutritivo
(não fornece nutrição). A publicação oficial da AAFCO (OP) contém perfis nutricionais para
cães e gatos que listam os ingredientes considerados ingredientes nutritivos essenciais.
De acordo com a CVM, uma alegação de que um suplemento animal afeta a estrutura ou
função do corpo com base em seu valor nutritivo (um ingrediente nutricional) é
considerada uma alegação alimentar, e o produto será classificado como um alimento.
Por exemplo, o cálcio é listado como um ingrediente nutritivo essencial no AAFCO OP
para cães e gatos. Assim, uma alegação de que um suplemento que contém leite em pó
fornece cálcio para suportar a estrutura óssea adequada seria uma alegação alimentar
1349
permitida e o suplemento seria classificado como um alimento. Por outro lado, uma
alegação de que um suplemento animal afeta a estrutura ou função do corpo além de seu
valor nutritivo (um ingrediente não nutritivo) é considerada uma alegação de medicamento
e o produto será classificado como medicamento. Além disso, as reivindicações para (1)
produção e desempenho melhorados ou aumentados, (2) alteração ou melhoria na função
ou (3) tratamento ou prevenção de doenças também são consideradas alegações de
medicamentos, independentemente de o ingrediente ser nutritivo ou não nutritivo. A FDA
declarou explicitamente que os suplementos para animais de estimação não devem “ter
sugestões terapêuticas vagas como promoção de saúde, resistência, força ou que eles
têm qualquer valor especial para fins de reprodução ou para fins de exibição ou corrida ou
para trabalho animais, ou que em virtude de sua formulação [isto é, quelado, liberação
cronometrada, natural] eles são superiores às preparações minerais de vitaminas comuns
do comércio” (FDA 2015a). Da mesma forma, representações diretas ou implícitas do
produto como um tônico, condicionador ou toner são consideradas alegações de
medicamentos. Por causa de tudo isso, a rotulagem de vários nutracêuticos para animais
normalmente dirá algo sobre “mantém as condições normais ou apóia alguma coisa” para
o que o nutracêutico realmente se destina, como uma forma de contornar as alegações de
medicamentos.

Em uma base caso a caso, a CVM permitiu algumas exceções e concordou em exercer
discricionariedade regulatória para certas referências a “suporte nutricional” para órgãos
ou funções corporais específicas. Por exemplo, a CVM explicou que não faria objeções a
uma alegação de que a vitamina E atua como um antioxidante no corpo dos animais. A
AAFCO obviamente considerou que os nutracêuticos serão usados por fabricantes e
veterinários e, indiretamente, os relaciona de uma forma tácita no livro AFFCO. AFFCO
categoriza ingredientes que são aprovados para uso de diferentes maneiras. Vários
ingredientes que podem ser considerados nutracêuticos podem se enquadrar nessas
várias categorias. Por exemplo, vários nutracêuticos botânicos ou à base de plantas
podem ser encontrados listados na categoria de “Especiarias e outros temperos e
aromatizantes naturais”. Outros podem ser encontrados listados na categoria de “Óleos
essenciais, oleorresinas (sem solvente) e extrativos naturais (incluindo destilados).” Ainda
outros nutracêuticos podem ser encontrados listados em outras categorias.

5. Reclamações de probióticos
A FDA publicou um Guia de Política de Conformidade (CPG) especial relacionado a
produtos que supostamente contêm microorganismos vivos (viáveis) (bactérias e/ou
1350
leveduras). A FDA se refere a esses produtos como “produtos microbianos de alimentação
direta (probióticos)” (FDA 2015b). A política da FDA é a seguinte: um produto microbiano
de alimentação direta com alegações de rótulo/promoção para cura de doenças,
mitigação, tratamento ou prevenção é um novo medicamento para animais e é adulterado
de acordo com a Seção 501 (a) (5), a menos que seja o objeto de NADA. Se as
reclamações estiverem em material promocional que não pode ser documentado como
rotulagem, o produto está classificado de acordo com a Seção 502 (f) (1). Um produto
microbiano alimentado diretamente com rótulos/alegações promocionais para afetar a
estrutura ou função do corpo é um novo medicamento animal porque as alegações não
são derivadas de suas propriedades alimentares (ou seja, o produto não atua apenas
como uma fonte de nutrição em corpo do animal) e é adulterado de acordo com a Seção
501 (a) (5), a menos que seja objeto de uma NADA aprovada. Essas alegações são
geralmente alegações de produtividade animal melhorada. Se as reclamações estiverem
em material promocional que não pode ser documentado como rotulagem, o produto está
classificado de acordo com a Seção 502 (f) (1). Normalmente, um produto microbiano de
alimentação direta que não é rotulado/promovido com quaisquer reivindicações
terapêuticas ou de estrutura/função, mas que contém um ou mais microrganismos não
listados na Publicação Oficial da AAFCO é um aditivo alimentar e é adulterado na Seção
402 (a) (2) (C), a menos que seja objeto de regulamentação sobre aditivos alimentares.

Um produto microbiano alimentador diretamente listado pela Publicação Oficial da AAFCO

e rotulado com a declaração do rótulo aprovado pela AAFCO para conteúdo de
microrganismos vivos, e não rotulado ou promovido com qualquer reivindicação
terapêutica ou de estrutura/função, será regulamentado como um alimento conforme
definido na Seção 201 (f) (3) e geralmente não requer atenção regulatória do FDA. Prevê-
se que os estados monitorarão esses produtos. No entanto, se a FDA tiver preocupações
com a segurança desses produtos, ela os tratará como geralmente não reconhecidos
como seguros e os regulamentará como aditivos alimentares sujeitos à atenção da FDA. A
AAFCO adotou uma declaração padrão para rotulagem de microorganismos viáveis. A
declaração da AAFCO é, “Contém uma fonte de microrganismos vivos (viáveis) de
ocorrência natural”, seguida por uma lista de cada um dos microrganismos e a garantia de
conteúdo, como unidades formadoras de colônias por grama. A expressão de garantia é
especificada no Regulamento 4 (g) da Lei de alimentação do estado uniforme na
Publicação Oficial da AAFCO. Além disso, a AAFCO especifica que deve haver um
método verificável para testar a veracidade do conteúdo garantido por microrganismos
especificado na rotulagem.

1351
Um produto contendo microrganismos listados pela Publicação Oficial da AAFCO, mas
não supostamente contendo microrganismos vivos e sem nenhum rótulo/representações
promocionais além de uma fonte de nutrientes designados, será regulamentado como um
alimento conforme definido na Seção 201 (f) (3). Embora as alegações de fontes de
nutrientes possam ser enganosas, dependendo das instruções de uso, este tipo de
produto geralmente não requer atenção regulatória do FDA. Prevê-se que os estados
monitorarão esses produtos. No entanto, se a FDA tiver preocupações com a segurança
desses produtos, ela os tratará como geralmente não reconhecidos como seguros e os
regulamentará como aditivos alimentares sujeitos à atenção da FDA.

6. Organizações comerciais relacionadas com nutracêuticos

veterinários
O interesse pelos nutracêuticos veterinários no início da década de 1990 resultou na
formação de várias organizações comerciais. O Conselho Nutracêutico Veterinário da
América do Norte (agora extinto) foi formado em 1996 por pessoas interessadas na
indústria, prática e academia. Ele definiu um nutracêutico veterinário como “uma
substância [não medicamentosa] que é produzida em uma forma purificada ou extraída e
administrada por via oral a um paciente para fornecer os agentes necessários para a
estrutura e função normal do corpo e administrados com a intenção de melhorar a saúde
e bem-estar de animais.” A semelhança entre os novos ingredientes de produtos é que
legalmente eles não são alimentos, aditivos alimentares ou medicamentos reconhecidos
pelo FDA. Como tal, eles não passam por nenhum processo de aprovação pré-
comercialização e nem a segurança, eficácia ou fabricação são garantidas. Pelo menos
dois grupos se formaram na América do Norte com interesse em nutracêuticos
veterinários: a Nutraceutical Alliance (2018), com sede no Canadá, e o National Animal
Supplement Council (NASC 2018), com sede nos EUA. Fundada em 2013, a
Nutraceutical Alliance fornece uma interface entre o desenvolvimento de produtos, testes
de produtos, pesquisa em animais e literatura, registro de produtos e ambiente
regulatório.

NASC é uma organização comercial sem fins lucrativos fundada em 2001 que é composta
por empresas comprometidas em fornecer suplementos de saúde e suplementos
nutricionais da mais alta qualidade para animais de companhia, principalmente cães,
gatos e cavalos. A NASC adotou uma abordagem assertiva ao tentar implementar ações
voluntárias entre os fabricantes de nutracêuticos que farão com que os reguladores
respondam positivamente aos seus produtos. A NASC está tentando garantir que os
1352
nutracêuticos veterinários que estão no mercado sejam seguros para o uso em animais.
Os novos ingredientes costumam ser usados sem supervisão médica. Até 70% dos
humanos não relatam o uso de ervas aos médicos, em parte por causa de sua falha em
reconhecer os produtos como drogas. Da mesma forma, os donos de animais de
estimação muitas vezes não mencionam o uso de nutracêuticos ou ervas quando
questionados sobre a terapia medicamentosa para seus animais de estimação. A
disponibilidade por meio de fontes reconhecidas e confiáveis do ponto de vista médico
muitas vezes leva o consumidor a assumir tanto sua precisão na rotulagem quanto sua
eficácia e segurança. No entanto, a falta de regulamentos e diretrizes deve levar ao
“comprador, cuidado”. A NASC criou um selo de qualidade como uma forma de os
consumidores saberem que, quando compram um produto, o compram de um fabricante
confiável. Apenas as empresas membros da NASC operando sob as diretrizes rigorosas
da NASC para fabricação, rotulagem e relatórios de eventos adversos, e demonstrando
participação responsável, têm permissão para usar o Selo de Qualidade da NASC.

O FDA/CVM consideraria as alegações de marketing de que se um ingrediente usado em

um animal afeta a estrutura ou função do corpo, então o ingrediente ativo é geralmente
considerado um medicamento. Isso gerou confusão quando se trata de comercializar
nutracêuticos. Por exemplo, a glucosamina não está listada como ingrediente nutritivo
essencial na publicação oficial da AAFCO para cães ou gatos. Assim, uma alegação de
que um suplemento para animais de estimação ajuda a melhorar a função articular com
base na glucosamina no produto seria uma alegação de medicamento, e o suplemento
seria considerado um medicamento. Com o pensamento FDA/CVM acima em mente,
muitos ingredientes não aprovados são atualmente comercializados para uso em
suplementos animais, incluindo bardana, equinácea, ginseng, cavalinha e urtiga.
Atualmente, nenhum desses ingredientes é permitido para uso em suplementos para
animais de estimação com a aprovação do FDA/CVM ou AFFCO. Obviamente, a indústria
nutracêutica veterinária tem um problema em relação às alegações de marketing sobre se
a glucosamina ou qualquer outro nutracêutico é uma droga ou não.

O aumento da demanda do consumidor por suplementos de saúde animal cria um

problema significativo para a indústria, pois muitos ingredientes, mesmo os mais comuns
encontrados em suplementos dietéticos humanos, como glucosamina, condroitina,
metilsulfonilmetano (MSM), etc., não são aprovados para uso em alimentos para animais/
alimentação. Pesquisas conduzidas pela NASC indicam que existem mais de 400
ingredientes comercializados atualmente por membros da NASC que não são aprovados
para uso em produtos para alimentação animal. No entanto, as organizações comerciais

1353
tomaram medidas para conseguir comercializar legalmente a glucosamina e esses outros
nutracêuticos nos EUA e em outros países. Em resposta ao status “não aprovado” desses
ingredientes, a NASC apresentou pedidos de definição de ingredientes em 2002 e 2003,
solicitando à FDA/CVM que permitisse o uso de glucosamina e MSM na alimentação
animal. Esses ingredientes foram escolhidos porque os requisitos nutricionais para eles
não foram estabelecidos em nenhum animal, incluindo “animais saudáveis”. Além disso,
devido à comercialização de produtos humanos, os consumidores reconhecem o uso
desses e de outros ingredientes para fins não nutricionais, ou seja, proporcionando
benefícios para apoiar a estrutura e/ou função do corpo, ou seu uso com condições
médicas específicas, como osteoartrite.

7. Comercialização legal de um nutracêutico animal nos EUA

Produtos nutracêuticos, como suplementos dietéticos para humanos, comercializados
para animais, têm apenas duas categorias legais possíveis de acordo com a legislação
dos Estados Unidos. Eles são um alimento/ração animal ou uma droga. Suplementos
dietéticos, como vitaminas e minerais, se enquadram na categoria de rações para
animais. Suplementos dietéticos para animais, como vitaminas e produtos minerais, são
comercializados há muitos anos. A maioria desses produtos inclui ingredientes que são
aditivos alimentares aprovados, geralmente substâncias GRAS ou ingredientes listados
na AFFCO. Mas, para muitos nutracêuticos, essas determinações deixam a indústria com
apenas uma outra opção de acordo com a lei atual: comercializar produtos nutracêuticos
como medicamentos de origem animal, consistentes com o uso pretendido. A
comercialização legal de produtos nutracêuticos como medicamentos de origem animal
requer o envio de um Novo Pedido de Medicamento para Animais ao FDA/CVM que
demonstre que os critérios de segurança e eficácia foram satisfeitos. A apresentação de
NADA para suplementos de saúde animal é problemática devido aos custos associados
ao desenvolvimento e à proteção de patentes de substâncias naturais. Os tribunais
sustentaram que as substâncias naturais não podem ser protegidas por meio de
propriedade intelectual, como patentes (Harrison 2014). O isolamento e a purificação de
um ingrediente ativo de uma planta podem não ser suficientes para permitir a
patenteabilidade. Como muitos agentes nutracêuticos vêm de plantas, isso causa
problemas para os fabricantes. As patentes permitem que uma empresa recupere o
investimento considerável no desenvolvimento do produto com um preço de venda
adequado do produto. O consumidor tem a capacidade de comprar suplementos
dietéticos humanos que podem ser semelhantes em formulação e uma alternativa mais
1354
barata para seus animais de companhia do que um produto animal patenteado que tenha
passado pelo processo NADA.

Em suma, para garantir que um suplemento para animais de estimação seja legalmente
comercializado como ração animal, cada um dos ingredientes do suplemento deve ser
listado em um dos três métodos a seguir: (1) Regulamentos da FDA em 21 C.F.R. Parte
573 como um aditivo alimentar aprovado, (2) regulamentos da FDA em 21 C.F.R. Parte
582 como uma substância GRAS, ou (3) as definições de ingredientes no livro AAFCO
(embora o status desta categoria de ingredientes esteja sujeito a alterações). Além disso,
qualquer alegação de que o produto afeta a estrutura ou função do corpo dos animais
deve ser baseada em um ingrediente nutritivo essencial, de acordo com os perfis
nutricionais da AAFCO.

Se o suplemento for comercializado como alimento para animais, é recomendável que a

rotulagem do produto esteja de acordo com os requisitos da FDA e o guia de rotulagem
de alimentos para animais da AAFCO. No entanto, nem todos os estados adotaram os
regulamentos modelo da AAFCO e alguns estados adotaram os regulamentos modelo
com modificações. Consequentemente, é possível que alguns estados exijam alterações
no rótulo dependendo do produto. Muitos estados exigem que os produtos de ração
animal, incluindo suplementos que são vendidos como ração, sejam registrados no estado
antes de serem vendidos nesse estado.

Outra opção é comercializar o produto com ingredientes que não estejam incluídos nos
três métodos listados acima, com o conhecimento de que o produto será tecnicamente
considerado um novo medicamento não aprovado. Geralmente, a FDA considera esses
produtos como “medicamentos não aprovados, para os quais pode ser exercido critério de
fiscalização”. Suplementos para animais estão em baixa na lista de prioridades do FDA, e
a agência geralmente não tem sido ativa com ações de fiscalização nesta área. Em vez
disso, a fiscalização é normalmente tratada em nível estadual, o que a torna um problema
em cada estado. Alguns estados são muito mais permissivos quando se trata de
ingredientes que não estão incluídos em uma das três listas discutidas anteriormente. No
entanto, existe uma chance de que um ou mais estados se oponham à venda do produto,
e esses estados podem suspender ou proibir a venda do produto naquele estado. Em
última análise, é uma decisão de negócios a ser tomada pela empresa, dependendo de
quanto risco está disposta a correr.

Se uma empresa pretende comercializar o produto como um produto não alimentar ou de

saúde, é recomendável avaliar se o produto pode ser comercializado como um
suplemento não alimentar de acordo com as diretrizes do NASC. Nesse caso, o NASC
1355
publicou modelos de rótulos para produtos não alimentícios. No entanto, é importante
observar que alguns estados lutam com o modelo NASC e provavelmente exigirão que o
produto nutracêutico esteja em conformidade com os regulamentos de alimentação
naquele estado. Os fabricantes que comercializam nutracêuticos que seguem o caminho
de um suplemento não alimentar podem evitar os requisitos de registro em muitos
estados como ração animal e podem evitar as taxas anuais associadas ao mesmo; no
entanto, essas empresas precisam se registrar como remédios para animais nos estados
com leis de remédios.

8. Regras regulatórias em diferentes países para nutracêuticos

veterinários
Nos EUA, o FDA/CVM, AFFCO e NASC têm voz ativa em como os nutracêuticos
veterinários são regulamentados e comercializados em maior ou menor grau, dependendo
da organização. Embora o FDA esteja autorizado a agir contra qualquer produto inseguro
no mercado, na União Europeia, a Autoridade Europeia para a Segurança dos Alimentos
(EFSA) não tem o mesmo mandato (Santini et al. 2018). A EFSA é uma agência europeia
financiada pela União Europeia que opera independentemente das instituições legislativas
e executivas europeias (Comissão, Conselho, Parlamento) e dos Estados-Membros da
UE. Foi criado em 2002 na sequência de uma série de crises alimentares no final dos
anos 90 para ser uma fonte de aconselhamento científico e comunicação sobre os riscos
associados à cadeia alimentar. A agência foi legalmente estabelecida pela UE sob a Lei
Geral de Alimentos – Regulamento 178/2002. A EFSA deve autorizar/aprovar
detalhadamente qualquer alegação de saúde antes de ser considerada a nível nacional
ou europeu antes de ser colocada no mercado na sequência de um pedido específico dos
estados-membros, Parlamento Europeu ou partes interessadas. Seguindo o parecer da
EFSA, cada país-membro europeu pode decidir independentemente estabelecer
regulamentos de aprovação e/ou autorizações específicos. Nos EUA, entretanto, os
fabricantes e outras partes interessadas não precisam registrar seus produtos no FDA
porque não há necessidade de obter a aprovação e/ou autorização do FDA antes de
produzir ou vender suplementos alimentares ou nutracêuticos. A atividade de vigilância é
relegada a agências governamentais e os fabricantes são responsáveis por garantir que
as informações relatadas no rótulo do produto sejam verdadeiras e não enganosas. No
Canadá, os nutracêuticos são regulamentados mais como uma droga do que como uma
categoria de alimentos (L'abbé et al. 2008).

1356
Outros países possuem legislação específica; por exemplo, a legislação indiana não
atribui nenhum status legal específico aos nutracêuticos. O governo da Índia estabeleceu
a Lei de Padrões e Segurança Alimentar (FSSA) em 2006 para introduzir um sistema
legislativo. FSSA não separa alimentos funcionais, nutracêuticos e suplementos
dietéticos; em vez disso, cada um é indicado como alimento para uma aplicação dietética
especial. Ele considera os produtos com alegações benéficas à saúde como semelhantes
aos alimentos, sem quaisquer declarações sobre nutracêuticos com resultados de ensaios
clínicos. Em 2015, a Índia notificou a Organização Mundial do Comércio de um projeto de
regulamento para nutracêuticos e alimentos para dietas especiais e fins médicos. O
projeto de regulamento definiu essas categorias com base em ingredientes, rotulagem,
aditivos, contaminantes e alegações nutricionais e de saúde. O projeto de regulamento
também determinou os critérios para a fabricação e venda dessas categorias de alimentos
e as doses recomendadas ou níveis de consumo. O novo regulamento, ou seja,
Segurança Alimentar e Normas para Suplementos Alimentares para Saúde,
Nutracêuticos, Alimentos para Uso Dietético Especial, Alimentos para Fins Médicos
Especiais, Alimentos Funcionais e Regulamentos Alimentares Normais 2016, é baseado e
enquadrado na Seção 22 do FSSA (FSSA 2018).

O Japão, em contraste, foi um dos primeiros países a enfrentar a questão da

regulamentação de suplementos alimentares e gêneros alimentícios, emitindo o Food for
Specified Health Uses (FOSHU) com base em uma solicitação voluntária de aprovação
das partes interessadas. Essa legislação, originalmente estabelecida em 1991, evoluiu
para a Lei de Promoção da Saúde de 2003 (Yamada et al. 2008). A possível aprovação
está disponível para alimentos com atividades benéficas à saúde, mesmo que essas
atividades não sejam comprovadas por evidências científicas, se o produto atender aos
requisitos do FOSHU (segurança, teor de ingrediente nutricionalmente adequado, etc.).
Mesmo alimentos sem um mecanismo de eficácia avaliado e definido para a sua função, a
saber, FOSHU qualificado e FOSHU padronizado, podem ser considerados. Qualquer
alegação de redução do risco de doença é permitida se a redução do risco de doença for
clínica e nutricionalmente estabelecida em um ingrediente.

Em geral, muitos países, como a Austrália ou a China, regulamentam os nutracêuticos

simplesmente como uma categoria de alimentos e aplicam-se as regulamentações
nacionais válidas para alimentos (Tapsell 2008, Yang 2008). Uma abordagem simples
baseada em registro foi adotada por alguns países, como Colômbia, Brasil e Argentina.
Uma abordagem baseada em notificação dirigida à autoridade competente local é válida
no México e no Chile. No entanto, outros países, como Brasil, China e Taiwan, têm

1357
requisitos mais rígidos e, antes do registro, é necessário um estudo clínico completo em
animais ou humanos. Com base nessas informações, é previsível que uma avaliação de
segurança e um estudo clínico completo possam ser necessários antes que qualquer
nutracêutico ou qualquer ingrediente seja colocado no mercado. Além disso, uma
alegação de saúde deve ser autorizada e atribuída somente após um estudo clínico
completo ser proposto à autoridade apropriada para aprovação com o objetivo de
comprovar sua segurança e eficácia com relação ao alegado efeito benéfico para a saúde
com base no entendimento do mecanismo de ação e a ausência de efeitos colaterais
indesejáveis.

9. O futuro dos regulamentos nutracêuticos veterinários

Não está claro por quanto tempo o FDA/CVM continuará a reconhecer as definições na
Publicação Oficial da AAFCO. Em um memorando de entendimento assinado em 2007 e
renovado em março de 2015, a FDA e a AAFCO concordaram em colaborar no
desenvolvimento e aprovação de definições de ingredientes para rações animais. No
entanto, também em março de 2015, a FDA anunciou sua intenção de trazer a definição e
os padrões de ingredientes da AAFCO totalmente para o FDA GRAS e a estrutura de
aditivos alimentares. Especificamente, a agência pretende (re)avaliar todos os
ingredientes da ração que aparecem no livro da AAFCO, mas não estão listados nos
regulamentos da FDA como GRAS ou aprovados como aditivos alimentares. A FDA
pretende determinar se há evidências científicas suficientes para afirmar o ingrediente
como GRAS ou aprová-lo como um aditivo alimentar. Quando não há evidência suficiente
disponível para que o FDA faça uma GRAS ou determinação de aditivo alimentar, a
agência pretende exigir que as empresas apresentem petições de aditivo alimentar para
continuar usando um ingrediente em produtos de ração animal. Assim, embora um
ingrediente possa atualmente ser permitido devido à sua listagem no livro da AAFCO, as
empresas devem entender que a permissibilidade do ingrediente está sujeita a alterações
no futuro (Harrison e Jackson 2016).

Como o atual aspecto regulatório dos nutracêuticos veterinários é complexo e confuso

para a maioria dos veterinários e fabricantes, uma reestruturação de toda a estrutura
regulatória dos suplementos dietéticos seria útil. Uma versão do DSHEA para
nutracêuticos destinada a animais que se modela segundo as diretrizes do NASC pode
ser iniciada. O NASC já possui um sistema de relatórios adversos em vigor que pode ser
adotado para garantir a segurança nutracêutica veterinária. As autoridades nacionais
competentes podem pedir aos fabricantes que forneçam dados sobre a segurança e o
1358
mecanismo de ação que apoiem quaisquer alegações contidas nos rótulos dos seus
produtos, especialmente quando é utilizado o termo nutracêutico. As informações e dados
relevantes podem estar relacionados com o complexo de substâncias que formam um
nutracêutico e não podem referir-se a uma única substância. A aparência dessas novas
regulamentações dependerá de quem ganhará a batalha entre o que o fabricante deseja e
o que as agências reguladoras desejam. Uma reestruturação não será fácil, mas espero
que resulte em mais clareza para os regulamentos nutracêuticos veterinários.

Referências
AFFCO (2018) www.affco.org
AVMA (2018) https://www.avma.org/About/Governance/Documents/2014W_2013W_Resolution3_Attch2.pdf
Boothe DM (2017) The use of nutraceuticals in veterinary medicine.
https://www.isvma.org/wp-content/uploads/2017/10/Nutraceuticals_Dietary_Supplements.pdf
FDA (2015a) Compliance Policy Guide Section 690.100, Nut.
https://www.fda.gov/ICECI/ComplianceManuals/CompliancePolicyGuidanceManual/ucm074708.htm
FDA (2015b) Compliance Policy Guide 689.100.
www.fda.gov/ICECI/ComplianceManuals/CompliancePolicyGuidanceManual/ucm074707.htm
FSSA (2018) www.fssai.gov.in/
Harrison C (2014) Patenting natural products just got harder. Nat Biotechnol 32(5):403–404
Harrison T, Jackson M (2016) Pet nutrition: a legal rundown. Nutraceutical World, 04.01.16
JAVMA (15 Oct 2015) https://www.avma.org/News/JAVMANews/Pages/151015n.aspx
Kalra EK (2003) Nutraceutical—definition and introduction. AAPS PharmSci 5(3):Article 25
L’abbé MR, Dumais L, Chao E et al (2008) Health claims on foods in Canada. J Nutr 138:1221–1227
Mordor Intelligence (2018) Global pet food nutraceutical market—segmented by pet type, function, ingredient, and
geography—growth, trends and forecast (2018–2023). https://www.mordorintelligence.com
National Research Council (2006) Nutrient requirements of dogs and cats. National Academies Press, Washington, DC
National Animal Supplement Council (2018) www.nasc.cc
Nutraceutical Alliance (2018) www.nutraceuticalalliance.com
Santini A, Cammarata SM, Capone G et al (2018) Nutraceuticals: opening the debate for a regulatory framework. Br J
Clin Pharmacol 84(4):659–672
Schultz WB (1996) Federal Register/Vol. 61, No. 78/Monday, April 22, 1996
Tapsell LC (2008) Evidence for health claims: a perspective from the Australia–New Zealand region. J Nutr 138:1206–
1209
Yang Y (2008) Scientific substantiation of functional food health claims in China. J Nutr 138:1199–1205
Yamada K, Sato-Mito N, Nagata J et al (2008) Health claim evidence requirements in Japan. J Nutr 138:1192–1198

1359
 Aspectos regulatórios de nutracêuticos veterinários
nos EUA e Canadá
Daljit Vudathala

Resumo
A Food and Drug Administration (FDA) dos EUA fornece esclarecimento, orientação e
supervisão regulatória para proteger a saúde humana e animal. O Centro de Medicina
Veterinária (CVM), uma filial do FDA, garante a segurança de produtos médicos
veterinários e ração animal, incluindo alimentos para animais de estimação. Os
nutracêuticos não são alimentos nem drogas e apresentam um desafio regulatório.
Embora a maioria dos nutracêuticos seja geralmente considerada segura, há uma
preocupação crescente com sua segurança, qualidade e eficácia. Para salvaguardar a
saúde humana, o FDA não forneceu nenhuma disposição especial para suplementos
naturais destinados a serem incluídos na alimentação animal. O FDA acredita que não há
informações suficientes sobre o uso seguro de produtos naturais em animais de
alimentação para garantir a saúde humana de resíduos tóxicos em potencial. No entanto,
o uso de suplementos naturais orais não é proibido em animais de estimação se um
produto for inofensivo e não rotulado para tratar ou curar uma doença. No Canadá, os
nutracêuticos veterinários são definidos como “suplementos naturais” e são
regulamentados pela Health Canada. A orientação inclui informações sobre produtos
permitidos e excluídos, fabricação, rotulagem e sistema de notificação de eventos
adversos. Todos os produtos devem obter um número de notificação (NN) antes da venda
no Canadá. O objetivo das regulamentações canadenses é facilitar a aprovação de
produtos seguros e, ao mesmo tempo, manter os suplementos prejudiciais fora do
mercado para proteger a saúde humana e animal.

Palavras-chave: Nutracêuticos veterinários · Diretrizes regulatórias nos EUA e Canadá

D. Vudathala. PADLS New Bolton Center Toxicology Laboratory, Department of Pathobiology, School of
Veterinary Medicine, University of Pennsylvania, Kennett Square, PA, USA. e-mail: vudathal@vet.upenn.edu

1. Introdução
A saúde e a segurança públicas são funções centrais do governo. Regulamentos e
diretrizes garantem a segurança do consumidor, evitando que alimentos e produtos de
saúde prejudiciais sejam distribuídos ao consumidor, ao mesmo tempo em que permitem
1360
o fluxo de produtos seguros para o mercado. Espera-se que fabricantes, distribuidores e
partes interessadas sigam os regulamentos de um país onde o produto será
comercializado. Os regulamentos podem exigir que os fabricantes e distribuidores
divulguem informações factuais para evitar a divulgação de informações imprecisas ou
enganosas. Informações precisas de um alimento e produto de saúde capacita as
pessoas a fazerem escolhas informadas e reduz a incidência de eventos adversos à
saúde.

Os nutracêuticos, também conhecidos como suplementos dietéticos ou “alimentos

funcionais”, fazem parte de um segmento crescente da indústria de saúde (Childs, 2000).
Um produto nutracêutico é usado para melhorar o bem-estar geral, retardar o processo de
envelhecimento, prevenir doenças crônicas e apoiar as funções corporais. Atualmente, um
grande número de produtos é comercializado no mercado como alternativa à medicina
tradicional com o intuito de prevenir e tratar diversas enfermidades (McKeever 2017).
Uma percepção comum do público é que os produtos farmacêuticos são produtos
químicos, sintetizados em laboratório e, portanto, prejudiciais. Ao contrário, os produtos
naturais vêm da generosidade da natureza e, portanto, são considerados seguros. O foco
na prevenção de doenças e o aumento dos custos dos medicamentos são algumas das
outras forças motrizes para o aumento do uso de nutracêuticos. Uma dieta saudável e
suplementos dietéticos para o bem-estar geral e prevenção de doenças crônicas para
melhorar a qualidade de vida são procurados por muitos consumidores não apenas para
eles, mas também para seus animais de estimação (Bauer 2001). Suplementos naturais
para melhorar a saúde geral e a produtividade dos animais de fazenda são usados
rotineiramente como aditivos para rações.

Os produtos classificados como nutracêuticos parecem residir em uma área cinzenta

entre os alimentos e os farmacêuticos (Crandell e Duren 2007; Boothe 1997). O alimento
é definido como uma substância que fornece nutrição, sabor ou aroma. Em comparação,
um medicamento se destina ao diagnóstico, cura, mitigação, tratamento ou prevenção de
uma doença no homem ou nos animais. Ao contrário da alimentação humana, a
alimentação animal não apenas atende às necessidades nutricionais de uma espécie,
mas também pode servir como um mecanismo de entrega de produtos farmacêuticos. Um
alimento medicamentoso pode, portanto, ser classificado como alimento e medicamento
(US Food and Drug Adminstration 1998). As agências reguladoras fazem grandes
avanços para garantir a segurança de humanos e animais, monitorando o fornecimento
de alimentos e regulamentando os medicamentos.

1361
2. Perspectiva da FDA
Diferentes ramos da Food and Drug Administration (FDA) nos Estados Unidos são
responsáveis por proteger a saúde pública, garantindo a segurança, eficácia e segurança
de medicamentos humanos e veterinários, produtos biológicos e dispositivos médicos.
Sob a égide da FDA, o Center for Veterinary Medicine (CVM) regulamenta os produtos
destinados ao uso em animais (US FDA 1998). A CVM garante que os alimentos para
animais, alimentos para animais de estimação e guloseimas sejam seguros, feitos em
condições sanitárias e devidamente rotulados. Um medicamento é aprovado e monitorado
quanto à segurança e eficácia ao longo do ciclo de vida do produto. Os medicamentos
para animais podem ser administrados diretamente ou incorporados na ração.

Em 1994, o FDA promulgou o Dietary Supplement Health and Education Act (DSHEA)
para aumentar a segurança do consumidor sem impor barreiras desnecessárias que
poderiam diminuir o fluxo de produtos seguros para os consumidores (National Institute of
Health 1994). Uma estrutura de diretrizes para suplementos dietéticos (DS) foi
implementada para substituir a política regulatória usada para lidar com quaisquer
preocupações. Antes do DSHEA, quaisquer efeitos adversos relatados de um produto
comercializado eram tratados caso a caso.

DSHEA define um DS como um produto (diferente do tabaco) destinado a complementar

a dieta com um ou mais dos seguintes ingredientes:

(a) Uma vitamina

(b) Um mineral

(c) Uma erva ou planta botânica

(d) Um aminoácido

(e) Um suplemento dietético usado pelo homem para complementar a dieta, aumentando
a ingestão alimentar total

(f) Um concentrado, um metabólito, um constituinte, um extrato ou uma combinação de

ingredientes descritos em (a), (b), (c), (d) ou (e)

Embora os suplementos dietéticos sejam geralmente considerados seguros, o FDA toma

medidas contra produtos que não são seguros para proteger os consumidores. De acordo
com o FDA, os ingredientes vendidos nos EUA antes de 15 de outubro de 1994 são
considerados seguros com base em seu uso histórico e não precisam de avaliação de
segurança adicional. Para um novo ingrediente alimentar vendido após 15 de outubro de
1994, o fabricante deve notificar o FDA e fornecer evidências razoáveis de que é seguro
1362
para consumo humano. Os requisitos de rotulagem de um DS delineados para fornecer
informações verdadeiras ao consumidor são:

• O produto deve ser rotulado como um suplemento dietético.

• Rotulado para não tratar, diagnosticar, prevenir ou curar doenças.
• “Fatos suplementares” substituem os “fatos nutricionais”.
• O nome de cada ingrediente é listado em ordem decrescente por peso ou quantidades
totais de todos os ingredientes em uma mistura patenteada por porção.
• As ervas devem listar a parte da planta da qual se originaram (folha, flor, raiz, etc.).
• Os botânicos são listados pelo nome comum.

O FDA recebeu questionamentos sobre se o DSHEA de 1994 era aplicável a produtos

destinados ao uso em animais. Em resposta, a CVM publicou uma avaliação no Federal
Register em 22 de abril de 1996 (US FDA 1996), após examinar a linguagem, a intenção e
a história legislativa do DSHEA. A definição de suplemento dietético no DSHEA não
especifica se inclui produtos destinados ao uso em animais que não sejam humanos. Em
sua avaliação, o FDA afirmou que, ao revisar o DSHEA completo, pode-se concluir que a
lei foi escrita para produtos humanos e não animais.

3. Inaplicabilidade do DSHEA para produtos veterinários

A CVM concluiu que o DSHEA foi escrito sem considerar totalmente a segurança
alimentar humana e a saúde animal. A falta de informações e preocupações de segurança
sobre resíduos potenciais na carne, leite e ovos de animais que receberam produtos
naturais foi uma grande preocupação da CVM (US FDA 1996). O FDA concluiu que os
suplementos dietéticos destinados a animais produtores de alimentos não podem receber
tratamento especial fornecido pelo DSHEA para melhor proteger a saúde pública. Além
disso, muitos produtos que são usados atualmente para afetar o desempenho animal
podem ser potencialmente cobertos como suplementos dietéticos no DSHEA. Esses
produtos foram comercializados com a aprovação do FDA após extensos estudos
científicos do fabricante para demonstrar a segurança e eficácia em animais e humanos.
O FDA acredita que permitir que um novo produto seja comercializado sob a provisão do
DSHEA não só levanta questões de segurança alimentar, mas oferece uma vantagem
injusta sobre os produtos existentes que foram aprovados após a demonstração de
segurança e podem agir como um impedimento para desenvolver produtos inovadores em
o futuro.

1363
A avaliação concluiu que, para salvaguardar o abastecimento alimentar humano e
proteger a saúde animal, o DSHEA de 1994 não é aplicável a produtos para uso animal.
De acordo com os regulamentos atuais, os suplementos naturais a serem incluídos na
alimentação animal são tratados como qualquer outro aditivo alimentar.

4. Aditivos para rações

Todos os aditivos na alimentação animal, incluindo suplementos dietéticos, requerem a
aprovação do FDA após determinar que o produto não deixará resíduos prejudiciais na
carne, leite e ovos (21 USC 348 (b) (2) e (c) (5), e 21 CFR parte 570) (US FDA 2018a). A
aprovação de um aditivo para alimentação animal destinado a uma espécie animal
envolve o estabelecimento de um intervalo de segurança para o produto em um animal
em terminação e níveis de tolerância em alimentos comestíveis. Se um composto ou
qualquer um de seus metabólitos for cancerígeno, a lei impõe requisitos adicionais à sua
aprovação (21 U.S.C. 348 (C) (3) (A) e 21 CFR parte 500, subparte E). O uso de um
composto que pode induzir câncer em humanos é proibido para uso em animais
produtores de alimentos, a menos que nenhum resíduo do composto cancerígeno possa
ser demonstrado nas condições de uso (US FDA 2012). Um produto pode ser elegível
para o status “geralmente considerado como seguro” (GRAS) com base na opinião de
especialistas qualificados extraídos de dados disponíveis e aceitos coletados usando
princípios científicos ou por meio de um uso comum em alimentos antes de 1º de janeiro
de 1958 (US FDA 2018b).

A alimentação animal é regulamentada pela CVM em cooperação com autoridades

regulatórias estaduais e parceiros que fornecem experiência no assunto em ciência e
nutrição animal. A Association of American Feed Control Officials (AAFCO), uma
organização sem fins lucrativos sem autoridade regulatória, oferece um fórum para que as
autoridades regulatórias estaduais e federais se reúnam e criem um modelo de orientação
para garantir que a regulamentação dos alimentos para animais seja o mais uniforme
possível no estado declarar. Os regulamentos incluem o estabelecimento de definições
uniformes de ingredientes para rações e rotulagem adequada para garantir o uso seguro
dos alimentos. As diretrizes da AAFCO protegem a saúde dos animais e garantem a
proteção do consumidor contra aditivos veterinários prejudiciais.

Os requisitos de rotulagem para alimentos para animais fornecem informações suficientes

para manter os animais saudáveis e seguros. Um rótulo típico inclui:

1364
• Nome da marca, se houver
• Nome do Produto
• Declaração de objetivo
• Análise garantida
• Lista de ingredientes
• Direção para uso
• Declarações de aviso ou cuidado
• Nome e endereço do fabricante
• Declaração de qualidade

O objetivo, a lista de ingredientes, as instruções de uso e as declarações de advertência

são úteis na prevenção de sobredosagem de aditivos para rações em animais-alvo ou
exposição inadvertida a espécies não-alvo. Os suplementos naturais a serem
incorporados na alimentação animal devem atender aos requisitos da CVM e da AAFCO.

5. Nutracêuticos para animais de estimação

O CVM acredita que os animais com rações balanceadas recebem uma quantidade
adequada de nutrientes de ingredientes naturais ou suplementos que são adicionados
durante a fabricação da ração. As quantidades de vitaminas, minerais, proteínas, gorduras
e carboidratos em uma ração comercial são adequadas e atendem aos requisitos de
nutrientes do National Research Council (US FDA 1995). A CVM não se opõe à
comercialização de suplementos nutricionais orais para animais de companhia, desde que
o comerciante do produto atenda às seguintes restrições:

1. O ingrediente nutriente representado no produto é benéfico para cada espécie animal

para a qual o produto se destina. 2. O produto é rotulado para uso como suplemento e
não como substituto de boas rações diárias. 3. O produto fornece uma quantidade útil,
mas não excessiva, de cada um dos nutrientes que parece conter. 4. O rótulo não deve
alegar cura ou prevenção de doenças, incluindo promoção de crescimento. 5. O rótulo
não deve fazer afirmações falsas ou enganosas. 6. A potência e a formulação do produto
não devem representar um perigo para a saúde do animal alvo.

A não conformidade resulta em ação regulatória apropriada contra produtos que violam a
política com uma carta de “Advertência” como ação inicial para atingir a conformidade. O
FDA detém autoridade para tomar medidas regulatórias adicionais contra produtos
adulterados que representam um perigo para a saúde (US FDA 1995). De acordo com o
FDA, a política acima é para produtos orais e exclui todos os suplementos nutricionais
1365
injetáveis. Os injetáveis são considerados drogas e quaisquer questões são tratadas caso
a caso.

6. Preocupações de segurança
Embora os produtos naturais sejam considerados seguros, existe uma preocupação
crescente com sua segurança em animais de estimação. A segurança de um
medicamento ou aditivo é geralmente avaliada antes e depois da aprovação para
comercialização. Antes da venda de um produto, são realizados estudos para identificar
potenciais efeitos adversos e, em seguida, por meio de estudos de vigilância para
monitorar eventos adversos inesperados ou previamente identificados. Atualmente, os
suplementos naturais estão disponíveis para animais de estimação sem a aprovação
prévia à comercialização. Um produto com dados de segurança estabelecidos em
humanos pode não ser seguro em animais. Além disso, um produto que é seguro em uma
espécie pode não ser seguro em outra. As diretrizes atuais carecem de um sistema
robusto de vigilância pós-comercialização para coletar quaisquer eventos adversos.

Preocupado com a segurança dos suplementos naturais, o FDA entrou em contato com o
National Research Council (NRC) para comentar sobre a segurança em geral e,
especificamente, a segurança de três produtos: luteína, óleo de prímula e alho em
animais de estimação. Um comitê de especialistas foi formado para fornecer um relatório
de avaliação de segurança e publicou suas descobertas (NRC 2009). O comitê identificou
três preocupações principais que desafiam a avaliação de segurança de suplementos: 1.
Estudos de segurança limitados são conduzidos, 2. Falta de padronização entre os
ingredientes ativos e 3. Sistema de notificação de eventos adversos insuficiente.

Para fortalecer as evidências de segurança de um suplemento, o comitê criou uma

pirâmide consistindo de dez fatores de suporte de dados no aumento da progressão,
começando com a opinião de especialistas como base e meta-análise como o ápice. A
lista de parâmetros é a seguinte: 1. Opinião de especialistas; 2. Pesquisa in vitro e ex
vivo; 3. Fundamentação fisiopatológica; 4. Pesquisa em outras espécies; 5.
Uso/exposição histórica; 6. Séries de casos/sinais; 7. Modelos de doença; 8. Estudos
controlados randomizados em espécies-alvo, 9. Estudos epidemiológicos e 10. Meta-
análise.

As informações coletadas por esses vários meios científicos seriam úteis em uma
avaliação de segurança. O desenho do estudo de segurança deve levar em consideração
a dosagem e a contaminação no suplemento. Embora o uso de outras espécies seja
1366
geralmente útil na avaliação da segurança dos suplementos, isso não fornece nenhuma
garantia de segurança nas espécies pretendidas. Por exemplo, um suplemento de alho é
considerado seguro para humanos, mas pode causar anemia hemolítica em cães, gatos e
cavalos (Cope 2005; Kovalkovičova et al. 2009; NRC 2009). Um modelo de estudo de
segurança adequado de um suplemento que ocorre naturalmente na dieta de um animal
substituto e alvo que tem um padrão dietético metabólico e natural semelhante seria o
preferido.

Os regulamentos da FDA para DS veterinários são insuficientes para abordar totalmente

sua segurança, qualidade e eficácia. Os produtos estão disponíveis para animais de
estimação sem qualquer aprovação regulamentar e a vigilância pós-venda é insuficiente
para monitorar eventos adversos de maneira adequada (Boothe 1998). Regulamentações
atualizadas são muito necessárias para garantir a segurança e eficácia dos produtos.

7. Regulamentos no Canadá
Os nutracêuticos destinados a animais no Canadá são definidos como produtos de saúde
veterinária (VHPs) e são regulamentados pela Health Canada. Os VHPs são usados para
manter ou promover a saúde e o bem-estar de animais de companhia e produtores de
alimentos. No entanto, eles não devem ser usados para tratar, prevenir ou curar doenças.
No Canadá, as orientações e recomendações para produtos veterinários vêm do
Veterinary Drugs Directorate (VDD), sob a direção da Health Canada. Um Comitê
Consultivo de Especialistas em Produtos de Saúde Natural Veterinária (EAC-VNHP ou
EAC) começou a se reunir com a VDD em 2008 para discutir as questões, objetivos e
prioridades em relação aos produtos de saúde natural veterinária (Health Canada 2011).
O comitê delineou os seguintes objetivos para:

• Proteja o bem-estar dos animais de produtos nocivos.

• Estabelecer padrões de segurança para produtos destinados ao uso em animais para
alimentação, a fim de proteger o abastecimento alimentar humano, a saúde e o meio
ambiente.
• Simplificar os regulamentos para facilitar a aprovação de produtos considerados
seguros, ao mesmo tempo que mantém os produtos nocivos fora do mercado.

Além disso, a EAC queria estabelecer padrões de controle de qualidade para a fabricação
de produtos e vigilância pós-venda eficiente para permitir que a Health Canada tomasse
medidas rápidas contra um produto não conforme ou prejudicial. A EAC também queria

1367
criar padrões para alegações de eficácia que seriam úteis para os consumidores na
tomada de decisões informadas.

Um Programa Piloto de Notificação Provisória (INPP) temporário foi lançado em 2012

para produtos de saúde veterinária de baixo risco, seguido por um programa de
notificação que entrou em vigor em 13 de novembro de 2017 (Health Canada 2012,
2017). O programa de notificação foi iniciado com o objetivo de fornecer uma estrutura
regulatória flexível e de risco apropriado para produtos de saúde veterinária (VHP) que
têm um histórico de uso seguro. Uma abordagem de conformidade e aplicação é baseada
no risco potencial com autoridade para tomar as medidas adequadas contra a não
conformidade e para interromper a venda de um produto não seguro. Um número de
notificação (NN) deve ser obtido como parte do programa dentro do prazo: pelo menos 30
dias antes de vender um VHP pela primeira vez no Canadá, pelo menos 30 dias antes de
fazer uma alteração em um VHP que já foi notificado no Canadá e antes de importar um
VHP para o Canadá.

Health Canada forneceu orientação para cumprir com o

programa de notificação que consiste em informações sobre produtos incluídos e
excluídos; requisitos de rótulo e declaração; diretrizes de fabricação, relatórios de reações
adversas e conformidade e aplicação.

8. Produtos incluídos e excluídos

Os VHPs são considerados medicamentos de baixo risco que podem conter ingredientes,
como vitaminas, minerais e medicamentos tradicionais.

Produtos orais, tópicos, óticos e dentais/periodontais, dependendo dos ingredientes, estão

incluídos nesta categoria. Substâncias tradicionais, homeopáticas e não médicas que
podem ser usadas para promover ou manter a saúde são permitidas, com uma
advertência obrigatória no rótulo do produto (Health Canada 2017). Os detalhes dos
produtos permitidos estão disponíveis em
https://health-products.canada.ca/vhp-psa/en/about/3, e uma lista atual de substâncias
permitidas é mantida e pode ser obtida em https:// health-products. canada.ca/vhp-psa/en/
substance-list.

Vários produtos, dependendo da finalidade, via de administração, tipos e classificação,

são excluídos da categoria. Um produto destinado a curar, tratar ou diagnosticar um
animal está excluído. Qualquer produto que precise ser injetado, inalado ou administrado
por via intramamária ou intrauterina não é permitido pelo programa. Os adesivos e
1368
implantes oftálmicos e transdérmicos também não estão incluídos nas disposições do
VHP.

Os tipos de produtos excluídos são: alimentos medicamentosos e alimentos para animais

de estimação; medicamentos prescritos e substâncias controladas; vermífugos e
repelentes de insetos; antimicrobianos e hormônios, exceto botânicos com atividade
antimicrobiana e hormonal leve; banhos de tetina; materiais de risco especificados
(SRMs) de ruminantes com risco potencial de encefalopatia espongiforme bovina (BSE)
causando príons e incluindo tecidos, como cérebro, crânio, medula espinhal, amígdala,
olhos, etc.; combinação de produtos da medicina homeopática e tradicional chinesa com
outros tipos de ingredientes, como vitaminas ou botânicos, que não fazem parte do
mesmo modelo de cura.

Uma lista completa e os detalhes dos produtos atualmente excluídos estão disponíveis no
site Health Canada https://health-products.canada.ca/vhp-psa/en/about/4. Uma lista atual
de produtos notificados está sendo mantida e pode ser obtida em https://health-
products.canada.ca/vhp-psa/en/product-list.

9. Orientação de rotulagem
As diretrizes da Health Canada exigem que os rótulos e declarações não sejam falsos ou
enganosos para criar uma impressão imprecisa em relação ao benefício ou segurança de
um VHP. Um produto pode alegar que ajuda a função corporal, mas não cura uma
doença. Por exemplo, um produto pode ter uma declaração “Mantém o equilíbrio da
microflora saudável”, mas não “Ajuda a combater problemas digestivos”. Os produtos
homeopáticos que consistem em um único ingrediente podem ser rotulados como
“Homeopático”, “Remédio Homeopático” ou “Preparação Homeopática”. Um produto
homeopático que consiste em vários ingredientes pode ter uma alegação geral de saúde
com base nos dados da Matéria Médica Homeopática. Um produto de medicina
tradicional chinesa pode ter a alegação de uso tradicional, mas não para tratamento ou
prevenção, se o produto tiver sido usado por um mínimo de 50 anos consecutivos e sua
preparação e uso não tiverem mudado. Um exemplo de uma afirmação aceitável seria
“Na Medicina Tradicional Chinesa… usado para reabastecer o Qi.”

Reivindicações específicas são permitidas nas seguintes condições: um ingrediente está

ausente em um produto e o ingrediente é uma preocupação de segurança e pode estar
potencialmente presente no produto; um ingrediente pode ser listado em uma alegação
feita se sua presença em quantidade suficiente tiver o efeito esperado; a ausência de
1369
efeitos colaterais é permitida se a alegação for baseada em evidências científicas e a
incidência de efeitos colaterais não exceder a do placebo.

Além disso, o fabricante é responsável por nomear o produto de forma que o nome não
cause confusão devido a nomes com ou sem som. Termos promocionais como seguro,
não tóxico, não tóxico ou não alergênico são considerados enganosos e proibidos. No
entanto, a palavra “seguro” pode ser usada para fornecer instruções como “para uso
seguro, não exceda três comprimidos por dia”. Palavras como “alternativa natural para…”
ou “alternativa para…” são consideradas enganosas e não são permitidas, pois tais
declarações podem atrasar o tratamento adequado de um animal, quando necessário
(Health Canada 2012).

Detalhes das declarações permitidas que podem ser usadas para reivindicações gerais e
específicas, incluindo referência ao VHP homeopático e chinês, podem ser obtidos em
https://healthproducts.canada.ca/vhp-psa/en/about/7.

As recomendações do rótulo fornecidas nas orientações são:

• Marca
• Forma de dosagem
• Número de notificação (NN)
• Nome e endereço do fabricante ou distribuidor
• Número de lote
• Data de validade ou vida útil
• Instruções adequadas de uso
• Quantidade de cada ingrediente ativo (medicinal) por unidade de dosagem
• Valor líquido (conteúdo líquido)
• Lista de ingredientes excipientes (ou seja, ingredientes não medicinais)
• Informações de contato “Em caso de dúvidas ou para relatar um efeito colateral”

Os requisitos do rótulo são escritos para evitar uma impressão imprecisa ou enganosa
sobre a natureza, utilidade, segurança, dosagem recomendada, quantidade e composição
de um produto. As informações de contato disponíveis no rótulo seriam úteis para relatar
efeitos adversos ao fabricante ou a um representante canadense de um produto
importado. Detalhes e informações adicionais sobre os requisitos do rótulo VHP podem
ser obtidos em https://health-products.canada.ca/vhp-psa/en/about/6.

1370
10. Requisitos de fabricação
A fabricação de VHP deve seguir a Parte 3 – Boas Práticas de Fabricação (GMP)
descritas nas Normas de Produtos de Saúde Natural (SOR/2003-196). As diretrizes de
GMP incluem as especificações, instalações, equipamentos, pessoal, programa de
saneamento e operação, bem como o programa de garantia de qualidade do fabricante
(Health Canada 2012).

11. Relatório de efeitos adversos

Um fabricante ou representante canadense, se o produto for importado, deve monitorar e
manter um registro das reações adversas de um produto comercializado. Todas as
reações adversas graves devem ser relatadas em até 15 dias após o recebimento das
informações sobre o evento. Relatórios de reações adversas são usados pela Health
Canada para emitir avisos ou advertências e para alterar as informações de segurança de
um produto quando necessário. A Health Canada tem autoridade para remover qualquer
produto inseguro do mercado (Health Canada 2012).

12. Conformidade e aplicação

A Health Canada aborda uma não conformidade regulamentar com base no risco
apresentado ao público em geral e tem autoridade para tomar as medidas adequadas
para tratar de reclamações, quando a não conformidade for encontrada (Health Canada).
As ações aplicáveis estão descritas na Política de Conformidade e Execução (POL_001)
e disponíveis em http://www.hc-sc.gc.ca/dhp-mps/compli-conform/gmp-bpf/pol/pol_1_tc-
tm-eng.php.

Quaisquer alterações no VHP notificado que precisem ser feitas após a revisão e
aprovação da Health Canada, e alterações importantes podem resultar em um novo NN
para o produto. As principais alterações incluem via de administração, dosagem, duração
do uso, ingredientes ativos, uso ou propósito recomendado e espécie a que se destina.

As diretrizes claras e precisas da Health Canada cobrem todos os principais tópicos para
garantir a segurança da SD em animais e proteger o suprimento de comida humana.
Objetivos, listas e detalhes dos produtos incluídos e excluídos, requisitos de rotulagem,
diretrizes de fabricação e um sistema de relatório de eventos adversos estão claramente
descritos no site da Health Canada, facilmente acessível aos fabricantes, distribuidores,
consumidores e ao público em geral.
1371
13. Comentários finais e orientações futuras
A definição legal dos nutracêuticos e os produtos incluídos são um tanto diferentes nos
EUA e no Canadá. Os nutracêuticos são chamados de “suplementos dietéticos” nos EUA
e “produtos veterinários para saúde” no Canadá. Nos EUA, apenas produtos orais são
considerados suplementos dietéticos, enquanto no Canadá produtos tópicos e óticos
também são permitidos, dependendo dos ingredientes. No entanto, tanto no Canadá
quanto nos EUA, os nutracêuticos não se destinam a curar, tratar ou prevenir doenças em
animais.

Variações regulamentares entre os EUA e o Canadá impediriam o comércio e a

comercialização de produtos nutracêuticos. Os regulamentos atuais da FDA são
inadequados para abordar totalmente a segurança, eficácia e qualidade dos suplementos
naturais. Embora nenhuma disposição especial esteja sendo dada a suplementos
destinados a serem incorporados em rações para proteger a saúde humana, produtos
estão sendo vendidos para animais de estimação sem qualquer aprovação pré-
comercialização. A segurança é a maior preocupação. São necessárias diretrizes para
avaliar a segurança de um suplemento em diferentes espécies e dosagem apropriada.
São necessários regulamentos eficazes para garantir que a fabricação atenda aos
padrões de qualidade de produtos livres de contaminantes. Além disso, um sistema de
vigilância abrangente para relatar eventos adversos ao fabricante é necessário para
avaliar totalmente a segurança dos produtos comercializados. Pelo contrário, a Health
Canada delineou extensas diretrizes para produtos naturais para garantir a segurança
animal sem criar uma barreira desnecessária para a venda de produtos seguros. Antes da
venda, o fabricante ou distribuidor é obrigado a se registrar e fornecer evidências para
apoiar a alegação de que o produto é seguro e eficaz. As diretrizes cobrem os tipos de
produtos incluídos ou excluídos, os padrões de fabricação e os requisitos de rotulagem
para garantir a segurança e a eficácia. Um sistema abrangente para registrar eventos
adversos foi estabelecido com ações baseadas em risco para lidar com a não
conformidade para proteger o público em geral.

Embora existam muitos desafios para abordar a segurança, eficácia e qualidade dos
nutracêuticos, diretrizes abrangentes são necessárias para garantir a segurança e
utilidade de um produto. Regulamentações adequadas são essenciais para garantir a
segurança e eficácia de um produto na dosagem adequada. Os desafios com
nutracêuticos podem ser resolvidos por cientistas e reguladores trabalhando juntos tanto
nacional quanto internacionalmente para fornecer uma abordagem harmonizada para

1372
obter produtos seguros e eficazes que sejam alternativos à medicina tradicional para o
mercado, para atender à crescente demanda.

Referências
Bauer JE (2001) Evaluation of nutraceuticals, dietary supplements, and functional food ingredients for companion
animals. J Am Vet Med Assoc 218(11):1755–1760
Boothe DM (1997) Nutraceuticals in veterinary medicine. I. Definitions and regulations. The Compendium on
continuing education for the practicing veterinarian (USA)
Boothe DM (1998) Nutraceuticals in veterinary medicine. Part II Safety and efficacy. Compend Contin Educ Pract Vet
20(1):15
Childs NM (2000) Nutraceutical industry trends. J Nutra Funct Med Foods 2(1):73–85
Cope RB (2005) Allium species poisoning in dogs and cats. Vet Med 100(8):562
Crandell K, Duren S (2007) Nutraceuticals: what are they and do they work? J Biotechnol 34(3):29–36
Health Canada (2011) Expert advisory committee on veterinary natural health products. Available at:
https://www.canada.ca/en/healthcanada/services/drugs-health-products/public-involvementconsultations/veterinary-
drugs/advisory-committees/expert-advisory-committee.html
Health Canada (2012) Interim notification pilot program. Available at:
https://www.canada.ca/en/health-canada/services/drugs-healthproducts/veterinary-drugs/other-issues/interim-
notification-pilot-program-low-risk-veterinary-health-products.html
Health Canada (2017) About the VHP notification program. Available at: https://health-products.canada.ca/vhp-psa/en/
about/1
Kovalkovičová N, Šutiaková I, Pistl J (2009) Some food toxic for pets. Interdiscip Toxicol 2(3):169–176
McKeever KH (2017) Nutraceuticals: a goldmine but for whom? Comp Exerc Physiol 13(3):121–126
National Research Council (2009) Safety of dietary supplements for horses, dogs, and cats. National Academies
Press, Washington, DC
National Instititute of Health (1994) Office of dietary supplements-Dietary supplement health and education act of
1994. Available at: https://ods.od.nih.gov/About/DSHEA_Wording.aspx
US FDA (1995) Compliance policy guides—CPG Sec. 690.100 nutritional supplements for companion animals.
Available at: https://www.fda.gov/ICECI/ComplianceManuals/CompliancePolicyGuidanceManual/ucm074708.htm
US FDA (1996) Food and drug administration [Docket No. 95N–0308] inapplicability of the dietary supplement health
and education act to animal products. Available at: https://www.gpo.gov/fdsys/pkg/FR-1996-04-22/pdf/96-9780.pdf
US FDA (1998) Center for veterinary medicine regulating animal foods with drug claims. Guide 1240.3605. Available
at: https://www.fda.gov/downloads/AnimalVeterinary/GuidanceComplianceEnforcement/PoliciesProceduresManual/
UCM046883.pdf
US FDA (2012) Code of Federal Regulations Title 21, 500.82. Available at: https://www.gpo.gov/fdsys/pkg/CFR-2018-
title21-vol6/pdf/CFR-2018-title21-vol6-sec500-82.pdf
US FDA (2018a) Animal and veterinary product regulation. Available at:
https://www.fda.gov/AnimalVeterinary/Products/AnimalFoodFeeds/ucm050223.htm
US FDA (2018b) CVM animal food GRAS notice description. Available at:
https://www.fda.gov/AnimalVeterinary/Products/AnimalFoodFeeds/GenerallyRecognizedasSafeGRASNotifications/
ucm192224.Htm

1373
 Diretrizes regulatórias para nutracêuticos na União
Europeia
Doriana Eurosia, Angela Tedesco e Petra Cagnardi

Resumo
Os nutracêuticos incluem uma ampla gama de substâncias que podem ser usadas como
medicamentos, matéria-prima ou aditivos para rações. Isso faz uma diferença substancial
no aspecto regulatório da autorização de introdução no mercado na União Europeia (UE)
porque, para obter a autorização de introdução no mercado apropriada, procedimentos
diferentes devem ser seguidos. Uma vez que os regulamentos específicos não se aplicam
aos nutracêuticos, quando são utilizados como aditivos para a alimentação animal, devem
cumprir o disposto no Regulamento n.º 1831/2003 relativo aos aditivos para utilização na
alimentação animal. Embora os nutracêuticos sejam administrados como ingredientes
para rações, devem cumprir o Regulamento da Comissão (UE) n.º 68/2013. Se os
nutracêuticos forem administrados com alegações médicas ou se exercerem um efeito
farmacológico, seu uso deve estar em conformidade com a Diretiva 2001/82 / CE. A
legislação da UE sobre este assunto é muito detalhada e complexa. No entanto, permite a
obtenção de Autorizações de Introdução no Mercado com ampla margem de segurança,
cautelosa para a saúde animal, saúde humana e meio ambiente. Os Comités Científicos e
painéis da Autoridade Europeia para a Segurança dos Alimentos (EFSA) são
responsáveis pela produção de pareceres que são utilizados pela Comissão Europeia
para a adoção de legislação relacionada com a nutrição animal. No caso dos
medicamentos veterinários, a responsabilidade pela autorização de introdução no
mercado é concedida pelas autoridades nacionais competentes dos Estados-Membros ou
pela Agência Europeia dos Medicamentos (EMA). Este capítulo descreve a legislação que
é relevante para a autorização de comercialização de nutracêuticos para uso, ou seja,
matérias-primas para alimentação animal, aditivos para alimentação animal e
medicamentos veterinários.

Palavras-chave: Nutracêuticos · Diretrizes europeias · Materiais para alimentação animal

· Aditivos para alimentação animal · Medicamentos veterinários

D. E. A. Tedesco. Department of Environmental Science and Policy, Università degli Studi di Milano, Milano,
Italy. e-mail: doriana.tedesco@unimi.it
P. Cagnardi. Department of Health, Animal Science and Food Safety, Università degli studi di Milano, Milano,
Italy e-mail: petra.cagnardi@unimi.it

1374
1. Introdução
O uso de nutracêuticos em animais tem aumentado substancialmente nos últimos anos, e
várias questões surgiram relacionadas à correta identificação de seu uso e como obter a
devida autorização. Na categoria de nutracêuticos, há uma ampla gama de substâncias
que podem ser usadas como medicamentos, matéria-prima ou aditivos para rações. As
diferenças substanciais nos aspectos regulatórios da autorização de comercialização na
União Europeia (UE) estão estritamente relacionadas à falta de regulamentações
específicas sobre nutracêuticos e às dificuldades em categorizá-los para um uso
específico. Se os nutracêuticos forem administrados com alegações médicas ou se
exercerem um efeito farmacológico, a sua utilização deve cumprir o corpo da legislação
da União Europeia no setor farmacêutico para medicamentos para uso veterinário, de
acordo com a Diretiva da Comissão 2001/82/CE (CE 2001).

Os nutracêuticos podem ser administrados como alimento para animais ou como aditivo
para rações, quando não tiverem uma alegação médica ou efeito farmacológico. Se os
nutracêuticos forem administrados como ingredientes da ração, eles devem estar em
conformidade com o Regulamento da Comissão (UE) Nº 68/2013 (UE 2013). Quando
usados como aditivos para alimentação animal, nutracêuticos como ervas ou seus
extratos, probióticos e prebióticos, devem estar em conformidade com o Regulamento
(CE) Nº 1831/2003 sobre aditivos para uso na alimentação animal (CE 2003a). Alguns
nutracêuticos são benéficos, pois sua inclusão na dieta afeta favoravelmente o bem-estar
animal, a manutenção da saúde animal e de um sistema digestivo saudável. Em qualquer
caso, se os nutracêuticos forem administrados como medicamentos veterinários,
ingredientes para alimentos para animais ou aditivos para alimentos para animais, apenas
podem ser usados produtos com a autorização de introdução no mercado adequada.

A complexidade da autorização de introdução no mercado de medicamentos veterinários,

especialmente em animais produtores de alimentos, limita muito a presença de alguns
nutracêuticos (ervas) entre as moléculas atualmente permitidas listadas na Tabela 1 do
Regulamento da Comissão (UE) Nº 37/2010 (UE 2010 ) Na lista de moléculas permitidas,
estão incluídos os compostos homeopáticos. Nesse caso, a alta diluição evita os
possíveis riscos relacionados à dose administrada. Para animais produtores de alimentos,
o risco de resíduos em tecidos comestíveis requer a definição de limites residuais
máximos (LMR) para todos os compostos administrados de acordo com o Regulamento
(CE) Nº 470/2009 (CE 2009a).

1375
Da mesma forma, a legislação da UE para a inclusão de nutracêuticos em aditivos para
alimentos para animais é muito complexa e limita novos pedidos de autorização de
introdução no mercado.

Tabela 1 Exemplos de matérias-primas para alimentação animal do Regulamento da Comissão (UE)

n.º 68/2013 no Catálogo de matérias-primas para alimentação animal
Declarações
Nº Nome Descrição
obrigatórias
Grãos de Hordeum vulgare L. Pode ser protegido no
1.1.1 Cevada
rúmen
1.4.1 Aveia Grãos de Avena sativa L. e outras cultivares de aveia
Sementes de linhaça Linum usitatissimum L. (pureza
2.8.1 Linhaça botânica mínima 93%) como semente de linhaça inteira,
achatada ou moída. Pode ser protegido no rúmen
Atividade da
2.18.11 Soja Grãos de soja (Glycine max L. Merr.) urease se > 0,4 mg
N/g * min
3.5.1 Feno-grego Semente de feno-grego (Trigonella foenum-graecum)
Fruto- Produto obtido do açúcar da beterraba por processo
4.1.14 Umidade > 28%
oligossacarídeos enzimático
Raizes da cenoura amarela ou vermelha Daucus carota
4.3.1 Cenouras
L.
4.4.1 Chicória Raízes de Cichorium intybus L.
Inulina A inulina é um frutano extraído das raízes de Cichorium
(complementar a intybus L., Inula helenium ou Helianthus tuberosus; a
4.4.9
espécie da inulina bruta pode conter até 1% de sulfato e 0,5% de
planta) sulfito
Pó branco a amarelo de alho puro e moído, Allium
4.5.1 Alho seco
sativum L.
Frutos inteiros de carvalho pedunculado Quercus robur
L., carvalho séssil Quercus petraea (Matt.) Liebl.,
5.1.1 Carvalho
Sobreiro de Quercus suber L., ou outras espécies de
carvalho
5.3.1 Anis Sementes de Pimpinella anisum
Produto da produção da farinha de castanha, constituído
Castanhas principalmente por partículas de endosperma, com finos Proteína bruta
5.12.1
quebradas fragmentos de invólucros e alguns restos de castanha Fibra bruta
(Castanea spp.)
Sementes de Vitis L. separadas da polpa da uva, da qual Gordura bruta Fibra
5.25.1 Uva
o óleo não foi removido bruta
Sementes de Perilla frutescens L. e seus produtos de
5.28.1 Perilla
moagem
5.31.1 Plantago Sementes de Plantago (L.) spp.
5.34.1 Cardo Sementes de Carduus marianus L.
5.36.1 Sementes Sementes de Achillea millefolium L.
Insolúvel em
Plantas de Martyn Medicago sativa L. e Medicago var. ou cinzas, em HCl se
6.10.1 Lucerna; [alfafa]
partes delas > 3,5% matéria
seca

1376
Tabela 1 Exemplos de matérias-primas para alimentação animal do Regulamento da Comissão (UE)
n.º 68/2013 no Catálogo de matérias-primas para alimentação animal
Declarações
Nº Nome Descrição
obrigatórias
Algas
Algas, vivas ou processadas, incluindo algas frescas, Proteína bruta
(complementar a
7.1.1 resfriadas ou congeladas. Pode conter até 0,1% de Gordura bruta
planta ou
agentes antiespumantes Cinza bruta
espécie)
7.9.1 Alcaçuz Raiz de Glycyrrhiza L.
Produto obtido da secagem de partes aéreas das plantas
7.10.1 Hortelã Mentha spicata, Mentha piperita ou Mentha viridis (L.),
independentemente de sua apresentação

2. Diretrizes para a distinção entre matérias-primas para rações,

aditivos para rações e medicamentos veterinários
A distinção entre matérias-primas para alimentação animal, aditivos para alimentação
animal e outros produtos, como medicamentos veterinários, tem implicações para a sua
colocação no mercado, dependendo da legislação aplicável. A fim de proporcionar um
nível adequado de segurança jurídica, a Comissão Europeia adotou recentemente a
Recomendação n.º 2011/25 / UE (UE 2011) para fornecer orientações não vinculativas
para a distinção entre matérias-primas para alimentação animal, aditivos para alimentação
animal e medicamentos veterinários. Os objetivos destas orientações são (a) evitar
inconsistências no tratamento de tais produtos, (b) facilitar o trabalho das autoridades
nacionais competentes, e (c) ajudar os operadores económicos interessados a agirem
num quadro que proporcione um nível adequado de segurança jurídica. As orientações
baseiam-se nas disposições estabelecidas no quadro legislativo que rege os diferentes
tipos de produtos em causa e nas suas definições específicas.

2.1 Legislação para rações

De acordo com a legislação alimentar relatada no Regulamento (CE) n.º 178/2002 (CE
2002), podem ser encontradas as seguintes definições. Ração é qualquer substância ou
produto, incluindo aditivos, processados, parcialmente processados ou não processados,
destinados ao uso na alimentação oral de animais. O Regulamento (CE) n.º 767/2009
estabelece em pormenor que “os alimentos para animais podem assumir a forma de
matérias-primas para alimentação animal, alimentos compostos para animais, aditivos
para alimentos para animais, pré-misturas ou alimentos medicamentosos para animais”
(CE 2009b).

1377
As matérias-primas para alimentação animal são produtos de origem vegetal ou animal
cuja finalidade principal é atender às necessidades nutricionais dos animais, em seu
estado natural, fresco ou em conserva, e produtos derivados do seu processamento
industrial, bem como substâncias orgânicas ou inorgânicas, que podem ou não pode
conter aditivos para alimentos para animais, que se destinam a ser utilizados na
alimentação animal por via oral. Os materiais alimentares são usados principalmente para
atender às necessidades dos animais por energia, nutrientes, minerais ou fibras
dietéticas. Eles geralmente não são quimicamente bem definidos, exceto para os
constituintes nutricionais básicos. Os efeitos que podem ser justificados por avaliação
científica e que são exclusivos de aditivos para alimentos para animais ou medicamentos
veterinários devem ser excluídos das utilizações objetivas de matérias-primas para
alimentação animal (CE, 2009b).

Os aditivos para alimentação animal são substâncias, microrganismos ou preparações,

além da matéria-prima (um produto não pode ser uma matéria-prima e um aditivo ao
mesmo tempo), que são intencionalmente adicionados à ração ou água para
desempenhar uma ou mais funções específicas. De acordo com o Regulamento (CE) nº
1831/2003, o aditivo para alimentos para animais deve (a) afetar favoravelmente as
características dos alimentos para animais; (b) afetar favoravelmente as características
dos produtos animais; (c) afetar favoravelmente a cor de peixes e pássaros ornamentais;
(d) satisfazer as necessidades nutricionais dos animais; (e) afetar favoravelmente as
consequências ambientais da produção animal; (f) afetar favoravelmente a produção,
desempenho ou bem-estar animal, particularmente afetando a flora gastrointestinal (GI)
ou a digestibilidade dos alimentos para animais; ou (g) têm um efeito coccidiostático ou
histomonostático. Coccidiostáticos e histomonostáticos são substâncias destinadas a
matar ou inibir protozoários e são os únicos medicamentos veterinários usados como
aditivos para rações (CE 2003a). Os aditivos para rações são definidos por suas funções
e são adicionados intencionalmente para essas funções específicas. No entanto, essas
funções não são exclusivas dos aditivos para rações. Assim, um material de alimentação
também pode exercer uma função aditiva (por exemplo, como espessante), mas este não
deve ser o único uso pretendido (EU 2011).

Medicamentos veterinários (VMPs) são qualquer substância ou combinação de

substâncias apresentadas como tendo propriedades para tratar ou prevenir doenças em
animais ou qualquer substância ou combinação de substâncias que podem ser usadas
em, ou administradas a, animais com o objetivo de restaurar, corrigir, ou modificar funções
fisiológicas exercendo uma ação farmacológica, imunológica ou metabólica ou para fazer

1378
um diagnóstico médico. A substância se destina a representar qualquer matéria da
seguinte origem: humana (ou seja, sangue e produtos sanguíneos), animal (ou seja,
microorganismos, animais inteiros, partes de órgãos, secreções de animais, toxinas,
extratos, produtos sanguíneos), vegetal (ou seja, microrganismos, plantas, partes de
plantas, secreções vegetais, extratos) e produtos químicos (isto é, elementos, materiais
químicos naturais e produtos químicos obtidos por mudança química ou síntese) (EC
2001). Para confirmar as diferenças substanciais entre matérias-primas para alimentação
animal e aditivos para alimentação animal e VMPs, a rotulagem ou a apresentação das
matérias-primas para alimentação animal não deve alegar que irá prevenir, tratar ou curar
uma doença, exceto para coccidiostáticos e histomonostáticos (CE 2009b). Na mesma
recomendação (UE 2011), as seguintes definições são relatadas:

Alimentos para animais destinados a fins nutricionais específicos, regulamentados pela

Diretiva 2008/38/CE da Comissão, são alimentos que podem satisfazer um objetivo
nutricional específico em virtude da sua composição ou método de fabrico, que os
distingue claramente dos alimentos para animais normais. Foi estabelecida uma lista das
utilizações pretendidas de alimentos para animais para fins nutricionais específicos. Esta
lista indica o uso preciso, ou seja, o propósito nutricional específico (EC 2008a). Os
alimentos para animais com objetivos nutricionais específicos não incluem VMPs ou
alimentos medicamentosos de acordo com as diretrizes da Diretiva 90/167/EEC (EC
2009b; ECC 1990). Objetivos nutricionais específicos (isto é, suporte da função hepática
no caso de insuficiência hepática crônica, redução da formação de cálculos de urato ou
redução do risco de febre do leite) podem ser alcançados por meio da alimentação.
Alimentos destinados a fins nutricionais específicos atendem às necessidades nutricionais
específicas de animais cujo processo de assimilação, absorção ou metabolismo está, ou
poderia ser, temporariamente ou irreversivelmente prejudicado e que podem, portanto, se
beneficiar da ingestão de alimentos adequados à sua condição (EC 2009b).

Alimentos medicamentosos para animais não são VMPs, mas, de acordo com o
Regulamento (CE) n.º 767/2009, uma forma de alimento para animais que contém pré-
misturas medicamentosas sujeitas a receita de um veterinário (CE 2009b).

3. Nutracêuticos como material de alimentação

Se os nutracêuticos forem administrados como ração funcional, eles precisam ser
incluídos nos ingredientes da ração. As matérias-primas permitidas na nutrição animal são
relatadas no Catálogo Comunitário de Materiais para Rações (UE 2013). Este Catálogo foi

1379
criado como uma ferramenta para melhorar a rotulagem de matérias-primas para
alimentação animal e alimentos compostos para animais, de acordo com o Artigo 24 do
Regulamento (CE) Nº 767/2009 (CE 2009b).

Todas as matérias-primas para alimentação animal relatadas no Catálogo cumprem as

restrições sobre o uso de matérias-primas para alimentação animal, de acordo com a
legislação pertinente da União Europeia. Os operadores de empresas de alimentos para
animais que utilizem uma matéria-prima inserida no Catálogo devem garantir que ela
cumpre os requisitos de segurança e comercialização estabelecidos no artigo 4.º do
Regulamento (CE) n.º 767/2009 (CE 2009b), por exemplo, a pureza botânica de um
alimento/materiais para animais não ser inferior a 95%, o nível de impureza química
resultante do processo de fabrico e dos auxiliares de processamento, em falta ou com um
teor máximo fixo de acordo com o Regulamento (CE) n.º 183/2005 (CE 2005). Deve ser
dada especial atenção ao cumprimento do Regulamento (CE) n.º 1829/2003 para as
matérias-primas para alimentação animal que são ou são produzidas a partir de
organismos geneticamente modificados ou resultam de um processo de fermentação
envolvendo microrganismos geneticamente modificados (CE 2003b).

As matérias-primas para alimentação animal, que têm uma presença natural de

microrganismos, podem ser colocadas no mercado, uma vez que a utilização prevista das
matérias-primas para alimentação animal não está ligada a uma função exercida por
microrganismo (s) de acordo com o anexo I do Regulamento (CE) n.º 1831 / 2003 (EC
2003a). A presença de microrganismos, bem como qualquer função deles resultante, não
deve ser reivindicada nas matérias-primas para alimentação animal e no alimento
composto para animais que os contenha.

Na parte C do Regulamento (UE) n.º 68/2013 da Comissão, a lista de matérias-primas

para alimentação animal indica o nome das matérias-primas para alimentação animal, a
descrição e as declarações obrigatórias (UE 2013).

A utilização deste Catálogo (UE 2013) pelos operadores das empresas de alimentos para
animais é voluntária. No entanto, o nome de uma matéria-prima listada no Catálogo pode
ser usado apenas para uma matéria-prima que atenda aos requisitos da entrada em
questão. A pessoa que, pela primeira vez, colocar no mercado uma matéria-prima para
alimentação animal que não esteja listada no Catálogo, deve notificar imediatamente os
representantes dos setores europeus das empresas de alimentos para animais. Os
representantes dos setores europeus das empresas de alimentos para animais devem
publicar um registro dessas notificações na Internet e atualizá-lo regularmente (CE,

1380
2009b). O Catálogo foi atualizado pela última vez com o Regulamento (UE) 2017/1017
(UE 2017).

Entre as matérias-primas para alimentação animal, Medicago sativa é uma das culturas
mais importantes utilizadas como forragem para o gado e é conhecida como uma fonte de
compostos bioativos naturais com potenciais efeitos de promoção da saúde (Rafińska et
al. 2017). Aveia (Avena sativa) e cevada (Hordeum vulgare) são dois grãos de cereais que
são boas fontes de β-glucana, uma fração de fibra solúvel em água que tem efeitos
redutores de lipídios e glicemia no plasma. Portanto, o uso de aveia e cevada como
ingredientes funcionais em alimentos para animais de estimação pode ser benéfico no
controle ou prevenção da obesidade, diabetes mellitus (DM) e dislipidemia (de Godoy et
al. 2013). O feno-grego apresenta uma oportunidade nutracêutica única e rara para
fornecer vários benefícios à saúde (Garg 2016). Muitos outros materiais para rações com
propriedades nutracêuticas podem ser encontrados no Catálogo de Materiais para
Rações (EU 2013). Na Tabela 1, alguns exemplos são relatados.

4. Nutracêuticos como aditivos para rações

As condições para a utilização de aditivos para a alimentação animal são estabelecidas
pelo Regulamento (CE) 1831/2003. Apenas os aditivos aprovados ao abrigo do
procedimento previsto no presente regulamento podem ser colocados no mercado,
utilizados e transformados na alimentação animal nas condições estabelecidas na
autorização (CE 2003a).

Nutracêuticos podem ser usados como aditivos alimentares funcionais. Esses aditivos
alimentares podem estimular adequadamente as respostas defensivas locais e influenciar
favoravelmente a microflora GI residente para otimizar o crescimento e o estado de saúde
intestinal. Os aditivos protegem os animais contra distúrbios fisiopatológicos, mas também
são capazes de melhorar a digestão e absorção de nutrientes (Domeneghini et al. 2006).
As plantas/ervas e seus extratos estão sendo usados cada vez mais, não apenas como
aditivos sensoriais, mas também para outros fins, notavelmente melhor crescimento ou
conversão alimentar, melhor qualidade da carne e para profilaxia. Seu uso é aumentado
mais ainda como aditivos de substituição para os promotores de crescimento de
antibióticos que foram proibidos no final de 2005 (Franz et al. 2005). Entre outras
substâncias nutracêuticas incluídas nas categorias de aditivos para rações estão os
probióticos, prebióticos, vitaminas, antioxidantes e alguns aminoácidos.

1381
Para proteger a saúde humana, a saúde animal e o meio ambiente, os aditivos para
rações devem passar por uma avaliação de segurança por meio de um procedimento
comunitário antes de serem colocados no mercado, usados ou processados na
comunidade. Qualquer pessoa que pretenda obter uma autorização para um aditivo para
a alimentação animal ou para uma nova utilização de um aditivo para a alimentação
animal deve apresentar um pedido. O Regulamento (CE) n.º 1831/2003 estabelece as
regras que regem a autorização comunitária de aditivos para utilização na alimentação
animal. Além disso, o Regulamento (CE) n.º 429/2008 (CE 2008b) fornece regras
pormenorizadas para a aplicação do Regulamento (CE) n.º 1831/2003 no que diz respeito
à preparação e apresentação de pedidos e à avaliação e autorização de aditivos para a
alimentação animal.

O requerente deve especificar o efeito pretendido do aditivo e fazer uma proposta para a
classificação do aditivo em uma ou mais categorias e grupos funcionais de acordo com os
seus efeitos principais (Tabela 2).

Tabela 2 Categorias de aditivos alimentares (excluindo coccidiostáticos ou histomonostáticos) e

exemplos dos grupos mais funcionais (CE 2003a)
Categorias de aditivos
para alimentos para Exemplos de grupos funcionais
animais
• Antioxidantes: substâncias que prolongam a vida de armazenamento de
alimentos para animais e matérias-primas para alimentação animal,
protegendo-os contra a deterioração causada pela oxidação
• Estabilizantes: substâncias que permitem manter o estado físico-químico dos
alimentos para animais
• Aglutinantes: substâncias que aumentam a tendência das partículas de
alimentos para animais aderirem
• Agentes antiaglomerantes: substâncias que reduzem a tendência de
Aditivos tecnológicos: partículas individuais de um alimento para animais aderirem
qualquer substância • Reguladores de acidez: substâncias que ajustam o pH dos alimentos para
adicionada à ração para animais
fins tecnológicos • Desnaturantes: substâncias que, quando utilizadas para a fabricação de
alimentos processados, permitem a identificação da origem de um alimento ou
matéria-prima específica
• Substâncias para redução da contaminação dos alimentos por micotoxinas:
substâncias que podem suprimir ou reduzir a absorção, promover a excreção
de micotoxinas ou modificar seu modo de ação
• Melhoradores das condições de higiene: substâncias ou, quando aplicável,
microrganismos que afetam favoravelmente as características higiênicas dos
alimentos, reduzindo uma contaminação microbiológica específica
Aditivos sensoriais
Qualquer substância, cuja
• Corantes – Substâncias que adicionam ou restauram a cor dos alimentos para
adição à alimentação
animais – Substâncias que, quando dadas aos animais, adicionam cor aos
melhora ou altera as
alimentos de origem animal – Substâncias que afetam favoravelmente a cor de
propriedades
peixes ornamentais ou pássaros
organolépticas da ração
• Compostos aromatizantes: substâncias que aumentam o cheiro ou
ou as características
palatabilidade dos alimentos
visuais dos alimentos
derivados de animais
1382
 Tabela 2 Categorias de aditivos alimentares (excluindo coccidiostáticos ou histomonostáticos) e
exemplos dos grupos mais funcionais (CE 2003a)
Categorias de aditivos
para alimentos para Exemplos de grupos funcionais
animais
• Vitaminas, pró-vitaminas e substâncias químicas bem definidas com efeito
semelhante
Aditivos nutricionais
• Compostos de oligoelementos
• Aminoácidos, seus sais e análogos
Aditivos zootécnicos
Qualquer aditivo usado • Intensificadores de digestibilidade: substâncias que, quando fornecidas aos
para afetar animais, aumentam a digestibilidade da dieta por meio da ação sobre os
favoravelmente o materiais de ração alvo
desempenho de animais • Estabilizadores da flora intestinal: microrganismos ou outras substâncias
em boa saúde ou usado quimicamente definidas, que, quando fornecidas aos animais, têm um efeito
para afetar positivo na flora intestinal
favoravelmente o meio • Substâncias que afetam favoravelmente o meio ambiente
ambiente

Os pedidos de autorização de aditivos para alimentos para animais devem levar em

consideração os diferentes requisitos de documentação para animais produtores de
alimentos e outros animais. No momento do pedido de autorização, o requerente deve
enviar os seguintes dados e documentos diretamente para a Autoridade Europeia para a
Segurança dos Alimentos (EFSA) e a inclusão no Registro de Aditivos para Alimentos
para Animais (União Europeia 2018):

(a) Nome e endereço

(b) Identificação do aditivo para alimentação animal, uma proposta para sua classificação
por categoria e grupo funcional e suas especificações, incluindo critérios de pureza
(c) Uma descrição do método de produção, fabricação e usos pretendidos do aditivo para
alimentação animal, uma descrição do método de análise do aditivo de acordo com seu
uso pretendido e, quando apropriado, o método de análise para a determinação de o nível
de resíduos do aditivo alimentar, ou seus metabólitos, nos alimentos
(d) Uma cópia dos estudos que foram realizados e qualquer outro material que esteja
disponível para demonstrar que o aditivo para alimentação animal atende aos critérios de
segurança e tem efeitos favoráveis
(e) Condições propostas para colocar o aditivo para alimentação animal no mercado,
incluindo requisitos de rotulagem e condições específicas de uso e manuseio, nível de
uso em alimentos complementares para animais e espécies animais, e categorias às
quais o aditivo se destina
(f) Uma declaração por escrito de que três amostras do aditivo para alimentação animal
foram enviadas pelo requerente diretamente para o laboratório comunitário de referência
(g) Para aditivos que não pertencem à categoria tecnológica ou sensorial e para aditivos

1383
que consistem em, contêm ou são produzidos a partir de OGM, uma proposta de
monitoramento pós-comercialização
(h) Um resumo contendo as informações fornecidas nos pontos anteriores
(i) Para aditivos abrangidos pelo âmbito da legislação comunitária relativa à
comercialização de produtos que consistem em, contendo ou produzidos a partir de OGM,
detalhes de qualquer autorização concedida de acordo com a legislação aplicável

Para certos aditivos, os critérios de segurança (d) para os animais-alvo podem ser
presumidos sem a necessidade de informações específicas. Para todos os outros
aditivos, a segurança para os animais-alvo pode ser avaliada por extensas pesquisas na
literatura para estudos em animais-alvo, dados de toxicidade (existentes ou novos) de
estudos de dose repetida em animais de laboratório ou estudos de tolerância em animais-
alvo.

A fim de satisfazer a avaliação de aditivos na alimentação animal e as regras relativas ao

procedimento de autorização, a Autoridade Europeia para a Segurança dos Alimentos
(EFSA) publicou as seguintes orientações:

- Guia de orientação sobre a avaliação da segurança dos aditivos para a alimentação

animal para as espécies-alvo (EFSA 2017a).
- Guia de orientação sobre a avaliação da segurança dos aditivos para alimentação
animal para o consumidor (EFSA 2017b)
- Orientação sobre a identidade, caracterização e condições de uso de aditivos para
rações (EFSA 2017c)
- Orientação sobre a caracterização de microrganismos usados como aditivos para
alimentos ou como organismos de produção (EFSA 2018a)
- Guia de orientação sobre a avaliação da eficácia dos aditivos para a alimentação animal
(EFSA 2018b).

O aditivo autorizado inscrito no Register of Feed Additives deve ser mantido atualizado
(União Europeia 2018). As autorizações ao abrigo do Regulamento (CE) n.º 1831/2003
são renováveis por períodos de 10 anos. O pedido de renovação deve ser enviado à
Comissão pelo menos 1 ano antes do termo da autorização (CE 2003a).

No Registro de Aditivos para Alimentos para Animais, existem muitos exemplos de

aditivos autorizados com propriedades nutracêuticas. Alguns desses aditivos representam
uma alternativa real aos antibióticos in-feed e incluem ácidos orgânicos, prebióticos e
probióticos. Ervas e produtos fitoterápicos / botânicos representam uma grande variedade
de nutracêuticos (Franz et al. 2005). Na categoria de aditivos sensoriais, um grupo
funcional de compostos aromatizantes (156 produtos naturais – definidos em base
1384
botânica) estão incluídos. Alguns exemplos de produtos naturais – definidos em base
botânica – e estabilizadores da flora intestinal estão listados na Tabela 3.

Tabela 3 Exemplos de aditivos para alimentos para animais do Anexo I: Lista de aditivos do
Registro de Aditivos para Alimentos para Animais (União Europeia 2018)
Grupo
Categoria Subclassificação Aditivo
Funcional
Astragalus membranaceus L. = A. pycnocladus Boiss.et
Haussk. ex Boiss.: Astragalus tincture
Crataegus oxyacantha L.p.p. et auct .: Hawthorne tinture
CoE 156
Curcuma longa L.: extrato de cúrcuma
CAS 8024-37-1 FEMA 3086 CoE 163
EINECS 283-882-1/oleorresina de cúrcuma CAS 84775-
52-0 FEMA 3087 CoE
163 EINECS 283-882-1/óleo de cúrcuma CAS 8024-37-
1 FEMA 3085 CoE 163 EINECS
283-882-1/tintura de cúrcuma CoE 163
Echinacea purpurea (L.) Moench.: Echinacea absoluto/
Extrato de Echinacea [cães e gatos]
2 b Produtos naturais
Aditivos Compostos – definidos pela Eleutherococcus senticosus Rupr. et Maxim. =
sensoriais aromatizantes botânica Acanthopanax s. Danos: extrato de raiz de taiga/tintura
de raiz de taiga
Panax ginseng C. A. Mey.: Extrato de ginseng CoE 318
[gato e cachorro]
Salix alba L.: extrato de salgueiro branco/tintura de
salgueiro branco
Silybum marianum (L.) Gaertn. = Carduus marianus L.:
Extrato de cardo leiteiro CoE 551 / tintura de cardo
leiteiro CoE 551
Zingiber officinale Rosc .: oleorresina de gengibre CAS
84696-15-1 FEMA 2523 CoE 489 EINECS 283-634-2 /
óleo de gengibre CAS 8007-08-7 FEMA 2522 CoE 489
EINECS 283-634-2 / tintura de gengibre CoE 489
b
4
estabilizadores Estabilizadores da Saccharomyces cerevisiae, Enterococcus faecium,
Aditivos
da flora flora intestinal Bacillus subtilis
zootécnico
intestinal

5. Propriedades nutracêuticas reivindicadas em rótulos de rações para

animais
Além dos requisitos de rotulagem obrigatórios, a rotulagem de matérias-primas para
alimentação animal e alimentos compostos também pode incluir particularidades de
rotulagem voluntárias. A rotulagem e a apresentação dos alimentos para animais podem
chamar atenção especial para a presença ou ausência de uma substância para uma
característica nutricional específica ou para uma função específica. A propriedade
nutracêutica pode ser destacada na rotulagem voluntária de alimentos para animais,
conforme descrito no Regulamento (CE) 767/2009 (CE 2009a).
1385
A pedido da autoridade competente, é necessária a fundamentação científica da
alegação. Isto permite verificar a exatidão das informações fornecidas no rótulo, incluindo
as percentagens exatas em peso das matérias-primas para alimentação animal utilizadas.
Alegações relativas à otimização da nutrição e suporte ou proteção das condições
fisiológicas são permitidas, a menos que contenham uma alegação como “isso prevenirá,
tratar ou curar uma doença” (EC 2009b). As alegações consideradas medicinais, como
dosagem, curas, guloseimas, remédios, previne, alivia, cura ou repara, devem ser
evitadas. Por outro lado, podem ser utilizadas alegações não consideradas medicinais,
como uso, administração, aplicação, acalma, prepara, mantém, aplica, limpa e
saúde/saudável (FEDIAF 2011).

Os Códigos de Boas Práticas de Rotulagem foram criados como uma ferramenta para
melhorar a rotulagem de matérias-primas e alimentos compostos para fornecer orientação
da indústria aos operadores para o gerenciamento de reclamações. Os códigos foram
desenvolvidos para rações (FEDIAF 2011) e animais produtores de alimentos (COPA-
COGECA/FEFAC 2016). Algumas alegações podem ser particularmente úteis para
fornecer informações relacionadas diretamente ao nutracêutico. Há evidências científicas
de que determinados alimentos podem fazer uma contribuição significativa para a
promoção da saúde (por exemplo, apoiar a função imunológica) e redução do risco de
doença (por exemplo, diminuir o risco de desenvolver doenças nas articulações) (FEDIAF
2011).

Uma reivindicação funcional descreve o efeito de uma matéria-prima, nutriente,

componente ou aditivo sobre o crescimento, desenvolvimento ou funções normais do
corpo. A alegação pode dizer respeito à otimização da nutrição e suporte ou proteção das
condições fisiológicas (Art. 13.2 EC 2009b). Esses efeitos vão além de atender às
necessidades nutricionais básicas dos animais. O código de prática sobre rotulagem
voluntária é aplicável a rações compostas e matérias-primas para rações usadas para
animais produtores e não-produtores de alimentos. A Tabela 4, lista as reivindicações
autorizadas que podem ser usadas no rótulo quando o escopo é para sublinhar algumas
características relacionadas às reivindicações nutricionais, composicionais e funcionais.

Em alimentos para animais com objetivos nutricionais específicos (EC 2008a), as

alegações funcionais devem ser claramente separadas dos objetivos nutricionais
específicos que indicam o uso preciso. No entanto, isso não impede que produtos
nutricionais específicos façam alegações funcionais adicionais. Além das declarações
legais sobre o uso preciso (ou seja, ração dietética de marca para gatos para redução da
1386
recorrência de pedra de estruvita, a alegação funcional com óleo de peixe para uma
pelagem brilhante) pode ser usada (FEDIAF 2011).

Tabela 4 Categorias de reivindicações autorizadas e exemplos de reivindicações

(COPA-COGECA/FEFAC 2016; FEDIAF 2011)
Categorias de
Tipologia de Exemplos: “Marca” com/contém/
reivindicaçõe Definição
reivindicações contribui/preserva etc.
s autorizadas
Reivindicações de
Consulte a presença de uma matéria- Cenoura e arroz
componentes
prima específica que pode ser Alto em [substância] (por
(componentes
Nutricional e acompanhada por um qualificador exemplo, energia)
principais)
composição.
Refere-se à Reivindicações de
Salsa
presença ou componentes Consulte a presença de um
Baixo em [substância] (por
a um nível de (componentes determinado componente secundário
exemplo, fibra)
inclusão alto secundários)
ou baixo de
Alegações de
um Referência à presença ou a um nível Vitamina E
nutrientes e
componente específico de um nutriente ou aditivo, Enriquecido com ômega-3
aditivos
específico incluindo ácidos graxos, vitaminas, Contém/traz/fonte
Presença/
etc., sem nenhuma outra conexão de/fornece/concentrado em/rico
ausência de uma
com os efeitos para a saúde em [substância]
substância
Vincula a presença de um
Cálcio para ossos fortes e
nutriente/combinação de nutrientes
saudáveis e dentes
Alegações de contidos em um produto ao papel
A vitamina E ajuda a proteger a
função nutricional fisiológico no crescimento,
gordura nos tecidos do corpo da
desenvolvimento e funções normais
oxidação
do corpo
Antioxidantes para apoiar o
sistema imunológico
Descreve o efeito benéfico específico
Reivindicações de Chicória para melhorar o
de nutrientes ou outras substâncias,
função crescimento de bactérias
isoladamente ou em combinação,
aprimoradas. benéficas no intestino
nas funções fisiológicas ou atividades
Apoiar as funções Para uma boa função hepática
biológicas além de seu papel
fisiológicas do Integridade do úbere Suporta o
Funcional estabelecido no crescimento,
animal ou permitir crescimento inicial
desenvolvimento e funções normais
o retorno ao Facilita o trânsito digestivo
do corpo. Nenhuma referência deve
estado fisiológico Aa ingestão de alimentos/água
ser feita a doenças ou estados
normal potável/digestão/apetência
patológicos específicos
Mantém o equilíbrio da flora
intestinal
Refere-se ao consumo de um
nutriente ou outras substâncias,
Manutenção da
isoladamente ou em combinação, Contém ácidos graxos ômega-3
saúde e redução
que ajudam a reduzir o risco de para manter as articulações
do risco de
desenvolvimento de doenças ou a saudáveis
doenças
manter as funções fisiológicas ou a
saúde

6. Nutracêuticos como medicamentos veterinários (VMP)

De acordo com a definição relatada anteriormente na Diretiva 2001/82/CE (CE 2001), os
produtos nutracêuticos com um efeito benéfico na saúde animal requerem uma
autorização de introdução no mercado se forem feitas alegações de medicamentos ou se
contiverem determinados ingredientes que exercem um efeito farmacológico no alvo
1387
animal. Portanto, eles devem seguir a legislação para medicamentos para uso veterinário
(EudraLex Volume 5 2015b).

A legislação para a autorização de introdução no mercado de VMP na UE é bastante

complexa e deve abordar as diferenças relacionadas com a legislação dos Estados-
Membros e também com as espécies veterinárias. Isso inclui animais produtores de
alimentos e animais de companhia. Qualquer VMP a ser legalmente colocado no mercado
na União Europeia ou em qualquer Estado-Membro deve estar sujeito a uma autorização
de introdução no mercado concedida pelas autoridades nacionais competentes do Estado
ou pela Agência Europeia de Medicamentos (EMA). A EMA fornece orientação e apoio a
empresas que pesquisam e desenvolvem medicamentos veterinários. Isso inclui
informações científicas e regulamentares sobre como projetar e executar ensaios clínicos,
padrões de conformidade, como estabelecer limites máximos de resíduos para
medicamentos e biocidas, apoio à inovação e incentivos para empresas que desenvolvem
medicamentos para uso menor/espécies menores (MUM)/mercados limitados (EudraLex
Volume 5 2015b).

O corpo da legislação da União Europeia no setor farmacêutico de produtos veterinários é

compilado em “As regras que regem os medicamentos na União Europeia”, EudraLex
Volume 5 – legislação farmacêutica da UE para medicamentos veterinários – que é
atualizado periodicamente para levar em consideração nova legislação (EudraLex Volume
5 2015b). A legislação básica é apoiada por uma série de diretrizes que também são
publicadas nos volumes 4 a 9 (EudraBook V1 de maio de 2015/EudraLex V30 de janeiro
de 2015). Todos os regulamentos, diretivas e diretrizes estão resumidos na Tabela 5.

Tabela 5 Legislação europeia sobre medicamentos veterinários

Nome Descrição
Regulamento
EudraLex
Legislação farmacêutica da UE para medicamentos para uso veterinário
volume 5
Diretrizes

Diretrizes para boas práticas de fabricação de medicamentos para uso humano e

EudraLex
veterinário
volume 4
Aviso aos requerentes e diretrizes regulamentares para medicamentos de uso
EudraLex
veterinário. Volume 6A, Procedimentos para autorização de comercialização; volume
volume 6
6B, Apresentação e conteúdo do dossiê; volume 6C, Diretrizes Regulatórias
EudraLex
Diretrizes científicas para medicamentos de uso veterinário
volume 7

1388
 Tabela 5 Legislação europeia sobre medicamentos veterinários
Nome Descrição
Limites máximos de resíduos. Aviso aos requerentes e diretriz – Medicamentos
EudraLex
veterinários – estabelecimento de limites máximos de resíduos (LMR) para resíduos
volume 8
de medicamentos veterinários em alimentos de origem animal
EudraLex – volume Diretrizes de farmacovigilância para medicamentos de uso humano e veterinário.
9 Volume 9B – Farmacovigilância para Medicamentos de Uso Veterinário
Diretivas
Diretiva 2001/82/EC Código comunitário relativo a medicamentos veterinários
Regulamento (CE)
n.º 470/2009 do
Procedimentos comunitários para o estabelecimento de limites de resíduos de
Parlamento Europeu
substâncias farmacologicamente ativas em alimentos de origem animal
e do Conselho, de 6
de maio de 2009

6.1 Procedimento de Autorização de Introdução no Mercado de VMP na UE

No que diz respeito ao procedimento de autorização de introdução no mercado do VMP,

os princípios gerais de avaliação da qualidade, segurança e eficácia de um produto estão
no centro de sua relação risco/benefício. A União Europeia mantém atualmente quatro
procedimentos de registro diferentes (Tabela 6) e vários procedimentos regulatórios
autoridades para o registro de VMPs. Historicamente, cada Estado-Membro da UE
mantinha o seu próprio Procedimento Nacional (NP), que exigia avaliações nacionais e
resultava em licenças válidas apenas em um país. O procedimento centralizado (CP)
deve ser submetido à EMA e permitirá que ela emita uma autorização de introdução no
mercado válida em todos os Estados-Membros, Islândia, Noruega e Liechtenstein. O
Procedimento de Reconhecimento Mútuo (MRP) permite obter autorizações para um
produto em dois ou mais Estados-Membros. Se uma autorização já tiver sido emitida num
Estado da UE, o titular pode solicitar a um ou mais Estados-Membros a emissão de
autorizações idênticas com base no reconhecimento mútuo da autorização de referência.
Este procedimento pretende harmonizar entre os Estados-Membros a avaliação individual
do mesmo conjunto de dados, o que pode resultar em alegações diferentes no rótulo. O
procedimento descentralizado (DCP) tem muitas semelhanças com o MRP e pode ser
utilizado para obter a autorização de introdução no mercado em vários Estados-Membros
em paralelo, se o requerente não possuir a autorização de introdução no mercado para o
medicamento em nenhum país. O procedimento descentralizado baseia-se no
reconhecimento pelas autoridades nacionais de uma primeira avaliação efectuada por um
Estado-Membro. O requerente solicita a um país para se tornar o Estado-Membro de
Referência (RMS) no procedimento, enquanto apresenta um pedido de autorização de
introdução no mercado em todos os países simultaneamente (CE 2001).

1389
 Tabela 6 Procedimentos de autorização de comercialização disponíveis na UE para VMP (EC 2001)
Modelo Avaliação Validade da licença
Procedimento Nacional
Autoridades nacionais competentes Apenas em um país
(NP)
Procedimento Todos os Estados-Membros,
Agência Europeia de Medicamentos (EMA)
Centralizado (CP) Islândia, Noruega e Liechtenstein
Autorização emitida na UE, o titular solicita a
Procedimento de um ou mais outros Estados-Membros a
Reconhecimento emissão de autorizações idênticas com base Dois ou mais Estados-Membros
Mútuo (MCP) no reconhecimento mútuo da autorização de
“referência”
Nenhuma autorização de comercialização
emitida em qualquer país. O requerente
solicita a um país para se tornar o Estado-
Procedimento
Membro de Referência (RMS) no Vários Estados-Membros
Descentralizado (DCP)
procedimento e pede o reconhecimento pelas
autoridades nacionais de uma primeira
avaliação realizada por um Estado-Membro

6.2 VMP e uso em animais produtores de alimentos ou de companhia

Para aumentar a complexidade do VMP, existem as características das espécies animais.

O uso do VMP em animais de companhia é realizado sob a responsabilidade veterinária
com medicamentos veterinários autorizados para doenças específicas na espécie
específica. O “uso off-label”, pretendido como o uso de um VMP em desacordo com o
resumo das características do produto, incluindo o uso indevido e grave abuso do
produto, é permitido nesses animais, assim como o uso de drogas para humanos uso, a
menos que nenhum produto veterinário específico esteja disponível ou seguindo um
sistema em cascata conforme relatado em EMA/CVMP/AWP/237294/2017 (EC 2001;
EMA 2017).

Quando os animais são criados para produzir alimentos destinados ao consumo humano,
ou seja, carne, vísceras, leite, ovos e mel, o foco está no potencial de resíduos
farmacologicamente ativos nos tecidos ou produtos de animais tratados no momento do
abate ou coleta, que pode ser posteriormente ingerido pelo consumidor.

Um VMP não pode ser objeto de uma autorização de introdução no mercado para
administração a espécies produtoras de alimentos, a menos que as substâncias
farmacologicamente ativas que ele contém apareçam na Tabela 1 do Regulamento da
Comissão 37/2010 sobre substâncias farmacologicamente ativas e sua classificação em
relação aos limites máximos de resíduos em alimentos de origem animal (CE 2001; UE
2010). Isso limita a possibilidade de tratamentos terapêuticos em animais produtores de
alimentos às substâncias que foram cuidadosamente avaliadas para serem seguras para
animais e também para consumo humano. Assim, atenção especial deve ser dada aos

1390
produtos destinados ao uso em animais produtores de alimentos, visto que muitas vezes,
mas nem sempre, é necessário fazer um pedido de avaliação de segurança alimentar
humana e MLR (EudraLex Volume 8 2015e). Na UE, todos os pedidos de MLR devem ser
apresentados à EMA, mas os pedidos de autorização de introdução no mercado podem
ser feitos à EMA, ou seja, no caso de Procedimento Centralizado, ou às autoridades
nacionais, ou seja, Procedimento Nacional, conforme relatado acima (CE 2001).

O princípio geral na base de uma definição de MRL para compostos originais e/ou
metabólitos é usar dados de estudos em animais de laboratório para estabelecer uma
ingestão diária aceitável (ADI) dos resíduos de drogas sem riscos para a saúde dos
consumidores. A configuração da ADI é muito preventiva para a saúde humana e inclui
vários fatores de segurança e hipóteses de pior caso. Uma vez estabelecida a ADI, os
MLR de substâncias farmacologicamente ativas são fixados para cada tecido comestível
(carne, vísceras, leite, mel, ovo) de forma que o consumidor possa ingerir alimentos de
origem animal todos os dias sem ultrapassar a ADI e, consequentemente, apresentar
qualquer riscos para sua saúde (EC 2009a).

Em animais destinados à produção de alimentos, não é possível administrar substâncias

farmacologicamente ativas que não estejam listadas na Tabela 1 (UE) No 37/2010 (UE
2010). No entanto, quando são necessários tratamentos particulares com substâncias que
não constam da lista, os animais devem ser excluídos da produção de alimentos
destinados ao consumo humano (EC 2001, 2009a).

Considerando as instalações, os nutracêuticos também administrados em espécies

destinadas à produção de alimentos devem ser listados na Tabela 1 de substâncias
permitidas no Regulamento da Comissão (UE) n.º 37/2010 (UE 2010). Os produtos
naturais botanicamente definidos incluídos na lista são aproximadamente 115, variando
do extrato de Absinthium ao Viscum album e para nenhum deles é exigido um MLR (UE
2010). Um trecho da lista é relatado na Tabela 7.

1391
 Tabela 7 Extrato de alguns compostos naturais listados como substâncias farmacologicamente
ativas publicado na Tabela 1 do Regulamento da Comissão (UE) No 37/2010 (UE 2010). Resíduo
marcador: NA. Espécies de animais: todas as espécies produtoras de alimentos. Não requer MRL.
Tecidos alvo: não aplicável. Classificação terapêutica: Sem registro
Substância farmacologicamente Outras disposições (de acordo com o artigo 14.º, n.º 7, do
ativa Regulamento (CE) n.º 470/2009)
Para uso em medicamentos veterinários homeopáticos preparados de
Adonis Vernalis acordo com farmacopéias homeopáticas em concentrações nos
produtos não superiores a uma parte por cem apenas
Gel e extrato de folha inteira de
Apenas para uso tópico
Aloe vera
Aloes, Barbados e Capae, seu
extrato seco padronizado Sem registro
e suas preparaçõe
Para uso em medicamentos veterinários homeopáticos preparados de
acordo com farmacopéias homeopáticas em concentrações
correspondentes à tintura-mãe e suas diluições. Apenas para uso
Echinacea tópico. Para uso em medicamentos veterinários homeopáticos
preparados de acordo com farmacopeias homeopáticas em
concentrações correspondentes nos produtos não superiores a uma
parte por dez apenas
Ginseng, extratos padronizados e
Sem registro
suas preparações
Juniperi fructus Sem registro
Lauri folii aetheroleum Sem registro
Lauri Fructus Sem registro
Lectina extraída do feijão
Apenas para uso oral
vermelho Phaseolus vulgar
Medicago sativa extractum Apenas para uso tópico
Myristicae aetheroleum Para uso apenas em animais recém-nascidos
Piceae turiones recentes
Apenas para uso oral
extractum
Para uso em medicamentos veterinários homeopáticos preparados de
Prunus laurocerasus acordo com farmacopéias homeopáticas em concentrações nos
produtos não superiores a uma parte por mil
Sinapis Nigrae Sem registro
Para uso em medicamentos veterinários homeopáticos preparados de
Solidago virgaurea acordo com farmacopéias homeopáticas em concentrações
correspondentes à tintura-mãe e diluições desta apenas
Para uso oral apenas em doses até o equivalente a 0,1 mg de
Strychni
estricnina / kg de peso corporal
Substâncias usadas em Todas as substâncias utilizadas em medicamentos homeopáticos
medicamentos veterinários veterinários, desde que a sua concentração no produto não exceda
homeopáticos uma parte por dez mil.

6.2.1 – Medicamentos veterinários homeopáticos

Os produtos naturais definidos botanicamente também podem ser usados como

“medicamentos veterinários homeopáticos”. Um esquema de registro simplificado foi
implementado para remédios homeopáticos, que são colocados no mercado sem
alegações médicas e onde há diluição suficiente para garantir a segurança do produto.
1392
Apenas os medicamentos homeopáticos veterinários que satisfaçam todas as seguintes
condições podem ser sujeitos a um procedimento de registo simplificado especial:

• São administrados por uma via descrita na Farmacopeia Europeia ou, na sua ausência,
pelas farmacopeias atualmente utilizadas oficialmente nos Estados-Membros

• Nenhuma indicação terapêutica específica aparece na rotulagem do medicamento

veterinário ou em qualquer informação relacionada com o mesmo

• Existe um grau de diluição suficiente para garantir a segurança do medicamento. Em

particular, o medicamento não deve conter mais do que uma parte por 10.000 da tintura
mãe (CE 2001)

Os medicamentos homeopáticos podem ser administrados a animais de companhia sob a

responsabilidade de um veterinário. Em animais destinados à produção de alimentos, a
administração de medicamentos veterinários homeopáticos é permitida se os constituintes
ativos aparecerem na Tabela 1 do Regulamento da Comissão (UE) n.º 37/2010 (UE
2010).

7. Comentários finais e orientações futuras

O substantivo “nutracêutico” é a união das palavras “nutrição” e “farmacêutico”, e as
substâncias nutracêuticas podem ser consideradas alimentos para animais e
medicamentos. Em qualquer caso, eles são usados para promover a promoção da saúde.
A complexidade para obter uma autorização de comercialização para nutracêuticos está
relacionada à definição de sua intenção de uso, ou seja, matéria-prima ou aditivo
alimentar ou VMPs. Uma vez definida a intenção, as diretrizes regulatórias da UE são
muito detalhadas, embora complexas. Eles estão livre e facilmente acessíveis em sites
institucionais (por exemplo, EFSA, EMA, EUR-Lex, etc.) pelo requerente. Assim,
atualizações regulares dos produtos autorizados ou permitidos estão disponíveis.

Referências
COPA-COGECA/FEFAC (2016) EU Code of good labelling practice for compound feed for food producing animals.
https://www.fefac.eu/files/69688.pdf
de Godoy MRC, Kerr KR, Fahey GC (2013) Alternative dietary fiber sources in companion animal nutrition. Nutrients
5:3099–3117
Domeneghini C, Di Giancamillo A, Arrighi S et al (2006) Gut-trophic feed additives and their effects upon the gut
structure and intestinal metabolism. State of the art in the pig, and perspectives towards humans. Histol Histopathol
21:273–283
EC (2001) Directive 2001/82/EC of the European Parliament and of the Council of 6 November 2001 on the
Community code relating to veterinary medicinal products (OJ L 311, 28.11.2001, p 1)
EC (2002) Regulation (EC) No 178/2002 of the European Parliament and of the Council of 28 January 2002 laying
down the general principles and requirements of food law, establishing the European Food Safety Authority and laying
down procedures in matters of food safety (OJ L 31, 1.2.2002, p 1)
EC (2003a) Regulation (EC) No. 1831/2003 of the European Parliament and of the Council of 22 September 2003 on
additives for use in animal nutrition (OJ L 268, 18.10.2003, p 29)

1393
 EC (2003b) Regulation (EC) No 1829/2003 of the European Parliament and of the Council of 22 September 2003 on
genetically modified food and feed (OJ L 268, 18.10.2003, p 1)
EC (2005) Regulation (EC) No 183/2005 of the European Parliament and of the Council of 12 January 2005 laying
down requirements for feed hygiene (OJ L 35, 8.2.2005, p 1)
EC (2008a) Commission Directive 2008/38/EC of 5 March 2008 establishing a list of intended uses of animal
feedingstuffs for particular nutritional purposes (OJ L 62, 6.3.2008, p 9)
EC (2008b) Commission Regulation (EC) No 429/2008 of 25 April 2008 on detailed rules for the implementation of
Regulation (EC) No 1831/2003 of the European Parliament and of the Council as regards the preparation and the
presentation of applications and the assessment and the authorisation of feed additives
EC (2009a) Regulation (EC) No 470/2009 of the European Parliament and of the Council of 6 May 2009 laying down
Community procedures for the establishment of residue limits of pharmacologically active substances in foodstuffs of
animal origin, repealing Council Regulation (EEC) No 2377/90 and amending Directive 2001/82/EC of the European
Parliament and of the Council and Regulation (EC) No 726/2004 of the European Parliament and of the Council (OJ L
152, 16.6.2009)
EC (2009b) Regulation (EC) No 767/2009 of the European Parliament and of the Council of 13 July 2009 on the
placing on the market and use of feed, amending European Parliament and Council Regulation (EC) No 1831/2003 and
repealing Council Directive 79/373/EEC, Commission Directive 80/511/EEC, Council Directives 82/471/EEC,
83/228/EEC, 93/74/EEC, 93/113/EC and 96/25/EC and Commission Decision 2004/217/EC (OJ L 229, 1.9.2009, p 1).
ECC (1990) Council Directive of 26 March 1990 laying down the conditions governing the preparation. In: placing on
the market and use of medicated feedingstuffs in the Community (90/167/EEC)
EFSA (2017a) Guidance on the assessment of the safety of feed additives for the target species.
https://efsa.onlinelibrary.wiley.com/doi/epdf/10.2903/j.efsa.2017.5021
EFSA (2017b) Guidance on the assessment of the safety of feed additives for the consumer.
https://efsa.onlinelibrary.wiley.com/doi/epdf/10.2903/j.efsa.2017.5022
EFSA (2017c) Guidance on the identity, characterization and conditions of use of feed additives.
https://efsa.onlinelibrary.wiley.com/doi/epdf/10.2903/j.efsa.2017.5023
EFSA (2018a) Guidance on the characterization of microorganisms used as feed additives or as production organisms.
https://efsa.onlinelibrary.wiley.com/doi/epdf/10.2903/j.efsa.2018.5206
EFSA (2018b) Guidance on the assessment of the efficacy of feed additives.
https://efsa.onlinelibrary.wiley.com/doi/epdf/10.2903/j.efsa.2018.5274
EMA (2017) EMA/CVMP/AWP/237294/2017, Committee for Medicinal Products for Veterinary Use (CVMP), Reflection
paper on off-label use of antimicrobials in veterinary medicine in the European Union, Draft, 25 July 2017
EU (2010) Commission Regulation (EU) No 37/2010 of 22 December 2009 on pharmacologically active substances
and their classification regarding maximum residue limits in foodstuffs of animal origin (OJ L 15, 20.1.2010)
EU (2011) Commission Recommendation of 14 January 2011 establishing guidelines for the distinction between feed
materials, feed additives. In: biocidal products and veterinary medicinal products (2011/25/EU)
EU (2013) Commission Regulation (EU) No 68/2013 of 16 January 2013 on the Catalogue of feed materials (OJ L 29,
30.1.2013, p 1)
EU (2017) Commission Regulation (EU) 2017/1017 of 15 June 2017 amending Regulation (EU) No 68/2013 on the
Catalogue of Feed Materials
EudraLex (2015a) Volume 4—“The rules governing medicinal products in the European Union”, Guidelines for good
manufacturing practices for medicinal products for human and veterinary use. In EudraBook V1 May 2015/EudraLex V30
January 2015. Compendium of EU pharmaceutical law. https://ec.europa.eu/health/documents/eudralex/vol-4_en
EudraLex (2015b) Volume 5—“The rules governing medicinal products in the European Union”, EU pharmaceutical
legislation for medicinal products for veterinary use. In EudraBook V1 May 2015/EudraLex V30 January 2015.
Compendium of EU pharmaceutical law. https://ec.europa.eu/health/documents/eudralex/vol-5_en
EudraLex (2015c) Volume 6—“The rules governing medicinal products in the European Union” Notice to applicants
and regulatory guidelines for medicinal products for veterinary use. In EudraBook V1 May 2015/EudraLex V30 January
2015. Compendium of EU pharmaceutical law. https://ec.europa.eu/health/documents/eudralex/vol-6_en
EudraLex (2015d) Volume 7—“The rules governing medicinal products in the European Union” Scientific guidelines for
medicinal products for veterinary use. In EudraBook V1 May 2015/EudraLex V30 January 2015. Compendium of EU
pharmaceutical law. https://ec.europa.eu/health/documents/eudralex/vol-7_en
EudraLex (2015e) Volume 8—“The rules governing medicinal products in the European Union” Maximum residue
limits. In EudraBook V1 May 2015/EudraLex V30 January 2015. Compendium of EU pharmaceutical law.
https://ec.europa.eu/health/documents/eudralex/vol-8_en
EudraLex (2015f) Volume 9—“The rules governing medicinal products in the European Union” Guidelines for
pharmacovigilance for medicinal products for human and veterinary use. In EudraBook V1 May 2015/EudraLex V30
January 2015. Compendium of EU pharmaceutical law. https://ec.europa.eu/health/documents/eudralex/vol-9_en
European Union (2018) Register of feed additives pursuant to Regulation (EC) No 1831/2003 Annex I: List of additives.
https://ec.europa.eu/food/sites/food/files/safety/docs/animal-feed-eu-reg-comm_register_feed_additives_1831-03.pdf
FEDIAF (2011) Code of good labelling practice for pet food. https://www.pfma.org.uk/_assets/docs/Final%20Code
%20of%20Good%20Labelling%20Practice%20Oct%202011.pdf
Franz Ch, Bauer R, Carle R, Tedesco D, et al (2005). Study on the assessment of plants/herbs, plant/herb extracts and
their naturally or synthetically produced components as “additives” for use in animal production.
CFT/EFSA/FEEDAP/2005/01. https://efsa.onlinelibrary.wiley.com/doi/pdf/10.2903/sp.efsa.2007.ZN-001
1394
 Garg RC (2016) Fenugreek: multiple health benefits. In: Gupta RC (ed) Nutraceutical efficacy, safety and toxicity.
Academic/Elsevier, Amsterdam
Rafińska K, Pomastowski P, Wrona O et al (2017) Medicago sativa as a source of secondary metabolites for
agriculture and pharmaceutical industry. Phytochem Lett 20:520–539

1395
 Diretrizes regulatórias para nutracêuticos e
suplementos alimentares na Índia
P. K. Gupta

Resumo

O uso de nutracêuticos e suplementos para ração animal é muito comum porque os

animais nem sempre podem obter nutrientes suficientes das refeições regulares que os
proprietários ou fazendeiros fornecem. Assim, os suplementos alimentares fornecem
nutrientes essenciais que são amplamente usados para manter a boa saúde dos animais.
Em alguns casos, se um animal não tiver alguma nutrição específica em sua dieta, ele
pode não crescer adequadamente. Na Índia, o setor pecuário sozinho contribui com
quase 25,6% do valor da produção a preços atuais do valor total da produção no setor de
Agricultura, Pesca e Silvicultura. A Índia é o terceiro maior produtor de ovos, depois da
China e dos Estados Unidos, e o quarto maior produtor de frangos, atrás da China, Brasil
e Estados Unidos. A contribuição geral do setor pecuário no PIB total foi de quase 4,11%
durante 2012–2013. A indústria de alimentação animal lida com alimentos dados a
animais nos setores de gado, aves e aquicultura como parte da pecuária sob o controle
do Departamento de Pecuária, Laticínios e Pesca do Ministério da Agricultura. Embora a
indústria de ração animal na Índia tenha quase cinco décadas, essa indústria ainda está
em sua infância, com alta dependência de importações. No entanto, a indústria é muito
lucrativa, com um grande número de participantes nacionais e várias multinacionais
estrangeiras se esforçando para entrar no mercado. Recentemente, no interesse do
público, a Lei de Segurança Alimentar de 2006 com regulamentação no ano de 2017
deverá ser implementada em breve. A lei também tem um compromisso com a Comissão
do Codex Alimentarius, Organização Mundial do Comércio (Direitos e Obrigações
Básicas, sob o SPS, junto com suas medidas sanitárias ou fitossanitárias de acordo com
seus padrões, diretrizes ou recomendações internacionais. Impacto da Lei de Segurança
Alimentar de 2006) ainda precisa ser visto após sua implicação no ano de 2018.
Palavras-chave: Nutracêuticos · Fitoquímicos · Produtos botânicos · Suplementos
dietéticos: probióticos · Prebióticos · Antioxidantes · Misturas minerais · Alimentos
funcionais · Medicina tradicional · Regulamentação · Alimentos saudáveis · Medicina
veterinária · Censo pecuário

1396
1. Introdução
Desde os tempos antigos, a humanidade fabrica medicamentos a partir de extratos de
materiais naturais e os utiliza para diversos fins. Em 1989, o Dr. Stephen De Felice,
fundador da Foundation for Innovation in Medicine, cunhou o termo “nutracêuticos” (a
combinação de nutrição e farmacêutico), que se tornou uma palavra recentemente aceita
no Dicionário Oxford. Os nutracêuticos já percorreram um longo caminho desde que uma
nova tendência no cuidado de animais de companhia surgiu na década de 1990, junto à
tendências semelhantes no setor humano. Com a aprovação da Lei de Saúde e Educação
de Suplementos Dietéticos de 1994, a definição de nutracêuticos foi expandida para
incluir vitaminas, minerais, ervas e outros botânicos, aminoácidos e substâncias dietéticas
que os humanos usam como suplementos (Stauffer 1999). O termo nutracêutico não é
bem aceito nos sistemas regulatórios globais, enquanto o termo suplementos dietéticos é.
A relevância e o impacto dos nutracêuticos tornaram-se mais proeminentes à medida que
a geração atual começa a se concentrar mais na saúde preventiva do que nunca (Manoj
2015).

Na Índia, o uso de suplementos alimentares para animais é muito comum. Esses

suplementos fornecem nutrientes essenciais que são amplamente usados para manter a
boa saúde dos animais. Em alguns casos, se um animal não tiver uma nutrição específica
em sua dieta, ele pode não crescer adequadamente. Os valores nutricionais dos
alimentos para animais são influenciados não apenas por seu conteúdo de nutrientes,
mas também por muitos outros fatores, como higiene, digestibilidade e efeito na saúde
intestinal. Historicamente, na Índia, várias leis e regulamentações prescreviam vários
padrões relativos a alimentos, aditivos alimentares, contaminantes, corantes alimentares,
conservantes e rotulagem. Este capítulo discute resumidamente as diretrizes regulatórias
para nutracêuticos animais e suplementos alimentares relevantes para a Índia.

2. Antecedentes históricos
A Índia tem uma das economias de crescimento mais rápido do mundo e está entre os
dez destinos mais populares para investimento. As recentes reformas de política foram
projetadas para acelerar o ritmo do investimento estrangeiro e, embora entrar no mercado
ainda seja um processo complexo e de várias etapas, o potencial da categoria de
alimentos funcionais é estimulante. Atualmente, apenas uma pequena quantidade de
produtos agrícolas perecíveis é processada (~ 2%) em comparação com 80% nos
Estados Unidos. A multiplicidade de formuladores de políticas de regulamentação de

1397
alimentos e agências de fiscalização prevalecentes em diferentes setores da indústria de
alimentos tem contribuído para uma confusão considerável entre consumidores,
produtores, varejistas e empresas e é prejudicial para o crescimento das indústrias de
alimentos funcionais e nutracêuticos (Keservani et al. 2014; Anon 2018).

Em meados da década de 1990, as leis do setor de processamento de alimentos para a

saúde pública foram enquadradas em uma verdadeira grade de regulamentação,
incluindo uma infinidade de leis estaduais e nacionais. Em 1998, o Conselho de Comércio
e Indústria do Primeiro-Ministro nomeou um grupo subjetivo sobre as indústrias de
alimentos e agricultura, que recomendou uma legislação unificada sob uma única
autoridade reguladora de alimentos. Peritos públicos e membros do Comitê Permanente
do Parlamento encorajaram a convergência das leis alimentares atuais com autoridades
regulatórias únicas responsáveis pela saúde pública e segurança alimentar na Índia. Além
disso, integrando todos os atos e ordens relativos aos alimentos e eliminando os controles
multiníveis e multi departamentais sobre os alimentos, foi dada ênfase especial aos
nutracêuticos e alimentos funcionais, um segmento mal definido com potencial crescente
e implicações para a saúde do consumidor. Em 2002, uma associação nacional sem fins
lucrativos foi encarregada de determinar que cada empresa de fabricação de alimentos
poderia fornecer suporte científico para seus produtos, a fim de proteger os consumidores
e promover e defender um ambiente regulatório favorável à indústria em geral, bem como
para a proteção do consumidor. Em 2003, um relatório de um grupo de especialistas do
Ministério da Saúde indicou a necessidade de criar categorias nas atuais leis de alimentos
para regulamentar alimentos funcionais e suplementos dietéticos. Foi recomendado que
deveria haver testes de segurança obrigatórios para esses produtos. Na Índia, os padrões
voluntários são desenvolvidos pelo Bureau of Indian Standards and National Standards,
que é composto por representantes de vários grupos de partes interessadas do setor de
alimentos. Em 2005, várias comissões, incluindo a Comissão Permanente do Parlamento
sobre Agricultura, enfatizaram a necessidade de um único órgão regulador e de uma lei
integrada. Finalmente, o projeto de lei de padrão de segurança alimentar indiano de 2005
foi sancionado e prometia um grande impacto na indústria indiana de processamento de
alimentos. O Ato Indiano de Segurança Alimentar e Padrão entrou em vigor em 2006 com
dois objetivos principais: introduzir um estatuto único relacionado aos alimentos e fornecer
o desenvolvimento científico da indústria de processamento de alimentos. Esses padrões
tratam basicamente de certificação de produto, qualidade, certificação e teste de sistema
e questões do consumidor. Esforços estão sendo feitos para combinar os padrões
indianos com os internacionais (Keservani et al. 2014; Anon 2006a).

1398
3. Contribuição da Pecuária no PIB
O setor pecuário sozinho contribui com quase 25,6% do valor da produção a preços
correntes do valor total da produção nos setores de agricultura, pesca e silvicultura. A
contribuição geral do setor pecuário no PIB total foi de quase 4,11% durante 2012–2013.
De acordo com os registros do Governo da Índia, o censo pecuário começou no país no
ano de 1919. O censo pecuário em 2012 foi o 19º na série. Os setores de pecuária e
pecuária são críticos para a economia rural, especialmente para pequenos agricultores e
agricultores marginais. Eles não apenas contribuem para sua renda, mas também são seu
melhor seguro contra qualquer calamidade natural. A população total de gado composta
por bovinos, búfalos, ovelhas, cabras, porcos, cavalos e póneis, mulas, burros, camelos,
mithun e iaques no país era de 512,05 milhões em 2012. A população total de gado
diminuiu cerca de 3,33% desde o censo anterior em 2007. A população total de bovinos
(bovinos, búfalos, mithun e iaques) era de 299,9 milhões em 2012, o que mostra uma
queda de 1,57% em relação ao censo anterior. O total de ovinos no país era de 65,06
milhões em 2012, uma queda de cerca de 9,07% em relação ao censo de 2007. O
número total de suínos no país diminuiu 7,54% em relação ao censo anterior, e a
população caprina total diminuiu 3,82% em relação ao censo anterior. O total de cabras
no país era de 135,17 milhões, e de porcos no país era de 10,29 milhões em 2012. A
população de cavalos e pôneis aumentou 2,08% em relação ao censo anterior e o total de
cavalos e pôneis no país foi de 0,62 milhões em 2012. Total de mulas no país
aumentaram 43,34% em relação ao censo anterior, e o total para o país era de 0,19
milhão em 2012. A população de camelos diminuiu 22,48% em relação ao censo anterior,
e o total de camelos no país era de 0,4 milhão em 2012. Os a população total de burros
no país diminuiu 27,22% em relação ao censo anterior, e o total no país era de 0,32
milhões em 2012.

No 19º censo pecuário, 37,28% eram bovinos, 21,23% búfalos, 12,71% ovinos, 26,40%
caprinos e 2,01% suínos. O último censo revelou 37,58%, 19,89%, 13,50%, 26,53% e
2,10%. Mithun, iaques e cavalos representavam 0,37% do gado total. Além disso, há um
bom número de cães, elefantes e coelhos. A população de cães diminuiu de 19,08
milhões em 2007 para 11,67 milhões em 2012, uma diminuição de 38,85%. A população
de coelhos aumentou de 0,424 milhões em 2007 para 0,592 milhões em 2012, um
aumento de 39,55%. A população de elefantes aumentou drasticamente de cerca de
1.000 para 22.000 em termos absolutos. Considerando a enorme população animal, a
Índia tem suprimento suficiente de produtos nutricionais. No entanto, a demanda e o

1399
tamanho do mercado não são proporcionais à população de gado, especialmente em
bovinos (Anon 2014).

No que diz respeito à indústria avícola, a Índia é o terceiro maior produtor de ovos, depois
da China e dos Estados Unidos, e o quarto maior produtor de frangos, atrás da China,
Brasil e Estados Unidos. A população avícola total no país aumentou 12,39% em relação
ao censo anterior, e a avicultura total no país era de 729,2 milhões em 2012. A avicultura
é o setor mais organizado da pecuária, que vale bilhões de dólares. O crescimento é de
6–8% nas poedeiras e 10–12% nos frangos por ano contra o crescimento da agricultura
como um todo, que é de cerca de 2,5% (Anon 2016).

4. Mercado Indiano e Nutrição para Saúde Animal: Tendências Atuais

Indianos, egípcios, chineses e sumérios são apenas algumas civilizações que forneceram
evidências sugerindo que os alimentos podem ser usados com eficácia como remédio
para tratar e prevenir doenças. Ayurveda, a antiga ciência da saúde indiana de 5.000
anos, mencionou os benefícios dos alimentos para fins terapêuticos. Como tal, esses
nutracêuticos e alimentos funcionais para uso animal podem ser categorizados da
seguinte forma:

(a) Substâncias que estabeleceram funções nutricionais, como vitaminas, minerais,

aminoácidos, ácidos graxos, etc.

(b) Fitoterápicos/fitoquímicos: ervas ou produtos botânicos

(c) Suplementos dietéticos: probióticos, prebióticos, antioxidantes, enzimas, etc.

A produção da indústria é de cerca de três milhões de toneladas, o que representa

apenas 5% do potencial total, e as exportações de rações não são muito altas. A indústria
de rações possui modernas instalações computadorizadas e equipamentos de última
geração para procedimentos analíticos e formulação de ração de menor custo, além de
utilizar a mais recente tecnologia de fabricação. Na Índia, a maior parte do trabalho de
pesquisa sobre rações animais é prática e enfoca o uso de subprodutos, a atualização de
ingredientes e o aumento da produtividade.

O país entrou em um período de liberalização e isso deve influenciar a indústria pecuária.

O consumo per capita de leite, ovos e carne de frango aumentará. As indústrias indianas
de rações funcionais e de rações estão passando por uma fase de crescimento muito
empolgante. Estima-se que os nutracêuticos/suplementos alimentares para bovinos estão
crescendo a uma taxa composta de crescimento anual (CAGR) de 6%, enquanto os

1400
nutracêuticos para aves estão crescendo a uma taxa CAGR de 9%. O mercado de
nutrição para saúde animal é impulsionado por estimulantes do leite, como suplementos
de cálcio, seguidos por misturas de minerais e suplementos de gordura. Os suplementos
de cálcio e misturas minerais contribuem com 85% do mercado total de nutracêuticos no
segmento bovino, e a gordura derivada constitui 4%. Probióticos, pré-mistura de vitaminas
e outros suplementos constituem o saldo de 11%. Da mesma forma, os suplementos de
aminoácidos e aglutinantes de toxinas constituem 58% do total de nutracêuticos aviários,
seguidos por pré misturas de vitaminas 17%, promotores de crescimento 6% e enzimas e
probióticos 6% (Balasubramaniam 2013).

A entrada de novos participantes é facilitada pela falta de regulamentação, bem como

pela aplicação indevida de leis de segurança alimentar. Existem cerca de 450 empresas
de saúde animal na Índia. Estima-se que cerca de 200 deles estão engajados na
comercialização ou fabricação de produtos nutracêuticos para bovinos, caninos, aves e
ovinos. Existem cerca de 12 empresas multinacionais operando na Índia nos segmentos
de saúde e nutrição animal. Isso levou a um alto poder de barganha para os
compradores, reduzindo os preços dos nutracêuticos e, portanto, margens estreitas. Com
o aumento da classe média e da demanda por suplemento protéico, há um aumento na
demanda por leite, que é a fonte da proteína. No ano de 2015-2016, estimou-se que a
demanda para o mercado de nutracêuticos crescerá até 1300 da moeda indiana em 2017-
2018 (Balasubramaniam 2013).

5. Visão geral das regulamentações de outros países

Como em alguns outros países, a legislação indiana não atribui nenhum status legal
específico aos nutracêuticos. Os nutracêuticos têm diferentes definições legais,
predominantemente baseadas em dois aspectos:

1. Origem ou fonte

2. Benefício(s) que pode(m) fornecer ao consumidor

A nomenclatura dos nutracêuticos também varia em diferentes países (Tabela 3): os

Estados Unidos os descrevem como “suplementos dietéticos”, no Canadá eles são
chamados de “produtos naturais para a saúde” e o Japão os lista como “alimentos para
usos específicos para a saúde (FOSHU).” Essas definições podem ser gerais ou
específicas. Existem definições e regulamentações distintas para suplementos dietéticos
e alimentos funcionais nos Estados Unidos, Canadá e Europa, enquanto no Japão, tanto
os suplementos dietéticos quanto os alimentos funcionais são regidos pelo mesmo
1401
conjunto de regulamentações. Os Estados Unidos e o Canadá listam os atributos que um
produto deve ter para ser denominado nutracêutico, enquanto a Europa e o Japão
fornecem apenas diretrizes gerais sobre as propriedades que um produto deve ter para
ser denominado como tal. Os medicamentos tradicionais e fitoterápicos estão incluídos na
definição de suplementos dietéticos/nutricionais no Canadá. O Japão não menciona
medicamentos fitoterápicos tradicionais sob o FOSHU, mas os Estados Unidos incluem
ervas e botânicos em sua definição. A definição indiana para saúde humana (de acordo
com a Lei de Segurança e Segurança Alimentar de 2006) especifica os ingredientes que
um produto deve ter, e as propriedades gerais dos nutracêuticos derivados de
medicamentos tradicionais foram excluídas desta definição. A Tabela 3 resume
brevemente as diferenças nas regulamentações em diferentes países.

Tabela 3 Resumo das diferenças nas regulamentações em diferentes países

País Regulamento
Estados A FDA regulamenta os produtos acabados de suplementos dietéticos e os ingredientes
Unidos dietéticos. O FDA regula os suplementos dietéticos sob um conjunto diferente de regulamentos
da do que aqueles que cobrem alimentos e medicamentos “convencionais”. De acordo com a Lei
América de Saúde e Educação de Suplementos Alimentares de 1994 (DSHEA) (FDA 2017)
Na legislação alimentar da UE, não existe um quadro regulamentar para “alimentos funcionais”
ou “nutracêuticos”. As regras são numerosas e dependem da natureza do género alimentício:
(a) Se for feita uma alegação que implique um benefício medicinal para um produto
nutracêutico, o produto terá de cumprir os requisitos regulamentares para medicamentos, no
que diz respeito à segurança, eficácia, testes de qualidade e procedimentos de autorização de
União comercialização; (b) as alegações relativas aos efeitos benéficos dos nutracêuticos só podem
Europeia ser “alegações de saúde” e não “alegações medicinais”; (c) as estruturas regulatórias de
(UE) PARNUTS (alimentos preparados para fins nutricionais específicos) ou alimentos dietéticos e de
suplementos alimentares podem ser aplicáveis a alguns “alimentos funcionais”. O Regulamento
de Novos Alimentos se aplica a “alimentos funcionais” que são “novos”. Mais precisamente, os
nutracêuticos são regulamentados como “suplementos alimentares”. Os regulamentos são
regidos pela Autoridade Europeia para a Segurança dos Alimentos (EFSA) (Coppens et al.
2006)
De acordo com o Regulamento de Produtos Naturais de Saúde, que entrou em vigor em 1o de
janeiro de 2004, os produtos naturais para a saúde (NHP) são definidos como: (a) vitaminas e
minerais; (b) remédios à base de ervas; (c) medicamentos homeopáticos; (d) medicamentos
tradicionais, como medicamentos tradicionais chineses; (e) probióticos, (f) outros produtos como
Canadá
aminoácidos e ácidos graxos essenciais NHP devem ser seguros para uso como produtos sem
receita e não precisam de receita para serem vendidos. A Direcção de Produtos de Saúde
Natural (NHPD) mudou o seu nome para Direcção de Produtos de Saúde Naturais e Não
Prescritos (NNHPD) (Anon 2015)
Os alimentos funcionais/nutracêuticos são regulamentados por “alimentos para usos específicos
para a saúde” (FOSHU) e devem ser aprovados pelo Ministério da Saúde e Bem-Estar da
Japão Família após a apresentação de evidências científicas abrangentes para apoiar a alegação dos
alimentos quando eles são consumidos como parte de uma dieta normal (Yamada et al. 2008).
De acordo com a Lei FOSHU, o alimento funcional pode ter três funções: (a) nutrição, (b)
satisfação sensorial e (c) melhorias fisiológicas

1402
 Tabela 3 Resumo das diferenças nas regulamentações em diferentes países
País Regulamento
Na Austrália, os medicamentos/alimentos são referidos como “medicamentos complementares”
e são regulamentados como medicamentos pela Lei de Bens Terapêuticos de 1989, que foi
implementada em 1991. A lei é regida pelo Departamento de Saúde e Envelhecimento e a
Austrália
definição abrange medicamentos fitoterápicos, vitaminas e minerais, suplementos nutricionais,
medicamentos homeopáticos, produtos de aromaterapia e medicamentos tradicionais (Anon
2013)
Os nutracêuticos são regulamentados pelo termo suplementos dietéticos biologicamente ativos
(BADS). A definição abrange nutracêuticos (vitaminas, minerais, aminoácidos, fibras dietéticas)
e parafarmacêuticos (bioflavonóides, alcalóides, óleos essenciais, polissacarídeos). De acordo
Rússia
com a regra, os BADS são “alimentos com eficácia clinicamente comprovada”. Eles são
recomendados profilaticamente e para a prevenção de efeitos colaterais induzidos por terapia
farmacêutica e para a obtenção da remissão completa (Yuliva 2014)
Como em outros países, a legislação indiana não atribui nenhum status legal específico aos
nutracêuticos. Os regulamentos do governo da Índia para uso público de nutracêuticos incluem
Índia a Lei de Padrões e Segurança Alimentar (FSSA), que foi aprovada em 2006, e os
Regulamentos de 2017, para implementação pelo Ministério da Saúde e Bem-Estar Familiar e
ainda não foi implementado (Anon 2006b)

6. Regulamentos
As leis alimentares em todos os países são a base para os regulamentos de todos os
tipos de alimentos, incluindo alimentos saudáveis, suplementos dietéticos, alimentos
funcionais e nutracêuticos, para os quais diretrizes/regulamentos específicos são
formulados para regular a fabricação, venda e qualidade do produto a ser usava.
Conforme indicado anteriormente, a legislação indiana não atribui realmente nenhum
status legal específico aos alimentos/alimentos usados para animais, exceto de vez em
quando alguns requisitos/especificações básicos para a regulamentação de misturas
minerais para suplementar rações animais. Recentemente, leis para vários alimentos para
uso humano foram promulgadas e serão discutidas posteriormente neste capítulo.

6.1 Regulamentações de Misturas Minerais para Suplementação de Alimentos para

Animais

A alimentação animal (incluindo aves e aquicultura) desempenha um papel vital na cadeia

alimentar, uma vez que a alimentação animal é um dos contribuintes mais importantes
para garantir proteína animal segura, abundante e acessível. O crescimento populacional
incessante na Índia e a acessibilidade crescente levaram a um aumento na demanda por
proteína animal. A indústria de alimentação animal lida com alimentos dados a animais no
setor de gado, aves e aquicultura como parte da pecuária sob o controle do Departamento
de Pecuária, Laticínios e Pesca, Ministério da Agricultura (Anon 2009). A indústria de
ração indiana atende predominantemente ao segmento de rações para bovinos, ovinos e
caprinos, aves e aquicultura. Embora a indústria de ração animal na Índia tenha quase
cinco décadas, a indústria ainda está em sua infância, com alta dependência de
1403
importações. No entanto, a indústria é muito lucrativa, com um grande número de
participantes nacionais e várias multinacionais estrangeiras se esforçando para entrar no
mercado.

O crescimento do mercado indiano de ração animal é impulsionado por um aumento na

demanda por proteína animal, um aumento no consumo de produtos lácteos e o
crescimento da população de gado. No entanto, existem vários fatores que restringem o
crescimento do mercado, incluindo altas taxas de importação de ingredientes para rações,
regime regulatório vago, volatilidade nos preços das matérias-primas e surto frequente de
doenças. O mercado é caracterizado por tendências líderes, como o advento de
ingredientes não tradicionais para rações, rações geneticamente modificadas para
animais e inovação tecnológica na indústria (Anon 2017a).

A venda de ração para gado e misturas minerais na Índia é regulamentada pelo

Regulamento de Fabricação e Ordem de Venda (Anon 2009), de acordo com os termos e
condições de um certificado de registro emitido pela Autoridade de Registro. Nenhuma
pessoa deve exercer a atividade de fabricação, venda ou distribuição de qualquer forma
de ração para gado e misturas minerais, exceto sob e de acordo com os termos e
condições de um certificado de registro emitido pela autoridade de registro. As
especificações para vários suplementos alimentares são estabelecidas pelo Bureau of
Indian Standards (BIS 1983, 1992, 2002).

Desde que, ainda, uma pessoa que, no início deste pedido, estava realizando o negócio
de fabricação, venda ou distribuição de ração para gado e misturas minerais deve obter
um registro no período de 3 meses a partir da data de início deste pedido. Todo titular de
um certificado de registro, que fabrica, vende ou distribui ração para gado e misturas
minerais, deve estar em conformidade com as especificações, fornecidas de tempos em
tempos pelo comitê de especialistas em ração e mistura mineral constituído pelo
secretário (ADF), Departamento de Pecuária, Laticínios e Pesca, Governo da Índia.
Seguindo o conselho de um comitê de especialistas, o secretário (ADF) pode emitir as
alterações necessárias conforme necessário (Anon 2017a, b, c).

A última década viu um crescimento saudável na Índia para alimentos, suplementos

alimentares e cresceu com CAGR mais alto (6–12%), os produtos farmacêuticos
cresceram em torno de 15%. Nutracêuticos e suplementos alimentares oferecem grandes
oportunidades para a Índia com sua enorme população humana e animal e necessidade
de nutrição e acompanharão o crescimento de alimentos, rações e nutrição porque os
fazendeiros e criadores se tornam cada vez mais preocupados com a saúde de seus
rebanhos. Parece provável então que o mercado de nutracêuticos e suplementos
1404
alimentares na Índia experimentará um crescimento exponencial. As estruturas
regulatórias em todo o mundo foram estabelecidas principalmente para atingir o objetivo
de garantir a segurança alimentar e a proteção dos interesses do consumidor. Os
regulamentos para nutracêuticos no mercado incluem o Food Safety and Standards Act
(FSSA), que foi aprovado em 2006, e os regulamentos de 2017 pelo Ministério da Saúde
e Bem-estar da Família, que podem ser implementados até o final de 2018 (Anon 2006a,
b, 2017b). A aprovação dessa lei na Índia é um primeiro passo significativo, mas muito
mais precisa acontecer para eliminar a confusa sobreposição com várias leis e
regulamentos antigos. Assim, a Lei FSS foi formulada com o objetivo de estabelecer um
ponto de referência único para todas as questões relacionadas com a regulamentação e
supervisão da segurança e normas alimentares.

6.2 Compromisso com os Padrões Internacionais

O FSSAI também é o Ponto de Contato Nacional do Codex (NCCP) da Índia e funciona

como uma interface entre a Comissão do Codex Alimentarius (CAC) e a Índia como país
membro. O FSSAI adotou alguns dos padrões internacionais de alimentos do Codex
Alimentarius que contribuem para a segurança, qualidade e equidade desse comércio
internacional de alimentos (Anon 2017b).

A Índia, como país-membro, tem um compromisso com a Organização Mundial do

Comércio. Consequentemente, o Artigo 2 (Direitos e Obrigações Básicas) do Acordo SPS
afirma que “Os Membros devem garantir que qualquer medida sanitária ou fitossanitária
seja aplicada apenas na medida necessária para proteger a vida ou saúde humana,
animal ou vegetal, é baseada em princípios científicos e é não mantida sem evidência
científica suficiente.” De acordo com o mesmo acordo, o artigo 3 exige “para harmonizar
as medidas sanitárias e fitossanitárias da forma mais ampla possível, os Membros devem
basear suas medidas sanitárias ou fitossanitárias em normas, diretrizes ou
recomendações internacionais, quando existam, exceto se de outra forma disposto neste
Acordo, em particular no parágrafo 3 do artigo” (Anon 2017c).

7. Requisitos regulamentares para entrada na Índia

Com a implementação recente do FSSA, as regulamentações nutracêuticas estão
evoluindo na Índia. Existe a possibilidade de alguns dos conteúdos serem
conflitantes/confusos, mas para que essa indústria tome forma, as regulamentações
devem ser simplificadas. Para entrar no mercado indiano de nutracêuticos, algumas das
áreas muito importantes a serem enfocadas incluem avaliação do produto, análise real do
1405
produto, obtenção de licenças e desenvolvimento de alegações de saúde e rótulos
específicos para a Índia (Anon 2017c).

8. Avaliação do produto
Sob condições ambientais específicas na Índia, as formulações podem se comportar de
maneira diferente e podem ser classificadas incorretamente. Portanto, a devida diligência
em termos de determinação de uma quantidade específica para cada ingrediente e da
combinação de ingredientes torna-se extremamente crucial. A fim de realizar a avaliação
do produto de acordo com a definição regulamentar indiana, é de extrema importância
examinar cada ingrediente ativo e aditivo no contexto de permissibilidade, padrões e
dosagem de vitaminas/minerais permitidos de acordo com a terapêutica, profilática ou
RDA para Índios. Além disso, os fabricantes não estão claros se seus produtos serão
classificados como um alimento ou suplemento alimentar ou medicamento no contexto da
Lei de Prevenção de Adulteração de Alimentos de 1954 e Regras de 1955, Lei de
Segurança Alimentar e Padrões de 2006 e Lei de Drogas e Cosméticos de 1940 e Regras
de 1945 As Regras de Segurança Alimentar e Padrões de 2011 destacam a estrutura e os
procedimentos de aplicação regulatória que o governo central se propõe a fazer. A
estrutura tem uma hierarquia que vai do comissário de segurança alimentar ao número de
oficiais e designações, como oficial de segurança alimentar, analista de alimentos, etc.,
que estarão envolvidos no processo de análise do produto em diferentes pontos
(Keservani et al. 2014).

Várias etapas na análise do produto incluem:

1. Desenvolver documentos e autenticá-los pela autoridade competente

2. Coleta de amostra (na presença de testemunhas)

3. Envio de amostra à autoridade em questão (processos diferentes para pacote a granel

e pacote único)

4. Análise de alimentos

5. Se a análise não for concluída dentro do período de tempo estipulado, plano de ação
adicional pelo oficial designado

6. Processo de julgamento (realização de inquérito, procedimento de recurso, audiência,

etc.)

1406
9. Os benefícios
Os nutracêuticos para uso veterinário não precisam de regulamentos rígidos. A esse
respeito, os nutracêuticos oferecem vantagens significativas em comparação com os
longos tempos de desenvolvimento e o alto custo de fabricação dos medicamentos,
enquanto o teste de eficácia dos nutracêuticos requer menos tempo para as espécies
cultivadas em comparação com os testes para os humanos (Varghese e Mishal 2014).

10. As desvantagens
Os principais problemas de regulamentação na Índia são:

1. As definições legais para nutracêuticos/alimentos funcionais são um pouco diferentes

em diferentes países; por exemplo, na Índia, os alimentos funcionais podem incluir
extratos de ervas, especiarias, frutas e alimentos ou produtos alimentícios melhorados
nutricionalmente com ingredientes funcionais adicionados.

2. Os requisitos para fazer alegações terapêuticas não são realistas – as ervas não são
patenteáveis.
3. Como não há disposição para patentear, o rótulo do suplemento dietético é impróprio
para nutracêuticos.

4. Problemas como controle de qualidade e elementos antiéticos e criminosos existem

neste setor.

11. Papel do Governo e Institutos do Setor Público

O governo não fornece nenhum subsídio ou apoio para este setor. No entanto, o
segmento de nutracêuticos e ração bovina não é tributável, o que por si só é um apoio
digno de nota do governo. O papel dos institutos do setor público tem sido insignificante e
a contribuição para a indústria não é adequada. No entanto, o National Dairy
Development Board (NDDB) e o Conselho Indiano de Pesquisa Agrícola (ICAR) fizeram o
mapeamento mineral e desenvolveram suplementos minerais necessários de acordo com
a região, solo e outras condições.

Existem muitas tecnologias desenvolvidas por universidades, ICAR, etc. No entanto,

materializar essas tecnologias em novos produtos é altamente localizado e mínimo.
Principalmente os players privados têm desempenhado um papel mais importante nisso, e
mesmo as empresas multinacionais têm uma presença maior com novos produtos de

1407
valor agregado neste segmento. Empresas indianas como a Indian Immunological Limited
(IIL) desenvolveram muitos produtos nutricionais com a ajuda de sua organização mãe;
NDDB entrou no mercado com sucesso.

12. Comentários finais e orientações futuras

Alguns dos principais desafios enfrentados pela indústria incluem a regulamentação para
introduzir padrões de qualidade que permitirão que muitas empresas se atualizem. As
normas do Bureau of Indian Standards (BIS) estão sendo usadas para o uso de
suplementos alimentares em indústrias de animais, aves e aquicultura. No entanto, o
procedimento em voga não tem controle sobre várias doenças que afetam a indústria
animal e avícola, o que pode anular todos os esforços para tornar a pecuária produtiva
por meio de nutracêuticos, melhoria na criação e estado genético de animais leiteiros e
integração do setor de laticínios. Embora a Lei de Segurança Alimentar e Padrão de 2006
para a saúde humana defina alimentos/nutracêuticos funcionais legalmente, ainda
existem outras regulamentações eficazes. Diretrizes e protocolos adequados são
necessários para ganhar impulso para uma implementação eficaz em todo o país. É
necessário esclarecer e formular o quadro regulamentar para o uso de nutracêuticos na
prática veterinária. Se a comprovação efetivamente forçar o Ato de Segurança Alimentar e
Padrão, há o potencial de abrir uma tremenda oportunidade para a indústria de alimentos
funcionais ou nutracêuticos. Para concluir, a aprovação da Lei Padrão e Segurança
Alimentar de 2006 foi um primeiro passo significativo, mas muito mais precisa acontecer
para eliminar a sobreposição de antigas leis e regulamentos. Os Regulamentos de
Segurança Alimentar e Padrões de 2017 anunciaram na Gazeta da Índia que
regulamentar a fabricação, distribuição e venda de nutracêuticos, alimentos funcionais e
suplementos dietéticos na Índia pode ser útil na implementação da segurança alimentar
para todos, mas isso ainda não foi implementado. Espera-se que esse ato possa
desencadear a formação de um ato semelhante para nutracêuticos e alimentos funcionais
utilizados em animais.

Referências
Anon (2006a) FICCI study on Implementation of Food Safety and Standard Act 2006: an industry perspective at. http://
www.indiaenvironmentportal.org.in/Files/food_safety_study.pdf
Anon (2006b) Food Safety and Security Act of India. www.drugscontrol.org/food%20safety%20and%20standards
%20Act%2006.pdf
Anon (2009) Cattle feed (Regulation of manufacture and sale) order, 2009. F. No. 2-35/2009-AHT/FF.Ministry of
Agriculture, Department of Animal Husbandry, Dairying and Fisheries Government of India
Anon (2013) Overview of the regulation of complementary medicines in Australia. Australian Government, Department
of Health, 25 Mar 2013. https://www.tga.gov.au/overview-regulation-complementarymedicines-australia

1408
 Anon (2014) Livestock census-2012. All India Ministry of Agriculture Department of Animal Husbandry, Dairying and
Fisheries Krishi Bhawan—Report 19, New Delhi, Dated the 17 Jun 2014. http://dahd.nic.in/sites/default/files/19%20th
%20Livestock%20%202012.pdf
Anon (2015) Licensed natural health products database (LNHPD)—Canada.ca, 4 May 2015.
https://www.canada.ca/en/health-canada/services/drugs-health-products/natural-nonprescription/applications-
submissions/product-licensing/licensed-naturalhealth-products-database.html
Anon (2016) Poultry production in India—the current scenario. APEDA, 10 Mar 2016. http://agriexchange.apeda.gov.in/
news/NewsSearch.aspx?newsid¼2205
Anon (2017a) Indian animal feed (poultry, cattle and aquaculture) market 2017 industry analysis, size, share, growth,
trends and forecast by 2022. http://www.digitaljournal.com/pr/3584516
Anon (2017b) Health supplements and nutraceuticals—emerging high growth sector in India. World Food India, 3–5
Nov 2017, Ministry of Food Processing Industries, Government of India, New Delhi.
http://www.ey.com/Publication/vwLUAssets/ey-health-supplements-andnutraceuticals/$File/ey-health-supplements-and-
nutraceuticals.pdf
Anon (2017c) Indian food code food categorization system, 2 Mar 2017.
http://old.fssai.gov.in/Portals/0/Pdf/INDIAN_FOOD_CODE(25-06-2012).pdf
Anon (2018) Potential for functional foods in the Indian market. 30 Aug to 1 Sept 2018, India. Expo Centre, Greater
Noida, Delhi-NCR, India https://www.figlobal.com/india/visit/news-and-updates/potentialfunctional-foods-indian-market
Balasubramaniam KV (2013), Animal nutra market will grow to 1,300 cr by 2017–2018, 23 Feb 2015, Bangalore
Bureau Report. www.nuffoodsspectrum.in/inner_view_single_details_print.php?page
BIS (1983) Mineral mixtures for supplementing cattle feed specification IS 10672. Bureau of Indian Standards,
Government of India
BIS (1992) Mineral mixtures for supplementing poultry feed specification IS 5672. Bureau of Indian Standards,
Government of India
BIS (2002) Mineral mixtures for supplementing cattle feed specification IS 1664. Bureau of Indian Standards,
Government of India
Coppens P, de Silva MF, Pettman S (2006) European regulations on nutraceuticals, dietary supplements and functional
foods: a framework based on safety. Toxicology 221:9–74
FDA (2017) Dietary supplements—overview of dietary supplements and FDA’s role in regulating them. 29 Nov 2017.
https://www.fda.gov/Food/DietarySupplements/
Keservani, R K, Sharma Anil K, Ahmad F, Baig Mirza E (2014) Nutraceutical and functional food regulations in India In:
Nutraceutical and functional food regulations in the United States and around the world by Debasis Bagchi (2nd edn),
Food Science and Technology, 2014, Elsevier: Amsterdam327-342. https://doi.org/10.1016/B978-0-12-405870-5.00019-0
Manoj PK (2015) Cattle feed industry in India: a macro perspective. Int J Bus Manag Soc Sci (IJBMSS) IV(10 (I)):96–
101. (ISSN-P: 2249-7463).
https://www.Researchgate.Net/Publication/280253947_Cattle_Feed_Industry_In_India_A_Macro_Perspective
Stauffer JE (1999) Nutraceuticals. Cereals Food World 44(2):115–116
Varghese T, Mishal P (2014) Scrutinizing the term ‘nutraceutical’—a global regulatory perspective. Nutraceut Bus Rev.
21 Jul 2014. https://www.nutraceuticalbusinessreview.com/.../Scrutinising_the_term_nutraceutical
Yamada K, Sato-Mito M, Nagata J, Umegaki K (2008) Health claim evidence requirements in Japan. J Nutr
138:1192S–1198S
Yuliva V (2014) Russia: biologically active supplements. Export.gov, June 2014. http://files.export.gov/x_4455523.pdf

1409
 Usos e diretrizes regulatórias para nutracêuticos na
China
Jianhua Sun, Zhongqi Jiang, Feng Wang e Likun Gong

Resumo
Na China, os nutracêuticos não são regulamentados como medicamentos veterinários,
mas são aprovados como aditivos para rações, pré-mistura de rações ou rações. O uso
de aditivos na alimentação animal é supervisionado pelo Ministério da Agricultura, que é
responsável por avaliar, regulamentar e publicar um catálogo de aditivos para rações, com
dosagens recomendadas e limitações. No entanto, informações detalhadas geralmente
estão disponíveis no folheto do produto da empresa relacionada. Os nutracêuticos
tradicionalmente incluem aminoácidos, vitaminas, minerais, enzimas, microrganismos
vivos, antioxidantes e outros. Os aditivos fitoterápicos são populares e, portanto,
frequentemente usados na alimentação animal. Entre eles estão o alho, o chá polifenol, o
extrato de folhas de Eucommia ulmoides, o extrato de Epimedium e o extrato de semente
de Perilla. Os aditivos são amplamente aplicados na agricultura intensiva por nutricionista,
sem a necessidade de receita de um veterinário. No entanto, cada vez mais veterinários
prescrevem nutracêuticos para animais de estimação. Neste capítulo, discutiremos a
classificação e as regras regulatórias de nutracêuticos comumente usados, aprovados na
China, para uma melhor compreensão das disposições regulatórias e dos cenários de
aplicação racionais.

Palavras-chave: Nutracêuticos · Diretriz regulatória · China

J. Sun. L. Gong Academy of Sciences, Shanghai Institute of Materia Medica, Center for Drug Safety
Evaluation and Research, Pudong, Shanghai, P.R. China e-mail: jhsun@mail.cdser.simm.ac.cn
Z. Jiang. Department of Veterinary Medicine, College of Animal Science, Zhejiang University, Hangzhou,
Zhejiang, P.R. China
F. Wang. Amlan Trading (Shenzhen) Company, Ltd., Shenzhen, Guangdong, P. R. China

1. Introdução
Um nutracêutico é um nutriente padronizado e de grau farmacêutico (Sarris et al. 2016)
que foi definido como “o uso de micronutrientes, macronutrientes e outros suplementos
nutricionais como agentes terapêuticos” (AVMA 1999). No entanto, na China, os
nutracêuticos não existem como categoria regulamentar e são controlados como
suplementos dietéticos (pré mistura), aditivos para rações ou rações. Os nutracêuticos

1410
para animais são regulamentados pelo Ministério da Agricultura (MOA), que publicou uma
lista essencial de aditivos para rações para animais (Aviso nº 105, 1999). Esta lista foi
atualizada no Aviso MOA Nº 1224 (2009), no qual a fonte, os animais, a dosagem
recomendada e as limitações dos aditivos para rações foram incluídos. Oito anos depois,
o documento foi atualizado no Aviso nº 2.625 (2017), no qual foram incluídos mais aditivos
e limitações especificadas.

Desde que a China ingressou na Organização Mundial do Comércio (OMC) em 2001,

muitas empresas ganharam acesso ao mercado chinês de medicamentos veterinários. No
mercado de animais de estimação, entre as categorias de suplementos alimentares
disponíveis, várias são do Japão, Alemanha e Reino Unido. Em comparação com os EUA,
a indústria de medicamentos para animais da China é relativamente jovem. No entanto, o
potencial é significativo não apenas para o rápido crescimento econômico da China, mas
também para a demanda cada vez maior do consumidor.

Ao todo, o uso de nutracêuticos para animais é uma prática relativamente recente na

China. Embora os nutracêuticos sejam comumente adicionados às rações para animais,
especialmente durante a vacinação, reprodução e período de produção de ovos ou leite,
esses suplementos dietéticos também estão se tornando populares em veterinários de
pequenos animais. No entanto, ainda existem alguns veterinários de animais de
companhia que se recusam a usar nutracêuticos devido a dados insuficientes de eficácia
e segurança. Além disso, a aceitação de nutracêuticos pelos proprietários dos animais
pode influenciar esta decisão.

2. Classificação
Os nutracêuticos são registrados como premix para ração animal, aditivos para rações ou
rações, em vez de medicamentos veterinários. Esta classificação se aplica como
diretrizes para os aditivos para rações aprovados, e os aditivos para rações foram
divididos em aminoácidos, vitaminas, minerais, enzimas, microrganismos vitais,
substâncias aromatizantes e apetitosas, antioxidantes e outros (Aviso nº 2045, 2013a, b).
Vale ressaltar que, como nutracêuticos, os fitoterápicos ou seus constituintes bioativos
são populares e frequentemente utilizados na China. Por exemplo, alho (substância
aromatizante e apetitosa), polifenóis do chá (antioxidantes) e os extratos das folhas de
Eucommia ulmoides, Epimedium ou sementes de Perilla estão entre eles.

Os nutracêuticos usados para animais de estimação são geralmente catalogados de

acordo com suas funções. Os produtos comuns no mercado incluem aqueles para
1411
tratamento de reparação de articulações com os principais ingredientes de glucosamina,
sulfato de condroitina, nutriente de mexilhão de lábios verdes e vitaminas e aqueles para
melhorar a parorexia e promoção do crescimento que continham vitaminas e
oligoelementos. Além disso, produtos usados para prevenir o ressecamento/descamação
do cabelo, para promover a recuperação da cor natural do cabelo e para aumentar a
pigmentação com lecitina combinada com pó de algas marinhas natural também são
frequentemente aplicados. Além disso, probióticos, comprimidos de microelemento e
preparações de cálcio contendo osso triturado, vitamina D3, lactato de cálcio e gluconato
de cálcio também estão disponíveis para seleção.

3. Usos de nutracêuticos nativos chineses

3.1 Alho

O alho (Allium sativum L.) é originário da China e é um ingrediente popular para cozinhar
devido ao seu cheiro forte e sabor delicioso. O alho é nutritivo, com substâncias minerais
ricas e oligoelementos. Além disso, o alho possui várias propriedades biológicas, como
imunomoduladora, anticâncer, antimicrobiana, anti-hipertensiva e anti-aterosclerótica (Lin
et al. 2017; Lou et al. 2018; Sheppard et al. 2018; Dubey et al. 2017; Gonen et al. 2005).
Portanto, como um poderoso alimento funcional, o alho tem sido aceito e amplamente
aplicado por mais de 5000 anos, tanto como aditivo alimentar quanto no tratamento de
uma ampla variedade de doenças.

O alho contém allimin (C6H10OS2), que é metabolizado pela alliinase de alliin, e é

responsável pelo sabor e aroma pungentes do alho, bem como seu benefício terapêutico
(Alhashim e Lombardo 2018). No entanto, a alicina é um composto instável que só está
brevemente presente no alho fresco depois de ter sido esmagado. Na verdade,
compostos de enxofre, por exemplo ajoene, podem desempenhar um papel importante
nos benefícios de saúde do alho (Demeule et al. 2004; Geng et al. 1997; Kaschula et al.
2016).

O alho em pó é tradicional e amplamente utilizado na alimentação de peixes, galinhas,

porcos, vacas e até mesmo de macacos cinomolgos. A dieta suplementada com alho a
1,0-1,5 g/kg melhorou significativamente o desempenho em frangos de corte (Jimoh et al.
2013) e a 20 g/kg aumentou a resistência de alevinos de bagre africano à infecção por A.
hydrophila (Eirna-liza et al. 2016). Quanto ao extrato de alho, a dose necessária depende
do seu teor de alicina. Por exemplo, um alimento com 200 mg/kg de extrato de alho (20%
de alicina) pode aumentar a eficácia da vacinação de Clostridium perfringens em coelhos
1412
(Abu El Hammed et al. 2016). O pó de alho e a fórmula estrutural de seus constituintes
bioativos mais representativos são apresentados na Fig. 1 (estrutura originada de Martins
et al. 2016).

Fig. 1 Estrutura estereoquímica dos constituintes bioativos mais

representativos de Allium sativum L .: alina, alicina, sulfeto de alila, (E) -
ajoena, (Z) -ajoena e 1,2-vinilditiína

3.2 Polifenóis do chá

Os polifenóis do chá (TP), que contêm galato de epigalocatequina (EGCG), têm várias
propriedades benéficas, incluindo efeitos anticâncer, antioxidantes, antidiabéticos, anti-
hipertensivos, antimicrobianos e da síndrome antimetabólica, bem como a capacidade de
melhorar a fertilidade em humanos e animais (Posadino et al. 2017; Rahman et al. 2018).
A fórmula estrutural de EGCG é mostrada na Fig. 2.

Fig. 2 Fórmula
estrutural de galato de
epigalocatequina

1413
O polifenol do chá-verde é valioso para porcos, galinhas e outros animais. Por exemplo,
um extrato contendo 0,2% p/v de polifenóis pode diminuir a lesão de esperma resultante
de congelamento em suínos (Kitaji et al. 2015), e frangos de corte alimentados com 50 e
100 mg/kg de peso corporal por 20 dias pode aliviar a obesidade por meio da regulação
dos genes relacionados ao metabolismo de lipídios e da expressão do fator de transcrição
(Huang et al. 2013).

Embora o polifenol do chá seja um luxo para os animais, ainda há uma grande quantidade
de extrato a ser obtida com a poda e as folhas velhas e grosseiras das árvores de chá.
Detalhes dos benefícios para a saúde do polifenol do chá podem ser encontrados em
várias análises (Williamson 2017; Bag and Bag 2018; Mao et al. 2017).

3.3 Extrato de folhas de Eucommia ulmoides

A casca de Eucommia ulmoides Oliver (Eucommiaceae), é usada na medicina tradicional

chinesa há muito tempo. As folhas contêm iridoides, lignanas, flavonóides, fenóis e
terpenos e, como resultado, o extrato das folhas tem efeitos favoráveis não apenas contra
hipertensão, obesidade e úlcera gástrica; também têm propriedades antioxidantes, anti-
sedativas e anti-hipnóticas (Deyama et al. 2001; Li et al. 2017; Hirata et al. 2011).

O extrato das folhas de Eucommia ulmoides e a fórmula estrutural do ácido clorogênico

são mostrados na Fig. 3.

Fig. 3 Eucommia ulmoides e fórmula estrutural do ácido

clorogênico

Em ratos e porcos, 5% do extrato da folha de Eucommia ulmoides adicionado a uma dieta

rica em gordura pode reduzir a pressão arterial e o peso (Hosoo et al. 2017). Da mesma
forma, o mesmo nível de extrato pode melhorar o desempenho de crescimento, os índices
sanguíneos e a qualidade da carne para porcos em crescimento (Lee et al. 2009).

As folhas da Eucommia ulmoides também são secas e utilizadas no chá para humanos.
Embora de qualidade inferior, o extrato restante pode ser aplicado na ração animal.
Atualmente, a dose recomendada do extrato da folha de Eucommia ulmoides em rações
para animais varia de 80 a 200 mg/kg.

1414
3.4 Extrato de Epimedium

Como um medicamento tradicional chinês comum, Epimedii folium tem sido usado para
tratar disfunção erétil, síndrome pós-menopausa e osteoporose por milhares de anos. O
principal componente do Epimedium é a icariin (8-prenil derivado do kaempferol 3,7-O-
diglucosídeo) e pode proteger o miocárdio isquêmico em cães e prevenir as propriedades
de necrose da cabeça femoral induzida por glicocorticoides em ratos. Além disso, o
extrato possui as propriedades de atividade antioxidante e efeito imunomodulador (Wang
et al. 1998, 2011; Yuan et al. 2016). O extrato de folhas de Epimedium e a fórmula
estrutural de icariin são mostrados na Fig. 4.

Fig. 4 Folhas de Epimedium e

fórmula estrutural de icariin

O extrato de Epimedium é uma espada de dois gumes, que só pode ser usada em
animais adequados durante um período apropriado. A dose segura na ração é de 150
g/kg, recomendada pelos fabricantes para criação de gado ou frangos de ccorte.

3.5 Extrato de Semente de Perilla

A semente de Perilla é obtida da planta Perilla frutescens L., comumente chamada de

Zisu em chinês, Cha-jo-ki em coreano e Shiso em japonês. Aminoácidos, ácido linolênico,
ácido rosmarínico e vitamina E são as principais substâncias ativas nas sementes de
perila e reduzem os lipídios do sangue, inibem bactérias e são antiinflamatórios e
antioxidantes (Wang et al. 2016). Senavong et al. (2016) relataram que um extrato de
folha de perila e óleo de semente mostrou um efeito neuroprotetor ao diminuir o estresse
oxidativo e inibir a hiperfosforilação da proteína tau in vitro.

Müller-Waldeck et al. (2010) descreveram que vários genótipos de P. frutescens L.

apresentaram teores notavelmente elevados de carotenóides, especialmente luteína, e
vários compostos fenólicos. No entanto, eles também contêm perila cetona, uma potente
toxina pulmonar (Guerry-Force et al. 1988). Embora a dose tóxica de perila cetona em
humanos seja desconhecida, recomenda-se que espécies de perila contendo perila

1415
cetona não sejam consumidas. Portanto, para a segurança dos animais, a quantidade de
perila cetona no extrato da semente de perila precisa ser estritamente controlada por meio
da identificação de genótipos de perila e otimização dos métodos de extração.

A figura do extrato de semente de perila e a fórmula estrutural do ácido alfa linolênico são
mostradas na Fig. 5. A fórmula estrutural da cetona de perila é mostrada na Fig. 6.

Fig. 6 Fórmula
estrutural da perila
Fig. 5 Sementes de Perilla e fórmula cetona
estrutural do ácido alfa linolênico

A adição de 250–350 mg/kg de extratos de sementes de Perilla frutescens à dieta

aumentou significativamente o desempenho da produção de suínos em crescimento (Chu
et al. 2011). Além disso, 300 mg/kg de extratos de sementes de Perilla frutescens
adicionados à dieta aumentaram consideravelmente a taxa de postura, a produção média
diária de ovos e a função imunológica das galinhas poedeiras durante o período de pico
de postura tardia. Esta adição também melhorou a função imunológica do gado em
terminação (Shi et al. 2015; Zhang et al. 2011). Atualmente, o fabricante recomenda
adicionar uma dose diária de 20–50 mg/kg de extratos de sementes de Perilla frutescens
à alimentação animal.

4. Diretrizes regulatórias de nutracêuticos na China

4.1 Lista da versão atual das diretrizes regulatórias

O Conselho de Estado é a agência administrativa suprema para ração animal e aditivos

para rações na China. O MOA é responsável pela gestão de rações para animais e
aditivos para rações. Seu Aviso e Decreto publicados fornecem orientações para a
produção, importação e uso de rações para animais e aditivos para rações.

(a) Regulamento para Gestão de Alimentos para Animais e Conselho Estadual de Aditivos
para Alimentos para Animais, Decreto nº 609, 2011

(b) MOA de aditivo de alimentação aprovado, Aviso nº 2045, 2013a, b

(c) Regulamento de Uso Seguro para Aditivos para Alimentos para Animais MOA, Aviso nº
2625, 2017

1416
(d) Regulamento de Rações e Aditivos para Alimentos para Animais Produzem MOA,
Decreto nº 3, MOA de 2012a, Decreto nº 5, 2012b

(e) Medidas para registro e gerenciamento de rações importadas e aditivos para rações,
MOA, Decreto nº 2, 2014

4.2 Regulamento para Gestão de Alimentos e Aditivos para Alimentos

Este regulamento é um decreto administrativo emitido pelo primeiro-ministro. As linhas

gerais de gestão de rações e aditivos para rações (produção, gestão e uso) estão
incluídas neste regulamento, garantindo a qualidade e segurança dos produtos de origem
animal e a manutenção da saúde pública (Decreto nº 609, 2011).

As responsabilidades do MOA também foram estipuladas, como a publicação dos aditivos

e ingredientes alimentares aprovados. Além disso, os procedimentos para a importação
de aditivos para rações também são especificados, e as penalidades para as violações
também foram estabelecidas. Em suma, esta é uma lei básica para o manejo de produtos
para a saúde animal.

4.3 “Aditivo de alimentação aprovado”

Os ingredientes principais dos nutracêuticos animais devem ser incluídos no “aditivo

alimentar aprovado”. Em 1999, um total de 173 aditivos foram permitidos para uso na
alimentação animal, incluindo vitaminas, minerais e oligoelementos, enzimas de qualidade
para rações, probióticos de qualidade para rações, antioxidantes e outros (Aviso nº 105,
1999). Cada vez mais aditivos para rações, como orégano e carvacrol (Origanum
aetheroleum), foram adicionados, e alguns produtos importados também foram aprovados
no Aviso nº 318 (2003) e Aviso nº 658 (2006).

No Aviso nº 1126 (2008), vários aditivos para rações foram adicionados e 24 novos
aditivos para rações foram listados, embora ainda estejam em período de proteção.

No Aviso nº 2045 (2013a, b), a versão atual de aditivos para rações aprovados, alho,
polifenol do chá e os extratos de folhas de Eucommia ulmoides, Epimedium grandiflorum
Morr e sementes de Perilla estão todos incluídos.

4.4 Regulamentação de utilizações seguras para aditivos de rações

Orientações adicionais sobre o uso seguro de aditivos para rações foram publicadas no
Aviso nº 1224 (2009); a fonte, os animais aprovados, a dosagem recomendada e as
limitações máximas foram incluídos. Essas diretrizes foram atualizadas no Aviso nº 2045
(2013a, b).

1417
Como o mais alto regulamento administrativo, o Aviso nº 2625 (2017) estipula o uso da
maioria dos aditivos para rações animais. No entanto, o conteúdo é relativamente breve e
incompleto. Por exemplo, a vitamina E só tem permissão para uso, mas nenhuma
recomendação de dosagem é dada. Isso leva à publicação de diferentes doses em
ensaios e recomendações com animais.

4.5 Regulamentação de Alimentos e Aditivos para Alimentos

Na China, se o produto for produzido, ele deve primeiro obter uma licença de produção
para rações ou aditivos para rações. As empresas devem solicitar ao MOA uma licença de
produção de aditivos para rações de acordo com o Decreto Regulamentar MOA No. 3
(2012a). O comitê de avaliação da licença de produção de rações e aditivos para rações
do MOA será responsável pela revisão técnica para aprovação da licença.

Depois de obter a licença de produção, a empresa deve solicitar um número de licença do

governo do povo a nível provincial de acordo com o Decreto MOA nº 5 (2012b). Na
aplicação, ingredientes do produto, padrão de qualidade do produto, método de teste dos
ingredientes do produto, estilo do rótulo do produto e descrição do produto devem ser
incluídos. A produção é permitida, a licença do produto e o número da licença é obtido.

4.6 Importação de Alimentos e Aditivos para Alimentos

As empresas devem solicitar ao MOA um número de aprovação de importação antes de

importar nutracêuticos animais de acordo com o Decreto MOA No. 2 (2014). Além disso, a
aplicação de um alimento ou aditivo para ração que nunca foi usado na China requer mais
dados, como relatórios de teste de avaliação de segurança.

As empresas estrangeiras precisam solicitar o MOA para registro de importação para a

primeira exportação de alimentos para animais ou de aditivos para alimentos para animais
para a China. Vários relatórios sobre o produto são necessários, incluindo o relatório de
análise e avaliação sobre o possível impacto do resíduo do aditivo na saúde humana, o
relatório do teste de estabilidade e o relatório de impacto ambiental. Se a limitação
máxima for exigida, o valor máximo e o método para a determinação dos componentes
efetivos também devem ser fornecidos.

5. Comentários finais e orientações futuras

A ciência por trás do uso de nutracêuticos é profundamente complicada pela espécie,
idade e estado da doença. O conhecimento do veterinário sobre o uso de nutracêuticos é
significativamente menor em comparação com os medicamentos veterinários usuais.

1418
Embora os usos de nutracêuticos estejam se tornando populares, testes em animais e
pesquisas de mecanismo suficientes precisam ser realizados para entender melhor sua
eficácia e segurança.

Para um grande número de nutracêuticos, nenhuma dosagem recomendada está

disponível e depende dos padrões do fabricante. As diretrizes regulatórias atuais do MOA
precisam ser mais especificadas. Alguns medicamentos fitoterápicos demonstraram forte
eficácia, mas não são isentos de toxicidade potencial (Gupta 2016; Gupta et al. 2018).
Quando os nutracêuticos são usados em animais como medicamentos terapêuticos, eles
precisam ser avaliados quanto a qualquer possível toxicidade para a saúde humana e
animal.
Agradecimentos: Os autores gostariam de agradecer a Ziqiang Wang por sua assistência técnica na preparação deste
capítulo.

Referências
Abu El Hammed W, Soufy H, El-Shemy A et al (2016) Use of allicin as feed additive to enhance vaccination capacity of
Clostridium perfringens toxoid in rabbits. Vaccine 34(17):2000–2007
Alhashim M, Lombardo J (2018) Mechanism of action of topical garlic on wound healing. Dermatol Surg 44(5):630–634
American Veterinary Medical Association (1999) Guidelines for alternative and complementary veterinary medicine. In:
AVMA directory and resource manual (48th edn). American Veterinary Medical Association, Schaumburg, IL
Bag A, Bag N (2018) Tea polyphenols and prevention of epigenetic aberrations in cancer. J Nat Sci Biol Med 9(1):2–5
Chu XH, Hu JP, Wang ZG et al (2011) Effect of feeding of perilla seed extracts on growing finishing pigs. Acta Agric
Zhejiang 23 (3):514–516
Demeule M, Brossard M, Turcotte S et al (2004) Diallyl disulfide, a chemopreventive agent in garlic, induces multidrug
resistance associated protein 2 expression. Biochem Biophys Res Commun 324(2):937–945
Deyama T, Nishibe S, Nakazawa Y (2001) Constituents and pharmacological effects of Eucommia and Siberian
ginseng. Acta Pharmacol Sin 22(12):1057–1070
Dubey H, Singh A, Patole AM et al (2017) Antihypertensive effect of allicin in dexamethasone-induced hypertensive
rats. Int Med Res 6 (1):60–65
Eirna-liza N, Saad CR, Hassim HA, et al (2016). The effects of dietary inclusion of garlic on growth performance and
disease resistance of African catfish (Clarias gariepinus) fingerlings against Aeromonas hydrophila infection. J Environ
Biol 37(4 Spec No):817–824
Geng Z, Rong Y, Lau BH (1997) S-allyl cysteine inhibits activation of nuclear factor kappa B in human T cells. Free
Radic Biol Med 23 (2):345–350
Gonen A, Harats D, Rabinkov A et al (2005) The antiatherogenic effect of allicin: possible mode of action. Pathobiology
72(6):325–334
Guerry-Force ML, Coggeshall J, Snapper J et al (1988) Morphology of noncardiogenic pulmonary edema induced by
Perilla ketone in sheep. Am J Pathol 133(2):285–297
Gupta RC (ed) (2016) Nutraceuticals: efficacy, safety and toxicity. Academic Press/Elsevier, Amsterdam, 1022 p
Gupta RC, Srivastava A, Lall R (2018) Toxicity potential of nutraceuticals. In: Nicolotti O (ed) Computational toxicology:
methods and protocols. Springer Nature, New York, NY, pp 367–394
Hirata T, Kobayashi T, Wada A et al (2011) Anti-obesity compounds in green leaves of Eucommia ulmoides. Bioorg
Med Chem Lett 21(6):1786–1791
Hosoo S, Koyama M, Watanabe A et al (2017) Preventive effect of Eucommia leaf extract on aortic media hypertrophy
in Wistar-Kyoto rats fed a high-fat diet. Hypertens Res 40(6):546–551
Huang J, Zhang Y, Zhou Y et al (2013) Green tea polyphenols alleviate obesity in broiler chickens through the
regulation of lipidmetabolism-related genes and transcription factor expression. J Agric Food Chem 61(36):8565–8572
Jimoh AA, Ibitoye EB, Dabai YU et al (2013) In vivo antimicrobial potentials of garlic against Clostridium perfringens
and its promotant effects on performance of broiler chickens. Pak J Biol Sci 16 (24):1978–1984
Kaschula CH, Hunter R, Cotton J et al (2016) The garlic compound ajoene targets protein folding in the endoplasmic
reticulum of cancer cells. Mol Carcinog 55(8):1213–1228
Kitaji H, Ookutsu S, Sato M et al (2015) Preincubation with green tea polyphenol extract is beneficial for attenuating
sperm injury caused by freezing-thawing in swine. Anim Sci J 86(11):922–928
Lee SD, Kim HY, Song YM et al (2009) The effect of Eucommia ulmoides leaf supplementation on the growth
performance, blood and meat quality parameters in growing and finishing pigs. Anim Sci J 80(1):41–45
1419
 Li X, Tang Z, Fei D et al (2017) Evaluation of the sedative and hypnotic effects of astragalin isolated from Eucommia
ulmoides leaves in mice. Nat Prod Res 31(17):2072–2076
Lin XL, Hu HJ, Liu YB et al (2017) Allicin induces the upregulation of ABCA1 expression via PPARγ/LXRα signaling in
THP-1 macrophage-derived foam cells. Int J Mol Med 39(6):1452–1460
Lou Z, Wei QQ, Wang DW et al (2018) Effect of allicin on proliferation and apoptosis of KG-1 cells and its molecular
mechanism. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi 43(12):2612–2617
Mao X, Gu C, Chen D et al (2017) Oxidative stress-induced diseases and tea polyphenols. Oncotarget 8(46):81649–
81661
Martins N, Petropoulos S, Ferreira IC (2016) Chemical composition and bioactive compounds of garlic (Allium sativum
L.) as affected by pre- and post-harvest conditions: a review. Food Chem 211:41–50
Müller-Waldeck F, Sitzmann J, Schnitzler WH et al (2010) Determination of toxic perilla ketone, secondary plant
metabolites and antioxidative capacity in five Perilla frutescens L. varieties. Food Chem Toxicol 48(1):264–270
Posadino AM, Phu HT, Cossu A et al (2017) Oxidative stress-induced Akt downregulation mediates green tea toxicity
towards prostate cancer cells. Toxicol in Vitro 42:255–262
Rahman SU, Huang Y, Zhu L et al (2018) Therapeutic role of green tea polyphenols in improving fertility: a review.
Nutrients 10(7):E834
Sarris J, Murphy J, Mischoulon D et al (2016) Adjunctive nutraceuticals for depression: a systematic review and meta-
analyses. Am J Psychiatry 173(6):575–587
Senavong P, Kongkham S, Saelim S et al (2016) Neuroprotective effect of perilla extracts on PC12 cells. J Med Assoc
Thail 99(Suppl 4):S256–S264
Sheppard JG, McAleer JP, Saralkar P et al (2018) Allicin-inspired pyridyl disulfides as antimicrobial agents for
multidrug-resistant Staphylococcus aureus. Eur J Med Chem 143:1185–1195
Shi YL, Gu XH, Huang Y et al (2015) Effect of perilla frutescens seed extracts on performance, reproductive hormone
and immune function of laying hens during the late laying peak period. Chin J Anim Nutr 27(5):1519–1526
The Ministry of Agriculture of the People’s Republic of China (1999) The approved feed additives. Notice No.105.
http://jiuban.moa.gov.cn/zwllm/tzgg/gg/200210/t20021016_14634.htm
The Ministry of Agriculture of the People’s Republic of China (2003) The approved feed additive. Notice No.318.
https://wenku.baidu.com/view/93dd81d533d4b14e85246859.html
The Ministry of Agriculture of the People’s Republic of China (2006) The approved feed additive. Notice No.658. http://
www.moa.gov.cn/govpublic/XMYS/201006/t20100606_1535045.htm
The Ministry of Agriculture of the People’s Republic of China (2008) Feed additive catalog. Notice No.1126.
http://www.moa.gov.cn/gk/tzgg_1/gg/201006/t20100606_1535108.htm
The Ministry of Agriculture of the People’s Republic of China (2009) Specification for safe use of feed additives. Notice
No.1224. http://www.moa.gov.cn/govpublic/XMYS/201006/t20100606_1535173.htm
The Ministry of Agriculture of the People’s Republic of China (2012a) Management measures for approval number of
feed additive and additive premix feed products. Decree No.3 in 2012.
http://jiuban.moa.gov.cn/zwllm/tzgg/bl/201205/t20120508_2619500.htm
The Ministry of Agriculture of the People’s Republic of China (2012b) Management measures for the license number of
feed additives and feed additive premix. Decree No.5 in 2012.
http://www.gov.cn/gongbao/content/2012/content_2218048.htm
The Ministry of Agriculture of the People’s Republic of China (2013a) The approved feed additives. Notice No.2045.
http://jiuban.moa.gov.cn/zwllm/tzgg/gg/201401/t20140103_3730193.htm
The Ministry of Agriculture of the People’s Republic of China (2013b) The approved feed additives. Notice No.2045.
http://www.moa.gov.cn/nybgb/2014/dyq/201712/t20171219_6104350.htm
The Ministry of Agriculture of the People’s Republic of China (2014) Measures for the registration and management of
imported feed and feed additives. Decree No.2 in 2014.
http://jiuban.moa.gov.cn/zwllm/tzgg/bl/201401/t20140120_3743426.htm
The Ministry of Agriculture of the People’s Republic of China (2017) Specification for safe use of feed additives. Notice
No.2625. http://www.moa.gov.cn/nybgb/2018/201801/201801/t20180129_6135954.htm
The State Council of the People’s Republic of China (2011) Regulations for management of feed and feed additives.
Decree No.609. http://www.gov.cn/flfg/2011-11/15/content_1993910.htm
Wang C, Li Y, Wang Y (1998) A review of pharmacological study on Epimedium grandiflorum Morr and its active
constituents. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi 23(3):183–185
Wang JZ, Gao HY, Wang KZ et al (2011) Effect of Epimedium extract on osteoprotegerin and RANKL mRNA
expressions in glucocorticoid-induced femoral head necrosis in rats. Nan Fang Yi Ke Da Xue Xue Bao 31(10):1714–1717
Wang J, Liu M, Wu Y et al (2016) Medicinal herbs as a potential strategy to decrease methane production by rumen
microbiota: a systematic evaluation with a focus on Perilla frutescens seed extract. Appl Microbiol Biotechnol
100(22):9757–9771
Williamson G (2017) The role of polyphenols in modern nutrition. Nutr Bull 42(3):226–235
Yuan JR, Wang CF, Song J et al (2016) Effect of Epimedii Herba alcohol extract on inhibition of lung tumor growth and
immunomodulatory. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi 41(1):112–117
Zhang WH, Dong GZ, Wu YX et al (2011) Effects of perilla seed extracts on performance and immune function of
finishing cattle. Chin J Anim Nutr 23(3):473–479

1420
 Regulamentação de Nutracêuticos na Austrália e Nova
Zelândia
Rhian B. Cope

Resumo
No cenário regulatório da Austrália e da Nova Zelândia, os nutracêuticos se enquadram
na potencialmente muito complexa interface humana alimentação/medicina. Ambos os
países têm um conjunto muito complexo de legislação, instrumentos legislativos,
regulamentos e documentos de orientação. Além disso, vários órgãos reguladores e
agências diferentes podem estar envolvidos. Na Austrália, os nutracêuticos também
podem estar sujeitos a várias legislações e processos regulatórios estaduais e territoriais,
além do sistema federal. Na maior parte, três agências regulatórias principais
provavelmente estarão envolvidas: a Australian Therapeutic Goods Administration, que faz
parte do Australian Commonwealth Department of Health, a agência transnacional Food
Standards Australia New Zealand e Medsafe New Zealand. Para organizações que não
estão acostumadas com os sistemas australiano e neozelandês, os requisitos e
processos podem parecer um nó górdio. Assim, este capítulo espera fornecer uma
introdução a esses ecossistemas regulatórios e desmistificar alguns dos conceitos
importantes.
Palavras-chave: Nutracêuticos · Nutracêuticos veterinários · Regulamentação na
Austrália e Nova Zelândia

R. B. Cope. Australian Pesticides and Veterinary Medicines Authority, Armidale, NSW, Australia. e-mail:
rhian.Cope@apvma.gov.au

1. Introdução
Se os produtos da interface humana comida/medicina são ou não regulamentados como
alimentos ou medicamentos na Austrália e na Nova Zelândia continua sendo uma questão
um tanto complexa. Na Austrália, esses produtos podem se enquadrar no Australian
Therapeutic Goods Act 1989, onde podem ser avaliados como um medicamento
complementar ou um medicamento. Na Nova Zelândia, eles podem ser considerados
como uma droga, ou podem estar sob os Regulamentos de Suplementos Alimentares de
1985, que, por sua vez, se enquadram na Lei de Alimentos de 2014. No entanto,
dependendo dos efeitos para a saúde alegados, eles podem ser potencialmente
1421
considerados como um “novo alimento” ou um “alimento para fins médicos especiais”
segundo o Food Standards Code, administrado pela agência transnacional Food
Standards Australia Nova Zelândia e por um segundo nível de legislação nos estados e
territórios da Nova Zelândia e da Austrália. Na Nova Zelândia, eles também podem ser
classificados como um suplemento dietético que é regulamentado pelos Regulamentos de
Suplementos Dietéticos de 1985, que se enquadram na Lei de Alimentos de 2014. Ele
também pode ser regulamentado como um alimento suplementado de acordo com os
Alimentos da Nova Zelândia (Alimentos Suplementados) Standard 2016.

Como já pode ser compreendido ao ler o parágrafo acima, as decisões sobre quais leis,
processos regulatórios e padrões regulatórios se aplicam a um produto nutracêutico
específico na Austrália e na Nova Zelândia podem ser muito confusas.

O objetivo deste capítulo é (espero) desmistificar algumas dessas questões.

2. O que é e não é um bem terapêutico na Austrália

Na Austrália, um produto que é ingerido é regulamentado como um alimento ou um bem
terapêutico (ou seja, um medicamento, um medicamento complementar ou um dispositivo
médico). As principais questões sobre se um produto é ou não um alimento ou
medicamento são a natureza das alegações de benefícios à saúde, feitas pelo produto.
De maneira crítica, só porque um produto é ingerido por via oral e faz algum tipo de
alegação de saúde, não o torna automaticamente um bem terapêutico. Da mesma forma,
só porque a forma física do produto é “semelhante a um medicamento” (por exemplo, uma
cápsula, um comprimido, um pó, etc.) também não o torna automaticamente um bem
terapêutico, um suplemento dietético ou um alimento.

Os produtos terapêuticos na Austrália são regulamentados por 26 diferentes atos,

regulamentos e instrumentos legislativos. Na Austrália, um bem terapêutico é
especificamente definido na Seção 3 do Therapeutic Goods Act 1989, agindo da seguinte
forma:

(a) que sejam representados de qualquer forma, ou que sejam, seja pela forma como os
produtos são apresentados ou por qualquer outro motivo, provavelmente sejam
considerados:

(i) para uso terapêutico; ou

(ii) para uso como ingrediente ou componente na fabricação de produtos

terapêuticos; ou

1422
 (iii) para uso como um contêiner ou parte de um contêiner para mercadorias do tipo
referido no subparágrafo (i) ou (ii); ou

(b) incluídos em uma classe de produtos cujo uso único ou principal seja, ou normalmente
seja, um uso terapêutico ou um dos tipos referidos no subparágrafo (a) (ii) ou (iii); e inclui
produtos biológicos, dispositivos médicos e bens declarados como bens terapêuticos

O acima é geralmente interpretado para cobrir qualquer produto para uso em humanos
em conexão com:

1. Prevenir, diagnosticar, curar ou aliviar uma doença, enfermidade, defeito ou lesão

2. Influenciando a inibição ou modificação de um processo fisiológico

3. Testar a suscetibilidade das pessoas a uma doença ou enfermidade

4. Influenciar, controlar ou prevenir a concepção

5. Teste de gravidez

6. Ajudando a proteger a pele dos efeitos prejudiciais da radiação UV

Isso também inclui pertinências:

1. São usados como ingrediente ou componente na fabricação de produtos terapêuticos

2. São usados para substituir ou modificar partes da anatomia

3. Faça alegações terapêuticas em um rótulo ou em publicidade (incluindo embalagem)

A seguinte chave dicotômica trabalha com as sete questões fundamentais que os

produtores de nutracêuticos para o mercado australiano precisam responder a fim de
determinar onde seu produto se encaixa na interface terapêutica e bem terapêutico.

1. O produto é para uso oral em humanos?

(a) Sim: Vá para 2.
(b) Não: A questão da interface alimento/medicamento não se aplica e o produto pode ser
um bem terapêutico.
2. O Secretário do Departamento de Saúde da Comunidade Australiana declarou que
determinados produtos ou classes de produtos são produtos terapêuticos (chamados de
Declaração da Seção 7 sob a Lei de Produtos Terapêuticos de 1989)?
(a) Sim: A questão da interface alimento/medicamento não se aplica e o produto é um
bem terapêutico.
(b) Não: Vá para 3.
3. O Secretário do Departamento de Saúde declarou que determinados bens ou classes
de bens são alimentos (chamada de declaração da Seção 7AA nos termos da Lei de Bens
Terapêuticos de 1989)?

1423
(a) Sim: o produto não é um “bem terapêutico”. É provável que seja “alimento” dentro da
legislação de regulamentação alimentar estadual/territorial e/ou regulamentado por outra
legislação estadual/territorial.
(b) Não: Vá para 4.
4. O produto se encaixa em algum dos padrões do Código de Padrões Alimentares
(aditivo alimentar, vitaminas e minerais, auxiliar de processamento, novos alimentos, etc.;
consulte http://www.foodstandards.gov.au/code/Pages/ default.aspx)
(a) Sim: o produto não é um “bem terapêutico”. É provável que seja “alimento” dentro da
legislação de regulamentação alimentar estadual/territorial e/ou regulamentado por outra
legislação estadual/territorial.
(b) Não: Vá para 5.
5. O produto tem tradição de uso como alimento para humanos na Austrália e a forma do
produto não foi substancialmente alterada (por exemplo, não purificado, refinado, com
composição alterada etc.)?
(a) Sim: o produto não é um “bem terapêutico”. É provável que seja “alimento” dentro da
legislação de regulamentação alimentar estadual/territorial e/ou regulamentado por outra
legislação estadual/territorial.
(b) Não: Vá para 6.
6. Aplica-se algum dos seguintes casos: (a) o produto é apresentado de alguma forma
para uso terapêutico (é um bem terapêutico ou um dispositivo terapêutico)? (b)
susceptível de ser tomado para uso terapêutico devido à forma como é apresentado?; e
(c) é provável que seja tomado para uso terapêutico por qualquer outro motivo?
(a) Sim: o produto é um bem terapêutico e é avaliado e regulamentado de acordo com o
Therapeutic Goods Act 1989.
(b) Não: Vá para 7.
7. O produto pertence a uma classe de produtos cujo uso único ou principal é, ou
normalmente é, um uso terapêutico?
(a) Sim: o produto é um bem terapêutico e é avaliado e regulamentado de acordo com o
Therapeutic Goods Act 1989.
(b) Não: Se não for um dispositivo biológico ou médico, o produto não é um “bem
terapêutico”. Pode ser “alimento” dentro da legislação estadual/territorial de
regulamentação de alimentos.
Se a chave dicotômica acima determinar que o produto é um bem terapêutico, então
algumas consequências regulatórias específicas se aplicam:

1. O Therapeutic Goods Act 1989 permite que a Therapeutic Goods Administration regule
os bens terapêuticos que são importados para a Austrália e/ou aqueles que são
despachados, transportados ou vendidos através das fronteiras estaduais ou territoriais.
Não regula produtos que são formulados ou compostos dentro de um estado ou território
que não são enviados, transportados ou vendidos através de uma fronteira nacional,
estadual ou territorial (por exemplo, compostos e vendidos por um profissional apenas
dentro de um estado ou território da Austrália, também chamado de combinação

1424
extemporânea). Substâncias compostas extemporaneamente são regulamentadas por
autoridades estaduais e territoriais.

2. Os produtos terapêuticos destinados exclusivamente ao propósito de exportação

devem ser listados (não registrados) no Registro Australiano de Produtos Terapêuticos
antes do início da exportação.

3. A Therapeutic Goods Administration pode tomar contra o importador, exportador,

fabricante ou fornecedor se o produto não estiver incluído no Australian Register of
Therapeutic Goods (ARTG) ou de outra forma não for isento ou aprovado pelo
Therapeutic Goods Act 1989.

4. Se o produto pode ser um risco para a saúde do público (por exemplo, contém
substâncias que só estão disponíveis quando prescritas por um profissional de saúde), a
TGA pode publicar um alerta ao público e, se necessário, solicitar um recall dos produtos.

5. Se um produto não for um bem terapêutico e estiver na ARTG, a TGA pode tomar
medidas de acordo com a Seção 9F do Therapeutic Goods Act 1989 para remover o
produto.

3. O que é um medicamento complementar na Austrália?

Algumas classes de nutracêuticos, que atendem à definição de bem terapêutico, podem
ser classificadas como medicina complementar na Austrália. Como regra, o rigor
regulatório aplicado aos medicamentos complementares é inferior ao aplicado a um
medicamento ou dispositivo médico. As avaliações de aprovação de pré-comercialização
de medicamentos complementares geralmente se concentram na segurança do produto e
na qualidade de fabricação. O padrão de evidência para demonstrar a eficácia é muito
mais baixo do que o exigido para um medicamento ou medicamento: o foco da avaliação
pré-comercialização está na segurança humana e na qualidade e consistência de
fabricação. Eles podem ser listados no ARTG se certos requisitos forem atendidos.

Um medicamento complementar é definido como um bem terapêutico que consiste total

ou principalmente em um ou mais ingredientes ativos designados, cada um dos quais com
uma identidade claramente estabelecida e cada um com um uso tradicional. Os
ingredientes ativos designados podem incluir (mas não estão limitados a):

1. Um aminoácido
2. Carvão
3. Um sal de colina
4. Um óleo essencial
1425
5. Uma preparação homeopática
6. Um microrganismo, inteiro ou extraído, exceto uma vacina
7. Um mineral incluindo um sal mineral e um mineral de ocorrência natural
8. Um mucopolissacarídeo
9. Material animal não humano (ou um substituto produzido sinteticamente para o material
desse tipo), incluindo material seco, osso e cartilagem, gorduras e óleos e outros extratos
ou concentrados
10. Um lipídio, incluindo um ácido graxo essencial ou fosfolipídio
11. Substância produzida ou obtida de abelhas, incluindo geleia real, pólen de abelha e
própolis
12. Um açúcar, polissacarídeo ou carboidrato
13. Uma vitamina ou pró-vitamina

Os medicamentos complementares são regulamentados de acordo com as Diretrizes

Regulatórias Australianas para Medicamentos Complementares
(https://www.tga.gov.au/publication/australianregulatory-guidelines-complementary-
medicines-argcm). Conforme discutido acima, substâncias extemporaneamente
compostas e dispensadas podem estar isentas do Regulamento Federal Australiano sob
condições específicas; no entanto, eles podem estar sujeitos à regulamentação por
autoridades estaduais e territoriais.

4. O que é e não é um produto terapêutico na Nova Zelândia e como

eles são regulamentados?
Os produtos terapêuticos e dispositivos médicos na Nova Zelândia são potencialmente
regulamentados por até 19 diferentes peças de legislação. Medicamentos novos ou
modificados e produtos relacionados que são classificáveis como produtos terapêuticos
requerem avaliação pré-comercialização para estabelecer segurança, qualidade e
eficácia, além de serem submetidos a um processo de avaliação pós-comercialização. O
termo “produto terapêutico” é um termo abrangente que é aplicado a produtos que se
destinam a ser usados em ou em humanos para uma finalidade terapêutica, conforme
definido pela Seção 4 do Medicines Act 1981. Um produto terapêutico é projetado para:

1. Prevenir, diagnosticar, monitorar, aliviar, tratar, curar ou compensar uma doença,

enfermidade, defeito ou lesão.
2. Influenciar, inibir ou modificar um processo fisiológico.
3. Teste a suscetibilidade das pessoas a uma doença ou enfermidade.
4. Influenciar, controlar ou impedir a concepção.

1426
5. Teste para gravidez
6. Investigue, substitua ou modifique partes da anatomia humana.
De acordo com a abordagem da Nova Zelândia, os produtos são considerados como
tendo uma finalidade terapêutica se:

1. O produto contém um ou mais ingrediente (s) com ação farmacológica.

2. Uma finalidade terapêutica é reivindicada para o produto (geralmente no rótulo ou em

material promocional).

3. Uma finalidade terapêutica está implícita para o produto (geralmente no rótulo ou em

material promocional).

4. O produto contém um medicamento listado na Primeira Tabela dos Regulamentos de

Medicamentos ou um Aviso no Diário da Nova Zelândia emitido sob a Seção 106 do
Medicines Act 1981 (a menos que o produto esteja em uma forma que não possa ser
administrada a um ser humano um propósito terapêutico).

Para que um produto não seja considerado como tendo uma finalidade terapêutica, o
rótulo e o material promocional devem (pelo menos) evitar o seguinte:

1. Um nome comercial que transmite uma finalidade terapêutica pretendida

2. Palavras como remédio, medicamentoso ou terapêutico

3. Declarações de que um produto irá/pode/pode prevenir ou tratar uma doença ou

condição ou dar alívio dos sintomas de uma doença ou condição

4. Declarações de uso terapêutico tradicional ou uso por grupos étnicos para fins
terapêuticos
5. Instruções de uso que inferem uma finalidade terapêutica, como “instruções de
dosagem” ou instruções para “aplicar na área afetada”

6. Declarações de que a lei impede o fornecedor de fazer alegações terapêuticas que ele
considera que deveria ser capaz de fazer sobre o produto

Criticamente, as declarações nutricionais (ou seja, declarações sobre uma característica

bioquímica ou nutricional normal de um produto) não são consideradas como alegações
terapêuticas. Crítico, as declarações nutricionais (ou seja, declarações sobre uma
característica bioquímica ou nutricional normal de um produto) não são consideradas
terapêuticas reivindicações.

A Seção 2 do Medicines Act 1981 trata os remédios fitoterápicos como uma subcategoria
de produtos terapêuticos, desde que não contenham um ingrediente médico prescrito,

1427
restrito ou somente farmacêutico. Para ser definido como um remédio fitoterápico, o
produto deve ser derivado de um material vegetal que foi seco, triturado, submetido à
extração aquosa ou etílica, ou ser uma mistura do material derivado de planta com uma
substância inerte.

A Seção 94 do Medicines Act 1981 também identifica outra classe de substâncias

denominadas “produtos relacionados”. Esses são produtos que são principalmente
alimentos, dentífricos ou cosméticos que também têm uma finalidade terapêutica. Muitos
produtos relacionados não contêm um ingrediente de medicamento de prescrição, restrito
ou somente farmacêutico.

Na Nova Zelândia, os suplementos dietéticos são controlados pelo Dietary Supplements

Regulations 1985. Esses produtos são definidos pelo Regulamento 2 como uma
substância comestível, em uma forma de dosagem controlada, que se destina a
suplementar a ingestão de substâncias normalmente derivadas dos alimentos. Essas
substâncias não devem ser comercializadas ou promovidas para fins terapêuticos.

5. O que é um novo alimento na Austrália e na Nova Zelândia

Alguns nutracêuticos que não são bens terapêuticos ou produtos terapêuticos podem ser
classificados como um novo alimento de acordo com o Código de Padrões Alimentares da
Austrália Nova Zelândia – Padrão 1.5.1. Como os medicamentos complementares, esses
produtos exigem aprovação pré-comercialização antes da venda e uso. Normalmente,
uma avaliação pré-comercialização muito extensa e detalhada é realizada pela Food
Standards Australia New Zealand, uma agência transnacional. Regulamentação adicional
pode ocorrer no nível do estado e território australiano ou na Nova Zelândia.

Um novo alimento é uma substância ou ingrediente alimentar proposto que não tem
histórico de uso tradicional. O termo “sem histórico de uso tradicional” é definido
especificamente da seguinte forma (https://www.legislation.gov.au/Details/F2017C00324):

(a) um alimento que não tem histórico de consumo humano na Austrália ou na Nova
Zelândia; ou

(b) uma substância derivada de um alimento, quando essa substância não tiver um
histórico de consumo humano na Austrália ou na Nova Zelândia a não ser como
componente desse alimento; ou

(c) qualquer outra substância, em que essa substância, ou a fonte da qual deriva, não
tenha um histórico de consumo humano como alimento na Austrália ou na Nova Zelândia.

1428
(d) A presença de um alimento em um alimento para fins médicos especiais ou o uso de
um alimento como alimento para fins médicos especiais não constitui uma história de
consumo humano na Austrália ou na Nova Zelândia em relação a esse alimento para fins
de esta seção.

A avaliação pré-comercialização de novos alimentos na Austrália normalmente envolve

uma avaliação profunda e detalhada das considerações de saúde pública e segurança,
levando em consideração:

1. O potencial para efeitos adversos em humanos

2. A composição ou estrutura da comida

3. O processo pelo qual a comida foi preparada

4. A fonte da qual é derivado

5. Padrões e níveis de consumo dos alimentos

6. Quaisquer outros assuntos relevantes

As categorias típicas de novos alimentos podem incluir (a) plantas ou animais e seus
componentes; (b) extratos vegetais ou animais; (c) ervas, incluindo extratos; (d) macro
componentes dietéticos; (e) entidades químicas únicas; (f) microrganismos, incluindo
probióticos; e (g) alimentos produzidos a partir de novas fontes ou por um processo não
anteriormente aplicado aos alimentos.

6. Comentários finais e orientações futuras

A questão crítica que deve ser tratada por um produtor de nutracêuticos na Austrália e/ou
Nova Zelândia é se o produto terá ou não uma alegação terapêutica. Embora os cenários
regulatórios da Austrália e da Nova Zelândia sejam complexos, o primeiro princípio
predominante em ambos os sistemas é que se um produto fizer qualquer tipo de alegação
terapêutica em qualquer forma de mídia (rotulagem, embalagem, promoção, publicidade,
etc.) em relação à substância, então, será potencialmente regulado como um bem
terapêutico ou produto terapêutico. O segundo princípio predominante é que se o produto
contiver qualquer medicamento ou substância farmacêutica (incluindo qualquer coisa que
esteja quimicamente relacionada a um medicamento ou substância farmacêutica ativa),
então será potencialmente regulado como um bem terapêutico ou produto terapêutico. O
terceiro princípio predominante é que, independentemente da categoria regulamentar em
que um nutracêutico se enquadra na Austrália e na Nova Zelândia, a segurança humana e
as características de qualidade do produto permanecem primordiais. Ambos os países
1429
têm processos legais e regulatórios muito substanciais para a restrição e/ou remoção de
produtos que apresentam questões de segurança humana. Se os produtores de
nutracêuticos tiverem alguma dúvida sobre a legalidade de seus produtos e como eles
podem ser regulamentados, eles devem entrar em contato com a Australian Therapeutic
Goods Administration, Medsafe New Zealand ou Food Standards Australia New Zealand
antes de produzir, importar ou comercializar seus produtos.

Referências
Commonwealth of Australia Therapeutic Goods Act 1989. https://www.legislation.gov.au/Series/C2004A03952
Food Standards Australia New Zealand. Advisory Committee Novel Foods.
http://www.foodstandards.gov.au/industry/novel/novelcommittee/Pages/default.aspx
Food Standards Australia New Zealand. Guidance tool for determining whether a food is novel or not.
http://www.foodstandards.gov.au/industry/novel/documents/Guidance%20Tool%20-%20for%20website%20_2_.pdf
Food Standards Australia New Zealand. Regulation of novel foods.
http://www.foodstandards.gov.au/industry/novel/Pages/default.aspx
Medsafe New Zealand. Categorisation of products. http://www.medsafe.govt.nz/regulatory/categorisation-of-
products.asp
Medsafe New Zealand. Introductory Regulatory Guidance. http://www.medsafe.govt.nz/regulatory/regguidance.asp
The Association of New Zealand Advertisers. Therapeutic advertising pre-vetting service.
https://www.anza.co.nz/Category?Action=View&Category_id=262
Therapeutic Goods Administration Australia. Food-Medicine InterfaceGuidance Tool (FMIGT).
https://www.tga.gov.au/food-medicineinterface-guidance-tool-fmigt
Therapeutic Goods Administration Australia. How therapeutic goodsare regulated in Australia.
https://www.tga.gov.au/how-therapeuticgoods-are-regulated-australia
Therapeutic Goods Administration Australia. TGA basics. https://www.tga.gov.au/tga-basics

1430
 Diretrizes regulatórias para nutracêuticos e
suplementos dietéticos para animais na Turquia
Ayhan Filazi e Begüm Yurdakok-Dikmen

Resumo
Devido à tendência global de alimentos saudáveis do produtor até o consumidor, que
compromete a saúde humana, a segurança alimentar e a proteção ambiental, os
consumidores hoje são mais sensíveis a alimentos de origem animal livres de
contaminantes. Esses contaminantes são principalmente fertilizantes, aditivos
biotecnológicos, produtos agrícolas, resíduos de pesticidas, medicamentos veterinários,
aditivos químicos, produtos geneticamente modificados e contaminantes decorrentes do
processamento, manutenção, transporte e armazenamento de produtos. Para aumentar a
quantidade de produtos de origem animal e a qualidade e padrões de higiene desses
produtos, os aditivos para rações estão sendo amplamente utilizados. A capacidade de
identificar substâncias aditivas usadas na nutrição animal – tanto em alimento quanto em
rações – é muito importante na investigação dos efeitos dessas substâncias na saúde
humana. Na Turquia, os nutracêuticos estão listados como “suplementos
alimentares/rações” na Lei de Serviços Veterinários, Alimentos para Saúde Vegetal e
Rações. Toda a legislação e diretrizes que estão sendo implementadas para este fim na
Turquia estão em conformidade com a legislação da União Europeia. Este capítulo
fornece informações sobre os regulamentos relativos à aprovação de aditivos para rações
usados na Turquia, bem como aqueles relativos ao lançamento e controle desses aditivos.

Palavras-chave: Animal · Diretrizes regulatórias de suplementos alimentares · Legislação

· Nutracêuticos · Turquia

A. Filazi · B. Yurdakok-Dikmen - Department of Pharmacology and Toxicology, Faculty of Veterinary

Medicine, Ankara University, Ankara, Turkey

1. Introdução
A ração, que é utilizada na nutrição animal, constitui um importante elo da cadeia
produtiva alimentar. A ração produzida para atender às necessidades de nutrição animal
apresenta uma mistura balanceada e apropriada e desempenha um papel importante no
aumento da produção animal e na obtenção de uma criação animal econômica. Os alvos
da criação de animais consistem em obter a máxima eficiência por animal; essas metas
1431
precisam ser cumpridas para que as quantidades de alimentos derivados de animais
sejam confiáveis, de modo a proteger a saúde pública. Um ponto importante na obtenção
de alimentos seguros de origem animal é a produção confiável de alimentos de acordo
com as regras de higiene. Para garantir a segurança alimentar da fazenda à mesa, a
ração precisa ser produzida, transportada, armazenada e usada de acordo com as boas
práticas de produção e regras de higiene em todas as fases, desde a produção primária
até a aquisição do produto final (Dorne e Fink-Gremmels 2013).

A produção de gado compreende uma parte importante do setor agrícola e da economia

da Turquia. A crescente demanda por produtos de origem animal devido ao aumento da
população, junto com as crescentes demandas de exportação, aumentou as expectativas
colocadas tanto nos criadores locais quanto nas grandes empresas em relação à
produção sustentável limpa/verde/ética. A Turquia tem uma vantagem distinta, situada no
centro de três zonas climáticas diferentes e três tipos diferentes de condições de solo com
uma geografia única que conduz ao crescimento ideal de vários produtos derivados de
plantas e animais.

De acordo com as estatísticas de produção animal do Instituto de Estatística da Turquia

(2017), houve aumentos no número de bovinos, pequenos ruminantes e aves, juntamente
com seus produtos, em relação a 2016. Os números de gado na Turquia, por espécie, são
os seguintes: bovinos (bovinos e bubalinos), 16.105 milhões de cabeças; pequenos
ruminantes (ovinos e caprinos), 44.312 milhões de cabeças; frangos de corte, 221.245
milhões de unidades; e galinhas poedeiras, 121.556 milhões de unidades (Instituto de
Estatística da Turquia 2017). Esses grandes números indicam a aplicação de sistemas de
gestão intensivos apoiados em grandes inovações tecnológicas e mudanças estruturais.
Com esses sistemas, o desenvolvimento sustentável está diretamente ligado à nutrição
animal sustentável e às práticas de controle de doenças – práticas que devem ser
aplicadas com cuidado para garantir rendimentos de produções animais seguros,
eficientes e de alta qualidade. Prevê-se que a prevenção e gestão de controle de doenças
para proteger a economia e aumentar a segurança alimentar sejam promovidas na forma
de sistemas de produção sem drogas, principalmente em resposta a problemas de
resistência e à demanda pública. Enquanto isso, métodos de baixo custo ainda estão em
alta demanda entre os produtores. Dada a crescente ameaça da resistência
antimicrobiana no tratamento da saúde humana e animal na Turquia (Yilmaz et al. 2016),
surgiram estratégias alternativas para manter estratégias de produção ideais e lidar com
um número crescente de animais. Os nutracêuticos desempenham um papel importante
em sistemas de produção livres de drogas, uma vez que seus efeitos antiinflamatórios,

1432
antioxidantes e moduladores da microbiota são fundamentais para a conservação da
saúde animal.

Durante o processo de harmonização da legislação turca relativa à segurança de

alimentos para consumo humano e animal com a legislação da União Europeia (UE)
(Regulamento 178/2002/CE, 2002), a primeira lei de Serviços Veterinários, Saúde
Vegetal, Alimentos e Alimentos para Animais (Lei No 5996, 2010) foi preparada.

A legislação secundária sobre a questão dos alimentos para animais preparada de acordo
com esta Lei é a seguinte:

1. O Regulamento sobre Higiene dos Alimentos (27 de dezembro de 2011)

2. O Regulamento sobre subprodutos animais e produtos derivados não destinados ao

consumo humano (24 de dezembro de 2011)

3. O Regulamento sobre Colocação no Mercado e Uso de Alimentos para Animais (27 de

dezembro de 2011)

4. O Comunicado sobre Substâncias Indesejáveis na Alimentação Animal (19 de abril de

2014)
5. O Regulamento sobre o Controle Oficial de Alimentos para Animais e Alimentos (17 de
dezembro de 2011)

6. O Regulamento sobre aditivos alimentares para uso na nutrição animal (18 de julho de
2013)
7. O Comunicado Relativo à Preparação e Apresentação de Pedidos e à Avaliação e
Autorização de Aditivos para Alimentos para Animais (27 de maio de 2016)

Estas legislações foram todas preparadas em conformidade com as Uniões Europeias e

atualizadas regularmente de acordo com a legislação da UE. Este capítulo tem como
objetivo fornecer informações sobre as diretrizes regulatórias para nutracêuticos e
suplementos dietéticos em animais na Turquia.

2. Aplicações relacionadas ao regulamento de higiene alimentar

O regulamento de higiene dos alimentos para animais (Regulamento 2011/28155, 2011a)
foi elaborado de acordo com o Regulamento da UE n.º 183/2005/CE, cujos objetivos são
fornecer as regras gerais relativas à higiene dos alimentos e as condições necessárias
para o registo e aprovação dos alimentos para animais empresas, permitem a
rastreabilidade dos alimentos e tomam as providências necessárias em relação a esses
assuntos. De acordo com este regulamento, as empresas de alimentos para animais são
1433
divididas em duas categorias – a saber, empresas registradas e empresas aprovadas. De
acordo com o Regulamento sobre Subprodutos Animais e Derivados Não Destinados ao
Consumo Humano (Regulamento 2011/28152, 2011), empresas de transformação (farinha
de carne e ossos, farinha de frango, farinha de peixe, etc.) e empresas que produzem
gatos ou cães alimentos são obrigados a obter a aprovação das autoridades competentes
relevantes. Além disso, todas as outras empresas devem ser registradas. Em julho de
2018, aproximadamente 13.600 empresas de rações foram aprovadas e registradas na
Turquia (Tabela 1). No setor de rações mistas em 2017, quase 23 milhões de toneladas
de rações mistas foram produzidas no total, a maioria das quais era ração para frangos de
corte (Ministério da Agricultura e Silvicultura 2018).

Tabela 1 Número de empresas de rações registradas e aprovadas na Turquia 1

Nº de Aprovado/
Tipo de operação
empresas Registrado
Empresas produtoras de rações mistas para alimentos para animais 322 A
Empresas que produzem sua própria ração mista 108 A
Empresas produtoras de aditivos para rações 15 A
Empresas produtoras de premix 100 A
Empresas produtoras de alimentos para cães e gatos 29 A
Empresas de renderização 77 A
Empresas de vendas de aditivos e premix para rações 1002 A
Empresas de produção mista de alimentos para animais 193 R
Empresas que produzem suas próprias rações mistas 443 R
Empresas produtoras de minerais em bloco (bloco de lamber) 23 R
Empresas produtoras de aditivos e premix para rações 28 R
Armazenamento de varejo e lojas de vendas 11.237 R
Empresas produtoras de farinha de peixe 23 R
Total 13.600
1
Referência: Ministério da Agricultura e Florestas 2018

As empresas de alimentos para animais são obrigadas a cumprir as regras de higiene

especificadas neste regulamento, em todas as fases da produção, operação e distribuição
(excluindo a produção primária). De acordo com este regulamento, os operadores de
alimentos para animais são obrigados a estabelecer e implementar um sistema de
segurança dos alimentos para animais, baseado nos princípios da Análise de Perigos e
Pontos Críticos de Controle (HACCP) na produção. Ao operar de acordo com os
princípios HACCP, é fundamental identificar e controlar os perigos que podem ter efeitos
adversos sobre a confiabilidade de qualquer alimento animal produzido e comercializado;
desta forma, a produção de ração segura e confiável é garantida (Regulamento
2011/28155, 2011a).
1434
Com a avaliação de risco, é avaliada a probabilidade de ocorrência de um fator ou
situação física, química ou biológica que pode ter um impacto negativo na segurança dos
alimentos para animais, bem como a intensidade dos impactos prováveis, onde uma
pontuação de risco de perigo é determinada. Ao pontuar os perigos dessa forma, é
possível atribuir maior importância aos riscos com pontuações mais altas. Depois de
classificar os perigos em termos de suas pontuações, se ocorrer um perigo com uma
pontuação de alto risco, seria importante aplicar medidas de controle para eliminar o
perigo ou mitigá-lo a um nível aceitável. Este processo pode ser prontamente aplicado a
perigos no que se refere a rações e alimentos para animais.

3. Regulamento sobre colocação no mercado e uso de rações

Este Regulamento (Regulamento 2011/28155, 2011b) foi preparado de acordo com o
Regulamento da UE nº 767/2009 / CE, com o objetivo de garantir a segurança alimentar
de alto nível, protegendo a saúde pública e animal, informando adequadamente os
usuários e consumidores e regulamentando condições relacionadas com o lançamento no
mercado de alimentos para animais, bem como a qualidade dos mesmos. De acordo com
este regulamento, os alimentos para animais que não sejam seguros não podem ser
lançados no mercado. As empresas de alimentos para animais têm a obrigação de
garantir que os alimentos que lançam no mercado sejam seguros e que sejam rotulados,
embalados e colocados no mercado de acordo com suas características e uso pretendido.
Este regulamento também especifica que todos os componentes do conteúdo alimentar
sejam especificados na rotulagem do produto, juntamente com suas proporções de peso
(em ordem decrescente). A conformidade com este Regulamento de alimentos para
animais exige que todos os alimentos sejam rotulados dessa maneira antes de serem
lançados no mercado.

4. Comunicado sobre substâncias indesejáveis na alimentação animal

Este Comunicado (Comunicado 2014/11, 2014) foi preparado de acordo com a Diretiva da
UE nº 2002/32/EC. “Substâncias indesejáveis” na alimentação animal são materiais que
estão na alimentação além de elementos patogênicos e que representam riscos
potenciais para a saúde humana e animal e para o meio ambiente ou que podem ter um
impacto negativo na produção animal. Este Comunicado especifica os limites máximos
permitidos para substâncias não desejadas na alimentação. Como essas substâncias
constituem um perigo químico dentro do escopo da auditoria do Comunicado, as
1435
inspeções são realizadas procurando e analisando contaminantes inorgânicos e
compostos nitrogenados, micotoxinas, toxinas vegetais, compostos orgânicos clorados
(incluindo dioxinas e PCB) e contaminações botânicas prejudiciais. Também
inspecionados são aditivos de ração aprovados que não podem ajudar, mas são
transportados com outros alimentos. Se os valores determinados no decorrer desta
análise excederem os limites máximos impostos pelo Comunicado, o alimento é
considerado “alimento inseguro” e não pode ser usado para alimentar animais nem
colocado no mercado.

5. Regulamento sobre o Controle Oficial de Alimentos para Rações e

Alimentos
Este regulamento (Regulamento 2011/28145, 2011) é preparado de acordo com o
Regulamento da UE n.º 882/2004/CE. Para garantir a segurança do abastecimento de
alimentos para consumo humano e animal, o presente regulamento visa ajudar a controlar
todas as fases de produção e distribuição do campo à mesa e promover investigações
sobre se as condições especificadas na legislação estão ou não sendo cumpridas. As
inspeções de alimentos para animais executadas de acordo com o presente regulamento
são realizadas no contexto do plano anual de controle de alimentos para animais. As
inspeções também são realizadas em resposta a notificações e reclamações. As
inspeções realizadas no âmbito do plano de controle da alimentação são programadas
considerando principalmente os resultados das investigações realizadas no ano anterior,
bem como a capacidade de produção da empresa, suas variedades de ração, possíveis
perigos do produto, riscos incorridos por tais perigos nos animais e saúde humana e meio
ambiente, e fatores semelhantes. A análise de risco é realizada todos os anos, e as
condições subjacentes também são revisadas a cada ano. Durante essas inspeções, as
empresas de alimentos para animais são investigadas no que diz respeito ao
cumprimento das condições de higiene e se o alimento que está sendo produzido e/ou
lançado no mercado é controlado em termos de conformidade com os regulamentos de
segurança dos alimentos para animais. As amostras de ração coletadas durante as
inspeções de segurança de ração são analisadas com base no risco (ou seja, contra
perigos químicos e biológicos) e com relação à conformidade com a rotulagem. Com base
no risco, as análises são realizadas com relação a substâncias indesejáveis na ração (por
exemplo, metais pesados, micotoxinas, anticoccidianos, pesticidas e dioxinas),
substâncias que são proibidas de serem adicionadas à ração (certas proteínas de origem
animal na ração de ruminantes) , antibióticos), contaminação microbiológica (Salmonella
1436
ou Enterobacteriaceae) e aquelas relativas ao cumprimento da legislação de
biossegurança. Em particular, espera-se que a frequência de testes e análises de controle
com base em risco aumente a cada ano.

6. Regulamento sobre aditivos alimentares para uso na nutrição animal

Na Turquia, os processos relativos a aditivos para rações são realizados de acordo com
as disposições do Regulamento sobre aditivos para rações para uso na nutrição animal
(Regulamento 2013/28711, 2013), que visa proteger a saúde humana e animal, o bem-
estar animal e o meio ambiente. Este regulamento estabelece procedimentos e princípios
para a autorização, inspeção e rotulagem de aditivos alimentares e pré-misturas
destinados ao mercado. O presente regulamento não se aplica a medicamentos
veterinários, com exceção dos coccidiostáticos e histomonostáticos utilizados como
aditivos para a alimentação animal. Além disso, este Regulamento é baseado nos artigos
21, 22, 24, 25, 26 e 43 da Lei 5996, a legislação básica na Turquia sobre controle de
qualidade/segurança alimentar, proteção ao consumidor, Codex Alimentarius, comércio
internacional, inspeção, crimes/penalidades, alimentos para animais/rações, saúde
animal, bem-estar animal, proteção de plantas e pragas/doenças. Também é preparado
de acordo com o Regulamento da UE nº 1831/2003/EC. Os processos relativos à
aprovação de uma nova substância aditiva para rações não indicada na lista registrada de
substâncias aditivas para rações são realizados de acordo com o Comunicado sobre a
Preparação e Apresentação de Pedidos e a Avaliação e Autorização de Aditivos para
Alimentos para Animais (Comunicado 2016/15, 2016). Este Comunicado também está em
conformidade com o Regulamento da UE nº 429/2008/EC.

No que diz respeito às substâncias aditivas e premix para alimentos para animais, os
controles são realizados especialmente no que diz respeito à pesquisa de metais pesados
e antibióticos e para garantir a conformidade com os regulamentos de informação do
rótulo. O uso de antibióticos como aditivos alimentares está proibido desde 2006. No
entanto, nos casos em que a doença é observada em um animal, exceções são
permitidas – nesse caso, se um medicamento de tratamento for usado e administrado em
conjunto com seu alimento, alimento aprovado – as empresas produtoras podem produzir
alimentos para animais que contenham antibióticos, mas apenas mediante receita de um
veterinário. Essas premix médicas veterinárias devem ser aprovadas pelas autoridades
competentes relevantes.

1437
Os aditivos para rações são usados na produção animal para melhorar a capacidade do
produto e para garantir a qualidade da higiene e o cumprimento dos padrões. Os aditivos
para rações são geralmente fornecidos do exterior por empresas que produzem rações
mistas ou comercializam aditivos para rações nas formas pura, concentrada ou pré-
misturada. Os aditivos para rações importados na forma pura ou concentrada são
apresentados para uso após terem sido diluídos em certas proporções com um
transportador apropriado nas instalações de preparação da premix. Os aditivos para
alimentos para animais podem ser adicionados como uma única premix de aditivos com
uma substância portadora de alimentos para animais mista, na forma de misturas
contendo mais de uma substância eficaz; na forma de premix especiais, como
concentrados de vitaminas; como premix mistas contendo minerais de vitaminas ou
aminoácidos; ou como minerais ou alimentos complementares contendo macro e
oligoelementos. Os aditivos para rações que são usados em rações misturadas para aves
em níveis de proporção significativa (para vários fins) são geralmente usados em
proporções mais baixas em rações misturadas para bovinos e ovinos, de modo a conter
mais premix de vitaminas/oligoelementos.

Os aditivos para rações são substâncias com estruturas orgânicas ou inorgânicas que são
adicionadas à ração para garantir o consumo ideal de substâncias nutricionais, aumentar
a quantidade de produtos de origem animal, melhorar o uso da ração auxiliando na
digestão e metabolismo, proteger a saúde animal, influenciar positivamente a qualidade
dos produtos de origem animal, facilitar a preparação e armazenamento de ração, ou
obter benefícios econômicos de outras maneiras (Regulamento 2013/28711, 2013).
Embora sejam usados em proporções mais baixas na alimentação mista, sua eficácia e
importância são muito maiores.

De acordo com o Regulamento da UE nº 2013/28711 e a Legislação Turca, o termo

“aditivos para rações” refere-se a substâncias, microrganismos ou preparações, que não
sejam matéria-prima e premix, que são intencionalmente adicionadas à ração ou água
para funcionar, em particular, uma ou mais das seguintes funções:

1. Afeta favoravelmente as características do alimento

2. Afeta favoravelmente as características do produto animal

3. Afeta favoravelmente a cor de peixes ornamentais e pássaros

4. Satisfazer as necessidades nutricionais dos animais

5. Afeta favoravelmente as consequências ambientais da produção animal

1438
6. Afeta favoravelmente a produção, desempenho ou bem-estar animal, particularmente
afetando a flora gastrointestinal ou a digestibilidade dos alimentos

7. Tem um efeito coccidiostático ou histomonostático

Hoje, um grande número de aditivos é usado no apoio à nutrição animal. Na Turquia,

apenas o uso de aditivos para rações aprovados pela UE é permitido (Registro de Aditivos
para Rações da União Europeia, 2018). A Tabela 2, lista as categorias de aditivos para
alimentos para animais aprovados pela autoridade competente relevante (Ministério da
Agricultura e Florestas 2018).

Tabela 2 Aditivos usados em rações na Turquia

Grupo Aditivos para rações
Conservantes; antioxidantes; agentes emulsionantes e estabilizantes, espessantes e
Aditivos agentes gelificantes; reguladores de acidez; aglutinantes, agentes antiaglomerantes e
tecnológicos coagulantes; substâncias que controlam a contaminação por radionuclídeos; aditivos
de silagem
Aditivos
Corantes e compostos aromatizantes
sensoriais
Vitaminas, pró-vitaminas e substâncias quimicamente bem definidas com efeito
Aditivos
semelhante; compostos de oligoelementos; aminoácidos, seus sais e análogos; ureia e
nutricionais
seus derivados
Aditivos Intensificadores de digestibilidade; estabilizadores da flora intestinal; substâncias que
zootécnicos afetam favoravelmente o meio ambiente; outros aditivos zootécnicos
Coccidiostáticos e
histomonostáticos
-

6.1 Aditivos Tecnológicos

6.1.1 – Conservantes

Essas substâncias ou microrganismos protegem os alimentos contra a deterioração

causada por microrganismos ou seus metabólitos. Alguns dos materiais usados
atualmente como conservantes são ácido láctico, ácido acético, ácido propiônico, ácido
sórbico, ácido DL-málico, sorbato de potássio, acetato de cálcio, propionato de sódio,
propionato de cálcio, propionato de amônio, formato de amônio, lactato de cálcio, ácido
cítrico, ácido ortofosfórico, sorbato de potássio, diacetato de sódio, acetato de cálcio,
formato de sódio, diformato de potássio, formato de cálcio, ácido fumárico (aves e suínos,
animais jovens alimentados com substitutos do leite, outras espécies animais), bissulfato
de sódio (animais de estimação e outros não alimentares – produzindo outros animais que
não gatos e visons, gatos, visons), nitrito de sódio (cães, gatos), benzoato de sódio 140 g/
kg + ácido propiônico 370 g/kg + propionato de sódio 110 g/kg (porcos, aves, bovinos,
ovinos, caprinos, coelhos, cavalos) e Lactobacillus fermentum + L. plantarum + L.

1439
rhamnosus (cães). O uso de formaldeído como conservante de rações foi proibido desde
7 de fevereiro de 2018.

6.1.2 – Antioxidantes

Os antioxidantes são substâncias que prolongam o tempo de armazenamento de

alimentos e matérias-primas para rações, protegendo-os contra a deterioração induzida
pela oxidação. Alguns antioxidantes são sintéticos; outros são naturais e, nos últimos
anos, seu uso tem aumentado. Os materiais usados para esta finalidade incluem ácido
ascórbico, ascorbato de sódio, ascorbato de cálcio, palmitato de ascorbil, extratos de
tocoferol de óleos vegetais, extratos ricos em tocoferol de óleos vegetais (ricos em delta),
alfa-tocoferol, propil galato, hidroxianisol butilado, hidroxitolueno butilado e etoxiquina.
Algumas plantas aromáticas (por exemplo, sálvia, alecrim, louro, cravo, tomilho, cominho,
hortelã-pimenta e canela) têm sido usadas como antioxidantes.

6.1.3 – Agentes Emulsificantes e Estabilizadores, Espessantes e Agentes Gelificantes

Emulsionantes são substâncias que permitem formar ou manter nos alimentos uma
mistura homogênea de duas ou mais fases imiscíveis. Eles são usados para fornecer uma
distribuição homogênea da alimentação e, normalmente, são adicionados à alimentação
na forma de óleo para fornecer energia. Os estabilizantes são substâncias que permitem
manter o estado físico-químico dos alimentos para animais; eles são usados para
aumentar a estabilidade de vitaminas, aminoácidos essenciais e certos medicamentos
que são adicionados à ração em quantidades muito pequenas. Os espessantes, por sua
vez, são substâncias utilizadas para aumentar a viscosidade dos alimentos, enquanto os
agentes gelificantes são substâncias que conferem mais textura aos alimentos por meio
da formação de um gel. Essas substâncias incluem lecitinas (apenas como agente
emulsionante), alginato de sódio [peixe; animais de estimação e outros animais não
produtores de alimentos (peles não comestíveis)], ágar [animais de estimação e outros
animais não destinados à produção de alimentos (peles não alimentícias)], carragena
[animais de estimação e outros animais não destinados à produção de alimentos (peles
não alimentícias)], goma de alfarroba (goma de alfarroba), goma de guar, tragacanto,
acácia (goma arábica), goma xantana, monooleato de polioxietileno (20) -sorbitano,
celulose microcristalina, metilcelulose, etilcelulose, hidroxipropilcelulose,
hidroxipropilmetilcelulose, rboximetilcelulose, polietilmetilcelulose, glicerilcelulose éster de
polietilenoglicol de ácidos graxos do óleo de soja [bezerros], monolaurato de sorbitano e
goma de cássia (cães, gatos).

1440
6.1.4 – Reguladores de acidez

Os reguladores de acidez são substâncias que ajustam o pH dos alimentos. DL e L-ácido

málico (gatos, cães), hidróxido de sódio (gatos, cães, peixes ornamentais) e bissulfato de
sódio são usados para este propósito.

6.1.5 – Aglutinantes, agentes antiaglomerantes e coagulantes

Os aglutinantes são substâncias que aumentam a tendência das partículas dos alimentos
a aderirem umas às outras, enquanto os agentes antiaglomerantes reduzem essa
tendência. Os coagulantes permitem que os alimentos líquidos escureçam até um estado
de coagulação semissólido. Algumas substâncias utilizadas para esses fins são
ferrocianeto de sódio, ferrocianeto de potássio, ácido silícico (precipitado e seco), sílica
coloidal, kieselgur (terra diatomácea purificada), silicato de cálcio (sintético),
aluminossilicato de sódio (sintético), argilas cauliníticas (sem amianto), misturas naturais
de esteatita e clorita, vermiculita, sepiolita, argila sepiolítica, lignosulfonatos,
natrolitafonolita, clinoptilolita de origem vulcânica (porcos, aves) e perlita.

6.1.6 – Substâncias que controlam a contaminação por radionuclídeos

As substâncias usadas para controlar a contaminação por radionuclídeos suprimem a

absorção de radionuclídeos ou promovem sua excreção. As substâncias utilizadas como
ligantes de césio radioativos (Cs137 e Cs134) incluem hexacianoferrato (II) de amônio férrico
(III) [ruminantes (domésticos e selvagens); bezerros antes do estado de ruminação;
cordeiros antes do estado de ruminação; crianças antes do estado de ruminação; suínos
(domésticos e selvagens)] e bentonita [todas as espécies animais].

6.1.7 – Aditivos de Silagem

Os aditivos para silagem são substâncias (incluindo enzimas ou microrganismos)

incorporados na ração para melhorar a produção de silagem. As enzimas utilizadas para
este fim incluem alfa-milase (de Aspergillus oryzae ou Bacillus amyloliquefaciens ou
Bacillus subtilis), beta-glucanase (de Aspergillus niger), celulase (de Aspergillus niger ou
Trichoderma longibrachiatumibrium) e xilanase (de Trichiatoderma long). Os
microrganismos usados na produção da silagem são Enterococcus faecium, Lactobacillus
brevis, L. buchneri, L. plantarum, L. fermentum, L. casei, L. kefiri, L. diolivorans, L.
paracasei, L. rhamnosus, Propionibacterium acidipropionici, preparação de L. plantarum e
Pediococcus pentosaceus. Além disso, ácidos orgânicos e produtos químicos como
propionato de amônio, sorbato de potássio, ácido fórmico, formato de sódio, ácido
propiônico, propionato de sódio, propionato de amônio e benzoato de sódio também são
usados na produção de silagem.
1441
6.2 Aditivos sensoriais

6.2.1 – Corantes

Corantes são substâncias que adicionam ou restauram a cor dos alimentos; estes,
quando dados a animais, adicionam corantes aos alimentos de origem animal e quando
consumidos podem afetar favoravelmente a cor de peixes ornamentais ou pássaros. São
comumente usados no setor avícola para melhorar a cor da carne e dos ovos de frango.
Para este propósito, materiais vegetais (por exemplo, milho amarelo, alfafa, glúten de
milho e pimenta vermelha em pó) contendo vários níveis de materiais corantes, bem como
carotenóides, como luteína, zeaxantina, capsantina e licopeno extraídos de fontes
naturais, são usados. Fontes sintéticas, como éster etílico de ácido beta-apo-80-
carotenóico, citranaxantina, tartrazina, amarelo-sol e Ponceau 4 R (cães, gatos) também
são usadas. As substâncias que melhoram ou restauram a cor dos alimentos incluem
amarelo quinolina (animais não produtores de alimentos), azorubina (carmoisina) (cães e
gatos) e azul patente V (animais não produtores de alimentos).

As substâncias que, quando dadas aos animais, adicionam cores aos alimentos de
origem animal incluem dimetildissuccinato de astaxantina (salmão, truta), Paracoccus
carotinifaciens vermelho rico em carotenóides (salmão, truta), cantaxantina (galinhas para
engorda e espécies avícolas menores para engorda, aves poedeiras e aves criadas para
postura) e astaxantina (peixes, crustáceos).

Finalmente, as substâncias que afetam favoravelmente a cor de peixes ou pássaros

ornamentais incluem cantaxantina (peixes ornamentais e pássaros ornamentais, exceto
galinhas reprodutoras ornamentais; galinhas reprodutoras ornamentais) e astaxantina
(peixes ornamentais). Outros corantes são tartrazina (pássaros ornamentais comedores
de grãos, pequenos roedores, peixes ornamentais), amarelo-sol FCF (pássaros
ornamentais comedores de grãos, pequenos roedores, peixes ornamentais), Ponceau 4 R
(peixes ornamentais), eritrosina (peixes ornamentais), indigotina (peixes ornamentais),
beta-caroteno (canários) e óxido de ferro vermelho (peixes ornamentais).

6.2.2 – Compostos Aromatizantes

Os compostos aromatizantes são substâncias que, quando adicionadas aos alimentos,

aumentam o cheiro ou a palatabilidade dos alimentos. Algumas das substâncias
permitidas para este fim são indol, beta-alanina, taurina, citronelol, metoxiacetofenona,
fenilmetanotiol (gatos, cães), alfa-metilcinamaldeído, éter difenílico, alfa-
hexilcinamaldeído, etil fenilacetato, isobutil fenilacetato, 3-metilbutilacetato, fenetil
fenilacetato, cinamato de metila, cinamato de etila, cinamato de benzila, acetato de

1442
fenetila, butirato de fenetila, acetato de cinamila, ácido fenilacético, fenilpropanal, álcool
cinamílico, cinamaldeído, butirato de etila, formato de geranila, propionato de geranila,
propionato de nerila, geraniol e nerol.

6.3 Aditivos Nutricionais

6.3.1 – Vitaminas, provitaminas e substâncias quimicamente bem definidas com efeitos

semelhantes

Sais e análogos de aminoácidos e vitaminas ou pró-vitaminas são adicionados à ração

para atender às necessidades nutricionais dos animais. Para tanto, são utilizadas
substâncias como vitaminas A, B, C, D, E e K e seus sais, cálcio-Dpantotenato L-carnitina,
ácido fólico, ômega-3 e ômega-6, etc., entre outros.

6.3.2 – Compostos de oligoelementos

Entre os oligoelementos adicionados à ração estão ferro, selênio, potássio, cobre, cobalto,
cálcio, manganês, zinco, molibdênio e seus sais.

6.3.3 – Aminoácidos, seus sais e análogos

Algumas das substâncias permitidas que se enquadram nesta categoria são lisina; L-
treonina, L-histidina e L-triptofano produzidos por fermentação com Escherichia coli; e L-
arginina, L-valina e DL-metionina sódica produzida por Corynebacterium glutamicum.

6.3.4 – Uréia e seus derivados

Esses aditivos são geralmente usados como fontes de proteína, e são adicionados às
dietas de animais ruminantes que possuem rúmen funcional. Os compostos mais
comumente usados são ureia, biureto, fosfato de ureia e diureidoisobutano.

6.4 Aditivos Zootécnicos

6.4.1 – Melhoradores de Digestibilidade

Essas substâncias aumentam a digestibilidade da dieta, por meio da ação sobre as

matérias-primas da ração quando fornecidas aos animais. Para este propósito,
polissacarídeos (lipases, fitases, pectinase, amilase e celulase) de vários fungos (por
exemplo, Trichoderma reesei, T. viride e Aspergillus niger) ou de certas bactérias (por
exemplo, Bacillus subtilis) são usados para quebrar polissacarídeos que não pode ser
digerido no ambiente intestinal das aves. Certas enzimas (celulase, xilanase,
endoglucanase, exoglucanase, amilase e proteases) também são usadas para melhorar a
digestão e melhorar o desempenho ruminal.

1443
6.4.2 – Estabilizadores da flora intestinal

Os estabilizadores da flora intestinal têm um efeito positivo na flora intestinal. Substâncias

cujas propriedades químicas já foram descritas, ou microorganismos que atuam
positivamente na microflora intestinal, ajudam a compor esse grupo. Enzimas, probióticos,
prebióticos, óleos essenciais e extratos de plantas são usados para regular a microflora
digestiva e intestinal, e esses aditivos são multifuncionais. Os microrganismos mais
comumente usados para produzir probióticos são as bactérias Lactobacillus e
Streptococcus, que produzem ácido lático. Saccharomyces cerevisiae de leveduras e
Aspergillus niger e A. oryzae de fungos também são amplamente utilizadas na produção
comercial de probióticos. Alguns probióticos são Saccharomyces cerevisiae,
Enterococcus faecium, Pediococcus acidilactici, Lactobacillus acidophilus, Bacillus
subtilis, B. amyloliquefaciens, B. licheniformis, Clostridium butyricum, Bifidobacterium
animalis ssp. animalis + Lactobacillus salivarius ssp. salivarius + E. faecium, E. faecium +
L. acidophilus + L. helveticus + L. delbrueckii ssp. lactis + L. delbrueckii ssp. bulgaricus +
Streptococcus thermophilus e L. lactis + Carnobacterium divergens + L. casei + L.
plantarum + S. cerevisiae.

Os prebióticos são aditivos alimentares não digeríveis intactos que aumentam o número e
a atividade das bactérias benéficas que vivem nos intestinos e, portanto, melhoram
positivamente a saúde animal. Os prebióticos mais comumente usados são
mananoligossacarídeos, frutooligossacarídeos, quitosana oligossacarídeos e beta-
glucanos.
Extratos de ervas e óleos essenciais – ambos naturais nos últimos tempos – oferecem
eficácia antimicrobiana, promovem o crescimento e melhoram a eficiência alimentar.
Plantas aromáticas, extratos e óleos como tomilho, alecrim, sálvia, cravo, louro, canela,
cominho, coentro, gengibre, mostarda, alho e hortelã são usados como aditivos.

6.4.3 – Substâncias que afetam favoravelmente o meio ambiente

As substâncias que afetam favoravelmente o meio ambiente incluem substâncias usadas

para reduzir a formação de gás metano em ruminantes, bem como a enzima fitase, que
demonstrou aumentar a utilização de fósforo vegetal em aves. A produção de metano por
microrganismos ruminais leva à atenuação da produção de gás metano (ou seja, da
energia de alimentação) e poluição do metano emitido para a atmosfera. Para prevenir a
produção de metano, óleos, cloral, produtos de hemiacetato de amido e compostos
halogenados (tetracloreto de cloreto de metileno, bromoclorometano) e anticoccidianos
(por exemplo, lacolosídeo e monensina) são usados. Outro suplemento é a fitase, usada
para aumentar o uso de fósforo vegetal entre as aves. A enzima fitase é usada para
1444
aumentar o uso de fósforo vegetativo e prevenir a poluição do fósforo, reduzindo os níveis
de fósforo nas águas subterrâneas e no solo.

6.4.4 – Outros aditivos zootécnicos

Aglutinantes de toxinas são usados para prevenir o crescimento de fungos nos alimentos.
Para tanto, são utilizados compostos como ácidos orgânicos (propiônico, sórbico,
benzóico e acético), sais de ácidos orgânicos (como propionato de cálcio e sorbato de
potássio), corantes orgânicos e sulfato de cobre. Materiais adsorventes, como polímeros
de polivinilpolipirrolidona, compostos de silicato de alumínio, carvão ativado,
aluminossilicato de cálcio e sódio hidratado (HSCAS), bentonita, perlita, terra de
diatomáceas e zeólita são usados como aglutinantes de toxinas em rações.
Substâncias tampão são normalmente usadas em ruminantes para prevenir a atenuação
do pH no rúmen – uma condição que normalmente decorre do uso de grandes
quantidades de alimentos intensos. Nos últimos anos, o bicarbonato de sódio tem sido
amplamente utilizado para esse fim; também são usados materiais tampão, como vários
sais de ácidos graxos voláteis, sais de fosfato, cloreto de amônio e sulfato de sódio.
A quitosana é um produto obtido pela desacidificação da quitina em uma estrutura de
biopolímero não tóxico e biodisponível que se assemelha à celulose encontrada em
artrópodes (caranguejos e camarões); é útil, pois promove melhor digestibilidade,
desempenho de crescimento, utilização de energia e proteína e fermentação ruminal.

6.5 Coccidiostáticos e Histomonostáticos

Coccidiostáticos e histomonostáticos são substâncias administradas para matar ou inibir

protozoários. Eles são substâncias usadas para proteger as espécies de Eimeria
colocadas nos intestinos das aves de protozoários que podem causar coccidiose (ou seja,
diarreia com sangue). Algumas substâncias são permitidas por lei (por exemplo,
monensina sódica, decoquinato, cloridrato de robenidina, lasalocida A sódica, bromidrato
de halofuginona, narasina, salinomicina sódica, maduramicina amônio alfa, diclazuril,
semduramicina sódica, nicarbazina e diclazuril); no entanto, existem períodos de retenção
para cada uma dessas substâncias, e o cumprimento de tais regulamentos é essencial.

7. Comentários finais e orientações futuras

A Turquia tem grande potencial no que diz respeito à produção animal. Os nutracêuticos
estão sendo amplamente usados para aumentar o número de produtos de origem animal
e melhorar a qualidade de higiene e a adesão aos padrões. A capacidade de determinar
as substâncias adicionadas aos alimentos e aos produtos obtidos para fins de nutrição
1445
animal é essencial, pois isso é fundamental para determinar os efeitos dessas
substâncias na saúde humana. Todas as diretrizes e atos legislativos aplicados na Turquia
para este fim estão em conformidade com a legislação da União Europeia em vigor.
Referências
Commission Regulation 429/2008/EC (2008) Commission Regulation of 25 April 2008 on detailed rules for the
implementation of Regulation (EC) No 1831/2003 of the European Parliament and of the Council as regards the
preparation and the presentation of applications and the assessment and the authorisation of feed additives. Official
Journal of the European Union, 22 May 2008, L 133:1–65
Communique 2014/11 (2014) The Communique on undesirable substances in animal feed. Official Journal of Turkey
Republic, 19 April 2014/28977
Communique 2016/15 (2016) The Communique as regards the preparation and the presentation of applications and
the assessment and the authorisation of feed additives. Official Journal of Turkey Republic, 27 May 2016/29724
Directive 2002/32/EC (2002) Directive of The European Parliament and of the Council of 7 May 2002 on undesirable
substances in animal feed. Official Journal of the European Communities, 30 May 2002, L 140:10–21
Dorne JL, Fink-Gremmels J (2013) Human and animal health risk assessments of chemicals in the food chain:
comparative aspects and future perspectives. Toxicol Appl Pharmacol 270(3):187–195
European Union Register of Feed Additives (2018) European Union Register of Feed Additives pursuant to Regulation
(EC) No 1831/2003. https://ec.europa.eu/food/safety/animal-feed/feed-additives/eu-register_en. Accessed 19 July 2018
Law No 5996 (2010). Law on veterinary services, phytosanitary, food and feed. Official Journal of Turkey Republic, 13
June 2010/27610
Ministry of Agriculture and Forestry (2018) Yem Isletmeleri Listesi. https://www.tarimorman.gov.tr/Konu/1719/Yem-
Isletmeleri-Listesi. Accessed 19 July 2018
Regulation 178/2002/EC (2002) Regulation of the European Parliament and of the Council of 28 January 2002 laying
down the general principles and requirements of food law, establishing the European Food Safety Authority and laying
down procedures in matters of food safety. Official Journal of the European Communities, 01 February 2002, L 31:1–24
Regulation 183/2005/EC (2005) Regulation of the European Parliament and of the Council of 12 January 2005 laying
down requirements for feed hygiene. Official Journal of the European Union, 8 February 2005, L 35:122
Regulation 767/2009/EC (2009) Regulation of the European Parliament and of Council of 13 July 2009 on the placing
on the market and use of feed, amending European Parliament and Council Regulation (EC) No 1831/2003 and
repealing Council Directive 79/373/EEC, Commission Directive 80/511/EEC, Council Directives 82/471/EEC,
83/228/EEC, 93/74/EEC, 93/113/EC and 96/25/EC and Commission Decision 2004/217/EC. Official Journal of the
European Union, 1 September 2009, L 229:1–28
Regulation 882/2004/EC (2004) Regulation of the European Parliament and of the Council of 29 April 2004 on official
controls performed to ensure the verification of compliance with Regulation 178/2002/EC (2002) Regulation of 28
January 2002 laying down the general principles and requirements of food law, establishing the European Food Safety
Authority and laying down procedures in matters of food safety. Official Journal of the European Communities, 1
February 2002, L 31:1–24
Regulation 2011/28145 (2011) The regulation on for official control of feed and food. Official Journal of Turkey
Republic, 17 December 2011/28145
Regulation 2011/28152 (2011) The regulation on animal by-products and derived products not intended for human
consumption. Official Journal of Turkey Republic, 24 December 2011/28152
Regulation 2011/28155 (2011a) The regulation on feed hygiene. Official Journal of Turkey Republic, 27 December
2011/28155
Regulation 2011/28155 (2011b) The regulation on the placing on the market and use of feed. Official Journal of Turkey
Republic, 27 December 2011/28155
Regulation 2013/28711 (2013) The regulation on feed additives for use in animal nutrition. Official Journal of Turkey
Republic, 18 July 2013/28711
Turkish Statistical Institute (2017) Animal production statistics, 2017. Ankara.
http://www.turkstat.gov.tr/PreHaberBultenleri.do?id=27704. Accessed 25 July 2018
Yılmaz EŞ, Aslantaş Ö, Önen SP, Türkyılmaz S, Kürekci C (2016) Prevalence, antimicrobial resistance and virulence
traits in enterococci from food of animal origin in Turkey. LWT – Food Sci Technol 66:20–26

1446
 Usos e regulamentação de nutracêuticos para animais
nas Filipinas
Jacob Anderson C. Sanchez e Geraldine C. Sanchez

Resumo
As Filipinas são um país arquipelágico no sudeste da Ásia com muitos requisitos para
animais de alimentação. As práticas veterinárias tradicionais ainda estão prosperando e
sua aplicação à saúde animal existe entre as comunidades rurais. Os tratamentos com
ervas para os animais listados neste capítulo são usados principalmente para distúrbios
gastrointestinais, como diarreia, constipação, distensão abdominal e disenteria. Essas
ervas, que são conhecidas por possuírem benefícios medicinais para animais, foram
reunidas com base em aplicações de ervas no tratamento de doenças humanas. As dez
principais espécies de plantas medicinais aprovadas pelo Departamento Filipino de
Administração de Alimentos e Medicamentos Saudáveis (DOH-FDA) para fins
terapêuticos são lagundi para tosse e asma, sambong como anti urolitíase, ampalaya para
redução do açúcar no sangue e como antidiabético, alho como anti hipercolesterolemia,
goiaba para antisséptico oral/cutâneo, tsaang gubat para enxaguatório bucal, erva buena
como analgésico ou antipirético, niyog-niyogan como anti-helmíntico, acapulco como
antifúngico e ulasimang-bato como anti-hiperuricemia. A pesquisa filipina e os órgãos
reguladores incluem o Departamento de Agricultura (DA), DA-Bureau of Animal Industry
(DA-BAI), Departamento de Saúde (DOH)-Philippine Institute of Traditional and Alternative
Health Care (PITAHC), DOH-FDA, e Indústria Filipina de Produtos de Saúde Natural
(PNHPI). Em 2017, um total de 497 empresas foram acreditadas pelo DA-BAI; no entanto,
eles não são classificados com base no fato de venderem ou não drogas sintéticas ou
nutracêuticos. O uso de nutracêuticos para fins veterinários nas Filipinas ainda está em
sua infância. É imperativo que as universidades veterinárias nas Filipinas inovem na
utilização de alimentos ou rações para animais com certos benefícios medicinais. Em
resposta a essa necessidade crescente, a Universidade Estadual de Agricultura de
Pampanga, por meio do Departamento de Agricultura-Escritório de Pesquisa
Agropecuária, criou o Laboratório de Pesquisa Nutracêutica (NRL).

Palavras-chave: Usos e regulamentação · Nutracêuticos · Animais para alimentação ·

Filipinas

J. A. C. Sanchez – College of Arts and Sciences (CAS), Pampanga State Agricultural University, Magalang,
Pampanga, Philippines
1447
Nutraceutical Research Laboratory, Pampanga State Agricultural University (PSAU), Magalang, Pampanga,
Philippines
G. C. Sanchez – Nutraceutical Research Laboratory, Pampanga State Agricultural University (PSAU),
Magalang, Pampanga, Philippines
College of Veterinary Medicine (CVM), Pampanga State Agricultural University (PSAU), Magalang,
Pampanga, Philippines

1. Introdução
As Filipinas são um país arquipelágico no sudeste da Ásia com muitos requisitos para
animais de alimentação. Exceto para aves, a produção de carne de porco, vaca, chevon,
carneiro e pato depende em grande parte dos agricultores de quintal. Portanto, é comum
que as práticas veterinárias tradicionais ainda estejam prosperando e sua aplicação na
saúde animal exista entre as comunidades rurais. Os tratamentos com ervas para os
animais listados neste capítulo são usados principalmente para distúrbios
gastrointestinais, como diarreia, constipação, distensão abdominal e disenteria. Essas
ervas, que são conhecidas por possuirem benefícios medicinais para animais, foram
reunidas com base em aplicações de ervas no tratamento de doenças humanas. As dez
principais espécies de plantas medicinais aprovadas pelo Departamento Filipino de
Administração de Alimentos e Medicamentos Saudáveis (DOH-FDA) para fins
terapêuticos são lagundi (Vitex negundo) para tosse e asma, sambongo (Blumea
balsamifera L.) como um anti-urolitíase, ampalaya (Momordica charantia L.) para baixar o
açúcar no sangue e um antidiabético, alho (Allium sativum) como anti-hipercolesterolemia,
goiaba (Psidium guajava) para antisséptico oral/cutâneo, tsaang gubat (Carmona retusa)
para enxaguatório bucal, yerba buena (Mentha arvensis) como analgésico ou antipirético,
niyog-niyogan (Quisqualis indica) como anti-helmíntico, acapulco (Cassia alata) como
antifúngico e ulasimang-bato (Peperomia pellucida) como anti-hiperuricemia. A pesquisa
filipina e os órgãos reguladores incluem várias partes interessadas, como o Departamento
de Agricultura (DA), DA-Bureau of Animal Industry (DA-BAI), Departamento de Saúde
(DOH) - Philippine Institute of Traditional and Alternative Health Care (PITAHC), DOH-FDA
e da Indústria de Produtos de Saúde Natural das Filipinas (PNHPI). Em 2017, um total de
497 empresas foram acreditadas pelo DA-BAI; no entanto, eles não são classificados
quanto à venda ou não de drogas sintéticas ou nutracêuticos. A maioria ainda depende de
drogas sintéticas comercialmente disponíveis, produzidas localmente ou importadas.
Pode-se dizer que os nutracêuticos para uso veterinário nas Filipinas ainda estão
engatinhando. Portanto, é imperativo para as universidades veterinárias nas Filipinas
inovarem ao fazer pesquisas em relação à utilização de alimentos ou rações com certos
benefícios medicinais em animais (Abelarde 2013). Em resposta a essa necessidade

1448
crescente, a Universidade Estadual de Agricultura de Pampanga, por meio do
Departamento de Agricultura - Escritório de Pesquisa Agropecuária, criou o Laboratório de
Pesquisa Nutracêutica (NRL). Este capítulo descreve os usos e regulamentos de
nutracêuticos nas Filipinas.

2. Regulamentação de Nutracêuticos
As Filipinas são um país arquipelágico com 7107 ilhas onde as províncias não têm litoral
ou estão rodeadas por diferentes cursos de água. Seu povo é composto de diferentes
etnias e religiões nas principais ilhas, a saber, Luzon, Visayas e Mindanao. Embora haja
uma variedade de outros fatores, são os fatores geográficos, sociais e religiosos (FAO
2002) que influenciam a indústria animal das Filipinas.

As pessoas em Luzon são, em sua maioria, cristãs, e sua principal fonte de carne são
aves, porco e bovino. Visayas é composta por várias ilhas, tornando-as um prolífico
produtor de produtos da pesca. Mindanao é uma combinação de cristãos e muçulmanos.
Também é uma rica fonte de pesca, mas seu sistema de produção é focado em alimentos
halal. Portanto, as iniciativas de pesquisa estão focadas em atender à crescente demanda
e consumo de produtos cárneos.

As agências e agências de pesquisa que se concentram nessas commodities são o

Departamento de Agricultura (DA), DA-Bureau of Agricultural Research (DA-BAR), DA-
Bureau of Animal Industry (DA-BAI), Philippine Carabao Center (PCC), DA-Livestock
Biotechnology Center (DA-LBC) e Departamento de Ciência e Tecnologia-Conselho
Filipino para Agricultura, Pesquisa e Desenvolvimento de Recursos Aquáticos e Naturais
(DOST-PCAARRD).

Enquanto isso, a Philippine Statistics Authority (PSA) relatou que em 2016, o volume de
produção de gado e aves foi maior para a carne de porco, seguido por frango, carne
bovina, carabeef e chevon, com o mínimo em carne de pato (PSA 2018). As principais
fontes de carne no país são derivados de animais para alimentação, como grandes
ruminantes (gado e carabao), pequenos ruminantes (cabras e ovelhas), suínos e aves
(frango e pato) (BAI 2015).

Embora os esforços para promover a saúde animal por parte do governo e do setor
privado estejam em andamento, com referência às estatísticas atuais do PSA, a indústria
animal filipina continua amplamente dependente de criadores de quintal, em vez de
produtores comerciais, com exceção da indústria avícola. Portanto, é comum que as

1449
práticas veterinárias tradicionais ainda estejam prosperando e sua aplicação na saúde
animal exista entre as comunidades rurais.

A Organização para a Alimentação e Agricultura (FAO) das Nações Unidas e a Comissão

Regional de Produção Animal e Saúde para a Ásia e o Pacífico (APHCA) documentaram
que mesmo antes da chegada da medicina moderna e medicamentos veterinários
ocidentais, os filipinos já usavam ervas para o tratamento de doenças animais (FAO
1992). Acredita-se que um método de tentativa e erro por “herbolários” ou curandeiros
tradicionais foi usado na aplicação de qualquer erva, e esse conhecimento e habilidade
foram passados para a próxima geração. Ao longo dos anos, as plantas medicinais que
funcionaram bem continuam a ser utilizadas, enquanto as que não o fizeram foram
esquecidas.

Ao contrário da crença popular, as ervas que são conhecidas por possuirem benefícios
medicinais para os animais foram, na verdade, colocadas juntas com base em aplicações
de ervas no tratamento de doenças humanas. Na verdade, um documento produzido pela
FAO tabulou o resumo das plantas utilizadas, as indicações de prescrição e as regiões
onde são relatadas ou praticadas. A maioria dessas ervas é usada no tratamento de
distúrbios gastrointestinais.

Por exemplo, no tratamento da diarreia, são utilizadas as seguintes plantas: goiaba

(Psidium guajava), caimito (Chrysophyllum cainito), banana (Musa sp.), Bambu (Bambusa
spinosa), duhat (Syzygium cumini), sambongo (Blumea balsamifera), e lagundi (Vitex
negundo). Suas folhas são preparadas em uma decocção fervendo em água e
adicionadas à água de beber de porcos (FAO 1992).

No tratamento da constipação, o extrato de leite da carne de coco (Cocos nucifera) é

administrado a suínos, bovinos e carabao. Além disso, as folhas do kangkong (Ipomoea
aquatica) ou do fruto fresco do mamão (Carica papaya) são dadas como alimento aos
animais.

Para inchaço em bovinos, carabões, cabras e ovelhas, a carne de um coco maturado é

preparada em um suco extraído e dada por via oral ao animal afetado. Outra prática é
uma decocção de luya (Zingiber officinale), vinagre e água administrada por via oral às
cabras.

A disenteria é tratada com uma decocção de folhas de banaba (Lagerstroemia speciosa) e

administrada como rega para porcos, carabos e gado. O fruto do chico (Achras zapota) é
misturado com ração animal, e as folhas de tawa-tawa (Euphorbia hirta) e bangka-

1450
bangkaan (Rhoeo discolor) ou flores frescas de alibangbang (Bauhinia malabarica) são
infundidas em água e ingeridas diariamente pelo animal.

Embora as plantas medicinais, conforme mencionado na introdução deste capítulo, já

tenham sido aprovadas pelo DOH-FDA, sua utilização é principalmente como um alimento
ou suplemento dietético para humanos e são rotuladas como “sem alegações terapêuticas
aprovadas”. Ainda assim, existem algumas tentativas das indústrias farmacêuticas locais
de fabricar e comercializar nutracêuticos para fins veterinários.

A fim de preservar e promover a utilização das plantas medicinais acima mencionadas

para fins de saúde e nutracêuticos, as Filipinas promulgaram a Lei da República 8423,
também conhecida como Ato de Medicina Tradicional e Alternativa (TAMA) de 1997
(Projeto LawPhil 2018). Este ato criou o Instituto Filipino de Cuidados de Saúde
Tradicionais e Alternativos (PITAHC) para acelerar o desenvolvimento dos cuidados de
saúde tradicionais e alternativos nas Filipinas, proporcionando um fundo de
desenvolvimento de cuidados de saúde tradicionais e alternativos e para outros fins. O
PITAHC é uma agência do Departamento de Saúde (DOH).

O mandato do PITAHC é promover a qualidade, segurança, eficácia, acessibilidade e

produtos, tecnologias e modalidades aceitáveis da medicina tradicional e complementar
(T&CM), bem como a proteção da medicina tradicional filipina (PTM). Esses mandatos
são reforçados pela Comissão de Governança para GOCCs (GCG) em 2012, enfatizando
que o PITAHC é uma instituição de pesquisa cujos assuntos orçamentários agora estarão
sob a responsabilidade do Departamento de Orçamento e Gestão (DBM). No entanto, em
uma reunião do Conselho de Curadores da PITAHC em outubro de 2015, eles afirmaram
que o impulso da PITAHC está principalmente na pesquisa e não na fabricação.

Enquanto isso, o Departamento de Agricultura - Bureau of Animal Industry credencia e

reconhece os fabricantes ou distribuidores de medicamentos e produtos veterinários no
país (BAI 2018). São 497 empresas credenciadas, mas não classificadas se vendem
drogas sintéticas ou nutracêuticos. A maioria ainda depende de drogas sintéticas
comercialmente disponíveis, produzidas localmente ou importadas. Portanto, pode-se
dizer que os nutracêuticos para fins veterinários nas Filipinas ainda estão em sua infância.

Para acelerar o mercado de nutracêuticos para fins veterinários, recentemente tem havido
um esforço das indústrias para se organizar e formar a Indústria Filipina de Produtos de
Saúde Natural (PNHPI), que é representada pela Câmara das Indústrias de Ervas das
Filipinas (CHIPI). A CHIPI é uma associação de empresas que fabricam, desenvolvem,
pesquisam, distribuem e comercializam o fornecimento de produtos fitoterápicos. Também
elaborou o Roteiro PNHPI FY 2014-2030, que categorizou os produtos naturais para a
1451
saúde em (a) ingredientes naturais (partes de plantas, extratos, óleo, semi-processados) e
(b) produtos acabados para humanos, domésticos, veterinários e verdes / uso de
pesticidas.

Para abordar as limitações nas regulamentações de nutracêuticos ou alimentos

funcionais, o DOH-FDA elaborou a Ordem Administrativa sobre as “Regras e
Regulamentos que Governam as Alegações de Nutrição e Saúde de Produtos Alimentares
Pré-embalados Distribuídos nas Filipinas” (Bagchi 2014). Atualmente, os produtos
nutracêuticos são avaliados com base em evidências de pesquisas por meio dos
regulamentos do DOH-Food and Drug Administration, anteriormente denominado Bureau
of Food and Drugs (BFAD). Ele emite várias regras e diretrizes sobre probióticos,
formulação, rotulagem e especificações técnicas que servem de base para a avaliação.

As informações do produto e outros requisitos devem incluir (1) lista de ingredientes, (2)
características físicas, químicas e microbiológicas: (3) apresentação da amostra real para
avaliação sensorial; (4) apresentação de rótulo de amostra em que as alegações
nutracêuticas dão ênfase ao ingrediente ativo, mas não ao produto acabado; (5) prazo de
validade e métodos para determiná-lo; e (6) uma descrição do processo de fabricação
(Tecson-Mendoza 2007). Vários estudos também são conduzidos pelo Departamento de
Ciência e Tecnologia-Food and Nutrition Research Institute (DOST-FNRI), incluindo várias
universidades e faculdades estaduais. A pesquisa sobre nutracêuticos é essencialmente
multidisciplinar, cobrindo agricultura básica, farmacologia clínica,
toxicologia/mutagenicidade, formulação de dosagem, pesquisa de manufatura e
fitoquímica (Mallillin e Bautista-Batallones 2004).

Vários estudos sobre nutracêuticos foram realizados, mas muitos deles permanecem
inéditos e subutilizados. Isso pode estar relacionado ao pequeno número de indústrias
que adotam e utilizam essas tecnologias. No entanto, o crescente interesse do público
pela compra de alternativas saudáveis fez com que uma série de pequenas e médias
empresas (PME) no país desenvolvessem produtos nutracêuticos (cápsulas, bebidas
saudáveis e chás) que são todos para consumo humano, mas não para usos veterinários.
Portanto, é imperativo que as universidades veterinárias nas Filipinas também inovem
fazendo investigações em relação à utilização de alimentos ou rações para animais com
certos benefícios medicinais.

Em resposta a essa necessidade crescente, a Universidade Estadual de Agricultura de

Pampanga, por meio de uma bolsa de financiamento do Departamento de Agricultura-
Bureau de Pesquisa Agrícola, criou o Laboratório de Pesquisa Nutracêutica (NRL). Este
laboratório possui cultura de tecidos, microbiologia e uma instalação de animais para
1452
conduzir experimentos usando ratos de laboratório. O laboratório, chefiado pela Dra.
Geraldine C. Sanchez, líder do projeto do NRL, foi autorizado a operar como uma
instalação de pesquisa de modelos animais do Bureau of Animal Industry.

O NRL já produziu vários resultados de pesquisa sobre as propriedades antidiabéticas

dos cogumelos (Pleurotus florida, Coprinus comatus, Ganoderma lucidum, Volvariella
volvacea), arroz com bolor vermelho e extratos de arroz integral; anticlastogênico de arroz
com bolor vermelho, feijão bóer, arroz preto, cúrcuma e amora; e hipocolesterolêmico do
feijão bóer. Atualmente, os seguintes experimentos estão sendo conduzidos: (1) o papel
da Moringa na ciclicidade do estro e na dinâmica folicular, (2) a soja como intensificador
da fertilidade entre porcos nativos e (3) anticlastogenicidade da erva-moura de Malabar.

3. Comentários finais e orientações futuras

As Filipinas são um país arquipélago composto por pessoas de origens multiétnicas. O
país tem uma rica história de uso de medicamentos fitoterápicos, mas carece de
conceitos e fundamentos baseados em evidências. Em resposta a esta necessidade
crescente, investigações são realizadas em várias universidades, incluindo a
Universidade Agrícola Estadual de Pampanga, por meio de uma bolsa de financiamento
do Departamento de Agricultura-Bureau de Pesquisa Agrícola. O Laboratório de Pesquisa
Nutracêutica (NRL) assumiu a liderança. O futuro do uso de nutracêuticos na prevenção e
tratamento de doenças animais parece brilhante nas Filipinas.

Referências
Abelarde L (2013) The Philippine natural health products industry roadmap. Retrieved from http://industry.gov.ph/wp-
content/uploads/2015/05/7th-TID-Mr.-Abelardes-Presentation-on-Natural-Health-Products.pdf on July 18, 2018
Bagchi D (2014) Nutraceutical and functional food regulations in the United States and around the world, 2nd edn.
Academic, London. ISBN:978-0-12-405-870-5
BAI (2015) Bureau of Animal Industry. Annual Report of the Philippine Bureau of Animal Industry. Retrieved online from
http://www.bai.gov.ph on April 11, 2018
BAI (2018) Bureau of Animal Industry. Issuance of Feed/Veterinary Drugs and Products (VDAP) Commodity
Clearance/Certificate of Free Sales. Retrieved from http://www.bai.da.gov.ph/index.php/regulatory/item/314 on April 11,
2018
FAO (1992) Food and Agriculture Organization. Traditional Veterinary Medicine in the Philippines. FAO Regional Office
for Asia and the Pacific, Bangkok, Thailand
FAO (2002) Food and Agriculture Organization. The diverse functions of livestock: an Asia-Pacific perspective.
Retrieved from http://www.fao.org/docrep/005/AC448E/ac448e06.htm
LawPhil Project (2018) Republic Acts of 1997. Retrieved from the website of Arellano Law Foundation database of
Philippine laws at https://www.lawphil.net/statutes/repacts/ra1997/ra1997.html
Mallilin AC, Bautista-Batallones C (2004) Review of country status on functional foods: Philippines: Report of the
regional expert consultation of the Asia-Pacific network for food and nutrition on functional foods and their implications in
the daily diet, FAO Corporate Document Repository, RAP Publication 2004/33.
PSA (2018) Philippine Statistics Authority. Selected Statistics on Agriculture. Retrieved from http://www.psa.gov.ph
Tecson-Mendoza EM (2007) Development of functional foods in the Philippines. Food Sci Technol Res 13(3):179–186

1453
 Diretrizes regulatórias para nutracêuticos na África do
Sul
V. Naidoo e E. Mokantla

Resumo
A África do Sul, como país, não inclui o termo ‘nutracêutico’ em sua legislação de controle
de drogas por definição direta. No entanto, as substâncias que podem ser consideradas
nutracêuticas estão disponíveis como medicamentos complementares, ração animal e/ou
remédios de gado. Geralmente, os remédios veterinários disponíveis são controlados pelo
Departamento Nacional (Ministério) da Agricultura para uso sem receita, especialmente
porque o país é limitado pelo número total de veterinários no país. Exemplos de
substâncias disponíveis incluem óleo de arnica, condroitina e cepas antimicrobianas
probióticas especificadas. Tal como acontece com os medicamentos alopáticos, os
sistemas reguladores na África do Sul levam em consideração a segurança, qualidade e
eficácia do produto em consideração para autorização de comercialização. No entanto, ao
contrário dos medicamentos alopáticos, em que um conjunto global completo de
informações é exigido no dossiê de registro, os requisitos de registro para os
medicamentos complementares e alimentos colocam o foco predominante na qualidade
na fabricação, ao mesmo tempo que adotam uma abordagem mais gradual para a
segurança e eficácia, ou seja, quanto maior for risco(s) associado(s) a uma alegação
específica, maior será a informação científica que será necessária para apoiar as
alegações de eficácia e segurança associada.

V. Naidoo. Faculty of Veterinary Science, Department of Paraclinical Science, University of Pretoria, Pretoria,
South Africa. e-mail: vinny.naidoo@up.ac.za
E. Mokantla. Department of Agriculture, Forestry and Fisheries, Pretoria, South Africa

1. Introdução
A África do Sul, como país, não inclui o termo ‘nutracêutico’ em sua legislação de controle
de drogas por definição direta. No entanto, quando nenhuma alegação médica direta é
feita para um nutracêutico, ele é registrável como medicamento complementar ou como
ração animal sob um dos dois atos regulamentares administrados pelo Departamento
Nacional [Ministério] da Saúde (DoH) e pelo Departamento Nacional [Ministério] da
Agricultura, Florestas e Pescas (DAFF), respetivamente, sendo este último predominante.

1454
A Tabela 1 lista alguns exemplos de produtos disponíveis na África do Sul que podem ser
geralmente considerados como nutracêuticos veterinários.

Tabela 1 Exemplos de nutracêuticos veterinários disponíveis na África do Sul

Marcas/produtos Ingrediente(s) Usos
Eukanuba, Hills, Prescrição de dietas Manejo de animais de estimação com problemas
Royal Canin veterinárias urinários, dermatológicos, obesidade, artrite, etc.
L-triptofano, vitamina B6, L- Calmeze pode ser misturado à comida do animal
Calmeze teanina, vitamina B1, vitamina ou administrado diretamente por via oral, antes de
B3 eventos que possam causar medo ou ansiedade
Complexo lipídico da pele,
Ajuda a manter a integridade da barreira da pele e
Allerderm glicotecnologia, tecnologia de
o equilíbrio microbiano natural da pele
defensina
Para auxiliar no alívio da inflamação crônica e
Artridês Remédio homeopático
desconforto artrítico
Óleo de colza, caulim,
Alimento complementar para cães e gatos,
frutooligossacarídeos,
combinando um probiótico, prebiótico, glutamina,
mananoligossacarídeos,
Canigest caulim e pectina; é particularmente adequado para
pectina, glutamina, aroma de
alimentar cães para auxiliar no manejo nutricional
carne assada, Enterococcus
de distúrbios do trato digestivo
faecium
Suplemento enzimático para insuficiência
Digesteaze Amilase, protease, lipase pancreática exócrina, derivado de pâncreas suíno
fresco
Pasta concentrada calmante para uso em
Equifox Pharmacalm emergências para ajudar os cavalos a lidar com
L-triptofano
Plus situações estressantes, sem remover o “limite”
necessário para o desempenho
Enzima, probiótico, extrato de Suplemento para controle de flatulência e odor
Fart Eze
iúca fecal em cães
Colágeno tipo 11, ômega-3,
GCS Joint Care sulfato de condroitina, Suplemento nutricional que apoia a saúde das
Advanced Chews glucosamina, extrato de articulações em cães
mexilhão de lábios verdes, MSM
Glucosamina, sulfato de
GCS Joint Care Suplemento nutricional para auxiliar no manejo de
condroitina, manganês, ácido
Advanced Powder doenças articulares degenerativas em cães
ascórbico
Ajuda na criação de aves de qualidade superior
que são mais saudáveis, são maiores e produzem
carne de melhor qualidade; reduz a necessidade
Fulvic Force Ácido fúlvico
de medicamentos antimicrobianos; ajuda a
produzir ovos que são maiores e têm cascas mais
grossas com muito menos rachaduras
Ajuda a manter o equilíbrio da microflora no trato
Clostat Bacillus subtilis cepa PB6
intestinal das aves

2. Quadro Legislativo na África do Sul

A África do Sul é um país vasto (1,22 milhão de quilômetros quadrados de área) que pode
ser melhor descrito como semi-árido, tornando-o mais adequado para a produção
pecuária, que é realizada em aproximadamente 70% do país. O censo de 2010
documentou as seguintes estimativas de números de animais de produção tanto no setor
1455
comercial quanto no setor agrícola rural (Scholtz et al. 2013): 13,6 milhões de bovinos de
corte, 1,4 milhões de bovinos leiteiros, 24,6 milhões de ovelhas, 7 milhões de cabras, 3
milhões de criadouros animais selvagens, 1,1 milhão de porcos, 113 milhões de frangos
de corte, 31,8 milhões de galinhas poedeiras e 1,6 milhão de avestruzes. Também foi
estimado que quase 5 milhões de famílias fornecem lar para mais de 8 milhões de gatos e
cães (Durham 2011). Apesar do tamanho do país e de sua população de 55 milhões de
habitantes, o país é atendido por apenas cerca de 3,5 mil médicos veterinários. Além
disso, uma grande parte do país ainda é rural, com as comunidades nessas áreas sendo
limitadas em termos do tipo de serviços veterinários que podem pagar. Para superar a
limitação dos serviços veterinários e mitigar o custo do tratamento veterinário versus o
valor do animal, o país adotou um sistema regulatório duplo pelo qual os medicamentos
prescritos são limitados ao uso veterinário por meio do DoH, enquanto o DAFF faz um
grande número de medicamentos e rações disponíveis no balcão, sem qualquer
intervenção veterinária, para uso direto do agricultor.

Esse controle se enquadra em duas leis: a Lei de Controle de Medicamentos e

Substâncias Relacionadas de 1965 (Lei nº 101 de 1965, que é administrada pelo DoH e é
comumente conhecida como Lei de Medicamentos) e os Fertilizantes, Rações, Remédios
Agrícolas e Remédios de Estoque Lei de 1947 (Lei nº 36 de 1947, que é administrada
pelo DAFF e é comumente conhecida como Lei de Compensação de Ações). Ambas as
leis seguem a mesma forma de controle e são amparadas por regulamentos e diretrizes,
que são revisados periodicamente. Em geral, a África do Sul segue as diretrizes da
Cooperação Internacional sobre Harmonização de Requisitos Técnicos para Registro de
Medicamentos Veterinários (VICH) como resultado do status de observador do país no
programa VICH. Ambos os atos também compartilham uma estrutura de governança
semelhante em que os registros requerem avaliação completa de um dossiê submetido
por consultores técnicos, que possuem qualificações nas áreas de química, farmacologia
veterinária, toxicologia, microbiologia, virologia e/ou medicina veterinária clínica em todas
as espécies principais aplicáveis como requerido. A única grande diferença entre os dois
atos é evidente no uso pretendido dos produtos. Como a Lei de Medicamentos tende a
controlar produtos restritos ao profissional veterinário (medicamentos veterinários), essa
lei garante que todo produto seja respaldado por uma bula científica completa. Em
contraste, a Lei de Remédios de Estoque, cuja principal função é permitir a
disponibilidade de produtos sem receita para profissionais não veterinários, coloca o foco
principal em garantir que a bula/folheto de apoio seja escrita em linguagem clara, simples
e não ambígua que torna mais fácil seguir as instruções. Além disso, a lei dá grande
ênfase em garantir que a embalagem externa e o material de marketing que o acompanha
1456
não incluam itens ou marcações (diretas ou indiretas) que possam deturpar como usar o
produto.

A Lei de Medicamentos controla as seguintes categorias de substâncias:

• Medicamento: significa qualquer substância ou mistura de substâncias que é usada ou

que parece adequada para uso – ou que é fabricada ou vendida para uso – no
diagnóstico, tratamento, mitigação, modificação ou prevenção de doenças ou um estado
físico ou mental anormal (ou seus sintomas) no homem; ou na restauração, correção ou
modificação de qualquer função somática, psíquica ou orgânica do homem. Os
medicamentos são controlados por meio dos horários do ato (S0 – S8), com controles de
acesso diferenciados por horário. Em geral, S0 abrange medicamentos humanos sem
receita, S1 e S2 abrangem medicamentos que são prescritos por um farmacêutico,
medicamentos S3 – S6 estão sob o controle de um médico ou veterinário, medicamentos
S7 são substâncias proibidas e medicamentos S8 são proibidos substâncias com
potencial de uso médico restrito (Tabela 2).

Tabela 2 Categorias da Lei de Medicamentos na África do Sul

1
Categoria Categorias gerais Requisitos de controle Exemplos
Disponível para venda em qualquer loja
Aspirina, paracetamol,
S0 De venda livre sem restrições; pode ser anunciado ao
antissépticos
público
Disponível ao balcão de qualquer farmácia Preparações tópicas de
De venda livre em sem a necessidade de consulta com um anestésicos locais, probióticos
S1
farmácia farmacêutico; pode ser anunciado ao acima de um valor CFU
público definido, vermífugos médicos
Disponível em qualquer farmácia após AINEs médicos, produtos de
De prescrição de
S2 consulta com um farmacêutico; não pode AINE/codeína, medicamentos
farmácia
ser anunciado ao público anticoncepcionais
Medicamento crônico que exige receita de AINEs veterinários, terapias de
S3
um médico ou veterinário reposição hormonal
Grupo geral de medicamentos prescritos Antimicrobianos,
S4
por um médico ou veterinário medicamentos sistêmicos
Apenas com Anestésicos, tranquilizantes,
receita Medicamentos potencialmente produtores
S5 sedativos, modificadores
de dependência
comportamentais
Opioides, opioides sintéticos,
Medicamentos perigosos que produzem
S6 formulações de eutanásia
dependência
veterinária
Anfetaminas, cannabis,
Substâncias
S7 Substâncias medicinais indesejáveis canabinóides, cocaína,
proibidas
fenciclidina
Uso apenas com
S8 uma autorização Medicamentos de uso restrito Qualquer substância S7
especial
1
Os medicamentos e substâncias S2 – S8 não podem ser anunciados ao público

1457
• Medicina veterinária: significa qualquer substância ou mistura de substâncias que é
usada ou que parece ser adequada para uso – ou que é fabricada ou vendida para uso –
em conexão com vertebrados, para tratamento, diagnóstico, prevenção ou cura de
qualquer doença, infecção ou outra condição insalubre; ou para manutenção ou melhoria
da saúde, crescimento, produção ou capacidade de trabalho; ou para curar, corrigir ou
modificar qualquer função somática ou orgânica; ou para corrigir ou modificar o
comportamento. Os medicamentos veterinários se enquadram no mesmo sistema de
agendamento mencionado acima para os medicamentos, com a exceção de que os
esquemas preveem a exclusão de princípios ativos sob o controle da Lei de Remédios
para Estoque.

• Medicamento complementar: significa qualquer substância ou mistura de substâncias

que se origina de uma planta, fungo, alga, alga marinha, líquen, mineral, animal ou outra
substância, conforme determinado, e que é usado ou pretende ser adequado para uso –
ou que são fabricados ou vendidos para uso – na manutenção, complementação ou
assistência ao poder de cura inato ou estado físico ou estado mental; ou para
diagnosticar, tratar, mitigar, modificar, aliviar ou prevenir doenças ou enfermidades (ou
sintomas ou sinais dos mesmos) ou um estado físico ou mental anormal em um ser
humano ou animal; e é utilizado como suplemento de saúde ou de acordo com as
seguintes disciplinas: substância/preparação fitoterápica; substâncias tradicionais
chinesas, ayurvédicas e Unani Tibb; e substâncias homeopáticas e aromaterapia. Os
medicamentos complementares são geralmente destinados à venda no balcão e estão
disponíveis gratuitamente ao público na maioria das lojas de saúde, supermercados e
farmácias.

• Suplemento de saúde: significa qualquer substância, extrato ou mistura de substâncias

que podem complementar a dieta ou ter efeito fisiológico nutricional. Esta categoria inclui
prebióticos, probióticos e outros suplementos vendidos em formas farmacêuticas
geralmente não associadas a alimentos e exclui os injetáveis. Assim como os
medicamentos complementares, os suplementos de saúde podem ser vendidos em
qualquer ponto de venda.

• Dispositivo médico: significa qualquer instrumento, aparelho, material, máquina,

aparelho, implante ou reagente de diagnóstico que é usado ou pretende ser adequado
para uso – ou que é fabricado ou vendido para uso – em diagnóstico, tratamento,
mitigação, modificação, monitoramento ou prevenção de doenças ou estados físicos ou
mentais anormais (ou seus sintomas); ou para restaurar, corrigir ou modificar qualquer
função somática, psíquica ou orgânica; ou para diagnóstico ou prevenção da gravidez; e
1458
que não atinja sua finalidade por meios químicos, farmacológicos, imunológicos ou
metabólicos.

A Lei de Recursos de Estoque controla as seguintes categorias de substâncias:

• Fertilizantes: inclui qualquer substância destinada ou oferecida para ser usada para
melhorar ou manter o crescimento das plantas ou a produtividade do solo.

• Remédios agrícolas: Isso inclui qualquer substância química ou remédio biológico, ou

qualquer mistura ou combinação de substâncias ou remédios, que é destinada ou
oferecida para uso na destruição, controle, repulsão, atração ou prevenção de qualquer
micróbio, alga, nematóide, fungo indesejado, inseto, planta, vertebrado, invertebrado ou
qualquer produto do mesmo.

• Ração agrícola: inclui qualquer substância obtida por um processo de trituração,

trituração ou trituração; qualquer substância obtida por adição ou remoção de outra
substância; qualquer alimento condimental, vitamina ou substância mineral ou outra
substância que possua, ou supostamente possua, propriedades nutritivas; qualquer
produto ósseo destinado ou vendido para alimentação de animais domésticos ou gado; ou
qualquer lambida de caldo ou substância que pode ser, e é, usada como uma lambida de
caldo, quer tal lambida de caldo ou substância possua propriedades medicinais ou não.
Também inclui “alimento completo para animais de estimação”, que é um alimento para
animais de estimação que contém todos os nutrientes necessários nas quantidades e
proporções corretas para as necessidades fisiológicas do animal. É nesta categoria que
os nutracêuticos veterinários são controlados na África do Sul e, como é o caso dos
medicamentos complementares (conforme mencionado acima), estão disponíveis para
venda em qualquer ponto de venda.

• Remédios de estoque: Inclui qualquer substância destinada ou oferecida para ser usada
em conexão com animais domésticos, gado, aves, peixes ou animais selvagens (incluindo
pássaros selvagens) para diagnóstico, prevenção, tratamento ou cura de qualquer
doença, infecção ou outra condição insalubre; ou para manutenção ou melhoria da saúde,
crescimento, produção ou capacidade de trabalho. Os remédios de estoque geralmente
cobrem medicamentos usados para o tratamento de ectoparasitas, endoparasitas ou
doenças transmitidas por carrapatos; certos antimicrobianos; e vitaminas/minerais
injetáveis. Esta categoria também inclui medicamentos veterinários complementares,
como arnica e óleos aromáticos. Em geral, as ações corretivas são destinadas à venda
aberta em qualquer loja de varejo. No entanto, existem algumas restrições a certos
produtos, uma vez que é necessário um certo grau de supervisão veterinária para o seu
uso.
1459
• Aditivos zootécnicos: Inclui substâncias que aumentam a digestibilidade, estabilizadores
da flora intestinal (que incluem microorganismos ou outras substâncias quimicamente
definidas que têm um efeito positivo na flora intestinal) e substâncias que afetam
favoravelmente o meio ambiente (Tabela 3).

Tabela 3 Produtos que podem ser considerados nutracêuticos e seu processo de registro na África
do Sul
Categorias legais Lei Descrições Exemplos
Geralmente substâncias que não são
controladas como medicamentos alopáticos Remédios homeopáticos,
Medicamentos
101/65 dentro das programações do ato, com a fitoterapia ocidental,
complementares
função primária de apoiar o sistema medicamentos orientais
imunológico e, assim, promover o bem-estar
Geralmente substâncias que exercem
Suplementos de
101/65 efeitos fisiológicos por meio de efeitos Probióticos, glucosamina
saúde
nutritivos
Substâncias medicinais que geralmente
Remédios Óleo de arnica, creme de
36/47 estão disponíveis para venda sem receita
disponíveis cânfora
para uso animal
Alimentos para Substâncias que apoiam a nutrição animal
fazendas e para e aquelas que têm um efeito fisiológico de Mexilhão de lábios verdes,
36/47
animais de uma maneira que não as torna remédios condroitina, glucosamina
estimação disponíveis
Aditivos Enzimas e / ou probióticos usados para o Cepas bacterianas
36/47
zootécnicos manejo da saúde intestinal em animais definidas

3. Controle Geral de Nutracêuticos Veterinários

Como é evidente do acima exposto, os nutracêuticos veterinários podem cair sob o
controle do DoH ou do DAFF, dependendo da categoria em que o medicamento se
enquadra. Não é de surpreender que a empresa registradora possa escolher em qual ato
registrar seu produto. De maneira geral, o DAFF continua sendo o principal ponto de
registro de remédios nutracêuticos e estima-se que controle 90% de todos os
medicamentos disponíveis para uso em animais no país. Este último está ligado ao foco
do DAFF na saúde animal, e este departamento tem controlado as substâncias medicinais
por um período substancialmente mais longo do que o DoH. Além disso, o registro de
medicamentos complementares no DoH como uma categoria de medicamento é
relativamente novo e entrou em vigor apenas em 2013.

3.1 Requisitos de registro

Tal como acontece com os medicamentos, os sistemas regulatórios na África do Sul

levam em consideração a segurança, a qualidade e a eficácia de um produto que está
sendo considerado para autorização de comercialização. No entanto, ao contrário dos
medicamentos (e remédios de estoque), para os quais um conjunto completo de

1460
informações globais é exigido no dossiê de registro, os requisitos de registro para
medicamentos complementares e alimentos colocam o foco predominante na qualidade
na fabricação, com a adoção de uma abordagem mais escalonada para a segurança e
eficácia, na medida em que quanto maior o risco, maiores são os requisitos do estudo
para apoiar as referidas alegações de segurança e eficácia. Uma diferença importante é
prontamente evidente para suplementos de saúde, para os quais alegações de eficácia
não são permitidas, e esses produtos precisam ser rotulados com a seguinte redação:
“Suplementos de saúde destinam-se apenas a complementar a saúde ou suplementar a
dieta”.

Registro de Medicamentos Complementares (Lei 101 de 1965) - Os seguintes requisitos

estão em vigor para medicamentos complementares:

• Controle de qualidade: O DoH exige o cumprimento das boas práticas de fabricação

(GMP), boas práticas de laboratório (BPL) e boas práticas agrícolas e de coleta (GACP)
na fabricação de medicamentos complementares, de acordo com as diretrizes estipuladas
pelo Regulatório de Produtos de Saúde da África do Sul Autoridade (um novo órgão que
substituiu o Conselho de Controle de Medicamentos da África do Sul em 2018). Os
regulamentos estipulam ainda que, para ser regulamentado como medicamento
complementar, um produto precisa estar livre de quaisquer substâncias contidas nas listas
do ato – ou seja, não pode conter ou ser formulado conjuntamente com um ingrediente
farmacêutico ativo; ser usado como um meio de evitar ser controlado como um
medicamento (ou medicamento veterinário); ou geralmente contêm qualquer constituinte
isolado quimicamente definido de uma planta, fungo, alga, alga marinha, líquen, animal ou
mineral, ou uma combinação de tais constituintes, que tem um efeito farmacológico. No
entanto, é permitido que um medicamento complementar contenha ingredientes inativos,
desde que sejam classificados como Geralmente Considerados como Seguros (GRAS)
pela Food and Drug Administration (FDA) dos EUA.

• Segurança: É necessário que os medicamentos complementares demonstrem sua

segurança, que pode ser determinada por meio de revisão da literatura e/ou envio de
dados originais do estudo, conforme outros princípios ativos farmacêuticos. A quantidade
de informações necessárias dependerá do histórico de uso documentado do produto e
dos riscos associados ao seu uso.

• Eficácia: Para o registro, é necessário apresentar evidências apropriadas para

comprovar a eficácia da(s) indicação(ões) e reivindicações propostas, dependendo da
natureza das referidas reivindicações. As reivindicações são divididas em feitas para
distúrbios menores e aquelas feitas para distúrbios maiores. Distúrbios considerados
1461
menores geralmente estão associados a um produto que tem indicações inespecíficas e,
geralmente, um histórico de uso tradicional que apóia essa indicação. As principais
indicações são as reivindicações feitas em relação ao tratamento de uma doença
específica (por exemplo, tratamento de diabetes), que geralmente requerem mais
informações para provar a eficácia. Para alegações de alto risco ou onde o uso tradicional
não foi estabelecido, a eficácia deve ser apoiada por evidências pré-clínicas e/ou clínicas
apropriadas.

Registro de rações agrícolas (e alimentos para animais de estimação) (Lei 36 de 1947) -

Os seguintes requisitos estão em vigor para rações agrícolas e alimentos para animais de
estimação:

• Fabricação: A lei faz menção que o local de fabricação, embalagem, marcação,

etiquetagem e/ou armazenamento deve ser mantido em ordem e limpo e apoiado por
equipamentos que sejam adequados para a finalidade e mantidos em boas condições de
funcionamento de modo a permitir para distribuição uniforme do ingrediente na comida
misturada. Em termos de sistema de qualidade, o fabricante da ração precisa estabelecer
pontos críticos na fabricação e garantir que sejam controlados. Os regulamentos fazem
menção especial que os alimentos e rações usados na fabricação devem ser protegidos
contra danos, contaminação e deterioração; e que diferentes aditivos e premix devem ser
mantidos separados uns dos outros para evitar contaminação cruzada.

• Qualidade: o controle de qualidade dos alimentos não se limita aos padrões de

fabricação; também considera as interações e é muito específico que uma formulação não
deve conter nenhum ingrediente que possa levar à perda de um ou mais dos nutrientes do
produto. Uma vez que os produtos podem ser de origem animal, o padrão de qualidade
indica que os produtos derivados de animais devem primeiro ser esterilizados para que
quaisquer microrganismos contaminantes sejam reduzidos a um nível em que não
representem perigo para a saúde ou capacidade produtiva dos animais alimentados com
o referido produto, ou deixar de representar um risco de doença para o país. A lei também
contém uma lista de substâncias proibidas que podem não ser incluídas na alimentação
animal.

• Eficácia: Em primeiro lugar, os requisitos limitam os alimentos a uma forma física que
pode ser consumida por ingestão oral. Em geral, quando um alimento deve ser registrado
para uma finalidade nutricional específica, é necessário gerar informações para apoiar
seu uso preciso, de modo a demonstrar que a finalidade nutricional específica atribuída ao
produto é apropriada. Especificamente para microrganismos, é necessário fornecer o
nome e a classificação taxonômica de cada microrganismo, de acordo com as
1462
informações publicadas mais recentes nos Códigos Internacionais de Nomenclatura
(ICN). Além disso, todas as características morfológicas, fisiológicas e moleculares
relevantes, necessárias para fornecer a identificação única da cepa e os meios para
confirmar sua estabilidade genética, precisam ser descritas.

• Segurança: é um requisito que a segurança dos animais-alvo da ração ou dos

ingredientes usados seja apoiada por dados apropriados. Uma folha de dados de
segurança do material deve ser fornecida. Se necessário, devem ser propostas medidas
de prevenção de riscos ocupacionais e meios de proteção durante a fabricação,
manuseio, uso e descarte.

4. Comentários finais e orientações futuras

A África do Sul, como país, tem um sistema regulatório duplo para permitir a
disponibilidade de medicamentos, que foi desenvolvido para permitir o tratamento de
animais por proprietários e criadores de animais em uma paisagem que é limitada pela
capacidade veterinária do país. Dentro desse sistema regulatório duplo, embora os
produtos que podem ser considerados nutracêuticos não sejam considerados, o país
permite seu registro dentro de uma das subcategorias dentro das leis de controle de
drogas, com a maioria dos produtos usados em animais sendo controlados como rações
de fazenda e pet .

Referências
Durham L (2011) Embrace pets as part of the family. Supermarket & Retailer, September: 39–43.
Fertilizers, Farm Feeds, Agricultural Remedies and Stock Remedies Act (1947) (Act No. 36 of 1947).
http://www.nda.agric.za/doaDev/sideMenu/ActNo36_1947/act36.htm. Accessed 2018
Medicines and Related Substances Control Act (1965) (Act No. 101 of 1965). www.mccza.com. Accessed 2018
Scholtz MM, van Ryssen JBJ, Meissner HH, et al. (2013) A South African perspective on livestock production in
relation to greenhouse gases and water usage. S Afr J Anim Sci 43(3): 247–254. http://www.scielo.org.za/scielo.php?
script=sci_arttext&pid=S0375-15892013000300003&lng=en.

1463
 Correção para: Avaliação da segurança e eficácia de
nutracêuticos usando Drosophila como uma ferramenta
in vivo
Anurag Sharma, Clinton D’Souza, Vipin Rai e Subash Chandra Gupta

Correção para: Capítulo 49 em: R. C. Gupta et al. (eds.), Nutraceuticals in Veterinary

Medicine, https://doi.org/10.1007/978-3-030-04624-8_49

A versão original do cap. 49 foi publicado inadvertidamente com o título incorreto do

capítulo “Avaliação da segurança e eficácia de nutracêuticos usando Drosophila como
ferramenta in vitro”, ao passo que deveria ser “Avaliação da segurança e eficácia de
nutracêuticos usando Drosophila como ferramenta in vivo”. O capítulo já foi corrigido e
aprovado pelo autor.

1464