EXPLORANDO TÉCNICAS CITOGENÉTICAS NA BIODOSIMETRIA: UMA

EXPERIÊNCIA LABORATORIAL NA AVALIAÇÃO DOS EFEITOS DA

RADIAÇÃO IONIZANTE

EXPLORACIÓN DE TÉCNICAS CITOGENÉTICAS EN BIODOSIMETRÍA: UNA

EXPERIENCIA DE LABORATORIO EN LA EVALUACIÓN DE LOS EFECTOS DE
LAS RADIACIONES IONIZANTES

EXPLORING CYTOGENETIC TECHNIQUES IN BIODOSIMETRY: A

LABORATORY EXPERIENCE IN EVALUATING THE EFFECTS OF IONIZING
RADIATION

Presentation: Experience Report

Caio Victor Barros Gonçalves da Silva1; Caio Ferreira de Oliveira2; Evelin Mirelle Lima Araújo3; Ronald
Mendes Leão4; Fabiana Farias de Lima5

INTRODUCTION

O Laboratório de Dosimetria Biológica (LDB) realiza pesquisas nas áreas médica,

ambiental e radiobiologia, utilizando técnicas citogenéticas, assim como estudos na expressão
de diferentes genes após a exposição à Radiação Ionizante (RI). A RI atualmente é bastante
utilizada na medicina nuclear, radioterapia e radiodiagnóstico, mas a utilização da RI pode
provocar exposições ocupacionais médicas ou acidentais resultando em respostas biológicas,
incluindo alterações bioquímicas e genéticas temporárias ou permanentes, com potencias
efeitos prejudiciais à saúde humana (Correia, 2022).
Dessa maneira, a RI possui a capacidade de levar mutações a nível citogenético que
1 Biomedicina, Universidade Federal de Pernambuco, caio.victors@ufpe.br
2 Biomedicina, Universidade Federal de Pernambuco, caio.foliveira@ufpe.br
3 Biomedicina, Centro Universitário Brasileiro, mirellelima03@gmail.com
4 Ciência Biológicas Bacharelado, Centro Universitário Brasileiro, ronnimendes45@gmail.com
5 Doutora, Centro Regional de Ciências Nucleares, fabiana.farias@cnen.gov.br
podem ser quantificadas e convertidas em análise com o objetivo de estimar a dose absorvida
por um indivíduo. Com isso, por meio da identificação da dose absorvida através das técnicas
citogenéticas é possível notificar o serviço médico para a realização de um tratamento mais
conciso (Lusiyanti, 2019; Fenech 2020). O relato apresenta as experiências dos graduando de
biomedicina e ciências biológicas no LDB do Centro Regional de Ciências Nucleares do
Nordeste (CRCN-NE), relatando a rotina laboratorial na realização das técnicas citogenéticas
(dicêntricos, micronúcleo e combinado) e mostrando como as pesquisas desenvolvidas no
LDB contribui na formação dos alunos.

EXPERIENCE REPORT

O estágio no LDB situado no CRCN-NE conta com 20 horas semanais, onde em um

ano se totaliza 1.040 horas, que tem por objetivo realizar a criação de curvas de dose resposta
por meio da aplicação de técnicas citogenéticas para a análise dos efeitos da RI no corpo
humano (Mendonça, 2015), para isso, é utilizado protocolos estabelecidos por Gajendiran et
al (2001) e pelo manual internacional de energia atômica (IAEA), sendo necessário uma
coleta de sangue periférico de um voluntário que atenda aos requisitos da pesquisa para que se
possa processar esse sangue no Departamento de Energia Nuclear da Universidade Federal de
Pernambuco (DEN/UFPE). Após a irradiação, esse sangue retorna para o laboratório de
dosimetria biológica para o processamento específico da técnica que será utilizada, a qual
conta com a cultura de linfócitos e posteriormente realizar a análise microscópica de
alterações celulares apenas em linfócitos periféricos.
A técnica citogenética convencional de cromossomos dicêntricos é considerada
padrão ouro pela Agência Internacional de Energia Atômica (IAEA) no que se refere à classe
de indicadores citogenéticos específicos a radiação ionizante. Nela é possível visualizar se a
presença de dois ou mais centrômeros em um único cromossomo e seus respectivos
fragmentos dentro de cada metáfase validada através de critérios que incluem a quantidade de
cromossomos (46) e que estejam visíveis e não sobrepostos. Os resultados dessa análise
levam em consideração a frequência e distribuição desses dicêntricos, onde esses valores são
calculados estatisticamente e comparados com uma curva dose-resposta previamente
estabelecida (Lusiyanti, 2019; IAEA, 2011).
Outra técnica utilizada é a análise de micronúcleos por bloqueio da citocinese celular
(CBMN), que apesar de não ser específica para a radiação, é sensível para estimativa de dose
absorvida. É uma técnica muito útil para momentos de triagem em grandes acidentes
radiológicos onde é necessário que pessoas mais expostas sejam atendidas com prioridade em
centros médicos. Este tipo de análise se baseia na presença e quantificação de micronúcleos
(fragmentos ou cromossomos inteiros defeituosos e exclusos do núcleo) que aparecem no
citoplasma dos linfócitos binucleados válidos, que também possuem requisitos para que
possam ser considerados, como: a membrana da célula binucleada conservada, os dois
núcleos principais idênticos em tamanho e coloração, o tamanho dos micronúcleos que deve
ser entre 1/3 no máximo e 1/16 no mínimo em relação aos dois núcleos principais e não
devem sofrer refringência ao movimentar o micrômetro do microscópio (Fenech 2020;
IAEA, 2011).
A terceira técnica utilizada está em processo de validação e implementação advém da
necessidade de melhorar a resposta dos analistas para determinado evento radiológico e/ou
nuclear. O Protocolo Combinado que tem como objetivo unir as técnicas de dicêntricos e
micronúcleos em uma análise simultânea para que se atinja uma leitura da dose absorvida o
mais rápido possível com a perspectiva de ser utilizado essencialmente como triagem médica
em acidentes em larga escala, ou seja, em um evento de acidente radiológico e nuclear, essa
técnica ser útil na resposta laboratorial para a equipe médica. Sendo assim, é um modelo de
análise radiobiológica promissor e inovador para atender a sociedade.
A experiência no LDB permite que estagiários desenvolvam um pensamento científico
sobre a importância da Radiação Ionizante (RI) em diversos setores da sociedade. Isso
contribui para a formação de biomédicos e biólogos capacitados, atendendo à demanda de
profissionais com essas habilidades (Correia, 2022; Lopes, 2018). O laboratório integra a rede
latino-americana de biodosimetria, conduzindo pesquisas e analisando amostras para
identificar possíveis erros de exposição, além de auxiliar na determinação da taxa de dose
absorvida pelo indivíduo. Os estudantes de iniciação científica adquirem uma ampla vivência
em rotinas laboratoriais relacionadas à radiação, contribuindo para o desenvolvimento pessoal
por meio de trabalhos em equipe e experiência profissional nas análises diárias.

CONCLUSIONS
O presente relato destaca a importância da utilização de técnicas citogenéticas para a
identificação de possíveis exposições a RI, onde se pontua que a Técnica Convencional de
Cromossomos Dicêntricos por mais que seja considerada padrão ouro a obtenção do
resultado é mais demorada por conta da análise das alterações nos cromossomos, enquanto a
Técnica de Micronúcleos com Bloqueio da Citocinese por mais que sua cultura seja demorada
em relação a primeira fornece resultados mais rápidos e assim possuindo maior importância
para a realização de uma triagem em caso de acidentes radiológicos e nucleares ou até mesmo
erros ocupacionais. Ademais, o Protocolo Combinado vem buscando conciliar as duas
técnicas trazendo a possibilidade de realizar duas análises em apenas uma lâmina o que torna
bastante vantajoso.
Dessa maneira, a experiência fomentada dentro da biodosimetria leva a formação de
biomédicos e biólogos capacitados por meio da vivência laboratorial levando a um olhar
crítico e a um vasto conhecimento e preparo para as situações que envolvem a RI e suas
aplicações.

REFERENCES

CORREIA, O.; MEDEIROS, R. Radiação e suas aplicações no cotidiano. 55 f. TCC

(Graduação) - Curso de Física, Universidade Católica de Goiás, Goiânia, 2022.

FENECH, M. Cytokinesis-Block micronucleus cytome assay evolution into a more

comprehensive method to measure chromosomal instability. Genes, v. 11, n. 10, p. 1203, 15
out. 2020.

GAJENDIRAN, N. et al. Neutron-Induced Adaptive Response in Go Human Lymphocytes

Using the Comet Assay. Journal of Radiation Research, v. 42, n. 1, p. 91-101. Mar, 2001

IAEA. International Atomic Energy Agency. Cytogenetic dosimetry: 52 applications in

preparedness for and response to radiation emergencies.IAEA. Vienna, 2011.

LOPES, M. J. P.; DARCIO L. S. J. Iniciação Científica: uma análise de sua contribuição na

formação acadêmica. Revista Cesumar–Ciências Humanas e Sociais Aplicadas, v. 23,
n .1, p. 133-148. 2018

LUSIYANTI, Y. et al. Development of Dose-Response Calibration Curve for Dicentric

Chromosome Induced by X-Rays. Genome integrity, vol. 10,n. 2, p. 1-19, Jul. 2019.

MENDONÇA, J. G. et al. Validação da Curva Dose-Resposta do CRCN-NE para 60Co:

Resultados Preliminares. Brazilian Journal of Radiation Sciences, v. 3, n. 1A, 2015.