MINISTÉRIO DA EDUCAÇÃO

UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DO SEMI-ÁRIDO

PRÓ-REITORIA DE PESQUISA E PÓS-GRADUAÇÃO
PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM AMBIENTE, TECNOLOGIA E SOCIEDADE
DISCIPLINA: TÓPICOS ESPECIAIS EM AMBIENTE, TECNOLOGIA E SOCIEDADE

CROMATOGRAFIA LÍQUIDA DE ALTA

EFICIÊNCIA
Mestranda: Ingrid Eduarda Alves Paiva
Professora Dra. Ana Beatriz Rocha de Jesus Passos

Mossoró/RN
21 de junho de 2023
 Título:

OCORRÊNCIA, DISTRIBUIÇÃO DE FONTES E RISCOS

POTENCIAIS DE PPCPS SELECIONADOS EM ÁGUAS
SUBTERRÂNEAS USADAS COMO FONTE DE ÁGUA POTÁVEL
DE ÁREAS URBANAS E RURAIS IMPORTANTES DO
PAQUISTÃO
“Occurrence, source apportionment and potential risks of selected PPCPs in groundwater used as a source of drinking
water from key urban-rural settings of Pakistan”
Autores:
Hudda Khaleeq Khan; Muhammad Yasir Abdur Rehman; Muhammad Junaid, Ming Lv, Linxia Yue, Ihsan-ul Haq,
Nan Xu, Riffat Naseem Malik

Ciência do Meio Ambiente Total

“Science of the Total Environment”

 Recebido em 06 de agosto de 2021;  Aceito em 11 de outubro de 2021;  Publicado em 15 de outubro de 2021

 1. INTRODUÇÃO

O aumento da população das cidades metropolitanas tem causado mudanças drásticas na utilização de produtos de
consumo, incluindo produtos farmacêuticos e de higiene pessoal (PPCPs);
Com o aumento do uso de produtos químicos, a proteção da qualidade dos recursos hídricos subterrâneos urbanos
tornou-se crucial;
Além de contaminantes orgânicos, inorgânicos e microbianos regulamentados, contaminantes emergentes não
regulamentados, como PPCPs, também ameaçam a qualidade dos recursos hídricos subterrâneos;
A exposição a esses contaminantes pode induzir potenciais efeitos indesejáveis nos organismos aquáticos e na saúde
humana;
A água subterrânea está entre as fontes significativas de água doce no Paquistão. (agricultura e consumo)
Em estudos revelaram que aproximadamente 82–89% das amostras de águas subterrâneas não são seguras para
consumo humano.
• ESTUDOS:
 Efeitos de interrupção do hormônio tireoidiano foram observados em
girinos após a exposição aos desinfetantes triclosan e triclocarban
amplamente utilizados (Hinther et al., 2011).
 Relatou a ocorrência de estrogênios, analgésicos e desinfetantes em águas
subterrâneas urbanas usadas para abastecimento de água em
Cracóvia,Polônia (Rusiniak et al., 2021).
 Estudo relatou a detecção de 73 contaminantes emergentes em águas
subterrâneas urbanas da Índia (Richards et al., 2021).
 Estudo relatou a ocorrência de 23 antibióticos em águas subterrâneas do
Paquistão (Zainab et al., 2021).
Investigar a ocorrência de produtos farmacêuticos e de higiene pessoal (PPCPs)
selecionados em águas subterrâneas urbano-rurais (usadas para beber) e seus riscos
associados à saúde humana.

Este estudo também teve como objetivo fornecer dados de linha de base para entender
a abundância de PPCPs não regulamentados e não monitorados nas águas
subterrâneas no Paquistão.
2. MATERIAIS E MÉTODOS
• Vinte e cinco locais de amostragem;
2.1 PPCPs direcionados a área de estudo Faisalabad (n = 24) e Peshawar (n = 20)

• Fontes pontuais disponíveis (incluindo hospitais,

aterros sanitários, esgotos, estações de tratamento de
• Nove compostos farmacêuticos (carbamazepina,
águas residuais, fazendas de laticínios/aves e indústria
ácido diclofenaco, diltiazem difenidramina,
farmacêutica)
gemfibrozil, ibuprofeno, cetoprofeno, naproxeno e
paracetamol); • Fontes não pontuais (áreas residenciais)
• Dois produtos de higiene pessoal (triclocarban e
• Proximidades rurais
triclosan)
5 em
5 em fontes 15 em fontes
25 amostras proximidade
pontuais não pontuais
• Seis cidades metropolitanas (Rawalpindi– s ruais

Islamabad; Gujrat; Faisalabad; Lahore;

Peshawar e Quetta)
• Em três províncias do pais (Punjab; Khyber
Pakhtunkhwa e Baluquistão)
 2. MATERIAIS E MÉTODOS
2.2 Coleta de amostras

As 144 amostras foram coletadas de cada em garrafas de vidro âmbar pré-

limpas e acidificadas a pH = 3 pela adição de 2 a 3 gotas de acido sulfúrico
(H2SO4) concentrado .

As amostras foram rotuladas e transportadas (dentro de 24 h) para o

Laboratório de Saúde Ambiental, em recipientes congelados e mantidas a 4
°C até a preparação e extração da amostra.

Foram medidos os parâmetros físico-químicos:

 pH;
 Temperatura;
 Condutividade elétrica;
 Sólidos totais dissolvidos;
 Potencial de oxidação-redox.
 2. MATERIAIS E MÉTODOS
2.3 Preparação e extração de amostras
• Cada amostra acidificada foi filtrada através de um filtro de fibra de vidro de 0,7 µm usando um conjunto de filtração
a vácuo dentro de 24 horas após a amostragem.
• 2 L de cada amostra filtrada foi medido com precisão para extração em fase sólida (SPE).
• 50 µL de padrão interno de PPCPs misturados foram adicionados a cada amostra e, em seguida, 500 mg de agente
anticoagulante Na2EDTA foram adicionados e bem misturados antes da extração para evitar a coagulação de PPCPs
com cátions metálicos.
• Cartuchos de equilíbrio hidrofílico-lipofílico (HLB) foram usados para SPE. Os cartuchos foram pré-condicionados em
sequência com 10 mL de metanol e 10 mL de água ultra pura a uma vazão de 1,5 mL/min usando uma bomba
peristáltica.
• As amostras foram passadas através de cartuchos a uma taxa de fluxo de 3 mL/min. Em seguida, enxaguou os
cartuchos com 10 mL de água ultrapura para remover as impurezas.
• Os cartuchos foram então liofilizados por 30 minutos e enviados para o Laboratório para análise instrumental.
• Os analitos alvo foram eluídos com 10 mL de metanol em tubos de ensaio de vidro e depois secos sob uma corrente
suave de nitrogênio. Os analitos foram redissolvidos em 1 mL de metanol e passados por um filtro de agulha de fase
orgânica de 0,22 µm em um frasco de amostra de vidro de 1 mL.
• Todas as amostras foram mantidas a -20 °C até a análise instrumental
 2. MATERIAIS E MÉTODOS
2.4 Análise instrumental
• Os PPCPs selecionados foram analisados usando cromatografia líquida de ultra-alta performance acoplada com espectrometria de
massa tandem (UHPLC MS/MS)
• O espectrômetro de massa triplo quadrupolo é um Agilent 6460A com uma fonte de ionização por eletrospray (ESI).

Configurações cromatográficas: Configuração espectrometria de massa:

Temperatura da coluna 25 °C Temperatura do gás 350 °C

Taxa de fluxo 0,25 mL/min Taxa de fluxo do gás 12 mL/min
Volume de injeção 2 µL Pressão do nebulizador 40 psi
Tensão capilar 3500 v (ESI-) e 4000 v (ESI+)

Solvente A era 100% de água ultrapura

Solvente B era 100% de acetonitrila para a fase móvel no modo de ionização negativa (ESI-).
No modo de ionização positiva (ESI+), água ultrapura contendo 0,1% de ácido fórmico e 100% de acetonitrila.
2. MATERIAIS E MÉTODOS
2.5 Garantia de qualidade/controle de qualidade (QA/QC)
 Três brancos processuais foram executados para amostras de cada cidade para determinar possíveis adulterações
durante o experimento.

 Uma solução de padrão interno foi adicionada a cada amostra para quantificar a concentração de PPCPs.

 Nove concentrações (1, 2, 5, 10, 20, 50, 100, 200, 500 µg/L) de solução padrão foram executadas para calcular as
curvas de calibração

 Os efeitos da matriz foram determinados misturando padrões internos em amostras de água com água ultrapura no
mesmo nível de concentração. Os efeitos de matriz variaram de 56 a 125%.

 O limite de detecção (LOD) foi medido como a concentração da amostra em uma relação sinal-ruído de 3.

 O limite de quantificação (LOQ) foi medido como a concentração da amostra em 10 vezes a relação sinal-ruído

 O valor médio para LOD foi de 0,33 ng/L enquanto o valor médio obtido para LOQ foi de 0,9 ng/L .
 2. MATERIAIS E MÉTODOS
2.6 Análise de dados

 O teste não paramétrico de Kruskal Wallis foi realizado para determinar a diferença significativa nas concentrações
de PPCPs entre as cidades (p < 0,05 para ser estatisticamente significativo);

 A correlação de Pearson foi realizada para analisar a relação entre as concentrações de PPCPs e parâmetros físico-
químicos;

 A análise de componentes principais (PCA) foi realizada para classificar os dados com base na abundância relativa
de PPCPs na cidade;

 A regressão linear múltipla foi realizado para identificar e quantificar as contribuições da fonte.
 2. MATERIAIS E MÉTODOS
2.7 Distribuição de fonte
Para interpretar quantitativamente a entrada de PPCPs selecionados de diferentes fontes, foi utilizado a regressão
linear múltipla (PCA MLR).

A normalização Kaiser e a rotação varimax foram realizadas para PCA, e fatores com autovalores maiores que 1
foram selecionados para identificar fontes prováveis.

A análise MLR foi realizada nas pontuações dos componentes do PCA e no índice de poluição para quantificar as
contribuições da fonte.

As contribuições percentuais finais das fontes foram calculadas.

Bi (coeficiente de regressão para o componente específico, contribuição de cada seção de água)

ΣBi (soma de todos os coeficientes de regressão, entrada total em todas as seções)
 2. MATERIAIS E MÉTODOS
2.8 Estimativa de risco
2.8.1. Risco à saúde humana 2.8.2. Risco ambiental

O risco para a saúde humana foi estimado calculando os
quocientes de risco (RQs) específicos para a idade
MC (concentração máxima de cada PPCP na água potável)
DWEL (equivalente de água potável específico para a idade)
ADI (são valores aceitáveis de ingestão diária de cada PPCPs)
BW (Peso corporal)
DWI (ingestão diária de água)
AB (taxa de absorção gastrointestinal assumida como 1)
FOE (frequência de exposição calculada como 350/365 dias = 0,96)
O risco ambiental foi estimado pelo cálculo do quociente de perigo (QR)
para PPCPs detectados. Permite avaliar o possível risco que as águas
subterrâneas urbanas contaminadas representam para o ambiente
aquático
PNEC (valores dos organismos selecionados)
Caso o PNEC não fornecido, os valores de EC50 dos organismos
selecionados
AF (fator de avaliação para toxicidade aguda cujo valor é 1000)

RQ > 1 indica possível risco à saúde humana, RQ > 1 risco insignificativo;

RQ entre 0,2 e 1 justifica uma avaliação mais aprofundada 0,1 < RQ< 1 risco moderado
RQ ≤ 0,2 implica nenhum risco. RQ ≥ 1 risco alto.
 3. RESULTADOS
3.1 Detecção e ocorrência de PPCPs em águas subterrâneas

Ao todo, onze PPCPs foram selecionados no estudo atual e, destes, oito

foram detectados nas amostras de águas subterrâneas com a detecção
frequência variando de 5,5 a 65,2%.

O diltiazem, um medicamento anti-hipertensivo prescrito, e os desinfetantes

triclosan e triclocarban não foram detectados no estudo atual.

AsNoconcentrações médiaspropriedades
entanto, certas diferiram significativamente
físico-químicas,entre
comoas cidades (p < 0,05)
a ionização de
teste de comparação múltipla revelou que as concentrações diferiram
compostos no pH ambiente do solo, podem aumentar a mobilidade de
significativamente entre asno
compostos hidrofóbicos cidades de Lahore e Gujrat
solo, aumentando (p =chance
assim sua 0,000),de
bem comonas
lixiviar
Lahore
águas esubterrâneas
Quetta (p = 0,002).
As concentrações médias em Lahore foram maiores em comparação com Quetta e
Gujrat. A diferença nas concentrações pode ser atribuída aos fatores
hidrogeoquímicos que limitam o transporte de contaminantes nas águas
subterrâneas
3. RESULTADOS
3.2 Distribuição espacial e perfil de composição de PPCPs

Em todas as seis cidades, suas concentrações

foram elevadas em fontes não pontuais em
comparação com as fontes pontuais (exceto
em alguns locais de amostragem).
 3. RESULTADOS
3.3 Distribuição de origem

O biplot euclidiano mostrou agrupamento próximo de amostras de

águas subterrâneas de Gujrat, Quetta e Peshawar sem influência das
concentrações de PPCPs, indicando contaminação mínima nessas
cidades.

A descarga de águas residuais domésticas continuou a ser a fonte

dominante de PPCPs selecionados em águas subterrâneas .
3. RESULTADOS
3.4 Nexo entre parâmetros físico-químicos e PPCPs

Uma correlação positiva significativa foi observada para Sólidos totais

dissolvidos(TDS) e Potencial de oxidação-redox (ORP) com Σ PPCPs.

O ORP é indicativo da via metabólica (aeróbica ou anaeróbica) envolvida na

degradação de PPCPs.

A temperatura é um fator positivamente relacionado à degradação de PPCPs e

sugeriram que altas temperaturas podem acelerar o processo.

No entanto, condutividade elétrica (EC) não mostrou associação significativa

 3. RESULTADOS
3.5 Avaliação de riscos à saúde
humana e ao meio ambiente
 4. CONCLUSÕES

 Ocorrência de PPCPs não regulamentados e não monitorados em águas subterrâneas usadas como fonte de água potável no Paquistão, com algumas
concentrações superiores a 100 ng/L.

 Oito dos onze PPCPs selecionados foram detectados em amostras de águas subterrâneas com frequência de detecção variando de 5,5 a 65,5%.

 A detecção de PPCPs na fonte pontual, bem como na fonte não pontual, mostrou a natureza presente desses contaminantes emergentes.

 Analgésicos, antiepilépticos e anti-histamínicos foram difundidos nas águas subterrâneas de todas as seis cidades.

 As concentrações de PPCPs detectadas parecem não representar nenhum risco para a saúde humana através do consumo de água potável.

 Os resultados da análise PCA-MLR indicam falha de sistemas de esgoto e levantam preocupações associadas à contaminação devido a esgotos com
vazamentos que afetam a qualidade das águas subterrâneas.

 A avaliação de risco ambiental, entretanto, mostrou risco moderado para P. subcapitata e D. magna. Os resultados do estudo atual propõem a
implementação de medidas necessárias de gerenciamento de resíduos, como combate ao consumo desnecessário e práticas de descarte de PPCPs no
Paquistão. Pois com a crescente taxa de urbanização e o uso excessivo de PPCPs, pode-se esperar um aumento nos níveis de exposição nos próximos
anos
OBRIGADA!