BIOTECNOLOGIAS DA

REPRODUÇÃO DE
CÃES E GATOS
Mestranda Anne Kemmer Souza Candotti
Anatomia do Sistema Genital Masculino

Corpo do Cauda do
Epidídimo Epidídimo

Cabeça do Ligamento Próprio do

Epidídimo Testículo

Testículo

Cordão Espermático
Ducto Deferente
Anatomia dos Cães

(Mialot, 1988)
 Anatomia dos Gatos

(Popesko, 1977)
 Anatomia dos Gatos
(JOHNSTON et al.,
Ureter 2001)
Vesícula
Urinária

Ductos
Ducto
Deferentes Deferente
Plexo
Pampiniforme
Artéria
Testicular
Cabeça do Epidídimo
Testículo
Corpo do
Próstata Epidídimo (Souza, FF de)
Cauda do
Testículo Epidídimo
Não
Uretra Castrado

Gld.
Bulbouretral
Corpo
do
Pênis Castrado

Glande do Pênis
Orifício (Fayrer-Hosken, R
Uretral www.convince.org)
Externo
 Termorregulação Testicular
** Fundamental para a espermatogênese
 Testículo fora da cavidade abdominal
 Túnica Dartos e Musculo Cremaster (Contração e
Relaxamento)
Glândulas Sudoríparas
Plexo Pampiniforme

- Obesidade Subfertilidade
ou
- Hipertermia Infertilidade
temporária
Controle Hormonal

Imediata e Transitória Lenta e Gradual

Compartimentos Funcionais do Testículo
Espermiação
 Puberdade
Cão: 5 a 12 meses
Gato: 8 a 10 meses (2,5 Kg PC) -
Espículas ( 9° a 13° semanas)
 Seleção de Reprodutores
• Anamnese Clínica e Reprodutiva
• Exame Clínico
• Doenças Infectocontagiosas ligadas a
reprodução:
• Brucella Canis
• Herpes virus
• Leptospirose
• Leishmania
• Exame Andrológico
 Indicações
Compra e venda de reprodutores
Seleção de doadores para o uso de inseminação artificial
Diagnóstico de alterações no sistema genital masculino

Histórico
Alimentação
Alterações em outros sistemas
Administração de fármacos
Traumas/ Estresse
Sanidade
Libido
Histórico reprodutivo
 EXAME FÍSICO
• Escroto
• Testículo (Palpáveis de 6° a 16° semanas de vida)
• Epidídimo e Cordão Espermático (Estocagem,
Maturação e Transporte Sptz)
• Pênis e Prepúcio
• Glândula Prostática (Única glândula acessória em cães)
Sensível a influências hormonais
*Castração*
50% - 3 Semanas
70% - 9 Semanas
• Glândula Bulbouretral (Não é possível realizar palpação
retal em Gatos)
EXAME FÍSICO
EXAME FISICO
TESTES LABORATORIAIS

1° hCG (10 UI ou 44 µg/Kg, IM) ou GnRH (0,5 a 1,0 µg/Kg, IM)

Hormônio Antes aplicação 1 hora 4 horas
hCG 0,5 a 5 ng/mL -- > 5 ng/mL
GnRH 0,5 a 5 ng/mL > 5 ng/mL --

2° Dosagens de Testosterona
3° Análise do sêmen
BIÓPSIAS
Aspiração com Agulha Fina
Testículos
Próstata
Neoplasias
“Imprint” - Pênis (Souza, FF)

Martins, MIM
BIÓPSIAS – Glândula Prostática

(Souza, FF de)
BIÓPSIAS

Espermatogônia

Espermátide Espermatócito
Inicial

Células de
Sértoli
Espermatozóide Espermátide
Final

(Souza, FF de)
Acasalamento Natural Cães

(SORRIBAS, 1995)
Acasalamento Natural Cães
Acasalamento Natural Cães

“Os movimentos pélvicos”

Acasalamento Natural Cães

“O Giro”
 Consequências do Acasalamento

(Martins, MIM)
Colheita de Sêmen em Cães

1. Manipulação Digital
2. Eletroejaculação
3. Recuperação do Sptz da Cauda
do Epidídimo
Manipulação Digital - Cães

(Martins, MIM)
 Manipulação Digital - Cães
Aumento Diminuição
do fluxo do fluxo
arterial venoso

Oclusão fisiológica
normal pelos
músculos vesiculares

Oclusão
manual da
circulação
Manipulação Digital - Cães
Manipulação Digital - Cães
Eletroejaculação - Cães
 Recuperação Sptz Cauda do Epidídimo - Cães

Corpo do Cauda do
Epidídimo Epidídimo

Cabeça do Ligamento Próprio

Epidídimo do Testículo
Testículo
Gubernaculum

Cordão Espermático
Ducto Deferente
Recuperação Sptz Cauda do Epidídimo - Cães
 Características Reprodutivas dos Felinos

Espículas penianas (12° semana)

Andrógeno-dependente
Desaparecem 6 semanas após orquiectomia
 Acasalamento Natural Gatos
1

Salto: 5 a 50 seg

Posicionamento: 0,3 a 8 min

Intromissão e ejaculação: 1 a 30 seg

3 4

Retirada macho:
5 a 50 seg

Reação: 1 a 7 min
Acasalamento Natural Gatos
Colheita de Sêmen em Gatos

1. Vagina Artificial
2. Lavagem da Vagina
3. Recuperação do Sptz da Cauda do
Epidídimo
4. Eletroejaculação
5. Cateterização uretral e ejaculação
farmacológica
Vagina Artificial- Gatos

(Axner, 1998 )

Villa-Verde, 2004
Lavagem de Vagina - Gatos
Recuperação do Sptz pela Cauda do Epidídimo -
Gatos
Eletroejaculação - Gatos
Eletroejaculação - Gatos
Eletroejaculação - Gatos
 Eletroejaculação - Gatos
Protocolo
Anestesia Cetamina (12 mg/kg) + Medetomidina (30
µg/kg )

Estímulos elétricos  80 (3 séries), intervalos de 5 min.

Série 1ª 2ª 3ª

Estímulos 10 10 10 10 10 10 10 10

Voltagem 2 3 4 3 4 5 4 5
 Eletroejaculação - Gatos
Problemas!!
Contaminação com urina
Posicionamento da probe
Protocolo anestésico
Estímulos inadequados
Voltagem, amperagem ou probe inadequada
Protocolo de eletroejaculação inadequado
Retroejaculação
Fisiológico
Protocolo anestésico
 Cateterização uretral e ejaculação
farmacológica
- Gatos
• Introdução da sonda uretral fina após a sedação do
animal com 130 a 140 µg/kg Medetomidina (IM,)
- Agonista de receptor α2
- Eliminação dos Sptz sem ejaculação completa
• Desvantagem:
- Necessidade de Sedação
- Pequeno Volume obtido (20µl)
ANÁLISE LABORATORIAL
DOS ESPERMÁTOZOIDES
 INTRODUÇÃO
• Avaliação Reprodutiva do Macho
Apto ou inapto a reprodução (CBRA, 2013)
Qualidade do sêmen
Não é um teste de fertilidade

• Repetição das análises antes do laudo final

• Indicadores de problemas nos órgãos

reprodutivos
 Análise dos Epermatozóides
MICROSCÓPICA
MACROSCÓPICA Cinética
Volume
Concentração
Cor
Morfologia
Odor
Outros
 Análise dos Espermatozóides

Característica do Ejaculado

1° Pré-espermática
2° Espermática
3° Prostática
Análise Espermática - Macroscópica
Avaliação Subjetiva - Microscópica
Motilidade e Vigor Espermático
Análise Computadorizada de Sêmen - CASA
Análise Computadorizada de Sêmen - CASA
 Fatores que Influenciam as Análises
 Tipo de câmara utilizada  Tempo decorrido entre

 Campo analisado
amostras
 Meios utilizados para diluição
 Quantidade de campos
 Modelo e versão do Software
mensurados
 Taxa de captura
 Quantidade da amostra
 Microscópio do CASA
 Concentração de SPTZ na
 Aumento utilizado
amostra

 Temperatura de análise
Infelizmente muito dessas variáveis não são publicadas dificultando
comparação dos resultados entre os diferentes centros de análises de sêmen
Fatores que Influenciam as Análises
Concentração Espermática

(Souza, FF de)
 Concentração Espermática
Fórmula

Sendo: A = n° sptz contados

B= Fator de diluição (Cães 1:20) 10 µL sêmen:190 µL FS
N= n° quadrados contados
1/10 = altura da câmara (0,1mm)
Resultado: mm3 x 1000 = mL
 Morfologia Espermática
 Procedimento Simples
 Importante para diagnosticar mudanças sensíveis no
quadro reprodutivo
 Acompanhar o desenvolvimento reprodutivo do macho
 Marcador da precocidade sexual

*** Indicador de fertilidade?!?

 Classificados pela região

anatômica do espermatozoide
 Morfologia Espermática
Defeitos Maiores (1°): Anormalidades que ocorrem durante o
processo de espermatogênese (Intra testicular)
 Altamente correlacionados com a infertilidade nos machos

Defeitos Menores (2°): Anormalidades que ocorrem durante a

maturação espermática (Extra testicular)

Defeitos Terciários: originados pela manipulação dos

espermatozoides após a ejaculação.

Padrão CBRA (2013):

 Mínimo de espermatozóides normais: 70%
 Máximo de defeitos totais: 30%
 Limite de 10% defeitos maiores
 Limite de 20% defeitos menores
Blom, 1973; Lagerlof, 1934
 Morfologia Espermática
Causas de Defeitos Espermáticos:
 Origem genética
 Origem ambiental: calor
 Degeneração Testicular
 Lesões testiculares
 Nutrição
 Tóxicos
Doenças gerais
Morfologia Espermática

Karras Preparação úmida

 Morfologia Espermática
Pope et al., 1991
 Morfologia Espermática
Defeitos de Acrossomo:

Fonte: UFRGS
 Morfologia Espermática
Defeitos de Cabeça:

Fonte: UFRGS
 Morfologia Espermática
Defeitos de Colo:

Fonte: UFRGS
 Morfologia Espermática
Defeitos de Peça Intermediária:

Fonte: UFRGS
 Morfologia Espermática
Defeitos Cauda:

Fonte: UFRGS
 Integridade de Membrana e Acrossomo
Sonda Fluorescente Eosina
 Citometria de Fluxo
Análise individual de milhares de células em poucos
segundos, o que mostra uma técnica de avaliação com
maior repetibilidade

• Integridade de Membrana
• Integridade de Acrossomo
• Função Mitocondrial
• Avaliação da Cromatina
• Apoptose Celular
Características do Ejaculado Canino
Características do Ejaculado Felino
CONSERVAÇÃO DO SÊMEN
CRIOPRESERVAÇÃO
• Interrupção artificial do processo de maturação do
espermatozoide pós ejaculação

• Refrigeração Quando comparados, a

• 4 °C a 15 °C refrigeração do sêmen causa
• Congelação menor danos as células
espermáticas e possui
• - 196 °C
maiores taxas de gestação
• Descongelação
Criopreservação
Refrigeração
Congelação
DESCONGELAÇÃO
• Se a taxa de congelação for rápida, deve-se utilizar
descongelação rápida

• CÃES
• 37°C por 30 seg
• 46°C por 15 seg
• 72°C por 8 seg

• GATOS
• 37°C por 30 seg
• 46°C por 15 seg
OBRIGADA!!!!
annekemmer@hotmail.com